ES2292265A1 - Mejoras introducidas en la patente principal n. 9902552, aceite de semilla de mostaza etiope con alto contenido en acido oleico. - Google Patents
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Abstract
Mejoras introducidas en la patente principal N° 9902552, aceite de semilla de mostaza etíope con alto contenido en ácido oleico. La presente invención se refiere a un aceite de semilla de mostaza etíope (nombre científico Brassica carinata A.Braun) carente de ácido erúcico (menos de 0.5% en peso respecto al contenido total en ácidos grasos del aceite) y con un contenido en ácido oleico entre el 80% y el 90% en peso del total de ácidos grasos. Este tipo de aceite no es producido en la naturaleza por plantas de mostaza etíope y ha sido obtenido mediante un procedimiento biotecnológico. El aceite de mostaza etíope, objeto de la presente invención, se produce siempre con independencia de las condiciones de cultivo, y la carencia de ácido erúcico y el alto contenido en ácido oleico de este aceite constituyen características heredables.
Description
Mejoras introducidas en la patente principal nº
9902552: "Aceite de semilla de mostaza etíope con alto contenido
en ácido oleico".
La presente invención se enmarca en el sector de
la agricultura, debido a que se trata de un nuevo tipo de aceite
producido por semillas de plantas mejoradas genéticamente. Este
nuevo tipo de aceite tiene una amplia gama de aplicaciones, tanto en
el sector alimentario, donde aporta claras ventajas nutricionales y
tecnológicas, como en el sector industrial, principalmente como
biocombustible y biolubricante.
La mostaza etíope es una especie vegetal
autóctona de Etiopía, donde se cultiva a pequeña escala como
verdura y como planta oleaginosa, debido a que sus semillas
contienen alto contenido en aceite. Este aceite posee un bajo
contenido en ácido oleico, entre el 8% y el 13%, y un alto
porcentaje de ácido erúcico, entre el 38% y el 45% (A. Getinet
"Review on breeding of Ethiopian mustard, Brassica carinata
A. Braun", Proceedings 7th International Rapeseed Conference,
pag. 593-597, 1987). A finales de los años 50 se
planteó la posible existencia de efectos perjudiciales derivados del
empleo de aceites ricos en ácido erúcico en alimentación humana,
planteamiento que se acentuó a raíz de una serie de estudios
realizados durante los años 70, y que pusieron de manifiesto que
los ácidos grasos C22:1 resultaban cardiotóxicos en animales, y por
tanto, potencialmente tóxicos para el hombre. Por este motivo,
aceites con alto contenido en ácido erúcico no deben destinarse a
consumo humano. (FAO/OMS, "Las grasas y aceites en la nutrición
humana", Estudio FAO: Alimentación y Nutrición, nº 3, FAO,
Roma,
1977).
1977).
Trabajos realizados en diferentes partes del
mundo han demostrado las ventajas de la mostaza etíope frente a
otras especies como la colza (Brassica napus) y la mostaza
india (Brassica juncea), cuando se cultivan en regiones
semiáridas, debido a su mayor resistencia a la sequía (E. Fereres,
J. M. Fernández Martínez, I. Mínguez y J. Domínguez: Productivity
of Brassica juncea and Brassica carinata in relation
to rapeseed, B. napus. I. Agronomic Studies. En: Proc. 6th
Int. Rapeseed Conf., Paris, Francia 1983, pág.
293-298). Otra de las ventajas de la mostaza etíope
respecto a otras Brassicas oleaginosas es su mayor resistencia o
tolerancia a plagas y enfermedades (I.J. Anand, J.P. Sing y R. S.
Malik: B. carinata a potential oilseed crop for rainfed
agriculture. Eucarpia Cruciferae Newsletter 10:
76-78. 1985; R.K. Gugel, g.
Seguin-Swartz y A. Petrie: Pathogenicity of three
isolates of Leptosphaeria maculans on Brassica species and
other crucifers. Can. J. Plant Pathol. 12: 75-82.
1990).
Se han desarrollado hasta la fecha dos tipos de
semillas de mostaza etíope que producen aceite con bajo contenido
en ácido erúcico, potencialmente utilizables en alimentación
humana. El primer tipo se obtuvo a través de un programa de
cruzamientos entre diferentes plantas de mostaza etíope con niveles
intermedios de este ácido graso (L.C. Alonso y col. "The outset
of a new oilseed crop: Brassica carinata with low erucic acid
content", Proceedings 8th International Rapeseed Conference, pag.
170-176, 1991). El segundo tipo se obtuvo mediante
cruzamientos interespecíficos entre plantas de mostaza etíope con
alto contenido en ácido erúcico y plantas de mostaza india
(Brassica juncea [L.] Czern.) carentes de ácido erúcico (A.
Getinet y col. "Development of zero erucic acid Ethiopian mustard
through interspecific cross with zero erucic acid Oriental
mustard", Can. J. Plant Sci. 74:793-795, 1994).
La composición en ácidos grasos de ambos tipos de semillas, así
como del tipo normal, se presenta en la Tabla 1. El contenido en
ácido oleico de ambos tipos de semillas de mostaza etíope carentes
de ácido erúcico fue inferior al
40%.
40%.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
En la actualidad se buscan aceites vegetales que
posean un elevado contenido en ácido oleico, tanto para su empleo
en alimentación humana como para su uso industrial. En alimentación
humana, un aceite con alto contenido en ácido oleico presenta varias
ventajas. En primer lugar, este tipo de aceite es muy estable
frente a la oxidación. Durante la misma, se producen sustancias que
confieren sabor y olor desagradables, lo que reduce
considerablemente la vida media del aceite en el mercado. Asimismo,
algunas de las sustancias producidas como consecuencia de la
oxidación del aceite están relacionadas con la formación de
peróxidos, causantes de la formación de radicales libres que a su
vez se han relacionado con procesos cancerígenos (Vles y Gottembos
"Nutritional characteristics and food uses of vegetable oils"
Oil Crops of the World, McGraw-Hill, EE.UU, pag.
63-86, 1989). En segundo lugar, estudios clínicos
han demostrado que aceites ricos en ácido oleico reducen los
niveles de colesterol total y de lipoproteínas de baja densidad
(LDL) en sangre (Mattson y Grundy "Comparison of effects of
dietary saturated, monounsaturated and polyunsaturated fatty acids
on plasma lipids and lipoproteins in man" J. Lipid Res.
26:194-202, 1985). En tercer lugar, el aceite rico
en ácido oleico es altamente termoestable, por lo que su uso en
frituras es aconsejable (M.C. Dobarganes y col. "Thermal
stability and frying performance of genetically modified sunflower
seed (Helianthus annuus L.) oils" J. Agr. Food. Chem.
41:678-681, 1993). En el campo industrial, los
aceites con alto contenido en ácido oleico son muy demandados,
especialmente por parte de la industria de aceites lubricantes,
precisamente por su alta termoestabilidad (S. Harold y col.
"Varieties of rapeseed oil and derived products for use in fuels
and lubricants" Proceedings 9th International Rapeseed
Conference, pag. 1341-1344, 1995).
Se han desarrollado variedades de colza
(Brassica napus L.) (US-5955623;
US-5625130; US-5840946;
US-5638637) y napina (Brassica rapa L.=
Brassica campestris L.) (US-5638637;
US-5840946) con una composición modificada de ácidos
grasos, que contienen al menos un 80% en peso de ácido oleico y
menos de un 0.1% en peso de ácido erúcico, siempre referido al
contenido total de ácidos grasos. La invención aplicada al material
vegetal desarrollado en US-5625130 ha sido dirigida
a la obtención de plantas de Brassica napus (genoma AACC
2n=38), Brassica campestris (genoma AA 2n=20) o Brassica
juncea (genoma AABB, 2n= 38), no habiéndose descrito hasta la
fecha el procedimiento de obtención de plantas de Brassica
carinata (genoma BBCC, 2n=34) cuyas semillas produzcan un
aceite con las características de bajo contenido en ácido erúcico y
alto contenido en ácido oleico que muestran las plantas objeto de la
presente invención. Las diferencias genómicas entre Brassica
carinata y el resto de las Brassicas oleaginosas impide la
transferencia genética entre ellas, y por lo tanto las plantas de
Brassica carinata objeto de la presente invención pueden ser
cultivadas en la proximidad de otras especies de Brassicas
oleaginosas sin peligro de contaminación y descenso del alto
contenido oleico ni de modificación del patrón de los restantes
ácidos grasos de la semilla.
Uno de los objetos de la invención es un aceite
vegetal obtenido de semillas de mostaza etíope (nombre científico
Brassica carinata A. Braun) modificadas biotecnológicamente.
Este aceite carece de ácido erúcico (menos del 0.5% en peso), lo
que le permite ser usado en alimentación humana. Asimismo, este
aceite vegetal presenta un alto contenido en ácido oleico,
comprendido entre el 80% y el 90% en peso del total de ácidos
grasos. Los restantes ácidos grasos presentes en el aceite de
mostaza etíope objeto de la presente invención están comprendidos
entre el 2% y el 8% en peso de ácido palmítico; entre el 0.5% y el
3% en peso de ácido esteárico; entre el 2% y el 6% en peso de ácido
linoleico; entre el 2% y el 10% en peso de ácido linolénico; e
inferior al 4% en peso de ácido eicosenoico. El contenido de otros
ácidos grasos menores (mirístico, palmitoleico, behénico,
nervónico) es siempre inferior al 2% en peso. El ratio de ácido
oleico: ácido linoleico es siempre superior a 15, siendo habitual
contenidos de ácido oleico superiores al 85% en peso. El contenido
en ácido erúcico puede ser inferior al 0.1% e incluso inferior al
0.05% en peso.
Este aceite de semilla de mostaza etíope puede
ser utilizado en alimentación humana y animal. También puede ser
utilizado como biolubricante y biocombustible.
Asimismo, constituyen otro objeto de la presente
invención las semillas, las plantas modificadas genéticamente que
dan lugar al aceite libre de ácido erúcico y con alto contenido en
ácido oleico, mencionado en los párrafos anteriores, y el
procedimiento de obtención de dichas plantas. Dicho procedimiento de
obtención de las plantas de mostaza etíope (Brassica
carinata A. Braun), comprende las siguientes etapas:
- a)
- Tratamiento de semillas normales de mostaza etíope, previamente embebidas en agua durante 16 horas, con una solución del agente mutagénico metil-sulfonato de etilo (EMS), preparada a una concentración comprendida entre el 0.1% y el 2% (vol/vol), durante un periodo de tiempo comprendido entre 0.5 y 6 horas.
- b)
- Cultivo de las semillas tratadas según el apartado a), selección de aquellas que presentan un incremento en el contenido en ácido oleico del aceite en comparación con las semillas de plantas normales, manteniendo un contenido en ácido erúcico similar al de aquellas.
- c)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope (Brassica carinata A. Braun) con contenido normal en ácido erúcico del aceite con plantas de una línea colza (B. napus L.) con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas, seguido de retrocruzamiento, autofecundación, y selección de plantas de mostaza etíope con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- d)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope (Brassica carinata A. Braun) con contenido normal en ácido erúcico del aceite con plantas de una línea de mostaza india (B. juncea [L.] Czern.) con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas, seguido de retrocruzamiento, autofecundación, y selección de plantas de mostaza etíope con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- e)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope obtenidas según el apartado c) con plantas de mostaza etíope obtenidas según el apartado d), seguido de autofecundación y selección de plantas de mostaza etíope procedentes del mencionado cruzamiento con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- f)
- Recombinación genética entre plantas de mostaza etíope obtenidas en el programa de mutagénesis química [etapas a) y b)] y plantas de mostaza etíope obtenidas en el programa de cruzamientos interespecíficos [etapas c), d) y e)], seguida de autofecundación y selección de semillas con bajo contenido en ácido erúcico y alto contenido en ácido oleico.
- g)
- Siembra de las semillas seleccionadas en la etapa f), seguida de autofecundación y selección para obtener una línea estable de mostaza etíope con bajo contenido en ácido erúcico y alto contenido en ácido oleico.
- h)
- Recombinación genética entre plantas de mostaza etíope obtenidas en las etapas a) a g) y plantas de mostaza etíope caracterizadas por contenido estándar en ácido oleico y bajo contenido en ácido linolénico, seguida de autofecundación y selección de semillas F_{2} que presentan mayor contenido en ácido oleico y menor contenido en ácido linoleico y ácido linolénico que las procedentes de las plantas desarrolladas en las etapas a) a g).
Para la obtención de las plantas modificadas
genéticamente cuyas semillas producen el aceite objeto de la
presente invención se ha llevado a cabo un largo proceso de mejora
genética consistente en (1) programa de mutagénesis química, (2)
programa de cruzamientos interespecíficos, (3) programa de
recombinación genética entre productos obtenidos en el programa de
mutagénesis química y productos obtenidos en el programa de
cruzamientos interespecíficos, y (4) programa de cruzamientos
intraespecíficos dirigido a realizar una mejora adicional del
material desarrollado.
El programa de mutagénesis química consistió en
el tratamiento de semillas normales con un producto químico con
propiedades mutagénicas, esto es, capaz de inducir mutaciones en el
ADN de la planta. Para que estas mutaciones resulten útiles, deben
ser heredables, por lo que al tratamiento mutagénico siguió un
proceso de varios anos consistente en la identificación y fijación
de aquellas mutaciones heredables que eran transmitidas de
generación en generación. Como resultado de este programa se
obtuvieron plantas de mostaza etíope cuyas semillas presentaban un
incremento en el contenido en ácido oleico respecto a las semillas
de plantas normales, aunque mantenían un contenido en ácido erúcico
similar al de semillas de plantas normales. El programa de
mutagénesis se llevó a cabo durante cinco generaciones, al cabo de
las cuales se demostró la estabilidad genética del carácter alto
oleico en fondo alto erúcico, independiente de las condiciones de
cultivo de las plantas.
El programa de cruzamientos interespecíficos
consistió en la transferencia de los genes responsables de la
ausencia de ácido erúcico desde material público de colza (nombre
científico Brassica napus L.) y de mostaza india (nombre
científico Brassica juncea [L.] Czern.) libres de ácido
erúcico (menos del 2% en peso de ácido erúcico) a una línea
seleccionada de mostaza etíope. El programa de cruzamientos
interespecíficos se llevó a cabo mediante tres subprogramas: (a)
cruzamiento interespecífico entre material de colza libre de ácido
erúcico y una línea seleccionada de mostaza etíope, seguido de una
generación de retrocruzamiento hacia el parental de mostaza etíope y
tres generaciones adicionales de autofecundación; (b) cruzamiento
interespecífico entre material de mostaza india libre de ácido
erúcico y una línea seleccionada de mostaza etíope, seguido de una
generación de retrocruzamiento hacia el parental de mostaza etíope
y tres generaciones adicionales de autofecundación; (c)
recombinación genética entre plantas de mostaza etíope procedentes
de cruzamientos interespecíficos con material de colza libre de
ácido erúcico y plantas de mostaza etíope procedentes de
cruzamientos interespecíficos con material de mostaza india libre de
ácido erúcico. Dicha recombinación genética se llevó a cabo durante
seis generaciones, al cabo de las cuales se demostró la estabilidad
del carácter cero erúcico, independiente de las condiciones de
cultivo de las plantas.
El programa recombinación genética entre
productos obtenidos en el programa de mutagénesis química y
productos obtenido en el programa de cruzamientos interespecíficos
se llevó a cabo durante cuatro generaciones, tras las que se
demostró la estabilidad de los caracteres cero erúcico y alto
oleico, independientes de las condiciones de cultivo de las
plantas.
En último término, se llevó a cabo un programa
de cruzamientos intraespecíficos dirigido a conseguir un incremento
adicional del contenido en ácido oleico de las semillas mediante la
introducción de genes que provocan un bloqueo parcial de la
desaturación de ácido linoleico a ácido linolénico. Al encontrarse
previamente bloqueada parcialmente la desaturación de ácido oleico
a ácido linoleico, la introducción de los nuevos genes se tradujo
en una reducción de los contenidos en ácido linoleico y ácido
linolénico y un incremento del contenido en ácido oleico en el
aceite de las semillas. Este incremento adicional del contenido en
ácido oleico se expresa de forma estable independientemente de las
condiciones de cultivo de las plantas.
Primero
Semillas de mostaza etíope de la línea
C-101, con 8.5% de ácido oleico, fueron sumergidas
en agua a temperatura ambiente durante 16 horas para promover el
ablandamiento de la cubierta externa y, por tanto, favorecer la
penetración del agente mutagénico. Pasado este tiempo, se
sumergieron por un período de 2 horas a temperatura ambiente y con
una agitación continua a 75 r.p.m. en una solución del agente
mutagénico metil-sulfonato de etilo (EMS), preparada
a una concentración del 1% (vol/vol) en tampón fosfato 0.1 M a pH
7. Tras el tratamiento mutagénico las semillas se lavaron durante
10 horas en agua corriente, se secaron, y se sembraron en campo.
Las plantas correspondientes se cosecharon individualmente, y las
semillas de cada una de las plantas cosechadas se sembraron en
campo. Las plantas correspondientes se cosecharon individualmente y
sus semillas se analizaron para conocer su composición en ácidos
grasos. A partir de estos análisis, se seleccionó una planta con un
contenido anormalmente alto en ácido oleico (19.3%). En sucesivas
generaciones se realizó selección para aumentar y estabilizar su
contenido en ácido oleico. Finalmente, se obtuvo una línea en la
quinta generación con valores máximos y mínimos de 27.9% y 17.0%,
respectivamente, de ácido oleico. La línea se denominó
N2-3591. Su composición media en ácidos grasos,
comparada con la línea a partir de la que se obtuvo,
C-101, se muestra en la Tabla 2.
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\newpage
Segundo
Las plantas de mostaza etíope (nombre científico
Brassica carinata A. Braun) tienen un genoma en el núcleo de
sus células que es de configuración BBCC. Las plantas de mostaza
india (nombre científico Brassica juncea [L.] Czern) tienen
un genoma en el núcleo de sus células que es de configuración AABB.
Las plantas de colza (nombre científico Brassica napus L.)
tienen un genoma en el núcleo de sus células que es de
configuración AACC. Para conseguir plantas de genoma BBCC con el
aceite de sus semillas carente de ácido erúcico, se realizó un
programa de cruzamientos interespecíficos entre una planta de
material público de colza cero erúcico, con menos del 2% en peso de
ácido erúcico (B. napus L. cv. "Duplo"), una planta de
material público de mostaza india cero erúcico, con menos del 2% en
peso de ácido erúcico (B. juncea cv.
"Zem-1"), y una planta de mostaza etíope con
niveles normales de ácido erúcico, entre 39% y 49% en peso de ácido
erúcico (B. carinata cv. "C-101"). Este
programa se realizó mediante tres subprogramas:
Una planta de mostaza etíope
C-101 se cruzó con una planta de colza Duplo. Las
semillas obtenidas de este cruzamiento se sembraron en macetas y
varias de las plantas resultantes se cruzaron de nuevo con plantas
de C-101. Las plantas de las semillas resultantes
del cruzamiento se autofecundaron durante tres generaciones, tras lo
cual se obtuvieron plantas de configuración genómica ABCC, con los
genes para cero erúcico procedentes de colza incorporados.
Una planta de mostaza etíope
C-101 se cruzó con una planta de mostaza india
Zem-1. Las semillas obtenidas de este cruzamiento
se sembraron en macetas y varias de las plantas resultantes se
cruzaron de nuevo con plantas de C-101. Las plantas
de las semillas resultantes del cruzamiento se autofecundaron
durante tres generaciones, tras lo cual se obtuvieron plantas de
configuración genómica BBAC, con los genes para cero erúcico
procedentes de mostaza india incorporados.
Plantas de configuración genómica ABCC y BBAC se
cruzaron entre sí. Las semillas procedentes de los cruzamientos se
sembraron. Las plantas a las que dieron lugar se autofecundaron y
se cosecharon individualmente. Sus semillas fueron analizadas para
conocer la composición en ácidos grasos de su aceite. De un total de
507 plantas analizadas, 45 de ellas presentaron un bajo contenido
en ácido erúcico (menos del 2% en peso de este ácido graso). Las
semillas de cinco de estas plantas fueron sembradas, tras lo que se
realizó un proceso de selección durante tres generaciones. La mejor
de estas cinco líneas se denominó 25X-1. Su
composición en ácidos grasos, en comparación con sus parentales
C-101, Duplo, y Zem-1 se muestra en
la Tabla 3.
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Tercero
Plantas del mutante alto oleico en fondo alto
erúcico, N2-3591, se cruzaron con plantas de la
línea cero erúcico 25X-1. Las semillas obtenidas del
cruzamiento se sembraron en macetas y las correspondientes plantas
se autofecundaron y se cosecharon individualmente. Las semillas
procedentes de estas plantas se analizaron para la composición en
ácidos grasos de su aceite. De un total de 300 semillas analizadas
se identificaron cinco que combinaban el carácter cero erúcico con
el carácter alto oleico. Estas semillas se sembraron y
autofecundaron, procediéndose a una selección durante dos
generaciones para alto contenido en ácido oleico y bajo contenido en
ácido erúcico. Al cabo de esta selección se obtuvo la línea
IAS-3, que contiene menos del 2% en peso de ácido
erúcico y entre el 70% y 80% en peso de ácido oleico. La composición
en ácidos grasos de IAS-3, comparada con las líneas
a partir de las que se obtuvo y con otras líneas de mostaza etíope
cero erúcico desarrolladas hasta la fecha, se muestra en la
Tabla 4.
Tabla 4.
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\vskip1.000000\baselineskip
Cuarto
Plantas de la línea IAS-3
(número de solicitud de patente 9902552) se cruzaron con plantas de
la línea IAS-21 (número de solicitud de patente
9902553), caracterizadas por un contenido estándar en ácido oleico
y un bajo contenido en ácido linolénico en el aceite de sus
semillas. Las semillas obtenidas del cruzamiento se sembraron en
macetas y las correspondientes plantas se autofecundaron y se
cosecharon individualmente. Las semillas procedentes de estas
plantas se analizaron para la composición en ácidos grasos de su
aceite. De un total de 1250 semillas analizadas, se identificaron
seis semillas que presentaron un incremento adicional del contenido
en ácido oleico junto con una reducción de los contenidos en ácido
linoleico y ácido linolénico. Estas semillas recombinantes se
sembraron, llevándose a cabo un proceso de selección durante tres
generaciones para asegurar la fijación del nuevo perfil de ácidos
grasos. Este perfil se demostró completamente fijado y estable a
partir de la segunda generación, expresándose con independencia de
las condiciones de cultivo de las plantas. La línea así obtenida,
denominada IAS-245, contiene menos del 2% en peso de
ácido erúcico y entre el 80% y 90% en peso de ácido oleico. La
composición media en ácidos grasos de IAS-245,
comparada con las líneas a partir de las que se obtuvo, se muestra
en la
Tabla 5.
Tabla 5.
Se ha realizado un depósito de semillas de la
línea IAS-245 en el NCIMB (National Collections of
Industrial, Food and Marine Bacteria), con número NCIMB 41157 y
fecha de depósito 13 de febrero de 2003.
Claims (10)
1. Aceite de semilla de mostaza etíope con alto
contenido en ácido oleico, que incluye un contenido en ácido
erúcico inferior al 0.5% en peso respecto al total de ácidos grasos
del aceite, un contenido en ácido linoleico comprendido entre el 2%
y el 6% en peso, un contenido en ácido linolénico comprendido ente
el 2% y el 10% en peso, un contenido en ácido palmítico comprendido
entre el 2% y el 8% en peso, un contenido en ácido esteárico
comprendido entre el 0.5% y el 3% en peso, y un contenido en ácido
eicosenoico inferior al 4%, caracterizado porque el contenido
en ácido oleico del aceite está comprendido entre el 80% y el 90%
en peso, referido también al total de ácidos grasos del aceite.
2. Aceite de semilla de mostaza etíope con alto
contenido en ácido oleico según la reivindicación 1,
caracterizado porque el ratio de ácido oleico a ácido
linoleico es siempre superior a 15.
3. Aceite de semilla de mostaza etíope con alto
contenido en ácido oleico según las reivindicaciones 1 y 2,
caracterizado porque el contenido en ácido oleico es superior
al 85%.
4. Aceite de semilla de mostaza etíope con alto
contenido en ácido oleico según las reivindicaciones 1 a 3,
caracterizado porque el contenido en ácido erúcico del aceite
es inferior al 0.1% en peso respecto al total de ácidos grasos del
aceite.
5. Aceite de semilla de mostaza etíope con alto
contenido en ácido oleico según la reivindicación 4,
caracterizado porque el contenido en ácido erúcico del aceite
es inferior al 0.05% en peso respecto al total de ácidos grasos del
aceite.
6. Semillas de mostaza etíope que poseen un
aceite con alto contenido en ácido oleico según las
reivindicaciones 1-5.
7. Plantas de mostaza etíope (Brassica
carinata A. Braun) que al ser autofecundadas producen semillas
que poseen un aceite con alto contenido en ácido oleico según las
reivindicaciones 1-5.
8. Procedimiento de obtención de plantas de
mostaza etíope (Brassica carinata A. Braun), según la
reivindicación 7, caracterizado porque comprende las
siguientes etapas:
- a)
- Tratamiento de semillas normales de mostaza etíope, previamente embebidas en agua durante 16 horas, con una solución del agente mutagénico metil-sulfonato de etilo (EMS), preparada a una concentración comprendida entre el 0.1% y el 2% (vol/vol), durante un periodo de tiempo comprendido entre 0.5 y 6 horas.
- b)
- Cultivo de las semillas tratadas según el apartado a), selección de aquellas que presentan un incremento en el contenido en ácido oleico del aceite en comparación con las semillas de plantas normales, manteniendo un contenido en ácido erúcico similar al de aquellas.
- c)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope (Brassica carinata A. Braun) con contenido normal en ácido erúcico del aceite con plantas de una línea colza (B. napus L.) con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas, seguido de retrocruzamiento, autofecundación, y selección de plantas de mostaza etíope con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- d)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope (Brassica carinata A. Braun) con contenido normal en ácido erúcico del aceite con plantas de una línea de mostaza india (B. juncea [L.] Czern.) con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas, seguido de retrocruzamiento, autofecundación, y selección de plantas de mostaza etíope con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- e)
- Cruzamiento de plantas de mostaza etíope obtenidas según el apartado c) con plantas de mostaza etíope obtenidas según el apartado d), seguido de autofecundación y selección de plantas de mostaza etíope procedentes del mencionado cruzamiento con menos del 2% en peso de ácido erúcico en el aceite de sus semillas.
- f)
- Recombinación genética entre plantas de mostaza etíope obtenidas en el programa de mutagénesis química [etapas a) y b)] y plantas de mostaza etíope obtenidas en el programa de cruzamientos interespecíficos [etapas c), d) y e)], seguida de autofecundación y selección de semillas con bajo contenido en ácido erúcico y alto contenido en ácido oleico.
- g)
- Siembra de las semillas seleccionadas en la etapa f), seguida de autofecundación y selección para obtener una línea estable de mostaza etíope con bajo contenido en ácido erúcico y alto contenido en ácido oleico.
- h)
- Recombinación genética entre plantas de mostaza etíope obtenidas en las etapas a) a g) y plantas de mostaza etíope caracterizadas por contenido estándar en ácido oleico y bajo contenido en ácido linolénico, seguida de autofecundación y selección de semillas F_{2} que presentan mayor contenido en ácido oleico y menor contenido en ácido linoleico y ácido linolénico que las procedentes de las plantas desarrolladas en las etapas a) a g).
9. Utilización de un aceite de semilla de
mostaza etíope según las reivindicaciones 1 a 5, en composiciones
para la alimentación humana y animal.
10. Utilización de un aceite de semilla de
mostaza etíope según las reivindicaciones 1 a 5, en composiciones
biolubricantes y biocombustibles.
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- 2003-03-28 ES ES200300733A patent/ES2292265B1/es not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5625130A (en) * | 1995-03-07 | 1997-04-29 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Oilseed Brassica bearing an endogenous oil wherein the levels of oleic, alpha-linolenic, and saturated fatty acids are simultaneously provided in an atypical highly beneficial distribution via genetic control |
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| Title |
|---|
| VELASCO L. et al. " Induced variability for C18 unsaturated fatty acids in Ethiopian mustard". Canadian Journal of Plant Science. 1997. Vol. 77, Nº. 1, páginas 91-95; ISSN 0008-4220. * |
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