ES2382909T3

ES2382909T3 - Procedimiento de evaluación de olor corporal

Info

Publication number: ES2382909T3
Application number: ES03748731T
Authority: ES
Inventors: Masayuki Yabuki; Yoshihiro Hasegawa; Masamoto Matsukane; Emi Yabe
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2002-10-04
Filing date: 2003-10-06
Publication date: 2012-06-14
Anticipated expiration: 2023-10-06
Also published as: EP1553411A4; AU2003268776A1; EP1553411B1; US7981686B2; US20060160240A1; ATE552499T1; EP1553411A1; US20100184122A1; WO2004031766A1

Abstract

Un procedimiento para evaluar olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de: una primera etapa de extracción de una mezcla de ácido b-hidroxicarboxílico y ácido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente de dicho ácido b-hidroxicarboxílico de la transpiración de un ser humano; una segunda etapa de adición de un reactivo a la mezcla para 5 mostrar color; y una tercera etapa de evaluación del tipo y/o fuerza de olor corporal a partir del color mostrado en la segunda etapa.

Description

Procedimiento de evaluacion de olor corporal

Campo técnico

La presente invencion se refiere a un procedimiento para evaluar un nivel de un olor corporal.

5 Tambien se describen, aunque no forman parte de la presente invencion, un kit de evaluacion y un procedimiento de evaluacion que incluye un reactivo de coloracion, que hace reaccionar acidoβ−hidroxicarboxilico o similares originado en la transpiracion de un ser humano con el reactivo de coloracion, asi como un material indicador para evaluar un olor corporal, y un procedimiento para evaluar la efectividad de un desodorante.

Técnica anterior

10 Recientemente, el numero de personas que estan preocupados por su olor corporal esta aumentando de acuerdo con el deseo creciente de higiene. El olor corporal es un termino colectivo para un olor generado desde cualquier parte del cuerpo, principalmente una cabeza, una boca, axilas, un area genital, pies y similares. En particular, ya que la propia persona o las personas alrededor perciben facilmente un olor axilar (olor de las axilas), un cierto nivel del mismo, por ejemplo, algunos factores que incluyen la presencia, fuerza, la diferencia en calidad o similares del olor

15 corporal tiende a dominar el nivel de olor corporal en terminos de todo un cuerpo. Ademas, la propia persona o las personas alrededor a menudo sienten que el propio olor axilar es mas desagradable que el olor corporal.

En la region axilar de un ser humano, no hay solamente glandulas ecrinas distribuidas casi a lo largo de todo el cuerpo sino tambien glandulas sudoriparas peculiares denominadas glandulas apocrinas. La region axilar de un ser humano es una parte en la que la transpiracion tiene menos posibilidades de vaporizarse y es probable que crezcan

20 bacterias. Por ello, es probable que la transpiracion segregada desde dos tipos de glandulas sudoriparas (sudoriparas ecrinas y sudoriparas apocrinas), el sebo, la caspa o similares se metabolicen por la accion de las bacterias sobre la piel para producir un olor.

Un olor debido a una transpiracion ecrina se denomina olor acido graso inferior o simplemente olor acido, que esta provocado por un acido carboxilico inferior que tiene de 2 a 5 carbonos y huele agrio y a aire viciado (de aqui en 25 adelante denominado olor acido graso inferior u olor acido). Tambien, dicho olor no solamente se produce en la axila sino tambien en todas las superficies cutaneas de todo el cuerpo. Por otro lado, un olor derivado de la glandula sudoripara apocrina se produce en una region axilar de un ser humano que tiene la llamada tragomascalia y denominado un olor apocrino o simplemente un "olor axilar" para distinguir. El olor apocrino es un olor picante peculiar de la region axilar y una misma persona o las personas alrededor lo perciben de manera particularmente

30 facil. Hay diferencias individuales en los olores axilares reales, que pueden clasificarse en terminos generales en un olor acido, un olor apocrino y el olor mezclado de los mismos.

Las personas con tragomascalia tiende a tener mas glandulas apocrinas en la region axilar en la que un olor acido debido a una transpiracion ecrina y un olor apocrino se mezclan para producir un olor fuerte peculiar. De este modo, si una persona esta preocupada por su propio olor axilar, la persona intenta reducir el olor usando un desodorante

35 que tiene un efecto desodorante o un efecto germicida, o extrayendo las glandulas apocrinas de la region axilar de manera quirurgica si el olor apocrino es particularmente fuerte.

Por ello, las personas que estan preocupadas por su propio olor corporal u olor axial, personas a las que se les senala su olor corporal en casa, el colegio, la oficina o similares, o personas que pueden colocar sus axilas en frente de la cara de alguien tales como peluqueros o dentistas, incluso si sus olores estan en un nivel imperceptible por

40 ellos mismos, tienen un gran interes en cuanto olor apocrino tienen originalmente en sus regiones axilares, y ademas si el uso de desodorantes o el esfuerzo para reducir un olor corporal tal como una operacion para extraer las glandulas apocrinas es actualmente efectivo.

Convencionalmente, como procedimientos para evaluar de un olor corporal, particularmente un olor apocrino, hay:

(1) un ensayo organoleptico en el que un tercero parte huele para determinar un olor de transpiracion de regiones

45 axilares con la nariz; (2) un procedimiento de evaluacion empirica que supone los hechos que son considerados que estan relacionados con un olor apocrino tales como la informacion genetica, por ejemplo, si hay un miembro familiar que tiene tragomascalia, un cerumen humedo, la coloracion de ropa interior en las regiones axilares o similares; (3) un procedimiento que supone un numero y un tamano de glandulas apocrinas, o similares.

El procedimiento (1) necesita miembros de un panel de expertos tales como dermatologos cualificados, por lo tanto

50 no puede realizarse facilmente. Tambien, el procedimiento (1) evalua el nivel de olor apocrino oliendo un olor del algodon que limpio las axilas de un sujeto de ensayo, que permite mezclar un juicio con un alto grado de subjetividad del evaluador y tiene dificultad en una evaluacion cuantitativa. Ademas, cuando la evaluacion se realiza de manera consecutiva, el sentido del olor se cansa y se consigue una menor objetividad.

El procedimiento (2) juzga a partir del potencial genetico o juzga indirectamente a partir de una relacion entre un 55 cerumen humedo y un olor apocrino. La evaluacion al colorear la ropa interior se centra en el asunto de la coloracion

contenida en sudoracion de glandulas apocrinas, que no evalua directamente el olor apocrino de las regiones axilares, por lo tanto, es un procedimiento indirecto de evaluacion.

Por consiguiente, hay un riesgo de falsa valoracion con puntos limitados de evaluacion y hay una posibilidad de ignorar el olor axial que no se hace realidad. Tambien, dichos estudios pueden ser indicaciones aproximadas para evaluar la tragomascalia, aunque, ya que no son cuantitativos y son dificiles de evaluar, pueden carecer de precision y no ser practicos para evaluar la mejora en el olor axilar despues de la operacion de extraer las glandulas apocrinas, la presencia y el nivel de recurrencia de olor apocrino debido a la regeneracion de glandulas apocrinas despues de la operacion, la efectividad de desodorizar o enmascarar de un desodorante o similares.

El procedimiento (3) estima un nivel de un olor corporal de tal manera que un medico realiza una incision quirurgica en las regiones axilares y despues observa el numero y tamano de las glandulas apocrinas. Un sujeto de ensayo necesita aceptar el sufrimiento mental y fisico, por lo tanto, el procedimiento no puede realizarse facilmente. Tambien, el coste de la operacion es generalmente alto.

El acido trans �3� metil�2�hexenoico, acido octenoico o similares contenidos en la transpiracion de las axilas como componentes del olor que son distintivos de las axilas se desvelan en "Molecular Recognition of Taste and Smell", Kagaku Sosetsu N° 40, 205� 211 (1999).

Un uso de cierto acido � hidroxicarboxilico o la sal del mismo como un material de perfume para animales se desvela en la Solicitud de Patente Japonesa Abierta a Inspeccion Publica (JP�A) N° Hei. 10�25265.

Por otro lado, un compuesto que tiene un grupo tiol en la posicion 3 que tiene un efecto de proporcionar un olor del tipo de la planta Salvia Sclarea significativamente fuerte como un componente aromatizante se desvela enel documento JP�A N° 2000� 95� 53.

En el documento JP�A N° 2001�2634 se desvelan, 3 �mecapto�3� metil �hexano�1�ol y 3 mercapto�2� metil�butano� 1�ol como compuestos de alcohol que tienen un grupo mercapto en la posicion 3. Se desvelan como componentes aromatizantes que tienen caracteristicas, en los que un isomero S de 3 �mecapto�3� metil �hexano�1�ol tiene un olor agreste o de tipo hierba, y un isomero R de 3�mecapto�3� metil�hexano�1�ol tiene un olor de tipo pomelo/fruta de la pasion, de tipo grosella o de tipo cebolla, y 3�mercapto�2� metil�butano� 1�ol tiene un olor de tipo hierba, de tipo puerro

o de tipo gas.

El alcohol 3 mercapto y los esteres formicos y aceticos del mismo se desvelan en la Solicitud de Patente Abierta a Inspeccion Publica N° 2.316.456 como agentes de fragancia y saborizantes efectivos para la preparacion y modificacion de una amplia variedad de componentes de sabor, en los que dicho alcohol 3 �mercapto y los esteres formicos y aceticos del mismo tienen un olor de tipo cebolla, de tipo azufre o de tipo sudor.

Un derivado tio como un componente de sabor y/o un potenciador de sabor se desvela en el documento JP�A N° 2003�1263 �, en el que el derivado tio recuerda al olor de una grosella negra, cebolla o pomelo.

Sin embargo, ni el acido β hidroxicarboxilico ni/o un derivado del mismo ni los compuestos de alcohol que tienen un grupo mercapto en la posicion 3 y/o derivados de los mismos se reconocieron por tener una relacion con un olor corporal de un ser humano particularmente en terminos de un agente causante de un olor corporal o constituyente de un olor axilar de un ser humano. Por ello, no se ha sido capaz de evaluar objetivamente y cuantitativamente la presencia o fuerza de un olor corporal de un ser humano, particularmente, un olor apocrino de regiones axilares.

Tambien, como un componente caracteristico del olor apocrino en las regiones axilares de un ser humano, convencionalmente no hubo solamente acido carboxilico no saturado que tenia de 6 a 10 carbonos como los tipificados por acido trans� 3 �metil�2� hexenoico y acido �octenoico sino tambien acido carboxilico inferior que tenia 5

o menos carbonos que provoca un olor acido y un acido carboxilico superior originado del sebo en la mezcla. Ha sido dificil separar selectivamente el acido carboxilico no saturado que es un componente caracteristico de un olor apocrino entre los varios componentes acidos.

Se desvela, aunque no es parte de la presente invencion, un material indicador para evaluar el olor corporal que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en:

una sustancia (A) es un compuesto de acido β �hidroxicarboxilico representado por la siguiente formula (1):

Formula (1)

en la que R1 es un alquilo que tiene de 1 a 4 carbonos; R2 es un atomo de hidrogeno o un alquilo que tiene de 1 a 4 carbonos, y el numero total de carbonos en la formula (1) es 10 o menos;

una sustancia (8) que es un derivado de acido β hidroxicarboxilico, en la que un atomo o atomos de un grupo atomico o grupos atomicos se introducen en un grupo hidroxilo y/o grupo carboxilico de un compuesto de acido β �hidroxicarboxilico representado por la formula (1);

una sustancia (C) que es un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representada por la siguiente formula (2):

Formula (2)

en la que R3 es un atomo de hidrogeno o grupo metilo; R4 es un grupo alquilo que tiene de 1 a 3 carbonos; y R5 es un atomo de hidrogeno o un grupo metilo, el numero total de carbonos en la formula (2) es � o menos, y

una sustancia (D) que es un derivado de un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3, en la que un atomo o atomos de un grupo atomico o grupos atomicos se introducen en un grupo mercapto y/o grupo hidroxilo de un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representado por la formula (2).

Se desvela un material indicador capaz de evaluar la presencia y fuerza de un olor apocrino de regiones axilares por las que muchas personas estan particularmente preocupadas entre los olores corporales objetivamente y cuantitativamente, y un procedimiento que usa el material indicador para evaluar un nivel de un olor corporal o la efectividad de un desodorante. Tambien se desvela un procedimiento para producir el material indicador para una evaluacion simple y precisa de un olor corporal. Ademas, se desvela un kit capaz de evaluar de manera segura, rapida y facil el tipo y nivel de olor corporal de un ser humano, y un procedimiento para evaluar el olor ser humano usando el kit.

Como resultado de minuciosos estudios sobre componentes que provocan el olor apocrino contenido en la transpiracion de las axilas, los inventores descubrieron y develan en el presente documento que las sustancias que existen en la transpiracion que tienen un olor significativamente similar al olor apocrino y que existen caracteristicamente en la transpiracion de personas que tiene el olor apocrino, tienen una concentracion suficiente para determinar de manera precisa la cantidad que son o mediante incubacion, y pueden separarse mediante una simple operacion quimica. Ademas, se desvela que los inventores hicieron que las sustancias fueran capaces de usarse como indice objetivos para evaluar cuantitativamente un nivel del olor apocrino de regiones axilares.

Tambien se desvela que varios materiales marcadores pueden introducirse a dichas sustancias con el fin de aumentar la sensibilidad analitica y/o precision de evaluacion, y los derivados obtenidos de materiales indicadores pueden usarse adecuadamente para evaluar el olor corporal y la efectividad de un desodorante.

Se desvela un material indicador para evaluar olor corporal que esta compuesto de al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en:

una sustancia (A) que es un compuesto de acido β hidroxicarboxilico representado por la siguiente formula (1):

Formula (1)

Formula (2)

en la que R3 es un atomo de hidrogeno o grupo metilo; R4 es un grupo alquilo que tiene de 1 a 3 carbonos; y R5 es un atomo de hidrogeno o un grupo metilo, siempre y cuando el numero total de carbonos en la formula

(2) sea � o menos, y

una sustancia (D) que es un derivado de un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3, en la que un atomo o atomos de un grupo atomico o grupos atomicos se introducen en un grupo mercapto y/o grupo hidroxilo de un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representado por la formula (2). Sin embargo, ninguna de las sustancias desveladas en el presente documento es por si misma parte de la presente invencion.

Tambien, un procedimiento para evaluar el olor corporal y un procedimiento para evaluar la efectividad de un desodorante desvelados en el presente documento son procedimientos para evaluar el nivel de olor corporal y efectividad de un desodorante usando como un material indicador al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en las sustancias (A), (8), (C) y (D) anteriormente mencionadas. En el caso de seleccionar dos o mas sustancias indicadoras entre las sustancias (A), (8), (C) y (D) para su uso, se desvela que puede usarse un material indicador que contiene todas las sustancias seleccionadas o puede usarse cada una de las sustancias indicadoras seleccionadas por separado en el curso del proceso de evaluacion. Tambien, se desvela que en un conjunto de procesos de evaluacion, una parte de las sustancias indicadoras seleccionadas puede mezclarse para su uso y cada una de las sustancias que no esta mezclada puede usarse por separado como una sola sustancia.

Se desvela que puede seleccionarse un tipo entre las sustancias (A), (8), (C) y (D) mencionadas anteriormente para su uso, o pueden seleccionarse arbitrariamente dos o mas tipos de las sustancias indicadoras para su uso en combinacion. Se devela, por ejemplo, que las sustancias indicadoras pueden usarse por separado o en combinacion del siguiente modo:

(1): Una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (A) y/o la sustancia (8).

La sustancia (A), es decir, un compuesto del acido hidroxicarboxilico representado por la formula (1), es particularmente efectivo para evaluar un olor apocrino de tipo aceite de comino. La sustancia (8) es un derivado de la sustancia (A) y se usa adecuadamente en lugar de la sustancia (A) con el fin de aumentar la sensibilidad analitica y/o precision de la evaluacion, en la que la sustancia (8) puede usarse en combinacion con la sustancia (A).

(2): Una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (C) y/o la sustancia (D). La sustancia (C), es decir, un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representado por la formula (2), es particularmente efectiva para evaluar el olor apocrino de tipo azufre. La sustancia (D) es un derivado de la sustancia (C) y se usa adecuadamente en lugar de la sustancia (C) con el fin de aumentar la sensibilidad analitica y/o precision de la evaluacion, en la que la sustancia (D) puede usarse en combinacion con la sustancia (C).

(3): Una combinacion de una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (A) y/o la sustancia (8) y una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (C) y/o la sustancia (D). Al usar la sustancia indicadora que comprende el grupo que consiste en la sustancia (A) y/o la sustancia (8) en combinacion con la sustancia indicadora que comprende el grupo que consiste en la sustancia (C) y/o la sustancia (D), pueden evaluarse tanto el olor apocrino de tipo aceite de comino como el olor apocrino de tipo azufre, asi, puede realizarse una evaluacion precisa de acuerdo con un olor apocrino real.

(4): Una combinacion de una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (A) y una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (C). Esta es una combinacion de sustancias indicadoras que no se derivatizan, que pueden ser mas adecuadas que usar derivados dependiendo del procedimiento de analisis o evaluacion.

(5): Una combinacion de una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (8) y una sustancia indicadora que comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (D).

Esta es una combinacion de sustancias indicadoras que se derivatizan, que pueden analizar o evaluar un nivel de olor mediante procedimientos diferentes al de una evaluacion directa usando un ensayo organoleptico y tambien pueden potenciar la sensibilidad analitica y/o precision de la evaluacion.

Ademas, se desvela un procedimiento para producir un material indicador que es un procedimiento para producir un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representado por la formula (2) mediante incubacion de la transpiracion originada en un ser humano en un ambiente con 10% v/v o menos de una concentracion de oxigeno.

Se desvela que la transpiracion originada en un ser humano se incuba en un medio con atmosfera anaerobica o microaerofilica para producir un compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 en una gran cantidad, de ese modo es imposible hacer que la evaluacion del olor corporal y la eficiencia de un desodorante sean mas faciles y mas precisas.

Los inventores de la presente invencion han centrado su atencion en un punto en el que un nivel de olor apocrino puede evaluarse facilmente a partir del color mostrado al separar acido β hidroxicarboxilico que incluye acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico que se acaba de descubrir como un componente principal que provoca olor apocrino de la transpiracion de las regiones axilares, y a partir de entonces reacciona con un reactivo de coloracion, y desvelan un kit capaz de evaluar de manera segura y facil un nivel del propio olor apocrino o un olor corporal total con enfoque en el olor apocrino, y un procedimiento para evaluar el olor ser humano usando el kit.

El kit para evaluar descrito en el presente documento es un kit para evaluar el olor corporal de un ser humano que incluye un reactivo de coloracion que reacciona con el acido β �hidroxicarboxilico y/o el acido graso que tiene 12 carbonos o menos, diferente a dicho acido β hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano respectivamente. El kit permitio evaluar un tipo y fuerza de olor y un nivel de olor ser humano originado en la transpiracion de un ser humano de manera segura, rapida y facil a partir del color mostrado al hacer reaccionar acido β �hidroxicarboxilico que es un material que provoca un olor apocrino y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico que es un material que provoca un olor acido con un reactivo de coloracion.

Divulgación de la presente invención

Un primer procedimiento para evaluar el olor corporal de acuerdo con la presente invencion usa el kit desvelado en el presente documento y es un procedimiento para evaluar el olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano; una segunda etapa de adicion del reactivo a la mezcla para mostrar color; y una tercera etapa de evaluacion del tipo y/o fuerza de olor corporal a partir del color mostrado en la segunda etapa.

Tambien, un segundo procedimiento para evaluar el olor corporal de acuerdo con la presente invencion usa el kit descrito en el presente documento y es un procedimiento para evaluar el olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano; una segunda etapa de separacion del acido β hidroxicarboxilico de la mezcla; una tercera etapa de reaccion de dicho acido β �hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con el reactivo para mostrar color; y una cuarta etapa para evaluar el tipo y/o fuerza de olor corporal a partir del color mostrado en la tercera etapa.

Ademas, un tercer procedimiento para evaluar el olor corporal de acuerdo con la presente invencion usa el kit desvelado en la presente invencion y es un procedimiento para evaluar el olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano; una segunda etapa de separacion de la mezcla en acido β hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico respectivamente; una tercera etapa de reaccion de dicho acido β �hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con el reactivo para mostrar color; una cuarta etapa de reaccion de dicho acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con el reactivo para mostrar color; una quinta etapa de evaluacion del tipo y/o fuerza de olor corporal de cada uno de los colores mostrados en

la tercera y cuarta etapa.

Breve descripción de los dibujos

En los dibujos adjuntos,

La FIG. 1 muestra los picos de elucion como un resultado del analisis GC MS de un extracto acido de transpiracion de una persona que tiene olor apocrino; La FIG. 2 muestra los picos de elucion como un resultado del analisis GC MS de un extracto acido de transpiracion de una persona que no tiene olor apocrino; La FIG. 3 es un grafico que muestra la relacion entre las cantidades de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico contenido en la transpiracion de regiones axilares y la fuerza de un olor apocrino, La FIG. 4 muestra el resultado del analisis GC MS de la transpiracion de una persona que tiene un olor apocrino; La FIG. 5 muestra el resultado del analisis GC MS de la transpiracion de una persona que no tiene olor apocrino; La FIG. 6 muestra el resultado del analisis GC MS de la transpiracion de una persona que tiene olor apocrino despues de la incubacion; La FIG. muestra el resultado del analisis GC �MS de la transpiracion de una persona que no tiene olor apocrino despues de la incubacion; La FIG. � muestra el proceso de evaluacion del nivel de olor corporal; La FIG. 9 muestra el procedimiento de uso de un kit para evaluar el nivel de olor corporal con el uso de una cromatografia de adsorcion en columna; La FIG. 10 muestra el procedimiento de uso de un kit para evaluar el nivel de olor corporal con el uso de una cromatografia en capa fina en columna; La FIG. 11 muestra la relacion entre la fuerza del olor apocrino (ensayo organoleptico) y la diferencia de color de las soluciones de la prueba despues de las reacciones de color; y La FIG. 12 muestra la absorbencia de la fraccion de metanol y fraccion de eter despues de la reacciones de color;

Mejor modo de realizar la invención

De aqui en adelante, el procedimiento de la presente invencion se explicara en detalle.

En el presente documento se desvela un material indicador para evaluar el olor corporal que es bastante similar a un olor apocrino real que se prepara seleccionando una o mas sustancias entre un grupo de compuestos de acido β hidroxicarboxilico que incluyen acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y compuestos que tienen una estructura quimica bastante similar a la de este, o seleccionando una o mas sustancias de un grupo de compuestos de alcohol 3 mercapto que incluyen 3� mercapto�3� metilhexanol y compuestos que tienen una estructura quimica bastante similar a la de este, o preferentemente usando el compuesto del acido β hidroxicarboxilico y el compuesto de alcohol 3 mercapto en combinacion, y de este modo puede obtenerse un resultado de una evaluacion precisa con respecto al nivel (fuerza y calidad) de olor corporal que las personas realmente sienten y la efectividad de un desodorante frente al olor corporal.

Se considera que dicho acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y los compuestos de alcohol 3 �mercapto encontrados en la transpiracion de regiones axilares de un ser humano por los inventores de la presente invencion tienen las siguientes caracteristicas, por lo que la cantidad presencial y el estado presencial del acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y/o los compuestos de alcohol 3 �mercapto en las regiones axilares forman el nivel y la diferencia individual del olor apocrino.

(Caracteristicas de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y compuesto de alcohol 3�mercapto)

(1): Una persona a la que no se le detecta acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico y/o compuesto de alcohol 3 mercapto en la transpiracion de sus regiones axilares no tiene el olor apocrino, pero una persona a la que se le detecta acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y compuesto de alcohol 3 �mercapto en la transpiracion de sus regiones axilares tiene el olor apocrino. Es decir, el acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico y el compuesto de alcohol 3 �mercapto estan especificamente presentes en la persona que tiene el olor apocrino (FIGS. 1, 2, 4 y 5).

(2): El olor apocrino es mas fuerte en una persona que tiene mas acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico (FIG. 3) y/o compuesto de alcohol 3 �mercapto contenido en la transpiracion de las regiones axilares.

(3): Una persona a la que no se le detecta acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico y/o compuesto de alcohol 3 mercapto en la transpiracion de sus regiones axilares incluso despues de la incubacion no tiene olor apocrino. Por otro lado, en lo relativo a una persona que tiene el olor apocrino, la cantidad de acido 3�hidroxi �3� metilhexanoico y/o compuesto de alcohol 3 �mercapto contenido en la transpiracion de las regiones axilares aumenta mediante incubacion. Es decir, el acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico y el compuesto de alcohol 3 mercapto aumentan especificamente mediante incubacion la transpiracion de la persona que tiene el olor apocrino (FIGS. 6 y �).

(4): Como el compuesto de acido β �hidroxicarboxilico no tiene solamente un grupo carboxilo sino tambien un grupo hidroxilo en la posicion 3, puede realizarse una modificacion quimica con el fin de tener una buena sensibilidad de deteccion en analisis instrumentales tales como una cromatografia de gases, una

cromatografia liquida o similares o para utilizar la reaccion de coloracion para evaluacion mediante un espectrometro o a simple vista. Tambien, el acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo puede separarse de otras sustancias que contribuyen poco al olor apocrino utilizando diferencias en polaridad, solubilidad o similares.

(5): Como el compuesto de alcohol 3 �mercapto no tiene solamente un grupo hidroxilo sino tambien un grupo mercapto en la posicion 3, puede realizarse una modificacion quimica con el fin de tener una buena sensibilidad de deteccion en analisis instrumentales tales como una cromatografia de gases, una cromatografia liquida o similares o para utilizar la reaccion de coloracion para evaluacion mediante un espectrometro o a simple vista. Tambien, el compuesto de alcohol 3 mercapto y/o el derivado del mismo puede separarse de otras sustancias que contribuyen poco al olor apocrino utilizando diferencias en polaridad, solubilidad o similares.

(6): Como el compuesto de acido β hidroxicarboxilico y el compuesto de alcohol 3 �mercapto pueden aislarse mediante la cromatografia de adsorcion o similares, la reaccion de color, que es segura, rapida y facil, puede utilizarse para evaluar cuantitativamente. ( ) Tambien, hay un olor picante de tipo comino y un olor a pescado de tipo azufre como principales malos olores que comprenden el olor apocrino. El acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico se detecta relativamente en abundancia en una persona que tiene el olor fuerte picante de tipo comino. El compuesto de alcohol 3 mercapto se detecta relativamente en abundancia en una persona que tiene un olor a pescado de tipo azufre.

Ademas, el compuesto de acido β �hidroxicarboxilico, que es un grupo de compuestos que tienen una estructura quimica bastante similar a la del acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico, es similar en caracteristicas tales como caracteristicas quimicas o caracteristicas organolepticas (particularmente olor) al acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico, por lo tanto, el compuesto de acido β �hidroxicarboxilico puede usarse como un indice objetivo para evaluar el olor apocrino de manera similar al acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico.

Por lo tanto, al medir la cantidad presencial y el estado presencial del acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo (por ejemplo, sal o ester de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico) en regiones axilares a traves de medios apropiados que son quimicos, fisicos o similares, el olor apocrino en las regiones axilares puede medirse objetivamente y cuantitativamente con el uso del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo como un indice.

Tambien, al medir la cantidad presencial y el estado presencial del compuesto de alcohol 3�mercapto y/o el derivado del mismo (por ejemplo, sal o ester de acido 3 mercapto� 3�metilhexanol) en regiones axilares a traves de medios apropiados que son quimicos, fisicos o similares, el olor apocrino en las regiones axilares puede medirse objetivamente y cuantitativamente con el uso del compuesto de alcohol 3 �mercapto y/o el derivado del mismo como un indice.

Particularmente se desvela que, mediante el uso del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo y el compuesto de alcohol 3 �mercapto y/o el derivado del mismo en combinacion, pueden evaluarse tanto el olor apocrino de tipo comino como el olor apocrino de tipo azufre, por lo tanto, puede realizarse una evaluacion precisa de acuerdo con un olor apocrino real. Tambien, en el caso de usar tal combinacion para la evaluacion de olor corporal y la efectividad de un desodorante, el nivel de olor corporal de un ser humano o el olor axilar, que es una parte del olor corporal, puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente no solamente a partir de la presencia y fuerza de olor apocrino en las regiones axilares sino tambien a partir de la diferencia en la calidad del mismo de manera que la precision del resultado de la evaluacion puede aumentar.

El compuesto de acido β hidroxicarboxilico de la sustancia (A) es un grupo de compuestos que incluyen el acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico y compuestos que tienen una estructura quimica similar al de este, que tiene un olor bastante similar al olor apocrino y esta representado por la siguiente formula (1). El acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico esta representado por la siguiente formula (3):

Formula (1)

Formula (3)

En la formula anterior (1), R1 es un alquilo que tiene de 1 a 4 carbonos, que puede ser un alquilo lineal o ramificado. Por ejemplo, puede ser metilo, etilo, n �propilo, i�propilo, n�butilo, i butilo y t�butilo. Puede considerarse que el

5 compuesto de acido β hidroxicarboxilico es mas facil de usar como material indicador si la caracteristica esta mas cerca del acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico. Por ello, con el fin de tener la estructura quimica cercana al acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico, es preferente que R1 tenga 3 o 4 carbonos, particularmente el caso de 3 carbonos es preferente, y es preferentemente un alquilo de cadena recta.

En la formula anterior (1), R2 es un atomo de hidrogeno o un alquilo que tiene de 1 a 4 carbonos, que puede ser un

10 alquilo lineal o ramificado. Como R2, por ejemplo, puede ser metilo, etilo, n�propilo, i�propilo, n� butilo, i �butilo y t butilo. Con el fin de tener la estructura quimica del compuesto de acido β hidroxicarboxilico cerca del acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico, es preferente que R2 tenga 1 o 2 carbonos, particularmente el caso de 1 carbono es preferente.

Entre los compuestos de acido β hidroxicarboxilico, acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico, acido 3�hidroxi �3�

15 metilpentanoico, acido 3 �hidroxi �3�metilbutanoico, acido 3�hidroxihexanoico y acido 3 �hidroxipentanoico son preferentes. Entre los anteriores, el acido 3�hidroxi �3 �metilhexanoico es particularmente adecuado como un material indicador ya que el propio acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico es una sustancia principal causante de olor apocrino presente en la transpiracion de las regiones axilares como se ha mencionado anteriormente.

El alcohol 3 �mercapto esta contenido en una cantidad relativamente grande en la transpiracion de una persona que

20 tiene el olor apocrino, y es un grupo de compuestos que incluyen 3�mercapto�3� metilhexanol, 3� mercaptohexanol, 3� mercaptopentanol, 3 �mercapto�2�metilpentanol, 3�mercapto �2�metilbutanol y compuestos que tienen una estructura quimica bastante similar a esos compuestos, que tiene un olor bastante similar al olor apocrino y esta representado por la formula (2). 3 mercapto 3�metilhexanol, 3�mercaptohexanol, 3�mercaptopentanol, 3 mercapto� 2�metilbutanol y 3�mercapto�2�metilpentanol estan representados por las siguientes formulas (4a) a (4e).

25 Formula (2)

en la que R3 es un atomo de hidrogeno o grupo metilo; R4 es un grupo alquilo que tiene de 1 a 3 carbonos; y R5 es un atomo de hidrogeno o un grupo metilo, el numero total de carbonos en la formula (2) es � o menos.

Formula (4a): 3� mercapto�3� metilhexanol

Formula (4b): 3� mercaptohexanol 5

40 Formula (4c): 3�mercaptopentanol

Formula (4d): 3� mercapto�2� metilbutanol

Formula (4e): 3� mercapto�2� metilpentanol

Puede considerarse que el compuesto de alcohol 3 �mercapto es mas facil de usar como un material indicador si la caracteristica esta cerca de 3�mercapto�3�metilhexanol que esta contenido en la transpiracion en una cantidad relativamente grande entre esos compuestos. Por ello, es preferente tener la estructura quimica cercana a 3� mercapto� 3�metilhexanol.

Desde el punto de vista, R3 en la formula anterior (2) es preferentemente un grupo metilo entre atomo de hidrogeno y grupo metilo. R4 es un grupo alquilo que tiene de 1 a 3 carbonos, que puede ser un alquilo lineal o ramificado, y ejemplos de ellos incluyen metilo, etilo, n� propilo e i �propilo. Particularmente, es preferente que R4 tenga de 2 a 3 carbonos, y mas preferentemente 3 carbonos. Tambien, R5 puede ser un atomo de hidrogeno o un grupo metilo. Entre ello, un atomo de hidrogeno es preferente.

Entre los compuestos de alcohol 3 mercapto, 3 �mercapto�3 metilhexanol, 3� mercaptohexanol, 3�mercaptopentanol, 3�mercapto�2�metilpentanol y3�mercapto�2�metilbutanol son preferentes. Entre ellos, 3mercapto�3�metilhexanol es particularmente util para un material indicador ya que 3 �mercapto�3�metilhexanol esta contenido en la transpiracion de las regiones axilares en una cantidad relativamente grande.

La sustancia (A) desvelada en el presente documento puede estar sujeta a modificacion quimica para que pueda usarse como la sustancia (8) con el fin de detectarse en una alta sensibilidad en la cromatografia de gases o cromatografia liquida o puede evaluarse mediante un espectrometro o a simple vista utilizando la reaccion de coloracion a menos que no pierda la funcion de deteccion como un material indicador. Por ejemplo, un atomo o atomos o un grupo atomico o grupos atomicos pueden introducirse a uno o a ambos de un grupo carboxilo y/o un grupo hidroxilo en la posicion �del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y despues usarse como derivados tales como sal, ester, amida, eter o similares.

Como un reactivo que puede usarse en el analisis de cromatografia liquida, analisis con espectrometro o prueba de colorimetria, y reacciona con un grupo carboxilo del compuesto de acido hidroxicarboxilico, pueden ser los reactivos que pueden conducir la hidrazida acida tales como 2 �nitrofenilhidrazina, hidrazida de acido carboxilico 6,�� dimetoxi �1�metil �2(1H)�quinoxalina�3�propionil (DMEQ H), p�(4,5�difenil�1H imidazol�2� il)� benzohidrazida, p �(1� metil 1h�fenantro� [9,10 �diimidazol�2 �il)�benzo hidrazida, p �(5,6 �dimetoxi�2�benzotiazoil)� benzohidrazida o similares; los reactivos que pueden provocar un ester tales como 9 antrildiazometano, 1 �naftildiazometano, 1 �(2� naftil)diazoetano 1�pirenildiazometano, 4�diazometil ��metoxicoumarina, 4 �bromometil�� metoxicoumarina (8r�MmC), 3 �bromoetil �6,�� dimetoxi �1�metil �2(1H)�quinoxalinona, 9 �bromoetilacridina, 4 �bromoetil� 6,�� metilenodioxicoumarina, N �(9�acridinil)� bromoacetamida, 2 �(2,3� naftilimino)etiltrifluorometano sulfonato, 2 �(ftalimino)etiltrifluorometano sulfonato, N clorometilftalimida, N clorometilo� 4 �nitroftalamida, N clorometilisoestano, o �(p�nitrobencil)�N,N'� diisopropilisourea (PN8DI) o similares; los regentes que pueden provocar amida tales como monodansilcadaverina, 2 �(p� aminometilfenil)�N,N �dimetil�2H �benzotriazol� 5 �amina o similares.

Como un reactivo que puede usarse en el analisis de cromatografia liquida, analisis con espectrometro o ensayo de colorimetria, y reacciona con un grupo hidroxilo del compuesto de acido β �hidroxicarboxilico, pueden ser los reactivos tales como cerio nitrato de amonio con el fin de conducir a un compuesto de coordinacion, los reactivos

tales como cloruro de benzoilo 4 �(2� ftalimidil) y el derivado del mismo con el fin de provocar un ester, los reactivos tales como 4 �diazometil�� metoxicoumarina con el fin de provocar un ester, o similar.

Tambien, el compuesto de acido β �hidroxicarboxilico puede conducirse a una sal inorganica, acido hidroxamico, cloruro acido, un complejo de cobre, complejo de cobalto y similares, y despues ademas ser inducido a un compuesto cromoforico. La sal inorganica del compuesto de acido β hidroxicarboxilico puede inducirse a una sal metalica cromoforica, el cloruro acido puede inducirse a una amida cromoforica, y un complejo de cobre o un complejo de cobalto de acido hidroxicarboxilico puede inducirse a un compuesto quelato cromoforico respectivamente.

Como un reactivo que conduce la sal inorganica del compuesto de acido β �hidroxicarboxilico a un ester cromoforico, puede ser bromuro de p �nitrobencilo, bromuro de fenacilo, bromuro de p�clorofenacilo, bromuro de p� bromofenacilo (P8P8), bromuro de p�yodofenacilo, bromuro de p �nitrofenacilo, bromuro de p �fenilfenacilo, bromuro de p fenilazofenacilo, cloruro de N,N �dimetil�p� aminobencenoazofenacilo y similares. Como un reactivo que conduce el acido hidroxamico a una sal compleja cromoforica, puede ser cloruro ferrico, vanadio y similares. Como un reactivo que conduce el cloruro acido a una amida cromoforica, puede ser 9 �aminofenantreno o similares. Como un reactivo que conduce el complejo de cobre o complejo de cobalto de un compuesto de acido hidroxicarboxilico a un compuesto quelato cromoforico, puede ser ditiocarbamato de dietilo, bis (ciclohexanona) oxalildilhidrazona, vasocupreina o similares. Pueden usarse mediante eleccion opcional como sea necesario.

Como un reactivo que puede usarse en el analisis de cromatografia de gases, y reacciona con un grupo carboxilo y/o un grupo hidroxilo del compuesto de acido β hidroxicarboxilico, puede ser un reactivo de sililacion tal como N trimetilsilimidazola (TMSI), N, O �bis (trimetilsilil) acetamida (8SA) o similares, un reactivo de acilacion tal como anhidrido trifluoroacetico, trifluoroacetilimidazol o similares.

El componente (C) desvelado en el presente documento puede someterse a modificacion quimica para usarse como una sustancia (D) con el fin de detectarse en una alta sensibilidad en la cromatografia de gases o cromatografia liquida o puede evaluarse mediante un espectrofotometro o a simple vista utilizando la reaccion de coloracion a menos que no pierda la funcion de deteccion como un material indicador. Por ejemplo, un atomo o atomos o un grupo atomico o grupos atomicos pueden introducirse a uno o a ambos de un grupo mercapto y/o un grupo hidroxilo en la posicion 3 de un compuesto de alcohol 3 mercapto y despues usarse como derivados tales como sal, ester, amida, eter o similares.

Como un reactivo y procedimiento que pueden usarse en el analisis de cromatografia liquida, el analisis con espectrofotometro y el ensayo de colorimetria y pueden usarse para reaccionar con el grupo mercapto del compuesto de alcohol 3 �mercapto, puede ser un procedimiento de fluorescencia que usa N �(9�acridinil)maleimida (NAM), sal de amonio de 4 cloro sulfobenzofurazano (S8DC1), sal de amonio de 4 fluoro sulfobenzofurazano (S8D �F), 4 �fluoro� ��sulfamoilbenzofrazano (A8D �F), N �[4�(5,6�metilenodioxi �2�benzofuranil)fenilimaleimida (M8PM), N [4�(6�dimetilamino �2�benzofuranil)fenilimaleimida (D8PM), N [p�(2�bencimidazolil)fenilimaleimida, monobromobimano, 5,5�ditiobis (2� acido nitrobenzoico), metosulfato de fenacina, aldehido o ftal, junto con 2 aminoetanol, que pueden usarse mediante eleccion libre como sea necesario.

Como un reactivo que puede usarse en el analisis de cromatografia liquida, el analisis con espectrofotometro y el ensayo de colorimetria y puede usarse para hacer reaccionar con un grupo hidroxilo del compuesto de alcohol 3 mercapto, pueden ser 3 clorocarbonil� 6,��dimetoxi �1�metil �2 (1H)�quinoxalinona (DMEQ COCI), 2 �5(clorocarbonil�2� oxazoil)�5,6�metilenodioxibenzofurano, cloruro de 3,4�dihidro�6, �dimetoxi�4�metil� 3�oxoquinoxalina�2�carboni 1, cloruro de ftalimidilbenzoilo, 1�antroilnitrilo, 9�antroilnitrilo, metoxicoumarina�3� carbonilazida, cloruro de p� fenilazobenzoilo, cloruro de 4 �dialquilamino� 3,5�dinitrobenzoilo, cloruro de p� nitrobenzoilo, cloruro de 3,5� dinitrobenzoilo o similares.

Como un reactivo que puede usarse en el analisis de cromatografia de gases y puede usarse para hacer reaccionar con un grupo mercapto y/o un grupo hidroxilo de un compuesto de alcohol 3 mercapto, puede ser un reactivo de sililacion tal como hexametildisilazano (HMDS), N trimetilsilil imidazol o similares, un reactivo de acilacion tal como anhidrido trifluoroacetico, trifluoroacetilimidazol o similares.

En el caso de usar un compuesto que tiene un cromoforo de una region visible se introduce como un compuesto etiquetado del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el compuesto de alcohol 3 mercapto, el nivel de olor apocrino puede evaluarse visualmente comparando la concentracion de color de la muestra convencional que se ha preparado preliminarmente en relacion con la concentracion del compuesto etiquetado con la coloracion generada en la transpiracion de un ser humano usando el mismo reactivo.

El compuesto de acido β hidroxicarboxilico y el derivado del mismo son adecuados para el material indicador en terminos de capacidad en evaluacion objetiva y valoracion del olor apocrino en cualquier momento y en cualquier lugar ya que pueden sintetizarse y el producto sintetizado puede suministrarse con una cierta calidad. El compuesto de acido β hidroxicarboxilico puede sintetizarse, por ejemplo, de acuerdo con la siguiente formula (5), en la que el ester que tiene un grupo hidroxilo en la posicion se sintetiza mediante la Reaccion de Reformatsky desvelada en Reformatsky Reaction: 8er. 20, 1210 (1� ��) y J. Russ. Phys. Chem. Soc., 22, 44 (1�90), y el ester se hidroliza.

Formula (5)

en la que R1 y R2 son los mismos que los mencionados anteriormente, y "X" es un atomo de halogeno.

Tambien, el compuesto de alcohol 3 �mercapto y el derivado del mismo son adecuados para el material indicador en

5 terminos de capacidad en evaluacion objetiva y valoracion del olor apocrino en cualquier momento y en cualquier lugar ya que pueden sintetizarse y el producto sintetizado puede suministrarse con una cierta calidad de manera estable.

El compuesto de alcohol 3 mercapto puede sintetizarse, por ejemplo, de acuerdo con la formula (6). Es decir, el compuesto de alcohol 3� mercapto se sintetiza preparando un derivado (a) de ester graso que tiene una estructura no

10 saturada en la posicion β, introduciendo bencilmercaptano o similares como un grupo tio eter en la posicion 3 del carbono carbonilo del derivado (a) para obtener un derivado (b) mediante la reaccion de adicion, reduciendo el derivado (b) con el uso de un agente reductor tal como hidruro de litio y aluminio o similares para convertir el grupo ester a un grupo alcohol para obtener un derivado (c),y continuamente llevar al grupo tio eter a un grupo mercapto mediante la reduccion 8irch.

15 Formula (6)

en la que R3, R4 y R5 sonlosmismosqueen la formula(2),R6 es un grupo bencilo y R es un grupo alquilo.

El compuesto de acido β hidroxicarboxilico y compuesto de alcohol 3 �mercapto sintetizado pueden convertirse cuando sea necesario a la sal, ester o el otro derivado a traves de medios conocidos.

20 El compuesto de acido β hidroxicarboxilico y el compuesto de alcohol 3 �mercapto, que tiene un atomo de carbono asimetrico, pueden sintetizarse como una mezcla racemica, o cada enantiomero puede formarse por separado mediante sintesis asimetrica. Tambien, la mezcla racemica puede someterse a la resolucion optica y usarse a partir de entonces.

En el material indicador para evaluar el olor corporal desvelado en el presente documento definitivamente la

25 sustancia (A) y/o la sustancia (C) por si misma puede usarse como un componente indicador, derivados de las sustancias indicadoras anteriormente mencionadas tales como la sustancia (8) y/o la sustancia (D) tambien puede

usarse. Tambien, una sustancia no derivada y una sustancia derivada pueden usarse en combinacion. Por ejemplo, combinaciones de: las sustancias (A) y (D); las sustancias (C) y (8); y las sustancias (A), (C) y (D) pueden usarse como un material indicador. Tambien, uno o mas tipos de cada grupo de sustancias (A) a (D) pueden usarse en combinacion. Ademas, pueden seleccionarse uno o mas tipos de los reactivos causantes conocidos del olor corporal de olor apocrino, olor acido o similares tales como acido acetico, acido butirico, acido isovalerico, acido 3 metil �2� hexenoico, acido 4�etilheptanoico, acido �octenoico, 1�octeno�3�uno, cis �1,5 �octadieno� 3�uno, 3a androstenol, 3a androstenon para anadirse al material indicador para evaluar el olor corporal.

De acuerdo con el material indicador para evaluar el olor corporal desvelado en el presente documento, es posible preparar un material indicador que corresponde a varios olores del olor apocrino diferentes en percepcion entre el tipo comino y el tipo sulfuro cambiando la proporcion de peso de la sustancia (A) y la sustancia (C) si es necesario. Particularmente, desde el punto de vista de tener la proporcion de presencia similar a la transpiracion en las regiones axilares reales, es preferente que la proporcion del peso en terminos de "la sustancia (C): las sustancia (A)" sea de 1:10 a 1:1.000 (proporcion del peso), mas preferentemente de 1:10 a 1:500, y mas preferentemente de 1:50 a 1:200.

En el presente documento se desvela que un olor corporal puede evaluarse con el uso de un material indicador desvelado en el presente documento.

Es decir, con el fin de acceder al nivel de olor corporal de un ser humano u olor axilar que es parte del olor corporal objetivamente y cuantitativamente en terminos de presencia o fuerza de olor apocrino de las regiones axilares, el compuesto de acido β hidroxicarboxilico sintetizado y/o el derivado del mismo puede usarse para determinar la cantidad y observar el contenido del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado de mismo contenido en la transpiracion de las regiones axilares. Tambien, el compuesto de alcohol 3 �mercapto sintetizado y/o el derivado del mismo puede usarse para determinar la cantidad y observar el contenido del compuesto de alcohol 3 mercapto sintetizado y/o el derivado del mismo contenido en la transpiracion de las regiones axilares. Ademas, el compuesto de acido hidroxicarboxilico sintetizado y/o el derivado del mismo y el compuesto de alcohol 3 �mercapto sintetizado y/o el derivado del mismo pueden usarse para determinar la cantidad y observar el contenido del compuesto de acido hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo y el compuesto de alcohol 3 mecapto y/o el derivado del mismo contenido en la transpiracion de las regiones axilares.

Cada uno de los materiales indicadores seleccionados puede usarse por separado como un material indicador o puede usarse como un material indicador que contiene una mezcla de sustancias plurales en el proceso de las etapas de evaluacion.

Tambien en el presente documento se desvela que el olor corporal puede evaluarse usando uno o mas tipos de compuesto de acido β hidroxicarboxilico y el derivado del mismo y/o uno o mas tipos de compuesto de alcohol 3 mercapto y el derivado del mismo como un indice. Es decir, "usar un indice" significa medir y evaluar las sustancias (A), (8), (C) y/o (D) contenidas en la transpiracion. Tipicamente, significa el caso de usar un material indicador preliminarmente preparado mediante sintesis o similares, aunque puede ser un procedimiento que no use un material indicador. Por ejemplo, puede ser un procedimiento para medir las sustancias (A), (8), (C) y/o (D) contenidas en la transpiracion en un cierto procedimiento y evaluar el nivel de olor corporal y efectividad de un desodorante en base a unos datos convencionales tales como una curva de calibracion o similares preliminarmente obtenidos.

Con el fin de medir la cantidad presencial y el estado presencial del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el compuesto de alcohol 3 mercapto o el derivado del mismo, pueden adaptarse algunos procedimientos para obtener transpiracion originada de un ser humano, tal como un procedimiento en el que se hace que los sujetos de ensayo entren a una habitacion bajo un ambiente con alta temperatura y se les somete a sudoracion termica y despues la transpiracion de las regiones axilares se recoge en un tubo de ensayo o similar, un procedimiento en el que una almohadilla de algodon se adjunta a las regiones axilares durante un cierto tiempo, un procedimiento en el que la transpiracion en las regiones axilares se limpia con un algodon o similares.

El compuesto de alcohol 3 mercapto se produce de 10 a 100 veces o mas al incubar la transpiracion originada en un ser humano que tiene el olor apocrino bajo la atmosfera anaerobica. Por otro lado, no se produce incluso al incubar la transpiracion originada en un ser humano que no tiene un olor apocrino.

Al utilizar esta caracteristica, el analisis despues de la incubacion de la transpiracion obtenida facilita la deteccion del compuesto de alcohol 3 �mercapto, la utilidad de la sustancia (C) como material indicador mejora, y la precision del resultado del analisis puede mejorar al mismo tiempo. Ademas, al utilizar esta caracteristica, el compuesto de alcohol 3 �mercapto puede producirse de manera industrial como un material indicador.

Tambien, si un sudor apocrino no es esta segregando en las regiones axilares pero los microorganismos no descomponen la transpiracion y el olor no aparece, significa que hay un estado latente de olor apocrino. En tal estado, no puede realizarse una evaluacion precisa incluso si se realiza un ensayo organoleptico o una investigacion sobre la relacion con el olor axilar.

Por el contrario, al evaluar el olor corporal usando un material indicador despues de incubar la transpiracion originada en un ser humano bajo una atmosfera anaerobica, es posible evaluar si un sujeto de ensayo tiene una constitucion que puede producir un olor apocrino, es decir, es posible realizar una evaluacion potencial.

Como un procedimiento para preparar una atmosfera anaerobica o microaerofilica para producir el compuesto de alcohol 3 �mercapto en gran cantidad a partir de la transpiracion recogida, no esta particularmente limitado siempre y cuando el procedimiento pueda eliminar el oxigeno en la atmosfera de incubacion y sustituirlo por dioxido de carbono. Pude haber procedimientos tales como rellenar con gas mezclado (nitrogeno y dioxido de carbono) artificialmente preparado, usar un agente que genera dioxido de carbono vaciando el gas de oxigeno o similares. Tambien, en lugar del gas mezclado binario (nitrogeno y dioxido de carbono), puede usarse un gas mezclado triple (nitrogeno, dioxido de carbono e hidrogeno). Como un procedimiento para reducir la concentracion de oxigeno restante, puede ser un procedimiento en el que una lana de acero de reduccion absorbe el resto del oxigeno, y un procedimiento que convierte el oxigeno en agua usando un catalizador.

La concentracion de gas de oxigeno bajo una atmosfera anaerobica o microaerofilica puede estar en el intervalo comprendido entre 0 y 10 v/v% (volumen en volumen porcentual, en lo sucesivo simplemente referido como "%"), preferentemente entre 0 y 5%, mas preferentemente entre 0 y 1%. Tambien, la concentracion de dioxido de carbono puede estar en el intervalo comprendido entre 5,0 y 22,0%, preferentemente entre 10,0 y 22,0%, mas preferentemente entre 20,0 y 22,0%.

La temperatura de incubacion de la transpiracion originada en un ser humano para producir el compuesto de alcohol 3�mercapto en gran cantidad puede estar en el intervalo comprendido entre 15 y 45 °C, preferentemente entre 20 y 40 °C, mas preferentemente entre 25 y 3 °C. Tambien, el tiempo de incubacion de la transpiracion puede estar en el intervalo comprendido entre 6 y 336 horas, preferentemente entre 12 y 240 horas, mas preferentemente entre 24 y 16� horas.

Como un procedimiento para evaluar el olor corporal desvelado en el presente documento que usa un material indicador para evaluar el olor corporal desvelado en el presente documento o que usa uno o mas tipos entre las sustancias (A), (8), (C) y (D) como un indice, puede ser un ensayo organoleptico directa mediante olfato humano y una evaluacion cuantitativa basada en el analisis quimico, que puede usarse adaptando a varios sistemas conocidos de evaluacion.

En el caso de realizar un ensayo organoleptico mediante olfato, un material indicador desvelado en el presente documento en el que el acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico o el derivado del mismo y/o el compuesto de alcohol 3 mercaptoo el derivado del mismo se diluye en varios grados para preparar muestras convencionales de olor de cada concentracion. Despues, el olor de cada muestra preparada usando la transpiracion recogida de las regiones axilares y las muestras convencionales se comparan para evaluar la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y/o compuesto de alcohol 3�mercapto contenido en la transpiracion por el ensayo organoleptico.

En el caso de medir el contenido de la sustancia (A) y la sustancia (C) contenidas en la transpiracion de la regiones axilares mediante GC MS, el acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico o el derivado del mismo y el compuesto de alcohol 3 mercapto o el derivado del mismo se usan preferentemente como un material convencional (estandar) para formar cada curva de calibracion. Usando la curva de calibracion, un pico de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico y el compuesto de alcohol 3 �mercapto se identifican respectivamente, y se mide la cantidad.

En el caso de usar tal analisis instrumental, un material indicador que contiene la sustancia (8) y la sustancia (D) que respectivamente son derivados obtenidos al hacer reaccionar la sustancia (A) y la sustancia (C) con el material etiquetado, puede usarse un reactivo fluorescente o similar que es facilmente detectable. Tambien, como un procedimiento para detectar la sustancia (C) y/o la sustancia (D) que es una derivada de la misma, hay un procedimiento para introducir un extracto de la transpiracion obtenida de un ser humano como un especimen usando un disolvente organico o similar directamente en la cromatografia de gases provista de un detector de azufre muy sensible.

Tambien, como un procedimiento de medicion para evaluar el olor corporal, puede anadirse un reactivo de coloracion a la sustancia (A) y/o la sustancia (C) separado de la transpiracion para medir el color mostrado por el espectrometro o realizar una evaluacion de colorimetria a simple vista.

En el caso de utilizar la reaccion de coloracion, puede realizarse un ensayo organoleptico preparando preliminarmente muestras convencionales de coloracion de varias concentraciones en forma de tubos colometricos llenos de una solucion acuosa o en forma de papeles de prueba que impregnan el compuesto etiquetado con el uso de un material indicador que contiene la sustancia (A) y la sustancia (C) que reaccionan con el reactivo de coloracion

o similar, y comparando el cambio de color obtenido al hacer reaccionar la transpiracion recogida con el reactivo de coloracion con las muestras convencionales de coloracion.

De esta manera, el nivel de olor corporal u olor axial, que es una parte del olor corporal, puede evaluarse evaluando cuantitativamente la fuerza del olor debido a la sustancia (A) y la fuerza del olor debido a la sustancia (C) con el uso de olor o un parametro diferente al olor y despues evaluando exhaustivamente.

Tambien, si hay una cantidad de produccion de acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico y/o el compuesto de alcohol 3 mercapto en una gran cantidad en las regiones axilares pero se cambian a un derivado de los mismos que no tiene olor o que tiene un olor debil tal como una sal o similar, significa que hay un estado latente del olor apocrino. En tal estado, no puede realizarse una evaluacion precisa incluso si se realiza un ensayo organoleptico o una investigacion sobre la relacion con un olor axilar. Por el contrario, debido a que los derivados que tienen olor latente de acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico y/o el compuesto de alcohol 3 �mercapto pueden analizarse y convertirse a la cantidad de la sustancia (A) y la sustancia (C) desveladas en el presente documento, es posible evaluar si un sujeto de ensayo tiene una constitucion que puede producir olor axilar, es decir, es posible realizar una evaluacion potencial.

Un material indicador desvelado en el presente documento puede utilizarse para el analisis quimico, el analisis instrumental, el ensayo organoleptico o similar como se ha descrito anteriormente y es capaz de una evaluacion cuantitativa con alta objetividad. Particularmente, al expresar el valor medido como la cantidad del compuesto de acido β �hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo y el compuesto de alcohol 3�mercapto y/o el derivado del mismo con el uso del analisis quimico, analisis instrumental o similares, la subjetividad puede excluirse del resultado de la evaluacion y el olor corporal puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente.

Ademas se desvela que la efectividad de un desodorante dirigido al olor apocrino puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente con el uso de un material indicador o las sustancias que constituyen tal material indicador como el indice.

Como un procedimiento para evaluar la efectividad de un desodorante desvelado en el presente documento, el material indicador puede usarse como una sustancia simple pero tambien puede usarse como una composicion preparada combinando otras sustancias, por ejemplo, un disolvente para disolucion o dilucion, o un aditivo tal como un estabilizador, desodorante, bactericida, agente antibacteriano, surfactante, antioxidante, perfume, extractos de plantas o similares para adaptarse al uso practico tal como conservacion, uso en la prueba de evaluacion o similares.

El desodorante dirigido al olor apocrino puede tener cualquier tipo de mecanismo de funcion tal como un tipo que previene la descomposicion de la transpiracion desinfectando bacterias sobre la piel, un tipo que descompone o cambia una sustancia con olor a un derivado sin olor, un tipo que tapa el olor o similar. Un procedimiento para usar el compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo, el compuesto de alcohol 3 �mercapto y/o el derivado del mismo, o ambos en combinacion como un material indicador para evaluar la efectividad de un desodorante no esta particularmente limitado y puede usarse de acuerdo con el mecanismo de funcion de un desodorante y el sistema de evaluacion.

Por ejemplo, la efectividad de una muestra de desodorante puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente anadiendo una cantidad predeterminada de la muestra de desodorante a un material indicador que contiene compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el derivado del mismo, preferentemente acido 3�hidroxi �3� metilhexanoico o el derivado del mismo, y el compuesto de alcohol 3 �mercapto o el derivado del mismo, preferentemente 3�mercapto� 3 �metilhexanol, 3�mercaptohexanol, 3�mercaptopentanol, 3 mercapto� 2�metilpentanol, 3�mercapto�2�metilbutanol o los derivados de los mismos en una concentracion predeterminada como la sustancia indicadora, y determinando cuantitativamente el estado cambiado del material indicador en un procedimiento apropiado.

Como un procedimiento para determinar cuantitativamente el estado cambiado del material indicador, si la muestra de desodorante es un tipo que descompone o lleva al acido β hidroxicarboxilico y/o el compuesto de alcohol 3 mercapto a otro compuesto para reducir el olor, puede realizarse un analisis instrumental usando una curva de calibracion del material indicador que se forma preliminarmente o puede realizarse un analisis quimico tal como titulacion o extraccion de un producto cambiado o un estado no cambiado del material indicador para determinar la cantidad. Si la muestra de desodorante es un tipo que tapa el olor apocrino, el efecto de enmascaramiento puede evaluarse mediante el ensayo organoleptico en la que el material indicador se diluye en varios niveles para preparar muestras convencionales de olor de cada concentracion y el olor del material indicador que se anade a la muestra del desodorante se compara con las muestras convencionales.

Tambien, la medicion cuantitativa puede realizarse usando un compuesto etiquetado del acido β hidroxicarboxilico y/o el compuesto de alcohol 3 �mercapto tal como un compuesto fluorescente etiquetado, de tal manera que se anada una cantidad predeterminada de la muestra de desodorante a un material indicador que contiene tal compuesto etiquetado en una concentracion predeterminada y despues se realiza el analisis instrumental para determinar el estado cambiado del material indicador con el uso de la curva de calibracion del mismo material indicador. Tambien, una parte etiquetada del compuesto etiquetado se detecta cuando una cantidad predeterminada de muestra de desodorante se anade a un material indicador que contiene un compuesto etiquetado en una concentracion predeterminada y a partir de entonces la cantidad de un producto cambiado o un estado no cambiado del material indicador se determina mediante el analisis quimico tal como titulacion, extraccion o similares.

Ademas, tambien es posible aplicar una muestra de desodorante realmente sobre las regiones axilares de un ser humano para evaluar y comparar cada transpiracion de las regiones axilares obtenida antes y despues de la aplicacion con el uso de un material indicador como el descrito en el presente documento.

De esta manera, la efectividad de un desodorante puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente, evaluando la fuerza del olor debido a la sustancia (A) y la fuerza del olor debido a la sustancia (C) contenidas en el olor apocrino de un material indicador desvelado en el presente documento en el que se hace un desodorante con el uso del olor

o un parametro diferente al olor y despues se evalua exhaustivamente.

Como se ha mencionado anteriormente, el nivel de olor corporal de un ser humano u olor axilar, que es una parte del olor corporal, puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente desde el punto de vista de presencia, fuerza y diferencia en calidad del olor apocrino en las regiones axilares usando un material indicador para evaluar el olor corporal que contiene al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en el compuesto de acido β hidroxicarboxilico representado por la formula (1) (sustancia (A)), el derivado de la sustancia (A) (sustancia (8)), el compuesto de alcohol que tiene un grupo mercapto en la posicion 3 representado por la formula (2) (sustancia (C)), y el derivado de la sustancia (C) (sustancia (D)), o usando al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en las sustancias (A), (8), (C) y (D) anteriormente mencionadas como un indice.

Particularmente, el olor debido a la sustancia (A) y el olor debido a la sustancia (C) pueden evaluarse exhaustivamente usando un material indicador para evaluar olor corporal que contiene al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (A) y/o la sustancia (8) y al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en la sustancia (C) y/o la sustancia (D), o usando la sustancia (A) y/o (8) y la sustancia (C) y/o

(D) en combinacion como un indice. Por lo tanto, el olor apocrino que los seres humanos realmente huelen puede evaluarse de manera mas precisa.

Un material indicador para evaluar el olor corporal desvelado en el presente documento puede evaluar objetivamente y cuantitativamente el olor corporal particularmente expresando el valor medido como contenido de la sustancia (A) y/o (8) o la sustancia (C) y/o (D) a traves del analisis quimico, analisis instrumental o similar.

Incluso si la transpiracion en las regiones axilares se cambia a derivados que no tienen olor o que tienen olor debil tal como una sal, ester o similar del compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o la sal, ester o similar del compuesto de alcohol 3 �mercapto, el compuesto de acido β hidroxicarboxilico y/o el compuesto de alcohol 3 mercapto es una muestra que puede detectarse o cuantificarse mediante un material indicador como el desvelado en el presente documento. Por lo tanto, el estado latente de olor axilar, concretamente, el estado sin olor o con olor debil puede tambien evaluarse de manera objetiva y precisa.

Tambien, si un sudor apocrino se esta segregando en las regiones axilares pero los microorganismos no descomponen la transpiracion y no se genera olor, significa que hay un estado latente del olor apocrino. Incluso en tal caso, es posible evaluar si un sujeto de ensayo tiene una constitucion que puede producir un olor apocrino, es decir, es posible realizar una evaluacion potencial incubando la transpiracion originada en un ser humano.

Ademas se desvela que puede obtenerse de manera precisa un resultado de la evaluacion correspondiente al efecto de desodorizacion y enmascaramiento frente al olor apocrino de un desodorante usando un material indicador que contiene una sustancia seleccionada de las sustancias (A) y (8) y/o una sustancia seleccionada de las sustancias

(C) y (D), o usando una sustancia seleccionada de las sustancias (A) y (8) y/o una sustancia seleccionada de las sustancias (C) y (D) como un indice. Por lo tanto, la efectividad de un desodorante dirigido al olor apocrino puede evaluarse objetivamente y cuantitativamente.

Ademas se desvela que tambien es posible producir un material indicador desvelado en el presente documento utilizando la caracteristica de que el contenido del compuesto de alcohol 3 �mercapto aumenta mediante la incubacion de la transpiracion en las regiones axilares de una persona que tiene olor apocrino.

Un kit para evaluar olor corporal desvelado en el presente documento es un producto que es una combinacion de al menos un reactivo de coloracion que reacciona con acido β hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano y accesorios que ayudan a una reaccion del acido β �hidroxicarboxilico y/u otras sustancia que provocan el olor corporal originado en la transpiracion con el reactivo de coloracion y una evaluacion basada en la coloracion. En los accesorios para ayuda, hay accesorios esenciales tales como medios de extraccion usados para pretratamiento que siempre se realiza antes de la reaccion de coloracion o evaluacion, y accesorios que mejoran la conveniencia tales como facilitacion, simplificacion o similares de la reaccion de coloracion o evaluacion.

Un kit para evaluar olor corporal incluye, por ejemplo, equipos y reactivos para extraer o separar el acido β hidroxicarboxilico y/o acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion en las regiones axilares, y uno o mas reactivos que muestran color reaccionando con el acido β hidroxicarboxilico y/o acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano. Ademas, el kit puede incluir acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico como una sustancia indicadora.

La FIG. muestra un diagrama esquematico de un proceso de evaluacion del olor corporal originado en la transpiracion de un ser humano, particularmente olor apocrino, que utiliza la reaccion de coloracion del acido hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico. Tambien, las FIGS. 9 y 10 muestran el equipo tipico incluido en el kit para evaluar el olor corporal y ejemplos de la

utilidad del mismo.

Como un procedimiento de recogida de transpiracion de las regiones axilares, puede ser el procedimiento que directamente recoge la transpiracion generada por la sudoracion termica en tubos de ensayo o similares, el procedimiento en el que los sujetos de ensayo llevan puesta una camiseta con almohadillas de algodon cosidas en una posicion correspondiente a la axila durante un cierto tiempo, o el procedimiento que directamente limpia la transpiracion en la axila con una gasa o similar.

Como un procedimiento de extraccion de material acido contenido en la transpiracion, no esta limitado siempre y cuando el procedimiento pueda extraer el material acido. Generalmente, se usa la extraccion con base acida mediante solucion acuosa de alcali. Como la solucion acuosa alcalina, puede ser una solucion acuosa de hidrogenocarbonato de sodio, solucion acuosa de carbonato de sodio, solucion acuosa de hidroxido de sodio, solucion acuosa de hidroxido de potasio o similares. Tambien es posible extraer el material acido usando la resina de intercambio de ion.

Como un procedimiento para evaluar un nivel del olor apocrino, puede ser un procedimiento en el que el material acido extraido en el proceso anterior se separa en el acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos

: o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico respectivamente, y a partir de entonces se anade un reactivo de coloracion al acido β �hidroxicarboxilico separado para observar un color mostrado.

Un procedimiento para separar acido β hidroxicarboxilico y el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β hidroxicarboxilico en el material acido no esta particularmente limitado siempre y cuando el procedimiento pueda separar usando la polaridad de molecula. Puede utilizarse la cromatografia de adsorcion en la que un tubo de cristal o un tubo de plastico se llena con un adsorbente apropiado tal como un polvo de gel de silice

: o similar, la cromatografia en capa fina en columna en la que una placa de cristal o de plastico o similar se cubre con un adsorbente apropiado tal como gel de silice o similar.

La cromatografia de adsorcion en columna puede descargar en orden ascendente de adsorbabilidad para ocupar por separado cuando componentes que tienen una alta absorbabilidad se quedan en la parte superior y los componentes que tienen una baja adsorbabilidad corren mas rapido cuando la solucion del material acido anterior fluye desde la parte superior del tubo de cristal. En el caso de usar el material acido originado en la transpiracion de un ser humano como una muestra, por ejemplo, como se muestra en la FIG. 9, despues de eluir el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β hidroxicarboxilico con el uso de un disolvente polar medio tal como eter dietilico, el acido β hidroxicarboxilico puede juntarse con el uso de un disolvente polar alto tal como metanol. Por ello, cuando un reactivo de coloracion se anade a una fraccion de metanol y la fraccion de metanol para generar coloracion, la presencia del acido β hidroxicarboxilico puede confirmarse. Tambien, el color de la solucion de la prueba puede cuantificarse mediante medicion usando equipos tales como un espectrofotometro o un medidor de diferencia de color asi como el ensayo organoleptico a simple vista.

La cromatografia en capa fina en columna es un procedimiento que separa moleculas diferentes en polaridad sobre una placa, por ejemplo como se muestra en la FIG. 10, si el material acido originado en la transpiracion de un ser humano se coloca en la posicion predeterminada de una placa y despues se desarrolla con el uso del disolvente polar medio tal como eter dietilico, el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico se extiende alrededor junto con el disolvente, aunque el acido β hidroxicarboxilico se queda en la posicion colocada. Por ello, si un reactivo de coloracion se coloca en el centro del lugar colocado para generar coloracion, la presencia del acido β hidroxicarboxilico originado en la transpiracion puede confirmarse. De esta manera, el procedimiento de cromatografia en capa fina en columna puede pulverizar directamente el reactivo de coloracion sobre la placa, por lo tanto, la prueba de coloracion cualitativa y cuantitativa puede realizarse rapidamente.

Como un procedimiento que evalua la presencia o cantidad de acido β hidroxicarboxilico que usa la reaccion de coloracion, puede ser: (1) un procedimiento que directamente introduce un cromoforo en un grupo hidroxilo o un grupo carboxilo de acido β hidroxicarboxilico; (2) un procedimiento que convierte acido β �hidroxicarboxilico al derivado del mismo e introduce un cromoforo en el derivado; (3) un procedimiento que descompone acido hidroxicarboxilico e introduce un cromoforo en el producto descompuesto; o similares.

(1) Como un reactivo de coloracion que se usa en un procedimiento que introduce directamente un cromoforo en un grupo hidroxilo o un grupo carboxilo del acido β hidroxicarboxilico y reacciona con un grupo carboxilo del acido β hidroxicarboxilico para mostrar color, puede ser un reactivo que lleva el acido β hidroxicarboxilico a una hidrazida acida cromoforica en presencia de un agente condensador para generar coloracion, un reactivo que lleva el acido β hidroxicarboxilico a un ester cromoforico para generar coloracion, un reactivo que lleva el acido β hidroxicarboxilico a una amida cromoforica para generar coloracion o similares.

Como un agente de coloracion que lleva el acido β hidroxicarboxilico a la hidrazida acida cromoforica, puede ser 2� nitrofenilhidrazina, hidrazida de acido carboxilico 6,�� dimetoxi �1�metil �2(1H)�quinoxalina�3�propionil (DMEQ H), p (4,5�difenil�1H �imidazol�2� il)�benzohidrazida, p �(1� metil�1h� fenantro �[9,10�diimidazol� 2 �il)� benzo hidrazida, p �(5,6�

dimetoxi �2�benzotiazoil)�benzohidrazida o similares.

Como un reactivo que lleva el acido β �hidroxicarboxilico al ester cromoforico para generar coloracion, puede ser 9� antrildiazometano, 1 naftildiazometano, 1�(2� naftil)diazometano, 1 pirenildiazometano, 4 diazometil�� metoxicoumarina, 4 �bromometil��metoxicoumarina, 3 bromoetil �6,�� dimetoxi�1�metil� 2(1H)�quinoxalinona, bromoetilacridina, 4 �bromoetil�6, ��metilenodioxicoumarina, N �(9�acridinil)� bromoacetamida, 2 �(2,3 naftilimino)etiltrifluorometano sulfonato, 2 �(ftalimino)etiltrifluorometano sulfonato, imida N cloromometilftalica, imida N clorometil�4� nitroftalica, N �clorometilestano o� (p �nitrobencil)�N,N'�diisopropilisourea o similares;

Como un reactivo que lleva el acido β hidroxicarboxilico a la amida cromoforica para generar coloracion, puede ser monodansilcadaverina, 2�(p� aminometilfenil) �N,N �dimetil �2H benzotriazol �5�amina o similares.

Como un reactivo de coloracion que reacciona con un grupo hidroxilo del acido β �hidroxicarboxilico para generar coloracion, puede ser un reactivo que conducea un compuesto de coordinacion cromoforico a generar coloracion, un reactivo que conduce a un ester cromoforico a generar coloracion, un reactivo que conduce a un eter cromoforico a generar coloracion o similares. Como un reactivo que conduce al compuesto de coordinacion cromoforico a generar coloracion, puede ser cerio, nitrato de amonio o similares. Como un reactivo que conduce al ester cromoforico a generar coloracion, puede ser cloruro de benzoilo 4 �(2� ftalimidil), el isomero del mismo, el derivado del mismo o similares. Como un reactivo que conduce al eter cromoforico a generar coloracion, puede ser 4� diazometil� ��metoxicoumarina o similares.

(2) Como un derivado del acido β hidroxicarboxilico que puede utilizares para la reaccion de coloracion en el procedimiento que convierte acido β hidroxicarboxilico al derivado del mismo y despues introduce un cromoforo en el derivado, puede ser una sal inorganica, acido hidroxamico, cloruro acido, un complejo de cobre, complejo de cobalto o similares.

La sal inorganica del compuesto de acido β �hidroxicarboxilico reacciona con un halogeno aromatico para ser inducida a un eter cromoforico, el acido hidroxamico es inducido a la sal metalica cromoforica, el cloruro acido es inducido a la amida cromoforica, un complejo de cobre y un complejo de cobalto del acido hidroxicarboxilico son inducidos a un compuesto quelato que reacciona con cobre y cobalto respectivamente para generar coloracion.

Como un procedimiento para convertir acido β hidroxicarboxilico a sal inorganica, puede ser un procedimiento que mezcla el acido β hidroxicarboxilico con el material alcalino tal como solucion de carbonato de hidroxido de sodio, solucion de carbonato de sodio, solucion de hidroxido de sodio, solucion de hidroxido de potasio o similares para neutralizar. Como un halogeno aromatico que reacciona con la sal inorganica del acido β hidroxicarboxilico que sera inducido al ester cromoforico, puede ser bromuro de p� nitrobencilo, bromuro de fenacilo, bromuro de p� clorofenacilo, bromuro de p �bromofenacilo, bromuro de p�yodofenacilo, bromuro de p �nitrofenacilo, bromuro de p �fenilfenacilo, bromuro de p�fenilazofenacilo, cloruro de N,N �dimetil�p� aminobencenoazofenacilo y similares.

Como un procedimiento para convertir acido hidroxicarboxilico a acido hidroxamico, puede ser un procedimiento que hace reaccionar acido β �hidroxicarboxilico con hidroxilamina en presencia de un agente condensador, un procedimiento que hacer reaccionar acido β hidroxicarboxilico con hidrocloruro de hidroxilamina usando niquel como catalizador o similares. Como un reactivo metal que forma la sal del complejo cromoforico con el acido hidroxamico, puede ser un cloruro ferrico, vanadio o similares.

Como un procedimiento para convertir acido β hidroxicarboxilico en cloruro acido, puede ser un procedimiento que hace reaccionar acido β hidroxicarboxilico con oxalilcloruro o similares. Como un procedimiento para llevar el cloruro acido a la amida cromoforica, puede ser un procedimiento que hace reaccionarlo con 9� aminofenantreno en presencia de trietilamina o similares.

Como un reactivo que forma el compuesto de quelato cromoforico (complejo) con cobre o cobalto, puede ser acido dietilditiocarbamico, biciclohexanoneoxalildihidrazona, batocuproina o similares.

(3) Como un procedimiento que descompone acido β �hidroxicarboxilico y hace que el producto descompuesto muestre color, puede ser un procedimiento en el que se hace la sintetasa de acil�CoA para el acido β hidroxicarboxilico en presencia de acido trifosforico de adenosina (ATP y coencima CoA para producir acil�CoA, que despues se procesa con oxidasa acil �CoA para producir enoil�CoA y peroxido de hidrogeno, el peroxido de hidrogeno se procesa despues con catalasa para obtener formaldehido, y el formaldehido obtenido reacciona con 4� amino�3�hidrazino �5� mercapto 1,2,3�triazol (AHMT), que es un reactivo de coloracion, para mostrar color purpura que se usa para el ensayo de colorimetria.

De esta manera, el reactivo usado para la reaccion de coloracion de acido hidroxicarboxilico en el procedimiento de la presente invencion no esta particularmente limitado siempre y cuando el reactivo actue con el acido β hidroxicarboxilico, el derivado del acido β �hidroxicarboxilico o el producto descompuesto del acido β hidroxicarboxilico. Un compuesto que tiene un grupo hidrazino tal como 2 nitrofenilhidrazina (2�NPH) o similares, tiene una alta sensibilidad en la deteccion de acido β hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano y la prueba de colorimetria es facil de realizar a simple vista, o un compuesto que tiene un grupo

diazometilo tal como 9 �antridiazometano (ADAM) o similares, que tiene una alta sensibilidad en la deteccion y reacciona bajo una condicion suave, se usan adecuadamente.

La reaccion de coloracion que usa 2�nitrofenilhidrazina es una reaccion (Formula ( �)) en la que el acido β hidroxicarboxilico reacciona con 2�nitrofenilhidrazina en agua o solucion de alcohol en presencia de un agente condensador para producir hidrazida acida que muestra un color magenta bajo la condicion alcali:

Formula (�)

Como un agente condensador, puede utilizarse diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1� etil�3�(3 �dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) o similares. Como un agente alcalino, puede utilizarse una solucion de hidroxido de potasio o similares.

Cuando 0,5 ml solucion de agua o de alcohol que contiene 0,02 M de hidrocloruro de 2�nitrofenilhidrazina se anaden a 0,5 ml de solucion de agua o de alcohol que contiene de 0,01 a 0,05 IM de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico, la solucion de la prueba muestra un color amarillo ligeramente parduzco. Tambien, cuando 0,5 Ml de solucion de agua

o de alcohol que contiene 0,2M de 2�nitrofenilhidrazina se anaden a 0,5 ml de solucion de agua o de alcohol que contiene de 0,05 a 1 IM de acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico, la solucion de la prueba muestra un color siena a magenta oscuro. Por el contrario, la solucion de agua o de alcohol que contiene 2 �nitrofenilhidrazina se anade a la solucion de agua o de alcohol que no contiene acido hidroxicarboxilico, no se produce la hidrazida acida y la solucion de la prueba permanece amarilla, que es el color original de 2�nitrofenilhidrazina sin reaccionar.

Como se ha mencionado anteriormente, la fuerza del olor apocrino es proporcional al contenido de acido β hidroxicarboxilico en la transpiracion. Por ello, un nivel de olor apocrino puede evaluarse de manera segura, rapida y sencilla observando el color desarrollado de una solucion de ensayo a simple vista.

La reaccion de coloracion que usa 9 antrildiazometano es un procedimiento que lleva al acido β �hidroxicarboxilico al eter 9� antrilmetilo que tiene una fuerte fluorescencia (Formula (�)):

Formula

La reaccion no necesita un catalizador o calor y finaliza aproximadamente en 10 a 60 minutos a temperatura ambiente. El ester 9�antrilmetilo es un metanol que tiene una longitud de onda de excitacion de 365 nm y la longitud de onda fluorescente de 412 nm.

Cuando 9�antrildiazometano al 1,0% en solucion de metanol o acetona se anade a una solucion de metanol que contiene de 0,01 a 0,05 IM de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico seguido de una radiacion con luz de 365 nm, la solucion de ensayo muestra un color blanco ligeramente azulado.

Ademas, cuando 9�antrildiazometano al 1,0% en solucion de metanol o acetona se anade a una solucion de metanol que contiene de 0,05 a 1 IM de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico seguido de una radiacion con luz de 365 nm, la solucion de ensayo muestra una fuerte fluorescencia azul. Por el contrario, aunque 9�antrildiazometano al 1,0% en solucion de alcohol metanol se anade a una solucion que no contiene acido β �hidroxicarboxilico, no se produce un ester que tiene fuerte fluorescencia.

Cuando el acido β �hidroxicarboxilico contenido en la transpiracion se separa de la transpiracion de las regiones axilares y a partir de entonces se realiza la evaluacion cuantitativa usando un reactivo de coloracion, el acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico sintetizado puede usarse como un material convencional (estandar).

Es decir, la cantidad de acido β �hidroxicarboxilico contenido en la transpiracion puede determinarse de manera mas precisa usando el color mostrado del acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico que se sintetiza y pesa y un reactivo como estandar. Al mismo tiempo, la cantidad de acido �hidroxicarboxilico es proporcional a la fuerza del olor apocrino, por lo tanto, un nivel del olor apocrino puede evaluarse de manera precisa.

El material convencional, el acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico, usado en el presente documento puede diluirse en la concentracion deseada en un laboratorio, aunque es conveniente si el material convencional se diluye en un disolvente tal como metanol, acetona o similar para facilitar que ocupe una cantidad adecuada para la comparacion. Particularmente, es preferente usar una solucion convencional diluida hasta el grado de ser capaz de poder medirse, tal como una solucion diluida de aproximadamente 1 a 1.000 Ig de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico en 100 IL de diluyente.

Como se ha mencionado anteriormente, el compuesto del acido β hidroxicarboxilico y el derivado del mismo tal como el acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico o similar pueden sintetizarse utilizando la reaccion de Reformatsky.

Tambien, en la presente invencion, si la diferencia en color entra las muestras a comparar es sutil o cuando se evalua un nivel de olor apocrino reducido despues del uso de un desodorante o de una operacion para extraer las glandulas apocrinas, es posible excluir la objetividad del resultado de la evaluacion cuantificando el color de la solucion de ensayo con el uso de un instrumento analitico.

El instrumento analitico usado en el presente documento no esta particularmente limitado siempre y cuando el instrumento pueda medir el grado de color mostrado de la solucion de ensayo. Puede usarse un colorimetro, un espectrofotometro visible de ultravioleta o similar para la hidrazida acida producida por la reaccion de coloracion usando 2� nitrofenilhirazina. Tambien, puede utilizarse un fluoroespectrofotometro o similar para el ester 9 antrilmetilo producido por la reaccion de coloracion usando 9�antrildiazometano.

Ademas, no solamente un nivel de olor apocrino especificamente generado en las regiones axilares de una persona que tiene tragomascalia sino tambien un nivel de olor acido (olor de transpiracion) generado en las regiones axilares de personas que no dependen de tener tragomascalia puede evaluarse de manera rapida y facil.

Como un procedimiento para evaluar un nivel de contribucion de olor apocrino y olor acido, puede ser un procedimiento en el que despues de separar un material acido extraido de la transpiracion a acido β hidroxicarboxilico, que provoca olor apocrino, y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β hidroxicarboxilico, se anade un reactivo de coloracion a los mismos respectivamente para observar los colores mostrados, o un procedimiento en el que se anade un reactivo de coloracion al material acido extraido de la transpiracion y el acido β hidroxicarboxilico se separa del material acido respectivamente para observar los colores mostrados.

Como un procedimiento para evaluar un nivel de olor apocrino, puede anadirse un reactivo de coloracion al acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico, que provoca olor apocrino. Por ejemplo, como se muestra en la FIG. 9, en la cromatografia de adsorcion en columna, un nivel de contribucion de olor apocrino y olor acido puede evaluarse de manera rapida y facil eluyendo el componente acido originado en la transpiracion, que es principalmente acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico con el uso del eter de dieteilo como un disolvente de desarrollo, a partir de entonces eluyendo el acido �hidroxicarboxilico con el uso de metanol, y despues anadiendo un reactivo de coloracion a la fraccion de eter y la fraccion de metanol obtenidas respectivamente para observar el color mostrado.

Tambien, en la cromatografia en capa fina, el material acido extraido de la transpiracion de un ser humano se coloca sobre una placa para la cromatografia en capa fina a la que se coloca un reactivo de coloracion para dejar que el material acido completo muestre color. El color que el material acido completo muestra tiene una correlacion con respecto a la cantidad total de acido �hidroxicarboxilico, que es un componente que provoca el olor apocrino, y el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico, que es un componente que provoca el olor acido.

Por otro lado, despues de colocar el material extraido sobre una placa similar para la cromatografia en capa fina preparada por separado y de separar el acido hidroxicarboxilico y el acido graso diferente de dicho acido hidroxicarboxilico con el uso del disolvente de desarrollo, el reactivo de coloracion se coloca sobre el acido hidroxicarboxilico que queda en el centro del lugar colocado para mostrar color. El color mostrado sobre esta placa tiene una correlacion positiva con respecto a la cantidad de acido hidroxicarboxilico, que es un componente

principal que provoca el olor apocrino. De este modo, al observar ambos colores mostrados, puede evaluarse un nivel de contribucion de olor apocrino y olor acido.

Por lo tanto, es posible evaluar un nivel de contribucion de olor apocrino y olor acido de cada sujeto de ensayo de manera rapida y facil con el uso de un kit para evaluar el olor corporal como el desvelado en el presente documento.

Como un reactivo de coloracion que reacciona con el acido carboxilico contenido en la transpiracion para generar coloracion, que no esta particularmente limitado siempre y cuando el reactivo de coloracion reaccione con un grupo carboxilo de un acido graso que tiene 12 carbonos o menos, que tiene principal contribucion al olor acido, puede utilizarse el reactivo de coloracion anteriormente mencionado que reacciona con un grupo carboxilo del acido hidroxicarboxilico para generar coloracion.

Con el fin de evaluar el tipo y fuerza de olor corporal de manera precisa, es decir, para una evaluacion precisa del grado de cada contribucion de olor apocrino y olor acido con respecto al material acido originado en la transpiracion, es preferente que la reactividad del reactivo de coloracion sea altamente especifico para el acido hidroxicarboxilico y el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico y la reaccion de coloracion con respecto al otro material acido sea debil.

Como se ha mencionado anteriormente, un kit para evaluar el olor corporal como el descrito en el presente documento puede evaluar de manera segura, rapida y facil el nivel de olor corporal, centrandose en la presencia y fuerza de olor apocrino de las regiones axilares y ademas teniendo en cuenta la presencia y fuerza del olor acido sin usar instrumentos analiticos caros tales como cromatografia de gases, cromatografia liquida o demas. Por lo tanto, el kit puede utilizarse cuando se realiza un diagnostico sobre un nivel de olor apocrino de una persona que esta preocupada por su olor axilar, o cuando se evalua la efectividad de un desodorante, una operacion para extraer glandulas apocrinas o similares en institutos de inspeccion tales como hospitales (dermatologia o similar), un centro de salud o similares.

En el caso de evaluar si un esfuerzo para reducir el olor corporal tal como el uso de un desodorante o una operacion para extraer las glandulas apocrinas es realmente efectivo, por ejemplo, la cantidad de acido hidroxicarboxilico y/o acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente al dicho acido hidroxicarboxilico en la transpiracion antes y despues del uso de un desodorante puede determinarse y evaluarse usando un kit para evaluar olor corporal como el desvelado en el presente documento para comparar. Por ejemplo, si el momento de recogida de cada muestra es diferente, la primera muestra de transpiracion recogida puede almacenarse en un lugar apropiado tal como un frigorifico para que la muestra no provoque un cambio quimico y la prueba de evaluacion puede realizarse en el mismo momento. Cuando la cantidad de acido hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido hidroxicarboxilico en la transpiracion se determina y evalua, si los colores de la solucion de la prueba se cuantifican con un instrumento analitico, la comparacion y evaluacion pueden realizarse aunque el momento en el que se realiza la prueba de evaluacion sea diferente.

Tambien, puede utilizarse un kit para evaluar el olor corporal como el descrito en el presente documento para evaluar la efectividad de una muestra de desodorante o para someter a una revision a personas que tienen tragomascalia en investigacion de desarrollo de desodorante dirigidos a olor apocrino.

Como un procedimiento para evaluar la efectividad de un desodorante dirigido a olor apocrino, por ejemplo, la efectividad de una muestra de desodorante puede evaluarse de manera precisa, rapida y facil anadiendo una cantidad predeterminada de un amuestra de desodorante a una muestra que contiene acido hidroxicarboxilico de una concentracion predeterminada, y evaluando la cantidad de acido hidroxicarboxilico, preferentemente la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico, con el uso de un kit para evaluar olor corporal como el descrito en el presente documento.

Tambien es posible aplicar una muestra de desodorante realmente sobre las regiones axilares de un ser humano y evaluar el acido hidroxicarboxilico, preferentemente la cantidad de acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico, contenido en la transpiracion de las regiones axilares recogido respectivamente antes y despues de la aplicacion con el uso de un kit para evaluar olor corporal como el descrito en el presente documento para comparar.

Como ejemplo de la constitucion del kit anteriormente mencionado, por ejemplo, puede ser los siguientes, pero no se limitan a los mismos.

(1): Un paquete que incluye un algodon, una taza de plastico o similar para recoger la transpiracion de un ser humano, preferentemente procesada para poder usarse sin modificacion, y envuelta con un paquete exterior cuando sea necesario;

(2): Un paquete que incluye reactivos, disolventes y equipos tales como una solucion acuosa de un alcali, disolvente organico, embudo separador o similar para extraer material acido de la transpiracion de un ser humano en combinacion con los componentes anteriores;

(3): Un paquete que incluye equipos tales como columnas para la cromatografia de adsorcion, placas para la cromatografia en capa fina o similares para separar el acido hidroxicarboxilico y el acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente a dicho acido β �hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(4): Un paquete que incluye disolventes polares medios usados para eluir acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente al acido β hidroxicarboxilico del material acido en la cromatografia de adsorcion o la cromatografia en capa fina en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(5): Un paquete que incluye disolventes polares altos usados para eluir acido β �hidroxicarboxilico de una columna en la cromatografia de adsorcion en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(6): Un paquete que incluye un reactivo de coloracion que reacciona con acidoβ �hidroxicarboxilico originado en la transpiracion de un ser humano, preferentemente lleno en un recipiente en el que el reactivo de coloracion se prepara en la condicion de composicion o concentracion que puede usarse sin modificacion en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores y envuelto con un paquete exterior cuando sea necesario; (�) Un paquete que incluye un reactivo de coloracion que reacciona con acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente al acido β �hidroxicarboxilico, preferentemente lleno en un recipiente en el que el reactivo de coloracion se prepara en la condicion de composicion o concentracion que puede usarse sin modificacion en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores y envuelto con un paquete exterior cuando sea necesario; (�) Un paquete que incluye reactivos de coloracion que reaccionan con acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente al acido β hidroxicarboxilico originado en las transpiracion de un ser humano, preferentemente llenos en un recipiente en el que los reactivos de coloracion se preparan en la condicion de composicion o concentracion que puede usarse sin modificacion en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores y envueltos con un paquete exterior cuando sea necesario;

(9): Un paquete que incluye reactivos auxiliares usados para preparaciones preliminares antes de la reaccion de coloracion cuando la cantidad de acido β �hidroxicarboxilico se determina y evalua usando un reactivo de coloracion despues de que el acido β hidroxicarboxilico se haya separado de la transpiracion de las regiones axilares, por ejemplo, una separacion preliminar para llevar al acido β �hidroxicarboxilico al derivado, en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(10): Un paquete que incluye equipos tales como lamparas ultravioletas usadas para confirmar un nivel de coloracion de una solucion de ensayo cuando la cantidad de acido β hidroxicarboxilico se determina y evalua usando un reactivo de coloracion despues de que el acido β �hidroxicarboxilico se haya separado de la transpiracion de las regiones axilares en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(11): Un paquete que incluye una solucion diluida de acido 3 �hidroxi �3�metilhexanoico o acido 3� hidroxi �3� metilhexanoico que son productos preferentemente sintetizados y se usan como materiales convencionales (estandar) cuando la cantidad de acido β �hidroxicarboxilico contenida en la transpiracion se determina y evalua usando un regante de coloracion despues de que el acido β hidroxicarboxilico se haya separado de la transpiracion de las regiones axilares en combinacion con componentes de los paquetes anteriores;

(12): Un paquete que incluye laminas de muestra de color para evaluar un nivel de coloracion de soluciones de prueba cuando al cantidad de acido β �hidroxicarboxilico contenido es la transpiracion se determina y evalua usando un reactivo de coloracion despues de que el acido β �hidroxicarboxilico se haya separado de la transpiracion de las regiones axilares en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores;

(13): Un paquete que incluye medios para colocacion tales como una pipeta o similares que es facil de ocupar y colocar una unica dosis de un reactivo de coloracion en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores; y

(14): Un paquete que incluye un instrumento analitico tal como el colorimetro, espectrometro o similar usados para cuantificar un nivel de color mostrado de las soluciones de prueba en combinacion con componentes de cualquiera de los paquetes anteriores.

Un kit para evaluar olor corporal como el descrito en el presente documento puede evaluar de manera segura, rapida y facil el nivel de olor corporal u olor axilar, que es parte del olor corporal, centrandose en la presencia y fuerza de olor apocrino en las regiones axilares y ademas teniendo en cuenta la presencia y fuerza de olor acido, utilizando la reaccion de coloracion de acido β hidroxicarboxilico, que esta peculiarmente presente en la transpiracion de una persona que tiene olor apocrino, y/o acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente al acido β hidroxicarboxilico, que es un material que provoca olor acido o el derivado del mismo o el producto descompuesto del mismo.

Tambien, un procedimiento para evaluar olor corporal de la presente invencion puede excluir objetividad del resultado de la evaluacion cuantificando el color mostrado como el resultado de la reaccion de coloracion de la solucion de ensayo con el uso de un instrumento analitico tal como un colorimetro o similar.

Ademas, un procedimiento para evaluar olor corporal de la presente invencion puede utilizarse como un procedimiento seguro, rapido y facil para evaluar olor corporal cuando se realiza un diagnostico sobre un nivel de olor apocrino de una persona que esta preocupada por su propio olor axilar, evaluar la efectividad de una operacion para extraer glandulas apocrinas o similares, evaluar la efectividad de una muestra de desodorante dirigida al olor

apocrino o similar en un hospital, centro de salud, instituto de investigacion o similar.

Ejemplo

Los siguientes ejemplos describen y demuestran ademas realizaciones de la presente invencion. Los ejemplos solamente se dan con el fin de ilustracion y no deben interpretarse como limitaciones de la presente invencion.

(Ejemplo A)

1. Exploracion de sujetos de ensayo

Cada uno de los 65 varones japoneses sanos seleccionados arbitrariamente como sujetos de ensayo llevo puesta una camiseta blanca nueva hecha de algodon durante 24 horas consecutivamente y las camisetas se recogieron. miembros del panel de expertos realizaron un ensayo organoleptico sobre las regiones axilares de las camisetas recogidas en relacion a los tipos y la fuerza del olor axilar,

Olor acido: olor agrio y putrefacto Olor apocrino de tipo comino: olor picante, a lena, de tipo animal Olor apocrino de tipo azufre: olor a pescado y salsa de soja y de tipo pomelo

0: Inodoro

1: Olor ligero

2: Olor debil

3: Olor facilmente perceptible

4: Olor fuerte

5: Olor muy fuerte

Como resultado, se reconocio que 2 personas tenian poco olor axilar (la fuerza de olor de estas personas fue 1 o menos) (en lo sucesivo referido como Grupo A), se reconocio que 21 personas tenian olor axilar debil (la fuerza mas alta de olor de estas personas fue 2 o 3) (en lo sucesivo referido como Grupo 8), y se reconocio que 16 personas tenian olor axilar fuerte (la mayor fuerza de olor de estas personas fue 4 o 5) (en los sucesivo referido como Grupo C).

El resultado de evaluacion del Grupo C, que se reconocio por tener el olor axilar fuerte, se muestra en la Tabla 1. Como se muestra en la Tabla 1, los sujetos de ensayo que tienen olor apocrino pueden clasificarse en un grupo que se mueve al olor de tipo comino (Sujetos de identificacion N° 1 al 3) y un grupo que se mueve al olor de tipo azufre (Sujetos de Identificacion N° 4 al 9)

Tabla 1 Resultado de evaluacion organoleptica del Grupo C 5

Sujeto de Identificacion N°: Resultado de evaluacion organoleptica

Olor acido graso bajo: Olor apocrino

Olor de tipo comino: Olor de tipo azufre

1: 3 5 4

2: 3 5 3

3: 2 5 4

4
4
4: 5

5: 4 4
5

6: 3 3 5

3
3: 4

2: 3 4

9: 3 3 4

10: 4 2 2

40 (continuacion)

Sujeto de Identificacion N°: Resultado de evaluacion organoleptica

Olor acido graso bajo: Olor apocrino

Olor de tipo comino: Olor de tipo azufre

11: 4 2 1

12: 4 2 1

13: 4 1 2

14: 5 0 0

15: 4 0 0

16: 4 0 0

2. Analisis del componente correspondiente al olor de tipo comino

Los sujetos de ensayo fueron 13 personas que se reconocieron por tener un olor apocrino de tipo comino en el Grupo C (Sujetos de identificacion N° 1 al 13). Una almohadilla de algodon se cosio sobre una parte de una camiseta correspondiente a la region axilar. Despues de que los sujetos de ensayo llevaran puesta la camiseta durante 24 horas, las camisetas se recogieron y la almohadilla de algodon de las regiones axilares se sometio a extraccion en eter dietilico. El extracto se dividio en una fraccion acida, una fraccion neutral y una fraccion basica mediante un procedimiento de extraccion con base acida, y los componentes volatiles se analizaron con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC MS). Los componentes importantes que generan olores tipicos de transpiracion de una region axilar se especificaron mediante una Cromatografia de Gases por olfateo (GC por olfateo).

Dispositivo: 6� 90GC 59�3MSD (Agilent Technology) Columna: D8� WAX (60 m X 0,25 mm X 0,25 pm) Condiciones de temperatura: 40 °C (1 minuto) - (6 °C/min.) - 60 °C - (2 °C/min.) - 300 °C (40 minutos) Gas de carrera: He Voltaje de ionizacion: �0 e�

Al analizar el extracto acido, se mostro una nueva presencia de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico junto con la presencia convencionalmente conocida de acido graso saturado, acido 3� metil�2�hexanoico, acido ��octenoico y y lactonas (FIG. 1). Este componente tenia un olor fuerte similar al olor apocrino en el momento de realizar la GC por olfateo. Tambien, la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico contenido en el extracto acido se calculo desde un area maxima y estuvo en el intervalo comprendido entre 0,1 y 64,3 Ig. Se descubrio que el acido 3�hidroxi 3 metilhexanoico esta presente en altas concentraciones capaces de ser cuantitativamente detectables. El acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico no ha aparecido como un componente de un olor axilar de un ser humano hasta ahora, aunque el acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico se detecto en todos los sujetos de ensayo.

Despues, los sujetos de ensayo fueron 3 personas que se reconocieron por no tener olor apocrino en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 14 a 16). Una almohadilla de algodon se cosio sobre una parte de una camiseta correspondiente a la region axilar. Despues de que los sujetos de ensayo llevaran puesta la camiseta durante 24 horas, las camisetas se recogieron y la almohadilla de algodon de la region axilar se sometio a extraccion en eter dietilico. Una fraccion acida se extrajo mediante un procedimiento de extraccion con base acida, y se analizo con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC MS).

Como resultado, como se muestra en la FIG. 2, el acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico no se detecto en ninguno de los sujetos de ensayo.

3. Determinar la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico

Los sujetos de ensayo fueron 5 personas que se reconocieron por tener olores apocrinos fuertes en el Grupo C ((Sujetos de Identificacion N° 1 a 5), 4 personas que se reconocieron por tener olores apocrinos debiles en el grupo C (Sujetos de Identificacion N° 10 a 13) y 3 personas quese reconocieron por no tener olor apocrino en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 14 a 16). Una almohadilla de algodon se cosio sobre una parte de una camiseta correspondiente a la region axilar. Despues de que los sujetos de ensayo llevaran puesta la camiseta durante 24 horas, las camisetas se recogieron y la almohadilla de algodon de la region axilar se sometio a extraccion en eter

dietilico. Una fraccion acida se extrajo mediante un procedimiento de extraccion con base acida. Despues, un matraz de 1 ml de capacidad (fabricado por DRAN) preparo una solucion diluida que uso eter del mismo volumen. Al usar la solucion diluida, la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico se determino con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC �MS). Un volumen cuantitativo se calculo desde un area maxima que se obtuvo inyectando acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico que tenia una concentracion determinada en la GC �MS.

Se obtuvo la relacion entre la presencia o nivel de olor apocrino y la cantidad detectada de acido 3 �hidroxi �3 metilhexanoco. Como resultado, como se muestra en la FIG. 3, la cantidad de acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico en la region axilar aumento cuando el olor apocrino se volvio mas fuerte.

4. Analisis del componente correspondientes al olor de tipo azufre

Los sujetos de ensayo fueron 3 personas que se reconocieron por tener un olor apocrino de tipo sulfuro en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 4 a 6). Se recogio aproximadamente 1 ml de transpiracion que fluia desde ambas regiones axilares de cada sujeto de ensayo en un tubo de ensayo en una habitacion acondicionada a 40 °C y 0% de humedad. El tubo de ensayo en el que se anadio T�ister (un agitador recubierto de 100% polidimetilsiloxano, alias Stir 8ar Sorptive Extraction; fabricado por Gerstel) se agito durante 30 minutos. Despues, se realizo un analisis con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC MS) equipada con un dispositivo de desorcion termica. Los componentes importantes que generaron olores tipicos de transpiracion de regiones axilares se especificaron mediante Cromatografia de Gases por olfateo (GC por olfateo) equipada con un dispositivo de desorcion termica.

Dispositivo: 6� 90GC 59�3MSD (Agilent Technology) Columna: D8�1 (60 m X 0,25 mm X 0,25 pm) Condiciones de temperatura: 40 °C (1 minuto) - (6 °C/min.) - 60 °C - (2 °C/min.) - 300 °C (40 minutos) Gas de carrera: He Voltaje de ionizacion: �0 eV

Al analizar los componentes del olor apocrino contenido en la traspiracion, el analisis GC MS mostro una nueva presencia de 3 mercapto�3� metilhexanol (FIG. 4). El componente eluido tenia un olor fuerte muy similar al olor apocrino en el momento de realizar la GS por olfateo. Tambien, se calculo la cantidad de de 3 �mercapto3 metilhexanol desde un area maxima en el intervalo entre 0,001 y 1,0 Ig. Se descubrio que 3� mercapto3 metilhexanol esta presente en altas concentraciones capaces de ser cuantitativamente detectables.

3�mercapto�3�metilhexanol no ha aparecido como un componente de un olor axilar de un ser humano hasta ahora, aunque se detecto 3� mercapto 3�metilhexanol en los 3 sujetos de ensayo.

Despues, los sujetos de ensayo fueron 3 personas que se reconocieron por no tener olor apocrino en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 14 a 16). Se recogio aproximadamente 1 ml de transpiracion que fluia desde ambas regiones axilares de cada sujeto de ensayo en un tubo de ensayo en una habitacion acondicionada a 40 °C y 0% de humedad. El tubo de ensayo en el que se anadio T�ister se agito durante 10 minutos. Despues, se realizo un analisis con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC �MS). Como resultado, como se muestra en la FIG. 5, no se detecto 3�mercapto� 3� metilhexano en ninguno de los sujetos de ensayo.

Los sujetos de ensayo fueron 3 personas que se reconocieron por tener un fuerte olor apocrino de tipo azufre en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 4 a 6) y 3 personas que se reconocieron por no tener olor apocrino en el Grupo C (Sujetos de Identificacion N° 14 a 16). Se recogio aproximadamente 1 ml de transpiracion que fluia desde ambas regiones axilares de cada sujeto de ensayo en un tubo de ensayo en una habitacion acondicionada a 40 °C y

�0% de humedad. Despues de que la transpiracion se incubara en un ambiente anaerobico (una concentracion de oxigeno de 0,1% o inferior y una concentracion de dioxido de carbono del 21%) a 30 °C durante 4� horas, el tubo de ensayo en el que se anadio T�ister se agito durante 10 minutos. Despues, se realizo un analisis con el uso de una Cromatografia de Gases�Espectrometro de Masas (GC MS) equipada con un dispositivo de desorcion termica. Los componentes importantes que generaron olores tipicos de transpiracion de una region axilar se especificaron mediante Cromatografia de Gases por olfateo (GC por olfateo) equipada con un dispositivo de desorcion termica.

Como resultado, como se muestra en la FIG. 6, 3 �mercapto�3� metilhexanol, 3�mercaptohexanol, 3 mercaptopentanol, 3 mercapto�2�metilpentanol y 3 �mercapto�2� metilbutanol se identificaron en la transpiracion incubada de personas que tenian un olor apocrino. Cada uno de estos componentes eluidos tuvo un olor fuerte similar al olor apocrino en el momento de realizar la GC por olfateo, que se volvio mas fuerte mediante la incubacion.

Por el contrario, 3 �mercapto�3 metilhexanol, 3� mercaptohexanol, 3� mercaptopentanol, 3� mercapto� 2�metilpentanol y 3�mercapto�2�metilbutanol no se detectaron en la traspiracion de ninguno de los sujetos de ensayo que no tenian olor apocrino incluso cuando se incubo (FIG. �).

(Ejemplo B) (Referencia)

1.: Preparacion de un material indicador para evaluar olor corporal

La mezcla de acido 3� hidroxi �3�metilhexanoico (Sustancia (A)) y 3�mercapto�3� metilhexanol (Sustancia (C)) se preparo en un concentracion diluida 0,015% en etanol, en la que la Sustancia (A) : Sustancia (C) = 50:1, 100:1 y 200:1, como materiales indicadores para evaluar el olor corporal para el Ejemplo 8 �1, 8�2 y 8�3 respectivamente. Tambien, se preparo una solucion diluida 0,015% de acido 3 metil�2�hexenocio en etanol como un material indicador para evaluar el olor corporal para el Ejemplo Comparativo 8� 2.

2.: Evaluacion de un efecto desodorizante y de enmascaramiento de un material indicador para evaluar olor corporal frente a un olor apocrino.

Los sujetos de ensayo fueron 6 personas en el Grupo A (que se reconocieron por no tener olor axilar) del Ejemplo A. Cada uno de los materiales indicadores anteriormente mencionados para evaluar olor corporal (Ejemplos 8 �1 a 8 3 en la Tabla 2) se pulverizaron en la region axilar de cada sujeto de ensayo una vez (aproximadamente 30 mg) para aplicar el material indicador para evaluar el olor corporal en las regiones axilares de los sujetos de ensayo que no tenian olor apocrino. Entonces, despues de pulverizar cada uno de los productos desodorantes disponibles en el mercado A a E en la region axilar de cada uno de los sujetos de ensayo, a los que se aplico el material indicador para evaluar olor corporal, durante aproximadamente 1 segundo, 10 miembros de un panel de expertos (5 hombres y 5 mujeres) realizaron un ensayo organoleptico con respecto a un efecto desodorante y de enmascaramiento de los desodorantes.

Tambien, despues de pulverizar cada uno de los productos desodorantes disponibles en el mercado A a E en la region axilar de cada uno de los sujetos de ensayo que se reconocieron por tener olor apocrino (6 personas que se reconocieron por tener un olor apocrino fuerte en el Grupo C del Ejemplo A (Sujetos de Identificacion N° 1 a 6) durante aproximadamente 1 segundo, 10 miembros de un panel de expertos (5 hombres y 5 mujeres) realizaron un ensayo organoleptico con respecto al efecto desodorante y de enmascaramiento de los desodorantes (Ejemplo Comparativo 8�1).

El ensayo organoleptico se realizo en una habitacion que se mantuvo a 25 °C y 65% de humedad. La evaluacion fue con respecto a 5 productos comerciales (productos desodorantes disponibles en el mercado A a E mostrados en la Tabla 2) en total de manera que se realizo un producto comercial por dia. Un olor de la region axilar despues de tratarla con cada producto comercial se evaluo de acuerdo con los siguientes criterios.

0: El olor apocrino no disminuye

1: El olor apocrino disminuye ligeramente

2: El olor apocrino disminuye

3: El olor apocrino disminuye de manera significativa

El efecto desodorante y de enmascaramiento de los productos desodorantes disponibles en el mercado se evaluo usando los resultados del olor del ensayo organoleptico (valor medio) por parte de 10 miembros del panel de expertos, que se presento en los siguientes 4 niveles:

0 o mas y menos que 0,5: No efectivo (X) 0,5 omas y menos de 1,5: Ligeramente efectivo (L) 1,5 o mas y menos de 2,5: Efectivo (0) 2,5 o mas y menos de 3,0: Significativamente efectivo ( )

3. Resultados de la evaluacion

La precision del olor apocrino reproducido por el material indicador para evaluar el olor corporal se prueba cuando el efecto desodorante de los desodorantes tratados en los sujetos de ensayo preliminarmente tratados con el material indicador para evaluar olor corporal es considerablemente consistente con el efecto desodorante de los desodorantes tratados en los sujetos de ensayo que no tenian olores apocrinos reales.

En la Tabla 2, los efectos desodorantes de los desodorantes tratados en los sujetos de ensayo preliminarmente tratados con el material indicador para evaluar olor corporal del Ejemplo Comparativo 8�2 y los Ejemplos 8 �1 a 8 3 se comparan en base al efecto desodorante de los desodorantes tratados en los sujetos de ensayo que tenian olores apocrinos reales (Ejemplo Comparativo 8� 1). Como resultado, el Ejemplo 8 �2 fue completamente consistente con el Ejemplo Comparativo 8 1 y los Ejemplos 8 1 a 8 3 fueron en su mayor parte consistentes con el Ejemplo Comparativo 8�1 y puede reproducir de manera precisa el olor apocrino, y el efecto desodorante y de enmascaramiento de un desodorante puede evaluarse de manera precisa mediante el material indicador descrito.

Por el contario, el Ejemplo Comparativo 8�2 no fue en absoluto consistente con el Comparativo 8�1, y el Ejemplo Comparativo 8�2 que uso acido 3�metil� 2�hexenoico no pudo evaluar el efecto desodorante y de enmascaramiento de desodorantes como una sustancia convencional, lo que probo que el Ejemplo Comparativo 8�2 no puede reproducir de manera precisa el olor apocrino.

Tabla 2 Resultados de la evaluacion de efectividad (desodorante y enmascaramiento) de desodorantes

Ejemplo Comparativo: Ejemplo

8�1: 8�2 8�1 8�2 8�3

Producto: Olor apocrino Acido 3� Mezcla de 50:1 Mezcla de 100:1 Mezcla de 200:1

desodorante: naturalmente generado en la axila metil� 2� hexenoico (Componente A:Componente C) (Componente A:Componente C) (Componente A:Componente C)

Producto comercial A: L X L L L

Producto comercial 8: L 0

Producto comercial C: X 0 X X L

Producto comercial D: L X L L 0

Producto comercial E: 0 L L 0 0

Consistencia con el Ejemplo Comparativo 8� 1: No consistente Ligeramente consistente Completamente consistente Ligeramente consistente

(Ejemplo C)

1. Exploracion de sujetos de ensayo

65 varones japoneses sanos cooperaron como voluntarios. Cada uno de ellos llevo puesta una camiseta blanca

10 nueva hecha de algodon durante 24 horas consecutivamente. Despues de recoger las camisetas, miembros del panel de expertos evaluaron la fuerza del olor apocrino y del olor acido sobre las regiones axilares de las camisetas en base a los siguientes criterios.

Intensidad 0: Inodoro

15 Intensidad 1: Olor ligero Intensidad 2: Olor debil Intensidad 3: Olor facilmente perceptible Intensidad 4: Olor fuerte Intensidad 5: Olor muy fuerte

20 Como resultado, 10 personas de los sujetos de ensayo se reconocieron por tener olor apocrino de intensidad 3 o mas, 3 personas se reconocieron por tener olor apocrino de intensidad 1 o 2, 52 personas se reconocieron por tener olor apocrino de intensidad 0.

2. Cuantificacion de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico

Se seleccionaron como sujetos de ensayo 4 personas que se reconocieron por tener olor apocrino de intensidad 3 o

25 mas (Sujetos de Identificacion N° A a D), 3 personas que se reconocieron por tener olor apocrino de intensidad 1 o 2 (Sujetos de Identificacion E a G), 3 personas que se reconocieron por no tener olor apocrino (intensidad 0) (Sujetos de Identificacion N° H a J).

Una almohadilla de algodon se cosio sobre una parte de una camiseta correspondiente a la region axilar del brazo derecho. Despues de que los sujetos de ensayo llevaran puesta las camisetas durante 24 horas, las camisetas se

recogieron y la almohadilla de algodon de la region axilar se sometio a la extraccion con base acida para extraer el componente acido originado en la transpiracion. Despues, usando la minicolumna de gel de silice (Varian 8ond Elute Jr), 10 ml de eter dietilico, y 10 ml de etanol, el extracto acido se separo en una fraccion de eter dietilico y en una fraccion de metanol. Despues de concentrar la fraccion de metanol una vez, se preparo 1 ml de la solucion diluida mediante un matraz de medicion (fabricado por DURAN).

1 IL de la solucion diluida se analizo mediante la cromatografia de gases� espectrometro de masas (GC �MS). Usando un acido 3�hidroxi �3� metilhexanoico sintetizado como un material convencional (estandar), se dibujo una curva de calibracion, y se midio la cantidad de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico contenida en la transpiracion.

El resultado del ensayo organoleptico sobre el olor axilar y la cuantificacion de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico se muestran en la FIG. 3. El acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico se detecto en las fracciones de metanol de todos los sujetos de ensayo que se reconocieron por tener olor apocrino (Sujetos de Identificacion N° A a G). Por el contrario, el acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico no se detecto en la fraccion de eter dietilico.

Tabla 3

Sujeto de Identificacion N°: Ensayo organoleptico Cantidad detectada de acido 3 hidroxi �3� metilhexanoico (Ig)

Intensidad de olor apocrino: Intensidad de olor acido Fraccion de metanol Fraccion de eter

A: 4 4 33,93 No detectada

8: 5 5 64,29 "

C: 3 3 15,�1 "

D: 4 4 3�,5 "

E: 2 2 1,�1 "

F: 1 2 0,�� "

G: 2 2 1,39 "

H: 0 1 No detectada "

I: 0 2 " "

J: 0 1 " "

Intensidad 0: Inodoro Intensidad 1: Olor ligero Intensidad 2: Olor debil Intensidad 3: Olor facilmente perceptible Intensidad 4: Olor fuerte Intensidad 5: Olor muy fuerte

En el grupo reconocido por tener olor apocrino de intensidad 3 o mas (Sujetos de Identificacion N° A a D), la cantidad detectada de acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico estuvo dentro del alcance de 15, 1 a 64,29 Ig. En el grupo reconocido por tener olor apocrino de intensidad 1 o 2 (Sujetos de Identificacion N° E a G), la cantidad detectada de acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico estuvo dentro del alcance de 0, a 1,� 1 Ig. Por el contrario, en el grupo reconocido por no tener olor apocrino (intensidad 0) (Sujetos de Identificacion N° H a J), el acido 3� hidroxi �3� metilhexanoico no se detecto en ninguno de los sujetos de ensayo.

(Ejemplo D)

La fraccion de metanol obtenida en el Ejemplo C (se uso 1 Il para el analisis GC MS) se concentro a 0,5 ml y se transfirio a un tubo de ensayo equipado con una valvula de rosca (NR 10, fabricado por Maruemu). 100 Il de 20 mM de solucion de 2�nitrofenilhidrazina preparada usando 40 mM de acido hidroclorico � etanol de acido hidroclorico (3:1, v/v), 100 Il de 3 v/v% piridina en solucion de etanol y 100 Il de 250 mM EDC (1�etil�3�(3� dimetilaminopropil) carbodiimida) en solucion de etanol se anadieron sucesivamente. Una muestra en blanco para comparar el color (se anadieron 0,5 ml de metanol) se preparo de manera similar. Despues las mezclas se calentaron a 60 °C durante 20 minutos, se anadieron 50 Il de 15% (P/V) de solucion de hidroxido de potasio preparada mediante la mezcla agua� metanol (1:4, v/v) y le siguio el calentamiento a 60 °C hasta que el color marron desaparece del blanco (durante 15 minutos). Despues de enfriar a temperatura ambiente, los colores de las soluciones reaccionadas se observaron a simple vista.

Los resultados se muestran en la Tabla 4. La muestra en blanco mostro un color amarillo vivo originado en el reactivo no reaccionado. Por otro lado, las fracciones de metanol de los sujetos de ensayo en los que se detecto acido 3�hidroxi �3�metilhexanoico mostraron un color magenta debido a la produccion de hidrazida acida. El color cambio proporcionalmente a la cantidad detectada de amarillo parduzco a magenta oscuro.

Tabla 4

Sujeto de Identificacion N°: Intensidad de olor apocrino Cantidad detectada de acido 3 hidroxi �3�metilhexanoico (Ig) Cambio de color Color de la solucion de la prueba

A: 4 33,93 0 Magenta oscuro

8: 5 64,29 0 Magenta muy oscuro

C: 3 15,�1 0 Siena ligeramente oscuro

D: 4 3�,5 0 Magenta oscuro

E: 2 1,�1 0 Amarillo ligeramente parduzco

F: 1 0,�� 0 Amarillo ligeramente parduzco

G: 2 1,39 0 Amarillo ligeramente parduzco

H: 0 No detectada x Amarillo claro (sobre un nivel con el blanco)

I: 0 " x

J: 0 " x

0: El cambio de color se reconocio adecuadamente

L: El cambio de color se reconocio

X: El cambio de color no se reconocio (sobre un nivel con el blanco).

15 En grupo reconocido por tener olor apocrino de intensidad 3 o mas, el color de la solucion reaccionada estuvo dentro del alcance del rojo al magenta. En el grupo reconocido por tener olor apocrino de intensidad 1 o 2, el color de la solucion de la reaccion fue amarillo parduzco. Por el contrario, en el grupo reconocido por no tener olor apocrino (intensidad 0), la solucion de la prueba de todos los sujetos de ensayo no tuvo color y el color estuvo sobre un nivel con el blanco.

20 Despues, el color de las soluciones de la prueba se cuantifico usando el colorimetro. El color se represento en un grafico seleccionando la diferencia de color (LE�b) sobre el eje vertical, y el resultado del ensayo organoleptico de olor apocrino en el Ejemplo C sobre el eje horizontal. El resultado fue, como se muestra en la FIG. 11, que la diferencia de color (LE�b) aumento proporcional a la intensidad de olor apocrino.

25 Equipo: Colorimetro CT 310 (fabricado por Minolta Co., Ltd.)

Longitud optica celular: 2 mm

Temperatura: 23 °C

La diferencia de color se obtuvo a partir de la siguiente expresion usando los datos medidos de la muestra en blanco como el color convencional de diferencia de color (L�t, a�t, b�t) y los datos medios como (L�, a�, b�):

Expresion 1

donde

5 (Ejemplo E)

1 ml de la fraccion de eter dietilico obtenido en el Ejemplo C se transfirio a un tubo de ensayo equipado con una valvula de rosca (fabricado por Maruemu). Despues el disolvente se extrajo en un bano de agua de 45 °C y se anadieron 0,5 ml de metanol, las soluciones de la prueba asi como una muestra en blanco para comparar el color (se anadieron 0,5 ml de metanol) se sometieron a la prueba de coloracion de manera similar al Ejemplo D usando un

10 reactivo de coloracion. Junto con la fraccion de metanol obtenida en el Ejemplo D, el color se cuantifico por medio de un espectrometro ultravioleta� visible. Los datos se representaron en un grafico seleccionando la absorbancia de la fraccion de metanol sobre el eje vertical, y la absorbancia de la fraccion de eter sobre el eje horizontal para evaluar un nivel de contribucion de olor apocrino y olor acido para cada sujeto de ensayo.

El resultado fue, como se muestra en la FIG. 12, que una persona cuya fraccion de metanol del extracto acido

15 mostro un color fuerte, es decir, una persona reconocida por tener olor apocrino, tiende a tener la fraccion de eter dietilico que muestra una coloracion fuerte (absorcion). Por el contrario, una persona reconocida por no tener olor apocrino, es decir, una persona cuya fraccion de metanol no muestra color tiende a tener la fraccion de eter dietilico que muestra una coloracion debil (absorcion).

20 Equipo: 8ECHMAN DU 600

Longitud optica celular: 10 mm

Temperatura: 23 °C

Procedimiento de medicion de datos: El area maxima se midio descontando el espectro de absorcion de la muestra en blanco del espectro de absorcion de una muestra a 530 nm.

25 (Ejemplo F)

10 sujetos de ensayo del Ejemplo C fueron los sujetos de ensayo para el Ejemplo F. La fraccion de metanol del extracto acido de la transpiracion separada de manera similar al Ejemplo C se concentro a 0,5 ml, y a partir de entonces se transfirio a un tubo de ensayo. Junto con una muestra en blanco (se anadieron 0,5 ml de metanol) para comparar el color, se anadieron 25 Il de 9�antrildiazometano al 1,0% en solucion de acetona a cada muestra. Cada

30 muestra se sello y se dejo durante aproximadamente 1 hora a temperatura ambiente. Despues, usando una lampara ultravioleta (fabricada por Ultraviolet Corporation, tipo de longitud de onda larga de 365 nm), la fluorescencia emitida se observo a simple vista. Un resultado se muestra en la Tabla 5.

Tabla 5

Sujeto de Identificacion N°: Intensidad de olor apocrino Cambio de color Fluorescencia de la solucion de ensayo

A: 4 0 Muy fuerte

8: 5 0 Muy fuerte

C: 3 0 Ligeramente fuerte

D: 4 0 Muy fuerte

E: 2 0 Fuerte

F: 1 0 Fuerte

G: 2 0 Fuerte

H: 0 x Debil (sobre un nivel con el blanco)

I: 0 x

J: 0 x

Como un resultado mostrado en la Tabla 5, las muestras de los sujetos de ensayo reconocidos por tener olor apocrino en el Ejemplo C emitieron fluorescencia mas fuerte proporcional a la intensidad del olor apocrino. Por el contrario, no se observo una fuerte fluorescencia con respecto a la muestra en blanco.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un procedimiento para evaluar olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente de dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano;

5 una segunda etapa de adicion de un reactivo a la mezcla para mostrar color; y una tercera etapa de evaluacion del tipo y/o fuerza de olor corporal a partir del color mostrado en la segunda etapa.
2. Un procedimiento para evaluar olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12

10 carbonos o menos diferente de dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano; una segunda etapa de separacion del acido β hidroxicarboxilico de la mezcla; una tercera etapa de reaccion de dicho acido β �hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con un reactivo para mostrar color; y una cuarta etapa para evaluar el tipo y/o fuerza de olor corporal a partir del color mostrado en la tercera

15 etapa.
3. Un procedimiento para evaluar olor corporal de un ser humano que comprende las etapas de:

una primera etapa de extraccion de una mezcla de acido β �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente de dicho acido β �hidroxicarboxilico de la transpiracion de un ser humano; una segunda etapa de separacion de la mezcla en acido �hidroxicarboxilico y acido graso que tiene 12

20 carbonos o menos diferente de dicho acido β �hidroxicarboxilico respectivamente; una tercera etapa de reaccion de dicho acido β �hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con un reactivo para mostrar color; una cuarta etapa de reaccion de dicho acido graso que tiene 12 carbonos o menos diferente de dicho acido

hidroxicarboxilico separado en la segunda etapa con el reactivo para mostrar color; 25 una quinta etapa de evaluacion del tipo y/o fuerza de olor corporal de cada uno de los colores mostrados en la tercera y cuarta etapa.