ES2377910T3 - Producción de maltobionato - Google Patents
Producción de maltobionato Download PDFInfo
- Publication number
- ES2377910T3 ES2377910T3 ES08775209T ES08775209T ES2377910T3 ES 2377910 T3 ES2377910 T3 ES 2377910T3 ES 08775209 T ES08775209 T ES 08775209T ES 08775209 T ES08775209 T ES 08775209T ES 2377910 T3 ES2377910 T3 ES 2377910T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- maltobionate
- maltose
- oxidase
- production
- oxygen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- JYTUSYBCFIZPBE-ZNLUKOTNSA-N cellobionic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JYTUSYBCFIZPBE-ZNLUKOTNSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 78
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 75
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims abstract description 75
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 71
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 101710128063 Carbohydrate oxidase Proteins 0.000 claims description 48
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 31
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 31
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 22
- 108010018734 hexose oxidase Proteins 0.000 claims description 8
- 108010026119 cellobiose oxidase Proteins 0.000 claims description 5
- 108010001816 pyranose oxidase Proteins 0.000 claims description 2
- 241000223196 Microdochium nivale Species 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 51
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 34
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 34
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 24
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 18
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 17
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 17
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 17
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 16
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 16
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 15
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 15
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 15
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 13
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 9
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 9
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 8
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N lactobionic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 7
- JYTUSYBCFIZPBE-UHFFFAOYSA-N Maltobionic acid Natural products OC(=O)C(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O JYTUSYBCFIZPBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 6
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tripyridin-2-yl-1,3,5-triazine Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=NC(C=2N=CC=CC=2)=NC(C=2N=CC=CC=2)=N1 KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 4
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001459558 Monographella nivalis Species 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 238000002376 fluorescence recovery after photobleaching Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 4
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 3
- ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N xylenol orange Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)C(O)=C(C)C=2)=C1 ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 2
- 241000589513 Burkholderia cepacia Species 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000206575 Chondrus crispus Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 2
- 241000719900 Euthora cristata Species 0.000 description 2
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001147462 Gigartinaceae Species 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000228417 Sarocladium strictum Species 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical class OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- -1 such as Substances 0.000 description 2
- JYTUSYBCFIZPBE-QOKIMYEXSA-N (2r,3r,4r,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JYTUSYBCFIZPBE-QOKIMYEXSA-N 0.000 description 1
- LGQKSQQRKHFMLI-SJYYZXOBSA-N (2s,3r,4s,5r)-2-[(3r,4r,5r,6r)-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)OC1 LGQKSQQRKHFMLI-SJYYZXOBSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOQHWNPVNXSDDO-UHFFFAOYSA-N 3-bromoimidazo[1,2-a]pyridine-6-carbonitrile Chemical compound C1=CC(C#N)=CN2C(Br)=CN=C21 UOQHWNPVNXSDDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LJJZKMDEQVYRJX-UHFFFAOYSA-N 4,5,6-tripyridin-2-yltriazine Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=NN=NC(C=2N=CC=CC=2)=C1C1=CC=CC=N1 LJJZKMDEQVYRJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGQKSQQRKHFMLI-UHFFFAOYSA-N 4-O-beta-D-xylopyranosyl-beta-D-xylopyranose Natural products OC1C(O)C(O)COC1OC1C(O)C(O)C(O)OC1 LGQKSQQRKHFMLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001019659 Acremonium <Plectosphaerellaceae> Species 0.000 description 1
- 241001273919 Acremonium fusidioides Species 0.000 description 1
- 241000771239 Acremonium potronii Species 0.000 description 1
- 240000000662 Anethum graveolens Species 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 241001530056 Athelia rolfsii Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101000866627 Chondrus crispus Hexose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000002309 Collariella virescens Species 0.000 description 1
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQNRKWHRVIAKLP-UHFFFAOYSA-N D-xylobiose Natural products O=CC(O)C(O)C(CO)OC1OCC(O)C(O)C1O SQNRKWHRVIAKLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241001134782 Gigartinales Species 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241001480714 Humicola insolens Species 0.000 description 1
- 241000221775 Hypocreales Species 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000424755 Iridophycus Species 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241001147496 Mazzaella flaccida Species 0.000 description 1
- 241000947859 Microdochium Species 0.000 description 1
- 101000592678 Microdochium nivale Carbohydrate oxidase Proteins 0.000 description 1
- 241001363490 Monilia Species 0.000 description 1
- 241000226677 Myceliophthora Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000222393 Phanerochaete chrysosporium Species 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000086487 Podochilus ovalis Species 0.000 description 1
- 241000589538 Pseudomonas fragi Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 239000000589 Siderophore Substances 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 241001085826 Sporotrichum Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- CMQGYZBXVLFZQH-UHFFFAOYSA-N aminolead Chemical compound [Pb]N CMQGYZBXVLFZQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 108010019077 beta-Amylase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000013124 brewing process Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000005323 carbonate salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 150000001773 cellobioses Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- MQLVWQSVRZVNIP-UHFFFAOYSA-L ferrous ammonium sulfate hexahydrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O MQLVWQSVRZVNIP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N flavin mononucleotide Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000000797 iron chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229940075525 iron chelating agent Drugs 0.000 description 1
- 235000014058 juice drink Nutrition 0.000 description 1
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 1
- 229940099584 lactobionate Drugs 0.000 description 1
- 229940099563 lactobionic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000014666 liquid concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010746 mayonnaise Nutrition 0.000 description 1
- 239000008268 mayonnaise Substances 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- YIIQUYHVWRJXEM-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[[5-[3-[3-[[bis(carboxylatomethyl)amino]methyl]-4-hydroxy-5-methylphenyl]-1,1-dioxo-2,1$l^{6}-benzoxathiol-3-yl]-2-hydroxy-3-methylphenyl]methyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(CN(CC([O-])=O)CC([O-])=O)C(O)=C(C)C=2)=C1 YIIQUYHVWRJXEM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
- A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
- A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
- A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23B2/783—Microorganisms; Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
- A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
- A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
- A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23B2/779—Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/14—Pretreatment of feeding-stuffs with enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/163—Sugars; Polysaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C11/00—Fermentation processes for beer
- C12C11/003—Fermentation of beerwort
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
- C12C5/004—Enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
- C12C5/02—Additives for beer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C7/00—Preparation of wort
- C12C7/04—Preparation or treatment of the mash
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12H—PASTEURISATION, STERILISATION, PRESERVATION, PURIFICATION, CLARIFICATION OR AGEING OF ALCOHOLIC BEVERAGES; METHODS FOR ALTERING THE ALCOHOL CONTENT OF FERMENTED SOLUTIONS OR ALCOHOLIC BEVERAGES
- C12H1/00—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages
- C12H1/12—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages without precipitation
- C12H1/14—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages without precipitation with non-precipitating compounds, e.g. sulfiting; Sequestration, e.g. with chelate-producing compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
Abstract
Proceso para producir maltobionato comprendiendo las etapas siguientes: a) obtener una maltosa con sustrato aplicable en un proceso de producción de mosto o de trituración; y b) convertir la maltosa en maltobionato por una reacción enzimática, donde el maltobionato se forma durante un sub-proceso en una producción de cerveza.
Description
Producción de maltobionato
Campo de la invención
[0001] La invención proporciona una vía de productos de cerveza de preservación con maltobionato producido directamente a partir de la maltosa ya presente en el producto de cerveza, usando un proceso enzimático.
Antecedentes de la invención
[0002] La prevención de la degradación oxidante de productos alimenticios y de pienso es muy importante para la conservación de la calidad de los productos. Procesos oxidantes en los productos pueden resultar en cambios en el color, sabor, aroma u otros cambios organolépticos inaceptables. Además, la oxidación puede causar daños a los aminoácidos esenciales y suponer la pérdida de vitaminas. En particular, productos alimenticios con ácidos grasos poliinsaturados son susceptibles de oxidación, potencialmente dando como resultado productos alimenticios rancios.
[0003] Una reacción de oxidación ocurre cuando una molécula de alimento, por ejemplo un ácido graso, se combina con oxígeno en presencia de radicales libres; metales traza, tales como Fe y Cu; o especies de oxígeno reactivas, tales como oxígeno singlete, peróxidos o hidroperóxido. Se utilizan antioxidantes para suprimir estas reacciones Ejemplos de antioxidantes generalmente utilizados son butilhidroxianisol (BHA) y butilhidroxitolueno (BHT), que son principalmente usados en alimentos que son ricos en grasas y aceites, al igual que sulfitos, que se usan principalmente como antioxidantes para prevenir o reducir la decoloración de frutas y verduras. No obstante, BHA y BHT son sospechosos de causar tumores cuando se usan en concentraciones altas y pueden por lo tanto no ser seguros para la salud humana y los sulfitos son conocidos porque destruyen la vitamina B. Por estas razones, antioxidantes naturales o biológicos, tales como, tocoferol (vitamina E), ácido L-ascórbico, ácido cítrico, melanoidina, flavonoides y ácido gálico son generalmente preferidos. Agentes quelantes tales como EDTA, sideróforos (agentes quelantes de hierro de microorganismos), ácido cítrico y ácido lactobiónico también han sido usados para tratar problemas con la oxidación debido a su capacidad para prevenir que los metales traza provoquen la oxidación.
[0004] La patente estadounidense n°. 3,899, 604 divulga la producción de ácido maltobiónico de maltosa por oxidación fermentativa usando una especie de Pseudomonas gravlolens y el uso de ácido maltobiónico como un aditivo alimenticio; el ácido maltobiónico tiene un sabor suavemente agrio y también contribuye a la viscosidad de los productos alimenticios en los que está contenido. Además, el ácido maltobiónico puede mejorar el olor natural y sabor de ciertos productos alimenticios (mejorador del sabor) como se describe en la patente estadounidense n°. 3,829,583. No obstante, no hay ninguna indicación de que el maltobionato contribuya con un efecto antioxidante en el alimento.
[0005] La patente europea n°. 0 384 534 B1 divulga la producción de ácido maltobiónico a partir de maltosa por oxidación fermentativa usando una cepa de Pseudomonas cepacia.
[0006] Maltosa y maltotriosa son los azúcares mayores en el mosto de cerveza (App Env Microbiol, 2005, págs. 78467857).
[0007] La oxidación no es sólo una consecuencia durante el almacenamiento prolongado, sino que puede también causar cambios indeseables a un producto durante la producción, en particular cuando el oxígeno está presente durante la producción. Consecuentemente, los métodos para suministrar antioxidantes naturales durante la producción del alimento serían deseables.
Resumen de la invención
[0008] La presente invención proporciona un método para impedir reacciones de oxidación en los productos de cerveza por producción de maltobionato a partir de la maltosa presente en el mosto o trituración por un proceso enzimático.
Descripción de la invención
[0009] Según la presente invención, reacciones oxidantes en los productos de cerveza pueden ser evitadas o impedidas durante su producción por el maltobionato. Para nuestro conocimiento, es la primera vez que el maltobionato ha sido usado como un antioxidante en la cerveza durante y después de la producción.
Definiciones:
[0010] El término "complemento" se entiende como la parte de la malta molida que no es malta de cebada. El complemento puede comprender cualquier material vegetal rico en almidón, por ejemplo grano no malteado, tal como cebada, arroz, maíz, trigo, centeno, sorgo y azúcar fácilmente fermentable y/o jarabe.
[0011] Como se utiliza en este caso el término "una fracción aislada de un proceso de producción de alimento o
pienso" debe ser entendido como una parte aislada que contiene esencialmente todos los ingredientes normalmente usados en la parte del proceso de donde ésta es aislada. Preferiblemente, la fracción contiene una cantidad aumentada de almidón en comparación con aquella que está normalmente presente en la parte del proceso del cual es aislada. La fracción se puede obtener en cualquier etapa durante el proceso de producción, y puede también ser el producto final. En el caso de que se desee una cantidad aumentada de almidón una cantidad adicional del ingrediente que contiene almidón del proceso o almidón puro se puede añadir a la fracción aislada.
[0012] Como se utiliza en este caso el término "malta molida" se entiende como el material que contiene almidón o azúcar que es la base para la producción de cerveza, por ejemplo la malta de cebada y el complemento.
[0013] El término "enzima aislada" como se utiliza en este caso se refiere a un polipéptido con la actividad enzimática descrita, donde el polipéptido es al menos 20% puro, preferiblemente al menos 40% puro, más preferiblemente al menos 60% puro, incluso más preferiblemente al menos 80% puro, de la forma más preferible al menos 90% puro, e incluso de la forma más preferible al menos 95% puro, según es determinado por SDS-PAGE.
[0014] El término "malta" se entiende como cualquier grano de cereal malteado, en particular cebada.
[0015] El término "maltobionato" como se usa aquí se refiere a ácido maltobiónico (CAS Reg. N°. 534-42-9; ácido 4-Oalfa-D-Glucopiranosil-D-glucónico) o sales derivadas. Sales adecuadas incluyen, pero de forma no limitativa, maltobionato de Na, maltobionato de Ca, maltobionato de NH4 y maltobionato de K.
[0016] El término "trituración" se entiende como una suspensión acuosa que contiene almidón que comprende la malta molida mojada en el agua.
[0017] El término "maltosa pura" debe ser entendido como una composición que sólo contiene maltosa, agua, sales inorgánicas y potencialmente un agente amortiguador tal como sales inorgánicas (p. ej. sal de fosfato, sal de carbonato, sal de hidróxido, etc.), sales orgánicas (p. ej. fosfato de citrato, acetato sódico, etc.), y otros tampones orgánicos (p. ej. HEPES, Tris, etc.).
[0018] El término base "débil" vs "fuerte" se refiere a la capacidad de la base para disociarse. En el presente contexto, una base débil es definida como una base con un valor pKb de como mínimo 3.5 (para bases dipróticas como CO32este valor pKb se refiere a la primera etapa).
[0019] El término "mosto" se entiende como la solución no fermentada drenada después de la extracción de la malta molida durante la trituración.
Enzimas
[0020] El maltobionato se puede generar por oxidación de maltosa. La oxidación puede ser realizada usando bromuro, no obstante esto no es deseable en un proceso de producción de alimentos.
[0021] En la presente invención, la conversión de maltosa en maltobionato es el producto de una reacción enzimática donde una oxidorreductasa que tiene especificidad de sustrato para maltosa, cataliza la conversión. Las oxidorreductasas son enzimas que catalizan la transferencia de electrones de una molécula a otra. Las deshidrogenasas y oxidasas pertenecen a la clase enzimática de las oxidorreductasas. Generalmente, las deshidrogenasas necesitan la presencia de un cofactor, por ejemplo NAD/NADP o una coenzima de flavina, tal como, FAD o FMN, y éste puede también ser el caso de las oxidasas. A menos que se sugiera alguna cosa más, las enzimas descritas abajo y en toda la descripción son enzimas aisladas con cofactor si se requiere.
[0022] Una categoría de oxidorreductasas, adecuadas para el uso en la presente invención, son las oxidasas que catalizan una reacción de oxidación/reducción implicando oxígeno molecular (O2) como el aceptor electrónico. En estas reacciones, el oxígeno se reduce a agua (H2O) o peróxido de hidrógeno (H2O2). En particular, las oxidasas de carbohidrato que catalizan la conversión de maltosa en maltosa-delta-lactona que inmediatamente se descompone en agua para formar maltobionato. El proceso genera peróxido de hidrógeno. El esquema de reacción neta puede ser descrito como:
maltosa + O2 + H2O (ecuación 1)
[0023] Varias oxidasas de oxidasas de carbohidrato adecuadas capaces de convertir maltosa en maltobionato, se conocen y están disponibles para el experto en la materia. Ejemplos de tales carbohidrato oxidasas son aldosa oxidasa, celobiosa oxidasa (EC 1.1.99.18), piranosa oxidasa (EC1.1.3.10), y hexosa oxidasa (EC1.1.3.5). Estudiando EC 1.1.3._, EC 1.2.3._, EC 1.4.3._, y EC 1.5.3_ o clases de enzimas similares con base en las recomendaciones del Comité de Nomenclatura de la Unión Internacional de Bioquímica y Biología Molecular (IUBMB), otros ejemplos de carbohidrato oxidasas útiles son fácilmente reconocidos por un experto en la técnica.
[0024] Una carbohidrato oxidasa preferida es una carbohidrato oxidasa microbiana, en particular una carbohidrato oxidasa aislada.
[0025] La hexosa oxidasa (EC1.1.3.5) es una carbohidrato oxidasa capaz de oxidar diferentes sacáridos incluyendo glucosa, galactosa, maltosa, celobiosa y lactosa. Enzimas de la clase de las hexosa oxidasas son enzimas preferidas en la presente invención. Las hexosa oxidasas se producen naturalmente por diferentes especies algales marinas. Tales especies son por ejemplo encontradas en la familia Gigartinaceae que pertenecen al orden Gigartinales. Ejemplos de especies algales de producción de hexosa oxidasa de Gigartinaceae son Chondrus crispus e Iridophycus flacci. También especies algales del orden Cryptomeniales incluyendo las especies Euthora cristata son fuentes potenciales de la hexosa oxidasa adecuadas para el uso en la presente invención. En particular, las hexosa oxidasas adecuadas para el uso en la presente invención son por ejemplo extraídas del alga roja Iridophycus flaccidum (Bean y Hassid, 1956, J Biol Chem 218: 425-436) o extraídas de Chondrus crispus, o Euthora cristata como se describe en WO96/40935, que además describe la clonación y expresión recombinante de la hexosa oxidasa de Chondrus crispus mostrada como SEC ID NOS 30 y 31 en WO96/40935. La celobiosa oxidasa (EC 1.1.99.18) es una carbohidrato oxidasa capaz de oxidar varios sacáridos incluyendo celobiosa, celooligosacáridos solubles, lactosa, xilobiosa y maltosa. Enzimas pertenecientes a la clase de las celobiosa oxidasas son también enzimas preferidas en la presente invención. La celobiosa oxidasa es una enzima extracelular producida por varios hongos de degradación de madera, tal como el hongo Phanerochaete chrysosporium de pudrición blanca, hongo de pudrición marrón Coniofora Puteana y hongos de pudrición blanda tal como Monilia sp., Chaetomium cellulolyticum, Myceliophthora (Sporotrichum) thermophila, Sclerotium rolfsii y Humicola insolens (Schou et al., 1998, Biochemical Journal 330: 565-571).
[0026] Otras carbohidrato oxidasas adecuadas pueden ser derivadas, por ejemplo de un Pyrenomycetes mitospórico tal como Acremonium, en particular, A. strictum depositado bajo ATCC 34717 o A. strictum T1 (Lin et al., 1991, Biochimica et Biophyisica Acta 1118: 41-47); A. fusidioides depositado bajo IFO 6813 o A. potronii depositado bajo IFO 31197. En una forma de realización preferida, la carbohidrato oxidasa se obtiene de la fuente descrita en (Lin et al., 1991, Biochimica et Biophyisica Acta 1118: 41-47) al igual que en JP5084074.
[0027] En otra forma de realización preferida la carbohidrato oxidasa es una carbohidrato oxidasa obtenida de un hongo del género Microdochium, más preferiblemente donde el hongo es Microdochium nivale e incluso más preferiblemente donde el hongo es el Microdochium nivale depositado bajo CBS 100236. La oxidasa aislada de CBS 100236 es descrita en detalle en WO 99/31990.
[0028] La generación de maltobionato por fermentación de bacterias del género Pseudomonas que crecen en un sustrato con maltosa ha sido descrita previamente (US 2,496,297, US 3,862,005, US 3,899,604 y EP384534). Es también posible usar deshidrogenasas con la presente invención. Tales sistemas de enzima dehidrogenasa se pueden aislar de Psedomonas, en particular de P. ovalis, P. schuilkilliensis, P. graveolens (p. ej. depositado bajo IFO 3460), P. fragi, P. iodinum, P. amiloderamosa (p. ej. depositado bajo ATCC 21262) o P. cepacia (p. ej. depositado bajo CBS
659.88 o CBS 658.88).
[0029] La cantidad de oxidasa/deshidrogenasa para ser usada generalmente dependerá de los requisitos específicos y de la enzima específica. La cantidad de adición de oxidasa es preferiblemente suficiente para generar el grado deseado de conversión de maltosa en maltobionato dentro de un tiempo específico. Típicamente, una adición de oxidasa en el intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 10000 OXU por kg de sustrato es suficiente, particularmente de aproximadamente 5 a aproximadamente 5000 OXU por kg de sustrato, y más particularmente de aproximadamente 5 a aproximadamente 500 OXU por kg de sustrato. El conocimiento general del experto en la materia incluirá ajustar la cantidad de enzima específica necesitada para la conversión de maltosa en maltobionato.
[0030] En la literatura, una Unidad de Oxidasa (OXU) es normalmente definida como la cantidad de enzima que oxida un µmol de maltosa por minuto bajo condiciones específicas. No obstante, en los ejemplos proporcionados aquí OXU se define como un mg de enzima oxidasa pura -según se mide con respecto a una enzima estándar.
[0031] En otro aspecto de la presente invención, el maltobionato se produce por una reacción catalizada de dos enzimas. La primera reacción forma maltosa a partir de los componentes de almidón presentes durante la producción del alimento o de pienso, usando una enzima amilasa. La segunda reacción es oxidar la maltosa a maltobionato como se describe en el aspecto anterior. Las dos reacciones pueden ser hechas simultáneamente o consecutivamente. En una forma de realización preferida la reacción de amilasa se hace primero seguido de la reacción de maltosa a maltobionato.
[0032] La amilasa es capaz de hidrolizar almidón para formar oligosacáridos como un producto principal, en particular maltosa, un proceso que es bien conocido por el experto en la materia. La amilasa se puede derivar de una bacteria o un hongo, en particular de una cepa de Aspergillus, preferiblemente una cepa de A. niger o A. oryzae, o de una cepa de Bacillus. Algunos ejemplos son alfa-amilasa, por ejemplo de Bacillus amyloliquefaciens, y amiloglucosidasa, por ejemplo de A. niger. Productos comerciales incluyen BAN y AMG (productos de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), Grindamyl A 1000 o A 5000 (disponible de Grindsted Products, Dinamarca) y amilasa H y amilasa P (productos de Gist-Brocades, Países Bajos). La beta-amilasa, u otras enzimas degradadoras de almidón que dan como resultado la formación de maltosa, pueden asimismo ser usadas.
[0033] En un aspecto adicional de la invención se añade la catalasa (EC 1.11.1.6) para prevenir la limitación de la reacción llevada a cabo por la carbohidrato oxidasa y eliminar H2 O2 indeseado en el producto final. Una catalasa es una enzima que cataliza la reacción: 2 H2 O2 O2 + 2 H2 O (ecuación 2).
[0034] Como se ha descrito anteriormente la carbohidrato oxidasa depende de oxígeno, pero produce peróxido de hidrógeno. La ventaja de añadir catalasa al proceso de la presente invención es que la carbohidrato oxidasa dispone de oxígeno y al mismo tiempo es el peróxido de hidrógeno que tiene fuertes propiedades de oxidación eliminadas. Esto es particularmente pertinente si el maltobionato es producido como una parte integrada del proceso de producción del alimento o de pienso.
[0035] Varias catalasas adecuadas se conocen por el experto en la materia, por ejemplo, la catalasa disponible comercialmente, Catazyme® de Novozymes A/S.
Producción
[0036] La producción de maltobionato por fermentación por ejemplo usando bacterias del género Pseudomonas que crecen en un sustrato con maltosa es generalmente conocida en la técnica (US 2,496,297, US 3,862,005, US 3,899,604 y EP384534). Adicionalmente, WO 99/31990 describe la oxidación de maltosa pura en maltobionato usando carbohidrato oxidasa.
[0037] Un aspecto de la invención se refiere a la producción de maltobionato, procesando la maltosa naturalmente presente en la producción de cerveza. El proceso para producir maltobionato comprende las siguientes etapas: a) obtener una maltosa con sustrato aplicable en un proceso de producción de mosto o trituración; b) convertir la maltosa en maltobionato por una reacción enzimática, donde el maltobionato se forma durante un subproceso en una producción de cerveza. La reacción enzimática en la fase b) se cataliza por una oxidorreductasa/deshidrogenasa, preferiblemente por una de las carbohidrato oxidasas, descrita anteriormente incluso más preferido por una de las hexosa oxidasas anteriormente descritas y las más preferidas por la carbohidrato oxidasa obtenible de Microdochium nivale depositada bajo CBS 100236. El proceso descrito produce una conversión casi completa de maltosa en maltobionato, preferiblemente 80%, más preferiblemente 85%, más preferiblemente 90%, incluso más preferido 95%, lo más preferido 99%, e incluso lo más preferido 100% de maltosa en el sustrato se convierte en maltobionato.
[0038] Una ventaja de este proceso es que los componentes usados son los que se usan en la producción de cerveza de todos modos, por lo tanto el maltobionato no está derivado de ningún aditivo. Preferiblemente, la fracción que contiene maltosa comprende entre 5% y 60%, más preferiblemente entre 10% y 40%, incluso más preferiblemente entre 15% y 30%, incluso más preferiblemente entre 20% y 25% de maltosa. Una ventaja adicional del proceso descrito es que los otros componentes del producto de cerveza no están complicando el proceso.
[0039] Las complicaciones del proceso de otros componentes pueden por ejemplo ser la formación de espuma ya que la reacción de carbohidrato oxidasa puede requerir la adición de oxígeno a la mezcla reactiva, que puede crear espuma en las mezclas que contienen la proteína.
[0040] El sustrato que comprende maltosa se obtiene a partir de la elaboración de cerveza,
[0041] En el proceso de elaboración de cerveza la maltosa está naturalmente presente, puesto que el proceso de trituración produce maltosa para la fermentación. En particular el mosto tiene alto contenido en maltosa.
[0042] El proceso para la producción de maltobionato debe ser realizado bajo condiciones que permiten a la carbohidrato oxidasa convertir maltosa en maltobionato. Tales condiciones incluyen, pero de forma no limitativa, temperatura, pH, oxígeno, cantidad y características de carbohidrato oxidasa, otros aditivos tales como por ejemplo catalasa y tiempo de reacción/incubación.
[0043] Un período de incubación adecuado debería permitir el grado de conversión de maltosa en maltobionato de interés. Generalmente, un período de incubación adecuado se selecciona en el intervalo de hora a 3 días, preferiblemente, de 2 horas a 48 horas, más preferiblemente de 5 horas a 24 horas, de la forma más preferible de 8
horas a 18 horas.
[0044] El oxígeno es un factor importante ya que la conversión de maltosa en maltobionato consume oxígeno (ver ecuación 1 más arriba). Por consiguiente, si el oxígeno se monitorea durante la reacción enzimática uno generalmente observará una caída inicial en la cantidad de oxígeno, que, si por ejemplo se proporciona aire constantemente, volverá a alrededor del nivel inicial, cuando la reacción enzimática termine. Cuando el oxígeno vuelve a más del 90% del nivel inicial la reacción enzimática ha cesado o al menos se ha ralentizado significativamente, indicando que todo el sustrato
(p. ej. almidón, dextrina y/o maltosa) ha sido procesado a maltobionato. Por consiguiente, un período de incubación adecuado podría preferiblemente ser un tiempo que al menos dura hasta que el nivel de oxígeno en el lote de producción ha retornado a más del 90% del nivel inicial, especialmente si se desea una conversión máxima de maltosa.
Alternativamente, la reacción se puede monitorear por la cantidad de base requerida para tener el pH constante. Cuando la cantidad de base necesitada para mantener el pH se reduce es una indicación de que la reacción ha cesado
o al menos se ha ralentizado significativamente. Un declive en la reacción enzimática puede, no obstante, no sólo deberse al agotamiento del sustrato. La estabilidad enzimática sobre el tiempo es también un parámetro que puede afectar a la reacción. Consecuentemente, si la enzima está degradándose en el tiempo esto puede también causar que la reacción sea ralentizada. En este caso la adición de sustrato no supondría una reducción renovada en el oxígeno y pH.
[0045] Fuentes adecuadas de oxígeno incluyen aire atmosférico (aprox. 20% oxígeno), aire atmosférico enriquecido con oxígeno (contenido de oxígeno > 20%) y oxígeno puro. Ejecutar el proceso bajo una presión superior a 1 atmósfera aumenta la solubilidad de oxígeno y puede ser preferido en cualquier lugar donde sea aplicable. El oxígeno se puede suministrar al proceso, por ejemplo mezclando continuamente aire en la mezcla reactiva durante la incubación.
[0046] Una opción alternativa para suministrar O2 es añadir H2O2 en la presencia de catalasa (ver ecuación 2 más arriba). Alternativamente, el H2O2 producido naturalmente por la carbohidrato oxidasa puede ser usado. El uso de H2O2 como una fuente de oxígeno puede ser particularmente preferido cuando el proceso se realiza usando enzimas inmovilizadas cuando la adición de oxígeno es más difícil, o cuando la formación de espuma, por ejemplo en la reacción que contiene la proteína, es un problema debido a la adición de oxígeno mezclando aire en la reacción. La catalasa se puede adicionar en cualquier tiempo adecuado por ejemplo con la carbohidrato oxidasa, o durante la reacción, cuando el nivel de O2 se reduce, preferiblemente la catalasa se añade al principio de la incubación (tiempo = 0). Una ventaja de añadir una catalasa con la carbohidrato oxidasa es que la necesidad de oxígeno puede ser significativamente reducida (hasta un 50%). Así, el suministro de oxígeno, por ejemplo en forma de aire puede ser significativamente reducido. En realidad, añadiendo una cantidad adecuada de catalasa junto con H2O2 es posible omitir la suplementación de oxígeno completamente. Este H2O2 extra-añadido puede originarse de cualquier fuente comercial.
[0047] Por consiguiente, se prefiere que esencialmente todo el oxígeno requerido para la oxidación de maltosa en maltobionato se obtenga por adición de una catalasa, que genera el oxígeno requerido por conversión del H2O2 disponible. Si la cantidad de H2O2 está limitada al proceso, se puede añadir H2O2 adicional.
[0048] En el presente contexto la expresión "esencialmente todo el oxígeno" se utiliza para describir el suministro de oxígeno necesitado para que la reacción enzimática funcione adecuadamente y en particular que no es necesario añadir activamente oxígeno extra durante el proceso. Preferiblemente, se añade catalasa en una cantidad que reduce la concentración de H2O2 en comparación con un proceso similar sin catalasa. Más preferiblemente, la cantidad de catalasa añadida al proceso como se describe en este caso, es una cantidad que es suficiente para obtener al menos 25%, 50%, 75%, 85% o 95% de reducción en la cantidad de H2O2 en comparación con un proceso de control comparativo donde la única diferencia comparativa es que la catalasa no es añadida, incluso más preferiblemente la cantidad de catalasa añadida al proceso como se describe en este caso, es una cantidad que es suficiente para obtener un 100% de reducción en la cantidad de H2O2 en comparación con un proceso de control comparativo donde la única diferencia comparativa es que no se añade catalasa. Preferiblemente, la catalasa se añade en una cantidad que también mejora el grado de conversión de maltosa en maltobionato.
[0049] La temperatura de incubación generalmente dependerá de la carbohidrato oxidasa usada y es típicamente seleccionada dependiendo de la temperatura de reacción óptima para la carbohidrato oxidasa. No obstante, como la solubilidad de oxígeno se reduce con el aumento de temperatura, se deben tener en cuenta otros factores para obtener un proceso óptimo. El experto en la materia sabrá ajustar la temperatura óptima respecto a por ejemplo la actividad enzimática y solubilidad del oxígeno. Generalmente, una temperatura adecuada estará en el intervalo de aproximadamente 0°C a aproximadamente 99 °C, más preferiblemente en el intervalo de 5°C a 90°C, incluso más preferiblemente en el intervalo de 15°C a 85°C, de la forma más preferible en el intervalo de 25°C a 80°C, incluso de la forma más preferible en el intervalo de 30°C a 60 °C.
[0050] El pH óptimo puede variar dependiendo de la carbohidrato oxidasa usada. No obstante, el análisis cinético de la carbohidrato oxidasa de Microdochium nivale (Nordkvist et al., 2007, Biotechnol Bioeng 97: 694-707) indica que el uso de bases fuertes (NaOH) puede afectar a la estabilidad de las carbohidrato oxidasas. Además, WO 97/004082 describe que rendimientos aumentados de lactobionato usando carbohidrato oxidasa se pueden obtener cuando el proceso se realiza a un pH estable. Por consiguiente, para aumentar el rendimiento de maltobionato del presente proceso se puede desear mantener el pH durante la conversión de maltosa en maltobionato (paso iii, más arriba), por adición adecuada de una base, a un nivel estable. En formas de realización específicas el nivel de pH estable se mantiene en el intervalo de aproximadamente 3.0 a aproximadamente 9.0 por adición de una base. Es posible mantener el pH en los intervalos prescritos usando cualquier base. En principio, cualquier sustancia capaz de neutralizar el ácido producido será aplicable en el proceso. El experto en la materia conoce numerosas bases que se pueden aplicar en el proceso de la invención, por ejemplo bases fuertes tales como Ca(OH)2, hidróxido de potasio, NaOH y Mg(OH)2. En una forma de realización preferida una base débil o carbonato se utiliza para mantener el pH a un nivel estable. Ejemplos de bases débiles incluyen, pero de forma no limitativa, CaCO3, Na2CO3, K2CO3, (NH4)2CO3 y NH4OH. Actualmente, las bases débiles preferidas son NH4OH y Na2CO3.
[0051] El valor de pH estable preferido para un proceso específico de interés, como será apreciado por el experto en la
materia, dependerá de varios factores. Por ejemplo, si el producto alimenticio es cerveza, el pH de producción del mosto
es conocido por ser alrededor de 5.0 a 5.7, preferiblemente alrededor de 5.1 a 5.3. Así, será preferido mantener el pH a
un nivel estable alrededor de 5.3, tal como de pH 5.0 a 5.6. Intervalo de pH preferidos para otros productos
alimenticios/piensos pueden estar en el intervalo de pH 3.0 a 4.0, por ejemplo para zumo o refrescos como cola, o en el
intervalo de 4.0 a 5.0, por ejemplo cerveza o mayonesa o preparaciones, o en el intervalo de 5.6 a 6.5, por ejemplo
productos de carne o en el intervalo de 6.6 a 7.5 productos lácteos y de huevo.
[0052] Será apreciado que el pH del producto o composición de maltobionato comprendiendo maltobionato puede
también ser ajustado a un nivel de pH preferido después o al final de la conversión enzimática realizada, por ejemplo
cuando el 95% de la conversión deseada de maltosa ha sido conseguida, se puede permitir que el pH caiga a un nivel
deseado.
[0053] En el presente contexto "un nivel de pH estable" debe ser entendido de forma general como el control y
mantenimiento del pH durante el proceso dentro de un intervalo específico, o cercano a un valor específico por adición
de una base. Control y ajuste/mantenimiento de pH durante un proceso enzimático es un procedimiento estándar que
puede llevarse a cabo con un grado de precisión muy alto. Así, un pH estable puede ser un valor mantenido a un nivel
constante con una variación inferior a 1.5 unidades de pH, preferiblemente menos que 1.0 unidades de pH, más
preferido menos que 0.5 unidades de pH, más preferido menos que 0.3 unidades de pH, incluso más preferido menos
que 0.2 o 0.1 unidades de pH. De ello se deduce que un intervalo óptimo se puede definir para un proceso específico
enzimático según la presente invención y que el pH se puede controlar y mantener con el grado de precisión descrito
dentro de este intervalo. En el proceso de la invención, un intervalo de pH adecuado específico o valor de pH específico
se selecciona en el intervalo de aproximadamente pH 3 a aproximadamente pH 9.
[0054] Se prefiere que el pH se mantenga al nivel de pH estable como se describe en este caso desde el inicio de la
reacción enzimática. En otras palabras, inmediatamente después de que se añada la oxidasa al producto que contiene
maltosa se añade la base para mantener el pH estable como se describe en este caso.
[0055] Particularmente, si se desea una conversión máxima de maltosa el pH se mantiene al nivel estable como se
describe en este caso para un periodo temporal que al menos dura hasta que el nivel de oxígeno de la mezcla reactiva
ha retornado a más del 90% del nivel inicial, o la cantidad de base usada para mantener el pH constante corresponde al
grado deseado de conversión.
[0056] Preferiblemente, el pH se mantiene al nivel de pH estable como se describe en este caso para un período de
tiempo de 30 minutos a 3 días, preferiblemente, de 2 horas a 48 horas, más preferiblemente de 5 horas a 24 horas, de
la forma más preferible de 8 horas a 18 horas.
[0057] En una forma de realización particular de la presente invención la conversión de maltosa en maltobionato se hace
en un lote de mosto obtenido de un proceso de trituración. El mosto conteniendo maltobionato se puede usar como
ingrediente para una serie de lotes de mosto para la producción de cerveza.
[0058] La conversión de almidón en maltosa en maltobionato se hace en un lote de trituración antes del proceso de
trituración. El proceso puede incluir la adición de amilasa junto con carbohidrato oxidasa. La trituración que contiene
maltobionato se puede usar como ingrediente en una serie de procesos de trituración.
[0059] Un aspecto específico se refiere a un proceso para obtener un rendimiento aumentado y/o un tiempo de reacción
reducido en la conversión enzimática de maltosa en maltobionato. El proceso se define por las etapas de:
i) añadir una carbohidrato oxidasa a un sustrato que comprende maltosa;
ii) incubar el sustrato bajo condiciones que permiten que la carbohidrato oxidasa convierta la maltosa en maltobionato; y
iii) mantener el pH durante la etapa ii) en el intervalo de aproximadamente 3.0 a aproximadamente 9.0 por adición de
una base.
[0060] Obviamente, los procesos descritos en la presente invención son útiles para un proceso de fabricación industrial
para la producción de un producto de cerveza donde la maltosa está naturalmente presente durante la producción.
[0061] La presente invención se refiere a la producción de maltobionato directamente (in situ) en un proceso de
producción de cerveza procesando la maltosa que está naturalmente presente en el proceso. Consecuentemente, el
maltobionato se forma durante la producción de cerveza como tal, y no en una reacción separada. El proceso para
producir maltobionato, donde se integra el proceso en el proceso de producción de cerveza comprende las etapas
siguientes:
i) añadir unas oxidorreductasas o deshidrogenasas, preferiblemente una carbohidrato oxidasa, a un proceso de
producción de cerveza;
ii) mantener el proceso bajo condiciones que permiten la conversión enzimática de maltosa en maltobionato;
iii) proceder con el proceso de producción de cerveza.
[0062] La reacción enzimática en la etapa i) puede ser precedida por una reacción de degradación de almidón, por
ejemplo catalizada por una amilasa, que bien se puede proporcionar endógenamente (p. ej. de la malta ya presente en
el proceso) o exógenamente (p. ej. por adición antes de o junto con la enzima de la etapa i). La carbohidrato oxidasa y las condiciones que permiten la conversión enzimática son esencialmente las mismas que se han descrito anteriormente. Con respecto a la temperatura óptima se debería, no obstante, considerar que la reacción se debe ejecutar en un proceso de producción de cerveza. Consecuentemente, será una ventaja que la carbohidrato oxidasa pueda funcionar a las temperaturas óptimas para este tipo de proceso.
[0063] La ventaja de generar maltobionato directamente durante el proceso de producción de cerveza es que una vez que el proceso ha sido optimizado, las etapas de producción separadas para la generación de maltobionato se vuelven superfluas.
[0064] En la presente invención, el maltobionato se genera durante un sub-proceso en la producción de cerveza, tal como el proceso de trituración o proceso de fermentación, por adición de la carbohidrato oxidasa y potencialmente la catalasa al sub-proceso. La conversión de maltosa en maltobionato puede tener lugar en la trituración (malta molida + fluido) antes de la trituración, o durante el proceso de trituración o después de la cocción del mosto antes de lafermentación, o incluso durante la fermentación. Ésta última, no obstante, requiere enzimas aptas para la alimentación. La presencia de maltosa en el mosto es, no obstante, necesitada para la fermentación del mosto en la cerveza. Por lo tanto, la conversión de maltosa en maltobionato debe ser optimizada de manera que la maltosa sólo se convierte parcialmente en maltobionato. Preferiblemente, el mosto contiene hasta 2% de maltosa, más preferido hasta 5 % de maltosa, y lo más preferido hasta 10% de maltosa.
[0065] El proceso de trituración generalmente aplica un aumento controlado gradualmente de temperatura, donde cada etapa favorece una acción enzimática sobre la otra, finalmente degradando proteínas, membranas celulares y almidón. Los perfiles de temperatura de trituración son generalmente conocidas en la técnica. En la presente invención la conversión de maltosa en maltobionato ocurre preferiblemente en relación con el paso de sacarificación (degradación de almidón) entre 55°C y 66°C. En una forma de realización preferida la carbohidrato oxidasa está activa en este intervalo de temperatura. Alternativamente, el proceso de trituración puede mantenerse a una temperatura inferior suficientemente largo para permitir la conversión de almidón en maltosa en maltobionato a una temperatura donde la carbohidrato oxidasa está activa. La amilasa se puede añadir exógenamente en esta etapa para facilitar la conversión de almidón en maltosa.
Ejemplo 1
Producción de maltobionato.
[0066] El maltobionato de Na fue producido a partir de maltosa por oxidación catalizada por una carbohidrato oxidasa
(M. Nivale CBS 100236 como se describe en WO99/31990) y catalasa (Catazyme 25L, Novozymes, Dinamarca). Las dosificaciones enzimáticas fueron: carbohidrato oxidasa 400 mg de proteína enzimática/kg de maltosa y, catalasa 6 g/kg de maltosa. La maltosa fue disuelta en una concentración del 10%, a 38°C. Un reactor agitado con 3 L de solución fue usado para la reacción. Durante la reacción, el aire atmosférico fue añadido a 1 L/minuto y el pH fue mantenido constante a 6.4 por adición continua de 1 M de solución de Na2CO3. El tiempo de reacción total fue 17 horas. Esencialmente toda la maltosa fue convertida en ácido maltobiónico durante la reacción.
Ejemplo 2
Efecto antioxidante de maltobionato medido por el ensayo del poder antioxidante reductor de hierro (FRAP).
[0067] En resumen el ensayo FRAP funciona de la siguiente manera: el complejo Fe3+-tripiridiltriazina (TPTZ) se reduce a Fe2+-TPTZ a bajo pH. La forma del hierro (Fe2+) es de color azul y se puede medir espectro-fotométricamente a 593 nm. El método se calibra con concentraciones conocidas de soluciones de Fe2+. Cuanto más alta es la absorbencia más alto es el estado antioxidante.
[0068] Para el ensayo FRAP un reactivo de trabajo fue obtenido a partir de los siguientes componentes:
Tampón de acetato: 3.1 g de CH3COONa·3H20 y 16 mL de CH3COOH conc. en " 800mL agua.
Controlar que el pH es 3.6. En caso contrario, ajustar con NaOH/CH3COOH. Añadir agua a 1 L.
Solución de TPTZ: 10mmol/L 2,4,6-Tri(2-piridil)-s-triazina (TPTZ) en 40mmol/L HCl
Solución de Fe(III): 20 mM Fe(III)CL3 ·6H2O.
[0069] Reactivo de trabajo (preparado a diario): 50 mL de tampón de acetato + 5.0 mL de solución de TPTZ + 5.0 mL de solución de Fe(III)
[0070] El ensayo fue realizado añadiendo 50 µL de muestra/standard/blanco a 1.5 mL de reactivo de trabajo en 2 mL de tubos Eppendorf oscuros seguido de incubación en termomezclador a 37°C durante 30 min. Las muestras consisten en maltobionato en diferentes concentraciones, los estándares contienen Fe2+ y ácido ascórbico, y los blancos fueron muestras de agua. El ensayo fue realizado por triplicado. La absorbencia fue leída inmediatamente a 593 nm, cuanto más alta es la absorbencia más alto es el estado antioxidante (tAbs ), antioxidantet). Los resultados se presentan en la tabla 1.
Tabla 1: Maltobionato de sodio en FRAP (g/L) Abs a 593 nm
- Maltobionato de sodio (concentrados líquidos)
- promedio de Abs
- Std. Dev.
- 5%
- 0.236 0.021
- 2, 50%
- 0.170 0.002
- 1%
- 0.112 0.006
- Blanco
- 0.0257 0.00058
10 El maltobionato muestra capacidad antioxidante en cuanto a reducir Fe(III) y así crear un cambio en la absorbencia debido al complejo de tripiridiltriazina ferrosa. El ensayo mostró un claro efecto de respuesta a la dosis del antioxidante.
Ejemplo 3
15 Efecto antioxidante de carbohidrato oxidasa y/o catalasa en el mosto de cerveza.
[0071] Mosto de cerveza fue producido a partir de malta de cebada bien modificado 50g en 250g de agua a 53 °C. La malta de cebada fue molida usando un perfil de temperatura que consiste en 30 min a 52 °C, aumento de 1°C/min durante 11 min, 63 °C durante 30 min, aumento de 1 °C/min durante 9 min, 72°C durante 30 min, aumento de 1 °C/min
20 durante 6 min, 78°C durante 15 min, seguido de enfriamiento a 20°C.
[0072] Una serie de experimentos con adición de carbohidrato oxidasa y/o catalasa al mosto fueron hechos y comparados con una muestra de control. Las enzimas fueron adicionadas antes de la etapa de trituración. La carbohidrato oxidasa fue dosificada según la actividad medida como LOXU donde una LOXU corresponde a 1 mg de
25 proteína enzimática. La catalasa fue dosificada según la actividad medida como CIU. 1 CIU es la cantidad de enzima que descompone 1 µmol de H2O2 por minuto a pH = 7.0 y T= 25 °C
[0073] Para medir la capacidad antioxidante de la carbohidrato oxidasa y/o catalasa, 1mM de Fe2+ se añadió a todas las muestras. La oxidación fue medida indirectamente usando un ensayo de complejo de naranja de xilenol (ensayo XO).
30 En este ensayo, hidroperóxido en el mosto oxida Fe2+ en el complejo de naranja de xilenol a Fe3+ que forma un complejo con naranja de xilenol. El complejo oxidado puede ser medido espectrofotométricamente, cuanto más baja es la absorbencia más alto es el estado antioxidante ("abs antioxidantet).
[0074] El reactivo de trabajo de XO fue obtenido a partir de los siguientes componentes:
35 A: 2.5 mM de hexahidrato de sulfato ferroso de amonio, 1.0 mM (XO) de sal tetrasódica de naranja de Xilenol en 1250mM de H2SO4
B: 4.89 mM de hidroxitolueno butilado (BHT) en metanol.
Reactivo de trabajo de XO: mezclar 1 parte A con 9 partes B. Estabilizar 1 mes en la nevera si se mantiene en una
botella oscura.
40 [0075] El ensayo fue iniciado añadiendo 100 µL de muestra a 900 µL de reactivo de trabajo de XO. La incubación fue realizada a temperatura ambiente durante 30 min con agitación. Cada muestra fue centrifugada a 14000 r.p.m. a 20°C durante 10 minutos. La absorción del sobrenadante fue medida espectrofotométricamente a 560nm.
45 [0076] La absorbencia aumentó en todas las muestras debido a un aumento en el complejo de XO teñido con Fe2+ a Fe3+ oxidado. Las muestras de mosto con 50 LOXU impide la formación de oxidación comparado con el control(abs =
0.410 control y 0.257 para el 50LOXU). El efecto es pobre en la mitad de la dosificación 25 LOXU (ABS = 0.421), no obstante mejora por combinación de 600 CIU de catalasa (abs = 0.308). 1200 CIU de catalasa también impide la formación de complejo teñido (abs = 0.264) y el efecto en la dosificación dependió de que 600 CIU fuera difícilmente
50 diferente (abs = 0.439) del control.
Claims (9)
- REIVINDICACIONES1. Proceso para producir maltobionato comprendiendo las etapas siguientes:a) obtener una maltosa con sustrato aplicable en un proceso de producción de mosto o de trituración; yb) convertir la maltosa en maltobionato por una reacción enzimática, donde el maltobionato se forma durante un sub-proceso en una producción de cerveza.
-
- 2.
- Proceso según la reivindicación 1, donde la reacción enzimática en la fase b) según la reivindicación 1 se cataliza por una oxidorreductasa.
-
- 3.
- Proceso según la reivindicación 2, donde la oxidorreductasa es una carbohidrato oxidasa.
-
- 4.
- Proceso según la reivindicación 3, donde la carbohidrato oxidasa se selecciona de hexosa oxidasa, celobiosa oxidasa, aldosa oxidasa y piranosa oxidasa.
-
- 5.
- Proceso según la reivindicación 3, donde la carbohidrato oxidasa es obtenible de Microdochium nivale depositada bajo CBS 100236.
-
- 6.
- Proceso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde una catalasa se añade al proceso.
-
- 7.
- Proceso según la reivindicación 6, donde la catalasa se añade a la reacción enzimática de la etapa b) según la reivindicación 1.
-
- 8.
- Proceso según la reivindicación 1, donde el sub-proceso es el proceso de trituración.
-
- 9.
- Proceso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde la etapa b) según la reivindicación 1 se mantiene a un nivel de pH estable por adición de una base durante el proceso.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP07113338 | 2007-07-27 | ||
| EP07113338 | 2007-07-27 | ||
| PCT/EP2008/059433 WO2009016049A1 (en) | 2007-07-27 | 2008-07-18 | Maltobionate as antioxidant in food products |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2377910T3 true ES2377910T3 (es) | 2012-04-03 |
Family
ID=39857346
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES08775209T Active ES2377910T3 (es) | 2007-07-27 | 2008-07-18 | Producción de maltobionato |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20100173044A1 (es) |
| EP (1) | EP2185717B1 (es) |
| CN (1) | CN101765664B (es) |
| AT (1) | ATE537268T1 (es) |
| BR (1) | BRPI0814603B1 (es) |
| DK (1) | DK2185717T3 (es) |
| ES (1) | ES2377910T3 (es) |
| PL (1) | PL2185717T3 (es) |
| RU (1) | RU2495130C2 (es) |
| WO (1) | WO2009016049A1 (es) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110318454A1 (en) * | 2009-03-20 | 2011-12-29 | Novozymes A/S | Nutritional beverage and a method of making the same |
| EP2532253A1 (en) * | 2011-06-09 | 2012-12-12 | RUDOLF WILD GmbH & CO. KG | Process of preparing a concentrated liquid foodstuff |
| EP2820961A1 (en) | 2013-07-03 | 2015-01-07 | RUDOLF WILD GmbH & CO. KG | Enzymatic fermentation process |
| CN104531810B (zh) * | 2015-01-14 | 2017-11-14 | 天津科技大学 | 一种高效微生物转化制备麦芽糖酸的方法 |
| JP6768241B2 (ja) * | 2016-06-30 | 2020-10-14 | ポッカサッポロフード＆ビバレッジ株式会社 | シクロヘキサン環を持つ単環性モノテルペンの安定化方法及びシクロヘキサン環を持つ単環性モノテルペン含有溶液 |
| JP6321857B1 (ja) * | 2017-05-17 | 2018-05-09 | サンエイ糖化株式会社 | 糖カルボン酸の製造方法 |
| WO2019163853A1 (ja) | 2018-02-20 | 2019-08-29 | サンエイ糖化株式会社 | 糖カルボン酸の製造方法 |
| JP6417060B1 (ja) * | 2018-02-20 | 2018-10-31 | サンエイ糖化株式会社 | 糖カルボン酸の製造方法 |
| JP7133972B2 (ja) * | 2018-05-02 | 2022-09-09 | サンエイ糖化株式会社 | アルコール飲料、アルコール飲料の刺激味緩和剤、アルコール飲料の刺激味緩和方法 |
| JP7193275B2 (ja) * | 2018-08-31 | 2022-12-20 | サッポロビール株式会社 | アルコール飲料及びその製造方法 |
| CN112369514B (zh) * | 2020-11-13 | 2022-05-27 | 张家口九州大地饲料有限公司 | 一种反刍动物越冬精料补充饲料及生产方法 |
| KR102559904B1 (ko) * | 2020-12-18 | 2023-07-25 | 대상 주식회사 | 항산화 활성을 가지는 산화당류 조성물의 제조방법 |
| CN112772897A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-05-11 | 四川省食品发酵工业研究设计院 | 一种利用甜瓣子发酵液制作甜面酱的方法 |
| CN116590355B (zh) * | 2022-12-27 | 2023-11-07 | 安徽斯拜科生物科技有限公司 | 一种利用葡萄糖脱氢酶催化麦芽糖合成麦芽糖酸的方法 |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3862005A (en) * | 1969-05-20 | 1975-01-21 | Hayashibara Co | Process for producing aldonic acids and starch sugars containing aldonic acids |
| US3899604A (en) * | 1969-12-04 | 1975-08-12 | Hayashibara Co | Process for the production of foods and drinks with the employment of maltobionic acid |
| GB1311829A (en) * | 1971-02-20 | 1973-03-28 | Hayashibara Co | Sealsoning of comestibles |
| US4246347A (en) * | 1979-05-29 | 1981-01-20 | Cetus Corporation | Process for the production of fructose |
| CN86102356A (zh) * | 1986-04-01 | 1987-10-21 | 江西上饶地区食品厂 | 大米制取高麦芽糖工艺 |
| NL8900420A (nl) * | 1989-02-21 | 1990-09-17 | Avebe Coop Verkoop Prod | Werkwijze voor de fermentatieve oxydatie van reducerende disacchariden. |
| DE69829878T2 (de) * | 1997-12-22 | 2006-03-02 | Novozymes A/S | Kohlenhydratoxidase sowie verwendung derselben beim backen |
| US7060474B1 (en) * | 1997-12-22 | 2006-06-13 | Novozymes A/S | Carbohydrate oxidase and use thereof in baking |
| EP1122303A1 (en) * | 2000-02-01 | 2001-08-08 | Quest International Nederland Bv | Process for the production of beer having improved flavour stability |
| CN1420163A (zh) * | 2001-11-20 | 2003-05-28 | 祝元智 | 黑麦啤酒的制造 |
| RU2294361C1 (ru) * | 2005-05-30 | 2007-02-27 | ГОУ ВПО Кемеровский технологический институт пищевой промышленности | Способ производства пива |
| DK1994136T3 (en) * | 2006-03-07 | 2017-09-04 | Novozymes As | Process of beer brewing |
-
2008
- 2008-07-18 US US12/666,074 patent/US20100173044A1/en not_active Abandoned
- 2008-07-18 RU RU2010107240/10A patent/RU2495130C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-07-18 DK DK08775209.3T patent/DK2185717T3/da active
- 2008-07-18 CN CN200880100522.1A patent/CN101765664B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-07-18 WO PCT/EP2008/059433 patent/WO2009016049A1/en not_active Ceased
- 2008-07-18 ES ES08775209T patent/ES2377910T3/es active Active
- 2008-07-18 EP EP08775209A patent/EP2185717B1/en not_active Not-in-force
- 2008-07-18 PL PL08775209T patent/PL2185717T3/pl unknown
- 2008-07-18 AT AT08775209T patent/ATE537268T1/de active
- 2008-07-18 BR BRPI0814603-9A patent/BRPI0814603B1/pt not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-12-02 US US14/957,130 patent/US20160081387A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2185717B1 (en) | 2011-12-14 |
| RU2495130C2 (ru) | 2013-10-10 |
| ATE537268T1 (de) | 2011-12-15 |
| CN101765664B (zh) | 2014-08-06 |
| US20100173044A1 (en) | 2010-07-08 |
| BRPI0814603A2 (pt) | 2014-10-14 |
| BRPI0814603A8 (pt) | 2017-02-21 |
| DK2185717T3 (da) | 2012-04-02 |
| WO2009016049A1 (en) | 2009-02-05 |
| BRPI0814603B1 (pt) | 2017-11-28 |
| RU2010107240A (ru) | 2011-09-10 |
| EP2185717A1 (en) | 2010-05-19 |
| CN101765664A (zh) | 2010-06-30 |
| US20160081387A1 (en) | 2016-03-24 |
| PL2185717T3 (pl) | 2012-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2377910T3 (es) | Producción de maltobionato | |
| RU2531436C2 (ru) | Питательный напиток и способ его получения | |
| AU2012266805B2 (en) | Process of preparing a concentrated liquid foodstuff | |
| Nordkvist et al. | Oxidation of lactose to lactobionic acid by a Microdochium nivale carbohydrate oxidase: kinetics and operational stability | |
| US4617190A (en) | Enzymatic powder milk | |
| Ludwig et al. | Continuous enzymatic regeneration of electron acceptors used by flavoenzymes: cellobiose dehydrogenase-catalyzed production of lactobionic acid as an example | |
| AU2007232478B2 (en) | Nutritional supplement for alcoholic fermentation medium | |
| AU2012266805A1 (en) | Process of preparing a concentrated liquid foodstuff | |
| ES2916209T3 (es) | Procedimiento y dispositivo para la disminución biotecnológica de azúcares en materias primas de frutos, con el propósito de obtener productos de fruto con disminución en el contenido de azúcar | |
| Zeng et al. | Laccase activities of a soil fungus Penicillium simplicissimum in relation to lignin degradation | |
| Gmünder et al. | Chemostat studies on the hexadecane assimilation by the yeast Candida tropicalis: II. Regulation of cytochromes and enzymes | |
| EP3016524B1 (en) | Enzymatic fermentation process | |
| Cywińska-Antonik et al. | Quantitative assessment of oxidoreductase and catalase enzymatic activity in model systems for catalyzed degradation of glucose and hydrogen peroxide | |
| Kibari | Impact of glutathione enriched inactivated yeast on the organoleptic properties of beer | |
| KR102751372B1 (ko) | 균주 접종을 통해 유익성분을 함유하는 발효스프레드 및 이의 제조방법 | |
| Filimon et al. | Enzymatic reduction of glucose from grape must using glucose oxidase as a strategy for the production of low-alcohol wine | |
| CN106398929A (zh) | 一种啤酒保鲜酶制剂及其应用 |