ES2425750T3

ES2425750T3 - Inhibición del VEGF

Info

Publication number: ES2425750T3
Application number: ES05776195T
Authority: ES
Inventors: David L. Morris; Mohammad Hossein Pourgholami
Original assignee: NewSouth Innovations Pty Ltd
Current assignee: NewSouth Innovations Pty Ltd
Priority date: 2004-08-31
Filing date: 2005-08-31
Publication date: 2013-10-17
Anticipated expiration: 2025-08-31
Also published as: JP5022220B2; EP1784181A4; CN101035530B; EP1784181A1; DK1784181T3; CN101035530A; EP1784181B1; PT1784181E; PL1784181T3; KR20070083538A; US20090105317A1; WO2006024092A1; US8912225B2; JP2008511549A; CA2576827A1; HK1103651A1

Abstract

Un compuesto según la fórmula II para uso en el tratamiento o prevención de la ascitis maligna producida por elcáncer de ovario: en donde R1 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo,cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7, -SOR8, -SO2R9, -SCN, -B'(CH2)nBR10, -C(O)-R11, -OR12, -COOR13, -NO2,-NR13aCOOR13b, isotiocianato o -CN, en donde R7 a R13b son cada uno independientemente H, alquilo de cadenalineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo, B yB' son independientemente O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4; y R21 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo,cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo.

Description

Inhibición del VEGF

Campo técnico

En general, la presente invención se refiere a métodos para el tratamiento de enfermedades asociadas con niveles anormales de producción y/o secreción de VEGF.

Antecedentes de la invención

El factor de crecimiento endotelial vascular [VEGF; conocido también como factor de permeabilidad vascular (VPF)] es una potente citocina multifuncional, altamente conservada. Los niveles anormales de producción y/o de secreción de VEGF han sido ligados a una serie de procesos patológicos. Por ejemplo, se han detectado altas concentraciones de VEGF biológicamente activo en los fluidos pleurales y en la ascitis de los pacientes de cáncer (Zebrowski et al., 1999a, b).

La ascitis, acumulación de fluido en la cavidad abdominal, puede ser el resultado de una serie de trastornos, incluyendo tumores y otras enfermedades tales como la enfermedad hepática crónica. La cirrosis hepática es responsable de la mayor parte de los casos de ascitis y el pronóstico generalmente es malo.

La acumulación de ascitis maligna es una importante causa de morbilidad y mortalidad en los pacientes con carcinomatosis peritoneal. Las causas de la formación de ascitis maligna incluyen los cánceres de colon, gástrico, pancreático, de endometrio y de ovario (Smith and Jayson, 2003). Por ejemplo, la evolución maligna del cáncer de ovario se limita predominantemente a la cavidad peritoneal y con frecuencia evoluciona hasta una forma de ascitis (Ozols et al., 1980). Tanto el tamaño del tumor como la acumulación de ascitis se asocian de forma inversa con la supervivencia (Hasumi et al., 2002). El tratamiento terapéutico actual de las pacientes con cáncer de ovario avanzado asocia la cirugía citorreductora y la quimioterapia sistémica, siendo considerada la combinación de paclitaxel y cisplatino la quimioterapia inicial para las etapas III y IV (Burbridge et al., 1999). Sin embargo dos tercios de las pacientes ya tienen avanzada la enfermedad cuando se diagnostica, y los peores pronósticos se asocian con la rápida acumulación de fluido ascítico y los fenotipos celulares pleomórficos y altamente invasivos. Sigue existiendo la necesidad de un método eficaz para el tratamiento de la ascitis y las enfermedades asociadas a la ascitis.

La ascitis está ligada a la hiperpermeabilidad peritoneal, así como a la hiperpermeabilidad microvascular tumoral y varios estudios han atribuido un papel al VEGF en la formación de ascitis a través del aumento de la permeabilidad vascular. Más generalmente, el VEGF ejerce una serie de efectos importantes sobre el endotelio vascular incluyendo la inducción de nueva formación vascular. El VEGF tiene una potente actividad potenciadora de la permeabilidad vascular y la producción o secreción de niveles anormales de VEGF lleva a la hiperpermeabilidad microvascular. El VEGF es reconocido ahora como un factor clave necesario para el crecimiento de los tumores y está implicado en otras muchas enfermedades tales como diabetes, artritis incluyendo artritis reumatoide, psoriasis, endometriosis, edema cerebral, ateroesclerosis, enfermedad cardiaca isquémica, y enfermedades retinopáticas tales como la degeneración macular relacionada con la edad.

La secreción tumoral de VEGF es esencial para la acumulación de ascitis. Las células tumorales normalmente representan la principal fuente de VEGF, pero el estroma asociado con un tumor es también un sitio importante de producción de VEGF. Se ha demostrado en estudios animales que el bloqueo de la producción o secreción de VEGF por las células tumorales, por ejemplo utilizando un inhibidor de VEGF, da como resultado la inhibición de la formación de ascitis (Zebrowski et al., 1999a, b; Xu et al., 2000). También hay cada vez más pruebas de que la producción y secreción de VEGF no se limita a los tumores sólidos, sino que el VEGF y los receptores de VEGF se expresan en una variedad de leucemias y otras neoplasias hematológicas.

Por consiguiente, el VEGF es una diana atractiva para la intervención terapéutica y se han buscado varias estrategias para bloquear la actividad del VEGF, incluyendo anticuerpos monoclonales, antagonistas del receptor de VEGF, antagonistas de tirosina cinasa y receptores de VEGF solubles (VEGF-trap). Sin embargo sigue existiendo la necesidad de un método eficaz para inhibir la producción y/o secreción de VEGF y para el tratamiento de enfermedades asociadas con la producción y/o secreción de VEGF.

El documento WO 02/076454 expone el tratamiento del cáncer de ovario con albendazol.

En Oncology, vol. 61, 2001, páginas 42-46 se indica que el albendazol tiene una potente actividad antiproliferativa frente al cáncer colorectal y el carcinoma hepatocelular.

La presente invención se basa en el sorprendente hallazgo de que el carbamato de bencimidazol, albendazol, tiene un potente efecto sobre los niveles de VEGF segregado por las células de cáncer de ovario humano in vitro y sobre los niveles de VEGF in vivo, y presenta un efecto inhibidor significativo sobre una serie de enfermedades asociadas con niveles anormales de VEGF.

Compendio de la invención

Según un primer aspecto, la presente invención proporciona un compuesto según la fórmula II para uso en el tratamiento o prevención de la ascitis maligna producida por el cáncer de ovario:

en donde R1 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7,-SOR8, -SO2R9, -SCN, -B'(CH2)nBR10,-C(O)-R11,-OR12,-COOR13,-NO2,-NR13aCOOR13b, isotiocianato o –CN, en donde R7 a R13b son cada uno independientemente H, alquilo de cadena

10 lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo, B y B' son independientemente O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4; y

R21 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo;

Según un segundo aspecto, la presente invención proporciona un compuesto según la fórmula III para uso en el 15 tratamiento o prevención de la ascitis maligna producida por el cáncer de ovario:

20 lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo, B y B' son independientemente O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4.

En los aspectos, primero y segundo, anteriores, el compuesto es preferiblemente albendazol, albendazol sulfóxido, mebendazol, flubendazol, triclabendazol, oxfenbendazol, luxabendazol, cambendazol, oxibendazol, parbendazol, tiabendazol, ciclobendazol, dribendazol, etibendazol o fenbendazol.

25 Preferiblemente el compuesto es albendazol, o uno de sus metabolitos, derivados o análogos.

Preferiblemente el compuesto se administra sistémicamente o regionalmente.

Preferiblemente la administración es intracavitaria, intravesical, intramuscular, intraarterial, intravenosa, subcutánea, tópica u oral.

Preferiblemente la administración intracavitaria es intraperitoneal o intrapleural.

30 También se contemplan dentro de los aspectos y realizaciones anteriores los isómeros, incluyendo los estereoisómeros y los isómeros geométricos de los compuestos de las fórmulas Il y III, así como sus formas tautoméricas.

Definiciones

En el contexto de esta memoria descriptiva, el término quot;que comprendequot; significa quot;que incluye principalmente, pero no necesariamente de forma únicaquot;. Además, variaciones del término quot;que comprendequot;, tales como quot;comprendenquot; y quot;comprendequot;, tienen los significados correspondientemente variados.

El término quot;inhibirquot; como se usa aquí en relación a los niveles de VEGF significa prevenir, reducir o mejorar de otra forma la producción o secreción de VEGF. Por ejemplo, dependiendo de las circunstancias, incluso de la naturaleza de la enfermedad a tratar, puede no ser necesario que la inhibición signifique el bloqueo completo de la producción o secreción de VEGF, sino la reducción de la producción de VEGF hasta un grado suficiente que haga posible alcanzar el efecto deseado.

Como se usan aquí los términos quot;tratarquot; y quot;tratamientoquot; se refieren a todos y cada uno de los usos que alivian un trastorno o los síntomas, que previenen el establecimiento de un trastorno o enfermedad, o que de otra forma previenen, dificultan, retrasan, o invierten el progreso de un trastorno o enfermedad o de otros síntomas indeseables de cualquier modo que sea.

El término quot;enfermedad asociada a ascitisquot; como se usa en esta memoria, se refiere a una enfermedad asociada al menos en parte, con la acumulación de exceso de fluido en la cavidad abdominal. La enfermedad se puede caracterizar por tal acumulación, puede ocurrir como resultado, directo o indirecto, de tal acumulación o por sí misma puede llevar a la acumulación de exceso de fluido en la cavidad abdominal. Un ejemplo de enfermedad asociada a ascitis es la cirrosis.

Como se usa aquí, el término quot;cantidad eficazquot; incluye dentro de su significado una cantidad de un agente o compuesto no tóxica pero suficiente para proporcionar el efecto deseado. La cantidad exacta requerida variará de sujeto a sujeto dependiendo de factores tales como la especie a tratar, la edad y el estado general del sujeto, la gravedad de la enfermedad a tratar, el agente particular a ser administrado y el modo de administración, etcétera. Por lo tanto, no es posible especificar una quot;cantidad eficazquot; exacta. Sin embargo, en un caso concreto, la quot;cantidad eficazquot; apropiada puede ser determinada por los expertos en la técnica utilizando solamente la experimentación rutinaria.

El término quot;alquiloquot; como se usa aquí, incluye dentro de su significado, radicales hidrocarbonados monovalentes, saturados, de cadena lineal y ramificada.

El término quot;alqueniloquot; como se usa aquí, incluye dentro de su significado, radicales hidrocarbonados monovalentes, de cadena lineal y ramificada que tienen al menos un doble enlace.

El término quot;ariloquot; como se usa aquí, incluye dentro de su significado, radicales hidrocarbonados monovalentes, únicos, polinucleares, conjugados y condensados con radicales hidrocarbonados aromáticos.

Breve descripción de los dibujos

La presente invención será descrita ahora, sólo a modo de ejemplo, con referencia a los siguientes dibujos:

Figura 1. Efecto del tratamiento con albendazol intraperitoneal (150 mg/kg 3 veces por semana durante 4 semanas) sobre la producción de ascitis en ratones lampiños que tienen tumores OVCAR-3 peritoneales. Volumen de fluido ascítico (ml) en los ratones control y en los ratones tratados con albendazol (ABZ). Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 2. Efecto del albendazol sobre el número de células OVCAR-3 presentes en el fluido ascítico peritoneal aspirado de los ratones lampiños que tienen tumores. Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 3. Efecto del albendazol sobre el peso total de los tumores peritoneales de ratones lampiños. Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 4. Efecto del albendazol sobre los niveles de CA-125 en células OVCAR-3 procedentes de ratones lampiños que tienen tumores. Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 5. Los niveles de VEGF en el fluido peritoneal de ratones lampiños que tienen tumores OVCAR-3 peritoneales. Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 6. Efecto del albendazol sobre los niveles plasmáticos de VEGF en ratones lampiños que tienen tumores OVCAR-3. Cada valor representa la media ± el error típico de 6 a 8 determinaciones.

Figura 7. RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa) que presenta diferentes isoformas de mRNA de VEGF extraídas de células aspiradas del fluido ascítico o lavado peritoneal de ratones lampiños que tienen tumores OVCAR-3 peritoneales. A-C son células de los animales control, mientras que, D-F se extrajeron de los animales tratados intraperitonealmente con albendazol (150 mg/kg, 3 veces por semana durante 4

5 semanas).

Figura 8. Efecto del tratamiento de 6 horas con albendazol sobre la producción de VEGF en células SKOV-3 in vitro. Cada valor representa la media ± el error típico de 4 determinaciones. A. Niveles de VEGF (pg/105 células) en presencia de concentraciones (IM) variables de albendazol. B. Niveles de VEGF (pg/105 células) en presencia de concentraciones (IM) variables de albendazol después de co-tratamiento con 6 ng/ml de MMP-9.

10 Figura 9. Neovascularización retiniana (número de vasos sanguíneos) de ratones en condiciones normóxicas e hiperóxicas (75 % de O2) después de tratamiento con DMSO, PBS o concentraciones variables de albendazol (0,1 Ig, 1 Ig o 10 Ig en 2 Il).

Figura 10. Micrografías de luz de secciones transversales teñidas con hematoxilina y eosina (50 Im) de retinas de ratón después de la inyección con albendazol en DMSO (A) o con DMSO solo (B).

15 Mejor modo de realizar la invención

Los compuestos de carbamato de bencimidazol son fármacos antihelmínticos de amplio espectro, utilizados ampliamente para el control de los parásitos helmínticos en los mamíferos, incluyendo los seres humanos. Se cree que el principal objetivo de los carbamatos de bencimidazol es la tubulina, actuando los compuestos para inhibir la polimerización de la tubulina y desestabilizar los microtúbulos. Uno de tales carbamatos de bencimidazol es el

20 albendazol (carbamato de metil-5-propiltio-1H-bencimidazol-2-ilo). Otros carbamatos de bencimidazol incluyen mebendazol, flubendazol, triclabendazol, oxfenbendazol, luxabendazol, cambendazol, oxibendazol, parbendazol, tiabendazol, ciclobendazol, dribendazol, etibendazol y fenbendazol.

Los autores de esta invención han encontrado previamente que el albendazol tiene un efecto antiproliferativo sobre un intervalo de líneas celulares de cáncer in vitro y sobre los cánceres en modelos animales y en estudios clínicos

25 (documento WO 02/076454). Como se describe aquí, los presentes autores han demostrado ahora que el albendazol tiene un potente efecto sobre los niveles de VEGF segregados por las células de cáncer de ovario humano in vitro, sobre la producción de ascitis, sobre la neovascularización retiniana y sobre los niveles de VEGF in vivo.

El compuesto de la invención es un carbamato de bencimidazol de la fórmula Il

en donde R1 se selecciona de H, alquilo de cadena lineal o ramificada, sustituido o no sustituido, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7, -SOR8, -SO2R9, -SCN, B'(CH2)nBR10,-C(O)-R11 o-OR12, -COOR13,-NO2,-NR13aCOOR13b, isotiocianato, o –CN, donde R7 a R13b se selecciona cada uno independientemente de H, alquilo de cadena lineal o ramificada, sustituido o no sustituido,

35 alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, B y B' se seleccionan independientemente de O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4;

R21 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, sustituido o no sustituido, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo;

o de la fórmula III

en donde R1 se selecciona de H, alquilo de cadena lineal o ramificada, sustituido o no sustituido, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7, -SOR8, -SO2R9, -SCN, B'(CH2)nBR10,-C(O)-R11 o-OR12, -COOR13,-NO2,-NR13aCOOR13b, isotiocianato, o –CN, en donde R7 a R13b se selecciona cada uno independientemente de H, alquilo de cadena lineal o ramificada, sustituido o no sustituido, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, B y B' se seleccionan independientemente de O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4.

Los expertos en la técnica apreciarán fácilmente que pueden existir isómeros, incluyendo estereoisómeros e isómeros geométricos, de los compuestos descritos anteriormente y que el uso de tales isómeros está incluido dentro del alcance de la presente invención. Además, se contempla también el uso de las formas tautoméricas de los compuestos anteriores. Por ejemplo el grupo bencimidazol sustituido puede existir en una serie de formas tautoméricas.

El albendazol o uno de sus metabolitos, derivados o análogos (tales como sulfóxido de albendazol o sulfona de albendazol) es un carbamato de bencimidazol particularmente útil en los métodos y composiciones de la presente invención. Sin embargo los expertos en la técnica podrán apreciar fácilmente que se pueden emplear también otros carbamatos de bencimidazol. Por ejemplo otros carbamatos de bencimidazol adecuados incluyen, pero no se limitan a mebendazol, flubendazol, triclabendazol, oxfenbendazol, luxabendazol, cambendazol, oxibendazol, parbendazol, tiabendazol, ciclobendazol, dribendazol, etibendazol y fenbendazol.

Condiciones

Un compuesto como se ha descrito antes puede actuar para inhibir la producción celular de VEGF y/o puede inhibir la secreción de VEGF desde las células del sujeto que está sometido a tratamiento. Por consiguiente, la presente invención proporciona métodos y composiciones para el tratamiento o prevención de la ascitis maligna causada por el cáncer de ovario asociada con la producción o secreción de niveles de VEGF anormales, típicamente aumentados.

Los hallazgos de los autores de esta invención como se describen aquí demuestran que la administración intraperitoneal de albendazol reduce rápidamente los niveles de VEGF en suero. Por lo tanto, la monitorización de los niveles de VEGF en suero hará posible el diseño y la implantación de una terapia apropiada con carbamato de bencimidazol para los pacientes que necesitan dicha terapia.

Composiciones y vías de administración

Las realizaciones de la presente invención contemplan composiciones para tratar o prevenir la ascitis maligna causada por cáncer de ovario asociada con niveles anormales de producción o secreción de VEGF.

Los compuestos y composiciones se pueden administrar por cualquier vía adecuada, ya sea sistémicamente, regionalmente o localmente. La vía particular de administración a utilizar en cualquier circunstancia dada dependerá de una serie de factores, incluyendo la naturaleza de la enfermedad a tratar, la gravedad y extensión de la enfermedad, la dosis requerida del compuesto particular a ser administrado y los potenciales efectos secundarios del compuesto.

Por ejemplo, en circunstancias en las que se requiere que las concentraciones apropiadas del compuesto deseado se administren directamente al sitio del cuerpo a ser tratado, la administración puede ser regional en lugar de sistémica. La administración regional proporciona la posibilidad de liberar concentraciones locales muy altas del compuesto deseado al sitio requerido y por lo tanto es adecuada para alcanzar el efecto terapéutico o preventivo deseado a la vez que se evita la exposición de otros órganos del cuerpo al compuesto y de este modo se reducen potencialmente los efectos secundarios.

A modo de ejemplo, la administración según las realizaciones de la invención se puede llevar a cabo por cualquiera de las vías convencionales, incluyendo las vías intracavitaria, intravesical, intramuscular, intraarterial, intravenosa, intraocular, subcutánea, tópica u oral. La administración intracavitaria puede ser intraperitoneal o intrapleural. Por ejemplo, en el tratamiento de la ascitis se puede administrar el compuesto deseado intra-peritonealmente y para el tratamiento del derrame pleural la administración puede ser intra-pleural.

En general, se pueden preparar composiciones adecuadas según métodos que son conocidos por los expertos en la técnica y pueden incluir un diluyente, adyuvante y/o excipiente farmacéuticamente aceptable. Los diluyentes, adyuvantes y excipientes deben ser quot;aceptablesquot; en términos de ser compatibles con los otros ingredientes de la composición, y no ser perjudiciales para el receptor de los mismos.

Son ejemplos de diluyentes farmacéuticamente aceptables el agua desmineralizada o el agua destilada; la solución salina; aceites vegetales tales como aceite de cacahuete, aceite de cártamo, aceite de oliva, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz, aceites de sésamo tal como aceite de cacahuete, aceite de cártamo, aceite de oliva, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz, aceite de sésamo, aceite de cacahuete o aceite de coco; aceites de silicona, incluyendo polisiloxanos, tales como metil-polisiloxano, fenil-polisiloxano y metilfenil-polisiloxano; siliconas volátiles; aceites minerales tales como parafina líquida, parafina blanda o escualeno; derivados de celulosa tales como metilcelulosa, etilcelulosa, carboximetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica o hidroxipropilmetilcelulosa; alcanoles inferiores, por ejemplo etanol o iso-propanol; aralcanoles inferiores; polialquilenglicoles inferiores o alquilenglicoles inferiores, por ejemplo polietilenglicol, polipropilenglicol, etilenglicol, propilenglicol, 1,3-butilenglicol o glicerina; ésteres de ácidos grasos tales como palmitato de isopropilo, miristato de isopropilo u oleato de etilo; polivinilpirrolidona; agar; carragenina; goma tragacanto o goma arábiga, y vaselina. Típicamente, el vehículo o vehículos representarán de 1 % a 99,9 % en peso de las composiciones.

Para la administración como solución o suspensión inyectable, los diluyentes o vehículos no tóxicos parenteralmente aceptables pueden incluir, solución de Ringer, triglicéridos de cadena media (MCT), solución salina isotónica, solución salina tamponada con fosfato, etanol y 1,2-propilenglicol.

Algunos ejemplos de vehículos, diluyentes, excipientes y adyuvantes adecuados para uso oral incluyen aceite de cacahuete, parafina líquida, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, alginato de sodio, goma arábiga, goma tragacanto, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, gelatina y lecitina. En adición estas formulaciones orales pueden contener agentes aromatizantes y colorantes adecuados. Cuando se usan en forma de cápsulas, las cápsulas pueden estar recubiertas con compuestos tales como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo que retrasan la disgregación.

Los adyuvantes incluyen típicamente emolientes, emulsionantes, agentes espesantes, conservantes, bactericidas y agentes tampones.

Las formas sólidas para administración oral pueden contener aglutinantes aceptables en la práctica farmacéutica humana y veterinaria, edulcorantes, agentes disgregantes, diluyentes, aromatizantes, agentes de recubrimiento, conservantes, lubricantes y/o agentes retardantes. Los aglutinantes adecuados incluyen goma arábiga, gelatina, almidón de maíz, goma tragacanto, alginato de sodio, carboximetilcelulosa o polietilenglicol. Los edulcorantes adecuados incluyen sacarosa, lactosa, glucosa, aspartamo o sacarina. Los agentes disgregantes adecuados incluyen almidón de maíz, metilcelulosa, polivinilpirrolidona, goma guar, goma xantano, bentonita, ácido algínico o agar. Los diluyentes adecuados incluyen lactosa, sorbitol, manitol, dextrosa, caolín, celulosa, carbonato de calcio, silicato de calcio o fosfato de dicalcio. Los agentes aromatizantes adecuados incluyen aceite de menta, aceite de gaulteria, esencia de cereza, naranja o frambuesa. Los agentes de recubrimiento adecuados incluyen polímeros o copolímeros de ácido acrílico y/o ácido metacrílico y/o sus ésteres, ceras, alcoholes grasos, zeína, shellac o gluten. Los conservantes adecuados incluyen benzoato de sodio, vitamina E, alfa-tocoferol, ácido ascórbico, metilparabeno, propilparabeno o bisulfito de sodio. Los lubricantes adecuados incluyen estearato de magnesio, ácido esteárico, oleato de sodio, cloruro de sodio o talco. Los agentes retardantes adecuados incluyen monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Las formas líquidas para administración oral pueden contener, en adición a los agentes anteriores, un vehículo líquido. Los vehículos líquidos adecuados incluyen agua, aceites tales como aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de sésamo, aceite de girasol, aceite de cártamo, aceite de cacahuete, aceite de coco, parafina líquida, etilenglicol, propilenglicol, polietilenglicol, etanol, propanol, isopropanol, glicerol, alcoholes grasos, triglicéridos o sus mezclas.

Las suspensiones para administración oral pueden comprender además agentes de dispersión y/o agentes de suspensión. Los agentes de suspensión adecuados incluyen carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetil-celulosa, poli-vinil-pirrolidona, alginato de sodio o alcohol acetílico. Los agentes de dispersión adecuados incluyen lecitina, ésteres de polioxietileno y ácidos grasos tales como ácido esteárico, mono-o di-oleato, estearato o laurato de sorbitol polioxietilenado, mono-o di-oleato, estearato o laurato de sorbitán polioxietilenado y similares.

Las emulsiones para administración oral pueden comprender además uno o más agentes emulsionantes. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen agentes de dispersión como los ejemplos anteriores o gomas naturales tales como goma guar, goma arábiga o goma tragacanto.

Los métodos para preparar composiciones administrables por vía parenteral son claros para los expertos en la técnica, y están descritos con más detalle, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Science, 15th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., incorporado aquí como referencia

La composición puede incorporar cualquier tensioactivo adecuado tal como un tensioactivo aniónico, catiónico o no iónico tal como ésteres de sorbitán o sus derivados de polioxietileno. Se pueden incluir también agentes de suspensión tales como las gomas naturales, derivados de celulosa o materiales inorgánicos tales como sílices silicáceas, y otros ingredientes tales como lanolina.

Las composiciones se pueden administrar también en la forma de liposomas. Los liposomas generalmente se derivan de fosfolípidos u otras sustancias lipídicas, y se forman por cristales líquidos hidratados monolamelares o multilamelares que se dispersan en un medio acuoso. Se puede usar cualquier lípido no tóxico, fisiológicamente aceptable y metabolizable, capaz de formar liposomas. Las composiciones en forma de liposomas pueden contener estabilizantes, conservantes, excipientes y similares. Los lípidos preferidos son los fosfolípidos y las fosfatidil-colinas (lecitinas), tanto naturales como sintéticos. Los métodos para formar liposomas son conocidos en la técnica, y con respecto a esto se hace referencia específica a: Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), página 33 y siguientes.

Los compuestos y composiciones descritos aquí se pueden administrar terapéuticamente o preventivamente. En una aplicación terapéutica, los compuestos y composiciones se administran a un paciente que ya sufre una enfermedad, en una cantidad suficiente para curar o al menos detener parcialmente la enfermedad y sus síntomas y/o complicaciones. El compuesto o composición debe proporcionar una cantidad del compuesto activo suficiente para tratar de modo efectivo al paciente.

El nivel de dosis eficaz del compuesto administrado a cualquier sujeto particular dependerá de una variedad de factores que incluyen: el tipo de enfermedad a ser tratada y el estado de la enfermedad; la actividad del compuesto empleado; la composición empleada; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente; el tiempo de administración; la vía de administración; la velocidad de secuestro de compuestos; la duración del tratamiento; los fármacos usados en combinación o coincidentes con el tratamiento, junto con otros factores relacionados bien conocidos en medicina.

Los expertos en la técnica por experimentación rutinaria, serán capaces de determinar la dosis eficaz, no tóxica, que podría ser requerida para tratar las enfermedades aplicables. Estas necesitarán lo más frecuentemente ser determinadas caso a caso.

En general, se espera que una dosis eficaz esté en el intervalo de aproximadamente 0,0001 mg a aproximadamente 1000 mg por kg de peso corporal en 24 horas; típicamente, de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 750 mg por kg de peso corporal en 24 horas; de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 500 mg por kg de peso corporal en 24 horas; de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg por kg de peso corporal en 24 horas; de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 250 mg por kg de peso corporal en 24 horas; o de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 250 mg por kg de peso corporal en 24 horas. Más típicamente, se espera que el intervalo de una dosis eficaz esté en el intervalo de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 200 mg por kg de peso corporal en 24 horas.

Alternativamente, una dosis eficaz puede ser de hasta aproximadamente 5000 mg/m2. En general, se espera que una dosis eficaz esté en el intervalo de aproximadamente 10 a aproximadamente 5000 mg/m2, típicamente de aproximadamente 10 a aproximadamente 2500 mg/m2, de aproximadamente 25 a aproximadamente 2000 mg/m2, de aproximadamente 50 a aproximadamente 1500 mg/m2, de aproximadamente 50 a aproximadamente 1000 mg/m2, o de aproximadamente 75 a aproximadamente 600 mg/m2.

Además, será evidente para los expertos en la técnica que la cantidad óptima y el espaciado de las dosis individuales será determinado según la naturaleza y extensión de la enfermedad a tratar, la forma, vía y sitio de administración, y la naturaleza del individuo particular a ser tratado. También, se pueden determinar dichas condiciones óptimas por técnicas convencionales.

Será también evidente para los expertos en la técnica que el ciclo óptimo de tratamiento, tal como, el número de dosis de la composición dadas por día durante un número de días definido, puede ser determinado por los expertos en la técnica utilizando pruebas convencionales de determinación de ciclo de tratamiento.

La presente invención será descrita adicionalmente ahora en gran detalle con referencia a los siguientes ejemplos específicos.

Ejemplos

Ejemplo 1-Tratamiento con albendazol de ratones lampiños que tienen un tumor OVCAR-3 peritoneal

Las células de la línea celular NIH:OVCAR-3 (ATCC Nº de acceso HTB 161) tienen la capacidad de crecer intraperitonealmente en ratones hembra atímicos lampiños. Después de una inyección intra-peritoneal, los animales desarrollan una diseminación metastásica similar a la del cáncer de ovario clínico. La evolución de la enfermedad se caracteriza por el desarrollo de la producción de ascitis masiva, tumores intra-peritoneales extensos y metástasis pulmonar. Las células de ascitis maligna expresan el antígeno CA-125 asociado con el cáncer de ovario. El modelo de ratón presenta características histopatológicas y embriológicas consistentes con el cáncer de ovario humano, un patrón reproducible de metástasis análogo a la enfermedad humana, marcadores adecuados para el seguimiento de la respuesta al tratamiento, y perfiles de sensibilidad a los fármacos similares a los del cáncer de ovario humano (Hamilton et al., 1984).

Se inyectaron células OVCAR-3 (13 x 106) cultivadas in vitro subcutáneamente a ratones lampiños. Ocho semanas después se disecaron los tumores, se trocearon y se lavaron 3 veces con PBS. Se suspendieron las células cultivadas en Bacto agar al 0,3 % en RPMI suplementado con suero de caballo al 20 %, penicilina (100 u/ml) estreptomicina (2 mg/ml) e insulina 3 u/ml, EGF 100 ng/ml, asparagina (0,1 mg/ml) y DEAE dextrano 0,5 mg/ml para dar una densidad de células de 5 x 106 células por ml. Se añadió 2-mercaptoetanol a una concentración 50 IM justo antes de poner las células en placas. Se añadió una porción (1 ml) de la mezcla resultante a una capa de alimentación con un combinado de 0,2 ml de medio acondicionado con células adherentes de bazo de ratones BALB/c tratados con aceite mineral en Bactoagar al 0,5 %. Se incubaron los cultivos a 37 ºC en CO2 al 5 %. A intervalos de 5 días, se extendieron en capas sobre la superficie de agarosa 0,8 ml de medio de crecimiento con EGF (10 ng/ml). Después de 3 semanas, se recogieron las colonias de células en masa y se extendieron en láminas en frascos de 75 cm2. Después se inyectaron estas células subcutáneamente a los ratones. Se suspendieron 50 x 106 células tumorales recogidas de estos tumores subcutáneamente, en 1 ml de medio y se inyectaron intraperitonealmente en cada ratón lampiño portador. Se recogió el fluido ascítico, se lavó con solución salina estéril, y se centrifugó a 300 g y 4 °C durante 5 minutos.

Se inyectaron 10 x 106 células tumorales viables recogidas del fluido ascítico y suspendidas en 1,0 ml de medio (RPMI 1640), intra-peritonealmente a cada animal de ensayo. Para todos los experimentos, se utilizaron como animales de ensayo ratones BaIb c nu/nu hembras atímicas lampiñas de 6-8 semanas (Animal Resources Centre, Perth, Western Australia). Se mantuvieron estos animales en condiciones de aislamiento libres de patógenos en el Biological Resources Centre de la University of New South Wales y se alimentaron con pelets autoclavados y agua ad libitum. Se comprobó diariamente la salud general de los animales. Todos los protocolos utilizados fueron aprobados por el Comité de ética animal de la University of New South Wales.

Los ratones inoculados intra-peritonealmente como se ha descrito antes, se distribuyeron aleatoriamente en grupos tratados con albendazol o en grupos control. Se inició el tratamiento con el fármaco (3 veces por semana durante 4 semanas). Se administró el albendazol suspendido en carboximetilcelulosa al 0,5 % a una dosis de 150 mg/kg a todos los animales tratados. Para la administración oral, se preparó una suspensión de 15 mg/ml (0,1 ml/10 g de peso corporal) mientras que para los tratamientos intra-peritoneales se utilizó una suspensión de 3 mg/ml (3 mg/1 ml/ratones de 20 g).

Inmediatamente antes del sacrificio, se anestesiaron los animales con pentobarbitona, y se recogieron muestras de sangre por medio de una punción cardíaca. Se sacrificaron entonces los animales con una sobredosis del fármaco anestésico. Para la recogida del fluido ascítico, se inyectaron 2 ml de solución salina fisiológica intra-peritonealmente y se mezclaron los contenidos de la cavidad peritoneal mediante masaje. Se recogió entonces el fluido peritoneal, se registró su volumen (Figura 1) y se contó el número de células tumorales viables presentes (Figura 2). Se conservaron el plasma y el fluido ascítico libre de células a -80 ºC para análisis posterior.

Se disecaron los tumores presentes en la cavidad peritoneal, se pesaron (Figura 3) y se conservaron para análisis posterior. Se inspeccionaron también los animales en cuanto a la presencia de metástasis en pulmón, hígado, bazo, estómago y páncreas (no se muestran los datos). Se analizaron los niveles del marcador tumoral (CA-125) (Figura 4) por los laboratorios de bioquímica de St George Hospital. Se determinaron las concentraciones de VEGF en el fluido ascítico (Figura 5) y en el plasma (Figura 6) utilizando kits Elisa (sistemas Quantikine R& D).

Los resultados obtenidos demuestran que el tratamiento con albendazol intra-peritoneal de los ratones portadores de tumor OVCAR-3 lleva a reducciones espectaculares en el volumen de la ascitis y en los niveles de VEGF.

Isoformas de VEGF

Se examinaron células OVCAR-3 aisladas de fluido ascítico de ratones lampiños portadores de tumores (como se ha descrito antes) en cuanto a la expresión de mRNA para diferentes isoformas de VEGF (VEGF121, VEGF165, VEGF189, VEGF206) por RT-PCR. Se separaron las células por centrifugación (5 min a 1500 rpm) y se aisló el RNA total del sedimento celular remanente utilizando el kit de aislamiento High Pure RNA Isolation Kit (Roche Diagnostics Corporation) según el protocolo del fabricante. Se midió la concentración de RNA en un espectrofotómetro a la longitud de onda de 260 nm utilizando un Quartz Spectrophotometer Cell (BioRad).

Se construyeron los cebadores para la amplificación de VEGF sobre la base de las secuencias presentadas en Pellizzaro et al 2002; VEGF con sentido: 5'-CAC ATA GGA GAG ATG AGC TTC-31 (SEQ ID NO:1); VEGF antisentido: 5'-CCG CCT CGG CTT GTC ACA T-3' (SEQ ID NO:2). Estos cebadores amplifican los siguientes productos: 100 pares de bases (bp) para VEGF121, 230 bp para VEGF165, 300 bp para VEGF189 y 320 bp para VEGF206. El gen �-Actin se utilizó como control interno (202 bp) utilizando cebadores como sigue: �-Actin con sentido: 5'-CTT CCT GGG CAT GGA GTC CT-31 (SEQ ID NO:3); �-Actin antisentido: 5'-GGA GCA ATG ATC TTG ATC TT-3' (SEQ ID NO:4) (Marchini et al. 1996).

Se utilizaron 250 ng/50 ng de RNA total para amplificar VEGF/�-Actin utilizando SuperScript™One Step RT-PCR con Platinum® Taq (Invitrogen). Se diluyó el RNA con agua tratada con DEPC (dietilpirocarbonato) hasta un volumen final de 11 Il para una reacción de RT-PCR. Se añadieron a la dilución de RNA 12,5 Il de la mezcla de reacción 2x (concentración final 1x), 1 Il de la mezcla de cebador (40 Il de agua con DEPC, 5Il de cebador con sentido 100 IM, 5 Il de cebador antisentido 100 IM; concentración de cebador final 0,2 IM) y 0,5 Il de RT/PlatinumGTag (volumen total de una reacción = 25 Il). Para mantener las enzimas (RNAsa & Taq) inactivas, todas las etapas de pipeteado se realizaron sobre hielo. Se llevó a cabo la amplificación en un Palm Cycler (Corbett Research) después de una síntesis inicial de cDNA a 54 ºC durante 30 min y 5 min a 94 ºC para desnaturalización. Esto fue seguido por 27 ciclos (desnaturalización a 94 ºC durante 1 min, anillamiento del cebador a 60 ºC durante 1 min, extensión del cebador a 72 ºC durante 45 s) y una extensión final de 72 ºC durante 10 min.

Se visualizaron los productos de la RT-PCR por electroforesis (25 min a 120 V) sobre gel de agarosa al 2 % en tampón 1xTAE que contiene bromuro de etidio. Para cuantificar el tamaño de los productos se hizo correr con las muestras una marcador en escalera de 100 bp de DNA ladder (Invitrogen). Los resultados se muestran en la Figura 7 que demuestra que la administración intra-peritoneal de albendazol lleva a una importante reducción en la expresión de mRNA de VEGF.

Ejemplo 2-Efecto de albendazol sobre la secreción de VEGF in vitro

La línea celular SKOV-3 de cistadenocarcinoma humano, obtenida de la American Type Culture Collección (ATCC Nº de acceso HTB 77) se cultivó en medio McCoy's 5a con L-glutamina 1,5 mM, 100 unidades/ml de penicilina, y 100 Ig/ml de estreptomicina, suplementado con FCS al 10 %. Se cultivaron las células hasta confluencia y se recogieron por tripsinización con 0,25 mg/ml de tripsina/EDTA y se suspendieron en el medio antes de poner en placas. Se sembraron entonces (2 x 105) sobre placas Corning de cultivo, de plástico, de 6 pocillos. Se mantuvieron los cultivos en un incubador a 37 ºC en una atmósfera humidificada de 95 % de O2/5 % de CO2. Veinticuatro horas más tarde, se separó el medio. Se lavaron los cultivos subconfluentes tres veces con tampón de fosfato seguido por incubación durante 6 horas con medio de cultivo que contenía diferentes concentraciones de albendazol (0, 0,1, 0,25 y 1,0 IM) disuelto en etanol al 1 %. Una vez completado el período de tratamiento, se recogió individualmente el medio de los pocillos y se analizó para determinar la concentración de VEGF utilizando un ensayo de inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) que detecta las isoformas solubles VEGF121 y VEGF165 (sistemas Quantikine R& D, Minneapolis, USA).

En otro conjunto de experimentos, mientras se mantenían todas las otras condiciones constantes, se utilizó la metaloproteinasa de la matriz MMP-9 (6 ng/ml) para estimular que las células aumentaran la producción de VEGF antes de tratamiento con albendazol. Hay pruebas de que la MMP-9 induce la liberación de VEGF biológicamente activo en el medio de cultivo de las células de tumor de ovario y en la ascitis de los ratones portadores de tumor de ovario (Belotti et al., 2003). Se expusieron células SKOV-3 a la forma recombinante activada de MMP-9, que se añadió directamente al medio de cultivo celular que contenía diferentes concentraciones de albendazol.

Los resultados obtenidos para ambos conjuntos de experimentos se presentan en la Figura 8. Queda claro de estos resultados que el tratamiento de células SKOV-3 (que liberan constitutivamente VEGF) con diferentes concentraciones de albendazol lleva a una reducción dependiente de la dosis de la secreción de VEGF. Utilizando un hemocitómetro y el método de exclusión de azul tripan, se comprobó la viabilidad de las células presentes en cada pocillo (al final del período de tratamiento) y se calculó la concentración de VEGF como picogramos por 105 células. Aunque debido a la acción antiproliferativa de albendazol, las células no pudieron ser incubadas durante más de 6 horas, se observó una reducción dependiente de la dosis en la concentración de VEGF. En ausencia de MMP-9, a la concentración de albendazol más alta usada (1,0 IM), se redujo la concentración de VEGF en un 64 % (Figura 8A). La estimulación de células con MMP-9 llevó a un aumento del 44,8 % en la concentración de VEGF en 6 horas (Figura 8B). El tratamiento con albendazol de células estimuladas con MMP-9 llevó a una profunda reducción de las concentraciones de VEGF; las concentraciones de VEGF en las células tratadas con albendazol 1 IM se redujeron en un 65 %. En estas células y en las condiciones descritas, el albendazol 0,1 IM bloqueó el exceso de secreción de VEGF inducido por la estimulación de MMP-9.

Estos resultados demuestran claramente que el albendazol reduce profundamente la secreción de VEGF a partir de las células SKOV-3 de cáncer de ovario humano in vitro.

Ejemplo comparativo 3-Inhibición de la neovascularización en un modelo murino de retinopatía proliferativa

Se evaluó la capacidad del albendazol de servir como un inhibidor potencial de la degeneración macular relacionada 5 con la edad (AMD) en un modelo murino bien establecido de neovascularización retiniana, ROP (retinopatía del prematuro), relevante para la AMD.

Los experimentos descritos anteriormente fueron aprobados por el Comité de ética y cuidados animales UNSW.

El día 6 postnatal (P6) se expusieron ratones C57BL/6 a condiciones hiperóxicas (75 % de oxígeno) durante 4 días en jaulas Quantum-Air Maxi-Sealed (Hereford, UK). Los ratones P10 se volvieron a normoxia, se anestesiaron (17 10 mg/kg de ketamina y 2,5 mg/kg de xilazina) y se les administraron inyecciones intravítreas en embolada de 2 Il de volumen, conteniendo 0,1, 1 o 10 Ig de albendazol en DMSO; DMSO solo o 1x PBS solo utilizando una aguja biselada de calibre 26 unida a una microjeringa (SGE International, Melbourne, Australia). Los ratones permanecieron a oxígeno ambiente durante otros 7 días después se separaron los ojos y se fijaron en formalina al 10 %/PBS. Se tiñeron secciones transversales en serie (50 micras) con hematoxilina y eosina. Se contaron los vasos

15 sanguíneos de cada grupo bajo microscopía óptica (400X) y se expresaron como la media ± SEM.

Como se muestra en la Figura 9, la hiperoxia-normoxia produjo un aumento de 2-3 veces en la neovascularización retiniana. El albendazol inhibió significativamente la angiogénesis retiniana inducida por hiperoxia después de una única inyección intravítrea del fármaco. La inhibición fue dependiente de la dosis y se observó con cantidades tan pequeñas como 1 ug. El DMSO solo (el vehículo de albendazol) no afectó a la formación de vasos sanguíneos en

20 los ratones expuestos a hiperoxia, con recuentos de vasos sanguíneos que no difieren de los del grupo PBS.

El análisis estadístico de los resultados mostrados gráficamente en la Figura 9 se realizó utilizando una prueba de Student de 2 colas con varianza desigual (Tabla 1).

Tabla 1: Significación estadística del tratamiento de albendazol

DMSO frente a 10 µg de albendazol: P = 0,000651889

DMSO frente a 1 µg de albendazol: P = 0,000117785

DMSO frente a 0,1 µg de albendazol: P = 0,305488779

1 µg frente a 10 µg de albendazol: P = 0,654672771

1 µg frente a 0,1 µg de albendazol: P = 0,0000853701

25 Las secciones teñidas con hematoxilina y eosina (Figura 10) revelaron que no había diferencias morfológicas detectables en el grupo inyectado con DMSO solo (Figura 10B) y el grupo inyectado con albendazol + DMSO (Figura 10A), aparte de la neovascularización, lo que da a entender que, dentro de los límites de este estudio, no hay ninguna reacción adversa o tóxica hacia el albendazol y/o su vehículo, DMSO.

Ejemplo 4-Composiciones para tratamiento

30 De acuerdo con el mejor modo de realizar la invención proporcionado aquí, a continuación se indican composiciones específicas. Las siguientes se deben considerar como ejemplos meramente ilustrativos de composiciones y no como una limitación del alcance de la presente invención en modo alguno.

Ejemplo 4(A)-Composición para administración parenteral

Se puede preparar una composición para inyección parenteral que contenga de 0,05 mg a 5 g de un compuesto de 35 la fórmula I (tal como albendazol) en 10 mililitros a 2 litros de carboximetilcelulosa al 1 %.

Similarmente, una composición para perfusión intravenosa puede comprender 250 ml de solución de Ringer estéril, y de 0,05 mg a 5 g de un compuesto de la fórmula I.

Una composición adecuada para administración por inyección se puede preparar también mezclando 1 % en peso del compuesto en 10 % en volumen de propilenglicol y agua. La solución se puede esterilizar por filtración.

Ejemplo 4(B)-Composición para administración oral Una composición de un compuesto de la fórmula I en la forma de una cápsula se puede preparar llenando una

cápsula estándar de gelatina dura de dos piezas con 500 mg del compuesto, en forma pulverizada, 100 mg de lactosa, 35 mg de talco y 10 mg de estearato de magnesio. Ejemplo comparativo 4(C)-Composición para administración tópica Una composición típica para administración como una pomada tópica incluye 1,0 g de un compuesto de la fórmula I,

junto con vaselina blanca hasta 100,0 g, dispersada para producir un producto suave, homogéneo. Ejemplo comparativo 4(D) – Composición de gotas oculares Se describe a continuación una composición típica para administración como gotas oculares:

Compuesto adecuado: 0,3 g

Hidroxibenzoato de metilo: 0,005 g

Hidroxibenzoato de propilo: 0,06 g

Agua purificada aproximadamente hasta: 100,00 ml.

Se disuelven los hidroxibenzoatos de metilo y propilo en 70 ml de agua purificada a 75 ºC, y se deja enfriar la solución resultante. Se añade entonces el compuesto, y se esteriliza la solución por filtración a través de un filtro de membrana (tamaño de poro 0,22 Im), y se llena asépticamente en envases estériles.

Referencias

Belotti, D., Paganoni, P., Manenti, L., Garofalo, A., Marchini, S., Taraboletti, G., and Giavazzi, R. Matrix metalloproteinases (MMP9 and MMP2) induce the release of vascular endothelial growth factor (VEGF) by ovarian carcinoma cells: implications for ascites formation. Cancer Research., 63: 5224-5229, 2003.

Burbridge, M. F., Kraus-Berthier, L., Naze, M., Pierre, A., Atassi, G., and Guilbaud, N. Biological and pharmacological characterisation of three models of human ovarian carcinoma established in nude mice: use of the CA125 tumor marker to predict antitumour activity. International Journal of Oncology., 15: 1155-1162, 1999.

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LISTA DE SECUENCIAS

Claims

1. Un compuesto según la fórmula II para uso en el tratamiento o prevención de la ascitis maligna producida por el cáncer de ovario:

5 en donde R1 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7, -SOR8, -SO2R9, -SCN, -B'(CH2)nBR10,-C(O)-R11,-OR12,-COOR13,-NO2, -NR13aCOOR13b, isotiocianato o –CN, en donde R7 a R13b son cada uno independientemente H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo, B y B' son independientemente O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4; y

10 R21 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo;
2. Un compuesto según la fórmula III para uso en el tratamiento o prevención de la ascitis maligna producida por el cáncer de ovario:

15 en donde R1 es H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo, arilalquilo, -SR7, -SOR8, -SO2R9, -SCN, -B'(CH2)nBR10,-C(O)-R11,-OR12,-COOR13,-NO2, -NR13aCOOR13b, isotiocianato o –CN, en donde R7 a R13b son cada uno independientemente H, alquilo de cadena lineal o ramificada, alquenilo, alquenilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, arilo o arilalquilo, B y B' son independientemente O, S, S(O) o SO2 y n es 1 a 4.

20 3. Un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde el compuesto es albendazol, albendazol sulfóxido, mebendazol, flubendazol, triclabendazol, oxfenbendazol, luxabendazol, cambendazol, oxibendazol, parbendazol, tiabendazol, ciclobendazol, dribendazol, etibendazol o fenbendazol.
4. Un compuesto según la reivindicación 3, en donde el compuesto es albendazol, o uno de sus metabolitos, derivados o análogos.

25 5. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el compuesto se administra sistémicamente o regionalmente.
6.

Un compuesto según la reivindicación 5, en donde la administración es intracavitaria, intravesical, intramuscular, intraarterial, intravenosa, subcutánea, tópica u oral.
7.

Un compuesto según la reivindicación 6, en donde la administración intracavitaria, es intraperitoneal o intrapleural.

Figura 1 Figura 2 Figura 3 Figura 4 Figura 5 Figura 6 Figura 7 Figura 8 Figura 9 Figura 10