ES2330131T3 - Procedimiento para el diagnostico de una infeccion por helicobacter pylori y kit de diagnostico para llevar a cabo dicho procedimiento. - Google Patents
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Abstract
Un procedimiento para diagnosticar una infección por Helicobacter pylori en un paciente tratado con inhibidores de la bomba de protones (IBP) que comprende las etapas de I. a) administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g, I. b) recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente, I. c) administrar al paciente urea marcada con 13 C, I. d) esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos, I. e) recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente, I. f) medir el contenido de 13 C en el CO 2 de la primera y la segunda muestra o II. a) recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente, II. b) administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g y urea marcada con 13 C, II. c) esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos, II. d) recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente, II. e) medir el contenido de 13 C en el CO 2 de la primera y la segunda muestra.
Description
Procedimiento para el diagnóstico de una
infección por Helicobacter pylori y kit de diagnóstico para
llevar a cabo dicho procedimiento.
La presente invención se refiere a un
procedimiento para el diagnóstico de una infección por
Helicobacter pylori y un kit de diagnóstico para llevar a
cabo dicho procedimiento.
Existen varios procedimientos conocidos para el
diagnóstico de una infección por Helicobacter pylori, por
ejemplo, la endoscopia del tracto digestivo superior, la prueba de
detección de antígenos en heces (HpSA/Meridian, Milán, Italia),
procedimiento serológico (Pylortest EIA-G III/Orion
Diagnostics, Espoo, Finlandia), detección de anticuerpos en orina
(Otsuka Diagnostic, Frankfurt, Alemania). La prueba de aliento para
la detección de Helicobacter INFAI (INFAI GmbH, Colonia,
Alemania) se ha convertido en el principal procedimiento. El mismo
se comercializa con 75 mg de urea marcada con ^{13}C junto con
hasta 1 g de ácido cítrico para adultos y con 45 mg de urea marcada
con ^{13}C junto con 100 ml de jugo de naranja para niños a partir
de 3 años de edad.
El documento
US-A-6 113 875 describe un
comprimido que comprende 50 mg de urea marcada con ^{13}C junto
con 63 mg de ácido cítrico y el documento
EP-A-O 881 491 describe un kit con
una solución de 200 ml que comprende 4,2 g de ácido cítrico y una
solución de 50 ml que comprende 75 mg de urea marcada con
^{13}C.
Sin embargo, una gran desventaja de casi todas
estas pruebas es que los inhibidores de la bomba de protones (IBP)
y la terapia con antiácidos ocasiona trastornos y arrojan falsos
negativos; ver L. Gatta et al, en American Journal of
Gastroenterology, 2004, p. 823-828.
Por lo tanto, es necesario que los IBP y la
terapia con antiácidos se interrumpan por lo menos 12 a 14 días
antes de que pueda llevarse a cabo la prueba de aliento con urea
^{13}C (PAU) con resultados confiables. Esto aumenta los costos y
genera inconvenientes ya que el paciente debe volver, por lo menos,
después de 12 días. Además, el paciente sufre por la interrupción
durante este tiempo.
Uno de las objetivos de esta invención es
proporcionar un procedimiento para el diagnóstico de Helicobacter
pylori para pacientes que toman IBP u otros fármacos
antiácidos.
Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que
este problema puede resolverse si a los pacientes que toman los
inhibidores de la bomba de protones (IBP) se les administran
cantidades mayores de ácidos que sobrecompensen por un período de
10 minutos a una hora la actividad del IBP.
No podía preverse que una sobrecompensación tan
corta de la actividad del IBP fuera capaz de superar la conocida
influencia negativa de estos fármacos en la confiabilidad de las
pruebas PAU.
Existen fuertes indicios de que esto es también
útil con pacientes a los que se les está administrando fármacos
antiácidos.
No solamente es más conveniente que los
pacientes se evalúen inmediatamente sin descontinuar la ingesta de
IBP o fármacos antiácidos, sino que es mejor aceptado sufrir como
máximo durante una hora en lugar de dos semanas sin la terapia.
En una realización, la invención proporciona un
procedimiento para diagnosticar una infección por Helicobacter
pylori en un paciente tratado con inhibidores de la bomba de
protones (IBP) que comprende las etapas de
- a)
- administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g,
- b)
- recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente,
- c)
- administrar al paciente urea marcada con ^{13}C,
- d)
- esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos,
- e)
- recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente,
- f)
- medir el contenido de ^{13}C en el CO_{2} de la primera y la segunda muestra.
\newpage
La cantidad de ácido se encuentra
preferiblemente en el intervalo de 5,5 a 6,5 g. Ácidos adecuados son
ácidos farmacológicamente aceptables, por ejemplo, aquellos que se
seleccionan del grupo de ácido cítrico, ácido málico, ácido
tartárico y mezclas de los mismos.
Una mezcla especialmente útil es una combinación
de 5 g de ácido cítrico, 0,3 g de ácido málico y 0,2 g de ácido
tartárico.
Preferiblemente el ácido se administra en una
solución con agua, por ejemplo, 150 a 300 ml. Preferiblemente se
agregan edulcorantes para que la solución tenga un sabor aceptable.
También pueden agregarse otros componentes tales como saborizantes o
colorantes.
En una realización de la invención, la prueba es
una prueba de aliento. En esta prueba, se toman las muestras de
aliento antes de la administración de la urea marcada con ^{13}C y
aproximadamente 30 minutos después de la administración de la urea.
Posteriormente se mide el contenido ^{13}C de CO_{2} de estas
muestras de aliento. Una diferencia entre el valor a los 00 min y
el valor a los 30 min de más de 3,2, preferiblemente más de 4 ppm,
indica una infección por Helicobacter pylori.
En una realización diferente se seleccionan
muestras de sangre del paciente antes de la administración de la
urea marcada con ^{13}C y aproximadamente 15 minutos más tarde se
selecciona una segunda muestra de sangre. Al agregar un ácido
fuerte, se libera ^{13}CO_{2} de las muestras de sangre y, de
esta forma, puede medirse la concentración de ^{13}CO_{2}. El
valor de corte para la prueba de sangre es 2 ppm, es decir que una
diferencia entre el valor a los 00 min y el valor a los 15 min de
más de 2 ppm indica infección por Helicobacter pylori.
La medición de ^{13}CO_{2} tiene que ver con
el contenido de ^{12}CO_{2} y ^{13}CO_{2} juntos. Un
procedimiento adecuado es, por ejemplo, la espectrometría de masas
de relaciones isotópicas (IRMS).
Las cantidades adecuadas de urea ^{13}C
dependen de la pureza de la urea ^{13}C y del tipo de
muestras.
La urea ^{13}C se encuentra comercialmente
disponible en una pureza del 99%. Cantidades de 10 a 100 mg son
suficientes si se utiliza esta urea ^{13}C. Si se utiliza urea
^{13}C menos pura, las cantidades de urea deben ser
proporcionalmente mayores. Si, por ejemplo, el contenido de ^{13}C
es 50%, se necesita aproximadamente el doble de cantidad.
Para la prueba de sangre, una cantidad
suficiente se encuentra en el intervalo de 5 a 50 mg,
preferiblemente aproximadamente 10 mg. Para la prueba de aliento,
típicamente la cantidad es aproximadamente 75 mg, mientras que para
niños la cantidad es aproximadamente 45 mg.
En una realización de la invención el
tratamiento con IBP se interrumpe durante 1, 2 o 3 días,
preferiblemente un día, antes del diagnóstico de la infección por
Helicobacter pylori. Esto aumenta la fiabilidad del
procedimiento y pueden utilizarse cantidades menores de ácidos. Una
mezcla conveniente es, por ejemplo, 4,5 g de ácido cítrico, 0,3 g
de ácido málico y 0,2 g de ácido tartárico.
En una realización adicional, el ácido se
administra junto con urea marcada con ^{13}C. El procedimiento
comprende las etapas de
- a)
- recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente,
- b)
- administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g y urea marcada con ^{13}C,
- c)
- esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos,
- d)
- recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente,
- e)
- medir el contenido de ^{13}C en el CO_{2} de la primera y la segunda muestra.
\vskip1.000000\baselineskip
Los ácidos se administran preferiblemente en
forma de soluciones acuosas.
Dichas soluciones pueden prepararse a partir de
ácidos sólidos o líquidos inmediatamente antes de la prueba.
También pueden prepararse en cantidades mayores y pueden
almacenarse.
La prueba de aliento se lleva a cabo según el
procedimiento usual y bien establecido descrito en la bibliografía
y las hojas de instrucciones del paciente, que también se encuentran
a disposición del médico. Las muestras se analizan, por ejemplo,
mediante espectrometría de masas de relaciones isotópicas de gases o
mediante un espectrómetro infrarrojo.
Los siguientes ejemplos comparan los resultados
de la prueba de acuerdo con la presente invención con 5 g de ácido
cítrico, 0,3 g de ácido málico y 0,2 de ácido tartárico (nuevo PAU
^{13}C) con las pruebas de acuerdo con la técnica anterior (PAU
^{13}C estándar con 1 g de ácido cítrico).
Se estudiaron 152 pacientes con Helicobacter
pylori positivo consecutivos.
Se realizó una endoscopía superior en cada
paciente. Durante la endoscopía se tomaron múltiples biopsias de
antro y cuerpo. Para evaluar el estado del Helicobacter
pylori se utilizaron histología, PRU (prueba rápida de ureasa)
y cultivo. La histología se llevó a cabo mediante el uso de H&E
y la tinción de Giemsa modificada.
La histología se puntuó mediante la utilización
del Sistema Sydney Actualizado. Se consideró que los pacientes
estaban infectados si 2 de 3 pruebas fueron positivas o si el
cultivo dio positivo solo.
Los pacientes positivos se escogieron
aleatoriamente mediante la utilización de una lista aleatoria para
realizar una PAU ^{13}C estándar o la nueva formulación de la PAU
^{13}C.
Después de la PAU recibieron una dosis estándar
de esomeprazol (40 mg/día) para tomarla en la mañana, 30 min antes
del desayuno.
Se les solicitó a los pacientes que volvieran el
día 14 y 28 del tratamiento con esomeprazol para llevar a cabo las
PAU y verificar el cumplimiento con la medicación.
También se les solicitó a los pacientes que
volvieran el día 7 y 14 después de la interrupción del tratamiento
con esomeprazol para llevar a cabo las PAU.
La sensibilidad, la diferencia entre
proporciones para muestras independientes y sus IC (intervalos de
confianza) se calcularon de acuerdo con el método de Wilson y
Newcombe.
La sensibilidad se evaluó de acuerdo con el
Análisis ITT (intención de tratar), es decir, los pacientes que
abandonaron se consideraron resultados falsos negativos.
El valor p se calculó mediante la utilización de
la prueba exacta de Fischer. También se calculó el NNT (número
necesario para tratar).
La regresión logística múltiple para los
determinantes independientes de la sensibilidad se llevó a cabo
utilizando las siguientes variables:
- Tipo de PAU
- Sexo
- Edad
- Índice de Masa Corporal
- Puntuación para Helicobacter pylori en antro (densidad)
- Puntuación para Helicobacter pylori en cuerpo (densidad)
\vskip1.000000\baselineskip
La regresión logística múltiple se llevó a cabo
de acuerdo con el Análisis ITT, es decir, los pacientes que
abandonaron se consideraron resultados falsos negativos.
De 152 pacientes con Helicobacter pylori
positivo se evaluaron de forma aleatoria 76 pacientes con el
procedimiento de la invención y 76 pacientes con la formulación de
la técnica anterior.
La prueba de acuerdo con la invención arrojó 71
verdaderos positivos, 3 falsos negativos y 2 abandonos.
La prueba estándar arrojó 59 verdaderos
positivos, 14 falsos negativos y 3 abandonos.
La sensibilidad aumentó de 75,7% a 95,8% con un
valor p de 0,0005.
\vskip1.000000\baselineskip
Procedimiento de la invención: 67 verdaderos
positivos, 7 falsos negativos, 2 abandonos.
Procedimiento de la técnica anterior: 43
verdaderos positivos, 30 falsos negativos, 3 abandonos.
Prueba nueva: 74 verdaderos positivos, 2
abandonos.
Prueba estándar: 73 verdaderos positivos, 3
abandonos
\vskip1.000000\baselineskip
Prueba nueva: 74 verdaderos positivos, 2
abandonos.
Prueba estándar: 73 verdaderos positivos, 3
abandonos.
\vskip1.000000\baselineskip
Estos resultados muestran claramente la mejora
altamente significativa con la nueva formulación y confirman la
necesidad conocida de al menos 12 días de interrupción del
tratamiento con IBP en la prueba convencional. Esto ahora puede
evitarse con el procedimiento de acuerdo con la presente
invención.
Claims (11)
1. Un procedimiento para diagnosticar una
infección por Helicobacter pylori en un paciente tratado con
inhibidores de la bomba de protones (IBP) que comprende las etapas
de
- I. a)
- administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g,
- I. b)
- recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente,
- I. c)
- administrar al paciente urea marcada con ^{13}C,
- I. d)
- esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos,
- I. e)
- recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente,
- I. f)
- medir el contenido de ^{13}C en el CO_{2} de la primera y la segunda muestra
- \quad
- o
- II. a)
- recoger una primera muestra de aliento o una primera muestra de sangre o ambas del paciente,
- II. b)
- administrar al paciente una cantidad de un ácido en el intervalo de 5 a 7 g y urea marcada con ^{13}C,
- II. c)
- esperar durante un tiempo de 10 a 60 minutos,
- II. d)
- recoger una segunda muestra de aliento o una segunda muestra de sangre o ambas del paciente,
- II. e)
- medir el contenido de ^{13}C en el CO_{2} de la primera y la segunda muestra.
2. El procedimiento de la reivindicación 1 en el
que la cantidad de ácido se encuentra en el intervalo de 5,5 a 6,5
g.
3. El procedimiento de la reivindicación 1 o 2
en el que el ácido se selecciona del grupo de ácido cítrico, ácido
málico, ácido tartárico y mezclas de los mismos.
4. El procedimiento de la reivindicación 1 o 2
en el que el ácido es ácido cítrico, solo o una mezcla de ácido
cítrico, ácido málico y ácido tartárico.
5. El procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4 en el que el ácido se administra como una
solución con agua, opcionalmente con compuestos que se seleccionan
del grupo de edulcorantes, saborizantes y colorantes.
6. El procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5 en el que el tiempo de la etapa I. d) o II.
c) se encuentra en el intervalo de 10 a 15 minutos y la primera y la
segunda muestra son muestras de sangre.
7. El procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6 en el que el tiempo de la etapa I. d) o II.
c) se encuentra en el intervalo de 20 a 40 minutos y la primera y la
segunda muestra son muestras de aliento.
8. El procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7 en el que el paciente interrumpe el
tratamiento con IBP durante 1 a 3 días antes de un diagnóstico de
infección por Helicobacter pylori.
9. El procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 8 en el que la cantidad de urea marcada con
^{13}C corresponde a 10 a 100 mg de urea marcada con ^{13}C al
99%.
10. Un kit para diagnosticar Helicobacter
pylori que comprende
- a)
- una solución acuosa ácida que contiene 5 a 7 g de un ácido y una cantidad de urea marcada con ^{13}C correspondiente a 10 a 100 mg de urea marcada con ^{13}C al 99%, o
- b)
- un envase de ácido sólido en polvo que comprende 5 a 7 g de un ácido y un envase de urea por separado que comprende una cantidad de urea marcada con ^{13}C correspondiente a 10 a 100 mg de urea marcada con ^{13}C al 99%
- c)
- recipiente de muestras para recolección de sangre o aliento
- d)
- una hoja de instrucciones para el paciente.
11. El kit de la reivindicación 10 en el que la
cantidad de ácido se encuentra en el intervalo de 5,5 a 6,5 g.
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