ES2350771T3 - Pirrolo [1,2-d][1,2-4]triazina como inhibidores de quinasas c-jun n-terminal (jnk) y quinasas p-38. - Google Patents

Abstract

Un compuesto o una sal de adición del ácido farmacéuticamente aceptable de estos en donde el compuesto tiene la fórmula (V): **(Ver fórmula)**5 en donde R1 es un hidrógeno, alquilo o halo; R2 es un hidrógeno o alquilo; R3 es cloro, metilo, amino, carboxi, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, ciclopropilaminocarbonilo, bencilaminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, 10 metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropiloxicarbonilamino, isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocarbonilo, oxazolil, triazinil o etilaminocarbonilamino; R4 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alcoxi, e hidroxi; R6 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, y alcoxi; Q1 es alquilo, alcoxi, aralquilamino, alquilamino o cicloalquilamino; en donde alquilo se refiere a grupos hidrocarburo no-sustituidos de cadena lineal o ramificada de 1 a 20 átomos de carbono, preferiblemente, 1 a 7 átomos de carbono; alcoxi significa un radical -OR donde R es alquilo como se define anteriormente; halo significa flúor, cloro, bromo, o yodo, preferiblemente flúor y cloro; 20 cicloalquilo se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo cíclico no aromático saturado o parcialmente insaturado, que contiene 1 a 3 anillos y de 3 a 7 carbonos por anillo que además se puede fusionar con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado; y arilo significa un radical hidrocarburo aromático bicíclico o monocíclico monovalente de 6 a 10 átomos del anillo, en donde dicho anillo arilo opcionalmente se puede fusionar a un anillo saturado monocíclico de 5-, 6-o 7-miembros, que opcionalmente contiene 1 o 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir del oxígeno, nitrógeno o azufre, los átomos del anillo remanentes siendo C donde uno o dos átomos de C opcionalmente se reemplazan por un grupo carbonilo.

Description

Se proporcionan en este documento los compuestos que tienen actividad inhibidora de la citoquina. Los compuestos en ciertas modalidades son los compuestos pirrolo-triazina para tratar las condiciones asociadas con las quinasas p38 y/o JNK y para tratar condiciones asociadas con la quinasa p38 o JNK. Los detalles se dan a continuación y en las reivindicaciones.

ANTECEDENTES

Un gran número de citoquinas participan en la respuesta inflamatoria, incluyendo IL-1, IL6, IL-8 y TNF-α. La sobreproducción de citoquinas tales como IL-1 y TNF-α, se implican en una amplia variedad de enfermedades, incluyendo enfermedad inflamatoria intestinal, artritis reumatoide, psoriasis, esclerosis múltiple, choque endotóxico, osteoporosis, enfermedad de Alzheimer, e insuficiencia cardíaca congestiva, entre otras [Henry et al., Drugs Fut., 24:1345-1354 (1999); Salituro et al., Curr. Med. Chem., 6:807-823 (1999)]. Las pruebas en pacientes humanos indican que los antagonistas de las proteínas citoquinas son efectivos en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas, tales como, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal para TNF-α (Remicade) [Rankin et al., Br. J. Rheumatol., 34:334-342 (1995)], y una proteína de fusión Fc del receptor soluble de TNF-α (Etanercept) [Moreland et al., 25 Ann. Intern. Med., 130:478-486 (1999)].

La biosíntesis de TNF-α, ocurre en muchos tipos de células en respuesta a un estímulo externo, tal como, por ejemplo, un mitógeno, un organismo infeccioso, o trauma. Importantes mediadores de la producción de TNF-α, son las proteínas quinasas (MAP) activadas por el mitógeno, incluyendo quinasas JNKs y p38. Estas quinasas se activan en respuesta a diferentes estímulos del estrés, incluyendo pero no limitando a citoquinas pro-inflamatorias, las endotoxinas, la luz ultravioleta, y el choque osmótico. Las rutas de JNK y p38, se activan por estimulación de los miembros de la familia del receptor de TNF, tales como TNFR1. CD40, mediador de la entrada del virus del Herpes (’HVEM’)/otras proteínas asociadas con el receptor de TNF (TRAF)-asociadas con el receptor (’ATAR’), CD95/Fas/Apo1. Los receptores TRAIL/Apo2L y el receptor de la citoquina inducida por la activación relacionada con TNF (’TRANCE’), activador del receptor de NFkB (’RANK’).

Existen cuatro isoformas conocidas de p38, i.e., p38α, p38β, p38γ, y p38δ. Las isoformas α y β se expresan en las células inflamatorias y son moduladores claves de la producción de TNF-α. La inhibición de las enzimas p38α y β en células, da lugar a niveles reducidos de la expresión de TNFα. También, la administración de los inhibidores de p38α y β en modelos en animales de enfermedad inflamatoria ha demostrado que tales inhibidores son efectivos en el tratamiento de aquellas enfermedades. Por consiguiente, las enzimas p38 desempeñan un papel importante en los procesos inflamatorios mediados por IL-1 y TNF-α. Los compuestos que supuestamente inhiben la quinasa p38 y las citoquinas tales como IL-1 y TNF-α para utilizar en el tratamiento de enfermedades inflamatorias se revelan en US Pats. Nos. 6,277,989 y 6,130,235 para Scios, Inc; US Pats. Nos. 6,147,080 y 5,945,418 para Vertex Pharmaceuticals Inc; US Pats Nos. 6,251,914, 5,977,103 y 5,658,903 para Smith-Kline Beecham Corp.; US Pats. Nos. 5,932,576 y 6,087,496 para G.D. Searle & Co.; WO 00/56738 y WO 01/27089 para Astra Zeneca; WO 01/34605 para Johnson & Johnson; WO 00/12497 (derivados de la quinazolina como inhibidores de la quinasa p38); WO 00/56738 (derivados de la piridina y pirimidona con el mismo propósito); WO 00/12497 (analiza la relación entre los inhibidores de la quinasa p38); y WO 00/12074 (compuestos de piperazina y piperidina útiles como inhibidores de p38).

JNK (quinasa N-terminal c-Jun), también llamada proteína quinasa activada por el estrés (SAPK), es un miembro de la familia treonina MAP serina/treonina. Las cascadas de señalización de la quinasa MAP son de importancia crítica en la traducción de las señales recibidas en la membrana del plasma en los cambios en la fisiología celular y la expresión génica. JNK se activa en respuesta a una variedad de estímulos, incluyendo citoquinas inflamatorias, factores de crecimiento y estrés celular, tal como luz Ultravioleta.

JNKs, junto con otras MAPKs, han sido implicadas, por tener un papel en la medición de la respuesta celular al cáncer, agregación plaquetaria inducida por la trombina, trastornos de inmunodeficiencia, enfermedades autoinmunes, muerte celular, alergias, osteoporosis y enfermedad cardíaca. Los objetivos terapéuticos relacionados con la activación de la vía JNK incluyen la leucemia mielógena crónica (CML), artritis reumatoide, asma, osteoartritis, isquemia, cáncer y enfermedades neurodegenerativas.

Tres genes distintos, JNK1, JNK2, JNK3 han sido identificados y al menos diez diferentes isoformas de corte y empalme de JNKs existen en células de mamífero (Gupta et al., EMBO J., 15:2760-70 (1996)). Los miembros de la familia JNK se activan por las citoquinas pro inflamatorias, tales como factor de necrosis tumoral -α (TNFα) y la interleucina-1β (IL-1β), así como por estrés ambiental, incluyendo anisomicina, la irradiación UV, la hipoxia, y el choque osmótico (Minden et al., Biochemica et Biophysica Acta, 1333:F85-F104 (1997)).

Los compuestos pirrolo-triazina, útiles como inhibidores de la tirosina quinasa se revelan en US patent application Serial No. 09/573,829 presentada en Mayo 18, 2000, asignada a Bristol-Myers Squibb. Además, los inhibidores de la pirrolo-triazina quinasa se revelan en WO 02/40486, asignada a Bristol-Myers Squibb. Otras aplicaciones que revelan los inhibidores de la quinasa p38 incluyen: WO 03/032970, WO 03/033482, WO03/032971, WO 03/032986, WO 03/032980, WO 03/032987, WO 03/033483. WO03/033457 y WO 03/032972. US 2004/082582 revela que las pirrolo[2,1f][1,2,4]triazinas, son inhibidores de la quinasa N-terminal c-Jun y p38. US 5.570,522 revela las pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazinas para tratar síntomas en trastornos cognitivos. Los compuestos son diferentes de aquellos de la presente invención.

RESUMEN

Se proporcionan en este documento los compuestos, composiciones y métodos para tratar, prevenir, o mejorar uno o más síntomas de condiciones asociadas con la actividad de la quinasa p38 y/o quinasa N-terminal c-Jun (JNK). En una modalidad, los compuestos para el uso en las composiciones y métodos son las pirrolotriazinas. En otra modalidad, los compuestos son útiles como inhibidores de la quinasa, incluyendo quinasas p38α, p38β y/o quinasas N-terminal c-Jun incluyendo, pero no limitando a, JNK1, JNK2 y JNK3.

De acuerdo con la invención, los compuestos son de la fórmula V

imagen1

como se define en la reivindicación 1, la cual se incorpora en este documento por referencia. Otras modalidades de la invención se revelan en las reivindicaciones 2 a 13 que también se incluyen en esta descripción por referencia.

También se revelan las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de fórmula V, como se define anteriormente en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable.

Los compuestos de fórmula (V) para utilizar en métodos para tratar, prevenir o mejorar uno o más síntomas de una enfermedad mediada por la citoquina en un mamífero, mediante la administración a un paciente mamífero, con necesidad de dicho tratamiento, de un compuesto de fórmula V, se revelan. Las enfermedades y trastornos tratados, prevenidos, o cuyos síntomas se mejoran, incluyen, pero no se limitan a, enfermedades inflamatorias crónicas, enfermedad inflamatoria intestinal, artritis reumatoide, psoriasis, esclerosis múltiple, choque endotóxico, osteoporosis. La enfermedad de Alzheimer, y la insuficiencia cardíaca congestiva. Los métodos para prevenir o inhibir las respuestas inflamatorias utilizando los compuestos y composiciones proporcionados en este documento también se revelan. Además se revelan los compuestos de fórmula

(V) para el uso en métodos para inhibir la actividad de las quinasas p38, incluyendo las quinasas p38α y p38β, y/o quinasas N-terminal c-Jun, incluyendo JNK1, JKN2, y JNK3, utilizando los compuestos y composiciones proporcionados en este documento. Además se proporcionan los compuestos de fórmula (V) para utilizar en métodos, para mediar la respuesta de la citoquina utilizando los compuestos y composiciones proporcionados en este documento. Se revela que los artículos de fabricación contienen material de empaque, un compuesto o composición revelados en este documento que es útil para tratar, prevenir, o mejorar uno o más síntomas de enfermedades o trastornos mediados por la quinasa p38 y/o JNK, y un marcador que indica que el compuesto o la composición es útil para tratar, prevenir, o mejorar uno o más síntomas de enfermedades o trastornos mediados por la quinasa p38 y/o JNK.

DESCRICPCIÓN DETALLADA

A. Definiciones

A menos que se defina de otra manera, todos los términos técnicos y científicos utilizados en este documento tienen el mismo significado como se entiende comúnmente por alguien de habilidad en el oficio al cual la invención(s) pertenece. En el caso que exista una pluralidad de definiciones para los términos en este documento, los de esta sección prevalecerán. Cuando se hace referencia a una URL u otro tipo de identificador o dirección, se entiende que tales identificadores pueden cambiar y la particular información en el internet puede ir y venir, pero la información equivalente se puede encontrar buscando en el internet. Referencia de las evidencias a esto, la disponibilidad y difusión pública de dicha información.

Como se utiliza en este documento, p38α se refiere a la enzima revelada en Han et al. (1995) Biochim. Biophys, Acta 1265(2-3):224-7. Como se utiliza en este documento, p38β se refiere a la

enzima revelada en Jiang et al. (1996) J. Biol. Chem. 271(30):17920-6, Como se utiliza en este documento, p38γ se refiere a la enzima revelada en Li et al. (1996) Biochem. Biophys. Res. Commun.

228: 334-340. Como se utiliza en este documento, p38δ se refiere a la enzima revelada en Wang et al. (1997) J. Biol. Chem. 272(38):23668-74.

Como se utiliza en este documento "JNK" se refiere a la quinasa N-terminal c-Jun, también llamada proteína quinasa activada por el estrés (SAPK). Este es un miembro de la familia treonina MAP serina/treonina. Tres genes distintos, JNK1, JNK2, JNK3 han sido identificados y al menos diez diferentes isoformas de corte y empalme de JNKs existen en las células de mamífero (Gupta et al., EMBO J., 15:2760-70 (1996)). Los miembros de la familia JNK se activan por citoquinas pro inflamatorias, tales como factor de necrosis tumoral -α (TNFα) y la interleucina-1β (IL-1β), así como por el estrés ambiental, incluyendo anisomicina, irradiación UV, hipoxia, y choque osmótico (Minden et al., Biochemica et Biophysica Acta. 1333:F85-F104 (1997)).

La presente divulgación también menciona los derivados farmacéuticamente aceptables de un compuesto que incluyen sales, ésteres, enol éteres, enol ésteres, acetales, cetales, ortoésteres, hemiacetales, hemicetales, ácidos, bases, solvatos, hidratos de estos. Tales derivados se pueden preparar fácilmente por aquellos de habilidad en este oficio, utilizando los métodos conocidos para tal derivatización. Los compuestos producidos se pueden administrar a animales o humanos sin efectos tóxicos sustanciales y son farmacéuticamente activos o son pro-fármacos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales amina, tales como pero no limitando a N,N’-dibenciletilenodiamina, cloroprocaina, colina, amoníaco, dietanolamina y otras hidroxialquilaminas, etilenodiamina, N-metilglucamina, procaina, N-bencilfenetilamina, 1-paraclorobencil-2-pirrolidin-1’-ilmetilbenzimidazol, dietilamina y otras alquilaminas, piperazina y tris(hidroximetil) aminometano; sales de metales alcalinos, tales como, pero no limitando a litio, potasio y sodio; sales de metales alcalinotérreos, tales como, pero no limitando a bario, calcio y magnesio; sales de metales de transición, tales como, pero no limitando a zinc; y otras sales metálicas, tales como, pero no limitando a fosfato ácido de sodio y fosfato disódico; y también incluyendo, pero no limitando a, nitratos, boratos, metanosulfonatos, bencenosulfonatos, toluenosulfonatos, sales de ácidos minerales, tales como, pero no limitando a clorhidratos, bromhidratos, hidroyoduros y sulfatos; y sales de ácidos orgánicos, tales como, pero no limitando a acetatos, trifluoroacetatos, oxalatos, benzoatos, salicilatos, maleatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos y fumaratos. Además, se pueden formar iones mixtos ("iones dipolares"). En ciertas modalidades, las formas de sales de los compuestos mejoran la velocidad de disolución y la biodisponibilidad oral de los compuestos. Los ésteres farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo y ésteres heterociclil de grupos ácidos, incluyendo, pero no limitando a, ácidos carboxílicos, ácidos fosfóricos, ácidos fosfínicos, ácidos sulfónicos, ácidos sulfínicos y ácidos borónicos. Los enol éteres farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, derivados de la fórmula C=C(OR) donde R es un hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo o heterociclil. Los enol ésteres farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, derivados de fórmula C=C(OC(O)R) donde R es un hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, eteroaralquil, cicloalquilo o heterociclil. Solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables son complejos de un compuesto con uno o más moléculas de solventes o agua, o 1 a aproximadamente 100, o 1 a aproximadamente 10, o uno a aproximadamente 2, 3 o 4, moléculas de solventes o agua.

El término "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo no-sustituidos de cadena lineal o ramificada de 1 a 20 átomos de carbono, en una modalidad, 1 a 7 átomos de carbono. La expresión "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo no-sustituido de 1 a 4 átomos de carbono. Cuando un subíndice se utiliza con referencia a un alquilo o otro grupo, el subíndice se refiere al número de átomos de carbono que el grupo puede contener. El término "alquilo C0-4" incluye un enlace y grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono.

El término "cicloalquilo" se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo no aromático cíclico saturado o parcialmente insaturado, que contiene 1 a 3 anillos y 3 a 7 carbonos por anillo, que además se puede fusionar con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado. Los grupos ejemplares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, cicloctilo, ciclodecilo, ciclododecilo, y adamantil. Un "cicloalquilo sustituido" se sustituye con uno o más grupos alquilo o alquilo sustituidos como se describe anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo. La expresión "cicloalquilo inferior" se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo no aromático cíclico no-sustituido saturado o insaturado que contiene 3 a 5 átomos de carbono.

"Alquileno" significa un radical hidrocarburo divalente lineal saturado de uno a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo divalente ramificado saturado de tres a seis átomos de carbono, por ejemplo, metileno, etileno, propileno, 2-metilpropileno, pentileno, y similares.

"Alquenilo" significa un radical hidrocarburo monovalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo monovalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene al menos un enlace doble, por ejemplo, etenil, propenil, y similares.

"Alquenileno" significa un radical hidrocarburo divalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo divalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene al menos un doble enlace, por ejemplo, etenileno, propenileno, y similares.

"Alquinilo" significa un radical hidrocarburo monovalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo divalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene al menos un enlace triple, por ejemplo, etinil, propinil, y similares.

"Alquinileno" significa un radical hidrocarburo divalente lineal de dos a seis átomos de carbono o un radical hidrocarburo monovalente ramificado de tres a seis átomos de carbono, que contiene al menos un enlace triple, por ejemplo, etinileno, propinileno, y similares.

"Alcoxi" significa un radical -OR donde R es un alquilo como se define anteriormente, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, 2-propoxi, similares.

"Acilo" significa un radical -C(O)R, donde R es un alquilo o haloalquilo por ejemplo, acetil, trifluoroacetil, y similares.

"Acilamino" significa un radical -NRC(O)R’ donde R es un hidrógeno o alquilo, y R’ es un alquilo, heteroalquilo o heterociclilalquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, acetilamino, 2amino-2-metilpropionamida, y similares.

"Halo" significa flúor, cloro, bromo, o yodo, generalmente flúor y cloro.

"Haloalquilo" significa alquilo sustituido con uno o más átomos halo iguales o diferentes, por ejemplo, -CH2Cl, -CF3, -CH2CF3, -CH2CCl3, y similares.

"Arilo" significa un radical hidrocarburo aromático bicíclico o monocíclico monovalente de 6 a 10 átomos del anillo por ejemplo, fenil, 1-naftil, 2-naftil, y similares. El anillo arilo opcionalmente se puede fusionar a un anillo monocíclico saturado de 5-, 6-o 7-miembros que opcionalmente contiene 1 o 2 heteroatomos independientemente seleccionados a partir del oxígeno, nitrógeno o azufre, siendo los átomos del anillo restantes C, donde uno o dos átomos de C opcionalmente se reemplazan por un grupo carbonilo. Representativos radicales arilo con anillos fusionados incluyen, pero no se limitan a, 2,3-dihidrobenzo[1,4]dioxan, croman, isocroman, 2,3-dihidrobenzofuran, 1,3dihidroisobenzofuran, benzo[1,3]dioxole, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina, 1,2,3,4tetrahidroquinolina, 2,3-dihidro-1H-indol, 2,3-dihidro-1H-isoindol, benzimidazol-2-ona, 3H-benzoxazol-2-ona, y similares.

"Heteroarilo" significa un radical aromático monovalente monocíclico o bicíclico de 5 a 10 átomos del anillo que contiene uno, dos, o tres heteroátomos del anillo seleccionados a partir de N, O,

o S, siendo los restantes átomos del anillo C. El término también incluye aquellos radicales donde un heteroátomo dentro del anillo ha sido oxidado o cuaternizado, tal como por ejemplo, para formar un N-óxido o una sal cuaternaria. Representativos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, tienil, benzotienil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, quinolinil, quinoxalinil, imidazolil, furanil, benzofuranil, tiazolil, isoxazolil, benzisoxazolil, benzimidazolil, triazolil, pirazolil, pirrolil, indolil, 2piridonil, 4-piridonil, N-alquilo-2-piridonil, pirazinonil, piridazinonil, pirimidinonil, oxazolonil, y sus correspondientes N-óxidos, (por ejemplo piridil N-óxido, quinolinil N-óxido), sus sales cuaternarias y similares.

"Heterociclo" o "heterociclil" significa un radical no-aromático cíclico de 3 a 8 átomos del anillo en los cuales uno o dos átomos del anillo son heteroátomos seleccionados a partir del N, O, o S(O)n, (donde n es un número entero de 0 a 2), siendo los restantes átomos del anillo C, donde uno o dos átomos de C opcionalmente se reemplazan por un grupo carbonilo. El término también incluye aquellos radicales donde un átomo de nitrógeno del anillo ha sido oxidado o cuaternizado, tal como, por ejemplo, para formar un N-óxido o una sal cuaternaria. Representativos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, tetrahidropiranil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofenil, piperidino, morfolino, piperazino, pirrolidino, oxiranil, dioxano, 1,3-dioxolanil, 2,2-dimetil-1,3-dioxalanil, sulfolanil, 2oxazolidonil, 2-imidazolidonil, S,S-dioxotiomorfolino, y similares.

"Heterocicloamino" significa un grupo cíclico monovalente saturado de 4 a 8 átomos del anillo, en donde al menos un átomo del anillo es N y opcionalmente contiene un átomo del anillo adicional seleccionado a partir de N u O, siendo los restantes átomos del anillo C. El término incluye grupos tales como pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino y similares.

"Opcionalmente alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi o cicloalquilo sustituido" significa un grupo alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi o cicloalquilo, como se define en este documento, que es opcionalmente sustituido de forma independiente con uno, dos, tres o cuatro o más sustituyentes seleccionados a partir del alquilo, fenil, bencil, haloalquil, heteroalquilo, halo, ciano, heterociclil, acil, -OR (donde R es hidrógeno o alquilo), -NRR’ (donde R y R’ se seleccionan independientemente a partir del hidrógeno, acil, o alquilo que es opcionalmente sustituido con un hidroxi, alcoxi, ciano, halo

o heterociclil), -NHCOR (donde R es alquilo que es opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi, ciano, halo o heterociclil), -NRS(O)nR’ (donde R es un hidrógeno o alquilo, n es un número entero de 0 a 2; y R’ es un hidrógeno, alquilo o heteroalquilo, y es opcionalmente sustituido con un hidroxi, alcoxi, ciano, halo o heterociclil), -NRS(O)nNR’R" (donde R es un hidrógeno o alquilo, n es un número entero a partir de 0 a 2; y R’ y R" son independientemente hidrógeno, alquilo o heteroalquilo y son opcionalmente sustituidos con hidroxi, alcoxi, ciano, halo o heterociclil), -S(O)nR (donde n es un número entero de 0 a 2; y R es un hidrógeno, alquilo o heteroalquilo y es opcionalmente sustituido con un hidroxi, alcoxi, ciano, halo o heterociclil), -S(O)nNRR’ (donde n es un número entero de 0 a 2; y R y R’ son independientemente hidrógeno, alquilo o heteroalquilo y son opcionalmente sustituidos con un hidroxi, alcoxi, ciano, halo o heterociclil), -COOR, -(alquileno)CO OR (donde R es un hidrógeno o alquilo), -CONR’R" o -(alquileno)CONR’R" (donde R’ y R" son independientemente hidrógeno o alquilo, o juntos forman un anillo heterociclil con el átomo de nitrógeno al cual ellos se unen).

"Opcionalmente arilo, heteroarilo o heterociclil sustituido" significa un arilo, heteroarilo o anillo heterociclil como se define anteriormente, que es opcionalmente sustituido independientemente con uno, dos, tres, cuatro o más sustituyentes seleccionados a partir del alquilo, fenil, bencil, haloalquil, heteroalquilo, halo, ciano, acil, -OR (donde R es un hidrógeno o alquilo), -NRR’ (donde R y R’ se seleccionan independientemente a partir del hidrógeno, alquilo o acil), -NHCOR (donde R es un alquilo), -NRS(O)nR’ (donde R es un hidrógeno o alquilo, n es un número entero de 0 a 2 y R’ es un hidrógeno, alquilo o heteroalquilo), -NRS(O)nNR’R" (donde R es un hidrógeno o alquilo, n es un número entero de 0 a 2 y R’ y R" son independientemente hidrógeno, alquilo o heteroalquilo), S(O)nR (donde n es un número entero de 0 a 2 y R es un hidrógeno, alquilo o heteroalquilo), S(O)nNRR’ (donde n es un número entero de 0 a 2 y R y R’ son independientemente hidrógeno, alquilo o heteroalquilo), -COOR, -(alquileno)COOR (donde R es un hidrógeno o alquilo), -CONR’R" o -(alquileno)CONR’R" (donde R’ y R" son independientemente hidrógeno o alquilo).

"Heteroalquilo" significa un radical alquilo como se define anteriormente, portando uno, dos

o tres sustituyentes seleccionados a partir del -NRaRb, -ORc en donde Ra, Rb y Rc son independientemente el uno del otro hidrógeno, alquilo o acil, o Ra y Rb juntos forman un grupo heterocicloamino. Representativos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, hidroximetil, acetoximetil, 3-hidroxipropil, 1,2-dihidroxietil, 2-metoxietil, 2-aminoetil, 2-dimetilaminoetil, 2-acetilaminoetil, 3[pirrolidin-1-il]etil y similares.

"Heteroalquenilo" significa un radical alquenilo como se define anteriormente, portando uno

o dos sustituyentes seleccionados a partir de -NRaRb, -ORc o -S(O)nRd en donde Ra, Rb y Rc son independientemente el uno del otro hidrógeno o alquilo, y Rd es un alquilo o -NRR’ (donde R y R’ son independientemente el uno del otro hidrógeno o alquilo. Representativos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, 3-hidroxi-1-propenil, 3-aminoprop-1-enil, 2-aminosulfoniletenil, 2-metilsulfoniletenil, y similares.

"Heteroalquinilo" significa un radical alquinilo como se define anteriormente, portando uno o dos sustituyentes seleccionados -NRaRb, -ORc, -S(O)nRd o -S(O)nNRR’ (donde R y R’ son independientemente el uno del otro hidrógeno o alquilo) en donde Ra, Rb y Rc son independientemente el uno del otro hidrógeno o alquilo, y Rd es un alquilo y n es un número entero de cero a dos. Representativos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, 3-hidroxi-1-propinil, 3-dimetilaminoprop-1inil y similares.

"Heteroalcoxi" significa un radical -OR donde R es un grupo heteroalquilo como se define anteriormente, por ejemplo, 2-hidroxietoxi, 3-hidroxipropoxi, 2,3-dihidroxipropoxi, 2-aminoetoxi, y similares.

"Heteroalquilamino" significa un radical -NRaRb donde Ra es un hidrógeno o alquilo, y Rb es un grupo heteroalquilo como se define anteriormente, por ejemplo, 2-hidroxietilamino, 3dimetilaminopropilamino, y similares.

"Heterociclilalquilo opcionalmente sustituido" significa un radical -RaRb donde Ra es un grupo alquileno, y Rb es un grupo heterociclil opcionalmente sustituido como se define anteriormente por ejemplo, el 2-(morfolin-4-il)etil, 3(piperidin-1-il)-2-metilpropil, y similares.

"Heterociclilalquenilo opcionalmente sustituido" significa un radical -RaRb donde Ra es un grupo alquenileno y Rb es un grupo heterociclil opcionalmente sustituido como se define anteriormente por ejemplo, el 3-(morfolin-4-il)prop-1-enill, 3-(piperidin-1-il)prop-1-enil, 3-(4metilpiperazin-1-il)prop-1-enil, y similares.

8 "Heterociclilalquinilo opcionalmente sustituido" significa un radical -RaRb donde Ra es un grupo alquinilo y Rb es un grupo heterociclil opcionalmente sustituido como se define anteriormente por ejemplo, 3-(morfolin-4-il)prop-1-inil, 3-(piperidin-1-il)prop-1-inil, y similares. "Heterociclilalcoxi opcionalmente sustituido" significa un radical -OR donde R es un grupo heterociclilalquilo opcionalmente sustituido como se define anteriormente, por ejemplo, 2-(morfolin4-il)-etoxi, 3-(piperazin-1-il)propoxi, 2-[2-oxopirrolidin-1-il] etoxi, y similares. "Heterociclilalquilamino opcionalmente sustituido" significa un radical -NRaRb donde Ra es un hidrógeno o alquilo y Rb es un grupo heterociclilalquilo opcionalmente sustituido como se define anteriormente, por ejemplo, 2-(pirrolidin-2-il)etilamino, 3-(piperidin-1-il)propilamino, y similares. "Heteroaralquiloxi opcionalmente sustituido” significa un radical -O-Ra donde Ra es un radical heteroaralquilo por ejemplo 2-(piridin-3-il)etoxi, 2-[3(2H)-piridazon-1-il]etoxi y similares. "Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o circunstancia descritos posteriormente puede pero no es necesario que ocurra, y que la descripción incluye los casos donde el evento o circunstancia ocurre y los casos en los cuales no lo hace. Por ejemplo, "grupo arilo opcionalmente mono-o di-sustituido con un grupo alquilo" significa que el alquilo puede pero no necesita estar presente, y la descripción incluye situaciones donde el grupo arilo es mono-o disustituido con un grupo alquilo y las situaciones donde el grupo heterociclo no se sustituye con el grupo alquilo. "Grupo protector amino" se refiere a aquellos grupos orgánicos que tienen la intención de proteger los átomos de nitrógeno contra reacciones indeseables durante procedimientos sintéticos por ejemplo, bencil, benciloxicarbonilo (CBZ), ter-butoxicarbonilo (Boc), trifluoroacetil, y similares. A lo largo de la especificación, grupos y sustituyentes de estos se pueden escoger por alguien de habilidad en el campo, para proporcionar fracciones y compuestos estables. También se entiende que los grupos químicos, como se describe en este documento, pueden ser sustituidos o no-sustituidos, ramificados o sin ramificar, según proceda y si se desea. Todos los estereoisómeros de los compuestos proporcionados en este documento se contemplan, ya sea en mezcla o en forma pura o sustancialmente pura. La definición de compuestos proporcionados en este documento abarca todos los posibles estereoisómeros y sus mezclas. Abarca las formas racémicas y los isómeros ópticos aislados que tienen la actividad específica. Las formas racémicas se pueden resolver por métodos físicos, tales como, por ejemplo, cristalización fraccional, separación o cristalización de derivados diastereoméricos o separación mediante cromatografía de columna quiral. Los isómeros ópticos individuales se pueden obtener a partir de los racematos a partir de los métodos convencionales, tales como, por ejemplo, formación de sal con un ácido ópticamente activo seguido por la cristalización. Además se debe entender que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos proporcionados en este documento también se contemplan en este documento. Los métodos de solvatación generalmente se conocen en el oficio. Como se utiliza en este documento, el tratamiento significa cualquier forma en que uno o más de los síntomas de una enfermedad o trastorno se mejoran o de otra manera se alteran beneficiosamente. El tratamiento también abarca cualquier uso farmacéutico de los compuestos y de las composiciones en este documento, tales como el uso para tratar enfermedades o trastornos mediados por la quinasa p38 y/o JNK, o enfermedades o trastornos en los cuales se implica la actividad de la quinasa p38, incluyendo la actividad de la quinasa p38α y p38β , y/o actividad de JNK incluyendo, pero no limitando a, actividad de JNK1, JNK2 y JNK3.

9 Como se utiliza en este documento, la mejora de los síntomas de un trastorno particular por la administración de un compuesto particular o composición farmacéutica se refiere a cualquier disminución, ya sea permanente o temporal, duradera o transitoria que se puede atribuir a o asociar con la administración de la composición. 5 Como se utiliza en este documento, IC50 se refiere a una cantidad, concentración o dosificación de un compuesto de prueba particular que logra una inhibición del 50% de una respuesta máxima, tal como modulación de la actividad de la quinasa p38α y/o JKN, en un ensayo que mide dicha respuesta. Como se utiliza en este documento, el término "paciente" tiene la intención de incluir todos 10 los sujetos, incluyendo las especies de mamíferos, tales como humanos, que se afectan por la mediación de los niveles de la enzima p38 y/o JNK.

B. Los compuestos

Los compuestos de la invención son de la fórmula (V):

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15 en donde R1 es un hidrógeno, alquilo o halo; R2 es un hidrógeno o alquilo; R3 es cloro, metilo, amino, carboxi, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo,

ciclopropilaminocarbonilo, bencilaminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, 20 metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropiloxicarbonilamino,

isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocarbonilo, oxazolil, triazinil o etilaminocarbonilamino; R4 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alcoxi, e hidroxi; R6 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, y alcoxi; Q1 es un alquilo, alcoxi, aralquilamino, alquilamino o cicloalquilamino;

25 en donde "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo no-sustituidos de cadena lineal o ramificada de 1 a

20 átomos de carbono, preferiblemente, 1 a 7 átomos de carbono; "alcoxi" significa un radical -OR donde, R es un alquilo como se define anteriormente; "halo" significa flúor, cloro, bromo, o yodo, preferiblemente flúor y cloro; "cicloalquilo" se

30 refiere a un sistema de anillo hidrocarburo no aromático cíclico saturado o parcialmente insaturado, que contiene 1 a 3 anillos y 3 a 7 carbonos por anillo que además se puede fusionar con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado; y

10 "arilo" significa un radical hidrocarburo aromático bicíclico o monocíclico monovalente de 6 a 10 átomos del anillo, en donde dicho anillo arilo opcionalmente se puede fusionar a un anillo saturado monocíclico de 5-, 6-o 7-miembros que opcionalmente contiene de 1 o 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir del oxígeno, nitrógeno o azufre, siendo los restantes 5 átomos del anillo C, donde uno o dos átomos de C opcionalmente se reemplazan por un grupo carbonilo. En cierto compuesto revelado en este documento, R1 es un hidrógeno o metilo. En ciertas modalidades, R2 es un hidrógeno. R3 es cloro, metilo, amino, carboxi, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, ciclopropilaminocarbonilo, bencilaminocarbonilo, 10 morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropiloxicarbonilamino, isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocarbonilo, oxazolil, triazinil y etilaminocarbonilamino. En ciertos compuestos revelados en este documento, R4 es un alquilo o alcoxi. En ciertas modalidades. R4 es un metilo o metoxi. 15 En otras modalidades. R4 es metilo. R5 es alcoxicarbonilo, aralquilaminocarbonilo, alquilaminocarbonilo y cicloalquilaminocarbonilo. En ciertos compuestos revelados en este documento, R5 es etoxicarbonilo, bencilaminocarbonilo, metilaminocarbonilo y ciclopropilaminocarbonilo. En ciertos compuestos revelados en este documento, R6 es un hidrógeno. 20 En ciertos compuestos revelados en este documento, los compuestos proporcionados en este documento tienen la fórmula:

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en donde las variables son como se describen en este documento.

En ciertas modalidades de la invención, los compuestos proporcionados en este documento 25 tienen la fórmula:

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11 las otras variables son como se describen en la reivindicación 2. En ciertas modalidades de la invención, los compuestos proporcionados en este documento tienen la fórmula:

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las otras variables are como se describen en la reivindicación 3.

En ciertas modalidades de la invención, los compuestos proporcionados en este documento

tienen la fórmula:

imagen1

en donde Q2 es un alcoxi, o alquilaminocarbonilo y las otras variables son como se describen 10 en la reivindicación 4. En ciertas modalidades de la invención, los compuestos proporcionados en este documento tienen la fórmula:

imagen1

en donde Q3 es un hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, aralquilo y arilo; y las otras variables son 15 como se describen en la reivindicación 5.

En ciertas modalidades de la invención, el compuesto proporcionado se selecciona de:

1.

2.

3.

4.

5.

5

10 6.

7.

8.

5 9.

10.

11.

12.

13.

14.

5 15.

16.

17.

18.

19.

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10 10

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5 20.

21.

22.

23.

24.

10

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25.

y 10 26.

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En ciertas modalidades de la invención, el compuesto proporcionado se selecciona de:

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15 y

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C. Preparación de los Compuestos

Los compuestos proporcionados en este documento, se pueden preparar de acuerdo con los siguientes esquemas y el conocimiento de alguien de habilidad en el oficio. Un método ejemplar útil 5 para la preparación de los compuestos revelados en este documento o de acuerdo con la invención se

ilustra en el esquema 1.

En consecuencia, las pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazin-4-ilaminas sustituidas del tipo (I), proporcionados en este documento, se pueden hacer por varios medios, por ejemplo como se muestra en el esquema 1, la reacción de una amina sustituida apropiadamente con un reactivo tal como

10 1,1’tiocarbonildi-2(1H)-piridona,1,1’-tiocarbonildiimidazol o tiofosgeno en un solvente tal como cloruro de metilo o dioxano produce el isotiocianato. El tratamiento del isotiocianato con una (1Hpirrol-2-ilmetileno)-hidrazina apropiadamente sustituida, produce la tiourea la cual se metila y cicla a una temperatura elevada para proporcionar el compuesto I, en el cual, los compuestos de la fórmula V, de acuerdo con la invención, caen.

15 Esquema I

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Referencias de métodos sintéticos adicionales son las siguientes: 1) Reacciones de formación de heterociclos: Bioorg. Med. Chem. Letters 12: 3125-3128 (2002)

La preparación de diferentes tioisocianatos, a partir de la anilina correspondiente se puede lograr fácilmente vía el siguiente procedimiento. La anilina se trata con 1,1’-tiocarbonildi-2(1H)piridona en CH2Cl2 durante 1-10 hrs. Por lo general, un precipitado se forma, el cual se recolecta por filtración para proporcionar el producto. Alternativamente, el solvente se retira in vacuo y el material resultante se purifica mediante los diferentes métodos conocidos por aquellos de habilidad en el oficio. También, la preparación descrita en el Ejemplo 1A, proporciona otro medio útil para la preparación del tioisocianato.

D. Formulación de las composiciones farmacéuticas

Las composiciones farmacéuticas reveladas en este documento o de la invención de acuerdo con la reivindicación 10, contienen cantidades terapéuticamente efectivas de uno o más de los compuestos revelados en este documento o de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6, que son útiles en la prevención, tratamiento, o la mejora de uno o más de los síntomas de condiciones asociadas con la quinasa p38 y/o asociadas con JNK, incluyendo condiciones mediadas por TNF-α, IL-1, y/o IL-8. Tales condiciones incluyen, pero no se limitan a, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos destructores de huesos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, y enfermedades virales.

En ciertas modalidades de esta divulgación o la invención, la enfermedad se selecciona de pancreatitis (aguda o crónica), asma, alergias, síndrome de dificultad respiratoria aguda, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, glomerulonefritis, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, escleroderma, tiroiditis crónica, enfermedad de Grave, gastritis autoinmune, diabetes, anemia hemolítica autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, dermatitis atópica, hepatitis crónica activa, miastenia gravis, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria intestinal, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn, psoriasis, enfermedad huésped vs. injerto, reacción inflamatoria inducida por endotoxinas, tuberculosis, ateroesclerosis, degeneración muscular, caquexia, artritis psoriática, síndrome de Reiter, gota, artritis traumática, artritis debida a la rubeola, sinovitis aguda, enfermedad de las células-β pancreáticas; enfermedades caracterizadas por infiltrado masivo de neutrófilo; espondilitis reumatoide, artritis gotosa y otras condiciones artríticas, malaria cerebral, enfermedad inflamatoria pulmonar crónica, silicosis, sarcoidosis pulmonar, enfermedad de resorción ósea, rechazos de aloinjertos, fiebre y mialgias debido a la infección, caquexia secundaria a la infección, formación mieloide, formación de tejido cicatrizante, colitis ulcerativa, piresis, influenza, osteoporosis, osteoartritis y trastorno del hueso relacionado con el mieloma múltiple, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiple, sepsis, shock séptico, y Shigellosis; enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, isquemia cerebral o enfermedad neurodegenerativa causada por lesión traumática; trastornos angiogénicos incluyendo tumores sólidos, neovasculización ocular, y hemangiomas infantiles; enfermedades virales incluyendo infección de hepatitis aguda (incluyendo hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), infección por el HIV y la retinitis por CMV, SIDA, SARS, ARC o malignidad, y herpes; accidente cerebrovascular, isquemia miocárdiaca, isquemia en ataques cardíacos del accidente cerebrovascular, hipoxia del órgano, hiperplasia vascular, lesión de reperfusión cardiaca y renal, trombosis, hipertrofia cardiaca, agregación plaquetaria inducida por la trombina, endotoxemia y/o síndrome de shock tóxico, y condiciones asociadas con sintasa-2 de prostaglandina endoperoxidasa.

Además, los inhibidores de p38 y/o JNK proporcionados en este documento inhiben la expresión de proteínas pro-inflamatorias inducibles tales como sintasa-2 de prostaglandina endoperoxida (PGHS-2), también denominado como ciclooxigenasa-2 (COX-2). Por consiguiente, las condiciones asociadas con p38 y/o JNK adicionales, incluyen edema, analgesia, fiebre y dolor, tales como dolor neuromuscular, dolor de cabeza, dolor causado por cáncer, dolor dental y dolor de artritis. Los compuestos proporcionados en este documento también se pueden utilizar para tratar infecciones virales veterinarias, tales como infecciones por lentivirus, incluyendo, pero no limitando a virus de anemia infecciosa equina; o infecciones retro virus, incluyendo virus de inmunodeficiencia felina, virus de inmunodeficiencia bovina, y virus de inmunodeficiencia canina. Cuando los términos "condición asociada con p38"; "enfermedad o trastorno asociado con p38"; "condición asociada con JNK" o "enfermedad o trastorno asociado con JNK" se utilizan en este documento, cada una tiene la intención de abarcar todas las condiciones identificadas anteriormente como si se repite en longitud, así como cualquier otra condición que se afecte por la actividad de la quinasa p38 y/o JNK.

Las composiciones contienen uno o más compuestos revelados en este documento o de la invención de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6. Los compuestos se formulan preferiblemente en las preparaciones farmacéuticas apropiadas tales como soluciones, suspensiones, comprimidos, comprimidos dispersables, píldoras, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación sostenida o elíxires, para la administración oral o en soluciones estériles o suspensiones para la administración parenteral, así como preparación de parche transdérmico e inhaladores en polvo seco. Por lo general los compuestos descritos arriba se formulan en composiciones farmacéuticas utilizando técnicas y procedimientos bien conocidos en el oficio (ver, por ejemplo, Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Fourth Edition 1985, 126). En las composiciones, las concentraciones efectivas de uno

o más compuestos o derivados farmacéuticamente aceptables es o son mezclados con un apropiado portador o vehículo farmacéutico. Los compuestos se pueden derivatizar como las sales, ésteres, enol éteres o ésteres, ácidos, bases, solvatos, hidratos o pro-fármacos correspondientes antes de la formulación, como se describe anteriormente. Las concentraciones de los compuestos en las composiciones son efectivas para la entrega de una cantidad, en la administración, que trata, previene,

o aminora uno o más de los síntomas de condiciones asociadas con la quinasa p-38 y/o JNK, incluyendo condiciones mediadas por TNF-α, IL-1, y/o IL-8. Tales condiciones incluyen, pero no se limitan a, cáncer, restenosis coronaria, osteoporosis y síndromes caracterizados por inflamación y/o autoinmunidad crónica.

Por lo general, las composiciones se formulan para la administración de dosis únicas. Para formular una composición, la fracción en peso del compuesto se disuelve, suspende, dispersa o se mezcla así en un vehículo seleccionado a una concentración efectiva de tal manera que la condición tratada se alivia o mejora. Los portados o vehículos farmacéuticos apropiados para la administración de los compuestos proporcionados en este documento incluyen cualquiera de estos portadores conocidos por aquellos de habilidad en el oficio, pueda ser apropiado para el modo particular de administración.

Además, los compuestos pueden ser formulados como los ingredientes activos farmacéuticamente solos en la composición o pueden ser combinados con otros ingredientes activos. Las suspensiones liposomales, incluyendo liposomas dirigidos al tejido, tales como liposomas dirigidos al tumor, también pueden ser apropiados como portadores farmacéuticamente aceptables. Estos se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por aquellos de habilidad en el oficio. Por ejemplo, formulaciones de liposomas se pueden preparar como se describe en U.S. Patent No. 4,522,811. En resumen, los liposomas tales como vesículas multilamellar (MLV’s) se pueden formar por secado de la fosfatidilcolina del huevo y fosfatidilserina del cerebro (relación molar 7:3) en el interior de un frasco. Una solución de un compuesto proporcionado en este documento en solución reguladora de fosfato salina carente de cationes divalentes (PBS) se adiciona y el frasco se agita hasta que la película del lípido se disperse. Las vesículas resultantes se lavan para eliminar el compuesto no encapsulado, se forman los pellets por centrifugación, y luego se re suspenden en PBS.

El compuesto activo se incluye en el portador farmacéuticamente aceptable en una cantidad suficiente para ejercer un efecto terapéuticamente útil, en la ausencia de efectos secundarios indeseables en los pacientes tratados. La concentración terapéuticamente efectiva se puede determinar empíricamente mediante la prueba de los compuestos en sistemas in vitro e in vivo descritos en este documento y luego se extrapolan a partir de estas a las dosificaciones para humanos.

La concentración del compuesto activo en la composición farmacéutica dependerá de las velocidades de absorción, inactivación y excreción del compuesto activo, las características fisicoquímicas del compuesto, el cronograma de dosificación, y la cantidad administrada así como otros factores conocidos por aquellos de habilidad en el oficio. Por ejemplo, la cantidad que se entrega es suficiente para mejorar uno o más de los síntomas de enfermedades o trastornos asociadas con quinasa p-38 y/o JNK, incluyendo condiciones mediadas por TNF-α, IL-1, y/o IL-8, como se describe en este documento.

Por lo general una dosificación terapéuticamente efectiva debería producir una concentración en suero del ingrediente activo de aproximadamente 0.1 ng/ml a aproximadamente 50-100 µg/ml. Las composiciones farmacéuticas normalmente deberían proporcionar una dosificación de aproximadamente 0.001 mg a aproximadamente 2000 mg del compuesto por kilogramo de peso corporal por día. Las formas farmacéuticas de dosificación por unidad se preparan para proporcionar aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1000 mg y en una modalidad, aproximadamente 10 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo esencial o una combinación de ingredientes esenciales por forma de dosificación por unidad.

El ingrediente activo se puede administrar a la vez, o se puede dividir en un número de dosis más pequeñas para ser administradas a intervalos de tiempo. Se entiende que la dosificación precisa y la duración del tratamiento es una función de la enfermedad que se trata y se puede determinar empíricamente utilizando conocidos protocolos de prueba o por extrapolación a partir de los datos de prueba in vivo o in vitro. Se debe señalar que las concentraciones y los valores de dosificación también pueden variar con la severidad de la condición que se alivia. Además, se debe entender que para cualquier sujeto particular, los regímenes de dosificación específicos se deben ajustar con el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el criterio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los rangos de concentración establecidos en este documento son ejemplares solamente y no tienen la intención de limitar el alcance o la práctica de las composiciones reivindicadas.

Los derivados farmacéuticamente aceptables incluyen sales, hidratos, y solvatos. El derivado se selecciona de tal manera que sus propiedades farmacocinéticas sean superiores al compuesto neutral correspondiente.

De esta manera, las concentraciones o cantidades efectivas de uno o más de los compuestos descritos en este documento o derivados farmacéuticamente aceptables de estos, se mezclan con un portador o vehículo farmacéutico apropiado para la administración sistémica, tópica o local para formar composiciones farmacéuticas. Los compuestos se incluyen en una cantidad efectiva para mejorar uno o más síntomas de, o para tratar o prevenir enfermedades o trastornos asociados con condiciones asociadas con p-38 y/o condiciones asociadas con JNk incluyendo, pero no limitando a, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos destructores de huesos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, y enfermedades virales como se describe en este documento. La concentración del compuesto activo en la composición, dependerá de las velocidades de absorción, inactivación, excreción del compuesto activo, el cronograma de dosificación, cantidad administrada, formulación particular así como de otros factores conocidos por aquellos de habilidad en el oficio.

Las composiciones tienen la intención de ser administradas mediante una ruta apropiada, incluyendo vía oral, parenteral, rectal, tópica y local. Para la administración oral se prefieren actualmente, las cápsulas y los comprimidos. Las composiciones son en forma líquida, semi-líquida o sólida y se formulan de una manera apropiada para cada ruta de administración. En una modalidad, los modos de administración incluyen modos de administración parenteral y oral. La administración oral es la más preferida actualmente.

Las soluciones o suspensiones utilizadas para la aplicación parenteral, intradérmica, subcutánea, o tópica pueden incluir cualquiera de los siguientes componentes: un diluente estéril, tal como agua para la inyección, solución salina, aceite fijo, polietileno glicol, glicerina, propileno glicol, dometil acetamida u otro solvente sintético; agentes antimicrobianos, tales como alcohol bencílico y metilparabenos; antioxidantes, tales como ácido ascórbico y bisulfito de sodio; agentes quelantes, tales como ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA); soluciones reguladoras, tales como acetatos, citratos y fosfatos; y agentes para el ajuste de la tonicidad tales como cloruro de sodio o dextrosa. Las preparaciones parenterales se pueden adjuntar en ampollas, jeringas desechables o viales de dosis únicas o múltiples hechas de vidrio, plástico u otro material apropiado.

En los casos en los cuales los compuestos muestran solubilidad insuficiente, se pueden utilizar los métodos para solubilizar los compuestos. Tales métodos son conocidos por aquellos de habilidad en este oficio, e incluyen, pero no se limitan a, el uso de cosolventes, tales como dimetilsulfoxido (DMSO), dimetilacetamida, utilizando agentes tensoactivos, tales como TWEEN®, o disolución en bicarbonato de sodio acuoso.

Al mezclar o adicionar el o los compuestos, la mezcla resultante puede ser una solución, suspensión, emulsión o similares. La forma de la mezcla resultante depende de un número de factores, incluyendo el modo pretendido de administración y la solubilidad del compuesto en el portador o vehículo seleccionado. La concentración efectiva es suficiente para mejorar los síntomas de la enfermedad, trastorno o condición tratados y se puede determinar empíricamente.

Las composiciones farmacéuticas se proporcionan para la administración a humanos y animales en formas de dosificación por unidad, tales como comprimidos, cápsulas, píldoras, polvos, gránulos, soluciones o suspensiones parenterales estériles, y soluciones o suspensiones orales, y emulsiones aceite-agua que contienen apropiadas cantidades de los compuestos o derivados farmacéuticamente aceptables de estos. Los compuestos activos farmacéuticamente terapéuticos y derivados de estos, normalmente se formulan y administran en formas de dosificación por unidad o formas de dosificación múltiples. Las formas de dosificación por unidad como se utilizan en este documento se refieren a unidades discretas físicamente apropiadas para sujetos humanos y animales y envasadas individualmente como se conoce en el oficio. Cada dosis por unidad contiene una cantidad predeterminada del compuesto activo terapéuticamente suficiente para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con el portador, vehículo o diluente farmacéutico necesario. Ejemplos de formas de dosificación por unidad incluyen ampollas y jeringas y comprimidos o cápsulas envasadas individualmente. Las formas de dosificación por unidad se pueden administrar en fracciones o múltiplos de estas. Una forma de dosificación múltiple es una pluralidad de formas idénticas de dosificación por unidad envasadas en un contenedor único para ser administradas en forma de dosis por unidad separada. Ejemplos de formas de dosis múltiples incluyen viales, botellas de comprimidos

o cápsulas o botellas de pintas o galones. Por lo tanto, la forma de dosis múltiple es un múltiplo de dosis por unidad que no se separan en el envase.

La composición puede contener junto con el ingrediente activo: un diluente tal como lactosa, sacarosa, fosfato dicálcico, o carboximetilcelulosa; un lubricante, tal como estearato de magnesio, estearato de calcio y talco; y un aglutinante tal como almidón, gomas naturales, tales como goma acacia gelatina, glucosa, melaza, polivinilpirrolidina, celulosas y derivados de estas, povidona, crospovidona y otros aglutinantes conocidos por aquellos de habilidad en el oficio. Las composiciones líquidas farmacéuticamente administrables, por ejemplo, se pueden preparar mediante disolución, dispersión, o de otra manera mezclando un compuesto activo como se define anteriormente y adyuvantes farmacéuticos opcionales en un portador, tales como, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa acuosa, glicerol, glicoles, etanol, y similares, para formar así una solución o suspensión. Sí se desea, la composición farmacéutica para ser administrada, también puede contener menores cantidades de sustancias auxiliares no-tóxicas tales como agentes humectantes, agentes de emulsificación, o agentes solubilizantes, agentes reguladores de pH y similares, por ejemplo, acetato, citrato de sodio, derivados de la ciclodextrina, monolaurato de sorbitán, acetato de sodio trietanolamina, trietanolamina oleato, y otros agentes. Los métodos de preparación actuales tales formas de dosificación son conocidos, o serán aparentes, por aquellos de habilidad en este oficio; por ejemplo, ver Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 15th Edition, 1975. La composición o formulación para ser administrada, en cualquier evento, contendrá una cantidad del compuesto activo en una cantidad suficiente para aliviar los síntomas del sujeto tratado. Se pueden preparar formas de dosificación o composiciones que contienen el ingrediente activo en un rango de 0.005% a 100% haciendo el balance a partir del portador no-tóxico. Para la administración oral, una composición no-tóxica farmacéuticamente aceptable se forma, mediante la incorporación de cualquiera de los excipientes empleados normalmente, tales como, por ejemplo manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, derivados de celulosa, croscarmelosa de sodio, glucosa, sacarosa, carbonato de magnesio o sacarina sódica de grado farmacéutico. Tales composiciones incluyen soluciones, suspensiones, comprimidos, cápsulas, polvos y formulaciones de liberación sostenida, tales como, pero no limitando a, implantes y sistemas de entrega microencapsulados, y biodegradables, polímeros biocompatibles, tales como colágeno, acetato de vinil etileno, polianhídridos, ácido poliglicólico, poliortoésteres, ácido poliláctico y otros. Los métodos para la preparación de estas composiciones son conocidos por aquellos de habilidad en el oficio. Las composiciones contempladas puede contener 0.001%-100% de ingrediente activo, en ciertas modalidades, 0.1-85%, normalmente 75-95%.

Los compuestos activos o derivados farmacéuticamente aceptables se pueden preparar con portadores que protegen el compuesto contra la eliminación rápida del cuerpo, tales como formulaciones o recubrimientos de liberación prolongada.

Las composiciones pueden incluir otros compuestos activos para obtener las combinaciones deseadas de propiedades. Los compuestos proporcionados en este documento, o derivados farmacéuticamente aceptables de estos como se describe en este documento, también se pueden administrar ventajosamente para propósitos terapéuticos o profilácticos junto con otro agente farmacológico conocido en el oficio general que es de valor en el tratamiento de una o más de las enfermedades o condiciones médicas mencionadas anteriormente, tales como enfermedades o trastornos asociados con quinasa p-38 y/o JNK incluyendo, pero no limitando a, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos destructores de huesos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, y enfermedades virales. Se debe entender que dicha terapia de combinación constituye otro aspecto de las composiciones y de los métodos de tratamiento proporcionados en este documento.

1. Composiciones para la administración oral

Las formas farmacéuticas de dosificación oral son tanto sólidas, en gel como líquidas. Las formas de dosificación sólidas son comprimidos, cápsulas, gránulos, y polvos a granel. Tipos de comprimidos orales incluyen comprimidos, pastillas masticables y comprimidos que pueden ser de cubierta entérica, recubiertos con azúcar o recubiertos con película. Las cápsulas pueden ser cápsulas de gelatina dura o suave, mientras que los gránulos y polvos se pueden proporcionar en forma no-efervescente o efervescente con la combinación de otros ingredientes conocidos por aquellos de habilidad en el oficio.

En ciertas modalidades, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o comprimidos. Los comprimidos, píldoras, cápsulas, comprimidos medicinales y similares pueden contener cualquiera de los siguientes ingredientes, o compuestos de una naturaleza similar: un aglutinante; un diluente; un agente de desintegración; un lubricante; un deslizante; un agente edulcorante; y un agente saborizante.

Ejemplos de aglutinantes incluyen celulosa microcristalina, goma tragacanto, solución de glucosa, mucílago de acacia, solución de gelatina, sacarosa y pasta de almidón. Los lubricantes incluyen talco, almidón, magnesio o estearato de calcio, lycopodium y ácido esteárico. Los diluentes incluyen, por ejemplo, lactosa, sacarosa, almidón, caolín, sal, manitol y fosfato dicálcico. Los deslizantes incluyen, pero no se limitan a, dióxido de silicio coloidal. Los agentes de desintegración incluyen sodio croscarmelosa, glicolato de almidón sódico, ácido algínico, almidón de maíz, almidón de patata, bentonita, metilcelulosa, agar y carboximetilcelulosa. Los agentes colorantes incluyen, por ejemplo, cualquiera de los colorantes C y FD hidrosolubles certificados aprobados, mezclas de estos; y colorantes C y FD insolubles en agua suspendidos en hidrato de alúmina. Los agentes edulcorantes incluyen sacarosa, lactosa, manitol y agente edulcorantes artificiales tales como sacarina, y cualquier número de sabores secados por pulverización. Los agentes aromatizantes incluyen aromas naturales extraídos a partir de plantas tales como frutas y mezclas sintéticas de compuestos que producen una sensación placentera, tales como, pero no limitando a menta y metil salicilato. Los agentes humectantes incluyen propileno glicol monoestearato, sorbitán monooleato, dietileno glicol monolaurato y polioxietileno laurel éter. Los recubrimientos eméticos incluyen ácidos grasos, grasas, ceras, goma laca, goma laca amoniacal y ftalatos del acetato de celulosa. Los recubrimientos de película incluyen hidroxietilcelulosa, sodio carboximetilcelulosa, polietileno glicol 4000 y ftalato del acetato de celulosa.

Si una administración oral se desea, el compuesto podría ser proporcionado en una composición que la proteja del ambiente ácido del estómago. Por ejemplo, la composición se puede formular en un recubrimiento entérico que mantiene su integridad en el estómago y libera el compuesto activo en el intestino. La composición también se puede formular en combinación con un antiácido o cualquier otro ingrediente.

Cuando la forma de dosificación por unidad es una cápsula, esta puede contener, además del material del tipo anterior, un líquido portador tal como un aceite graso. Además, las formas de dosificación por unidad pueden contener otros materiales que modifican la forma física de la unidad de dosificación, por ejemplo, recubrimientos de azúcar y otros agentes entéricos. Los compuestos también pueden ser administrados como un componente de un elixir, suspensión, jarabe, barquillo, comprimido dispersable, goma de mascar o similares. Un jarabe puede contener, además de los compuestos activos, sacarosa como un agente edulcorante y ciertos conservantes, tintes y colorantes y sabores.

Los materiales activos también se pueden mezclar con otros materiales activos que no vayan a deteriorar la acción deseada, o con materiales que complementan la acción deseada, tales como antiácidos, bloqueadores H2, y diuréticos. El ingrediente activo es un compuesto o derivado de estos farmacéuticamente aceptable, como se describe en este documento. Se pueden incluir concentraciones más altas, hasta aproximadamente 98% en peso del ingrediente activo.

24 Los portadores farmacéuticamente aceptables, incluidos en los comprimidos son aglutinantes, lubricantes, diluentes, agentes de desintegración, agentes colorantes, agentes saborizantes, y agentes humectantes. Los comprimidos de recubrimiento entérico, debido al recubrimiento entérico, resisten la acción del ácido del estómago y se disuelven o desintegran en los intestinos neutrales o alcalinos. Los comprimidos recubiertos con azúcar, son tabletas comprimidas a las que diferentes capas de sustancias farmacéuticamente aceptables se aplican. Los comprimidos recubiertos con película son tabletas comprimidas que han sido recubiertas con un polímero u otro recubrimiento apropiado. Las tabletas comprimidas múltiples son tabletas comprimidas hechas por más de un ciclo de compresión utilizando las sustancias farmacéuticamente aceptables mencionadas previamente. Los agentes colorantes también se pueden utilizar en las anteriores formas de dosificación. Los agentes aromatizantes y edulcorantes se utilizan en tabletas comprimidas, recubiertas con azúcar, comprimidos múltiples y comprimidos masticables. Los agentes aromatizantes y edulcorantes son especialmente útiles en la formación de comprimidos masticables y pastillas. Las formas de dosificación orales líquidas incluyen soluciones acuosas, emulsiones, suspensiones, soluciones y/o suspensiones reconstituidas a partir de gránulos no-efervescentes y preparaciones efervescentes reconstituidas a partir de los gránulos efervescentes. Las soluciones acuosas incluyen, por ejemplo, elíxires y jarabes. Las emulsiones son tanto aceite en agua o agua en aceite. Los elíxires son preparaciones hidroalcohólicas claras, edulcoradas. Los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en los elíxires incluyen solventes. Los jarabes son soluciones acuosas concentradas de un azúcar, por ejemplo, sacarosa, y pueden contener un conservante. Una emulsión es un sistema de dos-fases en el cual un líquido se dispersa en la forma de glóbulos pequeños por todo el otro líquido. Los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en las emulsiones son líquidos no acuosos, agentes de emulsificación y conservantes. Las suspensiones utilizan agentes de suspensión y conservantes farmacéuticamente aceptables. Las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los gránulos no-efervescentes, que se reconstituyen en una forma de dosificación oral líquida, incluyen diluentes, edulcorantes y agentes humectantes. Las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los gránulos efervescentes, que se reconstituyen en una forma de dosificación oral líquida, incluyen ácidos orgánicos y una fuente de dióxido de carbono. Los colorantes y agentes saborizantes se utilizan en todas las anteriores formas de dosificación. Los solventes incluyen glicerina, sorbitol, alcohol etílico y jarabe. Ejemplos de conservantes incluyen glicerina, metilo y propilparabeno, ácido benzoico, benzoato de sodio y alcohol. Ejemplos de líquidos no acuosos utilizados en las emulsiones incluyen aceite mineral y aceite de la semilla de algodón. Ejemplos de agentes de emulsificación incluyen gelatina, acacia, tragacanto, bentonita, y agentes tensoactivos tales como polioxietileno sorbitán monooleato. Los agentes de suspensión incluyen sodio carboximetilcelulosa, pectina, tragacanto, Veegum y acacia. Los diluentes incluyen lactosa y sacarosa. Los agentes edulcorantes incluyen sacarosa, jarabes, glicerina y agentes edulcorantes artificiales tales como sacarina. Los agentes humectantes incluyen propileno glicol monoestearato, sorbitán monooleato, dietileno glicol monolaurato y polioxietileno lauril éter. Ácidos orgánicos incluyen ácido cítrico y tartárico. Las fuentes de dióxido de carbono incluyen bicarbonato de sodio y carbonato de sodio. Los agentes colorantes incluyen cualquiera de los colorantes C y FD solubles en agua certificados aprobados, y mezclas de estos. Los agentes aromatizantes incluyen aromas naturales extraídos de plantas tales como frutas, y mezclas sintéticas de compuestos que producen una sensación de sabor agradable.

25 Para una forma de dosificación sólida, la solución o suspensión, en por ejemplo carbonato de propileno, aceites vegetales o triglicéridos, preferiblemente se encapsula en una cápsula de gelatina. Tales soluciones, y la preparación y encapsulación de estas, se revelan en U.S. Patent Nos 4,328,245; 4,409,239; y 4,410,545. Para una forma de dosificación líquida, la solución, por ejemplo, en un polietileno glicol, se puede diluir con una cantidad suficiente de un portador líquido farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, agua, que se mida fácilmente para la administración. Por otra parte, formulaciones orales líquidas o semi-sólidas se pueden preparar por disolución

o dispersión del compuesto activo o sal en aceites vegetales, glicoles, triglicéridos, propileno glicol ésteres (por ejemplo, carbonato de propileno) y otros de tales portadores, y la encapsulación de estas soluciones o suspensiones en cubiertas de cápsulas de gelatina dura o suave. Otras formulaciones útiles incluyen aquellas establecidas en U.S. Patent Nos. Re 28,819 y 4,358,603. En resumen, tales formulaciones incluyen, pero no se limitan a, aquellas que contienen un compuesto proporcionado en este documento, un mono-o poli-alquileno glicol dialquilado, incluyendo, pero no limitando a, 1,2dimetoximetano, diglima, triglima, tetraglima, polietileno glicol-350-dimetil éter, polietileno glicol550-dimetil éter, polietileno glicol-750-dimetil éter en donde 350, 550 y 750 se refiere al peso molecular medio aproximado del polietileno glicol, y uno o más antioxidantes, tales como hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisol butilado (BHA), propil galato, vitamina E, hidroquinona, hidroxicumarinas, etanolamina, lecitina, cefalina, ácido ascórbico, ácido málico, sorbitol, ácido fosfórico, ácido tiodipropionico y sus ésteres, y ditiocarbamatos.

Otras formulaciones incluyen, pero no se limitan a, soluciones alcohólicas acuosas incluyendo un acetal farmacéuticamente aceptable. Los alcoholes utilizados en estas formulaciones son cualquier solvente miscible en agua farmacéuticamente aceptable, que tienen uno o más grupos hidroxilo, incluyendo, pero no limitando a, propileno glicol y etanol. Los acetales incluyen, pero no se limitan a, di(alquilo inferior) acetales de alquilo inferior aldehídos tales como acetaldehído dietil acetal.

En todas las modalidades, las formulaciones en comprimidos y cápsulas se pueden recubrir como se conoce por aquellos de habilidad en el oficio con el fin de modificar o mantener la disolución del ingrediente activo. De esta manera, por ejemplo, se pueden recubrir con un recubrimiento entérico digerible convencional, tal como fenilsalicilato, ceras y ftalato acetato de celulosa.

2. Inyectables, soluciones y emulsiones

La administración parenteral, generalmente caracterizada por la inyección, ya sea vía subcutánea, intramuscular o intravenosa también se contempla en este documento. Los inyectables se pueden preparar de formas convencionales, tanto como soluciones líquidas o suspensiones, formas sólidas apropiadas para solución o suspensión en líquidos antes de la inyección, o como emulsiones. Los excipientes apropiados son, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa, glicerol o etanol. Además, si se desea, las composiciones farmacéuticas para ser administradas también puede contener menores cantidades de sustancias auxiliares no-tóxicas tales como agentes humectantes o de emulsificación, agentes reguladores de pH, estabilizadores, potenciadores de la solubilidad, y otros agentes, tales como por ejemplo, acetato de sodio, monolaurato de sorbitán, trietanolamina oleato y ciclodextrinas. También se contempla en este documento, la implantación de un sistema de liberación-controlada o de liberación sostenida, de tal manera que un nivel de dosificación constante se conserva (ver, por ejemplo, U.S. Patent No. 3,710,795). En resumen, un compuesto proporcionado en este documento se dispersa en una matriz interna sólida, por ejemplo, polimetilmetacrilato, polibutilmetacrilato, polivinilcloruro plastificado o no plastificado, nylon plastificado, polietilenotereftalato plastificado, caucho natural, poliisopreno, poliisobutileno, polibutadieno, polietileno, copolímeros etilenovinilacetato, cauchos de silicona, polidimetilsiloxanos, copolímeros silicona carbonato, polímeros hidrofílicos tales como hidrogeles de ésteres de ácido acrílico y metacrílico, colágeno, polivinilalcohol reticulado y polivinil acetato hidrolizado parcialmente reticulado, que está rodeado por una membrana polimérica exterior, por ejemplo, polietileno, polipropileno, copolímeros etileno/propileno, copolímeros etileno/etil acrilato, copolímeros etileno/vinilacetato, cauchos de silicona, polidimetil siloxanos, caucho de neopreno, polietileno clorinado, polivinilcloruro, copolímeros vinilcloruro con vinil acetato, cloruro de vinilideno, etileno y propileno, polietileno tereftalato ionómero, cauchos epiclorohidrin caucho butil, copolímero etileno/vinil alcohol, terpolímero etileno/vinil acetato/vinil alcohol, y copolímero etileno/viniloxietanol, que es insoluble en los fluidos corporales. El compuesto se difunde a través de la membrana polimérica exterior en una etapa que controla la velocidad de liberación. El porcentaje del compuesto activo contenido en tales composiciones parenterales es dependiente en gran medida de la naturaleza específica de estos, así como la actividad del compuesto y las necesidades del sujeto.

La administración parenteral de las composiciones incluye administraciones intravenosa, subcutánea e intramuscular. Las preparaciones para la administración parenteral incluyen soluciones estériles listos para la inyección, productos solubles secos estériles, tales como polvos liofilizados, listos para ser combinados con un solvente inmediatamente antes del uso, incluyendo comprimidos hipodérmicos, suspensiones estériles lista para la inyección, productos insolubles secos estériles listos para ser combinados con un vehículo inmediatamente antes del uso y emulsiones estériles. Las soluciones pueden ser tanto acuosas como no acuosas.

Si se administra vía intravenosa, apropiados portadores incluyen solución salina fisiológica o solución salina reguladora de fosfato (PBS), y soluciones que contienen agentes espesantes y solubilizantes, tales como glucosa, polietileno glicol, y polipropileno glicol y mezclas de estos.

Los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en preparaciones parenterales incluyen vehículos acuosos, vehículos no acuosos, agentes antimicrobianos, agentes isotónicos, soluciones reguladoras, antioxidantes, anestésicos locales, agentes de suspensión y de dispersión, agentes de emulsificación, agentes quelantes o secuestrantes y otras sustancias farmacéuticamente aceptables.

Ejemplos de vehículos acuosos incluyen Inyección de Cloruro de Sodio, Inyección de Ringer, Inyección de Dextrosa Isotónica, Inyección de Agua Estéril, Inyección de Ringer lactato y Dextrosa. Vehículos parenterales no acuosos incluyen aceites fijos de origen vegetal, aceite de la semilla de algodón, aceite de maíz, aceite de sésamo y aceite de maní. Agentes antimicrobianos en concentraciones bacteriostáticas o fungistáticas se deben adicionar a preparaciones parenterales envasadas en contenedores de dosis-múltiples que incluyen fenoles o cresoles, mercuriales, alcohol bencílico, clorobutanol, ésteres del ácido metil y propil p-hidroxibenzoico, timerosal, cloruro de benzalconio y cloruro de benzetonio. Los agentes isotónicos incluyen cloruro de sodio y dextrosa. Las soluciones reguladoras incluyen fosfato y citrato. Los antioxidantes incluyen bisulfito de sodio. Los anestésicos locales incluyen hidrocloruro de procaina. Los agentes de suspensión y dispersión incluyen sodio carboximetilcelulosa, hidroxipropil metilcelulosa y polivinilpirrolidona. Los agentes emulsificantes incluyen Polysorbate 80 (TWEEN® 80). Un agente secuestrante o quelante de iones metálicos incluyen EDTA. Los portadores farmacéuticos también incluyen alcohol etílico, polietileno glicol y propileno glicol para vehículos miscibles en agua e hidróxido de sodio, ácido clorhídrico, ácido cítrico o ácido láctico para ajustar el pH.

27 La concentración del compuesto farmacéuticamente activo se ajusta de tal manera que una inyección proporciona una cantidad efectiva para producir el efecto farmacológico deseado. La dosis exacta depende de la edad, peso y condición del paciente o animal según se conoce en el oficio. Las preparaciones parenterales de dosis por unidad se envasan en una ampolla, un vial o una jeringa con una aguja. Todas las preparaciones para la administración parenteral deben ser estériles, como se conoce y practica en el oficio. A manera ilustrativa, la infusión intravenosa o intraarterial de una solución acuosa estéril que contiene un compuesto activo es un modo de administración efectivo. Otra modalidad es una suspensión o solución oleosa o acuosa estéril que contiene un material activo inyectado, según sea necesario para producir el efecto farmacológico deseado. Los inyectables se designan para la administración local y sistémica. Por lo general una dosificación terapéuticamente efectiva se formula para que contenga una concentración de al menos aproximadamente 0.1% peso/peso hasta aproximadamente 90% peso/peso o más, en ciertas modalidades, más del 1% peso/peso del compuesto activo para el o los tejidos tratados. El ingrediente activo se puede administrar a la vez, o se puede dividir en un número de dosis más pequeñas para ser administradas a intervalos de tiempo. Se entiende que la dosificación precisa y la duración del tratamiento es una función del tejido que se trata y se puede determinar empíricamente utilizando conocidos protocolos de prueba o por extrapolación de los datos de prueba in vivo o in vitro. Se debe señalar que las concentraciones y los valores de dosificación también pueden variar con la edad de los individuos tratados. Además, se debe entender que para cualquier sujeto particular, los regímenes de dosificación específicos se deben ajustar durante el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el criterio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las formulaciones, y que los rangos de concentración establecidos en este documento son ejemplares solamente y no tienen la intención de limitar el alcance o la práctica de las formulaciones reivindicadas. El compuesto se puede suspender en forma micronizada u otra forma apropiada o se puede derivatizar para producir un producto activo más soluble o para producir un profármaco. La forma de la mezcla resultante depende de un número de factores, incluyendo el modo pretendido de administración y la solubilidad del compuesto en el portador o vehículo seleccionado. La concentración efectiva es suficiente para mejorar los síntomas de la condición y se puede determinar empíricamente.

3. Polvos liofilizados

De interés en este documento también son los polvos liofilizados, que se pueden reconstituir para la administración como soluciones, emulsiones y otras mezclas. También pueden ser reconstituidos y formulados como sólidos o geles.

El polvo estéril, liofilizado se prepara mediante la disolución de un compuesto proporcionado en este documento, o un derivado de este farmacéuticamente aceptable, en un solvente apropiado. El solvente puede contener un excipiente que mejora la estabilidad u otro componente farmacológico del polvo o de la solución reconstituida, preparada a partir del polvo. Los excipientes que se pueden utilizar incluyen, pero no se limitan a, dextrosa, sorbital, fructosa, jarabe de maíz, xilitol, glicerina, glucosa, sacarosa u otro agente apropiado. El solvente también puede contener una solución reguladora, tal como citrato, fosfato de sodio o potasio u otras soluciones reguladoras conocidas por aquellos de habilidad en el oficio, normalmente, a un pH aproximadamente neutro. La posterior filtración estéril de la solución seguida por la liofilización bajo condiciones estándar conocidas por aquellos de habilidad en el oficio, proporciona la formulación deseada. Generalmente, la solución resultante será repartida en viales para la liofilización. Cada vial contendrá una dosificación única (101000 mg, en una modalidad, 100-500 mg) o múltiples dosificaciones del compuesto. El polvo liofilizado se puede almacenar bajo condiciones apropiadas, tales como aproximadamente 4 °C a la temperatura ambiente.

La reconstitución de este polvo liofilizado con agua para la inyección proporciona una formulación para el uso en administración parenteral. Para la reconstitución, aproximadamente 1-50 mg, en una modalidad, 5-35 mg, en otra modalidad, aproximadamente 9-30 mg de polvo liofilizado, se adiciona por mL de agua estéril u otro portador apropiado. La cantidad precisa depende del compuesto seleccionado. Tal cantidad se puede determinar empíricamente.

4. Administración tópica

Las mezclas tópicas se preparan como se describe para la administración local y sistémica. La mezcla resultante puede ser una solución, suspensión, emulsión o similares y se formulan como cremas, geles, ungüentos, emulsiones, soluciones, elíxires, lociones, suspensiones, tinturas, pastas, espumas, aerosoles, irrigaciones, pulverizadores, supositorios, vendajes, parches dérmicos o cualquiera de las otras formulaciones apropiadas para la administración tópica.

Los compuestos o derivados farmacéuticamente aceptables de estos pueden ser formulados como aerosoles para la aplicación tópica, tales como por inhalación (ver, por ejemplo, U.S. Patent Nos. 4,044,126, 4,414,209, y 4,364,923, que describe aerosoles para la entrega de un esteroide útil para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, particularmente asma). Estas formulaciones para la administración en las vías respiratorias, pueden ser en la forma de un aerosol o solución para un nebulizador, o como un polvo microfino por la insuflación, solo o en combinación con un portador inerte tal como lactosa. En tal caso, las partículas de la formulación tendrán normalmente diámetros de menos de 50 micras, en una modalidad, menos de 10 micras.

Los compuestos pueden ser formulados para la aplicación local o tópica, tal como para la aplicación tópica en la piel y membranas mucosas, tales como en el ojo, en la forma de geles, cremas, y lociones y para la aplicación en el ojo o para la aplicación intracisterna o intraespinal. La administración tópica se contempla para la entrega transdérmica y también para la administración a los ojos o mucosa, o para terapias de inhalación. Las soluciones nasales del compuesto activo solo o en combinación con otros excipientes farmacéuticamente aceptables también pueden ser administradas.

Estas soluciones, particularmente los destinadas para uso oftálmico, pueden ser formuladas como 0.01% -10% de soluciones isotónicas, pH aproximadamente 5-7, con sales apropiadas.

5. Composiciones para otras rutas de administración

Otras rutas de administración, tales como aplicación tópica, parches transdérmicos, y la administración rectal también se contemplan en este documento.

Por ejemplo, formas de dosificación farmacéuticas para la administración rectal son supositorios rectales, cápsulas y comprimidos para el efecto sistémico. Los supositorios rectales utilizados en este documento significan cuerpos sólidos, para su inserción en el recto, que se funden o ablandan a una temperatura corporal liberando uno o más ingredientes farmacológicamente o terapéuticamente activos. Las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los supositorios rectales son bases o vehículos y agentes para elevar el punto de fusión. Ejemplos de bases incluyen manteca de cacao (aceite de Theobroma), glicerina-gelatina, carbowax (polioxietileno glicol) y mezclas apropiadas de mono-, di-y triglicéridos de ácidos grasos. Se pueden utilizar, combinaciones de diferentes bases. Agentes para elevar el punto de fusión de los supositorios incluyen spermaceti y cera. Los supositorios rectales se pueden preparar ya sea por el método de compresión o por moldeo. El peso típico de un supositorio rectal es de aproximadamente 2 a 3 gm.

29 Las tabletas y cápsulas para la administración rectal se fabrican utilizando la misma sustancia farmacéuticamente aceptable y por los mismos métodos como para las formulaciones para la administración oral.

E. Evaluación de la Actividad de los compuestos

Los procedimientos fisiológicos, farmacológicos y bioquímicos estándar están disponibles para la prueba de los compuestos para identificar aquellos que poseen actividades biológicas que modulan la actividad de las citoquinas, incluyendo la actividad de la quinasa p38 y/o JNK.

La actividad inhibidora del compuesto se midió en un ensayo de enzima radioactiva. La composición de la solución reguladora fue adoptada de Lisnock et al (Biochemistry, 1998, vol. 37, pp 16573-16581). El sustrato del péptido fue seleccionado a partir de Chen et al Biochemistry, 2000, vol. 39, 2079-2087). Las concentraciones de p38α,[γ-33P-ATP] y el péptido fueron iguales a 1 nM, 85 uM y 250 uM, respectivamente. La incorporación de 33P en el péptido se midió utilizando la absorción en filtermats con el posterior lavado con ácido fosfórico 100 mM seguido por etanol.

Otras condiciones para el ensayo enzimático p38α, también fueron descritas en literatura. Ellas difieren del ensayo descrito en cualquiera la composición de la solución reguladora (Biochemistry, 2000, vol. 39, 2079-2087)), como el sustrato (Biochemistry, 1998. vol. 37, pp 1657316581), o ambos (Protein Sci., 1998, vol. 7, pp. 2249-2255).

F. Métodos de uso de los compuestos y las composiciones

En otra parte de la presente divulgación, los compuestos proporcionados en este documento, se pueden utilizar en el tratamiento, prevención, o mejora de uno o más síntomas de enfermedades inflamatorias. Un compuesto proporcionado en este documento se puede utilizar, en otra modalidad, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de enfermedades inflamatorias.

Los compuestos proporcionados en este documento son inhibidores selectivos de la actividad de la quinasa p38, en particular, actividad de las isoformas p38α y p38β y/o JNK, en particular, la actividad de JNK1, JNK2 y JNK3. Por consiguiente, los compuestos proporcionados en este documento son útiles para tratar las condiciones asociadas con la actividad de la quinasa p38 y/o JNK. Tales condiciones incluyen enfermedades en las cuales los niveles de la citoquina se modulan como una consecuencia de señalización intracelular vía p38, y en particular, enfermedades que se asocian con una sobreproducción de citoquinas IL-1, IL-4, IL-8, y TNF-α. Las enfermedades que se pueden tratar o prevenir, mediante los inhibidores de p38 proporcionados en este documento, convenientemente, también se pueden agrupar por la citoquina (IL-1, TNF, IL-6, IL-8) que se cree que es responsable de la enfermedad.

De esta manera, una enfermedad o condición mediada por IL-1 incluye artritis reumatoide, osteoartritis, accidente cerebrovascular, endotoxemia y/o síndrome de shock tóxico, reacción inflamatoria inducida por endotoxina, enfermedad inflamatoria intestinal, tuberculosis, ateroesclerosis, degeneración muscular, caquexia, artritis psoriática, síndrome de Reiter, gota, artritis traumática, artritis debido a la rubeola, sinovitis aguda, diabetes, enfermedad de las células beta pancreáticas y enfermedad de Alzheimer.

La enfermedad o condición mediada por TNF incluye, artritis reumatoide, espondilitis reumatoide, osteoartritis, artritis gotosa y otras condiciones artríticas, sepsis, shock séptico, shock endotóxico, sepsis gramnegativa, síndrome de shock tóxico, síndrome de dificultad respiratoria aguda, malaria cerebral, enfermedad inflamatoria pulmonar crónica, silicosis, sarcoidosis pulmonar, enfermedades de resorción ósea, lesión por reperfusión, reacción injerto vs. huésped, rechazos de aloinjertos, fiebre y mialgias debido a la infección, caquexia secundaria a la infección, SIDA, ARC o malignidad, formación de queloides, formación de tejido cicatrizante, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa o piresis. Enfermedades mediadas por TNF también incluyen infecciones virales, tales como HIV, CMV, influenza y herpes; e infecciones veterinarias virales, tales como infecciones lentivirus, incluyendo, pero no limitando a virus de anemia infecciosa equina, virus de artritis caprina, virus visna o virus maedi; o infecciones de retrovirus, incluyendo virus de inmunodeficiencia felina, virus de inmunodeficiencia bovina, o virus de inmunodeficiencia canina.

Enfermedad o condición mediada por IL-8 incluye enfermedades caracterizadas por infiltrado masivo de neutrófilo, tales como psoriasis, enfermedad inflamatoria intestinal, asma, lesión de reperfusión cardiaca y renal, síndrome de dificultad respiratoria aguda, trombosis y glomerulonefritis.

Además, los compuestos proporcionados en este documento se pueden utilizar vía tópica para tratar o prevenir las condiciones causadas o exacerbadas por IL-1 o TNF. Tales condiciones incluyen articulaciones inflamadas, eczema, psoriasis, condiciones inflamatorias de la piel tales como quemadura por el sol, condiciones inflamatorias oculares tales como conjuntivitis, piresis, dolor y otras condiciones asociadas con la inflamación.

Revelados en este documento son los compuestos de fórmula V para el uso en métodos para tratar una enfermedad por la administración de un compuesto proporcionado en este documento que inhibe la actividad de la quinasa p38 y/o JNK. También revelados en este documento son los compuestos de fórmula V para el uso en métodos para inhibir o detener la aparición de una enfermedad o trastorno, mediante la administración de un compuesto proporcionado en este documento. Los compuestos de fórmula V, se pueden utilizar para lograr una reducción parcial o total de los síntomas de una enfermedad o estado de la enfermedad, y/o para aliviar, mejorar, o reducir, la enfermedad o trastorno y/o sus síntomas. Cuando se hace referencia en este documento a la inhibición de "quinasa p-38α/β", esto significa que cualquier quinasa p38α y/o p38β se inhibe. De esta manera, la referencia a un valor IC50 para inhibir la quinasa p-38α/β, significa que el compuesto tiene tal efectividad para inhibir al menos uno de, o ambos de, quinasas p38α y p38β. Cuando se hace referencia en este documento a la inhibición de "JNK 1/2/3", esto significa que cualquiera JNK1 y/o JNK2 o JNK3 se inhiben. De esta manera, la referencia a un valor IC50 para inhibir JNK 1/2/3 significa que el compuesto tiene tal efectividad para inhibir al menos uno, dos, o tres de quinasas N-terminal c-Jun.

En vista de su actividad como inhibidores de la actividad de la quinasa p38α/β y/o JNK, los compuestos revelados en este documento o de acuerdo con la invención son útiles en el tratamiento de condiciones asociadas p-38 y/o JNK incluyendo, pero no limitando a, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos destructores de huesos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, y enfermedades virales.

En una modalidad, las condiciones o enfermedades específicas que se pueden tratar con los compuestos proporcionados en este documento incluyen, sin limitación, pancreatitis (aguda o crónica), asma, alergias, síndrome de dificultad respiratoria aguda, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, glomerulonefritis, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, escleroderma, tiroiditis crónica, enfermedad de Grave, gastritis autoinmune, diabetes, anemia hemolítica autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, dermatitis atópica, hepatitis crónica activa, miastenia gravis, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria intestinal, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn, psoriasis, enfermedad huésped vs. injerto, reacción inflamatoria inducida por la endotoxina, tuberculosis, ateroesclerosis, degeneración muscular, caquexia, artritis psoriática, síndrome de Reiter, gota, artritis traumática, artritis debido a la rubeola, sinovitis aguda, enfermedad de las células-β pancreáticas; enfermedades caracterizadas por infiltrado masivo de neutrófilo; espondilitis reumatoide, artritis gotosa y otras condiciones artríticas, malaria cerebral, enfermedad inflamatoria pulmonar crónica, silicosis, sarcoidosis pulmonar, enfermedad de resorción ósea, rechazos de aloinjertos, fiebre y mialgias debido a la infección, caquexia secundaria a la infección, formación mieloide, formación de tejido cicatrizante, colitis ulcerativa, piresis, influenza, osteoporosis, osteoartritis y trastorno óseo relacionado con mieloma múltiple, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiple, sepsis, shock séptico, y Shigellosis; enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, isquemia cerebral o enfermedad neurodegenerativa causada por lesión traumática; trastornos angiogénicos incluyendo tumores sólidos, neovasculización ocular, y hemangiomas infantiles; enfermedades virales incluyendo infección de hepatitis aguda (incluyendo hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), infección de HIV y retinitis CMV, SIDA, SARS, ARC o malignidad, y herpes; accidente cerebrovascular, isquemia miocárdiaca, isquemia en accidente cerebrovascular ataques cardíacos, hipoxia del órgano, hiperplasia vascular, lesión de reperfusión cardiaca y renal, trombosis, hipertrofia cardiaca, agregación plaquetaria inducida por la trombina, endotoxemia y/o síndrome de shock tóxico, y condiciones asociadas con sintasa-2 prostaglandina endoperoxidasa.

Además, los inhibidores p38 y/o JNK revelados en este documento o de acuerdo con la invención inhiben la expresión de proteínas pro-inflamatorias inducibles tales como sintasa-2 prostaglandina endoperoxida (PGHS-2), también denominado como ciclooxigenasa-2 (COX-2). Por consiguiente, adicionales condiciones asociadas p38 y/o JNK incluyen edema, analgesia, fiebre y dolor, tales como dolor neuromuscular, dolor de cabeza, dolor causado por cáncer, dolor dental y dolor de artritis. Los compuestos revelados en este documento o de acuerdo con la invención también se pueden utilizar para tratar infecciones virales veterinarias, tales como infecciones lentivirus, incluyendo, pero no limitando a virus de anemia infecciosa equina: o infecciones retro virus, incluyendo virus de inmunodeficiencia felina, virus de inmunodeficiencia bovina, y virus de inmunodeficiencia canina.

G. Terapia de Combinación

También revelados en este documento son los compuestos de fórmula V para el uso en métodos para tratar las condiciones asociadas con quinasa p38 y/o JNK, mediante la administración, a un sujeto con necesidad de estos, de una cantidad efectiva de los compuestos revelados en este documento solo o en combinación con los demás y/u otros agentes terapéuticos apropiados útiles en el tratamiento de tales condiciones. Ejemplos de tales agentes terapéuticos revelados en este documento

o de acuerdo con la reivindicación 9 incluyen corticosteroides, rolipram, calfostina, CSAIDs, imidazo (1,2A)quinoxalinas 4-sustituidas, como se revela en US Pat. No. 4,200,750 y en S. Ceccarelli et al, "Imidazo(1, 2-a)quinoxalin-4-amines: A Novel Class of Nonxanthine AI Adenosine Receptor Antagonists," European Journal of Medicinal Chemistry Vol. 33, (1998), at pp. 943-955; Interleuquina-10, glucocorticoides, salicilatos, óxido nítrico, y otros inmunosupresores; inhibidores de la translocación nuclear, tales como desoxispergualina (DSG); fármacos anti-inflamatorios noesteroidales (NSAIDs) tales como ibuprofeno, celecoxib y rofecoxib; esteroides tales como prednisona o dexametasona; agentes antivirales tales como abacavir: agentes antiproliferativos tales como metotrexato, leflunomida, FK506 (tacrolimus, Prograf); fármacos citotóxicos tales como azatioprina y ciclofosfamida; inhibidores de TNF-α tales como tenidap, anticuerpos anti-TNF o receptor soluble de TNF, y rapamicina (sirolimus o Rapamune) o derivados de estos.

Los otros agentes terapéuticos anteriores, cuando se emplean en combinación con los compuestos revelados en este documento o de acuerdo con la invención, se pueden utilizar, por ejemplo, en aquellas cantidades indicadas en Physicians’ Desk Reference (PDR) o según lo determinado por alguien de habilidad en el oficio. En los métodos proporcionados en este documento, tales otros agente(s) terapéutico(s) se pueden administrar antes de, de forma simultánea con, o después de la administración de los compuestos proporcionados en este documento.

Los siguientes Ejemplos ilustran las modalidades en este documento, y no tienen la intención de limitar el alcance de las reivindicaciones. Las abreviaturas empleadas en los Ejemplos se definen a continuación. Los compuestos de los Ejemplos se identifican por el ejemplo y la etapa en las cuales se preparan (por ejemplo, "1A" indica el compuesto de título de la etapa A del Ejemplo 1), o por el ejemplo solamente donde el compuesto es el compuesto de título del ejemplo (por ejemplo, "2" indica el compuesto de título del Ejemplo 2).

Abreviaturas

Ph = fenil

Bz = bencil t-Bu = butil terciario

Me = metilo

Et = etilo

Pr = propilo

Iso-P o i-Pr = isopropilo

MeOH = metanol

EtOH = etanol

EtOAc = acetato de etilo

Boc = ter-butiloxicarbonil

CBZ = carbobenciloxi o carbobenzoxi o benciloxicarbonil

DCM o CH2Cl2 = diclorometano

DCE = 1,2-dicloroetano

DMF = dimetil formamida

DMSO = dimetil sulfóxido

TFA = ácido trifluoroacético

THF = tetrahidrofurano

HATU = O-(7-Azabenzotriazol-1-il-N,N,N’,N’-tetrametiluronio hexafluorofosfato

KOH = hidróxido de potasio

K2CO3 = carbonato de potasio

POCl3 =oxicloruro de fósforo

KOtBu = potasio t-butóxido

EDC o EDCI = 1-(3-Dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida hidrocloruro

DIPEA = diisopropiletilamina

HOBt = 1-hidroxibenzotriazol hidrato

m-CPBA = ácido m-cloroperbenzoico

NaH = hidruro de sodio

NaOH = hidróxido de sodio

Na2S2O3 = tiosulfato de sodio

Na2SO4 = sulfato de sodio

Pd = paladio

Pd/C = paladio sobre carbono

min = minuto(s)

L = litro

mL = mililitro

PL= microlitro

g = gramo(s) mg = miligramo(s) mol = moles mmol = milimol(s)

5 meq = milliequivalent RT o rt = temperatura ambiente ret. t. o tR = HPLC tiempo de retención (minutos) sat o sat’d = saturado

EJEMPLOS

10 Los espectros de masa fueron obtenidos en un espectrómetro de masas HP 1100. En los ejemplos: "HPLC (condición A)" se refiere a evaluación del material por HPLC utilizando una columna Thermal C18 de 3 mm de diámetro; un gradiente lineal de siete minutos con solventes de 5% A a 95% A (el residual es B) durante los siete minutos. El solvente A, es acetonitrilo con 0.325% de TFA y el solvente B, es agua con 0.325% de TFA, tR es el tiempo de retención observado para el

15 compuesto.

Ejemplo 1 Preparación del ácido 4-(5-Ciclopropilcarbamoil-2-metoxi-fenilamino)-6metilpirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

imagen1

20 A. Ácido 3-isotiocianato-4-metoxi-benzoico A una solución del ácido 4-metoxi-benzoico (1.20 g, 7.18 mmol), 30 mL de agua con suficiente HCL conc. para disolver, se le adicionó CSCl2 (0.55 mL, 7.18 mmol). La reacción fue agitada por 2.5 hrs a temperatura ambiente. El sólido de color blanco resultante fue recolectado por filtración y se lavó con agua y se secó in vacuo para proporcionar el compuesto de título, 1.37 g como

25 un sólido de color blanco. Este material fue utilizado sin otra purificación.

B. Ácido 5-hidrazonometil-2-metilo-1H-pirrol-3-carboxílico etil éster

A una solución del ácido 5-formil-2-metilo-1H-pirrol-3-carboxílico etil éster (6.30 g, 0.034 mol) en EtOH (6.3 mL), se le adicionó una solución de hidrazina (1.69 mL, 0.034 mol). La mezcla de reacción se agitó a RT durante la noche. El precipitado resultante se filtró y secó in vacuo para

30 proporcionar el compuesto de título, 6.79 g como un sólido de color ligeramente amarillo. Este material fue utilizado sin otra purificación.

imagen1

C. Preparación de 1C

Al THF anhidro (1.0 mL) se le adicionó 1A (32 mg, 0.153 mmol) y 1B (100 mg, 0.154 mmol) y se agitó a RT durante 1.5 h. A esta reacción se le adicionó NaHCO3 sat’d (0.2 mL) y Mel (29 µL, 0.47 mmol). La reacción luego se agitó durante la noche, se filtró a través de un cojín de Celite, y los solventes se eliminan in vacuo. El producto resultante se purificó por cromatografía de silica gel (MeOH 1-4%; CH2Cl2) para proporcionar el compuesto 1C (31 mgs).

D. Ácido 4-(5-carboxi-2-metoxi-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7carboxílico etil éster

Una solución de 3B (31 mg, 0.074 mmol) en DMF (0.5 mL) se calentó por radiación de microondas a 190°C durante 30 minutos. La reacción se agitó otra vez por 30 minutos bajo las mismas condiciones y se le adicionó agua (1 mL). El precipitado fue recolectado por filtración. El filtrado fue extraído con CH2CL2 (1 X 1 mL). Los extractos fueron combinados y se secaron sobre MgSO4, se filtraron y el solvente se elimina in vacuo. El precipitado se combinó con el extracto y se purificó por cromatografía de silica gel (4-7% MeOH en CH2Cl2). El solvente se eliminó in vacuo para producir el compuesto de título (13 mg) como un sólido de color naranja.

E. Ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metoxi-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

A una suspensión de HOBt (30 mg, 0.20 mmol), EDCI (30 mg, 0.16 mmol), ciclopropil amina (20 uL, 0.29 mmol) en DMF ( 0.5 mL) a RT se le adicionó ácido 4-(5-carboxi-2-metoxifenilamino)-6-metilo-pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster (13 mg, 0.035mmol). La reacción se agitó durante la noche. Se le adicionó agua (1 mL) y el precipitado se recolectó. El producto se purificó por cromatografía instantánea en silica gel (1-3% MeOH en CH2Cl2) proporcionando el compuesto de título, 7 mg, como un sólido amarillento. HPLC (condición A) tR

4.37 min. MS m/z 410 [M+H]+.

Ejemplo 2

Preparación del Ácido 4-[2-metil-5-(4H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenilamino]-6metilpirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

imagen1

A. Preparación de 2A

3-(3-Isotiocianato-4-metilo-fenil)-4H-[1,2,4]triazol (22 mg, 0.10 mmol) y 1B (20 mg, 0.10 mmol) en THF (1.0 mL) se agitaron a RT durante 1h. A esta mezcla de reacción se le adicionó

5 NaHCO3 sat’d (0.2 mL) y MeI (28 mg). La mezcla de reacción fue agitada por 2h. Se le adicionó agua (5 mL) y la mezcla fue extraída con EtOAc (2 X 20 mL). Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre MgSO4. El producto se purificó por cromatografía de silica gel para proporcionar 2A, 35 mg.

10

imagen1

B. Ácido 4-[2-metil-5-(4H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenilamino]-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

2A (20 mg, 0.047 mmol) en DMF (0.5 mL) se calentó por radiación de microondas a 190°C durante 30 minutos. El material resultante se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el 15 compuesto de título, 12 mg. HPLC (condición A) tR 4.48 min. MS m/z 378 [M+H]+.

Ejemplo 3 Preparación del Ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metilpirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

imagen1

A. Preparación de 3A

N-Ciclopropil-3-isotiocianato-4-metilo-benzamida (159 mg, 0.69 mmol) y 1B (134 mg,

0.0.69 mmol) en THF (1.0 mL) se agitaron a RT durante la noche. El solvente se eliminó por

5 evaporación proporcionando un sólido de color amarillo. Este material fue suspendido en THF (5 mL) y NaOH (0.2 N, 5 mL). A esta reacción se le adicionó Mel (43 µL, 0.69 mmol) y se agitó a rt durante 30 min. Se le adicionó agua (5 mL) y la mezcla fue extraída con CH2Cl2 (2 X 20 mL). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 y el solvente se elimina in vacuo, para producir 3A, (311 mg). Este material fue utilizado sin otra purificación.

10

imagen1

B. Ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

3A ( 0.69 mmol) en HOAc (4 mL) se calentó, mediante radiación de microondas a 190°C 15 durante 15 minutos. El material resultante se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto de título, 55 mg. HPLC (condición A) tR 4.91 min. MS m/z 394 [M+H]+.

Ejemplo 4 Preparación del ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metilpirrolo[1,2-d][1,2,4]triazina-7-carboxílico bencilamida

imagen1

A. Ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico bencilamida

A una solución del ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2

5 d][1,2,4]triazina-7-carboxílico (37, 0.13 mmol) en DMF (1 mL) se le adicionó EDCI (37 mg, 0.20 mmol), HOBt (30 mg, 0.20 mmol), Et3N (45 µL) y bencilamina (29 µl, 0.27 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 3 h a rt. El material crudo se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el producto de título, 3.3 mg como un sólido de color blanco crudo. HPLC (condición A) tR 4.40 min. MS m/z 455 [M+H]+.

10 Ejemplo 5 Preparación del Ácido 4-(5-etoxicarbonilamino-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

imagen1

A. Preparación de 5A

15 A THF anhidro (2.0 mL) se le adicionó el ácido (3-isotiocianato-4-metilo-fenil)-carbamico etil éster (32 mg, 0.153 mmol) y 1B (250 mg, 1.28 mmol) y se agitó a RT durante 2 h. A esta reacción se le adicionó NaHCO3 sat’d (0.5 mL) y MeI (120 µL, 1.93 mmol). La reacción luego se agitó durante la noche, se filtró a través de un cojín de Celite, y los solventes se eliminan in vacuo. El producto resultante se purificó por cromatografía de silica gel (1/1 EtOAc/hexanos) para proporcionar 5C (280

20 mg) como un sólido de color amarillo.

imagen1

B. Ácido 4-(5-etoxicarbonilamino-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2d][1,2,4]triazina-7-carboxílico etil éster

5A (50 mg) en DMF (0.2 mL) se calentó mediante radiación de microondas a 190°C durante 30 minutos. El material resultante se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto de título, 15 mg. HPLC (condición A) tR 5.54 min. MS m/z 398 [M+H]+.

Ejemplo 6 Ensayo enzimático de JNK:

En un volumen de reacción final de 20 µL, Jnk2 recombinante humana 5nM fue incubada en la ausencia o presencia de inhibidores de JNK putativos en concentraciones que aumentan con HEPES 25 mM pH 7.5, β-glicerolfosfato20 mM, MgCl2 10 mM, ortovanadato de sodio 0.1 mM, Tween® 80 al 0.005%, 10 uM [γ-33P-ATP], 500 µM del sustrato del péptido IPTTPITTTYFFFKKK y 2 mM de DTT. La reacción se inició, mediante la adición del [g-33P-ATP]. Después de la incubación por 20 minutos a 30°C, las alícuotas se transfirieron en filtermats P30/GF (PerkinElmer). Cada filtermat se lavó cuatro veces en 100 ml del ácido fosfórico al 0.5%, pirofosfato 0.5 mM, luego dos veces en 50 ml de etanol, se secó y se selló en la bolsa que contiene 5 ml de cóctel de centelleo líquido OptiPhase "SuperMix" (PerkinElmer). La radioactividad incorporada en el péptido fue cuantificada en el lector de placa Trilux 1450 Microbeta. Los valores IC50 fueron calculados utilizando SigmaPlot.

Ensayo p38α

El ensayo p38α empleado se basa en la medida de ADP liberada en la reacción de interés a través de la oxidación de NADH obtenida mediante el acoplamiento con las reacciones de piruvato quinasa y lactato dehidrogenasa. Los ensayos se llevaron a cabo en placas UV de 384 pozos. El volumen final fue 25 uL preparado a partir de la adición de 2.5 uL del compuesto disuelto en DMSO al 10%, 17.5 uL de solución reguladora de ensayo y 5 uL de ATP. La solución reguladora de ensayo contiene los siguientes reactivos para proporcionar la concentración final en el ensayo: HEPES 25 mM, 2-glicerofosfato 20 mM, pH 7.6, MgCl2 10 mM, ortovanadato de sodio 0.1 mM, fosfoenolpiruvato 0.5 mM, NADH 0.12 mM, LDH 3.1 mg/ml, 6.67 mg/ml de piruvato quinasa, sustrato del péptido 0.25 mM, DTT 2 mM, Tween 80 al 0.005% y p38α quinasa 20 nM de Upstate. Los compuestos de prueba se pre incuban con quinasa p38α por 60 min y la reacción se inicia mediante la adición de ATP a una concentración final de 0.15 mM. Las velocidades de reacción se midieron a 340 nm utilizando un espectrofotómetro lector de placa SpectraMax durante 10 min a 37°C. Los datos de inhibición se analizaron mediante la regresión no-lineal por mínimos cuadrados utilizando SigmaPlot.

Resultados

Los compuestos ejemplificados en este documento mostraron actividad en los anteriores ensayos como inhibidores de la quinasa p38. Además, estos compuestos han demostrado que inhiben

de menos de 10 µM, mucho menos de 1 µM. Las actividades inhibidoras de p38 e inhibidoras de

JNK2 de ciertos compuestos proporcionados en este documento se muestran abajo en la Tabla 1. Para

valores IC50 de la quinasa p38 y la quinasa JNK2, "+++" representa < 1 µM, "++" representa entre 1.0

y 10 µM y "+" representa > 10 µM.

Tabla 1

Compuesto

inhibición p38α JNK

1

++ ++

2

++ NA

3

+++ +++

4

+++ +++

5

+++ +++

6

++ ++

7

+++ +++

8

+++ ++

9

++ ++

10

NA ++

11

++ ++

12

++ ++

13

NA ++

14

++ ++

15

++ ++

16

++ ++

17

N/A ++

18

++ ++

19

+ ++

20

++ ++

21

NA +

22

NA +

23

NA +

24

+ +

REFERENCIAS CITADAS EN LA DESCRIPCION

Esta lista de referencias citada por el aspirante es solamente para conveniencia del lector. No forma parte del documento de la patente Europea. Aún cuando se ha tenido gran cuidado en recopilar las referencias, los errores u omisiones no se pueden excluir y la EPO desconoce toda responsabilidad a este respecto.

Documentos de patentes citadas en la descripción

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US 6147080 A [0004]

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US 6087496 A [0004]

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WO 0134605 A [0004]

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WO 0012497 A [0004]

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WO 0012074 A [0004]

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WO 0240486 A [0008]

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WO 03032970 A [0008]

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WO 03033482 A [0008]

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WO 03032971 A [0008]

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WO 03032986 A [0008]

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WO 03032980 A [0008]

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WO 03033457 A [0008]

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WO 03032972 A [0008]

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US 2004082582 A [0008]

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US 5570522 A [0008]

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US 4522811 A [0078]

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US 4328245 A [0103]

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US 4409239 A [0103]

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US 4410545 A [0103]

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US RE28819 E [0104]

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US 4358603 E [0104]

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US 3710795 A [0107]

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US 4044126 A [0121]

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US 4414209 A [0121]

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US 4364923 A [0121]

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Claims (13)

1. Reivindicaciones

   1. Un compuesto o una sal de adición del ácido farmacéuticamente aceptable de estos en donde el compuesto tiene la fórmula (V):

   imagen1

   5 en donde R1 es un hidrógeno, alquilo o halo; R2 es un hidrógeno o alquilo; R3 es cloro, metilo, amino, carboxi, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo,

   ciclopropilaminocarbonilo, bencilaminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, 10 metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropiloxicarbonilamino,

   isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocarbonilo, oxazolil, triazinil o etilaminocarbonilamino; R4 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alcoxi, e hidroxi; R6 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, y alcoxi; Q1 es alquilo, alcoxi, aralquilamino, alquilamino o cicloalquilamino;

   15 en donde "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo no-sustituidos de cadena lineal o ramificada de 1 a

   20 átomos de carbono, preferiblemente, 1 a 7 átomos de carbono; "alcoxi" significa un radical -OR donde R es alquilo como se define anteriormente; "halo" significa flúor, cloro, bromo, o yodo, preferiblemente flúor y cloro;

   20 "cicloalquilo" se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo cíclico no aromático saturado o parcialmente insaturado, que contiene 1 a 3 anillos y de 3 a 7 carbonos por anillo que además se puede fusionar con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado; y

   "arilo" significa un radical hidrocarburo aromático bicíclico o monocíclico monovalente de 6 a 10 átomos del anillo, en donde dicho anillo arilo opcionalmente se puede fusionar a un anillo

   25 saturado monocíclico de 5-, 6-o 7-miembros, que opcionalmente contiene 1 o 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir del oxígeno, nitrógeno o azufre, los átomos del anillo remanentes siendo C donde uno o dos átomos de C opcionalmente se reemplazan por un grupo carbonilo.
2. 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido 30 farmacéuticamente aceptable de este, en donde el compuesto tiene la fórmula (VI): y en donde las variables son como se definen en la reivindicación 1.

   imagen1
3. 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido

   imagen2

   y en donde las variables son como se definen en la reivindicación 1.
4. 4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de este, en donde el compuesto tiene la fórmula (VIII):

   imagen1

   en donde las variables son como se definen en la reivindicación 1, y en donde Q2 es alcoxi, o alquilaminocarbonilo.
5. 5. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de estos en donde el compuesto tiene la fórmula (IX):

   imagen1

   y en donde las variables son como se definen en la reivindicación 1, y en donde Q3 es un hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, aralquilo o arilo.
6. 6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado a partir del:

   imagen3

   imagen3

   imagen1

   5 y

   imagen1

   o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de estos.

7. 7.

   Un compuesto de la reivindicación 1, para tratar, prevenir, o mejorar uno o más síntomas de trastornos o enfermedades mediadas por la citoquina.

8. 8.

   El compuesto de la reivindicación 7, en donde la enfermedad o trastorno se selecciona de enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos destructores de huesos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, y enfermedades virales.

9. 9.

   El compuesto de la reivindicación 8, además comprende un compuesto seleccionado a partir de un corticosteroide, rolipram, calfostina, una CSAID, un imidazo[1,2-A]quinoxalina 4sustituida, interleucina-10, un glucocorticoide, un salicilato, óxido nítrico, un inmunosupresor, un inhibidor de la translocación nuclear, desoxispergualina (DSG); un fármaco antiinflamatorio noesteroidal (NSAID), ibuprofeno, celecoxib, rofecoxib; un esteroide, prednisona, dexametasona; un agente antiviral, abacavir; un agente antiproliferativo, metotrexato, leflunomida, FK506; un fármaco citotóxico, azatioprina, ciclofosfamida, un inhibidor del TNF-α, tenidap, un anticuerpo anti-TNF, un receptor soluble de TNF, y la rapamicina, o derivados de estos.

10. 10.

    Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

11. 11.

    La composición farmacéutica de la reivindicación 10, además comprende uno o más de los siguientes: corticosteroide, rolipram, calfostina, un CSAID, una imidazo[1,2-A]quinoxalina 4sustituida, interleucina-10, un glucocorticoide, una salicilato, óxido nítrico, un inmunosupresor, un inhibidor de la translocación nuclear, desoxispergualina (DSG); un fármaco anti-inflamatorio noesteroidal (NSAID), ibuprofeno, celecoxib, rofecoxib; un esteroide, prednisona, dexametasona; un agente antiviral, abacavir; un agente antiproliferativo, metotrexato, leflunomida, FK506; un fármaco citotóxico, azatioprina, ciclofosfamida, un inhibidor del TNF-α, tenidap, un anticuerpo anti-TNF, un receptor soluble de TNF, y la rapamicina, o derivados de estos.

12. 12.

    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, para utilizar como un producto farmacéutico.

13. 13.

    Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición asociada con la citoquina.