ES2336563T3

ES2336563T3 - Analogos de glp-1.

Info

Publication number: ES2336563T3
Application number: ES04711811T
Authority: ES
Inventors: Zheng Xin Dong
Original assignee: Ipsen Pharma SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 2003-02-19
Filing date: 2004-02-17
Publication date: 2010-04-14
Anticipated expiration: 2024-02-17
Also published as: EP1594529A2; CN1750842A; DE602004025205D1; CN101942018A; EP2067483A1; HK1083762A1; JP2007524579A; EP1594529B1; US20060217300A1; TWI283684B; WO2004074315A3; WO2004074315A2; TW200418877A; ATE455555T1; CA2513307A1; AR043365A1; EP1594529A4

Abstract

Compuesto de fórmula (I), (I)(R2R3)-A7-A8-A9-A10-A11A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22A23-A24-A25-A26- A27-A28-A29-A30-A31-A32-A33-A34-A35-A36-A37-A38-A39-R1, en la que: A7 es L-His; A8 es Abu, β-Ala, Ser o Val; A9 es Glu; A10 es Gly; A11 es Thr; A12 es Phe; A13 es Thr; A14 es Ser; A15 es Asp; A16 es Val; A17 es Ser; A18 es Ser; A19 es Tyr; A20 es Leu; A21 es Glu; A22 es Gly; A23 es Gln; A24 es Ala; A25 es Ala; A28 es Lys; A27 es Glu; A28 es Phe; A29 es lie; A30 es Ala; A31 es Trp; A32 es Leu; A33 es Val; A34 es Lys; A35 es β-Ala o Aib; A38 es L- o D-Arg; A37 está suprimido; A38 está suprimido; A39 está suprimido; R1 es OH, NH2, alcoxi (C1-C30) o NH-X2-CH2-Z0, en el que X2 es un radical de hidrocarburo (C1-C12) y Z0 es H, OH, CO2H o CONH2; X3 es **(Ver fórmula)** o -C(O)-NHR12, en el que X4 es, de forma independiente en cada caso, -C(O)-, -NH-C(O)- o -CH2- y en el que f es, de forma independiente en cada caso, un número entero comprendido entre 1 y 29, ambos incluidos; cada uno de R2 y R3 se selecciona de forma independiente entre el grupo compuesto por H, alquilo (C1-C30), alquenilo (C2-C30), fenil alquilo (C1-C30), naftil alquilo (C1-C30), hidroxi alquilo (C1-C30), hidroxi alquenilo (C2-C30), hidroxifenil alquilo (C1-C30) e hidroxinaftil alquilo (C1-C30); o uno de R2 y R3 es **(Ver fórmula)** acilo (C1-C30), alquil (C1-C30)sulfonilo, C(O)X5, **(Ver fórmula)** en la que Y es H, OH o NH2; r es entre 0 y 4; q es entre 0 y 4 y X5 es alquilo (C1-C30), alquenilo (C2-C30), fenil alquilo (C1-C30), naftil alquilo (C1-C30), hidroxi alquilo (C1-C30), hidroxi alquenilo (C2-C30), hidroxifenil alquilo (C1-C30) o hidroxinaftil alquilo (C1-C30); y R12 y R13 son, de forma independiente en cada caso, alquilo (C1-C30); a condición de que: (i) el citado compuesto no sea: (Ser8, β-Ala35)hGLP-1(7-36)NH2; (SEQ ID NO. 779); o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

Description

Análogos de GLP-1.

Listado de secuencias

La presente solicitud contiene un "extenso" listado de secuencias que se ha presentado a través de cuatro CD-R en lugar de una copia impresa en papel. Los citados CD-R, grabados el 10 de Febrero de 2004, se etiquetan respectivamente "CRF", "Copia 1", "Copia 2" y "Copia 3" y cada uno contiene solo un fichero de 456 Kb idéntico (129PPCT2.APP).

Antecedentes de la invención

La presente invención se dirige a análogos péptidos de péptido-1 similar al glucagón, a las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, a procedimientos de utilización de dichos análogos para tratar mamíferos y a composiciones farmacéuticas útiles que por consiguiente comprenden a los citados análogos.

La amida de péptido-1 (7-36) similar al glucagón (GLP-1) (SEQ ID NO.: 775) se sintetiza en las células-L intestinales mediante procesamiento post-traduccional específico de los tejidos del precursor del glucagón preproglucagón (Vamdell, J.M. y col., J. Histochem Cytochem, 1985:33:1080-6) y se libera hacia el interior de la circulación en respuesta a una comida. La concentración plasmática de GLP-1 se eleva desde un nivel de ayuno de aproximadamente 15 pmol/L hasta un nivel postprandial máximo de 40 pmol/L. Se ha demostrado que, para una elevación dada de la concentración plasmática de glucosa, el aumento de la insulina plasmática es de aproximadamente tres veces mayor cuando la glucosa se administra por vía oral, en comparación con la administración por vía intravenosa (Kreymann, B. y col., Lancet 1987: 2, 1300-4). Este incremento alimentario de la liberación de insulina, conocido como efecto incretina, es principalmente humoral y en la actualidad se piensa que el GLP-1 es la incretina fisiológica más potente en los humanos. Además del efecto insulinotrópico, el GLP-1 suprime la secreción de glucagón, retrasa el vaciado gástrico (Wettergren A. y col., Dig Dis Sci 1993:38:665-73) y puede potenciar la eliminación de la glucosa periférica (D'Alessio, D.A. y col., J. Clin Invest 1994:93:2293-6).

En 1994, se sugirió el potencial terapéutico del GLP-1 después de la observación de que una dosis subcutánea (s/c) individual de GLP-1 puede normalizar completamente los niveles de glucosa postprandial en pacientes con diabetes mellitus no insulinodependiente (DMNID) (Gutniak, M.K. y col., Diabetes Care 1994:17:1039-44). Se pensó que este efecto se encontraba mediado por la liberación aumentada de insulina y por una reducción en la secreción de glucagón. Además, una infusión intravenosa de GLP-1 ha mostrado que retrasa el vaciado gástrico postprandial en pacientes con DMNID (Williams, B. y col., J. Clin Endo Metab 1996:81:327-32). A diferencia de las sulfonilureas, la acción insulinotrópica del GLP-1 depende de la concentración plasmática de glucosa (Holz, G.G. 4th y col., Nature 1993:361:362-5). Por lo tanto, la pérdida de liberación de insulina mediada por el GLP-1 a bajas concentraciones plasmáticas de glucosa protege frente a hipoglucemias graves. Esta combinación de acciones proporciona al GLP-1 unas ventajas terapéuticas potenciales únicas sobre otros agentes que se usan en la actualidad para tratar la
DMNID.

Numerosos estudios han mostrado que cuando se administra a sujetos sanos, el GLP-1 influye de forma potente en los niveles glucémicos así como en las concentraciones de insulina y de glucagón (Orskov, C, Diabetologia 35:701-711, 1992; Holst, J.J. y col., Potential of GLP-1 in diabetes management in Glucagon III, Handbook of Experimental Pharmacology, Lefevbre PJ, Ed. Berlin, Springer Verlag, 1996, p. 311-326), efectos que son dependientes de la glucosa (Kreymann, B. y col., Lancet II: 1300-1304, 1987; Weir, G.C. y col., Diabetes 38:338-342, 1989). Además, también es eficaz en pacientes con diabetes (Gutniak, M., N. Engl J Med 226:1316-1322, 1992; Nathan, D.M. y col., Diabetes Care 15:270-276, 1992), normalizando los niveles de glucosa en sangre en sujetos con diabetes de tipo 2 (Nauck, M.A. y col., Diagbetologia 36:741-744, 1993) y mejorando el control glucémico en los pacientes con diabetes de tipo 1 (Creutzfeldt, W.O. y col., Diabetes Care 19:580-586, 1996), lo que plantea la posibilidad de su uso como agente terapéutico.

El GLP-1 es, no obstante, metabólicamente inestable y tiene una semivida (t_{1/2}) plasmática de solo 1-2 min in vivo. El GLP-1 administrado de forma exógena también se degrada rápidamente (Deacon, C.F. y col., Diabetes 44:1126-1131, 1995). Esta inestabilidad metabólica limita el potencial terapéutico del GLP-1 nativo. Por lo tanto, hay una necesidad de disponer de análogos de GLP-1 que sean más activos o que sean metabólicamente más estables que el GLP-1 nativo. El documento WO0198331 da a conocer compuestos de péptido-1 similar al glucagón (GLP-1) modificados. Los documentos WO0034331 y WO0034332 dan a conocer análogos péptidos de péptido-1 similar al glucagón. El documento W09943706 da a conocer derivados de análogos de GLP-1 que tienen un sustituyente lipófilo.

Resumen de la invención

En un aspecto, la presente invención se dirige a un compuesto de fórmula (I),

(I)(R^{2}R^{3})-A^{7}-A^{8}-A^{9}-A^{10}-A^{11}-A^{12}-A^{13}-A^{14}-A^{15}-A^{16}-A^{17}-A^{18}-A^{19}-A^{20}-A^{21}-A^{22}-A^{23}-A^{24}-A^{25}-A^{26}-A^{27}-A^{28}-A^{29}-A^{30}-A^{31}-A^{32}-A^{33}-A^{34}-A^{35}-A^{36}-A^{37}-A^{38}-A^{39}-R^{1},

\newpage

en la que:

A^{7} es L-His;

A^{8} es Abu, \beta-Ala, Ser o Val;

A^{9} es Glu;

A^{10} es Gly;

A^{11} es Thr;

A^{12} es Phe;

A^{13} es Thr;

A^{14} es Ser;

A^{15} es Asp;

A^{16} es Val;

A^{17} es Ser;

A^{8} es Ser;

A^{19} es Tyr;

A^{20} es Leu;

A^{21} es Glu;

A^{22} es Gly;

A^{23} es Gln;

A^{24} es Ala;

A^{25} es Ala;

A^{28} es Lys;

A^{27} es Glu;

A^{28} es Phe;

A^{29} es Ile;

A^{30} es Ala;

A^{31} es Trp;

A^{32} es Leu;

A^{33} es Val;

A^{34} es Lys;

A^{35} es \beta-Ala o Alb;

A^{36} es L- o D-Arg;

A^{37} está suprimido;

A^{38} está suprimido;

A^{39} está suprimido;

R^{1} es OH, NH_{2}, alcoxi (C_{1}-C_{30}) o NH-X^{2}-CH_{2}-Z^{0}, en el que X^{2} es un radical de hidrocarburo (C_{1}-C_{12}) y Z^{0} es H, OH, CO_{2}H o CONH_{2};

X^{3} es

1

o -C(O)-NHR^{12}, en el que X^{4} es, de forma independiente en cada caso, -C(O)-, -NH-C(O)- o -CH_{2}- y en el que f es, de forma independiente en cada caso, un número entero comprendido entre 1 y 29, ambos incluidos;

cada uno de R^{2} y R^{3} se selecciona de forma independiente entre el grupo compuesto por H, alquilo (C_{1}-C_{30}), alquenilo (C_{2}-C_{30}), fenil alquilo (C_{1}-C_{30}), naftil alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquenilo (C_{2}-C_{30}), hidroxifenil alquilo (C_{1}-C_{30}) e hidroxinaftil alquilo (C_{1}-C_{30}); o uno de R^{2} y R^{3} es

\vskip1.000000\baselineskip

2

\vskip1.000000\baselineskip

acilo (C_{1}-C_{30}), alquil (C_{1}-C_{30})sulfonilo, C(O)X^{5},

\vskip1.000000\baselineskip

3

\vskip1.000000\baselineskip

en la que Y es H, OH o NH_{2}; r es entre 0 y 4; q es entre 0 y 4 y X^{5} es alquilo (C_{1}-C_{30}), alquenilo (C_{2}-C_{30}), fenil alquilo (C_{1}-C_{30}), naftil alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquenilo (C_{2}-C_{30}), hidroxifenil alquilo (C_{1}-C_{30}) o hidroxinaftil alquilo (C_{1}-C_{30}) y

R^{12} y R^{13} son, de forma independiente en cada caso, alquilo (C_{1}-C_{30});

a condición de que:

(i) el citado compuesto no sea

(Ser^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}

(SEQ ID NO. 779)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\newpage

En una realización más preferente, la invención presenta un compuesto de acuerdo con la fórmula (I), en la que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 767)

(Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 768)

(Val^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 769)

(\beta-Ala^{8,35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 770)

(Abu^{8}, Alb^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 771)

(Val^{8}, Alb^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 772) o

(\beta-Ala^{8}, Alb^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 773)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

En una realización aún más preferente, la invención presenta un compuesto de acuerdo con la fórmula (I), en la que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 767)

(Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 768) o

(Abu^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};	(SEQ ID NO. 771)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

En una realización incluso aún más preferente, la invención presenta un compuesto de acuerdo con la fórmula (I), en la que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2};

(SEQ ID NO. 767)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

En otro aspecto de la invención se presenta una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto de la invención se presenta el uso de una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables en la preparación de un medicamento para producir como respuesta un efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujeto necesitado del mismo.

En otro aspecto de la invención se presenta el uso de una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre el grupo constituido por diabetes de tipo I, diabetes de tipo II, obesidad, glucagonomas, trastornos secretores de las vías respiratorias, trastorno metabólico, artritis, osteoporosis, enfermedad del sistema nervioso central, reestenosis y enfermedad neurodegenerativa en un sujeto necesitado del mismo. Preferentemente, la citada enfermedad es diabetes de tipo I o diabetes de tipo II.

En una realización preferente de cada uno de los aspectos detallados en los párrafos [0953], [0955] y [0956] el citado compuesto de acuerdo con la fórmula (I) es un compuesto descrito a través del párrafo [0943], o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. De forma aún más preferente el citado compuesto de acuerdo con la fórmula (I) se selecciona entre los compuestos descritos en los párrafos [0946] hasta [0948], o entre una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En una de las realizaciones más preferentes, el citado compuesto de acuerdo con la fórmula (I) es (Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2} (SEQ ID NO. 767), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\newpage

Con la excepción del aminoácido N terminal, todas las abreviaturas (por ejemplo Ala) de los aminoácidos mostradas en esta descripción representan la estructura de -NH-CH(R)-CO-, en la que R es una cadena lateral de un aminoácido (por ejemplo, CH_{3} para Ala). Para el aminoácido N terminal, la abreviatura representa la estructura de (R^{2}R^{3})-N-CH(R)-CO-, en la que R es una cadena lateral de un aminoácido y R^{2} y R^{3} son tal como se definieron anteriormente, excepto en el caso de que A^{7} sea Ura, Paa o Pta, en cuyo caso R^{2} y R^{3} no se encuentran presentes ya que Ura, Paa y Pta se consideran aquí como desamino aminoácidos. En esta invención se emplean otras determinadas abreviaturas para aminoácidos con los siguientes significados:

Abu: ácido \alpha-aminobutírico;

Ado: ácido 12-aminododecanoico;

Aec: 4-(2-aminoetil)-1-carboximetil-piperazina,

representada por la estructura:

4

Alb: ácido \alpha-aminoisobutírico;

Alc: ácido 2-aminoindano-2-carboxílico;

\beta-Ala: \beta-alanina;

Amp: 4-amino-fenilalanina;

Aun: ácido 11-aminoundecanoico;

Ava: ácido 5-aminovalérico;

Cha: ciclohexilalanina;

Gaba: ácido \gamma-aminobutírico;

hArg: homoarginina;

HEPA: ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil acético;

HEPES: ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazino-etano sulfónico;

N-Me-Ala: N-metil-alanina;

N-Me-Asp: ácido N-metil-aspártico;

N-Me-Glu: ácido N-metil-glutámico;

N-Me-Gly: N-metil-glicina;

N^{\alpha}-Me-His: N^{\alpha}-metil-histidina;

1-Nal: \beta-(1-naftil)alanina;

2-Nal: \beta-(2-naftil)alanina;

Nle: norleucina;

Om: ornitina;

Paa: ácido trans-3-(3-piridil) acrílico;

3-Pal: \beta-(3-piridinil)alanina;

4-Pal: \beta-(4-piridinil)alanina;

Pta: ácido (4-piridiltio) acético;

Tie: terc-butilglicina;

Tma-His: N,N-tetrametilamidino-histidina;

Tba: terc-butilalanina y

Ura: ácido urocánico.

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Acc es un aminoácido seleccionado entre el grupo de ácido 1-amino-1-ciclopropanocarboxílico (A3c); ácido 1-amino-1-ciclobutanocarboxílico (A4c); ácido 1-amino-1-ciclopentanocarboxílico (A5c); ácido 1-amino-1-ciclohexanocarboxílico (A6c); ácido 1-amino-1-cicloheptanocarboxílico (A7c); ácido 1-amino-1-ciclooctanocarboxílico (A8c) y ácido 1-amino-1-ciclononanocarboxílico (A9c).

Los términos hidroxialquilo, hidroxifenilalquilo e hidroxinaftilalquilo denotan cada uno un radical que contiene 1, 2, 3 ó 4 sustituyentes hidroxi.

El término COX^{5} representa -C=O\cdotX^{5}. Los ejemplos de -C=O\cdotX^{5}, incluyen, pero no se limitan a ellos, acetilo y fenilpropionilo.

Lo que se quiere decir por Lys(N^{\varepsilon}-alcanoilo) se representa mediante la siguiente estructura:

\vskip1.000000\baselineskip

5

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Lys(N^{\varepsilon}-alquilsulfonilo) se representa mediante la siguiente estructura:

\vskip1.000000\baselineskip

6

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Lys(N^{\varepsilon}-(2-(4-alquil-1-piperazino)-acetilo)) se representa mediante la siguiente estructura:

\vskip1.000000\baselineskip

7

\newpage

Lo que se quiere decir por Asp(1-(4-alquil-piperazino)) se representa mediante la siguiente estructura:

8

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Asp(1-alquilamino) se representa mediante la siguiente estructura:

9

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Lys(N^{\varepsilon}-Aec-alcanoilo) se representa mediante la estructura:

10

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Lys (N^{\varepsilon}-ace-alcanoilo) se representa mediante la estructura:

11

\vskip1.000000\baselineskip

Lo que se quiere decir por Ser(O-alcanoilo) se representa mediante la estructura:

12

La variable n en la estructura representada por Lys(N^{\varepsilon}-alcanoilo), Lys(N^{\varepsilon}-alquilsulfonilo), Lys(N^{\varepsilon}-(2-(4-alquil-1-piperazino)-acetilo)), Asp(1-(4-alquil-piperazino)), Asp(1-alquilamino), Lys(N^{\varepsilon}-Aec-alcanoilo), (N^{\varepsilon}-ace-alcanoilo) y Ser(O-alcanoilo) es un número entero comprendido entre 1 y 30, ambos incluidos.

Los nombres completos para otras abreviaturas usadas en esta invención son como sigue:

Boc: t-butiloxicarbonilo;

2BrZ: 2-bromobenciloxicarbonilo;

Bzl: bencilo;

2ClZ: 2-clorobenciloxicarbonilo;

DCM: diclorometano;

DIEA: diisopropiletilamina;

DMF: dimetilformamida;

DNP: 2,4-dinitrofenilo;

Fm: formilo;

Fmoc: 9-fluorenilmetoxicarbonilo;

HBTU: hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio;

HF: fluoruro de hidrógeno;

HOAc: ácido acético;

HOBt: N-hidroxibenzotriazol;

OcHex: O-ciclohexilo;

Resina PAM: resina de 4-hidroximetilfenilacetamidometilo;

TFA: ácido trifluoroacético;

Tos: tosilo y

Xan: xantilo.

\vskip1.000000\baselineskip

La expresión "radical de hidrocarburo (C_{1}-C_{30})" abarca alquilo, alquenilo y alquinilo y en el caso de alquenilo y alquinilo hay C_{2}-C_{30}.

El término "halo" abarca flúor, cloro, bromo y yodo.

En esta invención un péptido de esta invención también se denota mediante otro formato, por ejemplo, (A5c^{8})hGLP-1(7-36)NH_{2} (SEQ ID NO. 774), con los aminoácidos sustituidos de la secuencia natural colocados entre el primer conjunto de paréntesis (por ejemplo, A5c^{8} para Ala^{8} en hGLP-1). La abreviatura GLP-1 significa péptido-1 similar al glucagón; hGLP-1 significa péptido-1 similar al glucagón humano. Los números entre paréntesis después de "hGLP-1" se refieren al número de aminoácidos presentes en el péptido. Por ejemplo, hGLP-1(7-36) (SEQ ID NO. 775) denota los aminoácidos 7 hasta 36 de la secuencia de péptidos para el GLP-1 humano. La secuencia para hGLP-1(7-37) (SEQ ID NO. 776) se enumera en Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Res, 40, 1992, págs. 333-342. La denominación "NH_{2}" en hGLP-1(7-36)NH_{2} indica que el extremo C terminal del péptido está amidado. hGLP-1(7-36) (SEQ ID NO. 775) significa que el extremo C terminal es el ácido libre. En hGLP-1(7-38) (SEQ ID NO. 777), los residuos situados en las posiciones 37 y 38 son Gly y Arg, respectivamente.

Descripción detallada

Los péptidos de esta invención se pueden preparar mediante síntesis peptídica en fase sólida estándar. Véase, por ejemplo, Stewart, J.M. y col., Solid Phase Synthesis (Pierce Chemical Co., 2ª ed. 1984). Los sustituyentes R^{2} y R^{3} de la fórmula genérica anterior se pueden unir a la amina libre del aminoácido N terminal mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica. Se pueden unir, por ejemplo, grupos alquilo, por ejemplo alquilo (C_{1}-C_{30}), usando alquilación reductiva. También se pueden unir grupos hidroxialquilo, por ejemplo, hidroxialquilo (C_{1}-C_{30}), usando la alquilación reductiva en la que el grupo hidroxi libre está protegido con un t-butil éster. Se pueden unir grupos acilo, por ejemplo, COE^{1}, mediante el acoplamiento del ácido libre, por ejemplo, E'COOH, a la amina libre del aminoácido N terminal mediante la mezcla de la resina finalizada con 3 equivalentes molares del ácido libre y de diisopropil carbodiimida en cloruro de metileno durante una hora. Si el ácido libre contiene un grupo hidroxi libre, por ejemplo, ácido p-hidroxifenilpropiónico, entonces el acoplamiento se debería llevar a cabo con 3 equivalentes molares adicionales de HOBT.

Cuando R^{1} es NH-X^{2}-CH_{2}-CONH_{2}, (es decir, Z^{0} = CONH_{2}), la síntesis del péptido se inicia con BocHNX^{2}-CH_{2}-COOH que se acopla a la resina de MBHA. Si R^{1} es NH-X^{2}-CH_{2}-COOH, (es decir, Z^{0}= COOH), la síntesis del péptido se inicia con Boc-HN-X^{2}-CH_{2}-COOH que se acopla a la resina PAM. Para esta etapa en particular, se usan 4 equivalentes molares de Boc-HN-X^{2}-COOH, HBTU y HOBt y 10 equivalentes molares de DIEA. El tiempo de acoplamiento es de aproximadamente 8 horas.

El aminoácido protegido con ácido 1-(N-terc-butoxicarbonil-amino)-l-ciclohexanocarboxílico (Boc-A6c-OH) se sintetizó del modo siguiente. Se disolvieron 19,1 g (0,133 moles) de ácido 1-amino-1-ciclohexanocarboxílico (Acros Organics, Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) en 200 ml de dioxano y 100 ml de agua. A esto se añadieron 67 ml de NaOH 2N y la disolución se enfrió en un baño de hielo-agua. Se añadieron 32,0 g (0,147 moles) de di-terc-butil-dicarbonato a la disolución y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A continuación el dioxano se eliminó a presión reducida y se añadieron 200 ml de acetato de etilo a la disolución acuosa restante. La mezcla se enfrió en un baño de hielo-agua y el pH de la capa acuosa se ajustó hasta aproximadamente 3 mediante la adición de HCl 4N. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (1 x 100 ml). Se combinaron dos capas orgánicas, se lavaron con agua (2 x 150 ml), se secaron sobre MgSO_{4} anhidro, se filtraron y se concentraron hasta sequedad a presión reducida. El residuo se recristalizó en acetato de etilo/hexano para producir 9,2 g (0,0386 moles) del producto purificado, es decir, a partir del material de partida se obtuvo un rendimiento del 29%.

El Boc-A5c-OH se sintetizó de una forma similar a la de Boc-A6c-OH. Se pueden preparar otros aminoácidos Acc protegidos de una forma similar por parte de una persona con una experiencia normal en la técnica tal como se posibilita mediante las explicaciones mostradas en esta invención.

En la síntesis de un análogo de GLP-1 de la presente invención que contenga A5c, A6c, Aib, Boc-Lys(2ClZ)-OH y/o Boc-His(DNP)-OH, el tiempo de acoplamiento es de 2 h para estos residuos y para los residuos que siguen inmediatamente después de ellos. De lo contrario, el tiempo de acoplamiento es de aproximadamente 5 minutos. Para la síntesis de (Tma-His^{7})hGLP-1(7-36)NH_{2} (SEQ ID NO. 778) se usan HBTU (2 mmol) y DIEA (1,0 ml) en 4 ml de DMF para reaccionar con el extremo N terminal de la amina libre del péptido-resina en la última reacción de acoplamiento; el tiempo de acoplamiento es de aproximadamente 2 horas.

Los sustituyentes R^{2} y R^{3} de la fórmula genérica anterior se pueden unir a la amina libre del aminoácido N terminal mediante procedimientos estándar conocidos en la técnica. Se pueden unir, por ejemplo, grupos alquilo, por ejemplo alquilo (C_{1}-C_{30}), usando alquilación reductiva. También se pueden unir grupos hidroxialquilo, por ejemplo, hidroxialquilo (C_{1}-C_{30}), usando la alquilación reductiva en la que el grupo hidroxi libre está protegido con un t-butil éster. Se pueden unir grupos acilo, por ejemplo, COX^{1}, mediante el acoplamiento del ácido libre, por ejemplo, X^{1}COOH, a la amina libre del aminoácido N terminal mediante la mezcla de la resina finalizada con 3 equivalentes molares del ácido libre y de diisopropil carbodiimida en cloruro de metileno durante aproximadamente una hora. Si el ácido libre contiene un grupo hidroxi libre, por ejemplo, ácido p-hidroxifenilpropiónico, entonces el acoplamiento se debería realizar con 3 equivalentes molares adicionales de HOBT.

Mediante el siguiente procedimiento se puede ensayar un compuesto de la presente invención para determinar su actividad como compuesto de unión de GLP-1. Cultivo celular:

Se cultivaron células de insulinoma de rata RIN 5F (ATCC-# CRL-2058, Colección Americana de Cultivos Tipo, Manassas, VA) que expresaban el receptor de GLP-1, en medio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) que contenía suero fetal bovino al 10% y se mantuvieron a aproximadamente 37ºC en una atmósfera humidificada de 5% CO_{2}/95% aire. Unión de radioligandos:

Se prepararon membranas para estudios de unión de radioligandos mediante la homogeneización de las células RIN en 20 ml de Tris-HCl 50 nM helado con un Brinkman Polytron (Westbury, NY) (posición 6, 15 segundos). Los homogeneizados se lavaron dos veces mediante centrifugación (39.000 g/10 min) y los sedimentos finales se pusieron de nuevo en suspensión en Tris-HCl 50 mM, que contenía MgCl_{2} 2,5 mM, 0,1 mg/ml de bacitracina (Sigma Chemical, St. Louis, MO) y BSA al 0,1%. Para el ensayo, se incubaron alícuotas (0,4 ml) con (^{125}I)GLP-1(7-36) (-2200 Ci/mmol, New England Nuclear, Boston, MA) 0,05 nM, con y sin 0,05 ml de péptidos de ensayo competidores sin marcar. Tras una incubación de 100 min (25ºC), el (^{125}I)GLP-1(7-36) (SEQ ID NO.: 775) unido se separó del libre mediante filtración rápida a través de filtros GF/C (Brandel, Gaithersburg, MD), que se habían empapado anteriormente con polietilenoimina al 0,5%. A continuación los filtros se lavaron tres veces con alícuotas de 5 ml de Tris HCl 50 mM helado y la radioactividad unida atrapada en los filtros se contó mediante espectrometría gamma (Wallac LKB, Gaithersburg, MD). La unión específica se definió como el (^{125}I)GLP-1(7-36) (SEQ ID NO.: 775) total unido menos el que se unió en presencia de GLP1(7-36) 1000 nM (Bachem, Torrence, CA).

Los péptidos de esta invención se pueden obtener en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos de dichas sales incluyen, pero no se limita a ellos, a aquellas formadas con ácidos orgánicos (por ejemplo, ácido acético, láctico, maleico, cítrico, málico, ascórbico, succínico, benzóico, metanosulfónico, toluenosulfónico o pamóico), con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico) y con ácidos poliméricos (por ejemplo, ácido tánico, carboximetil celulosa, ácido poliláctico, ácido poliglicólico o copolímeros de ácidos poliláctico-glicólicos). Un procedimiento típico de producción de una sal de un péptido de la presente invención se conoce bien en la técnica y se puede llevar a cabo mediante procedimientos estándar de intercambio de sales. Por consiguiente, la sal de TFA de un péptido de la presente invención (la sal de TFA procede de la purificación del péptido mediante la utilización de HPLC preparativa, eluyendo con TFA que contiene disoluciones tampón) se puede convertir en otra sal, tal como una sal de acetato mediante la disolución del péptido en una pequeña cantidad de disolución acuosa de ácido acético 0,25 N. La disolución resultante se aplica a una columna de HPLC semipreparativa (Zorbax, 300 SB, C-8). La columna se eluye con (1) disolución acuosa de acetato de amonio 0,1N durante 0,5 h, (2) disolución acuosa de ácido acético 0,25N durante 0,5 h y (3) un gradiente lineal (entre el 20% y el 100% de disolución B durante 30 min) a un caudal de 4 ml/min (la disolución A es una disolución acuosa de ácido acético 0,25N; la disolución B es ácido acético 0,25N en acetonitrilo/agua, 80:20). Se recogen las fracciones que contienen el péptido y se liofilizan hasta
sequedad.

Tal como es bien conocido por los expertos en la técnica, los usos conocidos y potenciales del GLP-1 son variados y numerosos (véase, Todd, J.F. y col., Clinical Science, 1998, 95, págs. 325-329 y Todd, J.F. y col., European Journal of Clinical Investigation, 1997, 27, págs. 533-536). Por lo tanto, la administración de los compuestos de esta invención con el objetivo de producir como respuesta un efecto agonista puede tener los mismos efectos y usos que el propio GLP-1. Estos usos variados de GLP-1 se pueden resumir del modo siguiente, tratamiento de: diabetes de tipo I, diabetes de tipo II, obesidad, glucagonomas, trastornos secretores de las vías respiratorias, trastorno metabólico, artritis, osteoporosis, enfermedad del sistema nervioso central, reestenosis, enfermedad neurodegenerativa, fallo renal, insuficiencia cardiaca congestiva, síndrome nefrótico, cirrosis, edema pulmonar, hipertensión y trastornos en los que se desea la reducción de la ingesta alimentaria. Los análogos de GLP-1 de la presente invención que producen como respuesta un efecto antagonista de un sujeto se pueden usar para el tratamiento de lo siguiente: hipoglucemia y síndrome de mala absorción asociados con gastrectomía o resección del intestino delgado.

Por consiguiente, la presente invención incluye dentro de su alcance composiciones farmacéuticas que comprenden, como ingrediente activo, como mínimo uno de los compuestos de fórmula (I) en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Se puede variar la dosis de ingrediente activo en las composiciones de esta invención; no obstante, es necesario que la cantidad de ingrediente activo sea tal que se obtenga una forma farmacéutica adecuada. La dosis seleccionada depende del efecto terapéutico deseado, de la vía de administración y de la duración del tratamiento. En general, una dosis eficaz para las actividades de esta invención se encuentra en el intervalo de entre 1 x 10^{-7} y 200 mg/kg/día, preferentemente entre 1 x 10^{-4} y 100 mg/kg/día, que se puede administrar en una dosis única o se puede dividir en dosis múltiples.

Los compuestos de esta invención se pueden administrar mediante las vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, inyección intramuscular, intraperitoneal, intravenosa o subcutánea, o implante), nasal, vaginal, rectal, sublingual o tópica y se pueden formular con vehículos farmacéuticamente aceptables para proporcionar formas farmacéuticas adecuadas para cada vía de administración.

Las formas farmacéuticas sólidas para administración por vía oral incluyen cápsulas, comprimidos, píldoras, polvos y gránulos. En dichas formas farmacéuticas sólidas, el compuesto activo se mezcla con al menos un vehículo inerte farmacéuticamente aceptable tal como sacarosa, lactosa o almidón. Dichas formas farmacéuticas también pueden comprender, tal y como es práctica normal, sustancias adicionales distintas de dichos diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de las cápsulas, comprimidos y píldoras, las formas farmacéuticas también pueden comprender tampones. Los comprimidos y las píldoras se pueden preparar de forma adicional con recubrimientos entéricos.

Las formas farmacéuticas líquidas para administración por vía oral incluyen emulsiones, disoluciones, suspensiones, jarabes, elixires que contengan diluyentes inertes usados habitualmente en la técnica, tales como agua, farmacéuticamente aceptables. Además de dichos diluyentes inertes, las composiciones también pueden incluir adyuvantes, tales como humectantes, agentes emulsionantes y de suspensión y edulcorantes, potenciadores del sabor y agentes aromatizantes.

Los preparados de acuerdo con esta invención para administración por vía parenteral incluyen disoluciones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas esterilizadas. Ejemplos de disolventes o vehículos no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y aceite de maíz, gelatina y ésteres orgánicos inyectables tales como oleato de etilo. Dichas formas farmacéuticas también pueden contener adyuvantes tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes y agentes de dispersión. Se pueden esterilizar mediante, por ejemplo, filtración a través de un filtro que retenga bacterias, mediante la incorporación de agentes esterilizantes dentro de las composiciones, mediante irradiación de las composiciones o mediante calentamiento de las composiciones. También se pueden fabricar en forma de composiciones sólidas esterilizadas que se puedan disolver en agua esterilizada, o en algún otro medio inyectable esterilizado inmediatamente antes de su uso.

Las composiciones para administración por vía rectal o vaginal son preferentemente supositorios que pueden contener, además de la sustancia activa, excipientes tales como mantequilla de coco o una cera de supositorio.

Las composiciones para administración por vía nasal o sublingual también se preparan con excipientes estándar bien conocidos en la técnica.

Además, se puede administrar un compuesto de esta invención en una composición de liberación sostenida tal como aquellas descritas en las siguientes patentes y solicitudes de patentes. La patente de EE.UU. Nº 5.672.659 enseña composiciones de liberación sostenida que comprenden un agente bioactivo y un poliéster. La patente de EE.UU. Nº 5.595.760 enseña composiciones de liberación sostenida que comprenden un agente bioactivo en una forma gelificable. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 08/929.363/(US-A-5821221) presentado el 9 de Septiembre de 1997, enseña composiciones poliméricas de liberación sostenida que comprenden un agente bioactivo y chitosán. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 08/740.778 (US-A-5916883) presentado el 1 de Noviembre de 1996, enseña composiciones de liberación sostenida que comprenden un agente bioactivo y ciclodextrina. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 09/015.394 (WO-A-9938536) presentado el 29 de Enero de 1998, enseña composiciones absorbibles de liberación sostenida de un agente bioactivo. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 09/121.653 presentado el 23 de Julio de 1998, enseña un procedimiento para la fabricación de micropartículas que comprenden un agente terapéutico tal como un péptido en un procedimiento de aceite en agua. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 09/131.472 presentado el 10 de Agosto de 1998, enseña complejos que comprenden un agente terapéutico tal como un péptido y un polímero fosforilado. El documento de solicitud de patente de EE.UU. Nº 09/184.413 presentado el 2 de Noviembre de 1998, enseña complejos que comprenden un agente terapéutico tal como un péptido y un polímero que lleva una lactona no polimerizable. Las explicaciones de las patentes y de las solicitudes anteriores se incorporan en esta invención a modo de referencia.

A no ser que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos usados en esta invención tienen el mismo significado que el que entiende normalmente una persona con experiencia ordinaria en la técnica a la que pertenece esta invención. Además, todas las publicaciones, solicitudes de patentes, patentes y otra bibliografía mencionadas en esta invención se incorporan a modo de referencia. Síntesis:

El siguiente ejemplo describe un procedimiento de síntesis para la producción de un péptido de la invención, procedimiento que es bien conocido para los expertos en la técnica de la síntesis de péptidos. En el caso de que se proporcionen, las cantidades de reactivos son aproximadamente las empleadas para llevar a cabo la síntesis a una escala de 0,20 mmol. También son bien conocidos otros procedimientos por los expertos en la técnica, así el ejemplo se proporciona solo para propósitos de ilustración y no está hecho para limitar el alcance de la presente invención de ninguna forma.

En una serie de fuentes comerciales se encuentran disponibles una gran variedad de aminoácidos, con y sin protección de cadena lateral. Por ejemplo, los siguientes aminoácidos, en los que los paréntesis designan al grupo protector de cadena lateral, si se encuentra presente, se encuentran disponibles de distintas formas en Bachem, Torrance, CA; Nova Blochem., LaJolla, CA; Chem-Impex International; Wood Dale, IL y Synthetech, Inc. Albany, OR: Boc-Ado-OH, Boc-Aib-OH, Boc-Ala-OH, Boc-\betaAla-OH, Boo-Arg (Tos)-OH, Boc-D-Arg(Tos)-OH, Boc-Asp(OcHex)-OH, Boc-D-Asp(OcHex)-OH, Boc-Aun-OH, Boc-Ava-OH, Boc-Gin-OH, Boc-Glu(OcHex)-OH, Boc-Gly-OH, Boc-His(DNP)-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Lys(2ClZ)-OH. Boc-Nal-OH, Boc-Phe-OH, Boc-Ser(Bzl)-OH, Boc-Thr(Bzl)-OH, Boc-Trp(Fm)-OH, Boc-Tyr(2BrZ)-OH y Boc-Val-OH.

Ejemplo 1 Síntesis de (Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}

El péptido del título se puede sintetizar en un sintetizador de péptidos Applied Biosystems (Foster City, CA) modelo 430A modificado para acelerar la síntesis del péptido en fase sólida por química Boc. (Véase Schnolzer y col., Int. J. Peptide Protein Res., 90:180 (1992)). Se puede usar resina de 4-metilbenzhidrilamina (MBHA) (Peninsula Laboratories, Belmont, CA) con la sustitución de 0,91 mmol/g. Los aminoácidos protegidos por el grupo Boc (Bachem, CA, Torrance, CA; Nova Biochem., LaJolla, CA) se pueden usar, por ejemplo, con la siguiente protección de cadena lateral: Boc-Ala-OH, Boc-Arg(Tos)-OH, Boc-Asp(OcHex)-OH, Boc-Tyr(2BrZ)-OH, Boc-His(DNP)-OH, Boc-Val-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Gly-OH, Boc-Gln-OH, Boc-Ile-OH, Boo-Lys(2ClZ)-OH, Boc-Thr(Bzl)-OH, Boc-Ser(Bzl)-OH, Boc-Phe-OH, Boc-Glu(OcHex)-OH y Boc-Trp(Fm)-OH. Los grupos Boc se eliminan mediante tratamiento con TFA al 100% durante 2 x 1 min. Los aminoácidos protegidos por el grupo Boc (2,5 mmol) se preactivan con HBTU (2,0 mmol) y DIEA (1,0 mL) en 4 mL de DMF y se acoplan sin neutralización previa de la sal de TFA del péptido-resina.

Al final del acoplamiento de la cadena de péptido, la resina se trata con una disolución de mercaptoetanol al 20%/DIEA al 10% en DMF durante 2 x 30 min para eliminar el grupo DNP en la cadena lateral de His. A continuación se elimina el grupo Boc mediante tratamiento con TFA al 100% durante 2 x 2 min. Después de la neutralización del péptido resina con DIEA al 10% en DMF (1 x 1 min), se elimina el grupo formilo de la cadena lateral de Trp mediante tratamiento con una disolución de etanolamina al 15%/agua al 15%/DMF al 70% durante 2 x 30 min. A continuación, el péptido-resina se lava con DMF y con DCM y se seca a presión reducida. La escisión final se lleva a cabo mediante la agitación del péptido-resina en 10 mL de HF que contenían 1 mL de anisol y ditiotreitol (24 mg) a 0ºC durante aproximadamente 75 min. El HF se elimina mediante una corriente de nitrógeno y a continuación el residuo se lava con éter (6 x 10 mL) y se extrae con HOAc 4N (6 x 10 mL).

La mezcla de péptidos en el extracto acuoso se purifica mediante cromatografía líquida preparativa de fase inversa de alta presión (HPLC) usando una columna de fase inversa VYDAC® C18 (Nest Group, Southborough, MA). La columna se eluye con un gradiente lineal (entre el 20% y el 50% de disolución B durante 105 min) a un caudal de 10 mL/min (disolución A = agua que contiene TFA al 0,1%; disolución B = acetonitrilo que contiene el 0,1% de TFA). Las fracciones se recogen y se examinan mediante HPLC analítica. A continuación se combinan aquellas fracciones que contienen producto purificado y se liofilizan hasta sequedad. Para controlar el peso molecular del producto final se puede usar el análisis mediante espectrómetro de masas con electrospray (EM(ES)).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos 2-7

Los siguientes péptidos también se pueden sintetizar de acuerdo con el procedimiento detallado en el ejemplo 1, sustituyendo los aminoácidos adecuados durante el acoplamiento del péptido.

Ejemplo 2:: (Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 768)

Ejemplo 3:: (Val^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 769)

Ejemplo 4:: (\beta-Ala^{8,35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 770)

Ejemplo 5:: (Abu^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 771)

Ejemplo 6:: (Val^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2} y (SEQ ID NO. 772)

Ejemplo 7:: (\beta-Ala^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 773)

Cada uno de los ejemplos anteriores se puede hacer de acuerdo con los procedimientos descritos anteriormente, con las sustituciones adecuadas en los materiales de partida durante el acoplamiento del péptido.

\vskip1.000000\baselineskip

Referencias citadas en la descripción Esta lista de referencias citadas por el solicitante se incluye sólo para la conveniencia del lector. No forma parte del documento de patente europea. Incluso teniendo en cuenta que se han recopilado las referencias con gran cuidado, no se puede excluir la presencia de errores u omisiones, quedando exenta la EPO de toda responsabilidad a este respecto. Documentos de patentes citados en la descripción

\bullet WO 0198331 A [0006]: \bullet US 74077896 A [0109]

\bullet WO 0034331 A: \bullet US 5916883 A [0109]

\bullet WO 0034332 A [0006]: \bullet US 01539498 A [0109]

\bullet WO 9943706 A [0006]: \bullet WO 9938536 A [0109]

\bullet US 5672659 A [0109]: \bullet US 12165398 A [0109]

\bullet US 5595760 A [0109]: \bullet US 13147298 A [0109]

\bullet US 92936397 A [0109]: \bullet US 18441398 A [0109]

\bullet US 5821221 A [0109]: \bullet US 60449203 B [0118]

Bibliografía al margen de patentes citadas en la descripción

\bulletVamdell, J.M. y col. J. Histochem Cytochem, 1985, vol. 33, 1080-6 [0003]

\bulletKreymann, B. y col. Lancet, 1987, vol. 2, 1300-4 [0003]

\bulletWettergren A. y col. Dig Dis Sci, 1993, vol. 38, 665-73 [0003]

\bulletD'Alessio, D.A. y col. J. Clin Invest, 1994, vol. 93, 2293-6 [0003]

\bulletGutniak, M.K. y col. Diabetes Care, 1994, vol. 17, 1039-44 [0004]

\bulletWilliams, B. y col. J. Clin Endo Metab, 1996, vol. 81, 327-32 [0004]

\bulletHolz, G.G. y col. Nature, 1993, vol. 361, 362-5 [0004]

\bulletOrskov, C. Diabetologia, 1992, vol. 35, 701-711 [0005]

\bullet Potential of GLP-1 in diabetes management in Glucagon III. Holst, J.J. y col. Handbook of Experimental Pharmacology. Springer Verlag, 1996, 311-326 [0005]

\bulletKreymann, B. y col. Lancet, 1987, vol. II, 1300-1304 [0005]

\bulletWeir, G.C. y col. Diabetes, 1989, vol. 38, 338-342 [0005]

\bulletGutniak, M. N. Engl J Med, 1992, vol. 226, 1316-1322 [0005]

\bulletNathan, D.M. y col. Diabetes Care, 1992, vol. 15, 270-276 [0005]

\bulletNauck, M.A. y col. Diagbetologia, 1993, vol. 36, 741-744 [0005]

\bulletCreutzfeldt, W.O. y col. Diabetes Care, 1996, vol. 19, 580-586 [0005]

\bulletDeacon, C.F. y col. Diabetes, 1995, vol. 44, 1126-1131 [0006]

\bulletMojsov, S. Int. J. Peptide Protein Res, 1992, vol. 40, 333-342 [0089]

\bulletTodd, J.F. y col. Clinical Science, 1998, vol. 95, 325-329 [0100]

\bulletTodd, J.F. y col. European Journal of Clinical Investigation, 1997, vol. 27, 533-536 [0100]

\bulletSchnolzer y col. Int. J. Peptide Protein Res., 1992, vol. 90, 180 [0113]

<110> SOCIETE DE CONSEILS DE RECHERCHES ET D'APPLICATIONS SCIENTIFIQUES, S.A.S DONG, ZHENG ZIN

\vskip0.400000\baselineskip

<120> ANALOGOS DE GLP-1

\vskip0.400000\baselineskip

<130> 129P-PCT2

\vskip0.400000\baselineskip

<160> 781

\vskip0.400000\baselineskip

<140>

\vskip0.400000\baselineskip

<141>

\vskip0.400000\baselineskip

<150> 60/449,203

\vskip0.400000\baselineskip

<151> 2003-02-19

\vskip0.400000\baselineskip

<170> PatentIn versión 3.2

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 767

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Descripción de la secuencia artificial: Péptido hGLP-1 modificado sintético

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29).. (29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Aib

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 767

13

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 768

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (2)..(2)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Abu

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29)..(29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Beta-Ala

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\newpage

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 768

\vskip1.000000\baselineskip

14

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 769

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29)..(29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Beta-Ala

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 769

\vskip1.000000\baselineskip

15

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 770

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (2)..(2)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Beta-Ala

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29).. (29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Beta-Ala

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\newpage

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 770

\vskip1.000000\baselineskip

16

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 771

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (2)..(2)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Abu

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29)..(29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Aib

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 771

\vskip1.000000\baselineskip

17

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 772

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29)..(29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Aib

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\newpage

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 772

\vskip1.000000\baselineskip

18

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 773

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 30

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Descripción de la secuencia artificial: Péptido help-1 modificado sintético

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (2)..(2)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Beta-Ala

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<221> MOD__RES

\vskip0.400000\baselineskip

<222> (29).. (29)

\vskip0.400000\baselineskip

<223> Aib

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> amidación del extremo c terminal

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 773

\vskip1.000000\baselineskip

19

Claims

1. Compuesto de fórmula (I),

(I)(R^{2}R^{3})-A^{7}-A^{8}-A^{9}-A^{10}-A^{11}A^{12}-A^{13}-A^{14}-A^{15}-A^{16}-A^{17}-A^{18}-A^{19}-A^{20}-A^{21}-A^{22}A^{23}-A^{24}-A^{25}-A^{26}- A^{27}-A^{28}-A^{29}-A^{30}-A^{31}-A^{32}-A^{33}-A^{34}-A^{35}-A^{36}-A^{37}-A^{38}-A^{39}-R^{1},

en la que:

A^{7} es L-His;

A^{8} es Abu, \beta-Ala, Ser o Val;

A^{9} es Glu;

A^{10} es Gly;

A^{11} es Thr;

A^{12} es Phe;

A^{13} es Thr;

A^{14} es Ser;

A^{15} es Asp;

A^{16} es Val;

A^{17} es Ser;

A^{18} es Ser;

A^{19} es Tyr;

A^{20} es Leu;

A^{21} es Glu;

A^{22} es Gly;

A^{23} es Gln;

A^{24} es Ala;

A^{25} es Ala;

A^{28} es Lys;

A^{27} es Glu;

A^{28} es Phe;

A^{29} es lie;

A^{30} es Ala;

A^{31} es Trp;

A^{32} es Leu;

A^{33} es Val;

A^{34} es Lys;

A^{35} es \beta-Ala o Aib;

A^{38} es L- o D-Arg;

A^{37} está suprimido;

A^{38} está suprimido;

A^{39} está suprimido;

X^{3} es

20

o -C(O)-NHR^{12}, en el que X^{4} es, de forma independiente en cada caso, -C(O)-, -NH-C(O)- o -CH_{2}- y en el que f es, de forma independiente en cada caso, un número entero comprendido entre 1 y 29, ambos incluidos; cada uno de R^{2} y R^{3} se selecciona de forma independiente entre el grupo compuesto por H, alquilo (C_{1}-C_{30}), alquenilo (C_{2}-C_{30}), fenil alquilo (C_{1}-C_{30}), naftil alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquenilo (C_{2}-C_{30}), hidroxifenil alquilo (C_{1}-C_{30}) e hidroxinaftil alquilo (C_{1}-C_{30}); o uno de R^{2} y R^{3} es

21

acilo (C_{1}-C_{30}), alquil (C_{1}-C_{30})sulfonilo, C(O)X^{5},

22

en la que Y es H, OH o NH_{2}; r es entre 0 y 4; q es entre 0 y 4 y X^{5} es alquilo (C_{1}-C_{30}), alquenilo (C_{2}-C_{30}), fenil alquilo (C_{1}-C_{30}), naftil alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquilo (C_{1}-C_{30}), hidroxi alquenilo (C_{2}-C_{30}), hidroxifenil alquilo (C_{1}-C_{30}) o hidroxinaftil alquilo (C_{1}-C_{30});

y

R^{12} y R^{13} son, de forma independiente en cada caso, alquilo (C_{1}-C_{30}); a condición de que:

(i) el citado compuesto no sea:

(Ser^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 779);

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

2. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767) (Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 768)

(Val^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 769) (\beta-Ala^{8,35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 770) (Abu^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 771) (Val^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 772) o (\beta-Ala^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 773)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

3. Compuesto, según la reivindicación 2, en el que el citado compuesto es:

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

4. Compuesto, según la reivindicación 3, en el que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

5. Composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto según la reivindicación 1 o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

\vskip1.000000\baselineskip

6. Composición farmacéutica, según la reivindicación 5, en la que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1 (7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767) (Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 768) (Val^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 769) (\beta-Ala^{8,35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 770) (Abu^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 771) (Val^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 772) o (\beta-Ala^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 773)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

7. Composición farmacéutica, según la reivindicación 6, en la que el citado compuesto es:

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

8. Composición farmacéutica, según la reivindicación 7, en la que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

9. Uso de una cantidad eficaz de un compuesto según la reivindicación 1 o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables en la preparación de un medicamento para producir como respuesta un efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujeto necesitado del mismo.

10. Uso de una cantidad eficaz de un compuesto según la reivindicación 1 o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre el grupo constituido por diabetes de tipo I, diabetes de tipo II, obesidad, glucagonomas, trastornos secretores de las vías respiratorias, trastorno metabólico, artritis, osteoporosis, enfermedad del sistema nervioso central, reestenosis y enfermedad neurodegenerativa en un sujeto necesitado del mismo.

11. Uso, según la reivindicación 10, en el que la citada enfermedad es diabetes de tipo I o diabetes de tipo II.

12. Uso, según una de las reivindicaciones 9 a 11, en el que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767) (Abu^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 768) (Val^{8}, \beta-Ala^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 769) (\beta-Alae^{8,35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 770) (Abu^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 771) (Vai^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 772) o (\beta-Ala^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 773)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

13. Uso, según la reivindicación 12, en el que el citado compuesto es:

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

\vskip1.000000\baselineskip

14. Uso, según la reivindicación 13, en el que el citado compuesto es:

(Ser^{8}, Aib^{35})hGLP-1(7-36)NH_{2}; (SEQ ID NO. 767)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.