ES2278609T3 - Esteres tensioactivos de la proteina c. - Google Patents
Esteres tensioactivos de la proteina c. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2278609T3 ES2278609T3 ES00935162T ES00935162T ES2278609T3 ES 2278609 T3 ES2278609 T3 ES 2278609T3 ES 00935162 T ES00935162 T ES 00935162T ES 00935162 T ES00935162 T ES 00935162T ES 2278609 T3 ES2278609 T3 ES 2278609T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- baselineskip
- surfactant
- surfactant protein
- weight
- phe
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 33
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 33
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 47
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 101000612671 Homo sapiens Pulmonary surfactant-associated protein C Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102100040971 Pulmonary surfactant-associated protein C Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108010007125 Pulmonary Surfactant-Associated Protein C Proteins 0.000 claims description 45
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 40
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 24
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 11
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 8
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 5
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 5
- 108010007131 Pulmonary Surfactant-Associated Protein B Proteins 0.000 claims description 5
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 5
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 claims description 5
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000005085 Meconium Aspiration Syndrome Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 108010007100 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027773 Pulmonary surfactant-associated protein A2 Human genes 0.000 claims description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010059033 Neonatal aspiration Diseases 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract description 4
- 102000007620 Pulmonary Surfactant-Associated Protein C Human genes 0.000 description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 description 30
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 23
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 15
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 9
- 206010069351 acute lung injury Diseases 0.000 description 9
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 9
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 8
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 8
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 6
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 5
- -1 isopropyl ester Chemical class 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 102100032617 Pulmonary surfactant-associated protein B Human genes 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 3
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol Chemical compound CCC(C)O BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 229940066294 lung surfactant Drugs 0.000 description 3
- GUKVIRCHWVCSIZ-ROKJYLDNSA-N lusupultide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)C1=CN=CN1 GUKVIRCHWVCSIZ-ROKJYLDNSA-N 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101710117545 C protein Proteins 0.000 description 2
- BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N Gly-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 102000000528 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010041520 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L calcium chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Cl-].[Ca+2] LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940052299 calcium chloride dihydrate Drugs 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000015227 regulation of liquid surface tension Effects 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 208000017612 Acute Hemorrhagic Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMHBJCVEXUBGFI-BIIVOSGPSA-N Cys-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CS)N)C(=O)O BMHBJCVEXUBGFI-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- 206010013647 Drowning Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 125000003877 L-cysteinyl radical group Chemical group 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N Leu-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 208000006670 Multiple fractures Diseases 0.000 description 1
- WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N N-L-arginyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCN=C(N)N WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033650 Pancreatitis haemorrhagic Diseases 0.000 description 1
- 206010036595 Premature delivery Diseases 0.000 description 1
- WFLWKEUBTSOFMP-FXQIFTODSA-N Pro-Cys-Cys Chemical compound OC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 WFLWKEUBTSOFMP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DGDCSVGVWWAJRS-AVGNSLFASA-N Pro-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 DGDCSVGVWWAJRS-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 102000017975 Protein C Human genes 0.000 description 1
- 108010007127 Pulmonary Surfactant-Associated Protein D Proteins 0.000 description 1
- 206010037370 Pulmonary contusion Diseases 0.000 description 1
- 102100027845 Pulmonary surfactant-associated protein D Human genes 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVRLNEILGGVBJX-IHRRRGAJSA-N Val-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)CC1=CN=CN1 KVRLNEILGGVBJX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002713 calcium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000002612 cardiopulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 102000047087 human SFTPC Human genes 0.000 description 1
- 208000018875 hypoxemia Diseases 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000001006 meconium Anatomy 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 230000026792 palmitoylation Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 210000004043 pneumocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000007519 polyprotic acids Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 210000003456 pulmonary alveoli Anatomy 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000025160 regulation of secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/785—Alveolar surfactant peptides; Pulmonary surfactant peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Emulsifying, Dispersing, Foam-Producing Or Wetting Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
Abstract
Una proteína C tensioactiva en la cual el aminoácido en el término carboxi de la proteína tensioactiva está esterificado con un alcohol que tiene 1-4 átomos de carbono, o sales farmacológicamente aceptables de la misma.
Description
Ésteres tensioactivos de la proteína C.
La invención se refiere a polipéptidos activos
como agentes tensioactivos pulmonares (proteínas tensioactivas), a
procesos para su preparación y a composiciones farmacéuticas que los
contienen.
Los pulmones de todos los vertebrados contienen
una mezcla de sustancias denominada "agente tensioactivo
pulmonar". El mismo tiene propiedades tensioactivas y reduce la
tensión superficial en la región alveolar de los pulmones en tal
grado que se evita el colapso de las regiones finales del tracto
respiratorio durante la espiración. Esta mezcla de sustancias
regula dinámicamente la tensión superficial, de tal modo que el
colapso de los pequeños alvéolos, que puede esperarse de acuerdo
con la ley de Laplace, se evita a favor de los mayores, por ajuste
apropiado de la tensión superficial. Esto proporciona como resultado
una estructura bien equilibrada, histológica y fisiológicamente
estable del pulmón.
El agente tensioactivo pulmonar es secretado por
los neumocitos alveolares de tipo II en forma de cuerpos laminares.
Éstos son unidades compactas de bicapas fosfolipídicas que tienen
una proporción elevada de dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) y
fosfatidilglicerol. Como componentes esenciales adicionales, el
agente tensioactivo pulmonar contiene proteínas designadas
SP-A, SP-B, SP-C y
SP-D (Possmayer, F.: A Proposed Nomenclature for
Pulmonary Surfactant-Associated Proteins. Am. Rev.
Respir. Dis. 1988, 138, 990-998). SPA es una
glicoproteína de peso molecular elevado que juega un papel decisivo
en la regulación de la secreción.
Durante la formación de la película
monomolecular superficial (el agente tensioactivo en sentido
estricto), las proteínas SP-C y, en menor grado,
SP-B, juegan el papel de "catalizadores
termodinámicos": La presencia de estas proteínas acelera
enormemente la cinética de la propagación. Sólo debido a esto, el
ajuste del agente tensioactivo a los requisitos de tensión
superficial prevalecientes es posible sin retardo. Estas propiedades
se reflejan en el carácter extremadamente hidrófobo de las
proteínas, en particular de SP-C.
Por extracción de tejido pulmonar o lavado de
pulmones animales, ha sido posible obtener preparaciones del agente
tensioactivo que son capaces de compensar un déficit de agente
tensioactivo tanto en aparatos de medida
físico-químicos como en modelos animales y asimismo
en uso clínico, y son por tanto adecuadas, por ejemplo, para la
terapia del síndrome de dificultad respiratoria infantil (IRDS). Sin
embargo, estas preparaciones animales presentan serios
inconvenientes:
La composición fosfolipídica depende fuertemente
de la especie animal y del estado de salud y nutrición del animal,
y la compensación por mezcla de componentes definidos es únicamente
posible en grado limitado. El contenido de proteína tensioactiva y
la relación SP-B/SP-C se ven
sometidos a las mismas variaciones. Adicionalmente, los productos
de degradación proteolítica de las proteínas o derivados modificados
(por ejemplo por oxidación en la metionina) pueden estar presentes
también en la mezcla que se utiliza terapéuticamente. En casos de
utilización a largo plazo o de la administración de grandes
cantidades de agente tensioactivo, que podrían ser requeridas, por
ejemplo, en casos del síndrome de dificultad respiratoria de los
adultos (pulmón de choque, ARDS) o en otras áreas de utilización,
por ejemplo el uso de agente tensioactivo para "arrastrar"
otras sustancias en administración pulmonar, sigue sin resolver la
cuestión del suministro de la sustancia.
Por consiguiente, sería apropiado resolver estos
problemas por preparación de las proteínas por ingeniería genética.
Dado que las proteínas recombinantes, en particular cuando se
utilizan sistemas de expresión bacterianos, pueden prepararse
virtualmente en cantidades ilimitadas, y que es posible el uso de
métodos modernos de análisis y controles de calidad, puede
prepararse un agente tensioactivo que tenga una composición
exactamente definida utilizando fosfolípidos sintéticos. Este
agente tensioactivo puede adaptarse óptimamente a los requerimientos
terapéuticos.
La parte central de la proteína humana
SP-C, (SEQ ID NO:1, véase la fórmula I más adelante,
donde A = ausente o Phe, B = Cys y C = Met), que es particularmente
importante para la cinética de la propagación, está constituida
exclusivamente por aminoácidos alifáticos, altamente hidrófobos,
tales como valina, leucina e isoleucina. La longitud de esta parte
central (aminoácidos 12-34 en la fórmula I) permite
la integración del péptido en la película monomolecular del
fosfolípido. Los dos radicales Cys en la secuencia SEQ ID NO:2
Pro-Cys-Cys-Pro
(posición 3-6 en la fórmula I) están
tioesterificados en los grupos SH por ácido palmítico. El ácido
palmítico aumenta aún más el carácter hidrófobo de la proteína
entera y al mismo tiempo bloquea los dos grupos SH de las
cisteínas, protegiendo las mismas contra la oxidación y la formación
de puentes disulfuro. La región central (aminoácidos
13-34 en la fórmula I) forma una hélice
transmembranal. El término N de esta región está flanqueado por una
secuencia polar que contiene aminoácidos cargados positivamente
(Lys, 10; Arg 11 en la fórmula I).
Los documentos WO 89/04326 y WO 91/18015
describen la preparación de SP-C recombinante y de
mutantes de SP-C. En estas publicaciones, se
propone, entre otras cosas, reemplazar las dos cisteínas en las
posiciones 4 y 5 por dos radicales serina. En la preparación, esto
tiene la ventaja de que puede prescindirse de la palmitoilación
técnicamente complicada de las dos cisteínas después del aislamiento
de la proteína altamente hidrófoba.
El documento WO 95/32992 describe mutantes de
SP-C que difieren de la SP-C humana
en que las dos cisteínas en las posiciones 4 y 5 están reemplazadas
por fenilalanina o triptófano y la metionina en la posición 32 está
reemplazada por isoleucina, leucina o serina.
El documento US 5.876.970 describe, inter
alia, el análisis por espectrometría de masas de la proteína C
del agente tensioactivo aislada de diversas fuentes naturales. Se
menciona que, durante el tratamiento de las muestras de
SP-C para la espectrometría de masas, puede haberse
formado un éster metílico o isopropílico.
El documento
EP-A-0 458 167 describe un método
para modificar químicamente una proteína o polipéptidos
tensioactivos pulmonares con diversos ácidos grasos.
Es un objeto de la presente invención
proporcionar proteínas tensioactivas adicionales adecuadas para la
producción de preparaciones farmacéuticas de agente tensioactivo
pulmonar. Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que
polipéptidos SP-C que están esterificados en el
término carboxi con alcoholes que tienen 1-4 átomos
de carbono tienen, en primer lugar, propiedades ventajosas con
respecto a su actividad tensioactiva pulmonar y, en segundo lugar,
propiedades ventajosas con respecto a su estabilidad. En particular,
los ésteres de SP-C de acuerdo con la invención
tienen una tendencia baja a agregarse y, de acuerdo con ello, una
estabilidad mejorada en solución.
Un aspecto de la invención se refiere por tanto
a polipéptidos SP-C en los cuales el aminoácido en
el término carboxi del polipéptido está esterificado con un alcohol
que tiene 1-+4 átomos de carbono, y sales de los mismos.
En el contexto de la invención, el término
"SP-C" debe entenderse, por analogía a la
nomenclatura propuesta por Possmayer (Possmayer, F.: A Proposed
Nomenclature for Pulmonary Surfactant-Associated
Proteins. Am. Rev. Respir. Dis. 1988, 138,
990-998), como la "familia" de proteínas
tensioactivas que está presente en el agente tensioactivo pulmonar
natural o en el fluido amniótico de los mamíferos y designada
SP-C. SP-C debe entenderse
preferiblemente con el significado de la proteína tensioactiva
SP-C que está presente en el agente tensioactivo
pulmonar humano o en el fluido amniótico humano.
Adicionalmente, el término
"SP-C" incluye también SP-C y
modificaciones de SP-C sintetizado(as)
químicamente o preparado(as) por métodos recombinantes, por
ejemplo aquellas modificaciones en las cuales están ausentes uno o
más aminoácidos o han sido reemplazados por otros aminoácidos.
SP-C y modificaciones de SP-C
sintetizado(as) químicamente o preparado(as) por
medios recombinantes se describen, por ejemplo, en los documentos WO
89/04326, WO 91/00871, WO 91/18015, WO 93/21225 y también en WO
95/32992.
En una realización preferida de la invención,
SP-C debe entenderse con el significado de una
proteína tensioactiva conocida por el documento WO 95/32992 con la
secuencia de aminoácidos SEQ ID NO:3 de la fórmula I
en la cual A está ausente o es Phe,
B es Phe o Trp y C es Ile, Leu o
Ser.
Se da preferencia a aquellas proteínas
tensioactivas de la fórmula I en las cuales A está ausente o es Phe,
B es Phe y C es Ile. Se da una preferencia particular a una
proteína tensioactiva de la fórmula I en la cual A está ausente, B
es Phe y C es Ile [a la que se hace referencia también en lo
sucesivo como SP-C (FF/I) o rSP-C
(FF/I)].
Las secuencias de aminoácidos se muestran en la
notación abreviada habitual (código de tres letras) de acuerdo con
la nomenclatura, con el aminoácido que lleva el grupo amino libre en
el extremo izquierdo (término amino; aminoácido del número 0 ó 1 en
la fórmula I) y el aminoácido que lleva el grupo carboxilo libre en
el extremo derecho (término carboxi; aminoácido del número 34 en la
fórmula I).
En una mezcla con fosfolípidos, los ésteres de
SP-C de acuerdo con la invención tienen actividad de
agente tensioactivo pulmonar. La actividad de agente tensioactivo
pulmonar puede determinarse de una manera conocida por las personas
expertas en la técnica. El agente tensioactivo pulmonar natural
tiene propiedades tensioactivas; el mismo reduce, por ejemplo, la
tensión superficial en los alvéolos pulmonares. Un ensayo simple y
rápido in vitro para la determinación de la actividad
superficial de las preparaciones de agente tensioactivo pulmonar
es, por ejemplo, el denominado equilibrio de Wilhelmy
[Go-erke, J. Biochim. Biophys. Acta, 344:
241-261 (1974), King R.J. y Clements J.A., Am. J.
Physiol. 223: 715-726 (1972)]. Este método
proporciona una indicación de la calidad del agente tensioactivo
pulmonar, medida como la capacidad de un agente tensioactivo
pulmonar para alcanzar una tensión superficial de aproximadamente
cero mN/m. Otro dispositivo de medida para determinar la actividad
superficial del agente tensioactivo pulmonar es el "surfactómetro
de burbuja pulsante" [Possmayer F., Yu S. y Weber M., Prog.
Resp. Res., Ed. v. Wichert, vol. 18: 112-120
(1984)]. La actividad de una composición de agente tensioactivo
pulmonar puede determinarse también por medio de ensayos in
vivo. Por medida de, por ejemplo, la elasticidad pulmonar, el
intercambio de gases de la sangre o las presiones respiratorias
necesarias en modelos animales de ARDS e IRDS, es posible obtener
una indicación de la actividad de un agente tensioactivo pulmonar.
Un modelo de este tipo se describe, por ejemplo, por Häfner et
al. (D. Häfner et al.: Effects of rSP-C
surfactant on oxygenation and histology in a rat lung lavage model
of acute lung injury. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998, 158:
270-278).
En el contexto de la invención, un alcohol que
tiene 1-4 átomos de carbono debe entenderse con el
significado, en particular de un alcohol alifático que tiene
1-4 átomos de carbono. Metanol, etanol,
1-propanol, 2-propanol
(isopropanol), 1-butanol y 2-butanol
pueden ser mencionados aquí, siendo preferidos metanol y 2
propanol.
Sales adecuadas para los ésteres de
SP-C de acuerdo con la invención son, en particular,
sales de adición de ácido con ácidos. Puede hacerse mención
particular de las sales farmacológicamente aceptables de los ácidos
fuertes utilizados habitualmente en farmacia. Son adecuadas,
ventajosamente, sales de adición de ácido con ácidos tales como,
por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico y ácido sulfúrico,
donde, en la preparación de la sal, los ácidos se emplean en una
relación equimolar o una relación que difiere de ésta - dependiendo
de si se trata de un ácido mono- o polibásico y de la sal que se
desee.
El éster de SP-C puede
prepararse a partir de la proteína C tensioactiva correspondiente
que tiene el grupo carboxilo libre en el término carboxi, por
reacción con el alcohol apropiado en condiciones de esterificación
adecuadas. La invención, de acuerdo con ello, proporciona también un
proceso para preparar los ésteres de SP-C de
acuerdo con la invención por reacción de la proteína tensioactiva C
correspondiente que tiene el grupo carboxilo libre en el término
carboxi con un alcohol deseado en condiciones adecuadas de
esterificación. Se da preferencia a emplear un gran exceso de
alcohol como disolvente y a realizar la esterificación con la ayuda
de un ácido. Con respecto al carácter hidrófobo de las proteínas
tensioactivas, es ventajoso emplear el alcohol en una mezcla con
otros disolventes orgánicos. Estos otros disolventes orgánicos son
preferiblemente hidrocarburos halogenados, tales como, por ejemplo,
cloroformo y diclorometano. Ácidos adecuados son, en particular,
ácidos fuertes tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido
sulfúrico o ácido bromhídrico. Para evitar la formación de
productos de descomposición, la esterificación se lleva a cabo
preferiblemente a las temperaturas del ambiente o temperaturas
inferiores. Después de la esterificación, los ésteres resultantes se
aíslan de manera habitual y, en caso apropiado, se purifican, por
ejemplo por cromatografía en columna son un disolvente adecuado (por
ejemplo como se describe en los documentos WO 95/32992 o WO
92/00993). El aislamiento o la preparación de proteínas C
tensioactivas ilustrativas que pueden utilizarse como materiales de
partida para la esterificación se describe, por ejemplo, en los
documentos WO 89/04326, WO 91/00871, WO 91/18015, WO 93/21225 o
incluso en WO 95/32292. La preparación de rSP-C
(FF/I) se describe en el documento WO 95/32992. Es posible, por
ejemplo, procesar las soluciones de rSP-C (FF/I)
obtenidas en dicho lugar después de purificación cromatográfica de
la proteína (véase el documento WO 95/32992, página 10, segundo
párrafo) para dar directamente los ésteres de rSP-C
(FF/I) correspondientes.
Los ésteres de SP-C de acuerdo
con la invención pueden, solos o en combinación entre ellos,
proporcionarse en composiciones farmacéuticas que están adaptadas a
los requerimientos del tratamiento del tracto respiratorio. Puede
mencionarse la combinación de los ésteres de SP-C de
acuerdo con la invención con al menos otro polipéptido activo como
agente tensioactivo pulmonar del grupo SP-A,
SP-C no esterificado y SP-B en
composiciones farmacéuticas. En particular, puede mencionarse aquí
la combinación con SP-C no esterificado en
composiciones farmacéuticas. Se da preferencia a combinaciones que
(basado en la cantidad total de proteína tensioactiva en las
composiciones) comprenden hasta 50% en peso de SP-C
(no esterificado), siendo el resto uno o más ésteres de
SP-C de acuerdo con la invención, o combinaciones
que comprenden hasta 50% en peso de uno o más de los ésteres de
SP-C de acuerdo con la invención, siendo el resto
SP-C (no esterificado). Se da preferencia particular
a combinaciones que comprenden 5 a 15% en peso de
SP-C (no esterificado), siendo el resto uno o más de
los ésteres de SP-C de acuerdo con la invención, o
combinaciones que comprenden 0,5 a 10% en peso de uno o más de los
ésteres de SP-C de acuerdo con la invención, siendo
el resto SP-C (no esterificado), en particular
aquéllas que comprenden 2 a 5% en peso de ésteres de
SP-C, siendo el resto SP-C (no
esterificado). Se da preferencia en este contexto a la combinación
de ésteres de rSP-C (FF/I) y rSP-C
(FF/I) en forma no esterificada. Combinaciones ilustrativas
comprenden 1-6% en peso de éster metílico de
rSP-C (FF/I), siendo el resto rSP-C
(FF/I) en forma no esterificada. Tales combinaciones pueden
obtenerse, por ejemplo, directamente por la reacción de
esterificación de SP-C si la reacción de
esterificación se interrumpe antes que se alcance la conversión
completa, o por mezcla de los componentes puros de la combinación
apropiados.
Además de la proteína tensioactiva, las
composiciones comprenden fosfolípidos, preferiblemente fosfolípidos
que están contenidos en composiciones naturales de agente
tensioactivo pulmonar, tales como, preferiblemente,
dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), palmitoiloleilfosfatidilglicerol
(POPG) y/o fosfatidilglicerol (PG). Componentes posibles
adicionales de las composiciones de acuerdo con la invención son
ácidos grasos tales como, por ejemplo, ácido palmítico. Para
ajustar la viscosidad favorable, las composiciones pueden comprender
electrólitos, tales como sales de calcio, magnesio y/o sodio (por
ejemplo cloruro de calcio, cloruro de sodio, y/o bicarbonato de
sodio). Cuando se determinan el tipo y las cantidades de los
componentes individuales de las composiciones, la persona experta
en la técnica utiliza, por una parte, la composición conocida de los
agentes tensioactivos pulmonares naturales y, por otra parte, las
numerosas propuestas realizadas en la técnica anterior, tales como,
por ejemplo, los documentos EP-A 0119056 y
EP-A 0406732, para orientación.
Las preparaciones de acuerdo con la invención
comprenden convenientemente 80 a 95% en peso de fosfolípidos, 0,2 a
5% en peso de proteína tensioactiva, 2 a 15% en peso de ácidos
grasos y 0 a 5% en peso de electrólitos (basado en el peso
seco).
Los fosfolípidos son preferiblemente mezclas de
dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) y
palmitoiloleilfosfatidilglicerol (POPG), particularmente en una
relación (relación en peso) de 7 a 3 a 3 a 7.
Preparaciones preferidas de acuerdo con la
invención comprenden 80 a 95% en peso de fosfolípidos, 0,5 a 3,0%
en peso de proteína tensioactiva, 3 a 15% en peso de ácido graso,
preferiblemente ácido palmítico, y 0 a 3% en peso de cloruro de
calcio (basado en el peso seco).
Composiciones preferidas de acuerdo con la
invención comprenden 80 a 95% en peso de fosfolípidos, 0,5 a 3,0%
en peso de proteína tensioactiva, 4 a 7% en peso de ácido graso,
preferible ácido palmítico, y 1 a 3% en peso de cloruro de
calcio.
Las preparaciones de acuerdo con la invención se
producen de una manera conocida por las personas expertas en la
técnica, por ejemplo por incorporación de la proteína tensioactiva
en una matriz de fosfolípido como se describe en el documento WO
95/32992. De acuerdo con la invención, las preparaciones de agente
tensioactivo pulmonar se proporcionan preferiblemente en forma
liofilizada y en particular en forma secada por pulverización. Las
preparaciones liofilizadas son conocidas, por ejemplo, por los
documentos WO 97/35882, WO 95/32992, WO 91/100871 y DE 3229179. El
documento WO 97/26863 describe un proceso para producir
preparaciones pulverulentas de agente tensioactivo pulmonar
mediante secado por pulverización. De acuerdo con la invención, se
da preferencia a preparaciones producidas de esta manera.
En un embudo separador, se mezclan 5 fracciones
(de 1 l) de las soluciones rSPC(FF/I) puras obtenidas de
acuerdo con el documento WO 95/32992 por cromatografía HPLC, con
500 ml de cloroformo y 300 ml de ácido clorhídrico 1 N y se mezcla
concienzudamente, y la fase acuosa se retira, después de la
separación de las fases. Se diluye la fase orgánica con metanol
hasta 1 l y se lava una vez más con 300 ml de ácido clorhídrico 1 N.
Después de la separación de fases, la fase orgánica se diluye de
nuevo con metanol hasta 1 l, y se ajusta el pH de la solución a
aproximadamente pH 1 utilizando ácido clorhídrico conc. Se deja la
mezcla en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días, y se
eliminan luego aproximadamente 300 ml de mezcla disolvente por
destilación utilizando un evaporador rotativo. Después de 3 días
más a la temperatura ambiente, ya no es posible detectar
rSPC(FF/I) no esterificado por HPTLC (placas de HPTLC Diol
listas para ser utilizadas (Merck); fase móvil,
cloroformo:metanol:amoniaco (25%):H_{2}O = 13:6:0,4:0,8; tinción:
Azul Coomassie). La solución se extrae dos veces, en cada caso con
300 ml de ácido clorhídrico 0,1 N, y la fase orgánica, después de la
separación de fases, se diluye en cada caso con
2-propanol hasta aproximadamente 700 ml. El pH de la
solución se ajusta con NaHCO_{3} saturado a pH
3,5-4. Se concentra la solución un total de 4 veces
a 20-25ºC hasta 250 ml utilizando un evaporador
rotativo y, en cada caso, se lleva hasta 500 ml utilizando
2-propanol. La filtración da por último una solución
de aproximadamente 200 mg de éster metílico de rSPC(FF/I) en
2-propanol que se guarda a -20ºC. El espectro de
masas (MALDI-TOF) muestra el pico molecular MH^{+}
a 3634 Da.
En un embudo separador, se mezclan 6 fracciones
(1,2 l) de las soluciones rSPC(FF/I) puras obtenidas de
acuerdo con el documento WO 95/32992 por cromatografía HPLC con 600
ml de cloroformo y 400 ml de ácido clorhídrico 1 N y se mezcla
concienzudamente, y la fase acuosa se retira después de la
separación de fases. La fase orgánica se diluye con
2-propanol hasta 1,2 l, y el pH se ajusta luego a
0,5-1 utilizando ácido clorhídrico conc. La mezcla
se deja en reposo a la temperatura ambiente durante 1 día, y se
eliminan luego por destilación aproximadamente 300 ml de la mezcla
disolvente a 20-25ºC utilizando un evaporador
rotativa, y se reemplazan por 300 ml de 2-propanol.
Este procedimiento se repite después de 3, 6, 9 y 12 días de reposo
a la temperatura ambiente. Por HPTLC (véase el Ejemplo 1), es luego
virtualmente imposible detectar cualquier cantidad de
rSPC(FF/I) no esterificado. El pH de la solución se ajusta a
3,5-4 utilizando solución saturada de NaHCO_{3},
y la solución se concentra luego a 500 ml utilizando un evaporador
rotativo. La filtración da una solución de aproximadamente 250 mg
de éster 2-propílico de rSPC(FF/I) en
2-propanol que se guarda a -20ºC. El espectro de
masas (MALDI-TOF) muestra el pico molecular
MH^{+} a 3662 Da.
Se mezcla éster metílico o
2-propílico de rSP-C(FF/I) en
una solución de isopropanol con los componentes de la matriz de
fosfolípido y, por pulverización en una solución diluida de cloruro
de sodio (0,065% p/p de NaCl) a la temperatura ambiente se
precipita como una mezcla homogénea con los componentes de la matriz
de fosfolípido. A partir de la suspensión de agente tensioactivo
pulmonar, se separa el agente tensioactivo pulmonar (LSF)
utilizando una centrífuga de cubetas y se resuspende en solución
electrolítica (NaCl, CaCl_{2}), después de lo cual se ajusta el
pH a pH 6,5 utilizando NaOH 0,1 N. Esta suspensión acuosa se
introduce en viales de 20 ml y se liofiliza. Los pesos y volúmenes
indicados en el ejemplo de preparación siguiente están basados en
la preparación de 10 g de preparación de agente tensioactivo
pulmonar:
Se disuelven a 40ºC 7,00 g de
dipalmitolilfosfatidilcolina (OPCC), 3,08 g de sal amónica de
palmitoiloleilfosfatidil-glicerol (POPG x NH_{4})
y 0,25 g de ácido palmítico en 200 ml de isopropanol al 90%, y la
mezcla se enfría luego a la temperatura ambiente. La solución de
fosfolípido resultante se combina con 1 l de una solución que
comprende 200 mg de éster metílico o 2-propílico de
SP-C(FF/I). La "solución de
pulverización" resultante se ajusta a pH 4,5 por agitación con
solución de bicarbonato (aproximadamente 5 ml de solución de
NaHCO_{3} al 5%).
A la temperatura ambiente, se introduce la
"solución de pulverización" con agitación enérgica por medio de
una tobera de una sola sustancia a una velocidad de pulverización
de 25 ml/min en 9,6 l de solución diluida de NaCl (0,065% p/p). Se
forma una solución opalescente a partir de la cual, después de 2
horas de almacenamiento a 4ºC - 8ºC, se precipita la preparación
del agente tensioactivo pulmonar por pulverización en una solución
electrolítica
(3,0 g CaCl_{2} x 2H_{2}O y 61,3 g de NaCl en 300 ml de H_{2}O). La suspensión de agente tensioactivo pulmonar (volumen total 10,8-11,0 l) se guarda a 4ºC durante una noche y se centrifuga luego durante30 minutos en cada caso, utilizando una centrífuga de cubetas Sorvall (RC2-B) a 16.000 g. En cada caso, la torta de centrifugación se resuspende, a fin de eliminar el isopropanol adherente residual, en la mitad de su volumen de solución de cloruro de sodio de concentración 0,65% y se centrifuga de nuevo. Este procedimiento se repite un total de 3-4 veces. La torta de la última centrifugación se recoge en 400 ml de una solución de NaCl de concentración 0,65%, se ajusta a pH 6,5 utilizando NaOH 0,1 N y se divide, en porciones de 6,2 g, en viales de 20 ml. El contenido de los viales se liofiliza como sigue: congelación a -45ºC y a la presión atmosférica durante 6 horas, liofilización a 0,16 mbar y -20ºC durante 54 horas y posteriormente, para secado intensivo adicional, otras 5 horas a -20ºC y 0,02 mbar.
(3,0 g CaCl_{2} x 2H_{2}O y 61,3 g de NaCl en 300 ml de H_{2}O). La suspensión de agente tensioactivo pulmonar (volumen total 10,8-11,0 l) se guarda a 4ºC durante una noche y se centrifuga luego durante30 minutos en cada caso, utilizando una centrífuga de cubetas Sorvall (RC2-B) a 16.000 g. En cada caso, la torta de centrifugación se resuspende, a fin de eliminar el isopropanol adherente residual, en la mitad de su volumen de solución de cloruro de sodio de concentración 0,65% y se centrifuga de nuevo. Este procedimiento se repite un total de 3-4 veces. La torta de la última centrifugación se recoge en 400 ml de una solución de NaCl de concentración 0,65%, se ajusta a pH 6,5 utilizando NaOH 0,1 N y se divide, en porciones de 6,2 g, en viales de 20 ml. El contenido de los viales se liofiliza como sigue: congelación a -45ºC y a la presión atmosférica durante 6 horas, liofilización a 0,16 mbar y -20ºC durante 54 horas y posteriormente, para secado intensivo adicional, otras 5 horas a -20ºC y 0,02 mbar.
Esto proporciona 65-66 viales,
cada uno de los cuales contiene 0,150 g de agente tensioactivo
pulmonar (calculado sin NaCl).
Las muestras de agente tensioactivo pulmonar
seco se guardan en un frigorífico a 4ºC y deben resuspenderse con
agua o solución salina fisiológica antes de su utilización
(concentración de la suspensión, 25 mg/ml).
Cada vial contiene:
- 95,6 mg
- de dipalmitoilfosfatidilcolina
- 42,1 mg
- de palmitoiloleilfosfatidilglicerol (sal de amonio)
- 2,7 mg
- de éster metílico o 2-propílico de rSP-C(FF/I)
- 6,8 mg
- de ácido palmítico
- 2,9 mg
- de cloruro de calcio (anhidro)
\vskip1.000000\baselineskip
Se producen preparaciones pulverulentas de
agente tensioactivo pulmonar por el proceso descrito en el documento
WO 97/26863.
Ejemplo
A
A 50ºC, se disuelven 10,95 g de
1,2-dipalmitoil-3-sn-fosfatidilcolina,
4,6 g de
1-palmitoil-2-oleoil-3-sn-fosfatidilglicerol-amonio,
418 mg de cloruro de calcio dihidratado y 750 mg de ácido palmítico
en 330 ml de 2-propanol/agua (85:15) y, después de
enfriar a 30ºC, se mezclan con 620 ml de una solución de éster
2-propilíco de rSP-C(FF/I) en
isopropanol/agua (95:5, c = 484 mg/l). La solución resultante se
seca por pulverización en un secador de pulverización de laboratorio
Büchi B191. Condiciones de pulverización: gas para secado:
nitrógeno, temperatura de entrada: 100ºC, temperatura de salida:
58-60ºC. Esto proporciona un polvo incoloro.
\newpage
Ejemplo
B
A 50ºC, se disuelven 3,74 g (5,1 mmol) de
1,2-dipalmitoil-3-sn-fosfatidilcolina,
2,81 g (3,7 mmol) de
1-palmitoil-2-oleoil-3-sn-fosfatidilcolina,
2,90 g (3,9 mmol) de
1,2-dipalmitoilfosfatidil-3-sn-fosfatidil-glicerol-sodio,
234 mg de ácido palmítico y 279 mg (1,9 mmol) de cloruro de calcio
dihidratado en 160 ml de 2-propanol/agua (85:15) y,
después de enfriar a 30ºC, se mezcla a 30ºC con 566 ml de una
solución de éster metílico de rSP-C(FF/I) en
isopropanol/agua (92:8, c = 330 mg/l). La solución resultante se
seca por pulverización en un secador de pulverización de laboratorio
Büchi B 191. Condiciones de pulverización: gas para secado:
nitrógeno, temperatura de entrada: 90ºC, temperatura de salida:
58-60ºC. Esto proporciona un polvo incoloro.
El síndrome de dificultad respiratoria de los
adultos (ARDS) es una expresión descriptiva que se aplica a un gran
número de lesiones pulmonares agudas, difusamente infiltrantes de
etiología diferente si las mismas están asociadas con un trastorno
severo del intercambio de gases (en particular hipoxemia arterial).
La expresión ARDS se utiliza debido a las numerosas características
clínicas y patológicas comunes con el síndrome de dificultad
respiratoria infantil (IRDS). Si, en el caso del IRDS, es
predominante, la deficiencia de agente tensioactivo pulmonar
causada por un parto prematuro, en el caso del ARDS una disfunción
del agente tensioactivo pulmonar está causada por un trastorno
pulmonar basado en etiologías diferentes. Las causas del
desencadenamiento de una ALI (lesión pulmonar aguda) con inclusión
de ARDS pueden ser, por ejemplo (citado de acuerdo con Harrison's
Principles of Internal Medicine, 10ª edición, 1983
McGraw-Hill Int. Book Comp.) infecciones pulmonares
difusas (debidas por ejemplo a virus, bacterias, hongos),
aspiración de, por ejemplo, jugo gástrico o, en el caso de
cuasi-ahogamiento, inhalación de toxinas o irritantes (por
ejemplo cloro gaseoso, óxidos de nitrógeno, humo), traumatismos
directos o indirectos (por ejemplo fracturas múltiples o contusión
pulmonar), reacciones sistémicas a inflamaciones exteriores al
pulmón (por ejemplo pancreatitis hemorrágica, septicemia
gram-negativa), transfusiones de volúmenes de
sangre elevados o, alternativamente, después de derivación
cardiopulmonar.
Las composiciones de acuerdo con la invención
son adecuadas no sólo para el tratamiento o la profilaxis del IRDS
en los bebés nacidos prematuramente o en el tratamiento o la
profilaxis de ALI con inclusión de ARDS en los adultos, sino
también para el tratamiento o la profilaxis de neumonía, bronquitis,
síndrome de aspiración del meconio, COPD (enfermedad pulmonar
obstructiva crónica), asma y fibrosis quística. Además, las
proteínas tensioactivas de acuerdo con la invención y las
composiciones de acuerdo con la invención son adecuadas para uso
como vehículos para la administración de otros fármacos.
La administración de las composiciones de
acuerdo con la invención se lleva a cabo de una manera conocida por
las personas expertas en la técnica, preferiblemente por instilación
intratraqueal (infusión o bolus) o en la forma de una atomización.
Para la administración, las composiciones de acuerdo con la
invención se disuelven o suspenden preferiblemente en un disolvente
o medio de resuspensión adecuado, en particular cuando las
composiciones están presentes en forma liofilizada o secada por
pulverización. El medio de resuspensión adecuado es preferiblemente
solución salina fisiológica. Se ha encontrado que es ventajoso
administrar suspensiones o soluciones de las composiciones de
acuerdo con la invención que contienen desde 12,5 a 100 mg de
fosfolípidos por ml de suspensión. Para la aplicación, las
composiciones de acuerdo con la invención se administran
preferiblemente en tal cantidad que la cantidad de fosfolípidos
está comprendida entre 12,5 y 200 mg por kilogramo de peso
corporal. La administración se realiza generalmente una sola vez a
tres veces al día a lo largo de un periodo de 1 a 7 días. Si se
desea, puede realizarse un lavado broncoalveolar, preferiblemente
con composición diluida de agente tensioactivo pulmonar, antes de
la administración de las composiciones de acuerdo con la invención.
Un procedimiento de este tipo se describe, por ejemplo, en Gommers
et al. [Bronchoalveolar lavage with a diluted surfactant
suspension prior to surfactant instillation improves the
efecctiveness of a surfactant therapy in experimental acute
respiratory distress syndrome (ARDS), Intensive Care Med. 1998, 24:
494-500] y en el documento WO 98/49191.
De acuerdo con ello, la invención proporciona
también un método para el tratamiento o la profilaxis de neumonía,
bronquitis, síndrome de aspiración del meconio, COPD, asma, fibrosis
quística, IRDS y/o ALI (con inclusión de ARDS) en los mamíferos, en
particular humanos, por administración de una cantidad adecuada de
una composición de agente tensioactivo pulmonar de acuerdo con la
invención.
La invención proporciona adicionalmente el uso
de las proteínas tensioactivas de acuerdo con la invención para
preparar composiciones farmacéuticas (medicamentos) para el
tratamiento o la profilaxis de neumonía, bronquitis, síndrome de
aspiración del meconio, COPD, asma, fibrosis quística, IRDS y/o ALI
(con inclusión de ARDS) en mamíferos, en particular humanos.
La invención proporciona adicionalmente un
producto comercial, constituido por un paquete secundario habitual,
un paquete primario que contiene la composición farmacéutica (por
ejemplo una ampolla) y, en caso deseado, un prospecto acompañante,
siendo adecuada la preparación farmacéutica para el tratamiento o la
profilaxis de neumonía, bronquitis, síndrome de aspiración del
meconio, COPD, asma, fibrosis quística, IRDS y/o ALI (con inclusión
de ARDS), viniendo indicada la idoneidad de la composición
farmacéutica para la profilaxis o el tratamiento de los trastornos
mencionados en el paquete secundario o el prospecto acompañante del
producto comercial, y comprendiendo la composición farmacéutica al
menos un éster de SP-C de acuerdo con la invención,
junto con adyuvantes farmacéuticos adecuados. El paquete secundario,
el paquete primario que contiene la composición farmacéutica y el
prospecto acompañante corresponden por lo demás a lo que una persona
experta en la técnica podría considerar como estándar para
composiciones farmacéuticas de este tipo.
Una composición de acuerdo con la invención que
contenía éster metílico de rSP-C(FF/I) (a la
que se hace referencia en lo sucesivo como lote LLÜ139) y una
composición de acuerdo con la invención que contenía una combinación
de éster metílico de rSP-C(FF/I) y
rSP-C(FF/I) (no esterificado) en una relación
en peso (basada en la cantidad total de proteína tensioactiva en la
composición) de 5 a 95 (a la que se hace referencia en lo sucesivo
como lote ERa8) se ensayaron en un modelo descrito por Häfner et
al. [D. Häfner, P.-G. Germann y D. Hauschke: Effects of
rSP-C surfactant on oxygenation and histology in a
rat-lug-lavage model of acute lung
injury. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 158, 270-278
(1998)]. En el modelo RLL se utilizaron los dos lotes por
tratamiento final (administración 1 hora después del último lavado)
en las dosis de 12,5, 25, 50 y 100 mg de fosfolípido por kg de peso
corporal. Ambos lotes demuestran una mejora acusada de la
oxigenación en comparación con los controles sin tratar. Los
efectos son dependientes de la dosis. Específicamente, los valores
para dosificaciones de 50 y 100 mg de fosfolípido por kg de peso
corporal están comprendidos en el intervalo de los valores iniciales
de ratas que no han sido sometidas a lavado.
Fig. 1 muestra una presentación gráfica del
efecto de una composición de acuerdo con la invención que contiene
éster metílico de rSP-C(FF/I) (LLÜ139) y una
composición de acuerdo con la invención que contiene una combinación
de éster metílico de rSP-C(FF/I) y
rSP-C(FF/I) (sin esterificar) en una relación
en peso de 5 a 95 (Era8) para dosis de 12,5, 25, 50 y 100 mg de
fosfolípido por kg de peso corporal sobre la oxigenación en un
modelo descrito por Häfner et al. [D. Häfner, P.-G. Germann
y D. Hauschke: Effects of rSP-C surfactant on
oxygenation and histology in a
rat-lug-lavage model of acute lung
injury. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 158, 270-278
(1998)]. La dosis de 0 mg de fosfolípido por kg de peso corporal
representa la oxigenación de los controles sin tratar.
<110> Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik
GmbH
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Ésteres Tensioactivos de la Proteína
C
\vskip0.400000\baselineskip
<130> B639WOORD0196706082
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<140>
\vskip0.400000\baselineskip
<141>
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<150> 99111728.4
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
1999-06-17
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn Ver. 2.1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 35
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> VARIANTE
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Xaa es Phe o no es un aminoácido
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Gly Ile Pro Cys Cys Pro Val His Leu Lys
Arg Leu Leu Ile Val}
\sac{Val Val Val Val Val Leu Ile Val Val Val
Ile Val Gly Ala Leu Leu}
\sac{Met Gly Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 4
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> NON_TER
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> NON TER
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (4)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Pro Cys Cys Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 35
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> VARIANTE
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Xaa es Phe o no es un aminoácido
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> MUTÁGENO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (5)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Xaa es Phe o Trp
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> MUTÁGENO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (6)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Xaa es Phe o Trp
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> MUTÁGENO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (33)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Xaa es Ile, Leu o Ser
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Gly Ile Pro Xaa Xaa Pro Val His Leu Lys
Arg Leu Leu Ile Val}
\sac{Val Val Val Val Val Leu Ile Val Val Val
Ile Val Gly Ala Leu Leu}
\sac{Xaa Gly Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (10)
1. Una proteína C tensioactiva en la cual el
aminoácido en el término carboxi de la proteína tensioactiva está
esterificado con un alcohol que tiene 1-4 átomos de
carbono, o sales farmacológicamente aceptables de la misma.
2. La proteína C tensioactiva de acuerdo con la
reivindicación 1, que es una proteína tensioactiva que tiene la
secuencia de aminoácidos SEQ ID NO:3 de la fórmula I
en la cual A está ausente o es Phe,
B es Phe o Trp y C es Ile, Leu o
Ser.
3. La proteína tensioactiva C de acuerdo con la
reivindicación 2, en donde A está ausente o es Phe, B es Phe y C es
Ile.
4. La proteína C tensioactiva de acuerdo con la
reivindicación 2, en donde A está ausente, B es Phe y C es Ile.
5. La proteína C tensioactiva de acuerdo con la
reivindicación 1, en donde el alcohol es metanol o
2-propanol.
6. Una composición farmacéutica para el
tratamiento o la profilaxis de neumonía, bronquitis, síndrome de
aspiración del meconio, COPD, asma, fibrosis quística, IRDS y/o ALI
(con inclusión de ARDS) en mamíferos, que comprende un éster de la
proteína C tensioactiva de acuerdo con cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5.
7. La composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 6, que comprende al menos una proteína tensioactiva
adicional del grupo SP-A, SP-C no
esterificado y SP-B.
8. La composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 7, que comprende rSP-C (FF/I).
9. La composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 6, que comprende fosfolípidos, ácidos grasos y
electrólitos.
10. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 9, que comprende, basado en el peso seco de la
composición, de 80 a 95% en peso de fosfolípidos, de 0,2 a 5% en
peso de proteína tensioactiva, de 2 a 15% en peso de ácidos grasos
y de 0 a 5% en peso de electrólitos.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99111728 | 1999-06-17 | ||
| EP99111728 | 1999-06-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2278609T3 true ES2278609T3 (es) | 2007-08-16 |
Family
ID=8238379
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00935162T Expired - Lifetime ES2278609T3 (es) | 1999-06-17 | 2000-06-02 | Esteres tensioactivos de la proteina c. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7022671B1 (es) |
| EP (1) | EP1192184B1 (es) |
| JP (1) | JP4762466B2 (es) |
| AT (1) | ATE350399T1 (es) |
| AU (1) | AU5074400A (es) |
| CA (1) | CA2375214C (es) |
| DE (1) | DE60032769T2 (es) |
| DK (1) | DK1192184T3 (es) |
| ES (1) | ES2278609T3 (es) |
| PT (1) | PT1192184E (es) |
| SI (1) | SI1192184T1 (es) |
| WO (1) | WO2000078810A1 (es) |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5104853A (en) | 1984-12-11 | 1992-04-14 | California Biotechnology Inc. | Alveolar surfactant proteins having cys to ser mutations |
| ATE163013T1 (de) | 1987-11-04 | 1998-02-15 | Byk Gulden Lomberg Chem Fab | Alveolare oberflächenaktive proteine |
| CA2063273C (en) | 1989-07-11 | 2002-09-24 | Bradley J. Benson | Surfactant compositions and methods |
| DE69125750D1 (de) * | 1990-05-21 | 1997-05-28 | Abbott Lab | Fettsäure-Oberflächenaktives-Lungenprotein Konjate |
| DE4418936A1 (de) * | 1994-05-31 | 1996-02-08 | Byk Gulden Lomberg Chem Fab | Polypeptid |
| JP3856343B2 (ja) * | 1995-11-20 | 2006-12-13 | オーソ−マクニール・フアーマシユーチカル・インコーポレーテツド | 肺胞界面活性物質ペプチドの可溶化法 |
-
2000
- 2000-06-02 SI SI200030941T patent/SI1192184T1/sl unknown
- 2000-06-02 EP EP00935162A patent/EP1192184B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-02 DK DK00935162T patent/DK1192184T3/da active
- 2000-06-02 WO PCT/EP2000/005031 patent/WO2000078810A1/en not_active Ceased
- 2000-06-02 US US09/959,628 patent/US7022671B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-02 CA CA2375214A patent/CA2375214C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-02 PT PT00935162T patent/PT1192184E/pt unknown
- 2000-06-02 ES ES00935162T patent/ES2278609T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-02 AU AU50744/00A patent/AU5074400A/en not_active Abandoned
- 2000-06-02 DE DE60032769T patent/DE60032769T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-02 JP JP2001505568A patent/JP4762466B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-02 AT AT00935162T patent/ATE350399T1/de active
-
2005
- 2005-11-28 US US11/287,197 patent/US7173009B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4762466B2 (ja) | 2011-08-31 |
| JP2003502441A (ja) | 2003-01-21 |
| US7022671B1 (en) | 2006-04-04 |
| CA2375214C (en) | 2012-01-17 |
| PT1192184E (pt) | 2007-03-30 |
| DE60032769D1 (de) | 2007-02-15 |
| DK1192184T3 (da) | 2007-04-30 |
| EP1192184B1 (en) | 2007-01-03 |
| ATE350399T1 (de) | 2007-01-15 |
| US20060148701A1 (en) | 2006-07-06 |
| US7173009B2 (en) | 2007-02-06 |
| DE60032769T2 (de) | 2007-11-22 |
| WO2000078810A1 (en) | 2000-12-28 |
| EP1192184A1 (en) | 2002-04-03 |
| AU5074400A (en) | 2001-01-09 |
| CA2375214A1 (en) | 2000-12-28 |
| SI1192184T1 (sl) | 2007-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2228473T3 (es) | Peptidos artificiales con actividad de superficie y uso de los mismos en la preparacion de un tensioactivo artificial. | |
| CA2666344C (en) | Reconstituted surfactants having improved properties | |
| EP1997502A1 (en) | Reconstituted surfactants having improved properties | |
| JP3644035B2 (ja) | 新規な合成ペプチド，それを含有する肺サーファクタント及び呼吸窮迫症候群治療剤 | |
| JPWO1995015980A1 (ja) | 新規な合成ペプチド、それを含有する肺サーファクタント及び呼吸窮迫症候群治療剤 | |
| ES2339954T3 (es) | Composicion que comprende un agente tensioactivo pulmonar y un peptido derivado de tnf. | |
| ES2360976T3 (es) | Peptidos tensioactivos pulmonares sintéticos. | |
| ES2253003T3 (es) | Equipo de tratamiento que contiene composiciones a base de agentes tensioactivos pulmonares. | |
| EP1192184B1 (en) | Surfactant protein c esters | |
| JPH05294996A (ja) | 合成ペプチド、それを含有する肺サーファクタント及び呼吸窮迫症候群治療剤 | |
| RU2144925C1 (ru) | Новые синтетические пептиды, легочная поверхностно-активная композиция, лекарственный препарат для лечения респираторного дистресс-синдрома | |
| HK1144435A (en) | Synthetic pulmonary surfactant peptides |