ES2337795T3 - Uso de suero de cabra para tratamiento veterinario. - Google Patents

Abstract

El uso de una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con VIH en la fabricación de un medicamento para el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero no humano.

Description

Uso de suero de cabra para tratamiento veterinario.

Campo de la invención

La presente invención versa acerca de un medicamento para el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero no humano.

Antecedentes de la invención

Las publicaciones PCT WO 03/004049 y WO 03/064472 describen agentes y tratamientos terapéuticos que están basados en una composición de suero con muchos efectos beneficiosos sorprendentes. Específicamente, el documento WO 03/064472 describe una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con un inmunogén y el uso de esta composición de suero en el tratamiento de enfermedades con un componente inflamatorio como el VIH, la artritis reumatoide, la neuritis, la esclerosis múltiple y afecciones que implican el corazón, el pulmón, la piel, el tracto gastrointestinal, el riñón, el cerebro y el SNC.

En particular, se remite al lector a estos documentos para una comprensión de cómo se puede preparar el agente terapéutico, y para las indicaciones que pueden ser tratadas.

Normalmente, se vacuna una cabra con un lisato vírico VIH-3B cultivado en células H9. Se cree que el suero resultante es activo contra el VIH y la esclerosis múltiple. Adicionalmente, se remite al lector a la sección en las páginas 3 y 4 de del documento WO03/004049 de título "Example of Production of Goat Serum" para detalles adicionales de la producción de suero.

Además de los usos descritos en las anteriores publicaciones PCT, se ha identificado, sorprendentemente, que la composición de suero puede ser activa contra una variedad de afecciones veterinarias, entre ellas la dermatitis atópica canina, el melanoma oral canino y la COPD equina, al igual que otras enfermedades caninas y felinas que tienen un componente inflamatorio.

Resumen de la invención

Conforme a un primer aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con VIH en la fabricación de un medicamento para el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero no humano.

También se proporciona una composición farmacéutica para el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero, comprendiendo la composición una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con VIH, adecuada para su administración a un sujeto mamífero.

Preferentemente, el mamífero es un canino, un felino o un equino. Más preferentemente, el mamífero es un perro, un gato o un caballo.

El inmunogén puede comprender VIH. Este puede presentarse en células anfitrionas intactas, en extractos libres de células, como un lisato vírico, o en una mezcla de los mismos.

A continuación se da un ejemplo de preparación de suero de cabra.

Preferentemente, la composición de suero se administra en una dosis de entre 0,01 y 10 mg/kg al sujeto; más preferentemente entre 0,01 y 5 mg/kg, entre 0,05 y 2 mg/kg, y lo más preferentemente entre 0,1 y 1 mg/kg. La dosis precisa que se debe administrar puede variar dependiendo de dichos factores como la especie, la edad, el sexo y el peso del animal, el procedimiento y la formulación de administración, al igual que la naturaleza y la gravedad de la afección que se va a tratar. Se pueden tener en cuenta otros factores como la dieta, la hora de la administración, la condición del animal, las combinaciones de fármacos y la reacción de sensibilidad.

La composición de suero se puede administrar por medio de cualquier vía efectiva, preferentemente por medio de una inyección subcutánea, aunque vías alternativas que se pueden utilizar incluyen la inyección intramuscular o intralesional, oral, en aerosol, parenteral o tópica. Los ejemplos de composiciones farmacéuticas incluyen cualquier sólido (comprimidos, píldoras, cápsulas, gránulos, ungüentos, etc.) con una composición adecuada para una administración oral, tópica o parenteral; fluidos adecuados para su inyección; o aerosoles adecuados para su administración a un animal. Las composiciones pueden incluir un vehículo.

El clínico o el veterinario responsable del tratamiento pueden determinar un régimen de tratamiento efectivo, y puede depender de factores como la especie, la edad, el sexo y el peso del animal, el procedimiento de administración y la naturaleza y gravedad de la afección que se va a tratar. Se pueden tener en cuenta otros factores como la dieta, la hora de la administración, la condición del animal, las combinaciones de fármacos y la reacción de sensibilidad. Un régimen preferente es la inyección subcutánea de entre 0,1 y 0,5 mg/kg de composición de suero en una formulación líquida. Se cree que una única dosis ofrece una mejora en el estado del animal durante unos 2 a 5 días. Un régimen alternativo de tratamiento, que puede ser adecuado para afecciones más severas, es la administración de 1 mg/kg de composición de suero mediante inyección subcutánea una vez al día durante una semana. Se puede necesitar repetir las inyecciones a intervalos semanales o mensuales de forma indefinida para controlar la afección.

La composición de suero puede comprender, o no, anticuerpos anti-HLA. Se cree que este puede desempeñar un papel en la actividad del suero.

También se describe en el presente documento un procedimiento para el tratamiento veterinario de un mamífero, comprendiendo el procedimiento la administración de una composición de suero que comprende anticuerpos anti-HLA. Se cree que al menos un componente de la actividad del suero está unido a la actividad anti-HLA; la actividad puede residir en el propio anticuerpo o en algún otro factor asociado con el anticuerpo. Preferentemente, el anticuerpo anti-HLA es anticuerpo anti-HLA de cabra. El anticuerpo puede ser policlonal.

Descripción detallada de la invención Ejemplo de la producción de suero de cabra

Se vacunó una cabra mediante inyección intramuscular con un cóctel vírico lisado de VIH y se formuló con adyuvante de Freund. Anteriormente, se mató por calor el virus a 60ºC durante 30 minutos. Se sacaron muestras de sangre después de un intervalo apropiado, como dos semanas, para una valoración inicial. En el procedimiento optimizado, se vacuna a la cabra cada semana durante cuatro semanas, luego se toma una muestra de sangre del animal a la sexta semana para obtener el reactivo.

Se sacan aproximadamente 400 cc de sangre de la cabra mediante una técnica estéril. Se afeita y se prepara con betadine el área para la extracción mediante aguja. Se utiliza una aguja de calibre 18 para sacar aproximadamente 400 cc de sangre del animal. Cabe destacar que el animal puede tolerar que se le saquen aproximadamente 400 cc sin que el animal sufra ningún efecto adverso. El animal no tiene que ser sacrificado. Se puede volver a tomar una muestra de sangre del animal aproximadamente 10 a 14 días después de que repone su volumen de sangre.

Se confirmó la presencia de anticuerpos potencialmente útiles, teniendo en cuenta la actividad deseada de anticuerpos. Una vez se confirmó la presencia de dichos reactivos, se sacó sangre de la cabra cada 4-6 semanas.

Entonces, se centrifuga el producto sanguíneo base para crear el reactivo para crear el suero. Entonces, se filtraron 300 ml de suero para eliminar coágulos grandes y material en partículas. Entonces, se trató el suero con sulfato de amonio supersaturado (disolución al 45% a temperatura ambiente), para precipitar anticuerpos y otros materiales. Se centrifugó la disolución resultante a 5000 rpm durante cinco minutos, después de lo cual se eliminó el fluido sobrenadante. Se volvió a suspender la inmunoglobulina precipitada en suficiente solución salina tamponada con fosfato (tampón PBS, véase Sambrook et al., "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 1989) como para volver a disolver el precipitado.

Entonces, se dializó la disolución a través de una membrana con un corte de peso molecular de 10.000 Daltons. Se llevó a cabo la diálisis en tampón PBS, cambiado cada cuatro horas durante un periodo de 24 horas. La diálisis se llevó a cabo a 4ºC.

Después de 24 horas de diálisis se vaciaron los contenidos de la bolsa de diálisis en un vaso estéril de precipitación. Se ajustó la disolución de forma que la masa por unidad de volumen = 10 mg por ml. La disolución se llevó a cabo utilizando PBS. Entonces, se filtró la disolución resultante a través de un filtro de 0,2 micrómetros en un envase estéril. Después de la filtración, se prorrateó la disolución en dosis unitarias de 1 ml y se almacenaron a -22ºC antes de ser utilizadas.

Administración del suero

Se inyecta intramuscularmente 1 ml de alícuota del suero, preparado como se ha descrito, en un sujeto mamífero. Se repite el tratamiento de forma diaria durante siete días.

Resultados experimentales

Se han tratado mascotas domésticas (caninos y felinos) con el suero a dosis que varían entre 0,04 y 1,3 mg/kg (perros), y entre 0,14 y 1,2 mg/kg (gatos). No se han documentado efectos secundarios significativos. Los resúmenes de los tratamientos son como sigue.

Afecciones tratadas 1. Artropatía y problemas musculoesqueléticos

Se trataron doce perros en los que esta era su dolencia principal, y otros cuatro perros que la tenían como un problema secundario. Se ha documentado cinco animales como que mejoraron significativamente, cinco no han mostrado ninguna respuesta (incluyendo tres tratados por otros problemas), y dos fueron ambiguos. Un dueño sacó a su animal del estudio, y uno de los dueños informa de que ya no tiene días malos.

2. Problemas gastrointestinales incluyendo la pancreatitis

Se trataron cinco animales en los que esta era su dolencia principal, y otros tres que la tenían como un problema secundario. Se ha documentado que seis animales mejoraron significativamente o se resolvió la afección (incluyendo dos tratados por otros problemas). Un animal con pancreatitis mejoró enormemente en comportamiento después de una única inyección, pero siguió vomitando.

3. Enfermedad cutánea

Se trataron cinco animales en los que esta era su dolencia principal, y otros dos que la tenían como un problema secundario. Se ha documentado que cinco de ellos mejoraron significativamente, incluyendo los dos tratados por otros problemas.

Casos de estudio

Se trataron cuatro perros domésticos con el suero. Los resúmenes de sus afecciones y respuestas son como sigue.

Resumen del paciente 1

Afección principal a tratar: lesiones crónicas por lamido en ambos carpos y en el pie derecho asociadas aparentemente con una enfermedad degenerativa de las articulaciones.

Afecciones y tratamientos activos de forma simultánea: poliartropatía con desviación bilateral del carpo debida a una enfermedad degenerativa de las articulaciones.

Respuesta aparente al tratamiento: después de dos inyecciones el dueño dejó sin cubrir la lesión por lamido y el perro no se ha lamido desde entonces.

Reacciones adversas: ninguna documentada.

Resumen del paciente 2

Afección principal a tratar: atopia y quistes interdigitales - aceite de onagra.

Afecciones y tratamientos activos de forma simultánea: múltiples quistes sebáceos generalizados sobre los que el perro muerde. Enfermedad inflamatoria intestinal - control dietético y protexina. Una inyección ocasional de dexadreson para controlar un enrojecimiento agudo. Sin embargo, un tratamiento prolongado con esteroides (inhalados o en comprimidos) tiene como resultado unos efectos secundarios acusados. Enfermedad alérgica respiratoria crónica - responde a antihistamina y esteroides inhalados.

Respuesta aparente al tratamiento: durante el curso de un mes de tratamiento con suero se observó una mejoría notable en la condición de la piel y del manto. Inflamación reducida asociada con quistes sebáceos generalizados. Desde el tratamiento no se han producido episodios de la enfermedad inflamatoria intestinal. Al dejar de administrar antihistamina se repitieron los síntomas respiratorios a pesar del tratamiento.

Reacciones adversas: se documentó un mayor apetito.

Resumen del paciente 3

Afección principal a tratar: alopecia progresiva con niveles de tiroides rayando en lo bajo (a la espera de los resultados de la biopsia cutánea).

Afecciones y tratamientos activos de forma simultánea: ruido de las vías respiratorias superiores, especialmente cuando está excitado, no hay evidencia de colapso traqueal.

Respuesta aparente al tratamiento: solo se ha realizado una inyección hasta la fecha.

Reacciones adversas: no se ha documentado ninguna.

Resumen del paciente 4

Afección principal a tratar: atopia.

Afecciones y tratamientos activos de forma simultánea: ALT y ALKP elevados permanentemente, pero, a pesar de la investigación, no se ha identificado ninguna causa.

Respuesta aparente al tratamiento: solo se ha realizado una inyección hasta la fecha.

Reacciones adversas: después de la primera inyección al regresar a casa, el dueño informa que el animal está hiperexcitable y que corre por toda la casa.

Claims (5)

1. El uso de una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con VIH en la fabricación de un medicamento para el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero no humano.

2. Una composición de suero obtenido de una cabra después de someterla a una prueba de provocación con VIH para su uso en el tratamiento veterinario de la pancreatitis en un mamífero no humano.

3. El uso de la reivindicación 1 o de la composición de suero de la reivindicación 2, en el que el mamífero es un canino.

4. El uso de la reivindicación 1 o de la composición de suero de la reivindicación 2, en el que el mamífero es un felino.

5. El uso de la reivindicación 1 o de la composición de suero de la reivindicación 2, en el que el mamífero es un equino.