ES2536256A2 - Análogos de vitamina d con interés farmacéutico - Google Patents

Abstract

Análogos de vitamina D con interés farmacéutico.#La presente invención se dirige compuestos de interés farmacéutico. Más en particular, se dirige a los compuestos de fórmula (I), a los procedimientos de obtención de los mismos, a los intermedios de su síntesis y a los procedimientos de obtención. Los compuestos de fórmula (I) presentan cierta afinidad por el receptor de la vitamina D, son activos en un orden similar a la 1,25{al}-dihidroxivitamina D{sub,3} (1,25D), con la ventaja de presentar una menor o nula hipercalcemia.

Description

Análogos de vita mina O con interés farmacéutico

5 Sector de la técnica

La presente invención se dirige a compuestos de interés farmacéutico. Más en particular, se dirige a los compuestos de fórmula (1), a los procedimientos de obtención de los mismos, a los intermedios de su sintesis y a los procedimientos de obtención de éstos últimos.

Antecedentes

La 1,25a-dihidroxivitamina 03 (1,250) es el metabolito más activo de la vitamina D. Ejerce sus acciones biológicas uniéndose de forma especifica a su receptor nuclear, el receptor de la vitamina D (VDR). El

15 sistema endocrino de la vitamina O juega un papel fundamental en la regulación del metabolismo fosfocálcico, estimulando la absorción intestinal de estos minerales esenciales y su movilización en el tejido óseo. Asi, el déficit de vitamina D o la resistencia a sus acciones, produce manifestaciones clinicas a nivel óseo, como el raquitismo en niños o la osteomalacia en adultos.

20 Aunque las acciones sobre el metabolismo fosfo-cálcico son las más conocidas, estudios epidemiológicos, bioquimicos, celulares, o de genética molecular han demostrado su implicación en otros procesos fisiológicos, al inhibir la proliferación e inducir la diferenciación celular, y patológicos, como psonasls, diabetes, osteoporosis, enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, infecciosas, o tumorales (De Luca H. Historical overview of vitamin D. In Vitamin D, 3rd

25 Ed; Feldman O, Pike JW, Adams JS (Eds). Academic Press, London, UK, 2011, volumen 1, pp 3-12).

En cáncer, el tratamiento con vitamina D bloquea el ciclo celular e induce apoptosis, inhibiendo asi el crecimiento tumoral, y por tanto contribuyendo a la supresión tumoral. Numerosos estudios han evaluado el uso de la vitamina D como agente antineoplásico, solo o en combinación con otros fármacos para el 30 tratamiento del cancer. La vitamina D se ha combinado con agentes que causan daño en el ADN (como cisplatino o doxorrubicina), con agentes que bloquean el ensamblaje de los microtúbulos (como taxanos), con inhibidores de la topoisomerasa (como etopósido), o con agentes antimetabólicos (como 5-fluoracilo) (Rosen CJ, Adams JS, Bikle DD, Black DM, Demay MB, Manson JE, Murad MH, Kovacs cs. The nonskeletal effects of vitamin O: an endocrine society scientific statemenl. Endocr Rev. 2012,33(3):456-92; 35 Deeb K, Trump DL, Johnson CS. Vitamin D signaling pathways in cancer: potential for anticancer therapeutics. Nature Rev Cancer 2007; 7:684-700; Ma Y, Trump DL, Johnson CS. Vitamin D in combination cancer treatmenl. J Cancer 2010; 1:101-7). Sin embargo, la principal limitación de la vitamina D para su uso clínico es que su administración a dosis farmacológicas induce hipercalcemia (Deeb K, Trump DL, Johnson CS. Vitamin O signaling pathways in cancer: potential for anticancer therapeutics. 40 Nature Rev Cancer 2007; 7:684-700). Por tanto, el desarrollo de análogos de la vitamina D no hipercalcémicos es de especial relevancia para su uso en el tratamiento de patologias en las que la vitamina D ya ha demostrado su utilidad en estudios pre-clínicos. Por ejemplo, un análogo de la vitamina D, el calcipotriol, se está comercializando para el tratamiento de la psoriasis, siendo su administración tópica debido a los posibles riesgos de inducir hipercalcemia (Menter A, Korman NJ, Elmets CA, Feldman

45 SR, Gelfand JM, Gordon KB, Gottlieb A, Koo JYM, Lebwohl M, Lim HW, Van Voorhees AS, Beutner KR, Bhushan R. Guidelines of care for the management of psoriasis and psoriatic arlhritis. J Am Acad Dermatol 2009; 60:643-59).

Así, el desarrollo de nuevos analogos de vitamina O con las mismas propiedades de la hormona natural, 50 pero con escasa o nula capacidad de inducir hipercalcemia, es un objetivo a alcanzar para su utilización en la practica clinica

Breve descripción de la invención

55 Los autores de la presente invención han obtenido compuestos de fórmula ti) que presentan cierta afinidad por el receptor de la vitamina O, son activos en un orden similar a la 1,25a-dihidroxivitamina D3 (1 ,25D), con la ventaja de presentar una menor o nula hipercalcemia Dicha ventaja permite el empleo terapéutico a dosis a las que la vitamina O es tóxica.

60 Aunque estos compuestos de fórmula ti) estan altamente funcionalizados, el procedimiento para su preparación consta de pocas etapas de síntesis. Una ventaja adicional es que los intermedios obtenidos en esa ruta sintética presentan una elevada versatilidad en cuanto a la naturaleza de los sustituyentes, incluyendo el marcaje isotópico de los mismos

Así, en un aspecto la invención se dirige a un compuesto de fórmula (1), o uno de sus estereoisómeros, o sus sales fannacéuticamente aceptables,

R3 R2 R4

Rl

R5

Xl X2

pl0 Op2 (I) R7

donde cada uno de R', R2, R3, R4, RS, R6 y R7, se selecciona independientemente de entre hidrógeno, (C,-C,z)alquilo, (C,-C,z)hidroxialquilo, (Cl-C'l)alquenilo, (CZ-C1l )hidroxialquenilo, (Cz-C,l)alquinilo, (ClC,z)hidroxialquinilo, (C,-C12lheteroalquilo, (Cz-C,z)heteroalquenilo, (C,-C12lheteroalquinilo, (Ca-C,o)arilo, (C3-C ,s)heteroarilo, (Ca-C,o)aril(C,-C,z)alquilo, (C,-C12lalquilacilo, (Ca-C ,o)arilacilo, (C ,-C,z)alcoxilo, (CaClO)ariloxilo, (C,-C'l)alquilcarboxi, (Ce-Clo)arilcarboxi, (C,-C,z)carbociclo y (C3-C,s.)heterociclo, donde R',

R7

RZ, R3, R4, R5, Re y están opcionalmente sustituidos por hidrógeno, (C,-C12lalquilo o (C,-C,z)hidroxialquilo,

x ' y X2 son hidrógeno o bien forman conjuntamente con el átomo de carbono al que están unidos un grupo metileno (=CHz), y

cada uno de pI y p2 se selecciona independientemente de entre hidrógeno, (C,-C 12lalquilo, (Ca-C,o)arilo, (C,-C,z)alcoxilo, (Ce-ClO)ariloxilo, (C,-C12lalquilcarboxi, (Ce-ClO)arilcarboxi y -OSiR"RbRc, donde cada uno

Rb

de R3, Y RC se seleccionan de entre (Cl-C,z)alquilo, (Cs-C lO)arilo, (Ce-ClO)aril, (C,-C,z)alquilo (C,-C12lalcoxilo, (Cs-ClO)ariloxilo y (C3-C ,s)heterociclo. Como ejemplos no limitativos de los grupos p' y pi se pueden citar metoximetiléter, metoximetiléter, benciloximetiléter, metiltiometiléter, lrimetilsilietoximetiléter, acetato, pivalato, benzoato y p-nitrobenzoato,

donde entre 1 y 9 átomos de hidrógeno en el compuesto de fórmula (1) están opcionalmente reemplazados por isótopos de hidrógeno, deuterio eH) o tritio e H}, yfo entre 1 y 9 átomos de carbono en el compuesto de fórmula (1) están opcionalmente reemplazados por isótopos "c, , :J.C, ' 4C

Otro aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad lerapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (1) junto con uno o más excipientes o portadores fannacéuticamente aceptables

Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fónnula (1) para la preparación de un medicamento.

Descripción de las figuras

FIGURA 1. Experimento de unión competitiva de 1,250 Y diferentes análogos según la presente invención al receptor de vitamina D. Concentraciones crecientes de 1,25 O Y de los análogos (desde 10'" hasta 10-5 1M]) se incubaron con el receptor de vitamina O en un ensayo de unión competitiva por el receptor. El valor ICso que corresponde al 50% de la inhibición de la polarización de cada compuesto y que deriva de los valores de las curvas de dosis-respuesta se indica en la descripción (Tabla 1). Los valores representan la media de al menos dos experimentos. Las barras de error representa la desviación estándar (DS).

FIGURA 2. Experimento de transactivación (reporter assay) de 1,250 Y de diferentes análogos según la presente invención. Las células MCF-7 fueron transfectadas con el vector reportador de la 24-hidroxilasa (vector pCYP24A1-Luc) durante 24 horas. Estas células se trataron con 1,250 y los diferentes análogos durante 24 horas a concentración de 10"'·10..6 1M]. A continuación se determinó la actividad luciferasa y se calculó el ECso. que representa la concentración del análogo que incrementa la actividad transcipcional

el 50% según las curvas de dosis-respuesta, como se indica en la descripción (Tabla 2). Los experimentos se realizaron al menos en dos ocasiones. Las barras de error representa la desviación estándar (OS)

FIGURA 3. Ensayo de proliferación en la línea celular de adenocarcinoma de mama humana MCF-7 Las células MCF-7 se sembraron en placa de 24 pocillos, transcurridas 24 horas las células se trataron con 1,250 y diferentes análogos según la presente invención a 10-3 y 10.7 1M] durante 48 horas y posteriormente se incubaron con el reactivo MIT durante 1 hora. La absorbancia se determinó a 570 nm. Los valores se representaron en las gráficas como media.:. OS. Como valor de proliferación en el control se consideró en 100% al crecimiento normal de las células MCF-7 tratadas con el vehículo

FIGURA 4. Ensayo de proliferación en la línea celular de adenocarcinoma de próstata humana PC-3 Las células PC-3 se sembraron en placa de 24 pocillos, transcurridas 24 horas las células se trataron con 1,250 y diferentes análogos según la presente invención a 10-3 y 10.7 1M] durante 48 horas y posteriormente se incubaron con el reactivo MIT durante 1 hora. La absorbancia se determinó a 570 nm. Los valores se representaron en las gráficas como media.! OS. Como valor de proliferación en el control

se consideró en 100% al crecimiento normal de las células PC-3 tratadas con el vehículo

FIGURA 5. Ensayo de proliferación en la línea celular de adenocarcinoma de ovario humana SKOV-3 Las células SKOV-3 se sembraron en placa de 24 pocillos y transcurridas 24 horas se trataron con 1, 250 Y diferentes análogos según la presente invención a 10.11 y 10.71M] durante 48 horas y posteriormente se incubaron con el reactivo MTT durante 1 hora. La absorbancia se determinó a 570 nm. Los valores se representaron en las gráficas como media.:. OS. Como valor de proliferación en el control se consideró en 100% al crecimiento normal de las células SKOV-3 tratadas con el vehículo

FIGURA 6. Ensayo de proliferación en la línea celular de queratinocitos humanos HaCaT. Las células HaCa T se sembraron en placa de 24 pocillos, y transcurridas 24 horas se trataron con 1,250 Y diferentes análogos según la presente invencíón a 10-8 y 10-7 1M] durante 48 horas y posteriormente se incubaron con el reactivo MTT durante 1 hora. La absorbancia se determinó a 570 nm. Los valores se representaron en las gráficas como media.:. DS. Como valor de proliferación en el control se consideró en 100% al

crecimiento normal de las células HaCaT tratadas con el vehículo.

FIGURA 7. Las células MCF-7 se sembraron durante 10 dias sobre un colchón de matrigel hasta que formaron una estructura celular en 3D. Estos esferoides se trataron con la 1,25D Y diferentes análogos según la presente invención a una concentración de 10.7 1M] durante 7 dias. Concluido el tratamiento los esferoides se tiñeron con DAPI (4', 6--diamino-2-fenilindol) durante 1 hora y se fotografiaron en un microscopio invertido con luz ultravioleta. Se midió el tamaño de estos esferoides y los valores se representaron como media.! SD en unidades relativas. En la figura podemos observar que los análogos PG-136p y PG-403 según la presente invención inhiben el crecimiento tridimensional de forma similar a 1,250. Como valor control se consideran aquellas células tratadas con el vehículo.

FIGURA 8. El tratamiento con los análogos PG-128, PG-136p, PG-152, PG-156, PG-403, PG-385, Y PG433 según la presente invención no producen hipercalcemia en ratones (ausencia de diferencias significativas con respecto al control) La 1,250 Y los diferentes análogos se inyectaron intraperitonealmente cada 2 días durante 21 días a una dosis de 0.3 jJgfKg. Una vez terminado el tratamiento se valoraron los niveles de calcio en el suero y los valores de representaron como media.:. DS en mgfdL.

FIGURA 9. El tratamiento con los ano3logos PG-136p y PG-403 según la presente invención a dosis de 0.1,0.5,1, Y 5jJgfkg no produce hipercalcemia en ratones. La 1,250 (dosis de 0.3 jJgfkg) Y los análogos (dosis de 0.1, 0.5, 1, Y 5 jJg/kg) se inyectaron intraperitonealmente cada 2 días durante 21 dias. Una vez terminado el tratamiento se valoraron los niveles de calcio en el suero y los va lores de representaron como media.! OS en mgfdL.

FIGURA 10. El tratamiento con los análogos PG-136p y PG-403 según la presente invención a dosis de 0.1, 0.5, 1, Y 5 jJg/kg no modifica el peso corporal de los ratones con respecto a los animales control (tratados con vehiculo). La 1,25D (dosis de O.3jJg/kg) y los análogos (dosis de 0.1, 0.5, 1, Y 5 jJglkg) se inyectaron intraperitonealmente cada 2 días durante 21 días. Los animales se pesaron cada dos días durante el tratamiento. Los valores de representaron como media:!. OS en mgfdL

FIGURA 11 (A Y B), Los análogos según la presente invención regulan genes diana de la vitamina D de forma semejante a 1,25D. Células MCF-7 se trataron durante 24 horas con diferentes ano3l090s a dosis de 10.9, 10-3 Y 10.7 M. Los extractos proteicos se sometieron a eleclroforesis, se transfirieron a membranas de PVDF, y se incubaron con anticuerpos anti-p21 , anti-p27, anti-p53 (A), o anti E-cadherina (B) (anti

GAPDH se utilizó como control de carga). Las bandas del Western blot se cuantificaron por densitometria y los datos se expresan como la relación entre anti-p21 , anti-p27, anti-p53 yanti-GADPH

Descripción detallada de la invención

Definiciones

M(C,-C'2)Alquilo· se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, formada por atomos de carbono e hidrógeno, sin insaturaciones, de 1 a 12, preferiblemente ocho, mas preferiblemente de uno a cuatro atomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, que opcionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo que uno o más hidrógenos se sustituóen por deuterio eH) o tritio eH) y/o uno o más carbonos se sustituyen por carbono-11 e' C), carbono-13 ( C)

o carbono-14 C4 C), opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados entre el grupo consistente en un átomo de halógeno, un grupo (C,-C'2)alquilcarboxi, un grupo (C6-ClO)arilcarboxi, un grupo (C,-C'2)alcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C,-C'2)tioalcoxilo, un grupo (C,-C12lheteroalquilo, un grupo (C3-C,s)heterociclico o CF3. Ejemplos de grupos alquilo incluyen sin limitación metilo, etilo, n-propilo, ¡-propilo, n-butilo, t-butilo, n-pentilo, ciclopropilo, etc

M(C,-C12lCarbociclo· se refiere a una cadena hidrocarbonada cerrada formada por átomos de carbono e hidrógeno, sin insaturaciones, de 1 a 12, preferiblemente ocho, más preferiblemente de cinco a ocho átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, que opcionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo que uno o más hidrógenos se sustituyen por deuterio e H)

o tritio (3H) y/o uno o más carbonos se sustituyen por carbono-11 (" C), carbono-13 C3C) o carbono-14

CC)

~(C2-C'2)Alquenilo" se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ram ificada , formada por átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos una ¡nsaturación, conjugada o no, de 2 a 12, preferiblemente de dos a ocho, más preferiblemente de dos a cuatro átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo y que 0r.;ionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo que uno o más hidrógenos se sustituyen por Ha 3H y/o uno o más carbonos se sustituyen por "c, '3C o

'4C. Los radicales alquenilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes tales como un átomo de halógeno, un grupo carboxi, un grupo (C ,-C'2)alcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C,-C'2)tioalcoxilo, un grupo (C,-C'2)heteroalquilo, un grupo (C3-C'5)heterocíclico o CF3 Ejemplos de grupos alquenilo incluyen sin limitación vinil, alil, butenil (por ejemplo, 1-butenil, 2-butenil, 3butenil), o pentenil (por ejemplo, 1-pentenil, 2-pentenil, 3-pentenil, 4-pentenil).

~(C2-CdAlquinilo" se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, formada por átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono, conjugado o no, de dos a doce, preferiblemente de dos a ocho, más preferiblemente de dos a cuatro átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, tal como -CCH, -CH2CCH, -CCCH3, -CH2CCCH3, y que opcionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo flue uno o más hidrógenos se sustituyen por 2H o 3H y/o uno o más carbonos se sustituyen por " c, '3C o '4C. Los radicales alquinilo pueden estar opCionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes tales como un átomo de halógeno, un grupo carbox i, un grupo (C,-C'2)alcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C,-C'2)tioalcoxilo, un grupo (C3-C, !» heterociciclo o CF3.

~(C,-C12lHidroxialquilo· se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, ciclica o aciclica formada por álamos de carbono e hidrógeno, sin insaturaciones, de 1 a 12, preferiblemente de uno a ocho átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, que está sustituido por un grupo hidroxilo, opcionalmente protegidO mediante un grupo protector como se describe en Wuts,

P. G. M., Greene, T. W.: "Proteclive Groups in Organic Synthesis·, 4rd Ed., John Wiley & Sons, Inc_ 2007, New Jersey, páginas 24-222. Preferiblemente, la cadena es ramificada y el grupo hidroxilo está protegido con alquiléteres y ésteres, como por ejemplo metoximetiléter, metoximetiléter, benciloximetiléter, metiltiometiléter, trimetilsilietoximetiléter, acetato, pivalato, benzoato, p-nitrobenzoato Ejemplos de hidroxialquilos sustituidos, incluyen sin limitación, 5-metil-5-hidroxihexilo y 6-metil-6-hidroxiheptilo, 5-etil-5hidroxiheptilo y 6-etil-6-hidroxioctilo. Ejemplos de hidroxialquilos no sustituidos incluyen sin limitación 5hidroxihexilo y 6-hidroxiheptilo, 5-hidroxiheptilo y 6-hidroxioctilo

"(C,-C, 2lHidroxialquenilo· se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, formada por átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos una insaturación, conjugada o no, de 2 a 12, preferiblemente de dos a ocho, más preferiblemente de dos a cuatro átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo y que opcionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo Q,ue uno o más hidrógenos se sustituyen por 2H o 3H y/o uno o más carbonos se sustituyen por "c, 13C o 4 C. Los radicales alquenilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o

mas sustituyentes tales como un atomo de halógeno, un grupo carboxi, un grupo (C,-C12lalcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C,-C'2)tioalcoxilo, un grupo (C,-C'2)heteroalquilo, un grupo (C3C ,s)heterociclico

M(C,-CI2)Hidroxialquinilo" se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, formada por atamos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono, conjugado o no, de dos a doce, preferiblemente de dos a ocho, más preferiblemente de dos a cuatro átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula mediante un enlace sencillo, tal como -CCH, -CH2CCH, -CCCH3, -CH2CCCH3, y que opcionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo que uno o más hidrógenos se sustituyen por 2H o 3H yfo uno o mas carbonos se sustituyen por " c, 13C o '4C. Los radicales alquinilo pueden estar opcionalmente sustitu idos por uno o mas sustituyentes tales como un átomo de halógeno, un grupo carbox i, un grupo (C1-C12lalcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C1-C12ltioalcoxilo, un grupo (C3-C1s,)heterociciclo o CF3.

~(C6-Cl0)Arilo" se refiere a un hidrocarburo aromático de 6 a 10 átomos de carbono, tal como fenilo o naflilo, y que 0f,cionalmente puede estar marcado isotópicamente de modo que uno o más hidrógenos se sustituyen por H o 3H yfo uno o más carbonos se sustituyen por l1C, 13C o 14C. Los radicales anlo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes seleccionados entre el grupo consistente en un átomo de halógeno, un grupo hidroxilo, un grupo carboxi, un grupo (C1-C12lalcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro, un grupo (C1-CI2)tioalcoxilo, un grupo (C,-Cd alquilo o CF3.

~(C6-CIO)Aril(Cl-C12lalquilo" se refiere a uno o varios grupos arilo unidos al resto de la molécula mediante un radical alquilo, por ejemplo, bencil, 3-(fenil)-propil, etc.

~(C3-Cls)Heterociclo~ se refiere a un anillo estable de 3 a 15 miembros formado por átomos de carbono y entre 1 a 5 heteroátomos escogidos entre nitrógeno, oxigeno y azufre, preferiblemente un anillo de 4 a 8 miembros formado por uno o mas heteroatomos, y mas preferiblemente un anillo de 5 a 6 miembros con uno o mas heteroatomos. Para los propósitos de esta invención, los grupos heterociclico pueden ser sistemas monociclicos, biciclicos o triciclicos, que pueden incluir anillos fusionados; y el átomo de nitrógeno o de azufre en el anillo heterociclico puede estar opcionalmente oxidado; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuartenarizado; y el radical heterocíciclo puede estar parcial o totalmente saturado. Los radicales (C3-C,s)heterociciclos pueden ser aromáticos (por ejemplo, pueden tener uno o mas anillos aromaticos) en cuyo caso se consideran como "(C3-CI5)heteroarilos" para los propósitos de la presente invención. El anillo heterocíclico puede estar sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados entre el grupo consistente en un alomo de halógeno, un grupo hidroxilo, un grupo carboxi, un grupo (C,-Cd alcoxilo, un grupo (C,-CI2)alquilo, un grupo (Cl-C I2)tioalcoxilo, un grupo ciano, un grupo nitro o CF3. Ejemplos de tales heterociclos incluyen sin limitación, furano, tiofeno, pirrol, imidazol, triazol, isotiazol, benzotiofeno, benzofurano, indol, benzoimidazol, tetrahidrofurano.

~(C1-C12)Alcoxilo~ se refiere a un radical de fórmula -O-(C1-C12)alquilo, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, etc

~(C,-CI2)Tioalcoxilo" se refiere a un radical de fórmula -S-(C1-C12lalquilo, por ejemplo, tiometoxi, tioetoxi, liopropoxi, etc

~(Ce-ClO)Ariloxilo ' se refiere a un radical de fórmula -O-(Ce-Clo)arilo, por ejemplo fenoxi, benciloxi, etc

M(C1-CI2)Alquilcarboxi" se refiere a un grupo alquilo que se une al reslo de la molécula mediante el oxigeno de un grupo carboxi (-C02-)

~(Ce-ClO)Arilcarboxi' se refiere a un grupo arilo que se une al resto de la molécula mediante el oxigeno de un grupo carboxi (-C02-).

~(Cl-CI2)Alquilacilo" se refiere a un grupo alquilo que se une al resto de la molécula mediante un grupo carbonilo (-CO-)

~(Ce-ClO)Arilacilo' se refiere a un grupo arilo que se une al resto de la molécula mediante un grupo carbonilo (-CO-).

~(Cl-CI2)Heteroalquílo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más carbonos están sustituidos por heleroátomos, preferentemente de 1 a 5, donde el heteroátomo se puede seleccionar de entre oxígeno, azufre, selenio, teturo, nitrógeno, fósforo, arsénico

M(C1-C12lHeteroalquenilo" se refiere a un grupo alquenilo en el que uno o más carbonos estan sustituidos por heteroátomos, preferentemente de 1 a 5, donde el heteroátomo se puede seleccionar de entre oxígeno, azufre, selenio, teluro, nitrógeno, fósforo, arsénico

M(Cl-C12)Heteroalquinilo" se refiere a un grupo alquinilo en el que uno o más carbonos estan sustituidos por heteroátomos, preferentemente de 1 a 5, donde el heteroátomo se puede seleccionar de entre oxígeno, azufre, selenio, teluro, nitrógeno, fósforo, arsénico.

Los compuestos de la presente invención pueden incluir diastereoisómeros yfo enantiómeros, dependiendo de la presencia de centros quirales, o isómeros dependiendo de la presencia de enlaces múltiples (por ejemplo l, E). Dichos isómeros, diastereómeros, enantiómeros y sus mezclas están dentro del alcance de la presente invención.

La frase ·sal farmacéuticamente aceptable" tal como se usa en la presente descripción, se refiere a sales orgánicas o inorgánicas farmacéuticamente aceptables de un compuesto de la invención. Los ejemplos de sales farmacéutica mente aceptables incluyen sales con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhidrico, acido yodhídrico, acido sulfúrico, ácido nítrico yacido fosfórico; y ácidos organicos tales como ácido metansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, acido oxálico, ácido malónico, ácido succinico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido etansulfónico, ácido aspártico y ácido glutámico

Las sales de ejemplo incluyen, pero sin limitación, sales de sulfato, citrato, acetato, oxalato, cloruro, bromuro, yoduro, nitrato, bisulfato, fosfato, fosfato acido. isonicotinato, lactato, salicilato, citrato ácido, tartrato, oleato, tannato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucuronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metansulfonato "mesilato", etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato y pamoato (es decir, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)). Una sal farmacéuticamente aceptable puede comprender la ínclusión de otra molécula tales como un íon acetato, un ion succinato u otro contraión. El contraión puede ser una parte orgánica o inorgánica que estabilice la carga del compuesto principal. Por otra parte, una sal farmacéuticamente aceptable puede tener mas de

un átomo cargado en su estructura. Los casos en los que múltiples átomos cargados son parte de la sal farmacéuticamente aceptable pueden tener múltiples contra iones. Por ello, una sal farmacéuticamente aceptable puede tener uno o más átomos cargados yfo uno o más contra iones

Si el compuesto de la invención es una base, es posible preparar la sal farmacéutica mente aceptable deseada mediante cualquier método disponible en la técnica, por ejemplo, mediante el tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido metansulfónico, ácido fosfórico, y similares, o con un ácido orgánico, tales como ácido acético, ácido maleico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicilico, un acido piranosidilico, tal como acido glucurónico o acido galacturónico, un acido a-hidroxi, tal como acido citrico o ácido tartárico, un aminoacido tal como acido aspártico o acido glutámico, un ácido aromático tal como ácido benzoico o ácido cinámico, un ácido sulfónico, tal como ácido p-toluensulfónico o ácido etanosulfónico, o similares.

Si el compuesto de la invención es un ácido, es posible preparar la sal farmacéuticamente aceptable deseada mediante cualquier método adecuado, por ejemplo, mediante tratamiento del acido libre con una base inorgánica u orgánica tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria), un dióxido de metal alcalino o un hidróxido de metal alcalinotérreo, o similares. Los ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen, pero sin limitación, sales orgánicas derivadas de aminoacidos, lales como glicina y arginina, amoníaco, aminas primarias, secundarias y terciarias, y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina, y las sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, hierro, cobre, zinc, aluminio y lilio.

Tipicamente la sal es un mesilato, un clorhidrato, un fosfato, un bencensulfonato o un sulfato. Más típicamente, la sal es un mesilato o un clorhidrato

Las sales, por ejemplo, sales con cualquiera de los ácidos inorgánicos u organices mencionados arriba, pueden ser monosales o bis-sales. Por lo tanto, por ejemplo, la sal mesilato puede ser el mono-mesilato o el bis-mesilato

Compuestos de fórmula m

Los compuestos de fórmula (1) de la presenle invención presentan afinidad por el receptor de vitamina D, y se unen de manera específica (binding) al receptor de vitamina D (VDR); además inhiben la proliferación celular de forma equivalente a 1,25D en líneas celulares de queratinocitos, cáncer de mama, ovario y próstata, inducen transactivación de genes diana de vitamina D, como 24-hidroxilasa, y regulan la expresión de genes diana de vitamina D como p21 , p27, p53 o E-cadherina. Los compuestos de fórmula

(1) no inducen hipercalcemia tras su administración in vivo, lo cual los hace de especial interés para el

5 tratamiento de enfennedades relacionadas con la deficiencia de vitamina D como raquitismo, osteomalacia, o fracturas, o con patologías en las que la vitamina D pueda tener una especial indicación como, sin descartar otras, psoriasis, diabetes, osteoporosis, enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, infecciosas, o tumorales.

10 Los compuestos de fónnula (1) están altamente funcionalizados, pueden tener diferentes sustituyentes en las diferentes posiciones del anillo aromático y en otros carbonos del sistema

1 5

En una realización particular, en un compuesto de fórmula (1), cada uno de cada uno de Ry Rse

R3

selecciona independientemente de entre hidrógeno, (Cl-C12)alquilo y (Cl-C12)hidroxialquilo y se 15 selecciona de entre (C1-C12)alquilo y (C1-C12)hidroxialquilo. Más preferiblemente, R1 es (C1-C12)alquilo y

R3

es (C1-C12)hidroxialquilo.

En otra realización particular, R7 en un compuesto de fónnula (1) es hidrógeno. En otra realización particular, R2, R4, Y R6 en un compuesto de fórmula (1) son hidrógeno

En una realización particular, el compuesto de fórmula (1) es un compuesto de fórmula (la),

R3

.p

~

R5

X1

X2

p10 o p2 (la)

R7

25 donde R1es hidrógeno, (Cl-C12)alquilo o (C1 -C12)hidroxialqu ilo,

R3 es hidrógeno o (C1-C12lhidroxialquilo, R5es hidrógeno o (C1-C12)hidroxialquilo,

R7 es hidrógeno, (C 1-C12)alquilo o (Cl-C12)hidroxialquilo, y

Xl, X2, pI y p2tienen los mismos valores que se definieron anterionnente

En una realización farticular, en un compuesto de fórmula (la), R1 es (C1-C12lalquilo, R3 es ~Cl C 12)hidroxialquilo 1R es hidrógeno .. En otra realización particular, en un compuesto de fórmula (la), R es 35 (Cl-C12)alqUllo, R es (C\-C12)hldroxlalqUllo y R5 es (Cl-C12)hldroxlalqUllo

En una realización más particular, R\ se selecciona del grupo constituido por etilo, propilo, butilo, hexilo y heptilo.

R1 R3

40 En una realización particular, en un compuesto de fórmula (la), es hidrógeno, es (ClC 12)hidroxialquilo y R5 es (Cl-C12)hidroxialquilo.

R3

En otra realización particular, al menos uno de entre R\ Y R5 en un compuesto de fórmula (1) o (la) es un (C\ -C12)hidroxialquilo ramificado

En otra realización particular, Xl y X2 en un compuesto de fórmula (1) o (la) son metileno.

Derivados isotópicos Los derivados isotópicos de los compuestos de la invención son útiles para su uso como patrones internos en diferentes técnicas de espectrometría de masas o cromatografía líquida de alta eficacia acoplada a resonancia magnética nuclear. Los compuestos de la invención que incorporan lle , l3e , l4e ,

5 2H o 3H son útiles además como radiofármacos, por ejemplo pero sin limitamos, para llevar a cabo técnicas de diagnóstico e investigación ··in vivo·· por imagen, permitiendo la detección externa de la biodistribución del radiofármaco dentro del organismo. En particular el marcaje con lle es útil en las técnicas de tomografía de emisión de positrones (PET).

10 En la presente invención, un compuesto que "incorpora marcaje isotópico" se refiere a un compuesto de la invención en donde de entre 1 y 9 átomos de hidrógeno están sustituidos por isótopos de hidrógeno, deuterio o trilio, yfo de entre 1 y 9 átomos de carbono están sustituidos por isótopos lle , l3C, l4e . Preferiblemente de entre 3 y 9 átomos de hidrógeno y de entre 1 y 3 átomos de carbono están sustituidos por isótopos Preferiblemente 1, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o 9 átomos de hidrógeno están sustituidos por deuterio o

15 tritio.

Así, en una realización particular los compuestos de fórmula (I), según se han definido anteriormente, incorporan marcaje isotópico. En una realización más preferida, el marcaje isotópico se selecciona de entre lle, l3e, l4e , 2H y 3H. En una realización todavía más preferida, el marcaje isotópico es lle

20 En una realización particular, un compuesto de fórmula (I) incorpora marcaje isotópico en R\ R3 yfo R5. En una realización particular, el marcaje isotópico en Rl , R3 yfo R5 se selecciona de entre el grupo constituido por 2Hn-alquilo, 3Hn~alqUiIO, 2Hn.-hidrOXialqUiIO, 3Hn.-hidrOXialqUiIO r2Hrfenilos donde n tiene un valor entre 1 y 6. En una realización particular, el marcaje IsotÓpiCO en R , R y/o R se selecciona de

25 entre el grupo constituido por alquilo (el-e,) y fenilo, donde uno o más carbonos son lle, 13e o l4e.

En otro aspecto la invención se dirige al uso de compuestos de fórmula (I) según se han definido anteriormente, caracterizados porque íncorporan marcaje isotópico, como patrones internos en técnicas espectroscópicas y espectrométricas. La invención también se refiere a los compuestos de fórmula (1)

30 según se han definido anteriormente, caracterizados porque incorporan marcaje isotópico, para su uso como patrones internos en técnicas espectroscópicas y espectrométricas.

En otro aspecto, la invención se refiere a los compuestos de fórmula (I), según se han definido anteriormente, caracterizados porque incorporan marcaje isotópico seleccionado de entre " e , 13e , l 4e , 2H 35 o 3H para su uso como radiofánnacos. Un radiofármaco puede servir por ejemplo pero sin limitarnos, para llevar a cabo técnicas de diagnóstico e investigación ··in vivo"· por imagen, permitiendo la detección externa de la biodistribución del radiofánnaco dentro del organismo. Alternativamente, la invención se refiere al uso de los compuestos de fórmula (I). según se han definido anteriormente, caracterizados porque incorporan marcaje isotópico seleccionado de entre lle, l3C, l4e, 2H o 3H como radiofármacos. De

40 forma preferida, los compuestos de fórmula (1), según se han definido anteriormente, caracterizados porque incorporan lle son útiles como radiofármacos en técnicas de tomografia de emisión de positrones (PET).

En una realización particular el compuesto de fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en·

45 (1 R ,3S ,Z)-5-( {E )-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)pent-2 -eniliden }-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, {1 R ,3S,Z)-5-{ (E )-3-{3-{7 , 7,7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuterometilheptil) fenil)pent -2 -eniliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-diol, {1 R ,3S ,Z)-5-{ (E )-3-{3-{6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)hex-2 -enil iden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, {1 R ,3S,Z)-5-{ (E )-3-{3-{7 , 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideuterometilheptil)fenil)hex-2 -en iliden)-4

50 metilenociclohexano-1,3-diol, {1 R ,3S,Z)-5-{ (E )-3-{3-{6-hidroxi-6-metilheptil)fen il)hept -2 -en ¡Iiden)-4-metilenociclohexano-1 ,3--diol, (1 R ,3S ,Z)-5-( (E )-3-(3-(7 ,7,7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideuteroheptil)fenil)hept-2 -eniliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-diol, {1 R ,3S,Z)-5-{ {E )-3-{3-{6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)non-2 -eniliden}-4-m etilenociclohexano-1 ,3-diol,

55 (1 R,3S,Z)-5-({E)-3-(3-(7, 7,7 -lrideulero-6-hidroxi-6-trideuteroheptil)fenil) non-2-eniliden}-4melilenociclohexano-1 ,3-diol, {1 R ,3S,Z)-5-{ (E )-3-{3-{6-hidroxi-6-melilheplil)fenil)dec-2 -enil iden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S ,Z)-5-( {E )-3-(3-(7 ,7, 7 -lrideulero-6-hidroxi-6-trideuteroheplil)fenil)dec-2-enilide n}-4melilenociclohexano-1,3-diol,

60 (1 R ,3S,Z)-5-( {E )-9-hídroxí-3-{3-{6-hídroxi-6-metílheptíl)fen il}-9-metildec-2 -en iliden}-4-metílenociclohexa no-1,3-diol , {1 R ,3S,Z}-5-{ (E }-9-hidroxi-3-{3-{7 • 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideute roheplil)fen il)-9-metildee-2 -en iliden)-4melilenociclohexano-1,3-diol,

(1 R,3S,Z)-5-«E)-9-hidroxi-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil}-9-metildee-2-eniliden}-4-metilenociclohexano1,3-diol, (1 R ,3S,Z}-5-((E }-9-hidroxi-3-(3-(7 , 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideuteroheptil)fen il)-9-metildec-2-en iliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-diol,

5 (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3 ,5-bis(6-h idroxi-6-metilheptil)fenil)al iliden}-4-metilenociclohexa no-1,3-diol, (1 R,3S,Z)-5-«E)-3-(3,5-bis(7, 7, 7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuteroheptil) fenil) aliliden}-4metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S ,Z)-5-( (E )-3-(3-( 5-hidroxi-5-metilhexil)fenil )pent-2-eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(6, 6,6-trideutero-5-h idroxi-5-trideuterohexil)fenil) pent -2 -eniliden)-4

10 metilenociclohexano-1,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-( 5-hidroxi-5-metilhexil)fenil )hept -2-eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, y (1 R,3S,Z)-5-«E)-3-(3-(6,6,6-trideutero-5-hidroxi-5-trideuterohexil)fenil)hept-2-enilidenHmetilenociclohexano-1 ,3-diol.

15 Síntesis de los compuestos de fórmula (1)

En otro aspecto, la invención se dirige a un procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula (1) donde X' y X2 son metileno, que comprende un acoplamiento de los compuestos (11) y (111) en presencia de un catalizador metálico, que se selecciona de entre el grupo típico de catalizadores para una

20 reacción de acoplamiento, por ejemplo y sin sentido limitativo, Pd(OAch, PdClz, Pd(PPh3)4, Pd(dbah, Ni(PPh3)4, Pd2(dbah, (Ph3Ph PdCI2, compuestos de Cu y compuestos de Hf

R3

R4 ~

Y R'

R5

p'O Op2

R6

Z (11) R7 (111)

donde R\ R2, R3, R4, R5, Re, R7, pI Y p2tienen los mismos valores que los definidos anteriormente, Y es un halógeno o un grupo atractof de carga seleccionado del grupo que comprende alquilsulfonato, arilsulfonato, triflato y fosfato, y Z se selecciona de entre haluro de indio, di(Cl-CI2)alquilindio, di(CeClO)arillitio, (C1-C'2)alquil(Ce-C1o)arilindio, haluro de cinc, di(C,-C'2)alquilboro y di(C1-C'2)alcoxiboro.

La invención también se dirige a un procedimiento para la preparación de compuestos de fónnula (1) que comprende un acoplamiento de los compuestos (11) y (IV) en presencia de un catalizador metálico, que se selecciona de entre el grupo tipico de catalizadores para una reacción de acoplamiento, por ejemplo y sin sentido limitativo, Pd(OAc)2, PdCI2, Pd(PPh3)4, Pd(dba)2, Ni(PPh3)4, Pd2(dbah, (Ph3Pl2PdCI2, compuestos

35 de Cu y compuestos de Hf.

w

Op2

z (11) (IV)

40 donde Z se selecciona de entre cloro, bromo ~ yodo, W se selecciona de entre (C,-Cdal~uilsulfonato, (Ce-C lO)arilsulfonato, halógeno, fosfato y SIR~R Re, y donde R', R2, R3, R~, R5, Re, R7, p\ p2, R·, Rb Y Re tienen los mismos valores que los definidos anteriormente.

La elevada funcionalización de los compuestos de fórmula (1) que le confieren una elevada versatilidad, 45 sólo es posible obtenerla a partir de compuestos de fórmula (11) y (111), o altemativamente (11) y (IV), con esa misma elevada funcionalidad

Los compuestos de fórmula (11) modificados funcionalmente se pueden preparar a partir del compuesto (11) mediante la transformación del grupo funcional Z. Así, en una realización particular la invención se refiere a un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula (11) modificado funcionalmente a partir de un compuesto de fórmula (JI) mediante a) una reacción de metalación, y b) intercambio del metal por un grupo seleccionado de entre haluro de indio, diarilindio, alquilarilindio, haluro de cinc, dialquilboro y dialcoxiboro.

Un experto en la materia conoce las condiciones para realizar dicha transformación, como por ejemplo, la sustitución del yoduro se puede llevar a cabo por metalación con un organolílico, posterior atrapado con isopropóxido de boro e intercambio de los sustituyentes del boro (Qrg. Lett. 2003 (5) 523-525), también se puede llevar a cabo mediante una reacción de Suzuki por acoplamiento, por ejemplo con bis(pinacol)diborano en presencia de un catalizador de paladio, como por ejemplo, Pd(OAch, Pd{PPh3~, Pd{dppf)CI2, en presencia de una base como por ejemplo carbonato de sodio, hidróxido de bario, fosfato potásico, carbonato de cesio, carbonato potásico, hidróxido de talio, fluoruro de cesio, fluoruro de potasio, hidróxido sódico. (J. Am. Chem. Soco 2002 (27) 8001-8006). Un experto en la materia también conoce otras posibilidades como por ejemplo, la sustitución del bromuro se puede llevar a cabo por metalación con un organolitico, posterior reacción con tricloruro de indio (Org. Lett. 2004 (6) 4555-4558). En otro ejemplo, la sustitución del bromuro se puede llevar a cabo por metalación con un organolílico, posterior reacción con dicloruro de cinc (Synlett 2003 861-863). En otro ejemplo, la sustitución del yoduro se puede llevar a cabo por metalación directa con cinc, posterior reacción con el complejo cianuro de cobre{I)-cloruro de litio (Angew. Chem. Inl. Ed. 2006 (45) 6040-6044)

En la reacción de intercambio del metal pueden emplearse trihaluro de indio, haluro de dialquilindio, haluro de diarilindio, haluro de alquilarilindio, dihaluro de cinc, haluro de dialquilboro o trialcoxiboro.

En una realización particular, la invención se refiere a un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (II) como se ha descrito anteriormente, que comprende la reacción de un compuesto de fórmula (VI) con un agente halogenante,

R3 R2 R4

R' R5 R6

RaRbRcSi (VI)

En una realización particular, el agente halogenante es un agente yodante, clorante o bromante. En una realización particular, el agente halogenante se selecciona de entre yodo, N-yodosuccinimida, Nyodosacarina, 1,3-diyodo-5,5,-dimetilhidantoina, tetrafluoro-borato de bis{piridinina)yodonio), bromo, Nbromosuccinimida, cloro, N-clorosuccinimida.

En una realización particular, la invención se refiere a un procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula (VI), como se han descrito anteriormente, que comprende:

a) la reacción de un compuesto de fórmula (VIII) con un compuesto de fórmula (V) en presencia de un catalizador

45 (VIII)

donde R' se selecciona de entre (C,-Cd alquilo y (C1-C12lhidroxialquilo,

5 Hal es cloro, bromo o yodo y

R2, R3, R4, R5, R6, R8, Rb Y Retienen los mismos valores que los definidos anteriormente, y

b) reacción del intermedio obtenido en la etapa a) con un agente sililante.

Según una realización preferida, el catalizador que se emplea se selecciona entre el grupo lípico de catalizadores para una reacción de acoplamiento, por ejemplo y sin sentido limitativo, Pd(OAc12, PdCI2, Pd{PPh3)4, Pd(dbah, Ni{PPh3)4, Pd2(dbah, (Ph3Ph PdCb, Cu, Hf, Al. La selección de este catalizador dependerá del resto de condiciones de la reacción como se describe a continuación. Preferiblemente,

15 cuando M es Li, Zn-Hal o Sn{R8 RbRc) la reacción es catalizada por catalizadores de Pd; cuando M es MgHalla reacción es catalizada por catalizadores de Cu; cuando M es Si(R8 RbRc) la reacción es catalizada por catalizadores de Hf o Al

Alternativamente, en una realización particular la invención se refiere a un procedimiento para la

20 preparación de los compuestos de fórmula (VI), como se han descrito anteriormente, que comprende la reacción de un compuesto de fórmula (VIII) con cianuro de trimetilsililo catalizada por Pd o con hidruros de trialquilsilano, y atrapado posterior del organometálico resultante mediante el tratamiento con un agente sililante.

25 En una realización particular, el agente sililante se selecciona de entre cloruro de trimetilsilicio, cloruro de trietilsilicio y cloruro de tri-iso-propilsilicio.

Cuando en un compuesto de fórmula (1), R' es hidrógeno, necesariamente R1 en un compuesto de fórmula (l1), es hidrógeno.

Así, en una realización particular la invención se dirige a un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (tI) donde R1 es hidrógeno, que comprende la homologación del grupo aldehído de un compuesto de fórmula (VII) por yodo

donde R2, R3, R, R5Y R6 tienen los mismos valores que los definidos anteriormente.

La condiciones para llevar a cabo dicha homologación del aldehído por yodo son conocidas por el experto

40 en la materia, y así puede llevarse a cabo, por ejemplo, mediante el tratamiento de (VII) con yodoformo en presencia de cloruro de cromo{II), con tetrayodometano en presencia de trifenilfosfina, con yodometilentrifenilfosfonio en presencia de una base como por ejemplo n-butil litio, t-butil litio, n-hexillitio, hexametildisilazanuro de litio, hexametildisilazanuro de sodio, t-butóxido de sodio o l-butóxido de potasio (Chem. Rev. 1999 (99) 991-1045).

45 Los compuestos de fórmula (VIII) son conocidos por un experto en el estado de la técnica ya que un elevado número son comerciales. En todo caso, los procedimientos para la preparación de compuestos de fórmula (VIII) son conocidos por el experto en la materia ya que han sido descritos en bibliografía, como por ejemplo, el procedimiento llevado a cabo a partir de compuestos de fórmula (VII) mediante una

50 reacción de Corey-Fuchs (Synthesis 2013, 45, 1513-1518), la reacción de Ohira-Bestmann (Synlett 1996, 521-522), o a partir de compuestos aromáticos de estructura (IX) mediante una reacciÓn de Sonogashira por acoplamiento con un alquino catalizada por Pd (J. Org. Chem. 1997,62, 7471-7474),

donde Y es un halógeno (F, el, Br, 1) o un buen grupo saliente (triflato, mesilato, tosilato, fosfato) De este modo el experto en la materia dispone de herramientas para preparar el compuesto de fórmula (VIII) que 5 sea de su interés o bien adquirirlo a los proveedores habituales.

Actividad biológica

La administración de los compuestos de fórmula (1) de la presente invención, inducen una significativa

10 inhibición de la proliferación en lineas celulares no tumorales de queratinocitos, así como en líneas celulares tumorales de mama, ovario y próstata. La inhibición de la proliferación celular es semejante a la obtenida por 1,250 a dosis equivalentes. Por ensayos de binding (unión a receptor de vitamina O), se demuestra que los compuestos de fórmula (1) de la presente invención presentan una unión específica a VDR, y por medio de ensayos de transactivación que inducen la expresión de genes diana de 1,250,

15 como el gen de la 24-hidroxilasa. Los compuestos de fórmula (1) de la presente invención, a concentraciones similares a 1,250, regulan la expresión de genes diana de 1,250, como p21 , p27, p53 o E-cadherina. Nuestros datos demuestran que, in vivo, la administración intraperitoneal de los compuestos de fórmula (1) de la presente invención no inducen hipercalcemia a dosis de 0.3 jJgfkg peso, al contrario de lo que ocurre con la administración de 1,250 a las mismas dosis. En particular, los analogos PG-136 y

20 PG-403 inyectados intraperitonealmente en ratones cada dos días durante 21 días a dosis de 5 j.Jg/kg de peso, no elevan significativamente la calcemia, en relación a los animales controles (tratados con placebo)

Así, un aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1) para la preparación de un

25 medicamento. En otro aspecto la invención se dirige a un compuesto de fórmula (1) como se ha definido anteriormente para su uso como medicamento.

Dicho medicamento puede estar indicado para el tratamiento de enfermedades o cond iciones relacionadas con la deficiencia de vitamina O como raquitismo, osteoporosis, osteodistrofia, osteomalacia, 30 o fracturas. Asi, otro aspecto de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1) para la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o condiciones relacionadas con la deficiencia de vitamina O. Dicho aspecto también se puede formular como compuesto de fórmula

(1)

para uso en el tratamiento de enfermedades o condiciones relacionadas con la deficiencia de vitamina

O.

La presente invención también se refiere a un método de tratamiento de enfermedades o condiciones

35 relacionadas con la deficiencia de vitamina O que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (1) junto con uno o más excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables en un sujeto que lo necesite, en particular un ser humano

En una realización particular, las enfermedades y condiciones relacionadas con la deficiencia de vitamina 40 O se seleccionan del grupo que consiste en raquitismo, osteoporosis, osteodistrofia, osteomalacia, y fracturas

Dicho medicamento también puede estar indicado para el tratamiento de patologías en las que la vitamina O pueda tener una especial indicación, como por ejemplo, psoriasis, diabetes, osteoporosis,

45 enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, infecciosas, o tumorales Asi, otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1) para la preparación de un medicamento para el tratamiento de psoriasis, diabetes, enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, metabólicas, infecciosas, o tumorales. Dicho aspecto también se puede formular como compuesto de fórmula (1) para uso en el tratamiento de psoriasis, diabetes,

50 enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, metabólicas, infecciosas,

o tumorales. La presente invención también se refiere a un método de tratamiento de psoriasis, diabetes, enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, metabólicas, infecciosas,

o tumorales, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de

fórmula (1) junto con uno o mas excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables en un sujeto que lo necesite, en particular un ser humano

Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1) para la preparación de un

5 medicamento para el tratamiento de una enfermedad neoplasica. Dicho aspecto también se puede formular como compuesto de fórmula (1) para uso en el tratamiento de una enfermedad neoplasica. La presente invención también se refiere a un método de tratamiento una enfermedad neoplasica que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (1) junto con uno o mas excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables en un sujeto que lo necesite, en

10 particular un ser humano

En una realización particular, las enfermedades neoplásicas se seleccionan de entre el grupo de cáncer de mama, ovario, próstata, pulmón, leucemia, tumores sólidos y tumores hematológicos.

15 En otro aspecto, la invención se refiere a una combinación de al menos un compuesto de fórmula (1) y al menos un compuesto antineoplásico. En una realización particular, el compuesto antineoplasico se selecciona de entre el grupo que consiste en agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antineoplasicos, inhibidores de la topoisomerasa, inhibidores de la mitosis, agentes hormonales, reguladores del sistema inmunitario y terapias dirigidas

En una realización particular, el agente alquilante se selecciona de entre mostazas nitrogenadas, nitrosoureas, alquilsulfonatostriazinas, etileniminas y medicamentos con platino; el antimetabolito se selecciona de entre 5-fluorouracilo, 6-mercaptopurina, capecitabina, cladribina, clofarabina, citarabina, floxiridina, f1udarabina, gemcitabina, hidroxiurea, metotrexato, pemetrexed, pentostatin y tioguanina; el 25 antibiótico antineoplásico se selecciona entre antraciciinas y no antracinas; el inhibidor de la topoisomerasa se selecciona de entre inhibidores de la topoisomerasa I e inhibidores de la topoisomerasa 11; el inhibidor de la mitosis se selecciona de entre taxenos, epotilones, alcaloides de la vinca y estramustina; el agente hormonal se selecciona de entre antiestrogénicos, inhibidores de la aromatasa, progestinas, antiandrógenos, agonistas de la hormona liberadora de la hormona gonadotropina (GNRH) y 30 analogos de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH); el regulador del sistema inmunitario se selecciona de entre terapia con anticuerpos monodonales (inmunoterapias pasivas) inmunoterapias y

adyuvantes no especificos, medicamentos inmunomodulantes y vacunas contra el cancer; y la terapia dirigida se selecciona de entre imatinib (Gleeveo:ID), gefilinib (Iressa®), sunitinib (Sutent®), bortezomib (Velcade®) y trastuzumab (Herceptin®).

En una realización mas particular, las mostazas nitrogenadas se seleccionan de entre mecloretamina, dorambucil, ciclofosfamida, ifosfamida y melfalán; las nitrosoureas se seleccionan de entre estreptozocina, carmustina y lomustina; los alquilsulfonatos consisten en busulfan; las triazinas se seleccionan de entre dacarbazina y temozolomida; las etileniminas se seleccionan de entre tiotepa y 40 altretamina; los medicamentos con platino se seleccionan de entre cisplatino, carboplatino y oxaliplatino; las antraciclinas se seleccionan de entre daunorubicina, doxorrubicina, epirubicina e idarubicina; las no antracinas se seleccionan de entre actinomicina D, bleomicina y mitomicina-C; los inhibidores de la topoisomerasa I se seleccionan de entre topotecan e irinotecán; los inhibidores de la topoisomerasa 11 se seleccionan de entre etopósido, tenipósido y omitoxantrona; los taxenos se seleccionan de entre 45 paciitaxel y docetaxel; los epotilones consisten en ixabepilone; los alcaloides de la vinca se seleccionan de entre vinblastina, vincristina y vinorelbina; los antiestrogénicos se seleccionan de entre fulvestrant, tamoxifeno y toremifeno; los inhibidores de la aromatasa se seleccionan de entre anastrozol, exemestano y letrozol; las progestinas consisten en acetato de megestrol; los antiandrógenos se seleccionan de entre bicalutamida, flutamida y nilutamida; los análogos de la hormona liberadora de hormona luteinizante

50 (LHRH) se seleccionan de entre leuprolida y goserelin; la terapia con anticuerpos monoclonales (inmunoterapias pasivas) se selecciona de entre rituximab y alemtuzumab; las inmunoterapias y adyuvantes no especificos se seleccionan de entre BCG, interleucina-2 e interterón-alfa; los medicamentos inmunomodulantes se seleccionan de entre talidomida y lenalidomida; y las vacunas contra el cáncer consisten en sipuleucel-T (Provenge®)

55 Otro aspecto de la invención se refiere al uso de la combinación de al menos un compuesto de fórmula (1) y al menos un compuesto antineoplásico según se ha descrito anteriormente, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad neop!ásica. Dicho aspecto también se puede formular como la combinación de al menos un compuesto de fórmula {I} y al menos un compuesto

60 antineoplasico según se ha descrito anteriormente, para su uso en el tratamiento de una enfermedad neoplásica. La presente invención también se refiere a un método de tratamiento una enfermedad neoplasica que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento, en particular un ser humano, una cantidad terapéuticamente efectiva de la combinación de al menos un compuesto de

fórmula (1) Y al menos un compuesto antineoplásico según se ha descrito anteriormente, junto con uno o mas excipientes o portadores farrnacéuticamente aceptables

La terapia en combinación se puede llevar a cabo mediante la administración simultánea, separada o secuencial de al menos una cantidad terapéutica mente efectiva de un compuesto de fórmula (1) y de al menos un compuesto antineoplásico. La administración simultanea se refiere a que al menos un compuesto de fórmula (1) y al menos un compuesto antineoplásico se administran por la misma ruta y al mismo tiempo o sustancialmente al mismo tiempo. La administración separada se refiere a que al menos un compuesto de fórmula (1) y al menos un compuesto antineoplasico se administran por diferentes rutas La administración secuencial se refiere a que al menos un compuesto de fórmula (1) y al menos un compuesto antineoplasico se administran a diferentes tiempos por una ruta igualo diferente

En otro aspecto la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéutica mente efectiva de un compuesto de fórmula (1) como se ha descrito anteriormente junto con uno o más excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables.

La composición farmacéutica de la invención puede obtenerse mediante la mezcla de un compuesto de fórmula (1) con un vehículo farmacéutica mente aceptable, y así puede ser administrada en una pluralidad de formas farmacéuticas para su administración, como por ejemplo en forma sólida o líquida

Dado que los compuestos de fórmula (1) no causan hipercalcemia, es posible administrar la composición farmacéutica por diferentes vías de administración, como por ejemplo por vía oral, bucal, sublingual, tópica, ocular, nasal, pulmonar, ótica, o vaginal, intrauterina, rectal, entérica o parenteral o cualquier composición en la forma de gel, pomada, crema o balsamo para su administración por vía tópica, ocular, nasal, vaginal o rectal. De forma preferida, la invención se refiere a la administración oral. La composición farmacéutica puede administrase en una única administración, en aplicaciones múltiples o mediante liberación controlada

La expresión "cantidad terapéuticamente efectiva" tal como se utiliza en este documento, se refiere a la cantidad de un compuesto que, cuando se administra, es suficiente para prevenir el desarrollo de, o aliviar, en cierta medida, uno o más de los síntomas de la enfermedad o condición contemplada. La dosis particular de compuesto administrado de acuerdo con esta invención, por supuesto, se determinará por las circunstancias particulares que rodean el caso, incluyendo el compuesto administrado, la vía de administración, la condición particular que se trata, y consideraciones similares. En una realización particular, el compuesto de fórmula (1) en la composición farmacéutica esta comprendido en cantidades de entre 0.0001 y 10 mgfKg al día, preferiblemente de entre 0.001 y 1 mglKg al día, más preferiblemente de entre 0.005 y 0.1 mg/Kg al día.

La expresión "excipientes o portadores farmaceuticamente aceptables" se refiere a que cada componente debe ser compatible con los otros componentes de la composición farmacéutica y también debe ser adecuado para su uso en contacto con el tejido u órgano de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, inmunogenicidad u otros problemas o complicaciones acordes con una relación beneficio/riesgo razonable.

Los siguientes ejemplos ilustran la invención y no deben de ser interpretados como limitativos de la misma

A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Además, la palabra 'comprende" incluye el caso 'consiste en". Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la practica de la invención. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención. Además, la presente invención cubre todas las posibles combinaciones de realizaciones particulares y preferidas aquí indicadas

Preparación del organocincato (1)

o o

11. B,

~znBr.líCI

EtO~

E'O

,

LíCI anhidro (1.14g, 26.89 mmol) se secó en un tubo de reacción a 160 Oc durante 20 min con alto vacío 60 Zn en polvo (1 .75 g, 26.89 mmol) se añadió baja argón y la mezcla se secó de nuevo a 160 Oc con alto

vacio. Ellubo de reacción se evacuó y se rellenó con argón tres veces. THF (15 mL) se añadió y el Zn se aclivó con 1,2-dibromoelano (0.06 mL, 0.67 mmol) y TMSCI (0.017 mL, 0.13 mmol). 6-Bromohexanoalo de elilo (3 g, 13.45 mmol) se añadió y la mezcla de reacción se agitó a 55 Oc duranle loda la noche la disolución de 1 se separó cuidadosamente del cinc sobrante usando una jeringa seca.

Preparación del éster (2)

o

H)) EIO O

o 2

3-Bromobenzaldehido (1 .5 g, 8.1 mmol) se disolvió en THF (5 ml). Pd2(dbah (0.074 g, 0.08 mmol) y tBU3P (0.162 ml, 0.162 mmol, 1M) se añadieron. la disolución del organocincato 1 en THF (-1 .5 equivalentes) se añadió a la reacción. La mezcla se agitó durante 30 min a ta (temperatura ambiente) y enlonces se deluvo con NH4CI (sal. ac .. disolución acuosa saturada). la mezcla se extrajo con Et20 . la fase organica combinada se secó, concentró y purificó por cromatografía rápida, obteniéndose el éster 2

(1.95 g, 7.858 mmot, 97%). lH NMR (250 MHz, COCh): (:) = 9.96 (s, 1H), 7.60-7.72 (m, 2H), 7.37-7.46 (m, 2H), 4.08 (q, J=7 .1 Hz, 2H), 2.66 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.26 (t, J=7.4 Hz, 2H), 1.56-1.71 (m, 4H), 1.26-1.42 (m, 2H), 1.21 (1, J=7.1 Hz, 3H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C1sH2Q0 3 248.1412, encontrado 248.1413.

Preparación del dibromuro vecinal (3)

Ph3P (3.96 g, 15.1 mmol) y ln (0.987 g, 15.1 mmol) se agitaron en CH2CIZ (40 ml) a ta. Después de agilar 15 min, la mezcla se enfrió a O oC. CBr4 (5 g, 15.1 mmol) y se añadió. la mezcla se agiló a O Oc durante 1 h ya ta durante 1.5 h. la disolución del éster 2 (1.5 g, 6.04 mmol) en CHzClz (10 ml) se añadió a la reacción via canula. Después de agitar durante 1 h a ta, la reacción se filtró a través de celita y los sólidos se lavaron con Et20. la fase orgánica se concentró y el residuo se purificó por cromatografía rápida proporcionando el dibromuro 3 (2.24 g, 5.54 mmol, 92%). l H NMR (250 MHz, CDCb): (:) = 7.3 (s, 1H), 7.2-6.9 (m, 4H), 3.97 (q, J=7 .1 Hz, 2H), 2.47 (1 , J=7.6 Hz, 2H), 2.14 (t, J=7.5 Hz, 2H), 1.4-1.58 (m, 4H), 1.16-1.28 (m, 2H), 1.09 (t, J =7.1 Hz, 3H); HRMS (EI+): [M¡> calculado para C16H20BrZOZ 401 .9830, encontrado 401 .9841

Preparación del alquino (4)

O

HO

3 4

Una disolución de Meli en EhO (19.8 ml, 29.7 mmol, 1.5 M) se añadió a una disolución del dibromuro 3 (2 g, 4.95 mmol) en THF (30 mL) a -78 cC. La mezcla de reacción se dejó alcanzar ta y se detuvo con NH4CI (ac. sat)o La mezcla se extrajo con EtzO. La fase orgánica se secó, concentró y se purificó por cromalografía rápida proporcionando el alquino 4 (0.89 g, 3.86 mmol, 78%). lH NMR (250 MHz, CDCll): i5 .; 6.91-7.16 (m, 4H ), 2.85 (s, 1H), 2.38 (1, J=7 .5 Hz, 2H), 1.35--1.49 (m, 2H), 1.07-1.29 (m, 6H), 0.99 (s, 6H); HRMS (EI+): [M+Ht calculado para C16H230 231.1749, encontrado 231.1754

Preparación del silileter (5)

HO

TESO

TESOTf (2.34 mL, 10.33 mmol) y EllN (2.86 mL, 20.66 mmol) se añadieron a una disolución del alquino 4

(1.58 g, 6.89 mmol) en CH2Ch (30 mL) a -78 oC. Tras agitar durante 3 h a -78 oC, la reacción se detuvo

5 con NH4 CI (sat. ac.). La mezcla se extrajo con Et20. La fase orgánica se secó, concentró y se purificó por cromatografía rápida proporcionando el silileter 5 (2.25 g, 6.53 mmol, 95%). l H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.98-7.2 (m, 4H), 2.9 (s, 1H), 2.44 (t, J=7 .5 Hz, 2H), 1.39-1.55 (m, 2H), 0.99-1.08 (m, 6H), 1.04 (s, 6H),

0.81 (t, J=7.9 Hz, 9H), 0.42 (q , J=7.5 Hz, 6H); HRMS (CI+): [M+Ht calculado para C22H370Si 345.2614, encontrado 345.2618

Preparación del (E)-vinilsilano (6)

TMS

15 Liel anhidro (0.177 g, 4.18 mmol) y Cul (0.2069. 2.081 mmol) se secaron en un tubo de reacción a 120 Oc durante 3 h a vacío. Se añadió THF (3 mL) y se agitó durante 30 min a tao La mezcla se enfrió a -60 oC. Despues de 5 min, una disolución de EtMgBr in THF (1.4 mL, 4.18 mmol, 3M) se añadió gota a gota La mezcla se agitó a -60 Oc durante 1h. Una disolución del alquino 5 (0.3 g, 0.87 mmol) yHMPA (0.7 mL) en THF (5 mL) se añadió via cánula a la mezcla de reacción a -60 oC. Tras 15 min, se añadió una mezcla

20 de HMPA (0.3 mL) y TMSCI (0.53 mL, 4.18 mmol, recien destilada). La mezcla se dejó alcanzarta durante 7 h Y entonces se vertió sobre NH4CI (ac. sal.). La disolución se extrajo con EhO. La fase orgánica se secó, concentró y se purificó por cromatografía rápida proporcionando el vinilsilano 6 (0.309 g, 0.691 mmol, 79%). 1H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.9-7.2 (m, 4H ), 5.66 (s, 1H), 2.44-2.67 (m, 4H), 1.16-1 .69 (m, 8H), 1.12 (s , 6H), 0.79-0.98 (m, 12H), 0.5 (q , J=7 .8 Hz, 6H), 0.13 (bs, 9H); HRMS (EI+): [Mt calculado

25 para C21HsoOSi2 446.3400, encontrado 446.3405.

Preparación del (El-yoduro vinílico (7)

TESO TESO

7

30 Una disolución de vinilsilano 6 (0.3 g, 0.671 mmol) en CH2CI2 (20 ml) se enfrió a -45 oC. Nyodosuccinimida (0.151 g, 0.671 mmo!) se añadió y la mezcla de reacción se agitó durante 3 h a -45 oC. La reacción se detuvo con Na2S203 (sal. ac.) a -45 Oc y entonces dejó que alcanzara tao La mezcla se extrajo con CH¡Ch. La fase orgánica combinada se secó, concentró y purificó por cromatografía rápida

35 proporcionando el yoduro vinílico 7 (0.331 g, 0.661 mmol, 99%). l H NMR (250 MHz, CDCI3): ti = 6.91 -7.13 (m, 4H), 6.19 (s, 1H), 2.38-2.61 (m, 4H), 1.09-1.56 (m, 8H), 1.02 (bs, 6H), 0.73-0.89 (m, 12H), 0.41 (q, J=7.8 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C24H41 0Sil 500.1971, encontrado 500.1974.

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (8)

TESO

TESO

Pd{dppf)CI2.CH2CI2 (0.0155 g, 0.019 mmol), KOAc (0.188 g, 1.92 mmol, secado a yacio a 120 Oc durante 2h) y bis{pinacolato)diborano (0.195 g, 0.77 mmol) se añadieron sucesivamente a una disolución del 5 yoduro v¡nilico 7 (0.32 g, 0.64 mmol) en DMSO (3 mL). Después de agitar 1 h a 80 cc , la mezcla de reacción se enfrió a ta y se añadió agua. La mezda se extrajo con Et20. La fase organica combinada se secó, se concentró rse purificó por cromatografia rápida proporcionando el éster vinilborónico 8 (0.227 g,

0.453 mmol, 71%). H NMR (250 MHz, CDCh): O = 6.97-7.25 (m, 4H), 5.54 (s, 1H), 2.82 (t, J=7.5 Hz, 2H),

2 .52 (t, J=7 .5 Hz, 2H), 1.23 (bs, 12H), 1.1 (bs, 6H ), 0.79-1 (m, 12H), 0.48 (q, J=7 .6 Hz, 6H); HRMS (EI+): 10 [M¡* calculado para C30H53B03Si 500.3857, encontrado 500.3853

Preparación del {E)-vinilsilano (9)

TESO

TESO

TM'

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LiCI anhidro (0.177 g, 4.18 mmol), Cul (0.207 g, 2.09 mmol), THF (5 mL), cloruro de propilmagnesio en THF (2.09 mL, 4.18 mmol, 2M), alquino 5 (0.3 g, 0.87 mmol), HMPA (0.7 mL), THF (5 mL), HMPA (0.3 mL) y TMSCI (0.53 mL, 4.18 mmol); proporcionó el vinilsilano 9 (0.280 g, 0.607 mmol, 70%). lH NMR (250 MHz, CDCh): O o: 7.05-7 .31

20 (m, 4H), 5.78 (s, 1H), 2.57-2.72 (m, 4H), 1.6-1.77 (m, 2H), 1.29-1.53 (m, 8H), 1.23 (bs, 6H), 0.88-1.06 (m, 12H), 0.61 (q, J,=7.9 Hz, Jr 8 Hz, 6H), 0.24 (s, 3H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C2sH520Si2 460.3556, encontrado 460.3552.

Preparación del (E)-yoduro vinilico (10)

25 TESO TESO

TM'

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-vinilyoduro (7), utilizando vinilsilano 9 (0.28 g, 0.61 mmol), CH2CI2 (15 mL), N-yodosuccinimida (0.137 g, 0.61 mmol); proporcionó el yoduro vinilico 10 (0.3 g,

30 0.583 mmol, 96%). l H NMR (250 MHz, CDCI3): 0= 7.07-7.25 (m, 4H), 6.38 (s, 1H), 2.56-2.73 (m, 4H), 1.56-1.71 (m, 2H), 1.19 (bs, 6H), 0.89-1.01 (m, 12H), 0.57 (q, J=7 .5 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado pa ra C2sH4 30Sil 514.2127, encontrado 514.2125.

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (11)

TESO TESO

11

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1-alquen ilboronato (8), utilizando Pd(dppf)Cb.CH2Cb (0.0095 g, 0.0116 mmol), KOAc (0.115 g, 1.17 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.119 g, 0.47 mmol)

5 yoduro vinilico 10 (0.2 g, 0.39 mmol), DMSO (3 mL); proporcionó el éster vinilborónico 11 (0.172 g, 0.334 mmol, 86%). lH NMR (250 MHz, CDCh): i5 = 6.96-7.23 (m, 4H), 5.57 (s, 1H), 2.8 (t, J=7.4 Hz, 2H), 2.51 (t, J=7.4 Hz, 2H), 1.45-1.6 (m, 2H), 1.22 (bs, 12H), 1.1 (bs, 6H), 0.79-0.92 (m, 12H), 0.48 (q, J=7.6 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C31H55B03Si 514.4013, encontrado 514.4014

10 Preparación del (Ej-Vinilsilano (12)

TESOTESO

5 12

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-vinilsilano (6), utilizando Líel anhidro (0.177 g, 4.18

15 mmol), Cul (0.207 g, 2.09 mmol), THF (3 mL), cloruro de butilmagnesio en THF (2.09 mL, 4.18 mmol, 2M), alquino 5 (0.3 g, 0.87 mmol), HMPA (0.6 mL), THF (5 mL), HMPA (0.3 mL) y TMSCI (0.53 mL, 4.18 mmo!); proporcionó el vinilsilano 12 (0.273 g, 0.575 mmol, 66%). lH NMR (500 MHz, CDCh): ti = 7.18-7.25 (m, 3H), 7.08 (d, J=6.8, 1 H), 5.73 (s, 1H), 2.59-2.66 (m, 4H), 1.62-1.7 (m, 2H), 1.30-1.46 (m, 10H), 1.21 (s, 6H), 0.97 (t, J=7 .9, 9H), 0.89 (t, J=6 .9 Hz, 3H), 0.59 (q, J=7 .9 Hz, 6H), 0.21 (s, 9H); HRMS (EI+): [M(

20 calculado para C29HS40Sil 474.3713, encontrado 474.3715

Preparación del (Ej-yoduro vinilico (13)

TESOTESO

•

12 13

TMS

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando vinilsilano 12 (0.176 g, 0.37 mmol), CH2Ch (10 mL~, N-yodosuccinimida (0.084 g, 0.37 mmol); proporcionó el yoduro vinilico 13 (0.195 9,0.37 mmol, >99%). H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.9-7.1 (m, 4H), 6.2 (s, 1H), 2.4-2.58 (m, 4H), 1.38

1.4 (m, 2H), 1.13-1.3 (m, 10H), 1.02 (s, 6H), 0.79 (m, 12H), 0.41 (q, J=7.6 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mt 30 calculado para C~H450Si' 528.2284, encontrado 528.2293.

Preparación del (Ej-1-alquenilboronato (14)

TESO TESO

"" •

¿

13 14

~Z

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1-alquen ilboronato (8), utilizando Pd(dppf)Cb.CH2Cb

(0.005 g, 0.0061 mmol), KOAc (0.057 g, 0.58 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.053 g, 0.21 mmol) yoduro

5 vinílico 13 (0.1 g, 0.19 mmol), DMSO (3 mL); proporcionó el éster vinilborónico 14 (0.086 g, 0.163 mmol, 86%). l H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 7.03-7.14 (m, 3H), 6.93 (t, J=6.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 2.73 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.43 (t, J=7 .5 Hz, 2H), 1.35-1.57 (m, 3H), 1.14 (s, 12H), 1.02 (s, 6H), 0.67-0.84 (m, 12H),

0.40 (q, J=7.3 Hz, 6H HRMS (EI+ ): [Mf calculado para Cn Hs7 B03Si 528.4170, encontrado 528.4169.

10 Preparación del (Ej-vinilsilano (15)

TESO

TESO

15

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LiCI anhidro (0.236 g, 5.57

15 mmol), Cul (0.276 g, 2.786 mmol), THF (3 mL), bromuro de hexilmagnesio en THF (2.8 mL, 5.572 mmol, 2M), alquino 5 (0.4 g, 1.16 mmol), HMPA (0.9 mL), THF (5 mL), HMPA (0.3 mL) y TMSCI (0.7 mL, 5.57 mmol); proporcionó el vinilsilano 15 (0.375 g, 0.746 mmol, 64%). 1H NMR (250 MHz, CDCh): ti = 6.8-7.13 (m, 4H), 5.57 (s, 1H), 2.38-2.54 (m, 4H), 1.04 (s, 6H), 0.66-0.87 (m, 12H), 0.42 (q, J=7.5 Hz, 6H), 0.04 (s, 9H); HRMS (CI+): [M+H)+ calculado para C31Hs90Si2 503.4104, encontrado 503.4107.

Preparación del (Ej-yoduro vinilico (16)

TESO TESO

TMS

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando vinilsilano 15 (0.28 g, 0.557 mmol), CH2Ci2 (15 mL)j N-yodosuccinimida (0.125 g, 0.557 mmol); proporcionó el yoduro vinílico 16 (0.26 g, 0.467 mmol, 84%). H NMR (250 MHz, CDCl l): ti = 6.9-7.12 (m, 4H), 6.2 (s, 1H), 2.36-2.58 (m, 4H), 1.35-1.58 (m, 2H), 1.02 (s, 6H), 0.66-0.84 (m, 12H), 0.4 (q, J=7.5 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C2aH~90Si l 556.2597, encontrado 556.2608

Preparación del (Ej-1-alquenilboronato (17)

TESO

TESO

'"

h

16 17

~z

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1-alquenilboronato (8), utilizando Pd(dppf)Ci2.CH2Ci2 (0.0114 g, 0.014 mmol), KOAc (0.138 g, 1.4 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.142 g, 0.56 mmol) yoduro

5 vinílico 16 (0.26 g, 0.467 mmol), DMSO (3 mL); proporcionó el éster vinilborónico 17 [0.156 g, 0.28 mmol, 60%). 1H NMR (250 MHz, COCh): i5 = 6.92-7.27 (m, 4H), 5.55 (s, 1H), 2.81 (t, J=7 .2 Hz, 2H), 2.5 (t, J=7 .5 Hz, 2H), 1.45-1.64 (m, 2H), 1.22 (s, 12H), 1.01 (s, 6H), 0.72-0.92 (m, 12H), 0.48 (q, J=7.5 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C34H61B03Si 556.4483, encontrado 556.4461.

10 Preparación del (E)-Vinilsilano (18)

TESO TESO

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LíCI anhidro (0.233 g, 5.5

15 mmol), Cul (0.276 g, 2.786 mmol), THF (3 mL), bromuro de heptilmagnesio en EhO (5.5 mL, 5.5 mmol, 1M), alquino 5 (0.4 g, 1.16 mmol), HMPA (1 mL), THF (5 mL), HMPA (0.5 mL) y TMSCI (0.7 mL, 5.57 mmol); proporcionó el vinilsilano 18 (0.506 g, 0.979 mmol, 84%). 1H NMR (250 MHz, COCll ): i5 = 7.01

7.13 (m, 3H), 6.88-6.98 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 2.38-2.53 (m, 4H), 1.42-1.58 (m, 2H), 1.05 (bs, 6H), 0.67

0.87 (m, 12H), 0.43 (q, J=7.5 Hz, 6H), 0.04 (bs, 9H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C32H600Si2 20 516.4183, encontrado 516.4180.

Preparación del (E)-yoduro vinílico (19)

TESO TESO

'"

h

TMS

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando vinilsilano 18 (0.4 g, 0.774 mmol,), CH2CI2 (15 mL) r. N-yodosuccinimida (0.174 g, 0.774 mmol); se obtuvo el yoduro vinílico 19 ([0.44 g, 0.771 mmol, >99%). H NMR (250 MHz, CDCll ): li = 7.02-7.13 (m, 1H), 6.89-7.01 (m, 3H), 6.21 (bs, 1H), 2.39-2.59 (m, 4H), 1.40·1.58 (m, 2H), 1.04 (bs, 6H), 0.66-0.86 (m, 12H), 0.41 (q, J=7.5 Hz, 6H);

30 HRMS (EI+): [MJ+ calculado para C:zgH5110Si 570.2754, encontrado 570.2755

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (20)

TESO TESO

'" h • '" h

19 20

~z

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-1-alquenilboronato (8), utilizando Pd(dppf)CI2_CH2CI2

(0.017 g, 0.021 mmol), KOAc (0.206 g, 2.1 mmol), bis(pinacolato}diborano (0.213 g, 0.84 mmol) yoduro

5 vinilico 19 (0.4 g, 0.7 mmol), DMSO (3 mL); proporcionó el éster vinilborónico 20 (0_343 g, 0_6 mmol, 86) 'H NMR (250 MHz, CDCI3) : ti = 6_91 -7.23 (m, 4H), 5_54 (s, 1H), 2_79 (t, J=7_0 Hz, 2H), 2.49 (t, J=7 _3 Hz, 2H), 1.44-1.63 (m, 2H), 1.19 (bs, 12H), 1.08 (bs, 6H), 0.71-0.91 (m, 12H), 0.46 (q, J=7.8 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C3sH63B03Si 570.4640, encontrado 570.4641.

10 Preparación del dibromuro vecinal (21)

EtO EtO

o

o

21

B, B,

Siguiendo el procedimiento de preparación del dibromuro vecinal (3), utilizando Ph3P (3_162 g, 12_056 15 mmol), Zn (0.788 g, 12_056 mmol), CH2CI2 (40 mL), CBr4 (3_998 g, 12_056 mmol), 3-formilbencenopentanoato de etilo (1_13 g, 4_822 mmol), CH¡CI2 (10 mL); proporcionó el dibromuro vecinal 21

(1.571 g, 4.027 mmol, 84%). 'H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 7.36 (s, 1H), 7.00-7.32 (m, 4H), 4.02 (q, J=7 _1 Hz, 2H), 2.44-2_67 (m, 2H), 2_13-2.33 (m, 2H), 1.48-1_67 (m, 4H), 1_15 (t, J=7_1 Hz, 3H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C,sH,aBr202 387 _9673, encontrado 387_9673

Preparación del alquino (22)

EtO HO

21

B, B,

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del alquino (4), utilizando MeLi en Et¡O (16.1 mL, 24.15 mmol, 1_5 M), dibromuro genninal 21 (1_57 g, 4_02 mmol), THF (20 mL); se obtuvo el 22 (0_765 g, 3_536 mmol, 88%). ' H NMR (250 MHz, CDCI3): ti = 7.03-7.29 (m, 4H), 2.98 (s, 1H), 2.53 (t, J=7 .7 Hz, 2H), 1.47-1 .61 (m, 2H), 1.22-1.47 (m, 4H), 1.12 (bs, 6H); HRMS (EI+): [M+Ht calculado para C,sH:wO 216.1514, encontrado 216_1517

Preparación del sililéter (23)

HO TESO

h

22 23

35 Siguiendo el procedimiento de preparación del sililéter (5), utilizando TESOTf (1.1 mL, 4_86 mmol), EllN

(1.345 mL, 9.71 mmol), alquino 22 (0.7 g, 3.24 mmol), CH2CI¡ (25 mL); proporción el siliéter 23 (1.023 g,

3_098 mmol, 96%)_l H NMR (250 MHz, CDCh): O 0:0 7_07-7_3 (m, 4H), 2_99 (s, 1H), 2_54 (t, J=7_6 Hz, 2H),

1.46 (m, 2H), 1.13 (s, 6H), 0.88 (t, J0:07 .8 Hz, 9H), 0.5 (q, J0:07.5Hz, 6H); HRMS (CI+): [M+Hf calculado para C21H3S0Si 331.2457, encontrado 331_2461

Preparación del (E)-vinilsilano (24)

TESOTESO

23 TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LiCI (0.154 g, 3.63 mmol), Cul 10 (0_179 g, 1_82 mmol), THF (3 ml), disolución de EtMgBr en THF (1.21 ml, 3_63 mmol, 3M), alquino 23

(0.25 g, 0.757 mmol), HMPA (0.7 ml), THF (5 ml), HMPA (0.3 ml) y TMSCI (0.46 ml, 3.63 mmol); se obtuvo el vinilsilano 24 (0.246 g, 0_568 mmol, 75%)_l H NMR (250 MHz, CDCI3): O 0:0 7_05-7_17 (m, 3H), 6_19-7_01 (m, 1H), 5_62 (s, 1H), 2.53 (q, J=7_6 Hz, 4H), 1_44-1_59 (m, 2H), 1_06 (s, 6H), 0_78-0_94 (m,

12H), 0.46 (q, J=7 .8 Hz, 6H), 0.09 (bs, 6H); HRMS (EI+): [M)'" calculado para C26H480Sb 432.3243, 15 encontrado 432.3247.

Preparación del (E)-yoduro vinílico (25)

TESO

TESO

-

TMS 20

"

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-vinilyoduro (7), utilizando el vinilsilano 24 (0_322 g,

0.744 mmol), CH2CI2 (20 ml) y N-yodosuccinimida (0.167 g, 0.744 mmol) proporcionó el yoduro vinílico 25

(0.322 g, 0_662 mmol, 89%)_ l H NMR (250 MHz, CDCh): 6 = 6_92-7_12 (m, 4H), 6_19 (s, 1H), 2_36-2_64

(m, 4H), 1.37-1.53 (m, 2H), 1.03 (bs, 6H), 0.73-0.89 (m, 12H), 0.40 (q, J=7 .9 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf 25 calculado para C23H3110Sil 486.1815, encontrado 486.1822.

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (26)

TESO

-

25

30 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1 -alquenilboronato (B), utilizando Pd(dppf)CI2_CH2CI2 (0.0146 g, 0.018 mmol), KOAc (0.182 g, 1.85 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.188 g, 0.74 mmol) y disolución de yoduro vinilico 25 (0.3 g, 0.62 mmol) en DMSO (3 ml); se obtuvo el 1-alquenilboronato

260.216 g, 0.444 mmol, 72%)_l H NMR (250 MHz, CDCh): 6 = 6_94-7_24 (m, 4H), 5_53 (s, 1H), 2_81 (q,

35 J=7.4 Hz, 2H), 2.52 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.44-1.59 (m, 2H), 1.21 (bs, 12H), 1.1 (bs, 6H), 0.94 (t, J=7.5 Hz, 3H), 0_85 (t, J=7.8 Hz, 9H), 0.46 (q, J=7_6 Hz, 6H); HRMS (EI+): [M¡< calculado para C29Hs2B03Si 487_3778, encontrado 487_3773

Preparación del (E)-vinilsilano (27)

TESOTESO

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LiCI (0.148 g, 3.49 mmol), Cul

(0.173 g, 1.74 mmol), THF (3 mL), una disolución de BuMgCI en THF (1.74 mL, 3.49 mmol, 2M), el alquino

5 23 (0.24 g, 0.73 mmol), HMPA (0.61 mL), THF (5 mL), HMPA (0.3 mL) y TMSCI (0.44 mL, 3.49 mmol); proporcionó el vinilsilano 27 (0.221 g, 0.479 mmol, 66%). lH NMR (250 MHz, CDCh): ti = 7.02-7.15 (m, 3H), 6.9-6.99 (m, 1 H), 5.58 (s,1 H), 2.42-2.57 (m, 4H), 1.42-1 .57 (m, 2H), 1.06 (bs, 6H), 0.69-0.88 (m, 12H), 0.43 (q, J=7 .8, 6H), 0.06 (bs, 9H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C28H280Sh 460.3556, encontrado 460.3552.

Preparación del (E)-yoduro vinílico (28)

TMS

15 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando el vinilsilano 27 (0.19 g, 0.412 mmol), CH2CI2 (15 mL) y N-yodosuccinimida (0.093 g, 0.412 mmol) se obtuvo el yoduro vinílico 28 (0.21 g,

0.408 mmol, >99%). lH NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.89-7.11 (m, 4H), 6.19 (s, 1H), 2.4-2.57 (m, 4H), 1.38-1.53 (m, 4H), 1.37-1.53 (m, 2H), 1.03 (bs, 6H), 0.69-0.84 (m, 12H), 0.39 (q, J=7.8 Hz, 6H); HRMS (EI+): [M]+ calculado para C2sH430SiI 514.2128, encontrado 514.2130.

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (29)

TESO

TESO

~z

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1-alquenilboronato (8), utilizando Pd(dppf)Ci2.CH2Ci2 (0.0095 g, 0.0116 mmol), KOAc (0.1145 g, 1.167 mmol), bis(pinaoolato)diborano (0.1185 g, 0.4668 mmol) y disolución de yoduro vinilioo 28 (0.2 g, 0.389 mmol) en DMSO (2 mL); proporcionó el1-alquenilboronato 29 [0.144 g, 0.28 mmol, 72%). l H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.82-7.35 (m, 4H), 5.53 (s, 1H), 2.80 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.49 (t, J=7 .6 Hz, 2H), 1.21 (bs, 12H), 1.08 (bs, 6H), 0.69-0.95 (m, 12H), 0.46 (q, J=7 .9 Hz,

30 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C31HssB03Si 514.4013, encontrado 514.4013

Preparación del éter (30)

HO~Br-----+-~Br

)' I MOMO' I 30

35 DMAP (0.088 g, 0.72 mmol) y i-Pr2NEt (2.5 mL, 14.35 mmol) se añadieron sucesivamente a una disolución de 7-bromo-2-metil-heptan-2-ol (1.5 g, 7.17 mmol) en CH2CI2 (15 ml ) a tao La mezcla de reacción se enfrió a O oC. Después de agitar 15 min a O oC, MOMCI (1.36 mL, 17.93 mmol) se añadió gota a gota. La mezcla de reacción se agito a O Oc 1 h Y luego a ta durante 1.5 h. La reacción se detuvo con

40 disolución acuosa saturada de NH4CI y se extrajo con Et20. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purifica por cromatografia rápida y se obtuvo el compuesto 30 (1.56 g, 6.162 mmol, 86%) lH NMR (250 MHz, CDCh): 15 :0 4_61 (bs, 2H), 3_32 (t, J=6 _8 Hz, 2H), 3.27 (bs, 3H), 1_12 (bs, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C1QH218r02251 .0725, encontrado 251 .0729.

Preparación del reactivo de Grignard (31)

~B,--~.~ ~MgBr.L.jCI

MOMO' I 30 MOMO' I 31

LiCI anhidro(1 .67 g, 39.5 mmol) y Mg (1 .2 g, 49.37 mmol) se secaron en un tubo de reacción durante 12 h a 110 oC a vacío. THF (20 mL) se añadió y se agitó durante 5 min a ta. El Mg se activó con unas gotas de

10 dibromoetano_ Una disolución del compuesto 30 (5 g, 19_75 mmol) en THF (14 mL) se añadió a la mezcla via cánula. La mezcla se agitó vigorosamente durante 3 h a ta. La disolución del reactivo de Grignard 31 fue transferida, con cuidado de no remover el Mg sobrante, a un matraz seco via cánula.

Preparación del (E)-vinilsilano (32)

">

¿;

MOMO

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LíCI (0.149 g, 3.50 mmol), Cul (0_349 g, 3_52 mmol), THF (3 mL), una disolución de 31 en THF (14_68 mL, 8_81 mmol, 0_6M),

20 fenilacetileno (0_15 g, 1.468 mmol), HMPA (1 _2 mL), THF (5 mL), HMPA (0_6 mL) y TMSCI (0.46 mL, 3_67 mmol); proporcionó el vinilsilano 32 (0.358 g, 1.027 mmol, 70%). lH NMR (250 MHz, CDCl l): i5 = 7.047_25 (m, 5H), 5.60 (s, 1H), 4_55 (s, 2H), 3_20 (s, 3H), 2_48 (1, J=7 _2 Hz, 2H), 1_05 (bs, 6H), 0_07 (bs, 9H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C21H3602Si 348_2485, encontrado 348_2488

25 Preparación del (El-yoduro vínilico (33)

MOMO MOMO

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando el vinilsilano 32 (0_35 g, 1_004

30 mmol), CH2CI2 (15 mL~ y N-yodosuccinimida (0.2~6 ~, 1.01 mmol) proporcionó el yoduro vinilico 33 (0.343 g, 0.853 mmol, 85 0X,). H NMR (250 MHz, CDCh), i5 -7.19-7.25 (m, 5H), 6.32 (bs, 1H), 4.62 (bs, 2H), 3.28 (bs, 3H), 2_63 (1, J=7.4 Hz, 2H), 1.13 lbs, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para ClsH27021 402_1056, encontrado 402.1056.

35 Preparación del (E)-1-alquenilboronato (34)

MOMO

MOMO

Siguiendo el procedimiento de preparación del {E}-1 -alquenilboronato (8), utilizando Pd{dppf)CI2_CH2CI2

40 (0.017 g, 0.0212 mmol), KOAc (0.207 g, 2.117 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.215 g, 0.847 mmol) y una disolución de yoduro vinilico 33 (0.28S p., 0.708 mmol) en DMSO (2 mL); se obtuvo el 1alquenilboronato 34 (0_22 g, 0_547 mmol, 77%)_ H NMR (250 MHz, CDCh): 15 :0 7_18-7_29 (m, 2H), 7_027_18 (m. 3H), 5_44 lbs. 1H), 4.48 lbs. 2H), 3_14 lbs. 3H). 2_71 (I. J=7_2 Hz. 2H), 1.11 lbs. 12H). 0_99 lbs, 6H); HRMS (EI+): [Mt calculado para C24H39B04 402.2941, encontrado 402.2944.

Preparación del (E)-vinílsílano (35)

TESO TESO

MOMO

TMS

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilsilano (6), utilizando LiCI (0_074 g, 1_741 mmol), Cul (0.1724 g, 1.741 mmol), THF (3 mL), una disolución de 31 en THF (7.25 mL, 4.35 mmol, 0.6M), el 5 alquino 5 (0.25 g, 0_725 mmol), HMPA (0_8 mL), THF (5 mL), HMPA (0.4 mL) y TMSCI (0_23 ml, 1_81 mmol); proporcionó el vinilsilano 35 (0_384 g, 0_649 mmol, 89%)_ lH NMR (250 MHz, CDCll ): 0 == 7_15

7.25 (m, 3H), 7.04-7.11 (m, 1H), 5.71 (bs, 1H), 4.71 (bs, 2H), 3.37 (bs, 3H), 2.61 (t, J=7 .7 Hz, 4H), 1.57

1.73 (m, 2H), 1.21 (bs, 6H), 1.19 (bs, 3H), 1.18 (bs, 3H), 0.95 (t, J=7 .8 Hz, 9H), 0.57 (q, J=7 .6 Hz, 6H), 0_19 (bs, 9H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C35H660 3SiZ 590.4550, encontrado 590.4557

Preparación del (E)-yoduro vinilico (36)

TESO TESO

MOMO MOMO

TMS

15 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E)-vinilyoduro (7), utilizando el vinilsilano 35 (0.3 g, 0.5075 mmol), CHzCI2 (10 mL) y N-rOdosuccinimida (0_114 g, 0.5075 mmol); se obtuvo el yoduro vinilico 36

(0.248 g, 0.385 mmol, 76%). H NMR (250 MHz, COCh): O = 7.07-7.25 (m, 4H), 6.38 (bs, 1H), 4.71 (bs, 2H), 3.36 (bs, 3H), 2.57-2.76 (m, 4H), 1.58-1.73 (m, 2H), 1.21 (bs, 12H), 0.97 (t, .1==7.8 Hz, 9H), 0.59 (q, J=8.4 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para CnHs7103Si 644_3122, encontrado 644_3125

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (37)

TESOTESO

MOMO MOMO 36

25 Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1 -alquenilboronato (8), utilizando Pd(dppf)CI2_CH2CI2

(0.008 g, 0.0093 mmol), KOAc (0.0912 g, 0.93 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.0945 g, 0.372 mmol) y una disolución de yoduro vinilico 36 (0.2 g, 0.31 mmol) en DMSO (3 ml); se obtuvo el1-alquenilboronato 37 (0_127 g, 0_197 mmol, 64%)_ 1H NMR (250 MHz, COCh): O =7_05-7_3 (m, 4H), 5 _62 (bs, 1H), 4_67 (bs, 2H), 3.33 (bs, 3H), 2.88 (t, J=7 .1 Hz, 2H), 2.58 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.53-1.73 (m, 2H), 1.29 (bs, 12H), 1.17

30 (bs, 12H), 0.94 (t, J=7.8 Hz, 9H), 0.55 (q, J=7 .8 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C:>aH69BOsSi 644.5007, encontrado 644.5007

Preparación del éster (38)

o

on OE.

O

H~on --H OE.

O

Pd(OAc)2 (0.0145 g, 0.065 mmol) y S-Phos (0.053 g, 0.129 mmol) se agitaron en dioxano (3 mL) durante 15 min a ta. Una disolución de trifluorometanosulfonato de 5-formil-1 ,3-fenileno (1 .3 g, 3.23 mmol) en dioxano (7 mL) y una disolución del organocincato 31 en THF (13 mmol) se añadieron sucesivamente. La mezcla de reacción se agitó durante 30 min a ta y luego se detuvo con NH4CI (ac. sat). La mezcla se extrajo con Et20. La fase organica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida obteniéndose el éster 38 (0.964 g, 2.469 mmol, 76%). 1H NMR (250 MHz, CDCb): 15 = 9.9 (s, 1H), 7.45 (d, J=1.5 Hz, 2H), 7.19 (bs, 1H), 4.05 (q, J=7 .1 Hz, 4H), 2.6 (t, J=7.7 Hz, 4H), 2.24 (t, J=7.4 Hz, 4H), 1.53-1 .68 (m, 8H), 1.24-1.39 (m, 4H), 1.18 (t, J=7.1 Hz, 6H); HRMS (EI+): [Mf calculado para C23H340s390.2406, encontrado 390.2410.

Preparación del (E)-yoduro vinílico (39)

o

o

OE.

o

o

H

OE. 38 39

o

CrC\¡ anhidro (0.567 g, 4.61 mmol) se suspendió en THF (10 mL) bajo argón. Una disolución del aldehido 38 (0.3 g, 0.768 mmol) e yodoformo (0.605 g, 1.536 mmol) en THF (5 mL) se añadió gota a gota a la suspensión a O oC. Tras agitar 4h a O oC, la mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo con Et20

La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida obteniéndose el yoduro vinílico 39 [0.296 g, 0.575 mmol, 75% (EIZ = 14/1)]. 1H NMR (250 MHz, CDCb): i5 = 7.37 (d, J=14.9 Hz, 1H), 6 .91 (bs, 3H), 6.79 (d, J=14. 9 Hz, 1H), 4.1 1 (q, J=7 .1 Hz, 4H), 2.56 (t, J=7.7 Hz, 4H), 2.28 (t, J=7 .5 Hz, 4H), 1.53-1.75 (m, 8H), 1.29-1.43 (m, 4H), 1.24 (t, J=7.1 Hz, 6H); HRMS (EI+): [M¡+ calculado para C24H3S041 514.1580, encontrado 514.1577.

Preparación del (E)-1-alquenilboronato (40)

oo

CE'OE.

o

o

OE. 39 I 40

OE.

1-1

Siguiendo el procedimiento de preparación del (E}-1-alquenilboronato (8), utilizando Pd(dppf)CI2.CH2CI2

(0.012 g, 0.01 46 mmol), KOAc (0.143 g, 1.458 mmol), bis(pinacolato)diborano (0.185 g, 0.729 mmol) y una disolución de yoduro vinílico 39 (0.25 g, 0.486 mmo) en DMSO (3 mL); se obtuvo el éster borónico vinílico 40 (0.17 g, 0.33 mmol, 68%). 1H NMR (250 MHz, CDCh): li = 7.31 (d, J= 18 .4 Hz, 1H), 7.06 (d, J=1.1 Hz, 2H), 6.86 lbs, 1H), 6.08 (d, J=18.4 Hz, 1H), 4.06 (q, J=7 .1 Hz, 4H), 2.52 (t, J=7 .6 Hz, 4H), 2.23 (t, J=7 .5 Hz, 4H), 1.48-1.68 (m, 8H), 1.25 (bs, 12H), 1.18 (t, J=7 .1 Hz, 6H); HRMS (EI+): [M]+ calculado para C30H47BOS514.3466, encontrado 514.3470

EJEMPLO 1. Preparación del triol (42) -cód. PG-136p

TESO

HO

+

-

TfO

J:(

TIPSO" OTIPS 41

.'

K3P04 (3 mL, 2M ac.) y (Ph3PhPdCh (0.007 g, 0.01 mmol) se añadieron sucesivamente a una disolución del éster borónico 8 (0.1 g, 0.2 mmol) y enol triflato 41a (0.14 g, 0.233 mmol) en THF (10 mL). La mezcla 5 se agitó vigorosamente durante 1.5 h a tao La mezcla de reacción se diluyó con H20 y se extrajo con E120. La fase organica se secó y se concentró. El residuo se purificó por Cfomatografia rapida obteniéndose el compuesto protegido que se disolvió en THF (5 mL). Una disolución de TBAF en THF (1.2 mL, 1.2 mmol, 1M) se adicionó. La mezcla de reacción se agitó durante 24 h a ta y entonces se diluyó con NH4CI (ac. sat). La mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por 10 cromatografía rapida proporcionando eltriol 42 (0.053 g, 0.133 mmol, 67%). 1H NMR (250 MHz, CDCll ): ti

o: 6.99-7.24 (m, 4H), 6.66 (d, J=11.4 Hz, 1H), 6.43 (d, J:;11 .4 Hz, 1H), 5.35 (bs, 1H), 5.03 (bs, 1H), 4.45 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.17-4.29 (m, 1H), 2.51 -2.73 (m, 5H), 2.37 (q, J ,+' 7.0 Hz, JZ;13.3 Hz, 1H), 1.97 (t, J=5.5 Hz, 2H), 1.55-1.73 (m, 3H), 1.19 (bs, 6H), 1.06 (t, J=7.5 Hz, 3H) ; HRMS (EI+): [Mt calculado para

C26H380 3 398.2820, encontrado 398.2819; [01D= +19.1 ° (c=1.2 in EtOH). 15

EJEMPLO 2. Preparación del triol (43)-cód. PG-152

TESO

HO

+

~ HO... '/·...OH

TIPSO"'" 41 OTIPS 43

20 Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (3 ml, 2M ac), (Ph3PbPdCI2 (0.0116 g, 0.0165 mmol), una disolución de éster borónico 11 (0.17 g, 0.33 mmol) y de enol triflato 41

(0.252 g, 0.419 mmol) en THF (10 ml), THF (5 ml) y una disolución de TBAF en THF (1 .98 ml, 1.98 mmol, 1M), proporcionó el triol 43 (0.095 g, 0.23 mmol, 70%). 1H NMR (250 MHz, CDCb): ti = 6.98-7.24 (m, 4H), 6.68 (d, J=11.4 Hz, 1 H), 6.42 (d, J=11 .3 Hz, 1 H), 5.34 (bs, 1 H), 5.04 (bs, 1 H), 4.45 (t, J=5 .6 Hz,

25 1H), 4.16-4.29 (m, 1H), 2.50-2.72 (m, 5H), 2.37 (q, J,=7.0 Hz, Jr=13 .3 Hz, 1H), 1.97 (t, J=5 .5 Hz , 2H), 1.53-1. 72 (m, 3H), 1.19 (bs, 6H), 0.92 (t, J=7.3 Hz, 3H) ; HRMS (EI+): [Mf calculado para C27H400 3

412.2977, encontrado 412.2979; [010=+18 .9° (c=1.7 in EtOH).

EJEMPLO 3. Preparación del triol (44) -cód . PG-128

TESO

Ha

14

+

TfO

YX

TIPSO".' OTIPS

OH

Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (3 mL, 2M ac), (Ph3PhPdCI2 (0.00669, 0.0094 mmol), una disolución de éster borónico 14 (0.1 g, 0.189 mmol) y de enoltriflato 41 5 (0.1679, 0.278 mmol) en THF (10 mL), THF (5 mL) y una disolución de TBAF en THF (1 .134 mL, 1.134 mmol, 1M), proporcionó eltriol 44 (0.061 g, 0.143 mmol, 76%). lH NMR (400 MHz, COCh): ti = 7.00-7.24 (m, 4H), 6.66 (d, J=11.4 Hz, 1 H), 6.42 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 5.35 (bs, 1 H), 5.04 (bs, 1 H), 4.46 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.2-4.3 (m, 1H), 2.53-2.73 (m, 5H), 2.38 (q, J 1=7 .1 Hz, ;"=13.3 Hz, 1H), 1.98 (t, J=5.4 Hz, 2H), 1.54

1.72 (m, 3H), 1.19 (bs, 6Hl~ 0.89 (t, J=6.8 Hz, 3H) ; HRMS (EI+): [Mf calculado para C Z8H 4Z0 3 426.3133, 10 encontrado 426.3127; [0)0 = +14.20 (c=1 .1 In EtOH)

EJEMPLO 4. Preparación del triol (45) -cód . PG-156

TESO

Ha

17

+

~TfOy

--

"'/ 'OH

TIPSO....'UOTIPS

41 45

Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (3 mL, 2M ac), (Ph3Ph PdCIz (0.0063 g, 0.009 mmol), una disolución de éster borónico 17 (0.1 g, 0.179 mmol) y de enol tnflato 41

(0.107 g, 0.179 mmol) en THF (10 mL), THF (5 mL) y una disolución de TBAF en THF (1 .07 mL, 1.07 mmol, 1M), se obtuvo el triol 45 (0.055 g, 0.121 mmol, 68%). 1H NMR (500 MHz, CDCI3 ): ti = 7.14-7.24

20 (m, 3H), 7.04 (d, J=7 .3 Hz, 1H), 6.66 (d, J=11 .4 Hz, 1H), 6.43 (d, J=11 .3 Hz, 1H), 5.36 (bs, 1H), 5.05 (bs, 1H), 4.46 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.23-4.29 (m, 1H), 2.56-2.72 (m, 5H), 2.38 (q, Jl-'7.0 Hz, J2"'13.3 Hz, 1H), 1.99 (1, J=5.3 Hz, 2H), 1.57-1.70 (m, 3H)2 1.2 (bs, 6H), 0.86 (t, J=6 .9 Hz, 3H); [Mt calculado para C3QH460 3 454.3446, encontrado 454.3448; [ala 5= +20.00 (c=1 .3 in EtOH).

25 EJEMPLO 5. Preparación del triol (46) -cód. PG-403

TESO

Ha

+

~TfOv

HO·" ..'/....'OH

TIPSO·....UOTIPS

41 46

Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (4_5 mL, 2M ac), (Ph3PhPdCI2

(0.012 g, 0.0175 mmol), una disolución de éster borónico 20 (0.2 g, 0.35 mmol) y de enol triflato 41 (0.252

5 g, 0.42 mmol) en THF (10 mL), THF (5 mL) y una disolución de TBAF en THF (2.1 mL, 2.1 mmol, 1 M), se obtuvo eltriol 46 (0.129 g, 0.275 mmol, 79%). lH NMR (250 MHz, COCh): ti = 6.99-7.24 (m, 4H), 6.66 (d, J=1 1.4 Hz, 1H), 6.42 (d, J=11.4 Hz, 1H), 5_35 (bs, 1H), 5_04 (bs, 1H), 4.45 (t, J=5.5 Hz, 1H), 4_16--4_32 (m, 1H), 2.53-2.74 (m, 5H), 2.37 (q, J1=6.9 Hz, Jz= 13.3 Hz, 1H), 1.97 (t, J=5.4 Hz, 2H), 1.54-1 .72 (m, 3H), 1.19 (bs, 6H), 0.87 (t, J=6.6 Hz, 3H) ; HRMS (EI+): [M( calculado para C31H4803 468.3603, encontrado

10 468_3606; [01025= +21 f (c=0_3 in EtOH)

EJEMPLO 6. Preparación del triol (47)-cód . PG-149

TESO

Ha

+

~TfOv

OH

TIPSO· ....UOTIPS

41 2. 15

Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (3 mL, 2M ac), (Ph3Pl2PdCi2 (0_0094 g, 0_0134 mmol), una disolución de éster borónico 26 (0_13 g, 0_267 mmol) y de enol triflato 41

(0.204 g, 0.339 mmol) en THF (10 mL), THF (5 mL) y una disolución de TBAF en THF (1.6 mL, 1.6 mmol, 1M), se obtuvo el triol47 (0_069 g, 0_179 mmol, 67%)_ l H NMR (250 MHz, CDCh): ti = 7_15-7.23 (m, 3H),

20 6.99-7.08 (m, 1H), 6.66 (d, J=11 .4 Hz, 1H), 6.41 (d, J=11.4 Hz, 1H), 5.32 (bs, 1H), 5.02 (bs, 1H), 4.43 (t, J=5.4 Hz, 1H), 4.15--4.27 (m, 1H), 2.54-2.75 (m, 6H), 2.35 (q, J1=7.2 Hz, Jr=13.2 Hz, 1H), 1.91 -2.0 (m, 2H), 1_18 (bs, 6H), 1_04 (t, J=7.5 Hz, 3H); HRMS (EI+): [M( calculado para C25H360l 384 _2664, encontrado 384.2654; [01025= +17_1 0 (c=0_15 in EtOH)

25 EJEMPLO 7. Preparación del triol (48)-cód . PG-141

TESO Ha

+

~TfOy

OH

TIPSO"",UOTI PS 41 48

Siguiendo el procedimiento de preparación del triol (42), utilizando K3P04 (3 mL, 2M ac), (Ph3Pb PdClz (0.0068 g, 0.0097 mmol), una disolución de éster borónico 29 (0.1 g, 0.194 mmol) y de enoltriflato 41

5 (0.171 g, 0.284 mmol) en THF (10 mL), THF (5 mL) y una disolución de TBAF en THF (1 .16 mL, 1.16 mmol, 1M), se obtuvo eltriol 48 [0.053 g, 0.128 mmol, 66%). lH NMR (400 MHz, CDCb): ti = 7.01-7.07 (m, 3H), 7.04 (d, J=6.8 Hz), 6.66 (d, J=11 .3 Hz, 1H), 6.43 (d, J=1 1.3 Hz, 1H), 4.45 (t, J=4 .9 Hz, 1H), 4.25 (bs, 1H), 2.58-2.71 (m, 5H), 2.51 (t, J=7.4 Hz, 1H). 2.37 (q, J!=7 .1 Hz, h=13.1 Hz, 1H), 1.89-2.07 (m, 3H), 1.57-1.69 (m, 3H), 1.19 (bs, 6H), 0.89 (t, J=6.7 Hz, 3H) ; HRMS (EI+): [Mf calculado para CZ7H400 3

10 412.2977, encontrado 412.2969; [01025=+17.1° (c=1.5 in EtOH)

EJEMPLO 8. Preparación del tetraol (49) -cód. PG-385

TESO Ha

'"

¿;

MOMO

~Z + • Ha

:xx

TlPSO"'" OTIPS 41 49

K3P04 (2 mL, 2M ac.) y (Ph3P12PdClz (0.0054 g, 0.008 mmol) se añadieron sucesivamente a una disolución del éster borónico 37 (0.1 g, 0.1 55 mmol) y enoltriflato 41 (0.112 g, 0.1 86 mmol) en THF (2 mL). La mezcla se agitó vigorosamente durante 2 h a tao La mezcla de reacción se diluyó con H20 y se extrajo con EtzO. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida 20 obteniéndose el compuesto protegido que se disolvió en THF (5 mL). Una disolución de TBAF en THF

(0.93 mL, 0.93 mmol, 1M) se adicionó. La mezcla de reacción se agitó durante 12 h a ta y entonces se diluyó con NH4CI (ac. sat). La mezcla se extrajo con EtOAc. La fase organica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografia rápida proporcionando el triol, que se disolvió en MeOH (10 mL). La resina AG50W-X4 (3 g, peso húmedo, recién lavada con MeOH) se añadió y la mezcla se agitó durante 25 10 h a tao La mezcla se filtró y se lavó varias veces con EtOAc. La disolución se evaporó a vacío y el residuo se purificó por cromatografia rápida en columna proporcionando el tetraol 49 (0.041 g, 0.0822 mmol, 53%). lH NMR (400 MHz, CD30D): ti = 7.12-7.17 (m, 3H), 6.98-7.02 (m, 1H), 6.71 (d, J=11 .3 Hz, 1H), 6.40 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 5.33 (bs, 1H), 4.94 (d, J=2 Hz, 1H), 4.39 (q, J!=4 .5 Hz, h=6 .6 Hz, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.27-3.29 (m, 1H), 2.65 (t, J=7.4 Hz, 2H), 2.54-2.62 (m, 3H), 2.32 (q, J1=7.2 Hz, Jz;13.2 Hz, 1H),

30 1.83-1.97 (m, 2H), 1.55-1.66 (m, 2H), 1.13 (bs, 6H), 1.12 (bs, 6H) ; HRMS (EI+): [Mt calculado para CnHso04 498.3709, encontrado 498.3691; [0]025= +11.7" (c=1.15 in EtOH).

EJEMPLO 9. Preparación del triol (50) -cód. PG-366

MOMO

HO

+ •

~TfOV

HO..···'-.../'...OH

TBSO· ....U

OTBS 50

Siguiendo el procedimiento de preparación deltetraol (50), utilizando K3P04 (6 mL, 2M ac.), (Ph3PhPdCi2 (0.0174 g, 0.0245 mmol), una disolución de éster borónico 34 (0.2 g, 0.497 mmol) y enol triflato 41 (0.308 5 g, 0.596 mmol) en THF (8 mL), THF (5 mL), una disolución de TBAF en THF (2 mL, 2 mmol, 1M), MeOH (15 mL) y resina AG50W-X4 (3 g, peso húmedo, recién lavada con MeOH); se obtuvo eltetraol 50 (0.14 g,

0.378 mmol, 76%). 1H NMR (250 MHz, CDCI3): O o: 7.03-7.25 (m, 5H), 6.59 (d, .1=11.4 Hz, 1H), 6.29 (d, J=11.4 Hz, 1H), 5.2 (bs, 1H), 4.94 (bs, 1H), 4.25-4.36 (m, 1H), 4.[}1-4.16 (m, 1H), 2.38-2.95 (m, 6H ), 2.24 (q, J,=7.0 Hz, J;¡=13.1 Hz, 1H), 1.76-1 .89 (m2H), 1.04 (bs, 6H); HRMS (EI+): [M( calculado para

s

10 C24H3403 370.2508, encontrado 370.2492; [0]02 :: +33.61° (c=2.11 In EtOH).

EJEMPLO 10. Preparación del lelraol (51) -cód. PG-433

O OH

OE.

O

OH

OE.

40

•

OH

~

TIPSO...·' OTIPS

41 5.

K3P04 (2.5 mL, 2M ac.) y (Ph3P)2PdCI2 (0.007 g, 0.0097 mmol) se añadieron sucesivamente a una disolución del éster borónico 40 (0.1 g, 0.194 mmol) y enoltriflato 41 (0.14 g, 0.233 mmol) en THF (3 mL). La mezcla se agitó vigorosamente durante 1 ha tao La mezcla de reacción se diluyó con H20 y se extrajo con Et20 . La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida 20 obteniéndose el compuesto protegido que se disolvió en THF (5 mL) y se enfrió a -78 oC. Se agitó 15 min y entonces se añadió una disolución de MeMgBr en THF (0.97 mL, 0.97 mmol, 1M). La mezcla se agitó 4 h a ta y se diluyó con NH4CI (ac. sat) y la mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida obteniéndose el diol protegido que se disolvió en THF (5 mL). Una disolución de TBAF en THF (0.78 mL, 0.78 mmol, 1 M) se adicionó. La mezcla de 25 reacción se agitó durante 5 h a ta y entonces se diluyó con NH4CI (ac. sat). La mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida proporcionando eltetraol51 (0.07 g, 0.14 mmol, 72%). 1H NMR (250 MHz, COCb): ti = 7.09 (dd, J ,=10.9 Hz, Jf= 15.6 Hz, 1H), 6.97 (bs, 2H), 6.83 (bs, 1H), 6.49 (d, J=15.6 Hz, 1H), 6.18 (d, J=10.9 Hz, 1H), 5.37 (bs, 1H), 5.05 (bs, 1H), 4.46 (t, J=5.5 Hz, 1H), 4.15-4.27 (m, 1H), 2.47-2.66 (m, 6H), 2.25-2.39 (m, 2H),

30 1.96 (t, J=5 .3 Hz, 2H), 1.52-1 .69 (m~ 4H), 1.18 (bs, 12H); HRMS (EI+): [M( calculado para C32Hso04 498.3709, encontrado 498.3691; [alo2 := +12.3° (c=1.46 in EtOH)

ACTIVIDAD BIOLÓGICA METODOS y RESULTADOS

Cultivo celular

Las lineas celulares de adenocarcinoma mamario humano (MCF-7), de próstata (PC3), y de ovario (SKOV-3) se obtuvieron de la Colección Europea de Cultivos Celulares. La linea celular de keratinocitos

HaCaT se obtuvo del Dr. Miguel Quintanilla (Departamento de Biologia del Co3ncer, IIB Alberto Sois, eSIC, Madrid). Las células se cultivaron en placas de 9O-mm en medio de cultivo esencial, OMEM, suplementado con un 10% de suero fetal bovino libre de hormonas esteroides, 100 Ufml de penicilina, 100IJg/ml de estreptomicina y 2 mM de aminoácidos no esenciales (L-glutamina) a 37°C en atmosfera

5 húmeda Oc'C02(95f5%)

Compuestos

La 1,25--dihidroxivitamina 03 (1 ,250) Y los diferentes ano3logos PG-136p; PG-152; PG -1 28; PG-156; PG

10 403; PG-385, Y PG-433 se resuspendieron en etanol absoluto a una concentración de 10.3 M Y a partir de esta solución, se obtuvieron las concentraciones usadas para cada experimento (desde 10.:5 hasta 10' " M).

Afinidad de unión de 1,250 y sus an'1I090s por el receptor de la vitamina O IVDRI

La afinidad de la 1,25-dihidroxivitamina 03 (1,250) Y sus análogos por VOR se determinó por ensayo de desplazamiento competitivo (Polarscreen Vitamin O receptor competidor assay, Red, Invitrogen). La fluorescencia polarizada se determinó en placas negras de 384 pocillos durante 200 ms/pocillo utilizando un aparato Mithras LB 940 (Berthold Technologies). Los compuestos se evaluaron en un rango de

20 concentraciones que osciló entre 10"'M -10-sM, calculando la IC5Q para la 1,250 y cada análogo. La actividad de cada ano3logo se expresó como porcentaje en relación a la actividad de la hormona natural (1 ,250), que se normaliza al 100%.

Los resultados obtenidos indican que de los compuestos analizados, el compuesto PG-136p es el que

25 presenta mayor afinidad por VOR (IC5Q: 7.11x1O'9, 24%), en relación a la hormona 1,250 (IC5Q:1.74x10·1I, 100% unión). Los otros compuestos tienen el siguiente porcentaje de afinidad: PG-152: 10%, PG-128: 12%; PG-156; 9%, Y PG-403: 7% (FIGURA 1; TABLA 1).

TABLA 1.Unión de 1,250 y análogos al receptor de vitamina O (VDR).

Unión a V

OR

Compuestos

IC50 M %

1250

1.74xl0· 100

PG-136

7.11x10· 2.

PG-152

1.76x10 10

PG-128

1.36x10 12

PG-156

1.84x10 9

PG-403

2.35x10 7

Ensayos de transactivación

Para evaluar in vivo el efecto de la administración de análogos de 1,25D, se realizaron transfecciones

35 transitorias con el promotor de un gen diana de vitamina D unido a un vector reportador de luciferasa (promotor de 24-hidroxilasa, CYP24A1, pCYP24A1-Luc). Las células MCF-7 se transfectaron con el vector pCYP24Al-Luc o su control pGL2B durante 48 h, Y se trataron 24 h más con cada uno de los análogos y con 1,250 a concentraciones que fueron desde 10.11 M hasta 10.{l M. A las 72 h (desde el inicio de la transfección) las células se trataron con luciferina (100 mg/L) y se visualizó la

40 bioluminiscencia en un IVIS (CaliperlifeSciences, Alameda, CA, USA) Se determinó el EC5Q para cada análogo y para la 1,250, que sirvió como patrón.

Los resultados obtenidos indican que los compuestos PG-433, PG-385 Y PG-136p son los que presentan mayor capacidad de activar genes diana de 1,250 (67, 35, y 33%, respectivamente) en relación a la

45 hormona natural 1,250 (100% transactivación). Los otros compuestos tienen el siguiente porcentaje de capacidad de transactivación (en relación a 1,250): PG-152: 21%, PG-128: 20%; PG-156: 17%; PG-403: 6% (FIGURA 2; TABLA 2).

TABLA 2 Actividad transcripcional de 1,250 y análogos en células MCF-7 (gen reportador pCYP24A150 Luc).

Com uestos

Actividad transcripcional EC50 M %

1 250

1.97x10' 100

PG-136p

5.97x10' 33

PG-152

9.27x10· 21

PG-128

1.00x10 20

PG-156

1.14x10 17

PG--403

3.4Sx10 6

PG-385

5.60x10· 35

PG--433

2.9S.x10· 67

Inhibición de la proliferación celular

La proliferación/toxicidad celular en lineas de cáncer de mama se evaluó por medio de ensayos de 5 incorporación de bromuro de 3-(4,s.-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenilletrazolium (MIT) y por cultivo celular en tres dimensiones (3D).

El primero de ellos se trata de un método indirecto de estimación de células vivas en el que el MIT, soluble en agua y de color amarillo, es reducido en las mitocondrias, generando un producto insoluble de 10 color púrpura (fonnazán). La medición de la densidad óptica del formazán una vez se ha solubilizado pennite estimar la tasa de citotoxicidad celular que sufren las células con los diferentes tratamientos (1 ,250, como control, y los analogos). Tras sembrar 30.000 células por pocillo en placas de 24 pocillos, a las 24 horas se administraron los distintos análogos y la 1,250 a una concentración de 10-3 y 10. 7 M Y se incubó durante 48 horas mas. Una vez transcurrido el tiempo de tratamiento se añadió MIT (500 mg/ml) y

15 se incubó 1 hora. Transcurrido este tiempo se retiró el medio de cultivo y se añadieron 500 111 de dimetilsulfóxido (oMSO) en cada pocillo para solubilizar el formazan incorporado por las células. Finalmente se midió la absorbancia en cada pocillo en un lector automatico de placas, a una longitud de onda de 590 nm .

20 Los resultados obtenidos indican que la proliferación celular en la linea MCF-7tras el tratamiento con 10. M de 1,250 es de 66% (100% en células control), y con los análogos: PG-13Sp: S5%; PG-152: S9%; PG

128: 74%; PG-156: 78%; PG-403: S9%; PG-385: 69%, y PG-433: 69% (FIGURA 3; TABLA 3).

TABLA 3. Porcentaje de proliferación celular en distintas lineas celulares de 1,25 O Y análogos (100% 25 células control).

MCF-7

Porcentaje de proliferación ce lular MCF-7 PC-3 SKOV-3 HaCaT

Com uesto 1,250

20 % 66 3D % 61 20 % 77 20 % 78 20 % 69

PG -136p

65 69 78 78 68

PG -152 PG-128

69 74 74 84 83 84 82 81 71 71

PG -156

78 79 80 76 74

PG-403 PG-385

69 69 55 79 83 71

PG-433

69

En la línea celular de cáncer de próstata pe-3, la proliferación celular tras el tratamiento con 10.7 M de 1,250 es de 77% (100% en células control), y con 10.1 M de los analogos· PG-136p· 78%; PG-152: 83%; 30 PG-128; 84%; PG-156: 80%, y PG-403: 79% (FIGURA 4; TABLA 3)

En la linea celular de cancer de Ovario SKOV-3, la proliferación celular tras el tratamiento con 10.1 M de 1,250 es de 78% (100% en células control), y con 10.1 M de los analogos· PG-136p· 78%; PG-152· 82%; PG-128: 81%; PG-156: 76%, y PG-403: 83% (FIGURA 5; TABLA 3).

35 En la linea celular de keratinocitos HaCaT, la proliferación celular tras el tratamiento con 10.1 M de 1,250 es de 69% (100% en células control), y con 10.7 M de los análogos: PG-136p: 66%; PG-152: 71%; PG

128: 71 %; PG-156: 74%, y PG-403: 71% (FIGURA 6; TABLA 3)

40 Para el cultivo celular en 3D, se utilizó un fondo de 200 ¡JI de Matrigel (Bo Biosciences) en cada uno de los pocillos de placas multi-well (multipocillo) de 24. Se incubaron a 37°C durante 20 minutos para que solidificasen y posteriormente se cargó sobre el matrigel solidificado la suspensión celular (5x 103células por cada 100 111 de volumen de medio) y se realizó otra incubación a 37 OC durante 30 minutos para que las células penetrasen correctamente en la base de matrigel. Se añadieron 500 111 de medio OMEM a

4 5 cada pocillo, y las células se mantuvieron en cultivo durante 10 días. Transcurrido este tiempo, se empezaron a tratar las células con cada uno de los 5 analogos utilizados y con 1,250 Pasados otros 10 dias se realizaron fotografias de los pocillos con un microscopio (Nikon eclipse Ti-S) equipado con una cámara ProgRes C3 y se cuantificó el diámetro de las esferas manualmente

Los resultados obtenidos indican que la proliferación-crecimiento celular en 3-D en la linea MCF-7 tras el 5 tratamiento con 10-7 M de 1,250 fue de 61% (100% en células control), y con 10-7 M de los an810gos: PG-136p: 69%; PG-152· 74%; PG-128: 84%; PG-156: 79%, y PG-403: 55% (FIGURA 7; TABLA 3)

Efectos calcémicos

10 La movilización de calcio de los ano3logos se determinó en 28 ratones macho CO-1 (edad entre 6-8 semanas). Se establecieron 6 grupos de 4 ratones a los cuales se les inyectaron 0.3 j.Jg/kg peso de cada análogo o 1,250 disueltos por via intraperitoneal (i.p.) en aceite de sésamo cada dos días durante 3 semanas. Un séptimo grupo de 4 ratones tratados con el vehículo (aceite de sésamo) sirvió como control. Los niveles de calcio en sangre se determinaron por medio de QuantiChomCa/ciumAssay Kit

15 (BioAssaySystems, Hayward, CA, USA). Además, se realizó un ensayo de dosis-respuesta para valorar el efecto de la administración de los análogos PG136p y PG-403 Y la hormona (1,250) a distintas dosis sobre los niveles de calcio. Este ensayo se realizó en ratones macho (S ratones por grupo), y las dosis utilizadas fueron: 0.1, 0.5,1, Y 5 j.Jglkg peso de cada uno de los análogos o de 1,250, administradas i.p. cada dos días durante 21 días. Además, se utilizó un grupo control (ratones tratados con aceite de

20 sésamo).

Los resultados obtenidos en el primer ensayo indican que el tratamiento con 1,250 a dosis de 0.3 j.Jg!kg peso induce un significativo incremento de calcio en sangre (14.7.:!:.0.S8 mg/dl) en relación a los ratones tratados con vehiculo (11.9.:!:.0.7 mg/dl) (FIGURA 8, TABLA 4). Los niveles de calcio en sangre en los

25 ratones tratados con los análogos, expresados en porcentaje con respecto al inducido tras el tratamiento con 1,250, fueron: PG-136p: 0%; PG-152: 41%; PG-128: 34%; PG-156: 0%; PG-403: 0%; PG-385: 9%, y PG-433: 8% (FIGURA 8; TABLA 4)

TABLA 4. Actividad calcémica de 1,250 y análogos en ratones inyectados con 0.3 j.Jg/kg peso cada dos 30 días durante 21 días

Actividad calcémica

Com uestos

%

1 250

100

PG-136

O

PG-152

41

PG-128

34

PG-156

O

PG-403

O

PG-385

9

PG-433

8

Los resultados obtenidos en el segundo ensayo de dosis-respuesta (valoración de calcemia con distintas concentraciones de 1,250 y los análogos PG136p y PG-403), indican que 1,250 induce un incremento 35 significativo en la calcemia (con respecto a los controles) a dosis de 0.5 j.Jg/kg peso. Ninguno de los dos análogos analizados (PG136p 'i PG-403) induce aumento de calcemia (respecto a los controles) a ninguna dosis utilizada (0.1, 0.5, 1, Y 5 1..19lkg peso) (FIGURA 9). En este experimento, se cuantificó también el peso de los animales, para ver si habia modificación a lo largo del tratamiento. Mientras que el tratamiento con 1,250 a dosis de 0.5 j.Jg/kg peso produjo una disminución significativa en el peso de los

40 animales, el tratamiento con los ano3logos PG136p y PG-403 a la misma dosis o a dosis superiores (1 '1 5 j.Jg/kg peso), no modificó significativamente el peso corporal de los ratones (FIGURA 10).

Western blot

45 Para valorar la expresión proteica de genes regUlados por 1,250 tras la administración de los análogos, se realizaron siembras de MCF-7 en placas petri j ue se trataron durante 48 h a concentraciones diferentes con cada análogo o con 1,250 (10-7,10 , 10.9). Posteriormente se realizó una extracción proteica que se utiliza para la electroforesis. Cada muestra se resuspendió en tampón de carga compuesto por 50 mM Tris-Hel pH 6.8, 2% SDS, 2%, de ¡3-mercaptoetanol y azul de bromofenol. Las

50 muestras se cargaron en un gel de en SDS-PAGE al 12% y se transfirieron a membranas de nitrocelulosa durante 2 horas a 4°C. Tras bloqueo con PBS (al que se le añadió 0.1 gr de caseína y 0.1% de Tween 20 durante 1 hora a temperatura ambiente), las membranas se incubaron toda la noche a 4°C con anticuerpos policlonales anti-p21 , anti-p27 y anti-p53 Para los compuestos PG-385 y PG-433 se realizó un Western blot con E-cadherina

Después de varios lavados con tampón PBST, se incubó con un segundo anticuerpo anti-lgG anti-rabbit

5 (1 :5000) conjugado con peroxidasa durante 1 hora a temperatura ambiente. La membrana se volvió a lavar 5 veces con tampón PBST y finalmente se añadió el reactivo de quimioluminiscencia (Pierce, ECL Western bloltingsubstrate) para su marcaje. El inmunomarcaje fue detectado utilizando placas de autorradiografía.

10 Los resultados obtenidos indican que al igual que 1,25D, todos los ano3logos utilizados a dosis de 10.1 M inducen la expresión proteica de p53, p27 Y p21 (FIGURA 11A), que como se ha comentado son genes diana de 1,25D implicados en el control del ciclo celular (p21 y p27) Y en muerte celularlreparación del ADN (p53). Para los compuestos PG-385 y PG-433 se utilizó E-cadherina como gen diana de 1,25D (FIGURA 11B)

Anidisis estadístico

Los valores resultantes para cada experimento se expresan como media !.desviación esto3ndar. Los resultados se compararon mediante el ano3lisis de la varianza de un factor, también denominado como

20 ANOVA, utilizando un nivel de significación de p<0,05.

Claims (27)

1. REIVINDICACIONES

   1. Compuesto de fórmula (I) , °uno de sus estereoisómeros, °sus sales fannacéuticamente aceptables,

   R3 R2 R4

   R1

   R5 R6 X1 X2

   p10 Op2 (I) R7

   donde cada uno de R\ R2, R3, R4, RS, RS y R7, se selecciona independientemente de entre hidrógeno, (C,-C'2)alquilo, (C,-C,2)hidroxialquilo, {C2-C12lalquenilo, (C2-C12lhidroxialquenilo, (C2-C12lalquinilo, {C2C'2)hidroxialquinilo, {C,-C'2)heteroalquilo, {C2-C'2)heteroalquenilo, {C,-C'2)heteroalquinilo, {Cs-C,o)arilo, 10 (C3-C,s)heteroarilo, {Ce-C,o)aril{C,-C12lalquilo, {C,-C'2)alquilacilo, (Ce-C,o)arilacilo, {C,-C12lalcoxilo, (Cr ClO)ariloxilo, {C,-C12lalquilcarboxi, (Ce-ClO)arilcarboxi, {C,-C'2)carbociclo y (C3-C'5)heterociclo, donde R ,

   R7

   R2, R3, R4, RS, Re y estan opcionalmente sustituidos por hidrógeno, {C,-C12lalquilo o (C,-C'2)hidroxialquilo,

   15 x' y X2 son hidrógeno °bien forman conjuntamente con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo metileno (=C H2), y

   cada uno de P' y p 2 se selecciona independientemente de entre hidrógeno, (C,-C'2)alquilo, (Cs-C,o)arilo, (C,-C'2)alcoxilo, (Ce-C,o)ariloxilo, (C,-C12lalquilcarboxi, (Ce-C,o)arilcarboxi y -OSiR"RbRc, donde cada uno

   Rb

   20 de R3, Y RC se seleccionan de entre (C1-C12lalquilo, {Cs-ClO)arilo, {Ce-C lO)aril, (C,-C12)alquilo, (C,-C12)alcoxilo, (Ce-C,o)ariloxilo y (C3-C,s)heterociclo,

   donde entre 1 y 9 átomos de hidrógeno en el compuesto de fórmula (1) están opcionalmente reemplazados por isótopos de hidrógeno, deuterio eH) o tritio eH}, yfo entre 1 y 9 átomos de carbono en 25 el compuesto de fórmula (1) están opcionalmente reemplazados por isótopos 11e, 13C, ' 4C
2. 2. Compuesto de fórmula (1) según la reivind icación 1, donde cada uno de R1 y RS se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, (C1-C12)alquilo y (C1-C12)hidroxialquilo y R3 se selecciona de entre (Cl -C12)alquilo y (C,-C'2)hidroxialquilo
3. 3. Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, donde R' es (C,-C12)alquilo y

   R3 es (C1-C'2)hidroxialquilo.

   4 Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde R1 es hidrógeno 35

4. 5.

   Compuesto de fórmula (1) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R2, R4, Y Re son hidrógeno.

5. 6.

   Compuesto de fórmula (la) según la reivindicación 1,

   (la)

   donde R' es hidrógeno, (C,-Cd alquilo o (C,-Cdhidroxia!quilo,

   5 R3es hidrógeno o (C,-C,z)hidroxialquilo, R5es hidrógeno o (C,-C'2)hidroxialquilo,

   R7es hidrógeno, (C,-Cd alquilo o (C,-Cd hidroxialquilo, y

   x' y X2, P' y p 2 son como se han definido en la reivindicación 1. 10
6. 7. Compuesto de fórmula (la), según la reivindicación 6, donde R' e, (C,-Cd alquilo, R' e, (C,C,2)hidroxialquilo y RS es hidrógeno.
7. 8. Compuesto de fórmula (la), segun la relvlndlcac1ón 6, donde R' e, (C ,-C,z)alqu ilo, R' e, (C,15 C'2)hidroxialquilo y R5 es (C,-Cdh,droxlalqullo

   R3
8. 9. Compuesto de fórmula (la), según la reivindicación 6, donde R' es hidrógeno, es (C,C'2)hidroxialquilo y RS es (C,-Cdhidroxialquilo.

   20 10. Compuesto de fórmula (1) o (la ), según las reivindicaciones 1 ó 6 respectivamente, donde al menos uno de entre R', R3 Y R5 es un (C,-C'2)hidroxialquilo ramificado

9. 11.

   Compuesto de fórmula (I) o (la), según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde X ' y XZ son meti!eno.

10. 12.

    Compuesto de fórmula (1) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque incorpora marcaje isotópico.

11. 13. Compuesto de fórmula (1) según la reivindicación 12, donde el marcaje isotópico se selecciona de 30 entre "c, 13C, '4C, 2H y 3H.

12. 14.

    Compuesto de fórmula (1) según la reivindicación 13, donde el marcaje isotópico es llC

13. 15.

    Compuesto de fórmula (1) según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo que consiste en:

    35 (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)pent-2 -eniliden )-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(7 ,7,7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuterometilheptil) fenil)pent-2-eniliden)-4 metilenociclohexano-1 ,3-d iol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)hex-2 -eniliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-d iol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(7 , 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6 trideuterometilhe ptil)fenil)hex-2 -eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-d iol,

    40 (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fen il)hept -2 -en iliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(7 ,7,7 -lrideulero-6-h idroxi-6-lrideuleroheplil)fenil)hepl-2 -eniliden)-4melilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R,3S,Z)-5-( (E)-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)non-2 -eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(7, 7 , 7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuteroheptil)fen il) non-2 -eniliden)-4

    45 melilenociclohexano-1,3-diol, (1 R,3S,Z)-5-( (E)-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil)dec-2 -enil iden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3-(7, 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideuteroheplil)fenil)dec-2-enilide n)-4melilenociclohexano-1 ,3-diol,

    (1 R,3S,Z)-5-«E)-9-hidroxi-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fenil}-9-metildee-2-eniliden}-4-metilenociclohexano1,3-diol, (1 R ,3S,Z}-5-((E }-9-hidroxi-3-(3-(7 , 7 , 7 -trideutero-6-h idroxi-6-trideuteroheptil)fen il)-9-metildec-2-en iliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-diol,

    5 (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-9-hidroxi-3-(3-(6-hidroxi-6-metilheptil)fen il}-9-metildee-2 -en iliden}-4-metilenociclohexa no-1,3-diol, (1 R ,3S ,Z}-5-( (E }-9-hidroxi-3-(3-(7 , 7 ,7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuteroheptil )fen il)-9-metildec-2-en iliden)-4metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S,Z)-5-( (E )-3-(3,S-bis(6-h idroxi-6-metilheptil)fenil)al iliden}-4-metilenociclohexa na.-1,3-diol,

    10 (1 R,3S,Z)-5-«E)-3-(3,5-bis(7, 7, 7 -trideutero-6-hidroxi-6-trideuteroheptil) fenil) aliliden}-4metilenociclohexano-1,3-diol, (1 R ,3S ,Z)-5-( (E )-3-(3-( 5-hidroxi-5-metilhexil)fenil )pent-2-eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, (1 R ,3S ,Z)-5-( (E )-3-(3-(6,6 ,6-trideutero-5-h idroxi-S-trideuterohexil)fenil) pent-2 -eniliden)-4metilenociclohexano-1,3-diol,

    15 (1 R,3S,Z)-5-«E)-3-(3-(5-hidroxi-5-metilhexil)fenil)hept-2-eniliden)-4-metilenociclohexano-1 ,3-diol, y (1 R,3S,Z)-5-«E)-3-(3-(6,6,6-trideutero-5-hidroxi-S-trideuterohexil)fenil)hept-2-enilidenHmetilenociclohexano-1,3-diol
14. 16. Procedimiento para la preRaración de los compuestos de fórmula (I) tal como se han definido en la 20 reivindicación 1, donde Xl y X2 son metileno, que comprende un acoplamiento de los compuestos (11) y

    (111) en presencia de un catalizador metálico, que se selecciona de entre Pd(OAch, PdClz, Pd(PPh3)4 , Pd(dbah, Ni(PPh3)4, Pd2(dbah, (Ph3PhPdCI2, compuestos de Cu y compuestos de Hf.

    R3

    R4 ~

    R' Z

    donde R\ R2, R3, R4, halógeno o un grupo

    R5

    p10

    R6

    (11)

    R5, R6, R7, p l Y p2 son como se atractor de carga seleccionado

    Y

    Op2 R7 (111)

    han definido en la reivindicación 1, Y es un del grupo que comprende alquilsulfonato,

    arilsulfonato, triflato y fosfato,y Z se selecciona de entre haluro de indio, di(C 1-C1Z)alquilindio, di(Ce30 ClO)arillitio, {Cl-C12)alquil{Ce-Cl0)arilindio, haluro de cinc, di{C1-Cd alquilboro y di{Cl-C12)alcoxiboro.
15. 17. Procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula (1) tal como se han definido en la reivindicación 1 que comprende un acoplamiento de los compuestos (tI) y (IV) en presencia de un catalizador metálico, que se selecciona de entre Pd(OAc12, PdCI2, Pd(PPh3)4, Pd(dba)2, Ni(PPh3h,

    35 Pd2(dbah, (Ph3Ph PdCb, compuestos de Cu y compuestos de Hf,

    w

    Op2

    z (11) (IV)

    Z se selecciona de entre cloro, bromo y ~OdO, W se selecciona de entre (Cl-C12{al~uilsulfonato, {Ce40 C lO)arilsulfonato, halógeno, fosfato y SiR8 R RC, y donde R1, R2, R3, R4, R5, Re, R7, P, P , R8, Rb Y RCson como se han definido en la reivindicación 1.
16. 18. Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, como patrón interno en técnicas espectroscópicas y espectro métricas.

17. 19.

    Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, para la preparación de un rad iofarmaco

18. 20.

    Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, para la preparación de un radiofármaco para su uso en técnicas de tomografia de emisión de positrones (PET)

    21 Uso de un compuesto de fórmula (1) tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , para la preparación de un medicamento.

19. 22.

    Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , para la preparación de un medicamento para el tratam iento de enfermedades o cond iciones relacionadas con la deficiencia de vitamina D.

20. 23.

    Uso según la reivindicación 22, donde las enfermedades o condiciones relacionadas con la deficiencia de vitamina O se seleccionan del grupo que consiste en raquitismo, osteoporosis, osteodistrofia, osteomalacia y fracluras

21. 24.

    Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , para la preparación de un medicamento para el tratamiento de psoriasis, diabetes, enfermedades autoinmunes, degenerativas, endocrinológicas, cardiovasculares, metabólicas, infecciosas, o tumorales

22. 25.

    Uso de un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades neoplásicas.

23. 26.

    Uso según la reivindicación 25, donde las enfermedades neoplásicas se seleccionan del grupo que consiste en cáncer de mama, ovario, próstata, pulmón, leucemia, tumores sólidos y tumores hematológicos

24. 27.

    Combinación de al menos un compuesto de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , Y al menos un compuesto antineoplásico.

25. 28.

    Combinación según la reivindicación 27, donde el compuesto antineoplásico se selecciona de entre el grupo que consiste en agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antineoplásicos, inhibidores de la topoisomerasa, inhibidores de la mitosis, agentes hormonales, reguladores del sistema inmunitario y terapias dirigidas

26. 29.

    Combinación según la reivindicación 28, donde el agente alquilante se selecciona de entre mostazas nitrogenadas, nitrosoureas, alquilsulfonatos, triazinas, etileniminas y medicamentos con platino; el antimetabolito se selecciona de entre 5-f1uorouracilo, 6-mercaptopurina, capecitabina, ciadribina, clofarabina, citarabina, f1oxiridina, f1udarabina, gemcitabina, hidroxiurea, metotrexato, pemetrexed, pentostatin y tioguanina; el antibiótico antineoplasico se selecciona de entre antraciciinas y no antracinas; el inhibidor de la topoisomerasa se selecciona de entre inhibidores de la topoisomerasa I e inhibidores de la topoisomerasa 11; el inhibidor de la mitosis se selecciona de entre taxenos, epotilones, alcaloides de la vinca y estramustina; el agente hormonal se selecciona de entre antiestrogénicos, inhibidores de la aromatasa, progestinas, antiandrágenos, agonistas de la hormona liberadora de la hormona gonadotropina (GNRH) y análogos de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH); el regulador del sistema inmunita rio se selecciona de entre terapia con anticuerpos monoclonales, inmunoterapias y adyuvantes no específicos, medicamentos inmunomodulantes y vacunas contra el cáncer; y la terapia dirigida se selecciona de entre imatinib, gefitinib, sunitinib, borlezomib y trastuzumab.

27. 30.

    Combinación según la reivindicación 29, donde las mostazas nitrogenadas se seleccionan de entre mecioretamina, dorambucil, ciciofosfamida, ifosfamida y melfalán; las nitrosoureas se seleccionan de entre estreptozocina, carmustina y lomustina; los alquilsulfonatos consisten en busulfan; las triazinas se seleccionan de entre dacarbazina y temozolomida; las etileniminas se seleccionan de entre tiotepa y altretamina; los medicamentos con platino se seleccionan de entre cisplatino, carboplatino y oxaliplatino; las antraciciinas se seleccionan de entre daunorubicina, doxorrubicina, epirubicina e idarubicina; las no antracinas se seleccionan de entre actinomicina D, bleomicina y mitomicina-C; los inhibidores de la topoisomerasa I se seleccionan de entre topotecan e irinotecán; los inhibidores de la topoisomerasa 11 se seleccionan de entre etopósido, tenipósido y omitoxantrona; los taxenos se seleccionan de entre paciitaxel y docetaxel; los epotilones consisten en ixabepilone; los alcaloides de la vinca se seleccionan de entre vinblastina, vincristina y vinorelbina; los antiestrogénicos se seleccionan de entre fulvestrant,

    1amoxifeno y toremifeno; los inhibidores de la aromatasa se seleccionan de entre anastrozol, exemestano y letrozol; las progestinas consis1en en acetato de megestrol; los antiandrógenos se seleccionan de entre bicalutamida, flutamida y nilutamida; los análogos de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH) se seleccionan de entre leuprolida y goserelin; la terapia con anticuerpos monoclonales se

    5 selecciona de entre rituximab y alemtuzumab; las inmunoterapias y adyuvantes no especificos se seleccionan de entre BCG, interleucina-2 e interferón-alfa; los medicamentos inmunomodulan1es se seleccionan de entre talidomida y lenalidomida; y las vacunas contra el cáncer consisten en sipuleucel-T.

    31 Composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto

    10 de fórmula (1), tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , junto con uno o más excipientes o portadores farmacéutica mente aceptables