ES2318492T3

ES2318492T3 - Azaquinazolinas sustituidas con accion antiviral.

Info

Publication number: ES2318492T3
Application number: ES05747551T
Authority: ES
Inventors: Tobias Wunberg; Judith Baumeister; Mario Jeske; Frank Sussmeier; Holger Zimmermann; Kerstin Henninger; Dieter Lang
Original assignee: Bayer Healthcare AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2004-05-07
Filing date: 2005-04-23
Publication date: 2009-05-01
Anticipated expiration: 2025-04-23
Also published as: EP1751155A1; WO2005113552A1; BRPI0509667A; JP2007536297A; BRPI0509667B8; JP4928444B2; CN1980925A; HK1112228A1; US8198282B2; CN1980925B; US20100179174A1; DE502005006427D1; AU2005245536B2; US7662822B2; US20080132515A1; EP1751155B1; AU2005245536A1; CA2565761A1; DE102004022672A1; BRPI0509667B1

Abstract

Ar representa arilo, pudiendo estar arilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por alquilo, alcoxi, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi, amino, alquilamino, aminocarbonilo y nitro, pudiendo estar alquilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, amino, alquilamino, hidroxi y arilo, o dos de los sustituyentes en arilo junto con los átomos de carbono a los que están unidos forman un 1,3-dioxolano, un anillo de ciclopentano o un anillo de ciclohexano y un tercer sustituyente dado el caso presente se selecciona independientemente del grupo mencionado, Q 1 , Q 2 , Q 3 y Q 4 representan CH o N, representando uno o dos de Q 1 , Q 2 , Q 3 y Q 4 N y representando los otros al mismo tiempo CH, R 1 representa hidrógeno, amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo, R 2 representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo, R 3 representa amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro, trifluorometilo, alquilsulfonilo o alquilaminosulfonilo o uno de los restos R 1 , R 2 y R 3 representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo y los otros dos forman junto con los átomos de carbono a los que están unidos un 1,3-dioxolano, un anillo de ciclopentano o un anillo de ciclohexano, R 4 representa hidrógeno o alquilo, R 5 representa hidrógeno o alquilo o los restos R 4 y R 5 en el anillo de piperazina están unidos en átomos de carbono exactamente opuestos y forman un puente metileno sustituido dado el caso con 1 a 2 grupos metilo, R 6 representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro y R 7 representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro, o una de sus sales, sus solvatos o los solvatos de sus sales.

Description

Azaquinazolinas sustituidas con acción antiviral.

La invención se refiere a azaquinazolinas sustituidas y procedimiento para su preparación, así como a su uso para la preparación de fármacos para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, especialmente para el uso como agente antiviral, especialmente contra citomegalovirus.

La síntesis de dihidroquinazolinas se describe en Saito T. y col. Tetrahedron Lett., 1996, 37, 209-212 y en Wang F. y col. Tetrahedron Lett., 1997, 38, 8651-8654.

El documento EP-A-1.201.765 da a conocer, entre otros, fenil-(quinazolin-4-il)-aminas sustituidas, (3-morfolin-4-il-propilamino)-8H-pirido[2,3-d]pirimidin-7-onas sustituidas y (piridin-4-ilamino)-8H-pirido[2,3-d]pirimidin-7-onas sustituidas y su uso para el control de citomegalovirus. El documento US-A-2002019397 da a conocer, entre otros, N-bencil-naftiridincarboxamidas sustituidas y su uso contra citomegalovirus.

Aunque en el mercado están disponibles agentes con acción antiviral estructuralmente diferentes, las terapias actualmente disponibles con ganciclovir, valganciclovir, foscarnet y cidofovir están ligadas a efectos secundarios graves, por ejemplo, nefrotoxicidad, neutropenia o trombocitopenia. Además, regularmente puede producirse un desarrollo de resistencia. Por tanto, se desean nuevos agentes para una terapia eficaz.

Por tanto, un objetivo de la presente invención es poner a disposición nuevos compuestos con acción antiviral igual o mejorada para el tratamiento de enfermedades por infección viral en seres humanos y animales.

Se encontró de manera sorprendente que las azaquinazolinas sustituidas descritas en la presente invención tienen actividad antiviral.

Son objeto de la invención compuestos de fórmula

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1

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en la que

Ar: representa arilo, pudiendo estar arilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por alquilo, alcoxi, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi, amino, alquilamino, aminocarbonilo y nitro,

\quad: pudiendo estar alquilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes, independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, amino, alquilamino, hidroxi y arilo,

\quad: o dos de los sustituyentes en arilo junto con los átomos de carbono a los que están unidos forman un 1,3-dioxolano, un anillo de ciclopentano o un anillo de ciclohexano y un tercer sustituyente dado el caso presente se selecciona independientemente del grupo mencionado,

Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} representan CH o N,

\quad: representando uno o dos de Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} N y representando los otros al mismo tiempo CH,

R^{1}: representa hidrógeno, amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo,

R^{2}: representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo,

R^{3}: representa amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro, trifluorometilo, alquilsulfonilo o alquilaminosulfonilo o

uno de los restos R^{1}, R^{2} y R^{3} representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo y los otros dos forman junto con los átomos de carbono a los que están unidos un 1,3-dioxolano, un anillo de ciclopentano o un anillo de ciclohexano,

R^{4}: representa hidrógeno o alquilo,

R^{5}: representa hidrógeno o alquilo o

los restos R^{4} y R^{5} en el anillo de piperazina están unidos en átomos de carbono exactamente opuestos y forman un puente metileno sustituido dado el caso con 1 a 2 grupos metilo,

R^{6}: representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro y

R^{7}: representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro,

y sus sales, sus solvatos y los solvatos de sus sales.

Los compuestos según la invención son los compuestos de fórmula (I) y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, los compuestos mencionados a continuación como ejemplo(s) de realización y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, en tanto que en el caso de los compuestos mencionados a continuación comprendidos por la fórmula (I) no se trate ya de sales, solvatos y solvatos de las sales.

Los compuestos según la invención pueden existir en función de su estructura en formas estereoisoméricas (enantiómeros, diaestereómeros). Por esto la invención se refiere a los enantiómeros o diaestereómeros y sus mezclas respectivas. A partir de tales mezclas de enantiómeros y/o diaestereómeros pueden aislarse de manera conocida los constituyentes estereoisoméricamente unitarios.

Siempre y cuando los compuestos según la invención puedan presentarse en formas tautómeras, la presente invención comprende todas las formas tautómeras.

En el marco de la presente invención se prefieren como sales sales fisiológicamente inocuas de los compuestos según la invención. Pero también están comprendidas sales que por sí mismas no son adecuadas para aplicaciones farmacéuticas, pero pueden usarse, por ejemplo, para el aislamiento o la purificación de los compuestos según la invención.

Las sales fisiológicamente inocuas de los compuestos según la invención comprenden sales de adición de ácido de ácidos minerales, ácidos carboxílicos y ácidos sulfónicos, por ejemplo, sales de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido naftalendisulfónico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido maleico y ácido benzoico.

Las sales fisiológicamente inocuas de los compuestos según la invención también comprenden sales de bases habituales como, a modo de ejemplo y preferiblemente, sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales de sodio y potasio), sales alcalinotérreas (por ejemplo, sales de calcio y magnesio) y sales de amonio, derivadas de amoniaco o aminas orgánicas con 1 a 16 átomos de C como, a modo de ejemplo y preferiblemente, etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, procaína, dibencilamina, N-metilmorfolina, arginina, lisina, etilendiamina y N-metilpiperidina.

En el marco de la invención se denominan solvatos a aquellas formas de los compuestos según la invención que forman un complejo en estado sólido o líquido mediante coordinación con moléculas de disolvente. Los hidratos son una forma especial de los solvatos en los que la coordinación se realiza con agua.

En el marco de la presente invención, los sustituyentes tienen, mientras que no se especifique lo contrario, el siguiente significado:

Alquilo por sí mismo y "alc" y "alquil" en alcoxi, alquiltio, alquilamino, alquilcarbonilo, alquilsulfonilo, alquilaminosulfonilo y alcoxicarbonilo representan un resto alquilo lineal o ramificado con generalmente 1 a 6, preferiblemente 1 a 4, con especial preferencia 1 a 3 átomos de carbono, a modo de ejemplo y preferiblemente metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, terc-butilo, n-pentilo y n-hexilo.

Alcoxi representa a modo de ejemplo y preferiblemente metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, terc-butoxi, n-pentoxi y n-hexoxi.

Alquiltio representa a modo de ejemplo y preferiblemente metiltio, etiltio, n-propiltio, isopropiltio, terc-butiltio, n-pentiltio y n-hexiltio.

Alquilamino representa un resto alquilamino con uno o dos sustituyentes alquilo (seleccionados independientemente entre sí), a modo de ejemplo y preferiblemente metilamino, etilamino, n-propilamino, isopropilamino, terc-butilamino, n-pentilamino, n-hexilamino, N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n-propilamino, N-isopropil-N-n-propilamino, N-terc-butil-N-metilamino, N-etil-N-n-pentilamino y N-n-hexil-N-metilamino. Alquil C_{1}-C_{3}-amino representa, por ejemplo, un resto monoalquilamino con 1 a 3 átomos de carbono o un resto dialquilamino con respectivamente 1 a 3 átomos de carbono por sustituyente alquilo.

Alquilsulfonilo representa a modo de ejemplo y preferiblemente metilsulfonilo, etilsulfonilo, n-propilsulfonilo, isopropilsulfonilo, terc-butilsulfonilo, n-pentilsulfonilo y n-hexilsulfonilo.

Alquilaminosulfonilo representa un resto alquilaminosulfonilo con uno o dos sustituyentes alquilo (seleccionados independientemente entre sí), a modo de ejemplo y preferiblemente metilaminosulfonilo, etilaminosulfonilo, n-propilaminosulfonilo, isopropilaminosulfonilo, terc-butilaminosulfonilo, n-pentilaminosulfonilo, n-hexil-aminosulfonilo, N,N-dimetilaminosulfonilo, N,N-dietilaminosulfonilo, N-etil-N-metilaminosulfonilo, N-metil-N-n-propilaminosulfonilo, N-isopropil-N-n-propilaminosulfonilo, N-terc-butil-N-metilaminosulfonilo, N-etil-N-n-pentilaminosulfonilo y N-n-hexil-N-metilaminosulfonilo. Alquil C_{1}-C_{3}-aminosulfonilo representa, por ejemplo, un resto monoalquilaminosulfonilo con 1 a 3 átomos de carbono o un resto dialquilaminosulfonilo con respectivamente 1 a 3 átomos de carbono por sustituyente alquilo.

Alquilcarbonilo representa a modo de ejemplo y preferiblemente acetilo y propanoílo.

Alcoxicarbonilo representa a modo de ejemplo y preferiblemente metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo, n-pentoxicarbonilo y n-hexoxicarbonilo.

Arilo representa un resto carbocíclico aromático mono a tricíclico con generalmente 6 a 14 átomos de carbono; a modo de ejemplo y preferiblemente fenilo, naftilo y fenantrenilo.

Halógeno representa flúor, cloro, bromo y yodo, preferiblemente flúor y cloro.

Un símbolo * en un átomo de carbono significa que el compuesto, en lo que respecta a la configuración en este átomo de carbono, se presenta en forma enantioméricamente pura, por lo que en el marco de la presente invención se entiende un exceso enantiomérico (enantiomeric excess) de más del 90% (> 90% ee).

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Se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que

Ar: representa fenilo, pudiendo estar fenilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxicarbonilo, alquil C_{1}-C_{6}-carbonilo, alcoxi C_{1}-C_{6}-carbonilo, trifluorometilo, flúor, cloro, bromo, ciano, hidroxi, amino, alquil C_{1}-C_{6}-amino y nitro,

\quad: o dos de los sustituyentes en el fenilo forman junto con los átomos de carbono a los que están unidos un 1,3-dioxolano y un tercer sustituyente dado el caso presente se selecciona independientemente del grupo mencionado,

Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} representan CH o N,

\quad: representando siempre exactamente uno de Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} N y representando los otros al mismo tiempo CH,

Q^{4}: representa CH,

R^{1}: representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, alquiltio C_{1}-C_{3}, flúor o cloro,

R^{2}: representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, alquiltio C_{1}-C_{3}, flúor o cloro,

R^{3}: representa alquilo C_{1}-C_{4}, ciano, flúor, cloro, nitro, trifluorometilo o alquil C_{1}-C_{3}-sulfonilo, o

uno de los restos R^{1}, R^{2} y R^{3} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo y los otros dos forman junto con los átomos de carbono a los que están unidos un anillo de ciclopentano o un anillo de ciclohexano,

R^{4}: representa hidrógeno o metilo,

R^{5}: representa hidrógeno,

R^{6}: representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, trifluorometilo, flúor, cloro, ciano, hidroxi o nitro y

R^{7}: representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, flúor, cloro, ciano o hidroxi.

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Entre éstos se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que

Ar: representa fenilo, pudiendo estar fenilo sustituido con 1 a 2 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por metilo, metoxi, flúor y cloro,

Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} representan CH o N,

Q^{4}: representa CH,

R^{1}: representa hidrógeno, metilo, metoxi, metiltio, flúor o cloro,

R^{2}: representa hidrógeno,

R^{3}: representa metilo, iso-propilo, terc-butilo, ciano, flúor, cloro, nitro o trifluorometilo,

R^{4}: representa hidrógeno,

R^{5}: representa hidrógeno,

R^{6}: representa hidrógeno, aminocarbonilo, flúor, cloro, ciano o hidroxi y

R^{7}: representa hidrógeno.

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Entre éstos se prefieren muy especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que

Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} representan CH o N,

Q^{4}: representa CH,

R^{1}: representa hidrógeno, metilo o metoxi,

R^{2}: representa hidrógeno,

R^{3}: representa metilo, terc-butilo, cloro o trifluorometilo,

R^{4}: representa hidrógeno,

R^{5}: representa hidrógeno,

R^{6}: representa hidrógeno y

R^{7}: representa hidrógeno.

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También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} representa hidrógeno, metilo, metoxi o flúor.

Entre éstos se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} representa metoxi.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} está unido al anillo fenilo en la posición orto al punto de unión del anillo fenilo. Por el punto de unión del anillo fenilo sustituido con los restos R^{1}, R^{2} y R^{3} se entiende en el marco de la presente invención el átomo de carbono del anillo fenilo unido a uno de los dos átomos de nitrógeno de la dihidroquinazolina según la fórmula (I).

Se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} representa metoxi y R^{1} está unido al anillo fenilo en la posición orto al punto de unión del anillo fenilo.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{2} representa hidrógeno.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{3} representa trifluorometilo, cloro, metilo, iso-propilo o terc-butilo.

Entre éstos se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{3} representa trifluorometilo, cloro o metilo.

Entre éstos se prefieren muy especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{3} representa trifluorometilo.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} está unido al anillo fenilo en la posición orto al punto de unión del anillo fenilo y R^{3} está unido al anillo fenilo en la posición meta opuesta a R^{1} al punto de unión del anillo fenilo.

Se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} está unido al anillo fenilo en la posición orto al punto de unión del anillo fenilo, R^{3} representa trifluorometilo, cloro o metilo y R^{3} está unido al anillo fenilo en la posición meta opuesta a R^{1} al punto de unión del anillo fenilo.

Entre éstos se prefieren especialmente aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{1} está unido al anillo fenilo en la posición orto al punto de unión del anillo fenilo, R^{3} representa trifluorometilo y R^{3} está unido al anillo fenilo en la posición meta opuesta a R^{1} al punto de unión del anillo fenilo.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{4} y R^{5} representan hidrógeno.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{6} representa hidrógeno.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que R^{7} representa hidrógeno.

También se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en la que Ar representa fenilo, pudiendo estar fenilo sustituido con 1 a 2 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por metilo, metoxi, flúor y cloro.

Las definiciones de restos especificadas en particular en las respectivas combinaciones o combinaciones preferidas de restos también se sustituyen discrecionalmente, independientemente de las combinaciones especificadas respectivas de los restos, por definiciones de restos de otra combinación.

Se prefieren muy especialmente combinaciones de dos o varios de los intervalos preferidos anteriormente mencionados.

Además, es objeto de la invención un procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula (I) haciendo reaccionar compuestos de fórmula

2

en la que

Ar, Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{7} tienen el significado anteriormente especificado y

R^{8} representa alquilo, preferiblemente metilo o etilo o terc-butilo,

con bases o ácidos.

En el caso de metilo y etilo, la reacción se realiza en general con bases en disolventes inertes, preferiblemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente hasta reflujo de los disolventes a presión normal.

Las bases son, por ejemplo, hidróxidos alcalinos como hidróxido de sodio, litio o potasio, o carbonatos alcalinos como carbonato de cesio, sodio o potasio, dado el caso en disolución acuosa, se prefiere hidróxido de sodio en agua.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, éteres como 1,2-dimetoxietano, dioxano, tetrahidrofurano, éter dimetílico de glicol o éter dimetílico de dietilenglicol, alcoholes como metanol, etanol, n-propanol, iso-propanol, n-butanol o terc-butanol, o mezclas de disolventes, se prefiere dioxano o tetrahidrofurano.

En el caso de terc-butilo, la reacción se realiza en general con ácidos en disolventes inertes, preferiblemente en un intervalo de temperatura de 0ºC a 40ºC a presión normal.

En este caso, como ácidos son adecuados cloruro de hidrógeno en dioxano, ácido bromhídrico en ácido acético o ácido trifluoroacético en cloruro de metileno.

Los compuestos de fórmula (II) son conocidos o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula

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en la que

Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, R^{6}, R^{7} y R^{8} tienen el significado anteriormente especificado,

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en una reacción de dos etapas inicialmente con compuestos de fórmula

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en la que

R^{1}, R^{2} y R^{3} tienen el significado anteriormente especificado,

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y a continuación con compuestos de fórmula

5

en la que

Ar, R^{4} y R^{5} tienen el significado anteriormente especificado.

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La reacción se realiza en las dos etapas en general en disolventes inertes, preferiblemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente a 100ºC a presión normal. Dado el caso, en la segunda etapa se añade a la mezcla de reacción gel de sílice. La reacción se realiza preferiblemente con un procesamiento entre la primera y la segunda etapa.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, hidrocarburos halogenados como cloruro de metileno, triclorometano, tetraclorometano, tricloroetano, tetracloroetano, 1,2-dicloroetano o tricloroetileno, éteres como éter dietílico, éter metil-terc-butílico, 1,2-dimetoxietano, dioxano, tetrahidrofurano, éter dimetílico de glicol o éter dimetílico de dietilenglicol, hidrocarburos como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petróleo, u otros disolventes como dimetilformamida, dimetilacetamida, acetonitrilo o éster etílico de ácido acético, o mezclas de disolventes, se prefiere cloruro de metileno.

Los compuestos de fórmula (IV) son conocidos o pueden sintetizarse a partir de los productos de partida correspondientes según procedimientos conocidos.

Los compuestos de fórmula (V) son conocidos o pueden sintetizarse a partir de los productos de partida correspondientes según procedimientos conocidos, por ejemplo, mediante una reacción de Buchwald-Hartwig según el siguiente esquema de síntesis (visión general en: C.G. Frost, P. Mendonca, J. Chem. Soc., Perkin Trans I, 1998, 2615-2623):

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Reacción de Buchwald-Hartwig

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6

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Los productos de partida necesarios para ésta son conocidos o pueden sintetizarse a partir de los productos de partida correspondientes según procedimientos conocidos.

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Los compuestos de fórmula (III) son conocidos o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula

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en la que

con trifenilfosfina y tetracloruro de carbono.

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La reacción se realiza en general en disolventes inertes, en presencia de una base, preferiblemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente a 50ºC a presión normal.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, éteres como éter dietílico, éter metil-terc-butílico, 1,2-dimetoxietano, dioxano, tetrahidrofurano, éter dimetílico de glicol o éter dimetílico de dietilenglicol, hidrocarburos como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petróleo, u otros disolventes como dimetilformamida, dimetilacetamida, acetonitrilo o piridina, se prefiere acetonitrilo.

Las bases son, por ejemplo, carbonatos alcalinos y alcalinotérreos como carbonato de cesio, carbonato de sodio o potasio o aminas como trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina o piridina, se prefiere trietilamina.

Los compuestos de fórmula (VI) son conocidos o pueden sintetizarse a partir de los productos de partida correspondientes según procedimientos conocidos, por ejemplo mediante una reacción de Heck o una reacción de Wittig-Horner según los siguientes esquemas de síntesis:

Reacción de Heck

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Reacción de Wittig-Horner

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Los productos de partida necesarios para éstas son conocidos o pueden sintetizarse a partir de los productos de partida correspondientes según procedimientos conocidos.

La preparación de los compuestos según la invención puede aclararse mediante el siguiente esquema de síntesis.

Esquema de síntesis

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Los compuestos según la invención de fórmula general (I) muestran un sorprendente espectro de acción no previsible. Muestran una acción antiviral frente a representantes del grupo de los herpesvirus (virus del herpes), sobre todo frente a citomegalovirus (CMV), especialmente frente al citomegalovirus humano (CMVH).

Como campos de indicación pueden mencionarse, por ejemplo:

1): Tratamiento y profilaxis de infecciones por CMVH en pacientes con SIDA (retinitis, neumonitis, infecciones gastrointestinales).

2): Tratamiento y profilaxis de infecciones por citomegalovirus en pacientes con trasplante de médula ósea y órganos que frecuentemente enferman de forma potencialmente mortal de una neumonitis, encefalitis por CMVH, así como de infecciones por CMVH gastrointestinales y sistémicas.

3): Tratamiento y profilaxis de infecciones por CMVH en recién nacidos y niños pequeños.

4): Tratamiento de una infección por CMVH aguda en embarazadas.

5): Tratamiento de infección por CMVH en pacientes inmunodeprimidos durante el cáncer y la terapia del cáncer.

6): Tratamiento de pacientes con cáncer positivos a CMVH con el objetivo de disminuir la progresión tumoral mediada por CMVH (véase J. Cinatl y col., FEMS Microbiology Reviews 2004, 28, 59-77).

Otro objeto de la presente invención es la utilización de los compuestos según la invención para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, sobre todo de infecciones por virus, especialmente los virus anteriormente mencionados, y las enfermedades infecciosas causadas por éstos. Por una infección viral se entiende a continuación tanto una infección por un virus como también una enfermedad causada por una infección por un virus.

Otro objeto de la presente invención es el uso de los compuestos según la invención para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, especialmente de las enfermedades previamente mencionadas.

Otro objeto de la presente invención es el uso de los compuestos según la invención para la preparación de un fármaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, especialmente de las enfermedades previamente mencionadas.

Los compuestos según la invención se usan preferiblemente para la preparación de fármacos que son adecuados para la profilaxis y/o el tratamiento de infecciones con un representante del grupo de los herpesvirus, especialmente un citomegalovirus, especialmente el citomegalovirus humano.

Otro objeto de la presente invención es un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, especialmente de las enfermedades previamente mencionadas, usando una cantidad antiviralmente eficaz de los compuestos según la invención.

Otro objeto de la presente invención son fármacos que contienen al menos un compuesto según la invención y al menos uno o varios principios activos distintos, especialmente para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades previamente mencionadas. Como principios activos de combinación adecuados son de mencionar a modo de ejemplo y preferiblemente: principios activos antivirales como ganciclovir o aciclovir.

Los compuestos según la invención pueden actuar sistémica y/o localmente. Para este objetivo pueden administrarse de forma adecuada, como por ejemplo oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, rectal, dérmica, transdérmica, conjuntiva, ótica, tópica o como implante o prótesis endovascular.

Para estas vías de administración, los compuestos según la invención pueden administrarse en formas de administración adecuadas.

Para la administración por vía oral son adecuadas formas de administración que funcionan según el estado de la técnica que liberan los compuestos según la invención de forma rápida y/o modificada que contienen los compuestos según la invención en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, como por ejemplo comprimidos (comprimidos sin recubrir o recubiertos, por ejemplo con recubrimientos resistentes a los jugos gástricos o que se disuelven de forma retardada o insolubles, que controlan la liberación del compuesto según la invención), comprimidos o películas/obleas que se desintegran rápidamente en la cavidad bucal, películas/liofilizados, cápsulas (por ejemplo, cápsulas de gelatina dura o blanda), comprimidos recubiertos de azúcar, gránulos, pellas, polvos, emulsiones, suspensiones, aerosoles o disoluciones.

La administración parenteral puede producirse evitando una etapa de resorción (por ejemplo, intravenosa, intraarterial, intracárdica, intraespinal o intralumbar) o incluyendo una resorción (por ejemplo, intramuscular, subcutánea, intracutánea, percutánea o intraperitoneal). Para la administración parenteral son adecuadas como formas de administración, entre otras, preparaciones para inyección e infusión en forma de disoluciones, suspensiones, emulsiones, liofilizados o polvos estériles.

Para las otras vías de administración son adecuadas, por ejemplo, formas farmacéuticas para inhalación (entre otras inhaladores de polvo, nebulizadores), gotas, disoluciones, aerosoles nasales; comprimidos, películas/obleas o cápsulas que van a administrarse por vía lingual, sublingual o bucal, supositorios, preparaciones para el oído o los ojos, cápsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipófilas, pomadas, cremas, sistemas terapéuticos transdérmicos, leche, pastas, espumas, polvos para extender sobre la piel, implantes o prótesis endovasculares.

Los compuestos según la invención pueden convertirse en las formas de administración citadas. Esto puede producirse de una manera conocida en sí mediante mezclado con coadyuvantes inertes no tóxicos farmacéuticamente adecuados. Entre estos coadyuvantes figuran, entre otros, vehículos (por ejemplo celulosa microcristalina, lactosa, manitol), disolventes (por ejemplo polietilenglicoles líquidos), emulgentes y dispersantes o humectantes (por ejemplo dodecilsulfato de sodio, oleato de polioxisorbitano), aglutinantes (por ejemplo polivinilpirrolidona), polímeros sintéticos y naturales (por ejemplo albúmina), estabilizadores (por ejemplo antioxidantes, como por ejemplo ácido ascórbico), tintes (por ejemplo pigmentos inorgánicos como, por ejemplo, óxidos de hierro) y correctores del sabor y/o el olor.

Otro objeto de la presente invención son fármacos que contienen al menos un compuesto según la invención, normalmente junto con uno o varios coadyuvantes inertes no tóxicos farmacéuticamente adecuados, así como su uso para los fines previamente mencionados.

En general, en la administración por vía intravenosa ha demostrado ser ventajoso administrar cantidades de aproximadamente 0,001 a 10 mg/kg, preferiblemente aproximadamente 0,01 a 5 mg/kg de peso corporal, para lograr resultados eficaces, y en la administración por vía oral la dosificación asciende a aproximadamente de 0,01 a 25 mg/kg, preferiblemente 0,1 a 10 mg/kg de peso corporal.

No obstante, dado el caso puede ser necesario apartarse de las cantidades mencionadas y concretamente en función del peso corporal, vía de administración, comportamiento individual frente al principio activo, modo de preparación y momento o intervalo en el que o con el que se realiza la administración. Así, en algunos casos puede ser suficiente arreglárselas con menos de la cantidad mínima previamente mencionada, mientras que en otros casos debe superarse el límite superior mencionado. En caso de administración de cantidades más grandes puede ser recomendable distribuir éstas en varias dosis individuales a lo largo del día.

Los datos en porcentaje en las siguientes pruebas y ejemplos son, siempre y cuando no se especifique lo contrario, porcentajes en peso; las partes son partes en peso. Las relaciones de disolventes, relaciones de dilución y datos de concentración de disoluciones líquido/líquido se refieren respectivamente al volumen.

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A. Ejemplos Abreviaturas

aprox.: aproximadamente

BINAP: 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo

CDCl_{3}: deuterocloroformo

CCF: cromatografía en capa fina

DCI: ionización química directa (en EM)

DCM: diclorometano

DIEA: N,N-diisopropiletilamina

DMSO: dimetilsulfóxido

DMF: N,N-dimetilformamida

d. t.: del teórico

AE: acetato de etilo (éster etílico de ácido acético)

EI: ionización por impacto electrónico (en EM)

ESI: ionización por electropulverización (en EM)

Pf.: punto de fusión

sat.: saturada

d. c.: dado el caso

h: hora

HPLC: cromatografía líquida de alta presión, de alta resolución

conc.: concentrado

EM-CL: espectroscopía de masas acoplada a cromatografía de líquidos

LDA: diisopropilamida de litio

min: minutos

EM: espectroscopía de masas

MTBE: éter metil-terc-butílico

RMN: espectroscopía de resonancia nuclear

Pd-C: paladio sobre carbón

porc.: en porcentaje

RP-HPLC: HPLC en fase inversa

TA: temperatura ambiente

R_{t}: tiempo de retención (en HPLC)

THF: tetrahidrofurano

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Procedimientos generales EM-CL y HPLC

Procedimiento 1 (HPLC analítica): instrumento: HP 1100 con detección DAD; columna: Kromasil RP-18, 60 mm x 2 mm, 3,5 \mum; eluyente A: 5 ml de ácido perclórico/l de agua, eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0 min 2% de B, 0,5 min 2% de B, 4,5 min 90% de B, 6,5 min 90% de B; flujo: 0,75 ml/min; horno: 30ºC; detección UV: 210 nm.

Procedimiento 2 (HPLC preparativa, HPLC de laboratorio): columna: CromSil C18, 250 x 30 mm; flujo: 50 ml/min; tiempo de elución: 38 min; eluyente A: agua, eluyente B: acetonitrilo, gradiente: 10% de B (3 min) -> 90% de B (31 min) -> 90% de B (34 min) -> 10% de B (34,01 min); detección UV: 210 nm.

Procedimiento 3 (EM-CL): instrumento: Micromass Quattro LCZ, con HPLC Agilent Serie 1100; columna: Grom-SIL120 ODS-4 HE, 50 mm x 2,0 mm, 3 \mum; eluyente A: 1 l de agua + 1 ml de ácido fórmico al 50%, eluyente B: 1 l de acetonitrilo + 1 ml de ácido fórmico al 50%; gradiente: 0,0 min 100% de A \rightarrow 0,2 min 100% de A \rightarrow 2,9 min 30% de A \rightarrow 3,1 min 10% de A \rightarrow 4,5 min 10% de A; horno: 55ºC; flujo: 0,8 ml/min; detección UV: 208-400 nm.

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Compuestos de partida

Ejemplo 1A

Piridin-4-il-terc-butilcarbamato

11

A una disolución de 5,1 g (23,4 mmol) de dicarbonato de di-terc-butilo en 20 ml de THF se añaden en porciones 2,0 g (21,3 mmol) de 4-aminopiridina. Después de la adición completa se agita 1 h a temperatura ambiente, a continuación se elimina el disolvente a vacío y el residuo así obtenido se suspende en éter dietílico. El sólido se separa por filtración y se seca a vacío. Rendimiento: 3,43 g (83% d. t.)

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,42 min

EM (ESI-pos): m/z = 195 [M+H]^{+}

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Ejemplo 2A

Piridin-3-il-terc-butilcarbamato

12

A una disolución de 5,0 g (40,9 mmol) de amida de ácido nicotínico en 100 ml de terc-butanol se añaden 18,2 g (40,9 mmol) de acetato de plomo (IV) y la mezcla de reacción se agita a reflujo 4 h. A continuación se filtra la mezcla por tierra de infusorios, el disolvente se elimina a vacío y el residuo se recoge con éter dietílico. La fase orgánica se lava con disolución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, así como disolución saturada de cloruro sódico, se seca sobre sulfato de sodio y se filtra. La disolución se mezcla con pentano y el precipitado formado se separa por filtración y se seca. Rendimiento: 2,79 g (35% d. t.).

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,36 min

EM (ESI-pos): m/z = 195 [M+H]^{+}

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Ejemplo 3A

(3-Formilpiridin-4-il)-terc-butilcarbamato

13

En 75 ml de tetrahidrofurano se disuelven 4,12 g (21,3 mmol) de la aminopiridina protegida con Boc del ejemplo 1A, la disolución se enfría bajo argón hasta -78ºC y se mezcla gota a gota con 34 ml de una disolución 1,5 M (51,1 mmol) de terc-butil-litio en pentano. La adición se realiza de tal manera que la temperatura interna permanece por debajo de -65ºC. Después de la adición completa todavía se agita 1 h a -20ºC. Después, la mezcla se mezcla con 10,6 ml (138,3 mmol) de N,N-dimetilformamida absoluta de manera que durante la adición la temperatura de reacción permanece por debajo de -15ºC. La reacción se agita 16 h a temperatura ambiente, a continuación se mezcla con ácido clorhídrico 1 N con enfriamiento en hielo. El valor de pH se ajusta con carbonato de sodio sólido a pH 7, la mezcla se mezcla con éter etílico de ácido acético y la fase orgánica se lava con agua, así como con disolución saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se separa, se seca sobre sulfato de sodio y el disolvente se elimina a vacío. El producto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice con ciclohexano/éster etílico de ácido acético (3:2 v/v). Se obtienen 3,15 g (63% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,65 min

EM (ESI-pos): m/z = 223 [M+H]^{+}

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Ejemplo 4A

(4-Formilpiridin-3-il)-terc-butilcarbamato

14

En 50 ml de tetrahidrofurano se disuelven 2,7 g (13,9 mmol) de la aminopiridina protegida con Boc del ejemplo 2A, la disolución se enfría bajo argón hasta -78ºC y se mezcla gota a gota con 22,4 ml de una disolución 1,5 M (33,4 mmol) de terc-butil-litio en pentano. La adición se realiza de tal manera que la temperatura interna permanece por debajo de -65ºC. Después de la adición completa todavía se agita 1 h a -20ºC. Después, la mezcla se mezcla con 4,6 ml (41,7 mmol) de N-formilpiperidina de manera que durante la adición la temperatura de reacción permanece por debajo de -15ºC. La reacción se agita 16 h a temperatura ambiente, a continuación se mezcla con ácido clorhídrico 1 N con enfriamiento en hielo. El valor de pH se ajusta con carbonato de sodio sólido a pH 7, la mezcla se mezcla con éter etílico de ácido acético y la fase orgánica se lava con agua, así como con disolución saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se separa, se seca sobre sulfato de sodio y el disolvente se elimina a vacío. El producto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice con ciclohexano/éster etílico de ácido acético (7:3 v/v). Se obtienen 1,54 g (49% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,40 min

EM (ESI-pos): m/z = 223 [M+H]^{+}

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Ejemplo 5A

3-Amino-2-bromopiridina

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15

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En 200 ml de acetonitrilo se disuelven 4,00 g (42,5 mmol) de 3-aminopiridina, se mezclan con 8,32 g (46,8 mmol) de N-bromosuccinimida y se agitan en ausencia de luz 20 h a temperatura ambiente. A continuación se concentra la mezcla de reacción, se suspende en éster etílico de ácido acético y se lava con disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y disolución acuosa saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra. Se purifica mediante cromatografía en columna en gel de sílice con ciclohexano/éster etílico de ácido acético (1:1). Se obtienen 969 mg (12% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 1,08 min

EM (ESI-pos): m/z = 173 [M+H]^{+}

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Ejemplo 6A

Éster terc-butílico de ácido (2E)-3-(3-aminopiridin-2-il)acrílico

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16

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En 15 ml de acetonitrilo se disuelven 950 mg (4,94 mmol) del bromuro del ejemplo 5A, 1900 mg (14,83 mmol) de éster terc-butílico de ácido acrílico, 330 mg (1,50 mmol) de acetato de paladio (II), 450 mg (1,50 mmol) de tri-orto-tolilfosfina y se añaden (9,88 mmol) de etilamina. Se agita 16 h a reflujo. La mezcla de reacción se concentra, se mezcla con éster etílico de ácido acético y se lava con disolución acuosa saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se seca sobre sulfato de sodio, se filtra, se concentra y se purifica mediante cromatografía en columna en gel de sílice con ciclohexano/éster etílico de ácido acético (7:3). Se obtienen 95 mg (6% d. t.) de producto.

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Ejemplo 7A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{4-[(terc-butoxicarbonil)amino]piridin-3-il}acrílico

17

Una suspensión de 3,0 g (13,5 mmol) del aldehído del ejemplo 3A, 3,12 g (14,8 mmol) de dietilfosfonoacetato de metilo y 623 mg (14,8 mmol) de hidróxido de litio monohidratado en 30 ml de tetrahidrofurano se agita 16 h a temperatura ambiente. A continuación se mezcla con 30 ml de agua y se extrae con éster etílico de ácido acético. La fase orgánica se separa, se lava con disolución saturada de cloruro sódico, se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y el disolvente se elimina a vacío. El residuo se seca a 100ºC/1 mbar (0,1 kPa). Se obtienen 3,5 g (89% d. t.) del compuesto del título.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,71 min

EM (ESI-pos): m/z = 279 [M+H]^{+}

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Ejemplo 8A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{3-[(terc-butoxicarbonil)amino]piridin-4-il}acrílico

18

Una suspensión de 1,48 g (6,66 mmol) del aldehído del ejemplo 4A, 1,54 g (7,33 mmol) de dietilfosfonoacetato de metilo y 307 mg (7,33 mmol) de hidróxido de litio monohidratado en 15 ml de tetrahidrofurano se agita 16 h a temperatura ambiente. A continuación se mezcla con 15 ml de agua y se extrae con éster etílico de ácido acético. La fase orgánica se separa, se lava con disolución saturada de cloruro sódico, se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y el disolvente se elimina a vacío. El residuo se seca a 75ºC/1 mbar (0,1 kPa). Se obtienen 1,82 g (98% d. t.) del compuesto del título.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 3,73 min

EM (ESI-pos): m/z = 279 [M+H]^{+}

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Ejemplo 9A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{4-aminopiridin-3-il}acrílico

19

A 0ºC se disuelven 900 mg (3,23 mmol) de la aminopiridina protegida con Boc del ejemplo 7A en 3 ml de ácido trifluoroacético. A continuación se agita la mezcla de reacción 1 h a temperatura ambiente, la mezcla se introduce en disolución de hidrogenocarbonato de sodio enfriada con hielo, se agita 30 min y el precipitado formado se separa por filtración, se lava con agua y se seca. Se obtienen 242 mg (42% d. t.) del compuesto del título.

Otros 105 mg (18% d. t.) de producto pueden aislarse como aceite a partir de las aguas madres mediante ajuste del valor de pH a pH 10 y extracción con éster etílico de ácido acético. Ambas fracciones se diferencian probablemente en su grado de protonación.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 2,67 min

EM (CI-pos): m/z = 179 [M+H]^{+}

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Ejemplo 10A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{3-aminopiridin-4-il}acrílico

20

A temperatura ambiente se disuelven 1,8 g (6,47 mmol) de la aminopiridina protegida con Boc del ejemplo 8A en 18 ml de metanol y la disolución se mezcla con 1 ml de ácido clorhídrico concentrado. A continuación se agita la mezcla de reacción 4 h a 70ºC, la mezcla se introduce en 50 ml de disolución de hidrogenocarbonato de sodio, el valor de pH se ajusta mediante adición de solución cáustica al 20% a pH 14 y se extrae con éster etílico de ácido acético. La fase orgánica se lava con disolución concentrada de cloruro sódico, se seca sobre sulfato de sodio y el disolvente se elimina a vacío. Rendimiento: 935 mg (79% d. t.).

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 2,88 min

EM (ESI-pos): m/z = 179 [M+H]^{+}

Procedimiento general de trabajo [A]: preparación de iminofosforanos a partir de aminopiridinas

Se suspenden en acetonitrilo 1,0 eq de aminopiridina, 2,0 eq de trifenilfosfina, 10,0 eq de tetracloruro de carbono, así como 10,0 eq de trietilamina (aproximadamente 0,33 M referido a la aminopiridina). La mezcla de reacción se agita 16 h a temperatura ambiente y el disolvente se elimina a vacío. El producto bruto se hace reaccionar sin purificación adicional o se purifica mediante cromatografía en columna en gel de sílice.

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Ejemplo 11A

Éster terc-butílico de ácido (2E)-3-{3-[(trifenilfosforaniliden)amino]piridin-2-il}acrílico

21

Partiendo de 95 mg (0,28 mmol) de aminopiridina del ejemplo 6A, según el procedimiento general de trabajo [A] se obtiene el producto bruto que se purifica mediante cromatografía en columna en gel de sílice con ciclohexano/éster etílico de ácido acético (7:3). Se obtienen 70 mg (51% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,83 min

EM (ESI-pos): m/z = 481 [M+H]^{+}

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Ejemplo 12A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{4-[(trifenilfosforaniliden)amino]piridin-3-il}acrílico

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22

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Partiendo de 320 mg (1,8 mmol) de aminopiridina del ejemplo 9A, según el procedimiento general de trabajo [A] se obtienen 1650 mg de producto bruto que se hace reaccionar sin purificación adicional.

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Ejemplo 13A

Éster metílico de ácido de (2E)-3-{3-[(trifenilfosforaniliden)amino]piridin-4-il}acrílico

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23

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Partiendo de 900 mg (4,89 mmol) de aminopiridina del ejemplo 10A, según el procedimiento general de trabajo [A] se obtienen 1910 mg de producto bruto que se hace reaccionar sin purificación adicional.

EM (ESI-pos): m/z = 439 [M+H]^{+}

Procedimiento general de trabajo [B]: preparación de carbodiimidas a partir de iminofosforanos mediante reacción con isocianatos

Se disuelve en diclorometano 1,0 eq de iminofosforano (d. c. como producto bruto), se mezcla con 1,1 eq de isocianato y la mezcla de reacción se agita 16 h a temperatura ambiente. Al producto bruto así obtenido se le hace reaccionar más adelante directamente.

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Ejemplo 14A

Éster terc-butílico de ácido (2E)-3-{3-[({[3-(trifluorometil)fenil]imino}metilen)amino]piridin-2-il}acrílico

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24

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Se hacen reaccionar 65 mg (0,14 mmol) del iminofosforano del ejemplo 11A según el procedimiento general de trabajo [B] con 27 mg (0,14 mmol) de 3-trifluorometilfenilisocianato y al producto bruto se le hace reaccionar más adelante sin purificación.

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Ejemplo 15A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{4-[({[3-(trifluorometil)fenil]imino}metilen)amino]piridin-3-il}acrílico

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25

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Se hacen reaccionar 300 mg (0,34 mmol) del iminofosforano del ejemplo 12A según el procedimiento general de trabajo [B] con 70 mg (0,38 mmol) de 3- trifluorometilfenilisocianato y al producto bruto se le hace reaccionar más adelante sin purificación.

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Ejemplo 16A

Éster metílico de ácido (2E)-3-[4-({[(2-metoxi-5-metilfenil)imino]metilen}amino)piridin-3-il]acrílico

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26

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Se hacen reaccionar 150 mg (0,28 mmol) del iminofosforano del ejemplo 12A según el procedimiento general de trabajo [B] con 67 mg (0,42 mmol) de 1-metoxi-4-metilfenilisocianato y al producto bruto se le hace reaccionar más adelante sin purificación.

\newpage

Ejemplo 17A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{3-[({[3-(trifluorometil)fenil]imino}metilen)amino]piridin-4-il}acrílico

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27

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Se hacen reaccionar 1000 mg (1,37 mmol) de la aminopiridina del ejemplo 13A según el procedimiento general de trabajo [B] con 282 mg (1,51 mmol) de 3-trifluorometilfenilisocianato y al producto bruto se le hace reaccionar más adelante sin purificación.

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Ejemplo 18A

Éster metílico de ácido (2E)-3-{4-[({[2-metoxi-5-(trifluorometil)fenil]imino}metilen)amino]piridin-3-il}acrílico

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28

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Se hacen reaccionar 1017 mg (1,90 mmol) del iminofosforano del ejemplo 12A según el procedimiento general de trabajo [B] con 413 mg (1,90 mmol) de 1-metoxi-4-trifluorometilfenilisocianato y al producto bruto se le hace reaccionar más adelante sin purificación.

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Ejemplo 19A

2-Isocianato-1-metoxi-4-(trifluorometil)benceno

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29

En 100 ml de diclorometano se disuelven 3 g (15,69 mmol) de 2-metoxi-5-trifluorometilanilina y se mezclan con 6,73 g (31,39 mmol) de 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno. A 0-5ºC se añaden gota a gota 2,24 g (11,3 mmol) de éster triclorometílico de ácido clorofórmico, disuelto en 50 ml de diclorometano, y se agita 30 min a 0ºC, así como 60 min a temperatura ambiente. A 0ºC se lava con ácido clorhídrico 1 N, agua en hielo y disolución de hidrogenocarbonato de sodio. El producto se obtiene después de secar sobre sulfato de magnesio y separar por destilación el disolvente. A continuación se hace reaccionar el isocianato sin purificación adicional en las siguientes reacciones. Rendimiento: 3 g (88% d. t.)

Procedimiento general de trabajo [C]: reacción de carbodiimidas con fenilpiperazinas para dar ésteres de ácido dihidropiridopirimidinilacético

Se disuelve en diclorometano 1,0 eq de carbodiimida (d. c. como producto bruto), se mezcla con 1,05 eq de fenilpiperazina, así como una punta de espátula de gel de sílice, y la mezcla de reacción se agita 16 h a reflujo. A continuación se elimina a vacío el disolvente y el producto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice o mediante HPLC preparativa (procedimiento 2).

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Ejemplo 20A

Éster metílico de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

30

Partiendo de 250 mg (0,34 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 17A y 65 mg (0,36 mmol) de 4-fluorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación doble mediante HPLC preparativa se obtienen 64 mg (33% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,42 min

EM (ESI-pos): m/z = 528 [M+H]^{+}

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Ejemplo 21A

Éster metílico de ácido {2-[4-(3-metilfenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

31

Partiendo de 250 mg (0,34 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 17A y 63 mg (0,36 mmol) de 3-metilfenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 88 mg (48% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,42 min

EM (ESI-pos): m/z = 524 [M+H]^{+}

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Ejemplo 22A

Éster metílico de ácido {2-[4-(3-clorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

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32

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Partiendo de 250 mg (0,34 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 17A y 71 mg (0,36 mmol) de 3-clorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 102 mg (53% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,65 min

EM (ESI-pos): m/z = 544 [M+H]^{+}

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Ejemplo 23A

Éster metílico de ácido {2-[4-(3-metoxifenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

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33

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Partiendo de 250 mg (0,34 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 17A y 69 mg (0,36 mmol) de 3-metoxifenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 90 mg (46% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,40 min

EM (ESI-pos): m/z = 540 [M+H]^{+}

\newpage

Ejemplo 24A

Éster metílico de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il}acético

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34

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Partiendo de 107 mg (0,31 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 15A y 56 mg (0,31 mmol) de 4-fluorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 50 mg (28% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,60 min

EM (ESI-pos): m/z = 528 [M+H]^{+}

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Ejemplo 25A

Éster metílico de ácido {2-[4-(3-metoxifenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il}acético

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35

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Partiendo de 107 mg (0,31 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 15A y 59 mg (0,31 mmol) de 3-metoxifenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 40 mg (23% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,60 min

EM (ESI-pos): m/z = 540 [M+H]^{+}

\newpage

Ejemplo 26A

Éster terc-butílico de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,2-d]pirimidin-4-il}acético

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36

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Partiendo de 53 mg (0,14 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 14A y 24 mg (0,14 mmol) de 4-fluorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación en HPLC preparativa se obtienen 38 mg (48% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,87 min

EM (ESI-pos): m/z = 570 [M+H]^{+}

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Ejemplo 27A

Éster metílico de ácido de [2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-(2-metoxi-5-metilfenil)-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il]acético

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37

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Partiendo de 91 mg (0,28 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 16A y 76 mg (0,42 mmol) de 4-fluorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 14 mg (9% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,23 min

EM (ESI-pos): m/z = 504 [M+H]^{+}

\newpage

Ejemplo 28A

Éster metílico de ácido de {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[2-metoxi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il}acético

38

Partiendo de 565 mg (1,50 mmol) de la carbodiimida del ejemplo 18A y 297 mg (1,65 mmol) de 4-fluorofenilpiperazina, según el procedimiento general de trabajo [C] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 90 mg (10% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,44 min

EM (ESI-pos): m/z = 558 [M+H]^{+}

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Ejemplos de realización Procedimiento general de trabajo [D]: saponificación de ésteres

Se disuelve en dioxano 1,0 equivalente del éster (aprox. disolución 0,5 M), luego se añaden 3,0 equivalentes de solución cáustica 1 N y la mezcla de reacción se agita durante 16 h a 50ºC. A continuación, la mezcla se ajusta a pH 5 con ácido clorhídrico 1 N, el disolvente se elimina a vacío y el producto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice o HPLC preparativa.

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Ejemplo 1

Clorhidrato de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

39

Partiendo de 44 mg (0,08 mmol) del éster del ejemplo 20A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 24 mg (52% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,19 min

EM (ESI-pos): m/z = 514 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN+DMSO-d_{6}): \delta [ppm] = 8,34 (s, 1H); 8,11 (d, 1H); 7,62 (s, 1H); 7,47 (t, 1H); 7,39-7,37 (m, 2H); 7,07 (t, 1H); 6,99 (t, 1H); 6,91-6,87 (m, 1H); 5,27-5,23 (m, 1H); 3,58-3,53 (m, 2H), otros protones debajo de la señal del disolvente o agua.

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Ejemplo 2

Clorhidrato de ácido {2-[4-(3-metilfenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

40

Partiendo de 70 mg (0,13 mmol) del éster del ejemplo 21A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 51 mg (71% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,21 min

EM (ESI-pos): m/z = 510 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN+DMSO-d_{6}): \delta [ppm] = 8,34 (s, 1H); 8,12 (d, 1H); 7,62 (s, 1H); 7,44 (t, 1H); 7,38-7,36 (m, 2H); 7,10 (t, 1H); 7,05 (d, 1H); 6,89-6,88 (m, 1H); 6,72-6,64 (m, 3H); 5,26-5,22 (m, 1H); 3,59-3,53 (m, 2H); 3,08-2,95 (m, 3H); 2,72-2,65 (m, 1H); 2,48-2,46 (m, 1H); 2,25 (s, 3H).

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Ejemplo 3

Clorhidrato de ácido {2-[4-(3-clorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

41

Partiendo de 84 mg (0,15 mmol) del éster del ejemplo 22A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 44 mg (52% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,43 min

EM (ESI-pos): m/z = 530 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN+DMSO-d_{6}): \delta [ppm] = 8,34 (s, 1H); 8,12 (d, 1H); 7,62 (s, 1H); 7,46 (t, 1H); 7,39-7,35 (m, 2H); 7,19 (t, 1H); 7,05 (d, 1H); 6,89-6,88 (m, 1H); 6,83-6,79 (m, 2H); 5,26-5,22 (m, 1H); 3,59-3,53 (m, 2H); 3,13-3,02 (m, 3H); 2,72-2,65 (m, 1H); 2,48-2,41 (m, 1H).

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Ejemplo 4

Clorhidrato de ácido {2-[4-(3-metoxifenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il}acético

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42

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Partiendo de 72 mg (0,13 mmol) del éster del ejemplo 23A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 48 mg (67% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,18 min

EM (ESI-pos): m/z = 526 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN+DMSO-d_{6}): \delta [ppm] = 8,35 (s, 1H); 8,12 (d, 1H); 7,56 (s, 1H); 7,46 (t, 1H); 7,39-7,36 (m, 2H); 7,12 (t, 1H); 7,05 (d, 1H); 6,50-6,47 (m, 1H); 6,43-6,39 (m, 2H); 5,26-5,22 (m, 1H); 3,73 (s, 3H); 3,59-3,52 (m, 2H); 3,09-2,98 (m, 3H); 2,72-2,65 (m, 1H); 2,48-2,46 (m, 1H).

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Ejemplo 5

Clorhidrato de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il}acético

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43

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Partiendo de 38 mg (0,07 mmol) del éster del ejemplo 24A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 24 mg (67% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,24 min

EM (ESI-pos): m/z = 514 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN): \delta [ppm]= 8,22 (d, 1H); 8,18 (s, 1H); 7,45 (s, 1H); 7,40-7,36 (m, 3H); 7,03-6,83 (m, 5H); 5,28 (t, 1H); 3,603-3,50 (m, 4H); 2,99-2,90 (m, 4H); 2,78 (dd, 1H); 2,57 (dd, 1H).

\newpage

Ejemplo 6

Ácido {2-[4-(3-metoxifenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il}acético

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44

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Partiendo de 27 mg (0,05 mmol) del éster del ejemplo 25A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 19 mg (72% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,24 min

EM (ESI-pos): m/z = 526 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN): \delta [ppm] = 8,24 (d, 1H); 8,18 (s, 1H); 7,45 (s, 1H); 7,40-7,35 (m, 3H); 7,12 (t, 1H); 7,01 (d, 1H); 6,45 (d, 1H); 6,41-6,38 (m, 2H); 5,28 (t, 1H); 3,72 (s, 3H); 3,60-3,54 (m, 4H); 3,07-2,78 (m, 4H); 2,55 (dd, 2H).

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Ejemplo 7

Clorhidrato de ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[3-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[3,2-d]pirimidin-4-il}acético

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45

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Partiendo de 25 mg (0,04 mmol) del éster del ejemplo 26A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 16 mg (66% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,30 min

EM (ESI-pos): m/z = 514 [M+H-HCl]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN): \delta [ppm] = 8,12 (d, 1H); 7,60 (s, 1H); 7,45-7,39 (m, 4H); 7,22 (dd, 1H); 6,96 (t, 2H); 6,89-6,86 (m, 2H); 5,18 (dd, 1H); 3,68-3,59 (m, 4H); 3,06-2,99 (m, 4H); 2,76 (dd, 1H); 2,63 (dd, 1H).

\newpage

Ejemplo 8

Ácido [2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-(2-metoxi-5-metilfenil)-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il]acético

46

Partiendo de 12 mg (0,02 mmol) del éster del ejemplo 27A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 11 mg (97% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 1): R_{t} = 4,05 min

EM (ESI-pos): m/z = 490 [M+H]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN): \delta [ppm] = 8,14-8,10 (m, 2H); 7,15-6,81 (m, 8H); 4,86-4,84 (m, 1H); 3,77-3,73 (m, 4H); 3,50 (s, 3H); 2,96-2,92 (m, 2H); 2,78-2,74 (m, 2H); 2,49 (dd, 1H); 2,50-2,48 (m, 1H, parcialmente bajo la señal de CH_{3}); 2,44 (s, 3H).

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Ejemplo 9

Ácido {2-[4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il]-3-[2-metoxi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-4-il} acético

47

Partiendo de 80 mg (0,14 mmol) del éster del ejemplo 28A, después de la reacción según el procedimiento general de trabajo [D] y la purificación mediante HPLC preparativa se obtienen 27 mg (35% d. t.) de producto.

HPLC (procedimiento 3): R_{t} = 2,31 min

EM (ESI-pos): m/z = 543 [M+H]^{+}

RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN): \delta [ppm] = 8,26-8,20 (m, 2H); 7,55 (d, 1H); 7,16 (d, 1H); 7,10-6,78 (m, 6H); 5,00 (dd, 1H); 3,88-3,80 (m, 4H); 3,54 (s, 3H); 3,03 (dd, 1H); 2,96-2,91 (m, 2H); 2,79-2,77 (m, 2H); 2,55 (dd, 1H).

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B. Valoración de la eficacia fisiológica

El efecto in vitro de los compuestos según la invención puede mostrarse en los siguientes ensayos:

Prueba de citopatogenia anti-CMVH (anti-citomegalovirus humano)

Los compuestos de prueba se utilizan como disoluciones 50 milimolar (mM) en dimetilsulfóxido (DMSO). Ganci-
clovir®, Foscarnet® y Cidofovir® sirven de compuestos de referencia. Después de la adición de respectivamente 2 \mul de las disoluciones madre de DMSO 50, 5, 0,5 y 0,05 mM a cada 98 \mul de medio de cultivo celular en la fila 2 A-H en determinación doble se realizan diluciones 1:2 cada vez con 50 \mul de medio hasta la fila 11 de la placa de 96 pocillos. Los pocillos en las filas 1 y 12 contienen cada uno 50 \mul de medio. Entonces, en cada pocillo se pipetean 150 \mul de una suspensión de 1 x 10^{4} células (fibroblastos de prepucio humano [NHDF]) (fila 1 = control de células) o en las filas 2-12 una mezcla de células de NHDF infectadas con CMVH y sin infectar (M.O.I. = 0,001 - 0,002), es decir, 1-2 células infectadas en 1000 células no infectar. La fila 12 (sin sustancia) sirve de control del virus. Las concentraciones de prueba finales se encuentran a 250 - 0,0005 \muM. Las placas se incuban durante 6 días a 37ºC/5% de CO_{2}, es decir, hasta que todas las células estén infectadas en los controles de virus (100% de efecto citopatogénico [ECP]). Entonces, los pocillos se fijan y se tiñen mediante la adición de una mezcla de formalina y colorante de Giemsa (30 minutos), se lavan con agua bidestilada y se secan en una estufa de secado a 50ºC. Después de evalúan visualmente las placas con un microscopio superior (Plaque Multiplier de la empresa Technomara).

De las placas de prueba de determinaron los siguientes datos:

\quad: CC_{50} (NHDF) = concentración de sustancia en \muM a la que no puede reconocerse ningún efecto citostático visible en las células en comparación con controles de células sin tratar;

\quad: CE_{50} (CMVH) = concentración de sustancia en \muM que inhibe el 50% el ECP (efecto citopático) en comparación con controles de virus sin tratar;

\quad: IS (índice de selectividad) = CC_{50} (NHDF)/CE_{50} (CMVH).

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En la tabla A se reproducen los datos de acción in vitro representativos para los compuestos según la invención:

TABLA A

48

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La idoneidad de los compuestos según la invención para el tratamiento de infecciones por CMVH puede mostrarse en el siguiente modelo animal:

Modelo Gelfoam® de xenoinjerto de CMVH Animales

Se compran ratones inmunodeficientes hembra de 3-4 semanas de edad (16-18 g), Fox Chase SCID o Fox Chase SCID-NOD o SCID-beige, de criadores comerciales (Taconic M+B, Jackson, EE.UU.). Los animales se mantienen en condiciones estériles (incluyendo la paja y el pienso) en aisladores.

Cultivo de virus

El citomegalovirus humano (CMVH), cepa Davis o AD169, se cultiva in vitro en fibroblastos de prepucio embrionario humano (células de NHDF). Después de la infección de las células de NHDF con una multiplicidad de la infección (M.O.I) de 0,01-0,03, las células infectadas por el virus se recogen 5-10 días después y se conservan en presencia de medio mínimo esencial (MEM), 10% de suero bovino fetal (SBF) con 10% de DMSO a -40ºC. Después de la dilución seriada en etapas de diez de las células infectadas por el virus, la determinación de los títulos se realiza en placas de 24 pocillos de células de NHDF confluentes después de la tinción vital con rojo neutro.

Preparación de las esponjas, trasplante, tratamiento y evaluación

Esponjas de colágeno de 1x1x1 cm de tamaño (Gelfoam®; empresa Peasel & Lorey, nº de catálogo 407534; K.T. Chong y col., Abstracts of 39th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1999, pág. 439) se humedecen inicialmente con solución salina tamponada con fosfato (PBS), las burbujas de aire incluidas se eliminan mediante desgasificación y luego se conservan en MEM + 10% de SBF. 1 x 10^{6} células de NHDF infectadas por el virus (infección con M.O.I de Davis de CMVH o AD169 de CMVH = 0,03) se desprenden 3 horas después de la infección y se añaden gota a gota en 20 \mul de MEM, 10% de SBF sobre una esponja húmeda. Aprox. 16 horas después, las esponjas cargadas con las células infectadas se incuban con 25 \mul de PBS/0,1% de BSA/DTT 1 mM con 5 ng/\mul de factor de crecimiento de fibroblastos básico (FGFb). Para el trasplante, los ratones inmunodeficientes se anestesian con avertina o con una mezcla de ketamina/xilazina/acepromazina, se quita la piel de la espalda con ayuda de una cuchilla, la epidermis se abre 1-2 cm, se quita y las esponjas húmedas se trasplantan debajo de la piel de la espalda. La herida de la operación se cierra con pegamento para tejidos. 6 horas después del trasplante, los ratones pueden tratarse por primer vez (en el día de la operación se trata una vez). En los siguientes días se tratan peroralmente con sustancia durante un periodo de tiempo de 8 días tres veces al día (7:00 horas y 14:00 horas y 19:00 horas), dos veces al día (8:00 horas y 18:00 horas) o una vez al día (14:00 horas). La dosis diaria asciende a, por ejemplo, 3 ó 10 ó 30 ó 60 ó 100 mg/kg de peso corporal, el volumen de administración a 10 ml/kg de peso corporal. La formulación de las sustancias se realiza en forma de una suspensión de tilosa al 0,5% con 2% de DMSO o una suspensión de tilosa al 0,5%. 9 días después del trasplante y 16 horas después de la última administración de sustancia, los animales se sacrifican de forma indolora y se extrae la esponja. Las células infectadas por el virus se liberan de la esponja mediante digestión con colagenasa (330 U/1,5 ml) y se conservan en presencia de MEM, 10% de suero bovino fetal, 10% de DMSO a -140ºC. La evaluación se realiza después de la dilución seriada en etapas de diez de las células infectadas por el virus mediante la determinación de los títulos en placas de 24 pocillos de células de NHDF confluentes después de la tinción vital con rojo neutro. Se determina el número de células infectadas o partículas virales infecciosas (ensayo de centro infeccioso) después del tratamiento con la sustancia en comparación con el grupo de control tratado con placebo.

Ensayo de inhibición de CYP

Para investigar la inhibición de CYP3A4 basada en el mecanismo (irreversible), la sustancia de prueba se incuba en distintas concentraciones con microsomas de hígado humano (2 mg/ml de proteína microsomal) en tampón fosfato de potasio de pH 7,4 con adición de sistema generador de NADPH (NADP^{+}, glucosa-6-fosfato y glucosa-6-fosfatodeshidrogenasa) a 37ºC. A distintos momentos de tiempos se extraen 2 alícuotas de la incubación.

La primera alícuota se incuba 1:50 en una nueva disolución de incubación (tampón fosfato, sistema generador de NADPH y midazolam 10 \muM) durante otros 10 min a 37ºC. Después se detiene la incubación con acetonitrilo en hielo, la proteína se centrifuga en la centrífuga a 15000 g y el sobrenadante se analiza con HPLC/EM según procedimientos habituales para la formación de 1'-hidroximidazolam.

La segunda alícuota se detiene con acetonitrilo en hielo y se analiza con HPLC/UV/EM para la sustancia de prueba restante.

De ambos conjuntos de datos analíticos se determinan parámetros típicos de inhibición irreversible (k_{inact}, K_{i} y relación de reparto r) y con esto se valora la sustancia de prueba (véase A. Madan y col., en A.D. Rodrigues (ed.) "Drug-Drug Interaction" en "Drugs and the Pharmaceutical Science", vol. 116, ISBN 0-8247-0283,2, Marcel Dekker Inc., Nueva York, 2002.).

C. Ejemplos de realización de composiciones farmacéuticas

Los compuestos según la invención pueden convertirse en preparaciones farmacéuticas de la siguiente manera:

Comprimidos

Composición:

100 mg del compuesto del ejemplo 1, 50 mg de lactosa (monohidratada), 50 mg de almidón de maíz (nativo), 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP 25) (empresa BASF, Ludwigshafen, Alemania) y 2 mg de estearato de magnesio.

Peso del comprimido 212 mg. Diámetro 8 mm, radio de curvatura 12 mm.

Preparación:

La mezcla del principio activo, lactosa y almidón se granula con una disolución al 5% (m/m) de PVP en agua. El gránulo se mezcla después del secado con el estearato de magnesio durante 5 min. Esta mezcla se prensa con una prensa de comprimidos habitual (forma de los comprimidos, véase anteriormente). Como valor de consigna para la compresión se usa una fuerza de compresión de 15 kN.

Suspensión que puede administrarse por vía oral

Composición:

1000 mg del compuesto del ejemplo 1, 1000 mg de etanol (96%), 400 mg de Rhodigel (goma xantana de la empresa FMC, Pensilvania, EE.UU.) y 99 g de agua.

Una monodosis de 100 mg del compuesto según la invención se corresponde con 10 ml de suspensión oral.

Preparación:

El Rhodigel se suspende en etanol, el principio activo se añade a la suspensión. Con agitación se realiza la adición del agua. Hasta terminar el hinchamiento del Rhodigel se agita aproximadamente 6 h.

Disolución que puede administrarse por vía intravenosa

Composición:

10-500 mg del compuesto de ejemplo 1, 15 g de polietilenglicol 400 y 250 g de agua para fines de inyección.

Preparación:

El compuesto del ejemplo 1 se disuelve junto con polietilenglicol 400 en el agua con agitación. La disolución se esteriliza por filtración (diámetro de poro 0,22 \mum) y se envasa en condiciones asépticas en botellas de infusión esterilizadas por calor. Éstas se cierran con tapones de infusión y tapas rebordeadas.

Claims

1. Compuesto de fórmula

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en la que

\quad: Ar representa arilo, pudiendo estar arilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por alquilo, alcoxi, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi, amino, alquilamino, aminocarbonilo y nitro,

\quad: pudiendo estar alquilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, amino, alquilamino, hidroxi y arilo,

\quad: Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} representan CH o N,

\quad: R^{1} representa hidrógeno, amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo,

\quad: R^{2} representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, ciano, halógeno, nitro o trifluorometilo,

\quad: R^{3} representa amino, alquilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, ciano, halógeno, nitro, trifluorometilo, alquilsulfonilo o alquilaminosulfonilo o

\quad: R^{4} representa hidrógeno o alquilo,

\quad: R^{5} representa hidrógeno o alquilo o

\quad: R^{6} representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro y

\quad: R^{7} representa hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquiltio, formilo, hidroxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, trifluorometilo, halógeno, ciano, hidroxi o nitro,

o una de sus sales, sus solvatos o los solvatos de sus sales.

2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque

\quad: Ar representa fenilo, pudiendo estar fenilo sustituido con 1 a 3 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxicarbonilo, alquil C_{1}-C_{6}-carbonilo, alcoxi C_{1}-C_{6}-carbonilo, trifluorometilo, flúor, cloro, bromo, ciano, hidroxi, amino, alquil C_{1}-C_{6}-amino y nitro,

\quad: Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} representan CH o N,

\quad: Q^{4} representa CH,

\quad: R^{1} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, alquiltio C_{1}-C_{3}, flúor o cloro,

\quad: R^{2} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, alquiltio C_{1}-C_{3}, flúor o cloro,

\quad: R^{3} representa alquilo C_{1}-C_{4}, ciano, flúor, cloro, nitro, trifluorometilo o alquil C_{1}-C_{3}-sulfonilo, o

\quad: R^{4} representa hidrógeno o metilo,

\quad: R^{5} representa hidrógeno,

\quad: R^{6} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, trifluorometilo, flúor, cloro, ciano, hidroxi o nitro y

\quad: R^{7} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{3}, alcoxi C_{1}-C_{3}, flúor, cloro, ciano o hidroxi.

3. Compuesto según la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque

\quad: Ar representa fenilo, pudiendo estar fenilo sustituido con 1 a 2 sustituyentes, seleccionándose los sustituyentes independientemente entre sí del grupo constituido por metilo, metoxi, flúor y cloro,

\quad: Q^{1}, y Q^{3} representan CH o N,

\quad: Q^{4} representa CH,

\quad: R^{1} representa hidrógeno, metilo, metoxi, metiltio, flúor o cloro,

\quad: R^{2} representa hidrógeno,

\quad: R^{3} representa metilo, iso-propilo, terc-butilo, ciano, flúor, cloro, nitro o trifluorometilo,

\quad: R^{4} representa hidrógeno,

\quad: R^{5} representa hidrógeno,

\quad: R^{6} representa hidrógeno, aminocarbonilo, flúor, cloro, ciano o hidroxi y

\quad: R^{7} representa hidrógeno.

4. Compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque

\quad: Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} representan CH o N,

\quad: Q^{4} representa CH,

\quad: R^{1} representa hidrógeno, metilo o metoxi,

\quad: R^{2} representa hidrógeno,

\quad: R^{3} representa metilo, terc-butilo, cloro o trifluorometilo,

\quad: R^{4} representa hidrógeno,

\quad: R^{5} representa hidrógeno,

\quad: R^{6} representa hidrógeno y

\quad: R^{7} representa hidrógeno.

5. Procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, caracterizado porque un compuesto de fórmula

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en la que

\quad: Ar, Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, R^{1}, R^{2},R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{7} tienen el significado especificado en la reivindicación 1 y

\quad: R^{8} representa alquilo, preferiblemente metilo o etilo o terc-butilo,

se hace reaccionar con una base o un ácido.

6. Compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 4 para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades.

7. Fármaco que contiene un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 4 en combinación con un coadyuvante inerte no tóxico farmacéuticamente adecuado.

8. Uso de un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 4 para preparar un fármaco para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones por virus.

9. Uso según la reivindicación 8, caracterizado porque la infección por virus es una infección por el citomegalovirus humano (CMVH) u otro representante del grupo de los herpesvirus.

10. Fármaco según la reivindicación 7 para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones por virus.