ES2288018T3 - Formulaciones inyectables de igf que contienen succinato como tampon. - Google Patents
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Abstract
Una composición farmacéutica inyectable que comprende el factor de crecimiento humano tipo insulina 1 (IGF-1) o su variante biológicamente activa y un tampón, en el que dicho tampón consiste sustancialmente en succinato a una concentración de 10 mM a 40 mM y un contraión, y en el que dicha variante es un polipéptido que tiene actividad de IGF-1 y una identidad de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% respecto a la secuencia de aminoácidos para el IGF-1 humano.
Description
Formulaciones inyectables de IGF que contienen
succinato como tampón.
El campo de la invención es las formulaciones
inyectables de agentes farmacéuticamente activos para su uso in
vivo. Las formulaciones a las cuales se refiere la invención son
diseñadas para reducir al mínimo el dolor asociado a los
componentes en las formulaciones inyectables, distintos a los
componentes activos. La invención particularmente se refiere a
formulaciones farmacéuticas que son tamponadas con succinato y que
proporciona menos dolor en la inyección. El factor de crecimiento
tipo insulina I humano (hIGF-I) es el agente
farmacéuticamente activo.
Numerosos estudios han demostrado que la
inyección subcutánea puede ser dolorosa (Ipp et al. (1990)
Pediatrics 85: 134-135); Zindel (1989)
Conn. Med. 53: 741-744); Gazzaniga et
al. (1993) Int. Surg. 78: 271-275). Poca
información existe sobre las causas del dolor en las inyecciones
debido a las variables de la formulación. Se ha postulado que los
factores que causan el dolor incluyen el volumen de la inyección, la
velocidad de la inyección, osmolalidad, pH, sitio de inyección,
tamaño y la calidad de la aguja de la inyección, presencia de
sustancias irritantes y la temperatura de la solución (Fransson
et al. (1996) J. Pharm. Pharmacol. 48:
1012-1015).
La mayoría de las formulaciones farmacéuticas
inyectables contienen un tampón para estabilizar al agente
farmacéuticamente activo contra la degradación química que podría
ocurrir si el pH cambiara considerablemente. Los sistemas tampón
más comúnmente usados en las formulaciones farmacéuticas inyectables
son citratos, acetatos y fosfatos. Sin embargo, la inyección de
tales formulaciones ha estado asociada con el dolor. Por ejemplo, se
ha publicado que la inyección de una solución salina es menos
dolorosa que la inyección con tampón citrato (Fleischaker et
al. (1993) J. Clin. Pharmacol. 33:
182-190).
Frenken et al. (1993) Am. J. Kidney
Dis.. 22: 553-556) publicaron un estudio clínico
en el cual fue evaluado el papel del citrato 20 mM por causar dolor
después de la administración subcutánea de epoetina \alpha. Los
resultados sugirieron que el citrato de sodio 20 mM (pH 6,9) causaba
un dolor significativo comparado con la solución salina. Los
resultados de otro estudio por este mismo grupo sugirieron que (1)
la inyección de volúmenes más pequeños era beneficiosa; (2) el
ajuste de la osmolaridad de Eprex para llevarlo hasta la
isotonicidad no redujo el dolor; y (3) la inclusión de alcohol
bencílico en la inyección diluida disminuyó el dolor, probablemente
debido a efectos anestésicos (Frenken et al. (1994)
Nephrol. Dial. Transplant. 9: 1295-1298).
La inyección de IGF-I ha sido
asociada con el dolor. En la bibliografía se muestra que los
tampones preferidos en las formulaciones de IGF-I
son tampones de acetato, fosfato y citrato. Por ejemplo, la Patente
de EE.UU. Nº 5.374.620 menciona el posible uso de un tampón de
succinato en formulaciones farmacéuticas que contienen
IGF-I y GH. Sin embargo, la Patente de EE.UU. Nº
5.374.620 muestra que el acetato de sodio, opcionalmente en
combinación con citrato de sodio, es el tampón preferido.
Fransson et al. (1996) (J. Pharm.
Pharmacol. 48: 1012-1015) estudiaron
formulaciones para reducir al mínimo el dolor con la inyección
subcutánea de hIGF-I. En el estudio se evaluó cómo
el pH, la concentración de tampón, y la presencia de
hIGF-I afectan a la tolerancia local frente a la
inyección subcutánea de la solución. El estudio divulgó que (1) un
tampón con alta capacidad tamponante (fosfato 50 mM) a pH 6,0 hecho
isotónico con NaCl causaba considerablemente más dolor que una
formulación de tampón fosfato 10 mM; (2) formulaciones de hIGF
tamponadas con fosfato a pH 7 fueron bien toleradas; (3)
formulaciones tamponadas con hIGF-I de fosfato 10
mM, fueron tan bien toleradas como la formulación a pH 7; y (4)
hIGF-I por sí mismo no causó dolor.
El documento WO 94/15584 se refiere a
formulaciones inyectables para la administración subcutánea de
IGF-I diseñado para reducir el dolor. La referencia
muestra el uso de tampón fosfato para reducir el dolor de la
inyección subcutánea.
El documento
EP-A-0 284 249 describe una
composición de linfoquina liofilizada que comprende una cantidad
terapéuticamente eficaz de una linfoquina tal como un interferón y,
entre otros componentes, un tampón tal como una combinación de
ácido succícino y succinato de sodio. El documento
US-5.151.265 describe una composición farmacéutica
líquida que comprende \gamma-interferón no
liofilizante. La composición incluye un tampón, que puede ser
citrato, succinato, tartrato, fumarato, gluconato, oxalato, lactato
o acetato y mantiene la composición a un pH de 4,0 a 6,0. El
documento WO 96/40894 describe composiciones para el tratamiento de
resistencia a la insulina por la inhibición de la fosforilación de
serina de proteína quinasa C. Tales composiciones pueden incluir un
tampón con succinato. El documento US-5.681.814
describe formulaciones de IGF1 que comprenden una solución
tamponada, osmólita y estabilizadora, y opcionalmente un
tensioactivo. Los ejemplos de tampón incluyen al succinato.
El documento WO 95/31213 describe formulaciones
líquidas de interferón-\beta estabilizadas con un
poliol, un azúcar no reductor o un aminoácido. También son
descritas composiciones que comprenden el tampón succinato. El
documento JP 09/304379 describe métodos profilácticos para reducir
el riesgo de trombosis empleando la administración de TFPI (el
inhibidor de la vía del factor tisular) para alcanzar niveles más
altos en el plasma. El TFPI puede ser formulado de acuerdo con
cualquier medio conocido en la técnica, incluyendo formulaciones que
incluyen
tampones.
tampones.
Los sujetos inyectados con formulaciones de
IGF-I tamponadas con fosfato o acetato cuentan que
padecen menos dolor que con una formulación de citrato. Sin
embargo, queda un nivel significativo de dolor asociado a la
inyección de formulaciones de IGF-I tamponadas con
fosfato o acetato. En consecuencia, un objeto de la invención es
proporcionar mejores composiciones farmacéuticas que causen un menor
dolor en la inyección.
Un objeto específico de la invención es
proporcionar una composición farmacéutica que permita la inyección
de hIGF-I con menos dolor.
Un objeto más específico de la invención es
proporcionar una composición farmacéutica en la que el agente
farmacéuticamente activo sea estable y así poder ser almacenado
durante largos períodos de tiempo sin una degradación física y/o
biológica significativa.
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención está basada en el
descubrimiento de los inventores de que las formulaciones
farmacéuticas tamponadas con succinato causan menos dolor en la
inyección que las formulaciones que contienen los tampones más
comúnmente usados, tales como tampones de fosfato, acetato y
citrato. En particular, los inventores han descubierto que los
tampones de succinato reducen el dolor asociado a la inyección de
las formulaciones de IGF-I. Basado en este
descubrimiento, es ahora posible desarrollar composiciones
farmacéuticas para IGF-I y otros agentes
farmacéuticamente activos con menos dolor debido a la inyección.
Antes, la bibliografía médica no aconsejaba el uso del tampón
succinato para reducir al mínimo el dolor asociado a la
inyección.
La presente invención proporciona una
composición farmacéutica inyectable que comprende el factor de
crecimiento tipo insulina I (IGF-I) humano o su
variante biológicamente activa y un tampón, en el que dicho tampón
consiste sustancialmente en succinato a una concentración de 10 mM
a 40 mM y un contraión, y en el que dicha variante es un
polipéptido que tiene actividad de IGF-I y una
identidad de secuencia de aminoácidos de al menos 70% respecto a la
secuencia de aminoácidos para el IGF-I humano.
El uso de succinato como tampón proporciona
menos dolor en la inyección. En una realización preferida, la
composición de la invención comprende succinato de sodio y
IGF-1.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
pueden ser almacenadas durante largos períodos de tiempo manteniendo
la integridad física y biológica del agente farmacéuticamente
activo. La invención también se refiere a métodos para administrar
cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas
anteriormente y en este documento.
\vskip1.000000\baselineskip
Figura
1
Estabilidad de rhIGF-I como una
función del pH. En este estudio, fue formulado con rhIGF tampón de
citrato-fosfato en un intervalo de pH de
4,0-7,0. Fue medida la integridad del porcentaje del
pico principal (el pico que contiene la molécula natural) durante un
período de ocho semanas a una temperatura de 50ºC. La medida fue con
CN(ciano)-RP-HPLC.
Figura
2
Estabilidad de rhIGF-I como una
función del pH. En este estudio, fue formulado con rhIGF tampón de
citrato-fosfato en un intervalo de pH de
4,0-7,0. El porcentaje de actividad mitogénica fue
medida durante un periodo de ocho semanas a una temperatura de
50ºC.
Figura
3
Efecto de varias especies de tampón a pH 6,0 y
pH 6,5 respecto a la estabilidad de rhIGF. En este estudio, fueron
formulados varios tampones con rhIGF-1. La
integridad del pico principal fue medida durante un periodo de ocho
semanas a una temperatura de 50ºC. La integridad fue medida con
CN-RP-HPLC.
Figura
4
Efecto de varias especies de tampón a pH 6,0 y
pH 6,5 respecto a la estabilidad de rhIGF. La medida del porcentaje
de monómero (molécula natural) restante fue durante un periodo de
ocho semanas a una temperatura de 50ºC. El resto del porcentaje de
monómero fue medido por SDS-PAGE no reductora.
\newpage
Figura
5
Efecto de tampones de citrato de sodio y
succinato de sodio a varias concentraciones respecto a la
estabilidad de rhIGF-I. La estabilidad fue medida
durante un periodo de ocho semanas en 50ºC. La medida fue hecha por
ensayo del porcentaje de monómero por SDS-PAGE no
reductora.
Figura
6
Efecto de tampones de citrato de sodio y
succinato de sodio a varias concentraciones respecto a la
estabilidad de rhIGF-I. La estabilidad fue medida
por ensayo de actividad mitogénica durante un periodo de ocho
semanas a 50ºC.
Figura
7
Datos de un modelo de activación nociceptor
diseñado para predecir el dolor con la inyección inducida por
formulaciones. En este modelo, es usada la capsaicina (un compuesto
conocido por causar dolor en la inyección) (Santos et al.
(1997) Neuropeptides 31: 381-389) para
generar una curva estándar. Las formulaciones entonces fueron
analizadas y les fue dado un valor basado en la curva estándar.
Todas las formulaciones entonces fueron comparadas con la solución
salina normal. Dos tampones fueron analizados y comparados con la
solución salina normal: ácido acético 87 mM, acetato de sodio 13 mM,
pH 4,0; y succinato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 140 mM, pH 6,0.
C1, C2 y C3 son diferentes concentraciones de capsaicina.
Figura
8
Efectos irritantes locales de formulaciones
farmacéuticas inyectadas subcutáneamente. Se inyectó a conejos con
solución salina, un vehículo control (tampón sin el agente
farmacéutico), y una muestra de ensayo (tampón más el agente
farmacéutico) en tres sitios separados. A: succinato de sodio 10 mM,
cloruro de sodio 140 mM, pH 6,0; B: citrato de sodio 10 mM, cloruro
de sodio 135 mM, pH 6,0; C: ácido acético 87 mM, acetato de sodio
13 mM, cloruro de sodio 50 mM; D: metionina 1 mM, cloruro de sodio
135 mM, pH 6,0; E: succinato de sodio 10 mM; arginina
125 mM, cloruro de sodio 20 mM, pH 6,0; y F: sacarosa del 1,9%, cloruro de sodio 97 mM, pH 4,8.
125 mM, cloruro de sodio 20 mM, pH 6,0; y F: sacarosa del 1,9%, cloruro de sodio 97 mM, pH 4,8.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención se refiere a una composición
farmacéutica inyectable que comprende IGF-1 y un
tampón, en el que dicho tampón consiste sustancialmente en un
tampón de succinato. Las formulaciones farmacéuticas tamponadas con
succinato causan menos dolor en la inyección que formulaciones
similares que contienen tampones distintos a succinato, tales como
tampones de citrato, fosfato o acetato.
La invención además proporciona una composición
de la invención para el uso en un método de tratamiento, prevención
o diagnóstico de una enfermedad o condición, en un sujeto humano o
animal mediante inyección.
Por "tampón succinato" se entiende un
tampón que comprende una sal de ácido succícino. En una realización
preferida, el catión del succinato es el sodio. Sin embargo, se
espera que cualquier catión sea eficaz. Otros cationes de succinato
posibles incluyen potasio, amonio, calcio y magnesio. En una
realización, el agente farmacéuticamente activo
IGF-1 proporciona el catión.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
son tamponadas sustancialmente o esencialmente por un tampón
succinato. Será entendido, sin embargo, que otros compuestos pueden
estar presentes en las composiciones de la invención que tienen una
capacidad tamponante relativamente menor. Los ejemplos de tales
compuestos son el agente farmacéuticamente activo en sí mismo,
agentes estabilizantes, y otros similares.
El tampón de succinato puede ser usado en un
intervalo de concentraciones de 10 mM hasta 40 mM. Los intervalos
de concentración adecuados incluyen aproximadamente
11-30 mM; 12-25 mM;
13-20 mM; 14-19 mM; y
aproximadamente 15 mM. Los intervalos de concentración preferidos
del tampón succinato son menos de 40 mM, menos de 35 mM, menos de
30 mM, menos de 25 mM, menos de 20 mM y menos de 15 mM. Lo más
preferiblemente, la concentración de tampón succinato es de
aproximadamente 10 mM.
Preferiblemente, el agente farmacéuticamente
activo IGF-1 está presente en las composiciones de
la invención en una concentración útil para la administración de una
cantidad farmacéuticamente eficaz de dicho agente a un sujeto. El
agente farmacéuticamente activo puede prepararse a partir de
cualquier fuente, incluyendo la purificación a partir de un
mamífero, la producción recombinante o la síntesis química.
En la presente invención, el agente
farmacéuticamente activo es IGF-I humano
(hIGF-I) o su variante biológicamente activa. Lo más
preferiblemente, el agente farmacéuticamente activo es el
IGF-I recombinante (rhIGF-1).
El término "IGF-I", según
se usa en este documento, se refiere al factor de crecimiento tipo
insulina I, en su forma natural y sus variantes biológicamente
activas. Las variantes biológicamente activas adecuadas pueden ser
los fragmentos, análogos y derivados de IGF-I.
Preferiblemente, el IGF-I es de la misma especie que
la especie que sufre el tratamiento. Sin embargo, el
IGF-I de la presente invención puede ser codificado
por cualquier especie animal incluyendo aviar, canino, bovino,
porcino, equino y humano.
Puede ser purificado IGF-I a
partir de una fuente natural, puede ser químicamente sintetizado o
producido recombinantemente. El IGF-I humano ha
sido purificado a partir de plasma y se ha establecido su secuencia
de aminoácidos completa (Rinderknecht et al. (1978) J.
Biol. Chem. 253: 2769-2776). Las secuencias con
extensas homologías respecto a IGF-I humano están
presentes en el IGF-I purificado a partir del plasma
de otras especies.
Las composiciones de la presente invención
pueden incluir variantes biológicamente activas de
IGF-I. Las variantes de IGF-I se
diferencian de las moléculas de IGF-I naturales
debido a la modificación química o a inserciones de aminoácidos,
deleciones, sustituciones (incluyendo aminoácidos químicamente
modificados), y truncamientos del extremo carboxi- o
amino-terminal o fusiones. Tales variantes deben
conservar sustancialmente o completamente las actividades de
IGF-I suficientes para el tratamiento beneficioso de
un trastorno dado. En particular, las variantes deben conservar la
capacidad de unirse a sitios del receptor de IGF-I.
Los expertos en la técnica conocen las variantes de
IGF-I. Véase, por ejemplo, la Patente de EE.UU. Nº
5.374.620.
Por "sustancialmente" se entiende una
actividad que puede ser cuantitativamente diferente, siendo
cualitativamente la misma. Cuando una proteína tiene múltiples
actividades, una variante puede tener sustancialmente la misma
actividad si tiene menos que todas las actividades, siempre que una
de estas sea conservada. Preferiblemente, la variante tiene al menos
la misma actividad que la molécula natural.
La actividad de IGF-I puede ser
medida usando bioensayos de IGF-I estándar conocidos
por los expertos en la técnica. Los ensayos representativos
incluyen ensayos de radioreceptor conocidos usando membranas
placentarias (véase, por ejemplo, la Patente de EE.UU. Nº
5.324.639; Hall et al. (1974) J. Clin. Endocrinol. and
Metab. 39: 973-976; y Marshall et al.
(1974) J. Clin. Endocrinol. and Metab. 39:
283-292), un bioensayo que mide la capacidad de la
molécula de realzar la incorporación de timidina tritiada, en una
manera dependiente de la dosis, en el ADN de fibroblastos de BALB/C
3T3 (véase, por ejemplo, Tamura et al. (1989) J. Biol.
Chem. 262: 5616-5621), incorporado en este
documento como referencia.
Por "fragmento de IGF-I" se
entiende un péptido que es sólo una parte de la secuencia de
IGF-I intacta y estructura. Esto incluye, pero no
está limitado, a una deleción del extremo C-terminal
o una deleción del extremo N-terminal de
IGF-I. El término "fragmento" se entiende que
incluye cualquier parte de la proteína que proporcione un segmento
que sustancialmente o completamente conserve la(s)
función(ones) biológica(s) esencial(s) de la
proteína. Los fragmentos pueden prepararse a partir de cualquier
fuente, tal como, por ejemplo, a partir de secuencias peptídicas
naturales, secuencias peptídicas sintéticas o químicamente
sintetizadas, y secuencias peptídicas manipuladas
genética-
mente.
mente.
Por "análogo" se entiende un análogo de
IGF-I o de un fragmento de IGF-I que
comprende una secuencia de IGF-I natural y una
estructura que tiene una o varias sustituciones de aminoácidos,
inserciones, o deleciones. Un análogo abarca una proteína que es la
misma o sustancialmente similar en función a la proteína natural.
Por ejemplo, un análogo de la proteína IGF-I es una
proteína que no tiene la misma secuencia de aminoácidos que la
proteína IGF-I, pero que es suficientemente homóloga
para conservar sustancialmente o completamente la actividad
biológica. Los péptidos que tienen uno o varios peptoides (imitan al
péptido) también están abarcados por el término "análogo"
(véase la Publicación Internacional Nº WO 91/04282).
Las modificaciones adecuadas de
IGF-I, fragmentos de IGF-I, o sus
análogos respectivos, incluyen, pero no están limitadas, a
glicosilación, fosforilación, PEGilación, u otra adición de restos
ajenos, siempre que la actividad de IGF-I sea
sustancialmente o completamente conservada. Tales modificaciones
pueden mejorar la solubilidad del compuesto, absorción, semivida
biológica, disminuir la toxicidad de la molécula, o eliminar o
atenuar cualquier efecto secundario indeseable de la molécula, etc.
Los derivados y específicamente, los restos químicos capaces de
mediar tales efectos son descritos en "Remington's Pharmaceutical
Sciences" (1980). Los procedimientos para acoplar tales restos a
una molécula son conocidos en la técnica.
Las variantes de IGF-I
generalmente tendrán al menos un 70%, preferiblemente 80%, más
preferiblemente de 90% a 95% o más, y lo más preferiblemente un 98%
o más de identidad de secuencia de aminoácidos respecto a la
secuencia de aminoácidos de la molécula IGF-I de
referencia. Una variante puede diferenciarse por únicamente 10,
únicamente 5, únicamente 4, 3, 2, o hasta 1 resto de aminoácido. Por
"identidad de secuencia" se entiende que los mismos restos de
aminoácidos son encontrados dentro de la variante de
IGF-I y la molécula IGF-I de
referencia cuando un segmento especificado y contiguo de la
secuencia de aminoácidos de la variante es alineado y comparado con
la secuencia de aminoácidos de la molécula de referencia. La
identidad de secuencia es determinada de acuerdo con el Paquete de
Análisis de Secuencia de Wisconsin, el programa GAP, Versión 8
(disponible en el Grupo "Genetics Computer", Madison,
Wisconsin), usando los ajustes por defecto.
Para los objetivos de alineación óptima de las
dos secuencias, el segmento contiguo de la secuencia de aminoácidos
de la variante puede tener restos de aminoácidos adicionales o
restos de aminoácidos suprimidos respecto a la secuencia de
aminoácidos de la molécula de referencia. El segmento contiguo usado
para la comparación respecto a la secuencia de aminoácidos de
referencia comprenderá al menos veinte (20) nucleótidos contiguos, y
puede tener 30, 40, 50, 100, o más nucleótidos. Las correcciones
para la identidad de secuencia aumentada asociada con la inclusión
de huecos en la secuencia de aminoácidos de la variante pueden ser
hechas asignando fallos de huecos. Los métodos de alineación de
secuencia son conocidos en la técnica.
Considerando el porcentaje de identidad de
secuencia de aminoácidos, algunas posiciones de restos de
aminoácidos pueden diferenciarse como consecuencia de las
sustituciones de aminoácidos conservadoras, que no afectan a las
propiedades de la función de la proteína. En estos casos, el
porcentaje de la identidad de secuencia puede ser ajustado hacia
arriba para considerar la semejanza en aminoácidos sustituidos de
manera conservadora. Tales ajustes son conocidos en la técnica.
Véase, por ejemplo, Meyers y Miller (1988) Computer Applic. Biol.
Sci. 4: 1117.
La técnica proporciona una guía sustancial en
cuanto a la preparación y el uso de tales análogos, como se discute
más abajo. Un fragmento de IGF-I generalmente
incluirá al menos aproximadamente 10 restos de aminoácidos
contiguos de la molécula de cadena entera, preferiblemente
aproximadamente 15-25 restos de aminoácido contiguos
de la molécula de cadena entera, y lo más preferiblemente
aproximadamente 20-50 o más restos de aminoácidos
contiguos de IGF-I de cadena entera. En la
preparación de las variantes de IGF-I, cualquier
experto en la técnica puede determinar fácilmente qué
modificaciones respecto a la secuencia de nucleótidos o aminoácidos
de la proteína natural causarán una variante que permita la
preparación de la forma altamente concentrada de la variante de
IGF-I conforme a los métodos descritos en la
presente invención. Éstas generalmente serán sustituciones de
aminoácidos conservadoras que conservan la carga del resto
sustituido (por ejemplo, ácido aspártico por ácido glutámico).
Se conocen varios análogos de
IGF-I y fragmentos en la técnica e incluyen los
descritos en, por ejemplo, Proc.Natl. Acad. Sci. USA (1986)
83: 4904-4907; Biochem. Biophys. Res. Commun.
(1987) 149: 398-404; J. Biol. Chem. (1988)
263: 6233-6239; Biochem. Biophys. Res.
Commun. (1989) 165: 766-771; Forsbert et
al. (1990) Biochem. J. 271: 357-363;
Patentes de EE.UU. N^{os} 4.876.242 y 5.077.276; y N^{os} de
Publicación Internacional WO87/01038 y WO89/05822. Los análogos
representativos incluyen uno con una deleción de
Glu-3 de la molécula madura, análogos con hasta 5
aminoácidos truncados del extremo N-terminal, un
análogo con un truncamiento de los 3 primeros aminoácidos del
extremo N-terminal (denominados
des(1-3)-IGF-I,
des-IGF-I, tIGF-I, o
IGF de cerebro), y un análogo que incluye los 17 primeros
aminoácidos de la cadena B de insulina humana en el lugar de los 16
primeros aminoácidos de IGF-1 humano.
Los métodos para preparar fragmentos de
IGF-I, análogos y derivados están disponibles en la
técnica. Véase, de forma general, las Patentes de EE.UU. N^{os}
4.738.921, 5.158.875 y 5.077.276; N^{os} de Publicación
Internacional WO85/00831, WO 92/04363, WO 87/01038 y WO 89/05822; y
Patentes Europeas N^{os} EP 135094, EP 123228 y EP 128733.
El IGF-I puede ser de cualquier
especie animal incluyendo, pero no limitado, a aviar, canino,
bovino, porcino, equino y humano. Preferiblemente, el
IGF-I es de una especie de mamífero cuando el
tratamiento es de un trastorno sensible al IGF-I de
mamífero, y más preferiblemente es de un mamífero de la misma
especie que el mamífero que sufre el tratamiento para tal
trastorno. Se reconoce que el IGF-I puede prepararse
mediante métodos recombinantes usando la secuencia correspondiente
que codifica para IGF-I de la especie animal de
interés. Tales métodos recombinantes son discutidos más abajo
detalladamente.
Las variantes biológicamente activas de
IGF-I deberían conservar las actividades de
IGF-I, particularmente la capacidad de unirse a los
sitios del receptor de IGF-I. La actividad de
IGF-I puede ser medida usando bioensayos de
IGF-I estándar. Ensayos representativos incluyen los
conocidos ensayos de radioreceptor que usan membranas placentarias
(véase, por ejemplo, la Patente de EE.UU. Nº 5.324.639; Hall et
al. (1974) J. Clin. Endocrinol. and Metab. 39:
973-976; y Marshall et al. (1974) J Clin.
Endocrinol. and Metab. 39: 283-292), un
bioensayo que mide la capacidad de la molécula de realzar la
incorporación de timidina tritiada, en una manera dependiente de la
dosis, en el ADN de fibroblastos de BALB/C 3T3 (véase, por ejemplo,
Tamura et al. (1989) J. Biol. Chem. 262:
5616-5621), y similares; incorporado en este
documento como referencia. Preferiblemente, la variante tiene al
menos la misma actividad que la molécula natural.
El IGF-I usado en la fabricación
de las composiciones de la presente invención puede estar en su
forma sustancialmente purificada, natural, producida
recombinantemente o químicamente sintetizada. Por ejemplo, el
IGF-I puede ser aislado directamente a partir de la
sangre, tal como a partir del suero o del plasma, por métodos
conocidos. Véase, por ejemplo, Phillips (1980) New Eng. J.
Med. 302: 371-380; Svoboda et al. (1980)
Biochemistry 19: 790797; Comell y Boughdady (1982) Prep.
Biochem. 12: 57; Cornell y Boughdady (1984) Prep.
Biochem. 14: 123; Patente europea Nº EP 123.228; y Patente de
EE.UU. Nº 4.769.361.
De forma alternativa, el IGF-I
puede ser sintetizado químicamente, por cualquiera de diversas
técnicas conocidas por los expertos en la técnica de los péptidos.
Véase, por ejemplo, Li et al. (1983) Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 80: 2216-2220, Stewart y Young (1984)
"Solid Phase Peptide Synthesis" (Pierce Chemical Company,
Rockford, Illinois), y Barany y Merrifield (1980) "The Peptides:
Analysis, Synthesis, Biology", ed. Gross y Meienhofer, Vol. 2
(Academic Press, New York, 1980), págs. 3-254, para
las técnicas de síntesis de péptidos en fase sólida; y Bodansky
(1984) "Principles of Peptide Synthesis"
(Springer-Verlag, Berlín); y Gross y Meienhofer,
ed. (1980) "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 1
(Academic Press, Nueva York), para la síntesis en solución clásica.
El IGF-I también puede prepararse químicamente por
el método de la síntesis múltiple de péptidos simultánea. Véase, por
ejemplo, Houghten (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA
82:5131-5135; y Patente de EE.UU. Nº 4.631.211.
La ingeniería genética mediante técnicas de ADN
recombinante puede ser el modo más eficiente de producir
IGF-I. Se conoce la secuencia de ADN humana que
codifica para IGF-I y puede ser introducida en
células huésped para su expresión. El IGF-I puede
ser producido mediante técnicas de ADN recombinante en E.
coli, levadura, células de insecto y mamífero. El
IGF-I secretado puede prepararse añadiendo una
secuencia señal a la secuencia de ADN que codifica para
IGF-1. Además, la secuencia de ADN que codifica para
IGF-I puede ser manipulada para preparar fragmentos
de IGF-I, análogos o derivados. Tales técnicas de
ADN recombinante están generalmente disponibles en la técnica.
Véase, por ejemplo, la Publicación Internacional Nº WO 96/07424, en
la que la proteína recombinante de IGF-I humana es
producida en levadura.
La concentración apropiada de
IGF-I en las composiciones de la invención depende
de la solubilidad en el tampón específico usado y la cantidad
terapéutica deseada para la dosis dada. Típicamente, la
concentración de IGF-I en las composiciones
líquidas de la invención estará en el intervalo de
0,01-200 mg/ml. Preferiblemente, la concentración de
IGF-I es 0,1-20,0 mg/ml, y más
preferiblemente 2,0-10,0 mg/ml.
La composición farmacéutica que comprende
IGF-I y un tampón de succinato también puede
contener otros componentes que faciliten el tratamiento con IGF.
Tales componentes incluyen proteínas de unión de
IGF-I, receptores de IGF-I, y la
subunidad ácido-lábil del complejo de unión de IGF.
Es generalmente conocido que la acción de IGF-I en
el cartílago está modulada por proteínas de unión de
IGF-I, al menos seis de las cuales (de
IGFBP-1 a IGFBP-6) han sido
aisladas (véase Baxer et al. (1989) Prog. Growth Factors
Res. 1:49-68; y Rechler et al. (1992)
Growth Regul. 2:55-68). De éstas,
IGFBP-3 es la proteína de unión primaria para
IGF-I. Su presencia puede realzar el efecto
estimulador de IGF-I en la síntesis de proteoglucano
(véase Chevalier et al. (1996) British J. Rheumat.
35:515-522). Además, se ha demostrado que una
glicoproteína ácido lábil también se asocia con el complejo de
proteína formado por IGF-I y sus proteínas de unión.
Así, la composición farmacéutica de la invención puede contener tal
glicoproteína ácido lábil y proteínas de unión de
IGF-I, cuando se prueba para facilitar el efecto
deseado de IGF-I en el mantenimiento y/o la
regeneración del cartílago.
La cantidad de IGFBP que se administran con
IGF-I puede ser determinada de acuerdo con la
relación molar entre IGF-I y las IGFBP. Esta
relación molar puede estar en el intervalo de 0,5:1 a 3:1,
preferiblemente 1:1 (véase la Patente de EE.UU. Nº 5.187.151).
Todas tales referencias a los componentes que facilitan el
mantenimiento promovido por IGF y/o la regeneración del cartílago en
este documento son incorporadas como referencia.
La composición farmacéutica de
IGF-I conforme a la presente invención puede
comprender además a uno o varios otros agentes terapéuticos que
sean eficaces en el tratamiento de otros trastornos en el individuo,
siempre que las acciones bioquímicas de los agentes terapéuticos
adicionales no interfieran con la eficacia de la acción pretendida
del tratamiento con IGF-I. Los ejemplos de tales
agentes incluyen antibióticos, agentes antinflamatorios y otros
similares.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
pueden incluir uno o varios inhibidores de proteasa. Un inhibidor de
proteasa ejemplar es pentosan polisulfato de sodio (PPS), un
polisacárido polisulfatado.
Las composiciones de la invención pueden incluir
opcionalmente a agentes estabilizantes incluyendo, aminoácidos
(tales como arginina, lisina y glicina), azúcares (tales como
sacarosa, manitol y trehalosa), sales (tales como NaCl y
MgCl_{2}), tensioactivos, PEG, conservantes, agentes
antimicrobianos, agentes complejantes (tales como el EDTA) y
antioxidantes. Para hIGF-1, las formulaciones pueden
incluir bajos niveles de metionina, tal como 1 mM, para reducir la
oxidación y conservar contra la agregación o la precipitación de la
proteína.
Preferiblemente, la composición farmacéutica es
isotónica con las células del sujeto. Preferiblemente, la
composición farmacéutica es isotónica con los eritrocitos del
sujeto. Más preferiblemente, la composición farmacéutica es
isotónica con los eritrocitos humanos. Así, en una realización, la
composición farmacéutica contiene una concentración suficiente de al
menos un agente tonicificante tal que la composición sea
isotónica.
Por "isotónico" se entiende una solución en
la cual una célula ni se encogerá, ni se hinchará. Un ejemplo de una
solución isotónica es el cloruro de sodio del 0,9% en agua.
Típicamente, una solución isotónica tendrá aproximadamente la misma
presión osmótica que la fase fluido de las células de un sujeto o
tejido. Sin embargo, una solución que es isosmótica con el fluido
intracelular no será isotónica si éste contiene un soluto que
impregne libremente las membranas celulares. Para determinar si una
solución es isotónica, es necesario identificar la concentración de
solutos en los cuales las células conservarán su tamaño normal y
forma. Se conocen métodos para determinar la isotonicidad de una
solución para los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo,
Setnikar et al. (1959) JAPhA Sci Editor
48: 628.
48: 628.
En una realización preferida, la composición
farmacéutica comprende además cloruro de sodio. El cloruro de sodio
es incluido para proporcionar la isotonicidad a la formulación. Por
lo tanto, la concentración de cloruro de sodio en la formulación
dependerá de la contribución de los otros componentes tonificantes.
Preferiblemente, la concentración de cloruro de sodio es
aproximadamente 140 mM.
Los expertos en la técnica tienen familiaridad
con una variedad de solutos farmacéuticamente aceptables útiles en
proporcionar isotonicidad en composiciones farmacéuticas. Así, las
composiciones de la invención además comprenden componentes que
pueden ser usados para proporcionar isotonicidad, por ejemplo,
cloruro de sodio, glicina, manitol, glicerol, sacarosa y otros
carbohidratos, ácido acético, otros ácidos orgánicos o sus sales, y
cantidades relativamente menores de citratos o fosfatos. El experto
ordinario en la técnica conocerá agentes adicionales que sean
adecuados para proporcionar una tonicidad óptima.
El pH de la composición farmacéutica afecta
tanto al nivel del dolor en la inyección como a la estabilidad del
ingrediente farmacéuticamente activo. Un ingrediente
farmacéuticamente activo dado tendrá mayor estabilidad en un cierto
intervalo de pH de un tampón particular. El pH óptimo que
proporciona el equilibrio deseado de estabilidad y mínimo o ningún
dolor en la inyección puede ser determinado por los expertos en la
técnica. Sin embargo, el intervalo de pH podría comprender
formulaciones con un pH 4,0-7,5. Los pH adecuados
incluyen 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1,
5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4,
6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5. Intervalos de
pH adecuados son 4,5-7,2; 4,6-7,1;
4,7-7,0; 4,8-6,9;
4,9-6,8; 5,0-6,7;
5,1-6,6; 5,2-6,5;
5,3-6,4; 5,4-6,3;
5,5-6,2; 5,7-6,1 y
5,8-6,0. El intervalo preferido es pH
4,6-6,6. Lo más preferiblemente, el pH es 5,6. Para
composiciones que contienen IGF-I, el pH preferido
es 6,0.
La composición farmacéutica puede ser formulada
como una solución, suspensión o emulsión. También puede estar en
forma de polvo liofilizado, que pueda ser convertido en una
solución, suspensión o emulsión antes de la administración. El
almacenaje también puede ser facilitado añadiendo proteínas tales
como albúmina humana que pueden reducir la pérdida de actividad de
la proteína farmacéuticamente activa. Así, la albúmina podría
funcionar como una proteína estabilizante durante el procedimiento
de liofilización. Los métodos para formular una composición
farmacéutica son generalmente conocidos en la técnica. Una discusión
profunda de la formulación y selección de vehículos
farmacéuticamente aceptables, estabilizadores, e isomolitos puede
ser encontrada en "Remington's Pharmaceutical Sciences" (1990)
(18 ed., Mack Pub. Co., Eaton, Pensilvania).
El agente farmacéuticamente activo también puede
ser formulado en una forma de liberación sostenida para prolongar la
presencia del agente farmacéuticamente activo en el mamífero
tratado, generalmente durante más de un día. Se conocen muchos
métodos de preparación de formulaciones de liberación sostenida en
la técnica y son descritas en "Remington's Pharmaceutical
Sciences" (1990) 18 ed., Mack Pub. Co., Eaton, Pensilvania.
Generalmente, el agente puede ser atrapado en matrices
semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos. Las matrices pueden
ser formadas en películas o microcápsulas.
Los ejemplos de tales matrices incluyen
poliésteres, copolímeros de ácido L-glutámico y
\gamma-etil-L-glutamato
(Sidman et al. (1983) Biopolymers 22:
547-556), poliactidas (Patente de EE.UU. Nº
3.773.919 y documento EP 58.481), poliglicolato de poliactato
(PLGA), hidrogeles (véase, por ejemplo, Langer et al. (1981)
J. Biomed. Mater. Res. 15: 167-277; Langer
(1982) Chem. Tech. 12: 98105), acetato de etilenvinilo no
degradable, copolímeros de ácido láctico-ácido glicólico degradables
tales como el LupronDepot®, y poly-D-(-)-ácido
3-hidroxibutírico (documento EP 133.988).
Microcápsulas adecuadas también pueden incluir hidroximetilcelulosa
o microcápsulas de gelatina y microcápsulas de
poli-metilmetacrilato preparadas por técnicas de
coacervación o por polimerización interfacial. Además, también
pueden ser usadas micro-emulsiones o sistemas de
liberación de fármaco coloidales tales como liposomas y microesferas
de albúmina. Véase "Remington's Pharmaceutical Sciences" (1990)
(18 ed., Mack Pub. Co., Eaton, Pensilvania).
Las composiciones de la invención, que
comprenden al agente farmacéuticamente activo y un compuesto de
succinato, pueden ser almacenadas durante largos períodos de tiempo
manteniendo la integridad física y biológica del agente
farmacéuticamente activo. El almacenaje puede ser en forma líquida o
como una formulación seca, que puede ser reconstituida añadiendo un
líquido. Cuando los agentes farmacéuticamente activos son proteínas,
el almacenaje puede ser facilitado por procedimientos de secado,
tales como la liofilización. En consecuencia, la proteína puede ser
almacenada en forma de una composición liofilizada. Así, en una
realización, la invención proporciona una composición farmacéutica
liofilizada que comprende un compuesto de succinato y el agente
farmacéuticamente activo.
El intervalo de temperaturas en la cual el
almacenaje de una preparación líquida de un agente farmacéuticamente
activo y succinato es posible es de 2ºC a 8ºC, con una semivida de
almacenaje esperada de 18-24 meses o más larga. El
intervalo de temperaturas en la cual el almacenaje de una
preparación seca de un agente farmacéuticamente activo y succinato
es posible es de 2ºC a 30ºC, con una semivida de almacenaje esperada
de 18 a 24 meses o más larga. Las formulaciones pueden ser
almacenadas, sin embargo, hasta 5 años. Un intervalo más para la
formulación en seco es de 22ºC a 30ºC. Las temperaturas preferidas
incluyen, pero no están limitadas, a de 2ºC a 8ºC para líquido, y
temperatura ambiente (es decir, 25ºC-30ºC) para
seco. Las formulaciones líquidas y secas son estables durante
aproximadamente 18-24 meses o más tiempo. Se ha
demostrado que la formulación específica descrita de
rhIGF-I es estable durante al menos un año a
2-8ºC en forma líquida.
La composición farmacéutica preferiblemente es
esterilizada por filtración de membrana y es almacenada en
recipientes de dosis unitarias o multidosis tales como viales
sellados o ampollas. En una realización de la invención, el espacio
de cabeza de los viales puede ser insuflado con nitrógeno al
rellenarlo. La invención también comprende dispositivos para
dosificar convenientemente, tales como jeringuillas prerrellenas,
autoinyectores, paquetes de ampollas, o sistemas sin aguja, para
hacer la administración o la inyección más fácil.
Una cantidad farmacéuticamente eficaz de la
composición de la invención es administrada a un sujeto. Por
cantidad farmacéuticamente eficaz se entiende una cantidad que es
útil en el tratamiento, la prevención o el diagnóstico de una
enfermedad o condición.
Por el término "administrar" se entiende
cualquier método adecuado para suministrar un agente
farmacéuticamente activo a un sujeto, incluyendo parenteral,
intranasal, intrapulmonar, oral, tópica, anal o implantación
quirúrgica o inserción. Las rutas parenterales de administración
típicas incluyen inyección intravenosa, intramuscular, subcutánea,
intraarterial e intraperitoneal o infusión. Preferiblemente, la
administración es por inyección. En realizaciones preferidas, la
inyección es subcutánea. Las formas inyectables de las composiciones
de la invención incluyen, pero no están limitadas, a soluciones,
suspensiones y emulsiones.
Por "sujeto" se entiende cualquier animal.
Preferiblemente, el sujeto es un mamífero, preferiblemente el sujeto
es un ser humano. Los mamíferos de importancia particular otra que
el ser humano incluyen perros, gatos, vacas, caballos, oveja y
cerdos.
Cuando la administración es para el objetivo del
tratamiento, la administración puede ser para un objetivo
profiláctico o terapéutico. Cuando se proporciona profilácticamente,
la sustancia es proporcionada antes de cualquier síntoma. La
administración profiláctica de la sustancia sirve para prevenir o
atenuar cualquier síntoma subsecuente. Cuando se proporciona
terapéuticamente, la sustancia es proporcionada en (o un poco
después de) el inicio de un síntoma. La administración terapéutica
de la sustancia sirve para atenuar cualquier síntoma real.
La composición farmacéutica que comprende
IGF-I reconstituido debe ser formulada en una forma
de dosificación unitaria e inyectable o infusible tal como
solución, suspensión o emulsión. También puede estar en forma de
polvo liofilizado, que puede ser convertido en una solución,
suspensión o emulsión antes de la administración. La composición
farmacéutica que comprende IGF-I reconstituido
preferiblemente es esterilizada por filtración de membrana y es
almacenada en dosis unitarias o recipientes de multidosis tales como
viales sellados o ampollas.
Un vehículo farmacéuticamente aceptable debe ser
mezclado con el agente farmacéuticamente activo y el tampón de
succinato. Por "vehículo farmacéuticamente aceptable" se
entiende un vehículo que es usado de manera convencional en la
técnica para facilitar el almacenaje, la administración, y/o el
efecto de cura de los ingredientes terapéuticos. El vehículo
también puede reducir cualquier efecto secundario indeseable del
IGF-I. Un vehículo adecuado debe ser estable, es
decir, incapaz de reaccionar con otros ingredientes en la
formulación. No debe producir un efecto local significativo o
sistémico adverso en los receptores a las dosificaciones y
concentraciones empleadas para el tratamiento. Tales vehículos son
conocidos de forma general en la técnica. Los vehículos adecuados
para esta invención son macromoléculas grandes estables usadas de
manera convencional tales como albúmina, gelatina, colágeno,
polisacáridos, monosacáridos, polivinilpirrolidona, ácido
poliláctico, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos,
aceites fijados, oleato de etilo, liposomas, glucosa, sacarosa,
lactosa, manosa, dextrosa, dextrano, celulosa, manitol, sorbitol,
polietilenglicol (PEG), y otros similares. Los vehículos de
liberación lenta, tales como el ácido hialurónico, también pueden
ser adecuados. Véase particularmente Prisell et al. (1992)
Int. J. Pharmaceu. 85: 51-56, y la Patente de
EE.UU. Nº 5.166.331. La inclusión del ácido hialurónico y otros
polímeros puede tener un efecto beneficioso adicional sobre el
trastorno sensible a IGF-I osteoartritis. Véase
particularmente Bragantini (1987) Clin. Trials J. 24 (4):
333-340; Dougados et al. (1993)
Osteoarthritis and Cartilage 1: 97-103; y
Lussier et al. (1996) J Rheum.
23: 1579-1585.
23: 1579-1585.
La composición farmacéutica puede comprender
además a un agente de solubilización o denominado potenciador de la
solubilidad. Los compuestos que contienen un grupo guanidinio, más
preferiblemente la arginina, son potenciadores de la solubilidad
adecuados.
El método para formular una composición
farmacéutica es generalmente conocido en la técnica. Una discusión
cuidadosa de la formulación y selección de vehículos
farmacéuticamente aceptables, estabilizadores, e isomolitos puede
ser encontrada en "Remington's Pharmaceutical Sciences" (18
ed.; Mack Pub. Co.: Eaton, Pensylvania, 1990).
Las composiciones farmacéuticas que comprenden
IGF-I son útiles en la terapia dirigida al
tratamiento de condiciones sensibles a IGF-I. Por
"condición sensible a IGF-I" se entiende
cualquier condición que responde a corto plazo o a largo plazo
positivamente o negativamente frente a IGF-I. Tales
condiciones sensibles a IGF-I pueden ser una
condición normal. Por ejemplo, un mamífero puede sufrir terapia con
IGF-I para aumentar la masa muscular normal donde
sea deseable una mayor masa de músculo, tal como en un atleta. Al
contrario, la condición sensible a IGF-I puede ser
una condición anormal que sea crónica, y así ocurre más o menos
continuamente, o que sea aguda, como ocurre después del daño en un
sitio, tal como una herida ósea o en una articulación.
Las condiciones sensibles a
IGF-I incluyen condiciones agudas o crónicas
incluyendo, pero no limitadas, a trastornos hiperglucémicos,
incluyendo todas las formas de diabetes; enfermedad crónica
pulmonar; trastornos renales agudos y crónicos; daño hepático agudo
y crónico; cirrosis hepática; respuestas inflamatorias, tales como
artritis reumatoide, artritis psoriática, síndrome de Reiter y
enfermedad inflamatoria del intestino; síndrome del intestino
corto; daño isquémico que implica el corazón, hígado o cerebro, o
tales como son el resultado de la necrosis tubular renal;
trastornos inmunológicos, tales como inmunodeficiencias incluyendo
tolerancia inmune disminuida o daño de tejido inducido por
quimioterapia; rechazo de órganos después del trasplante;
enfermedades o insuficiencias de la estructura o función cardíaca,
tales como enfermedades del corazón crónicas, cardiomiopatía,
apoplejía, y paro cardíaco congestivo; retraso del crecimiento;
osteoporosis; cicatrización de heridas; daño óseo; condiciones
oftálmicas; infertilidad; trastornos neurodegenerativos, tales como
la enfermedad motoneurona, esclerosis múltiple, distrofia muscular,
neuropatía diabética, neuropatías desmielinizantes periféricas,
enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, y una secuela de
lesiones medulares traumáticas; y trastornos articulares del
cartílago, tales como osteoartritis y daños relacionados con
traumas. Cualquier trastorno sensible a IGF-I puede
beneficiarse de la administración de las composiciones farmacéuticas
que comprenden el jarabe de IGF-I o
IGF-I reconstituído obtenido a partir de éste de la
presente invención.
Por "tratamiento" se entiende el
tratamiento de una condición existente normal que es realzada por el
agente farmacéuticamente activo, el tratamiento terapéutico de una
condición existente anormal, y procedimientos preventivos o
profilácticos realizados antes de la aparición de un trastorno
anormal.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
pueden ser útiles para el tratamiento de cualquier mamífero. Los
mamíferos ejemplares incluyen gatos, perros, caballos, vacas, oveja,
cerdos, y más preferiblemente seres humanos.
\vskip1.000000\baselineskip
El IGF-I para uso en estos
experimentos fue producido recombinantemente en cepas de levadura de
Pichia pastoris y fue purificado esencialmente como se
describe en las Patentes de EE.UU. N^{os} 5.324.639, 5.324.660 y
5.650.496 y la Publicación Internacional Nº. WO 96/40776.
La separación y la cuantificación de especies de
rhIGF-I fueron logradas con cromatografía líquida de
alta resolución de fase inversa de ciano
(CN-RP-HPLC). Las separaciones
fueron logradas en un Zorbax 300SB-CN, 4,6 mm ID x
15 cm, 5 \mu, columna de ciano con detección de la muestra a 214
nm. Las muestras fueron diluidas en agua a una concentración común
de 0,8 mg/ml y los volúmenes de inyección fueron 20 l (\sim16
\mug de proteína por inyección). La elución fue alcanzada con un
gradiente de acetonitrilo/agua/0,2% de ácido trifluoroacético (TFA)
a partir de aproximadamente acetonitrilo del 25% (ACN) a 34% de ACN
en 25 minutos.
El perfil de
CN-RP-HPLC de
rhIGF-I contiene picos que representan al
rhIGF-I "auténtico", que es totalmente activo,
y varios otros picos que contienen especies menores de
rhIGF-I. Estas especies menores son las variantes
del rhIGF-I "auténtico" que contienen pequeños
cambios químicos respecto a la molécula de proteína (por ejemplo,
los restos de metionina oxidados, glicosilación, etc.) En el Tiempo
0, el pico cromatográfico correspondiente al
rhIGF-I "auténtico" comprende aproximadamente
el 95% del área total de todos los picos. Este pico, que contiene el
rhIGF-I "auténtico" se denomina "Pico
Principal". Para estimar la cinética de degradación de
rhIGF-I por
CN-RP-HPLC en los estudios de
estabilidad, el porcentaje del área del Pico Principal es seguido
como una función del tiempo bajo un grupo dado de condiciones de
almacenaje. Según rhIGF-I se degrada, el porcentaje
del área del Pico Principal es encontrado que disminuye según
aumenta el porcentaje del área de picos correspondiente a los
productos de degradación de rhIGF-I.
Los agregados covalentes de
rhIGF-I, que ocurren debido a la formación de
disulfuros intermoleculares, pueden ser detectados en geles de
SDS-PAGE no reductora. Para este análisis, fue
corrida Tris-glicina del 18% en
SDS-PAGE no reductora. Los geles fueron corridos a
un voltaje constante y teñidos con Coomassie Coloidal. Los geles
desteñidos fueron explorados con un densitómetro y las bandas fueron
convertidas a las áreas de los picos.
En el Tiempo 0, rhIGF-I
comprende una sola banda monomérica en SDS-PAGE no
reductora. Esta banda (es decir, la banda del monómero) comprende
el 100% del área total del pico en el Tiempo 0. Para determinar la
cinética de degradación de rhIGF-I por
SDS-PAGE no reductora en los estudios de
estabilidad, el porcentaje del área de monómero es seguido como una
función del tiempo bajo un grupo dado de condiciones de almacenaje.
Según rhIGF-I se degrada, el porcentaje del área
del monómero es encontrado que disminuye y el porcentaje del área
de otras bandas correspondiente a los productos de degradación de
rhIGF-I (por ejemplo, los dímeros, trímeros, etc.)
son encontrados que aumentan.
Las bioactividades de muestras de
rhIGF-I fueron determinadas usando un ensayo
mitogénico de acuerdo con el procedimiento de W. Lopaczynski et
al. (1993) Regulatory Peptides, 48:
207-216. Este ensayo está basado en la inducción
dependiente de la dosis de una proliferación de células por
rhIGF-1. La respuesta es medida con tinción con MTT
(bromuro de
3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolio),
que se reduce a un producto coloreado por las enzimas
mitocondriales de células vivas MG-63 (Colección de
Cultivo del Tipo Americana (ATCC CRL 1427)). El ensayo ha sido
estandartizado contra un WHO de referencia para proporcionar la
actividad de rhIGF-I en Unidades Internacionales
(UI). La actividad en % de rhIGF-I es determinada en
estudios de estabilidad por la comparación de la actividad de la
muestra con un estándar de referencia de actividad conocida.
Este Ejemplo ilustra la estabilidad de
rhIGF-I como una función del pH de la
formulación. Para la Figura 1, el tampón de
citrato-fosfato en un intervalo de pH de
4,0-7,0 fue formulado con rhIGF-1.
El porcentaje de la integridad del pico principal (el pico que
contiene la molécula natural) fue medido durante un periodo de ocho
semanas a una temperatura de 50ºC. La medida fue con
CN(ciano)-RP-HPLC. Para la
Figura 2, el tampón de citrato-fosfato en un
intervalo de pH de 4-7 fue formulado con rhIGF. El
porcentaje de actividad fue medido durante un periodo de ocho
semanas a una temperatura de 50ºC. La medida de la actividad era por
bioensayo mitogénico. Los resultados del Ejemplo 1 indican que el
pH 6,0 permite el mantenimiento de una estabilidad adecuada de
rhIGF-I en una formulación farmacéutica.
Este Ejemplo ilustra la estabilidad de rhIGF
a pH 6,0 y pH 6,5 como una función de especies tampón. Para la
Figura 3, fueron formulados varios tampones con
rhIGF-1. La integridad del pico principal fue medida
durante un periodo de ocho semanas a una temperatura de 50ºC. La
integridad fue medida por
CN-RP-HPLC. Para la Figura 4, la
medida del porcentaje de monómero (la molécula natural) restante fue
durante un periodo de ocho semanas a una temperatura de 50ºC. El
porcentaje de monómero restante fue medido por
SDS-PAGE no reductora. Los resultados mostrados en
este Ejemplo indican que (1) las formulaciones a pH 6,0 proporcionan
una mayor estabilidad que las formulaciones a pH 6,5; y (2) los
tampones de citrato de sodio y succinato de sodio son altamente
compatibles con rhIGF-I a un pH 6,0.
Este Ejemplo ilustra la estabilidad de
rhIGF-I como una función de la concentración de
citrato de sodio y succinato de sodio a pH 6,0. Para la Figura
5, la estabilidad fue medida durante un periodo de ocho semanas a
50ºC. La medida fue hecha mediante un ensayo del porcentaje de
monómero por SDS-PAGE no reductora. Para la Figura
6, la estabilidad fue medida mediante un ensayo de actividad durante
un periodo de ocho semanas a 50ºC. La medida de actividad fue hecha
mediante un ensayo mitogénico. El resultado en este Ejemplo indica
que los tampones de succinato son más compatibles con
rhIGF-I que los tampones de citrato, y que una
concentración de 10 mM es óptima para la estabilidad de
rhIGF-I.
Este Ejemplo muestra datos de un modelo de
activación nociceptor diseñado para predecir el dolor de la
inyección producida por formulaciones. En este modelo,
capsaicina (un compuesto conocido que causa dolor en la inyección)
es usado para generar una curva estándar. Las formulaciones entonces
fueron analizadas y se les dió un valor basado en la curva
estándar. Todas las formulaciones entonces fueron comparadas con
solución salina normal. Dos tampones fueron analizados y comparados
con la solución salina normal: acetato de sodio 0,1 M, pH 4,0; y
succinato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 140 mM, pH 6,0. La
formulación de acetato generó una respuesta de la curva estándar
que indicaba un dolor de inyección significativo. La formulación de
succinato 10 mM fue encontrada que no era más dolorosa que la
solución salina normal.
El estudio descrito en este Ejemplo fue
realizado para evaluar los efectos irritantes potenciales locales
de formulaciones farmacéuticas en conejos blancos de Nueva Zelanda
cuando se le administraban inyecciones subcutáneas durante siete
días consecutivos. A cada conejo le fue administrado muestras de
ensayo (tampón más IGF), controles de vehículo (tampón solo) y
solución salina en tres sitios diferentes. A los conejos les fue
administrado 0,5 ml de solución salina/vehículo/muestra de análisis
apropiada, en cada uno de los sitios designados de ensayo, una vez
a diario durante siete días consecutivos vía inyección subcutánea.
Los sitios de ensayo fueron examinados según sus signos de eritema y
edema y el signo fue anotado antes de la medicación cada día y
durante ocho y nueve días de acuerdo con un sistema de clasificación
basado en Draize (Appraisal of the Safety of Chemicals in Food,
Drugs, and Cosmetics (1959), the Association of Food and Drug
Officias of the United States, págs. 49-51). Todos
los sitios de inyección y cualquier lesión gruesa fueron fijados y
tratados según bloques de parafina. Las secciones de tejido fueron
teñidas con hematoxilina y eosina y fueron examinadas al microscopio
por un patólogo veterinario oficial. El tratamiento histológico fue
realizado por HistoTechnics, Powell, Ohio. Los resultados de la
histopatología indican que los sitios de inyección de la solución
salina y del vehículo control exhibieron una inflamación
relativamente suave y eran comparables a excepción de un sitio de
control de solución salina con inflamación severa. Los sitios de
inyección de la muestra de ensayo que exhibían la mayor parte de la
inflamación ocurrieron en las muestras de ensayo C y D. Las
muestras de ensayo restantes no fueron notablemente diferentes entre
sí, pero causaron ligeramente mayor inflamación que la solución
salina y que las muestras de vehículo control. Los vehículos control
A, B, D, E, y F, fueron comparables con la solución salina. En
consecuencia, mientras que la irritación suave externa dérmica fue
notada en varios sitios esporádicamente en todo el estudio, no fue
necesariamente ninguna indicación de la histopatología resultante.
Es de señalar en la histopatología en el sitio de inyección que las
muestras de ensayo C y D, según se consideraban, eran excepcionales,
con una inflamación sólo moderada comparada con las muestras de
ensayo restantes, que exhibieron sólo ligeramente una inflamación
mayor en su solución salina/vehículos control respectivos.
Fueron usadas las formulaciones siguientes:
(1)
\;La solución salina fue usada como una solución del 0,9%;
(2)
\;Las muestras de ensayo incluyeron el tampón del vehículo (debajo) más 8,0 mg/ml de rhIGF-1;
(3)
\;Vehículo Control A - succinato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 140 mM, pH 6,0;
- \quad
- Vehículo Control B - citrato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 135 mM, pH 6,0;
- \quad
- Vehículo Control C - acetato de sodio 0,1M, cloruro de sodio 50 mM;
- \quad
- Vehículo Control D - metionina 1 mM, cloruro de sodio 135 mM, pH 6,0;
- \quad
- Vehículo Control E - succinato de sodio 10 mM, arginina 125 mM, cloruro de sodio 20 mM, pH 6,0;
- \quad
- Vehículo Control F - citrato de amonio 7,4 mM, sacarosa del 1,9%, cloruro de sodio 97 mM, pH 4,8.
Los resultados son mostrados en la Figura 8. Los
resultados muestran que el succinato (muestra de ensayo A)
proporcionó un medio eficaz para la inyección subcutánea.
Claims (14)
1. Una composición farmacéutica inyectable que
comprende el factor de crecimiento humano tipo insulina 1
(IGF-1) o su variante biológicamente activa y un tampón, en el que dicho tampón consiste sustancialmente en succinato a una concentración de 10 mM a 40 mM y un contraión, y en el que dicha variante es un polipéptido que tiene actividad de IGF-1 y una identidad de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% respecto a la secuencia de aminoácidos para el IGF-1 humano.
(IGF-1) o su variante biológicamente activa y un tampón, en el que dicho tampón consiste sustancialmente en succinato a una concentración de 10 mM a 40 mM y un contraión, y en el que dicha variante es un polipéptido que tiene actividad de IGF-1 y una identidad de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% respecto a la secuencia de aminoácidos para el IGF-1 humano.
2. La composición de la reivindicación 1, en la
que dicho contraión se seleccionada a partir de sodio, potasio,
amonio y dicho IGF-1.
3. La composición de la reivindicación 1 ó 2, en
la que la concentración de succinato es de 10 mM a 30 mM.
4. La composición de la reivindicación 3, en la
que la concentración de succinato es de 10 mM a 20 mM.
5. La composición de la reivindicación 4, en la
que la concentración de succinato es aproximadamente 10 mM.
6. La composición de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en la que dicha composición tiene un
pH de 4,0 a 7,0.
7. La composición de la reivindicación 6, en la
que dicho pH es de 4,6 a 6,6.
8. La composición de la reivindicación 7, en la
que dicho pH es aproximadamente 6,0.
9. La composición de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, que comprende además una concentración
suficiente de al menos un agente tonicificante tal que la
composición es isotónica.
10. La composición de la reivindicación 9, en la
que dicho agente tonicificante es cloruro de sodio.
11. La composición de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en la que dicho IGF-1
humano es IGF-1 recombinante humano.
12. La composición de la reivindicación 1 ó 11,
en la que dicha composición tiene un pH de aproximadamente 6,0, la
concentración de dicho succinato es aproximadamente 10 mM, y la
composición comprende además cloruro de sodio aproximadamente 140
mM.
13. La composición de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en la que dicha composición es un
líquido.
14. La composición de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en la que dicha composición es
liofilizada.
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| US5783556A (en) * | 1996-08-13 | 1998-07-21 | Genentech, Inc. | Formulated insulin-containing composition |
| GB2326279B (en) * | 1997-06-11 | 2002-07-31 | Hyundai Electronics Ind | Method of forming a capacitor of a semiconductor device |
| US6663899B2 (en) * | 1997-06-13 | 2003-12-16 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6887462B2 (en) * | 2001-04-09 | 2005-05-03 | Chiron Corporation | HSA-free formulations of interferon-beta |
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