ES2531402T3 - Colagenasa de fusión a la que se une una marca de afinidad, y método para producir la misma - Google Patents

Colagenasa de fusión a la que se une una marca de afinidad, y método para producir la misma Download PDF

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Abstract

Un método para producir una colagenasa de fusión, en el que: un cultivo obtenido mediante el cultivo de E. coli transformada por uno cualquiera de un ADN que codifica la colagenasa de fusión y un vector de expresión que comprende el ADN se purifica mediante cromatografía por afinidad que corresponde a una marca de afinidad para recoger de ese modo de forma selectiva la colagenasa de fusión que tiene un dominio de unión a colágeno, en donde la colagenasa de fusión tiene las siguientes características (i) a (ii): (i) la marca de afinidad se une directa o indirectamente a un extremo carboxilo de la colagenasa; (ii) la colagenasa se selecciona entre los siguientes (a) a (h): (a) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos de las posiciones -110 a 1008 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 1 y 2; (b) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos de las posiciones -110 a 1008 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 1 y 2 en la que se suprimen, sustituyen, insertan o añaden de 1 a 30 aminoácidos; (c) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una homología de un 80 % o 20 superior con la secuencia de aminoácidos de las posiciones -110 a 1008 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 1 y 2; (d) una colagenasa en la que una secuencia de aminoácidos de las posiciones -110 a -1 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 1 y 2 se retira de una cualquiera de las colagenasas que se han descrito en (a) a (c); (e) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos de las posiciones -40 a 981 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 5 y 6; (f) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos de las posiciones -40 a 981 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 5 y 6 en la que se suprimen, sustituyen, insertan o añaden de 1 a 30 aminoácidos; (g) una colagenasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una homología de un 80 % o superior con la secuencia de aminoácidos de las posiciones -40 a 981 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 5 y 6; (h) una colagenasa en la que una secuencia de aminoácidos de las posiciones -40 a -1 de una cualquiera de las SEC ID Nº: 5 y 6 se retira de una cualquiera de las colagenasas que se han descrito en (e) a (g).
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