ES2260859T3 - Profarmacos polimericos con bloqueo trialquilo facilitado de agentes bioactivos que contienen amino. - Google Patents

Profarmacos polimericos con bloqueo trialquilo facilitado de agentes bioactivos que contienen amino.

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ES2260859T3 ES98965013T ES98965013T ES2260859T3 ES 2260859 T3 ES2260859 T3 ES 2260859T3 ES 98965013 T ES98965013 T ES 98965013T ES 98965013 T ES98965013 T ES 98965013T ES 2260859 T3 ES2260859 T3 ES 2260859T3
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Yun E. Choe
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Abstract

Un compuesto que comprende la fórmula: (Ver fórmula) R, en el que: B es H, OH, OSiR13, un residuo de un fragmento blanco que contiene amina o un residuo de un fragmento que contiene hidroxilo; L1 y L2 son fragmentos de unión bifuncionales; Y2 es O o S; R2 se selecciona del grupo constituido por alquilos C1_6, alquilos C3_12 ramificados, cicloalquilos C3_8, alquilos C1_6 sustituidos, cicloalquilos C3_8 sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C1_6, heteroalquilos C1_6 sustituidos, alcoxi C1_66, fenoxi y heteroalcoxi C1_6; R9, R10 y R13 son independientemente uno de hidrógeno, alquilos C1_6, alquilos C3_12 ramificados, cicloalquilos C3_8, alquilos C1_6 sustituidos, cicloalquilos C3_8 sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C1_6, heteroalquilos C1_6 sustituidos, alcoxi C1_6, fenoxi y heteroalcoxi C1_6; Ar es un fragmento que, cuando está incluido en la Fórmula (I), forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones; (m) es cero o uno; y R11 es un residuo polímero.

Description

Profármacos poliméricos con bloqueo trialquilo facilitado de agentes bioactivos que contienen amino.
Campo técnico
La presente invención se refiere a profármacos dobles. En particular, la invención se refiere a profármacos dobles basados en polímeros que tienen enlaces reversibles que incluyen fracciones amino o hidroxilo de compuestos químicos y materiales biológicamente activos tales como enzimas, proteínas y similares.
Antecedentes de la invención
A lo largo de los años se han propuesto diversos procedimientos para administrar a mamíferos materiales biológicamente eficaces. Muchos agentes medicinales están disponibles como sales solubles en agua y pueden incluirse en formulaciones farmacéuticas con relativa facilidad. Los problemas sobrevienen cuando el agente medicinal deseado es insoluble en fluidos acuosos o se degrada rápidamente in vivo. Por ejemplo, los alcaloides son a menudo especialmente difíciles de solubilizar.
Una manera de solubilizar agentes medicinales es incluirlos como parte de un profármaco soluble. Los profármacos incluyen derivados químicos de un compuesto biológicamente activo principal que, tras la administración, eventualmente libera el compuesto principal in vivo. Los profármacos permiten al artesano modificar el inicio y/o duración de la acción de un agente in vivo y puede modificar el transporte, distribución o solubilidad de un fármaco en el cuerpo. Además, las formulaciones de profármacos a menudo reducen la toxicidad y/o superan dificultades que se encuentran cuando se administran preparaciones farmacéuticas. Los ejemplos típicos de profármacos incluyen fosfatos orgánicos o ésteres de alcoholes o trialcoholes. Ver Remington's Pharmaceutical Sciences, 16º Ed., A. Osol, Ed. (1980), cuya descripción se incorpora en este documento por referencia.
Los profármacos son a menudo formas del compuesto activo o principal, biológicamente inertes, o sustancialmente inactivos. La tasa de liberación del fármaco activo, es decir, la tasa de hidrólisis, está influenciada por diversos factores pero especialmente por el tipo de enlace que une al fármaco principal con el modificador. Debe tenerse cuidado para evitar preparar profármacos que se eliminan a través del riñón o del sistema reticuloendotelial, etc. antes de que se produzca una cantidad de hidrólisis suficiente del compuesto principal. Incorporando un polímero como parte del sistema del profármaco puede incrementarse la vida media en circulación del fármaco.
Aunque los conceptos mencionados anteriormente sobre sistemas de administración basados en profármacos han probado ser útiles en muchas circunstancias, existen no obstante situaciones en las que resultan deseables otras alternativas. Por ejemplo, Bundgaard en "The Double Prodrug Concept and Its Applications" en Advanced Drug Delivery, Reviews, 3 (1989) 39-65, (cuyo contenido se incorpora en este documento como referencia) señala que en muchos casos es difícil obtener un profármaco con la combinación apropiada de estabilidad adecuada in vitro y alta susceptibilidad para regenerar el fármaco principal in vivo. Como señala Bundgaard, una manera promisoria de superar algunos de los problemas encontrados previamente incluye el uso de compuestos latentes en cascada o "pro-profármacos". En tales sistemas, la secuencia de reacción hidrolítica incluye una primera etapa que usualmente es un clivaje enzimático y la segunda etapa incluye una hidrólisis no enzimática que tiene lugar sólo después de que la primera etapa haya ocurrido. El uso de sistemas de transporte basados en polímeros como parte de la tecnología de compuestos latentes en cascada no se ha descrito.
Shan y col. destacó recientemente los problemas asociados con la preparación de profármacos de fármacos que contienen aminas en "Prodrug Strategies Based on Intramolecular Cyclization Reactions" J. Pharm. Sci. Julio 1997 Vol. 86, Nº 7, 765-767, (cuyo contenido se incluye en este documento como referencia). Para evitar la relativa estabilidad del enlace amida, los autores describen profármacos que incorporan diversos fragmentos capaces de sufrir reacciones de ciclización para liberar el fármaco principal. Los mecanismos desencadenantes químicos o biológicos que inician las reacciones de ciclización son independientes de aquellos necesarios para liberar el fármaco original por medio de hidrólisis del enlace amida. Nuevamente, se describen sistemas no basados en polímeros.
Se cree que a pesar del trabajo descrito en el campo de los profármacos, no se abordaron suficientemente algunos problemas específicos. Por ejemplo, las técnicas descritas anteriormente no abordan suficientemente los problemas de solubilidad de muchos compuestos principales. Además, tampoco se desarrolló suficientemente el problema de diseñar para obtener un aumento suficiente de la vida media circulante para el profármaco. Por ello, sigue existiendo una necesidad de proveer técnicas adicionales para brindar al artesano técnicas alternativas para unión a vehículos de transporte para regular el efecto biológico. Además, sería deseable proveer técnicas adicionales para abordar problemas asociados con residuos amino y/o hidroxilo de compuestos principales y así evitar la hidrólisis excesivamente rápida o lenta de la forma de transporte del compuesto principal a pH fisiológico.
\newpage
Resumen de la invención
La presente invención aborda los problemas descritos anteriormente. En un aspecto de la invención, se proveen compuestos de Fórmula (I):
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1 
\vskip1.000000\baselineskip
en los que:
B es H, OH, OSiR_{13}, un residuo de un fragmento blanco que contiene amina o un residuo de un fragmento que contiene hidroxilo; L_{1} es un fragmento de unión bifuncional tal como
2
o
3 
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L_{2} es un fragmento de unión bifuncional tal como
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4 
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G es
--- 
\uelm{C}{\uelm{\dpara}{Y _{1} }}
---
o CH_{2};
Y_{1-2} son independientemente O ó S;
M es X ó Q; en el que
X es un grupo aceptor de electrones;
Q es un fragmento que contiene un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde C(=Y_{2});
R_{1}, R_{2} y R_{4} son independientemente uno de alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6}, heteroalquilos C_{1-6} sustituidos, alcoxi C_{1-6}, fenoxi y heteroalcoxi C_{1-6};
R_{7}, R_{8}, R_{9}, R_{10} y R_{13} son independientemente hidrógeno o un miembro del grupo que define R_{1}, R_{2} y R_{4};
Ar es un fragmento que cuando está incluido en la Fórmula (I) forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones;
(m) es cero o uno;
(n) es cero o un número entero positivo;
(p) es cero, uno o dos;
(q) es tres o cuatro; y
R_{11} es un residuo polímero, tal como un óxido de polialquileno soluble en agua.
En ciertos aspectos de preferencia, Ar es un fenilo sustituido con dialquilo tal como un dimetilfenilo y/o B es un grupo saliente tal como N-hidroxibenzotriazolilo, N-hidroxiftalimidilo, halógeno, p-nitrofenoxi, imidazolilo, N-hidroxisuccinimidilo, tiazolidiltiona u otros grupos activadores. Alternativamente, B es un residuo de un compuesto conteniendo amino o hidroxilo para el que es deseable mejorar una o más de sus propiedades de solubilidad en agua, disminución de antigenicidad, administración de profármaco y/o liberación controlada. Por ejemplo, B puede ser un residuo de una enzima, proteína o compuesto orgánico tal como daunorrubicina, doxorrubicina, mostaza de p-aminoanilina, camptotecina, paclitaxel, AraC, etc.
Para los objetivos de la presente invención, debe entenderse que el término "residuo" significa la parte de un compuesto biológicamente activo que permanece tras sufrir la reacción en la que la parte vehículo del profármaco ha sido unida por modificación de un grupo hidroxilo o amino.
Para los objetivos de la presente invención, debe entenderse que el término "alquilo" incluye alquilos C_{1-12} sustituidos lineales o ramificados, incluyendo alcoxi, cicloalquilos C_{3-8} o cicloalquilos sustituidos, etc.
Los profármacos dobles de la presente invención son sistemas de administración únicos. De preferencia la parte polimérica se libera primero por hidrólisis o actividad esterasa y posteriormente el fragmento resultante "segundo profármaco" sufre una reacción de ciclización para regenerar el compuesto principal conteniendo amina o hidroxilo (es decir bioactivo) in vivo.
Algunas de las mayores ventajas de los compuestos profármacos dobles de la presente invención es que son capaces de solubilizar compuestos que contienen amina o hidroxilo extendiendo su vida media comparada con la de sus homólogos profármacos nativos o "segundos". La parte polimérica puede también impartir un efecto de reducción de antigenicidad en el compuesto principal. Otra ventaja de los sistemas de la presente invención es que el enlace entre la parte polimérica y el compuesto "segundo profármaco" como se describió anteriormente, está diseñado para hidrolizarse o clivarse a una velocidad que permite al compuesto conservar su estabilidad y vida media circulante aumentadas. El fármaco nativo, sin embargo, no es liberado en este punto. La molécula nativa o principal deseada se liberará una vez que el "segundo profármaco" haya sufrido la reacción de bloqueo por lactonización de trialquilo relativamente rápida. Resulta fácilmente evidente que este enfoque de profármaco doble de la presente invención ofrece características únicas e inesperadas que mejoran la vida media circulante y la solubilidad de las moléculas nativas o sin modificar.
Se proveen también procedimientos para fabricar y usar los compuestos y conjugados descritos en este documento.
Breve descripción de los dibujos
Las Figuras 1-2 ilustran de manera esquemática dos procedimientos para formar profármacos dobles de la presente invención.
Las Figuras 3-16 ilustran los esquemas de reacción asociados con los Ejemplos.
Descripción detallada de la invención A. Fórmula (I)
En un aspecto de la invención, se proveen compuestos de fórmula (I):
5
en los que:
B es H, OH, OSiR_{13}, un residuo de un fragmento blanco que contiene amina o un residuo de un fragmento que contiene hidroxilo; L_{1} es un fragmento de unión bifuncional tal como
6
o
7
L_{2} es un fragmento de unión bifuncional tal como
8
G es
--- 
\uelm{C}{\uelm{\dpara}{Y _{1} }}
---
o CH_{2};
Y_{1-2} son independientemente O ó S;
M es X ó Q; en el que
X es un grupo aceptor de electrones
Q es un fragmento que contiene un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde C(=Y_{2});
R_{1}, R_{2} y R_{4} son independientemente uno de alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6}, heteroalquilos C_{1-6} sustituidos, alcoxi C_{1-6}, fenoxi y heteroalcoxi C_{1-6};
R_{7}, R_{8}, R_{9}, R_{10} y R_{13} son independientemente uno de hidrógeno, alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6}, heteroalquilos C_{1-6} sustituidos, alcoxi C_{1-6}, fenoxi y heteroalcoxi C_{1-6};
Ar es un fragmento que cuando está incluido en la Fórmula (I) forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones;
(m) es cero o uno;
(n) es cero u un número entero positivo;
(p) es cero, uno o dos;
(q) es tres o cuatro; y
R_{11} es un residuo polímero.
B. Descripción del fragmento Ar
En referencia a la Fórmula I, puede verse que el fragmento Ar es un fragmento que cuando está incluido en la Fórmula I forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones. Una característica clave es que el fragmento Ar es de naturaleza aromática. Generalmente, para ser aromático, los electrones \pi deben compartirse dentro de una "nube" por encima y por debajo del plano de una molécula cíclica. Además, el número de electrones \pi debe satisfacer la regla de Hückle (4n+2). Los expertos en la técnica se darán cuenta de que una miríada de fragmentos satisfará los requerimientos aromáticos del fragmento para la Fórmula I y por lo tanto son adecuados para el uso en este documento.
Los fragmentos hidrocarbonados aromáticos de preferencia incluyen, sin limitación:
9
10
11
en los que J es O, S o NR_{14}, E y Z son independientemente CR_{14} o NR_{14}; y R_{14} se selecciona del mismo grupo que aquel que define R_{9} en la Fórmula I por ejemplo hidrógeno, alquilos C_{1-6}, etc. También se contemplan isómeros de los anillos de 5 y 6 miembros como también sistemas benzo y dibenzo y sus congéneres relacionados. Los artesanos expertos en la técnica también apreciarán que los anillos aromáticos puedan sustituirse opcionalmente con heteroátomos tales como O, S, NR_{14}, etc. siempre que se cumpla con la regla de Hückle. Además, las estructuras aromáticas o heterocíclicas pueden opcionalmente estar sustituidas con halógeno(s), y/o cadenas laterales. Sin embargo, todas las estructuras adecuadas para fragmentos Ar de la presente invención son capaces de permitir que los fragmentos L_{2} y R_{2} estén en conformación orto dentro del mismo plano, como se muestra a continuación:
12
en los que L_{2} y R_{2} son como se definió anteriormente con respecto a la Fórmula (I) y R_{3}, R_{5} y R_{6} se seleccionan independientemente del grupo que define a R_{9} o un grupo ciano, nitro, carboxilo, acilo, acilo sustituido, carboxialquilo.
En aspectos de preferencia de la presente invención, R_{2} es alquilo C_{1-6}. De más preferencia, R_{2} es metilo. Además, R_{1} y R_{4} son de preferencia alquilo, por ejemplo metilo. Y_{1-2} son de preferencia O, y (p) es de preferencia uno.
Para los objetivos de la presente invención, los alquilos sustituidos incluyen carboxialquilos, aminoalquilos, dialquilaminos, hidroxialquilos y mercaptoalquilos; los cicloalquilos sustituidos incluyen fragmentos tales como 4-clorociclohexilo; los arilos incluyen fragmentos tales como naftilo; los arilos sustituidos incluyen fragmentos tales como 3-bromofenilo; los aralquilos incluyen fragmentos tales como toluilo; los heteroalquilos incluyen fragmentos tales como etiltiofeno; los heteroalquilos sustituidos incluyen fragmentos tales como 3-metoxitiofeno; alcoxi incluye fragmentos tales como metoxi; y fenoxi incluye fragmentos tales como 3-nitrofenoxi. Debe entenderse que halo incluye fluoro, cloro, iodo y bromo.
C. Fragmentos de enlace L_{1} Y L_{2}
Como se muestra anteriormente, la invención incluye fragmentos de enlace bifuncionales L_{1} y L_{2}, con L_{1} sirviendo para unir R_{11} y C(=Y_{2}) y L_{2} uniendo el fragmento Ar y B. En formas de realización de preferencia, L_{1} incluye el fragmento (M) que es un grupo aceptor de electrones (nombrado en este documento como X) o un fragmento conteniendo un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde C(=Y_{2}) (nombrado en este documento como Q). L_{1} y L_{2} pueden también incluir fragmentos bifuncionales tales como alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, etc.
D. La parte de enlace del profármaco doble
El primer enlace lábil del sistema de profármacos dobles, que une L_{1} a
\uelm{C}{\uelm{\dpara}{Y _{2} }}
,
se selecciona para hidrolizarse, tal como por medio de hidrólisis catalizada por una esterasa in vivo a una velocidad que genere cantidades suficientes del compuesto "segundo" profármaco dentro de un tiempo adecuado tras la administración. El término "cantidades suficientes" para los objetivos de la presente invención significará una cantidad que puede sufrir posteriormente bloqueo por lactonización de trialquilo in vivo para liberar el compuesto nativo y obtener el efecto deseado. Cuando está presente como parte de L_{1}, (n) es de preferencia 1 ó 2.
1. El Grupo X Aceptor de Electrones
En aquellos aspectos de la fórmula I donde L_{1} incluye M, el fragmento puede ser un grupo aceptor de electrones, nombrado en este documento como X. En particular, X puede ser fragmentos tales como O, NR_{12},
--- 
\uelm{C}{\uelm{\dpara}{Y _{3} }}
--- 
\uelm{N}{\uelm{\para}{}}
---,
S, SO y SO_{2} donde Y_{3} es igual a como se definió para Y_{1} y R_{12} es igual a como se definió para R_{9}, es decir H, alquilos C_{1-6}, etc., y R_{12} es igual a como se definió para R_{9}, por ejemplo H, alquilos C_{1-6}, alquilos ramificados, etc.. De preferencia, sin embargo cuando X es NR_{12}, R_{12} es H. Resulta de preferencia que X sea O o NR_{12}.
2. Parte Q del Enlace
Alternativamente, cuando L_{1} incluye Q, que es un fragmento que contiene un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde el fragmento C(=Y_{2}), el polímero R_{11}, está unido a Q de preferencia por medio de un heteroátomo tal como oxígeno. En una forma de realización de preferencia, el par de electrones libres está a 5 átomos de este oxígeno. Q puede seleccionarse de la lista no limitante de grupos alquilos C_{2-4} o cicloalquilos C_{3-8}, arilos o aralquilos sustituidos con un miembro del grupo constituido por O, S y NR_{12}. El par de electrones libres puede estar en cualquier lugar dentro del fragmento Q siempre que se mantenga la separación definida entre el par de electrones libres y el oxígeno.
En estas formas de realización, R_{11} está unido a Q por medio de NR_{12}, O o S. Por lo tanto, Q ayuda a la hidrólisis del enlace del profármaco de manera anquimérica por que el fragmento con el par de electrones libres puede generar un anillo de tres a seis miembros, de preferencia de cinco miembros como subproducto tras la hidrólisis del enlace éster de preferencia.
Q puede también seleccionarse del grupo constituido por grupos alquilo C_{2-4}, cicloalquilos, arilos, aralquilos sustituidos con un miembro del grupo constituido por NH, O, S, -CH_{2}-C(=O)-NH-, y fenilos sustituidos en orto tales como
13
3. Generación del Fármaco por Medio de Hidrólisis del Profármaco
Los compuestos profármacos de la presente invención están diseñados de tal manera que el t_{1/2} de hidrólisis < el t_{1/2} de eliminación en plasma.
Los enlaces incluidos en los compuestos tienen velocidad de hidrólisis en plasma del mamífero tratado suficientemente rápida para permitir liberación de cantidades suficientes de compuestos principales, es decir el compuesto bioactivo conteniendo amino o hidroxilo, previo a la eliminación. Algunos compuestos de preferencia de la presente invención, es decir aquellos en los que (n) es 1, tienen un t_{1/2} de hidrólisis en plasma en el intervalo de aproximadamente 5 minutos a aproximadamente 12 horas. De preferencia, las composiciones tienen un t_{1/2} de hidrólisis en plasma en el intervalo de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 8 horas y de mayor preferencia de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 horas.
4. Lactonización y Regeneración del Fármaco Nativo
Una vez que la primera hidrólisis éster del profármaco doble tuvo lugar in vivo, usualmente por medio de actividad esterasa o actividad moderada por el pH o reacción de ciclización, se cliva el residuo polimérico quedando el fragmento de segundo profármaco resultante. Este profármaco único sufre otra reacción de lactonización independiente in vivo para producir el compuesto principal o nativo deseado. Esta reacción espontánea tiene lugar tras la primera etapa de hidrólisis que controla la velocidad y se inicia por la simple eliminación de un protón del intermediario aromático que provoca una reacción de lactonización y liberación de la molécula principal. La reacción se muestra a continuación.
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La liberación de un compuesto principal conteniendo hidroxilo tendrá lugar de manera similar.
E. Polímeros sustancialmente no antigénicos
Las composiciones de "profármacos dobles" de la presente invención incluyen un polímero soluble en agua, R_{11}. En aspectos de preferencia de la invención, R_{11} incluye un grupo de cierre A que puede ser hidrógeno, fragmentos alquilo C_{1-6}, carboxialquilo, alquilos de dialquilacilurea, o un compuesto de fórmula (II) que se muestra a continuación que forma un bisistema:
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en el que B' es igual que B u otro miembro del grupo definido por B y las variables restantes como se expusieron anteriormente con respecto a la Fórmula (I).
Los ejemplos adecuados de tales polímeros incluyen óxidos de polialquileno tales como polietilenglicoles que, de preferencia, son sustancialmente no antigénicos. La fórmula general de PEG y sus derivados, es decir A'-O-(CH_{2}CH_{2}O)_{x}-(CH_{2})_{a}-A, donde (x) representa el grado de polimerización (es decir 10-2.300) o el número de unidades de repetición en la cadena polimérica y depende del peso molecular del polímero; (n) es cero o un entero positivo; A es un grupo de cierre como se definió en este documento, es decir un H, amino, carboxi, halo, alquilo C_{1-6} u otro grupo activador y A' es el mismo que A u otro fragmento A. También resultan útiles los polipropilenglicoles, derivados de PEG ramificados tales como aquellos descritos en la Patente de EEUU de asignación común Nº 5.643.575, "PEGs estrella" y PEGs multiarmados tales como aquellos descritos en Shearwaters Polymers, Inc. catálogo "Polyethilene Glycol Derivatives 1997-1998"; cuya descripción se incorpora en este documento como referencia. Debe entenderse que el polímero soluble en agua será funcionalizado para el enlace por medio de M, X o Q en este documento. A modo de ejemplo, la parte PEG de los profármacos puede ser, sin limitación, alguno de los siguientes compuestos:
- C(=Y)-(CH_{2})_{n}-O-(CH_{2}CH_{2}O)_{x}-A, -C(=Y)-Y-(CH_{2})_{n}-O-(CH_{2}CH_{2}O)_{x}-A y
- C(=Y)-NR_{12}-(CH_{2})_{n}-O-(CH_{2}CH_{2}O)_{x}-A donde Y es O o S y R_{12}, (n) y (x) son como se definieron anteriormente.
En muchos aspectos de la invención, resultan de preferencia poietilenglicoles (PEGs), PAOs terminados en alquilo C_{1-4}, mono activados, tales como polietilenglicoles terminados en monometilo (mPEGs).
Con el objeto de proveer el enlace hidrolizable deseado, pueden usarse polímeros activados por mono o diácidos tales como ácidos PEG o diácidos PEG así como también mono o di PEG aminas y mono o di PEG dioles. Los PAO ácidos adecuados pueden sintetizarse convirtiendo mPEG-OH en un etil éster y posterior saponificación. Ver también, Gehrhardt, H., y col. Polymer Bulletin 18: 487 (1987) y Veronese, F.M., y col., J. Controlled Release 10: 145 (1989). Alternativamente, el PAO ácido puede sintetizarse convirtiendo mPEG-OH en un éster de t-butilo y posterior clivaje ácido. Ver, por ejemplo, la Patente de EEUU de asignación común Nº 5.605.976. Las descripciones de cada una de las anteriores se incorporan en este documento por referencia.
Aunque los PAOs y PEGs pueden variar sustancialmente en el peso molecular promedio, usualmente se seleccionan polímeros en el intervalo de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 100.000 para los objetivos de la presente invención. Resultan de preferencia los pesos moleculares desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 50.000 y particularmente de preferencia desde 5.000 hasta aproximadamente 40.000. El peso molecular promedio del polímero seleccionado para inclusión en el "profármaco doble" debe ser suficiente como para proveer circulación suficiente del "profármaco doble" previamente a la hidrólisis del enlace. Dentro de los intervalos provistos anteriormente, resultan de preferencia los polímeros con peso molecular en intervalos de al menos 20.000 en algunos aspectos para fragmentos quimioterapéuticos y orgánicos. En el caso de algunos nucleofilos tales como ciertas proteínas, enzimas y similares, son de preferencia polímeros con un intervalo de peso molecular desde aproximadamente 2.000 hasta aproximadamente 20.000.
Las sustancias poliméricas incluidas en este documento son de preferencia solubles en agua a temperatura ambiente. Una lista no limitante de tales polímeros incluye homopolímeros de óxido de polialquileno tales como polietilenglicol (PEG) o polipropilenglicoles, polioles polioxietilenados, copolímeros de los mismos y copolímeros en bloque de los mismos, a condición de que se mantenga la solubilidad en agua de los copolímeros en bloque.
Como una alternativa a polímeros basados en PAO, pueden usarse materiales efectivamente no antigénicos tales como dextrán, alcoholes polivinílicos, polímeros basados en carbohidratos, poliaminoácidos, hidroxipropilmetacrilamida (HPMA) y copolímeros de los mismos, etc. y similares, si se emplea el mismo tipo de activación como el descrito en este documento para PAOs tal como PEG. Los expertos en la técnica reconocerán que la lista anterior es meramente ilustrativa y que se contemplan todos los materiales poliméricos con las cualidades descritas en este documento. Para los objetivos de la presente invención, "efectivamente no antigénico" significa todo material polimérico conocido en la técnica como no tóxico y que no provoca una respuesta inmune apreciable en un mamífero.
F. Síntesis del sistema de transporte del profármaco doble polimérico
Los profármacos dobles de la presente invención pueden prepararse al menos de dos maneras. Una técnica mostrada esquemáticamente en la Figura 1 incluye:
a. proveer un compuesto intermedio (III)
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en el que M_{2} es un grupo protector clivable o reversible, B_{2} es un grupo saliente tal como OH y todas las demás variables que se expusieron anteriormente con respecto a la Fórmula (I);
b. tratar el compuesto intermedio (III) con un ácido fuerte tal como TFA (ácido trifluoroacético) u otro ácido trihaloacético, HCl, ácido sulfúrico, etc., o por hidrogenación catalítica para eliminar el grupo protector; y
c. hacer reaccionar el compuesto intermedio (III) desprotegido obtenido en la etapa b. con un fragmento capaz de reaccionar con L_{1} tal como un polímero activado, es decir un polímero que tiene un grupo funcional reactivo, (nombrado R_{15} en la Figura 1) por ejemplo, p-nitrofenilo o carbonato de succinimidilo, carbonilimidazol, tiazolidiniltiona, o similares, y un grupo separador opcional, es decir CR_{9}R_{10}, para formar una forma de transporte del profármaco doble activada de fórmula (IV):
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en la que B_{2} es un grupo saliente y todas las demás variables como se expusieron anteriormente con respecto a la Fórmula (I); y opcionalmente
d. unir un residuo de un compuesto que contiene amina o hidroxilo, por ejemplo el fármaco a transportar, al compuesto (IV) desplazando B_{2} en una reacción con un compuesto que contiene amina o hidroxilo. Ver Figura 1. Pueden usarse técnicas similares cuando se usan otros fragmentos aromáticos como materiales de inicio.
Alternativamente, el profármaco doble puede prepararse como se muestra en la Figura 2 con fines ilustrativos con un compuesto que contiene amina mediante:
a. la unión de un compuesto que contiene amina o hidroxilo al compuesto intermedio (III);
b. la eliminación del grupo protector y
c. la reacción del compuesto intermedio desprotegido con un polímero activado para formar el profármaco doble.
Aunque no se ilustra en la Figura 2 en el esquema de reacción para un compuesto que contiene OH, el esquema de reacción no obstante tendría lugar de la manera mostrada en la Figura 2 con un enlace éster formado entre el sistema de transporte y el residuo profármaco.
El compuesto intermedio (III) puede prepararse usando técnicas de síntesis orgánica estándar. Por ejemplo, los derivados bloqueados de ácido dialquilfenilpropiónico tales como ácido 3-(2'-Boc-alanil-4',4'-dimetilfenil)-3,3-dimetilpropiónico pueden sintetizarse usando un procedimiento descrito por Binghe Wang, y col., Synthesis of a Novel Esterase-Sensitive Cyclic Prodrug System for Peptides That Utilizes a "Trimethyl Lock" - Facilitated Lactonization Reaction. J. Org. Chem. 1997, 62, 1363), cuya descripción se incorpora en este documento como referencia. Para los expertos en la técnica resultarán evidentes materiales de inicio aromáticos alternativos sin una excesiva experimentación.
La unión del compuesto principal al compuesto intermedio (III) o (IV) puede llevarse a cabo usando técnicas de síntesis estándar mediante agentes de acoplamiento conocidos por los expertos en la técnica tales como 1,3-diisopropilcarbodiimida (DIPC), dialquilcarbodiimidas, haluros de 2-halo-1-alquil-piridinio, 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC), anhídrido cíclico del ácido propanfosfónico (PPACA) y diclorofosfatos de fenilo. Alternativamente cuando B es un buen grupo saliente tal como aquellos expuestos anteriormente en G.1., no se necesita un agente de acoplamiento y la reacción tiene lugar en presencia de una base.
La eliminación del grupo protector se lleva a cabo de la misma manera descrita en el primer procedimiento.
G. El grupo saliente o residuo "B" 1. Grupos Salientes
En aquellos aspectos en los que B es un grupo saliente, los grupos salientes adecuados incluyen, sin limitación, fragmentos tales como N-hidroxibenzotriazolil, halógeno, N-hidroxiftalimidil, p-nitrofenoxi, imidazolil, N-hidroxisuccinimidil; tiazolidiniltiona u otros grupos salientes resultarán evidentes para aquellos expertos en la técnica.
Los grupos salientes pueden ser unidos a la parte L_{2} del compuesto una vez que se ha formado la parte profármaco "doble", es decir la parte PEG. Los expertos en la técnica entenderán las reacciones de síntesis usadas y descritas en este documento sin excesiva experimentación. Generalmente, con fines ilustrativos y sin limitación, las formas activadas del sistema de transporte de profármacos doble se preparan mediante acilación el hidroxi aromático de un compuesto de fórmula (V) que se muestra a continuación:
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en el que:
L_{2} y B_{2} son como se establecieron anteriormente y a partir de entonces haciendo reaccionar el compuesto resultante acilado con un grupo activador para el acoplamiento a un blanco, por ejemplo, compuestos tales como 4-nitrofenil-cloroformato, carbonato de disuccinimidilo (DSC), carbonildiimidazol, tiazolidintiona, etc., para proveer el derivado deseado.
Una vez en el lugar, la forma "activada" del profármaco PEG está lista para conjugación con un compuesto que contiene amina o hidroxilo. A continuación se muestran algunas formas de transporte activadas.
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2. Residuos de Compuestos que Contienen Amina
En aquellos aspectos de la invención, por ejemplo tras la formación del transporte del profármaco, B es un residuo de un compuesto que contiene amina, una lista no limitante de compuestos adecuados incluye residuos de compuestos orgánicos, enzimas, proteínas, polipéptidos, etc.. Los compuestos orgánicos incluyen, sin limitación, fragmentos tales como compuestos de antraciclina incluyendo daunorrubicina, doxorrubicina; mostaza de p-aminoanilina, Ara-C (arabinósido de citosina) y compuestos antimetabolito relacionados, por ejemplo, Gemcitabina, etc.. Alternativamente, B puede ser un residuo de un agente cardiovascular, antineoplásico, antiinfeccioso, antifúngico que contiene amina, tal como nistatina y anfotericina B, agente ansiolítico, agente gastrointestinal, agente activador del sistema nervioso central, agente analgésico, de fertilidad, anticonceptivo, agente antiinflamatorio, agente esteroidal, agente antiuricémico, agente vasodilatador, agente vasoconstrictor, etc..
Las proteínas, polipéptidos, enzimas, péptidos y similares adecuados que tienen al menos un grupo amino disponible para unión al polímero incluyen materiales que tienen actividades fisiológicas o farmacológicas así como aquellos que son capaces de catalizar reacciones en solventes orgánicos. El único requerimiento adicional de los materiales que contienen aminas es que mantengan al menos alguna parte de la actividad asociada con la proteína, enzima, péptido, etc. sin modificar tras la hidrólisis de la parte de transporte del profármaco.
Las proteínas, polipéptidos y péptidos adecuados de interés incluyen, pero no se limitan a, hemoglobina, proteínas séricas tales como factores sanguíneos incluyendo Factores VII, VIII y IX; inmunoglobulinas, citoquinas tales como interleuquinas, es decir. IL-1 a IL-13, \alpha, \beta y \gamma interferones, factores estimulantes de colonias incluyendo factores estimulantes de colonias de granulocitos, factores de crecimiento derivados de plaquetas y proteínas activadoras de fosfolipasa (PLAP). Otras proteínas de interés biológico o terapéutico general incluyen insulina, proteínas de plantas tales como lectinas y ricinas, factores de necrosis tumoral y proteínas relacionadas, factores de crecimiento tales como factores de crecimiento y transformación, tales como TGF\alphas o TGF\betas y factores de crecimiento epidérmico, hormonas, somatomedinas, eritropoyetina, hormonas pigmentarias, factores de liberación hipotalámicos, hormonas antidiuréticas, prolactina, gonadotrofina coriónica, hormona estimulante de folículos, hormona estimulante de tiroides, activador tisular de plasminógeno y similares. Las inmunoglobulinas de interés incluyen IgG, IgE, IgM, IgA, IgD y fragmentos de las mismas.
Algunas proteínas tales como las interleuquinas, interferones y factores estimulantes de colonias existen en forma no glicosilada, usualmente como resultado de usar técnicas recombinantes. Las versiones no glicosiladas también están dentro de las proteínas de la presente invención.
Las enzimas de interés incluyen enzimas específicas de carbohidratos, enzimas proteolíticas, oxidorreductasas, transferasas, hidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas. Sin limitación a enzimas en particular, los ejemplos de enzimas de interés incluyen asparaginasa, arginasa, arginina desaminasa, adenosina desaminasa, superóxido dismutasa, endotoxinasas, catalasas, quimotripsina, lipasas, uricasas, adenosina difosfatasa, tirosinasas y bilirrubina oxidasa. Las enzimas específicas de carbohidratos de interés incluyen glucosa oxidasas, glucodasas, galactosidasas, glucocerebrosidasas, glucouronidasas, etc.
También se incluye en este documento cualquier parte de un polipéptido que demuestra bioactividad in vivo. Esto incluye secuencias de aminoácidos, ácidos nucléicos (ADN, ARN), ácidos nucléicos peptídicos (PNA), fragmentos de anticuerpos, proteínas de unión de cadena única, ver, por ejemplo la Patente de EEUU Nº 4.946.778, cuya descripción se incorpora en este documento como referencia, moléculas de unión incluyendo fusiones de anticuerpos o fragmentos, anticuerpos policlonales, anticuerpos monoclonales y anticuerpos catalíticos.
Las proteínas o partes de las mismas pueden prepararse o aislarse usando técnicas conocidas por los expertos en la técnica tales como cultivos tisulares, extracción de fuentes animales o procedimientos de ADN recombinante. Las fuentes transgénicas de proteínas, polipéptidos, secuencias de aminoácidos o similares también están contempladas. Tales materiales se obtienen de animales transgénicos, es decir, ratones, cerdos, vacas, etc., en los que las proteínas se expresan en leche, sangre o tejidos. También están contemplados como fuentes los insectos transgénicos y los sistemas de expresión con ultravirus. Más aún, las versiones mutantes de las proteínas, tales como interferones mutantes se encuentran dentro del alcance de la invención.
Otras proteínas de interés son proteínas de alergenos tales como ambrosia, Antígeno E, veneno de abeja, alergeno de ácaro y similares. Las anteriores son ilustrativas de las proteínas que son adecuadas para la presente invención. Debe entenderse que aquellas proteínas, como se definen en este documento, no nombradas específicamente pero que tienen un grupo amino disponible están también dentro del alcance de la presente invención.
En un aspecto de preferencia de la invención, el compuesto que contiene amino es un compuesto biológicamente activo que es adecuado para uso medicinal o diagnóstico en el tratamiento de animales, por ej., mamíferos, incluyendo seres humanos, para afecciones para las que tal tratamiento es deseado. La lista anterior es ilustrativa y no limitante de los compuestos que pueden ser modificados. Los expertos comprenderán que tales otros compuestos pueden modificarse de manera similar sin excesiva experimentación. Debe entenderse que aquellos materiales biológicamente activos no mencionados específicamente pero que tienen grupos amino adecuados también se encuentran dentro del alcance de la presente invención.
Las únicas limitaciones en los tipos de moléculas que contienen amino para ser incluidas en este documento son que esté disponible al menos una (primaria o secundaria) posición conteniendo amina que puede reaccionar y unirse con la parte del vehículo y que no haya pérdida sustancial de bioactividad tras la liberación del sistema de profármaco doble y la regeneración del compuesto principal.
3. Residuos de Compuestos que Contienen Hidroxilo a. Camptotecina e Inhibidores de Topoisomerasa I Relacionados
La camptotecina es un alcaloide citotóxico soluble en agua producido por árboles naturales de la China Camptotheca accuminata y árboles naturales de la India nothapodytes foetida. La camptotecina y compuestos relacionados y análogos son también conocidos por ser agentes potenciales anticáncer o antitumorales y han mostrado que exhiben estas actividades in vitro e in vivo. La camptotecina y compuestos relacionados son también candidatos para conversión en profármacos dobles de la presente invención.
La camptotecina y ciertos análogos relacionados comparten la estructura:
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Se prepararon diversos análogos conocidos a partir de esta estructura central. Por ejemplo, el anillo A en cualquiera o ambas posiciones 10- y 11- puede sustituirse con un OH. El anillo A puede sustituirse también en la posición 9- con un alquilo C_{1-30} lineal o ramificado o alcoxi C_{1-17}, opcionalmente unido al anillo por un heteroátomo es decir -O o S. El anillo B puede estar sustituido en la posición 7- con un alquilo C_{1-30} lineal o ramificado o alquilo sustituido, cicloalquilo C_{5-8}, alcoxi C_{1-30}, fenilalquilo, etc., alquilcarbamato, alquilcarbazidas, derivados de fenilhidrazina, amino, aminoalquil, aralquil, etc.. Son posibles otras sustituciones en los anillos C, D y E. Ver, por ejemplo, las Patentes de EEUU Nº 5.004.758; 4.943.579; Re 32.518, cuyos contenidos se incorporan en este documento como referencia. Tales derivados pueden obtenerse usando técnicas sintéticas conocidas sin excesiva experimentación. Los derivados de camptotecina de preferencia para uso en este documento incluyen aquellos que incluyen un 20-OH u otro fragmento OH capaz de reaccionar directamente con formas activadas de los sistemas de transporte de polímeros descritos en este documento o los fragmentos intermedios de unión, por ejemplo ácido iminodiacético, etc., los que posteriormente se unen a un polímero tal como PEG. Las referencias a análogos de camptotecina se hicieron en este documento con fines ilustrativos y no limitantes.
b. Taxanos y Derivados de Paclitaxel
Una clase de compuestos incluidos en las composiciones de profármacos dobles de la presente invención son los taxanos. Para los objetivos de la presente invención, el término "taxano" incluye todos los compuestos dentro de la familia taxano y terpenos. Por ello, el taxol (paclitaxel), derivados sustituidos en 3' de tert-butoxi-carbonilamina (taxoteros) y similares así como otros análogos que son fácilmente sintetizados usando técnicas orgánicas estándar o están disponibles en fuentes comerciales tales como Sigma Chemical de St. Louis, Missouri están dentro del alcance de la presente invención. Los taxanos representativos se muestran a continuación.
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Paclitaxel: R'_{1} = C_{6}H_{5}; R'_{2} = CH_{3}CO; Taxotero: R'_{1} = (CH_{3})_{3}CO; R'_{2} = H
Se descubrió que estos derivados son agentes eficaces anticáncer. Numerosos estudios indican que los agentes tienen actividad contra diversas neoplasias. Hasta el momento, su uso ha estado limitado severamente por, entre otras cosas, su escaso abastecimiento, pobre solubilidad en agua e hipersensibilidad. Debe entenderse que otros taxanos incluyendo los 7-arilcarbamatos y 7-carbazatos descritos en las Patentes de EEUU de asignación común Nº 5.622.986 y 5.547.981 pueden incluirse también en profármacos dobles de la presente invención. Los contenidos de las patentes de EEUU anteriores se incorporan en este documento como referencia. La única limitación en el taxano es que debe ser capaz de sufrir una reacción de sustitución basada en hidroxilo tal como en la posición 2'. El Paclitaxel, sin embargo, es un taxano de preferencia.
c. Fragmentos Biológicamente Activos Adicionales
Además de las moléculas descritas anteriormente, las formulaciones de profármacos dobles de la presente invención pueden prepararse usando muchos otros compuestos. Por ejemplo, pueden usarse compuestos biológicamente activos como gemcitabina:
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etopósido:
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o
agentes antifúngicos basados en triazol tal como fluconazol:
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o ciclopirox:
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Es necesario que los compuestos principales seleccionados para formas de profármacos dobles no sean sustancialmente insolubles en agua, aunque los profármacos dobles basados en polímeros de la presente invención son especialmente adecuados para administrar tales compuestos insolubles en agua. Otros compuestos principales útiles incluyen, por ejemplo, ciertas proteínas, enzimas y péptidos biológicamente activas de bajo peso molecular, incluyendo péptidoglicanos, así como otros agentes antitumorales; agentes cardiovasculares tal como forskolin; antineoplásicos tales como combretastatina, vinblastina, doxorrubicina, Ara-C, maitansina, etc.; antiinfecciosos tales como vancomicina, eritromicina, etc.; antifúngicos, tales como nistatina, anfotericina B, triazoles, papulocandinas, pneumocandinas, equinocandinas, polioxinas, nikkomicinas, pradimicinas, benanomicinas, etc., ver, "Antibiotics That Inhibit Fungal Cell Wall Development" Annu. Rev. Microbiol. 1994, 48:471-97, cuyo contenido se incorpora en este documento como referencia; agentes ansiolíticos, agentes gastrointestinales, agentes activadores del sistema nervioso central, agentes analgésicos, de fertilidad, anticonceptivos, agentes antiinflamatorios, agentes esteroidales, agentes antiuricémicos, agentes vasodilatadores, agentes vasoconstrictores, y similares.
Se advierte que los compuestos principales adecuados para incorporar en las composiciones de profármacos dobles de la invención, pueden ser por sí mismos sustancias o compuestos inactivos tras la liberación hidrolítica desde la composición a la que están unidos, pero que se volverán activos tras otro proceso o reacción química. Por ejemplo, un fármaco anticáncer que se administra en el torrente sanguíneo por medio del sistema de transporte de profármacos dobles, puede permanecer inactivo hasta entrar en una célula cancerosa o tumoral, en la que es activado por la química de la célula cancerosa o tumoral, por ejemplo, por medio de una reacción enzimática exclusiva de esa célula. Tras la conjugación, el compuesto remanente que contiene amina o hidroxilo se refiere al residuo del compuesto sin conjugar.
4. Híbridos Poliméricos
En otro aspecto de la invención, se proveen tipos híbridos de los sistemas de profármacos dobles poliméricos descritos en este documento. En particular, el sistema híbrido incluye no solo el sistema de profármacos dobles reversible sino también un segundo sistema polimérico basado en tipos de enlaces más permanentes. Los híbridos pueden prepararse al menos mediante dos procedimientos. Por ejemplo, el conjugado de proteína y profármaco doble bloqueado basado en trialquilo puede sintetizarse primero y posteriormente polimerizarse con PEG usando cualquier polímero activado conocido en la técnica tal como tiazolidiniltiona o PEG activado con succinidinilcarbonato. Alternativamente, la reacción de conjugación más permanente puede llevarse a cabo primero (es decir se PEGhila el compuesto principal) y los conjugados resultantes pueden usarse para formar los conjugados de profármaco doble bloqueados con trialquilo descritos en este documento. Debe entenderse que los sistemas híbridos serán más adecuados para proteínas, enzimas y similares en los que están disponibles múltiples grupos amino o una combinación de grupos amino o hidroxilo para la unión del profármaco polimérico. Para los objetivos de la presente invención, el término "polímeros activados" debe entenderse que incluye polímeros que contienen uno o más grupos terminales capaces de reaccionar con uno o más grupos \alpha-amino, grupos \varepsilon-amino, nitrógenos de histidina, grupos carboxilo, grupos sulfhidrilo, etc. que se encuentran en enzimas, proteínas, etc., así como tales grupos hallados en compuestos orgánicos preparados sintéticamente.
El fragmento terminal de activador puede ser cualquier grupo que facilita la conjugación del polímero con el material biológicamente activo, es decir, proteína, enzima, etc. ya sea antes o después de la síntesis del sistema de transporte de profármacos doble de la presente invención. Ver, por ejemplo, la Patente de EEUU Nº 4.179.337, cuya descripción se incorpora en este documento como referencia. Tales grupos activadores pueden ser fragmentos seleccionados de:
I. Grupos funcionales capaces de reaccionar con un grupo amino tales como:
a)
carbonatos tales como p-nitrofenilo o succinimidilo; ver, por ejemplo la Patente de EEUU Nº 5.122.614, cuya descripción se incorpora en este documento como referencia;
b)
carbonilimidazol;
c)
azlactonas; ver, por ejemplo la Patente de EEUU Nº 5.321.095, cuya descripción se incorpora en este documento por referencia;
d)
imidotionas cíclicas, ver, por ejemplo la Patente de EEUU Nº 5.349.001, cuya descripción se incorpora en este documento por referencia; o
e)
isocianatos o isotiocianatos;
f)
ésteres activos tales como N-hidroxisuccinidimilo o N-hidroxibenzotriazolilo.
II. Grupos funcionales capaces de funcionar con grupos ácido carboxílico y grupos carbonilo reactivos tales como
a)
aminas primarias; o
b)
grupos funcionales hidrazina e hidrazida tales como acilhidrazidas, carbazatos, semicarbamatos, tiocarbazatos, etc..
III. Grupos funcionales capaces de reaccionar con grupos mercapto o sulfhidrilo tales como maleimidas; ver, por ejemplo, Shearwater Polymers Catalog "Polyethylene Glycol Derivatives 1997-1998", cuya descripción se incorpora en este documento como referencia
IV. Grupos funcionales capaces de reaccionar con grupos hidroxilo tales como ácidos (carboxílicos) u otros nucleofilos capaces de reaccionar con un centro electrofílico, tales comos isocianato, ésteres o carbonatos activados, imidas cíclicas, tionas, etc.
El fragmento activador puede incluir también un fragmento separador ubicado cerca del polímero. El fragmento separador puede ser un heteroalquilo, alcoxi, alquilo, conteniendo hasta 18 átomos de carbono o también una cadena polimérica adicional. Los fragmentos separadores pueden agregarse usando técnicas de síntesis estándar.
H. Procedimientos de tratamiento
La presente invención permite procedimientos de tratamiento para diversas afecciones médicas en mamíferos. Los procedimientos incluyen administrar al mamífero que necesita tal tratamiento, una cantidad eficaz de una composición de la invención, como se describe en este documento, tal como un profármaco doble de doxorrubicina. Las composiciones de profármaco son útiles para, entre otras cosas, tratar enfermedades similares a aquellas tratadas con el compuesto principal, por ejemplo terapia de reemplazo enzimático, enfermedad neoplásica, reducción de carga tumoral, prevención de metástasis o neoplasmas y prevención de recurrencias de tumores o crecimientos neoplásicos en mamíferos.
La cantidad de profármaco administrada dependerá de la cantidad de molécula principal incluida en el mismo. Generalmente, la cantidad de profármaco usado en los procedimientos de tratamiento es aquella cantidad que permite alcanzar eficazmente resultados terapéuticos deseados en mamíferos. Naturalmente, las dosificaciones de los diversos compuestos profármacos variarán dependiendo del compuesto principal, velocidad de hidrólisis in vivo, peso molecular del polímero, etc.. En general, los derivados poliméricos de profármacos dobles de derivados de mostaza nitrogenada se administran en cantidades que varían desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 500 mg/m^{2} por día. El intervalo expuesto anteriormente es ilustrativo y los expertos en la técnica determinarán la dosificación óptima del profármaco seleccionado en base a la experiencia clínica y a la indicación del tratamiento. Las dosificaciones reales serán evidentes para los expertos sin excesiva experimentación. Las composiciones, incluyendo profármacos, de la presente invención pueden incluirse en una o más composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración a mamíferos. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de una solución, suspensión, comprimido, cápsula o similar, preparadas de acuerdo con procedimientos bien conocidos en la técnica. Se contempla también la administración de tales composiciones por vía oral y/o parenteral dependiendo de las necesidades del experto en la técnica. Puede utilizarse una solución y/o suspensión de la composición, por ejemplo, como un vehículo para inyección o infiltración de la composición por cualquiera de los procedimientos conocidos en la técnica, por ejemplo, por inyección intravenosa, intramuscular, subdérmica y similares.
Tal administración puede también realizarse por infusión dentro de una cavidad corporal, así como por inhalación y/o por vía intranasal. De preferencia, sin embargo, los profármacos se administran por vía parenteral a los mamíferos que los necesitan.
I. Ejemplos
Los siguientes ejemplos sirven para proveer otra apreciación de la invención pero no tienen la intención de restringir de ninguna manera el alcance de la invención. Los números subrayados y en negrita de los Ejemplos corresponden con aquellos mostrados en las Figuras.
Ejemplo 1
Compuesto 2: Sal de Ácido Trifluoroacético de Éster de Alanina de Ácido 3-(2'-Hidroxi-4',6'-dimetilfenil)-3,3-dimetilpropiónico
Se agitó 1 g (2,54 mmol) de éster de t-Boc-alanina de ácido 3-(2'-hidroxi-4',6'-dimetilfenil)-3,3-dimetilpropiónico, 1 (sintetizado usando el procedimiento de J. Org. Chem, 1997, 62, 1363), en 20 ml de TFA-CH_{2}Cl2 (1:1, v/v) a temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el solvente bajo vacío y se agregó éter al residuo para precipitar 2 (0,6873 g, 67%).
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,41 (3H, s, C(CH_{3})_{2}), 1,42 (3H, s, C(CH_{3})_{2}), 1,54 (3H, d, J = 8,1 Hz, CHCH_{3}, 2,21 (3H, s, Ar-CH_{3}), 2,45 (3H, s, Ar-CH_{3}), 2,65 (2H, s, CH_{2}COOH), 4,36 (1H, d, J = 8,1 Hz, CHCH_{3}), 6,57 (1H, s, Ar-H), 6,81 (1H, s, Ar-H).
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 15,27 (Ar-CH_{3}), 19,57 (Ar-CH_{3}), 24,66 (CHCH_{3}), 30,92 (C(CH_{3})_{2}), 38,28 (CH_{2}COOH), 47,32 (C(CH_{3})_{2}), 48,45 (CHCH_{3}), 122,23, 132,30, 133,97, 135,61, 138,05, 149,10 (Ar), 169,50
(-COOAr), 172,50 (COOH).
Ejemplo 2
Compuesto 4: Acoplamiento de 2 con SC PEG (5 kDa), 3
Se agregaron 2 g (0,39 mmol) de SC PEG (5 kDa), 3, a la mezcla de 175,8 mg (0,6 mmol) de 2 y 280 \mul (1,5 mmol) de N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) en 40 ml de diclorometano anhidro (DCM). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante toda la noche. Se eliminó el solvente y se cristalizó el producto desde 80 ml de 2-propanol para dar 1,86 g (93%) de 4 como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,01 (Ar-CH_{3}), 18,94 (Ar-CH_{3}), 24,07 (CHCH_{3}), 30,11 (C(CH_{3})_{2}), 30,20 (C(CH_{3})_{2}), 37,49 (CH_{2}COOH), 46,04 (C(CH_{3})_{2}), 49,11 (CHCH_{3}), 57,59, (OCH_{3}), 62,86-70,68 (PEG), 121,37, 131,04, 132,80, 134,54, 136,71, 148,62 (Ar), 154,80 (OC(=O)NH), 170,82 (-COOAr), 171,27 (COOH).
Ejemplo 3
Compuesto 6: Acoplamiento de 4 con Hidrocloruro de Daunorrubicina, 5
Se agregaron 38,4 mg (0,2 mmol) de hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) a la mezcla de 0,5 g (0,1 mmol) de 4, 84,6 mg (0,15 mmol) de hidrocloruro de daunorrubicina, 5, 40,4 mg (0,4 mmol) de N-metilmorfolina (NMM), y 20,3 mg (0,2 mmol) de hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT) en 10 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche y se filtró. Se concentró el filtrado bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 20 ml de 2-propanol para dar 0,44 g (88%) de 6. El ensayo UV mostró 0,7 equivalentes (70% de rendimiento de acoplamiento) de 5.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 15,66, 15,81, 18,96, 23,56, 24,45, 29,96, 30,78, 30,84, 32,32, 33,65, 38,61, 44,13, 17,78, 49,45, 55,48, 57,73, 63,17-75,35 (PEG), 99,79, 109,81, 109,94, 117,75, 117,80, 118,37, 119,26, 121,45, 131,39, 133,02, 133,21, 133,92, 134,74, 134,78, 134,85, 135,04, 137,30, 148,88, 154,36, 155,17, 155,41, 159,84, 169,36, 171,81, 185,14, 185,33, 210,58.
Ejemplo 4
Compuesto 8: Acoplamiento de 2 con mPEG (5 kDa) Tiazolidintiona, 7
Se agregaron 0,5 g (0,1 mmol) de mPEG (5 kDa) tiazolidintiona a la mezcla de 44 mg (0,15 mmol) de 2 y 70 \mul (0,4 mmol) de DIPEA en 10 ml de DCM anhidro a temperatura ambiente. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante toda la noche. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 0,44 g (88%) de producto como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,22, 19,17, 24,29, 30,37, 37,71, 46,37, 47,29, 57,85, 67,40-72,38 (PEG), 121,58, 131,38, 132,95, 134,85, 136,99, 148,75, 169,08, 170,53, 171,50.
Ejemplo 5
Compuesto 9: Acoplamiento de 8 con 5
Se agregaron 39 mg (0,2 mmol) de EDC a la mezcla de 0,5 g (0,1 mmol) de 8, 85 mg (0,1 mmol) de 5, 40 mg (0,4 mmol) de (NMM), y 20 mg (0,2 mmol) de HOBT en 10 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche y se filtró. Se concentró el filtrado bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 20 ml de 2-propanol para dar 0,45 g (90%) de 9.
Ejemplo 6
Compuesto 11: Acoplamiento de 2 con PEG (40 kDa) Ditiazolidintiona, 10
Se agregó 1 g (0,025 mmol) de PEG (40 kDa) ditiazolidintiona, 10, a la mezcla de 29 mg (0,099 mmol) de 2 y 36,6 \mul (0,20 mmol) de DIPEA en 15 ml de DCM anhidro. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante toda la noche. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 0,8 g (80%) de 11 como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,90, 19,48, 24,45, 30,81, 38,34, 46,83, 47,87, 68,52-72,82 (PEG), 76,19, 77,83, 122,00, 131,77, 133,76, 135,40, 137,51, 149,46, 169,28, 170,88, 171,55.
Ejemplo 7
Compuesto 12: Acoplamiento de 11 con 5
Se agregaron 94,5 mg (0,492 mmol) de EDC a la mezcla de 2,5 g (0,0615 mmol) de 11 (40 kDa), 208 mg (0,3688 mmol) de 5, 99,4 mg (0,984 mmol) de (NMM), y 49,8 mg (0,369 mmol) de HOBT en 50 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche y se filtró. Se concentró el filtrado bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol (200 ml) para dar 2,3 g (92%) de 12. El ensayo UV mostró 1,9 equivalentes (95% de rendimiento de acoplamiento) de 5.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,14, 19,31, 23,55, 24,63, 28,80, 31,15, 32,78, 34,77, 39,23, 44,97, 48,12, 56,18, 66,80-75,95 (PEG), 100,14, 110,93, 118,68, 119,13, 121,81, 131,88, 133,86, 134,02, 134,96, 135,03, 137,96, 149,56, 155,20, 160,73, 169,73, 170,22, 171,34, 186,05, 210,41.
\newpage
Ejemplo 8
Compuesto 14: Acoplamiento de 11 con Hidrocloruro de p-Amino-(N,N-di-2-cloroetil)anilina, 13
Se agregaron 37,8 mg (0,20 mmol) de EDC a la mezcla de 1,0 g (0,027 mmol) de 4 (40 kDa), 39,8 mg (0,15 mmol) de hidrocloruro de p-amino-(N,N-di-2-cloroetil)anilina, 13 (sintetizado usando un procedimiento modificado de Edwards y col. Cytotoxic Compounds. Part XVII. o-, m-, and p-(Bis-2-chloroethylamino)phenol, p-[N-(2-Chloroethyl)methylamino)phenol, N,N-Bis-2-chloroethyl-p-phenylenediamine, and N,N-Bis-2-chloroethyl-N'-methyl-p-phenylenediamine as Sources of Biologically Active Carbamates. JCS Perkin 1, 1973, 2397.), 39,7 mg (0,39 mmol) de NMM, y 19,9 mg (0,15 mmol) de HOBT en 20 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche y se filtró. Se concentró el filtrado bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol (100 ml) para dar 0,8 g (80%) de 14. El ensayo UV mostró 1,5 equivalentes (75% de rendimiento de acoplamiento) de la mostaza nitrogenada aromática.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 15,63, 19,35, 24,86, 30,99, 31,10, 39,12, 39,81, 47,99, 48,36, 52,84, 67,79-71,79 (PEG), 111,59, 120,97, 121,57, 129,54, 131,86, 133,83, 135,38, 137,93, 141,53, 149,12, 168,37, 170,25, 171,66.
Ejemplo 9
Compuesto 15: Acoplamiento de 11 con 2-Mercaptotiazolina
Se realizó una mezcla azeotrópica de 3 g (0,074 mmol) de 11 en 60 ml de tolueno por destilación de 20 ml de tolueno durante 2 horas. Se enfrió la solución hasta 35ºC y se agregaron 47 mg (0,37 mmol) de cloruro de oxalilo y 2 \mul de DMF. Se agitó la solución a 35-40ºC durante 4 horas, posteriormente se agregaron 53 mg (0,44 mmol) de 2-mercaptotiazolina y 32 mg (0,44 mmol) de DIPEA. Se mantuvo la mezcla a reflujo durante la noche y se concentró bajo vacío. Se recristalizó el residuo desde 250 ml de 2-propanol para dar 15 (2,72 g, (90%) como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,38, 19,28, 24,63, 27,54, 31,06, 31,15, 39,00, 47,37, 51,56, 55,32, 67,48-71,10 (PEG), 121,52, 131,43, 132,63, 134,86, 137,20, 148,79, 168,82, 170,90, 171,86, 200,58.
Ejemplo 10
Compuesto 17: Acoplamiento de 11 o 15 con Hidrocloruro de Doxorrubicina, 16
Acoplamiento de 11 con Doxorrubicina, 16: Se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche una mezcla de 1,25 mg (0,031 mmol) de 11, 105 mg (0,18 mmol) de hidrocloruro de doxorrubicina, 16, 50 mg (0,50 mmol) de NMM, 25 mg (0,18 mmol) de HOBT, y 50 mg (0,25 mmol) de EDC en 15 ml de DCM anhidro. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 850 mg (68%) de 17. El ensayo UV mostró 1,64 equivalentes (82% de rendimiento de acoplamiento) de 16.
Acoplamiento de 15 con 16: Se mantuvo a reflujo durante toda la noche una mezcla de 0,25 mg (0,006 mmol) de 15, 40 mg (0,07 mmol) de 16, y 25 mg (0,20 mmol) de dimetilaminopiridina (DMAP) en 10 ml de DCM anhidro. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 0,23 g (92%) de 17. El ensayo UV mostró 1,82 equivalentes (91% de rendimiento de acoplamiento) de 16.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 15,21, 15,83, 18,75, 24,39, 27,81, 30,60, 30,63, 32,27, 34,80, 38,71, 43,90, 46,71, 47,87, 55,48, 64,27, 66,05, 67,43-71,05 (PEG), 75,69, 99,38, 109,47, 117,46, 118,68, 118,92, 120,45, 127,10, 131,70, 133,17, 132,89, 133,45, 133,75, 134,50, 137,44, 148,88, 154,41, 154,81, 159,69, 169,16, 170,15, 170,98, 185,20, 185,46, 212,40.
Ejemplo 11
Compuesto 18: Acoplamiento de 8 con N-hidroxisuccinimida
Se disolvieron 2,5 g (0,47 mmol) de 8 y 108 mg (0,94 mmol) de N-hidroxisuccinimida en 40 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agregaron a la mezcla 114 mg (0,94 mmol) de DMAP y 118 mg (0,94 mmol) de DIPC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 2,1 g (84%) de 18 como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,38, 19,46, 24,47, 24,75, 30,11, 30,36, 38,21, 43,66, 47,58, 58,12, 67,97-71,13 (PEG), 121,81, 131,80, 131,93, 135,68, 137,01, 148,89, 165,87, 168,55, 169,34, 171,03.
Ejemplo 12
Compuesto 20: Conjugación de 18 a (L)-Asparaginasa
Se agregaron 450 mg (0,083 mmol, 317 equivalentes) de conector de PEG,18, a 37,5 mg (416 \mul, 0,00027 mmol) de (L)-asparaginasa nativa, 19, en 3 ml de tampón fosfato de sodio (0,1 M, pH 7,8) con agitación suave. Se agitó la solución a 30ºC durante 30 minutos. Para controlar la conjugación de PEG se usó una columna de GPC (Zorbax GF-450: El conjugado PEG-Asp tiene un tiempo de retención de 8,5 minutos. Al finalizar la reacción (como se evidenció por la ausencia de enzima nativa), se diluyó la mezcla con 12 ml de tampón de formulación (0,05 M de fosfato de sodio, 0,85% de cloruro de sodio, pH 7,3) y se diafiltró con un concentrador Centriprep (Amicon) con un peso molecular de corte de 50.000 daltons para eliminar el PEG sin reaccionar. Se continuó la diafiltración a 4ºC hasta no detectar PEG libre mezclando cantidades iguales de filtrado y PMA (ácido polimetacrílico en HCl 0,1 M) al 0,1%.
El producto, 20, no es estable en solución de tampón básico durante largos períodos de tiempo, por lo tanto la solución se liofiliza y se almacena 20 en el congelador (-20ºC). Tras 15 días de almacenamiento en estas condiciones, el análisis de GPC indica menos del 0,8% de descomposición. La actividad específica de 20 preparado fresco es de 137 UI/mg (asparaginasa nativa = 217 UI/mg). La modificación proteica de asparaginasa con SS-PEG (un conector permanente) usando un procedimiento correspondiente a la Patente de EEUU Nº 4.179.337 descrita anteriormente da una actividad similar de 120 UI/mg. Se usa un ensayo TNBS para calcular el porcentaje de modificación de la proteína y el ensayo Biuret para controlar la concentración de proteína.
Ejemplo 13
Cinética de Hidrólisis de 20 en Plasma de Rata y Tampón
Se midió la velocidad de hidrólisis de 20 en plasma de rata usando una columna de GPC (Zorbax GF-450) y se encontró que tiene una vida media < 2 horas. La vida media en tampón fosfato (pH 7,4) se determinó como >> 2 horas.
Ejemplo 14
Compuesto 20A: Un Híbrido de Proteína - Conjugación de 20 con SS-PEG (un conector permanente)
Se hicieron reaccionar 393 mg (0,073 mmol, 70 equivalentes) de 18 con 150 mg (1,664 ml, 0,00106 mmol) de (L)-asparaginasa nativa, 19, en 30 ml de tampón fosfato de sodio (0,1 M, pH 7,8) como se describió en el Ejemplo 14 a 30ºC durante 15 minutos para proveer una solución de 20, seguido por el agregado de 1,272 g (0,245 mmol, 230 equivalentes) de SS-PEG. Se agitó la solución de reacción durante otros 15 minutos. Se mantuvo el pH de la mezcla de reacción en 7,8 con hidróxido de sodio 0,5 M. Se diluyó la mezcla de reacción don 30 ml de agua estéril y se diafiltró usando un concentrador Centriprep (Amicon) con un peso molecular de corte de 50.000 daltons para eliminar el PEG sin reaccionar. Se continuó la diafiltración a 4ºC hasta no detectar PEG libre mezclando cantidades iguales de filtrado y PMA (ácido polimetacrílico en HCl 0,1 M) al 0,1%. Se usó una columna de GPC (Zorbax GF-450) para seguir el curso de la reacción. La solución final del producto, 20A, se liofilizó y se almacenó en congelador.
Ejemplo 15
Compuesto 20B: Demostración de Eliminación Selectiva del Conector de PEG reversible de un Híbrido, 20A - Generación de Asparaginasa Modificada Permanentemente, 20B
Se disolvieron 100 mg de asparaginasa modificada con conector híbrido, 20A, en 30 ml de tampón fosfato, pH 7,8 y se agitó a 30ºC durante la noche. Se diluyó esta solución con 30 ml de agua estéril y se diafiltró usando un concentrador Centriprep (Amicon) con un peso molecular de corte de 50.000 daltons para eliminar el PEG libre que se forma por clivaje selectivo de un conector de PEG reversible, 8 del conjugado. La solución contiene ahora únicamente asparaginasa conjugada con SS-PEG, 20B. Por lo tanto se hidrolizó el conector reversible, dejando únicamente unido a la asparaginasa el PEG unido de forma relativamente permanente.
Ejemplo 16
Compuesto 22: Éster de t-Boc-Prolina de 1-O-t-Butildimetilsilil-3-(2'-hidroxi-4',6'-Dimetilfenil)-3,3-dimetilpropanol, 21
Se agregaron 392 mg (3,11 mmol) de DIPC a una mezcla de 0,5 g (1,55 mmol) de 1-O-t-butildimetilsilil-3-(2'-hidroxi-4',6'-dimetilfenil)-3,3-dimetilpropanol, 21, (sintetizado usando el procedimiento de R.P.Borchardt, y col. Amine Prodrugs Which Utilize Hydroxy Amide Lactonization. II. A Potential Esterase-Sensitive Amide Prodrug. Pharmaceu. Res. 1991, 8,455), 568 mg (4,66 mmol) de DMAP, 668 mg (3,11 mmol) de t-Boc-Prolina-OH en 15 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, se filtró y concentró. Se purificó el residuo por cromatografía en columna en gel de sílice (acetato de etilo: hexano = 3:7, v/v) para dar 700 mg (87%) de 22.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,04, (s, 3H, CH_{3}-Si), 0,14 (s, 3H, CH_{3}-Si), 0,88 (s, 3H, CH_{3}-C), 0,92 (s, 3H, CH_{3}-C), 1,51 (s, 9H, Si(CH_{3})_{3}), 1,55 (s, 9H, C(CH)_{3}), 2,00 (m, 2H, CH_{2}O), 2,07 (t, 2H, CH_{2}CH_{2}CH_{2}, J = 8,1 Hz), 2,25 (s, 3H, PhCH_{3}), 2,30 (m, 2H, CHCH_{2}), 2,55 (s, 3H, PhCH_{3}), 3,53 (t, 2H, CH_{2}N, J = 8,1 Hz), 4,57 (bs, 1H, COCHN), 6,65 (bs, 1H, PhH), 6,82 (s, 1H, PhH).
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 18,23, 20,06, 25,14, 25,70, 25,98, 28,49, 32,00, 32,06, 39,51, 46,24, 46,62, 59,74, 60,93, 80,08, 122,73, 132,14, 134,56, 135,87, 138,30, 150,68, 171,84.
Ejemplo 17
Compuesto 23: Éster de t-Boc-Prolina de 3-(2'-hidroxi-4',6-Dimetilfenil)-3,3-dimetilpropanol
Se agitó una solución de 2,82 g (5,43 mmol) de 23 en 10 ml de tetrahidrofurano, 10 ml de H_{2}O y 30 ml de ácido acético glacial a temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el solvente bajo vacío para dar un producto crudo 23 como un aceite incoloro, que se llevó a siguiente etapa sin otra purificación.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,01, 0,77, 0,84, 1,38, 1,40, 1,42, 1,93, 1,97, 2,01, 2,13, 2,38, 2,43, 3,47, 4,48, 6,50, 6,70.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta -3,71, 19,95, 20,29, 23,19, 25,06, 25,20, 25,59, 28,44, 31,78, 32,04, 32,27, 33,21, 39,33, 42,96, 46,01, 46,53, 46,62, 59,62, 60,22, 64,95, 66,59, 80,44, 103,87, 122,59, 132,04, 132,27, 134,23, 135,79, 135,89, 138,14, 150,37, 150,37, 150,55, 154,52, 171,86, 175,10.
Ejemplo 18
Compuesto 24: Oxidación de Éster de t-Boc-Prolina de 3-(2'-hidroxi-4',6'-Dimetilfenil)-3,3-dimetilpropanol, 23
Se agregó una solución de 2,5 g (6,2 mmol) de 23 en 125 ml de cloruro de metileno anhidro a una solución de 2,88 g (13,4 mmol) de clorocromato de piridinio en 125 ml de DCM anhidro. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente se filtró a través de celite. Se eliminó el solvente bajo vacío y se purificó el residuo por cromatografía en columna de gel de sílice (acetato de etilo/hexano = 3:7, v/v). Se disolvió el producto, aldehído, en 25 ml de acetona y se agregó a una solución de 1 g (6,3 mmol) de KMnO_{4} en 25 ml de acetona-H_{2}O (1:1, v/v). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se agregaron 40 ml de H_{2}O y se eliminó la acetona bajo vacío previo a la filtración a través de Celite. Se ajustó el pH de la solución a 3,0 con HCl 1N, posteriormente se extrajo con acetato de etilo (30 ml, 2 veces). Se eliminó el solvente bajo presión reducida y se agregó hexano para precipitar 24 (550 mg, 21% desde 23).
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,41, 1,43, 1,50, 1,61, 1,97, 2,21, 2,30, 2,33, 2,54, 2,85, 3,56, 4,56, 6,57, 6,79.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 20,09, 24,13, 25,27, 28,14, 28,56, 29,87, 31,40, 31,57, 39,12, 46,79, 47,40, 59,76, 80,68, 122,56, 132,43, 134,04, 136,27, 138,29, 150,21, 171,87.
Ejemplo 19
Compuesto 25: Sal de Ácido Trifluoroacético de Éster de Prolina de Ácido 3-(2'-hidroxi-4',6'-Dimetilfenil)-3,3-dimetilpropiónico
Se agitaron 0,55 g (1,31 mmol) de éster de t-Boc-prolina de ácido 3-(2'-hidroxi-4',6'-dimetilfenil)-3,3-dimetilpropiónico, 24, en 10 ml de TFA-CH_{2}Cl_{2} (1:1, v/v) a temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el solvente completamente bajo vacío para dar 25 como un sólido espumoso amarillo (0,436 g, 77%).
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,53, 1,55, 2,03, 2,19, 2,48, 2,59, 2,76, 3,32, 4,61, 6,54, 6,85, 9,80.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 13,86, 23,73, 24,86, 28,27, 31,70, 31,92, 38,99, 46,43, 47,76, 60,33, 122,25, 133,08, 133,74, 136,65, 138,89, 149,30, 168,35.
Ejemplo 20
Compuesto 26: Acoplamiento de 25 con PEG (40 kDa) Ditiazolidintiona, 10
Se agregaron 52,6 g (0,41mmol) de DIPEA a la solución de 65 mg (0,15 mmol) de 25 y 1 g (0,025 mmol) de 10 en 15 ml de DCM. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante toda la noche. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 0,85 g (85%) de 26 como un sólido blanco.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 19,61, 24,39, 27,34, 30,72, 38,11, 45,86, 59,13, 68,40-71,45 (PEG), 122,18, 131,78, 133,40, 135,04, 137,18, 149,36, 168,65, 170,67, 171,18.
\newpage
Ejemplo 21
Compuesto 27: Acoplamiento de 26 con 5
Se agregaron 13,2 g (0,07mmol) de EDC a la mezcla de 0,35 g (0,01 mmol) de 26, 29 mg (0,005 mmol) de 5, 13,9 mg (0,14 mmol) de NMM, y 6,97 mg (0,05 mmol) de HOBT en 20 ml de DCM anhidro a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante toda la noche y se filtró. Se concentró el filtrado bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol (50 ml) para dar 0,35 g (84%) de 27. El ensayo UV mostró 2,0 equivalentes (100% de rendimiento de acoplamiento) de 5.
Ejemplo 22
Compuesto 29
El compuesto 28 se preparó usando el procedimiento provisto en el Ejemplo 16. Por ello se hicieron reaccionar 500 mg (1,55 mmol) de 21, 587,6 mg (3,11 mmol) de t-Bock-\beta-alanina-OH, 474 \mul (3,11 mmol) de DIPC, y 568 mg (4,66 mmol) de DMAP en 15 ml de DCM anhidro para dar 580 mg (76%) de 28.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,00, (s, 6H, 2 x CH_{3}-Si), 0,87 (s, 6H, 2 x CH_{3}C), 1,48 (s, 18H, C(CH_{3})_{3} y Si
(CH_{3})_{3}), 2,05 (t, 2H, CH_{2}C, J = 5,4 Hz), 2,26 (s, 3H, PhCH_{3}), 2,54 (s, 3H, PhCH_{3}), 2,79 (t, 2H, CH_{2}C(=O), J = 5,4 Hz), 3,50 (t, 4H, NHCH_{2} y CH_{2}O, J = 8,1 Hz), 5,01 (bs, 1H, NH), 6,58 (s, 1H, PhH), 6,84 (s, 1H, PhH).
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 18,18, 20,11, 25,20, 25,88, 28,36, 31,78, 35,40, 36,00, 38,99, 45,94, 60,69, 79,35, 122,91, 132,38, 133,99, 135,92, 138,40, 149,46, 155,79, 171,73.
El compuesto 29 se preparó usando el mismo procedimiento que se describió para la conversión de 22 en 27 (Ejemplos 17-21).
Ejemplo 23
Compuesto 31
El compuesto 30 se preparó usando el procedimiento dado en el Ejemplo 16. Se hicieron reaccionar el compuesto 21, 150 mg (0,57 mmol), 189,4 mg (0,93 mmol) de ácido t-Bock-\alpha-aminoisobutírico, 117 mg (0,93 mmol) de DIPC, y 133,7 mg (0,93 mmol) de DMAP en 25 ml de DCM anhidro y tras purificar, se obtuvieron 76 mg (32%) de 30.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,00, (s, 6H, 2 x CH_{3}-Si), 0,87 (s, 6H, 2 x CH_{3}C), 1,48 (s, 18H, C(CH_{3})_{3} y Si
(CH_{3})_{3}), 1,70 (s, 6H, C(CH_{3})_{2}), 2,06 (t, 2H, CH_{2}C, J = 8,1 Hz), 2,19 (s, 3H, PhCH_{3}), 2,54 (s, 3H, PhCH_{3}), 3,50 (t, 2H, CH_{2}O, J = 8,1 Hz), 5,19 (bs, 1H, NH), 6,70 (s, 1H, PhH), 6,81 (s, 1H, PhH).
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 18,16, 50,13, 25,13, 25,17, 25,33, 25,90, 28,33, 31,92, 32,04, 39,28, 45,08, 45,83, 56,44, 60,80, 61,61, 79,96, 116,65, 122,70, 126,74, 132,17, 134,12, 136,07, 138,04, 151,07, 154,70, 174,24.
El compuesto 30 se sometió a los procedimientos de los Ejemplos 17-21 para obtener el compuesto 31.
Ejemplo 24
Compuesto 33: Acoplamiento de 8 con Ara-C, 32
Se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche una solución de 300 mg (0,056 mmol) de 8, 68,3 mg (0,28 mmol) de Ara-C, 32, y 65 mg (0,34 mmol) de EDC en 10 ml de piridina anhidra. Se agregó éter etílico a la solución de reacción para precipitar el producto crudo que se cristalizó desde 2-propanol para dar 180 mg (53%) de 33.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,07, 19,85, 25,35, 31,56, 32,11, 39,00, 48,39, 49,40, 58,61, 61,51, 68,53-72,18 (PEG), 74,70, 85,43, 87,72, 95,36, 122,00, 132,30, 132,34, 133,32, 135,74, 138,27, 145,62, 149,35, 155,46, 161,74, 171,37, 172,04, 172,20.
Ejemplo 25
Compuesto 34
El compuesto 34 puede prepararse a partir de 11 acoplado con 32 o desde 1 acoplado con 32 seguido por desprotección y acoplamiento con 10 como en los Ejemplos 26-28.
Acoplamiento de 11 con 32: Se agitó una solución de 1 g (0,025 mmol) de 11, 120 mg (0,50 mmol) de 32 y 57 mg (0,30 mmol) de EDC en 10 ml de piridina anhidra a temperatura ambiente durante 3 días. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde IPA para dar 640 mg (64%) de 34. El ensayo UV mostró 1,67 equivalentes (84% de rendimiento de acoplamiento) de 32.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 14,87, 18,58, 24,54, 31,30, 31,36, 38,66, 47,68, 49,09, 61,12, 67,54-71,05 (PEG), 74,76, 85,19, 86,54, 94,69, 121,25, 131,85, 133,08, 134,73, 137,35, 144,94, 148,58, 154,39, 160,88, 170,96, 171,26, 172,38.
Ejemplo 26
Compuesto 35: Acoplamiento de 1 con 32
Se agitó una mezcla de 700 mg (1,78 mmol) de 1, 1,73 g (7,12 mmol) de 32, 0,96 g (7,12 mmol) de HOBT, y 2,73 g (14,25 mmol) de EDC en 50 ml de piridina anhidra a temperatura ambiente durante 2 horas y posteriormente se agitó a 40ºC durante la noche. Se eliminó el solvente y se usaron 50 ml de DCM parta disolver la mezcla, posteriormente se lavó con agua (3 veces, 30 ml) y HCl 0,1 N. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de magnesio anhidro y se eliminó el solvente bajo vacío para dar el producto crudo que se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (metanol 5 a 10% en DCM) para dar 638,8 mg (52%) de 35 como un sólido blanco.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,42, 1,55, 2,17, 2,26, 2,46, 2,79, 3,84, 3,91, 4,14, 4,33, 4,53, 5,49, 6,07, 6,17, 6,52, 6,76, 7,31, 7,67, 8,16, 8,62.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 17,77, 20,11, 25,36, 28,31, 31,51, 31,96, 39,57, 50,18, 50,45, 61,88, 74,50, 80,15, 85,90, 88,58, 96,25, 122,51, 132,82, 133,34, 136,73, 138,22, 146,57, 149,90, 155,65, 155,96, 162,08, 171,89,
174,06.
Ejemplo 27
Compuesto 36: Desprotección de 35
Se agitó el compuesto 35 (638,8 mg, 1,03 mmol) en 6 ml de DCM anhidro y 4 ml de TFA a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó éter etílico a la solución para precipitar el producto crudo que se filtró y lavó con éter para dar 36 como un sólido blanco (534,5 mg, 82%).
^{1}H NMR (270 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 1,52 (s, 3H, (CH_{3})_{2}CH) 1,55 (s, 3H, (CH_{3})_{2}CH), 1,62, (d, 1H, J = 8,1 Hz), (CH_{3})_{2}
CH), 2,22 (s, 3H, CH_{3}Ar), 2,57 (s, 3H, CH_{3}Ar), 2,97 (s, 2H, CH_{2}C(=O)), 3,41-4,27 (m, 5H, Ara-Cs H-2'-H5'), 6,09 (d, 1H, J = 5,4 Hz, Ara-Cs H-1'), 6,67 (s, 1H, Ar-H), 6,90 (s, 1H, Ar-H), 7,12 (d, J = 5,4 Hz, H-6), 8,05 (d, J = 8,1 Hz, H-5), 8,67 (bs, 1H, TFA).
^{13}C NMR (67,80 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 15,45, 19,67, 24,97, 31,05, 31,23, 38,56, 40,41, 48,53, 49,02, 61,02, 64,94, 74,64, 76,14, 85,74, 86,95, 94,32, 122,32, 132,41, 134,08, 135,67, 138,09, 146,71, 149,20, 154,50, 158,21, 158,72, 162,02, 169,68, 171,87.
Ejemplo 28
Compuesto 34 mediante acoplamiento de 10 con 36
Se agitó una solución de 778 mg (0,019 mmol) de 10, 40 mg (0,077 mmol) de 36, y 20 mg (0,15 mmol) de DIPEA en 10 ml de DCM anhidro a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 650 mg (rendimiento 84%) de 34 como un sólido blanco. Los datos de NMR correspondieron con el producto del Ejemplo 25.
Ejemplo 29
Compuesto 38: Acoplamiento de 1 con Gemcitabina, 37
Se agitó una mezcla de 359 mg (0,91 mmol) de 1, 960 mg (3,65 mmol) de gemcitabina, 492 mg (3,65 mmol) de HOBT, 737 mg (7,29 mmol) de NMM, y 390 mg (2,04 mmol) de EDC en 25 ml de piridina anhidra a temperatura ambiente durante 3 días. Se concentró la mezcla bajo vacío y se purificó el residuo por cromatografía en columna (acetato de etilo) para dar 280 mg (48%) de 38.
^{1}H NMR (270 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,26 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,41 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,63 (bs, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,53 (s, 3H), 2,92 (dd, 2H, J = 29,7, 16,2 Hz) 3,96 (m, 2H), 4,50 (bs, 1H), 5,41 (bs, 1H), 6,21 (bs, 1H), 6,50 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 7,35 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 9,37 (bs, 1H).
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 17,40, 20,16, 25,54, 26,89, 28,28, 29,68, 31,36, 31,93, 39,29, 50,05, 50,53, 59,57, 68,96, 80,68, 81,50, 97,50, 122,46, 132,92, 133,49, 136,66, 138,25, 144,97, 149,64, 155,75, 162,89, 172,04,
173,48.
\newpage
Ejemplo 30
Compuesto 39: Desprotección de 38
Se agitó el compuesto 38 (280 mg, 0,44 mmol) en 5 ml de TFA y 5 ml de DCM anhidro a temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el solvente bajo vacío y se agregó éter etílico para precipitar el producto que se recogió por filtración y se lavó con éter etílico para dar 250 mg (87%) de 39.
^{1}H NMR (270 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 1,48 (d, 6H, J = 8,1 Hz) 1,58 (d, 6H, J = 5,4 Hz), 2,95 (s, 3H), 3,61-3,66 (m, 1H), 3,77-3,90 (m, 2H), 4,14 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 5,23 (bs, 1H), 6,16 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 6,34 (bs, 1H) 6,60 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 7,13 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,18 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,47 (bs, 3H).
^{13}C NMR (67,80 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 15,38, 19,63, 24,92, 30,99, 31,07, 31,15, 48,47, 49,12, 58,73, 68,35, 81,07, 95,81, 122,19, 122,91, 132,41, 133,95, 135,65, 138,09, 144,75, 149,07, 154,14, 162,69, 169,65, 172,05.
Ejemplo 31
Compuesto 40: Acoplamiento de 39 con 10
Se agitó una solución de 778 mg (0,019 mmol) de 10, 50 mg (0,077 mmol) de 39, y 20 mg (0,15 mmol) de DIPEA en 10 ml de DCM anhidro a temperatura ambiente durante la noche. Se eliminó el solvente bajo vacío y se recristalizó el residuo desde 2-propanol para dar 40.
Ejemplo 32
Compuesto 42: Acoplamiento de 11 con Melfalan, 41
Se agitó una mezcla de 1,0 g (0,025 mmol) de 11, 13,7 mg (0,10 mmol) de p-nitrofenol, 12,4 mg (0,10 mmol) de DIPC, y 12,0 mg (0,10 mmol) de DMAP en 10 ml de DCM anhidro a 0ºC hasta temperatura ambiente durante la noche. Se concentró la solución y se usó éter etílico para precipitar un sólido, que se usó para la siguiente etapa sin otra purificación. Se hizo reaccionar el éster de p-nitofenol de 11 con 45 mg (0,15 mmol) de melfalan en presencia de 51 mg (0,40 mmol) de DIPEA en 10 ml de N,N-dimetilformamida anhidra a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó éter etílico para precipitar el producto crudo que se recristalizó desde 2-propanol para dar 700 mg (70%) de producto.
^{13}C NMR (67,80 MHz, CDCl_{3}) \delta 16,35, 16,70, 19,59, 20,64, 21,31, 24,67, 25,12, 31,04, 31,15, 36,02, 38,47, 39,12, 40,01, 47,18, 47,40, 48,35, 52,84, 61,62, 68,08-71,63 (PEG), 111,22, 125,57, 130,44, 131,67, 131,72, 133,81, 135,66, 135,90, 137,36, 142,80, 144,17, 149,02, 154,62, 168,34, 169,26, 168,25, 171,8, 171,52.
Ejemplo 33
Compuesto 46
Se preparó el compuesto 44 a partir de 2,5-fenomenológica, 43, usando un procedimiento descrito (L. A. Cohen, y col., J. Am. Chem. Soc. 1972, 94, 9158).
Se convierte el compuesto 44 en el compuesto 45 mediante el procedimiento usado para la preparación del compuesto 1 como se describió. Se somete el compuesto 45 a los procedimientos de los Ejemplos 29-31 para obtener el compuesto 46.
Las diversas publicaciones, patentes, solicitudes de patente y solicitudes publicadas nombradas en esta solicitud se incorporan en este documento por referencia.
Aunque se han descrito las que actualmente se cree que son las formas de realización de preferencia de la invención, los expertos en la técnica reconocerán que pueden realizarse cambios y modificaciones sin apartarse del espíritu de la invención. Se pretende reivindicar todos los cambios y modificaciones que estén comprendidas dentro del verdadero ámbito de la invención.

Claims (34)

1. Un compuesto que comprende la fórmula:
47
en el que:
B es H, OH, OSiR_{13}, un residuo de un fragmento blanco que contiene amina o un residuo de un fragmento que contiene hidroxilo; L_{1} y L_{2} son fragmentos de unión bifuncionales;
Y_{2} es O o S;
R_{2} se selecciona del grupo constituido por alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6}, heteroalquilos C_{1-6} sustituidos, alcoxi C_{1-6}, fenoxi y heteroalcoxi C_{1-6};
R_{9}, R_{10} y R_{13} son independientemente uno de hidrógeno, alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6}, heteroalquilos C_{1-6} sustituidos, alcoxi C_{1-6}, fenoxi y heteroalcoxi C_{1-6};
Ar es un fragmento que, cuando está incluido en la Fórmula (I), forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones;
(m) es cero o uno; y
R_{11} es un residuo polímero.
2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que
48
en el que:
M es X ó Q; en el que
X es un grupo aceptor de electrones;
Q es un fragmento que contiene un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde C(=Y_{2});
(n) es cero o un entero positivo;
(q) es tres o cuatro; y
R_{7} y R_{8} se seleccionan independientemente del grupo que define a R_{9}.
3. El compuesto de la reivindicación 1, en el que L_{2} es R_{1}
49
en el que G es
--- 
\uelm{C}{\uelm{\dpara}{Y _{1} }}
---
o CH_{2};
Y_{1} es O o S;
(p) es cero, uno o dos; y
R_{1} y R_{4} se seleccionan independientemente del grupo que define a R_{2}.
4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que Ar se selecciona del grupo constituido por:
50
51
en los que J es O, S o NR_{14};
E y Z son independientemente CR_{14} o NR_{14}; y
R_{14} se selecciona independientemente del grupo que define a R_{9}.
5. El compuesto de la reivindicación 1, en el que Ar es
52
en el que R_{3}, R_{5} y R_{6} se seleccionan independientemente del grupo que define a R9 o un grupo ciano, nitro, carboxilo, acilo, acilo sustituido o carboxialquilo.
6. El compuesto de la reivindicación 5, en el que R_{2} y R_{5} se seleccionan independientemente del grupo constituido por alquilos C_{1-6}.
7. El compuesto de la reivindicación 6, en el que R_{2} y R_{5} son metilo.
8. El compuesto de la reivindicación 5, en el que R_{3} y R_{6} son hidrógeno.
9. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R_{11} además comprende un grupo de cierre A.
10. El compuesto de la reivindicación 9, en el que A se selecciona del grupo constituido por hidrógeno, CO_{2}H, fragmentos alquilo C_{1-6}, alquilos de dialquilacilurea y
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en el que B' es igual a B u otro miembro del grupo definido por B.
11. El compuesto de la reivindicación 3, en el que R_{1} y R_{4} se seleccionan independientemente del grupo constituido por CH_{3} y CH_{2}CH_{3}.
12. El compuesto de la reivindicación 2, en el que X se selecciona del grupo constituido por O, NR_{12}, S, SO y donde R_{12} se selecciona del grupo constituido por hidrógeno, alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6} y heteroalquilos C_{1-6} sustituidos.
13. El compuesto de la reivindicación 12, en el que X se selecciona del grupo constituido por O y NR_{12}.
14. El compuesto de la reivindicación 2, en el que Q se selecciona del grupo constituido por grupos alquilos C_{2-4}, cicloalquilos, arilos, aralquilos sustituidos con un miembro del grupo constituido por NH, O, S, -CH_{2}-C(O)-NH-, y fenilos sustituidos en posición orto.
15. El compuesto de la reivindicación 2, en el que (n) es un número entero desde 1 hasta 12.
16. El compuesto de la reivindicación 15, en el que (n) es 1 ó 2.
17. El compuesto de la reivindicación 1, en el que (m) es 0.
18. El compuesto de la reivindicación 3, en el que (p) es uno.
19. El compuesto de la reivindicación 2, en el que Y_{1-2} son ambos 0.
20. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R_{11} comprende un óxido de polialquileno.
21. El compuesto de la reivindicación 20, en el que dicho óxido de polialquileno comprende polietilenglicol.
22. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho residuo polímero tiene un peso molecular desde aproximadamente 2.000 hasta aproximadamente 100.000.
23. El compuesto de la reivindicación 22, en el que dicho residuo polímero tiene un peso molecular desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 40.000.
24. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R_{11} se selecciona del grupo constituido por -C(=Y)-(CH_{2})_{a}-O-(CH_{2}CH_{20})_{x}-A, -C(=Y)-Y-(CH_{2})_{a}-(CH_{2}CH_{20})_{x}-A y -C(=Y)-NR_{12}-(CH_{2})_{a}-O-(CH_{2}CH_{20})_{x}-A,
en los que (a) es cero o un número entero positivo;
Y es O o S;
A es un grupo de cierre; y
(x) representa el grado de polimerización.
25. El compuesto de la reivindicación 1, en el que B es un grupo saliente seleccionado del grupo constituido por N-hidroxibenzotriazolilo, halógeno, N-hidroxiftalimidilo, p-nitrofenoxi, imidazolilo, N-hidroxisuccinimidilo, tiazolidiltiona y un grupo activador ácido.
26. El compuesto de la reivindicación 1, en el que B es un residuo de un miembro del grupo constituido por antraciclinas, daunorrubicina, doxorrubicina, mostaza de p-hidroxianilina, Ara-C, arabinósido de citosina y gemcitabina.
27. El compuesto de la reivindicación 1, en el que B es un residuo de una enzima, proteína o un compuesto que contiene amina seleccionado del grupo constituido por agentes cardiovasculares, antineoplásicos, antiinfecciosos, antifúngicos, agentes ansiolíticos, agentes gastrointestinales, agentes activadores del sistema nervioso central, agentes analgésicos, agentes de fertilidad, agentes anticonceptivos, agentes antiinflamatorios, agentes esteroidales, agentes antiuricémicos, agentes vasodilatadores y agentes vasoconstrictores.
28. El compuesto de la reivindicación 1, en el que B incluye un segundo sistema de transporte polimérico.
29. Un compuesto de la reivindicación 1, seleccionado del grupo constituido por:
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en los que, R_{3}, R_{5} y R_{6} se seleccionan independientemente del grupo que define a R_{9} o se seleccionan del grupo constituido por ciano, nitro, carboxilo, acilo, acilo sustituido y carboxialquilo;
n es cero o un número entero positivo;
p es un número entero desde 1 hasta 3;
J es O, S o se selecciona independientemente del grupo que define a R_{9};
M es X o Q, y X es un grupo aceptor de electrones y Q es un fragmento que contiene un par de electrones libres ubicados a una distancia de tres a seis átomos desde C(=Y_{2});
G es -C(Y_{1})-o CH_{2} e Y_{1} es O o S;
R_{1}, R_{4}, R_{7} y R_{8} se seleccionan independientemente del grupo constituido por hidrógeno, alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6} y heteroalquilos C_{1-6} sustituidos; y PEG es un residuo polietilenglicol.
30. Un procedimiento para preparar una forma de transporte de profármaco, que comprende:
a. proveer un compuesto intermedio (III)
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en el que
M_{2} es un grupo protector clivable o reversible;
L_{1} y L_{2} son fragmentos de unión bifuncionales;
B_{2} es un grupo saliente;
Y_{2} es O o S;
R_{2} se selecciona del grupo constituido por alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6} y heteroalquilos C_{1-6} sustituidos; y
Ar es un fragmento que, cuando está incluido en el compuesto (III), forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones;
b. tratar el compuesto intermedio (III) con un ácido o por hidrogenación catalítica para eliminar el grupo protector; y
c. hacer reaccionar el compuesto intermedio (III) desprotegido con un fragmento capaz de reaccionar con L_{1}.
31. El procedimiento de la reivindicación 30, que además comprende la etapa de:
d. hacer reaccionar el compuesto resultante en la etapa c) con un compuesto que contiene amina o hidroxilo para formar un conjugado.
32. El procedimiento de la reivindicación 30 en el que el fragmento capaz de reaccionar con L_{1}, es un polímero activado.
33. Un procedimiento para preparar una forma de transporte de profármaco, que comprende:
a. hacer reaccionar un compuesto intermedio (III)
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en el que
M_{2} es un grupo protector clivable o reversible;
L_{1} y L_{2} son fragmentos de unión bifuncionales;
B_{2} es un grupo saliente;
Y_{2} es O o S;
R_{2} se selecciona del grupo constituido por alquilos C_{1-6}, alquilos C_{3-12} ramificados, cicloalquilos C_{3-8}, alquilos C_{1-6} sustituidos, cicloalquilos C_{3-8} sustituidos, arilos, arilos sustituidos, aralquilos, heteroalquilos C_{1-6} y heteroalquilos C_{1-6} sustituidos; y
Ar es un fragmento que, cuando está incluido en el compuesto (III), forma un hidrocarburo aromático con múltiples sustituciones o un grupo heterocíclico con múltiples sustituciones;
con un compuesto que contiene amina o hidroxilo para formar un segundo compuesto intermedio;
b. tratar el segundo compuesto intermedio con un ácido o por hidrogenación catalítica para eliminar el grupo protector; y
c. hacer reaccionar el segundo compuesto intermedio desprotegido con un polímero activado.
34. Un profármaco para uso en un procedimiento para tratamiento de un mamífero, en el que el profármaco es un compuesto como se definió en la reivindicación 1 en el que B es un residuo de un fragmento terapéutico que contiene amina o hidroxilo.
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