ES2261721T3

ES2261721T3 - Formulaciones de 3,7-diazabiciclo(3.3.1) como compuestos antiarritmicos.

Info

Publication number: ES2261721T3
Application number: ES02761972T
Authority: ES
Inventors: Neil Barnwell; Annika Bjore; Lal Cheema; David Cladingboel; Adam Herring; Karin Lovqvist
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2001-04-12
Filing date: 2002-04-12
Publication date: 2006-11-16
Anticipated expiration: 2022-04-12
Also published as: DK1389213T3; PL367179A1; ZA200307759B; CN1269823C; HK1061026A1; EP1389213A1; NO20034527L; BR0208829A; US20040143000A1; UA74629C2; KR20030087078A; ATE323095T1; EP1389213B1; JP2004525970A; TWI237025B; HUP0303487A2; CZ20032760A3; IL158250A0; EP1550663A1; NO20034527D0

Abstract

Una sal farmacéuticamente aceptable de uno de los siguientes compuestos: 4-({3-(7-(3, 3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3, 7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il]propil}amino)benzonitrilo; 2-{7-[3cianoanilino)propil]-9-oxa-3, 7-diazabiciclo[3.3.1]-non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo; 2-{7-[4-(4-cianofenil)-bu9oxa-3, 7-diazabiciclo[3.3.1]-non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo; o 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxiprop9oxa-3, 7-di-azabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil-carbamato de terc-butilo, con la condición de que la sal no sea la sal del ácido bencenosulfónico del 4-({3-[7-(3, 3-dimetil-2-oxobutil)3, 7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il]propil}amino)benzonitrilo.

Description

Formulaciones de 3,7-diazabiciclo[3.3.1] como compuestos antiarrítmicos.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a nuevas formas en estado sólido de ciertos fármacos antiarrítmicos, a composiciones farmacéuticas que los contienen, y a procedimientos para obtenerlos.

Antecedentes de la invención

En la formulación de composiciones farmacéuticas, es importante que la sustancia farmacéutica esté en una forma en la que se pueda manipular y procesar convenientemente. Esto es importante no sólo desde el punto de vista de la obtención de un procedimiento de fabricación comercialmente viable, sino también desde el punto de vista de la fabricación posterior de formulaciones farmacéuticas que comprendan el compuesto activo.

Además, en la fabricación de composiciones farmacéuticas, es importante que se proporcione un perfil de concentración plasmática fiable, reproducible y constante del fármaco tras la administración a un paciente.

La estabilidad química, la estabilidad del estado sólido, y el "período de caducidad" de los ingredientes activos también son factores muy importantes. La sustancia farmacéutica, y las composiciones que lo contienen, preferiblemente deben ser capaces de ser almacenados eficazmente durante períodos apreciables de tiempo, sin mostrar ningún cambio significativo en las características fisicoquímicas del componente activo (por ejemplo, su composición química, su densidad, su higroscopia y su solubilidad).

Además, también es importante ser capaz de proporcionar un fármaco en una forma que sea tan químicamente pura como sea posible.

A este respecto, los materiales amorfos pueden presentar problemas significativos. Por ejemplo, tales materiales son típicamente difíciles de manipular y de formular, proporcionan una solubilidad poco fiable, y se encuentra que a menudo son inestables y químicamente impuros.

La persona experta observará que, si se puede obtener fácilmente un fármaco en una forma cristalina estable, se pueden resolver los problemas anteriores.

De este modo, en la fabricación de composiciones farmacéuticas comercialmente viables y farmacéuticamente aceptables, tales como composiciones de liberación modificada, es importante, siempre que sea posible, proporcionar un fármaco en una forma sustancialmente cristalina y estable.

Sin embargo, también se debe observar que esta meta no siempre se puede lograr. De hecho, típicamente, no es posible predecir, a partir de la sola estructura molecular, cuál será el comportamiento de cristalización de un compuesto. Esto sólo se puede determinar habitualmente de manera empírica.

Técnica anterior

La Solicitud de Patente Internacional WO 01/28992 describe un número de compuestos de oxabispidina, incluyendo:

(a): 4-({3-[7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il]propil}amino)benzonitrilo:

1

: compuesto el cual se denomina en lo sucesivo como Compuesto A. El Compuesto A se describe específicamente en el documento WO 01/28992, tanto en forma de base libre como en forma de una sal de bencenosulfonato;

(b): 2-{7-[3-(4-cianoanilino)propil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo

2

: en forma de base libre, compuesto el cual se denomina en lo sucesivo como Compuesto B;

(c): 2-{7-[4-(4-cianofenil)butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo

3

: en forma de base libre, compuesto el cual se denomina en lo sucesivo como Compuesto C; y

(d): 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo

4

: en forma de base libre, compuesto el cual se denomina en lo sucesivo como Compuesto D.

Los compuestos de la Solicitud de Patente Internacional WO 01/28992 se señalan como útiles en el tratamiento de arritmias cardíacas.

Los procedimientos para la síntesis de los Compuestos A, B, C y D se describen en los Ejemplos 3,7,8 y 9 (respectivamente) del documento WO 01/28992.

Las sales farmacéuticamente aceptables específicas de los Compuestos B, C, y D no se describen en el documento WO 01/28992. Además, no se proporciona ninguna información en relación con las diferentes formas cristalinas de cualquiera de los Compuestos A, B, C o D, o sus sales, que se pueden preparar.

Descripción de la invención

Según un primer aspecto de la invención, se proporciona una sal farmacéuticamente aceptable de un Compuesto A, de un Compuesto B, de un Compuesto C, o de un Compuesto D, con la condición de que la sal no sea la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A.

Según un segundo aspecto de la invención, se proporciona Compuesto A, Compuesto B, Compuesto C o Compuesto D, o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos compuestos, en forma sustancialmente crista-
lina.

Los Compuestos A, B, C y D, y sus sales, según los aspectos primero y segundo de la invención, se denominan en lo sucesivo como "los compuestos de la invención".

Aunque se ha encontrado que es posible producir compuestos de la invención en formas que son cristalinas en más de un 80%, por "sustancialmente cristalina" incluye una cristalinidad mayor que 20%, preferiblemente mayor que 30%, y más preferiblemente mayor que 40%. El grado (%) de cristalinidad se puede determinar por la persona experta usando difracción de rayos X en polvo (XRPD). También se pueden usar otras técnicas, tales como RMN en estado sólido, FT-IR, espectroscopia Raman, calorimetría diferencial de barrido (DSC) y microcalorimetría.

Se prefiere que, cuando el compuesto de la invención sea una sal del ácido para-toluenosulfónico del Compuesto A, se proporcione en una forma sustancialmente cristalina.

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A, se prefiere que la forma cristalina no sea la forma descrita específicamente en lo sucesivo en el Ejemplo 4 (y/o en la reivindicación 8).

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto A (base libre), se prefiere que la forma cristalina no sea la forma descrita específicamente en lo sucesivo en uno cualquiera del Ejemplo 1 (y/o reivindicación 4), Ejemplo 2 (y/o reivindicación 5), o Ejemplo 3 (y/o reivindicación 6).

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto A, se prefiere que el compuesto no se proporcione como la base libre, o, cuando se proporciona en forma de una sal, como la sal de bencenosulfonato.

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto C (base libre), se prefiere que la forma cristalina no sea la forma descrita específicamente en lo sucesivo en el Ejemplo 12 (y/o reivindicación 25).

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto C, se prefiere que el compuesto no se proporcione como la base libre.

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto D (base libre), se prefiere que la forma cristalina no sea la forma descrita específicamente en lo sucesivo en el Ejemplo 9 (y/o reivindicación 19).

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina del Compuesto D, se prefiere que el compuesto no se proporcione como la base libre.

Cuando el compuesto de la invención se proporcione como una forma cristalina del Compuesto B, se prefiere que el compuesto no se proporcione como la base libre.

Los compuestos de la invención pueden estar en forma de un solvato, un hidrato o de un solvato/hidrato mixtos. Los solvatos pueden ser de uno o más disolventes orgánicos, tales como alcoholes de alquilo inferior (por ejemplo, alquilo de C_{1-4}) (por ejemplo, metanol, etanol o isopropanol), cetonas (tales como acetona), ésteres (tales como acetato de etilo), o sus mezclas.

Los compuestos de la invención pueden tener una estabilidad mejorada cuando se comparan con compuestos/sales descritos en el documento WO 01/28992.

El término "estabilidad", como se define aquí, incluye estabilidad química y estabilidad del estado sólido.

Por "estabilidad química" se incluye que puede ser posible almacenar los compuestos de la invención en una forma aislada, o en forma de una formulación en la que se proporciona en mezcla con vehículos, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables (por ejemplo, en una forma de dosificación oral, tal como un comprimido, una cápsula, etc.), en condiciones normales de almacenamiento, con un grado insignificante de degradación química o descomposición.

Por "estabilidad en estado sólido", se incluye que puede ser posible almacenar los compuestos de la invención en una forma sólida aislada, o en forma de una formulación sólida en la que se proporciona en mezcla con vehículos, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables (por ejemplo, en una forma de dosificación oral, tal como un comprimido, una cápsula, etc.), en condiciones normales de almacenamiento, con un grado insignificante de transformación del estado sólido (por ejemplo, cristalización, recristalización, transición de fases en estado sólido, hidratación, deshidratación, solvatación o desolvatación).

Los ejemplos de "condiciones normales de almacenamiento" incluyen temperaturas entre menos 80 y más 50ºC (preferiblemente entre 0 y 40ºC, y más preferiblemente a temperatura ambiente, tal como 15 a 30ºC), presiones entre 0,1 y 2 bares (preferiblemente a presión atmosférica), humedades relativas entre 5 y 95% (preferiblemente 10 a 75%), y/o una exposición a 460 lux de luz UV/visible, durante períodos prolongados (es decir, mayores o iguales a seis meses). En tales condiciones, se puede encontrar que los compuestos de la invención se degradan/descomponen químicamente, o se transforman en estado sólido, según sea apropiado, en una cantidad menor que 15%, más preferiblemente menor que 10%, y especialmente menor que 5%. La persona experta apreciará que los límites superior e inferior mencionados anteriormente para la temperatura, la presión y la humedad relativa, representan extremos de las condiciones normales de almacenamiento, y que no se experimentarán ciertas combinaciones de estos extremos durante el almacenamiento normal (por ejemplo, una temperatura de 50ºC y una presión de 0,1 bar).

Las sales preferidas de los Compuestos A, B, C y D incluyen sales de adición básicas o, preferiblemente, ácidas, las cuales se pueden formar mediante adición de una cantidad apropiada del ácido o base apropiado antes del aislamiento (que puede incluir la cristalización). Por ejemplo, en el caso de compuestos de la invención en forma sustancialmente cristalina, se puede añadir un ácido o una base a la mezcla de cristalización antes de que se efectúe la cristalización.

Las sales de adición preferidas incluyen sales de adición ácidas de ácidos inorgánicos y, especialmente, orgánicos, preferiblemente sales de ácidos carboxílicos, tales como ácido hipúrico, ácido naftoico y ácido naftoico sustituido por hidroxi (por ejemplo, ácido 1-hidroxi-2-naftoico), ácido aspártico, ácido maleico, ácido succínico y ácido malónico, ácido acético, ácido fumárico, ácido benzoico, ácido tereftálico, ácido pamoico y ácido hidroxibenzoico; aquellas de hidroxiácidos, tales como ácido salicílico, ácido glicólico, ácido málico, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido glucónico, ácido láctico, así como ácido tartárico y sus derivados, tales como ácido O,O’-dibenzoiltartárico (por ejemplo, ácido O,O’-dibenzoil-D-tartárico o ácido O,O’-dibenzoil-L-tartárico) y ácido O,O’-di-para-toluiltartárico (por ejemplo, ácido O,O’-di-para-toluil-D-tartárico o ácido O,O’-di-para-toluil-L-tartárico); aquellas de otros diácidos, tales como ácido 2,2,3,3-tetrametil-1,4-dibutanoico y ácido 1,2-ciclopentanodicarboxílico; y aquellas de ácidos alquil-, aril- y alquilarilsulfónicos, por ejemplo ácidos (alquil C_{1-8})-, (aril C_{6-10})- y (alquil C_{1-4})-(aril C_{6-10})-sulfónicos, (ácidos aril- y alquilarilsulfónicos los cuales pueden estar sustituidos, en la parte arílica, con, por ejemplo, uno o más grupos metilo, metoxi, hidroxi o halo), incluyendo sales de ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico, un ácido bencenosulfónico sustituido con hidroxi, ácido naftalenosulfónico, ácido naftalenodisulfónico, ácido mesitilenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico y ácido 2-hidroxietanosulfónico.

Las sales de adición de ácidos, particularmente del Compuesto D, que también se pueden mencionar incluyen aquellas en las que el ácido es un derivado de ácido hipúrico, por ejemplo un ácido de fórmula I,

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en la que

Ar^{1} representa fenilo o naftilo, los cuales están ambos opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados de halo (por ejemplo cloro), nitro, alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6}, hidroxi y fenilo; y

R^{1}, R^{2} y R^{3} representan independientemente H o alquilo C_{1-3}.

Se apreciará por la persona experta que, cuando Ar^{1} representa fenilo y R^{1}, R^{2} y R^{3} representan todos H, entonces el ácido de fórmula I es ácido hipúrico.

Los grupos Ar^{1} preferidos incluyen fenilo, grupo fenilo el cual está opcionalmente sustituido con fenilo (por ejemplo, en la posición 4 con relación al punto de unión del grupo C(O)), cloro (por ejemplo en las posiciones 3 y/o 4 con relación al grupo C(O)), nitro (por ejemplo, en la posición 4 con relación al grupo C(O)) y/o alquilo C_{1-4}, tal como metilo (por ejemplo, en las posiciones 2 y/o 4 con relación al grupo C(O)); y naftilo. Los valores de Ar^{1} más preferidos incluyen fenilo, 4-fenilfenilo (bifenilo), 3,4-diclorofenilo, 2-naftilo, 4-nitrofenilo y 2,4,6-trimetilfenilo.

Los grupos R^{1} y R^{2} preferidos incluyen H y metilo. Se prefiere que R^{1} y R^{2} representen ambos H, o representen ambos metilo.

Los grupos R^{3} preferidos incluyen H.

Cuando ambos R^{1} y R^{2} representan metilo, se prefiere que Ar^{1} represente fenilo. Cuando ambos R^{1} y R^{2} representan H, se prefiere que Ar^{1} represente 4-nitrofenilo, 2,4,6-trimetilfenilo, o, especialmente, 3,4-diclorofenilo, 2-naftilo o 4-fenilfenilo (bifenilo).

Los ácidos de fórmula I están comercialmente disponibles (por ejemplo, ácido hipúrico, ácido 4-nitrohipúrico y ácido 2-, 3- ó 4-metilhipúrico), o se pueden preparar según técnicas estándares.

Por ejemplo, los ácidos de fórmula I se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula II

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en la que R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se definen aquí anteriormente, con un cloruro de ácido de fórmula III,

IIIAr^{1}C(O)Cl

en la que Ar^{1} es como se define aquí anteriormente, por ejemplo en presencia de una base, por ejemplo NaOH acuoso, según los procedimientos de Schotten-Baumann clásicos (véase, por ejemplo, J. Med. Chem., 1989, 32, 1033). La neutralización con ácido, por ejemplo ácido clorhídrico conc., puede precipitar el ácido de fórmula I, el cual se puede recristalizar si es necesario en diversos disolventes, por ejemplo alcohol iso-propílico, metanol, etanol, acetona y agua, o mezclas de esos disolventes.

Como alternativa, derivados de éster (por ejemplo, éster de alquilo inferior) de los compuestos de fórmula II, opcionalmente en forma de una sal, por ejemplo la sal de hidrocloruro, se pueden hacer reaccionar con un cloruro de ácido de fórmula III, en presencia de una base, por ejemplo trietilamina, en un disolvente adecuado, por ejemplo diclorometano, para dar una ester-amida de fórmula IV,

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en la que R^{4} representa alquilo inferior (tal como alquilo C_{1-6}) o alquilo inferior-fenilo (por ejemplo, (alquilo C_{1-3})-fenilo), y Ar^{1}, R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se definen aquí anteriormente (véase, por ejemplo, J. Heterocyclic Chem. 1973, 10, 935, Tetrahedron 1989, 45, 1691 y J. Org. Chem., 1999, 64, 8929). Las ester-amidas de fórmula IV pueden ser sólidos a temperatura ambiente, y de este modo se pueden purificar mediante cristalización tras su formación, si es apropiado. Los compuestos de fórmula IV se pueden convertir entonces en compuestos de fórmula I mediante hidrólisis estándar, por ejemplo con hidróxido sódico acuoso, seguido de la adición de un ácido, por ejemplo ácido clorhídrico, para precipitar el producto. La recristalización se puede llevar a cabo entonces, si se requiere.

Los compuestos de fórmulas I, II y IV, en las que R^{3} representa alquilo C_{1-3}, se pueden obtener mediante alquilación estándar de un compuesto correspondiente de fórmula I, II o IV en las que R^{3} representa H.

Los compuestos de fórmulas II, (y derivados de éster) y III están comercialmente disponibles, o se pueden obtener fácilmente mediante técnicas normales.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto de la invención, que comprende:

(a): añadir una cantidad apropiada de un ácido, o de una base, a un Compuesto A, B, C o D, para formar una sal de adición de ácidos o de bases; y/o

(b): cristalizar los Compuestos A, B, C o D, o una sal del Compuesto A, B, C o D.

Es posible cristalizar los Compuestos A, B, C y D, y sus sales farmacéuticamente aceptables, con o sin la presencia de un sistema disolvente (por ejemplo, la cristalización se puede realizar a partir de una masa fundida, en condiciones supercríticas, o se puede lograr mediante sublimación). Sin embargo, se prefiere que la cristalización se efectúe en un sistema disolvente apropiado.

Las sales de adición ácidas o básicas cristalinas de los Compuestos A, B, C o D se pueden proporcionar añadiendo una cantidad apropiada del ácido o base apropiado a la mezcla de cristalización (por ejemplo, un sistema disolvente que incluye el Compuesto A, B, C o D como la base libre) antes de que se efectúe la cristalización. Por ejemplo, se pueden añadir ácidos orgánicos (opcionalmente en forma de una disolución que comprende un disolvente polar apropiado (por ejemplo, un alcohol de alquilo inferior, tal como metanol o etanol) o un acetato, tal como acetato de etilo) a un Compuesto A, B, C o D (opcionalmente en forma de una disolución, en la que la base libre es un disolvente de cristalización apropiado). (La persona experta apreciará que, en este contexto, la expresión "base libre" significa "forma libre" de los Compuestos A, B, C o D (es decir, formas que no están en forma de sales de adición ácidas o básicas)).

La persona experta apreciará que el ácido o la base se puede combinar de esta manera con el Compuesto A, B, C o D disolviendo los materiales apropiados en disolventes apropiados como se describe anteriormente, eliminando al menos parcialmente los disolventes, y redisolviendo entonces la mezcla resultante antes de realizar una cristalización como se describe aquí.

Cuando los compuestos de la invención están en forma de sales de adición de ácidos, las relaciones estequiométricas adecuadas de ácido a base libre están en el intervalo de 0,25:1,5 a 1,5:1, tal como 0,45:1,25 a 1,25:1, incluyendo 0,50:1 a 1:1.

El sistema disolvente puede ser heterogéneo u homogéneo, y puede comprender de este modo uno o más disolventes orgánicos, tal como acetatos de alquilo (por ejemplo, acetatos de alquilo C_{1-6} ramificado o lineal, tales como acetato de etilo, acetato de iso-propilo y acetato de butilo); alcoholes de alquilo inferior (por ejemplo, C_{1-6} lineal o ramificado), tales como 1-hexanol, 3-metil-1-butanol, 1-pentanol, 2-pentanol, 4-metil-2-pentanol y 2-metil-1-propanol, o un alcohol de alquilo C_{1-4}, tal como metanol, etanol, n-propanol, iso-propanol y butanol (por ejemplo, n-butanol); hidrocarburos alifáticos (por ejemplo, de C_{6-12}, tal como un alifático de C_{7-12}) (por ejemplo, iso-hexano, iso-octano y n-heptano), e hidrocarburos aromáticos (por ejemplo, tolueno); alcanos clorados (por ejemplo, cloroformo y diclorometano); dialquilcetonas (por ejemplo, acetona, metil-iso-butilcetona), acetonitrilo, éteres de dialquilo (por ejemplo, éter dietílico, éter di-iso-propílico, éter di-n-propílico, éter di-n-butílico y terc-butil-metiléter); y/o disolventes acuosos, tales como agua. Se pueden usar mezclas de cualquiera de los disolventes mencionados anteriormente.

Las diferentes formas cristalinas pueden tener diferentes solubilidades en cualquier disolvente dado a cualquier temperatura dada. A este respecto, los disolventes mencionados anteriormente se pueden emplear como "antidisolventes" (es decir, un disolvente en el que los compuestos de la invención son muy poco solubles), y de este modo pueden ayudar al proceso de cristalización. Los antidisolventes incluyen de este modo hidrocarburos y éteres dialquílicos enumerados anteriormente.

Los disolventes adecuados incluyen de este modo acetatos de alquilo (tal como acetato de etilo o acetato de iso-propilo), alcoholes de alquilo inferior (tales como metanol, etanol e iso-propanol), metanos clorados (tales como diclorometano), alcanos (tales como n-heptano), éteres (tales como éter dietílico), cetonas (tales como acetona), agua, etc.

La cristalización de los compuestos de la invención en un sistema disolvente apropiado se puede lograr mediante la sobresaturación en un sistema disolvente que comprende el Compuesto A, B, C o D, o sus sales, (por ejemplo, enfriando, mediante evaporación del disolvente, y/o vía la adición de un antidisolvente (es decir, un disolvente en el que los compuestos de la invención son poco solubles (por ejemplo, un hidrocarburo, tal como iso-octano, n-heptano o iso-hexano, o un éter de dialquilo, tal como éter di-iso-propílico, éter di-n-butílico, etc.))), o disminuyendo la solubilidad de la sustancia mediante adición de una sal (tal como NaCl), o, en caso de compuestos de la invención que son sales de adición de ácidos, la adición de un exceso del ácido apropiado.

Las temperaturas de cristalización y los tiempos de cristalización dependen del compuesto o de la sal que se va a cristalizar, de la concentración de ese compuesto/sal en disolución, y del sistema disolvente que se use.

La cristalización también se puede iniciar y/o efectuar mediante técnicas estándares, por ejemplo sembrando o no con cristales del compuesto cristalino apropiado de la invención, y/o ajustando el pH.

Un procedimiento de cristalización particular que se puede usar para preparar los Compuestos A, B, C y, especialmente, D, y sus sales, implica disolver el compuesto de la invención en un sistema disolvente que comprende un alcohol de alquilo C_{3-7} y un antidisolvente de tipo éter de di-alquilo C_{3-5} apropiado.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona de este modo un procedimiento para la preparación de una forma sustancialmente cristalina del Compuesto A, Compuesto B, Compuesto C o, especialmente, Compuesto D, o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos compuestos, procedimiento el cual comprende cristalizar el compuesto pertinente en un sistema disolvente que comprende una combinación de un alcohol de alquilo C_{3-7} y un éter de di-alquilo C_{3-5}.

Los éteres preferidos incluyen éteres de di-alquilo C_{3-5}, tales como éter di-n-propílico, éter di-iso-propílico y éter di-n-butílico. Los alcoholes preferidos incluyen n-propanol, iso-propanol, n-butanol, 4-metil-2-pentanol, 3-metil-1-butanol, 2-metil-1-propanol y 1-pentanol.

Las combinaciones preferidas de disolventes incluyen:

: n-propanol y éter di-n-propílico;

: iso-propanol y éter di-iso-propílico;

: n-butanol y éter di-n-butílico;

: 4-metil-2-pentanol y éter di-n-butílico;

: iso-propanol y éter-di-n-butílico;

: 4-metil-2-pentanol y éter di-iso-propílico; y

: 1-pentanol y éter di-iso-propílico.

Se puede añadir un compuesto/sal al sistema disolvente de tipo alcohol/éter, con este último en forma premezclada. Como alternativa, el compuesto/sal se puede disolver en el alcohol apropiado y después se puede añadir el éter a la disolución resultante. Las sales también se pueden obtener in situ como se describe aquí anteriormente.

El compuesto/sal preferiblemente se disuelve en la combinación de disolventes calentando hasta una temperatura elevada (por ejemplo, 50 a 100ºC, tal como 65 a 90ºC, por ejemplo 75 a 85ºC), para asegurar la disolución total. Después, la disolución resultante se deja enfriar para efectuar la cristalización.

Este proceso de cristalización en alcohol/éter se emplea preferiblemente para proporcionar formas cristalinas del Compuesto D y sus sales. Preferiblemente, se puede usar para proporcionar el Compuesto D cristalino en forma de la base libre.

Se ha encontrado que, cuando los compuestos de la invención (y particularmente el Compuesto D) se preparan mediante cristalización en este sistema disolvente particular, se obtiene de manera eficaz un material muy cristalino, con una recuperación elevada de material cristalino (con buen rendimiento), y en una cantidad de tiempo predecible.

Los compuestos de la invención también se pueden preparar en forma de un solvato (mediante lo cual se incluye en forma de hidrato, tal como un monohidrato) o de cualquier otro modo (por ejemplo, en forma de un anhidrato).

Para asegurar que se produce el anhidrato, el disolvente en el que se produce la cristalización debe estar preferiblemente seco, ya sea antes o durante el proceso de cristalización, a fin de reducir el contenido de agua por debajo de un nivel crítico, que preferiblemente no se debería de superar durante la cristalización. El disolvente se puede secar durante el proceso de cristalización, por ejemplo disminuyendo el contenido de agua de una mezcla del compuesto/sal a cristalizar y el sistema de disolvente orgánico/disolvente acuoso apropiado (por ejemplo, aumentando la cantidad de disolvente orgánico que está presente, y/o eliminando el agua mediante formación de un azeótropo, con destilaciones sucesivas).

Para asegurar que se producen hidratos (por ejemplo, monohidratos), el agua debe estar presente en el disolvente en el que se produce la cristalización. El contenido de agua se debe mantener preferiblemente por encima del nivel crítico mencionado anteriormente, durante la cristalización.

El "nivel crítico" de agua depende de factores tales como la temperatura, la concentración en disolución del compuesto a cristalizar, del perfil de impurezas, y del sistema disolvente que se emplea, pero se puede determinar de forma no inventiva.

De este modo, los hidratos cristalinos se pueden preparar cristalizando compuestos de la invención en un sistema disolvente que comprende agua, o una combinación de agua y uno o más disolventes orgánicos, incluyendo disolventes orgánicos que son capaces de disolver el agua (por ejemplo, metanol, etanol, iso-propanol, etc.).

Contrariamente, los anhidratos cristalinos se pueden preparar cristalizando compuestos de la invención en un sistema de un disolvente orgánico apropiado que se puede haber secado, y/o que se puede secar durante el proceso de cristalización, de forma que el contenido de agua esté por debajo del nivel crítico mencionado anteriormente. De este modo, el anhidrato se puede producir mediante cristalización en un sistema disolvente que está sustancialmente libre de agua.

Por "sustancialmente libre de agua" se incluye que el contenido de agua en el sistema disolvente está por debajo de aquel que dará como resultado la formación de, como máximo, un 10% de hidrato (por ejemplo, monohidrato), para un sistema particular de disolvente y para un conjunto de condiciones de cristalización.

Los compuestos de la invención que son anhidratos no contienen más de 3%, preferiblemente 2%, más preferiblemente 1% y más preferiblemente 0,5% (p/p) de agua, ya sea que tal agua esté ligada (agua de cristalización o de otro modo) o no. Los hidratos no contienen menos de 0,5 moles de agua por mol de compuesto de la invención.

El hecho de que los anhidratos o los hidratos cristalicen está relacionado con la cinética y con las condiciones de equilibrio de las formas respectivas en las condiciones específicas.

Cuando el compuesto de la invención se proporciona como una forma cristalina de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A, se prefiere que la sal se proporcione como un monohidrato.

Adicionalmente, como apreciará la persona experta, los compuestos de la invención que están en la misma forma química (base libre/sal) también se pueden obtener en formas físicas diferentes (por ejemplo, formas cristalinas diferentes) en condiciones de cristalización diferentes. La forma cristalina del compuesto de la invención que se obtiene depende tanto de la cinética como de la termodinámica del proceso de cristalización. En ciertas condiciones termodinámicas (sistema disolvente, temperatura, presión y concentración de compuesto de la invención), una forma cristalina puede ser más estable que la otra (o de hecho más estable que cualquier otra). Sin embargo, las formas cristalinas que tienen una estabilidad termodinámica relativamente baja pueden estar cinéticamente favorecidas. De este modo, además, los factores cinéticos, tales como el tiempo, el perfil de impurezas, la agitación, la presencia o ausencia de semillas, etc., también pueden influir sobre qué formas aparecen. De este modo, los procedimientos descritos aquí se pueden adaptar por la persona experta según sea apropiado, a fin de obtener diferentes formas cristalinas.

Las formas cristalinas diferentes de los compuestos de la invención se pueden caracterizar fácilmente usando métodos de difracción de rayos X en polvo (XRPD), por ejemplo como se describe en lo sucesivo.

A fin de asegurar de que se prepara una forma cristalina particular en ausencia de otras formas cristalinas, las cristalizaciones se llevan a cabo preferiblemente sembrando con núcleos y/o semillas cristalinas de la forma cristalina deseada, en ausencia sustancialmente completa de núcleos y/o semillas cristalinas de otras formas cristalinas. Las semillas cristalinas del compuesto/sal apropiado se pueden preparar, por ejemplo, mediante evaporación lenta del disolvente a partir de una parte de la disolución del compuesto/sal apropiado.

Los compuestos de la invención se pueden aislar usando técnicas que son bien conocidas por los expertos en la técnica: por ejemplo decantando, filtrando o centrifugando.

Los compuestos se pueden secar usando técnicas estándares. La persona experta apreciará que la temperatura de secado y el tiempo de secado pueden afectar a las propiedades del estado sólido de los compuestos (o sales) que están en forma de solvatos, tales como hidratos (por ejemplo, se puede producir la deshidratación a temperaturas elevadas y/o a presiones reducidas). Por ejemplo, después de la formación del hidrato cristalino, puede haber una humedad crítica por debajo de la cual no se debe de realizar el secado, ya que el agua de cristalización se puede perder, y se puede producir una transformación del estado sólido, es decir, se puede perder el agua de cristalización si los cristales se secan a temperaturas elevadas o a presiones muy bajas durante un período más prolongado.

Se ha encontrado que, empleando procedimientos de cristalización como se describen aquí, es posible producir compuestos de la invención con una pureza química mayor que la del compuesto de la invención que se va a aislar en el primer caso.

La purificación adicional de los compuestos de la invención se puede efectuar usando técnicas que son bien conocidas por el experto en la técnica. Por ejemplo, las impurezas se pueden eliminar recristalizando en un sistema disolvente apropiado (por ejemplo, acetato de etilo, acetato de iso-propilo, diclorometano, iso-propanol, n-heptano, metanol, etanol, metiletilcetona, acetonitrilo, 2-pentanol, 3-metil-1-butanol, 1-hexanol, agua, o una combinación de estos disolventes). Las temperaturas y tiempos adecuados para la recristalización dependen de la concentración del compuesto, o sal, en disolución, y del sistema disolvente que se use.

Cuando los compuestos de la invención se cristalizan, o recristalizan, como se describe aquí, el compuesto, o sal, puede estar en una forma que tiene una estabilidad química y/o una estabilidad del estado sólido mejoradas, como se describe aquí anteriormente.

Preparaciones Farmacéuticas y Usos Médicos

Los compuestos de la invención son útiles debido a que poseen actividad farmacológica. Por lo tanto, están indicados como fármacos.

De este modo, según un aspecto adicional de la invención, se proporcionan los compuestos de la invención para uso como fármacos.

En particular, los compuestos de la invención muestran una actividad electrofisiológica miocardíaca, por ejemplo como se puede demostrar en pruebas, tales como las descritas, entre otras, en las Solicitudes de Patentes Internacionales WO 99/31100, WO 00/77000 y WO 01/28992, cuyas descripciones pertinentes de estos documentos se incorporan aquí como referencia.

De este modo, es de esperar que los compuestos de la invención sean útiles tanto en la profilaxis como en el tratamiento de arritmias, y en particular de arritmias auriculares y ventriculares. Las enfermedades particulares que se pueden mencionar incluyen fibrilación auricular (por ejemplo, aleteo auricular).

Los compuestos de la invención están indicados así en el tratamiento o profilaxis de cardiopatías, o en indicaciones relacionadas con cardiopatías, en las que se cree que las arritmias desempeñan un papel importante, incluyendo cardiopatía isquémica, infarto repentino, infarto de miocardio, insuficiencia cardíaca, cirugía cardíaca y sucesos tromboembólicos.

En el tratamiento de arritmias, se ha encontrado que los compuestos de la invención retrasan selectivamente la repolarización cardíaca. Aunque se ha encontrado que los compuestos de la invención retrasan la repolarización cardíaca en particular, en el tratamiento de arritmias, su modo o modos de actividad no está o están necesariamente restringidos a este modo de acción.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método de tratamiento de una arritmia, método el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención a una persona que padece o es susceptible a tal patología.

Para evitar dudas, por "tratamiento" se incluye el tratamiento terapéutico, así como la profilaxis, de una patología.

Los compuestos de la invención se administrarán normalmente de forma oral, subcutánea, intravenosa, intraarterial, transdérmica, intranasal, mediante inhalación, o mediante cualquier otra vía parenteral, en forma de preparaciones farmacéuticas que comprenden el ingrediente activo (ya sea como la base libre o como una sal), en una forma de dosificación farmacéuticamente aceptable. Dependiendo del trastorno y del paciente a tratar, así como de la vía de administración, las composiciones se pueden administrar a dosis variables.

Los compuestos de la invención también se pueden combinar con cualquier otro fármaco útil en el tratamiento de arritmias y/o de otros trastornos cardiovasculares.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona de este modo una formulación farmacéutica que incluye un compuesto de la invención en mezcla con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Los compuestos de la invención se pueden procesar adicionalmente antes de su formulación en una formulación farmacéutica adecuada. Por ejemplo, la forma cristalina se puede moler o triturar en partículas más pequeñas.

Las formulaciones farmacéuticas preferidas incluyen aquellas en forma de un sistema de matriz gelificante, en el que los compuestos de la invención se proporcionan en asociación con un polímero que se hincha en un medio acuoso, tales como los encontrados en el aparato digestivo. Tales sistemas son bien conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Advanced Drug Delivery Reviews, 11, 37 (1993)).

La cantidad de compuesto de la invención que se emplea en tal formulación dependerá de la patología y del paciente a tratar, así como del compuesto o compuestos que se empleen, pero se puede determinar de forma no inventiva.

Las dosis diarias adecuadas de los compuestos de la invención en el tratamiento (por ejemplo terapéutico) de seres humanos oscilan desde alrededor de 0,005 hasta 25,0 mg/kg de peso corporal en la administración oral, y desde alrededor de 0,005 a 10,0 mg/kg de peso corporal en la administración parenteral, de la base libre (es decir, en el caso de una sal, excluyendo cualquier peso que resulte de la presencia de un contraión). Los intervalos preferibles de dosis diarias de los compuestos de la invención (en forma de base libre según se indica anteriormente) en el tratamiento (por ejemplo terapéutico) de seres humanos son alrededor de 0,005 a 10,0 mg/kg de peso corporal en la administración oral, y alrededor de 0,005 a 5,0 mg/kg de peso corporal en la administración parenteral.

Los compuestos de la invención tienen la ventaja de que son eficaces frente a arritmias cardíacas.

Los compuestos de la invención también tienen la ventaja de que pueden ser más eficaces, menos tóxicos, pueden tener un intervalo más amplio de actividad (incluyendo cualquier combinación de actividad de clase I, clase II, clase III y/o clase IV (especialmente actividad de clase I y/o clase IV, además de la actividad de clase III)), pueden ser más potentes, pueden actuar de forma más prolongada, pueden producir menos efectos secundarios (incluyendo una menor incidencia de proarritmias tales como taquicardia ventricular polimorfa en entorchado (torsades de pointes)), se pueden absorber más fácilmente, o tienen la ventaja de que pueden tener otras propiedades farmacológicas útiles con respecto a los compuestos conocidos en la técnica anterior.

Los compuestos de la invención tienen la ventaja de que están en una forma que proporciona una facilidad mejorada de manipulación. Además, los compuestos de la invención tienen la ventaja de que se pueden producir en formas que tienen una estabilidad química y en estado sólido mejorada (incluyendo, por ejemplo, una menor higroscopia). De este modo, los compuestos pueden ser estables cuando se almacenan durante períodos prolongados.

Los compuestos de la invención también pueden tener la ventaja de que se pueden cristalizar con buenos rendimientos, con una mayor pureza, en menos tiempo, más convenientemente, y a un coste menor que las formas de los Compuestos A, B, C y D y sus sales preparados previamente.

La invención se ilustra, pero en ningún modo se limita, mediante los siguientes Ejemplos, con referencia a las figuras adjuntas, en las que:

la Figura 1 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina del Compuesto A (Forma B), obtenido mediante el Ejemplo 1.

La Figura 2 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina del Compuesto A (Forma A), obtenido mediante el Ejemplo 2.

La Figura 3 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina del Compuesto A (Forma C), obtenido mediante el Ejemplo 3.

La Figura 4 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A, obtenida mediante el Ejemplo 4.

La Figura 5(a) muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal de ácido para-toluenosulfónico del Compuesto A (Forma A), obtenida mediante el Ejemplo 5.

La Figura 5(b) muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal de ácido para-toluenosulfónico del Compuesto A (Forma B), obtenida mediante el Ejemplo 5.

La Figura 6 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido 1-hidroxi-2-naftoico del Compuesto A, obtenida mediante el Ejemplo 6.

La Figura 7 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido 1,5-naftalenosulfónico del Compuesto A, obtenida mediante el Ejemplo 7.

La Figura 8 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido 2-mesitilenosulfónico del Compuesto A, obtenida mediante el Ejemplo 8.

La Figura 9 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina del Compuesto D, obtenido mediante el Ejemplo 9.

La Figura 10 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 10.

La Figura 11 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido hipúrico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 11.

La Figura 12 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina del Compuesto C, obtenido mediante el Ejemplo 12.

La Figura 13 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto C, obtenida mediante el Ejemplo 13.

La Figura 14 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido para-toluenosulfónico del Compuesto C, obtenida mediante el Ejemplo 14.

La Figura 15 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 15.

La Figura 16 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido hemisuccínico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 16.

La Figura 17 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 17.

La Figura 18 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]acético del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 18.

La Figura 19 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido 2,2,3,3-tetrametil-1,4-dibutanoico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 19.

La Figura 20 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido trans-D,L-1,2-ciclopentanodicarboxílico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 20.

La Figura 21 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido (+)-O,O’-dibenzoil-D-tartárico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 21.

La Figura 22 muestra un difractograma de rayos X en polvo para la forma cristalina de la sal del ácido (+)-O,O’-di-para-toluoil-D-tartárico del Compuesto D, obtenida mediante el Ejemplo 22.

Procedimientos generales

El análisis de difracción de rayos X en polvo (XRPD) se realizó usando ranuras variables sobre muestras preparadas según métodos estándares, por ejemplo los descritos en Giacovazzo, C. et al. (1995), Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. y Snyder, R.L. (1996), Introduction to X-Ray Powder Diffractometry, John Wiley & Sons, Nueva York; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, Londres; o Klug, H.P. & Alexander, L.E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, Nueva York. Los análisis mediante rayos X se realizaron usando un difractómetro Siemens D5000.

La calorimetría diferencial de barrido (DSC) se realizó usando un instrumento Mettler DSC820, según métodos estándares, por ejemplo los descritos en Höhne, G. W. H. et al. (1996), Differential Scanning Calorimetry, Springer, Berlín.

El análisis termogravimétrico (TGA) se realizó usando un instrumento Mettler Toledo TGA850.

Los expertos en la técnica apreciarán que las formas cristalinas de los compuestos de la invención se pueden preparar mediante analogía con procedimientos descritos aquí y/o según los Ejemplos más abajo, y pueden mostrar esencialmente los mismos patrones de difracción de XRPD y/o DSC y/o termogramas de TGA como los descritos en este documento. Por "esencialmente los mismos" patrones de difracción de XRPD y/o DSC y/o termogramas de TGA, se incluyen aquellos casos cuando está claro, a partir de los patrones y/o termogramas pertinentes (permitiendo el error experimental), que se ha formado esencialmente la misma forma cristalina. Cuando se proporcionan, las temperaturas de comienzo de DSC pueden variar en el intervalo de \pm5ºC (por ejemplo, \pm2ºC), y los valores de las distancias de XRPD pueden variar en el intervalo de \pm2 en el último sitio decimal. La persona experta apreciará que las intensidades de XRPD pueden variar, cuando se miden para esencialmente la misma forma cristalina, por una variedad de razones que incluyen, por ejemplo, la orientación preferida.

Preparación A

Preparación de Compuesto A y su Sal de Bencenosulfonato (i) 4-[(3-Hidroxipropil)amino]benzonitrilo

Alternativa 1

Se agitó a 80ºC una mezcla de 4-fluorobenzonitrilo (12,0 g, 99,1 mmoles) y 3-amino-1-propanol (59,6 g, 793 mmoles) en una atmósfera inerte durante 3 horas antes de que se añadiese agua (150 ml). La mezcla se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente, y después se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se separó, se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a vacío para dar 17 g (97%) del compuesto del subtítulo como un aceite que cristalizó al dejar reposar.

Alternativa 2

Se añadió 4-fluorobenzonitrilo (24,6 g, 0,203 moles, Aldrich 99%) a 3-amino-1-propanol (122,0 g, 1,625 moles, 8 equiv., Aldrich 99%), y la mezcla se calentó hasta 80ºC durante 5 horas, en nitrógeno. La disolución se dejó enfriar hasta 22ºC, y se añadió agua (300 ml). La disolución turbia se extrajo dos veces con cloruro de metileno (300 ml y 200 ml), y los extractos combinados de cloruro de metileno se lavaron con agua (300 ml; el análisis mediante GC de la capa orgánica dio \sim1,0% de área de aminopropanol que queda).

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Alternativa 3

Se añadió 3-amino-1-propanol (150 ml, 148,8 g, 1981,5 mmol, 8,0 eq.) a 4-fluorobenzonitrilo (30,29 g, 247,7 mmoles, 1,0 eq.). La mezcla se agitó en nitrógeno a temperatura ambiente (27ºC) hasta que todo el sólido se disolvió. La disolución se calentó (baño de aceite) hasta 77ºC, y se mantuvo a esta temperatura durante 7 horas, antes de agitarla a temperatura ambiente toda la noche (14 horas). Se añadió agua (365 ml), y la disolución turbia resultante se extrajo con diclorometano (365 ml, después 245 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (365 ml). La disolución en DCM del producto se secó mediante destilación: el disolvente (200 ml) se eliminó y se sustituyó por DCM fresco (200 ml). Se eliminó más disolvente (250 ml) para llevar el volumen del disolvente total hasta 365 ml.

(ii) 4-Metilbencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo

Alternativa I

Una disolución enfriada (0ºC) de 4-[(3-hidroxipropil)-amino]benzonitrilo (procedente de la etapa (i) (Alternativa 1) anterior; 17 g, 96,5 mmoles), en MeCN (195 ml) seco, se trató con trietilamina (9,8 g, 96,5 mmoles) y después con cloruro de p-toluenosulfonilo (20,2 g, 106 mmoles). La mezcla se agitó a 0ºC durante 90 minutos antes de concentrarla a vacío. Se añadió agua (200 ml) al residuo, y la disolución acuosa se extrajo con DCM. La fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a vacío. El residuo resultante se purificó mediante cristalización en iso-propanol para producir 24,6 g (77%) del compuesto del título.

Alternativa II

La disolución del 4-[(3-hidroxipropil)amino]-benzonitrilo bruto (procedente de la etapa (i) (Alternativa 2) anterior) se concentró hasta un volumen de 300 ml mediante destilación, y se añadieron otros 200 ml de cloruro de metileno y se redestiló hasta 300 ml (agua de disolución mediante Karl-Fischer 0,07%). Se añadió trietilamina (20,55 g, 0,203 moles), seguido de 4-(N,N-dimetilamino)piridina (248 mg, 2,0 mmoles), y la disolución se enfrió hasta 0ºC. Se añadió una disolución de cloruro de tosilo (38,70 g, 0,203 moles) en cloruro de metileno (150 ml), durante aprox. 30 minutos, con enfriamiento y buena agitación, permitiendo que la temperatura se elevase hasta 5ºC. La reacción se agitó durante 23 horas en el intervalo de 3 a 5ºC en nitrógeno (después de 5 horas, se produjo la precipitación de hidrocloruro de trietilamina. La TLC mostró muy poca conversión, si es que hay alguna adicional, del cianoalcohol residual a las 20-23 horas). Se añadió agua (300 ml), y las capas se agitaron vigorosamente durante 15 min. La disolución orgánica se concentró mediante destilación a 35 hasta 40ºC, hasta un volumen de aprox. 60 a 70 ml. Se añadió iso-propanol (100 ml) durante 5 minutos. (En esta etapa, se produjo alguna precipitación granular del producto antes de la adición de iso-propanol. La cristalización ocurrió rápidamente con la adición de iso-propanol). La destilación se continuó usando vacío para eliminar el cloruro de metileno final. (Se eliminaron otros \sim30 ml, y el destilado se comprobó mediante GC para determinar la ausencia de cloruro de metileno). La suspensión de cristales se enfrió a 0 hasta 5ºC durante aprox. 1 hora con agitación lenta, y se mantuvo durante una hora a 0-5ºC. Los cristales se filtraron sobre una caliza sinter media, y la torta del filtro húmeda compactada se lavó cuidadosamente con iso-propanol (80 ml) frío (0ºC). La torta del filtro se secó a vacío y en una corriente de nitrógeno, toda la noche. Rendimiento: 52,6 g, 78,4% en moles; HPLC: 99,64% de área.

Microanálisis: encontrado (teórico): %C: 61,60 (61,67); %H: 5,41 (5,49); %N: 8,44 (8,47); %S: 9,71 (9,70).

(iii)N,N-Bis(2-oxiranilmetil)bencenosulfonamida

Se añadió agua (2,5 l, 10 vol.), seguido de epiclorohidrina (500 ml, 4 eq.), a bencenosulfonamida (250 g, 1 eq.). Los agentes reaccionantes se calentaron hasta 40ºC. Se añadió hidróxido sódico acuoso (130 g en 275 ml de agua), de forma que la temperatura de la reacción permaneció entre 40ºC y 43ºC. Esto tomó aproximadamente 2 horas. (La velocidad de adición del hidróxido sódico tiene que ser más lenta en el comienzo de la adición que al final, a fin de mantener la temperatura dentro del intervalo establecido). Después de que se terminó la adición de hidróxido sódico, la reacción se agitó a 40ºC durante 2 horas, y después a temperatura ambiente toda la noche. El exceso de epiclorohidrina se eliminó como un azeótropo con agua mediante destilación a vacío (aprox. 40 mbar, temp. interna 30ºC), hasta que no destiló más epiclorohidrina. Se añadió diclorometano (1 l), y la mezcla se agitó rápidamente durante 15 minutos. Se dejó que las fases se separaran (esto tomó 10 minutos, aunque las fases totalmente claras se obtuvieron después de dejar reposar toda la noche). Las fases se separaron, y la disolución de diclorometano se usó en la siguiente etapa a continuación.

RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 2,55-2,65 (2H, m), 2,79 (2H, t, J 4,4), 3,10-3,22 (4H, m), 3,58-3,73 (2H, m), 7,50-7,56 (2H, m), 7,58-7,63 (1H, m), 7,83-7,87 (2H, m).

(iv) 5-Bencil-3,7-dihidroxi-1-fenilsulfonil-1,5-diazaciclo-octano

Se añadió IMS (2,5 l, 10 vol.) a la disolución de diclorometano procedente de la etapa (iii) anterior. La disolución se destiló hasta que se alcanzó la temperatura interna de 70ºC. Se recogieron aproximadamente 1250 ml de disolvente. Se añadió más IMS (2,5 l, 10 vol.), seguido de bencilamina (120 ml, 0,7 eq.) en una porción (no se observa exotermia), y la reacción se calentó a reflujo durante 6 horas (sin cambio desde el punto de muestreo a las 2 horas). Se añadió más bencilamina (15 ml), y la disolución se calentó durante otras 2 horas. El IMS se separó por destilación (aprox. 3,25 l), y se añadió tolueno (2,5 l). Se destiló más disolvente (aprox. 2,4 l), y después se añadió más tolueno (1 l). La temperatura de la cabeza fue ahora 110ºC. Se recogieron otros 250 ml de disolvente a 110ºC. Teóricamente, esto dejó el producto en aprox. 2,4 l de tolueno a 110ºC. Esta disolución se usó en la siguiente etapa.

RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,83-7,80 (4H, m, ArH), 7,63-7,51 (6H, m, ArH), 7,30-7,21 (10H, ArH), 3,89-3,80 (4H, m, CH(a)+CH(b)), 3,73 (2H, s, CH_{2}Ph(a)), 3,70 (2H, s, CH_{2}Ph(b)), 3,59 (2H, dd, CHHNSO_{2}Ar(a)), 3,54 (2H, dd, CHHNSO_{2}Ar (b)), 3,40 (2H, dd, CHHNSO_{2}Ar(b)), 3,23 (2H, dd, CHHNSO_{2}Ar(a)), 3,09-2,97 (4H, m, CHHNBn(a) + CHHNBn(b)), 2,83 (2H, dd, CHHNBn(b)), 2,71 (2H, dd, CHHNBn(a)).

(Datos tomados a partir de material purificado que comprende una mezcla 1:1 de trans-(a) y cis-diol (b)).

(v) 3-Bencil-7-(fenilsulfonil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]nonano

La disolución toluénica procedente de la etapa (iv) previa anterior se enfrió hasta 50ºC. Se añadió ácido metanosulfónico anhidro (0,2 l). Esto provocó que la temperatura se elevase desde 50ºC hasta 64ºC. Después de 10 minutos, se añadió ácido metanosulfónico (1 l), y la reacción se calentó hasta 110ºC durante 5 horas. Después, el tolueno se destiló de la reacción; y se recogieron 1,23 l. (Nótese que no se debe de permitir que la temperatura interna sea mayor que 110ºC en ninguna etapa, ya que de otro modo disminuirá el rendimiento). La reacción se enfrió entonces hasta 50ºC, y se aplicó vacío para eliminar el resto del tolueno. El calentamiento a 110ºC y 650 mbar permitió que se eliminasen otros 0,53 l. (Si el tolueno se puede eliminar a una menor temperatura y presión, entonces esto es beneficioso). La reacción se dejó entonces enfriar hasta 30ºC, y se añadió agua desionizada (250 ml). Esto provocó que la temperatura se elevase desde 30ºC hasta 45ºC. Se añadió más agua (2,15 l) durante un tiempo total de 30 minutos, de tal manera que la temperatura fue menor que 54ºC. La disolución se enfrió hasta 30ºC, y después se añadió diclorometano (2 l). Con enfriamiento externo y agitación rápida, la mezcla de reacción se basificó añadiendo hidróxido sódico acuoso (10 M, 2 l) a una velocidad que mantuvo la temperatura interna por debajo de 38ºC. Esto tomó 80 minutos. La agitación se detuvo, y las fases se separaron en 3 minutos. Las capas se repartieron. Se añadió IMS (2 l) a la disolución de diclorometano, y se comenzó la destilación. Se recogió disolvente (2,44 l) hasta que la temperatura de la cabeza alcanzó 70ºC. Teóricamente, esto dejó al producto en 1,56 l de IMS. La disolución se dejó entonces enfriar hasta la temperatura ambiente toda la noche, con agitación lenta. El producto sólido que precipitó se filtró y se lavó con IMS (0,5 l) para dar un producto de color café claro que, al secar a 50ºC, a vacío, dio 50,8 g (8,9% en 3 etapas). Se disolvieron 20,0 g de este producto en acetonitrilo (100 ml) a reflujo, para dar una disolución amarillo pálido. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, se recogieron los cristales que se formaron, mediante filtración, y se lavaron con acetonitrilo (100 ml). El producto se secó a vacío a 40ºC durante 1 hora para dar 17,5 g (87%) del compuesto del subtítulo.

RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,18-7,23 (10H, m), 3,86-3,84 (2H, m), 3,67 (2H, d), 3,46 (2H, s), 2,91 (2H, d), 2,85 (2H, dd), 2,56 (2H, dd).

(vi) 3-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano x 2 HCl

Se añadió ácido bromhídrico concentrado (1,2 l, 3 vol. rel.) a 3-bencil-7-(fenilsulfonil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano sólido (400 g, véase la etapa (v) anterior), y la mezcla se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno. El sólido se disolvió en el ácido a 95ºC. Después de calentar la reacción durante 8 horas, el análisis mediante HPLC mostró que la reacción estaba terminada. Los contenidos se enfriaron hasta la temperatura ambiente. Se añadió tolueno (1,2 l, 3 vol. rel.), y la mezcla se agitó vigorosamente durante 15 minutos. La agitación se detuvo, y las fases se repartieron. La fase toluénica se desechó junto con una pequeña cantidad de material interfacial. La fase ácida se devolvió a la vasija de reacción original, y se añadió hidróxido sódico (10 M, 1,4 l, 3,5 vol. rel.) en una porción. La temperatura interna se elevó desde 30ºC hasta 80ºC. El pH se comprobó para asegurarse de que era > 14. Se añadió tolueno (1,6 l, 4 vol. rel.), y la temperatura cayó desde 80ºC hasta 60ºC. Después de la agitación vigorosa durante 30 minutos, las fases se repartieron. La capa acuosa se desechó junto con una pequeña cantidad de material interfacial. La fase toluénica se devolvió a la vasija de reacción original, y se añadió 2-propanol (4 l, 10 vol. rel.). La temperatura se ajustó entre 40ºC y 45ºC. Se añadió ácido clorhídrico concentrado (200 ml) durante 45 minutos, de forma que la temperatura permaneció entre 40ºC y 45ºC. Se formó un precipitado blanco. La mezcla se agitó durante 30 minutos, y después se enfrió hasta 7ºC. El producto se recogió por filtración, se lavó con 2-propanol (0,8 l, 2 vol. rel.), se secó por succión y después se secó adicionalmente en un horno de vacío a 40ºC. Rendimiento = 297 g (91%).

RMN ^{1}H (CD_{3}OD + 4 gotas de D_{2}O): \delta 2,70 (br d, 2H), 3,09 (d, 2H), 3,47 (br s, 4H), 3,60 (s, 2H), 4,12 (br s, 2H), 7,30-7,45 (m, 5H). API MS: m/z = 219 [C_{13}H_{18}N_{2}O+H]^{+}.

(vii) 3,3-Dimetil-1-[9-oxa-7-(fenilmetil)-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il]-2-butanona

Se añadió agua (500 ml, 5 vol.) seguido de 1-cloropinacolona (45,8 ml, 1 eq.) a bicarbonato sódico (114,2 g, 4 eq.). Se añadió lentamente una disolución de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano x 2 HCl (100,0 g; véase la etapa (vi) anterior) en agua (300 ml, 3 vol.), de forma que se controló la evolución de dióxido de carbono (20 min). La mezcla de reacción se calentó a una temperatura de 65 hasta 70ºC durante 4 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, se añadió diclorometano (400 ml, 4 vol.) y, después de agitar durante 15 minutos, se separaron las fases. La fase acuosa se lavó con diclorometano (400 ml, 4 vol.), y los extractos orgánicos se combinaron. La disolución se destiló, y se recogió el disolvente (550 ml). Se añadió etanol (1 l), y se continuó la destilación. Se recogió más disolvente (600 ml). Se añadió etanol (1 l), y se continuó la destilación. Se recogió más disolvente (500 ml) (la temperatura de la cabeza fue ahora 77ºC). Esta disolución (que contiene teóricamente 1150 ml de etanol) se usó directamente en la siguiente etapa.

RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 1,21 (9H, s), 2,01-2,59 (2H, m), 2,61-2,65 (2H, m), 2,87-2,98 (4H, m), 3,30 (2H, s), 3,52 (2H, s), 3,87 (2H, br s), 7,26 (2H, d, J 7,6), 7,33 (1H, dd, J 7,6, 7,6), 7,47 (2H, d, J 7,6).

(viii) 3,3-Dimetil-1-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1)non-3-il)-2-butanona

Se añadió paladio sobre carbón (44 g, 0,4 eq. peso de catalizador húmedo al 61%, Johnson Matthey Tipo 440L) a la disolución etanólica de la etapa (vii) previa anterior. La mezcla se hidrogenó a 4 bares. Se consideró que la reacción estaba terminada después de 5 horas. El catalizador se eliminó por filtración y se lavó con etanol (200 ml). Los filtrados de etanol combinados se usaron, o se pueden usar, en la etapa (ix) más abajo. El ensayo de la disolución dio 61,8 g del producto del título en etanol (teóricamente 1,35 l; medido 1,65 l). Se aisló y se purificó una porción del producto. El análisis se realizó sobre el producto purificado.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 1,17 (9H, s), 2,69 (2H, dt, J 11,4, 2,4), 2,93 (2H, d, J 10,8), 3,02 (2H, d, J 13,8), 3,26 (2H, s), 3,32 (2H, dt, J 14,1), 3,61 (2H, br s).

Esta reacción también se puede realizar usando una relación en peso de catalizador a material de partida bencilado más baja. Esto se puede lograr de varias formas diferentes, por ejemplo usando catalizadores diferentes (tales como Pd/C con una carga metálica diferente de aquella en el catalizador de Tipo 440L empleado anteriormente, o Rh/C) y/o mejorando las propiedades de transferencia de masa de la mezcla de reacción (la persona experta apreciará que se puede obtener una transferencia mejorada de masa, por ejemplo, realizando la hidrogenación a una escala más grande que la descrita en la reacción anterior). Usando tales técnicas, la relación en peso de catalizador a material de partida se puede reducir por debajo de 4:10 (por ejemplo, entre 4:10 y 1:20).

(ix) Compuesto A, monohidrato de la sal del ácido bencenosulfónico

Método 1

Se añadió carbonato potásico (56,6 g, 1,5 equiv.) y 4-metilbencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo (véase la etapa (ii) anterior, 90,3 g, 1 equiv.) a una disolución etanólica de 3,3-dimetil-1-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]-non-3-il)-2-butanona (véase la etapa (viii) anterior; 61,8 g del ensayo en 1,65 l). La reacción se calentó a 80ºC durante 4 horas. Un ensayo mostró que quedaba algo de agente reaccionante (8,3 g), de forma que se añadió más 4-metilbencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo (12,2 g), y el resultante se calentó a 80ºC durante 4 horas. El disolvente (1,35 l) se destiló, y después se añadió acetato de iso-propilo (2,5 l). Se eliminó el disolvente (2,51 l). Se añadió acetato de iso-propilo (2,5 l). Se eliminó el disolvente (0,725 l). La temperatura interna fue ahora 88ºC. Se eliminó el disolvente (0,825 l), dejando el producto como una disolución en acetato de iso-propilo (teóricamente en 2,04 l). Después de enfriar a 34ºC, se añadió agua (0,5 l). Hubo una suspensión negra, posiblemente de Pd, en la mezcla. El pH de la fase acuosa fue 11. Se añadió hidróxido sódico (1 M, 0,31 l), de forma que la temperatura fue menor que 25ºC, y la mezcla se agitó vigorosamente durante 5 minutos. El pH de la fase acuosa fue 12. Las fases se separaron, y se desechó la fase acuosa. Se añadió más agua (0,5 l), y las fases se separaron. Se desechó la fase acuosa. La disolución de éster que queda se filtró para eliminar las partículas suspendidas, y el filtrado se completó entonces hasta exactamente 2 l. La disolución se dividió entonces en 2 x porciones de 1 l.

(A fin de evitar producir el producto del subtítulo que comprenda un contenido elevado de paladio, se puede realizar el siguiente tratamiento: se añadió resina Deloxan® (12,5 g, 25% en peso) a la disolución de la base libre (1 l), y la mezcla se calentó a reflujo con agitación vigorosa durante 5 horas. La disolución se enfrió entonces hasta temperatura ambiente, y se agitó durante 2 días. La resina se eliminó por filtración).

Se realizó un ensayo para calcular la cantidad requerida de ácido bencenosulfónico, para obtener la sal de bencenosulfonato.

Se añadió una disolución de ácido bencenosulfónico (20,04 g, 1 eq., suponiendo que el ácido era monohidrato puro), en acetato de isopropilo (200 ml), durante 5 minutos (mejor añadir de forma lenta si es posible) con agitación vigorosa a la disolución de la base libre (1 l), y se formó un precipitado amarillo pálido. La temperatura se elevó desde 18ºC hasta 22ºC. Después de 10 minutos, la mezcla se enfrió hasta 10ºC, y el producto se recogió por filtración. El producto se lavó con acetato de iso-propilo (250 ml), se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC durante 2 días para dar 59,0 g (61% a partir de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano x 2 HCl).

(La sal de bencenosulfonato bruta se preparó alternativamente mediante adición de una disolución acuosa al 70% (p/p) de ácido bencenosulfónico a una disolución etanólica de la base libre).

El producto del subtítulo bruto se aisló como un monohidrato.

Se añadieron etanol (500 ml) y agua (250 ml) al compuesto del subtítulo bruto (50,0 g). La disolución se calentó hasta 75ºC. El material se disolvió totalmente a 55ºC. La disolución se mantuvo a 75ºC durante 5 minutos, después se enfrió hasta 5ºC durante 1 hora. La precipitación comenzó a 18ºC. La disolución fría se filtró, y el filtrado se lavó con etanol:agua (2:1; 150 ml), se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC para dar el producto del subtítulo puro (41,2 g, 82%).

(Esta recristalización se puede llevar a cabo con volúmenes mayores de disolvente, si es necesario, para ajustarse a las vasijas de reacción, por ejemplo

: EtOH:agua 2:1, 45 vol. (dio una recuperación del 62%)

: EtOH:agua 6:1, 35 vol. (dio una recuperación del 70%)).

El producto del subtítulo se aisló como el monohidrato después de la recristalización (según se determina mediante difracción de rayos X de cristal único).

Método 2

(a) Bencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo

Se añadió, secuencialmente, de una sola vez, trietilamina (52 ml, 37,60 g, 371,55 mmoles, 1,5 eq.) e hidrocloruro de trimetilamina (11,89 g, 123,85 mmoles, 0,5 eq.) a una disolución de 4-[(3-hidroxipropil)amino]benzonitrilo (procedente de la etapa (i) Alternativa 3 anterior, suponiendo 43,65 g, 247,7 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (360 ml de volumen de disolución total). La disolución amarilla se enfrió hasta -20ºC (usando un baño de acetona/hielo seco, o una placa fría), y se trató con una disolución de cloruro de bencenosulfonilo (32 ml, 43,74 g, 247,7 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (220 ml, 5 vols. con respecto al cianoalcohol), vía un embudo de goteo igualador de la presión. La disolución se añadió en porciones, de forma que la temperatura interna no superó -14ºC. La adición duró 25 minutos hasta terminar. La mezcla se agitó entonces durante 35 minutos a una temperatura entre -15 y -10ºC. Se añadió agua (365 ml), y la temperatura se elevó hasta 10ºC. La mezcla se enfrió nuevamente hasta 0ºC, y se agitó vigorosamente durante 15 minutos. La capa orgánica (volumen 570 ml) se recogió y se destiló a presión ambiente para eliminar DCM (450 ml, temperatura del recipiente 40-42ºC, temperatura de la cabeza de destilación 38-39ºC). Se añadió etanol (250 ml), y se dejó enfriar la disolución hasta una temperatura por debajo de 30ºC antes de poner en marcha el vacío. Se eliminó más disolvente (se recogieron 40 ml, presión 5,2 kPa (52 mbares), las temperaturas del recipiente y de la cabeza de destilación fueron 21-23ºC), y el producto desapareció gradualmente de la disolución. En este momento se detuvo la destilación, y se añadió más etanol (50 ml). La mezcla se calentó (baño de agua caliente a 50ºC) hasta 40ºC para disolver todo el sólido, y se añadió lentamente agua (90 ml) vía un embudo de goteo. La disolución se agitó lentamente a temperatura ambiente (20ºC) toda la noche (15 horas), mediante lo cual cristalizó algo de producto. La mezcla se enfrió hasta -5ºC (baño de hielo/metanol), y se agitó a esta temperatura durante 20 minutos antes de recoger el sólido amarillo pálido por filtración. El sólido se lavó con una mezcla de etanol/agua (42 ml, EtOH, 8 ml, H_{2}O), y se secó por succión durante 30 minutos antes de secar hasta peso constante en un horno de vacío (40ºC, 72 horas). La masa del producto bruto obtenido fue 47,42 g (149,9 mmoles, 60%). Se añadió etanol (160 ml, 8 vols.) al producto bruto (20,00 g, 63,22 mmoles, 1,0 eq.). La mezcla se agitó en nitrógeno y se calentó hasta 40ºC usando un baño de agua caliente. Al alcanzar esta temperatura, todo el sólido se había disuelto para dar una disolución amarilla clara. Se añadió gota a gota agua (60 ml, 3 vols.) durante un período de 10 minutos, mientras que la temperatura interna se mantuvo en el intervalo de 38-41ºC. Se retiró el baño de agua, y se dejó que la disolución se enfriase hasta 25ºC durante 40 minutos, mediante lo cual comenzó la cristalización. La mezcla se enfrió hasta -5ºC durante 10 minutos, después se mantuvo a esta temperatura durante otros 10 minutos. La disolución amarilla pálida se recogió por filtración, se secó por succión durante 10 minutos, y después se secó hasta peso constante en un horno de vacío (40ºC, 15 horas). La masa del compuesto del subtítulo obtenido fue 18,51 g (58,51 mmoles, 93% (procedente del producto bruto)).

(b) Compuesto A, monohidrato de la sal del ácido bencenosulfónico

Se añadió bencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)-propilo (49,05 g, 154,52 mmoles, 1,0 eq.; véase la etapa (a) anterior), de una sola vez, a una disolución etanólica (volumen total de 770 ml, aprox. 20 vols. con respecto a la amina) de 3,3-dimetil-1-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)-2-butanona (suponiendo 34,97 g (verificado por ensayo), 154,5 mmoles, 1,0 eq.; véase la etapa (viii) anterior). La mezcla resultante se calentó a 74ºC durante 6 horas, y después se agitó a temperatura ambiente (20ºC) durante 65 horas (a lo largo del fin de semana; la persona experta sabrá que la reacción también tendrá éxito sin esta agitación prolongada a temperatura ambiente). Se eliminó el etanol (370 ml), y se añadió agua (200 ml) (esto dio una mezcla 2:1 de EtOH:H_{2}O, volumen total 600 ml). Al añadir el agua, la temperatura del recipiente cayó desde 80ºC hasta 61ºC. La disolución se volvió a calentar hasta 70ºC, y después se dejó enfriar naturalmente hasta la temperatura ambiente toda la noche (19 horas), mientras se agitaba lentamente. En esta etapa se observó un sólido. La mezcla se enfrió hasta 0ºC, y después se agitó a esta temperatura durante 15 minutos antes de recoger el sólido blanquecino por filtración. El sólido se lavó con una mezcla 2:1 fría de etanol:agua (150 ml), se secó por succión durante 1,25 horas, y después se secó en un horno (40ºC, 20 horas). La masa del producto bruto obtenido fue 57,91 g (103,3 mmoles, 60%).

Se encontró que el producto bruto tenía una pureza de 98,47% (según se determina mediante análisis por HPLC), y se recristalizó (usando el procedimiento detallado a continuación) para dar el compuesto del subtítulo con una pureza de 99,75% (recuperación de 84%).

Procedimiento de recristalización

Se añadieron etanol (562 ml) y agua (281 ml) al producto bruto obtenido anteriormente (56,2 g). La disolución se calentó hasta 75ºC. Todo el material se disolvió a 55ºC. La disolución se mantuvo a 75ºC durante 5 minutos, antes de enfriarla hasta 5ºC durante 1,5 horas. La precipitación comenzó a 35ºC. La disolución fría se filtró, y el precipitado recogido se lavó con etanol:agua (2:1, 168 ml). El material sólido se secó por succión sobre el filtro, antes de secarlo a vacío a 40ºC para dar el producto (47,1 g, 84%).

(x) Compuesto A (base libre)

Método I

Se añadió la sal de bencenosulfonato bruta (50,0 g, 1,0 equiv., procedente de la etapa (ix) anterior; Método 1) a hidróxido sódico acuoso (1 M, 500 ml), lavando con diclorometano (1,0 l, 20 vol.). La mezcla combinada se agitó durante 15 minutos. Las capas se separaron entonces, y se dejó una pequeña cantidad de material interfacial con la capa acuosa superior. Se añadió etanol (500 ml, 10 vol.) a la disolución de diclorometano, y después el disolvente se eliminó por destilación (1,25 l). La temperatura de la cabeza de destilación fue ahora 78ºC. Se dejó enfriar a la disolución por debajo de la temperatura de reflujo, y se añadió etanol (250 ml, 5 vol.). Se eliminó el disolvente (250 ml). Esta disolución tibia se diluyó con etanol hasta 890 ml, 17,8 vol. (25 vol. suponiendo una conversión del 100% en la base libre). Después de calentar a reflujo, la disolución se enfrió lentamente. A 5ºC se añadió una semilla del compuesto del título. Comenzó la cristalización, y la mezcla se agitó a 5ºC durante 30 minutos. El producto se recogió por filtración, y se lavó con etanol (2 x 50 ml, 2 x 1 vol.). El producto se secó entonces en un horno de vacío a 40ºC durante 60 horas para dar un polvo blanquecino (26,3 g; 74%).

RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,86-7,82 (2H, m), 7,39-7,32 (3H, m), 7,30-7,26 (2H, m), 6,47 (2H, m), 4,11-4,07 (4H, m), 3,70 (2H, s), 3,36-3,33 (4H, m), 3,26 (2H, t), 3,12 (2H, d), 2,90 (2H, d), 2,28-2,21 (2H, m), 1,06 (9H, s). RMN ^{13}C (CDCl_{3}): \delta 24,07, 26,38, 41,52, 43,52, 56,17, 56,47, 63,17, 68,46, 96,61, 111,64, 121,03, 133,43.

MS (ES): m/z = 385,1 (M+H)^{+}.

Método II

Una mezcla de 4-{[3-(9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il)propil]amino}-benzonitrilo (véase la Preparación B(I)(vi) más abajo; 5,73 g, 0,02 moles), y K_{2}CO_{3} (11,05 g, 0,08 moles) en MeCN (300 ml) se trató con 1-cloropinacolona (4,44 g, 0,032 moles). La mezcla se agitó a 50ºC toda la noche antes de añadir DCM, y se filtró la mezcla. La torta del filtro se lavó entonces con una mezcla de DCM y MeCN antes de que se evaporase el disolvente del filtrado. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía sobre sílice, eluyendo con un gradiente de acetato de etilo:metanol:metanol amoniacal (95:5:0 hasta 95:0:5), para dar el compuesto del título (5,8 g, 73,9%).

Preparación B(I)

Preparación del Compuesto B (Método I) (i) 2-Bromoetilcarbamato de terc-butilo

Se disolvieron bicarbonato de sodio (6,15 g, 0,073 moles) y dicarbonato de di-t-butilo (11,18 g, 0,051 moles) en una mezcla de H_{2}O (50 ml) y diclorometano (150 ml), y después se enfrió hasta 0ºC. Se añadió lentamente hidrobromuro de 2-bromoetilamina (10,0 g, 0,049 moles) como un sólido, y la reacción se agitó toda la noche a 25ºC. La capa de diclorometano se separó, se lavó con H_{2}O (200 ml), y se lavó con una disolución de hidrogenosulfato de potasio (150 ml, pH = 3,5). La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró a vacío. El aceite bruto se cromatografió sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano, para dar 7,87 g (72%) del compuesto del subtítulo como un aceite claro incoloro.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 4,98 (bs, 1H), 3,45-3,57 (m, 4H), 1,47 (s, 9H).

API-MS: (M+1-C_{5}H_{8}O_{2}) 126 m/z.

(ii) 3-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano x 2 HCl

Esto es una preparación alternativa a la descrita en la Preparación A(vi) anterior. Un matraz de 3 l, de tres bocas, se equipó con un agitador magnético, con un termómetro y con un condensador de reflujo. Se añadió ácido bromhídrico acuoso (48%, 0,76 l, 4,51 moles) a 3-bencil-7-(fenilsulfonil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano sólido (190 g, 0,53 moles, véase la Preparación A(v) anterior), y la mezcla se calentó a reflujo en nitrógeno. El sólido se disolvió a 90ºC. Después de calentar la mezcla durante 12 horas, el análisis mediante GC mostró que la reacción estaba terminada. Los contenidos se enfriaron hasta la temperatura ambiente. Se añadió tolueno (0,6 l), y la mezcla se agitó durante unos pocos minutos. Las fases se separaron. La fase acuosa se devolvió a la vasija de reacción adicional, y se añadió hidróxido sódico acuoso (10 M, 0,85 l, 8,5 moles) de una sola vez. La temperatura interna se elevó hasta 80ºC, y la mezcla era fuertemente básica. Se añadió tolueno (0,8 l) cuando la temperatura interna cayó hasta 55ºC. Después de agitar vigorosamente durante 30 minutos, la fase de tolueno se separó y se devolvió a la vasija de reacción original. Se añadió 2-propanol (1,9 l), y la temperatura interna se ajustó entre 40ºC y 50ºC. Se añadió ácido clorhídrico concentrado (hasta acidez), a una velocidad tal para mantener la temperatura entre 40ºC y 50ºC. Se formó un precipitado blanco. La mezcla se agitó durante 30 minutos, y después se enfrió hasta 7ºC. El polvo blanco se recogió por filtración, se lavó con 2-propanol (0,4 l), se secó haciendo pasar aire a través de la muestra durante diez minutos, y después se secó adicionalmente en un horno de vacío a 40ºC. Rendimiento: 130 g (84%).

(iii) Hidrocloruro de 7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo

Un matraz de tres bocas de 5 l se equipó con un agitador de sobrecabeza, con un termómetro y con un burbujeador de nitrógeno. Se cargaron por orden agua (1,4 l), diclorometano (1,4 l), bicarbonato sódico (150 g, 1,79 moles) y 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano x 2 HCl (130 g, 0447 moles, procedente de la etapa (ii) anterior). La mezcla se agitó rápidamente durante diez minutos, y después se añadió lentamente dicarbonato de di-terc-butilo (0,113 l, 0,491 moles). La mezcla se agitó rápidamente durante tres horas a temperatura ambiente. La capa orgánica se separó, se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 160 g de un sólido blanquecino. El sólido blanquecino se cargó en un matraz de tres bocas de 3 l equipado con un agitador de sobrecabeza, con un termómetro y con un embudo de adición. Se cargó acetato de etilo (0,6 l), y la disolución clara se enfrió hasta -10ºC. Se añadió gota a gota una disolución de HCl con dioxano (4 M), hasta que el pH fue menor que 4. La sal de hidrocloruro precipitó, y la mezcla se agitó durante una hora adicional. El producto se recogió por filtración, se lavó con acetato de etilo (0,1 l), y se secó toda la noche en un horno de vacío. El producto cristalino blanco pesó 146 g (rendimiento 92%).

(iv) Hidrocloruro de 9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo

Se cargaron la sal de hidrocloruro procedente de la etapa (iii) anterior (146 g, 0,411 moles) y Pd(OH)_{2} al 20% sobre carbón (7,5 g) en una botella hidrogenadora Parr. Se añadió metanol (0,5 l), y la botella se agitó vigorosamente en una atmósfera de hidrógeno a 3,5 bares. La reacción se monitorizó mediante análisis por GC, y se encontró que estaba terminada después de una hora. El catalizador se filtró, y el filtrado se concentró para dar un producto cristalino blanquecino. El producto bruto se disolvió en acetonitrilo caliente (1,2 l), y después se filtró mientras estaba caliente. El filtrado se diluyó con acetato de etilo (1,2 l). La disolución clara se dejó reposar toda la noche a temperatura ambiente. Se recogió la primera cosecha de cristales, y se secó a vacío para dar 52 g del compuesto del subtítulo como un sólido blanco. El filtrado se concentró hasta casi sequedad, después se disolvió en acetonitrilo caliente (0,4 l), y se diluyó con acetato de etilo (0,4 l). Se obtuvo una segunda cosecha de cristales (38 g) después de enfriar la disolución hasta 10ºC. Se encontró que ambas cosechas eran comparables mediante análisis de GC y análisis de
RMN ^{1}H. Rendimiento combinado: 90 g (83%).

(v) 7-[3-(4-Cianoanilino)propil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]-nonan-3-carboxilato de terc-butilo

La sal de hidrocloruro de 9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo (véase la etapa (iv) anterior; 1,1 g, 4,15 mmoles) se mezcló con MeCN (46 ml), agua (2,5 ml) y K_{2}CO_{3} (3,5 g, 25 mmoles). La mezcla se agitó durante 4 h antes de que se añadiese CHCl_{3}, y la mezcla se filtró a través de Celite®. El filtrado se concentró a vacío para dar 0,933 g de la base libre. Esto se mezcló entonces con 4-metilbencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo (véase la Preparación A(ii) anterior; 2,1 g, 6,2 mmoles) y con K_{2}CO_{3} (0,86 g, 6,2 mmoles) en MeCN (18 ml). La mezcla resultante se agitó toda la noche a 60ºC antes de concentrarla a vacío. El residuo se trató con DCM (250 ml) y NaOH 1 M (50 ml). Las capas se separaron, y la capa de DCM se lavó dos veces con NaHCO_{3} acuoso, antes de secar (Na_{2}SO_{4}) y de concentrar a vacío. El producto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida, eluyendo con un gradiente de tolueno:acetato de etilo:trietilamina (2:1:0 hasta 1000:1000:1), para dar 1,47 g (91%) del compuesto del subtítulo.

(vi) 4-{[3-(9-Oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)-propil]-amino}benzonitrilo

El compuesto del subtítulo se obtuvo con un rendimiento de 96% usando un procedimiento análogo al descrito en las Preparaciones C(v) y D(iii) a continuación, usando 7-[3-(4-cianoanilino)propil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]-nonan-3-carboxilato de terc-butilo (procedente de la etapa (v) anterior).

(vii) Compuesto B

Se añadió 4-{[3-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)propil]amino}benzonitrilo (véase la etapa (vi) anterior, 4,48 g, 0,016 moles) y trietilamina (3,27 ml, 0,024 moles) a una disolución de 2-bromoetilcarbamato de terc-butilo (4,21 g, 0,019 moles; véase la etapa (i) anterior) en DMF (65 ml). La mezcla se agitó toda la noche a 35ºC, y después se concentró a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (80 ml), y se lavó con cloruro sódico saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (1 x 150 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron a vacío. El aceite rojo pardo bruto se cromatografió (x 2) sobre gel de sílice, eluyendo con cloroformo:metanol:NH_{4}OH conc. (9:1:0,02), para dar 3,75 g (56%) del compuesto del título.

RMN ^{1}H (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,37-7,40 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,64-6,67 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,94 (bs, 2H), 3,21-3,31 (m, 4H), 3,01 (bs, 4H), 2,47-2,59 (m, 8H), 1,90 (bs, 2H), 1,39 (s, 9H)

RMN ^{13}C (75 MHz, CD_{3}OD) \delta 158,5, 134,7, 121,9, 113,2, 97,7, 80,3, 69,2, 58,8, 58,1, 57,5, 57,3, 41,9, 38,3, 28,9, 26,2.

API-MS: (M+1) = 430 m/z.

Preparación B(II)

Preparación del Compuesto B (Método II) (i) Éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico

Alternativa 1

(a) Tosilato de 2-(terc-butiloxicarbonilamino)etilo

Una disolución de cloruro de p-toluenosulfonilo (28,40 g, 148 mmoles) en diclorometano (100 ml) se añadió gota a gota durante 30 minutos a 0ºC a una mezcla de N-(2-hidroxietil)carbamato de terc-butilo (20 g, 120 mmoles), trietilamina (18,80 g, 186 mmoles) y cloruro de trimetilamonio (1,18 g, 12,4 mmoles), en diclorometano (120 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 1 hora, y después se filtró, lavando con diclorometano (100 ml). El filtrado se lavó con ácido cítrico al 10% (3 x 100 ml) y con salmuera (100 ml). La capa orgánica se secó con sulfato de magnesio, y después se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. El aceite se disolvió en acetato de etilo (40 ml), y después se añadió lentamente iso-hexano (160 ml). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas, y después se filtró. El sólido recogido se lavó con iso-hexano (240 ml) para dar el compuesto del subtítulo como un polvo incoloro (25 g, 64%).

P.f. 64-66ºC

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,40 (9H, s), 2,45 (3H, s), 3,38 (2H, q), 4,07 (2H, t), 4,83 (1H, bs) 7,34 (2H, d), 7,87 (2H, d).

MS: m/z = 216 (MH^{+}(316)-Boc).

(b) Éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico

Una disolución de dihidrocloruro de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano (véase la Preparación A(vi) anterior; 10 g, 34 mmoles) en agua (25 ml) se añadió lentamente a una disolución de bicarbonato de sodio (10 g, 119 mmoles) en agua (10 ml). Se añadió más agua (5 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió una disolución de tosilato de 2-(terc-butiloxicarbonilamino)etilo (véase la etapa (a) anterior; 11,92 g, 37 mmoles) en tolueno (40 ml). Esta mezcla se calentó entonces a 65-70ºC durante 7 horas antes de agitar a temperatura ambiente toda la noche. La reacción se volvió a calentar hasta 50ºC, y las fases se separaron. La capa acuosa se extrajo con tolueno (40 ml) a 50ºC. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con bicarbonato sódico saturado (25 ml). Los disolventes se evaporaron a presión reducida para producir una mezcla de aceite y sólido (13 g, > 100%). Se añadieron acetato de etilo (50 ml) y ácido cítrico (10%, 25 ml) a una porción del sólido oleoso (5 g, 138 mmoles). La capa acuosa se separó, y la capa orgánica se lavó nuevamente con ácido cítrico (10%, 20 ml). Las capas acuosas se combinaron y se trataron con bicarbonato sódico sólido hasta pH neutro. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml), se secó sobre sulfato de magnesio, y se filtró. El filtrado se evaporó hasta sequedad a presión reducida para dar el compuesto del subtítulo como un semisólido incoloro que solidificó totalmente cuando se almacenó en el frigorífico (4,68 g, 93%).

P.f. 58-60ºC.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,46 (9H, s), 2,38-2,57 (4H, m), 2,6-2,68 (2H, m) 2,75-2,85 (4H, m), 3,22 (2H, q), 3,26 (2H, s), 3,83 (2H, bs), 6,17 (1H, bs) 7,2-7,4 (5H, m).

MS: m/z = 362 (MH^{+}).

Alternativa 2

(a) 3-(7-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)-etil]propionamida

Se añadió lentamente trietilamina (3,60 g, 35,7 mmoles) a una disolución de dihidrocloruro de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano (véase la Preparación A(vi) anterior; 5 g, 17 mmoles) en etanol (50 ml). A esta mezcla se añadió acrilamida (1,34 g, 18 mmoles), mezcla la cual se calentó entonces a reflujo durante 7 horas. La mezcla de reacción se concentró entonces a presión reducida. Se añadió agua (50 ml) e hidróxido sódico (1 M, 150 ml) al residuo, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida para dar un sólido incoloro. Éste se recristalizó en acetato de etilo (50 ml) para dar el compuesto del subtítulo (3,80 g, 76%).

P.f. 157-159ºC.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 2,39 (2H, t), 2,42-2,61 (6H, m), 2,82-2,95 (4H, m), 3,39 (2H, s), 3,91 (2H, bs), 5,07 (1H, bs), 7,18-7,21 (2H, m), 7,25-7,39 (3H, m), 9,5 (1H, bs).

MS: m/z = 290 (MH^{+}).

Se añadió N-bromosuccinimida (6,0 g, 33 mmoles) en porciones durante 1 minuto a una disolución de 3-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-propionamida (véase la etapa (a) anterior; 5 g, 12 mmoles) en terc-butóxido de potasio en terc-butanol (1 M, 81 ml) y terc-butanol (20 ml). La mezcla se calentó entonces a 60-65ºC durante 30 minutos. Se dejó que la reacción volviese a la temperatura ambiente, y después se añadió agua (100 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron (lavando la torta del filtro con acetato de etilo (50 ml)), y después el filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del subtítulo como un aceite marrón (6,5 g, > 100%).

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,46 (9H, s), 2,4-2,58 (4H, m), 2,58-2,7 (2H, m) 2,75-2,91 (4H, m), 3,22 (2H, q), 3,28 (2H, s), 3,83 (2H, bs), 6,19 (1H, bs) 7,2-7,42 (5H, m).

MS: m/z = 316 (MH^{+}).

Alternativa 3

(a) 3-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano

Todos los volúmenes y equivalentes se midieron con respecto a la cantidad de dihidrocloruro de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano (véase la Preparación A(vi) anterior) usado. Se añadió tolueno (420 ml, 7 vols.) y disolución de hidróxido sódico acuosa (2M, 420 ml, 7 vols., 4,0 eq.) a dihidrocloruro de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano (60,07 g, 206,03 mmoles, 1,0 eq., véase la Preparación A(vi) anterior). La mezcla se agitó en nitrógeno, se calentó hasta 60ºC, y se mantuvo esta temperatura durante 30 minutos, momento en el cual se habían formado dos capas claras. La capa acuosa inferior se eliminó, y la disolución toluénica del compuesto del subtítulo (base libre) se secó azeotrópicamente a presión atmosférica (volumen total de disolvente eliminado = 430 ml; volumen total de tolueno añadido = 430 ml), después se concentró hasta un volumen de 240 ml (4 vols). El análisis de Karl-Fischer en esta etapa mostró un 0,06% de agua en la disolución. La disolución seca del compuesto del subtítulo (teóricamente 44,98 g, 206,03 mmoles, 1,0 eq.) se usó como tal en una etapa subsiguiente.

(b) 2,4,6-Trimetilbencenosulfonato de 2-(terc-butiloxi-carbonilamino)etilo

Se añadió trietilamina (65 ml, 465,3 mmoles, 1,5 eq.) de una sola vez a una disolución de N-(2-hidroxietil)carbamato de terc-butilo (50,11 g, 310,2 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (250 ml, 5 vols.). La disolución se enfrió hasta -10ºC, y se añadió de una sola vez hidrocloruro de trimetilamina (14,84 g, 155,1 mmoles, 0,5 eq.). La mezcla resultante se enfrió adicionalmente hasta -15ºC, se agitó durante 5 minutos, después se trató con una disolución de cloruro de metilenosulfonilo (74,74 g, 341,2 mmoles, 1,1 eq.) en diclorometano (250 ml, 5 vols.), durante 28 minutos, de forma que la temperatura interna permaneció por debajo de -10ºC. Una vez que la adición estuvo terminada, se formó un precipitado, y la mezcla se agitó a -10ºC durante otros 30 minutos. Se añadió agua (400 ml, 8 vols.), y se disolvió todo el precipitado. La mezcla se agitó rápidamente durante 5 minutos, y después se separaron las dos capas. Se llevó a cabo un cambio de disolvente, de diclorometano a iso-propanol, mediante destilación a presión reducida. El disolvente se eliminó (450 ml) y se sustituyó por iso-propanol (450 ml) (presión inicial 450 mbares, p.e. 24ºC; la presión final fue 110 mbares, p.e. 36ºC). Al final de la destilación, se eliminó el disolvente (150 ml) para reducir el volumen hasta 350 ml (7 vols. con respecto a la cantidad de N-(2-hidroxietil)carbamato de terc-butilo usado). La disolución se enfrió hasta 25ºC, después se añadió lentamente agua (175 ml) con agitación, provocando que la disolución se pusiera gradualmente turbia. En esta etapa no precipitó más sólido. Se añadió más agua (125 ml), y empezó a formarse un precipitado sólido después de que se había añadido una cantidad de aproximadamente 75 ml. La temperatura interna se elevó desde 25ºC hasta 31ºC. La mezcla se agitó lentamente y se enfrió hasta 7ºC. El sólido se recogió por filtración, se lavó con iso-propanol:agua (1:1, 150 ml), y se secó a vacío a 40ºC durante 21 horas para dar el compuesto del subtítulo como un sólido cristalino blanco (92,54 g, 87%). P.f. 73,5ºC.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,42 (9H, s), 2,31 (3H, s), 2,62 (6H, s) 3,40 (2H, q), 4,01 (2H, t), 4,83 (1H, bs), 6,98 (2H, s).

(c) Sal del ácido 2,4,6-trimetilbencenosulfónico del éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico

Se añadió una disolución tibia (28ºC) de 2,4,6-trimetilbencenosulfonato de 2-(terc-butiloxicarbonilamino)etilo (70,93 g, 206,03 mmoles, 1,0 eq., véase la etapa (b) anterior) en tolueno (240 ml, 4 vols.) a una disolución de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano (44,98 g, 206,03 mmoles, 1,0 eq.) en tolueno (240 ml, 4 vols.) (véase la etapa (a) anterior). La disolución resultante se agitó rápidamente en nitrógeno, con calentamiento a 68ºC durante 8 horas. La reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 84 horas. Se había formado un precipitado sólido blanco espeso en una disolución de color amarillo pálido. La mezcla se enfrió hasta +9ºC, y el compuesto del subtítulo se recogió por filtración. La vasija de reacción se lavó con tolueno (100 ml), y se añadió al filtro. La torta del filtro se lavó con tolueno (150 ml). El producto sólido blanco se secó por succión durante 15 minutos, después se secó hasta peso constante a vacío a 40ºC durante 23 horas. El rendimiento del compuesto del subtítulo obtenido fue 79,61 g, 141,7 mmoles, 69%. El filtrado y los lavados combinados (670 ml) se lavaron con disolución acuosa de hidróxido sódico (2 M, 200 ml, 3,3 vols.). La mezcla se calentó hasta 60ºC, y se mantuvo a esta temperatura durante 20 minutos con agitación rápida. Después, las dos capas se separaron. La disolución toluénica se concentró hasta 200 ml mediante destilación a vacío (pe 50-54ºC a 650-700 mbares; pe 46ºC a 120 mbares al final). A medida que progresaba la destilación, la disolución se puso turbia debido a la formación del compuesto del subtítulo. Se supone que el 20% de la cantidad original de 3-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonano permaneció en el filtrado, y de este modo se añadió de una sola vez más 2,4,6-trimetilbencenosulfonato de 2-(terc-butiloxicarbonilamino)etilo (14,20 g, 41,21 mmoles, 0,2 eq) (cargado como un sólido en lugar de como una disolución en tolueno). La disolución turbia se calentó a 67ºC durante 8 horas con agitación rápida, y después se dejó agitar a temperatura ambiente durante 11 horas. La mezcla se enfrió hasta +8ºC, y el compuesto del subtítulo se recogió por filtración. La vasija de reacción se lavó con más tolueno (2 x 30 ml), y se añadió al filtro. El producto sólido blanco se secó por succión durante 15 minutos, después se secó hasta peso constante a vacío a 40ºC durante 7 horas. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue 23,25 g, 41,39 mmoles, 20%. El rendimiento combinado del compuesto del subtítulo (un sólido blanco) fue 102,86 g, 183,11 mmoles, 89%. P.f. 190-190,5ºC.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,43 (9H, s), 2,17 (3H, s), 2,51 (6H, s), 2,73-2,80 (2H, m), 2,90-2,94 (4H, m), 3,14-3,22 (4H, m), 3,37 (2H, bm), 3,89 (2H, bs), 4,13 (2H, bs),6,74 (2H, s), 7,12 (1H, bt), 7,42-7,46 (5H, m).

(ii) Éster terc-butílico del ácido [2-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico

Método 1

Se añadieron bicarbonato sódico (0,058 g, 0,069 mmoles) y Pd al 5%/C (0,250 g, pasta Johnson Matthey Tipo 440) a una disolución de éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-carbámico (véase la etapa (i), Alternativa 1 anterior; 1 g, 2,77 mmoles) en etanol (10 ml). La mezcla se hidrogenó entonces a 500 kPa (5 bares) durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite®, y después se lavó con etanol (20 ml). La disolución se concentró a presión reducida para dar un aceite. Éste se disolvió en diclorometano (20 ml), y se lavó con hidróxido sódico (1 M, 10 ml). La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio y después se filtró.
El filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del subtítulo como un sólido amarillo (0,67 g, 87%).

P.f. 91-93ºC.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,46 (9H, s), 2,25 (2H, t), 2,58-2,65 (2H, m), 2,95-3,06 (4H, m), 3,2-3,38 (4H, m), 3,64 (2H, bs), 4,65 (1H, bs).

MS: m/z = 272 (MH^{+}).

Método 2

Se agitaron juntos, durante 15 minutos, la sal del ácido 2,4,6-trimetilbencenosulfónico del éster terc-butílico del ácido [2-(7-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico (320 g, 1,0 eq. en moles, 1,0 vol./peso rel., véase la etapa (i), Alternativa 3 anterior), tolueno (640 ml, 2,0 vol.) e hidróxido sódico acuoso (1M, 1,6 l, 5,0 vol.), y las capas se separaron entonces. La capa orgánica, que contiene el éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico, se diluyó con etanol (690 ml, 2,16 vol.) y agua (130 ml, 0,4 vol.). Se añadieron ácido cítrico (32,83g, 0,3 eq. en moles) y Pd al 5%/C (20,8 g, 0,065 eq. peso de catalizador humedecido con agua al 61%, Johnson Matthey tipo 440L). La mezcla combinada se hidrogenó entonces a 4 bares de presión de hidrógeno, durante 24 horas. La reacción se monitorizó mediante TLC, usando una placa de sílice con fase móvil X:DCM (1:1 v/v; X es cloroformo:metanol:amoníaco concentrado, 80:18:2 v/v). La visualización se realizó mediante luz UV (254 nm) y mediante tinción con permanganato potásico acuoso. Esto mostró la desaparición total del material de partida, y la aparición del compuesto del subtítulo. La mezcla de reacción se filtró a través de kieselguhr, y se lavó con etanol (590 ml, 1,84 vol.). La disolución resultante del compuesto del título (se supone 154,85 g, 100%) se usó directamente en una reacción subsiguiente.

Método 3

Se agitaron juntos, durante 20 minutos, la sal del ácido 2,4,6-trimetilbencenosulfónico del éster terc-butílico del ácido [2-(7-Bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-carbámico (50 g, 1,0 eq. en moles, 1,0 vol./peso rel., véase la etapa (i), Alternativa 3 anterior), tolueno (100 ml, 2,0 vol.) e hidróxido sódico acuoso (1 M, 100 l, 2,0 vol.), después a 30ºC durante 10 minutos, y finalmente las capas se separaron. La capa orgánica, que contiene el éster terc-butílico del ácido [2-(7-bencil-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-carbámico, se diluyó con etanol (100 ml, 2,0 vol.). A esto se añadió una disolución de ácido cítrico (5,14 g, 0,3 eq. en moles) en agua (5 ml, 0,1 vol.), seguida de Pd al 5%/C (1,50 g, 0,03 eq. en peso de catalizador húmedo en agua al 61%, Johnson Matthey tipo 440L). La mezcla combinada se hidrogenó entonces a 4 bares de presión de hidrógeno, durante 24 horas. La reacción se monitorizó mediante TLC, usando una placa de sílice con una fase móvil X:DCM 1:1 v/v (X es cloroformo:metanol:amoníaco concentrado, 80:18:2 v/v). La visualización se realizó mediante luz UV (254 nm) y mediante tinción con permanganato potásico acuoso. Esto mostró la desaparición total del material de partida, y la aparición del compuesto del subtítulo. La mezcla de reacción se basificó con hidróxido sódico acuoso (10 M, 8 ml, 0,9 eq. en moles), después se filtró a través de kieselguhr. La torta del filtro se lavó con etanol (100 ml, 2,0 vol.). La disolución resultante del compuesto del subtítulo (suponiendo 24,15 g, 100%) se usó directamente en una reacción subsiguiente.

(iii) Compuesto B

Método I

Se añadió 4-metilbencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo (véase la Preparación A(ii) anterior; 0,30 g, 0,92 mmoles) y carbonato potásico (0,2 g, 1,38 mmoles) a una disolución de éster terc-butílico del ácido [2-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico (véase la etapa (ii), Método 1 anterior; 0,250 g, 0,92 mmoles) en etanol (5 ml). La mezcla de reacción se calentó hasta 70ºC durante 10 horas antes de concentrar la mezcla a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo (20 ml) e hidróxido sódico (1 M, 10 ml). La fase acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo (20 ml). Las fases orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida para dar un sólido amarillo (0,290 g). El sólido se disolvió en acetato de etilo (10 ml), y esta disolución se lavó con una disolución de ácido cítrico (0,250 g) en agua (10 ml). La fase acuosa se separó, se basificó con hidróxido sódico (1 M, 10 ml), y se extrajo con acetato de etilo (2 x 10 ml). Todas las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio y después se filtraron (lavando los sólidos filtrados con acetato de etilo (10 ml)). El filtrado se concentró a presión reducida para dar un sólido amarillo (0,160 g). Éste se suspendió en acetato de etilo (0,2 ml), y después se filtró para dar el compuesto del título (0,050 g, 12%).

P.f. 113-115ºC.

RMN ^{1}H (400 MHz, DMSO-D_{6}) \delta 1,32 (9H, s), 1,7 (2H, qt), 2,20 (2H, t), 2,22-2,3 (4H, m), 2,38-3,1 (2H, m) 2,8-2,85 (4H, m), 3,05 (2H, q), 3,19 (2H, q), 3,79 (2H, bs), 6,47 (1H, t), 6,66 (2H, d), 6,69 (1H, t), 7,41 (2H, d).

MS: m/z = 430 (MH^{+}).

Método II

Se añadió carbonato potásico anhidro (18,58 g, 1,5 eq. en moles) a la disolución de éster terc-butílico del ácido [2-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-carbámico generado en la etapa (ii) (Método 3) anterior (se suponen 24,15 g, 1,0 eq. en moles, 1,0 peso/vol.) en una mezcla de tolueno (aprox. 100 ml), etanol (aprox. 200 ml) y agua (aprox. 14 ml). Se añadió bencenosulfonato de 3-(4-cianoanilino)propilo sólido (28,17 g, 1,0 eq. en moles, véase la Preparación A(ix), Método 2, etapa (a) anterior), y la mezcla combinada se calentó hasta 70ºC durante seis horas. La reacción se monitorizó mediante TLC usando una placa de sílice con una fase móvil X:DCM 1:1 v/v (en la que X es cloroformo:metanol:amoníaco concentrado, 80:18:2 v/v). La visualización se realizó mediante luz UV (254 nm) y tiñendo con permanganato potásico acuoso. Esto mostró la desaparición total del material de partida, y la aparición del compuesto del título. La mezcla de reacción se enfrió, y el disolvente se concentró a vacío. El residuo se repartió entre tolueno (200 ml) y agua (200 ml). Las capas se separaron, y la fase orgánica se concentró a vacío para dar un sólido amarillo (38,6 g).

Preparación C

Preparación del Compuesto C (i) 4-(4-Cianofenil)but-3-in-1-ol

Se disolvió carbonato potásico (376,7 g, 2,5 eq. en moles) en una mezcla de 1,2-dimetoxietano (DME, 1,2 l, 6 vol.) y agua (1,2 l, 6 vol.). Se añadieron paladio sobre carbón (20 g, 0,01 eq. en moles, 10% Johnson Matthey tipo 87L, agua 60%), trifenilfosfina (11,5 g, 0,04 eq. en moles) y yoduro de cobre (I) (4,2 g, 0,02 eq. en moles). Después se añadió 4-bromobenzonitrilo (200 g, 1 eq. en moles), lavando con una mezcla de DME (200 ml, 1 vol.) y agua (200 ml, 1 vol.). Esta mezcla se agitó rápidamente en nitrógeno durante un mínimo de treinta minutos. Se añadió gota a gota, durante cinco minutos, una disolución de but-3-in-1-ol (92,1 ml, 1,1 eq. en moles) en DME (200 ml, 1 vol.) y agua (200 ml, 1 vol.). La mezcla combinada se calentó entonces hasta 80ºC durante tres horas. La reacción se monitorizó mediante HPLC para determinar la desaparición del bromuro de arilo, y la formación del compuesto del subtítulo. Una vez que se consumió todo el material de partida, la reacción se enfrió hasta 25ºC, y se filtró a través de kieselguhr. La torta del filtro se lavó separadamente con tolueno (1,6 l, 8 vol.). La mezcla de DME:agua se concentró parcialmente a vacío para eliminar la mayoría de DME. Ésta se repartió entonces con el lavado de tolueno. La capa toluénica se concentró a vacío para dar el alquino del subtítulo como un sólido amarillo, que se secó en un horno de vacío toda la noche a 40ºC. Rendimiento 182,88 g, 97%.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,599-7,575 (d, J = 7,2 Hz, 2H, CH), 7,501-7,476 (d, J = 7,5 Hz, 2H, CH), 3,880-3,813 (q, 2H, CH_{2}), 2,751-2,705 (t, 2H, CH_{2}), 1,791-1,746 (t, 1H, OH).

P.f. 79,6-80,5ºC.

(ii) 4-(4-Hidroxibutil)benzonitrilo

Se agitaron rápidamente 4-(4-cianofenil)but-3-in-1-ol (40 g, 1 eq. en peso, véase la etapa (i) anterior), en etanol (200 ml, 5 vol.) y paladio sobre carbón (20 g, 0,5 eq. en peso, 10% de Johnson Matthey tipo 487, 60% de agua), en cinco bares de presión de hidrógeno durante cinco horas. La reacción se monitorizó mediante HPLC para determinar la desaparición del material de partida, y la formación del compuesto del subtítulo. La reacción se filtró a través de kieselguhr, y se lavó con etanol (80 ml, 2 vol.). La disolución etanólica se concentró a vacío para dar el alcohol del subtítulo como un aceite amarillo pardo. Rendimiento 36,2 g, 88,5%.

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,550-7,578 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,271-7,298 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 3,646-3,688 (t, 2H), 2,683-2,733 (t, 2H), 1,553-1,752 (m, 4H).

RMN ^{13}C (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 148,04 (C), 132,16 (C), 119,1 (C), 109,64 (C), 62,46 (C), 35,77 (C), 32,08 (C), 27,12 (C).

(iii) Toluenosulfonato de 4-(4-cianofenil)butilo

El compuesto del subtítulo se preparó mediante adición de cloruro de toluenosulfonilo a 4-(4-hidroxibutil)benzonitrilo (véase la etapa (ii) anterior).

(iv) 7-[4-(4-Cianofenil)butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]-nonan-3-carboxilato de terc-butilo

Un matraz de tres bocas de 2 l se equipó con un agitador magnético, con un termómetro y con un condensador de reflujo. El matraz se cargó con una disolución de toluenosulfonato de 4-(4-cianofenil)butilo (72 g, 0,218 moles, véase la etapa (iii) anterior), en dimetilformamida (0,55 l). Se añadió hidrocloruro de 9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo (48,2, 0,182 moles, véase la Preparación B(I)(iv) anterior), seguido de carbonato potásico (62,9 g, 0,455 moles). La mezcla heterogénea se agitó durante 22 horas a 85ºC. El análisis mediante TLC indicó el consumo completo del material de partida. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, y se diluyó con agua (0,5 l). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 0,4 l), y las fracciones orgánicas se combinaron. Después de lavar con agua (2 x 200 ml) y salmuera (200 ml), la capa orgánica se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a vacío. El aceite pardo bruto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con 3:2 de hexanos/acetato de etilo, dando 34 g (rendimiento 48%) del compuesto del subtítulo como un sólido
blanquecino.

(v) 4-[4-(9-Oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)butil]-benzonitrilo

Se equipó un matraz de tres bocas de 2 l con un agitador magnético, con un termómetro y con un embudo de adición. El matraz se cargó con 7-[4-(4-cianofenil)butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]-nonan-3-carboxilato de terc-butilo (34 g, 88 mmoles, procedente de la etapa (iv) anterior) y diclorometano (440 ml). Se añadió lentamente ácido trifluoroacético (132 ml) a temperatura ambiente. La disolución se agitó durante tres horas, momento en el cual el análisis mediante TLC mostró el consumo completo del material de partida. Los contenidos se transfirieron a una matraz de una sola boca, y se concentraron a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (500 ml), y se lavó con disolución saturada de bicarbonato sódico. La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron a vacío para dar 25,8 g (rendimiento 100%) del compuesto del subtítulo como un sólido blanquecino. El material bruto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

(vi) Compuesto C

Se equipó un matraz de tres bocas de 3 l con un agitador magnético, con un termómetro y con un condensador de reflujo. El matraz se cargó con 4-[4-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)butil]benzonitrilo sin purificar (25,8 g, 88 mmoles, procedente de la etapa (v) anterior), diclorometano (0,88 l) y 2-bromoetilcarbamato de terc-butilo (véase la Preparación B(I)(i) anterior, 27,7 g, 123 mmoles). Después se añadió trietilamina (0,0197 l, 0,141 moles). La disolución clara se puso a reflujo durante 12 horas en una atmósfera de nitrógeno, y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. El transcurso de la reacción se monitorizó mediante análisis por TLC, y se encontró que en este punto estaba terminada. La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación, y se lavó secuencialmente con agua (200 ml), con hidróxido sódico acuoso al 15% (200 ml), con agua (200 ml), y con salmuera (200 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío. El aceite viscoso amarillo resultante se cromatografió sobre gel de sílice, eluyendo primero con diclorometano/metanol 9:1, después con diclorometano/metanol/hidróxido amónico acuoso al 28% 9:1:0,02, para dar el compuesto del título (25,1 g; rendimiento 66%) como un sólido blanquecino. Se encontró que las primeras fracciones (5,1 g) de la cromatografía contenían una pequeña cantidad de una impureza menos polar (mediante análisis por TLC), que eluye con diclorometano/metanol/hidróxido amónico acuoso al 28%, 9:1:0,05), mientras que las fracciones finales (20 g) presentaban una mancha mediante análisis por TLC. Las primeras fracciones (5,1 g) se combinaron con otro lote de compuesto del título (7,1 g, que contiene una ligera impureza), y se cromatografiaron sobre gel de sílice, eluyendo primero con diclorometano/metanol 19:1, y después con diclorometano/metanol 9:1, para dar un polvo amarillo pálido (5,5 g). El polvo se disolvió en diclorometano (200 ml). La disolución resultante se lavó secuencialmente con hidróxido sódico acuoso al 25% (50 ml), con agua (50 ml), y con salmuera (40 ml). El material se secó entonces sobre sulfato de magnesio, y se concentró a vacío para dar el compuesto del título como un polvo blanquecino (5 g). La fracción de 20 g se disolvió en diclorometano (500 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con hidróxido sódico acuoso al 25% (100 ml), con agua (100 ml), y con salmuera (100 ml). El material se secó entonces sobre sulfato de magnesio, y se concentró a vacío para dar el compuesto del título como un polvo blanquecino (19 g). Los lotes se mezclaron juntos.

Preparación D

Preparación del Compuesto D (i) 4-[(2S)-Oxiranilmetoxi]benzonitrilo

Se añadió carbonato potásico (414 g) y (R)-(-)-epiclorohidrina (800 ml) a una disolución agitada de p-cianofenol (238 g) en 2,0 l de MeCN, y la mezcla de reacción se puso a reflujo en una atmósfera inerte durante 2 h. La disolución caliente se filtró, y el filtrado se concentró, dando un aceite claro que cristalizó en éter di-iso-propílico, dando el producto con un rendimiento de 90%.

(ii) 7-[(2S)-3-(4-Cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo

Un matraz de tres bocas de 3 l, equipado con un agitador magnético y con un termómetro, se cargó con 9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo como su base libre (53,7 g, 0,235 moles, obtenido a partir de la sal de hidrocloruro, véase la Preparación B(I)(iv) anterior), 4-[(2S)-oxiranilmetoxi]benzonitrilo (41,2 g, 0,235 moles, véase la etapa (i) anterior), y una disolución 10:1 (v/v) de 2-propanol/agua (0,94 l). La mezcla se agitó a 60ºC durante 20 horas, durante cuyo tiempo los materiales de partida se consumieron gradualmente (ensayo mediante análisis por TLC). La mezcla se enfrió y se concentró a vacío para dar 100 g (rendimiento > 100%) del compuesto del subtítulo como un sólido blanco. El material sin purificar se usó en la siguiente etapa.

(iii) 4-{[(2S)-2-Hidroxi-3-(9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]-non-3-il)propil]-oxi}benzonitrilo

Un matraz de tres bocas de 3 l, equipado con un agitador magnético, con un termómetro y con un embudo de adición, se cargó con 7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxi-propil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]nonan-3-carboxilato de terc-butilo sin purificar (100 g, procedente de la etapa (ii) anterior) y diclorometano (1,15 l). Se añadió lentamente ácido trifluoroacético (0,352 l) a temperatura ambiente, y la disolución resultante se agitó durante tres horas, momento en el cual el análisis mediante TLC mostró que la reacción estaba terminada. Los contenidos se transfirieron a un matraz de una sola boca, y se concentraron a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (1,2 l), y se lavó con bicarbonato sódico saturado. La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2 x 0,2 l). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (0,25 l), se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron a vacío para dar 73 g (rendimiento > 100%) del compuesto del subtítulo como un sólido blanquecino. El material sin purificar se usó en la siguiente etapa.

(iv) Compuesto D

Método I

Un matraz de tres bocas de 2 l se equipó con un agitador magnético, con un termómetro y con un condensador de reflujo. El matraz se cargó con 4-{[(2S)-2-hidroxi-3-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)propil]-oxi}benzonitrilo sin purificar (73 g, procedente de la etapa (iii) anterior), diclorometano (0,7 l) y 2-bromoetilcarbamato de terc-butilo (véase la Preparación B(I)(i) anterior, 74 g, 0,330 moles). Después se añadió trietilamina (52 ml, 0,359 moles). La disolución clara se puso a reflujo durante 16 horas, y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación, y se lavó secuencialmente con agua (100 ml) y con salmuera (100 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a vacío. El aceite viscoso amarillo resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo primero con diclorometano/metanol 9:1, y después con diclorometano/metanol/hidróxido amónico acuoso al 28% 9:1:0,02, para dar un sólido espumoso blanquecino (40 g). El sólido se disolvió en diclorometano (200 ml), y se lavó secuencialmente con hidróxido sódico acuoso al 20% (100 ml) y con agua (100 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío para dar el compuesto del título como un sólido blanquecino (35,4 g, rendimiento 67% en tres
etapas).

Método II

Se añadieron iso-propanol (5 ml) y agua (0,5 ml) a éster terc-butílico del ácido [2-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]carbámico (véase la Preparación B(II)(ii), Método I anterior; 0,43 g, 1,6 mmoles), y se añadió 4-[(2S)-oxiranilmetoxi]benzonitrilo (0,280 g, 1,6 mmoles, véase la etapa (i) anterior). La mezcla se calentó a 66ºC durante 19 horas (la reacción estaba terminada en 2 horas). El disolvente se evaporó hasta sequedad a presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido blanquecino (0,71 g, 100%).

\newpage

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,41 (9H, s), 2,3-2,75 (6H, m), 2,75-3,0 (5H, m), 3,1-3,38 (3H, m), 3,88 (2H, s), 3,95-4,19 (3H, m), 5,85 (1H, bs), 6,99 (2H, d), 7,6 (2H, d).

RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-D_{6}) \delta 1,35 (9H, s), 2,12-2,59 (7H, m), 2,63-2,78 (1H, m), 2,78-2,9 (4H, m), 3,2 (2H, q), 3,78 (2H, m), 4-4,1 (2H, m), 4,12-4,19 (1H, m), 5,3 (1H, bs), 6,61 (1H, t), 7,15 (2H, d), 7,76 (2H, d).

MS: m/z = 447 (MH^{+}).

Método III

La disolución de éster terc-butílico del ácido [2-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil]-carbámico, generado en la Preparación B(II)(ii), Método 2 anterior (suponiendo 154,85 g, 1,0 eq. en moles, 1,0 peso/vol.), en una mezcla de tolueno (aprox. 640 ml), etanol (aprox. 1280 ml) y agua (aprox. 130 ml), se basificó con hidróxido sódico acuoso (10 M, 51 ml, 0,9 eq. en moles). Se añadió 4-[(2S)-oxiranilmetoxi]benzonitrilo sólido (99,80g, 1,0 eq. en moles; véase la etapa (i) anterior), y la mezcla combinada se calentó hasta 70ºC durante cuatro horas. La reacción se monitorizó mediante TLC usando un placa de sílice con fase móvil X:DCM 1:1 v/v (en la que X es cloroformo:metanol:amoníaco concentrado, 80:18:2 v/v). La visualización se realizó mediante luz UV (254 nm) y, tiñendo con permanganato potásico acuoso. Esto mostró la desaparición total del material de partida, y la aparición del compuesto del título. La mezcla de reacción se enfrió, se filtró a través de kieselguhr, y se lavó con etanol (620 ml, 4,0 vol.). Esto dio una disolución del compuesto del título (se supone 254,38 g, 100% teórico, 2,4 l, 1,0 peso/vol. para el tratamiento de la reacción). Esta disolución se cargó en un matraz que estaba montado para la destilación a presión reducida. Se marcó una línea de graduación sobre un lado de este matraz. Se eliminó el disolvente (1250 ml) a una temperatura entre 50ºC y 35ºC, 320 mbares y 100 mbares. Después se añadió 4-metilpentan-2-ol (1500 ml) a fin de alcanzar la línea graduada. Se eliminó el disolvente (1250 ml) a una temperatura entre 35ºC y 80ºC, 220 mbares y 40 mbares. Se añadió más 4-metilpentan-2-ol (1500 ml), a fin de alcanzar la línea graduada. Se eliminó el disolvente (1250 ml) a una temperatura entre 62ºC y 76ºC, 100 mbares y 90 mbares. La mezcla combinada se enfrió a una temperatura menor que 25ºC, y se añadió hidróxido sódico acuoso (2 M, 1,27 l, 5,0 vol.). Las capas se separaron, y la capa orgánica se filtró a través de kieselguhr para dar una disolución clara (1,2 l). Esta disolución se cargó en un matraz limpio, que se montó para la destilación a presión reducida. Se eliminó el disolvente (450 ml) a una temperatura entre 52ºC y 55ºC, 90 mbares y 35 mbares. Teóricamente, el producto se dejó ahora en 2 volúmenes de 4-metilpentan-2-ol. Se añadió éter di-n-butílico (1,27 l, 5 vol.), y la disolución se dejó enfriar lentamente hasta la temperatura ambiente, lo que provocó que se formase un precipitado. La mezcla se enfrió desde la temperatura ambiente hasta aproximadamente 10ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con una disolución premezclada de éter di-n-butílico (320 ml, 1,25 vol.) y 4-metilpentan-2-ol (130 ml, 0,50 vol.). El producto húmedo se secó a vacío a 55ºC hasta peso constante, para dar el compuesto del título como un sólido blanco (193,6 g, 76%).

P.f. 99-101ºC

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,41 (9H, s), 2,3-2,75 (6H, m), 2,75-3,0 (5H, m), 3,1-3,38(3H, m), 3,88 (2H, s), 3,95-4,19 (3H, m), 5,85 (1H, bs), 6,99 (2H, d), 7,6 (2H, d).

Ejemplo 1 Cristalización del Compuesto A (Método (I); Forma B)

El Compuesto A (246,58 g; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior, aunque en esta ocasión el material se recombinó con licores madres, se lavó básicamente con NaOH, y después se evaporó para dar un sólido) se suspendió en acetato de etilo (500 ml), y después se calentó para disolver el sólido. Se obtuvo una disolución clara. Se eliminó acetato de etilo (80 ml) por destilación a fin de secar azeotrópicamente el compuesto (dejando 1,7 volúmenes de acetato de etilo). La disolución se transfirió entonces en caliente a un matraz de 1 l con bridas precalentado (la temperatura en la transferencia fue 68ºC). La disolución se dejó entonces enfriar de forma natural (se retiró completamente la fuente de calor) en nitrógeno, con una agitación con aire por la parte superior de la cabeza. Después de 40 minutos de enfriamiento, comenzó la cristalización (la temperatura interna fue 38ºC). La temperatura de la disolución estuvo entre 38-40ºC durante las siguientes 1,5 horas. La disolución se enfrió entonces hasta 20ºC con un baño de agua/hielo, y se dejó reposar durante 1 hora. El producto se filtró, se lavó con acetato de etilo (330 ml) frío (0ºC), y después se secó toda la noche a vacío a 40ºC para dar 126,83 g (rendimiento 51%, suponiendo que el material de entrada estaba seco).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 1), y se muestran en la Figura 1.

TABLA 1

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
11,0	81
8,3	2
7,8	5
7,0	24
6,7	2
5,9	3
5,7	16
5,5	4
5,4	8
5,1	44
4,94	7
4,71	4
4,62	5
4,54	33
4,44	100
4,34	12
4,20	7
4,12	2
3,92	5
3,65	15
3,51	9
3,47	2
3,41	4
3,34	5
3,31	0,8
3,26	2
3,04	2
2,89	4
2,82	3
2,77	2
2,70	2

TABLA 1 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
2,58	2
2,44	1
2,34	4
2,18	3
2,06	3

Se determinó una celda unitaria a partir de los datos de rayos X de cristal único. Fue ortorrómbica, con un grupo espacial P2_{1}2_{1}2_{1} y con las siguientes dimensiones: a = 9,096 \ring{A}, b = 11,077 \ring{A}, c = 22,136 \ring{A}, \alpha = \beta = \gamma = 90º, y V = 2230,3 \ring{A}^{3}.

La DSC mostró dos endotermias con temperaturas de comienzo extrapoladas de aprox. 121ºC y 126ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,1% (p/p) entre 110 y 130ºC.

Ejemplo 2 Cristalización del Compuesto A (Método (II); Forma A)

Se añadió acetato de etilo (250 ml) al Compuesto A (188,10 g, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior), y la mezcla se calentó. La disolución caliente obtenida se filtró (no había residuo). Durante la filtración, precipitó algo de sólido a partir de la disolución que se filtraba. Éste se redisolvió en acetato de etilo (50 ml), y se filtró. Los filtrados combinados se concentraron eliminando acetato de etilo (120 ml). La disolución que queda se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente (la cristalización comenzó a 40ºC). La suspensión se enfrió entonces hasta 10ºC durante 1 hora. El producto sólido se filtró, se lavó con acetato de etilo frío (100 ml), y después se secó a vacío a 40ºC para dar 126,7 g (68%).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 2), y se muestran en la Figura 2.

TABLA 2

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
10,9	65
8,3	54
7,8	9
7,5	3
7,0	3
6,9	6
6,8	2
6,7	12
6,4	2
5,9	2
5,6 (5,64)	26
5,6 (5,56)	8

TABLA 2 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
5,5	7
5,4	20
5,3	3
5,1	27
5,0	14
4,90	3
4,84	8
4,78	8
4,70	16
4,49	64
4,45	100
4,36	26
4,25	4
4,15	6
4,10	15
4,03	9
3,97	6
3,90	11
3,80	5
3,73	15
3,60	2
3,52	4
3,47	8
3,44	3
3,39	2
3,35	2
3,31	6
3,23	1
3,13	2
3,01	1
2,95	5

TABLA 2 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
2,93	3
2,89	5
2,85	5
2,80	6
2,74	3
2,69	2
2,63	2
2,56	2

La DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 125ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,1% (p/p) entre 120 y 130ºC.

Ejemplo 3 Cristalización del Compuesto A (Método (III); Forma C)

Se añadió el monohidrato de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A (4,5 kg, preparado análogamente a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior) a diclorometano (89,7 kg). Se añadió hidróxido sódico acuoso (1 M, 46,9 kg), y la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos. La temperatura final de los contenidos fue 16,9ºC. Se dejó durante 68 minutos que las dos fases se separaran, y se desechó la capa acuosa (48,8 kg). La capa orgánica se filtró en una vasija limpia, y se filtró. Se añadió etanol (72 kg). Se separó por destilación el disolvente (101,1 kg) (3 horas 20 min). La temperatura final de los contenidos fue 76,0ºC. Se añadió etanol (25,4 kg), y se separó por destilación otros 11,6 kg de disolvente (1 hora 30 min), y la temperatura final de los contenidos fue 79,3ºC. La disolución se enfrió hasta -17ºC toda la noche, pero no se observó cristalización. Se separó por destilación otros 32,7 kg de disolvente, y la mezcla de reacción se enfrió hasta 15ºC toda la noche, tiempo durante el cual el producto cristalizó. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0ºC y se agitó durante 30 minutos. El producto se separó por filtración y se lavó con etanol (7,3 kg) para dar un sólido húmedo (2,7 kg). El producto se secó a temperatura ambiente durante 2 horas 16 min (33 mm Hg), y después a 40-45ºC durante 15 horas 24 minutos (29 mm Hg), para dejar 2,18 kg de producto, que tenía una pureza de 99,76% mediante área, etanol 0,3% p/p.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 3), y se muestran en la Figura 3.

TABLA 3

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
10,4	4
9,6	100
8,5	0,6
7,0	0,9
5,7	9
5,3	6
5,2	20
4,83	22

TABLA 3 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
4,71	6
4,55	6
4,39	0,6
3,96	0,5
3,83	1
3,58	2
3,50	1
3,43	0,4
3,29	1
3,22	6
3,19	2
3,12	0,3
3,08	0,5
2,99	0,3
2,86	0,3
2,66	0,6
2,63	0,8
2,55	0,9
2,37	0,7
2,31	0,4
2,19	0,6
2,13	0,4
2,10	0,3

Se determinó una celda unitaria a partir de los datos de rayos X de cristal único. Fue ortorrómbica, con grupo espacial C2cb y las siguientes dimensiones: a = 10,685 \ring{A}, b = 19,391 \ring{A}, c = 21,071 \ring{A}, \alpha = \beta = \gamma = 90º, y V = 4365,8 \ring{A}^{3}.

La DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 122ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,3% (p/p) entre 25 y 140ºC.

Ejemplo 4 Cristalización del monohidrato de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A

Se disolvieron 1,88 g (4,9 mmoles) de Compuesto A (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior) en 23 ml de acetato de etilo. Se disolvieron 0,807 g (5,1 mmoles) de ácido bencenosulfónico en 4,5 ml de metanol. La disolución de ácido bencenosulfónico se añadió a la disolución agitada de Compuesto A. La sal de bencenosulfonato precipitó después de aprox. 10 minutos. El precipitado se mantuvo a 4ºC toda la noche. Los cristales se separaron por filtración, se lavaron con acetato de etilo y se secaron a vacío toda la noche. Rendimiento 1,6 g (60%). El producto se recristalizó en EtOH:H_{2}O (1:1).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 4), y se muestran en la Figura 4.

TABLA 4

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
18,7	100
9,4	13
7,5	0,3
6,6	0,2
6,4	0,2
6,3	2
5,1	0,3
4,85	0,3
4,77	0,3
4,69	37
4,63	0,7
4,48	1
4,40	0,2
4,19	0,6
4,13	0,2
4,05	0,3
3,92	0,2
3,89	0,3
3,76	28
3,61	0,2
3,35	1
3,31	0,3
3,21	0,2
3,13	14
3,07	0,2
3,00	0,4
2,68	2
2,35	1

TABLA 4 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
2,31	0,3
2,09	0,6
2,00	0,4
1,88	1

Se determinó una celda unitaria a partir de los datos de rayos X de cristal único. Fue monoclínica, con un grupo espacial P2_{1}/c y con las siguientes dimensiones: a = 18,833 \ring{A}, b = 9,293 \ring{A}, c = 16,271 \ring{A}, \alpha = 90º, \beta = 94,94º, \gamma = 90º, y V = 2837,1 \ring{A}^{3}.

El producto es un monohidrato sin un punto de fusión bien definido. La DSC mostró dos endotermias con una temperatura de comienzo extrapolada en el intervalo de aprox. 85-110ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 3% (p/p) entre 60 y 160ºC.

Ejemplo 5 Cristalización la sal del ácido para-toluenosulfónico del Compuesto A (Formas A y B)

El Compuesto A (1,14 g, 2,96 mmoles, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior (por ejemplo antes de la adición de ácido bencenosulfónico en el procedimiento descrito allí para la formación de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A)) se disolvió en acetato de etilo (20 ml). Se añadió gota a gota una disolución de ácido para-toluenosulfónico (PTSA) (0,57 g, 2,99 mmoles) en metanol (0,3 ml). El lavado de PTSA en 0,1 ml de metanol, y se añadieron 5 ml adicionales de acetato de etilo. Se formó una suspensión blanca en pocos minutos. Ésta se agitó durante 1 h. El sólido se separó por filtración y se lavó con 5 ml de acetato de etilo. Rendimiento 1,4 g (84,8%). La sal del ácido toluenosulfónico sólida (1,40 g) se mezcló con 15 ml de acetato de etilo, y se calentó a reflujo. A la suspensión se añadieron 0,85 ml de metanol. En pocos segundos, todo el sólido había pasado a la disolución. Ésta se dejó enfriar y, en unos pocos minutos, se observó la cristalización. Pronto, ésta se convirtió en un sólido endurecido. A éste, se añadió más acetato de etilo (10 ml) y metanol (0,15 ml). La suspensión espesa se agitó entonces a 0ºC durante 30 minutos. Los sólidos se separaron por filtración, y se lavaron con acetato de etilo (5 ml).

Se dejó secar a estos mediante succión. Rendimiento 1,10 g (66,6%). Una porción de éste (500 mg) se secó a 50ºC a presión reducida, dando 0,440 g.

Una porción de sal de ácido toluenosulfónico se recristalizó en acetona. Los cristales (Forma A) se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 5(a)), y se muestran en la Figura 5(a). Una porción de la sal del ácido toluenosulfónico se suspendió en un tampón de fosfato (fuerza iónica 0,1 M a pH 3), seguido de la decantación. Los cristales (Forma B) se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 5(b)), y se muestran en la Figura 5(b).

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 5(a)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
19,9	100
10,0	30
8,7	0,5
7,6	1
7,0	0,9
6,6	0,7

TABLA 5(a) (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
6,4	1
6,0	4
5,7	1
5,5	0,8
5,2	1
4,99	33
4,86	4
4,49	2
4,38	4
4,36	8
4,19	5
3,99	5
3,93	1
3,77	1
3,59	2
3,40	1
3,33	5
3,29	1
3,19	0,7
3,08	1
2,86	0,7
2,22	0,7
2,11	0,6
2,09	0,7
2,00	1

Para la forma A, la DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 145ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 3,3% (p/p) entre 20 y 120ºC.

TABLA 5(b)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
18,6	100
9,7	0,6
9,3	43
7,6	0,4
6,2	8
5,0	0,9
4,66	20
4,49	2
3,73	8
3,11	4
2,33	0,6

Para la forma B, la DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 153ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 4,4% (p/p) entre 25 y 120ºC.

Ejemplo 6 Cristalización de la sal del ácido 1-hidroxi-2-naftoico del Compuesto A

Se añadió ácido 1-hidroxi-2-naftoico (0,323 g, 1,7 mmoles) en metanol (1 ml) al Compuesto A (0,60 g, 1,56 mmoles, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior (por ejemplo, antes de la adición de ácido bencenosulfónico en el procedimiento descrito allí para la formación de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A)) en acetato de etilo (10 ml). No se formó una disolución. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. No se observó cristalización. La disolución se enfrió entonces durante 30 minutos. Se observaron cantidades pequeñas de cristales. Los disolventes se evaporaron hasta sequedad, los sólidos se recogieron en acetato de etilo (5 ml) y se calentaron a reflujo. A la disolución parcial se añadió metanol (0,2 ml). La suspensión resultante se enfrió con hielo/agua, se filtró y se lavó con acetato de etilo (2 ml). El sólido se secó entonces en un horno a 50ºC a presión reducida, durante 24 h. Rendimiento 0,510 g (57%).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 6), y se muestran en la Figura 6.

TABLA 6

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
17,6	100
12,4	16
8,8	44
7,9	4
7,5	5
6,6	2
6,4	2

TABLA 6 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
6,2	5
5,7	5
5,6	29
5,2	4
5,1	6
4,95	7
4,88	9
4,47	20
4,40	4
4,21	4
4,16	8
4,08	6
3,95	5
3,84	5
3,80	8
3,64	3
3,55	3
3,33	6
3,03	7
2,96	2
2,63	4

Ejemplo 7 Cristalización de la sal del ácido 1,5-naftalenosulfónico del Compuesto A

El Compuesto A (0,490 g, 1,27 mmoles, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior (por ejemplo, antes de la adición de ácido bencenosulfónico en el procedimiento descrito allí para la formación de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A)) se disolvió en acetato de etilo (10 ml). Se añadió una disolución de ácido 1,5-naftalenosulfónico en metanol (0,5 ml). En pocos minutos, apareció un sólido blanco. Éste se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, y después se enfrió con hielo/agua. Se observaron algunos pedazos de sólido blanco en la suspensión. Los sólidos se filtraron para dar 0,34 g de un sólido blanco. Éste se recogió en metanol (50 ml) y agua (100 ml), y se calentó a reflujo hasta que se obtuvo una disolución casi clara. La disolución se dejó que alcanzara la temperatura ambiente, y después se enfrió con hielo/agua durante 30 minutos. Los sólidos se filtraron para dar un polvo blanco (0,150 g). El sólido se secó en un horno a 50ºC a presión reducida, durante 5 h.

La RMN ^{1}H demostró una relación 1:2 de ácido a base.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 7), y se muestran en la Figura 7.

TABLA 7

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
16,1	100
8,6	4
8,1	19
7,8	2
7,1	7
6,8	3
6,3	10
6,0	6
5,5	3
5,4 (5,43)	3
5,4 (5,39)	4
5,3	2
4,96	17
4,88	22
4,68	18
4,62	4
4,49	9
4,34	8
4,10	12
4,04	6
3,94	13
3,55	2
3,44	5
3,40	15
3,23	11
3,20	5
3,15	4
2,87	2
2,72	3
2,19	3
2,18	3

Ejemplo 8 Cristalización de la sal del ácido 2-mesitilenosulfónico del Compuesto A

Se añadió una disolución de ácido 2-mesitilenosulfónico (0,276 g) en metanol (0,3 ml) a una disolución agitada del Compuesto A (0,45 g, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación A anterior (por ejemplo, antes de la adición de ácido bencenosulfónico en el procedimiento descrito allí para la formación de la sal del ácido bencenosulfónico del Compuesto A)) en acetato de etilo (10 ml). La precipitación se produjo inmediatamente. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, y después se enfrió con hielo/agua. El producto se separó por filtración y se lavó con acetato de etilo (3 ml) para dar el compuesto del título (0,60 g, 88%). La sal producida se disolvió en acetato de etilo (10 ml), y se calentó a reflujo. Se añadió metanol (3 ml) para dar una disolución clara. Se dejó que la disolución se enfriase hasta la temperatura ambiente, y después se agitó a 0-5ºC durante 1 hora. La suspensión se filtró para dar un sólido incoloro (0,370 g, 54% a lo largo de dos etapas).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 8), y se muestran en la Figura 8.

TABLA 8

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
18,9	100
9,5	25
8,8	1
7,8	1
6,3 (6,33)	10
6,3 (6,26)	9
5,7	3
5,3	2
5,1	3
4,98	2
4,75	20
4,62	2
4,50	4
4,46	5
4,41	2
4,29	1
4,24	1
4,13	2
3,92	5
3,80	12
3,69	1
3,54	2
3,36	1

TABLA 8 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
3,17	6
3,04	1
2,38	2
2,11	1

Ejemplo 9 Cristalización del Compuesto D

Método I

El Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) se purificó primero mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice, usando como eluyente 9:1:0,05 de diclorometano/metanol/amoníaco acuoso al 28%. El polvo amarillo pálido resultante (203 g) se disolvió en diclorometano (400 ml), y después la disolución amarilla se diluyó con n-heptano (2 l) hasta que la mezcla se puso turbia. La mezcla se agitó vigorosamente a temperatura ambiente y se sembró con cristales de Compuesto D (preparados mediante evaporación lenta de disolvente a partir de una pequeña porción de una disolución del compuesto del título, preparado de manera análoga a este procedimiento). Una gran parte de producto había precipitado después de agitar durante dos horas. La suspensión resultante se filtró, y después se secó a vacío a 40ºC para dar 179 g del compuesto del título como un polvo blanquecino. Una segunda porción (44 g) de material purificado en columna dio 25 g adicionales del compuesto del título después de la recristalización similar.

Método II

Se calentó a 80ºC una mezcla de Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos anteriormente (véase especialmente la Preparación D(iv), Método III anterior); 14,29 g), iso-propanol (28 ml) y éter di-iso-propílico (140 ml). La disolución se filtró en caliente para aclararla, y después se volvió a calentar hasta 80ºC. La disolución se dejó entonces enfriar hasta la temperatura ambiente, con lo que comenzó a formarse un precipitado. Después de agitar durante 2 horas, el precipitado se recogió por filtración, se lavó con iso-propanol:éter di-iso-propílico (1:6, 70 ml), y después se secó por succión sobre el filtro. El producto húmedo se secó a vacío a 70ºC toda la noche para dar el compuesto del título como un sólido blanco (10,1 g, 70%).

Método III

El Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos anteriormente; 1,0 g) se disolvió en metil-iso-butilcetona caliente (10 ml). Se añadió iso-hexano (30 ml), y la disolución se decantó, a partir de una pequeña cantidad de material sin disolver, en un matraz limpio. La disolución se enfrió toda la noche en un frigorífico, lo que provocó que se formase un precipitado granular. La disolución se dejó calentar hasta temperatura ambiente, y después el sólido se recogió por filtración. El sólido se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC para dar un sólido blanquecino (0,73 g).

Método IV

El Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente; 1,0 g) se disolvió en acetato de iso-propilo caliente (10 ml). Se añadió iso-octano (20 ml), y la disolución se decantó, a partir de una pequeña cantidad de material sin disolver, en un matraz limpio. La disolución se enfrió toda la noche en un frigorífico, lo que provocó que se formase un precipitado granular. Se dejó que la disolución se calentase hasta temperatura ambiente, y después el sólido se recogió por filtración. El sólido se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC para dar un sólido blanquecino (0,82 g).

Método V

El Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente; 1,0 g) se disolvió en etanol acuoso caliente (50%, 20 ml). La disolución se enfrió durante un fin de semana en un frigorífico, lo que provocó que se formasen cristales con forma de agujas. Los cristales se recogieron por filtración y se secaron por succión sobre el filtro. El secado a vacío a 40ºC dio un sólido incoloro (0,48 g).

Método VI

El Compuesto D (preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente; 100 mg) se disolvió en tolueno (1 ml). Se añadió iso-octano (2 ml), y la disolución turbia se enfrió durante un fin de semana en un frigorífico, lo que provocó que se formase un precipitado granular fino. Se dejó que la disolución se calentase hasta temperatura ambiente, y después el sólido se recogió por filtración. El sólido se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC para dar un sólido blanquecino (62 mg).

Los cristales (procedentes de los Métodos I a VI) se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 9), y se muestran en la Figura 9.

TABLA 9

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
22,3	45
11,2	16
8,4	41
7,5	5
7,1	14
6,4	17
5,8	60
5,5	13
5,2	7
4,91	31
4,81	28
4,69	4
4,62	10
4,52	100
4,32	77
4,22	14
4,12	35
4,06	7
3,91	9
3,81	7
3,72	4
3,53	5
3,50	9
3,42	5
3,34	12
3,15	8

TABLA 9 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
3,03	5
2,98	3
2,92	3
2,83	4
2,77	4
2,75	5
2,67	6
2,37	3
2,11	5

Se determinó una celda unitaria a partir de los datos de rayos X de cristal único. Fue ortorrómbica, con un grupo espacial P2_{1}2_{1}2_{1} y con las siguientes dimensiones: a = 5,870 \ring{A}, b = 9,098 \ring{A}, c = 45,101 \ring{A}, \alpha = \beta = \gamma = 90º, y V = 2408,6 \ring{A}^{3}.

La DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 100-102ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,4% (p/p) entre 90 y 110ºC.

Ejemplo 10 Cristalización de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D

Método I

El Compuesto D (250 mg, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación D anterior) se disolvió en metanol (10 ml). Se añadió ácido metanosulfónico (56 mg, 38 \mul) a la disolución. El metanol se eliminó a presión reducida, y la goma que queda se redisolvió en la cantidad mínima posible de acetato de etilo caliente. La disolución se sembró con cristales previamente preparados de la sal (preparados mediante evaporación lenta del disolvente a partir de una porción pequeña de una disolución del compuesto del título, preparado de manera análoga a este procedimiento), y se dejaron en el frigorífico durante varios días para que cristalizara. Los cristales resultantes se recogieron por filtración y se lavaron con una pequeña cantidad de acetato de etilo frío (se recuperaron 280 mg,
91%).

Método II

El Compuesto D (4,00 g, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en la Preparación D anterior) se disolvió en acetato de etilo (40 ml). Se añadió una disolución de ácido metanosulfónico (0,87 g) en acetato de etilo (40 ml). Después de 3 minutos, la disolución se sembró con la sal previamente preparada (14 mg, procedente del Método I anterior), lo que provocó la formación inmediata de un precipitado. Después de 5 minutos, el sólido se recogió por filtración y se lavó con acetato de etilo antes de secarlo por succión sobre el filtro. El secado a vacío a 40ºC durante 3,5 horas dio un sólido cristalino blanco (4,71 g, 97%).

P.f. 170-2ºC (desc.).

Método III

La sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D (0,8 g; preparada según el método descrito en el Método II anterior) se calentó en acetonitrilo (8 ml, 10 vol.). A 70ºC, se había formado una disolución. Ésta se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente. El producto se recogió por filtración, y se lavó con un pequeño volumen de acetonitrilo frío. Éste se secó inicialmente a vacío a 40ºC (punto de fusión 169,4 a 69,9ºC (se descompone), disolvente residual acetonitrilo 0,08% p/p (GC)). Éste se secó adicionalmente a vacío a 80ºC, disolvente residual acetonitrilo menor que 0,02% p/p (GC). Pureza 99,92% de área de HPLC.

\newpage

Método IV

Una mezcla de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D (2,0 g, 1,0 eq. en moles, preparada según el método descrito en el Método II anterior) y acetonitrilo (20 ml, 10 vol. rel.) se calentó hasta 80ºC. A esta temperatura se había formado una disolución. La disolución se dejó enfriar hasta 25ºC \pm 5ºC, y después se enfrió adicionalmente hasta 5ºC \pm 5ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con acetonitrilo frío (4 ml, 2 vol. rel.). El sólido húmedo se secó a vacío a 80ºC. Esto dio el compuesto del título (0,15 g, 7,5%) como un sólido blanquecino. Área de HPLC 99,97%. Disolvente residual acetonitrilo menor que 0,02% p/p (GC).

Método V

Una mezcla de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D (10,0 g, 1,0 eq. en moles; preparada de forma análoga al método descrito en el Método II anterior, excepto que, en este caso, se usó como disolvente acetato de butilo, véase acetato de etilo) y 2-pentanol (100 ml, 10 vol. rel.) se calentó a 85ºC para dar una disolución. La disolución se dejó enfriar hasta 25ºC \pm 5ºC, y después se enfrió adicionalmente hasta 5ºC \pm 5ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con 2-pentanol frío (20 ml, 2 vol. rel.). El sólido húmedo se secó a vacío a 40ºC durante veinte horas. Esto dio el compuesto del título (6,72 g, 67,2%) como un sólido blanquecino. Área de HPLC 99,47%.

Método VI

Una mezcla de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D (3,0 g, 1,0 eq. en moles; preparada según el método descrito en el Método V anterior) y 3-metil-1-butanol (15 ml, 5 vol. rel.) se calentó hasta 90ºC para dar una disolución. La disolución se dejó enfriar hasta 25ºC \pm 5ºC, y después se enfrió adicionalmente hasta 5ºC \pm 5ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con 3-metil-1-butanol frío (6 ml, 2 vol. rel.). El sólido húmedo se secó a vacío a 40ºC. Esto dio el compuesto del título como un sólido blanquecino (2,43 g, 81%).

Método VII

Una mezcla de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto D (2,0 g, 1,0 eq. en moles; preparada según el método descrito en el Método V anterior) y 1-hexanol (15 ml, 5 vol. rel.) se calentó hasta 80ºC para dar una disolución. La mezcla se dejó enfriar hasta 25ºC \pm 5ºC, y después se enfrió adicionalmente hasta 5ºC \pm 5ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con 1-hexanol frío (6 ml, 2 vol. rel.). El sólido húmedo se secó a vacío a 40ºC. Esto dio el compuesto del título como un sólido blanquecino (2,43 g, 81%).

Los cristales (Métodos I a VII) se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 10), y se muestran en la Figura 10.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 10

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
12,7	100
9,4	6
7,3	20
7,1	11
6,8	3
6,6	11
6,4	3
6,0	17
5,4	18
5,1	21
4,92	38
4,83	22

TABLA 10 (continuación

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
4,74	5
4,66	4
4,45	4
4,27	11
4,14	14
4,05	30
3,99	38
3,87	33
3,73	9
3,65	7
3,42	19
3,37	6
3,31	3
3,22	5
3,12	4
3,00	6
2,96	5
2,92	5
2,89	4
2,81	3
2,71	2
2,63	5
2,57	2
2,50	3
2,41	3

Se determinó una celda unitaria a partir de los datos de rayos X de cristal único. Fue ortorrómbica, con un grupo espacial P2_{1}2_{1}2_{1} y con las siguientes dimensiones: a = 7,772 \ring{A}, b = 14,250 \ring{A}, c = 25,750 \ring{A}, \alpha = \beta = \gamma = 90º, y V = 1717,2 \ring{A}^{3}.

La DSC mostró una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 167ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 1,2% (p/p) entre 25 y 100ºC.

Ejemplo 11 Cristalización de la sal del ácido hipúrico del Compuesto D

Se añadió una disolución de ácido hipúrico (0,8 g) en metanol (20 ml) a una disolución de Compuesto D (2,00 g, preparado de forma análoga a los procedimientos descritos en el Ejemplo 9 anterior) en metanol (5 ml). Después, la disolución se concentró a vacío, para dar un aceite. Se añadió éter dietílico (20 ml), y la mezcla se volvió a concentrar para dar una espuma. La agitación en éter (100 ml) toda la noche, y el filtrado, produjeron 2,22 g del compuesto del título (79%). La sal se secó a vacío a 34ºC, produciendo 2,19 g (78%).

La presencia de la sal de ácido hipúrico se confirmó mediante RMN.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 11), y se muestran en la Figura 11.

TABLA 11

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
16,4	100
13,8	3
6,9	8
6,2	6
6,1	25
5,6	5
5,5	7
5,2	17
5,1	15
4,93	13
4,82	4
4,61	18
4,50	26
4,28	30
4,20	6
4,11	8
3,68	8
3,54	5
3,27	5

Ejemplo 12 Cristalización del Compuesto C

(i) El Compuesto C se preparó de forma análoga al procedimiento descrito en la Preparación C anterior, excepto que se llevó a cabo la siguiente etapa final del proceso: se equipó un matraz de tres bocas de 3 l con un agitador magnético, con un termómetro y con un condensador de reflujo. El matraz se cargó con 4-[4-(9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il)butil]benzonitrilo sin purificar (véase la Preparación C(v) anterior, 25,8 g, 88 mmoles), diclorometano (0,88 l) y 2-bromoetilcarbamato de terc-butilo (véase la Preparación B(I) (i) anterior, 27,7 g, 123 mmoles). Después se añadió trietilamina (0,0197 l, 0,141 moles). La disolución clara se puso a reflujo durante 12 horas en una atmósfera de nitrógeno, y después se enfrió hasta temperatura ambiente. El transcurso de la reacción se monitorizó mediante análisis por TLC, y en este punto se encontró que estaba terminada.

(ii) La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación, y se lavó secuencialmente con agua (200 ml), hidróxido sódico acuoso al 15% (200 ml), agua (200 ml), y salmuera (200 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, y se concentró a vacío. El aceite viscoso amarillo resultante se cromatografió sobre gel de sílice, eluyendo primero con diclorometano/metanol 9:1, y después con diclorometano/metanol/hidróxido amónico acuoso al 28% 9:1:0,02, para dar el Compuesto C bruto (25,1 g, rendimiento 66%) como un sólido blanquecino. Se encontró que las primeras fracciones (5,1 g) de la cromatografía contenían una pequeña cantidad de una impureza menos polar (mediante análisis por TLC, eluyendo con 9:1:0,05 de diclorometano/metanol/hidróxido amónico acuoso al 28%), mientras que las últimas fracciones (20 g) dieron una mancha mediante análisis de TLC. Las primeras fracciones (5,1 g) se combinaron con un lote previamente preparado de Compuesto C (7,1 g, que contiene una pequeña impureza), y se cromatografiaron sobre gel de sílice, eluyendo primero con diclorometano/metanol 19:1, y después con diclorometano/metanol 9:1, para dar un polvo amarillo pálido (5,5 g). El polvo se disolvió en diclorometano (200 ml). La disolución resultante se lavó secuencialmente con hidróxido sódico acuoso al 25% (50 ml), con agua (50 ml), y con salmuera (40 ml). El material se secó entonces sobre sulfato de magnesio, y se concentró a vacío para dar el compuesto del título bruto como un polvo blanquecino (5 g). La fracción de 20 g se disolvió en diclorometano (500 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con hidróxido sódico acuoso al 25% (100 ml), con agua (100 ml), y con salmuera (100 ml). El material se secó entonces sobre sulfato de magnesio, y se concentró a vacío para dar un polvo blanquecino (19 g). Los lotes se mezclaron juntos.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 12), y se muestran en la Figura 12.

TABLA 12

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
19,4	24
10,0	16
9,1	64
8,1	100
6,5	84
5,5	19
5,2	41
5,1	21
4,99	20
4,90	21
4,60	9
4,46	30
4,32	25
4,06	78
4,00	33
3,85	15
3,80	23
3,66	10

TABLA 12 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
3,56	5
3,44	17
3,33	4
3,16	5
2,94	8
2,82	4
2,69	4
2,44	5

La DSC mostró un pico endotérmico con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 97ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,6% (p/p) entre 25 y 120ºC.

Ejemplo 13 Cristalización de la sal del ácido metanosulfónico del Compuesto C

El Compuesto C (250 mg, preparado de manera análoga al procedimiento descrito en el Ejemplo 12 anterior) se disolvió en metanol (10 ml). Se añadió ácido metanosulfónico (56 mg, 38 \mul) a la disolución. El metanol se eliminó a presión reducida, y la goma que queda se redisolvió en la cantidad mínima posible de iso-propanol caliente. La disolución se sembró con sal previamente preparada (preparada mediante evaporación lenta de disolvente a partir de una pequeña porción de una disolución del compuesto del título, preparado de manera análoga a este procedimiento), y se dejó en el frigorífico durante varios días para que cristalizase. Los cristales resultantes se recogieron por filtración y se lavaron con una pequeña cantidad de iso-propanol frío (se recuperaron 220 mg, 72%).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 13), y se muestran en la Figura 13.

TABLA 13

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
13,3	100
12,3	5
9,6	5
7,5	6
6,9	6
6,8	3
6,7	12
6,4	2
6,2	2
6,0	2
5,5	12

TABLA 13 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
5,3	2
5,1	13
5,0	5
4,89	5
4,81	4
4,34	4
4,23	4
4,20	6
4,08	5
3,99	2
3,89	8
3,85	5
3,80	4
3,68	2
3,52	2
3,49	2
3,43	2
3,39	2
3,33	2
3,25	3
3,01	2
2,94	2
2,90	1
2,80	1
2,49	1
2,40	2

La DSC mostró picos endotérmicos con temperaturas de comienzo extrapoladas de aprox. 145ºC (más pequeño) y 170ºC (más grande). El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,9% (p/p) entre 25 y 105ºC.

Ejemplo 14 Cristalización de la sal del ácido para-toluenosulfónico del Compuesto C

El Compuesto C (250 mg, preparado de manera análoga al procedimiento descrito en el Ejemplo 12 anterior) se disolvió en metanol (10 ml). Se añadió ácido toluenosulfónico (110 mg) a la disolución. El metanol se eliminó a presión reducida, y la goma que queda se redisolvió en la cantidad mínima posible de acetato de etilo caliente. La disolución se sembró con sal previamente preparada (preparada mediante evaporación lenta de disolvente a partir de una pequeña porción de una disolución del compuesto del título, preparado de manera análoga a este procedimiento), y se dejó en el frigorífico durante varios días para que cristalizase. Los cristales resultantes se recogieron por filtración y se lavaron con una pequeña cantidad de acetato de etilo frío (se recuperaron 280 mg, 78%).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 14), y se muestran en la Figura 14.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 14

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
13,2	100
8,1	0,5
7,5	0,7
7,1	3
6,6	0,7
6,4	0,9
6,3	0,7
6,0	0,8
5,6	1
5,4	2
5,2	3
5,0	4
4,97	2
4,86	0,8
4,67	2
4,42	0,7
4,28	3
4,24	7
4,19	2
4,12	1
4,08	2
4,03	2
4,01	1
3,92	1
3,82	0,7

TABLA 14 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
3,78	0,8
3,66	0,8
3,57	0,5
3,46	1
3,36	2
3,32	1
3,12	2

La DSC mostró un pico endotérmico con una temperatura de comienzo extrapolada de aprox. 138ºC. El TGA mostró una disminución de la masa de aprox. 0,2% (p/p) entre 25 y 150ºC.

Ejemplo 15 Sal del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético del Compuesto D (a) Éster metílico del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]-acético

Se añadieron diclorometano (50 ml) y después trietilamina (11,2 ml, 79,6 mmoles, 2,0 eq.) al hidrocloruro del éster metílico de la glicina (5,0 g, 39,8 mmoles, 1,0 eq.). La mezcla se agitó y se enfrió hasta -5ºC usando un baño de hielo/metanol. Se añadió una suspensión de cloruro de bifenil-4-carbonilo (8,26 g, 39,8 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (25 ml) durante 22 minutos. La mezcla se agitó durante 3 horas a -5ºC, y después se dejó agitar a temperatura ambiente toda la noche (16 horas). Se añadió agua (75 ml), y la mezcla se agitó rápidamente durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (75 ml), después se evaporó hasta sequedad usando un evaporador giratorio para dar un sólido blanquecino (6,58 g, 62%).

RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) 8 3,82 (s, 3H), 4,29 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 6,68 (s, 1H), 7,3-7,5 (m, 3H), 7,62 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,90(d, J = 8,4 Hz, 2H) p.f. 127-128ºC

(b) Ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético

Se añadió el éster metílico del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético (6,58 g, 25 mmoles, 1,0 eq., procedente de la etapa (a) anterior) al matraz, seguido de hidróxido sódico acuoso (1 M, 84 ml, 50 mmoles, 2,0 eq.). La mezcla se calentó hasta 50ºC usando un baño de aceite durante 5 horas. La disolución se agitó entonces toda la noche (16 horas) a temperatura ambiente. Al enfriar, se formó un precipitado blanco. La mezcla se enfrió adicionalmente hasta 5ºC, usando un baño de hielo/agua. Se añadió muy lentamente ácido clorhídrico concentrado (8 ml) a la disolución enfriada, asegurándose de que la temperatura no se elevase por encima de 10ºC. La mezcla se agitó durante 15 minutos y después se filtró. El sólido blanco se secó en aire durante 30 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 16 horas para dar un sólido blanquecino (5,75 g, 93%).

RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 3,95 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,35-7,5 (m, 3H), 7,7-7,8 (m, 4H), 7,97 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 8,89 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 12,58 (s, 1H)

P.f. 217-217,5ºC.

(c) Recristalización de ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]-acético

Se añadió metanol (100 ml, 20 vols.) al ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]-acético (5,0 g, procedente de la etapa (b) anterior). La mezcla se calentó hasta 62ºC usando un baño de aceite, mientras se agitaba. La disolución naranja pálida resultante se mantuvo a esta temperatura durante 10 minutos. Se dejó que la disolución se enfriase hasta la temperatura ambiente, y después se enfrió adicionalmente hasta 5ºC usando un baño de hielo/agua. La cristalización comenzó a aproximadamente 30ºC. El precipitado se recogió por filtración, se secó en aire durante 15 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 26 horas para dar cristales incoloros (2,9 g, 58%).

RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 3,95 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,35-7,5 (m, 3H), 7,7-7,8 (m, 4H), 7,97 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 8,89 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 12,58 (s, 1H).

(d) Sal del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético del Compuesto D

El ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético (1,14 g, véanse las etapas (b) o (c) anteriores) y el Compuesto D (2 g, preparado de forma análoga a los métodos descritos aquí anteriormente) se disolvieron en iso-propanol caliente (40 ml). Al enfriar hasta la temperatura ambiente, se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó con iso-propanol (2 x 20 ml) y se secó por succión sobre el filtro. El secado durante 6 horas a vacío a 40ºC dio la sal como un sólido cristalino incoloro (2,50 g, 80%).

RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6+}) \delta 1,34 (9H, s), 2,25 (2H, t), 2,3-2,5 (4H, m), 2,6-2,7 (1H, m), 2,7-2,8 (1H, m), 2,85-3,0 (4H, m), 3,0-3,1 (2H, m), 3,82 (2H, s), 3,88 (2H, d), 3,95-4,05 (2H, m), 4,1-4,2 (1H, m), 6,65 (1H, t), 7,14 (2H, d), 7,35-7,55 (3H, m), 7,7-7,85 (6H, m), 7,96 (2H, d), 8,75 (1H, t) p.f. 143-143,5ºC.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 15), y se muestran en la Figura 15.

TABLA 15

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
20,4	45
15,3	100
11,5	24
10,3	4
10,0	6
9,4	11
7,7	34
7,2	23
6,2	5
5,9	49
5,7	15
5,6	6
5,4	11
5,3	13
5,2	14
5,0	6
4,89	8
4,81	9
4,70	6
4,60	57
4,54	89
4,36	9
4,22	7

TABLA 15 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
4,13	18
4,06	8
3,85	13
3,79	27
3,64	12
3,61	11
3,40	11
3,31	6
2,98	6
2,94	12
2,88	6

Ejemplo 16 Sal del ácido hemisuccínico del Compuesto D

Se sembró una disolución caliente de Compuesto D (5,35 g; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) y ácido succínico (0,71 g) en iso-propanol (20 ml) con la sal del ácido hemisuccínico del Compuesto D (preparada mediante evaporación lenta del disolvente a partir de una pequeña porción de una disolución del compuesto del título, preparado de manera análoga a este procedimiento), y después se dejó reposar en el frigorífico. Al día siguiente, se recogió el sólido precipitado por filtración, y se lavó con iso-propanol (20 ml). El sólido se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC durante 2 horas para dar el compuesto del título como un sólido blanco. El filtrado se dejó que se evaporase totalmente dejándolo abierto a la atmósfera. Esto dejó un sólido que se suspendió en iso-propanol (20 ml), y después se filtró, lavando sobre el filtro con iso-propanol (70 ml). El sólido se secó por succión sobre el filtro, y después se secó a vacío a 40ºC durante 90 minutos para dar el compuesto del título como un sólido blanco (2,8 g). P.f. 112-114ºC.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 16), y se muestran en la Figura 16.

TABLA 16

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
35,4	5
18,0	100
12,1	2
8,3	7
8,0	12
7,5	15
7,3	5
6,8	10

TABLA 16 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
6,1	12
5,8	9
5,4	9
4,89	41
4,79	7
4,68	28
4,59	5
4,54	26
4,43	37
4,35	10
4,18	16
4,04	10
3,99	4
3,90	5
3,83	4
3,67	4
3,58	8
3,13	2
3,07	6
3,03	3
2,47	4
2,44	3

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Ejemplo 17 Sal del ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético del Compuesto D (a) Éster metílico del ácido (3,4-diclorobenzoilamino)-acético

Se añadieron diclorometano (150 ml) y después trietilamina (33,0 ml, 234 mmoles, 2,0 eq.) al hidrocloruro del éster metílico de la glicina (14,7 g, 117 mmoles, 1,0 eq.). La mezcla se agitó y se enfrió hasta 2ºC usando un baño de hielo/agua. Se añadió una disolución de cloruro de 3,4-diclorobenzoilo (24,55 g, 117 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (75 ml) durante 7 minutos. La mezcla se agitó durante 1 hora a 2ºC, y después se dejó agitar a temperatura ambiente toda la noche (16 horas). Se añadió agua (225 ml), y la mezcla se agitó rápidamente durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (225 ml), después se evaporó hasta sequedad usando un evaporador giratorio para dar un sólido blanquecino. El sólido aislado (26,18 g, 85%) se añadió a diclorometano (300 ml, 10 vols.) con una disolución de hidróxido sódico 1 M (300 ml, 10 vols.). La capa orgánica inferior se concentró hasta sequedad a vacío (25,91 g, 84%). P.f. 133,2-134,3ºC.

\delta_{H} (300 MHz, CDCl_{3}) 3,66 (1H, s, CH_{3}), 4,03 (2H, d, J = 6, CH_{2}), 7,78-7,87 (2H, m, CH), 8,100 (1H, s, CH), 9,18 (1H, t, J = 5,7, NH).

(b) Ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético

Se añadió al matraz el éster metílico del ácido (3,3-diclorobenzoilamino)acético (25,91 g, 100 mmoles, 1,0 eq., véase la etapa (a) anterior), seguido de hidróxido sódico acuoso (1 M, 198 ml, 200 mmoles, 2,0 eq.). La mezcla se calentó hasta 50ºC usando un baño de aceite durante 2 horas. Al enfriar, se formó un precipitado blanco. La mezcla se enfrió adicionalmente hasta 5ºC usando un baño de hielo/agua. Se añadió muy lentamente ácido clorhídrico concentrado (60 ml) a la disolución enfriada, asegurándose de que la temperatura no se elevó por encima de 10ºC. La mezcla se agitó durante 10 minutos, y después se filtró. El sólido blanco se secó al aire durante 15 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 16 horas para dar un sólido blanquecino (19,15 g, 78%).

P.f. 140,0-140,3ºC

\delta_{H} (300 MHz, DMSO-D_{6}) 3,94 (2H, d, J = 6, CH_{2}), 7,77- 7,87 (2H, m, CH), 8,10 (1H, s, CH), 9,06 (1H, t, J = 6), 12,66 (1H, bs, OH).

(c) Sal del ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético del Compuesto D

El ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético (0,56 g, véase la etapa (b) anterior) y el Compuesto D (1,02 g, preparado de forma análoga a los métodos descritos aquí anteriormente) se disolvieron en acetato de etilo caliente (4 ml). Al enfriar hasta la temperatura ambiente, se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó con acetato de etilo (15 ml) y se secó por succión sobre el filtro. El secado durante toda la noche a vacío a 40ºC dio la sal del título como un sólido cristalino incoloro (0,92 g, 58%).

P.f. 128,5-130,5ºC

RMN ^{1}H (400 MHz, DMSO-D_{6}) \delta 1,34 (9H, s), 2,26 (2H, t), 2,3-2,5 (3H, m), 2,5-2,6 (1H, m), 2,6-2,7 (1H, m), 2,7-2,8 (1H, m), 2,85-3,0 (4H, m), 3,0-3,1 (2H, m), 3,8-3,9 (4H, m), 4,01 (2H, d), 4,1-4,2 (1H, m), 6,69 (1H, t), 7,12 (2H, d), 7,7-7,8 (3H, m), 7,84 (1H, dd), 8,09 (1H, dd) 8,92 (1H, t).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 17), y se muestran en la Figura 17.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 17

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
16,6	100
13,8	4
10,9	10
10,3	3
6,3	6
6,2	15
5,5	31
5,3	30
5,1	14
5,0	12
4,60	38
4,33	20
4,30	11

TABLA 17 (continuación)

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
4,22	11
4,1	3
3,85	8
3,70	13
3,50	6
3,30	10
3,16	7
3,06	6
2,99	5
2,95	3

Ejemplo 18 Sal del ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]acético del Compuesto D (a) Éster metílico del ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]-acético

Se añadieron diclorometano (66 ml) y después trietilamina (14,6 ml, 105 mmoles, 2,0 eq.) a hidrocloruro del éster metílico de la glicina (6,61 g, 52,5 mmoles, 1,0 eq.). Con la adición de la trietilamina apareció un precipitado blanco, y la disolución se puso mucho más espesa. La mezcla se agitó y se enfrió hasta 2ºC usando un baño de hielo/agua. Se añadió una disolución de cloruro de 2-naftoilo (10,07 g, 52,5 mmoles, 1,0 eq.) en diclorometano (33 ml) durante 15 minutos. La mezcla marrón pálida se agitó durante 25 horas a 5ºC. Se añadió agua (100 ml), y la mezcla se agitó rápidamente durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se separaron las capas. La capa orgánica se lavó con hidróxido sódico (1 M, 100 ml), y después se evaporó hasta sequedad usando un evaporador giratorio, para dar un sólido blanquecino (12,21 g, 96%). P.f. 117,7-118,1ºC.

\delta_{H} (400 MHz, DMSO-D_{6}) 3,68 (3H, s, CH_{3}), 4,08 (2H, d, J = 4,5, CH_{2}), 7,59-7,66 (2H, m, CH), 7,935-8,015 (4H, m, CH), 8,491 (1H, s, CH), 9,124 (1H, t, J = 45,6, NH).

(b) Ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]acético

Se añadió al matraz el éster metílico del ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]acético (10,03 g, 41 mmoles, 1,0 eq., véase la etapa (a) anterior), seguido de hidróxido sódico acuoso (1 M, 120 ml, 123 mmoles, 3,0 eq.). La mezcla se calentó hasta 55ºC usando un baño de aceite durante 2 horas. La mezcla se enfrió hasta 5ºC usando un baño de hielo/agua. Se añadió muy lentamente ácido clorhídrico concentrado (50 ml) a la disolución enfriada, asegurándose de que la temperatura no se elevase por encima de 10ºC. Se formó un precipitado amarillo denso. La mezcla se agitó durante 10 minutos, y después se filtró. El sólido amarillo se secó al aire durante 15 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 16 horas (8,73 g, 93%). Se añadieron metanol (50 ml, 10 vols.) y agua (100 ml, 20 vols.) a una porción del compuesto del subtítulo (5,0 g, 22 mmoles). La mezcla se calentó hasta 70ºC usando un baño de aceite mientras se agitaba. La disolución se mantuvo a esta temperatura durante 10 minutos, y después se dejó enfriar adicionalmente hasta 5ºC usando un baño de hielo/agua. La cristalización comenzó a aproximadamente 30ºC. El precipitado se recogió por filtración, se secó al aire durante 15 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 2 horas (3,2 g, 64%). El compuesto del subtítulo aislado (3,2 g, 0,014 moles, 64%) se añadió a agua (100 ml, 20 vols.) y metanol (50 ml, 10 vols.). La mezcla se calentó hasta 70ºC para disolver el sólido. Se dejó que la disolución se enfriase hasta la temperatura ambiente, y la cristalización se produjo al enfriar. La mezcla se enfrió adicionalmente hasta 2ºC, y después se filtró usando un embudo de sinter. El sólido se secó al aire durante 10 minutos, y después se secó a vacío a 40ºC durante 16 horas (2,21 g, 44%). P.f. 167,1-167,4ºC.

\delta_{H} (400 MHz, DMSO-D_{6}) 3,98 (2H, d, J = 5,6, CH_{2}), 7,58-7,65 (2H, m, CH), 7,95-8,05 (4H, m, CH), 8,49 (1H, s, CH), 8,99 (1H, t, J = 5,6, NH), 12,63 (1H, bs, OH).

(c) Sal del ácido [(naftaleno-2-carbonil)amino]acético del Compuesto D

Se disolvieron el ácido [(naftaleno-2-carbonil)-amino]acético (0,51 g, véase la etapa (b) anterior) y el Compuesto D (1,01 g; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) en metil-iso-butilcetona (30 ml) a 100ºC. Al enfriar hasta la temperatura ambiente se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó con acetona (25 ml) y se secó por succión sobre el filtro. El secado durante un fin de semana a vacío a 40ºC dio la sal del título como un sólido cristalino incoloro (1,17 g, 77%).

P.f. 138,5-140ºC

RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-D_{6}) \delta 1,34 (9H, s), 2,25 (2H, t), 2,3-2,5 (4H, m), 2,6-2,7 (1H, m), 2,7-2,8 (1H, m), 2,85-3,0 (4H, m), 3,0-3,1 (2H, m), 3,81 (2H, s), 3,92 (2H, d), 3,95-4,05 (2H, m), 4,1-4,2 (1H, m), 6,68 (1H, t), 7,11 (2H, d), 7,5-7,7 (2H, m), 7,7-7,8 (2H, m), 7,9-8,1 (4H, m), 8,47 (1H, d), 8,85 (1H, t).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 18), y se muestran en la Figura 18.

TABLA 18

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
16,8	100
6,2	15
5,8	11
5,6	15
5,2	6
5,1	15
4,90	10
4,76	14
4,66	4
4,53	31
4,37	7
4,31	15
4,23	7
4,08	10
3,70	3
3,51	9
3,25	7
3,12	5

Ejemplo 19 Sal del ácido 2,2,3,3-tetrametil-1,4-dibutanoico del Compuesto D

El Compuesto D (200 mg; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) se disolvió en acetato de etilo (10 ml). Se disolvió ácido 2,2,3,3-tetrametil-1,4-dibutanoico (38,3 mg, 0,5 eq.) en 1 ml de metanol, y se añadió a la disolución de Compuesto D. Se evaporaron los disolventes, se añadió ácido acético, y después este disolvente se evaporó lentamente dejando el resultante en un matraz abierto a temperatura ambiente durante varios días. Los cristales formados se separaron por filtración. Los análisis mediante RMN mostraron que se había formado una sal 1:1 (\sim 100 mg, 42%).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 19), y se muestran en la Figura 19.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 19

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
14,2	100
10,3	12
7,1	18
6,4	11
6,0	5
5,6	10
5,4	41
5,1	22
4,84	12
4,77	6
4,73	13
4,66	7
4,50	4
4,29	3
4,22	5
3,87	3
3,78	4
3,62	5
3,49	4
3,35	4
3,09	6
2,75	3

Ejemplo 20 Sal del ácido trans-D,L-1,2-ciclopentanodicarboxílico del Compuesto D

Se disolvió el Compuesto D (100 mg; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) en acetato de etilo (5 ml). Se disolvió ácido trans-D,L-1,2-ciclopentanodicarboxílico (17,4 mg, 0,5 eq.) en metanol, y después se añadió a la disolución del Compuesto D. Se evaporaron los disolventes, y después se disolvió en acetato de etilo. Después de un rato, se formó un precipitado blanco. Los cristales se filtraron. Los análisis mediante RMN mostraron que se había formado una sal 1:1 (\sim 60 mg).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 20), y se muestran en la Figura 20.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 20

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
12,9	100
11,1	14
10,7	35
9,0	10
7,7	14
7,0	15
6,5	18
6,3	10
6,1	14
6,0	21
5,6	17
5,4	55
5,3	37
5,2	55
4,73	29
4,68	32
4,31	29
4,26	26
4,02	13
3,86	12
3,61	22
3,50	19
3,24	16
2,90	15

Ejemplo 21 Sal del ácido (+)-O,O’-dibenzoil-D-tartárico del Compuesto D

Se mezcló el Compuesto D (100 mg; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) y 0,5 equivalentes de ácido (+)-O,O’-dibenzoil-D-tartárico, según el procedimiento descrito en el Ejemplo 20 anterior. La sal cristalizó en acetato de etilo. La RMN mostró que se había formado una sal con una relación fármaco:ácido de 2:1, con un rendimiento de \sim 70%.

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 21), y se muestran en la Figura 21.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 21

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
15,1	100
13,5	5
8,7	2
7,7	3
7,1	4
6,6	4
5,7	3
5,5	3
5,3	9
5,2	7
4,79	9
4,50	9
4,38	10
4,25	10
3,53	3
3,49	4
2,92	4

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 22 Sal del ácido (+)-O,O’-di-para-toluoil-D-tartárico del Compuesto D

Se disolvió el Compuesto D (1,0 g; preparado de forma análoga a los procedimientos descritos aquí anteriormente) en acetato de etilo (15 ml). Se disolvió ácido (+)-O,O’-di-para-toluoil-D-tartárico (0,43 g) en acetato de etilo (20 ml). Las disoluciones se mezclaron. Después de unos pocos minutos, se formó un precipitado blanco. La mezcla se almacenó a 4ºC toda la noche. Los cristales se separaron por filtración y se secaron a vacío, produciendo 1,1 g (76%) de una sal 2:1 (confirmado por RMN).

Los cristales se analizaron mediante XRPD, y los resultados se tabulan a continuación (Tabla 22), y se muestran en la Figura 22.

TABLA 22

Valor d (\ring{A})	Intensidad (%)
15,8	100
14,4	2
13,1	2
6,8	7
6,2	2
5,7	7
5,6	5
5,3 (5,32)	3
5,3 (5,25)	5
4,84	5
4,80	9
4,75	9
4,59	3
4,39	13
4,37	12
4,26	2
4,10	2
3,98	5
3,82	2
3,32	3
3,05	1

Ejemplo 23 Cristalización del Compuesto B

El material bruto procedente de la Preparación B, Alternativa II, etapa (iii), Método II, se disolvió en iso-propanol (190 ml, 5,0 vol. rel.) a 60ºC, y la disolución caliente se filtró. El filtrado se agitó y se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente. Cristalizó un sólido blanco. La mezcla se enfrió desde la temperatura ambiente hasta aproximadamente 8ºC. El producto se recogió por filtración y se lavó con iso-propanol (50 ml, 2,0 vol.). El producto húmedo se secó a vacío a 40ºC hasta peso constante, para dar el compuesto del título como un sólido cristalino blanco (30,96 g, 81%).

P.f. 113,5ºC

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta 1,40 (9H, s), 1,81-1,90 (2H, m), 2,35-2,54 (8H, m), 2,93 (4H, t) 3,18-3,27 (4H, m), 3,87 (2H, bs), 6,66 (2H, d), 7,39 (2H, d)

MS: m/z = (MH^{+}, 430).

Abreviaturas

API =: ionización a presión atmosférica (con relación a MS)

br =: ancho (con relación a RMN)

d =: doblete (con relación a RMN)

DCM =: diclorometano

DMF =: N,N-dimetilformamida

DMSO =: dimetilsulfóxido

dd =: doblete de dobletes (en relación con RMN)

Et =: etilo

eq. =: equivalentes

GC =: cromatografía de gases

h =: hora(s)

HCl =: ácido clorhídrico

HPLC =: cromatografía de líquidos de altas prestaciones

IMS =: alcohol metilado industrial

IPA =: alcohol iso-propílico

KF =: Karl-Fischer

m =: multiplete (en relación con RMN)

Me =: metilo

MeCN =: acetonitrilo

min =: minuto(s)

p.f. =: punto de fusión

MS =: espectroscopia de masas

Pd/C =: paladio sobre carbono

q =: cuartete (en relación con RMN)

rt =: temperatura ambiente

s =: singlete (en relación con RMN)

t =: triplete (en relación con RMN)

TLC =: cromatografía de capa fina

UV =: ultravioleta

Los prefijos n-, s-, i-, t- y terc- tienen sus significados habituales: normal, secundario, iso, y terciario.

Claims

1. Una sal farmacéuticamente aceptable de uno de los siguientes compuestos:

4-({3-(7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il]propil}amino)benzonitrilo; 2-{7-[3-(4-
cianoanilino)propil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]-non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo; 2-{7-[4-(4-cianofenil)-butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]-non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo; o 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-di-azabiciclo[3.3.1]non-3-il)etil-carbamato de terc-butilo,

con la condición de que la sal no sea la sal del ácido bencenosulfónico del 4-({3-[7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il]propil}amino)benzonitrilo.

2. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es la sal del ácido hidroxinaftoico 4-({3-[7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il]propil}-amino)benzonitrilo.

3. Una sal según la reivindicación 2, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 17,6, 12,4, 8,8, 5,7, 5,6, 5,1, 4,95, 4,88, 4,47, 4,16, 4,08, 3,84, 3,80, 3,33 y 3,03 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 6 y/o en la Figura 6.

4. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido naftalenosulfónico del 4-({3-[7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il]-propil}amino)benzonitrilo.

5. Una sal según la reivindicación 4, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 16,1, 8,1, 7,1, 6,3, 6,0, 5,4 (5,39), 4,96, 4,88, 4,68, 4,49, 4,34, 4,10, 4,04, 3,94, 3,44, 3,40, 3,23, 3,20 y 3,15 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 7 y/o en la Figura 7.

6. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido mesitilenosulfónico del 4-({3-[7-(3,3-dimetil-2-oxobutil)-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il]-propil}-amino)benzonitrilo.

7. Una sal según la reivindicación 6, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 18,8, 9,5, 6,3 (6,33), 6,3 (6,26), 4,75, 4,50, 4,46, 3,92, 3,80 y 3,17 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 8 y/o en la Figura 8.

8. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido metanosulfónico del 2-(7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

9. Una sal según la reivindicación 8, caracterizada por una curva de calorimetría diferencial de barrido, a una velocidad de calentamiento de 10ºC/min en una copa cerrada con un orificio en nitrógeno circulante, que muestra una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de alrededor de 167ºC; y/o un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 12,7, 9,4, 7,3, 7,1, 6,6, 6,0, 5,4, 5,1, 4,92, 4,83, 4,27, 4,14, 4,05, 3,99, 3,87, 3,73, 3,65, 3,42, 3,37 y 3,00 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 10 y/o en la Figura 10.

10. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido hipúrico del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

11. Una sal según la reivindicación 10, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 16,4, 6,9, 6,2, 6,1, 5,5, 5,2, 5,1, 4,93, 4,61, 4,50, 4,28, 4,20, 4,11 y 3,68 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 11 y/o en la Figura 11.

12. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido metanosulfónico del 2-{7-(4-(4-ciano-fenil)butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etil-carbamato de terc-butilo.

13. Una sal según la reivindicación 12, caracterizada por una curva de calorimetría diferencial de barrido, a una velocidad de calentamiento de 10ºC/min en una copa cerrada con un orificio en nitrógeno circulante, que muestra endotermias con temperaturas de comienzo extrapoladas de alrededor de 145ºC y 170ºC; y/o un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 13,3, 12,3, 9,6, 7,5, 6,9, 6,7, 5,5, 5,1, 5,0, 4,89, 4,81, 4,34, 4,23, 4,20, 4,08, 3,89, 3,85 y 3,80 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 13 y/o en la Figura 13.

14. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido toluenosulfónico del 2-{7-[4-(4-ciano-fenil)butil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etil-carbamato de terc-butilo.

15. Una sal según la reivindicación 14, caracterizada por una curva de calorimetría diferencial de barrido, a una velocidad de calentamiento de 10ºC/min en una copa cerrada con un orificio en nitrógeno circulante, que muestra una endotermia con una temperatura de comienzo extrapolada de alrededor de 138ºC; y/o un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 13,2, 7,1, 5,2, 5,0, 4,67, 4,28, 4,24, 4,19, 4,08, 3,36 y 3,12 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 14 y/o en la Figura 14.

16. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido [(bifenil-4-carbonil)amino]acético del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

17. Una sal según la reivindicación 16, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 20,4, 15,3, 11,5, 9,4, 7,7, 7,2, 5,9, 5,7, 5,4, 5,3, 5,2, 4,60, 4,54, 4,13, 3,85, 3,79, 3,64, 3,61, 3,40 y 2,94 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 15 y/o en la Figura 15.

18. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido hemisuccínico del 2-{7-[(2S)-3-(4-ciano-fenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

19. Una sal según la reivindicación 18, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 18,0, 8,3, 8,0, 7,5, 7,3, 6,8, 6,1, 5,8, 5,4, 4,89, 4,79, 4,68, 4,59, 4,54, 4,43, 4,35, 4,18, 4,04, 3,99, 3,90, 3,83, 3,67, 3,58, 3,07 y 2,47 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 16 y/o en la Figura
16.

20. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido (3,4-diclorobenzoilamino)acético del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

21. Una sal según la reivindicación 20, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 16,6, 13,8, 10,9, 6,3, 6,2, 5,5, 5,3, 5,1, 5,0, 4,60, 4,33, 4,30, 4,22, 3,85, 3,70, 3,50, 3,30, 3,16, 3,06 y 2,99 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 17 y/o en la Figura 17.

22. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido [(naftalen-2-carbonil)amino]acético del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

23. Una sal según la reivindicación 22, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 16,8, 6,2, 5,8, 5,6, 5,2, 5,1, 4,90, 4,76, 4,66, 4,53, 4,37, 4,31, 4,23, 4,08, 3,51, 3,25 y 3,12 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 18 y/o en la Figura 18.

24. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido 2,2,3,3,-tetrametil-1,4-dibutanoico del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

25. Una sal según la reivindicación 24, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 14,2, 10,3, 7,1, 6,4, 6,0, 5,6, 5,4, 5,1, 4,84, 4,77, 4,73, 4,66, 4,50, 4,22, 3,78, 3,62, 3,49, 3,35 y 3,09 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 19 y/o en la Figura 19.

26. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido 1,2-ciclopentandicarboxílico del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

27. Una sal según la reivindicación 26, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 12,9, 11,1, 10,7, 9,0, 7,7, 7,0, 6,5, 6,3, 6,1, 6,0, 5,6, 5,4, 5,3, 5,2, 4,73, 4,68, 4,31, 4,26, 4,02, 3,86, 3,61, 3,50, 3,24 y 2,90 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 20 y/o en la Figura
20.

28. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido O,O’-dibenzoiltartárico del 2-(7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo-[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

29. Una sal según la reivindicación 28, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 15,1, 13,5, 7,1, 6,6, 5,3, 5,2, 4,79, 4,50, 4,38, 4,25, 3,49 y 2,92 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 21 y/o en la Figura 21.

30. Una sal según la reivindicación 1, sal la cual es una sal del ácido O,O’-di-para-toluoiltartárico del 2-{7-[(2S)-3-(4-cianofenoxi)-2-hidroxipropil]-9-oxa-3,7-diazabiciclo[3.3.1]non-3-il}etilcarbamato de terc-butilo.

31. Una sal según la reivindicación 30, caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo caracterizado por picos con valores de d a 15,8, 6,8, 5,7, 5,6, 5,3 (5,25), 4,84, 4,80, 4,75, 4,39, 4,37 y 3,98 \ring{A}, y/o esencialmente como se define en la Tabla 22 y/o en la Figura 22.

32. Un procedimiento para la preparación de una sal según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, procedimiento el cual comprende la adición de un ácido al compuesto en forma de base libre apropiado, según se define en la reivindicación 1.

33. Un procedimiento para la preparación de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, que comprende cristalizar la sal farmacéuticamente aceptable apropiada del mismo.

34. Un procedimiento según la reivindicación 33, que comprende cristalizar el compuesto o la sal en un disolvente.

35. Un procedimiento según la reivindicación 34, en el que el disolvente se selecciona del grupo: acetatos, alcoholes de alquilo inferior, hidrocarburos alifáticos y aromáticos, éteres de dialquilo, dialquilcetona, acetonitrilo, alcanos clorados, disolventes acuosos, o mezclas de los mismos.

36. Un procedimiento según la reivindicación 35, en el que el disolvente se selecciona del grupo: acetatos de alquilo C_{1-6}, alcoholes de alquilo C_{1-6} lineal o ramificado, hidrocarburos alifáticos de C_{6-12}, hidrocarburos aromáticos de C_{6-10}, éteres de dialquilo C_{1-6}, dialquil(C_{1-6})cetonas, metanos o etanos clorados, acetonitrilo, agua, o mezclas de los mismos.

37. Un procedimiento según la reivindicación 36, en el que el disolvente se selecciona del grupo: acetato de etilo, acetato de iso-propilo, metanol, etanol, iso-propanol, n-heptano, éter dietílico, acetona, diclorometano, agua, o mezclas de los mismos.

38. Un compuesto obtenible mediante un procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 32 a 37.

39. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 ó 38, para uso como un medicamento.

40. Una formulación farmacéutica que incluye un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 ó 38, en mezcla con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

41. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 ó 38, para uso en la profilaxis o en el tratamiento de una arritmia.

42. El uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 ó 38, como ingrediente activo para la fabricación de un medicamento para uso en la profilaxis o en el tratamiento de una arritmia.

43. El uso según la reivindicación 42, en el que la arritmia es una arritmia auricular o una arritmia ventricular.

44. El uso según la reivindicación 42, en el que la arritmia es fibrilación auricular.

45. El uso según la reivindicación 42, en el que la arritmia es aleteo auricular.