ES2618178T3

ES2618178T3 - Sales del éster (1R,2R,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ílico del ácido isobutírico

Info

Publication number: ES2618178T3
Application number: ES09752894.7T
Authority: ES
Inventors: Stefan Abele; Stéphanie COMBES; Jacques-Alexis Funel; Kurt Hilpert; Francis Hubler; Katharina Reichenbaecher; Dorte Renneberg; Markus Von Raumer
Original assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Current assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2008-10-22
Filing date: 2009-10-21
Publication date: 2017-06-21
Anticipated expiration: 2029-10-21
Also published as: BRPI0920635B1; NZ592996A; CL2011000921A1; BRPI0920635A2; MY160597A; WO2010046857A1; AU2009306002A1; TWI463981B; RU2011120042A; US8492555B2; AR074049A1; CN102186828B; KR101331291B1; KR20110075030A; AU2009306002B2; EP2344461A1; CN102186828A; JP2012506416A; BRPI0920635B8; MX2011004138A

Abstract

Una sal cristalina del compuesto éster (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metilamino}- etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ílico del ácido isobutírico; en la que dicha sal cristalina consiste en: * 1 equivalente de éster (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ílico del ácido isobutírico; * un componente ácido que consiste en 1 a 2 equivalentes de un ácido seleccionado entre el grupo que consiste en ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido metanosulfónico, ácido paratoluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido naftaleno-1,5-disulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico y ácido etanosulfónico; y * de 0 a 5 equivalentes de agua.

Description

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DESCRIPCION

Sales del ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil- biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco

La invencion se refiere a formas novedosas de sal cristalina del ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H- benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco (en lo sucesivo en el presente documento tambien denominado "COMPUESTO") o enantiomeros del mismo, a procedimientos para la preparacion del mismo, a composiciones farmaceuticas que contengan dichas formas de sal cristalina y a su uso como bloqueantes de canales de calcio en el tratamiento o en la prevencion de la angina estable cronica, la hipertension, la isquemia (renal o cardfaca), las arritmias cardfacas incluyendo la fibrilacion auricular, la hipertrofia cardfaca o la insuficiencia cardfaca congestiva. Dichas formas de sal cristalina de la presente invencion tambien pueden usarse, solas o en composiciones farmaceuticas, para el tratamiento de enfermedades renales, la diabetes y sus complicaciones, el hiperaldosteronismo, la epilepsia, el dolor neuropatico o el cancer en seres humanos y en otros mairnferos.

Antecedentes de la invencion

Muchos trastornos cardiovasculares se han asociado a una 'sobrecarga de calcio' que es resultado de un flujo de entrada de calcio anormalmente alto a traves de la membrana plasmatica de las celulas musculares lisas cardfacas y vasculares. Existen 3 vfas principales a traves de las cuales el calcio extracelular puede entrar a estas celulas: 1) canales de calcio activados por receptor, 2) canales de calcio abiertos por ligando y 3) canales de calcio operados por voltaje (COV).

Los COV se han clasificado en 6 categonas principales: L (de larga duracion), T (Temporales), N (Neuronales), P (celulas de Purkinje), Q (despues de P) y R (Restante o Resistente).

Los canales de calcio de tipo L son responsables del movimiento hacia el interior del calcio que inicia la contraccion en las celulas musculares cardfacas y lisas, lo que indica una supuesta aplicacion para los bloqueantes de estos canales en el campo cardiovascular. A este respecto, se han utilizado bloqueantes de canales de calcio de tipo L en clmica desde los inicios de los anos 60 y hoy en dfa se recomiendan como una primera lmea de tratamiento para la hipertension sistolica-diastolica y la angina de pecho.

Los canales de calcio de tipo T se encuentran en diversos tejidos tales como la vasculatura coronaria y periferica, el nodulo sinoauricular y las fibras de Purkinje, el cerebro, las glandulas suprarrenales y en el rinon. Esta amplia distribucion indica que un bloqueante de canal de tipo T ejercena una supuesta proteccion cardiovascular, tendna un efecto sobre los trastornos del sueno, los trastornos ammicos, la depresion, la migrana, la hiperaldosteronemia, el trabajo de parto prematuro, la incontinencia urinaria, el envejecimiento del cerebro o los trastornos neurodegenerativos tales como la enfermedad de Alzheimer.

El mibefradilo (Posicor®), el primer bloqueante de canales de calcio de tipo L y de tipo T demostro un efecto superior a los bloqueantes de canales de calcio, que se dirigen predominantemente al canal L.

El mibefradilo se uso para el tratamiento de la hipertension y la angina sin mostrar los efectos secundarios negativos observados con frecuencia en otros bloqueantes de canales de calcio L como la inotropia, la taquicardia refleja, la liberacion de hormonas vasoconstrictoras o el edema periferico. Adicionalmente, el mibefradilo mostro un efecto potencialmente cardioprotector (Villame, Cardiovascular Drugs and Therapy 15, 41-28, 2001; Ramires, J Mol Cell Cardiol 1998, 30, 475-83), un efecto protector renal (Honda, Hipertension 19, 2031-37, 2001) y mostro un efecto positivo en el tratamiento de la insuficiencia cardfaca (Clozel, Proceedings Association American Physicians 1999, 111, 429-37).

El documento US2003/130330A1 desvela bloqueantes de canales de calcio a basa de mibefradilo. El documento US6.268.377B1 desvela el uso combinado de inhibidores de la 5a-reductasa junto con bloqueantes de canales de calcio para ciertas afecciones relacionadas con androgenos.

A pesar de la enorme demanda de un compuesto con este perfil, el mibefradilo se retiro del mercado en 1998 (un ano despues de su lanzamiento) debido a interacciones farmacologicas inaceptables con el CYP 3A4. Ademas, tambien se notificaron anormalidades en los ECG (es decir, prolongaciones del intervalo QT) e interaccion con el flujo de salida de digoxina mediado por MDR-1 (du Souich, Clin Pharmacol Ther 67, 249-57, 2000; Wandel, Drug Metab Dispos 2000, 28, 895-8).

Ahora se ha descubierto que en ciertas condiciones se pueden encontrar formas cristalinas del COMPUESTO (ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2- flico del acido isobutmco). Las formas cristalinas del COMPUESTO son novedosas y tienen propiedades ventajosas, especialmente en comparacion con la base libre (documento WO2008/132679) o con la sal de di-clorhidrato del COMPUESTO. Dichas ventajas pueden incluir mejores propiedades de flujo, mejor solubilidad, menor higroscopicidad, mejor reproducibilidad durante la fabricacion (por ejemplo, mejores parametros de filtracion, mejor reproducibilidad de formacion, mejor sedimentacion), morfologfa definida y/o mayor estabilidad a largo plazo.

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Descripcion de las figuras

La Figura 1 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-clorhndrico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo de Referencia S1. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta (20) indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 2-40 °, 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 3,02 ° (100%), 9,19° (88%), 9,77° (81 %), 10,81 ° (16%), 12,50° (19%), 12,94° (21 %), 13,15° (30%), 14,30° (26%), 14,62° (24%), 15,36° (66%), 16,14° (37%), 17,08° (73%), 18,12° (76%), 19,46° (45%), 19,71 °

(40 %), 20,54 ° (35 %), 20,92 ° (31 %), 21,17 ° (29 %), 21,56 ° (41 %), 22,47 ° (29 %), 22,90 ° (22 %), 23,99 °

(24 %), 25,41 ° (52 %), 26,05 ° (31 %), 26,90 ° (32 %), 27,28 ° (24 %) y 28,45 ° (37 %).

La Figura 2 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-metilsulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S2. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos

seleccionados del intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10%): 3,97° (100%), 7,21 °

(42%), 10,00° (39%), 14,09° (40%), 14,45° (29%), 15,99° (55%), 16,38° (22%), 17,16° (51 %), 18,12°

(44%), 18,34° (53%), 18,60° (19%), 19,38° (25%), 20,62° (35%), 21,02° (74%), 21,79° (18%), 22,24°

(25 %), 26,66 ° (30 %) y 27,63 ° (29 %).

La Figura 3 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-toluenosulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S3. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos

seleccionados del intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10%): 4,35° (31 %), 5,79°

(100%), 7,43° (16%), 8,62° (17%), 10,93° (19%), 11,51 ° (31 %), 13,98° (34%), 15,81 ° (26%), 18,06° (30 %), 19,00 ° (20 %), 19,39 ° (21 %), 19,84 ° (31 %), 20,30 ° (25 %) y 25,51 ° (20 %).

La Figura 4 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido sulfurico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S4. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 2-30 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 2,85 ° (100 %), 8,50 ° (21 %), 9,50 ° (28 %), 11,78° (85%), 13,26° (41 %), 13,69° (51 %), 14,19° (82%), 15,78° (40%), 16,47° (39%), 17,12° (38%), 18,91 ° (40 %), 19,48 ° (43 %), 26,77 ° (65 %) y 27,24 ° (63 %).

La Figura 5 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo del acido di-maleico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S5. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 2-40 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 5,07 ° (26 %), 8,19 ° (12 %), 10,15 ° (93 %),

15.26 ° (39 %), 17,20 ° (12 %), 17,61 ° (18 %), 20,39 ° (100 %), 20,88 ° (12 %), 22,63 ° (47 %), 23,93 ° (43 %),

24.27 ° (26 %), 24,51 ° (13 %), 24,73 ° (17 %), 25,61 ° (21 %), 29,42 ° (25 %) y 32,93 ° (16 %).

La Figura 6 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido sesqui-fumarico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S6. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10%): 5,27° (57%), 8,05° (100%), 12,93° (18%), 15,20° (10%), 15,50° (20%), 19,45° (14%), 20,31 ° (31 %), 20,61 ° (62%), 21,11 ° (27 %), 22,77 ° (15 %), 25,42 ° (11 %), 26,22 ° (11 %) y 31,27 ° (21 %).

La Figura 7 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-bromhndrico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del Ejemplo S7. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 2-40 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 3,1 ° (59 %), 6,2 ° (28 %), 9,3° (18%), 14,4° (11%), 15,6° (100%), 17,3° (33%), 18,1° (15%), 19,4° (20%), 20,0° (37%), 21,4° (14 %), 22,8 ° (16 %) y 34,8 ° (43 %).

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La Figura 8 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido sesqui-naftaleno-1,5- disulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del procedimiento general de formacion de sales. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 8-26,5 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 9,9 ° (40 %), 10,4 ° (18 %), 12,8 ° (42 %), 14,2 ° (100 %), 15,0 ° (73 %), 18,3 ° (68 %), 19 ° (54 %), 20,1 ° (39 %), 20,6 ° (48 %), 21,3 ° (83 %), 23,8 ° (13 %), 24,9 ° (14 %) y 26,2 ° (22 %).

La Figura 9 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-bencenosulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del procedimiento general de formacion de sales. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 8-26,5° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 8,1 ° (16%), 8,5° (18%), 10,9° (20%), 11,4° (16%), 12,3° (20%), 12,6° (37%), 12,9° (22%), 13,4° (55%), 14,6° (32%), 15,3° (37%), 16,1 ° (27%), 17,5° (71 %), 17,9° (37%), 19,1 ° (22%), 19,4° (25 %), 20,1 ° (46 %), 21,3 ° (91 %), 21,8 ° (46 %), 22,7 ° (100 %), 23,6 ° (18 %), 24,5 ° (20 %) y 25,5 ° (21 %).

La Figura 10 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-etanosulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del procedimiento general de formacion de sales. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 8-26,5° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 9,6° (25 %), 9,9° (21 %), 10,5° (23,3 %), 11,2° (27 %), 11,9° (17 %), 12,9° (48 %), 14,5° (53%), 15,0° (40%), 15,7° (100%), 16,5° (65%), 17,0° (40%), 17,7° (49%), 19,0° (67%), 19,7° (69%), 20,4° (68 %), 21,5 ° (55 %), 22,6 ° (67 %) y 23,3 ° (47 %).

La Figura 11 muestra el diagrama de difraccion de rayos X de polvo de la sal de acido di-naftaleno-2-sulfonico del COMPUESTO en una forma cristalina como se obtiene a partir del procedimiento general de formacion de sales. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se proporcionan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan los picos seleccionados del intervalo 8-26,5 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10 %): 9,8 ° (98 %), 11,2 ° (45 %), 11,8 ° (24 %), 13,7 ° (20 %), 14,6 ° (33 %), 15,6 ° (100 %), 16,9 ° (90 %), 19,4 ° (96 %), 22,4 ° (45 %) y 23,9 ° (23 %).

En los diagramas de difraccion de rayos X de la Figura 1 a la Figura 11 el angulo de refraccion 2-teta (20) se representa en el eje horizontal y los recuentos en el eje vertical.

Descripcion detallada de la invencion

1) La invencion se refiere a una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura, del COMPUESTO (ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil- biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco); en la que dicha sal cristalina consiste en:

• 1 equivalente del COMPUESTO;

• un componente acido que consiste en de 1 a 2 equivalentes de un acido seleccionado entre el grupo que consiste en acido bromhHdrico, acido sulfurico, acido maleico, acido fumarico, acido metanosulfonico, acido para-toluenosulfonico, acido bencenosulfonico, acido naftaleno-1,5-disulfonico, acido naftaleno-2-sulfonico y acido etanosulfonico; y

• de 0 a 5 equivalentes de agua.

2) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 1), en la que el COMPUESTO es el ester (1R,2R,4R)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco enantiomericamente enriquecido.

3) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 1), en la que el COMPUESTO es el ester (1S,2S,4S)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco enantiomericamente enriquecido.

4) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 1), en la que el COMPUESTO es el ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco en una forma enantiomericamente enriquecida que tiene una rotacion optica negativa.

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5) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 4), en la que dicha sal cristalina contiene de 0 a 3 (especialmente de 0,5 a 3, en particular de 1 a 2) equivalentes de agua.

6) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 4), en la que dicha sal cristalina contiene 0 equivalentes de agua.

7) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 6), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido bromhndrico, 1 o 2 equivalentes de acido sulfurico, 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido maleico, 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido fumarico, 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido metanosulfonico, 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido para-toluenosulfonico, 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido bencenosulfonico, 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido naftaleno-1,5-disulfonico, 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido naftaleno-2-sulfonico o 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido etanosulfonico.

En una sub-realizacion, el componente acido de dicha sal cristalina consiste preferentemente en 2 equivalentes de acido bromtndrico, 1 o 2 equivalentes de acido sulfurico, 2 equivalentes de acido maleico, 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido fumarico, 2 equivalentes de acido metanosulfonico, 2 equivalentes de acido para-toluenosulfonico o 2 equivalentes de acido bencenosulfonico. En otra sub-realizacion, el componente acido de dicha sal cristalina consiste preferentemente en 1 o 2 (especialmente 2) equivalentes de acido maleico o 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido fumarico.

8) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido bromhndrico. Una sub-realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 5) o 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido bromhndrico; y en la que dicha sal cristalina contiene aproximadamente 3 equivalentes de agua.

9) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1 o 2 equivalentes de acido sulfurico.

10) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido maleico.

11) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido fumarico.

12) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido metanosulfonico.

13) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido para-toluenosulfonico.

14) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido bencenosulfonico.

15) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de acido naftaleno-1,5-disulfonico.

16) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido naftaleno-2-sulfonico.

17) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 7), en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido etanosulfonico.

18) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura, del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 1) o 10), en la que dicha sal cristalina consiste en: •

• 1 equivalente del COMPUESTO o del COMPUESTO enantiomericamente enriquecido como se define en una

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cualquiera de las realizaciones 2) a 4);

• 2 equivalentes de acido maleico; y

• 0 equivalentes de agua.

19) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 10) o 18), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 10,15 °, 20,39 ° y 22,63 °.

20) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 10) o 18), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 5,07 °, 8,19 °, 10,15 °, 15,26 °, 17,61 °, 20,39 °, 22,63 °, 23,93 °, 24,27 ° y 25,61 °

21) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 10) o 18), que muestra esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 5.

22) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 10) o 18) a 21), que tiene un punto de fusion de aproximadamente 147 °C como se determina mediante calorimetna diferencial de barrido usando el procedimiento que se describe en el presente documento.

23) En otra realizacion, la presente invencion se refiere a una sal cristalina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 10) o 18) a 22), obtenible mediante:

1. someter a reflujo una solucion del COMPUESTO (682 g, 84% p/p, 1,05 mol) en EtOAc (6,3 l, 11 volumenes);

2. anadir acido maleico (256 g, 2,2 mol, 2,1 eq) disuelto en MeOH (630 ml, 1,1 volumenes);

3. agitar la mezcla resultante a reflujo durante 15 minutos y enfriar a 65-68 °C en el plazo de 30 minutos;

4. opcionalmente, sembrar con un 0,04 % p/p de cristales de siembra;

5. enfriar la mezcla a 40 °C en el plazo de 3 horas;

6. enfriar la mezcla a 20 °C en el plazo de 1 hora;

7. filtrar el solido en 0,2 bar (20 kPa) de nitrogeno y aclarar el solido con EtOAc (1500 ml 2,6 volumenes); y

8. secar el solido en 1 atmosfera de nitrogeno durante 24 horas.

24) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 8),

caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes

angulos de refraccion 20: 9,3 °, 15,6 ° y 17,3 °.

25) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 8) o 24),

angulos de refraccion 20: 6,2, 9,3 °, 15,6 °, 17,3 °, 18,1 °, 19,4 °, 20,0 ° y 22,8 °.

26) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 8), 24) o 25), que muestra esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 7.

27) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 11),

angulos de refraccion 20: 5,27 °, 8,05 ° y 20,61 °.

28) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 11) o 27), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 5,27 °, 8,05 °, 12,93 °, 19,45 °, 20,61 °, 21,11 °y 31,27 °.

29) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 11), 27) o 28), que presenta esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 6.

30) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 11) o 27) a 29), que tiene un punto de fusion de aproximadamente 180 °C como se determina mediante calorimetna diferencial de barrido usando el procedimiento como se describe en el presente documento.

31) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 12),

angulos de refraccion 20: 7,21 ° y 10,00 °.

32) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 12) o 31), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 3,97 °, 7,21 °, 10,00°, 15,99°, 17,16 ° y 21,02 °.

33) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 12), 31) o 32), que presenta esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 2.

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34) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 13),

angulos de refraccion 20: 5,79 ° y l9,84 °.

35) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 13) o 34),

angulos de refraccion 20: 4,35 °, 5,79 °, 10,93 °, 13,98 °, 15,81 ° y 19,84 °

36) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 13), 34) o 35), que presenta esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 3.

37) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 14),

angulos de refraccion 20: 13,4°, 17,5 ° y 21,3 °

38) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 14) o 37), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 12,6°, 13,4°, 14,7°, 17,5°, 21,3 °y 22,7°.

39) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 14), 37) o 38), que muestra esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 9.

40) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 15),

angulos de refraccion 20: 9,9 °, 14,2 ° y 21,3 °

41) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 15) o 40), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 9,9 °, 12,9 °, 14,2 °, 20,1 °, 20,6 ° y 21,3 °

42) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 15), 40) o 41), que muestra esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 8.

43) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 16),

angulos de refraccion 20: 9,8 °, 11,2 ° y 15,6 °

44) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 16) o 43), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 9,8 °, 11,2 °, 15,6 °, 22,4 ° y 23,9 °

45) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 16), 43) o 44), que muestra esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 11.

46) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 17),

angulos de refraccion 20: 11,2°, 15,7 ° y 20,4 °

47) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 17) o 46), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 11,2°, 14,5°, 15,7°, 17,7°, 20,4°y22,6°

48) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 17), 46) o 47), que presenta esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 10.

49) La invencion se relaciona ademas con una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura del COMPUESTO (ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco); en la que dicha sal cristalina consiste en:

• 1 equivalente del COMPUESTO;

• un componente acido que consiste en aproximadamente 1 equivalente de acido sulfurico; y

• aproximadamente 6 equivalentes de agua.

50) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 49), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 11,78°, 13,69 ° y 14,19 °

51) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 49) o 50), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes

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angulos de refraccion 20: 2,85 °, 8,50 °, 9,50 °, 11,78 °, 13,26 °, 13,69 ° y 14,19 °.

52) Otra realizacion se refiere a una sal cristalina del COMPUESTO de acuerdo con la realizacion 49), 50) o 51),

que presenta esencialmente el patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 4.

Para evitar cualquier duda, cada vez que una de las realizaciones anteriores, en especial una de las realizaciones 19), 20), 24), 25), 27), 28), 31), 32), 34), 35), 37), 38), 40), 41), 43), 44), 46), 47), 50) y 51), se refiera a "picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20", dicho diagrama de difraccion de rayos X de polvo se obtiene usando radiacion Cu Ka1 (A = 1,5406 A); y se debe entender que la precision de los valores 20 tal como se proporcionan en el presente documento se encuentra en el intervalo de +/- 0,1-0,2° En particular, cuando se especifique un angulo de refraccion 2-teta (20) para un pico en las realizaciones y las reivindicaciones de la invencion, el valor 20 proporcionado debe entenderse como un intervalo desde dicho valor menos 0,2 ° hasta dicho valor mas 0,2 ° (20 +/- 0,2 °); y preferentemente desde dicho valor menos 0,1 ° hasta dicho valor mas 0,1 ° (20 +/- 0,1 °).

Para evitar cualquier duda, la configuracion relativa de los estereoisomeros se representa como se indica a continuacion: ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-

biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco denomina el ester (1R,2R,4R)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H- benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco o el ester (1S,2S,4S)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco o mezclas de estos dos enantiomeros, tales como por ejemplo el racemato.

En el ambito de la presente invencion se incluyen las formas cristalinas de la sal del COMPUESTO, es decir, el ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2- flico del acido isobutmco, descrito en el presente documento; en las que el COMPUESTO puede estar en forma racemica; en una forma enantiomericamente enriquecida del enantiomero de configuracion absoluta (1R,2R,4R); en una forma enantiomericamente enriquecida del enantiomero de configuracion absoluta (1S,2S,4S); o en forma de una mezcla de estos dos enantiomeros. Se prefiere la forma enantiomericamente enriquecida que tiene una rotacion optica negativa como se determina usando el procedimiento que se describe en el presente documento.

Cuando se usa la forma plural para los compuestos, sales, composiciones farmaceuticas, enfermedades y similares, esto pretende significar tambien la forma singular de un compuesto, sal o similar.

En el contexto de la presente invencion, se entiende que la expresion "enantiomericamente enriquecido" significa especialmente que al menos el 90, preferentemente al menos el 95 y mucho mas preferentemente al menos el 99 por ciento en peso del COMPUESTO esta presente en forma de un enantiomero del COMPUESTO.

En el contexto de la presente invencion, se entiende que la expresion "esencialmente puro" significa especialmente que al menos el 90, preferentemente al menos el 95 y mucho mas preferentemente al menos el 99 por ciento en peso de los cristales de un COMPUESTO estan presentes en una forma cristalina de acuerdo con la presente invencion, especialmente en una unica forma cristalina de la presente invencion.

Cuando se define la presencia de un pico en, por ejemplo, un diagrama de difraccion de rayos X de polvo, un enfoque comun es hacerlo en terminos de la relacion S/R (S = senal, R = ruido). De acuerdo con esta definicion, cuando se establece que un pico tiene que estar presente en un diagrama de difraccion de rayos X de polvo, se entiende que el pico en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo se define como que tiene una relacion S/R (S = senal, R = ruido) mayor que x (siendo x un valor numerico mayor que 1), por lo general mayor que 2, especialmente mayor que 3.

En el contexto en el que se establece que la forma cristalina muestra esencialmente un patron de difraccion de rayos X de polvo como se representa en la Figura 1 a la Figura 11, respectivamente, el termino "esencialmente" significa que tienen que estar presentes al menos los mayores picos del diagrama representado en dichas figuras, es decir, aquellos que tienen una intensidad relativa de mas del 10 %, especialmente mas del 20 %, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama. Sin embargo, los expertos en la materia de la difraccion de rayos X de polvo reconoceran que las intensidades relativas en los diagramas de difraccion de rayos X de polvo pueden estar sometidas a fuertes variaciones de intensidad debido a efectos de orientacion preferida.

A menos que se use con respecto a las temperaturas, el termino "aproximadamente" ubicado antes de un valor numerico "X" se refiere en la presente solicitud a un intervalo que se extiende desde X menos el 10 % de X hasta X mas el 10 % de X y preferentemente a un intervalo que se extiende desde X menos el 5 % de X hasta X mas el 5 % de X. En el caso particular de las temperaturas, el termino "aproximadamente" ubicado antes de una temperatura "Y" se refiere en la presente solicitud a un intervalo que se extiende desde Y menos 10 °C hasta Y mas 10 °C y preferentemente a un intervalo que se extiende desde Y menos 5 °C hasta Y mas 5 °C. Temperatura ambiente significa una temperatura de aproximadamente 25 °C. Cuando en la presente solicitud se usa el termino n equivalente o equivalentes, en el que n es un numero, se significa y pertenece al ambito de la presente solicitud, que n se refiere aproximadamente al numero n, preferentemente n se refiere al numero n de manera exacta.

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Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51) pueden usarse como medicamentos, por ejemplo, en la forma de composiciones farmaceuticas para la administracion enterica o parenteral.

La produccion de las composiciones farmaceuticas puede efectuarse de una manera que sera familiar para cualquier experto en la materia (vease por ejemplo Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21a edicion (2005), parte 5, "Pharmaceutical Manufacturing" [publicado por Lippincott Williams & Wilkins]) convirtiendo las formas cristalinas de la presente invencion, opcionalmente en combinacion con otras substancias de valor terapeutico, en una forma de administracion galenica junto con vehuculos solidos o lfquidos adecuados no toxicos, farmaceuticamente aceptables e inertes y, si se desea, adyuvantes farmaceuticos habituales.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51) pueden usarse como un unico componente o como mezclas con otras formas cristalinas o la forma amorfa del COMPUESTO.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51) son utiles en la preparacion de un medicamento y/o son adecuadas

• para el tratamiento o la prevencion de la angina estable cronica, la hipertension, la isquemia (renal y cardfaca), las arritmias cardfacas incluyendo la fibrilacion auricular, la hipertrofia cardfaca o la insuficiencia cardfaca congestiva.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51) son adicionalmente utiles en la preparacion de un medicamento y/o son adecuadas para los siguientes grupos de enfermedades solas o en cualquier combinacion:

• para el tratamiento de enfermedades renales, la diabetes y sus complicaciones, el hiperaldosteronismo, la epilepsia, el dolor neuropatico o el cancer en seres humanos y otros mairnferos;

• para su uso como agente antifibrilante, agente antiasmatico, agente antiateroesclerotico, aditivo para las soluciones cardioplegicas para las derivaciones pulmonares, complemento a la terapia trombolftica, como agente antiagregante o como agente para el tratamiento de la angina inestable;

• para el tratamiento o la profilaxis de la hipertension, especialmente la hipertension portal, la hipertension secundaria al tratamiento con eritropoyetina y la hipertension por renina baja;

• para su uso en enfermedades hipoxicas o isquemicas o como agente antiisquemico para el tratamiento de, por ejemplo, la isquemia y la reperfusion cardfaca, renal y cerebral (por ejemplo que ocurren despues de la revascularizacion quirurgica cardiopulmonar), el vasoespasmo coronario y cerebral y similares, la terapia para las enfermedades vasculares perifericas (por ejemplo la enfermedad de Raynaud, la claudicacion intermitente, la enfermedad de Takayashu), la enfermedad drepanocftica incluyendo el inicio y/o la evolucion de la crisis dolorosa;

• para el tratamiento o la profilaxis de trastornos relacionados con la funcion de las celulas renales, glomerulares y mesangiales, incluyendo la insuficiencia renal aguda y cronica, la nefropatfa diabetica, la nefropatfa inducida por hipertension, la lesion glomerular, el dano renal relacionado con la edad o la dialisis, la nefroesclerosis, la nefrotoxicidad relacionada con agentes de formacion de imagenes y contraste y con ciclosporina, la isquemia renal, el reflujo vesicoureteral primario o la glomeruloesclerosis;

• para su uso en la terapia del infarto de miocardio, en el tratamiento de la hipertrofia cardfaca, la hipertension pulmonar primaria y secundaria, la terapia para la insuficiencia cardfaca congestiva incluyendo la inhibicion de la fibrosis, la inhibicion de la dilatacion del ventnculo izquierdo, el remodelamiento y la disfuncion o la reestenosis posterior a una angioplastia o a la implantacion de una endoprotesis vascular;

• para el tratamiento de la endotoxemia o el choque endotoxico o el choque hemorragico;

• para el tratamiento de la disfuncion sexual tanto en hombres (disfuncion erectil por ejemplo debida a la diabetes mellitus, a la lesion de la medula espinal, a la prostatectom^a radical, a la etiologfa psicogenica y otras causas) como en mujeres mediante la mejora del flujo sangumeo a los genitales, especialmente al cuerpo cavernoso;

• para la prevencion y/o la reduccion del cancer o del dano final de organos asociado a la proliferacion celular;

• para la terapia de trastornos metabolicos o de enfermedades inflamatorias cronicas, de la diabetes mellitus insulinodependiente y no insulinodependiente y de sus complicaciones (por ejemplo, la neuropatfa, la retinopatfa), el hiperaldosteronismo, el remodelamiento oseo, la psoriasis, la artritis, la artritis reumatoide, la osteoartritis, la sarcoidosis o la dermatitis eccematosa;

• para el tratamiento de hepatotoxicidad y la muerte subita, la lesion y la enfermedad temprana y avanzada del hugado incluyendo complicaciones derivadas (por ejemplo hepatotoxicidad, fibrosis, cirrosis), consecuencias daninas de tumores tales como la hipertension que es resultado del hemangiopericitoma, enfermedades espasticas del tracto urinario y/o de la vejiga, el smdrome hepatorrenal, enfermedades inmunologicas que involucran vasculitis tales como el lupus, la esclerosis sistemica, la crioglobulinemia mixta, la fibrosis asociada a la disfuncion renal y la hepatotoxicidad;

• para su uso en enfermedades gastrointestinales tales como la colitis ulcerosa, la enfermedad de Crohn, el dano de la mucosa gastrica, la ulcera, la enfermedad inflamatoria intestinal y la enfermedad isquemica intestinal, enfermedades de la vesfcula biliar o de los conductos biliares tales como la colangitis, la pancreatitis, la

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regulacion del crecimiento celular, la hipertrofia prostatica benigna o el trasplante, o para su uso como agente antidiarreico;

• para el tratamiento de trastornos que involucran la broncoconstriccion o trastornos de inflamacion cronica o aguda tales como la enfermedad pulmonar obstructiva y smdrome disneico del adulto;

• para el alivio del dolor incluyendo el dolor neuropatico, el dolor periferico y el dolor asociado al cancer tal como el dolor asociado al cancer de la prostata o al cancer de huesos;

• para el tratamiento de trastornos vasculares del sistema nervioso central tales como el ictus, los ataques isquemicos transitorios, la migrana y la hemorragia subaracnoidea, trastornos conductuales del sistema nervioso central, el tratamiento de la demencia incluyendo la demencia de Alzheimer, la demencia senil y la demencia vascular, la epilepsia o los trastornos del sueno; o

• para la reduccion de la morbidez y/o la mortalidad generales como resultado de los beneficios anteriores.

La presente invencion tambien se refiere a un procedimiento para la prevencion o el tratamiento de una enfermedad o trastorno mencionados en el presente documento que comprende la administracion a un sujeto de una cantidad farmaceuticamente activa de una sal cristalina, especialmente de una sal cristalina esencialmente pura, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51).

Ademas, las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras, del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51) tambien pueden usarse de manera favorable en combinacion con uno o mas agentes seleccionados entre agentes que disminuyen los lfpidos tales como estatinas, anticoagulantes tales como cumarinas, agentes antitromboticos tales como clopidogrel, p-bloqueantes y otros agentes cardioprotectores.

La presente invencion tambien se refiere a un procedimiento para la preparacion del COMPUESTO en una forma enriquecida racemica y enantiomericamente y a procedimientos para la preparacion y la caracterizacion de sales cristalinas del COMPUESTO de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1) a 51), dichos procedimientos se describen en la parte experimental a continuacion.

Parte experimental

Los siguientes Ejemplos ilustran la invencion en mayor detalle. Las temperaturas se proporcionan en grados Celsius. Si no se establece de otra manera, los porcentajes se proporcionan en peso.

Abreviaturas como se usan en el presente documento y en la descripcion anterior:

ac.: acuoso

aprox.: aproximadamente

CC: cromatograffa en columna sobre gel de sflice

DCM: diclorometano

DIPA: diisopropil-amina

DIPEA: diisopropil-etilamina, base de Hunig, etil-diisopropilamina

DMAP: 4-dimetilamino-piridina

DMF: dimetilformamida

CDB: calorimetna diferencial de barrido

eq.: equivalente o equivalentes

Et2O: dietil eter

EtOA: acetato de etilo

EtOH: etanol

Fig.: figura

h: hora u horas

RMN-1H: resonancia magnetica nuclear de hidrogeno-1

Hept: heptano

Hex: hexano

HOBt: 1-hidroxibenzotriazol

MEK: 2-butanona

MeCN: acetonitrilo

MeOH: metanol

NEta: trietilamina

Pd/C: paladio sobre carbono

2-PrOH: isopropanol

Red-Al: hidruro de sodio-bis(2-metoxietoxi)aluminio

HR: humedad relativa

ta: temperatura ambiente

rpm: revoluciones por minuto

sat.: saturado

TBME: ferc-butil metil eter

terc.: terciario

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THF tetrahidrofurano

TsOH acido para (p)-toluenosulfonico

DRXP difraccion de rayos X de polvo

Analisis de difraccion de rayos X de polvo (DRXP):

Procedimiento 1: Se recogieron patrones de difraccion de rayos X de polvo en un difractometro de rayos X Bruker D8 Advance equipado con un detector LynxEye con una ventana de 3° operado con radiacion Cu Ka en geometna de reflexion (Bragg-Brentano). Normalmente, el tubo de rayos X se uso a 40 kV/40 mA. Se aplicaron un tamano de etapa de 0,02 ° (20) y un tiempo de etapa de 37 segundos para un intervalo de exploracion de 2 - 50 ° en 2-teta (20). La rendija de divergencia se fijo a V12 o V20 variable, dependiendo de la profundidad del soporte de la muestra. El polvo (aproximadamente 15 mg para una profundidad de 0,1 mm y aproximadamente 80 mg para una profundidad de 1 mm) se presiono ligeramente en un soporte de muestras de un unico cristal de silicio con una profundidad de 0,1 mm o de 1 mm y las muestras se rotaron en su propio plano durante la medicion. Se cubrieron muestras seleccionadas con papel metalizado Kapton. Los datos de la difraccion se presentaron usando Cu Ka1 (A = 1,5406 A), despues que el componente Ka2 se hubiera separado usando el software de evaluacion de instrumentos (EVA). Ademas, la senal de fondo se retiro usando el software de evaluacion de instrumentos (EVA), para las muestras que estaban cubiertas con Kapton durante la obtencion de los datos. La precision de los valores 20 como se proporcionan en el presente documento estaba en el intervalo de +/- 0,1-0,2 ° como en general es el caso para los patrones de difraccion de rayos X de polvo registrados convencionalmente.

Procedimiento 2: Los patrones de difraccion de rayos X de polvo se recogieron en un difractometro de rayos X Bruker D8 HTS equipado con un detector GADDS HiStar operado con radiacion Cu Ka en geometna de reflexion. Normalmente, el tubo de rayos X se uso a 40 kV/40 mA. El rendimiento del instrumento se comprobo usando una norma Corundum certificada (NIST 1976). Las muestras ejecutadas en condiciones ambientales se prepararon como muestras de ensayo de placa plana usando el polvo tal como se recibio. Se presionaron suavemente aproximadamente 3 mg de la muestra en un portaobjetos de microscopfa. Los datos se recogieron en un intervalo angular de 7,6 ° a 26,7 ° 20 en 1 marco con un tiempo de obtencion de 180 segundos. Los datos de difraccion se presentaron sin la separacion del componente Ka2 y la senal de fondo se retiro usando el software de evaluacion de instrumentos (EVA). La precision de los valores 20 como se proporcionan en el presente documento estaba en el intervalo de +/- 0,1-0,2 ° como en general es el caso para los patrones de difraccion de rayos X de polvo registrados convencionalmente.

Los puntos de fusion se midieron en un aparato Buchi B-540 y no se corrigieron; o se midieron, si se establece explfcitamente, mediante calorimetna diferencial de barrido (CDB):

Los datos de CDB se recogieron en un Perkin Elmer DCS7. Normalmente, se calentaron 2-3 mg de muestra, previamente almacenada abierta en nitrogeno seco durante 16 horas, en un recipiente de oro cerrado a 20 °C min'1 de -20 °C a 200 °C. Los puntos de fusion se presentan como temperaturas maximas.

Las rotaciones opticas se midieron en un aparato Jasco P-1030 a temperatura ambiente usando la lmea D de sodio (A = 589 nm).

Las RMN-1H se midieron en un Bruker Avance 400 (400 MHz); los desplazamientos qmmicos se proporcionan en ppm con respecto al disolvente empleado; las multiplicidades: s = singulete, d = doblete, t = triplete, c = cuarteto, q = quintuplete, sex = sextuplete, sept = septuplete, m = multiplete, dm = doblete de multiplete, a = ancho, las constantes de acoplamiento se proporcionan en Hz). Los ensayos de RMN se midieron usando dimetileter de hidroquinona como patron interno.

La higroscopicidad se evaluo mediante mediciones de sorcion de vapor exploradas gravimetricamente en un SPS11- 100m (Projekt Messtechnik, Ulm, Alemania) (la tasa de exploracion es un cambio del 5 % en la humedad relativa por hora, ciclo que se iniciaba a una humedad relativa del 50 % seguido de una exploracion a sequedad y una exploracion hacia arriba hasta una humedad relativa del 95 %). La clasificacion se realizo de acuerdo con la Gma Tecnica de la Farmacopea Europea (edicion de 1999) (por ejemplo, ligeramente higroscopico: el aumento en masa es menor del 2 % y mayor o igual del 0,2 % masa/masa). Se considero el cambio de masa en la exploracion hacia arriba entre una humedad relativa del 40 % y una humedad relativa del 80 %.

Las CL-EM se realizaron usando las siguientes condiciones: Finnigan Navigator con bomba binaria HP 1100 y DAD (detector de diodos en serie), columna: 4,6 x 50 mm, Zorbax SB-AQ, 5 pm, 120 A, gradiente: 5-95 % de acetonitrilo en agua, 1 min, con un 0,04 % de acido trifluoroacetico, caudal: 4,5 ml/min, el tR se proporciona en minutos.

Los compuestos se purificaron mediante HPLC preparativa (columna: X-terra RP18, 50x19 mm, 5 pm, gradiente: 1095 % de acetonitrilo en agua que contema un 0,5 % de acido formico) o mediante cromatograffa en columna sobre gel de sflice. Los racematos pueden separarse en sus enantiomeros mediante HPLC preparativa (condiciones preferidas: Daicel, ChiralCel OD 20 x 250 mm, 10 pm, 4 % de etanol en hexano, caudal 10-20 ml/min).

I. Preparacion y caracterizacion del COMPUESTO

La preparacion del COMPUESTO se conoce a partir del documento WO2008/132679:

Preparacion de intermedios

Procedimientos generales para la preparacion de intermedios clave K:

5 Los intermedios clave K1A y K2A que son derivados de biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ilo o biciclo[3,2.2]non-8-en-6-ilo se obtuvieron como una mezcla entre el racemato principal que tiene la configuracion relativa (R*,R*,R*) (es decir, la union -(CH2)2- del resto ciclohexeno esta en cis con respecto al grupo -OR2 que es hidroxi) y el racemato secundario que tiene una configuracion relativa (R*,S*,R*) (es decir, la union -(CH2)2- del resto ciclohexano esta en trans con respecto al grupo -OR2 que es hidroxi). Los racematos principal y secundario pueden separarse como se describe 10 para el intermedio K1A en el procedimiento A1.5. El racemato principal se aislo y se uso en la preparacion de los ejemplos a continuacion.

K1A: Ester ferc-butflico del acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico

K1A.1 (Procedimiento A1.1): rac-(1R*4R*)-Biciclo[2.2.2]octan-2,5-diona

Se mezclaron 25 ml de 2-(trimetilsililoxi)-1,3-ciclohexadieno y 13 ml de a-acetoxiacrilonitrilo y se calentaron a 150 °C 15 en un vaso cerrado durante 22 h. El aceite viscoso de color naranja oscuro obtenido se disolvio en 200 ml de MeOH. Despues de la adicion gota a gota de una solucion de 2.2 g de metoxido de sodio en 150 ml de MeOH la mezcla de reaccion se agito durante 3 h a temperatura ambiente, se vertio en hielo/agua y se extrajo con DCM. Las fases organicas se concentraron al vacfo y el residuo en bruto se purifico mediante CC con EtOAc-Hept (1:2) para proporcionar 7.9 g de rac-(1R*,4R*)-biciclo[2.2.2]octan-2,5-diona.

20 CL-EM: tR = 0,44 min.

K1A.2 (Procedimiento A1.2): rac-(1R*.4R*)-Espiro[biciclo[2.2.21octan-2.2'-[1.31dioxolan1-5-ona

A 4,0 g de rac-(1R*,4R*)-biciclo[2.2.2]octan-2,5-diona (intermedio K1A.1), disueltos en 120 ml de tolueno, se les anadieron 1,7 ml de etilenglicol y 0,27 g de TsOH y la solucion se calento con agitacion vigorosa a reflujo durante 3,5 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se inactivo con NaHCO3 acuoso saturado, se extrajo 25 con Et2O y la fase organica se evaporo. El producto en bruto se purifico mediante CC con Hex-EtOAc (7:3) para proporcionar 2,41 g de rac-(1R*,4R*)-espiro[biciclo[2.2.2]octan-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-ona en forma de un aceite de color amarillo.

CL-EM: tR = 0,64 min.; [M+H+CHaCN]+: 224,35.

K1A.3 (Procedimiento A1.3): Mezcla de rac-(7R*8R*10R*)- y rac-(7R*.8S*.10R*)-7.10-(1.2-etilen)-8-fenil-1.4-dioxa- 30 espiro[4.51decan-8-ol

A una solucion de 2,41 g de rac-(1R*,4R*)-espiro[biciclo[2.2.2]octan-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-ona (intermedio K1A.2) en 80 ml de Et2O, se le anadieron gota a gota 14,5 ml de solucion de bromuro de fenilmagnesio (1 M en Et2O) durante 10 min. La mezcla de reaccion se agito durante 4h a temperatura ambiente. Despues, la mezcla se inactivo cuidadosamente con hielo, se anadieron 8 ml de HCl 2 N y las fases se separaron. La fase organica se evaporo y el 35 producto en bruto se purifico mediante CC con Hept-EtOAC (7:3) para proporcionar 0,37 g de 7,10-(1,2-etilen)-8- fenil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decan-8-ol en forma de un aceite incoloro. (La separacion de los diastereomeros mediante CC es posible pero no se realizo en este caso).

CL-EM: tR = 0,84 min.; [M-H2O+H]+: 243,34.

K1A.4 (Procedimiento A1.4): rac-(1R*.4R*)-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2-ona

40 A una solucion de 0,54 g de 7,10-(1,2-etilen)-8-fenil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decan-8-ol (intermedio K1A.3) en 20 ml se le anadieron acetona, 200 mg de TsOH y luego la mezcla se agito durante 2 dfas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se inactivo con NaHCOa acuoso saturado, se extrajo con EtOAC y la fase organica se evaporo. El producto en bruto se purifico mediante CC con Hept-EtOAC (7:3) para proporcionar 0,34 g de rac-(1R*,4R*)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ona en forma de un aceite incoloro.

45 CL-EM: tR = 0,93 min.; [M+H+CH3CN]+: 240,11.

K1A.5 (Procedimiento A1.5): Ester terc-butilico del acido rac-(1R*.2R*.4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2- il)-acetico y ester terc-butilico del acido rac-(1R*.2S*.4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2-il)-acetico

A una solucion de 0,51 ml de DIPA en 0,5 ml de THF se le anadieron gota a gota 2,2 ml de n-butillitio (1,6 M en Hex) a -20 °C. Despues de 10 min, se anadieron 0,5 ml de tolueno y la solucion se agito durante 30 min. La mezcla se 50 enfrio a -50 °C, se anadieron 0,73 ml de acetato de terc-butilo y se mantuvo la agitacion durante 1 h a -50 °C. Despues se anadieron 0,32 g de rac-(1R*,4R*)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ona (intermedio K1A.4) disueltos en 1 ml de THF y la solucion se agito a -50 a -20 °C durante 2,5 h. La mezcla de reaccion se vertio en hielo/HCl acuoso, la fase organica se separo, se lavo y se evaporo. El producto de reaccion en bruto se purifico mediante CC con

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Hept-EtOAc (9:1) para proporcionar 0,30 g del racemato principal, ester ferc-butilico del acido rac-(1R*,2R*,4R*)-2- hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico, en forma de un solido de color blanco y 0,07 g del racemato secundario, ester ferc-butilico del acido rac-(1R*,2S*,4R*)-2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico, en forma de un aceite incoloro.

CL-EM (racemato principal): tR = 1,06 min.; [M-(CHa)3-H2O+H]+: 241,11.

CL-EM (racemato secundario): tR = 1,05 min.; [M+H]+: 315,18.

K1A.6: Ester ferc-butilico del acido (1S.2S.4S)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2-il)-acetico y ester ferc-butilico del acido (1R.2R.4R)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2-il)-acetico

Se separo el ester ferc-butilico del acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico en sus enantiomeros respectivos usando HPLC preparativa quiral (columna: Daicel ChiralPak AD-H, 20 x 250 mm, 5 pm; Hex/ EtOH 95:5, caudal 16 ml/min)

HPLC analtiica quiral (Daicel ChiralPak AD-H, 4,6 x 250 mm, 5 pm; Hex/ EtOH 95:5, flujo 0,8 ml/min):

Ester ferc-butilico del acido (1R,2R,4R)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico: Enantiomero A: tR = 6,70 min.

Ester ferc-butilico del acido (1S,2S,4S)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico: Enantiomero B: tR = 7,93 min.

BB. [3-(4,7-Dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amina

BB.1 3,6-Dimetoxi-bencen-1,2-diamina

Se sintetizo 3,6-dimetoxi-bencen-1,2-diamina mediante la disolucion de 6,0 g de 1,4-dimetoxi-2,3-dinitro-benceno (Eur. J. Org. Chem. 2006, 2786-2794) en 220 ml de EtOH, evacuando 3 veces con N2 y anadiendo 600 mg de Pd/C al 10 % en peso. La reaccion se agito en una atmosfera de H2 (globo). Se anadieron otros 300 mg de Pd/C al 10 % en peso despues de 2 dfas y la mezcla se agito durante otras 24 h. La filtracion a traves de un lecho de celite y el lavado con EtOH y EtOAc proporcionaron, despues de la concentracion al vado, 4,3 g de 3,6-dimetoxi-bencen-1,2- diamina en forma de un solido de color negro.

CL-EM: tR = 0,48 min.; [M+H]+: 169,09.

BB.2 Ester bendlico del acido [3-(2-amino-3,6-dimetoxi-fenilcarbamoil)-propil]-metil-carbamico

A una solucion de 3,1 g de acido 4-(benciloxicarbonil-metil-amino)-butirico en 80 ml de DCM se le anadieron 6,5 ml de DIPEA, 1,8 g de HOBt, 2,6 g de EdC y 154 mg de DMAP. Despues de agitar durante 10 min, se anadieron 2,1 g de 3,6-dimetoxi-bencen-1,2-diamina, disueltos en 20 ml de DCM y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante la noche. La reaccion se inactivo con NaHCO3 acuoso saturado, las fases se separaron y la fase organica se lavo con solucion salina, se seco usando MgSO4 y se concentro al vado para proporcionar el compuesto del titulo en bruto en forma de un aceite de color negro.

CL-EM: tR = 0,88 min.; [M+H]+: 402,06.

BB.3 Ester bencilico del acido [3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-carbamico

A una mezcla del ester bendlico del acido 3-(2-amino-3,6-dimetoxi-fenilcarbamoil)-propil]-metil-carbamico en bruto anterior en 16 ml de tolueno, se le anadieron 4 ml de DMF y 1,9 g de TsOH y la reaccion se calento a 150 °C durante 2 horas en el microondas. Se anadio NaHCO3 acuoso saturado y las fases se separaron. La fase organica se lavo con solucion salina, se seco usando MgSO4, se concentro al vado, se filtro usando un lecho corto de gel de sflice con EtOAc y se concentro de nuevo. La purificacion usando CC con EtOAc proporciono 2,7 g de ester bendlico del acido 3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-carbamico en forma de una resina de color marron.

CL-EM: tR = 0,85 min.; [M+H]+: 384,62.

BB.4 [3-(4,7-Dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amina

Una solucion de 2,6 g de ester bendlico del acido 3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-carbamico en 60 ml de EtOH se evacuo 3 veces con N2 antes de que se anadieran 260 mg de Pd/C al 10 % en peso. La mezcla de reaccion despues se agito en una atmosfera de H2 (globo) durante 5 h a temperatura ambiente. La filtracion usando un lecho de celite y el lavado con EtOH proporcionaron despues de la concentracion al vado 1,7 g de 3-(4,7- dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amina en forma de una espuma de color marron.

CL-EM: tR = 0,57 min.; [M+H]+: 250,13.

Preparacion del COMPUESTO

Ejemplo de referencia 1A: Ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ilico del acido rac-isobutirico

1.1 (Procedimiento P1.1): acido rac-(1R*2R*4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico

5

10

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20

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40

45

50

55

A una solucion de 4,0 g de ester ferc-butflico del acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)- acetico en 25 ml de EtOH se le anadieron 2,1 g de LiOH.H2O, 8 ml de H2O y 22 ml de MeOH. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 dfas y despues se concentro. El residuo se repartio entre agua y Et2O. La fase acuosa se separo y se acidifico con HCl 1 N dando como resultado la formacion de un solido de color blanco. El solido se filtro, se lavo con 5 ml de HCl acuoso y se seco al vado para obtener 3,2 g de acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2- hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico en forma de un solido de color blanco.

CL-EM: tR = 0,86 min.; [M-H2O+H]+: 241,28.

1.2 (Procedimiento P1.2): rac-(1R*2R*4R*)-N-[3-(4.7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil1-2-(2-hidroxi-5-fenil- biciclo[2.2.21oct-5-en-2-il)-N-metil-acetamida

A una solucion de 280 mg de acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico en 7 ml de THF se le anadieron 0,58 ml de DIPEA, 175 mg de HOBt y 250 mg de EDC a temperatura ambiente. Despues de agitar durante 10 min, se anadieron 270 mg de 3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amina y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reaccion se inactivo con NaHCO3 acuoso saturado, las fases se separaron y la fase organica se lavo con agua y solucion salina, se seco usando MgSO4 y se concentro al vado. La purificacion mediante CC usando EtOAc-MeOH (de 5:1 a 2:1) proporciono 475 mg de rac-(1R*,2R*,4R*)-N-[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-2-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5- en-2-il)-N-metil-acetamida en forma de una espuma de color blanco.

CL-EM: tR = 0,91 min.; [M+H]+: 490,06.

1.3 (Procedimiento P1.3): rac-(1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil1-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2-ol

A una solucion de 310 mg de rac-(1R*,2R*,4R*)-N-[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-2-(2-hidroxi-5-fenil- biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-N-metil-acetamida en 8 ml de tolueno se le anadieron gota a gota 0,77 ml de una solucion de rojo de aluminio (al 65% en tolueno) a 0 °C. Despues de agitar durante 10 min a 0 °C, se retiro el bano de enfriamiento y se mantuvo la agitacion durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se vertio cuidadosamente sobre una mezcla de NaOH 1 M/hielo y se agito durante 10 min. La fase acuosa se extrajo con tolueno, las fases organicas combinadas se lavaron con solucion salina, se secaron usando MgSO4 y se concentraron al vado. La purificacion mediante CC usando EtOAc-MeOH (2:1) proporciono 230 mg de rac- (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ol en forma de una espuma de color blanco.

CL-EM: tR = 0,79 min.; [M+H]+: 476,13.

1.4: Ester 1R*.2R*.4R*)-2-(2-{[3-(4.7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil1-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.21oct- 5-en-2-ilico del acido rac-isobutirico

A una solucion de 199 mg de rac-(1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}- etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ol en 4 ml de DCM se le anadieron 0,2 ml de NEt3 y 0,1 ml de cloruro de isobutirilo a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito durante la noche permitiendo que la temperatura alcanzara lentamente la temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con NaHCO3 acuoso saturado, las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo nuevamente con DCM. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion salina, se secaron usando MgSO4 y se concentraron al vado. El residuo se volvio a disolver en 3 ml de EtOAc, se anadieron gel de sflice y 1,5 ml de MeOH y la mezcla se agito vigorosamente durante 7 dfas. La mezcla se filtro, se lavo cuidadosamente con EtOAc-MeOH (2:1) y se evaporo. La purificacion mediante CC usando EtOAc-MeOH (de 5:1 a 3:1 + 0,1% de NEt3) proporciono 186 mg de ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)- propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido rac-isobutmco en forma de una espuma de color beige.

CL-EM: tR = 0,90 min.; [M+H]+: 546,23.

Ejemplo de referencia 2A: Ester (1S,2S,4S)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxMH-benzoimidazol-2-M)-propM]-metM-ammo}- etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ilico del acido isobutfrico

2.1: Acido (1S,2S,4S)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico

Preparado de acuerdo con el procedimiento P1.1 en el Ejemplo de Referencia 1A usando el enantiomero B del ester ferc-butflico del acido rac-(1R*,2R*,4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico (ver K1A.6).

CL-EM: tR = 0,91 min.; [M-H2O+H]+: 241,10.

2.2: (1S.2S.4S)-2-(2-{[3-(4.7-Dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil1-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.21oct-5-en-2- o]

Preparado de acuerdo con los procedimientos P1.2 a P1.3 en el Ejemplo de Referencia 1A usando el acido (2- hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico anterior.

CL-EM: tR = 0,78 min.; [M+H]+: 476,09.

2.3: Ester (1S.2S.4S)-2-(2-(r3-(4.7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propill-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclor2.2.2loct-5- en-2-ilico del acido isobutirico

Preparado de acuerdo con el procedimiento P1.4 en el Ejemplo de Referencia 1A usando el 2-(2-{[3-(4.7-dimetoxi- 1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ol anterior.

5 CL-EM: tR = 0.89 min.; [M+H]+: 546,19.

Ejemplo de Referencia 3A: Ester (1R,2R,4R)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxMH-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-nico del acido isobutirico

3.1: Acido (1R.2R.4R)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2loct-5-en-2-il)-acetico

Preparado de acuerdo con el procedimiento P1.1 en el Ejemplo de Referencia 1 usando el enantiomero A del ester 10 ferc-butilico del acido rac-(1R*.2R*.4R*)-(2-hidroxi-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico (vease K1A.6).

CL-EM: tR = 0.91 min.; [M-H2O+H]+: 241.16.

3.2: (1R.2R.4R)-2-(2-{[3-(4.7-Dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propill-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2loct-5-en-2- oj

Preparado de acuerdo con los procedimientos P1.2 a P1.3 en el Ejemplo de Referencia 1 usando el acido (2-hidroxi- 15 5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-il)-acetico anterior.

CL-EM: tR = 0.79 min.; [M+H]+: 476.09.

3.3: Ester (1R.2R.4R)-2-(2-{[3-(4.7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propill-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2loct- 5-en-2-ilico del acido isobutirico

Preparado de acuerdo con el procedimiento P1.4 en el Ejemplo de Referencia 1A usando el 2-(2-{[3-(4.7-dimetoxi- 20 1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2-ol anterior.

CL-EM: tR = 0.89 min.; [M+H]+: 546.11.

Rotacion optica: alfa D (c = 10 mg/ml EtOH) = -21.5 °. RMN 1H (MeOD. 400 MHz) 6 7.39-7.37 (m. 2H). 7.30 (t. J =

6.4 Hz. 2H). 7.24-7.20 (m. 1H). 6.60 (s. 2 H). 6.43 (d a. J = 7.6 Hz. 1H). 3.91 (s. 6H). 3.27-3.23 (m. 1H). 3.18-3.15 (m. 1H). 2.87 (t. J = 7.6 Hz. 2H). 2.54 (sept. J = 7.0 Hz. 1H). 2.47-2.37 (m. 4H). 2.21 (s. 3H). 2.19-2.12 (m. 1H). 2.01-1.92 25 (m. 5H). 1.75-1.65 (m. 2H). 1.48-1.38 (m. 1H). 1.27-1.19 (m. 1H). 1.16 (d. J = 7.0 Hz. 6H).

Ensayos biologicos Ensayo in vitro del canal L

La actividad antagonista del canal L (valores de CI50) de los Ejemplos de Referencia 1A. 2A y 3A se determino de acuerdo con el siguiente procedimiento experimental.

30 Se cultivaron celulas de rinon de embrion humano (HEK293) que expresaban el canal Cav1.2 humano ademas de las sub-unidades auxiliares p-2a y a26-1. en medio de cultivo (DMEM que contema suero bovino fetal al 10% inactivado mediante calor (FCS). penicilina 100 U/ml. estreptomicina 100 pg/ml. G418 100 pg/ml. zeocina 40 pg/ml y higromicina 100pg/ml). Las celulas se sembraron a 20.000 celulas/pocillo en placas esteriles negras con fondo transparente de 384 pocillos (recubiertas con poli-L-lisina. Becton Dickinson). Las placas sembradas se incubaron 35 durante la noche a 37 °C en CO2 al 5 %. La solucion de KCl se preparo como una solucion madre 80 mM en tampon de ensayo (HBSS que contema BSA 0.1 %. HEPES 20 mM. NaHCo3 0.375 g/l. pH ajustado a 7.4 con NaOH) para su uso en el ensayo a una concentracion final de 20 mM. Los antagonistas se prepararon como soluciones madre 10 mM en DMSO. despues se diluyeron en placas de 384 pocillos primero en DMSO. despues en tampon de ensayo para obtener soluciones madre 3x. El dfa del ensayo. se anadieron 25 pl del tampon de tincion (HBSS que contema 40 HEPES 20 mM. NaHCO3 0.375 g/l e indicador fluorescente de calcio fluo-4 AM 3 pM (solucion madre 1 mM en DMSO. que contema Pluronic al 10 %) a cada pocillo de la placa sembrada. Las placas de celulas de 384 pocillos se incubaron durante 60 minutos a 37 °C en CO2 al 5 % seguido del lavado con 50 pl dos veces por pocillo usando tampon de ensayo dejando 50 pl/pocillo de este tampon para el equilibrado a temperatura ambiente (30-60 min). Dentro del lector de placas de formacion de imagenes fluorescentes (FLIPR. Molecular Devices). se anadieron 45 antagonistas a la placa en un volumen de 25 pl/pocillo. se incubaron durante 3 min y finalmente se anadieron 25 pl/pocillo de solucion de KCl para la despolarizacion celular. La fluorescencia se midio para cada pocillo a intervalos de 2 segundos durante 8 minutos y el area bajo la curva de cada pico fluorescente se comparo con el area del pico de fluorescencia inducido por KCl 20 mM con vehfculo en lugar de antagonista. Para cada antagonista. se determino el valor de CI50 (la concentracion (en nM) de compuesto necesaria para inhibir el 50 % de la respuesta de 50 fluorescencia inducida por KCl) hasta 10 pM.

Se midieron los valores de CI50 de los compuestos de los ejemplos de referencia 1A. 2A y 3A y estaban en el intervalo de 156 a 439 nM.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Ensayo in vitro del canal T:

Se determino la actividad antagonista del canal T (valores de CI50) de los Ejemplos de Referencia 1A, 2A y 3A de acuerdo con el siguiente procedimiento experimental y los datos se muestran en la Tabla 1.

Se cultivaron celulas de rinon de embrion humano (HEK293) que expresaban el canal Cav3.1 Cav3.2 o Cav3.3 humano, respectivamente, en medio de cultivo (DMEM que contema suero bovino fetal al 10 % inactivado mediante calor (FCS), penicilina 100U/ml, estreptomicina 100|jg/ml, G418 100|jg/ml, zeocina 40 jg/ml y higromicina 100 jg/ml). Las celulas se sembraron a 20,000 celulas/pocillo en placas esteriles negras con fondo transparente de 384 pocillos (recubiertas con poli-L-lisina, Becton Dickinson). Las placas sembradas se incubaron durante la noche a 37 °C en CO2 al 5%. La solucion de Ca2+ se preparo como una solucion madre 100 mM en cloruro de tetraetilamonio (cloruro de TEA) 100 mM, HEPES 50 mM, CaCl2 2,5 mM, KCl 5 mM, MgCh 1 mM, pH ajustado a 7,2 con hidroxido de TEA, para su uso en el ensayo a una concentracion final de 10 mM. Los antagonistas se prepararon como soluciones madre 10 mM en DMSO y posteriormente se diluyeron en placas de 384 pocillos, primero en DMSO, despues en cloruro de TEA 100 mM, hEpES 50 mM, CaCl2 2,5 mM, KCl 5 mM, MgCh 1 mM, pH ajustado a 7,2 con hidroxido de TEA, para obtener soluciones madre 9x. El dfa del ensayo, se anadieron a cada pocillo de la placa sembrada 25 jl de tampon de tincion (HBSS que contema HEPES 20 mM, NaHCO3 0,375 g/l e indicador fluorescente de calcio fluo-4 AM 3 jM (solucion madre 1 mM en DMSO, que contema Pluronic al 10 %). Las placas de celulas de 384 pocillos se incubaron durante 60 min a 37 °C en CO2 al 5 % seguido de lavado con 50 jl 2 veces por pocillo usando HBSS que contema BSA al 0,1 %, HEPES 20 mM, NaHCO3 0,375 g/l, dejando 50 jl/pocillo de este tampon para el equilibrado a temperatura ambiente (30-60 min). Dentro del lector de placas de formacion de imagenes fluorescentes (FLIPR, Molecular Devices), se anadieron antagonistas a la placa en un volumen de 6,25 jl/pocillo, se incubaron durante 3 min y finalmente se anadieron 6,25 jl/pocillo de solucion de Ca2+. La fluorescencia se midio para cada pocillo a intervalos de 2 segundos durante 8 minutos y el area bajo la curva de cada pico de fluorescencia se comparo con el area del pico de fluorescencia inducido por Ca2+ 10 mM con vehuculo en lugar de antagonista. Para cada antagonista, se determino el valor de CI50 (la concentracion (en nM) de compuesto necesaria para inhibir el 50 % de la respuesta fluorescente inducida por Ca2+) hasta 10 jM.

Tabla 1:

Compuesto del ejemplo de referencia: CI50 Compuesto del ejemplo de referencia CI50

2A: 778 3A 793

Efecto sobre corazones aislados de acuerdo con el procedimiento de Langendorff (Lgdff)

Los Ejemplos de Referencia 1A, 2A y 3A se sometieron a ensayo para determinar su potencial para reducir la presion sangumea y su efecto en la contractilidad del musculo cardfaco. Se determinaron valores de CE50 en corazones aislados de raton de acuerdo con la bibliograffa (Doring HJ., The isolated perfused heart according to Langendorff technique--function--application, Physiol. Bohemoslov. 1990, 39(6), 481-504; Kligfield P, Horner H, Brachfeld N., A model of graded ischemia in the isolated perfused rat heart, J. Appl. Physiol. 1976 Jun, 40(6), 10048).

El compuesto del ejemplo de referencia 1A se midio usando el procedimiento descrito anteriormente para el experimento de Langendorff con una CE50 de 5 nM.

II. Preparacion de formas de sal del COMPUESTO

II.a) Procedimiento general para la formacion de sal con el COMPUESTO:

Se disolvio 1 eq. de COMPUESTO en DISOLVENTE 1. La solucion se llevo a 50 °C. Se anadieron 2 equivalentes de acido disueltos en DISOLVENTE 2. La mezcla se agito a 50 °C durante 5 min y la fuente de calor se apago. Se permitio que la mezcla se enfriara a temperatura ambiente durante 1 hora. Si se observaba un precipitado, la mezcla se filtraba y el solido se aislaba. En el caso de que no se obtuviera solido, la mezcla se evaporaba a sequedad y se anadfan 6 volumenes de heptano. La mezcla se calento a reflujo, se anadieron 3 volumenes de EtOAc hasta que se disolvio todo. En el caso de que la disolucion no fuera completa, se anadfan 3 volumenes adicionales de EtOAc. Si la disolucion aun no era completa, se anadfa tan poco MeOH como fuera posible hasta la disolucion completa. Se permitio que la mezcla se enfriara lentamente a temperatura ambiente. A temperatura ambiente el caso se raspo con una espatula y se enfrio adicionalmente a 0 °C. La mezcla se filtro y la solucion se evaporo a sequedad en un rotavapor.

Como se usa en el presente documento, el termino "volumenes" significa 1 l por 1 kg de material solido.

DISOLVENTE 1 = 8 volumenes de EtOAc para: acido bencenosulfonico, acido benzoico, acido salidlico, sacarina, acido para-toluenosulfonico, acido malonico, acido metanosulfonico, acido naftaleno-2-sulfonico, acido naftaleno-1,5-disulfonico, acido etanosulfonico, acido malico, acido glicolico, acido cetoglutarico y acido fumarico; DISOLVENTE 1 = 1,8 volumenes de EtOAc para: acido bromhudrico y acido clorhudrico;

DISOLVENTE 1 = 8 volumenes de acetona para: acido sulfurico y acido fosforico;

DISOLVENTE 1 = 7 volumenes de acetona para: acido dtrico, acido sucdnico y acido tartarico.

DISOLVENTE 2 = 7 volumenes de EtOAc para: acido dtrico;

DISOLVENTE 2 = 3 volumenes de EtOAc para: acido bencenosulfonico, acido benzoico, acido metanosulfonico, acido salidlico y sacarina (parcialmente soluble);

5 DISOLVENTE 2 = 3 volumenes de MeOH para: acido para-toluenosulfonico, acido malonico, acido naftaleno-2-

sulfonico, acido naftaleno-1,5-disulfonico, acido malico, acido glicolico, acido cetoglutarico y acido fumarico; DISOLVENTE 2 = 15 volumenes de acetona para: acido sucdnico;

DISOLVENTE 2 = 12 volumenes de EtOH para: acido tartarico;

DISOLVENTE 2 = agua para: acido bromlddrico, acido clorlddrico, acido sulfurico y acido fosforico.

10 Los resultados obtenidos usando el procedimiento general descrito anteriormente se resumen en las Tablas 1 y 2. En el caso de que se hayan usado procedimientos particulares para la preparacion de las formas cristalinas de las sales del COMPUESTO, dichos procedimientos se describen en el Ejemplo de Referencia S1 y en los Ejemplos S2 a S7 a continuacion.

Tabla 1: Datos de caracterizacion para formas de sales cristalinas del COMPUESTO obtenidas de acuerdo 15 _________________________________con el procedimiento general_________________________________

Sal: Punto de fusion/RMN-1H DRXP

sal del acido di- bromlddrico: Punto de fusion a aproximadamente 93 °C. RMN-1H coherente con la estructura. El diagrama de difraccion de rayos X medido con el procedimiento 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparacion con el pico de mayor intensidad en el diagrama, de los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre parentesis) en los angulos de refraccion 2-teta indicados (se presentan picos seleccionados del intervalo 8-26,5 ° 2-teta con una intensidad relativa mayor del 10%): 9,1 ° (22 %), 9,5° (62%), 12,3° (23%), 12,6° (27%), 14,1° (36%), 14,6° (18 %), 15,3 ° (86 %), 15,8 ° (49 %), 17,0 ° (71 %), 17,9 ° (100 %), 19,1 ° (81 %), 19,6 ° (67 %), 20,2 ° (52 %), 20,6 ° (44 %), 21,1 ° (54 %), 22,5 ° (35 %), 23,6 ° (16 %), 24,5 ° (48 %), 25,0 ° (42 %), 25,4 ° (28 %) y 26,1 ° (43 %). Los picos anteriores corresponden a la Figura 7 medidos para el Ejemplo S7 a continuacion. Un desplazamiento de 2-teta de 0,2-0,3 ° puede explicarse por el uso del procedimiento 1 para la medicion del diagrama de difraccion de rayos X en el Ejemplo S7. Cristalina, forma cristalina identica al Ejemplo S7 a continuacion

sal del acido sesqui- naftaleno-1,5- disulfonico: RMN-1H (D6-DMSO, 400 MHz, solo se describen los picos principales) 6 8,88 (d, J = 9,2 Hz, 2,7 H, 1,5 moleculas de acido naftaleno-1,5-disulfonico), 7,94 (d, J = 7,0 Hz, 2,7 H, 1,5 moleculas de acido naftaleno-1,5-disulfonico), 7,47-7,25 (m, 8,6 H, 1,5 moleculas de acido naftaleno-1,5-disulfonico + 5H), 6,99 (s, 2H), 6,54 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,24-3,03 (m, 8H), 2,72 (s, 3H), 2,56 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 1,14-1,06 (m, 6H). Cristalina, vease la Figura 8

sal del acido di- bencenosulfonico: RMN-1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,84-7,80 (m, 4H, 2 moleculas de acido bencenosulfonico), 7,45-7,38 (m, 8H, 2 moleculas de acido bencenosulfonico + 2H), 7,34-7,29 (m, 2H), 7,26-7,22 (m, 1H), 6,99 (s, 2H), 6,51 (d a, J = 6,4 Hz, 1H), 4,00 (s, 6H), 3,32-3,20 (m, 8H), 2,87 (s, 3H), 2,60 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,46-2,27 (m, 4H), 2,06-1,97 (m, 1H), 1,95-1,91 (m, 1H), 1,76-1,69 (m, 2H), 1,49-1,40 (m, 1H), 1,29-1,22 (m, 1H), 1,19 (d, J = 2,9 Hz, 3H), 1,18 (d, J = 2,9 Hz, 3H). Cristalina, vease la Figura 9

sal del acido di- etanosulfonico: RMN-1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,48-7,46 (m, 2H), 7,35-7,31 (m, 2H), 7,27-7,24 (m, 1H), 7,00 (s, 2H), 6,55 (dd, J = 7,0, 1,2 Hz, 1H), 4,01 (s, 6H), 3,22-3,15 (m, 8H), 2,87 (s, 3H), 2,79 (c, J = 7,8 Hz, 4 H, 2 moleculas de acido etanosulfonico), 2,62 (sept, J = 7,2 Hz, 1H), 2,50-2,29 (m, 4H), 2,07-1,94 (m, 2H), 1,80-1,71 (m, 2H), 1,50-1,41 (m, 1H), 1,29 (t, J = 7,8 Hz, 6H, 2 moleculas de acido etanosulfonico), 1,29-1,27 (m, 1H), 1,22 (d, J = 1,9 Hz, 3H), 1,19 (d, J = 2,4 Hz, 3H). Cristalina, vease la Figura 10

(continuacion)

Sal: Punto de fusion/RMN-1H DRXP

sal del acido di- naftaleno-2-sulfonico: RMN-1H (MeOD, 400 MHz) 6 8,34 (s a, 2H, 2 moleculas de acido naftaleno-2-sulfonico), 7,91-7,85 (m, 8H, 2 moleculas de acido), 7,57-7,51 (m, 4H, 2 moleculas de acido naftaleno-2-sulfonico), 7,38-7,35 (m, 2H), 7,39-7,19 (m, 3H), 6,88 (s, 2H), 6,44 (d a, J = 7,2 Hz, 1H), 3,95 (s, 6H), 3,31-3,10 (m, 8H), 2,87 (s, 3H), 2,58 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,47-2,25 (m, 4H), 2,04-1,94 (m, 1H), 1,931,86 (m, 1H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,46-1,36 (m, 1H), 1,27-1,19 (m, 1H), 1,18 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 2,4 Hz, 3H). Cristalina, vease la Figura 11

Tabla 2: Datos de caracterizacion para formas salinas adicionales del COMPUESTO obtenidas de acuerdo 5 _______________________________con el procedimiento general_______________________________

Sal: Tecnica

sal del acido di-benzoico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-salidlico: RMN-1H Coherente con la estructura.

di-sacarinato: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-malonico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-malico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-glicolico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-cetoglutarico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-fosforico: Punto de fusion a aproximadamente 145 °C. RMN-1H coherente con la estructura.

sal del acido di-dtrico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-sucdnico: RMN-1H Coherente con la estructura.

sal del acido di-tartrico: RMN-1H Coherente con la estructura.

Ejemplo de Referencia S1: Preparacion y caracterizacion de la sal del acido di-clorhidrico del COMPUESTO

Se anadieron 7,598 ml de HCl acuoso (0,1 N) a 200,7 mg del COMPUESTO dando como resultado una suspension de color blanco. Se anadieron 5 ml de 2-PrOH y la solucion transparente obtenida se evaporo a sequedad en 10 nitrogeno. Se anadieron 4 ml de TBME al residuo y la suspension despues se agito con un ciclo de temperature (T1 = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de retencion 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5°C/h, 500 rpm). Despues de 18 repeticiones la suspension se filtro y el solido se seco al vacfo para proporcionar 265 mg de la sal del acido di-clorhidrico del COMPUESTO.

Tabla S1: Datos de caracterizacion de la sal del acido di-clorhidrico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina. La sal de di-clorhidrato del COMPUESTO se caracteriza por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 9,19 ° °, 9,77 °, 15,36 °, 16,14 °, 17,08 °, y 18,12 ° (especialmente caracterizada por 20: 9,19 °, 9,77 °, y 18,12 °). vease la Figura 1

Punto de fusion: aproximadamente 113 °C

RMN-1H: Coherente con la estructura.

Analisis elemental: Coherente con la sal de di-clorhidrato

Higroscopicidad: Ligeramente higroscopica (cambio de masa del 0,5 %)

15

Ejemplo S2: Preparacion y caracterizacion de la sal del acido di-metanosulfonico del COMPUESTO

Se anadieron 0,0476 ml de acido metanosulfonico a una solucion transparente de 199,7 mg del COMPUESTO disueltos en 7 ml de EtOAc. La solucion transparente se evaporo a sequedad en nitrogeno y el residuo obtenido see suspendio y se agito en 4 ml de una mezcla EtOAc/heptano (1:3) con un ciclo de temperatura (T1 = 20 °C, T2 = 20 25 °C, tiempo de retencion 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5 °C/h, 500 rpm). Despues

de 18 repeticiones la suspension se filtro y el solido se seco al vado. El solido obtenido se suspendio y se agito en 1 ml de TBME (ciclo de temperatura: T1 = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de transparente 1 h, respectivamente; tasa de

calentamiento y de enfriamiento 5 °C/h, 500 rpm). Despues de 18 repeticiones la suspension se filtro y el solido se seco al vado para proporcionar la sal del acido di-metanosulfonico del COMPUESTO.

Tabla S2: Datos de caracterizacion para la sal del acido di-metanosulfonico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 2

RMN-1H: RMN 1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,48-7,46 (m, 2H), 7,35-7,32 (m, 2H), 7,27-7,23 (m, 1H), 7,00 (s, 2H), 6,57 (d a, J = 7,0 Hz, 1H), 4,01 (s, 6H), 3,35-3,20 (m, 8H), 2,89 (s, 3H), 2,71 (s, 6H, 2 moleculas de acido metanosulfonico), 2,63 (sept, J = 7,2 Hz, 1H), 2,53-2,26 (m, 4H), 2,07-1,94 (m, 2H), 1,79-1,71 (m, 2H), 1,51-1,42 (m, 1H), 1,32-1,23 (m, 1H), 1,21 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 1,8 Hz, 3H).

Analisis elemental: Coherente con la sal del acido di-metanosulfonico.

5 Ejemplo S3: Preparacion y caracterizacion de la sal del acido di-para-toluenosulfonico del COMPUESTO

Se disolvieron 199,7 mg del COMPUESTO en 7 ml de EtOAc. Se anadieron 139,2 mg de acido para- toluenosulfonico disueltos en 10 ml de EtOAc. La solucion transparente se evapoo a sequedad en nitrogeno y el residuo se suspendio en 4 ml de una mezcla EtOAc/Hept (1:3) y se agito con un ciclo de temperature (ciclo de temperatura: T1 = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de retencion 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de 10 enfriamiento 5°C/h, 500 rpm). Despues de 18 ciclos el disolvente se evaporo al vado y el residuo solido se suspendio en 2 ml de EtOAc. Despues de un breve tratamiento con ultrasonidos (3 min) la suspension se agito con un ciclo de temperatura (ciclo de temperatura: T1 = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de retencion 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5°C/h, 500 rpm). Despues de 18 repeticiones la suspension se filtro y el solido se seco al vado para proporcionar 173,8 mg de la sal del acido di-para-toluenosulfonico del COMPUESTO.

15 Tabla S3: Datos de caracterizacion para la sal del acido di-para-toluenosulfonico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 3

RMN-1H: RMN 1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,71-7,68 (m, 4H, 2 moleculas de TsOH), 7,45-7,42 (m, 2H, 2 moleculas de TsOH), 7,34-7,30 (m, 2H, 2 moleculas de TsOH), 7,27-7,25 (m, 1H), 7,21-7,19 (m, 4H), 7,00 (s, 2H), 6,35 (d a, J = 8,0 Hz, 1H), 4,00 (s, 6H), 3,233,15 (m, 8H), 2,87 (s, 3H), 2,60 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,36 (s, 6H, 2 moleculas de TsOH), 2,36-2,29 (m, 4H), 2,01-1,98 (m, 1H), 1,97-1,91 (m, 1H), 1,75-1,69 (m, 2H), 1,49-1,41 (m, 1H), 1,32-1,23 (m, 1H), 1,20 (d, J = 2,9 Hz, 3H), 1,17 (d, J = 2,9 Hz, 3H).

Analisis elemental: Coherente con sal di-para-toluenosulfonica.

Ejemplo S4: Preparacion y caracterizacion de la sal del acido sulfurico del COMPUESTO

Se anadieron 0,733 ml de acido sulfurico acuoso (0,5 M) a una solucion de 200,2 mg del COMPUESTO en 10 ml de MEK dando como resultado una solucion transparente. Despues de 2 dfas la suspension obtenida se filtro y el solido 20 se seco al vado durante 1 h proporcionando la sal del acido mono-sulfurico del COMPUESTO que conterna aproximadamente 6 equivalentes de agua.

Tabla S4: Datos de caracterizacion para la sal de acido di-sulfurico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 4

Analisis elemental: Coherente con la sal del acido mono-sulfurico (se encontraron aproximadamente 1,1 equivalentes de H2SO4). Contiene aproximadamente 6 equivalentes de agua.

Ejemplo S5: Preparacion y caracterizacion de la sal de acido di-maleico del COMPUESTO

25 Se anadio acido maleico (256 g, 2,2 mol, 2,1 eq), disuelto en MeOH (630 ml, 1,1 volumenes) a una solucion a reflujo del COMPUESTO (682 g, 84% p/p (ensayo de RMN), 1,05 mol) en EtOAc (6,3 l, 11 volumenes). La mezcla resultante se agito a reflujo durante 15 minutos y despues se enfrio a 65-68 °C en 30 minutos y se sembro con un 0,04 % p/p de cristales de siembra de sal del acido di-maleico del COMPUESTO (Los cristales de siembra se obtuvieron despues de una cristalizacion cuidadosa usando el mismo protocolo). La mezcla despues se enfrio de 6530 68 °C a 40 °C en 3 h. La suspension obtenida despues se enfrio a 20 °C durante 1 h, se filtro a 0,2 bar (20 kPa) de

nitrogeno y se lavo con EtOAc (1,500 ml, 2,6 volumenes). El solido de color blanco obtenido despues se seco a 1

atmosfera de nitrogeno durante 24 horas para proporcionar 715 g (88%) de la sal del acido di-maleico del COMPUESTO.

Tabla S5: Datos de caracterizacion para la sal de acido di-maleico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 5

CDB: Endotermia de fusion con punto de fusion a aproximadamente 147 °C

RMN-1H: RMN 1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,31-7,21 (m, 5H), 6,68 (s, 2 H), 6,38 (d a, J = 5,8 Hz, 1H), 6,27 (s, 4H, 2 moleculas de acido maleico), 3,88 (s, 6H), 3,32-3,10 (m, 8H), 2,86 (s, 3H), 2,60 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,52-2,45 (m, 2H), 2,29-2,23 (m, 2H), 2,06-2,02 (m, 1H), 1,96 (dd, J = 14,2, 2,4 Hz, 1H), 1,76-1,69 (m, 2H), 1,48-1,39 (m, 1H), 1,29-1,21 (m, 1H), 1,19 (d, J = 2,5 Hz, 3H), 1,18 (d, J = 2,5 Hz, 3H).

Analisis elemental: Coherente con la sal del acido di-maleico.

Higroscopicidad: No higroscopica (cambio de masa del 0,1 %)

5 Ejemplo S6: Preparacion de la sal de sesqui-fumarato del COMPUESTO

Se disolvieron 199,5 mg de COMPUESTO en 5 ml de EtOAc. Se anadio lentamente una solucion transparente de 85,4 mg de acido fumarico en 5 ml de THF. La solucion transparente obtenida se concentro a 3 ml de solucion en nitrogeno dando como resultado la precipitacion. La mezcla se filtro y el solido se seco al vado. El solido obtenido era la sal del acido sesqui-fumarico del COMPUESTO.

10 ________Tabla S6: Datos de caracterizacion para la sal del acido sesqui-fumarico del COMPUESTO________

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 6

CDB: Endotermia de fusion con punto de fusion a aproximadamente 180 °C

RMN-1H: RMN 1H (MeOD, 400 MHz) 6 7,25-7,20 (m, 5H), 6,73 (s, 3 H, 1,5 moleculas de acido fumarico), 6,59 (s, 2H), 6,35 (dd, J = 7,1, 1,6 Hz, 1H), 3,86 (s, 6H), 3,29-3,22 (m, 4H), 3,22-3,18 (m, 1H), 3,15-3,11 (m, 3H), 2,85 (s, 3H), 2,60 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,53-2,46 (m, 2H), 2,28-2,21 (m, 2H), 2,07-1,98 (m, 1H), 1,96 (dd, J = 14,0, 2,8 Hz, 1H), 1,76-1,69 (m, 2H), 1,48-1,39 (m, 1H), 1,29-1,21 (m, 1H), 1,19 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 1,18 (d, J = 2,8 Hz, 3H).

Analisis elemental: Coherente con la sal del acido sesqui-fumarico.

Higroscopicidad: No higroscopica (cambio de masa del 0,1 %)

Ejemplo S7: Preparacion de la sal del acido di-bromhdrico del COMPUESTO

Se anadieron lentamente 0,3665 ml de acido bromhndrico acuoso 2 molar a una solucion de 199,8 mg del COMPUESTO en 0,4 ml de THF y la suspension obtenida se calento (lanzallamas). La solucion transparente se 15 enfrio a temperatura ambiente dando como resultado la precipitacion. Se anadieron 3 ml de THF, la suspension se agito, se filtro y el solido se seco al vado (1 h, 3 mbar (0,3 kPa). El solido obtenido era la sal del acido di-bromlddrico del COMPUESTO que contema aproximadamente 3 equivalentes de agua.

Tabla S7: Datos de caracterizacion para la sal del acido di-bromhidrico del COMPUESTO

Tecnica: Sumario de los datos Observaciones

DRXP: Cristalina vease la Figura 7

CDB: 2 endotermias anchas con picos aproximadamente a 99 y 117 °C

Analisis elemental: Coherente con la sal del acido di-broml'ndrico. Contiene aproximadamente 3 equivalentes de agua.

Higroscopicidad: No higroscopica (cambio de masa del 0,1 %)

Claims

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

REIVINDICACIONES

1. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco; en la que dicha sal cristalina consiste en:

• 1 equivalente de ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5- fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco;

• un componente acido que consiste en 1 a 2 equivalentes de un acido seleccionado entre el grupo que consiste en acido bromhHdrico, acido sulfurico, acido maleico, acido fumarico, acido metanosulfonico, acido para- toluenosulfonico, acido bencenosulfonico, acido naftaleno-1,5-disulfonico, acido naftaleno-2-sulfonico y acido etanosulfonico; y

• de 0 a 5 equivalentes de agua.
2. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 1, en la que el compuesto es el ester (1R,2R,4R)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil- biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco enantiomericamente enriquecido.
3. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1 o 2 equivalentes de acido bromlddrico, 1 o 2 equivalentes de acido sulfurico, 1 o 2 equivalentes de acido maleico, 1 a 2 equivalentes de acido fumarico, 1 o 2 equivalentes de acido metanosulfonico, 1 o 2 equivalentes de acido para-toluenosulfonico, 1 o 2 equivalentes de acido bencenosulfonico, 1 a 2 equivalentes de acido naftaleno-1,5-disulfonico, 1 o 2 equivalentes de acido naftaleno- 2-sulfonico o 1 o 2 equivalentes de acido etanosulfonico.
4. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-

amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 3, en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido bromhudrico, 2 equivalentes de acido maleico o 1,5 equivalentes de acido fumarico.
5. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-

amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 4, en la que dicha sal cristalina consiste en:

• 1 equivalente del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco;

• 2 equivalentes de acido maleico; y

• 0 equivalentes de agua.
6. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-

amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 5,

caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 10,15 °, 20,39 ° y 22,63 °; en la que dicho diagrama de difraccion de rayos X de polvo se obtiene mediante el uso de radiacion Cu Ka1; y la precision de los valores 20 esta en el intervalo de 20 +/- 0,2 °.
7. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-

amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 5,

caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 5,07 °, 8,19 °, 10,15 °, 15,26 °, 17,61 °, 20,39 °, 22,63 °, 23,93 °, 24,27 ° y 25,61 °; en la que dicho diagrama de difraccion de rayos X de polvo se obtiene mediante el uso de radiacion Cu Ka1; y la precision de los valores 20 esta en el intervalo de 20 +/- 0,2 °.
8. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 5, que tiene un punto de fusion de 147 °C determinado mediante calorimetna diferencial de barrido.
9. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 1,5 equivalentes de acido fumarico.
10. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 9, caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 5,27 °, 8,05 ° y 20,61 °; en la que dicho diagrama de difraccion de rayos X de polvo se obtiene mediante el uso de radiacion Cu Ka1; y la precision de los valores 20 esta en el intervalo de 20 +/- 0,2 °.
11. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el componente acido de dicha sal cristalina consiste en 2 equivalentes de acido bromlmdrico.

5 12. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-

amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con la reivindicacion 11, caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difraccion de rayos X de polvo en los siguientes angulos de refraccion 20: 9,3°, 15,6° y 17,3°; en la que dicho diagrama de difraccion de rayos X de polvo se obtiene mediante el uso de radiacion Cu Ka1; y la precision de los valores 20 esta en el intervalo de 20 +/- 0,2 °

10 13. Una composicion farmaceutica que comprende una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-

(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 y un vehmulo farmaceuticamente aceptable.
14. Una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]-metil- amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2Hlico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las

15 reivindicaciones 1 a 12 o una composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 15, para su uso como un medicamento.
15. Uso de una sal cristalina del compuesto ester (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1H-benzoimidazol-2-il)-propil]- metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-24lico del acido isobutmco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para la preparacion de una composicion farmaceutica para el tratamiento o la prevencion de

20 la angina estable cronica, la hipertension, la isquemia renal o cardfaca, las arritmias cardfacas incluyendo la fibrilacion auricular, la hipertrofia cardfaca o la insuficiencia cardfaca congestiva.