ES2287559T3 - Una preparacion farmaceutica que contiene compuestos de complejo de paladio. - Google Patents

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Abstract

Una preparación farmacéutica caracterizada por un contenido de al menos un compuesto de fórmula general (I) Pd(S2COR)2 en la que R es un resto alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene 1 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo de cadena lineal o ramificada que tiene 2 a 30 átomos de carbono, un resto alquilo monocíclico o policíclico que tiene 3 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo monocíclico o policíclico que tiene 4 a 30 átomos de carbono o un resto aromático monocíclico o policíclico que tiene 6 a 30 átomos de carbono, estando estos restos opcionalmente sustituidos con uno o varios sustituyentes seleccionados de los siguientes grupos: - halógeno, - amino, alquilamino, dialquilamino, estando cada uno de estos restos dialquilamino presentes opcionalmente en forma de óxido, - aminoalquilo, - dialquilaminoalquilo, - dialquilaminoalcoxi, - hidroxilo, - grupo carboxilo esterificado libre, tal como alcoxicarbonilo, o convertido en una sal, - alquilo que tiene 1 a 8 átomos de carbono, opcionalmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno, - oxo, ciano, nitro, formilo, - acilo, - aciloxi, o un resto de fórmula -O-CO-(CH2)nCO2H, en la que n = 1 a 5 - alcoxi, - alquiltio, - carbamoílo, - alquenilo, - alquinilo y - arilo.

Description

Una preparación farmacéutica que contiene compuestos de complejo de paladio.
Esta invención se refiere a preparaciones farmacéuticas que contienen complejos de paladio y al uso de las mismas para tratar enfermedades tumorales y autoinmunes.
Hoy en día, las enfermedades cancerosas se tratan usualmente mediante terapia con fármacos o radioterapia antes y/o después de la cirugía. La oncoterapia mediante fármacos, es decir, la quimioterapia, usa compuestos que influyen sobre el crecimiento del cáncer de varias formas. No obstante, la quimioterapia a menudo va acompañada de graves efectos secundarios desagradables para los pacientes, tales como pérdida del cabello, náuseas, vómitos, cansancio, daño a la médula ósea y a los glóbulos blancos. Este es válido en particular para los compuestos de platino usados hasta ahora, tales como cisplatino o carboplatino. También aparecen con frecuencia infecciones secundarias más o menos graves. Además, no todos los tipos de tumores responden a la quimioterapia, por ejemplo, el carcinoma de células renales o tumores del tracto gastrointestinal.
El documento WO-A-00/10543 se refiere a agentes antitumorales de platino y describe complejos xantogénicos de platino como alternativas al fármaco bien conocido cisplatino.
El documento US-A-5679697 describe complejos de platino-ácido lipoico.
El documento JP-A-11060493 (resumen Derwent, AN: 199-226104) se refiere a una terapia de combinación usando coloides de paladio y platino.
Recientemente ha habido algunos resultados prometedores con complejos xantogénicos de platino, llamados "tioplatino" (documento DE 199 40 470.0). No obstante, han aparecido algunas dificultades cuando se administraba la dosis terapéutica máxima tolerable a paciente en vistas de la mala solubilidad de los compuestos.
En el pasado, las enfermedades autoinmunes se han tratado usualmente con citocinas y compuestos de metales pesados. No obstante, este tratamiento muchas veces no ha sido satisfactorio y no se ha podido detener la enfermedad autoinmune y no mejoraron los síntomas.
Por lo tanto, el objeto de la presente invención es proporcionar un fármaco eficaz para tratar enfermedades cancerosas o autoinmunes.
El fármaco debe ser eficaz en pequeñas dosis, tener el menor efecto tóxico posible sobre células sanas y pocos efectos secundarios. Además, el fármaco también debe ser adecuado para la terapia local y ser administrable mediante tratamiento ambulatorio. Además, el fármaco debe disminuir también el riesgo de una recaída. Adicionalmente, debe ser posible almacenar el fármaco sin pérdida de su acción a lo largo de un periodo de tiempo prolongado.
Se ha descubierto sorprendentemente que complejos de paladio-ácido ditiocarboxílico forman compuestos estables que tienen un excelente efecto antitumoral y anti-autoinmune.
Por lo tanto, el objeto de la invención se refiere a preparaciones farmacéuticas que contienen complejos de paladio de la fórmula general (I)
(I)Pd(S_{2}COR)_{2}
en la que R es un resto alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene 1 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo de cadena lineal o ramificada que tiene 2 a 30 átomos de carbono, un resto alquilo monocíclico o policíclico que tiene 3 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo monocíclico o policíclico que tiene 4 a 30 átomos de carbono o un resto aromático monocíclico o policíclico que tiene 6 a 30 átomos de carbono, estando estos restos opcionalmente sustituidos con uno o varios sustituyentes.
Se puede usar cualquier resto alquilo C_{1-30} de cadena lineal o ramificada. Son ejemplos de los mismos grupos metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, n-hexilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2,2-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, n-heptilo, 2-metilhexilo, 3-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo, 3,3-dimetilpentilo, 3-etilpentilo, 2,2,3-trimetilbutilo, n-octilo, 2-metilheptilo, 3-metilheptilo, 4-metilheptilo, 2,2-dimetilhexil, 2,3-dimetilhexilo, 2,4-dimetilhexilo, 3,3-dimetilhexilo, 3,4-dimetilhexilo, 4,4-dimetilhexilo, 2-etilhexilo, 3-etilhexilo, 4-etilhexilo, 2,2,3-trimetilpentilo, 2,3,3-trimetilpentilo, 3-metil-3-etilpentilo, etc. A causa de su mejor solubilidad, se prefieren cadenas de alquilo cortas, tales como grupos metilo, etilo, propilo e isopropilo.
R es preferiblemente restos alquilo C_{1-14} de cadena lineal o restos cicloalquilo C_{3-14}. R preferiblemente denota -CH_{3}CH_{2} o isopropilo.
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Se pude usar cualquier resto alquenilo C_{2-30} de cadena lineal o ramificada. Son ejemplos de los mismos grupos vinilo, propenilo, isopropenilo, alilo, 2-metilalilo, butenilo o isobutenilo, hexenilo o isohexenilo, heptenilo o isoheptenilo, octenilo o isooctenilo. Se prefieren grupos vinilo, propenilo e isopropenilo.
El resto cicloalquilo que tiene 3 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier resto cicloalquilo. Son ejemplos de los mismos grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo o ciclodecilo. Se prefieren grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
El resto cicloalquenilo que tiene 4 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier resto cicloalquenilo. Son ejemplos de los mismos grupos ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciclohexenilo, cicloheptenilo, ciclooctenilo, ciclononenilo o ciclodecenilo. Se prefieren grupos ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciclohexenilo.
Son ejemplos de restos alquilo y alquenilo policíclicos norbornano, adamantano o benzvaleno, respectivamente.
R también puede ser cualquier resto arilo C_{6-30} monocíclico o policíclico. Es un ejemplo de los mismos un resto carbocíclico, monocíclico, por ejemplo, el grupo fenilo, un resto heterocíclico monocíclico, por ejemplo, los grupos tienilo, furilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, tiazoilo, oxazolilo, pirrolinilo, imidazolinilo, pirazolinilo, tiazolinilo, triazolilo, tetrazolilo y los isómeros posicionales del heteroátomo o heteroátomos que pueden comprender estos grupos, un resto constituido por anillos carbocíclicos condensados, por ejemplo, el grupo naftilo o el grupo fenantrenilo, un resto constituido por anillos heterocíclicos condensados, por ejemplo, benzofuranilo, benzotienilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, nafto[2,3-b]tienilo, tiantrenilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxantiinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolino, purinilo, quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalzinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, carbazolilo, 2-carbolinilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenorazinilo, indolinilo, isoindolinilo, imidazopiridilo, imidazopirimidinilo o también los sistemas policíclicos condensados constituidos por monociclos heterocíclicos como se han definido anteriormente, tales como furo[2,3-b]pirrol o tieno[2,3-b]furano, y particularmente los grupos fenilo, furilo, tales como 2-furilo, imidazolilo, tal como 2-imidazolilo, piridilo, tales como 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirimidinilo, tal como pirimidin-2-ilo, tiazolilo, tal como 2-tiazol-2-ilo, tiazolinilo, tal como tiazolin-2-ilo, triazolilo, tal como triazolil-2-ilo, tetrazolilo, tal como tetrazol-2-ilo, benzimidazolilo, tal como benzimidazol-2-ilo, benzotiazolilo, benzotiazol-2-ilo, purinilo, tal como purin-7-ilo o quinolilo, tal como 4-quinolilo.
Opcionalmente los sustituyentes presentes de los diversos restos anteriormente mencionados se pueden seleccionar de los siguientes grupos:
-
halógeno: flúor, cloro, bromo, yodo,
-
amino, alquilamino, tal como metilamino o etilamino, dialquilamino, tal como dimetilamino, dietilamino, metiletilamino, estando cada uno de estos restos dialquilamino presentes opcionalmente en forma de óxido,
-
aminoalquilo tal como aminometilo o aminoetilo,
-
dialquilaminoalquilo, tal como dimetilaminometilo o dimetilaminoetilo,
-
dialquilaminoalcoxi, tal como dimetilaminometoxi,
-
hidroxilo,
-
grupo carboxilo esterificado libre, tal como alcoxicarbonilo, por ejemplo, metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, o convertido en una sal, por ejemplo mediante un átomo de sodio o potasio,
-
alquilo que tiene 1 a 8 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, opcionalmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno, por ejemplo con flúor, tal como trifluorometilo,
-
oxo, ciano, nitro, formilo,
-
acilo, tal como acetilo, propionilo, butirilo, benzoílo,
-
aciloxi, tal como acetoxi, o un resto de fórmula
-O-CO-(CH_{2})_{n}CO_{2}H,
en la que n = 1 a 5
-
alcoxi, tal como metoxi, etoxi, propiloxi, isopropiloxi, butiloxi,
-
alquiltio, tal como metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio,
-
carbamoílo,
-
alquenilo, tal como vinilo, propenilo,
-
alquinilo, tal como etinilo, propinilo y
-
arilo, tal como fenilo, furilo, tienilo.
Como ejemplos de tales restos sustituidos se puede mencionar un resto alquilo sustituido con uno o varios átomos de halógeno, tal como un grupo trifluorometilo, trifluorobutilo, pentafluoropropilo, pentafluorobutilo, pentafluoropentilo, heptafluorobutilo o nonafluorobutilo o 2-cloroetilo.
Resumiendo, los compuestos de la fórmula (I) anterior se pueden describir mediante la expresión "compuestos de tiopaladio".
Los compuestos de fórmula (I) se producen preferiblemente mediante una reacción de un ditiocarbonato de O-alquilo alcalino con un tetracloropaladato (II) dialcalino (II) como se describe en C. G. Sceney, R. J. Magee, Palladium Xanthate Complexes Chimia Scripta, 1974, 6, 47-48; C. G. Sceney, J. O. Hill, R. J. Magee, Termal Studies on palladium alkyl xanthates, Termochimica Acta 1973, 6, 111-117 y G. Watt, B. J. McCormick, The synthesis and characterization of methyl and ethylxanthato complexes of Pt(II), Pd(II), Ni(II), Cr(III) y Co(III), J. Inorg. Nucl. Chem. 1965, 27, 898-900.
Los compuestos de fórmula (I) son adecuados para tratar varias enfermedades cancerosas, tales como tumores testiculares, carcinomas ováricos, carcinomas de la vejiga, carcinomas colónicos, carcinomas prostáticos, carcinomas bronquiales parvocelulares y no parvocelulares, carcinomas de las partes cefálica y cervical, carcinomas de la regiones torácica y abdominal, carcinomas del cuello uterino y endometriales, sarcomas y melanomas así como leucemias. Se prefiere el tratamiento del carcinoma bronquial parvocelular o carcinoma colorrectal. El tratamiento también se puede llevar a cabo como un tratamiento asociado con una radioterapia o antes y/o después de una intervención quirúrgica.
Los compuestos de fórmula (I) son bien tolerables. El valor de L50 es 3 veces menor que para el cisplatino conocido en el tratamiento tumoral. Cuando se usa una dosificación que tiene buenos efectos antitumorales apenas se produce ningún efecto secundario. En particular, la temida nefrotoxicidad conocida para el cisplatino aún no se ha producido de esta forma en el caso de los presentes compuestos. Otra ventaja de los compuestos según la invención es que tienen un amplio espectro de actividad frente a los tumores más variables y son particularmente también eficaces contra tumores que han resistido el tratamiento con compuestos de platino (por ejemplo, cisplatino) hasta el momento. Los compuestos de paladio son particularmente adecuados para tumores sólidos. Se ha descubierto que su efecto citotóxico frente a líneas de células tumorales humanas es 30-50 veces mayor que el del cisplatino. En comparación con compuestos de tioplatino, el efecto citotóxico de los compuestos de paladio es 7 veces mayor. En vista de la baja toxicidad, es posible alcanzar la dosis máxima tolerable (100 mg/kg cuando se administran por vía oral) sin ningún problema.
Con frecuencia se usan compuestos de metales pesados tales como complejos de oro para el tratamiento de enfermedades autoinmunes. Estos compuestos tienen graves efectos secundarios, tales como nefrotoxicidad y depresión de la médula ósea. Los complejos de paladio de la presente invención, no obstante, son bien tolerados y por lo tanto son superiores a los fármacos de metales pesados actualmente disponibles. Los compuestos de fórmula (I) se pueden usar, por ejemplo, para el tratamiento de artritis, enfermedad de Morbos Crohn, colitis ulcerosa, diabetes, esclerosis múltiple, lupus eritematoso.
Otra ventaja consiste en que la eficacia de los compuestos según la invención es mayor en el intervalo de pH ligeramente ácido que en el alcalino, dado que muchos tejidos tumorales tiene un entorno más bien ácido. Los inventores llevaron a cabo investigaciones (véanse las figs. 4 y 5) con bis[O-isopropilditio-carbonato]-paladio (II), bis[O-ciclohexal-ditiocarbonato]-paladio (II) y bis[O-etilditiocarbonato]-paladio (II), todos complejos de coordinación de paladio según la fórmula (I) en los que el paladio está acomplejado con átomos de azufre. Después de la protonación, dos iones de ligamiento de azufre se abren reversiblemente (de forma que se forma un complejo de agua) que puede iniciar una reticulación del ADN. Tras aumentar el valor de pH, los protones se disocian de los átomos de azufre y se recupera la molécula inerte. El cambio del valor de pH al intervalo (ligeramente) ácido a partir del profármaco según la fórmula (I) provoca la formación del compuesto realmente reactivo. Este concepto se confirma mediante los
ejemplos.
La preparación farmacéutica según la invención se puede administrar de varias formas, por ejemplo, por vía oral, parenteral, cutánea, subcutánea, intravenosa, intramuscular, rectal o intratumoral. Se prefiere la administración intravenosa o intratumoral, es decir, la administración en determinados órganos o partes del cuerpo enfermos. La preparación farmacéutica se administra a un paciente a lo largo de un periodo de tiempo que debe ser determinado por un facultativo. La preparación farmacéutica se puede administrar tanto a seres humanos como a animales.
La dosificación del compuesto según la invención se determina por parte de un facultativo por medio de los parámetros específicos del paciente, tales como edad, peso, sexo, gravedad de la enfermedad, etc. La dosificación es preferiblemente de 0,001 a 1000 mg/kg de peso corporal.
Según el tipo de administración, la preparación farmacéutica se formula de una forma adecuada, por ejemplo en forma de comprimidos simples o recubiertos, cápsulas de gelatina blandas o duras, polvos para reconstituir antes de su uso, polvos granulares, supositorios, óvulos, inyectables, soluciones para infusión, pomadas, cremas, geles, microesferas, implantes, que se producen según los procedimientos galénicos convencionales.
Los compuestos de fórmula (I) se pueden administrar opcionalmente junto con otras sustancias activas y con excipientes comunes en composiciones farmacéuticas, por ejemplo, en función de la preparación que se va a producir, talco, goma arábiga, lactosa, almidón, estearato de magnesio, manteca de cacao, vehículos acuosos y no acuosos, adipoides de origen animal o vegetal, derivados de parafina, glicoles (particularmente polietilenglicol), varios plastificantes, dispersantes o emulsionantes, conservantes.
Se pueden usar aditivos tales como solución de cloruro sódico, etanol, sorbitol, glicerol, aceite de oliva, aceite de almendra, propilenglicol o etilenglicol para la producción de preparaciones líquidas.
Preferiblemente se producen infusiones o soluciones inyectables. Son preferiblemente soluciones o suspensiones acuosas, siendo posible producirlas antes del uso, por ejemplo, a partir de preparaciones liofilizadas que contienen la sustancia activa como tal o junto con un vehículo tal como manitol, lactosa, glucosa y similares. Las soluciones listas para su uso se esterilizan y opcionalmente se mezclan con adyuvantes, por ejemplo, conservantes, estabilizantes, emulsionantes, ayudantes de solubilización, tampones y/o sales para controlar la presión osmótica. La esterilización se puede llevar a cabo mediante filtración estéril a través de filtros que tienen un tamaño de poro pequeño, en los que la composición puede liofilizarse de forma óptima. Se pueden añadir pequeñas cantidades de antibióticos para mantener la esterilidad.
Es ventajoso proporcionar la preparación farmacéutica según la invención en una forma de dosificación unitaria para su administración a un mamífero que requiera tratamiento anticanceroso o tratamiento frente a una enfermedad autoinmune.
La invención también se refiere a preparaciones farmacéuticas y a composiciones farmacéuticas, respectivamente, que contienen una cantidad terapéuticamente eficaz del ingrediente activo (compuesto de fórmula (I) según la invención junto con vehículos y diluyentes orgánicos o inorgánicos inertes sólidos o líquidos farmacéuticamente compatibles, respectivamente, que son adecuados para la administración que se pretende y que no muestran interacciones desfavorables con los ingredientes activos.
La invención también se refiere a un procedimiento para la producción de una composición farmacéutica que se caracteriza por mezclar el compuesto según la fórmula (I) con un vehículo farmacéuticamente compatible.
Los fármacos según la invención pueden incluir en particular los compuestos descritos en la parte experimental y más particularmente los compuestos en los que en la fórmula (I) anterior, R es un grupo metilo, etilo, propilo o isopropilo, o un grupo CH_{2}CH_{2}OH, CH_{2}CH_{2}CH_{2}OH o CH_{2}(CH_{2})_{2}CH_{2}OH.
Las preparaciones farmacéuticas y/o composiciones farmacéuticas según la invención comprenden como sustancia activa al menos una sustancia activa como se ha definido anteriormente. Opcionalmente se pueden añadir sustancias farmacéuticas activas adicionales a la composición, tales como agentes inmunosupresores, por ejemplo, ciclosporina, rapamicina, 15-deoxiespergualina, OKT3, azatioprina, citocinas (por ejemplo, TNF), interferón, etc. Además, la composición según la invención puede contener adicionalmente un esteroide o agentes citostáticos adicionales (por ejemplo cisplatino, metotrexato, aminopterina, dicarbacina, compuestos de nitrosourea, fluorouracilo, bleomicina, daunomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, mitramicina, mitomicina C, etc.).
La invención se explica adicionalmente mediante la figura:
fig. 1 actividad antitumoral del bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II) in vivo;
fig. 2 toxicidad después de la aplicación por vía intravenosa de 20 mg/kg de bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II)
fig. 3 toxicidad después de la aplicación por vía oral de 100 mg/kg y 200 mg/kg de bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II);
fig. 4 efecto citotóxico sobre la línea celular de melanoma humano SK-MEL25
fig. 5 efecto citotóxico sobre la línea celular de carcinoma pulmonar humano Calu-6.
La invención se explica con mayor detalle mediante los ejemplos a continuación.
Ejemplo 1 Síntesis de complejos de paladio Procedimiento general
Todos los O-alquil-ditiocarbonatos se prepararon según procedimientos como los descritos en C. G. Sceney, R. J. Magee, Palladium Xanthate Complexes, Chimia Scripta, 1974, 6, 47-48; C. G. Sceney, J. O. Hill, R. J. Magee, Thermal Studies on palladium alkyl xanthates, Termochimica Acta 1973, 6, 111-117 y G. W. Watt, B. J. McCormick, The synthesis and characterization of methyl and ethylxanthato complexes of Pt(II), Pd(II), Ni(II), Cr(III) y Co(III), J. Inorg. Nucl. Chem. 1965, 27, 898-900.
Se hicieron reaccionar O-alquil-ditiocarbonatos de potasio (KS_{2}COR) con tetracloropaladato (II) de dipotasio (K_{2}PdCl_{4}) mediante el siguiente procedimiento general:
Se mezclaron 1,53 moles de K_{2}PdCl_{4} en 5 ml de H_{2}O destilada con 4,60 mmoles de los O-alquil-ditiocarbonatos de potasio (KS_{2}COR) en 5 ml de H_{2}O destilada con fuerte agitación, seguido de otros 5ml de H_{2}O destilada. Se cerró el recipiente de reacción y la mezcla se agitó durante 80-120 minutos a temperatura ambiente. Se separó el precipitado mediante filtración con succión, se lavó tres veces con H_{2}O destilada seguido de un lavado con dietiléter o pentano. La recristalización a partir de acetona o acetona/CHCl_{3} dio los complejos de Pd como cristales amarillos o marrones. El producto se secó a vacío (10^{-3} Torr) durante 1-2 días.
Las estructuras de los complejos de bis(O-alquil-ditiocarbonato)-paladio (II) (1-7) se verificaron mediante RMN ^{1}H y ^{13}C, espectroscopia de IR y UV, mediante espectrometría de masas y análisis elemental.
Los complejos de paladio son insolubles en agua, difícilmente solubles en acetona y solubles en CHCl_{3}.
Bis(O-ciclohexil-ditiocarbonato)paladio (II) (1)
Rendimiento: 82%, cristales marrones
Bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II) (2)
Rendimiento: 79%, cristales naranjas
Bis(O-etil-ditiocarbonato)paladio (II) (3)
Rendimiento: 79%, cristales marrones-dorados
Bis(O-(2-metil)-butil-ditiocarbonato)paladio (II) (4)
Rendimiento: 18%, cristales marrones-anaranjados
Bis(O-butil-ditiocarbonato)paladio (II) (5)
Rendimiento: 57%, cristales marrones
Bis(O-hexil-ditiocarbonato)paladio (II) (6)
Rendimiento: 64%, cristales naranjas-dorados
Bis(O-metil-ditiocarbonato)paladio (II) (7)
Rendimiento: 85%, cristales rojos.
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Ejemplo 2 Actividad antitumoral de complejos de Pd (1-7) sobre lineas celulares cancerosas humanas Ensayo de citotoxicidad
Los complejos de Pd se disolvieron en acetona (solución madre de 1 mg/ml). Se usaron las líneas celulares cancerosas humanas SK-MEL 25 (melanoma) y CALU-6 (cáncer de pulmón) para la determinación de la actividad citotóxica de los complejos de Pd. Para la comparación se incluyeron los fármacos bien conocidos cisplatino y complejos de platino correspondientes. Se sembraron las células a una densidad de 2x10^{6} células/placa de 96 pocillos. Después de 24 horas, se retiró el medio de cultivo de tejidos y se añadió medio fresco suplementado con suero de ternera fetal al 10% y 100 unidades/ml de penicilina/estreptomicina que contenía 2,2 g/l (pH 7,4) o 0,85 g/l (pH 6,8) de NaHCO_{3}. Después de 1 hora de equilibrado en una atmósfera que contenía 5% de CO_{2} se añadieron los fármacos a varias concentraciones (50, 25, 12,5, 6,25, 3,1, 1,6, 0,8 \mug/ml) por cuadruplicado. Los cultivos no tratados sirvieron como controles. Dos horas más tarde se reemplazó el medio de cultivo con 0,1 ml de medio de cultivo de tejidos fresco (pH 7,4, suero de ternera fetal al 10%). Entonces se incubaron las placas de cultivo durante 48 horas (SK-MEL 25) o 72 horas (Calu-6) a 37ºC. Después, las células se fijaron con formaldehído al 3% y se tiñeron con violeta cristal al 1%. El número de células viables es proporcional a la cantidad de cristal violeta unido. Por lo tanto, se pudo determinar el número relativo de células en un lector ELISA Antos 2001 (550 nm). Se establecieron curvas de dosis-respuesta a partir de los datos de DO y se determinó la concentración a la que se redujo el número de células al 50% del control (CI50). Los resultados se muestran en la tabla 1 y en las figs. 4 y 5.
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TABLA 1 Actividad citotóxica de complejos de paladio sobre líneas celulares tumorales humanas
1
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Ejemplo 3 Actividad antitumoral de Bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II) in vivo
Se transplantaron células de cáncer de pulmón humanas (H10) en ratones desnudos atímicos (cepa Balb c). Tres semanas después, cuando los tumores habían crecido hasta un tamaño de 6-10 mm se inició el tratamiento. Cinco animales recibieron una única inyección intravenosa de bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II) (0,2 mg/ml en ciclodextrina al 30%, 0,2 ml/20 g de peso corporal) a día 0 y a día 4. Se determinó el tamaño del tumor en dos dimensiones, usando calibres. Diez animales recibieron ciclodextrina al 30% como control. Se determinó el crecimiento relativo del tumor diariamente. En la figura 1 se indican los valores medios \pm desviación estándar.
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Ejemplo 4 Estudios de toxicidad
Se inyectó (vía intravenosa en la vena lateral caudal) a ratones Balb c hembra (6-8 semanas de edad, 5 animales/grupo) 0,2 ml/20 g de peso corporal de una solución de 2mg/ml de bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II) en ciclodextrina al 30%/agua al 70%. Los animales de control recibieron ciclodextrina al 30%/agua al 70%. Se determinó el peso corporal medio de cada grupo diariamente. Se encontró que las desviaciones estándar eran menores del 5%. Los resultados se muestran en la figura 2.
Ratones Balb c hembra (6-8 semanas de edad, 5 animales/grupo) recibieron (por intubación intragástrica) 0,2 ml de aceite de cacahuete/20 g de peso corporal que contenía 0, 10 ó 20 mg/ml de bis(O-isopropil-ditiocarbonato)paladio (II). Se determinó el peso corporal medio de cada grupo diariamente. Se encontró que las desviaciones estándar eran menores del 8%. Los resultados se muestran en la figura 3.
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Ejemplo 5 Espectro antitumoral de ciclohexil-paladio-xantato
Se sembraron líneas celulares cancerosas humanas (obtenidas de ATCC) en placas de 96 pocillos a una densidad de 2 x 10^{6} células/placa. Un día después, las células se trataron con cisplatino o con ciclohexil-paladio-xantato a concentraciones de 25, 12,5, 6,3, 3,2, 1,6, 0,8, 0,4 o 0,0 \mug/ml por cuadruplicado. Las células se incubaron durante 48 horas a 37ºC. Después de desechar el medio, las células se fijaron con formaldehído al 3% y se tiñeron con violeta cristal al 0,5%. La DO a 595 nm se determinó con un lector ELISA. Los valores de CI_{50} se leyeron a partir de las curvas de dosis-respuesta.
2
Resultado: se encontró que el ciclohexil-paladio-xantato era superior al cisplatino en las seis líneas celulares.

Claims (12)

1. Una preparación farmacéutica caracterizada por un contenido de al menos un compuesto de fórmula general (I)
Pd(S_{2}COR)_{2}
en la que R es un resto alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene 1 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo de cadena lineal o ramificada que tiene 2 a 30 átomos de carbono, un resto alquilo monocíclico o policíclico que tiene 3 a 30 átomos de carbono, un resto alquenilo monocíclico o policíclico que tiene 4 a 30 átomos de carbono o un resto aromático monocíclico o policíclico que tiene 6 a 30 átomos de carbono, estando estos restos opcionalmente sustituidos con uno o varios sustituyentes seleccionados de los siguientes grupos:
-
halógeno,
-
amino, alquilamino, dialquilamino, estando cada uno de estos restos dialquilamino presentes opcionalmente en forma de óxido,
-
aminoalquilo,
-
dialquilaminoalquilo,
-
dialquilaminoalcoxi,
-
hidroxilo,
-
grupo carboxilo esterificado libre, tal como alcoxicarbonilo, o convertido en una sal,
-
alquilo que tiene 1 a 8 átomos de carbono, opcionalmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno,
-
oxo, ciano, nitro, formilo,
-
acilo,
-
aciloxi, o un resto de fórmula
-O-CO-(CH_{2})_{n}CO_{2}H,
en la que n = 1 a 5
-
alcoxi,
-
alquiltio,
-
carbamoílo,
-
alquenilo,
-
alquinilo y
-
arilo.
2. La preparación farmacéutica según la reivindicación 1, en la que en el compuesto de fórmula (I), R es un resto alquilo C_{1-14} de cadena lineal o un resto cicloalquilo C_{3-14} cada uno.
3. La preparación farmacéutica según la reivindicación 1 ó 2, en la que en el compuesto de fórmula (I), R es CH_{3}CH_{2}, isopropilo, CH_{2}CH_{2}OH, CH_{2}CH_{2}CH_{2}OH o CH_{2}(CH_{2})_{2}CH_{2}OH.
4. La preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el compuesto de fórmula (I) es Bis(O-ciclohexil-ditiocarbonato)paladio (II), Bis(isopropil-ditiocarbonato)paladio (II), Bis(O-etil-ditiocarbonato)paladio (II), Bis(O-(2-metil)-butil-ditiocarbonato)paladio (II), Bis(O-butil-ditiocarbonato)paladio (II), Bis(O-hexil-ditiocarbonato)paladio (II) o Bis(O-metil-ditiocarbonato)paladio (II).
5. La preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende adicionalmente un compuesto inmunodepresor seleccionado entre el grupo constituido por ciclosporina, rapamicina, 15-deoxiespargualina, OKT3 y azatioprina.
6. La preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende adicionalmente citocinas, interferón o agentes citostáticos adicionales.
7. La preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, proporcionada en una forma de dosificación unitaria para la administración a un mamífero que requiere tratamiento con un agente anticanceroso o antiautoinmune.
8. La preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende adicionalmente un vehículo inerte o un diluyente farmacéuticamente compatibles.
9. Uso de un compuesto de fórmula general (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para preparar una preparación farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad cancerosa.
10. Uso según la reivindicación 9, en el que la enfermedad cancerosa es el carcinoma bronquial parvocelular o carcinoma colorrectal.
11. Uso de un compuesto de fórmula general (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para preparar una preparación farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad autoinmune.
12. Un procedimiento para la producción de una preparación farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque el compuesto según la fórmula (I) se mezcla con un vehículo o diluyente farmacéuticamente compatibles.
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