ES2618489T3 - Composiciones farmacéuticas combinadas y usos de las mismas - Google Patents

Abstract

Una combinación de un primer agente y un inhibidor de mTOR para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo en un sujeto que lo necesita que comprende administrar al sujeto dicho primer agente seguido de la administración de dicho inhibidor de mTOR, en el que dicho primer agente es paclitaxel, en el que dicho inhibidor de mTOR es un compuesto de fórmula I-C1a:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en el que: E2 es -H; X1 y X2 sean N; R1 es -L-alquilo C1-10, -L-cicloalquilo C3-8, -L-alquilheterociclilo C1-10, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales está sin sustituir o sustituido con uno o más R3 independientes; L está ausente, -(C>=O)-, -C(>=O)O-, -C(>=O)N(R31)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R31)-, o -N(R31)-; R3 es hidrógeno, -OH, -OR31, -NR31R32, -C(O)R31, -C(>=O)NR31R32, -C(>=O)NR34R35, arilo, heteroarilo, alquilo C1-4, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, o heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo o heteroarilo está sin sustituir o está sustituido independientemente con uno o más alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(>=O)NR31R32, -C(>=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(>=O)R32, -NR31C(>=O)OR32, NR31C(>=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32, -C(>=S)OR31, -C(>=O)SR31, -NR31C(>=NR32)NR33R32, -NR31C(>=NR32)OR33, -NR31C(>=NR32)SR33, -OC(>=O)OR33, -OC(>=O)NR31R32, -OC(>=O)SR31, -SC(>=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o-SC(>=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, o heterociclilo está sin sustituir o sustituido con uno más alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(>=O)NR34R35, o -C(>=O)NR31R32; -(W2)k- es -NH-, -N(H)C(O)- o -N(H)S(O)2-; R2 es hidrógeno, halógeno, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(>=O)NR31R32, -C(>=O)NR34R35, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, arilo bicíclico, arilo monocíclico sustituido, heteroarilo, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3-8-alquilo-C1-10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10, cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil C2-10-arilo monocíclico, monocicloaril-alquilo C2-10, alquil C1-10bicicloarilo, bicicloaril-alquilo C1-10, alquilarilo C1-10 sustituido, aril sustituido-alquilo C1-10, alquil C1-10 heteroarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 heteroarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 heteroarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3--8, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1-10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10 alquenilo C2-10, alcoxi C1-10 alquinilo C2-10, heterociclilo, heterociclil-alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, aril-heterociclilo, heteroaril-alquilo C1-10, heteroaril-alquenilo C2-10, heteroaril-alquinilo C2-10, heteroaril-cicloalquilo C3-8, heteroaril-heteroalquilo, o heteroaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo bicíclico o heteroarilo está sin sustituir, o en el que cada uno de arilo bicíclico, resto de heteroarilo o resto de arilo monocíclico está sustituido independientemente con uno o más halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(>=O)NR31R32, -C(>=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(>=O)R32, NR31C(>=O)OR32, NR31C(>=O)NR32R33, NR31S(O)0-2R32, -C(>=S)OR31, -C(>=O)SR31, -NR31C(>=NR32)NR33R32, -NR31C(>=NR32)OR33, -NR31C(>=NR32)SR33, -OC(>=O)OR33, OC(>=O)NR31R32, -OC(>=O)SR31, -SC(>=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o-SC(>=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo está sin sustituir o sustituido cono uno o más halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo, -NR31 R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(>=O)NR34R35, o -C(>=O)NR31R32; R31, R32, y R33, en cada caso, son independientemente H o alquilo C1-10, en el que el alquilo C1-10 está sin sustituir; y R34 y R35 en -NR34R35, -C(>=O)NR34R35, o -SO2NR34R35, se toman conjuntamente con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros; en el que dicho anillo está independientemente sin sustituir o está sustituido por uno o más -NR31R32, hidroxilo, halógeno, oxo, arilo, heteroarilo, alquilo C1-6, u O-arilo, y en el que dicho anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros contiene independientemente 0, 1, o 2 heteroátomos más además del nitrógeno.

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DESCRIPCION

Composiciones farmaceuticas combinadas y usos de las mismas Antecedentes de la invencion

La division celular eucariota se produce a lo largo de un ciclo celular altamente regulado que comprende fases consecutivas que comienzan con una fase denominada G1, y va seguido de las fases denominadas S (smtesis de ADN), G2 y M (mitosis). La alteracion del ciclo celular o del control del ciclo celular puede dar como resultado anomalfas celulares o patologfas tales como el cancer, que surgen a causa de multiples cambios geneticos que transforman las celulas con crecimiento limitado en celulas invasoras que no responden al control del crecimiento normal. La transicion de celulas normales a celulas cancerosas puede surgir mediante una perdida de la funcion correcta en la replicacion del ADN y los mecanismos de reparacion del ADN. Las celulas en division normal estan sometidas a una serie de mecanismos de control, conocidos como los puntos de control del ciclo celular, que mantienen la integridad genomica deteniendo o induciendo la destruccion de las celulas aberrantes. La investigacion de la progresion y el control del ciclo celular es, por consiguiente, de un interes significativo en el diseno de farmacos anticancer (Flatt, P. M. y Pietenpol, J. A. Drug Metab. Rev., (2000), 32(3-4), 283-305; Buolamwini, J. K. Current Pharmaceutical Design, (2000), 6, 379-392).

La progresion del ciclo celular esta estrechamente relacionada por la expresion, localizacion y destruccion temporal y espacial definida de una serie de reguladores del ciclo celular, que muestran un comportamiento altamente dinamico durante el ciclo celular (Pines, J., Nature Cell Biology, (1999), 1, E73-E79). Por ejemplo, en etapas espedficas del ciclo celular, algunas protemas se traslocan del nucleo al citoplasma, o viceversa, y algunas se degradan rapidamente (Kohn, Molecular Biology of the Cell (1999), 10, 2703-2734).

Muchas celulas cancerosas portan anomalfas en las protemas relacionadas con el punto de control de G1, tales como p53, Rb, MDM-2, p16 INK4 y p19 ARF (Levine (1997) Cell, 88:323). Como alternativa, las mutaciones pueden provocar la sobreexpresion y/o la sobreactivacion de los productos oncogenicos, por ejemplo, Ras, MDM-2 y ciclina D, que reducen la rigurosidad del punto de control de G1. Ademas de estas mutaciones, la senalizacion excesiva de factores de crecimiento puede estar causada por la sobreexpresion de factores de crecimiento y puede reducir la rigurosidad del punto de control de G1. Conjuntamente con las mutaciones de perdida de funcion o de ganancia de funcion, la activacion continua por receptores de factores de crecimiento o moleculas transductoras de senales aguas abajo puede provocar transformacion celular sobrepasando el punto de control de G1. Un punto de control de G1 alterado o suprimido contribuye a las mayores tasas de mutacion y a las diversas mutaciones observadas en las celulas cancerosas. Como resultado, muchas celulas cancerosas dependen del punto de control de G1 para su supervivencia frente a un dano excesivo en el ADN (O'Connor y Fan (1996) Prog. Cell Cycle Res., 2:165).

El punto de control del ciclo celular de G2 restringe el inicio de la mitosis hasta que se completan la replicacion y la reparacion del ADN. Un mal funcionamiento del punto de control de G2 podna permitir una aparicion prematura de la mitosis antes de que se complete la replicacion y reparacion del ADN, produciendo celulas hijas que carecen de una porcion sustancial del ADN genomico o que portan mutaciones. Las funciones del punto de control de G2 incluyen la deteccion del dano en el ADN y la generacion de una senal que puede ocasionar la detencion del ciclo celular cuando se detecta dano en el ADN. Se cree que el mecanismo que promueve la detencion en G2 del ciclo celular despues de un dano en el ADN esta conservado entre especies, desde levaduras hasta seres humanos.

Las cinasas desempenan un papel central en la regulacion del ciclo celular. Se ha encontrado que los defectos en diversos componentes de las vfas de transduccion de senales son responsables de un gran numero de enfermedades, que incluyen numerosas formas de cancer, trastornos inflamatorios, trastornos metabolicos, enfermedades vasculares y neuronales (Gaestel et al. Current Medicinal Chemistry (2007) 14:2214-2234). En los ultimos anos, han surgido cinasas que estan asociadas con las rutas de senalizacion oncogenicas como dianas farmacologicas importantes en el tratamiento de diversas patologfas, incluyendo muchos tipos de cancer.

La diana de mairnfero de la rapamicina (mTOR), tambien conocida como la diana mecamstica de la rapamicina, es una serina/treonina protema cinasa que regula el crecimiento celular, el control de la traduccion, la angiogenesis y/o la supervivencia celular. mTOR esta codificado por el gen de protema 12 de union a FK506-protema 1 asociada a rapamicina (FRAP1). mTOR es la subunidad catalftica de dos complejos, mTORC1 y mTORC2. mTORC1 esta compuesto de mTOR, la protema reguladora asociada de mTOR (Raptor), protema similar a LST8 de mam^fero/subunidad p de protema G (mLSTB/GpL), PRAS40, y DEPTOR. El complejo 2 de mTOR (mTORC2) esta compuesto de mTOR, companero insensible a la rapamicina de mTOR (Rictor), GpL, y la protema 1 que interactua con protema cinasa activada por estres de mai^ero (mSIN1).

Aparte de sus subunidades, mTORC1 y mTORC2 se distinguen por sus sensibilidades diferenciales a la rapamicina y sus analogos (tambien conocidos como rapalogos). La rapamicina se une e inhibe alostermicamente a mTORC1, pero por lo general, mTORC2 es insensible a la rapamicina. A consecuencia de esta senalizacion de mTOR insensible a la rapamicina mediada por mTORC2, las celulas cancerosas tratadas con analogos de rapamicina normalmente muestran unicamente una inhibicion parcial de la senalizacion de mTOR, que puede ocasionar una supervivencia y

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resistencia aumentadas al tratamiento con rapamicina. Normalmente, los inhibidores de mTOR suprimen la progresion del ciclo celular en la fase G1.

El paclitaxel es un agente quimioterapeutico citotoxico usado como agente antitumoral en el tratamiento de carcinomas de ovario, mama, pulmon y en el tratamiento del sarcoma de Kaposi relacionado con el SIDA. Obtenido originariamente del tejo occidental, Taxus brevifolia, el paclitaxel se ha usado para tratar el cancer de mama administrando por via sistemica el farmaco de manera preoperatoria. A nivel molecular, el paclitaxel ejerce una actividad antitumoral mediante su capacidad para promover la apoptosis (muerte celular programada) induciendo el ensamblaje de microtubulos a partir de los dfmeros de tubulina y evitando la despolimerizacion de los microtubulos. Los microtubulos estabilizados inhiben la reorganizacion dinamica normal de la red de microtubulos que es esencial para las funciones vitales de la interfase y mitoticas. Ademas, el paclitaxel induce matrices u "ovillos" anormales de microtubulos durante el ciclo celular y multiples asteres de microtubulos durante la mitosis. Como resultado, el paclitaxel aumenta la fraccion de celulas en las fases G2 o M.

Los documentos WO 2010/006086 y US 2010/184760 se refieren a entidades qmmicas o compuestos y a composiciones farmaceuticas que son capaces de modular determinadas protemas cinasas, tales como mTOR, tirosina cinasas, y/o lfpido cinasas, tales como PI3 cinasa.

El documento WO 2010/036380 se refiere a compuestos heterodclicos para su uso como inhibidores de cinasas y en otras aplicaciones.

El documento WO 2009/114874 se refiere a entidades qmmicas o compuestos y a composiciones farmaceuticas que son capaces de modular las lfpido cinasas, tales como PI3 cinasa, tirosina cinasas y protema cinasas, tales como mTOR.

El documento WO 2009/008992 se refiere a un metodo para tratar tumores o metastasis tumorales en un paciente, que comprende administrar a dicho paciente de manera simultanea o secuencial una cantidad terapeuticamente eficaz de una combinacion de un agente o tratamiento anticancer que eleva los niveles de pAkt en las celulas tumorales y un inhibidor de mTOR que se une e inhibe directamente a las cinasas tanto de mTOR1 como de mTORC2.

Faried et al. (European Journal of Cancer, vol. 42, n.° 7, 1 de mayo de 2006, p. 934-047) se refieren a la inhibicion de la diana de mairnfero de la rapamicina (mTOR) mediante rapamicina, lo que aumenta la quimiosensibilidad de las celulas CaSki al paclitaxel. Meier et al. (J. Am. Acad. Dematol., vol. 60, n.° 5, 1 de mayo de 2009, p. 863-868) se refieren a la respuesta significativa despues del tratamiento con el inhibidor de mTOR, sirolimus, en combinacion con carboplatino y paclitaxel en pacientes con melanoma metastasico.

Aissat et al. (Cancer Chemother. Pharmacol, vol. 62, no.2, 2008, p. 305-313) se refieren a los efectos antiproliferativos de la rapamicina como agente unico y en combinacion con carboplatino y paclitaxel en lmeas de cancer de cabeza y cuello.

Fung et al. (Clinical Cancer Research, vol. 15, 2009, p.5389-5395) se refieren a la administracion concurrente y secuencial de quimioterapia y a la diana de mamffero del inhibidor de rapamicina, temsirolimus, en celulas y xenoinjertos de cancer humano.

Giannakakou et al. (Journal of Biological Chemistry, vol. 272, n.° 27, 1997, p. 17118-17125) se refiere a celulas de cancer de ovario humanas resistentes al paclitaxel que tienen p-tubulinas mutantes que muestran una polimerizacion dirigida por paclitaxel impedida.

El documento US 6 709 676 se refiere a una composicion solida bicapa que comprende (a) una primera capa de liberacion inmediata que comprende una cantidad eficaz antialergica de desloratadina y al menos un excipiente farmaceuticamente aceptable y (b) una segunda capa de liberacion sostenida que comprende una cantidad eficaz de un descongestivo nasal, por ejemplo, sulfato de seudoefedrina y un agente de liberacion sostenida farmaceuticamente aceptable, en la que la composicion comprende menos de aproximadamente un 2% de productos de descomposicion de descloratadina.

Aunque se ha obtenido un exito impresionante usando esta estrategia, algunos tumores o bien no responden o bien se vuelven resistentes al tratamiento con paclitaxel. Ademas, un gran numero de casos no dan como resultado un resultado clmicamente satisfactorio bien debido a que los tumores no se reducen o bien debido a que los efectos secundarios obligan a interrumpir la administracion de paclitaxel.

Sumario de la invencion

La presente invencion aborda la necesidad de tratamientos mejorados para una gran variedad de enfermedades asociadas con la desregulacion de las cinasas. En un aspecto, la invencion proporciona una combinacion de un primer agente y un inhibidores de mTOR para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo, incluyendo, pero sin limitacion, el cancer, en un sujeto que lo necesite que comprende administrar a un sujeto dicho primer agente seguido de la administracion a dicho sujeto de dicho inhibidor de mTOR, en la que dicho primer agente es paclitaxel y en la que dicho inhibidores de mTOR es un compuesto de formula I-C1a, tal como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, dicho primer agente suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1. En algunas realizaciones, el primer agente se administra antes de administrar cualquier cantidad eficaz de inhibidor de mTOR a dicho sujeto. En algunas realizaciones, el primer agente suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular, seleccionadas entre el grupo que consiste en G2, M, y transicion G2/M. En algunas

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realizaciones, el primer agente se administra en dos instantes diferentes antes de administrar el inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas administrar el primer agente una o mas veces despues de administrar el inhibidor de mTOR, tal como semanalmente durante al menos dos semanas, estando cada una de las administraciones del primer agente seguidas opcionalmente de la administracion del inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el primer agente y el inhibidor de mTOR proporcionan un efecto sinergico para tratar el trastorno proliferativo. En algunas realizaciones, el primer agente y/o el inhibidor de mTOR se administran en una cantidad individualmente subterapeutica. En algunas realizaciones, el trastorno proliferativo es una afeccion neoplasica, incluyendo, pero sin limitacion, NSCLC, carcinoma de celulas escamosas de cabeza y cuello, cancer pancreatico, cancer de mama, cancer de ovario, sarcoma de Kaposi, carcinoma de celulas renales, cancer de prostata, cancer neuroendocrino, cancer colorrectal, y cancer de endometrio. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se administra mas de 6, 12, 18, 24, 30, 36, 42, o 48 horas despues de dicho primer agente; o mas de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, o 14 dfas despues de dicho primer agente. En algunas realizaciones, el primer agente y/o el inhibidor de mTOR se administran por via parenteral, oral, intraperitoneal, intravenosa, intraarterial, transdermica, intramuscular, liposomal, mediante suministro local a traves de un cateter o una endoprotesis, subcutanea, intraadiposa, o intratecal.

En otro aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica. La composicion farmaceutica comprende una combinacion de una cantidad de un primer agente que es paclitaxel y una cantidad de un inhibidor de mTOR de formula I-C1a, tal como se describe en el presente documento, en la que (i) dicho primer agente suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1, y (ii) dicha composicion farmaceutica se formula para liberar dicho inhibidor de mTOR despues de liberar dicho primer agente. En algunas realizaciones, dicha combinacion comprende una cantidad sinergicamente eficaz de dicho primer agente y dicho inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, las una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1 se seleccionan entre el grupo que consiste en G2, M, y transicion G2/M. En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica se formula en una dosificacion oral o en una endoprotesis que eluye farmaco. En algunas realizaciones, el primer agente y/o el inhibidor de mTOR estan presentes en una cantidad individualmente subterapeutica. En algunas realizaciones, el primer agente es un modulador de tubulina, tal como un agente que se une a la tubulina polimerizada, y que incluye, pero sin limitacion, paclitaxel o un analogo del mismo.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR en los metodos y las composiciones de la invencion inhibe de manera selectiva a mTORC1. Por ejemplo, el inhibidor de mTOR inhibe a mTORC1 con un valor de CI50 de aproximadamente 1000 nM o menor, 500 nM o menor, 100 nM o menor, 50 nM o menor, 10 nM o menor, segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro.

En algunas realizaciones de los metodos y las composiciones de la invencion, el inhibidor de mTOR se une e inhibe directamente tanto a mTORC1 como a mTORC2. Por ejemplo, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 500 nM o menor, 400 nM o menor, 300 nM o menor, 200 nM o menor, 100 nM o menor, 50 nM o menor, 10 nM o menor, o 1 nM o menor, segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. En otra realizacion, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 10 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y el inhibidor de mTOR es sustancialmente inactivo frente a uno o mas PI3-cinasas de tipo I, seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6. Como alternativa, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 100 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y el valor de CI50 es al menos 2, 5 o 10 veces menor que su valor de CI50 contra todas las PI3-cinasas de tipo I seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6.

En las composiciones de la invencion, el inhibidor de mTOR es un compuesto de formula I-C1a:

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o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en el que:

E2 es -H;

X1 y X2 sean N;

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Ri es -L-alquilo C1-10, -L-cicloalquilo C3.8, -L-alquilheterociclilo C1.10, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales esta sin sustituir o sustituido por uno o mas R3 independientes; L es ausente, -(C=O)-, -C(=O)O-, -C(=O) N(R31)-, -S-,

-S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R3

o -NTO-

-NR31R32,

-C(=O)NR31R32,

C(=O)NR34R35 arilo, heteroarilo, alquilo C1-4,

R3 es hidrogeno, -OH, -OR31, -NR3IR32, -C(O)R alquilo C1.10, cicloalquilo C3-8, o heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo o heteroarilo esta sin sustituir o esta sustituido independientemente con uno o mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32

34 35 31 31 31 32 34 35 31 31 32 34

-NR34R

C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)o-2R, -SO2NR3

-C(=S)OR

SO2NR34R35,

-C(=O)SR

31

-C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NRR3

-NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)o-2R32,

-NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31oR32, o-SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, o heterociclilo esta sin sustituir o sustituido con uno mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo, -NR31R32, -NR34R35, C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32; -(W2)k- es -NH-, -N(H)C(O)- o

-N(H)S(O)2-;

R2 es hidrogeno, halogeno, -OR31, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35

NR31R32,

-NR34R35,

-C(=O)NR31R32,

-C(=O)NR34R35,

-C(O)R31, -CO2R3

arilo bidclico, arilo monodclico sustituido, heteroarilo, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3.8-alquilo-C1.10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10, cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil C2-10-arilo monodclico, arilo monodclico-alquilo C2-10, alquil C1_10-bicicloarilo,

bicicloaril-alquilo C1-10, alquilarilo C1-10 sustituido, aril-alquilo C1-10 sustituido, alquil C1-10 heteroarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 heteroarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 heteroarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3-8, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1-10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10 alquenilo C2-10, alcoxi C1-10 alquinilo C2-10, heterociclilo, heterociclilo, alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquenilo C210, aril-alquinilo C2-10, aril-heterociclilo, heteroaril-alquilo C1-10, heteroaril-alquenilo C2-10, heteroaril-alquinilo C2-10, heteroaril-cicloalquilo C3-8, heteroaril-heteroalquilo, o heteroaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo bidclico o heteroarilo esta sin sustituir, o en el que cada uno de arilo bidclico, resto de heteroarilo o resto de arilo monodclico esta sustituido independientemente con

-OR

-NR31R32

uno o mas halo, -OH, -R , -CF3, -OCF3 -C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)o-2R31, SO2NR31R32

-NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31, -C(=O)SR31

31 32 33 33 31 32

NR34R35

C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32,

NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33,

31 31 31 32

-SO2NR34R35

OC(=O)OR, -OC(=O)NR3'R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR3IOR

-NR31C(=NR32)SR33m,

o-SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo esta sin sustituir o sustituido cono uno o mas halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32;

R , R , y R , en cada caso, son independientemente H o alquilo C1-10, en el que el alquilo C1-10 esta sin sustituir; y R34 y R35 en -NR34R35, -C(=O)NR34R35, o -SO2NR34R35, se toman conjuntamente con el atomo de nitrogeno al que estan unidos para formar un anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros; en el que dicho anillo esta independientemente sin sustituir o esta sustituido por uno o mas -NR31R32, hidroxilo, halogeno, oxo, arilo, heteroarilo, alquilo C1-6, u O-arilo, y en el que dicho anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros contiene independientemente 0, 1, o 2 heteroatomos mas ademas del nitrogeno.

Breve descripcion de los dibujos

Las nuevas caractensticas de la invencion se exponen en las reivindicaciones adjuntas. Se obtendra una mejor comprension de las caractensticas y ventajas de la presente invencion mediante referencia a la siguiente descripcion detallada que expone realizaciones ilustrativas, en las que se utilizan los principios de la invencion, y los dibujos adjuntos de los que:

La figura 1 es una ilustracion esquematica de las rutas de senalizacion activadas en el cancer humano.

La figura 2 muestra un efecto sinergico de un tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento en el crecimiento tumoral en ratones, mostrando la grafica de la derecha una vista aumentada de la grafica de la izquierda.

La figura 3 muestra un efecto sinergico de un tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento en el crecimiento tumoral en ratones, mostrando la grafica de la derecha una vista aumentada de la grafica de la izquierda.

La figura 4 muestra A) una ilustracion de las diferentes rutas de senalizacion mediadas por mTORC1 y mTORC2 y B) una transferencia de Western que ilustra la sensibilidad de la fosforilacion de NRDG1 dependiente de mTORC1 al compuesto B, pero no a rapamicina.

La figura 5 muestra una transferencia de Western que ilustra la inhibicion diferencial de la fosforilacion de Akt en la serina 473 frente a la treonina 308 por el compuesto B (panel superior), y una comparacion de la inhibicion de la fosforilacion de Akt para un pan-inhibidor de PI3K frente al compuesto B.

La figura 6A muestra una transferencia de Western que ilustra la induccion de pS6 mediante paclitaxel, que se inhibe mediante la adicion de compuesto B. La figura 6B muestra la induccion de PARP escindido por el compuesto B en combinacion con paclitaxel.

La figura 7A muestra el efecto del compuesto B y taxol en la proliferacion de celulas AN3-CA. La figura 7B muestra

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el efecto sinergico del tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento en el crecimiento tumoral, segun se muestra por un estudio de mdice de combinacion en celulas Hec-1A y AN-3CA.

La figura 8 muestra un estudio de poblacion de ciclo celular que indica que la combinacion del compuesto B con paclitaxel induce una poblacion aumentada de sub G0/G1 frente al uso de cualquiera de los dos agentes individualmente.

La figura 9A muestra la inhibicion parcial del crecimiento de celulas HEC59 (lmea celular resistente al paclitaxel) mediante paclitaxel, pero una inhibicion sustancialmente mayor mediante el compuesto B. La figura 9B muestra los efectos de combinar el compuesto B con paclitaxel en celulas HEC59.

La figura 10 muestra el alivio de la ploidfa inducida por paclitaxel mediante el uso de una combinacion de compuesto B y paclitaxel. La figura 11 muestra un efecto sinergico de un tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento en la regresion tumoral y el crecimiento tumoral en ratones.

La figura 12A muestra un efecto sinergico de un tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento segun se evidencia por el recrecimiento tumoral retardado en ratones tras abandonar el tratamiento (Hec-IA). La figura 12B muestra la prevencion de la activacion de las rutas de PI3K/AKT/mTOR en lisados tumorales mediante una combinacion de compuesto B y paclitaxel.

La figura 13 muestra un efecto sinergico de un tratamiento de acuerdo con la combinacion descrita en el presente documento, segun se evidencia por una inhibicion potenciada del crecimiento tumoral en un modelo de tumor de endometrio resistente al paclitaxel en ratones (HEC59).

Descripcion detallada de la invencion

Varios aspectos de la invencion se describen a continuacion con referencia a aplicaciones ejemplares a modo ilustrativo. Debe entenderse que numerosos detalles espedficos, relaciones, y metodos se exponen con el fin de proporcionar una compresion completa de la invencion. Sin embargo, un experto habitual en la materia reconocera facilmente que la invencion puede ponerse en practica sin uno o mas de los detalles espedficos o con otros metodos. A menos que se indique lo contrario, la presente invencion no esta limitada por el orden de actos o acontecimientos ilustrado, ya que algunos actos pueden producirse en ordenes diferentes y/o de manera concurrente con otros actos o acontecimientos. Ademas, todos los actos o acontecimientos ilustrados son necesarios para implementar una metodologfa de acuerdo con la presente invencion.

La terminologfa empleada en el presente documento tiene como unico objetivo describir realizaciones particulares y no se pretende que limite la invencion. Tal como se usa en el presente documento, las formas del singular "un", "una", "uno" y "el" o "la" pretenden incluir tambien las formas del plural, a menos que el contexto indique claramente lo contrario. Ademas, en la medida que se usan los terminos "incluyendo", "incluye", "que tiene", "tiene", "con", o variantes de los mismos, en la descripcion detallada y/o en las reivindicaciones, dichos terminos pretenden ser inclusivos, de un modo similar al termino "comprender".

El termino "sobre" o "aproximadamente" significa dentro de un intervalo de error aceptable para el valor concreto segun se determine por un experto habitual en la materia, que dependera, en parte, de la forma en la que se mida o determine el valor, es dear, las limitaciones del sistema de medida. Por ejemplo, "aproximadamente" puede significar dentro de 1 o mas de 1 desviacion tfpica, segun la practica de la tecnica. Como alternativa, "aproximadamente" puede significar un intervalo de hasta un 20%, hasta un 10%, hasta un 5%, o hasta un 1% de un valor dado. Como alternativa, en particular en lo referente a sistemas o procesos biologicos, el termino puede significar dentro de un orden de magnitud, preferentemente en un factor 5, y mas preferentemente en un factor 2, de un valor. En los casos donde se describan valores concretos en la solicitud y reivindicaciones, a menos que se indique lo contrario, debe presuponerse el termino "aproximadamente" con el significado de dentro de un intervalo de error aceptable para el valor concreto.

"Tratamiento", "tratar", "paliar" y "aliviar", tal como se usan en el presente documento, se usan de manera intercambiable. Estos terminos se refieren a una estrategia para obtener resultados beneficiosos o deseados, incluyendo, pero sin limitacion, un beneficio terapeutico y/o un beneficio profilactico. Por beneficio terapeutico se entiende la erradicacion o mejona del trastorno subyacente que se este tratando. Asimismo, se logra un beneficio terapeutico con la erradicacion o mejora de uno o mas de los smtomas fisiologicos asociados con el trastorno subyacente, de tal forma que se observa una mejora en el paciente, independientemente de que el paciente pueda estar todavfa afectado por el trastorno subyacente. Para beneficio profilactico, la composicion puede administrarse a un paciente en riesgo de desarrollar una enfermedad particular, o a un paciente que muestra uno o mas de los smtomas fisiologicos de una enfermedad, aunque no se haya efectuado un diagnostico de esta enfermedad.

Tal como se usa en el presente documento, la expresion "afeccion neoplasica" se refiere a la presencia de celulas que poseen caractensticas de crecimiento anormales, tales como una proliferacion no controlada, inmortalidad, potencial metastasico, rapida velocidad de crecimiento y proliferacion, senalizacion oncogenica alterada, y determinados rasgos morfologicos caractensticos. Esto incluye, pero sin limitacion, el crecimiento de: (1) celulas benignas o malignas (por ejemplo, celulas tumorales) que se correlaciona con la sobreexpresion de una tirosina o serina/treonina cinasa; (2) celulas benignas o malignas (por ejemplo, celulas tumorales) que se correlaciona con un nivel anormalmente elevado de actividad de tirosina o serina/treonina cinasa. Las tirosina cinasas ejemplares implicadas en una afeccion neoplasica incluyen, pero sin limitacion, tirosina cinasas receptoras, tales como los receptores de factor de crecimiento epidermico (receptor de EGF), receptores del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), y tirosina cinasas

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citosolicas, tales como src y abl cinasa. Las serina/treonina cinasas no limitantes implicadas en las afecciones neoplasicas incluyen, pero sin limitacion, raf y mek.

La expresion "cantidad eficaz" o "cantidad terapeuticamente eficaz" se refiere a aquella cantidad de un inhibidor descrito en el presente documento que es suficiente para efectuar la aplicacion prevista, incluyendo, pero sin limitacion, el tratamiento de la enfermedad, tal como se define mas adelante. La cantidad terapeuticamente eficaz puede variar dependiendo de la aplicacion prevista (in vitro o in vivo), o del sujeto y la patologfa que se este tratando, por ejemplo, el peso y la edad del sujeto, la gravedad de la patologfa, el modo de administracion y similares, que pueden determinarse facilmente por un experto en la materia. La expresion tambien se aplica a una dosis que inducira una respuesta concreta en celulas diana, por ejemplo, la reduccion de la proliferacion o la regulacion negativa de la actividad de una protema diana. La dosis espedfica variara dependiendo de los compuestos concretos elegidos, de la pauta de dosificacion que se va a seguir, de si se administra o no en combinacion con otros compuestos, del ritmo de administracion, del tejido al que se administra, y del sistema ffsico de dispensacion en el que se transporta.

Una "cantidad subterapeutica" de un agente o tratamiento es una cantidad menor que la cantidad eficaz para ese agente o tratamiento, pero cuando se combina con una cantidad eficaz o subterapeutica de otro agente o tratamiento puede producir un resultado deseado por el medico, debido a, por ejemplo, la sinergia en los efectos eficaces resultantes, o efectos secundarios reducidos.

Una "cantidad terapeutica sinergicamente eficaz" o una "cantidad sinergicamente eficaz" de un agente o tratamiento es una cantidad que, cuando se combina con una cantidad eficaz o subterapeutica de otro agente o tratamiento, produce un efecto mayor que cuando se usan individualmente cualquiera de los dos agentes. En algunas realizaciones, una cantidad terapeutica sinergicamente eficaz de un agente o tratamiento produce un efecto mayor cuando se usa en combinacion que los efectos aditivos de los dos agentes o tratamientos cuando se usan individualmente.

Tal como se usa en el presente documento, "agente" o "agente biologicamente activo" se refiere a un compuesto biologico, farmaceutico o qmmico o a otro resto. Los ejemplos no limitantes incluyen moleculas organicas o inorganicas simples o complejas, un peptido, una protema, un oligonucleotido, un anticuerpo, un derivado de anticuerpo, fragmento de anticuerpo, un derivado de vitamina, un hidrato de carbono, una toxina, o un compuesto quimioterapeutico. Pueden sintetizarse diversos compuestos, por ejemplo, moleculas y oligomeros pequenos (por ejemplo, oligopeptidos y oligonucleotidos), y compuestos organicos sinteticos basados en diversas estructuras principales. Ademas, diversas fuentes naturales pueden proporcionar compuestos para exploracion, tales como extractos vegetales o animales, y similares. Un experto en la materia puede reconocer facilmente que no hay un lfmite en cuanto a la naturaleza estructural de los agentes de la presente invencion.

El termino "agonista", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un compuesto que tiene la capacidad de iniciar o potenciar una funcion biologica de una protema diana, independientemente de que sea inhibiendo la actividad o la expresion de la protema diana. Por consiguiente, el termino "agonista" se define en el contexto del papel biologico del polipeptido diana. Aunque los agonistas preferidos del presente documento interaction espedficamente con (por ejemplo, se unen a) la diana, los compuestos que inician o aumentan la actividad biologica del polipeptido diana mediante la interaccion con otros miembros de la via de transduccion de senales de la que es miembro el polipeptido diana tambien se incluyen de forma espedfica dentro de esta definicion.

Los terminos "antagonista" e "inhibidor" se usan de manera indistinta, y se refieren a un compuesto que tiene la capacidad de inhibir una funcion biologica de una protema diana, independientemente de que sea inhibiendo la actividad o la expresion de la protema diana. Por consiguiente, los terminos "antagonista" e "inhibidores" se definen en el contexto del papel biologico de la protema diana. Aunque los antagonistas preferidos del presente documento interaction espedficamente con (por ejemplo, se unen a) la diana, los compuestos que inhiben una actividad biologica de la protema diana mediante la interaccion con otros miembros de la via de transduccion de senales de la que es miembro la protema dina tambien se incluyen espedficamente dentro de esta definicion. Una actividad biologica preferida inhibida por un antagonista esta asociada con el desarrollo, crecimiento, o diseminacion de un tumor, o una respuesta inmunitaria no deseada como la que se manifiesta en una enfermedad autoinmune.

La expresion "inhibidor de mTOR que se une a e inhibe directamente tanto a mTORCI como a mTORC2 cinasas" se refiere a un inhibidor de mTOR que interactua con y reduce la actividad cinasa de los complejos tanto mTORCI como mTORC2.

Un "agente anticancer", "agente antitumoral" o "agente quimioterapeutico" se refiere a cualquier agente util en el tratamiento de una afeccion neoplasica. Una clase de agentes anticancerosos comprende los agentes quimioterapicos. "Quimioterapia" significa la administracion de uno o mas farmacos quimioterapeuticos y/u otros agentes a un paciente con cancer mediante diversos metodos, incluyendo la administracion intravenosa, oral, intramuscular, intraperitoneal, intravesical, subcutanea, transdermica, bucal, o la inhalacion o en forma de un supositorio.

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La expresion "proliferacion celular" se refiere a un fenomeno mediante el cual ha cambiado el numero de celulas como resultado de una division. Esta expresion tambien abarca el crecimiento celular mediante el cual ha cambiado la morfologfa celular (por ejemplo, aumento de tamano) consecuente con una senal proliferativa.

Las expresiones "coadministracion", "administrado en combinacion con" y sus equivalentes gramaticales, abarcan la administracion de dos o mas agentes a un animal, de tal modo que ambos agentes y/o sus metabolitos estan presentes en el animal al mismo tiempo. La coadministracion incluye la administracion simultanea en composiciones separadas, la administracion en diferentes momentos en composiciones separadas, o la administracion en una composicion en la que ambos agentes estan presentes. Los agentes coadministrados pueden encontrarse en la misma formulacion. Los agentes coadministrados tambien pueden estar en diferentes formulaciones.

Un "efecto terapeutico", tal como se usa en el presente documento, abarca un beneficio terapeutico y/o un beneficio profilactico tal como se ha descrito anteriormente. Un beneficio profilactico incluye el retraso o la eliminacion de la aparicion de una enfermedad o afeccion, el retraso o la eliminacion del comienzo de los smtomas de una enfermedad o afeccion, la ralentizacion, interrupcion, o reversion del avance de una enfermedad o afeccion, o cualquier combinacion de las mismas.

La expresion "sal farmaceuticamente aceptable" se refiere a sales procedentes de una serie de contraiones organicos e inorganicos de sobra conocidos en la tecnica. Pueden formarse sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables con acidos inorganicos y acidos organicos. Los acidos inorganicos a partir de los cuales pueden derivarse sales incluyen, por ejemplo, acido clorddrico, acido bromlddrico, acido sulfurico, acido mtrico, acido fosforico, y similares. Los acidos organicos a partir de los cuales pueden derivarse sales incluyen, por ejemplo, acido acetico, acido propionico, acido glicolico, acido piruvico, acido oxalico, acido maleico, acido malonico, acido sucdnico, acido fumarico, acido tartarico, acido dtrico, acido benzoico, acido cinamico, acido mandelico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido p-toluenosulfonico, acido salidlico, y similares. Sales de adicion de bases o farmaceuticamente activas se pueden formar con bases inorganicas y bases organicas. Las bases inorganicas a partir de los cuales pueden derivarse sales incluyen, por ejemplo, sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, hierro, cinc, cobre, manganeso, aluminio, y similares. Las bases organicas a partir de las cuales pueden obtenerse sales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas, incluyendo aminas sustituidas de origen natural, aminas dclicas, resinas de intercambio ionico basicas, y similares, espedficamente aquellas tales como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, y etanolamina. En algunas realizaciones, la sal de adicion de base farmaceuticamente aceptable se selecciona entre sales de amonio, potasio, sodio, calcio, y magnesio.

"Portador farmaceuticamente aceptable" o "excipiente farmaceuticamente aceptable" incluye cualquiera y a todos los disolventes, medios de dispersion, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos y retardantes de la absorcion y similares. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmaceuticamente activas es bien conocido en la tecnica. Excepto en el caso de que cualquier agente o medio convencional sea incompatible con el principio activo, se contempla su uso en las composiciones terapeuticas de la invencion. Tambien pueden incorporarse principios activos complementarios en las composiciones.

La "transduccion de senales" es un proceso durante el cual las senales estimuladoras o inhibidoras se transmiten al interior o dentro de una celula para provocar una respuesta intracelular. Un modulador de una via de transduccion de senales se refiere a un compuesto que modula la actividad de una o mas protemas celulares que se identifican geneticamente en la misma via espedfica de transduccion de senales. Un modulador puede aumentar (agonista) o suprimir (antagonista) la actividad de una molecula de senalizacion.

La expresion "inhibicion selectiva" o "inhibir de forma selectiva", aplicada a un agente biologicamente activo se refiere a la capacidad del agente para reducir de forma selectiva la actividad de senalizacion de la diana en comparacion con la actividad de senalizacion fuera de la diana, por medio de la interaccion directa o indirecta con la diana.

"Sujeto" se refiere a un animal, tal como un mairnfero, por ejemplo, un ser humano. Los metodos descritos en el presente documento pueden ser utiles tanto en agentes terapeuticos para seres humanos, aplicaciones preclfnicas y veterinarias. En algunas realizaciones, el sujeto es un mamffero, y en algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano.

La expresion "in vivo" se refiere a un acontecimiento que se produce en el cuerpo de un sujeto.

La expresion "in vitro" se refiere a un acontecimiento que se produce fuera del cuerpo de un sujeto. Por ejemplo, un ensayo in vitro" abarca cualquier ensayo efectuado fuera de un sujeto de ensayo. Los ensayos in vitro abarcan ensayos a base de celulas en los que se emplean celulas vivas o muertas. Los ensayos in vitro tambien abarcan ensayos sin celulas, en los que no se emplean celulas intactas.

A menos que se indique lo contrario, los enlaces de restos del nombre del compuesto se encuentran en el resto citado mas a la derecha. Es decir, el nombre del sustituyente comienza con un resto terminal, continua con cualquier resto enlazante, y termina con el resto enlazante. Por ejemplo, heteroariltio alquilo C-Mtiene un grupo heteroarilo conectado

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a traves de un tio azufre a un radical alquilo C1-4 que se conecta con la especie qmmica que porta el sustituyente. Esta condicion no se aplica en los casos donde se representa una formula tal como, por ejemplo "-L-alquil Ci-10-cicloalquilo C3-8". En dicho caso, el grupo terminal es un grupo cicloalquilo C3-8 unido a un resto enlazante de alquilo C1-10 que esta unido a un elemento L, que por sf mismo esta conectado a la especie qmmica que porta el sustituyente.

"Alquilo" se refiere a un radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que consiste unicamente en atomos de carbono e hidrogeno, que no contiene insaturaciones, que tiene de uno a diez atomos de carbono (por ejemplo, alquilo C1-C10). En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "1 a 10", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "1 a 10 atomos de carbono" significa que el grupo alquilo puede consistir en 1 atomo de carbono, 2 atomos de carbono, 3 atomos de carbono, etc., hasta e incluyendo 10 atomos de carbono, aunque la presente definicion tambien abarca la aparicion del termino "alquilo", donde no se indica un intervalo numerico. En algunas realizaciones, es un grupo alquilo C1-C4. Los grupos alquilo tfpicos incluyen, pero no estan en modo alguno limitados a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, isobutilo, butilo terciario, pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, y similares. El alquilo esta unido al resto de la molecula por un solo enlace, por ejemplo, metilo (Me), etilo (Et), n-propilo, 1 -metiletilo (/so-propilo), n-butilo, n-pentilo, 1,1 -dimetiletilo (f-butilo), 3-metilhexilo, 2-metilhexilo, y similares. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo alquilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2 donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El termino "halo" o "halogeno" se refiere a fluor, cloro, bromo, o yodo.

El termino "haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno o mas grupos halo, por ejemplo, clorometilo,

2-bromoetilo, 3-yodopropilo, trifluorometilo, perfluoropropilo, 8-clorononilo, y similares.

"Acilo" se refiere a los grupos (alquil)-C(O)-, (aril)-C(O)-, (heteroaril)-C(O)-, (heteroalquil)-C(O)-, y (heterocicloalquil)-C(O)-, en el que el grupo esta unido a la estructura parental a traves de la funcionalidad carbonilo. En algunas realizaciones, es un radical acilo C1-C10 que se refiere al numero total de atomos de cadena o anillo de la porcion de alquilo, arilo, heteroarilo o heterocicloalquilo del grupo aciloxi mas el carbono de carbonilo del acilo, es decir, otros tres atomos de anillo o cadena mas carbonilo. En caso de que el radical R sea heteroarilo o heterocicloalquilo, los heteroatomos de anillo o cadena contribuyen al numero total de atomos de cadena o anillo. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, el "R" de un grupo aciloxi esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(o)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o pO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Cicloalquilo" se refiere a un radical monodlcico o polidclico que contiene unicamente carbono e hidrogeno, y puede estar saturado, o parcialmente insaturado. Los grupos cicloalquilo incluyen grupos que tienen de 3 a 10 atomos de anillo (es decir, cicloalquilo C2-C10). En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "3 a 10", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "3 a 10 atomos de carbono" significa que el grupo cicloalquilo puede consistir en 3 atomos de carbono, etc., hasta e incluyendo 10 atomos de carbono. En algunas realizaciones, es un radical cicloalquilo C3-C8. En algunas realizaciones, es un radical cicloalquilo C3-C5. los ejemplos ilustrativos de grupos cicloalquilo incluyen, pero sin limitacion, los siguientes restos: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo, ciclodecilo, norbornilo, y similares. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo cicloalquilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra-N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El termino "alquil C1-10-cicloalquilo C3-8" se usa para describir un grupo alquilo, de cadena lineal o ramificada y que contiene 1 a 10 atomos de carbono, unido a un grupo enlazador cicloalquilo que contiene de 3 a 8 carbonos, tal como, por ejemplo, 2-metil ciclopropilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

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El termino "bicidoalquilo" se refiere a una estructura que consiste en dos restos cicloalquilo, sin sustituir o sustituidos, que tienen dos o mas atomos en comun. En caso de que los restos cicloalquilo tengan exactamente dos atomos en comun, se dice que estan "condensados". Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion, biciclo[3.1.0]hexilo, perhidronaftilo, y similares. En caso de que los restos cicloalquilo tengan mas de dos atomos en comun, se dice que estan "puenteados". Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion, biciclo[3.2.1]heptilo ("norbornilo"), biciclo[2.2.2]octilo, y similares.

Tal como se usa en el presente documento, el termino "heteroatomo" o "heteroatomo de anillo" pretende incluir oxfgeno (O), nitrogeno (N), azufre (S), fosforo (P), y silicio (Si).

"Heteroalquilo", "heteroalquenilo" y "heteroalquinilo" incluyen, opcionalmente, radicales alquilo, alquenilo y alquinilo sustituidos y que tienen uno o mas atomos de la cadena principal seleccionados entre un atomo distinto de carbono, por ejemplo, oxfgeno, nitrogeno, azufre, fosforo o combinaciones de los mismos. Puede proporcionarse un intervalo numerico, por ejemplo, heteroalquilo C1-C4 que se refiere a la longitud total de la cadena, que en este ejemplo es de 4 atomos de longitud. Por ejemplo, un radical -CH2OCH2CH3 se cita como heteroalquilo "C4", que incluye el centro de heteroatomo en la descripcion de la longitud de la cadena de atomos. La conexion al resto de la molecula puede ser a traves de un heteroatomo o de un carbono en la cadena de heteroalquilo. Puede sustituirse un grupo heteroalquilo con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El termino "heteroalquilarilo" se refiere a un grupo heteroalquilo, tal como se ha definido anteriormente, que esta unido a un grupo arilo, y puede estar unido a un punto terminal o a traves de una porcion ramificada del heteroalquilo, por ejemplo, un resto benciloximetilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroalquilheteroarilo" se refiere, igualmente, a un grupo heteroalquilo que esta unido a un resto heteroarilo, por ejemplo, un grupo etoximetilpiridilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroaril-heterociclilo" se refiere a un grupo heteroalquilo, tal como se ha definido anteriormente, que esta unido a un grupo heterodclico, por ejemplo, 4(3-aminopropil)-N-piperazinilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroalquil-cicloalquilo C3-8" se refiere a un grupo heteroalquilo, tal como se ha definido anteriormente, que esta unido a un grupo alquilo dclico que contiene 3 a 8 carbonos, por ejemplo, 1-aminobutil-4-ciclohexilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterobicicloalquilo" se refiere a una estructura de bicicloalquilo, que esta sin sustituir o sustituida, en la que se reemplaza al menos un atomo de carbono con un heteroatomo seleccionado independientemente entre oxfgeno, nitrogeno, y azufre.

El termino "heteroespiroalquilo" se refiere a una estructura espiroalquilo, que esta sin sustituir o sustituida, en la que se reemplaza al menos un atomo de carbono con un heteroatomo seleccionado independientemente entre oxfgeno, nitrogeno, y azufre.

Un resto "alqueno" se refiere a un grupo que consiste en al menos dos atomos de carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono, y un resto "alquino" se refiere a un grupo que consiste en al menos dos atomos de carbono y al menos un triple enlace carbono-carbono. El resto alquilo, ya este saturado o insaturado, puede ser ramificado, de cadena lineal, o dclico.

"Alquenilo" se refiere a un grupo radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificado que consiste unicamente en atomos de carbono e hidrogeno, que contiene al menos un doble enlace, y que tiene de dos a diez atomos de carbono (es decir, alquenilo C2-C10). En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "2 a 10", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "2 a 10 atomos de carbono" significa que el grupo alquenilo puede consistir en 2 atomos de carbono, 3 atomos de carbono, etc., hasta e incluyendo 10 atomos de carbono. En determinadas realizaciones, un alquenilo comprende de dos a ocho atomos de carbono. En otras realizaciones, un alquenilo comprende de dos a cinco atomos de carbono (por ejemplo, alquenilo C2-C5). El alquenilo esta unido al resto de la molecula por un solo enlace, por ejemplo, etenilo (es decir, vinilo), prop-1-enilo (es decir, alilo), but-1-enilo, pent-1-enilo, penta-1,4-dienilo, y similares. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo alquenilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2),

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-S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El termino "alquenil C2-io-heteroalquilo" se refiere a un grupo que tiene un resto alquenilo, que contiene 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, que esta unido a un grupo enlazador heteroalquilo, tal como, por ejemplo, aliloxi, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquinil C2-io-heteroalquilo" se refiere a un grupo que tiene un resto alquinilo, que esta sin sustituir o sustituida, que contiene 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, que esta unido a un grupo enlazador heteroalquilo, tal como, por ejemplo, 4-but-1-inoxi, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "haloalquenilo" se refiere a un grupo alquenilo sustituido con uno o mas grupos halo.

A menos que se especifique otra cosa, el termino "cicloalquenilo" se refiere a una estructura de anillo alifatica dclica de 3 a 8 miembros, opcionalmente sustituida con alquilo, hidroxi y halo, que tiene 1 o 2 enlaces etilenicos, tales como metilciclopropenilo, trifluorometilciclopropenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, 1,4-ciclohexadienilo, y similares.

"Alquinilo" se refiere a un grupo radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificado que consiste unicamente en atomos de carbono e hidrogeno, que contiene al menos un triple enlace, que tiene de dos a diez atomos de carbono (es decir, alquinilo C2-C10). En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "2 a 10", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "2 a 10 atomos de carbono" significa que el grupo alquinilo puede consistir en 2 atomos de carbono, 3 atomos de carbono, etc., hasta e incluyendo 10 atomos de carbono. En determinadas realizaciones, un alquinilo comprende de dos a ocho atomos de carbono. En otras realizaciones, un alquinilo tiene de dos a cinco atomos de carbono (por ejemplo, alquinilo C2-C5). El alquinilo esta unido al resto de la molecula por un solo enlace, por ejemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, y similares. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo alquinilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra-N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(o)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

El termino alquinil C2-10-cicloalquilo C3-8 se refiere a un grupo que contiene un grupo alquinilo, que contiene de 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, que esta unido a un grupo enlazador cicloalquilo que contiene de 3 a 8 carbonos, tal como, por ejemplo, 3-prop-3-inicilciclopent-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "haloalquinilo" se refiere a un grupo alquinilo sustituido con uno o mas grupos halo independientes.

"Amino" o "amina" se refiere a un grupo radical -N(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo, a menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva. Cuando un grupo -N(Ra)2 tiene dos Ra distintos de hidrogeno, pueden combinarse con el atomo de nitrogeno para formar un anillo de 4, 5, 6, o 7 miembros. Por ejemplo, se entiende que -N(Ra)2 incluye, pero sin limitacion, 1 -pirrolidinilo y 4-morfolinilo. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo amino esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra), -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(R)2, -N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(o)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo y cada uno de estos restos puede estar opcionalmente sustituido, tal como se define en el presente documento.

"Amida" o "amido" se refiere a un resto qmmico con la formula -C(O)N(R)2 o -NHC(O)R, donde R se selecciona entre el grupo que consiste en hidrogeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a traves de un carbono de anillo) y heteroalidclico (unido a traves de un carbono de anillo), pudiendo estar cada uno de estos restos opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, es un radical amido o amida C1-C4, que incluye el carbonilo de amida en el numero total de carbonos en el radical. El R2' de -N(R)2 de la amida puede tomarse opcionalmente conjuntamente con el nitrogeno al que esta unido para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un grupo amido esta opcionalmente sustituido de manera independiente con uno o mas de los sustituyentes descritos en el presente documento para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, o heterocicloalquilo. Una amida puede ser un aminoacido o una molecula de peptido unida a un compuesto de formula

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(I), formando de este modo un profarmaco. Puede amidarse cualquier cadena lateral de amina, hidroxi o carboxilo en los compuestos descritos en el presente documento. Los procedimientos y grupos espedficos para producir dichas amidas son conocidos pos los expertos en la materia y pueden encontrarse facilmente en fuentes de referencia, tales como Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Ed., John Wiley & Sons, New York, N.Y., 1999, que se incorpora al presente documento por referencia en su totalidad.

"Aromatico" o "arilo" se refiere a un radical aromatico con seis a diez atomos de anillo (por ejemplo, aromatico C6-C10 o arilo C6-C10) que tiene al menos un anillo que tiene un sistema de electrones pi conjugado que es carbodclico (por ejemplo, fenilo, fluorenilo, y naftilo). Los radicales bivalentes formados por derivados de benceno sustituidos y que tienen tres valencias libres en los atomos de anillo se denominan radicales fenileno sustituidos. Los radicales bivalentes procedentes de radicales hidrocarburo polidclicos univalentes cuyos nombres terminan en "-ilo" mediante la eliminacion de un atomo de hidrogeno del atomo de carbono con la valencia libre se nombran anadiendo "-ideno" al nombre del radical univalente correspondiente, por ejemplo, un grupo naftilo con dos puntos de union se denomina naftilideno. En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "6 a 10", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "6 a 10 atomos de anillo" significa que el grupo arilo puede consistir en 6 atomos de anillo, 7 atomos de anillo, etc., hasta e incluyendo 10 atomos de anillo. El termino incluye grupos monodclicos o polidclicos de anillo condensado (es decir, anillos que comparten pares de atomos de anillo adyacentes). A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un resto arilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(o)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o pOs(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Heteroarilo" o, como alternativa, "heteroaromatico" se refiere a un radical aromatico de 5 a 18 miembros (por ejemplo, heteroarilo C5-C13) que incluye uno o mas heteroatomos de anillo seleccionados entre nitrogeno, oxfgeno y azufre, y que puede ser un sistema de anillo monodclico, bidclico, tridclico o tetradclico. En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "5 a 18", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "5 a 18 atomos de anillo" significa que el grupo heteroarilo puede consistir en 5 atomos de anillo, 6 atomos de anillo, etc., hasta e incluyendo 18 atomos de anillo. Los radicales bivalentes procedentes de radicales heteroarilo univalentes cuyos nombres terminan en "-ilo" mediante la eliminacion de un atomo de hidrogeno del atomo con la valencia libre se nombran anadiendo "-ideno" al nombre del radical univalente correspondiente, por ejemplo, un grupo piridilo con dos puntos de union es un piridilideno. Un resto "heteroaromatico" o "heteroarilo" que contiene N se refiere a un grupo aromatico en el que al menos uno de los atomos de la cadena principal del anillo es un atomo de nitrogeno. El grupo heteroarilo polidclico puede estar condensado o no condensado. El heteroatomo o los heteroatomos en el radical heteroarilo esta(n) opcionalmente oxidado(s). Uno o mas atomos de nitrogeno, en caso de que esten presentes, estan opcionalmente cuaternizados. El heteroarilo esta unido al resto de la molecula mediante cualquier atomo de el(los) anillo(s). Los ejemplos de heteroarilos incluyen, pero sin limitacion, azepinilo, acridinilo, benzimidazolilo, benzindolilo, 1,3-benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzo[d]tiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[6][1,4]dioxepinilo, benzo[6][1,4]oxazinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzonaftofuranilo, benzoxazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzoxazolilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzofurazanilo, benzotiazolilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzotieno[3,2-d]pirimidinilo, benzotriazolilo,

benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinolinilo, ciclopenta[d]pirimidinilo,

6.7- dihidro-5H-ciclopenta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinil, 5,6-dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5,6-dihdrobenzo[h]cinnolinilo,

6.7- dihidro-5H-benzo[6,7]ciclohepta[1,2-c]piridazinilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furazanilo, furanonilo,

furo[3,2-c]piridinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]pirimidinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]piridazinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d]piridinilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, 5,8-metano-5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, naftiridinilo, 1,6-naftiridinonilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo,

5,6,6a,7,8,9,10,10a-octahidrobenzo[h]quinazolinilo, 1-fenil-1H-pirrolilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazolo[3,4-d]pirimidinilo, piridinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, pirido[3,4-d]pirimidinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, 5,6,7,8-tetrahidrobenzo[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 6,7,8,9-tetrahidro-5H-ciclohepta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 5,6,7,8-tetrahidropirido[4,5-c]piridazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiapiranilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo, tieno[3,2-d]pirimidinilo, tieno[2,3-c]piridinilo, y tiofenilo (es decir, tienilo). A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un resto heteroarilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

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Los terminos "aril-alquilo", "arilalquilo" y "aralquilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace con el arilo terminal, como se ha definido anteriormente, del resto aril-alquilo. Los ejemplos de grupos aril-alquilo incluyen, pero sin limitacion, bencilo, fenetilo, fenpropilo y fenbutilo opcionalmente sustituidos, tales como 4-clorobencilo, 2,4-dibromobencilo, 2-metilbencilo,

2-(3-fluorofenil)etilo, 2-(4-metilfenil)etilo, 2-(4-(trifluorometil)fenil)etilo, 2-(2-metoxifenil)etilo, 2-(3-nitrofenil)etilo,

2- (2,4-diclorofenil)etilo, 2-(3,5-dimetoxifenil)etilo, 3-fenilpropilo, 3-(3-clorofenil)propilo, 3-(2-metilfenil)propilo,

3- (4-metoxifenil)propilo, 3-(4-(trifluorometil)fenil)propilo, 3-(2,4-diclorofenil)propilo, 4-fenilbutilo, 4-(4-clorofenil)butilo,

4- (2-metilfenil)butilo, 4-(2,4-diclorofenil)butilo, 4-(2-metoxifenil)butilo, y 10-fenildecilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquilarilo C1.10" tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo, como se ha definido anteriormente, que contiene de 1 a 10 atomos de carbono, ramificado o sin ramificar, en el que el grupo arilo reemplaza a un hidrogeno en el grupo alquilo, por ejemplo, 3-fenilpropilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

La expresion "alquil C2-10 monocicloarilo" se refiere a un grupo que contiene un grupo alquilo terminal, de cadena ramificada o lineal y que contiene de 2 a 10 atomos unidos a un grupo arilo enlazador que tiene unicamente un anillo, tal como, por ejemplo, 2-fenil etilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

La expresion "alquil C1-10 bicicloarilo" se refiere a un grupo que contiene un grupo alquilo terminal, de cadena ramificada o lineal y que contiene de 2 a 10 atomos unidos a un grupo arilo enlazador que es bidclico, tal como, por ejemplo, 2-(1-naftil)-etilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "aril-cicloalquilo" y "arilcicloalquilo" se usan para describir un grupo en el que el grupo arilo terminal esta unido a un grupo cicloalquilo, por ejemplo, fenilciclopentilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "heteroaril-cicloalquilo C3-8" y "heteroaril-cicloalquilo C3-8" se usan para describir un grupo en el que el grupo heteroarilo terminal esta unido a un grupo cicloalquilo, que contiene de 3 a 8 atomos de carbono, por ejemplo, pirid-2-ilciclopentilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroaril-heteroalquilo" se refiere a un grupo en el que el grupo heteroarilo terminal esta unido a un grupo heteroalquilo enlazador, tal como, por ejemplo, pirid-2-il metilenoxi, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "aril-alquenilo", "arilalquenilo" y "aralquenilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquenilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto de aralquenilo con la porcion terminal de arilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, estiril (2-fenilvinilo), fenpropenilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "aril-alquenilo C2-10" significa un arilalquenilo como se ha descrito anteriormente en el que el resto alquenilo contiene de 2 a 10 atomos de carbono, tal como, por ejemplo, estiril (2-fenilvinilo), y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquenil C2-10-arilo" se usa para describir un grupo en el que el grupo alquenilo terminal, que contiene de 2 a 10 atomos de carbono y que puede ser de cadena ramificada o lineal, esta unido al resto de arilo que forma la porcion de enlace del resto alquenil-arilo, tal como, por ejemplo, 3-propenilnaft-1-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "aril-alquinilo", "arilalquinilo" y "aralquinilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquinilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto aril-alquinilo con la porcion terminal de arilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 3-fenil-1-propinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "aril-alquinilo C2-10" significa un arilalquinilo como se ha descrito anteriormente en el que el resto alquinilo contiene de dos a diez carbonos, tal como, por ejemplo, 3-fenil-1-propinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquinil C2-10 arilo" significa un grupo que contiene un resto alquinilo unido a un grupo enlazador de arilo, ambos como se han definido anteriormente, en el que el resto alquinilo contiene de dos a diez carbonos, tal como, por ejemplo, 3-propinil-naft-1-ilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "aril-oxi", "ariloxi" y "aroxi" se usan para describir un grupo arilo terminal unido a un atomo enlazador de oxfgeno. Los grupos aril-oxi tfpicos incluyen fenoxi, 3,4-diclorofenoxi, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

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Los terminos "aril-oxialquilo", "ariloxialquilo" y "aroxialquilo" se usan para describir un grupo en el que un grupo alquilo esta sustituido con un grupo aril-oxi terminal, por ejemplo, pentafluorofenoximetilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alcoxi Ci-io-alquilo C1.10" se refiere a un grupo en el que un grupo alcoxi, que contiene de 1 a 10 atomos de carbono y un atomo de oxfgeno dentro de la cadena ramificada o lineal, esta unido a un grupo enlazador alquilo, de cadena ramificada o lineal que contiene de 1 a 10 atomos de carbono, tal como, por ejemplo, metoxipropilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alcoxi C-Mo-alquenilo C2-10" se refiere a un grupo en el que un grupo alcoxi, que contiene de 1 a 10 atomos de carbono y un atomo de oxfgeno dentro de la cadena ramificada o lineal, esta unido a un grupo enlazador alquenilo, de cadena ramificada o lineal que contiene de 1 a 10 atomos de carbono, tal como, por ejemplo,

3-metoxibut-2-en-1-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alcoxi C1-10-alquinilo C2-10" se refiere a un grupo en el que un grupo alcoxi, que contiene de 1 a 10 atomos de carbono y un atomo de oxfgeno dentro de la cadena ramificada o lineal, esta unido a un grupo enlazador alquinilo, de cadena ramificada o lineal que contiene de 1 a 10 atomos de carbono, tal como, por ejemplo, 3-metoxibut-2-in-1-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterocicloalquenilo" se refiere a una estructura de cicloalquenilo, que esta sin sustituir o sustituida en la que al menos un atomo de carbono esta reemplazado con un heteroatomo seleccionado entre oxfgeno, nitrogeno, y azufre.

Los terminos "heteroaril-oxi", "heteroaril-oxi", "heteroariloxi", "heteroariloxi", "hetaroxi" y "heteroaroxi" se usan para describir un grupo heteroarilo terminal, que esta sin sustituir o sustituido, unido a un atomo enlazador de oxfgeno. Los grupos heteroaril-oxi tfpicos incluyen 4,6-dimetoxipirimidin-2-iloxi y similares.

Los terminos "heteroarilalquilo", "heteroarilalquilo", "heteroaril-alquilo", "heteroaril-alquilo", "heteralquilo" y "heteroaralquilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto heteroaralquilo con la porcion terminal de heteroarilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 3-furilmetilo, tienilo, furfurilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroaril-alquilo C1-10" se usa para describir un grupo heteroaril alquilo como se ha descrito anteriormente donde el grupo alquilo contiene de 1 a 10 atomos de carbono. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquil C1-10-heteroarilo" se usa para describir un alquilo unido a un grupo heteroarilo como se ha descrito anteriormente donde el grupo alquilo contiene de 1 a 10 atomos de carbono. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "heteroarilalquenilo", "heteroarilalquenilo", "heteroaril-alquenilo", "heteroaril-alquenilo", "heteralquenilo" y "heteroaralquenilo" se usan para describir un grupo heteroarilalquenilo en el que la cadena de alquenilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto heteroaralquenilo con la porcion de heteroarilo terminal, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 3-(4-piridil)-1 -propenilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino grupo "heteroaril-alquenilo C2-10" se usa para describir un grupo como se ha descrito anteriormente en el que el grupo alquenilo contiene de 2 a 10 atomos de carbono. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquenil C2-10-heteroarilo" se usa para describir un grupo que contiene un grupo alquenilo, que es de cadena ramificada o lineal y que contiene de 2 a 10 atomos de carbono, y esta unido a un grupo enlazador heteroarilo, tal como, por ejemplo, 2-estiril-4-piridilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "heteroarilalquinilo", "heteroarilalquinilo", "heteroaril-alquinilo", "heteroaril-alquinilo", "heteralquinilo" y "heteroaralquinilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquinilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto heteroaralquinilo con la porcion de heteroarilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 4-(2-tienil)-1-butinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroaril-alquinilo C2-10" se usa para describir un grupo heteroarilalquinilo como se ha descrito anteriormente en el que el grupo alquinilo contiene de 2 a 10 atomos de carbono. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

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El termino "alquinil C2-io-heteroarilo" se usa para describir un grupo que contiene un grupo alquinilo que contiene de 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, que esta unido a un grupo enlazador heteroarilo, tal como, por ejemplo, 4(but-1-inil)tien-2-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclilo" se refiere a un anillo de cuatro, cinco, seis, o siete miembros que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroatomos seleccionados independientemente entre nitrogeno, oxfgeno y azufre. El anillo de cuatro miembros tiene cero dobles enlaces, el anillo de cinco miembros tiene de cero a dos dobles enlaces, los anillos de seis y siete miembros tiene de cero a tres dobles enlaces. El termino "heterociclilo" tambien incluye grupos bidclicos en los que el anillo de heterociclilo esta condensado a otro grupo heterociclilo monodclico, o a un anillo carbodclico aromatico o no aromatico de cuatro a seis miembros. El grupo heterociclilo puede estar unido al resto molecular parental a traves de cualquier atomo de carbono o atomo de nitrogeno en el grupo.

"Heterocicloalquilo" se refiere a un radical de anillo estable de 3 a 18 miembros no aromatico que comprende d dos a doce atomos de carbono y de uno a seis heteroatomos seleccionados entre nitrogeno, oxfgeno y azufre. En cada uno de los casos en los que aparece en el presente documento, un intervalo numerico, tal como "3 a 18", se refiere a cada numero entero en el intervalo dado; por ejemplo, "3 a 18 atomos de anillo" significa que el grupo heterocicloalquilo puede consistir en 3 atomos de anillo, 4 atomos de anillo, etc., hasta e incluyendo 18 atomos de anillo. En algunas realizaciones, es un heterocicloalquilo C5-C10. En algunas realizaciones, es un heterocicloalquilo C4-C10. En algunas realizaciones, es un heterocicloalquilo C3-C10. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, el radical heterocicloalquilo es un sistema de anillo monodclico, bidclico, tridclico o tetradclico, que puede incluir sistemas de anillo condensados o puenteados. Los heteroatomos en el radical heterocicloalquilo pueden estar opcionalmente oxidados. Uno o mas de los atomos de nitrogeno, en caso de estar presentes, estan opcionalmente cuaternizados. El radical heterocicloalquilo esta parcial o completamente saturado. El heterocicloalquilo puede estar unido al resto de la molecula a traves de cualquier atomo de el o los anillos. Los ejemplos de dichos radicales heterocicloalquilo incluyen, pero sin limitacion, dioxolanilo, tienil[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperazinilo,

2- oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofurilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo, y 1,1-dioxo-tiomorfolinilo. A menos que se indique espedficamente lo contrario en la memoria descriptiva, un resto heterocicloalquilo esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes que son independientemente: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, hidroxi, halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, trimetilsilanilo, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (donde t es 1 o 2), -S(O)tORa (donde t es 1 o 2), -S(O)tN(Ra)2 (donde t es 1 o 2), o PO3(Ra)2, donde cada Ra es independientemente hidrogeno, alquilo, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo.

"Heterocicloalquilo" tambien incluye sistemas de anillo bidclicos en los que un anillo no aromatico, normalmente con 3 a 7 atomos de anillo, contiene al menos 2 atomos de carbono ademas de 1-3 heteroatomos seleccionados independientemente entre oxfgeno, azufre, y nitrogeno, asf como combinaciones que comprenden al menos uno de los heteroatomos anteriores; y el otro anillo, normalmente con 3 a 7 atomos de anillo, contiene opcionalmente 1-3 heteroatomos seleccionados independientemente entre oxfgeno, azufre, y nitrogeno y no es aromatico.

Los terminos "heterociclilalquilo", "heterociclil-alquilo", "hetciclilalquilo", y "hetciclil-alquilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto heterociclilalquilo con la porcion terminal de heterociclilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo,

3- piperidinilmetilo y similares. El termino "heterocicloalquileno" se refiere al derivado divalente de heterocicloalquilo.

El termino "alquil C1-10-heterociclilo" se refiere a un grupo como se ha definido anteriormente donde el resto alquilo contiene de 1 a 10 atomos de carbono. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquilo C1-10" se refiere a un grupo que contiene un grupo heterodclico terminal unido a un grupo alquilo enlazador que contiene de 1 a 10 carbonos y que es de cadena lineal o ramificada, tal como, por ejemplo,

4- morfolinil etilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "heterociclilalquenilo", "heterociclil-alquenilo", "hetciclilalquenilo" y "hetciclilalquenilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquenilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace del resto heterociclilalquenilo con la porcion terminal de heterociclilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 2-morfolinil-1-propenilo y similares. El termino "heterocicloalquileno" se refiere al derivado divalente de heterociclilalquenilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquenilo C2-10" se refiere a un grupo como se ha definido anteriormente donde el grupo alquenilo contiene de 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, tal como, por ejemplo,

4-(N-piperazinil)-but-2-en-1-ilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "heterociclilalquinilo", "heterociclil-alquinilo", "hetciclilalquinilo" y "hetciclilalquinilo" se usan para describir un grupo en el que la cadena de alquinilo puede ser una cadena ramificada o lineal que forma una porcion de enlace

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del resto heterociclilalquinilo con la porcion terminal de heterociclilo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, 2-pirrolidinil-1 -butinilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquinilo C2-10" se refiere a un grupo como se ha definido anteriormente donde el grupo alquinilo contiene de 2 a 10 atomos de carbono y es de cadena ramificada o lineal, tal como, por ejemplo, 4-(N-piperazinil)-but-2-in-1-ilo, y similares.

El termino "aril-heterociclilo" se refiere a un grupo que contiene un grupo arilo terminal unido a un grupo enlazador heterodclico, tal como, por ejemplo, N4-(4-fenil)-piperazinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heteroaril-heterociclilo" se refiere a un grupo que contiene un grupo heteroarilo terminal unido a un grupo enlazador heterodclico, tal como, por ejemplo, N4-(4-piridil)-piperazinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "carboxialquilo" se refiere a un grupo carboxilo terminal (-COOH) unido a grupos alquilo de cadena ramificada o lineal como se han definido anteriormente.

El termino "carboxialquenilo" se refiere a un grupo carboxilo terminal (-COOH) unido a grupos alquenilo de cadena ramificada o lineal como se han definido anteriormente.

El termino "carboxialquinilo" se refiere a un grupo carboxilo terminal (-COOH) unido a grupos alquinilo de cadena ramificada o lineal como se han definido anteriormente.

El termino "carboxicicloalquilo" se refiere a un grupo carboxilo terminal (-COOH) unido a una estructura dclica alifatica de anillo como se ha definido anteriormente.

El termino "carboxicicloalquenilo" se refiere a un grupo carboxilo terminal (-COOH) unido a una estructura dclica alifatica de anillo que tiene enlaces etilenicos como se han definido anteriormente.

Los terminos "cicloalquilalquilo" y "cicloalquil-alquilo" se refieren a un grupo cicloalquilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquilo, por ejemplo, ciclopropilmetilo, ciclohexiletilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "cicloalquilalquenilo" y "cicloalquil-alquenilo" se refieren a un grupo cicloalquilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquenilo, por ejemplo, ciclohexilvinilo, cicloheptilalilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "cicloalquilalquinilo" y "cicloalquil-alquinilo" se refieren a un grupo cicloalquilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquinilo, por ejemplo, ciclopropilpropargilo, 4-ciclopentil-2-butinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "cicloalquenilalquilo" y "cicloalquenil-alquilo" se refieren a un grupo cicloalquenilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquilo, por ejemplo, 2-(ciclopenten-1-il)etilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

Los terminos "cicloalquenilalquenilo" y "cicloalquenil-alquenilo" se refieren a un grupo cicloalquenilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquenilo, por ejemplo, 1-(ciclohexen-3-il)alilo y similares.

Los terminos "cicloalquenilalquinilo" y "cicloalquenil-alquinilo" se refieren a un grupo cicloalquenilo terminal como se ha definido anteriormente unido a un grupo alquinilo, por ejemplo, 1-(ciclohexen-3-il)propargilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alcoxi" se refiere al grupo -O-alquilo, que incluye de 1 a 8 atomos de carbono de una configuracion lineal, ramificada o dclica y combinaciones de las mismas, unido a la estructura parental a traves de un oxfgeno. Los ejemplos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, ciclopropiloxi, ciclohexiloxi y similares. "Alcoxi inferior" se refiere a grupos alcoxi que contienen de uno a seis carbonos. En algunas realizaciones, alquilo C1-C4, es un grupo alquilo que abarca alquilos tanto de cadena lineal como ramificada de 1 a 4 atomos de carbono.

El termino "haloalcoxi" se refiere a un grupo alcoxi sustituido con uno o mas grupos halo, por ejemplo, clorometoxi, trifluorometoxi, difluorometoxi, perfluoroisobutoxi, y similares.

El termino "alcoxialcoxialquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con un resto alcoxi que a su vez esta sustituido con un segundo resto alcoxi, por ejemplo, metoximetoximetilo, isopropoximetoxietilo, y similares. Este resto esta sustituido con sustituyentes adicionales o no esta sustituido con otros sustituyentes.

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El termino "alquiltfo" se refiere a grupos alquilo de cadena tanto lineal como ramificada unidos a un atomo enlazador de azufre, por ejemplo, metiltio y similares.

El termino "alcoxialquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo alcoxi, por ejemplo, isopropoximetilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

EL termino "alcoxialquenilo" se refiere a un grupo alquenilo sustituido con un grupo alcoxi, por ejemplo, 3-metoxialilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alcoxialquinilo" se refiere a un grupo alquinilo sustituido con un grupo alcoxi, por ejemplo,

3- metoxi-propargilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquenil C2-10 cicloalquilo C3-8" se refiere a un grupo alquenilo como se ha definido anteriormente sustituido con un grupo cicloalquilo de tres a ocho miembros, por ejemplo, 4-(ciclopropil)-2-butenilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "alquinil C2-io-cicloalquilo C3-8" se refiere a un grupo alquinilo como se ha definido anteriormente sustituido con un grupo cicloalquilo de tres a ocho miembros, por ejemplo, 4-(ciclopropil)-2-butinilo y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquilo C1-10" se refiere a un grupo heterodclico como se ha definido anteriormente sustituido con un grupo alquilo como se ha definido anteriormente que tiene de 1 a 10 carbonos, por ejemplo,

4- (N-metil)-piperazinilo, y similares. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquenilo C2-10" se refiere a un grupo heterodclico como se ha definido anteriormente, sustituido con un grupo alquenilo como se ha definido anteriormente, que tiene de 2 a 10 carbonos, por ejemplo,

4-(N-alil)piperazinilo, y similares. Tambien se incluyen restos en los que el grupo heterodclico esta sustituido en un atomo de carbono con un alquenilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "heterociclil-alquinilo C2-10" se refiere a un grupo heterodclico como se ha definido anteriormente, sustituido con un grupo alquinilo como se ha definido anteriormente, que tiene de 2 a 10 carbonos, por ejemplo,

4-(N-propargil)piperazinilo, y similares. Tambien se incluyen restos en los que el grupo heterodclico esta sustituido en un atomo de carbono con un alquenilo. Cualquiera de las porciones del resto esta sin sustituir o sustituida.

El termino "oxi" se refiere a un oxfgeno que esta doblemente enlazado a un atomo de carbono. Un experto en la materia entiende que un "oxo" necesita un segundo enlace respecto del atomo al que esta unido el oxo. Por consiguiente, se entiende que un oxo no puede estar sustituido en un anillo de arilo o heteroarilo, a menos que forme parte del sistema aromatico en forma de un tautomero.

El termino "oligomero" se refiere a un polfmero de bajo peso molecular, cuyo peso molecular medio en numero es tfpicamente menor de aproximadamente 5000 g/mol, y cuyo grado de polimerizacion (numero medio de unidades de monomero por cadena) es mayor de uno y tfpicamente igual o menor de aproximadamente 50.

"Sulfonamidilo" o "sulfonamido" se refiere a un radical -S(=O)2-NR'R', donde cada R' se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en hidrogeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a traves de un carbono de anillo) y heteroalidclico (unido a traves de un carbono de anillo). Los grupos R' en -NR'R' del radical -S(=O)2-NR'R' pueden tomarse junto con el nitrogeno al que estan unidos para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. Un grupo sulfonamido esta opcionalmente sustituido con uno o mas de los sustituyentes descritos para alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, respectivamente.

Los compuestos descritos pueden contener uno o mas centros asimetricos y por lo tanto, pueden dar lugar a diastereomeros e isomeros opticos. La presente invencion incluye todos estos posibles diastereomeros, asf como sus mezclas racemicas, sus enantiomeros resueltos sustancialmente puros, todos los posibles isomeros geometricos, y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos pueden mostrarse sin una estereoqrnmica definida en determinadas posiciones. La presente invencion incluye todos los estereoisomeros de los compuestos divulgados y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. Ademas, tambien se incluyen mezclas de estereoisomeros asf como estereoisomeros espedficos aislados. A lo largo del transcurso de los procedimientos sinteticos usados para preparar dichos compuestos, o al usar los procedimientos de racemizacion o epimerizacion conocidos por los expertos en la materia, los productos de dichos procedimientos pueden ser una mezcla de estereoisomeros.

La presente invencion incluye todas las formas de rotameros y estados conformacionalmente restringidos de un inhibidor de la invencion.

Los sustituyentes para radicales alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo derivados monovalentes y divalentes (incluyendo aquellos grupos citados normalmente como alquileno, alquenilo, heteroalquileno,

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heteroalquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, y heterocicloalquenilo) pueden ser uno o mas de una diversidad de grupos seleccionados entre, pero sin limitacion: alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, -OR', =O, =nR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halogeno, -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)OR', -NR-C(NR'R")=NR"', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN y -NO2 en un numero en el intervalo de cero a (2m'+1), donde m' es el numero total de atomos de carbono en dicho radical. R', R", R'" y R"" se refieren cada uno preferentemente de manera independiente a hidrogeno, heteroalquilo sustituido o sin sustituir, cicloalquilo sustituido o sin sustituir, heterocicloalquilo sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir (por ejemplo, arilo sustituido con 1-3 halogenos), alquilo sustituido o sin sustituir, grupos alcoxi o tioalcoxi, o grupos arilalquilo. Cuando un inhibidor de la invencion incluye mas de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R se selecciona independientemente como cada uno de los grupos R', R", R''' y R"" cuando esta presente mas de uno de estos grupos.

Cuando R' y R'' o R'' y R''' estan unidos al mismo atomo de nitrogeno, pueden combinarse con el atomo de nitrogeno para formar un anillo de 4, 5, 6 o 7 miembros. Por ejemplo, se entiende que -NR'R" incluye, pero sin limitacion, 1 -pirrolidinilo, 4-piperazinilo, y 4-morfolinilo. A partir de la descripcion anterior de sustituyentes, un experto en la materia entendera que el termino "alquilo" pretende incluir grupos que incluyen atomos de carbono unidos a grupos distintos de grupos hidrogeno, tales como haloalquilo (por ejemplo, -CF3 y -CH2CF3) y acilo (por ejemplo, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3, y similares).

De manera similar a los sustituyentes descritos para radicales alquilo anteriores, los sustituyentes ejemplares para grupos arilo y heteroarilo (asf como sus derivados divalentes) son variados y se seleccionan entre, por ejemplo: halogeno, alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, -OR', -NR'R", -SR', -halogeno, -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)OR', -NR-C(NR'R"R"')=NR"", -NR-C(NR'R")=NR"', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN y NO2, -R', -N3, -CH(Ph)2, fluoroalcoxi (C1-C4), y fluoroalquilo (C1-C4), en un numero que vana de cero al numero total de valencias abiertas en el sistema de anillo aromatico; y donde R', R", R''' y R'''' se seleccionan preferentemente de manera independiente entre hidrogeno, alquilo sustituido o sin sustituir, heteroalquilo sustituido o sin sustituir, cicloalquilo sustituido o sin sustituir, heterocicloalquilo sustituido o sin sustituir, arilo sustituido

0 sin sustituir y heteroarilo sustituido o sin sustituir. Cuando un inhibidor de la invencion incluye mas de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R se selecciona independientemente como cada uno de los grupos R', R", R''' y R'''' cuando esta presente mas de uno de estos grupos.

Tal como se usa en el presente documento, 0-2 en el contexto de -S(O)(o-2)- son numeros enteros de 0, 1, y 2.

Dos de los sustituyentes en atomos adyacentes del anillo de arilo o heteroarilo pueden formar opcionalmente un anillo de la formula -T-C(O)-(CRR')q-U-, en la que T y U son independientemente -NR-, -O-, -CRR'- o un enlace sencillo, y q es un numero entero de 0 a 3. Como alternativa, dos de los sustituyentes en atomos adyacentes del anillo de arilo o heteroarilo pueden reemplazarse opcionalmente con un sustituyente de la formula -A-(CH2)r-B-, en la que A y B son independientemente -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR' o un enlace sencillo, y r es un numero entero de

1 a 4. Uno de los enlaces sencillos en el nuevo anillo formado de este modo puede reemplazarse opcionalmente con un doble enlace. Como alternativa, dos de los sustituyentes en atomos adyacentes del anillo de arilo o heteroarilo pueden reemplazarse opcionalmente con un sustituyente de la formula -(CRR')s-X'-(C"R"')d-, donde s y d son independientemente numeros enteros de 0 a 3, y X' es -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, o -S(O)2NR'-. Los sustituyentes R, R', R'' y R''' se seleccionan preferentemente de manera independiente entre hidrogeno, alquilo sustituido o sin sustituir, cicloalquilo sustituido o sin sustituir, heterocicloalquilo sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, y heteroarilo sustituido o sin sustituir.

A menos que se indique lo contrario, las estructuras representadas en el presente documento tambien pretenden incluir compuestos que difieren unicamente en la presencia de uno o mas atomos enriquecidos isotopicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras excepto por la sustitucion de un hidrogeno por un deuterio o tritio, o el reemplazo de un carbono por un carbono enriquecido en 13C o 14C se encuentran dentro del alcance de la presente invencion.

Los compuestos de la presente invencion tambien pueden contener proporciones no naturales de isotopos atomicos en uno o mas de los atomos que forman dichos compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden radiomarcarse con isotopos radiactivos, tales como, por ejemplo, tritio (3H), yodo-125 (125I) o carbono-14 (14C). Todas las variaciones isotopicas de los compuestos de la presente invencion, ya sean radiactivas o no, estan abarcadas dentro del alcance de la presente invencion.

Combinaciones para su uso

En un aspecto, la presente invencion proporciona una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo en un sujeto mediante la administracion a un sujeto de dicho primer agente seguido de la administracion a dicho sujeto de dicho inhibidor de mTOR, en la que dicho primer agente es paclitaxel y en la que dicho inhibidores de mTOR es un compuesto de formula I-C1a, tal como se describe en las

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reivindicaciones. En algunas realizaciones, dicho primer agente suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1. En algunas realizaciones, las una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1 se seleccionan entre el grupo que consiste en la fase G2, la fase M, y la fase de transicion G2/M. En general, la administracion del primer agente precede a la primera administracion de un inhibidor de mTOR como parte de un regimen terapeutico. En algunas realizaciones, la administracion del primer agente seguida de la administracion del inhibidor de mTOR proporciona un efecto sinergico. El efecto sinergico puede ser un efecto terapeutico que es mayor que cualquiera de los dos agentes usados individualmente en cantidades comparables en condiciones comparables. El efecto sinergico puede ser un efecto terapeutico que es mayor que los resultados esperados al sumar los efectos de cada agente individualmente. En algunas realizaciones, el efecto sinergico es un efecto terapeutico que es mayor que el efecto de administrar los agentes simultaneamente, o en orden inverso. Esta combinacion para su uso puede abarcar el suministro de una composicion que comprende tanto dicho inhibidor de mTOR como dicho primer agente, en la que el inhibidor de mTOR se libera sustancialmente de la composicion en una forma activa en un instante posterior que la liberacion del primer agente en una forma activa.

Tal como se usa en el presente documento, una cantidad terapeuticamente eficaz de una combinacion de dicho primer agente y dicho inhibidor de mTOR administrada en el orden divulgado en el presente documento se refiere a una combinacion de dicho primer agente y dicho inhibidor de mTOR, en la que la combinacion es suficiente para efectuar la aplicacion prevista, incluyendo, pero sin limitacion, el tratamiento de la enfermedad, tal como se define en el presente documento. En esta combinacion para su uso esta abarcado el uso de una cantidad terapeuticamente eficaz de dicho primer agente y/o dicho inhibidor de mTOR en combinacion para efectuar dicho tratamiento. Tambien se contempla en la combinacion para su uso el uso de una cantidad subterapeutica de un primer agente y/o un inhibidor de mTOR en la combinacion para tratar una patologfa prevista. Los componentes individuales de la combinacion, aunque esten presentes en cantidades subterapeuticas, producen de manera sinergica un efecto eficaz y/o reducen un efecto secundario en una aplicacion prevista.

la cantidad del primer agente y del inhibidor de mTOR administrada en el orden divulgado en el presente documento puede variar dependiendo de la aplicacion prevista (in vitro o in vivo), o del sujeto y la patologfa que se este tratando, por ejemplo, el peso y la edad del sujeto, la gravedad de la patologfa, el modo de administracion y similares, que pueden determinarse facilmente por un experto en la materia.

Primeros agentes

En el presente documento tambien se describe una diversidad de tipos de moleculas que pueden usarse como primeros agentes. Por ejemplo, el primer agente puede ser un compuesto biologico o qmmico, tal como una molecula organica o inorganica simple o compleja, peptido, peptidomimetico, protema (por ejemplo, anticuerpo), liposoma, o un polinucleotido (por ejemplo, ARN pequeno interferente, microARN, antisentido, aptamero, ribozima, o triple helice). Algunas clases ejemplares de compuestos qdmicos adecuadas para su uso se detallan en las secciones a continuacion. El primer agente puede ser cualquier primer agente conocido en la tecnica para suprimir la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1. Preferentemente, el primer agente no suprime la progresion de la fase G1. En algunas realizaciones, el primer agente suprime preferente o espedficamente la progresion de una sola fase del ciclo celular o una transicion de fase despues de G1. Las fases del ciclo celular posteriores a G1 incluyen las fases S (es decir, smtesis), G2 y M (es decir, mitosis), asf como transiciones entre cada una de las fases (es decir, transicion G1/S, transicion S/G2, y transicion G2/M). La fase M comprende ademas la progresion a lo largo de la profase, metafase, anafase, telofase, y concluye con la citocinesis. Un primer agente puede suprimir una o mas fases del ciclo despues de G1, en cualquier combinacion. La supresion por un primer agente puede ser espedfica para celulas asociadas con un trastorno proliferativo (por ejemplo, cancer, ya sea benigno o maligno), o puede afectar a celulas tanto asociadas con la enfermedad como no asociadas con la enfermedad (por ejemplo, normales). En algunas realizaciones, un primer agente es espedfico para las celulas en division. En general, la supresion de la progresion de una fase del ciclo celular se evidencia por la acumulacion de celulas en la fase suprimida en la poblacion de celulas tratadas respecto de una poblacion de control de celulas no tratadas. En general, la supresion de una transicion de fase en el ciclo celular se evidencia por la acumulacion de celulas en la fase inmediatamente antes de la transicion (por ejemplo, acumulacion en la fase G2 tardfa para un supresor de la transicion G2/M) respecto de una poblacion de control de celulas no tratadas. En algunas realizaciones, un supresor de fase del ciclo celular suprime la progresion del ciclo celular en al menos aproximadamente un 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, o mas de las celulas tratadas en relacion a una poblacion de control de celulas no tratadas.

La supresion de una o mas fases del ciclo celular puede determinarse rutinariamente mediante cualquier metodo conocido en la tecnica, para agentes conocidos y nuevos. Por ejemplo, puede determinarse el estado de ciclo celular para poblaciones de celulas mediante citometna de flujo usando colorantes fluorescentes que tinen el contenido de ADN de los nucleos celulares (Barlogie, B. et al, Cancer Res., (1983), 43(9), 3982-97). La citometna de flujo proporciona informacion cuantitativa acerca del contenido de ADN de las celulas y por lo tanto permite la determinacion de los numeros relativos de celulas en las fases G1, S y G2/M del ciclo celular. Debido a que el contenido de ADN del nucleo celular vana a lo largo del ciclo de una manera razonablemente predecible, es decir, las celulas en G2 o M tienen el doble de contenido de ADN que las celulas en G1, y las celulas que estan sintetizando ADN en la fase S tienen una cantidad de ADN intermedia, es posible monitorizar la distribucion relativa de celulas entre las diferentes fases del ciclo celular. Como ejemplo adicional, el documento EP 798386 describe un metodo para el

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analisis del ciclo celular de subpoblaciones presentes en muestras celulares heterogeneas. Este metodo emplea incubacion secuencial de la muestra con anticuerpos monoclonales marcados fluorescentemente para identificar tipos celulares espedficos y un fluorocromo que se une espedficamente a los acidos nucleicos. Hauser y Bauer (Plant and Soil, (2000), 226, 1-10) usaron p-glucuronidasa (GUS) para estudiar la division celular en un meristemo vegetal y Brandeis y Hunt (EMBO J., (1996), 15, 5280-5289) usaron protemas de fusion a cloranfenicol acetil transferasa (CAT) para estudiar variaciones en los niveles de ciclinas, y la Patente de los Estados Unidos n.° 6.048.693 describe un metodo para explorar respecto de compuestos que afectan a protemas reguladoras del ciclo celular, en el que la expresion de un gen indicador se relaciona con elementos de control sobre los que actuan las ciclinas u otras protemas de control del ciclo celular. En este metodo, la expresion temporal de un producto genico indicador esta dirigida de una manera espedfica del ciclo celular y los compuestos que actuan en uno o mas componentes del ciclo celular pueden aumentar o reducir los niveles de expresion. Jones et al (Nat. Biotech., (2004), 23, 306-312) describen un biosensor fluorescente de la mitosis basado en una senal de direccionamiento a la membrana plasmatica y un NLS de antigeno T de SV40 fusionado a EYFP. A lo largo del ciclo celular, los restos indicadores se acumulan en el nucleo pero se traslocan a la membrana plasmatica durante la mitosis, entre la rotura de la envoltura nuclear y su reformacion. El documento WO 03/031612 describe construcciones indicadoras de ADN y metodos para determinar la posicion en el ciclo celular de celulas de mairnfero vivas mediante elementos de control de la expresion y elementos de control de la destruccion de fases espedficas del ciclo celular. En la Patente de los Estados Unidos n.° 7.612.189 se describen ejemplos adicionales de metodos conocidos en la tecnica para determinar el efecto de agentes sobre el ciclo celular, incluyendo el uso de indicadores y marcadores.

En algunas realizaciones, el primer agente comprende uno o mas moduladores de tubulina (por ejemplo, un agente anti-microtubulos o antimitotico). Los moduladores de tubulina incluyen cualquier agente capaz de modular la funcion de la tubulina dentro de una celula, tal como inhibir la polimerizacion, inhibir la despolimerizacion, y de otro modo alterar una actividad o funcion de los microtubulos. Los moduladores de tubulina incluyen agentes de fase espedfica activos contra los microtubulos de las celulas tumorales durante la fase M o de mitosis del ciclo celular. Los ejemplos de agentes anti-microtubulos incluyen, pero sin limitacion, diterpenoides y alcaloides de la vinca. Los diterpenoides, que proceden de fuentes naturales, son agentes anticancer espedficos que trabajan en las fases G2/M del ciclo celular. Se cree que los diterpenoides estabilizan la subunidad de p-tubulina de los microtubulos, uniendose a esta protema. Por tanto, el desensamblaje de la protema parece estar inhibido, deteniendose la mitosis y produciendose la muerte celular. Los ejemplos de diterpenoides incluyen, pero sin limitacion, paclitaxel y su analogo, docetaxel. El paclitaxel, 13-ester 2-benzoato 4,10-diacetato de 5p,20-epoxi-1,2,4,7p,10p,13a-hexa-hidroxitax-11-en-9-ona con (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina, es un producto diterpenico natural aislado del tejo del Padfico, Taxus brevifolia y esta disponible comercialmente en forma de solucion inyectable como TAXOL®. En un miembro de la familia taxano de los terpenos. Un mecanismo de su actividad esta relacionado con la capacidad del paclitaxel para unirse a la tubulina, inhibiendo de este modo el crecimiento de las celulas cancerosas. El paclitaxel ha sido aprobado para uso clmico en el tratamiento del cancer de ovarios refractario en los Estados Unidos y para el tratamiento del cancer de mama. Es un candidato potencial para el tratamiento de neoplasias en los carcinomas de piel y de cabeza y cuello. El compuesto tambien muestra un potencial para el tratamiento de la enfermedad renal poliqrnstica, el cancer de pulmon y la malaria. El tratamiento de los sujetos con paclitaxel produce supresion de la medula osea (multiples linajes celular, Ignoff, R. J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998) relacionada con la duracion de la dosificacion por encima de un nivel umbral (50 nM) (Kearns, C. M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p. 16-23, 1995). El docetaxel, (2R,3S)--N-carboxi-3-fenilisoserina, N-ferc-butil ester, 13-ester con 2-acetato 2-benzoato de

5p-20-epoxi-1,2a,4,7p,10p,13a-hexahidroxitax-11-en-9-ona, trihidrato; esta disponible comercialmente en forma de una solucion inyectable como TAXOTERE®. El docetaxel esta indicado para el tratamiento del cancer de mama. El docetaxel es un derivado semisintetico del paclitaxel q.v., preparado usando un precursor natural, 10-desacetil-baccatina III, extrafda de la adcula del tejo europeo. La toxicidad limitante de la dosis del docetaxel es la neutropenia.

En algunas realizaciones, el primer agente comprende uno o mas alcaloides de la vinca, que incluye agentes antineoplasicos espedficos de fase procedentes de la vincapervinca. Los alcaloides de la vinca actuan en la fase M (mitosis) del ciclo celular uniendose espedficamente a la tubulina. Por consiguiente, la molecula de tubulina unida es incapaz de polimerizarse en microtubulos. Se cree que la mitosis se detiene en la metafase, seguido de la muerte celular. Los ejemplos de alcaloides de la vinca incluyen, pero sin limitacion, vinblastina, vincristina, y vinorelbina. La vinblastina, sulfato de vincaleucoblastina, esta disponible comercialmente como VELBAN® en forma de una solucion inyectable. Aunque tiene una posible indicacion como tratamiento de segunda lmea para varios tumores solidos, esta indicada principalmente en el tratamiento del cancer de testmulos y varios linfomas, incluyendo la enfermedad de Hodgkin, y linfomas linfodticos e histiodticos. La mielosupresion es el efecto secundario limitante de la dosis para la vinblastina. La vincristina, vincaleucoblastina, 22-oxo-, sulfato, esta disponible comercialmente como ONCOVIN® en forma de una solucion inyectable. La vincristina esta indicada para el tratamiento de leucemias agudas y tambien ha demostrado ser util en regfmenes de tratamiento para linfomas malignos de Hodgkin y no Hodgkin. La alopecia y los efectos neurologicos son los efectos secundarios mas comunes de la vincristina y en menor medida, se producen efectos de mielosupresion y mucositis gastrointestinal. Vinorelbina, 3',4'-dideshidro-4'-desoxi-C'-norvincaleucoblastina [R--(R*,R*)-2,3-dihidroxibutanodioato (1:2)(sal)], disponible comercialmente en forma de una solucion inyectable de tartrato de vinorelbina (NAVELBINE®), es un alcaloide de la vinca semisintetico. La vinorelbina esta indicada como agente unico o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos, tales como cisplatino, en el tratamiento de diversos tumores solidos, en particular, de los canceres de pulmon no microdtico, de mama avanzado y de prostata

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refractario a hormonas. La mielosupresion es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun para la vinorelbina.

En algunas realizaciones, el primer agente comprende uno o mas inhibidores de topoisomerasa II, que incluyen, pero sin limitacion, epipodofilotoxinas. Las epipodofilotoxinas son agentes antineoplasicos espedficos de fase derivados de la planta de la mandragora. Las epipodofilotoxinas afectan normalmente a las celulas en las fases S y G2 del ciclo celular formando un complejo ternario con topoisomerasa II y el ADN provocando roturas en la hebra de ADN. Las roturas de la hebra se acumulan y provocan la muerte celular. Los ejemplos de epipodofilotoxinas incluyen, pero sin limitacion, etoposido y teniposido. El etoposido, 4'-desmetilepipodofilotoxina 9[4,6-0-(R)-etiliden-p-D-glucopiranosido], esta disponible en forma de una solucion inyectable o en forma de capsulas como VePESID® y normalmente se conoce como VP-16. El etoposido esta indicado como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de los canceres testicular y de pulmon no microcftico. La mielosupresion es el efecto secundario mas comun del etoposido. La incidencia de leucopenia tiende a ser mas grave que la de trombocitopenia. El teniposido, 4'-desmetil-epipodofilotoxina 9[4,6-0-(R)-teniliden-p-D-glucopiranosido], esta disponible comercialmente en forma de una solucion inyectable como VUMON® y normalmente se conoce como VM-26. El teniposido esta indicado como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de la leucemia aguda en ninos. La mielosupresion es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun para el teniposido. El teniposido puede inducir tanto leucopenia como trombocitopenia. Otros inhibidores de topoisomerasa II incluyen epirrubicina, idarrubicina, nemorubicina, mitoxantrona, y losoxantrona.

En algunas realizaciones, el primer agente comprende uno o mas agentes antineoplasicos antimetabolitos, que incluyen agentes antineoplasicos espedficos de fase que actuan en la fase S (smtesis de ADN) del ciclo celular inhibiendo la smtesis del ADN o inhibiendo la smtesis de las bases puricas o pirimidmicas y de este modo limitando la smtesis de ADN. Por consiguiente, no se produce la fase S y se produce la muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplasicos anti-metabolitos incluyen, pero sin limitacion, fluorouracilo, metotrexato, citarabina, mercaptopurina, tioguanina, y gemcitabina. 5-fluorouracilo, 5-fluoro-2,4-(1H,3H)pirimidindiona, esta disponible comercialmente como fluorouracilo. La administracion de 5-fluorouracilo da lugar a la inhibicion de la smtesis de timidilato y tambien se incorpora tanto en el ARN como en el ADN. El resultado es tfpicamente la muerte celular. El 5-fluorouracilo esta indicado como agente unico o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de carcinomas de mama, colon, recto, estomago y pancreas. La mielosupresion y la mucositis son efectos secundarios limitantes de la dosis del 5-fluorouracilo. Otros analogos de fluoropirimidina incluyen 5-fluoro desoxiuridina (floxuridina) y monofosfato de 5-fluorodesoxiuridina. La citarabina, 4-amino-1-p-D-arabinofuranosil-2(1H)-pirimidinona, esta disponible comercialmente como CYTOSARU® y normalmente se conoce como Ara-C. Se cree que la citarabina muestra especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo el alargamiento de la hebra de ADN mediante la incorporacion terminal de la citarabina en la hebra de ADN en crecimiento. La citarabina esta indicada como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de la leucemia aguda. Otros analogos de citidina incluyen 5-azacitidina y 2',2'-difluorodesoxicitidina (gemcitabina). La citarabina induce leucopenia, trombocitopenia, y mucositis. La mercaptopurina, monohidrato de 1,7-dihidro-6H-purina-6-tiona, esta disponible comercialmente como PURINETHOL®. La mercaptopurina muestra especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo la smtesis de ADN mediante un mecanismo aun no especificado. La mercaptopurina esta indicada como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de la leucemia aguda. La mielosupresion y la mucositis gastrointestinal son efectos secundarios esperados de la mercaptopurina a altas dosis. Un analogo de mercaptopurina util es la azatioprina. La tioguanina, 2-amino-1,7-dihidro-6H-purina-6-tiona, esta disponible comercialmente como TABLOID®. La tioguanina muestra especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo la smtesis de ADN mediante un mecanismo aun no especificado. La tioguanina esta indicada como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento de la leucemia aguda. La mielosupresion, incluyendo leucopenia, trombocitopenia y anemia, es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun de la administracion de tioguanina. Sin embargo, se producen efectos gastrointestinales y pueden ser limitantes de la dosis. Otros analogos de purina incluyen pentostatina, eritrohidroxinoniladenina, fosfato de fludarabina, y cladribina. La gemcitabina, monoclorhidrato de 2'-desoxi-2',2'-difluorocitidina (isomero p), esta disponible comercialmente como GEMZAR®. La gemcitabina muestra especificidad de fase celular en la fase S y bloquea la progresion de las celulas al ftmite G1/S. La gemcitabina esta indicada en combinacion con el cisplatino en el tratamiento del cancer de pulmon no microcftico localmente avanzado y sola en el tratamiento del cancer pancreatico localmente avanzado. La mielosupresion, incluyendo leucopenia, trombocitopenia y anemia, es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun de la administracion de gemcitabina. El metotrexato, acido

N-[4-[[(2,4-diamino-6-pteridinil)metil]metilamino]benzoil]-L-glutamico, esta disponible comercialmente como

metrotexato sodico. El metotrexato muestra efectos de fase celular espedficamente en la fase S inhibiendo la smtesis, reparacion y/o replicacion del ADN mediante la inhibicion de la reductasa del acido dihidrofolico, que es necesario para la smtesis de nucleotidos de purina y de timidilato. El metotrexato esta indicada como agente individual o en combinacion con otros agentes quimioterapeuticos en el tratamiento del coriocarcinoma, leucemia menmgea, linfoma no de Hodgkin, y carcinomas de mama, de cabeza, de cuello, ovario y vejiga. La mielosupresion (leucopenia, trombocitopenia, y anemia) y la mucositis son efectos secundarios esperados de la administracion de metotrexato.

En algunas realizaciones, el primer agente comprende uno o mas inhibidores de topoisomerasa I, que incluyen camptotecinas, tales como camptotecina y derivados de camptotecina, y funcionan tfpicamente suprimiendo el ciclo celular durante las fases S y/o G2. Se cree que la actividad citotoxica de la camptotecina esta relacionada con su actividad inhibidora de topoisomerasa i. Los ejemplos de camptotecinas incluyen, pero sin limitacion, irinotecan y

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topotecan. El irinotecan HCl, clorhidrato de

(4S)-4,11-dietil-4-hidroxi-9-[(4-piperidinopiperidino)carboniloxi]-1H-pirano[3',4',6,7]indolizino[1,2-b]quinolin-3,14(4H,1 2H)-diona, esta disponible comercialmente como la solucion inyectable CAMPTOSAR®. El irinotecan es un derivado de la camptotecina que se une, junto con su metabolito activo, SN-38, al complejo topoisomerasa I-ADN. Se cree que la citotoxicidad se produce como resultado de las roturas irreparables de doble hebra causadas por la interaccion del complejo ternario topoisomerasa I:ADN:irinotecan o SN-38 con las enzimas de replicacion. El irinotecan esta indicado para el tratamiento del cancer metastasico de colon o recto. Los efectos limitantes de la dosis del irinotecan HCl son mielosupresion, incluyendo neutropenia, y efectos GI, incluyendo diarrea. El topotecan HCl, monoclorhidrato de (S)-10-[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-dihidroxi-1H-pirano[3',4',6,7]-indolizino[1,2-b]quinolin-3,14-(4H,12H)-diona, esta disponible comercialmente como la solucion inyectable HYCAMTlN®. El topotecan es un derivado de camptotecina que se une al complejo topoisomerasa I-ADN y previene la religadura de roturas monocatenarias causadas por la topoisomerasa I en respuesta a la tension torsional en la molecula de ADN. El topotecan esta indicado como tratamiento de segunda lmea del carcinoma metastasico del ovario y del cancer de pulmon microcftico. El efecto limitante de la dosis del topotecan HCl es la mielosupresion, principalmente neutropenia.

Se conocen en la tecnica otros ejemplos de agentes espedficos del ciclo celular que suprimen la progresion de las fases del ciclo celular despues de la fase G1, e incluyen, sin limitacion, bleomicina, hidroxiurea, y vindesina. Tambien son utiles como primeros agentes cualquier compuesto quimioterapeutico descrito en el presente documento que se sepa que suprime una fase del ciclo celular despues de G 1, o que pueda determinarse que suprime una fase del ciclo celular despues de G1 usando cualquier metodo conocido en la tecnica, incluyendo metodos de determinacion del ciclo celular descritos y citados en el presente documento.

Compuestos inhibidores de mTOR

Un inhibidor de mTOR puede inhibir a mTOR mediante cualquier mecanismo bioqmmico, incluyendo competicion en el sitio de union de ATP, competicion en otra parte en el sitio catalttico de mTOR cinasa, inhibicion no competitiva, inhibicion irreversible (por ejemplo, modificacion covalente de la protema), o modulacion de las interacciones de otras subunidades de la protema o protemas de union con mTOR cinasa de un modo que de como resultado la inhibicion de la actividad de la mTOR cinasa (por ejemplo, modulacion de la interaccion de mTOR con FKBP12, GpL, (mLST8), RAPTOR (mKOGI), o RICTOR (mAVO3)).

En algunas realizaciones, la capacidad de un inhibidor de mTOR para inhibir a mTOR se expresa en terminos de un valor de CI50. Tal como se usa en el presente documento, el termino "CI50" se refiere a la concentracion inhibidora semimaxima de un inhibidor para inhibir una funcion biologica o bioqmmica. Esta medida cuantitativa indica que cantidad se necesita de un inhibidor concreto para inhibir un proceso biologico dado (o componente de un proceso, es decir, una enzima, celula, receptor celular o microorganismo) a la mitad. En otras palabras, por lo tanto, es la concentracion inhibidora (CI) semimaxima (50%) de una sustancia (CI al 50%, o CI50). CE50 se refiere a la concentracion plasmatica necesaria para obtener el 50% de un efecto maximo in vivo.

La determinacion de la CI50 puede efectuarse determinando y construyendo una curva de respuesta a la dosis y examinando el efecto de diferentes concentraciones de un inhibidor para revertir la actividad agonista. Los ensayos in vitro que son utiles para efectuar estas determinaciones se citan como "ensayos de cinasa in vitro".

En algunas realizaciones, un ensayo de cinasa in vitro incluye el uso de ATP marcado como donante de fosforo, y despues de la reaccion de cinasa, el sustrato peptfdico se captura en un filtro adecuado. El ATP marcado no reaccionado y los metabolitos se redisuelven a partir del sustrato peptfdico radiactivo mediante diversas tecnicas, tales como aquellas que implican precipitacion con acido tricloroacetico y lavado exhaustivo. La adicion de varios restos cargados positivamente permite la captura sobre papel de fosfocelulosa seguido de lavado. La radiactividad incorporada en el sustrato peptfdico se detecta mediante recuento de centelleo. Este ensayo es relativamente simple, razonablemente sensible, y el sustrato peptfdico puede ajustarse tanto en terminos de secuencia como de concentracion para cumplir con los requisitos del ensayo. Se detallan otros ensayos de cinasa ejemplares en la Patente de los Estados Unidos n.° 5.759.787 y en la Solicitud de los Estados Unidos con n.° de serie 12/728.926.

El inhibidor de mTOR utilizado en el presente documento tfpicamente es altamente selectivo por la molecula diana. En un aspecto, el inhibidor de mTOR se une e inhibe directamente tanto a mTORCI como a mTORC2. Dicha capacidad puede determinarse usando cualquier metodo conocido en la tecnica o descrito en el presente documento. Por ejemplo, la inhibicion de la actividad de mTORCI y/o mTORC2 puede determinarse mediante una reduccion en la transduccion de senales de la via de PI3K/Akt/mTOR. Puede emplearse una diversidad de lecturas para establecer una reduccion de la salida de dicha ruta de senalizacion. Algunas lecturas ejemplares no limitantes incluyen (1) una reduccion de la fosforilacion de Akt en los restos, incluyendo, pero sin limitacion, S473 y T308; (2) una reduccion en la activacion de Akt evidenciada por una reduccion de la fosforilacion de los sustratos de Akt, incluyendo, pero sin limitacion, FoxO1/O3a T24/32, GSK3a/p S21/9, y TSC2 T1462; (3) una reduccion en la fosforilacion de moleculas de senalizacion aguas abajo de mTOR, incluyendo, pero sin limitacion S6 S240/244 ribosomico, 70S6K T389, y 4EBP1 T37/46; (4) inhibicion de la proliferacion de celulas, incluyendo, pero sin limitacion, celulas normales o neoplasicas, fibroblastos embrionarios de raton, blastocitos leucemicos, celulas madre del cancer, y celulas que median las reacciones autoinmunes; (5) induccion de la apoptosis de celulas o detencion del ciclo celular (por ejemplo,

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acumulacion de celulas en la fase G1); (6) reduccion de la quimiotaxis; y (7) un aumento en la union de 4EBP1 a eIF4E.

mTOR existe en dos tipos de complejos, mTORC1, que contiene la subunidad raptor y mTORC2, que contiene rictor. Como se conoce en la tecnica, "rictor" se refiere a una protema reguladora del crecimiento celular que tiene el locus genico humano 5p 13.1. Estos complejos estan regulados de un modo diferente y tienen un espectro de sustratos diferente. Por ejemplo, mTORCI fosforila a S6 cinasa (S6K) y a 4EBP1, promoviendo una traduccion aumentada y la biogenesis del ribosoma para facilitar el crecimiento celular y la progresion del ciclo celular. S6K tambien actua en una via de retroalimentacion para atenuar la activacion de PI3K/Akt. Por lo tanto, la inhibicion de mTORCI (por ejemplo, mediante un agente biologicamente activo tal como se discute en el presente documento) da como resultado la activacion de 4EBP1, dando como resultado la inhibicion (por ejemplo, una reduccion en) la traduccion del ARN.

mTORC2 es generalmente insensible a la rapamicina y los inhibidores selectivos y se cree que modula la senalizacion de factores de crecimiento fosforilando el motivo hidrofobo C-terminal de algunas AGC cinasas, tales como Akt. En muchos contextos celulares, mTORC2 es necesario para la fosforilacion del sitio S473 de Akt. Por lo tanto, la actividad de mTORCI esta controlada parcialmente por Akt, mientras que Akt en sf esta controlado parcialmente por mTORC2.

La estimulacion de factores de crecimiento de PI3K causa la activacion de Akt mediante la fosforilacion en los dos sitios clave, S473 y T308. Se ha comunicado que la activacion completa de Akt requiere la fosforilacion tanto de S473 como de T308. Akt activo promueve la supervivencia y la proliferacion celular de muchas formas, que incluyen suprimiendo la apoptosis, promoviendo la captacion de glucosa, y modificando el metabolismo celular. De los dos sitios de fosforilacion en Akt, la fosforilacion del bucle de activacion en T308, mediada por PDK1, se considera indispensable para la actividad de cinasa, mientras que la fosforilacion del motivo hidrofobo en S473 potencia la actividad de cinasa de Akt.

Puede determinarse la inhibicion de la fosforilacion de Akt usando cualquier metodo conocido en la tecnica o descrito en el presente documento. Los ensayos representativos incluyen, pero sin limitacion, inmunotransferencia e inmunoprecipitacion con anticuerpos, tales como anticuerpos anti-fosfotirosina que reconocen las protemas fosforiladas espedficas. Tambien hay disponible un kit de ELISA basado en celulas (SuperArray Biosciences) que cuantifica la cantidad de Akt activado (fosforilado en S473) en relacion a la protema Akt total.

Tambien puede determinarse la inhibicion selectiva de mTOR segun los niveles de expresion de los genes de mTOR, sus genes de senalizacion aguas abajo (por ejemplo, mediante RT-PCR), o los niveles de expresion de las protemas (por ejemplo, mediante inmunocitoqmmica, inmunohistoqmmica, transferencias de Western) en comparacion con otras Pl3-cinasas o protema cinasas.

Los ensayos basados en celulas para determinar la inhibicion selectiva de mTORCI y/o mTORC2 pueden adoptar una diversidad de formatos. Esto dependera normalmente de la actividad biologica y/o de la lectura de transduccion de senales que se este investigando. Por ejemplo, puede determinarse la capacidad del agente para inhibir que mTORCI y/o mTORC2 fosforilen sustratos aguas abajo mediante diversos tipos de ensayos de cinasa conocidos en la tecnica. Los ensayos representativos incluyen, pero sin limitacion, inmunotransferencia e inmunoprecipitacion con anticuerpos, tales como anticuerpos anti-fosfotirosina, anti-fosfoserina o anti-fosfotreonina que reconocen protemas fosforiladas. Como alternativa, pueden usarse anticuerpos que reconocen espedficamente una forma fosforilada particular de un sustrato de cinasa (por ejemplo, anti-fosfoAKT S473 o anti-fosfo AKT T308). Ademas, la actividad de cinasa puede detectarse mediante ensayos quimioluminiscentes de alto rendimiento, tales como AlphaScreen™ (disponible en Perkin Elmer) y el ensayo eTag™ (Chan-Hui, et al. (2003) Clinical Immunology 111: 162-174). En otro aspecto, pueden usarse ensayos de celulas individuales, tales como citometna de flujo, tal como se describe en el experimento PhosFlow para medir la fosforilacion de multiples sustratos aguas abajo de mTOR en poblaciones mixtas de celulas.

Una ventaja de los metodos de inmunotransferencia y PhosFlow es que puede medirse simultaneamente la fosforilacion de multiples sustratos de cinasa. Esto proporciona la ventaja de que puede medirse a la vez la eficacia y la selectividad. Por ejemplo, pueden ponerse en contacto las celulas con un inhibidor de mTOR a varias concentraciones y pueden medirse los niveles de fosforilacion de sustratos tanto de mTOR como de otras cinasas. En un aspecto, se ensaya un gran numero de sustratos de cinasa en lo que se denomina un "estudio de cinasa exhaustivo". Se espera que los inhibidores selectivos de mTOR inhiban la fosforilacion de sustratos de mTOR sin inhibir la fosforilacion de los sustratos de otras cinasas. Como alternativa, los inhibidores selectivos de mTOR pueden inhibir la fosforilacion de sustratos de otras cinasas mediante mecanismos previstos o no previstos, tales como bucles de retroalimentacion o redundancia.

Puede determinarse el efecto de la inhibicion de mTORC1 y/o mTORC2 mediante un ensayo de formacion de colonias celulares u otras formas de un ensayo de proliferacion celular. Hay disponible en la tecnica una gran variedad de ensayos de proliferacion, y muchos de estos estan disponibles en forma de kit. Los ejemplos no limitantes de ensayos de proliferacion celular incluyen ensayos que comprueban la captacion de timidina tritiada, la captacion de BrdU (5'-bromo-2'-desoxiuridina) (kit comercializado por Calbiochem), la captacion de MTS (kit comercializado por Promega), la captacion de MTT (kit comercializado por Cayman Chemical), la captacion del colorante CyQUANT® (comercializado por Invitrogen).

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Puede efectuarse un analisis de la apoptosis y de la detencion del ciclo celular mediante cualquier metodo ilustrado en el presente documento as^ como otros metodos conocidos en la tecnica. Se han disenado muchos metodos diferentes para detectar la apoptosis. Los ensayos ejemplares incluyen, pero sin limitacion, el analisis TUNEL (marcado del extremo libre por duTP mediado por TdT), ISEL (marcado de extremos in situ), y analisis de escalera de ADN para la deteccion de la fragmentacion de ADN en poblaciones de celulas o en celulas individuales, analisis de anexina V que mide alteraciones en las membranas plasmaticas, deteccion de protemas relacionadas con la apoptosis, tales como p53 y Fas.

Un ensayo basado en celulas se efectua tfpicamente exponiendo las celulas diana (por ejemplo, en un medio de cultivo) a un compuesto de ensayo, que es un inhibidor selectivo potencial de mTORCI y/o mTORC2, y despues ensayando la lectura que se este investigando. Dependiendo de la naturaleza de los inhibidores de mTOR candidatos, pueden anadirse directamente a las celulas o conjuntamente con vehmulos. Por ejemplo, cuando el agente es un acido nucleico, puede anadirse al cultivo celular por metodos bien conocidos en la tecnica, que incluyen, sin limitacion, precipitacion por fosfato de calcio, microinyeccion o electroporacion. Como alternativa, puede incorporarse el acido nucleico en un vector de expresion o insercion para su incorporacion en las celulas. Se conocen bien en la tecnica vectores que contienen tanto un promotor como un sitio de clonacion en el que puede unirse operablemente un polinucleotido. Dichos vectores son capaces de transcribir ARN in vitro o in vivo, y estan disponibles comercialmente de proveedores tales como Stratagene (La Jolla, CA) y Promega Biotech (Madison, WI). Para optimizar la expresion y/o la transcripcion in vitro, puede ser necesario retirar, anadir o alterar las partes 5' y/o 3' no traducidas de los clones para eliminar codones adicionales, potencialmente de iniciacion de la traduccion alternativos inadecuados u otras secuencias que puedan interferir con o reducir la expresion, ya sea a nivel de transcripcion o traduccion. Como alternativa, pueden insertarse sitios de union a ribosomas consenso inmediatamente 5' respecto del codon de inicio para potenciar la expresion. Los ejemplos de vectores son virus, tales como baculovirus y retrovirus, bacteriofagos, adenovirus, virus adenoasociados, cosmido, plasmido, vectores fungicos y otros vehmulos de recombinacion usados normalmente en la tecnica que se han descrito para la expresion en una serie de hospedadores eucariotas y procariotas, y pueden usarse para terapia genica asf como para la expresion de protemas sencillas. Entre estos, se encuentran varios vectores no vmcos, incluyendo complejos de ADN/liposoma, y complejos dirigidos de protema vmica-ADN. Para potenciar el suministro a una celula, el acido nucleico o las protemas de la presente invencion pueden conjugarse a anticuerpos o fragmentos de union de los mismos que se unen a antfgenos de la superficie. Los liposomas que tambien comprenden un anticuerpo de direccionamiento o un fragmento del mismo pueden usarse en los metodos de la presente invencion. Pueden utilizarse otros vehmulos biologicamente aceptables, incluyendo aquellos descritos en, por ejemplo, REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 19a Ed. (2000), conjuntamente con los compuestos objeto. Se describen metodos adicionales para ensayos basados en celulas para determinar los efectos de agente en la progresion del ciclo celular en el documento US7612189.

En la puesta en practica de los presentes metodos, cualquier celula que exprese PI3-cinasa a, mTORCI, mTORC2 y/o Akt puede ser una celula diana. Los ejemplos no limitantes de tipos celulares espedficos cuya proliferacion puede inhibirse incluyen fibroblastos, celulas del tejido esqueletico (hueso y cartflago), celulas de tejidos epiteliales (por ejemplo, hugado, pulmon, mama, piel, vejiga y rinon), celulas musculares cardfacas y lisas, celulas neurales (glfa y neuronas), celulas endocrinas (adrenales, pituitaria, celulas de islote pancreaticas), melanocitos, y muchos tipos diferentes de celulas hematopoyeticas (por ejemplo, celulas de linaje de celulas B o celulas T, y sus correspondientes celulas madre, los linfoblastos). Tambien son de interes celulas que muestran una propension o fenotipo neoplasico. Es de interes particular el tipo de celulas que expresan diferencialmente (sobreexpresan o subexpresan) un gen causante de enfermedad. Los tipos de enfermedades que implican un funcionamiento anormal de los genes incluyen, pero sin limitacion, enfermedades autoinmunitarias, cancer, obesidad, hipertension, diabetes, enfermedades degenerativas neuronales y/o musculares, enfermedades cardfacas, trastornos endocrinos, y cualquier combinacion de los mismos.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORCI como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 1 nM, 2 nM, 5 nM, 7 nM, 10 nM, 20 nM, 30 nM, 40 nM, 50 nM, 60 nM, 70 nM, 80 nM, 90 nM, 100 nM, 120 nM, 140 nM, 150 nM, 160 nM, 170 nM, 180 nM, 190 nM, 200 nM, 225 nM, 250 nM, 275 nM, 300 nM, 325 nM, 350 nM, 375 nM, 400 nM, 425 nM, 450 nM, 475 nM, 500 nM, 550 nM, 600 nM, 650 nM, 700 nM, 750 nM, 800 nM, 850 nM, 900 nM, 950 nM, 1 pM, 1,2 pM, 1,3 pM, 1,4 pM, 1,5 pM, 1,6 pM, 1,7 pM, 1,8 pM, 1,9 pM, 2 pM, 5 pM, 10 pM, 15 pM, 20 pM, 25 pM, 30 pM, 40 pM, 50 pM, 60 pM, 70 pM, 80 pM, 90 pM, 100 pM, 200 pM, 300 pM, 400 pM, o 500 pM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y dicho valor de CI50 es al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 100, o 1000 veces menor que su valor de CI50 contra todas las otras PI3-cinasas de tipo I seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6. Por ejemplo, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 200, 100, 75, 50, 25, 10, 5, 1 o 0,5 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. En un caso, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 100 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. Como otro ejemplo, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 10 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro.

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o menor de un valor predeterminado, segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 1 nM o menor, 2 nM o menor, 5 nM o menor, 7 nM o menor, 10 nM o menor, 20 nM o menor, 30 nM o menor, 40 nM o menor, 50 nM o menor, 60 nM o menor, 70 nM o menor, 80 nM o menor, 90 nM o menor, 100 nM o menor, 120 nM o menor, 140 nM o menor, 150 nM o menor, 160 nM o menor, 170 nM o menor, 180 nM o menor, 190 nM o menor, 200 nM o menor, 225 nM o menor, 250 nM o menor, 275 nM o menor, 300 nM o menor, 325 nM o menor, 350 nM o menor, 375 nM o menor, 400 nM o menor, 425 nM o menor, 450 nM o menor, 475 nM o menor, 500 nM o menor, 550 nM o menor, 600 nM o menor, 650 nM o menor, 700 nM o menor, 750 nM o menor, 800 nM o menor, 850 nM o menor, 900 nM o menor, 950 nM o menor, 1 pM o menor, 1,2 pM o menor, 1,3 pM o menor, 1,4 pM o menor, 1,5 pM o menor, 1,6 pM o menor, 1,7 pM o menor, 1,8 pM o menor, 1,9 pM o menor, 2 pM o menor, 5 pM o menor, 10 pM o menor, 15 pM o menor, 20 pM o menor, 25 pM o menor, 30 pM o menor, 40 pM o menor, 50 pM o menor, 60 pM o menor, 70 pM o menor, 80 pM o menor, 90 pM o menor, 100 pM o menor, 200 pM o menor, 300 pM o menor, 400 pM o menor, o 500 pM o menor.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 1 nM o menor, 2 nM o menor, 5 nM o menor, 7 nM o menor, 10 nM o menor, 20 nM o menor, 30 nM o menor, 40 nM o menor, 50 nM o menor, 60 nM o menor, 70 nM o menor, 80 nM o menor, 90 nM o menor, 100 nM o menor, 120 nM o menor, 140 nM o menor, 150 nM o menor, 160 nM o menor, 170 nM o menor, 180 nM o menor, 190 nM o menor, 200 nM o menor, 225 nM o menor, 250 nM o menor, 275 nM o menor, 300 nM o menor, 325 nM o menor, 350 nM o menor, 375 nM o menor, 400 nM o menor, 425 nM o menor, 450 nM o menor, 475 nM o menor, 500 nM o menor, 550 nM o menor, 600 nM o menor, 650 nM o menor, 700 nM o menor, 750 nM o menor, 800 nM o menor, 850 nM o menor, 900 nM o menor, 950 nM o menor, 1 pM o menor, 1,2 pM o menor, 1,3 pM o menor, 1,4 pM o menor, 1,5 pM o menor, 1,6 pM o menor, 1,7 pM o menor, 1,8 pM o menor, 1,9 pM o menor, 2 pM o menor, 5 pM o menor, 10 pM o menor, 15 pM o menor, 20 pM o menor, 25 pM o menor, 30 pM o menor, 40 pM o menor, 50 pM o menor, 60 pM o menor, 70 pM o menor, 80 pM o menor, 90 pM o menor, 100 pM o menor, 200 pM o menor, 300 pM o menor, 400 pM o menor, o 500 pM o menor, y el inhibidor de mTOR es sustancialmente inactivo frente a uno o mas PI3-cinasas de tipo I, seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 10 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y el inhibidor de mTOR es sustancialmente inactivo frente a uno o mas PI3-cinasas de tipo I, seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6.

Tal como se usa en el presente documento, la expresion "sustancialmente inactivo" se refiere a un inhibidor que inhibe la actividad de su diana a menos de aproximadamente un 1%, 5%, 10%, 15% o 20% de su actividad maxima en ausencia del inhibidor, segun se determina mediante un ensayo enzimatico in vitro (por ejemplo, ensayo de cinasa in vivo).

En otras realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 1000, 500, 100, 75, 50, 25, 10, 5, 1, o 0,5 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y dicho valor de CI50 es al menos 2, 5, 10, 15, 20, 50, 100 o 100 veces menor que su valor de CI50 contra todas las PI3-cinasas de tipo I seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6. Por ejemplo, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 100 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y dicho valor de CI50 es al menos 5 veces menor que su valor ce CI50 frente a todas las otras PI3-cinasas de tipo I seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe tanto a mTORC1 como a mTORC2 con un valor de CI50 de aproximadamente 100 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro, y dicho valor de CI50 es al menos 5 veces menor que su valor ce CI50 frente a todas las otras PI3-cinasas de tipo I seleccionadas entre el grupo que consiste en PI3-cinasa a, PI3-cinasa p, PI3-cinasa y, y PI3-cinasa 6.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR inhibe a uno de mTORC1 y mTORC2 de manera selectiva con un valor ce CI50 de aproximadamente 1000, 500, 100, 75, 50, 25, 10, 5, 1, o 0,5 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. Por ejemplo, un inhibidor de mTOR utilizado en los presentes metodos inhibe selectivamente a mTORC1 con un valor de CI50 de aproximadamente 1000, 500, 100, 75, 50, 25, 10, 5, 1, o 0,5 nM o menor segun se determina en un ensayo de cinasa in vitro. Por ejemplo, se ha demostrado que la rapamicina y los derivados o analogos de rapamicina inhiben principalmente a mTORC1 y no a mTORC2. Los compuestos inhibidores de mTORC1 adecuados incluyen, por ejemplo, sirolimus (rapamicina), deforolimus (AP23573, MK-8669), everolimus (RAD- 001), temsirolimus (cCI-779), zotarolimus (ABT-578), y biolimus A9 (umirolimus).

Los inhibidores de mTOR adecuados para su uso en el presente documento pueden seleccionarse entre una diversidad de tipos de moleculas. Por ejemplo, un inhibidor puede ser un compuesto biologico o qmmico, tal como una molecula organica o inorganica simple o compleja, peptido, peptidomimetico, protema (por ejemplo, anticuerpo), liposoma, o un polinucleotido (por ejemplo, ARN pequeno interferente, microARN, antisentido, aptamero, ribozima, o triple helice). Algunas clases ejemplares de compuestos qmmicos adecuadas para su uso en el presente documento se detallan en las secciones a continuacion.

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Son multiples las ventajas de la inhibicion selectiva de una diana celular como forma para tratar una patologfa mediada por dicha diana. Debido a que las celulas sanas dependen de las v^as de senalizacion que se activan en el cancer para su supervivencia, la inhibicion de estas vfas durante el tratamiento para el cancer puede provocar efectos secundarios daninos. Para que un metodo para tratar el cancer sea exitoso sin provocar un dano excesivo a las celulas sanas, es deseable un grado muy elevado de especificidad para dirigirse al componente o a los componentes de senalizacion aberrantes. Ademas, las celulas cancerosas pueden depender de una senalizacion sobreactiva para su supervivencia (conocido como la hipotesis de adiccion al oncogen). De este modo, con frecuencia se observa que las celulas cancerosas se adaptan a la inhibicion farmacologica de un componente aberrante de la senalizacion seleccionando mutaciones en la misma via que superen al efecto del farmaco. Por lo tanto, las terapias para el cancer podnan tener mas exito al superar el problema de la resistencia a los farmacos si se dirigiesen a una via de senalizacion como un todo, o si se dirigiesen a mas de un componente en una via de senalizacion.

En la figura 1 se ilustran algunas vfas de senalizacion que contienen mTOR. Un efector aguas abajo principal de la senalizacion de mTOR es la serina/treonina cinasa Akt. Akt posee un dominio de protema conocido como el dominio PH, o dominio de homologfa de plecstrina, que se une a los fosfoinosftidos con alta afinidad. En el caso del dominio PH de Akt, se une a PIP3 (fosfatidilinositol (3,4,5)-trifosfato, PtdIns(3,4,5)P3) o a PIP2 (fosfatidilinositol (3,4)-bifosfato, Pt-dIns(3,4)P2). PI3K fosforila a PIP2 en respuesta a senales de mensajeros qmmicos, tales como union de ligando a receptores acoplados a protema G o tirosina cinasas receptoras. La fosforilacion mediante PI3K convierte a PIP2 en PIP3, reclutando a Akt en la membrana celular, donde se fosforila en serina 473 (S473) por mTORC2. La fosforilacion de Akt en otro sitio, treonina 308 (T308), no depende directamente de mTORC2, sino que necesita la actividad de PI3K. Por lo tanto, La actividad de PI3K hacia Akt puede aislarse de la actividad de mTOR examinando el estado de fosforilacion en treonina 308 de Akt en celulas que carecen de actividad de mTORC2.

En una combinacion de la invencion, un inhibidor de mTOR es un compuesto de formula I-C1a como se ha descrito en el presente documento. Por referencia, los compuestos de formula I-C1a se agrupan dentro de una clase mas amplia de inhibidores de mTOR definida por la formula I:

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Formula I

o una sal farmaceuticamente aceptable de la misma, en donde:

Xi es N o C-E1, X2 es N o C, X3 es N o C, X4 es C-R9 o N, X5 es N o C-E1, X6 es C o N, y X7 es C o N; y en el que no mas de dos atomos de anillo de nitrogeno son adyacentes;

Ri es H, -L-alquilo C1-10, -L-cicloalquilo C3-8, -L-alquilo Ci-10-cicloalquilo C3-8, -L-arilo, -L-heteroarilo, -L-alquilarilo C1-10, -L-alquilhetarilo C1-10, -L-alquilheterociclilo C1-10, -L-alquenilo C2-10, -L-alquinilo C2-10, -L-alquenil C2-i0-cicloalquilo C3-8, -L-alquinil C2-i0-cicloalquilo C3-8, -L-heteroalquilo, -L-heteroarilalquilo,

-L-heteroalquilheteroarilo, -L-heteroalquil-heterociclilo, -L-heteroalquil-cicloalquilo C3-8, -L-aralquito -L-heteroalquilo, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales esta sin sustituir o sustituido con uno o mas R independientes;

L esta ausente, -(C=O)-, -C(=O)O-, -C(=O) N(R31)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R31)-, o -N(R31)-;

E1 y E2 son independientemente -(W1)J -R4;

Mi es un sistema de anillo de 5, 6, 7, 8, 9, o 10 miembros, en el que el sistema de anillo es monodclico o bidclico

3

sustituido con R5 y ademas opcionalmente sustituido con uno o mas

es independientemente 0 o 1;

-S(O)0-2 -CH(R7)N(C(O)R8)

C(O)-, -C(O)N(R7)

j en E1 o j en E2 W1 es -O-, -NR7 CH(R7)N(C(O)OR8)-,

CH(R7)N(R8)C(O)-, -CH(R7)N(R8)S(O)-, o -CH(R7)N(R8)S(O)2 W2 es -O-, -NR7-, -S(O)0-2-, -C(O)-, -C(O)N(R7)-, -N(R7)C(O)

(W2)k

R2; cada k es 0 o 1;

- -N(R7)C(O)-, -N(R7)S(O)- CH(R7)N(SO2R8)-, -CH(R7)N(R8)-

-N(R7)S(O)2-, -C(O)O- -CH(R7)C(O)N(R8)-

N(R7)C(O)N(R8)-, -N(R7)S(O)-, -N(R7)S(O)2-

8

C(O)O-, -CH(R7)N(C(O)OR8)-, -CH(RjN(C(O)R8)-, -CH(R7)N(SO2R8)-, -CH(R7)N(R8)-, -CH(R7)C(O)N(R8)

-CH(R7)N(R8)S(O)

o-CH(R7)N(R8)S(O)2

-CF3, -OCF3, -OR3

-NR31C(=O)NR32R33 -NR31C(=NR32)SR33,

SC(=O)NR31R32, arilo (por ejemplo

NR31S(O)0-2R32, -OC(=O)OR33,

-SO2NR31R32,

-NR31R32,

-NR34R35,

SO2NR34R35,

C(O)R31, -CO2R NR31C(=O)R32

31

-CH(R7)N(R8)C(O)

R2 es hidrogeno, halogeno, -OH, -R C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31

C(=S)OR31, -C(=O)SR31

-OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR

arilo bidclico, arilo sin sustituir, o arilo monodclico sustituido), hetarilo, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3.8-alquilo-C1.10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10,

NR31C(=NR32)NR33R32,

, -C(=O)NR31R32 -NR31C(=O)OR32

NR31C(=NR32)OR33

, -P(O)OR31OR32

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil Ci-10-alquenilo C2-10, alquil Ci-10-alquinilo C2-10, alquilarilo C1-10 (por ejemplo, alquil C2-i0-arilo monodclico, alquil Ci-10-arilo monodclico sustituido, o alquil C1.10 bicicloarilo), alquil C1-10 hetarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10-alquilo C1.10, alquinil C2-10-alquilo C1.10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 hetarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3-8, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 hetarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1.10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10-alquenilo C2-10, alcoxi C1-10-alquinilo C2-10, heterociclilo, heteroalquilo, heterociclil-alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquilo C1.10 (por ejemplo, monocicloaril-alquilo C2-10, monocicloaril sustituido-alquilo C1.10, o bicicloaril-alquilo C1.10), aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, aril-heterociclilo, hetaril-alquilo C1-10, hetaril-alquenilo C2-10, hetaril-alquinilo C2-10, hetaril-cicloalquilo C3-8, hetaril-heteroalquilo, o hetaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo bidclico o heteroarilo esta sin sustituir, o en el que cada uno de arilo bidclico, resto de heteroarilo o resto de arilo monodclico esta sustituido independientemente con uno o mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)N R34R35, -NO2, -CN,

arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo halo,

-C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)N R34R35, -NO2, S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31, -C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR333, -OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o -SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo esta sin sustituir o sustituido cono uno o alquilo, heteroalquilo, aJquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, jarilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo,

halo, -OH,

31

-CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo

-NR31R32,

-NR34R35,

C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o

31

, -R3

-C(=O)NR31R32;

R3 y R4 son independientemente hidrogeno, halogeno, -OH, -R31, -CF3, -OCF3 -OR31, -NR31R32-NR34R35 -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31, -C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31,

-P(O)OR31OR32, -SC(=O)NR31R32, arilo, hetarilo, alquilo C1-4, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3.8-alquilo-C1.10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10, cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil C1-10-alquenilo C2-10, alquil C1-10-alquinilo C2-10, alquil C1-10 arilo, alquil C1-10 hetarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10-alquilo C1-10, alquinil C2-10-alquilo C1-10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 hetarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3-8, alquinil C2-10-cicloalquilo C3-8, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 hetarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1-10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10-alquenilo C2-10, alcoxi C1-10-alquinilo C2-10,

heterociclilo, heterociclil-alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquilo C1-10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, arilheterociclilo, hetaril-alquilo C1-10, hetaril-alquenilo C2-10, hetaril-alquinilo C2-10, hetaril-cicloalquilo C3-8, heteroalquilo, hetaril-heteroalquilo, o hetaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo o heteroarilo esta sin sustituir o esta sustituido independientemente con uno o mas halo, -OH -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, C(=O)NR34R35, -NO2, -CN

-S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32 -C(=S)OR31, -C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, -NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR333 -OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o -SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo esta sin sustituir o sustituido cono uno o mas halo -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo, -NR31 R32, -NR34R35rC(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32 R5 es hidrogeno, halogeno, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32 -C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32 -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31, -C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33 -NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31R32, -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32 o

SC(=O)NR31R32;

31 32 33

cada uno de R , R , y R es independientemente H o alquilo C1-10, en el que el alquilo C1-10 esta sin sustituir o sustituido con uno o mas grupos arilo, heteroalquilo, heterociclilo, o hetarilo, en el que cada uno de dichos grupos arilo, heteroalquilo, heterociclilo, o hetarilo esta sin sustituir o sustituido con uno o mas halo, -OH, -alquilo C1-10, -CF3, -O-arilo, -OCF3, -Oalquilo C1-10, -NH2, -N(alquil C1-10)(alquilo C1-10), -NH(alquilo C1-10), -NH(arilo), -NR34R35, -C(O)(alquilo C1-10), -C(O)(alquil C1_10-arilo), -C(O)(arilo), -CO2-alquilo C1-10, -CO2-alquilarilo C1-10, -CO2-arilo, -C(=O)N(alquil C1-10)(alquilo C1-10), -C(=O)NH(alquilo C1-10), -C(=O)NR34R35, -C(=O)NH2, -OCF3, -O(alquilo C1-10), -O-arilo, -N(aril)(alquilo C1-10), -NO2, -Cn, -S(O)0-2 alquilo C1-10,-S(O)0-2 alquil C1-10 arilo, -S(O)0-2 arilo, -SO2N(arilo), -SO2N(alquil C1-10)(alquilo C1-10),

-SO2NH(alquilo C1-10) o -SO2NR34R35;

R34 y R35 en -NR34R35, -C(=O)NR34R35, o -SO2NR34R35, se toman conjuntamente con el atomo de nitrogeno al que estan unidos para formar un anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros; en el que dicho anillo esta independientemente sin sustituir o esta sustituido por uno o mas -NR31R32, hidroxilo, halogeno, oxo, arilo, hetarilo, alquilo C1-6, u O-arilo, y en el que dicho anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros contiene independientemente 0, 1, o 2 heteroatomos mas ademas del atomo de nitrogeno;

cada uno de R7 y R8 es independientemente hidrogeno, alquilo C1-10, alquenilo C2-10, arilo, heteroarilo, heterociclilo o cicloalquilo C3-10, cada uno de los cuales excepto para el hidrogeno esta sin sustituir o sustituido con uno o mas R6 independientes; R6 es halo, -OR31, -SH, -NH2, -NR34R35, -NR31R32, -CO2R31, -CO2arilo, -C(=O)NR31R32, C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2 alquilo C^0, -S(O)0-2arilo, -SO2NR34R35, -SO2NR31R32, alquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10; aril-alquilo C1-10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, hetaril-alquilo C1-10, hetaril-alquenilo

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

C2-10, hetaril-alquinilo C2-10, en el que cada uno de dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroalquilo, heterociclilo, o hetarilo esta sin sustituir o sustituido independientemente con uno o mas halo, ciano, nitro, -Oalquilo C1-10, alquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, haloalquilo C1-10, halo-alquenilo C2-10, halo-alquinilo C2-10, -COOH, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35, -SO2NR34R35, -SO2 NR31R32, -NR31R32, o -NR34R35; y

R9 es H, halo, -OR31, -SH, -NH2, -NR34R35, -NR31R32, -CO2R31, -CO2arilo, -C(=O)NR31R32, C(=O)NR3aR35, -NO2, -CN, -S(O)0-2 alquilo C1-10, -S(O)0-2arilo, -SO2NR34R35, -SO2NR31R32, alquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10; aril-alquilo C1.10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, hetaril-alquilo C1.10, hetaril-alquenilo C2-10, hetaril-alquinilo C2-10, en el que cada uno de dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroalquilo, heterociclilo, o hetarilo esta sin sustituir o sustituido independientemente con uno o mas halo, ciano, nitro, -Oalquilo C1-10, alquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, haloalquilo C1-10, halo-alquenilo C2-10, halo-alquinilo C2-10, -COOH, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R05, -SO2NR34F?35, -SO2NR31R32, -NR31R32, o -NR34R35.

M1 es un sistema de anillo de 5, 6, 7, 8, 9, o 10 miembros, en el que el sistema de anillo es monodclico o bidclico. El anillo monodclico M1 esta sin sustituir o sustituido con uno o mas sustituyentes R5 (incluyendo 0, 1, 2, 3, 4, o 5 sustituyentes R5). En algunas realizaciones, el anillo monodclico M1 es aromatico (incluyendo fenilo) o heteroaromatico (incluyendo, pero sin limitacion, piridinilo, pirrolilo, imidazolilo, tiazolilo, o pirimidinilo). El anillo monodclico M1 puede ser un anillo de 5 o 6 miembros (incluyendo, pero sin limitacion, piridinilo, pirrolilo, imidazolilo, tiazolilo, o pirimidinilo). En algunas realizaciones, M2 es un grupo heteroaromatico de cinco miembros con un heteroatomo, en el que el heteroatomo es N, S, u O. En otra realizacion, M2 es un grupo heteroaromatico de cinco miembros con dos heteroatomos, en el que los heteroatomos son nitrogeno y oxfgeno o nitrogeno y azufre.

El anillo bidclico M1 esta sin sustituir o sustituido con uno o mas sustituyentes R5 (incluyendo 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 sustituyentes R5). El anillo bidclico M1 es aromatico o heteroaromatico de 7, 8, 9, o 10 miembros. Los ejemplos de un anillo aromatico bidclico M1 incluyen naftilo. En otras realizaciones, el anillo bidclico M1 es heteroaromatico e incluye, pero sin limitacion, benzotiazolilo, quinolinilo, quinazolinilo, benzoxazolilo, y benzoimidazolilo.

El inhibidor de mTOR de la invencion es un compuesto de formula I-C1a:

imagen3

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en el que:

E2 es -H;

X1 y X2 sean N;

R1 es -L-alquilo C1-10, -L-cicloalquilo C3-8, -L-alquilheterociclilo C1-10, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales esta sin sustituir o sustituido con uno o mas R3 independientes;

L esta ausente, -(C=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)N(R31)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R31)-, o -N(R31)-;

R3 es hidrogeno, -OH, -OR31, -NR31R32, -C(O)R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35 arilo, heteroarilo, alquilo C1.4, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, o heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo o heteroarilo esta sin sustituir o esta sustituido independientemente con uno o mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32

34 35 31 31 31 32 34 35 31 31 32 34

-NR34R -NR31C(=O)R32

C(O)R3

-S(O)0-2R , -SO2NR3 -C(=S)OR

SO2NR34R35,

CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35, -NO2, -CN,

NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32,

-NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31R32,

-SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o-SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo, cicloalquilo, o heterociclilo esta sin sustituir o sustituido con uno mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo,

-C(=O)SR3

-OC(=O)SR3

-R3

heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32;

-(W2)k- es -NH-, -N(H)C(O)- o -N(H)S(O)2-;

R2 es hidrogeno, halogeno, -OR31, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31 -S(O)R31, -SONR31R32, -SONR34R35, arilo bidclico, arilo monodclico sustituido

CF3, -OCF3, -OR31, -O-arilo,

C(=O)NR31R32,

-C(=O)NR34R35,

heteroarilo, alquilo C1-10,

cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3.8-alquilo-C1.10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10, cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil C2-10-arilo monodclico, monocicloaril-alquilo C2-10, alquil C1-10bicicloarilo, bicicloaril-alquilo C1-10, alquilarilo C1-10 sustituido, aril sustituido-alquilo C1-10, alquil C1-10 heteroarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 heteroarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil

5

10

15

20

25

30

35

40

45

C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 heteroarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3-8, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1-10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10 alquenilo C2-10, alcoxi C1-10 alquinilo C2-10, heterociclilo, heterociclil-alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, aril-heterociclilo, heteroaril-alquilo C1.10, heteroaril-alquenilo C2-10, heteroaril-alquinilo C2-10, heteroaril-cicloalquilo C3-8, heteroaril-heteroalquilo, o heteroaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo bidclico o heteroarilo esta sin sustituir, o en el que cada uno de arilo bidclico, resto de heteroarilo o resto de arilo monoddico esta sustituido independientemente con uno o mas halo, -OH, -R , -CF3

-OCF3, -OR31, -SO2NR31R32,

31

-NR31R32

-nr34r35.

C(O)R31, -CO2R

-SO2NR34R35

-NO2, -CN, -S(O)0-2R

“ -C(=sior;

-C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35

-NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, -NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32,

-C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, -NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31 r32 -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o -SC(=O)NR31 R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo esta sin sustituir o sustituido cono uno o mas halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3 -OR31, -O-arilo, -NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32;

R31, R32, y R33, en cada caso, son independientemente H o alquilo C1-10, en el que el alquilo C1-10 esta sin sustituir; y R34 y R35 en -NR34R35, -C(=O)NR34R35, o -SO2NR34R35, se toman conjuntamente con el atomo de nitrogeno al que estan unidos para formar un anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros; en el que dicho anillo esta independientemente sin sustituir o esta sustituido por uno o mas -NR31R32, hidroxilo, halogeno, oxo, arilo, heteroarilo, alquilo C1-6, u O-arilo, y en el que dicho anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros contiene independientemente 0, 1, o 2 heteroatomos mas ademas del nitrogeno.

Esquemas de reaccion - Compuestos inhibidores de mTOR

Los compuestos inhibidores de mTOR divulgados en el presente documento pueden prepararse mediante las rutas descritas a continuacion. Los materiales usados en el presente documento estan disponibles comercialmente o se preparan mediante metodos sinteticos conocidos generalmente en la tecnica. Estos esquemas no estan limitados a los compuestos listados o a cualquier sustituyente particular empleado con fines ilustrativos. La numeracion no se corresponde necesariamente con aquella de las reivindicaciones u otras tablas.

Esquema A

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En una realizacion, los compuestos se sintetizan condensando un heterociclo A-1 funcionalizado con formamida, para proporcionar una pirazolopirimidina A-2. La pirazolopirimidina se trata con N-yodosuccinimida, que introduce un sustituyente yodo en el anillo de pirazol como en A-3. El sustituyente R1 se introduce haciendo reaccionar la pirazolopirimidina A-3 con un compuesto de formula R1-Lg en presencia de una base, tal como carbonato de potasio, para producir un compuesto de formula A-4. Otras bases que son adecuadas para su uso en esta etapa incluyen, pero sin limitacion, hidruro de sodio y t-butoxido de potasio. El compuesto de formula R1-Lg tiene un resto R1 como se ha definido para R1 de un compuesto de formula I-A, y en el que -Lg es un grupo saliente adecuado, tal como haluro (que incluye bromo, yodo, y cloro), tosilato, u otro grupo saliente adecuado.

Posteriormente, se introducen los sustituyentes correspondientes a M1 haciendo reaccionar acidos aril o heteroaril boronicos con el compuesto de formula A-4 para obtener el compuesto A-5.

Esquema A-1

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Como alternativa, Puede usarse qmmica de Mitunobu para obtener la pirazolopirimidina alquilada A-4, tal como se muestra en el esquema A-1. La yodopirazolopirimidina A-3 se hace reaccionar con un alcohol adecuado, en presencia de trifenilfosfina y diisopropilazodicarboxilato (DIAD) para producir la pirazolopirimidina A-4.

Esquema B

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Los compuestos divulgados en el presente documento pueden sintetizarse mediante un esquema de reaccion presentado de manera general en el esquema B. La smtesis se produce mediante acoplamiento de un compuesto de formula A con un compuesto de formula B para proporcionar un compuesto de formula C. La etapa de acoplamiento se cataliza tfpicamente usando, por ejemplo, un catalizador de paladio, incluyendo, pero sin limitacion, tetraquis(trifenilfosfina) de paladio. El acoplamiento se efectua generalmente en presencia de una base adecuada, siendo un ejemplo no limitante el carbonato de sodio. Un ejemplo de un disolvente adecuado para la reaccion es dioxano acuoso.

Un compuesto de formula A para su uso en el esquema B tiene una estructura de formula A, en la que Ti es triflato o halo (incluyendo bromo, cloro, y yodo), y en el que Ri, Xi, X2, X3, R31 y R32 se definen como para un compuesto de formula I-A. Para los acidos boronicos y los derivados de acido como los ilustrados en la formula B, M es M1 o M2. M1 se define como para un compuesto de formula I-A. Por ejemplo, M1 puede ser un resto 5-benzoxazolilo o 6-benzoxazolilo, incluyendo, pero sin limitacion, aquellos restos M1 divulgados en el presente documento. M2 es un resto que se transforma sinteticamente para formar M1, despues de que el resto M2 se haya acoplado al nucleo biciclico del compuesto de formula A.

Para un compuesto de formula B, G es hidrogeno o Rg1, en el que Rg1 es alquilo, alquenilo, o arilo. Como alternativa, B(OG)2 se toma conjuntamente para formar un resto dclico de 5 o 6 miembros. En algunas realizaciones, el compuesto de formula B es un compuesto que tiene una estructura de formula E:

GO

H

-R

G2

Formula E

en la que G es H o Rg1; Rg1 es alquilo, alquenilo, o arilo. Como alternativa,

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forma un resto dclico de 5 o 6 miembros; y R2 es un resto Rg2, en el que el resto Rg2 es H, acilo, o un grupo protector de amino que incluye, pero sin limitacion, carbamato de ferc-butilo (Boc), carbobenciloxi (Cbz), bencilo (Bz), fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), p-metoxibencil (PMB), y similares.

Esquema C

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En algunas realizaciones, un compuesto de formula B es un compuesto de formula B', en el que G es Rgi o un compuesto de formula B", en el que G es hidrogeno. El esquema C ilustra un esquema ejemplar para sintetizar un compuesto de formula B' u, opcionalmente, la formula B'' para su uso en el esquema de reaccion C. Esta reaccion se produce haciendo reaccionar un compuesto de formula D con un borato de trialquilo o un derivado de acido boronico para producir un compuesto de formula B'. La reaccion se lleva a cabo en un disolvente, tal como dioxano o tetrahidrofurano. El borato de trialquilo incluye, pero sin limitacion, borato de triisopropilo y el derivado del acido boronico incluye, pero sin limitacion, bis(pinacolato)diboro.

Cuando la reaccion se lleva a cabo con borato de trialquilo, se anade en primer lugar una base, tal como n-butillito al compuesto de formula D para generar un anion, antes de la adicion del borato. Cuando la reaccion se lleva a cabo con un derivado del acido boronico, tal como bis(pinacolato)diboro, se usa un catalizador de paladio y una base. Los catalizadores de paladio tfpicos incluyen, pero sin limitacion, cloruro de ((difenilfosfino)ferroceno)paladio. Una base adecuada incluye, pero sin limitacion, acetato de paladio.

Un compuesto de formula D para su uso en el esquema C es un compuesto en el que T2 es halo u otro grupo saliente, y M es como se ha definido anteriormente en el esquema B. El compuesto de formula B' puede convertirse ademas en un compuesto de formula B'' mediante tratamiento con un acido, tal como acido clorhndrico.

En una realizacion de un compuesto de formula B, B', B", o E, los grupos G son hidrogeno. En otra de un compuesto de formula B, B', B", o E, los grupos G son Rgi.

En algunas realizaciones, no se efectua una transformacion sintetica del resto M1 despues de la reaccion de acoplamiento cuando, por ejemplo, M1 es N-acetil-benzoxazol-5-ilo.

Algunos compuestos ilustrativos de formula B que pueden sintetizarse mediante el esquema C incluyen, pero sin limitacion, compuestos de las siguientes formulas:

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Puede sintetizarse un compuesto de formula E a partir de un compuesto de formula F, tal como se muestra en el esquema C-1:

Esquema C-1

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Formula F

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El esquema C-1 representa un esquema ilustrativo para sintetizar un compuesto de formula E. Esta reaccion se produce haciendo reaccionar un compuesto de formula F con un borato de trialquilo o un derivado del acido boronico para producir un compuesto de formula E. Las condiciones de la reaccion son como se han descrito anteriormente en el esquema C.

Un compuesto de formula F para su uso en el esquema C-1 es un compuesto en el que T2 es halo (que incluye Br, Cl, e I) u otro grupo saliente (incluyendo, pero sin limitacion, triflato, tosilato, y mesilato), y el resto Gp es H, acilo, o un grupo protector de amino que incluye, pero sin limitacion, carbamato de ferc-butilo (Boc), carbobenciloxi (Cbz), bencilo (Bz), fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), p-metoxibencil (PMB), y similares.

El compuesto de formula E, en el que G es alquilo, puede convertirse ademas en un compuesto de formula E, en el que G es hidrogeno, por tratamiento con un acido, tal como acido clorhndrico.

Cuando se desee, la desproteccion de un sustituyente (por ejemplo, retirada de la proteccion de Boc de un sustituyente amino) en el resto benzoxazolilo (es decir, M1 de formula C) se efectua despues de acoplar el compuesto de formula B al compuesto de formula A.

Algunos compuestos ejemplares con dichos grupos protectores, incluyen, pero sin limitacion, compuestos de las siguientes formulas:

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Puede llevarse a cabo una transformacion ejemplar de M2 a M1 mediante el esquema D como se muestra a continuacion.

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En la etapa 1, se hace reaccionar un compuesto de formula 3-1 con acido boronico 3-2, en presencia de tetraquis(trifenilfosfina)paladio y una base adecuada, tal como carbonato de sodio en una mezcla de disolvente acuoso/organico para producir un compuesto de formula 3-3. En la etapa 2, se hace reaccionar el compuesto de formula 3-3 con aproximadamente 2 equivalentes de acido mtrico en acido acetico como disolvente para producir un compuesto de formula 3-4. Pueden usarse dos transformaciones alternativas para efectuar la siguiente transformacion de la etapa 3. En el primer metodo, se trata el compuesto de formula 3-4 con ditionita de sodio e hidroxido de sodio en agua para producir un compuesto de formula 3-5. Como alternativa, se reduce el compuesto de formula 3-4 usando paladio sobre carbono en un disolvente adecuado en atmosfera de nitrogeno para dar un compuesto de formula 3-5.

En la etapa 4, se hace reaccionar el compuesto 3-5 con aproximadamente 1,2 equivalentes de bromuro de cianogeno en un disolvente, tal como mezcla de metanol/tetrahidrofurano para producir un compuesto de formula 3-6. El compuesto de formula 3-6 puede transformarse adicionalmente mediante otra sustitucion o derivatizacion.

Un compuesto de formula 3-1 util en el metodo del esquema D es un compuesto que tiene una estructura de formula 3-1, en el que T1 es triflato o halo (que incluye bromo, cloro, y yodo), y en el que R1, X1, X2, X3, R31 y R32 se definen como para un compuesto de formula I-A.

Pueden sintetizarse compuestos ilustrativos que tienen un nucleo de pirazolopirimidina mediante el esquema E. Esquema E

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4-2 Formula B Etapa 3 Formula C

En la etapa 1 del esquema E, se hace reaccionar el compuesto A-2 en dimetilformamida (DMF) con una N-halosuccinimida (NT1S) aproximadamente a 80°C, para dar el compuesto 4-1, donde T1 es yodo o bromo. En la

etapa 2, el compuesto 4-1 en DMF se hace reaccionar con un compuesto RiTx, en presencia de carbonato de potasio, para dar el compuesto 4-2. En la etapa 4, el compuesto 4-2 se acopla con un compuesto de formula B usando un catalizador de paladio, tal como tetraquis(trifenilfosfina)paladio, y en presencia de carbonato de sodio, para dar un compuesto de pirazolopirimidina como el mostrado.

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Un compuesto de formula RiTx adecuado para su uso en el esquema de reaccion E es el compuesto en el que Ri es cicloalquilo o alquilo y Tx es halo (que incluye bromo, yodo, o cloro) o un grupo saliente, incluyendo, pero sin limitacion, mesilato o tosilato.

10 Los esquemas de reaccion F-M ilustran metodos de smtesis de reactivos de borano utiles para preparar intermedios utiles en la smtesis de los compuestos divulgados en el presente documento tal como se describe en los esquemas de reaccion A, B, y E anteriores, para introducir sustituyentes Mi.

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Esquema de reaccion F

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Esquema de reaccion I

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Esquema de reaccion J

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Tubo sellado

NHjOH HCI

NCS/DMF

NaOH(sq)/EtOH Br.

60 °C.1h

TA, una noche

B-B

~y~d o^v

DBU/THF

150 C Una noche

dppfPdClj/KOAc/DME

TA, una noche

Reflujo, 2 h

K-4

Esquema de reaccion L

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nh2oh hci

NCS/DMF

NaOH aq /EtOH

60 °C. 1h

TA, una noche

B-B

/"o' W

JBU/THF

Tubo sellado

dppfPdClj/KOAc/DME

150 C

TA. una noche

Reflujo, 2 h

Una noche

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b is (p in aco Into) d lboro

Pdt'li(dppl ), KOAc

1,4-dioxam, 110 °C

w

Etapa 2

HrC’N, MeOH

HCI

2. 6N HCI, SO

M-2

M-

Etapa 1

G-6-B

Etapa 3

Esquema de reaccion N

T-|-M

En un metodo de smtesis alternativo, se acoplan un compuesto de formula N-1 y un compuesto de N-2 para producir un compuesto de formula C. La etapa de acoplamiento se cataliza bpicamente usando, por ejemplo, un catalizador de paladio, incluyendo, pero sin limitacion, tetraquis(trifenilfosfina) de paladio. El acoplamiento se efectua generalmente en presencia de una base adecuada, siendo un ejemplo no limitante el carbonato de sodio. Un ejemplo de un disolvente adecuado para la reaccion es dioxano acuoso.

Un compuesto de formula N-1 para su uso en el esquema N tiene una estructura de formula N-1, en la que G es hidrogeno o Rgi, en la que Rgi es alquilo, alquenilo, o arilo. Como alternativa, B(OG)2 del compuesto de formula N-1 se toma conjuntamente para formar un resto dclico de 5 o 6 miembros. Ri, Xi, X2, X3, R31 y R32 del compuesto de formula N-1 se definen como para un compuesto de formula I-A.

Un compuesto de formula N-2 para su uso en el esquema N tiene una estructura de formula N-2, en la que T1 es triflato o halo (que incluye bromo, cloro, y yodo). M del compuesto de formula N-2 es M1 o M2. M1 se define como para un compuesto de formula I. Por ejemplo, M1 puede ser un resto 5-benzoxazolilo o 6-benzoxazolilo, incluyendo, pero sin limitacion, aquellos restos M1 divulgados en el presente documento. M2 es un resto que se transforma sinteticamente para formar M1, despues de que el resto M2 se haya acoplado al nucleo biciclico del compuesto de formula N-1.

Esquema N-1

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Puede sintetizarse un compuesto de formula N-1 como se muestra en el esquema N-1. Se hace reaccionar un compuesto de formula N-1 con un borato de trialquilo o un derivado de acido boronico para producir un compuesto de formula N-1. La reaccion se lleva a cabo en un disolvente, tal como dioxano o tetrahidrofurano. El borato de trialquilo incluye, pero sin limitacion, borato de triisopropilo y el derivado del acido boronico incluye, pero sin limitacion, bis(pinacolato)diboro.

Cuando la reaccion se lleva a cabo con borato de trialquilo, se anade en primer lugar una base, tal como n-butillito al compuesto de formula N-3 para generar un anion, antes de la adicion del borato. Cuando la reaccion se lleva a cabo

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con un derivado del acido boronico, tal como bis(pinacolato)diboro, se usa un catalizador de paladio y una base. Los catalizadores de paladio tipicos incluyen, pero sin limitacion, cloruro de ((difenilfosfino)ferroceno)paladio. Una base adecuada incluye, pero sin limitacion, acetato de paladio.

Un compuesto de formula N-3 adecuado para su uso en el esquema N-1 es un compuesto en el que T2 es halo u otro grupo saliente, tal como mesilato, tosilato, o triflato. X1, X2, X3, R1, R31, y R32 del compuesto de formula N-3 es como se ha definido para un compuesto de formula I-A.

Un compuesto de formula A, B, B', B", C, e, D, E, E", 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3" puede proporcionarse en forma de su sal, incluyendo, pero sin limitacion, clorhidrato, acetato, formiato, nitrato, sulfato, y boronato.

Puede usarse un compuesto de paladio, incluyendo, pero sin limitacion, cloruro de (difenilfosfinio)ferroceno paladio y tetraquis(trifenilfosfina)paladio en la smtesis de un compuesto de formula A, B, B', B", C, C", D, E, E", 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3". Cuando esta presente un compuesto de paladio en la smtesis de un compuesto de formula A, B, B', B", C, C", D, E, E", 3-1,3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3'', esta presente en una cantidad en el intervalo de aproximadamente 0,005 equivalentes molares a aproximadamente 0,5 equivalentes molares, de aproximadamente 0,05 equivalentes molares a aproximadamente 0,20 equivalentes molares, de aproximadamente 0,05 equivalentes molares a aproximadamente 0,25 equivalentes molares, de aproximadamente 0,07 equivalentes molares a aproximadamente 0,15 equivalentes molares, o de aproximadamente 0,8 equivalentes molares a aproximadamente 0,1 equivalentes molares del compuesto de formula A, B, B', B", C, D, E, 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1, o N-3. En algunas realizaciones, esta presente un compuesto de paladio, incluyendo, pero sin limitacion, cloruro de (difenilfosfinio)ferroceno paladio y tetraquis(trifenilfosfina)paladio en la smtesis de un compuesto de formula A, B, B', B", C, C", D, E, E", 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3" en aproximadamente 0,07, aproximadamente 0,08, aproximadamente 0,09, aproximadamente 0,10, aproximadamente 0,11, aproximadamente 0,12, aproximadamente 0,13, aproximadamente 0,14, o aproximadamente 0,15 equivalentes molares de un material de partida de formula A, B, B', B", C, C", D, E, E",

3- 1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3" que se usa para sintetizar un compuesto de formula A, B, B', B", C, C", D, E, E", 3-1, 3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1", N-3", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", N-1", o N-3".

En algunas realizaciones de los esquemas de reaccion B, D, E, N o N-1 anteriores, otra realizacion de los compuestos de formula A, C, 3-1, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, A-2, 4-1,4-2, N-1 y N-3 es como se muestra en los esquemas B'. D'. E', N' o N-I' a continuacion. En estas smtesis alternativas, la produccion de un compuesto de formula C, 3-1, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, A-2,

4- 1, 4-2, N-1 o N-3, usan compuestos que comprenden un resto amino que tiene un resto Rg2 presente durante una o mas de las etapas sinteticas, en el que Rg2 es un grupo protector de amino que incluye, pero sin limitacion, carbamato de ferc-butilo (Boc), carbobenciloxi (Cbz), bencilo (Bz), fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC), p-metoxibencil (PMB), y similares. Estos incluyen un compuesto de formula A'', C", 3-1", 3-3", 3-4", 3-5", 3-6", A-2", 4-1", 4-2", N-1" o N-3".

El resto Rg2 se retira, usando metodos adecuados, en cualquier punto deseado, tras lo cual el compuesto de formula C, 3-1, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, A-2, 4-1,4-2, N-1 o N-3 tiene un hidrogeno R31 que reemplaza al resto Rg2 en el resto de amino. Esta transformacion se ilustra espedficamente para la conversion de un compuesto de formula C'' en un compuesto de formula C (es decir, como en la etapa 4 del esquema E') y para la conversion de compuesto de formula 3-6'' en un compuesto de formula 3-6 (es decir, como en la etapa 5 del esquema D'). Esta ilustracion no es en modo alguno limitante en cuanto a la eleccion de etapas en las que puede convertirse un compuesto que comprende un resto NR31 Rg2 en un compuesto que comprende un resto NR31R32 en el que el resto R32 es hidrogeno.

Esquema B'

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Esquema D'

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Esquema E'

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Ademas, la invencion abarca metodos de smtesis de los compuestos de A, B, B', B", C, E, 3-1,3-2, 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, N-1 o N-3, en los que uno o mas de M, M1, o R1 tiene un grupo protector presente durante una o mas etapas de la smtesis. Los grupos protectores adecuados para su uso para un resto M, Mi, o Ri se conocen bien en la tecnica, asf como los metodos para su incorporacion y retirada, y los reactivos adecuados para dichas transformaciones.

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Algunos compuestos ilustrativos divulgados en el presente documento que son inhibidores de mTOR se describen a continuacion.

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Los compuestos ilustrativos de la invencion incluyen aquellos de la subclase 1a, donde los sustituyentes R1, X1, y V son como se describen a continuacion.

En algunas realizaciones, cuando Ri es CH3 y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es Et y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es iPr y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En una realizacion, Ri es iPr, Xi es N, y V es NH2. En otra realizacion, Ri es iPr, Xi es N, y V es NHCOMe. En otras realizaciones, cuando Ri es ciclobutilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es ciclopentilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es fenilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es piridin-2-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilaminociclohex-4-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilpiperidin-4-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilaminociclobut-3-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es terc-butilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es i-ciano-but-4-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es i-ciano-prop-3-ilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es 3-azetidinilo y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me.

En otras realizaciones, cuando Ri es

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y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es

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y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es

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y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es

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y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

A

T nh2

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

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y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

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y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

HO

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

Co

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

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y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen37

5

10

15

20

25

30

35

imagen38

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen39

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen40

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen41

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen42

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen43

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen44

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen45

5

10

15

20

25

30

35

imagen46

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen47

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen48

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen49

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen50

OH

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

AW

imagen51

CONHMe

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

NHAc

5

10

15

20

25

30

$

imagen52

y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando Ri es

imagen53

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

N'OMe

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

0.

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

•JW

imagen54

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

6

OH

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen55

5

10

15

20

25

30

35

imagen56

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen57

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen58

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen59

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen60

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen61

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen62

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen63

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me.

En otras realizaciones, cuando R1 es

/OH

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen64

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen65

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen66

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen67

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen68

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen69

5

10

15

20

25

30

35

40

JWXrt/v

imagen70

y Xi es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen71

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen72

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

HWW

imagen73

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen74

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen75

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen76

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen77

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen78

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

imagen79

y X1 es N, V es fenilamino, NHMe, NH2, NHEt, NHCOH, NHCOMe, NHCOEt, NHCOiPr, NHCOOMe, o NHSO2Me. En las realizaciones indicadas, piridin-2-ilo es

imagen80

N-metilaminociclohex-4-ilo es

metilpiperidin-4-ilo es

imagen81

imagen82

y N-metilaminociclobut-3-ilo es

imagen83

Los compuestos ilustrativos de la invencion incluyen aquellos de la subclase 1a, donde los sustituyentes Ri, Xi, y V son como se describen a continuacion. En algunas realizaciones, cuando Ri es H y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es CH3 y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es Et y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es iPr y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es ciclobutilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es ciclopentilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es fenilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es piridin-2-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilaminociclohex-4-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilpiperidin-4-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es N-metilaminociclobut-3-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es ferc-butilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es i-ciano-but-4-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es i-ciano-prop-3-ilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es 3-azetidinilo y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando Ri es

imagen84

5

10

15

20

25

30

35

40

k

Cnh

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

k

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

A

V NH2

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

A

r

NhU

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen85

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen86

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

Oo

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen87

imagen88

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen89

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen90

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen91

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen92

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen93

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen94

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen95

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen96

5

10

15

20

25

30

35

imagen97

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen98

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen99

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen100

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen101

OH

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen102

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen103

CONHMe

5

10

15

20

25

30

$

NHAc

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen104

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

*

N-OH

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen105

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen106

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen107

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen108

5

10

15

20

25

30

35

imagen109

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen110

0

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen111

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen112

H

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen113

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen114

n'OH

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen115

N~OMe

5

10

15

20

25

30

35

imagen116

y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen117

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen118

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen119

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen120

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones,

cuando R1 es

imagen121

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen122

OH

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen123

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen124

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

VWAA,

imagen125

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido; realizaciones, cuando R1 es

imagen126

ciclopropilamino

morfolinoetilamino

o hidroximetilamino. En otras

imagen127

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

•J+t+Slf

imagen128

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen129

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen130

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen131

5

10

15

20

25

30

35

imagen132

y Xi es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

imagen133

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En otras realizaciones, cuando R1 es

n-Oh

imagen134

y X1 es N, V es ciclopropanocarboxamido, ciclopropilamino, morfolinoetilamino, o hidroximetilamino. En las realizaciones indicadas, ciclopropanocarboxamido es

imagen135

ciclopropilamino es

2-morfolinoetilamino es

imagen136

hidroxietilamino es

y N-morfolino es

imagen137

imagen138

Tabla 1. Actividad biologica de varios compuestos inhibidores de mTOR ilustrativos de la invencion.

Estructura CI50 de mTOR (nM) CI50 de PI3K a (nM) CI50 de PI3K 3 (nM) CI50 de PI3K y (nM) CI50 de PI3K 6 (nM) CE50 de PC3 (nM)

1

y°YNH2 fi-N nh2 L JL + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

2

- NHCOCH3 A nhs <y=' U 1 N r~ + + + + + + + + + + + + + + + +

5

ryN NH2 \s=/ u JL. -N 0 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

6

nh2 ys& 11 1 N 0 0 + + + + + + + + + + + + + + +

7

NHn fr nVm u JL N 0 + + + + + + + + + + + + + + + +

22

nh2 y=/ NVi„ _ A D + + + + + + + + + + + + + + + + + +

Estructura

CI50 de mTOR (nM)

CI50 de PI3K a CI50 de PI3K (nM)_______p (nM)

CI50 de PI3K y (nM)

CI50 de PI3K 5 (nM)

CE50 de PC3 (nM)

23

imagen139

24

25

Pt

nh2

fr

NH?

N'^V

i X N

N "N >>

0

26

imagen140

27

++++

++

+

++

++

+

+

+

+

+++

++

++++

+++

++++

+++

++++

+++

++

+

+

+++

La tabla 1 muestra la actividad biologica en ensayos de cinasa de mTOR y PI3K de varios compuestos de la invencion. La escala utilizada en la tabla 1 es la siguiente: ++++ menos de 100 nM; +++ menos de 1,0 pM; ++ menos de 10 pM; y + mayor de 10 pM.

5

En otras realizaciones, la presente invencion proporciona los siguientes compuestos:

imagen141

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

imagen142

Cualquiera de los compuestos mostrados anteriormente puede mostrar una actividad biologica en un ensayo de inhibicion de mTOR o PI3K de entre aproximadamente 0,5 nM y 25 pM (CI50).

En algunas realizaciones, la invencion proporciona un tratamiento combinado que comprende un inhibidor de mTOR, que puede ser un compuesto proporcionado en el presente documento y un primer agente tambien proporcionado en el presente documento. El inhibidor de mTOR es un compuesto de formula I-C1a, o un compuesto de la tabla 1, y el primer agente es paclitaxel.

Los metodos objeto son utiles para tratar una patologfa asociada con mTOR, y/o con la desregulacion del ciclo celular. Cualquier patologfa que sea el resultado directo o indirecto de una actividad o nivel de expresion anormal de mTOR puede ser una patologfa prevista. La patologfa es un trastorno proliferativo, tales como los descritos en el presente documento, incluyendo, pero sin limitacion, cancer.

Dianas de enfermedades

Se han comunicado una gran variedad de patologfas asociadas con mTOR y/o PI3-cinasa. PI3-cinasa a, una de las cuatro isoformas de las PI3-cinasas de tipo I, se ha relacionado, por ejemplo, con una serie de trastornos proliferativos humanos, tales como canceres. Se ha demostrado que la angiogenesis requiere de manera selectiva de la isoforma a de PI3K para el control de la migracion de celulas endoteliales. (Graupera et al, Nature 2008;453;662-6). Se cree que las mutaciones en el gen que codifica PI3K a o las mutaciones que producen la regulacion positiva de PI3K a se producen en muchos canceres humanos, tales como canceres de pulmon, estomago, endometrio, ovario, vejiga, mama, colon, cerebro y piel. A menudo, las mutaciones en el gen que codifica PI3K a son mutaciones puntuales agrupadas en varios puntos clave en los dominios helicoidales y de cinasa, tales como E542K, E545K, y H1047R. Se ha demostrado que muchas de estas mutaciones son mutaciones oncogenicas de ganancia de funcion. Debido a la alta tasa de mutaciones de PI3K a, el uso como diana de esta via proporciona oportunidades terapeuticas valiosas. Aunque otras isoformas de PI3K, tales como PI3K 6 o PI3K y se expresan principalmente en celulas hematopoyeticas, PI3K a, junto con PI3K p, se expresa de manera constitutiva.

Las patologfas asociadas con PI3-cinasa y/o mTOR tambien pueden caracterizarse por un nivel anormalmente elevado de actividad y/o expresion de mensajeros aguas abajo de mTOR y PI3-cinasa. Por ejemplo, las protemas o mensajeros, tales como PIP2, PIP3, PDK, Akt, PTEN, PrAs40, GSK-3p, p21, p27 pueden estar presentes en cantidades anormales que pueden identificarse mediante cualquier ensayo conocido en la tecnica.

La desregulacion de la ruta de mTOR esta surgiendo como un tema comun en varias enfermedades humanas por consiguiente, los farmacos que se dirigen a mTOR tienen valor terapeutico. Las enfermedades asociadas con la desregulacion de mTORCI incluyen, pero sin limitacion, complejo de esclerosis tuberosa (TSC) y linfangioleiomiomatosis (LAM), estando ambas causadas por mutaciones en los supresores tumorales TSC1 o TSC2. Sin embargo, los pacientes con TSC desarrollan tumores benignos que, cuando estan presentes en el cerebro, pueden provocar ataques, retraso mental y la muerte. La LAM es una enfermedad pulmonar grave. La inhibicion de mTORCI puede ayudar a pacientes con smdrome propenso al cancer de Peutz-Jeghers causado por la mutacion LKB 1. mTORCI tambien puede estar implicado en la genesis de canceres esporadicos. La inactivacion de varios supresores tumorales, en particular PTEN, p53, VHL y NF 1, se ha vinculado con la activacion de mTORCI. La rapamicina y sus analogos (por ejemplo, CCI-779, RAD001 y AP23573) inhiben a TOC1 y han demostrado una actividad anticancer moderada en ensayos clmicos de fase II. Sin embargo, debido a la senal negativa de S6K1 a la via de insulina/PI3K/Akt, es importante indicar que los inhibidores de mTORCI, al igual que los rapalogos, pueden activar a PKB/Akt. En caso de que persista este efecto con el tratamiento cronico con rapamicina, puede proporcionar celulas cancerosas con una senal de supervivencia aumentada que puede ser clmicamente indeseable. La ruta de PI3K/Akt esta activada en muchos canceres. Akt activada regula la supervivencia celular, la proliferacion y el metabolismo fosforilando protemas tales como BAD, FOXO, NF-KB, p2lCip 1, p27Kipl, GSK3p y otras. Akt tambien podna promover el crecimiento celular fosforilando a TSC2. La activacion de Akt puede promover la transformacion celular y la resistencia a la apoptosis promoviendo de manera colectiva el crecimiento, la proliferacion y la supervivencia, a la vez que inhibe las vfas apoptoticas.

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Cuando se desee, se efectua una prueba en el sujeto que se va a tratar antes del tratamiento usando un ensayo diagnostico para determinar la sensibilidad de las celulas tumorales a un primer agente o a un inhibidor de mTOR. Puede emplearse cualquier metodo conocido en la tecnica que pueda determinar la sensibilidad de las celulas tumorales de un sujeto a un primer agente o a un inhibidor de mTOR. En los casos donde se efectua una prueba en el sujeto antes del tratamiento usando un ensayo diagnostico para determinar la sensibilidad de las celulas tumorales a un primer agente o a un inhibidor de mTOR, en una realizacion, cuando se identifica que el sujeto tiene celulas tumorales en las que se predice que tienen baja sensibilidad al primer agente como agente unico, es probable que muestre sensibilidad aumentada en presencia adicional de un inhibidor de mTOR, o viceversa, cuando se administra al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR, administrandose el inhibidor de mTOR despues del primer agente. En otra realizacion, cuando se identifica que el sujeto tiene celulas tumorales en las que se predice que tienen alta sensibilidad al primer agente como agente unico, pero tambien puede mostrar sensibilidad aumentada en presencia de un inhibidor de mTOR basandose en los resultados descritos en el presente documento, se administra al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR, administrandose el inhibidor de mTOR despues del primer agente. Pueden coadministrarse simultanea o secuencialmente uno o mas agentes o tratamientos anticancer adicionales con el primer agente y el inhibidor de mTOR (administrandose el inhibidor de mTOR despues del primer agente), segun considere adecuado el medico tratante dada la prediccion de respuesta probable del sujeto a la combinacion del primer agente y el inhibidor de mTOR, en combinacion con cualquier circunstancia adicional que pertenezca al sujeto individual.

Los datos presentados en los ejemplos mas adelante en el presente documento demuestran que los efectos antitumorales de una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR (administrandose el inhibidor de mTOR despues del primer agente) son superiores a los efectos antitumorales de cualquiera de los dos inhibidores individualmente o ambos administrados simultaneamente o en un orden inverso. Como tales, las combinaciones descritas en el presente documento son particularmente utiles para tratar un trastorno proliferativo, tal como una afeccion neoplasica. Los ejemplos no limitantes de dichas afecciones incluyen, pero sin limitacion, acantoma, carcinoma de celulas adnicas, neuroma acustico, melanoma lentiginoso acral, acrospiroma, leucemia eosinofflica aguda, leucemia linfoblastica aguda, leucemia megacarioblastica aguda, leucemia monodtica aguda, leucemia mieloblastica aguda con maduracion, leucemia mieloide aguda de celulas dendnticas, leucemia mieloide aguda, leucemia promielotica aguda, adamantinoma, adenocarcinoma, carcinoma qrnstico adenoide, adenoma, tumor odontogenico adenomatoide, carcinoma adrenocortical, o leucemia de linfocitos T adultos, linfoma agresivo de celulas NK, canceres relacionados con el SIDA, linfoma relacionado con SIDA, sarcoma de la parte blanda alveolar, fibroma ameloblastico, cancer anal, linfoma anaplasico de celulas grandes, cancer anaplasico de tiroides, linfoma angioinmunoblastico de linfocitos T, angiomiolipoma, angiosarcoma, cancer de apendice, astrocitoma, tumor rabdoide teratoide atfpico, carcinoma de celulas basales, carcinoma de tipo basal, leucemia de celulas B, linfoma de linfocitos B, carcinoma del conducto de Bellini, cancer del tracto biliar, cancer de vejiga, blastoma, cancer oseo, tumor oseo, glioma del tronco encefalico, tumor cerebral, cancer de mama, tumor de Brenner, tumor bronquial, cacrinoma bronquioalveolar, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, cancer de sitio primario desconocido, tumor carcinoide, carcinoma, carcinoma in situ, carcinoma de pene, carcinoma de sitio primario desconocido, carcinosarcoma, enfermedad de Castleman, tumor embrionario del sistema nervioso central, astrocitoma cerebelar, astrocitoma cerebral, cancer de cuello de utero, colangiocarcinoma, condroma, condrosarcoma, cordoma, coriocarcinoma, papiloma del plexo coroide, leucemia linfodtica cronica, leucemia monodtica cronica, leucemia mielogena cronica, trastorno mieloproliferativo cronico, leucemia neutrofila cronica, tumor de celulas claras, cancer de colon, cancer colorrectal, craniofaringioma, linfoma cutaneo de linfocitos T, enfermedad de Degos, dermatofibrosarcoma protuberante, quiste dermoide, tumor de celulas redondas pequenas dermoplasticas, linfoma difuso de celulas B grandes, tumor neuroepitelial disembrioplasico, carcinoma embrionario, tumor del seno endodermico, cancer de endometrio, cancer uterino del endometrio, tumor endometrioide, linfoma de linfocitos T asociado a enteropatfa, ependimoblastoma, ependimoma, sarcoma epitelioide, eritroleucemia, cancer esofagico, estesioneuroblastoma, tumores de la familia de Ewing, sarcomas de la familia de Ewing, sarcoma de Ewing, tumor de celulas germinales extracraneales, tumor de celulas germinales extragonadales, cancer del conducto biliar extrahepatico, enfermedad de Paget extramamaria, cancer de las trompas de falopio, fetus in fetu, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, cancer folicular de tiroides, cancer de vesroula biliar, cancer de vesroula biliar, ganglioglioma, ganglioneuroma, cancer gastrico, linfoma gastrico, cancer gastrointestinal, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor estromal gastrointestinal, tumor estromal gastrointestinal, tumor de celulas germinales, germinoma, coriocarcinoma gestacional, tumor trofoblastico gestacional, tumor oseo de celulas gigantes, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatosis cerebri, tumor glomico, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de celulas granulosas, tricoleucemia, tricoleucemia, cancer de cabeza y cuello, cancer de cabeza y cuello, cancer de corazon, hemangioblastoma, hemangiopericitoma, hemangiosarcoma, neoplasia hematologica, carcinoma hepatocelular, linfoma hepatosplenico de linfocitos T, srndrome de cancer de mama-ovario hereditario, linfoma de Hodgkin, linfoma de Hodgkin, cancer hipofarrngeo, glioma hipotalamico, cancer de mama inflamatorio, melanoma intraocular, carcinoma de celulas de islote, tumor de celulas de islote, leucemia mielomonodtica juvenil, sarcoma de Kaposi, sarcoma de Kaposi, cancer de rinon, tumor de Klatskin, tumor de Krukenberg, cancer de laringe, cancer de laringe, melanoma lentigo maligno, leucemia, leucemia, cancer de labio y de la cavidad oral, liposarcoma, cancer de pulmon, luteoma, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoepitelioma, leucemia linfoide, linfoma, macroglobulinemia, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno del hueso, glioma maligno, mesotelioma maligno, tumor maligno de la vaina nerviosa periferica, tumor rabdoide maligno, tumor maligno triton, linfoma de MALT, linfoma de celulas del manto, leucemia de mastocitos, tumor

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de mediastino de celulas germinales, tumor de mediastino, cancer medular de tiroides, meduloblastoma, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, melanoma, meningioma, carcinoma de celulas de Merkel, mesotelioma, mesotelioma, cancer de cuello escamoso metastasico con primario oculto, carcinoma urotelial metastasico, tumor mulleriano mixto, leucemia monocftica, cancer de boca, tumor mucinoso, smdrome neoplasico endocrino multiple, mieloma multiple, mieloma multiple, micosis fungoide, micosis fungoide, enfermedad mielodisplasica, smdromes mielodisplasicos, leucemia mieloide, sarcoma mieloide, enfermedad mieloproliferativa, mixoma, cancer de la cavidad nasal, cancer nasofarmgeo, carcinoma nasofarmgeo, neoplasia, neurinoma, neuroblastoma, neuroblastoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, linfoma no Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cancer de piel no melanoma, cancer de pulmon no microcftico, oncologfa ocular, oligogastrocitoma, oligodendroglioma, oncocitoma, meningioma de la vaina del nervio optico, cancer oral, cancer oral, cancer orofarmgeo, osteosarcoma, osteosarcoma, cancer de ovario, cancer de ovario, cancer epitelial de ovario, tumor de celulas germinales ovaricas, tumor ovarico de bajo potencial maligno, enfermedad de Paget de mama, tumor de Pancoast, cancer pancreatico, cancer pancreatico, cancer papilar de tiroides, papilomatosis, paraganglioma, cancer del seno paranasal, cancer paratiroideo, cancer de pene, tumor de celulas epitelioides perivascular, cancer farmgeo, feocromocitoma, tumor parenquimal pineal de diferenciacion intermedia, pineoblastoma, pituicitoma, adenoma pituitario, tumor pituitario, neoplasia de celulas plasmaticas, blastoma pleuropulmonar, poliembrioma, linfoma linfoblastico de precursores de linfocitos T, linfoma primario del sistema nervioso central, linfoma de efusion primaria, cancer hepatocelular primario, cancer hepatico primario, cancer peritoneal primario, tumor neuroectodermico primitivo, cancer de prostata, pseudomixoma peritoneal, cancer rectal, carcinoma de celulas renales, carcinoma del tracto respiratorio que implica al gen NUT en el cromosoma 15, retinoblastoma, rabdomioma, rabdomiosarcoma, transformacion de Richter, teratoma sacrococdgeo, cancer de las glandulas salivales, sarcoma, Schwannomatosis, carcinoma de las glandulas sebaceas, neoplasia secundaria, seminoma, tumor seroso, tumores de celulas de Sertoli-Leydig, tumor estromal del cordon sexual, smdrome de Sezary, carcinoma de celulas en anillo de sello, cancer de piel, tumores de celulas pequenas azules redondas, carcinoma microdtico, cancer de pulmon microdtico, linfoma microdtico, cancer de intestino delgado, sarcoma detejidos blandos, somatostatinoma, verruga del hollm, tumor de la medula espinal, tumor espinal, linfoma de la zona marginal esplenica, carcinoma de celulas escamosas, cancer de estomago, melanoma de difusion superficial, tumor neuroectodermico primitivo supratentorial, tumor estromal de la superficie epitelial, sarcoma sinovial, leucemia linfoblastica aguda de celulas T, leucemia linfocftica granular de celulas T grandes, leucemia de celulas T, linfoma de linfocitos T, leucemia prolinfodtica de celulas T, teratoma, cancer linfatico terminal, cancer de testmulos, tecoma, cancer de garganta, carcinoma tfmico, timoma, cancer de tiroides, cancer de celulas transicionales de la pelvis renal y el ureter, carcinoma de celulas transicionales, cancer de uraco, cancer de uretra, neoplasia urogenital, sarcoma uterino, melanoma uveal, cancer vaginal, smdrome de Morrison Verner, carcionma verrugoso, glioma de la via visual, cancer vulvar, macroglobulinemia de Waldenstrom, tumor de Warthin, tumor de Wilms, o cualquier combinacion de los mismos.

En otras realizaciones, los metodos que comprenden administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR descritos en el presente documento se aplican al tratamiento de afecciones cardfacas que incluyen ateroesclerosis, hipertrofia cardfaca, disfuncion monodtica cardfaca, presion sangumea elevada y vasoconstriccion. La invencion tambien se refiere a un metodo para tratar enfermedades relacionadas con la vasculogenesis o la angiogenesis en un mairnfero que comprende administrar a dicho mamffero una cantidad terapeuticamente eficaz de un primer agente y un inhibidor de mTOR descrito en el presente documento, o cualquier sal, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivado del mismo farmaceuticamente aceptable.

En algunas realizaciones, dicho metodo es para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en angiogenesis tumoral, enfermedad inflamatoria cronica, tal como artritis reumatoide, aterosclerosis, enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedades de la piel, tales como psoriasis, eccema, y esclerodermia, diabetes, retinopatfa diabetica, retinopatfa del prematuro, degeneracion macular asociada a la edad, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi y cancer de ovario, mama, pulmon, pancreatico, de prostata, de colon y epidermoide.

En algunas realizaciones, en el presente documento se describe la administracion de un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para tratar una patologfa asociada con PI3-cinasa a y/o mTOR, incluyendo, pero sin limitacion, afecciones relacionadas con una respuesta inmunitaria no deseada, hiperactiva, danina o perjudicial en un mamffero, denominada colectivamente "enfermedad autoinmunitaria". Los trastornos autoinmunitarios incluyen, pero sin limitacion, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, psoriasis, artritis psoriasica, artritis juvenil y espondilitis anquilosante. Otros ejemplos no limitantes de trastornos autoinmunitarios incluyen diabetes autoinmune, esclerosis multiple, lupus sistemico eritematoso (LSE), espondilitis reumatoide, artritis gotosa, alergia, uveftis autoinmune, smdrome nefrotico, enfermedades autoinmunitarias multistema, perdida auditiva autoinmunitaria, smdrome de dificultad respiratoria del adulto, choque pulmonar, enfermedad pulmonar inflamatoria cronica, sarcoidosis pulmonar, fibrosis pulmonar, silicosis, enfermedad pulmonar intersticial idiopatica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica, asma, restenosis, espondilopatfas, smdrome de Reiter, hepatitis autoinmune, trastornos inflamatorios de la piel, vasculitis de vasos grandes, vasos medianos o vasos pequenos, endometriosis, prostatitis y smdrome de Sjogren. La respuesta inmunitaria no deseada tambien puede estar asociada con o dar como resultado, por ejemplo, asma, enfisema, bronquitis, psoriasis, alergia, anafilaxia, enfermedades autoinmunitarias, artritis reumatoide, enfermedad de injerto contra hospedador, rechazo de trasplantes, lesiones pulmonares, y lupus eritematoso. Las composiciones farmaceuticas descritas en el presente documento pueden usarse para tratar otras enfermedades respiratorias, incluyendo, pero sin limitacion, enfermedades que afectan a los lobulos del pulmon,

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Tambien se describen en el presente documento metodos que comprenden administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para el tratamiento de enfermedades hepaticas (incluyendo la diabetes), pancreatitis o nefropatia (incluyendo la glomerulonefritis proliferativa y nefropatia diabetica) o el dolor en un mairnfero.

Tambien se describe en el presente documento un metodo que comprende administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para el tratamiento de la motilidad espermatica. tambien se describe en el presente documento un metodo que comprende administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para el tratamiento de enfermedades neurologicas o neurodegenerativas, incluyendo, pero sin limitacion, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, traumatismo del SNC, e ictus.

Tambien se describe en el presente documento un metodo que comprende administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para la prevencion de la implantacion del blastocisto en un mamnfero.

Tambien se describe en el presente documento un metodo para usar un primer agente y un inhibidor de mTOR administrado en el orden divulgado en el presente documento para tratar una enfermedad relacionada con la vasculogenesis o la angiogenesis en un mamffero que pueda manifestarse como angiogenesis tumoral, enfermedad inflamatoria cronica, tal como artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, aterosclerosis, enfermedades de la piel, tales como psoriasis, eccema, y esclerodermia, diabetes, retinopatfa diabetica, retinopatfa del prematuro, degeneracion macular asociada a la edad, hemangioma, glioma, melanoma, sarcoma de Kaposi y cancer de ovario, mama, pulmon, pancreatico, de prostata, de colon y epidermoide.

Tambien se describe en el presente documento un metodo que comprende administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para el tratamiento de trastornos que implican la agregacion plaquetaria o la adhesion plaquetaria, incluyendo, pero sin limitacion, el smdrome de Bernard-Soulier, trombobastenia de Glanzmann, smdrome de Scott, enfermedad de von Willebrand, smdrome de Hermansky-Pudlak, y smdrome plaquetario de Gray.

En algunas realizaciones, se proporcionan metodos que comprenden administrar un primer agente seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR para tratar una enfermedad que es atrofia muscular esqueletica, hipertrofia esqueletica muscular, reclutamiento de leucocitos en tejido canceroso, metastasis invasiva, melanoma, sarcoma de Kaposi, infecciones vmcas y bacterianas agudas y cronicas, septicemia, glomeruloesclerosis, glomerulonefritis, o fibrosis renal progresiva.

Determinadas realizaciones contemplan un sujeto humano, tal como un sujeto al que se le ha diagnosticado que padece o esta en riesgo de desarrollar o adquirir un trastorno o afeccion proliferativa. Otras realizaciones determinadas contemplan un sujeto no humano, por ejemplo, un primate no humano, tal como un macaco, chimpance, gorila, vervet, orangutan, babuino u otro primate no humano, incluyendo dichos sujetos no humanos que se conozcan en la tecnica como modelos preclmicos, incluyendo modelos preclmicos para trastornos inflamatorios. Otras realizaciones determinadas contemplan un sujeto no humano que es un mamffero, por ejemplo, un raton, rata, conejo, cerdo, oveja, caballo, bovino, cabra, jerbo, hamster, cobaya u otro animal. Tambien se contemplan otras realizaciones en las que el sujeto o fuente biologica puede ser un vertebrado no mamffero, por ejemplo, otro vertebrado superior, o una especie aviar, anfibia o reptil, u otro sujeto o fuente biologica. En determinadas realizaciones de la presente invencion, se utiliza un animal transgenico. Un animal transgenico es un animal no humano en el que una o mas de las celulas del animal incluye un acido nucleico que no es endogeno (es decir, heterologo) y esta presente en forma de un elemento extracromosomico en una porcion de sus celulas o esta integrado de manera estable en su ADN de lmea germinal (es decir, en la secuencia genomica de la mayona de o todas sus celulas).

Eficacia terapeutica

En algunas realizaciones, la eficacia terapeutica se mide basandose en un efecto de tratar un trastorno proliferativo, tal como un cancer. En general, la eficacia terapeutica de los metodos y composiciones de la invencion, respecto del tratamiento de un trastorno proliferativo (por ejemplo, cancer, ya sea benigno o maligno), puede medirse segun el grado en el que los metodos y composiciones promueven la inhibicion de la proliferacion de las celulas tumorales, la inhibicion de la vascularizacion tumoral, la erradicacion de celulas tumorales, y/o la reduccion de tamano de al menos un tumor, de tal forma que se trata al sujeto para el trastorno proliferativo. En el presente documento se describen varios parametros que se han de tener en consideracion al determinar la eficacia terapeutica. El medico puede determinar la combinacion adecuada de parametros para una situacion particular. El avance del metodo de la invencion para tratar el cancer (por ejemplo, reducir el tamano tumoral o erradicar celulas cancerosas) puede determinarse usando cualquier metodo adecuado, tal como aquellos metodos usados actualmente en la clmica para efectuar el seguimiento del tamano tumoral y del progreso del cancer. El parametro de eficacia primario para evaluar el tratamiento del cancer mediante el metodo y las composiciones de la invencion es preferentemente una reduccion en el tamano de un tumor. Puede deducirse el tamano de un tumor usando cualquier tecnica adecuada, tal como medicion de sus dimensiones, o estimacion del volumen tumoral usando programas informaticos disponibles, tales como el programa informatico FreeFlight desarrollado en la Universidad de Wake Forest que permite una estimacion precisa

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del volumen tumoral. El tamano del tumor puede determinarse visualizando el tumor usando, por ejemplo, TC, ultrasonidos, SPECT, TC medular, IRM, fotograffas, y similares. En las realizaciones donde se resecciona quirurgicamente un tumor tras finalizar el periodo terapeutico, puede determinarse la presencia de tejido tumoral y del tamano tumoral mediante analisis macroscopico del tejido que se va a reseccionar, y/o mediante analisis patologico del tejido reseccionado.

De manera deseable, se estabiliza el crecimiento de un tumor (es decir, uno o mas tumores no aumentan en mas de un 1%, 5%, 10%, 15%, o 20% de tamano, y/o no metastatizan) a causa del metodo y las composiciones de la invencion. En algunas realizaciones, se estabiliza un tumor durante al menos aproximadamente 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas semanas. En algunas realizaciones, se estabiliza un tumor durante al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas meses. En algunas realizaciones, se estabiliza un tumor durante al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, o mas anos. Preferentemente, el metodo de la invencion reduce el tamano de un tumor en aproximadamente un 5% (por ejemplo, al menos aproximadamente un 10%, 15%, 20%, o 25%). Mas preferentemente, el tamano tumoral se reduce en al menos aproximadamente un 30% (por ejemplo, al menos aproximadamente un 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, o 65%). Aun mas preferentemente, el tamano tumoral se reduce en al menos aproximadamente un 70% (por ejemplo, al menos aproximadamente un 75%, 80%, 85%, 90%, o 95%). Lo mas preferentemente, el tumor se elimina completamente, o se reduce por debajo de un lfmite de deteccion. En algunas realizaciones, un sujeto permanece libre de tumores (por ejemplo, en remision) durante al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas semanas despues del tratamiento. En algunas realizaciones, un sujeto permanece libre de tumores durante al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas meses despues del tratamiento. En algunas realizaciones, un sujeto permanece libre de tumores durante al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, o mas anos despues del tratamiento.

Cuando se somete a un tumor a reseccion quirurgica despues de completar el periodo terapeutico, puede determinarse la eficacia del metodo de la invencion para reducir el tamano tumoral midiendo el porcentaje de tejido reseccionado que esta necrotico (es decir, muerto). En algunas realizaciones, un tratamiento es terapeuticamente eficaz si el porcentaje de necrosis del tejido reseccionado es mayor de aproximadamente un 20% (por ejemplo, al menos aproximadamente un 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, o 100%), mas preferentemente, aproximadamente un 90% o mas (por ejemplo, aproximadamente un 90%, 95%, o 100%). Lo mas preferentemente, el porcentaje de necrosis del tejido reseccionado es del 100%, es decir, no hay tejido tumoral presente o detectable.

Puede emplearse una serie de parametros secundarios para determinar la eficacia del metodo de la invencion. Los ejemplos de parametros secundarios incluyen, pero sin limitacion, deteccion de nuevos tumores, deteccion de antfgenos o marcadores tumorales (por ejemplo, CEA, PSA, o CA-125), biopsia, retroceso quirurgico del estadio (es decir, conversion del estadio quirurgico de un tumor de irreseccionable a reseccionable), escaneres PET, supervivencia, supervivencia libre de progresion de la enfermedad, tiempo hasta la progresion de la enfermedad, evaluaciones de la calidad de vida, tales como la Evaluacion de Respuesta de Beneficio Clmico, y similares, todas las cuales pueden indicar la progresion general (o regresion) del cancer en un ser humano. La biopsia es particularmente util para detectar la erradicacion de celulas cancerosas en un tejido. Se usa radioinmunodeteccion (RAID) para localizar y determinar el estadio de los tumores usando niveles sericos de marcadores (antfgenos) producidos por y/o asociado con los tumores ("marcadores tumorales" o "antfgenos asociados a tumores"), y puede ser util como predicado diagnostico antes del tratamiento, un indicador diagnostico despues del tratamiento de la recurrencia, y un indicador despues del tratamiento de la eficacia terapeutica. Los ejemplos de marcadores tumorales o de antfgenos asociados a tumores que pueden evaluarse como indicadores de la eficacia terapeutica incluyen, pero sin limitacion, antfgeno carcinoembrionario (CEA), antfgeno espedfico de prostata (PSA), CA-125, CA19-9, moleculas de gangliosido (por ejemplo, GM2, GD2, y GD3), MART-1, protemas de choque termico (por ejemplo, gp96), sialil Tn (STn), tirosinasa, MuC-1, HER-2/neu, c-erb-B2, KSA, PsMa, p53, RAS, EGF-R, VEGF, MagE, y gp100. Se conocen en la tecnica otros antfgenos asociados a tumores. La tecnologfa RAID en combinacion con sistemas de deteccion endoscopica tambien distingue de manera eficaz tumores pequenos del tejido circundante (vease, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos n.° 4.932.412).

De manera deseable, el tratamiento del cancer tal como se describe en el presente documento se evidencia por uno o mas de los siguientes resultados: (a) la desaparicion completa de un tumor (es decir, una respuesta completa), (b) una reduccion de aproximadamente un 25% a aproximadamente un 50% en el tamano de un tumor durante al menos cuatro semanas tras completar el periodo terapeutico en comparacion con el tamano del tumor antes del tratamiento, (c) una reduccion de aproximadamente un 50% en el tamano de un tumor durante al menos cuatro semanas despues de completar el periodo terapeutico en comparacion con el tamano del tumor antes del periodo terapeutico, y (d) una reduccion de al menos un 2% (por ejemplo, aproximadamente un 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% de reduccion) en un nivel de antfgeno espedfico asociado a tumores aproximadamente a las 4-12 semanas despues de haber completado el periodo terapeutico en comparacion con el nivel de antfgeno asociado a tumores antes del periodo terapeutico. Aunque se prefiere una reduccion de al menos un 2% en un nivel de antfgeno asociado a tumores, cualquier reduccion en el nivel de antfgeno asociado a tumores es una prueba del tratamiento de un cancer en un paciente mediante el metodo de la invencion. Por ejemplo, con respecto al cancer de pancreas irreseccionable localmente avanzado, el tratamiento puede evidenciarse por una reduccion de al menos el 10% en el nivel de antfgeno asociado a tumores CA19-9 a las 4-12 semanas despues de haber completado el periodo terapeutico en comparacion el nivel de CA19-9 antes del periodo terapeutico. De manera similar, con respecto al cancer rectal localmente

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Con respecto a las evaluaciones de calidad de vida, tal como el Criterio de Respuesta de Beneficio Clmico, el beneficio terapeutico del tratamiento de acuerdo con la invencion puede evidenciarse en terminos de intensidad del dolor, consumo de analgesicos, y/o la puntuacion de la escala de rendimiento de Karnofsky. La escala de rendimiento de Karnofsky permite clasificar a los pacientes segun su discapacidad funcional. La puntuacion de rendimiento de Karnofsky se puntua de 0-100. En general, una menor puntuacion de Karnofsky predice un mal pronostico de supervivencia. Por lo tanto, el tratamiento del cancer en un paciente humano, como alternativa, o ademas, se evidencia mediante (a) una reduccion de al menos el 50% (por ejemplo, al menos un 60%, 70%, 80%, 90%, o 100% de reduccion) en la intensidad del dolor comunicada por el paciente, tal como durante cualquier periodo de cuatro semanas consecutivas en las 12 semanas posteriores a haber completado el tratamiento, en comparacion con la intensidad del dolor comunicada por el paciente antes del tratamiento, (b) una reduccion de al menos el 50% (por ejemplo, al menos un 60%, 70%, 80%, 90%, o 100% de reduccion) en el consumo de analgesicos comunicado por un paciente, tal como durante cualquier periodo de cuatro semanas consecutivas en las 12 semanas posteriores a haber completado el tratamiento en comparacion con el consumo de analgesicos comunicado por el paciente antes del tratamiento, y/o (c) un aumento de al menos 20 puntos (por ejemplo, un aumento de al menos 30 puntos, 50 puntos, 70 puntos o 90 puntos) en la escala de rendimiento de Karnofsky comunicada por un paciente, tal como durante cualquier periodo de cuatro semana consecutivas en las 12 semanas posteriores a haber completado el periodo terapeutico en comparacion con la puntuacion de la escala de rendimiento de Karnofsky comunicada por el paciente antes del periodo terapeutico.

El tratamiento de un trastorno proliferativo (por ejemplo, cancer, ya sea benigno o maligno) en un paciente humano se evidencia deseablemente por uno o mas (en cualquier combinacion) de los resultados anteriores, aunque resultados alternativos o adicionales de las pruebas citadas y/u otras pruebas pueden evidenciar la eficacia del tratamiento.

En algunas realizaciones, el tamano del tumor se reduce a consecuencia del tratamiento descrito en el presente documento preferentemente sin acontecimientos adversos significativos en el sujeto. Los acontecimientos adversos se clasifican o "graduan" mediante el Cancer Therapy Evaluation Program (CTEP) del National Cancer Institute (NCI), representando el grado 0 efectos secundarios adversos mmimos y el grado 4 representando los acontecimientos adversos mas graves. La escala de toxicidad del NCI (publicada en abril de 1999) y el Common Toxicity Criteria Manual (actualizado en agosto de 1999) estan disponibles a traves del NCI, por ejemplo, a traves del sitio web de Internet del NCI en
www.ctep.info.nih.gov o en el manual del investigador para participates en ensayos clmicos de agentes de investigacion patrocinados por la division de tratamiento y diagnostico del cancer, NCI (actualizado en marzo de 1998). De manera deseable, el metodo de la invencion se asocia con acontecimientos adversos mmimos, por ejemplo, acontecimientos adversos de grado 0, grado 1 o grado 2, segun se clasifica por el CTEP/NCI. Sin embargo, tal como se discute en el presente documento, la reduccion en el tamano tumoral, aunque se prefiere, no es necesaria en tanto que el tamano real del tumor puede no reducirse a pesar de la eliminacion de celulas tumorales. La erradicacion de celulas cancerosas es suficiente para evidenciar un efecto terapeutico. Del mismo modo, cualquier reduccion en el tamano del tumor es suficiente para evidenciar un efecto terapeutico.

La deteccion, control y clasificacion de diversos canceres en un ser humano se describe ademas en Cancer Facts and Figures, 2001, American Cancer Society, Nueva York, N.Y., y la Solicitud Internacional de Patente WO 01/24684. Por consiguiente, un medico puede usar pruebas convencionales para determinar la eficacia de las diversas realizaciones del metodo de la invencion para tratar el cancer. Sin embargo, ademas del tamano y la diseminacion del tumor, el medico tambien puede tomar en consideracion la calidad de vida y la supervivencia del paciente para evaluar la eficacia del tratamiento.

En algunas realizaciones, la administracion de un primer agente seguida de la administracion de un inhibidor de mTOR, en la que el primer agente suprime la progresion de una fase del ciclo celular despues de G1 y se administra al menos una vez antes de cualquier administracion del inhibidor de mTOR, proporciona una eficacia terapeutica mejorada frente al tratamiento con cualquiera de los dos agentes individualmente, al tratamiento con ambos agentes administrados simultaneamente, y/o el tratamiento con ambos agentes en orden inverso. La eficacia mejorada puede medirse usando cualquier metodo conocido en la tecnica, incluyendo, pero sin limitacion, aquellos descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, la eficacia terapeutica mejorada es una mejora de al menos aproximadamente un 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 150%, 200%, 300%, 400%, 500%, 600%, 700%, 1000%, 10000% o mas, usando una medida adecuada (por ejemplo, reduccion del tamano tumoral, duracion de la estabilidad del tamano tumoral, duracion del tiempo sin acontecimientos metastasicos, duracion de la supervivencia libre de enfermedad). La eficacia mejorada tambien puede expresarse como multiplo de mejora, tal como al menos aproximadamente 2 veces, 3 veces, 4 veces, 5 veces, 6 veces, 7 veces, 8 veces, 9 veces, 10 veces, 20 veces, 30 veces, 40 veces, 50 veces, 60 veces, 70 veces, 80 veces, 90 veces, 100 veces, 1000 veces, 10000 veces, o mas, usando una medida adecuada (por ejemplo, reduccion del tamano tumoral, duracion de la estabilidad del tamano tumoral, duracion del tiempo sin acontecimientos metastasicos, duracion de la supervivencia libre de enfermedad).

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La invencion proporciona, en un aspecto, un tratamiento combinado que comprende administrar a un sujeto un primer agente que es paclitaxel seguido de la administracion de un inhibidor de mTOR de formula I-C1a tal como se describe en el presente documento. En general, el inhibidor de mTOR se administra en un instante que es posterior a la administracion del primer agente. La administracion en un instante posterior incluye la administracion de una composicion que comprende tanto un primer agente como un inhibidor de mTOR, en la que el inhibidor de mTOR se formula para su liberacion retardada respecto del primer agente. En algunas realizaciones, una composicion que comprende tanto un primer agente como un inhibidor de mTOR libera la mayona del inhibidor de mTOR (por ejemplo, al menos un 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas) en forma de un compuesto activo despues de la liberacion de la mayona del primer agente (por ejemplo, al menos un 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas) en forma de un compuesto activo. En algunas realizaciones, se administra un primer agente antes y separado de la administracion de un inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se administra aproximadamente, o mas de aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21,22, 23, 24, 30, 36, 42, 48, 72, o mas horas despues de la administracion del primer agente. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se administra aproximadamente, o mas de aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 21,28, 30, 60, 90, o mas dfas despues de la administracion del primer agente. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se administra aproximadamente, o mas de aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas semanas despues de la administracion del primer agente.

En algunas realizaciones, se administra un primer agente y/o un inhibidor de mTOR a un sujeto mas de una vez. En algunas realizaciones, se administra un primer agente una o mas veces (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, o mas) cada 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, o mas dfas (por ejemplo, a diario, en dfas alternos, cada 7 dfas), donde una o mas de las administraciones del primer agente va seguida de una o mas administraciones (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, o mas) de un inhibidor de mTOR con cualquier espaciado temporal deseado, tales como los descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, se administra un primer agente una o mas veces (por ejemplo, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, o mas) cada 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, o mas semanas (por ejemplo, administracion en 1, 2, 3, 4, 5, 6, y/o 7 dfas de una semana, que pueden ser o no dfas consecutivos), donde una o mas de las administraciones del primer agente va seguida de una o mas administraciones (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, o mas) de un inhibidor de mTOR con cualquier espaciado temporal deseado, tales como los descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, una pauta de dosificacion que comprende una o mas administraciones de un primer agente y una o mas administraciones de un inhibidor de mTOR, en la que al menos una administracion de un inhibidor de mTOR es posterior a al menos una administracion del primer agente, tales como los descritos en el presente documento, puede repetirse diariamente, semanalmente, bisemanalmente, mensualmente, bimensualmente, anualmente, semianualmente, o en cualquier otro periodo segun se determine por un profesional medico. Puede repetirse una pauta de dosificacion repetida durante un periodo de tiempo fijo determinado al inicio de la pauta; puede terminarse, extenderse, o de otro modo ajustarse basandose en una medida del efecto terapeutico, tal como un nivel de reduccion en presencia de tejido enfermo detectable (por ejemplo, una reduccion de al menos el 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, o 100%); o puede terminarse, extenderse, o de otro modo ajustarse por cualquier otro motivo segun lo determine un profesional medico.

Un tratamiento combinado puede comprender ademas la administracion de uno o mas agentes terapeuticos adicionales, incluyendo uno o mas agentes adicionales descritos en el presente documento como candidatos a primeros agentes, y uno o mas agentes adicionales descritos en el presente documento como candidatos a inhibidores de mTOR. Dichos uno o mas agentes adicionales pueden administrarse simultaneamente o por separado respecto del primer agente, el inhibidor de mTOR, o ambos. La administracion en combinacion que utiliza uno o mas agentes adicionales incluyen, por ejemplo, la administracion simultanea de dos agentes en la misma forma de dosificacion, la administracion simultanea en formas de dosificacion separadas, y la administracion por separado. Por ejemplo, pueden formularse multiples agentes terapeuticos juntos en la misma forma de dosificacion y administrarse simultaneamente. Como alternativa, pueden administrarse simultaneamente multiples agentes terapeuticos, en la que ambos agentes esten presentes en formulaciones separadas. En otra alternativa, puede administrarse un inhibidor de la presente invencion inmediatamente seguido de cualquiera de los agentes descritos anteriormente, o viceversa. En el protocolo de administracion por separado, pueden administrarse un inhibidor de la presente invencion y cualquiera de los agentes descritos anteriormente separados por unos pocos minutos, o separados por unas pocas horas, o separados por unos pocos dfas. La expresion "tratamientos combinados" tambien abarca la administracion de los agentes terapeuticos tal como se han descrito en el presente documento en combinacion ademas con otros compuestos o ingredientes biologicamente activos y tratamientos no farmacologicos (por ejemplo, cirugfa o tratamiento con radiacion).

La administracion de los compuestos de la presente invencion puede efectuarse mediante cualquier metodo que permita el suministro de los compuestos al sitio de accion. Estos metodos incluyen vfas orales, vfas intraduodenales, inyeccion parenteral (incluyendo intravenosa, intraarterial, subcutanea, intramuscular, intravascular, intraperitoneal o por infusion), topica (por ejemplo, aplicacion transdermica), administracion rectal, mediante suministro local a traves de un cateter o endoprotesis o mediante inhalacion. Los compuestos tambien pueden administrarse por via intraadiposa o intratecal. Puede administrarse una cantidad eficaz de un inhibidor de la invencion en dosis individuales o multiples

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mediante cualquiera de los modos de administracion aceptados para agentes que tienen utilidades similares, incluyendo las rutas rectal, bucal, intranasal y transdermica, mediante inyeccion intraarterial, intravenosa, intraperitoneal, parenteral, intramuscular, subcutanea, oral, topica, como un inhalante, o mediante un dispositivo impregnado o recubierto, tal como una endoprotesis, por ejemplo, o un polfmero cilmdrico insertado en la arteria. La administracion secuencial o sustancialmente simultanea de un primer agente, un inhibidor de mTOR, y/o cualquier agente terapeutico adicional puede efectuarse por cualquier ruta adecuada, tal como se ha indicado anteriormente, e incluye, pero sin limitacion, rutas orales, rutas intravenosas, rutas intramusculares, y absorcion directa a traves de los tejidos de membrana mucosa. Los agentes terapeuticos pueden administrarse por la misma via o por vfas diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapeutico de la combinacion seleccionada puede administrarse por inyeccion intravenosa mientras que los otros agentes terapeuticos de la combinacion pueden administrarse por via oral. Como alternativa, por ejemplo, todos los agentes terapeuticos pueden administrarse por via oral o todos los agentes terapeuticos pueden administrarse mediante inyeccion intravenosa.

Los metodos para determinar los medios mas efectivos y dosificacion de la administracion son bien conocidos para los expertos en la tecnica y variaran con la composicion usada para terapia, el proposito de la terapia, la celula o tejido diana que se este tratando, y el sujeto que se esta tratando. Pueden efectuarse administraciones individuales o multiples (por ejemplo, aproximadamente o mas de aproximadamente 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, o mas dosis) seleccionandose el nivel de dosis y la pauta por el medico tratante.

Puede administrarse un primer agente en cualquier cantidad adecuada, y en el orden divulgado en el presente documento. En algunas realizaciones, un primer agente se administra a un sujeto en un intervalo de aproximadamente 0,1mg/kg-50mg/kg por dfa, tal como aproximadamente, menos de aproximadamente, o mas de aproximadamente, 1mg/kg, 2mg/kg, 3mg/kg, 4mg/kg, 5mg/kg, 6mg/kg, 7mg/kg, 8mg/kg, 9mg/kg, 10mg/kg, 11mg/kg, 12mg/kg, 13mg/kg, 14mg/kg, 15mg/kg, 16mg/kg, 17mg/kg, 18mg/kg, 19mg/kg, 20mg/kg, 25mg/kg, 30mg/kg, 35mg/kg, 40mg/kg, 45mg/kg,

0 50mg/kg por dfa. En algunas realizaciones, un primer agente se administra a un sujeto en un intervalo de aproximadamente 0,1mg/kg-400mg/kg por semana, tal como aproximadamente, menos de aproximadamente, o mas de aproximadamente 1mg/kg, 5mg/kg, 10mg/kg, 15mg/kg, 20mg/kg, 25mg/kg, 30mg/kg, 35mg/kg, 40mg/kg, 45mg/kg, 50mg/kg, 100mg/kg, 150mg/kg, 200mg/kg, 250mg/kg, 300mg/kg, 350mg/kg, o 400mg/kg por semana. En algunas realizaciones, un primer agente se administra a un sujeto en un intervalo de aproximadamente 0,1mg/kg-1500mg/kg por mes, tal como aproximadamente, menos de aproximadamente, o mas de aproximadamente 50mg/kg, 100mg/kg, 150mg/kg, 200mg/kg, 250mg/kg, 300mg/kg, 350mg/kg, 400mg/kg, 450mg/kg, 500mg/kg, 550mg/kg, 600mg/kg, 650mg/kg, 700mg/kg, 750mg/kg, 800mg/kg, 850mg/kg, 900mg/kg, 950mg/kg, o 1000mg/kg por mes. En algunas realizaciones, un primer agente se administra a un sujeto en un intervalo de aproximadamente 0,1mg/m2-200mg/m2

por semana, tal como aproximadamente, menos de aproximadamente, o mas de aproximadamente 5mg/m2, 10mg/m2,

1 2 2 2 2 2 ' 2 2 *2 2 ^2^2 15mg/m , 20mg/m , 25mg/m , 30mg/m , 35mg/m , 40mg/m , 45mg/m , 50mg/m , 55mg/m , 60mg/m , 65mg/m ,

70mg/m2, 75mg/m2, 100mg/m2, 125mg/m2, 150mg/m2, 175mg/m2, o 200mg/m2 por semana. La dosis diana puede

administrarse en una sola dosis. Como alternativa, la dosis diana puede administrarse en aproximadamente o mas de

aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, o mas dosis. Por ejemplo,

puede suministrarse semanalmente una dosis de aproximadamente 20mg/kg por semana a una dosis de

aproximadamente 20mg/kg, o puede suministrarse a una dosis de aproximadamente 6,67mg/kg administrada en tres

dfas durante el transcurso de la semana, pudiendo ser estos dfas consecutivos o no. La pauta de administracion puede

repetirse de acuerdo con cualquier regimen descrito, incluyendo cualquier pauta de administracion descrita en el

presente documento. En algunas realizaciones, se administra un primer agente a un sujeto en el intervalo de

aproximadamente 0,1mg/m-500mg/m2, tal como aproximadamente,^ menos de

30mg/m2, 35mg/m2

10 mg/m2, 15mg/m2, 20mg/m2, 25mg/m

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de

aproximadamente, o mas

40mg/m2, 45mg/m2 . 155mg/m2, 175mg/m2

300mg/m2, 350mg/m2, 400mg/m2, 420mg/m2, 450mg/m2, o 500mg/m2.

aproximadamente 5mg/m

50mg/m2, 55mg/m2, 60mg/m2, 65mg/m2, 70img/m2, 75mg/m2, 100mg/m2, 130mg/m2, 135mg/m 200mg/m2, 225mg/m2, 250mg/m2

La cantidad de cada inhibidor o compuesto administrado dependera del mamnfero que se vaya a tratar, la gravedad del trastorno o afeccion, la velocidad de administracion, la disposicion del compuesto y el criterio del medico que prescribe el medicamento. Sin embargo, una dosis eficaz de un inhibidor de mTOR puede estar en un intervalo de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal por dfa, preferentemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 35 mg/kg/dfa, en dosis unitarias o divididas. Para un ser humano de 70 kg, esto sena una cantidad de aproximadamente 0,05 a 7 g/dfa, preferentemente de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 2,5 g/dfa. En algunos casos, pueden ser mas que adecuados niveles de dosificacion por debajo del lfmite inferior del anteriormente resenado, mientras que, en otros casos, se pueden utilizar dosis aun mayores sin producir ningun efecto secundario perjudicial, por ejemplo, dividiendo dichas dosis mayores en varias dosis pequenas para su administracion a lo largo del dfa.

En algunas realizaciones, el primer agente, un inhibidor de mTOR, y/o cualquier compuesto terapeutico adicional de la invencion se administran en multiples dosis. La dosificacion puede ser aproximadamente una vez, dos veces, tres veces, cuatro veces, cinco veces, seis veces, o mas de seis veces al dfa. La dosificacion puede ser de aproximadamente una vez al mes, una vez cada dos semanas, una vez a la semana, o cada dos dfas. En algunas realizaciones, los ciclos de administracion de un primer agente seguido de una o mas administraciones de un inhibidor de mTOR se repiten durante mas de aproximadamente 6, 10, 14, 28 dfas, dos meses, seis meses, o un ano. En algunos casos, la repeticion de un ciclo de dosificacion que comprende la administracion de un primer agente seguida

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de la administracion de un inhibidor de mTOR se continua durante el tiempo que sea necesario.

La administracion de los tratamientos combinados de la invencion puede continuar durante el tiempo que sea necesario. En algunas realizaciones, se administran un primer agente y/o un inhibidor de mTOR de la invencion durante mas de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, o 28 dfas, siendo una administracion del inhibidor de mTOR posterior a una administracion del primer agente. En algunas realizaciones, se administra un primer agente y/o un inhibidor de mTOR de la invencion durante menos de 28, 14, 7, 6, 5, 4, 3, 2, o 1 dfa, siendo una administracion del inhibidor de mTOR posterior a una administracion del primer agente. En algunas realizaciones, se administra un primer agente y/o un inhibidor de mTOR de la invencion de manera cronica o de manera continua, por ejemplo, para el tratamiento de efectos cronicos, siendo una administracion del inhibidor de mTOR posterior a una administracion del primer agente.

Cuando se administra un tratamiento combinado de la invencion en forma de una composicion que comprende uno o mas compuestos, y un compuesto tiene una semivida mas corta que otro compuesto, las formas de dosis unitarias pueden ajustarse en consecuencia.

En algunas realizaciones, los tratamientos combinados de la invencion se ensayan para estimar propiedades farmacocineticas y el perfil esperado de efectos secundarios. En la tecnica se conocen para este fin varios ensayos. Por ejemplo, la disponibilidad oral puede estimarse durante las etapas tempranas del desarrollo farmacologico efectuando un ensayo de permeabilidad en Caco-2. Ademas, puede efectuarse una estimacion de la farmacocinetica oral extrapolando a partir de los resultados de ensayos en ratones, ratas o monos. En algunas realizaciones, los compuestos de la invencion muestran una buena disponibilidad oral entre multiples especies de organismos.

Otros ensayos examinan el efecto de un inhibidor en la funcion hepatica y el metabolismo. Las protemas citocromo P450 (CYP) son la enzima principal implicada en la metabolizacion de farmacos administrados a organismos mairnferos. Como tal, la interaccion no deseada de un farmaco candidato puede ser una fuente significativa de interacciones farmacologicas adversas. En general, es deseable que un farmaco no interactue con las isozimas de CYP, tales como CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, o CYP3A4. En algunas realizaciones, un inhibidor de la invencion muestra una CI50 de mas de 10 |jM para CYP1A2, |jCYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, o CYP3A4. Ademas, pueden emplearse ensayos metabolicos en microsomas hepaticos y hepatocitos usando preparaciones humanas para estimar la semivida in vitro de un candidato a farmaco.

La toxicidad cardfaca es tambien una consideracion importante para evaluar compuestos. Por ejemplo, hERG es el gen que codifica el canal de iones potasio Kv11.1, una protema que esta implicada en la mediacion de la corriente de repolarizacion en el potencial de accion cardfaca en el corazon. La inhibicion del producto genico hERG por un candidato a farmaco puede dar lugar a un aumento del riesgo de muerte subita y por lo tanto, es una propiedad no deseada. En algunas realizaciones, un inhibidor de la invencion muestra una inhibicion de hERG menor del 10% cuando se administra a una concentracion adecuada.

Puede ensayarse la mutagenicidad de los compuestos mediante una prueba Ames o una prueba Ames modificada usando, por ejemplo, el sistema de tngado S9. En algunas realizaciones, los compuestos muestran actividad negativa en dicha prueba.

Tambien pueden determinarse otras interacciones no deseadas mediante una exploracion de un panel de receptores. En algunas realizaciones, no se detectan interacciones significativas para los tratamientos combinados de la invencion. Las composiciones farmaceuticas de interes pueden formularse para proporcionar una cantidad terapeuticamente eficaz de una combinacion de agentes terapeuticos de la presente invencion, o sales farmaceuticamente aceptables, esteres, profarmacos, solvatos, hidratos o derivados de los mismos. Cuando se desee, las composiciones farmaceuticas contienen una sal farmaceuticamente aceptable y/o un complejo de coordinacion de los mismos, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, vehfculos, incluyendo diluyentes solidos inertes y cargas, diluyentes, incluyendo solucion acuosa esteril y diversos disolventes organicos, potenciadores de la penetracion, solubilizantes y adyuvantes.

Las composiciones farmaceuticas de interes pueden administrarse en forma de una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR, o en combinacion adicional con uno o mas agentes diferentes, que tfpicamente tambien se administran en forma de composiciones farmaceuticas, en las que la composicion se formula de tal forma que una parte sustancial del primer agente (por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas) se libera de la composicion antes de la liberacion de una parte significativa del inhibidor de mTOR (por ejemplo, menos de aproximadamente un 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, o menos). Por ejemplo, una endoprotesis que eluye farmaco puede comprender una capa del primer agente mas proxima a una superficie expuesta que, y recubriendo, una segunda capa que comprende un inhibidor de mTOR. Como alternativa, una composicion para administracion oral puede comprender un inhibidor de mTOR formulado para liberacion retardada, de tal forma que se libera un primer agente de la composicion al sujeto sustancialmente antes de la liberacion del inhibidor de mTOR. Los metodos y composiciones para preparar endoprotesis recubiertas que eluyen farmaco, y otras formulaciones de liberacion retardad se conocen en la tecnica. Cuando se desee, las combinaciones de interes y otros agentes pueden mezclarse en una preparacion o pueden formularse ambos componentes en preparaciones separadas para usarlas en combinacion, por separado o al mismo tiempo, mientras que a la vez efectuan la administracion de un primer agente

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En algunas realizaciones, la concentracion de uno o mas compuestos proporcionada en las composiciones farmaceuticas de la presente invencion es menor de aproximadamente el 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002%, o 0,0001% p/p, p/v o v/v.

En algunas realizaciones, la concentracion de uno o mas de los compuestos de la presente invencion es mayor del 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19,75%, 19,50%, 19,25%, 19%, 18,75%, 18,50%, 18,25%, 18%, 17,75%, 17,50%, 17,25%, 17%, 16,75%, 16,50%, 16,25%, 16%, 15,75%, 15,50%, 15,25%, 15%, 14,75%, 14,50%, 14,25%, 14%, 13,75%, 13,50%, 13,25%, 13%, 12,75%, 12,50%, 12,25%, 12%, 11,75%, 11,50%, 11,25%, 11%, 10,75%, 10,50%, 10,25%, 10%, 9,75%, 9,50%, 9,25%, 9%, 8,75%, 8,50%, 8,25%, 8%, 7,75%, 7,50%, 7,25%, 7%, 6,75%, 6,50%, 6,25%, 6%, 5,75%, 5,50%, 5,25%, 5%, 4,75%, 4,50%, 4,25%, 4%, 3,75%, 3,50%, 3,25%, 3%, 2,75%, 2,50%, 2,25%, 2%, 1,75%, 1,50%, 125%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002%, o 0,0001% p/p, p/v, o v/v.

En algunas realizaciones, la concentracion de uno o mas de los compuestos de la presente invencion se encuentra en el intervalo de aproximadamente el 0,0001% a aproximadamente el 50%, de aproximadamente el 0,001 % a aproximadamente el 40 %, de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 30%, de aproximadamente el 0,02% a aproximadamente el 29%, de aproximadamente el 0,03% a aproximadamente el 28%, de aproximadamente el 0,04% a aproximadamente el 27%, de aproximadamente el 0,05% a aproximadamente el 26%, de aproximadamente el 0,06% a aproximadamente el 25%, de aproximadamente el 0,07% a aproximadamente el 24%, de aproximadamente el 0,08% a aproximadamente el 23%, de aproximadamente el 0,09% a aproximadamente el 22%, de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 21%, de aproximadamente el 0,2% a aproximadamente el 20%, de aproximadamente el 0,3% a aproximadamente el 19%, de aproximadamente el 0,4% a aproximadamente el 18%, de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 17%, de aproximadamente el 0,6% a aproximadamente el 16%, de aproximadamente el 0,7% a aproximadamente el 15%, de aproximadamente el 0,8% a aproximadamente el 14%, de aproximadamente el 0,9% a aproximadamente el 12%, de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 10% p/p, p/v o v/v.

En algunas realizaciones, la concentracion de uno o mas de los compuestos de la presente invencion se encuentra en el intervalo de aproximadamente el 0,001% a aproximadamente el 10%, de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 5%, de aproximadamente el 0,02% a aproximadamente el 4,5%, de aproximadamente el 0,03% a

aproximadamente el 4%, de aproximadamente el 0,04% a aproximadamente el 3,5%, de aproximadamente el 0,05% a

aproximadamente el 3%, de aproximadamente el 0,06% a aproximadamente el 2,5%, de aproximadamente el 0,07% a

aproximadamente el 2%, de aproximadamente el 0,08% a aproximadamente el 1,5%, de aproximadamente el 0,09% a

aproximadamente el 1%, de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 0,9% p/p, p/v o v/v.

En algunas realizaciones, la cantidad de uno o mas de los compuestos de la presente invencion es igual a o menor de 10 g, 9,5 g, 9,0 g, 8,5 g, 8,0 g, 7,5 g, 7,0 g, 6,5 g, 6,0 g, 5,5 g, 5,0 g, 4,5 g, 4,0 g, 3,5 g, 3,0 g, 2,5 g, 2,0 g, 1,5 g, 1,0 g, 0,95 g, 0,9 g, 0,85 g, 0,8 g, 0,75 g, 0,7 g, 0,65 g, 0,6 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,45 g, 0,4 g, 0,35 g, 0,3 g, 0,25 g, 0,2 g, 0,15 g, 0,1 g, 0,09 g, 0,08 g, 0,07 g, 0,06 g, 0,05 g, 0,04 g, 0,03 g, 0,02 g, 0,01 g, 0,009 g, 0,008 g, 0,007 g, 0,006 g, 0,005 g, 0,004 g, 0,003 g, 0,002 g, 0,001 g, 0,0009 g, 0,0008 g, 0,0007 g, 0,0006 g, 0,0005 g, 0,0004 g, 0,0003 g, 0,0002 g, o 0,0001 g.

En algunas realizaciones, la cantidad de uno o mas de los compuestos de la presente invencion es mayor de 0,0001 g, 0,0002 g, 0,0003 g, 0,0004 g, 0,0005 g, 0,0006 g, 0,0007 g, 0,0008 g, 0,0009 g, 0,001 g, 0,0015 g, 0,002 g, 0,0025 g, 0,003 g, 0,0035 g, 0,004 g, 0,0045 g, 0,005 g, 0,0055 g, 0,006 g, 0,0065 g, 0,007 g, 0,0075 g, 0,008 g, 0,0085 g, 0,009 g, 0,0095 g, 0,01 g, 0,015 g, 0,02 g, 0,025 g, 0,03 g, 0,035 g, 0,04 g, 0,045 g, 0,05 g, 0,055 g, 0,06 g, 0,065 g, 0,07 g, 0,075 g, 0,08 g, 0,085 g, 0,09 g, 0,095 g, 0,1 g, 0,15 g, 0,2 g, 0,25 g, 0,3 g, 0,35 g, 0,4 g, 0,45 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,6 g, 0,65 g, 0,7 g, 0,75 g, 0,8 g, 0,85 g, 0,9 g, 0,95 g, 1 g, 1,5 g, 2 g, 2,5, 3 g, 3,5, 4 g, 4,5 g, 5 g, 5,5 g, 6 g, 6,5g, 7 g, 7,5g, 8 g, 8,5 g, 9 g, 9,5 g, o 10 g.

En algunas realizaciones, la cantidad de uno o mas de los compuestos de la presente invencion esta en el intervalo de 0,0001-10 g, 0,0005-9 g, 0,001-8 g, 0,005-7 g, 0,01-6 g, 0,05-5 g, 0,1-4 g, 0,5-4 g, o 1-3 g.

Los tratamientos combinados de acuerdo con la invencion son eficaces frente a un amplio intervalo de dosis. Por ejemplo, en el tratamiento de seres humanos adultos, las dosificaciones de 0,01 a 1000 mg, de 0,5 a 100 mg, de 1 a 50 mg por dfa, y de 5 a 40 mg por dfa son ejemplos de dosificaciones que pueden emplearse. Una dosificacion ejemplar es de 10 a 30 mg por dfa. La dosificacion exacta dependera del agente seleccionados, la ruta de administracion, la forma en la que se administra el compuesto, el sujeto que se va a tratar, el peso corporal del sujeto que se va a tratar, y la preferencia y experiencia del medico tratante.

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Una composicion farmaceutica de la presente invencion contiene tipicamente un principio activo (por ejemplo, un inhibidor de la presente invencion o una sal y/o complejo de coordinacion farmaceuticamente aceptable del mismo, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, vetnculos, incluyendo, pero sin limitacion, diluyentes solidos inertes y cargas, diluyentes, solucion acuosa esteril y diversos disolventes organicos, potenciadores de la penetracion, solubilizantes y adyuvantes.

A continuacion se describen composiciones farmaceuticas y metodos no limitantes para preparar las mismas. Composiciones farmaceuticas para administracion oral

En algunas realizaciones, la invencion proporciona una composicion farmaceutica para administracion oral que contiene al menos un agente terapeutico, y un excipiente farmaceutico adecuado para la administracion oral.

En algunas realizaciones, la invencion proporciona una composicion farmaceutica solida para administracion oral que contiene: (i) un primer agente que suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1; (ii) un segundo compuesto que es un inhibidor de mTOR formulado para su liberacion sustancialmente despues de la liberacion del primer agente (por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del inhibidor de mTOR liberado despues de la liberacion de una parte sustancial del primer agente, por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del primer agente); y (iii) un excipiente farmaceutico adecuado para la administracion oral. En algunas realizaciones, la composicion contiene ademas: (iv) un tercer agente e incluso un cuarto agente. En algunas realizaciones, cada compuesto o agente esta presente en una cantidad terapeuticamente eficaz. En otras realizaciones, uno o mas compuestos o agentes estan presentes en una cantidad subterapeutica, y los compuestos o agentes actuan sinergicamente para proporcionar una composicion farmaceutica terapeuticamente eficaz.

En algunas realizaciones, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el primer agente y el inhibidor de mTOR se envasan en forma de una sola forma de dosificacion oral, en la que el inhibidor de mTOR se formula para su liberacion sustancialmente despues de la liberacion del primer agente (por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del inhibidor de mTOR liberado despues de la liberacion de una parte sustancial del primer agente, por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del primer agente). En otras realizaciones, el primer agente y el inhibidor de mTOR pueden envasarse como formas de dosificacion separadas, tales como comprimidos separados.

En una realizacion, la presente invencion proporciona una forma de dosificacion oral que comprende de 100 mg a 1,5g de un inhibidor de la invencion. La forma de dosificacion oral puede ser un comprimido, formularse en forma de lfquido, en formato de liberacion inmediata o sostenida.

En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica puede ser una composicion farmaceutica lfquida adecuada para el consumo oral. Las composiciones farmaceuticas de la invencion adecuadas para administracion oral pueden presentarse como formas de dosificacion discretas, tales como capsulas, sellos, o comprimidos, lfquidos o aerosoles que contienen cada uno una cantidad predeterminada de un principio activo como polvo o en granulos, solucion, o una suspension en un lfquido acuoso o no acuoso, una emulsion de aceite en agua, o una emulsion lfquida de agua en aceite, incluyendo formas de dosificacion lfquidas (por ejemplo, una suspension o lechada), y formas de dosificacion oral solidas (por ejemplo, un comprimido o polvo a granel). Tal como se usa en el presente documento, el termino "comprimido" se refiere generalmente a comprimidos, comprimidos con forma de capsula, capsulas, incluyendo capsulas de gelatina blanda, y pastillas para chupar. Las formas de dosificacion oral pueden formularse en comprimidos, pfldoras, grageas, capsulas, emulsiones, suspensiones lipofilas e hidrofilas, lfquidos, geles, jarabes, lechadas, suspensiones y similares, para su ingesta oral por un individuo o un paciente que vaya a tratarse. Dichas formas de dosificacion pueden prepararse mediante cualquiera de los metodos de farmacia, pero todos los metodos incluyen la etapa de poner el principio activo en asociacion con el vehfculo, que constituye uno o mas ingredientes necesarios. En una realizacion, el inhibidor de la invencion esta contenido en capsulas. Las capsulas para administracion oral incluyen capsulas de encaje a presion hechas de gelatina, asf como capsulas blandas cerradas hermeticamente hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las capsulas de ajuste a presion pueden contener los principios activos mezclados con una carga, tal como lactosa, aglutinantes, tales como almidones, y/o lubricantes, tales como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizantes. Opcionalmente, la composicion de la invencion para uso oral puede obtenerse mezclando un primer agente o inhibidor de mTOR con un excipiente solido, triturando opcionalmente una mezcla resultante, y procesando la mezcla de granulos, despues de anadir agentes auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o nucleos de grageas. Los excipientes adecuados son, en particular, cargas, tales como azucares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol, o sorbitol; preparaciones de celulosa, tales como, por ejemplo, almidon de mafz, almidon de trigo, almidon de arroz, almidon de patata, gelatina, goma de tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, y/o polivinilpirrolidona (PVP). En general, las composiciones se preparan mezclando uniforme e mtimamente el principio activo con vetnculos lfquidos o vetnculos solidos finamente divididos o ambos, y despues, si es necesario, dando forma al producto en la presentacion deseada. Por ejemplo, puede prepararse un comprimido mediante compresion o moldeado, de forma opcional con uno o mas ingredientes accesorios. Los comprimidos prensados pueden prepararse prensando en una maquina adecuada el principio activo en una forma suelta tal como polvos o granulos, mezclados de forma opcional con un excipiente tal como, pero sin limitacion, un aglutinante, un lubricante, un diluyente inerte, y/o un

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agente tensioactivo o dispersante. Los comprimidos moldeados pueden fabricarse moldeando en una maquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente Kquido inerte.

La presente invencion abarca ademas composiciones y formas de dosificacion farmaceutica anhidras que comprenden un principio activo, ya que el agua puede facilitar la degradacion de algunos compuestos. Por ejemplo, puede anadirse agua (por ejemplo, un 5%) en las tecnicas farmaceuticas como un medio para simular el almacenamiento a largo plazo a fin de determinar caractensticas tales como el periodo de caducidad o la estabilidad de las formulaciones a lo largo del tiempo. Las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion anhidras de la invencion pueden prepararse usando ingredientes anhidros o que contienen baja humedad y condiciones de baja humedad o de baja humedad ambiental. Las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion de la invencion que contienen lactosa pueden hacerse anhidras si se espera un contacto sustancial con la humedad o la humedad ambiental durante su fabricacion, envasado y/o almacenamiento. Una combinacion farmaceutica anhidra puede prepararse y almacenarse de modo que se mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, las composiciones anhidras pueden envasarse usando materiales que se sabe que evitan la exposicion al agua de modo que puedan incluirse en los kits formularios adecuados. Los ejemplos de envases adecuados incluyen, pero sin limitacion, pelfculas, plastico o similares cerrados hermeticamente, recipientes de dosis unitarias, envases de blisters, y envases de tiras.

Un principio activo puede combinarse en una mezcla mtima con un vehfculo farmaceutico de acuerdo con tecnicas de composicion farmaceutica convencionales. El vehfculo puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparacion deseada para su administracion. En la preparacion de las composiciones para una forma farmaceutica oral, pueden emplearse como vehfculos cualquiera de los medios farmaceuticos habituales, tal como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservantes, agentes colorantes, y similares en el caso de preparaciones orales lfquidas (tales como suspensiones, soluciones, y elixires) o aerosoles; o vehfculos tales como almidones, azucares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulacion, lubricantes, aglutinantes, y pueden usarse agentes disgregantes en el caso de preparaciones orales solidas, en algunas realizaciones sin emplear el uso de lactosa. Por ejemplo, los vehmulos adecuados incluyen polvos, capsulas, y comprimidos, con las preparaciones orales solidas. Si se desea, los comprimidos pueden recubrirse mediante tecnicas habituales acuosas o no acuosas.

Los aglutinantes adecuados para su uso en las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion incluyen, pero sin limitacion, almidon de mafz, almidon de patata, u otros almidones, gelatina, gomas naturales y sinteticas, tales como goma arabiga, alginato de sodio, acido algmico, otros alginatos, tragacanto en polvo, goma guar, celulosa y sus derivados, etilcelulosa, acetato de celulosa, carboximetilcelulosa de calcio, carboximetilcelulosa de sodio), polivinilpirrolidona, metilcelulosa, almidon pregelatinizado, hidroxipropilmetilcelulosa, celulosa microcristalina, y mezclas de los mismos.

Los ejemplos de cargas adecuadas para su uso en las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion desveladas en el presente documento incluyen, pero sin limitacion, talco, carbonato de calcio (por ejemplo, granulos o polvo), celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, caolm, manitol, acido silfcico, sorbitol, almidon, almidon pregelatinizado, y mezclas de los mismos.

Pueden usarse disgregantes en las composiciones de la invencion para proporcionar comprimidos que se disgregan cuando se exponen a un ambiente acuoso. Un exceso de disgregante puede producir comprimidos que pueden disgregarse en el frasco. Demasiado poco puede no ser suficiente para que se produzca la disgregacion y puede por tanto alterar el alcance de la liberacion de los principios activos de la forma de dosificacion. Por lo tanto, puede usarse una cantidad suficiente de disgregante que no sea ni demasiado poca ni demasiado abundante para alterar de forma perjudicial la liberacion del(los) principio(s) activo(s) desde las formas de dosificacion de los compuestos desvelados en el presente documento. La cantidad usada de disgregante puede variar sobe la base del tipo de formulacion y el modo de administracion, y puede discernirse facilmente por los expertos habituales en la tecnica. Puede usarse en la composicion farmaceutica de aproximadamente un 0,5 a aproximadamente un 15 por ciento en peso de disgregante, o de aproximadamente un 1 a aproximadamente un 5 por ciento en peso de disgregante. Los disgregantes que pueden usarse para formar composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion de la invencion incluyen, pero sin limitacion, agar-agar, acido algmico, carbonato de calcio, celulosa microcristalina, croscarmelosa sodica, crospovidona, polacrilina potasio, glicolato sodico de almidon, almidon de patata o tapioca, otros almidones, almidon pregelatinizado, otros almidones, arcillas, otras alginas, otras celulosas, gomas o mezclas de los mismos.

Los lubricantes que pueden usarse para formar composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion de la invencion incluyen, pero sin limitacion, estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, aceite mineral ligero, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenglicol, otros glicoles, acido estearico, lauril sulfato de sodio, talco, aceite vegetal hidrogenado (por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodon, aceite de girasol, aceite de sesamo, aceite de oliva, aceite de mafz, y aceite de soja), estearato de cinc, oleato de etilo, laurato de etilo, agar, o mezclas de los mismos. Los lubricantes adicionales incluyen, por ejemplo, un gel de sflice Syloid, un aerosol coagulado de sflice sintetico, o mezclas de los mismos. De forma opcional puede anadirse un lubricante, en una cantidad de menos de alrededor de 1 de porcentaje en peso de la composicion farmaceutica.

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Tambien pueden usarse lubricantes conjuntamente con barreras de tejido que incluyen, pero sin limitacion, polisacaridos, poliglucanos, seprafilm, interceed y acido hialuronico.

Cuando se desean suspensiones acuosas y/o elixires para la administracion oral, el principio activo esencial que contienen puede combinarse con diversos agentes edulcorantes o saborizantes, materiales colorantes o tintes y, si asf se desea, agentes emulsionantes y/o agentes de suspension, junto con dichos diluyentes como agua, etanol, propilenglicol, glicerina y diversas combinaciones de los mismos.

Los comprimidos pueden ser no recubiertos o recubrirse mediante tecnicas conocidas para retrasar la disgregacion y absorcion en el tracto gastrointestinal y, de este modo, proporcionar una accion sostenida durante un periodo de tiempo mas largo. Por ejemplo, puede emplearse un material retardante, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral tambien pueden presentarse como capsulas de gelatina dura en las que el principio activo se mezcla con un diluyente solido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolm, o como capsulas de gelatina blanda, en las que el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina ftquida o aceite de oliva.

Los tensioactivos que pueden usarse para formar composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion de la invencion incluyen, pero sin limitacion, tensioactivos hidrofilos, tensioactivos lipofilos, y mezclas de los mismos. Es decir, puede emplearse una mezcla de tensioactivos hidrofilos, puede emplearse una mezcla de tensioactivos lipofilos, o puede emplearse una mezcla de al menos un tensioactivo hidrofilo y al menos un tensioactivo lipofilo.

Un tensioactivo hidrofilo adecuado tiene por lo general un valor EHL de al menos 10, mientras que los tensioactivos lipofilos pueden tener generalmente un valor de EHL de menos de aproximadamente 10. Un parametro emprnco usado para caracterizar la hidrofilidad y la hidrofobicidad relativa de los compuestos anfffilos es el equilibrio hidrofilo lipofilo (valor "EHL"). Los tensioactivos con valores de EHL menores son mas lipofilos o hidrofobos, y tienen mayor solubilidad en aceites, mientras que los tensioactivos con valores de EHL mayores son mas hidrofilos, y tienen mayor solubilidad en soluciones acuosas. Se considera que los tensioactivos hidrofilos son aquellos compuestos que tienen un valor de EHL mayor de alrededor de 10, asf como los compuestos anionicos, cationicos o zwitterionicos para los cuales no es aplicable en general la escala EHL. De manera similar, tensioactivos lipofilos (es decir, hidrofobos) son compuestos que tienen un valor de EHL igual o menor de aproximadamente 10. Sin embargo, el valor EHL de un tensioactivo es meramente una grna aproximada que se usa en general para permitir la formulacion de emulsiones farmaceuticas y cosmeticas industriales.

Los tensioactivos hidrofilos pueden ser bien ionicos o bien no ionicos. Los tensioactivos ionicos adecuados incluyen, pero sin limitacion, sales de alquilamonio; sales del acido fusfdico; derivados de acidos grasos de aminoacidos, oligopeptidos, y polipeptidos; derivados gliceridos de aminoacidos, oligopeptidos, y polipeptidos; lecitinas y lecitinas hidrogenadas; lisolecitinas y lisolecitinas hidrogenadas; fosfoftpidos y derivados de los mismos; lisofosfoftpidos y derivados de los mismos; sales de esteres de acido graso de carnitina; sales de sulfatos de alquilo; sales de acido graso; docusato sodico; acilactilatos; esteres de mono y digliceridos de acido tartarico mono y diacetilado; mono y digliceridos succinilados; esteres de acido cftrico de mono y digliceridos; y mezclas de los mismos.

Dentro del grupo anteriormente mencionado, los tensioactivos ionicos incluyen, a modo de ejemplo: lecitinas, lisolecitina, fosfoftpidos, lisofosfoftpidos y derivados de los mismos; sales de esteres de acido graso de carnitina; sales de sulfatos de alquilo; sales de acido graso; docusato sodico; acilactilatos; esteres de mono y digliceridos de acido tartarico mono y diacetilado; mono y digliceridos succinilados; esteres de mono y digliceridos de acido cftrico; y mezclas de los mismos.

los tensioactivos ionicos pueden ser las formas ionizadas de la lecitina, lisolecitina, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilglicerol, acido fosfatfdico, fosfatidilserina, lisofosfatidilcolina, lisofosfatidiletanolamina, lisofosfatidilglicerol, acido lisofosfatfdico, lisofosfatidilserina, PEG-fosfatidiletanolamina, PVP-fosfatidiletanolamina, esteres lactflicos de acidos grasos, estearoil-2-lactilato, estearoil lactilato, monogliceridos succinilados, esteres de mono/digliceridos de acido tartarico mono/diacetilado, esteres de mono/digliceridos de acido cftrico, colilsarcosina, caproato, caprilato, caprato, laurato, miristato, palmitato, oleato, ricinoleato, linoleato, linolenato, estearato, lauril sulfato, teracecil sulfato, docusato, lauroil carnitinas, palmitoil carnitinas, miristoilcarnitinas, y sales y mezclas de los mismos.

Los tensioactivos hidrofilos no ionicos pueden incluir, pero sin limitacion, glucosidos de alquilo; maltosidos de alquilo; tioglucosidos de alquilo; laurilmacrogolgliceridos; eteres de polioxialquilenalquilo, tales como eteres de polioxietilenglicolalquilo; polioxialquilenalquilfenoles tales como polietilenglicolalquilfenoles; esteres de acido graso de polioxialquilenalquilfenol tales como monoesteres de acido graso de polietilenglicol y diesteres de acidos grasos de polietilenglicol; esteres de acido graso de polietilenglicolglicerol; esteres de acido graso de poliglicerol; esteres de acido graso de polioxialquilenglicolsorbitano tales como esteres de acido graso de polietilenglicolsorbitano; productos de transesterificacion hidrofila de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en gliceridos, aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados, acidos grasos, y esteroles; polioxietilenesteroles, derivados, y analogos de los mismos; vitaminas polioxietiladas y derivados de las mismas; copoftmeros de bloque polioxietileno-polioxipropileno; y mezclas de los mismos; esteres de acidos grasos de polietilenglicolsorbitano y

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productos de transesterificacion hidrofila de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en trigliceridos, aceites vegetales, y aceites vegetales hidrogenados. El poliol puede ser glicerol, etilenglicol, polietilenglicol, sorbitol, propilenglicol, pentaeritritol, o un sacarido.

Otros tensioactivos no ionicos hidrofilos incluyen, sin limitacion, laurato de PEG-10, laurato de PEG-12, laurato de PEG-20, laurato de PEG-32, dilaurato de PEG-32, oleato de PEG-12, oleato de PEG-15, oleato de PEG-20, dioleato de PEG-20, oleato de PEG-32, oleato de PEG-200, oleato de PEG-400, estearato de PEG-15, diestearato de PEG-32, estearato de PEG-40, estearato de PEG-100, dilaurato de PEG-20, gliceril trioleato de PEG-25, dioleato de PEG-32, gliceril laurato de PEG-20, gliceril laurato de PEG-30, gliceril estearato de PEG-20, gliceril oleato de PEG-20, gliceril oleato de PEG-30, gliceril laurato de PEG-30, gliceril laurato de PEG-40, aceite de semilla de palma con PEG-40, aceite de ricino hidrogenado con PEG-50, aceite de ricino con PEG-40, aceite de ricino con PEG-35, aceite de ricino con PEG-60, aceite de ricino hidrogenado con PEG-40, aceite de ricino hidrogenado con PEG-60, aceite de mafz con PEG-60, gliceridos de caprato/caprilato con PEG-6, gliceridos de caprato/caprilato con PEG-8, laurato de poligliceril-10, colesterol con PEG-30, fitoesterol con PEG-25, esterol de soja con PEG-30, trioleato de PEG-20, oleato de sorbitan con PEG-40, laurato de sorbitan con PEG-80, polisorbato 20, polisorbato 80, lauril eter de POE-9, lauril eter de POE-23, oleil eter de POE-10, oleil eter de POE-20, estearil eter de POE-20, tocofeil succinato de PEG-100, colesterol con PEG-24, oleato de poliglicerilo-10, Tween 40, Tween 60, monoestearato de sacarosa, monolaurato de sacarosa, monopalmitato de sacarosa, la serie de nonil fenol de PEG 10-100, la serie de octil fenol de PEG 15-100, y poloxameros.

Los tensioactivos lipofilos adecuados incluyen, solo a modo de ejemplo: alcoholes grasos; esteres de acidos grasos de glicerol; esteres acetilados de acidos grasos de glicerol; esteres acetilados de acidos grasos de alcohol inferior; esteres de acidos grasos de propilenglicol; esteres de acidos grasos de sorbitano; esteres de acidos grasos de polietilenglicolsorbitano; esteroles y derivados de esteroles; esteroles y derivados de esteroles polioxietilados; eteres de polietilenglicolalquilo; esteres de azucar; eteres de azucar; derivados de acido lactico de mono y digliceridos; productos de transesterificacion hidrofoba de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en gliceridos, aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados, acidos grasos y esteroles; vitaminas/derivados de vitaminas liposolubles; y mezclas de los mismos. Dentro de este grupo, los tensioactivos lipofilos preferidos incluyen esteres de acido graso de glicerol, esteres de acidos grasos de propilenglicol, y mezclas de los mismos, o son productos de transesterificacion hidrofoba de un poliol con al menos un miembro del grupo que consiste en aceites vegetales, aceites vegetales hidrogenados, y trigliceridos.

En una realizacion, la composicion puede incluir un solubilizante para asegurar una buena solubilizacion y/o disolucion del compuesto de la presente invencion y para minimizar la precipitacion del compuesto de la presente invencion. Esto puede ser especialmente importante para composiciones para uso no oral, por ejemplo, composiciones para inyeccion. Tambien puede anadirse un solubilizante para aumentar la solubilidad del farmaco hidrofilo y/u otros componentes, tales como tensioactivos, o para mantener la composicion como una solucion o dispersion estable u homogenea.

Los ejemplos de solubilizantes adecuados incluyen, pero sin limitacion, los siguientes: alcoholes y polioles, tales como etanol, isopropanol, butanol, alcohol bendlico, etilenglicol, propilenglicol, butanodioles e isomeros de los mismos, glicerol, pentaeritritol, sorbitol, manitol, transcutol, dimetilisosorbida, polietilenglicol, polipropilenglicol, alcohol polivimlico, hidroxipropil metilcelulosa y otros derivados de celulosa, ciclodextrinas y derivados de ciclodextrina; eteres de polietilenglicoles que tienen un peso molecular medio de aproximadamente 200 a aproximadamente 6000, tales como eter de PEG o metoxi PEG del alcohol tetrahidrofurfunlico (glucofurol); amidas y otros compuestos que contienen nitrogeno, tales como 2-pirrolidona, 2-piperidona, .epsilon.-caprolactama, N-alquilpirrolidona,

N-hidroxialquilpirrolidona, N-alquilpiperidona, N-alquilcaprolactama, dimetilacetamida y polivinilpirrolidona; esteres tales como propionato de etilo, citrato de tributilo, citrato de acetiltrietilo, citrato de tributilacetilo , citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, butirato de etilo, triacetm, monoacetato de propilenglicol, diacetato de propilenglicol, £-caprolactona e isomeros de la misma, 5-valerolactona e isomeros de la misma, p-butirolactona e isomeros de la misma; y otros solubilizantes conocidos en la tecnica, tales como dimetilacetamida, dimetilisosorbida, N-metilpirrolidonas, monooctanoma, eter monoetilico de dietilenglicol, y agua.

Tambien pueden usarse mezclas de solubilizantes. Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion, triacetm, citrato de trietilo, oleato de etilo, caprilato de etilo, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, N-hidroxietilpirrolidona, polivinilpirrolidona, hidroxipropil metilcelulosa, hidroxipropil ciclodextrinas, etanol, polietilenglicol 200-100, glucofurol, transcutol, propilenglicol, y dimetilisosorbida. Los solubilizantes particularmente preferidos incluyen sorbitol, glicerol, triacetm, alcohol etflico, PEG-400, glucofurol y propilenglicol.

La cantidad de solubilizante que puede incluirse no esta limitada de forma concreta. La cantidad de un solubilizador dado puede limitarse a una cantidad bioaceptable, que puede determinarse facilmente por un experto en la materia. En algunas circunstancias, puede ser ventajoso incluir cantidades de solubilizantes muy por encima de las cantidades bioaceptables, por ejemplo, para aumentar al maximo la concentracion de farmaco, eliminando el exceso de solubilizante antes de proporcionar la composicion a un sujeto usando tecnicas convencionales, tales como destilacion o evaporacion. Por lo tanto, en caso de estar presentes, el solubilizante puede estar en una proporcion en peso del 10%, 25%, 50%, 100%, o hasta alrededor del 200% en peso, sobre la base del peso combinado del farmaco, y otros

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excipientes. Si se desea, pueden usarse tambien cantidades muy pequenas de solubilizante, tal como un 5%, 2%, 1 % o incluso menos. Normalmente, el solubilizante puede estar presente en una concentracion de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 100 %, mas tipicamente, de aproximadamente el 5 % a aproximadamente el 25 % en peso.

La composicion puede incluir ademas uno o mas aditivos y excipientes farmaceuticamente aceptables. Dichos aditivos y excipientes incluyen, sin limitacion, antiadherentes, agentes antiespumantes, agentes tamponadores, poftmeros, antioxidantes, conservantes, agentes quelantes, moduladores de la viscosidad, tonificantes, aromatizantes, colorantes, odorizantes, opacificantes, agentes suspensores, aglutinantes, cargas, plastificantes, lubricantes, y mezclas de los mismos.

Ademas, puede incorporarse un acido o una base a la composicion para facilitar el procesamiento, mejorar la estabilidad, o por otras razones. Los ejemplos de bases farmaceuticamente aceptables incluyen aminoacidos, esteres de aminoacidos, hidroxido de amonio, hidroxido de potasio, hidroxido de sodio, hidrogenocarbonato de sodio, hidroxido de aluminio, carbonato de calcio, hidroxido de magnesio, silicato de aluminio y magnesio, silicato de aluminio sintetico, hidrocalcita sintetica, hidroxido de aluminio y magnesio, diisopropiletilamina, etanolamina, etilendiamina, trietanolamina, trietilamina, triisopropanolamina, trimetilamina, tris(hidroximetil)aminometano (TRIS) y similares. Tambien son adecuadas aquellas bases que son sales de un acido farmaceuticamente aceptable, tal como acido acetico, acido acnlico, acido adfpico, acido algmico, acido alcanosulfonico, aminoacidos, acido ascorbico, acido benzoico, acido borico, acido butftico, acido carbonico, acido cftrico, acidos grasos, acido formico, acido fumarico, acido gluconico, acido hidroquinosulfonico, acido isoascorbico, acido lactico, acido maleico, acido oxalico, acido para-bromofenilsulfonico, acido propionico, acido p-toluenosulfonico, acido salidlico, acido estearico, acido sucdnico, acido tanico, acido tartarico, acido tioglicolico, acido toluenosulfonico, acido urico, y similares. Las sales de acidos poliproticos, tales como fosfato de sodio, hidrogeno fosfato de disodio, y dihidrogenofosfato de sodio tambien pueden emplearse. Cuando la base es una sal, el cation puede ser cualquier cation conveniente y farmaceuticamente aceptable, tal como amonio, metales alcalinos, metales alcalinoterreos, y similares. Los ejemplos pueden incluir, pero sin limitacion, sodio, potasio, litio, magnesio, calcio y amonio.

Los acidos adecuados son acidos organicos o inorganicos farmaceuticamente aceptables. Los ejemplos de acidos organicos adecuados incluyen acido clorhfdrico, acido bromlddrico, acido hidriodico, acido sulfurico, acido nftrico, acido borico, acido fosforico, y similares. Los ejemplos de acidos organicos adecuados incluyen acido acetico, acido acnlico, acido adfpico, acido algmico, acido alcanosulfonico, aminoacidos, acido ascorbico, acido benzoico, acido borico, acido butmco, acido carbonico, acido cftrico, acidos grasos, acido formico, acido fumarico, acido gluconico, acido hidroquinosulfonico, acido isoascorbico, acido lactico, acido maleico, acido metanosulfonico, acido oxalico, acido para-bromofenilsulfonico, acido propionico, acido p-toluenosulfonico, acido salidlico, acido estearico, acido sucdnico, acido tanico, acido tartarico, acido tioglicolico, acido toluenosulfonico, acido urico y similares.

Composiciones farmaceuticas para inyeccion. En algunas realizaciones, la invencion proporciona una composicion farmaceutica para inyeccion que contiene al menos un compuesto de la presente invencion y un excipiente farmaceutico adecuado para inyeccion. Por ejemplo, se proporciona una composicion farmaceutica para inyeccion que comprende un primer agente que suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1 (por ejemplo, paclitaxel) y/o un inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, se formula una composicion inyectable que comprende tanto el primer agente como el inhibidor de mTOR de tal forma que el inhibidor de mTOR es un componente inicialmente inactivo que se vuelve activo sustancialmente despues del primer agente (por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% o mas del inhibidor de mTOR se vuelve activo despues de que un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del primer agente se encuentre en forma activa). Por ejemplo, puede formularse el primer agente de tal forma que se encuentra activo inmediatamente despues de la inyeccion, mientras que el inhibidor de mTOR se formula para que se vuelva activo en un momento posterior. Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas que comprenden un primer agente, y composiciones farmaceuticas que comprenden un inhibidor de mTOR, donde el primer agente se administra antes del inhibidor de mTOR. El primer agente y el inhibidor de mTOR pueden formularse por separado, y pueden incluir ademas un tercer agente terapeutico. Los componentes y cantidades de agentes en las composiciones son como se describen en el presente documento.

Las formas en las que pueden incorporarse las nuevas composiciones de la presente invencion para administracion por inyeccion incluyen suspensiones acuosas u oleosas, o emulsiones, con aceite de sesamo, aceite de mafz, aceite de semilla de algodon, o aceite de cacahuete, asf como elixires, manitol, dextrosa, o una solucion acuosa esteril, y vehmulos farmaceuticos similares.

Las soluciones acuosas en solucion salina tambien se usan de forma convencional para inyeccion. Tambien pueden usarse etanol, glicerol, propilenglicol, polietilenglicol ftquido y similares (y mezclas adecuadas de los mismos), derivados de ciclodextrina y aceites vegetales. Puede mantenerse la fluidez adecuada, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento, tales como lecitina, para el mantenimiento del tamano de partmula necesario en el caso de dispersion y mediante el uso de tensioactivos. La prevencion de la accion de microorganismos puede lograrse por medio de varios agentes antibacterianos y antifungicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, acido sorbico, timerosal, y similares.

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Las soluciones inyectables esteriles se preparan incorporando el compuesto de la presente invencion en la cantidad necesaria en el disolvente adecuado con varios otros ingredientes como los indicados anteriormente, segun sea necesario, seguido de esterilizacion por filtracion. En general, las dispersiones se preparan incorporando los varios principios activos esterilizados en un veldculo esteril que contiene el medio de dispersion basico y los demas ingredientes necesarios de entre los enumerados anteriormente. En el caso de polvos esteriles para la preparacion de soluciones inyectables esteriles, determinados metodos preferidos de preparacion son las tecnicas de secado al vado y criodesecacion que producen un polvo del principio activo mas cualquier otro ingrediente adicional deseado a partir de una solucion previamente esterilizada por filtracion del mismo.

Composiciones farmaceuticas para administracion topica (por ejemplo, transdermica). En algunas realizaciones, la invencion proporciona una composicion farmaceutica para administracion transdermica que contiene al menos un compuesto de la presente invencion y un excipiente farmaceutico adecuado para administracion transdermica. Por ejemplo, se proporciona una composicion farmaceutica para administracion topica que comprende al menos un primer agente y/o un inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, las composiciones que comprenden tanto el primer agente como el inhibidor de mTOR se formulan de tal forma que el inhibidor de mTOR se suministra sustancialmente despues del primer agente (por ejemplo, al menos un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% o mas del inhibidor de mTOR se suministra despues de que un 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99%, o mas del primer agente se haya suministrado). Por ejemplo, un parche transdermico puede comprender una capa que comprende un primer agente (por ejemplo, paclitaxel) que esta mas proxima a la piel que, y que cubre una capa que comprende un inhibidor de mTOR. Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas para administracion topica que comprenden un primer agente, y composiciones farmaceuticas para administracion topica que comprenden un inhibidor de mTOR, donde el primer agente se administra antes del inhibidor de mTOR. El primer agente y el inhibidor de mTOR pueden formularse por separado, y pueden incluir ademas un tercer agente terapeutico.

Las composiciones de la presente invencion pueden formularse en preparaciones en formas solidas, semisolidas o lfquidas adecuadas para administracion local o topica, tales como geles, gelatinas solubles en agua, cremas, lociones, suspensiones, espumas, polvos, lechadas, pomadas, soluciones, aceites, pastas, supositorios, pulverizadores, emulsiones, soluciones salinas, soluciones a base de dimetilsulfoxido (DMSO). En general, los vehfculos con densidades mayores son capaces de proporcionar una zona con una exposicion prolongada a los principios activos. Por el contrario, una formulacion en solucion puede proporcionar una exposicion mas inmediata al principio activo en la zona elegida.

Las composiciones farmaceuticas tambien pueden comprender vehfculos o excipientes en fase solida o de gel adecuados, que son compuestos que permiten mayor penetracion de, o ayudan en la dispensacion de, las moleculas terapeuticas a lo largo de la barrera de permeabilidad cutanea del estrato corneo. Existen muchas de estas moleculas potenciadoras de la penetracion conocidas para las personas cualificadas en la tecnica de la formulacion topica. Los ejemplos de dichos vehfculos y excipientes incluyen, pero sin limitacion, humectantes (por ejemplo, urea), glicoles (por ejemplo, propilenglicol), alcoholes (por ejemplo, etanol), acidos grasos (por ejemplo, acido oleico), tensioactivos (por ejemplo, miristato de isopropilo y lauril sulfato de sodio), pirrolidonas, monolaurato de glicerol, sulfoxidos, terpenos (por ejemplo, mentol), aminas, amidas, alcanos, alcanoles, agua, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azucares, almidones, derivados de celulosa, gelatina, y polfmeros, tales como polietilenglicoles.

Otra formulacion ejemplar para su uso en los metodos de la presente invencion emplea dispositivos de dispensacion transdermica ("parches"). Dichos parches transdermicos pueden usarse para proporcional infusion continua o discontmua de un inhibidor de la presente invencion en cantidades controladas, ya sea con o sin otro agente.

La construccion y uso de parches transdermicos para la dispensacion de agentes farmaceuticos se conoce bien en la tecnica. Veanse, por ejemplo, las Patentes de los Estados Unidos n.° 5.023.252, 4.992.445 y 5.001.139. Dichos parches pueden construirse para suministro continuo, pulsatil o bajo demanda de agentes farmaceuticos.

Composiciones farmaceuticas para inhalacion. Las composiciones para inhalacion o insuflacion incluyen soluciones y suspensiones en disolventes acuosos u organicos farmaceuticamente aceptables, o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones lfquidas o solidas pueden contener excipientes farmaceuticamente aceptables adecuados como se describen anteriormente. Preferentemente, las composiciones farmaceuticas se administran por la via respiratoria oral o nasal para un efecto local o sistemico. Las composiciones en disolventes preferentemente farmaceuticamente aceptables pueden nebulizarse mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas pueden inhalarse directamente a partir del dispositivo de nebulizacion, o el dispositivo de nebulizacion puede acoplarse a una mascara facial, o a un respirador de presion positiva intermitente. Las composiciones en solucion, suspension o polvo pueden administrarse, preferentemente por via oral o nasal, a partir de dispositivos que suministren la formulacion de un modo adecuado. Por ejemplo, se proporciona una composicion farmaceutica para administracion topica que comprende al menos un primer agente que suprime la progresion de una fase del ciclo celular despues de la fase G1, o un inhibidor de mTOR. Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas para administracion topica que comprenden un primer agente, y composiciones farmaceuticas para administracion topica que comprenden un inhibidor de mTOR, donde el primer agente se administra antes del inhibidor de mTOR. Las composiciones que comprenden un primer agente y un inhibidor de mTOR pueden formularse por separado, pueden formularse para suministro retardado del inhibidor de mTOR, y pueden incluir ademas un tercer agente terapeutico.

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Otras composiciones farmaceuticas. Tambien pueden prepararse composiciones farmaceuticas a partir de composiciones descritas en el presente documento y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables para administracion sublingual, bucal, rectal, intraosea, intraocular, intranasal, epidural, o intraespinal. Las preparaciones para dichas composiciones farmaceuticas son bien conocidas en la tecnica. Vease, por ejemplo, Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, Decima edicion, McGraw-Hill, 2002; Pratt y Taylor, eds., Principles of Drug Action, Tercera edicion, Churchill Livingston, Nueva York, 1990; Katzung, ed., Basic and Clinical Pharmacology, novena edicion, McGraw Hill, 20037ybg; Goodman y Gilman, eds., The Pharmacological Basis of Therapeutics, Decima edicion, McGraw Hill, 2001; Remingtons Pharmaceutical Sciences, la 20a Ed., Lippincott Williams y Wilkins., 2000; Martindale, The Extra Pharmacopoeia, trigesimosegunda edicion (The Pharmaceutical Press, Londres, 1999).

Las composiciones de la invencion tambien pueden administrarse mediante un dispositivo recubierto o impregnado, tal como una endoprotesis, por ejemplo, o un polfmero cilmdrico insertado en la arteria. Dicho metodo de administracion puede, por ejemplo, ayudar en la prevencion o mejona de las reestenosis que siguen a procedimientos tales como la angioplastia con globo. Sin pretender quedar vinculados a teona alguna, los compuestos de la invencion pueden frenar o inhibir la migracion y proliferacion de celulas musculares lisas en la pared arterial, lo que contribuye a la reestenosis. Puede administrarse un inhibidor de la invencion, por ejemplo, mediante dispensacion local desde los sostenes metalicos de estent, desde un injerto de estent, desde injertos, o desde la cubierta o vaina de un estent. En algunas realizaciones, se mezcla un inhibidor de la invencion con una matriz. Dicha matriz puede ser una matriz polimerica, y puede servir para unir el compuesto a la endoprotesis. Las matrices polimericas utiles para dicho uso, incluyen, por ejemplo, poliesteres o copoliesteres a base de lactona, tales como polilactida, policaprolactona glicolida, poliortoesteres, polianhndridos, poliaminoacidos, polisacaridos, polifosfacenos, copolfmeros de poli (eter-ester) (por ejemplo, PEO-PLLA); polidimetilsiloxano, vinilacetato de polietileno), polfmeros o copolfmeros a base de acrilato (por ejemplo, polihidroxietilmetilmetacrilato, polivinilpirrolidinona), polfmeros fluorados tales como politetrafluoroetileno y esteres de celulosa. Las matrices adecuadas pueden ser no degradables o pueden degradarse con el paso del tiempo, liberando el compuesto o compuestos. Los compuestos de la invencion pueden aplicarse a la superficie de la endoprotesis mediante diversos metodos, tales como recubrimiento por inmersion/centrifugacion, recubrimiento por rociado, recubrimiento por inmersion, y/o recubrimiento por pincel. Los compuestos pueden aplicarse en un disolvente y el disolvente se puede dejar evaporar, formando, por tanto, una capa de compuesto sobre el estent. Como alternativa, el compuesto puede ubicarse en el cuerpo de la endoprotesis o injerto, por ejemplo, en microcanales o microporos. Al implantarse, el compuesto difunde fuera del cuerpo del estent para entrar en contacto con la pared arterial. Dichas endoprotesis pueden prepararse sumergiendo una endoprotesis fabricada para que contenga dichos microporos o microcanales en una solucion del compuesto de la invencion en un disolvente adecuado, seguido de la evaporacion del disolvente. Puede retirarse el exceso de farmaco en la superficie de la endoprotesis mediante un lavado breve adicional en disolvente. En otras realizaciones mas, los compuestos de la invencion pueden unirse covalentemente a una endoprotesis o injerto. Puede usarse un enlazador covalente que se degrada in vivo, dando lugar a la liberacion del compuesto de la invencion. Puede usarse cualquier enlace biolabil para este fin, tales como enlaces ester, amida o anhndrido. Ademas, los compuestos de la invencion pueden administrarse por via intravascular a partir de un globo usado durante una angioplastia. Tambien puede efectuarse la administracion extravascular de los compuestos a traves del pericardio o mediante aplicacion advencial de formulaciones de la invencion para reducir la restenosis.

Se divulga una serie de dispositivos de endoprotesis que pueden usarse del modo descrito, por ejemplo, en las siguientes referencias: Patente de los Estados Unidos n.° 5451233; Patente de los Estados Unidos n.° 5040548; Patente de los Estados Unidos n.° 5061273; Patente de los Estados Unidos n.° 5496346; Patente de los Estados Unidos n.° 5292331; Patente de los Estados Unidos n.° 5674278; Patente de los Estados Unidos n.° 3657744; Patente de los Estados Unidos n.° 4739762; Patente de los Estados Unidos n.° 5195984; Patente de los Estados Unidos n.° 5292331; Patente de los Estados Unidos n.° 5674278; Patente de los Estados Unidos n.° 5879382; Patente de los Estados Unidos n.° 6344053.

Los compuestos de la invencion pueden administrarse en dosificaciones. En la tecnica se conoce que, debido a la variabilidad entre sujetos de la farmacocinetica de los compuestos, es necesaria la individualizacion de la dosificacion para una terapia optima. La dosificacion para un inhibidor de la invencion puede obtenerse mediante experimentacion rutinaria a la luz de la presente divulgacion.

La composicion farmaceutica de interes puede, por ejemplo, estar en una forma adecuada para administracion oral como un comprimido, capsula, pfldora, polvo, formulaciones de liberacion sostenida, solucion, suspension, para inyeccion parenteral como una solucion esteril, suspension o emulsion, para administracion topica como una pomada o crema o para administracion como un supositorio. La composicion farmaceutica puede estar en formas de dosificacion unitarias para administracion individual de dosis precisas. La composicion farmaceutica incluira un transportador o excipiente farmaceutico convencional y un inhibidor de acuerdo con la invencion como principio activo. Ademas, puede incluir otros agentes medicinales o farmaceuticos, vehfculos, adyuvantes, etc.

Las formas de administracion parenteral ejemplares incluyen soluciones o suspensiones de principio activo en soluciones acuosas esteriles, por ejemplo, soluciones de propilenglicol acuoso o dextrosa. Dichas formas de dosificacion pueden tamponarse adecuadamente, si se desea.

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La invencion tambien proporciona kits. Los kits incluyen uno o mas primeros agentes, uno o mas inhibidores de mTOR, y/u otros compuestos de la presente invencion, tal como se describe en el presente documento, en un envasado adecuado, y material escrito que puede incluir instrucciones de uso, discusion de estudios clmicos, listado de efectos secundarios, y similares. Dichos kits tambien pueden incluir informacion, tal como referencias bibliograficas de literatura cientffica, materiales de prospecto, resultados de ensayos clmicos, y/o resumenes de estos y similares, que indican o establecen las actividades y/o ventajas de la composicion, y/o que describan la dosificacion, administracion, efectos secundarios, interacciones farmacologicas, u otra informacion util para el profesional sanitario. Dicha informacion puede estar basada en los resultados de diversos estudios, por ejemplo, estudios que usan animales de experimentacion que implican modelos in vivo y estudios basados en ensayos clmicos con seres humanos El kit puede contener ademas otro agente. En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invencion y el agente se proporcionan en forma de composiciones separadas en envases separados dentro del kit. En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invencion y el agente se proporcionan en formad e una sola composicion dentro de un recipiente en el kit. Los envases y artmulos adicionales para su uso (por ejemplo, copa medidora para preparaciones lfquidas, envoltorio de pelmula para minimizar la exposicion al aire, y similares) se conocen en la tecnica y pueden incluirse en el kit. Los kits descritos en el presente documento pueden proporcionarse, venderse y/o promocionarse a los profesionales sanitarios, incluyendo medicos, personal de enfermena, farmaceuticos, tecnicos farmaceuticos, y similares. Los kits tambien pueden, en algunas realizaciones, comercializarse directamente al consumidor.

En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano que necesita tratamiento para el cancer, o una afeccion o lesion precancerosa, en el que el cancer es preferentemente NSCL, cancer de mama, de colon o pancreatico. Los sujetos que pueden tratarse con tratamientos combinados de la presente invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivados de los agentes terapeuticos, de acuerdo con los metodos de la presente invencion, incluyen, por ejemplo, sujetos a los que se les ha diagnosticado psoriasis; restenosis; aterosclerosis; HBP; cancer de mama, tal como un carcinoma ductal en el tejido ductal en una glandula mamaria, carcinomas medulares, carcinomas coloidales, carcinomas tubulares, y cancer de mama inflamatorio; cancer de ovario, incluyendo tumores ovaricos epiteliales, tales como adenocarcinoma en el ovario y un adenocarcinoma que ha migrado del ovario a la cavidad abdominal, cancer uterino; cancer de cuello de utero, tal como adenocarcinoma del epitelio del cuello del utero, incluyendo carcinoma de celulas escamosas y adenocarcinoma; cancer de prostata, tal como un cancer de prostata seleccionado entre los siguientes: un adenocarcinoma o un adenocarcinoma que ha migrado al hueso; cancer pancreatico, tal como carcinoma epiteloide en el tejido del conducto pancreatico y un adenocarcinoma en un conducto pancreatico; cancer de vejiga, tal como carcinoma de celulas transicionales en la vejiga urinaria, carcinomas uroteliales (carcinomas de celulas transicionales), tumores en las celulas uroteliales que recubren la vejiga, carcinomas de celulas escamosas, adenocarcinomas, y canceres microdticos; leucemia, tal como leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfodtica aguda, leucemia linfoide cronica, leucemia mieloide cronica, tricoleucemia, mielodisplasia, trastornos mieloproliferativos, leucemia mieloide aguda (AML); leucemia mielogena cronica (CML), mastocitosis, leucemia linfodtica cronica (CLL), mieloma multiple (MM), y smdrome mielodisplasico (SMD); cancer oseo; cancer de pulmon, tal como carcinoma no microdtico de pulmon (CNMP), que se divide en carcinomas de celulas escamosas, adenocarcinomas, y carcinomas indiferenciados de celulas grandes, y carcinoma microdtico de pulmon; cancer de piel, tal como carcinoma de celulas basales, melanoma, carcinoma de celulas escamosas y queratosis actfnica, que es una afeccion de la piel que en ocasiones deriva en carcinoma de celulas escamosas; retinoblastoma ocular; melanoma cutaneo o intraocular (del ojo); cancer hepatico primario (cancer que comienza en el hugado); cancer de rinon; cancer de tiroides, tal como papilar, folicular, medular y anaplasico; linfoma relacionado con el SIDA, tal como linfoma difuso de celulas B grandes, linfoma inmunoblastico de celulas B y linfoma de celulas pequenas no escindidas; sarcoma de Kaposi; canceres inducidos por virus, incluyendo virus de la hepatitis B (VHB), virus de la hepatitis C (VHC), y carcinoma hepatocelular; virus linfotropico humano de tipo 1 (HTLV-1) y leucemia/linfoma de celulas T adultas; y virus del papiloma humano (VPH) y cancer de cuello de utero; canceres del sistema nervioso central (SNC), tales como tumor cerebral primario, que incluye gliomas (astrocitoma, astrocitoma anaplasico, o glioblastoma multiforme), oligodendroglioma, ependimoma, meningioma, linfoma, Schwannoma, y meduloblastoma; canceres del sistema nervioso periferico, tales como neuromas acusticos y tumo maligno de la vaina nerviosa periferica (MPNST), incluyendo neurofibromas y schwanomas, citoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, meningioma maligno, mesotelioma maligno, y tumor Mulleriano mixto maligno; cancer de la catvidad oral y orofarmgea, tal como cancer hipofarmgeo, cancer de laringe, cancer nasofarmgeo, y cancer orofarmgeo; cancer de estomago, tal como linfomas, tumores estromales gastricos, y tumores carcinoides; cancer testicular, tal como cancer de celulas germinales (GCT), que incluye seminomas y noseminomas, y tumores estromales gonadales, que incluyen tumores de celulas de Leydig y tumores de celulas de Sertoli; cancer de timo, tal como timomas, carcinomas tfmicos, enfermedad de Hodgkin, linfomas no de Hodgkin, carcinoides o tumores carcinoides; cancer rectal; y cancer de colon.

Tambien se describe en el presente documento un metodo para tratar la diabetes en un marnffero que comprende administrar a dicho marnffero una cantidad terapeuticamente eficaz de un tratamiento combinado descrito en el presente documento.

Ademas, los tratamientos combinados descritos en el presente documento pueden usarse para tratar el acne.

Ademas, los tratamientos combinados descritos en el presente documento pueden usarse para el tratamiento de la arterioesclerosis, incluyendo la ateroesclerosis. La arteriosclerosis es una expresion general que describe cualquier endurecimiento de las arterias medianas o grandes. La ateroesclerosis es un endurecimiento de una arteria debido

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espedficamente a una placa ateromatosa.

Ademas, los tratamientos combinados descritos en el presente documento pueden usarse para el tratamiento de la glomerulonefritis. La glomerulonefritis es una enfermedad renal autoinmunitaria primaria o secundaria caracterizada por inflamacion de los glomerulos. Puede ser asintomatica, o presentarse con hematuria y/o proteinuria. Existen varios tipos reconocidos, divididos en glomerulonefritis aguda, subaguda o cronica. Las causas son infecciosas (patogenos bacterianos, vmcos o parastticos), autoinmunitarias o paraneoplasicas.

Ademas, los tratamientos combinados descritos en el presente documento pueden usarse para el tratamiento de bursitis, lupus, encefalomielitis diseminada aguda (ADEM), enfermedad de Addison, smdrome de anticuerpos antifosfolfpidos (SAAF), anemia aplasica, hepatitis autoinmune, enfermedad celiaca, enfermedad de Crohn, diabetes mellitus (tipo 1), smdrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, smdrome de Guillain-Barre (SGB), enfermedad de Hashimoto, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso, miastenia grave, smdrome de opsoclorna-mioclorna (SOM), neuritis optica, tiroiditis de Ord, artrosis, uveorretinitis, penfigo, poliartritis, cirrosis biliar primaria, smdrome de Reiter, arteritis de Takayasu arteritis temporal, y anemia hemolftica autoinmunitaria por anticuerpos calientes, granulomatosis de Wegener, alopecia universal, enfermedad de Chagas, smdrome de la fatiga cronica, disautonomfa, endometriosis, hidradenitis supurativa, cistitis intersticial, neuromiotoma, sarcoidosis, esclerodermia, colitis ulcerosa, vitiligo, vulvodinia, apendicitis, arteritis, artritis, blefaritis, bronquiolitis, bronquitis, cervicitis, colangitis, coleocistitis, corioamnionitis, colitis, conjuntivitis, cistitis, dacrioadenitis, dermatomiositis, endocarditis, endometritis, enteritis, enterocolitis, epicondilitis, epididimitis, fascitis, fibrositis, gastritis, gastroenteritis, gingivitis, hepatitis, hidradenitis, ileitis, iritis, laringitis, mastitis, meningitis, mielitis, miocarditis, miositis, nefritis, onfalitis, ooforitis, orquitis, osteitis, otitis, pancreatitis, parotitis, pericarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, flebitis, neumonitis, proctitis, prostatitis, pielonefritis, rinitis, salpingitis, sinusitis, estomatitis, sinovitis, tendinitis, amigdalitis, uveitis, vaginitis, vasculitis, o vulvitis.

Tambien se describe en el presente documento un metodo para tratar una enfermedad cardiovascular en un mairnfero que comprende administrar a dicho marnffero una cantidad terapeuticamente eficaz de un tratamiento combinado descrito en el presente documento. Los ejemplos de afecciones cardiovasculares incluyen, pero sin limitacion, ateroesclerosis, restenosis, oclusion vascular, enfermedad obstructiva de la carotida, o afecciones isquemicas.

Tambien se describen en el presente documento metodos para alterar la funcion de un leucocito o alterar la funcion de un osteoclasto. El metodo incluye poner en contacto el leucocito o el osteoclasto con una cantidad alteradora de la funcion de un tratamiento combinado de la invencion.

Tambien se describen en el presente documento metodos para tratar enfermedades oftalmicas mediante la aplicacion de uno o mas de los tratamientos combinados de interes al ojo de un sujeto. Ademas, se proporcionan metodos para administrar los tratamientos combinados descritos en el presente documento mediante gotas oculares, inyeccion intraocular, inyeccion intravftrea, topicamente, o mediante el uso de un dispositivo que eluye farmaco, una microcapsula, implante, o dispositivo de microfluidos. En algunos casos, los tratamientos combinados se administran con un vehmulo o excipiente que aumenta la penetracion intraocular del compuesto, tal como una emulsion de aceite y agua con partroulas coloidales que tienen un nucleo oleoso rodeado de una pelroula interfacial.

En algunos casos, las partroulas coloidales incluyen al menos un agente cationico y al menos un tensioactivo no ionico, tal como un poloxamero, tiloxapol, un polisorbato, un derivado polioxietilenado de aceite de ricino, un ester de sorbitan, o un estearato de polioxilo. En algunos casos, el agente cationico es una alquilamina, una alquilamina terciaria, un compuesto de amonio cuaternario, un lfpido cationico, un aminoalcohol, una sal de biguanida, un compuesto cationico o una mezcla de los mismos. En algunos casos, el agente cationico es una sal de biguanida, tal como clorhexidina, poliaminopropil biguanidina, fenformina, biguanida de alquilo, o una mezcla de los mismos. En algunos casos, el compuesto de amonio cuaternario es un haluro de benzalconio, haluro de lauralconio, cetrimida, haluro de hexadeciltrimetilamonio, haluro de tetradeciltrimetilamonio, haluro de dodeciltrimetilamonio, haluro de cetrimonio, haluro de bencetonio, haluro de behenalconio, haluro de cetalconio, haluro de cetetildimonio, haluro de cetilpiridinio, haluro de benzododecinio, haluro de cloralil metenamina, haluro de miristalconio, haluro de estearalconio o una mezcla de dos o mas de los mismos. En algunos casos, el agente cationico es un cloruro de benzalconio, cloruro de lauralconio, bromuro de benzododecinio, cloruro de bencetonio, bromuro de hexadeciltrimetilamonio, bromuro de tetradeciltrimetilamonio, bromuro de dodeciltrimetilamonio o una mezcla de dos o mas de los mismos. En algunos casos, la fase oleosa es aceite mineral y aceite mineral ligero, trigliceridos de cadena media (MCT), aceite de coco; aceites hidrogenados que comprenden aceite de algodon hidrogenado, aceite de palma hidrogenado, aceite de ricino hidrogenado o aceite de soja hidrogenado; derivados de aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno que comprenden aceite de ricino hidrogenado con polioxil-40, aceite de ricino hidrogenado con polioxil-60 o aceite de ricino hidrogenado con polioxil-100.

La invencion proporciona ademas combinaciones para su uso en metodos para tratar un trastorno proliferativo administrando a un sujeto una cantidad combinada eficaz de un primer agente y un inhibidor de mTOR, en las que el primer agente suprime la progresion de una o mas fases del ciclo celular despues de la fase G1 y se administra antes del inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, la invencion proporciona combinaciones para su uso en metodos para suprimir la progresion de una fase del ciclo celular despues de G1 seguida de la supresion de la progresion de la

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fase G1 poniendo en contacto celulas con una cantidad de una composicion que comprende un primer agente seguido de poner en contacto las celulas con una cantidad de un inhibidor de mTOR en solucion, siendo las cantidades combinadas eficaces para tratar un trastorno proliferativo de las celulas. En algunas realizaciones, la invencion proporciona combinaciones para su uso en metodos para inhibir la actividad de cinasa poniendo en contacto una celula, tejido, u organo que expresa una cinasa de interes. En algunas realizaciones, el sujeto tratado es un roedor u otro mairnfero (por ejemplo, ser humano). En algunas realizaciones, el porcentaje de inhibicion de cinasa por el inhibidor de mTOR supera el 50%, 60%, 70%, 80%, o 90%.

Terapias combinadas adicionales

La presente invencion tambien proporciona terapias combinadas adicionales en las que, ademas de un primer agente y un inhibidor de mTOR, se usan uno o mas terceros agentes que se sabe que modulan otras vfas, u otros componentes de la misma via, o incluso conjuntos solapantes de enzimas dianas o una sal, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivado farmaceuticamente aceptable de los mismos. En un aspecto, dicha terapia incluye, pero sin limitacion, la combinacion de la composicion que comprende un primer agente y/o un inhibidor de mTOR, tal como se describe en el presente documento, con otros primeros agentes como se describen en el presente documento, agentes quimioterapeuticos, anticuerpos terapeuticos, y tratamiento con radiacion, para proporcionar, cuando se desee, un efecto terapeutico sinergico o aditivo. Las rutas que pueden usarse como diana mediante la administracion de un tercer agente incluyen, pero sin limitacion, MAP cinasa, Akt, NFkB, WNT, RAS/RAF/MEK/ERK, JNK/SAPK, MAPK p38, la familia de cinasas de Src, JAK/STAT y/o las vfas de senalizacion de PKC. Los terceros agentes pueden dirigirse a uno o mas miembros de una o mas vfas de senalizacion. Los miembros representativos de la via de factor nuclear kappaB (NFkB) incluyen, pero sin limitacion, RelA (p65), RelB, c-Rel, p50/p105 (NF-kB 1), p52/p 100 (NF-kB2), IkB, e IkB cinasa. Los ejemplos no limitantes de tirosina cinasas receptoras que son miembros de la via de fosfatidilinositol 3-cinasa (Pl3K)/AKT que pueden usarse como diana por uno o mas terceros agentes incluyen ligando FLT3, EGFR, IGF-1R, HER2/neu, VeGfR, y PDGFR. Los miembros aguas debajo de la via de PI3K/AKT que pueden usarse como diana por los terceros agentes de acuerdo con los metodos de la invencion incluyen, pero sin limitacion, factores de transcripcion de la caja O de forkhead, Bad, GSK-3p, I-kB, mTOR, MDM-2, y la subunidad ribosomica S6.

Los terceros agentes utiles en los metodos de la invencion incluyen cualquiera capaz de modular una molecula diana, de forma directa o indirecta. Los ejemplos no limitantes de moleculas diana moduladas por los terceros agentes incluyen enzimas, sustratos enzimaticos, productos de transiciones, anticuerpos, antfgenos, protemas de membrana, protemas nucleares, protemas citosolicas, protemas mitocondriales, protemas lisosomicas, protemas armazon, balsas iipfdicas, fosfoprotemas, glucoprotemas, receptores de membrana, receptores acoplados a protema G, receptores nucleares, protema tirosina cinasas, protema serina/treonina cinasas, fosfatasas, proteasas, hidrolasas, lipasas, fosfolipasas, ligasas, reductasas, oxidasas, sintasas, factores de transcripcion, canales de iones, ARN, ADN, RNasa, DNasa, fosfolfpidos, esfingolfpidos, receptores nucleares, protemas de canales de iones, protemas de union a nucleotidos, protemas de union a calcio, chaperonas, protemas de union a ADN, protemas de union a ARN, protemas armazon, supresores tumorales, protemas del ciclo celular, e histonas.

Los terceros agentes pueden dirigirse a una o mas moleculas de senalizacion, incluyendo, pero sin limitacion, las siguientes: receptores de HER, receptores de PDGF, receptor Kit, receptores de FGF, receptores de Eph, receptores de Trk, receptores de IGF, receptor de insulina, receptor de Met, Ret, receptores de VEGF, TIE1, TIE2, FAK, Jak1, Jak2, Jak3, Tyk2, Src, Lyn, Fyn, Lck, Fgr, Yes, Csk, Ab1, Btk, ZAP70, Syk, |RaK, cRaf, ARaf, BRAF, Mos, Lim cinasa, ILK, Tp1, ALK, receptores de TGFp, receptores de BMP, MEKK, ASK, MLK, DLK, PAK, Mek 1, Mek 2, MKK3/6, MKK4/7, ASK1, Cot, NIK, Bub, Myt 1, Wee1, casema cinasas, PDK1, SGK1, SGK2, SGK3, Akt1, Akt2, Akt3, p90Rsks, p70S6 cinasa, Prk, PKC, PKA, ROCK 1, ROCK 2, Aurora, CaMK, MNK, AMPK, MELK, MARK, Chk1, Chk2, LKB-1, MAPKAPK, Pim1, Pim2, Pim3, IKK, Cdk, Jnk, Erk, IKK, GSK3a, GSK3p, Cdk, CLK, PKR, PI3-cinasa de clase 1, clase 2, clase 3, mTOR, SAPK/JNK1, 2,3, p38s, PKR, DNA-PK, ATM, ATR, protema tirosina fosfatasas receptoras (RPTP), LAR fosfatasa, CD45, tirosina fosfatasas no receptoras (NPRTP), SHP, MAP cinasa fosfatasas (MKP), fosfatasas de especificidad dual (DUSP), CDC25 fosfatasas, tirosina fosfatasa de bajo peso molecular, tirosina fosfatasas Eyes absent (EYA), Slingshot fosfatasas (SSH), serina fosfatasas, PP2A, PP2B, PP2C, PP1, PP5, inositol fosfatasas, PTEN, SHIP, miotubularinas, fosfoinosttido cinasas, fosfolipasas, prostaglandina sintasas, 5-lipooxigenasa, esfingosina cinasas, esfingomielinasas, protemas adaptadoras/armazon, Shc, Grb2, BLNK, LAT, adaptador de celulas B para PI3-cinasa (BCAP), SLAP, Dok, KsR, MyD88, Crk, CrkL, GAD, Nck, molecula de union asociada a Grb2 (GAB), dominio de muerte asociado a Fas (FADD), tRaDD, TRAF2, RIP, familia de leucemia de celulas T, IL-2, IL-4, IL-8, IL-6, interferon p, interferon a, supresores de senalizacion de citocinas (SOC), Cb1, complejo de ubiquitinacion de ligasa SCF, aPc/C, moleculas de adhesion, integrinas, moleculas de adhesion similares a inmunoglobulina, selectinas, cadherinas, cateninas, cinasa de adhesion focal, p130CAS, fodrina, actina, paxilina, miosina, protemas de union a miosina, tubulina, eg5/KSP, CENP, receptores p-adrenergicos, receptores muscarmicos, receptores de adenilil ciclasa, GTPasas de bajo peso molecular, H-Ras, K-Ras, N-Ras, Ran, Rac, Rho, Cdc42, Arf, RAB, RHEB, Vav, Tiam, Sos, Db1, PRK, TSC1, 2, Ras-GAP, Arf-GAP, Rho-GAP, caspasas, caspasa 2, caspasa 3, caspasa 6, caspasa 7, caspasa 8, caspasa 9, Bcl-2, Mcl-1, Bcl-XL, Bcl-w, Bcl-B, A1, Bax, Bak, Bok, Bik, Bad, Bid, Bim, Bmf, Hrk, Noxa, Puma, IAP, XIAP, Smac, Cdk4, Cdk 6, Cdk 2, Cdk1, Cdk 7, ciclina D, ciclina E, ciclina A, ciclina B, Rb, p16, p14Arf, p27KIP, p21CIP, chaperonas moleculares, Hsp90s, Hsp70, Hsp27, enzimas metabolicas, acetil-CoAa carboxilasa, ATP citrato liasa, sintasa de oxido mtrico, caveolinas, complejo de clasificacion endosomica necesario para el transporte de protemas (ESCRT), clasificacion de protema vesicular (Vsp), hidroxilasas, prolil-hidroxilasas PHD-1,2 y 3, asparagina

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hidroxilasa FIH transferasas, Pin1 prolil isomerasa, topoisomerasas, desacetilasas, histona desacetilasas, sirtuinas, histona acetilasas, familia de CBP/P300, familia de MYST, ATF2, ADN metil transferasas, histona H3K4 desmetilasas, H3K27, JHDM2A, UTX, VHL, WT-1, p53, Hdm, ubiquitina proteasas, activador de plasminogeno de tipo urocinasa (uPA) y sistema receptor de uPA (uPAR), catepsinas, metaloproteinasas, esterasas, hidrolasas, separasa, canales de potasio, canales de sodio, protemas de resistencia a multiples farmacos, glucoprotema P, transportadores de nucleosidos, Ets, Elk, SMAD, Rel-A (p65-NFKB), CREB, NFAT, ATF-2, AFT, Myc, Fos, Sp1, Egr-1, T-bet, p-catenina, HIF, FOXO, E2F, SRF, TCF, Egr-1, {tilde over (P)}-catenina, FOXO, STAT1, STAT 3, STAT 4, STAT 5, STAT 6, p53, WT-1, HMGA, pS6, 4EPB-1, protema de union a eIF4E, ARN polimerasa, factores de iniciacion, y factores de elongacion.

Para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias, los compuestos o composiciones farmaceuticas de interes pueden usarse en combinacion con farmacos prescritos habitualmente que incluyen, pero no se limitan a Enbrel®, Remicade®, Humira®, Avonex®, and Rebif®. Para el tratamiento de las enfermedades respiratorias, los compuestos o composiciones farmaceuticas de interes pueden usarse en combinacion con farmacos prescritos habitualmente que incluyen pero no se limitan a Xolair®, Advair®, Singulair® y Spiriva®.

Los compuestos de la invencion pueden formularse o administrarse conjuntamente con otros agentes que actuan para aliviar los smtomas de afecciones inflamatorias, tales como encefalomielitis, asma, y otras enfermedades descritas en el presente documento. Estos agentes incluyen farmacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE), por ejemplo, acido acetilsalidlico; ibuprofeno; naproxeno; indometacina; nabumetona; tolmetina; etc. Los corticosteroides se usan para reducir la inflamacion y suprimir la actividad del sistema inmunitario. El farmaco de este tipo prescrito con mayor frecuencia es la prednisona. La cloroquina (Aralen) o la hidroxicloroquina (Plaquenil) tambien pueden ser muy utiles en algunos individuos con lupus. Con mucha frecuencia, se prescriben para los smtomas dermatologicos y articulares del lupus. La azatioprina (Imuran) y la ciclofosfamida (Cytoxan) suprimen la inflamacion y tienden a suprimir el sistema inmunitario. Otros agentes, por ejemplo, metotrexato y ciclosporina se usan para controlar los smtomas del lupus. Los anticoagulantes se emplean para evitar que la sangre se coagule rapidamente. Van desde la aspirina a dosis muy bajas que evita que las plaquetas se peguen, a la heparina/Coumadin.

En un aspecto, la presente invencion se refiere tambien a combinaciones para su uso en metodos y composiciones farmaceuticas para inhibir el crecimiento celular anormal en un mairnfero que comprende una cantidad de un primer agente y/o un inhibidor de mTOR de la presente invencion, o una sal, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivado de los mismos farmaceuticamente aceptable, en combinacion con una cantidad de un agente anticanceroso (por ejemplo, un agente quimioterapeutico). Actualmente se conocen en la tecnica muchos agentes quimioterapeuticos y pueden usarse en combinacion con los compuestos de la invencion.

En algunas realizaciones, el agente quimioterapeutico se selecciona del grupo que consiste en inhibidores mitoticos, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibioticos intercalantes, inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores del ciclo celular, enzimas, inhibidores de topoisomerasa, modificadores de la respuesta biologica, antihormonas, inhibidores de la angiogenesis, agentes inmunoterapeuticos, agentes proapoptoticos, y antiandrogenos. Son ejemplos no limitantes los agentes quimioterapicos, agentes citotoxicos, y moleculas pequenas no peptfdicas, tales como Tykerb/Tyverb (lapatinib), Gleevec (Imatinib mesilato), Velcade (bortezomib), Casodex (bicalutamida), Iressa (gefitinib), y adriamicina, asf como una multitud de agentes quimioterapeuticos. Los ejemplos no limitantes de agentes quimioterapeuticos incluyen agentes alquilantes, tales como tiotepa y ciclofosfamida (CYTOXAN®); sulfonatos de alquilo tales como busulfan, improsulfan y piposulfan; aziridinas, tales como benzodopa, carbocuona, meturedopa, y uredopa; etileniminas y metilamelaminas incluyendo altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosforamida y trimetilolomelamina; mostazas de nitrogeno, tales como clorambucilo, clornafazina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, clorhidrato de oxido de mecloretamina, melfalano, novembiquina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostaza de uracilo; nitrosoureas, tales como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; oxazafosforinas, nitrosoureas; triazenos; antibioticos, tales como antraciclinas, actinomicinas y bleomicinas, incluyendo aclacinomicinas, actinomicina, antramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, caliceamicina, carabicina, carminomicina, carcinofilina, Casodex™, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina, epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, acido micofenolico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina; antimetabolitos tales como metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); analogos de acido folico, tales como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; analogos de purina, tales como fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; analogos de pirimidina, tales como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didesoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, androgenos, tales como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antiadrenales como aminoglutimida, mitotano, trilostano; recuperador del acido folico tal como el acido frolmico; aceglatona; glucosido de aldofosfamida; acido aminolevulmico; amsacrina; bestrabucilo; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diazicuona; elfomitina; acetato de eliptinio; etoglucido; nitrato de galio; hidroxiurea; lentinano; lonidamina; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarubicina; acido podofilmico; 2-etilhidrazida; procarbazina; PSK.R™; razoxano; sizofiran; espirogermanio; acido tenuazonico; triazicuona; 2,2',2"-triclorotrietilamina; uretano; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobroman; gacitosina; arabinosido ("Ara-C"); ciclofosfamida; tiotepa; taxanos, por ejemplo, paclitaxel (TAXOL™, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.) y docetaxel

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(TAXOTERE™, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, Francia); acido retinoico; esperamicinas; capecitabina; gemcitabina y sales farmaceuticamente aceptables, acidos y derivados de cualquiera de los anteriores. Tambien se incluyen como acondicionadores celulares quimioterapicos agentes antihormonales que actuan para regular o inhibir la accion hormonal en tumores, tales como antiestrogenos, incluyendo, por ejemplo, tamoxifeno (Nolvadex™), raloxifeno, 4(5)-imidazoles inhibidores de aromatasa, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, queoxifeno, LY 117018, onapristona, y toremifeno (Fareston); y anti-androgenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolida, y goserelina; clorambucilo; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; platino o analogos y complejos de platino, tales como cisplatino y carboplatino; anti-microtubulos, tales como diterpenoides, incluyendo paclitaxel y docetaxel, o alcaloides de la vinca, incluyendo vinblastina, vincristina, vinflunina, vindesina, y vinorelbina; etoposido (VP-16); ifosfamida; mitomicina C; mitoxantrona; vincristina; vinorelbina; navelbina; novantrona; teniposido; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; inhibidores de topoisomerasa I e II, incluyendo camptotecinas (por ejemplo, camptotecina-11), topotecan, irinotecan, y epipodofilotoxinas; inhibidor de topoisomerasa rFs 2000; epotilona A o B; difluorometilornitina (DMFO); inhibidores de histona desacetilasa; compuestos que inducen procesos de diferenciacion celular; agonistas de gonadorrelina; inhibidores de metionina aminopeptidasa; compuestos que se dirigen a/reducen una actividad de protema o lfpido cinasa; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de una protema o lfpido fosfatasa; antiandrogenos; bisfosfonatos; modificadores de la respuesta biologica; anticuerpos antiproliferativos; inhibidores de heparanasa; inhibidores de isoformas oncogenicas de Ras; inhibidores de telomerasa; inhibidores del proteasoma, compuestos usados en el tratamiento de neoplasias hematologicas; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de FIT-3; inhibidores de Hsp90; temozolomida (TEMODAL®); inhibidores de Hsp90, tales como 17-AAG (17-alilaminogeldanamicina, NSC330507), 17-DMAG (17-dimetilaminoetilamino-17-desmetoxi-geldanamicina, NSC707545), IPI-504, CNF1010, CNF2024, CNF1010 de Conforma Therapeutics; temozolomida (TEMODAL®); inhibidores de la protema del huso de cinesina, tales como SB715992 o SB743921 de GlaxoSmithKline, o pentamidina/clorpromazina de CombinatoRx; inhibidores de MEK, tales como ARRY142886 de Array BioPharma, AZD6244 de AstraZeneca, PD181461 o PD0325901 de Pfizer, leucovorina, moleculas de union a EDG, compuestos antileucemicos, inhibidores de ribonucleotido reductasa, inhibidores de S-adenosilmetionina descarboxilasa, anticuerpos antiproliferativos u otros compuestos quimioterapeuticos. Cuando se desee, los compuestos o las composiciones farmaceuticas de la presente invencion pueden usarse en combinacion con farmacos anticancer prescritos comunmente, tales como Herceptin®, Avastin®, Erbitux®, Rituxan®, Taxol®, Arimidex®, Taxotere® y Velcade®. A continuacion, se proporciona informacion adicional acerca de compuestos que pueden usarse conjuntamente con los compuestos de la invencion.

Los inhibidores del proteasoma incluyen compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad del proteasoma. Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad del proteasoma incluyen, por ejemplo, Bortezomid (Velcade™) y MLN 341. Los inhibidores de metaloproteinasa de matriz (inhibidores de "MMP") incluyen, pero sin limitacion, inhibidores peptidomimeticos y no peptidomimeticos de colageno, derivados de tetraciclina, por ejemplo, el inhibidor peptidomimetico de hidroxamato, batimastat y su analogo biodisponible por via oral, marimastat (BB-2516), prinomastat (AG3340), metastat (NSC 683551), BMS-279251, BAY 12-9566, TAA211, MMI270B o AAJ996. Los compuestos usados en el tratamiento de neoplasias malignas hematologicas incluyen, pero sin limitacion, inhibidores de tirosina cinasa similares a FMS, por ejemplo, compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de receptores de tirosina cinasa similar a FMS (FIt-3R); Interferon, 1-b-D-arabinofuranosilcitosina (ara-c) y busulfan; e inhibidores de ALK, por ejemplo, compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la cinasa de linfoma anaplasico. Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de receptores de tirosina cinasa similar a FMS (FIt-3R) son compuestos de especialidad, protemas o anticuerpos que inhiben a miembros de la familia de cinasas receptoras FIt-3R, por ejemplo, PKC412, midostaurina, un derivado de estaurosporina, SU11248 y MLN518.

Los inhibidores de Hsp90 incluyen compuestos, tales como 17-AAG (17-alilaminogeldanamicina, NSC330507), 17-DMAG (17-dimetilaminoetilamino-17-desmetoxi-geldanamicina, NSC707545), IPI-504, CNF1010, CNF2024, CNF1010 de Conforma Therapeutics; temozolomida (TEMODAL®); inhibidores de la protema del huso de cinesina, tales como SB715992 o SB743921 de GlaxoSmithKline, o pentamidina/clorpromazina de CombinatoRx; inhibidores de MEK, tales como ARRY142886 de Array BioPharma, AZD6244 de AstraZeneca, PD181461 de Pfizer, leucovorina, moleculas de union a EDG, compuestos antileucemicos, inhibidores de ribonucleotido reductasa, inhibidores de S-adenosilmetionina descarboxilasa, anticuerpos antiproliferativos u otros compuestos quimioterapeuticos.

Los inhibidores de histona desacetilasa (o "inhibidores de HDAC") incluyen compuestos que inhiben una histona desacetilasa y que poseen actividad antiproliferativa. Esto incluye compuestos divulgados en el documento WO 02/22577, especialmente N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(1H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-etil] amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. Ademas, incluye especialmente el acido suberoilanilida hidroxamico (SAHA).

Los bisfosfonatos para su uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero sin limitacion, acido etridonico, clodronico, tiludronico, pamidronico, alendronico, ibandronico, risedronico y zoledronico.

Los compuestos de la invencion tambien pueden usarse conjuntamente con compuestos que se dirigen a o reducen una actividad de protema o lfpido cinasa, una actividad de protema o lfpido fosfatasa, o compuestos antiangiogenicos adicionales. Dichos compuestos incluyen, pero sin limitacion, inhibidores de protema tirosina cinasa y/o serina y/o treonina cinasa o inhibidores de lfpido cinasa, por ejemplo, compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad

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de los receptores de factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR), tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de PDGFR, especialmente compuestos que inhiben al receptor de PDGf, por ejemplo, un derivado de N-fenil-2-pirimidin-amina, por ejemplo, imatinib, SU101, SU6668 y GFB-1 11; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de los receptores de factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR); compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad del receptor I de factor de crecimiento insulmico (IGF-IR), tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de IGF-IR, especialmente compuestos que inhiben la actividad de cinasa del receptor de IGF-I, tales como aquellos compuestos divulgados en el documento WO 02/092599, tales como OSI906, o anticuerpos que se dirigen al dominio extracelular del receptor de IGF-I, tales como CP-751871, R1507, AVE1642, IMC-A12, AMG479, MK-0646, SCH717454 o sus factores de crecimiento; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de la familia de receptores de tirosina cinasa Trk, o inhibidores de efrina B4; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de la familia de receptores de tirosina cinasa Axl; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de receptores de tirosina cinasa Ret; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de receptores de tirosina cinasa Kit/SCFR; por ejemplo, imatinib; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de tirosina cinasas receptoras C-kit (parte de la familia de PDGFR), tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de la familia de tirosina cinasas receptoras c-Kit, especialmente compuestos que inhiben al receptor de c-Kit, por ejemplo, imatinib; compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de miembros de la familia c-Abl, sus productos de fusion genica (por ejemplo, BCR-Abl cinasa) y mutantes, tales como compuestos cuya diana reduce o inhibe la actividad de los miembros de la familia de c-Abl y sus productos de fusion genica, por ejemplo, un derivado de N-fenil-2-pirimidin-amina, por ejemplo, imatinib o nilotinib (AMN107); PD180970; AG957; NSC 680410; PD173955 de ParkeDavis; o dasatinib (BMS-354825); compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de miembros de la familia de protema cinasa C (PKC) y Raf de serina/treonina cinasas, miembros de las familias MEK, SRC, JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt, y Ras/MAPK, y/o miembros de la familia de cinasas dependientes de ciclina (CDK) y son especialmente aquellos derivados de estaurosporina divulgados en el documento US 5.093.330, por ejemplo, midostaurina; los ejemplos de compuestos adicionales incluyen, por ejemplo, UCN-01, safingol, BAY 43-9006, briostatina 1, perifosina; ilmofosina; RO 318220 y RO 320432; GO 6976; Isis 3521; LY333531/LY379196; compuestos de isoquinolina, tales como aquellos divulgados en el documento WO 00/09495; FTI; PD184352 o QAN697 (un inhibidor de P13K) o AT7519 (inhibidor de CDK); compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de inhibidores de protema-tirosina cinasa, tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de inhibidores de protema-tirosina cinasa incluyen mesilato de imatinib (GLEEVEC) o tirfostina. Una tirfostina es preferentemente un compuesto de bajo peso molecular (Mr < 1500), o una sal farmaceuticamente aceptable de la misma, especialmente un compuesto seleccionado entre la clase de bencilidenomalonitrilo o la clase de compuestos de S-arilbencenomalonitrilo o quinolina bisustrato, mas especialmente, cualquier compuesto seleccionado del grupo que consiste en tirfostina A23/RG-50810; AG 99; tirfostina AG 213; tirfostina AG 1748; tirfostina AG 490; tirfostina B44; enantiomero (+) de tirfostina B44; tirfostina AG 555; AG 494; tirfostina AG 556, AG957 y adafostina (adamantil ester del acido

4-{[(2,5-dihidroxifenil)metil]amino}-benzoico; NSC 680410, adafostina).

Los compuestos de la invencion tambien pueden usarse en combinacion con compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de la familia de tirosina cinasas receptoras de factor de crecimiento epidermico (EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 en forma de homo o heterodfmeros) y sus mutantes, tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de la familia de receptores de factor de crecimiento epidermico son especialmente compuestos, protemas o anticuerpos que inhiben a miembros de la familia de tirosina cinasas receptoras de EGF, por ejemplo, receptor de EGF, ErbB2, ErbB3 y ErbB4 o que se unen a EGF o a ligandos relacionados con EGF, y son en particular aquellos compuestos, protemas o anticuerpos monoclonales divulgados generica y espedficamente en el documento WO 97/02266, por ejemplo, el compuesto del ejemplo 39, o en los documentos EP 0 564 409, WO 99/03854, EP 0520722, EP 0 566 226, EP 0 787 722, EP 0 837 063, US 5.747.498, WO 98/10767, WO 97/30034, WO 97/49688, WO 97/38983 y, especialmente, WO 96/30347 (por ejemplo, el compuesto conocido como CP 358774), WO 96/33980 (por ejemplo, el compuesto ZD 1839) y WO 95/03283 (por ejemplo, el compuesto ZM105180); por ejemplo, trastuzumab (Herceptin™), cetuximab (Erbitux™), Iressa, Tarceva, OSI-774, C1-1033, EKB-569, GW-2016, E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.1 1, E6.3 o E7.6.3, y derivados de 7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidina que se divulgan en el documento WO 03/013541; y compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad del receptor c-Met, tales como compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de c-Met, especialmente compuestos que inhiben la actividad de cinasa del receptor de c-Met, o anticuerpos que se dirigen al dominio extracelular de c-Met o que se unen a HGF. Los compuestos anti-angiogenicos adicionales incluyen compuestos que tienen otro mecanismo para su actividad, por ejemplo, no relacionada con la inhibicion de protema o lfpido cinasas, por ejemplo, talidomida (THALOMID) y TNP-470.

Los inhibidores de la angiogenesis de cinasa no receptora tambien pueden ser utiles conjuntamente con los compuestos de la presente invencion. En general, la angiogenesis esta vinculada con la senalizacion de erbB21EGFR, ya que se ha demostrado que los inhibidores de erbB2 y EGFR inhiben la angiogenesis, principalmente la expresion de VEGf. Por consiguiente, pueden usarse inhibidores de tirosina cinasa no receptora en combinacion con los compuestos de la presente invencion. Por ejemplo, anticuerpos anti-VEGF, que no reconocen al VEGFR (la tirosina cinasa receptora), pero que se unen al ligando; inhibidores de integrina de molecula pequena (alfav beta3) que inhibiran la angiogenesis; la endostatina y angiostatina (no-RTK) tambien pueden demostrar ser utiles en combinacion con los compuestos divulgados. (Vease Bruns C J et al (2000), Cancer Res., 60: 2926-2935; Schreiber A B, Winkler M E, y Derynck R. (1986), Science, 232: 1250-1253; Yen L et al. (2000), Oncogene 19: 3460-3469).

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Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de una protema o Ifpido fosfatasa incluyen, por ejemplo, inhibidores de fosfatasa 1, fosfatasa 2A, o CDC25, por ejemplo, acido okadaico o un derivado del mismo. Los compuestos que inducen los procesos de diferenciacion celular son, por ejemplo, acido retinoico, a, y o 8-tocoferol o a, Y o 8-tocotrienol. Los inhibidores de ciclooxigenasa incluyen, pero sin limitacion, por ejemplo, inhibidores de COX-2, acido 2-arilaminofenilacetico 5-alquil sustituido y derivados, tales como celecoxib (CELEBREX), rofecoxib (VIOXX), etoricoxib, valdecoxib o un acido 5-alquil-2-arilaminofenilacetico, por ejemplo, acido

5- metil-2-(2'-cloro-6'-fluoroanilino)fenil acetico, y lumiracoxib.

Los inhibidores de heparanasa incluyen compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la degradacion del sulfato de heparina, incluyendo, pero sin limitacion, PI-88. Los modificadores de la respuesta biologica incluyen linfocinas e interferones, por ejemplo, interferon Y. Los inhibidores de isoformas oncogenicas de Ras incluyen H-Ras, K-Ras, N-Ras, y otros compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad oncogenica de Ras. Los inhibidores de farnesil transferasa incluyen, pero sin limitacion, por ejemplo, L-744832, DK8G557 y R115777 (Zarnestra).

Los inhibidores de telomerasa incluyen compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de telomerasa. Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de telomerasa son especialmente compuestos que inhiben al receptor de telomerasa, por ejemplo, telomestatina. Los inhibidores de metionina aminopeptidasa son, por ejemplo, compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de metionina aminopeptidasa. Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de metionina aminopeptidasa son, por ejemplo, bengamida o un derivado de la misma.

Los anticuerpos antiproliferativos incluyen, pero sin limitacion, trastuzumab (Herceptin™), Trastuzumab-DMI, erbitux, bevacizumab (Avastin™), rituximab (Rituxan®), PRO64553 (anti-CD40) y anticuerpo 2C4. Por anticuerpos se entiende, por ejemplo, anticuerpos monoclonales intactos, anticuerpos policlonales, anticuerpos multiespedficos formados a partir de al menos 2 anticuerpos intactos, y fragmentos de anticuerpos siempre que muestren la actividad biologica deseada.

Para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML), pueden usarse compuestos de la invencion en combinacion con tratamientos convencionales para la leucemia, especialmente en combinacion con terapias usadas para el tratamiento de la AML. En particular, los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con, por ejemplo, inhibidores de farnesil transferasa y/u otros farmacos utiles para el tratamiento de la AML, tales como daunorrubicina, adriamicina, Ara-C, VP-16, teniposido, mitoxantrona, idarrubicina, carboplatino y PCK412.

Los compuestos antileucemicos para su uso en combinacion con compuestos de la invencion incluyen, por ejemplo, Ara-C, un analogo de pirimidina, que es el derivado de 2'-alfa-hidroxi ribosa (arabinosido) de la desoxicitidina. Tambien se incluye el analogo de purina de hipoxantina, 6-mercaptopurina (6-MP) y fosfato de fludarabina. Los compuestos que se dirigen a, reducen o inhiben la actividad de los inhibidores de histona desacetilasa (HDAC), tales como butirato de sodio y acido suberoilanilida hidroxamico (SAHA) inhiben la actividad de las enzimas conocidas como histona desacetilasas. Los inhibidores de HDAC espedficos incluyen MS275, SAHA, FK228 (anteriormente FR901228), tricostatina A y compuestos divulgados en el documento US 6.552.065, en particular, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y N-hidroxi-3-[4-[(2-hidroximetil) {2-(1-H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, o una sal farmaceuticamente aceptable de la misma, por ejemplo, la sal de lactato.

Los antagonistas del receptor de somatostatina incluyen compuestos que se dirigen a, tratan o inhiben al receptor de somatostatina, tales como octreotida, y SOM230 (pasireotida). Las estrategias que danan a las celulas tumorales incluyen estrategias tales como radiacion ionizante, por ejemplo, radiacion ionizante que se produce en forma de rayos electromagneticos (tales como rayos X y rayos gamma) o partfculas (tales como partfculas alfa y beta). La radiacion ionizante se proporciona en, pero sin limitacion, radioterapia y se conoce en la tecnica. Vease Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, en Principles and Practice of Oncology, Devita et al., Eds., 4a Edicion, Vol. 1, pags. 248-275 (1993). Las moleculas de union a EDG incluyen inmunosupresores que modulan la recirculacion de linfocitos, tales como FTY720.

Los inhibidores de ribonucleotido reductasa incluyen analogos nucleosidos de pirimidina o purina que incluyen, pero sin limitacion, fludarabina y/o arabinosido de citosina (ara-C), 6-tioguanina, 5-fluorouracilo, cladribina,

6- mercaptopurina (especialmente en combinacion con ara-C contra la ALL) y/o pentostatina. Los inhibidores de ribonucleotido reductasa son, por ejemplo, hidroxiurea o derivados de 2-hidroxi-1H-isoindol-1,3-diona, tales como PL-1, PL-2, PL-3, PL-4, PL-5, PL-6, PL-7 o PL-8 mencionados en Nandy et al., Acta Oncologica, Vol. 33, n.° 8, pags. 953-961 (1994).

Los inhibidores de S-adenosilmetionina descarboxilasa incluyen, pero sin limitacion, los compuestos divulgados en el documento US 5.461.076.

Tambien se incluyen en particular aquellos compuestos, protemas o anticuerpos monoclonales para VEGF divulgados en el documento WO 98/35958, por ejemplo, 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos, por ejemplo, el succinato, o en los documentos WO 00/09495, WO 00/27820, WO 00/59509,

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WO 98/11223, WO 00/27819 y EP 0 769 947; aquellos descritos por Prewett et al, Cancer Res, Vol. 59, pags. 5209-5218 (1999); Yuan et al., Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 93, pags. 14765-14770 (1996); Zhu et al., Cancer Res, Vol. 58, pags. 3209-3214 (1998); y Mordenti et al., Toxicol Pathol, Vol. 27, n.° 1, pags. 14-21 (1999); en los documentos WO 00/37502 y WO 94/10202; ANGIOSTATINA, descrito por O'Reilly et al., Cell, Vol. 79, pags. 315-328 (1994); ENDOSTATInA, descrito por O'Reilly et al., Cell, Vol. 88, pags. 277-285 (1997); amidas acidas antramlicas; zD4190; ZD6474; SU5416; SU6668; bevacizumab; o anticuerpos anti-VEGF o anticuerpos anti-receptor de VEGF, por ejemplo, rhuMAb y RHUFab, aptameros de VEGF, por ejemplo, Macugon; inhibidores de FLT-4, inhibidores de FLT-3, anticuerpo IgG1 para VEGFR-2, Angiozyme (RPI 4610) y Bevacizumab (Avastin™).

Los compuestos de la invencion tambien son utiles como compuestos co-terapeuticos para su uso en combinacion con otras sustancias farmacologicas, tales como sustancias antiinflamatorias, broncodilatadoras o anthistammicas, en particular, en el tratamiento de enfermedades obstructivas o inflamatorias de las vfas respiratorias, tales como aquellas mencionadas anteriormente en el presente documento, por ejemplo, como potenciadores de la actividad terapeutica de dichos farmacos o como medio para reducir la dosis necesaria o los efectos secundarios potenciales de dichos farmacos. Puede mezclarse un primer agente y/o un inhibidor de la invencion con otra sustancia farmacologica en una composicion farmaceutica fija o puede administrarse por separado, antes, simultaneamente con o despues de la otra sustancia farmacologica. Por consiguiente, la invencion incluye una combinacion de un inhibidor de la invencion como se ha descrito con una sustancia farmacologica antiinflamatoria, broncodilatadora, antihistammica o antitusiva, siendo dicho compuesto de la invencion y dicha sustancia farmacologica de la misma composicion farmaceutica u otra diferente. Los farmacos antiinflamatorios adecuados incluyen esteroides, en particular, glucocorticosteroides, tales como budesonida, dipropionato de beclometasona, propionato de fluticasona, furoato de ciclesonida o mometasona, o esteroides descritos en los documentos WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 (espedficamente, aquellos de los ejemplos 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 y 101), WO 03/035668, WO 03/048181, WO 03/062259, WO 03/064445, WO 03/072592, agonistas de receptores de glucocorticoides no esteroideos, tales como aquellos descritos en los documentos WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/082280, WO 03/082787, WO 03/104195, WO 04/005229; antagonistas de LTB4 tales como LY29311 1, CGS025019C, CP-195543, SC-53228, BIIL 284, ONO 4057, SB 209247 y aquellos descritos en el documento US 5451700; antagonistas de LTD4, tales como montelukast y zafirlukast; inhibidores de PDE4, tales como cilomilast (Ariflo® GlaxoSmithKline), Roflumilast (Byk Gulden), V-1 1294A (Napp), BAY19-8004 (Bayer), SCH-351591 (Schering-Plough), Arofilina (Almirall Prodesfarma), PD189659/PD168787 (Parke-Davis), AWD-12-281 (Asta Medica), CDC-801 (Celgene), SelCID(TM) CC-10004 (Celgene), VM554/UM565 (Vernalis), T-440 (Tanabe), KW-4490 (Kyowa Hakko Kogyo), y aquellos divulgados en los documentos WO 92/19594, WO 93/19749, WO 93/19750, WO 93/19751, WO 98/18796, WO 99/16766, WO 01/13953, WO 03/104204, WO 03/104205, WO 03/39544, WO 04/000814, WO 04/000839, WO 04/005258, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/018431, WO 04/018449, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/019944, WO 04/019945, WO 04/045607 y WO 04/037805; agonistas de A2a, tales como aquellos divulgados en el documento EP 409595A2, EP 1052264, EP 1241176, WO 94/17090, WO 96/02543, WO 96/02553, WO 98/28319, WO 99/24449, WO 99/24450, WO 99/24451, WO 99/38877, WO 99/41267, WO 99/67263, WO 99/67264, WO 99/67265, WO 99/67266, WO 00/23457, WO 00/77018, WO 00/78774, WO 01/23399, WO 01/27130, WO 01/27131, WO 01/60835, WO 01/94368, WO 02/00676, WO 02/22630, WO 02/96462, WO 03/086408, WO 04/039762, WO 04/039766, WO 04/045618 y WO 04/046083; antagonistas de A2b tales como aquellos divulgados en el documento WO 02/42298; y agonistas del adrenorreceptor beta-2, tales como albuterol (salbutamol), metaproterenol, terbutalina, salmeterol fenoterol, procaterol, y especialmente, formoterol y sales farmaceuticamente aceptables del mismo, y compuestos (en forma libre, de sal o de solvato) de formula I del documento WO 0075114, incorporandose dicho documento al presente documento por referencia, preferentemente, compuestos de los ejemplos del mismo, asf como compuestos (en forma libre, de sal o de solvato) de formula I del documento WO 04/16601, y tambien compuestos del documento WO 04/033412. Los farmacos broncodilatadores adecuados incluyen compuestos anticolinergicos o antimuscarmicos, en particular, bromuro de ipratropio, bromuro de oxitropio, tales de tiotropio y CHF 4226 (Chiesi), y glucopirrolato, salvo aquellos descritos en los documentos WO 01/041 18, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/87094, WO 04/05285, WO 02/00652, WO 03/53966, EP 424021, US 5171744, US 3714357, WO 03/33495 y WO 04/018422.

Las sustancias farmacologicas antihistammicas adecuadas incluyen clorhidrato de cetirizina, acetaminofeno, fumarato de clemastina, prometazina, loratadina, desloratadina, difenhidramina y clorhidrato de fexofenadina, activastina, astemizol, azelastina, ebastina, epinastina, mizolastina y tefenadina, asf como aquellos divulgados en los documentos WO 03/099807, WO 04/026841 y JP 2004107299.

Otras combinaciones de compuestos utiles de la invencion con farmacos antiinflamatorios son aquellas con antagonistas de los receptores de quimiocinas, por ejemplo, CCR-1, CCR-2, CCR-3, CCR-4, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9 y CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5, en particular, antagonistas de CCR-5, tales como los antagonistas de Schering-Plough, SC-351 125, SCH- 55700 y SCH-D, antagonistas de Takeda, tales como TAK-770, y antagonistas de CCR-5 descritos en los documentos US 6166037 (en particular, las reivindicaciones 18 y 19), WO 00/66558 (en particular la reivindicacion 8), WO 00/66559 (en particular la reivindicacion 9), WO 04/018425 y WO 04/026873.

Otros compuestos que pueden regular la apoptosis (por ejemplo, inhibidores de BCL-2) pueden usarse conjuntamente.

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Los complejos de coordinacion de platino incluyen agentes anticancer no espedficos de fase, que interactuan con el ADN. Los complejos de platino entran en las celulas tumorales, sufren hidratacion y forman reticulaciones intra e intercadena con el ADN provocando efectos biologicos adversos al tumor. Los ejemplos de complejos de coordinacion con platino incluyen, pero sin limitacion, cisplatino y carboplatino. El cisplatino, cis-diaminodicloroplatino, esta disponible comercialmente como PLATINOL® en forma de una solucion inyectable. El cisplatino esta indicado principalmente en el tratamiento del cancer testicular metastasico y de ovario y el cancer de vejiga avanzado. Los principales efectos secundarios limitantes de la dosis del cisplatino son nefrotoxicidad, que puede controlarse mediante hidratacion y diuresis, y ototoxicidad. El carboplatino, platino, diamina[1,1-ciclobutano-dicarboxilato(2-)-O,O'], esta disponible comercialmente como PARAPLATIN®) en forma de una solucion inyectable. El carboplatino esta indicado principalmente en el tratamiento de primera y segunda lmea del carcinoma ovarico avanzado. La supresion de la medula osea es la toxicidad limitante de la dosis del carboplatino.

Los agentes alquilantes incluyen agentes espedfico anticancer sin fase y electrofilos fuertes. Normalmente, los agentes alquilantes forman engarces covalentes, por alquilacion, con el DNA a traves de restos nucleofilos de la molecula de ADN, tales como grupos fosfato, amino, sulfhidrilo, hidroxilo, carboxilo, e imidazol. Dicha alquilacion altera la funcion del acido nucleico que da lugar a la muerte celular. Los ejemplos de agentes alquilantes incluyen, pero sin limitacion, mostazas de nitrogeno, tales como ciclofosfamida, melfalano, y clorambucilo; sulfonatos de alquilo tales como busulfan; nitrosoureas, tales como carmustina; y triazenos, tales como dacarbazina. La ciclofosfamida, 2-oxido de monohidrato de 2-[bis(2-cloroetil)amino]tetrahidro-2H-1,3,2-oxazafosforina, esta disponible comercialmente en forma de una solucion inyectable o en comprimidos como CYTOXAN®. La ciclofosfamida esta indicada como agente individual o en combinacion con otros agentes terapeuticos, en el tratamiento de linfomas malignos, mieloma multiple, y leucemias. La alopecia, nauseas, vomitos y leucopenia son los efectos secundarios limitantes de la dosis mas comunes de la ciclofosfamida. El melfalano, 4-[bis(2-cloroetil)amino]-L-fenilalanina, esta disponible comercialmente en forma de una solucion inyectable o comprimidos, como ALKERAN®. El melfalano esta indicado para el tratamiento paliativo del mieloma multiple y el carcinoma epitelial no reseccionable del ovario. La supresion de la medula osea es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun del melfalano. El clorambucilo, 4-[bis(2-cloroetiyl)amino]bencenosulfonico, esta disponible comercialmente como comprimidos LEUKERAN®. El clorambucilo esta indicado para el tratamiento paliativo de la leucemia linfatica cronica, y linfomas malignos, tales como linfosarcoma, linfoma folicular gigante, y enfermedad de Hodgkin. La supresion de la medula osea es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun del clorambucilo. El busulfan, dimetanosulfonato de 1,4-butanodiol, esta disponible comercialmente como MYLERAN® TABLETS. El busulfan esta indicado para el tratamiento paliativo de la leucemia mielogena cronica. La supresion de la medula osea es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun del busulfan. La carmustina, 1,3-[bis(2-cloroetil)-1-nitrosourea, esta disponible comercialmente en forma de viales individuales de material liofilizado como BiCNU®. La carmustina esta indicada para el tratado paliativo como agente unico o en combinacion con otros agentes para tumores cerebrales, mieloma multiple, enfermedad de Hodgkin, y linfomas no Hodgkin. La mielosupresion retardada es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun para la carmustina. La dacarbazina, 5-(3,3-dimetil-1-triazeno)-imidazol-4-carboxamida, esta disponible comercialmente en forma de viales individuales de material como DTIC-Dome®. La dacarbazina esta indicada para el tratamiento del melanoma maligno metastasico y en combinacion con otros agentes para el tratamiento de segunda lmea de la enfermedad de Hodgkin. Los efectos secundarios limitantes de la dosis mas comunes de la dacarbazina son nauseas, vomitos y anorexia.

Los antibioticos antineoplasicos incluyen agentes no espedficos de fase, que se unen a o intercalan con el ADN. Normalmente, dicha accion da como resultado complejos estables de ADN o rotura de la hebra, que alteran la funcion normal de los acidos nucleicos, lo que origina la muerte celular. Los ejemplos de antibioticos antineoplasicos incluyen, pero sin limitacion, actinomicinas, tales como dactinomicina, antraciclinas, tales como daunorrubicina y doxorrubicina; y bleomicinas. La dactinomicina, tambien conocida como actinomicina D, esta disponible comercialmente en forma inyectable como COSMEGEN®. La dactinomicina esta indicada para el tratamiento del tumor de Wilm y del rabdomiosarcoma. Los efectos secundarios limitantes de la dosis mas comunes de la dactinomicina son nauseas, vomitos y anorexia. La daunorrubicina, clorhidrato de

(8S-cis-)-8-acetil-l0-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi-a-L-lixo-hexopiranosil)oxi]-7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi- 5,12-naftacenodiona, esta disponible comercialmente en forma inyectable liposomica como DAUNOXOME® o en inyectable como CERUBIDINE®. La daunorrubicina esta indicada para inducir la remision en el tratamiento de la leucemia no linfodtica aguda y el sarcoma de Kaposi asociado con el VIH avanzado. La mielosupresion es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun para la daunorrubicina. La doxorrubicina, clorhidrato de (8S,10S)-10-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi-a-L-lixo-hexopiranosil)oxi]-8-glicoloil,7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-meto xi-5,12-naftacenodiona, esta disponible comercialmente en forma inyectable como RUBEX® o ADRIAMYCIN RDF®. La doxorrubicina esta indicada principalmente para el tratamiento de la leucemia linfoblastica aguda y la leucemia mieloblastica aguda, pero es tambien un componente util en el tratamiento de algunos tumores solidos y linfomas. La mielosupresion es el efecto secundario limitante de la dosis mas comun para la doxorrubicina. La bleomicina, una mezcla de antibioticos glucopeptfdicos citotoxicos aislados de una cepa de Streptomyces verticillus, esta disponible comercialmente como BLENOXANE®. La bleomicina esta indicada como tratamiento paliativo, como agente unico o en combinacion con otros agentes, del carcinoma de celulas escamosas, linfomas, y carcinomas testiculares. Las toxicidades pulmonares y cutaneas son los efectos secundarios limitantes de la dosis mas comunes para la bleomicina.

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Las hormonas y los analogos hormonales son compuestos utiles para tratar cancer en los que hay una relacion entre las hormonas y el crecimiento y/o ausencia de crecimiento del cancer. Los ejemplos de hormonas y analogos hormonales utiles en el tratamiento del cancer incluyen, pero sin limitacion, adrenocorticosteroides, tales como prednisona y prednisolona, que son utiles en el tratamiento del linfoma maligno y de la leucemia aguda en ninos; aminoglutetimida y otros inhibidores de aromatasa, tales como aminoglutetimida, rogletimida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, ketokonazol, vorozol, fadrozol, anastrozol, letrazol, formestano, atamestano y exemestano utiles en el tratamiento del carcinoma adrenocortical y carcinoma de mama dependiente de hormonas que contiene receptores de estrogenos; progestinas, tales como acetato de megestrol, utiles en el tratamiento del cancer de mama dependiente de hormonas y carcinoma endometrial; estrogenos, androgenos, y anti-androgenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona y 5a-reductasas, tales como finasteride y dutasteride, utiles en el tratamiento del carcinoma prostatico y la hipertrofia benigna de prostata; antiestrogenos, tales como fulvestrant, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, asf como moduladores selectivos de los receptores de estrogenos (SERMS) tales como aquellos descritos en las Patentes de los Estados Unidos n.° 5.681.835, 5.877.219, y 6.207.716, utiles en el tratamiento del carcinoma de mama dependiente de hormonas y otros canceres susceptibles; y hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) y analogos de la misma que estimulan la liberacion de hormona luteinizante (LH) y/o de hormona folfculo estimulante (FSH) para el tratamiento del carcinoma prostatico, por ejemplo, agonistas y antagonistas de LHRH, tales como abarelix, goserelina, acetato de goserelina y luprolida. Los bloqueantes de dominio SH2/SH3 son agentes que alteran la union al dominio SH2 o SH3 en una serie de enzimas o protemas adaptadoras que incluyen, subunidad p58 de PI3-K, cinasas de la familia Src, moleculas adaptadoras (Shc, Crk, Nck, Grb2) y Ras-GAP. Los dominios SH2/SH3 como dianas para farmacos anticancer se discuten en Smithgall, T. E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34(3) 125-32. Los inhibidores de serina/treonina cinasas, incluyendo bloqueantes de la cascada de MAP cinasa que incluyen bloqueantes de Raf cinasas (rafk), cinasa regulada por mitogeno o extracelular (MEK), y cinasas reguladas extracelulares (ERK); y bloqueantes de miembros de la familia de protema cinasa C, incluyendo bloqueantes de PKC (alfa, beta, gamma, epsilon, mu, lambda, iota, zeta). cinasas de la familia IkB (IKKa, IKKb), cinasas de la familia PKB, miembros de la familia de cinasas akt, y cinasas receptoras de TGF beta. Dichas serina/treonina cinasas e inhibidores de las mismas se describen en Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A., y Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P. A., y Harris, A. L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; Patente de los Estados Unidos n.° 6.268.391; y Martinez-Iacaci, L., et al, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52.

Tambien son interesantes para su uso con los compuestos de la invencion los inhibidores de la senalizacion de Myo-inositol, tales como bloqueantes de fosfolipasas C y analogos de mioinositol. Dichos inhibidores de senales se describen en Powis, G., y Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman y David Kerr, CRC press 1994, Londres.

Otro grupo de inhibidores son inhibidores de vfas de transduccion de senales, tales como inhibidores del oncogen Ras. Dichos inhibidores incluyen inhibidores de farnesiltransferasa, geranil-geranil transferasa, y CAAX proteasas, asf como oligonucleotidos antisentido, ribozimas e inmunoterapia. Se ha demostrado que dichos inhibidores bloquean la activacion de ras en celulas que contienen ras mutante de tipo silvestre, actuando de este modo como agentes antiproliferativos. La inhibicion del oncogen Ras se describe en Scharovsky, O. G., Rozados, V. R., Gervasoni, S. I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8; Ashby, M. N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99-102; y BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3):19-30.

La presente invencion se refiere ademas a un metodo para usar los compuestos o las composiciones farmaceuticas en combinacion con otras estrategias para el tratamiento de tumores, incluyendo la cirugfa, radiacion ionizante, terapia fotodinamica, o implantes, por ejemplo, con corticosteroides, hormonas, o usadas como radiosensibilizantes.

Una de dichas estrategias puede ser, por ejemplo, radioterapia para inhibir el crecimiento celular anormal o tratar el trastorno proliferativo en el mairnfero. Las tecnicas para administrar radioterapia se conocen en la tecnica, y estas tecnicas pueden usarse en la terapia de combinacion descrita en el presente documento. La administracion del compuesto de la invencion en esta terapia combinada puede determinarse tal como se describe en el presente documento.

La radioterapia puede administrarse a traves de uno de varios metodos, o una combinacion de metodos, incluyendo sin limitacion la terapia de haz externo, radioterapia interna, radiacion con implante, radiocirugfa estereotactica, radioterapia sistemica, radioterapia y braquitarapia intersticial permanente o temporal. El termino “braquiterapia”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a la radioterapia que se dispensa mediante un material radiactivo confinado espacialmente insertado en el organismo en o cerca de un tumor u otra localizacion patologica de tejido proliferativo. El termino pretende incluir sin limitacion la exposicion a isotopos radiactivos (por ejemplo, At-211, I-131, I-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32, e isotopos radioactivos de Lu). Las fuentes de radiacion adecuadas para su uso como acondicionador celular de la presente invencion incluyen tanto solidos como lfquidos. A modo de ejemplo no limitante, la fuente de radiacion puede ser un radionuclido, tales como I-125, I-131, Yb-169, Ir-192 como fuente solida, I-125 como fuente solida, u otros radionuclidos que emiten fotones, partfculas beta, radiacion gamma, u otros rayos terapeuticos. El material radiactivo tambien puede ser un fluido formado por cualquier solucion

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de radionuclidos, por ejemplo, una solucion de I-125 o I-131, o puede producirse un fluido radiactivo usando una suspension de un fluido adecuado que contiene pequenas pardculas de radionuclidos solidos, tales como Au-198, Y-90. Ademas, los radionuclidos pueden encontrarse en forma de un gel o de microesferas radiactivas.

Sin estar ligados a ninguna teona, los compuestos de la presente invencion pueden hacer a las celulas mas sensibles al tratamiento con radiacion con el fin de eliminar a dichas celulas y/o inhibir su crecimiento. Por consiguiente, la presente invencion se refiere ademas a compuestos para su uso en un metodo para sensibilizar al tratamiento con radiacion a las celulas anormales en un mairnfero que comprende administrar al mairnfero una cantidad de un primer agente seguida de la administracion de un inhibidor de mTOR de la presente invencion, o una sal, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivado del mismo farmaceuticamente aceptable, siendo dichas cantidades combinadas eficaces para sensibilizar a las celulas anormales al tratamiento con radiacion. La cantidad del compuesto, sal, o solvato en este metodo puede determinarse segun los medios para determinar cantidades eficaces de dichos compuestos descritos en el presente documento.

La terapia fotodinamica incluye terapia que usa determinados agentes qmmicos conocidos como compuestos fotosensibilizantes para tratar o prevenir canceres. Los ejemplos de terapia fotodinamica incluyen el tratamiento con compuestos, tales como, por ejemplo, VISUDYNE y porffmero sodico. Los esteroides angiostaticos incluyen compuestos que bloquean o inhiben la angiogenesis, tal como, por ejemplo, anecortave, triamcinolona, hidrocortisona, 11-a-epihidrocotisol, cortexolona, 17a-hidroxiprogesterona, corticosterona, desoxicorticosterona, testosterona, estrona y dexametasona.

Los implantes que contienen corticosteoides incluyen compuestos, tales como, por ejemplo, fluocinolona y dexametasona. Otros compuestos quimioterapeuticos incluyen, pero sin limitacion, alcaloides de plantas, compuestos y antagonistas hormonales; modificadores de la respuesta biologica, preferentemente, linfocinas o interferones; oligonucleotidos antisentido o derivados de oligonucleotidos; ARNhc o ARNpi; o compuestos miscelaneos o compuestos con otro mecanismo de accion u otro desconocido.

Los compuestos o composiciones farmaceuticas de la presente invencion pueden usarse en combinacion con una cantidad de una o mas sustancias seleccionadas entre agentes anti-angiogenesis, inhibidores de transduccion de senales, y agentes antiproliferativos.

Los agentes anti-angiogenesis, tales como inhibidores de MMP-2 (metaloproteinasa de matriz 2), inhibidores de MMP-9 (metaloproteinasa de matriz 9), e inhibidores de COX-11 (ciclooxigenasa 11), pueden usarse conjuntamente con un inhibidor de la presente invencion y las composiciones farmaceuticas descritas en el presente documento. Los ejemplos de inhibidores de COX-II utiles incluyen CELEBREX™ (alecoxib), valdecoxib, y rofecoxib. Los ejemplos de inhibidores de metaloproteinasas de matriz utiles se describen en los documentos WO 96/33172 (publicado el 24 de octubre de1996), WO 96/27583 (publicado el 7 de marzo de1996), la Solicitud de Patente Europea n.° 97304971.1 (presentada el 8 de julio de 1997), la Solicitud de Patente Europea n.° 99308617.2 (presentada el 29 de octubre de 1999), el documento WO 98/07697 (publicado el 26 de febrero de 1998), el documento WO 98/03516 (publicado el 29 de enero de 1998), el documento Wo 98/34918 (publicado el 13 de agosto de 1998), el documento WO 98/34915 (publicado el 13 de agosto de 1998), el documento WO 98/33768 (publicado el 6 de agosto de 1998), el documento Wo 98/30566 publicado el 16 de julio de 1998), la Publicacion de Patente Europea 606.046 (publicada el 13 de julio de 1994), la Publicacion de Patente Europea 931.788 (publicada el 28 de julio de 1999), el documento WO 90/05719 (publicado el 31 de mayo de 1990), el documento WO 99/52910 (publicado el 21,1999 de octubre de el documento WO 99/52889 (publicado el 21 de octubre de 1999), el documento WO 99/29667 (publicado el 17 de junio de 1999), la Solicitud Internacional PCT n.° PCT/IB98/01113 (presentada el 21 de julio de 1998), la Solicitud de Patente Europea n.° 99302232.1 (presentada el 25 de marzo de 1999), la Solicitud de Patente de Gran Bretana n.° 9912961.1 (presentada el 3 de junio de 1999), la Solicitud Provisional de los Estados Unidos n.° 60/148.464 (presentada el 12 de agosto de 1999), la Patente de los Estados Unidos n.° 5.863.949 (concedida el 26 de enero de 1999), la Patente de los Estados Unidos n.° 5.861.510 (concedida el 19 de enero de 1999), y la Publicacion de Patente Europea 780.386 (publicada en 25 de junio de 1997), todas las cuales se incorporan al presente documento por referencia en su totalidad. En algunas realizaciones, los inhibidores de MMP-2 y MMP-9 tienen poca o ninguna actividad que inhiba a MMP-1, o inhiben de manera selectiva a MMP-2 y/o MMP-9 en relacion a otras metaloproteinasas de matriz (es decir, MAP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12, y MMP-13). Algunos ejemplos espedficos de inhibidores de MMP utiles en la presente invencion son AG-3340, RO 32-3555, y RS 13-0830.

Tambien se describe en el presente documento un metodo y una composicion farmaceutica para tratar una enfermedad cardiovascular en un mairnfero que comprende administrar una cantidad de un primer agente, seguida de la administracion de un inhibidor de mTOR de la presente invencion, o una sal, ester, profarmaco, solvato, hidrato o derivado del mismo farmaceuticamente aceptable, o un derivado marcado isotopicamente del mismo, y, por separado o en combinacion con el primer agente y/o el inhibidor de mTOR, administrando una cantidad de uno o mas agentes terapeuticos utiles para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares.

Los agentes ilustrativos para su uso en aplicaciones para la enfermedad cardiovascular son agentes antitromboticos, por ejemplo, prostaciclina y salicilatos, agentes trombolfticos, por ejemplo, estreptocinasa, urocinasa, activador de plasminogeno tisular (TPA) y complejo activador de plasminogeno-estreptocinasa anisoilado (APSAC), agentes

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antiplaquetarios, por ejemplo, acido acetil salidlico (ASA) y clopidogrel, agentes vasodilatadores, por ejemplo, nitratos, farmacos bloqueantes de los canales de calcio, agentes antiproliferativos, por ejemplo, colchicina y agentes alquilantes, agentes intercalantes, factores moduladores del crecimiento, tales como interleucinas, factor de crecimiento transformante beta y congeneres del factor de crecimiento derivado de plaquetas, anticuerpos monoclonales dirigidos contra factores de crecimiento, agentes antiinflamatorios, tanto esteroideos como no esteroideos, y otros agentes que pueden modular el tono vascular, la funcion, la arterioesclerosis, y la respuesta de curacion a la lesion de un vaso u organo despues de una intervencion. Tambien pueden incluirse antibioticos en las combinaciones o recubrimientos comprendidos por la invencion. Ademas, puede usarse un recubrimiento para efectuar el suministro terapeutico focalmente dentro de la pared del vaso. Al incorporar el principio activo en un polfmero hinchable, el principio activo se liberara tras hincharse el polfmero.

Los medicamentos que pueden administrarse conjuntamente con los compuestos descritos en el presente documento incluyen cualquier farmaco adecuado util suministrado por inhalacion, analgesicos, por ejemplo, codema, dihidromorfina, ergotamina, fentanilo o morfina; preparaciones anginales, por ejemplo, diltiazem; antialergicos, por ejemplo, cromoglicato, cetotifeno o nedocromilo; antiinfecciosos, por ejemplo, cefalosporinas, penicilinas, estreptomicina, sulfonamidas, tetraciclinas o pentamidina; antihistammicos, por ejemplo, metapirileno; antiinflamatorios, por ejemplo, beclometasona, flunisolida, budesonida, tipredano, acetonido de triamcinolona o fluticasona; antitusivos, por ejemplo, noscapina; broncodilatadores, por ejemplo, efedrina, adrenalina, fenoterol, formoterol, isoprenalina, metaproterenol, fenilefrina, fenilpropanolamina, pirbuterol, reproterol, rimiterol, salbutamol, salmeterol, terbutalina, isoetarina, tulobuterol, orciprenalina o

(-)-4-amino-3,5-dicloro-a-[[[6-[2-(2-piridinil)etoxi]hexil]-amino]metil]bencenometanol; diureticos, por ejemplo, amilorida; anticolinergicos, por ejemplo, ipratropio, atropina u oxitropio; hormonas, por ejemplo, cortisona, hidrocortisona o prednisolona; xantinas, por ejemplo, aminofilina, teofilinato de colina, teofilinato de lisina o teofilina; y protemas y peptidos terapeuticos, por ejemplo, insulina o glucagon. Sera evidente para un experto en la materia que, cuando sea apropiado, los medicamentos pueden usarse en forma de sales (por ejemplo, en forma de sales de metales alcalinos o de aminas o como sales de adicion de acido) o como esteres (por ejemplo, esteres de alquilo inferior) o como solvatos (por ejemplo, hidratos) para optimizar la actividad y/o estabilidad del medicamento.

Otros agentes terapeuticos ejemplares utiles para una terapia combinada incluyen, pero sin limitacion, agentes como los descritos anteriormente, radioterapia, antagonistas hormonales, hormonas y sus factores de liberacion, farmacos tiroideos y antitiroideos, estrogenos y progestinas, androgenos, hormona adrenocorticotropica; esteroides adrenocorticales y sus analogos sinteticos; inhibidores de la smtesis y las acciones de las hormonas adrenocorticales, insulina, agentes hipoglucemicos orales, y la farmacologfa del pancreas endocrino, agentes que afectan a la calcificacion y la regeneracion osea; calcio, fosfato, hormona paratiroidea, vitamina D, calcitonina, vitaminas, tales como vitaminas hidrosolubles, complejo de vitamina B, acido ascorbico, vitaminas liposolubles, vitaminas A, K, y E, factores de crecimiento, citocinas, quimiocinas, agonistas y antagonistas del receptor muscarmico; agentes anti-colinesterasa; agentes que actuan en la union neuromuscular y/o los ganglios autonomos; catecolaminas, farmacos simpatomimeticos, y agonistas o antagonistas del receptor adrenergico; y agonistas y antagonistas del receptor de 5-hidroxitriptamina (5-HT, serotonina).

Los agentes terapeuticos tambien pueden incluir agentes para el dolor y la inflamacion, tales como histamina y antagonistas de histamina, bradiquidina y antagonistas de bradiquidina, 5-hidroxitriptamina (serotonina), sustancias lipfdicas que se generan por biotransformacion de los productos de la hidrolisis selectiva de fosfolfpidos de membrana, eicosanoides, prostaglandinas, tromboxanos, leucotrienos, aspirina, agentes anti-inflamatorios no esteroideos, agentes analgesicos-antipireticos, agentes que inhiben la smtesis de prostaglandinas y tromboxanos, inhibidores selectivos de ciclooxigenasa inducible, inhibidores selectivos de ciclooxigenasa inducible-2, autacoides, hormonas paracrinas, somatostatina, gastrina, citocinas que median interacciones implicadas en las respuestas inmunitarias humorales y celulares, autacoides derivados de lfpidos, eicosanoides, agonistas p-adrenergicos, ipratropio, glucocorticoides, metilxantinas, bloqueantes de los canales de sodio, agonistas del receptor de opioides, bloqueadores de los canales de calcio, estabilizantes de membrana e inhibidores de leucotrienos.

Los agentes terapeuticos adicionales contemplados en el presente documento incluyen diureticos, vasopresina, agentes que afectan a la conservacion renal del agua, renina, angiotensina, agentes utiles en el tratamiento de la isquemia miocardica, agentes antihipertensivos, inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, antagonistas del receptor de p-adrenergico, agentes para el tratamiento de la hipercolesterolemia y agentes para el tratamiento de la dislipidemia.

Otros agentes terapeuticos previstos incluyen farmacos usados para el control de la acidez gastrica, agentes para el tratamiento de las ulceras pepticas, agentes para el tratamiento de la enfermedad por reflujo gastroesofagico, agentes procineticos, antiemeticos, agentes usados en el smdrome de intestino irritable, agentes usados para la diarrea, agentes usados para el estrenimiento, agentes usados para la enfermedad inflamatoria intestinal, agentes usados para la enfermedad biliar, agentes usados para la pancreopatfa, Agentes terapeuticos usados para tratar infecciones protozoarias, farmacos usados para tratar la malaria, amebiasis, giardiasis, tricomoniasis, tripanosomiasis, y/o leishmaniasis, y/o farmacos usados en la quimioterapia de helmintiasis. Otros agentes terapeuticos incluyen agentes antimicrobianos, sulfonamidas, trimetoprim/sulfametoxazol quinolonas, y agentes para infecciones del tracto urinario, penicilinas, cefalosporinas, y otros, antibioticos p-lactamicos, un agente que comprende un aminoglucosido,

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inhibidores de la smtesis de protemas, farmacos usados en la quimioterapia de tuberculosis, enfermedad por el complejo Mycobacterium avium, y lepra, agentes antifungicos, agentes antivirales incluyendo agentes no retrovirales y agentes retrovirales,

Los ejemplos de anticuerpos terapeuticos que pueden combinarse con un compuesto de interes incluyen, pero no se limitan a anticuerpos antirreceptor de tirosina-cinasa (cetuximab, panitumumab, trastuzumab), anticuerpos anti-CD20 (rituximab, tositumomab), y otros anticuerpos tales como alemtuzumab, bevacizumab, y gemtuzumab.

Ademas, los agentes terapeuticos usados para la inmunomodulacion, tales como inmunomoduladores, agentes inmunosupresores, tolerogenos, e inmunoestimuladores estan previstos por los metodos del presente documento. Ademas, agentes terapeuticos que actuan sobre la sangre y los organos formadores de sangre, agentes hematopoyeticos, factores de crecimiento, minerales, y vitaminas, farmacos anticoagulantes, tromboltticos y antiplaquetarios.

Pueden encontrarse mas agentes terapeuticos que pueden combinarse con un compuesto de interes en Goodman y Gilman “The Pharmacological Basis of Therapeutics”, decima edicion editada por Hardman, Limbird y Gilman o el Physician’s Desk Reference (Vademecum), incorporados ambos al presente documento por referencia en su totalidad.

Los ejemplos y preparaciones proporcionadas mas adelante ilustran y ejemplifican adicionalmente los compuestos de la presente invencion y los metodos para preparar dichos compuestos. Debe entenderse que el alcance de la presente invencion no esta limitado en modo alguno por el alcance de los siguientes ejemplos y preparaciones. En los siguientes ejemplos las moleculas con un unico centro quiral, a menos que se indique otra cosa, existen como una mezcla racemica. Las moleculas con dos o mas centros quirales, a menos que se indique otra cosa, existen como una mezcla de diastereomeros. Pueden obtenerse enantiomeros/diastereomeros individuales por metodos conocidos por los expertos en la tecnica.

Ejemplos

Ejemplo 1: Terapia combinada en un modelo de tumor de raton

Se implantaron en ratones celulas de cancer de endometrio que conteman mutaciones en PTEN y FGFR2. Se agruparon los ratones que teman volumenes tumorales de aproximadamente 150 mm3 por pauta de tratamiento, indicandose el dfa de inicio del tratamiento como el dfa 0. Los ratones de control no recibieron tratamiento. Un grupo de ratones recibio unicamente paclitaxel ("Pac") a 20mg/kg, administrado semanalmente (Q1 W, dfa 0 y dfa 7) por inyeccion intravenosa. Un grupo de ratones recibio unicamente compuesto B ("Comp. B", compuesto 1 de la tabla 1) a 1mg/kg, administrado a diario durante tres dfas (QDx3) por sonda oral, seguido de 4 sin tratamiento, en una pauta repetida semanalmente (dfa 0 y dfa 7). Un grupo recibio tanto 20mg/kg de paclitaxel, como se ha descrito anteriormente, y 1mg/kg de compuesto B, como se ha descrito anteriormente, comenzando la pauta de dosificacion Q1W de paclitaxel y la pauta de QDx3-4off del compuesto B en el mismo dfa (pauta "ST"). Otro grupo recibio tanto 20mg/kg de paclitaxel, como se ha descrito anteriormente, y 1mg/kg de compuesto B, como se ha descrito anteriormente, comenzando la pauta de dosificacion Q1W de paclitaxel el dfa antes de la pauta QDx3-4off del compuesto B (pauta "PRTX"). En la figura 2 se proporcionan diagramas de las dos pautas de dosificacion combinadas. El volumen tumoral se midio periodicamente durante el transcurso de 22 dfas, y los resultados se ilustran en las graficas de la figura 2. La grafica de la izquierda ilustra todos los puntos de datos, mientras que la grafica de la derecha proporciona una vista en aumento de los datos resaltados en la grafica de la izquierda. El compuesto B solo dio como resultado un crecimiento medio retardado del volumen tumoral de aproximadamente 150mm3 a aproximadamente 2400mm3 (aumento del 1600%) en el dfa 22. El paclitaxel solo dio como resultado un aumento medio del volumen tumoral de aproximadamente 150mm3 a aproximadamente 175mm3 (aumento del 17%) en el dfa 22. El paclitaxel en combinacion con el compuesto B en la pauta ST dio como resultado una reduccion media del volumen tumoral de aproximadamente 150mm3 a aproximadamente 100mm3 (reduccion del 33%) en el dfa 22. El paclitaxel en combinacion con el compuesto B en la pauta PRTX dio como resultado una reduccion media del volumen tumoral de aproximadamente 150mm3 a aproximadamente 5mm3 (reduccion del 97%) en el dfa 22. Por lo tanto, ninguno de los agentes individuales fue capaz de reducir el volumen tumoral, y la terapia combinada con la pauta PRTX fue aproximadamente un 290% (2,9 veces) mas eficaz (en terminos relativos) que la terapia combinada con la pauta ST. Los datos ilustran que la combinacion con la pauta ST proporciona resultados terapeuticos mejorados frente a cualquier agente solo. Los datos ilustran ademas una mejora aun mayor en la eficacia terapeutica del tratamiento combinado con la pauta PRTX, demostrando el efecto sinergico de administrar paclitaxel como primer agente antes de cualquier administracion del compuesto B inhibidor de mTORC1/C2, en lugar de una pauta de dosificacion que incluye la administracion simultanea con la primera dosis del primer agente. Sin desear quedar ligados a teona alguna, la sinergia puede ser a causa de suprimir la progresion de una fase del ciclo celular despues de la fase G1 (por ejemplo, G2 y/o M suprimidas por paclitaxel), seguido de la supresion de la progresion de la fse G1 con un inhibidor de mTOR. Como tales, puede esperarse una sinergia similar para combinaciones de administrar otros primeros agentes que suprimen la progresion de una fase del ciclo celular despues de G1 seguido de la administracion de otros inhibidores de mTOR.

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En un ejemplo adicional, se implanto a los ratones celulas de cancer de endometrio como en el caso anterior. Se agruparon los ratones que teman volumenes tumorales de aproximadamente 150 mm3 por pauta de tratamiento, indicandose el d^a de inicio del tratamiento como el dfa 0. Los ratones de control no recibieron tratamiento. Un grupo de ratones recibio unicamente paclitaxel ("Pac") a 20mg/kg, administrado semanalmente (Q1W, dfa 0 y d^a 7) por inyeccion intravenosa. Un grupo de ratones recibio unicamente compuesto B ("Comp. B", compuesto 1 de la tabla 1) a 3mg/kg, administrado semanalmente (Q1W, dfa 0 y dfa 7) por sonda oral. Un grupo recibio tanto 20mg/kg de paclitaxel, como se ha descrito anteriormente, y 3mg/kg de compuesto B, como se ha descrito anteriormente, comenzando la pauta de dosificacion Q1W de paclitaxel y la pauta de QlW del compuesto B en el mismo dfa (pauta "ST"). Otro grupo recibio tanto 20mg/kg de paclitaxel, como se ha descrito anteriormente, y 3mg/kg de compuesto B, como se ha descrito anteriormente, comenzando la pauta de dosificacion Q1W de paclitaxel el dfa antes de la pauta Q1W del compuesto B (pauta "PRTX"). En la figura 3 se proporcionan diagramas de las dos pautas de dosificacion combinadas. El volumen tumoral se midio periodicamente durante el transcurso de 22 dfas, y los resultados se ilustran en las graficas de la figura 3. La grafica de la izquierda ilustra todos los puntos de datos, mientras que la grafica de la derecha proporciona una vista en aumento de las tres graficas inferiores de la grafica de la izquierda. Unicamente el grupo que recibio la terapia combinada con la pauta PRTX experimento una reduccion del volumen tumoral en el dfa 22. Los datos ilustran ademas la mejora de la dosificacion combinada con la pauta PRTX frente a ambos tratamientos combinados con la pauta ST asf como frente a cualquier agente individual. Los resultados de la pauta de dosificacion PRTX en el grupo de ratones es tambien comparable con la pauta de dosificacion PRTX en ratones que reciben la dosis QDx3-4off del grupo de PRTX anterior, lo que indica que al menos en estas condiciones, la dosificacion escalonada de acuerdo con los metodos de la invencion permite una reduccion en el numero de administraciones terapeuticas. Debido a que la grafica de ratones que reciben la dosificacion combinada con la pauta ST indica una eficacia terapeutica reducida en relacion a solo paclitaxel, los datos sugieren ademas que la administracion tanto de paclitaxel como primer agente y el compuesto B como inhibidor de mTOR sustancialmente al mismo tiempo puede interferir con la actividad del primer agente, mientras que el suministro del inhibidor de mTOR despues del primer agente proporciona una sinergia inesperada,

La actividad antitumoral del compuesto B, paclitaxel, carboplatino y la combinacion de compuesto B con paclitaxel y carboplatino se evaluo tambien en ratones desnudos que portaban tumores de carcinoma endometrial pequenos (~150-250 mg) (AN3CA, Hec-1A o Hec-59). El compuesto B se administro por via oral en forma de solucion de la forma indicada. El paclitaxel se administro a 5 mg/kg por via intravenosa a diario durante 5 dfas o a 20 mg/kg, una vez a la semana. El carboplatino se administro a 100mg/kg por via intraperitoneal una vez cada 3 semanas. Los resultados se muestran en las figuras 11-13. Para la figura 12, se recogieron los tumores 2 horas despues de la ultima dosis, y se analizaron los lisados mediante transferencia de Western respecto de los marcadores mostrados.

Ejemplo 2: Ensayos de expresion e inhibicion de mTOR

La inhibicion de mTOR puede medirse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la tecnica o los metodos divulgados a continuacion. Los compuestos descritos en el presente documento y cualquier otro inhibidor de mTOR conocido en la tecnica pueden ensayarse contra mTOR recombinante (Invitrogen) en un ensayo que contiene HEPES 50 mM, pH 7,5, EGTA 1mM, MgCh 10 mM, 2,5 mM, Tween al 0,01%, ATP 10 pM (2,5 pCi de p-32P-ATP), y 3 pg/ml de BSA. Como sustrato, se usa PHAS-1/4EBP1 recombinante de rata (Calbiochem; 2 mg/ml). Las reacciones se detienen mediante la aplicacion puntual sobre nitrocelulosa, que se lavan con NaCl 1 M/acido fosforico al 1 % (aproximadamente 6 veces, 5-10 minutos cada una). Las laminas se secan y la radiactividad se cuantifica mediante generacion de imagenes con fosforo.

Se dispone de otros kits o sistemas comerciales para analizar la actividad de mTOR. Por ejemplo, se puede usar en ensayo LanthaScreen™ Kinase de Invitrogen para analizar los inhibidores de mTOR que se desvelan en el presente documento. Este ensayo es una plataforma FRET resuelta en tiempo que mide la fosforilacion de 4EBP1 marcado por GFP por mTOR cinasa. La reaccion de cinasa se lleva a cabo en una placa de microtitulacion de 384 pocillos de color blanco. El volumen total de reaccion es de 20 pl por pocillo y la composicion del tampon de reaccion es HEPES 50 mM, pH 7,5, Polisorbato 20 al 0,01% EGTA 1mM, MnCh 10 mM, y DTT 2 mM. En la primera etapa, cada pocillo recibe 2 pl de compuesto de ensayo en dimetilformamida al 20 % lo que da como resultado una concentracion final de DMSO del 2 %. A continuacion, se anaden aproximadamente 8 pl de mTOR diluidos en tampon de reaccion por pocillo para una concentracion final de 60ng/ml. Para comenzar la reaccion, se anaden 10 pl de una mezcla de ATP/GFP-4EBP1 (diluida en tampon de reaccion) por pocillo hasta una concentracion final de ATP 10pM y GFP-4EBP1 0,5 pM. La placa se sella y se incuba durante 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se detiene anadiendo 10 pl por pocillo de una mezcla de anticuerpo Tb-anti-pT46 4EBP1/EDTA (diluida en tampon de TR-FRET) hasta una concentracion final de 1,3 nM de anticuerpo y EDTA 6,7 mM. La placa se sella, se incuba durante 1 h a temperatura ambiente, y despues se lee en un lector de placas ajustado para LanthaScreen™ TR-FRET. Se analizaron los datos y se generaron las CI50 usando GraphPad Prism 5.

Ejemplo 3: Ensayo de activacion y proliferacion de linfocitos B

La inhibicion de la activacion y proliferacion de celulas B mediante la administracion de un primer agente seguido de un inhibidor de mTOR, se determina segun procedimientos estandar conocidos en la tecnica. Por ejemplo, se establece un ensayo de proliferacion celular in vitro que determina la actividad metabolica de las celulas vivas. El ensayo se

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realiza en una placa de microtitulacion de 96 pocillos usando reduccion de Alamar Blue. Se purifican linfocitos B esplenicos de Balb/c sobre un gradiente de Ficoll-Paque™ PLUS mediante separacion celular magnetica usando un kit de aislamiento celular MACS B cell Isolation Kit (Miltenyi). Las celulas se siembran en 90 pl a 50.000 celulas/pocillo en medio de linfocitos B (RPMI + SBF 10% + Penn/Strep + BME 50 pM + HEPES 5 mM). Se diluye un compuesto divulgado en el presente documento en medio de linfocitos B y se anade en un volumen de 10 pl. Las placas se incuban durante 30 min a 37°C y CO2 al 5% (concentracion final de DMSO del 0,2%). Esta etapa de incubacion puede repetirse para la adicion de un segundo agente, tal como un inhibidor de mTOR. Despues, se anaden 50 pl de coctel de estimulacion de celulas B que contiene 10 pg/ml de LPS o 5 pg/ml de F(ab')2 de burro anti-IgM de raton mas 2 ng/ml de IL-4 de raton recombinante en medio para linfocitos B. Las placas se incuban durante 72 horas a 37°C y CO2 al 5%. Se anade un volumen de 15pl de reactivo Alamar Blue a cada pocillo y se incuban las placas durante 5 horas a 37C y CO2 al 5%. La fluorescencia del Alamar Blue se lee a 560Ex/590Em, y se calculan los valores de CI50 o CE50 usando GraphPad Prism 5.

Ejemplo 4: Ensayo de proliferacion de lmea celular de tumor

La inhibicion de la proliferacion de lmeas celulares tumorales por los presentes metodos se determina segun procedimientos estandar conocidos en la tecnica. Por ejemplo, puede llevarse a cabo un ensayo de proliferacion celular in vitro para medir la actividad metabolica de las celulas vivas. El ensayo se realiza en una placa de microtitulacion de 96 pocillos usando reduccion de Alamar Blue. Se obtienen lmeas celulares tumorales humanas de la ATCC (por ejemplo, MCF7, U-87 MG, MDA-MB-468, PC-3), se cultivan hasta confluencia en matraces T75, se tripsinizan con tripsina al 0,25%, se lavan una vez con medio de celulas de tumor (DMEM + SBF al 10%), y se siembran en 90 pl a 5.000 celulas/pocillo en medio de celulas de tumor. Se diluye un compuesto divulgado en el presente documento en medio de celulas tumorales y se anade en un volumen de 10 pl. Las placas se incuban durante 72 horas a 37°C y CO2 al 5%. Despues de la adicion del primer compuesto, tal como durante este periodo posterior de 72 horas (por ejemplo, tras 24 horas), puede anadirse de manera similar un segundo agente, tal como un inhibidor de mTOR, a las celulas. Se anade un volumen de 10 pl de reactivo Alamar Blue a cada pocillo y se incuban las placas durante 3 horas a 37C y CO2 al 5%. La fluorescencia del Alamar Blue se lee a 560Ex/590Em, y se calculan los valores de CI50 usando GraphPad Prism 5.

Ejemplo 5: Actividad antitumoral in vivo

La inhibicion del crecimiento tumoral mediante el presente metodo puede determinarse mediante los siguientes modelos de tumor murinos.

Modelos de tumor refractarios a paclitaxel

1. Modelo de carcinoma ovarico procedente de clmica

Este modelo tumoral se establece a partir de una biopsia tumoral de un paciente de cancer de ovario. Se toma la biopsia tumoral de la paciente.

Los compuestos descritos en el presente documento se administran a ratones desnudos que portan los tumores manipulados, administrandose paclitaxel semanalmente, y administrandose un inhibidor de mTOR 1 dfa despues de cada administracion de paclitaxel.

2. Xenoinjerto de carcinoma de ovario humano A2780Tax (con tubulina mutada).

A2780Tax es un modelo de carcinoma de ovario humano resistente al paclitaxel. Procede de la lmea A2780 parental sensible mediante incubacion conjunta de las celulas con paclitaxel y verapamilo, un agente reversor de MDR. Se ha demostrado que su mecanismo de resistencia no esta relacionado con MDR y se atribuye a una mutacion en el gen que codifica la protema beta-tubulina.

Los compuestos descritos en el presente documento se administran a ratones desnudos que portan los tumores manipulados, administrandose paclitaxel semanalmente, y administrandose un inhibidor de mTOR 1 dfa despues de cada administracion de paclitaxel.

3. Xenoinjerto de carcinoma de colon humano HCT 116/VM46 (resistente a multiples farmacos).

HCT116/VM46 es un carcinoma de colon resistente MDR desarrollado a partir de la lmea parental HCT116 sensible. In vivo, cultivado en ratones desnudos, HCT116/VM46 ha demostrado consistentemente una alta resistencia al paclitaxel.

Los compuestos descritos en el presente documento se administran a ratones desnudos que portan los tumores manipulados, administrandose paclitaxel semanalmente, y administrandose un inhibidor de mTOR 1 dfa despues de cada administracion de paclitaxel.

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5. Modelo de sarcoma murino M5076

M5076 es un fibrosarcoma de raton que es inherentemente refractario al paclitaxel in vivo.

Los compuestos descritos en el presente documento se administran a ratones desnudos que portan los tumores manipulados, administrandose paclitaxel semanalmente, y administrandose un inhibidor de mTOR 1 d^a despues de cada administracion de paclitaxel.

El tratamiento mediante los metodos de la invencion puede usarse en combinacion con otros agentes terapeuticos in vivo en los xenoinjertos de carcinoma de colon humano resistente a multiples farmacos HCT/VM46 o cualquier otro modelo conocido en la tecnica, incluyendo aquellos descritos en el presente documento.

Se espera que los resultados muestren que el tratamiento con un primer agente, por ejemplo, paclitaxel, seguido del tratamiento con un inhibidor de mTOR, sea un potente regimen terapeutico para el tratamiento del crecimiento tumoral in vivo en las condiciones ensayadas.

Ejemplo 6: Ensayo de cinasa Akt

La inhibicion de Akt mediante el presente metodo puede determinarse mediante el siguiente ensayo. Las celulas que comprenden componentes de la via Akt/mTOR, incluyendo, pero sin limitacion, mioblastos L6, celulas B-ALL, linfocitos B, linfocitos T, celulas de leucemia, celulas de medula osea, celulas transducidas con p190, celulas positivas al cromosoma Philadelphia (Ph+), y fibroblastos embrionarios de raton, se cultivan de forma tfpica en medio de cultivo celular tal como DMEm complementado con suero bovino fetal y/o antibioticos, y se cultivan hasta confluencia.

Se priva de suero a las celulas durante una noche y se incuban con el primer agente seguido de un inhibidor de mTOR durante aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 1 hora antes de la estimulacion con insulina (por ejemplo, 100 nM) durante aproximadamente 1 minuto hasta aproximadamente 1 hora. Las celulas se lisan mediante raspado en tampon de lisis enfriado en hielo que contiene detergentes tales como dodecilsulfato e inhibidores de proteasa (por ejemplo, PMSF). Tras poner en contacto las celulas con el tampon de lisis, la solucion se somete brevemente a ultrasonido, se aclara mediante centrifugacion, se resuelve mediante SDS-PAGE, se transfieren a nitrocelulosa o PVDF y se inmunotransfieren usando anticuerpos para fosfo-Akt S473, fosfo-Akt T308, Akt, y p-actina (Cell Signaling Technologies).

Ejemplo 7: Senalizacion de cinasa en sangre

La senalizacion PI3K/ Akt /mTOR se mide en celulas sangumeas usando el metodo PhosFlow (Methods Enzymol. 2007;434:131-54). La ventaja de este metodo es que es por naturaleza un ensayo de celulas individuales, de tal forma que puede detectarse heterogeneidad celular en lugar de medias de poblacion. Esto permite la distincion concurrente de estados de senalizacion en diferentes poblaciones definidas por otros marcadores. Phosphoflow tambien es altamente cuantitativo. Los esplenocitos no fraccionados, o las celulas mononucleares de sangre periferica se estimulan con anti-CD3 para iniciar la senalizacion del receptor de celulas T. Despues, se fijan las celulas y se tinen respecto de marcadores superficiales y fosfoprotemas intracelulares.

De manera similar, se incuban alfcuotas de sangre total durante 15 minutos con vehfculo (por ejemplo, DMSO al 0,1%) o inhibidores de cinasa a diversas concentraciones, antes de la adicion de estfmulos para reticular el receptor de celulas T (TCR) (anti-CD3 con anticuerpo secundario) o el receptor de celulas B (BCR) usando anticuerpo anti-cadena ligera kappa (fragmentos Fab'2). Despues de aproximadamente 5 y 15 minutos, las muestras se fijan (por ejemplo, con paraformaldefndo fno al 4%) y se usan para el Phosphoflow. Se usa tincion de superficie para distinguir los linfocitos T y B usando anticuerpos dirigidos contra marcadores de la superficie celular que se conocen en la tecnica. Despues, se mide el nivel de fosforilacion de sustratos de cinasa, tales como Akt y S6 incubando las celulas fijadas con anticuerpos marcados espedficos para las isoformas fosforiladas de estas protemas. Despues, se analiza la poblacion de celulas por citometna de flujo.

Ejemplo 8: Ensayo de formacion de colonias

Se siembran celulas de medula osea murinas recientemente transformadas con un retrovirus p190 BCR-Abl (citadas en el presente documento celulas transducidas con p190), en presencia de diversas combinaciones de farmaco en medio de metilcelulosa M3630 durante aproximadamente 7 dfas con IL-7 humana recombinante en suero a aproximadamente el 30%, y se cuenta mediante examen visual el numero de colonias formadas en un microscopio.

Como alternativa, se obtienen celulas mononucleares humanas de sangre periferica a partir de pacientes positivos y negativos para el cromosoma Filadelfia (Ph+) y (Ph-) en el momento del diagnostico inicial o la recafda. Se afslan celulas vivas y se complementan con progenitores CD19+ y CD34+ de celulas B. Despues del cultivo lfquido durante una noche, las celulas se siembran en methocult GF+ H4435, Stem Cell Tehcnologies) complementado con citocinas (IL-3, IL-6, IL-7, G-CSF, GM-CSF, CF, ligando Flt3, y eritropoyetina) y se anaden a los cultivos diversas concentraciones de agentes quimioterapeuticos conocidos, seguido en un momento posterior (por ejemplo, 24 horas)

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de la adicion de un inhibidor de mTOR. Las colonias se cuentan mediante microscop^a 12-14 dfas mas tarde. Este metodo puede usarse para analizar la evidencia de actividad aditiva o sinergica. Se espera que los resultados demuestren que el tratamiento ordenado usando el primer agente y un inhibidor de mTOR sea eficaz para inhibir la formacion de colonias.

Ejemplo 9: Efecto in vivo de los inhibidores de cinasa sobre las celulas leucemicas

Se irradia de forma letal a partir de una fuente y a ratones hembra receptoras en dos dosis separadas por alrededor de 4 h, aproximadamente con 5Gy cada una. Aproximadamente 1 h despues de la segunda dosis de radiacion, se inyecta a los ratones por via intravenosa alrededor de 1 x 106 celulas leucemicas (por ejemplo, celulas humanas o murinas Ph+, o celulas de medula osea transducidas con p190). Estas celulas se administran conjuntamente con una dosis radioprotectora de aproximadamente 5 x 106 celulas de medula osea normal de un raton donante de 3-5 semanas de edad. Se administra antibiotico a los receptores en el agua y se les controla a diario. Se eutanasia a ratones que se ponen enfermos despues de alrededor de 14 dfas y los organos linfoides se recogen para su analisis. El tratamiento con un primer agente, tal como paclitaxel, se administra semanalmente, comenzando aproximadamente diez dfas despues de la inyeccion con celulas leucemicas y continua a diario hasta que los ratones se ponen enfermos o hasta un maximo de aproximadamente 15 dfas postrasplante. El tratamiento con inhibidor de mTOR se administra comenzando en uno o mas del dfa 10, 11, y 12, y se repite semanalmente. Por ejemplo, algunos ratones reciben tanto el primer agente como el inhibidor de mTOR en el dfa 10, con tratamientos adicionales con inhibidor de mTOR en los dfas 11 y 12, repitiendose el ciclo comenzando en el dfa 17. Algunos ratones reciben unicamente el primer agente en el dfa 10, y el inhibidor de mTOR en el dfa 11, repitiendose el ciclo semanalmente. Algunos ratones reciben unicamente el primer agente o el inhibidor de mTOR, segun una pauta coincidente con la de ratones que reciben terapia combinada, para determinar un efecto sinergico. El inhibidor se administra por sonda oral.

Se recogen celulas de sangre periferica aproximadamente en el dfa 10 (pretratamiento) y en la eutanasia (postratamiento), se ponen en contacto con anticuerpos anti-hCD4 marcados y se cuentan mediante citometna de flujo. Mediante el tratamiento adicional con agentes quimioterapeuticos adicionales, tambien puede usarse este metodo para demostrar un efecto sinergico de las combinaciones con agentes quimioterapeuticos adicionales conocidos. La sinergia puede demostrarse por una reduccion significativa de los recuentos de celulas sangumeas leucemicas en comparacion con el tratamiento con cualquiera de los compuestos (por ejemplo, paclitaxel, inhibidor de mTOR, Gleevec) solos o en las condiciones analizadas.

Ejemplo 10: Ensayo murino de trasplante de medula osea

Se irradia de forma letal a partir de una fuente y a ratones hembra receptoras. Alrededor de 1 h despues de la segunda dosis de radiacion, se inyecta a los ratones aproximadamente 1x106 celulas leucemicas de pases tempranos de cultivos transducidos con p190 (por ejemplo, como se describe en Cancer Genet Cytogenet. agosto de 2005, 161(1):51-6). Estas celulas se administran conjuntamente con una dosis radioprotectora de aproximadamente 5 x 106 celulas de medula osea normal de un raton donante de 3-5 semanas de edad. Se administra antibiotico a los receptores en el agua y se les controla a diario. Se eutanasia a ratones que se ponen enfermos despues de alrededor de 14 dfas y los organos linfoides se recogen para citometna de flujo y/o enriquecimiento magnetico. El tratamiento comienza aproximadamente en el dfa 10 y continua hasta que los ratones se ponen enfermos, o despues de un maximo de alrededor de 35 dfas postrasplante. El tratamiento con un primer agente, tal como paclitaxel, se administra semanalmente, comenzando aproximadamente en el dfa 10. El tratamiento con inhibidor de mTOR se administra comenzando en uno o mas del dfa 10, 11, 12, y 13, y se repite semanalmente. Por ejemplo, algunos ratones reciben tanto el primer agente como el inhibidor de mTOR en el dfa 10, con tratamientos adicionales solo con inhibidor de mTOR en los dfas 11 y 12, repitiendose el ciclo comenzando en el dfa 17. Algunos ratones reciben unicamente el primer agente en el dfa 10, y solo el inhibidor de mTOR en los dfas 11, 12, y 13, repitiendose el ciclo semanalmente. Algunos ratones reciben tanto el primer agente como el inhibidor de mTOR en el dfa 10, repetido semanalmente comenzando en el dfa 17. Algunos ratones reciben unicamente el primer agente en el dfa 10, seguido solo del inhibidor de mTOR en el dfa 11, repitiendose el ciclo semanalmente comenzando en el dfa 17. Algunos ratones reciben unicamente el primer agente o el inhibidor de mTOR, segun una pauta coincidente con la de ratones que reciben terapia combinada, para determinar el efecto sinergico. Los inhibidores de mTOR se administran por sonda oral (p.o.). En un experimento piloto se identifica una dosis de un primer agente que no es curativa pero retrasa el comienzo de la leucemia alrededor de una semana o menos; los controles se tratan con vetuculo o se tratan con el primer agente, que previamente se ha demostrado que retrasa pero no cura la leucemogenesis en este modelo (por ejemplo, imatinib a alrededor de 70 mg/kg dos veces al dfa). Para la primera fase, se usan celulas p190 que expresan eGFP, y el analisis postmortem se limita a la enumeracion del porcentaje de celulas leucemicas en la medula osea, el tugado y el ganglio linfatico (GL) mediante citometna de flujo. En la segunda fase, Las celulas p190 que expresan una forma sin cola de CD4 humano se usan y el analisis postmortem incluye clasificacion magnetica de celulas hCD4+ del bazo seguido de analisis de inmunotransferencia de criterios de valoracion clave de la senalizacion: pAKT-T308 y S473; pS6 y p4EBP-1. Como controles para la deteccion por inmunotransferencia, las celulas clasificadas se incuban en presencia o ausencia de inhibidores de cinasa de los inhibidores de la presente divulgacion antes de la lisis. Opcionalmente, se usa "PhosFlow" para detectar p Akt-S473 y pS6-S235/236 en celulas clasificadas como hCD4-gated sin clasificacion previa. Estos estudios de senalizacion son particularmente utiles si, por ejemplo, los ratones tratados con farmaco no han desarrollado leucemia clmica en el punto temporal del dfa 35. Se generan curvas de supervivencia de

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Kaplan-Meier y se efectua el analisis estad^stico de acuerdo con metodos conocidos en la tecnica. Los resultados de las celulas p190 se analizan por separado asf como de manera acumulativa.

Se obtienen muestras de sangre periferica (100-200pl) semanalmente de todos los ratones, comenzando en el dfa 10 inmediatamente antes de comenzar el tratamiento. Se usa plasma para determinar las concentraciones de farmaco, y las celulas se analizan respecto de marcadores de leucemia (eGFP o hCD4) y biomarcadores de senalizacion, tal como se describe en el presente documento.

Este ensayo general conocido en la tecnica puede usarse para establecer que el presente metodo es eficaz para inhibir la proliferacion de celulas leucemicas.

Ejemplo 11: Administracion del primer agente de la presente invencion seguida de un inhibidor de mTOR para la inhibicion del crecimiento tumoral

Pueden usarse las siguientes celulas y modelos animales para establecer que el presente metodo es eficaz para inhibir el crecimiento de celulas tumorales.

Lineas celulares

Las lineas celulares de interes (A549, U87, ZR-75-1 y 786-O) se obtienen de la American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Las celulas se someten a proliferacion y se crioconservan en un pase temprano (por ejemplo, pase 3). Se usa una alfcuota para proliferacion adicional para obtener suficientes celulas para un estudio TGI (aproximadamente en el pase 9).

Animales

Los ratones hembra atfmicos desnudos se suministran por Harlan. Los ratones se reciben a las 4 a 6 semanas de edad. Se aclimata a todos los ratones durante aproximadamente un dfa a dos semanas antes de su manipulacion. Los ratones se alojan en jaulas de microaislamiento y se mantienen en condiciones espedficas libres de patogenos. Se alimenta a los ratones con comida para raton irradiada y se les proporciona agua autoclavada libremente.

Modelo de xenoinjerto de tumor

Se inocula a los ratones por via subcutanea en el lado derecho con 0,01 a 0,5 ml de celulas tumorales (aproximadamente 1,0 x 105 a 1,0 x 108 celulas/raton). De cinco a 10 dfas despues de la inoculacion, se miden los tumores usando calibres y se calcula el peso tumoral, por ejemplo, usando el programa informatico para estudios animales, tal como Study Director V.1.6.70 (Study Log). Los ratones con tamanos tumorales de aproximadamente 120 mg se emparejan en grupos deseados usando Study Director (Dfa 1). Los pesos corporales se registran cuando los ratones se emparejan. Se registran el volumen tumoral y las medidas de peso corporal de una a cuatro veces a la semana y se efectuan observaciones macroscopicas al menos una vez al dfa. En el dfa 1, se administran los compuestos de la presente invencion y compuestos de referencia, asf como el control de vehfculo mediante sonda oral o i.v., segun se indique, tal como segun una pauta descrita en el ejemplo 9. En el ultimo dfa del experimento, se sacrifica a los ratones y se recogen sus tumores 1-4 horas despues de la dosis final. Los tumores se extirpan y se cortan en dos secciones. Se fija un tercio del tumor en formalina y se incluye en bloques de parafina y los restantes dos tercios del tumor se congelan inmediatamente y se almacenan a -80°C.

Datos y analisis estadisticos

La inhibicion del crecimiento tumoral media (TGI) se calcula utilizando la siguiente formula:

1 jfTrat. (final) •— rat. (dia 1) J

tgi =[i-- 4l ( );]xio(y/o

Control (final!-^Control ld'a 1>

Los tumores que retroceden respecto del tamano inicial del dfa 1 se eliminan de los calculos. La reduccion tumoral individual (TS) se calcula usando la formula a continuacion para tumores que muestran regresion en relacion al peso tumoral del dfa 1. Se calcula y comunica la reduccion tumoral media de cada grupo.

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El modelo puede emplearse para mostrar si los compuestos de la presente invencion pueden inhibir el crecimiento de celulas tumorales, tal como el crecimiento de celulas de carcinoma renal, el crecimiento de celulas de cancer de mama, el crecimiento de celulas de cancer de pulmon, o el crecimiento de celulas de glioblastoma en las condiciones ensayadas.

Ejemplo 12: Inhibicion de la via de PI3K y proliferacion de celulas tumorales con mutacion de PI3Ka

Las celulas que comprenden una o mas mutaciones en PI3Ka, incluyendo, pero sin limitacion, celulas de cancer de mama (por ejemplo, MDA-MB-361, T47D, SKOV-3), y celulas que comprenden una o mas mutaciones en PTEN incluyendo, pero sin limitacion, celulas de cancer de prostata (por ejemplo, PC3), se cultivan de forma tfpica en medio de cultivo celular tal como DMEM complementado con suero bovino fetal y/o antibioticos, y se cultivan hasta confluencia. Despues, se tratan las celulas con varias concentraciones de compuesto de ensayo durante aproximadamente 2 horas y posteriormente se lisan en tampon de lisis celular. Los lisados se someten a SDS-PAGE seguido de analisis por transferencia de Western para detectar los marcadores de senalizacion aguas abajo, incluyendo, pero sin limitacion, pAKT (S473), pAKT (T308), pS6, y p4E-BP1. El grado de proliferacion (e inhibicion de la proliferacion) tambien puede medirse para celulas a varias dosis de compuesto de la presente invencion, tal como compuesto B (compuesto 1 de la tabla 1). Puede usarse p-actina como protema constitutiva para determinar la carga adecuada. La figura 5 muestra una transferencia de Western que ilustra la inhibicion diferencial de la fosforilacion de Akt en la serina 473 frente a la treonina 308 por el compuesto B (panel superior) en un modelo de PC3. Tambien se muestra la comparacion de la inhibicion de la fosforilacion de Akt para un pan-inhibidor de PI3K frente al compuesto B en un modelo de SKOV-3. Ejemplo 13: Inhibicion de la angiogenesis in vitro

Puede usarse el siguiente ensayo para determinar que el presente metodo es eficaz para inhibir la angiogenesis. Puede medirse la capacidad angiogenica in vitro usando una lmea celular endotelial, tal como celulas endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC). El ensayo se lleva a cabo de acuerdo con las instrucciones del kit, en presencia o ausencia de compuesto. Brevemente, se aplica una matriz de gel a una superficie de cultivo celular, se anaden las celulas a la superficie cubierta por la matriz junto con factores de crecimiento, recibiendo algunas muestras un compuesto inhibidor, las celulas se incuban a 37°C y CO2 al 5% durante un tiempo suficiente para que las muestras de control (sin compuesto anadido) formen estructuras tubulares (tal como durante una noche), las celulas se tinen usando un colorante permeable (por ejemplo, calcema), y se visualizan las celulas para identificar el grado de formacion de tubos. Cualquier reduccion en la formacion de tubos en relacion a las celulas de control no inhibidas es indicativa de inhibicion angiogenica. Basandose en las dosis ensayadas y en el correspondiente grado de inhibicion de formacion de tubos, se calculan los valores de CI50 para la formacion de tubos. Pueden medirse los valores de CI50 para la viabilidad celular usando cualquier numero de metodos conocidos en la tecnica, tales como metodos de tincion que distinguen celulas vivas de muertas (por ejemplo, el colorante de viabilidad celular verde Image-iT DEAD, disponible comercialmente de Invitrogen).

Ejemplo 14: Analisis del ciclo celular

Se uso reactivo de ciclo celular Guava para tenir celulas despues de 48 horas de cultivo y despues se analizaron las celulas en una maquina FACS GUAVA EasyCyte. Los resultados se analizaron usando el programa informatico Guava Cytosoft 5.2 y se muestran en las figuras 8 y 10.

Ejemplo 15: Estudios de mdice de combinacion

Se aplico un analisis de mediana de efecto para determinar la sinergia, el antagonismo, o la aditividad del compuesto B cuando se combina con taxol en lmeas celulares endometriales. Se determino el mdice de combinacion (IC) usando la ecuacion de Chou/Talalay. Se determinaron las CI50 para cada compuesto individual en un ensayo CellTiter-Glo de 72 h. Para los ensayos de combinacion, se usaron los farmacos a su relacion equipotente (por ejemplo, a la relacion de sus CI50). Se uso el programa informatico CalcuSyn (de Biosoft) para el analisis del efecto de la dosis. Los resultados se muestran en la Figura 7.

Aunque se han mostrado y descrito en el presente documento realizaciones preferidas de la presente invencion, sera evidente para los expertos en la materia que dichas realizaciones se proporcionan solo a modo de ejemplo. Numerosas variaciones, cambios y sustituciones seran evidentes para los expertos en la materia sin apartarse de la invencion. Debe entenderse que pueden emplearse varias alternativas a las realizaciones de la invencion descrita en el presente documento en la practica de la invencion. Se pretende que las siguientes reivindicaciones definan el alcance de la invencion y que mediante estas queden cubiertos los metodos y estructuras dentro del alcance de estas reivindicaciones y sus equivalentes.

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   REIVINDICACIONES

   1. Una combinacion de un primer agente y un inhibidor de mTOR para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo en un sujeto que lo necesita que comprende administrar al sujeto dicho primer agente seguido de la administracion de dicho inhibidor de mTOR, en el que dicho primer agente es paclitaxel, en el que dicho inhibidor de mTOR es un compuesto de formula I-C1a:

   imagen1

   o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo en el que:

   E2 es -H;

   Xi y X2 sean N;

   R1 es -L-alquilo C1-10,

   L-cicloalquilo C3.8, -L-alquilheterociclilo C1.10, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales esta

   sin sustituir o sustituido con uno o mas R L esta ausente, -(C=O)-, -C(=O)O

   inde

   3 > < 31 < 3 1-C32=O)N(R33-

   R3 es hidrogeno, -OH, -OR31, -NR31R32, -C(O)R31

   endientes S

   ■ S(O)- -S(O)2-, -S(O)2N(R31)-, o ■

   -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35, arilo, heteroarilo, alquilo C1.4,

   -N(R31)-

   alquilo C1.10, cicloalquilo C3-8, o heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo o heteroarilo esta sin sustituir o esta sustituido independientemente con uno o mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo: heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3, -OR31, -NR31R32 -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35, -NO2, -CN, -S(O)0-2R31, -SO2NR31R32, -SO2NR34R35 -NR31C(=O)R32, -NR31C(=O)OR32, NR31C(=O)NR32R33, -NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31, -C(=O)SR31

   -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, -NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, -OC(=O)NR31R32

   -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o-SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo cicloalquilo, o heterociclilo esta sin sustituir o sustituido con uno mas alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo

   -C(O)R31, -CO2R3

   cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo -O-arilo, -NR31R32

   -(W2)k- es -NH-, -N(H)C(O)- o -N(H)S(O)2-;

   -NR34R35,

   heteroarilalquilo, halo, -OH, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32;

   -R3

   -CF3, -OCF3, -OR3

   R2 es hidrogeno, halogeno, -OR31, -NR31R

   -SO2NR34R35,

   -NR34R35,

   -C(=O)NR31R32,

   -C(=O)NR34R35,

   . -C(O)R31, -CO2R

   S(O)0-2R31, -SO2NR31R^2, -SO2NR34R35, arilo bidclico, arilo monodclico sustituido, heteroarilo, alquilo C1-10, cicloalquilo C3-8, alquil C1-10-cicloalquilo C3-8, cicloalquil C3.8-alquilo-C1.10, cicloalquil C3-8-alquenilo C2-10, cicloalquil C3-8-alquinilo C2-10, alquil C2-10-arilo monodclico, monocicloaril-alquilo C2-10, alquil C1_10bicicloarilo, bicicloaril-alquilo C1-10, alquilarilo C1-10 sustituido, aril sustituido-alquilo C1-10, alquil C1-10 heteroarilo, alquil C1-10 heterociclilo, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, alquenil C2-10 arilo, alquenil C2-10 heteroarilo, alquenil C2-10 heteroalquilo, alquenil C2-10 heterociclilo, alquinil C2-10 arilo, alquinil C2-10 heteroarilo, alquinil C2-10 heteroalquilo, alquinil C2-10 heterociclilo, alquenil C2-10-cicloalquilo C3--8, alquinil C2-10-cicloalquenilo C3-8, alcoxi C1-10 alquilo C1-10, alcoxi C1-10 alquenilo C2-10, alcoxi C1-10 alquinilo C2-10, heterociclilo, heterociclil-alquilo C1-10, heterociclil-alquenilo C2-10, heterociciclil-alquinilo C2-10, aril-alquenilo C2-10, aril-alquinilo C2-10, aril-heterociclilo, heteroaril-alquilo C1-10, heteroaril-alquenilo C2-10, heteroaril-alquinilo C2-10, heteroaril-cicloalquilo C3-8, heteroaril-heteroalquilo, o heteroaril-heterociclilo, en el que cada uno de dichos restos arilo bidclico o heteroarilo esta sin sustituir, o en el que cada uno de arilo bidclico, resto de heteroarilo o resto de arilo monodclico esta sustituido independientemente con uno o mas halo, -OH, -R , -CF3 -OCF3, -OR31, NR31R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR31R32, -C(=O)NR34R35 -NO2, -CN, -S(O)0-2R31 -SO2NR31R32, -SO2NR34R35, -NR31C(=O)R32, NR31C(=O)OR32, NR31C(=O)NR32R33, NR31S(O)0-2R32, -C(=S)OR31 -C(=O)SR31, -NR31C(=NR32)NR33R32, -NR31C(=NR32)OR33, -NR31C(=NR32)SR33, -OC(=O)OR33, OC(=O)NR31R32 -OC(=O)SR31, -SC(=O)OR31, -P(O)OR31OR32, o-SC(=O)NR31R32, y en el que cada uno de dichos restos alquilo cicloalquilo, heterociclilo, o heteroalquilo esta sin sustituir o sustituido cono uno o mas halo, -OH, -R31, -CF3, -OCF3 -OR31, -O-arilo, -NR31 R32, -NR34R35, -C(O)R31, -CO2R31, -C(=O)NR34R35, o -C(=O)NR31R32;

   R31, R32, y R33, en cada caso, son independientemente H o alquilo C1-10, en el que el alquilo C1-10 esta sin sustituir; y R34 y R35 en -NR34R35, -C(=O)NR34R35, o -SO2NR34R35, se toman conjuntamente con el atomo de nitrogeno al que estan unidos para formar un anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros; en el que dicho anillo esta independientemente sin sustituir o esta sustituido por uno o mas -NR31R32, hidroxilo, halogeno, oxo, arilo, heteroarilo, alquilo C1-6, u O-arilo, y en el que dicho anillo saturado o insaturado de 3-10 miembros contiene independientemente 0, 1, o 2 heteroatomos mas ademas del nitrogeno.

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2. 2. La combinacion para el uso de la reivindicacion 1, en donde:

   E2 es -H;

   X1 y X2 sean N;

   R1 es -L-alquilo C1.10, -L-cicloalquilo C3-8, o -L-heterociclilo, cada uno de los cuales esta sin sustituir o sustituido con uno o mas R3 independientes;

   L esta ausente;

   R3 es hidrogeno, -OH, -OR31, -NR31R32, -C(O)R31, -C(=O)NR31R32, arilo, heteroarilo, alquilo C1.4, cicloalquilo C3-8, o heterociclilo;

   -(W2)k- es -NH-, -N(H)C(O)- o -N(H)S(O)2-;

   R2 es hidrogeno o alquilo C1-10 y

   R31 y R32, en cada caso, son independientemente H o alquilo C1-10.
3. 3. La combinacion para el uso de la reivindicacion 1, en el que dicho inhibidor de mTOR es un compuesto de formula:

   imagen2

   o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

   en el que R1 es -alquilo C1.10, -cicloalquilo C3-8, o heterociclilo, cada uno de los cuales esta sin sustituir o sustituido con uno o mas R3; y R3 es hidrogeno, -OH, -OR31, NR31R32, o -C(O)R31.
4. 4. La combinacion para el uso de la reivindicacion 3, en el que R1 es -alquilo C1-10, que esta sin sustituir o esta sustituido con uno o mas R3; y R3 es hidrogeno, u -OH.
5. 5. La combinacion para el uso de la reivindicacion 1, en la que dicho inhibidor de mTOR es

   imagen3

   o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
6. 6. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho primer agente se administra por separado a dicho sujeto antes de que se administre cualquier cantidad eficaz de dicho inhibidor de mTOR.
7. 7. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho primer agente se administra dos o mas veces diferentes antes de administrar dicho inhibidor de mTOR.
8. 8. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho primer agente se administra semanalmente durante al menos dos semanas.
9. 9. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho primer agente se administra una o mas veces cada 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 o mas dfas seguido de la administracion de dicho inhibidor de mTOR.
10. 10. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho inhibidor de mTOR se administra aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12, 18, 24, 30, 36, 42, o 48 horas despues de que se haya administrado dicho primer agente.

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    25
11. 11. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicho inhibidor de mTOR se administra mas de 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, o 14 dfas despues de que se haya administrado dicho primer agente.
12. 12. La combinacion para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en el que dicho trastorno proliferativo es una afeccion neoplasica.
13. 13. La combinacion para el uso de la reivindicacion 12, en la que dicha afeccion neoplasica se selecciona entre el grupo que consiste en NSCLC, carcinoma de celulas escamosas de cabeza y cuello, cancer pancreatico, cancer de mama, cancer de ovario, sarcoma de Kaposi, carcinoma de celulas renales, cancer de prostata, cancer neuroendocrino, cancer colorrectal, y cancer de endometrio.
14. 14. Una composicion farmaceutica que comprende un primer agente y un inhibidor de mTOR como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que dicha composicion farmaceutica se formula para liberar dicho inhibidor de mTOR despues de liberar dicho primer agente.
15. 15. La composicion farmaceutica de la reivindicacion 14, en la que la composicion farmaceutica se formula en una dosificacion oral o en una endoprotesis que eluye farmaco.
16. 16. La composicion farmaceutica de la reivindicacion 14, en la que el inhibidor de mTOR se formula para su liberacion retardada respecto del primer agente.
17. 17. La composicion farmaceutica de la reivindicacion 14, para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo en un sujeto que lo necesita.
18. 18. La composicion farmaceutica para el uso de la reivindicacion 17, en la que dicha afeccion neoplasica se selecciona entre el grupo que consiste en NSCLC, carcinoma de celulas escamosas de cabeza y cuello, cancer pancreatico, cancer de mama, cancer de ovario, sarcoma de Kaposi, carcinoma de celulas renales, cancer de prostata, cancer neuroendocrino, cancer colorrectal, y cancer de endometrio.