ES2320436T3 - Compuestos heterociclicos que inhiben la adhesion de leucocitos mediada por integrinas alfa-4. - Google Patents

Compuestos heterociclicos que inhiben la adhesion de leucocitos mediada por integrinas alfa-4. Download PDF

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Ying-Zi Xu
Frank Stappenbeck
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Eugene D. Thorsett
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Abstract

Un compuesto de Fórmula (I): ** ver fórmula** en la que cada X es independientemente fluoro, cloro o bromo; p es un número entero de 0 a 3; R 1 y R 3 junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, 2,5dihidropirrol-1-ilo, piperidinilo o 1,2,3,6-tetrahidro-piridin-1-ilo; R 2 se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo inferior que tiene de 1 a 5 átomos de carbono, alquenilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono y alquilencicloalquilo inferior en el que el grupo alquileno tiene de 1 a 4 átomos de carbono y el grupo cicloalquilo tiene de 3 a 6 átomos de carbono, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Description

Compuestos heterocíclicos que inhiben la adhesión de leucocitos mediada por integrinas \alpha_{4}.
Antecedentes de la invención Campo técnico de la invención
La presente invención se refiere a compuestos que inhiben la adhesión de leucocitos y, en particular, la adhesión de leucocitos mediada por integrinas \alpha_{4} en la que la integrina \alpha_{4} es preferentemente VLA-4.
\vskip1.000000\baselineskip
Referencias
En esta solicitud se citan las siguientes publicaciones, patentes y solicitudes de patente como números en superíndice:
^{1}Hemler y Takada, Publicación de Solicitud de Patente Europea nº 330.506, publicada el 30 de agosto de
1989.
^{2}Elices, y col., Cell, 60:577-584 (1990).
^{3}Springer, Nature, 346:425-434 (1990).
^{4}Osborne, Cell, 62:3-6 (1990).
^{5}Vedder, y col., Surgery, 106:509 (1989).
^{6}Pretolani, y col., J. Exp. Med., 180:795 (1994).
^{7}Abraham, y col., J. Clin. Invest., 93:776 (1994).
^{8}Mulligan, y col., J. Immunology, 150:2407 (1993).
^{9}Cybulsky, y col., Science, 251:788 (1991).
^{10}Li, y col., Arterioscler. Thromb., 13:197 (1993).
^{11}Sasseville, y col., Am. J. Path., 144:27 (1994).
^{12}Yang, y col., Proc. Nat. Acad. Science (USA), 90:10494 (1993).
^{13}Burkly, y col., Diabetes, 43:529 (1994).
^{14}Baron, y col., J. Clin. Invest., 93:1700 (1994).
^{15}Hamann, y col., J. Immunology, 152:3283 (1994).
^{16}Yednock, y col., Nature, 356:63 (1992).
^{17}Baron, y col., J. Exp. Med., 177:57 (1993).
^{18} van Dinther-Janssen, y col., J. Immunology, 147:4207 (1991).
^{19} van Dinther-Janssen, y col., Annals. Rheumatic Dis., 52:672 (1993).
^{20}Elices, y col., J. Clin. Invest., 93:405 (1994).
^{21}Postigo, y col., J. Clin. Invest., 89:1445 (1991).
^{22}Paul, y col., Transpl. Proceed., 25:813 (1993).
^{23}Okarhara, y col., Can. Res., 54:3233 (1994).
^{24}Paavonen, y col., Int. J. Can., 58:298 (1994).
^{25}Schadendorf, y col., J. Path., 170:429 (1993).
^{26}Bao, y col., Diff., 52:239 (1993).
^{27}Lauri, y col., British J. Cancer, 68:862 (1993).
^{28}Kawaguchi, y col., Japanese J. Cancer Res., 83:1304 (1992).
^{29}Konradi, y col., PCT/US00/01.686, presentada el 21 de enero de 2000.
El documento WO-02/08.201 describe derivados de aminoácidos \beta que inhiben la adhesión de leucocitos mediada por VLA-4.
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Estado de la técnica
VLA-4 (también referida como integrina \alpha_{4}\beta_{1} y CD49d/CD29), identificada por primera vez por Hemler y Takada,^{1} es un miembro de la familia de las integrinas \beta_{1} de receptores de la superficie celular, cada una de las cuales comprende dos subunidades, una cadena \alpha y una cadena \beta. VLA-4 contiene una cadena \alpha_{4} y una cadena \beta_{1}. Existen al menos nueve integrinas \beta_{1}, todas las cuales comparten la misma cadena \beta_{1} y cada una de las cuales tiene una cadena \alpha distinta. Estos nueve receptores se unen todos a diferente complemento de las diversas moléculas de matriz celular, como fibronectina, laminina y colágeno. VLA-4, por ejemplo, se une a fibronectina. VLA-4 también se une a moléculas no matriciales que se expresan mediante células endoteliales y otras. Estas moléculas no matriciales incluyen VCAM-1, que se expresa sobre células endoteliales de la vena umbilical activadas por citoquina en cultivo. Distintos epítopos de VLA-4 son responsables de las actividades de unión de la fibronectina y VCAM-1 y cada actividad ha demostrado que se inhibe independientemente.^{2}
La adhesión intercelular mediada por VLA-4 y otros receptores de la superficie celular se asocia con una serie de respuestas inflamatorias. En el sitio de una lesión u otro estímulo inflamatorio, las células endoteliales vasculares expresan moléculas que son adhesivas para leucocitos. La mecánica de adhesión de leucocitos a células endoteliales implica, en parte, el reconocimiento y unión de receptores de la superficie celular en leucocitos a las moléculas correspondientes de la superficie celular en células endoteliales. Una vez unidos, los leucocitos migran a través de la pared del vaso sanguíneo para entrar en el sitio dañado y liberan mediadores químicos para combatir la infección. Para revisiones de receptores de adhesión del sistema inmunitario, véase, por ejemplo, Springer^{3} y
Osborn.^{4}
Los trastornos inflamatorios del encéfalo, como encefalomielitis autoinmune experimental (EAE), esclerosis múltiple (EM) y meningitis, son ejemplos de trastornos del sistema nervioso central en los que el mecanismo de adhesión entre endotelio/leucocitos da como resultado la destrucción de tejido encefálico por lo demás sano. Grandes cantidades de leucocitos migran a través de la barrera hematoencefálica (BHE) en sujetos con estas enfermedades inflamatorias. Los leucocitos liberan mediadores tóxicos que causan un extenso daño en los tejidos que produce deterioro de la conducción nerviosa y parálisis.
En otros sistemas orgánicos, el daño en los tejidos se produce también a través de un mecanismo de adhesión que produce migración o activación de leucocitos. Por ejemplo, se ha demostrado que la agresión inicial que sigue a una isquemia miocárdica en tejido cardíaco puede complicarse adicionalmente por la entrada de leucocitos en el tejido dañado que provoca una agresión todavía mayor (Vedder y col.).^{5} Otras dolencias inflamatorias o médicas mediadas por un mecanismo de adhesión incluyen, a modo de ejemplo, asma^{6-8}, enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis,^{9-10} demencia por SIDA,^{11} diabetes^{12-14} (incluyendo diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria intestinal^{15} (incluyendo colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn), esclerosis múltiple,^{16-17} artritis reumatoide,^{18-21} trasplante de tejidos,^{22} metástasis tumorales,^{23-28} meningitis, encefalitis, accidente cerebrovascular y otros traumatismos cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, psoriasis, isquemia miocárdica y lesión pulmonar mediada por leucocitos como la que tiene lugar en síndrome de distrés respiratorio del adulto.
Las aminopirimidinas sustituidas, como clase, se han desvelado como inhibidoras de unión de VLA-4 a VCAM-1 y, en consecuencia, exhiben propiedades antiinflamatorias.^{29} Aunque estos compuestos poseen propiedades antagonistas a dicha unión, la biodisponibilidad potenciada de estos compuestos aumentaría su eficacia.
\vskip1.000000\baselineskip
Resumen de la invención
La presente invención se dirige al descubrimiento de que ciertos compuestos de N-[2-N',N'-dietilamino-5-aminosulfonilfenilpirimidin-4-il]-p-carbomiloxi-fenilalanina poseen una biodisponibilidad inesperadamente superior, según se mide por su ABC, en comparación con otros compuestos de aminopirimidina sustituida desvelados precedentemente.
\newpage
En uno de sus aspectos de composición, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I):
1
en la que cada X es independientemente fluoro, cloro o bromo;
p es un número entero de 0 a 3;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, 2,5-dihidropirrol-1-ilo, piperidinilo o 1,2,3,6-tetrahidropiridin-1-ilo;
R^{2} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo inferior, alquenilo inferior y alquilencicloalquilo inferior;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En una forma de realización preferida, R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (II):
2
en la que cada X se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en fluoro y cloro;
m es un número entero igual a 1 ó 2;
R^{2} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo inferior, alquenilo inferior y alquilencicloalquilo inferior;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En una forma de realización preferida en particular, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (III)
3
en la que cada X es independientemente fluoro o cloro;
n es cero o uno;
R^{2} es -CH_{2}-R' en el que R' se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, metilo o -CH=CH_{2};
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En otro de sus aspectos de composición, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (IV):
4
en la que cada X es independientemente fluoro, cloro o bromo;
p es un número entero de 0 a 3;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, 2,5-dihidropirrol-1-ilo, piperidinilo o 1,2,3,6-tetrahidropiridin-1-ilo;
R^{2} es alquinilo inferior;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
\global\parskip0.950000\baselineskip
En una forma de realización preferida, R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo y R^{2} es propargilo.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (V):
5
en la que cada X se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en fluoro y cloro;
m es un número entero igual a 1 ó 2;
R^{2} es alquinilo inferior;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En una forma de realización preferida en particular, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (VI)
6
en la que cada X es independientemente fluoro o cloro;
n es cero o uno;
R^{2} es alquinilo inferior;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Los compuestos de N-[2-N',N'-dietilamino-5-aminosulfonilfenilpirimidin-4-il]-p-carbomiloxi-fenilalanina dentro del ámbito de la presente invención incluyen los expuestos en la Tabla I del modo siguiente:
TABLA I
7 
\newpage
\global\parskip1.000000\baselineskip
Los compuestos específicos dentro del ámbito de la presente invención incluyen los siguientes compuestos. Según se usa más adelante, estos compuestos se denominan basándose en los derivados de fenilalanina pero, alternativamente, estos compuestos podrían haberse denominado basándose en derivados de N-[2-N',N'-dietilamino-5-aminosulfonilfenil-pirimidin-4-il]-p-carbomiloxifenilalanina o en derivados de ácido 2-{2-dietilamino-5-[(bencenosulfonil)metilamino]-pirimidin-4-ilamino}-p-carbamoiloxi-fenil)propiónico.
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N'-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina; y
sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un soporte farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos definidos en la presente memoria descriptiva.
En uno de sus aspectos de procedimiento, la presente invención se dirige a un procedimiento para tratar una enfermedad mediada al menos en parte por integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4, en un paciente, procedimiento que comprende la administración de una composición farmacéutica que comprende un soporte farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de esta invención.
Los compuestos y composiciones farmacéuticas de la presente invención son útiles para tratar dolencias de enfermedad mediadas al menos en parte por integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4 o adhesión de leucocitos. Dichas dolencias de enfermedad incluyen, a modo de ejemplo, asma, enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis, demencia por SIDA, diabetes (incluyendo diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria intestinal (incluyendo colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn), esclerosis múltiple, artritis reumatoide, trasplante de tejidos, metástasis tumoral, meningitis, encefalitis, accidente cerebrovascular y otros traumatismos cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, psoriasis, isquemia miocárdica y lesión pulmonar aguda mediada por leucocitos como la que sucede en el síndrome de distrés respiratorio del adulto.
Otras dolencias de enfermedad incluyen, pero no se limitan a, dolencias inflamatorias como eritema nudoso, conjuntivitis alérgica, neuritis óptica, uveítis, rinitis alérgica, espondilitis anquilosante, artritis psoriásica, vasculitis, síndrome de Reiter, lupus eritematoso sistémico, esclerosis sistémica progresiva, polimiositis, dermatomiositis, granulomatosis de Wegner, aortitis, sarcoidosis, linfocitopenia, arteritis temporal, pericarditis, miocarditis, insuficiencia cardíaca congestiva, poliarteritis nudosa, síndromes de hipersensibilidad, alergia, síndromes hipereosinófilos, síndrome de Churg-Strauss, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, neumonitis por hipersensibilidad, hepatitis activa crónica, cistitis intersticial, insuficiencia endocrina autoinmune, cirrosis biliar primaria, anemia aplásica autoinmune, hepatitis persistente crónica y tiroiditis.
En una forma de realización preferida, la dolencia de enfermedad es una enfermedad inflamatoria.
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Descripción detallada de la invención
Como anteriormente, la presente invención se refiere a compuestos que inhiben la adhesión de leucocitos y, en particular, la adhesión de leucocitos mediada al menos en parte por integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4. Sin embargo, antes de describir la presente invención en mayor detalle, se definirán primero los siguientes términos.
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Definiciones
A no ser que se indique lo contrario, los términos siguientes usados en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones tienen los significados que se ofrecen a continuación:
Según se usa en la presente memoria descriptiva, "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo monovalentes que tienen de 1 a 5 átomos de carbono incluyendo grupos alquilo de cadena lineal y ramificada. Este término se ilustra mediante grupos como metilo, etilo, iso-propilo, n-propilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y
similares.
El término "alquileno inferior" se refiere a grupos alquileno divalentes de 1 a 4 átomos de carbono incluyendo grupos alquileno de cadena lineal y ramificada. Este término se ilustra mediante grupos como metileno, etileno, n-propileno, isopropileno (-CH_{2}CH(CH_{3})- y -CH(CH_{3})CH_{2}-) y similares.
El término "alquenilo inferior" se refiere a un grupo alquenilo que tiene preferentemente de 2 a 6 átomos de carbono y que tiene al menos 1 sitio y preferentemente sólo 1 sitio de insaturación de alquenilo (es decir, >C=C<). Este término se ilustra mediante grupos como alilo, etenilo, propenilo, butenilo, y similares.
El término "alquinilo inferior" se refiere a un grupo alquinilo que tiene preferentemente de 2 a 6 átomos de carbono y que tiene al menos 1 sitio y preferentemente sólo 1 sitio de insaturación de alquinilo (es decir, -C\equivC-). Este término se ilustra mediante grupos como acetilo (-C\equivCH), propargilo (-CH_{2}-C\equivCH), 3-butinilo (-CH_{2}CH_{2}C\equivCH_{3}) y
similares.
El término "cicloalquilo inferior" se refiere a grupos alquilo cíclicos de 3 a 6 átomos de carbono que tienen un único anillo cíclico incluyendo, a modo de ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
El término "alquilencicloalquilo inferior" se refiere al grupo que consiste en un alquileno inferior-cicloalquilo inferior, según se define en la presente memoria descriptiva. Dichos grupos se ilustran mediante metilenciclopropilo (-CH_{2}-ciclopropilo), etilenciclopropilo y similares.
"Soporte farmacéuticamente aceptable" significa un soporte que es útil para preparar una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica y no indeseable biológicamente ni en ningún otro sentido, e incluye un soporte que es aceptable para uso veterinario así como para uso farmacéutico humano. "Un soporte farmacéuticamente aceptable" según se usa en la memoria descriptiva y las reivindicaciones incluye tanto uno como más de uno de dichos soportes.
"Tratar" o "tratamiento" de una enfermedad incluye:
(1) prevenir la enfermedad, es decir, conseguir que los síntomas clínicos de la enfermedad no se desarrollen en un mamífero que puede estar expuesto o predispuesto a la enfermedad pero todavía no experimenta ni muestra síntomas de la enfermedad,
(2) inhibir la enfermedad, es decir, interrumpir o reducir el desarrollo de la enfermedad o de sus síntomas clínicos, o
(3) aliviar la enfermedad, es decir, provocar una regresión de la enfermedad o de sus síntomas clínicos.
Una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un mamífero para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar dicho tratamiento para la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" variará dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad y la edad, peso, etc., del mamífero que se tratará.
"Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales farmacéuticamente aceptables de un compuesto de Fórmula I, donde las sales se obtienen de una diversidad de contraiones orgánicos e inorgánicos bien conocidos en la técnica e incluyen, a modo de ejemplo sólo, sodio, potasio, calcio, magnesio, amonio, tetraalquilamonio y similares; y cuando la molécula contiene una funcionalidad básica, sales de ácidos orgánicos e inorgánicos, como clorhidrato, bromhidrato, tartrato, mesilato, acetato, maleato, oxalato y similares.
Las integrinas son una gran familia de proteínas ligadoras transmembrana homólogas que son los principales receptores en células animales para unión de la mayoría de las proteínas de matriz extracelular, como colágeno, fibronectina y laminina. Las integrinas son heterodímeros formados por una cadena \alpha y una cadena \beta. Hasta la fecha, se han identificado veinte heterodímeros de integrinas diferentes, formados por 9 subunidades \alpha diferentes y 14 subunidades \beta diferentes. El término "integrinas \alpha_{4}" se refiere a la clase de receptores de superficie celular ligada a enzimas de heterodímeros que contienen la subunidad \alpha_{4} acoplada con cualquiera de las subunidades \beta. VLA-4 es un ejemplo de una integrina \alpha_{4}, y es un heterodímero de las subunidades \alpha_{4} y \beta_{1}, y se refiere también como integrina
\alpha_{4}\beta_{1}.
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Preparación de compuestos
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando los métodos y procedimientos expuestos en los ejemplos mostrados a continuación. Estos métodos y procedimientos exponen protocolos de reacción específicos para preparar compuestos de N-[2-N',N'-dietilamino-5-aminosulfonilfenil-pirimidin-4-il]-p-carbomiloxi-fenilalanina. Los compuestos dentro del ámbito no ilustrados en estos ejemplos y procedimientos se preparan fácilmente mediante la sustitución apropiada de los materiales de partida que están disponibles comercialmente o son bien conocidos en la técnica.
En los ejemplos expuestos a continuación se describen otros procedimientos y condiciones de reacción para preparar los compuestos de la presente invención. Adicionalmente, otros procedimientos para preparar compuestos útiles en ciertos aspectos de la presente invención se desvelan en la patente de EE.UU. 6.492.372, cedida el 10 de diciembre de 2002.
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Formulaciones farmacéuticas
Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos de la presente invención se administran habitualmente en la forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones pueden administrarse por una diversidad de rutas que incluyen oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular e intranasal. Estas composiciones son eficaces por suministro inyectable y oral. Dichas composiciones se preparan de una manera bien conocida en la técnica farmacéutica y comprenden al menos un compuesto activo.
La presente invención también incluye composiciones farmacéuticas que contienen, como ingrediente activo, uno o más de los compuestos de Fórmula I asociados anteriormente con soportes farmacéuticamente aceptables. Al preparar las composiciones de esta invención, el ingrediente activo se mezcla habitualmente con un excipiente, diluido por un excipiente o confinado dentro de dicho soporte que puede estar en forma de una cápsula, bolsa, papel u otro envase. El excipiente empleado es normalmente un excipiente adecuado para la administración a sujetos humanos u otros mamíferos. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como vehículo, soporte o medio para el ingrediente activo. Así, las composiciones pueden estar en forma de comprimidos, píldoras, polvos, tabletas, bolsas, sellos, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como sólido o en un medio líquido), pomadas que contienen, por ejemplo, hasta el 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina blanca y dura, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos envasados
estériles.
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En la preparación de una formulación, puede ser necesario triturar el compuesto activo para proporcionar el tamaño de partícula apropiado antes de combinarlo con los otros ingredientes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, por lo común se tritura a un tamaño de partícula de menos de malla 200. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamaño de partícula se ajusta normalmente mediante triturado para proporcionar una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, por ejemplo, malla 40 aproximada-
mente.
Algunos ejemplos de excipientes adecuados incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, mannitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden incluir adicionalmente: agentes lubricantes como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservantes como metil- y propilhidroxibenzoatos; agentes edulcorantes; y agentes aromatizantes. Las composiciones de la invención pueden formularse para proporcionar una liberación rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo después de la administración al paciente empleando procedimientos conocidos en la
técnica.
Las composiciones se formulan preferentemente en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosificación de aproximadamente 5 a aproximadamente 100 mg, más habitualmente de aproximadamente 10 a aproximadamente 30 mg, del ingrediente activo. El término "formas de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéuticamente adecuado.
El compuesto activo es eficaz en un intervalo amplio de dosificación y generalmente se administra en una cantidad farmacéuticamente eficaz. Sin embargo, se comprenderá que la cantidad del compuesto realmente administrado será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias pertinentes, incluyendo la dolencia que se va a tratar, la ruta de administración elegida, el compuesto real administrado, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual, la gravedad de los síntomas del paciente, y similares.
Para preparar composiciones sólidas como comprimidos, el ingrediente activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se quiere decir que el ingrediente activo se dispersa uniformemente por toda la composición de manera que la composición puede subdividirse fácilmente en formas de dosificación unitaria igualmente eficaces como comprimidos, píldoras y cápsulas. Esta preformulación sólida se subdivide a continuación en formas de dosificación unitaria del tipo descrito anteriormente que contienen, por ejemplo, de 0,1 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo de la presente invención.
Los comprimidos o píldoras de la presente invención pueden estar recubiertos o combinados de otra manera para proporcionar una forma de dosificación que ofrezca la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, el comprimido o píldora puede comprender un componente de dosificación interno y uno externo, estando el segundo en forma de un envoltorio encima del primero. Los dos componentes pueden separarse mediante una capa entérica que sirve para resistir a la desintegración en el estómago y permite que el componente interno pase intacto al duodeno o se libere de forma retardada. Puede usarse una diversidad de materiales para dichas capas o recubrimientos entéricos, incluyendo dichos materiales una serie de ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales como goma laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa.
Las formas líquidas en las que pueden incorporarse las nuevas composiciones de la presente invención para administración oral o por inyección incluyen jarabes adecuadamente aromatizados en soluciones acuosas, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares.
Las composiciones para inhalación o insuflado incluyen soluciones y suspensiones en disolventes acuosos u orgánicos farmacéuticamente aceptables o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados según se describe anteriormente. Preferentemente las composiciones se administran por la ruta respiratoria oral o nasal para un efecto local o sistémico. Las composiciones en disolventes farmacéuticamente aceptables preferentemente pueden nebulizarse mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas pueden respirarse directamente a partir del dispositivo de nebulización o bien puede unirse el dispositivo de nebulización a una tienda de máscaras faciales o a una máquina de presión positiva intermitente. Las composiciones en solución, suspensión o polvo pueden administrarse, preferentemente de forma oral o nasal, a partir de dispositivos que suministran la formulación de una manera
apropiada.
Los siguientes ejemplos de formulación ilustran las composiciones farmacéuticas de la presente invención.
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Ejemplo de formulación 1
Se preparan cápsulas de gelatina dura que contienen los siguientes ingredientes:
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Los ingredientes anteriores se mezclan y rellenan en cápsulas de gelatina dura en cantidades de 340 mg.
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Ejemplo de formulación 2
Se prepara una fórmula de comprimidos usando los ingredientes mostrados a continuación:
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9 
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Los componentes se mezclan y se comprimen para formar comprimidos, cada uno de los cuales pesa 240 mg.
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Ejemplo de formulación 3
Se prepara una formulación de inhalador de polvo en seco que contiene los siguientes componentes:
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La mezcla activa se mezcla con la lactosa y la mezcla se añade a un equipo de inhalación de polvo en seco.
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Ejemplo de formulación 4
Se preparan comprimidos, cada uno de los cuales contiene 30 mg de ingrediente activo, del modo siguiente:
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El ingrediente activo, el almidón y la celulosa se pasan a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 20 y se mezclan detenidamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con los polvos resultantes, que a continuación se hacen pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. 16. Los gránulos así producidos se secan a entre 50º y 60ºC y se hacen pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. 16. El carboximetilalmidón de sodio, el estearato de magnesio y el talco, pasados previamente a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 30, se añaden a continuación a los gránulos que, después de mezclado, se comprimen en una máquina de comprimidos para producir comprimidos que pesan cada uno
120 mg.
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Ejemplo de formulación 5
Se fabrican cápsulas, cada una de las cuales contiene 40 mg de medicamento, del modo siguiente:
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El ingrediente activo, el almidón y el estearato de magnesio se mezclan, se hacen pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 20, y se rellenan en cápsulas de gelatina dura en cantidades de 150 mg.
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Ejemplo de formulación 6
Se fabrican supositorios, cada uno de los cuales contiene 25 mg de ingrediente activo, del modo siguiente:
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El ingrediente activo se hace pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 60 y se suspende en los glicéridos de ácidos grasos saturados previamente fundidos usando el calor mínimo necesario. A continuación se vierte la mezcla en un molde de supositorios de capacidad nominal de 2,0 g y se deja enfriar.
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Ejemplo de formulación 7
Se fabrican suspensiones, cada una de las cuales contiene 50 mg de medicamento por dosis de 5,0 ml, del modo siguiente:
14
El medicamento, la sacarosa y la goma de xantano se mezclan, se hacen pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 10, y a continuación se mezclan con una solución preparada previamente de la celulosa microcristalina y la carboximetilcelulosa de sodio en agua. El benzoato de sodio, el aromatizante y el colorante se diluyen con parte del agua y se añaden con agitación. A continuación se añade agua suficiente para producir el volumen
requerido.
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Ejemplo de formulación 8
15
El ingrediente activo, el almidón y el estearato de magnesio se mezclan, se hacen pasar a través de un tamiz de malla EE.UU. nº 20, y se rellenan en cápsulas de gelatina dura en cantidades de 425 mg.
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Ejemplo de formulación 9
Puede prepararse una formulación intravenosa del modo siguiente:
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Ejemplo de formulación 10
Puede prepararse una formulación tópica del modo siguiente:
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La parafina blanda blanca se calienta hasta fundirse. La parafina líquida y la cera emulsionante se incorporan y se agitan hasta que se disuelven. El ingrediente activo se añade y se continúa con la agitación hasta que se dispersa. A continuación se enfría la mezcla hasta que solidifica.
Otra formulación preferida empleada en los procedimientos de la presente invención emplea dispositivos de suministro transdérmico ("parches"). Dichos parches transdérmicos pueden usarse para proporcionar infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y el uso de parches transdérmicos para el suministro de agentes farmacéuticos es conocida en la técnica. Véase, por ejemplo, la patente de EE.UU. 5.023.252, cedida el 11 de junio de 1991, incorporada en la presente memoria descriptiva como referencia. Dichos parches pueden construirse para suministro continuo, pulsátil o bajo demanda de agentes farmacéuticos.
Las técnicas de colocación directa o indirecta pueden usarse cuando es deseable o necesario introducir la composición farmacéutica en el encéfalo. Las técnicas directas implican habitualmente la colocación de un catéter de suministro de fármacos en el sistema ventricular del hospedador para sortear la barrera hematoencefálica. Se describe un sistema de suministro implantable semejante usado para el transporte de factores biológicos para regiones anatómicas específicas del cuerpo en la patente de EE.UU. 5.011.472 que se incorpora en la presente memoria descriptiva como referencia.
Las técnicas indirectas, que se prefieren generalmente, implican habitualmente la formulación de las composiciones para proporcionar la latencia del fármaco mediante la conversión de fármacos hidrófilos en fármacos liposolubles. La latencia se consigue generalmente a través del bloqueo de los grupos hidroxi, carbonilo, sulfato y amino primarios presentes en el fármaco para hacer el fármaco más liposoluble y susceptible de transporte a través de la barrera hematoencefálica. Alternativamente, el suministro de fármacos hidrófilos puede potenciarse por infusión intraarterial de soluciones hipertónicas que pueden abrir transitoriamente la barrera hematoencefálica.
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Utilidad
Los compuestos de la presente invención inhiben, in vivo, la adhesión de leucocitos a células endoteliales mediada al menos en parte por integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4, mediante unión competitiva a integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4. En consecuencia, los compuestos de la presente invención pueden usarse en el tratamiento de enfermedades en mamíferos mediadas al menos en parte por integrinas \alpha_{4}, preferentemente VLA-4 o adhesión de leucocitos. Dichas enfermedades incluyen enfermedades inflamatorias en pacientes mamíferos como asma, enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis, demencia por SIDA, diabetes (incluyendo diabetes aguda de inicio juvenil), enfermedad inflamatoria intestinal (incluyendo colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn), esclerosis múltiple, artritis reumatoide, trasplante de tejidos, metástasis tumoral, meningitis, encefalitis, accidente cerebrovascular y otros traumatismos cerebrales, nefritis, retinitis, dermatitis atópica, psoriasis, isquemia miocárdica y lesión pulmonar aguda mediada por leucocitos como la que se produce en el síndrome de distrés respiratorio del adulto.
La cantidad administrada al paciente mamífero variará dependiendo de lo que se esté administrando, del objetivo de la administración, como profilaxis o terapia, el estado del paciente, la manera de administración, y similares. En aplicaciones terapéuticas, las composiciones se administran a un paciente que está sufriendo ya una enfermedad en una cantidad suficiente para curar o al menos detener parcialmente los síntomas de la enfermedad y sus complicaciones. Una cantidad adecuada para conseguir este propósito se define como "dosis terapéuticamente eficaz". Las cantidades eficaces para este uso dependerán de la dolencia de enfermedad que se esté tratando así como de la valoración del médico responsable dependiendo de factores como la gravedad de la inflamación, la edad, el peso y el estado general del paciente, y similares.
Las composiciones administradas a un paciente están en la forma de composiciones farmacéuticas descritas anteriormente. Estas composiciones pueden esterilizarse mediante técnicas de esterilización convencionales o pueden filtrarse estériles. Las soluciones acuosas resultantes pueden envasarse para su uso tal cual o liofilizarse, combinándose la preparación liofilizada con un soporte acuoso estéril antes de la administración. El pH de las preparaciones del compuesto estará normalmente entre 3 y 11, más preferentemente de 5 a 9 y con la máxima preferencia de 7 a 8. Se entenderá que el uso de algunos de los excipientes, soportes o estabilizadores anteriores dará como resultado la formación de sales farmacéuticas.
La dosificación terapéutica de los compuestos de la presente invención variará de acuerdo, por ejemplo, con el uso concreto para el que se realiza el tratamiento, la manera de administración del compuesto, la salud y el estado del paciente y la valoración del médico al cargo. Por ejemplo, para administración intravenosa, la dosis estará normalmente en el intervalo de aproximadamente 20 \mug a aproximadamente 500 \mug por kilogramo de peso corporal, preferentemente de aproximadamente 100 \mug a aproximadamente 300 \mug por kilogramo de peso corporal. Los intervalos adecuados de dosificación para administración intranasal son generalmente de aproximadamente 0,1 pg a 1 mg por kilogramo de peso corporal. Las dosis eficaces pueden extrapolarse a partir de las curvas de dosis-respuesta obtenidas de sistemas de prueba in vitro o de modelo animal.
Los siguientes ejemplos de síntesis y biológicos se ofrecen para ilustrar la presente invención y no pretenden en ningún modo limitar el ámbito de esta invención. A no ser que se indique lo contrario, todas las temperaturas están en grados Celsius.
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Ejemplos
En los ejemplos mostrados a continuación, las siguientes abreviaturas tendrán los siguientes significados. Si una abreviatura no se ha definido, tendrá generalmente el significado aceptado.
ABC = Área bajo la curva
d ancho = duplete ancho
s ancho = singlete ancho
ASB = albúmina de suero bovino
d = duplete
DMAP = clorhidrato de 4-N,N-dimetilaminopiridinetilcarbodiimida
EDTA = Ácido etilendiamintetraacético
EtOAc = acetato de etilo
EtOH = etanol
eq. = equivalente
FACS = Clasificador de células activadas por fluorescencia
FITC = Isotiocianato de fluoresceína
g = gramos
i.p. = intraperitoneal
h = hora
HBSS = Solución salina equilibrada de Hank
Hct = hematocrito o medida de glóbulos rojos empaquetados obtenida por centrifugado en un volumen de una muestra de sangre
HB o Hb = hemoglobina
HEPES = ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazin-etanosulfónico
IgG Fc = un dominio de unión de la inmunoglobulina
kg = kilogramo
L = litro
m = multiplete (cuando se usa con datos de RMN)
M = Molar
HCM = Hemoglobina Corpuscular Media; Hb/GR
RHCM = recuento de hemoglobina corpuscular media
VCM = expresado como porcentaje; Hb/Hct. volumen corpuscular medio; el promedio de volumen de eritrocitos,
MeOH = expresado convencionalmente en micrómetros cúbicos por glóbulo rojo. metanol
mg = miligramo
mL = mililitro
mm = milímetro
mM = milimolar
mol = moles
mmol = milimol
mpk = miligramos por kilogramo
N = normal
ng = nanogramos
PBS++ = Solución salina con tampón de fosfato
kPa = kilopascales
q.s. o Q.S. = llevar al volumen
Rfs o R_{f} = factor de retención
rpm = revoluciones por minuto
ta o TA = temperatura ambiente
s = singlete
t = triplete
TFA = ácido trifluoroacético
THF = tetrahidrofurano
CCF o ccf = cromatografía de capa fina
\muL = microlitro
\mug = microgramo
mm = micrómetros
V_{t} = Volumen total
GB = glóbulos blancos
p/v = peso/volumen
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse según se ilustra en el Esquema 1 y según se describe en los procedimientos mostrados a continuación:
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Ejemplo 1
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Etapa 1
Preparación de 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (2)
Se trató 5-Nitrouracilo, (1), con oxicloruro fosforoso (POCl_{3}) y N,N-dimetilanilina (PhNMe_{2}), según el procedimiento de Whittaker (J. Chem. Soc. 1951, 1565), para dar el compuesto 2. El compuesto 2 está disponible también en City Chemical (West Haven, CT).
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Etapa 2
Preparación de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-L-tirosina (3)
Se añadió a una solución de éster terc-butílico de L-tirosina (H-Tyr(OH)-OtBu) (30,6 g, 0,129 mol) en THF (250 mL) a -10ºC 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (25 g, 0,129 mol), manteniendo la temperatura por debajo de 5ºC durante la adición. Una vez completa la adición, se añadió N,N-diisopropiletilamina (EtiPr_{2}N) (33,7 mL, 0,194 mol) gota a gota. Después de agitación durante 1 h a -10ºC, se añadió dietilamina (Et_{2}NH) (66,73 mL, 0,645 mol) lentamente, y a continuación se calentó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se diluyó con éter dietílico (500 mL), y la capa orgánica se lavó con ácido cítrico 0,2 N (3 x 150 mL), agua (1 x 150 mL) y K_{2}CO_{3} al 10% (3 x 150 mL). La fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para producir un residuo amarillo. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (EtOAc/hexanos al 20% sobre gel de sílice) para producir 37,39 g (67%) de compuesto 3 como una espuma amarilla. R_{f} = 0,21 (EtOAc/hexanos al 25% sobre gel de sílice).
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Etapa 3
Preparación de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (4)
A una solución de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-L-tirosina (37,39 g, 0,087 mol) en CH_{2}Cl_{2} (150 mL) se añadió DMAP (10,59 g, 0,087 mol). Después de 5 minutos se añadió trietilamina (TEA) (18,19 mL, 0,131 mol) gota a gota. Se añadió cloruro de 1-pirrolidincarbamoilo (14,42 mL, 0,131 mol) gota a gota, y la reacción se calentó a reflujo (40ºC) durante toda la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se tomó en EtOAc (300 mL). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico 0,2 N (3 x 150 mL), agua (1 x 150 mL), NaHCO_{3} sat. (3 x 150 mL), salmuera (1 x 150 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para producir 43,07 g (94%) de compuesto 4 como un sólido amarillo. R_{f} = 0,5 (EtOAc/hexanos al 50% sobre gel de
sílice).
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Etapa 4
Preparación de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-aminopirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (5)
Se agitó una mezcla de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (43,07 g, 0,081 mol) y Pd/C al 10% (4,3 g, Pd al 10% en peso) en EtOH (200 mL) a 310,26 kPa de hidrógeno hasta que la CCF (EtOAc/hexanos al 50% sobre gel de sílice) mostró conversión al 100% al producto (48 horas). A continuación se filtró la mezcla de reacción a través de un tapón de Celita y se concentró al vacío para producir 40,29 g (100%) de compuesto 5 como una espuma morada. R_{f} = 0,11 (EtOAc/hexanos 6:1 sobre gel de sílice).
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Etapa 5
Preparación de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenil-sulfonil)amino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (6)
Se enfrió una solución de piridina (160 mL) de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-aminopirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (40,29 g, 0,081 mol) a -20ºC con un baño de hielo seco/CH_{3}CN. Se agitó la mezcla durante 30 minutos, y a continuación se añadió cloruro de 4-clorobencenosulfonilo (17,06 g, 0,081 mol) lentamente. Se agitó la reacción a entre -20ºC y -15ºC durante 4 h y a continuación se dejó calentar a temperatura ambiente durante toda la noche. Se diluyó la reacción con EtOAc (400 mL), y se lavó la fase orgánica con ácido cítrico 0,2 N (3 x 150 mL), agua (1 x 150 mL), NaHCO_{3} sat. (3 x 150 mL), salmuera (1 x 150 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para producir un residuo marrón. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea (EtOAc/hexanos al 50% sobre gel de sílice) para producir 43,49 g (80%) de compuesto 6 como una espuma amarilla. R_{f} = 0,35 (EtOAc/hexanos al 50% sobre gel de sílice).
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Etapa 6
Preparación de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-4(-clorofenil-sulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (7)
A una solución de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenil-sulfonil)amino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (42,92 g, 0,064 mol) en acetona (Me_{2}CO) (600 mL) se añadió K_{2}CO_{3} (12,75 g, 0,096 mol), y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. A continuación se añadió yodoetano (EtI) (7,73 mL, 0,096 mol) lentamente, y se agitó la mezcla de reacción durante toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró al vacío, y se tomó el residuo en EtOAc (300 mL). La fase orgánica se lavó con agua (2 x 300 mL), salmuera (1 x 100 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró, y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea (hexanos/EtOAc 2:1 sobre gel de sílice) para producir 37,36 g (85%) de compuesto 7 como un sólido blanco. R_{f} = 0,53 (EtOAc/hexanos al 50% sobre gel de
sílice).
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Etapa 7
Preparación de clorhidrato de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (8)
Se calentó una solución de ácido fórmico (500 mL) de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenil-sulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina (36,21 g, 0,052 mol) a 70ºC durante 2 h y a continuación concentró al vacío. Se disolvió de nuevo el residuo en ácido fórmico (500 mL) y se calentó de nuevo a 70ºC durante 2 h. Se redujo la solución en volumen el 80% y a continuación se trató con al menos 1 eq. de HCl 1,0 N (52 mL, 0,052 mol) seguido de agua destilada (100 mL). Se concentró al vacío la mezcla heterogénea resultante. Se añadió agua destilada (100 mL), y se concentró al vacío la mezcla heterogénea. Las últimas etapas se repitieron dos veces para producir un producto blanco húmedo. Éste se secó colocándolo a alto vacío a 40ºC (7 días) para producir 32,8 g (93%) de compuesto 8, como un sólido blanco de flujo libre. R_{f} = 0,25 (7/3 MeOH/H_{2}O + TFA al 0,1%, fase inversa).
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,22 (s ancho, 1H), 7,82-7,79 (m, 1H), 7,64-7,60 (m, 2H), 7,36-7,33 (m, 1H), 7,22-7,13 (m, 2H), 7,07-6,98 (m, 2H), 4,91-4,90 (m, 1H), 4,80-4,79 (m, 1H), 4,12-4,10 (m, 1H), 3,87-3,75 (m, 1H), 3,55-3,53 (m, 4H), 3,41-3,40 (m, 3H), 3,26-3,19 (m, 2H), 2,03 (s ancho, 1H), 1,97-1,89 (m, 3H), 1,27-1,15 (m, 6H), 1,10-1,05 (t, 1,5H), 0,97-0,92 (t, 1,5H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 175,8, 175,7, 166,5, 162,7, 162,2, 155,8, 155,7, 155,7, 152,6, 148,1, 147,7, 142,0, 138,5, 136,2, 132,6, 132,3, 131,9, 131,7, 123,7, 111,8, 111,5, 62,3, 57,8, 44,9, 38,7, 38,0, 27,4, 26,6, 15,3, 14,9, 14,7, 14,0, 13,9.
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Ejemplo 2
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 1. La etapa 5 se realizó usando cloruro de 4-fluorobencenosulfonilo en lugar de cloruro de 4-clorobencenosulfonilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,17 (s ancho, 1H), 7,90-7,87 (m, 2H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,20-7,16 (m, 1H), 7,08-7,00 (m, 3H), 5,52-5,51 (m, 1H), 4,96-4,93 (m, 2H), 5,78-5,70 (m, 1H), 3,85-3,75 (m, 1H), 3,59-3,53 (m, 4H), 4,47-4,43 (m, 2H), 3,44-3,24 (m, 2H), 2,02-1,94 (m, 3H), 1,24-1,16 (m, 6H), 1,10-1,05 (t, 1,5H), 0,99-0,94 (t, 1,5H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 133,0, 132,9, 132,5, 132,2, 123,7, 123,6, 118,6, 57,1, 44,3, 38,3, 27,3, 26,6, 14,7,
14,1.
EM m/z 629,5 (MH+).
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Ejemplo 3
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-il-carboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 2. La etapa 6 se realizó usando sulfato de dimetilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,16 (s ancho, 1H), 7,89-7,88 (m, 1H), 7,39-7,35 (m, 3H), 7,20-7,13 (m, 1H), 7,05-7,00 (m, 2H), 4,85-4,84 (m, 1H), 4,14-4,12 (m, 1H), 3,59-3,54 (m, 5H), 3,45-3,44 (m, 2H), 3,45-3,33 (m, 3H), 3,13-3,12 (m, 1H), 3,02-3,01 (m, 1H), 2,04-1,95 (m, 4H), 1,29-1,18 (m, 6H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 176,5, 169,8, 166,9, 166,4, 156,2, 152,7, 151,8, 150,4, 136,8, 133,3, 133,2, 132,5, 123,7, 118,8, 118,5, 57,8, 57,1, 48,3, 44,5, 41,0, 38,8, 27,5, 26,7, 14,1.
EM m/z 615,2 (MH+).
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Ejemplo 4
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 1. La etapa 6 se realizó usando sulfato de dimetilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,20 (s ancho, 1H), 7,83-7,80 (m, 2H), 7,67-7,64 (m, 2H), 7,37-7,34 (m, 1H), 7,21-7,18 (m, 1H), 7,10-7,03 (m, 2H), 4,88-4,87 (m, 1H), 4,13-4,10 (m, 1H), 3,55-3,45 (m, 6H), 3,42-3,40 (m, 2H), 3,24-3,23 (m, 2H), 3,11-3,10 (m, 1H), 3,02-3,01 (m, 1H), 2,04-2,03 (m, 1H), 1,98-1,90 (m, 3H), 1,28-1,18 (m, 6H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 176,0, 166,4, 161,8, 155,9, 155,4, 152,6, 146,5, 142,2, 137,6, 137,4, 136,4, 132,5, 131,9, 123,7, 114,6, 62,4, 58,1, 57,7, 45,0, 40,8, 38,6, 38,3, 27,4, 26,6, 15,3, 13,9.
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Ejemplo 5
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 3. La etapa 3 se realizó usando cloruro de 1-piperidincarbonilo en lugar de cloruro de 1-pirrolidincarbonilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,16 (s ancho, 1H), 7,90-7,88 (m, 2H), 7,40-7,35 (m, 2H), 7,21-7,20 (m, 1H), 7,14-7,13 (m, 1H), 7,02-7,01 (m, 2H), 5,51 (s ancho, 1H), 4,83-4,77 (m, 1H), 3,64-3,53 (m, 6H), 3,34-3,33 (m, 2H), 3,20-3,17 (m, 1H), 3,12-3,11 (m, 2H), 3,02-3,01 (m, 1H), 1,68-1,65 (m, 6H), 1,19-1,17 (m, 6H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 185,0, 169,7, 166,3, 152,7, 136,6, 135,0, 133,2, 133,0, 132,5, 131,8, 126,3, 123,6, 121,7, 118,6, 118,3, 57,6, 54,5, 46,9, 44,3, 39,6, 38,7, 27,6, 25,9, 14,0.
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Ejemplo 6
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 2. La etapa 3 se realizó usando cloruro de 1-piperidinecarbonilo en lugar de cloruro de 1-pirrolidincarbonilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,17 (s ancho, 1H), 7,91-7,85 (m, 2H), 7,39-7,31 (m, 3H), 7,20-7,16 (m, 1H), 7,05-6,97 (m, 2H), 4,88-4,69 (m, 2H), 4,71-4,69 (m, 1H), 3,80-3,75 (m, 1H), 3,62-3,39 (m, 6H), 3,34-3,32 (m, 2H), 3,30-3,16 (m, 3H), 1,68-1,65 (m, 4H), 1,23-1,17 (m, 6H), 1,10-1,05 (t, 1,5H), 0,99-0,94 (t, 1,5H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 199,9, 187,6, 183,1, 176,2, 169,7, 166,3, 163,0, 162,7, 153,9, 152,9, 136,5, 133,1, 133,0, 132,7, 132,4, 123,8, 118,8, 118,4, 111,1, 110,6, 102,8, 79,4, 57,3, 55,4, 44,4, 38,9, 38,4, 27,7, 26,1, 15,1, 14,8, 14,3, 14,2.
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Ejemplo 7
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 2. La etapa 3 se realizó según el siguiente procedimiento.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 7,92-7,86 (m, 2H), 7,41-7,32 (m, 3H), 7,22 (d, 1H), 7,04-6,91 (m, 3H), 4,29-3,98 (m, 4H), 3,88-3,72 (m, 1H), 3,69-3,37 (m, 4H), 2,40-2,24 (m, 2H), 1,28-1,11 (m, 6H), 1,10-1,00 (t, 1,5H), 1,01-0,89 (t,
1,5H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 174,2, 169,7, 166,4, 163,2, 162,8, 157,0, 153,3, 153,2, 152,4, 144,3, 143,8, 136,1, 135,6, 135,5, 133,2, 133,1, 132,5, 132,2, 123,7, 118,9, 118,6, 112,9, 112,6, 57,5, 38,1, 37,7, 17,4, 14,7, 14,5, 13,8,
13,7.
EM m/z 615 (MH+).
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Preparación alternativa de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
A una solución agitada a -15ºC del compuesto 3 (24,9 g, 0,0578 mol) y cloroformato de 4-nitrofenilo (11,7 g, 0,0578 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (300 mL) se añadió trietilamina (24,2 mL, 0,173 mol), a una velocidad tal que la temperatura de la mezcla de reacción no superó -10ºC. Después de agitar durante 20 min, se añadió azetidina (3,30 g, 0,0578 mmol) gota a gota, y se calentó la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. Se diluyó la mezcla de reacción con EtOAc (100 mL) y hexanos (100 mL), y a continuación se extrajo repetidamente con K_{2}CO_{3} acuoso 10%, hasta que no se observó color amarillo (4-nitrofenol) en la fase acuosa. La capa orgánica se lavó con salmuera (75 mL), se secó con MgSO4, se filtró, y se evaporó para producir 28,5 g (96%) de éster terc-butílico de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-nitropirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina como un sólido amarillo, que se usó sin purificación. R_{f} = 0,17 (EtOAc/hexanos 2:5 sobre gel de sílice).
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Ejemplo 8
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 7. La etapa 6 se realizó usando sulfato de dimetilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 7,95-7,76 (m, 2H), 7,44-7,11 (m, 4H), 7,01-6,83 (m, 3H), 4,30-3,93 (m, 4H), 3,66-3,41 (m, 4H), 3,14-2,92 (m, 3H), 2,42-2,21 (m, 2H), 1,32-1,01 (m, 6H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 152,3, 136,3, 133,4, 133,2, 132,4, 123,6, 118,8, 118,5, 38,2, 17,4, 13,8.
EM m/z 601 (MH+).
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Ejemplo 9
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 8. La etapa 5 se realizó usando cloruro de 4-clorobencenosulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencenosulfonilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 7,83 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 7,36-7,18 (m, 2H), 7,06-6,86 (m, 3H), 4,29-3,97 (m, 4H), 3,66-3,34 (m, 5H), 3,15-2,95 (m, 4H), 2,41-2,22 (m, 2H), 1,26-1,06 (m, 6H).
RMN ^{13}C(CD_{3}OD) \delta 157,2, 153,0, 152,5, 142,9, 142,5, 136,4, 132,5, 132,1, 132,0, 123,8, 57,9, 52,2, 40,7, 38,0, 17,4, 13,6.
EM m/z 617 (MH+).
\newpage
Ejemplo 10
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 7. La etapa 5 se realizó usando cloruro de 4-clorobencenosulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencenosulfonilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 7,86-7,76 (m, 2H), 7,70-7,60 (m, 2H), 7,32 (d ancho, 1H), 7,21 (d ancho, 1H), 7,03-6,97 (m, 2H), 6,90 (s ancho, 1H), 4,29-4,00 (m, 4H), 3,89-3,72 (m, 1H), 3,70-3,36 (m, 5H), 3,28-3,10 (m, 2H), 2,42-2,24 (m, 2H), 1,28-1,13 (m, 6H), 1,11-1,02 (t, 1,5H), 1,01-0,90 (t, 1,5H).
EM m/z 631 (MH+).
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Ejemplo 11
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirro- lidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 3. La etapa 5 se realizó usando cloruro de 2,4-difluorobencenosulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencenosulfonilo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,16 (s ancho, 6H), 1,93 (s ancho, 4H), 2,50-3,75 (m, 13H), 4,83 (s ancho, 1H), 6,60-7,40 (m, 7H), 7,60 (s ancho, 1H), 7,77 (m, 1H), 9,41 (s ancho, 1H).
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Ejemplo 12
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirro- lidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 2. La etapa 5 se realizó usando cloruro de 2,4-difluorobencenosulfonilo en lugar de cloruro de 4-fluorobencensulfonilo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,91 (t, J = 6,9, 1,8H), 1,12 (m, 7,2H), 1,92 (s ancho, 4H), 2,50-4,00 (m, 13H), 4,78 (m, 0,6H), 4,88 (m, 0,4H), 6,55 (d, J = 6,9, 0,4H), 6,77 (d, J = 6,3, 0,6H), 6,80-7,38 (m, 6H), 7,51 (s, 0,4H), 7,58 (s, 0,6H), 7,74 (m, 1H), 9,33 (m, 1H)
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Ejemplo 13
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azeti- din-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 11. La etapa 3 se realizó como en el ejemplo 7.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,14 (t, J =6,6, 6H), 2,32 (m, 2H), 2,50-3,80 (m, 9H), 4,13 (m, 4H), 4,62 (m, 0,6H), 4,81 (m, 0,4H), 5,81 (d ancho, 0,6H), 5,90 (d ancho, 0,4H), 6,90-7,40 (m, 7H), 7,77 (m, 1H).
EM m/z 619,2 (MH+).
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Ejemplo 14
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 12. La etapa 3 se realizó como en el ejemplo 7.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,89 (t, J = 6,7, 1,8H), 1,16 (m, 7,2H), 2,28 (m, 2H), 3,00-4,00 (m, 8H), 4,09 (s ancho, 4H), 4,79 (m, 0,6H), 4,88 (m, 0,4H), 6,80-7,30 (m, 7H), 7,57 (s, 0,4H), 7,62 (s, 0,6H), 7,75 (m, 1H), 11,9 (s ancho,
1H).
EM m/z 633,2 (MH+).
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Ejemplo 15
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirroli- din-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 2. La etapa 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,18 (m, 6H), 1,93 (s ancho, 4H), 2,37 (s, 1H), 3,00-3,70 (m, 10H), 3,80 (d, J = 21,3, 0,6H), 3,98 (d, J = 18,3, 0,4H), 4,51 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 6,75-7,35 (m, 7H), 7,58 (s, 0,6H), 7,63 (s, 0,4H), 7,86 (m, 2H), 9,71 (s ancho, 1H).
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Ejemplo 16
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 11. La etapa 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de sulfato de dimetilo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,17 (m, 6H), 1,94 (m, 4H), 2,40 (m, 1H), 3,00-3,75 (m, 10H), 3,99 (d, J = 18,0, 0,6H), 4,18 (d, J = 18,0, 0,4H), 4,50 (m, 1H), 4,90 (m, 1H), 6,75-7,35 (m, 7H), 7,81 (m, 2H), 10,0 (s ancho, 1H).
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Ejemplo 17
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 4, 5, 6 y 7 se realizaron como en el ejemplo 16. La etapa 3 se realizó como en el ejemplo 7.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,18 (m, 6H), 2,34 (m, 3H), 3,00-3,75 (m, 6H), 3,80-4,25 (m, 5H), 4,47 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 6,75-7,35 (m, 7H), 7,79 (m, 2H), 10,3 (s ancho, 1H).
EM m/z 643,2 (MH+).
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Ejemplo 18
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(aze- tidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 7. La etapa 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,25 (m, 6H), 2,28 (m, 3H), 3,00-3,75 (m, 6H), 3,80-4,25 (m, 5H), 4,47 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 6,75-7,35 (m, 7H), 7,57 (s, 0,6H), 7,62 (s, 0,4H), 7,79 (m, 2H), 10,6 (s ancho, 1H).
EM m/z 625,2 (MH+).
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Ejemplo 19
Preparación de N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirro- lidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina
Las etapas 1, 2, 3, 4, 5 y 7 se realizaron como en el ejemplo 1. La etapa 6 se realizó usando bromuro de propargilo en lugar de yoduro de etilo.
RMN ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 8,13 (s, 1H), 7,86-7,82 (m, 2H), 7,62-7,58 (m, 2H), 7,32-7,28 (m, 2H), 7,19-7,17 (m, 1H), 7,04-6,98 (m, 2H), 4,83-4,5 (m, 2H), 4,12-3,82 (m, 1H), 3,63-3,37 (m, 8H), 3,27-3,08 (m, 2H), 2,72 (s ancho, 1H), 2,04-1,86 (m, 4H), 1,24-1,07 (m, 6H).
RMN ^{13}C (CD_{3}OD) \delta 177,2, 176,5, 162,7, 156,7, 155,7, 154,5, 153,2, 142,6, 140,3, 137,4, 137,3, 133,1, 132,9, 132,8, 132,7, 132,2, 132,1, 124,3, 111,3, 80,5, 80,3, 77,7, 58,2, 57,7, 44,9, 43,4, 28,1, 27,3, 14,8, 14,7.
EM m/z 655 (MH+).
Pueden usarse los siguientes procedimientos para someter a prueba los compuestos de esta invención.
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Ejemplo A
Ensayo de adhesión de integrina \alpha_{4}\beta_{1}: Adhesión de células Jurkat^{TM} a fibronectina de plasma humano Procedimiento
Se recubrieron placas de 96 pocillos (placas Costar 3590 EIA) con fibronectina humana (Gibco/BRL, cat #33016-023) a una concentración de 10 \mug/mL durante toda la noche a 4ºC. A continuación se bloquearon las placas con una solución de albúmina de suero bovino (ASB; 0,3%) en suero salino. Se marcaron células Jurkat^{TM} (mantenidas en crecimiento de fase logarítmica) con Calceína AM según las instrucciones del fabricante, y se suspendieron a una concentración de 2 x 10^{6} células/mL en Hepes/Suero salino-ASB. A continuación se expusieron las células para probar y controlar los compuestos durante 30 minutos a temperatura ambiente antes de su transferencia a pocillos individuales de la placa recubierta con fibronectina. Se permitió que se produjera adhesión durante 35 minutos a 37ºC. A continuación se lavaron los pocillos mediante aspiración suave y se pipeteó con suero salino nuevo. Se cuantificó la fluorescencia asociada con las células adherentes remanentes usando un lector de placas de fluorescencia a EX 485/EM 530.
Se prepararon cultivos celulares dividiendo primero las células Jurkat^{TM} de fase estacionaria a 1:10 en el día uno, y 1:2 en el día dos para realizar el ensayo en el día 3. Las células divididas 1:10 en el día uno se dividieron 1:4 en el día 3 para un ensayo en el día 4.
Se prepararon las placas de ensayo primero realizando una solución de trabajo de Fibronectina humana Gibco/BRL (cat. # 33016-023) en PBS++, a 10 \mug/mL. A continuación se recubrió una placa Costar 3590 EIA con 50 \muL/pocillo durante 2 horas a temperatura ambiente (aunque también se dejó durante toda la noche a 4ºC). Finalmente se aspiró y bloqueó la placa con Tampón de Hepes/suero salino, 100 \muL/pocillo, durante 1 hora a TA seguido de lavado 3X con 150 \muL de PBS++.
Se realizaron diluciones del compuesto preparando diluciones en serie 1:3 de compuestos del modo siguiente. Para cada placa (4 compuestos/placa) se añadieron 600 \muL a 4 tubos de valoración Bio-Rad en una gradilla de tubos de valoración. Se añadió suficiente compuesto a cada tubo apropiado para dar una concentración 2X usando procedimientos bien conocidos en la técnica. Usando placas flexibles Falcon, se añadieron 100 \muL de tampón de Hepes/suero salino o suero humano a las filas B a G. Se usó pipeteador multicanal ajustado a 180 \muL con cuatro puntas separadas uniformemente en el pipeteador. Cada conjunto de cuatro tubos se mezcló 5 veces y se transfirieron 180 \muL de compuesto 2X a la primera columna de cada dilución de compuesto en la Fila B, dejando vacía la Fila A. Se añadieron 180 \muL a los otros pocillos de la Fila A. Se realizaron diluciones en serie en toda la placa transfiriendo 50 \muL a la siguiente dilución y mezclando 5 veces, cambiando las puntas cada vez después del mezclado. Las diluciones se interrumpieron en la Fila F. La Fila G no tenía compuesto presente.
Una solución de 20 \mug/mL en tampón de Hepes/suero salino o suero humano, de anticuerpos 21/6, fue el control positivo y se separó en un canal de reactivo para añadirlo a una placa de suspensión de células.
La tinción celular se realizó primero recogiendo las células Jurkat^{TM} de fase logarítmica por centrifugado en tubos de 50 mL (1.100 rpm durante 5 minutos). Se resuspendieron las células en 50 mL de PBS++, se centrifugaron y se resuspendieron en 20 mL de PBS++. Las células se tiñeron añadiendo 20 \muL de Calceína AM durante 30 minutos a TA. El volumen se llevó a 50 mL con tampón de Hepes/suero salino y las células se contaron, se centrifugaron y se resuspendieron a 2 x 10^{6} células/mL en tampón de Hepes/suero salino o suero humano.
Los compuestos se incubaron usando el siguiente procedimiento. En una nueva placa flexible, se añadieron 65 \muL de células teñidas a las Filas B a H. A continuación se añadieron 65 \muL de compuestos 2X a las filas apropiadas siguiendo la configuración de placas y se mezclaron tres veces. Se añadieron 65 \muL de anticuerpos 21/6 2X a la Fila H y se mezclaron 3X. Finalmente se incubó la placa a temperatura ambiente durante 30 minutos.
La adhesión de fibronectina se midió usando un lector de placas fluorescente a EX 485/EM 530 después del siguiente procedimiento de trabajo. Después de la incubación, se mezclaron las células tres veces y se transfirieron 100 \muL a las placas recubiertas con fibronectina y se incubaron a 37ºC durante 35 minutos aproximadamente. Se lavó cada placa, fila por fila, mediante suave pipeteo de 100 \muL a TA de PBS++ de los lados de los pocillos y girando la placa 90 grados para aspirar. Este procedimiento se repitió durante un total de 3 lavados. Se llenó cada pocillo con 100 \muL después de lavado mediante pipeteo del lateral del pocillo.
Se calculó un valor de CI_{50} para cada compuesto, en presencia del suero humano y en ausencia del suero humano. CI_{50} es la concentración a la que el crecimiento o actividad se inhiben en el 50%. Los datos se presentan en las siguientes tablas.
Adhesión celular a fibronectina de plasma humano (Sin el suero humano) 
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19
Adhesión celular a fibronectina de plasma humano (que contiene suero humano)
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Ejemplo B
Ensayo de saturación in vitro para determinar la unión de compuestos candidatos a \alpha_{4}\beta_{1}
A continuación se describe un ensayo in vitro para determinar los niveles de plasma necesarios para que un compuesto esté activo en el modelo de Encefalomielitis Autoinmune Experimental ("EAE"), descrito en el siguiente ejemplo, o en otros modelos in vivo.
Se lavan células Jurkat de crecimiento logarítmico y se resuspenden en plasma animal normal que contiene 20 \mug/mL del anticuerpo 15/7 (Yednock, y col., J. Biol. Chem., (1995) 270(48):28740).
Las células Jurkat se diluyen dos veces en muestras de plasma normal que contienen cantidades conocidas del compuesto candidato en diversas concentraciones que comprenden de 66 \muM a 0,01 \muM, usando una dilución en serie de 12 puntos estándar para una curva estándar o en muestras de plasma obtenidas de la sangre periférica de animales tratados con compuesto candidato.
A continuación se incuban las células durante 30 minutos a temperatura ambiente, se lavan dos veces con suero salino de tampón fosfato ("PBS") que contiene suero bovino fetal al 2% y 1 mM de cloruro de calcio y de cloruro de magnesio (medio de ensayo) para eliminar el anticuerpo 15/7 no ligado.
A continuación se exponen las células a IgG Fc antirratón F(ab')_{2} conjugada de ficoeritrina (Immunotech, Westbrook, ME), que ha sido adsorbida para cualquier reactividad cruzada inespecífica por coincubación con suero al 5% de la especie animal sometida a estudio, a 1:200 y se incuba en la oscuridad a 4ºC durante 30 minutos.
Las células se lavan dos veces con medio de ensayo y se resuspenden en el mismo. A continuación se analizan con un análisis de clasificador de células activadas por fluorescencia ("FACS") según se describe en Yednock y col. J. Biol. Chem., 1995, 270: 28740.
A continuación se representan los datos gráficamente como fluorescencia frente a dosis, por ejemplo, en una forma de dosis-respuesta normal. Los niveles de dosis que se obtienen en la meseta superior de la curva representan los niveles necesarios para obtener la eficacia en un modelo in vivo.
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Ejemplo C
Dosificación de casete y análisis de suero para determinación de biodisponibilidad
Se realizó detección selectiva de biodisponibilidad oral mediante dosificación de ratas con una casete, es decir, una mezcla de 6 compuestos por solución de dosificación. La casete incluía 5 artículos de prueba y un compuesto estándar, para una dosis total de 10 mg/kg. Cada compuesto/artículo de prueba se convirtió a la sal de sodio con NaOH 1 N equimolar y se disolvió en agua a 2 mg/mL. Se preparó la casete mezclando volúmenes iguales de cada una de las seis soluciones. Se mezcló bien la solución de dosificación de casete y a continuación se ajustó el pH a entre 7,5 y 9. La solución de dosificación se preparó el día antes del estudio y se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente.
Se usaron ratas Sprague Dawley (SD) macho de Charles River Laboratories, de 6 a 8 semanas de vida en esta detección selectiva. Las ratas se mantuvieron en cuarentena durante al menos un día y tuvieron acceso continuo a comida y agua. En la noche anterior a la administración de la casete, se mantuvo a las ratas en ayunas durante aproximadamente 16 h.
Se asignaron cuatro ratas SD a cada casete. Se administró una única dosis de la solución de dosificación oralmente a cada rata. Se registraron el volumen de dosificación (5 mL/kg) y el tiempo y se alimentó a las ratas 2 h después de la dosificación.
Se recogieron muestras de sangre por medio de punción cardíaca en los siguientes puntos temporales: 4 h, 8 h y 12 h. Inmediatamente antes de la recogida de sangre, se anestesió a las ratas con gas CO_{2} dentro de 10 a 20 segundos. Después de que se recogieron las muestras de 12 h, se sometió a eutanasia a las ratas mediante asfixia con CO_{2} seguido de dislocación cervical.
Las muestras de sangre se guardaron en tubos microtainer heparinizados a temperatura subambiente (4ºC) antes de que fueran procesados. Las muestras de sangre se centrifugaron (10.000 rpm durante 5 minutos) y se retiraron muestras de plasma y se almacenaron en un congelador a -20ºC hasta su análisis de niveles de fármaco. Los niveles de fármaco en el plasma se analizaron usando el siguiente protocolo para precipitación directa de plasma.
Las muestras de plasma in vivo se prepararon en una placa de 96 pocillos de 1,5 mL, añadiendo, en orden, 100 \muL del plasma de prueba, 150 \muL de metanol, seguido de agitación en vórtex durante 10 a 20 segundos. Se añadieron 150 \muL de 0,05 ng/\muL de un Estándar Interno en acetonitrilo y se agitaron en vórtex durante 30 segundos.
Se prepararon las muestras de curva estándar en una placa de 96 pocillos de 1,5 mL, añadiendo, en orden, 100 \muL de plasma de ratón de control, seguido por 150 \muL de metanol y agitación en vórtex durante 10 a 20 segundos. Se añadieron 150 \muL de 0,05 ng/\muL de un Estándar Interno en acetonitrilo y se agitaron en vórtex durante 30 segundos. Se incluyeron las muestras con de 0 a 200 ng (10 concentraciones) del compuesto de interés en metanol al 50% para obtener un intervalo de curva estándar de 0,5 ng/mL a 2.000 ng/mL. De nuevo, se agitó la muestra en vórtex durante 30 segundos.
A continuación se centrifugaron las muestras durante 20 a 30 minutos a 3.000 rpm en una microcentrífuga Eppendorf antes de que se transfiriera del 80 al 90% de sobrenadante a una placa de 96 pocillos limpia. A continuación se evaporó el disolvente orgánico hasta que las muestras estuvieron secas (en N_{2} a 40ºC/30-60 min (ZymarkTurbovap)).
A continuación se disolvió el residuo en 200-600 L de fase móvil (CH_{3}OH al 50%/TFA al 0,1%). A continuación se realizó CL/EM/EM usando un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo PE-Sciex API-3000 (SN0749707), Automuestreador Perkin-Elmer, Serie 200 y bomba Shimadzu 10A. La adquisición se realizó con PE-Sciex Analyst (v1.1) y los análisis de datos y la cuantificación se efectuaron usando Analizador PE-Sciex (v1.1). Se inyectó un volumen de muestra de 5 a 50 \muL en una columna de fase inversa ThermoHypersil DASH-18 (Keystone 2,0 x 20 mm, 5 mm, PN: 8823025-701) usando una fase móvil de CH_{3}OH al 25%, TFA al 0,1%-CH_{3}OH al 100%, TFA al 0,1%. El tiempo de ejecución fue de aproximadamente 8 minutos a una velocidad de flujo de aproximadamente 300 \muL/minutos.
El Área bajo la curva (ABC) se calculó usando la regla trapezoidal lineal de t = 0 al último tiempo de muestreo t_{x} (véase Handbook of Basic Pharmacokinetics, Wolfgang A. Ritschel y Gregory L. Kearns, 5ª ed., 1999).
ABC^{0\rightarrow t_{x}} = S((C_{n} + C_{n+1})/2)\cdot (t_{n+1}-t_{n})[\mu g/mL)h]
En el caso del paradigma de dosificación de casetes, muestras a 4, 8 y 12 h después de dosificación extravascular, el ABC se calculó desde t = 0 a t = 12 h. Se calcularon los valores de ABC^{0\rightarrow 12\ h} para cada animal individual y en la tabla mostrada a continuación se comunica el ABC^{0\rightarrow 12\ h} promedio.
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Ejemplo D
Modelos de asma
Las dolencias inflamatorias mediadas por integrina \alpha_{4}\beta_{1} incluyen, por ejemplo, aflujo de eosinófilos, hiperrespuesta de las vías respiratorias y oclusión que se produce con asma crónica. A continuación se describen modelos animales de asma que se usaron para estudiar los efectos in vivo de los compuestos de la presente invención para su uso en el tratamiento del asma.
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Modelo de asma en ratas
Este modelo sigue los procedimientos descritos por Chapman y col., Am J. Resp. Crit. Care Med. 153 4, A219 (1996) y Chapman y col., Am. J. Resp. Crit Care Med 155:4, A881 (1997). Se mezcló ovoalbúmina (OA; 10 mg/mL) con hidróxido de aluminio (10 mg/mL) y se inyectó (i.p.) en ratas pardas de Noruega en el día 0. Las inyecciones de OA, junto con adyuvante, se repitieron en los días 7 y 14. En el día 21, se confinó a los animales sensibilizados en tubos de plástico y se expusieron (60 minutos) a un aerosol de OA (10 mg/kg) en un sistema de exposición sólo en la nariz. Los animales se sacrificarían 72 horas más tarde con pentobarbital (250 mg/kg, i.p.). Se lavaron los pulmones por medio de una cánula traqueal usando 3 partes alícuotas (4 mL) de solución de Hank (HBSS x 10, 100 mL; EDTA 100 mM, 100 mL; HEPES 1 M, 25 mL; se llevó a 1 L con H_{2}O); se agruparon las células recuperadas y se ajustó el volumen total de fluido recuperado a 12 mL por adición de solución de Hank. Se contaron las células totales (contador de microcélulas Sysmex F-500, TOA Medical Electronics Otd., Japón) y se realizaron frotis diluyendo el fluido recuperado (a aproximadamente 10^{6} células/mL) y pipeteando una parte alícuota (100 \muL) en una centrífuga (Cytospina, Shandon, R.U.). Los frotis se secaron al aire, se fijaron usando una solución de verde rápido en metanol (2 mg/mL) durante 5 segundos y se tiñeron con eosina G (5 segundos) y tiazina (5 segundos) (Diff-Quick, Browne Ltd. R.U.) con el fin de diferenciar eosinófilos, neutrófilos, macrófagos y linfocitos. Se contó un total de 500 células por frotis mediante microscopia óptica en inmersión en aceite (x 100). Se formularon los compuestos de la presente invención en una suspensión de carboximetilcelulosa al 0,5% y Tween 80 al 2% y se administró oralmente a ratas que habían sido sensibilizadas al alergeno, ovoalbúmina. Los compuestos que inhibieron la acumulación de leucocitos inducida por alergeno en las vías respiratorias de ratas pardas de Noruega sensibilizadas activamente se consideraron activos en este modelo.
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Modelo de asma en ratones
También se evaluaron compuestos en un modelo de ratones de inflamación pulmonar aguda según los procedimientos descritos por Kung y col., Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 13:360-365, (1995) y Schneider y col., (1999). Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 20:448-457, (1999). Se sensibilizaron ratones Black/6 hembra (de 8 a 12 semanas de vida) en el día 1 mediante una inyección intraperitoneal (i.p.) de 0,2 mL de mezcla de ovoalbúmina/hidróxido de aluminio que contenía 20 \mug de ovoalbúmina (Calidad 4, Sigma) y 2 mg de hidróxido de aluminio inyectado (Pierce). Se administró una inyección de recuerdo el día 14. Los ratones se someten a prueba de desafío en los días 28 y 29 con ovoalbúmina al 1% aerosolizada (en suero salino al 0,9%) durante 20 minutos. Se eutanasia a los ratones y se recogen muestras de lavado broncoalveolar (3 mL) el día 30, 48 horas después de la primera prueba de desafío. Se cuantificaron los eosinófilos mediante un procedimiento de tinción FACs/FTTC. Se formularon los compuestos de la presente invención en una suspensión de carboximetilcelulosa al 0,5% y Tween 80 al 2% y se administró oralmente a ratones que habían sido sensibilizados al alergeno, ovoalbúmina. Los compuestos que inhibieron la acumulación de leucocitos inducidos por el alergeno en las vías respiratorias de ratones C57BL/6 sensibilizados activamente se consideraron activos en este modelo.
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Modelo de asma en ovejas
Este modelo sigue los procedimientos descritos por Abraham y col., J. Clin. Invest, 93:776-787 (1994) y Abraham y col., Am J. Respir Crit Care Med 156:696-703 (1997), que se incorporan como referencia en su totalidad. Los compuestos de la presente invención se han evaluado mediante administración intravenosa (solución acuosa de suero salino), oral (Tween 80 al 2%, carboximetilcelulosa al 0,5%) y de aerosol a ovejas que son hipersensibles al antígeno Ascaris suum. Los compuestos que reducen la respuesta bronquial temprana inducida por antígenos y/o bloquean la respuesta de las vías respiratorias de fase tardía, por ejemplo, tienen un efecto protector frente a respuestas tardías inducidas por antígeno e hiperrespuesta de las vías respiratorias ("HRVR"), se consideran activos en este modelo.
Se usaron las ovejas alérgicas para las que se muestra que desarrollan respuestas bronquiales tempranas y tardías al antígeno Ascaris suum inhalado para estudiar los efectos en las vías respiratorias de los compuestos candidatos. Después de anestesia tópica de los pasos nasales con lidocaína al 2%, se hizo avanzar un catéter con balón a través de un orificio nasal al esófago inferior. A continuación se incubó a los animales con una sonda endotraqueal con balón a través del otro orificio nasal con un broncoscopio de fibra óptica flexible como guía.
La presión pleural se estimó según Abraham (1994). Los aerosoles (véase la formulación mostrada a continuación) se generaron usando un nebulizador médico desechable que proporcionó un aerosol con un diámetro aerodinámico medio en masa de 3,2 \mum según se determina con un impactador de cascada Andersen. El nebulizador se conectó a un sistema de dosímetro consistente en una válvula solenoidal y una fuente de aire comprimido (137,89 kPa). La salida del nebulizador se dirigió a una pieza de plástico en T, un extremo de la cual estaba conectado al orificio inspiratorio de un respirador de pistón. La válvula solenoidal se activó durante 1 segundo al inicio del ciclo inspiratorio del respirador. Los aerosoles se suministraron a V_{T} de 500 mL y una velocidad de 20 respiraciones/minuto. Como control se usó sólo una solución de bicarbonato de sodio al 0,5%.
Para valorar la respuesta bronquial, se generaron curvas de concentración-respuesta acumulativas a carbacol según Abraham (1994). Se tomaron biopsias bronquiales antes y después del inicio del tratamiento y 24 horas después de la prueba de desafío del antígeno. Las biopsias bronquiales se realizaron de acuerdo con Abraham (1994).
También se realizó un estudio de adhesión in vitro de macrófagos alveolares según Abraham (1994), y se calculó un porcentaje de células adherentes.
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Formulación de aerosoles
Se prepara una solución del compuesto candidato en bicarbonato de sodio al 0,5%/suero salino (p/v) a una concentración de 30,0 mg/mL usando el siguiente procedimiento:
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A. Preparación de solución de reserva de bicarbonato de sodio al 0,5%/suero salino: 100,0 mL
22
Procedimiento
1. Se añaden 0,5 g de bicarbonato de sodio en un matraz volumétrico de 100 mL.
2. Se añaden aproximadamente 90,0 mL de suero salino y se somete a sonicación hasta disolución.
3. Q.S. a 100,0 mL con suero salino y se mezcla detenidamente.
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B. Preparación de 30,0 mg/mL de compuesto candidato: 10,0 mL
23 
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Procedimiento
1. Se añaden 0,300 g del compuesto candidato en un matraz volumétrico de 10,0 mL.
2. Se añaden aproximadamente 9,7 mL de solución de reserva de bicarbonato de sodio al 0,5%/suero salino.
3. Se somete a sonicación hasta que el compuesto candidato se disuelve completamente.
4. Q.S. a 10,0 mL con solución de reserva de bicarbonato de sodio al 0,5%/suero salino y se mezcla detenidamente.
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Ejemplo E
Estudio de toxicidad a 10 días en ratones C57B6
Se realizó un estudio de 10 días para evaluar la toxicidad de compuestos de la presente invención para ratones C57B6 hembra. El compuesto se administró por sonda a cinco niveles de dosis, 0 (control de vehículo), 10, 30, 100, 300 y 1.000 mg/kg (mpk), con cinco ratones en cada nivel de dosis. El volumen de dosis para todos los niveles fue de 10 mL/kg. Se prepararon soluciones o suspensiones de dosis en Tween 80 al 2% en carboximetilcelulosa (CMC) al 0,5% y se prepararon nuevas soluciones o suspensiones de dosis cada dos o tres días. Las observaciones in vivo incluyeron pesos corporales (día de estudio 1, 2, 3, 5, 7, 8 y 11), observaciones clínicas diarias junto a la jaula (1-2/día) y batería de observaciones funcionales periódicas (día de estudio -1, 2 y 9).
Al terminar, se recogieron muestras de sangre por punción cardíaca para patología clínica (hematología y química clínica) y niveles de fármaco. Se analizaron las muestras de sangre con EDTA para recuento de glóbulos blancos totales, recuento de glóbulos rojos, hemoglobina, hematocrito, índices eritrocitarios (VCM, HCM, RHCM), plaquetas y un diferencial de GB en cinco partes (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos). Se analizaron las muestras de plasma heparinizado para alanina transaminasa, aspartato transaminasa, fosfatasa alcalina, bilirrubina total, albúmina, proteína, calcio, glucosa, nitrógeno en la urea, creatinina, colesterol y triglicéridos.
Después de recogida de sangre, se sometió a necropsia la carcasa y se pesaron los órganos (hígado, bazo, riñones, corazón y timo). Se recogieron muestras de tejidos; encéfalo, glándulas salivares, timo, corazón, pulmón, hígado, riñón, bazo suprarrenal, estómago, duodeno, íleon, colon y útero/ovario, y se fijaron en formalina. Se procesaron tejidos del control de vehículo y se procesaron 300 y 1.000 mpk de animales del grupo en portaobjetos de vidrio tintado H & E y se evaluaron las lesiones histopatológicas.
Se analizaron los cambios en el peso corporal, los pesos absolutos y relativos de los órganos y la patología clínica para detectar diferencias estadísticas significativas con los controles de vehículo mediante prueba de comparación múltiple de Dunnet usando software Prism. Se analizaron los resultados de las baterías funcionales de observación para descubrir diferencias usando las pruebas exactas de Dunnet, de Fisher y los efectos de tendencia de la dosis mediante la prueba de correlación de Cochran-Mantel-Haenszel usando software SAS.
Usando una formulación oral convencional, los compuestos de la presente invención estarían activos en este modelo.
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Ejemplo F
Artritis inducida por adyuvante en ratas
La artritis inducida por adyuvante ("AIA") es un modelo animal útil en el estudio de artritis reumatoide (AR), que se induce por inyección de M. tuberculosis en la base de la cola de ratas Lewis. Entre 10 y 15 días después de la inyección, los animales desarrollan una artritis progresiva grave.
Generalmente, los compuestos se someten a prueba en cuanto a su capacidad de alterar la inflamación de las patas traseras y la lesión ósea resultante de edema inducido por adyuvante en ratas. Para cuantificar la inhibición de la inflamación de las patas traseras resultante de AIA, se han definido dos fases de inflamación: (1) la pata trasera inyectada primaria y secundaria, y (2) la pata trasera no inyectada secundaria, que generalmente empieza a desarrollarse aproximadamente once días después de la inducción de inflamación en la pata inyectada. La reducción del último tipo de inflamación es una indicación de actividad inmunosupresora. Cf. Chang, Arth. Rheum., 20, 1135-1141 (1977).
El uso de un modelo animal de AR, como AIA, permite estudiar los episodios celulares implicados en las primeras fases de la enfermedad. La expresión de CD44 en macrófagos y linfocitos se regula por incremento durante el desarrollo temprana de artritis adyuvante, mientras que la expresión de LFA-1 se regula por incremento más adelante en el desarrollo de la enfermedad. La comprensión de las interacciones entre las moléculas de adhesión y el endotelio en las fases tempranas de artritis adyuvante podría conducir a avances significativos en los procedimientos usados en el tratamiento de AR.
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Referencias citadas en la descripción Esta lista de referencias citadas por el solicitante es únicamente para comodidad del lector. No forma parte del documento de patente europeo. Aun cuando se ha puesto el máximo esmero en la elaboración de las referencias, no pueden excluirse errores u omisiones y la EPO declina toda responsabilidad a este respecto. Documentos de patentes citados en la descripción
\bullet EP-330.506-A [0003]
\bullet US-6.492.372-B [0087]
\bullet US-0.001.686-W, Konradi [0031]
\bullet US-5.023.252-A [0116]
\bullet WO-0.208.201-A [0032]
\bullet US-5.011.472-A [0117]
Bibliografía distinta de patentes citada en la descripción
\bulletELICES y col. Cell, 1990, vol. 60, 577-584 [0004]
\bulletSPRINGER. Nature, 1990, vol. 346, 425-434 [0005]
\bulletOSBORNE. Cell, 1990, vol. 62, 3-6 [0006]
\bulletVEDDER y col. Surgery, 1989, vol. 106, 509 [0007]
\bulletPRETOLANI y col. J. Exp. Med., 1994, vol. 180, 795 [0008]
\bulletABRAHAM y col. J. Clin. Invest., 1994, vol. 93, 776 [0009]
\bulletMULLIGAN y col. J. Immunology, 1993, vol. 150, 2407 [0010]
\bulletCYBULSKY y col. Science, 1991, vol. 251, 788 [0011]
\bulletLI y col. Arterioscler. Thromb., 1993, vol. 13, 197 [0012]
\bulletSASSEVILLE y col. Am. J. Path., 1994, vol. 144, 27 [0013]
\bulletYANG y col. Proc. Nat. Acad. Science (USA), 1993, vol. 90, 10494 [0014]
\bulletBURKLY y col. Diabetes, 1994, vol. 43, 529 [0015]
\bulletBARON y col. J. Clin. Invest., 1994, vol. 93, 1700 [0016]
\bulletHAMANN y col. J. Immunology, 1994, vol. 152, 3283 [0017]
\bulletYEDNOCK y col. Nature, 1992, vol. 356, 63 [0018]
\bulletBARON y col. J. Exp. Med., vol. 177, 57 [0019]
\bullet VAN DINTHER-JANSSEN y col. J. Immunology, 1991, vol. 147, 4207 [0020]
\bullet VAN DINTHER-JANSSEN y col. Annals. Rheumatic Dis., 1993, vol. 52, 672 [0021]
\bulletELICES y col. J. Clin. Invest., 1994, vol. 93, 405 [0022]
\bulletPOSTIGO y col. J. Clin. Invest., 1991, vol. 89, 1445 [0023]
\bulletPAUL y col. Transpl. Proceed., 1993, vol. 25, 813 [0024]
\bulletOKARHARA y col. Can. Res., 1994, vol. 54, 3233 [0025]
\bulletPAAVONEN y col. Int. J. Can., 1994, vol. 58, 298 [0026]
\bulletSCHADENDORF y col. J. Path., 1993, vol. 170, 429 [0027]
\bulletBAO y col. Diff., 1993, vol. 52, 239 [0028]
\bulletLAURI y col. British J. Cancer, 1992, vol. 68, 862 [0029]
\bulletKAWAGUCHI y col. Japanese J. Cancer Res., 1992, vol. 83, 1304 [0030]
\bulletYEDNOCK y col. J. Biol. Chem, 1995, vol. 270 (48), 28740 [0165]
\bulletYEDNOCK y col. J. Biol. Chem., 1995, vol. 270, 28740 [0169]
\bulletCHAPMAN y col. Am J. Resp. Crit. Care Med, 1996, vol. 153 (4), A219 [0184]
\bulletCHAPMAN y col. Am. J. Resp. Crit Care Med, 1997, vol. 155 (4), A881 [0184]
\bulletKUNG y col. Am J. Respir. Cell Mol. Biol., 1995, vol. 13, 360-365 [0185]
\bulletSCHNEIDER y col. Am J. Respir. Cell Mol. Biol., 1999, vol. 20, 448-457 [0185]
\bulletABRAHAM y col. J. Clin, Invest, 1994, vol. 93, 776-787 [0186]
\bulletABRAHAM y col. Am J. Respir Crit Care Med, 1997, vol. 156, 696-703 [0186]
\bullet CF. CHANG. Arth. Rheum., 1977, vol. 20, 1135-1141 [0203]

Claims (23)

1. Un compuesto de Fórmula (I):
24
en la que cada X es independientemente fluoro, cloro o bromo;
p es un número entero de 0 a 3;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, 2,5-dihidropirrol-1-ilo, piperidinilo o 1,2,3,6-tetrahidro-piridin-1-ilo;
R^{2} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo inferior que tiene de 1 a 5 átomos de carbono, alquenilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono y alquilencicloalquilo inferior en el que el grupo alquileno tiene de 1 a 4 átomos de carbono y el grupo cicloalquilo tiene de 3 a 6 átomos de carbono,
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
2. Un compuesto según la reivindicación 1 de Fórmula (II):
25
en la que cada X se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en fluoro y cloro;
m es un número entero igual a 1 ó 2;
R^{2} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo inferior que tiene de 1 a 5 átomos de carbono, alquenilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono y alquilencicloalquilo inferior en que el grupo alquileno tiene de 1 a 4 átomos de carbono y el grupo cicloalquilo tiene de 3 a 6 átomos de carbono;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
3. Un compuesto según la reivindicación 1 de Fórmula (III)
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en la que cada X es independientemente fluoro o cloro;
n es cero o uno;
R^{2} es -CH_{2}-R' en el que R' se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, metilo o -CH=CH_{2};
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
4. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
5. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 ó 3, en el que R^{2} es CH_{3}.
6. Un compuesto de la reivindicación 3, en el que X es F o Cl y n es 0.
7. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado entre el grupo que consiste en:
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(piperidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(difluorofenilsulfonil)-N''-metilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-etilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina; y
sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
8. Una composición farmacéutica que comprende un soporte farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, 6 ó 7.
9. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, 6 ó 7 para su uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por integrinas \alpha_{4}.
10. El compuesto de la reivindicación 9, en la que la enfermedad está mediada por VLA-4.
11. El compuesto de la reivindicación 9, en la que la enfermedad es una enfermedad inflamatoria.
12. Un compuesto de Fórmula (IV):
27
en la que cada X es independientemente fluoro, cloro o bromo;
p es un número entero de 0 a 3;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, 2,5-dihidropirrol-1-ilo, piperidinilo o 1,2,3,6-tetrahidropiridin-1-ilo;
R^{2} es alquinilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
13. Un compuesto según la reivindicación 12 de Fórmula (V):
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28 
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en la que cada X se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en fluoro y cloro;
m es un número entero igual a 1 ó 2;
R^{2} es alquinilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
14. Un compuesto según la reivindicación 12 de Fórmula (VI)
29
en la que cada X es independientemente fluoro o cloro;
n es cero o uno;
R^{2} es alquinilo inferior que tiene de 2 a 6 átomos de carbono;
R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
15. Un compuesto de la reivindicación 12, en el que R^{1} y R^{3} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
16. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 12, 13 ó 14, en el que R^{2} es propargilo.
17. Un compuesto de la reivindicación 15, en el que X es F o Cl y n es 0.
18. Un compuesto de la reivindicación 12 seleccionado entre el grupo que consiste en:
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(2,4-difluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-fluorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(azetidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina;
N-(2-[N',N'-dietilamino]-5-[N''-(4-clorofenilsulfonil)-N''-propargilamino]pirimidin-4-il)-4'-(pirrolidin-1-ilcarboniloxi)-L-fenilalanina; y
sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
19. Una composición farmacéutica que comprende un soporte farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 12-15, 17 ó 18.
20. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 12-15, 17 ó 18 para su uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por integrinas \alpha_{4}.
21. El compuesto de la reivindicación 20, en la que la enfermedad está mediada por VLA-4.
22. El compuesto de la reivindicación 20, en la que la enfermedad es una enfermedad inflamatoria.
23. El compuesto de la reivindicación 20, en la que la enfermedad es artritis reumatoide.
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Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL350050A1 (en) * 1999-01-22 2002-10-21 Elan Pharm Inc Acyl derivatives which treat vla-4 related disorders
TWI281470B (en) * 2002-05-24 2007-05-21 Elan Pharm Inc Heterocyclic compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by alpha4 integrins
AR044927A1 (es) * 2003-06-25 2005-10-12 Elan Pharm Inc Metodos y composiciones para tratar la artritis reumatoidea
WO2005111020A2 (en) * 2004-04-30 2005-11-24 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine hydantoin analogues which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
TWI418346B (zh) * 2004-07-08 2013-12-11 伊蘭製藥公司 包括聚合物部分之多價ｖｌａ-４拮抗劑
US8030328B2 (en) 2005-05-20 2011-10-04 Elan Pharmaceuticals, Inc. Imidazolone phenylalanine derivatives
CA2624524C (en) * 2005-09-29 2014-07-08 Elan Pharmaceuticals, Inc. Carbamate compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
ATE493405T1 (de) * 2005-09-29 2011-01-15 Elan Pharm Inc Pyrimidinylamidverbindungen, die die durch vla-4 vermittelte leukozytenadhäsion inhibieren
WO2007101165A1 (en) * 2006-02-27 2007-09-07 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidinyl sulfonamide compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
ES2752137T3 (es) 2006-02-28 2020-04-03 Biogen Ma Inc Métodos para tratar enfermedades inflamatorias y autoinmunes con natalizumab
US8410115B2 (en) * 2006-02-28 2013-04-02 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases with alpha-4 inhibitory compounds
WO2007103112A2 (en) 2006-03-03 2007-09-13 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases with natalizumab
JP2011506322A (ja) * 2007-12-07 2011-03-03 エラン ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 液性腫瘍を治療するための方法および組成物
EP2085407A1 (en) 2008-02-04 2009-08-05 Sahltech I Göteborg AB Treatment of idiopathic thrombocytopenic purpura
AU2009242092A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Nsab, Filial Af Neurosearch Sweden Ab, Sverige Modulators of dopamine neurotransmission
AU2010241742A1 (en) * 2009-04-27 2011-11-17 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyridinone antagonists of alpha-4 integrins
RS56977B1 (sr) 2010-01-11 2018-05-31 Biogen Ma Inc Test za antitela protiv jc virusa
US11287423B2 (en) 2010-01-11 2022-03-29 Biogen Ma Inc. Assay for JC virus antibodies
PL3575792T3 (pl) 2011-05-31 2023-03-27 Biogen Ma Inc. Metoda oceny ryzyka postępującej wieloogniskowej leukoencefalopatii (pml)
JP6080521B2 (ja) * 2012-11-30 2017-02-15 インターナショナル・ビジネス・マシーンズ・コーポレーションＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｍａｃｈｉｎｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ 広域分散医療情報ネットワークのデータ管理機構
EP3004334A4 (en) 2013-05-28 2016-12-21 Biogen Ma Inc METHOD FOR ASSESSING A PML RISK
BR112018012981A2 (pt) * 2015-12-30 2018-12-04 Saint Louis University derivados do ácido meta-azacíclico amino benzoico como antagonistas de pan integrina com melhores propriedades farmacocinéticas
EP4541422A3 (en) 2018-10-30 2025-06-25 Gilead Sciences, Inc. Quinoline derivatives as alpha4beta7 integrin inhibitors
AU2019373242B2 (en) 2018-10-30 2023-07-13 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of alpha 4 beta 7 integrin
KR102659859B1 (ko) 2018-10-30 2024-04-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 알파4β7 인테그린의 억제를 위한 화합물
CN112969700B (zh) 2018-10-30 2024-08-20 吉利德科学公司 作为α4β7整合素抑制剂的咪唑并吡啶衍生物
CN109541237A (zh) * 2018-12-28 2019-03-29 吴江近岸蛋白质科技有限公司 纤维连接蛋白的生物学活性测定方法
KR102908219B1 (ko) 2019-08-14 2026-01-08 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 알파 4 베타 7 인테그린의 저해용 화합물

Family Cites Families (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2525656A1 (de) 1974-06-19 1976-01-15 Sandoz Ag Verfahren zur herstellung neuer heterocyclischer verbindungen
US4096255A (en) 1974-11-08 1978-06-20 Mitsubishi Chemical Industries Limited N2 -naphthalenesulfonyl-L-argininamides, and pharmaceutical salts, compositions and methods
US4046876A (en) 1974-11-08 1977-09-06 Mitsubishi Chemical Industries Limited N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4073914A (en) 1974-11-08 1978-02-14 Mitsubishi Chemical Industries Limited N2 -naphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4055636A (en) * 1974-11-08 1977-10-25 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4104392A (en) 1974-11-08 1978-08-01 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -naphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof, and antithrombotic compositions and methods employing them
US4018915A (en) * 1976-01-05 1977-04-19 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4055651A (en) * 1974-11-08 1977-10-25 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4041156A (en) 1974-11-08 1977-08-09 Mitsubishi Chemical Industries Limited N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4070457A (en) 1974-11-08 1978-01-24 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -naphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
JPS5727454B2 (es) 1975-02-21 1982-06-10
US4018913A (en) * 1976-01-14 1977-04-19 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -alkoxynaphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
US4036955A (en) * 1976-07-22 1977-07-19 Mitsubishi Chemical Industries Ltd. N2 -naphthalenesulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
CA1102316A (en) 1975-12-09 1981-06-02 Shosuke Okamoto N su2 xx-arylsulfonyl-l-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof
DE2742173A1 (de) 1977-09-20 1979-03-29 Bayer Ag Phenoxy-pyridinyl(pyrimidinyl)-alkanole, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung als fungizide
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
IT1211096B (it) * 1981-08-20 1989-09-29 Lpb Ist Farm Pirimidine e s.triazinici adattivita' ipolipidemizzante.
US4672065A (en) * 1982-11-19 1987-06-09 Chevron Research Company N-substituted phenoxyacetamide fungicides
US4501728A (en) * 1983-01-06 1985-02-26 Technology Unlimited, Inc. Masking of liposomes from RES recognition
US4565814A (en) 1983-01-28 1986-01-21 Sanofi Pyridazine derivatives having a psychotropic action and compositions
JPS59212480A (ja) 1983-05-17 1984-12-01 Nippon Soda Co Ltd ピリダジン誘導体及び除草剤
DE3322720A1 (de) 1983-06-24 1985-01-03 Chemische Werke Hüls AG, 4370 Marl Verwendung von in 2-stellung mit (substituierten) aminogruppen substituierten 4-dl-alkylester-(alpha)-alaninyl-6-chlor-s-triazinen als herbizide, insbesondere gegen flughafer
US4505910A (en) * 1983-06-30 1985-03-19 American Home Products Corporation Amino-pyrimidine derivatives, compositions and use
NZ210669A (en) 1983-12-27 1988-05-30 Syntex Inc Benzoxazin-4-one derivatives and pharmaceutical compositions
US4595364A (en) * 1984-02-15 1986-06-17 Molten Corp. Dental prosthesis and process for preparing the same
PH22520A (en) 1984-11-12 1988-10-17 Yamanouchi Pharma Co Ltd Heterocyclic compounds having 4-lover alkyl-3-hydroxy-2-lower alkyl phenoxy-lower alkylene-y-group, and process of producing them
US4959364A (en) 1985-02-04 1990-09-25 G. D. Searle & Co. Method of treating inflammation, allergy, asthma and proliferative skin disease using heterocyclic amides
US5023252A (en) 1985-12-04 1991-06-11 Conrex Pharmaceutical Corporation Transdermal and trans-membrane delivery of drugs
US4837028A (en) * 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
JPH0784424B2 (ja) 1987-04-15 1995-09-13 味の素株式会社 チロシン誘導体及びその用途
EP0330506A3 (en) * 1988-02-26 1990-06-20 Dana Farber Cancer Institute Vla proteins
DE3904931A1 (de) 1989-02-17 1990-08-23 Bayer Ag Pyridyl-substituierte acrylsaeureester
US5030644A (en) 1989-07-31 1991-07-09 Merck & Co., Inc. Imidazole compounds and their use as transglutaminase inhibitors
US5260210A (en) 1989-09-27 1993-11-09 Rubin Lee L Blood-brain barrier model
US4992439A (en) * 1990-02-13 1991-02-12 Bristol-Myers Squibb Company Pyridazine carboxylic acids and esters
FR2679903B1 (fr) 1991-08-02 1993-12-03 Elf Sanofi Derives de la n-sulfonyl indoline portant une fonction amidique, leur preparation, les compositions pharmaceutiques en contenant.
NZ239846A (en) * 1990-09-27 1994-11-25 Merck & Co Inc Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
DE4108029A1 (de) * 1991-03-13 1992-09-17 Bayer Ag Triazinyl-substituierte acrylsaeureester
WO1992016549A1 (de) 1991-03-18 1992-10-01 Pentapharm Ag Para-substituierte phenylalanin-derivate
IT1247509B (it) * 1991-04-19 1994-12-17 Univ Cagliari Composti di sintesi atti all'impiego nella terapia delle infezioni da rhinovirus
US5296486A (en) 1991-09-24 1994-03-22 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Leukotriene biosynthesis inhibitors
AU3420693A (en) 1991-12-24 1993-07-28 Fred Hutchinson Cancer Research Center Competitive inhibition of high-avidity alpha4-beta1 receptor using tripeptide ldv
JPH07504654A (ja) * 1992-03-11 1995-05-25 ナルヘックス　リミテッド オキソ及びヒドロキシ置換炭化水素のアミン誘導体
DE4227748A1 (de) 1992-08-21 1994-02-24 Bayer Ag Pyridyloxy-acrylsäureester
JP2848232B2 (ja) * 1993-02-19 1999-01-20 武田薬品工業株式会社 アルデヒド誘導体
US5770573A (en) 1993-12-06 1998-06-23 Cytel Corporation CS-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
TW530047B (en) 1994-06-08 2003-05-01 Pfizer Corticotropin releasing factor antagonists
US5510332A (en) 1994-07-07 1996-04-23 Texas Biotechnology Corporation Process to inhibit binding of the integrin α4 62 1 to VCAM-1 or fibronectin and linear peptides therefor
WO1996001644A1 (en) 1994-07-11 1996-01-25 Athena Neurosciences, Inc. Inhibitors of leukocyte adhesion
US6306840B1 (en) 1995-01-23 2001-10-23 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
IL117659A (en) 1995-04-13 2000-12-06 Dainippon Pharmaceutical Co Substituted 2-phenyl pyrimidino amino acetamide derivative process for preparing the same and a pharmaceutical composition containing same
BR9610422A (pt) * 1995-08-30 1999-07-13 Searle & Co Derivados de meta-guanidina uréia tiouréia ou ácido aminobenzóico azacíclico como antagonistas de integrina
PT765879E (pt) * 1995-09-29 2001-05-31 Sankyo Co Derivados 13-substituidos de milbemicina-5-oxima sua preparacao e utilizacao contra insectos e outras pragas
DE19536891A1 (de) 1995-10-04 1997-04-10 Basf Ag Neue Aminosäurederivate, ihre Herstellung und Verwendung
DE19548709A1 (de) 1995-12-23 1997-07-03 Merck Patent Gmbh Tyrosinderivate
EP0910575B1 (en) 1996-06-21 2002-09-25 Takeda Chemical Industries, Ltd. Method for producing peptides
KR20000022190A (ko) 1996-06-28 2000-04-25 플레믹 크리스티안 인테그린 저해제로서의 페닐알라닌 유도체
DE19629817A1 (de) * 1996-07-24 1998-01-29 Hoechst Ag Neue Imino-Derivate als Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
DE19647381A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19647317A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Substituierte Stickstoff-Heterocyclen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Schädlingsbekämpfungsmittel
TR199901128T2 (xx) 1996-11-22 1999-07-21 Elan Pharmaceuticals, Inc. N-(aril/heteroarilasetil) amino asit esterler, bunu ihtiva eden farmas�tik bile�imler ve bu t�r bile�ikler kullanarak �-amiloit peptit sal�n�m�n� ve/veya bunun sentezlenmesini inhibe etme y�ntemleri.
AU6264898A (en) 1997-02-04 1998-08-25 Versicor Inc Solid phase and combinatorial library syntheses of 3,1-benzoxazine-4-ones
DE19713000A1 (de) 1997-03-27 1998-10-01 Merck Patent Gmbh Adhäsionsrezeptor-Antagonisten
EP1001764A4 (en) 1997-05-29 2005-08-24 Merck & Co Inc HETEROCYCLIC AMIDE COMPOUNDS AS INHIBITORS OF CELL ADHESION
EP1017382B1 (en) 1997-05-29 2006-03-01 Merck &amp; Co., Inc. (a New Jersey corp.) Biarylalkanoic acids as cell adhesion inhibitors
AR016133A1 (es) 1997-07-31 2001-06-20 Wyeth Corp Compuesto de carbamiloxi que inhiben la adhesion de leucocitos mediada por vla-4, compuestos que son prodrogas de dichos compuestos, composicionfarmaceutica, metodo para fijar vla-4 a una muestra biologica, metodo para el tratamiento de una condicion inflamatoria
PL338423A1 (en) 1997-07-31 2000-11-06 Elan Pharm Inc Compounds of substituted phenylamine type capable to inhibit adhesion of leucocytes through the mediation of vla-4
WO1999006433A1 (en) 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
EP1001971A1 (en) 1997-07-31 2000-05-24 Elan Pharmaceuticals, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
CN1276785A (zh) 1997-08-22 2000-12-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 N－烷酰基苯丙氨酸衍生物
BR9811730B1 (pt) 1997-08-22 2014-04-08 Hoffmann La Roche Derivados de n-aroilfenilalanina, uso dos mesmos, medicamentos contendo os mesmos.
HUP0100336A3 (en) 1998-01-23 2002-11-28 Novartis Ag Vla-4 antagonists, pharmaceutical compositions comprising them and process for preparing them
US6329372B1 (en) 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
DE69939165D1 (de) 1998-04-16 2008-09-04 Encysive Pharmaceuticals Inc N,n-disubstituierte amide welche die bindung von integrinen an ihre rezeptoren hemmen
GB9821061D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9825652D0 (en) 1998-11-23 1999-01-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
PL350050A1 (en) * 1999-01-22 2002-10-21 Elan Pharm Inc Acyl derivatives which treat vla-4 related disorders
WO2000043372A1 (en) 1999-01-22 2000-07-27 Elan Pharmaceuticals, Inc. Acyl derivatives which treat vla-4 related disorders
PE20020384A1 (es) * 2000-07-21 2002-05-28 Schering Corp PEPTIDOS COMO INHIBIDORES DE LA PROTEASA SERINA NS3/NS4a DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C
TWI281470B (en) * 2002-05-24 2007-05-21 Elan Pharm Inc Heterocyclic compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by alpha4 integrins

Also Published As

Publication number Publication date
CN1314682C (zh) 2007-05-09
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US20050119290A1 (en) 2005-06-02
EA200401562A1 (ru) 2005-06-30
DE60325583D1 (de) 2009-02-12
BR0308881A (pt) 2005-01-11
IL164225A (en) 2010-11-30
US7427628B2 (en) 2008-09-23
NO329933B1 (no) 2011-01-24
JP4469715B2 (ja) 2010-05-26
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NZ535504A (en) 2005-11-25
KR100978832B1 (ko) 2010-08-30
AU2003240823A1 (en) 2003-12-12
DK1507775T3 (da) 2009-05-11
US20070027131A1 (en) 2007-02-01
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CN1656090A (zh) 2005-08-17
WO2003099809A1 (en) 2003-12-04
AU2003240823B2 (en) 2008-11-06
KR20050003434A (ko) 2005-01-10
US20040138243A1 (en) 2004-07-15
AU2003240823C1 (en) 2009-05-28
US7135477B2 (en) 2006-11-14

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