ES2314122T3

ES2314122T3 - Producto alimenticio para humanos, o composicion alimenticia para animales de compañia, que contiene extractos de plantas procedentes de amelanchier, para la salud de los huesos.

Info

Publication number: ES2314122T3
Application number: ES02792794T
Authority: ES
Inventors: Elizabeth Offord-Cavin; Ermanno Federici; Bernard Lemaure; Didier Courtois
Original assignee: Societe des Produits Nestle SA; Nestle SA
Current assignee: Societe des Produits Nestle SA; Nestle SA
Priority date: 2001-12-11
Filing date: 2002-12-10
Publication date: 2009-03-16
Anticipated expiration: 2022-12-10
Also published as: IL161737A; JP4237063B2; KR20040073449A; NO326796B1; AU2002358530B2; CO5590865A2; PT1455600E; EP1325682A1; JP4195904B2; EP1455600A1; DE60229286D1; CA2466617A1; US20050106215A1; CN1602158A; ATE410076T1; WO2003053166A1; CN100473291C; NO20042150L; JP2005512553A; ZA200405451B

Abstract

Una composición alimenticia pretendida para la prevención, alivio y/o tratamiento de los trastornos óseos, o el mantenimiento de las salud de los huesos, en humanos y animales de compañía, la cual comprende, como ingrediente activo, una cantidad efectiva de por lo menos una planta o extracto de planta de Amelanchier.

Description

Producto alimenticio para humanos, o composición alimenticia para animales de compañía, que contiene extractos de plantas procedentes de Amelanchier, para la salud de los huesos.

La presente invención, se refiere a una composición para humanos o para animales de compañía, para el mantenimiento de la salud de los huesos, o prevención, alivio y/o tratamiento de los trastornos óseos. Esta se refiere, asimismo, al uso de la composición en la fabricación de un producto nutritivo, un suplemento o un medicamento, para fomentar el crecimiento óseo, en el mantenimiento de la salud de los huesos.

Antecedentes y trasfondo de la invención

La salud de los huesos, requiere un remodelado o reorganización efectiva de los huesos, el cual involucra un equilibrio entre la formación y la resorción ósea. La mayoría de las enfermedades óseas, se deben a una resorción incrementada de los huesos, convirtiendo a su inhibición en un objetivo terapéutico primario, a cuyo efecto, la mayoría de los agentes farmacéuticos desarrollados hasta la fecha, son anti-resorcivos. Por ejemplo, la producción en bloque de estrógenos, de citocinas que fomentan la generación y diferenciación de osteoclastos. Se están desarrollando SERMs (del inglés, selective estrogen response modulator, -modulador selectivo de la respuesta estrógena-), los cuales proporcionan beneficios para la salud de los huesos, al mismo tiempo que reducen el riesgo de los efectos hormonales adversos, en los tejidos del pecho o endometriales. Se asume el hecho de que, éstos, trabajan mediante un mecanismo similar para el estrógeno, en el hueso. Los bisfosfonatos (tales como el alendronato, el risondrato, etc.), se concentran en los huesos y, éstos son, hasta la fecha, los inhibidores más efectivos de la resorción ósea. Éstos inhiben una trayectoria o paso crítico enzimático, el cual se requiere para una actividad y supervivencia osteoclástica. La calcitronina es una hormona polipeptídica, la cual inhibe la resorción ósea, mediante de la actividad osteoclástica. Las nuevas dianas, incluyen el bloqueo de los miembros de la familia de receptores/ligandos de TNF, y sus trayectorias o pasos de señalización, particularmente, de RANK/RANKL, inhibición de metaloproteinasas óseo-específicas, tal como la catepsina K, o inhibición de quinasas específicas.

El desarrollo de agentes específicos que estimulan la formación ósea, ha quedado rezagado, por detrás de aquéllos correspondientes a la resorción. Se conocen algunos agentes químicos o farmacéuticos, para fomentar el crecimiento óseo, en humanos. Así, por ejemplo, la publicación de patente internacional WO 96 19246, describe un procedimiento para fomentar el crecimiento óseo en un paciente humano mediante la administración (normalmente, intermitente o discontinua), de una hormona paratiroidea, la proteína PTH-relacionada, o un agonista, durante un transcurso de tiempo de un mes. En la publicación de patente internacional WO 96 19501, un factor pancreático-derivado, inhibe la resorción de los huesos, y estimula la proliferación de las células óseas, e incrementa la formación ósea.

La patente alemana DE 198 14 725 A, da a conocer el uso de un extracto de Taraxacum, para la prevención o tratamiento de daños en la médula ósea (es decir, aplasia de la médula ósea), y para enlentecer la desmineralización de los huesos.

La patente estadounidense US 2001/024 664 A1, da a conocer un procedimiento para la actividad de COX-2, en un organismo, comprendiendo, el procedimiento, la etapa de administrar al organismo, una composición que comprende una cantidad terapéuticamente o profilácticamente efectiva de un extracto orgánico de una planta comestible, tal como el Teraxacum. Los extractos de la invención reivindicada, son de utilidad en el tratamiento de la artritis, incluyendo, pero no de una forma limitativa en cuanto a éstas, a la artritis reumatoidea, las espodiloartopatías, la artritis del tipo gota, y la osteoartritis.

La publicación de patente internacional WO 99/55 351 A, da a conocer una composición herbácea, caracterizada por el hecho de que, ésta, comprende raíz de dandelion (Teraxaci radix), en un porcentaje del 6 - 12%, en peso. Se revela el hecho de que, el dandelion, se utiliza en la medicina popular, en el caso de las aflicciones de la artritis y reumáticas.

A pesar del hecho de que, estos compuestos químicos y farmacéuticos se han probado para el tratamiento de los trastornos óseos, sería de interés, el proporcionar una vía nutritiva segura, eficaz y nutricional, para fomentar el crecimiento óseo, y prevenir o evitar los síntomas de los trastornos óseos/de las articulaciones, en los mamíferos.

Resumen de la invención

Correspondientemente en concordancia, la presente invención, proporciona una composición alimenticia, según la reivindicación 1.

De una forma remarcable, se ha encontrado, ahora, el hecho de que, algunas plantas, o extractos de plantas, tienen un particular efecto positivo en la formación y reparación ósea, en el mantenimiento de la salud ósea, o la prevención, alivio y/o tratamiento de los trastornos de los huesos.

La composición en concordancia con la presente invención, puede utilizarse para la fabricación de un producto nutritivo, un suplemento, una recompensa, o un medicamento, previsto para humanos o para animales de compañía o domésticos.

La administración de una composición en concordancia con la presente invención, a un mamífero, tiene como resultado una regeneración ósea mejorada, durante el sanado de una fractura. Esta ayuda a inhibir la resorción ósea. Ésta ayuda, también, a incrementar la formación ósea y la densidad ósea de minerales, durante el crecimiento, y optimizar la masa ósea pico (máxima). Asimismo, esta composición, ayuda a hacer decrecer la pérdida ósea, de una forma particular, la pérdida ósea, asociada con la edad, en los mamíferos. Ésta reduce el riesgo de osteoporosis. Adicionalmente, además, ésta ayuda a construir cartílago en los mamíferos, para prevenir la osteoporosis, en animales de compañía o en humanos, lo cual tiene como resultado una mejor actividad o movilidad del individuo.

En otro aspecto, la invención, se refiere al uso de una planta o extracto de planta, tal y como se ha descrito anteriormente, arriba, para la preparación de una composición prevista para la prevención, alivio y/o tratamiento de trastornos óseos, o el mantenimiento de la salud, en mamíferos.

Ésta se refiere, asimismo, al uso de una planta, o extracto de planta, tal y como se ha descrito anteriormente, arriba, para la preparación de una composición prevista para inhibir la resorción ósea.

Ésta se refiere, asimismo, al uso de una planta, o extracto de planta, tal y como se ha descrito anteriormente, arriba, para la preparación de una composición prevista para mejorar la actividad y/o movilidad, en animales de compañía.

La invención, proporciona adicionalmente el uso de una planta o extracto de plantas procedente de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, para el incremento de la formación ósea, densidad ósea durante el crecimiento y optimizar la masa ósea pico, tratar o prevenir la osteoporosis, estimulando la regeneración ósea durante la curación de la fractura, el cual comprende la administración de una cantidad efectiva de una composición tal y como se ha descrito anteriormente, arriba.

Ésta se refiere, adicionalmente, al uso de una planta o extracto de plantas procedente de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, para el tratamiento, alivio y/o profilaxis de osteoartritis, en animales de compañía o en humanos, que comprende la etapa de administrar a un individuo, una composición según se ha descrito anteriormente, arriba.

Ésta proporciona, adicionalmente, el uso de una planta o extracto de plantas, procedente de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, para hacer decrecer la pérdida ósea, de una forma particular, la pérdida ósea, asociada con la edad, en humanos y en animales de compañía, que comprende la etapa de administrar, a una individuo, una composición según se ha descrito anteriormente, arriba.

Descripción detallada de la invención

Con respecto al primer objeto de la presente invención, la planta o extracto de plantas, es Amelanchier.

En una forma preferida de presentación, la planta o extracto de plantas, es Amelanchier ovalis, Amelanchier alnifolia, Amelanchier laevis, Amelanchier arborea, Amelanchier asiatica, por ejemplo.

La planta en concordancia con la presente invención, puede proceder de cualquier parte de la fuente de plantas, por ejemplo, hojas, tubérculos, frutas o raíces. En una forma de presentación mayormente preferida, se utilizan frutas de especies de Amelanchier. La planta o extracto de plantas, puede ser en forma de un extracto seco (deshidratado), liofilizado, de hojas, raíces y/o frutas, en dependencia de la fuente de la planta, o planta fresca, o fracción enriquecida, obtenida mediante procesos de extracción en disolventes inorgánicos u orgánicos, conocidos en el arte especializado de la técnica.

La planta o extracto de planta en concordancia con la presente invención, puede utilizarse en la preparación de una de una composición alimenticia. La citada composición, puede ser en forma de un alimento nutricionalmente equilibrado, o un alimento para animales de compañía o domésticos, un suplemento dietético, una recompensa, o una composición farmacéutica.

La planta o extracto de plantas, puede utilizarse sola, o en asociación con otras plantas, tales como la achicoria, el té, el cacao, o con otra molécula bioactiva, tal como antioxidantes, ácidos grasos, fibras prebióticas, glucosamina, sulfato de condroitina, por ejemplo.

En una forma de presentación, se prepara una composición alimenticia para el consumo humano. Esta composición, puede ser una fórmula nutritiva completa, un producto lácteo, una bebida enfriada o estable con el tiempo, una sopa, un suplemento dietético, un reemplazo de comida, y una barra nutritiva o un producto de confitería.

Aparte del extracto de planta en concordancia con la presente invención, la fórmula nutritiva, puede comprender una fuente de proteínas. De una forma preferible, se utilizan las proteínas dietéticas. Las proteínas dietéticas, puede ser de cualquier fuente de proteínas apropiada; por ejemplo, proteínas animales (tales como las proteínas lácteas, las proteínas de carne, o las proteínas de huevos); proteínas vegetales (tales como la proteína de soja, la proteína de trigo, la proteína de arroz, la proteína de guisantes); mezclas de aminoácidos libres; o una combinación de éstas. Las proteínas lácteas, tales como la caseína, las proteínas de suero láctico, y las proteínas de soja, son las que se prefieren, de una forma particular. La composición, puede también contener una fuente de hidratos de carbono, y una fuente de grasa.

Si la fórmula nutritiva incluye una fuente de grasa, la fuente de grasa, de una forma preferible, proporciona unos porcentajes comprendidos dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 5% hasta aproximadamente un 55%, de la energía de la fórmula nutritiva, por ejemplo, un porcentaje de energía comprendido dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 20% hasta aproximadamente un 50%. Los lípidos que forman la fuente de proteínas, pueden ser cualquier grasa o mezcla de grasas apropiadas. Las grasas vegetales, son particularmente apropiadas; por ejemplo, el aceite de soja, el aceite de palma, el aceite de coco, el aceite de cártamo, el aceite de girasol, el aceite de maíz, el aceite de colza, las lecitinas, y por el estilo. Las grasas animales, tales como la leche, pueden también añadirse, en caso deseado.

A la fórmula nutritiva, se le puede añadir una fuente de hidratos de carbono. De una forma preferible, ésta proporciona unos porcentajes comprendidos dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 40% hasta aproximadamente un 80%, de la energía de la composición nutritiva. Pueden utilizarse cualesquiera hidratos de carbono apropiados, por ejemplo, sacarosa, lactosa, glucosa, fructosa, sólidos de jarabe de maíz, y maltodextrinas, y mezclas de éstos. En caso deseado, puede también añadirse fibra dietética. En el caso en el que ésta se utilice, ésta comprende, de una forma preferible, un porcentaje de hasta aproximadamente un 5% de la energía de la fórmula nutritiva. La fibra dietética, puede ser de procedencia de cualquier origen apropiado, incluyendo, por ejemplo, a la soja, guisantes, avena, pectina, goma de guar, goma arábica, y fructooligosacáridos. En la fórmula nutritiva, pueden incluirse vitaminas y minerales apropiados, en una cantidad correspondiente como para cumplir con las líneas de guía apropiadas.

Pueden incorporase uno o más emulsionantes de grado alimenticio, en la fórmula nutritiva, en el caso en el que ello se desee; por ejemplo, ésteres del ácido diacetiltartático de mono- y di-glicéridos, lecitina y mono- y di-glicéridos. De una forma similar, pueden incluirse sales y estabilizadores apropiados. Con el extracto de planta, pueden también combinarse vitaminas y minerales.

La fórmula nutritiva, de una forma preferible, es administrable entéricamente; por ejemplo, en forma de una materia en polvo, tableta, cápsula, un concentrado líquido, un producto sólido, o una bebida lista para beberse. Si se desea producir una fórmula nutritiva en polvo, la mezcla homogeneizada, se transfiere a un aparato apropiado de secado, tal como un secador por proyección pulverizada (spray), o un secador por congelación (liofilización), y ésta se convierte en una materia en polvo.

En otra forma de presentación, una composición nutritiva, comprende un cereal a base de leche, conjuntamente con una formulación prebiótica. De una forma preferible, el cereal a base de leche, es un cereal para lactantes, el cual actúa como soporte o vehículo para la formulación prebiótica.

En otra forma de presentación, un producto alimenticio usual, puede enriquecerse, vía por lo menos una planta o extracto de planta, en concordancia con la presente invención. Por ejemplo, una leche fermentada, un yogurt, un queso fresco, una leche cuajada, un artículo de confitería, por ejemplo, una bebida dulce o edulcorada, una barra de confitería, copos o barras de cereales para desayunos, bebidas, leches en polvo, productos a base soja, productos no lácteos fermentados, o suplementos nutritivos, para la nutrición clínica.

La cantidad de la planta o extracto de planta, en la composición, puede variar, en concordancia con la fuente de planta y su utilización. En una forma preferida de presentación, una cantidad eficiente de dosis diaria, es de por lo menos aproximadamente 1 mg y, de una forma más preferible, de una cantidad comprendida dentro de unos márgenes que van desde 1 mg hasta 200 mg, de la molécula activa, por día.

En una forma de presentación, puede prepararse una composición farmacéutica que contenga por lo menos un extracto o substancia fitoquímica, de la forma que se ha descrito anteriormente, arriba, en una cantidad suficiente como para lograr el deseado efecto en un individuo. Esta composición, puede ser una tableta, un líquido, cápsulas, cápsulas blandas, pastas o pastillas, gomas, soluciones o emulsiones bebibles, un suplemento oral deshidratado, un suplemento oral húmedo. La composición farmacéutica, contendrá, adicionalmente, portadores o vehículos, y excipientes, que sean apropiados para suministrar la respectiva molécula activa de diferentes naturalezas, al tejido diana. La clase de vehículo o portador/excipiente, y la cantidad de éste, dependerá de la naturaleza de la substancia y del modo de suministro y/o administración del fármaco contemplada. Se apreciará el hecho de que, la persona experta en el arte especializado
de la técnica, seleccionará, en base a sus propios conocimientos, los componentes y forma galénica apropiados.

La planta o extracto de planta en concordancia con la invención, puede utilizarse en la preparación de un composición alimenticia para animales de compañía o domésticos. La citada composición, puede administrarse, a una animal de compañía, como un suplemento a su dieta normal, o como un componente de un producto alimenticio nutricionalmente completo para animales de compañía y, de una forma más preferible, en un producto alimenticio hipocalórico, para animales de compañía. Ésta puede ser, también, una composición farmacéutica.

La planta o extracto de planta, puede utilizarse sola, o puede utilizarse en asociación con otras plantas, tales como la achicoria, el té, el cacao, o con otra molécula bioactiva, tal como antioxidantes, ácidos grasos, fibras prebióticas, glucosamina, sulfato de condroitina, por ejemplo.

De una forma preferible, la composición alimenticia para animales de compañía, contiene una cantidad comprendida dentro de unos márgenes que van desde a aproximadamente 0,01 g hasta aproximadamente 0,5 g, de plantas deshidratadas, por gramo de producto alimenticio, seco, para animales de compañía, para un perro de 15 kg de peso, y desde a aproximadamente 0,001 g hasta aproximadamente 0,1 g, de plantas deshidratadas, por gramo de producto alimenticio, húmedo, para animales de compañía, para un perro de 15 kg de peso.

La composición alimenticia para animales de compañía, nutricionalmente completa, en concordancia con la presente invención, puede ser un producto alimenticio para animales de compañía en forma de una materia en polvo, deshidratada, en forma de una materia tratada, o en forma de una materia húmeda, enfriada o estable durante un largo tiempo de duración. Ésta puede ser refrigerada o suministrarse como un producto estable de largo tiempo de duración. Estos productos alimenticios para animales de compañía, pueden producirse mediante vías que son bien conocidas por parte de las personas expertas en el arte especializado de la técnica.

El producto alimenticio para animales de compañía, puede contener, opcionalmente, un prebiótico, un microorganismo prebiótico, u otro agente activo, por ejemplo, un ácido graso de cadena larga. La cantidad de prebiótico, en el producto alimenticio para animales de compañía es, de una forma preferible, la correspondiente a un porcentaje inferior a un 10%, en peso. Así, por ejemplo, el prebiótico, puede comprender un porcentaje comprendido dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 0,1% hasta aproximadamente un 5%, en peso, del producto alimenticio. Para animales de compañía, los cuales utilizan achicoria como fuerte de prebiótico, la achicoria, puede encontrarse incluida o comprender un porcentaje comprendido dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 0,5% hasta aproximadamente un 10%, en peso, de la mezcla de producto alimenticio, de una forma más preferible, un porcentaje comprendido dentro de unos márgenes que van desde aproximadamente un 1% hasta aproximadamente un 5%, en peso, del producto alimenticio.

Si se utiliza un micro-organismo probiótico, el producto alimenticio para animales de compañía, contiene de aproximadamente 10^{4} a aproximadamente 10^{10} células de los micro-organismos probióticos, por gramo de producto alimenticio para animales de compañía; de una forma más preferible, de aproximadamente 10^{6} células a aproximadamente 10^{8} células, por gramo de microorganismo probiótico. El producto alimenticio para animales de compañía, puede contener de aproximadamente un 0,5% a aproximadamente un 20%, en peso, de la mezcla de micro-organismos probióticos; de una forma preferible, de aproximadamente un 1% a aproximadamente un 6%, en peso; por ejemplo, de aproximadamente un 3% a aproximadamente un 6%, en peso.

En caso necesario, los producto alimenticios para animales domésticos o de compañía, se suplementa con minerales y vitaminas, de tal forma que, éstos, sean nutritivamente completos. Adicionalmente, además, en caso deseado, en el producto alimenticio para animales domésticos o de compañía, puede añadirse otros ingredientes varios, tales como, por ejemplo, azúcar, sal, especias, salsas, agentes condimentantes o saborizantes, y por el estilo.

En otra forma de presentación, pueden prepararse suplementos dietéticos, de tal forma que se mejore la calidad del producto alimenticio para animales de compañía o domésticos. Como suplementos dietéticos, éstos pueden encapsularse o pueden suministrarse en forma de una materia en polvo, y envasarse, conjuntamente con la comida principal de animal, o separadamente de ésta, y puede ser en forma húmeda o en forma seca o deshidratada. A título de ejemplo, una materia en polvo que contenga extractos en concordancia con la presente invención, puede envasarse en saquitos o bolsitas, en una forma en polvo, o en un gel o en un lípido, u otro portador o vehículo apropiado. Estas unidades separadamente envasadas, pueden suministrarse conjuntamente con una comida principal, o en envases multi-unidad, para su uso conjuntamente con una comida principal, o como una recompensa, en concordancia con las instrucciones para el usuario.

La cantidad de producto alimenticio para animales domésticos o de compañía, a ser consumida por parte del animal doméstico o de compañía, para obtener un efecto beneficioso, dependerá del tamaño del producto alimenticio para animales de compañía o domésticos, el tipo de animal de compañía o doméstico, y la edad del animal de compañía o doméstico. No obstante, una cantidad del producto alimenticio para el animal doméstico o de compañía, para proporcionar una cantidad diaria correspondiente a unos valores comprendidos dentro de unos márgenes que van de 0,5 a 5 g, de plantas secas o deshidratadas, por kilo de peso corporal, será usualmente adecuada, para perros y
gatos.

La administración a un humano o a un animal, de la composición alimenticia para humanos, o de la composición alimenticia para animales de compañía, respectivamente, según se ha descrito anteriormente, arriba, tiene como resultado una regeneración ósea mejorada, durante el sanado o curado de la fractura. Ésta ayuda a estimular la formación ósea y la densidad ósea de minerales, durante el crecimiento, y a optimizar la masa ósea pico (máxima). De una forma particular, ésta puede proporcionar un crecimiento óseo óptimo, durante la niñez o infancia, para humanos y animales de compañía, respectivamente. Esta composición alimenticia, ayuda en la prevención de la pérdida ósea, de una forma particular, la pérdida ósea, asociada con la edad, en mamíferos, o pérdida ósea, asociada con la hospitalización a largo plazo. Ésta reduce el riesgo de osteoporosis. Adicionalmente, además, ésta ayuda a construir cartílago, en mamíferos, previene la osteoartritis en humanos y animales de compañía, lo cual tiene como resultado una mejor actividad o movilidad del individuo.

Los ejemplos que se facilitan a continuación, se proporcionan únicamente a título orientativo y éstos, no deben interpretarse, en forma alguna, como siendo limitativos de la materia objeto de la presente invención. Todos los porcentajes, se proporcionan en peso, a menos que se indique expresamente de otra forma. Los ejemplos, vienen precedidos de una breve descripción de la figura.

Figura 1: Comparación de los valores medidos para el Ensayo de Calvaria (A) y el ensayo de fosa (B), para los extractos de frutas de Amelanchier alnifolia (10 \mug/ml): P.E. 734.

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Ejemplos

Ejemplo 1

Efecto de las especies de Amelanchier y de Taraxacum (comparativo), en la formación ósea

Se procedió a someter a test de ensayo, extractos de las especies de plantas Amelachier y Taraxacum (comparativo), para valorar su potencial para inducir la formación ósea o inhibir la resorción ósea.

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Materiales y métodos Preparación de los extractos, para los ensayos de rastreo

Se procede a desengrasar el material de planta, molido, con hexano y, a continuación, éste se extrae con una mezcla de alcohol y agua, con diferentes porcentajes de agua, correspondientes a un valores comprendido dentro de unos márgenes que van desde un 10 a un 90%, de una forma preferible, con un porcentaje de agua del 50%. Los alcoholes, pueden ser alcoholes metílico o etílico, proporcionando el extracto 1a.

En un alícuoto del residuo del primer extracto, se lleva a cabo un hidrólisis enzimática, con glicosidasas \alpha y \beta. Las enzimas, pueden reemplazarse mediante condiciones ácidas. La operación, puede realizarse bajo unas condiciones suaves (temperatura ambiente) o a través de reflujo, con diferentes concentraciones de ácido. La fase acuosa hidrolizada, se extrae con un disolvente no miscible, de una forma preferible, acetato de etilo, para proporcionar el extracto 2a.

El extracto, puede deshidratrarse (secarse), secarse por congelación (liofilizarse), o suministrarse como una forma líquida.

En algunos casos, puede descargarse polifenoles, a través de un tratamiento con polivinilpirrolidona (PVPP), evitando un artefacto con ensayos de rastreo.

A continuación de la etapa de la preparación del extracto, se procedió a pesar cada extracto, se redisolvieron en dimetilsulfóxido (DMSO), a una concentración final de 20 mg/ml, y se almacenaron en alícuotos, a una temperatura de -20ºC. Éstos, se utilizaron como una solución de abastecimiento corriente, y, a continuación, se diluyeron en el medio para cada test de ensayo. Se procedió a someter a test de ensayo, una determinada gama de dosis, a los mismos sistemas. Se procedió a preparar subfracciones en cartuchos de gel de sílice de fase inversa, mediante la elución con disolventes de polaridad variada.

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\bullet Test de ensayo de formación ósea

Ensayo de luciferasa BMP-2 - Se procedió a determinar la activad de los extractos, utilizando células 2T3, que contenían el promotor de BMP2, operativamente enlazado al gen de luciferasa. Un incremento en la actividad luciferasa, en los lisados de células, refleja un incremento en la actividad del promotor de BMP-2. Los extractos, se sometieron a un dilución inicial de 100 \mug/ml, con ½ diluciones hasta un valor de 0,2 \mug/ml. Se procedió a medir la actividad del promotor de BMP-2, midiendo la actividad luciferasa en extractos de células.

Los extractos de Amelanchier ovalis y Taraxacum officinalis (comparativo), proporcionaron unos significativos resultados positivos en la estimulación de la expresión del BMP-2 (Tabla 1).

1

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Se procedió a someter a tests de ensayo adicionales, extractos de Amelanchier ovalis (P.E. 219 (MeOH/agua)), y de Taraxacum officinale (comparativo) (P.E. 750 (acetato de etilo)), en líneas celulares periosteales/preosteoblasticas, hPOB-tert, con objeto de valorar su capacidad para inducir la expresión endógena de BMP2.

La validación de este ensayo, se realizó con estatinas, como control positivo. Se procedió a incubar células, a confluencia, con 0,5 \mug/ml de Lovastatina, o con los extractos de plantas (10-50 \mul/ml), durante un transcurso de tiempo de 24 horas - 48 horas. Se procedió a extraer el RNA total, con reactivo TrIzol (de la firma Gibco). Se procedió a transcribir inversamente, 10 \mug de RNA, utilizando el equipo, a modo de "kit", de síntesis de cDNA, de la primera hebra (de la firma Boehringer). Las secuencias de cDNA de BMP-2, se amplificaron durante 35 ciclos, a una temperatura de reasociación de 55ºC, utilizando cebadores específicos de oligonucleótidos (5':TTGCGGCTGCT
CAGCATGTT; 3':CATCTTGCATCTGTTCTCGGAA). Los productos de PCR, se separaron mediante electroforesis en gel de agarosa, y se determinaron mediante tinción de bromuro de etidio. La cuantificación, se realizó utilizando un software informático de formación de imágenes, del tipo "NIH Image Software" y, los resultados de normalización, se realizaron con Actin, como gen de mantenimiento doméstico.

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Resultados

Para Amelanchier ovalis (conc. ext. 10 \mug/ml): inducción de BMP-2, en un valor de 1,5 veces mayor.

Para Taraxacum officinalis (comparativo)(conc. ext. 50 \mug/ml): inducción de BMP-2, en un valor de 2,0 veces mayor.

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Ejemplo 2

Efecto de las especies de Amelanchier y de Taraxacum (comparativo), en la resorción ósea

Se procedió a evaluar la capacidad de los extractos preparados en el ejemplo 1, para inhibir IL-1 (10^{-1} M) la resorción ósea estimulada, en el ensayo de resorción ósea neonatal. Cada extracto, se evaluó, para medir su capacidad para inhibir la resorción ósea, a 10 \mug/ml.

Los extractos de frutas de Amelanchier Alnifolia (10 \mug(ml)(P.E. 734 (acetato de etilo)), eran aptos para inhibir la resorción ósea inducida por IL-1, y el ensayo de la calvaria múrida (R.J. Murills, "In vitro Bone Resorption assays" in Principles on Bone Biology, -Ensayos in vitro de la resorción ósea-, en Principios de la Biología ósea (Academia Press) 1986, capítulo 90). Este efecto, se confirmó en un segundo test de ensayo de resorción ósea, a saber, en el ensayo de fosa, utilizando hueso de conejo, mezclado con cultivos de rodajas o cortes de hueso bovino (Tezuka K., et al., 1992, Biochem. Biophys. Res. Commun. 186 (2): 911-7, y Lorget F., et al., 2000, Biochem. Biophys. Res. Commun. 268 (3): 899-903). Las fosas de resorción, se visualizan mediante la tinción para células TRAP-positivas (TRAP = fosfatasa ácida resistente al tartrato), y se procedió a su recuento.

En la figura 1, se muestra una comparación de la actividad de los extractos a 10 \mug/ml, en dos sistemas de ensayo.

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Ejemplo 3

Producto alimenticio deshidratado (seco), para animales de compañía

Se realiza una mezcla de producto alimenticio, a base de aproximadamente un 58%, en peso, de maíz, aproximadamente un 5,5%, en peso, de gluten de maíz, aproximadamente un 22%, en peso, de harina de pollo, un 2,5%, en peso, de achicoria deshidratada, aproximadamente un 10% de extracto de hojas de Taraxacum (comparativo), formando, las sales, vitaminas y minerales, el resto.

La mezcla de producto alimenticio, se introduce en un preacondicionador, y se humedece. El producto alimenticio humedecido, se introduce, a continuación, en un horno - extrusionadora, y se gelatiniza. La matriz gelatinizada que abandona la extrusionadora, se fuerza a hacerla pasar a través de una matriz, y se extrusiona. El producto de extrusión, se corta en piezas apropiadas para alimentar a perros, se secan a una temperatura de aproximadamente 110ºC, durante un transcurso de tiempo de aproximadamente 20 minutos, y se enfrían, para formar gránulos.

Este producto alimenticio deshidratado (en forma seca), para perros, tiene un efecto positivo en la salud de los huesos y de los cartílagos, e incrementa su movilidad.

Claims

1. Una composición alimenticia pretendida para la prevención, alivio y/o tratamiento de los trastornos óseos, o el mantenimiento de las salud de los huesos, en humanos y animales de compañía, la cual comprende, como ingrediente activo, una cantidad efectiva de por lo menos una planta o extracto de planta de Amelanchier.

2. Una composición, según la reivindicación 1, en donde, la planta o el extracto de planta, se selecciona entre el grupo consistente en Amelanchier ovalis, Amelanchier alnifolia, Amelanchier laevis, Amelanchier arborea, y Amelanchier asiatica.

3. Una composición, según las reivindicaciones 1 ó 2, en donde, la planta o extracto de plantas, es de frutas de de la especie Amelanchier.

4. Una composición, según una de las reivindicaciones 1 a 3, en donde, el extracto de planta, se utiliza solo, o en asociación con otras plantas, tales como la achicoria, el té, el cacao, o con otra molécula bioactiva, tal como antioxidantes, ácidos grasos, fibras prebióticas, glucosalina o sulfato de condroitina.

5. Una composición, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, la cual es en forma de un producto alimenticio, o un producto alimenticio para animales de compañía, nutricionalmente equilibrado, un suplemento dietético, una recompensa, o una composición farmacéutica.

6. Uso de una planta o extracto de planta, de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, pretendida para la prevención, alivio y/o el tratamiento de trastornos óseos, o el mantenimiento de la salud de los huesos, en humanos o en animales de compañía.

7. El uso de un extracto de planta, de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, pretendida para ayudar en la regeneración ósea, durante el curado de fracturas, el incremento de la formación ósea y densidad ósea de minerales, durante el crecimiento, y optimizar la masa ósea pico, o para hacer decrecer la pérdida de masa ósea, de una forma particular, la pérdida ósea, asociada con la edad, en humanos o en animales de compañía.

8. El uso de una planta o extracto de planta, de Amelanchier, para la preparación de un producto alimenticio o composición alimenticia, pretendida para ayudar en la prevención o alivio de los síntomas de la osteoartritis, en humanos o en animales de compañía.

9. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6-8, para mejorar la actividad y/o movilidad del individuo.

10. El uso de una cualquiera de la reivindicaciones 6-9, para ayudar en la construcción del cartílago, en humanos o en animales de compañía.

11. El uso, según la reivindicación 6-10, en donde, la composición, es tal y como se describe en una de las reivindicaciones 1 a 5.