ES2274053T3 - Agente contra la obesidad y/0 antidiabetico que contiene cianidin 3-glucosido como ingrediente activo. - Google Patents

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Takanori Tsuda
Fumihiko Horio
Toshihiko Osawa
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Hiromitsu San-Ei Gen F.F.I. Inc. AOKI
Takatoshi San-Ei Gen F.F.I. Inc. KODA
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Abstract

Uso de cianidín 3-glucósido como un ingrediente activo para la preparación de un agente contra la obesidad y/o contra la diabetes.

Description

Agente contra la obesidad y/o antidiabético que contiene cianidín 3-glucósido como ingrediente activo.
Campo técnico
La presente invención se refiere al uso de un agente contra la obesidad y/o antidiabético que contiene cianidín 3-glucósido como un ingrediente activo, y a un alimento saludable al cual se ha añadido cianidín 3-glucósido o un extracto soluble en agua de una planta que contiene cianidín 3-glucósido.
Técnica anterior
En tiempos recientes, a medida que la dieta occidental se está haciendo más imperante, la frecuencia de la obesidad sigue aumentando. La obesidad es una condición en la que el tejido adiposo aumenta más allá de su proporción normal en un cuerpo debido a la excesiva ingesta de azúcares (carbohidratos) y grasas.
Normalmente, los azúcares y grasas, después de su descomposición por enzimas digestivas, se utilizan como fuente de energía o similar. Sin embargo, si se los ingiere en exceso, un exceso de azúcares se transforma en ácidos grasos por medio de acetil CoA, y se almacena en el tejido junto con las grasas, siendo el resultado la obesidad.
Las células adiposas que almacenan grasas secretan ácidos grasos libres y un factor de la necrosis de los tumores (TNF, tumor necrosis factor), e inhiben la acción de la insulina que regula el metabolismo del azúcar, que incluye la glucosa de la sangre, las grasas y los aminoácidos. Por ello, si las células adiposas aumentan debido a la obesidad, la insulina no actúa bien y la glucosa de la sangre aumenta de manera de ocasionar diabetes. Se ha destacado que la enfermedad, si persiste por un tiempo prolongado, conduce a trastornos de los vasos periféricos y a esclerosis arterial.
Los pigmentos de antocianina que tienen una amplia distribución en el reino vegetal se utilizan como colorantes, pero también es sabido que tienen un efecto decreciente sobre el colesterol en la sangre, por ejemplo, como bioactividad (Agric. Biol. Chem., 54(1), 171-175, 1990).
El colesterol es un constituyente de la membrana biológica y de la lipoproteína de suero, y se sintetiza in vivo. Normalmente, si se ingiere el colesterol externamente, la cantidad de colesterol sintetizado in vivo se suprime. Sin embargo, si se ingiere una gran cantidad de colesterol, se pierde el equilibrio del colesterol en el cuerpo, siendo el resultado una hipercolesterolemia. El colesterol excesivo causa esclerosis arterial. Sin embargo, en la actualidad no se conoce la correlación entre obesidad y colesterol, y no se prevé que el control del colesterol conduzca al control del peso.
La Publicación de Solicitud de Patente Japonesa Sin Examinar, Nº 2000-178295 describió que los cianidín glucósidos tienen un efecto antitumoral y que la ingesta de alimento que contiene cianidín glucósidos como ingredientes activos es preferible para la prevención de enfermedades como hiperlipidemia, esclerosis arterial, diabetes, hígado grasoso, infarto de miocardio, y similares, o para mejorar la condición de personas afectadas por dichas enfermedades. Sin embargo, esta referencia presenta datos farmacológicos que soportan solamente el efecto antitumoral de los cianidín glucósidos, pero no presenta ningún dato farmacológico acerca del efecto contra la obesidad o antidiabético de los mismos. De los descubrimientos médicos no puede considerarse que el efecto antitumoral resulte en una mejora del estado de las personas en cuanto a la obesidad ni en cuanto a las enfermedades arriba mencionadas.
Revelación de la invención
Bajo estas circunstancias, los inventores de la presente han descubierto que el cianidín 3-glucósido suprime el incremento de las células adiposas y reduce el nivel de la glucosa en la sangre, lo cual los llevó a completar la presente invención.
Por lo tanto, la presente invención provee el uso de un agente contra la obesidad y/o antidiabético que contiene cianidín 3-glucósido como un ingrediente activo, y un alimento saludable al que se ha añadido cianidín 3-glucósido o un extracto soluble en agua de una planta que contiene cianidín 3-glucósido.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 es una fotografía de tejido adiposo de epidídimo del grupo C (x200) en el Ejemplo 2;
la Figura 2 es una fotografía de tejido adiposo de epidídimo del grupo A (x200) en el Ejemplo 2;
la Figura 3 es una fotografía de tejido adiposo de epidídimo del grupo H (x200) en el Ejemplo 2; y
la Figura 4 es una fotografía de tejido adiposo de epidídimo del grupo HA (x200) en el Ejemplo 2.
Mejor modo de implementar la invención
En la presente invención, puede obtenerse cianidín 3-glucósido a partir de un material de planta, pero puede obtenerse mediante un método semisintético o totalmente sintético mediante la utilización de una técnica conocida en el campo del arte.
En el caso en que el cianidín 3-glucósido ha de obtenerse a partir de una planta, puede utilizarse un material, o dos o más materiales, seleccionados del grupo consistente en maíz morado, col roja, bayas tales como fresas, boysenberry (hibrido de mora y frambuesa), frambuesa, arándano agrio, zarzamora y arándano, granos como arroz silvestre, arroz rojo, arroz negro y similares, tamarindo, cacahuete e hibisco. Puede utilizarse cualquier porción de estas plantas, tales como tallos, hojas, raíces, pétalos, frutos y semillas, o células de cultivos de tejidos de los mismos. Por ejemplo, se utilizan preferentemente las pepitas o granos o mazorcas de maíz morado, bayas, pericarpios y zumo de uvas, y pétalos de hibiscos.
El método de la obtención del cianidín 3-glucósido a partir de una planta no está particularmente limitado. Por ejemplo, dado que los compuestos de cianidina son estables bajo una condición ácida, es posible macerar la planta en un líquido tibio o fresco bajo una condición ácida ajustada dentro del intervalo de aproximadamente pH 1 a pH 4 con el uso de un ácido inorgánico tal como ácido sulfúrico o con el uso de un ácido orgánico tal como ácido cítrico, durante 4 a 12 horas, por ejemplo durante la noche, para extraer un pigmento y formar un extracto soluble en agua a partir del mismo. El extracto puede utilizarse como tal, o puede filtrárselo y utilizárselo como un filtrado.
Para la extracción, puede utilizarse la planta directamente o cortársela o triturársela hasta un tamaño adecuado. Como alternativa, pueden utilizarse plantas secas en estas diversas formas.
Se piensa que el extracto soluble en agua así obtenido contiene pigmentos de antocianina tales como cianidín 3-glucósido así como carbohidratos, sal y similares.
Por esta razón, el extracto soluble en agua puede refinarse para aislar cianidín 3-glucósido mediante la combinación de uno o más tratamientos tales como los que utilizan resinas de intercambio iónico o resinas adsorbentes no-iónicas y filtración, o mediante la repetición de un único tratamiento bajo condiciones iguales o diferentes.
En el caso en que se refine el extracto con una resina adsorbente no iónica, puede utilizarse por ejemplo Duolite S-861, Duolite S-862, Duolite S-863 o Duolite S-866 de la serie de los estirenos (marcas comerciales fabricadas por Diamond Shamrock, EE.UU.); Sepabeads SP70, Sepabeads SP700, Sepabeads SP825 o Sepabeads SP207 de la serie de los aromáticos (marcas comerciales fabricadas por Mitsubishi Chemical Corporation); Diaion HP10, Diaion HP20, Diaion HP21, Diaion HP40 o Diaoion HP50 (marcas comerciales fabricadas por Mitsubishi Chemical
Corporation); Amberlite XAD-4, Amberlite XAD-7 o Amberlite XAD-2000 (marcas comerciales fabricadas por
Organo Corporation).
En el caso en que se utilice una resina de intercambio de iones, puede utilizarse como resina de intercambiadora de cationes, por ejemplo, Diaion SK 1B, Diaion SK 102, Diaion SK 116, Diaion PK 208, Diaion WK 10 o Diaion WK 20 (marcas comerciales fabricadas por Mitsubishi Chemical Corporation), y puede utilizarse como una resina de intercambio de aniones, por ejemplo Diaion SA 10A, Diaion SA 12A, Diaion SA 20A, Diaion PA 306, Diaion WA 10 o Diaion WA 20 (marcas comerciales fabricadas por Mitsubishi Chemical Corporation).
La filtración puede ser ultrafiltración u ósmosis inversa mediante la utilización de diversas membranas polímeras funcionales.
Los inventores de la presente invención se han dado cuenta que el cianidín 3-glucósido obtenido mediante el método arriba mencionado suprime el incremento de células adiposas y/o reduce el nivel de glucosa en la sangre.
Por lo tanto, la presente invención provee el uso de un agente contra la obesidad y/o antidiabético que contiene cianidín 3-glucósido o un extracto soluble en agua de planta que contiene cianidín 3-glucósido como un ingrediente activo.
El agente se produce mediante un método convencional utilizando un excipiente sólido o líquido conocido en la técnica. Los excipientes sólidos incluyen, por ejemplo, lactosa, sucrosa, glucosa, almidón de maíz, gelatina, almidón, dextrina, fosfato de calcio, carbonato de calcio, silicato de aluminio sintético y natural, óxido de magnesio, hidróxido de magnesio seco, estearato de magnesio, bicarbonato de sodio, levadura seca, y similares. Los excipientes líquidos incluyen, por ejemplo, agua, glicerina, propilenglicol, jarabe simple, etanol, etilénglicol, propilenglicol, sorbitol, y similares.
El agente arriba descrito puede contener aditivos convencionales tales como estabilizantes que incluyen ácido cítrico, ácido fosfórico, ácido málico y sales de los mismos; edulcorantes de alta potencia que incluyen sucralosa, acesulfame K y similares; y edulcorantes como sucrosa, fructosa y similares; agentes de conservación que incluyen alcoholes, glicerina y similares; emolientes, diluyentes, tampones, agentes saborizantes y agentes colorantes, si se desea. El agente puede producirse en formas para uso interno, tales como dispersión, tableta, emulsión, cápsula, gránulo, tableta masticable, solución, jarabe y similar, mediante un método convencional u otro método adecuado.
El alimento saludable, tal como se utiliza en la presente invención, significa un alimento positivamente destinado al cuidado de la salud, mantenimiento de la salud y refuerzo de la salud, en contraste con el alimento común. El alimento, al cual se ha añadido cianidín 3-glucósido o el extracto soluble en agua de planta que contiene cianidín 3-glucósido conforme a la presente invención, puede ser el alimento saludable del cual se prevé que presenta los efectos de prevenir o tratar la obesidad y/o la diabetes, o de mejorar la condición de la persona con dichos trastornos.
Por ejemplo, el alimento saludable utilizado para los fines arriba mencionados puede obtenerse mediante mezcladura o rociado de cianidín 3-glucósido o del extracto soluble en agua de planta que contiene cianidín 3-glucósido de la invención, con o en un producto intermedio bajo procesamiento, o con o en un producto final, por ejemplo productos sólidos, líquidos o semisólidos utilizables por si mismos como alimento, tal como almidón, harina de trigo, azúcar y jarabe; por ejemplo, pan, fideos o tallarines, dulces que incluyen caramelos y galletitas, otros productos sólidos; reforzadores de sabor tales como aderezos y salsas; productos líquidos tales como bebidas, bebidas nutritivas y sopa; productos semisólidos tales como jalea.
En cuanto a las dosis de cianidín 3-glucósido de la invención, se utiliza el mismo preferentemente en una dosis de 10 a 100 mg por día para una persona adulta de 60 kg. Sin embargo, la dosis puede variar en función de diversos factores tales como el estado de salud de una persona que tomará cianidín 3-glucósido, un método de administración y una combinación con otros agentes.
El cianidín 3-glucósido de la presente invención puede utilizarse con seguridad y de manera efectiva como una sustancia para impedir o tratar la obesidad y/o diabetes o para mejorar la condición de una persona con estos trastornos y, además de ello, tiene la característica de poder producirse de manera económica, por cuanto el cianidín
3-glucósido se encuentra contenido en muchas especies de plantas naturales y ha sido utilizado como un aditivo en
alimentos.
Ejemplos
A continuación se detalla la invención haciendo referencia a ejemplos.
Ejemplo 1
A una solución de una mezcla de 100 L de agua y 450 g de ácido sulfúrico (pH 2,3), se añadieron 10 kg de maíz morado seco (mazorcas y granos), y se dejó en reposo por la noche a temperatura ambiente para extraer un pigmento. Después de la extracción se llevó a cabo la separación de sólidos-líquidos utilizando una tela metálica de malla 60. Al líquido resultante se añadió un adyuvante de filtración al 2% (Radiolite # 700 producido por Showa Kagaku Kogyo Co., Ltd.), y se llevó a cabo la filtración de manera de obtener aproximadamente 100 L de un extracto bruto de maíz morado.
El extracto bruto fue sometido a adsorción mediante la utilización de 10 L de resina adsorbente (copolímero estireno vinil benceno, Diaion HP 20 producido por Mitsubishi Chemical Corporation) bajo las condiciones de SV (Space Velocity = Velocidad Espacial) = 1 y a una temperatura de 20ºC, y se lavó la resina con 30 L (SV = 1) de agua. Además, se hicieron pasar 15 L de una solución acuosa de etanol al 30% vol/vol que contenía ácido cítrico al 0,2% peso/vol a través de la resina (SV = 1, temperatura: 20ºC), para reunir el eluato. Se concentró el eluato obtenido bajo presión reducido a menos de 40ºC, con lo cual se obtuvo un concentrado de maíz morado.
Seguidamente se hizo pasar el extracto de maíz morado a través de 10 L de Sepabeads SP207 (una resina adsorbente producida por Mitsubishi Chemical Corporation) bajo las condiciones de SV = 1 y a una temperatura de 20ºC, y se lavó la resina con 30 L (SV = 1) de agua y a continuación con 10 L de una solución acuosa de etanol al 15% vol/vol que contenía ácido cítrico al 0,2% peso/vol (SV = 1). Además, se hicieron pasar 20 L de una solución acuosa de etanol al 25% vol/vol que contenía ácido cítrico al 0,2% peso/volumen a través de la resina (SV = 1, temperatura 20ºC), para reunir el eluato.
El eluato se concentró bajo presión reducida a menos de 40ºC, y seguidamente se secó por rociado para obtener
70 g de un extracto de maíz morado en polvo, de color rojo oscuro.
Este polvo contenía 18,5% de cianidín 3-glucósido.
Ejemplo 2
Se evaluó la acción de cianidín 3-glucósido mediante la adición del extracto obtenido en el Ejemplo 1, a una dieta normal (dieta de control) y a una dieta que contenía grasas en una proporción superior (dieta de elevado contenido de grasas).
Unos ratones de cuatro semanas de edad (C57BL/6J) fueron distribuidos en cuatro grupos (6 a 8 ratones por grupo), a los cuales se suministró la dieta de control (grupo C), la dieta de control + el extracto obtenido en el Ejemplo 1 (grupo A), la dieta de elevado contenido de grasas (grupo H), y la dieta de elevado contenido de grasas + el extracto obtenido en el Ejemplo 1 (grupo HA), respectivamente. Las dietas fueron ingeridas libremente durante 12 semanas.
La dieta de control, de 1 kg, estaba compuesta de 204 g de caseína, 35 g de minerales mixtos, 10 g de vitaminas mixtas, 2 g de cloruro de colina, 50 g de aceite de maíz, 40 g de celulosa en polvo y 659 g de sucrosa. La dieta de elevado contenido de grasas, de 1 kg, estaba compuesta por 204 g de caseína, 35 g de minerales mixtos, 10 g de vitaminas mixtas, 2 g de cloruro de colina, 50 g de aceite de maíz, 40 g de celulosa en polvo, 300 g de manteca de cerdo, y 359 g de sucrosa. En los grupos A y HA, se añadió el extracto del Ejemplo 1 de modo tal que el contenido de cianidín 3-glucósido era del 0,2% en la dieta de control y en la dieta de elevado contenido de grasas, y de la sucrosa dada como parte de las dietas se descontó la cantidad de cianidín 3-glucósido añadida.
(1) Medición del peso y cantidad de ingesta de la dieta
La cantidad de dieta ingerida por cada ratón por día se pesó a las 2, 4, 6, 10 y 12 semanas después del inicio de la puesta de los animales a dieta (Tabla 1).
TABLA 1
1
\vskip1.000000\baselineskip
Tal como se muestra en la Tabla 1, dado que la dieta de elevado contenido de grasas era elevada en calorías, la cantidad de ingesta de los grupos H y HA era más pequeña que la de los grupos C y A. Sin embargo, no se observó una diferencia significativa en la cantidad de ingesta entre el grupo C y el grupo A ni entre el grupo H y el grupo HA.
Después de 12 semanas, se pesaron los ratones y se calculó su BMI (Body Mass Index (Índice de Masa Corporal) = peso [kg] x longitud del cuerpo [m^{2}])), y se pesaron la grasa subcutánea y la grasa periférica de epidídimo (Tabla 2, los valores representan valor promedio \pm error standard). También se fotografió el tejido adiposo de epidídimo (Figuras 1 a 4).
TABLA 2
2
\vskip1.000000\baselineskip
Como se muestra en la Tabla 2, el grupo H mostró un significativo incremento en peso, BMI y cantidad de tejido adiposo en comparación con el grupo C, pero el grupo HA, al cual se dio el extracto de maíz morado del Ejemplo 1, mostró una significativa supresión en peso, BMI y cantidad de tejido adiposo. No se reconoció una diferencia significativa entre el grupo C, el grupo A y el grupo HA.
Como se muestra en las Figuras 1 a 4, el tamaño de las células adiposas de epidídimo aumentó en el grupo H. Sin embargo, en el grupo HA al cual se suministró el extracto de maíz morado del Ejemplo 1, el tamaño de las células adiposas permaneció casi igual que en el grupo C, si bien el grupo HA ingirió la dieta de elevado contenido de grasas.
(2) Medición del nivel de glucosa en la sangre, de la concentración de insulina en el suero y de la concentración de leptina en el suero
Se extrajo sangre de ratones criados durante 12 semanas. Se midieron la concentración de glucosa, la concentración de insulina y la concentración de leptina en el suero, mediante el Kit de Ensayo de Glucosa B (fabricado por Wako Junyaku Kogyo), el Kit de Insulina Lbis ® (para ratones-T, fabricado por Shibayagi Company) y el Kit de Leptina para Ratones (fabricado por Morinaga Company), respectivamente (Tabla 3).
TABLA 3
3
La concentración de glucosa en el suero, de insulina en el suero, y de leptina en el suero (la leptina es una hormona que tienen una acción contra la obesidad), aumentaron significativamente en el grupo H en comparación con el grupo C. Se consideró que el grupo H tenía hiperinsulinemia e hiperleptinemia debido a la ingesta de dieta de elevado contenido de grasas.
Estos valores se decrementaron notablemente mediante la puesta a dieta con el extracto de maíz morado del Ejemplo 1 (grupo HA). Es decir, la ingesta del extracto de maíz morado suprimió la hiperglicemia y evitó la hiperinsulinemia y la hiperleptinemia. No se reconocieron diferencias significativas en estas concentraciones entre el grupo C, el grupo A y el grupo HA.
(2) Medición de ARNms de sintetasas de ácidos grasos y de leptina
El incremento de células adiposas implica el aumento de sintetasas de ácidos grasos y de leptina a un nivel molecular. Por ello, la cantidad de ARNms de sintetasas de ácidos grasos hepáticas se midió mediante RT-PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, Reacción en Cadena de Polimerasa con Transcripción Inversa).
Se extrajeron los hígados de ratones criados durante 12 semanas, y se los congeló de inmediato en nitrógeno líquido. Subsiguientemente se extrajeron los ARNs totales de los hígados mediante la utilización de reactivos para la extracción de ADN y de ARN e Isogen (producido por Nippon Gene) conforme al método convencional, y se los sometió a RT-PCR para obtener los resultados mostrados en la Tabla 4.
TABLA 4
4
La cantidad de ARNms expresados de las sintetasas de ácidos grasos fue significativamente más pequeña en el grupo A que en el grupo C, y fue significativamente más pequeña en el grupo HA que en el grupo H. Se confirmó que la síntesis de ácidos grasos a nivel molecular fue afectada por el extracto de maíz morado del Ejemplo 1. La cantidad de ARNms de leptina expresados fue significativamente más grande en el grupo H que en los grupos C, A y HA. Se confirmó la correlación entre la cantidad de ARNms expresados de leptina y la concentración de leptina en el suero.
Por lo tanto, se demostró que el extracto de maíz morado que contiene cianidín 3-glucósido no suprimió el incremento de peso, de grasa y el nivel de la glucosa en la sangre con respecto a la dieta ordinaria, sino que lo suprime de manera significativa con respecto a la dieta de elevado contenido de grasas.
Ejemplo 3
Se administró el extracto obtenido en el Ejemplo 1 a ratones NOD que eran un modelo de diabetes humana de tipo I (comprados a Clea Japan Inc.), y se observó la incidencia de diabetes.
Ratones NOD hembra de seis semanas de edad fueron distribuidos en dos grupos, a razón de 16 ratones por grupo, que recibieron una dieta de control (pellas CA-1 producidas por Clea Japan Inc., grupo NC) y una dieta de control más el extracto obtenido en el Ejemplo 1 (grupo NA), durante 24 semanas. Las dietas fueron ingeridas libremente. Se observó la incidencia de diabetes mediante láminas de varillas de inmersión para azúcar urinario (Tabla 5). En el grupo NA, se adicionó el extracto del Ejemplo 1 de modo tal que el contenido de cianidín 3-glucósido en la dieta de control era de 0,2%, y se restó la sucrosa de la dieta de control, en la cantidad adicionada de cianidín 3-glucósido.
5
En el grupo NA que recibió la dieta que contenía el extracto de maíz morado del Ejemplo 1, la incidencia de diabetes es significativamente menor en comparación con el grupo NC.
Se demostró que el extracto de maíz morado que contenía cianidín 3-glucósido suprimió no solamente la incidencia de diabetes cuando se administró la dieta de elevado contenido de grasas sino también la incidencia de diabetes de
tipo I.
Ejemplo 4
Utilizando el extracto de maíz morado obtenido en el Ejemplo 1, se mezclaron materiales conforme a la siguiente fórmula. La mezcla resultante fue filtrada, se la colocó en una botella de 250 mL y se la esterilizó a 60ºC durante 20 minutos para preparar una bebida gasificada que contenía 20% de zumo de uva. La bebida, de 250 mL, contenía aproximadamente 50 mg de cianidín 3-glucósido.
Unidad (kg)
Sucralosa 0,0136
X5 zumo de uva concentrado transparente 4,0000
Ácido cítrico (cristalino) 0,2500
Extracto de maíz morado 0,1000
Sabor de uva 0,1000
Sabor de fruta 0,1000
agua \hskip-0.8cm cantidad adecuada
\hskip2cm Total 45,0000 kg
\vskip1.000000\baselineskip
El jarabe arriba mencionado se mezcló con 55,0 kg de agua gasificada para completar la cantidad total de
100,0 kg.
Ejemplo 5
Utilizándose el extracto de maíz morado obtenido en el Ejemplo 1, se mezclaron materiales conforme a la fórmula siguiente, y se prepararon en forma de tabletas mediante una máquina tableteadora. Las tabletas, de 10 g, contenían aproximadamente 50 mg de cianidín 3-glucósido.
Unidad (kg)
Glucosa en forma de polvo fino 87,8
Almidón de maíz al 10% peso/peso 7,0
Ácido cítrico (cristalino) 1,5
Sabor de uva 1,0
Extracto de maíz morado 2,7
\hskip2cm Total 100,0 kg
\vskip1.000000\baselineskip
Conforme a la presente invención, el compuesto cianidina contenido de manera natural en muchas especies de plantas puede utilizarse como agente contra la obesidad y/o antidiabético para suprimir el incremento de células adiposas y para reducir el nivel de glucosa en la sangre, de manera segura y efectiva.

Claims (5)

1. Uso de cianidín 3-glucósido como un ingrediente activo para la preparación de un agente contra la obesidad y/o contra la diabetes.
2. Uso conforme a la reivindicación 1, en el que se utiliza cianidín 3-glucósido como un extracto soluble en agua, de una planta.
3. Uso conforme a la reivindicación 2, en el que la planta es maíz morado.
4. Uso conforme a las reivindicaciones 1- 3, en el que el agente suprime el incremento de células adiposas y/o reduce el nivel de glucosa en la sangre.
5. Uso conforme a las reivindicaciones 1- 4, en el que se añade el agente a alimento.
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