ES2353750T3

ES2353750T3 - Oxazolidinonas para una utilización farmaceútica en la patologías cutáneas, las enfermedades autoinmunes, la foto-inmunosupresión y el rechazo de injerto.

Info

Publication number: ES2353750T3
Application number: ES03789496T
Authority: ES
Inventors: Nathalie Piccardi; Philippe Msika; Antoine Piccirilli
Original assignee: Laboratoires Expanscience SA
Current assignee: Laboratoires Expanscience SA
Priority date: 2002-11-25
Filing date: 2003-11-25
Publication date: 2011-03-04
Anticipated expiration: 2023-11-25
Also published as: AU2003294081A1; EP2266530B1; ATE483461T1; FR2847473A1; FR2847473B1; EP1565158B1; DE60334485D1; WO2004050052A1; EP2266530A1; EP1565158A1

Abstract

Utilización de una oxazolidinona de fórmula general (I): **(Ver fórmula)**en la que R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH); R2 y R'2 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH); R3 y R'3 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH), para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento o a la prevención: -de las reacciones o patologías alérgicas y/o inflamatorias de la piel y/o de las mucosas, - del eczema atópico y/o de contacto, -de las dermatosis inflamatorias tales como la soriasis, - de las dermitis irritativas, - de las enfermedades autoinmunes, 30 -de la foto-inmunosupresión, o - del rechazo de injerto.

Description

La presente invención se refiere al tratamiento farmacéutico, en particular dermatológico, de la piel y/o de las mucosas. Más particularmente, la presente invención se refiere a la utilización de por lo menos una oxazolidinona, para la obtención de un medicamento destinado a la prevención o al tratamiento de las patologías cutáneas de origen alérgico y/o inflamatorio.

Las oxazolidinonas según la presente invención permiten inhibir la migración de las células implicadas en la respuesta inmunitaria y/o inflamatoria y/o irritativa tales como los monocitos, los linfocitos, los dendrocitos dérmicos, las células dendríticas y más particularmente las células de Langerhans a consecuencia de un estímulo exterior o "señal de peligro" de origen químico, físico, biológico y más particularmente inmunitario, o a consecuencia del envejecimiento intrínseco (cronológico), hormonal o extrínseco (Sol, contaminación), cuya intensidad sería suficientemente importante para inducir una perturbación de la homeostasis cutánea.

Una de las principales funciones de la piel es la proyección del organismo contra unas agresiones del medio exterior. Esta proyección está asegurada en gran parte gracias a la cooperación de células presentes en la piel que son capaces, en presencia de un agente nocivo, de generar una respuesta inflamatoria y/o inmunitaria dirigida contra el agente nocivo. Se trata de las células dendríticas, en particular de las células de Langerhans (CL) de la epidermis, de los dendrocitos dérmicos, de los monocitos, de los linfocitos, de los queratinocitos, de los mastocitos, y de las células endoteliales vasculares.

Las CL son unas células dendríticas procedentes de la médula espinal y que residen en los tejidos no linfoides tales como la piel y las mucosas (boca, pulmón, vejiga, recto, vagina). En la piel, las CL se intercalan entre los queratinocitos epidérmicos en posición suprabasal. En el plano ultraestructural, se caracterizan por la presencia de un organito específico de origen membranario, el gránulo de Birbeck. En el plano inmunohistoquímico, las CL expresan en particular la molécula CD1a y las moléculas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad de clase II.

Las CL desempeñan un papel determinante en la inmunidad, como células presentadoras del antígeno. En efecto, unos experimentos realizados en el ratón demuestran que las CL capturan los antígenos presentes a nivel de la epidermis y migran hacia los tejidos linfoides que drenan la piel, en los que presentan el antígeno a las células

T. La iniciación de la respuesta inmune cutánea depende de la capacidad de las CL para dejar la epidermis para migrar hasta los ganglios proximales. Diferentes factores pueden influir en esta migración: la expresión de moléculas de adherencia, las proteínas de la matriz extracelular, unos haptenos, unas citoquinas, etc. Sin embargo, los mecanismos implicados en la migración de las CL no están todavía totalmente dilucidados. En particular, antes de alcanzar los ganglios linfáticos, las CL deben no sólo atravesar la unión dermo-epidérmica (JDE) sino también hacerse paso a través de la matriz extracelular (MEC) dérmica. La JDE está compuesta principalmente por laminina 5, por colágeno de tipo IV y VII, por nidógeno y por perlecan. La MEC que rodea los fibroblastos de la dermis contiene esencialmente unos colágenos de tipo I y III.

La maduración, así como la iniciación y la regulación de la migración de las CL están bajo la dependencia de citoquinas pro-inflamatorias tales como la IL-1β (interleucina-1-beta) y el TNF-α (Tumor Necrosis-alpha). Resulta de ello que cualquier agresión cutánea, más particularmente cualquier reacción inflamatoria y/o irritativa, capaz

5 de inducir en cantidad suficiente una u otra de estas citoquinas o las dos, es capaz de estimular la migración de las CL, y por lo tanto facilitar la reacción alérgica si estas CL están asociadas a un antígeno.

Unas patologías de tipo dermatológico pueden ser observadas como la resultante

10 de la migración de las CL a consecuencia de la captura de un antígeno de superficie. En el eczema atópico, las CL son capaces de fijar unos IgE en superficie e inducir una respuesta inmunitaria patológica. En el eczema de contacto, las CL desempeñan un papel principal puesto que captan y tratan el antígeno antes de presentarlo a los linfocitos T. Éste lo guardará en memoria y la reacción inmunitaria se iniciará al segundo contacto. El

15 documento EP 0 835 650 describe unas composiciones dermatológicas a base de oxazolidinonas para disminuir o impedir la aparición del carácter irritante o sensibilizante de por lo menos un agente activo antes de un efecto secundario irritante o sensibilizante.

Teniendo en cuenta lo anterior, es altamente deseable poder modificar la

20 capacidad migratoria de los dendrocitos dérmicos, de los monocitos, de los linfocitos, de las células de Langerhans (CL), para intentar aumentar el nivel de tolerancia o limitar la reactividad de la piel alérgica y/o inflamatoria y/o irritada y/o mayor. Es el problema que se propone resolver la presente invención. Los inventores han demostrado en efecto de manera completamente sorprendente e inesperada que unos compuestos tales como las

25 oxazolidinonas permiten inhibir de manera espectacular la migración de las células, tales como las células de Langerhans, en particular la migración inducida por la presencia de un agente alérgeno.

La presente invención tiene así por objeto la utilización de una oxazolidinona de 30 fórmula general (I):

imagen1

en la que:

35 R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH);

40 R2 y R’2 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH);

R3 y R’3 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo

alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende

eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o

5 varios sustituyente(s) hidroxi (OH);

para la obtención de un medicamento destinado al tratamiento o a la prevención de las condiciones citadas en las reivindicaciones.

10 Según un modo de realización de la invención, R1 representa un átomo de hidrógeno.

Según otro modo de realización de la invención, R2 representa un grupo alquilo lineal saturado en C8-C22, ventajosamente en C9-C18, de manera aún más ventajosa en C915 C12, de manera todavía más ventajosa en C10-C11, y R’2 representa un átomo de

hidrógeno.

Según otro modo de realización de la invención, R3 y R’3 representan un átomo de hidrógeno. 20

En un modo de realización particular de la presente invención, R1 representa un átomo de hidrógeno, R2 representa un grupo alquilo lineal saturado en C8-C22, ventajosamente en C9-C18, de manera aún más ventajosa en C9-C12, de manera todavía más ventajosa en C10-C11, y R’2, R3 y R’3 representan un átomo de hidrógeno.

25 Ventajosamente según la presente invención, la oxazolidinona se selecciona de entre el grupo constituido por la 4-dodecil-oxazolidin-2-ona, la 3,4-didodecil-oxazolidin-2ona y la 4,5-didodecil-oxazolidin-2-ona.

30 La 4-dodecil-oxazolidin-2-ona se puede representar mediante la fórmula siguiente:

imagen1

La 3,4-didodecil-oxazolidin-2-ona se puede representar mediante la fórmula siguiente:

imagen1

La 4,5-didodecil-oxazolidin-2-ona se puede representar mediante la fórmula siguiente:

imagen1

Según un modo de realización, la composición comprende además por lo menos un inhibidor de la migración de las células, tales como las células de Langerhans, seleccionado de entre el grupo de los inhibidores de metaloproteasas matriciales (MMP).

Mediante la expresión "compuestos inhibidores de las metaloproteasas matriciales (MMP)" se entiende cualquier compuesto conocido por el experto en la materia por su capacidad para inhibir la actividad de degradación de la matriz extracelular por las MMP. Las MMP constituyen una familia de enzimas (actualmente más de una veintena han sido identificadas y caracterizadas), zinc-dependientes, de estructura muy conservada, que poseen la capacidad de degradar los componentes de la matriz extracelular. Se clasifican según la naturaleza de su sustrato en colagenasas, gelatinasas y estromelisinas. Se pueden sintetizar mediante diferentes tipos celulares a nivel de la piel (fibroblastos, queratinocitos, macrófagos, células endoteliales, eosinófilas, células de Langerhans, etc.). El grupo de las MMP está así constituido por cuatro sub-clases: (1) las colagenasas, (2) las gelatinasas, (3) las estromelisinas, y (4) las MMP de tipo membranario (MT-MMP). La actividad de los MMP puede ser modulada por unos inhibidores de proteinasa naturalmente presentes tales como los inhibidores tisulares de metaloproteinasas (TIMP, en particular TIMP-1 y TIMP-2). En particular, el compuesto activo para inhibir la migración de las células de Langerhans es un compuesto inhibidor de por lo menos una MMP seleccionada de entre el grupo constituido por MMP-1, MMP-2, MMP-3 MMP-9, MMP-7, MMP-13 y MMP-18. Como "compuesto inhibidor de MMP", como compuesto activo para inhibir la migración de las células de Langerhans, se entienden los inhibidores tisulares de metaloproteinasas (TIMP), la alfa-2-macroglobulina, los inhibidores del activador del plasminógeno, la brioestatina-1, los antibióticos (doxiciclinas, minociclinas, etc.), los péptidos sintéticos o naturales que tienen una estructura similar a los sustratos de MMP (batimastato, marimastato, etc.), los retinoides (en particular los retinoides no aromáticos tales como el retinaldehído, la tretinoina, y el ácido retinoico 9-cis, la vitamina A, los retinoides monoaromáticos tales como el etretinato, la all-trans acitretina y la motrerinida, y los retinoides poliaromáticos tales como el adapaleno, el tazaroteno, el tamibiroteno y el arotinoide metil sulfona), los antioxidantes (los captadores de oxígeno singulete, etc.), los anticancerígenos (o "antimetastáticos"), los hidrolizados de malta tales como Colalift comercializados por la compañía Coletica, los extractos de algas marinas tales como Kelpadélie comercializados por la compañía Secma, los extractos de cartílago de tiburón tales como el complejo MDI comercializado por la compañía Atrium, los péptidos de arroz tales como por ejemplo Colhibin comercializado por la compañía Pentapharm, y los extractos peptídicos de lupino. Más particularmente, el compuesto inhibidor de las MMP se selecciona de entre el grupo constituido por los extractos peptídicos de lupino o "péptidos de lupino", tales como los descritos en la solicitud de patente FR 2 792 202 presentada el 19 de abril de 1999 a nombre de la compañía Laboratoires Pharmascience. Se puede citar en particular el extracto peptídico descrito en la solicitud FR 2 792 202 con la denominación "extrait B (LU105"). Según otro modo ventajoso de realización, dicho inhibidor de MMP se selecciona de entre el grupo constituido por los retinoides.

Según un modo de realización particular, la composición puede comprender asimismo además por lo menos un compuesto seleccionado de entre el grupo constituido por los inhibidores de PKC, los agentes antiinflamatorios, los agentes calmantes, los inmunosupresores, los quelantes de iones, las oxazolinas, las alcanolamidas y los derivados de ácido carbámico. Este o estos compuesto(s) seleccionado(s) de entre el grupo constituido por los inhibidores de PKC, los agentes antiinflamatorios, los agentes calmantes, los inmunosupresores, los quelantes de metales, las oxazolinas, las aclanolamidas y los derivados de ácido carbámico permite(n) actuar sobre y/o limitar la reacción irritativa o de sensibilización, incluso para algunos de ellos inhibir asimismo la migración de las células dendríticas, más particularmente de las células de Langerhans, de los dendrocitos dérmicos, de los monocitos, de los linfocitos, de los queratinocitos, de los mastocitos y de las células endoteliales.

Por el término "PKC" o "proteínas quinasas C", se entienden las enzimas que catalizan una reacción de fosforilación sobre un sustrato celular.

Cuando están activadas, las PKC fosforilan unos residuos serina o treonina específicos sobre unos sustratos proteicos, que varían según el tipo celular. En numerosas células la activación de las PKC aumenta la transcripción de genes específicos.

Las proteínas quinasas C (PKC) son unas proteínas codificadas por una familia de genes (11 isoformas diferentes). Se sabe en particular que estas proteínas están implicadas en la transducción de señales extracelulares mediadas por los factores de crecimiento, las citoquinas, así como por un cierto número de otras moléculas biológicas. La proteína quinasa β2 (PKC-β2) aparece expresada específicamente por las CL de la epidermis.

Cualquier compuesto conocido por el experto en la materia como inhibidor de la actividad de fosforilación de las PKC puede así ser utilizado como compuesto inhibidor de las PKC. Se pueden citar por ejemplo los polipéptidos descritos en la solicitud WO 99/43805 (Incyte Genomics Inc.).

En particular, el compuesto inhibidor de las PKC se selecciona de entre el grupo constituido por los inhibidores no específicos de las PKC, los inhibidores específicos de la isoforma PKC-β2, y las asociaciones de éstos.

Más particularmente, el compuesto inhibidor de las PKC se selecciona de entre el grupo constituido por los compuestos fenólicos y polifenólicos, las procianidinas (catequinas, epicatequinas, etc.), la alfa-amirina, el lupeol, el lupeol linoleato, los esteroles, los estanoles, los alcoholes triterpénicos y sus homólogos hidrogenados, los antibióticos tales como la estaurosporina, Ro-318425 (o 2-(8)-(aminometil)-6,7,8,9tetrahidropiridol(1,2-a)indol-3-il)3(1-metil-indol-3-il-maleimida, HCl) tal como el comercializado por la compañía Calbiochem, los compuestos que actúan por competición con los activadores fisiológicos de las PKC tales como el diacilglicerol y el forbol éster, los lípidos cutáneos de tipo (liso) esfingolípidos, lisofosfolípidos tales como las ceramidas y pseudoceramidas, esfingosinas y fitoesfingosinas, las esfinganinas, los derivados, precursores, análogos y homólogos de estos compuestos, de origen natural o sintético.

Mediante la expresión "compuestos fenólicos y polifenólicos" se entienden los

5 fenoles simples, las benzoquinonas, los ácidos fenólicos, las acetofenonas, los ácidos fenilacéticos, los ácidos hidroxicinámicos, las cumarinas e isocumarinas, las cromonas, las naftoquinonas, las xantonas, las antraquinonas, los flavonoides, los lignanos y neolignanos, las ligninas, las chalconas, las dihidrochalconas, las auronas, las flavonas, los flavonoles, los dihidroflavonoles, las flavanonas, los flavanoles, los flavandioles o

10 leucoantocianidinas, las antocianidinas, los isoflavonoides, los biflavanoides, las proantocianidinas y los taninos condensados.

Por el término "esteroles" se entiende más particularmente el esterol, es decir el compuesto perhidro-1,2-ciclopentanofenantreno que tiene un grupo hidroxilo en la posición 15 3, y los análogos del esterol de fórmula general (I) siguiente.

Así, preferentemente, los esteroles que se pueden utilizar responden a la fórmula general siguiente:

imagen1

20

en la que la insaturación en puntitos en posición 5 corresponde a la insaturación en

el caso de los esteroles, R representa una cadena hidrocarbonada, lineal o ramificada,

insaturada o no, que comprende de 1 a 25 átomos de carbono. En particular, R se

25 selecciona de entre el grupo constituido por los grupos alquilo en C1-C12, los grupos alcoxi en C1-C8, los grupos alcenilo en C2-C8, los grupos alcinilos en C2-C8, los grupos cicloalquilo en C3-C8, los grupos alcenilo en C2-C8 halogenados, y los grupos alcinilo en C2-C8 halogenados. El término "halogenado" designa uno o varios sustituyentes halógeno, a saber uno o varios átomos de cloro, flúor, bromo o yodo.

30 Entre los esteroles que se pueden utilizar ventajosamente, se pueden citar en particular el β-sitosterol, el α-sitosterol, el γ-sitosterol, el estigmaesterol, el campesterol o también el brasicasterol, y las mezclas de éstos. Por ejemplo, el β-sitosterol puede ser utilizado en forma del producto denominado "Ultra" (que comprende principalmente

35 β-sitosterol) tal como se comercializa por la compañía Kaukas. En el caso de una utilización de una mezcla de esteroles, se puede citar por ejemplo el producto denominado "Generol" que comprende principalmente β-sitosterol (aproximadamente 50% en peso), estigmaesterol, brasicaesterol y campesterol tal como se comercializa por la compañía Cognis o también el producto "Primal" de la compañía Kaukas.

40 Entre los alcoholes triterpénicos que se pueden utilizar ventajosamente, se puede citar en particular la β-amirina, el eritrodiol, el taraxasterol, el cicloartenol, el

24-metilencicloartanol, el lupeol, el lanoesterol, y las mezclas de éstos.

Mediante la expresión "homólogos hidrogenados" de un alcohol triterpénico, se entiende el o los compuestos alcohol(es) triterpénico(s) correspondiente(s) cuya(s)

5 unión(es) insaturada(s) eventualmente presente(s) ha(n) sido hidrogenada(s) (es decir transformada(s) en unión saturada) según unos procedimientos bien conocidos por el experto en la materia.

Más particularmente todavía, el compuesto inhibidor de las PKC se selecciona de 10 entre el grupo constituido por los esfingolípidos y los lisofosfolípidos, tales como los citados en la tabla siguiente:

Tabla 1: estructuras de esfingolípidos y lisoesfingolípidos

ESFINGOLÍPIDOS: LISOESFINGOLÍPIDOS

Estructura

X = H-: Ceramida Esfingosina

X = Galactosa -: Galactocerebrósida Psicosina (Galactosilesfingosina)

X = Sulfogalactosa -: Sulfalida Lisosulfótido (Sulfogalactosesfingosina)

GM2: Liso GM2

X = Fosforilcrolina -: Esfingomielina Lisoesfingomielina

15 Se pueden citar asimismo más particularmente, como compuesto inhibidor de las PKC, los lípidos cutáneos de tipo esfingolípidos y lisofosfolípidos.

Como esfingolípidos, se pueden citar aquellos de entre los más elementales tales

20 como la esfingosina (D eritro dihidroxi-1,3-amino-2-octadeceno 4t) y sus isómeros, la fitoesfingosina (D-ribo-trihidroxi-1,3,4-amino-2-octadecano) y sus isómeros. Pero también los lisoesfingolípidos (entre ellos, la lisosulfatida y la psicosina), la sulfogalactosilesfingosina, la esfinganina (2-amino-1,3-octadecano-diol) y las esfingomielinas.

25 Como fosfolípidos, se pueden citar aquellos de entre las familias de los fosfatidilamino-alcoholes y de los fosfatidilpolioles. El grupo de los fosfatidilaminoalcoholes comprende en particular las fosfatidiletanolaminas (o fosfatidilcolaminas), las fosfatidilcolinas, las fosfatidilserinas, las N-acilfosfatidiletanolaminas. El de los

30 fosfatidilpolioles comprende por su parte los fosfatidilcolinositoles, los difosfo-inositidos, los lisodifosfoinositidos, los fosfatidilgliceroles y los cardiolípidos.

Se pueden citar asimismo más particularmente, como compuesto inhibidor de las PKC, las ceramidas, en particular las ceramidas del cemento intercorneocitario de la 35 epidermis así como los precursores de las ceramidas que son la esfingosina y la

fitoesfingosina.

De manera general, las ceramidas pueden ser sintetizadas químicamente (se habla en particular de pseudo-ceramidas), ser de origen animal (unas concentraciones relativamente elevadas de esfingolípidos están presentes en el encéfalo y la columna vertebral de los mamíferos), de origen vegetal (principalmente de los cerebrósidos y otros

5 esfingolípidos glicosilados) o también ser unos derivados de levaduras (configuración estereoquímica idéntica a la de las ceramidas naturalmente presentes en la piel humana).

Las ceramidas del cemento intercomeocitario de la epidermis pueden ser separadas mediante los métodos habituales (cromatografía sobre capa delgada) en seis 10 fracciones, que corresponden a unos compuestos que difieren por la naturaleza de los ácidos grasos y la naturaleza de la base implicada (esfingosinas, insaturadas, o fitoesfingosinas, saturadas). La tabla 2 siguiente ilustra las estructuras respectivas presentes en estas fracciones, según la clasificación de Werts y Downing. La fracción 6 puede a su vez ser sub-dividida por unos métodos más finos en dos entidades: las

15 ceramidas 6a y 6b.

Tabla 2: las seis principales fracciones de ceramidas de la epidermis

imagen1

20 Así, las ceramidas 1, las menos polares, comprenden una estructura muy particular, que se vuelve a encontrar en la ceramida 6a: un omega-hidroxiácido con larga cadena que amidifica la base, y atado en su extremo omega por un enlace éster a otro ácido graso (0-acilceramidas). En el caso de la fracción 1, los ácidos grasos unidos a la esfingosina están esencialmente en C24, C26, C30, C32 o C34, pudiendo ser saturados,

25 monoetilénicos (principalmente para los C30, C32 y C34) o dietilénicos (C32 y sobre todo C34). En cuanto al ácido graso unido al extremo omega del anterior, se trata, de manera ampliamente predominante para las ceramidas 1, del ácido linoleico, cuyo papel capital en la función de barrera híbrida de la epidermis es bien conocido.

30 La fracción 2, de estructura más clásica (esfingosinas o dihidroesfingosinas unidas por un enlace amida a un ácido graso, principalmente C20 a C28), es la más abundante.

La fracción 3 es bastante similar, basándose la diferencia en la naturaleza de la base, en este caso, está esencialmente representada por las fitoesfingosinas, saturadas.

Las fracciones 4 y 5 están caracterizadas esencialmente por la presencia de alfahidroxiácidos unidos a una esfingosina.

La fracción 6b es parecida a las fracciones 4 y 5, que comprende un alfahidroxiácido, pero unido a una fitoesfingosina saturada.

La fracción 6a, tal como la ceramida 1, comprende el motivo característico que se encuentra sólo a nivel de las ceramidas de la epidermis, es decir, el enlace éster entre el hidroxilo en omega de un ácido graso unido a una esfingosina, y el grupo carboxílico de un ácido graso terminal que, esta vez, no es el ácido linoleico, sino un alfahidroxiácido.

Conviene asimismo citar las fitoceramidas (ceramidas de base fitoesfingosina), las colesterol-ceramidas sintéticas, los galacto o gluco cerebrósidos.

Por último, entre los compuestos inhibidores de las PKC que se pueden utilizar, la esfingosina está presente en el estado natural en la piel, y desempeña entre otro un papel importante en la función de barrera del stratum corneum, como precursor de los esfingolípidos (ceramidas y esfingoglicolípidos). Puede derivarse de fuente biológica tal como unos extractos de cerebros bovinos o por vía de síntesis, a partir de la serina, tal como se ha descrito, por ejemplo, en el artículo de Newman, J. Am. CHEM., 95 (12): 4098 (1973). Se pueden citar más particularmente las formas isómeras de la esfingosina: D-eritro, L-treo, L-eritro y D-treo. La forma D-eritro está presente más frecuentemente en la naturaleza.

Los compuestos inhibidores de las PKC que se pueden utilizar comprenden los isómeros, los derivados (sales, complejos, etc.), los análogos, los homólogos, los precursores y los metabolitos de los compuestos inhibidores de las PKC descritos anteriormente.

Los agentes antiinflamatorios que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unos agentes antiinflamatorios esteroideos (AIS), tales como los corticoides, o no esteroideos (AINS).

Los agentes calmantes que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unos derivados de regaliz y unos derivados del alfa-bisabolol.

Los inmunosupresores que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente el tacrolimus, el pimecrolimus, y la ciclosporina.

Los agentes quelantes de iones que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unos agentes quelantes químicos seleccionados ventajosamente de entre el grupo constituido por el ácido etilendiamina-tetracético (EDTA) y sus sales de sodio, de potasio, de calcio disodio, de diamonio, de trietanolamina (TEA-EDTA), el ácido hidroxietilo etileno diamina tetracético (HEDTA) y su sal trisódica, el ácido dietilentriamina pentacético (DTPA), y sus mezclas. Los agentes quelantes de iones pueden ser asimismo unos agentes quelantes biológicos ventajosamente seleccionados de entre el grupo constituido por la metalotioneina, la

5 transferrina, la lactoferrina, la calmodulina, el chitosán metileno fosfonato, y sus mezclas.

Los iones quelatados son ventajosamente los iones Na+, K+, Ca2+, Cl-, Ni2+, Co+,

Co2+, Zr2+, Zr4+, pero también los iones cromo a nivel de oxidación II y III tales como Cr2+ ,

Cr3+, y Cr2O72-.

10 Las oxazolinas que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unas oxazolinas que responden a las fórmulas generales siguientes:

imagen2

Tipo 2

imagen1

20 Tipo 3

en las que R1 representa un grupo alquilo en C1-C40, lineal o ramificado, saturado o

insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) así

como uno o varios sustituyente(s) seleccionado(s) de entre el grupo constituido por los

25 radicales hidroxi (OH) y alcoxi en C1-C6 (OC1-C6); R2, R3, R4 y R5 representan, de manera 5

10

15

20

25

30

35

-11

independiente, un átomo de hidrógeno, un radical hidroxi, o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias insaturaciones etilénicas así como uno o varios sustituyente(s) seleccionado(s) de entre el grupo constituido por los radicales hidroxi (OH), alcoxi en C1-C6 (OC1-C6) y alcoxi en C1-C6 carbonilos (COOC1-C6). Por el término de "alcoxi en C1-C6 (OC1-C6)" se entiende en el sentido de la presente invención, un radical alcoxi cuyo grupo alquilo comprende de 1 a 6 átomos de carbono.

Ventajosamente, dicha oxazolina es una oxazolina de tipo 1 seleccionada de entre el grupo constituido por la 2-undecil-4-hidroximetil-4-metil-1,3-oxazolina, la 2-undecil-4,4dimetil-1,3-oxazolina, la (E)-4,4-dimetil-2-heptadec-8-enil-1,3-oxazolina, la 4-hidroximetil-4metil-2-heptadecil-1,3-oxazolina, la (E)-4-hidroximetil-4-metil-2-heptadec-8-enil-1,3oxazolina, la 2-undecil-4-etil-4-hidroximetil-1,3-oxazolina. De manera todavía más ventajosa, dicha oxazolina es la 2-undecil-4,4-dimetil-1,3-oxazolina, denominada OX-100, de fórmula:

imagen1

Las alcanolamidas que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unas alcanolamidas que responden a la fórmula general siguiente:

imagen1

en la que R1 representa un grupo alquilo en C1-C40 que comprende de 0 a 6 insaturaciones y que comprende de manera eventual por lo menos un sustituyente seleccionado de entre el grupo constituido por los radicales hidroxilos (OH), los alcoxi en C1-C6 (OC1-C6) y los alcoxi en C1-C6 carbonilos (COOC1-C6); R2 y R3 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno, un grupo metilo, un grupo alquilo en C2-C20 que comprende de 0 a 6 insaturaciones y que comprende eventualmente por lo menos un sustituyente seleccionado de entre el grupo constituido por los radicales hidroxilos (OH), los alcoxi en C1-C6 (OC1-C6) y los alcoxi en C1-C6 carbonilos (COOC1-C6). Por el término "alcoxi en C1-C6 (OC1-C6)" se entiende un radical alcoxi cuyo grupo alquilo comprende de 1 a 6 átomos de carbono. Ventajosamente, el radical R1 representa un grupo alquilo que comprende de 1 a 40 átomos de carbono (en C1-C40), de manera preferida de 6 a 22 átomos de carbono (en C6-C22) y de manera todavía más preferida de 8 a 18 átomos de carbono (en C8-C18), eventualmente saturado puesto que comprende de 0 a 6 insaturaciones, y que comprende de manera eventual por lo menos un radical hidroxilo, alcoxi o alcoxicarbonilo tales como se han definido anteriormente. De manera todavía más ventajosa, dicha alcanolamida es la alcanolamida denominada AK100 de fórmula:

5

imagen1

Las oxazolinas y las alcanolamidas son unos agentes inhibidores conocidos en la

migración de las células de Langerhans (véanse las solicitudes de patente FR 2 834 213 y

FR 2 834 216).

10 Los derivados de ácido carbámico que se pueden utilizar en asociación con las oxazolidinonas y los inhibidores de MMP son ventajosamente unos derivados de ácido carbámico de fórmula general siguiente:

imagen1

15

en la que:

R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o

20 ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH);

R2 y R’2 representan, de manera independiente un átomo de hidrógeno o un grupo

25 alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyentes hidroxi (OH);

30 alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH);

R4 y R5 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo

35 acilo de tipo RxCO, en el que Rx es un radical alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias insaturaciones etilénicas y/o acetilénicas, así como uno o varios sustituyentes hidroxi (OH).

Según un modo de realización, R1 representa un átomo de hidrógeno.

40 Según otro modo de realización, R2 representa un grupo alquilo lineal saturado en C8-C22, ventajosamente en C9-C18, de manera aún más ventajosa en C9-C13, todavía más ventajosa en C11-C13, y/o R’2 representa un átomo de hidrógeno.

Según otro modo de realización, R3 y R’3 representan un átomo de hidrógeno. 5 Según otro modo de realización, R4 y R5 representan un átomo de hidrógeno.

En un modo de realización particular, R1 representa un átomo de hidrógeno, R2 representa un grupo alquilo lineal saturado en C8-C22, ventajosamente C9-C18, aún más 10 ventajosamente en C9-C13, de manera todavía más ventajosa en C11-C13, y R’2, R3, R’3, R4

y R5 representan un átomo de hidrógeno.

Ventajosamente, el derivado de ácido carbámico se selecciona de entre el grupo constituido por el ácido (1-hidroximetil-tridecil)-carbámico y el ácido (1-hidroximetil15 undecil)-carbámico.

El ácido (1-hidroximetil-tridecil)-carbámico puede ser representado por la fórmula siguiente:

imagen1

20

Los derivados de ácido carbámico son unos agentes conocidos en la migración de las células de Langerhans (véase la solicitud de patente FR 0214792).

25 Ventajosamente, la composición se caracteriza porque la concentración en oxazolidinona está comprendida entre aproximadamente 0,001 y aproximadamente 10% en peso, y más particularmente entre aproximadamente 0,01 y 3% en peso, ventajosamente entre 0,1 y 1% en peso, de manera todavía más ventajosa entre 0,1 y 0,5% en peso, con respecto al peso total de la composición.

30 La composición es una composición farmacéutica, en particular dermatológica. La composición puede ser formulada en forma de diferentes preparaciones adaptadas a una administración tópica, a una administración oral o rectal, a una administración parenteral. Preferentemente, las diferentes preparaciones esetán adaptadas a una administración

35 tópica e incluyen las cremas, las pomadas, las lociones, los aceites, los parches, los pulverizadores o cualquier otro producto para aplicación externa. Los modos de administración, las posologías y las formas galénicas óptimas de los compuestos y de las composiciones pueden ser determinadas según los criterios considerados generalmente en el establecimiento de un tratamiento farmacéutico, preferentemente dermatológico,

40 adaptado a un paciente como por ejemplo la edad o el peso corporal del paciente, la gravedad de su estado general, la tolerancia al tratamiento, los efectos secundarios observados, y el tipo de piel. En función del tipo de administración deseada, la composición y/o los compuestos activos pueden comprender además por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable, en particular dermatológicamente aceptable.

45 Preferentemente, se utiliza un excipiente adaptado para una administración por vía tópica externa. La composición puede comprender además por lo menos un adyuvante farmacéuticamente conocido por el experto en la materia, seleccionado de entre los espesantes, los conservantes, los perfumes, los colorantes, los filtros químicos o minerales, los agentes hidratantes, y las aguas termales.

Se describe asimismo la utilización de por lo menos una oxazolidinona de fórmula general (I) tal como se ha definido anteriormente para la preparación de un medicamento destinado a inhibir la migración de las células dendríticas, de los dendrocitos dérmicos, de los monocitos, de los linfocitos, de los queratinocitos, de los mastocitos y de las células endoteliales.

El medicamento está destinado a inhibir la migración de las células de Langerhans.

Según la presente invención, el medicamento está destinado al tratamiento y/o a la prevención de las reacciones o patologías alérgicas y/o inflamatorias de la piel y/o de las mucosas, en particular de la boca, de los pulmones, de la vejiga, del recto o de la vagina.

Ventajosamente, el medicamento está destinado al tratamiento y/o a la prevención de las reacciones o patologías de la piel y/o de las mucosas consecutivas a la migración de las células, tales como las células de Langerhans, inducidas por una señal de peligro. Se entiende por "señal de peligro", en el sentido de la presente invención, cualquier señal que provoca en particular la producción de citoquinas inflamatorias o cualquier señal inmunológica verdadera del tipo penetración de un alérgeno.

Según un modo de realización, el medicamento está destinado al tratamiento y/o a la prevención de las reacciones o patologías inducidas por unos haptenos químicos o metálicos.

La composición según la invención, así como los compuestos activos según la invención, permiten reducir la respuesta inmunitaria inducida por la migración de CL que ha fijado unas IgE en superficie. Por eso, la presente invención se refiere asimismo a la utilización de por lo menos una oxazolidinona de fórmula general (I) tal como se ha definido anteriormente o de una composición según la invención para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento y/o a la prevención del eczema atópico. La composición según la invención, así como los compuestos activos según la invención, están destinados asimismo al tratamiento y/o a la prevención del eczema de contacto, en la medida en que permiten reducir una respuesta inmunitaria inducida en particular por captura de un antígeno, tratamiento y presentación de este antígeno a los linfocitos T por las CL.

La composición según la invención, así como los compuestos activos según la invención, se utilizan asimismo para el tratamiento y/o la prevención de dermatosis inflamatorias tales como la soriasis, de las dermitis irritativas, de las enfermedades auto-inmunes, de la foto-inmuno-supresión (disminución de la respuesta inmunitaria inducida por los ultravioletas solares, y más particularmente por los ultravioletas B), o del rechazo de injerto.

En las diferentes utilizaciones mencionadas anteriormente del compuesto activo seleccionado de entre el grupo de las oxazolidinonas tales como se han definido anteriormente, éste puede ser utilizado en asociación con por lo menos un compuesto seleccionado de entre el grupo constituido por lo inhibidores de metaloproteasas matriciales (MMP), los inhibidores de PKC, los agentes antiinflamatorios, los agentes calmantes, los inmunosupresores, los agentes quelantes de iones, las oxazolinas y las alcanolamidas tales como se han definido anteriormente.

Otras características y ventajas de la invención se pondrán más claramente de manifiesto a partir de la descripción con los ejemplos representados a continuación. Los ejemplos siguientes están destinados a ilustrar la invención sin limitar su alcance de ninguna manera. Salvo que se precise de otra manera, los porcentajes indicados en los ejemplos siguientes son unos porcentajes en peso. La 4-dodecil-oxazolidin-2-ona se denomina a continuación oxazolidinona A, la 4,5-didodecil-oxazolidin-2-ona se denomina a continuación oxazolidinona B y la 3,4-didodecil-oxazolidin-2-ona se denomina a continuación oxazolidinona C.

EJEMPLO 1: Ejemplos de composición según la presente invención

% en peso Agua 58,1 Polideceno hidrogenado 12 Glicerina 15 Carbonato de dicaprililo 7 Glucósido de dicaprililo 2,5 2-dipolihidroxiestearato de poliglicerilo 3,5 Extracto peptídico de lupino (proteína hidrolizada) 0,2 Acrilato/copolímero de acrilato de alquilo en C10-30 0,4 Hidroximetilglicinato de sodio 0,4 Goma xantana 0,3 Oxazolidinona A o B o C 0,5 Hidróxido de sodio 0,07 Ácido cítrico 0,03

EJEMPLO 2: Medición de la pérdida insensible de agua de composiciones según la presente invención:

Las mediciones de la pérdida insensible de agua (P.I.E.) permiten verificar la integridad de la función "barrera" del stratum corneum, cuantificando los intercambios de agua entre el medio cercano y la piel. Un deterioro de la integridad del stratum corneum se traduce por un aumento de la P.I.E. relacionada con una mayor permeabilidad del tegumento. Se ha demostrado así que unos voluntarios que tienen una piel de naturaleza seca tendrían una piel que equilibraría menos agua y a la que se asociaría una elevación de la P.I.E. Por extensión, un producto que presenta un poder filmógeno, y por lo tanto un efecto barrera, limitaría de manera significativa la P.I.E.

Modo de realización:

La pérdida insensible de agua ha sido determinada después de la aplicación cutánea única de las 3 formulas presentadas en el ejemplo anterior, que contiene la oxazolidinona A, B o C, en un voluntario adulo de sexo femenino que tiene la piel de las piernas seca.

•: Mediciones de P.I.E.: Las mediciones de P.I.E. se efectúan en modo estándar. La sonda se posiciona en la zona de medición cutánea, sin presión. Una señal sonora se activa para significar que la medición empieza. Una medición de P.I.E. se toma cada 2 segundos durante 2 minutos aproximadamente, siendo un tiempo de 1 minuto como media necesario para obtener unos valores estables. El valor medio de los 20 últimos segundos y la desviación del valor medio aparecen entonces en la pantalla.

•: Zonas: Se delimitan cuatro zonas cutáneas de 30 cm2 (6 cm x 5 cm) aproximadamente de la cara externa de las piernas entre la rodilla y el tobillo. Tres zonas son tratadas respectivamente por las tres fórmulas presentadas anteriormente, que contienen la oxazolidinona A, B o C, y una cuarta zona constituye la zona de control en la que no se aplica ningún producto. La zona de control y las tres zonas tratadas han sido aplicadas sobre las piernas derecha o izquierda, según una randomización al azar.

Las mediciones han sido realizadas, para cada tiempo del estudio y para cada zona, sobre una sub-zona de 10 cm2 (una sub-zona por tiempo de medición), después de un secado cuidadoso con la ayuda de un papel de guata de celulosa.

•: Dosis aplicada: 0,06 g aproximadamente de cada producto sobre el conjunto de las cuatro zonas, es decir ± 0,04 mg/cm2.

•: Modalidades de aplicación: se efectúa un masaje delicado, de manera uniforme, con la ayuda de un dedil, con el fin de asegurar la mejor penetración posible del producto.

•: Periodo de reposo: 30 minutos mínimosantes de las mediciones experimentales iniciales.

•: Tiempo de medición: T0 (antes de la aplicación), T1 hora y T8 horas.

•: Panel: 10 personas han sido admitidos por el Encargado del Estudio y han participado a la totalidad del ensayo. El análisis de los resultados se ha referido por lo tanto a un panel de 10 voluntarios, de sexo femenino, de 22 a 63 años de edad (media: 39 años).

Resultados:

La tabla 3 reúne los resultados que se refieren al estudio de la evolución de la pérdida insensible de agua (P.I.E.) de las fórmulas 1 (oxazolidinona A al 0,5%); 2 (oxazolidinona B al 0,5%) y 3 (oxazolidinona C al 0,5%) en función del tiempo.

Tabla 3

P.I.E (g/m2.h)

Zonas: Placebo Zona 1 Fórmula 1 Zona 2 Fórmula 2 Zona 3 Fórmula 3 Zona 4

T0: 3,5 3,4 3,5 3,4

T1 hora: 3,3 3,2 3,3 3,3

T8 horas: 3,2 3,3 3,3 3,2

En conclusión, la pérdida insensible de agua no se ha modificado casi nada

5 después de la aplicación de las fórmulas 1, 2 y 3 que contienen respectivamente 0,5% de las oxazolidinonas A, B y C. Por consiguiente, las fórmulas 1, 2 y 3 a base de oxazolidinonas no tienen por lo tanto ninguna propiedad filmógena y ningún efecto barrera. Por lo tanto, no pueden contribuir a bloquear la penetración eventual de agentes alérgenos

o sensibilizantes. 10

EJEMPLO 3: Estudio de la actividad de las oxazolidinonas A, B y C sobre la inhibición de la migración de las CL aisladas recientemente a partir de fragmentos de piel humana

15

1. Material y métodos 1.1 Obtención de las células de Langerhans

20 Unas suspensiones de células epidérmicas han sido obtenidas mediante un tratamiento enzimático (0,05% de tripsina, durante 18h a +4ºC) de fragmentos de piel humana normal procedentes de cirugía plástica. Las suspensiones obtenidas contienen como media 2 a 4% de CL. La obtención de suspensiones que contienen como media 70% de CL se basa en el principio de la centrifugación sobre gradiente de densidad

25 (LymphoprepTM) y eliminación de los queratinocitos.

1.2 Preparación de los medios

El medio de base seleccionado para el conjunto del estudio ha sido el RPMI 1640

30 (Gibco BRL, Francia). Las oxazolidinonas A, B y C suministradas por EXPANSCIENCE, a la concentración de 10-2 M en disolución en DMSO (Dimetilsulfóxido), han sido diluidas en RPMI-1640 y ensayadas a 1 µM.

1.3 Sensibilización de las CL

35 Se utilizó como agente sensibilizador el DNSB (Sigma Aldrich), forma disoluble del TNCB. (dinitro-cloro-benceno), solubilizado en RPMI-BSA y utilizado a la concentración de 50 µm.

1.4 Migración de las CL

Se utilizó un sistema de cámara de cultivo con dos compartimientos (Falcon, Becton Dickinson, Francia). El compartimiento superior se separa del compartimiento 5 inferior mediante una membrana de porosidad de 8 µm, sobre la cual se depositan 50 µg/cm2 de Matrigel. La membrana se recubre entonces de proteínas que forman una película equivalente a una membrana basal (laminina, colágeno IV, nidógeno, entactina, heparan sulfato proteoglicanos). Las células recogidas en el medio RPMI-BSA solo o en presencia de los diferentes productos se depositan en el compartimiento superior. En el

10 compartimiento inferior, se añade un sobrenadante de cultivo de fibroblastos humanos normales. Después de 18 horas de incubación a 37ºC, el número de células vivas que han atravesado el Matrigel y que se encuentran en el compartimiento inferior se cuenta bajo microscopio (las CL son fácilmente identificables por su forma dendrítica). Cada ensayo se realiza por triplicado.

15

2. Resultados

Los resultados que se refieren a la migración de las CL se presentan en la tabla 4 siguiente. 20 Tabla 4

Células de control: Células sensibilizadas por el hapteno DNSB DNSB + oxazolidinona A (1 µM) DNSB + oxazolidinona B (1 µM) DNSB + oxazolidinona C (1 µM)

Índice de migración: 1 2,13 1,2 0,98 1,1

La tabla 4 muestra así la relación entre el número de células que han migrado en

25 presencia de DNSB +/-el producto de ensayo y el número de células que han migrado en las condiciones normales (células de control no sensibilizadas y no tratadas). Las CL aisladas recientemente de la epidermis no tienen una capacidad migratoria elevada. En la expresión de los resultados, la capacidad migratoria de las CL de control (no tratadas y no sensibilizadas) está arbitrariamente fijada en 1.

30 El tratamiento de las células con el hapteno DNSB ha estimulado la migración de las CL de manera significativa (+113%) con respecto a las células normales no estimuladas (células de control).

35 Las oxazolidinonas A, B y C a la concentración de 1 µM inhiben de manera significativa la migración de las CL inducida por el DNSB. Las células así tratadas tienen un índice de migración comparable al de las células de control no sensibilizadas.

En conclusión, se ha demostrado así, de manera completamente sorprendente,

40 que utilizando unas CL aisladas recientemente, dispuestas en un sistema de cámara de cultivo con dos compartimientos (que permite la migración celular), que las oxazolidinonas A, B y C inhiben de manera significativa la migración de las CL.

EJEMPLO 4: Estudio de la actividad de la asociación de la oxazolidinona B (4,5didodecil-oxazolidin-2-ona) y del LU105 (inhibidor de MMP) sobre la inhibición de la migración de las CL aisladas recientemente a partir de fragmentos de piel humana

5 Con el fin de ilustrar el interés de la asociación entre una oxazolidinona y un inhibidor de MMP, la oxazolidinona B (4,5-didodecil-oxazolidin-2-ona), así como el LU105 (LU105 es un inhibidor de MMP, que corresponde a un extracto peptídico de lupino blanco comercializado por la compañía Expanscience con el nombre de marca Actimp 193®), han sido aplicados simultáneamente sobre unas CL aisladas recientemente.

10

1. Material y métodos

Los mismos que en el ejemplo 3.

15 2. Resultados Los resultados que se refieren a la migración de las CL se presentan en la tabla 5

siguiente. 20 Tabla 5

Células de control: Células sensibilizadas por el hapteno DNSB DNSB + oxazolidinona B (1 µM) DNSB + LU105 (5 µM) DNSB + oxazolidinona B (1 µM) + LU105 (5 µg/ml)

Índice de migración: 1 1,78 1,2 1,3 0,91

En conclusión, las dos moléculas del ensayo (oxazolidinona B y LU105) ensayadas separadamente inhiben de manera significativa la migración de las CL sensibilizadas.

25 Cuando se asocian estas dos moléculas, su actividad respectiva está potencializada, y las células sensibilizadas tienen una capacidad migratoria parecida a la de las células normales no sensibibilizadas. En otras palabras, la oxazolidinona B y LU105 actúan en sinergia para inhibir la migración de las CL activadas.

30 Estudio de la actividad de la oxazolidinona B sobre la inhibición de la migración de las células dendríticas sobre el ratón

1. Materiales y métodos

35 1.1 Agentes reactivos

El FITC (Fluoresceína isotiocianatao, Sigma, St. Louis, MO) ha sido diluido extemporáneamente en una mezcla de acetona:dibutilftalato (1:1).

40 1.2 Inhibidores

La oxazolidinona B y el LU105 (LU 105 es un inhibidor de MMP, que corresponde a

un extracto peptídico de lupino blanco comercializado por la compañía Expanscience con

el nombre de marca Actimp 193®) han sido suministrados por los laboratorios Expanscience, y formulados solos o en asociación en un vehículo inerte compatible con una aplicación tópica tal como se ha descrito en el ejemplo 1 anterior [oxazolidinona B (0,5% ± LU 105 (2%)]. Las diferentes formulaciones han sido aplicadas sobre las orejas de ratones dos veces por día durante 4 días consecutivos. Tres horas después de la última aplicación, 1,5% de FITC se aplican sobre las dos orejas (una tratada y la otra no tratada (control)).

1.3 Migración de las células de Langerhans (CL) y de las células dendríticas CD sobre el ratón

El efecto de las dos moléculas ha sido evaluado in vivo en el ratón. La piel de las dos orejas se utan con 1,5% de FITC (2x3 µl). Los ratones son sacrificados 24 horas después y se prepara una suspensión celular a partir de los ganglios auriculares y cervicales (ganglios drenantes, denominados a continuación GL) o a partir de los ganglios popliteales (ganglios no drenantes, control negativo). Los tejidos han sido cortados y las células se separan mediante filtración (filtro de 100 µM, Falcon; Becton Dickinson), y después se lavan. Las células se centrifugan después durante 10 minutos a 600 x g (m x s-2) sobre gradiente de metrizamida (14,5% en RPMI 1640; 7,5% de SVF). Las células de la interfaz se recuperan, se aclaran y después se marcan con un AC anti-CDS86 PE-conjugado, biot-MHC CLII mAbs más estreptavidina-Cya (PharMingen) y analizadas mediante citometría de flujo. Sólo las células FITC+, PE+ y Cya+ son contabilizadas debido a que representan la población de células que han migrado de la piel hacia los GL a consecuencia de la aplicación del hapteno.

2. Resultados

La aplicación tópica del vehículo solo no supone ninguna modificación del número de CD FITC+ a nivel de los GL. El vehículo no tiene por lo tanto ningún efecto sobre las capacidades de las CD.

Los resultados que se refieren a la migración de las CD se presentan en la tabla 6 siguiente.

Tabla 6

OXAZOLIDINONA B (0,5%): LU105 (2%) OXAZOLIDINONA B (0,5%) + LU105 (2%)

Inhibición de la migración en %: 28 30 90

La migración de las CD a nivel de los GL, a consecuencia de la aplicación del hapteno FITC, se inhibe en unas proporciones comparables y sin diferencia significativa por la oxazolidinona B a la dosis de 0,5% y el LU105 a la dosis de 2%.

Cuando se asocian los dos tipos de moléculas, esta inhibición es prácticamente total. En conclusión, se ha demostrado así, de manera completamente sorprendente, utilizando un modelo de ratones sensibilizados por el hapteno FITC, que la oxazolidinona B inhibe de manera significativa la migración de las CD hacia los GL. Por otra parte, la oxazolidinona B y el LU105 actúan en sinergía para inhibir la migración de las CD en el ratón sensibilizado.

Claims

1. Utilización de una oxazolidinona de fórmula general (I):

imagen1

en la que R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal

o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias

10 instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH); R2 y R’2 representan, de manera independiente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH); R3 y R’3 representan, de manera independiente, un

15 átomo de hidrógeno o un grupo alquilo en C1-C30, lineal o ramificado, saturado o insaturado, que comprende eventualmente una o varias instauración(es) etilénica(s) y/o acetilénica(s), así como uno o varios sustituyente(s) hidroxi (OH), para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento o a la prevención:

20 -de las reacciones o patologías alérgicas y/o inflamatorias de la piel y/o de las mucosas,

-del eczema atópico y/o de contacto,

25 -de las dermatosis inflamatorias tales como la soriasis,

-de las dermitis irritativas,

-de las enfermedades autoinmunes, 30 -de la foto-inmunosupresión, o

-del rechazo de injerto.

35

2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque R1 representa un átomo de hidrógeno.

40 3. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque R2 representa un grupo alquilo lineal saturado en C8-C22, ventajosamente en C9-C18, de manera todavía más ventajosa en C9-C12, de manera aún más ventajosa en C10-C11, y R’2 representa un átomo de hidrógeno.

4.: Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque R3 y R’3 representan un átomo de hidrógeno.

5.: Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque dicha oxazolidinona se selecciona de entre el grupo constituido por la 4-dodeciloxazolidin-2-ona, la 3,4-didodecil-oxazolidin-2-ona y la 4,5-didodecil-oxazolidin-2-ona.

5

10 --