ES2364696T3 - Análogos macrocíclicos y procedimientos para su uso y preparación. - Google Patents

Análogos macrocíclicos y procedimientos para su uso y preparación. Download PDF

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Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula: **Fórmula** en la que A es un esqueleto de hidrocarburo C1-6 saturado o C2-6 insaturado, estando dicho esqueleto sin sustituir o teniendo entre 1 y 10 sustituyentes, ambos inclusive, seleccionados independientemente de ciano, halógeno, azido, oxo y Q1; cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NR2R1, NR2(CO)R1, NR2(CO)(CO)R1, NR4(CO)NR2R1, NR2(CO)OR1, (CO)OR1, O(CO)R1, (CO)NR2R1 y O(CO)NR2R1; cada uno de R1, R2 y R4 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, aminoalquilo C1-6, arilo C6-10, haloarilo C6-10, hidroxiarilo C6-10, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-10-alquilo C1-6, alquil C1-6-arilo C6-10, haloaril C6-10-alquilo C1-6, alquil C1-6-haloarilo C6-10, (alcoxi C1-3-aril C6)-alquilo C1-3, radical heterocíclico C2-9, radical heterocíclico C2-9-alquilo C1-6, heteroarilo C2-9 y heteroaril C2-9-alquilo C1-6; cada uno de D y D' se selecciona independientemente de R3 y OR3 en las que R3 es H, alquilo C1-3 o haloalquilo C13; n es 0 ó 1; E es R5 o OR5 en las que R5 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 y aminoalquilo C1-6; G es O; cada uno de J y J' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o J y J' tomados conjuntamente son =CH2; Q es alquilo C1-3; T es etileno o etenileno; cada uno de U y U' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o U y U' tomados conjuntamente son =CH2; X es H o alcoxi C1-6; cada uno de Y e Y' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Y e Y' tomados conjuntamente son =O; y cada uno de Z y Z' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Z y Z' tomados conjuntamente son =O; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

La invención se refiere a macrólidos farmacéuticamente activos. La halicondrina B es un potente agente anticancerígeno aislado originariamente de la esponja marina Halichondria okadai, y posteriormente encontrado en 5 Axinella sp., Phakellia carteri y Lissondendryx sp.
Una síntesis total de halicondrina B se publicó en 1992 (Aicher, T.D. y col., J. Am. Chem. Soc. 114:3162-3164). La halicondrina B ha demostrado inhibición in vitro de la polimerización de tubulina, ensamblaje de microtúbulos, reticulación de betas-tubulina, GTP y unión de vinblastina a tubulina e hidrólisis de GTP dependiente de tubulina y ha mostrado propiedades anticancerígenas in vitro e in vivo.
10 El documento EP-A-0572 109 desvela derivados de halicondrina de fórmula:
imagen1
en la que R1 y R2 forman juntos ciertos sistemas de anillo fusionados que contienen oxígeno bi o tricíclico sustituidos con una cadena de alquilo hidroxilada. Se ha encontrado que estos derivados de halicondrina tienen actividad citotóxica.
15 El documento WO 93/17690 desvela ciertos derivados de halicondrina que pueden usarse para sintetizar halicondrina B y norhalicondrina B. Algunos de estos derivados también presentan actividad antitumoral.
La invención proporciona análogos de halicondrina que tienen actividad farmacéutica tales como actividad anticancerígena o antimitótica (bloqueo de la mitosis). Estos compuestos son sustancialmente más pequeños que la halicondrina B. La invención caracteriza un compuesto que tiene la fórmula (I):
imagen1
20
Fórmula (I)
En la fórmula (I), A es un esqueleto de hidrocarburo C1-6 saturado o C2-6 insaturado, estando el esqueleto sin sustituir
o teniendo entre 1 y 10 sustituyentes, por ejemplo, al menos un sustituyente seleccionado de ciano, halógeno, azido, Q1 y oxo. Cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NR2R1, NR2(CO)R1,
25 NR2(CO)(CO)R1, NR4(CO)NR2R1, NR2(CO)OR1, (CO)OR1, O(CO)R1, (CO)NR2R1 y O(CO)NR2R1. El número de sustituyentes puede estar, por ejemplo, entre 1, y 6, 1 y 8, 2 y 5, o 1 y 4. En toda la divulgación se entienden que los intervalos numéricos son incluyentes.
2
Cada uno de R1, R2 y R4 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-5, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-5, aminoalquilo C1-5, arilo C6-10, haloarilo C6-10 (por ejemplo, p-fluorofenilo o p-clorofenilo), hidroxiarilo C6-10, alcoxi C1-3arilo C6 (por ejemplo, p-metoxifenilo, 3,4,5-trimetoxifenilo, p-etoxifenilo o 3,5-dietoxifenilo), aril C6-10-alquilo C1-5 (por ejemplo, bencilo o fenetilo), alquil C1-6-arilo C6-10, haloaril C6-10-alquilo C1-6, alquil C1-6-haloarilo C6-10, (alcoxi C1-3-aril C6)-alquilo C1-3, radical heterocíclico C2-9, radical heterocíclico C2-9-alquilo C1-6, heteroarilo C2-9 y heteroaril C2-9alquilo C1-6. Puede haber más de un R1, por ejemplo, si A está sustituido con dos grupos alcoxi (OR1) diferentes tales como butoxi y 2-aminoetoxi.
Ejemplos de A incluyen 2,3-dihidroxipropilo, 2-hidroxietilo, 3-hidroxi-4-perfluorobutilo, 2,4,5-trihidroxipentilo, 3-amino2-hidroxipropilo, 1,2-dihidroxietilo, 2,3-dihidroxi-4-perfluorobutilo, 3-ciano-2-hidroxipropilo, 2-amino-1-hidroxietilo, 3azido-2-hidroxipropilo, 3,3-difluoro-2,4-dihidroxibutilo, 2,4-dihidroxibutilo, 2-hidroxi-2(p-fluorofenil)-etilo, CH2(CO)(arilo sustituido o sin sustituir), -CH2(CO)(alquilo o alquilo sustituido tal como haloalquilo o hidroxialquilo) y 3,3-difluoro-2-hidroxipent-4-enilo.
Ejemplos de Q1 incluyen -NH(CO)(CO)-(radical heterocíclico o heteroarilo), -OSO2-(arilo o arilo sustituido), O(CO)NH-(arilo o arilo sustituido), aminoalquilo, hidroxialquilo, -NH(CO)(CO)-(arilo o arilo sustituido), NH(CO)(alquil)(heteroarilo o radical heterocíclico), O(alquil sustituido o sin sustituir)(arilo sustituido o sin sustituir) y NH(CO)(alquil)(arilo o arilo sustituido).
Cada uno de D y D' se selecciona independientemente de R3 y OR3 en las que R3 es H, alquilo C1-3 o haloalquilo C1
3. Ejemplos de D y D' son metoxi, metilo, etoxi y etilo. En algunas realizaciones, uno de D y D' es H.
El valor para n es 1 o preferentemente 0, formándose así tanto un anillo de seis miembros como un anillo de cinco miembros. El anillo puede estar sin sustituir o sustituido, por ejemplo, en el que E es R5 o OR5 en las que R5 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 y aminoalquilo C1-6, y es un radical heterocíclico en el que G es O.
Cada uno de J y J' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o J y J' tomados conjuntamente son =CH2, Q es alquilo C1-3, y es preferentemente metilo. T es etileno o etenileno. Cada uno de U y U' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o U y U' tomados conjuntamente son =CH2. X es H o alcoxi C1-6. Cada uno de Y e Y' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Y e Y' tomados conjuntamente son =O. Cada uno de Z y Z' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Z y Z' tomados conjuntamente son =O.
La invención caracteriza compuestos de suficiente estabilidad para ser adecuados para el desarrollo farmacéutico. La invención también caracteriza sales farmacéuticamente aceptables de compuestos desvelados, productos intermedios sintéticos novedosos desvelados, composiciones farmacéuticas que contienen uno o más compuestos desvelados, procedimientos de preparación de los compuestos o productos intermedios desvelados y usos de los compuestos o composiciones desvelados. Los usos incluyen el uso de los compuestos desvelados para la preparación de un medicamento para inhibir reversiblemente o irreversiblemente la mitosis en una célula, y para inhibir cáncer o crecimiento tumoral in vitro, in vivo, o en un paciente.
A. Definiciones
B. Análogos de halicondrina
C. Síntesis de análogos de halicondrina
D. Actividad farmacológica
E. Usos
A. Definiciones
Los siguientes términos se definen en parte más adelante y por su uso en el presente documento.
Los esqueletos de hidrocarburo contienen átomos de carbono y de hidrógeno y pueden ser lineales, ramificados o cíclicos. Los hidrocarburos insaturados incluyen uno, dos, tres o más dobles enlaces C-C (sp2) o triples enlaces C-C (sp). Ejemplos de radicales de hidrocarburo insaturado incluyen etinilo, 2-propinilo, 1-propenilo, 2-butenilo, 1,3butadienilo, 2-pentenilo, vinilo (etenilo), alilo e isopropenilo. Ejemplos de radicales de hidrocarburo insaturado bivalente incluyen alquenilenos y alquilidenos tales como metilidino, etilideno, etilidino, vinilideno e isopropilideno. En general, los compuestos de la invención tienen esqueletos de hidrocarburo (“A” en la fórmula (I)) que están sustituidos, por ejemplo, con hidroxi, amino, ciano, azido, heteroarilo, arilo y otros restos descritos en el presente documento. Los esqueletos de hidrocarburo pueden tener dos átomos de hidrógeno geminales sustituidos con oxo, un átomo de oxígeno de carbonilo bivalente (=O), o un sustituyente formador de anillo tal como -O-(alquileno o alquilideno lineal o ramificada)-O- para formar un acetal o cetal.
Alquilo C1-6 incluye hidrocarburos lineales, ramificados y cíclicos tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, sec-pentilo, neopentilo, terc-pentilo, ciclopentilo, hexilo, isohexilo, sec-hexilo, ciclohexilo, 2-metilpentilo, terc-hexilo, 2,3-dimetilbutilo, 3,3-dimetilbutilo,1,3-dimetilbutilo y 2,3-dimetilbut2-ilo. Alcoxi (-OR), alquiltio (-SR) y otros restos derivados de alquilo (sustituido, insaturado o bivalente) son análogos a grupos alquilo (R). Grupos alquilo y grupos derivados de alquilo tales como los grupos alcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alquenilo, alquilideno y alquileno representativos pueden ser C2-6, C3-6, C1-3 o C2-4.
Alquilos sustituidos con halógeno, hidroxi, amino, ciano, azido, etc., pueden tener 1, 2, 3, 4, 5 o más sustituyentes que se seleccionan independientemente (pueden o pueden no ser los mismos) y pueden o pueden no estar en el mismo átomo de carbono. Por ejemplo, los haloalquilos son grupos alquilo con al menos un sustituyente seleccionado de flúor, cloro, bromo y yodo. Los haloalquilos pueden tener dos o más sustituyentes halo que pueden
o pueden no ser el mismo halógeno y pueden o pueden no estar en el mismo átomo de carbono. Ejemplos incluyen clorometilo, peryodometilo, 3,3-dicloropropilo, 1,3-difluorobutilo y 1-bromo-2-cloropropilo.
Radicales heterocíclicos y heteroarilos incluyen furilo, piranilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatienilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, imidazolilo (por ejemplo, 1-, 2- o 4-imidazolilo), pirazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, piridilo (por ejemplo, 1-, 2- o 3-piridilo), pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo (por ejemplo, 1-, 2- o 3-indolilo), indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperidilo, piperazinilo, indolinilo, isoindolinilo y morfolinilo. Los radicales heterocíclicos y heteroarilos pueden ligarse al resto de la molécula en cualquier posición a lo largo del anillo. Los radicales heterocíclicos y heteroarilos pueden ser C2-9, o más pequeños, tales como C3-6, C2-5 o C3-7.
Grupos arilo incluyen fenilo, bencilo, naftilo, tolilo, mesitilo, xililo y cumenilo.
Se entiende que “radical heterocíclico”, “arilo” y “heteroarilo” incluyen aquellos que tienen 1, 2, 3, 4 o más sustituyentes independientemente seleccionados de alquilo inferior, alcoxi inferior, amino, halógeno, ciano, nitro, azido e hidroxilo. Los radicales heterocíclicos, heteroarilos y arilos también pueden ser sustituyentes bivalentes del esqueleto de hidrocarburo “A” en la fórmula (I).
B. Análogos de halicondrina
Con referencia a la fórmula (I) anterior, realizaciones de la invención incluyen compuestos en la que n es 0; en la que cada uno de D y D' se selecciona independientemente de R3, alcoxi C1-3 y haloalquiloxi C1-3; y combinaciones de los mismos.
Otras realizaciones incluyen compuestos que tienen una o más de las siguientes características: (a) en la que A es un esqueleto de hidrocarburo C1-4 saturado o C2-6 insaturado, teniendo el esqueleto al menos un sustituyente seleccionado de ciano, halo, azido, Q1 y oxo; (b) cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO1R1, OSO2R1, NR2R1, NR2(CO)R1 y O(CO)NR2R1; (c) Z y Z' tomados conjuntamente son =O; (d) en la que cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NH(CO)R1, NH(CO)(CO)R1 y O(CO)NHR1; (e) cada R1 se selecciona independientemente de alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, arilo C6, haloarilo C6, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-arilo C6, haloaril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-haloarilo C6, (alcoxi C1-3-aril C6)-alquilo C1-3, radical heterocíclico C2-9, heteroarilo C2-9 y heteroaril C3-9-alquilo C1-6; (f) uno de D y D' es metilo o metoxi y el otro es H; (g) n es 0; (i) J y J' tomados conjuntamente son =CH2; (j) Q es metilo; (k) T es etileno; (I) U y U' tomados conjuntamente son =CH2; (m) X es H; (n) cada uno de Y e Y' es H; y (o) Z y Z' tomados conjuntamente son =O. Ejemplos de combinaciones son la combinación de (i)-(m) y la combinación de (a) y (b). Dos compuestos particularmente preferidos son B1793 y B1939.
Otra realización incluye compuestos en los que Q se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1 y OSO2R1; y cada R1 se selecciona independientemente de alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, arilo C6, haloarilo C6, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-arilo C6, haloaril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-haloarilo C6 y (alcoxi C1-3-aril C6)-alquilo C1-3. Otras realizaciones incluyen compuestos en los que: uno de D y D' es alquilo o alcoxi, en la que n es
1: (f) como antes, en el que n es 1; E es alcoxi en el que n es 1; n es 0 en la que uno de D y D' es hidroxi y el otro es H; y (f) como antes, en el que n es 1 y E es etilo.
La invención también caracteriza compuestos en los que: (1) A tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo, amino, azido, halógeno y oxo; (2) A es un esqueleto de hidrocarburo saturado que tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo, amino y azido (por ejemplo, B1793, B1939, B2042, B1794 y B1922); (3) A tiene al menos dos sustituyentes independientemente seleccionados de hidroxilo, amino y azido (por ejemplo, B2090 y B2136); (4) A tiene al menos dos sustituyentes independientemente seleccionados de hidroxilo y amino (por ejemplo, B2042 y B2090); (5) A tiene al menos un sustituyente hidroxilo y al menos un sustituyente amino (por ejemplo, B1939 y B2136); (6) A tiene al menos dos sustituyentes hidroxilo (por ejemplo, B1793 y B1794); (7) A es un esqueleto de hidrocarburo C1-4 que está sustituido (por ejemplo, B2004, B2037, B1920, B2039, B2070, B2090 y B2043); (8) A es un esqueleto de hidrocarburo C que está sustituido (por ejemplo, B1793, B1920, B1984, B1988, B1939, B1940, B2014); (9) A tiene un (S)-hidroxil-alfa al átomo de carbono que liga A al anillo que contiene G (por ejemplo, B1793, B1939 o B1920) o un (R)-hidroxilo (por ejemplo, B2102, B2013, B2042); y (10) A es un esqueleto de hidrocarburo saturado C1-6 que tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo y ciano (por ejemplo, B2013, B2037, B2102, B2086 y B2091). Por (S)-hidroxilo se indica que la configuración del átomo de carbono que tiene el grupo hidroxilo es (S). Realizaciones de la invención también incluyen compuestos que tienen al menos dos sustituyentes en los átomos de carbono (1) alfa y gamma, (2) beta y gamma, o preferentemente (3) alfa y beta al átomo de carbono que liga A al anillo que contiene G. Los átomos de carbono alfa, beta y gamma pueden tener una configuración (R) o (S)
La invención proporciona además compuestos preferidos que tienen la fórmula (1)-A, mostrada a continuación, en la que los sustituyentes son idénticos a los definidos anteriormente.
imagen1
Fórmula 1-A
También se desvela el siguiente producto intermedio de monosacárido que tiene la fórmula (II):
imagen1
Fórmula (II)
en la que R es metilo o metoxi, y cada uno de P1, P2 y P3 se selecciona independientemente de H y grupos protectores de alcohol primario. Preferentemente, la cadena lateral de diol está debajo del plano de la página y OP2
10 está encima del plano de la página. Grupos protectores de alcohol primario incluyen ésteres, éteres, éteres silílicos, éteres alquílicos y éteres alcoxialquílicos.
Ejemplos de ésteres incluyen formiatos, acetatos, carbonatos y sulfonatos. Ejemplos específicos incluyen formiato, formiato de benzoílo, cloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, 3fenilpropionato, 4-oxopentanoato, 4,4-(etilenditio)pentanoato, pivaloato, crotonato, 4-metoxi-crotonato, benzoato, p
15 fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato, carbonatos tales como metilo, 9-fluorenilmetilo, etilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2(trimetilsilil)etilo, 2-(fenilsulfonil)etilo, vinilo, alilo y p-nitrobencilo.
Ejemplos de éteres silílicos incluyen trimetilsililo, trietilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, triisopropilsililo y otros éteres trialquilsilílicos. Éteres alquílicos incluyen éteres metílicos, bencílicos, p-metoxibencílicos, 3,4dimetoxibencílicos, tritílicos, t-butílicos, alílicos y aliloxicarbonílicos o derivados. Éteres alcoxialquílicos incluyen 20 acetales tales como éteres metoximetílicos, metiltiometílicos, (2-metoxietoxi)metílicos, benciloximetílicos, beta(trimetilsilil)etoximetílicos y tetrahidropiranílicos. Ejemplos de éteres bencílicos incluyen p-metoxibencilo (MPM), 3,4dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, 2-y 4-picolilo. Preferentemente, cada uno de P1 y P2 es TBS y P3 es MPM (véase el alcohol 19 más adelante). En un aspecto, la fórmula (II) puede modificarse de forma que la cadena lateral de hidroxietilo también pueda ser un hidroxilo
25 protegido, CH2CH2O-P4, en la que P4 se selecciona independientemente de valores para P1. Un producto intermedio relacionado es el alcohol 17, en el que la cadena lateral de hidroxietilo es una cadena lateral de hidroximetilo. Similarmente puede prepararse una cadena lateral de hidroxipropilo correspondiente, o una cadena lateral de aminoalquilo.
P1 y P2, tomados conjuntamente, pueden ser un grupo protector de diol tal como acetales y cetales cíclicos
30 (metileno, etilideno, bencilidenos, isopropilideno, ciclohexilideno y ciclopentilideno), derivados de silileno tales como derivados de di-t-butilsilileno y 1,1,3,3-tetra-isopropildisiloxanilideno, carbonatos cíclicos y boronatos cíclicos. Procedimientos de añadir y quitar tales grupos protectores de hidroxilo, y grupos protectores adicionales, son muy conocidos en la técnica y están disponibles, por ejemplo, en P.J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme, 1994, y en
T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2ª edición, John Wiley & Sons, 1992.
La siguiente sección proporciona síntesis representativas de productos intermedios de fórmula (II) y análogos de halicondrina de fórmula (I).
C. Síntesis de análogos de halicondrina
A continuación se proporciona una visión general, seguida de los esquemas de síntesis 1-16, y varios protocolos 5 detallados.
Los compuestos de fórmula general 4 pueden prepararse por la ruta explicada resumidamente en el Esquema 1. El fragmento clave F-2 ejemplificado por el compuesto X2 de yoduro de vinilo puede prepararse según el procedimiento de Kishi y col. (Total synthesis of halichondrin B and norhalichondrin B. Aicher, T. D.: Buszek, K. R.; Fang, F. G.; Forsyth. C. J.; Jung. S. H.; Kishi, Y.; Matelich, M. C.; Scola, P. M.; Spero, D. M.; Yoon, S. K. J. Am. Chem. Soc.
10 1992, 114. 3162-4).
imagen1
Yoduro de vinilo X2
imagen1
El fragmento clave F-3 puede obtenerse por reducción con DIBALH del éster metílico correspondiente, XF3, 15 preparado según el procedimiento de Stamos y col. (Esquema 2).
[Synthetic studies on halichondrins: a practical synthesis of the C.1-C.13 segment. Stamos, D. P.; Kishi, Y. Tetrahedron Lett. 1996, 37, 8643-8646]. La síntesis de fragmento clave F-1 ejemplificado por el compuesto 20 puede sintetizarse como se describe en el Esquema 3 o el Esquema 4.
Usando B1793 como ejemplo representativo, el acoplamiento de los tres fragmentos clave avanzó como se explica
20 resumidamente en el Esquema 5: acoplamiento de Nozaki-Hiyama-Kishi de los fragmentos 20 y X2 seguido de la formación del éter de Williamson intramolecular proporcionó el tetrahidropirano B2318. La modificación del grupo protector como se describe en el Esquema 5 o alternativamente en el Esquema 6 proporcionó el yoduro primario B2313. La reacción de intercambio halógeno-metal y el acoplamiento con el fragmento clave F-3 proporcionó una mezcla de alcoholes diaestereoméricos B2308. La manipulación del grupo protector y la oxidación adicional seguida
25 de una reacción de Nozaki-Hiyama-Kishi intramolecular proporcionó un producto intermedio que cuando se oxidó y se trató con TBAF experimentó el cierre de anillo de hetero-Michael intramolecular. La formación de acetal mediada por PPT proporcionó B1793.
Los grupos arilo pueden incorporarse en la cadena lateral C32 (por ejemplo, B2043) como se ejemplifica en el Esquema 7. El producto intermedio B2318 se desprotegió y el diol resultante se escindió oxidativamente al aldehído
30 correspondiente. El tratamiento con un reactivo de Grignard (por ejemplo, p-F-PhMgBr), la separación de los diaestereómeros resultantes y la sililación proporcionó 204, que se convirtió en el producto final de un modo similar al descrito en el Esquema 6.
Los análogos de éter pueden prepararse a partir de B1793 mediante tratamiento con un agente alquilante apropiado (por ejemplo, Esquema 8). Similarmente, sulfonatos, ésteres, carbamatos, etc., pueden prepararse a partir de B1793
35 mediante tratamiento con un componente de carbonilo activado. Las escisión y la reducción oxidativa del diol o la oxidación selectiva del grupo hidroxilo podría proporcionar derivados tales como B2037 y B1934, respectivamente.
Como alternativa, uno o más grupos hidroxilo podrían convertirse en los grupos amino correspondientes con posterior acoplamiento con un componente de carbonilo activado (Esquema 9). También podría proporcionarse fácilmente el desplazamiento del producto intermedio de sulfonilo (por ejemplo, B1920) mediante carbono o nucleófilos de heteroátomos (Esquema 10).
Los análogos de metilo C31 pueden prepararse como se explica resumidamente en el Esquema 11. El acoplamiento 5 mediado por indio de un éster de bromuro de alilo con 2,3-O-(3-isopropilidin)-D-gliceraldehído proporcionó la lactona
103. La adición de hetero-Michael, la reducción de lactona, el acoplamiento de Wittig y la adición de Michael intramolecular proporcionó el tetrahidrofurano 107. La transposición de Pummerer, el ajuste del grupo protector y la reducción con DIBALH proporcionó el fragmento clave F1 (por ejemplo, 114), que se convirtió en el compuesto final de un modo análogo al descrito en el Esquema 6.
10 Los átomos de flúor podrían introducirse como se describe en los Esquemas 12 - 14. Empezando con el producto intermedio de tetrahidrofurano apropiado se obtuvo el fragmento clave F1 fluorado y se llevó al compuesto final de un modo análogo al ilustrado en el Esquema 6.
Los derivados de triol podrían prepararse similarmente a partir del producto intermedio de tetrahidrofurano. Por ejemplo, como se explica resumidamente en el Esquema 15, la adición de aliltributilestannano al aldehído X32 15 proporcionó el alcohol homoalílico 33a que se llevó al compuesto final de un modo similar al descrito en el Esquema
6. Estos trioles podrían modificarse adicionalmente como se ejemplifica en el Esquema 6.
Los derivados de 1,3-diol podrían prepararse a partir de los productos intermedios previamente descritos. Por ejemplo, B2086 podría escindirse oxidativamente y reducirse para proporcionar el 1,3-diol B2091 (Esquema 16).
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SECCIÓN EXPERIMENTAL Síntesis del fragmento clave F-3:
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Fragmento clave F-3. Se añadió DIBALH (1 M en tolueno, 3,86 ml) a una solución de XF-3 (1,46 g, 1,93 mmol) en tolueno (37 ml) a -78ºC. Después de agitar durante 10 min, la reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de MeOH (0,46 ml) y H2O (0,21 ml), se calentó hasta ta y se agitó durante 15 min. La suspensión blanca se filtró a través de Celite con 1:1 de CH2Cl2/Et2O. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna (10% de EtOAc-hexanos) dando el fragmento clave F-3 (1,34 g, 96%) como un aceite.
Síntesis de B1793:
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Triol 1 Se añadió una solución de TBDPSCl (444 ml, 1,7 mol) en DMF (0,5 l) en tres porciones a una suspensión de L-arabinosa (250,0 g, 1,66 mol), imidazol (231,4 g, 3,40 mol) y DMF (2,5 l). La adición de cada porción llevó 1,5 h con un intervalo de 30 min y uno de 15 h separando la segunda y la tercera porciones, respectivamente. La solución resultante se agitó durante 3 h, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (5% al 33% de EtOAchexanos) proporcionando el triol 1 (394 g, 61%).
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Triacetato 2 Se añadió anhídrido acético (6,06 mol) durante 1,5 h al triol 1 (1,01 mol) en piridina (1,0 l) a 15ºC. La solución se agitó durante 1 h, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (15% al 25% de EtOAchexanos) proporcionando el triacetato 2 (518 g, 97%).
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15 Diacetatos 3 Se añadió aliltrimetilsilano (1,11 mol) seguido de BF3·OEt2 (1,11 mmol) durante 1,5 h al triacetato 2 (164 g, 0,32 mol) en tolueno (1,5 l) a 0ºC. La solución naranja se agitó durante 1 h a 0ºC y durante 2 h a ta. La mezcla se vertió lentamente en NaHCO3 acuoso saturado (1,7 l) a 0ºC y se agitó durante 30 min. La fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (3 × 600 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (5% al 10% de EtOAc-hexanos) proporcionando una
20 mezcla de diacetatos 3 (108 g, 69%).
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Diol 4a Se añadió K2CO3 sólido (72 mmol) a los diacetatos 3 (108 g, 218 mmol) en MeOH (0,5 l) a ta. La suspensión se agitó durante 2,5 h y luego se concentró. El residuo naranja se suspendió en NH4Cl acuoso saturado (150 ml), se extrajo con EtOAc (3 × 150 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se
25 purificaron por cromatografía ultrarrápida (15% al 50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alfa-isómero 4a (33,86 g, 37%) y el beta-isómero 4b (58 g, 63%).
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Alcohol 5 Se añadieron imidazol (16,75 g, 246 mmol) y TBSCI (16,08 g, 107 mmol) a una solución del diol 4a (33,86 g, 82 mmol) en CH2Cl2 (250 ml) a 0ºC. Después de 18 h a 0ºC y 5 h a ta, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (250 ml), se agitó durante 30 min y se dejó que las fases se separaran. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 × 250 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (2% al 50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 5 (36,0 g, 83%).
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Éter metílico 6 Se añadieron yodometano (16,5 ml, 265 mmol) y NaH (60% en aceite mineral, 5,28 g, 132 mmol) a una solución del alcohol 5 (34,93 g, 66 mmol), THF (320 ml) y DMF (80 ml) a 0ºC. Después de 19 h a 0ºC, la
10 reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado y Na2S2O3 acuoso saturado. La mezcla resultante se agitó durante 20 min y se dejó que las fases se separaran. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 × 200 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (3% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter metílico 6 (34,23 g, 96%).
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15 Diol 7 Se añadió HCl (solución acuosa al 37%, 12,75 ml, 153 mmol) a una solución del éter metílico 6 (32,93 g, 61 mmol) en MeOH (110 ml) a ta. Después de 17 h se añadió NaHCO3 (17 g) a la mezcla de reacción. La mezcla se agitó durante 30 min, se concentró, se suspendió en EtOAc y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (50% de EtOAc-hexanos a EtOAc) dando el diol 7 (10,0 g, 87%).
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20 Alcohol 8 Se añadió una solución de cloruro de pivaloílo (8,4 ml, 67 mmol) en piridina (50 ml) durante 1,5 h a una solución del diol 7 (12,24 g, 65 mmol) en piridina (100 ml) a 0ºC. Después de 1 h a 0ºC y 18 h a ta, la mezcla se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3 × 800 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 8 (16,9 g, 96%).
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Olefina 9 Se añadieron bromuro de bencilo (62 ml, 521 mmol) y Bu4NHSO4 (10,6 g, 31 mmol) a una solución del alcohol 8 (16,9 g, 62 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) a 0ºC. Se añadió una solución de NaOH (9,95 g, 248 mmol) en H2O (10 ml) a la mezcla de reacción durante 15 min. Después de 30 min a 0ºC y 18 h a ta, la mezcla de reacción se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3 × 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (hexanos al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando la olefina 9 (22,1 g, 98%).
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Diol 10a Se añadieron OsO4 (solución 0,1 M en tolueno, 7,3 ml, 0,73 mmol) y una solución de la olefina 9 (24,9 g, 69
10 mmol) en t-BuOH (165 ml) a una solución de K2CO3 (31,3 g, 161 mmol), K3Fe(CN)6 (74,4 g, 161 mmol), (DHQ)2PYR (1,33 g, 1,50 mmol), H2O (500 ml) y i-BuOH (330 ml) a 0ºC. Después de 3 h a 0ºC se añadió Na2S2O5•5 H2O (37,3 g, 150 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta ta, se agitó durante 1 h y se extrajo con EtOAc (3 × 300 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (5% de isopropanol-CH2Cl2) proporcionando el diol 10a (17,98 g, 75%).
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Éter silílico 11 Se añadieron imidazol (21 g, 308 mmol) y TBSCl (26,5 g, 176 mmol) a una solución del diol 10a (17,4 g, 44 mmol) en DMF (90 ml) a ta. Después de 18 h, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO acuoso saturado (250 ml), se agitó durante 1 h y se extrajo con CH2Cl2 (3 × 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (5% de EtOAc-hexanos)
20 proporcionando el éter silílico 11 (25,7 g, 94%).
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Alcohol 12 Se agitó una mezcla del éter silílico 11 (21,2 g, 33,8 mmol), Pd(OH)2 (20%, 4,7 g, 33,8 mmol) y EtOAc (200 ml) a ta bajo 1 atm de H2 durante 3 h. La mezcla se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (10% al 20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 12 (17,4 g, 96%).
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5 fase orgánica se separó, se lavó secuencialmente con CuSO4 acuoso saturado-salmuera (1:1) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró a través de Celite y se concentró proporcionando la cetona bruta deseada.
El reactivo de Tebbe se preparó agitando bis(ciclopentadienil)titanio (11,36 g, 45,6 mmol) y Me3Al (2,0 M en tolueno, 45,6 ml, 91,2 mmol) durante 4 días a ta. Este material se enfrió a -25ºC y se añadió una solución de cetona bruta en THF (150 ml). La mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC, se agitó durante 30 min, se extinguió mediante la adición
10 lenta de NaOH 0,1 N (3,5 ml) y luego se agitó durante 20 min adicionales a ta. La mezcla se diluyó con Et2O, se filtró a través de Celite y se concentró. El residuo se disolvió en CH2Cl2, se filtró a través de Al2O3 básico, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (5% de EtOAc-hexanos) dando la olefina 13 (12,8 g, 74% para las dos etapas).
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15 Alcohol 14 Se añadió 9-BBN (0,5 M en THF, 165 ml, 83 mmol) a una solución de la olefina 13 (12,78 g, 24 mmol) en THF (280 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 5 h a ta, la mezcla de reacción se volvió a enfriar hasta 0ºC a la vez que se añadieron H2O (200 ml), THF (100 ml) y NaBO3· 4H2O (75 g). La mezcla se calentó hasta ta, se agitó durante 16 h y luego se concentró. El residuo acuoso se extrajo con EtOAc (4 × 300 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4. La concentración y la purificación por cromatografía ultrarrápida (20% al 35% de EtOAc
20 hexanos) proporcionó el alcohol 14 (12,05 g, 91%).
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Alcohol 15 Se añadió DMSO (9 ml, 127 mmol) a una solución de cloruro de oxalilo (5,6 ml, 64 mmol) en CH2Cl2 (350 ml) a -78ºC. Después de agitar durante 15 min se añadió una solución del alcohol 14 (11,7 g, 0,021 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) y la agitación continuó durante 1 h, tras lo cual se añadió Et3N (26,7 ml, 192 mmol). La mezcla de
25 reacción se calentó hasta 0ºC, se agitó durante 15 min, se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3 × 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron proporcionando el aldehído bruto deseado.
Este material se disolvió en CH2Cl2 (200 ml) y se trató con Et3N (20 ml) a ta. Después de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3 × 200 ml). Las fases orgánicas
30 combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se filtraron a través de una columna de SiO2 corta (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el producto epimerizado bruto.
El aldehído se disolvió en Et2O-EtOH (1:1, 100 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con borohidruro de sodio (1,21 g, 32 mmol). La mezcla se agitó durante 20 min, se diluyó cuidadosamente con NH4Cl acuoso saturado, se agitó durante 30 min a ta y se extrajo con CH2Cl2 (3 × 150 ml). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se
35 concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 15 (9,95 g, 85% para las tres etapas).
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Éter de MPM 16 Se añadió BF3•OEt2 (0,1 M en CH2Cl2, 1,8 ml, 0,18 mmol) a una solución del alcohol 15 (9,87 g, 18 mmol), tricloroimidato de MPM (4,9 ml, 27 mmol) y CH2Cl2 (175 ml) a 0ºC. Después de 40 min se añadió una segunda porción de BF3•OEt2 (0,1 M en CH2Cl2, 0,9 ml, 0,09 mmol) a la mezcla de reacción. Después de 20 min, la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado, se agitó durante 1 h a ta y se diluyó con Et2O (600 ml). La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con Et2O (150 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron secuencialmente con NaOH acuoso 0,1 N, NaHCO3 acuoso saturado, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (20% de EtOAc-hexanos) dando el éter de MPM 16 (10,20 g, 85%).
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Alcohol 17 Se añadió LAH (1 M en THF, 22,5 ml, 22,5 mmol) a una solución del éter de MPM 16 (10,05 g, 15 mmol) en Et2O (1,0 l) a 0ºC. Después de 30 min, la reacción se extinguió cautelosamente con H2O (1,3 ml) y NaOH acuoso 1 N (1,3 ml). Después de agitar durante 1 h a ta, la suspensión se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 17 (8,18 g, 93%).
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Olefina 18 Se añadió DMSO (5,8 ml, 82,4 mmol) a una solución de cloruro de oxalilo (3,6 ml, 41,2 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) a -78ºC. Después de 15 min se añadió una solución del alcohol 17 (7,94 g, 13,5 mmol) en CH2Cl2 (35 ml) a la mezcla de reacción. Después de agitar durante 1 h se añadió Et3N (17 ml, 122 mmol), la mezcla se calentó hasta 0ºC, se agitó durante 20 min, se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y luego se extrajo con CH2Cl2, (3 × 100 ml). Los
20 extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se filtraron a través de una columna de SiO2 corta (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído bruto deseado.
Se añadió gota a gota n-BuLi (1,6 M, 20 ml, 30 mmol) a una solución de CH3PPh3Br (10,1 g, 30 mmol) en THF (350 ml) y DMSO (100 ml) a 0ºC. Después de 1 h se añadió una solución del aldehído bruto en THF (50 ml). La mezcla de reacción se calentó hasta ta y se agitó durante 3 h. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con
25 EtOAc (3 × 500 ml). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (7% de EtOAc-hexanos) proporcionando la olefina 18 (5,57 g, rendimiento del 71% para las 2 etapas).
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Alcohol 19 Se añadió 9-BBN (0,5 M en THF, 65 ml, 33 mmol) a una solución de la olefina 18 (5,56 g, 9,6 mmol) en THF (85 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó durante 5 h a ta y luego se enfrió a 0ºC. Secuencialmente se añadieron H2O (200 ml), THF (100 ml) y NaBO3•4 H2O (30 g). Después de agitar durante la noche a ta, los compuestos volátiles orgánicos se eliminaron a presión reducida. El residuo acuoso se extrajo con EtOAc (3 × 200 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4. La concentración y la purificación por cromatografía ultrarrápida (30% de EtOAc-hexanos) proporcionó el alcohol 19 (12,05 g, 92%).
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Aldehído 20. Se añadió DMSO (1,36 ml, 19,2 mmol) gota a gota durante 4 min a una solución de cloruro de oxalilo (1,26 ml, 14,4 mmol) en CH2Cl2 (120 ml) a -78ºC. Después de agitar durante 10 min se añadió una solución del 10 alcohol 19 (5,76 g, 9,61 mmol) en CH2Cl2 (20 ml) mediante una cánula. La transferencia se completó aclarando con CH2Cl2 adicional (2 × 5 ml). Después de agitar durante 20 min, la mezcla se trató con Et3N (5,36 ml, 38,4 mmol) y se agitó durante 10 min a -78ºC, 30 min a 0ºC y 10 min a ta. La mezcla de reacción se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (200 ml) y la fase acuosa separada se extrajo con CH2Cl2 (3×) seguido de EtOAc (100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna
15 (10% al 20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el compuesto de aldehído 20 (5,28 g, 92%) como un aceite.
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B2318. Se añadió 0,1% de NiCl2/CrCl2, (peso/peso, 3,21 g) y 1% de NiCl2/CrCl2 (peso/peso, 4,31 g) a una solución del aldehído 20 (3,73 g, 6,25 mmol), el fragmento clave F-2 ejemplificado por el yoduro de vinilo X2 (5,10 g, 9,16 mmol), THF (85 ml) y DMF (21 ml) a ta en una cámara sellada con guantes. La mezcla de reacción se agitó durante 20 24 h, se sacó de la cámara sellada con guantes, se enfrió a 0ºC, se diluyó con EtOAc (100 ml), se extinguió con NH4Cl saturado (200 ml) y se agitó durante 30 min. La fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (6×) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 30%) dando B2318 (-3 g) contaminado con impurezas que corrían próximas y el producto intermedio sin ciclar (4,61 g). Este último (4,51 g, 4,48 mmol) se disolvió en THF (150 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con KHMDS
25 (0,5 M en tolueno, 14 ml, 7,0 mmol) durante un periodo de 2 min. Después de agitar a 0ºC durante 15 min, la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado (150 ml) y se calentó hasta ta. La fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (3×) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se combinaron con el producto parcialmente purificado obtenido anteriormente. La cromatografía en columna (10% de EtOAc-hexanos) proporcionó B2318 (3,17 g, 55%) como una mezcla -3:1 inseparable de diaestereómeros C27.
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B2317. Se añadió DDQ (1,45 g, 6,42 mmol) en porciones durante 30 min a una solución con agitación de B2318 (3,12 g, 3,35 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) y tampón fosfato a pH 7 (5 ml) a ta. La reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (50 ml), se agitó durante 5 min, se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado adicionales (100 ml), H2O 5 (200 ml) y se extrajo con Et2O (5×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (15% al 30% de EtOAc-hexanos) dando B2318 recuperado (1,40 g) y una mezcla de los productos isoméricos C27. El B2318 recuperado se volvió a someter a las condiciones de reacción descritas anteriormente proporcionando producto adicional. El material de partida recuperado se cicló de nuevo mediante las condiciones de desprotección. Todo el material deseado se combinó y se separó por MPLC
10 proporcionando B2317 (1,65 g, 61%).
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B2316. Se añadió TsCl (0,63 g, 3,30 mmol) a una solución de B2317 (1,60 g, 1,97 mmol) en CH2Cl2 (8 ml) y piridina (2 ml) a ta. Después de agitar durante 29 h, la reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (30 ml) y H2O (10 ml). La fase acuosa separada se extrajo con Et2O y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se
15 concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (15% al 30% de EtOAc-hexanos) dando B2316 (2,01 g, 92%) como un aceite junto con B2317 recuperado (92 mg, 5,8%).
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B2315. Se añadió LAH (1 M en THF, 2,61 ml, 2,61 mmol) durante 1 min a una solución de B2316 (1,68 g, 1,74
mmol) en Et2O (80 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 7 min, la reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de MeOH (0,42 ml, 10,4 mmol) y H2O (0,19 ml, 10 mmol), se calentó hasta ta y se agitó durante 20 min. La filtración a través de Celite con 1:1 de CH2Cl2-Et2O, la concentración y la purificación por cromatografía en columna (30% al 40% de EtOAc-hexanos) dio B2315 (1,38 g, 90%) como un aceite.
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B2314. Se añadió MMTrCl (0,70 g, 2,26 mmol) a una solución de B2315 (1,33 g, 1,51 mmol) en CH2Cl2 (25 ml) e iPr2NEt (0,79 ml, 4,53 mmol) a ta. La mezcla resultante se agitó durante 1 h y luego se vertió en una mezcla de NaHCO3 acuoso saturado (20 ml), H2O (10 ml) y Et2O (50 ml). La fase acuosa separada se extrajo con Et2O (3×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en
10 columna (CH2Cl2 seguido de 15% al 30% de EtOAc-hexanos) dando B2314 (1,65 g, 95%) como una espuma sólida.
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B2313. Una mezcla de B2314 (1,60 g, 1,39 mmol) y NaI (3,10 g, 20,8 mmol) en acetona (50 ml) se calentó a reflujo durante 13 h. Después de enfriarse hasta ta, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se concentró. Se añadieron H2O (5 ml), salmuera (20 ml) y Na2S2O3 (200 mg) y la mezcla resultante se extrajo con Et2O (4×). Los
15 extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% de EtOAc-hexanos) dando B2313 (1,50 g, 97%) como un aceite.
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B2307 y B2308. Se añadió terc-BuLi (1,7 M en pentano, 1,00 ml, 1,7 mmol) durante 1 min a una solución de B2313 (0,90 g, 0,81 mmol) en Et2O (14 ml) a -78ºC. Después de agitar durante 9 min, la mezcla se transfirió mediante una cánula durante 4 min a una solución del fragmento clave F-3 (0,83 g, 1,14 mmol) en Et2O (4 ml) a -78ºC. La transferencia se completó aclarando con Et2O adicional (2 ml). La mezcla resultante se agitó a - 78ºC durante 5 min 5 y luego a 0ºC durante 10 min, se extinguió con NaHCO3 acuoso saturado (30 ml) y se calentó hasta ta. La fase acuosa separada se extrajo con Et2O (3×) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se combinó con los de otros dos lotes (correspondientes a 0,11 g y 0,44 g de B2313) y se purificó por cromatografía en columna (10% al 20% de EtOAc-hexanos) dando una mezcla de B2307 y B2308 (1,86 g, 83%) como una espuma sólida. Aunque los isómeros pudieron separarse por CCL prep (20% de EtOAc-hexanos),
10 se transfirieron como una mezcla.
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B2305 y B2306. La mezcla de B2307-B2308 (1,80 g, 1,05 mmol) se disolvió en EtOH (20 ml), se trató con PPTS (10,0 mg, 0,04 mmol), se agitó a ta durante 11 h y luego se extinguió con NaHCO3 (20,0 mg, 0,24 mmol). Después de agitar durante 15 min, la mezcla se concentró, se azeotropizó con tolueno (15 ml) y se purificó por cromatografía
15 en columna (20% al 30% de EtOAc-hexanos) dando una mezcla de B2305 y B2306 (1,22 g, 81%) como una espuma sólida. Aunque los isómeros pudieron separarse por CCF prep (30% de EtOAc-hexanos), se transfirieron como una mezcla.
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B2304. Se agitó una mezcla de B2305/B2306 (1,16 g, 0,68 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (0,61 g, 1,44 mmol) en CH2Cl2 (35 ml) a ta durante 1 h. Se añadió peryodinano de Dess-Martin adicional (0,54 g, 1,27 mmol) a la mezcla y la agitación continuó durante 1 h adicional. La mezcla se diluyó con Et2O (100 ml), se agitó durante 20 min y se
5 filtró a través de Celite con Et2O. El filtrado incoloro se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y la fase acuosa separada se extrajo con Et2O (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% al 15% de EtOAc-hexanos) dando B2304 (0,98 g, 84%) como una espuma sólida.
Como alternativa, el B2304 puede prepararse del siguiente modo y de hecho la síntesis descrita a continuación es 10 superior a la facilitada anteriormente.
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A una solución de alcohol, 2,4 g, en cloruro de metileno, 29 ml, se añadió anhídrido de metanosulfonilo, 770 mg. La mezcla se agitó durante 15 minutos, se extrajo con bicarbonato sódico saturado, se secó y se sometió a cromatografía dando 2,737 g, 100%.
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A una solución del mesilato, 405 mg, en DMF, 0,06 ml, se añadió diisopropiletilamina, 0,130 ml, seguido de bencenotiol, 0,061 ml. Después de 4 horas y después de 22 horas se añadieron amina adicional, 0,03 ml, y bencenotiol, 0,015 ml, Después de 24 horas, la mezcla se diluyó con 5% de acetato de etilo/hexano, 1 ml, y se sometió a cromatografía dando 409 mg.
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A una solución del sulfuro, 1,97 g, en acetonitrilo, 16 ml, se añadió óxido de N-metilmorfolina (NMO), y luego una solución de 1,02 g de perrutenato de tetrapropilamonio (VII) (TPAP), 38 mg, en acetonitrilo, 1 ml. Después de 3,5 horas a temperatura ambiente, la mezcla se calentó hasta 40ºC durante 1 hora. La mezcla se enfrió y se añadió
10 tiosulfato de sodio saturado acuoso y la mezcla se repartió entre agua y acetato de etilo. El tratamiento final usual dio 1,567 g de un aceite marrón.
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A una solución del éster de pivaloato, 1,567 g, en cloruro de metileno, 11,2 ml, a - 78ºC se añadió DIBAL, 2,5 ml, de una solución 1 M en tolueno. Después de 15 minutos se añadió DIBAL adicional, 0,8 ml. Después de 5 minutos 15 adicionales se añadió lentamente metanol, 0,46 ml, seguido de agua, 0,2 ml. La mezcla se filtró a través de Celite y se sometió a cromatografía dando 1,386 g de un aceite.
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A una solución de la sulfona, 36 mg, en DME, 1 ml, a -40ºC se añadió n-butil-litio, 2,8 equivalentes. Después de 35 minutos se añadió una solución de aldehído, 42 mg, en DMB, 0,5 ml. Después de 40 minutos se añadió cloruro de amonio acuoso saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. El tratamiento final usual, seguido de cromatografía dio, 52 mg de un aceite.
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A una solución de alcohol, 42 mg, en cloruro de metileno, 2 ml, se añadió el reactivo de Dess-Martin, 36,4 mg. La mezcla se agitó durante 30 minutos y se añadió éter. La mezcla se filtró a través de Celite, se lavó con bicarbonato sódico saturado, con tiosulfato de sodio saturado, se procesó en la forma usual y se sometió a cromatografía dando
10 38 mg de un aceite.
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Preparación de la solución de SmI2
Se añadió una solución de 1,2-diyodoetano en 10 ml de THF a una suspensión de Sm, 0,16 g, en THF, 1 ml. La mezcla se agitó durante 1 hora.
Una alícuota de esta solución, 0,03 ml, se añadió a una solución de la sulfona en THF a -78ºC. Después de 5 minutos se añadió reactivo de SmI2 adicional, 0,05 ml. Después de unos minutos adicionales se añadió más reactivo, 0,25 ml. Se quitó el baño de enfriamiento y se añadió bicarbonato sódico acuoso saturado, 3 ml. La mezcla se repartió entre éter y agua y el tratamiento final usual dio 9,1 mg, 81%, de un aceite.
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B2302 y B2303. En una cámara sellada con guantes se añadió NiCl2/CrCl2 (1% peso/peso, 1,09 g, 8,86 mmol) a una
10 solución de B2304 (1,01 g, 0,70 mmol) en THF (600 ml) y DMF (150 ml) a ta. Después de agitar durante 2 días, la mezcla de reacción se sacó de la cámara sellada con guantes, se enfrió a 0ºC, se extinguió con NH4Cl acuoso saturado (300 ml) y se agitó a 0ºC durante 20 min. Después de la adición de H2O (100 ml), las dos fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (5×). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (15% de EtOAc-hexanos)
15 proporcionando una mezcla de B2302 y B2303 (0,84 g, 92%) como una espuma sólida. Aunque los isómeros pudieron separarse por CCF prep (20% de EtOAc-hexanos), se transfirieron como una mezcla.
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B2301. Una mezcla de B2302/B2303 (0,79 g, 0,60 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (0,26 g, 0,60 mmol) en CH2Cl2 (30 ml) a ta se agitó durante 30 min. Se añadió peryodinano de Dess-Martin adicional (0,26 g, 0,60 mmol) a la mezcla y la agitación continuó durante 1,5 h adicionales. La mezcla se diluyó luego con Et2O (100 ml), se agitó durante 15 min y se filtró a través de Celite. El filtrado se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y la fase acuosa separada se extrajo con Et2O (3×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% al 155% de EtOAc-hexanos) dando B2301 (0,67 g, 85%) como un aceite.
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10 B1793. Se añadió TBAF (1 M en THF que contiene HCl de imidazol 0,5 M, 4,60 ml, 4,60 mmol) durante 2 min a una solución de B2301 (0,62 g, 0,48 mmol) en THF (29 ml) a ta y la mezcla resultante se agitó durante 18 h. Después de
la dilución con hexanos (10 ml), la mezcla de reacción se cargó directamente sobre una columna de SiO2 empaquetada con 50% de EtOAc-hexanos y se eluyó con 50% de EtOAc-hexanos (1 l) seguido de 10% de MeOH/EtOAc para recoger una mezcla de productos intermedios. Después de la eliminación del disolvente, el residuo se disolvió en CH2Cl2 (15 ml) y se trató con PPTS (645 mg). Después de agitar durante 1 h a ta se añadió 5 PPTS adicional (414 mg) y la suspensión blanca resultante se agitó durante 4,5 h. La mezcla de reacción se cargó luego directamente sobre una columna de SiO2 empaquetada con 70% de EtOAc-hexanos y se eluyó con 70% de EtOAc/hexanos (0,5 l), EtOAc (1 l). La elución con 5% al 10% de MeOH/EtOAc proporcionó B1793 puro (181 mg) y la elución con 15% de MeOH-EtOAc dio producto semipuro adicional, que después de la purificación por CCF preparativa (10% de MeOH-EtOAc) proporcionó B1793 puro adicional (42 mg). B1793 (total 223 mg, 64%) se obtuvo
10 como un sólido blanco. HRMS: calc. para C40H58O12 + Na 753,3826. Hallado: 753,3808.
Síntesis de B1794:
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Arabinosa
B1794. Excepto las diferencias estereoquímicas y de grupos protectores (Esquemas 4 y 6), la arabinosa se convirtió 15 en B1794 de un modo similar al descrito para B1793 (véanse los Esquemas 3 y 5). HRMS: calc. para C40H58O12 + Na 753,3826. Hallado: 753,3856.
Síntesis de análogos representativos de B1793:
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B1920 y B1921 Se añadió TsCl (9,9 mg, 0,052 mmol) a una solución del diol B1793 (7,6 mg, 0,010 mmol) en CH2Cl2 20 (1 ml) y piridina (0,1 ml) a ta. Después de 48 h, la reacción se inactivó con una mezcla 1:4 de NaHCO3 acuoso saturado-salmuera y se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se
concentraron. La purificación por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos) proporcionó el monotosilato B1920 (6,0 mg, 67%) y el ditosilato B1921 (1,8 mg, 18%).
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B2294 Se añadió gota a gota MsCl (0,3 M en CH2Cl2, 98 µl, 0,030 mmol) durante 40 min a una mezcla de colidina (7 µl, 0,054 mmol), B1793 (20,8 mg, 0,028 mmol) y CH2Cl2 (1 ml) a 0ºC. Después de 76 h a 4ºC, la reacción se inactivó con una mezcla 1:4 de NaHCO3 acuoso saturado-salmuera y se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El producto bruto se disolvió en tolueno (3 ml), se concentró y se purificó por CCF preparativa (1,5% de MeOH-EtOAc) proporcionando el mesilato B2294 (21,4 mg, 95%).
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10 B2014 y B2015 Una solución 0,016 M de bromuro de 4-fluorobencilo en Et2O (800 µl, 13 µmol) y Ag2O (10 mg, 43 µmol) se añadieron cada una en tres porciones a intervalos de 1 h a una solución a ta de B1793 (1,7 mg, 2,3 µmol) en Et2O (1,2 ml). La mezcla se protegió de la luz, se agitó durante 7 h y luego se filtró a través de Celite. La concentración y la purificación por CCF preparativa (EtOAc) proporcionó el éter primario B2014 (1,1 mg, 56%) y el éter secundario B2015 (0,6 mg, 31%). HRMS (FAB): calc. para C47H63FO12 + Na 861,4201. Hallado: para B2014 861,4178, para B2015 861,4160.
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General. Una mezcla de B1793 (1 mg, 1,37 micromol), Et3N (10 microL, 72 micromol) y ArNCO (2 a 4 equiv.) en CH2Cl2 (0,2 ml) se agitó a ta durante 4 h hasta durante toda la noche hasta que por CCF se juzgó que la reacción se
5 había completado. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 saturado (3 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3×) y EtOAc (2×), se secó sobre Na2SO4 y se purificó por CCF preparativa (5% de MeOH-CH2CH2Cl2) proporcionando los productos:
B1984. (1,0 mg, 86%) HRMS (FAB): calc. para C47H63NO13 + Na 872,4197. Hallado: 872,4214. B1990. (1,1 mg, 92%) HRMS (FAB): calc. para C47H62ClNO13 + Na 906,3807. Hallado: 906,3826.
10 B1992. (1,0 mg, 83%) HRMS (FAB): calc. para C48H65NO14 + Na 902,4303. Hallado: 902,4269.
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B2042 Se añadió DEAD (0,4 M en éter, 50 µl, 19 µmol) a una solución de B1793 (2,0 mg, 2,7 µmol), trifenilfosfina (5 mg, 19 µmol), ácido 4-nitrobenzoico (3,2 mg, 19 µmol) y Et2O (500 µl) a ta. Después de 22 h, la mezcla de reacción se cargó directamente sobre una placa de CCF preparativa y se eluyó con 60% de EtOAc-hexanos dando el diéster 15 intermedio (3,0 mg). Este material se recogió en MeOH (300 µl) y se trató con K2CO3 (aproximadamente 1 mg). Después de agitar a ta durante 30 min, la mezcla de reacción se diluyó con salmuera y se extrajo con CH2Cl2 (5×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (5% de
MeOH-EtOAc) proporcionando B2042 (1,2 mg, 60% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C40H58O12 + Na 753,3826. Hallado: 753,3810.
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B1896 y B1897. Se añadió NaBH4 (3 mg, 0,08 mmol) a una solución de B1793 (2,30 mg, 3,15 µmol) en 1:1 de CH2Cl2-MeOH (0,2 ml) a ta. La concentración de la mezcla de reacción y la purificación por CCF preparativa (8% de MeOH-EtOAc) proporcionó B1896 (0,80 mg, 35%) y B1897 (mezcla 2:1, 0,15 mg, 6,5%). HRMS (FAB) para B1896: calc. para C40H60O12 + Na 755,3983. Hallado: 753,3969.
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B1918. Una mezcla de B1793 (2,0 mg, 2,74 µmol), NaIO4 (35 mg, 0,16 mmol), MeOH (0,8 ml) y H2O (0,2 ml) se
10 agitó a ta durante 40 min. La mezcla de reacción se diluyó con H2O (1 ml), se extrajo con CH2Cl2 (6×), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (5% de MeOH-CH2Cl2) dando B1918 (1,9 mg, 100%).
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B2037. Una solución 0,034 M de NaBH4 (0,1 ml, 3,4 µmol) en EtOH se añadió en porciones a una solución de B1918 (1,9 mg, 2,72 µmol) en MeOH (0,8 ml) y CH2Cl2 (0,2 ml) a -78ºC hasta ta hasta que por CCF se juzgó que la reacción se había completado. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado (2 ml) a -78ºC, se calentó hasta ta, se extrajo con CH2Cl2 (6×), se secó sobre Na2SO4 y se purificó por CCF preparativa (5% de MeOH-CH2Cl2) proporcionando B2037 (1,7 mg, 89%). HRMS (FAB): calc. para C39H56O15 + Na 723,3720. Hallado: 723,3749.
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B2035
Se añadió NaIO4 (35 mg, 0,16 mmol) a una solución de B1793 (1,7 mg, 0,0023 mmol), MeOH (800 µl) y H2O (200 µl)
10 y después de 15 min la mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con CH2Cl2 (5×). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y el aldehído intermedio se disolvió inmediatamente en DMF (300 µl). Se añadieron 3-bromo-3,3-difluoropropeno (3 µl, 0,023 mmol) y polvo de indio (3 mg, 0,23 mmol) y después de 24 h se añadió 3bromo-3,3-difluoropropeno adicional (1 µl, 0,008 mmol). Después de 18 h se añadió H2O, la mezcla se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con H2O y salmuera, se secaron sobre
15 Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos) proporcionando B2035 (0,74 mg, 41% para las 2 etapas) como una mezcla de isómeros. HRMS (FAB): calc. para C42H58F2O11 + Na 799,3845. Hallado: 799,3883.
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B2008, B2011
5 Se añadió NaBH4 (2 mg, 0,05 mmol) a una solución de B1793 (2,2 mg, 0,003 mmol) en 1:1 de CH2Cl2-MeOH (200 µl) a ta. Después de 15 min se añadieron NH4Cl acuoso saturado y H2O y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (6×) y EtOAc (2×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% de MeOH-EtOAc) proporcionando un triol intermedio que se disolvió en MeOH (800 µl) y H2O (200 µl). Se añadió NaIO4 (35 mg, 0,16 mmol) y después de 20 min la mezcla se diluyó con H2O y se
10 extrajo con CH2Cl2 (6×). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y el aldehído intermedio se disolvió inmediatamente en THF (500 µl). Se añadió bromuro de 4-fluorofenilmagnesio (2 M en Et2O, 12 µl, 0,024 mmol) y después de 20 min la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (6×) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. La purificación por CCF preparativa (EtOAc) proporcionó el producto deseado como una mezcla de 4 isómeros (1,32 mg, 55% para las 3
15 etapas).
Se añadió peryodinano de Dess-Martin (-3 mg, 0,007 mmol) a una solución del producto anterior (0,95 mg, 0,0012 mmol) en CH2Cl2 (300 µl) y la mezcla se agitó a ta durante 20 min. Se añadieron peryodinano de Dess-Martin adicional (-3 mg, 0,007 mmol) y CH2Cl2 (300 µl) y después de otros 40 min se añadieron Et2O, NaHCO3 acuoso saturado (4 ml) y Na2S2O3 acuoso saturado (1 ml). La mezcla se extrajo con Et2O (3×) y los extractos combinados se
20 lavaron con salmuera, se secaron sobre Na3SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de BtOAc-hexanos) proporcionando B2008 (0,58 mg, 61%). HRMS (FAB): calc. para C45H57FO11 + Na 815,3783. Hallado: 815,3758.
B2011. De un modo análogo, B1793 (1,9 mg, 0,003 mmol) se convirtió en B2011 (0,87 mg, 42% para las 4 etapas). HRMS (FAB): calc. para C45H58O11 + Na 797,3877. Hallado: 797,3877.
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B2013
Una solución de B1920 (1,4 mg, 0,0016 mmol), KCN (1 mg, 0,016 mmol) y DMSO (500 µl) se calentó a 60ºC durante 8 h. Después de enfriarse hasta ta se añadió H2O y la mezcla se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con H2O y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos) proporcionando B2013 (0,78 mg, 67%). HRMS (FAB): calc. para C41H57NO11 + Na 762,3829. Hallado: 762,3848.
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X1920
10 Una mezcla de B1920 (1,3 mg, 1,47 µmol), NaI (30 mg, exceso) y acetona (1 ml) se agitó a 60ºC durante 3,5 h. Después de enfriarse hasta ta, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (3 ml), se extrajo con CH2Cl2 (5×) y EtOAc, se secó sobre Na2SO4 y se purificó por cromatografía en columna (50% de EtOAc-CH2Cl2 a 80% de EtOAc-hexanos) dando el yoduro X1920 (1,3 mg, 100%).
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General. Una mezcla del yoduro X1920 (1,0 equiv.), iPr2EtN (11 a 22 equiv.), ArSH (9 a 46 equiv.) y DMF (0,3 ml) se agitó a ta hasta que por CCF se juzgó que la reacción se había completado (normalmente 24 a 48 h). La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (2 ml), se extrajo con CH2Cl2 y EtOAc, se secó sobre Na2SO4 y se purificó por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos o 5% de MeOH-CH2Cl2) proporcionando los productos de sulfuro:
B1998. (1,3 mg dieron 1,1 mg, 85%) HRMS (FAB): calc. para C46H61ClO11S + Na 897,3521. Hallado: 897,3533. B2010. (1,1 mg dio 0,7 mg, 59%). HRMS (FAB): calc. para C47H64O12S + Na 875,4016. Hallado: 875,4057. B2019. (1,1 mg dio 0,7 mg, 61 %) EM (FAB): M + Na
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General. Se añadió una solución 0,01 M de mCPHA (1,2 equiv.) en CH2Cl2 a una solución de un sulfuro (1,0 equiv.) en CH2Cl2 (0,5 ml) a 0ºC durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 saturado (2 ml), se extrajo con CH2Cl2 y EtOAc, se secó sobre Na2SO4 y se purificó por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos o EtOAc) proporcionando los productos:
B2016. (0,9 mg dieron 0,7 mg, 74%) B2030. (1,0 mg dio 0,6 mg, 61%) HRMS (FAB): calc. para C47H64O14S + Na 907,3914. Hallado: 907,3950.
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B1934. Se añadió TBDPSCI (3,0 µl, 12 µmol) a una solución de B1793 (1,3 mg, 1,78 µmol), imidazol (10 mg, 166
5 µmol) y DMF (0,10 ml) a ta. Después de agitar durante 1 h, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (2 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3×) y EtOAc (2×), se secó sobre Na2SO4 y se purificó por CCF preparativa (5% de MeOH-CH2Cl2) dando el éter silílico intermedio (1,3 mg, 77%).
Este material se disolvió en CH2Cl2 (0,5 ml) y se trató con peryodinano de Dess-Martin (10 mg, 24 µmol) durante 1,5 h a ta, se diluyó con Et2O y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se purificó por CCF preparativa (50%
10 de EtOAc-hexanos) proporcionando el producto intermedio de dicetona (1,0 mg, 77%) que se disolvió en THF (0,5 ml) y se trató con TBAF 0,02 M que contenía clorhidrato de imidazol 0,01 M (solución de THF, 75 µl, 1,5 µmol) a ta durante 15 min. La mezcla de reacción se eluyó a través de una columna de SiO2 (50% de EtOAc-hexanos a 5% de MeOH-CH2Cl2) y el producto deseado se purificó adicionalmente por CCF preparativa (5% de MeOH-CH2Cl2) proporcionando B1934 (0,75 mg, 100%). HRMS (FAB): calc. para C40H36O12 + Na 751,3669. Hallado: 751,3690.
15 Síntesis de B1939:
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B1922 Se añadió azida de tetra-n-butilaminonio (0,2 M en DMF, 0,5 ml, 0,10 mmol) a una solución del mesilato B2294 (21,4 mg, 0,026 mmol) en DMF (2 ml) a ta. Después de agitar a 83ºC durante 3,5 h, la mezcla de reacción se enfrió hasta ta, se diluyó con tolueno, se concentró y se purificó por CCF preparativa (80% acetato de etilo-hexanos) proporcionando B1922 (18 mg, 92%).
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B1939 Se añadieron secuencialmente Me3P (1 M en THF) y H2O (0,8 ml) a una solución de la azida B1922 (24,6 mg, 0,032 mmol) en THF (3,2 ml) a ta. La mezcla se agitó durante 22 h, se diluyó con tolueno, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida [gradiente por etapas, 10% de MeOH-EtOAc seguido de MeOH-EtOAc-30% de NH4OH acuoso (9:86:5)] proporcionando la amina primaria deseada (23,3 mg), que por RMN 1H contuvo 1% de
10 óxido de trimetilfosfina. La liofilización en benceno y el reposo a alto vacío durante 2 d proporcionó B1939 (20,3 mg, 87%).
Síntesis de análogos de B1939 representativos: B1930, B1940, B1973, B1987, B1988, B1991, B2003, B2004
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B1930 Se añadió Me3P (1 M en THF, 13 µl, 0,013 mmol) a una solución de B1922 (1,6 mg, 2,1 µmol), THF (400 µl) y H2O (100 µl) a ta. La mezcla se agitó durante 22 h, se diluyó con tolueno, se concentró y se secó azeotrópicamente con tolueno (2×) dando la amina bruta que se usó directamente en la siguiente etapa.
Se añadió EDC (0,06 M en CH2Cl2, 100 µl, 11 µmol) a una solución de la amina bruta, ácido benzoilfórmico (0,8 mg, 5,3 µmol) y CH2Cl2 (200 µl) a ta. Después de 30 min, la reacción se inactivó con una mezcla 1:4 de NaHCO3 acuoso saturado-salmuera y se extrajo con CH2Cl2 (5×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (EtOAc) proporcionando B1930 (1,5 mg, 83% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C48H63NO13 + Na 884,4197. Hallado: 884,4166.
B1940 Usando el procedimiento descrito anteriormente para B1930, B1922 se redujo, se acopló con clorhidrato de ácido 3-piridilacético y se purificó por CCF preparativa [(MeOH-EtOAc-30% de NH4OH acuoso (9:86:5)] proporcionando B1940 (0,8 mg, 67% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C47H64N2O12 + Na 871,4357. Hallado: 871,4362.
B1973 Usando el procedimiento descrito anteriormente, B1922 (0,9 mg, 1,2 µmol) se redujo, se acopló con ácido fenilacético y se purificó por CCF preparativa (5% de MeOH-EtOAc) proporcionando B1973 (0,44 mg, 44% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C48H65NO12 + Na 870,4404. Hallado: 870,4447.
B1987 Usando el procedimiento descrito anteriormente, B1922 (0,9 mg, 1,2 µmol) se redujo, se acopló con ácido 3indolglioxílico y se purificó por CCF preparativa (3% de MeOH-EtOAc) proporcionando B1987 (0,8 mg, 75% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C50H64N2O13 + Na 923,4306. Hallado: 923,4338.
B1991 Usando el procedimiento descrito anteriormente, B1922 (1,0 mg, 1,3 µmol) se redujo, se acopló con ácido 4clorobenzoico y se purificó por CCF preparativa (3% de MeOH-EtOAc) proporcionando B1991 (0,8 mg, 70% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C47H62ClNO12 + Na 890,3858. Hallado: 890,3843.
B2003 Usando el procedimiento descrito anteriormente, B1922 (1,0 mg, 1,3 µmol) se redujo, se acopló con ácido 3,4,5-trimetoxibenzoilfórmico y se purificó por CCF preparativa (EtOAc) proporcionando B2003 (0,7 mg, 56% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. para C51H69NO16 + Na 974,4514. Hallado: 974,4525.
B2004 Usando el procedimiento descrito anteriormente, B1922 (1,0 mg, 1,3 µmol) se redujo, se acopló con ácido 3,4,5-trimetoxibenzoico y se purificó por CCF preparativa (5% de MeOH-EtOAc) proporcionando B2004 (0,7 mg, 58
% para las dos etapas). HRMS (FAB): calc. C50H69NO15 + Na 946,4565. Hallado: 946,4599.
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B1988 Se añadió peryodinano de Dess-Martin (1 mg, 2,3 µmol) a una solución de B1930 (0,80 mg, 0,93 µmol) en CH2Cl2 (500 µl) a ta. Después de 1 h, la reacción se diluyó con Et2O y se filtró a través de Celite. El filtrado se lavó secuencialmente con una mezcla 1:9 de NaHCO3 acuoso saturado-Na2S2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por CCF preparativa (80% de EtOAc-hexanos) proporcionando B1938 (0,45 mg, 56%). HRMS (FAB): calc. para C18H61NO13 + Na 882,4041. Hallado: 884,4012.
Síntesis de B2090:
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10 Compuesto 103. Se añadió polvo de indio (1,35 g, 11,8 mmol) a una solución de 102 (3,38 g, 17,6 mmol) en DMF (20 ml) a ta. Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se enfrió a 0ºC. Luego se añadió el aldehído puro 101 (3,72 g, 28,6 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche mientras que se dejaba que la temperatura se calentara hasta ta. La mezcla de reacción se volvió a enfriar hasta 0ºC y luego se extinguió cuidadosamente con NH4Cl acuoso saturado (100 ml). Después de agitar durante 30 min, la mezcla resultante se extrajo con Et2O (3×),
15 se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (10% al 20% de EtOAc-hexanos) dando 103 cristalino puro (2,20 g, 59%).
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Compuesto 104. Se añadió Et3N (12 µl, 0,51 µmol) a una solución de 103 (1,09 g, 5,13 mmol) y tiofenol (0,63 ml, 7,16 mmol) en CH2Cl2 y la mezcla resultante se agitó a 0ºC durante 1 h. La filtración a través de SiO2 dio una mezcla de 104 y 105 que después de MPLC (15% al 20% de EtOAc-hexanos) proporcionó 104 (0,53 g, 32%) y 105 (0,92 g, 56%).
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Compuesto 106. Se añadió DIBALH (1 M en tolueno, 3,28 ml, 3,28 mmol) a una solución de 104 (0,53 g, 1,64 mmol) en tolueno (10 ml) a -78ºC y la mezcla se agitó a -78ºC durante 10 min. La reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de MeOH (0,40 ml, 9,84 mmol) y H2O (0,17 ml, 9,84 mmol), se calentó hasta ta y se agitó durante
10 20 min. La suspensión blanca se filtró a través de una mezcla de Celite y SiO2 con 1:1 de CH2Cl2-Et2O y se concentró dando 106 (0,53 g, 100%) como un aceite.
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Compuesto 107. Una mezcla de 106 (0,53 g, 1,64 mmol) y (trifenilfosforaniliden)acetato de etilo (1,15 g, 3,29 mmol) en tolueno (10 ml) se calentó a 80ºC durante 15 h. La mezcla se enfrió hasta ta y se introdujo DBU (25 µl, 0,16 15 mmol). La mezcla se calentó a 80ºC durante 1,5 h, se enfrió hasta ta, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (10% al 20% de EtOAc-hexanos) dando 107 (0,54 g, 83%) como un aceite (relación 3: de isómeros α:β).
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(50 ml), H2O (10 ml) y Et2O (60 ml) y luego se calentó hasta ta. La fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (4×) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (50% de EtOAc-hexanos) dando 108 (0,51 g, 92%) como un aceite.
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Compuesto 109. Una mezcla de 108 (0,51 g, 1,24 mmol) y NaOAc (1,00 g, 12,4 mmol) en Ac2O (10 ml) se agitó a 140ºC durante 12 h, se enfrió hasta ta y luego se concentró. El residuo se repartió entre NaHCO3 acuoso saturado (20 ml) y Et2O (30 ml) y se agitó vigorosamente a ta durante 30 min. La fase acuosa separada se extrajo con Et2O (2×) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (5% al 15% de EtOAc-hexanos) dando 109 (0,41 g, 73%) como un aceite.
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Compuesto 110. Una mezcla de 109 (0,41 g, 0,91 mmol) y K2CO3 (44,3 mg, 0,32 mmol) en EtOH (5 ml) se calentó a 60-70ºC durante 1 d. Después de enfriarse hasta ta, la mezcla de reacción se concentró y se eluyó a través de una columna de SiO2 (10% al 20% de EtOAc-hexanos) dando el producto intermedio de aldehído parcialmente purificado. Este material se disolvió en EtOH (2,5 ml), se trató con NaBH4 (50 mg, 1,33 mmol) y se agitó a ta durante
15 30 min. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (40% de EtOAc-hexanos) dando 110 (181 mg, 66%).
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Compuesto 111. Se añadió BF3·OEt2 (0,05 M en CH2Cl2, 175 µl, 8,75 µmol) a una solución de 110 (181 mg, 0,60 mmol) y 2,2,2-tricloroacetimidato de p-metoxibencilo (0,50 ml, 1,80 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) a 0ºC. La mezcla
20 resultante se agitó durante 1,5 h a 0ºC y durante 2 h a ta hasta que la reacción se completó. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (25 ml) y se extrajo con Et2O (5×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (CH2Cl2 y luego 20% de EtOAc-hexanos) dando 111 semipuro (0,37 g, >100%) como un aceite.
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Compuesto 112. Una mezcla de 111 (0,37 g, máx.= 0,60 mmol) y TsOH·H2O (36 mg) en EtOH (5 ml) se agitó inicialmente a ta durante la noche y luego a 60ºC durante 1 h. Se añadió TsOH·H2O adicional (31 mg) a ta y la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a ta. La mezcla se concentró luego, se extinguió con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (5×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 50% de EtOAc-hexanos y luego 5% de MeOH-CH2Cl2) dando 112 (121 mg, 53%) como un aceite junto con 111 recuperado (49 mg, 21%).
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Compuesto 113. Se añadió TBSOTf (250 µl, 1,09 mmol) a una solución de 112 (121 mg, 0,32 mmol) y Et3N (176 µl,
10 1,26 mmol) en CH2Cl2 a 0ºC y la mezcla resultante se agitó durante 25 min. La reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (15 ml) y la fase acuosa separada se extrajo con éter (3×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (5% al 10% de EtOAc/hexanos) dando 113 (165 mg, 85%) como un aceite.
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15 Compuesto 114. Se añadió DIBALH (1 M en tolueno, 0,54 ml, 0,54 mmol) a una solución de 113 (165 mg, 0,27 mmol) en tolueno (5 ml) a -78ºC y la mezcla resultante se agitó a -78ºC durante 10 min. La reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de MeOH (65 µl, 0,81 mmol) y H2O (29 µl, 0,81 mmol), se calentó hasta ta y se agitó durante 25 min. La suspensión blanca se filtró a través de Celite con 1:1 de CH2Cl2-Et2O. La concentración y la purificación por cromatografía en columna (10% al 20% de EtOAc-hexanos) dio 114 (153 mg, 100%) como un aceite.
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B2090. De un modo similar al descrito en el Esquema 6 para la síntesis de B1794, el producto intermedio 114 se convirtió en B2090. HRMS (FAB): calc. para C39H56O11 + Na 723,3720. Hallado: 723,3731.
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B2136. De un modo análogo al de B1939, B2090 se convirtió en B2136. HRMS (FAB): calc. para C39H57NO10 + Na 722,3880. Hallado: 722,3907.
Síntesis de B2039/B2043:
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Aldehído 202 Una mezcla del diol 201 (49,7 mg, 0,0707 mmol), NaIO4 (100 mg, 0,47 mmol), MeOH (10 ml) y H2O (2,5 ml) se agitó a ta durante 30 min. Se añadió H2O y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (30% de
10 EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído 202 (41,7 mg, 88%).
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Alcohol 203 Se añadió bromuro de 4-fluorofenilmagnesio (2 M en Et2O, 155 µl, 0,31 mmol) a una solución del aldehído 202 (41,7 mg, 0,062 mmol) en THF (6 ml). Después de 15 min a ta, la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se
15 concentraron y se purificaron por CCF preparativa (40% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 203 (32,4 mg, 68%) como una mezcla 1:1 de isómeros C34. El isómero C27 no deseado secundario se separó en esta etapa y también se aisló como una mezcla 1:1 de isómeros C34 (8,4 mg, 18%).
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Alcohol 205 Se añadió LAH (1 M en THF, 113 µl, 0,113 mmol) gota a gota a una solución del éter 204 (33,1 mg, 0,0375 mmol) en Et3O (10 ml) a 0ºC. Después de 20 min se añadieron H2O y NaOH 1 M y la mezcla se agitó a ta 10 durante 10 min. La filtración a través de Celite, la concentración y la purificación por cromatografía en columna (40% de EtOAc-hexanos) proporcionó el alcohol 205 (28,4 mg, 95%).
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Éter 206 Se añadieron diisopropiletilamina (31 µl, 0,18 mmol) y MMTrCl (22 mg, 0,071 mmol) a una solución del alcohol 205 (28,4 mg, 0,0356 mmol) en CH2Cl2 (4 ml) a 0ºC. Después de 15 h a ta se añadió H2O y la mezcla se 15 extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (40% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter 206 como una
mezcla ~1,5:1 de epímeros C34 (45 mg, cuantitativa) que contuvo una pequeña cantidad de impurezas que corrieron próximas.
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Alcohol 207 Se añadió DDQ (40 mg, 0,18 mmol) a una solución del éter 206 (37 mg, 0,034 mmol) en CH2Cl2 (4 ml)
5 y una mezcla 1:10 de t-BuOH:tampón fosfato a pH 7 (2 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó vigorosamente en la oscuridad durante 15 min. Se añadieron tres porciones adicionales de DDQ (40 mg, 0,18 mmol) a intervalos de 10 min, luego la reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 207 (19,2 mg, 59%), además del éter 206
10 recuperado (9,7 mg, 26%).
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Mesilatos 208A y 208B Se añadieron secuencialmente Et3N (19 µl, 0,13 mmol) y Ms2O (10 mg, 0,056 mmol) a una solución del alcohol 207 (21,3 mg, 0,022 mmol) en CH2Cl2 (6 ml) a 0ºC. Después de 30 min se añadió NaHCO3 acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se
15 secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando los mesilatos 208A (11,7 mg, 51%) y 208B (6,5 mg, 28%) como isómeros C34 individuales.
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B2039 y B2043. De un modo similar al descrito en el Esquema 6 para la síntesis de B1794, ambos diaestereómeros 208A y 208B se convirtieron independientemente en B2039 y B2043. HRMS (FAB): calc. para C45H59F11 + Na 817,3939. Hallado: para B2039 817,3896, B2043 817,3910.
Síntesis de B2086, B2088, B2091
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Alcohol X-20 Se añadió NaIO4 (1,16 g, 5,4 mmol) a una solución de los dioles 10 a, b (1,19 g, 3,0 mmol) en MeOHH2O (4:1, 75 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta ta. Después de agitar durante 40 min, la mezcla se diluyó con EtOAc, se filtró a través de Celite, se concentró y se repartió entre salmuera y CH2Cl2. La fase
10 acuosa separada se extrajo con CH2Cl2 (2×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron proporcionando el producto intermedio de aldehído bruto.
Se añadió NaBH4 (228 mg, 6,0 mmol) a una solución del aldehído en MeOH-Et2O (1:1, 40 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó durante 30 min, cuidadosamente se extinguió con NH4Cl acuoso saturado, se agitó durante 20 min a ta y se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por
15 cromatografía ultrarrápida (40% al 50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol X-20 (1,03 g, 93% para las dos etapas).
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Éter silílico 21 Se añadieron secuencialmente imidazol (0,94 g, 13,9 mmol) y TBSCl (0,59 g, 3,89 mmol) a una solución del alcohol X-20 (1,02 g, 2,78 mmol) en DMF (10 ml) a ta. Después de 14 h, la mezcla de reacción se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con H2O, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (5% al 15% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter silílico 21 (1,3 g, 98%).
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Alcohol 22 Una mezcla de Pd(OH)2 (20%, 0,8 g), el éter silílico 21 (1,3 g, 2,70 mmol) y EtOAc (30 ml) se agitó durante 1 h bajo 1 atm H2 a ta, se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (20% al 40% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 22 (0,96 g, 91 %).
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Alcohol 25 Se añadieron secuencialmente N-óxido de 4-metilmorfolina (980 mg, 8,4 mmol) y TPAP (131 mg, 3,26 mmol) a una solución del alcohol 22 (1,78 g, 4,6 mmol) en CH2Cl2 (45 ml) a ta. Fue necesario un baño frío para controlar la exotermia. Después de 20 min, la mezcla de reacción se diluyó con hexanos, se filtró a través de una columna de SiO2 corta (15% de EtOAc-hexanos) y se concentró dando la cetona bruta.
15 Se añadió reactivo de Tebbe (14,9 ml, 9,0 mmol) durante 10 min a una solución de la cetona bruta en THF (60 ml) a 0ºC. Después de 20 min, la mezcla de reacción se vertió en Et2O (100 ml) que se enfrío previamente a -78ºC, se extinguió mediante la adición lenta de H2O (30 ml), se calentó hasta ta, se agitó durante 30 min y se extrajo con Et2O (4×). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (10% de EtOAc-hexanos) proporcionando la olefina deseada contaminada por el
20 producto de dimetilo geminal (1,07 g). Esta mezcla se usó directamente en la siguiente etapa.
Se añadió 9-BBN (0,5 M en THF, 11,6 ml, 5,8 mmol) a una solución de la olefina en THF (15 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta ta, se agitó durante 5 h y luego se enfrió a 0ºC. Se añadieron H2O (60 ml), THF (60 ml) y NaBO3·4 H2O (5,7 g). Después de agitar durante 5 h a ta, el THF se eliminó a presión reducida y el residuo acuoso se extrajo con EtOAc (4×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre
25 Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (20% al 40% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 25 (605 mg, 18% para las tres etapas).
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Alcohol 26 Usando el procedimiento previamente descrito, el alcohol 25 (604 mg, 1,49 mmol) se oxidó secuencialmente, se isomerizó y se redujo. La purificación por cromatografía ultrarrápida (20% al 40% de EtOAc30 hexanos) proporcionó el alcohol 26 (550 mg, 91% para las tres etapas).
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Éter de MPM 27 Se añadió BF3·OEt2 (0,05 M en CH2Cl2, 270 µl, 0,013 mmol) a una solución del alcohol 26 (545 mg, 1,35 mmol) y tricloroimidato de MPM (1,14 g, 4,0 mmol) en CH2Cl2 (40 ml) a 0ºC. Después de 1 h, la reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado, se extrajo con CH2Cl2, se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (10% al 15% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter de MPM 27 (580 mg, 82%).
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Alcohol 28 Se añadió LAH (1 M en THF, 1,9 ml, 1,9 mmol) a una solución del éter de MPM 27 (580 mg, 1,11 mmol) en Et2O (100 ml) a 0ºC. Después de 30 min, la reacción se inactivó cuidadosamente con H2O (0,5 ml) y NaOH acuoso 1 N (0,5 ml), se agitó durante 1 h a ta, se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por
10 cromatografía ultrarrápida (30% al 50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 28 (460 mg, 95%).
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Olefina 29 Se añadió DMSO (441 µl, 6,23 mmol) a una solución de cloruro de oxalilo (272 µl, 3,12 mmol) en CH2Cl2 (30 ml) a -78ºC. Después de 15 min se añadió una solución del alcohol 28 (458 mg, 1,04 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) a la mezcla de reacción. Después de agitar durante 1 h a -78ºC se añadió Et3N (1,3 ml, 9,35 mmol). La mezcla de
15 reacción se calentó hasta 0ºC, se agitó durante 10 min, se diluyó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se filtraron a través de una columna de SiO2 corta (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído bruto.
Se añadió gota a gota n-BuLi (1,63 M, 1,4 ml, 2,28 mmol) a una solución de CH3PPh3Br (815 mg, 2,28 mmol), THF (20 ml) y DMSO (7,5 ml) a 0ºC. Después de 1 h se añadió una solución del aldehído en THF (10 ml). La mezcla de
20 reacción se calentó hasta ta y se agitó durante 3 h. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con EtOAc (4×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con H2O, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (10% al 15% de EtOAc-hexanos) proporcionando la olefina 29 (380 mg, rendimiento del 95% para las 2 etapas).
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Compuesto 31 Se añadió 9-BBN (0,5 M en THF, 6 ml, 3 mmol) a una solución de la olefina 29 (370 mg, 0,85 mmol) en THF (7 ml) a 0ºC. La mezcla se dejó calentar hasta ta y se agitó durante 1 h. Después de volverse a enfriar a 0ºC se añadieron H2O (30 ml), THF (20 ml) y NaBO3•4 H2O (2,8 g). Después de agitar durante 3 h a ta, el THF se eliminó a presión reducida. El residuo acuoso se extrajo con EtOAc (4×), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó
5 por cromatografía ultrarrápida (25% al 50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 30 que se usó directamente en la siguiente etapa.
Se añadió cloruro de pivaloílo (157 µl, 1,27 mmol) a una solución del alcohol 30 en CH2Cl2-piridina (1:1 mezcla, 10 ml) a ta. Después de 18 h se añadió cloruro de pivaloílo adicional (100 µl, 0,81 mmol). Después de 1 h, la mezcla de reacción se enfrió a 0ºC, se extinguió con MeOH (0,5 ml), se concentró, se diluyó con salmuera y se extrajo con
10 CH2Cl2 (4×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (10% al 15% de EtOAc-hexanos) proporcionando el compuesto 31 (410 mg, 90% para las dos etapas).
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Alcohol 32 Se añadió TBAF (1 M en THF, 1,14 ml, 1,14 mmol) a una solución de 31 (410 mg, 0,761 mmol) en THF 15 (5 ml) a ta. Después de 1,5 h la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (40% de EtOAc-hexanos a 100% de EtOAc) proporcionando el alcohol 32 (320 mg 100%).
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Alcoholes 33a y 33b Se añadió peryodinano de Dess-Martin (925 mg, 2,18 mmol) a una solución del alcohol 32 (309 mg, 0,727 mmol) en CH2Cl2 (19 ml) a ta. Después de 1 h, la reacción se diluyó con Et2O y se filtró a través de
20 Celite. El filtrado se lavó secuencialmente con una mezcla 1:9 de NaHCO3 acuoso saturado-Na2S2O3 y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído deseado, que se llevó inmediatamente a la siguiente etapa.
Se añadió BF2•OEt2 (135 µl, 1,1 mmol) a una solución del aldehído bruto, tri-n-butilalilestaño (337 µl, 1,08 mmol) y CH2Cl2 (16 ml) a -78ºC. Después de 1 h, la reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con
25 CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por MPLC (25% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 33a principal más polar (165 mg, 49% para las dos etapas) y el producto 33b secundario menos polar (90 mg, 27% para las dos etapas).
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Compuesto 34. Se añadió TBSOTf (163 µl, 0,710 mmol) a una solución del alcohol 33a (165 mg, 0,355 mmol), Et3N 30 (247 µl, 1,78 mmol) y CH2Cl2 (5 ml) a 0ºC. Después de 25 min, la reacción se inactivó con NaHCO2 acuoso saturado, se extrajo con CH2Cl2 (3×), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (15% al
20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el compuesto 34 (200 mg, 98%).
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Dioles 35a y 35b Se añadió OsO4 (solución 0,1 M en tolueno, 32 µl, 3,2 µmol) a una solución de K2CO3 (168 mg, 1,22 mmol), K3Fe(CN)6 (400 mg, 1,32 mmol), (DHQ)2PYR (11 mg, 12 µmol), H2O (3,2 ml) y t-BuOH (2,2 ml) a 0ºC. 5 Luego se añadió una solución de la olefina 34 (200 mg, 0,345 mmol) en t-BuOH (1 ml) a la mezcla de reacción. Después de 5 h a 0ºC se añadió Na2S2O5•5 H2O (200 mg). La mezcla de reacción se calentó hasta ta, se agitó durante 30 min y se extrajo con CH2Cl2 (5×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (70% de EtOAc-hexanos) proporcionando el diol 35a principal menos polar (118 mg, 56%) y el producto 35b diaestereomérico secundario más
10 polar (74 mg, 35%). Los diaestereómeros individuales se transfirieron cada uno por separado.
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Compuesto 36. Se añadió TBSOTf (177 µl, 0,77 mmol) a una solución del diol 35a (118 mg, 0,192 mmol), Et3N (267 µl, 1,92 mmol) y CH2Cl2 (5 ml) a 0ºC. Después de 25 min, la reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado, se extrajo con CH2Cl2 (3×), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (10% al
15 15% de EtOAc-hexanos) proporcionando el compuesto 36 (161 mg, 100%).
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Alcohol 37 Usando el procedimiento descrito previamente para la preparación del alcohol 28, el compuesto 36 (161 mg, 0,192 mmol) proporcionó el alcohol 37 (135 mg, 93%) después de la purificación por cromatografía ultrarrápida (20% al 40% de EtOAc-hexanos).
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secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (10% al 20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído 38 (127 mg, 95%).
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B2086, B2102. Cada uno de los diaestereómeros obtenidos anteriormente se llevó por separado al producto final de 5 un modo similar al descrito en el Esquema 6 para B1794. El diaestereómero 35a proporcionó B2086. El diaestereómero 35b proporcionó B2102.
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B2088 Se añadió NalO4 a una solución de B2086 (1 mg, 1,29 µmol) en MeOH-H2O (4:1, 1 ml) a ta. Después de 30 min, la mezcla de reacción se diluyó con H2O, se extrajo con CH2Cl2 (6×), se secó sobre Na2SO4 y se concentró 10 proporcionando B2088 (1,2 mg).
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B2091 Se añadió NaBH4 (0,013 M en EtOH, 20 µl, 0,27 µmol) a una solución de B2088 (1 mg, 1,29 µmol) en MeOHCH2Cl2 (4:1. 0,5 ml) a -78ºC. Periódicamente se añadió NaBH4 adicional con una estrecha monitorización de la reacción por CCF (se requirió un total de 220 µl de la solución de NaBH4). La mezcla de reacción se inactivó a 0ºC con NH4Cl acuoso saturado, se agitó durante 20 min a ta y se extrajo con CH2Cl2 (6×). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (7% de MeOH-EtOAc) proporcionando B2091 (0,40 mg, 50%).
Síntesis de B1933:
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10 Alcohol 303 Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 23 ml, 0,012 mol) durante 30 min a una solución del alqueno 302 (1,51 g, 0,00386 mol) en THF (40 ml) a 0ºC. Después de agitar a ta durante 80 min, la mezcla se enfrió a 0ºC y cuidadosamente se añadió H2O (80 ml) seguida de NaBO3•4 H2O (4,2 g, 0,027 mol). La mezcla se agitó vigorosamente a ta durante 2,3 h, luego se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (50% de
15 EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 303 (1,37 g, 87%).
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Aldehído 304 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (88 µl, 1,00 mmol) a una solución de DMSO (142 µl, 2,00 mmol) en CH2Cl2 (20 ml) a -78ºC. Después de 30 min se añadió una solución del alcohol 303 (137 mg, 0,335 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) y se agitó a -78ºC durante 1 h. Se añadió Et3N (420 µl, 3,01 mmol) y después de 10 min la reacción 20 se agitó durante 10 min a 0ºC, momento en el que se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla resultante se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se
concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído intermedio 304 (0,114 g, 84%) que se usó inmediatamente en la siguiente etapa.
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Alcohol 305 Se añadió TBAF (1 M en THF, 5 µl, 0,005 mmol) a una solución del aldehído 304 (0,114 g, 0,27 mmol)
5 en CF3TEM (0,5 M en THF, 1,1 ml, 0,54 mmol) a 0ºC. Después de 20 min se añadió una segunda porción de TBAF (1 M en THF, 100 µl, 0,1 mmol) y la mezcla se agitó durante 10 min, momento en el que se añadió gota a gota TBAF en exceso (1 M en THF, 270 µl, 0,27 mmol) para escindir el éter silílico intermedio. Después de 30 min, la mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos se lavaron con H2O, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (50% de EtOAc-hexanos)
10 proporcionando el alcohol 305 (123 mg, 95%) como una mezcla 1:1 inseparable de isómeros.
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Éter silílico 306 Se añadió TBSOTf (265 µl, 1,16 mmol) a una solución del alcohol 305 (123 mg, 0,257 mmol) y Et3N (430 µl, 3,08 mmol) en CH2Cl2 (8 ml) a 0ºC. Después de agitar a ta durante 20 h se añadió NaHCO3 acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH3Cl3 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se
15 secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter silílico 306 (148 mg, 97%).
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Alcohol 307 Se añadió gota a gota LAH (1 M en THF, 220 µl, 0,22 mmol) a una solución del éter silílico 306 (131 mg, 0,22 mmol) en Et2O (5 ml) a 0ºC. Después de 20 min se añadieron cuidadosamente H2O y NaOH 1 M. La 20 mezcla se agitó a ta 30 min, se filtró a través de lana de vidrio, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 307 (112 mg, cuant.).
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Alqueno 309 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (58 µl, 0,66 mmol) a una solución de DMSO (94 µl, 1,3 mmol) en CHCl2 (10 ml) a -78ºC. Después de 30 min se añadió una solución del alcohol 307 (112 mg, 0,22 mmol) en CH2Cl2 (3 ml). Después de 1 h se añadió Et3N (276 µl, 1,98 mmol) y después de 10 min a -78ºC la reacción se agitó a 0ºC durante 10 min. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos
5 orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído 308 (101 mg, 91%) que se usó inmediatamente en la siguiente etapa.
Se añadió gota a gota n-BuLi (1,63 M en THF, 200 µl, 0,33 mmol) a una solución de CH3PPh3Br (118 mg, 0,33 mmol) en THF (3 ml) y DMSO (1,2 ml) a 0ºC. Después de 70 min se añadió una solución del aldehído 308 (101 mg,
10 0,20 mmol) en THF (3 ml) y después de 10 min a 0ºC la reacción se agitó a ta durante 1 h. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alqueno 309 (90,9 mg, 90%).
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15 Alcohol 310 Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 17 ml, 8,45 mmol) a una solución del alqueno 309 (1,06 g, 2,11 mmol) en THF (30 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 2,5 h a ta, la reacción se enfrió a 0ºC y se añadió cuidadosamente H2O (60 ml) seguido de NaBO3•4 H2O (3,25 g, 21,1 mmol). La mezcla se agitó vigorosamente a ta durante 2 h, luego se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al
20 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 310 (0,920 g, 84%).
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Pivaloato 311 Una mezcla del alcohol 310 (65,8 mg, 0,0126 mmol), piridina (61 µl, 0,76 mmol) y PvCl (23 µl, 0,189 mmol) en CH2Cl2 (3 ml) se agitó a ta durante 5 h. Una segunda reacción utilizando el alcohol 310 (0,92 g, 1,76 mmol) se ejecutó bajo condiciones similares y ambas reacciones se combinaron durante el tratamiento final: se añadió
25 NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el pivaloato 311 (1,08 g, cuant).
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Alcohol 312 Una mezcla del éter 311 (0,811 g, 1,33 mmol), DDQ (6,1 g, 27 mmol) y 10:1 de BuOH:tampón fosfato a
30 pH 7 (42 ml) en CH2Cl2 (84 ml) se agitó vigorosamente en la oscuridad a ta durante 1,5 h, momento en el que se añadió DDQ adicional (1,0 g, 4,4 mmol). Después de 1 h se añadió NaHCO3 acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con NaHCO2 acuoso saturado y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 312 (0,56 g, 87%), además del material de partida 311 recuperado (97 mg, 12%).
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5 Cetona 313 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (21 µl, 0,12 mmol) a una solución de DMSO (34 µl, 0,48 mmol) en CH2Cl3 (3 ml) a -78ºC. Después de 1 h se añadió una solución del alcohol 312 (39,4 mg, 0,081 mmol) en CH2Cl2 (1,5 ml) y la mezcla se agitó durante 1,5 h. Se añadió Et3N (100 µl, 0,73 mmol) y después de 10 min la mezcla se calentó hasta 0ºC. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CF2Cl3 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía
10 ultrarrápida (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando la cetona 313 (36,6 mg, 93%) que se usó inmediatamente en la siguiente etapa.
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Alqueno 314 Se añadió gota a gota reactivo de Tebbe (~0,65 M en tolueno, 720 l,0,47 mmol) a una solución de la cetona 313 (151 mg, 0,31 mmol) en THF (5 ml) a 0ºC. Después de 15 min se añadió cuidadosamente H2O y la
15 mezcla se extrajo con EtoAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alqueno 314 (139 mg, 93%).
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Alcohol 315 Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 6,0 ml, 2,9 mmol) a una solución del alqueno 314 (468
20 mg, 0,97 mmol) en THF (10 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó a ta durante 2 h, momento en el que se añadió 9-BBN adicional (0,5 M en THF, 500 µl, 0,25 mmol). Después de 2,5 h, la mezcla se enfrió a 0ºC y se añadieron cuidadosamente H2O (10 ml) seguido de NaBO3•4 H2O (1,5 g, 9,7 mmol). La mezcla se agitó vigorosamente a ta durante 5 h, se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (gradiente del
25 20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 315 (0,47 g, 97%).
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Alcohol 316 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (246 µl, 2,82 mmol) a una solución de DMSO (400 µl, 5,64 mmol) en CH2Cl2 (40 ml) a -78ºC. Después de 1 h se añadió una solución del alcohol 315 (0,47 g, 0,94 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) y la mezcla se agitó durante 1 h. Se añadió Et3N (1,2 ml, 8,5 mmol), y después de 10 min la mezcla 5 se calentó hasta 0ºC y se agitó durante 10 min. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El aldehído bruto se agitó en CH2Cl2 (20 ml) y Et3N (2 ml) a ta durante la noche. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (30% de EtOAc-hexanos) proporcionado el
10 aldehído epimerizado que se disolvió inmediatamente en 1:1 de Et2O:EtOH (10 ml) y se enfrió a 0ºC. Se añadió NaBH4 (35 mg, 0,94 mmol) y después de 10 min la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con EtOAc (3×) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 316 (0,410 g, rendimiento del 87% para las 3 etapas).
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Éter 317 Se combinaron el alcohol 316 (60,7 mg, 0,12 mmol) y MPMOTCI (0,10 g, 0,36 mmol), se azeotropizaron en tolueno (3×) y se secaron a alto vacío durante la noche. Se añadió CH2Cl2 (3 ml) y la mezcla se enfrió a 0ºC. Se añadió BF3•OEt2 (aprox. 1 µl, 0,01 mmol) y después de agitar durante 10 min la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×) y los extractos combinados se lavaron con salmuera, se
20 secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter 317 (55,4 mg, 74%).
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Alcohol 318 Se añadió gota a gota LAH (1 M en THF, 104 µl, 0,104 mmol) a una solución del éter 317 (54 mg, 0,087 mmol) en Et2O (5 ml) a 0ºC. Después de 30 min se añadieron cuidadosamente H2O y NaOH 1 M. La mezcla se agitó 25 a ta durante 10 min, se filtró a través de lana de vidrio, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (30%-50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 318 (45,5 mg, 98%).
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Aldehído 319 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (11 µl, 0,13 mmol) a una solución de DMSO (18 µl, 0,25 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) a -78ºC. Después de 1,8 h se añadió una solución del alcohol 318 (22,6 mg, 0,042 mmol) en CH2Cl2 (1 ml) y la mezcla se agitó durante 1 h. Se añadió Et3N (53 µl, 0,38 mmol) y después de 10 min la reacción se calentó hasta 0ºC y se agitó 10 min. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl3 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído 319 (21,7 mg, 97%).
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B1933. De un modo similar al descrito en el Esquema 6 para la síntesis de B1794, el producto intermedio 319 se 10 convirtió en B1933. HRMS (FAB): calc. para CH41H57F3O11 + H 783,3931. Hallado: 783,3940.
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se agitó a ta durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó luego con H2O (3 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (6×) y EtOAc (2×). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se purificaron por cromatografía en columna (5% de MeOH-CH2Cl2) dando el aldehído deseado.
Este material se disolvió en THF (0,1 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con CF3TMS 0,5 M en THF (30 µl, 15 mmol)
5 seguido de TBAF 0,05 M en THP (5 ml, 0,025 mmol). Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (2 ml) y H2O (1 ml), se extrajo con EtOAc (6×), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando el éter de bis-TMS bruto.
Este material se disolvió en THP (0,5 ml) y se trató con TBAF 1 M en THF que contenía clorhidrato de imidazol 0,5 M (8 µl, 8 µmol) a ta durante 30 min. La mezcla de reacción se eluyó a través de una columna de SiO2 (50% de EtOAc
10 hexanos a EtOAc) proporcionando el producto intermedio de diol.
Una mezcla de este producto y peryodinano de Dess-Martin (10 mg, 24 mmol) en CH2Cl2 (0,5 ml) se agitó a ta durante 1 h, se diluyó con Et2O (5 ml) y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y se purificó por CCF preparativa (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando B1942 (1,5 mg, 72% para las 5 etapas). HRMS (FAB): calc. para C�40H53F3O11 + H 767,3516. Hallado: 767,3542
15 Síntesis de B2070/B2073:
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Alcohol 401 Una mezcla de NaIO4, (375 mg, 1,74 mmol), X400 (674 mg, 1,58 mmol), MeOH (16 ml) y H2O (4 ml) se agitó a ta durante 1 h. Después de la dilución con H2O, la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (4x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na3SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida 20 (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído intermedio (570 mg), que se disolvió inmediatamente en DMF (15 ml). Se añadieron indio (275 mg, 2,4 mmol) y 3-bromo-3,3-difluoropropeno (240 µl, 2,4 mmol) y después de agitar a ta durante 17 h se añadieron H2O y HCl 0,1 M. La mezcla se extrajo con EtOAc (3x) y los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con H2O y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 401 como
25 una mezcla 1:1 de isómeros C34 (605 mg, 81% para las 2 etapas).
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Diol 402 Una mezcla de OsO4 (1 cristal), alcohol 401 (605 mg, 1,28 mmol), N-óxido de 4-metil-morfolina (0,45 g, 3,84 mmol), acetona (30 ml) y H2O (6 ml) se agitó a ta durante 29 h. Se añadieron OsO4 adicional (3 cristales) y N-óxido de 4-metilmorfolina (0,1 g, 0,8 mmol) y después de 2 días se añadió Na2S2O3 acuoso saturado. La mezcla se 30 extrajo con CH2Cl2 (6x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El triol intermedio bruto se disolvió inmediatamente en 4:1: de MeOH:H2O (25 ml) y se añadió NalO4 (0,41 g,1,9 mmol). Después de agitar vigorosamente a ta durante 2 h, la mezcla se diluyó con H2O, se extrajo con CH2Cl2 (3×) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron proporcionando el aldehído intermedio que se disolvió inmediatamente en 1:1 de EtOH-Et2O (30 ml) y se enfrió a 0ºC. Se añadió NaBH4 (48 mg, 1,3 mmol)
35 y después de 20 min la reacción se inactivó con H2O y se extrajo con CH2Cl2 (4×). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (50% de EtOAc-hexanos) proporcionando el diol 402 (485 mg, 80% durante 3 etapas).
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Éter silílico 403 Se añadió gota a gota TBSOTf (2,3 ml, 10 mmol) a una mezcla del diol 402 (485 mg, 1,0 mmol), Et3N (2,8 ml, 20 mmol) y CH2Cl2 (30 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 1 h a ta se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter silílico 403 (668 mg, 95%).
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Alcohol 404 Se añadió gota a gota LAH (1 M en THF, 2,8 ml, 2,8 mmol) a una solución del éter silílico 403 (668 mg, 0,948 mmol) en Et2O (60 ml) a 0ºC. Después de 15 min se añadieron cuidadosamente H2O y NaOH 1 M. La mezcla 10 se agitó a ta durante 20 min, se filtró a través de lana de vidrio, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 404 (500 mg, 85%).
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Aldehído 405 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (210 µl, 2,42 mmol) a una solución de DMSO (345 µl, 4,84 mmol) en CH2Cl2 (30 ml) a -78ºC. Después de 1 h se añadió una solución del alcohol 404 (500 mg, 0,806 mmol) en
15 CH2Cl2 (10 ml). Después de 40 min se añadió Et3N (1,0 ml, 7,2 mmol). Después de agitar a -78ºC durante 10 min, la mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC y se agitó durante 10 min adicionales. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con H2O, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. La purificación por cromatografía ultrarrápida (30% de EtOAc-hexanos) proporcionó el aldehído 405 (486 mg, 98%) que se usó inmediatamente en la siguiente etapa.
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Alqueno 406 Se añadió gota a gota n-BuLi (1,63 M, 860 µl, 1,4 mmol) a una solución de CH3PPh3Br (500 mg, 1,4 mmol) en THF (15 ml) y DMSO (6 ml) a 0ºC. Después de 1 h se añadió una solución del aldehído 405 (486 mg) en THF (15 ml). La mezcla de reacción se calentó hasta ta y se agitó durante 30 min. Se añadió NH4Cl acuoso saturado, la mezcla se extrajo con EtOAc (3x) y los extractos combinados se lavaron sucesivamente con H2O y
25 salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alqueno 406 (450 mg, 93%).
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Éster 407 Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 9,0 ml, 4,5 mmol) a una solución del alqueno 406 (0,460 g, 0,746 mmol) en THF (10 ml) a 0ºC. Después de calentarse hasta ta, la mezcla se agitó durante 3 h y se añadieron dos porciones adicionales de 9-BBN (0,5 M en THF, 3,0 ml, 1,5 mmol) a intervalos de 30 min. La mezcla de reacción 5 se volvió a enfriar hasta 0ºC, tras lo cual se añadieron cuidadosamente THF (10 ml), H2O (10 ml) y NaBO3·4 H2O (1,72 g, 11,3 mmol). La mezcla se agitó vigorosamente a ta durante 1,5 h y se añadió NaBO3·4 H2O adicional (1,0 g, 6,5 mmol). Después de 2 h la mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol intermedio (509 mg) que se disolvió inmediatamente en
10 CH2Cl2 (10 ml) y se trató con piridina (600 µl, 7,5 mmol) y PvCl (275 µl, 2,2 mmol). Después de 6 h se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éster 407 (423 mg, 79% para las 2 etapas).
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15 Alcohol 408 Una mezcla del éster 407 (11 mg, 0,015 mmol) y Pd(OH)2/C (10 mg) en EtOAc (500 µl) se agitó vigorosamente bajo una atmósfera de H2 a ta durante 6 h. La mezcla se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 408 (9,4 mg, cuant).
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Alqueno 409 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (7 µl, 0,075 mmol) a una solución de DMSO (11 µl, 0,15 mmol)
20 en CH2Cl2 (2 ml) a -78ºC bajo N2. Después de 40 min se añadió una solución del alcohol 408 (15,2 mg, 0,025 mmol) en CH2Cl2 (1 ml) y la reacción se agitó a -78ºC durante 1 h. Se añadió Et3N (31 µl, 0,22 mmol) y después de agitar durante 10 min la mezcla se calentó hasta 0ºC. Después de 10 min la mezcla de reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3×) Los extractos combinados se lavaron sucesivamente con H2O y salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. Después de la cromatografía ultrarrápida (30% de EtOAc
25 hexanos), la cetona intermedia (13 mg) se disolvió inmediatamente en THF (500 µl) y se trató con reactivo de Tebbe (~0,65 M en tolueno, 62 µl, 0,040 mmol) a 0ºC. Después de 1,5 h se añadió reactivo de Tebbe adicional (~0,65 M en tolueno, 62 µl, 0,040 mmol) y después de 10 min se añadieron cuidadosamente H2O y luego salmuera. La mezcla se extrajo con EtOAc (3×) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (10% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alqueno 409 (11,9 mg, 80% para las 2 etapas).
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Alcohol 410 Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 1,5 ml, 0,72 mmol) a una solución del alqueno 409 (0,144 g, 0,242 mmol) en THF (2 ml) a 0ºC. Después de calentar hasta ta, la mezcla se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se volvió a enfriar hasta 0ºC, tras lo cual se añadieron cuidadosamente THF (2 ml), H2O (2 ml) y NaBO3·4 H2O (0,38 g, 2,4 mmol). La mezcla se agitó vigorosamente a ta durante 4 h, se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 410 (0,140 g, 94%).
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10 Alcohol 411 Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (26 µl, 0,30 ml) a una solución de DMSO (43 µl, 0,60 mmol) en CH2Cl2 (4 ml) a -78ºC. Después de 1 h se añadió una solución del alcohol 410 (57 mg, 0,093 mmol) en CH2Cl2 (2 ml). Después de 45 min se añadió Et3N (125 µl 0,90 mmol). Después de agitar a -78ºC durante 10 min, la mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC y se agitó durante 10 min adicionales. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4
15 y se concentraron. El producto bruto se disolvió en CH2Cl2 (4 ml), se trató con Et3N (400 µl) y se agitó a ta durante 15 h. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el aldehído intermedio (48 mg), que se disolvió inmediatamente en 1:1 de Et2O-EtOH (4 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con NaBH4 sólido (-4 mg, 0,09 mmol). Después de agitar durante 15 min
20 se añadió cuidadosamente NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (20% al 30% de EtOAc-hexanos) proporcionando el alcohol 411 (45,6 mg, 80% para las 3 etapas).
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412A y 412B Se combinaron el alcohol 411 (120 mg, 0,196 mmol) y MPMOTCI (0,17 g, 0,59 mmol), se
25 azeotropizaron en tolueno (3x) y se secaron a alto vacío durante 1 h. Se añadió CH2Cl2 (9 ml) y la mezcla se enfrió a 0ºC. Se añadió gota a gota BF3·OEt2 (0,016 M en CH2Cl2, 125 µl, 0,002 mmol) y después de agitar durante 20 min la reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3x) y los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por CCF preparativa (20% de EtOAc-hexanos) proporcionando el éter de MPM intermedio que contuvo algunas impurezas que corrían próximas.
30 Este material se disolvió inmediatamente en Et2O (10 ml) y se trató con LAH (1 M en THF, 300 µl, 0,300 mmol) a 0ºC. Después de 10 min se añadieron H2O y NaOH 1 M, y después de agitar durante 10 min a ta la mezcla se filtró a través de Celite, se concentró y se purificó por CCF preparativa (35% de EtOAc-hexanos) proporcionando 412A (49 mg, 39% para las 2 etapas) como un isómero C34 único y 412B (46 mg, 36% para las 2 etapas) como una mezcla ~9:1 de isómeros C34.
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B2070 y B2073. De un modo similar al descrito en los Esquemas 4 y 6 para la síntesis de B1794, los productos intermedios 412A y 412B se convirtieron en B2070 y B2073, respectivamente. Para B2070: HRMS (FAB): calc. para C41H58F2O12 + Na 803,3794. Hallado: 803,3801. Para B2073: HRMS (FAB): calc. para C41H58F2O12 + Na 803,3793. Hallado: 803,3781
Síntesis de B1963:
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Diol 501 (64) Se añadieron NaHCO3 acuoso saturado (21 ml) y KBr (89 mg, 0,75 mmol) a una solución del diol 10a
10 (1,35 g, 3,4 mmol) en CH2Cl2 (34 ml). La mezcla se enfrió a 0ºC y se añadieron secuencialmente 4-metoxi-2,2,6,6tetrametil-1-piperidiniloxi (0,05 M en CH2Cl2, 7,45 ml, 0,37 mmol) y NaOCl (0,07 M en H2O, 5,6 ml, 0,39 mmol). Después de 1 h, la mezcla de reacción se inactivó con Na2S2O3 acuoso saturado, se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (3x). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se disolvieron en THF (21 ml).
15 Después de enfriarse hasta 0ºC se añadieron secuencialmente CF3TEM (1,5 g, 10,5 mmol) y TBAF (0,1 M en THF, 680 µl, 0,068 mmol). Después de agitar durante 40 min se añadió TBAF adicional (1 M en THF, 8,3 ml, 8,3 mmol). Después de 30 min la reacción se inactivó con H2O y se extrajo con EtOAc (3×). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (30%, 40%, 50% de EtOAc-hexanos seguido de EtOAc) proporcionando una mezcla 2:1 de los dioles
20 (553 mg, 35%). La separación por MPLC (1,5% de MeOH-CH2Cl2) dio el isómero 501 principal más polar (64) (340 mg, 22%) y el isómero secundario menos polar (152 mg, 10%).
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B1963. De un modo similar al descrito en los Esquemas 4 y 6 para la síntesis de B1794, el producto intermedio 501 se convirtió en B1963.
Síntesis de B2320 y análogos relacionados
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Estos compuestos se preparan tratando B2294 con una amina apropiada en un disolvente tal como metanol durante un periodo de unas pocas horas a varios días. El progreso de la reacción puede monitorizarse por cromatografía en capa fina. Un procedimiento de tratamiento final estándar, muy conocido para aquellos expertos en la materia, proporciona los compuestos deseados. El siguiente procedimiento es para preparar ER803868: sin embargo, este
10 procedimiento es general y puede usarse para preparar cualquier análogo deseado.
Síntesis de ER803868
A una solución de B2294, 1,2 mg, en metanol, 0,5 ml, se añadió morfolina, 0,012 ml. La mezcla se agitó durante 10 días con morfolina adicional, 0,012 ml, añadiéndose en los días 1, 2, 3, 4 y 8. La mezcla se purificó luego por cromatografía dando 1,4 mg del compuesto deseado.
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B2320 R = N,N-dimetilamino B2330 R = N-isopropilamino B2336 R = N-metilamino B2339 R = N-t-butilamino B2417 R = N-2-hidroxietilamino B2418 R = N-piperazinilo B2489 R = N,N-bis-(2-hidroxietil)amino B2490 R = N-1,3-dihidroxi-2-propilamino B2491 R = N-bencilamino ER803834 R = N-piperidinilo ER803835 R = N-pirrolidinilo ER803836 R = N-3-(R)-hidroxipirrolidinilo ER803843 R = N-homopiperidinilo ER803845 R = N-para-metoxibencilamino ER803846 R = N-fenetilamino ER803851 R = N-2-(S-hidroximetil)pirrolidinilo ER803852 R = N-2-(R-hidroximetil)pirrolidinilo ER803868 R = N-morfolinilo ER803869 R = N-etilamino ER803870 R = N-imidazoílo ER803883 R = N,N-dietilamino ER803884 R = N-para-clorobencilamino
D. Actividad farmacológica
Muchos de los fármacos individualmente desvelados se probaron para actividad in vitro e in vivo (véase la Tabla 1, más adelante). Los procedimientos de cribado incluyeron un ensayo de inhibición del crecimiento celular in vivo
5 estándar usando células cancerosas de colon humano DLD-1 (número de acceso de ATCC CCL 221) en una forma de placa de microtitulación de 96 pocillos (Finlay, GJ. y col. Analytical Biochemistry 139:272-277, 1984), un ensayo de reversibilidad del bloque mitótico de U937 (número de acceso de ATCC CRL 1593) (descrito a continuación) y, en algunos casos, un ensayo de inhibición del crecimiento in vivo de xenoinjerto de tumor de melanoma humano LOX (véase la Tabla 1). También se examinó la estabilidad química a la degradación de esterasa.
10 Ensayo de reversibilidad del bloque mitótico de U937
Se añadieron células de linfoma histiocítico humano U937 a matraces de cultivo de tejido de 75 cm2 como 2,5 x 106 células en 22,5 ml de medio RPMI 1640 que contenía 10% de suero bovino fetal. Se dejó que las células se adaptaran al cultivo durante 36 h de incubación a 37ºC en una atmósfera humidificada que contenía 5% de CO2. Cada fármaco de prueba se añadió luego a un matraz como 2,5 ml de 10x concentración final. La concentraciones
15 finales alcanzadas fueron 0,1-1000 nM, en incrementos semilogarítmicos, durante un total de 10 etapas de concentración que incluyeron un matraz de control libre de fármaco que recibió 2,5 ml de medio. Las células se incubaron con fármaco durante un periodo de pretratamiento de 12 h a 37ºC en una atmósfera humidificada que contenía 5% de CO2.
El contenido se sacó de cada matraz y se centrifugó a 300 x g durante 10 min a temperatura ambiente, después de
20 lo cual el medio que contenía fármaco se quitó del sedimento de células. Las células se resuspendieron en 25 ml de medio libre de fármaco caliente y se centrifugaron a 300 x g durante 10 min a temperatura ambiente. Después de quitarse el medio del sedimento de células, las células se resuspendieron en 35 ml de medio libre de fármaco caliente, se transfirieron a matraces nuevos y de cada matraz se sacó inmediatamente una muestra de 10 ml de células, se procesaron inmediatamente como se describe más adelante y se guardaron para el posterior análisis del
25 ciclo celular (0 horas de lavado del fármaco).
La incubación de los 25 ml de células restantes continuó en medio libre de fármaco durante otras 10 h. De cada matraz se sacó una muestra de 10 ml de células, se procesó inmediatamente y se aguardó para el posterior análisis del ciclo celular (10 horas de lavado del fármaco) y a cada matraz de incubación se añadieron 10 ml de medio de sustitución fresco. La incubación de células en medio libre de fármaco continuó durante 5 días. En el día dos, de
30 cada matraz se sacaron 20 ml de medio de células y se sustituyeron con 20 ml de medio fresco. La viabilidad de células se cuantificó después de 5 días mediante técnicas de exclusión con azul de tripano usando recuento del hemocitómetro.
Las células se procesaron para análisis del ciclo celular usando modificaciones del procedimiento publicado en la sección 1.11 del libro de consulta Becton Dickinson Immunocytometry Systems (Preparación de células completas
35 fijadas en alcohol de suspensiones para análisis de ADN). Brevemente, cada muestra de 10 ml de células sacada de los matraces a 0 y 10 horas del lavado del fármaco se centrifugó por separado a 300 x g durante 10 min. Después de quitar el medio del sedimento de células, las células se resuspendieron en 3 ml de solución salina fría. Se añadieron lentamente siete mililitros de etanol frío al 100% con agitación con vórtex vigorosa. Las muestras de células tratadas con etanol de los periodos de 0 horas y 10 horas del lavado de compuesto se almacenaron durante la noche a 4ºC. Las células tratadas con etanol se centrifugaron a 300 x g durante 10 min, se quitó el etanol y las células se lavaron luego en 10 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS). Las células se resuspendieron en 0,5 ml de ribonucleasa A 0,2 mg/ml (Sigma nº R-5503) en PBS y se incubaron en un baño de agua a 37ºC durante
5 30 min.
Las células se transfirieron a tubos de citometría de flujo apropiados y a cada tubo se añadieron 0,5 ml de yoduro de propidio 10 mg/ml (PI) (Sigma nº P4170) en PBS. Las células se incubaron con PI a temperatura ambiente en la oscuridad durante al menos 15 min antes del análisis con un citómetro de flujo (citómetro de flujo Becton Dickinson FACScan o equivalente). Las células deberán analizarse dentro de una hora y mantenerse en la oscuridad a 4ºC 10 hasta que estén listas. El análisis del ciclo celular se realizó en células de 0 horas y 10 horas usando medición de citometría de flujo de la intensidad de fluorescencia celular. La intensidad de la fluorescencia del yoduro de propidio para cada célula se midió en una escala de amplificación lineal con acontecimientos duplicados ignorados usando discriminación de doblete. Los resultados obtenidos de analizar 15.000 células se presentaron como un histograma con intensidad de fluorescencia creciente en el eje x y el número de células a un nivel de intensidad particular en el
15 eje y.
La intensidad de la tinción con PI depende de la cantidad de ADN en la célula, por lo que es posible identificar células en diversas fases del ciclo celular tales como células que todavía no han sintetizado ADN desde la última mitosis (fase G1), células que están en fases intermedias de la síntesis de ADN (fase S) y células que han duplicado su complemento de ADN y están listas para dividirse (fase G2). Las células que se bloquean en la fase de mitosis del 20 ciclo celular también tienen el doble de cantidad de ADN en comparación con las células de fase G1. Si todas las células se bloquean en la mitosis, no hay células de fase G1, pero si el bloqueo se elimina cuando se elimina el compuesto, las células completan la mitosis y reaparecen en la fase G1. Por tanto, el número de células que así reaparecen en la fase G1 o S es una medida del número de células que recientemente han completado la mitosis. Para cada muestra a 0 y 10 horas después de la eliminación del compuesto se cuantificó el porcentaje de células 25 que completó la mitosis (como el número de células que reaparecen en la fase G1) y se representó en función de la concentración inicial de compuesto usada durante el periodo de pretratamiento de 12 horas. En la misma gráfica se superpuso el porcentaje de células todavía viables 5 días después del lavado del fármaco. Puede determinarse una relación entre la concentración de compuesto requerida para bloquear completamente todas las células en la mitosis a 0 horas y la concentración requerida para mantener el bloqueo 10 horas después de la eliminación del compuesto.
30 Esto se tomó como una medida de la reversibilidad de un compuesto, indicando relaciones próximas o iguales a uno compuestos antitumorales in vivo probablemente potentes (véase la Tabla 1, columnas 4-6).
Tabla 1
Datos de inhibición y reversibilidad in vitro
DLD-1*
Bloqueo mitótico completo
Relación de reversibilidad
Compuesto
CI50 media, mn
SB
0 horas, nM**
10 horas, uM‡
B1793
0,93
0,04
3
44
14,7
B1794
12,20
0,72
B1918
1,27
0,12
B1920
2,00
0,15
B1921
24,00
1,15
B1922
0,53
0,01
3
30
10,0
B1930
0,87
0,03
B1933
0,79
0,16
B1934
1,05
0,21
3
30
10,0
B1939
19,34
2,36
12
12
1,0
B1940
5,43
0,62
-
B1942
0,60
0,03
3
30
10,0
B1963
0,56
0,04
3
20
6,7
B1973
1,15
0,24
B1984
1,01
0,15
B1987
1,82
0,21
B1988
2,67
1,02
B1990
1,30
0,06
B1991
0,69
0,03
B1992
0,86
0,07
B1998
1,23
0,13
B2003
1,21
0,12
B2004
0,63
0,04
B2008
2,63
0,63
B2010
0,71
0,12
B2011
1,81
0,52
(cont.)
Datos de inhibición y reversibilidad in vitro
DLD-1*
Bloqueo mitótico completo Relación de reversibilidad
Compuesto CI50 media, mn
SB 0 horas, nM** 10 horas, uM‡
B2013
0,49 0,07 2 30 15,0
B2014
0,87 0,09
B2015
2,78 0,23
B2016
0,66 0,06
B2019
0,82 0,07
B2034
0,74 0,03
B2035
0,76 0,09
B2037
0,66 0,11
B2039
0,91 0,08
B2042
1,93 0,11 3 100 33,3
B2043
1,70 0,06
B2070
0,64 0,09 3 30 10,0
B2073
0,89 0,15
B2086
11,17 1,96
B2088
1,23 0,12
B2090
0,52 0,04 2 10 5,0
B2091
1,36 0,07 3 30 10,0
B2103
3,47 0,22
B2136
5,23 1,04 3 3 1,0
B2294
0,80 0,01
B2320
1,20 0,17 1 10 10,0
B2330
4,40 0,42 7 7 1,0
B2336
3,33 0,09 10 10 1,0
B1339
4,30 0,21 3 3 1,0
B2417
12,67 0,33 10 10 1,0
B2418
3,63 0,17 10 10 1,0
B2489
14,67 2,03 10 10 1,0
B2490
35,67 3,33 100 100 1,0
B2491
0,92 0,14 2 10 6,7
ER803834
0,47 0,08 1 10 10,0
ER803835
15,33 0,33 10 10 1,0
ER803836
1,97 0,12 3 10 3,3
ER803843
0,49 0,05 1 10 10,0
ER803845
1,50 0,20 3 10 3,3
ER803846
1,16 0,10 1 10 10,0
ER803851
3,33 0,26 3 3 1,0
ER803852
3,03 0,50 3 10 3,3
ER803868
0,43 0,03 3 10 3,3
ER803869
4,13 0,64 3 3 1,0
ER803970
1,27 0,12 3 30 10,0
ER803883
1,02 0,04 1 10 10,0
ER803884
0,59 0,03 1 10 10,0
* = inhibición del crecimiento celular in vitro ** = antes del lavado ‡ = después del lavado
E. Uso
Los compuestos desvelados tienen actividad farmacológica, que incluye actividad antitumoral y antimitótica, como se
5 demuestra en la sección D anterior. Ejemplos de tumores incluyen melanoma, fibrosarcoma, leucemia monocítica, carcinoma de colon, carcinoma de ovario, carcinoma de mama, osteosarcoma, carcinoma de próstata, carcinoma de pulmón y fibroblastos transformados por ras.
La invención muestra composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de fórmula (I) y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las composiciones también pueden incluir una combinación de compuestos
10 desvelados, o una combinación de uno o más compuestos desvelados y otros agentes farmacéuticamente activos tales como un agente antitumoral, un agente inmunoestimulante, un interferón, una citocina, un agente anti-MDR o un agente antiangiogénico. Las composiciones pueden formularse para administración por vía oral, tópica, parenteral, intravenosa o intramuscular, o administración por inyección o inhalación. Las formulaciones también pueden prepararse para liberación controlada, incluyendo parches transdérmicos.
El uso de los compuestos desvelados para la preparación de un medicamento para inhibir el crecimiento tumoral en un paciente incluye la formulación de un medicamento que contiene una cantidad antitumoral eficaz de un compuesto o composición desvelado. Tal uso también contempla la preparación de un medicamento para uso en terapias de combinación que incluyen la coadministración de un compuesto de fórmula (I) antes, durante o después
5 de la administración de otro agente farmacéuticamente activo. Los procedimientos de administración pueden ser iguales o diferentes. La inhibición del crecimiento tumoral incluye un crecimiento de la célula o tejido expuesto al compuesto de prueba que es al menos el 20% inferior, y preferentemente el 30%, el 50% o el 75% inferior al crecimiento del control (ausencia de inhibidor conocido o compuesto de prueba).
Otras realizaciones
10 Las características esenciales de la invención pueden percibirse fácilmente a partir de la descripción anterior y las siguientes reivindicaciones.

Claims (36)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto que tiene la fórmula:
    imagen1
    en la que A es un esqueleto de hidrocarburo C1-6 saturado o C2-6 insaturado, estando dicho esqueleto sin sustituir o
    5 teniendo entre 1 y 10 sustituyentes, ambos inclusive, seleccionados independientemente de ciano, halógeno, azido, oxo y Q1; cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NR2R1, NR2(CO)R1, NR2(CO)(CO)R1, NR4(CO)NR2R1, NR2(CO)OR1, (CO)OR1, O(CO)R1, (CO)NR2R1 y O(CO)NR2R1; cada uno de R1, R2 y R4 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6,
    10 aminoalquilo C1-6, arilo C6-10, haloarilo C6-10, hidroxiarilo C6-10, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-10-alquilo C1-6, alquil C1-6-arilo C6-10, haloaril C6-10-alquilo C1-6, alquil C1-6-haloarilo C6-10, (alcoxi C1-3-aril C6)-alquilo C1-3, radical heterocíclico C2-9, radical heterocíclico C2-9-alquilo C1-6, heteroarilo C2-9 y heteroaril C2-9-alquilo C1-6; cada uno de D y D' se selecciona independientemente de R3 y OR3 en las que R3 es H, alquilo C1-3 o haloalquilo C13;
    15 n es 0 ó 1; E es R5 o OR5 en las que R5 se selecciona independientemente de H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 y aminoalquilo C1-6; G es O; cada uno de J y J' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o J y J' tomados conjuntamente son =CH2;
    20 Q es alquilo C1-3; T es etileno o etenileno; cada uno de U y U' es independientemente H, alcoxi C1-6 o alquilo C1-6; o U y U' tomados conjuntamente son =CH2; X es H o alcoxi C1-6; cada uno de Y e Y' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Y e Y' tomados conjuntamente son =O;
    25 y cada uno de Z y Z' es independientemente H o alcoxi C1-6; o Z y Z' tomados conjuntamente son =O; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que n es 0; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  3. 3. Un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que cada uno de D y D' se selecciona 30 independientemente de R3, alcoxi C1-3 y haloalquiloxi C1-3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  4. 4. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A comprende un esqueleto de hidrocarburo C1-6 saturado o C2-6 insaturado, tendiendo dicho esqueleto al menos un sustituyente seleccionado de ciano, halógeno, azido, oxo y Q1;
    cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NR2R1, NR2(CO)R1 y
    35 O(CO)NR2R1; n es 0; J y J' tomados conjuntamente son =CH2; Q es metilo; T es etileno;
    40 U y U' tomados conjuntamente son =CH2; X es H; cada uno de Y e Y' es H; y Z y Z' tomados conjuntamente son =O;
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    45 5. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo, amino, azido, halógeno y oxo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  5. 6.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A comprende un esqueleto de hidrocarburo saturado que tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo, amino y azido; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  6. 7.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A tiene al menos dos sustituyentes seleccionados independientemente de hidroxilo, amino y azido; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  7. 8.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A tiene al menos dos sustituyentes seleccionados independientemente de hidroxilo y amino; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  8. 9.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A tiene al menos un sustituyente hidroxi y al menos un sustituyente amino; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  9. 10.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que A tiene al menos dos sustituyentes hidroxilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  10. 11.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A comprende un esqueleto de hidrocarburo C2-4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  11. 12.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A comprende un esqueleto de hidrocarburo C3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  12. 13.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que A tiene un (S)-hidroxilo en el átomo de carbono alfa con respecto al enlace A del átomo de carbono al anillo que contiene G; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  13. 14.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que A comprende un esqueleto de hidrocarburo C1-6 saturado que tiene al menos un sustituyente seleccionado de hidroxilo y ciano; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  14. 15.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que cada Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1, OSO2R1, NH(CO)R1, NH(CO)(CO)R1 y O(CO)NHR1;
    cada R1 se selecciona independientemente de alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, arilo C6, haloarilo C6, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-arilo C6, haloaril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3- haloarilo C6, (alcoxi C1-3-aril C6)alquilo C1-3, radical heterocíclico C2-9, heteroarilo C2-9 y heteroaril C2-9-alquilo C1-6; uno de D y D' es metilo o metoxi, y el otro es H; n es 0; J y J' tomados conjuntamente son =CH2; Q es metilo; T es etileno; U y U' tomados conjuntamente son =CH2; X es H; cada uno de Y e Y' es H; y Z y Z' tomados conjuntamente son =O;
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  15. 16.
    Un compuesto según la reivindicación 15, en el que Q1 se selecciona independientemente de OR1, SR1, SO2R1 y OSO2R1 en las que cada R1 se selecciona independientemente de alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, arilo C6, haloarilo C6, alcoxi C1-3-arilo C6, aril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-arilo C6, haloaril C6-alquilo C1-3, alquil C1-3-haloarilo C6 y (alcoxi C1-3aril C6)-alquilo C1-3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  16. 17.
    Un compuesto de la siguiente estructura
    imagen1
  17. 18. Un compuesto de la siguiente estructura
    imagen1
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  18. 19.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso como un medicamento.
  19. 20.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la inhibición del crecimiento tumoral o cáncer.
  20. 21.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de cáncer.
  21. 22.
    Un compuesto según la reivindicación 20 o la reivindicación 21 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el tumor o el cáncer es melanoma, fibrosarcoma, leucemia monocítica, carcinoma de colon, carcinoma de ovario, carcinoma de mama, osteosarcoma, carcinoma de próstata o carcinoma de pulmón.
  22. 23.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de mama.
  23. 24.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de pulmón.
  24. 25.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de ovario.
  25. 26.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de próstata.
  26. 27.
    Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la inhibición de mitosis en una célula.
  27. 28.
    Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la preparación de un medicamento para uso uso en la inhibición del crecimiento tumoral o cáncer.
  28. 29.
    Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la preparación de un medicamento para su uso en el tratamiento de cáncer.
  29. 30.
    Uso según la reivindicación 28 o la reivindicación 29, en el que el tumor o el cáncer es melanoma, fibrosarcoma, leucemia monocítica, carcinoma de colon, carcinoma de ovario, carcinoma de mama, osteosarcoma, carcinoma de próstata o carcinoma de pulmón.
  30. 31.
    Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 28 a 30, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de mama.
    5 32. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 28 a 30, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de pulmón.
  31. 33.
    Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 28 a 30, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de ovario.
  32. 34.
    Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 28 a 30, en el que el tumor o el cáncer es carcinoma de próstata.
    10 35. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la preparación de un medicamento para su uso en la inhibición de mitosis en una célula.
  33. 36.
    Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
  34. 37.
    Un compuesto que tiene la fórmula:
  35. 38.
    Un compuesto que tiene la fórmula:
  36. 39.
    Un compuesto que tiene la fórmula:
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