ES2256797T3

ES2256797T3 - Pirazolopirimidinas sustituidas con alquilo.

Info

Publication number: ES2256797T3
Application number: ES03797239T
Authority: ES
Inventors: Martin Hendrix; Frank-Gerhard Boss; Nils Burkhardt; Christina Erb; Adrian Tersteegen; Marja Van Kampen
Original assignee: Bayer Healthcare AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2002-08-23
Filing date: 2003-08-13
Publication date: 2006-07-16
Anticipated expiration: 2023-08-13
Also published as: EP1534713A1; CA2496308C; US20060111372A1; US8039477B2; EP1534713B1; JP4603885B2; US8741907B2; CA2496308A1; US20110294834A1; AU2003251706A1; DE10238724A1; DE50302207D1; JP2006503051A; WO2004026876A1

Abstract

Compuestos de fórmula (I) en la que R1 significa alquilo C1-C6, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi C1-C6, -C(=O)OR5 o -C(=O)NR6R7, estando alquilo C1-C6 dado el caso sustituido con 1 a 3 restos seleccionados independientemente del grupo formado por hidroxi, alcoxi C1-C6, halógeno, trifluorometilo, trifluorometoxi, -C(=O)OR5 o -C(=O)NR6R7, y R5 representa alquilo C1-C6, R6 y R7 representan independientemente entre sí hidrógeno, arilo C6-C10, alquilo C1-C6, o forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un heterociclilo de 4 a 10 miembros, R2 significa hidrógeno, alquilo C1-C6, trifluorometilo, alcoxi C1-C6, o R1 y R2 forman, junto con el átomo de carbono al que están unidos, cicloalquilo C3-C8, cicloalquenilo C3-C8 o heterociclilo de 4 a 10 miembros que están sustituidos dado el caso con hasta 2 sustituyentes del grupo formado por alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, hidroxi, oxo, -C(=O)OR8, y R8 representa alquilo C1-C6 o bencilo, R3 significa hidrógeno o alquilo C1-C6, R4 pentan-3-ilo, cicloalquilo C3-C6, X oxígeno o azufre, así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Description

Pirazolopirimidinas sustituidas con alquilo.

La invención se refiere a nuevas pirazolopirimidinas sustituidas con alquilo, a un procedimiento para su preparación y a su uso para la preparación de medicamentos para mejorar la percepción, la capacidad de concentración y las capacidades de aprendizaje y/o de memoria.

La activación celular de las adenilato o guanilatociclasas produce la ciclación del ATP o GTP para dar el monofosfato de adenosina 5'-3' cíclico (AMPc) o el monofosfato de guanosina 5'-3' cíclico (GMPc), respectivamente. Estos nucleótidos cíclicos (AMPc y GMPc) son importantes segundos mensajeros y, por lo tanto, desempeñan un papel central en las cascadas de transducción de señales celulares. Ambos activan a su vez, entre otras cosas pero no exclusivamente, proteinaquinasas. La proteinaquinasa activada por AMPc se denomina proteinaquinasa A (PKA) y la proteinaquinasa activada por GMPc se denomina proteinaquinasa G (PKG). La PKA o PKG activada puede a su vez fosforilar una serie de proteínas efectoras celulares (por ejemplo, canales iónicos, receptores acoplados a proteína G, proteínas estructurales). De este modo, los segundos mensajeros AMPc y GMPc pueden controlar los más diversos procesos fisiológicos en todo tipo de órganos. No obstante, los nucleótidos cíclicos también pueden actuar directamente sobre moléculas efectoras. Así, por ejemplo, se sabe que el GMPc puede actuar directamente sobre canales iónicos e influir de este modo en la concentración celular de iones (revisión en: Wei y col., Prog. Neurobiol., 1998, 56: 37-64). Un mecanismo de control para regular a su vez la actividad de AMPc y GMPc y, con ello, estos procesos fisiológicos, lo constituyen las fosfodiesterasas (PDE). Las PDE hidrolizan los monofosfatos cíclicos para proporcionar los monofosfatos inactivos AMP y GMP. Entretanto se han descrito al menos 21 genes de PDE (Exp. Opin. Investig. Drugs 2000, 9, 1354-3784). Estos 21 genes de PDE se pueden clasificar en 11 familias de PDE en función de su homología de secuencia (para la nomenclatura propuesta véase http://depts.washington.edu/pde/Nomenclature.html.). Los genes de PDE individuales dentro de una familia se distinguen por letras (por ejemplo, PDE1A y PDE1B). En caso de que existan diferentes variantes de ayuste, éstas se indican entonces mediante una numeración adicional detrás de la letra (por ejemplo, PDE1A1).

La PDE9A humana se clonó y secuenció en 1998. La identidad de aminoácidos con otras PDE se encuentra como máximo en 34% (PDE8A) y como mínimo en 28% (PDE5A). Con una constante de Michaelis-Menten (valor Km) de 170 nM, la PDE9A posee una alta afinidad por GMPc. La PDE9A es, además, selectiva de GMPc (valor Km para AMPc = 230 \muM). La PDE9A no presenta ningún dominio de unión a GMPc que permita deducir una regulación alostérica de la enzima por GMPc. En un análisis de transferencia Western se demostró que la PDE9A se expresa en el hombre en los testículos, el cerebro, el intestino delgado, la musculatura esquelética, el corazón, el pulmón, el timo y el bazo. La expresión máxima se detectó en el cerebro, el intestino delgado, el corazón y el bazo (Fisher y col., J. Biol. Chem., 1998, 273 (25): 15559-15564). El gen para la PDE9A humana se encuentra en el cromosoma 21q22.3 y contiene 21 exones. Hasta ahora se han identificado 4 variantes de ayuste alternativo de la PDE9A (Guipponi y col., Hum. Genet., 1998, 103: 386-392). Los inhibidores clásicos de las PDE no inhiben la PDE9A humana. Así, IBMX, dipiridamoles, SKF94120, rolipram y vinpocetina no muestran ninguna inhibición de la enzima aislada a concentraciones de hasta 100 \muM. Para zaprinast se determinó un valor de CI_{50} de 35 \muM (Fisher y col., J. Biol. Chem., 1998, 273 (25): 15559-15564).

La PDE9A de ratón fue clonada y secuenciada en 1998 por Soderling y col. (J. Biol. Chem., 1998, 273, (19): 15553-15558). Esta posee, al igual que la forma humana, una alta afinidad por GMPc, con una Km de 70 nM. En el ratón se detectó una expresión especialmente elevada en el riñón, el cerebro, el pulmón y el corazón. Tampoco la PDE9A de ratón es inhibida por IBMX a concentraciones inferiores a 200 \muM; el valor de CI_{50} para zaprinast se encuentra en 29 \muM (Soderling y col., J. Biol. Chem., 1998, 273, (19): 15553-15558). En el cerebro de rata se demostró que la PDE9A se expresa intensamente en algunas regiones cerebrales. Entre ellas se cuentan el bulbo olfatorio, el hipocampo, la corteza, los ganglios basales y el prosencéfalo basal (Andreeva y col., J. Neurosci., 2001, 21 (22): 9068-9076). Concretamente el hipocampo, la corteza y el prosencéfalo basal desempeñan un importante papel en los procesos de aprendizaje y de memoria.

Como ya se mencionó anteriormente, la PDE9A se caracteriza por una afinidad especialmente alta por GMPc. Por este motivo, y al contrario que la PDE2A (Km = 10 \muM; Martins y col., J. Biol. Chem., 1982, 257: 1973-1979), la PDE5A (Km = 4 \muM; Francis y col., J. Biol. Chem., 1980, 255: 620-626), la PDE6A (Km = 17 \muM; Gillespie y Beavo, J. Biol. Chem., 1988, 263 (17): 8133-8141) y la PDE11A (Km = 0,52 \muM; Fawcett y col., Proc. Nat. Acad. Sci., 2000, 97 (7): 3702-3707), la PDE9A ya es activa a bajas concentraciones fisiológicas. Al contrario que en la PDE2A (Murashima y col., Biochemistry, 1990, 29: 5285-5292), la actividad catalítica de la PDE9A no aumenta con GMPc puesto que no presenta ningún dominio GAF (dominio de unión a GMPc por medio del cual se potencia la actividad de la PDE de forma alostérica) (Beavo y col., Current Opinion in Cell Biology, 2000, 12: 174-179). Por eso, los inhibidores de la PDE9A producen un aumento de la concentración basal de GMPc. Este aumento de la concentración basal de GMPc condujo sorprendentemente a una mejora de las capacidades de aprendizaje y de memoria en el ensayo de reconocimiento social.

El documento WO 98/40384 da a conocer pirazolopirimidinas que destacan como inhibidores de las PDE1, 2 y 5 y se pueden usar para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares, así como de enfermedades del tracto urogenital. En los documentos US 5.977.118 y EP 0995751 se dan a conocer otras pirazolopirimidinas con un efecto inhibidor sobre las PDE.

En los documentos CH 396924, CH 396925, CH 396926, CH 396927, DE 1147234, DE 1149013, GB 937726 se describen pirazolopirimidinas con un efecto coronariodilatador que se pueden usar para el tratamiento de trastornos circulatorios del miocardio.

En el documento US 3.732.225 se describen pirazolopirimidinas que presentan un efecto antiinflamatorio e hipoglucémico.

En el documento DE 2408906 se describen estirenopirazolopirimidinas que se pueden usar como agentes antimicrobianos y antiinflamatorios para el tratamiento de, por ejemplo, edemas.

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula

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1

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en la que

R^{1}: significa alquilo C_{1}-C_{6}, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando alquilo C_{1}-C_{6} dado el caso sustituido con 1 a 3 restos seleccionados independientemente del grupo formado por hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, trifluorometilo, trifluorometoxi, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, y

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{6},

R^{6} y R^{7} representan independientemente entre sí hidrógeno, arilo C_{6}-C_{10}, alquilo C_{1}-C_{6}, o

\quad: forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un heterociclilo de 4 a 10 miembros,

R^{2}: significa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, trifluorometilo, alcoxi C_{1}-C_{6},

o

R^{1} y R^{2} forman, junto con el átomo de carbono al que están unidos, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloalquenilo C_{3}-C_{8} o heterociclilo de 4 a 10 miembros que están sustituidos dado el caso con hasta 2 sustituyentes del grupo formado por alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, oxo, -C(=O)OR^{8}, y

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{6} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6},

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{3}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Los compuestos de acuerdo con la invención son los compuestos de fórmula (I) y sus sales, solvatos y solvatos de las sales; los compuestos abarcados por la fórmula (I) con las fórmulas indicadas a continuación y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, así como los compuestos abarcados por la fórmula (I) mencionados a continuación como ejemplos de realización y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, siempre que en el caso de los compuestos abarcados por la fórmula (I) mencionados a continuación no se trate ya de sales, solvatos y solvatos de las sales.

Dependiendo de su estructura, los compuestos de acuerdo con la invención pueden existir en formas estereoisoméricas (enantiómeros, diaestereómeros). La invención se refiere a los enantiómeros o diaestereómeros y a sus mezclas correspondientes. A partir de estas mezclas de enantiómeros y/o diaestereómeros se pueden aislar de manera conocida los componentes estereoisoméricos uniformes.

Como sales se prefieren en el marco de la invención las sales fisiológicamente inocuas de los compuestos de acuerdo con la invención.

Las sales fisiológicamente inocuas de los compuestos (I) comprenden sales de adición de ácido de ácidos minerales, ácidos carboxílicos y ácidos sulfónicos, por ejemplo sales del ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido naftalenodisulfónico, ácido acético, ácido propiónico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido maleico y ácido benzoico.

Las sales fisiológicamente inocuas de los compuestos (I) también comprenden sales de bases habituales, por ejemplo y preferentemente sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales de sodio y de potasio), sales de metales alcalinotérreos (por ejemplo, sales de calcio y de magnesio) y sales de amonio derivadas de amoniaco o de aminas orgánicas con 1 a 16 átomos de C, por ejemplo y preferentemente etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, procaína, dibencilamina, N-metilmorfolina, deshidroabietilamina, arginina, lisina, etilendiamina y metilpiperidina.

Con solvatos se designan en el marco de la invención aquellas formas de los compuestos que en estado sólido o líquido forman un complejo por coordinación con moléculas de disolvente. Los hidratos constituyen una forma especial de los solvatos, en los que la coordinación se efectúa con agua.

La presente revelación se refiere asimismo a profármacos de los compuestos de acuerdo con la invención. El término "profármaco" comprende compuestos que de por sí pueden ser biológicamente activos o inactivos pero que durante el tiempo de permanencia en el cuerpo se transforman en los compuestos de acuerdo con la invención (por ejemplo, metabólica o hidrolíticamente).

En el marco de la presente invención, los sustituyentes presentan el siguiente significado, salvo que se especifique otra cosa:

Alcoxi C_{1}-C_{6} representa un resto alcoxi de cadena lineal o ramificado con 1 a 6, preferentemente 1 a 4, muy preferentemente 1 a 3 átomos de carbono. Ejemplos no limitantes comprenden metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, terc.-butoxi, n-pentoxi y n-hexoxi.

Alquilo C_{1}-C_{6} representa un resto alquilo de cadena lineal o ramificado con 1 a 6, preferentemente 1 a 4, muy preferentemente 1 a 3 átomos de carbono. Ejemplos no limitantes comprenden metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, terc.-butilo, n-pentilo y n-hexilo.

Arilo C_{6}-C_{10} representa fenilo o naftilo.

Cicloalquilo C_{3}-C_{8} representa ciclopropilo, ciclopentilo, ciclobutilo, ciclohexilo, cicloheptilo o ciclooctilo. Preferentemente son de mencionar ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Cicloalquenilo C_{3}-C_{8} representa restos cicloalquilo no aromáticos, parcialmente insaturados, que contienen uno o varios enlaces múltiples, preferentemente enlaces dobles. Ejemplos no limitantes comprenden ciclopentenilo, ciclohexenilo y cicloheptenilo.

Halógeno representa flúor, cloro, bromo y yodo. Se prefieren flúor, cloro, bromo; se prefieren especialmente flúor y cloro.

Heterociclilo de 4 a 10 miembros representa un resto heterocíclico mono- o policíclico con 4 a 10 átomos en el anillo y hasta 3, preferentemente 1, heteroátomos o heterogrupos de la serie N, O, S, SO, SO_{2}. Se prefiere heterociclilo de 4 a 8 miembros. Se prefiere heterociclilo mono- o bicíclico. Como heteroátomos se prefieren N y O. Los restos heterociclilo pueden estar saturados o parcialmente insaturados. Se prefieren los restos heterociclilo saturados. Los restos heterociclilo pueden estar unidos a través de un átomo de carbono o de un heteroátomo. Se prefieren especialmente restos heterociclilo saturados, monocíclicos, de 5 a 7 miembros y con hasta dos heteroátomos de la serie O, N y S. Son de mencionar a modo de ejemplo y preferentemente: Oxetan-3-ilo, pirrolidin-2-ilo, pirrolidin-3-ilo, pirrolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, piranilo, piperidinilo, tiopiranilo, morfolinilo, perhidroazepinilo.

Si los restos en los compuestos de acuerdo con la invención están dado el caso sustituidos, se prefiere, salvo que se especifique otra cosa, una sustitución con hasta tres sustituyentes iguales o diferentes.

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Los compuestos de acuerdo con la invención también pueden estar presentes en forma de tautómeros, como se muestra a modo de ejemplo a continuación:

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Otra forma de realización de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que

R^{1}: significa alquilo C_{1}-C_{6}, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando alquilo C_{1}-C_{6} dado el caso sustituido con hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, y

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{6},

R^{2}: significa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6},

o

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{6} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6},

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{4}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Otra forma de realización adicional de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que

R^{1}: significa alquilo C_{1}-C_{4}, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando alquilo C_{1}-C_{4} dado el caso sustituido con hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, trifluorometilo, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, y

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{4},

R^{6} y R^{7} representan independientemente entre sí hidrógeno, fenilo, alquilo C_{1}-C_{4}, o

\quad: forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un heterociclilo de 5 a 6 miembros,

R^{2}: significa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, trifluorometilo,

o

R^{1} y R^{2} forman, junto con el átomo de carbono al que están unidos, cicloalquilo C_{5}-C_{6}, cicloalquenilo C_{5}-C_{6} o heterociclilo de 5 a 6 miembros que están sustituidos dado el caso con hasta 2 sustituyentes del grupo formado por alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, hidroxi, oxo, -C(=O)OR^{8}, y

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{4} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Otra forma de realización más de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que

R^{1}: significa metilo, etilo, isopropilo, trifluorometilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando metilo dado el caso sustituido con metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, y

R^{6}: representa fenilo y

R^{7}: representa hidrógeno,

R^{2}: significa hidrógeno, metilo, trifluorometilo, o

R^{1} y R^{2} forman, junto con el átomo de carbono al que están unidos, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclopentenilo o tetrahidrofurilo, estando ciclohexilo dado el caso sustituido con metilo, y

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

R^{1}: significa metilo, etilo, isopropilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando metilo dado el caso sustituido con metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, y

\quad: R^{6} representa fenilo y

\quad: R^{7} representa hidrógeno,

R^{2}: significa hidrógeno, metilo, o

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Además se descubrió un procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula (I) de acuerdo con la invención, caracterizado porque

[A] compuestos de fórmula

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en la que R^{4} presenta los significados antes indicados,

se convierten primero, por transformación con un compuesto de fórmula

4

en la que R^{1}, R^{2} y R^{3} presentan los significados antes indicados

y

Z representa cloro o bromo,

en un disolvente inerte y en presencia de una base, en compuestos de fórmula

5

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} presentan los significados antes indicados,

después se ciclan en un disolvente inerte y en presencia de una base para dar compuestos de fórmula

6

o bien

[B] compuestos de fórmula (II) se transforman, bajo ciclación directa para dar (IA), con un compuesto de fórmula

7

en la que R^{1}, R^{2} y R^{3} presentan los significados antes indicados

y

R^{9} representa metilo o etilo,

en un disolvente inerte y en presencia de una base,

o bien

[C] compuestos de fórmula

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en la que R^{4} presenta los significados antes indicados,

se convierten primero, por transformación con un compuesto de fórmula (IIIa) en un disolvente inerte y en presencia de una base, en compuestos de fórmula

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y éstos, en un segundo paso, se ciclan en un disolvente inerte y en presencia de una base y un agente oxidante para dar (IA),

y los compuestos de fórmula (IA) se convierten después, dado el caso por transformación con un agente de sulfuración como, por ejemplo, pentasulfuro de difósforo, en los derivados tiono de fórmula

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y los compuestos resultantes de fórmula (I) se transforman dado el caso con los (i) disolventes y/o (ii) bases o ácidos correspondientes en sus solvatos, sales y/o solvatos de las sales.

Para el primer paso del procedimiento [A] y del procedimiento [C] son adecuados los disolventes orgánicos inertes que no se alteran en las condiciones de reacción. Entre ellos se encuentran preferentemente éteres, como, por ejemplo, dietiléter, dioxano, tetrahidrofurano o dimetiléter de glicol, o tolueno o piridina. Asimismo es posible usar mezclas de los disolventes mencionados. Se prefieren especialmente el tetrahidrofurano, el tolueno o la piridina.

Como bases son adecuados en general hidruros alcalinos, como, por ejemplo, hidruro sódico, o aminas cíclicas, como, por ejemplo, piperidina, piridina, dimetilaminopiridina (DMAP), o alquil-C_{1}-C_{4}-aminas, como, por ejemplo, trietilamina. Se prefieren el hidruro sódico, la piridina y/o la dimetilaminopiridina.

La base se usa en general en una cantidad de 1 mol a 4 moles, preferentemente de 1,2 moles a 3 moles, respecto a 1 mol de los compuestos de fórmula general (II) o (V).

En una variante, la transformación se realiza en piridina a la que se añade una cantidad catalítica de DMAP. Dado el caso se puede añadir además tolueno.

Por regla general, la temperatura de reacción se puede variar en un amplio intervalo. En general se trabaja en un intervalo de -20ºC a +200ºC, preferentemente de 0ºC a +100ºC.

Como disolventes para la ciclación en el segundo paso de los procedimientos [A] y [C] son adecuados los disolventes orgánicos habituales. Entre ellos se encuentran preferentemente alcoholes, tales como metanol, etanol, propanol, isopropanol, n-butanol o terc.-butanol, o éteres, tales como tetrahidrofurano o dioxano, o dimetilformamida o dimetilsulfóxido. Muy preferentemente se usan alcoholes, tales como metanol, etanol, propanol, isopropanol o terc.-butanol. Asimismo es posible usar mezclas de los disolventes mencionados.

Como bases para la ciclación en el segundo paso de los procedimientos [A] y [C] son adecuadas las bases inorgánicas habituales. Entre ellas se encuentran preferentemente hidróxidos alcalinos o hidróxidos alcalinotérreos, como, por ejemplo, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio o hidróxido de bario, o carbonatos alcalinos, tales como carbonato sódico o potásico o hidrogenocarbonato sódico, o alcoholatos alcalinos, tales como metanolato sódico, etanolato sódico, metanolato potásico, etanolato potásico o terc.-butanolato potásico. Se prefieren especialmente el carbonato potásico, el hidróxido de sodio y el terc.-butanolato potásico.

Para la realización de la ciclación, la base se usa en general en una cantidad de 2 moles a 6 moles, preferentemente de 3 moles a 5 moles, respecto a 1 mol de los compuestos de fórmula general (IV) o (VI).

Como agente oxidante para la ciclación en el segundo paso del procedimiento [C] son adecuados, por ejemplo, peróxido de hidrógeno o borato sódico. Se prefiere el peróxido de hidrógeno.

La ciclación en los procedimientos [A], [B] y [C] se realiza en general en un intervalo de temperaturas de 0ºC a +160ºC, preferentemente a la temperatura de ebullición del disolvente correspondiente.

La ciclación se realiza en general a presión normal. No obstante, también es posible realizar el procedimiento a sobrepresión o a presión subatmosférica (por ejemplo, en un intervalo de 50 a 500 kPa).

Como disolventes para el procedimiento [B] son adecuados los alcoholes expuestos anteriormente para el segundo paso de los procedimientos [A] y [C], prefiriéndose el etanol.

Como bases para el procedimiento [B] son adecuados hidruros alcalinos, como, por ejemplo, hidruro sódico o potásico, o alcoholatos alcalinos, como, por ejemplo, metanolato, etanolato, isopropilato sódico o terc.-butilato potásico. Se prefiere el hidruro sódico.

La base se usa en una cantidad de 2 moles a 8 moles, preferentemente de 3 moles a 6 moles, respecto a 1 mol de los compuestos de fórmula (II).

Los compuestos de fórmula (II) son conocidos o se pueden preparar, por ejemplo, condensando primero dinitrilo del ácido etoximetilenmalónico con derivados de hidracina de fórmula (VII)

(VII)R^{4}-NH-NH_{2},

en la que R^{4} presenta los significados antes indicados,

en un disolvente inerte para dar los pirazolonitrilos de fórmula (V) y transformando éstos después con uno de los agentes oxidantes antes expuestos, preferentemente con peróxido de hidrógeno, en presencia de amoniaco [véase, por ejemplo, A. Miyashita y col., Heterocycles 1990, 31, 1309 en adelante].

Los compuestos de las fórmulas (IIIa), (IIIb) y (VII) se pueden adquirir en el mercado, se conocen en la bibliografía o se pueden preparar de forma análoga a procedimientos conocidos en la bibliografía.

El procedimiento de acuerdo con la invención se puede ilustrar a modo de ejemplo mediante el siguiente esquema de fórmulas:

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Esquema

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Los compuestos de fórmula (IA) y (IB) dado el caso se pueden modificar adicionalmente dentro del alcance de los significados de R^{1}, R^{2} y R^{3} según procedimientos convencionales.

Se conocen procedimientos adicionales para la preparación de las pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-onas que se pueden usar igualmente para la síntesis de los compuestos de acuerdo con la invención (véase, por ejemplo: P. Schmidt y col., Helvetica Chimica Acta 1962, 189, 1620 en adelante).

Los compuestos de acuerdo con la invención muestran un valioso espectro de actividad farmacológica y farmacocinética no previsible.

Por lo tanto, son adecuados para el uso como medicamentos para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades en seres humanos y animales.

En el marco de la presente invención, el término "tratamiento" incluye la profilaxis.

Sorprendentemente se descubrió que los inhibidores selectivos de la PDE9A son adecuados para la preparación de medicamentos para mejorar la percepción, la capacidad de concentración, la capacidad de aprendizaje o la capacidad de memoria.

Debido a sus propiedades farmacológicas, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden usar solos o en combinación con otros medicamentos para mejorar la percepción, la capacidad de concentración y las capacidades de aprendizaje y/o de memoria.

Otro objeto de la presente manifestación es un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, especialmente de las enfermedades antes mencionadas, usando una cantidad eficaz de los compuestos de acuerdo con la invención.

En el sentido de la invención, un inhibidor de la PDE9A es un compuesto que en las condiciones indicadas más adelante inhibe la PDE9A humana con un valor de CI_{50} inferior a 10 mM, preferentemente inferior a 1 mM.

En el sentido de la invención, un inhibidor selectivo de la PDE9A es un compuesto que en las condiciones indicadas más adelante inhibe la PDE9A humana con mayor intensidad que las PDE1C, PDE2A, PDE3B, PDE4B, PDE5A, PDE7B, PDE8A, PDE10A y PDE11 humanas. Se prefiere una relación de CI_{50} (PDE9A)/CI_{50} (PDE1C, PDE2A, PDE3B, PDE4B, PDE5A, PDE7B y PDE10A) inferior a 0,2.

Los inhibidores selectivos de la PDE9A son especialmente adecuados para mejorar la percepción, la capacidad de concentración, la capacidad de aprendizaje o la capacidad de memoria tras sufrir trastornos cognitivos, como los que aparecen en particular en situaciones/enfermedades/síndromes tales como deterioro cognitivo leve, trastornos de aprendizaje y de memoria asociados a la edad, pérdidas de memoria asociadas a la edad, demencia vascular, traumatismos craneoencefálicos, ataque de apoplejía, demencia que aparece después de ataques de apoplejía ("post stroke dementia"), demencia postraumática, trastornos de concentración generales, trastornos de concentración en niños con problemas de aprendizaje y de memoria, la enfermedad de Alzheimer, demencia con corpúsculos de Levy, demencia con degeneración de los lóbulos frontales incluido el síndrome de Pick, la enfermedad de Parkinson, parálisis nuclear progresiva, demencia con degeneración corticobasal, esclerosis lateral amiotrófica (ALS), la enfermedad de Huntington, esclerosis múltiple, degeneración del tálamo, demencia de Creutzfeld-Jacob, demencia por VIH, esquizofrenia con demencia o psicosis de Korsakow.

El efecto in vitro de los compuestos de acuerdo con la invención se puede demostrar con los siguientes ensayos biológicos:

Inhibición de la PDE

Se expresaron las PDE1C (número de acceso GenBank/EMBL: NM_005020, Loughney y col., J. Biol. Chem. 1996, 271, 796-806), PDE2A (número de acceso GenBank/EMBL: NM_002599, Rosman y col., Gene 1997, 191, 89-95), PDE3B (número de acceso GenBank/EMBL: NM_000922, Miki y col., Genomics 1996, 36, 476-485), PDE4B (número de acceso GenBank/EMBL: NM_002600, Obernolte y col., Gene 1993, 129, 239-247), PDE5A (número de acceso GenBank/EMBL: NM_001083, Loughney y col., Gene 1998,216, 139-147), PDE7B (número de acceso GenBank/EMBL: NM_018945, Hetman y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000, 97, 472-476), PDE8A (número de acceso GenBank/EMBL: AF_056490, Fisher y col., Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998, 246, 570-577), PDE9A (Fisher y col., J. Biol. Chem. 1998, 273 (25): 15559-15564), PDE10A (número de acceso GenBank/EMBL: NM_06661, Fujishige y col., J. Biol. Chem. 1999, 274, 18438-45), PDE11A (número de acceso GenBank/EMBL: NM_016953, Fawcett y col., Proc. Natl. Acad. Sci. 2000, 97, 3702-3707) recombinantes en células Sf9 con la ayuda del sistema de expresión de baculovirus pFASTBAC (GibcoBRL).

Para la determinación de su efecto in vitro sobre la PDE9A, las sustancias de ensayo se disuelven en DMSO al 100% y se realizan diluciones seriadas. Típicamente se preparan diluciones seriadas de 200 \muM a 1,6 \muM (concentraciones finales resultantes en el ensayo: 4 \muM a 0,032 \muM). Se disponen en cada caso 2 \mul de las soluciones de sustancia diluidas en los pocillos de placas de microvaloración (Isoplate; Wallac Inc., Atlanta, GA). A continuación se añaden 50 \mul de una dilución del preparado de PDE9A antes descrito. La dilución del preparado de PDE9A se elige de tal manera que durante la incubación posterior se transforme menos del 70% del sustrato (dilución típica: 1:10.000; tampón de dilución: Tris/HCl 50 mM pH 7,5, MgCl_{2} 8,3 mM, EDTA 1,7 mM, 0,2% de BSA). El sustrato, fosfato de guanosina [8-^{3}H] 3',5' cíclico (1 \muCi/\mul; Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ), se diluye 1:2.000 con tampón de ensayo (Tris/HCl 50 mM pH 7,5, MgCl_{2} 8,3 mM, EDTA 1,7 mM) a una concentración de 0,0005 \muCi/\mul. Mediante la adición de 50 \mul (0,025 \muCi) del sustrato diluido se inicia finalmente la reacción enzimática. Las preparaciones de ensayo se incuban durante 60 min a temperatura ambiente y la reacción se detiene mediante la adición de 25 \mul de un inhibidor de la PDE9A disuelto en el tampón de ensayo (por ejemplo, el inhibidor del ejemplo de preparación 1, concentración final 10 \muM). Inmediatamente después se añaden 25 ml de una suspensión con 18 mg/ml de Yttrium Scintillation Proximity Beads (Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ). Las placas de microvaloración se sellan con una hoja y se dejan reposar durante 60 min a temperatura ambiente. A continuación, las placas se miden durante 30 s por pocillo en un contador de centelleo Microbeta (Wallac Inc., Atlanta, GA). Los valores de CI_{50} se determinan registrando gráficamente la concentración de sustancia frente a la inhibición porcentual.

El efecto in vitro de las sustancias de ensayo sobre las PDE3B, PDE4B, PDE7B, PDE8A, PDE10A y PDE11A recombinantes se determina de acuerdo con el protocolo de ensayo antes descrito para la PDE9A, con las siguientes adaptaciones: Como sustrato se usa fosfato de adenosina [5',8-^{3}H] 3',5' cíclico (1 \muCi/\mul; Amersham Pharmacia
Biotech., Piscataway, NJ). No es necesario añadir una solución de inhibidor para detener la reacción. En su lugar, después de la incubación de sustrato y PDE se continúa directamente con la adición de las Yttrium Scintillation Proximity Beads como se describió anteriormente, deteniendo así la reacción. Para la determinación de un efecto correspondiente sobre las PDE1C, PDE2A y PDE5A recombinantes, el protocolo se adapta adicionalmente de la siguiente manera: En el caso de la PDE1C se añaden adicionalmente calmodulina 10^{-7} M y CaCl_{2} 3 mM a la preparación de reacción. La PDE2A se estimula en el ensayo mediante la adición de GMPc 1 \muM y se ensaya con una concentración de BSA de 0,01%. Para la PDE1C y la PDE2A se usa como sustrato fosfato de adenosina [5',8-^{3}H] 3',5' cíclico (1 \muCi/\mul; Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ) y para la PDE5A, fosfato de guanosina [8-^{3}H] 3',5' cíclico (1 \muCi/\mul; Amersham Pharmacia Biotech., Piscataway, NJ).

El efecto inhibidor de los compuestos de acuerdo con la invención sobre la PDE9A se puede demostrar mediante los siguientes ejemplos expuestos en las Tablas 1 y 2:

TABLA 1 Inhibición de isoenzimas de la PDE mediante el ejemplo 3

Isoenzima	Especie	CI_{50} [nM]
PDE1C	humana	720
PDE2A	humana	> 4.000
PDE3B	humana	> 4.000
PDE4B	humana	> 4.000
PDE5A	humana	> 4.000
PDE7B	humana	> 4.000
PDE8A	humana	> 4.000
PDE9A	humana	110
PDE10A	humana	> 4.000

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TABLA 2 Efecto inhibidor de los compuestos de acuerdo con la invención sobre la PDE9A

Ejemplo	CI_{50} [nM]
1	5
3	110
4	30
6	6
12	65
17	86
19	390

Aumento de la concentración de GMPc intracelular neuronal en cultivos celulares

Los inhibidores de la PDE9A aumentan el GMPc intracelular neuronal en neuronas corticales primarias en cultivo.

Se decapitaron embriones de rata (día embrionario E17-E19) y las cabezas se transfirieron a placas de preparación rellenas de medio de preparación (DMEM, penicilina/estreptomicina; ambos de Gibco). Se retiraron el cuero cabelludo y la bóveda craneal, y los cerebros preparados se transfirieron a otra placa Petri con medio de preparación. Con la ayuda de un binocular y dos pinzas se aisló el encéfalo (corteza) y se enfrió con hielo a 4ºC. Esta preparación y la separación de las neuronas corticales se realizaron con el kit de papaína (Worthington Biochemical Corporation, Lakewood, New Jersey 08701, EE.UU.) según un protocolo convencional (Huettner y col., J. Neurosci. 1986, 6, 3044-3060). Las neuronas corticales separadas mecánicamente se cultivaron en condiciones convencionales (37ºC, 5% CO_{2}) durante 7 días en placas de 96 pocillos (tratadas previamente con poli-D-lisina 100 \mug/ml durante 30 min) con 150.000 células/pocillo en 200 \mul de medio neurobasal/pocillo (neurobasal; suplemento B27; L-glutamina 2 mM; en presencia de penicilina/estreptomicina; todos los reactivos de Gibco). Al cabo de 7 días, se retiró el medio y las células se lavaron con tampón HBSS (Hank's balanced salt solution (solución salina equilibrada de Hank), Gibco/BRL). A continuación se añadieron a las células 100 \mul de compuesto de acuerdo con la invención disuelto en tampón HBSS (disuelto previamente en DMSO al 100%: 10 mM). A continuación se volvieron a añadir 100 \mul de tampón HBSS, de manera que la concentración final de los compuestos de acuerdo con la invención se encontraba, por ejemplo, en un intervalo de 20 nM a 10 \muM, y se incubaron durante 20 min a 37ºC. Después se retiró por completo el tampón de ensayo. A continuación, las células se lisaron en 200 \mul de tampón de lisis (kit de GMPc, código RPN 226; de Amersham Pharmacia Biotech.) y se midió la concentración de GMPc según las indicaciones del fabricante. Todas la mediciones se realizaron por triplicado. La valoración estadística se llevó a cabo con el software Prism, versión 2.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, EE.UU.).

La incubación de las neuronas primarias con los compuestos de acuerdo con la invención dio lugar a un incremento del contenido en GMPc.

Potenciación a largo plazo

La potenciación a largo plazo se considera una correlación celular para los procesos de aprendizaje y de memoria. Para determinar si la inhibición de la PDE9A influye sobre la potenciación a largo plazo, se puede usar el siguiente procedimiento:

Se colocan hipocampos de rata en un ángulo de aproximadamente 70 grados respecto a la cuchilla de corte (cortador periódico). El hipocampo se corta en secciones de 400 \mum. Los cortes se retiran de la cuchilla con la ayuda de un pincel muy blando y mojado (pelo de marta) y se transfieren a un recipiente de vidrio con una solución de cultivo carbogenada refrigerada (NaCl 124 mM, KCl 4,9 mM, MgSO_{4} x 7 H_{2}O 1,3 mM, CaCl_{2} anhidro 2,5 mM, KH_{2}PO_{4} 1,2 mM, NaHCO_{3} 25,6 mM, glucosa 10 mM, pH 7,4). Durante la medición, los cortes se encuentran en una cámara temperada bajo un nivel de líquido de 1 a 3 mm de altura. La velocidad de circulación asciende a 2,5 ml/min. El gaseado previo se lleva a cabo en la antecámara a una ligera sobrepresión (aproximadamente 1 atm) y a través de una microcánula. La cámara de corte está comunicada con la antecámara de tal manera que se pueda mantener una minicirculación. Como impulso de la minicirculación se usa el carbógeno que sale de la microcánula. Los cortes de hipocampo recién preparados se adaptan en la cámara de corte durante al menos 1 hora a 33ºC.

La intensidad del estímulo se elige de tal manera, que los potenciales postsinápticos excitatorios focales (fEPSP) asciendan al 30% del potencial postsináptico excitatirio (EPSP) máximo. Con la ayuda de un electrodo de estimulación monopolar que consta de acero noble lacado y un generador de estímulos bifásico de corriente constante (AM-Systems 2100), se excitan localmente las colaterales de Schaffer (tensión: 1 a 5 V, duración de impulso de una polaridad 0,1 ms, impulso total 0,2 ms). Con la ayuda de electrodos de vidrio (vidrio al borosilicato con filamento, 1 a 5 MOhmios, diámetro: 1,5 mm, diámetro de la punta; 3 a 20 \mum) rellenos de solución de cultivo normal se registran los potenciales postsinápticos excitatorios (fEPSP) del estrato radiado. La medición de los potenciales de campo se realiza con la ayuda de un amplificador de tensión continua frente a un electrodo de referencia clorurado de plata situado en el borde de la cámara de corte. El filtrado de los potenciales de campo se lleva a cabo a través de un filtro de paso bajo (5 kHz). Para el análisis estadístico de los experimentos se halla el incremento (pendiente) de los fEPSPs (incremento de fEPSP). El registro, el análisis y el control del experimento se llevan a cabo con la ayuda de un programa de software (PWIN) que se desarrolló en el departamento de neurofisiología. La obtención de la media de los valores de incremento de fEPSP en los momentos correspondientes y la construcción de los diagramas se llevan a cabo con la ayuda del software EXCEL en el que un macro correspondiente automatiza el registro de los datos.

La superfusión de los cortes de hipocampo con una solución 10 \muM de los compuestos de acuerdo con la invención produce un incremento significativo de la LTP.

Ensayo de reconocimiento social

El ensayo de reconocimiento social es un ensayo de aprendizaje y memoria. Mide la capacidad de las ratas para distinguir entre congéneres conocidos y desconocidos. Por este motivo, este ensayo es adecuado para estudiar el efecto de mejora del aprendizaje o de la memoria de los compuestos de acuerdo con la invención.

Ratas adultas mantenidas en grupos se colocan por separado en jaulas de ensayo 30 min antes de comenzar con el ensayo. Cuatro min antes de comenzar con el ensayo, el animal de ensayo se introduce en la caja de observación. Tras este periodo de adaptación se coloca un animal joven junto al animal de ensayo, y durante 2 min se mide el tiempo absoluto durante el cual el animal adulto inspecciona a la cría (ensayo 1). Se miden todos los tipos de comportamiento dirigidos claramente al animal joven, es decir, la inspección anogenital, la persecución y el cuidado del pelaje, en los que el animal adulto se encuentra a una distancia máxima del animal joven de 1 cm. Después se saca el animal joven, el adulto se trata con un compuesto de acuerdo con la invención o con un vehículo y a continuación se vuelve a colocar en su jaula original. Después de un tiempo de retención de 24 horas se repite el ensayo (ensayo 2). Un periodo de interacción social reducido en comparación con el ensayo 1 indica que la rata adulta se acuerda del animal joven.

Inmediatamente después del ensayo 1 se inyecta en los animales adultos por vía intraperitoneal bien vehículo (10% de etanol, 20% de solutol, 70% de solución salina fisiológica) o bien 0,1 mg/kg, 0,3 mg/kg, 1,0 mg/kg o 3,0 mg/kg de compuesto de acuerdo con la invención disuelto en 10% de etanol, 20% de solutol, 70% de solución salina fisiológica. Las ratas tratadas con vehículo no muestran ninguna reducción del periodo de interacción social en el ensayo 2 en comparación con el ensayo 1. Por consiguiente, han olvidado que ya tuvieron contacto una vez con el animal joven. Sorprendentemente, el periodo de interacción social en el segundo ciclo después del tratamiento con los compuestos de acuerdo con la invención está reducido significativamente respecto al de los animales tratados con vehículo. Esto significa que las ratas tratadas con las sustancias se acuerdan del animal joven y que, por lo tanto, los compuestos de acuerdo con la invención presentan un efecto que mejora el aprendizaje y la memoria.

Otro objeto de la presente invención son medicamentos que contienen al menos un compuesto de acuerdo con la invención y al menos uno o varios principios activos adicionales, en particular para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades antes mencionadas.

Los compuestos de acuerdo con la invención pueden actuar de forma sistémica y/o local. Para este fin se pueden administrar de manera adecuada, como, por ejemplo, por vía oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, rectal, dérmica, transdérmica, conjutival, ótica o como implante o malla intraarterial.

Para estas vías de administración, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden administrar en formas de administración adecuadas.

Para la administración por vía oral son adecuadas las formas de administración que funcionan según el estado de la técnica y que liberan los compuestos de acuerdo con la invención de forma rápida y/o modificada y contienen los compuestos de acuerdo con la invención en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, como, por ejemplo, comprimidos (comprimidos no recubiertos o recubiertos, por ejemplo con cubiertas gastrorresistentes o insolubles o de disolución retardada que controlan la liberación del compuesto de acuerdo con la invención), comprimidos que se disgregan rápidamente en la cavidad bucal u obleas recubiertas, liofilizados recubiertos, cápsulas (por ejemplo, cápsulas de gelatina dura o blanda), grageas, gránulos, comprimidos subcutáneos, polvos, emulsiones, suspensiones, aerosoles y soluciones.

La administración parenteral se puede efectuar evitando un paso de reabsorción (por ejemplo, por vía intravenosa, intraarterial, intracardial, intraespinal o intralumbar) o introduciendo una reabsorción (por ejemplo, por vía intramuscular, subcutánea, intracutánea, percutánea o intraperitoneal). Para la administración parenteral son adecuadas como formas de administración, entre otras, preparaciones para inyección e infusión en forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, liofilizados y polvos estériles.

Para las demás vías de administración son adecuadas, por ejemplo, las formas farmacéuticas de inhalación (inhaladores de polvo, nebulizadores, entre otros), gotas, soluciones y aerosoles nasales; comprimidos, obleas recubiertas o cápsulas de administración lingual, sublingual o bucal, supositorios, preparaciones óticas y oftálmicas, cápsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas de agitación), suspensiones lipófilas, pomadas, cremas, sistemas terapéuticos transdérmicos (como, por ejemplo, parches), leches, pastas, espumas, polvos de talco, implantes o mallas intraarteriales.

Los compuestos de acuerdo con la invención se pueden incorporar en las formas de administración expuestas. Esto se puede realizar de manera conocida en sí mezclándolos con coadyuvantes inertes, no tóxicos y farmacéuticamente adecuados. Entre estos coadyuvantes se cuentan, entre otros, vehículos (por ejemplo, celulosa microcristalina, lactosa, manitol), disolventes (por ejemplo, polietilenglicoles líquidos), emulsionantes y dispersantes o agentes tensioactivos (por ejemplo, dodecilsulfato sódico, oleato de polioxisorbitán), aglutinantes (por ejemplo, polivinilpirrolidona), polímeros sintéticos y naturales (por ejemplo, albúmina), estabilizadores (por ejemplo, antioxidantes como, por ejemplo, ácido ascórbico), colorantes (por ejemplo, pigmentos inorgánicos como, por ejemplo, óxidos de hierro) y correctores del sabor y/o del olor.

Otro objeto de la presente invención son medicamentos que contienen al menos un compuesto de acuerdo con la invención, generalmente junto con uno o varios coadyuvantes inertes, no tóxicos y farmacéuticamente adecuados, así como su uso para los fines antes mencionados.

En general, para lograr unos resultados eficaces, ha resultado ventajoso en el caso de la administración parenteral administrar cantidades diarias de aproximadamente 0,001 a 10 mg/kg de peso corporal. En el caso de la administración oral, la cantidad diaria se encuentra entre aproximadamente 0,005 a 3 mg/kg de peso corporal.

Aún así puede ser necesario dado el caso desviarse de las cantidades mencionadas, esto es, dependiendo del peso corporal, de la vía de administración, del comportamiento individual frente al principio activo, del tipo de preparación y del momento o intervalo en el que se lleva a cabo la administración. Así, en algunos casos puede ser suficiente una cantidad menor que la mínima antes mencionada, mientras que en otros casos se ha de sobrepasar el límite superior mencionado. En el caso de administrar cantidades mayores, puede ser recomendable distribuirlas en varias tomas individuales a lo largo del día.

Los datos de porcentaje en los siguientes ensayos y ejemplos son porcentajes en peso, salvo que se indique otra cosa; partes son partes en peso. Las relaciones entre disolventes, la tasa de dilución y los datos de concentración de soluciones líquido/líquido se refieren en cada caso al volumen.

Abreviaturas usadas

BSA	albúmina de suero bovina
DCI	ionización química directa (en EM)
DMSO	dimetilsulfóxido
d. t.	del teórico (rendimiento)

EDTA	ácido etilendiaminotetraacético
equiv.	equivalente(s)
ESI	ionización por electropulverización (en EM)
HATU	exafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
bibl.	referencia bibliográfica
EM	espectroscopía de masas
RMN	espectroscopía de resonancia magnética nuclear
p. f.	punto de fusión
Tris	Tris-(hidroximetil)-aminometano

Compuestos de partida

Ejemplo 1A

5-Amino-1-ciclohexil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

12

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A una solución de hidrocloruro de ciclohexilhidracina (3 g, 19,9 mmoles) en 36 ml de etanol se añaden a temperatura ambiente primero dinitrilo del ácido etoximetilenmalónico (2,43 g, 19,9 mmoles) y a continuación 8 ml de trietilamina. La mezcla se mantiene a reflujo durante 20 min y después se enfría. El disolvente se extrae en evaporador rotativo y el residuo se suspende en DCM, se lava con una solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico, se seca mediante sulfato sódico, se filtra y se concentra al vacío. El producto bruto se cromatografía en gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol 0-10%).

Rendimiento: 1,95 g (51% d. t.)

EM (DCI): m/z = 191 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 7,5 (s, 1H), 6,5 (s, 2H), 4,0 (m, 1H), 1,95-1,05 (m, 10H) ppm.

Ejemplo 2A

5-Amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

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13

\vskip1.000000\baselineskip

La preparación se lleva a cabo de forma análoga al protocolo del ejemplo 1A.

EM (ESI): m/z = 177 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 7,5 (s, 1H), 4,45 (s a, 2H), 4,35 (m, 1H), 2,2-1,55 (m, 6H) ppm.

\newpage

Ejemplo 3A

5-Amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carbonitrilo

14

La preparación se lleva a cabo de forma análoga al protocolo del ejemplo 1A.

EM (ESI): m/z = 179 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 7,55 (s, 1H), 6,45 (s, 2H), 4,0 (m, 1H), 1,8-1,55 (m, 4H), 0,65 (t, 6H) ppm.

Ejemplo 4A

5-Amino-1-ciclohexil-1H-pirazol-4-carboxamida

15

A una solución de 5-amino-1-ciclohexil-1H-pirazol-4-carbonitrilo (1,86 g, 9,81 mmoles) en una mezcla de 73 ml de etanol y 90 ml de una solución de amoniaco acuosa concentrada se añaden a temperatura ambiente 18 ml de una solución de peróxido de hidrógeno al 30% y se agita durante 1 h a temperatura ambiente. A continuación se extraen en el evaporador rotativo los disolventes no acuosos. En la mezcla residual precipita el producto en forma de sólido, que se filtra con succión, se lava con un poco de agua y se seca al alto vacío.

Rendimiento: 1,77 g (86% d. t.)

EM (DCI): m/z = 209 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 7,6 (s, 1H), 7,3-6,4 (ancho, 2H), 6,1 (s, 2H), 3,95 (m, 1H), 1,95-1,05 (m, 10H) ppm.

Ejemplo 5A

5-Amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida

16

La preparación se lleva a cabo de forma análoga al protocolo del ejemplo 4A.

EM (ESI): m/z = 195 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 7,5 (s, 1H), 5,6-4,8 (ancho, 4H), 4,35 (m, 1H), 2,2-1,55 (m, 8H) ppm.

Ejemplo 6A 5-Amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida

17

La preparación se lleva a cabo de forma análoga al protocolo del ejemplo 4A.

EM (ESI): m/z = 197 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 7,65 (s, 1H), 6,9 (s a, 2H), 6,1 (s, 2H), 3,9 (m, 1H), 1,85-1,6 (m, 4H), 0,7 (t, 6H) ppm.

Ejemplos de realización Ejemplo 1 6-(Ciclohexilmetil)-1-ciclopentil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

18

Se disponen bajo argón 75 mg (0,39 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 183 mg (1,16 mmoles, 3 equiv.) de éster metílico del ácido ciclohexilacético en 1,5 ml de etanol absoluto. Se añaden lentamente a 0ºC 54 mg de hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite mineral; 1,35 mmoles, 3,5 equiv.) a contracorriente de argón. La mezcla generada se calienta lentamente y se agita durante 18 h a reflujo. Para el procesamiento se añaden 20 ml de agua, y la mezcla se extrae varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se secan mediante sulfato sódico y se concentran al vacío. El producto bruto se purifica mediante HPLC preparativa.

Rendimiento: 36 mg (31% d. t.)

EM (ESI): m/z = 301 (M+H)^{+}

P.f.: 147ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 11,95 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 2,5 (d, 2H), 2,15-1,75 (m, 7H), 1,75-1,55 (m, 7H), 1,3-0,9 (m, 5H) ppm.

Ejemplo 2 1-Ciclopentil-6-(3-hidroxipropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

19

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 75 mg (0,39 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 140 mg (1,16 mmoles) de éster metílico del ácido 4-hidroxibutírico.

Rendimiento: 85 mg (84% d. t.)

EM (ESI): m/z = 263 (M+H)^{+}

P.f.: 138ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 3,5 (t, 2H, J = 6,5 Hz), 2,65 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,2-1,55 (m, 10H) ppm.

Ejemplo 3 6-(Ciclohexilmetil)-1-(1-etilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

20

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,02 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 482 mg (3,06 mmoles) de éster metílico del ácido ciclohexilacético.

Rendimiento: 146 mg (47% d. t.)

EM (ESI): m/z = 303 (M+H)^{+}

P.f.: 122ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,5 (m, 2H), 2,0-1,5 (m, 10H), 1,4-0,9 (m, 5H), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 4 1-Ciclopentil-6-(2-metilbutil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

21

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,01 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 450 mg (3,03 mmoles) de éster etílico del ácido 3-metilvalérico.

Rendimiento: 88 mg (32% d. t.)

EM (DCI): m/z = 275 (M+H)^{+}

P.f.: 86ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 2,65 (dd, 1H), 2,45 (dd, 1H), 2,15-1,8 (m, 7H), 1,7 (m, 2H), 1,45-1,15 (m, 2H), 0,9 (m, 6H) ppm.

Ejemplo 5 1-Ciclopentil-6-(3-metilbutil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

22

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,01 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 450 mg (3,03 mmoles) de éster etílico del ácido 4-metilvalérico.

Rendimiento: 165 mg (60% d. t.)

EM (ESI): m/z = 275 (M+H)^{+}

P.f.: 133ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 2,6 (m, 2H), 2,2-1,5 (m, 11H), 0,9 (d, 6H, J = 6,5 Hz) ppm.

Ejemplo 6 6-(2-Ciclopenten-1-ilmetil)-1-ciclopentil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

23

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,01 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 446 mg (1,82 mmoles, pureza 95%) de éster metílico del ácido 2-ciclopenten-1-ilacético (bibl.: Roenn y col., Tetrahedron Lett. 1995, 36, 7749).

Rendimiento: 86 mg (30% d. t.)

EM (ESI): m/z = 285 (M+H)^{+}

P.f.: 166ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,75 (m, 2H), 5,1 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,8-2,5 (m, 2H), 2,45-1,45 (m, 12H) ppm.

Ejemplo 7 1-(1-Etilpropil)-6-(2-metilbutil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

24

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 445 mg (3,0 mmoles) de éster etílico del ácido 3-metilvalérico.

Rendimiento: 99 mg (36% d. t.)

EM (ESI): m/z = 277 (M+H)^{+}

P.f.: 121ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,5 (m, 1H), 2,6 (dd, 1H), 2,45 (dd, 1H), 2,05-1,7 (m, 5H), 1,45-1,15 (m, 2H), 0,9 (m, 6H), 0,65 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 8 1-(1-Etilpropil)-6-isopentil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

25

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 445 mg (3,0 mmoles) de éster etílico del ácido 4-metilvalérico.

Rendimiento: 127 mg (46% d. t.)

EM (ESI): m/z = 277 (M+H)^{+}

P.f.: 127ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 2,0-1,8 (m, 4H), 1,7-1,5 (m, 3H), 0,9 (d, 6H, J = 7 Hz), 0,6 (t, 6H, J = 6 Hz) ppm.

Ejemplo 9 1-(1-Etilpropil)-6-isobutil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

26

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 464 mg (3,5 mmoles) de éster etílico del ácido 3-metilbutírico.

Rendimiento: 127 mg (48% d. t.)

EM (ESI): m/z = 263 (M+H)^{+}

P.f.: 161ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,5 (m, 2H), 2,15 (m, 1H), 1,95-1,75 (m, 4H), 0,9 (d, 6H, J = 7 Hz), 0,55 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 10 1-(1-Etilpropil)-6-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

27

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 410 mg (3,5 mmoles) de éster etílico del ácido butírico.

Rendimiento: 159 mg (64% d. t.)

EM (ESI): m/z = 249 (M+H)^{+}

P.f.: 127ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 11,95 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,5 (m, 1H), 2,6 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,0-1,65 (m, 6H), 0,9 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 11 1-(1-Etilpropil)-6-(tetrahidro-2-furanilmetil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

28

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 553 mg (3,5 mmoles) de éster etílico del ácido tetrahidrofuran-2-ilacético.

Rendimiento: 202 mg (68% d. t.)

EM (ESI): m/z = 291 (M+H)^{+}

P.f.: 136ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,6 (m, 1H), 2,8 (m, 2H), 2,1-1,55 (m, 8H), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 12 6-(2-Ciclopenten-1-ilmetil)-1-(1-etilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

29

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 490 mg (3,5 mmoles) de éster metílico del ácido 2-ciclopenten-1-ilacético (bibl.: Roenn y col., Tetrahedron Lett. 1995, 36, 7749).

Rendimiento: 111 mg (39% d. t.)

EM (ESI): m/z = 287 (M+H)^{+}

P.f.: 128ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,8-5,65 (m, 2H), 4,5 (m, 1H), 3,2 (m, 1H), 2,8-2,55 (m, 2H), 2,3 (m, 2H), 2,15-1,8 (m, 5H), 1,55 (m, 1H), 0,65 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 13 Éster etílico del ácido 4-[1-(1-etilpropil)-4-oxo-4,5-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il]butírico

30

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 1,13 g (6,0 mmoles) de éster dietílico del ácido glutárico.

Rendimiento: 46 mg (13% d. t.)

EM (ESI): m/z = 321 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,5 (m, 1H), 4,2 (c, 2H, J = 7 Hz) 2,7 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,4 (t, 2H, J = 7 Hz), 2,1-1,75 (m, 6H), 1,2 (t, 3H, J = 7 Hz), 0,65 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 14 Éster etílico del ácido 4-[1-(1-etilpropil)-4-oxo-4,5-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il]propiónico

31

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 1,04 g (6 mmoles) de éster dietílico del ácido succínico.

Rendimiento: 176 mg (56% d. t.)

EM (ESI): m/z = 307 (M+H)^{+}

P.f.: 118ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,1 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,0 (c, 2H, J = 7 Hz), 2,9 (m, 2H), 2,8 (m, 2H), 2,0-1,7 (m, 4H), 1,2 (t, 3H, J = 7 Hz), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 15 1-Ciclopentil-6-[(4-metilciclohexil)metil]-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

32

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 664 mg (3,5 mmoles) de éster etílico del ácido (4-metilciclohexil)acético (mezcla cis/trans). El producto está presente como mezcla de los isómeros cis y trans.

Rendimiento: 131 mg (41% d. t.)

EM (ESI): m/z = 315 (M+H)^{+}

P.f.: 126ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 2,6 (d, 2H, J = 7 Hz), 2,2-0,8 (m, 21H) ppm.

Ejemplo 16 1-(1-Etilpropil)-6-[(4-metilciclohexil)metil]-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

33

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 413 mg (2,2 mmoles) de éster etílico del ácido (4-metilciclohexil)acético (mezcla cis/trans). El producto está presente como mezcla de los isómeros cis y trans.

Rendimiento: 60 mg (19% d. t.)

EM (ESI): m/z = 317 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,6 (d, 2H, J = 7 Hz), 2,2-0,8 (m, 17H), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 17 1-Ciclopentil-6-(tetrahidro-2-furanilmetil]-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

34

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 559 mg (3,5 mmoles) de éster etílico del ácido tetrahidrofuran-2-ilacético.

Rendimiento: 175 mg (60% d. t.)

EM (ESI): m/z = 289 (M+H)^{+}

P.f.: 179ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 11,95 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 3,8 (m, 1H), 3,6 (m, 1H), 2,8 (m, 2H), 2,15-1,55 (m, 12H) ppm.

Ejemplo 18 Éster etílico del ácido 4-[1-ciclopentil-4-oxo-4,5-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-6-il]propiónico

35

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 200 mg (1,0 mmoles) de 5-amino-1-ciclopentil-1H-pirazol-4-carboxamida y 1,05 g (6,05 mmoles) de éster dietílico del ácido succínico.

Rendimiento: 150 mg (49% d. t.)

EM (DCI): m/z = 305 (M+H)^{+}

P.f.: 185ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,1 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,05 (c, 2H, J = 7 Hz), 2,9 (m, 2H), 2,8 (m, 2H), 2,15-1,6 (m, 8H), 1,2 (t, 3H, J = 7 Hz) ppm.

Ejemplo 19 6-(Ciclohexilmetil)-1-(1-etilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-tiona

36

A una solución de 50 mg (0,17 mmoles) de 6-(ciclohexilmetil)-1-(etilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona (ejemplo 3) en 1 ml de piridina se añaden a temperatura ambiente 74 mg (0,33 mmoles, 2 equiv.) de pentasulfuro de difósforo y a continuación se agita durante la noche a reflujo. Tras enfriarse, se añaden a la solución de reacción 20 ml de una solución helada de hidrogenocarbonato sódico al 2,5% y se extrae tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con una solución saturada de cloruro sódico, se secan mediante sulfato sódico y se concentran al vacío. El producto bruto se purifica mediante HPLC preparativa.

Rendimiento: 42 mg (80% d. t.)

EM (DCI): m/z = 319 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 13,4 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,7 (d, 2H, J = 7 Hz), 2,0-1,5 (m, 10H), 1,4-0,85 (m, 5H), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 20 3-(1-Ciclopentil-4-oxo-4,5-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il)-N-fenil-propanamida

37

Se agita durante 1 h a 60ºC una solución de 100 mg (0,33 mmoles) de éster etílico del ácido 4-[1-ciclopentil-4-oxo-4,5-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il]propiónico (ejemplo 18) en una mezcla de 1 ml de etanol y 0,5 ml de sosa cáustica al 20%. La proporción de disolvente orgánico se extrae en evaporador rotativo y la solución se ajusta a pH 3 con ácido clorhídrico 1 N. Después, la solución se concentra por evaporación hasta la sequedad, el residuo se mezcla con 5 ml de metanol y la solución se filtra. Tras extraer el metanol se obtiene el ácido carboxílico correspondiente en forma de producto bruto (90 mg, cuantitativo).

Se disponen 87 mg (0,31 mmoles) del ácido carboxílico así obtenido en 6 ml de diclorometano y se añaden primero 119 mg (0,31 mmoles, 1 equiv.) de HATU y a continuación 29 mg (0,31 mmoles, 1 equiv.) de anilina y 81 mg (0,63 mmoles, 2 equiv.) de N-etildiisopropilamina y se agitan durante la noche. Para el procesamiento, la solución de reacción se lava dos veces con una solución saturada de hidrogenocarbonato sódico, la fase orgánica se seca mediante sulfato sódico y se concentra al vacío. El producto bruto se purifica mediante HPLC preparativa.

Rendimiento: 25 mg (22% d. t.)

EM (ESI): m/z = 352 (M+H)^{+}

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,05 (s, 1H), 10,1 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 7,6 (d, 2H), 7,3 (t, 2H), 7,0 (t, 1H), 5,0 (m, 1H), 3,0 (m, 2H), 2,8 (m, 2H), 2,05-1,4 (m, 8H) ppm.

Ejemplo 21 6-(Ciclopentilmetil)-1-(1-etilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

38

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 150 mg (0,75 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 351 mg (2,25 mmoles) de éster etílico del ácido 2-ciclopentilacético.

Rendimiento: 91 mg (42% d. t.)

EM (ESI): m/z = 289 (M+H)^{+}

P.f.: 156ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,0 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,7 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 2,3 (m, 1H), 2,0-1,45 (m, 10H), 1,35-1,1 (m, 2H), 0,6 (t, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.

Ejemplo 22 1-(1-Etilpropil)-6-(3,3,3-trifluoro-2-metilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

39

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 100 mg (0,51 mmoles) de 5-amino-1-(1-etilpropil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 469 mg (2,55 mmoles) de éster etílico del ácido 3-metil-4,4,4-trifluorobutírico.

Rendimiento: 98 mg (61% d. t.)

EM (ESI): m/z = 317 (M+H)^{+}

P.f.: 156ºC

RMN-^{1}H (200 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,2 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,2-2,9 (m, 2H), 2,7 (m, 1H), 2,0-1,7 (m, 4H), 1,1 (d, 3H), 0,6 (t, 6H) ppm.

Ejemplo 23 1-(1-Ciclopentil)-6-(3,3,3-trifluoro-2-metilpropil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]-pirimidin-4-ona

40

El producto se obtiene de forma análoga al ejemplo 1 partiendo de 100 mg (0,51 mmoles) de 5-amino-1-(1-ciclopentil)-1H-pirazol-4-carboxamida y 474 mg (2,57 mmoles) de éster etílico del ácido 3-metil-4,4,4-trifluorobutírico.

Rendimiento: 119 mg (73% d. t.)

EM (ESI): m/z = 315 (M+H)^{+}

P.f.: 166ºC

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 12,1 (s, 1H), 8,0 (s, 1H), 5,1 (m, 1H), 3,2-2,95 (m, 2H), 2,7 (m, 1H), 2,2-1,6 (m, 8H), 1,1 (d, 3H) ppm.

Claims

1. Compuestos de fórmula

41

en la que

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{6},

o

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{6} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6},

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{3}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

2. Compuestos según la reivindicación 1, en los que

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{6},

R^{2}: significa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6},

o

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{6} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6},

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{4}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

3. Compuestos según las reivindicaciones 1 y 2, en los que

R^{1}: significa alquilo C_{1}-C_{4}, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, estando alquilo C_{1}-C_{4} dado el caso sustituido con hidroxi, trifluorometilo, alcoxi C_{1}-C_{4}, -C(=O)OR^{5} o -C(=O)NR^{6}R^{7}, y

R^{5}: representa alquilo C_{1}-C_{4},

R^{2}: significa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, trifluorometilo, alcoxi C_{1}-C_{4},

o

R^{8}: representa alquilo C_{1}-C_{4} o bencilo,

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

4. Compuestos según las reivindicaciones 1 a 3, en los que

R^{6}: representa fenilo y

R^{7}: representa hidrógeno,

R^{2}: significa hidrógeno, metilo, trifluorometilo, o

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno o azufre,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

5. Compuestos según las reivindicaciones 1 a 4, en los que

R^{6}: representa fenilo y

R^{7}: representa hidrógeno,

R^{2}: significa hidrógeno, metilo, o

R^{3}: significa hidrógeno,

R^{4}: pentan-3-ilo, cicloalquilo C_{5}-C_{6},

X: oxígeno,

así como sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

6. Procedimiento para la preparación de los compuestos según las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque

[A] compuestos de fórmula

42

\vskip1.000000\baselineskip

en la que R^{4} presenta los significados antes indicados,

se convierten primero, por transformación con un compuesto de fórmula

\vskip1.000000\baselineskip

43

\vskip1.000000\baselineskip

en la que R^{1}, R^{2} y R^{3} presentan los significados antes indicados

y

Z representa cloro o bromo,

en un disolvente inerte y en presencia de una base, en compuestos de fórmula

44

\newpage

45

o bien

46

en la que R^{1}, R^{2} y R^{3} presentan los significados antes indicados

y

R^{9} representa metilo o etilo,

en un disolvente inerte y en presencia de una base,

o bien

[C] compuestos de fórmula

47

en la que R^{4} presenta los significados antes indicados,

48

49

7. Compuestos según una de las reivindicaciones 1 a 5 para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades.

8. Medicamento que contiene al menos uno de los compuestos según una de las reivindicaciones 1 a 5 y al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable y esencialmente no tóxico.

9. Uso de los compuestos según una de las reivindicaciones 1 a 5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis y/o el tratamiento de trastornos de la percepción, la capacidad de concentración y las capacidades de aprendizaje y/o de memoria.

10. Uso según la reivindicación 9, en el que el trastorno es una consecuencia de la enfermedad de Alzheimer.

11. Uso de los compuestos según una de las reivindicaciones 1 a 5 para la preparación de un medicamento para mejorar la percepción, la capacidad de concentración y las capacidades de aprendizaje y/o de memoria.