ES2315312T3 - Procedimiento y composiciones para el tratamiento de enfermedades del ojo. - Google Patents

Abstract

Empleo del ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)carbamoiletil]- (2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico o de las sales fisiológicamente aceptables del mismo, para la fabricación de una preparación para la profilaxis y/o para el tratamiento de enfermedades del ojo de un sujeto, que resultan de la angiogénesis en el ojo, debiéndose llevar a cabo la inyección de dicha preparación a través de la localización de la superficie externa de la esclera que cubre el tejido retinal del ojo de dicho sujeto y que comprende una cantidad efectiva de dicho inhibidor que es suficiente para inhibir la angiogénesis del ojo.

Description

Procedimientos y composiciones para el tratamiento de enfermedades del ojo.

Campo técnico

La presente invención está relacionada, en general, con el campo de la medicina y está relacionada, de manera específica, con los procedimientos y con las composiciones para el tratamiento de las enfermedades del ojo mediante el empleo de antagonistas de los receptores de la integrina \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5}. De una manera más específica, la invención está relacionada con procedimientos y con composiciones para el tratamiento de enfermedades del ojo, mediante el empleo de antagonistas de los receptores de la integrina \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5}, administrándose las composiciones por inyección en el interior de la esclerótica del ojo.

Fundamento

Las integrinas constituyen una clase de receptores celulares, de los que se sabe que enlazan las proteínas de la matriz extracelular y, por lo tanto, que intervienen en las interacciones célula-célula y célula-matriz extracelular, que están asociadas, en general, con acontecimientos de adhesión. Los receptores de las integrinas constituyen una familia de proteínas transmembranales, que comparten características estructurales con los complejos heterodiméricos de glicoproteína, formados por subunidades \alpha y \beta.

Una clase de receptores de la integrina, el receptor de la vitronectina, denominado así por su característica original de enlazarse, de manera preferente, con la vitronectina, es conocida por referirse a tres integrinas diferentes, de manera concreta la \alpha_{v}\beta_{1}, la \alpha_{v}\beta_{3} y la \alpha_{v}\beta_{5}. Horton, Int. J. Exp. Pathol., 71:741-759 (1990). La \alpha_{v}\beta_{1} se enlaza con la fibronectina y con la vitronectina. La \alpha_{v}\beta_{3} se enlaza con una gran variedad de ligandos, con inclusión de la fibrina, del fibrinógeno, de la laminina, de la trombospondina, de la vitronectina, del factor de Willebrand, de la osteospontina y de la sialoproteína ósea I. La \alpha_{v}\beta_{5} se enlaza con la vitronectina. Todavía se encuentra bajo investigación el papel que juega la adhesión celular específica de estas tres integrinas en muchas interacciones celulares en el tejido, pero es evidente que existen integrinas diferentes con funciones biológicas diferentes.

Un locus de reconocimiento importante en el ligando para muchas integrinas consiste en la secuencia tripéptida de arginina-glicina-ácido aspártico (RGD). La RGD se encuentra en todos los ligandos, que han sido identificados precedentemente, para las integrinas receptoras de la vitronectina. Este punto de reconocimiento de la RGD puede ser simulado por polipéptidos ("péptidos") que contienen la secuencia RGD, y tales péptidos RGD son conocidos inhibidores de la función integrina.

Los inhibidores de la integrina, que contienen la secuencia RGD, han sido descritos, por ejemplo, en la publicación EP 0 770 622 A2. Los compuestos descritos inhiben, en particular, las interacciones de los receptores de la integrina \beta_{3} y/o \beta_{5} con ligandos y son particularmente activos en el caso de las integrinas \alpha_{v}\beta_{3}, \alpha_{v}\beta_{5} y \alpha_{II}\beta_{3}, así como también con relación a los receptores \alpha_{v}\beta_{1}, \alpha_{v}\beta_{6} y \alpha_{v}\beta_{8}. Estas acciones pueden ser demostradas, por ejemplo, de conformidad con el método descrito por los autores J. W. Smith et al. en J. Biol. Chem. 265, 12267-12271 (1990). Así mismo, los compuestos tienen efectos antiinflamatorios.

Se ha proporcionado una multitud de antagonistas sin la secuencia RGD, tomándose como base los inhibidores de la integrina que contienen la secuencia RGD. Estos inhibidores de la integrina, que no contienen la secuencia RGD, han sido descritos, por ejemplo, en las publicaciones WO 96/00730 A1, WO 96/18602 A1, WO 97/37655 A1, WO 97/06791 A1, WO 97/45137 A1, WO 97/23451 A1, WO 97/23480 A1, WO 97/44333 A1, WO 98/00395 A1, WO 98/14192 A1, WO 98/30542 A1, WO 99/11626 A1, WO 99/15178 A1, WO 99/15508 A1, WO 99/26945 A1, WO 99/44994 A1, WO 99/45927 A1, WO 99/50249 A2, WO 00/03973 A1, WO 00/09143 A1, WO 00/09503 A1, WO 00/33838 A1.

La publicación DE 1970540 A1 se refiere a aminoácidos aromáticos bicíclicos, que actúan como inhibidores de la integrina de los receptores de la integrina \alpha_{v}, en particular de las integrinas \alpha_{v}\beta_{3} y \alpha_{v}\beta_{5}. Los compuestos son activos, de una manera muy particular, como antagonistas del receptor de la adhesión para el receptor de la vitronectina \alpha_{v}\beta_{3}. Este efecto puede ser demostrado, por ejemplo, de acuerdo con el método descrito por los autores J.W. Smith et al. en J. Biol. Chem. 265, 11008-11013 y 12267-12271 (1990).

La publicación WO 00/26212 A1 se refiere a cromenonas y a derivados de la cromanona que actúan como inhibidores de la integrina de los receptores de la integrina \alpha_{v}, en particular de las integrinas \alpha_{v}\beta_{3} y \alpha_{v}\beta_{5}. Así mismo, los compuestos son muy particularmente activos como antagonistas del receptor de la adhesión para el receptor de la vitronectina \alpha_{v}\beta_{3}.

Los inhibidores de la integrina han sido sugeridos como principios farmacéuticamente activos en la medicina humana y veterinaria, en particular para la profilaxis y para el tratamiento de diversos desórdenes. De manera específica, se ha sugerido su empleo para el tratamiento y para la profilaxis de la circulación, de la trombosis, del infarto de corazón, de la arterioesclerosis, de las inflamaciones, de la apoplejía, de la angina pectoris, de los desórdenes tumorales, de los desórdenes osteolíticos, especialmente de la osteoporosis, de la angiogénesis y de los desórdenes que resultan de la angiogénesis, por ejemplo la retinopatía diabética del ojo, la degeneración macular, la miopía, la histoplasmosis ocular, la artritis reumatoide, la osteoartritis, el glaucoma rubeótico y también la colitis ulcerosa, la enfermedad de Crohn, la esclerosis múltiple, la psoriasis y la restenosis producida como consecuencia de angioplastia.

Las enfermedades del ojo, que resultan de la angiogénesis, son la causa principal de la pérdida de visión en América. Mientras que, en el caso de la población con una edad por encima de los 65 años, la pérdida de visión está relacionada, de manera predominante, por la degeneración macular relacionada con la edad (AMD), en el caso de la población con una edad menor que 65, ésta está afectada de manera predominante por la retinopatía diabé-
tica.

En la publicación Wall Street Journal de fecha 6 de marzo del año 2000, se ha dado una recopilación sobre la incidencia y las terapias actuales de la AMD. De acuerdo con esta publicación la AMD afecta en la actualidad a unos 12 millones de americanos. La AMD destruye de manera progresiva la mácula que es responsable de la visión central y de la visión en color. En algunos casos, puede producirse rápidamente en el transcurso de semanas o de meses el deterioro de la visión central en forma de mancha borrosa. Existen dos formas de la enfermedad denominadas "atrófica" y "exudante". Aún cuando la AMD exudante afecta únicamente al 10% de la población con AMD, ésta está relacionada con el 90% de todas las cegueras relacionadas con la AMD.

Hasta hace poco tiempo, el único tratamiento para la AMD exudante consistía en dirigir un rayo de luz láser potente hasta los vasos sanguíneos nocivos para calentarlos y coagularlos. Sin embargo, aproximadamente sólo el 15% de los pacientes con AMD exudante podían se elegidos para esta operación quirúrgica con láser. Otras terapias se encuentran actualmente en fase de experimentación. En una proposición para resolver el problema, denominada terapia fotodinámica, se ha combinado un láser de baja potencia con la inyección de un colorante absorbente de la luz. Otra terapia consiste en una proposición de solución más quirúrgica y se denomina "translocación limitada de la retina". En esta terapia se destruyen los vasos no estancos con un láser de alto poder, una vez realizada la separación y la rotación de la retina desde la pared externa del ojo.

La publicación US 5,766,591 describe el empleo de antagonistas de \alpha_{v}\beta_{3} que contienen RGD para el tratamiento de pacientes en los que se ha producido una neovascularización del tejido de la retina. De una manera más específica, se ha sugerido el empleo de dichos antagonistas para el tratamiento de pacientes con retinopatía diabética, con degeneración macular y con glaucoma neovascular. Sin embargo, no han sido presentados ejemplos relacionados con estas indicaciones. En lo que se refiere a la vía de administración, únicamente se ha dado una información general. De manera específica, se ha mencionado la aplicación intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intracavitaria y transdérmica. En todos los casos son preferentes aquellos antagonistas \alpha_{v}\beta_{3} que presenten una selectividad para \alpha_{v}\beta_{3} entre otras integrinas tal como la \alpha_{v}\beta_{5}.

La publicación WO 97/06791 A1 describe que los antagonistas de \alpha_{v}\beta_{5} también pueden ser empleados para la inhibición de la angiogénesis. Tal como se ha sugerido para los antagonistas \alpha_{v}\beta_{3} en la publicación US 5,766,591, los antagonistas \alpha_{v}\beta_{5} han sido sugeridos para el tratamiento de un paciente con retinopatía diabética, con degeneración macular y con glaucoma neovascular. Con relación a la vía de administración se ha mencionado de manera específica la aplicación intravenosa, intraocular, intrasinovial, intramuscular, transdérmica y oral.

La publicación WO 00/07565 A1 describe un procedimiento para la aplicación en el ojo de substancias farmacéuticamente activas, por vía de inyección intraescleral en la capa esclerótica.

Como substancias activas se ha mencionado en la publicación WO 00/07565 A1 una multitud de substancias activas que incluyen bloqueadores de la integrina. Sin embargo, el término bloqueador de la integrina es silente con relación al tipo receptor y se refiere a cualquier substancia que actúe como inhibidor de cualquiera de los receptores, contenidos en la amplia clase de los receptores heterodiméricos, formada por las subunidades \alpha y \beta. Por otra parte, no han sido dado ejemplos de bloqueadores de la integrina.

Descripción de la invención

Se ha encontrado que los inhibidores de los receptores de la integrina \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} tienen propiedades farmacológicas y fisicoquímicas particularmente útiles en combinación con una buena tolerabilidad puesto que, en particular, pueden ser empleados para la profilaxis y para el tratamiento de las enfermedades del ojo de un paciente como resultado de una angiogénesis en el ojo por inyección del inhibidor en la capa escleral del ojo.

Así pues, la invención está dirigida a un procedimiento para la profilaxis y/o para el tratamiento de enfermedades del ojo de un paciente, resultantes de la angiogénesis en el ojo, que comprende la inyección en la capa escleral del ojo de dicho paciente de una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} suficiente para inhibir la angiogénesis del ojo llevándose a cabo la inyección a través de la posición de la superficie externa de la esclera que cubre el tejido retinal.

Una cantidad terapéuticamente efectiva es una cantidad del inhibidor suficiente para producir una inhibición medible de la angiogénesis en el tejido del ojo cuando se inyecta dentro de la capa escleral. En general, esto ocurre cuando el inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} es empleado en una cantidad comprendida entre aproximadamente 0,5 \mug y aproximadamente 5 mg.

El procedimiento, de conformidad con la invención, es especialmente aplicable para la profilaxis y/o para el tratamiento de la retinopatía diabética, de la degeneración macular, de la miopía y de la histoplasmosis.

Los inhibidores \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} que deben ser usados en el procedimiento para la profilaxis o para el tratamiento de las enfermedades del ojo están constituidos por compuesto de la fórmula II

1

en la que

R^{1}

significa H, alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono o bencilo,

R^{2}

significa R^{10}, CO-R^{10}, COOR^{6}, COOR^{10}, SO_{2}R^{6} o SO_{2}R^{10},

R^{3}

significa H, Hal, OA, NHR^{10}, N(R^{10})_{2}, -NH-acilo, -O-acilo, CN, NO_{2}, OR^{10}, SR^{10}, R^{2} o CONHR^{10},

R^{4}

significa H, =O, =S, alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono o acilo,

R^{5}

significa NH_{2}, H_{2}N-C(=NH) o H_{2}N-(C=NH)-NH, pudiendo estar provistos también los grupos amino primarios con grupos protectores de amino convencionales o pueden estar monosubstituidos, disubstituidos o trisubstituidos por R^{10}, CO-R^{10}, COOR^{10} o SO_{2}R^{10},o R^{6},

R^{7}, R^{8} están ausentes de manera independiente entre sí o significan H,

R^{7} y R^{8} significan en conjunto, por lo tanto, un enlace,

X, Y significan, de manera independiente entre sí, =N-, -N-, O, S, -CH_{2}- o =C-,

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con la condición de que, al menos, una de las dos definiciones de

X, Y sea =N-, -N-, O o S,

W, Z de manera independiente entre sí, están ausentes o significan O, S, NR^{1}, C(=O), CONH, NHCO, C(=S)NH, NHC(=S), C(=S), SO_{2}NH, NHSO_{2} o CA=CA',

R^{6}

es un heterociclo con un núcleo o con dos núcleos que tiene entre 1 y 4 átomos de N, de O y/o de S y que puede estar no substituido o que puede estar monosubstituido, disubstituido o trisubstituido por Hal, A, -CO-A, OH, CN, COOH, COOA, CONH_{2}, NO_{2}, =NH o =O,

R^{9}

significa H, Hal, OA, NHA, NAA', NHacilo, Oacilo, CN, NO_{2}, SA, SOA, SO_{2}A, SO_{2}Ar o SO_{3}H,

R^{10}

significa H, A, Ar o aralquilo con 7 hasta 14 átomos de carbono,

R^{11}

significa H o alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono,

A, A' significan, de manera independiente entre sí, H o significan alquilo o cicloalquilo no substituidos o monosubstituidos, disubstituidos o trisubstituidos por R^{9}, teniendo cada uno de ellos respectivamente de 1 hasta 15 átomos de carbono y pudiendo estar reemplazados uno, dos o tres grupos metileno por N, O y/o S,

Ar

significa un sistema anular aromático con un núcleo o con dos núcleos, que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos de N, de O y/o de S, no substituido o monosubstituido, disubstituido o trisubstituido por A y/o por R^{9},

Hal

significa F, Cl, Br o I y

m, n significan, de manera independiente entre sí, 0, 1, 2, 3 o 4,

y por sus sales fisiológicamente aceptables.

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En particular, el ingrediente activo que debe ser usado es:

el ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)carbamoil-etil]-(2S)-2H-
1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico.

Puede demostrarse la inhibición de la angiogénesis, tras la aplicación intraescleral del compuesto, mediante la cuantificación de la neovascularización en el ojo tras la estimulación de la angiogénesis y subsecuente aplicación intraescleral del inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5}. Un modelo adecuado para demostrar el efecto inhibidor del inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} sobre la angiogénesis es, por ejemplo, el modelo de la microcavidad corneal en el conejo descrito por los autores Shaffer R.W. et al., en: Molecular, Cellular, and Clinical Aspects of Angiogenesis, Maragoudakis E. (ed.), Plenum Press, New York, 241 y siguientes. (1996). En este modelo la angiogénesis es estimulada mediante la implantación en la córnea de pellets de Hydron que contienen una citocina que estimula la angiogénesis tal como, por ejemplo, el factor de crecimiento de los fibroblastos (FGF) o el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Tras la implantación del compuesto activo que debe ser ensayado se administra una inyección intraescleral paralimbal. Se mide el efecto de la neovascularización al cabo de intervalos de tiempo predeterminados mediante el examen a simple vista empleándose un microscopio, mediante fotografía y cuantificación de las fotografías con asistencia de un ordenador.

Como alternativa a la aplicación de la angiogénesis inducida por citocina, puede llevarse a cabo la inducción de la angiogénesis, así mismo, mediante fotocoagulación por medio de láser, como se ha descrito, por ejemplo, por los autores Murata T. et al., IOVS, 41, 2309 y siguientes (2000).

Otro objeto de la invención consiste en proporcionar una composición adecuada para el procedimiento para la profilaxis y el tratamiento de las enfermedades del ojo de un paciente, que están producidas por la angiogénesis, que comprende la inyección en la capa escleral del ojo de dicho paciente una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5}, suficiente para inhibir la angiogénesis del ojo.

La formulación empleada para la administración del compuesto en la capa escleral del ojo puede ser cualquier forma adecuada para ser aplicada en la esclera, por medio de inyección a través de una cánula con un diámetro pequeño adecuada para la inyección en la capa escleral. Ejemplos de formas de aplicación inyectables son las soluciones, las suspensiones o las suspensiones coloidales. La esclera es una capa vascular delgada, que comprende una red de colágeno altamente ordenada, que rodea el ojo de la mayoría de los vertebrados. Puesto que la esclera es avascular, puede ser utilizada como un depósito de almacenamiento natural a partir del cual no puede ser rápidamente removido o eliminado por el ojo el material inyectado.

En función de la forma de aplicación, el compuesto activo es liberado de una manera inmediata o de una manera sostenida. Es preferente una formulación de liberación sostenida puesto que puede reducirse además la frecuencia de inyección.

Una posibilidad para conseguir una cinética de liberación sostenida consiste en la incrustación o en el encapsulamiento del compuesto activo en nanopartículas. Las nanopartículas pueden ser administradas en forma de polvo, en forma de mezcla pulverulenta con excipientes adicionales o como suspensiones. Son preferentes las suspensiones coloidales de nanopartículas puesto que éstas pueden ser fácilmente administradas a través de una cánula de diámetro pequeño.

Las nanopartículas son partículas con un diámetro comprendido entre aproximadamente 5 nm hasta aproximadamente 1.000 nm. El concepto de "nanopartículas", tal como es usado a continuación, se refiere a partículas formadas por una matriz polímera en la que está dispersado el compuesto activo, que se conocen también como "nanoesferas", y por lo tanto se refiere también a nanopartículas que están compuestas por un núcleo, que contiene el compuesto activo, que está rodeado por una membrana polímera, que se conocen también como "nanocápsulas". Para la administración en la esclera del ojo son preferentes aquellas nanopartículas que tengan un diámetro comprendido entre aproximadamente 50 nm y aproximadamente 500 nm, en particular comprendido entre aproximadamente 100 nm y aproximadamente 200 nm.

Las nanopartículas pueden ser preparadas mediante polimerización in situ de los monómeros dispersados o mediante la utilización de polímeros preformados. Puesto que los polímeros preparados in situ no son frecuentemente biodegradables y/o contienen productos acompañantes seriamente toxicológicos, son preferentes las nanopartículas obtenidas a partir de polímeros preformados. Las nanopartículas procedentes de polímeros preformados pueden ser preparadas según diversas técnicas, por ejemplo mediante evaporación en emulsión, desplazamiento del disolvente, precipitación por salificación y mediante difusión por emulsificación.

La evaporación en emulsión es la técnica clásica para la preparación de nanopartículas a partir de polímeros preformados. De conformidad con esta técnica, el polímero y los compuestos activos son disueltos en un disolvente orgánico no miscible con agua, que está emulsionado en una solución acuosa. La emulsión en bruto se expone a continuación a una fuente de alta energía tal como dispositivos ultrasónicos o se hace pasar a través de homogeneizadores de alta presión o de microfluidizadores para reducir el tamaño de las partículas. A continuación se elimina el disolvente orgánico mediante calentamiento y/o vacío lo que da por resultado la formación de las nanopartículas con un diámetro comprendido entre aproximadamente 100 nm y aproximadamente 300 nm. De manera usual, como disolventes orgánicos se emplean el cloruro de metileno y el cloroformo, debido a que son insolubles en agua, a sus buenas propiedades solubilizantes, a su fácil emulsificación y a su elevada volatilidad. Sin embargo, estos disolventes son críticos en lo que se refiere a su tolerancia fisiológica. Por otra parte, la elevada fuerza de cizallamiento, que es necesaria para reducir el tamaño de las partículas, puede conducir al deterioro del polímero y/o del compuesto activo.

El procedimiento por desplazamiento del disolvente fue descrito por primera vez en la publicación EP 0 274 961 A1. En este procedimiento se disuelven el compuesto activo y el polímero en un disolvente orgánico que es miscible con agua en todas las proporciones. Esta solución se introduce en una solución acuosa que contiene un estabilizante bajo agitación suave dando por resultado una formación espontánea de nanopartículas. Ejemplos de disolventes orgánicos adecuados y de estabilizantes son la acetona o el etanol y respectivamente el alcohol polivinílico. De manera ventajosa pueden evitarse disolventes clorados y la tensión por cizallamiento. El mecanismo de la formación de las nanopartículas ha sido explicado por medio de turbulencia interfacial, generada durante el desplazamiento del disolvente (Fessi H. et al., Int. J. Pharm. 55 (1989) R1-R4). Recientemente se ha descrito una técnica de desplazamiento del disolvente en la publicación WO 97/03657 A1, en la que el disolvente orgánico, que contiene el compuesto activo y el polímero, es introducido en una solución acuosa sin agitación.

La técnica de precipitación por salificación fue descrita por primera vez en la publicación WO 88/08011 A1. En esta técnica se mezcla una solución de un polímero insoluble en agua y de un compuesto activo en un disolvente orgánico soluble en agua, especialmente la acetona, con una solución viscosa, acuosa, concentrada o con un gel que contiene un estabilizante coloidal y un agente para la precipitación por salificación. A la emulsión de aceite-en-agua resultante se le añade agua en una cantidad suficiente como para difundirse en la fase acuosa y para introducir una rápida difusión del disolvente orgánico en la fase acuosa, lo que conduce a una turbulencia interfacial y a la formación de nanopartículas. El disolvente orgánico y el agente para la precipitación por salificación, que permanecen en la suspensión de nanopartículas, son eliminados a continuación mediante lavados repetidos con agua. De manera alternativa, el disolvente y el agente para la precipitación por salificación pueden ser eliminados mediante filtración en corriente transversal.

En el procedimiento de difusión por emulsificación el polímero se disuelve en un disolvente orgánico parcialmente soluble en agua, saturado con agua. Esta solución se mezcla con una solución acuosa que contiene un estabilizante lo que da por resultado una emulsión de aceite-en-agua. A esta emulsión se añade agua lo que provoca que el disolvente se difunda en la fase externa acuosa acompañado por la formación de nanopartículas. Durante la formación de las partículas cada gotícula de la emulsión conduce a varias nanopartículas. Puesto que este fenómeno no puede ser exactamente explicado mediante el efecto convencional causado por la turbulencia interfacial, se ha propuesto que la difusión del disolvente orgánico a partir de las gotículas de la emulsión en bruto que arrastra moléculas del compuesto activo y la fase polímera hasta la fase acuosa lo que da por resultado regiones localmente sobresaturadas, a partir de las cuales el polímero se agrega en forma de nanopartículas (Quintanar-Guerrero D. et al. Colloid. Polym. Sci. 275 (1997) 640-647). De manera ventajosa, pueden ser empleados como disolvente orgánicos los disolventes farmacéuticamente aceptables tales como el carbonato de propileno o el acetato de etilo.

Con los procedimientos precedentemente descritos pueden formarse nanopartículas con diversos tipos de polímeros. Para el empleo en el procedimiento de la presente invención, que envuelve la inyección de la formulación en la esclera del ojo, son preferentes las nanopartículas realizadas a partir de polímeros biocompatibles. El término "biocompatible" se refiere a aquellos materiales que no tengan efectos serios en el medio ambiente biológico, una vez que han sido introducidos en el medio ambiente biológico. Entre los polímeros biocompatibles son especialmente preferentes aquellos polímeros que también sean biodegradables. El término "biodegradable" se refiere a aquellos materiales que se degraden por vía enzimática o por vía química en moléculas más pequeñas que pueden ser eliminadas a continuación, una vez que han sido introducidos en el medio ambiente biológico.

Los polímeros biodegradables son perfectamente conocidos por el técnico en la materia. Ejemplos a este respecto son los poliésteres procedentes de los ácidos hidroxicarboxílicos tales como el ácido poli(láctico) (PLA), el ácido poli(glicólico) (PGA), la policaprolactona (PCL), los copolímeros del ácido láctico y del ácido glicólico (PLGA), los copolímeros del ácido láctico y de la caprolactona, la poliépsiloncaprolactona, el ácido polihidroxibutírico y los poli(orto)ésteres, los poliuretanos, los polianhídridos, los poliacetales, los polihidropiranos, los policianoacrilatos, los polímeros naturales tales como los alginatos y otros polisacáridos con inclusión del dextrano y de la celulosa, el colágeno y la albúmina.

Los liposomas constituyen otro sistema para la liberación de fármacos, que es fácilmente inyectable. Por lo tanto, en el procedimiento de la invención, los compuestos activos pueden ser administrados así mismo en la esclera del ojo en forma de sistemas que liberen liposomas. Los liposomas son perfectamente conocidos por el técnico en la materia. Los liposomas pueden ser formados a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como el colesterol, la estearilamina de fosfatidilcolinas. Los liposomas que pueden ser empleados en el procedimiento de la invención abarcan todos los tipos de liposomas con inclusión, pero sin carácter limitativo, de pequeñas vesículas unilaminares, vesículas grandes unilaminares y vesículas multilaminares.

Ejemplo

Se examinó el efecto de la aplicación intraescleral del inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} en modelo en la microcavidad corneal de conejo como ha sido descrito por Shaffer R.W. (véase más arriba). En el experimento se utilizó el ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)carbamoiletil]-(2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}
propiónico inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5}. Para la inducción de la angiogénesis se utilizaron pellets de Hydron que contienen factor de crecimiento de fibroblasto básico (bFGF). Se llevó a cabo la preparación de los implantes que contienen bFGF mediante la fusión de Hydron [poli(hidroxietil)metacrilato] en pellas de teflón especialmente preparadas que tenían un núcleo de 5 mm, perforadas en sus superficies. Se colocaron aproximadamente 12 \mul de material fundido en cada pella y se llevó a cabo la polimerización durante la noche en una campana estéril, esterilizándose a continuación por medio de irradiación ultravioleta.

El experimento está constituido por 12 animales; se implantó un pellet individual en cada ojo de los animales en una "cavidad" creada por vía quirúrgica en el centro del estroma de la córnea de conejo. El procedimiento quirúrgico se llevó a cabo bajo técnica estéril mediante la utilización de un microscopio para operación Wild modelo M691 equipado con un dispositivo divisor de la luz y cámara para el registro fotográfico individual de las córneas. Se utilizó una cuchilla 69 Beaver para crear una "cavidad" de 3 mm por 5 mm hasta una profundidad correspondiente a la mitad del espesor de la córnea. El estroma se sometió a una disección periférica mediante el empleo de una espátula y se implantó el pellets con su margen periférico a una distancia de 2 mm desde el limbo. Inmediatamente después de la implantación de los pellets de Hydron, que contenían bFGF, 6 de los 12 animales recibieron, en cada ojo, 100 \mul de una solución de fármaco constituida por 2,0 mg/ml del ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)carbamoiletil]-(2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico solubilizado en tampón fosfato salino (PBS) mediante inyección intraescleral paralimbal. Con fines comparativos se llevó a cabo el mismo procedimiento en los otros 6 animales empleándose PBS únicamente. Después de la implantación se fotografiaron los ojos y se midió el área de la neovascularización al cabo de intervalos predeterminados. Los resultados obtenidos al cabo de 5 y de 7 días desde el implante están indicados en las tablas 1 y 2.

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TABLA 1 Efecto de una inyección intraescleral simple (día 0) del ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)-carbamoiletil]-(2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico sobre la angiogénesis de la córnea estimulada por bFGF, al cabo de 5 días desde la implantación

2

3

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La neovascularización se había inhibido al cabo de 5 días desde la implantación en el 56,5% (p < 0,01) en el grupo de animales que habían recibido la solución del fármaco en comparación con el grupo de animales que habían recibido únicamente PBS.

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TABLA 2 Efecto de una inyección intraescleral simple (día 0) del ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)-carbamoiletil]-(2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico sobre la angiogénesis de la córnea estimulada por bFGF, al cabo de 7 días desde la implantación

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La neovascularización se había inhibido al cabo de 7 días desde la implantación en el 52,3% (p < 0,01) en el grupo de animales que habían recibido la solución del fármaco en comparación con el grupo de animales que habían recibido únicamente PBS.

Los resultados obtenidos demuestran claramente el efecto ventajoso de la presente invención. Aún cuando se administró sólo una dosis simple del inhibidor \alpha_{v}\beta_{3} y/o \alpha_{v}\beta_{5} y la formulación del fármaco fue solamente una solución, se verificó una fuerte inhibición de la neovascularización durante muchos días.

Claims (6)

1. Empleo del ácido (2S)-2-(2,2-dimetilpropiloxicarboxamido)-3-{3,4-dihidro-2-[N-(2-imidazolil)carbamoiletil]-(2S)-2H-1,4-benzoxazin-3-on-6-il}propiónico o de las sales fisiológicamente aceptables del mismo, para la fabricación de una preparación para la profilaxis y/o para el tratamiento de enfermedades del ojo de un sujeto, que resultan de la angiogénesis en el ojo, debiéndose llevar a cabo la inyección de dicha preparación a través de la localización de la superficie externa de la esclera que cubre el tejido retinal del ojo de dicho sujeto y que comprende una cantidad efectiva de dicho inhibidor que es suficiente para inhibir la angiogénesis del ojo.

2. Empleo según la reivindicación 1, en el que dicha cantidad está comprendida entre aproximadamente 0,5 \mug y 5 mg.

3. Empleo según la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad ocular es la retinopatía diabética.

4. Empleo según la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad ocular es la degeneración macular.

5. Empleo según la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad ocular es la miopía.

6. Empleo según la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad ocular es la histoplasmosis ocular.