ES2297031T3 - Cepa de bacilo sp.d747, agentes de control de enfermedades de plantas y agentes de control de plagas de insector usando los mismo y procedimiento de control usando los agentes. - Google Patents
Cepa de bacilo sp.d747, agentes de control de enfermedades de plantas y agentes de control de plagas de insector usando los mismo y procedimiento de control usando los agentes. Download PDFInfo
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Abstract
Una cepa D747 de Bacillus sp. que tiene un número de acceso FERM-BP 8234, depositado a tenor del Tratado de Budapest.
Description
Cepa de Bacillus sp. D747, agentes de
control de enfermedades de plantas y agentes de control de plagas de
insectos usando los mismos y procedimiento de control usando los
agentes.
La presente invención se refiere a una cepa D747
de Bacillus sp. y a aplicaciones de la misma. Más
particularmente, la presente invención se refiere a un agente para
controlar una enfermedad de una planta y/o un agente para controlar
una plaga de insecto que comprende, como bacteria activa, la cepa
D747 de Bacillus sp. que exhibe efectos de control de
enfermedades de plantas y efectos de control de plagas, y se refiere
a un procedimiento de control que usa estos agentes de control.
Como ejemplos de procedimientos para controlar
enfermedades y plagas de plantas, se debe hacer mención de
procedimientos de control físico y procedimientos de control
agrícola en campo que emplean rotación de cultivos o calentamiento
solar, procedimientos de control químico que usan agroquímicos,
procedimientos de control que utilizan variedades resistentes a
enfermedades, procedimientos de control biológico que usan virus
atenuados o microorganismos antagonistas sobre hongos patogénicos,
y similares. Entre estos procedimientos, se ha mejorado
significativamente la investigación y desarrollo de agroquímicos y
particularmente fungicidas organosintéticos en los últimos años, y
se están desarrollando continuamente muchos agentes que tienen alta
potencia y que exhiben efectos diversos. Además, también se han
proporcionado diversos procedimientos de aplicación. Los
procedimientos de control químico que usan éstos han contribuido en
gran medida a controlar enfermedades de plantas, ahorrar trabajo en
las operaciones de control, y similares, y se han empleado mucho.
Sin embargo, recientemente, se observa en algunas plantas de
cultivo y enfermedades que los efectos de control proporcionados
por los procedimientos de control químico se reducen debido a la
aparición de las llamadas plagas resistentes a químicos, y esto se
ha convertido en un problema. Además, como consecuencia del
cosechado continuo impuesto por la extensión de los monocultivos,
los brotes de enfermedades infecciosas a través de la tierra, que se
cree que son difíciles de controlar con agroquímicos, se han
convertido en un problema grave en diversas localidades. Además, en
los procedimientos en los que se emplean repetidamente grandes
cantidades de agroquímicos, se liberan sustancias químicas, que no
aparecen de forma natural, en el medio ambiente. Por esta razón, se
ha comprendido que no sólo los químicos que son tóxicos
directamente para animales y plantas, sino también químicos no
tóxicos, pueden causar efectos negativos sobre el medio
ambiente.
Como se describe anteriormente, es altamente
probable que el control de enfermedades con agroquímicos reduzca
los efectos de control debido a la aparición de plagas resistentes.
En este caso, es necesario desarrollar nuevos fungicidas. Además,
respecto al control de enfermedades que se cree que son difíciles de
controlar con agroquímicos, se deben implementar medios
alternativos o medios usados junto con otros procedimientos.
Además, se desea establecer una técnica de control que sea más
segura de cara al medio ambiente.
Recientemente, a la luz de estas circunstancias,
se están reconsiderando procedimientos de control dependientes del
uso de agroquímicos, y se han propuesto procedimientos de control
biológico que utilizan microorganismos (denominados agentes de
control biológico) que se cree que son más seguros para el medio
ambiente comparados con los agroquímicos, y a algunos de éstos se
les ha dado uso práctico.
En la investigación del control biológico de
enfermedades de plantas, se ha intentado la utilización de virus
atenuados, la utilización de microorganismos de tipo patogénico o no
patogénico atenuados de microbios patogénicos, la utilización de
microorganismos antagonistas, y similares. Entre éstos, existe mucha
investigación sobre la utilización de microorganismos antagonistas.
Además, hay muchos informes sobre investigación para controlar
enfermedades entre los microorganismos antagonistas del género
Bacillus. Sin embargo, no se ha encontrado que el género
Bacillus muestre efectos para controlar un amplio espectro de
enfermedades.
El documento WO 98/50422 describe una nueva cepa
de bacilos para controlar enfermedades de plantas en el gusano de
la raíz del maíz. La nueva cepa de bacilos de acuerdo con la
presente invención no se describe.
Höfte y Whiteley, Microbiological Reviews,
53(89), Junio, páginas 242-255, describen
proteínas de cristal insecticidas de Bacillus thuringiensis.
La cepa de bacilos descrita en este documento es completamente
distinta de la nueva cepa de Bacillus de acuerdo con la
presente invención.
El documento EP 0 522 836 A2 describe una nueva
cepa de bacilos y un agente de control de plagas de insectos que
pertenece al grupo del Bacillus thuringiensis, pero que es
distinto del tema de acuerdo con la presente inven-
ción.
ción.
Un objeto de la presente invención es aislar una
nueva cepa que muestra efectos de control de enfermedades de
variedades plurales de enfermedades de plantas y/o control de plagas
de insectos.
\global\parskip0.900000\baselineskip
Otro objeto de la presente invención es
proporcionar un agente para controlar una enfermedad de una planta
y/o un agente para controlar una plaga de insecto, que comprende,
como bacteria activa, la cepa antes mencionada, que se puede emplear
eficazmente como agente de control biológico.
Otro objeto de la presente invención es
proporcionar un procedimiento para controlar enfermedades de plantas
y/o plagas de insectos que usa el agente para controlar una
enfermedad de una planta y/o el agente para controlar una plaga de
insecto anteriormente descrito.
Los presentes inventores descubrieron que una
cepa nueva perteneciente al género Bacillus aislada de la
naturaleza exhibe efectos de control de diversas variedades de
enfermedades de plantas y exhibe efectos de control de plagas sin
dañar el crecimiento de la planta, completando de este modo la
presente invención.
La presente invención se refiere a una cepa
descrita en lo que sigue, un agente para controlar una enfermedad
de una planta y/o un agente para controlar una plaga de insecto, y
un procedimiento para controlar enfermedades de plantas y/o
controlar plagas de insectos.
(1) Una cepa D747 de Bacillus sp. que
tiene un número de acceso FERM BP 8234, depositado a tenor del
Tratado de Budapest.
(2) Un agente para controlar una enfermedad de
una planta caracterizado por comprender la cepa D747 de
Bacillus sp. como bacteria activa.
(3) Un agente para controlar una plaga de
insecto caracterizado por comprender la cepa D747 de Bacillus
sp. como bacteria activa.
(4) Un procedimiento para controlar una
enfermedad de una planta y/o una plaga de insecto caracterizado por
emplear el agente para controlar una enfermedad de una planta
descrito anteriormente en el punto (2) y/o el agente para controlar
una plaga de insecto descrito anteriormente en el punto (3).
La cepa D747 de Bacillus sp. de la
presente invención es una cepa aislada del aire en
Kikugawa-cho, Ogasa-gun,
Shizuoka-ken, JAPON. A raíz de la identificación de
la cepa a la vista de las características bacterianas descritas a
continuación de acuerdo con el Manual de Bacteriología
Sistemática de Bergey, Volumen 1 (1984), se pensó que era una
nueva cepa perteneciente al género Bacillus, y podría ser
Bacillus cereus. Por esta razón, la cepa se depositó como
"Bacillus cereus D747" en la Agencia de Ciencia
Industrial y Tecnología, Instituto Nacional de Biociencia y
Tecnología Humana, el 28 de Noviembre de 2000.
Sin embargo, después de eso, se estudió de nuevo
en detalle para ver si pertenecía o no a Bacillus cereus.
Por consiguiente, el estudio solamente proporcionó la confirmación
de que pertenecía al género Bacillus. Por esta razón, se
presentó una notificación de cambio del nombre de la cepa a
"Bacillus sp. D747" el 1 de Abril de 2002.
Por lo tanto, la cepa D747 de Bacillus
sp. (de aquí en adelante, referida simplemente como la "cepa
D747") de acuerdo con la presente invención se depositó en el
Instituto Nacional de Ciencia Industrial Avanzada y Tecnología,
Depositario de Organismos de Patente Internacional como
"Bacillus sp. D747" con Número de Acceso "FERM
P-18128", y después se transfirió para ser
depositado bajo el Tratado de Budapest el 8 de Noviembre de 2002,
como "Bacillus sp. D747" con nuevo Número de Acceso
"FERM BP-8234".
Las características bacterianas de la cepa D747
de acuerdo con la presente invención se describen como sigue. Las
pruebas para las características bacterianas se llevaron a cabo de
acuerdo con el Manual de Bacteriología Sistemática de Bergey
anteriormente mencionado.
Morfología: bacilo
Tamaño: anchura = 1,0 a 1,2 \mum; longitud = 3
a 5 \mum
Movilidad: +
Condición adherente flagelar: flagelos
periféricos
Endospora: +
Posición de la espora: centro
Crecimiento de la espora: -
\global\parskip1.000000\baselineskip
Color de colonia: blanco a marrón pálido
Cultivo en un medio en placa de
agar-caldo: Se forma una colonia coloreada de blanco
a crema, y la superficie de la misma está arrugada.
\vskip1.000000\baselineskip
Capacidad de tinción gram: +
Reducción de nitratos: +
Prueba MR: -
Prueba VP: +
Formación de indol: -
Hidrólisis del almidón: +
Capacidad de asimilación de ácido cítrico: +
Fuente de nitrógeno inorgánico: +
Oxidasa: -
Catalasa: +
Crecimiento a pH 6,8, medio caldo: +
Crecimiento a pH 5,7, medio caldo: +
Temperatura de crecimiento, 30ºC: +
Temperatura de crecimiento, 50ºC: -
Concentración de NaCl de crecimiento, 2%: +
Concentración de NaCl de crecimiento, 5%: +
Concentración de NaCl de crecimiento, 7%: +
Crecimiento aerobio: +
Crecimiento anaerobio: +
Prueba O-F: O
Reacción de York: -
Formación de ácido de la glucosa: +
Formación de ácido del manitol: -
Formación de ácido de la
L-arabinosa: -
Formación de ácido de la
D-xilosa: -
Formación de gas de la glucosa: -
\beta-galactosidasa: -
Propiedad de requerimiento de NaCl y KCl: -
En el procedimiento de cultivo de la cepa D747
empleado en la presente invención, se pueden seleccionar
apropiadamente las clases de medios, condiciones de cultivo, y
similares. Como ejemplos de medios, se debe hacer mención de, por
ejemplo, un medio que incluya glucosa, peptona, y un extracto de
levadura, y similares, además de un medio común tal como un medio
caldo. Además, se pueden emplear medios sólidos tales como un medio
slant, un medio en placa, y similares, que incluyen agar, además de
un medio líquido. Al ser cultivada, la cepa D747 se multiplica, de
manera que pueda obtenerse una cantidad deseable de la cepa.
Como fuente de carbono del medio, se pueden
utilizar todos los materiales que pueda asimilar la cepa
anteriormente mencionada. Como ejemplos de los mismos, se deben
mencionar diversas fuentes de carbono sintéticas o naturales que
puede utilizar la cepa D747, además de azúcares como glucosa,
galactosa, lactosa, sacarosa, maltosa, un extracto de malta, y un
hidrolisato de almidón.
Como fuente de nitrógeno del medio, se pueden
utilizar productos que contienen nitrógeno orgánico tales como
peptona, caldo, extracto de levadura, y similares, y diversos
productos sintéticos o naturales que la cepa D747 es capaz de
utilizar.
De acuerdo con procedimientos habituales para
cultivar microorganismos, se pueden añadir, si se considera
necesario, sales inorgánicas como el cloruro sódico, fosfatos, o
similares; sales de metal tales como calcio, magnesio, hierro, o
similares; fuentes de micronutrientes tales como vitaminas,
aminoácidos, o similares.
El cultivo se puede llevar a cabo bajo
condiciones aerobias tales como cultivo en agitación, cultivo con
aireación, o similares. La temperatura de cultivo oscila de 20 a
30ºC, y preferiblemente oscila de 25 a 30ºC; el pH oscila de 5 a 8,
y preferiblemente oscila de 6 a 7; y el periodo de cultivo oscila
apropiadamente de 1 a 4 días, y preferiblemente oscila de 2 a 3
días.
La cepa D747 de Bacillus sp. de acuerdo
con la presente invención exhibe propiedades de control de diversas
enfermedades de plantas y control de plagas al administrar cultivos
de las mismas (incluyendo las bacterias per se) o productos
tratados de los mismos (una mezcla de un cultivo y otros
ingredientes, o similares), o bacterias aisladas mediante cultivo
(bacterias obtenidas tratando un cultivo mediante centrifugación, o
bacterias extraídas del mismo, o similares) o productos tratados de
las mismas (una mezcla de bacterias aisladas y otros ingredientes,
o similares), productos tratados de aquellos anteriormente
descritos (un producto diluido de los mismos con un líquido o un
sólido, o similares), sobre partes de la planta tales como raíces,
tallos, hojas, semillas, y similares, o sobre la tierra de
cultivo.
cultivo.
La cepa D747 de la presente invención puede
controlar enfermedades de plantas provocadas por bacterias y hongos
pertenecientes a los géneros Oomycetes, Ascomycetes,
Basidiomycetes, y Deuteromycetes.
Como ejemplos de hongos plaga causantes de
enfermedades que puede controlar la cepa D747, se debe mencionar,
por ejemplo, Pseudoperonospora tales como
Pseudoperonospora cubensis, Venturia tales como
Venturia inaequalis, Erysiphe tales como Erysiphe
graminis, Pyricularia tales como Pyricularia
oryzae, Botrytis tales como Botrytis cinerea,
Rhizoctonia tales como Rhizoctonia solani,
Puccinia tales como Puccinia recondite,
Septoria tales como Septoria nodorum,
Sclerotinia tales como Sclerotinia sclerotiorum,
Pythium tales como Pythium debaryanum Hesse;
como bacterias, Burkholderia tales como Burkholderia
plantarii; y similares. Se debería sobrentender que no se
limitan a estos ejemplos en la presente invención.
Además, la cepa D747 de la presente invención
puede controlar lagas tales como plagas de hemípteros, plagas de
lepidópteros, plagas de coleópteros, plagas de dípteros, plagas de
ortópteros, plagas de isópteros, plagas de tisanópteros, plagas de
tetraníquidos, y similares.
Como ejemplos de plagas que puede controlar la
cepa D747, se debe mencionar, por ejemplo, plagas de hemípteros que
incluyen Pentatomidae (Heteroptera) tales como Riptortus
clavatus y similares, Cicadellidae tales como
Nephotettix cincticeps y similares, Delphacidae tales como Nilaparvata lugens y similares, Psyliidae tales como Psylla sp., y similares, Aleyrodidae tales como Bemisia tabaci y similares, Aphididae tales como Myzus persicae y similares, Pseudococcoidae tales como Pseudococcus comstocki y similares; plagas de lepidópteros que incluyen Torticoidea tales como Homona magnanima y similares, Cochylidae tales como Eupoecillia ambiguella y similares, Psychidae tales como Bambalina sp., y similares, Gracillariidae tales como Nemapogon granellus y similares, Phyllocnistinae tales como Phyllocnistis citrella y similares, Yponomeutidae tales como Plutella xylostella y similares, Pyralidae tales como Chilo suppressalis y similares, Noctuidae tales como Heliothis virescens y similares; plagas de coleópteros que incluyen Scarabeidae tales como Anomala cuprea y similares, Coccinellidae tales como Epilachna vigintiocto-punctata y similares, Curculionidae tales como Lissorhoptrus oryzophilus y similares; plagas de dípteros tales como Culex pipiens, Anopheles sinensis, Culex tritaeniorhynchus, y similares; plagas de ortópteros tales como Blatella germanica, y similares; plagas de isópteros tales como Reticulitermes speratus, y similares; plagas de tisanópteros tales como Scirtothrips dorsali, y similares; plagas de tetraníquidos tales como Tetranychus urticae, y similares; otros animales dañinos, criaturas que deban ser repelidas, plagas de insectos dadas unas condiciones de salubridad, parásitos, ejemplos de los cuales incluyen Gastropoda tales como Pomacea canaliculat, Incilaria sp., y similares; e Isopoda tales como Armadillium sp., y similares. Se debería sobrentender que la presente invención no se limita a estos ejemplos.
Nephotettix cincticeps y similares, Delphacidae tales como Nilaparvata lugens y similares, Psyliidae tales como Psylla sp., y similares, Aleyrodidae tales como Bemisia tabaci y similares, Aphididae tales como Myzus persicae y similares, Pseudococcoidae tales como Pseudococcus comstocki y similares; plagas de lepidópteros que incluyen Torticoidea tales como Homona magnanima y similares, Cochylidae tales como Eupoecillia ambiguella y similares, Psychidae tales como Bambalina sp., y similares, Gracillariidae tales como Nemapogon granellus y similares, Phyllocnistinae tales como Phyllocnistis citrella y similares, Yponomeutidae tales como Plutella xylostella y similares, Pyralidae tales como Chilo suppressalis y similares, Noctuidae tales como Heliothis virescens y similares; plagas de coleópteros que incluyen Scarabeidae tales como Anomala cuprea y similares, Coccinellidae tales como Epilachna vigintiocto-punctata y similares, Curculionidae tales como Lissorhoptrus oryzophilus y similares; plagas de dípteros tales como Culex pipiens, Anopheles sinensis, Culex tritaeniorhynchus, y similares; plagas de ortópteros tales como Blatella germanica, y similares; plagas de isópteros tales como Reticulitermes speratus, y similares; plagas de tisanópteros tales como Scirtothrips dorsali, y similares; plagas de tetraníquidos tales como Tetranychus urticae, y similares; otros animales dañinos, criaturas que deban ser repelidas, plagas de insectos dadas unas condiciones de salubridad, parásitos, ejemplos de los cuales incluyen Gastropoda tales como Pomacea canaliculat, Incilaria sp., y similares; e Isopoda tales como Armadillium sp., y similares. Se debería sobrentender que la presente invención no se limita a estos ejemplos.
Los agentes para controlar enfermedades de
plantas y agentes para controlar plagas de acuerdo con la presente
invención comprenden, como bacterias activas, la cepa D747, que
tiene el número de acceso FERM-BP 82, que puede
controlar enfermedades de plantas y plagas de insectos como se
describe anteriormente. En los agentes para controlar enfermedades
de plantas y agentes para controlar plagas de la presente invención,
la cepa D747 se puede emplear sola o en combinación con una
variante de la cepa D747. Las variantes tienen las características
bacterianas de la cepa D747 descrita anteriormente, exhiben efectos
de control de enfermedades de plantas, y exhiben efectos de control
de plagas. Por tanto se pueden emplear cepas mutantes espontáneas,
cepas mutantes producidas al usar rayos UV o agentes mutágenos
químicos, cepas de fusión celular, y cepas de recombinación
genética. En la presente invención, la cepa D747 contenida en los
agentes para controlar enfermedades de plantas y los agentes para
controlar plagas también incluyen las variantes de la cepa D747.
El término "controlar" en la memoria se usa
para significar no solamente prevenir y repeler enfermedades o
plagas, sino también eliminarlas y destruirlas. Por lo tanto,
incluso para plantas que han sido infectadas por hongos
patogénicos, si se les aplican los agentes para controlar
enfermedades de plantas, se pueden eliminar los hongos patogénicos
de las plantas, y de este modo, se puede evitar la patogenicidad
provocada por los hongos patogénicos y el deterioro de las
enfermedades. Además, las plagas también se pueden controlar debido
a los efectos de repulsión y muerte de las plagas.
Para el caso en que la cepa D747 se incluye como
microorganismo viable en los agentes para controlar enfermedades de
plantas y los agentes para controlar plagas de insectos de acuerdo
con la presente invención, es preferible que la cepa se aplique al
organismo de la planta a una concentración que oscila entre 10^{5}
y 10^{10} microorganismos/ml.
Además, para el caso en que se emplee un cultivo
de la cepa D747, el tiempo de aplicación y la cantidad de
aplicación del mismo se debe determinar apropiadamente de acuerdo
con el caso del microorganismo viable anteriormente descrito.
Además, en los agentes para controlar
enfermedades de plantas y los agentes para controlar plagas de
insectos de acuerdo con la presente invención, la cepa D747 se
puede emplear sola como cepa, o se puede emplear un cultivo de la
misma, como formulaciones en las que se diluye la cepa con un
líquido inerte o vehículo sólido, y a ello se añaden tensioactivos
y otros agentes auxiliares, si se considera necesario. Como ejemplos
de formulaciones, se deben mencionar gránulos, polvos finos, polvos
humectables, suspensiones, concentrados emulsionables, y similares.
Como ejemplos de vehículos preferibles, se deben mencionar vehículos
sólidos porosos tales como talco, bentonita, arcilla, caolín, barro
de diatomeas, carbón blanco, vermiculita, cal muerta, arena de
sílice, sulfato amónico, y urea; vehículos líquidos tales como
agua, alcohol de isopropilo, xileno, ciclohexanona, metilnaftaleno,
y glicol de alquilo; y similares. Como ejemplos de tensioactivos y
dispersivos, se debe mencionar, por ejemplo,
dinaftilmetanosulfonatos, sulfatos de alcohol, alquil aril
sulfonatos, sulfonatos de lignina, éteres de polioxietilenglicol,
alquil aril éteres de polioxietileno, monoalquilatos de
polioxietilen sorbitan, y similares. Como ejemplos de agentes
auxiliares, se debe mencionar carboximetilcelulosa, polietilen
glicol, propilen glicol, goma arábiga, goma de xantano, y
similares. Como ejemplos de agentes protectores, se debe mencionar
leche desnatada, tampones de pH, y similares. En este caso, la
cantidad de microorganismos viables de la cepa D747 y/o la cantidad
de cultivos de la misma, el tiempo de aplicación, y la cantidad de
aplicación se pueden determinar apropiadamente de acuerdo con el
caso de los microorganismos viables anteriormente descrito.
Además, los agentes para controlar enfermedades
de plantas y los agentes para controlar plagas de insectos de
acuerdo con la presente invención pueden incluir otros ingredientes
tales como pesticidas, otros fungicidas, herbicidas, modificadores
del crecimiento vegetal, fertilizantes y abonos, y similares, como
ingredientes activos, si se considera necesario. Además, los
agentes para controlar enfermedades de plantas y los agentes para
controlar plagas de insectos de acuerdo con la presente invención
pueden incluir distintas variedades de cepas de la cepa D747, junto
con la cepa D747.
Los agentes para controlar enfermedades de
plantas y los agentes para controlar plagas de insectos de acuerdo
con la presente invención pueden aplicarse directamente o pueden
aplicarse después de diluir los agentes con agua o similar. Los
procedimientos para aplicar los agentes para controlar enfermedades
de plantas y los agentes para controlar plagas de insectos no están
particularmente limitados. Como ejemplos de los mismos, se debe
mencionar, por ejemplo, un procedimiento en el que se pulverizan
directamente sobre plantas o plagas de insectos, un procedimiento
en el que se pulverizan sobre la tierra, un procedimiento en el que
se añaden a agua o fertilizantes y abonos para aplicarse a las
plantas o a la tierra, y similares. Además, la cantidad de
formulaciones aplicadas dependerá de las enfermedades que se vayan
a controlar, de las plagas de insectos que se vayan a controlar, de
las plantas a las que se vaya a aplicar, de los procedimientos de
aplicación, de la naturaleza de la ocurrencia de las enfermedades o
plagas, del grado de daño, de las condiciones ambientales, de las
formas de las formulaciones que se vayan a usar, y similares. Por
esta razón, es preferible que la cantidad de las formulaciones
aplicadas se ajuste apropiadamente.
Como se describe anteriormente, la cepa D747 de
Bacillus sp. de la presente invención controla un amplio
espectro de enfermedades y plagas, y puede controlar múltiples
variedades de enfermedades y plagas de plantas.
\newpage
Los agentes para controlar enfermedades de
plantas y los agentes para controlar plagas que comprenden la cepa
D747 de acuerdo con la presente invención pueden controlar
enfermedades y plagas de plantas. Por esta razón, se pueden emplear
como agentes de control biológico. Por lo tanto, los agentes para
controlar enfermedades de plantas y los agentes para controlar
plagas de insectos de la presente invención son altamente seguros
respecto al medio ambiente, y exhiben efectos de control de
múltiples variedades de enfermedades y plagas. Por esta razón,
habitualmente pueden prevenir enfermedades y plagas sin emplear
otros medios para uso simultáneo con el mismo.
La presente invención se describe en detalle por
medio de los Ejemplos descritos a continuación. Sin embargo, se
debería sobrentender que la presente invención no se limita a estos
Ejemplos.
Se aisló la cepa D747 del aire en
Kikugawa-cho, Ogasa-gun,
Shizuoka-ken, JAPON. Más particularmente, para
aislar el microorganismo presente en el aire en Kamo,
Kikugawa-cho, Ogasa-gun,
Shizuoka-ken, JAPON, se dejó reposar un medio en
placa que contenía agar de patata-dextrosa durante
10 minutos sin la tapa para que estuviera en contacto con el aire.
El medio se incubó durante 3 días a 27ºC, y se aisló la colonia
formada. La colonia aislada se incubó con un agitador en un medio
líquido de patata-dextrosa. Se descubrió la cepa que
exhibía actividades respecto a las enfermedades de plantas,
desembocando así en el aislamiento de la cepa D747.
Se incubó la cepa D747 aislada a 27ºC sobre un
agitador rotatorio a 120 rpm durante 3 días en un medio que tenía
un pH de 6,0 y que comprendía un 1% de glucosa, un 2% de un almidón
soluble, un 0,5% de polipeptona, un 1% de una levadura seca, un 1%
de semillas de soja libres de grasa, un 0,2% de KH_{2}PO_{4}, un
0,2% de NaCl, y un 0,3% de carbonato cálcico. Subsiguientemente, se
recogieron las cepas mediante centrifugación (10.000 g, durante 15
minutos), se suspendieron en agua esterilizada, y se lavaron para
eliminar los ingredientes del medio. Los procedimientos en serie
anteriormente descritos se repitieron dos veces. Subsiguientemente,
se suspendieron las cepas de nuevo en agua esterilizada a una
concentración de aproximadamente 10^{9}/ml.
Se sembraron semillas de arroz (variedad: Aichi
Asahi) a una tasa de 10 granos por maceta en macetas de arcilla que
tenían un diámetro de 7,5 cm, y se dejaron crecer en un invernadero.
Se pulverizó una suspensión de las cepas D747 producidas como se
describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por maceta sobre los
brotes de arroz en su estado de 4 hojas. Después de secar al aire,
se inocularon los brotes pulverizando una suspensión de esporas de
hongos del mal del cuello del arroz (Pyricularia oryzae), y
se ubicaron en una cámara de humedad. Al quinto día tras la
inoculación, se contó el número de lesiones en la cuarta hoja, y se
evaluó según el alcance de las lesiones sobre la base de los
criterios de evaluación que se muestran en la Tabla 1 descritos a
continuación. Los resultados de los ensayos se muestran en la Tabla
2.
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Se sembraron semillas de arroz (variedad:
Kinmaze) a una tasa de 10 granos por maceta en macetas de arcilla
que tenían un diámetro de 6,0 cm, y se dejaron crecer en un
invernadero. Se pulverizó una suspensión de las cepas D747
producidas como se describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por
maceta sobre los brotes de arroz en sus estados de 2 a 3 hojas.
Después de secar al aire, se inocularon los brotes con hongos de la
plaga de la vaina del arroz (Thanatephorus cucumeris), y se
ubicaron en una cámara de humedad. Al quinto día tras la
inoculación, se midió la altura de las lesiones, y se emplearon como
una evaluación del alcance de las lesiones. La evaluación se llevó
a cabo sobre la base de los criterios de evaluación que se muestran
en la Tabla1 descritos a continuación. Los resultados de los
ensayos se muestran en la Tabla 2.
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Se sembraron semillas de trigo (variedad: Nourin
Nº 61) a una tasa de 10 granos por maceta en macetas de plástico
que tenían un diámetro de 6,0 cm, y se dejaron crecer en un
invernadero. Se pulverizó una suspensión de las cepas D747
producidas como se describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por
maceta sobre los brotes de trigo en su estado de 2 hojas. Después
de secar al aire, se inocularon los brotes con picnosporas de hongos
de la mancha de la gluma del trigo (Septoria nodorum), y se
ubicaron en un invernadero. Al décimo día tras la inoculación, se
midió el área infectada de la primera hoja en cada maceta, y se
empleó como una evaluación del alcance de las lesiones. La
evaluación se llevó a cabo sobre la base de los criterios de
evaluación que se muestran en la Tabla1 descritos a continuación.
Los resultados de los ensayos se muestran en la Tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
Se sembraron semillas de trigo (variedad: Nourin
Nº 61) a una tasa de 10 granos por maceta en macetas de plástico
que tenían un diámetro de 6,0 cm, y se dejaron crecer en un
invernadero. Se pulverizó una suspensión de las cepas D747
producidas como se describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por
maceta sobre los brotes de trigo en sus estados de 1,5 a 2 hojas.
Después de secar al aire, se inocularon los brotes con conidiosporas
de la oidiosis del trigo (Erysiphe graminis), y se ubicaron
en un banco de un invernadero hasta que se llevara a cabo una
medida de la infección. Al décimo día tras la inoculación, se midió
el área infectada de la primera hoja en cada maceta, y se empleó
como alcance de las lesiones. La evaluación se llevó a cabo sobre
la base de los criterios de evaluación que se muestran en la Tabla1
descritos a continuación. Los resultados de los ensayos se muestran
en la Tabla 2.
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Se sembraron semillas de pepino (variedad:
Sagami Hanjiiro) a una tasa de 4 granos por maceta en macetas de
plástico que tenían un diámetro de 6,0 cm, y se dejaron crecer en un
invernadero. Se pulverizó una suspensión de las cepas D747
producidas como se describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por
maceta sobre los brotes jóvenes de pepino en su estado
cotiledónico. Después de secar al aire, se inocularon los brotes
colocando un disco de papel inmerso en una suspensión de esporas
del moho gris del pepino (Botrytis cinerea) sobre la
superficie de los cotiledones de los brotes de pepino, y después se
ubicaron en una cámara de humedad a 20ºC. Al tercer día tras la
inoculación, se midió el área infectada de los cotiledones, y se
empleó como una evaluación del alcance de las lesiones. La
evaluación se llevó a cabo sobre la base de los criterios de
evaluación que se muestran en la Tabla1 descritos a continuación.
Los resultados de los ensayos se muestran en la Tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
Se sembraron semillas de pepino (variedad:
Sagami Hanjiiro) a una tasa de 4 granos por maceta en macetas de
plástico que tenían un diámetro de 6,0 cm, y se dejaron crecer en un
invernadero. Se pulverizó una suspensión de las cepas D747
producidas como se describe en el Ejemplo 1 a una tasa de 10 ml por
maceta sobre los brotes jóvenes de pepino en su estado
cotiledónico. Después de secar al aire, se inocularon los brotes
pulverizando una suspensión de zoosporangios del mildiú velloso del
pepino (Pseudoperonospora cubensis), y después se dejaron
reposar en una cámara de humedad a 22ºC durante 24 horas. Al octavo
día tras la inoculación, se midió el área infectada de los
cotiledones, y se empleó como una evaluación del alcance de las
lesiones. La evaluación se llevó a cabo sobre la base de los
criterios de evaluación que se muestran en la Tabla1 descritos a
continuación. Los resultados de los ensayos se muestran en la Tabla
2.
Se colocó una suspensión de la cepa D747
producida como se describe en el Ejemplo 1, en una cantidad de 30
ml, en una taza de plástico que tenía un volumen de 60 ml. En ella
se dejaron flotar tres trozos de hojas de arroz con una longitud de
3 cm. Se liberaron diez imagos de Lissorhoptrus oryzophilus
en ella, y se cubrió la taza con una tapa. Tras dejarla reposar en
una cámara termostática a 25ºC durante 3 días, se contó el número
de insectos vivos. El ensayo se llevó a cabo tres veces. Se calculó
una tasa de mortalidad mediante la Ecuación (1) descrita a
continuación. Se determinó una tasa de mortalidad definitiva
calculando un valor medio de los tres valores. Los resultados de
los ensayos se muestran en la Tabla 3.
Tasa de
mortalidad (%) = {[10 - (el número de insectos vivos)] /10} x
100
Como resulta evidente a partir de los resultados
que se muestran en la Tabla 2 y la Tabla 3, las plantas a las que
se aplicaron los agentes para controlar enfermedades de plantas y
los agentes para controlar plagas de insectos que comprenden la
cepa D747 de acuerdo con la presente invención exhibieron mayores
efectos de control respecto a diversas enfermedades y plagas de
plantas.
La presente invención resulta característica en
que se descubrió una nueva cepa de D747 (FERM
BP-8234) de Bacillus sp. Al administrar
cultivos de la cepa D747 de Bacillus sp. (que incluyen las
bacterias viables) o bacterias viables aisladas mediante cultivo,
sobre partes de la planta tales como raíces, tallos, hojas,
semillas, y similares, o en la tierra de cultivo, se pueden
controlar brotes de diversas enfermedades de plantas en un
intervalo extremadamente amplio, y se pueden controlar plagas.
Además, las plantas sobre las que se pulverizan los agentes para
controlar enfermedades de plantas y los agentes para controlar
plagas de insectos que comprenden la cepa D747 de acuerdo con la
presente invención pueden exhibir mayores efectos de control
respecto a diversas enfermedades y plagas de plantas.
Claims (4)
1. Una cepa D747 de Bacillus sp. que
tiene un número de acceso FERM-BP 8234, depositado a
tenor del Tratado de Budapest.
2. Un agente para controlar una enfermedad de
una planta caracterizado por comprender la cepa de bacilo de
acuerdo con la reivindicación 1 como bacteria activa.
3. Un agente para controlar una plaga de insecto
caracterizado por comprender una cepa de Bacillus de
acuerdo con la reivindicación 1 como bacteria activa.
4. Un procedimiento para controlar una
enfermedad de una planta y/o una plaga de insecto,
caracterizado por emplear el agente para controlar una
enfermedad de una planta de acuerdo con la Reivindicación 2 y/o
emplear el agente para controlar una plaga de insecto de acuerdo con
la Reivindicación 3.
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