ES2309258T3 - Composiciones farmaceuticas que comprenden trioxido de arsenico para el tratamiento de linfoma no hodgkin. - Google Patents

Abstract

Uso de trióxido de arsénico en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano.

Description

Composiciones farmacéuticas que comprenden trióxido de arsénico para el tratamiento de linfoma no Hodgkin.

1. Campo de la invención

La presente invención se refiere a procedimientos y composiciones para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano. En la práctica del tratamiento de cáncer se usan composiciones que contienen trióxido de arsénico para detener e invertir crecimiento neoplásico.

Más específicamente, la presente invención se refiere a procedimientos quimioterápicos novedosos, usos novedosos de trióxido de arsénico para tratar linfoma no Hodgkin en un ser humano.

2. Antecedentes de la invención

En 1997 más de un millón de personas desarrollarán algún tipo de cáncer en los Estados Unidos. Aproximadamente 500.000 se curarán o estarán en un estado de remisión. Estas cifras representan una mejora de la tasa de curación que se observa a lo largo de la última década que se debe en gran parte a la detección temprana, al mejor tratamiento y a los avances en quimioterapia. En particular, los avances en quimioterapia incluyen tratamiento seleccionado como diana o con fármacos específicos en el que se desarrolla un fármaco específicamente para el tratamiento de un cierto tipo de cáncer. Este enfoque "orientado a la enfermedad" se diseña para identificar compuestos que ejercen efectos selectivos in vitro sobre tipos de tumores particulares y para seguir estos candidatos in vivo utilizando líneas celulares, (Fiebig et al., Cancer Treatment Reviews 17:109-117 (1990)). Sin embargo, la incidencia de cáncer continua subiendo a medida que nuestra población envejece y a medida que nuevos canceres se desarrollan y se producen más frecuentemente, tales como en pacientes infectados con el virus del SIDA. Por tanto, está claro que existe una tremenda demanda de otros regímenes para tratar pacientes con cáncer.

2.1. Patobiología del cáncer

El cáncer se caracteriza principalmente por un aumento en el número de células anómalas derivadas de un tejido normal dado, una invasión de tejidos adyacentes por estas células anómalas, y una extensión linfática o transmitida por sangre de células malignas hacia los nódulos linfáticos y hacia sitios distantes (metástasis). Los datos clínicos y estudios biológicos moleculares indican que el cáncer es un proceso de múltiples etapas que comienza con cambios preneoplásicos minoritarios que pueden evolucionar en determinadas condiciones hasta la neoplasia.

El crecimiento de células anómalas premalignas se da como ejemplo mediante hiperplasia, metaplasia, o lo más particularmente, displasia (para una revisión de tales condiciones de crecimiento anómalo véase Robbins y Angell, 1976, Basic Pathology, 2ª ed., W.B. Saunders Co., Filadelfia, págs. 68-79). La hiperplasia es una forma de proliferación de células controlada que implica un aumento en el número de células en un tejido u órgano, sin alteración significativa en la estructura o función. Sin embargo como un ejemplo, la hiperplasia de endometrio con frecuencia precede a cáncer de endometrio. La metaplasia es una forma de crecimiento de células controlado en el que un tipo de célula adulta o totalmente diferenciada se sustituye por otro tipo de célula adulta. La metaplasia puede producirse en células de tejido conjuntivo o epitelial. La metaplasia atípica implica un epitelio metaplásico algo desordenado. La displasia frecuentemente es un precursor del cáncer y se encuentra principalmente en los epitelios; es la forma más desordenada del crecimiento celular no neoplásico, que implica una pérdida de la uniformidad celular individual y de la orientación arquitectural de las células. Las células displásicas tienen con frecuencia núcleos grandes de manera anómala, intensamente teñidos y muestran pleomorfismo. La displasia se produce característicamente donde existe inflamación o irritación crónica, y se encuentra con frecuencia en el cuello uterino, vías respiratorias, cavidad oral y vesícula biliar.

La lesión neoplásica puede evolucionar de manera clonal y desarrollar un aumento de la capacidad de invasión, crecimiento, metástasis y heterogeneidad, especialmente en condiciones en las que las células neoplásicas escapan de la vigilancia inmunitaria del huésped (Roitt, I., Brostoff, J y Kale, D., 1993, Immunology, 3ª ed., Mosby, St. Louis, pág. 17.1-17.12).

2.2. Linfoma no Hodgkin relacionado con el SIDA

Desde el descubrimiento del SIDA, la enfermedad ha tenido una estrecha asociación a un espectro de canceres interesante. Además, los tipos de tumores malignos y sus tasas de incidencia se aumentan a medida que el desarrollo de profilaxis y tratamientos antirretrovirales eficaces frente a infecciones oportunistas conducen a una supervivencia prolongada en el estado inmunodeficiente para pacientes con SIDA, (Karp y Broder, Cancer Res. 51:4747-4756 (1991)). Se encontró que el linfoma no Hodgkin relacionado con SIDA se producía en pacientes con SIDA sólo después de 1981. El linfoma no Hodgkin relacionado con SIDA es una enfermedad muy agresiva con una incidencia muy alta de implicación del sistema nervioso central. La incidencia está aumentando en la población con SIDA. Ya que los pacientes infectados con el virus del SIDA ahora viven más tiempo porque no se mueren de infecciones habituales, están desarrollando linfoma a una tasa creciente. Las características del linfoma no Hodgkin relacionado con SIDA se detallan en un artículo por Karp y Broder, (1991), citado anteriormente.

Los problemas que tiene el médico oncólogo para tratar pacientes con linfomas relacionados con SIDA son la predilección recientemente descrita de que el linfoma se produzca en el sistema nervioso central (en el cerebro y las meninges de alrededor) y el hecho de que el paciente con SIDA tiene una médula ósea muy débil que no puede tolerar un tratamiento con quimioterapia habitual. Esto hace muy difícil el tratamiento de linfoma en pacientes con SIDA porque los agentes quimioterápicos habituales son normalmente muy supresores de médula y no cruzan la barrera hematoencefálica (para tratar la enfermedad del sistema nervioso central).

2.6. Arsénico y sus usos médicos

Se ha considerado que el arsénico es tanto un veneno como un fármaco durante mucho tiempo en ambas prácticas médicas, occidental y china. En los últimos años del siglo diecinueve, se usó arsénico frecuentemente en intentos de tratar enfermedades de la sangre en occidente. En 1878 se notificó que el tratamiento de un paciente con leucemia con solución de Fowler (una disolución de arsenito de potasio) reducía notablemente el recuento de glóbulos blancos (Cutler y Bradford, Am. J. Med. Sci., enero de 1878, 81-84). Otros intereses del uso de la solución de Fowler como agente paliativo para tratar leucemia mielógena crónica (LMC) se describieron por Forkner y Scott en 1931 (J. Am. Med. Assoc., 1931, iii, 97), y posteriormente confirmados por Stephens y Lawrence en 1936 (Ann. Intern. Med. 9, 1488-1502). Normalmente, la solución de Fowler se administraba por vía oral a pacientes con leucemia como una disolución hasta que se disminuía el nivel de glóbulos blancos hasta un nivel aceptable o hasta el desarrollo de toxicidades (tales como hiperpigmentación y queratosis de la piel), mientras que los pacientes disfrutaban de periodos variables de remisión. En los años 60, todavía se usaba de manera ocasional la solución de Fowler en intentos para tratar LMC, sin embargo, la mayoría de los pacientes con LMC se trataban con otros agentes quimioterápicos, tales como busulfán, y/o tratamiento con radiación (Monfardini et al., Cancer, 1973, 31: 492-501).

De manera paradójica, uno de los efectos más reconocidos de la exposición a arsénico, ya sea la fuente ambiental o médica, es el cáncer de piel (Hutchinson, 1888, Trans. Path. Soc. Lond., 39:352; Neubauer, 1947, Br. J. Cancer, 1:192). Existen incluso datos epidemiológicos que sugieren que el uso de la solución de Fowler durante periodos largos podría conducir a un aumento de la incidencia de cáncer en sitios internos (Cuzick et al., Br. J. Cancer, 1982, 45:904-911; Kaspar et al., J. Am. Med. Assoc., 1984, 252:3407-3408). La carcinogenicidad del arsénico ya se ha demostrado por el hecho de que puede inducir aberración cromosómica, amplificación génica, cambios entre cromátidas hermanas y transformación celular (véase por ejemplo, Lee et al., 1988, Science, 241:79-81; y Germolec et al., Toxicol. Applied Pharmacol., 1996, 141:308-318). Debido al efecto carcinogénico conocido del arsénico, su único uso terapéutico en seres humanos en la medicina occidental se encuentra hoy día en el tratamiento de enfermedades tropicales, tales como la tripanosomiasis africana, (melarsoprol, o Arsobal® por Rhône Poulenc Rorer, Collegeville, PA; véase Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9ª edición, capítulo 66, 1659-1662, 1997).

En la medicina china tradicional, la pasta de ácido arsenoso o trióxido de arsénico se ha usado para tratar enfermedades de médula dental, soriasis, sífilis y reumatosis (Chen et al., 1995, en Manual of Clinical Drugs, Shanghai, China, Instituto de Shanghai de ciencia y tecnología (Shanghai Institute of Science and Technology), pág. 830). En los años 70, se había aplicado el trióxido de arsénico para tratar experimentalmente la leucemia promielocítica aguda (LPA) en China (comentado por Mervis, 1996, Science, 273:578). La eficacia clínica del trióxido de arsénico se ha vuelto a investigar recientemente en 14 de 15 pacientes con LPA resistente a tratamiento, notificándose el uso de una dosis intravenosa a 10 mg/día durante 4-9 semanas para dar como resultado la remisión morfológica completa sin la supresión de médula ósea asociada (Shen et al., 1997, Blood, 89:3354-3360). También se notificó que el trióxido de arsénico inducía apóptosis (muerte celular programada) in vitro en células NB4, una línea celular de LPA, y que la apóptosis estaba asociada aparentemente a la regulación por disminución del oncogen bcl-2, y la redistribución intracelular de la proteína PML/RAR\alpha quimérica que son únicas para las células de LPA (Chen et al., 1996, Blood, 88:1052-1061; Andre et al., 1996, Exp. Cell Res. 229:253-260). De manera similar, se ha notificado que melarsoprol induce apóptosis en líneas celulares representativas de leucemia de células B crónica (Konig et al., 1997, Blood 90:562-570). Actualmente no está claro si la apóptosis se induce en pacientes con LPA, pero algunos piensan que es uno de los posibles mecanismos de los efectos terapéuticos de determinados compuestos de arsénico.

Aunque se conoce bien que el arsénico es tanto un veneno como un agente carcinogénico, existen muchos informes en lo que se refiere al uso de arsénico en tratamiento médico.

Además, de la discusión anterior debe estar claro que existe una plétora de tipos diferentes de canceres, cada uno de los cuales requiere un único protocolo de tratamiento. Por tanto, el desarrollo de un agente anticancerígeno de amplio espectro es extremadamente deseable. Como mínimo, se necesita añadir agentes anticancerígenos eficaces adicionales al arsenal contra el cáncer.

3. Sumario de la invención

A pesar de los informes conflictivos en la técnica en lo que se refiere a beneficios y riesgos de la administración de arsénico a pacientes, los solicitantes han descubierto que el trióxido de arsénico tiene amplia aplicabilidad en el tratamiento de diversos canceres.

La presente invención abarca la reivindicación 1, incluyendo linfoma folicular, linfoma difuso, linfoma linfoblástico, linfoma linfocítico pequeño.

Según la presente invención, el trióxido de arsénico puede usarse solo o en combinación con otros agentes terapéuticos conocidos (incluyendo agentes quimioterápicos, agentes radioprotectores y agentes radioterápicos) o técnicas para mejorar la calidad de vida del paciente o bien para tratar la enfermedad neoplásica primaria. Por ejemplo, el trióxido de arsénico puede usarse antes, durante o tras la administración de uno o más agentes antitumorales conocidos incluyendo pero sin limitarse a compuestos de mostaza, mostaza de nitrógeno, clorambucilo, melfalán, ciclofosfamida, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracilo, floxuridina, metotrexato, vincristina, vinblastina, taxol, etopósido, temipósido, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, bleomicina, mitomicina, cisplatino, carboplatino, estramustina fosfato, hidroxiurea, BCNU, procarbazina, VM-26 (vumon), interferones y ácido todo trans retinoico (ATTR), (véase por ejemplo, the Physician Desk References 1997). Además, los compuestos de arsénico pueden usarse antes, durante o tras el tratamiento de radiación. Para el tratamiento de individuos infectados por el VIH, el trióxido de arsénico puede usarse solo o en combinación con AZT, ddI, ddA, ddC, d4T, 3TC y otros agentes antivirales conocidos.

Sin quedar limitado por teoría alguna, los inventores creen que el trióxido de arsénico de la invención puede tener uno o más mecanismos de acción en relación con los procedimientos descritos en el presente documento. Por ejemplo, el trióxido de arsénico puede actuar como un análogo de fósforo que interfiere con los acontecimientos de fosforilación que se producen en la transducción de señales implicada en la apóptosis. El arsénico también puede actuar como un inhibidor de la angiogénesis, es decir, la formación de nuevos vasos sanguíneos, limitando de ese modo el flujo sanguíneo hacia metástasis, tumores y masas celulares preneoplásicas en proliferación. Se sabe bien que si un tumor no es invadido por capilares sanguíneos debería depender de la difusión de nutrientes a partir de su entorno y no puede aumentar más allá de un determinado tamaño. El arsénico también puede funcionar como agente de diferenciación que hace que las células cancerígenas y/o preneoplásicas en división que presentan un fenotipo no diferenciado o subdiferenciado se desarrollen dentro de células diferenciadas de manera terminal y mueran tras un número finito de divisiones celulares. Finalmente, el arsénico también puede actuar para sensibilizar las células cancerígenas a la radiación y/o quimioterapia. Por tanto, el trióxido de arsénico de la invención se describe como que es útil contra una variedad de canceres.

Las composiciones particulares de la invención y sus propiedades se describen en las secciones y subsecciones que siguen.

4. Breve descripción de las figuras

Figuras 1A-1I. Curvas de respuesta a la dosis que muestran el crecimiento en porcentaje de diversas líneas de células de cáncer tras la exposición continua a 10^{-5} \mug/ml a 10^{-9} \mug/ml de trióxido de arsénico durante 2 días. Figura 1A. Líneas celulares leucémicas CCRF-CEM, HL-60(TB), K- 562, MOLT-4, RPMI-8226, SR. Figura 1B. Líneas de células de cáncer de pulmón de células no pequeñas A549/ATCC, EKVX, HOP-62, HOP-92, NCI-H226, NCI-H23, NCI-8322M, NCI-H460, NCI-H522. Figura 1C. Líneas de células de cáncer de colon COLO 205, HCT-116, HCT-15, HT29, KM12, SW620. Figura 1D. Líneas de células de cáncer del SNC SF-268, SF-295, SF-539, SNB-19, SNB-75, U251. Figura 1E. Líneas de células de melanoma LOX 1MV1, MALME-3M, Ml4, SK-MEL-2, SK-MEL-28, SK-MEL-5, UACC-257, UACC-62. Figura 1F. Líneas de células de cáncer de ovario IGROV1, OVCAR-3, OVCAR-5, OVCAR-8, SK-OV-3. Figura 1G. Líneas de células de cáncer renal A498, CAKI-1, RXE 393, SN12C, TX-10, UO-31. Figura 1H. Líneas de células de cáncer de próstata PC-3, DU-145. Figura 1I. Líneas de células de cáncer de mama MCF7, NCI/ADR-RES, MDA-MB-435, MDA-N, BT-549, T-47D.

Figura 2. Gráficos de las medias que muestran patrones de selectividad de cada uno de los parámetros de respuesta principales para todas las líneas celulares sometidas a prueba tras la exposición continua, a 10^{-5} \mug/ml a 10^{-9} \mug/ml de trióxido de arsénico durante 2 días.

Figuras 3A-3I. Curvas de respuesta a la dosis que muestran el crecimiento en porcentaje de diversas líneas de células de cáncer tras la exposición continua a 10^{-5} \mug/ml a 10^{-9} \mug/ml de trióxido de arsénico durante 6 días. Figura 3A. Líneas celulares leucémicas CCRF-CEM, K-562, MOLT- 4, RPMI-8226. Figura 3B. Líneas de células de cáncer de pulmón de células no pequeñas EKVX, HOP-62, HOP-92, NCI-H226, NCL-H23, NCI-H322M, NCI-H460, NCI-H522. Figura 3C. Líneas de células de cáncer de colon COLO 205, HCT-116, HCT-15, HT29, KM12, SW-620. Figura 3D. Líneas de células de cáncer del SNC SF-268, SF-295, SF-539, SNB-75, U251. Figura 3E. Líneas de células de melanoma LOX IMVI, MALMI-3M, SK-MEL-2, SK-MEL-28, SK-MEL-5, UACC-257, UACC-62. Figura 3F. Líneas de células de cáncer de ovario IGROVI, OVCAR-3, OVCAR-5, OVCAR-8, SK-OV-3. Figura 3G. Líneas de células de cáncer renal 786-O, A498, CAKI-1, RXF 393, S12C, TK-10. Figura 3H. Líneas de células de cáncer de próstata DU-145. Figura 3I. Líneas de células de cáncer de mama MCF7, NCI/ADR-RIS, MDA-MB-231/ATCC, HS 578T, MDA-MB-435, MDA-N, BR-549, T-47D.

Figura 4. Gráficos de las medias que muestran patrones de selectividad a cada uno de los parámetros de respuesta principales para todas las líneas celulares sometidas a prueba tras la exposición continua a 10^{-5} \mug/ml a 10^{-9} \mug/ml de trióxido de arsénico durante 6 días.

5. Descripción detallada de la invención

En el presente documento se describen procedimientos y composiciones para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano. La invención se basa, en parte, en un régimen de dosificación para la administración de trióxido de arsénico. La invención también se basa en parte en la potencia del trióxido de arsénico de la invención contra linfoma no Hodgkin en un ser humano.

La invención se refiere a un procedimiento para tratar linfoma no Hodgkin que comprende administrar uno o más compuestos de arsénico en una cantidad no letal y terapéuticamente eficaz.

Generalmente, el experto en la técnica reconocerá que la forma del trióxido de arsénico que va a usarse debe ser terapéuticamente eficaz con toxicidad razonable. La toxicidad depende de la dosis, la forma de dosificación, el modo de administración y frecuencia de dosificación.

Tal como se usa en el presente documento, "trióxido de arsénico" se refiere a una forma farmacéuticamente aceptable de trióxido de arsénico incluyendo sales, disoluciones, complejos, quelatos y compuestos orgánicos e inorgánicos que incorporan trióxido de arsénico. El trióxido de arsénico de la presente invención puede sintetizarse o adquirirse comercialmente. Por ejemplo, el trióxido de arsénico puede prepararse a partir de técnicas químicas bien conocidas. (Véase por ejemplo, Kirk-Othmer, Encyclopedia of Chemical Technology 4ª ed. volumen 3 pág. 633-655 John Wiley & Sons).

En una realización, el trióxido de arsénico de la invención se disuelve en una disolución acuosa de hidróxido de sodio, con el pH ajustado hasta un intervalo fisiológicamente aceptable, por ejemplo aproximadamente pH 6-8.

Cualquier modo de administración adecuado puede usarse según la presente invención incluyendo pero sin limitarse a administración parenteral tal como administración intravenosa, subcutánea, intramuscular e intratecal; también puede usarse la administración oral, intranasal, rectal o vaginal; directamente dentro del tumor; parches transdérmicos; dispositivos de implante (particularmente para la liberación lenta); finalmente, puede usarse la administración tópica. El modo de administración variará según la enfermedad que va a tratarse.

Las composiciones farmacéuticas que van a usarse pueden estar en forma de disoluciones fisiológicamente aceptables estériles (acuosas u orgánicas), suspensiones coloidales, cremas, pomadas, pastas, cápsulas, comprimidos oblongos, comprimidos y cápsulas con forma de sello. Las composiciones farmacéuticas que comprenden trióxido de arsénico de la invención pueden estar contenidas en ampollas y/o recipientes de vidrio estériles sellados. Además, el principio activo puede estar microencapsulado, encapsulado en un liposoma, noisoma o Lipofoam solo o en relación con anticuerpos de selección como diana. Debe reconocerse que las formas de administración de liberación sostenida o lenta retardada también se incluyen.

Linfoma no Hodgkin- \hskip0,52cm linfoma folicular

\hskip3,7cm linfoma difuso

\hskip3,7cm linfoma linfocítico pequeño

La expresión "un procedimiento para tratar linfoma no Hodgkin en un ser humano" tal como se usa en el presente documento significa que la enfermedad y los síntomas asociados a la enfermedad se alivian, se reducen, se curan o por lo demás se sitúan en un estado de remisión.

La expresión "resistente a un tratamiento" cuando se usa en el presente documento significa que los tumores malignos son generalmente resistentes al tratamiento o a la cura. La expresión "resistente a un tratamiento" cuando se usa en los términos anteriores significa que los tumores malignos que son generalmente resistentes al tratamiento o a la cura se alivian, se reducen, se curan o se sitúan en un estado de remisión.

Tal como se usa en el presente documento las expresiones "un agente terapéutico", "régimen terapéutico", "agente radioprotector", "agente quimioterápico" significan fármacos y tratamientos con fármacos convencionales, incluyendo vacunas, para tratar cáncer, infecciones virales y otros tumores malignos que los expertos en la técnica conocen. Los agentes "radioterapéuticos" se conocen bien en la técnica.

Tal como se usa en el presente documento, "un procedimiento de tratamiento de cáncer" o "un procedimiento de tratamiento de enfermedades neoplásicas" significa que la enfermedad y los síntomas asociados a la enfermedad se alivian, se reducen, se curan o se sitúan en un estado de remisión. Además, el crecimiento tumoral se inhibe y/o se reduce el tamaño del tumor.

Tal como se usa en el presente documento, célula "preneoplásica" se refiere a una célula que está en transición desde una forma normal hasta una neoplásica; y la evidencia morfológica, apoyada crecientemente por los estudios biológicos moleculares, indica que la preneoplasia evoluciona a través de múltiples etapas. El crecimiento celular no neoplásico comúnmente está constituido por hiperplasia, metaplasia, o los más particularmente, displasia (para una revisión de tales condiciones de crecimiento anómalas (véase Robbins y Angell, 1976, Basic Pathology, 2ª ed., W.B. Saunders Co., Filadelfia, pág. 68-79). La hiperplasia es una forma de proliferación de células controlada que implica un aumento en el número de células en un tejido u órgano, sin alteración significativa en la estructura o función. Sin embargo como un ejemplo, la hiperplasia de endometrio con frecuencia precede a cáncer de endometrio. La metaplasia es una forma de crecimiento de células controlado en el que un tipo de célula adulta o totalmente diferenciada se sustituye por otro tipo de célula adulta. La metaplasia puede producirse en células de tejido conjuntivo o epitelial. La metaplasia atípica implica un epitelio metaplásico algo desordenado. La displasia frecuentemente es un precursor del cáncer y se encuentra principalmente en los epitelios; es la forma más desordenada del crecimiento celular no neoplásico, que implica una pérdida de la uniformidad celular individual y de la orientación arquitectural de las células. Las células displásicas tienen con frecuencia núcleos grandes de manera anómala, intensamente teñidos y muestran pleomorfismo. La displasia se produce característicamente donde existe inflamación o irritación crónica, y se encuentra con frecuencia en el cuello uterino, vías respiratorias, cavidad oral y vesícula biliar. Aunque las lesiones preneoplásicas pueden evolucionar hacia la neoplasia, también pueden permanecer estables durante periodos largos y pueden incluso remitir, particularmente si se elimina el agente provocador o si la lesión sucumbe a un ataque inmunológico por su huésped.

Los regímenes terapéuticos y las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse con otros potenciadores de la respuesta inmunitaria o modificadores de la respuesta biológica incluyendo, pero sin limitarse a, las citocinas IFN-\alpha, IFN-\gamma, IL-2, IL-4, IL-6, TNF, u otros inmunoestimulantes/inmunomoduladores. Según este aspecto de la invención, el trióxido de arsénico se administra en terapia de combinación con uno o más de estos agentes.

5.1. Formulación

El trióxido de arsénico de la invención puede formularse dentro de preparaciones farmacéuticas para la administración a mamíferos para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano. Las composiciones que comprenden trióxido de arsénico de la invención formuladas en un vehículo farmacéuticamente compatible pueden prepararse, envasarse, etiquetarse para el tratamiento de y usarse para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano.

Si el complejo es soluble en agua, entonces puede formularse en un tampón apropiado, por ejemplo, solución salina tamponada con fosfato u otras disoluciones fisiológicamente compatibles. Como alternativa, si el complejo resultante tiene poca solubilidad en disolventes acuosos, entonces puede formularse con un tensioactivo no iónico tal como Tween, polietilenglicol o glicerina. Por tanto, el trióxido de arsénico y sus solvatos fisiológicamente aceptables pueden formularse para la administración mediante inhalación o insuflación (a través de la boca o bien de la nariz) o administración oral, bucal, parenteral, tópica, dérmica, vaginal, por dispositivo de suministro de fármaco, por ejemplo, material poroso o viscoso tal como Lipofoam, rectal o, en el caso de tumores, directamente inyectados dentro de un tumor sólido.

Para la administración oral, la preparación farmacéutica puede estar en forma de líquido, por ejemplo, disoluciones, jarabes o suspensiones, o pueden presentarse como un producto farmacológico para la reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Tales preparaciones líquidas pueden prepararse por medios convencionales con aditivos farmacéuticamente aceptables tales como agentes de suspensión (por ejemplo, jarabe de sorbitol, derivados de celulosa o grasas comestibles hidrogenadas); agentes de emulsión (por ejemplo, lecitina o acacia); vehículos no acuosos (por ejemplo, aceite de almendras, ésteres aceitosos o aceites vegetales fraccionados); y conservantes (por ejemplo, p-hidroxibenzoatos de metilo o propilo o ácido sórbico). Las composiciones farmacéuticas pueden tomar la forma de, por ejemplo, comprimidos o cápsulas preparadas por medios convencionales con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como agentes de unión (por ejemplo, almidón de maíz pregelatinizado, polivinilpirrolidona o hidroxipropilmetilcelulosa); cargas (por ejemplo, lactosa, celulosa microcristalina o hidrogenofosfato de calcio); lubricantes (por ejemplo, estearato de magnesio, talco o sílice); disgregantes (por ejemplo, almidón de patata o glicolato sódico de almidón); o agentes humectantes (por ejemplo, laurilsulfato de sodio). Los comprimidos pueden revestirse mediante procedimientos bien conocidos en la técnica.

Las preparaciones para la administración oral pueden formularse de manera adecuada dando la liberación controlada de trióxido de arsénico.

Para la administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o pastillas para chupar formuladas de manera convencional.

Para la administración mediante inhalación, el trióxido de arsénico para su uso según la presente invención se suministra de manera convenientemente en forma de una presentación de pulverización en aerosol a partir de envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propelente adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado la unidad de dosificación puede determinarse proporcionando una válvula para suministrar una cantidad dosificada. Pueden formularse cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina para su uso en un inhalador o insuflador que contienen una mezcla en polvo del compuesto y una base en polvo adecuada tal como lactosa o almidón.

El trióxido de arsénico puede formularse para la administración parenteral mediante inyección, por ejemplo, mediante inyección en bolo o infusión continua. Tales formulaciones son estériles. Las formulaciones para inyección pueden presentarse en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ampollas o en recipientes de múltiples dosis, con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, disoluciones o emulsiones en aceite o vehículos acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, de estabilización y/o de dispersión. Como alternativa, el principio activo puede estar en forma de polvo para la constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua libre de pirógenos estéril, antes de su uso.

El trióxido de arsénico también puede formularse en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases de supositorio convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos.

Además de las formulaciones descritas anteriormente, el trióxido de arsénico también puede formularse como una preparación de liberación lenta. Tales formulaciones de acción prolongada pueden administrarse mediante implantación (por ejemplo, por vía subcutánea, por vía intramuscular) o mediante inyección intramuscular. Por tanto, por ejemplo, el trióxido de arsénico puede formularse con materiales hidrófobos o poliméricos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o como derivados moderadamente solubles, por ejemplo, como una sal moderadamente soluble. Liposomas y emulsiones son ejemplos bien conocidos de vehículos o portadores de suministro para fármacos hidrófilos.

Las composiciones pueden presentarse, si se desea, en un dispositivo dispensador o envase que puede contener una o más formas de dosificación unitaria que contienen el principio activo. El envase puede comprender por ejemplo una lámina de plástico o metal, tal como un envase de blister. El dispositivo dispensador o envase puede ir acompañado de instrucciones para la administración.

Se proporcionan kits para llevar a cabo los regímenes terapéuticos de la invención. Tales kits comprenden en uno o más recipientes cantidades terapéuticamente eficaces del trióxido de arsénico en forma farmacéuticamente aceptable. El trióxido de arsénico en un vial de un kit puede estar en forma de una disolución farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, en combinación con solución salina estéril, disolución de dextrosa, o disolución tamponada, u otro fluido estéril farmacéuticamente aceptable. Como alternativa, el complejo puede liofilizarse o desecarse; en este caso, el kit comprende además opcionalmente en un recipiente una disolución farmacéuticamente aceptable (por ejemplo, solución salina, disolución de dextrosa, etc.), preferiblemente estéril, para reconstituir el complejo para formar una disolución para fines de inyección.

En otra realización, un kit comprende además una aguja o jeringa, preferiblemente envasada en forma estéril, para inyectar el complejo, y/o una almohadilla con alcohol envasada. Opcionalmente se incluyen las instrucciones para la administración de trióxido de arsénico por un médico o por el paciente.

La magnitud de una dosis terapéutica de un trióxido de arsénico en la gestión aguda o crónica de linfoma no Hodgkin variará con la gravedad del estado que va a tratarse y la vía de administración. La dosis, y quizás la frecuencia de dosis también variará con la edad, peso corporal, estado y respuesta del paciente individual. En general, los intervalos de dosis diaria total para los estados descritos en el presente documento son generalmente desde aproximadamente 10 \mug hasta aproximadamente 200 mg administrados en dosis divididas por vía parenteral o por vía oral o por vía tópica. Una dosis diaria total preferida es desde aproximadamente 0,5 mg hasta aproximadamente 70 mg del principio activo.

Pueden mantenerse niveles en sangre deseables mediante una infusión continua de trióxido de arsénico tal como se determina por niveles en plasma. Debe observarse que el médico encargado sabría cómo y cuándo terminar, interrumpir o ajustar el tratamiento hasta dosificaciones inferiores debido a la toxicidad, o insuficiencias renales, hepáticas o de la médula ósea. Por el contrario, el médico encargado también sabría cómo y cuándo ajustar el tratamiento hasta niveles superiores si la respuesta clínica no es adecuada (excluyendo efectos secundarios tóxicos).

De nuevo, puede emplearse cualquier vía de administración adecuada para proporcionar al paciente una dosificación eficaz de trióxido de arsénico. Por ejemplo, puede emplearse la administración oral, rectal, vaginal, transdérmica, parenteral (subcutánea, intramuscular, intratecal y similares). Las formas de dosificación incluyen comprimidos, pastillas, cápsula en forma de sello, dispersiones, suspensiones, disoluciones, cápsulas, parches y similares. (Véase, Remington's Pharmaceutical Sciences).

Las composiciones farmacéuticas comprenden trióxido de arsénico como principio activo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y también pueden contener un vehículo farmacéuticamente aceptable y opcionalmente, otros ingredientes terapéuticos, por ejemplo antivirales. La expresión "sales farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales preparadas a partir de bases y ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, incluyendo bases y ácidos inorgánicos y orgánicos.

Las composiciones farmacéuticas incluyen composiciones adecuadas para la administración oral, rectal, por vías mucosas, transdérmica, parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intratecal e intravenosa), aunque la ruta más adecuada en cualquier caso dado dependerá de la naturaleza y gravedad del estado que se está tratando.

En el caso en el que se emplea una composición de infusión o inyección intravenosa, un intervalo de dosificación adecuado para su uso es, por ejemplo desde aproximadamente 0,5 mg hasta aproximadamente 150 mg de dosis diaria total.

Además, el vehículo de trióxido de arsénico puede suministrarse mediante matrices cargadas o no cargadas usadas como dispositivos de suministro de fármacos tales como membranas de acetato de celulosa, también a través de sistemas de suministro seleccionados como diana tales como liposomas fusogénicos unidos a anticuerpos o antígenos específicos.

En el uso práctico, el trióxido de arsénico puede combinarse como principio activo en mezcla estrecha con un vehículo farmacéutico según técnicas convencionales de composición farmacéutica. El vehículo puede tomar una variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración, por ejemplo, administración oral o parenteral (incluyendo comprimidos, cápsulas, polvos, infusiones o inyecciones intravenosas). Para preparar las composiciones para la forma de dosificación oral puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos habituales, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes, agentes de coloración y similares; en el caso de preparaciones líquidas orales, por ejemplo, suspensiones, disoluciones, elixires, liposomas y aerosoles; almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares en el caso de preparaciones sólidas orales por ejemplo polvos, cápsulas y comprimidos. Para preparar las composiciones para la forma de dosificación parenteral, tales como infusión o inyección intravenosa, pueden emplearse medios farmacéuticos similares, agua, glicoles, aceites, tampones, azúcar, conservantes y similares conocidos por los expertos en la técnica. Ejemplos de tales composiciones parenterales incluyen pero no se limitan a dextrosa al 5% p/v, solución salina u otras disoluciones. La dosis total de trióxido de arsénico puede administrarse en un vial de fluido intravenoso, por ejemplo, que oscila entre aproximadamente 2 ml y aproximadamente 2000 ml. El volumen del fluido de dilución variará según la dosis total administrada.

En una realización específica, el linfoma de no Hodgkin es metastásico. En otra realización específica, el paciente que tiene un linfoma no Hodgkin está inmunosuprimido por motivo de haberse sometido a tratamiento anticancerígeno (por ejemplo, radiación y quimioterapia) antes de la administración del trióxido de arsénico de la invención.

5. Ejemplos de referencia

Las siguientes subsecciones describen las pruebas de una composición farmacéutica que comprende trióxido de arsénico in vitro usando un panel de líneas de células de cáncer empleadas por el Instituto Nacional contra el Cáncer (NCI, National Cancer Institute). Los resultados demuestran que el trióxido de arsénico es eficaz para inhibir el crecimiento de una amplia gama de células leucémicas y células de cáncer in vitro.

5.1. Procedimientos y materiales

Se sometió a prueba trióxido de arsénico (1 mg/ml, 10 mg/ampolla, fabricado por Taylor Pharmaceuticals, Decatur, Illinois) a cinco concentraciones cada una diluciones de 10 veces, es decir, 10^{-5}, 10^{-6}, 10^{-7} 10^{-8}, y 10^{-9} \mug/ml.

Se realizaron las pruebas in vitro incubando las células de prueba en presencia de la concentración indicada de trióxido de arsénico en condiciones de cultivo habituales durante un periodo de tiempo designado, que se sigue por un ensayo de proteína de sulforhodamina B (SRB) para evaluar el crecimiento o viabilidad celular. Se organizan las líneas celulares en subpaneles según el origen de las líneas celulares, por ejemplo, leucemia, cáncer de mama, etc. Una descripción de las líneas celulares y procedimiento de prueba se describe en Monk et al. (1997, Anticancer Drug Des. 12:533-41) y Weinstein et al., (1997, Science 275:343-9).

A continuación se describen las presentaciones y procedimientos de análisis de datos.

La medición de un efecto se expresa en porcentaje de crecimiento (PC). El efecto medido del compuesto sobre una línea celular se calcula según una o la otra de las siguientes dos expresiones:

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si (DO_{test} media - DO_{cero} media) \geq 0. entonces

PG = 100 X (DO_{test}media - DO_{cero} media) / ( DO_{ctrl} media - DO_{cero} media)

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si (DO_{test} media - DO_{cero} media) < 0. entonces

PG = 100 X (DO_{test}media - DO_{cero} media) / DO_{cero} media

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en las que:

DO_{cero} media =

el promedio de las mediciones de densidad óptica de color derivado de SRB justo antes de la exposición de las células al compuesto de prueba;

DO_{test} media =

el promedio de las mediciones de densidad óptica de color derivado de SRB tras la exposición de las células al compuesto de prueba durante un periodo de tiempo designado; y

DO_{ctrl} media =

el promedio de las mediciones de densidad óptica de color derivado de SRB tras la no exposición de las células al compuesto de prueba durante un periodo de tiempo designado.

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Las tablas 1 y 2 presentan los datos experimentales recogidos frente a cada línea celular. Las dos primeras dos columnas describen el subpanel (por ejemplo, leucemia) y línea celular (por ejemplo, CCRF-CEM) implicados. Las dos columnas siguientes enumeran la DO_{cero} media y la DO_{ctrl} media; las cinco columnas siguientes enumeran la DO_{test} media para cada una de las cinco concentraciones diferentes. Cada concentración se expresa como el log_{10} (molar o \mug/ml). Las cinco columnas siguientes enumeran los PC calculados para cada concentración. Los parámetros de respuesta IC50, ICT y CL50 son valores interpolados que representan las concentraciones a las que el PC es +50, 0 y -50, respectivamente. A veces estos parámetros de respuesta no pueden obtenerse mediante interpolación. Si, por ejemplo, todos los PC en una fila dada superan +50, entonces ninguno de los tres parámetros puede obtenerse mediante interpolación. En un caso de este tipo, el valor dado para cada parámetro de respuesta es la concentración más alta sometida a prueba y se precede por un signo ">". Está práctica se extiende de manera similar a las otras posibles situaciones en las que no puede obtenerse un parámetro de respuesta mediante interpolación.

Se crea una curva de dosis-respuesta (véanse las figuras 1A-1I y 3A-3I) para el conjunto de datos trazando los PC frente al log_{10} de la concentración correspondiente para cada línea celular. Las curvas de línea celular se agrupan en subpaneles. Se proporcionan líneas horizontales al valor de PC de +50, 0 y -50. Las concentraciones correspondientes a puntos en los que las curvas cruzan estas líneas son las IC50, ICT y CL50, respectivamente.

Un gráfico de las medias (figuras 2 y 4) facilita la exploración visual de datos para posibles patrones de selectividad para líneas celulares particulares o para subpaneles particulares con respecto a un parámetro de respuesta seleccionado. Pueden producirse diferencias en patrones de selectividad evidentes para el mismo compuesto frente a las mismas líneas celulares cuando se comparan diferentes parámetros. La página de gráficos de las medias del paquete de datos muestra gráficos de las medias a cada uno de los parámetros de respuesta principales: IC50, ICT y CL50. Las barras que se extienden a la derecha representan la sensibilidad de la línea celular con respecto al agente de prueba en exceso de la sensibilidad promedio de todas las líneas celulares sometidas a prueba. Puesto que la escala de barras es logarítmica, dos unidades de barra a la derecha implica que el compuesto alcanza el parámetro de respuesta (por ejemplo IC50) para la línea celular a una concentración de una centésima la concentración media requerida por todas las líneas celulares y por tanto la línea celular es sensible de manera inusual a ese compuesto. Las barras que se extienden a la izquierda implican de manera correspondiente menos sensibilidad que la media. Si para una línea celular y un fármaco particulares no era posible determinar el parámetro de respuesta deseado mediante interpolación, la longitud de la barra mostrada es la mayor concentración sometida a prueba (y el log_{10} enumerado del parámetro de respuesta estará precedido por un ">") o bien la menor concentración sometida a prueba (y el log_{10} enumerado estará precedido por un "<").

También se calculan los valores a cualquier límite (> o <) en la media usada para el gráfico de las medias. Por tanto, la media usada en el gráfico de las medias puede no ser la media real de la IC50 por ejemplo. Por este motivo, este valor se denomina el PMGM (para el punto medio del gráfico de las medias).

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2. Resultados

Los resultados de dos conjuntos de pruebas se presentan a continuación. En el primer conjunto, las células de 56 líneas celulares de cáncer diferentes se expusieron a cinco concentraciones de trióxido de arsénico de manera continua durante dos días antes de realizar el ensayo de SRB. En el segundo conjunto, las células de 50 líneas celulares diferentes (un subconjunto de las primeras 56 líneas celulares, más la línea de células de cáncer renal 786-0) se expusieron de manera continua durante seis días antes del ensayo de SRB.

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(Tabla pasa a página siguiente)

1

2

3

4

En el primer conjunto de pruebas, según la tabla 1 y las curvas de respuesta a la dosis según lo mostrado en la figura 1A a 1I, el trióxido de arsénico era eficaz para reducir el crecimiento celular contra casi todas las líneas celulares sometidas a prueba. En particular, las líneas celulares leucémicas, las líneas de células de melanoma y las líneas de células de cáncer de ovario respondieron consecuentemente mostrando una reducción superior al 50% de crecimiento. Según el gráfico de las medias tal como se muestra en la figura 2, la mayor parte de las líneas de células de melanoma y leucémicas, las líneas de células de cáncer del sistema nervioso central SNB-75 y U251, la línea de células de cáncer de próstata PC-3, las líneas de células de cáncer renal A498, CAKI-1, SN12C, y la línea de células de cáncer de pulmón NCI-H522 fueron especialmente sensibles (con respecto a todas las líneas celulares sometidas a prueba) al tratamiento con trióxido de arsénico.

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(Tabla pasa a página siguiente)

5

6

7

8

En el segundo conjunto de pruebas, según la tabla 2, las curvas de respuesta a la dosis, y el gráfico de las medias tal como se muestran en la figura 3A a 3I, y la figura 4, el trióxido de arsénico era eficaz para reducir el crecimiento celular contra todas las líneas celulares sometidas a prueba. Los resultados eran compatibles con los obtenidos a partir del primer conjunto de pruebas. En particular, varias líneas de células de melanoma parecen ser especialmente sensibles a los diversos parámetros de respuesta principales.

En conclusión, estos resultados demuestran que el trióxido de arsénico es eficaz para inhibir el crecimiento de células leucémicas y células de cáncer in vitro, y que el trióxido de arsénico puede usarse en sujetos humanos para tratar una amplia gama de leucemia y canceres, incluyendo, pero sin limitarse a cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de colon, cáncer del sistema nervioso central, melanoma, cáncer de ovario, cáncer renal, cáncer de próstata y cáncer de mama.

Claims (13)

1. Uso de trióxido de arsénico en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de linfoma no Hodgkin en un ser humano.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que dicho trióxido de arsénico se formula como una disolución iónica.

3. Uso según la reivindicación 1, en una forma adaptada para la administración de desde aproximadamente 10 \mug hasta aproximadamente 200 mg por día.

4. Uso según la reivindicación 1, en una forma adaptada para la administración de desde aproximadamente 0,5 mg hasta aproximadamente 70 mg por día.

5. Uso según la reivindicación 1, en una forma adaptada para la administración parenteral.

6. Uso según la reivindicación 1, en una forma adaptada para la administración intravenosa.

7. Uso según la reivindicación 6, en una forma adaptada para la administración de desde aproximadamente 0,5 mg hasta aproximadamente 150 mg por día.

8. Uso según la reivindicación 1, en el que el medicamento comprende adicionalmente una cantidad eficaz de al menos otro agente terapéutico.

9. Uso según la reivindicación 8, en el que el otro agente terapéutico es un agente quimioterápico o agente radioterápico.

10. Uso según la reivindicación 9, en el que el otro agente terapéutico se selecciona del grupo constituido por etopósido, cisplatino, carboplatino, estramustina fosfato, vinblastina, metotrexato, hidroxiurea, ciclofosfamida, doxorubicina, 5-fluorouracilo, taxol, dietilestilbestrol, VM-26(vumon), BCNU, ácido todo trans retinoico, procarbazina, citocinas, vacunas terapéuticas e inmunomoduladores.

11. Uso según la reivindicación 1, para el tratamiento de linfoma folicular.

12. Uso según la reivindicación 1, para el tratamiento de linfoma difuso.

13. Uso según la reivindicación 1, para el tratamiento de linfoma linfocítico pequeño.