ES2364687T3

ES2364687T3 - SAMPLING SYSTEM BY PIPETTE.

Info

Publication number: ES2364687T3
Application number: ES02756462T
Authority: ES
Inventors: Ravinder C. Mehra; Zygmunt M. Andrevski; Zvi G. Loewy
Original assignee: Alfa Wassermann Inc
Current assignee: Alfa Wassermann Inc
Priority date: 2001-02-27
Filing date: 2002-02-27
Publication date: 2011-09-12
Anticipated expiration: 2022-02-27

Abstract

Dispositivo para extraer una alícuota de una muestra de un receptáculo sellado que contiene dicha muestra y que comprende: a) una cámara hueca de volumen predefinido que presenta paredes interior y exterior y extremos superior e inferior; b) una punta perforadora hueca que presenta extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentra introducido en el extremo inferior de la cámara hueca; c) una barrera de filtro en las paredes interiores de la cámara hueca; d) un orificio de ventilación lateral situado dentro de la cámara hueca y entre la barrera de filtro y la punta perforadora; y e) una placa deflectora que separa la cámara hueca y el orificio de ventilación lateral, donde la placa deflectora evita o bloquea esencialmente la entrada del excedente de muestra en el orificio de ventilación lateral.Device for extracting an aliquot from a sample of a sealed receptacle containing said sample and comprising: a) a hollow chamber of predefined volume having inner and outer walls and upper and lower ends; b) a hollow piercing tip having sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber; c) a filter barrier in the inner walls of the hollow chamber; d) a side vent hole located inside the hollow chamber and between the filter barrier and the piercing tip; and e) a baffle plate separating the hollow chamber and the lateral vent hole, where the baffle plate essentially prevents or blocks the entry of excess sample into the vent hole.

Description

FIELD OF THE INVENTION

[0001] La invención se refiere a un dispositivo para extraer una alícuota de una muestra de un receptáculo sellado, según las reivindicaciones 1 y 8 incluidas en el presente documento, con las realizaciones preferidas que se describen en las reivindicaciones dependientes. [0001] The invention relates to a device for extracting an aliquot from a sample of a sealed receptacle, according to claims 1 and 8 included herein, with the preferred embodiments described in the dependent claims.

BACKGROUND OF THE INVENTION

[0002] La dilucidación de las secuencias completas del genoma de innumerables organismos procariotas y eucariotas, entre los que se incluyen los humanos en especial, ha fijado los cimientos para un análisis exhaustivo del genoma. El análisis de expresión génica mediante micro-matrices, el diagnóstico de ADN y el descubrimiento de fármacos basado en genes, entre otras aplicaciones, dependen del conocimiento y acceso a la secuencia del genoma. El genoma humano contiene aproximadamente tres billones de pares de bases contenidos en 24 cromosomas independientes que albergan un total estimado de 30.000 genes distintos, cada uno de los cuales posee una longitud media de codificación de proteína de unos 3.000 pares de bases. Además, se ha establecido que el contenido genético que comprende la totalidad de los genes identificados en el genoma humano explica solamente alrededor del diez por ciento de la secuencia total de nucleótidos. La función de la porción de genoma restante todavía no se comprende en su totalidad. [0002] The elucidation of the complete genome sequences of innumerable prokaryotic and eukaryotic organisms, including humans in particular, has laid the foundations for a thorough genome analysis. The analysis of gene expression by means of micro-matrices, the diagnosis of DNA and the discovery of drugs based on genes, among other applications, depend on knowledge and access to the genome sequence. The human genome contains approximately three billion base pairs contained in 24 independent chromosomes that house an estimated total of 30,000 different genes, each of which has an average protein coding length of about 3,000 base pairs. In addition, it has been established that the genetic content comprising all of the genes identified in the human genome accounts for only about ten percent of the total nucleotide sequence. The function of the remaining genome portion is not yet fully understood.

[0003] Concomitante con la reciente finalización de la secuenciación del genoma humano, se ha desarrollado un esfuerzo mundial a gran escala, en el que están implicados científicos de centros de investigación académicos, públicos y privados, para comprender las funciones de todos los nuevos genes identificados, los productos de proteína que codifican y las complejas interacciones de estos componentes. Existe la creencia generalizada de que esta investigación tendrá un efecto inmediato y profundo sobre la futura comprensión de los procesos bioquímicos, genéticos y fisiológicos, así como en el diagnóstico y tratamiento de los trastornos médicos. [0003] Concomitant with the recent completion of human genome sequencing, a large-scale global effort has been developed, involving scientists from academic, public and private research centers, to understand the functions of all new genes identified, the protein products they encode and the complex interactions of these components. There is a widespread belief that this research will have an immediate and profound effect on the future understanding of biochemical, genetic and physiological processes, as well as in the diagnosis and treatment of medical disorders.

[0004] En particular, la tecnología de genotipado se está desarrollando a gran velocidad. Esta tecnología vincula diferentes enfermedades humanas y rasgos moleculares a variaciones específicas encontradas en los genes. Estas variaciones se definen en términos de una sección específica de un gen puesto que, cuando la secuencia de nucleótidos de dicha sección cambia, se origina un defecto correspondiente en la proteína u otro material sintetizado a partir del gen. Estas porciones del gen se denominan polimorfismos de nucleótido único o SNP (single-nucleotide polymorphisms). Los SNP pueden utilizarse para predecir si un individuo es propenso a desarrollar cierta enfermedad o si ciertos fármacos serán efectivos para dicho individuo. Esta tecnología es inmensamente interesante para las empresas farmacéuticas, puesto que los SNP que controlan las respuestas ante un fármaco pueden utilizarse para desarrollar pruebas para el cribado de pacientes antes de la prescripción de un medicamento, lo que, a su vez, resulta beneficioso para reducir las reacciones adversas al fármaco mediante la identificación de individuos susceptibles. Además, las investigaciones sobre el fármaco se volverán más eficientes, puesto que el conocimiento de los SNP ayudará a definir nuevos fármacos y a determinar y documentar la eficacia terapéutica de un compuesto farmacéutico dado. [0004] In particular, genotyping technology is developing at high speed. This technology links different human diseases and molecular traits to specific variations found in genes. These variations are defined in terms of a specific section of a gene since, when the nucleotide sequence of said section changes, a corresponding defect in the protein or other material synthesized from the gene originates. These portions of the gene are called single nucleotide polymorphisms or SNPs (single-nucleotide polymorphisms). SNPs can be used to predict if an individual is prone to develop a certain disease or if certain drugs will be effective for that individual. This technology is immensely interesting for pharmaceutical companies, since SNPs that control responses to a drug can be used to develop tests for patient screening before prescribing a drug, which, in turn, is beneficial to reduce Adverse reactions to the drug by identifying susceptible individuals. In addition, research on the drug will become more efficient, since knowledge of SNPs will help define new drugs and determine and document the therapeutic efficacy of a given pharmaceutical compound.

[0005] La revelación de la secuencia del genoma humano ha creado, de la noche a la mañana, una plétora de métodos para estudiar el ADN, el ARN y otras macromoléculas biológicas como las proteínas. Se están generando en la actualidad nuevas secuencias de todo el genoma de multitud de organismos a un ritmo cada vez más elevado. Las secuencias y los patrones de expresión de los genes se comparan y contrastan para encontrar diferencias y similitudes, en un esfuerzo por promover la comprensión de la biología humana en los niveles genético, bioquímico y fisiológico. La generación, examen, análisis y análisis comparativo rápidos de las secuencias de ácido nucleico de todo el genoma de los organismos biológicos característicos de la técnica se ha calificado como "genómica". [0005] The revelation of the human genome sequence has created, overnight, a plethora of methods to study DNA, RNA and other biological macromolecules such as proteins. New sequences of the entire genome of many organisms are being generated at an ever higher rate. The sequences and expression patterns of genes are compared and contrasted to find differences and similarities, in an effort to promote understanding of human biology at the genetic, biochemical and physiological levels. The rapid generation, examination, analysis and comparative analysis of the nucleic acid sequences of the entire genome of the biological organisms characteristic of the technique has been described as "genomic."

[0006] El campo de la genómica puede dividirse en dos áreas principales: (a) genómica funcional, que intenta interpretar las funciones de los genes, incluyendo la investigación de la expresión y el control de los genes, y la (b) genómica comparativa, que estudia el genoma humano a través de comparaciones con los genomas de los seres no humanos, con el fin de comprender la función de los genes y la evolución de los genes, proteínas y organismos. Además, la bioinformática, disciplina relacionada, se ha desarrollado concomitante con la expansión de la genómica. Este campo, en rápida evolución, se ha definido como aquel que integra métodos computacionales para la manipulación e interpretación de cantidades masivas de información sobre la secuencia de nucleótidos y proteínas que se está generando actualmente en la técnica. El desarrollo de nuevos ordenadores, software y métodos de extracción de datos constituyen componentes críticos de esta tecnología. [0006] The field of genomics can be divided into two main areas: (a) functional genomics, which attempts to interpret the functions of genes, including the investigation of gene expression and control, and (b) comparative genomics , which studies the human genome through comparisons with the genomes of non-human beings, in order to understand the function of genes and the evolution of genes, proteins and organisms. In addition, bioinformatics, a related discipline, has developed concomitantly with the expansion of genomics. This rapidly evolving field has been defined as one that integrates computational methods for the manipulation and interpretation of massive amounts of nucleotide and protein sequence information that is currently being generated in the art. The development of new computers, software and data extraction methods are critical components of this technology.

[0007] Aunque son innumerables los pasos que comprenden el análisis genómico, ocurre a menudo que las etapas iniciales de las metodologías de la genómica conforman los pasos limitantes del proceso completo. La purificación del ácido nucleico es un ejemplo de uno de tales procesos que tienen lugar en las etapas iniciales de los métodos de la genómica y que pueden afectar a la velocidad total del proceso. En la técnica actual, la purificación de los ácidos nucleicos es realizada todavía, en gran parte, en pequeños lotes y por técnicos formados. Además, el técnico está limitado a procesar unas pocas muestras al día y a generar una menor producción de ácidos nucleicos. Este hecho restringe la capacidad de generar información sobre la secuencia de nucleótidos, expone al técnico a agentes infecciosos, amplía el riesgo de contaminación de las muestras y genera un malgasto de los recursos. Por consiguiente, la purificación de los ácidos nucleicos puede representar un paso determinante para la velocidad en las metodologías de la genómica. [0007] Although the steps that comprise genomic analysis are innumerable, it often happens that the initial stages of genomic methodologies make up the limiting steps of the entire process. Nucleic acid purification is an example of one such process that takes place in the initial stages of genomic methods and that can affect the total speed of the process. In the current technique, the purification of nucleic acids is still carried out, in large part, in small batches and by trained technicians. In addition, the technician is limited to processing a few samples a day and generating a lower production of nucleic acids. This fact restricts the ability to generate information on the nucleotide sequence, exposes the technician to infectious agents, expands the risk of contamination of the samples and generates a waste of resources. Therefore, the purification of nucleic acids may represent a determining step for speed in genomic methodologies.

[0008] Una técnica para aumentar la eficiencia, productividad y calidad de la purificación de macromoléculas biológicas sería emplear métodos automatizados. Existen disponibles varios métodos semi-automatizados de procesamiento de muestras para la purificación de los ácidos nucleicos, pero todavía precisan de la intervención del hombre y no proporcionan un rendimiento elevado. Por ejemplo, la Patente Nº 5 270 211 de los EE. UU. hace referencia a una toma de entrada de tubo de muestras para un analizador químico automático que facilita la extracción de muestras con la pipeta sin que el operador se exponga a un contacto accidental con los materiales líquidos contenidos en el tubo de extracción. [0008] One technique to increase the efficiency, productivity and quality of the purification of biological macromolecules would be to use automated methods. Several semi-automated methods of sample processing are available for the purification of nucleic acids, but they still require the intervention of man and do not provide a high yield. For example, US Patent No. 5 270 211. UU. It refers to a sample tube inlet for an automatic chemical analyzer that facilitates the extraction of samples with the pipette without exposing the operator to accidental contact with the liquid materials contained in the extraction tube.

[0009] Existen además sistemas totalmente automatizados para la purificación de los ácidos nucleicos, pero su uso no es extenso debido a su falta de flexibilidad y al elevado coste. Estos sistemas se utilizan, por lo general, en aplicaciones dedicadas de gran volumen, como las que se realizan en los grandes laboratorios de pruebas genéticas centrados en el aislamiento y purificación del ADN en tipos de muestras en particular. Los sistemas totalmente automáticos no se usan, por lo general, en laboratorios de menor tamaño donde existe, típicamente, una mayor diversidad de tipos de muestras biológicas a partir de las cuales se purifican con regularidad los ácidos nucleicos. En la actualidad, los sistemas totalmente automatizados también sufren de falta de flexibilidad en el volumen de muestras y se han diseñado, por lo general, para muestras de pequeño tamaño. Además, la integridad, pureza, concentración y producción de ácidos nucleicos tiende a ser baja. [0009] There are also fully automated systems for the purification of nucleic acids, but their use is not extensive due to their lack of flexibility and high cost. These systems are generally used in dedicated large volume applications, such as those performed in large genetic testing laboratories focused on the isolation and purification of DNA in particular sample types. Fully automatic systems are generally not used in smaller laboratories where there is typically a greater diversity of types of biological samples from which nucleic acids are regularly purified. At present, fully automated systems also suffer from a lack of flexibility in the volume of samples and are generally designed for small samples. In addition, the integrity, purity, concentration and production of nucleic acids tends to be low.

[0010] Otra etapa inicial de las metodologías de la genómica es la toma de muestras biológicas. A este paso se le denomina en ocasiones “parte frontal”, puesto que se produce al principio del proceso y, en consecuencia, puede determinar el ritmo de la totalidad de éste, en especial cuando es preciso tomar muestras de una gran cantidad de tubos. La toma de una muestra biológica, como de sangre, se realiza por lo general aspirando una cantidad definida de líquido de un recipiente, típicamente un tubo de muestra sin tapón. En numerosos laboratorios clínicos son comunes las gradillas de tubos de muestra sin tapón. [0010] Another initial stage of genomic methodologies is the taking of biological samples. This step is sometimes referred to as "front", since it occurs at the beginning of the process and, consequently, can determine the rhythm of the entire process, especially when it is necessary to take samples of a large number of tubes. The taking of a biological sample, such as blood, is usually done by aspirating a defined amount of liquid from a container, typically a sample tube without a cap. In many clinical laboratories, sample tube racks without a cap are common.

[0011] Puesto que las muestras biológicas son con frecuencia fuente de materiales peligrosos (bacterias, virus, hongos, toxinas biológicas), pueden entrañar peligro para los técnicos de laboratorio y trabajadores sanitarios de numerosos ambientes de trabajo diferentes, incluidos los laboratorios clínicos y de investigación. Además, la manipulación de muestras por parte de los técnicos conduce a menudo a una contaminación involuntaria de las muestras biológicas debido a los microorganismos existentes en el entorno que rodea al técnico. En otras palabras, el técnico debe ser cauto y ejercer una manipulación cautelosa para no contaminarse ni provocar ningún tipo de contaminación en la muestra. [0011] Since biological samples are often a source of hazardous materials (bacteria, viruses, fungi, biological toxins), they can pose a danger to laboratory technicians and healthcare workers in many different work environments, including clinical and medical laboratories. investigation. In addition, sample manipulation by technicians often leads to involuntary contamination of biological samples due to the microorganisms in the environment surrounding the technician. In other words, the technician must be cautious and exercise cautious handling so as not to contaminate or cause any contamination in the sample.

[0012] Una vez retirados los tapones de los tubos, las muestras ya no estarán selladas y podría originarse, de forma involuntaria, una entrada de contaminación en el tubo o una liberación de contaminación de éste, incluso respetando de manera escrupulosa las medidas necesarias. Sería preferible que la toma de muestras se realizase directamente a partir del tubo sellado, de tal modo que no resultase necesario retirar los tapones durante el proceso. Tras la obtención de la muestra, las cantidades de muestras biológicas definidas se procesan individualmente a través de distintos pasos para obtener macromoléculas biológicas purificadas, como los ácidos nucleicos. [0012] Once the tube caps are removed, the samples will no longer be sealed and could lead to involuntary entry of contamination into the tube or release of contamination from the tube, even scrupulously respecting the necessary measures. It would be preferable if the sampling was done directly from the sealed tube, so that it would not be necessary to remove the caps during the process. After obtaining the sample, the defined biological sample quantities are processed individually through different steps to obtain purified biological macromolecules, such as nucleic acids.

[0013] A la vista de los problemas de la técnica mencionada hasta este momento, surge la necesidad de un sistema de toma de muestras mediante pipeta que permita la extracción de muestras biológicas de los tubos de un modo seguro, sin necesidad de usar las manos y con el tubo cerrado. También es necesario un sistema de toma de muestras mediante pipeta en tubo cerrado que esté automatizado o semi-automatizado y que pueda integrarse con los sistemas de procesamiento automatizados y no-automatizados secuencia abajo para purificación de macromoléculas biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. Existe también la necesidad de un sistema de toma de muestras mediante pipeta en tubo cerrado que pueda adaptarse a una gama flexible de cantidades y tipos de muestras biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, sangre completa, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Y también es necesario un sistema de toma de muestras mediante pipeta que elimine o minimice la posible contaminación de la muestra o del operador, que permita la toma de muestras de una pluralidad de tubos y que sea de bajo coste. La US 5 525 298 describe un dispositivo para suministrar una muestra de suero a partir de un tubo de recogida de sangre. [0013] In view of the problems of the technique mentioned so far, the need arises for a pipette sampling system that allows the extraction of biological samples from the tubes in a safe way, without using your hands and with the tube closed. It is also necessary a sampling system by closed pipette pipette that is automated or semi-automated and that can be integrated with the automated and non-automated processing systems downstream for purification of biological macromolecules, including, but not limited to, the purification of nucleic acids and proteins. There is also a need for a closed tube pipette sampling system that can adapt to a flexible range of quantities and types of biological samples, including, but not limited to, whole blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum , urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cultured cell lines, plants and combinations thereof. And a pipette sampling system is also necessary that eliminates or minimizes the possible contamination of the sample or the operator, that allows sampling of a plurality of tubes and that is low cost. US 5 525 298 describes a device for delivering a serum sample from a blood collection tube.

SUMMARY AND OBJECTS OF THE INVENTION

[0014] De acuerdo con la presente invención se suministra un dispositivo para extraer una alícuota de una muestra biológica de un receptáculo sellado que contenga dicha muestra biológica según las reivindicaciones 1 y 8. Las realizaciones preferidas de la invención se describen en las reivindicaciones dependientes. [0014] In accordance with the present invention, a device for extracting an aliquot of a biological sample from a sealed receptacle containing said biological sample according to claims 1 and 8 is provided. Preferred embodiments of the invention are described in the dependent claims.

[0015] Más abajo se describen los dispositivos reivindicados. [0015] The claimed devices are described below.

[0016] También se describe un método para extraer una alícuota de una muestra biológica de un receptáculo sellado que contenga dicha muestra biológica, que comprenda la perforación de dicho receptáculo cerrado con un dispositivo que comprende una cámara hueca de volumen predefinido y con paredes interior y exterior y extremos superior e inferior, una punta perforadora hueca que presente extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentre introducido en el extremo inferior de la cámara hueca, y medios de filtrado en las paredes interiores de la cámara hueca para evitar la contaminación cruzada de fluidos, aerosoles o muestras más allá de dicha cámara de volumen predefinido, y que aspire una cantidad predefinida de dicha muestra biológica hacia dicha cámara hueca. [0016] A method is also described for extracting an aliquot from a biological sample from a sealed receptacle containing said biological sample, comprising perforating said closed receptacle with a device comprising a hollow chamber of predefined volume and with inner walls and outer and upper and lower ends, a hollow piercing tip that has sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber, and filtering means on the inner walls of the hollow chamber to prevent contamination cross-linking fluids, aerosols or samples beyond said predefined volume chamber, and aspirating a predefined amount of said biological sample into said hollow chamber.

[0017] Además, se describe un sistema de tubo de toma de muestras para extraer una alícuota de una muestra biológica de un receptáculo sellado que contenga dicha muestra biológica, que comprenda un abrazo de carga compuesto, como mínimo, de un soporte de membrana inflable para sujetar de modo reversible dicho tubo de muestra para la aspiración de la muestra biológica de dicho tubo, un brazo de transferencia que comprenda un elemento de posicionamiento sujeto de modo reversible al brazo de carga para hacer girar dicho brazo de carga e invertir dicho tubo de muestra, una punta de pipeta sujeta de modo reversible al brazo de transferencia que comprenda una barrera de filtro, una cámara de volumen predefinido y una punta perforadora para traspasar dicho tubo de muestra, un tubo de aspiración colocado en dicha punta de pipeta para aspirar dicha muestra biológica una vez que la punta perforadora haya traspasado dicho tubo de muestra y, como opción, un porta-tiras para sujetar dichas puntas de pipeta. [0017] In addition, a sampling tube system for extracting an aliquot of a biological sample from a sealed receptacle containing said biological sample, comprising at least one loading embrace composed of at least one inflatable membrane support is described to reversibly hold said sample tube for aspiration of the biological sample from said tube, a transfer arm comprising a positioning element reversibly attached to the loading arm to rotate said loading arm and invert said tube shows, a pipette tip reversibly attached to the transfer arm comprising a filter barrier, a predefined volume chamber and a piercing tip for transferring said sample tube, a suction tube placed in said pipette tip to aspirate said biological sample once the piercing tip has pierced said sample tube and, as an option, a strip holder for holding dic Do pipette tips.

[0018] Conforme a una realización de la presente invención, se suministra un dispositivo para extraer una alícuota de una muestra (biológica) de un receptáculo sellado que contiene dicha muestra (biológica), el cual comprende de una cámara hueca de volumen predefinido y con paredes interior y exterior y extremos superior e inferior, una punta perforadora hueca que presenta extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentra introducido en el extremo inferior de la cámara hueca, una barrera de filtro sujeta a las paredes interiores de la cámara hueca, un orificio de ventilación lateral situado dentro de la cámara hueca y entre la barrera de filtro y la punta perforadora y una placa deflectora que separa la cámara hueca y el orificio de ventilación lateral, donde el deflector evita o bloquea sustancialmente la entrada del excedente de muestra en el orificio de ventilación lateral. [0018] According to an embodiment of the present invention, a device is provided for extracting an aliquot from a (biological) sample from a sealed receptacle containing said (biological) sample, which comprises a hollow chamber of predefined volume and with inner and outer walls and upper and lower ends, a hollow piercing tip that has sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber, a filter barrier attached to the inner walls of the hollow chamber , a side vent hole located within the hollow chamber and between the filter barrier and the piercing tip and a deflector plate separating the hollow chamber and the side vent hole, where the deflector substantially prevents or blocks the entry of excess of shows in the side vent hole.

[0019] Conforme a otra realización de la presente invención, se suministra un dispositivo para extraer una alícuota de una muestra (biológica) de un receptáculo sellado que contiene dicha muestra (biológica), el cual comprende una cámara hueca de volumen predefinido y con paredes interior y exterior y extremos superior e inferior, una punta perforadora hueca que presenta extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentra introducido en el extremo inferior de la cámara hueca, una barrera de filtro sujeta a las paredes interiores de la cámara hueca y un orificio de ventilación lateral situado dentro de la cámara hueca y entre la barrera de filtro y la punta perforadora, donde la punta perforadora se extiende hacia el interior de dichas cámaras más allá de una entrada al orificio de ventilación lateral, de tal modo que el extremo romo de la punta perforadora evite o bloquee sustancialmente la entrada del excedente de muestra en el orificio de ventilación lateral. [0019] According to another embodiment of the present invention, a device for extracting an aliquot of a (biological) sample from a sealed receptacle containing said (biological) sample, which comprises a hollow chamber of predefined volume and with walls is provided interior and exterior and upper and lower ends, a hollow piercing tip that has sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber, a filter barrier attached to the inner walls of the hollow chamber and a side vent hole located within the hollow chamber and between the filter barrier and the piercing tip, where the piercing tip extends into said chambers beyond an entrance to the side vent hole, such that the blunt end of the piercing tip substantially avoid or block the entry of excess sample into the side vent hole .

[0020] Además, se describe un dispositivo para extraer una alícuota de una muestra de un receptáculo sellado que contiene dicha muestra, el cual comprende una cámara hueca de volumen predefinido y con paredes interior y exterior y extremos superior e inferior, una punta perforadora hueca que presenta extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentra introducido en el extremo inferior de la cámara hueca, y una barrera de filtro sujeta a las paredes interiores de la cámara hueca. [0020] In addition, a device is described for extracting an aliquot from a sample of a sealed receptacle containing said sample, which comprises a hollow chamber of predefined volume and with inner and outer walls and upper and lower ends, a hollow piercing tip It has sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber, and a filter barrier attached to the inner walls of the hollow chamber.

[0021] También se describe un sistema de tubos para toma de muestras para extraer una alícuota de una muestra de un tubo de muestra sellado que contiene dicha muestra, el cual comprende un brazo de carga compuesto, como mínimo, por un soporte de membrana inflable para enganchar de modo reversible dicho tubo de muestra durante la aspiración de la muestra, un brazo de transferencia compuesto por un elemento de posicionamiento enganchando de modo reversible al brazo de carga para hacer girar el brazo de carga e invertir dicho tubo de muestra, una punta de pipeta enganchada de modo reversible al brazo de transferencia que comprende una barrera de filtro, una cámara hueca de volumen predefinido y una punta perforadora para traspasar dicho tubo de muestra, un tubo de aspiración sujeto a dicha punta de pipeta para aspirar dicha muestra una vez que la punta perforadora haya traspasado dicho tubo de muestra y, como opción, un porta-tiras para sujetar las puntas de dicha pipeta. [0021] A sample tube system for extracting an aliquot of a sample from a sealed sample tube containing said sample, which comprises a loading arm composed of at least one inflatable membrane support is also described. to reversibly engage said sample tube during sample aspiration, a transfer arm composed of a positioning element reversibly engaging the loading arm to rotate the loading arm and invert said sample tube, a tip of a pipette reversibly attached to the transfer arm comprising a filter barrier, a hollow chamber of predefined volume and a piercing tip for transferring said sample tube, a suction tube attached to said pipette tip to aspirate said sample once that the piercing tip has pierced said sample tube and, as an option, a strip holder to hold the tips of said pipette.

[0022] Asimismo, se revela un método para la toma de una o más muestras de tubos de muestra sellados que contienen dichas muestras, el cual comprende los pasos para transferir dicho tubo de muestra desde una gradilla de muestras hasta un brazo de carga, donde dicho tubo de muestra se encuentra en posición vertical, perforando dicho tubo de muestra con una punta de pipeta que comprende una punta perforadora, invirtiendo el tubo de muestra perforado con un grado suficiente para mantener el contacto de la muestra y el cierre durante un periodo de tiempo suficiente para permitir la recogida de la muestra, aspirando dicho fluido desde el tubo de muestra perforado hasta una cámara situada dentro de la punta de pipeta, invirtiendo de nuevo el tubo perforado hasta la posición vertical y retirando la punta perforadora del tubo de muestra. [0022] Likewise, a method for taking one or more samples of sealed sample tubes containing said samples is disclosed, which comprises the steps for transferring said sample tube from a sample rack to a loading arm, where said sample tube is in an upright position, perforating said sample tube with a pipette tip comprising a piercing tip, inverting the perforated sample tube with a sufficient degree to maintain contact of the sample and the closure for a period of sufficient time to allow the collection of the sample, aspirating said fluid from the perforated sample tube to a chamber located inside the pipette tip, reverting the perforated tube to the vertical position and removing the perforating tip from the sample tube.

[0023] Además, se revela un método para evitar la contaminación cruzada de una alícuota compuesta por una muestra, al tiempo que se extrae dicha alícuota de un receptáculo sellado que contenga dicha muestra, el cual comprende los pasos para perforar dicho receptáculo sellado con un dispositivo que comprende una cámara hueca de volumen predefinido y con paredes interior y exterior y extremos superior e inferior, una punta perforadora hueca que presenta extremos afilados y romos, donde el extremo romo se encuentra introducido en el extremo inferior de la cámara hueca, y medios de filtrado sujetos a las paredes interiores de la cámara hueca para evitar la contaminación cruzada de fluidos, aerosoles o muestras más allá de dicha cámara hueca, y que aspira un volumen predefinido de dicha muestra en dicha cámara hueca. [0023] In addition, a method is disclosed to avoid cross-contamination of an aliquot composed of a sample, while removing said aliquot from a sealed receptacle containing said sample, which comprises the steps to pierce said sealed receptacle with a device comprising a hollow chamber of predefined volume and with inner and outer walls and upper and lower ends, a hollow piercing tip having sharp and blunt ends, where the blunt end is inserted into the lower end of the hollow chamber, and means of filtering attached to the inner walls of the hollow chamber to avoid cross-contamination of fluids, aerosols or samples beyond said hollow chamber, and which aspirates a predefined volume of said sample into said hollow chamber.

[0024] Un objeto era proporcionar un sistema de toma de muestras mediante pipeta que permita la extracción de muestras biológicas de los tubos de muestra de un modo seguro y con los tubos cerrados, con el fin de eliminar el riesgo de contaminación de la muestra o del operador. Otro objeto era suministrar un sistema de toma de muestras mediante pipeta en tubo cerrado, automatizado, semi-automatizado o manual, que pueda integrarse con los sistemas de procesamiento automatizados y no-automatizados posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. Otro objeto era suministrar un sistema de toma de muestras mediante pipeta de tubo cerrado que pueda adaptarse a una gama flexible de volúmenes de muestra y tipos de muestras biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, sangre completa, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Otro objeto más era proporcionar un sistema de toma de muestras mediante pipeta y con el tubo cerrado que permita tomar muestras de una pluralidad de tubos, emplee puntas de pipeta y puntas perforadoras desechables, tenga un bajo coste y resulte adecuado para una plataforma de genómica. [0024] One object was to provide a pipette sampling system that allows the extraction of biological samples from the sample tubes in a safe manner and with the tubes closed, in order to eliminate the risk of contamination of the sample or operator. Another object was to provide a sampling system by pipette in a closed, automated, semi-automated or manual tube, which can be integrated with subsequent automated and non-automated processing systems for the purification of biological macromolecules, including, but not limited to , the purification of nucleic acids and proteins. Another object was to provide a sampling system by means of a closed tube pipette that can adapt to a flexible range of sample volumes and types of biological samples, including, but not limited to, whole blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cultured cell lines, plants and combinations thereof. Another object was to provide a sampling system by pipette and with the closed tube that allows sampling of a plurality of tubes, use pipette tips and disposable piercing tips, have a low cost and is suitable for a genomics platform.

[0025] La presente descripción abarca los métodos y componentes para un sistema de toma de muestras mediante pipeta que permita realizar dicha toma a partir de tubos de muestra cerrados que pueden contener una amplia variedad de tipos de muestra. Tales tipos de muestra pueden ser biológicos, como, por ejemplo, sangre completa, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Los tipos de muestra también pueden ser químicos como, por ejemplo, reactivos, catalizadores y similares. Es más, un operario experto comprendería fácilmente que, con la presente invención, podría utilizarse cualquier tipo de muestra que pudiese ser extraída de un tubo mediante aspiración. [0025] The present description encompasses the methods and components for a pipette sampling system that allows such sampling to be made from closed sample tubes that may contain a wide variety of sample types. Such types of samples can be biological, such as whole blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cell lines cultivated, plants and combinations of these. Sample types can also be chemicals, such as reagents, catalysts and the like. Moreover, an expert operator would easily understand that, with the present invention, any type of sample that could be extracted from a tube by aspiration could be used.

[0026] Los componentes que constituyen la presente invención incluyen, aunque sin limitación, un tubo de muestra, preferentemente, aunque sin limitación, un VacutainerTM (Becton Dickinson), una punta de pipeta, preferiblemente desechable, y un sistema de tubos para toma de muestras, preferiblemente que no precise de la intervención del hombre. Además, la invención puede automatizarse o semi-automatizarse, puede proporcionar toma de muestras a partir de una pluralidad de tubos de muestra y puede integrarse en los sistemas de procesamiento automatizados y no-automatizados posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. [0026] The components constituting the present invention include, but are not limited to, a sample tube, preferably, but not limited to, a VacutainerTM (Becton Dickinson), a pipette tip, preferably disposable, and a tube system for making samples, preferably that does not require the intervention of man. In addition, the invention can be automated or semi-automated, can provide sampling from a plurality of sample tubes and can be integrated into subsequent automated and non-automated processing systems for the purification of biological macromolecules, including, but not limitation, the purification of nucleic acids and proteins.

[0027] En una realización, la punta de pipeta comprende una cámara principal de volumen definido, una barrera de filtro y una punta perforadora. Preferentemente, la punta perforadora ha sido diseñada para traspasar el cierre del tubo de muestra sin la destrucción o extracción del cierre del tubo. La punta perforadora puede estar fabricada con cualquier material no reactivo conocido en la técnica, incluyendo, por ejemplo, acero inoxidable, plástico, polipropileno y poliestireno. [0027] In one embodiment, the pipette tip comprises a main chamber of defined volume, a filter barrier and a piercing tip. Preferably, the piercing tip has been designed to pierce the sample tube closure without destruction or removal of the tube closure. The piercing tip may be made of any non-reactive material known in the art, including, for example, stainless steel, plastic, polypropylene and polystyrene.

[0028] El tubo de muestra se compone de una cámara hueca con un orificio en el extremo superior y una superficie cerrada en el extremo inferior. Es preferible que el tubo de muestra sea un tubo de recogida mediante vacío como el representado por, aunque no limitado a, un VacutainerTM (fabricado por Becton Dickenson). Preferentemente, la barrera de filtro de la punta de pipeta es suficiente para evitar la contaminación cruzada de muestras, fluidos o aerosoles y / o absorción o desplazamiento del fluido más allá de la cámara, como en las líneas o componentes del instrumento. Preferiblemente, la barrera de filtro es una barrera de filtro hidrofóbica y esterilizable, como, por ejemplo, PorexTM. Preferentemente, la punta de pipeta y la punta perforadora han sido diseñadas y adaptadas para traspasar el cierre del tubo de muestra, son desechables y se suministran pre-esterilizadas. [0028] The sample tube is composed of a hollow chamber with a hole in the upper end and a closed surface in the lower end. It is preferable that the sample tube is a vacuum collection tube such as that represented by, but not limited to, a Vacutainer ™ (manufactured by Becton Dickenson). Preferably, the filter barrier of the pipette tip is sufficient to avoid cross contamination of samples, fluids or aerosols and / or absorption or displacement of the fluid beyond the chamber, as in the lines or components of the instrument. Preferably, the filter barrier is a hydrophobic and sterilizable filter barrier, such as, for example, PorexTM. Preferably, the pipette tip and the piercing tip have been designed and adapted to pierce the sample tube closure, are disposable and supplied pre-sterilized.

[0029] La punta de pipeta permite la aspiración de muestras alícuotas de tubos de muestra. Tales alícuotas puede tener un volumen aproximado de entre 1 µl y 5 ml, siendo preferible un volumen aproximado de entre 5 µl y 1 ml o siendo de máxima preferencia un volumen aproximado de entre 20 y 100 µl. Preferentemente, la punta de pipeta ha sido diseñada y adaptada para su uso en un sistema de toma de muestras mediante pipeta en tubo cerrado y sistemas de procesamiento automatizados y no-automatizados posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas. [0029] The pipette tip allows aspiration of aliquots of sample tubes. Such aliquots may have an approximate volume of between 1 µl and 5 ml, an approximate volume of between 5 µl and 1 ml being preferable or an approximate volume of between 20 and 100 µl being most preferred. Preferably, the pipette tip has been designed and adapted for use in a sampling system using a closed pipette pipette and subsequent automated and non-automated processing systems for the purification of biological macromolecules.

[0030] La presente invención comprende además un sistema de tubos para toma de muestras que permite el acceso del sistema de tubos de toma de muestras mediante pipeta a muestra contenida en el tubo, con el fin de obtener un volumen definido de la muestra. El volumen definido puede ser de entre 1 µl y 5 ml, siendo preferible un volumen de entre 5 µl y 1 ml o siendo de máxima preferencia un volumen de entre 20 y 100 µl. Además, es preferible que el tubo de muestra se encuentre cerrado con una barrera de que selle el tubo y evite que la muestra tenga fugas, se derrame o libere aerosoles. Un ejemplo de sistema de tubos disponible en la técnica que podría utilizarse es el tubo VacutainerTM, un tipo de tubo de recogida mediante vacío (Becton Dickinson). Estos tubos se suministran con tapones de caucho comunes o con tapones de caucho recubiertos por plástico HemogardTM, que proporcionan un collar protector adicional para evitar todavía más el contacto accidental con los fluidos de muestra en la superficie del tapón. Los tubos de recogida mediante vacío disponibles en la técnica se han diseñado típicamente para contener volúmenes de fluido de muestra que van desde 3 a 10 ml y presentan diámetros externos de 10,25 a 16 mm y longitudes de 64 a 100 mm. Los tubos pueden incluir una etiqueta, que puede estar fabricada con algún material conocido en la técnica, entre los que se incluyen, aunque sin limitación, papel o plástico. Preferentemente, la etiqueta será un código de barras. [0030] The present invention further comprises a tube system for sampling that allows access to the sample tube system via pipette to sample contained in the tube, in order to obtain a defined volume of the sample. The defined volume may be between 1 µl and 5 ml, a volume between 5 µl and 1 ml being preferable or a volume of between 20 and 100 µl being most preferred. In addition, it is preferable that the sample tube is closed with a barrier that the tube is sealed and prevents the sample from leaking, spilling or freeing aerosols. An example of a tube system available in the art that could be used is the VacutainerTM tube, a type of vacuum collection tube (Becton Dickinson). These tubes are supplied with common rubber caps or rubber caps coated with HemogardTM plastic, which provide an additional protective collar to further prevent accidental contact with sample fluids on the surface of the cap. Vacuum collection tubes available in the art have typically been designed to contain volumes of sample fluid ranging from 3 to 10 ml and have external diameters of 10.25 to 16 mm and lengths of 64 to 100 mm. The tubes may include a label, which may be made of some material known in the art, including, but not limited to, paper or plastic. Preferably, the label will be a barcode.

[0031] En una realización preferida, el sistema de tubos para toma de muestras permite acceder a la muestra de un modo automatizado o semi-automatizado. De la manera preferente, el acceso se realiza a través de la punta de pipeta de la presente invención, que comprende la punta perforadora, la cámara de volumen predefinido y la barrera de filtro. En la presentación de máxima preferencia, el sistema de tubos para toma de muestras permite la manipulación de la muestra con el tubo cerrado y opera de tal modo que no precisa de la intervención del hombre. [0031] In a preferred embodiment, the sampling tube system allows access to the sample in an automated or semi-automated manner. Preferably, access is made through the pipette tip of the present invention, which comprises the piercing tip, the predefined volume chamber and the filter barrier. In the most preferred presentation, the sampling tube system allows the sample to be manipulated with the tube closed and operates in such a way that it does not require the intervention of man.

[0032] El sistema de tubos de toma de muestras contiene un brazo de carga que sostiene y manipula el tubo de la muestra a través de soportes de membrana hinchable, donde el brazo de carga permite la colocación adecuada del cierre del tubo de la muestra y de la punta perforadora de la punta de pipeta, de tal modo que se produzca la aspiración de la muestra a través del cierre perforado. Un brazo de transferencia gira y desplaza el brazo de carga para tomar muestras de varios tubos de modo paralelo o en serie. [0032] The sampling tube system contains a loading arm that holds and manipulates the sample tube through inflatable membrane supports, where the loading arm allows proper placement of the sample tube closure and of the perforating tip of the pipette tip, such that aspiration of the sample occurs through the perforated closure. A transfer arm rotates and displaces the loading arm to sample several tubes in parallel or series mode.

[0033] La presente invención abarca un sistema de toma de muestras mediante pipeta, diseñado para su uso de un modo coordinado y automatizado o semi-automatizado con respecto a la función y al tiempo, el tubo de muestra, la punta de pipeta y el sistema de tubos para la toma de muestras biológicas provenientes de tubos cerrados. Además, la invención puede permitir la toma de muestras a partir de una pluralidad de tubos de muestra y puede integrarse con los sistemas de procesamiento automatizados y no-automatizados posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas, incluyendo, pero sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. [0033] The present invention encompasses a pipette sampling system, designed for use in a coordinated and automated or semi-automated manner with respect to function and time, the sample tube, the pipette tip and the tube system for taking biological samples from closed tubes. In addition, the invention may allow sampling from a plurality of sample tubes and may be integrated with subsequent automated and non-automated processing systems for the purification of biological macromolecules, including, but not limited to, acid purification. nucleic and proteins.

BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0034] La siguiente descripción detallada que se proporciona a modo de ejemplo, pero que no tiene como fin limitar la invención únicamente a las realizaciones específicas aquí descritas, puede comprenderse mejor conjuntamente con los dibujos que se acompañan, en los que: [0034] The following detailed description provided by way of example, but which is not intended to limit the invention only to the specific embodiments described herein, can be better understood in conjunction with the accompanying drawings, in which:

La Figura 1 representa una realización de la punta de pipeta y de un tubo de muestra, siendo preferible, aunque no limitado a, un tubo de recogida mediante vacío y de máxima preferencia, aunque no limitado a, un tubo VacutainerTM. La Figura 2 representa la realización detallada de una punta de pipeta que comprende distintos elementos, incluida la punta perforadora. La Figura 3 representa otra realización detallada de una punta de pipeta que comprende distintos elementos, incluida la punta perforadora con forma de aguja. La Figura 4a representa una realización del sistema de tubos para toma de muestras, donde el tubo de muestra se carga en el sistema con una configuración vertical. La Figura 4b representa una realización del sistema de tubos para toma de muestras, donde el tubo de muestra en posición vertical ha sido traspasado por la punta perforadora. La Figura 4c representa una realización del sistema de tubos para toma de muestras, donde el tubo de muestra se ha invertido para la aspiración. Figure 1 represents an embodiment of the pipette tip and a sample tube, preferably, although not limited to, a vacuum collection tube and of maximum preference, although not limited to, a VacutainerTM tube. Figure 2 represents the detailed embodiment of a pipette tip comprising different elements, including the piercing tip. Figure 3 represents another detailed embodiment of a pipette tip comprising different elements, including the needle-shaped piercing tip. Figure 4a represents an embodiment of the sampling tube system, where the Sample is loaded into the system with a vertical configuration. Figure 4b represents an embodiment of the sampling tube system, where the Sample in vertical position has been pierced by the piercing tip. Figure 4c represents an embodiment of the sampling tube system, where the Sample has been inverted for aspiration.

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0035] Los términos siguientes utilizados en esta exposición tendrán el significado expuesto a continuación: [0035] The following terms used in this statement shall have the meaning set forth below:

“Parte frontal” alude a, por ejemplo, el proceso o procesos iniciales necesarios para un flujo de trabajo. En el caso de la aplicación actual, la toma de muestras constituye la “parte frontal”, puesto que es el proceso inicial que se necesita antes de que puedan comenzar los procesos de purificación de macromoléculas posteriores y las aplicaciones basadas en genómica, los cuales incluyen, aunque no están limitados a, PCR, secuenciación, "Front" refers to, for example, the initial process or processes necessary for a workflow. In the case of the current application, sampling is the “front part”, since it is the initial process that is needed before the subsequent macromolecule purification processes and genomic-based applications can begin, which include , although they are not limited to, PCR, sequencing,

análisis de micro-matrices, detección de SNP y perfiles de trascripción. “Genómica” hace referencia a, por ejemplo, la caracterización y análisis de la composición genética de los organismos al nivel de genoma completo. “Tecnologías de la genómica” hace referencia a, por ejemplo, los métodos, dispositivos y componentes utilizados en el campo de la genómica. “Plataforma de genómica” hace referencia a, por ejemplo, grandes números de muestras procesadas durante un periodo de tiempo dado y de un modo eficaz. “Formato de matrices paralelas” hace referencia a, por ejemplo, una pluralidad de muestras procesadas simultáneamente. “Robótica X-Y-Z” hace referencia a, por ejemplo, la robótica que controla la posición horizontal, vertical y diagonal de un objeto o grupo de objetos. micro-matrix analysis, SNP detection and transcription profiles. "Genomics" refers to, for example, the characterization and analysis of the genetic composition of organisms at the complete genome level. "Genomics technologies" refers to, for example, the methods, devices and components used in the field of genomics. "Genomics platform" refers to, for example, large numbers of samples processed during a given period of time and in an effective way. "Parallel matrix format" refers to, for example, a plurality of processed samples simultaneously. "Robotics X-Y-Z" refers to, for example, robotics that controls the horizontal, vertical and diagonal of an object or group of objects.

[0036] La presente descripción describe los métodos y componentes para un sistema de toma de muestras mediante pipeta que permita la toma de muestras biológicas en tubos cerrados que contengan una amplia variedad de tipos de muestra. Entre los tipos de muestra se incluyen, aunque no se limitan a, muestras biológicas, muestras químicas, reactivos, muestras fluidas y semi-fluidas y similares. Entre los ejemplos de muestras biológicas se incluyen, aunque sin limitación, sangre completa, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos [0036] The present description describes the methods and components for a pipette sampling system that allows biological samples to be taken in closed tubes containing a wide variety of sample types. Sample types include, but are not limited to, biological samples, chemical samples, reagents, fluid and semi-fluid samples and the like. Examples of biological samples include, but are not limited to, whole blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cell lines cultivated, plants and combinations of these

[0037] Los componentes que constituyen la presente invención incluyen, aunque no están limitados a, un tubo de muestra, una punta de pipeta y un sistema de tubos para toma de muestras. Además, la invención puede proporcionar tomas de muestras de una pluralidad de tubos de muestra, siendo preferible, aunque sin limitación, un número de entre 1 y 200 tubos de muestra. Se prevé que la presente invención pueda ser automatizado e integrado en los sistemas de procesamiento manuales y automatizados posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas, que incluyen, aunque sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. [0037] The components constituting the present invention include, but are not limited to, a sample tube, a pipette tip and a tube system for sampling. In addition, the invention can provide sampling of a plurality of sample tubes, with a number of between 1 and 200 sample tubes being preferred, but not limited to. It is envisioned that the present invention can be automated and integrated into subsequent manual and automated processing systems for the purification of biological macromolecules, which include, but are not limited to, the purification of nucleic acids and proteins.

[0038] En una realización, las muestras biológicas se presentan al sistema de toma de muestras mediante pipeta en recipientes tapados. Las muestras biológicas son, preferentemente, de sangre completa, aunque también podrían incluir, aunque sin limitación, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Las muestras, preferentemente alícuotas de pequeño volumen de aproximadamente entre 1 µl y 5 ml, siendo preferible un volumen de aproximadamente entre 5 µl y 1 ml o siendo de máxima preferencia un volumen de aproximadamente entre 20 y 100 µl, se aspiran de tubos de muestra cerrados con una punta de pipeta que comprende una punta perforadora, una cámara de volumen predefinido y una barrera de filtro. La muestra aspirada puede dispensarse y procesarse a continuación mediante cualquier método conocido de la técnica de purificación de macromoléculas biológicas y puede incluir, aunque sin limitación, la purificación del ácidos nucleicos y proteínas. Pueden tomarse muestras de una pluralidad de tubos, preferentemente, aunque sin limitación, de aproximadamente entre 1 y 200, mediante el uso de múltiples pipetas y puede integrarse el sistema con sistemas de procesamiento automatizado y no automatizado posteriores para la purificación de macromoléculas biológicas, incluyendo, aunque sin limitación, la purificación de ácidos nucleicos y proteínas. [0038] In one embodiment, the biological samples are presented to the sampling system by pipette in covered containers. Biological samples are preferably whole blood, but may also include, but are not limited to, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cultured cell lines, plants and combinations of these. The samples, preferably small volume aliquots of approximately 1 µl to 5 ml, a volume of approximately 5 µl to 1 ml being preferable or a volume of approximately 20 to 100 µl being most preferred, are aspirated from sample tubes closed with a pipette tip comprising a piercing tip, a predefined volume chamber and a filter barrier. The aspirated sample can then be dispensed and processed by any method known from the technique of purification of biological macromolecules and may include, but is not limited to, the purification of nucleic acids and proteins. Samples of a plurality of tubes can be taken, preferably, but not limited to approximately 1 to 200, by using multiple pipettes and the system can be integrated with subsequent automated and non-automated processing systems for the purification of biological macromolecules, including , although without limitation, the purification of nucleic acids and proteins.

[0039] El sistema de toma de muestras mediante pipeta acepta muestras presentadas en tubos cerrados, preferentemente, aunque sin limitación, en VacutainersTM. En una realización, los tubos de muestra se aceptan en gran número, preferentemente aunque sin limitación, de aproximadamente entre 1 y 200 tubos de muestra, y se cargan en una gradilla de muestras que coloca los tubos para la toma de muestras. Los tubos de muestra se sellan por medio de un cierre situado en la parte superior del tubo, minimizándose así el riesgo de fuga, derrame o generación de aerosoles. El cierre puede ser de alguno de los tipos conocidos en la técnica. El sistema de toma de muestras mediante pipeta utiliza puntas perforadoras para extraer alícuotas de muestra de los tubos, en los que las puntas perforadoras son, preferentemente, un componente de las puntas de pipeta de la presente invención. La técnica de aspiración automatizada de muestras, preferentemente el sistema de tubos para toma de muestras de la presente invención, permite una toma de muestras exacta y precisa y evita el arrastre y la contaminación debidos a fugas, derrames o generación de aerosoles de fluidos de muestras biológicas. [0039] The pipette sampling system accepts samples presented in closed tubes, preferably, but not limited to, in VacutainersTM. In one embodiment, the sample tubes are accepted in large numbers, preferably but not limited to approximately 1 to 200 sample tubes, and loaded into a sample rack that places the tubes for sampling. The sample tubes are sealed by means of a closure located in the upper part of the tube, thus minimizing the risk of leakage, spillage or aerosol generation. The closure may be of any of the types known in the art. The pipette sampling system uses piercing tips to extract sample aliquots from the tubes, in which the piercing tips are preferably a component of the pipette tips of the present invention. The automated sample aspiration technique, preferably the sampling tube system of the present invention, allows accurate and precise sampling and prevents entrainment and contamination due to leaks, spills or aerosol generation of sample fluids. Biological

[0040] La punta de pipeta dla presente invención permite la toma de muestras en tubo o receptáculo cerrado, minimiza o evita la contaminación cruzada y permite la toma de muestras de pequeño volumen. Las muestras de pequeño volumen pueden ser alícuotas de aproximadamente entre 1 µl y 5 ml, siendo preferibles de aproximadamente entre 5 µl y 1 ml o siendo de máxima preferencia de aproximadamente entre 20 y 100 µl. La toma de muestras de tubo cerrado mediante punta perforadora permite la extracción automática de alícuotas de muestra de los tubos, sellados con cierres, sin destrozar ni retirar los cierres de los tubos. Los tubos se sellan de nuevo tras la extracción de la punta perforadora de la punta de pipeta a través del movimiento del material del cierre, que regresa a su posición previa a la inserción. [0040] The pipette tip of the present invention allows sampling in a closed tube or receptacle, minimizes or prevents cross contamination and allows small volume sampling. Small volume samples may be aliquots of approximately 1 µl to 5 ml, with approximately 5 µl and 1 ml being preferable or most preferably between approximately 20 and 100 µl. The sampling of closed tube by means of a piercing tip allows the automatic extraction of sample aliquots from the tubes, sealed with closures, without destroying or removing the closures of the tubes. The tubes are sealed again after removal of the drill tip from the pipette tip through the movement of the closure material, which returns to its position prior to insertion.

[0041] La punta de pipeta se acomoda a tubos de muestra de diferentes diámetros y longitudes. Entre las dimensiones de los tubos de muestra se incluyen, por ejemplo, 10,25 mm x 47 mm, 10,25 mm x 64 mm, 13 mm x 75 mm, 13 mm x 100 mm, 16 mm x 100 mm y 16 mm x 125 mm. [0041] The pipette tip accommodates sample tubes of different diameters and lengths. The dimensions of the sample tubes include, for example, 10.25 mm x 47 mm, 10.25 mm x 64 mm, 13 mm x 75 mm, 13 mm x 100 mm, 16 mm x 100 mm and 16 mm x 125 mm

[0042] Preferentemente, los tubos disponen de un identificador que se corresponde con otro identificador pegado a las muestras o a la documentación de las muestras. De manera preferente, el identificador es un código de barras. [0042] Preferably, the tubes have an identifier that corresponds to another identifier attached to the samples or to the documentation of the samples. Preferably, the identifier is a barcode.

[0043] En una realización de la presente invención, se extrae un único tubo o receptáculo de una gradilla de muestras. La gradilla de muestras podría configurarse como gradilla recta, gradilla de tipo carrusel o cualquier otra configuración conocida por un operario experto. Preferentemente, los tubos se mantienen en posición vertical en la gradilla de muestras. Además, también es preferible que las gradillas puedan contener de aproximadamente 1 a 200 tubos. [0043] In one embodiment of the present invention, a single tube or receptacle is removed from a sample rack. The sample rack could be configured as a straight rack, carousel type rack or any other configuration known to an expert operator. Preferably, the tubes are kept upright in the sample rack. In addition, it is also preferable that the racks can contain about 1 to 200 tubes.

[0044] En un proceso preferido, se retira un tubo de la gradilla de muestras y se presenta al sistema de toma de muestras mediante pipeta. Tras la inserción de la punta perforadora de la punta de pipeta mediante el desplazamiento vertical de una pieza central, el tubo de muestra se invierte unos 180°, provocando el desplazamiento del fluido de muestra hacia la parte superior del tubo de muestra. La muestra se aspira, el tubo de muestra se devuelve a su posición vertical, la punta de pipeta se retira del tubo, el cierre se sellan de nuevo y el tubo es devuelto a la gradilla de muestras. En esta realización se utiliza la robótica X-Y-Z, a través de la cual puede localizarse en el espacio la posición exacta del tubo y de la punta de pipeta para permitir la toma de la muestra. [0044] In a preferred process, a tube is removed from the sample rack and presented to the sampling system by pipette. After insertion of the piercing tip of the pipette tip by vertical displacement of a centerpiece, the sample tube is inverted about 180 °, causing the sample fluid to move towards the top of the sample tube. The sample is aspirated, the sample tube is returned to its vertical position, the pipette tip is removed from the tube, the seal is sealed again and the tube is returned to the sample rack. In this embodiment, the X-Y-Z robotics is used, through which the exact position of the tube and the pipette tip can be located in the space to allow the sample to be taken.

[0045] En otra realización, los tubos de muestra se cargan en una gradilla de tipo carrusel. Cuando el carrusel gira, un grupo de tubos de muestra se alinea con el sistema de tubos para toma de muestras. Preferentemente, el grupo de tubos es igual o superior a 32 tubos. Se perforan una pluralidad de tubos con las puntas de pipeta en paralelo o en serie, permitiéndose así una aspiración de las muestras paralela o en serie. [0045] In another embodiment, the sample tubes are loaded into a carousel-type rack. When the carousel rotates, a group of sample tubes aligns with the sample tube system. Preferably, the group of tubes is equal to or greater than 32 tubes. A plurality of tubes are drilled with the pipette tips in parallel or in series, thus allowing parallel or serial sample aspiration.

[0046] Las puntas de pipeta pueden utilizarse en un proceso de cinco pasos. Cada una de las puntas de pipeta comprende una cámara de volumen definido, una punta perforadora y una barrera de filtro hidrofóbica y esterilizable que evita la contaminación cruzada de los fluidos o aerosoles de las muestras generados en el contacto con los componentes de los sistemas de pipeta. En esta realización, (1) la punta de una pipeta perfora el tubo cerrado, (2) el tubo perforado se invierte unos 180°, (3) se aspira la muestra, (4) el tubo se invierte de nuevo hasta la posición inicial y (5) se retira la punta de pipeta que contiene la muestra aspirada. [0046] Pipette tips can be used in a five-step process. Each of the pipette tips comprises a defined volume chamber, a piercing tip and a hydrophobic and sterilizable filter barrier that prevents cross-contamination of the fluids or aerosols of the samples generated in contact with the components of the pipette systems . In this embodiment, (1) the tip of a pipette pierces the closed tube, (2) the perforated tube is inverted about 180 °, (3) the sample is aspirated, (4) the tube is inverted again to the initial position and (5) the pipette tip containing the aspirated sample is removed.

[0047] En referencia a la Figura 1, la punta de pipeta comprende una barrera de filtro (100), una cámara principal de volumen predefinido (110) y una punta perforadora hueca (120). Durante el uso, la punta perforadora (120) traspasa el cierre (130), lo que, una vez correctamente insertada en un tubo de muestra (140), da como resultado un tubo cerrado lo suficientemente sellado como para evitar la fuga, derrame o liberación de aerosoles. El tubo de muestra [0047] Referring to Figure 1, the pipette tip comprises a filter barrier (100), a main chamber of predefined volume (110) and a hollow piercing tip (120). During use, the piercing tip (120) passes through the closure (130), which, once correctly inserted into a sample tube (140), results in a sealed tube sufficiently sealed to prevent leakage, spillage or aerosol release. Sample tube

(140) comprende una cámara hueca, un extremo superior (160) con un orificio y un extremo inferior (170) con una superficie cerrada. Preferentemente, el tubo de muestra es, aunque sin limitación, un VacutainerTM. (140) comprises a hollow chamber, an upper end (160) with a hole and a lower end (170) with a closed surface. Preferably, the sample tube is, but not limited to, a VacutainerTM.

[0048] Preferentemente, la barrera de filtro (100) evitará de forma considerable la contaminación cruzada de fluidos [0048] Preferably, the filter barrier (100) will considerably prevent cross-contamination of fluids

o aerosoles y / o la absorción de fluido más allá de la cámara, como en las líneas del instrumento. En la práctica, la barrera de filtro (100) es hidrofóbica y puede esterilizarse con métodos conocidos en la técnica. Entre las barreras de filtro adecuadas (100) se incluyen, aunque sin limitación, PorexTM o cualquier otro consumible conocido en la técnica. Puede recortarse la barrera de filtro (100) para adaptar su tamaño a la cámara principal (110). or aerosols and / or fluid absorption beyond the chamber, as in the instrument lines. In practice, the filter barrier (100) is hydrophobic and can be sterilized with methods known in the art. Suitable filter barriers (100) include, but are not limited to, PorexTM or any other consumable known in the art. The filter barrier (100) can be trimmed to adapt its size to the main chamber (110).

[0049] En una realización, la punta perforadora (120) se adapta para que traspase un cierre de tubo de muestra como los utilizados en los VacutainersTM. Entre los materiales adecuados para las puntas perforadoras se incluyen, aunque sin limitación, acero inoxidable, plástico, poliestireno y polipropileno. Preferentemente, la punta perforadora [0049] In one embodiment, the piercing tip (120) is adapted to pass a sample tube closure like those used in VacutainersTM. Suitable materials for drilling tips include, but are not limited to, stainless steel, plastic, polystyrene and polypropylene. Preferably, the piercing tip

(120) es desechable. Entre los métodos de fabricación de la punta perforadora se incluyen todos los conocidos en la técnica. (120) is disposable. The manufacturing methods of the piercing tip include all those known in the art.

[0050] En la presentación de máxima preferencia, la punta de pipeta (150) se adapta para la aspiración de muestras de pequeño volumen. Esto resulta especialmente adecuado para su uso en la aspiración de volúmenes asociados a muestras forenses. Preferentemente, las cantidades pequeñas de muestra serán de aproximadamente entre 1 µl y 5 ml. De manera preferente, las cantidades pequeñas de muestra serán de aproximadamente entre 5 µl y 1 ml. En la presentación de máxima preferencia, las cantidades pequeñas de muestra serán de aproximadamente entre 20 y 100 µl. [0050] In the most preferred presentation, the pipette tip (150) is adapted for the aspiration of small volume samples. This is especially suitable for use in the aspiration of volumes associated with forensic samples. Preferably, the small amounts of the sample will be approximately between 1 µl and 5 ml. Preferably, the small amounts of the sample will be approximately between 5 µl and 1 ml. In the most preferred presentation, small amounts of sample will be approximately between 20 and 100 µl.

[0051] La Figura 2 hace referencia a una realización más detallada de una punta de pipeta (200). La punta de pipeta [0051] Figure 2 refers to a more detailed embodiment of a pipette tip (200). Pipette tip

(200) comprende un cuerpo (220), una barrera de filtro (221), que evita en gran medida que fluidos o aerosoles escapen por el orificio de ventilación lateral (230), y una soldadura del cuerpo (250) y una soldadura de la punta (270). Una punta perforadora (290) posee una abertura (280) a través de la cual entra la muestra en la cámara principal (210) de la punta de pipeta. El orificio de ventilación lateral (230) funciona, por ejemplo, para evitar o bloquear en gran medida el paso del excedente de fluido a la barrera de filtro (221). Un deflector (240) evita que la muestra se desplace hasta el orificio de ventilación lateral (230) mientras la muestra se encuentra en la cámara principal (210). Entre los materiales adecuados para la construcción de la punta de pipeta (200) se incluyen, aunque sin limitación, acero inoxidable, plástico, polipropileno y poliestireno. (200) comprises a body (220), a filter barrier (221), which largely prevents fluids or aerosols from escaping through the side vent hole (230), and a welding of the body (250) and a welding of the tip (270). A piercing tip (290) has an opening (280) through which the sample enters the main chamber (210) of the pipette tip. The side vent hole (230) works, for example, to prevent or greatly block the passage of excess fluid to the filter barrier (221). A baffle (240) prevents the sample from moving to the side vent hole (230) while the sample is in the main chamber (210). Materials suitable for the construction of the pipette tip (200) include, but are not limited to, stainless steel, plastic, polypropylene and polystyrene.

[0052] La Figura 3 hace referencia a otra realización detallada de la punta de pipeta (300). La punta de pipeta (300) comprende un cuerpo (320), una barrera de filtro (321), que evita en gran medida que fluidos o aerosoles escapen por el orificio de ventilación lateral (330), y una soldadura del cuerpo (350) y una soldadura de la punta (370). La punta perforadora (360), que en esta realización toma la forma de una aguja, posee una abertura (380) a través de la cual la muestra entra en la cámara principal (321) de la punta de pipeta. La prolongación de la aguja (360) más allá de la entrada al orificio de ventilación (330) evita que la muestra se desplace hacia el orificio de ventilación mientras la muestra se encuentra situada en la cámara principal (321). Entre los materiales adecuados para la construcción de la punta de pipeta (300) se incluyen, aunque sin limitación, acero inoxidable, plástico, polipropileno y poliestireno. [0052] Figure 3 refers to another detailed embodiment of the pipette tip (300). The pipette tip (300) comprises a body (320), a filter barrier (321), which largely prevents fluids or aerosols from escaping through the side vent hole (330), and a welding of the body (350) and a solder of the tip (370). The piercing tip (360), which in this embodiment takes the form of a needle, has an opening (380) through which the sample enters the main chamber (321) of the pipette tip. The extension of the needle (360) beyond the entrance to the vent hole (330) prevents the sample from moving towards the vent hole while the sample is located in the main chamber (321). Suitable materials for the construction of the pipette tip (300) include, but are not limited to, stainless steel, plastic, polypropylene and polystyrene.

[0053] La presente invención comprende además un sistema de tubos para toma de muestras que permite el acceso del sistema de toma de muestras mediante pipeta a una muestra contenida en el tubo, con el fin de obtener una cantidad definida de la muestra. Preferiblemente, el tubo será un tubo o receptáculo de recogida mediante vacío. De manera preferente, el tubo es un tubo VacutainerTM o un sistema de tubos o receptáculos comparable disponible en la técnica actual. En la presentación de máxima preferencia, el sistema de tubos para toma de muestras permite acceder a la muestra de un modo automatizado o semi-automatizado. Además, el acceso a la muestra biológica se realiza, preferentemente, a través de la punta de pipeta de la presente invención. En la presentación de máxima preferencia, el sistema de tubos para toma de muestras permite la manipulación de la muestra con el tubo cerrado. [0053] The present invention further comprises a tube system for sampling that allows access to the sample contained in the tube by pipette, in order to obtain a defined quantity of the sample. Preferably, the tube will be a vacuum collection tube or receptacle. Preferably, the tube is a VacutainerTM tube or a comparable tube or receptacle system available in the current art. In the most preferred presentation, the sampling tube system allows access to the sample in an automated or semi-automated way. In addition, access to the biological sample is preferably performed through the pipette tip of the present invention. In the most preferred presentation, the sampling tube system allows the sample to be manipulated with the tube closed.

[0054] El sistema de tubos para toma de muestras comprende un brazo de carga que sostiene y manipula el tubo de muestra a través de un soporte de membrana inflable. El brazo de carga permite la colocación y alineación adecuadas del cierre del tubo de muestra y de la punta perforadora de la punta de pipeta, de tal modo que se produzca la aspiración de la muestra a través del cierre perforado. El brazo de transferencia gira y desplaza el brazo de carga para tomar muestras de una pluralidad de tubos de modo paralelo o en serie. [0054] The sampling tube system comprises a loading arm that holds and manipulates the sample tube through an inflatable membrane holder. The loading arm allows proper placement and alignment of the sample tube closure and the drill tip of the pipette tip, such that aspiration of the sample occurs through the perforated closure. The transfer arm rotates and displaces the loading arm to sample a plurality of tubes in parallel or series mode.

[0055] En una realización preferida, la punta de pipeta ha sido diseñada para que se enganche a un sistema de tubos para toma de muestras. En una realización, el sistema de tubos para toma de muestras se acciona de forma manual. En otra realización, se ha automatizado la operación del sistema de tubos para toma de muestras. En una realización adicional, las puntas de pipeta se embalan sueltas y sin esterilizar y el usuario final deberá esterilizarlas. Preferentemente, se embalarán y esterilizarán previamente las puntas de pipeta. Para su uso en el sistema de toma de muestras mediante pipeta, las puntas de las pipetas estarán embaladas previamente en un porta-tiras. Entre los materiales adecuados para la construcción del porta-tiras se incluyen, aunque sin limitación, acero inoxidable, plástico, polipropileno y poliestireno. De manera preferente, las puntas de pipeta se suministrarán en porta-tiras preesterilizados y listos para su uso dentro del sistema de toma de muestras mediante pipeta. [0055] In a preferred embodiment, the pipette tip has been designed to be attached to a tube system for sampling. In one embodiment, the sampling tube system is operated manually. In another embodiment, the operation of the tube system for sampling has been automated. In a further embodiment, the pipette tips are packed loose and unsterilized and the end user must sterilize them. Preferably, the pipette tips will be pre-packaged and sterilized. For use in the pipette sampling system, the pipette tips will be pre-packed in a strip holder. Suitable materials for the construction of the strip holder include, but are not limited to, stainless steel, plastic, polypropylene and polystyrene. Preferably, the pipette tips will be supplied in pre-sterilized strip holders and ready for use within the pipette sampling system.

[0056] En referencia a la Figura 4a, el sistema de tubos para toma de muestras (400) comprende un tubo de muestra (401) que contiene una muestra (402). El tubo de muestra (401) está situado en vertical en un brazo de carga (430). Soportes de membrana inflados (420) mantienen el tubo de muestra (401) en su sitio. Una vez desinflados, los soportes de membrana (420) liberan el tubo de muestra (401). El brazo de carga se hace girar mediante el uso de un brazo de transferencia (440) y un elemento de posicionamiento (480), de tal modo que el cierre (431) puede engancharse de manera reversible a la punta perforadora (491) de la punta de pipeta (492) cargada en un porta-tiras (450). La punta de pipeta (492) se engancha de forma reversible al brazo de transferencia [0056] Referring to Figure 4a, the sampling tube system (400) comprises a sample tube (401) containing a sample (402). The sample tube (401) is located vertically on a loading arm (430). Inflated membrane brackets (420) keep the sample tube (401) in place. Once deflated, the membrane supports (420) release the sample tube (401). The loading arm is rotated by the use of a transfer arm (440) and a positioning element (480), so that the closure (431) can be reversibly attached to the piercing tip (491) of the pipette tip (492) loaded on a strip holder (450). The pipette tip (492) is reversibly hooked to the transfer arm

(440) en un pipeteador (460) y un cilindro de punción (470), lo que permite que el extremo del tubo de aspiración (440) in a pipettor (460) and a puncture cylinder (470), which allows the end of the suction tube

(493) se conecte funcionalmente con la punta de pipeta (492). El cilindro de punción (470) se mantiene en su sitio gracias al adaptador de la pieza central (494). (493) connect functionally with the pipette tip (492). The puncture cylinder (470) is held in place thanks to the centerpiece adapter (494).

[0057] En referencia a la Figura 4b, el sistema de tubos para toma de muestras (400) comprende un tubo de muestra (401) que contiene la muestra (402). El tubo de muestra (401) está situado en vertical en el brazo de carga (430). Soportes de membrana inflados (420) mantienen el tubo de muestra (401) en su sitio. Una vez desinflados, los soportes de membrana (420) liberan el tubo de muestra (401). El brazo de carga se hace girar mediante el uso del brazo de transferencia (440) y el elemento de posicionamiento (480), de tal modo que el cierre (431) puede engancharse de manera reversible a la punta perforadora (491) de la punta de pipeta (492) cargada en el porta-tiras (450). La punta de pipeta (492) se engancha de forma reversible al brazo de transferencia (440) en el pipeteador [0057] Referring to Figure 4b, the sampling tube system (400) comprises a sample tube (401) containing the sample (402). The sample tube (401) is located vertically in the loading arm (430). Inflated membrane brackets (420) keep the sample tube (401) in place. Once deflated, the membrane supports (420) release the sample tube (401). The loading arm is rotated by the use of the transfer arm (440) and the positioning element (480), so that the closure (431) can be reversibly attached to the piercing tip (491) of the tip of pipette (492) loaded in the strip holder (450). The pipette tip (492) is reversibly hooked to the transfer arm (440) in the pipettor

(460) y el cilindro de punción (470), lo que permite que el extremo del tubo de aspiración (493) se conecte funcionalmente con la punta de pipeta (492). El cilindro de punción (470) se mantiene en su sitio gracias al adaptador de la pieza central (494). El adaptador de la pieza central (494) se desplaza hacia arriba para permitir que la punta perforadora (491) traspase el tubo de muestra (401). (460) and the puncture cylinder (470), which allows the end of the suction tube (493) to be functionally connected to the pipette tip (492). The puncture cylinder (470) is held in place thanks to the centerpiece adapter (494). The centerpiece adapter (494) moves up to allow the piercing tip (491) to pass through the sample tube (401).

[0058] En referencia a la Figura 4c, el sistema de tubos para toma de muestras (400) comprende un tubo de muestra [0058] Referring to Figure 4c, the sampling tube system (400) comprises a sample tube

(401) que contiene la muestra (402). Soportes de membrana inflados (420) mantienen el tubo de muestra (401) en su sitio. Una vez desinflados, los soportes de membrana (420) liberan el tubo de muestra (401). El brazo de carga se hace girar mediante el uso del brazo de transferencia (440) y el elemento de posicionamiento (480), de tal modo que el cierre (431) puede engancharse de manera reversible a la punta perforadora (491) de la punta de pipeta (492) cargada en el porta-tiras (450). El elemento de posicionamiento (480) hace girar el tubo de muestra (401) y la muestra biológica (402) se aspira mediante el tubo de aspiración (493) hacia la punta de pipeta (492). (401) containing the sample (402). Inflated membrane brackets (420) keep the sample tube (401) in place. Once deflated, the membrane supports (420) release the sample tube (401). The loading arm is rotated by the use of the transfer arm (440) and the positioning element (480), so that the closure (431) can be reversibly attached to the piercing tip (491) of the tip of pipette (492) loaded in the strip holder (450). The positioning element (480) rotates the sample tube (401) and the biological sample (402) is aspirated by the suction tube (493) towards the pipette tip (492).

[0059] En una realización, el brazo de transferencia lleva la punta de pipeta, que contiene la muestra aspirada, hasta un tubo de procesamiento por el cual la muestra se dispensa. El cilindro de punción (470) de desplaza entonces para extraer el pipeteador (460) de las puntas de pipeta desechables (492). Un nuevo conjunto de puntas de pipeta [0059] In one embodiment, the transfer arm carries the pipette tip, which contains the aspirated sample, to a processing tube through which the sample is dispensed. The puncture cylinder (470) then moves to remove the pipettor (460) from the disposable pipette tips (492). A new set of pipette tips

(492) se inserta automáticamente en el porta-tiras (450), desechándose así la banda de puntas de pipeta usadas y permitiendo que el instrumento tome una muestra de otro tubo o conjunto de tubos de muestra. (492) is automatically inserted into the strip holder (450), thus discarding the band of used pipette tips and allowing the instrument to take a sample from another tube or set of sample tubes.

[0060] Las muestras dispensadas se procesan a continuación mediante cualquier método conocido de la técnica para obtener macromoléculas biológicas purificadas, incluyendo, aunque sin limitación, ácidos nucleicos y proteínas. Los ácidos nucleicos incluyen, aunque sin limitación, ADN y ARN. El ADN incluye, aunque sin limitación, tanto material cromosómico como extra-cromosómico. El ARN incluye, aunque sin limitación, ARNm, ARNt, ARNhn y ARNr. [0060] The dispensed samples are then processed by any method known in the art to obtain purified biological macromolecules, including, but not limited to, nucleic acids and proteins. Nucleic acids include, but are not limited to, DNA and RNA. The DNA includes, but is not limited to, both chromosomal and extra-chromosomal material. The RNA includes, but is not limited to, mRNA, tRNA, rRNA and rRNA.

[0061] El ácido nucleico aislado puede utilizarse posteriormente con cualquier método conocido en la técnica. Entre tales métodos se incluyen, aunque sin limitación, análisis de micro-matrices, secuenciación manual y automatizada, análisis de SNP, todos los tipos de PCR, análisis de fragmentos de restricción, incluyendo análisis RFLP (restriction fragment length polymorphism, polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción), trascripción y traducción “in vitro” y clonación. [0061] The isolated nucleic acid can then be used with any method known in the art. Such methods include, but are not limited to, micro-matrix analysis, manual and automated sequencing, SNP analysis, all types of PCR, restriction fragment analysis, including RFLP analysis (restriction fragment length polymorphism, length polymorphism restriction fragments), "in vitro" transcription and translation and cloning.

DETAILED EXAMPLES

Ejemplo 1: carga del tubo de muestra Example 1: sample tube load

[0062] Se llenó con sangre y se tapó un tubo de muestra VacutainerTM. El tubo de muestra se colocó en vertical dentro del brazo de carga y se mantuvo en su sitio mediante soportes de membrana inflable. [0062] It was filled with blood and a VacutainerTM sample tube was capped. The sample tube was placed vertically inside the loading arm and held in place by inflatable membrane supports.

Ejemplo 2: perforación del tubo de muestra Example 2: sample tube perforation

[0063] La punta perforadora de la punta de pipeta se colocó por encima del extremo con tapón del tubo de muestra por medio del brazo de carga. El cilindro de punción empujó hacia abajo la punta de pipeta para que se enganchase de forma reversible y perforase el tubo de muestra. [0063] The drill tip of the pipette tip was placed above the capped end of the sample tube by means of the loading arm. The puncture cylinder pushed down the pipette tip so that it was reversibly hooked and pierced the sample tube.

Ejemplo 3: aspiración de la muestra contenida en el tubo Example 3: aspiration of the sample contained in the tube

[0064] El tubo de muestra y la punta de pipeta se hicieron rotar unos 180 grados, por lo que el tubo de muestra se invirtió de modo considerable. Se aspiró una alícuota de sangre del tubo de muestra hacia la cámara hueca de la punta de pipeta. El cilindro de punción replegó la punta de pipeta, desenganchándose así la punta perforadora del tubo de muestra. El tubo de muestra se invirtió hasta una posición básicamente vertical. La alícuota de sangre se procesó mediante cualquiera de los métodos conocidos en la técnica para obtener ADN purificado. [0064] The sample tube and the pipette tip were rotated about 180 degrees, whereby the sample tube was inverted considerably. An aliquot of blood was aspirated from the sample tube into the hollow chamber of the pipette tip. The puncture cylinder retracted the pipette tip, thus disengaging the piercing tip from the sample tube. The sample tube was inverted to a basically vertical position. The blood aliquot was processed by any of the methods known in the art to obtain purified DNA.

REFERENCES CITED IN THE DESCRIPTION

La lista de referencias citadas por el solicitante tiene como fin exclusivamente la comodidad del lector. No forman parte del documento de Patente Europea. Aunque se han extremado los cuidados en la compilación de las referencias, no se excluye la posibilidad de errores u omisiones y la OEP rechaza cualquier tipo de responsabilidad a este respecto. The list of references cited by the applicant is solely for the convenience of the reader. They are not part of the European Patent document. Although care has been taken in compiling references, the possibility of errors or omissions is not excluded and the EPO rejects any type of responsibility in this regard.

Documentos de patente citados en la descripción Patent documents cited in the description

• US 5525298 A [0013] • US 5525298 A [0013]

Claims

1. Device for extracting an aliquot from a sample of a sealed receptacle containing said sample and comprising:

a) a hollow chamber of predefined volume having inner and outer walls and upper and lower ends; b) a hollow drill point with sharp and blunt ends, where the blunt end is

it is inserted in the lower end of the hollow chamber; c) a filter barrier in the inner walls of the hollow chamber; d) a side ventilation hole located inside the hollow chamber and between the filter barrier and the tip

drill; Y e) a baffle plate that separates the hollow chamber and the side vent hole,

where the baffle plate essentially prevents or blocks the entry of excess sample into the side vent hole.

2. 2.: Dispositivo de la reivindicación 1, donde la muestra es una muestra de tipo biológico. Device of claim 1, wherein the sample is a biological type sample.

3.3.: Dispositivo de la reivindicación 2, donde la punta perforadora es retráctil dentro de dicha cámara hueca. Device of claim 2, wherein the piercing tip is retractable within said hollow chamber.

4. Four.: Dispositivo de la reivindicación 2, donde dicha muestra biológica es sangre, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Device of claim 2, wherein said biological sample is blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cultured cell lines, plants and combinations of these.

5. 5.: Dispositivo de la reivindicación 4, donde dicho receptáculo sellado es un tubo de muestra. Device of claim 4, wherein said sealed receptacle is a sample tube.

6. 6.: Dispositivo de la reivindicación 4, donde la punta de pipeta y / o la punta perforadora es / son desechables. Device of claim 4, wherein the pipette tip and / or the piercing tip is / are disposable.

7. 7.: Dispositivo de la reivindicación 4, donde la barrera de filtro es una barrera de filtro hidrofóbica y esterilizable. Device of claim 4, wherein the filter barrier is a hydrophobic and sterilizable filter barrier.

8. 8.: Dispositivo para extraer una alícuota de una muestra de un receptáculo sellado que contiene dicha muestra y que comprende: Device for extracting an aliquot from a sample of a sealed receptacle containing said sample and comprising:

it is inserted in the lower end of the hollow chamber; c) a filter barrier in the inner walls of the hollow chamber; and d) a side vent hole located inside the hollow chamber and between the filter barrier and the tip

drill,

wherein the piercing tip extends into said chamber beyond an entrance to the side vent hole, such that the blunt end of the piercing tip substantially prevents or blocks the entry of excess sample into the side vent hole.

9. 9.: Dispositivo de la reivindicación 1, donde la muestra es una muestra de tipo biológico. Device of claim 1, wherein the sample is a biological type sample.

10. 10.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde dicha alícuota tiene un volumen de aproximadamente entre 1 µl y 5 ml, siendo preferible un volumen de aproximadamente entre 5 µl y 1 ml o siendo de máxima preferencia un volumen aproximadamente de entre 20 y 100 µl. Device of claim 9, wherein said aliquot has a volume of approximately between 1 µl and 5 ml, a volume of approximately between 5 µl and 1 ml being preferable or a volume of approximately 20 to 100 µl being most preferably.

11. eleven.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde la punta perforadora es retráctil dentro de dicha cámara hueca. Device of claim 9, wherein the piercing tip is retractable within said hollow chamber.

12. 12.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde dicha muestra biológica es sangre, plasma, líquido cefalorraquídeo, suero, saliva, esputo, orina, heces, células bucales, espermatozoides, tejidos sólidos, bacterias, levadura, muestras víricas, semen, líneas celulares cultivadas, plantas y combinaciones de éstos. Device of claim 9, wherein said biological sample is blood, plasma, cerebrospinal fluid, serum, saliva, sputum, urine, feces, buccal cells, sperm, solid tissues, bacteria, yeast, viral samples, semen, cultured cell lines, plants and combinations of these.

13.13.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde dicho receptáculo sellado es un tubo de muestra. Device of claim 9, wherein said sealed receptacle is a sample tube.

14.14.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde la punta de pipeta y / o la punta penetrable es / son desechables. Device of claim 9, wherein the pipette tip and / or the penetrable tip is / are disposable.

15.fifteen.: Dispositivo de la reivindicación 9, donde la barrera de filtro es una barrera de filtro hidrofóbica y esterilizable. Device of claim 9, wherein the filter barrier is a hydrophobic and sterilizable filter barrier.