ES2307768T3 - Derivados de variolina y su uso como agentes antitumorales. - Google Patents

Derivados de variolina y su uso como agentes antitumorales. Download PDF

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Abstract

Un compuesto de formula general (5a): (Ver fórmula) en donde el grupo sustituyente definido por R1 se selecciona del grupo que consiste en OH, OR'''', SH, SR'', SOR'', SO2R'', NO2, NH2, NHR'', N(R'')2, NHCOR'', NHSO2R'', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R'', CO2H, CO2R'', carboxialquilo, alquilo de C1-C12, alquenilo de C2-C12, alquinilo de C2-C12, arilo, aralquilo y heteroaromático; en donde el sustituyente de los grupos definidos por X1, X2, R2, R3, R4, R5, R6, y R7 se selecciona cada uno de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, OR'', SH, SR'', SOR'', SO2R'', NO2, NH2, NHR'', N(R'')2, NHCOR'', NHSO2R'', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R'', CO2H, CO2R'', carboxialquilo, alquilo de C1-C12, alquenilo de C2-C12, alquinilo de C2-C12, arilo, aralquilo y heteroaromático; en donde cada uno de los grupos R'' se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, SH, NO2, NH2, CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)CH3, CO2H, CO2CH3, alquilo de C1-C12, alquenilo de C2-C12, alquinilo de C2-C12, arilo, aralquilo y heteroaromático; en donde los pares de grupos R1 y R2 pueden estar unidos en un sistema fusionado de anillos de benceno; en donde el grupo arilo contiene de 6 hasta alrededor de 18 de átomos de carbono en el anillo; y el grupo heteroaromático contiene uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S.

Description

Derivados de variolina y su uso como agentes antitumorales.
La presente invención se refiere a compuestos antitumorales, y en particular a nuevos análogos de variolina antitumorales que incluyen variolina B y desoxivariolina B.
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Antecedentes de la invención
Las variolinas son una clase de alcaloides marinos aislados de la esponja antártica, rara, de difícil acceso Kirkpatrickia varialosa, siendo variolina B (1) un ejemplo típico. Todas las variolinas contienen un núcleo pirido[3'.2':4.5]pirrolo[1.2-c]pirimidina fusionado (2), con un anillo aromático heterocíclico o un grupo éster unido al C_{5}, como en la variolina B (1), variolina D (3) y desoxivariolina B (4).
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1 
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Se ha divulgado que las variolinas tienen actividad antitumoral y otras propiedades útiles. Se da la estructura completa para estos y compuestos relacionados en N. B. Perry et al., Tetrahedron 1994, 50, 3987-3992 y G. Trimurtulu et al., Tetrahedron 1994, 50, 3993-4000.
Los estudios sintéticos para los alcaloides de 2-animopirimidina variolinas y meridianinas son el tema de Tetrahedron Lett. 2000, 41, 4777-4780. M. Alvarez et al., Tetrahedron Lett. 2001, 42, 315-317 describe una síntesis de desoxivariolina B empezando a partir de 7-azaindol. Se describen estudios para la síntesis total de las variolinas en Tetrahedron Lett. 2001, 42, 311-313. La primera síntesis total variolina B se describió en R. J. Anderson et al. Tetrahedron Lett. 2001, 42, 8697-8699. Después, P. Molina et al. Tetrahedron Lett. 2002, 43, 1005- 1007 también describieron la síntesis de variolina B alcanzada mediante ciclación en tándem aza-Wittig/carbodiimida.
WO 0204447 publicada el 17 de enero de 2002 describe un método para la preparación de variolina B (1) y desoxivariolina B (4) a partir de materiales de partida monoheteroaromáticos simples, al tiempo que proporciona nuevos derivados de variolina.
WO 0212240 publicada el 14 de febrero de 2002 se refiere a derivados de variolina B.
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Compendio de la invención
La presente invención se dirige a compuestos de fórmula general (5a) que tienen el sistema de anillo fusionado pirido pirrolo pirimidina de los compuestos de variolina:
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2
en donde el grupo sustituyente definido por R_{1} se selecciona del grupo que consiste en OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde el sustituyente de los grupos definidos por X_{1}, X_{2}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, y R_{7} se selecciona cada uno de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde cada uno de los grupos R' se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, SH, NO_{2}, NH_{2}, CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)CH_{3}, CO_{2}H, CO_{2}CH_{3}, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde los pares de grupos R_{1} y R_{2} pueden estar unidos en un sistema fusionado de anillos de benceno;
en donde
el grupo arilo contiene desde 6 hasta alrededor de 18 de átomos de carbono en el anillo;
el grupo heteroaromático contiene uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S.
Los sustituyentes halógenos adecuados en los compuestos de la presente invención incluyen F, Cl, Br y I.
Los grupos alquilo tienen preferiblemente desde 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono y lo más preferiblemente 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono. Metilo, etilo y propilo incluyendo isopropilo son grupos alquilo particularmente preferidos en los compuestos de la invención. Como se usa aquí, el término alquilo, a menos que se modifique de otra manera, se refiere tanto a grupos cíclicos como no cíclicos, aunque los grupos cíclicos comprenderán al menos tres carbonos miembros del anillo.
Los grupos alquenilo y alquinilo preferidos en los compuestos de la presente invención tienen uno o más enlaces insaturados y de 2 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 2 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, aún más preferiblemente de 2 hasta alrededor de 6 átomos de carbono, incluso más preferiblemente 2, 3 ó 4 átomos de carbono.
Los términos alquenilo y alquinilo como se usan aquí se refieren tanto a grupos cíclicos como no cíclicos, aunque los grupos no cíclicos lineales o ramificados son generalmente más preferidos.
Los grupos alcoxi preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen grupos que tienen uno o más enlaces de oxígeno y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, y aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono, y lo más preferible 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono.
Los grupos alquiltio preferidos en los compuestos de la presente invención tienen uno o más enlaces tioéter y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, y aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono. Los grupos alquiltio que tienen 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono son particularmente preferidos.
Los grupos alquilsulfinilo preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen aquellos que tienen uno o más grupos sulfóxido (SO) y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, y aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono. Los grupos alquilsulfinilo que tienen 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono son particularmente preferidos.
Los grupos alquilsulfonilo preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen aquellos grupos que tienen uno o más grupos sulfonilo (SO2) y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, y aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono. Los grupos alquilsulfonilo que tienen 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono son particularmente preferidos.
Los grupos aminoalquilo preferidos incluyen aquellos grupos que tienen uno o más grupos amino primario, secundario y/o terciario, y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 8 átomos de carbono, y aún más preferiblemente de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono, incluso más preferiblemente 1, 2, 3 ó 4 átomos de carbono. Los grupos amino secundarios y terciarios son más preferidos que los grupos amino primarios.
Los grupos carboxialquilo adecuados incluyen grupos alquilo sustituidos con mono- y dicarboxi. Los grupos carboxi típicamente toman la forma COOR', especialmente donde R' es hidrógeno o alquilo, preferiblemente hidrógeno o metilo.
Los grupos heterocíclicos adecuados comprenden grupos heteroaromáticos y heteroalicíclicos. Los grupos heteroaromáticos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S e incluyen, por ejemplo, cumarinilo incluyendo 8-cumarinilo, quinolinilo incluyendo 8-quinolinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidilo, furilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, oxazolilo, imidazolilo, indolilo, benzofuranilo y benzotiazol. Los grupos heteroalicíclicos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen, uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S e incluyen, por ejemplo, grupos tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, morfolino y pirrolindinilo.
Los grupos arilo carbocíclicos adecuados en los compuestos de la presente invención incluyen compuestos de anillos individuales y múltiples, incluyendo compuestos de anillos múltiples que contienen grupos arilo separados y/o fusionados. Los grupos arilo carbocíclicos típicos contienen de 1 a 3 anillos separados o fusionados y desde 6 hasta alrededor de 18 átomos de carbono en el anillo. Específicamente los grupos arilo carbocíclicos preferidos incluyen fenilo incluyendo fenilo sustituido tal como fenilo 2-sustituido, fenilo 3-sustituido, fenilo 4-sustituido, fenilo 2,3-sustituido, fenilo 2,4-sustituido, fenilo 2,5-sustituido, fenilo 2,6-sustituido, fenilo 3,4-sustituido, fenilo 3,5-sustituido, fenilo 3,6-sustituido, fenilo 2,3,4-sustituido, 2,3,5-sustituido, 2,3,6-sustituido, 2,4,5-sustituido, 2,4,6-sustituido, y 3,4,5-sustituido, incluyendo donde uno o más de los sustituyentes del fenilo es un grupo tal como halógeno, ciano, nitro, alcanoilo, sulfinilo, sulfonilo y similares; naftilo, incluyendo 1-naftilo y 2-naftilo; bifenilo; fenantrilo; y antracilo.
Las referencias aquí a los grupos R' sustituidos en los compuestos de la presente invención se refiere al grupo especificado que puede estar sustituido en una o más posiciones disponibles por uno o más grupos adecuados, por ejemplo, halógeno, tal como fluoro, cloro, bromo y yodo; ciano; hidroxilo; nitro; azido; alcanoilo tal como un grupo alcanoilo de C1-6 tal como acilo y similares; carboxamido; grupos alquilo incluyendo aquellos grupos que tienen de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o desde 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono y más preferiblemente de 1-3 átomos de carbono; grupos alquenilo y alquinilo incluyendo grupos que tienen uno o más enlaces insaturados y de 2 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o de 2 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alcoxi que tienen aquellos que tienen uno o más enlaces de oxígeno y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; ariloxi tal como fenoxi; grupos alquiltio incluyendo aquellos grupos que tienen uno o más enlaces tioéter y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o desde 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo incluyendo aquellos grupos que tienen uno o más enlaces alquilsulfinilo y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o desde 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfonilo incluyendo aquellos grupos que tienen uno o más enlaces sulfonilo y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o desde 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; grupos aminoalquilo tal como grupos que tienen uno o más átomos de N y de 1 hasta alrededor de 12 átomos de carbono o desde 1 hasta alrededor de 6 átomos de carbono; arilo carbocíclico que tiene 6 ó más carbonos, particularmente fenilo (por ejemplo, siendo R un grupo bifenilo sustituido o no sustituido); y aralquilo tal como bencilo.
Preferiblemente están excluidos del ámbito de la presente invención los compuestos conocidos variolina A, variolina B, variolina D, N(3')-metil-tetrahidrovariolina B, y desoxivariolina B.
Los compuestos de la presente invención se pueden preparar de forma sintética usando la metodología descrita en WO 0204447 en la que se construye el núcleo del esqueleto de variolina a partir de materiales de partida monoheteroaromáticos simples, basada en la siguiente retrosíntesis:
3 
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Dependiendo de la elección de los materiales de partida monoheteroaromáticos (6) y (7), la metodología se puede ampliar fácilmente para proporcionar acceso a un amplio rango de análogos de variolina como se ejemplifica aquí.
WO 0212240 también proporciona consejos para la síntesis de compuestos de variolina.
De esta manera la presente invención también proporciona vías de síntesis para los compuestos de la invención.
Las actividades antitumorales de estos compuestos incluyen leucemia, cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de riñón, cáncer de cuello uterino, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer endotelial, cáncer de mama, sarcoma y melanoma.
De esta manera, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención en la fabricación de un medicamento para tratar a cualquier mamífero, notablemente un ser humano, afectado por cáncer que comprende administrar al individuo afectado una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención, o una composición farmacéutica del mismo.
Otra forma de realización especialmente preferida de la presente invención es composiciones farmacéuticas útiles como agentes antitumorales que contienen como principio activo un compuesto o compuestos de la invención, así como los procesos para su preparación.
Ejemplos de composiciones farmacéuticas incluyen cualquier sólido (comprimidos, píldoras, cápsulas, gránulos, etc.) o líquido (soluciones, suspensiones o emulsiones) con composición adecuada para administración oral, tópica o parenteral.
La administración de los compuestos o composiciones de la presente invención puede ser cualquier método adecuado, tal como infusión intravenosa, preparación oral, preparación intraperitoneal e intravenosa.
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Descripción detallada de las formas de realización preferidas
R_{1} es preferiblemente alquilo o halógeno; más preferiblemente hidrógeno, metilo o cloro. De forma alternativa R_{1} con R_{2} forma preferiblemente un anillo fusionado, más preferiblemente un anillo aromático fusionado, y lo más preferiblemente un anillo de benceno fusionado. Tal anillo puede tener sustituyentes, por ejemplo OR', NR'_{2} o halógeno; más preferiblemente hidroxi, alcoxi, amino, o halógeno; lo más preferiblemente hidroxi, metoxi, amino, fluoro o cloro.
R_{2} es preferiblemente hidrógeno o halógeno; más preferiblemente hidrógeno, fluoro o cloro. Como se ha mencionado, de forma alternativa R_{1} con R_{2} forma preferiblemente un anillo fusionado.
R_{3} es preferiblemente hidrógeno, OR', NR'_{2} o halógeno; más preferiblemente hidrógeno, hidroxi, alcoxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno; lo más preferiblemente hidrógeno, hidroxi, metoxi, benciloxi, amino, metoxibencilamino o cloro.
Parece que se obtiene mayor actividad cuando R_{3} es hidrógeno, seguido por hidroxi, halógeno (cloro), metoxi, amino.
R_{4} es preferiblemente hidrógeno.
R_{5} es preferiblemente hidrógeno.
R_{6} es preferiblemente hidrógeno.
R_{7} es preferiblemente hidrógeno.
Parece que se obtiene mayor actividad cuando R_{12} es 4-pirimidinilo, como en la fórmula (5a).
X_{1} es preferiblemente hidrógeno, alquilo, OR', NR'_{2}, SR', SOR', SO_{2}R', carboxialquilo o aralquilo; más preferiblemente hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, tioalquilo, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, o dicarboxialquilo; lo más preferiblemente hidrógeno, metilo, hidroxi, metoxi, etoxi, benciloxi, fenoxi, amino, metoxibencilamino, tiometilo, metilsulfinilo, metilsulfonilo o dimetilcarboxietilo.
Parece que cuando X_{1} es SR', SOR', SO_{2}R', hay gran selectividad para cáncer de cuello de útero. En pruebas contra la línea celular HeLa, la actividad aumentó en 2 ó 3 órdenes de magnitud. En particular, X_{1} es preferiblemente S-alquilo, SO-alquilo o SO_{2}-alquilo, donde alquilo es normalmente metilo.
X_{2} es preferiblemente NR'_{2} o SR'; más preferiblemente NH_{2} o tioalquilo; lo más preferiblemente NH_{2} o tiometilo.
De esta manera, los compuestos preferidos de esta invención son de fórmula (5) donde los sustituyentes están de acuerdo con una o más, preferiblemente todas de estas definiciones preferidas, más preferidas y las más preferidas.
Formas de realización especialmente preferidas de la presente invención son los compuestos semejantes a variolina con las estructuras generales (10), (11) y (29).
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4
en donde los grupos sustituyentes definidos por X_{1} y X_{2} se seleccionan cada uno de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero son más preferiblemente NH_{2}, SMe, SOMe, o SO_{2}Me.
en donde R_{8} se selecciona del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero es más preferiblemente H, metilo o Cl.
en donde R_{9} se selecciona del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero es más preferiblemente H u OMe.
en donde R_{10} se selecciona del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero es más preferiblemente H, OH, Cl, F, NH_{2} u OMe.
en donde R_{11} se selecciona del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero es más preferiblemente H, Cl o F.
en donde R_{12} es pirimidinilo, con sustituyentes preferidos que incluyen alcoxi o nitro, especialmente metoxi o nitro, junto con las definiciones permitidas para el grupo X_{1}.
en donde cada uno de los grupos R' se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, SH, NO_{2}, NH_{2}, CN, halógeno, =O, C(=O)H, C(=O)CH_{3}, CO_{2}H, CO_{2}CH_{3}, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático.
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Las formas de realización particulares de los compuestos de fórmula (10) incluyen aquellos en los que uno o más sustituyentes son como sigue:
X_{1} es como se ha definido, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
X_{2} es como se ha definido, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
R_{8} es como se ha definido para R_{1}, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
R_{10} es como se ha definido para R_{3}, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
R_{11} es como se ha definido para R_{2}, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas.
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Las formas de realización particulares de los compuestos de fórmula (11) incluyen aquellos en donde uno o más sustituyentes son como sigue:
X_{1} es como se ha definido, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
X_{2} es como se ha definido, incluyendo las opciones preferidas, más preferidas y las más preferidas;
R_{9} es uno de los sustituyentes permitidos para un anillo arilo, tal como hidrógeno o alcoxi, preferiblemente hidrógeno o metoxi.
Los compuestos de las fórmulas generales (10), (11) y (29) se puede preparar de forma sintética usando modificaciones de la metodología descrita en WO 0204447 y WO 0212240.
Algunos de los métodos preferidos de producir los compuestos de esta invención se describen a continuación en los siguientes esquemas de reacción con ejemplos de grupos sustituyentes típicos. Estos sustituyentes típicos no son limitantes de la invención y se debe entender el proceso en el sentido más general, sin prestar especial atención a las identidades indicadas por las letras del código.
Se han preparado muchos compuestos antitumorales activos a partir de estos compuestos y se cree que se pueden formar muchos más compuestos según las enseñanzas de la presente divulgación.
La preparación de los compuestos de fórmula general (11) se ilustra a continuación para R_{9} como H u OMe.
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La preparación de compuestos de fórmula general (10) se ilustra para el caso donde R_{8} es metilo, y R_{10} y R_{11}
son H.
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La preparación de compuestos de fórmula general (10) se ilustra para el caso donde R_{8} es H o Cl, R_{10} es H y R_{11} es F o Cl.
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La preparación de compuestos de fórmula general (10) se ilustra para el caso donde R_{8}, R_{10} y R_{11} son H.
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Para obtener el intermediario clave (8b, ejemplo 17: compuesto 18 en WO 0204447) usando el método conocido, fue necesario realizar la reacción entre cloruro de 2-cloronicotinoilo (7b) y yodopirimidina (13) a -100ºC. Cuando se intentó aumentar proporcionalmente esta reacción, se tuvieron que aumentar los tiempos de adición para mantener la temperatura dentro de la reacción por debajo de -95ºC. Estos tiempos más largos aumentaron las reacciones secundarias y disminuyeron el rendimiento.
Para evitar estas temperaturas extremadamente bajas en la formación de (8b) se desarrolló una nueva vía para obtener (8b). De esta manera (7b) se convirtió en la amida de Weinreb correspondiente (30) que se hizo reaccionar con el derivado de magnesio de (13) a -5ºC para producir la cetona (31). La transformación de (30) en (8b) se hizo con dos métodos: a) con el derivado de magnesio de (13) a 0ºC o b) con el derivado de litio de (13) en condiciones de Barbier a -78ºC. En ambos métodos, la reacción se aumenta de forma proporcional fácilmente y los rendimientos son mejores que el método original.
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9 
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Reflejando este descubrimiento, la presente invención proporciona un proceso para preparar un intermediario de variolina de fórmula (8z):
10
donde hal es halógeno, y los sustituyentes restantes son como se han definido previamente; que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (31z):
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donde los sustituyentes son como se han definido previamente, con un compuesto de fórmula (13z):
12
donde los sustituyentes son como se han definido previamente.
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En esta reacción, X_{1} y X_{2} pueden ser el mismo o diferente y son preferiblemente ambos -SMe, hal es normalmente Cl; R' es típicamente H o Ac, y los sustituyentes restantes son generalmente H o como para los compuestos preferidos de esta invención.
El compuesto de fórmula (31z) se produce adecuadamente haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (30z):
13
donde los sustituyentes son como se han definido previamente, con un compuesto de fórmula (13z). El compuesto de fórmula (13z) utilizado para reaccionar con el compuesto de fórmula (30z) puede ser el mismo o diferente que el compuesto de fórmula (13z) utilizado para reaccionar con el compuesto de fórmula (31z).
La preparación de los compuestos de fórmula general (10) se ilustra para el caso donde R_{3} y R_{11} son H y R_{10} es OBn.
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La preparación de los compuestos de fórmula general (29) se ilustra para el caso donde R_{12} es aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido.
De esta manera, es posible transformar una variedad de moléculas heteroaromáticas simples en un número de intermediarios y derivados con potencial actividad terapéutica antitumoral.
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15 
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Para compuestos de fórmula general (10) y (11), una variedad de interconversiones de grupos funcionales simples da acceso a una gran variedad de derivados adicionales con diferentes sustituyentes X_{1}, X_{2} y R_{10} como se ilustra a continuación.
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17
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Se incluyen ejemplos de las actividades biológicas de los compuestos de la presente invención en la tabla I al final del documento.
La presente solicitud reivindica prioridad de una solicitud de patente de GB.
Los procedimientos experimentales y las características fisicoquímicas de los compuestos son los siguientes:
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Detalles experimentales generales
A menos que se especifique lo contrario, todas las reacciones se realizaron en un atmósfera de argón en material de vidrio presecado.
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Ejemplo 1 Compuesto 13 
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Se preparó yodopirimidina (13) siguiendo el procedimiento experimental descrito en la bibliografía por A.J. Majeed et al., Tetrahedron 1989, 45, 993.
Ejemplo 2 Compuesto 14a 
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Método A
Se trató una solución de 4-yodo-3-metiltiopirimidina 13 (5,13 g, 20,3 mmol) en tetrahidrofurano (75 mL) a -100ºC con nBuLi (8,1 mL, 20,3 mmol, 2,5 M en hexanos). La mezcla de reacción se agitó a -100ºC durante 45 minutos y se trató con una solución de 2-cloro-3-quinolinacarboxialdehído 12a (3,0 g, 15,7 mmol) en tetrahidrofurano (60 mL) a -100ºC durante 2,5 horas. La reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23ºC y se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se evaporó. El crudo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 14a como un sólido amarillo (4,0 g, 81%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,45 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,91 (d, J = 4,2 Hz, 1H, OH), 2,58 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,4, 169,5, 157,9, 149,4, 147,0, 138,0, 133,9, 130,9, 127,9, 127,9, 127,4, 127,2, 113,5, 71,7, 14,2.
MS (ESI) m/z: 318 (M+1)^{+}.
Rf: 0.12 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
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Método B
Se trató una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (5,1 g, 20,3 mmol) en tolueno (40 mL) a 0ºC con i-PrMgCl (10 mL, 20,0 mmol, 2 M en tetrahidrofurano) durante 1 hora y se añadió a través de una cánula a una solución de 2-cloro-3-quinolinacarboxialdehído 12a (3,0 g, 15,7 mmol) en tolueno (150 mL) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 16 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23ºC y se repartió entre solución acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 14a como un sólido amarillo (3,5 g, 70%).
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Ejemplo 3 Compuesto 14b 
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Se trató una solución de 4-yodo-3-metiltiopirimidina 13 (3,4 g, 13,5 mmol) en tetrahidrofurano (60 mL) a -100ºC con nBuLi (5,4 mL, 2,5 M en hexano, 13,5 mmol) y se agitó a -100ºC durante 45 minutos. Después de esto, se añadió una solución de 2-cloro-6-metoxi-3-quinolinacarboxialdehído 12b (1,7 g, 7,9 mmol) en tetrahidrofurano (35 mL) a -100ºC y se agitó durante 2,5 horas. La reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23ºC y se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1) para dar 14b como un sólido amarillo (1,8 g, 67%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,42 (dd, J = 5,1, 1,0 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,86 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 9,3, 2,7 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,20 (br s, 1H), 5,09 (br s, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,53 (br s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,7, 168,4, 158,6, 157,9, 146,6, 143,5, 136,8, 133,6, 129,7, 128,6, 123,9, 113,5, 105,3, 71,2, 55,8, 14,4.
MS (ESI) m/z: 370 (M+23)^{+}.
Rf: 0.37 (hexano:acetato de etilo, 1:1).
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Ejemplo 4 Compuesto 15a
22
Se agitó una solución de 14a (4,0 g, 12,6 mmol) con PDC (7,1 g, 18,9 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 mL) a 23ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite, se evaporó y se cromatografió (hexano:acetato de etilo, 4:1) para dar 15a como un sólido blanco (3,0 g, 75%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,85 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 192,7, 173,7, 159,7, 159,3, 148,3, 146,8, 140,6, 132,6, 131,2, 128,8, 128,6, 128,1, 126,1, 113,7, 14,3.
MS (ESI) m/z: 280 (M-35)^{+}.
Rf: 0,23 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
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Ejemplo 5 Compuesto 15b
23
Se trató una solución de 14b (1,8 g, 5,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 mL) con PDC (2,9 g, 7,8 mmol) a 23ºC durante 48 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite, se concentró y se cromatografió (hexano:acetato de etilo, 3:1) para dar 15b como un sólido blanco (1,5 g, 82%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,82 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,97 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 9,3, 2,9 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,34 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 193,0, 173,7, 159,6, 159,4, 158,9, 144,4, 144,2, 139,2, 131,3, 130,1, 127,3, 125,2, 113,7, 105,9, 55,9, 14,3.
MS (ESI) m/z: 368 (M+23)^{+}.
Rf: 0,26 (hexano:acetato de etilo, 3:1).
Ejemplo 6 Compuesto 16a 
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24 
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Se trató una solución de de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (0,50 g, 2,0 mmol) en tolueno anhidro (12 mL) a 0ºC con i-PrMgCl (1,0 mL, 2 M en tetrahidrofurano, 2 mmol) durante 1 hora. El arilmagnesio formado se transfirió a través de una cánula a una solución de 15a (0,32 g, 1,0 mmol) en tolueno anhidro (30 mL) a 0ºC, se agitó durante 25 minutos, se trató con exceso de cloruro de acetilo (2,0 mL), y se agitó durante la noche a 23ºC. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 16a como un sólido amarillo (150 mg; 15%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,53 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,01 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,81-7,77 (m, 2H), 7,58 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 2,36 (s, 6H), 2,30 (s, 3H).
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Ejemplo 7 Compuesto 16b 
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25 
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Se trató una solución de 4-yodo-3-metiltiopirimidina 13 (2,1 g, 8,3 mmol, 2,0 equivalentes) en tetrahidrofurano (50 mL) a -100ºC con nBuLi (3,3 mL, 2,5 M en hexanos, 8,3 mmol) y se agitó a -100ºC durante 45 minutos. Después de esto, se añadió una solución de 15b (1,4 g, 4,1 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) a -78ºC lentamente a través de una cánula manteniendo -100ºC. La mezcla de reacción se agitó a -100ºC durante 3 horas. La reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23ºC y se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El crudo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 2:1) para dar 16b como un sólido blanco (1,48 g, 76%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,57 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 7,87 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,43 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 7,36 (dd, J = 9,3, 2,7 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,47 (s, 6H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,1, 169,4, 158,7, 158,2, 147,5, 143,1, 138,1, 134,4, 129,7, 127,4, 124,2, 115,3, 105,7, 80,0, 55,9, 14,5.
MS (ESI) m/z: 494 (M+23)^{+}.
Rf: 0,06 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
Ejemplo 8 Compuesto 17a
26
Una mezcla de 16a (680 g, 1,40 mmol), trietilsilano (2,70 mL, 16,9 mmol) y ácido trifluoroacético (0,23 mL, 2,95 mmol) se sometió a reflujo en dicloroetano (3 mL) en un tubo sellado a 80ºC durante 32 horas. Después de enfriar, el residuo rojo se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (50 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) y una solución acuosa saturada de NaCl (50 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:acetato de etilo, de 100:0 a 30:1) para dar 17a como un sólido naranja (226 mg, 41%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,95 (s, 1H), 8,53 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,09-8,03 (m, 2H), 7,89 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,75 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H), 2,71 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 173,5, 161,0, 157,3, 156,3, 144,8, 143,1, 141,8, 141,0, 128,7, 128,4, 128,0, 126,3, 125,9, 120,0, 112,7, 108,4, 100,1, 15,1, 14,4.
MS (ESI) m/z: 392 (M+1)^{+}.
Rf: 0,83 (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 96:4).
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Ejemplo 9 Compuesto 17b
27
Se trató una suspensión de 16b (113 mg, 0,24 mmol) y TFA (37 \muL, 0,48 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,5 mL) con Et_{3}SiH (0,3 mL, 1,9 mmol) en un tubo sellado a 100ºC durante 43 horas. La mezcla de reacción se enfrió, y se repartió entre CH_{2}Cl_{2} y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El crudo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 2:1) para dar 17b como un sólido amarillo (34 mg, 34%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,87 (s, 1H), 8,54 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 2,76 (s, 3H), 2,72 (s, 3H).
MS (APCI) m/z: 420 (M+1)^{+}.
Rf: 0,27 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
Ejemplo 10 Compuesto 18a 
\vskip1.000000\baselineskip
28 
\vskip1.000000\baselineskip
Se calentó una solución de 17a (15,3 mg, 0,039 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (5 mL) y NH_{4}OH (8 mL, 32%) en un tubo sellado a 85ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 98:2) para dar 18a como un sólido amarillo (9,3 mg, 67%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 9,02 (s, 1H), 8,49 (d, J = 5,4Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72-7,68 (m, 2H), 7,59 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 359 (M+1)^{+}.
Rf: 0,64 (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 6:1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 11 Compuesto 18b 
\vskip1.000000\baselineskip
29 
\vskip1.000000\baselineskip
Se calentó una solución de 17b (21,0 mg, 0,05 mmol) en 1,4-dioxano:NH_{4}OH al 32%, 2:3 (25 mL), a 90ºC en un tubo sellado durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 98:2) para dar 18b como un sólido amarillo (10 mg, 52%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,80 (s, 1H), 8,30 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,52-7,47 (m, 2H), 7,32 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,27-7,25 (dd, J = 8,7, 2,7 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 2,58 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 389 (M)^{+}.
Ejemplo 12 Compuesto 19a 
\vskip1.000000\baselineskip
30 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató una solución de 17a (26,7 mg, 0,068 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL) a -30ºC gota a gota con una solución de mCPBA (12,5 mg, 0,0051 mmol, 2,4 equivalentes, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (1 mL) y se calentó a 0ºC durante 30 minutos. La mezcla de reacción se trató con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El crudo de la reacción se disolvió en 1,4-dioxano:NH_{4}OH (32%) y se calentó a 80ºC en un tubo sellado durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:CH_{3}OH, de 98:2 a 94:6) para dar 19a como un sólido amarillo (4,5 mg, 20%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,90 (s, 1H), 8,17 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,04 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 328 (M+1).
Rf: 0,79 (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 6:1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 13 Compuesto 42 
\vskip1.000000\baselineskip
31 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató 19a (2,1 mg, 0,006 mmol) con HCl en 1,4-dioxano (0,5 mL, 3,8 M) a 23ºC durante 5 minutos. La mezcla de reacción se evaporó para dar 42 como un sólido amarillo (2,5 mg, 100%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 9,47 (s, 1H), 8,30 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 6,9 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 328 (M)^{+}.
\global\parskip0.900000\baselineskip
Ejemplo 14 Compuesto 19b
32
Se trató una solución de 17b (18,0 mg, 0,04 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (24,7 mg, 0,11 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL). La mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC durante 30 minutos y se trató con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3}. La mezcla de reacción se repartió entre CH_{2}Cl_{2} y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 19b como un sólido amarillo (2,8 mg, 20%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,81 (s, 1H), 8,13 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,27 (dd, J = 9,3, 2,7 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H).
Ejemplo 15 Compuesto 20
33
Se añadió DMF (2 gotas) a una suspensión de cloruro de oxalilo (5,4 mL, 10,6 mmol) y ácido 2-cloro-6-metilnicotínico (1,69 g, 9,8 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (45 mL). La mezcla se agitó durante 3 horas a 23ºC y el solvente se evaporó a presión para dar un aceite marrón (1,8 g, 97%) que se usó sin más purificación.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 330 MHz) \delta 8,35 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 2,61 (s, 3H).
Ejemplo 16 Compuesto 21
34
Se añadió nBuLi (11,6 mL, 2,5 M en hexano, 28,8 mmol) gota a gota a una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (7,16 g, 28,4 mmol) en tetrahidrofurano (60 mL) a -100ºC. La solución negra se agitó durante 15 minutos a -100ºC. Se añadió una solución de cloruro de 2-cloro-6-metilnicotinoilo 20 (1,8 g, 9,47 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a través de una cánula a -100ºC. La mezcla roja intensa se agitó durante 1 hora a -95ºC y añadió cloruro de acetilo (3,4 mL, 47,3 mmol) cuidadosamente. La mezcla roja se agitó durante 4 horas a 23ºC y se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (100 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con éter dietílico (3 x 150 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo rojo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 1:5 a 1:1,5) para dar 21 (2,3 g, 54%) como un sólido rojo pálido.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,54 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 7,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 5,3 Hz, 2 H), 7,05 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,49 (s, 6H), 2,27 (s, 3H).
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Ejemplo 17 Compuesto 22 
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35 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de 21 (2,3 g, 5,1 mmol), Et_{3}SiH (6,6 mL, 41,1 mmol) y ácido trifluoroacético (0,83 mL, 10,7 mmol) se sometió a reflujo en dicloroetano (10 mL) en un tubo sellado durante 3 horas. Después de enfriar, el residuo rojo se filtró, se lavó con éter dietílico y se echó en una mezcla de CH_{2}Cl_{2} (300 mL) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (300 mL). La mezcla marrón se agitó durante 1 hora a 23ºC y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 200 mL) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron a presión reducida para dar 22 (1,1 g, 61%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,51 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 2,79 (s, 3H), 2,79 (s, 3H), 2,71 (s, 3H).
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Ejemplo 18 Compuesto 24 
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36 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de mCPBA (45 mg, 0,18 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL), previamente secada sobre sulfato de sodio, se añadió gota a gota a una solución enfriada (-30ºC) de 22 (29,5 mg, 0,083 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (4 mL). La solución amarilla se agitó durante 15 minutos a 0ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} (5 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 mL). Las fases acuosas combinadas se extrajeron con CH_{2}Cl_{2} (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El intermediario 23 se echó en un tubo sellado con 1,4-dioxano (4 mL) y se añadió una solución de amoniaco al 32% (14 mL). La mezcla marrón se calentó durante 14 horas a 85ºC. La mezcla marrón resultante se evaporó al vacío y se añadió CH_{2}Cl_{2}:MeOH (10:1, 11 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y el solvente se evaporó a presión reducida. El sólido amarillo se purificó mediante cromatografía rápida usando CH_{2}Cl_{2}:MeOH (2%) a CH_{2}Cl_{2}:MeOH (5%) como eluyente para dar 24 (4 mg, 17%, 2 pasos) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,50 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,46-7,73 (m, 2H), 7,29 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,68 (s, 3H).
MS (ES) m/z: 292 (M+1)^{+}.
Ejemplo 19 Compuesto 44
37
Se resuspendió el compuesto 24 (30 mg) en una solución de HCl en 1,4-dioxano (6 mL, 3,8 N) a 0ºC. La mezcla marrón pálida se agitó a 0ºC durante 15 minutos y se evaporó al vacío. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (5 mL), se agitó durante 1 minuto y se evaporó de nuevo. Se añadió 1,4-dioxano (5 mL) y el sólido marrón pálido se filtró y se lavó con más 1,4-dioxano (3 mL) para dar 30 mg de 44.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 2,79 (s, 3H).
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Ejemplo 20 Compuesto 43
38
Se añadió una solución de amoniaco al 32% (4 mL) a una solución de 22 (11 mg, 0,031 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL). La mezcla marrón se calentó durante 14 horas a 85ºC en un tubo sellado. La mezcla amarilla resultante se evaporó al vacío, se añadió CH_{2}Cl_{2} (5 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y el solvente se evaporó a presión reducida. El sólido amarillo se purificó mediante cromatografía rápida usando (CH_{2}Cl_{2}:MeOH del 1% al 3%) como eluyente para dar 43 (3 mg, 67% BRSM) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,69 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 323 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 21 Compuesto 45
39
Se trató una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (0,76 g, 3,0 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL) a -100ºC con nBuLi (1,2 mL, 2,5 M en hexanos, 3,0 mmol) y la solución naranja se agitó a -100ºC durante 20 minutos. Se añadió una solución de cloruro de 2,5-dicloronicotinoilo (0,21 g, 1,0 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) gota a gota a la solución previamente preparada de derivado de organolitio y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a -100ºC. Después de esto, la reacción cruda se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La cromatografía rápida del residuo (acetato de etilo:hexano, 50:50) produjo el correspondiente carbinol (0,11 g, 26%).
Se añadió una solución de este carbinol (0,11 g, 0,26 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a una suspensión de NaH (16 mg, 0,4 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (5 mL). La mezcla roja oscura se agitó a 23ºC durante 10 minutos. Se añadió después cloruro de acetilo (0,071 mL, 1,0 mmol) gota a gota y la suspensión amarilla resultante se agitó durante 5 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa de bicarbonato de sodio (20 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 45 (0,11 g, 90% rendimiento total del 24%) como un aceite marrón que se usó sin más purificación.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 2,30 (s, 3H), 2,40 (s, 6H), 7,28 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,91 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 5,3 Hz, 2H).
MS (ESI) m/z: 468 (M)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 22 Compuesto 46 
\vskip1.000000\baselineskip
40 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (2,3 g, 9,0 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL) a -100ºC con nBuLi (3,6 mL, 2,5 M en hexanos, 9,1 mmol) y la solución naranja se agitó a esta temperatura durante 20 minutos. Se añadió una solución de cloruro de 2,6-dicloro-5-fluoronicotinoilo (0,69 g, 3 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) gota a gota a la solución previamente preparada del derivado de organolitio y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a -100ºC. Después de esto, la reacción cruda se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La cromatografía rápida del residuo (acetato de etilo:hexano, 50:50) para producir el correspondiente carbinol (0,15 g, 11%).
Se añadió una solución de este carbinol (0,15 g, 0,3 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a una suspensión de NaH (20 mg, 0,5 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (2 mL). La mezcla roja oscura se agitó a 23ºC durante 10 minutos. Se añadió después cloruro de acetilo (0,10 mL, 1,3 mmol) gota a gota y la suspensión amarilla resultante se agitó durante 5 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (20 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 46 (0,13 g, 86% rendimiento total del 9%) como un aceite marrón que se usó sin más purificación.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 2,31 (s, 3H), 2,42 (s, 6H), 7,27 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,81 (d, J_{H-F}= 8.6 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 5,3 Hz, 2H).
MS (ESI) m/z: 486 (M)^{+}.
Ejemplo 23 Compuesto 47 
\vskip1.000000\baselineskip
41 
\vskip1.000000\baselineskip
Se transfirió una solución de 45 (110 mg, 0,23 mmol) y ácido trifluoroacético (0,04 mL, 0,52 mmol) en 1,2-dicloroetano (2 mL) a un tubo Young equipado con un tapón de goma, que contenía trietilsilano (0,33 mL, 2,08 mmol). Con un flujo fuerte de argón el tapón se cambió por una tapa de rosca de teflón, y se calentó el vaso de reacción sellado a 100ºC durante 48 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (10 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación del material crudo se logró mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33%) para producir una mezcla de dos productos con el mismo Rf. Se obtuvo 47 mediante adición de éter dietílico (15 mL) y filtración como un sólido amarillo (20 mg, 20%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 2,68 (s, 3H), 2,73 (s, 3H), 7,31 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,51 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,54 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,66 (d, J= 2.1 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 374 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 24 Compuesto 48 
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42 
\vskip1.000000\baselineskip
Se transfirió una solución de 46 (200 mg, 0,42 mmol) y ácido trifluoroacético (64 \muL, 0,82 mmol) en 1,2-dicloroetano (2 mL) a un tubo Young equipado con un tapón de goma, que contenía trietilsilano (0,52 mL, 3,28 mmol). Con un flujo fuerte de argón, el tapón se cambió por una tapa de rosca de teflón, y se calentó el vaso de reacción sellado a 140ºC durante 96 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (10 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación del material crudo se logró mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33%) para producir una mezcla de dos productos con el mismo Rf. Se obtuvo 48 mediante adición de éter dietílico (15 mL) y filtración como un sólido amarillo (26 mg, 16%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 2,67 (s, 3H), 2,74 (s, 3H), 7,25 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8.47 (d, J_{H-F} = 8,8 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 392 (M+1)^{+}.
Ejemplo 25 Compuesto 49
43
Se disolvió el compuesto 47 (20 mg, 0,054 mmol) en cloroformo (5 mL) enfriado a -30ºC. Se añadió una solución preenfriada (-30ºC) de ácido m-cloroperbenzoico (19 mg, 0,11 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) gota a gota y se agitó a 0ºC durante 15 minutos. La solución se calentó hasta 23ºC, se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2}. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para obtener después el sulfóxido como un sólido amarillo, que se usó sin más purificación. El material oxidado crudo se calentó con un exceso de p-metoxibencilamina (1 mL) a 85ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 50:50). Este producto se trató con ácido tríflico (0,5 mL) a 23ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató sucesivamente con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (1 mL, 32%).
El precipitado se eliminó por filtración, se lavó con MeOH (5 mL) y éter dietílico (5 mL) y se secó para producir 49 como un sólido amarillo (10 mg, rendimiento total del 60%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 6,92 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,64 (d, J = 2,2 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 312 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 26 Compuesto 50
44
Se disolvió el compuesto 48 (26 mg, 0,066 mmol) en cloroformo (5 mL) y se enfrió a -30ºC. Se añadió una solución preenfriada (-30ºC) de ácido m-cloroperbenzoico (23 mg, 0,132 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) gota a gota y se agitó a 0ºC durante 15 minutos. La solución se calentó hasta 23ºC, se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2}. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para obtener el sulfóxido como un sólido amarillo, que se usó sin más purificación. El material oxidado crudo se calentó con un exceso de p-metoxibencilamina (1 mL) a 85ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 50:50). Este producto se trató con ácido tríflico (0,5 mL) a 23ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató sucesivamente con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (1 mL, 32%).
El precipitado se filtró, se lavó con MeOH (5 mL) y éter dietílico (5 mL) y se secó para producir 50 como un sólido amarillo (3 mg, rendimiento total del 14%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 6,86 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,50 (d, J_{H-F}= 9,3 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 329 (M)^{+}.
Ejemplo 27 Compuesto 8b 
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45 
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Método A
Se añadió una solución de bromuro de i-propilmagnesio (5,0 mL, 10,0 mmol, 2,0 M en tetrahidrofurano) gota a gota a una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (2,52 g, 10,0 mmol) en tolueno (60 mL) a 0ºC. La solución marrón se agitó durante 1 hora a 0ºC. Esta solución se añadió gota a gota a una solución de 31 (1,06 g, 4 mmol) en tolueno (40 mL) a través de una cánula durante un período de 20 minutos. Cuando se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos adicionales a 0ºC y después se extinguió con cloruro de acetilo (0,99 mL, 14,0 mmol). Se eliminó el baño de hielo y la suspensión marrón resultante se agitó durante 3 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (100 mL) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron. La cromatografía rápida del residuo crudo (acetato de etilo:hexano, 50:50) produjo 8b (1,28 g, 74%) como un sólido espumoso naranja pálido. El producto se aisló junto con una pequeña cantidad de 32 que se forma como producto secundario en la reacción. La mezcla de ambos compuestos se usó en el siguiente paso.
\vskip1.000000\baselineskip
8b
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,48 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 8,36 (dd, J = 4,9, 1,9 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 7,24 (dd, J = 7,8, 4,6 Hz, 1H), 2,36 (s, 6H), 2,28 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 456 (M+23)^{+}, 434 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
46 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,47 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,37 (dd, J = 4,9, 1,9 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 7,8, 1,6 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 7,8, 4,6 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Método B
Se añadió nBuLi (9 mL, 22,6 mmol, 2,5 M en hexano) previamente enfriado gota a gota a una solución de 31 (3 g, 11,3 mmol) y 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (5,71 g, 22,6 mmol) en tetrahidrofurano (75 mL) a -78ºC. La mezcla marrón oscura se agitó durante 15 minutos a -78ºC y se añadió cloruro de acetilo (3,2 mL, 45,3 mmol) cuidadosamente. La suspensión verde oscura se agitó a 23ºC durante 3,5 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (150 mL), y se extrajo con éter dietílico (2 x 150 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 4:1 a 100:0) para producir 8b (3 g, 61%) como un sólido rojo pálido.
Ejemplo 28 Compuesto 9 
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47 
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Se echó una mezcla de 8b (1,6 g, 3,7 mmol), ácido trifluoroacético (0,6 mL, 7,74 mmol) y Et_{3}SiH (4,7 mL, 29,5 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (8 mL). El vaso de reacción sellado se calentó a 90ºC durante 24 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con cloroformo (100 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (100 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con cloroformo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante adición de éter dietílico (100 mL) y filtración del precipitado rojo brillante para obtener 9 (0,85 g, 68%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,64 (dd, J = 8,1, 1,7 Hz, 1H), 8,60 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 8,51 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 8,5, 4,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,68 (s, 3H).
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Ejemplo 29 Desoxivariolina 4 
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48 
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Una solución de mCPBA (98 mg, 0,39 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (4 mL), previamente secada sobre sulfato de sodio, se añadió gota a gota a una solución enfriada (-30ºC) de 9 (61 mg, 0,18 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL). La solución amarilla se agitó durante 15 minutos a 0ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} (5 mL) y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 mL). Las fases acuosas combinadas se extrajeron con CH_{2}Cl_{2} (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. Se echó 28 en un tubo sellado con 1,4-dioxano (4 mL) y se añadió una solución de amoniaco al 32% (8 mL). La mezcla marrón se calentó durante 14 horas a 85ºC. La mezcla amarilla resultante se evaporó al vacío y se añadió CH_{2}Cl_{2}:MeOH (10:1, 11 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y el solvente se evaporó a presión reducida. El sólido amarillo se purificó mediante cromatografía rápida de CH_{2}Cl_{2}:MeOH (2%) a CH_{2}Cl_{2}:MeOH (5%) como eluyente para producir desoxivariolina 4 (14 mg, 29%, 2 pasos) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (DMSO-d_{6}, 300 MHz) \delta 8,92 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,45 (dd, J = 4,6, 1,4 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 278 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 30 Compuesto 51
49
Se trató desoxivariolina 4 (6 mg, 0,024 mmol) con una solución de HCl en 1,4-dioxano (2 mL, 5,3 M) y se agitó durante 2 horas a 23ºC. La suspensión se filtró para producir 51 (3 mg) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,99 (dd, J = 8,2, 1,2 Hz, 1H), 8,67 (dd, J = 4,9, 1,2 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,77 (dd, J = 8,3, 4,9 Hz, 1H), 7,67 (1 H, J = 6,9 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,1 Hz, 1H).
Ejemplo 31 Compuesto 30
50
A una suspensión vigorosamente agitada de clorhidrato de N,O-dimetilhidroxilamina (33,2 g, 0,34 mmol) en tetrahidrofurano (1,2 L), se añadió trietilamina (59 mL, 0,426 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos a 23ºC. Después de esto, añadió cloruro de 2-cloronicotinoilo 7b (50 g, 0,284 mmol) puro y la reacción se agitó durante la noche a 23ºC. La mezcla cruda se extinguió con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 750 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 30 (49,4 g, 87%) como un sólido amarillo, que se usó sin más purificación.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 3,39 (s, 3H), 3,48 (s, 3H), 7,29 (dd, J = 7,5, 4,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,43 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 201 (M+1)^{+}.
Ejemplo 32 Compuesto 31
51
A una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (20,3 g, 80,5 mmol) en tolueno anhidro se le añadió gota a gota a -4ºC i-PrMgCl (40,2 mL, 80,5 mmol, 2,0 M en tetrahidrofurano). La suspensión marrón pálida formada se agitó a -4ºC durante 45 minutos. Se añadió una solución de 30 (12,9 g, 64,4 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL) a través de una cánula durante 15 minutos y la mezcla marrón oscura resultante se agitó a 0ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se paró mediante adición de una solución saturada de cloruro de amonio (200 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar un sólido marrón (18 g). El residuo se trituró con una mezcla de éter dietílico y hexano (3:1, 40 mL) y se filtró para dar 31 como un sólido marrón pálido (13,6 g, 80%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,82 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,57 (dd, J = 4,2, 1,9 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 7,6, 4,8 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 198,2, 173,6, 159,6, 158,7, 151,6, 148,5, 139,4, 133,3, 122,3, 113,6, 14,2.
MS (ESI) m/z: 288 (M+23)^{+}, 266 (M+1)^{+}.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 33 Compuesto 33
52
Método A
Se trató una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (15,6 g, 62 mmol) en tetrahidrofurano (200 mL) con n-BuLi (24,8 mL, 2,5 M en hexanos, 62 mmol) a -100ºC. Después de la adición la mezcla de reacción se agitó a -100ºC durante 30 minutos y se trató a -110ºC con una solución de carbonato de dietilo (3,8 mL, 31 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) durante 30 minutos. La mezcla de reacción se calentó hasta -80ºC, se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (Hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1) para dar 33 como un sólido amarillo (5,3 g, 61%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,78 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 2,50 (s, 6H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 190,9, 173,5, 159,5, 159,0, 115,2, 14,4.
MS (ESI) m/z: 279 (M+1)^{+}.
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Método B
Se trató una solución de 4-yodo-2-metiltiopirimidina 13 (50,4 g, 200 mmol) en tolueno (420 mL) con i-PrMgCl (100 mL, 2 M en tetrahidrofurano, 200 mmol) a -10ºC durante 2 horas. Se transfirió la pirimidina magnesio a través de una cánula a EtOCOOEt (72 mL, 594,4 mmol) a -10ºC y se agitó a 0ºC durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23ºC y se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se trituró con CH_{2}Cl_{2} y se filtró. El filtrado se evaporó y se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1) para dar 33 como un amarillo sólido (13,3 g, 48%).
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Ejemplo 34 Compuesto 34
53
Se calentó una solución de 4-benciloxi-2-(1H)piridona (3,0 g, 5,0 mmol) en POCl_{3} recién destilado (18 mL) a 90ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se evaporó. El residuo se echó en hielo, se trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El residuo obtenido se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 100:1) para dar 34 como un sólido blanco (2,5 g, 75%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,19 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,40 (m, 5H), 6,90 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,80 (dd, J = 5,7, 2,1 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 166,6, 152,8, 150,6, 135,3, 129,0, 128,8, 127,8, 110,6, 110,5, 70,6.
MS (ESI) m/z: 219 (M)^{+}.
Rf: 0.4 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
Ejemplo 35 Compuesto 35
54
Se trató una solución de 34 (1,5 g, 6,8 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) a -100ºC con n-BuLi (2,7 mL, 6,8 mmol, 2,5 M en hexanos), se dejó calentar a -78ºC y se mantuvo a esta temperatura durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfrió a -100ºC y se trató a través de una cánula con una solución de 33 (1,9 g, 6,8 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) previamente enfriado a -78ºC. La mezcla de reacción se agitó a -78ºC durante 3 horas y se calentó a -50ºC durante 30 minutos, se volvió a enfriar a -78ºC y se trató con cloruro de acetilo previamente destilado en quinolina (2,0 mL, 28 mmol), se calentó a 23ºC, y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 2:1 a 1:1) para dar 35 como un sólido blanco (2,9 g, 78%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,26 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,32-7,26 (m, 4H), 7,08 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,02 (dd, J = 6,0, 2,4 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,80 (s, 2H), 2,37 (s, 6H), 2,32 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 171,5, 168,3, 168,1, 165,8, 156,5, 152,5, 149,9, 133,9, 128,7, 128,7, 128,0, 122,5, 115,1, 107,8, 84,7, 71,7, 21,7, 14,2.
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Ejemplo 36 Compuesto 52
55
Una solución de 35 (740 mg, 1,37 mmol) y TFA (221 \muL, 2,86 mmol) en 1,2-dicloroetano (3,0 mL) se añadió en Ar a un tubo Young con Et_{3}SiH (1,8 mL, 11 mmol). El tubo Young se cerró y se calentó a 80ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se disolvió en cloroformo y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo 4:1) para dar 52 como un sólido amarillo (420 mg, 69%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,47 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,39 (m, 5H), 7,35 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,28 (s, 2H), 2,70 (s, 3H), 2,63 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 171,2, 160,9, 158,9, 155,8, 154,4, 144,7, 143,6, 138,9, 136,3, 135,1, 128,9, 128,9, 128,3, 118,3, 111,2, 108,9, 103,1, 71,2, 15,12, 14,3. Un carbono aromático se solapa.
MS (APCI) m/z: 446 (M+1)^{+}.
Rf: 0,037 (hexano:acetato de etilo, 2:1).
Ejemplo 37 Compuesto 53
56
Se trató una solución de 52 (1,9 g, 4,3 mmol) en cloroformo (50 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (2,4 g, 10,9 mmol, 77%) en cloroformo (20 mL). Después de la adición la mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC, se agitó durante 20 minutos y se extinguió con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3}. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El residuo se trató con p-metoxibencilamina (10 mL, 76,5 mmol) a 90ºC durante 24 horas. El exceso de p-metoxibencilamina se eliminó mediante destilación en un aparato Kugelrohr (140ºC, 0,5 mm de Hg) y el residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 1:1 a 0:100) para dar 53 como un sólido amarillo (1,5 g, 55%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 10,39 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,44-7,25 (m, 11H), 6,98 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,91-6,89 (m, 5H), 5,47 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,85 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 4,62 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,79 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 624 (M)^{+}.
Ejemplo 38 Variolina B 1
57
Una solución de 53 (204 mg, 0,33 mmol) en TfOH (0,5 mL) se agitó a 23ºC durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató gota a gota con MeOH (3 mL) y una solución de NH_{4}OH (4 mL, 32%). La mezcla de reacción se filtró y se lavó con H_{2}O, MeOH y éter dietílico. El sólido obtenido se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, de 95:5 a 85:15) para dar variolina B 1 como un sólido amarillo (701 mg, 72%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,12 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,03-6,99 (m, 2H), 6,76 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
Ejemplo 39 Compuesto 54
58
Se trató variolina B (19 mg, 0,065 mmol) con HCl anhidro en 1,4-dioxano (3,0 mL, 3,8 M) durante 5 horas a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó y se lavó con éter dietílico para dar 54 como un sólido naranja.
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,37 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 294 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 40 Compuesto 36
59
Una solución de bromuro de 3-metoxifenilmagnesio (3,2 mL, 3,2 mmol, 1 M en tetrahidrofurano) se añadió gota a gota a una solución de 31 (0,7 g, 2,65 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a 0ºC. La mezcla marrón se agitó a 0ºC durante 2 horas. Se añadió cloruro de acetilo (0,75 mL, 10,6 mmol) y la mezcla se agitó 2 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL) y la fase acuosa se extrajo con éter dietílico (3 x 40 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se evaporaron. El residuo naranja se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:1,5) para producir 36 (0,6 g, 59%) como un aceite incoloro.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,48 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,37 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 7,99 (dd, J = 7,8, 1,6 Hz, 1H), 7,28-7,20 (m, 3H), 6,95-6,91 (m, 2 H), 6,85-6,81 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,31 (s, 3H).
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Ejemplo 41 Compuesto 57
60
Se echó una mezcla de 36 (0,38 g, 0,91 mmol), ácido trifluoroacético (0,15 mL, 1,9 mmol) y trietilsilano (1,17 mL, 7,3 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (4 mL). El vaso de reacción sellado se calentó a 90ºC durante 22 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con cloroformo (50 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (60 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con cloroformo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:3) para dar 57 (20 mg, 54%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,59 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,48-7,41 (m, 2H), 7,33 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,24-7,16 (m, 2H), 6,94-6,90 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,74 (s, 3H).
^{13}C RMN (75 MHz, CDCl_{3}) \delta 160,4, 141,7, 136,8, 134,9, 132,8, 130,3, 127,0, 126,5, 121,6, 120,2, 114,9, 112,1, 107,2, 55,6, 14,8.
MS (ESI) m/z: 344 (M+23)^{+}, 322 (M+1)^{+}.
Ejemplo 42 Compuesto 62
61
Se añadió NH_{4}OH acuoso (15 mL, 32%) a una solución de 57 (150 mg, 0,46 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL). La mezcla amarilla se agitó durante 30 horas a 90ºC en un tubo sellado. La mezcla amarilla resultante se evaporó a presión reducida y el residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida usando CH_{2}Cl_{2}:MeOH (2%) a CH_{2}Cl_{2}:MeOH (3%) como eluyente para producir 62 (64 mg, 65% BRSM) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,38 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 8,27 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,47-7,38 (m, 3 H), 7,27-7,19 (m, 2 H), 7,00 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 8,3, 2,5 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H).
^{13}C RMN (75 MHz, CDCl_{3}) \delta 160,1, 149,3, 142,6, 139,7, 139,6, 135,1, 133,6, 130,0, 126,5, 122,3, 121,1, 119,7, 114,3, 111,5, 103,8, 100,8, 55,3.
MS (ESI) m/z: 291 (M+1)^{+}.
Ejemplo 43 Compuesto 67
62
Se trató el compuesto 62 (10 mg, 0,03 mmol) con una solución de HCl en 1,4-dioxano (3 ml, 3,5 M) y se agitó durante 2 horas a 23ºC. La solución incolora se evaporó, se lavó con éter dietílico y se filtró para producir 67 (11 mg) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 8,65 (dd, J = 4,9, 1,5 Hz, 1H), 8,41 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,24-7,18 (m, 3H), 7,09 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,3, 2,4 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H).
Ejemplo 44 Compuesto 37
63
Se añadió gota a gota una solución de PhLi (0,58 mL, 1,04 mmol, 1,8 M en ciclohexano:éter) a una solución de 31 (190 mg, 0,73 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) a -78ºC. La mezcla roja oscura se agitó a -78ºC durante 3 horas. Se añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (25 mL) y la fase acuosa se extrajo con éter dietílico (3 x 40 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se evaporaron. El residuo naranja se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano del 25% al 35%) para producir el alcohol (0,11 g, 44%) como un aceite amarillo pálido. Se añadió una solución del alcohol (94 mg, 0,27 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) a una suspensión de NaH al 60% (22 mg, 0,54 mmol) en tetrahidrofurano (1 mL). La mezcla roja oscura se agitó a 23ºC durante 10 minutos. Se añadió cloruro de acetilo (0,6 mL, 8,5 mmol) gota a gota y la suspensión amarilla resultante se agitó durante 5 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (20 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 25 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo marrón se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, del 25% al 35%) para producir 37 (52 mg, 50%, 22% para dos pasos) como un aceite incoloro.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,97 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,35-7,10 (m, 7H), 2.31 (br s, 6H).
MS (ESI) m/z: 408 (M+23)^{+}, 386 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 45 Compuesto 58
64
Se echo una mezcla de 37 (51 mg, 0,13 mmol), ácido trifluoroacético (22 \muL, 0,28 mmol) y trietilsilano (0,17 mL, 1,07 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (0,5 mL). El vaso de reacción sellado se calentó a 80ºC durante 22 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con cloroformo (25 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (30 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con cloroformo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:3) para dar 58 (0,19 g, 66%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,62 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,67-7,63 (m, 2H), 7,58 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,57-7,53 (m, 2H), 7,45 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,42-7,37 (m, 1H), 7,33 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H).
^{13}C RMN (75 MHz, CDCl_{3}) \delta 154,3, 141,8, 136,5, 133,3, 129,0, 128,9, 126,6, 121,4, 119,9, 106,9, 14,5.
MS (ESI) m/z: 292 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 46 Compuesto 63
65
Se añadió NH_{4}OH acuoso (5 mL, 32%) a una solución de 58 (19 mg, 0,065 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL). La mezcla amarilla se agitó durante 24 horas a 90ºC en un tubo sellado. La mezcla amarilla resultante se evaporó a presión reducida y el residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida usando CH_{2}Cl_{2}:MeOH (1%) a CH_{2}Cl_{2}:MeOH (2%) como eluyente para producir 63 (8 mg, 98% BRSM) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,35 (dd, J = 4,3, 1,4 Hz, 1H), 8,23 (dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 7,62-7,58 (m, 2H), 7,54-7,37 (m, 2H), 7,39 (dd, J = 8,1, 4,4 Hz, 1H), 7,38-7,31 (m, 2H), 6,92 (d, J = 6,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 261 (M+1)^{+}.
Ejemplo 47 Compuesto 38 
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66 
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió gota a gota una solución de nBuLi (0,83 mL, 2,075 mmol, 2,5 M en hexano) a una solución de 1-yodo-2-nitrobenceno (0,51 g, 2,0 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) a -78ºC. La mezcla negra se agitó a -78ºC durante 10 minutos y se añadió una solución de 31 (0,45 g, 1,7 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) a través de una cánula. La mezcla oscura se calentó lentamente hasta -40ºC durante 2 horas. Se añadió cloruro de acetilo (0,36 mL, 5,0 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) y la fase acuosa se extrajo con éter dietílico (2 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se evaporaron. El residuo marrón se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 4:1 a 1:1) para producir 38 (0,14 g, 19%) como un aceite marrón pálido.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,52 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,41 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz , 1H), 8,34 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 8,17-8,14 (m, 1H), 8,03 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,78-7,72 (m, 1H), 7,50 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz. 1H), 7,19 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,35 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 453 (M+23)^{+}, 431 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 48 Compuesto 59 
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67 
\vskip1.000000\baselineskip
Se echó una mezcla de 38 (140 mg, 0,32 mmol), ácido trifluoroacético (53 \muL, 0,68 mmol) y trietilsilano (0,42 mL, 2,6 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (2 mL). El vaso de reacción sellado se calentó a 90ºC durante 22 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con cloroformo (100 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con cloroformo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:3) para dar 59 (72 mg, 23%) como un sólido naranja.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,65 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 8,50 (br t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,27 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 8,21 (ddd, J = 8,3, 2,4, 1,0 Hz, 1H), 7,97 (dt, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,73-7,67 (m, 2H), 7,50 (dd, J = 8,3, 4,6 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 337 (M+1)^{+}.
Ejemplo 49 Compuesto 64
68
Se añadió NH_{4}OH acuoso (6 mL, 32%) a una solución de 59 (48 mg, 0,14 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL). La mezcla amarilla se calentó durante 48 horas a 105ºC en un tubo sellado. La mezcla marrón resultante se evaporó a presión reducida y el residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 64 (5 mg, 12%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,50 (br t, J = 1,8 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 8,22 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,19-8,12 (m, 1H), 7,92 (dt, J = 7,6, 1,5 Hz, 1H), 7,69-7,61 (m, 1H), 7,48-7,41 (m, 2H), 6,91 (d, J = 6,8 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 306 (M+1)^{+}.
Ejemplo 50 Compuesto 39
69
Se añadió gota a gota una solución de nBuLi (1,4 mL, 3,50 mmol, 2,5 M en hexano) a una solución de 2-yodotiofeno (0,37 mL, 3,40 mmol) en tetrahidrofurano (12 mL) a -78ºC. La mezcla roja marrón se agitó a -78ºC durante 15 minutos y se añadió una solución de 31 (0,75 g, 2,83 mmol) en tetrahidrofurano a través de una cánula. La mezcla marrón se agitó a -78ºC durante 2 horas. Se añadió cloruro de acetilo (0,6 mL, 17,0 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo marrón se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:2) para producir 39 (0,61 g) como un sólido marrón pálido. Se determinó que 39 era ligeramente inestable y se usó inmediatamente para el siguiente paso.
MS (ESI) m/z: 392 (M+1)^{+}.
Ejemplo 51 Compuesto 60
70
Se echó una mezcla de 39 (610 mg, 1,56 mmol), ácido trifluoroacético (0,25 mL, 3,27 mmol) y trietilsilano (2 mL, 12,4 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (2,5 mL). El vaso de reacción se selló y se calentó a 90ºC durante 16 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (250 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (200 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:2) para dar 60 (72 mg, 23%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,61 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 8,40 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,51-7,45 (m, 2H), 7,39 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,31-7,29 (m, 1H), 7,22 (dd, J = 5,1, 3,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 298 (M+1)^{+}.
Ejemplo 52 Compuesto 65
71
Se añadió NH_{4}OH acuoso (2,5 mL, 32%) a una solución de 60 (13,5 mg, 0,045 mmol) en 1,4-dioxano (1,5 mL). La mezcla amarilla se calentó durante 12 horas a 90ºC en un tubo sellado. La mezcla amarilla resultante se evaporó a presión reducida y el residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 2% al 3%) para producir 65 (8 mg, 67%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,39-8,32 (m, 2H), 7,42 (dd, J = 7,8, 4,8 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 7,19 (dd, J = 5,1, 3,7 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 6,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 267 (M+1)^{+}.
Ejemplo 53 Compuesto 40
72
Se añadió gota a gota una solución de nBuLi (0,94 mL, 2,36 mmol, 2,5 M en hexano) a una solución de 2-bromopiridina (0,21 mL, 2,27 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a -78ºC. La mezcla roja-marrón se agitó a -78ºC durante 15 minutos y se añadió una solución de 31 (0,5 g, 1,89 mmol) en tetrahidrofurano a través de una cánula. La mezcla marrón se agitó a -78ºC durante 1 hora. Se añadió cloruro de acetilo (0,4 mL, 5,67 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo naranja se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:1) para producir 40 (0,25 g, 35%) como un aceite incoloro.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,49 (dt, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 5,3, 1H), 8,35 (dd, J = 4,9, 2,0 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 8,1, 2,0 Hz, 1H), 7,71-7,61 (m, 2H), 7,30 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,26-7,15 (m, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 387(M+1)^{+}.
Ejemplo 54 Compuesto 55
73
Se echó una mezcla de 40 (250 mg, 0,65 mmol), ácido trifluoroacético (0,1 mL, 1,36 mmol) y trietilsilano (0,83 mL, 5,18 mmol) en un tubo Young que contenía 1,2-dicloroetano (2 mL). El vaso de reacción se selló y se calentó a 90ºC durante 24 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (150 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (100 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo rojo oscuro se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:1) para dar 55 (34 mg, 19%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,94 (dt, J = 7,1, 1,2 Hz, 1H), 8,64-8,58 (m, 2H), 8,48 (dd, J = 4,6, 1,4 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,3, 4,6 Hz, 1H), 7,40 (m, 2H), 6,85 (td, J = 7,1, 1,3 Hz, 1H), 2,70 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 293 (M+1)^{+}.
Ejemplo 55 Compuesto 56
74
Una solución de mCPBA (34 mg, 0,14 mmol, 70%) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL), previamente secada sobre sulfato de sodio, se añadió gota a gota a una solución de 55 (34 mg, 0,12 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL) a 0ºC. La solución amarilla se agitó durante 30 minutos a 0ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} (5 mL) y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mL). Las fases acuosas combinadas se extrajeron con CH_{2}Cl_{2} (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo amarillo se echó en un tubo sellado con 1,4-dioxano (4 mL) y se añadió una solución de NH_{4}OH (8 mL, 32%). La mezcla marrón se calentó durante 14 horas a 85ºC. La mezcla amarilla resultante se evaporó al vacío. El sólido amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 56 (6 mg, 20% para 2 pasos) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,94 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,64 (dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 8,54 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,46 (dd, J = 4,4, 1,5 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 8,3, 4,6 Hz, 1H), 7,36 (ddd, J = 9,3, 6,6, 1,3 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,85 (td, J = 6,8, 1,1 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 262 (M+1)^{+}.
Ejemplo 56 Compuesto 41
75
Se añadió gota a gota i-PrMgCl (0,75 mL, 1,5 mmol, 2,0 M en tetrahidrofurano) a una solución de 31 (0,40 g, 1,5 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) a 0ºC y la mezcla se agitó a 0ºC durante 3 horas. Se añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (25 mL) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33%) para dar 41 (0,28 mg, 61%) como un aceite transparente.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 0,84 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,53 (s, 3H), 3,01 (sept, J = 6,6 Hz, 1H), 5,17 (s, 1H), 7,18 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 7,8, 4,6 Hz, 1H), 8,24 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 8,30 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 5,5 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 258 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 57 Compuesto 61
76
Se transfirió una solución de 41 (0,28 g, 0,91 mmol) y ácido trifluoroacético (0,15 mL, 2,0 mmol) en 1,2-dicloroetano (3 mL) a un tubo Young equipado con un tapón de goma, que contenía trietilsilano (1,28 mL, 8 mmol). Con un flujo fuerte de argón, el tapón se cambió por una tapa a rosca de teflón, se selló y el vaso de reacción se calentó a 100ºC durante 48 horas. Después de enfriar, el vaso se abrió y el contenido se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (20 mL). La solución se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (20 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo repetidamente con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación del material crudo se logró mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 5%) para producir 61 como un aceite amarillo (176 mg, 75%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 1,47 (d, J = 7,1 Hz, 6H), 2,69 (s, 3H), 3,44 (sept, J = 7,1 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 8,16 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,52 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 258, (M+1)^{+}.
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Ejemplo 58 Compuesto 66
77
Se trató una solución de 61 (146 mg, 0,56 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) con NH_{4}OH acuoso (30 mL, 32%) en un tubo sellado a 90ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (acetato de etilo:hexano, 33%) para producir 66 (50 mg, 39%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 1,46 (d, J = 7,1 Hz, 6H), 3,41 (sept, J = 7,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 227, (M+1)^{+}.
Ejemplo 59 Compuesto 25 
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78 
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Se añadió una solución de NH_{4}OH (3 mL, 32%) a una solución de 9 (12 mg, 0,035 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL). La mezcla marrón se calentó durante 14 horas a 85ºC en un tubo sellado. La mezcla amarilla resultante se evaporó al vacío, se añadió CH_{2}Cl_{2} (5 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y el solvente se evaporó a presión reducida. El sólido amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 2% al 3%) para producir 25 (8 mg, 73%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,72 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 2,67 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 309 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 60 Compuesto 68 
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79 
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Se trató el compuesto 25 (0,6 g, 1,95 mmol) con una solución de HCl en 1,4-dioxano (45 mL, 5,0 N) y se agitó durante 20 horas a 23ºC. La suspensión marrón se evaporó, se lavó con éter dietílico (30 mL), dioxano (30 mL) y se filtró para producir 68 (0,65 g) como un sólido naranja.
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 8,89 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 8,69 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,68 (m, 1H), 7,89 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,78 (dd, J = 7,8, 4,9 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 2,81 (s, 3H).
Ejemplo 61 Compuestos 69 y 26
80
Se añadió cloruro de acetilo (1,5 mL, 0,019 mmol) a una solución de 25 (6 mg, 0,019 mmol) y Et_{3}N (3 mL, 0,029 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL). La solución amarilla se agitó durante la noche a 23ºC y se evaporó a presión reducida. El residuo amarillo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (4 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 0,5% al 1%) para producir 69 (2 mg, 39% BRMS) y 26 (2,5 mg, 47% BRMS) como aceites amarillos.
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69
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,77 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 8,54 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,52 (dd, J = 4,9, 1,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,2, 4,6 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,67 (s, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
26
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,65 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 8,58 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,54 (dd, J = 6,1, 1,7 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 8,2, 4,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,42 (s, 6H).
MS (ESI) m/z: 415 (M+23)^{+}.
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Ejemplo 62 Compuesto 28
81
Se sometió a reflujo una mezcla de bencilamina (0,5 mL, 4,5 mmol) y 27 (160 mg, 0,45 mmol) en tetrahidrofurano (2,5 mL) durante 14 horas. Se evaporó el solvente y el residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, de 99:1 a 97:3) para producir 28 (90 mg, 44%) como un aceite amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 10,44 (br s, 1H), 8,51 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,48-7,28 (m, 12H), 6,99 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,81 (br s, 1H), 4,97 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,76 (d, J = 5,8 Hz, 2H).
Ejemplo 63 Compuestos 72 y 73
82
Una solución de mCPBA (70 mg, 0,30 mmol, 70%) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL), previamente secada sobre sulfato de sodio, se añadió gota a gota a una solución de 25 (39 mg, 0,13 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (7 mL). La solución amarilla se agitó durante 2 horas a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} (5 mL) y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 mL). Las fases acuosas combinadas se extrajeron con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 2% al 5%) para producir 72 (15 mg, 35%) como un aceite amarillo y 73 (25 mg, 58%) como un sólido amarillo.
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72
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,86 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,43 (dd, J = 4,6, 1,3 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,54 (dd, J = 8,0, 4,6 Hz, 1H), 3,02 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 325 (M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
73
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,80 (dd, J = 8,1, 1,4 Hz, 1H), 8,71 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,41 (dd, J = 4,8, 1,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,2, 4,8 Hz, 1H), 3,40 (s, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 64 Compuesto 70
83
Se trató una suspensión de 25 (29 mg, 0,09 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,5 mL) con Pd/C (3 mg, 10%), TFA (14 \muL, 0,18 mmol) y Et_{3}SiH (110 \muL, 0,7 mmol) en un tubo sellado a 100ºC durante 72 horas. La mezcla de reacción se disolvió con CH_{2}Cl_{2}:MeOH (20:1) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, de 50:1 a 95:5) para recuperar 25 (6,5 mg) y dar 70 como un sólido amarillo (7,5 mg, 39% BRSM).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 9,02 (s, 1H), 8,60 (dd, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 4,9, 1,5 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,49-7,43 (m, 2H), 7,38 (dd, J = 8,3, 4,9 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 263 (M+1)^{+}.
Ejemplo 65 Compuesto 71 
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84 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató el compuesto 70 (6,5 mg, 0,025 mmol) con HCl en 1,4-dioxano (1,0 mL, 3,8 M) durante 15 minutos. La mezcla de reacción se evaporó y se lavó con éter dietílico, se disolvió en MeOH y se evaporó para dar 71 como un sólido naranja (7,0 mg, 94%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 9,35 (s, 1H), 8,97 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,88 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,68 (dd, J = 4,9, 1,5 Hz, 1H), 8,27 (dd, J = 6,3, 1,2 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,78 (dd, J = 8,3, 5,1 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,3 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 263 (M)^{+}.
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Ejemplo 66 Compuesto 74 
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85 
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Se añadió gota a gota malonato de dimetilo (0,013 mL, 0,11 mmol) a una suspensión de NaH (4,4 mg, 0,1 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (2,5 mL) a 23ºC. Después de 10 minutos, se añadió 73 (4 mg, 0,011 mmol) de una vez y la suspensión amarilla se agitó a 23ºC durante la noche. La reacción se siguió mediante TLC y sólo se observó el material de partida. La mezcla se sometió a reflujo durante 3 horas, se enfrió y se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 10 mL) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 74 (1,5 mg, 36%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,72 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 8,69 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 8,2, 4,7 Hz, 1H), 4,23 (s, 1H), 3,85 (s, 6H).
MS (ESI) m/z: 415 (M+23)^{+}, 393 (M+1)^{+}.
Ejemplo 67 Compuesto 75 
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86 
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Se añadió gota a gota una solución de bromuro de metilmagnesio (0,037 mL, 3 M en tetrahidrofurano) a una solución de 73 (25 mg, 0,073 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) a 0ºC. La mezcla marrón se agitó a 0ºC durante 2 horas y 1 hora a 23ºC. Se añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (25 mL) y la fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo naranja se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 75 (14 mg, 69%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,75 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,1, 5,0 Hz, 1H), (d, J = 5,6 Hz, 1H), 2,81 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 277 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 68 Compuesto 76 
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87 
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Se añadió una solución de 72 (5,8 mg, 0,017 mmol) en MeOH (2 mL) a una solución de de NaMeO en MeOH (2 mL) a 0ºC. La solución amarilla se agitó a 23ºC durante 4 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron a presión reducida. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 76 (2,6 mg, 53%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,78 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,51 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,41 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 293 (M+1)^{+}.
Ejemplo 69 Compuesto 81
88
Se resuspendió el compuesto 76 (30 mg) en una solución 5,3 N de HCl en 1,4-dioxano (7 mL). La mezcla marrón pálida se agitó a 23ºC durante 2 horas y se evaporó al vacío. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (5 mL), se agitó durante 1 minuto y se evaporó de nuevo. Se añadió 1,4-dioxano (5 mL) y el sólido marrón pálido se filtró y se lavó con más 1,4-dioxano (3 mL) para producir 81 (3 mg).
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 8,92 (dd, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 8,78-8,70 (m, 2H), 8,01 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,38 (s, 3H).
Ejemplo 70 Compuesto 77
89
Se añadió una solución de 72 (150 mg, 0,46 mmol) en EtOH (2 mL) a una solución de de EtONa en EtOH (3 mL), recién preparada mediante adición de un exceso de Na en EtOH, a 0ºC. La solución amarilla se agitó a 23ºC durante 5 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con cloroformo (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron a presión reducida. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 1% al 3%) para producir 77 (96 mg, 68%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,74 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 8,2, 4,7 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,55 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 1,52 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
MS (ESI) m/z: 329 (M+23)^{+}, 307 (M+1)^{+}.
Ejemplo 71 Compuesto 82
90
Se trató el compuesto 77 (35 mg, 0,11 mmol) con una solución de HCl en 1,4-dioxano (4 mL, 5,3 M) y se agitó durante 3 horas a 23ºC. La suspensión se evaporó, se lavó con éter dietílico y se filtró para producir 82 (32 mg) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 8,91 (dd, J = 8,2, 1,2 Hz, 1H), 8,77-8,63 (m, 2H), 7,98 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 7,9, 4,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,69 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 1,54 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
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Ejemplo 72 Compuesto 78
91
Se añadió PhOH (116 mg, 1,2 mmol) a una suspensión de NaH (50 mg, 1,2 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (3 mL) a 0ºC. Se añadió una suspensión de 72 (50 mg, 0,15 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) a 0ºC y la solución amarilla se agitó a 23ºC durante 24 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de NaCl (50 mL) y se extrajo con cloroformo (3 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron a presión reducida. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, del 0,5% al 1,5%) para producir 78 (20 mg, 53% BRSM) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,54 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1H), 8,32 (dd, J = 4,6, 1,2 Hz, 1H), 7,54-7,46 (m, 3H), 7,39 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,40-7,30 (m, 3H), 7,29-7,25 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 355 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 73 Compuesto 79
92
Se añadió alcohol p-metoxibencílico (0,085 mL, 0,67 mmol) a una suspensión de NaH (27 mg, 0,67 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (1 mL) a 0ºC. Se añadió una suspensión de 72 (23 mg, 0,06 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) a 0ºC y la solución amarilla se agitó a 23ºC durante 5 horas, se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 mL) y se extrajo con cloroformo (3 x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron a presión reducida. El residuo amarillo se purificó mediante cromatografía rápida usando CH_{2}Cl_{2}:MeOH (2%) como eluyente. El residuo sólido se lavó con éter dietílico para producir 79 (12 mg, 46%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,72 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 8,56 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,39 (dd, J = 4,4, 1,6 Hz, 1H), 7,61-7,45 (m, 5H), 7,32 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 5,42 (br s, 2H), 3,82 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 399 (M+1)^{+}.
Ejemplo 74 Compuesto 80 
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93 
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Se disolvió el compuesto 79 (10 mg, 0,025 mmol) en ácido tríflico puro (0,5 mL) y se agitó a 23ºC durante 3 horas. La botella se enfrió a 0ºC y se añadió MeOH (1 mL) gota a gota. La adición de NH_{4}OH acuoso (1 mL, 32%) produjo un precipitado amarillo brillante que se filtró y lavó con éter para producir 80 (6 mg, 78%).
^{1}H RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 8,85 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz), 8,45 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz), 7,85 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,1, 4,6 Hz), 6,88 (d, J = 6,8 Hz, 1H).
^{13}C RMN (75 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 156,3, 153,1, 149,8, 145,7, 145,1, 143,1, 140,3, 140,1, 129,1, 121,6, 121,0, 101,3, 101,2, 99,0.
MS (ESI) m/z: 279 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 75 Compuesto 84 
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94 
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Se agitó una solución de 52 (250 mg, 0,56 mmol) en POCl_{3} (2 mL) a 100ºC en un tubo sellado durante 48 horas. La mezcla de reacción se echó en hielo y se trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio hasta pH 7 y se extrajo con cloroformo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (hexano:acetato de etilo, 4:1) para dar 84 como un sólido amarillo (154 mg, 74%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,55 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,64 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,2, 160,1, 156,2, 155,0, 141,5, 139,7, 137,7, 135,1, 122,1, 119,0, 107,4, 102,8, 15,2, 14,4. Dos señales cuaternarias se solapan.
MS (ESI) m/z: 374 (M+1)^{+}.
Ejemplo 76 Compuesto 85 
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95 
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Se agitó una solución de 84 (20 mg, 0,053 mmol) en p-metoxibencilamina (0,2 mL) a 100ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 85 como un sólido amarillo (29 mg, 97%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 11,02 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 9,28 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,42 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,91-6,85 (m, 4H), 6,35 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 4,52 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 2,50 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 564 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 77 Compuesto 86 
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96 
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Se trató una solución de 85 (40 mg, 0,071 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (20 mg, 0,09 mmol, 1,25 equivalentes, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (1 mL), se calentó a 0ºC durante 30 minutos y se extinguió con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3}. La mezcla de reacción se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (x4). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 100:3) para dar 86 como un sólido amarillo (26 mg, 63%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 11,26 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 10,18 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 8,58 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,02 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,35 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 4,70-4,63 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 2,90 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 602 (M+23)^{+}, 580 (M+1)^{+}.
Ejemplo 78 Compuesto 89 
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97 
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Se trató una solución de 84 (14 mg, 0,037 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (3 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (18 mg, 0,08 mmol, 2,2 equivalentes, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL). La solución amarilla se calentó a 0ºC durante 30 minutos y se trató con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (3x). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar el bis-sulfóxido crudo que se trató con 4-metoxibencilamina (0,1 mL, 0,76 mmol) a 100ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 98:2) para dar 89 como un aceite amarillo (11 mg, 46%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 10,99 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 9,38 (br s, 1H), 8,22 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,97-6,80 (m, 8H), 6,44 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 4,35 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 4,29 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,70 (s, 3H). Una señal NH no se observó.
MS (ESI) m/z: 653 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 79 Compuesto 90 
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98 
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Se trató el compuesto 89 (10 mg, 0,015 mmol) con ácido tríflico (0,2 mL) a 23ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (1 mL, 32%). La mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en MeOH:H_{2}O 1:4 y se aplicó a una columna de sílice de fase reversa precondicionada con MeOH:H_{2}O 1:1. La columna se lavó con MeOH:H_{2}O 1:4 para eliminar las sales y se eluyó 90 con MeOH:H_{2}O 4:1 (1,5 mg, 34%).
El compuesto 90 es insoluble en MeOH y se formó su sal trifluoroacética para la determinación por RMN.
^{1}H RMN (CD_{3}OD más una gota de TFA, 300 MHz) \delta 8,28 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,39-7,29 (m, 3H), 6,80 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 293 (M+1)^{+}.
Ejemplo 80 Compuesto 91
99
Se trató el compuesto 90 (19 mg, 0,065 mmol) con HCl anhídrido en 1,4-dioxano (3 mL, 3,8 M) a 23ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evaporó y se lavó con éter etílico para dar 91 como un sólido naranja (20 mg).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,31 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,41-7,32 (m, 3H), 6,82 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 293 (M)^{+}.
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Ejemplo 81 Compuesto 92
100
Se agitó una solución de 85 (29 mg, 0,051 mmol) en ácido tríflico (0,2 mL) a 23ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (32%) (1 mL) se filtró, y se lavó con H_{2}O, MeOH y éter dietílico para dar 92 como un sólido amarillo (10 mg, 61%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,63 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,18-7,17 (m, 2H), 6,72 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 2,63 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 324 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 82 Compuesto 93 
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101
Se trató el compuesto 92 con HCl anhídrido en 1,4-dioxano (1 mL, 3,8 M) durante 15 minutos a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó y se lavó con éter dietílico para dar 93 como un sólido naranja (10 mg).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,66 (d, J = 5,1 H, 1H), 8,09 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,21 (s, 2H), 6,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 324 (M)^{+}.
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Ejemplo 83 Compuesto 87
102
Se trató una solución de 86 con una solución de MeONa en MeOH, preparada a partir de Na (30 mg, 1,3 mmol) en MeOH (4 mL) a 23ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en CH_{2}Cl_{2} y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 100:3) para dar 87 como un sólido amarillo (24 mg, 97%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 11,06 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 9,44 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,40 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 4,47 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,80 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 548 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 84 Compuesto 88
103
Se trató el compuesto 87 (23 mg, 0,04 mmol) con TfOH (0,02 mL) a 23ºC durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (2 mL, 32%). El sólido amarillo formado se filtró a través de un filtro de teflón y se lavó con H_{2}O (5 mL), EtOH (5 mL) y éter dietílico (5 mL) para dar 88 (15 mg) como un sólido naranja. Este compuesto es insoluble en cloroformo y se caracterizó como su sal trifluoroacética.
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1 más 2 gotas de TFA deuterado, 300 MHz) \delta 8,56 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 308 (M+1)^{+}.
Ejemplo 85 Compuesto 94
104
Se trató una solución de 52 (100 mg, 0,22 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) con NH_{4}OH acuoso al 32% (20 mL) en un tubo sellado a 90ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 97:3) para dar 94 como un sólido amarillo (83 mg, 89%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,22 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,38-7,26 (m, 6H), 6,94 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 2,56 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 415 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 86 Compuesto 95
105
Se trató el compuesto 94 (62 mg, 0,15 mmol) con TfOH (0,3 mL) a 23ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se trató con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (2 mL, 32%), se filtró y se lavó con H_{2}O (5 mL), MeOH (5 mL) y éter dietílico (4 mL). El sólido obtenido se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 95 como un sólido amarillo (45 mg, 92%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 8,38 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 2,58 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 325 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 87 Compuesto 97
106
Se trató el compuesto 95 (45 mg, 0,14 mmol) con una solución de HCl en 1,4-dioxano (3 mL, 3,8 M) durante 15 minutos a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó y se lavó con éter dietílico (2x) para dar 97 como un sólido amarillo (36 mg, 71%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,71 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 2,72 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 325 (M)^{+}.
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Ejemplo 88 Compuesto 98 
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107 
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Se trató una mezcla de 94 (65 mg, 0,157 mmol), Pd/C (6 mg, 10%) y TFA (28 \muL, 0,36 mmol) en un tubo Young en Ar con Et_{3}SiH (220 \muL, 1,4 mmol) a 100ºC durante 72 horas. La mezcla de reacción se trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 98:2) para dar 98 como un sólido amarillo pálido (13 mg, 23%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 9,14 (s, 1H), 8,27 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,67-7,63 (m, 2H), 7,54 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,38 (s, 5H), 6,97 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,28 (s, 2H).
MS (ESI) m/z: 369 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 89 Compuesto 100 
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108 
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Se trató el compuesto 98 (11 mg, 0,030 mmol) con TfOH (0,3 mL) a 23ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató con MeOH (2 mL) y NH_{4}OH acuoso al 32% (2 mL). Se formó un sólido naranja, se recogió por filtración, se lavó con H_{2}O, EtOH y éter dietílico, y se trató con TFA para dar 100 (9,0 mg, 76%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 9,30 (s, 1H), 8,88 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 279 (M)^{+}.
Ejemplo 90 Compuesto 101
109
Se trató el compuesto 100 (35 mg, 0,13 mmol) con HCl en 1,4-dioxano (4 mL, 3,8 M) a 0ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en MeOH y se evaporó para dar 101 como un sólido amarillo (36 mg, 88%).
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 9,35 (s, 1H), 8,92 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 8,38 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 279 (M)^{+}.
Ejemplo 91 Compuesto 99
110
Se trató una solución de 94 (83 mg, 0,20 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) a 0ºC con una solución de mCPBA (112 mg, 0,5 mmol, 2,5 equivalentes, 77%) y se calentó a 23ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (3x). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 99 como un sólido amarillo (25 mg, 28%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,21 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,31 (s, 5H), 6,98 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 3,24 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 447 (M+1)^{+}.
Ejemplo 92 Compuesto 102
111
Se trató una suspensión de 99 (10 mg, 0,022 mmol) a 0ºC con una solución de MeONa en MeOH, previamente preparada con Na (15 mg, 0,66 mmol) en 1 mL de MeOH. La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 5 horas. Después se repartió entre CH_{2}Cl_{2} y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar 102 como un sólido amarillo (5,6 mg, 64%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,26 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,42-7,34 (m, 6 H), 6,97 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,06 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 399 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 93 Compuesto 103
112
Se trató una suspensión de 99 (10 mg, 0,022 mmol) a 0ºC con una solución de EtONa en EtOH, previamente preparada con Na (15 mg, 0,66 mmol) en EtOH (1 mL), durante 6 horas. La mezcla de reacción se repartió entre cloroformo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 103 como un sólido amarillo (8 mg, 88%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,19 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,27-7,24 (m, 6H), 6,92 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,36 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,35 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
MS (ESI) m/z: 413 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 94 Compuesto 104
113
Se trató una suspensión de NaH (18 mg, 0,44 mmol, 60%) en tetrahidrofurano (2 mL) con alcohol bencílico (45 \muL, 0,44 mmol). Se añadió una solución de 99 (10 mg, 0,022 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 mL) gota a gota y se agitó a 23ºC durante 6 horas. La mezcla de reacción se repartió entre cloroformo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (de CH_{2}Cl_{2} a CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 104 como un sólido amarillo (9,0 mg, 86%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,18 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36-7,19 (m, 12H), 6,92 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,40 (s, 2H), 5,20 (s, 2H).
MS (ESI) m/z: 475 (M+1)^{+}.
Ejemplo 95 Compuesto 105
114
Se agitó una solución de 102 (4,0 mg, 0,01 mmol) en ácido tríflico (0,2 mL) a 23ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se trató gota a gota con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (32%) (1 mL). La mezcla de reacción se filtró, se lavó con H_{2}O, MeOH y éter dietílico y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 105 como un sólido amarillo (1,8 mg, 58%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 95:5, 300 MHz) \delta 8,26 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 309 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 96 Compuesto 106
115
Se agitó una solución de 104 (7 mg, 0,017 mmol) en ácido tríflico (0,2 mL) a 23ºC durante 1,5 horas. La mezcla de reacción se trató a 0ºC con MeOH (1 mL) y NH_{4}OH acuoso (32%) (1 mL), se filtró, y se lavó con H_{2}O, EtOH y éter dietílico para dar 106 como un sólido naranja (6,6 mg, 95%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD:CF_{3}CO_{2}D 95:5, 300 MHz) \delta 8,35 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 295 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 97 Compuesto 96
116
Se trató una solución de 52 (24 mg, 0,05 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (30 mg, 0,14 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2}. La mezcla de reacción se calentó a 0ºC y se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se lavó con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El crudo se disolvió en 1,4-dioxano (6 mL), se trató con NH_{4}OH acuoso (32%) (10 mL) en un tubo sellado y se agitó a 100ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, de 98:2 a 95:5) para dar 96 como un sólido amarillo (6 mg, 29%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 8,18 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,30-7,25 (m, 7H), 6,90 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 5,19 (s, 2H).
MS (APCI) m/z: 384 (M+1)^{+}.
Rf: 0.64 (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 6:1).
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Ejemplo 98 Compuesto 107
117
Se agitó una solución de 84 (50 mg, 0,135 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano:H_{2}O (50:50, 8 mL) en un tubo sellado a 100ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 98:2) para dar 107 como un sólido amarillo (40 mg, 86%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,54 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 172,0, 160,3, 156,1, 149,5, 144,0, 143,1, 139,9, 139,0, 135,0, 122,0, 119,9, 118,6, 101,4, 101,1, 14,3.
MS (ESI) m/z: 343 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 99 Compuesto 108
118
Se trató el compuesto 107 (25 mg, 0,073 mmol) con HCl anhídrido (0,5 mL, 3,8 N en 1,4-dioxano) durante 10 minutos a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en MeOH y se evaporó para dar 108 como un sólido amarillo (28 mg, 100%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,75 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,59 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 2,71 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 343 (M)^{+}.
Ejemplo 100 Compuesto 109
119
Se trató el compuesto 107 (10 mg, 0,029 mmol) con MeONa en MeOH, recién preparada a partir de Na (30 mg, 1,3 mmol) y MeOH (4 mL), a 80ºC durante 22 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se repartió entre CH_{2}Cl_{2} y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 109 (15 mg, 53%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,45 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,7 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,4 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H), 4,04 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 323 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 101 Compuestos 110 y 111
120
Se trató una solución de 107 (50 mg, 0,146 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (82 mg, 77%, 0,37 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (1 mL). La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas, se trató con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y se repartió entre una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 110 (23 mg, 44%) y 111 (29 mg, 53%) como sólidos amarillos.
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110
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,84 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 381 (M+23)^{+}, 359 (M+1)^{+}.
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111
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,84 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,43 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 397 (M+23)^{+}, 375 (M+1)^{+}.
Ejemplo 102 Compuesto 112 
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121 
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Se trató el compuesto 111 (29 mg, 0,077 mmol) con MeONa metanólico en MeOH, recién preparado a partir de Na (30 mg, 1,3 mmol) y MeOH (4 mL), durante 6 horas a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó y se repartió entre CH_{2}Cl_{2} y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 112 (17 mg, 68%) como un sólido amarillo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,54 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 327 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 103 Compuesto 113 
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122 
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Se trató una solución de 84 (50 mg, 0,14 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) a -30ºC con una solución de mCPBA (76 mg, 0,34 mmol, 77%) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 0ºC y se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se trató con una solución acuosa saturada de Na_{2}S_{2}O_{3} y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El crudo de la reacción se disolvió en 1,4-dioxano (4 mL) y se trató con NH_{4}OH acuoso (32%) (4 mL). La mezcla de reacción se echó en un tubo sellado y se agitó a 85ºC durante 16 horas. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 113 como un sólido amarillo (17 mg, 40%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 8,17 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,367,34 (m, 2H), 6,98 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 5,1 Hz, 1H).
^{13}C RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 75 MHz) \delta 162,5, 161,6, 156,9, 149,6, 143,9, 141,8, 140,1, 138,1, 135,0, 121,9, 119,8, 114,0, 101,7, 100,7. MS (ESI) m/z: 312 (M+1)^{+}.
Ejemplo 104 Compuesto 83
123
Se trató el compuesto 113 (12 mg, 0,038 mmol) con HCl anhídrido en 1,4-dioxano (0,5 mL, 3,8 N) durante 10 minutos a 23ºC. La mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en MeOH (1 mL) y se evaporó para dar 83 como un sólido amarillo (13,9 mg, 95%).
^{1}H RMN (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 8,61 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,55 (s, 2H), 7,36 (d, J = 6,6 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 312 (M)^{+}.
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Ejemplo 105 Compuesto 115
124
Se calentó una mezcla de 113 (5,0 mg, 0,016 mmol), 18-corona-6 (10 mg, 0,038 mmol) y KF anhidro (60 mg, 1,2 mmol) en DMSO (0,5 mL) en un tubo sellado durante 16 horas a 140ºC. La mezcla de reacción se evaporó y se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 115 como un sólido amarillo (3,5 mg, 74%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 8,26 (dd, J = 7,1, 5,4 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 11,0, 5,4 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 5,4, 3,2 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z: 296 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 106 Compuesto 114
125
Se trató el compuesto 113 (10 mg, 0,032 mmol) a 90ºC durante 40 horas con una solución de MeONa en MeOH:
tetrahidrofurano 2:1 (6 mL), preparado mediante adición de Na (30 mg, 1,3 mmol) a MeOH. La mezcla de reacción se evaporó y se disolvió en CH_{2}Cl_{2} y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió (CH_{2}Cl_{2}:MeOH, 95:5) para dar 114 como un sólido amarillo (4,0 mg, 41%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}:CD_{3}OD 9:1, 300 MHz) \delta 8,21 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,32 (s, 2H), 6,96 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,95 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 308 (M+1)^{+}.
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Ejemplo 107 Compuesto 116
126
Se trató el compuesto 114 (1-7 mg, 0,006 mmol) a 23ºC con HCl en 1,4-dioxano (0,5 mL, 5 N) durante 20 minutos. La mezcla de reacción se evaporó, se resuspendió en éter dietílico y se evaporó para dar 116 como un sólido amarillo (1,2 mg, 57%).
^{1}H RMN (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 8,57 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,94-7,90 (m, 2H), 7,68 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,16 (s, 3H).
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Bioensayos para cribado antitumoral
La finalidad de estos ensayos es interrumpir el crecimiento de un cultivo de células tumorales "in vitro" por medio de una continua exhibición de las células a la muestra que se va a ensayar.
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Líneas celulares
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1º.- Inhibición del crecimiento celular contando células
Esta forma de ensayo utiliza multiplacas de 24 pocillos de 16 mm de diámetro (Bergeron, 1984; Schroeder, 1981). Las líneas celulares tumorales empleadas son: P-388 (ATCC CCL 46), cultivo en suspensión de una neoplasia linfoide de un ratón DBA/2; A-549 (ATCC CCL 185), cultivo en monocapa de un carcinoma de pulmón humano; HT-29 (ATCC HTB-38), cultivo en monocapa de un carcinoma de colon humano; MEL-28 (ATCC, HTB-72), cultivo en monocapa de un melanoma humano y DU-145 (ATCC HTB-81), cultivo en monocapa de un carcinoma de próstata humano.
Las células se mantuvieron, en fase logarítmica de crecimiento en medio mínimo esencial de Eagle (EMEM), con sales de equilibrio de Earle, con aminoácidos no esenciales, con L-glutamina 2,0 mM, sin bicarbonato de sodio (EMEM/neaa), suplementado con suero fetal de ternera al 10% (SFT), bicarbonato de sodio 10^{-2} M y penicilina G 0,1 U/l + sulfato de estreptomicina 0,1 g/l. Para los experimentos, las células se recogieron de cultivos subconfluentes usando tripsina y se resuspendieron en medio fresco antes de sembrar.
Las células P-388 se sembraron en pocillos de 16 mm de diámetro a 1 x 10^{4} células por pocillo en alícuotas de 1 ml de EMEM con SFT al 5% que contenía diferentes concentraciones de la muestra a ensayar. Se sembraron una serie separada de cultivos sin drogas como control de crecimiento, para asegurar que las células se mantenían en la fase exponencial de crecimiento. Todas las determinaciones se llevan a cabo por duplicado. Después de tres días de incubación a 37ºC, CO_{2} al 5% en una atmósfera con humedad al 98%, se determinó un IC50 aproximadamente comparando el crecimiento en los pocillos sin droga respecto al crecimiento en los pocillos control.
Las células A-549, HT-29, MEL-28 y DU-145 se sembraron en pocillos de 16 mm de diámetro a 1 x 10^{4} células por pocillo en alícuotas de 1 ml de EMEM con SFT al 5% que contenía diferentes concentraciones de la muestra a ensayar. Se sembraron una serie separada de cultivos sin drogas como control de crecimiento, para asegurar que las células se mantenían en la fase exponencial del crecimiento. Todas las determinaciones se llevan a cabo por duplicado. Después de tres días de incubación a 37ºC, CO_{2} al 5% en una atmósfera con humedad al 98% las células se tiñeron con violeta cristal al 0,1%. Se determinó un IC50 aproximadamente comparando el crecimiento en los pocillos sin droga respecto al crecimiento en los pocillos control.
Para la cuantificación de la actividad, después del tiempo de incubación, las células se tripsinizan y se cuentan en un contador Coulter ZM. Todas las cuentas (células netas por pocillo), representan la media de pocillos por duplicado. % de G, tanto por ciento de crecimiento relativo a los cultivos sin droga. Los resultados de estos ensayos se usan para generar curvas de respuesta a dosis a partir de las cuales se determinan valores más precisos de IC50 (concentración de muestra que produce un 50% de inhibición del crecimiento celular).
Los resultados obtenidos pueden predecir la utilidad de una cierta droga como un tratamiento potencial contra el cáncer. Para esta técnica, se seleccionan compuestos que muestran valores de IC50 menores de 1 \mug/ml para continuar con estudios adicionales. Los datos de IC50 permiten predecir que una droga no sólo podría ser citostática, sino que también podría tener un potencial en términos de reducción del tumor.
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2º.- Inhibición del crecimiento celular mediante ensayo colorimétrico
Se ha adaptado un ensayo de tipo colorimétrico, usando sulforodamina B (SRB) para una medida cuantitativa del crecimiento celular y viabilidad [siguiendo la técnica descrita por Philip Skehan, et al. (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Natl. Cancer Inst., 82: 1107-1112].
Esta forma de ensayo utiliza microplacas de cultivo celular de 96 pocillos de 9 mm de diámetro (Faircloth, 1988; Mosmann, 1983). La mayoría de las líneas celulares se obtienen de la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC) derivadas de diferentes tipos de cánceres humanos.
Las células se mantienen en RPMI 1640 con SBF al 10%, suplementado con penicilina 0,1 g/l y sulfato de estreptomicina 0,1 g/l y después se incuban a 37ºC, CO_{2} al 5% y humedad del 98%. Para los experimentos, las células se recogieron de cultivos subconfluentes usando tripsina y se resuspendieron en medio fresco antes de sembrar.
Las células se siembran en placas de microtitulación de 96 pocillos, a 5 x 10^{3} células por pocillo en alícuotas de 195 \mul de medio, y se deja que se adhieran a la superficie de la placa haciéndolas crecer en medio sin drogas durante 18 horas. Después, se añaden muestras en alícuotas de 5 \mul que varían de 10 a 10^{-8} \mug/ml, disueltas en DMSO/EtOH/PBS (0,5:0,5:99). Tras 48 horas de exposición, se mide el efecto antitumoral mediante la metodología SRB: las células se fijan añadiendo 50 \mul de ácido tricloroacético (TCA) frío al 50% (peso/volumen) e incubando durante 60 minutos a 4ºC. Las placas se lavan con agua desionizada y se secan. Se añaden cien \mul de solución SRB (al 0,4% peso/volumen en ácido acético al 1%) a cada pocillo de microtitulación y se incuba durante 10 minutos a temperatura ambiente. Se elimina la SRB no unida lavando con ácido acético al 1%. Las placas se secan al aire y el colorante unido se solubiliza con tampón Tris. Se leen las densidades ópticas en un lector de placas espectrofotométrico automatizado a una única longitud de onda de 490 nm.
Se calculan los valores para la media +/- DE de datos a partir de pocillos por triplicado. Se pueden calcular algunos parámetros para respuesta celular: GI = inhibición de crecimiento, TGI = inhibición total de crecimiento (efecto citostático) y LC = muerte celular (efecto citotóxico).
Los resultados obtenidos pueden predecir la utilidad de una cierta droga como un potencial tratamiento contra el cáncer. Para esta técnica, se seleccionan los compuestos que muestran valores de GI50 menores de 10 \mug/ml para continuar con estudios adicionales. Los datos de GI50 permiten predecir que una droga no sólo podría ser citostática, sino que también tendría potencial en términos de reducción del tumor.
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Referencias
Bergeron, R.J.; Cavanaugh, P.F. Jr.; Kline, S.J.; Hughes, R.G. Jr.; Elliott, G.T. y Porter C.W. (1984). Antineoplastic and antiherpetic activity of spermidine catecholamide irons chelators. Biochemical and Biophisical Research Communications, 121(3): 848-854.
Faircloth, G.T.; Stewart, D. y Clement, J.J. (1988). A simple screening procedure for the quantitative measurement of cytotoxicity assay. Journal of Tissue and Culture Methods, 11(4): 201-205.
Monks, A.; Scudiero, D.; Skehan, Ph.; Shoemaker, R.; Paull, K.; Vistica, D., Hose, C.; Langley, J.; Cronise, P.; Vaigro-Wolf, A.; Gray-Goodrich, M.; Campbell, H.; Mayo, J.; Boyd, M. (1991). Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines. Articles, 83 (11): 757-766.
Mosmann, T. (1983). Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods, 65: 55-63.
Skehan, P.A. et al. (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Natl. Cancer Inst., 82: 1107-1112.
Schroeder, A.C.; Hughes R.C. Jr y Bloch, A. (1981). Synthesis and Biological Effects of Acyclic Pyrimidine Nucleoside Analoges. J. Med. Chem., 24: 1078-1083.

Claims (34)

1. Un compuesto de formula general (5a):
168
en donde el grupo sustituyente definido por R_{1} se selecciona del grupo que consiste en OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde el sustituyente de los grupos definidos por X_{1}, X_{2}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, y R_{7} se selecciona cada uno de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde cada uno de los grupos R' se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, SH, NO_{2}, NH_{2}, CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)CH_{3}, CO_{2}H, CO_{2}CH_{3}, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático;
en donde los pares de grupos R_{1} y R_{2} pueden estar unidos en un sistema fusionado de anillos de benceno;
en donde el grupo arilo contiene de 6 hasta alrededor de 18 de átomos de carbono en el anillo; y
el grupo heteroaromático contiene uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S.
2. Un compuesto según la reivindicación 1, en donde R_{1} es alquilo de C_{1}-C_{6} o halógeno.
3. Un compuesto según la reivindicación 2, en donde R_{1} es metil o cloro.
4. Un compuesto según la reivindicación 1, en donde R_{1} con R_{2} forma un anillo de benceno fusionado.
5. Un compuesto según la reivindicación 4, en donde el anillo fusionado tiene sustituyentes elegidos de OR'.
6. Un compuesto según la reivindicación 5, en donde los sustituyentes del anillo fusionado comprenden uno o más de hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4}.
7. Un compuesto según la reivindicación 6, en donde los sustituyentes del anillo fusionado comprenden uno o más de hidroxi o metoxi.
8. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde R_{2} es hidrógeno o halógeno.
9. Un compuesto según la reivindicación 8, en donde R_{2} es hidrógeno, fluoro o cloro.
10. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R_{3} es hidrógeno, OR', NR'_{2} o halógeno.
11. Un compuesto según la reivindicación 10, en donde R_{3} es hidrógeno, hidroxi, alcoxi de C_{1}-C_{6}, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno.
12. Un compuesto según la reivindicación 11, en donde R_{3} es hidrógeno, hidroxi, metoxi, benciloxi, amino, metoxibencilamino o cloro.
13. Un compuesto según la reivindicación 12, en donde R_{3} es hidrógeno.
14. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R_{6} es hidrógeno.
15. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R_{7} es hidrógeno.
16. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R_{4} es hidrógeno.
17. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R_{5} es hidrógeno.
18. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde X_{1} es hidrógeno, alquilo, OR', NR'_{2}, SR', SOR', SO_{2}R', carboxialquilo o aralquilo.
19. Un compuesto según la reivindicación 18, en donde X_{1} es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, alquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo o dicarboxialquilo.
20. Un compuesto según la reivindicación 19, en donde X_{1} es hidrógeno, metilo, hidroxi, metoxi, etoxi, benciloxi, fenoxi, amino, metoxibencilamino, metiltio, metilsulfinilo, metilsulfonilo o dimetilcarboxietilo.
21. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde X_{2} es NR'_{2} o SR'.
22. Un compuesto según la reivindicación 21, en donde X_{2} es NH_{2} o alquiltio.
23. Un compuesto según la reivindicación 22, en donde X_{2} es NH_{2} o metiltio.
24. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde uno o más de los sustituyentes son como sigue:
X_{1} es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, alquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo o dicarboxilalquilo;
X_{2} es NH_{2} o alquiltio;
R_{1} es alquilo o halógeno;
R_{3} es hidrógeno, hidroxi, alcoxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno;
R_{2} es hidrógeno o halógeno.
25. Un compuesto según la reivindicación 1, que es un compuesto de fórmula (11):
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en donde los grupos sustituyentes definidos por X_{1}, X_{2} y R_{9} se seleccionan cada uno de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO_{2}R', NO_{2}, NH_{2}, NHR', N(R')_{2}, NHCOR', NHSO_{2}R', CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)R', CO_{2}H, CO_{2}R', carboxialquilo, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; y
en donde cada uno de los grupos R' se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en H, OH, SH, NO_{2}, NH_{2}, CN, halógeno, C(=O)H, C(=O)CH_{3}, CO_{2}H, CO_{2}CH_{3}, alquilo de C_{1}-C_{12}, alquenilo de C_{2}-C_{12}, alquinilo de C_{2}-C_{12}, arilo, aralquilo y heteroaromático.
26. Un compuesto según la reivindicación 25, que es un compuesto de fórmula (11) en donde uno o más de los sustituyentes son como sigue:
X_{1} es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, alquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo o dicarboxilalquilo;
X_{2} es NH_{2} o alquiltio;
R_{9} es hidrógeno o alcoxi.
27. Un compuesto según la reivindicación 25, de la fórmula
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28. Un compuesto según la reivindicación 1, de la fórmula
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29. Un compuesto según la reivindicación 1 de fórmula:
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30. Un compuesto de fórmula:
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31. Una composición farmacéutica que comprende como principio activo un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30.
32. El uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30, en la preparación de un medicamento para su uso en el tratamiento del cáncer.
33. Un proceso para preparar un intermediario de variolina de fórmula (8z):
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donde hal es un halógeno, y X_{1}, X_{2}, R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7} y R' son como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30, y R_{1} puede ser adicionalmente H; que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (31z):
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donde X_{2}, R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{6}, R_{7} y hal son como se han definido en esta reivindicación, con un compuesto de fórmula (13z):
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donde los sustituyentes X_{1}, R_{4} y R_{5} son como se ha definido en esta reivindicación.
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34. Un proceso según la reivindicación 33, en donde el compuesto de fórmula (31z) se produce haciendo reaccionar con un compuesto de fórmula (30z):
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donde hal, R_{1}, R_{2} y R_{3} son como se han definido en la reivindicación 33, con un compuesto de fórmula (13y):
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donde los sustituyentes X_{2}, R_{6} y R_{7} son como se han definido en la reivindicación 33.
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