ES2384260T3 - Polímeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos - Google Patents

Polímeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos Download PDF

Info

Publication number
ES2384260T3
ES2384260T3 ES05744145T ES05744145T ES2384260T3 ES 2384260 T3 ES2384260 T3 ES 2384260T3 ES 05744145 T ES05744145 T ES 05744145T ES 05744145 T ES05744145 T ES 05744145T ES 2384260 T3 ES2384260 T3 ES 2384260T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
tobacco
printed polymer
molecularly
molecularly printed
polymer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES05744145T
Other languages
English (en)
Inventor
Sumita Bhattacharyya
K. Mcadam
Anthony Rees
Börje SELLERGREN
Christine Widstrand
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
British American Tobacco Investments Ltd
Original Assignee
British American Tobacco Investments Ltd
British American Tobacco Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by British American Tobacco Investments Ltd, British American Tobacco Co Ltd filed Critical British American Tobacco Investments Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2384260T3 publication Critical patent/ES2384260T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F226/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen
    • C08F226/06—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen by a heterocyclic ring containing nitrogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/24—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by extraction; Tobacco extracts
    • A24B15/241—Extraction of specific substances
    • A24B15/245—Nitrosamines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/24—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by extraction; Tobacco extracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES OF CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
    • A24D3/00—Tobacco smoke filters, e.g. filter tips or filtering inserts; Filters specially adapted for simulated smoking devices; Mouthpieces of cigars or cigarettes
    • A24D3/02—Manufacture of tobacco smoke filters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES OF CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
    • A24D3/00—Tobacco smoke filters, e.g. filter tips or filtering inserts; Filters specially adapted for simulated smoking devices; Mouthpieces of cigars or cigarettes
    • A24D3/06—Use of materials for tobacco smoke filters
    • A24D3/067—Use of materials for tobacco smoke filters characterised by functional properties
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES OF CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
    • A24D3/00—Tobacco smoke filters, e.g. filter tips or filtering inserts; Filters specially adapted for simulated smoking devices; Mouthpieces of cigars or cigarettes
    • A24D3/06—Use of materials for tobacco smoke filters
    • A24D3/08—Use of materials for tobacco smoke filters of organic materials as carrier or major constituent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES OF CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
    • A24D3/00—Tobacco smoke filters, e.g. filter tips or filtering inserts; Filters specially adapted for simulated smoking devices; Mouthpieces of cigars or cigarettes
    • A24D3/06—Use of materials for tobacco smoke filters
    • A24D3/12—Use of materials for tobacco smoke filters of ion exchange materials
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography
    • B01D15/3852—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography using imprinted phases or molecular recognition
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/268—Polymers created by use of a template, e.g. molecularly imprinted polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F236/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, at least one having two or more carbon-to-carbon double bonds
    • C08F236/02—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, at least one having two or more carbon-to-carbon double bonds the radical having only two carbon-to-carbon double bonds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/0098—Plants or trees

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Cigarettes, Filters, And Manufacturing Of Filters (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Polyamides (AREA)

Abstract

Un polímero impreso molecularmente selectivo al menos para una nitrosamina específica de tabaco, en el que dicho polímero impreso molecularmente se obtiene usando como plantilla un análogo funcional o estructural de una nitrosamina específica de tabaco.

Description

Polfmeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos.
Campo de la invenci6n
La presente invenci6n se refiere a una clase de polfmeros impresos molecularmente y al uso de polfmeros impresos molecularmente en bioanalisis y separaci6n de metabolitos de nicotina. La invenci6n se refiere ademas a procedimientos para usar los polfmeros impresos molecularmente para tratar tabaco, sustitutos de tabaco, y sus derivados para reducir en los mismos el nivel de compuestos que se consideran dianas.
Antecedentes de la invenci6n
En los campos de las ciencias medicas, nutricionales, medioambientales y qufmicas hay necesidad creciente de realizar alguna separaci6n selectiva de sustancias especfficas en mezclas complejas de sustancias emparentadas. El objetivo puede ser la extracci6n cuantitativa de cierto compuesto o compuestos, la medici6n de su concentraci6n,
o la retirada selectiva de un compuesto diana de una mezcla multicomponente.
Unos controles sanitarios mas estrictos han hecho subir la demanda de procedimientos que permitan la cuantificaci6n sensible y selectiva de productos peligrosos y metabolitos de ciertas sustancias cuotidianas de uso ampliamente extendido. De particular interes son los compuestos qufmicos emparentados con el uso de productos a base de tabaco, compuestos que estan presentes originalmente en la propia hoja de tabaco de partida o que se generan durante el acto de fumar. Se considera que los compuestos que contienen algun grupo nitroso, tales como las nitrosaminas, son de especial significaci6n a este respecto.
Con el objetivo de reducir la incidencia de los peligros de fumar, se han elaborado ciertos productos farmaceuticos que contienen solo la sustancia neuroactiva, nicotina, la sustancia qufmica que se reivindica que es responsable de los aspectos de dependencia del material fumable.
Entre las formulaciones de nicotina en terapias para dejar de fumar, el chicle de nicotina ha encontrado el uso mas ampliamente extendido. El control de calidad que se requiere durante su producci6n incluye vigilar el nivel de nicotina (2 a 4 mg por pieza de chicle) asf como vigilar los productos primarios de oxidaci6n de nicotina, cotinina, miosmina, cis-N-6xido de nicotina, trans-N-6xido de nicotina y beta-nicotirina. Tambien es deseable, cuando no exigida, la cuantificaci6n de nornicotina, anatabina y anabasina. Segun la Farmacopea de EE.UU. (U.S.P.) la formulaci6n del chicle deberfa contener entre 95% y 110% de la cantidad de nicotina declarada en la etiqueta y la cantidad de cada producto de oxidaci6n no deberfa exceder de 0,1% de la cantidad de nicotina.
A pesar del uso de sustitutos de cigarrillos de este tipo, se pueden producir en vivo metabolitos de nicotina como nitrosamina por procesos metab6licos naturales durante la residencia de la nicotina dentro de los tejidos corporales. Los niveles de estos metabolitos se mantienen por debajo de las concentraciones a las que la mayorfa de los procedimientos analfticos se pueden llevar a cabo cuantitativamente. Por lo tanto la necesidad de procesos que sean capaces de vigilar estos niveles, asf como los niveles de otros metabolitos de nicotina, es de importancia. Tfpicamente, dicha vigilancia se lleva a cabo sobre muestras de orina humana en las que los niveles de tales sustancias carcin6genas sospechosas son extremadamente bajos.
Los compuestos que se consideran diana para cuantificaci6n, reducci6n o retirada de tabaco o humo son conocidos e incluyen los componentes principales de nitrosaminas especfficas del tabaco (TSNAs) y sus precursores alcaloides: NNK, 4-(metilnitrosamino)-1-(3-piridil)-1-butanona; NNA, 4-(metilnitrosamino)-4-(3-piridil)butanal; NNN, Nnitrosonornicotina; NAB, N-nitrosoanabasina; NAT, N-nitrosoanatabina; NNAL, 4-(metilnitrosamino)-1-(3-piridil-1butanol; iso-NNAL, 4-(metilnitrosamino)-4-(3-piridil-1-butanol; iso-NNAC, acido 4-(metilnitrosamino)-4-(3piridil)butanoico.
Para cuantificar apropiadamente cuanto de cada compuesto que se considera diana esta presente en los fluidos biol6gicos humanos, se estan desarrollando procedimientos para analizar en el tabaco los alcaloides, especialmente los productos y metabolitos de descomposici6n nitrosilados. Los procedimientos existentes de separaci6n cromatografica o extracci6n usados para este analisis carecen de la robustez, sensibilidad y velocidad requeridas para manejar el gran numero de muestras que se genera cuando se estudia una poblaci6n general. Con los procedimientos existentes, la baja concentraci6n de nitrosaminas, que estan tfpicamente presentes en picogramos por mililitro, demanda una considerable preparaci6n de la muestra con extracciones multietapa y a menudo derivatizaci6n qufmica (por ejemplo deuterizaci6n previa a espectrometrfa de masas) del analito previa al analisis. Una raz6n de esta complejidad es que los materiales de separaci6n existentes no son selectivos como, por ejemplo, un anticuerpo o receptor biol6gico puede ser para los metabolitos en cuesti6n sino que se basan mas bien en propiedades fisicoqufmicas como la carga o la hidrofobia de los metabolitos para el comportamiento de separaci6n. Estas propiedades qufmicas se pueden compartir con otras muchas moleculas irrelevantes en la muestra.
Un procedimiento tfpico podrfa implicar hasta siete etapas de trabajo que incluyen centrifugaciones, ajustes de pH, tratamientos enzimaticos, etc., que pueden sumar hasta un tiempo de preparaci6n de muchas horas o incluso dfas
por muestra. Con procedimientos tan engorrosos, la perdida de material durante el proceso puede conducir a errores en la estimaci6n de las concentraciones de la muestra original, que requieren extrapolaci6n por retroceso de la medida final, en lugar de depender de una medici6n directa, para obtener la concentraci6n en la muestra original. Por lo tanto, un procedimiento rapido y sencillo para el analisis de nitrosaminas especfficas de tabaco es una significativa necesidad analftica medica sin satisfacer. (Veanse, por ejemplo Byrd & Ogden, Journal of Mass Spectrometry, 2003, 38, 98-107 y Wu y col., Anal. Chem. 2003,75, 4827-4832).
En los ultimos anos, han aparecido numerosos informes sobre reconocimiento selectivo de moleculas pequenas con materiales preparados por impresi6n molecular (polfmeros impresos molecularmente o MIP). Vease, por ejemplo, Wulff, G. Angew, Chemie. Int. Ed. Engl. 1995 (34) 1812. Los MIP son polfmeros que tienen sitios reactivos adaptados para unirse selectivamente con compuestos que se consideran dianas. Se han usado materiales impresos molecularmente preparados de modo covalente, para reconocimiento de quiral de diversas moleculas pequenas que incluyen farmacos terapeuticos, azucares, bases de nucle6tidos, y plaguicidas, asf como hormonas esteroideas y peptfdicas. Ejemplos de los mismos se describen, por ejemplo, en Sellergren, B. Trends Anal. Chem. 1997 (16) 310. La afinidad y la selectividad altas para el analito diana que exhiben algunos de los materiales impresos han justificado la comparaci6n con las correspondientes fases de la inmuno-afinidad (IA). Sin embargo, en contraste con estas ultimas fases, los materiales MIP son directos de preparar, estables en la mayorfa de los medios y reutilizables a lo largo de prolongados perfodos de tiempo.
Por lo tanto, estan bajo investigaci6n aplicaciones de los materiales de MIP en cromatograffa, separaci6n (continua o por lotes), detecci6n qufmica o en analisis especfficos.
Otra aplicaci6n es la extracci6n en fase s6lida (SPE, vease Mayes, A. G.; Mosbach, K. Trends Anal. Chem. 1997, 16, 321) de analitos presentes en concentraciones bajas en muestras biol6gicas, o en matrices complejas. La SPE puede conducir a enriquecimiento selectivo y limpieza de analito hasta niveles no alcanzables con los procedimientos existentes. Las extracciones en fase s6lida impresa molecularmente (MISPE) se han usado en bioanalisis, analisis de alimentos y analisis medioambiental. En estos ejemplos se obtiene enriquecimiento selectivo y limpieza del analito lo que da como resultado una precisi6n mas alta y un descenso del lfmite de detecci6n (LOD) en la posterior cuantificaci6n cromatografica (por ejemplo HPLC) o por espectrometrfa de masas.
En vista de su alta selectividad combinada con buena afinidad para la molecula diana o el grupo de moleculas diana, los MIP han despertado un considerable interes por parte de la industria alimentaria como herramienta para mejorar la calidad de los alimentos. Esto requiere el uso de MIP para la retirada selectiva de componentes indeseables de la matriz del alimento. Como estos componentes estan presentes a menudo en concentraciones bajas, la capacidad de saturaci6n del MIP no es tfpicamente un factor limitante.
El material preferido de MIP de la invenci6n disenado especfficamente es capaz de absorber selectivamente los derivados nitrosilados de nicotina mas comunes de matrices complejas, tales como orina, dando recuperaci6n cuantitativa y conduciendo por lo tanto a errores pequenos en la estimaci6n de las concentraciones de dichas sustancias qufmicas peligrosas.
Ademas de la cuantificaci6n, es tambien muy conocido el intento de reducir los efectos nocivos de consumir material que contiene tabaco, sustitutos de tabaco o mezclas de los mismos reduciendo los niveles de los compuestos que se consideran diana. Dichas reducciones se pueden hacer en el propio material o en un derivado del mismo tal como un extracto del material. La reducci6n tambien se puede efectuar en los productos de descomposici6n termica del material, esto es en el humo de la corriente principal o de la corriente lateral que se obtiene por combusti6n, o los aerosoles que se producen calentando el material a una temperatura por debajo de su temperatura de combusti6n.
Un procedimiento muy bien conocido para esta clase de reducci6n es el de poner en contacto los productos de descomposici6n termica del material con un filtro que adsorbe los componentes indeseados de los mismos. Un procedimiento alternativo implica extracci6n con disolventes del material, por ejemplo, segun se describe en la patente de EE.UU. US-5601097. Segun la memoria de dicha patente, el contenido en protefnas del material de tabaco se reduce tratando el tabaco con una disoluci6n que contiene un tensioactivo para extraer polipeptidos, separando la disoluci6n, retirando el tensioactivo y los polipeptidos de la disoluci6n, y recombinado la disoluci6n con el material de tabaco. La patente internacional WO 01/65954 describe un procedimiento en el que se pone en contacto tabaco con un fluido de extracci6n supercrftico tal como di6xido de carbono supercrftico para reducir selectivamente o eliminar nitrosaminas.
Estos procedimientos son igualmente aplicables tanto al propio tabaco como a los sustitutos de tabaco esto es, materiales naturales o sinteticos que tienen caracterfsticas similares a las del tabaco natural que permiten consumirlos de manera similar al tabaco, ya sea fumando, masticando, mediante inhalaci6n, o de otra forma.
Ha habido un intento de retirar nicotina del humo de tabaco usando MIP, como han informado Liu, Y., y col., Molecularly Imprinted Solid-Phase Extraction Sorbent for Removal of Nicotine from Tobacco Smoke, Analytical Letters, Vol. 36, N° 8, pags. 1631-1645 (2003). El MIP que se describe en el artfculo se habfa disenado para unirse a nicotina y no a los metabolitos de nicotina mas t6xicos tales como las nitrosaminas. No esta claro si el MIP era realmente selectivo para nicotina puesto que el metodo cientffico que producfa los datos carecfa de los elementos
clave de las comprobaciones de control.
Por lo tanto, sigue existiendo necesidad en la tecnica de nuevos MIP y procedimientos de empleo de los mismos, particularmente en el campo de la nicotina y los metabolitos de nicotina.
Resumen de la invenci6n
La presente invenci6n proporciona un polfmero impreso molecularmente (MIP) selectivo al menos para una nitrosamina especffica de tabaco, en el que dicho polfmero impreso molecularmente se obtiene usando como plantilla un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco.
En una realizaci6n de la invenci6n se proporciona el polfmero impreso molecularmente, en el que dicha al menos una nitrosamina se deriva de nicotina, nornicotina, anabasina o anatabina. Los MIP de la invenci6n se pueden obtener, por ejemplo, copolimerizando un mon6mero o mon6meros funcionales y un reticulador en presencia de un analogo estructural de una nitrosamina especffica de tabaco, en un medio de polimerizaci6n que contiene un iniciador de radicales libres, tras de lo cual se retira la plantilla del MIP.
La invenci6n incluye el uso de los polfmeros impresos molecularmente de la invenci6n para extracciones analfticas y preparativas, en cromatograffa, para pretratamiento de muestras analfticas, en sensores qufmicos o como filtro en fase s6lida para extracci6n de nitrosaminas de nicotina en sustancias o dispositivos que contienen nicotina.
Adicionalmente, la invenci6n incluye un procedimiento para reducir el nivel de un componente que se considera diana en un producto de tabaco, en el que el producto de tabaco se trata con un MIP que es selectivo al menos para un compuesto de contiene algun grupo nitroso. Ademas, la invenci6n proporciona procedimientos para fabricar un material para fumar que incorpora el uso de MIP para retirar selectivamente compuestos que contienen algun grupo nitroso.
La presente invenci6n incluye el tratamiento de productos de tabaco con MIP para reducir en los mismos el nivel de compuestos que contienen algun grupo nitroso.
En esta memoria de patente, "producto de tabaco" quiere dar a entender un material que contiene tabaco (incluyendo hoja de tabaco o tallo de tabaco), o un sustituto de tabaco, o una mezcla de tabaco y sustitutos de tabaco, y derivados de dicho material, incluyendo extractos del material, humo producido por la descomposici6n termica del material y aerosoles producidos calentando el material por debajo de su temperatura de combusti6n.
Cuando el producto de tabaco es un derivado producido por la descomposici6n termica del material que contiene tabaco o un sustituto de tabaco, la descomposici6n se puede efectuar por combusti6n del material, como en un cigarrillo convencional, o calentando el material a una temperatura por debajo de su temperatura de combusti6n, conforme a un procedimiento que se usa en algunos productos alternativos de tabaco conocidos para producir un aerosol que es inhalado por el consumidor.
Como alternativa, el producto de tabaco puede ser un derivado que se produce poniendo en contacto material que contiene tabaco o un sustituto de tabaco con un disolvente. En particular, la invenci6n proporciona un procedimiento para fabricar un material para fumar que comprende las etapas de extraer material fumable con un disolvente, tratar el extracto con un polfmero impreso molecularmente que es selectivo al menos para un compuesto con algun grupo nitroso para reducir el nivel del mismo en el extracto y combinar el extracto tratado con el material fumable.
En este procedimiento, el material fumable puede estar en cualquier forma conveniente, por ejemplo polvo, tallos, recortes, lamina cortada, picadura de tallos o cualquier combinaci6n de las mismas. El disolvente puede ser acuoso
o no acuoso, tal como metanol, etanol o un medio de extracci6n de fluido supercrftico, tal como di6xido de carbono lfquido supercrftico. La extracci6n se puede llevar a cabo en condiciones cualesquiera que favorezcan la extracci6n de los compuestos que contienen nitr6geno del tabaco.
La invenci6n tambien incluye un artfculo para fumar que comprende tabaco o sustituto de tabaco y un polfmero impreso molecularmente selectivo para la retirada de al menos un compuesto que contiene algun grupo nitroso del producto de la descomposici6n termica del mismo.
El artfculo para fumar de la invenci6n puede tomar cualquier forma convencional, por ejemplo, un cigarrillo, cigarro puro, o purito. En particular el artfculo para fumar puede comprender un cilindro de material para fumar opcionalmente en una envoltura, con o sin filtro. La envoltura puede ser de papel, hoja de tabaco, tabaco reconstituido o de un sustituto de tabaco. Como alternativa, por ejemplo, cuando el artfculo para fumar esta disenado para producir bajas emisiones de humo de corriente lateral o bajos niveles de productos de pir6lisis en el humo de la corriente principal, la envoltura puede estar compuesta de material inorganico no combustible tal como un material ceramico. El filtro puede ser de cualquier material adecuado, por ejemplo acetato de celulosa fibroso, polipropileno o polietileno, o papel.
El material para fumar es preferiblemente tabaco pero puede ser un sustituto de tabaco tal como un material para fumar que no es tabaco. Ejemplos de materiales para fumar que no son tabaco son materiales vegetales secos y
curados, incluyendo materiales de frutas y un material para fumar sintetico tal como el que se puede producir a partir de alginatos y una sustancia que genera aerosoles tal como glicerol. El material para fumar tambien puede comprender una mezcla de tabaco y materiales para fumar que no son tabaco. Cuando el material para fumar comprende tabaco, el tabaco puede ser de cualquier tipo adecuado, o una mezcla de los mismos, que incluye lamina
o tallo curado al aire, curado al fuego, curado en atm6sfera artificial, curado al sol, y puede haberse procesado usando cualquier proceso apropiado. Por ejemplo, el tabaco se puede cortar, picar, expandir o reconstituir. El material para fumar tambien puede incluir aditivos convencionales, tales como mejoradores, colorantes, humectantes (tales como glicerol y propilenglicol), cargas inertes (tales como creta), y saborizantes (tales como azucar, regaliz o cacao).
La invenci6n tambien se puede aplicar a tabaco que se ha disenado para consumo oral o nasal, chupando, mascando, o con ingesti6n nasal, en lugar de fumarlo. Productos de este tipo incluyen rape, snus y tabaco "duro" o de mascar.
El material impreso molecularmente se puede incorporar en el material fumable. Por consiguiente, la invenci6n incluye material para fumar que contiene un polfmero impreso molecularmente selectivo para la retirada al menos de un compuesto que contiene algun grupo nitroso de los productos de descomposici6n termica del material fumable.
Como alternativa, cuando el artfculo para fumar comprende un cilindro de material fumable dentro de una envoltura, el material impreso molecularmente se puede incorporar en la envoltura. Por lo tanto, la invenci6n incluye material de envoltura para artfculos para fumar que comprende un polfmero impreso molecularmente selectivo para la retirada de un componente que se considera diana de los productos de descomposici6n termica de un material para fumar. La envoltura puede ser un material a base de celulosa tal como un papel o un material a base de tabaco tal como tabaco reconstituido.
Los artfculos para fumar preferidos de la invenci6n son cigarrillos, que comprenden un cilindro de tabaco, envoltura, y un filtro que incluye un polfmero impreso molecularmente selectivo para la retirada al menos de un compuesto que contiene algun grupo nitroso de los productos de descomposici6n termica de un material fumable.
La invenci6n tambien incluye un filtro para el humo que comprende un polfmero impreso molecularmente selectivo para la retirada al menos de un compuesto que contiene algun grupo nitroso de los productos de descomposici6n termica de un material para fumar. El filtro para el humo se puede producir por separado del artfculo para fumar, por ejemplo en forma de una boquilla de cigarrillo o cigarro, o se puede integrar en el artfculo para fumar, por ejemplo en forma de un cigarrillo con una punta de filtro.
Los filtros para el humo en forma de puntas de filtro pueden ser de cualquier construcci6n convencional. Por ejemplo, puede estar en forma de un filtro de tipo "dalmata" que comprende una secci6n de material fibroso de filtro, tal como acetato de celulosa, estando el polfmero impreso molecularmente en forma de partfculas y distribuido en toda la extensi6n de la secci6n. Como alternativa, el filtro puede estar en forma de un filtro de tipo "cavidad", que comprende multiples secciones en las que el polfmero impreso molecularmente se puede situar entre dos secciones adyacentes del material fibroso de filtro. El filtro para el humo tambien puede comprender otros materiales absorbentes tales como una resina de intercambio i6nico, una zeolita, sflice, alumina o amberlita.
Durante el uso, el humo pasa a traves del filtro, el polfmero impreso molecularmente absorbe selectivamente y retiene los compuestos que se consideran diana del humo y el humo filtrado pasa al fumador.
Los filtros para el humo y los artfculos para fumar segun la invenci6n pueden incluir medios para proteger el polfmero impreso molecularmente del humo, o reducir su exposici6n, cuando esta en uso. Esto se puede conseguir de muchas maneras diferentes. Por ejemplo, el filtro para el humo puede comprender un elemento de filtro para adsorber materiales del vapor o fase en partfculas del humo. Los elementos del filtro de este tipo pueden comprender un adsorbente general tal como carb6n activado, que puede estar en cualquier forma conveniente, tal como hebras, partfculas, granulos, tela o papel. El elemento del filtro tambien puede ser un adsorbente selectivo tal como una resina de intercambio i6nico, una zeolita, sflice, alumina o amberlita. Los medios para proteger al catalizador pueden incluir dos o mas elementos de filtro de este tipo de diferentes composiciones, por ejemplo, un primer elemento de filtro de acetato de celulosa, y un segundo elemento de filtro de carb6n activado. La provisi6n de multiples elementos de filtro en filtros para el humo y artfculos para fumar es bien conocida, y se pueden usar cualquier configuraci6n convencional de filtro, y procedimientos de construcci6n adecuados.
Breve descripci6n de los dibujos
La Figura 1 muestra un esquema del procedimiento para la sfntesis de un polfmero impreso;
La Figura 2 muestra el grupo funcional nitrosamina y ejemplos de dianas de nitrosamina emparentadas con nicotina;
La Figura 3 muestra analogos isoestericos de nitrosaminas;
La Figura 4A muestra ejemplos de analogos de dianas a base de amida y sulfonamida;
La Figura 4B muestra un analogo de diana de enamina (MPAPB) que se usa como plantilla para preparar un MIP para extracci6n de NNAL;
La Figura 4C muestra piridincarbinol usado como plantilla para preparar un MIP para extracci6n de NNAL;
La Figura 5 muestra las tasas de recuperaci6n de NNAL usando un MIP selectivo para NNAL;
La Figura 6 muestra los cromatogramas obtenidos tras analisis de 1 ml de orina humana al que se ha anadido 0,25 µg de NNAL (representado por la lfnea delgada) y 1 ml de orina humana de ensayo en blanco (representado por la lfnea gruesa);
La Figura 7 muestra una superposici6n de cromatogramas obtenidos tras analisis de muestras en presencia de nicotina donde la lfnea continua representa muestra a la que se ha anadido NNAL y nicotina, la lfnea discontinua representa eluyente recogido tras cargar 1ml de la muestra a la que se ha anadido NNAL y nicotina, y la lfnea larga discontinua representa un lavado de (NH4)H2PO4, pH 4,5;
La Figura 8 es una vista de perfil, en secci6n parcialmente longitudinal y parcialmente fracturada de un artfculo para fumar con un filtro para el humo segun la invenci6n;
La Figura 9 es una vista similar a la de la Figura 8 de un artfculo para fumar con un filtro para el humo alternativo segun la invenci6n;
La Figura 10 muestra la estructura qufmica y el punto de ebullici6n para tres productos que se describen en el Ejemplo 6; y
La Figura 11 muestra la estructura qufmica y el punto de ebullici6n para nitrosaminas volatiles seleccionadas.
En los dibujos, se dan rasgos similares como numeros de referencia.
Descripci6n detallada
Tfpicamente, la impresi6n molecular consiste en las siguientes etapas: (1) se deja que interaccione un compuesto de plantilla, que puede ser la molecula que se considera diana o un analogo estructural de la misma, con un mon6mero,
o varios mon6meros funcionales seleccionados, en disoluci6n para formar un complejo plantilla-mon6mero; (2) el complejo plantilla-mon6mero se copolimeriza con un mon6mero reticulador dando como resultado una matriz polimerica que incorpora el compuesto de plantilla; (3) el compuesto de plantilla se extrae de la matriz de polfmero para formar un MIP que se puede usar para uni6n selectiva a la molecula que se considera diana. Antes de la etapa (3), en la que el MIP se prepara como un polfmero s6lido (o monolito) tfpicamente se tritura y se tamiza para obtener una fracci6n del tamano deseado del material en partfculas. Cuando se prepara mediante procedimientos de polimerizaci6n en suspensi6n o en emulsi6n, dichas trituraci6n y tamizado son innecesarias puesto que el tamano de partfcula se puede controlar dentro de los lfmites deseados durante el proceso de polimerizaci6n. El material en partfculas preparado por cualquiera de los procedimientos anteriormente mencionados se puede empaquetar en una columna cromatografica o de extracci6n en fase s6lida y se puede usar para separaci6n cromatografica de la plantilla de los otros componentes de la mezcla, que incluyen moleculas con estructuras o funcionalidades similares.
Los sitios reactivos sobre el polfmero impreso molecularmente que quedan expuestos por la retirada del compuesto de plantilla estaran en una configuraci6n estereoqufmica apropiada para reacci6n con moleculas nuevas de la molecula que se considera diana. Como resultado, el polfmero se puede usar para uni6n selectiva a la molecula que se considera diana.
Actualmente, la tecnica que se aplica mas ampliamente para generar sitios de uni6n impresos molecularmente es la vfa de la ruta "no-covalente". Esta hace uso del auto-ensamblaje no covalente del compuesto de plantilla y los mon6meros funcionales para formar el complejo plantilla-mon6mero, a lo que sigue polimerizaci6n por radicales libres en presencia de un mon6mero reticulador y finalmente extracci6n del compuesto de plantilla. La impresi6n covalente, en la que la molecula de plantilla y un mon6mero o mon6meros adecuados se unen entre ellos de manera covalente antes de la polimerizaci6n, tambien se puede llevar a cabo segun procedimientos conocidos. Las propiedades de uni6n de los MIP formados por unos u otros de los procedimientos anteriores se pueden examinar volviendo a unirlos a la molecula de plantilla.
La polimerizaci6n se realiza en presencia de un disolvente que forma poros que se denomina por6geno. Para estabilizar las interacciones electrostaticas entre los mon6meros funcionales y el compuesto de plantilla a menudo se elige el por6geno entre disolventes apr6ticos de polaridad baja a moderada. Idealmente, los compuestos de plantilla exhiben solubilidad moderada a alta en los medios de polarizaci6n, y aquellos, o sus analogos estructurales, se pueden usar por tanto directamente usando este procedimiento estandar.
Aun cuando es posible usar la propia molecula que se considera diana como plantilla, comunmente se prefiere un analogo estructural de la molecula diana porque: (a) la molecula que se considera diana puede que sea inestable en las condiciones de polimerizaci6n o puede que inhiba la polimerizaci6n; (b) la molecula que se considera diana puede que no este disponible en cantidades suficientes debido a la complejidad de su sfntesis o coste, o de ambos;
(c) la plantilla puede que sea insoluble o escasamente soluble en la mezcla de polimerizaci6n; (d) el MIP puede quedar contaminado por niveles bajos de de la molecula que se considera diana retenidos en regiones diffcilmente accesibles de la matriz de polfmero, que pueden exudar del MIP durante el uso; y/o (e) el(los) analito(s) diana puede
5 que presente(n) riesgo significativo para la salud y no se debe(n) usar como plantilla(s).
En el caso de compuestos con grupo nitroso, particularmente los compuestos conocidos como TSNA que se describen a continuaci6n, a menudo es mas conveniente usar analogos funcionales de los mismos como compuestos de plantilla. Por ejemplo, derivados de glucosa de TSNA pueden ser particularmente utiles como compuestos de plantilla, vease Figura 2.
10 Cuando se deriva el MIP usando un analogo funcional del compuesto que se considera diana, el analogo funcional deberfa ser isoesterico y preferiblemente tambien isoelectr6nico con el compuesto que se considera diana, o puede contener una subestructura del compuesto que se considera diana en la que es probable que haya interacciones fuertes.
Los compuestos que contienen algun grupo nitroso, particularmente las nitrosaminas, que tienen la f6rmula general
15 O=N-N(R1)(R2) estan entre los numerosos ingredientes del tabaco y del humo del tabaco que se ha sugerido que tienen efecto nocivo sobre los consumidores.
Una clase particular de compuestos con grupo nitroso a los que es aplicable la presente invenci6n es el grupo de nitrosaminas que se dan naturalmente en el tabaco, conocidas como nitrosaminas especfficas del tabaco (TSNA), que se derivan de los alcaloides que se dan naturalmente en el tabaco, concretamente nicotina, nornicotina,
20 anabasina y anatabina. Las TSNA incluyen:
4-(metilnitrosamino)-1-(3-piridil)-1-butanona ("NNK"):
N'-nitrosonornicotina ("NNN"):
N'-nitrosoanabasina ("NAB"):
N'-nitrosoanatabina ("NAT"): 4-(metilnitrosamino)-4-(3-piridil)-1-butanol ("NNA"):
Ademas, un grupo de compuestos conocidos como nitrosoaminas volatiles se encuentra en la fase vapor del humo del tabaco. Este grupo incluye los siguientes compuestos:
N'-nitrosodimetilamina ("NDMA"):
10 N'-nitrosodietilamina ("NDEA"):
N'-nitrosoetilmetilamina ("NP"):
N-nitrosodietanolamina:
Otros compuestos que contienen algun grupo nitroso tambien se han identificado en estudios qufmicos del tabaco o del humo del tabaco, por ejemplo:
N-nitrosopirrolidina ("NYPR"):
N'-nitrosometilbutilnitrosamina ("BMNA"), N'-nitroso-n-butilamina ("NBA") y N'-nitrosopiperidina ("NIPI"):
En la Figura 3 se observan posibles analogos isoestericos que se pueden considerar dianas de nitrosaminas. Las moleculas que se muestran son todas derivadas de la amina progenitora y se pueden sintetizar en una sola etapa desde la amina secundaria y el correspondiente aldehfdo o cloruro de acido. Los modelos moleculares de la enamina (Figura 4A) han mostrado buena complementariedad esterica con una de las nitrosaminas de interes, NNAL.
Durante el diseno de un compuesto de plantilla adecuado para el analito diana NNAL, se identific6 una plantilla particularmente interesante, correspondiente a la subestructura de piridincarbinol pero que carecfa sorprendentemente del resto nitrosamina (Figura 4B). Si se puede obtener suficiente afinidad y selectividad de uni6n para dichas plantillas subestructurales, esta es la aproximaci6n preferida. Realmente, la afinidad de uni6n, la selectividad y las recuperaciones que se obtienen con este MIP de piridincarbinol son superiores a las de aquellos MIP que se obtienen con la plantilla mas compleja de enamina. Asf, la invenci6n proporciona un MIP sorprendentemente eficaz que comprende una plantilla sencilla que carece de ciertos rasgos clave de la diana pero que proporciona uni6n eficaz con aquellas nitrosaminas diana que contienen el resto piridina-metanol.
Preparaci6n de MIP para NNAL
Usando el mon6mero funcional de acido metacrflico (MAA), cualquiera de los dos reticuladores, dimetacrilato de etilenglicol (EDMA) o trimetacrilato de trimetilolpropano (TRIM) y cualquiera de los dos analogos de NNAL, 4(metilpropenil-amino)-1-piridin-3-il-butan-1-ol (4MPAPB, Fig 4A) o piridincarbinol (Fig 4B) como plantillas, se obtienen dos polfmeros diferentes que exhiben ambos fuertes afinidad y selectividad para NNAL en medios disolventes organicos y acuosos.
Esta invenci6n incluye un procedimiento de extracci6n para la recuperaci6n cuantitativa del analogo de nicotina NNAL que supone las etapas de preparaci6n de un MIP selectivo para NNAL en un formato de material cromatografico, acondicionamiento de la columna, aplicaci6n de una muestra de orina, retirada de los compuestos que interfieren y finalmente eluci6n selectiva del analito de NNAL.
A manera de explicaci6n y no de limitaci6n, la invenci6n se describira adicionalmente con mas detalle con referencia a una serie de ejemplos. La invenci6n se refiere a moleculas de plantilla, materiales polfmeros disenados para que se unan a nitrosaminas que se derivan de nicotina y estan presentes en sistemas organicos o acuosos, y finalmente al uso de dichos materiales, por ejemplo, en separaciones analfticas o preparativas, en cromatograffa, para pretratamiento de muestra analftica, y en sensores qufmicos.
A menos que se describa otra cosa, los materiales estan disponibles comercialmente o se pueden preparar mediante tecnicas convencionales. Veanse, por ejemplo, B. Sellergren (Ed.) Molecularly-imprinted Polymers: Man made mimics of antibodies and their application in analytical chemistry, parte de la serie Techniques and Instrumentation in Analytical Chemistry, Elsevier Science, Amsterdam, Pafses Bajos, 2001.
Ejemplo 1: Sintesis de plantilla de enamina (MPAPB)
Se anadieron 2 ml de tolueno anhidro (secado recientemente sobre sodio) a un vial que contenfa 4-metilamina-1-(3
piridil)-1-butanol (100 ml). Se anadieron a esto 500 mg de tamiz molecular secado recientemente. Se agit6 la mezcla durante 1 hora bajo N2. A la mezcla se anadieron 100 µl de propionaldehfdo. La mezcla se agit6 a 55°C durante 4 horas. La reacci6n se vigil6 mediante HPLC despues de 1,5 horas. El color del producto era anaranjado-amarillo en tolueno. El producto bruto en tolueno se us6 directamente para la sfntesis del MIP tras filtraci6n sin purificaci6n. El rendimiento de plantilla de MPAPB fue de alrededor de 90%.
Ejemplo 2: Sintesis de MIP usando piridincarbinol como plantilla
A piridina metanol (97 µl) se anadieron 3,74 ml de TRIM purificado (que se ha purificado sobre alumina basica), mon6mero funcional de MAA (1020 µl), disolvente por6geno de tolueno (7,1 ml) y finalmente iniciador de ABDV (63 mg) y se agit6 hasta que se obtuvo una disoluci6n transparente. Se transfiri6 la disoluci6n a un vial de vidrio, se purg6 con nitr6geno durante 5 minutos y se cerr6 a la llama. Se llev6 a cabo una polimerizaci6n inducida por calor a 45°C durante 24 horas. A continuaci6n se cur6 la mezcla de polfmeros a 70°C durante 24 horas mas.
El procesamiento del material de MIP bruto fue como sigue: el MIP se tritur6 gruesamente y se transfiri6 a un cartucho de Soxhlet. Se lav6 a fondo en primer lugar con metanol durante 12 horas y a continuaci6n con acido acetico durante 12 horas a fin de retirar cualquier resto de plantilla y otros mon6meros sin reaccionar. Tras estas primeras etapas de extracci6n, el polfmero se sec6 al vacfo y luego se moli6 y se tamiz6 en un polvo fino dentro de un intervalo de tamano de 20 a 90 µm. Como etapa final de extracci6n, el MIP finamente molido se someti6 a una extracci6n con disolvente asistida por microondas de 40 minutos usando acido f6rmico como disoluci6n de extracci6n. Despues de secar, el MIP estaba listo para usar.
Ejemplo 3: Uso de MIP como sorbentes selectivos en SPE
En una realizaci6n de la invenci6n, el MIP se puede empaquetar en columnas de extracci6n en fase s6lida para la extracci6n selectiva de NNAL desde una matriz biol6gica. En primer lugar, se coloc6 una frita de polipropileno en una columna de SPE apropiada (tfpicamente 10 ml de capacidad para usos analfticos), se anadieron a continuaci6n 25 mg de MIP en la parte superior para formar un lecho de MIP y una segunda frita se comprimi6 firmemente sobre la superficie del lecho de MIP. El acondicionamiento de la columna se llev6 a cabo en el orden siguiente: se anadieron a la MIPSPE 1 ml de DCM, 1 ml de MeOH y finalmente 1 ml de agua destilada.
Se dej6 pasar la muestra, por ejemplo, orina humana (5 ml) que contenfa cantidades bajas del analito, a traves de la columna de MIPSPE acondicionada. A continuaci6n se someti6 la columna a vacfo para retirar el agua hasta que se sec6 el material. A continuaci6n, se eluyeron las sustancias polares, que interferfan y que se podfan haber asociado no especfficamente con el MIP, mediante un lavado con 1 ml de agua destilada. Se realiz6 otra vez una etapa de secado que aplica varios minutos de vacfo para facilitar el denominado cambio de fase (cambio de medio de acuoso a organico). En este punto, las sustancias no polares que interfieren se retiraron mediante lavados con 1 ml cada vez de tolueno, tolueno:DCM (9:1) y tolueno:DCM (4:1). La eluci6n selectiva final de NNAL se llev6 a cabo en etapas de eluci6n de 3 veces, cada una de 1 ml de DCM.
Tras la evaporaci6n del disolvente, se reconstituyeron las muestras en la fase m6vil y se analizaron sobre un sistema de HPLC: por ejemplo Merck-Hitachi (sistema L-7000) usando una columna beta-basica C18, 5 µm, 150x2,1 mm + precolumna 10x2,1 mm. El caudal fue de 0,25 ml/min, volumen de inyecci6n 100 µl, temperatura 30°C y detecci6n a 262 nm UV. La fase m6vil consiste en NH4PO4 50 mM pH 3, acido octanosulf6nico 5 mM y metanol al 20%.
En estas condiciones se obtuvo NNAL como un pico doble claramente distinguible que se eluye a los 8-10 minutos aproximadamente (vease la Figura 6, en la que se compara una muestra de orina humana de 1 ml a la que se ha anadido 0,25 µg de NNAL con orina exenta de NNAL). El pico doble es caracterfstico de NNAL porque corresponde a sus dos rotameros. A partir de la estructura de NNAL, se puede demostrar que la cadena lateral sobre el anillo de piridina puede tener diferentes estados conformacionales. Las conformaciones preferidas se denominan rotameros y para NNAL hay dos conformaciones principales. La retenci6n de estos dos rotameros sobre una columna de HPLC ha de diferir. Como se muestra en la Figura 6, el pico de NNAL se separa limpiamente de las sustancias que interfieren. Por lo tanto se puede cuantificar con facilidad y precisi6n. Las tasas de recuperaci6n para NNAL (definidas como cantidad recuperada/cantidad cargada x 100) son tfpicamente hasta 90%, dependiendo de los niveles iniciales de NNAL en la muestra biol6gica. Se han observado tasas de recuperaci6n de cerca de 100% con muestras que contenfan 50 pg/ml y 500 pg/ml de NNAL (Figura 5).
Ejemplo 4: Uso de MIP como sorbentes selectivos en SPE en presencia de nicotina
Otra aplicaci6n de la invenci6n es el uso del MIP como sorbente selectivo para NNAL en el que hay presentes altos niveles de nicotina. Esto ilustra el amplio alcance de las aplicaciones del material de MIP y c6mo la naturaleza selectiva del MIP se puede adaptar finamente para muestras particulares.
Se prepararon columnas de SPE como se describe en el Ejemplo 3. El acondicionado de la columna de SPE se llev6 a cabo en el orden siguiente: 1 ml de DCM seguido por 1 ml de MeOH seguido por 1 ml de (NH4)H2PO4 50 mM, pH 4,5. La muestra, en este ejemplo 5 ml de orina humana que contenfa pequenas cantidades de analito, se dej6 pasar
a traves de la columna de MIPSPE acondicionada. A continuaci6n se someti6 la columna a un vacfo suave (por ejemplo, 10-80 kPa) para retirar el agua hasta que el material estuvo seco. Se eluyeron las sustancias polares que interferfan y que se podfan haber asociado no especfficamente con el MIP, mediante un lavado con 1 ml de (NH4)H2PO4 50 mM, pH 4,5. Se realiz6 otra etapa de secado de varios minutos de vacfo suave. Posteriormente, se realizaron lavados con 1 ml cada vez de tolueno, tolueno:DCM (9:1) y tolueno:DCM (4:1) en este orden. La eluci6n selectiva final de NNAL se llev6 a cabo en 3 etapas de eluci6n cada una de 1 ml de DCM.
Tras la evaporaci6n del disolvente, se reconstituyeron las muestras en la fase m6vil y se analizaron sobre un sistema de HPLC similar al que se ha descrito en el Ejemplo 3. Un cromatograma de ejemplo se muestra en la Figura 7, que ilustra c6mo se retiene selectivamente el NNAL sobre el MIP mientras que la nicotina se retira en el lavado con tamp6n.
Ejemplo 5: Articulos para fumar que incorporan MIP
Con referencia a los dibujos, las Figuras 8 y 9 ilustran artfculos para fumar en forma de cigarrillos que tienen un cilindro 1 de tabaco encajado en una envoltura 2 unida a un filtro para el humo 3 por medio de un papel de la punta
4. Para aclaraci6n, el papel de la punta 4 se muestra con un espaciado de separaci6n de la envoltura 2, pero en realidad se situaran en estrecho contacto.
En la Figura 8, el filtro para el humo 3 comprende tres elementos de filtro cilfndricos 3a, 3b, 3c. El primer elemento de filtro 3a en el extremo de la boca del filtro es de 7 mm de longitud, esta compuesto de estopa de acetato de celulosa impregnada con 7% en peso de plastificante de triacetina que tiene una cafda de presi6n manometrica de 25 mm de columna de agua sobre su longitud. El segundo elemento de filtro 3b, posicionado centralmente es una cavidad de 5 mm de longitud que contiene 150 mg de granulos de carb6n activado. El tercer elemento de filtro 3c adyacente al cilindro 1 es de 15 ml de longitud, tiene una cafda de presi6n manometrica de 90 mm de columna de agua sobre su longitud, y comprende 80 mg de estopa de acetato de celulosa. La estopa esta impregnada con 4% en peso de triacetina y tiene 80 mg de MIP especffico para nitrosaminas volatiles, producido como se describe en el Ejemplo 6 a continuaci6n, distribuido uniformemente en todo su volumen al estilo "Dalmata".
El cigarrillo que se muestra en la Figura 9 es similar al de la Figura 8 excepto que el filtro para el humo 3 tiene cuatro elementos de filtro coaxiales, cilfndricos 3a, 3b, 3c y 3d. El primer elemento de filtro 3a en el extremo de la boca del cigarrillo es de 5 mm de longitud, y esta compuesto de estopa de acetato de celulosa impregnada con 7% en peso de plastificante de triacetina. El segundo elemento de filtro 3b, posicionado adyacente al primer elemento de filtro 3a es una cavidad de 5 mm de longitud que contiene 200 mg de polfmero impreso molecularmente especffico para nitrosaminas volatiles, producido como se describe en el Ejemplo 6 a continuaci6n. El tercer elemento de filtro 3c adyacente al segundo elemento de filtro 3b es de 10 ml de longitud y comprende estopa de acetato de celulosa impregnada con 7% en peso de triacetina. El cuarto elemento de filtro 3d se situa despues del tercer elemento del filtro 3c, es de 7 mm de longitud y comprende 80 mg de de carb6n activado granular. Se forma un anillo de orificios de ventilaci6n 5 en el papel de la punta 4 en un plano radial A-A que proporciona aire al tercer elemento de filtro 3c aproximadamente 3 mm corriente abajo del empalme con el cuarto elemento de filtro 3d cuando se inhala el humo a traves del cigarrillo.
Los siguientes Ejemplos ilustran adicionalmente este aspecto de la invenci6n.
Ejemplo 6: Anmlogos de plantillas para nitrosaminas volmtiles
p.e. = 99-102°C p.e. = 92-96°C p.e. = 35°C (10,0 kPa) (9,3 kPa) (2,0 kPa)
Se disuelven dos equivalentes de una amina secundaria apropiada, por ejemplo, dimetilamina, dietilamina, pirrolidina, piperidina o morfolina, en eter anhidro y se anaden tamices moleculares secados recientemente (50 g/mol de amina). A continuaci6n se enfrfa la mezcla a -5°C y se agita. A continuaci6n se anade gota a gota un equivalente de propionaldehfdo a la mezcla frfa, manteniendo la temperatura a 0 ± 5°C. Se deja la mezcla en reposo en un bano
frfo toda la noche y luego se filtra. Se obtiene el producto, con un rendimiento de aproximadamente 50%, mediante destilaci6n del filtrado a presi6n reducida, dependiendo del punto de ebullici6n del producto. A modo de ejemplo, en la Figura 10 se muestran estructuras y puntos de ebullici6n. (Vease, Brannock, y col., J. Org. Chem., 1964, 29, 801812).
Usando un mon6mero funcional de acido fuerte, se protona la enamina, creando asf la necesaria interacci6n no covalente durante la etapa de impresi6n. La carga positiva reside en el atomo de carbono unido al nitr6geno, una estructura estabilizada debido a la deslocalizaci6n para dar un i6n iminio. Esto posiciona correctamente los mon6meros funcionales acidos para el reconocimiento posterior de las nitrosaminas volatiles. Como no hay oportunidad de deslocalizar la carga positiva, la protonaci6n del nitr6geno de la enamina esta desfavorecida. (Vease, Cook, y col., J. Org. Chem., 1995, 60, 3169-3171).
Puede que se prefiera usar un mon6mero funcional acido mas fuerte que MAA. Realizaciones adicionales incorporan acido 4-vinilbenzoico o acido 4-vinilbenceno sulf6nico como mon6meros funcionales.
Ejemplo 7: Sintesis de un MIP usando una enamina como plantilla
Se prepara una disoluci6n de prepolimerizaci6n disolviendo la enamina deseada (1 mmol), un mon6mero funcional acido (4 mmol), un mon6mero reticulador (20 mmol) y un iniciador de radicales libres (1% peso/peso del total de mon6meros) en un disolvente por6geno apropiado. El mon6mero funcional es indistintamente MAA o acido trifluormetacrflico (TFMAA), el reticulador es indistintamente EDMA o TRIM, el iniciador de radicales libres es ABDV y el disolvente por6geno es uno entre cloroformo, tolueno, acetonitrilo o acetonitrilo/tolueno (1/1 v/v). La disoluci6n se transfiere a un recipiente de polimerizaci6n, se enfrfa a 0°C y se purga a continuaci6n con N2 durante 5 minutos, tras lo cual, se cierra a la llama el recipiente. La polimerizaci6n se inicia a 45°C y se deja que continue a esta temperatura durante 24 horas. A continuaci6n, se cura el polfmero a 70°C durante 24 horas mas.
A continuaci6n se procesa el material de MIP bruto. Se tritura gruesamente el MIP y se transfiere a un cartucho de Soxhlet. A continuaci6n se extrae a fondo (i) con metanol durante 12 horas e (ii) con acido acetico durante 12 horas, a fin de retirar la molecula de plantilla y los mon6meros que no han reaccionado. Tras estas primeras etapas de extracci6n, el polfmero se seca al vacfo, se muele y se tamiza para dar partfculas del intervalo de tamano deseado, por ejemplo, 25-36 µm. A continuaci6n, el MIP molido finamente se somete a una etapa final de extracci6n, que implica 40 minutos de extracci6n asistida por microondas usando acido f6rmico como disolvente de extracci6n. A continuaci6n el MIP se seca al vacfo durante 24 horas
Como alternativa, se puede usar la TSNA diana en lugar de la enamina. Los puntos de ebullici6n de nitrosaminas volatiles seleccionadas a presi6n atmosferica normal se muestran en la Figura 11.
Ejemplo 8: Uso del material de MIP del Ejemplo 2 y/o del Ejemplo 7 en el tratamiento de extractos de tabaco
El polfmero producido en conformidad con el procedimiento del Ejemplo 2 o del Ejemplo 7 se incorpora a una columna de extracci6n en fase s6lida, y se acondiciona la columna haciendo pasar a traves de ella diclorometano (DCM), metanol y finalmente agua destilada.
Se extrae hoja de tabaco Shredded Burley con agua durante 15 minutos a 60°C. Se separa el tabaco de la disoluci6n por filtraci6n y se seca. Se hace pasar la disoluci6n a traves de la columna y se deja que adsorba TSNA del extracto. A continuaci6n, se drena la columna y se concentra la disoluci6n por evaporaci6n en pelfcula y a continuaci6n, el concentrado se recombina con el tabaco extrafdo y se seca al aire.
La TSNA adsorbida por el polfmero se puede eluir de la columna usando DCM.
Ejemplo 9: Uso del material de MIP del Ejemplo 2 o del Ejemplo 7 en el tratamiento de extractos de tabaco
Se extrae hoja de tabaco picada, curada en atm6sfera artificial, con agua durante 15 minutos a 60°C. Se separa el tabaco de la disoluci6n por filtraci6n y se seca. La disoluci6n se mezcla con el MIP del Ejemplo 2 o del Ejemplo 7, perfodo durante el que el polfmero adsorbe selectivamente las TSNA de la disoluci6n. A continuaci6n, el MIP se separa mecanicamente del extracto por filtraci6n o por centrifugaci6n. Se concentra la disoluci6n por evaporaci6n; a continuaci6n, el concentrado se recombina con el tabaco extrafdo y se seca al aire.
El MIP se puede regenerar mediante eluci6n con DCM, metanol y finalmente agua desionizada o tamp6n de pH 4, para reutilizaci6n.
Ejemplo 10: Uso del material de MIP del Ejemplo 2 o del Ejemplo 7 en el tratamiento de extractos de tabaco
Usando un procedimiento continuo de extracci6n, se carga hoja de tabaco picada de tipo mezcla US a una primera camara de extracci6n a la que se alimenta di6xido de carbono supercrftico. Despues de que haya estado en contacto con el tabaco, el di6xido de carbono se alimenta a una segunda camara de extracci6n que contiene un MIP producido segun se describe en el Ejemplo 2 o en el Ejemplo 7. El di6xido de carbono, que ha estado en contacto con el polfmero, se hace volver a la primera camara de extracci6n y se pone otra vez en contacto con el tabaco. Se
continua el procedimiento cfclico hasta que el contenido en TSNA del tabaco se haya reducido al nivel deseado, momento en el que el di6xido de carbono se expulsa del sistema, y el tabaco se retira de la primera camara. El MIP en la segunda camara se regenera a continuaci6n usando DCM, metanol y acido acetico.
Ejemplo 11: Uso del material de polimero impreso molecularmente desarrollado para 4�metilnitrosamino�1� (3�piridil)�1�butanol (NNAL)� en el tratamiento de una disoluci6n que contiene NNAL y nicotina
El polfmero producido en conformidad con el procedimiento del Ejemplo 2 se incorpor6 a una columna de extracci6n en fase s6lida, y se acondicion6 la columna haciendo pasar a traves de ella disoluci6n tamp6n de fosfato.
Se prepararon disoluciones patr6n acuosas de NNAL y nicotina en tampones de fosfato en un intervalo de pH de 3,0 -7,5. La disoluci6n patr6n tamponada se hizo pasar a traves de la columna, se recogi6 esta fracci6n y se analiz6 en cuanto a su contenido en NNAL y nicotina. Una disoluci6n de lavado tamponada se hizo pasar a traves de la columna, esta fracci6n tambien se recogi6 y se analiz6 en cuanto a su contenido en NNAL y nicotina.
Se analizaron las disoluciones por HPLC con detecci6n UV. Las condiciones 6ptimas para que el MIP retenga NNAL y recupere nicotina se observaron en el intervalo de pH 4,0 -4,5. A valores de pH inferiores la nicotina se protona y tiene poca interacci6n con el polfmero, de modo que se arrastra con el tamp6n acuoso.
Ejemplo 12: Uso del material de MIP desarrollado para 4�metilnitrosamino�1�(3�piridil)�1�butanol (NNAL)� en el tratamiento de una disoluci6n que contiene NNAL y �SNA
El polfmero producido en conformidad con el procedimiento del Ejemplo 2 se incorpora a una columna de extracci6n en fase s6lida, y se acondicion6 la columna haciendo pasar a traves de ella diclorometano (DCM), metanol y finalmente agua destilada.
Se acidificaron disoluciones patr6n acuosas de NNAL y varias TSNA (NAB, NAT, NNK y NNN) con acido acetico glacial a pH 3. La disoluci6n patr6n se hizo pasar a traves de la columna, a lo que siguieron tres lavados con disoluci6n de acido acetico glacial, se analiz6 esta fracci6n respecto a su contenido en NNAL y TSNA por GC-TEA. Se hicieron pasar a traves de la columna tres lavados de diclorometano, esta fracci6n tambien se analiz6 respecto al contenido en NNAL y TSNA.
El MIP retuvo 91% de NNAL, 65% de NNK y tuvo una eficacia de aproximadamente 20-30% para las otras TSNA (menos similares estructuralmente).
La descripci6n anterior se ha expuesto meramente para ilustrar la invenci6n y no tiene la intenci6n de ser limitante. Dado que a los expertos en la tecnica se les pueden ocurrir modificaciones de las realizaciones descritas que incorporen el espfritu y la esencia de la invenci6n, se deberfa interpretar la invenci6n de modo que incluya todo aquello que este dentro del alcance de las reivindicaciones que se adjuntan y equivalentes de las mismas.

Claims (27)

  1. REIVINDICACIONES
    1.
    Un polfmero impreso molecularmente selectivo al menos para una nitrosamina especffica de tabaco, en el que dicho polfmero impreso molecularmente se obtiene usando como plantilla un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco.
  2. 2.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, en el que dicha al menos una nitrosamina se deriva de nicotina, nornicotina, anabasina o anatabina.
  3. 3.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, selectivo para la nitrosamina NNAL derivada de nicotina.
  4. 4.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, en el que el polfmero se ha preparado usando como plantilla un analogo isosterico de una nitrosamina de nicotina.
  5. 5.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, en el que el polfmero se ha preparado usando como plantilla 4-(metilpropenil-amino)-1-piridin-3-il-butan-1-ol.
  6. 6.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, en el que el polfmero se ha preparado usando como plantilla piridincarbinol.
  7. 7.
    Un polfmero impreso molecularmente segun la reivindicaci6n 1, en el que el polfmero se ha preparado usando un compuesto que incluye una subestructura de la nitrosamina especffica de tabaco.
  8. 8.
    Un kit que comprende: un polfmero impreso molecularmente segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7; e instrucciones de uso del polfmero impreso molecularmente para que realice al menos una de las acciones
    de detectar, cuantificar, y separar nitrosaminas en una muestra.
  9. 9.
    Un procedimiento para preparar un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende:
    copolimerizar al menos un mon6mero funcional y al menos un reticulador en presencia de al menos un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco en un medio de polimerizaci6n que contiene al menos un iniciador de radicales libres para producir un polfmero impreso molecularmente unido a un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco; y
    retirar dicho analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco del polfmero impreso molecularmente.
  10. 10.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 9, en el que el mon6mero funcional exhibe funcionalidad de acido.
  11. 11.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 9, en el que el mon6mero funcional se selecciona entre el grupo que consiste en acido metacrflico (MAA), TFMAA, acido vinilbenzoico, y acido itac6nico.
  12. 12.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 9, en el que el reticulador se selecciona entre el grupo que consiste en dimetacrilato de etilenglicol (EDMA), trimetacrilato de trimetilolpropano (TRIM) y tetraacrilato de pentaeritritol.
  13. 13.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 9, en el que el analogo estructural se selecciona entre el grupo que consiste en 4-(metilpropenil-amino)-1-piridin-3-il-butan-1-ol (4MPAPB) y piridincarbinol.
  14. 14.
    Un procedimiento para preparar un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende:
    copolimerizar una mezcla de polimerizaci6n y al menos un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco en un medio de reacci6n homogeneo; y
    recuperar las partfculas suspendidas del medio de reacci6n.
  15. 15. Un procedimiento para preparar un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende:
    copolimerizar una mezcla de polimerizaci6n y al menos un analogo funcional o estructural de una nitrosamina especffica de tabaco en un medio de reacci6n heterogeneo; y
    recuperar el material polimerizado del medio de reacci6n heterogeneo.
  16. 16. Un procedimiento para determinar si un producto de tabaco contiene nitrosaminas, que comprende:
    hacer que reaccione la muestra con un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en condiciones que permitan que se unan las nitrosaminas presentes en la muestra al polfmero impreso molecularmente; y
    evaluar si el polfmero impreso molecularmente se ha unido a algunas nitrosaminas, en el que la evaluaci6n que da como resultado la observaci6n del polfmero impreso molecularmente unido a nitrosaminas indica que la muestra contiene nitrosaminas.
  17. 17. Un procedimiento para cuantificar la cantidad de nitrosaminas en un producto de tabaco, que comprende:
    hacer que reaccione la muestra con un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en condiciones que permitan que se unan las nitrosaminas presentes en la muestra al polfmero impreso molecularmente; y
    medir la cantidad de nitrosaminas unidas al polfmero impreso molecularmente.
  18. 18.
    Un procedimiento para tratar un producto de tabaco para reducir el nivel de un componente del mismo que se considera diana que comprende tratar el producto de tabaco con un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7.
  19. 19.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 18, en el que el producto de tabaco se produce por descomposici6n termica de un material que contiene tabaco, un sustituto de tabaco o una mezcla de los mismos.
  20. 20.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 19, en el que el producto de tabaco se produce calentando el material a una temperatura por debajo de su temperatura de combusti6n.
  21. 21.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 19 o la 20, en el que el producto de tabaco se produce por combusti6n del material.
  22. 22.
    Un procedimiento segun la reivindicaci6n 18, en el que el producto de tabaco se produce poniendo en contacto un material que contiene tabaco, un sustituto de tabaco o una mezcla de los mismos con un disolvente.
  23. 23.
    Un procedimiento para fabricar un material de tabaco, que comprende las etapas de:
    extraer un material que contiene tabaco, sustituto de tabaco o una mezcla de los mismos con un disolvente;
    poner en contacto el extracto con un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, de modo que reduzca el nivel de un compuesto que se considera diana en el extracto, y combinar el extracto tratado con el material de tabaco extrafdo.
  24. 24. Un artfculo para fumar, que comprende:
    un material para fumar; y
    un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, selectivo al menos para una nitrosamina especffica de tabaco que se encuentra en los productos de descomposici6n termica del material para fumar.
  25. 25.
    Un artfculo para fumar, segun la reivindicaci6n 24, en el que el polfmero impreso molecularmente es selectivo al menos para una nitrosamina volatil que se encuentra en la fase vapor de los productos de descomposici6n termica del material para fumar.
  26. 26.
    Un filtro para el humo, que comprende un polfmero impreso molecularmente, segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-7.
  27. 27.
    Un filtro para el humo segun la reivindicaci6n 26, en el que el polfmero impreso molecularmente es selectivo al menos para una nitrosamina volatil que se encuentra en la fase vapor de los productos de descomposici6n termica de tabaco o de un sustituto de tabaco.
ES05744145T 2004-05-24 2005-05-24 Polímeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos Expired - Lifetime ES2384260T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US57333704P 2004-05-24 2004-05-24
US573337P 2004-05-24
PCT/SE2005/000773 WO2005112670A1 (en) 2004-05-24 2005-05-24 Molecularly imprinted polymers selective for nitrosamines and methods of using the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2384260T3 true ES2384260T3 (es) 2012-07-03

Family

ID=35428207

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES05744145T Expired - Lifetime ES2384260T3 (es) 2004-05-24 2005-05-24 Polímeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos

Country Status (16)

Country Link
US (2) US8807142B2 (es)
EP (1) EP1756023B1 (es)
JP (1) JP5468736B2 (es)
KR (3) KR101505333B1 (es)
CN (1) CN1972884B (es)
AT (1) ATE553074T1 (es)
AU (1) AU2005244726B2 (es)
BR (1) BRPI0511416B8 (es)
CA (1) CA2565129C (es)
EA (1) EA014824B1 (es)
ES (1) ES2384260T3 (es)
MX (1) MXPA06013628A (es)
PL (1) PL1756023T3 (es)
UA (1) UA88469C2 (es)
WO (1) WO2005112670A1 (es)
ZA (1) ZA200609378B (es)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024246596A1 (es) 2023-05-31 2024-12-05 Compañía Industrial De Tabacos Monte Paz S.A. Dispositivo multifiltro para compuestos de hoffmann en medios gaseosos

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005112670A1 (en) 2004-05-24 2005-12-01 Mip Technologies Ab Molecularly imprinted polymers selective for nitrosamines and methods of using the same
US7479098B2 (en) 2005-09-23 2009-01-20 R. J. Reynolds Tobacco Company Equipment for insertion of objects into smoking articles
KR100846898B1 (ko) 2005-12-30 2008-07-17 엘지전자 주식회사 영상 디스플레이 기기의 스탠드
US7709264B2 (en) * 2006-09-21 2010-05-04 Philip Morris Usa Inc. Handheld microcantilever-based sensor for detecting tobacco-specific nitrosamines
TWI421037B (zh) * 2006-12-07 2014-01-01 British American Tobacco Co 選作為煙草特異性亞硝胺類之分子拓印的聚合物及使用其之方法
GB201200878D0 (en) 2012-01-19 2012-02-29 British American Tobacco Co Polymer compositions
EP2134757A2 (en) * 2007-03-27 2009-12-23 University of Maryland, College Park Imprinted polymeric materials for binding various targets such as viruses
JP5370712B2 (ja) 2008-02-21 2013-12-18 日東電工株式会社 酸性水溶性標的物質吸着ポリマー及びその製造方法
WO2009143338A2 (en) 2008-05-21 2009-11-26 R.J. Reynolds Tobacco Company Apparatus and associated method for forming a filter component of a smoking article and smoking articles made therefrom
US8079369B2 (en) 2008-05-21 2011-12-20 R.J. Reynolds Tobacco Company Method of forming a cigarette filter rod member
EP2138214A1 (en) * 2008-06-27 2009-12-30 British American Tobacco (Investments) Limited A method for removing polycyclic aromatic hydrocarbons
AU2010207887B2 (en) * 2009-01-29 2015-05-21 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Molecularly imprinted polymers
FR2962549B1 (fr) * 2010-07-08 2012-08-24 Commissariat Energie Atomique Dispositif de detection et/ou quantification electrique par empreinte moleculaire de composes organophosphores
US9192193B2 (en) * 2011-05-19 2015-11-24 R.J. Reynolds Tobacco Company Molecularly imprinted polymers for treating tobacco material and filtering smoke from smoking articles
US9474303B2 (en) 2011-09-22 2016-10-25 R.J. Reynolds Tobacco Company Translucent smokeless tobacco product
CN102423116B (zh) * 2011-11-07 2013-03-20 上海聚华科技股份有限公司 一种凤梨烟用香料的制备方法
US9420825B2 (en) 2012-02-13 2016-08-23 R.J. Reynolds Tobacco Company Whitened tobacco composition
US20150361203A1 (en) * 2012-06-21 2015-12-17 Ligar Limited Partnership Polymer and method of use
US9854841B2 (en) 2012-10-08 2018-01-02 Rai Strategic Holdings, Inc. Electronic smoking article and associated method
US11412775B2 (en) 2012-10-09 2022-08-16 R.J. Reynolds Tobacco Company Tobacco-derived composition
US10034988B2 (en) 2012-11-28 2018-07-31 Fontem Holdings I B.V. Methods and devices for compound delivery
US8910640B2 (en) 2013-01-30 2014-12-16 R.J. Reynolds Tobacco Company Wick suitable for use in an electronic smoking article
US10031183B2 (en) 2013-03-07 2018-07-24 Rai Strategic Holdings, Inc. Spent cartridge detection method and system for an electronic smoking article
US20140261486A1 (en) 2013-03-12 2014-09-18 R.J. Reynolds Tobacco Company Electronic smoking article having a vapor-enhancing apparatus and associated method
US9301544B2 (en) * 2013-03-14 2016-04-05 R.J. Reynolds Tobacco Company Protein-enriched tobacco-derived composition
US20140261487A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 R. J. Reynolds Tobacco Company Electronic smoking article with improved storage and transport of aerosol precursor compositions
US9661876B2 (en) * 2013-03-14 2017-05-30 R.J. Reynolds Tobacco Company Sugar-enriched extract derived from tobacco
US9423152B2 (en) 2013-03-15 2016-08-23 R. J. Reynolds Tobacco Company Heating control arrangement for an electronic smoking article and associated system and method
US9175052B2 (en) 2013-05-17 2015-11-03 R.J. Reynolds Tobacco Company Tobacco-derived protein compositions
US20140356295A1 (en) 2013-06-03 2014-12-04 R.J. Reynolds Tobacco Company Cosmetic compositions comprising tobacco seed-derived component
UA116250C2 (uk) * 2013-06-19 2018-02-26 Джапан Тобакко Інк. Спосіб одержання вихідного тютюнового матеріалу
US9629391B2 (en) 2013-08-08 2017-04-25 R.J. Reynolds Tobacco Company Tobacco-derived pyrolysis oil
US11503853B2 (en) 2013-09-09 2022-11-22 R.J. Reynolds Tobacco Company Smokeless tobacco composition incorporating a botanical material
US10194693B2 (en) 2013-09-20 2019-02-05 Fontem Holdings 1 B.V. Aerosol generating device
CN103601855B (zh) * 2013-09-30 2016-08-10 广东中烟工业有限责任公司 一种对烟草特有亚硝胺具有特异性吸附功能的分子印迹单分散微球及其制备和应用
US10357054B2 (en) 2013-10-16 2019-07-23 R.J. Reynolds Tobacco Company Smokeless tobacco pastille
CN103776944B (zh) * 2014-01-13 2015-07-15 红云红河烟草(集团)有限责任公司 一种检测烟丝和卷烟烟气中nnal和nna的方法
EP3698832B1 (en) 2014-01-22 2022-07-13 Fontem Holdings 1 B.V. Methods and devices for smoking urge relief
US9375033B2 (en) 2014-02-14 2016-06-28 R.J. Reynolds Tobacco Company Tobacco-containing gel composition
DE102014008135A1 (de) * 2014-06-06 2015-12-17 Gfl Gesellschaft Für Lebensmittel-Forschung Mbh Verfahren zur analytischen Authentizitätprüfung von Inhaltsstoffen in Lebensmitteln unter Verwendung künstlicher Antikörper
CN105044252A (zh) * 2015-08-18 2015-11-11 云南中烟工业有限责任公司 一种亚硝胺标志物检测的前处理装置及应用
US10869497B2 (en) 2015-09-08 2020-12-22 R.J. Reynolds Tobacco Company High-pressure cold pasteurization of tobacco material
US9585835B1 (en) * 2015-09-16 2017-03-07 Sansa Corporation (Barbados) Inc. Inhalable nicotine formulations and methods of making and using the same
US10149844B2 (en) 2015-09-16 2018-12-11 Philip Morris Products S.A. Inhalable nicotine formulations, and methods of making and using thereof
US20170119048A1 (en) * 2015-10-30 2017-05-04 British American Tobacco (Investments) Limited Article for Use with Apparatus for Heating Smokable Material
US10532046B2 (en) 2015-12-03 2020-01-14 Niconovum Usa, Inc. Multi-phase delivery compositions and products incorporating such compositions
US11612183B2 (en) 2015-12-10 2023-03-28 R.J. Reynolds Tobacco Company Protein-enriched tobacco composition
US10757964B2 (en) 2017-07-20 2020-09-01 R.J. Reynolds Tobacco Company Purification of tobacco-derived protein compositions
US12114688B2 (en) 2017-10-24 2024-10-15 Rai Strategic Holdings, Inc. Method for formulating aerosol precursor for aerosol delivery device
CN107868164B (zh) * 2017-11-28 2020-04-24 南京大学 一种亚硝胺类消毒副产物分子印迹聚合物的制备方法及应用
US20190307082A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 R.J. Reynolds Tobacco Company Oriental tobacco production methods
CN109007950B (zh) * 2018-05-25 2021-02-19 吉首大学 一种n-亚硝胺毒物复合印迹薄片的制备方法及应用
CA3132789A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Rai Strategic Holdings, Inc. Method for hydrolysis of lactic acid for aerosol delivery device
CN110128590A (zh) * 2019-05-15 2019-08-16 南通市产品质量监督检验所 一种以丙烯酰胺作为功能单体的n-二甲基亚硝胺分子印迹聚合物的制备方法
CN112903831A (zh) * 2019-12-04 2021-06-04 中国科学院大连化学物理研究所 一种烟气体液代谢糖苷衍生物集成化样品处理系统及应用
CN111521716A (zh) * 2020-06-09 2020-08-11 甘肃烟草工业有限责任公司 一种基于设计值的卷烟原料混合均匀度评价方法
GB202009493D0 (en) * 2020-06-22 2020-08-05 Nicoventures Trading Ltd Delivery systems and compositions for inclusion
US12102136B2 (en) * 2020-07-08 2024-10-01 Daniel Rush Universal filtering mouthpiece for smoking devices
AU2021405529A1 (en) * 2020-12-24 2023-08-10 Ligar Limited Partnership Method, system and/or apparatus for use of liquid or fluid carbon dioxide in extraction and/or solubilising source material and binding and/or elution with a molecularly imprinted polymer
US11491377B1 (en) 2021-12-28 2022-11-08 Acushnet Company Golf club head having multi-layered striking face
KR102897193B1 (ko) * 2022-01-18 2025-12-08 주식회사 청안오가닉스 각인기법을 사용한 가르시니아 캄보지아 유효물질을 추출하는 방법 및 그 추출물
US12285661B2 (en) 2022-03-11 2025-04-29 Acushnet Company Golf club head having supported striking face
US11850461B2 (en) 2022-03-11 2023-12-26 Acushnet Company Golf club head having supported striking face
CN114853961A (zh) * 2022-05-25 2022-08-05 重庆中烟工业有限责任公司 烟草特有亚硝胺磁性替代模板分子印迹材料及其制备方法

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4589428A (en) * 1980-02-21 1986-05-20 Philip Morris Incorporated Tobacco treatment
SU1432067A1 (ru) * 1986-11-14 1988-10-23 Башкирский государственный научно-исследовательский и проектный институт нефтяной промышленности Способ получени полимерного флокул нта
AT396862B (de) 1991-10-22 1993-12-27 Austria Tabakwerke Ag Verfahren zur herstellung eines zelluloseazetat-kabels und zigarettenfilter daraus
US5311886A (en) 1991-12-31 1994-05-17 Imasco Limited Tobacco extract treatment with insoluble adsorbent
SE9203435D0 (sv) * 1992-11-11 1992-11-11 Georg Vlatakis Fondation For R Framstaellande av artificiella antikroppar med molekylavtrycksmetoden samt deras anvaendning vid analys
RU2045921C1 (ru) * 1992-12-08 1995-10-20 Товарищество с ограниченной ответственностью "Сфинкс" Фильтр для сигарет
US5587273A (en) * 1993-01-21 1996-12-24 Advanced Microbotics Corporation Molecularly imprinted materials, method for their preparation and devices employing such materials
US5810020A (en) * 1993-09-07 1998-09-22 Osmotek, Inc. Process for removing nitrogen-containing anions and tobacco-specific nitrosamines from tobacco products
DE19541873A1 (de) * 1995-11-09 1997-05-15 Rhodia Ag Rhone Poulenc Filterzigarette
RU2113810C1 (ru) * 1996-09-10 1998-06-27 Институт биохимической физики РАН Фильтр для сигарет
SE9704919L (sv) * 1997-12-30 1999-03-15 Olof Ramstroem Material för selektering av substanser ur kombinatoriska bibliotek
US6082370A (en) * 1998-02-09 2000-07-04 Rousseau Research, Inc. Cigarette with dry powered Vitamin E
CA2352068C (en) * 1998-11-30 2009-05-19 Dr. Gottschall Instruction Gesellschaft Fur Die Technische Chromatographie Mbh Method of producing a polymer network
CA2400408C (en) 2000-03-10 2008-12-30 British American Tobacco (Investments) Limited Tobacco treatment
BR0114448A (pt) * 2000-10-05 2003-09-02 Nicolas Baskevitch Redução de nitrosaminas em tabaco e em produtos de tabaco
US20030003587A1 (en) * 2002-06-28 2003-01-02 Murray George M Molecularly imprinted polymer based sensors for the detection of narcotics
KR200322202Y1 (ko) 2003-02-06 2003-08-02 이형 필터궐련
WO2005112670A1 (en) 2004-05-24 2005-12-01 Mip Technologies Ab Molecularly imprinted polymers selective for nitrosamines and methods of using the same
GB0427901D0 (en) 2004-12-21 2005-01-19 Univ Cranfield Virtual imprinting
TWI421037B (zh) * 2006-12-07 2014-01-01 British American Tobacco Co 選作為煙草特異性亞硝胺類之分子拓印的聚合物及使用其之方法
GB201200878D0 (en) 2012-01-19 2012-02-29 British American Tobacco Co Polymer compositions
EP2118177A1 (en) 2007-03-05 2009-11-18 MIP Technologies AB Imprinted polymers

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024246596A1 (es) 2023-05-31 2024-12-05 Compañía Industrial De Tabacos Monte Paz S.A. Dispositivo multifiltro para compuestos de hoffmann en medios gaseosos

Also Published As

Publication number Publication date
JP2008500442A (ja) 2008-01-10
AU2005244726A1 (en) 2005-12-01
KR20140108600A (ko) 2014-09-11
US20140332015A1 (en) 2014-11-13
BRPI0511416B1 (pt) 2016-06-21
KR101556872B1 (ko) 2015-10-01
EA014824B1 (ru) 2011-02-28
BRPI0511416A (pt) 2007-12-04
KR101276988B1 (ko) 2013-06-24
CA2565129C (en) 2012-12-11
CA2565129A1 (en) 2005-12-01
US9844230B2 (en) 2017-12-19
ATE553074T1 (de) 2012-04-15
UA88469C2 (uk) 2009-10-26
AU2005244726B2 (en) 2010-08-26
EA200602044A1 (ru) 2007-06-29
EP1756023A1 (en) 2007-02-28
EP1756023B1 (en) 2012-04-11
PL1756023T3 (pl) 2012-09-28
KR101505333B1 (ko) 2015-03-23
US20070186940A1 (en) 2007-08-16
ZA200609378B (en) 2009-02-25
JP5468736B2 (ja) 2014-04-09
WO2005112670A8 (en) 2006-08-24
BRPI0511416B8 (pt) 2016-08-02
KR20130036360A (ko) 2013-04-11
MXPA06013628A (es) 2007-03-23
WO2005112670A1 (en) 2005-12-01
CN1972884A (zh) 2007-05-30
US8807142B2 (en) 2014-08-19
CN1972884B (zh) 2014-03-26
KR20070033356A (ko) 2007-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2384260T3 (es) Polímeros impresos molecularmente selectivos para nitrosaminas y procedimientos para usarlos
ES2573933T3 (es) Polímeros de impresión molecular selectivos para las nitrosaminas específicas del tabaco y sus procedimientos de uso