ES2619954T3 - Derivados de cloropiracinocarboxamida útiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratación mucosa insuficiente - Google Patents

Derivados de cloropiracinocarboxamida útiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratación mucosa insuficiente Download PDF

Info

Publication number
ES2619954T3
ES2619954T3 ES13814392.0T ES13814392T ES2619954T3 ES 2619954 T3 ES2619954 T3 ES 2619954T3 ES 13814392 T ES13814392 T ES 13814392T ES 2619954 T3 ES2619954 T3 ES 2619954T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
compound
mmol
compounds
treatment
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES13814392.0T
Other languages
English (en)
Inventor
Michael R. Johnson
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Parion Sciences Inc
Original Assignee
Parion Sciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Parion Sciences Inc filed Critical Parion Sciences Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2619954T3 publication Critical patent/ES2619954T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/047—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates having two or more hydroxy groups, e.g. sorbitol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/10—Laxatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/12—Mucolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/14—Antitussive agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/28—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/28—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms
    • C07D241/30—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms in which said hetero-bound carbon atoms are part of a substructure —C(=X)—X—C(=X)—X— in which X is an oxygen or sulphur atom or an imino radical, e.g. imidoylguanidines
    • C07D241/32—(Amino-pyrazinoyl) guanidines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Un compuesto de la fórmula:**Fórmula** en la que: Ar se selecciona de:**Fórmula** y n es un número entero seleccionado de 0, 1, 2, 3, 4, 5 o 6; R1 se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 átomos de carbono; R2 es hidrógeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 átomos de carbono; R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrógeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
DESCRIPCION
Derivados de cloropiracinocarboxamida utiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratacion mucosa insuficiente
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a nuevos compuestos, incluyendo 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3- (bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)- 6-cloropiracino-2-carboxamida y compuestos relacionados y sus sales farmaceuticamente aceptables, utiles como bloqueadores de canales del sodio, composiciones que contienen los mismos, su utilidad en metodos terapeuticos y usos para los mismos y procedimientos para preparar los mismos.
Antecedentes de la invencion
Las superficies mucosas en la interfase entre el ambiente y el cuerpo han evolucionado a un numero de mecanismos de "defensa innata", es decir, protectores. Una forma principal de tal defensa innata es lavar estas superficies con lfquido. Tfpicamente, la cantidad de la capa de lfquido sobre una superficie mucosa refleja el equilibrio entre la secrecion de lfquidos epiteliales, que a menudo refleja la secrecion de aniones (Cl" y/o HCO3") acoplada con agua (y un ion conjugado cationico), y la absorcion de lfquidos epiteliales, que a menudo refleja la absorcion de Na+, acoplada con agua y un anion conjugado (Cl"y/o HCO3"). Muchas enfermedades de las superficies mucosas estan provocadas por demasiado poco lfquido protector sobre esas superficie mucosas creado por un desequilibrio entre la secrecion (demasiado poca) y la absorcion (relativamente demasiada). Los procesos de transporte de sales defectuoso que caracterizan a estas disfunciones mucosas residen en la capa epitelial de la superficie mucosa.
Un enfoque para reponer la capa lfquida protectora sobre superficies mucosas es "reequilibrar" el sistema mediante el bloqueo de un canal de Na+ y la absorcion de lfquidos. La protema epitelial que media en la etapa limitante de la
velocidad de absorcion de Na+ y lfpidos es el canal epitelial del Na+ ("ENaC"). El ENaC esta situado en la superficie
apical del epitelio, es decir la interfase superficie mucosa-ambiente. Idealmente, para inhibir la absorcion de Na+ y lfquidos mediada por ENaC, un bloqueante de ENaC de la clase de la amilorida se aportara a la superficie mucosa y se mantendra en esta zona hasta conseguir un beneficio terapeutico maximo.
Se ha presentado el uso de bloqueantes de ENaC para una variedad de enfermedades que se aplacan mediante un incremento de la hidratacion mucosa. En particular, se ha presentado el uso de bloqueantes de ENaC en el tratamiento de enfermedades respiratorias tales como bronquitis cronica (CB), fibrosis qrnstica (CF) y COPD, que reflejan la ineficacia del cuerpo para depurar moco normalmente de los pulmones y finalmente dan como resultado una infeccion cronica de las vfas respiratorias. Vease Evidence for airway surface dehydration as the initiating event in CF airway disease, R. C. Boucher, Journal of Internal Medicine, Vol. 261, Edicion 1, enero de 2007, paginas 5-16;
y Cystic fibrosis: a disease of vulnerability to airway surface dehydration, R.C. Boucher, Trends in Molecular
Medicine, Vol. 13, Edicion 6, junio de 2007, paginas 231-240.
Los datos indican que el problema inicial tanto en la bronquitis cronica como en la fibrosis qrnstica es la ineficacia para depurar moco de las superficies de las vfas respiratorias. La ineficacia para depurar moco refleja un desequilibrio en las cantidades de moco como lfquido superficial de las vfas respiratorias (ASL) sobre las superficies de las vfas respiratorias. Este desequilibrio da como resultado una reduccion relativa en el ASL que conduce a concentracion de moco, reduccion en la actividad lubricante del lfquido periciliar (PCL), adherencia de moco a la superficie de las vfas respiratorias e ineficacia para depurar moco a traves de actividad ciliar hacia la boca. La reduccion en la depuracion de moco conduce a la colonizacion bacteriana cronica de moco adherido a las superficies de las vfas respiratorias. La retencion cronica de bacterias, la incapacidad de las sustancias antimicrobianas locales para destruir bacterias atrapadas en el moco de forma cronica y la consiguiente respuesta inflamatoria cronica de este tipo de infeccion superficial se manifiestan en bronquitis cronica y fibrosis qrnstica.
Actualmente, existe una gran necesidad medica sin resolver de productos que traten espedficamente la variedad de enfermedades que se mejoran mediante un incremento de la hidratacion mucosa, incluyendo bronquitis cronica, COPD y fibrosis qrnstica, entre otras. Las terapias actuales para bronquitis cronica, COPD y fibrosis qrnstica se enfocan a tratar los srntomas y/o los efectos tardfos de estas enfermedades. Sin embargo, ninguna de estas terapias tratan eficazmente el problema fundamental de la ineficacia para depurar moco del pulmon.
R.C. Boucher, en el documento U.S. 6.264.975, describe el uso de bloqueantes de canales del sodio de piracinoilguanidina para hidratar superficies mucosas tipificados por los diureticos muy conocidos amilorida, benzamilo y fenamilo. Sin embargo, estos compuestos son relativamente impotentes, considerando la masa de farmaco limitada que puede ser inhalada al pulmon; (2) se absorben rapidamente y de ese modo exhiben una
5
10
15
20
25
30
35
40
semivida indeseablemente corta sobre la superficie mucosa; y (3) son libremente disociable a partir de ENaC. Se necesitan farmacos mas potentes con semividas mas prolongadas sobre la superficie mucosa.
Demasiado poco Kquido superficial protector sobre otras superficies mucosas es una patofisiologia comun de un numero de enfermedades. Por ejemplo, en la xerostomia (boca seca), la cavidad oral se agota de Aquido debido a una ineficacia de las glandulas parotida, sublingual y submandibular para secretar Aquido a pesar de la absorcion mediada por transporte de Na+ (ENaC) continuado desde la cavidad oral. La queratoconjuntivitis seca (ojo seco) esta provocada por la ineficacia de las glandulas lagrimales para secretar Aquido en presencia de una absorcion de Aquido dependiente de Na+ continuada sobre superficies conjuntivales. En la rinosinusitis, existe un desequilibrio entre la secrecion de mucina y el agotamiento relativo de ASL. La ineficacia para secretar Cl- (y Aquido) en el intestino delgado proximal, combinada con un incremento de la absorcion de Na+ (y Aquido) en el Aeon terminal conduce al smdrome de obstruction intestinal distal (DIOS). En pacientes ancianos, la excesiva absorcion de Na+ (y volumen) en el colon descendente produce estrenimiento y diverticulitis.
La bibliografia publicada incluye un numero de solicitudes de patente y patentes concedidas a Parion Sciences Inc., dirigidas a analogos de piracinoilguanidina como bloqueantes de canales del sodio. Ejemplos de tales publicaciones incluyen las Publicaciones PCT N° WO2003/070182, WO2003/070184, WO2004/073629, WO2005/025496, WO2005/016879, WO2005/018644, WO2006/022935, WO2006/023573, WO2006/023617, WO2007/018640, WO2007/146869, WO2008/031028, WO2008/031048, y las Patentes de EE. UU. N° 6858614, 6858615, 6903105, 7064129, 7186833, 7189719, 7192958, 7192959, 7192960, 7241766, 7247636, 7247637, 7317013, 7332496, 7368447, 7368450, 7368451,7375102, 7388013, 7399766, 7410968, 7807834, 7842697y7868010.
Sigue existiendo una necesidad de nuevos compuestos bloqueantes de canales del sodio con potencia y eficacia intensificadas sobre tejidos mucosos. Tambien sigue habiendo una necesidad de nuevos compuestos bloqueantes de canales del sodio que proporcionan efecto terapeutico, pero minimicen o eliminen el inicio o el avance de hipercalemia en los receptores.
Sumario de la invention
Esta invencion proporciona compuestos de la formula I:
en la que:
imagen1
Ar se selecciona del grupo de:
imagen2
n es un numero entero seleccionado de 0, 1,2, 3, 4, 5 o 6;
R1 se selecciona de hidrogeno, alquilo Ci-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
5
10
15
20
25
30
35
40
Esta invencion tambien proporciona solvatos e hidratos, estereoisomeros individuales, incluyendo isomeros opticos (enantiomeros y diastereoisomeros) e isomeros geometricos (isomena cis/trans), mezclas de estereoisomeros, y tautomeros de compuestos de la formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, asf como composiciones farmaceuticas que comprenden los compuestos, o sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, siendo todos utiles en metodos de tratamiento, y metodos para su preparacion.
Esta invencion tambien proporciona el compuesto 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, asf como isomeros opticos (enantiomeros y diastereoisomeros) e isomeros geometricos (isomena cis/trans), mezclas de estereoisomeros, y tautomeros de los mismos, asf como composiciones farmaceuticas que comprende el compuesto, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, siendo todos utiles en metodos de tratamiento, y metodos para su preparacion.
Breve descripcion de los dibujos
Una valoracion mas completa de la invencion y muchas de las ventajas de la misma se puede obtener facilmente mediante referencia a la informacion de la presente junto con las siguientes figuras:
La FIG. 1 es una grafica del efecto del Compuesto 33 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 2 es una grafica del efecto del Compuesto 123 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 3 es una grafica del efecto del Compuesto 48 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 4 es una grafica del efecto del Compuesto 33 sobre MCC ovina a las 8 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 5 es una grafica del efecto del Compuesto 152 sobre MCC ovina a las 8 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 6 es una grafica de la intensificacion del Compuesto 33 sobre MCC ovina a las 8 horas despues de la dosificacion mediante solucion salina hipertonica.
La FIG. 7 es una grafica del efecto del Ejemplo comparativo I sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 8 es una grafica del efecto del Ejemplo comparativo 1 sobre los niveles de potasio plasmatico en ovejas.
La FIG. 9 es una grafica que compara la actividad del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 33 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion..
La FIG. 10 es una grafica que compara el efecto sobre los niveles de K+ en plasma de oveja del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 33.
La FIG. 11 es una grafica que compara la actividad del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 123 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 12 es una grafica que compara el efecto sobre los niveles de K+ en plasma de oveja del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 123.
La FIG. 13 es una grafica que compara la actividad del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 48 sobre MCC ovina a las 4 horas despues de la dosificacion.
La FIG. 14 es una grafica que compara el efecto sobre los niveles de K+ en plasma de oveja del Ejemplo comparativo 1 y el Compuesto 48.
5
10
15
20
25
30
35
40
Descripcion detallada de la invencion
Segun se usan en la presente, los siguientes terminos se definen segun se indica.
"Un compuesto de la invencion" significa un compuesto de Formula I o una sal, particularmente una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
"Un compuesto de Formula I" significa un compuesto que tiene la formula estructural indicada en la presente como Formula I. Compuestos de Formula I incluyen solvatos e hidratos (es decir, aductos de un compuesto de Formula I con un disolvente). En las realizaciones en las que un compuesto de Formula I incluye uno o mas centros quirales, la expresion pretende abarcar cada estereoisomero individual incluyendo isomeros opticos (enantiomeros y diastereoisomeros) e isomeros geometricos (isomeria cis/trans) y mezclas de estereoisomeros. Ademas, los compuestos de Formula I tambien incluyen tautomeros de la formula o las formulas representadas.
A lo largo de la descripcion y los ejemplos, los compuestos se nombran usando principios de nomenclatura estandar de la IUPAC, cuando sea posible, incluyendo el uso del programa de software ChemDraw Ultra 11.0 para nombrar compuestos, vendido por CambridgeSoft Corp./PerkinElmer.
En algunas representaciones de la estructura qmmica en las que los atomos de carbono no tienen un numero suficiente de variables ligadas representadas para producir una valencia de cuatro, se debe suponer que los restantes sustituyentes de carbono necesarios para proporcionar una valencia de cuatro son hidrogeno. De forma similar, en algunas estructuras qmmicas en las que se traza un enlace sin especificar el grupo terminal, tal enlace es indicativo de un grupo metilo (Me, -CH3), como es convencional en la especialidad.
En una realization, el compuesto de Formula (I) es 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida, que tiene la estructura:
imagen3
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En otra realizacion, el compuesto de Formula (I) es 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6- cloropiracino-2-carboxamida, que tiene la estructura:
imagen4
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realizacion adicional, el compuesto de Formula (I) es 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-2-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida, que tiene la estructura:
imagen5
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
5 En otra realization, el compuesto de Formula (I) es 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida, que tiene la formula:
imagen6
10 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Tres realizaciones independientes comprenden compuestos de Formula (II), Formula (III) y Formula (IV), respectivamente:
imagen7
imagen8
imagen9
20 en las que:
n es un numero entero seleccionado de 0, 1,2, 3, 4, 5 o 6;
5
10
15
20
25
30
35
R1 se selecciona de hidrogeno, alquilo C1-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay una realizacion adicional en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 se selecciona de hidrogeno, alquilo C1-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay una realizacion adicional en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 se selecciona de hidrogeno y alquilo C1-C8;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay otra realizacion en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 se selecciona de hidrogeno y alquilo C1-C8;
R2 es hidrogeno;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay otra realizacion mas en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 y R2 son cada uno, independientemente, un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3;
10
15
20
25
30
35
40
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), existe otra realizacion en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 y R2 son cada uno, independientemente, un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son hidrogeno;
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay otra realizacion en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 y R2 son cada uno, independientemente, un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada grupo de compuestos representados independientemente por las Formulas (I), (II), (III) y (IV), hay una realizacion adicional en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6;
R1 y R2 son cada uno, independientemente, un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 es hidrogeno; y R4 es alquilo C1-C3;
o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
Grupos alquilo polihidroxilados de esta invencion son aquellos en los que una cadena alqrnlica de 3 a 8 atomos de carbono esta sustituida por dos o mas grupos hidroxilo. Ejemplos de grupos alquilo polihidroxilados son butano-1,4- diol; butano-1,2,2-triol; butano-1,1,2,3,-tetraol; pentano-1,2,3,4-tetraol; hexano-1,2,3,4,5-pentaol; heptano-
1,2,3,4,5,6-hexaol; y octano-1,2,3,4,5,6,7-heptaol.
Una realizacion dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente son los compuestos en los que el grupo alquilo polihidroxilado tiene la formula -CH2-(CHR5)n-H, en la que n es un numero entero seleccionado de 2, 3, 4, 5, 6 o 7 y R5 es independientemente en cada caso H u OH, con la condicion de que al menos dos de los grupos R5 son OH.
Otra realizacion dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente son los compuestos en los que el grupo alquilo polihidroxilado tiene la formula -CH2-CHOH-(CHR6)m-H, en la que m es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3 4, 5 o 6 y R6 es independientemente en cada caso H o OH, con la condicion de que al menos uno de los grupos R6 sea OH.
Una realizacion mas dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente comprende compuestos en los que el grupo alquilo polihidroxilado tiene la formula -CH2-(CHOH)n-CH2OH, en la que n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. Otra realizacion dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente comprende compuestos en los que n es un numero entero seleccionado de 2, 3, 4 o 5. Otra realizacion dentro de cada grupo comprende compuestos en los que n es un numero entero seleccionado de 3, 4 o 5.
5
10
15
20
25
En otra realization dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente, la cadena representada por la formula -CH2-(CHOH)n-CH2OH es 2,3,4,5,6-pentahidroxihexano, que tiene la formula:
imagen10
En una realizacion adicional dentro de cada grupo de compuestos descritos en la presente, la cadena representada por la formula -CH2-(CHOH)n-CH2OH es de la formula:
imagen11
Tres realizaciones independientes adicionales incluyen compuestos de Formula (V), Formula (VI) y Formula (VII), respectivamente:
imagen12
imagen13
imagen14
en las que:
n es un numero entero seleccionado de 1,2, 3, 4, 5 o 6; y R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo Ci-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Dentro de cada realizacion representada por las Formulas (V), (VI) y (VII) hay una realizacion adicional en la que n es un numero entero seleccionado de 1, 2, 3, 4, 5 o 6; y R3 y R4 son cada uno hidrogeno; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables. Dentro de cada realizacion representada por las Formulas (V), (VI) y (VII) hay otra realizacion en la que n es un numero entero seleccionado de 1,2, 3, 4, 5 o 6; y R3 y R4 son cada uno alquilo C1-C3; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Dentro de cada una de las realizaciones descritas en la presente, hay una realizacion adicional en la que n es un numero entero seleccionado de 1,2 o 3. Dentro de cada una de las realizaciones descritas en la presente, hay una realizacion adicional en la que n es un numero entero seleccionado de 4, 5 o 6. Dentro de cada una de las realizaciones descritas en la presente, hay seis realizaciones independientes adicionales en las que n es un numero entero de, respectivamente, 1,2, 3, 4, 5 y 6.
Los compuestos de la presente, incluyendo los de las Formulas (I), (la), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), pueden estar en la forma de una base libre o una sal, particularmente una sal farmaceuticamente aceptable. Para una revision de sales farmaceuticamente aceptables, vease Berge y cols., J. Pharma Sci. (1977) 66:1-19.
Sales farmaceuticamente aceptables formadas a partir de acidos inorganicos u organicos incluyen, por ejemplo, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, sulfato, bisulfato, nitrato, sulfamato, fosfato, hidrogenofosfato, acetato, trifluoroacetato, maleato, malato, fumarato, lactato, tartrato, citrato, formato, gluconato, succinato, piruvato, tanato, ascorbato, palmitato, salicilato, estearato, ftalato, alginato, poliglutamato, oxalato, oxaloacetato, sacarato, benzoato, alquil- o arilsulfonatos (p. ej., metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato o naftalenosulfonato) e isetionato; complejos formados con aminoacidos tales como lisina, arginina, acido glutamico, glicina, serina, treonina, alanina, isoleucina y leucina. Los compuestos de la invention tambien pueden estar en la forma de sales formadas a partir de aniones elementales seleccionados de cloro, bromo o yodo.
Para el uso terapeutico, las sales de los ingredientes activos de los compuestos de Formula I seran farmaceuticamente aceptables, es decir seran sales derivadas de un acido farmaceuticamente aceptable. Sin embargo, tambien pueden encontrar uso sales de acidos que no son farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, en la preparation o la purification de un compuesto farmaceuticamente aceptable. Las sales de trifluoroacetato, por ejemplo, pueden encontrar tal uso. Todas las sales, se deriven o no de un acido farmaceuticamente aceptable, estan dentro del alcance de la presente invencion.
El termino "quiral" se refiere a moleculas que tienen la propiedad de no ser superponibles con la pareja de imagen especular, mientras que el termino "aquiral" se refiere a moleculas que son superponibles con su pareja de imagen especular.
El termino "estereoisomeros" se refiere a compuestos que tienen una constitution qmmica identica, pero difieren con respecto a la disposition de los atomos o grupos en el espacio. "Diastereoisomero" se refiere a un estereoisomero con dos o mas centro de quiralidad y cuyas moleculas no son imagenes especulares entre si. Los diastereoisomeros tienen diferentes propiedades fisicas, p. ej. puntos de fusion, puntos de ebullition, propiedades espectrales y reactividades. Las mezclas de diastereoisomeros se pueden separar bajo procedimientos analrticos tales como electroforesis y cromatografia. "Enantiomeros" se refiere a dos estereoisomeros de un compuesto que no son imagenes especulares superponibles entre si.
Las definiciones y convenciones estereoqmmicas usadas en la presente siguen generalmente S. P. Parker, Ed., MCGRAW-HILL DICTIONARY OF CHEMICAL TERMS (1984) McGraw-Hill Book Company, Nueva York; y Eliel, E. y Wilen, S., STEREOCHEMISTRY OF ORGANIC COMPOUNDS (1994) John Wiley & Sons, Inc., Nueva York.
Muchos compuestos organicos existen en formas opticamente activas, es decir, tienen la capacidad de girar el plano de luz polarizada en el plano. Al describir un compuesto opticamente activo, los prefijos Dy L oRy S se usan para indicar la configuration absoluta de la molecula alrededor de su centro o centros quirales. Un estereoisomero espedfico tambien se puede denominar un enantiomero y una mezcla de tales isomeros se llama a menudo una mezcla enantiomera. Una mezcla 50:50 de enantiomeros se denomina una mezcla racemica o un racemato, que se puede presentar cuando no haya estereoseleccion o estereoespecificidad en una reaction o proceso qmmicos. Los terminos "mezcla racemica" y "racemato" se refieren a una mezcla equimolar de dos especies enantiomeras.
El termino "tautomeros" se refiere a un tipo de estereoisomero en el que la migration de un atomo de hidrogeno da como resultado dos o mas estructuras. Los compuestos de Formula I pueden existir en diferentes formar tautomeras. Un experto en la especialidad reconocera que las amidinas, las amidas, las guanidinas, las ureas, las tioureas, los heterociclos y similares pueden existir en formas tautomeras. A modo de ejemplo, los compuestos de Formula I pueden existir en diversas formas tautomeras segun se muestra a continuation:
imagen15
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
imagen16
Todas las posibles formas tautomeras de las amidinas, las amidas, las guanidinas, las ureas, las tioureas, los heterociclos y similares de todas las realizaciones de Formula I estan dentro del alcance de esta invention. Los tautomeras existen en equilibrio y asi se entendera por los expertos en la especialidad que la representation de un solo tautomero en las formulas proporcionadas se refiere igualmente a todos los posibles tautomeras.
Se ha de entender que todos los enantiomeros, los diastereoisomeros y las mezclas racemicas, los tautomeros, los polimorfos, los pseudopolimorfos de los compuestos dentro del alcance de la Formula I y sus sales farmaceuticamente aceptables son abarcados por la presente invencion. Todas las mezclas de tales enantiomeros y diastereoisomeros, incluyendo mezclas enantiomeramente enriquecidas y mezclas y diastereoisomeramente enriquecidas, estan dentro del alcance de la presente invencion. Las mezclas enantiomeramente enriquecidas son mezclas en las que la relation del enantiomero especificado al enantiomero alternativo es mayor de 50:50. Mas particularmente, una mezcla enantiomeramente enriquecida comprende al menos aproximadamente 75% del enantiomero especificado y preferiblemente al menos aproximadamente 85% del enantiomero especificado. En una realization, la mezcla enantiomeramente enriquecida esta sustancialmente libre de otro enantiomero. De forma similar, las mezclas diastereoisomeramente enriquecidas son mezclas de diastereoisomeros en las que la cantidad del diastereoisomero especificado es mayor que la cantidad de cada diastereoisomero alternativo. Mas particularmente, una mezcla diastereoisomeramente enriquecida comprende al menos aproximadamente 75% del diastereoisomero especificado y preferiblemente al menos aproximadamente 85% del diastereoisomero especificado. En una realizacion, la mezcla diastereoisomeramente enriquecida esta sustancialmente libre de todos los otros diastereoisomeros. Se entendera por los expertos en la especialidad que el termino "sustancialmente libre de" indica menos de 5% de presencia de otros diastereoisomeros, preferiblemente menos de 1%, mas preferiblemente menos de 0,1%. En otras realizaciones, no estaran presentes otros diastereoisomeros o la cantidad de cualesquiera otros diastereoisomeros presente estara por debajo del nivel de detection. Los estereoisomeros se pueden separar mediante tecnicas conocidas en la especialidad, incluyendo cromatografia de liquidos de alta resolution (HPLC) y cristalizacion de sales quirales.
Un solo estereoisomero, p. ej. un enantiomero, sustancialmente libre de su estereoisomero se puede obtener mediante la resolucion de la mezcla racemica usando un metodo tal como la formation de diastereoisomeros usando agentes de resolucion opticamente activos ("Stereochemistry of Carbon Compounds," (1962) de E. L. Eliel, McGraw Hill; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113:(3) 283-302). Las mezclas racemicas de compuestos quirales de la invencion se pueden separar y aislar mediante cualquier metodo conocido, incluyendo: (1) formacion de sales diastereoisomeras ionicas con compuestos quirales y separation mediante cristalizacion fraccionada u otros metodos, (2) formacion de compuestos diastereoisomeros con reactivos de derivation quirales, separacion de los diastereoisomeros y conversion en los estereoisomeros puros y (3) separacion de los estereoisomeros sustancialmente puros o enriquecidos directamente bajo condiciones quirales.
En una realizacion, la presente invencion proporciona una mezcla o composition enantiomeramente que comprende
3.5- diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)- 3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, como el isomero predominante.
Otras realizaciones comprenden las mezclas o composiciones enantiomeramente enriquecidas que comprenden, respectivamente, los compuestos de Formulas (I), (la), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VlI), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, como el isomero predominante en cada una de sus mezclas respectivas.
En otra realizacion, la presente invencion proporciona una mezcla o composicion enantiomeramente enriquecida de
3.5- diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)- 3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, sustancialmente libre de otros.
Otras cuatro realizaciones comprenden las mezclas o composiciones enantiomeramente enriquecidas que comprenden, respectivamente, los compuestos de Formulas (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
sales farmaceuticamente aceptables, sustancialmente libres de otros isomeros en cada una de sus mezclas respectivas.
Tambien se proporciona en la presente cada uno de los compuestos y grupos de compuestos descritos en la presente, incluyendo los de las Formulas (I), (la), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para el uso como un medicamento.
Un compuesto de Formula I y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden existir como diferentes polimorfos o pseudopolimorfos. Segun se usa en la presente, polimorfismo cristalino significa la capacidad de un compuesto cristalino para existir en diferentes estructuras cristalinas. El polimorfismo cristalino puede resultar de diferencias en el empaquetamiento cristalino (polimorfismo de empaquetamiento) o diferencias en el empaquetamiento entre diferentes conformeros de la misma molecula (polimorfismo de conformacion). Segun se usa en la presente, el pseudopolimorfismo cristalino tambien incluye la capacidad de un hidrato o solvato de un compuesto para existir en diferentes estructuras cristalinas. Los pseudopolimorfos de esta invencion pueden existir debido a diferencias en el empaquetamiento cristalino (pseudopolimorfismo de empaquetamiento) o debido a diferencias en el empaquetamiento entre diferentes conformeros de la misma molecula (pseudopolimorfismo de conformacion). Esta invencion comprende todos los polimorfos y pseudopolimorfos de los compuestos de Formula I y sus sales farmaceuticamente aceptables.
Un compuesto de Formula I y sus sales farmaceuticamente aceptable tambien pueden existir como un solido amorfo. Segun se usa en la presente, un solido amorfo es un solido en el que no hay un orden de largo alcance de las posiciones de los atomos en el solido. Esta definicion se aplica tambien cuando el tamano del cristal es de dos nanometros o menos. Tambien se pueden usar aditivos, incluyendo disolventes, para crear las formas amorfas de esta invencion. Esta invencion, incluyendo todas las composiciones farmaceuticas, los metodos de tratamiento, los productos de combinacion y sus usos descritos en la presente, comprende todas las formas amorfas de los compuestos de Formula I y sus sales farmaceuticamente aceptables.
Usos
Los compuestos de la invencion exhiben actividad como bloqueantes de canales del sodio. Sin querer limitarse por ninguna teona particular, se cree que los compuestos de la invencion pueden funcionar en vivo al bloquear canales del sodio epiteliales presentes en superficies mucosas y de ese modo reducir la absorcion de agua por las superficies mucosas. Este efecto incrementa el volumen de lfquidos protectores sobre superficies mucosas y reequilibra el sistema.
Como consecuencia, los compuestos de la invencion son utiles como medicamentos, particularmente para el tratamiento de afecciones clmicas para las que puede estar indicado un bloqueantes de canales del sodio. Tales afecciones incluyen afecciones pulmonares tales como enfermedades asociadas con la obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD), incluyendo exacerbaciones agudas de COPD, asma, bronquiectasia (incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica), bronquitis aguda, bronquitis cronica, tos posviral, fibrosis qrnstica, enfisema, neumoma, panbronquiolitis y bronquiolitis asociada a trasplantes, incluyendo bronquiolitis asociada a trasplantes de pulmon y medula osea, en un ser humano que lo necesite. Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar traqueobronquitis asociada al respirador y/o prevenir la neumoma asociada al respirador en pacientes con respirador. La presente memoria descriptiva divulga metodos para tratar cada una de las afecciones descritas en la presente en un mairnfero que lo necesite, preferiblemente en un ser humano que lo necesite, comprendiendo cada metodo administrar a dicho marnffero una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables. Tambien se divulgan (a) un metodo para reducir exacerbaciones de COPD en un marnffero que lo necesite; (b) un metodo para reducir exacerbaciones de CF en un mamffero que lo necesite; (c) un metodo para mejorar la funcion pulmonar (FEV1) en un mamffero que lo necesite, (d) un metodo para mejorar la funcion pulmonar (FEV1) en un mamffero que sufre COPD, (e) un metodo para mejorar la funcion pulmonar (FEV1) en un mamffero que sufre CF, (f) un metodo para reducir infecciones de las vfas respiratorias en un mam^era que lo necesite.
Tambien se divulga un metodo para estimular, intensificar o mejorar la depuracion mucociliar en un mamffero, comprendiendo el metodo administrar a un mamffero que lo necesite una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables. Se entendera que la depuracion mucociliar incluye las acciones mucociliares naturales implicadas en la transferencia o la depuracion de moco en las vfas respiratorias, incluyendo los mecanismos de autodepuracion de los bronquios. Por lo tanto, tambien se divulga un metodo para mejorar la depuracion de moco en las vfas respiratorias de un mamffero que lo necesite.
Adicionalmente, los bloqueantes de canales del sodio pueden estar indicados para el tratamiento de afecciones que se aplacan mediante un incremento de la hidratacion mucosa en superficies mucosas distintas a las superficies mucosas pulmonares. Ejemplos de tales afecciones incluyen boca seca (xerostomia), piel seca, sequedad vaginal, sinusitis, rinosinusitis, deshidratacion nasal, incluyendo deshidratacion nasal causada por la administracion de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
ox^geno seco, ojo seco, enfermedad de Sjogren, otitis media, discinesia ciliar primaria, smdrome de obstruccion intestinal distal, esofagitis, estrenimiento y diverticulitis cronica. Los compuestos de la invencion tambien se pueden usar para promover la hidratacion ocular o corneal.
Los compuestos de la presente invencion tambien pueden ser utiles en metodos para obtener una muestra de esputos procedente de un ser humano. El metodo se puede llevar a cabo al administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion a al menos un pulmon del paciente y a continuacion inducir y recoger una muestra de esputos de ese ser humano.
Segun esto, en un aspecto, la presente memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de una afeccion en un mairnfero, tal como un ser humano, para la que esta indicado un bloqueante de canales del sodio.
En otras realizaciones, la presente memoria descriptiva divulga cada uno de los metodos descritos en la presente con el beneficio adicional de minimizar o eliminar la hipercalemia en el receptor del metodo. Tambien se divulgan realizaciones que comprenden cada uno de los metodos descritos en la presente en los que se consiga un mdice terapeutico mejorado.
Los terminos "tratar", "tratando" y "tratamiento", segun se usan en la presente, se refieren a invertir, aliviar, inhibir el avance de o prevenir el trastorno o la afeccion o uno o mas smtomas de tal trastorno o afeccion.
Todos los metodos terapeuticos descritos en la presente se llevan a cabo al administrar una cantidad eficaz de un a compuesto de la invencion, un compuesto de Formula I o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, a un sujeto (tfpicamente un mai^ero y preferiblemente un ser humano) que necesite el tratamiento.
En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de una afeccion que se aplaca mediante un incremento de la hidratacion mucosa en un marnffero, particularmente un ser humano que los necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de una enfermedad asociada con la obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion particular, la presente memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD) en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion particular, la presente memoria descriptiva divulga un metodo para reducir la frecuencia, la gravedad o la duracion de la exacerbacion aguda de COPD o para el tratamiento de uno o mas smtomas de exacerbacion aguda de COPD en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de asma en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de bronquiectasia (incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica) en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la bronquitis, incluyendo y bronquitis aguda y cronica en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de tos posviral en un mamnfero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la fibrosis qrnstica en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento del enfisema en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la neumoma en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de panbronquiolitis en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de bronquiolitis asociada a trasplantes, incluyendo bronquiolitis asociada a trasplante de pulmon y medula osea en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para tratar traqueobronquitis asociada al respirador y/o prevenir la neumoma asociada al respirador en un ser human con respirador que lo necesite.
Esta memoria descriptiva divulga metodos espedficos para tratar una enfermedad seleccionada del grupo de obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD), asma, bronquiectasia (incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica), bronquitis aguda, bronquitis cronica, tos posviral, fibrosis qrnstica, enfisema, neumoma, panbronquiolitis, bronquiolitis asociada a trasplantes y traqueobronquitis asociada al respirador o prevenir la neumoma asociada al respirador en un ser humano que lo necesite, comprendiendo cada metodo administrar a dicho ser humano una cantidad eficaz de un compuesto de Formula 1(a), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables. En realizaciones adicionales para cada metodo de tratamiento, la forma de sal farmaceuticamente aceptable es una sal de hidrocloruro o una sal de a hidroxinaftoato del compuesto de Formula (1a). En otra realizacion dentro de cada metodo de tratamiento, se usa la base libre del compuesto de Formula (1a).
En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la boca seca (xerostomia) en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la piel seca en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la sequedad vaginal en un mamffero,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la sinusitis, la rinosinusitis o la deshidratacion nasal, incluyendo la deshidratacion nasal causada por la administracion de ox^geno seco, en un mairnfero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento del ojo seco o la enfermedad de Sjogren o promover la hidratacion ocular o corneal en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la otitis media en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento de la discinesia ciliar primaria, en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, la memoria descriptiva divulga un metodo para el tratamiento del smdrome de obstruccion intestinal distal, la esofagitis, el estrenimiento o la diverticulitis cronica en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite.
Tambien se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en terapia medica, particularmente para el uso en el tratamiento de una afeccion en un mam^era, tal como un ser humano, para la que esta indicado un bloqueante de canales del sodio. Todos los usos terapeuticos descritos en la presente se llevan a cabo al administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion al sujeto que necesite el tratamiento. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de una afeccion pulmonar tal como una enfermedad asociada con la obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion particular, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD) en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en la reduccion de la frecuencia, la gravedad o la duracion de la exacerbacion aguda de COPD o para el tratamiento de uno o mas smtomas de la exacerbacion aguda de COPD, en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento del asma en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la bronquiectasia, incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica, o bronquitis, incluyendo bronquitis aguda y bronquitis cronica, en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la tos posviral, en un mam^era, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la fibrosis qrnstica en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento del enfisema en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la neumoma en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de panbronquiolitis o la bronquiolitis asociada a trasplantes, incluyendo bronquiolitis asociada a trasplante de pulmon y medula osea en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la traqueobronquitis asociada al respirador o prevenir la neumoma asociada al respirador en un ser humano con respirador que lo necesite.
En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de una afeccion aplacada por un incremento de la hidratacion mucosa es superficies mucosas de un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la boca seca (xerostomia) en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la piel seca en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de la sequedad vaginal en un mamffero, particularmente un ser humano que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la sinusitis, la rinosinusitis o la deshidratacion nasal, incluyendo la deshidratacion nasal causada por la administracion de oxfgeno seco en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento del ojo seco o la enfermedad de Sjogren o promover la hidratacion ocular o corneal en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la otitis media en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la discinesia ciliar primaria en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite. En una realizacion, se proporciona un compuesto de la invencion para el uso en el tratamiento de la obstruccion intestinal distal, la esofagitis, el estrenimiento o la diverticulitis cronica en un mamffero, particularmente un ser humano, que lo necesite.
La presente invencion tambien proporciona el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una afeccion en un mamffero, tal como un ser humano, para la que esta indicado un bloqueante de canales del sodio. En una realizacion, se proporciona el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades asociadas con la obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias, la enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD), las exacerbaciones agudas de COPD, el asma, la bronquiectasia (incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica), bronquitis (incluyendo bronquitis aguda y bronquitis cronica), la tos posviral, la fibrosis
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
qmstica, el enfisema, la neumoma, la panbronquiolitis, la bronquiolitis asociada a trasplantes, (incluyendo bronquiolitis asociada a trasplantes de pulmon y medula osea), traqueobronquitis asociada al respirador o prevenir la neumoma asociada al respirador.
En una realizacion particular, se proporciona el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una afeccion aplacada por un incremento de la hidratacion mucosa en superficies mucosas, el tratamiento de la boca seca (xerostomia), la piel seca, la sequedad vaginal, la sinusitis, la rinosinusitis, la deshidratacion nasal, incluyendo la deshidratacion nasal causada por la administracion de oxfgeno seco, el tratamiento del ojo seco, la enfermedad de Sjogren, promover la hidratacion ocular o corneal, el tratamiento de la otitis media, la discinesia ciliar primaria, el smdrome de obstruccion intestinal distal, la esofagitis, el estrenimiento o la diverticulitis cronica
Los terminos "cantidad eficaz", "cantidad farmaceuticamente eficaz", "dosis eficaz" y "dosis farmaceuticamente eficaz", segun se usan en la presente, se refieren a una cantidad de compuesto de la invencion que es suficiente en el sujeto al que se administra, para provocar la respuesta biologica o medica de un cultivo celular, un tejido, un sistema o un mairnfero (incluyendo un ser humano) que se esta buscando, a modo de ejemplo por un investigador o profesional clmico. El termino tambien incluye dentro de su alcance cantidades eficaces para intensificar una funcion fisiologica normal. En una realizacion, la cantidad eficaz es la cantidad necesaria para proporcionare un nivel deseado de farmaco en las secreciones y los tejidos de las vfas respiratorias y los pulmones, o alternativamente, en la corriente sangumea de un sujeto que se va a tratar para dar una respuesta fisiologica anticipada o un efecto biologico deseado cuando tal composicion se administra mediante inhalacion. Por ejemplo, una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion para el tratamiento de una afeccion para la que esta indicado un bloqueante de canales del sodio es suficiente en el sujeto al que se administra para tratar la afeccion particular. En una realizacion, una cantidad eficaz es una cantidad de un compuesto de la invencion que es suficiente para el tratamiento de COPD o fibrosis qmstica en un ser humano.
La cantidad eficaz precisa de los compuestos de la invencion dependera de un numero de factores incluyendo pero no limitados a la especie, la edad y el peso del sujeto que se trate, la afeccion precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la biodisponibilidad, la potencia y otras propiedades del compuesto espedfico que se administra, la naturaleza de la formulacion, la via de administracion y el dispositivo de aporte y finalmente estara a discrecion del medico o veterinario a cargo. Una gma adicional con respecto a la dosis apropiada se puede encontrar al considerar la dosificacion de otros bloqueantes de canales del sodio, tales como amilorida, prestando ademas la debida atencion a cualesquiera diferencias en la potencia entre la amilorida y los compuestos de la presente invencion.
Una dosis farmaceuticamente eficaz administrada topicamente a las superficies de las vfas respiratorias de un sujeto (p. ej., mediante inhalacion) de un compuesto de la invencion para el tratamiento de un ser humano de 70 kg puede estar en el intervalo de aproximadamente 10 ng a aproximadamente 10 mg. En otra realizacion, la dosis farmaceuticamente eficaz puede ser de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1.000 |jg. Tfpicamente, la dosis diaria administrada topicamente a las superficies de las vfas respiratorias sera una cantidad suficiente para conseguir una concentracion disuelta de agente activo sobre las superficies de las vfas respiratorias de aproximadamente 10-9, 10-8 o 10-7 a aproximadamente 10-4, 10-3, 10-2 o 10-1 moles/litro, mas preferiblemente de aproximadamente 10-9 a aproximadamente 10-4 moles/litro. La seleccion de la dosis espedfica para un paciente sera determinada por el medico, el profesional clmico o el veterinario a cargo de experiencia normal en la especialidad basandose en un numero de factores incluyendo los apuntados anteriormente. En una realizacion particular, la dosis de un compuesto de la invencion para el tratamiento de un ser humano de 70 kg estara en el intervalo de aproximadamente 10 nanogramos (ng) a aproximadamente 10 mg. En otra realizacion, la dosis eficaz sena de aproximadamente 0,1 jg a aproximadamente 1.000 jg. En una realizacion, la dosis de un compuesto de la invencion para el tratamiento de un ser humano de 70 kg estana en el intervalo de aproximadamente 0,5 jg a aproximadamente 0,5 mg. En una realizacion adicional, la dosis sera de aproximadamente 0,5 jg a aproximadamente 60 jg. En otra realizacion, la dosis farmaceuticamente eficaz sera de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 jg. En otra realizacion, la dosis farmaceuticamente eficaz sera de aproximadamente 5 jg a aproximadamente 50 jg. Otra realizacion tendra una dosis eficaz de aproximadamente 10 jg a aproximadamente 40 jg. En dos realizaciones mas, la dosis farmaceuticamente eficaz sera de aproximadamente 15 jg a aproximadamente 50 jg, de aproximadamente 15 jg a aproximadamente 30 jg, respectivamente. Se entendera que en cada uno de estos intervalos de dosis, se incluyen todas las dosis incrementales en el intervalo. A modo de ejemplo, el intervalo de 0,5-50 jg incluye dosis individuales de: 0,5 jg, 0,6 jg, 0,7 jg, 0,8 jg, 0,9 jg, 1,0 jg, 1,1 jg,
1.2 jg, 1,3 jg, 1,4 jg, 1,5 jg, 1,6 jg, 1,7 jg, 1,8 jg, 1,9 jg, 2,0 jg, 2,1 jg, 2,2 jg, 2,3 jg, 2,4 jg, 2,5 jg, 2,6 jg, 2,7
jg, 2,8 jg, 2,9 jg, 3,0 jg, 3,1 jg, 3,2 jg, 3,3 jg, 3,4 jg, 3,5 jg, 3,6 jg, 3,7 jg, 3,8 jg, 3,9 jg, 4,0 jg, 4,1 jg, 4,2 jg,
4.3 jg, 4,4 jg, 4,5 jg, 4,6 jg, 4,7 jg, 4,8 jg, 4,9 jg, 5,0 jg, 5,1 jg, 5,2 jg, 5,3 jg, 5,4 jg, 5,5 jg, 5,6 jg, 5,7 jg, 5,8
jg, 5,9 jg, 6,0 jg, 6,1 jg, 6,2 jg, 6,3 jg, 6,4 jg, 6,5 jg, 6,6 jg, 6,7 jg, 6,8 jg, 6,9 jg, 7,0 jg, 7,1 jg, 7,2 jg, 7,3 jg,
7.4 jg, 7,5 jg, 7,6 jg, 7,7 jg, 7,8 jg, 7,9 jg, 8,0 jg, 8,1 jg, 8,2 jg, 8,3 jg, 8,4 jg, 8,5 jg, 8,6 jg, 8,7 jg, 8,8 jg, 8,9
jg, 9,0 jg, 9,1 jg, 9,2 jg, 9,3 jg, 9,4 jg, 9,5 jg, 9,6 jg, 9,7 jg, 9,8 jg, 9,9 jg, 10,0 jg, 10,1 jg, 10,2 jg, 10,3 jg,
10.4 jg, 10,5 jg, 10,6 jg, 10,7 jg, 10,8 jg, 10,9 jg, 11,0 jg, 11,1 jg, 11,2 jg, 11,3 jg, 11,4 jg, 11,5 jg, 11,6 jg,
11,7 jg, 11,8 jg, 11,9 jg, 12,0 jg, 12,1 jg, 12,2 jg, 12,3 jg, 12,4 jg, 12,5 jg, 12,6 jg, 12,7 jg, 12,8 jg, 12,9 jg,
13,0 jg, 13,1 jg, 13,2 jg, 13,3 jg, 13,4 jg, 13,5 jg, 13,6 jg, 13,7 jg, 13,8 jg, 13,9 jg, 14,0 jg, 14,1 jg, 14,2 jg,
14,3 jg, 14,4 jg, 14,5 jg, 14,6 jg, 14,7 jg, 14,8 jg, 14,9 jg, 15,0 jg, 15,1 jg, 15,2 jg, 15,3 jg, 15,4 jg, 15,5 jg,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
15
6 Mg, 15 7 Mg, 15 00 Mg, 15 ,9 Mg, 16 ,0 Mg, 16 1 Mg, 16 2 Mg, 16 3 Mg, 16 ,4 Mg, 16 ,5 Mg, 16 ,6 Mg, 16 7 Mg, 16 00 Mg
16
9 Mg, 17 0 Mg, 17 ,1 Mg, 17 ,2 Mg, 17 ,3 Mg, 17 4 Mg, 17 5 Mg, 17 6 Mg, 17 ,7 Mg, 17 ,8 Mg, 17 ,9 Mg, 18 0 Mg, 18 ,1 Mg
18,
2 Mg, 18 3 Mg, 18 ,4 Mg, 18 ,5 Mg, 18 ,6 Mg, 18 7 Mg, 18 8 Mg, 18 9 Mg, 19 ,0 Mg, 19 ,1 Mg, 19 ,2 Mg, 19 3 Mg, 19 ,4 Mg
19,
5 Mg, 19 6 Mg, 19 ,7 Mg, 19 ,8 Mg, 19 ,9 Mg, 20 0 Mg, 20 1 Mg, 20 2 Mg, 20 ,3 Mg, 20 ,4 Mg, 20 ,5 Mg, 20 6 Mg, 20 ,7 Mg
20
8 Mg, 20 9 Mg, 21 ,0 Mg, 21 ,1 Mg, 21 ,2 Mg, 21 3 Mg, 21 4 Mg, 21 5 Mg, 21 ,6 Mg, 21 ,7 Mg, 21 ,8 Mg, 21 9 Mg, 22 ,0 Mg
22
1 Mg, 22 2 Mg, 22 ,3 Mg, 22 ,4 Mg, 22 ,5 Mg, 22 6 Mg, 22 7 Mg, 22 8 Mg, 22 ,9 Mg, 23 ,0 Mg, 23 ,1 Mg, 23 2 Mg, 23 ,3 Mg
23
4 Mg, 23 5 Mg, 23 ,6 Mg, 23 ,7 Mg, 23 ,8 Mg, 23 9 Mg, 24 0 Mg, 24 1 Mg, 24 ,2 Mg, 24 ,3 Mg, 24 ,4 Mg, 24 5 Mg, 24 ,6 Mg
24
7 Mg, 24 8 Mg, 24 ,9 Mg, 25 ,0 Mg, 25 ,1 Mg, 25 2 Mg, 25 3 Mg, 25 4 Mg, 25 ,5 Mg, 25 ,6 Mg, 25 ,7 Mg, 25 8 Mg, 25 ,9 Mg
26
0 Mg, 26 1 Mg, 26 ,2 Mg, 26 ,3 Mg, 26 ,4 Mg, 26 5 Mg, 26 6 Mg, 26 7 Mg, 26 ,8 Mg, 26 ,9 Mg, 27 ,0 Mg, 27 1 Mg, 27 ,2 Mg
27,
3 Mg, 27 4 Mg, 27 ,5 Mg, 27 ,6 Mg, 27 ,7 Mg, 27 8 Mg, 27 9 Mg, 28 0 Mg, 28 ,1 Mg, 28 ,2 Mg, 28 ,3 Mg, 28 4 Mg, 28 ,5 Mg
28
6 Mg, 28 7 Mg, 28 ,8 Mg, 28 ,9 Mg, 29 ,0 Mg, 29 1 Mg, 29 2 Mg, 29 3 Mg, 29 ,4 Mg, 29 ,5 Mg, 29 ,6 Mg, 29 7 Mg, 29 ,8 Mg
29
9 Mg, 30 0 Mg, 30 ,1 Mg, 30 ,2 Mg, 30 ,3 Mg, 30 4 Mg, 30 5 Mg, 30 6 Mg, 30 ,7 Mg, 30 ,8 Mg, 30 ,9 Mg, 31 0 Mg, 31 ,1 Mg
31
2 Mg, 31 3 Mg, 31 ,4 Mg, 31 ,5 Mg, 31 ,6 Mg, 31 7 Mg, 31 8 Mg, 31 9 Mg, 32 ,0 Mg, 32 ,1 Mg, 32 ,2 Mg, 32 3 Mg, 32 ,4 Mg
32
5 Mg, 32 6 Mg, 32 ,7 Mg, 32 ,8 Mg, 32 ,9 Mg, 33 0 Mg, 33 1 Mg, 33 2 Mg, 33 ,3 Mg, 33 ,4 Mg, 33 ,5 Mg, 33 6 Mg, 33 ,7 Mg
33
8 Mg, 33 9 Mg, 34 ,0 Mg, 34 ,1 Mg, 34 ,2 Mg, 34 3 Mg, 34 4 Mg, 34 5 Mg, 34 ,6 Mg, 34 ,7 Mg, 34 ,8 Mg, 34 9 Mg, 35 ,0 Mg
35
1 Mg, 35 2 Mg, 35 ,3 Mg, 35 ,4 Mg, 35 ,5 Mg, 35 6 Mg, 35 7 Mg, 35 8 Mg, 35 ,9 Mg, 36 ,0 Mg, 36 ,1 Mg, 36 2 Mg, 36 ,3 Mg
36
4 Mg, 36 5 Mg, 36 ,6 Mg, 36 ,7 Mg, 36 ,8 Mg, 36 9 Mg, 37 0 Mg, 37 1 Mg, 37 ,2 Mg, 37 ,3 Mg, 37 ,4 Mg, 37 5 Mg, 37 ,6 Mg
37
7 Mg, 37 8 Mg, 37 ,9 Mg, 38 ,0 Mg, 38 ,1 Mg, 38 2 Mg, 38 3 Mg, 38 4 Mg, 38 ,5 Mg, 38 ,6 Mg, 38 ,7 Mg, 38 8 Mg, 38 ,9 Mg
39
0 Mg, 39 1 Mg, 39 ,2 Mg, 39 ,3 Mg, 39 ,4 Mg, 39 5 Mg, 39 6 Mg, 39 7 Mg, 39 ,8 Mg, 39 ,9 Mg, 40 ,0 Mg, 40 1 Mg, 40 ,2 Mg
40
3 Mg, 40 4 Mg, 40 ,5 Mg, 40 ,6 Mg, 40 ,7 Mg, 40 8 Mg, 40 9 Mg, 41 0 Mg, 41 ,1 Mg, 41 ,2 Mg, 41 ,3 Mg, 41 4 Mg, 41 ,5 Mg
41
6 Mg, 41 7 Mg, 41 ,8 Mg, 41 ,9 Mg, 42 ,0 Mg, 42 1 Mg, 42 2 Mg, 42 3 Mg, 42 ,4 Mg, 42 ,5 Mg, 42 ,6 Mg, 42 7 Mg, 42 ,8 Mg
42
9 Mg, 43 0 Mg, 43 ,1 Mg, 43 ,2 Mg, 43 ,3 Mg, 43 4 Mg, 43 5 Mg, 43 6 Mg, 43 ,7 Mg, 43 ,8 Mg, 43 ,9 Mg, 44 0 Mg, 44 ,1 Mg
44
2 Mg, 44 3 Mg, 44 ,4 Mg, 44 ,5 Mg, 44 ,6 Mg, 44 7 Mg, 44 8 Mg, 44 9 Mg, 45 ,0 Mg, 45 ,1 Mg, 45 ,2 Mg, 45 3 Mg, 45 ,4 Mg
45
5 Mg, 45 6 Mg, 45 ,7 Mg, 45 ,8 Mg, 45 ,9 Mg, 46 0 Mg, 46 1 Mg, 46 2 Mg, 46 ,3 Mg, 46 ,4 Mg, 46 ,5 Mg, 46 6 Mg, 46 ,7 Mg
46
8 Mg, 46 9 Mg, 47 ,0 Mg, 47 ,1 Mg, 47 ,2 Mg, 47 3 Mg, 47 4 Mg, 47 5 Mg, 47 ,6 Mg, 47 ,7 Mg, 47 ,8 Mg, 47 9 Mg, 48 ,0 Mg
48
1 Mg, 48 2 Mg, 48 ,3 Mg, 48 ,4 Mg, 48 ,5 Mg, 48 6 Mg, 48 7 Mg, 48 8 Mg, 38 ,9 Mg, 49 ,0 Mg, 49 ,1 Mg, 49 2 Mg, 49 ,3 Mg
49
4 Mg, 49, 5 Mg, 49, 6 Mg, 49,7 Mg, 49,8 Mg, 39,9 Mg y 50 Mg.
Las dosis sugeridas precedentes se pueden ajustar usando calculos convencionales si el compuesto se administra a traves de una via diferente. La determinacion de una dosis apropiada para la administracion por otras v^as esta dentro de la experiencia de los expertos en la especialidad a la luz de la descripcion precedente y el conocimiento general de la especialidad.
El aporte de una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion puede implicar el aporte de una sola forma de dosificacion o multiples dosis unitarias que se pueden aportar contemporaneamente o separadas en el tiempo a lo largo de un penodo indicado, tal como 24 horas. Una dosis de un compuesto de la invencion (solo o en la forma de una composicion que comprende el mismo) se puede administrar de una a diez veces al dfa. Tfpicamente, un compuesto de la invencion (solo o en la forma de una composicion que comprende el mismo) se administrara cuatro, tres, dos o una vez al dfa (24 horas).
Los compuestos de Formula (I) de la presente invencion tambien son utiles para tratar infecciones transmitidas por el aire. Ejemplos de infecciones transmitidas por el aire incluyen, por ejemplo, RSV. Los compuestos de Formula (I) de la presente invencion tambien son utiles para tratar infeccion por carbunco. La presente invencion se refiera al uso de los compuestos de Formula (I) de la presente invencion para el tratamiento profilactico, profilactico posterior a la exposicion, preventivo o terapeutico contra enfermedades o afecciones provocadas por patogenos. En una realizacion preferida, la presente invencion se refiere al uso de los compuestos de Formula (l) para el tratamiento profilactico, profilactico posterior a la exposicion, preventivo o terapeutico contra enfermedades o afecciones provocadas por patogenos que se pueden usar en bioterrorismo.
En los ultimos anos, se han puesto en marcha una variedad de programas de investigacion y medidas de biodefensa para hacer frente a las preocupaciones sobre el uso de agentes biologicos en actos de terrorismo. Estas medidas estan destinadas a tratar problemas relativos al bioterrorismo o al uso de microorganismos o toxinas biologicas para matar personas, difundir el miedo y alterar la sociedad. Por ejemplo, the National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) ha desarrollado un Strategic Plan for Biodefense Research que esboza planes para tratar necesidades de investigacion en la amplia area del bioterrorismo y enfermedades infecciosas emergentes y reemergentes. Segun el plan, la exposicion deliberada de la poblacion civil de los Estados Unidos a esporas de Bacillus anthracis revelaba un hueco en la preparacion global del pafs contra el bioterrorismo. Por otra parte, el informe detalla que estos ataques descubnan una necesidad no satisfecha de pruebas para diagnosticar rapidamente, vacunas e inmunoterapias para prevenir u farmacos y productos biologicos para curar una enfermedad provocada por agentes de bioterrorismo.
Gran parte del foco de los diversos esfuerzos de investigacion se ha dirigido a estudiar la biologfa de los patogenos identificados como potencialmente peligrosos con agentes de bioterrorismo, estudiar la respuesta del hospedador contra tales agentes, desarrollar vacunas contra enfermedades infecciosas, evaluar las terapias disponibles actualmente y bajo investigacion contra tales agentes y desarrollar diagnosticos para identificar signos y smtomas de agentes amenazantes. Tales esfuerzos son loables pero, dado el gran numero de agentes patogenos que se ha
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
identificado como potencialmente disponible para bioterrorismo, estos esfuerzos todavfa no han podido proporcionar respuestas satisfactorias para todas las posibles amenazas de bioterrorismo. Adicionalmente, muchos de los patogenos identificados como potencialmente peligrosos como agentes de bioterrorismo no proporcionan incentivos economicos adecuados para el desarrollo de medidas terapeuticas o preventivas por la industria. Por otra parte, incluso si estuvieran disponibles medidas preventivas tales como vacunas para cada patogeno que se puede usar en bioterrorismo, el coste de administrar todas estas vacunas a la poblacion general es prohibitivo.
Hasta que esten disponibles tratamientos convenientes y eficaces contra cada amenaza de bioterrorismo, existe una necesidad importante de tratamientos preventivos, profilacticos o terapeuticos que puedan prevenir o reducir el riesgo de infeccion por agentes patogenos.
La presente memoria descriptiva divulga tales metodos de tratamiento profilactico. En un aspecto, se proporciona un metodo de tratamiento profilactico que comprende administrar una cantidad profilacticamente eficaz de los compuestos de Formula (I) a un individuo que necesite tratamiento profilactico contra una infeccion por uno o mas patogenos transmitidos por el aire. Un ejemplo particular de un patogeno de transmision aerea es el carbunco.
En otro aspecto, se divulga un metodo de tratamiento profilactico para reducir el riesgo de infeccion procedente de un patogeno de transmision aerea que puede provocar una enfermedad en un ser humano, comprendiendo dicho metodo administrar una cantidad eficaz de los compuestos de Formula (I) a los pulmones del ser humano que puede tener riesgo de infeccion por el patogeno de transmision aerea pero es asintomatico para la enfermedad, en el que la cantidad eficaz de un bloqueante de canales del sodio y osmolito son suficientes para reducir el riesgo de infeccion en el ser humano. Un ejemplo particular de un patogeno de transmision aerea es el carbunco.
En otro aspecto, se divulga un metodo de tratamiento profilactico posterior a la exposicion o de tratamiento terapeutico para tratar la infeccion por un patogeno de transmision aerea que comprende administrar una cantidad eficaz de los compuestos de Formula (I) a los pulmones de un individuo que necesite tal tratamiento contra la infeccion por un patogeno de transmision aerea. Los patogenos contra los que se puede proteger mediante los metodos de exposicion profilactica posterior, rescate y tratamiento terapeutico de la invencion incluyen cualesquiera patogenos que puedan entrar en el cuerpo a traves de la boca, la nariz o las vfas respiratorias nasales, avanzando sf hasta el interior de los pulmones. Tfpicamente, los patogenos seran patogenos de transmision aerea, bien naturalmente o bien mediante aerosolizacion. Los patogenos pueden ser naturales o pueden haber sido introducidos en el ambiente intencionadamente despues de la aerosolizacion u otro metodo para introducir los patogenos en el ambiente. Muchos patogenos que no son transmitidos naturalmente en el aire se han aerosolizado o se pueden aerosolizar para el uso en bioterrorismo. Los patogenos para los que puede ser util el tratamiento de la invencion incluyen, pero no se limitan a, patogenos prioritarios de categona A, By C segun se indica por el NIAID. Estas categonas corresponden generalmente a las listas compiladas por los Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Segun se indica por los CDC, los agentes de Categona A son los que se pueden diseminar o transmitir facilmente de persona a persona, provocar alta mortalidad, con potencial para un impacto importante sobre la salud publica. Los agentes de Categona B son proximos en prioridad e incluyen los que son moderadamente faciles de diseminar y provocan morbidez moderada y baja mortalidad. La Categona C consiste en patogenos emergentes que se podnan manipular para la diseminacion en masa en el futuro debido a su disponibilidad, facilidad de produccion y diseminacion y potencial de alta morbidez y mortalidad. Ejemplos particulares de estos patogenos son el carbunco y la peste. Patogenos adicionales contra los que se puede proteger o se puede reducir el riesgo de infeccion de los mismos incluyen virus de la gripe, rinovirus, adenovirus y virus respiratorios sincitiales y similares. Un patogeno adicional contra el que se puede proteger es el coronavirus que se cree que provoca el smdrome respiratorio agudo grave (SARS).
La presente memoria descriptiva tambien divulga el uso de bloqueantes de canales del sodio de Formula I, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para prevenir, aplacar y/o tratar efectos deterministas sobre la salud del tracto respiratorio provocados por la exposicion a materiales radiologicos, particularmente aerosoles respirables que contienen radionuclidos procedentes de ataques nucleares, tales como la detonacion de dispositivos de dispersion radiologica (RDD) o accidentes, tales como desastres en centrales nucleares. Como tal, se proporciona en la presente un metodo para prevenir, aplacar y/o tratar efectos deterministas sobre la salud del tracto respiratorio y/u otros organos corporales provocados por aerosoles respirables que contienen radionuclidos en un receptor que lo necesite, incluyendo en un ser humano que lo necesite, comprendiendo dicho metodo administrar a dicho ser humano una cantidad eficaz de un compuesto de Formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Una preocupacion principal asociada con la planificacion del manejo de las consecuencias para exposiciones de miembros del publico a aerosoles respirables que contienen radionuclidos procedentes de ataques nucleare, tales como la detonacion de dispositivos de dispersion radiologica (RDD) o accidentes, tales como desastres en centrales nucleares, es como prevenir, mitigar o tratar efectos deterministas potenciales sobre la salud del tracto respiratorio, principalmente el pulmon. Es necesario tener farmacos, tecnicas y procedimientos y personal entrenado preparado para manejar y tratar a estos individuos muy contaminados internamente.
La investigacion se ha conducido a determinar modos en los que prevenir, mitigar o tratar un dano potencial al tracto respiratorio y diversos organos del cuerpo que esta provocado por radionuclidos depositados internamente. Hasta la
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
fecha, la mayona de la atencion de la investigacion se ha enfocado a estrategias disenadas para mitigar efectos sobre la salud procedentes de radionuclidos depositados internamente al acelerar su excrecion o retirada. Estas estrategias se han enfocado a formas qmmicas solubles que sean capaces de alcanzar la corriente sangumea y se depositen en zonas sistemicas remotas espedficas para un radioelemento dado. Tales enfoques no funcionaran en casos en los que el radionuclido depositado este en una forma relativamente insoluble. Los estudios han mostrado que muchos, si no la mayona de las formas fisicoqmmicas de radionuclidos dispersados procedentes de RDD, estaran en una forma relativamente insoluble.
El unico metodo conocido para reducir eficazmente la dosis de radiacion a los pulmones procedente de aerosoles radiactivos insolubles inhalados en el lavado broncoalveolar o BAL. Se ha observado que esta tecnica, que se adaptaba a partir de la que ya esta en uso para el tratamiento de pacientes con proteinosis alveolar, es un procedimiento repetible seguro, incluso cuando se realiza a lo largo de un penodo prolongado. Aunque hay variaciones en el procedimiento, el metodo basico para el BAL es anestesiar al sujeto, seguido por la introduccion lenta de solucion salina isotonica en un solo lobulo del pulmon hasta que se alcanza la capacidad funcional residual. A continuacion, volumenes adicionales se anaden y se drenan por gravedad.
Los resultados de los estudios que usan BAL en animales indican que aproximadamente 40% del contenido pulmonar profundo se puede retirar mediante una secuencia razonable de BAL. En algunos estudios, habfa una variabilidad considerable entre animales en la cantidad de radionuclido recuperado. Las razones de la variabilidad no se entienden actualmente.
Ademas, basandose en un estudio en animales, se cree que una reduccion de dosis significativa a partir de una terapia con BAL da como resultado la mitigacion de efectos sobre la salud debidos a la inhalacion de radionuclidos insolubles. En el estudio, perros adultos inhalaron partfculas de 144Ce-FAP insolubles. A dos grupos de perros se les dieron contenidos de 44Ce que se sabe que provocan neumonitis y fibrosis pulmonar por radiacion (aproximadamente 2 MBq/kg de masa corporal), tratandose un grupo con 10 lavados unilateral entre 2 y 56 dfas despues de la exposicion, el otro sin tratar. Un tercer grupo se expuso a un nivel de 144Ce comparable al observado en el grupo tratado con BAL despues del tratamiento (aproximadamente 1 MBq/kg), pero estos animales no se trataron. Se dejo que todos los animales vivieran sus vidas, que se prolongaron hasta 16 anos. Debido a que hay variabilidad en el contenido pulmonar inicial de 144Ce entre los perros de cada grupo, los grados de dosificacion y las dosis acumulativas para cada grupo se solapan. No obstante, el efecto del BAL en la reduccion del riesgo de neumonitis/fibrosis sera evidente a partir de las curvas de supervivencia. En los perros no tratados con contenidos pulmonares de 1,5-2,5 MBq/kg, el tiempo de supervivencia medio era 370 ± 65 d. Para los perros tratados, la supervivencia media era 1270 ± 240 d, que era significativamente diferente estadfsticamente. El tercer grupo, que recibfa contenidos pulmonares de 144Ce de 0,6-1,4 MBq tema un tiempo de supervivencia medio de 1800 ± 230, que no era estadfsticamente diferente del grupo tratado. Igualmente importante para la supervivencia incrementada, los perros en el grupo no tratado de dosis alta mona de efectos deterministas en el pulmon (neumonitis/fibrosis) mientras que los perros tratados no lo hadan. En cambio, los perros tratados, como los perros del grupo no tratado de dosis baja, teman en gran parte tumores pulmonares (hemangiosarcoma o carcinoma). Por lo tanto, el reduccion en la dosis resultante de tratamiento con BAL parece haber producido efectos biologicos en el pulmon que eran predecible basandose en las dosis de radiacion que recidan los pulmones.
Basandose en estos resultados, se cree que disminuir la dosis radiologica residual adicionalmente mediante cualquier metodo o combinacion de metodos para intensificar la depuracion de partfculas del pulmon disminuina adicionalmente la probabilidad de efectos sobre la salud del pulmon. Sin embargo, el BAL es un procedimiento que tiene muchas desventajas. El BAL es un procedimiento muy invasivo que se debe realizar en centros medicos especializados por neumologos entrenados. Como tal, un procedimiento de BAL es costoso. Dadas las desventajas del BAL, no es una opcion de tratamiento que este disponible facilmente e inmediatamente para personas que necesiten una retirada acelerada de partfculas radiactivas, por ejemplo, en el caso de un ataque nuclear. En el caso de un ataque nuclear o un accidente nuclear, se necesita un tratamiento inmediato y administrado de forma relativamente facil para personas que se han expuesto o estan en riesgo de ser expuestas. Se ha mostrado que los bloqueantes de canales del sodio administrados como un aerosol de inhalacion restauran la hidratacion de superficies de las vfas respiratorias. Tal hidratacion de superficies de las vfas respiratorias ayuda a depurar del pulmon secreciones mucosas acumuladas y materia en partfculas asociada. Como tal, sin querer limitarse por ninguna teona particular, se cree que se pueden usar bloqueantes de canales del sodio para acelerar la retirada de partfculas radiactivas de los conductos respiratorios.
Segun se analiza anteriormente, el mayor riesgo para los pulmones despues de un ataque radiologico, tal como una bomba sucia, resulta de la inhalacion y la retencion de partfculas radiactivas insolubles. Como resultado de la retencion de partfculas radiactivas, la exposicion acumulativa al pulmon se incrementa significativamente, dando como resultado finalmente fibrosis pulmonar/neumonitis y potencialmente muerte. Las partfculas insolubles no pueden ser depuradas sistemicamente mediante agentes quelantes debido a que estas partfculas no estan en solucion. Hasta la fecha, la retirada ffsica de materia en partfculas a traves de BAL es el unico regimen terapeutico que se muestra que es eficaz para mitigar la enfermedad pulmonar inducida por radiacion. Segun se analiza anteriormente, el BAL no es una solucion de tratamiento realista para reducir los efectos de partfculas radiactivas que se han inhalado en el cuerpo. Como tal, es deseable proporcionar un regimen terapeutico que ayude
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
eficazmente a depurar partfculas radiactivas de los conductos respiratorios y que, a diferencia del BAL, sea relativamente simple de administrar y aumentable a escala en un entorno de exposicion a radiacion a gran escala. Ademas, tambien es deseable que el regimen terapeutico este facilmente disponible para un numero de personas en un penodo relativamente corto.
En un aspecto de la presente divulgacion, un metodo para prevenir, mitigar y/o tratar efectos deterministas sobre la salud del tracto respiratorio y/u otros organos corporales provocados por aerosoles respirables que contienen radionuclidos comprende administrar una cantidad eficaz de un bloqueante de canales del sodio de Formula I o una de sus sales farmaceuticamente aceptables a un individuo que lo necesite. En una caractenstica de este aspecto, el bloqueante de canales del sodio se administra junto con un osmolito. Con respecto tambien a esta caractenstica, el osmolito es solucion salina hipertonica (HS). En una caractenstica adicional, el bloqueante de canales del sodio y el osmolito se administran junto con un modulador del transporte ionico. Con respecto tambien a esta caractenstica, el modulador del transporte ionico se puede seleccionar del grupo que consiste en p-agonistas, potenciadores de CFTR, agonistas de receptores purinergicos, lubiprostonas e inhibidores de proteasas. En otra caractenstica de este aspecto, los radionuclidos se seleccionan del grupo que consiste en cobalto-60, cesio-137, iridio-192, radio-226, fosforo-32, estroncio-89 y 90, yodo-125, talio-201, plomo-210, torio-234, uranio-238, plutonio, cobalto-58, cromo-51, americio y curio. En una caractenstica adicional, los radionuclidos proceden de un dispositivo de eliminacion de residuos radiactivos. En otra caractenstica adicional mas, el bloqueante de canales del sodio o su sal farmaceuticamente aceptable se administra en una suspension en aerosol de partfculas respirables que inhala el individuo. En una caractenstica adicional, el bloqueante de canales del sodio o una de sus sales farmaceuticamente aceptables se administra despues de la exposicion a los radionuclidos.
Composiciones
Aunque es posible que un compuesto de la invencion se administre solo, en algunas realizaciones es preferible presentarlo en la forma de una composicion, particularmente una composicion (formulacion) farmaceutica. Asf, en otro aspecto, la invencion proporciona composiciones y particularmente composiciones farmaceuticas (tales como una composicion farmaceutica inhalable) que comprenden una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de la invencion como un ingrediente activo y un excipiente, diluyente o portador farmaceuticamente aceptable. El termino "ingrediente activo", segun se emplea en la presente, se refiere a cualquier compuesto de la invencion o combinacion de dos o mas compuestos de la invencion en una composicion farmaceutica. Tambien se proporcionan realizaciones espedficas en las que una composicion farmaceutica comprende una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formulas (I), (la), (Il), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, independientemente o en combinacion con un excipiente, diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica comprende una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formulas (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, independientemente o en combinacion, en un diluyente. En realizaciones separadas, la composicion farmaceutica comprende una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formulas (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, en solucion salina hipertonica, agua esteril y solucion salina hipertonica, respectivamente, en donde la concentracion salina puede ser como se describe en la presente. En una realizacion, la concentracion salina es 0,17% p/v y en otra es 2,8% p/v.
Tambien se proporciona un estuche que comprende i) una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables; ii) uno o mas excipientes, portadores o diluyentes farmaceuticamente aceptables; iii) instrucciones para administrar el compuesto del grupo i) y los excipientes, portadores o diluyentes del grupo ii) a un sujeto que lo necesite; y iv) un recipiente. Un sujeto que lo necesite incluye cualquier sujeto que necesite los metodos de tratamiento descritos en la presente, incluyendo particularmente un sujeto humano que lo necesite. Realizaciones adicionales tambien comprenden un dispositivo de aerosolizacion seleccionado del grupo de un nebulizador, incluyendo nebulizadores de malla vibratoria y nebulizadores de chorro, un inhalador de polvo seco, incluyendo inhaladores de polvo seco activo y pasivo y un inhalador de dosis medidas, incluyendo inhaladores de dosis medida presurizados, de polvo seco y de nebulizacion suave.
En una realizacion un estuche comprende i) de aproximadamente 10 ng a aproximadamente 10 mg de un compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, por dosis; ii) de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de diluyente por dosis; iii) instrucciones para administrar el compuesto del grupo i) y el diluyente del grupo ii) a un sujeto que lo necesite; y iv) un recipiente. En una realizacion adicional, el diluyente es de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de una solucion salina, segun se describe en la presente, por dosis. En una realizacion adicional, el diluyente es de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de una solucion salina hipotonica por dosis. En otra realizacion, el diluyente es de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de una solucion salina hipertonica por dosis. En una realizacion adicional mas, el diluyente es de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de agua esteril por dosis.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Tambien se proporciona un estuche que comprende i) una solucion que comprende una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables; disuelta en un diluyente farmaceuticamente aceptable; iii) instrucciones para administrar la solucion del grupo i) a un sujeto que lo necesite; y iii) un recipiente.
Tambien se proporciona un estuche que comprende i) una solucion que comprende de aproximadamente 10 ng a aproximadamente 10 mg de un compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables; disuelta en un diluyente farmaceuticamente aceptable; iii) instrucciones para administrar la solucion del grupo i) a un sujeto que lo necesite; y iii) un recipiente. En una realizacion adicional, el diluyente es de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml de una solucion salina, segun se describe anteriormente, por dosis.
Otra realizacion comprende un estuche que comprende i) una cantidad farmaceuticamente eficaz de un compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables; en una formulacion en polvo seco adecuada para la inhalacion ii) opcionalmente, uno o mas excipientes o portadores farmaceuticamente aceptables adecuados para la inhalacion; iii) instrucciones para administrar el compuesto del grupo i) y los excipientes o portadores del grupo ii) a un sujeto que lo necesite; y iv) un recipiente. En una realizacion adicional, el estuche tambien comprende un inhalador de polvo seco adecuado para aportar la formulacion de polvo seco a un receptor. El inhalador de polvo seco puede ser, en realizaciones adicionales, un inhalador de una sola dosis o un inhalador de multiples dosis.
Realizaciones adicionales de cada uno de los estuches descritos en la presente incluyen aquellas en las que la concentracion del compuesto de Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, por dosis, es uno de los intervalos de dosis eficaz descritos en la presente, incluyendo a) de aproximadamente 0,1 |jg a aproximadamente 1.000 |jg; b) de aproximadamente 0,5 |jg a aproximadamente 0,5 mg; y c) de aproximadamente 0,5 jig a aproximadamente 50 jig.
Para cada uno de los estuches descritos anteriormente, hay una realizacion adicional en la que el diluyente es solucion salina hipertonica de las concentraciones descritas en la presente. En otra realizacion para cada estuche el diluyente es solucion salina hipotonica de las concentraciones descritas en la presente. En una realizacion adicional para cada estuche, el diluyente es agua esteril adecuada para inhalacion.
El excipiente o excipientes, diluyente o diluyentes o portador o portadores farmaceuticamente aceptables deben ser aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulacion y no perjudiciales para el receptor de la misma. Generalmente, el excipiente o excipientes, diluyente o diluyentes o portador o portadores farmaceuticamente aceptables empleados en la formulacion farmaceutica son "atoxicos", lo que significa que se consideran seguros para el consumo en la cantidad aportada en la formulacion, e "inertes", lo que significa que no reaccionan apreciablemente con o dan como resultado un efecto no deseado sobre la actividad terapeutica del ingrediente o los ingredientes activos. Excipientes, diluyentes y portadores farmaceuticamente aceptables son convencionales en la especialidad y se pueden seleccionar usando tecnicas convencionales, basandose en la via de administracion deseada. Vease REMINGTON'S, PHARMACEUTICAL SCIENCES, Lippincott Williams & Wilkins; 21a Ed (1 de mayo de 2005). Preferiblemente, el excipiente o excipientes, diluyente o diluyentes o portador o portadores farmaceuticamente aceptables son considerados generalmente como seguros (GRAS) segun la FDA.
Las composiciones farmaceuticas segun la invencion incluyen las adecuadas para la administracion oral; la administracion parenteral, incluyendo subcutanea, intradermica, intramuscular, intravenosa e intraarticular; la administracion topica, incluyendo la administracion topica a la piel, los ojos, los ofdos, etc.; la administracion vaginal o rectal; y la administracion al tracto respiratorio, incluyendo las fosas y los senos nasales, las vfas respiratorias orales y extratoracicas y los pulmones, incluyendo mediante el uso de aerosoles que se pueden aportar por medio de diversos tipos de inhaladores de polvo seco, inhaladores de dosis medidas presurizados, inhaladores de nebulizacion suave, nebulizadores o insufladores. La via de administracion mas adecuada puede depender de varios factores incluyendo el paciente y la afeccion o el trastorno que se trate.
Las formulaciones se pueden presentar en forma de dosificacion unitaria o a granel como por ejemplo en el caso de formulaciones que se van a medir mediante un inhalador y se pueden preparar mediante cualquiera de los metodos bien conocidos en la especialidad de la farmacia. Generalmente, los metodos incluyen la etapa de asociar el ingrediente activo con el portador, diluyente o excipiente y opcionalmente uno o mas ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan al asociar uniformemente e mtimamente el ingrediente activo con uno o mas portadores, diluyentes o excipientes lfquidos o portadores, diluyentes o excipientes solidos finamente divididos o ambos y, a continuacion, si es necesario, conformar el producto en la formulacion deseada.
En una realizacion preferida, la composicion es una composicion farmaceutica inhalable que es adecuada para la inhalacion y el aporte al espacio endobronquial. Tfpicamente, tal composicion esta en la forma de un aerosol que comprende partfculas para el aporte usando un nebulizador, un inhalador de dosis medidas presurizado (MDI), un inhalador de nebulizacion sueva o un inhalador de polvo seco (DPI). La formulacion en aerosol usada en los metodos de la presente invencion puede ser un lfquido (p. ej., una solucion) adecuado para la administracion
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
mediante un nebulizador, un inhalador de nebulizacion suave o MDI o un polvo seco adecuado para la administracion mediante un MDI o DPI.
Los aerosoles usados para administrar medicamentos al tracto respiratorio tfpicamente estan polidispersos; esto es, estan comprendidos por partfculas de muchos tamanos diferentes. La distribucion del tamano de partfcula se describe tipicamente mediante el diametro aerodinamico medio en masa (MMAD) y la desviacion estandar geometrica (GSD). Para el aporte optimo de farmaco al espacio endobronquial, el MMAd esta en el intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 pm y preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 pm y el GSD es menor de 3 y preferiblemente menor de aproximadamente 2. Los aerosoles que tienen un MMAD por encima de 10 pm son generalmente demasiado grandes cuando se inhalan para alcanzar los pulmones. Los aerosoles con un GSD mayor de aproximadamente 3 no se prefieren para el aporte pulmonar ya que aportan un alto porcentaje del medicamento a la cavidad oral. Para alcanzar estos tamanos de partfcula en la formulacion en polvo, las partfculas del ingrediente activo se pueden reducir en tamano usando tecnicas convencionales tales como micronizacion o secado por pulverizacion. Ejemplos no limitativos de otros procedimientos o tecnicas que se pueden usar para producir partfculas respirables incluyen secado por pulverizacion, precipitacion, un fluido supercntico y criodesecacion. La fraccion deseada se puede separar mediante clasificacion por aire o tamizado. En una realizacion, las partfculas seran cristalinas. Para las formulaciones lfquidas, el tamano de partfcula se determina mediante la seleccion de un modelo particular de nebulizador, inhalador de nebulizacion suave o MDI.
Las distribuciones del tamano de partfcula del aerosol se determinan usando dispositivos muy conocidos en la especialidad, por ejemplo un impactador de cascada de Anderson de multiples fases u otro metodo adecuado tal como los citados espedficamente dentro del Capttulo 601 de la Farmacopea de EE. UU. como dispositivos caractensticos para aerosoles emitidos a partir de inhaladores de dosis medidas y de polvo seco.
Las composiciones de polvo seco para el aporte topico al pulmon mediante inhalacion se pueden formular sin excipiente o portador e incluyendo en cambio solamente los ingredientes activos en una forma de polvo seco que tiene un tamano de partfcula adecuado para la inhalacion. Las composiciones de polvo seco tambien pueden contener una mezcla del ingrediente activo y una base de polvo adecuada (sustancia portadora/diluyente/excipiente) adecuada tal como mono-, di- o polisacaridos (p. ej., lactosa o almidon). La lactosa es tfpicamente el excipiente preferido para formulaciones de polvo seco. Cuando se emplea un excipiente solido tal como lactosa, generalmente el tamano de partfcula del excipiente sera mucho mayor que el ingrediente para ayudar a la dispersion de la formulacion en el inhalador.
Ejemplos de inhaladores en polvo seco incluyen inhaladores de multiples dosis de deposito, inhaladores de multiples dosis premedidas, inhaladores basados en capsulas e inhaladores desechables de una sola dosis. Un inhalador de deposito contiene un gran numero de dosis (p. ej. 60) en un recipiente. Antes de la inhalacion, el paciente acciona el inhalador lo que hace que el indicador mida una dosis de medicamento desde el deposito y la prepare para la inhalacion. Ejemplos de DPI de deposito incluyen el Turbohaler® de AstraZeneca y el ClickHaler® de Vectura.
En un inhalador de dosis multiples premedidas, cada dosis individual se ha fabricado en un recipiente separado y el accionamiento del inhalador antes de la inhalacion hace que una nueva dosis de farmaco se libere desde su recipiente y se prepare para la inhalacion. Ejemplos de inhaladores DPI de multiples dosis incluyen, pero no se limitan a, Diskus® de GSK, Gyrohaler® de Vectura y Prohaler® de Valois. Durante la inhalacion, el flujo inspiratorio del paciente acelera la salida de polvo del dispositivo y hacia el interior de la cavidad oral. Para un inhalador de capsula, la formulacion esta en una capsula y se almacena fuera del inhalador. El paciente pone una capsula en el inhalador, acciona el inhalador (perfora la capsula), y a continuacion inhala. Ejemplos incluyen el Rotohaler™ (GlaxoSmithKline), Spinhaler™ (Novartis), HandiHaler™ (IB), TurboSpin™ (PH&T). Con inhaladores desechables de una sola dosis, el paciente acciona el inhalador para prepararlo para la inhalacion, inhala y a continuacion desecha el inhalador y el envase. Ejemplos incluyen el Twincer™ (U Groningen), OneDose™ (GFE) y Manta Inhaler™ (Manta Devices).
Generalmente, los inhaladores de polvo seco utilizan caractensticas de flujo turbulento de la trayectoria del polvo para hacer que los agregados de excipiente-farmaco de dispersen y las partfculas de ingrediente activo se depositan en los pulmones. Sin embargo, ciertos inhaladores de polvo seco utilizan una camara de dispersion ciclonica para producir partfculas del tamano respirable deseado. En una camara de dispersion ciclonica, el farmaco entra en una dispersion con conformacion de moneda tangencialmente de modo que la trayectoria del aire y el farmaco se mueven a lo largo de la pared circular externa. A medida que la formulacion de farmaco se mueve a lo largo de esta pared circular rebota alrededor y los aglomerados se rompen por fuerzas de impacto. La trayectoria del aire se mueve en espiral hacia el centro de la camara saliendo verticalmente. Las partfculas que tienen tamanos aerodinamicos suficientemente pequenos pueden seguir la trayectoria del aire y salir de la camara. En efecto, la camara de dispersion funciona como un pequeno molino de chorro. Dependiendo de las especificidades de la formulacion, se pueden anadir a la formulacion grandes cantidades de lactosa para ayudar a la dispersion a traves de impacto con las partfculas de API.
El inhalador desechable de una sola dosis Twincer™ parece funcionar usando una camara de dispersion ciclonica con conformacion de moneda denominada "clasificador por aire". Vease la Solicitud de Patente de EE. UU.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Publicada N° 2006/0237010 de Rijksuniversiteit Groningen. Documentos publicados por la Universidad de Groningen han indicado que una dosis de 60 mg de sulfometato de colistina micronizado puro se podna aportar eficazmente como un polvo seco inhalable utilizando esta tecnologfa.
En realizaciones preferidas, la formulacion en aerosol se aporta como un polvo seco usando un inhalador de polvo seco en el que las partfculas emitidas desde el inhalador tienen un MMAD en el intervalo de aproximadamente 1 pm a aproximadamente 5 pm y un GSD aproximadamente menor de 2.
Ejemplos de inhaladores de polvo seco y dispositivos de dispersion de polvo seco adecuados para el uso en el aporte de compuestos y composiciones segun la presente invencion incluyen los divulgados en los documentos US7520278; US7322354; US7246617; US7231920; US7219665; US7207330; US6880555; US5,522,385;
US6845772; US6637431; US6329034; US5.458.135; US4.805.811; y la Solicitud de Patente de EE. UU. Publicada N° 2006/0237010.
En una realizacion, la formulacion farmaceutica segun la invencion es un polvo seco para inhalacion que se formula para el aporte mediante un dispositivo de tipo Diskus®. El dispositivo Diskus® comprende una tira alargada formada por una lamina de base que tiene una pluralidad de rebajes separados a lo largo de su longitud y una lamina de tapa cerrada a la misma hermeticamente pero separablemente para definir una pluralidad de recipientes, teniendo cada recipiente en el mismo una formulacion inhalable que contiene una cantidad predeterminada de ingrediente activo bien solo o bien mezclado con uno o mas portadores o excipientes (p. ej., lactosa) y/o otros agentes terapeuticamente activos. Preferiblemente, la tira es suficiente flexible para ser arrollada como un rollo. La lamina de tapa y la lamina de base tendran preferiblemente porciones extremas delanteras que no se cierran entre sf y al menos una de las porciones extremas delanteras esta construida para estar conectada a medios de arrollamiento. Ademas, preferiblemente, el cierre hermetico entra las laminas de base y tapa se extiende sobre toda su anchura. Para preparar la dosis para inhalacion, la lamina de tapa preferiblemente se puede separar de la lamina de base en una direccion longitudinal desde un primer extremo de la lamina de base.
En una realizacion, la formulacion farmaceutica segun la invencion es un polvo seco para inhalacion que se formula para el aporte usando un inhalador desechable de una sola dosis y particularmente el inhalador Twincer™. El inhalador Twincer™ comprende un blister de estratificado de papel de aluminio con uno o mas rebajos y una lamina de tapa cerrada al mismo hermeticamente pero separablemente para definir una pluralidad de recipientes. Cada recipiente tiene en el mismo una formulacion inhalable que contiene una cantidad predeterminada de ingrediente o ingredientes activos bien solos o bien mezclados con uno o mas portadores o excipientes (p. ej., lactosa). La lamina de tapa preferiblemente tendra una porcion extrema delantera que esta construida para protegerla del cuerpo del inhalador. El paciente accionana el dispositivo y de ese modo administrana la formulacion en aerosol al 1) retirar la envuelta externa del envase, 2) tirar de la lengueta de papel de aluminio para descubrir el farmaco del blister y 3) inhalar el farmaco del blister.
En otra realizacion, la formulacion farmaceutica segun la invencion es un polvo seco para inhalacion en la que el polvo seco se formula en micropartfculas segun se describe en la Publicacion PCT N° WO2009/015286 o el documento WO2007/114881, ambos de NexBio. Tales micropartfculas se forman generalmente al anadir un ion conjugado a una solucion que contiene un compuesto de la invencion en un disolvente, anadir un antidisolvente a la solucion; y enfriar gradualmente la solucion hasta una temperatura por debajo de aproximadamente 25°C, para formar una composicion que contiene micropartfculas que comprenden el compuesto. Las micropartfculas que comprenden el compuesto se pueden separar entonces de la solucion por cualesquiera medios adecuados tales como sedimentacion, filtracion o liofilizacion. lones conjugados, disolventes y antidisolventes adecuados para preparar micropartfculas de los compuestos de la invencion se describen en el documento WO2009/015286.
En otra realizacion, una composicion farmaceutica segun la invencion se aporta como un polvo seco usando un inhalador de dosis medidas. Ejemplos no limitativos de inhaladores y dispositivos de dosis mediadas incluyen los divulgados en los documentos US5.261.538, US5.544.647, US5.622.163, US4.955.371, US3.565.070, US3.361306 y US6.116.234 y US7.108.159. En una realizacion preferida, un compuesto de la invencion se aporta como un polvo seco usando un inhalador de dosis medidas en el que las partfculas emitidas tienen un mMaD que esta en el intervalo de aproximadamente 1 pm a aproximadamente 5 pm y un GSD que es menor de aproximadamente 2.
Las formulaciones en aerosol lfquido para el aporte al espacio endobronquial o al pulmon mediante inhalacion se pueden formular, por ejemplo, como soluciones o suspensiones acuosas o como aerosoles aportados desde envases presurizados, tales como inhaladores de dosis medidas, con el uso de propelentes licuados adecuados, inhaladores de nebulizacion suave o nebulizadores. Tales composiciones en aerosol adecuadas para la inhalacion pueden ser bien una suspension o bien una solucion y generalmente contienen el ingrediente o los ingredientes activos junto con un portador o diluyente farmaceuticamente aceptable (p. ej., agua (destilada o esteril), solucion salina, solucion salina hipertonica o etanol) y opcionalmente uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos.
Las composiciones en aerosol para el aporte mediante inhaladores de dosis medidas presurizados tfpicamente comprenden ademas un propelente farmaceuticamente aceptable. Ejemplos de tales propelentes incluyen un fluorocarbono o un clorofluorocarbono que contiene hidrogeno o mezclas de los mismos, particularmente
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
hidrofluoroalcanos, p. ej., diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, especialmente 1,1,1,2- tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3,-heptafluoro-n-propano o una mezcla de los mismos. La composicion en aerosol puede estar libre de excipiente o puede contener opcionalmente excipientes de formulacion adicionales muy conocidos en la especialidad tales como tensioactivos, p. ej., acido oleico o lecitina, y codisolventes, p. ej., etanol. Las formulaciones presurizadas generalmente se retendran en un bote (p. ej., un bote de aluminio) cerrado con una valvula (p. ej., una valvula medidora) y montado en un accionador provisto de una boquilla.
En otra realizacion, una composicion farmaceutica segun la invencion se aporta como un lfquido usando un inhalador de dosis medidas. Ejemplos no limitativos de inhaladores y dispositivos de dosis medidas incluyen los divulgados en las Patentes de EE. UU. N° 6.253.762, 6.413.497, 7.601.336, 7.481.995, 6.743.413 y 7.105.152. En una realizacion preferida, un compuesto de la invencion se aporta como un polvo seco usando un inhalador de dosis medidas en el que las partfculas emitidas tienen un MMAD que esta en el intervalo de aproximadamente 1 pm a aproximadamente 5 pm y un GSD que es menor de aproximadamente 2.
En una realizacion, la formulacion en aerosol es adecuada para la aerosolizacion mediante un nebulizador de chorro o un nebulizador ultrasonico incluyendo nebulizadores de placa porosa estaticos y vibratorios. Las formulaciones en aerosol lfquido se pueden generar al solubilizar o reconstituir una formulacion de partfculas solidas o se pueden formular con un vehfculo acuoso con la adicion de agentes tales como un acido o un alcali, sales tamponadoras y agentes de ajuste de la isotonicidad. Se pueden esterilizar mediante tecnicas dentro del procedimiento de fabricacion, tales como filtracion, o procedimientos terminales tales como calentamiento en un autoclave o irradiacion y. Tambien se pueden presentar en forma no esteril.
Los pacientes pueden ser sensibles al pH, la osmolalidad y el contenido ionico de una solucion nebulizada. Por lo tanto, estos parametros se deben ajustar para ser compatibles con el ingrediente activo y tolerables para los pacientes. La solucion o suspension de ingrediente activo mas preferida contendra una concentracion de cloro >30 mM a pH 4,5-7,4, preferiblemente 5,0-5,5. y una osmolalidad de aproximadamente 800-1.600 mOsm/kg. El pH de la solucion se puede controlar bien mediante valoracion con acidos comunes (acido clorhndrico o acido sulfurico, por ejemplo) o bases (hidroxido sodico, por ejemplo) o a traves del uso de tampones. Tampones comunmente usados incluyen tampones de citrato, tales como tampones de acido cftrico/citrato sodico, tampones de acetato, tales como tampones de acido acetico/acetato sodico, tampones de fosfato. Las intensidades de los tampones pueden variar de 2 mM a 50 mM.
Tampones de acetato, fosfato y citrato utiles incluyen acetato sodico, trihidrato de acetato sodico, acetato amonico, acetato potasico, fosfato sodico, fosfato sodico dibasico, hidrogenofosfato disodico, dihidrogenofosfato potasico, hidrogenofosfato potasico, fosfato potasico, citrato sodico y citrato potasico. Otros tampones que se pueden utilizar incluyen hidroxido sodico, hidroxido potasico, hidroxido amonico, aminometilpropanol, trometamina,
tetrahidroxipropiletilendiamina, acido dtrico, acido acetico, acido hidroxitricarboxflico o una de sus sales, tales como una de sus sales de citrato o citrato sodico, acido lactico y sales de acido lactico incluyendo lactato sodico, lactato potasico, lactato de litio, lactato calcico, lactato magnesico, lactato barico, lactato de aluminio, lactato de cinc, lactato de plata, lactato de cobre, lactato de hierro, lactato de manganeso, lactato amonico, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diisopropanolamina, asf como sus combinaciones y similares.
Tales formulaciones se pueden administrar usando nebulizadores disponibles comercialmente u otro atomizador que pueda romper la formulacion en partfculas o gotfculas adecuadas para la deposicion en el tracto respiratorio. Ejemplos no limitativos de nebulizadores que se pueden emplear para el aporte en aerosol de una composicion de la invencion incluyen nebulizadores de chorro neumatico, nebulizadores de chorro ventilados o de aspiracion intensificada o nebulizadores ultrasonicos incluyendo nebulizadores de placa porosa estaticos o vibratorios. Nebulizadores disponibles comercialmente incluye el nebulizador Aeroneb® Go (Aerogen) y el nebulizador eFlow (Pari Pharma).
Un nebulizador de chorro utiliza una corriente de alta velocidad de aire que se inyecta a traves de una columna de agua para generar gotfculas. Las partfculas inadecuadas para la inhalacion impactan sobre las paredes o pantallas aerodinamicas. Un nebulizador ventilado o de aspiracion intensificada funciona esencialmente del mismo modo que un nebulizador de chorro excepto que el aire inhalado pasa a traves de la zona de generacion de gotfculas primaria para incrementar la velocidad de salida del nebulizador mientras el paciente inhala.
En un nebulizador ultrasonico, la vibracion de un cristal piezoelectrico crea inestabilidades superficiales en el deposito de farmaco que hacen que se forman gotfculas. En los nebulizadores de placa porosa, los campos de presion generados por energfa sonica empujan al lfquido a traves de los poros de la malla donde se rompe en gotfculas mediante fragmentacion de Rayleigh. La energfa sonica puede ser suministrada por un cuerno o una placa vibratorios conducidos por un cristal piezoelectrico o por la vibracion de la propia malla. Ejemplos no limitativos de atomizadores incluyen cualquier atomizador de fluidos o tobera simple o doble que produzca gotfculas de un tamano apropiado. Un atomizador de fluidos simple funciona al empujar a un lfquido a traves de uno o mas orificios, donde el chorro de lfquido se fragmenta en gotfculas. Los atomizadores de fluidos dobles funcionan bien empujando tanto un gas como un lfquido a traves de uno o mas orificios o bien haciendo chocar un chorro de lfquido contra otro chorro bien de lfquido o bien de gas.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
La eleccion del nebulizador que aerosoliza la formulacion en aerosol es importante en la administracion del ingrediente o los ingredientes activos. Diferentes nebulizadores tienen diferentes eficacias basandose en su diseno y principio operativo y son sensibles a las propiedades ffsicas y qmmicas de la formulacion. Por ejemplo, dos formulaciones con diferentes tensiones superficiales pueden tener diferentes distribuciones del tamano de partfcula. Adicionalmente, propiedades de la formulacion tales como el pH, la osmolalidad y el contenido de iones penetrantes pueden afectar a la tolerabilidad de la medicacion, de modo que las realizaciones preferidas se ajusten a ciertos intervalos de estas propiedades.
En una realizacion preferida, la formulacion para nebulizacion se aporta al espacio endobronquial como un aerosol que tiene un MMAD entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 5 pm y un GSD menor de 2 usando un nebulizador apropiado. Para que sea optimamente eficaz y para evitar efectos secundarios sobre el sistema respiratorio superior y sistemicos, el aerosol no debe tener un MMAD mayor de aproximadamente 5 pm y no debe tener un GSD mayor de aproximadamente 2. Si un aerosol tiene un MMAD mayor de aproximadamente 5 pm o un GSD mayor de aproximadamente 2, un gran porcentaje de la dosis se puede depositar en las vfas respiratorias superiores disminuyendo la cantidad de farmaco aportada a la zona deseada del tracto respiratorio inferior. Si el MMAD del aerosol es menor de aproximadamente 1 pm, entonces un gran porcentaje de las partfculas puede quedar suspendido en el aire inhalado y a continuacion se puede exhalar durante la espiracion.
Los compuestos de la invencion tambien se pueden administrar mediante lavado transbroncoscopico.
Las formulaciones adecuadas para la administracion oral se pueden presentar como unidades discretas tales como capsulas, obleas o comprimidos, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o granulos; como una solucion o suspension en un lfquido acuoso o un lfquido no acuoso; o como una emulsion lfquida de aceite en agua o una emulsion lfquida de agua en aceite. El ingrediente activo tambien se puede presentar como un saquito, una embolada, un electuario o una pasta.
Un comprimido se puede elaborar mediante compresion o moldeo, opcionalmente con uno o mas ingredientes accesorios. Los comprimidos elaborados por compresion se pueden preparar al comprimir en una maquina adecuada el ingrediente activo en una forma que fluye libremente tal como un polvo o granulos, opcionalmente mezclado con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, agente tensioactivo o dispersante. Los comprimidos moldeados se pueden elaborar al moldear en una maquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecida con un diluyente lfquido inerte. Los comprimidos pueden estar opcionalmente revestidos o ranurados y se pueden formular a fin de proporcionar una liberacion lenta o controlada del ingrediente activo de los mismos.
Las formulaciones para la administracion topica en la boca, por ejemplo bucalmente o sublingualmente, incluyen pastillas para chupar, que comprenden el ingrediente activo en una base aromatizada tal como sacarosa y goma arabiga o tragacanto y pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arabiga.
Las formulaciones para la administracion parenteral incluyen soluciones para inyeccion acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostaticos y solutos que hacen a la formulacion isotonica con la sangre del receptor pretendido; y suspensiones esteriles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspension y agentes espesantes. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitaria o multiples dosis, por ejemplo ampollas y viales cerrados hermeticamente, y se pueden almacenar en un estado criodesecacion (liofilizado) que requiere solamente la adicion del portador lfquido esteril, por ejemplo solucion salina o agua para inyeccion, inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones para inyeccion extemporanea se pueden preparar a partir de polvos esteriles, granulos y comprimidos del tipo descrito previamente.
Los fluidos orales tales como soluciones, jarabes y elixires se pueden preparar en forma unitaria de dosificacion de modo que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del ingrediente activo. Los jarabes se pueden preparar al disolver el ingrediente activo en una solucion acuosa adecuadamente aromatizada, mientras que los elixires se preparan a traves del uso de un vehnculo alcoholico farmaceuticamente aceptable. Las suspensiones se pueden formular al dispersar el ingrediente activo en un vetnculo farmaceuticamente aceptable. Tambien se pueden incorporar en las composiciones orales lfquidas solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes esteanlicos etoxilados y eteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes tales como aceite de hierbabuena o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales y similares .
Tambien se pueden emplear sistemas de aporte liposomicos tales como vesfculas unilaminares pequenas, vesfculas unilaminares grandes y vesfculas multilaminares como medios de aporte para los compuestos de la invencion. Los liposomas se pueden formar a partir de una variedad de fosfoifpidos tales como colesterol, estearilamina y fosfatidilcolinas.
Las composiciones farmaceuticas para la administracion topica se pueden formular como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizaciones, aerosoles o aceites. Las composiciones disenadas para el tratamiento de los ojos u otros tejidos externos, por ejemplo la boca y la piel, se pueden aplicar
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
como una pomada o crema topica. Cuando se formula como una pomada, el ingrediente activo se puede emplear con una base de pomada parafmica o una miscible con agua. Alternativamente, el ingrediente activo se puede formular en una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.
Otras composiciones disenadas para la administracion topica a los ojos o los ofdos incluyen gotas oculares y gotas para los ofdos en las que el ingrediente activo se disuelve o se suspende en un portador adecuado, tal como, por ejemplo, un disolvente acuoso, incluyendo solucion salina.
Las composiciones disenadas para la administracion nasal incluyen aerosoles, soluciones, suspensiones, pulverizaciones, nebulizaciones y gotas. Las formulaciones aerosolizables para la administracion nasal se pueden formular casi de los mismos modos que las formulaciones aerosolizables para inhalacion con la condicion de que se preferiran partfculas de tamano no respirable en las formulaciones para la administracion nasal. Tfpicamente, se pueden emplear partfculas de aproximadamente 5 micras de tamano, hasta el tamano de goticulas visibles. Asf, para la administracion nasal, se puede usar un tamano de partfcula en el intervalo de 10-500 pm para asegurar la retencion en la fosa nasal.
Tambien se pueden emplear parches transdermicos, que estan disenados para permanecer en contacto con la epidermis del paciente durante un penodo prolongado y promover la absorcion del ingrediente activo a su traves.
Las composiciones para la administracion vaginal o rectal incluyen pomadas, cremas, supositorios y enemas, todos los cuales se pueden formular usando tecnicas convencional.
En otro aspecto, la invencion proporciona un metodo para promover la hidratacion de superficies mucosas o restaurar la defensa mucosa en un ser humano que lo necesite, que comprende administrar al ser humano una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, en donde dicho compuesto se administra en una cantidad eficaz. En una realizacion preferida, el metodo comprende administrar la composicion farmaceutica como una composicion inhalable que comprende una cantidad de un compuesto de la invencion que es suficiente para alcanzar una concentracion disuelta del compuesto sobre las superficies de las vfas respiratorias de aproximadamente 10"9, 10"8 o 10"7 a aproximadamente 10"4, 10"3, 10"2 o 10"1 Moles/litro, mas preferiblemente de aproximadamente 10"9 a aproximadamente 10"4 moles/litro.
En otro aspecto, la invencion proporciona un metodo para tratar uno de: una enfermedad asociada con la obstruccion reversible o irreversible de las vfas respiratorias, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (COPD), asma, bronquiectasia (incluyendo bronquiectasia debida a afecciones distintas a la fibrosis qrnstica), bronquitis aguda, bronquitis cronica, tos posviral, fibrosis qrnstica, enfisema, neumoma, panbronquiolitis, bronquiolitis asociada a trasplantes y traqueobronquitis asociada al respirador o prevenir neumoma asociada al respirador en un ser humano que lo necesite, que comprende administrar al ser humano una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, en donde dicho compuesto se administra en una cantidad eficaz. En una realizacion preferida, el metodo comprende administrar la composicion farmaceutica como una composicion inhalable que comprende una cantidad de un compuesto de la invencion que es suficiente para alcanzar una concentracion disuelta del compuesto sobre las superficies de las vfas respiratorias de aproximadamente 10"9, 10"8 o 10"7 a aproximadamente 10"4, 10"3, 10"2 o 10"1 moles/litro, mas preferiblemente de aproximadamente 10"9 a aproximadamente 10"4 moles/litro.
En otro aspecto, la invencion proporciona un metodo para tratar uno cualquiera de boca seca (xerostomia), piel seca, sequedad vaginal, sinusitis, rinosinusitis o deshidratacion nasal, incluyendo deshidratacion nasal causada por la administracion de oxfgeno seco, ojo seco o enfermedad de Sjogren, promover la hidratacion ocular o corneal, tratar el smdrome de obstruccion intestinal distal, tratar la otitis media, la discinesia ciliar primaria, el smdrome de obstruccion intestinal distal, la esofagitis, el estrenimiento o la diverticulitis cronica en un ser humano que lo necesite, que comprende administrar al ser humano una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, en donde dicho compuesto se administra en una cantidad eficaz.
Formulaciones de dosificacion unitaria preferidas para los compuestos de la invencion son las que contienen una cantidad eficaz del ingrediente activo o una fraccion apropiada del mismo.
Se debe entender que ademas de los ingredientes mencionados particularmente anteriormente, las formulaciones de esta invencion pueden incluir otros agentes convencionales en la especialidad teniendo en cuenta el tipo de formulacion en cuestion, por ejemplo las adecuadas para la administracion oral pueden incluir agentes aromatizantes.
Las composiciones de la presente invencion se pueden formular para liberacion inmediata, controlada o sostenida segun se desee para la afeccion particular que se trate y la via de administracion deseada. Por ejemplo, una formulacion de liberacion controlada para la administracion oral se puede desear para el tratamiento del estrenimiento a fin de maximizar el aporte de agente activo al colon. Tales formulaciones y excipientes adecuados para las mismas son muy conocidos en la especialidad de la farmacia. Debido a que la base libre del compuesto generalmente es menos soluble en soluciones acuosas que la sal, las composiciones que comprenden una base
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
libre de un compuesto de Formula I se pueden emplear para proporcionar una liberacion mas sostenida del agente activo aportado mediante inhalacion a los pulmones. Un agente activo presente en los pulmones en forma de partmulas que no se haya disuelto en solucion no esta disponible para inducir una respuesta fisiologica, pero sirve como un deposito de farmaco biodisponible que se disuelve gradualmente en solucion. Como otro ejemplo, una formulacion puede emplear tanto una base libre como una forma salina de un compuesto de la invencion para proporcionar tanto liberacion inmediata como liberacion sostenida del ingrediente activo para la disolucion en las secreciones mucosas de, por ejemplo, la nariz.
Combinaciones
Los compuestos de la invencion se pueden formular y/o usar en combinacion con otros agentes terapeuticamente activos. Ejemplos de otros agentes terapeuticamente activos que se pueden formular o usar en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero no se limitan a, osmolitos, agentes antiinflamatorios, agentes anticolinergicos, p-agonistas (incluyendo p2-agonistas selectivos), agonistas del receptor P2Y2, agonistas d de receptores activados por proliferadores de peroxisomas (PPAR), otros bloqueantes de canales del sodio epiteliales (bloqueantes de receptores de ENaC), moduladores de regulador de la conductancia transmembranaria de la fibrosis qrnstica (CFTR), inhibidores de cinasa, agentes antiinfecciosos, antihistammicos, macrolidos antiinflamatorios no antibioticos, inhibidores de elastasa y proteasa y agentes modificadores del moco o la mucina, tales como tensioactivos. Ademas, para indicaciones cardiovasculares, los compuestos de la invencion se puede usar en combinacion con 13-bloqueantes, inhibidores de ACE, inhibidores de HMGCoA reductasa, bloqueantes de canales del calcio y otros agentes cardiovasculares.
La presente invencion proporciona asf, como otro aspecto, una composicion que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion y uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos seleccionados de osmolitos, agentes antiinflamatorios, agentes anticolinergicos, p-agonistas (incluyendo p2-agonistas selectivos), agonistas del receptor P2Y2, agonistas d del PPAR, bloqueantes de receptores de ENaC, moduladores de regulador de la conductancia transmembranaria de la fibrosis qrnstica (CFTR), inhibidores de cinasa, agentes antiinfecciosos, antihistammicos, macrolidos antiinflamatorios no antibioticos, inhibidores de elastasa y proteasa y agentes modificadores del moco o la mucina, tales como tensioactivos. La presente invencion proporciona asf, como otro aspecto, una composicion que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion y uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos seleccionados de bloqueantes U, inhibidores de ACE, inhibidores de HMGCoA reductasa y bloqueantes de canales del calcio. El uso de los compuestos de la invencion en combinacion con uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos (particularmente osmolitos) puede disminuir la dosis del compuesto de la invencion que se requiere para hidratar suficientemente superficies mucosas, reduciendo de ese modo el potencial de efectos secundarios no deseados atribuibles al bloqueo sistemico de canales del sodio tal como, por ejemplo, en los rinones.
Los "osmolitos", segun la presente invencion, son moleculas o compuestos que son osmoticamente activos. Las moleculas y los compuestos "osmoticamente activos" son impermeables a la membrana (es decir, esencialmente no absorbibles) sobre la superficie epitelial de las vfas respiratorias o pulmonar. Los terminos "superficie de las vfas respiratorias" y "superficie pulmonar", segun se usan en la presente, incluyen superficies de las vfas respiratorias pulmonares tales como los bronquios y los bronquiolos, las superficies alveolares y las superficies nasales y sinusales. Osmolitos adecuados incluyen osmolitos ionicos (es decir, sales) y osmolitos no ionicos (es decir, azucares, alcoholes sacaricos y osmolitos organicos). En general, los osmolitos (tanto ionicos como no ionicos) usados en combinacion con los compuestos de la invencion son preferiblemente osmolitos que no promueven o de hecho detienen o retardan el crecimiento bacteriano. Osmolitos adecuados para el uso en la presente invencion puede estar en forma racemica o en la forma de un enantiomero, diastereoisomero, tautomero, polimorfo o pseudopolimorfo.
Ejemplos de osmolitos ionicos utiles en la presente invencion incluyen cualquier sal de un anion farmaceuticamente aceptable y un cation farmaceuticamente aceptable. Preferiblemente, cualquiera (o ambos) del anion y el cation es osmoticamente activo y no esta sometido a un transporte activo rapido, con relacion a las superficies de las vfas respiratorias a las que se administra. Tales compuestos incluyen, pero no se limitan a, aniones y cationes que estan contenidos en sales comercializadas aprobadas por la FDA, vease, p. ej., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Vol. II, pg. 1457 (19a Ed. 1995) y se pueden usar en cualquier combinacion como se sabe en la especialidad.
Ejemplos espedficos de aniones osmoticamente activos farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartrato, bromuro, edetato calcico, camsilato (canforsulfonato), carbonato, cloruro, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato (1,2-etanodisulfonato), estolato (laurilsulfato), esilato (1,2-etanodisulfonato), fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato (p- glicolamidofenilarsonato), hexilresorcinato, hidrabamina (W,W-di(deshidroabietil)etilendiamina), hidrobromuro, hidrocloruro, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, nitrito, pamoato (embonato), pantotenato, fosfato o difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartrato, teoclato (8-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
cloroteofilinato), trietyoduro, bicarbonato, etc. Aniones preferidos incluyen cloruro, sulfato, nitrato, gluconato, yoduro, bicarbonato, bromuro y fosfato.
Ejemplos espedficos de cationes osmoticamente activos farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, cationes organicos tales como benzatina (W,W-dibenciletilendiamina), cloroprocama, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (W-metil-D-glucamina), procama, D-lisina, L-lisina, D-arginina, L-arginina, trietilamonio, N- metil-D-glicerol y similares; y cationes metalicos tales como aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio, cinc, hierro, amonio y similares. Cationes organicos preferidos incluyen cationes organicos de 3 carbonos, 4 carbonos, 5 carbonos y 6 carbonos. Cationes preferidos incluyen sodio, potasio, colina, litio, meglumina, D-lisina, amonio, magnesio y calcio.
Ejemplos espedficos de osmolitos ionicos que se pueden usar en combinacion con un compuesto de la invencion incluyen, pero no se limitan a, cloruro sodico (particularmente solucion salina hipertonica), cloruro potasico, cloruro de colina, yoduro de colina, cloruro de litio, cloruro de meglumina, cloruro de L-lisina, cloruro de D-lisina, cloruro amonico, sulfato potasico, nitrato potasico, gluconato potasico, yoduro potasico, cloruro ferrico, cloruro ferroso, bromuro potasico y combinaciones de cualesquiera dos o mas de los precedentes. En una realizacion, la presente invencion proporciona una combinacion de un compuesto de la invencion y dos sales osmoticamente activas diferentes. Cuando se usan sales diferentes, uno del anion o el cation puede ser igual entre las diferentes sales. La solucion salina hipertonica es un osmolito ionico preferidos para el uso en combinacion con los compuestos de la invencion.
Osmolitos no ionicos incluyen azucares, alcoholes sacaricos y osmolitos organicos. Azucares y alcoholes sacaricos utiles como osmolitos en la presente invencion incluyen, pero no se limitan a, azucares de 3 carbonos (p. ej., glicerol, dihidroxiacetona); azucares de 4 carbonos (p. ej., las formas tanto D como L de eritrosa, treosa y eritrulosa); azucares de 5 carbonos (p. ej., las formas tanto D como L de ribosa, arabinosa, xilosa, lixosa, psicosa, fructosa, sorbosa y tagatosa); y azucares de 6 carbonos (p. ej., las formas tanto D como L de altosa, alosa, glucosa, manosa, gulosa, idosa, galactosa y talosa y las formas D y L de aloheptulosa, alohepulosa, glucoheptulosa, manoheptulosa, guloheptulosa, idoheptulosa, galactoheptulosa, taloheptulosa). Azucares adicionales utiles en la practica de la presente invencion incluyen rafinosa, oligosacaridos de la serie de la rafinosa y estaquiosa. Las formas tanto D como L de la forma reducida de cada azucar/alcohol sacarico tambien son adecuadas para la presente invencion. Por ejemplo, la glucosa, cuando se reduce, se convierte en sorbitol; un osmolito dentro del alcance de la invencion. Segun esto, el sorbitol y otras formas reducidas de azucares/alcoholes sacaricos (p. ej., manitol, dulcitol, arabitol) son osmolitos adecuados para el uso en la presente invencion. El manitol es un osmolito no ionico preferido para el uso en combinacion con los compuestos de la invencion.
"Osmolitos organicos" se usa generalmente para referirse a moleculas que controlan la osmolalidad intracelular en el rinon. Veanse, p. ej., J. S. Handler y cols., Comp. Biochem. Physiol, 1I7, 301-306 (1997); M. Burg, Am. J. Physiol. 268, F983-F996 (1995). Los osmolitos organicos incluyen, pero no se limitan a, tres clases principales de compuestos: polioles (alcoholes polihidroxilados), metilaminas y aminoacidos. Osmolitos organicos poliolicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, inositol, mioinositol y sorbitol. Osmolitos organicos metilammicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, colina, betama, carnitina (formas L, D y DL), fosforilcolina, lisofosforilcolina, glicerofosforilcolina, creatina y fosfato de creatina. Osmolitos organicos de aminoacido adecuados incluyen, pero no se limitan a, las formas D y L de glicina, alanina, glutamina, glutamato, aspartato, prolina y taurina. Osmolitos organicos adicionales adecuados para el uso en la presente invencion incluyen tihulosa y sarcosina. Se prefieren osmolitos organicos de mairnfero, siendo los mas preferidos los osmolitos organicos humanos. Sin embargo, ciertos osmolitos organicos son de origen bacteriano, de levadura y animales marinos y estos compuestos tambien se pueden emplear en la presente invencion.
Se pueden usar precursores de osmolitos en combinacion con los compuestos de la invencion. Un "precursor de osmolito", segun se usa en la presente, se refiere a un compuesto que se convierte en un osmolito mediante una etapa metabolica, bien catabolica o bien anabolica. Ejemplos de precursores de osmolitos incluyen, pero no se limitan a, glucosa, polfmeros de glucosa, glicerol, colina, fosfatidilcolina, lisofosfatidilcolina y fosfatos inorganicos, que son precursores de polioles y metilaminas. Precursores de osmolitos de aminoacido incluyen protemas, peptidos y poliaminoacidos, que se hidrolizan para dar aminoacidos osmolfticos y precursores metabolicos que se pueden convertir en aminoacidos osmolfticos mediante una etapa metabolica tal como transaminacion. Por ejemplo, un precursor del aminoacido glutamina es poli-L-glutamina y un precursor de glutamato es el poli-acido L-glutamico.
Tambien se pueden emplear osmolitos o precursores de osmolitos qmmicamente modificados. Tales modificaciones qmmicas implican conectar el osmolito (o precursor) a un grupo qmmico adicional que altera o intensifica el efecto del osmolito o el precursor de osmolito (p. ej., inhibe la degradacion de la molecula de osmolito). Tales modificaciones qmmicas se han utilizado con farmacos o profarmacos y se conocen en la especialidad. (Veanse, por ejemplo, las Pat. EE. UU. N° 4.479.932 y 4.540.564; Shek, E. y cols., J. Med. Chem. 19:113-117 (1976); Bodor, N. y cols., J. Pharm. Sci. 67:1045-1050 (1978); Bodor, N. y cols., J. Med. Chem. 26:313-318 (1983); Bodor, N. y cols., J. Pharm. Sci. 75:29-35 (1986).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Osmolitos preferidos para usar en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen cloruro sodico, particularmente solucion salina hipertonica y manitol.
Para la formulacion de solucion salina hipertonica al 7% y >7%, pueden ser particularmente utiles formulaciones que contienen aniones bicarbonato, especialmente para trastornos respiratorios con disfuncion del regulador de la conductancia transmembranaria de la fibrosis qmstica (CFTR) tales como CF o COPD. Hallazgos recientes indican que, aunque la relacion relativa de conductancia de HCO3-/conductancia de Cl- este entre 0,1 y 0,2 para canales de CFTR simples activados con cAMP y ATP, la relacion en el conducto sudonparo puede variar virtualmente de 0 a casi 1,0, dependiendo de las condiciones de estimulacion. Esto es, combinar cAMP + cGMP + a-cetoglutarato puede dar conductancia de HCO3- de CFTR casi igual a la de la conductancia de Cl- (Quiton y cols. Physiology, Vol. 22, N° 3, 212-225, junio de 2007). Por otra parte, las formulaciones de solucion salina hipertonica al 7% y >7% que contienen aniones bicarbonato pueden ser particularmente utiles debido a un mejor control del pH en el lfquido superficial de las vfas respiratorias. En primer lugar, se ha observado que se produce acidificacion de las vfas respiratorias en la CF (Tate y cols. 2002) y que la ausencia de secrecion de bicarbonato dependiente de CFTR- puede conducir a una capacidad deteriorada para responder a afecciones de las vfas respiratorias asociadas con la acidificacion de la capa de lfquido superficial de las vfas respiratorias (Coakley y cols. 2003). En segundo lugar, la adicion de solucion HS sin bicarbonato a la superficie del pulmon puede diluir adicionalmente las concentraciones de bicarbonato y potencialmente reducir el pH o la capacidad para responder a la acidificacion de las vfas respiratorias dentro de la capa de lfquido superficial de las vfas respiratorias. Por lo tanto, la adicion de aniones bicarbonato a HS puede ayudar a mantener o mejorar el pH de la capa de lfquido superficial de las vfas respiratorias en pacientes con CF.
Debido a esta evidencia, la inclusion de anion bicarbonato en la formulacion de solucion salina hipertonica al 7% o >7% administrada mediante el metodo de esta invencion sena particularmente util. Las formulaciones que contienen concentraciones de hasta 30 a 200 mM de aniones bicarbonato son de particular interes para soluciones HS al 7% o >7%.
Se entiende que la solucion salina hipertonica tiene una concentracion de sal mayor que la de solucion salina normal (NS), es decir mayor de 9 g/l o 0,9% p/v y la solucion salina hipotonica tiene una concentracion de sal menor que la de solucion salina normal, tal como de aproximadamente 1 g/l o 0,1% p/v a aproximadamente 8 g/l o 0,8% p/v. Las soluciones salinas hipertonicas utiles en las formulaciones y los metodos de tratamiento de la presente pueden tener una concentracion de sal de aproximadamente 1% a aproximadamente 23,4% (p/v). En una realizacion, la solucion salina hipertonica tiene una concentracion de sal de aproximadamente 60 g/l (6% p/v) a aproximadamente 100 g/l (10% p/v). En otra realizacion, la solucion salina tiene una concentracion de sal de aproximadamente 70 g/l (7% p/v) a aproximadamente 100 g/l (10% p/v). En realizaciones adicionales, la solucion salina tiene concentraciones de sal de a) de aproximadamente 0,5 g/l (0,05% p/v) a aproximadamente 70 g/l (7% p/v); b) de aproximadamente 1 g/l (0,1% p/v) a aproximadamente 60 g/l (6% p/v); c) de aproximadamente 1 g/l (0,1% p/v) a aproximadamente 50 g/l (5% p/v); d) de aproximadamente 1 g/l (0,1 % p/v) a aproximadamente 40 g/l (4% p/v); e) de aproximadamente 1 g/l (0,1 % p/v) a aproximadamente 30 g/l (3% p/v); y f) de aproximadamente 1 g/l (0,1% p/v) a aproximadamente 20 g/l (2% p/v).
Concentraciones espedficas de soluciones salinas utiles en las formulaciones y los metodos de tratamiento de la presente incluyen, independientemente, las que tienen concentraciones de sal de 1 g/l (0,1% p/v), 2 g/l (0,2% p/v), 3 g/l (0,3% p/v), 4 g/l (0,4% p/v), 5 g/l (0,5% p/v), 6 g/l (0,6% p/v), 7 g/l (0,7% p/v), 8 g/l (0,8% p/v), 9 g/l (0,9% p/v), 10 g/l (1% p/v), 20 g/l (2% p/v), 30 g/l (3% p/v), 40 g/l (4% p/v), 50 g/l (5% p/v), 60 g/l (6% p/v), 70 g/l (7% p/v), 80 g/l (8% p/v), 90 g/l (9% p/v), 100 g/l (10% p/v), 110 g/l (11% p/v), 120 g/l (12% p/v), 130 g/l (13% p/v), 140 g/l (14% p/v), 150 g/l (15% p/v), 160 g/l (16% p/v), 170 g/l (17% p/v), 180 g/l (18% p/v), 190 g/l (19% p/v), 200 g/l (20% p/v), 210 g/l (21% p/v), 220 g/l (22% p/v) y 230 g/l (23% p/v). Tambien se pueden usar concentraciones de solucion salina entra cada una de estas concentraciones/porcentajes listados, tales como una solucion salina de 1,7 g/l (0,17% p/v), 1,25 g/l (1,25% p/v), 1,5 g/l (1,5% p/v), 25 g/l (2,5% p/v), 28 g/l (2,8% p/v), 35 g/l (3,5% p/v), 45 g/l (4,5% p/v) y 75 g/l (7,5% p/v).
Una concentracion util espedfica de soluciones salinas hipotonicas incluye las de aproximadamente 0,12 g/l (0,012% p/v) a aproximadamente 8,5 g/l (0,85% p/v). Se puede usar cualquier concentracion dentro de este intervalo, tal como, sobre una base de p/v, 0,05%, 0,1%, 0,15%, 0,2%, 0,225% (1/4 NS), 0,25%, 0,3% (1/3 NS), 0,35%, 0,4%, 0,45% (1/2 NS), 0,5%, 0,55%, 0,6% (2/3 NS), 0,65%, 0,675% (3/4 NS), 0,7%, 0,75% y 0,8%.
Cada uno de los intervalos y las concentraciones espedficas de solucion salina descritos en la presente se pueden usar con las formulaciones, los metodos de tratamiento, los regfmenes y los estuches descritos en la presente.
Tambien se proponen dentro del alcance de esta invencion osmolitos o precursores de osmolito modificados qmmicamente. Tales modificaciones qrnmicas implican conectar al osmolito (o precursor) un grupo qrnmico adicional que altere o intensifique el efecto del osmolito o precursor de osmolito (p. ej., inhiba la degradacion de la molecula de osmolito). Tales modificaciones qrnmicas se han utilizado con farmacos o profarmacos y son conocidas en la especialidad. (Veanse, por ejemplo, las Pat. EE. UU. N° 4.479.932 y 4.540.564; Shek, E. y cols., J. Med. Chem. 19:113-117 (1976); Bodor, N. y cols., J. Pharm. Sci. 67:1045-1050 (1978); Bodor, N. y cols., J. Med. Chem. 26:313-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
318 (1983); Bodor, N. y cols., J. Pharm. Sci. 75:29-35 (1986), cada uno incorporado en la presente mediante referencia.
Agentes antiinflamatorios adecuados para el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen corticosteroides y farmacos antiinflamatorios no esteroideos (NSAID), particularmente inhibidores de fosfodiesterasa (PDE). Ejemplos de corticosteroides para el uso en la presente invencion incluyen corticosteroides o profarmacos de los mismos orales o inhalados. Ejemplos espedficos incluyen, pero no se limitan a, ciclesonida, desisobutirilciclesonida, budesonida, flunisolida, mometasona y esteres de la misma (p. ej., furoato de mometasona), propionato de fluticasona, furoato de fluticasona, beclometasona, metilprednisolona, prednisolona, dexametasona, ester S-fluorometflico de acido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11p-hidroxi-16a-metil-3-oxo-androsta-1,4- dieno-17p-carbotioico, ester S-(2-oxo-tetrahidro-furan-3S4lico) de acido 6a,9a-difluoro-11p-hidroxi-16a-metil-3-oxo- 17a-propioniloxi-androsta-1,4-dieno-17p-carbotioico, esteres de beclometasona (p. ej., el ester de 17-propionato o el ester de 17,21-dipropionato, ester fluorometflico, acetonido de triamcinolona, rofleponida o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos. Corticosteroides preferidos para la formulacion o el uso en combinacion con los compuestos de la invencion se seleccionan de ciclesonida, desisobutirilciclesonida, budesonida, mometasona, propionato de fluticasona y furoato de fluticasona o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
NSAID para el uso en la presente invencion incluyen, pero no se limitan a, cromoglicato sodico, nedocromilo sodico, inhibidores de fosfodiesterasa (PDE) (p. ej., teofilina, aminofilina, inhibidores de PDE4, inhibidores de PDE3/PDE4 mixtos o inhibidores de PDE4/PDE7 mixtos), antagonistas de leucotrienos, inhibidores de la smtesis de leucotrienos (p. ej., inhibidores de 5 LO y FLAP), inhibidores de oxido mtrico sintasa (iNOS), inhibidores de proteasas (p. ej., inhibidores de triptasa, inhibidores de elastasa de neutrofilos e inhibidores de metaloproteasa), antagonistas de integrina p2 y agonistas y antagonistas de receptores de adenosina (p. ej., agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citocinas (p. ej., antagonistas de quimiocinas) o inhibidores de la smtesis de citocinas (p. ej., antagonistas del receptor de prostaglandina D2 (CRTh2)). Ejemplos de modificadores leucotrienicos adecuados para la administracion mediante el metodo de esta invencion incluyen montelukast, zileutona y zafirlukast.
El inhibidor de PDE4, el inhibidor de PDE3/PDE4 mixto o el inhibidor de PDE4/PDE7 mixto puede ser cualquier compuesto que se sepa que inhiba la enzima PDE4 o que se descubra que actue como un inhibidor de PDE4 y que sean inhibidores de PDE4 selectivos (es decir, compuestos que no inhiban apreciablemente otros miembros de la familia de PDE). Ejemplos de inhibidores de PDE4 espedficos para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la presente invencion incluyen, pero no se limitan a, roflumilast, pumafentrina, arofilina, cilomilast, tofimilast, oglemilast, tolafentrina, piclamilast, ibudilast, apremilast, 2-[4-[6,7-dietoxi-2,3-bis(hidroximetil)-1-naftalenil]- 2-piridinil]-4-(3-piridinil)-1(2H)-ftalacinona (T2585), N-(3,5-dicloro-4-piridinil)-1-[(4-fluorofenil)metil]-5-hidroxi-a-oxo- 1H-indol-3-acetamida (AWD-12-281, 4-[(2R)-2-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]-2-feniletil]-piridina (CDP-840), acido 2-[4-[[[[2-(1,3-benzodioxol-5-iloxi)-3-piridinil]carbonil]amino]metil]-3-fluorofenoxi]-(2R)-propanoico (CP-671305), N- (4,6-dimetil-2-pirimidinil)-4-[4,5,6,7-tetrahidro-2-(4-metoxi-3-metilfenil)-5-(4-metil-1-piperacinil)-1H-indol-1-il]- bencenosulfonamida, (2E)-2-butenodioato (YM-393059), 9-[(2-fluorofenil)metil]-N-metil-2-(trifluorometil)-9H-purin-6- amina (NCS-613), N-(2,5-dicloro-3-piridinil)-8-metoxi-5-quinolinocarboxamida (D-4418), N-[(3R)-9-amino-3,4,6,7- tetrahidro-4-oxo-1-fenilpirrolo[3,2,1-][1,4]benzodiazepin-3-il]-3H-purin-6-amina (PD-168787), hidrocloruro de 3-[[3- (ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]metil]-N-etil-8-(1-metiletil)-3H-purin-6-amina (V-11294A), N-(3,5-dicloro-1-oxido-4- piridinil)-8-metoxi-2-(trifluorometil)-5-quinolinocarboxamida (Sch351591), 5-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]-3-[(3- metilfenil)metil]-(3S,5S)-2-piperidinona (HT-0712), 5-(2-((1R,4R)-4-amino-1-(3-(ciclopentiloxi)-4-
metoxifenil)ciclohexil)etinil)-pirimidin-2-amina, cis-[4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclohexan-1- ol] y 4-[6,7-dietoxi-2,3-bis(hidroximetil)-1-naftalenil]-1-(2-metoxietil)-2(1H)-piridinona (T-440) y cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
Antagonistas de leucotrienos e inhibidores de la smtesis de leucotrienos incluyen zafirlukast, montelukast sodico, zileutona y pranlukast.
Agentes anticolinergicos para la formulacion o el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero no se limitan a, antagonistas de receptores muscarmicos, incluyendo particularmente panantagonistas y antagonista de los receptores M3. Compuestos ejemplares incluyen los alcaloides de las plantas de belladona, tales como atropina, escopolamina, homatropina, hiosciamina y las diversas formas incluyendo sales de los mismos (p. ej., atropina anhidra, sulfato de atropina, oxido o HCl de atropina, nitrato de metilatropina, hidrobromuro de homatropina, metilbromuro de homatropina, hidrobromuro de hiosciamina, sulfato de hiosciamina, hidrobromuro de escopolamina, metilbromuro de escopolamina) o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
Anticolinergicos adicionales para la formulacion y el uso en combinacion con metantelina, bromuro de propantelina, metilbromuro de anisotropina o Valpin 50, bromuro de aclidinio, glicopirrolato (Robinul), yoduro de isopropamida, bromuro de mepenzolato, cloruro de tridihexetilo, metilsulfato de hexociclio, HCl de ciclopentolato, tropicamida, CCl de trihexifenidilo, pirencepina, telencepina y metoctramina o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
Anticolinergicos preferidos para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen (bromuro de) ipratropio, (bromuro de) oxitropio y (bromuro de) y tiotropio o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Ejemplos de p-agonistas para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero no se limitan a, salmeterol, R-salmeterol y sus sales de xinafoato, albuterol o R-albuterol (base libre o sulfato), levalbuterol, salbutamol, (fumarato de) formoterol, fenoterol, procaterol, pirbuterol, metaproterenol, terbutalina y sus sales y cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
Agonistas del receptor P2Y2 para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion se pueden emplear en una cantidad eficaz para estimular la secrecion de cloruro y agua por superficies de las vfas respiratorias, particularmente superficies de las vfas respiratorias nasales. Agonistas del receptor P2Y2 adecuados son conocidos en la especialidad y se describen, por ejemplo, en las columnas 9-10 de la Patente de EE. UU. N° 6.264.975 y tambien en las Patentes de EE. UU. N° 5.656.256 y 5.292.498.
Agonistas de P2Y2 que se pueden administrar mediante los metodos de esta invencion incluyen agonistas del receptor P2Y2 tales como agonistas del receptor P2Y2 de ATP, UTP, UTP-y-S y dinucleotfdicos (p. ej. denufosol o dicuafosol) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables. El agonista del receptor P2Y2 tipicamente esta incluido en una cantidad eficaz para estimular la secrecion de cloruro y agua por superficies de las vfas respiratorias, particularmente superficies de las vfas respiratorias nasales. Agonistas del receptor P2Y2 adecuados se describen en, pero no limitado a, la Pat. EE. UU. N° 6.264.975, la Pat. EE. UU. N° 5.656.256, la Pat. EE. UU. N° 5.292.498, la Pat. EE. UU. N° 6.348.589, la Pat. EE. UU. N° 6.818.629, la Pat. EE. UU. N° 6.977.246, la Pat. EE. UU. N° 7.223.744, la Pat. EE. UU. N° 7.531.525 y la Sol. Pat. EE. UU. 2009/0306009, cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante referencia.
Terapias y formulaciones combinadas en la presente pueden incluir agonistas de adenosina 2b (A2b), ademas, incluyendo BAY 60-6583, NECA (N-etilcarboxamidoadenosina), (S)-PHPNECA, LUF-5835 y LUF-5845. Agonistas de A2b que se pueden usar son descritos por Volpini y cols., Journal of Medicinal Chemistry 45 (15): 3271-9 (2002); Volpini y cols., Current Pharmaceutical Design 8 (26): 2285-98 (2002); Baraldi y cols., Journal of Medicinal Chemistry 47 (6): Cacciari y cols., 1434-47 (2004); Mini Reviews in Medicinal Chemistry 5 (12): 1053-60 (Dic. 2005); Baraldi y cols., Current Medicinal Chemistry 13 (28): 3467-82 (2006); Beukers y cols., Medicinal Research Reviews 26 (5): 667-98 (Sept. 2006); Elzein y cols., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 16 (2): 302-6 (En. 2006); Carotti, y cols., Journal of Medicinal Chemistry 49 (1): 282-99 (En. 2006); Tabrizi y cols., Bioorgonic & Medicinal Chemistry 16 (5): 2419-30 (Marzo 2008); y Stefanachi, y cols., Bioorgonic & Medicinal Chemistry 16 (6): 2852-69 (Marzo 2008).
Ejemplos de otros bloqueantes de receptores de ENaC para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero no se limitan, a amilorida y sus derivados tales como los compuestos descritos en la Patente de EE. UU. N° 6858615 y las Publicaciones PCT N° WO2003/070182, WO2004/073629, WO2005/018644, WO2006/022935, WO2007/018640 y WO2007/146869, todas de Parion Sciences, Inc.
Los bloqueantes de ENaC de molecula pequena son capaces de prevenir directamente el transporte de sodio a traves del poro del canal ENaC. Un bloqueante de ENaC que se puede administrar en las combinaciones de la presente incluye, pero no se limita a, amilorida, benzamilo, fenamilo y analogos de amilorida como los ejemplificados por la Pat. EE. UU. N° 6.858.614, la Pat. EE. UU. N° 6.858.615, la Pat. EE. UU. N° 6.903.105, la Pat. EE. UU. N° 6.995.160, la Pat. EE. UU. N° 7.026.325, la Pat. EE. UU. N° 7.030.117, la Pat. EE. UU. N° 7.064.129, la Pat. EE. UU. N° 7.186.833, la Pat. EE. UU. N° 7.189.719, la Pat. EE. UU. N° 7.192.958, la Pat. EE. UU. N° 7.192.959, la Pat. EE. UU. N° 7.241.766, la Pat. EE. UU. N° 7.247.636, la Pat. EE. UU. N° 7.247.637, la Pat. EE. UU. N° 7.317.013, la Pat. EE. UU. N° 7.332.496, la Pat. EE. UU. N° 7.345.044, la Pat. EE. UU. N° 7.368.447, la Pat. EE. UU. N° 7.368.450, la Pat. EE. UU. N° 7.368.451, la Pat. EE. UU. N° 7.375.107, la Pat. EE. UU. N° 7.399.766, la Pat. EE. UU. N° 7.410.968, la Pat. EE. UU. N° 7.820.678, la Pat. EE. UU. N° 7.842.697, la Pat. EE. UU. N° 7.868.010, la Pat. EE. UU. N° 7.875.619.
Esta bien descrito que la proteolisis de ENaC incrementa el transporte de sodio a traves de ENaC. Un inhibidor de proteasa bloquea la actividad de proteasas endogenas de las vfas respiratorias, evitando de ese modo la escision y activacion de ENaC. Proteasas que pueden escindir ENaC incluyen furina, meprina, matriptasa, tripsina, proteasas asociadas a canales (CAP) y elastasas de neutrofilos. Inhibidores de proteasas que pueden inhibir la actividad proteolttica de estas proteasas que se pueden administrar en las combinaciones de la presente incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de camostat, prostasina, furina, aprotinina, leupeptina y tripsina.
Las combinaciones de la presente pueden incluir uno o mas acidos nucleicos (o poli(acidos nucleicos)) adecuados, incluyendo, pero no limitados a, un oligonucleotido antisentido, siARN, miARN, un mimetico de miARN, antagomir, ribozima, un aptamero y acidos nucleicos oligonucleotfdicos de reclamo. Vease, p. ej., la Publicacion de Solicitud de Patente de EE. UU. N° 20100316628. En general, tales acidos nucleicos pueden tener de 17 o 19 nucleotidos de longitud hasta 23, 25 o 27 nucleotidos de longitud o mas. Ejemplos incluyen, pero no se limitan a, los descritos en la Patente de EE. UU. N° 7.517.865 y las Solicitudes de Patente de EE. UU. N° 20100215588; 20100316628; 20110008366; y 20110104255. En general, los siARNs tienen de 17 o 19 nucleotidos de longitud hasta 23, 25 o 27 nucleotidos de longitud o mas.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Compuestos que modulan la actividad de CFTR que se pueden administrar en las combinaciones de esta invencion incluyen, pero no se limitan a, los compuestos descritos en los documentos US 2009/0246137 A1, US 2009/0253736 A1, US 2010/0227888 A1, Patente numero 7.645.789, US 2009/0246820 A1, US 2009/0221597 A1, US 2010/0184739 A1, US 2010/0130547 A1, US 2010/0168094 A1 y la patente emitida: 7.553.855; US 7.772.259 B2, US 7.405.233 B2, US 2009/0203752, US 7.499.570.
Agentes modificadores del moco o la mucina utiles en las combinaciones y los metodos de la presente incluyen agentes reductores, tensioactivos y detergentes, expectorantes y agentes desoxirribonucleasa.
Las protemas de la mucina se organizan en polfmeros de alto peso molecular a traves de la formacion de enlaces covalentes (disulfuro) y no covalentes. La ruptura de los enlaces covalentes con agentes reductores es un metodo bien establecido para reducir la propiedades viscoelasticas del moco en vitro y se predice que minimiza la adherencia del moco y mejora la depuracion en vivo. Se sabe bien que los agentes reductores disminuyen la viscosidad del moco en vitro y se usan comunmente como un adyuvante para procesar muestras de esputos. Ejemplos de agentes reductores incluyen moleculas que contienen sulfuro o fosfinas capaces de reducir enlaces disulfuro protemicos incluyendo, pero no limitados a, protemas que contienen N-acetilcistema, N-acistelina, carbocistema, glutationa, ditiotreitol, tiorredoxina, y tris(2-carboxietil)fosfina.
La N-acetilcistema (NAC) esta aprobada para el uso junto con fisioterapia toracica para liberar moco viscoso o espeso de las vfas respiratorias. Estudios clmicos que evaluan los efectos de NAC oral o inhalada en la CF y la COPD han presentado mejoras en las propiedades reologicas del moco y tendencias hacia mejoras en la funcion pulmonar y disminuciones en las exacerbaciones pulmonares9. Sin embargo, la preponderancia de datos clmicos sugiere que la NAC es en el mejor de los casos un agente terapeutico marginalmente eficaz para tratar obstruccion mucosa de las vfas respiratorias cuando se administra oralmente o mediante inhalacion. Una reciente revision de Cochrane de la bibliograffa clmica existente sobre el uso de NAC no encontro una evidencia para apoyar la eficacia de NAC para CF. El beneficio clmico marginal de la NAC refleja:
La NAC es un agente reducto relativamente ineficaz que solo es parcialmente activo sobre la superficie de las vfas respiratorias. Se requieren concentraciones muy altas de NAC (200 mM o 3,26%) para reducir completamente Muc5B, una mucina de las vfas respiratorias formadora de gel principal, en vitro. Por otra parte, en el ambiente de pH de la superficie de las vfas respiratorias (medido en el intervalo de pH 6,0 a 7,2 en vfas respiratorias con CF y COPD), la NAC existe solo parcialmente es su estado reactivo como un tiolato cargado negativamente. Asf en la clmica, la NAC se administra a concentraciones muy altas. Sin embargo, se predice que los dispositivos de aerosol actuales no seran capaces de alcanzar concentraciones terapeuticas ni siquiera de una solucion de Mucomyst al 20% sobre superficies distales de las vfas respiratorias en los dominios temporales relativamente cortos (7,5 - 15 minutos) tfpicamente usados.
En estudios no clmicos, la NAC marcada con 14C, administrada mediante inhalacion, exhibe una eliminacion rapida de los pulmones con una semivida que vana de 6 a 36 minutos.
La NAC se administra como una solucion de inhalacion hipertonica muy concentrada (20% o 1,22 molar) y se ha presentado que provoca broncoconstriccion y tos. En muchos casos, se recomienda que la NAC se administre con un broncodilatador para mejorar la tolerabilidad de este agente.
Asf, agentes reductores tales como NAC no son muy adecuados para la administracion de aerosol en embolada. Sin embargo, se anticipa que el aporte de agentes reductores mediante una infusion de aerosol pulmonar incremental la eficacia, mientras que permitina una disminucion en la concentracion de agente reductor en la solucion de inhalacion (se predice que incrementa la tolerabilidad).
Los tensioactivos y detergentes son agentes de extension que se muestra que disminuyen la viscoelasticidad del moco, mejorando la capacidad de depuracion. Ejemplos de tensioactivos incluyen dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), PF, acido palmftico, palmitoiloleoilfosfatidilglicerol, protemas asociadas a tensioactivos (p. ej. SP-A, Bo C) o se pueden derivar de animales (p. ej. de lavado pulmonar de vaca o ternero o extrafdos de pulmon de cerdo picado) o sus combinaciones. Veanse, p. ej., las Patentes de EE. UU. N° 7.897.577, 5.876.970, 5.614.216, 5.100.806 y 4.312.860. Ejemplos productos tensioactivos incluyen Exosurf® Neonatal (palmitato de colfoscerilo), Pumactant® (DPPC y fosfatidilglicerol de huevo), tensioactivo KL-4, Venticute® (lusulptida, tensioactivo rSP-C), Alveofact® (bovactant), Curosurf® (poractant alfa), Infasurf® (calfactant), Newfacten® (tensioactivo bovino modificado), Surface®, Natsurf™ (tensioactivo de etoxilato de alcohol no ionico) y Survanta® (beractant). Ejemplos de detergentes incluyen, pero no se limitan a, Tween-80 y triton-X 100.
Se puede usar cualquier expectorante adecuado, incluyendo, pero no limitado a, guaifenesina (vease, p. ej., la Patente de EE. UU. N° 7.345.051). Se puede usar cualquier desoxirribonucleasa adecuada, incluyendo, pero no limitada, dornasa alfa (vease, p. ej., Patente de EE. UU. N° 7.482.024).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Ejemplos de inhibidores de cinasas incluyen inhibidores de NFkB, PI3K (fosfatidilinositol 3-cinasa), p38-MAP cinasa y Rho cinasa.
Agentes antiinfecciosos para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen antivirales y antibioticos. Ejemplos de antivirales adecuados incluyen Tamiflu® (oseltamivir) y Relenza® (zanamivir). Ejemplos de antibioticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aztreonam (arginina o lisina), fosfomicina y aminoglucosidos tales como tobramicina o cualquier combinacion o subgrupo de los mismos. Agentes antiinfecciosos adicionales que se pueden usar en la presente incluyen aminoglucosidos, daptomicina, fluoroquinolonas, cetolidos, carbapenems, cefalosporinas, eritromicina, linezolida, penicilinas, azitromicina, clindamicina, oxazolidinonas, tetraciclinas y vancomicina.
Ejemplos antibioticos de carbapenam utiles son impenam, panipenam, meropenam, biapenam, MK-826 (L-749,345), DA-1131, ER-35786, lenapenam, S-4661, CS-834 (profarmco de R-95867), KR-21056 (profarmaco de KR-21012), L- 084 (profarmaco de LJC 11036) y ceftolozano (CXA-101).
Antihistammicos (es decir, antagonistas del receptor H1) para la formulacion y el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen, pero no se limitan a: etanolaminas tales como HCl de difenhidramina, maleato de carbinoxamina, doxilamina, fumarato de clemastina, HCl de difenilhidramina y dimenhidrinato; etilendiaminas tales como maleato de pirilamina (metpiramina), HCl de tripelennamina, citrato de tripelennamina y antazolina; alquilaminas tales como feniramina, clorofeniramina, bromofeniramina, dexclorfeniramina, triprolidina y acrivastina; piridinas tales como metapirileno, piperacinas tales como HCl de hidroxicina, pamoato de hidroxicina, HCl de ciclicina HCl, lactato de ciclicina, HCl de meclicina y HCl de cetiricina; piperidinas tales como astemisol, HCl de levocabastina, loratadina, descarboetoxiloratadina, terfenadina y HCl de fexofenadina; tri- y tetraciclinas tales como prometacina, clorprometacina, trimepracina y azatadina; y HCl de acelastina cualquier combinacion o subgrupo de los mismos.
Ejemplos de otras clases de agentes terapeuticos adecuadas para el uso en las combinaciones y los metodos de la presente incluyen antivirales tales como ribavirina, agentes antifungicos tales como anfotericina, intraconazol y voriconazol, agentes contra el rechazo tales como ciclosporina, tacrolimus y sirolimus, broncodilatadores incluyendo, pero no limitados a, agentes anticolinergicos tales como atrovent, siARNs, vectores para terapia genica, aptameros, agonistas del receptor de endotelina, alfa-1-antitripsina y prostaciclinas.
En los metodos de tratamiento y los usos descritos anteriormente, un compuesto de la invencion se puede emplear solo o en combinacion con uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos. Tfpicamente, cualquier agente terapeuticamente activo que tenga un efecto terapeutico en la enfermedad o afeccion que se trata con el compuesto de la invencion se puede utilizar en combinacion con los compuestos de la invencion, con tal de que el agente terapeuticamente activo particular sea compatible con la terapia que emplea un compuesto de la invencion. Agentes terapeuticamente activos tfpicos que son adecuados para el uso en combinacion con los compuestos de la invencion incluyen los agentes descritos anteriormente.
En una realizacion preferida, los compuestos de la invencion se usan en combinacion con uno o mas osmolitos, particularmente solucion salina hipertonica o manitol.
En otro aspecto, la memoria descriptiva divulga metodos para el tratamiento y los usos que se describen anteriormente, que comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion y al menos un agente terapeuticamente activo diferente. Los compuestos de la invencion y al menos un agente terapeuticamente activo adicional se pueden emplear en combinacion concomitantemente o secuencialmente en cualquier combinacion terapeuticamente apropiada. La administracion de un compuesto de la invencion con uno o mas de otros agentes terapeuticamente activos puede ser mediante la administracion concomitantemente en 1) una composicion farmaceutica unitaria, tal como las composiciones descritas anteriormente o 2) composiciones farmaceuticas separadas que incluyen cada una uno o mas de los ingredientes activos integrantes. Los componentes de la combinacion se pueden administrar separadamente de un modo secuencial en el que el compuesto de la invencion se administra en primer lugar y el otro agente terapeuticamente activo se administra en segundo lugar o viceversa.
Cuando el compuesto de la invencion se administra en combinacion con uno o mas osmolitos, la administracion de cada componente es preferiblemente concomitante y puede ser en una composicion unitaria o en composiciones separadas. En una realizacion, el compuesto de la invencion y uno o mas osmolitos se administran concomitantemente mediante lavado transbroncoscopico. En otra realizacion, el compuesto de la invencion y uno o mas osmolitos se administran concomitantemente mediante inhalacion.
Cuando un compuesto de la invencion se usa en combinacion con otro agente terapeuticamente activo, la dosis de cada compuesto puede diferir de aquella cuando el compuesto de la invencion se usa solo. Las dosis apropiadas seran determinadas facilmente por un experto normal en la especialidad. La dosis apropiada del compuesto de la invencion, el otro o los otros agentes terapeuticamente activos y las cronologfas de administracion relativas se
seleccionaran a fin de alcanzar el efecto terapeutico combinado deseado y estaran dentro de la experiencia y la discrecion del medico, profesional clmico o veterinario a cargo.
Procedimientos experimentales. La presente invencion tambien proporciona procedimientos para preparar los 5 compuestos de la invencion y los productos intermedios sinteticos utiles en tales procedimientos, segun se describe con detalle posteriormente.
Ciertas abreviaturas y acronimos se usan para describir los procedimientos sinteticos y los detalles experimentales. Aunque la mayoffa de estos seran entendidos por un experto en la especialidad, la siguiente tabla contiene una lista 10 de muchas de estas abreviaturas y acronimos.
Abreviatura
Significado
AcOH
Acido acetico
AIBN
Azobisisobutironitrilo
DIAD
Azidodicarboxilato de diisopropilo
DIPEA
N,N-Diisopropiletilamina
DCE
dicloroetano
DCM
diclorometano
DMF
dimetilformamida
Et
Etilo
EtOAc o EA
acetato de etilo
EtOH
Etanol
ESI
ionizacion por electropulverizacion
HATU
hexafluorofosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3- tetrametiluronio
HPLC
Cromatograffa de Kquidos de alta resolucion
iPrOH
Alcohol isoprc^lico
i.t. o IT
intratraqueal
Me
Metilo
MeOH
metanol
AcOH
Acido acetico
m/z o m/e MH+
relacion de masa a carga masa mas 1
MH-
masa menos 1
MIC
concentracion inhibidora m^nima
MS o ms
espectro de masas
ta o t. a.
temperatura ambiente
Rf t-Bu
Factor de retardo terc-butilo
THF
tetrahidrofurano
TLC o tlc
cromatograffa en capa fina
8
partes por millon por debajo del campo del tetrametilsilano
Cbz
Benciloxicarbonilo, es decir-(CO)O-bencilo
AUC
Area bajo la curva o el pico
MTBE
Metil-tec-butil-eter
tR GC-MS
Tiempo de retencion Cromatograffa de gases-espectrometffa de masas
% en peso h
Porcentaje en peso Horas
5
10
15
20
25
30
35
40
Abreviatura
Significado
min.
Minutos
MHz
megahercios
TFA
Acido trifluoroacetico
UV
Ultravioleta
Boc
ferc-butiloxicarbonilo
DIAD
Azodicarboxilato de diisopropilo
AcOH
Acido acetico
DIPEA
N,N-Diisopropiletilamina o base de Hunig
Ph3P
Trifenilfosfina
Los compuestos de Formula I se pueden sintetizar usando tecnicas conocidas en la especialidad. Un procedimiento sintetico representativo se ilustra en el Esquema 1 posteriormente.
Esquema 1
imagen17
Estos procedimientos se describen in, por ejemplo, en E. J. Cragoe, "The Synthesis of Amiloride and Its Analogs" (Cap. 3) en Amiloride and Its Analogs, pp. 25-36. Otros procedimientos para preparar analogos de amilorida se describen, por ejemplo, en la Patente de Ee. UU. N° 3.318.813, de Cragoe, particularmente en los metodos A, B, C y D de la patente '813. Otros procedimientos adicionales que se pueden adaptar para la preparacion de los compuestos de la invencion se describen en las Publicaciones PCT N° WO2003/07182, WO2005/108644, WO2005/022935, US 7,064,129, US 6,858,615, US 6,903,105, WO 2004/073629, WO 2007/146869 y WO 2007/018640, concedidas todas a Parion Sciences, Inc.
La preparacion de N'-3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (2) se puede observar en el documento WO 2009/074575.
Generalmente, los compuestos de la invencion se puede preparar convenientemente al tratar un compuesto de Formula II con una amina de Formula III. Mas espedficamente, los compuestos de Formula 2 se tratan con la amina de Formula 3 en un disolvente adecuado tal como metanol, etanol o tetrahidrofurano y una base tal como trietilamina (TEA) o diisopropiletilamina (DIPEA), con calentamiento hasta temperatura elevada, p. ej., 70°C. Se pueden llevar a cabo purificacion adicional, resolucion de estereoisomeros, cristalizacion y/o preparacion de formas salinas usando tecnicas convencionales.
Como sera evidente para los expertos en la especialidad, en ciertos casos, los compuestos de partida o intermedios en la smtesis pueden poseer otros grupos funcionales que proporcionan centros reactivos alternativos. La interferencia de tales grupos funcionales se puede evitar mediante la utilizacion de grupos protectores apropiados, tales como grupos protectores de amina o alcohol y, cuando sea aplicable, priorizando apropiadamente las etapas sinteticas. Grupos protectores adecuados seran evidentes para los expertos en la especialidad. Se conocen bien en la especialidad metodos para instalar y retirar tales grupos protectores y tales tecnicas convencionales tambien se pueden emplear en los procedimientos de esta invencion.
Los siguientes ejemplos espedficos se proporcionan en la presente con propositos de ilustracion.
Material y metodos. Todos los reactivos y disolventes se adquirieron de Aldrich Chemical Corp., Chem-Impex International Inc. y TCI chemical industry Co. Ltd. Los espectros de NMR se obtuvieron bien en un Bruker AC 400 (1H NMR a 400 MHz y 13C NMR a 100 MHz) o bien en un Bruker AC 300 (1H NMR at 300 MHz y 13C NMR at 75 MHz). Los espectros de protones se refirieron al tetrametilsilano como un patron interno y los espectros de carbono se refirieron a CDCl3, cD3OD o DMSO-cf6 (adquiridos de Aldrich o Cambridge Isotope Laboratories, a menos que se especifique otra cosa). La cromatografia de desarrollo rapido se realizo en un sistema Combiflash (Combiflash Rf, Teledyne Isco) cargado con columna de gel de sflice (Redi Sep. Rf, Teledyne Isco) o columna en fase inversa (columna de alta resolucion Gold C18). Los espectros de masas de ESI se obtuvieron con un espectrometro de masas Shimadzu LCMS-2010 EV. Los analisis de HPLC se obtuvieron usando una columna analrtica Waters XTerra
MS C18 de 5 pm 4,6x150 mm detectada a 220 nm (a menos que se especifique otra cosa) en un sistema de HPLC Shimadzu Prominence. El siguiente programa temporal se uso con un caudal de 1,0 ml por minuto:
Tiempo (min)
Porcentaje de A (H2O con 0,05% de TFA) Porcentaje de B (CH3CN con 0,05% de TFA)
2,50
90 10
20,00
10 90
30,00
10 90
32,50
90 10
5 Los analisis de UPLC se obtuvieron usando una columna analttica Waters ACQUITY UPLC HSS T3 de 1,8 pm 2,1x100 mm detectada a 220 nm (a menos que se especifique otra cosa) en un sistema de UFLC Shimadzu Prominence. El siguiente programa temporal se uso con un caudal de 0,3 ml por minuto:
Tiempo (min)
Porcentaje de A (H2O con 0,05% de NH4COOH y 0,1% de HCOOH) Porcentaje de B (CH3CN/agua 80:20% con 0,05% de NH4COOH y 0,1% de HCOOH)
1,00
90 10
4,00
30 70
5,00
30 70
5,50
90 10
6,50
90 10
10
1. Preparacion de la sal de hidrocloruro de acido (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2- carbonil)guanidino)butil)naftalen-1-il)propanoico (16)
Esquema 2
imagen18
5 Preparacion de 4-(terc-butildimetilsililoxi)naftaleno-1-carbaldel'ndo (2); Una solucion de 4-hidroxinaftaleno-1- carbaldehndo (1) (10,0 g, 58,1 mmol) en THF seco (200 ml) se enfrio hasta 0°C y se anadieron secuencialmente imidazol (12,0 g, 174 mmol) y cloruro de terc-butildimetilsililo (TBSCl) (13,1 g, 87,1 mmol). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 16 h, la mezcla de reaccion se filtro y el disolvente se evaporo. El residuo se recogio en EtOAc (500 ml), se lavo con NH4Cl acuoso saturado (100 ml), agua (100 ml) y salmuera (100 ml) y se seco sobre 10 Na2SO4. El disolvente se retiro bajo presion reducida y el residuo se purifico mediante cromatograffa de desarrollo
rapido sobre gel de silice (2% de EtOAc/hexano), dando 2 (14,8 g, 90%) como un solido amarillo claro: 1H NMR (300 MHz, CDCla): 8 10,22 (s, 1H), 9,30 (d, J = 8,10 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 7,57 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 1,10 (s, 9H), 0,36 (s, 6H)
Preparacion de (Z)-2-(ferc-butiloxicarbonil)amino-3-[1-(ferc-butildimetilsililoxi)naftalen-4-il]acrilato de metilo (4);
Una solucion de (MeO)2P(O)CH(NHBoc)CO2Me, 3 (23,0 g, 52,7 mmol) en CH2CI2 seco (100 ml) se cargo con DBU (10,1 ml, 67,3 mmol) y la mezcla se agito durante 30 min a 0°C. Una solucion de 1 (14,8 g, 51,74 mmol) en CH2Cl2 seco (60 ml) se anadio lentamente a traves de una jeringa y la mezcla de reaccion se calento hasta temperatura 5 ambiente a lo largo de 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (500 ml), se lavo rapidamente con NH4Cl acuoso saturado (2 x 150 ml) y salmuera (200 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (20% de EtOAc/hexano con 1% de NEt3), dando 4 (20,0 g, 85%) como un solido amarillo: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): 8 8,23 (dd, J = 8,6, 2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 8,6, 2,1 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,4 Hz, 10 1H), 7,53-7,47 (m, 2H), 6,85 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,05 (brs, 1H), 3,88 (s, 3H), 1,30 (s, 9H), 1,09 (s, 9H), 0,30 (s, 6H).
Preparacion de 2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(4-(terc-butildimetilsililoxi)naftalen-1-il)propanoato de metilo (5);
Una suspension de 4 (17,2 g, 37,6 mmol) y Pd al 10%/C (3,40 g) en EtOH (200 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm, globo) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar 5 (17,0 g, 15 99%) como un solido blanco: 1H NMR (300 MHz, CDCls): 8 8,23 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57
7,44 (m, 2H), 7,10 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,07-4,94 (brs, 1H), 4,74-4,61 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,55-3,17 (m, 2H), 1,40 (s, 9H), 1,18 (s, 9H), 0,30 (s, 6H).
Preparacion de 2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(4-hidroxinaftalen-1-il)propanoato de metilo (6);
Una solucion de 5 (17,0 g, 37,0 mmol) en THF seco (200 ml) a 0°C se cargo con fluoruro de tetrabutilamonio (48,1 20 ml, 48,1 mmol). La solucion resultante se agito durante 15 min y se desactivo con NH4Cl acuoso saturado (150 ml). Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (500 ml), se lavo rapidamente con agua acuosa saturada (2 x 150 ml) y salmuera (200 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (25% de EtOAc/hexano), dando el rotamero 6 (14,0 g, 94%) como un solido amarillo: 1H NmR (300 MHz, CDCl3): 8 8,23 (d, J 25 = 8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57-7,44 (m, 2H), 7,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,55 (brs,
1H), 5,14-4,85 (brs, 1H), 4,77-4,51 (m, 1H), 3,78-3,31 (m, 5H), 1,40 (s, 6H), 1,10 (s, 3H).
Preparacion del Compuestos 7 y 8;
Se uso una columna CHIRALPAK AD 5 cm D.I. x 50 cm L, parffcula 20 p para separar enantiomeros usando el sistema isocratico IPA/Heptano (7,5% con 0,4% de DEA). 8,0 g del compuesto racemico 6 se purificaron mediante la 30 columna para suministrar el isomero S 8 (3,5 g, 44% de rendimiento) como un solido blanco y el isomero R 7 (2,2 g, 28%) como un solido blanco.
Preparacion de (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-[4-(trifluorometilsulfoniloxi)naftalen-1-il]propanoato de metilo (9);
Una solucion del compuesto 8 (1,22 g, 3,53 mmol) en piridina (20 ml) se cargo con triflato (0,9 ml, 5,30 mmol) a 0°C y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Despues de la concentracion, la mezcla de 35 reaccion se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 9 (1,51 g, 89%) como un aceite pardo: 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 8,19-8,07 (m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,12-5,06 (brs, 1H), 4,78-4,67 (m, 1H), 3,68-3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, 1H).
40
Preparacion de (S)-3-{4-[4-(benciloxicarbonilamino)but-1-inil]naftalen-1-il}-2-(terc-butoxicarbonilamino)propanoato de metilo (11);
Una solucion del compuesto 9 (1,50 g, 3,14 mmol) en CH3CN anhidro (60 ml) se cargo con TEA (1,27 ml, 12,6 45 mmol), 10% de (f-Bu^P en hexanos (1,27 ml, 0,62 mmol), but-3-inilcarbamato de bencilo (10, 948 mg, 4,71 mmol) y Cul (30 mg, 0,16 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante 10 min y se cargo Pd(PPh3)4 (363 mg, 0,31 mmol) rapidamente en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 16 h. La mezcla de reaccion se concentro bajo vacfo y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, acetato de etilo/hexanos 60:40) para 50 suministrar el compuesto 11 (1,30 g, 78%) como un aceite pardo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 8,33 (dd, J = 7,5, 2,2 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 7,5, 2,2 Hz, 1H), 7,58-7,51 (m, 2H), 7,52 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,35-7,29 (m, 5H), 7,19 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,16-5,12 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 5,07-4,99 (m, 1H), 4,74-4,65 (m, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,91-3,42 (m, 2H), 3,53 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 2,79 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, 1H).
5
10
15
20
25
30
35
40
Preparacion de sal de acido acetico de (S)-3-(4-(4-aminobutil)naftalen-1-il)-2-(terc-butoxicarbonilamino)propanoato de metilo (12);
Una suspension de 11 (1,00 g, 1,88 mmol) y Pd al 10%/C (200 mg) en una mezcla de MeOH (20 ml) y AcOH (2 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 12 (820 mg, 95%) como un solido blanco: 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,17-8,05 (m, 2H), 7,62-7,48 (m, 2H), 7,27 (brs, 2H), 4,47 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 3,75-3,51 (m, 5H), 3,13 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,93 (t, J = 7,66 Hz, 2H), 1,93 (s, 3H), 1,88-1,65 (m, 4H), 1,34 (s, 7H), 1,01 (s, 2H).
Preparacion de (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(4-14-[3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2-
carbonil)guanidino]butil}naftalen-1-il)propanoato de metilo (14);
Una solucion de la sal de amina 12 (815 mg, 1,77 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 1,1 g, 2,83 mmol) en EtOH (6,0 ml) se cargo con DIPEA (2,50 ml, 14,2 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 80:18:2 CHCh/CHaOH/N^OH) para suministrar la guanidina 14 (870 mg, 80%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,17-8,07 (m, 2H), 7,58-7,48 (m, 2H), 7,26 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 4,56-3,68 (m, 1H), 3,753,68 (m, 1H), 3,64 (s, 2H), 3,58-3,43 (m, 2H), 3,13 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,98 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,86-1,70 (m, 4H), 1,33 (s, 7H), 0,98 (s, 2H).
Acido (S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonil)guanidino)butil)naftalen-1- il)propanoico (15);
Una solucion del ester medico 14 (510 mg, 0,83 mmol) en una mezcla de THF (3 ml), metanol (3 ml) y agua (1 ml) se cargo con LiOH solido (120 mg, 4,99 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Cuando la TLC de la mezcla de reaccion mostraba la terminacion de la reaccion, el pH de la mezcla de reaccion se llevo hasta 9-10 mediante la adicion de HCl 1 N (acuoso) y el disolvente organico se retiro. El pH de la parte acuosa se ajusto hasta 5-6 y el precipitado resultante se extrajo con diclorometano. La parte acuosa se extrajo con DCM (2 x 50 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para suministrar el compuesto 15 (375 mg, 76%) como un solido blanco: 1H NMR (300 MHz, DMsO-cfe): 8 8,22-8,02 (m, 2H), 7,59-7,47 (m, 2H), 7,34-7,22 (m, 2H), 6,82 (brs, 2H), 4,19-4,06 (m, 1H), 3,59-3,46 (m, 1H), 3,25-3,13 (m, 2H), 3,09-2,94 (m, 10H), 1,80-1,55 (m, 4H), 1,28 (s, 7H), 0,93 (s, 2H).
Preparacion de la sal de HCl de acido (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2- carbonil)guanidino)butil)naftalen-1-il)propanoico (16);
Se anadio HCl 4 N en dioxano (8,0 ml) a 15 (258 mg, 0,43 mmol) seguido por agua (4,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se evaporo y el residuo se liofilizo para dar el compuesto 16 (250 mg, 99%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,54 (brs, 1H), 9,33 (t, J = 5,92 Hz, 1H), 9,03-8,80 (m, 2H), 8,60 (brs, 3H), 8,17 (ddd, J = 10,1, 7,6, 4,5 Hz, 2H), 7,59 (ddd, J = 9,2, 6,7, 4,5 Hz, 2H), 7,467,36 (m, 2H), 7,34 (dd, J = 9,9, 7,5 Hz, 2H), 4,13-4,02 (m, 1H), 3,75-3,44 (m, 3H), 3,43-3,33 (m, 2H), 3,09 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,81-1,62 (m, 4H).
Esquema 3
imagen19
NHCbz
NHCbz
BocHN
'NHCbz
Bod IN
DIPEA, EtOH
BocHN
HCI ac4 N, dioxano
NaOH
Mod IN
MeOH/THF/H-,0 BocHN
DEPBT/DIPEA
a n
TT IF
Pd/C.H
MeOH, AcOH
5 Preparacion de (S)-3-{4-[4-(benciloxicarbonilamino)but-1-inil]naftalen-1-il}-2-(terc-butoxicarbonilamino)propanoato de metilo (17);
Una solucion del ester metflico 11 (1,71 g, 3,22 mmol) en una mezcla de THF (21 ml), metanol (21 ml) y agua (7,0 ml) se cargo con NaOH solido (1,29 g, 32,3 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. Cuando la TLC de la mezcla de reaccion mostraba la terminacion de la reaccion, el pH de la mezcla de reaccion 10 se llevaba hasta 9-10 mediante la adicion de HCl 1 N (acuoso) y el disolvente organico se retiraba. El pH de la parte acuosa se ajusto hasta 5-6 y el precipitado resultante se extrajo con diclorometano. La parte acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para suministrar el compuesto 17 (1,55 g, 93%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-da): 8 8,32 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,13-8,05 (m, 1H), 7,58-7,48 (m, 4H), 7,38-7,29 (m, 5H), 5,21-5,15 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,07-4,93 (m, 15 1H), 4,70-4,54 (m, 1H), 3,77-3,62 (m, 1H), 3,57-3,35 (m, 2H), 2,84-2,68 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Preparacion del Compuesto 19;
El compuesto 18 (100 mg, 0,56 mmol) en THF (2,5 ml) se cargo con DEPBT (218 mg, 0,72 mmol), 17 (289 mg, 0,56 mmol) y DIPEA (0,3 ml, 1,68 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (8% de metanol/CH2Cl2), dando la amida 19 (250 mg, 66%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8 8,34 (dd, J = 8,3, 1,4 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61-7,47 (m, 4H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,16 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,36-5,19 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,36-4,53 (m, 1H), 3,66-3,42 (m, 4H), 2,79 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,40 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,32 (s, 6H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,39 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 20;
Una suspension de 19 (210 mg, 0,31 mmol) y Pd al 10%/C (150 mg) en una mezcla de MeOH (3,0 ml) y AcOH (0,3 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 22 que se neutralizo con trietilamina y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 20 (130 mg, 77%) como un solido blanco: 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,24 (dd, J = 8,1, 2,1 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 7,58-7,47 (m, 2H), 7,33-7,20 (m, 4H), 7,07-7,05 (m, 2H), 4,53 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 3,66-3,55 (m, 2H), 3,09 (t, J =
7,5 Hz, 2H), 2,82 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,35 (dd, J = 10,5, 7,5 Hz, 2H), 2,24 (s, 6H), 1,84-1,61 (m, 6H), 1,36 (s, 7H), 1,10 (s, 2H).
Preparacion de 22;
Una solucion de la amina 20 (122 mg, 0,22 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 139 mg, 0,35 mmol) en EtOH (4,0 ml) se cargo con DIPEA (0,31 ml, 1,76 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) para suministrar la guanidina 22 (111 mg, 66%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (dd, J = 7,5, 2,4 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,57-7,48 (m, 2H), 7,29 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,13-7,05 (m, 2H), 4,53 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,60-3,37 (m, 2H), 3,23 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,15-3,03 (m, 2H), 2,55 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,29 (dd, J = 9,7, 7,6 Hz, 2H), 2,21 (s, 6H), 1,86-1,64 (m, 6H), 1,36 (s, 7H), 1,12 (s, 2H).
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 23 (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-
(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida
Se anadio HCl 4 N en dioxano (3,0 ml) a 22 (100 mg, 0,13 mmol) seguido por agua (1,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se retiro y se neutralizo con NaOH 1 N (acuoso), el solido resultante se lavo con agua y se trato de nuevo con HCl 1 N (acuoso) el agua se retiro y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 22 (65 mg, 65%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 10,50 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 10,46-10,40 (m, 1H), 9,26 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 9,01-8,74 (m, 2H), 8,61 (brs, 1H), 8,35 (dd, J = 6,6, 3,4 Hz, 1H), 8,13 (dd, J = 6,5, 3,3 Hz, 1H), 7,58 (ddd, J = 9,9, 6,6, 3,6 Hz, 2H), 7,42 (brs, 1H), 7,40 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,29-4,20 (m, 1H), 3,64-3,49 (m, 2H), 3,123,03 (m, 2H), 3,02-2,94 (m, 2H), 2,72 (s, 3H), 2,70 (s, 3H), 2,56 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,97-1,88 (m, 2H), 1,79-1,61 (m, 4H).
Esquema 4
5
imagen20
azucar ^
24
azucar
DEPBT/DIPEA
THF
NIICbz
BocHN
NIICbz
Pd/C. Hi EtOH, AcOH
azucar
BocHN
azucan
DI PEA, EtOH
BocHN
HCI ac4 N, dioxano
Bocl IN
azucar
Preparacion del Compuesto 25;
El compuesto 24 (165 mg, 0,38 mmol) en THF (10 ml) se cargo con DEPBT (148 mg, 0,48 mmol), 17 (200 mg, 0,38 mmol) y DIPEA (0,2 ml, 1,14 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con 10 NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el
producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (8% de metanol/CH2Cl2), dando la amida 25 (210 mg, 60%) como un solido amarillo: 1H NMR (300 MHz, CDCh): 8 8,35 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63-7,52 (m, 2H), 7,51 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,44-7,39 (m, 1H), 7,37-7,27 (m, 6H), 7,16-7,02 (m, 3H), 5,24-5,16 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,68 (ddd, J = 11,3, 10,3, 5,1 Hz, 1H), 4,56 (q, J = 7,2 Hz, 15 1H), 4,19-4,09 (m, 1H), 3,90-3,76 (m, 5H), 3,74-3,68 (m, 1H), 3,63-3,46 (m, 5H), 3,45-3,24 (m, 3H), 2,80 (t, J = 6,7
Hz, 2H), 2,70-2,35 (m, 8H), 1,81-1,67 (m, 2H), 1,63-1,53 (m, 1H), 1,35-1,20 (m, 6H), 1,21 (s, 9H), 1,31 (d, J = 5,1 Hz, 3H), 0,87 (t, J = 6,2 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 26;
Una suspension de 25 (280 mg, 0,30 mmol) y Pd al 10%/C (560 mg) en una mezcla de EtOH (9,0 ml) y AcOH (1,0 20 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 4 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 22, que se neutralizo con NaHCO3 y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de silice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 26 (160 mg, 67%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,29 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 6,9
5
10
15
20
25
30
35
Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 8,2, 6,9, 1,1 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,02-7,96 (m, 1H), 7,95-6,88 (m, 2H), 6,77-6,69 (m, 1H), 5,56-5,35 (m, 1H), 4,68 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,61-4,53 (m, 1H), 4,12 (dd, J =
10,8, 5,4 Hz, 1H), 3,89-3,80 (m, 2H), 3,74 (t, J = 3,3 Hz, 2H), 3,46 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,39 (t, J = 10,7 Hz, 2H), 3,18 -
3.09 (m, 1H), 3,02-2,92 (m, 1H), 2,68 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,61-2,47 (m, 5H), 2,46-2,37 (m, 4H), 1,77-1,63 (m, 4H),
1,33 (d, J = 5,1 Hz, 3H), 1,31-1,20 (m, 8H), 1,21 (s, 9H), 0,88 (t, J = 6,7 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 27;
Una solucion de la amina 26 (155 mg, 0,20 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 123 mg, 0,31 mmol) en EtOH (8,0 ml) se cargo con DIPEA (0,28 ml, 1,56 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) seguida por cromatograffa en fase inversa (Gold C18) para suministrar la guanidina 27 (100 mg, 51%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H),

8.10 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,56-7,49 (m, 2H), 7,29 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 7,9 Hz, 2H),

4,67 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,56-4,50 (m, 1H), 4,04 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 1H), 3,92-3,86 (m, 1H), 3,82-3,74 (m, 2H),

3,51-3,46 (m, 1H), 3,25 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,15-3,06 (m, 2H), 2,71 (dd, J = 13,2, 5,2 Hz, 1H), 2,60-2,45 (m, 6H),
1,87-1,63 (m, 6H), 1,48-1,40 (m, 6H), 1,33-1,26 (m, 6H), 1,23 (d, J = 5,1 Hz, 3H), 1,20 (s, 9H), 0,89 (t, J = 6,7 Hz, 3H).
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 28 - 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(hexil((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-
carboxamida;
Se anadio HCl 4 N en agua (3,0 ml) a 27 (80 mg, 0,08 mmol) en etanol (0,5 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 40°C durante 6 h. El disolvente se retiro, se anadio HCl 4 N adicional y la mezcla se calento a 40°C durante otras 4 h. El disolvente se retiro, se anadio agua y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 28 (78 mg, 99%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 10,58 (brs, 1H), 10,56 (brs, 1H), 9,70-9,58 (m, 1H), 9,38
9,31 (m, 1H), 9,04-8,84 (m, 2H), 8,70 (brs, 1H), 8,43-8,34(m, 1H), 8,16-8,08 (m, 1H), 7,62-7,52 (m, 2H), 7,46-7,37
(m, 4H), 7,34 (d, J
= 7,1 1 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 7,1 Hz, 1H) , 7,17 (d, J= 8,1 Hz , 2H) , 5 ,52-5,46 (m, 1H), 4 ,85-4,76 (m
1H),
4,68-4,52 (m, 2H), 4,49-4,37 (m, 1H), 4,32-4,22 (m, 1H), 4,05-3 ,97 (m, 1H), 3, 72-3,43 (m, 6H), 3, 17-2,97 (m
8H),
2,02-1,90 (m, : 2H), 1,77-1,54 (m, 6H), 1 ,33-1,21 (m, 6H), 0, 86 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
1H NMR (400 MHz
, CD3OD): 8 8,23 (d, J = ; 8,3 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7 ,62-7,53 (m, 2H), 7 ,41-7,36 (m
1H),
7,35-7,32 (m, 1H), 7,31-7,25 (m, 2H), 7,21-7,12 (m, 2H), 4,35-4 ,25 (m, 1H), 4, 17-4,02 (m, 1H), 3, 86-3,75 (m
2H),
3,73-3,59 (m, 6H), 3,23-3,08 (m, 9H), 2,73-2,60 (m, 2H), 2,11-1 ,97 (m, 2H), 1, 91-1,75 (m, 4H), 1, 74-1,62 (m
2H),
1,44-1,30 (m, < 6H), 0,92 (t, J = 6,6 Hz, 3H)
Esquema 5
5
imagen21
azucar.
azucar
NHCbz
NHCbz
Pd/C, H2 EtOH, AcOH
azucar
azucar
NH7*2AcOH
DIPEA, EtOH
azucar
azucar
locHN
k N
DEPii'lV D1PEA/T11E
azLCdi
OJ
Preparacion del Compuesto 30:
El Compuesto 29 (290 mg, 0,54 mmol) en THF (8,0 ml) se cargo con DEPBT (210 mg, 0,70 mmol), 17 (311 mg, 0,60 mmol) y DIPEA (0,28 ml, 1,62 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente 10 con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (8% de metanol/CH2Cl2), dando la amida 30 (400 mg, 72%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 8,36-8,26 (m, 1H), 8,20-8,09 (m, 1H), 8,03-7,85 (m, 1H), 7,61-7,46 (m, 1H), 7,49 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,38-7,28 (m, 5H), 7,18
6,96 (m, 4H), 5,51-5,36 (m, 1H), 5,32-5,21 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,67 (q, J = 5,1 Hz, 2H), 4,66-4,53 (m, 1H), 4,11 (dd, 15 J = 10,4, 5,2 Hz, 2H), 4,06-3,96 (m, 2H), 3,93-3,86 (m, 2H), 3,86-3,77 (m, 2H), 3,68-3,56 (m, 2H), 3,56-3,44 (m, 6H), 3,39 (t, J = 10,4 Hz, 2H), 3,05 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,96-2,88 (m, 2H), 2,79 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,64-2,61 (m, 4H), 1,93
1,72 (m, 4H), 1,48-1,40 (m, 2H), 1,35 (s, 9H), 1,29 (d, J = 5,1 Hz, 6H).
Preparacion del Compuesto 31;
Una suspension de 30 (400 mg, 0,39 mmol) y Pd al 10%/C (210 mg) en una mezcla de EtOH (54 ml) y AcOH (6,0 20 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 4 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vacfo para suministrar la sal de amina 31 (333 mg, 84%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8
8.25 (dd, J = 7,5, 2,5 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,36-7,32 (m, 1H), 7,31 (d, J = 7,2 Hz, 2H),
7.26 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,70 (q, J = 4,9 Hz, 2H), 4,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,18-4,10 (m, 2H),
5
10
15
20
25
30
4,06 (dd, J = 10,6, 5,3 Hz, 2H), 3,87-3,82 (m, 2H), 3,81-3,68 (m, 3H), 3,53 (dd, J = 9,5, 1,8 Hz, 2H), 3,39 (t, J = 9,2 Hz, 3H), 3,35-3,30 (m, 2H), 3,15-3,08 (m, 2H), 2,92 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,09-2,00 (m, 4H), 2,77-2,58 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,60 (m, 4H), 1,36 (s, 9H), 1,25 (d, J = 4,9 Hz, 6H).
Preparacion de 32;
Una solucion de 31 (370 mg, 0,36 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 226 mg, 0,58 mmol) en EtOH (12 ml) se cargo con DIPEA (0,51 ml, 2,88 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 32 (250 mg, 63%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,13-8,03 (m, 1H), 7,54-7,49 (m, 2H), 7,30-7,20 (m, 4H), 7,13-7,04 (m, 2H), 4,67 (q, J = 4,9 Hz, 2H), 4,54-4,49 (m, 1H), 4,03 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,91-3,84 (m, 2H), 3,82-3,72 (m, 5H), 3,48-3,43 (m, 5H), 3,41-3,34 (m, 2H), 3,13-3,10 (m, 2H), 2,68-2,50 (m, 8H), 1,87-1,67 (m, 6H), 1,36 (s, 9H), 1,23 (d, J = 4,9 Hz, 6H).
Preparacion de la sal de HCl de 33 -3 ,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-
carboxamida
Se anadio HCl 4 N en agua (6,0 ml) a 32 (200 mg, 0,18 mmol) en etanol (2,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 40°C durante 8 h. El disolvente se retiro, se anadio HCl 4 N adicional y la mezcla se calento a 40°C durante otras 6 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 33 (138 mg, 59%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,48 (brs, 1H), 10,45-10,41 (m, 1H), 9,25-9,19 (m, 1H), 8,95-8,85 (m, 1H), 8,81-8,69 (m, 1H), 8,64-8,46 (m, 4H),
8,36-8,29 (m, 1H), 8,18-8,10 (m, 1H), 7,62-7,55 (m, 2H), 7,46-7,38 (m, 4H), 7,34 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,3
Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,48-5,39 (m, 2H), 4,87-4,75 (m, 2H), 4,68-4,33 (m, 4H), 4,28-4,17 (m, 1H), 4,05
3,93 (m, 2H), 3,72-3,65 (m, 2H), 3,62-3,53 (m, 4H), 3,52-3,35 (m, 8H), 3,27-3,13 (m, 6H), 3,3.10-3,00 (m, 2H), 2,622,48 (m, 4H), 2,03-1,90 (m, 2H), 1,78-1,61 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,24-8,20 (m, 1H), 8,18-8,15 (m, 1H), 7,57 (td, J = 4,6, 1,5 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 7,4
Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 2H), 7,16 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 2H), 4,28 (t, J = 6,9 Hz,
1H), 4,19-4,13 (m, 1H), 4,12-4,07(m, 1H), 3,85-3,79 (m, 2H), 3,77(dd, J = 10,4, 5,2 Hz, 2H), 3,73-3,60 (m, 6H), 3,49
3,45 (m, 2H), 3,42-3,34 (m, 6H), 3,26-3,23 (m, 1H), 3,19-3,13 (m, 2H), 3,14-3,11 (m, 1H), 2,74-2,59 (m, 2H), 2,14
2,00 (m, 2H), 1,90-1,72 (m, 4H).
Esquema 6
imagen22
5 Preparacion del Compuesto 35;
El Compuesto 34 (400 mg, 0,91 mmol) en THF (15 ml) se cargo con DEPBT (389 mg, 1,30 mmol), 17 (516 mg, 1,00 mmol) y DIPEA (0,52 ml, 3,00 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el 10 producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (8% de metanol/CH2Cl2), dando la amida 35 (700 mg, 83%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 8,35 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,64-7,35 (m, 4H), 7,38-7,26 (m, 5H), 7,06 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,17
7,09 (m, 2H), 5,21-5,13 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,69 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,55 (q, J = 7,25 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 11,4,
5,6 Hz, 1H), 4,11-4,02 (m, 1H), 4,07-3,92 (m, 1H), 3,88-3,77 (m, 1H), 3,73-3,67 (m, 1H), 3,64-3,49 (m, 5H), 3,41 (d, J 15 = 10,6 Hz, 2H), 3,37-3,30 (m, 2H), 3,29-3,20 (m, 3H), 2,80 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,52 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,90-1,76 (m,
3H), 1,42 (s, 18 H), 1,32 (d, J = 5,2 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 36;
Una suspension de 35 (700 mg, 0,74 mmol) y Pd al 10%/C (400 mg) en una mezcla de EtOH (90 ml) y AcOH (10 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla 20 de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vacfo para suministrar la sal de amina 36 (650 mg, 95%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 8,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,86-7,71 (m, 1H), 7,70-7,63 (m, 1H), 7,58-7,43(m, 2H), 7,36-7,26 (m, 2H), 7,02-6,91 (m, 2H), 4,70-4,63 (m, 1H), 4,61-4,54 (m, 1H), 4,20-4,05 (m, 2H), 4,04-3,90 (m, 1H), 3,89-3,68 (m, 3H),
5
10
15
20
25
3,67-3,46 (m, 3H), 3,45-3,27 (m, 5H), 3,29-3,21 (m, 4H), 3,11-2,91 (m, 4H), 2,90-2,76 (m, 2H), 2,48 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,08 (s, 6H), 1,86-1,61 (m, 6H), 1,41 (s, 15H), 1,32 (d, J = 5,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H).
Preparacion de 37;
Una solucion de 36 (650 mg, 0,70 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 436 mg, 1,13 mmol) en EtOH (12 ml) se cargo con DIPEA (0,90 ml, 5,60 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 37 (444 mg, 62%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (dd, J = 7,7, 2,2 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,57-7,47 (m, 2H), 7,33-7,21 (m, 4H),
7,08 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 4,68 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 4,53 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,04 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 1H), 4,03-3,93 (m, 1H), 3,25 (ddd, J = 10,3, 9,2, 5,2 Hz, H), 3,71-3,65 (m, 1H), 3,58-3,37 (m, 4H), 3,27-3,20 (m, 4H), 3,20-3,15 (m, 1H), 3,14-3,05 (m, 2H), 2,66 (q, J = 7,5 Hz, 1H), 2,53 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,89-1,76 (m, 4H), 1,76-1,64 (m, 2H), 1,36 (s, 6H), 1,42 (s, 9H), 1,25 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 1,11 (s, 3H).
Preparacion de la sal de HCl de 38 ;
Se anadio HCl 4 N en agua (6,0 ml) a 37 (240 mg, 0,23 mmol) en etanol (3,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 40°C durante 8 h. El disolvente se retiro, se anadio HCl 4 N adicional y la mezcla se calento a 40°C durante otras 8 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 38 (251 mg, 64%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,50 (brs, 1H), 9,28 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 9,02-8,87 (m, 1H), 8,86-8,75 (m, 1H), 8,72-8,55 (m, 4H), 8,39-8,33 (m, 1H), 8,16-8,10 (m, 1H), 7,61-7,55 (m, 2H), 7,45-7,40 (m, 1H), 7,40 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,38 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,64-4,51 (m, 2H),
4,49-4,35 (m, 1H), 4,30-4,20 (m, 2H), 3,94-3,86 (m, 1H), 3,70-3,64 (m, 1H), 3,63-3,52 (m, 3H), 3,51-3,34 (m, 6H), 3,15-2,98 (m, 3H), 2,98-2,81 (m, 3H), 2,58 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,96-1,85 (m, 2H), 1,79-1,61 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,26-8,20 (m, 1H), 8,19-8,14 (m, 1H), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,38 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,29 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 4,07-4,00 (m, 1H),
3,83 (dd, J = 9,8, 1,5 Hz, 1H), 3,77 (dd, J = 9,8, 2,6 Hz, 1H), 3,73-3,64 (m, 5H), 3,37 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,21-3,11 (m, 4H), 3,06-2,96 (m, 2H), 2,66 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,03-1,94 (m, 2H), 1,90-1,75 (m, 4H).
Esquema 7
imagen23
5 Preparacion del Compuesto 40;
Una solution del acido 17 (880 mg, 1,70 mmol) en THF (30 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo. Se anadio NMM (0,37 ml, 3,40 mmol), seguido por PivCl (0,20 ml, 1,70 mmol) y la mezcla de reaction se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio 39 (375 mg, 1,70 mmol, 15 ml tHF) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante otros 10 min. La mezcla de reaccion se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante 16 10 h. El disolvente organico se retiro. El residuo se cargo con agua y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatografia en columna (4% de metanol en cloroformo) para suministrar la amida 40 (719 mg, 59%) como un solido amarillo claro: [M + H]+ 720.
5
10
15
20
25
Una suspension de 40 (719 mg, 1,00 mmol) y Pd al 10%/C (300 mg) en una mezcla de EtOH (110 ml) y AcOH (20 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 41 como un solido amarillo (660 mg, 93%): [M + H]+ 589.
Preparacion del Compuesto 42;
Una solucion de amina 41 (660 mg, 0,93 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 650 mg, 1,67 mmol) en EtOH (10 ml) se cargo con DIPEA (1,66 ml, 9,3 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para proporcionar la guanidina 42 (370 mg, 50%) como un solido amarillo: [M + H]+ 801.
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 43 (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(6-
(dimetilamino)hexil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida
Se anadio TFA (10 ml) a 42 (370 mg, 0,46 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, se anadio HCl 1 N adicional y el disolvente se retiro. La mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 43 (290 mg, 92%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,39 (brs, 2H), 9,25 (brs, 1H), 9,028,87 (m, 1H), 8,86-8,73 (m, 2H), 8,71-8,44 (m, 2H), 8,35 (brs, 1H), 8,13 (dd, J = 6,8, 3,8 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 6,5,
3,2 Hz, 2H), 7,42 (brs, 2H), 7,35 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,26-4,18 (m, 1H), 3,65-3,48 (m, 2H), 3,39-3,32 (m, 3H), 3,06 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,99-2,91 (m, 2H), 2,69 (s, 6H), 1,77-1,56 (m, 6H), 1,52 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 1,34-1,21 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,22-8,17 (m, 1H), 8,16-8,12 (m, 1H), 7,58-7,51 (m, 2H), 7,36 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,04 Hz, 2H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,24 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,70-3,58 (m, 2H),
3,33 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,14 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,09-3,03 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 2,53 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 1,88-1,73 (m, 4H), 1,72-1,63 (m, 2H), 1,61-1,52 (m, 2H), 1,41-1,32 (m, 4H).
7. Preparation de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)hexil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida
Esquema 8
imagen24
imagen25
NHCbz
NHCbz
NH7*2AcOH
BocHN
azucar
azucar
PivCl, NMM, THF
azucar
azucar
azucar
BocHN
Pd/C, H-,
EtOH. AcOH
azucar
azucar
BocHN
nh-ht
DIPEA, EtOH
NH
5
10
15
20
25
30
35
40
Una solucion del acido 17 (900 mg, 1,74 mmol) en THF (40 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo. Se anadio NMM (0,38 ml, 3,48 mmol), seguido por PivCl (0,21 ml, 1,74 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio 44 (1,21 g, 1,74 mmol, 20 ml THF) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 10 min mas. La mezcla de reaccion se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante 16 h. El disolvente organico se retiro. El residuo se cargo con agua y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (4% de metanol en cloroformo) para suministrar la amida 45 (2,00 g, impura) como un solido amarillo claro: [M + H]+1196.
Preparacion del Compuesto 46;
Una suspension de 45 (2,00 g, impura) y Pd al 10%/C (400 mg) en una mezcla de EtOH (120 ml) y AcOH (20 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 46, que se neutralizo con NaHCO3 y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 46 como un solido amarillo (500 mg, 27% a lo largo de dos etapas): [M + H]+ 1067.
Preparacion del Compuesto 47;
Una solucion de la amina 46 (500 mg, 0,47 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 330 mg, 0,84 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (0,84 ml, 94,70 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 47 (325 mg, 55%) como un solido amarillo: [M + H]+ 1278.
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 48 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(bis((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)hexil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-
carboxamida
Se anadio HCl 4 N en agua (20 ml) a 47 (325 mg, 0,25 mmol) en EtOH (2,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 48 (165 mg, 60%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,52 (brs, 1H), 10,44 (brs, 1H), 9,28 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 9,00-8,88 (m, 1H), 8,87-8,75 (m, 1H), 8,63 (brs, 2H), 8,60-8,50 (m, 1H), 8,39-8,33 (m, 1H), 8,17-8,11 (m, 1H), 7,58 (dd, J = 6,5, 3,3 Hz, 2H), 7,47-7,35 (m, 2H), 7,36 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 6,8 hz, 1H), 7,27 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,72-3,66 (m, 3H), 3,60 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,53-3,46 (m, 3H), 3,45-3,38 (m, 3H),
3,37-3,27 (m, 4H), 3,26- 3,12 (m, 4H), 3,06 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 1,76-1,60 (m, 6H), 1,58-1,47 (m, 2H), 1,35-1,23 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23-8,18 (m, 1H), 8,17-8,12 (m, 1H), 7,59-7,52 (m, 2H), 7,36 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,25 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,18-4,10 (m, 2H), 3,833,79 (m, 2H), 3,77 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 3,74 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,71-3,60 (m, 8H), 3,49-3,41 (m, 2H), 3,40-3,33 (m, 4H), 3,32-3,30 (m, 1H), 3,25-3,19 (m, 1H), 3,18-3,10 (m, 2H), 2,52 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,88-1,69 (m, 6H), 1,62-1,53 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 4H).
8. Preparacion de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-oxo-3-(4-(6-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexilamino)hexil)fenilamino)propil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida
Esquema 9
imagen26
NIICbz
BocHN
50
NHCbz
BocHN
NH2*2AcOH
BocIFN
UlK'I IN
azucar
PivCl, NMM, THF
azucar
azucar
EtOH, AcOH
azucar
DIPEA, ElOH
azucar
«cCc
I UN N Nil,
HCIac4N, EtOH
OH OH
5 Preparacion del Compuesto 50;
Una solucion del acido 17 (950 mg, 1,84 mmol) en THF (30 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo. Se anadio NMM (0,40 ml, 3,68 mmol), seguido por PivCl (0,23 ml, 1,84 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio 49 (800 mg, 1,47 mmol, 10 ml THF) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 10 min mas. La mezcla de reaccion se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante 16 10 h. El disolvente organico se retiro. El residuo se cargo con agua y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (4% de metanol en cloroformo) para suministrar la amida 50 (1,40 g, impura) como un solido amarillo claro: [M + H]+ 1043.
Preparacion del Compuesto 51;
15 Una suspension de 50 (1,40 g, impuro) y Pd al 10%/C (400 mg) en una mezcla de EtOH (120 ml) y AcOH (20 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vacfo para suministrar la sal de amina 51, directamente usada en la siguiente etapa (1,20 g, bruto): [M + H]+ 913.
5
10
15
20
25
Una solucion de la amina 51 (1,20 g, 0,47 mmol, bruto) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 723 mg, 1,86 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (2,00 ml, 11,6 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 52 (500 mg, 24% a lo largo de tres etapas) como un solido amarillo: [M + H]+1125.
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 53 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-oxo-3-(4-(6-((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexilamino)hexil)fenilamino)propil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-
carboxamida
Se anadio HCl 4 N en agua (25 ml) a 52 (500 mg, 0,44 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 53 (170 mg, 41%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-da): 8 10,52 (brs, 1H), 10,45-10,41 (m, 1H), 9,31-9,24 (m, 1H), 9,02-8,89 (m,
1H), 8,88-8,76 (m, 1H), 8,70-8,58 (m, 3H), 8,57-8,46 (m, 2H), 8,40-8,31 (m, 1H), 8,17-8,10 (m, 1H), 7,62-7,54 (m,
2H), 7,42 (brs, 2H), 7,36 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,41-5,35 (m, 1H), 4,79-4,72 (m, 1H), 4,62-4,53 (m, 2H), 4,47-4,38 (m, 1H), 4,29-4,19 (m, 1H), 3,94-3,87 (m,
1H), 3,63-3,52 (m, 3H), 3,50-3,39 (m, 3H), 3,38-3,32 (m, 2H), 3,12-2,96 (m, 3H), 2,97-2,90 (m, 1H), 2,89-2,80 (m,
2H), 1,77-1,56 (m, 6H), 1,54-1,45 (m, 2H), 1,35-1,20 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,24-8,20 (m, 1H), 8,19-8,14 (m, 1H), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,38 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,24-7,18 (m, 2H), 7,07 (d, J = 8,1Hz, 2H), 4,31-4,22 (m, 1H), 4,08-4,01 (m, 1H), 3,84 (dd, J =
4,8, 1,3 Hz, 1H), 3,77 (dd, J = 10,1, 2,5 Hz, 1H), 3,71-3,62 (m, 5H), 3,36 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,19-3,12 (m, 4H), 3,03
2,96 (m, 2H), 2,55 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,90-1,74 (m, 4H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,63-1,53 (m, 2H), 1,45-1,31 (m, 4H).
9. Preparacion de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(hexil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)hexil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida
Esquema 10
imagen27
BocHN
NHCbz
aziicar
PivCI.NMM, THF
aziicar
BocHN
Pd/C, H, EtOH, AcOH
NHCbz
BocHN
NH2*2AcOH
DIPEA, EtOH
dZicai
dZ!.:Cd
imagen28
Preparacion del Compuesto 55;
El Compuesto 54 (770 mg, 1,45 mmol) en THF (50 ml) se cargo con DEPBT (564 mg, 1,88 mmol), 17 (752 mg, 1,45 5 mmol) y DIPEA (0,77 ml, 4,35 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 100 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de s^lice (5% de metanol/CH2Cl2) y mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold), dando la amida 55 como un solido 10 amarillo (800 mg, 54%): [M + H]+ 1027.
Preparacion del Compuesto 56;
Una suspension de 55 (800 mg, 0,78 mmol) y Pd al 10%/C (400 mg) en una mezcla de EtOH (120 ml) y AcOH (30 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo 15 vacfo para suministrar la sal de amina 56 como un solido amarillo (780 mg, 99%): [M + H]+ 897.
Preparacion del Compuesto 57;
Una solucion de la sal de amina 56 (780 mg, 0,75 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 466 mg, 1,20 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (1,37 ml, 7,67 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta 20 temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) para suministrar la guanidina 57 (455 mg, 55%) como un solido amarillo: [M + H]+1110.
Preparacion de la sal de HCl del Compuesto 58 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(hexil((2S,3R,4R,5R)-
2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)hexil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- 25 carboxamida
Se anadio HCl 4 N en agua (25 ml) a 57 (455 mg, 0,41 mmol) en etanol (10 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el 30 residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 58 (230 mg, 55%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,45 (brs, 1H), 9,30 (brs, 1H), 9,09-8,49 (m, 3H), 8,41-8,32 (m, 1H), 8,16-8,08 (m, 1H), 7,62-7,52 (m, 2H), 7,42 (brs, 2H), 7,37 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,52-5,36 (m, 1H), 4,87-4,70 (m, 1H), 4,63-4,51 (m, 2H), 4,47-4,38 (m, 1H), 4,23 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,03-3,94 (m, 1H), 3,71-3,66 (m, 1H), 3,65-3,52 (m, 2H), 3,50-3,34 (m, 5H), 3,21(d, J = 3,2 Hz, 1H), 3,12 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 35 3,09-2,96 (m, 6H), 1,77-1,58 (m, 8H), 1,57-1,46 (m, 2H), 1,35-1,21 (m, 10 H), 0,86 (t, J = 6,4 Hz, 3H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,26-8,20 (m, 1H), 8,19-8,12 (m, 1H), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,38 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,26 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 4,16-4,09 (m, 1H), 3,82 (dd, J = 5,0, 1,5 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 11,3, 3,2 Hz, 1H), 3,72-3,61 (m, 6H), 3,35 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,24-3,11 (m, 40 7H), 2,54 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,90-1,67 (m, 8H), 1,64-1,54 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 10 H), 0,92 (t, J = 6,7 Hz, 3H).
10. Preparacion de acido (S)-2-amino-3-(6-(4-(3-(3,5-diairiino-6-doropiradno-2-carboml)guamdino)butN)naftalen-2- il)propanoico (80)
Esquema 11
imagen29
5
10
15
20
25
30
35
imagen30
Preparacion del Compuesto 62;
El iluro de Wittig estable carbometoximetilentrifenilfosforano (Ph3PCHCO2Me, 43,0 g, 129 mmol) se anadio a una solucion del aldehndo 59 (20,0 g, 107 mmol) en CH2Cl2 (200 ml) bajo atmosfera de nitrogeno y la mezcla de reaccion se agito 16 h a temperatura ambiente. La TLC controlaba la finalizacion de la reaccion (16 h). Se retiro CH2Cl2 bajo presion reducida y FCC usando 10% de acetato de etilo-hexanos para proporcionar el correspondiente ester trans- a,p-insaturado 62 (24,0 g, 92%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 8 7,88-7,82 (m, 1H), 8,81 (d, J =
15,8 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 9,2, 2,2 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,82 (s, 3H).
Preparacion del Compuesto 62 (ruta adicional);
Se anadio DBU (48,8 ml, 322 mmol) al fosfonoacetato de trimetilo (55,6 ml, 381 mmol) en 250 ml de CH2Cl2 anhidro enfriado hasta 0°C y la mezcla se agito durante 15 min. Se anadio gota a gota el aldehfdo 59 (40,0 g, 215 mmol) en 50 ml de CH2Cl2. La temperatura de la mezcla de reaccion se llevo hasta ta y la mezcla de reaccion resultante se agito a ta durante 16 hya continuacion se desactivo con 100 ml de agua. La mezcla se repartio y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (3 x 150 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, se concentraron y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (hexanos/acetato de etilo 10:1) para proporcionar el ester trans-a,p-insaturado deseado 62 (48,0 g, 92%) como un solido blanco.
Preparacion del Compuesto 64;
Una suspension del compuesto 62 (48,0 g, 196 mmol) y Pd al 10%/C (10 g) en EtOAc/THF (600 ml/75 ml) se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 64 (46,5 g, 96%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 8 7,67 (d, J = 9,4 Hz, 2H), 7,57-7,54 (m, 1H), 7,29(dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 7,11-7,09 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,07 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,70 (t, J = 7,7 Hz, 2H).
Preparacion del Compuesto 66;
Se anadio NaOH (45,6 g, 114 mmol) a una solucion del ester metflico 64 (46,5 g, 191 mmol) en THF/MeOH/H2O (500 ml/500 ml/150 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro y el valor del pH se ajusto hasta 1 con HCl ac. 1 N; precipitaba un solido blanco. El solido se filtro, se lavo con agua y se seco bajo vacfo para suministrar el acido 66 (42,5 g, 97%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 12,14 (brs, 1H), 7,73 (dd, J = 9,5, 2,3 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, 1H), 7,35 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,12 9 (dd, J = 9,1, 2,5 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 2,94 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 7,6 Hz, 2H).
Preparacion del Compuesto 67;
Se anadio n-butil-litio (110 ml, solucion 2 M en ciclohexano) gota a gota a -78°C a una solucion del compuesto 60 (39,3 g, 222 mmol) en THF seco (500 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 h para dar una solucion del compuesto 61. Se anadieron NmM (26,3 ml, 240 mmol) y PivCl (27,3 ml, 222 mmol) gota a gota a -78°C a otra solucion del compuesto 66 (42,5 g, 185 mmol) en THF seco (1000 ml). La mezcla de reaccion se agito durante 1 min a la misma temperatura y a continuacion la solucion preparada del compuesto 66 se anadio lentamente a -78°C. La
mezcla de reaccion se agito durante otros 10 min y a continuacion se llevo hasta 0°C y se agito durante 1 h seguido por una temperatura ambiente durante 30 min, se desactivo con NH4Cl saturado, se concentro para retirar el THF y se repartio entre CH2CI2 (1000 ml) y agua (1000 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2CI2 (2 x 1.000 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico 5 mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Cl2) para suministrar el compuesto 67 (45,0 g, 63%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 8 7,68 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, 1H), 7,31 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,33-7,24 (m, 4H), 7,17-7,12 (m, 2H), 7,11-7,09 (m, 1H), 4,69 -4,61 (m, 1H), 4,15 (d, J =2,4 Hz, 1H), 4,13 (s, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,46-3,21 (m, 3H), 3,20-3,08 (m, 2H), 2,74 (dd, J = 13,6, 9,4 Hz, 1H).
Preparacion del Compuesto 68;
10 Se anadio KHMDS (34,6 g, 174 mmol) en porciones a -78°C a una solucion del compuesto 67 (45,0 g, 116 mmol) en THF seco (700 ml). Despues de que la mezcla resultante se agitara durante 30 min, se anadio trisilazida (53,6 g, 174 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 5 min. A continuacion, se anadio lentamente a la misma temperatura acido acetico (69,6 ml, 1158 mmol) seguido por acetato de tetrametilamonio (30,9 g, 232 mmol). La mezcla de reaccion se dejo calentar hasta 24°C, se agito durante 16 h, se desactivo con NaHCO3 saturado (300 ml), se 15 concentro para retirar THF y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 500 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, EtOAc/Hexano 10:90 seguido por DCM) para suministrar el compuesto 68 (31,0 g, 62%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCla) 8 7,70 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,68-7,65 (m, 1H), 7,40 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H), 7,36-7,23 (m, 3H), 7,20 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,19-7,17 (m, 1H), 7,13 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 20 9,0, 6,0 Hz, 1H), 4,58-4,50 (m, 1H), 4,11 (dd, J = 9,1, 2,6 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,91 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,34 (dd, J =
13.8, 6,5 Hz, 1H), 3,30 (dd, J = 13,0, 3,5 Hz, 1H), 3,19 (dd, J = 13,4, 8,6 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 13,4, 9,5 Hz, 1H).
Preparacion del Compuesto 69;
Se anadio H2O2 (49 ml, 433 mmol) seguido por LiOH (6,04 g, 144 mmol) en porciones a 0°C a una solucion del compuesto 68 (31,0 g, 72,1 mmol) en THF/H2O (300 ml/100 ml). La mezcla de reaccion se agito durante 10 min a la 25 misma temperatura seguido por a ta durante 1 h y a continuacion se desactivo con Na2SO3 saturado (200 ml), se concentro bajo presion reducida para retirar THF y se lavo con CH2Cl2 (500 ml). La capa acuosa se acidifico con HCl ac. 1 N y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 500 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se lavaron con MTBE para suministrar el compuesto 69 (15,0 g, 82%) como un solido blancuzco: 1H NMR (400 MHz, MeOD-d3) 8 7,70 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,66-7,63 (m, 1H), 7,35 (dd, J = 8,6, 1,7 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 30 2,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 9,1, 2,6 Hz, 1H), 4,25 (dd, J = 8,6, 5,3 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,29 (dd, J = 13,9, 5,1 Hz,
1H), 3,10 (dd, J = 14,3, 8,6 Hz, 1H).
Preparacion del Compuesto 70;
Una suspension del compuesto 69 (15,0 g, 55,1 mmol) y Pd al 10%/C (3,50 g) en AcOH/H2O (300 ml/100 ml) se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro 35 a traves de celita y se lavo con AcOH/H2O, seguido por MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar la sal acetica 70 (14,0 g, 83%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6,TFA) 8 8,38-8,18 (m, 3H), 7,78 (dd, J = 11,4, 8,1 Hz, 2H), 7,75-7,70 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 8,6, 1,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,18 (dd, J =
8.8, 2,4 Hz, 1H), 4,33-4,23 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,33 (dq, J = 14,5, 5,9 Hz, 2H), 1,92 (s, 3H).
Preparacion del Compuesto 71;
40 Se anadio acido bromtndrico (140 ml) gota a gota a temperatura ambiente a una solucion del compuesto 70 (14,0 g,
45,9 mmol) en acido acetico (140 ml) y la mezcla de reaccion se sometio a reflujo durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro. El residuo pardo en bruto 71 (12,4 g, 87%) se uso directamente para la siguiente epata sin purificacion: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 13,83 (brs, 1H), 9,71 (brs, 1H), 8,41 (brs, 1H), 8,25 (brs, 2H), 7,67 (dd, J = 13,8, 8,7 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, 1H), 7,29 (dd, J = 8,6, 1,7 Hz, 1H), 7,1345 7,05 (m, 2H), 4,29-4,19 (m, 1H), 3,20 (t, J = 5,5 Hz, 2H).
Preparacion del Compuesto 72;
Se anadio cloruro de acetilo (38,4 ml, 540 mmol) a metanol seco (400 ml) a 0°C y a continuacion se anadio el compuesto 71 (24,0 g, 77,2 mmol). La mezcla de reaccion se sometio a reflujo durante 4 h y se concentro. El residuo se repartio entre CH2Ch (500 ml) y NaHCO3 saturado (300 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 50 x 300 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 72 (16,6 g, 88%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 9,62 (brs, 1H), 7,67 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,22 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,09-7,06 (m, 1H), 7,04 (dd, J = 8,8, 2,6
Hz, 1H), 3,67 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 3,57 (s, 3H), 2,97 (dd, J = 13,5, 6,1 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 13,2, 7,4 Hz, 1H), 1,90 (brs, 2H).
Preparacion del Compuesto 73;
Se anadieron NaHCO3 (22,8 g, 271 mmol) y B0C2O (17,7 g, 81,3 mmol) a 0°C a una solucion del compuesto 72 (16,6 5 g, 67,8 mmol) en MeOH/H2O (360 ml/120 ml). La mezcla resultante se dejo calentar hasta temperatura ambiente y se agito durante 1 h. La mezcla de reaccion se repartio entre CH2Cl2 (200 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 x 400 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. La FCC usando 20% de acetato de etilo-hexanos seguida por CH2O2 daba el compuesto 73 (17,0 g, 73%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCls) 8 7,60 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 10 7,51 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,49-7,43 (m, 1H), 7,15 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,09-6,99 (m, 2H), 6,31 (brs, 1H), 5,15-4,84 (m,
1H), 4,73-4,46 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,23 (dd, J = 13,7, 5,3 Hz, 1H), 3,14 (dd, J = 13,7, 5,5 Hz, 1H), 1,39 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 74;
Se anadio piridina (16,5 ml, 203 mmol) a una solucion del compuesto 73 (7,0 g, 20,3 mmol) en CH2Cl2 (300 ml) y se anadio triflato (5,11 ml, 30,4 mmol) a 0°C y se agito a la misma temperatura durante 1 h seguido por una 15 temperatura ambiente durante 2 h. Despues de concentrarse, la mezcla de reaccion se repartio entre CH2Cl2 (300 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 300 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 74 (8,80 g, 91%) como un aceite pardo (piridina presente segun se confirmaba por NMR). La reaccion se siguio al usar LC-MS y la formacion de producto se confirmo mediante los datos de LM-mS: 1H NMR (400 MHz, CDCla) 7,85 (d, J 20 = 9,2 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,66-7,63 (m, 1H), 7,37 (ddd, J = 10,0, 7,3, 2,0 Hz,
2H), 5,12-5,03 (m, 1H), 4,73-4,61 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,32 (dd, J = 13,3, 5,3 Hz, 1H), 3,20 (dd, J = 13,3, 6,2 Hz, 1H), 1,38 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 75;
El Compuesto 74 (16,5 g, 34,6 mmol) y but-3-inilcarbamato de bencilo (17, 10,4 g, 51,9 mmol) en CH3CN anhidro 25 (450 ml) se desgasificaron con argon durante 10 min a ta, a continuacion se anadieron TEA (19,3 ml, 138 mmol),
10% de (f-Bu^P en hexanos (13,9 ml, 6,91 mmol) y Cul (0,33 g, 1,72 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante 10 min y se anadio Pd(PPh3)4 (3,99 g, 3,45 mmol) rapidamente en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 18 h. La mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se purifico mediante una columna (gel de sflice, hexanos/EA 30 75:25) para suministrar el compuesto 75 (14,1 g, 77%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7,86 (brs,
1H), 7,68 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,53 (brs, 1H), 7,41 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,38-7,28 (m, 5H), 7,27-7,22 (m, 1H), 5,26-5,17 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 5,06-4,99 (m, 1H), 4,70-4,59 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,46 (q, J = 6,7 Hz, 2H), 3,27 (dd, J = 14,1, 5,9 Hz, 1H), 3,16 (dd, J = 13,2, 6,2 Hz, 1H), 2,67 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,38 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 76;
35 Se anadio NaOH (4,56 g, 114 mmol) a una solucion del ester metflico 75 (12,1 g, 22,8 mmol) en THF/MeOH/H2O (150 ml/150 ml/50 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El valor del pH se ajusto hasta 9 con HCl ac 1 N y el disolvente organico se retiro. El valor del pH del residuo se ajusto hasta 5-6 y la suspension se repartio entre CH2Cl2 (500 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 400 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el 40 compuesto 76 (10,50 g, 89%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7,83 (s, 1H), 7,73-7,61 (m, 3H), 7,44-7,19 (m, 7H), 5,10 (s, 2H), 4,42-4,34 (m, 1H), 3,41-3,32 (m, 3H), 3,06 (dd, J = 14,3, 9,3 Hz, 1H), 2,64 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,31 (s, 7H), 1,21 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 77; SG-SJL-B-27
Una suspension de 75 (2,0 g, 3,77 mmol) y Pd al 10%/C (500 mg) en una mezcla de EtOH (90 ml) y AcOH (10 ml) 45 se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar la sal de amina 77 (1,60 mg, 93%) como un solido blanco: H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,73 (d, J = 8,5, 1H), 7,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,62 ((brs, 2H), 7,73 (ddd, J = 10,0, 8,7, 2,7 Hz, 2H), 4,44 (dd, J = 8,8, 5,6 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,25 (dd, J = 14,0, 6,6 Hz, 1H), 3,04 (dd, J = 13,5, 9,2 Hz, 1H), 2,93 (t, J = 7,4 Hz, 50 2H), 2,83 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,96 (s, 6H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,74-1,68 (m, 2H), 1,33 (s, 7H), 1,26 (s, 2H).
10
15
20
25
30
Se anadio DIPEA (6,20 ml, 34,70 mmol) a temperature ambiente a una solucion de la sal de amina 77 (1,60 g, 3,47 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 2,16 g, 5,56 mmol) en EtOH (40 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 1 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, ChCI3/CH3OH/NH40h 80:18:2) para suministrar la guanidina 78 (1,24 g, 59%) como un solido amarillo: ^H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7,71 (dd, J = 8,4, 2,8 Hz, 2H), 7,60 (brs, 2H), 7,34 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 8,7, 1,7 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 8,9, 5,7 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,28-3,26 (m, 1H), 3,25 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 3,22 (d, J =
5,9 Hz, 1H), 3,04 (dd, J = 14,0, 9,2 Hz, 1H), 2,82 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,86 -1,77 (m, 2H), 1,73-1,63 (m, 2H), 1,32 (s, 7H), 1,23 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 79; SG-SJL-B-32
Se anadio NaOH solido (324 mg, 8,00 mmol) a una solucion del ester metflico 78 (1,24 g, 2,00 mmol) en una mezcla de THF (25 ml), metanol (25 ml) y agua (10 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 h. La TLC de la mezcla de reaccion mostraba la finalizacion de la reaccion y a continuacion el pH de la mezcla de reaccion se llevo hasta pH 9-10 mediante la adicion de HCl 1 N (acuoso) y el disolvente organico se retiro. El pH de la parte acuosa se ajusto hasta pH 5-6 y aparecio un precipitado y se extrajo con diclorometano. La parte acuosa se extrajo con CH2CI2 (2 X 50 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El compuesto solido de color amarillo (79, 1,10 g, 92%) se seco bajo vacfo: 1H NMR ((400 MHz, CD3OD) 7,70 (t, J = 9,4, 2H), 7,61 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,33 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 2H), 4,38 (dd, J = 8,4, 5,1 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 14,1, 9,1 Hz, 1H), 2,84 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,35-3,34 (m, 3H), 1,88-1,79 (m, 2H), 1,76-1,67 (m, 2H), 1,32 (s, 7H), 1,21 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 80 - Sal de hidrocloruro de acido (S)-2-amino-3-(6-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2- carbonil)guanidino)butil)naftalen-2-il)propanoico
Se anadio HCl 4 N en dioxano (25 ml) a 79 (1,10 g, 1,83 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 80 (700 mg, 67%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)10,48 (s, 1H), 9,24 (brs, 1H), 8,99-8,86 (m, 1H), 8,84-8,70 (m, 1H), 8,38 (brs, 3H), 7,80 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,45-7,35 (m, 4H), 4,25 (dd, J = 11,4, 5,9 Hz, 1H), 3,34 (q, J = 6,6 Hz, 2H),
3,27 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,79 (t, J = 7,70 Hz, 2H), 1,79-1,67 (m, 2H), 1,65-1,54 (m, 2H).
1H NMR ((400 MHz, CD3OD) 7,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,40 (ddd, J = 10,5, 8,6, 1,6 Hz, 2H), 4,33 (dd, J = 7,7, 5,2 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 14,9, 6,0 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 3,333,29 (m, 1H), 2,87 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,90-1,80 (m, 2H), 1,79-1,71(m, 2H).
11. Preparacion de (S)-3,5-diamino-6-cloro-N-(N-(4-(6-(2,3-diamino-3-oxopropil)naftalen-2-
il)butil)carbamimidoil)piracino-2-carboxamida (84)
Esquema 12
imagen31
NHCbz
Pd/C, H, (1 atm) BtOILAcOII
BocHN
NH,*AcOH
DIPFA, F,lOH
BocILN
HOI
Hl< )H
HCI
NH,
k N
(-BCF. NMM
NH- 7 N en MeOH
BocHN
5 Preparacion del Compuesto 81;
Una solucion del acido 76 (2,0 g, 3,87 mmol) en THF (80 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo, se anadio NMM (0,63 ml, 5,03 mmol) seguido por la adicion gota a gota de /-BCF (0,63 ml, 5,80 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio gota a gota NH3 (7,0 N en metanol, 5,52 ml, 38,7 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 2 h mas. A continuacion, la mezcla de reaccion se llevo 10 hasta ta y se agito durante 16 h. El disolvente organico se retiro. Se anadio agua a este residuo y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (3% de metanol en cloroformo) para suministrar la amida 81 (1,75 g, 88%) como un solido amarillo claro: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,83 (s, 1H), 7,69 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,39 (dt, J = 8,8, 1,9 Hz, 2H), 7,35-7,21 (m, 5H), 5,09 (s, 2H), 4,40 (dd, J = 9,6, 5,8 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 15 6,9 Hz, 2H), 3,27 (dd, J = 13,8, 5,2 Hz, 1H), 2,97 (dd, J = 13,7, 9,4 Hz, 1H), 2,63 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,27 (s, 7H),
1,21 (s, 2H).
5
10
15
20
25
30
Una suspension de 81 (1,75 mg, 3,39 mmol) y Pd al 10%/C (600 mg) en una mezcla de EtOH (110 ml) y AcOH (15 ml) se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar la sal de amina 82 como un solido blanco (1,40 g, 93%): H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,72 (dd, J = 8,3, 5,6 Hz, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,38 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 4,38 (dd, J = 9,0, 5,0 Hz, 1H), 3,27 (dd, J = 13,8, 5,0 Hz, 1H), 2,93 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,83 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 3,01-2,95 (m, 1H), 1,96 (s, 3H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,29 (s, 7H), 1,23 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 83;
Se anadio DIPEA (5,64 ml, 31,5 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de la sal de amina 82 (1,40 g, 3,15 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 1,96 g, 5,04 mmol) en EtOH (40 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 83 (1,15 g, 61%) como un solido amarillo: ^H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,34 (dt, J = 8,9, 1,9 Hz, 2H), 4,38 (dd, J = 9,0, 5,5 Hz, 1H), 3,28-3,20 (m, 3H), 2,96 (dd, J = 9,6, 14,1 Hz, 1H), 2,81 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,85-1,76 (m, 2H), 1,70-1,61 (m, 2H), 1,27 (s, 7H), 1,20 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto sal de HCl de (S)-3,5-diamino-6-cloro-N-(N-(4-(6-(2,3-diamino-3-oxopropil)naftalen-2- il)butil)carbamimidoil)piracino-2-carboxamida (84)
Se anadio HCl 4 N en dioxano (25 ml) a 83(1,15 g, 1,92 mmol) en EtOH (6,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 84 (310 mg, 28%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10,56 (s, 1H), 9,38 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 9,06-8,83 (m, 2H), 8,31 (brs, 3H), 8,02 (s, 1H), 7,79 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,46 -7,36 (m, 4H), 4,06 (dd, J= 11,5, 6,0 Hz, 1H), 3,37 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 3,27 (dd, J = 6,6, 1,4 Hz, 1H), 3,18 (dd, J = 13,7, 6,9 Hz, 1H), 2,79 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,791,69 (m, 2H), 1,64-1,54 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,41 (td, J = 8,1, 1,6 Hz, 2H), 4,18 (dd, J = 8,1, 6,3 Hz, 1H), 3,42-3,34 (m, 3H), 3,21 (dd, J = 14,1, 8,0 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,91-1,80 (m, 2H), 1,79-1,71 (m, 2H).
Esquema 13
imagen32
5
Preparacion del Compuesto 86;
Se anadieron DEPBT (766 mg, 2,56 mmol), 76 (1,00 g, 1,97 mmol) y DIPEA (1,0 ml, 5,91 mmol) sucesivamente al compuesto 85 (1,10 g, 2,32 mmol) en THF (50 ml) y se agitaron a ta durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con agua acuosa 10 saturada (2 X100 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de silice (5% de metanol/C^Ch), dando la amida 86 como un producto solido amarillo (1,19 g, 57%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 7,82 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,73-7,61 (m, 4H), 7,51-7,43 (m, 2H), 7,39-7,19 (m, 10H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,52 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,31-4,25 (m, 1H), 4,24 (dd, J = 11,0, 5,4 Hz, 1H), 4,01-3,91 (m, 2H), 3,88 (dd, J = 5,5, 2,1 Hz, 1H), 3,76 (dd, J 15 = 9,3, 2,1 Hz, 1H), 3,61 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,12-3,00 (m, 1H), 2,74 (dd, J = 13,2, 5,3 Hz,
1H), 2,64 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,57-2,37 (m, 7H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,31 (s, 9H), 1,29-1,16 (m, 8H), 0,86 (t, J = 6,9 Hz, 3H).
Una suspension de 86 (1,19 g, mixture) y Pd al 10%/C (220 mg) en una mezcla de EtOH (110 ml) y AcOH (15 ml) se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a 5 vacio para suministrar la sal de amina 87 que a continuacion se neutralizo con NaHCO3 y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 87 como un solido amarillo (550 mg, 58%, a lo largo de dos etapas): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,49-7,45 (m, 3H), 7,40 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,36-7,28 (m, 5H), 7,09 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 5,55 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 15,6, 8,4 Hz, 1H), 4,25 (dd, J = 10,6, 5,4 Hz, 1H), 4,17-4,03 (m, 2H), 3,98-3,90 (m, 2H), 10 3,81-3,74 (m, 1H), 3,63 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 3,27-3,20 (m, 1H), 3,09-2,98 (m, 5H), 2,93 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,83 (t, J =
6,8 Hz, 2H), 2,61-2,54 (m, 2H), 1,95-1,86 (m, 2H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,74-1,65 (m, 2H), 1,57-1,47 (m, 2H), 1,39-1,19 (m, 7H), 1,33 (s, 9 H), 0,88 (t, J = 6,9 Hz, 3H).
Preparacion de 88;
Se anadio DIPEA (1,15 ml, 6,44 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de la amina 87 (550 mg, 0,65 mmol) 15 y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 400 mg, 1,04 mmol) en EtOH (20 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) seguido por una columna en fase inversa (Gold C18) para suministrar la guanidina 88 (333 mg, 48%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,69 (dd, J = 8,6, 3,5 Hz, 2H), 20 7,66 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,48-7,44 (m, 2H), 7,35 (ddd, J = 10,4, 8,6, 1,6 Hz, 2H), 7,33-7,28 (m, 5H), 7,04 (d, J = 8,3
Hz, 2H), 5,52 (s, 1H), 4,52-4,55 (m, 1H), 4,24 (dd, J = 10,6, 5,4 Hz, 1H), 4,00-3,91 (m, 2H), 3,88 (dd, J = 5,4, 2,0 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 9,6, 2,2 Hz, 1H), 3,60 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,28-3,23 (m, 3H), 3,06 (dd, J = 13,5, 8,3 Hz, 1H), 2,82 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,77 (dd, J = 13,9, 5,6 Hz, 1H), 2,59-2,40 (m, 7H), 1,86-1,76 (m, 2H), 1,74-1,68 (m, 4H),1,42-1,60 (m, 7H), 1,33 (s, 9H), 0,86 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
25 Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(hexil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-2-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida Compuesto (89) ;
Se anadio HCl 4 N en agua (20 ml) a 88 (333 mg, 0,31 mmol) en etanol (10 ml) y la mezcla de reaccion se agito a ta durante 2 h. Se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para 30 suministrar el compuesto 89 (210 mg, 68%) como un solido amarillo: "H NMR (400 Mhz, DMSO-cfe) 10,94 (brs, 1H), 9,29 (brs, 1H), 9,02-8,77 (m, 2H), 8,64-8,17 (m, 2H), 7,80-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,47 (dd, J = 8,2, 1,0 Hz, 1H), 7,44-7,36 (m, 3H), 7,19 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,52-5,41 (m, 1H), 4,86-4,71 (m, 1H), 4,60 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,59-4,53 (m, 1H), 4,42 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,03-3,95 (m, 1H), 3,71-3,66 (m, 1H), 3,62-3,55 (m, 1H), 3,53-3,34 (m, 5H), 3,27 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,23 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 3,16-2,99 (m, 5H), 2,78 35 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,58 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,01-1,90 (m, 2H), 1,78-1,68 (m, 2H), 1,66- 1,54 (m, 4H), 1,32-1,21 (m,
6H), 0,85 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,79 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,77-7,73 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,47-7,37 (m, 4H), 7,21 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 4,30 (dd, J= 7,7, 6,7 Hz, 1H), 4,12-4,05 (m, 1H), 3,82-3,74 (m, 1H), 3,71-3,61 (m, 2H), 3,49 (dd, J = 40 14,0, 6,6 Hz, 1H), 3,47(t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,33-3,27 (m, 3H), 3,26-3,13 (m, 4H), 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,73-2,64 (m,
2H), 2,10-2,00 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,79-1,72 (m, 2H), 1,71-1,63 (m, 2H), 1,40-1,30 (m, 6H), 0,91 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
Esquema 14
5
imagen33
azucar-
DF.PBT / DIP EA/THF
azucar
azucar
BocHN
azucar
NHCbz
Pd/C, II EtOH/AcOH
azucar
azucar
BocHN
DIPEA, HtOH
azucar
azucar
BocHN
HCI ac 4 N EtOH
BocHN
NHCbz
Preparacion del Compuesto 91;
Se anadieron DEPBT (300 mg, 1,00 mmol), 19 (400 g, 0,77 mmol) y DIPEA (0,40 ml, 2,31 mmol) sucesivamente al compuesto 90 (484 mg, 0,91 mmol) en THF (30 ml) y se agitaron a ta durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con agua acuosa 10 saturada (2 X100 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de silice (5% de metanol/C^Ch), dando la amida 91 como un producto solido amarillo (600 mg, 76%, impuro). La formacion del producto se confirmo mediante LCMS.
Una suspension de 91 (600 mg, 0,59 mmol) y Pd al 10%/C (200 mg) en una mezcla de EtOH (90 ml) y AcOH (10 ml) se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se 5 concentro a vacio para suministrar la sal de amina 92 que a continuacion se neutralizo con NaHCO3 y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 36 como un solido amarillo (350 mg, 66%, impuro): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,61 (s, 2H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,34 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,69 (q, J = 5,1 Hz, 2H), 4,50 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 4,13-4,06 (m, 2H), 4,05 (dd, J = 11,0, 5,6 Hz, 2H), 3,83 (dd, J = 4,8, 2,1 Hz, 2H), 3,81 - 3,73 10 (m, 2H), 3,51 (dd, J = 9,5, 2,3 Hz, 2H), 3,38 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,13-3,03 (m, 6H), 2,93 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,82 (t, J
= 7,2 Hz, 2H), 2,74-2,57 (m, 2H), 2,04-1,95 (m, 2H), 1,84-1,75 (m, 3H), 1,74-1,63 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,25 (d, J =
5.1 Hz, 6H).
Preparacion de 93;
Se anadio DIPEA (0,67 ml, 3,80 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de la amina 92 (350 mg, 0,38 mmol) 15 y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 242 mg, 0,62 mmol) en EtOH (10 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) seguido por una columna en fase inversa (Gold C18) para suministrar la guanidina 93 (170 mg, 20% a lo largo de tres etapas) como un solido amarillo: 1H NmR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (d, J 20 = 8,2 Hz, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,26 (ddd, J = 10,6, 8,6, 1,3 Hz, 2H), 7,18 (d, J =
8.2 Hz, 2H), 4,70 (q, J = 0,5 Hz, 2H), 4,49 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,22-4,09 (m, 2H), 4,06 (dd, J = 10,4, 5,1 Hz, 2H), 3,893,81 (m, 2H), 3,80-3,71 (m, 2H), 3,60-3,49 (m, 2H), 3,43-3,32 (m, 8H), 3,31-3,23 (m, 2H), 3,10-2,98 (m, 2H), 2,85 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,77-2,61 (m, 2H), 2,12-2,02 (m, 2H), 1,89-1,79 (m, 2H), 1,78-1,68 (m, 2H), 1,31 (s, 9H), 1,25 (d, J = 5,1 Hz, 6H).
25 Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-2-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (94)
Se anadio HCl 4 N en agua (20 ml) a 93 (170 mg, 0,15 mmol) en etanol (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 40°C durante 2 h. El disolvente se retiro se nuevo, se anadio HCl 4 N y se calento a 40°C durante otras 2 h. Estas 30 adicion se repitio dos veces mas. El disolvente se retiro y se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 94 (80 mg, 50%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10,74 (brs, 1H), 9,28-9,19 (m, 1H), 9,03-8,60 (m, 2H), 8,58-8,04 (m, 1H), 7,81-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, 1H), 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,48-7,34 (m, 4H), 7,19 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 5,39-5,35 (m, 1H), 4,87-4,63 (m, 1H), 4,62-4,47 (m, 3H), 4,45-4,35 (m, 2H), 4,32-4,23 (m, 1H), 4,01-3,85 (m, 1H), 3,67 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,6235 3,55 (m, 2H), 3,53-3,38 (m, 5H), 3,37-3,29 (m, 2H), 3,24-3,09 (m, 2H), 2,78 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,62-2,53 (m, 2H),
2,01-1,86 (m, 2H), 1,79-1,68 (m, 2H), 1,64-1,55 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,78 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,42 (d, J =
8,8 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 4,16 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,13-4,05 (m, 2H), 3,81 (dd, J 40 = 4,7, 1,9 Hz, 2H), 3,77 (dd, J = 10,6, 3,0 Hz, 2H), 3,72-3,61 (m, 6H), 3,44-3,30 (m, 10 H), 2,86 (t, J = 7,0 Hz, 2H),
2,76-2,61 (m, 2H), 2,11-2,01 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,79-1,72 (m, 2H).
Esquema 15
imagen34
imagen35
5 Preparacion del Compuesto 96;
Una solucion del acido 19 (1,17 g, 2,27 mmol) en THF (60 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo, se anadio NMM (0,30 ml, 2,95 mmol) seguido por PivCl (0,30 ml, 2,49 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio 34 (1,0 g, 2,27 mmol, 10 ml THF) de la anilina 171 y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 10 min mas. A continuacion, la mezcla de reaccion se llevo hasta ta y se agito 10 durante 16 h. El disolvente organico se retiro. Se anadio agua a este residuo y se extrajo con CH2O2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (4% metanol en cloroformo) para suministrar la amida 96 (1,40 g, 66%, impura) como un solido amarillo claro. La formacion del producto se confirmo mediante LCMS.
Preparacion del Compuesto 97;
15 Una suspension de 96 (1,40 g, 1,50 mmol) y Pd al 10%/C (300 mg) en una mezcla de EtOH (120 ml) y AcOH (12 ml) se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar la sal de amina 97 que a continuacion se neutralizo con NaHCO3 y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de silice (CMA, 80:18:2) dando la amina libre 20 97 como un solido amarillo (550 mg, 30%, a lo largo de dos etapas): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,74-7,65 (m, 3H),
5
10
15
20
25
30
7,59 (s, 1H), 7,41-7,29 (m, 4H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,69 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 4,50 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 4,04 (dd, J = 10,4, 5,2 Hz, 1H), 4,02-3,94 (m, 1H), 3,79-3,71 (m, 1H), 3,70-3,63 (m, 1H), 3,54-3,39 (m, 3H), 3,26-(dd, J = 13,6,
6,8 Hz, 1H), 3,07 (dd, J = 13,1, 8,3 Hz, 1H), 2,79 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,75-2,67 (m, 2H), 2,55 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,91
1,80 (m, 2H), 1,79-1,69 (m, 2H), 1,62-1,52 (m, 2H), 1,50-1,37 (m, 12H), 1,33 (s, 9H), 1,25 (d, J = 4,9 Hz, 3H).
Preparacion de 98;
Se anadio DIPEA (1,21 ml, 6,80 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de la amina 97 (550 mg, 0,68 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 423 mg, 0,62 mmol) en EtOH (20 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) seguido por una columna en fase inversa (Gold C18) para suministrar la guanidina 98 (500 mg, 72%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,73-7,64 (m, 3H), 7,61 (s, 1H), 7,40-7,30 (m, 4H), 7,11 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,68 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,49 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,04 (dd, J = 10,9, 5,5 Hz, 1H), 4,02-3,93 (m, 1H), 3,78-3,70 (m, 1H), 3,69-3,64 (m, 1H), 3,54-3,38 (m, 4H), 3,30-3,20 (m, 2H), 3,15-3,01 (m, 1H), 2,83 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,54 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,90-1,78 (m, 4H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,53-1,37 (m, 12H), 1,32 (s, 9H), 1,25 (d, J = 4,9 Hz, 3H).
Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-oxo-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexilamino)propil)fenilamino) propil)naftalen-2-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida (99)
Se anadio HCl 4 N en agua (20 ml) a 98 (500 mg, 0,15 mmol) en etanol (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 40°C durante 2 h. El disolvente se retiro de nuevo, se anadio HCl 4 N y se calento a 40°C durante otras 2 h. Esta adicion se repitio dos veces mas. El disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 99 (206 mg, 50%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 11,0 (brs, 1H), 9,34 (brs, 1H), 9,09-8,25 (m, 6H), 7,82-7,73 (m, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,41 (s, 2H), 7,39 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 5,39 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,80-4,70 (m, 1H), 4,62 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 4,60-4,54 (m, 1H), 4,46-4,36 (m, 2H), 3,96-3,88 (m, 1H), 3,71-3,65 (m, 1H), 3,62-3,54 (m, 1H), 3,51-3,35 (m, 5H), 3,09 (d, J= 13,3 Hz, 1H), 2,94 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,87 (t, J = 9,1 Hz, 2H), 2,78 (t, J= 6,7 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,00-1,86 (m, 2H), 1,85-1,67 (m, 2H), 1,65-1,53 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,80 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,78-7,73 (m, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,45-7,37 (m, 4H), 7,19 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 4,31 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 4,09-4,00 (m, 1H), 3,87-3,81 (m, 1H), 3,78 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,73-3,61 (m, 3H), 3,46 (dd, J = 13,6, 6,3 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,30-3,25 (m, 1H), 3,22-3,12 (m, 2H), 3,03 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,69 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,07-1,95 (m, 2H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,80-1,69 (m, 2H).
Esquema 16
imagen36
5 Preparacion del Compuesto 100;
Una solution del acido 19 (1,75 g, 3,39 mmol) en THF (70 ml) se enfrio hasta 0°C en un bano de hielo, se anadio NMM (0,74 ml, 6,78 mmol) seguido por PivCl (0,41 ml, 3,39 mmol) y la mezcla de reaction se agito a la misma temperatura durante 2 h. Se anadio 18 (825 mg, 4,61 mmol, 10 ml THF) y la mezcla de reaccion se agito a la misma temperatura durante 10 min mas. A continuation, la mezcla de reaccion se llevo hasta ta y se agito durante 16 h. El 10 disolvente organico se retiro. Se anadio agua a este residuo y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatografia en columna (4% de metanol en cloroformo) para suministrar la amida 100 (1,60 g, 71%) como un solido amarillo claro: 1H NMR (400 MHz, CDCls) 7,87 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,657,62 (m, 2H), 7,42 (dd, J = 8,4, 1,9 Hz, 1H), 7,40-7,29 (m, 5H), 7,22 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 15 5,21-5,10 (m, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,51 (q, J = 7,6 Hz, 1H), 3,47 (q, J = 6,5 Hz, 2H), 3,29 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,68 (t, J =
6,7 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,26 (ddt, J = 11,5, 9,3, 2,5 Hz, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,22-2,19 (m, 1H), 1,78-1,69 (m, 3H), 1,39 (s, 9H).
5
10
15
20
25
30
Una suspension de 100 (1,60 g, 2,30 mmol) y Pd al 10%/C (400 mg) en una mezcla de EtOH (130 ml) y AcOH (20 ml) se desgasifico y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar la sal de amina 101 como un solido amarillo (1,60 g, 99%): H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,39 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H),
7,33 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,50 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,28 (dd, J = 14,0, 6,3 Hz, 1H), 3,07 (dd, J = 13,3, 8,7 Hz, 1H), 3,05-2,98 (m, 2H), 2,93 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,82 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,78 (s, 6H), 2,65 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,06-1,96 (m, 2H), 1,93 (s, 6H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,33 (s, 9H).
Preparacion de 102;
Se anadio DIPEA (4,1 ml, 23,0 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de la amina 101 (1,60 g, 2,30 mmol) y
3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (21, 1,60 g, 4,14 mmol) en EtOH (25 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, a continuacion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro a vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice (80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 102 (645 mg, 37% y 640 mg, 37% impura) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,70 (dd, J = 9,0, 4,3 Hz, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,39 -
7,31 (m, 4H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,48 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,30-3,22 (m, 3H), 3,06 (dd, J = 13,8, 8,9 Hz, 1H),
2,83 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,32 (dd, J = 10,5, 7,6 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,86-1,74 (m, 4H), 1,731,64 (m, 2H), 1,32 (s, 9H).
Preparacion de la sal de HCl de (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(6-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3- oxopropil)naftalen-2-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida (103)
Se anadio TFA (10 ml) a 47 (545 mg, 0,71 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) y la mezcla de reaccion se agito a ta durante 1 h. El disolvente se retiro de nuevo, se anadio HCl 1 N y el disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 48 (206 mg, 50%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 11,02 (brs, 1H), 10,81-10,58 (m, 1H), 10,53 (s, 1H), 9,32 (s, 1H), 9,04-8,72 (m, 2H), 8,50 (brs, 3H), 7,82-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, 1H), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,45-7,35 (m, 3H), 7,18 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,45-4,35 (m, 1H), 3,74-3,45 (m, 1H), 3,27 (dd, J = 14,7, 8,3 Hz, 1H), 3,03-2,93 (m, 2H), 2,78 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,70 (s, 6H), 2,58 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,02-1,88 (m, 2H), 1,79-1,66 (m, 2H), 1,64-1,54 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,80 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,78-7,73 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,47-7,38 (m, 4H), 7,20 (d, J =
8,9 Hz, 2H), 4,33 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 13,6, 6,6 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,36-3,26 (m, 3H), 2,87
2,83 (m, 2H), 2,87 (s, 6H), 2,68 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,07-1,97 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,80-1,71 (m, 2H).
16. Preparacion de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(hexil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6- cloropiracino-2-carboxamida (123)
Esquema 17
5
imagen37
OCH,
sulfato de dimetiio NaOH, acetona
1. KHMDS, THF
?n 2. TrisilN,, AcOH
0<^N'"\ 3. (CH3)4N+AcO- o^N-^
J-'O
imagen38
^,CO,Me
PCOXOCH,),
DBU, CHiCU
OCH
imagen39
| Pd/C, H2, EtOH
OCH,
OCH
P11 1. Bui,i, THF
' 2. PivCl, VMM THF
0
| LiOH, H202, THF. ICO
O'
111
no
imagen40
NaOH MeOH/THF/THO
imagen41
OCH,
OCH, OH OH
A/ ^
Pd/C, H2 1 JL J HBr, AcOI l AcCl
L -N,
AcOH/H20 L ,NHn L vNH,*HBr MeOH
rtiil
o/l 1 0
O^OH
Cr'Ol I cr
112
113 114 i
,NH,-HC!
OTf
BoC'.O, NaHCO, MeOH OH
HsCO
BocHN
imagen42
Pd(PPh,)4t Cul, (>Bu),P Et,N, CH3CN
NHCbz
NaOH
THF/H,0/MeOfi
imagen43
imagen44
NHCbz
5
10
15
20
25
Esquema 17 (continuacion)
imagen45
Preparacion del Compuesto 105;
Una solucion de 104 (100 g, 0,675 mmol) en THF seco (800 ml) se cargo con NaOH (32,0 mg, 0,809 mmol) y sulfato de dimetilo (102 g, 0,809 mmol) gota a gota a 0°C. La mezcla de reaccion se agito durante 2 h a temperatura ambiente. El THF se retiro bajo presion reducida y la mezcla se repartio entre CH2Cl2 (1,0 l) y agua (1,0 l). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 x 1,0 L). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 100% CH2O2) para suministrar el compuesto 105 (108,0 g, 90%) como un lfquido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-dg): 8 7,06 (t, J = 7,85 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 7,25, 1H), 6,64 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,74 (t, J = 2,75 Hz, 2H), 2,65 (t, J = 2,65 Hz, 2H), 1,81-1,71 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 106;
Una solucion de DMF seca (71,45 ml, 0,923 mmol) se cargo con POCl3 (57,40 ml, 0,616 mmol) gota a gota bajo atmosfera de nitrogeno a 0°C. La mezcla de reaccion se agito durante 30 min a 0°C. Una solucion de 105 (50,0 g, 0,308 mmol) en 1,2-diclorometano seco (500 ml) se anadio a la mezcla de reaccion gota a gota bajo atmosfera de nitrogeno a 0°C. Despues de que se completara la adicion, la mezcla de reaccion se calento a 80°C durante 6 h. La mezcla de reaccion se desactivo con H2O fria y se repartio entre CH2Cl2 (1,0 L) y agua (1,0 L). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 x 1,0 L). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, 5% de EA/Hexano) para suministrar el compuesto 106 (35,0 g, 61%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,10 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,81, 1H), 6,78 (d, J = 7,47 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,18 (t, J = 5,80 Hz, 2H), 2,70 (t, J = 4,64 Hz, 2H), 1,82
1,73 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 107;
Una solucion de fosfonoacetato de trimetilo (55,0 ml, 0,378 mmol) en 100 ml de CH2Cl2 anhidro enfriado hasta 0°C se cargo con DBU (58,0 g, 0,380 mmol) y la mezcla se agito durante 15 min. Se anadio gota a gota el aldehfdo 106 (16,0 g, 0,084 mmol) en 50 ml de CH2Cl2. La mezcla de reaccion se llevo hasta temperatura ambiente, se agito durante 16 h y se desactivo con 100 ml de agua. La mezcla se repartio y la capa acuosa se extrajo con CH2O2 (3 x 150 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se
concentraron y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de s^lice (10:1 hexanos/acetato de etilo) para dar el ester a,p-insaturado cis y trans 107 (15,0 g, 72%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 7,83 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 15,2 Hz, 1H),
3,80 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,76 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,55 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,80-1,60 (m, 4H).
5 Preparacion del Compuesto 108
Una suspension de 107 (33,0 g, 0,134 mmol) y Pd al 10%/C (15 g, 0,127) en EtOH (300 ml) se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar 108 (28,0 g, 90%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCls): 8 7,65 (d, J = 7,62, 1H), 6,78 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 4,06-4,11 (m, 1H), 3,78 (s, 10 3H), 2,86 (t, J = 7,79 Hz, 2H), 2,69-2,64 (m, 4H), 2,57-2,51 (m, 2H), 1,79-1,74 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 109;
Una solucion del ester metilico 108 (28,0 g, 0,106 mmol) en THF/MeOH/H2O (200 ml/200 ml/60 ml) se cargo con NaOH (25,0 g, 0,625 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se retiro y el pH se ajusto hasta 1 con HCl acuoso 1 N; un solido blanco precipito y se filtro, se lavo con agua y se seco 15 bajo vado para suministrar el acido 109 (25,5 g, 92%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 6,96 (d, J = 7,29, 1H), 6,63 (d, J = 6,86 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,88 (t, J = 7,29 Hz, 2H), 2,69-2,66 (m, 4H), 2,63-2,59 (m, 2H), 1,80-1,73 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 110
Una solucion de 60 (13,70 g, 77,31 mmol) en THF seco (200 ml) se cargo con n-butil-litio (45,07 ml, 90,08 mmol, 20 solucion 2 M en ciclohexano) gota a gota a -78°C y la mezcla de reaccion se agito durante 1 h para dar una solucion de la sal de litio 61. Otra solucion de 109 (15,0 g, 64,37 mmol) en THF seco (200 ml) se cargo con NMM (9,30 ml, 83,64 mmol) y PivCl (10,30 ml, 83,64 mmol) gota a gota a -78°C. La mezcla de reaccion se agito durante 30 min y se calento hasta -20°C durante 1 h y la solucion preparada de sal de litio se anadio lentamente a -78°C. La mezcla de reaccion se agito durante otros 10 min, se llevo hasta 0°C y se agito durante 1 h, se llevo hasta temperatura 25 ambiente y se agito durante 30 min, se desactivo con NH4Cl saturado, se concentro para retirar el THF y se repartio entre CH2Cl2 (300 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (150 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2O2) para suministrar el compuesto 110 (15,0 g, 60%) como un solido blanco.
Preparacion del Compuesto 111;
30 Una solucion de 110 (15,0 g, 38,14 mmol) en THF seco (250 ml) se cargo con KHMDS (13,70 g, 68,67 mmol) en porciones a -78°C. Despues de que la mezcla resultante se agitara durante 30 min, se anadio trisilazida (19,0 g, 61,40 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 5 min. Se anadieron lentamente a la misma temperatura acido acetico (15,0 ml, 228 mmol) y acetato de tetrametilamonio (30,9 g, 76,28 mmol). La mezcla de reaccion se calento hasta 24°C, se agito durante 16 h, se desactivo con NaHCO3 saturado (100 ml), se concentro para retirar el THF y 35 se extrajo con CH2Cl2 (300 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 90:10 seguido por DCM) para suministrar el compuesto 111 (8,80 g, 54%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 7,36-7,30 (m, 3H), 7,23 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 7,01 (d, J = 7,79 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 7,59 Hz, 2H), 5,35 (t, J = 7,99, 2H), 4,89 (s, 1H), 4,58-4,51 (m, 1H), 4,13-4,10 (m, 3H), 3,93 (t, J = 7,54, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,33-3,27 (m, 3H), 2,71 40 (m, 2H), 2,63 (m, 2 H), 1,78-1,75 (m, 5H), 1,58 (m, 2H).
Preparacion del Compuesto 112;
Una solucion de 111 (31,0 g, 72,1 mmol) en THF/H2O (300 ml/100 ml) se cargo con H2O2 (49 ml, 433 mmol) seguido por LiOH (6,04 g, 144 mmol) en porciones a 0°C. La mezcla de reaccion se agito durante 10 min a 0°C y a temperatura ambiente durante 1 h, se desactivo con Na2SO3 saturado (200 ml), se concentro bajo presion reducida 45 para retirar el THF y se lavo con CH2O2 (500 ml). La capa acuosa se acidifico con HCl acuoso 1 N y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 500 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se lavaron con MTBE para suministrar el compuesto 112 (15,0 g, 82%) como un solido blancuzco: 1H NMR (400 mHz, CD3OD): 8 6,92 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,81 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,61 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,49-2,47 (m, 2H), 1,84-1,70 (m, 6H).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Una suspension de 112 (15,0 g, 55,1 mmol) y Pd al 10%/C (3,50 g) en AcOH/H2O (300 ml/100 ml) se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con AcOH/H2O seguido por MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal acetica 113 (14,0 g, 83%) como un solido amarillo.
Preparacion del Compuesto 114;
Una solucion de 113 (11,0 g, 44,1 mmol) en acido acetico (120 ml) se cargo con acido bromlddrico (120 ml) gota a gota a temperatura ambiente y la mezcla de reaccion se sometio a reflujo durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro. El residuo pardo 114 en bruto (8,90 g, 80%) se uso directamente para la siguiente etapa sin purificacion: 1H NMR (400 MHz, CdCI3): 8 6,80 (d, J = 7,85, 1H), 6,57 (d, J = 7,21 Hz, 1H), 3,92-3,91 (m, 1H), 3,04-2,98 (m, 1H), 2,91-2,86 (m, 1H), 2,61 (m, 2H), 2,54-2,53 (m, 2H), 1,69-1,68 (m, 5H).
Preparacion del Compuesto 115;
Se anadio cloruro de acetilo (17,0 ml, 243 mmol) a metanol seco (300 ml) a 0°C y se anadio 114 (8,90 g, 28,2 mmol). La mezcla de reaccion se sometio a reflujo durante 4 h y se concentro. El residuo se repartio entre CH2CI2 (200 ml) y NaHCO3 saturado (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2CI2 (200 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 115 (7,30 g, 90%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCI3): 8 6,81 (d, J = 7,51, 1H), 6,59 (d, J = 7,21 Hz, 1H), 4,12-4,11 (m, 1H), 3,75 (s, 1H), 3,31-3,30 (m, 2H), 2,70-2,67 (m, 2H), 2,63 (t, J = 6,16 Hz, 2H).
Preparacion del Compuesto 116;
Una solucion de 115 (7,30 g, 25,60 mmol) en MeOH/H2O (100 ml/60 ml) se cargo con NaHCO3 (12,0 g, 145 mmol) y Boc2O (10,0 g, 45,8 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se calento hasta temperatura ambiente y se agito durante 1 h. La mezcla de reaccion se repartio entre CH2CI2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2CI2 (100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. La cromatograffa en columna de desarrollo rapido usando 20% de acetato de etilo/hexanos seguido por CH2CI2 daba el compuesto 116 (7,1 g, 81%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCI3): 8 6,77 (d, J = 7,36, 1H), 6,55 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 4,96-4,94 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,96-4,94 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,50-4,48 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,07-3,01 (m, 1H), 2,89-2,84 (m, 1H), 2,86 (m, 2H), 2,63 (m, 2H), 1,80-1,78 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 117;
Una solucion de 116 (7,0 g, 20,05 mmol) en CH2CI2 (80 ml) se cargo con piridina (100 ml) y triflato (4,64 ml, 24,0 mmol) a 0°C, se agito durante 1 h y se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Despues de la concentracion, la mezcla de reaccion se repartio entre CH2CI2 (150 ml) y agua (70 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2CI2 (100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 117 (8,00 g, 83%) como un aceite pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8
8,81 (d, J = 4,63 Hz, 5H), 8,56-8,51 (m, 2H), 8,02-7,99 (m, 4H), 7,11 (d, J = 7,98 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,98, 1H), 4,39-4,35 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,19-3,14 (dd, 1H), 2,90-2,77 (m, 5H), 1,86-1,81 (m, 4H), 1,35 (s, 9H), 1,32-1,28 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 118;
El Compuesto 117 (8,0 g, 16,6 mmol) y but-3-inilcarbamato de bencilo (10, 5,00 g, 24,9 mmol) en CH3CN anhidro (100 ml) se desgasificaron con argon durante 10 min a temperatura ambiente y se cargaron con TEA (9,34 ml, 66,50 mmol), 10% de (f-Bu)3P en hexanos (7,0 ml, 3,32 mmol) y Cul (0,16 g, 0,84 mmol). La mezcla resultante se desgasifico con argon durante 10 min y se anadio Pd (PPh3)4 (2,00 g, 1,73 mmol) rapidamente en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 16 h. La mezcla de reaccion se concentro bajo vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 75:25 hexanos/acetato de etilo) para suministrar el compuesto 118 (4,50 g, 52%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,36-7,34 (m, 4H), 7,33-7,29 (m, 2H), 7,16 (d, J = 7,63 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 7,02 Hz, 1H), 5,12-5,08 (m, 2H), 4,95 (d, J = 7,88 Hz, 1H), 4,52-4,51 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,48-3,34 (m, 2H), 3,10-3,05 (dd, 1H), 2,84-2,83 (m, 2H), 2,68-2,65 (m, 4H), 1,81-1,76 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Una solucion del ester mefflico 118 (4,50 g, 8,42 mmol) en THF/MeOH/H2O (30 ml/30 ml/10 ml) se cargo con NaOH (3,60 g, 90 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. El valor del pH se ajusto hasta 9 con HCl acuoso 1 N y el disolvente organico se retiro. El valor del pH del residuo se ajusto hasta 5-6 y la suspension se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (100 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 119 (3,66 g, 85%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,28-7,24 (m, 5H), 7,05-7,03 (d, J = 7,67 Hz, 1H), 6,89-6,87 (d, J = 7,55 Hz, 1H), 5,04 (brs, J = 7,02 Hz, 1H), 5,12-5,08 (m, 2H), 4,95 (d, J = 7,88 Hz, 1H), 4,524,51 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,48-3,34 (m, 2H), 4,27-4,26 (m, 1H), 3,38-3,30 (m, 2H), 3,15-3,10 (m, 1H), 2,78-2,71 (m, 4H), 2,59 (d, J = 5,95, 2H), 1,73-1,71 (m, 4H), 1,31 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 120;
El Compuesto 119 (800 mg, 1,53 mmol) en THF (30 ml) se cargo con DEPBT (845 mg, 2,56 mmol), 24 (700 mg,
2,33 mmol) y DIPEA (1,0 ml, 4,65 mmol) sucesivamente u se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (50 ml), se lavo rapidamente con agua acuosa saturada (50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (6% de metanol/CH2Cl2), dando la amida 120 (1,0 g) como un solido amarillo: 1H NmR (400 MHz, CDCh): 8 7,46-7,44 (m, 3H), 7,36-7,30 (m, 7H), 7,17 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,07 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,99-6,92 (m, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,35-4,31 (m, 1H), 4,05-3,90 (m, 2H), 3,80-3,82 (m, 1H), 3,75-3,72 (m, 1H), 3,62 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 3,43 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,18-3,16 (m, 1H), 3,01-3,08 (m, 1H), 2,83-2,82 (m, 2H), 2,68-2,48 (m, 8H), 1,86-1,78 (m, 3H), 1,71-1,62 (m, 10H), 1,44 (s, 9H), 0,87 (t, J = 6,3 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 121;
Una suspension de 120 (1,00 g, 1,01 mmol) y Pd al 10%/C (600 mg) en una mezcla de EtOH (50 ml) y AcOH (2 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 121 como un solido blanco (700 mg, 80%): 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 7,49-7,41 (m, 2H), 7,34-7,30 (m, 5H), 7,12-6,78 (m, 5H), 4,30-4,27 (m, 2H), 4,19-4,18 (m, 1H), 3,98-391 (m, 2H), 3,78-3,58 (m, 2H), 3,19-3,08 (m, 3H), 3,02-2,89 (m, 6H), 2,75-2,73 (m, 2H), 2,65-2,62 (m, 3H), 2,55-2,52 (m, 3H), 1,98-1,92 (m, 2H), 1,73-1,68 (m, 3H), 1,60-1,52 (m, 7H), 1,41 (s, 9H), 1,29-1,20 (m, 7H), 0,88-0,84 (m, 3H), 0,87 (t, J = 6,4 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 122;
Una solucion de la sal de amina 121 (700 mg, 0,81 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 680 mg, 1,75 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (1,60 ml, 9,26 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 122 (380 g, 48%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 7,43-7,39 (m, 3H), 7,33-7,31 (m, 3H), 7,05 (d, J = 6,69 Hz, 2H), 6,99-6,95 (m, 2H), 6,86 (d, J = 7,59 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,33-4,31 (m, 1H), 4,14-4,10 (m, 1H), 3,79-3,72 (m, 4H), 3,68-3,65 (m, 2H), 2,69-2,66 (m, 6H), 2,56-2,53 (m, 3H), 2,45-2,36 (m, 7H), 1,70 (m, 4H), 1,56 (m, 6H), 1,32 (s, 9H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(hexil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6- cloropiracino-2-carboxamida (Compuesto 123);
Se anadio HCl 4 N en dioxano (15 ml) a 122 (350 g, 0,35 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para dar 110 mg (45%) del compuesto 123 como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,16 (s, 1H), 9,16 (brs, 1H), 8,51-8,34 (brs, 2H), 7,41 (t, J = 8,1 Hz, 4H), 7,20 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,95-6,89 (q, 2H), 5,42 (brs, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,53 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,01 (m, 1H),
3,93 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,50-3,38 (m, 4H), 3,08-3,03 (m, 6H), 2,72 (brs, 2H), 2,66-2,65 (m, 2H), 2,57 (m, 2H),
1,91-1,90 (m, 2H), 1,72-1,69 (m, 4H), 1,61-1,54 (m, 6H), 1,26 (s, 6H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
1H NMR (400 MHz, D2O): 8 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,04-6,98 (q, 2H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,06-4,02 (m, 2H),
3,78-3,69 (m, 3H), 3,62-3,54 (m, 2H), 3,25 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,19-3,14 (m, 3H), 3,10-3,04 (m, 4H), 2,66-2,54 (m,
7H), 1,90-1,86 (m, 2H), 1,65-1,58 (m, 5H), 1,50-1,40 (m, 4H), 1,19-1,18 (m, 6H), 0,78 (t, J = 6,62).
17. Preparacion de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6- cloropiracino-2-carboxamida (127)
Esquema 18
5
imagen46
Preparacion del Compuesto 124;
El compuesto 119 (1,0 g, 1,92 mmol) en THF (30 ml) se cargo con DEPBT (845 mg, 2,82 mmol), 29 (1,25 g, 1,91 mmol) y DIPEA (1,0 ml, 5,73 mmol) sucesivamente y se agito a temperature ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (50 ml), se lavo rapidamente con 10 agua acuosa saturada (50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (5% metanol/C^Ch), dando la amida 124 [900 mg (mezcla)] como un solido amarillo.
Preparacion del Compuesto 125;
Una suspension de 124 [900 mg (mezcla), 0,77 mmol] y Pd al 10%/C (600 mg) en una mezcla de EtOH (50 ml) y 15 AcOH (1,5 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vacfo para suministrar 125 en bruto (800 mg) como un aceite incoloro.
Preparacion del Compuesto 126;
Una solucion de 125 en bruto (800 mg) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 400 20 mg, 1,02 mmol) en EtOH (40 ml) se cargo con DIPEA (1,10 ml, 6,38 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vacfo. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 126 (285 mg, 12% a lo largo de 3 etapas) como un solido
amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-da): 8 7,44-7,42 (m, 4H), 7,30-7,28 (m, 6H), 7,22 (d, J = 7,27 Hz, 2H), 6,96 (d, J = 7,11 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 7,61 Hz, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,33 (m, 1H), 4,23-4,19 (m, 2H), 3,97-3,91 (m, 4H), 3,84-3,82 (m, 2H), 3,71 (d, J = 2,29 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,58 (t, J = 10,08 Hz, 2H),
3,06-3,00 (m, 1H), 2,91-2,86 (m, 1H), 2,76 (m, 2H), 2,71-2,68 (m, 4H), 2,61-2,55 (m, 4H), 2,44-2,35 (m, 4H), 1,745 1,60 (m, 10H), 1,38 (s, 9H).
Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6- cloropiracino-2-carboxamida (Compuesto 127)
Se anadio HCl 4 N en dioxano (10 ml) a 126 (1,15 g, 0,23 mmol) en EtOH (3,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 10 temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para dar 62 mg (32%) del compuesto 127: 1H NMR (400 MHz, DMSO- cfe): 8 10,39 (brs, 1H), 10,03 (brs, 1H), 8,91-8,82 (brs, 2H), 8,48 (brs, 2H), 7,42 (d, J = 7,6 Hz, 4H), 7,18 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,96 (d, J = 7,1, 1H), 6,89 (d, J = 7,4, 1H), 5,44 (d, J = 10,8, 2H), 4,81 (br, 2H), 4,59 (d, J = 4,2, 2H), 4,55 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 4,42 (t, J = 4,4, 2H), 4,11 (br, 1H), 4,00 (brs, 2H), 3,69-3,65 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,47 (m, 4H), 15 3,43-3,39 (m, 4H), 3,25-3,22 (m, 4H), 3,04 (d, J = 6,3, 2H), 2,73 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 2,58-2,56 (m, 2H), 1,98 (m,
2H), 1,97 (m, 2H), 1,70-1,67 (m, 4H), 1,61-1,59 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H), 1,70-1,67 (m, 4H), 1,61-1,59 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, D2O): 8 7,10 (d, J = 8,30 Hz, 2H), 7,02-6,90 (m, 2H), 6,91 (d, J = 7,42 Hz, 2H), 4,07-3,92 (m, 5H), 20 3,77-3,70 (m, 8H), 3,62-3,55 (m, 5H), 4,07-3,95 (m, 5H), 3,74-3,56 (m, 8H), 3,60-3,55 (m, 5H), 3,30 (d, J = 8,2 Hz,
5H), 3,20-3,16 (m, 7H), 2,60-2,51 (m, 10H), 1,97-1,95 (m, 3H), 1,61-1,59 (m, 7H), 1,49-1,45 (m, 2H).
18. Preparacion de 3,5-diamino-N-(4-(4-((S)-2-amino-3-oxo-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexilamino)propil)fenilamino)propil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butilcarbamoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (131)
25
Esquema 19
imagen47
azucar
azucar
BoeHN
DIPEA,DEPBT, THF
NHCbz
‘NHCbz
Pd/C, H, EtOH. AttOH
aziicar
NHvAcOIl
aziicar = rm - m
DIPEA, EtOH
aziicar
El compuesto 119 (1,00 g, 1,92 mmol) en THF (30 ml) se cargo con DEPBT (862 mg, 2,88 mmol), 34 (1,50 g, 2,98 mmol) y DIPEA (1,0 ml, 5,76 mmol) sucesivamente y se agito a temperature ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (50 ml), se lavo rapidamente con 5 agua acuosa saturada (30 ml) y salmuera (20 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (6% metanol/cH2Cl2), dando la amida 128 (780 mg, 42%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 7,49 (m, 3H), 7,31-7,29 (m, 10H), 7,00-7,08 (m, 3H), 6,94 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,54 (m, 1H), 5,50-5,49 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,36 (m, 1H), 4,26-4,22 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,95-3,91 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 3,64-3,59 (m, 1H), 3,52-3,48 (m, 1H), 3,14-3,06 (m, 1H), 2,9410 2,89 (m, 1H), 2,79 (d, J = 16,12 Hz, 4H), 2,63 (t, J = 5,98 Hz, 1H), 2,51 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 1,82-1,75 (m, 7H), 1,41 (s,
18H).
Preparacion del Compuesto 129;
Una suspension de 128 (780 mg, 0,776 mmol) y Pd al 10%/C (300 mg) en una mezcla de EtOH (30 ml) y AcOH (1,0 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La 15 mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado para suministrar la sal de amina 129 (720 mg, 85%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8
7,49-7,46 (m, 2H), 7,32-7,30 (m, 5H), 7,08-7,06 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,53 (s, 1H), 4,34-4,33 (m, 1H), 4,25-4,21 (m, 1H), 4,03-4,02 (m, 1H), 3,96-3,89 (m, 1H), 3,78-3,76 (m, 1H), 3,71-3,69 (m, 1H), 3,60 (t, J =
9,9 Hz, 1H), 3,48-3,46 (m, 1H), 3,09-3,04 (m, 1H), 2,89 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 2,79 (m, 2H), 2,69 (m, 2H), 2,58 (t, J = 6,5 20 Hz, 2H), 2,51 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,84-1,77 (m, 6H), 1,67-1,66 (m, 2H), 1,61-1,57 (m, 2H), 1,41 (s, 18H).
Preparacion del Compuesto 130;
Una solucion de la sal de amina 129 (720 mg, 0,77 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 456 mg, 1,17 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (1,12 ml, 6,24 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta 25 temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 130 (380 mg, 45%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 7,48-7,46 (m, 2H), 7,30 (t, J = 2,70 Hz, 5H), 7,08-7,06 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,53 (s, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,25-4,21 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,96-3,90 (m, 1H), 3,79 (m, 2H), 3,60 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 3,50-3,46 (m, 1H), 3,25 (t, J = 5,9 Hz, 3H), 3,07-3,02 (m, 1H), 2,92-2,87 (m, 1H), 30 2,77 (m, 2H), 2,69-2,67 (m, 2H), 2,58 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,48 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,82-1,74 (m, 6H), 1,67-1,64 (m,
5H), 1,40 (s, 18H).
Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(4-(4-((S)-2-amino-3-oxo-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexilamino)propil)fenilamino)propil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butilcarbamoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (131);
35 Se anadio HCl 4 N en dioxano (25 ml) a 130 (350 mg, 0,35 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold) y el residuo se liofilizo para dar el compuesto 131 (125 mg, 48%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,35 (d, J = 7,6, 2H), 7,18 (d, J = 7,3, 2H), 6,99-6,98 (m, 2H), 4,07-4,03 (m, 2H), 3,83 (d, J = 1,30, 1H), 3,82 (d, J = 1,40 Hz, 1H), 3,78-3,75 (m, 1H), 3,68-3,66 (m, 3H), 3,36 (t, J = 6,3, 2H), 3,18-3,15 (m, 4H), 40 3,04-3,00 (m, 2H), 2,76 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 2,69-2,61 (m, 5H), 2,00-1,97 (m, 2H), 1,77-1,73 (m, 5H), 1,69-1,65 (m,
3H).
1H NMR (400 MHz, D2O): 8 10,46 (s, 1H), 9,31 (br, 1H), 8,55 (br, 4H), 7,45 (d, J = 6,6, 4H), 7,20 (d, J = 7,62 Hz, 2H), 7,00 (d, J = 6,6, 1H), 6,93 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 5,43 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 5,38 1H), 4,64-4,63 (m, 2H), 4,46 45 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 4,15 (t, J = 4,6 Hz, 1H), 3,96-3,94 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,64-3,61 (m, 1H), 3,51-3,45 (m, 3H),
2,96-2,92 (m, 3H), 2,78-2,77 (m, 2H), 2,68-2,65 (m, 2H), 2,62 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,95-1,94 (m, 2H), 1,76-1,15 (m, 8H).
19. Preparacion de (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)-5,6,7,8- tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida (135)
Esquema 20
imagen48
DEPBT, DIPEA, THF
NHCbz
NHCbz
Pd/C, H2 I K ilt<V\d ill
NHj-AcOH
DIPEA. EtOH
0
BocHN
5 Preparacion del Compuesto 132;
El compuesto 119 (700 mg, 1,34 mmol) en THF (30 ml) se cargo con DEPBT (600 mg, 2,00 mmol), 18 (360 mg, 1,51 mmol) y DIPEA (0,80 ml, 4,03 mmol) sucesivamente y se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de que el disolvente se retirara bajo presion reducida, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (50 ml), se lavo rapidamente con agua acuosa saturada (50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El disolvente se evaporo y el producto en 10 bruto se purifico mediante cromatograffa de desarrollo rapido sobre gel de sflice (6% de metanol/C^Ch), dando la amida 132 [800 mg (mixture)] como un producto solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 8,13 (d, J = 7,54 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,89-7,85 (m, 1H), 7,71 (t, J = 7,52 Hz, 1H), 7,64-7,59 (m, 2H), 7,44 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,33-7,30 (m, 6H), 7,12-7,06 (m, 3H), 7,0 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,02 (s, 2H), 2,70 (m, 4H), 2,63-2,61 (m, 5H), 2,45 (m, 5H), 1,83 (s, 6H), 1,69-1,65 (m, 3H), 1,33 (s, 9H).
15 Preparacion del Compuesto 133;
Una suspension de 132 [800 mg (mezcla), 1,01 mmol] y Pd al 10%/C (350 mg) en una mezcla de EtOH (30 ml) y AcOH (1 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado y se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CHCh/CHaOH/N^OH 80:18:2) 20 para suministrar el compuesto 233 (500 mg, 67% a lo largo de 2 etapas) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 7,31 (d, J = 7,54 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 1H), 2,91-2,86 (m, 1H), 2,77-2,76 (m, 4H), 2,69 (m, 2H), 2,60-2,55 (m, 4H), 2,35
2,31 (m, 2H), 1,82 (s, 6H), 1,58-1,57 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
5
10
15
20
25
Una solucion de la sal de amina 133 (500 mg, 0,90 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 530 mg, 1,36 mmol) en EtOH (20 ml) se cargo con DIPEA (1,30 ml, 7,25 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, 80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar la guanidina 134 (285 mg, 42%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-da): 8 7,29 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,10 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,94-6,87 (m, 2H), 4,33 (m, 1H), 3,27-3,24 (m, 2H), 3,07-3,00 (m, 1H), 2,92-2,87 (m, 1H), 2,76 (m, 2H), 2,70 (m, 2H), 2,61-2,54 (m, 4H), 2,35-2,31 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,80-1,72 (m, 5H), 1,69-1,62 (m, 4H), 1,39 (s, 9 H).
Preparacion de la sal de HCl de (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3- oxopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2-carboxamida Compuesto 135;
Se anadio HCl 4 N en dioxano (10 ml) a 134 (380 g, 0,35 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold C18) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 135 (125 mg, 49%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 10,69 (brs, 1H), 10,54-10,50 (d, J = 16,7 Hz, 2H), 9,32 (t, J = 4,8 Hz, 1H),
8,96 (brs, 1H), 8,86 (brs, 1H), 8,58 (brs, 3H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 4H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,96 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,15 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,36-3,32 (m, 2H), 3,09-3,06 (m, 2H), 3,00-2,95 (m, 2H), 2,74
2,73 (m, 1H), 2,22 (s, 6H), 2,64 (m, 2H), 2,57-2,56 (m, 2H), 1,94-1,90 (m, 2H), 1,70-1,67 (m, 3H), 1,62-1,58 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H).
1H NMR (400 MHz, D2O): 8 7,08 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,00-6,97 (q, 2H), 6,91 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 4,12-4,08 (q, 1H), 3,25 (t, J = 5,2 Hz, 3H), 3,21-3,17 (m, 1H), 3,10 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 3,0-2,96 (m, 2H), 2,77 (s, 6H), 2,60-2,58 (m, 5H),
2,50-2,50 (m, 4H), 1,91-1,87 (m, 2H), 1,60-1,58 (m, 6H), 1,45-1,43 (m, 2H).
20. Preparacion de acido (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonil)guanidino)butil)-5,6,7,8- tetrahidronaftalen-1-il)propanoico (139)
Esquema 21
imagen49
5
10
15
20
25
30
35
Una suspension de 118 (800 mg, 1,49 mmol) y Pd al 10%/C (350 mg) en una mezcla de EtOH (50 ml) y AcOH (1,0 ml) se desgasifico y se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 12 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un taco de Celite y el taco se lavo con MeOH. El filtrado se concentro bajo vado y se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 136 (700 mg, 93%) como un solido amarillo.
Preparacion del Compuesto 137;
Una solucion de la sal de amina 136 (700 mg, 1,50 mmol) y 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 880 mg, 2,26 mmol) en EtOH (30 ml) se cargo con DIPEA (2,15 ml, 12,03 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se calento a 70°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CHCl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) para suministrar la guanidina 137 (560 mg, 60%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD); 8 6,95-6,85 (m, 2H), 4,32-4,28 (m, 1H), 3,72-3,67 (m, 2H), 3,34 (m, 3H), 3,22-3,16 (m, 2H),
3.08- 3,03 (m, 1H), 2,73 (m, 4H), 2,62 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,81-1,78 (m, 4H), 1,74-1,72 (m, 2H), 1,68-1,60 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,34 (s, 5H).
Preparacion del Compuesto 138;
Una solucion del ester medico 137 (560 mg, 0,907 mmol) en THF/MeOH/H2O (30 ml/30 ml/10 ml) se cargo con NaOH (3,60 g, 7,25 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 h. El valor del pH se ajusto hasta 9 con HCl acuoso 1 N y el disolvente organico se retiro. El valor del pH del residuo se ajusto hasta 5-6 y la suspension se sometio a reparto entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (100 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 138 (420 mg, 78%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe); 8 6,93 (d, J = 6,7 Hz, 1H),
6,84 (d, J = 7,35 Hz, 1H), 6,70 (s, 3H), 3,93 (m, 1H), 3,16 (m, 5H), 2,98-2,94 (m, 1H), 2,74-2,64 (m, 6H), 1,70 (m, 5H), 1,55 (m, 5H), 1,31 (s, 9H), 1,16-1,06 (m, 2H).
Preparacion de la sal de HCl de acido (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonil)guanidino)butil)-
5.6.7.8- tetrahidronaftalen-1-il)propanoico Compuesto 139;
Se anadio HCl 4 N en dioxano (10 ml) a 138 (420 mg, 0,69 mmol) en EtOH (5,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, la mezcla se purifico mediante cromatograffa en fase inversa (columna Gold C18) y el residuo se liofilizo para suministrar el compuesto 139 como un solido amarillo (200 mg, 49%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe); 8 10,56 (brs, 1H), 9,36 (t, J = 4,7 Hz, 1H), 8,9-8,8 (brs, 2H), 6,98-6,93 (m, 2H), 3,95-3,92 (m, 2H), 3,38-3,35 (m, 2H), 3,04 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,67-2,66 (m, 4H), 2,56-2,55 (m, 2H), 1,72-1,70 (m, 4H), 1,63-1,56 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, D2O); 8 7,43 (brs, 2H), 6,94 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,41 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,28-3,26 (m, 4H), 3,11 (d, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,66-2,64 (m, 6H), 1,67-1,57 (m, 8H).
21. Smtesis quiral de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (33)
Esquema 22
5
imagen50
Preparacion del Compuesto 141;
Se anadieron varias porciones de NBS (142,12,3 g, 69,4 mmol) a lo largo de un penodo de 30 min a una solucion de 1-naftol (140, 10,0 g, 69,4 mmol) en acetonitrilo (70,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperature ambiente durante 4 h, se concentro bajo vado, seguido por la adicion de agua (200 ml) y acetato de etilo (200 ml). La capa 10 acuosa se separo y se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 4:1 hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto deseado 141 (9,50 g, 61%) como un solido blanco: "H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 10,49 (s, 1H), 8,20 (dd, J = 8,3, 0,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 8,2, 7,7, 1,1 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H).
Se anadio polvo de cinc (7,03 g, 107,6 mmol) a un matraz de fondo redondo con brazo lateral purgado con nitrogeno, secado a la llama. Se anadio DMF anhidra (50,0 ml) a traves de una jeringa, seguido por una cantidad catafftica de yodo (1,00 g, 3,94 mmol). Se observo si la mezcla resultante sufffa un cambio de color de incoloro a 5 amarillo y negro a incoloro. Se anadio en una porcion la yodoalanina protegida 143 (11,8 g, 35,9 mmol), seguido por una cantidad catalffica de yodo (1,00 g, 3,94 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 30 min; la insercion satisfactoria de cinc esta acompanada por una exoterma suave. La solucion de reactivo de organocinc se dejo enfriar hasta temperatura ambiente antes de que se anadieran Pd2dba3 (821 mg, 0,89 mmol), SPhos (736 mg, 1,79 mmol) y bromuro de arilo 141 (8,00 g, 35,9 mmol) y la mezcla se calento a 50°C durante 16 h, bajo una presion 10 positiva de nitrogeno. La mezcla de reaccion se dejo enfriar hasta temperatura ambiente. Se anadieron solucion saturada de NH4Cl (300 ml) y EtOAc (300 ml) y a continuacion la mezcla se filtro a traves de celita y se lavo con EtOAc (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con EtOAc (2 x 300 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 4:1) para suministrar el compuesto deseado 7 15 (4,60 g, 37%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros) 8 8,23 (d, J = 8,3 Hz, 1H),
7,99 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 8,04 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,3 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,57 (br s, 0,2 H), 6,45 (br s, 0,2H), 5,91 (br s, 0,65 H), 5,05 (d, J = 7,7 Hz, 0,75H), 4,89 (br s, 0,25H), 4,68 (q, J =6,8 Hz, 0,7H), 4,56 (br s, 0,2H), 3,73 (s, 0,7H), 3,62 (s, 2,3 H), 3,49 (dd, J = 14,0, 5,9 Hz, 0,8H), 3,89 (dd, J = 14,0, 7,2 Hz, 0,7H), 3,05 (br s, 0,2H), 1,39 (s, 7,5H), 1,09 (s, 2,5H).
20 Preparacion del Compuesto 9;
Se anadieron piridina (18,0 ml) y Tf2O (9,19 g, 32,6 mmol) a 0°C a una solucion del compuesto 7 (7,60 g, 21,8 mmol) en CH2Cl2 (150 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h, se concentro bajo vado y se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para 25 suministrar el compuesto 9 (11,0 g, bruto) como un aceite pardo. El producto en bruto se uso directamente para la siguiente etapa sin purificacion adicional: 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros) 8 8,19-8,07 (m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,12-5,06 (br s, 1H), 4,78-4,67 (m, 1H), 3,68
3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, 1H).
Preparacion del Compuesto 11;
30 La solucion del compuesto 9 (11,0 g, 21,8 mmol) y but-3-inilcarbamato de bencilo 10 (6,56 g, 32,6 mmol) en acetonitrilo anhidro (100 ml) se desgasifico durante 10 min bajo una atmosfera de argon seguido por la adicion de TEA (11,9 ml, 87,0 mmol), 10% de (f-Bu)aP en hexanos (8,80 ml, 4,35 mmol) y Cul (207 mg, 1,08 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante otros 10 min y se anadio Pd(PPh3)4 (2,51 g, 2,17 mmol) en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se 35 sometio a reflujo durante 16 h. La mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 2:3 hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto 11 (7,00 g, 61% a lo largo de dos etapas) como un aceite pardo: 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros) 8 8,33 (dd, J = 8,9, 1,9 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 9,0, 1,7 Hz, 1H), 7,59-7,49 (m, 3H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,19 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,24-5,16 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,08-4,99 (m, 1H), 4,69 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,57-3,40 (m, 4H), 2,79 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 40 1,39 (s, 7,5 H), 1,11 (s, 1,5 H).
Preparacion del Compuesto 17;
Se anadio NaOH solido (16,0 g, 79,2 mmol) a una solucion del ester mefflico 11 (7,00 g, 13,2 mmol) en THF (200 ml), metanol (200 ml) y agua (75,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 h hasta que la TLC mostraba que la reaccion era completa. Se anadio acido clorddrico 1 N para ajustar el pH de la mezcla de 45 reaccion hasta 10. Despues de concentrarse, se anadio agua (100 ml) y el pH se ajusto hasta 5-6. El precipitado resultante se extrajo con CH2O2 (2 x 250 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron y se trituraron con MTBE para suministrar el compuesto 17 (5,00 g, 75%) como un solido blanco: 1H NMR (400 MHz, CD3OD; mezcla de rotameros) 8 8,33 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,28-8,20 (m, 1H), 7,59-7,45 (m, 3H), 7,38-7,21 (m, 6H), 5,09 (s, 2H), 4,55-4,45 (m, 1H), 3,76-3,66 (m, 1H), 3,44 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,28-3,20 (m, 50 1H), 2,76 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 1,29 (s, 6H), 0,82 (s, 3H).
Preparacion del Compuesto 30;
Se anadieron T3P (50% en acetato de etilo, 10,7 ml) y NMM (4,89 ml, 44,5 mmol) sucesivamente a una solucion del compuesto 17 (4,60 g, 8,91 mmol) en THF (160 ml). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 10 min, se anadio la amina 29 (6,11 g, 9,33 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 h.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Despues de que el disolvente se retirara, el residuo se disolvio en CH2CI2 (100 ml), se lavo rapidamente con NH4CI saturado, NaHCO3 saturado y salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se concentro. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 9:1 CH2Cl2/MeOH) para suministrar la amida 30 (6,60 g, 64%) como un solido blancuzco: 1H NMR (400 MHz, CDCla) 8 8,33 (dd, J = 9,0, 1,7 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,62-7,47 (m, 4H), 7,42 (dd, J = 7,7, 4,1 Hz, 4H), 7,37-7,28 (m, 11H), 7,09-6,95 (m, 4H), 5,46 (s, 2H), 5,33 (br s, 1H), 5,22 (t, J =
5,8 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,63-4,51 (m, 1H), 4,27 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 4,02-3,84 (m, 6H), 3,71 (t, J = 4,5 Hz, 6H impurezas), 3,57 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,54-3,45 (m, 4H), 2,82-2,60 (m, 6H), 2,59-2,45 (m, 3H), 2,44-2,36 (m, 4H), 1,82-1,69 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 31
Una suspension de 30 (7,26 g, 6,20 mmol) y Pd al 10%/C (1,50 g) en EtOH/AcOH (240 ml/40,0 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado y se trituro con MTBE para suministrar la sal de amina 31 (7,06 g, 98%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD, mezcla de rotameros) 8 8,24 (dd, J = 7,2, 2,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,59-7,22 (m, 2H), 7,49-7,41 (m, 4H), 7,39-7,22 (m, 10H), 6,95 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,51 (s, 2H), 4,55 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 10,7, 5,4 Hz, 2H), 4,19-4,10 (m, 2H), 3,99-3,88 (m, 4H), 3,83-3,73 (m, 8H, impurezas), 3,61 (t, J = 10,5, Hz, 2H), 3,59-3,52 (m, 1H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,19-3,02 (m, 4H), 2,93-2,81 (m, 8H), 2,54, 2,39 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,80 (m, 2H), 1,80-1,65 (m, 4H), 1,36 (s, 7H), 1,09 (s, 2H).
Preparacion de 32
Se anadio DIPEA (8,80 ml, 49,4 mmol) seguido por 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de metilo (13, 3,84 g, 9,88 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de 31 (7,06 g, 6,18 mmol) en EtOH (50,0 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico dos veces mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, cHcl3/CH3OH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 32 (2,50 g, 33%) como un solido amarillo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD, mezcla de rotameros) 8 8,22 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,56-7,47 (m, 4H), 7,43 (dd, J = 7,4, 3,6 Hz, 4H), 7,33-7,14 (m, 10H), 6,94 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,53 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,89 (m, 4H), 3,84 (dd, J = 5,5, 2,3 Hz, 2H), 3,70 (dd, J = 9,2, 2,2 Hz, 2H), 3,59 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,54
3,46 (m, 1H), 3,47-3,38 (m, 1H), 3,22 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,11-3,02 (m, 2H), 2,70 (dd, J = 13,5, 4,6 Hz, 2H), 2,61 (dd, J = 13,6, 8,9, 2H), 2,57-2,47 (m, 2H), 2,46-2,34 (m, 2H), 1,84-1,73 (m, 2H), 1,72-1,61 (m, 4H), 1,36 (s, 7H), 1,12 (s, 2H).
Preparacion de la sal de HCl de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6- pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (33)
Se anadio acido clorddrico 4 N (80,0 ml) a una solucion de 32 (2,50 g, 2,02 mmol) en EtOH (30,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en fase inversa y se liofilizo para suministrar el compuesto 33 (1,82 g, 85%) como un solido higroscopico amarillo: 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 10,61 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 9,41 (t, J = 5,2 Hz, H), 9,01 (br s, 1H), 8,96 (br s, 1H), 8,81 (br s, 2H), 8,77 (br s, 2H), 8,44-8,37 (m, 1H), 8,16-8,10 (m, 1H), 7,61-7,52 (m, 2H), 7,41 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,28 (q, J = 7,4 Hz, 1H), 4,09-3,99 (m, 2H), 3,75-3,65 (m, 3H), 3,58 (dd, J = 11,0, 2,6 Hz, 2H), 3,55-3,31 (m, 10H), 3,30-3,13 (m, 4H), 3,32-3,00 (m, 2H), 2,63-2,53 (m, 2H), 2,05-1,92 (m, 2H), 1,78-1,61 (m, 4H).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 9,25 (t, J = 5,9 Hz, 0,5H), 8,26-8,21 (m, 1H), 8,17-8,12 (m, 1H), 7,60-7,54 m, 2H), 7,38 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,15 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,31 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,21-4,14 (m, 1H), 4,13-4,08 (m, 1H), 3,85-3,80 (m, 2H), 3,79(d, J = 2,9 Hz, 1H), 3,76 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 3,733,62 (m, 8H), 3,51-3,34 (m, 8H), 3,15 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,73-2,57 (m, 2H), 2,15-1,98 (m, 2H), 1,91-1,73 (m, 4H).
5
10
15
20
25
30
22. Preparacion de (2R,2'R,3R,3'R,4R,4'R,5S,5'S)-6,6'-(3-(4-aminofenil)propilazanodiil)dihexano-1,2,3,4,5-pentaol (29)
Esquema 23
imagen51
Preparacion del Compuesto 145
Se anadio TEA (32,2 ml, 231,2 mmol) y B0C2O (40,4 g, 185,3 mmol) a 0°C a una solucion del compuesto 144 (8,80 g, 154,1 mmol) en CH2Cl2 (150 ml). La mezcla de reaccion se continuo agitando a 0°C durante 0,5 h, se dejo calentar hasta temperatura ambiente y se agito durante 5 h. A continuacion, la mezcla se repartio entre CH2Cl2 (150 ml) y agua (150 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 150 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron para suministrar el compuesto deseado 145 (22,0 g, 91%) como un aceite incoloro. 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 5,90-5,77 (m, 1H), 5,17 (dq, J = 17,1, 1,7 Hz, 1H), 5,10 (dq, J= 10,4, 1,4 Hz, 1H), 4,64 (brs, 1H), 3,74 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 1,45 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 147
Se anadio 9-BBN (0,5 M en THF, 270 ml, 133,8 mmol) bajo argon a una solucion del compuesto 145 (14,0 g, 89,12 mmol) en THF anhidro (150 ml). Despues de que la mezcla de reaccion se agitara durante 2 h a temperatura ambiente, se anadieron a temperatura ambiente el compuesto 146 (17,7 g, 71,3 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (3,12 g, 4,45 mmol) y NaOH ac 1 N (150 ml). La mezcla resultante se agito durante 1 h adicional. Despues de que el disolvente se retirara; el residuo se repartio entre EtOAc (200 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con EtOAc (2 * 200 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 4:1 hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto 147 (8,00 g, 43%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CDCla) 8 8,14 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,56 (br s, 1H), 3,17 (q, J = 6,2 Hz, 2H), 2,75 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,89-1,79 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 148;
El compuesto 147 (8,00 g, 28,6) se disolvio en HCl 4 N en dioxano (50,0 ml) a temperatura ambiente y la solucion se agito durante 1 h. La mezcla de reaccion se concentro bajo vacfo y el residuo se trituro con MTBE para suministrar el compuesto 148 (4,00 g, 65%) como un solido pardo: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8,19 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,07-1,97 (m, 2H).
Preparacion del Compuesto 150;
Se anadio AcOH (11,1 ml, 185 mmol) a una solucion del compuesto 148 (4,00 g, 18,5 mmol) y triol 149 (24,8 g, 92,5 mmol) en MeOH (150 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 10 min. Despues de que
se anadiera NaCNBH3 (5,83 g, 92,5 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 24 h. Se anadieron compuesto 149 (4,0 equiv), AcOH (4,0 equiv) y NaCNBH3 (4,0 equiv) adicionales a lo largo de 4 d^as. A continuacion, se anadieron hexanal (2,0 equiv), AcOH (2,0 equiv) y NaCNBH3 (2,0 equiv). La solucion se agito adicionalmente a temperatura ambiente durante 1 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo 5 con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre EtOAc (200 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 300 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, C^Ch/MeOH 9::1, cHcl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 150 (6,50 g, 52%) como un solido blancuzco. Se aislaron 4,00 g adicionales de material de las fracciones impuras y se purificaron mediante una columna en fase 10 inversa para suministrar 1,50 g (12%) de compuesto puro 150 (total 7,70 g, 64%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 8
8,03 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,50-7,41 (m, 4H), 7,35-7,23 (m, 8H), 5,48 (s, 2H), 4,22 (dd, J = 10,6, 5,3 Hz, 2H), 3,99-3,91 (m, 4H), 3,85 (dd, J = 5,5, 2,4 Hz, 2H), 3,70 (dd, J = 9,5, 2,4 Hz, 2H), 3,59 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 2,73 (dd, J = 13,6, 4,5 Hz, 2H), 2,67-2,50 (m, 6H), 1,83-1,71 (m, 2H).
Preparacion de (2R,2'R,3R,3'R,4R,4'R,5S,5'S)-6,6'-(3-(4-aminofenil)propilazanodiil)dihexano-1,2,3,4,5-pentaol 15 (Compuesto 153);
Una suspension del compuesto 150 (6,50 g, 9,50 mmol) y Pd al 10%/C (1,30 g) en EtOH (150 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito a ta bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 6 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 153 (6,01 g, 97%) como un solido blancuzco: 1H NMR (400 20 MHz, CD3OD): 8 7,49-7,42 (m, 4H), 7,35-7,26 (m, 6H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,60 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,48 (s, 2H), 4,22 (dd, J = 10,8, 5,9 Hz, 2H), 3,98-3,89 (m, 4H), 3,83 (dd, J = 5,7, 2,3 Hz, 2H), 3,69 (dd, J = 13,2, 3,4 Hz, 2H), 3,62-3,55 (m, 3H), 2,71 (dd, J = 13,2, 3,4 Hz, 2H), 2,65-2,48 (m, 3H), 2,45-2,29 (m, 2H), 1,74-1,63 (m, 2H).
23. Preparacion de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((R)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (152)
Esquema 24
5
imagen52
Preparacion del Compuesto 14
Se anadieron varias porciones de NBS (142, 12,3 g, 69,4 mmol) a lo largo de un penodo de 30 min a una solucion de 1-naftol (1, 10,0 g, 69,4 mmol) en acetonitrilo (70,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 4 h, se concentro bajo vado, seguido por la adicion de agua (200 ml) y acetato de etilo (200 ml). La capa 10 acuosa se separo y se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purifico mediante cristalizacion (heptano/EtOAc) para suministrar el compuesto deseado 14 (6,0 g, 39%) como un solido blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,49 (s, 1H), 8,20 (dd, J = 8,3, 0,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 8,2, 7,7, 1,1 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H).
15 Preparacion del Compuesto 145
Se anadio polvo de cinc (4,76 g, 72,9 mmol) a un matraz de fondo redondo con brazo lateral purgado con nitrogeno, secado a la llama. Se anadio DMF anhidra (25,0 ml) a traves de una jeringa, seguido por una cantidad catalftica de yodo (677 mg, 2,67 mmol). Se observo si la mezcla resultante sufna un cambio de color de incoloro a amarillo y negro a incoloro. Se anadio en una porcion la yodoanilina protegida 114 (8,00 g, 24,3 mmol), seguido por una
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
cantidad catalttica de yodo (677 mg, 2,67 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 30 min; la insercion satisfactoria de cinc esta acompanada por una exoterma suave. La solucion de reactivo de organocinc se dejo enfriar hasta temperatura ambiente antes de que se anadieran Pd2(dba)3 (556 mg, 0,60 mmol), SPhos (498 mg, 1,21 mmol) y bromuro de arilo 14 (5,40 g, 24,3 mmol) y la mezcla se calento a 50°C durante 16 h, bajo una presion positiva de nitrogeno. La mezcla de reaccion se dejo enfriar hasta temperatura ambiente. Se anadieron solucion saturada de NH4Cl (300 ml) y EtOAc (300 ml) y a continuacion la mezcla se filtro a traves de celita y se lavo con EtOAc (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con EtOAc (2 x 300 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 4:1 hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto 145 (3,10 g, 37%) como un solido amarillo. 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros): 8 8,23 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 8,04 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,3 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,70 (d, J =
7.6 Hz, 1H), 5,98 (brs, 0,3H), 5,59 (br s, 0,7 H), 5,03 (d, J = 7,7 Hz, 0,85H), 4,84 (br s, 0,15H), 4,68 (q, J =6,8 Hz, 1H), 3,76-3,68 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,54-3..33 (m, 2H), 1,39 (s, 7H), 1,09 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 146
Se anadieron piridina (7,25 ml, 88,9 mmol) y Tf2O (2,24 ml, 13,3 mmol) a 0°C a una solucion del compuesto 145 (3,07 g, 8,90 mmol) en CH2Cl2 (75,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h, se concentro bajo vado y se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para suministrar el compuesto 146 (4,20 g, bruto) como un aceite pardo. El producto en bruto se uso directamente para la siguiente etapa sin purificacion adicional. 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros): 8 8,19-8,07 (m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,12-5,06 (br s, 1H), 4,784,67 (m, 1H), 3,68-3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, 1H).
Preparacion del Compuesto 147
La solucion del compuesto 6 (4,20 g, 8,80 mmol, bruto) y but-3-inilcarbamato de bencilo 7 (2,65 g, 13,2 mmol) en acetonitrilo anhidro (50,0 ml) se desgasifico durante 10 min bajo atmosfera de argon seguido por la adicion de TEA (4,81 ml, 35,2 mmol), 10% de (f-Bu)aP en hexanos (3,56 ml, 1,76 mmol) y Cul (84 mg, 0,44 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante otros 10 min y se anadio Pd(PPh3)4 (1,01 g, 0,88 mmol) en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 18 h. La mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 2:3 hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto 147 (3,20 g, 67% a lo largo de dos etapas) como un aceite pardo. 1H NMR (400 MHz, CDCh, mezcla de rotameros) : 8 8,33 (dd, J = 8,9, 1,9 Hz, 1H),
8.07 (dd, J = 9,0, 1,7 Hz, 1H), 7,59-7,49 (m, 3H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,19 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,24-5,16 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,08-4,99 (m, 1H), 4,69 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,57-3,40 (m, 4H), 2,79 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 7,5 H), 1,11 (s, 1,5 H).
Preparacion del Compuesto 148
Se anadio NaOH solido (1,40 g, 35,09 mmol) a una solucion del ester medico 147 (3,10 g, 5,84 mmol) en THF (60 ml), metanol (60 ml) y agua (20,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h hasta que la TLC mostraba que la reaccion era completa. Se anadio acido clorhfdrico 1 N para ajustar el pH de la mezcla de reaccion hasta 10. Despues de concentrarse; se anadio agua (100 ml) y el pH se ajusto hasta 5-6. El precipitado resultante se extrajo con CH2Cl2 (2 x 200 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron y se trituraron con MTBE para suministrar el compuesto 148 (3,00 g, 99%) como un solido blanco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD; mezcla de rotameros): 8 8,33 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,28-8,20 (m, 1H), 7,59-7,45 (m, 3H), 7,38-7,21 (m, 6H), 5,09 (s, 2H), 4,55-4,45 (m, 1H), 3,76-3,66 (m, 1H), 3,44 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,28-3,20 (m, 1H), 2,76 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 1,29 (s, 6H), 0,82 (s, 3H).
Preparacion del Compuesto 149
Se anadieron T3P (50% en acetato de etilo, 1,86 ml) y NMM (0,85 ml, 7,75 mmol) sucesivamente a una solucion del compuesto 148 (800 mg, 1,55 mmol) en THF (30 ml). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 10 min, se anadio la amina 29 (1,01 g, 1,55 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 h. Despues de que el disolvente se retirara, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo rapidamente con NH4Cl saturado, NaHCO3 saturado y salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se concentro. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Ch/MeOH 9:1) para suministrar la amida 149 (1,20 g, 67%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 8,35 (d, J = 8,0, 1,7 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,60-7,52 (m, 2H), 7,50 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,45-7,39 (m, 5H), 7,37-7,28 (m, 11H), 7,08-6,96 (m, 3H), 5,47 (s, 2H), 5,33-5,17 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,59-4,48 (m, 1H), 4,29 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 4,07-4,00 (m, 2H), 3,99-3,91 (m, 4H), 3,78-3,68
(m, 3H), 3,59 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,55-3,46(m, 4H), 2,95-2,82 (m, 2H), 2,81-2,69 (m, 4H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,562,44 (m, 3H), 2,43-2,38 (m, 1H), 1,85-1,69 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 150
Una suspension de 149 (1,15 g, 1,00 mmol) y Pd al 10%/C (230 mg) en EtOH/AcOH (80,0 ml/20,0 ml) se desgasifico 5 al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se sometio a condiciones de hidrogenacion (1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado y se trituro con MTBE para suministrar la sal de amina 150 (1,12 g, 97%) como un solido pardo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, mezcla de rotameros): 8 8,25 (dd, J = 7,2, 2,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,59-7,51 (m, 2H), 7,48-7,41 (m, 4H), 7,37-7,21 (m, 10H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,52 (s, 2H), 10 4,54 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 10,7, 5,4 Hz, 2H), 4,16-4,08 (m, 2H), 3,97-3,88 (m, 4H), 3,75-3,70 (m, 2H), 3,62
(t, J = 10,5, Hz, 2H), 3,60-3,51 (m, 1H), 3,28-3,15 (m, 2H), 3,14-2,95 (m, 4H), 2,89 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,73-2,67 (m, 1H), 2,54-2,39 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,64 (m, 8H), 1,36 (s, 7,5H), 1,09 (s, 1,5H).
Preparacion de 151
Se anadio DIPEA (1,30 ml, 7,35 mmol) seguido por 3,5-diamino-6-cloropiracino-2-carbonilcarbamimidotioato de 15 metilo (13, 573 mg, 1,47 mmol) a temperatura ambiente a una solucion de 150 (1,05 g, 0,92 mmol) en EtOH (15,0 ml). La mezcla de reaccion se calento a 70°C durante 2 h, se enfrio hasta temperatura ambiente y se concentro bajo vado. El residuo se purifico dos veces mediante cromatograffa en columna (gel de sflice , 80:18:2 CHCl3/CH3OH/NH4OH) para suministrar el compuesto 151 (410 mg, 36%) como un solido amarillo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, mezcla de rotameros): 8 8,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,56-7,48 (m, 2H), 7,4720 7,40 (m, 4H), 7,33-7,25 (m, 6H), 7,22 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 6,94 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,47 (s,
2H), 4,53 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,89 (m, 4H), 3,84 (dd, J = 5,5, 2,1 Hz, 2H), 3,70 (dd, J = 9,1, 2,0 Hz, 2H), 3,59 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,53-3,47 (m, 1H), 3,46-3,39 (m, 1H), 3,26-3,17 (m, 2H), 3,12-3,04 (m, 2H), 2,70 (dd, J = 13,2, 4,0 Hz, 2H), 2,60 (dd, J = 13,0, 8,2, 2H), 2,57-2,49 (m, 2H), 2,47-2,33 (m, 2H), 1,84-1,73 (m, 2H), 1,72-1,61 (m, 4H), 1,37 (s, 7H), 1,12 (s, 2H).
25 Smtesis de 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((R)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-
pentahidroxihexil)amino)propil)fenilamino)-3-oxopropil)naftalen-1-il)butil)carbamimidoil)-6-cloropiracino-2- carboxamida (152)
Se anadio acido clorddrico 4 N (25,0 ml) a una solucion de 151 (480 mg, 0,42 mmol) en EtOH (5,0 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiro, se purifico mediante una columna en 30 fase inversa y se liofilizo para suministrar el compuesto 152 (300 mg, 71%) como un solido higroscopico amarillo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 8 10,57 (brs, 1H), 10,55 (brss, 1H), 9,35 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 9,04-8,84 (m, 2H), 8,81-8,66 (m, 4H), 8,42-8,36 (m, 1H), 8,16-8,10 (m, 1H), 7,61-7,53 (m, 2H), 7,41 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 7,5 Hz, 1H),
7,28 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,32-4,23 (m, 1H), 4,08-3,97 (m, 2H), 3,75-3,30 (m, 13H), 3,29-3,15 (m, 4H), 3,14-2,97 (m, 2H), 2,64-2,53 (m, 2H), 2,05-1,92 (m, 2H), 1,79-1,60 (m, 4H).
35
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,25-8,21 (m, 1H), 8,18-8,13 (m, 1H), 7,59-7,53 (m, 2H), 7,38 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,15 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,30 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 4,20-4,14 (m, 1H), 4,13
4,08 (m, 1H), 3,84-3,80 (m, 2H), 3,79-3,75(m, 2H), 3,72-3,61 (m, 8H), 3,51-3,34 (m, 8H), 3,15 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,74-2,58 (m, 2H), 2,13-1,98 (m, 2H), 1,91-1,73 (m, 4H).
40
HRMS calculado para C44H64CIN1qO12 [M + Na]+, 959,4418 y encontrado 959,4394.
5
10
15
20
25
30
imagen53
Preparacion del Compuesto 155;
Se anadieron TEA (1,63 ml, 11,7 mmol) y Boc2O (2,16 g, 9,90 mmol) a 0°C a una solucion del compuesto 154 (500 mg, 9,00 mmol) en CH2Cl2 (50 ml). La mezcla de reaccion se continuo agitando a 0°C durante 0,5 h, se dejo calentar hasta temperatura ambiente y se agito durante 3 h. A continuacion, la mezcla se repartio entre CH2Cl2 (50 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Ch (2 * 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron, el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 2:3) para suministrar el compuesto deseado 155 (1,20 g, 86%) como un aceite incoloro. 1H NMR (300 MHz, CDCh): 8 4,70 (br s, 1H), 3,91 (dd, J = 5,3, 2,2 Hz, 2H), 2,21 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 157;
La solucion del compuesto 155 (1,00 g, 6,45 mmol) y 156 (1,30 g, 6,45 mmol) en THF anhidro (15 ml) se desgasifico durante 10 min bajo atmosfera de argon seguido por la adicion de TEA (3,53 ml, 25,8 mmol), PPh3 (424 mg, 1,61 mmol) y Cul (246 mg, 1,29 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante otros 10 min y se anadio Pd(PPh3)4 (7,45 g, 6,45 mmol) en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 16 h. La mezcla de reaccion se concentro a vacfo y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 2:3) para suministrar el compuesto 157 (750 mg, 42%) como un aceite pardo. 1H NMR (400 MHz, CDCla) : 8 8,17 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 4,79 (brs, 1H), 4,18 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 1,47 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 158;
El compuesto 157 (2,00 g, 7,24) se disolvio en HCl 4 N en dioxano (20,0 ml) a temperatura ambiente y la solucion se agito durante 2 h. La mezcla de reaccion se concentro bajo vacfo y el residuo se trituro con MTBE para suministrar el compuesto 158 (1,25 g, 82%) como un solido pardo. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,26 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 7,72 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 4,09 (s, 2H).
Preparacion del Compuesto 159;
Se anadio AcOH (0,09 ml, 1,41 mmol) a una solucion del compuesto 158 (100 mg, 0,47 mmol) y solucion de formaldehffdo en agua (30%, 1,40 ml, 1,41 mmol) en MeOH (3,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues de que se anadiera NaCNBH3 (88 mg, 1,41 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron solucion de formaldehffdo en agua (30%, 0,92 ml, 0,94 mmol), AcOH (0,09 ml, 1,41 mmol) y NaCNBH3 (88 mg, 1,41 mmol) adicionales y se agitaron durante otras 16 h.
Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralize con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 * 40 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de s^lice, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) para suministrar el 5 compuesto 159 (50 g, 52%) como un aceite blancuzco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,17 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,57 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 3,50 (s, 2H), 2,37 (s, 6H).
Preparacion del Compuesto 18;
Una suspension del compuesto 159 (100 mg, 0,49 mmol) y Pd al 10%/C (40 mg) en MeOH (3,0 ml) se desgasifico con argon durante 10 min y a continuacion se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 3 h a 10 temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado y se trituro con CH2Cl2/hexano para suministrar 18 (48 mg, 55%) como un cristal blanco: 1H NMR (300 MHz, CDCla): 8 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,60 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 3,47 (br s, 2H), 2,53 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,26 (dd, J = 8,7,
7,2 Hz, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,77-1,67 (m, 2H).
Preparacion del producto intermedio 29
15 Esquema 26
imagen54
Preparacion del Compuesto 161;
Se anadio AcOH (3,40 ml, 56,6 mmol) a una solucion del compuesto 158 (4,00 g, 18,9 mmol) y el triol 160 (11,7 g, 56,6 mmol) en MeOH (50 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues de 20 que se anadiera NaCNBH3 (3,55 g, 56,6 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 160 (11,7 g, 56,6 mmol), AcOH (3,40 ml, 56,6 mmol) y NaCNBH3 (3,55 g, 56,6 mmol) adicionales y la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre CH2Cl2 (10 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 10 ml). Los extractos organicos combinados se secaron 25 sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) para suministrar el compuesto 29 (700 mg, 7,0%) como un solido blancuzco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,21 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,68 (q, J = 5,1 Hz, 2H),
4,04 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,93 (m, 2H), 3,86-3,74 (m, 6H), 3,54 (dd, J = 9,8, 2,3 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 10,7 Hz, 2H), 2,87 (dd, J = 13,3, 4,9 Hz, 2H), 2,74 (dd, J = 13,3, 7,8 Hz, 2H), 1,25 (d, J = 5,1 Hz, 6H).
30 Preparacion del Compuesto 29;
Una suspension del compuesto 161 (500 mg, 0,90 mmol) y Pd(OH)2 al 10%/C (215 mg) en EtOH (230 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de 35 silice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 29 (264 mg, 55%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 6,97 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,67 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,71 (q, J = 5,1 Hz, 2H), 4,06 (dd, J = 10,6, 5,3 Hz, 2H), 4,13-4,05 (m, 2H), 3,81 (dd, J = 5,0, 2,3 Hz, 2H), 3,80-3,72 (m, 2H), 3,51 (dd, J = 9,6, 2,4 Hz, 2H), 3,33-3,23 (m, 2H), 3,38 (t, J = 10,7 Hz, 2H), 2,83-2,54 (m, 6H), 1,85-1,69 (m, 2H), 1,26 (d, J = 5,1 Hz, 6H).
5
10
15
20
25
30
35
40
imagen55
azucar
160OH
NaCNBH3, AcOH, MeOH
NaCNBH3. AcOH. MeOH
azucar
azucar
azucar
MeOH
Preparacion del Compuesto 162;
Se anadio AcOH (0,17 ml, 2,82 mmol) a una solucion del compuesto 158 (200 mg, 0,94 mmol) y el triol 160 (194 mg, 0,94 mmol) en MeOH (2,0 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues de que se anadiera NaCNBH3 (148 mg, 2,35 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 160 (0,2 equiv), AcOH (3,0 equiv) y NaCNBH3 (1,0 equiv) adicionales y la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre CH2Cl2 (10 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 10 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 162 (95 mg, 28%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,24 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,69 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 4,70 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,09-4,02 (m, 2H),
4.00 (d, J = 2,1 Hz, 2H), 3,83 (dd, J =5,1, 2,3 Hz, 1H), 3,81-3,71 (m, 1H), 3,53 (dd, J = 9,3, 2,3 Hz, 1H), 3,38 (t, J =
11.0 Hz, 1H), 3,21-3,07 (m, 2H), 1,25 (d, J = 5,1 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 164;
Se anadieron AcOH (0,05 ml, 0,78 mmol) y NaCNBH3 (41 mg, 0,65 mmol) a una solucion del compuesto 162 (95 mg, 0,26 mmol) y hexanal 163 (52 mg, 0,51 mmol). La solucion se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre EtOAc (10 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 10 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Ch/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 164 (70 mg, 59%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 5 8,18(d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,70 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 10,4, 5,2 Hz, 1H), 4,01-3,89 (m, 2H), 3,83 (dd, J = 3,8, 2,7 Hz, 1H), 3,77 (brs, 1H), 3,70 (brs, 1H), 3,64 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 3,41 (t, J= 10,8 Hz, 1H), 2,87 (dd, J = 13,2, 4,3 Hz, 1H), 2,78-2,68 (m, 2H), 2,63-2,55 (m, 1H), 1,75-1,43 (m, 4H), 1,34 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 1,32-1,25 (m, 6H), 0,89 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 24
Una suspension del compuesto 164 (1,70 g, 3,77 mmol) y Pd al 10%/C (200 mg) en MeOH (40 ml) se desgasifico con argon durante 10 min y a continuation se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Ch/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 24 (1,20 g, 76%) como un solido blancuzco. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): 5 6,96 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,62 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,68 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 11,0, 5,5Hz, 1H), 3,92-3,81 (m, 2H), 3,72 (dd, J = 3,8, 2,4 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 9,1,4,0 Hz, 1H), 3,40 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,76-2,38 (m, 10H), 1,81-1,64 (m, 3H), 1,48-1,36 (m, 2H), 1,33 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 1,30-1,20 (m, 6H), 0,88 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
5
10
15
20
25
imagen56
Se anadio AcOH (12,1 ml, 63,9 mmol) a una solution del compuesto 148 (4,60 g, 21,3 mmol) y el triol 165 (17,1 g,
63,9 mmol) en MeOH (100 ml) y la mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante 10 min. Despues de que se anadiera NaCNBH3 (4,00 g, 63,9 mmol), la solution se continuo agitando a temperatura ambiente durante 6 h. A continuation, se anadieron hexanal 163 (5,10 ml, 42,6 mmol) y NaCNBH3 (2,60 g, 42,6 mmol). La solution se agito adicionalmente a temperatura ambiente durante 2 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre EtOAc (200 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 300 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla en columna (gel de sllice, C^C^/MeOH 9:1, CHC^/MeOH/N^OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 166 (6,90 g, 64%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,12 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,51-7,43 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,37-7,27 (m, 3H), 5,55 (s, 1H), 4,24 (dd, J= 11,5, 5,5 Hz, 1H), 4,18-4,01 (m, 1H), 4,00-3,94 (m, 1H), 3,93-3,89 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 9,3, 1,8 Hz, 1H), 3,61 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,13-2,77 (m, 6H), 2,71 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,99-1,85 (m, 2H), 1,55-1,42 (m, 2H),
1,38-1,18 (m, 6H), 0,87 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
Preparation del Compuesto 85;
Una suspension del compuesto 166 (800 mg, 1,55 mmol) y Pd al 10%/C (300 mg) en EtOH (40 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito a temperatura ambiente bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaction se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 85 (700 mg, 93%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7,52-7,42 (m, 2H), 7,38-7,25 (m, 3H), 6,88 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,63 (d, J =
8,4 Hz, 2H), 5,53 (s, 1H), 4,24 (dd, J = 10,8, 5,5 Hz, 1H), 4,05-3,84 (m, 3H), 3,76 (dd, J = 9,6, 1,8 Hz, 1H), 3,61 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 13,6, 5,0 Hz, 1H), 2,79 (dd, J= 13,4, 9,0 Hz, 1H), 2,73-2,60 (m, 4H), 2,42 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 1,88-1,68 (m, 2H), 1,48-1,36 (m, 2H), 1,33-1,14 (m, 6H), 0,87 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
imagen57
Preparacion del Compuesto 168;
5 Una solucion de 162 (534 mg, 1,45 mmol) en MeOH (30 ml) y se cargo con solucion saturada de NaHCO3 en agua (5,0 ml) a 0°C y se agito durante 10 min. A continuacion, se anadio (Boc)2O (350 mg, 1,60 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 3 h a la misma temperatura, se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante otros 30 min. La mezcla se concentro, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml) y la solucion se lavo con agua (100 ml) y salmuera (50 ml). La capa organica se seco sobre Na2SO4, se filtro, se concentro y el residuo se purifico mediante 10 cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH 8:2) para suministrar el compuesto 168
(435 mg, 64%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CDCla): 8 8,18 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 4,72 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,41-4,35 (m, 2H), 4,16 (dd, J = 10,8, 5,5 Hz, 1H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,93-3,83 (m, 1H), 3,81-3,76 (m, 1H), 3,66-3,53 (m, 4H), 3,40 (t, J = 11,0 Hz, 1H), 3,25-3,12 (m, 1H), 3,08-2,96 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,32 (d, J = 5,1 Hz, 3H).
15 Preparacion del Compuesto 34;
Una suspension del compuesto 168 (80 mg, 0,21 mmol) y Pd al 10%/C (40 mg) en EtOH (10 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 34 (82 mg, 89%) como un solido blancuzco. 1H NMR (400 20 MHz, CDCl3): 8 6,96 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,62 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 4,69 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 10,8, 5,5 Hz,
1H), 4,13-4,09 (m, 1H), 4,01-3,93 (m, 1H), 3,89-3,78 (m, 1H), 3,75-3,68 (m, 1H), 3,62-3,43 (m, 4H), 3,40 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,35 (dd, J= 13,5, 4,0 Hz, 1H), 3,26 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,23-3,13 (m, 1H), 2,48 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,86-1,76 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,33 (d, J = 5,1 Hz, 3H).
imagen58
NaCNBH3. AcOH 0?N
Boc?0, NaHCO^ MeOH/H,0
Pd/C. H EtOH
azucar
azucar
165 Ph
azucar
MeOH
azucar
azucar =
azucar
Se anadio AcOH (5,32 ml, 88,8 mmol) a una solution del compuesto 148 (6,40 g, 29,6 mmol) y el triol 165 (11,9 g, 5 44,5 mmol) en MeOH (300 ml) y la mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues de
que se anadiera NaCNBH3 (3,73 g, 59,2 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 165 (11,9 g, 44,5 mmol), AcOH (5,32 ml, 88,8 mmol) y NaCNBH3 (3,73 g, 59,2 mmol) adicionales y la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 14 h. Se anadieron compuesto 165 (7,93 g, 29,6 mmol), AcOH (3,55 ml, 59,2 mmol) y NaCNBH3 (2,80 g, 44,4 mmol) adicionales y la solucion se 10 continuo agitando a temperatura ambiente durante 10 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 100 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. Se encontro una purification diffcil mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 150 y 169 (20 g, mezcla). La 15 mezcla se uso directamente para la siguiente etapa.
Preparacion del Compuesto 170;
Una solucion de 150 y 169 (20,0 g, mixture) en MeOH (120 ml) y agua (40 ml) se cargo con NaHCO3 saturado (9,99 g, 118,4 mmol) a 0°C y se agito durante 10 min. Se anadio (Boc)2O (9,69 g, 44,4 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 10 min a la misma temperatura, se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante otras 2 h. La 20 mezcla se concentro, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml) y la solucion se lavo con agua (100 ml) y salmuera (50 ml). La capa organica se seco sobre Na2SO4, se filtro, se concentro y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCh/MeOH 8:2) para suministrar el compuesto 150 (1,50 g) y 170 (4,50 g) como un solido blancuzco. ESI-MS m/z 529 [C27H32N2O9+H]+.
Preparacion del Compuesto 171
25 Una suspension del compuesto 170 (4,20 g, 7,92 mmol) y Pd al 10%/C (500 mg) en EtOH (100 ml) y AcOH (10 ml) se desgasifico con argon durante 10 min y a continuation se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vado, se neutralizo con Na2CO3 y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Ch/MeOH 9:1, CHCh/MeOH 8:2) para suministrar el compuesto 172 (2,70 g, 68%) como un solido 30 blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7,52-7,44 (m, 2H), 7,36-7,29 (m, 3H), 6,89 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,64 (d, J =
8,3 Hz, 2H), 5,54 (s, 1H), 4,23 (dd, J = 11,9, 5,9 Hz, 1H), 4,10-3,97 (m, 1H), 3,97-3,89 (m, 1H), 3,81-3,75 (m, 1H), 3,74-3,69 (m, 1H), 3,60 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 14,1,4,6 Hz, 1H), 3,28-3,22 (m, 3H), 2,41 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,83-1,71 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
5
10
15
20
25
30
35
imagen59
DMAP. TEA
Pd(PPh3)4, Cut, (/-Bu)3P, Et3N, o^N CH3CN ~
40%deNHMe2 en H20 " THE
^ ch3 EtOH
39
La solucion del compuesto 17 (30. 0 g, 121 mmol) y 173 (14,2 g, 145 mmol) en acetonitrilo anhidro (300 ml) se desgasifico durante 10 min bajo atmosfera de argon seguido por la adicion de TEA (67 ml, 484 mmol), 10% de (t- Bu)3P en hexanos (49,0 ml, 24,2 mmol) y Cul (1,15 g, 6,05 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se desgasifico con argon durante otros 10 min y se anadio Pd(PPh3)4 (14,0 g, 12,1 mmol) en una porcion. Despues de desgasificar con argon durante 5 min, la mezcla resultante se calento a 50°C durante 16 h. La mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 2:3) para suministrar el compuesto 174 (15,0 g, 58%) como un aceite pardo. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 8 8,14 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,71 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,50 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,80-1,70 (m, 4H), 1,70-1,65 (m, 1H).
Preparacion del Compuesto 175;
Se anadieron Et3N (28,0 ml, 203,7 mmol) y DMAP (4,12 g, 33,9 mmol) bajo argon a 0°C a una solucion del compuesto 174 (15,0 g, 67,9 mmol) en CH2Cl2 anhidro (50 ml). Despues de que la mezcla de reaccion se agitara durante 5 min a la misma temperatura, se anadio TsCl (32,5 g, 170 mmol), a 0°C. La mezcla resultante se agito durante 4 h adicionales a temperatura ambiente. Despues de que se retirara el disolvente; el residuo se repartio entre CH2Cl2 (250 ml) y agua (150 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2O2 (2 * 250 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, hexanos/EtOAc) para suministrar el compuesto 175 (15,0 g, 60%) como un aceite pardo. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8 8,15 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,79 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,10 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,44 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,90-1,79 (m, 2H), 1,75-1,61 (m, 2H).
Preparacion del Compuesto 176;
Se anadio NHMe2 en agua (30%, 50,0 ml) a una solucion del compuesto 175 (5,00 g, 12,9 mmol, bruto) en THF (10 ml) y a continuacion se agito a ta en un tubo cerrado hermeticamente durante 3 h. Despues de que el disolvente se retirara; el residuo se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice) para suministrar el compuesto 176 (400 mg, 13%) como un solido pegajoso amarillo. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8 8,15 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,48 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,30 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,70-1,61 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 39;
Una suspension del compuesto 176 (400 mg, 1,62 mmol) y Pd al 10%/C (50 mg) en EtOH (50 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito a temperatura ambiente bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 39 (300 mg, 84%) como un solido pegajoso pardo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 6,91 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 6,65 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 2,47 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,30 (dd, J = 8,4, 6,5 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,60-1,52 (m, 2H), 1,51-1,41 (m, 2H), 1,38-1,27 (m, 4H).
5
10
15
20
25
30
imagen60
.OTos
NH3 7 N enMeOH
NaCNBHj, AcOH, MeOH
165Pll
azucar
'azucar
'azucar
Pd/C, H, EtOH/AcOH
azucar
azucar
'azucar
■2AcOH
Preparacion del Compuesto 177;
Una solution del compuesto 175 (6,00 g, 16,0 mmol) en NH3 7 N en metanol (150 ml) se calento a 30°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 5 h. La temperatura se elevo hasta 40°C y se agito durante 16 h y a continuation la temperatura se elevo de nuevo hasta 60°C y se agito durante 4 h. Despues de que el disolvente se retirara; el residuo se repartio entre CH2Cl2 (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vacfo. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Ch/MeOH 9:1) para suministrar el compuesto 177 (1,48 g, 43%) como un aceite amarillo. 1H NMR (400 MHz, CDCh): 5 8,16 (d, J =
8,4 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,61 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,08-2,05 (m, 2H), 1,65-1,53 (m, 4H).
Preparacion de los Compuestos 178 y 179;
Se anadio AcOH (0,6 ml, 9,49 mmol) a una solucion del compuesto 177 (1,38 g, 6,33 mmol) y el triol 165 (2,03 g, 7,59 mmol) en MeOH (10 ml) y la mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues de que se anadiera NaCNBH3 (800 mg, 12,7 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 165 (2,55 g, 9,49 mmol), AcOH (0,80 ml, 12,7 mmol) y NaCNBH (1,19 g, 18,9 mmol) adicionales y la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 165 (2,55 g, 9,49 mmol), AcOH (0,80 ml, 12,7 mmol) y NaCNBH3 (1,19 g, 18,9 mmol) adicionales y la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre CH2Cl2 (10 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Ch (2 * 10 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vacfo. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de silice, CH2Ch/MeOH 9:1, CHCh/MeOH/N^OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 179 (2,28 g, 51%) como un solido blancuzco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 5 8,14 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,47-7,44 (m, 4H), 7,34-7,30 (m, 6H), 5,48 (s, 2H), 4,24-4,19 (m, 2H), 3,99-3,94 (m, 4H), 3,86-3,84 (m, 2H), 3,73-3,69 (m, 2H), 3,57 (t, J = 10,8 Hz, 4H), 3,35-3,25 (m, 4H), 2,33 (d, J = 6,9 Hz, 2H),, 1,61-1,51 (m, 4H).
Asimismo, una mezcla de 178/179 (900 mg) se aislo y se uso directamente para la siguiente etapa (SG-GHC-G- 106).
Una suspension del compuesto 179 (2,26 g, 3,11 mmol) y Pd al 10%/C (100 mg) en una mezcla de EtOH (50 ml) y AcOH (10 ml) se desgasifico con argon durante 10 min y a continuacion se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con 5 MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 44 (1,90 g, 80%) como un solido pardo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,46-7,44 (m, 4H), 7,33-7,31 (m, 6H), 6,89 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,65 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,51 (s, 2H), 4,264,14 (m, 2H), 3,93-3,90 (m, 2H), 3,76-3,73 (m, 4H), 3,63-3,58 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 2H), 3,10-3,00 (m, 2H), 2,41 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,47-1,45 (m, 4H), 1,16-1,12 (m, 4H).
Preparacion del producto intermedio 49
10 Esquema 33
imagen61
Preparacion del Compuesto 180;
Una solucion de 178 (900 mg, mezcla, aprox. 2,0 mmol) en una mezcla de MeOH (20 ml) y agua (10 ml) y se cargo con NaHCO3 (672 mg, 4,0 mmol) a 0°C y se agito durante 10 min. Se anadio (Boc)2O (524 mg, 2,40 mmol) y la 15 mezcla de reaccion se agito durante 1 h a la misma temperatura, se llevo hasta temperatura ambiente y se agito durante otras 4 h. La mezcla se concentro, el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml) y la solucion se lavo con agua (100 ml) y salmuera (50 ml). La capa organica se seco sobre Na2SO4, se filtro, se concentro y el residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH 8:2) para suministrar el compuesto 180 (780 mg, 64%) como un solido blancuzco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,16 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 20 7,55 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,50-7,47 (m, 2H), 7,34-7,30 (m, 3H), 5,53 (s, 1H), 4,25-4,20 (m, 1H), 4,10 (br s, 1H), 3,94
3,91 (m, 1H), 3,80-3,48 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 3H), 2,46 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 1,70-1,49 (m, 4H), 1,43 (s, 9H).
Preparacion del Compuesto 49;
Una suspension del compuesto 180 (780 mg, 1,36 mmol) y Pd al 10%/C (50 mg) en una mezcla de EtOH (10 ml) y AcOH (2,0 ml) se desgasifico al burbujear con argon usando una jeringa durante 10 min y a continuacion se agito a 25 ta bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 4 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se neutralizo con Na2CO3, se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 49 (625 g, 84%) como un solido blanco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 7,50-7,46 (m, 2H), 7,32-7,30 (m, 3H), 6,90 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,66 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,53 (s, 1H), 4,25-4,20 (m, 1H), 4,04 (br s, 1H), 3,94-3,89 (m, 1H), 3,77-3,43 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 3H), 2,45 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,52-1,47 (m, 4H), 1,42 (s, 9H), 1,27-1,24 (m, 4H). 30
5
10
15
20
25
30
imagen62
9-BBN, PdCl2(PPh3)2 NaOH ac 1 N~
azucar
1. NaCNBHj, AcOH, MeOH
Pd/C, H- EtOH
azucar
azucar
Preparacion del Compuesto 182;
Se anadio 9-BBN (0,5 M en THF, 80 ml, 40,0 mmol) bajo argon a una solucion del compuesto 181 (1,60 g, 16,00 mmol) en THF anhidro (40 ml). Despues de que la mezcla de reaccion se agitara durante 2 h a temperatura ambiente, se anadieron el compuesto 172 (3,17 g, 12,8 mmol), Pd(PPh3)2Ch (561 mg, 0,80 mmol) y NaOH ac 1 N (24 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito durante 1 h adicional. Despues de que se retirara el disolvente; el residuo se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatografia en columna (gel de sflice, hexanos/EtOAc 4:1) para suministrar el compuesto 182 (1,20 g, 34%) como un solido pardo. 1H nMr (400 MHz, CDCl3): 5 8,13 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 3,64 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,71 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,73-1,46 (m, 4H), 1,43-1,31 (m, 4H).
Preparacion del Compuesto 183
Se anadio Et3N (7,32 ml, 53,8 mmol) bajo argon a 0°C a una solucion del compuesto 182 (1,20 g, 5,38 mmol) en CH2Cl2 anhidro (20 ml). Despues de que la mezcla de reaccion se agitara durante 5 min a la misma temperatura, se anadio cloruro de mesilo (0,62 ml, 8,07 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agito durante 2 h adicionales a ta. Despues de que el disolvente se retirara; el residuo se repartio entre CH2Cl2 (50 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2sO4 y se concentro bajo vado. El producto en bruto 183 (3,00 g, bruto) se uso directamente para la siguiente etapa.
Preparacion del Compuesto 184;
Una solucion del compuesto 183 (3,00 g, 5,38 mmol, bruto) en NH3 7 N en metanol (30,0 ml) se calento a 60°C en un tubo cerrado hermeticamente durante 2 h. Despues de que el disolvente se retirara; el residuo se repartio entre CH2Q2 (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 100 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El producto en bruto se purifico mediante cromatografia en columna (gel de sflice) para suministrar el compuesto 184 (390 mg, 33%, a lo largo de dos etapas) como un aceite amarillo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,14 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 2,75 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,72-1,63 (m, 2H), 1,53-1,46 (m, 2H), 1,42-1,35 (m, 4H).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Se anadio AcOH (1,16 ml, 27,8 mmol) a una solucion del compuesto 184 (620 mg, 2,79 mmol) y el triol 165 (938 mg, 3,49 mmol) en MeOH (30 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 10 min. Despues de que se anadiera NaCNBH3 (526 mg, 8,37 mmol), la solucion se continuo agitando a temperatura ambiente durante 16 h. Se anadieron compuesto 165 (0,3 equiv), AcOH (10 equiv) y NaCNBH3 (1,0 equiv) adicionales a lo largo de 16 h. A continuacion, se anadieron hexanal 163 (0,96 ml, 8,37 mmol), AcOH (1,00 ml) y NaCNBH3 (526 mg, 8,37 mmol). La solucion se agito adicionalmente a temperatura ambiente durante 2 h. Despues de la retirada del disolvente, el residuo se neutralizo con NaHCO3 saturado y el residuo se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). La capa acuosa se separo y se extrajo con CH2Cl2 (2 * 100 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron bajo vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, CH2Cl2/MeOH 9:1, CHCl3/MeOH/NH4OH 80:18:2) para suministrar el compuesto 185 (950 g, 61 %) como un aceite blancuzco. 1H NMR (400 MHz, CDCh): 8 8,02 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,48-7,42 (m, 3H),7,37-7,34 (m, 2H),
7,31 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,54 (s, 1H), 4,46-4,40 (m, 1H), 4,30 (dd, J = 11,6, 6,6 Hz, 1H), 4,03 (t, J = 4,0 Hz, 1H), 3,97 (dd, J = 10,5, 5,4 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 9,4, 4,0 Hz, 1H), 3,65 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 3,11-3,00 (m, 4H), 2,69 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,00 (s, 1H), 1,70-1,55 (m, 6H), 1,37-1,30 (m, 4H), 1,29-1,20 (m, 8H), 0,87 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
Preparacion del Compuesto 54;
Una suspension del compuesto 185 (950 g, 1,70 mmol) y Pd al 10%/C (300 mg) en EtOH (100 ml) se desgasifico con argon durante 10 min y a continuacion se agito bajo atmosfera de hidrogeno (globo, 1 atm) durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celita y se lavo con MeOH. El filtrado se concentro a vacio para suministrar 54 (790 mg, 88%) como un aceite amarillo. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,51-7,44 (m, 2H), 7,35-7,29 (m, 3H), 6,90 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,54 (s, 1H), 4,24 (dd, J = 10,8, 5,4 Hz, 1H), 4,08-4,02 (m, 1H), 4,00-3,92 (m, 1H), 3,91 (dd, J = 5,6, 1,8 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 9,6, 1,8 Hz, 1H), 3,61 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,01 (dd, J = 13,7, 5,4 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 12,1, 8,1 Hz, 1H), 2,82-2,71 (m, 4H), 2,45 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,59-1,42 (m, 6H), 1,37-1,13 (m, 10H), 0,89 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
Se pueden usar varios ensayos para caracterizar los compuestos de la presente invencion. Se analizan posteriormente ensayos representativos.
Medida in vitro de la actividad y la reversibilidad del bloqueo de canales del sodio
Un ensayo usado para evaluar el mecanismo de accion y/o la potencia de los compuestos de la presente invencion implica la determinacion de la inhibicion por el farmaco luminal de corrientes de sodio epiteliales de las vfas respiratorias medida bajo corriente de cortocircuito (Isc) usando monocapas epiteliales de las vfas respiratorias montadas en camaras de Ussing. Celulas obtenidas de vfas respiratorias de ser humano, perro, oveja o roedor extirpadas recientemente se siembran sobre inserciones Snapwell™ porosas de 0,4 micras (CoStar), se cultivan en condiciones de interfase aire-lfquido (ALI) en medios hormonalmente definidos y se ensayan con respecto a la actividad de transporte de sodio (Isc) mientras se banan en Krebs-bicarbonato-Ringer (KBR) en camaras de Ussing. Todas las adiciones de farmaco de prueba son al bano luminal con protocolos de adicion de dosis semilogantmica (de 1 x 10-11 M a 3 x 10-5 M) y se registra el cambio acumulativo en Isc (inhibicion). Todos los farmacos se preparan en dimetilsulfoxido como soluciones de reserva a una concentracion de 1 x 10-2 M y se almacenan a -20°C. Tfpicamente, se prueban ocho preparaciones en paralelo; dos preparaciones por prueba incorporan amilorida y/o benzamilo como controles positivos. Despues de que se administrara la concentracion maxima (5 x 10-5 M), el bano luminal se intercambia tres veces con solucion de KBR reciente libre de farmaco y la Isc resultante se mide despues de cada lavado a lo largo de aproximadamente 5 minutos. La reversibilidad se define como el porcentaje de retorno hasta el valor de referencia para la corriente de sodio despues del tercer lavado. Todos los datos de los pinzamientos de voltaje se recogen a traves de una interfaz informatica y se analizan fuera de lmea.
Las relaciones dosis-efecto para todos los compuestos se consideran y se analizan mediante el programa Prism 3.0. Los valores de IC50, las concentraciones eficaces maximas y la reversibilidad se calculan y se comparan con la amilorida y el benzamilo como controles positivos. La potencia de la actividad de bloqueo de canales del sodio de compuestos representativos con relacion a la amilorida en celulas recientemente extirpadas de vfas respiratorias caninas se muestran en la Tabla 1.
5
10
15
20
25
30
Tabla 1. Inhibicion de la corriente de cortocircuito por el Compuesto (la) en celulas epiteliales bronquiales caninas (IC50 nM
Compuesto Numero
Potencia del Bloqueo del Canal del Sodio IC50 nM
Amilorida
773
23
20,7
38
25,4
28
7,4
33
21,8
16
79,6
103
17,9
99
7,6
94
21,2
80
19,4
135
5,2
131
6,0
123
2,3
127
8,6
139
73,7
43
50,1
53
15,5
58
10,6
48
47
Ensayo 2. Estudios de depuracion mucociliar (MCC) en ovejas
El modelo animal que se ha usado mas a menudo para medir cambios en la MCC es el modelo en ovejas. El efecto de los compuestos para intensificar la depuracion mucociliar (MCC) se puede medir usando un modelo in vivo descrito por Sabater y cols., Journal of Applied Physiology, 1999, pp. 2191-2196, incorporado en la presente mediante referencia.
En estos estudios, ovejas adultas se retuvieron y se intubaron nasalmente con un tubo endotraqueal. Se administran artfculos de prueba aerosolizados a lo largo de 10-15 minutos a las ovejas. A continuacion, se administro coloide de 99mTc-azufre radiomarcado (TSC, 3,1 mg/ml; que contema aproximadamente 20 mCi) en un momento espedfico cuatro u ocho horas despues del artfculo de prueba. El aerosol radiomarcado se administro a traves del tubo endotraqueal durante aproximadamente 5 minutos. A continuacion, las ovejas se extubaron y los recuentos radiactivos totales en el pulmon se midieron cada 5 minutos durante un penodo de observacion de 1 hora. La velocidad de depuracion de radiomarcador del pulmon es representativa de la velocidad de MCC en el animal. La ventaja de este sistema es que simula estrechamente el ambiente del pulmon humano. El modelo tambien permite la recogida de informacion farmacocinetica/farmacodinamica simultanea a traves del muestreo de plasma y orina a lo largo del penodo de prueba. Tambien hay varias tecnicas para medir las concentraciones de farmaco sobre la superficie de las vfas respiratorias durante las medidas de la MCC. Estas incluyen la recogida de condensados respiratorios exhalados o un metodo con papel de filtro para obtener ASL a traves de broncoscopia.
El modelo ovino descrito anteriormente se uso para evaluar los efectos in vivo (eficacia/durabilidad) de un agente de prueba aportador en aerosol sobre la MCC. Se probaron tratamientos que consistfan bien en 4 ml de agente de prueba o bien agente de prueba en combinacion con HS. Para determinar si combinar HS con agente de prueba intensificaba la MCC, se administro HS inmediatamente despues de la administracion del agente de prueba. Se aerosolizaron las soluciones de prueba usando un nebulizador Raindrop a un caudal de ocho litros por minuto y se conectaron a un sistema dosimetrico que consistfa en una valvula de solenoide y una fuente de aire comprimido [0,14 MPa (20 psi)]. Se estima que la dosis depositada de farmaco en los pulmones de las ovejas despues de la
administracion de aerosol usando el nebulizador Raindrop es 8-15% de la dosis. Usando un nebulizador Raindrop, se administro TSC radiomarcado a lo largo de aproximadamente 3 minutos bien 4 o bien 8 horas despues del tratamiento con farmaco para evaluar la eficacia/durabilidad. Los recuentos radiactivos se midieron en una region central del pulmon derecho a intervalos de 5 min durante una hora con una gammacamara. Se utilizaron tres 5 metodos de analisis, 1) velocidad inicial de depuracion (pendiente) a lo largo de los primeros 30 min ajustada usando regresion lineal 2) area bajo la curva para % de depuracion a lo largo de una hora y 3) la depuracion maxima obtenida en una hora.
El efecto del Compuesto 33 a 0,24 nmol/kg (3 jM) se midio y se comparo con el vehfculo (4 ml de H2O esteril) sobre 10 MCC ovina cuatro horas despues de la dosificacion (Figura 1). Los analisis de los efectos se muestran en la Tabla A. El Compuesto 33 intensificaba la MCC en comparacion con el control de vehnculo.
Tabla A. MCC en Ovejas 4 horas despues de la dosificacion de Compuesto 33 o vehfculo
Dosis de Compuesto 33
Pendiente Inicial (4,0-4,5 h) AUC (% Cl - h) Depuracion Maxima
0,24 nmol/kg (3 jM)
37,5* (4) 17,4* (4) 30,0* (4)
Vehfculo (H2O) 4 ml
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5 (8) 12,2±2,9 (8)
15
Las Tablas By C junto con las Figuras 2 y 3 demuestran que otros compuestos de esta invencion intensifican de forma similar la MCC en comparacion con el vehfculo (veanse, p. ej., los Compuestos 123 y 48)
Tabla B. MCC en Ovejas 4 horas despues de la dosificacion de Compuesto 123 o vehfculo
20
Dosis de Compuesto 123
Pendiente Inicial (4,0-4,5 h) AUC (% Cl - h) Depuracion Maxima
0,24 nmol/kg (3 jM)
29,2* (2) 14,4* (2) 22,8* (2)
Vehfculo (H2O) 4 ml
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5 (8) 12,2±2,9 (8)
Tabla C. MCC en Ovejas 4 horas despues de la dosificacion de Compuesto 48 o vehfculo
Dosis de Compuesto 48
Pendiente Inicial (4,0-4,5 h) AUC (% Cl - h) Depuracion Maxima
0,24 nmol/kg (3 jM)
29,8* (2) 15,4* (2) 26,7* (2)
Vehfculo (H2O) 4 ml
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5 (8) 12,2±2,9 (8)
25 Para determinar si los compuestos de esta invencion han intensificado la duracion de la accion, se probaron 8 horas despues de la dosificacion. Las Tablas D y E junto con las Figuras 4 y 5 muestran claramente una accion de duracion intensificada de la MCC frente al vehfculo para los Compuestos 33 y 152.
Tabla D. MCC en ovejas 8 h despues de la dosificacion de Compuesto 33 o vehfculo 30
Dosis de Compuesto 33
Pendiente Inicial (8,0-8,5 h) AUC (% Cl - h) Depuracion Maxima
0,24 nmol/kg (3 jM)
25,8* (4) 11,7* (4) 21,4*(4)
Vehfculo (H2O) 4 ml
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5 (8) 12,2±2,9 (8)
Tabla E. MCC en ovejas 8 h despues de la dosificacion de Compuesto 152 o vehfculo
Dosis de Compuesto 152
Pendiente Inicial (8,0-8,5 h) AUC (% Cl - h) Depuracion Maxima
0,24 nmol/kg (3 jM)
37,5* (4) 17,4* (4) 30,0* (4)
Vehfculo (H2O) 4 ml
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5 (8) 12,2±2,9 (8)
35 Para determinar si la HS incrementa el efecto sobre la MCC del Compuesto 33, se dosifico 7% de HS inmediatamente despues de 0,24 nmol/kg del Compuesto 33 y la MCC se evaluo ocho horas despues de la dosificacion combinada (Figura 6). La HS incrementaba el efecto del Compuesto 33 sobre la MCC segun se muestra en la Figura 6.
Ensayo 3. Depuracion de farmaco de Kquido superficial de las vias respiratorias (ASL) y metabolismo epitelial de las v^as respiratorias humanas
La desaparicion de 33 de la superficie apical y el metabolismo epitelial de las vias respiratorias se evaluaron en celulas epiteliales bronquiales humanas (HBE) (Tabla 3). En estos experimentos, se anadieron 25 ^l de una solucion 5 25 ^M de bloqueante ENaC a la superficie apical de celulas HBE desarrolladas en una interfase aire/Kquido y se
midio la concentration de farmaco y metabolito en el compartimento apical y basolateral a lo largo de 2 h mediante UPLC.
Tabla G. Desaparicion apical y metabolismo del Compuesto 33
Compuesto
% de Masa de Farmaco Inicial sobre la Cara Apical (Original y metabolito, 2 h) % de Masa Apical como Metabolitos (2 h) % de Masa Apical sobre la Cara Basolateral (2 h) % sobre la Cara Basolateral como Metabolitos (2 h)
33
44,8±18% 4% 1,1 ±0,45% 32%
Los valores representan la media ± DE
Ejemplo comparativos
Los presentes compuestos de Formula (I) son mas potentes y/o se absorben menos rapidamente de las superficies mucosas, especialmente las superficies de las vias respiratorias, en comparacion con bloqueantes de canales del 15 sodio conocidos, tales como amilorida y compuestos de tercera generation tales como el Ejemplo comparativo 1 descrito posteriormente. Por lo tanto, los compuestos de Formula (I) tienen una semivida mas prolongada sobre las superficies mucosas en comparacion con estos compuestos conocidos como se evidencia por los datos mostrados en la Tabla G. La desaparicion del Compuesto 33 de la superficie apical y el metabolismo epitelial de las vias respiratorias se evaluaron en HBE y se compararon con el Ejemplo comparativo 1 (Tabla H). En estos experimentos, 20 se anadieron 25 ^l de una solucion 25 ^M de bloqueante ENaC a la superficie apical de celulas HBE que cretian en una interfase aire/lfquido y la concentracion de farmaco en el compartimento apical y basolateral se midio a lo largo de 2 h mediante UPLC. Despues de 2 h de incubation de los compuestos de la presente invention sobre la superficie apical (37°C), el Compuesto 33 estaba en gran parte sin metabolizar sobre la cara apical. A la inversa, la mayor parte del Ejemplo comparativo 1 se eliminaba de la cara apical con 83% metabolizado hasta el acido 25 carboxflico menos activo, acido (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-cloropiracino-2-
carbonil)guanidino)butil)fenoxi)propanoico, estructura siguiente.
imagen63
30 Tabla H. Desaparicion apical y metabolismo del Compuesto 33 frente al Ejemplo comparativo 1 en HBE
Compuesto
% de Masa de Farmaco Inicial sobre la Cara Apical (Original y metabolito, 2 h) % de Masa Apical como Metabolitos (2 h) % de Masa Apical sobre la Cara Basolateral (2 h) % sobre la Cara Basolateral como Metabolitos (2 h)
33
44,8±18% 4% 1,1±0,45% 32%
Ejemplo comparativo 1
41,6±7,6% (8% del original) 83,0±3,5% 8,3±0,2 (1% del original) 94,7±1,0%
Los valores representan la media ± DE
El Ejemplo comparativo 1 se reivindica, se describe o esta dentro de las divulgaciones del documento WO 35 2003/070182 (Patentes de EE. UU. N°. 6.858.615, 7.186.833, 7.189.719, 7.192.960 y 7.332.496), como bloqueante
de canales del sodio que tiene propiedades medicinales utiles y se puede preparar mediante metodos descritos en la presente y otros conocidos en la especialidad.
5
10
15
20
25
30
35
40
imagen64
(S)-3,5-diamino-6-cloro-A/-(A/-(4-(4-(2,3-diamino-3-oxopropoxi)fenil)butil)carbamimidoil)piracino-2-carboxamida
El compuesto del Ejemplo comparativo 1 se puede observar en la pagina 15 del documento US 2005/0080093 y como el Compuesto 2 en la pagina 90 del documento WO 2008/031048 y como Compuesto 2 en las paginas 42-43 del documento WO 2008/031028. A fin de tener una actividad util en el tratamiento de la fibrosis qmstica y la C.O.P.D, un compuesto debe tener propiedades que provoquen una intensification de la depuration mucociliar (MCC) a dosis que no eleven en potasio plasmatico que conducirian finalmente a hipercalemia, una afeccion grave y peligrosa, con una dosificacion multiple. Por lo tanto, se debe evitar esta clase de compuestos, que se sabe que elevan el potasio plasmatico si son excretados significativamente por el rinon. A fin de evaluar este potencial, es beneficioso tener actividad de MCC in vivo y no provocar la elevation del potasio plasmatico a la dosis util. Un modelo para evaluar esto es el modelo de MCC ovina descrito posteriormente.
Como se puede observar a partir de la Tabla I y la Figura 7, la ED50 para el Ejemplo comparativo 1 en el modelo de MCC ovina es aproximadamente 240 nmol/kg (3 mM) usando tres medidas diferentes (pendiente, AUC y depuracion maxima). A esta dosis, que seria una dosis clmicamente activa, el Ejemplo comparativo 1 provoca un aumento en el potasio plasmatico (Figura 8) que al repetir la dosificacion conducira a hipercalemia. Asi, el Ejemplo comparativo I es inaceptable para uso humano mientras que el Compuesto (la) produce una MCC segura y eficaz con una relation de beneficio a riesgo mayor que 1.000 en este modelo.
Tabla I. MCC en ovejas 4 horas despues de la dosificacion de vehmulo, Ejemplo comparativo 1 o Compuesto 33
Dosis
Pendiente Inicial (4,0-4,5 h) AUC (% CI x h) Depuracion Maxima
Ejemplo comparativo 1 240 nmol/kg (3 mM)
32,2±7,3* (6) 14,1 ±2,2* (6) 22,9±2,1* (6)
Ejemplo comparativo 1 24 nmol/kg (300 pM)
14,5±1,3 (3) 6,9±1,0 (3) 14,6±0,9 (3)
Compuesto 33 0,240 nmol/kg (30 pM)
37,5* (4) 17,4* (4) 30,0* (4)
Vehmulo H2O (4 ml)
17,2±6,8 (8) 7,3±1,5(8) 12,2±2,9 (8)
La Figura 1 representa en forma grafica el porcentaje de depuracion de modo a lo largo del tiempo por el Compuesto 33 y el Ejemplo comparativo 1, segun se describe en el modelo de MCC anterior. Un porcentaje de depuracion de moco aun mayor era proporcionado por el Compuesto 33 a una dosis 1.000 menor que la observada con el Ejemplo comparativo 1. Asi, el Compuesto 33 proporcionaba un efecto maximo en un intervalo de dosificacion clmicamente pertinente libre de elevaciones de potasio.
La Figura 10 ilustra el incremento significativo en los niveles de potasio plasmatico con una dosis eficaz observada en el plasma de las ovejas que reciben el Ejemplo comparativo 1 en el estudio de MCC. El Compuesto 33 es mas de
1.000 veces mas potente en MCC ovina que el Ejemplo comparativo 1 sin elevacion del K plasmatico en dosis tan altas como 24 nmol/kg (1.000 veces la dosis ED50), mientras que el Ejemplo comparativo 1 tiene elevaciones de K plasmatico con la dosis ED50 aproximada de 3 mM (Figuras 7 y 8). Esto demuestra de nuevo la ventaja de potencia y seguridad unica e inesperada del Compuesto 33 como se observa en la Tabla J con un mdice terapeutico mas de
1.000 veces mayor en seguridad renal que el Ejemplo comparativo 1.
Tabla J. Relacion terapeutica (Beneficio/Riesgo)
Dosis Submaxima Mayor de MCC Dosis Superior en Ovejas sin Elevacion de Potasio Plasmatico Relacion Terapeutica
Ejemplo comparativo 1
240 nmol/kg (3 mM) 24 nmol/kg (300 pM) 0,1
33
<0,24 nmol/kg (3 pM) 24 nmol/kg (300 pM) >100
Relacion
>1.000 1 >1.000
Otros compuestos de esta invention tiene ventajas de seguridad y eficacia similares sobre compuestos conocidos segun se ejemplifica en las Figuras 11, 12, 13 y 14.

Claims (3)

1. Un compuesto de la formula:
imagen1
5 en la que:
Ar se selecciona de:
imagen2
R1 se selecciona de hidrogeno, alquilo Ci-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de 10 carbono;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3;
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
15 2. Un compuesto segun la reivindicacion 1, que tiene la formula:
imagen3
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
3. Un compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
imagen4
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
5 4. Un compuesto segun la reivindicacion 1 de Formula (II):
imagen5
en la que:
n es un numero entero seleccionado de 1,2, 3, 4, 5 o 6;
10 R1 se selecciona de hidrogeno, alquilo C1-C8 y un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de
carbono;
R2 es hidrogeno o un grupo alquilo polihidroxilado que tiene de 3 a 8 atomos de carbono;
R3 y R4 son cada uno, independientemente, hidrogeno o alquilo C1-C3;
o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
15
5. Un compuesto segun la reivindicacion 4, seleccionado del grupo de:
imagen6
ES13814392.0T 2012-12-17 2013-12-13 Derivados de cloropiracinocarboxamida útiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratación mucosa insuficiente Active ES2619954T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261738248P 2012-12-17 2012-12-17
US201261738248P 2012-12-17
PCT/US2013/075108 WO2014099676A1 (en) 2012-12-17 2013-12-13 Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2619954T3 true ES2619954T3 (es) 2017-06-27

Family

ID=49883318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES13814392.0T Active ES2619954T3 (es) 2012-12-17 2013-12-13 Derivados de cloropiracinocarboxamida útiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratación mucosa insuficiente

Country Status (33)

Country Link
US (3) US9593084B2 (es)
EP (2) EP3150585A1 (es)
JP (2) JP6392242B2 (es)
KR (1) KR102258469B1 (es)
CN (2) CN108484513A (es)
AP (1) AP2015008556A0 (es)
AU (2) AU2013363218B2 (es)
BR (1) BR112015014349A2 (es)
CA (1) CA2895512C (es)
CL (1) CL2015001696A1 (es)
CY (1) CY1118678T1 (es)
DK (1) DK2931713T3 (es)
EC (1) ECSP15025947A (es)
ES (1) ES2619954T3 (es)
GE (2) GEP20186903B (es)
HR (1) HRP20170060T1 (es)
HU (1) HUE032891T2 (es)
IL (2) IL239452B (es)
LT (1) LT2931713T (es)
MX (1) MX379300B (es)
PE (1) PE20151054A1 (es)
PH (1) PH12015501363B1 (es)
PL (1) PL2931713T3 (es)
PT (1) PT2931713T (es)
RS (1) RS55618B1 (es)
RU (1) RU2015129065A (es)
SA (1) SA515360611B1 (es)
SG (2) SG10201708931XA (es)
SI (1) SI2931713T1 (es)
SM (2) SMT201700107T1 (es)
UA (1) UA120343C2 (es)
WO (1) WO2014099676A1 (es)
ZA (1) ZA201504559B (es)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6858615B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenyl guanidine sodium channel blockers
AR086745A1 (es) 2011-06-27 2014-01-22 Parion Sciences Inc 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-(4-(2-(hexil(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil)carbamimidoil)pirazina-2-carboxamida
HUE032851T2 (en) 2011-06-27 2017-11-28 Parion Sciences Inc A chemically and metabolically stable dipeptide having strong sodium channel blocking activity
MX2014014648A (es) 2012-05-29 2015-09-04 Parion Sciences Inc Aminoamidas tipo dendrimero que poseen actividad bloqueadora del canal de sodio para el tratamiento de ojo reseco y otras enfermedades mucosas.
RU2018138195A (ru) 2012-12-17 2018-12-18 Пэрион Сайенсиз, Инк. Соединения 3,5-диамино-6-хлор-n-(n-(4- фенилбутил)карбамимидоил)пиразин-2-карбоксамида
SG10201708931XA (en) 2012-12-17 2017-12-28 Parion Sciences Inc Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration
SG11201601291QA (en) 2013-08-23 2016-03-30 Parion Sciences Inc Dithiol mucolytic agents
US9102633B2 (en) 2013-12-13 2015-08-11 Parion Sciences, Inc. Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
UY36034A (es) 2014-03-18 2015-09-30 Astrazeneca Ab Derivados de 3,5-diamino-6-cloro-pirazina-2-carboxamida y sales farmaceuticamente aceptables de estos
WO2015182682A1 (ja) 2014-05-29 2015-12-03 塩野義製薬株式会社 アルキニルケトン誘導体の製造方法
US20150376145A1 (en) 2014-06-30 2015-12-31 Parion Sciences, Inc. Stable sodium channel blockers
CN104402791B (zh) * 2014-12-15 2017-02-01 河南师范大学 一种奈拉西坦的制备方法
KR20170108088A (ko) 2015-01-30 2017-09-26 패리온 사이언스 인코퍼레이티드 신규 모노티올 점액용해제
JP2018520986A (ja) 2015-04-30 2018-08-02 パリオン・サイエンシィズ・インコーポレーテッド ジチオール粘液溶解剤の新規なプロドラッグ
EP3455203B1 (en) * 2016-05-12 2021-09-22 Research Triangle Institute Vinylogous phenethylamines as neurotransmitter releasers
GB201610854D0 (en) 2016-06-21 2016-08-03 Entpr Therapeutics Ltd Compounds
GB201619694D0 (en) 2016-11-22 2017-01-04 Entpr Therapeutics Ltd Compounds
GB201717051D0 (en) * 2017-10-17 2017-11-29 Enterprise Therapeutics Ltd Compounds
GB201808093D0 (en) 2018-05-18 2018-07-04 Enterprise Therapeutics Ltd Compounds
EP3858328A1 (en) * 2020-01-31 2021-08-04 MetrioPharm AG Use of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione in the inhalatory treatment of inflammatory pulmonary diseases

Family Cites Families (413)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3268406A (en) 1961-10-12 1966-08-23 Merck & Co Inc Compositions and method of using (3-amino-pyrazinoyl) guanidines
US3316266A (en) 1964-03-31 1967-04-25 Merck & Co Inc 3-aminopyrazinoic acid derivatives and process for their preparation
BE639386A (es) 1962-10-30
NL6409716A (es) 1962-10-30 1965-10-01
NL6409714A (es) 1962-10-30 1965-10-01
DK109779C (da) 1962-10-30 1968-07-01 Merck & Co Inc Fremgangsmåde til fremstilling af 3-aminopyrazinamidoguanidinforbindelser eller syreadditionssalte heraf.
BE639393A (es) 1962-10-30
US3274191A (en) 1963-11-15 1966-09-20 Merck & Co Inc N-(3-aminopyrazinoyl) benzamidines and process for preparing
US3240780A (en) 1963-12-23 1966-03-15 Merck & Co Inc Amino-pyrazinoyl guanidines
DE1245967B (de) 1964-03-31 1967-08-03 Merck &. Co., Inc., Rahway, N.J. (V. St. A.) Verfahren zur Herstellung von S.S-Diamino-o-chlor-pyrazincarbonsäurealkylestern
NL6501301A (es) 1964-04-03 1965-10-04
US3249610A (en) 1964-09-08 1966-05-03 Merck & Co Inc Synthesis of 3-amino, 5-chloro, 6-substituted-pyrazinoates
DE1281818B (de) 1965-07-17 1968-10-31 Rheinische Kalksteinwerke Verfahren zum gleichzeitigen Mahlen mehrerer Rohstoffe unterschiedlicher Mahlbarkeit
US3318813A (en) 1965-08-16 1967-05-09 Dow Chemical Co Poly-alkylstyrene viscosity index improver
US3341540A (en) 1965-10-04 1967-09-12 Merck & Co Inc 3-amino-6-halopyrazinonitriles and their syntheses
US3274192A (en) 1965-10-04 1966-09-20 Merck & Co Inc Derivatives of pyrazine and a method for their preparation
US3305552A (en) 1965-11-22 1967-02-21 Merck & Co Inc 3-aminopyrazinoic acids and process for their preparation
US3361748A (en) 1965-11-22 1968-01-02 Merck & Co Inc Process for the preparation of pteridinones
US3361306A (en) 1966-03-31 1968-01-02 Merck & Co Inc Aerosol unit dispensing uniform amounts of a medically active ingredient
IL27897A (en) 1966-08-25 1972-02-29 Merck & Co Inc Preparation of pyrazinoalguanides and pyrazinoamidoguanidines
FR1525670A (fr) 1966-08-25 1968-05-17 Merck & Co Inc Procédé de fabrication de guanidines substituées
NL6707564A (es) 1966-08-25 1968-02-26
FR1525671A (fr) 1966-08-25 1968-05-17 Merck & Co Inc Procédé de préparation de (3, 5 - diamino - 6 - halogéno - pyrazinoyl) - guanidines et de (3, 5 - diamino - 6 - halogéno -pyrazinamido) guanidines
US3472848A (en) 1966-11-17 1969-10-14 Merck & Co Inc 3-hydroxy and 3-mercapto-pyrazinoyl-guanidines,corresponding ethers and thioethers and processes for their preparation
US3660400A (en) 1966-11-17 1972-05-02 Merck & Co Inc Lower alkyl 3-hydroxy and 3-mercaptopyrazinoates
US3527758A (en) 1967-04-13 1970-09-08 Merck & Co Inc Process for the preparation of pyrazinoylguanidines from a pyrazinoic azide and a guanidine
US3507865A (en) 1967-04-27 1970-04-21 Merck & Co Inc 3-hydroxy- and 3-mercaptopyrazinamidoguanidines the corresponding ethers and thioethers and processes for their preparation
US3507866A (en) 1967-08-08 1970-04-21 Merck & Co Inc 1h - imidazo(4,5-b)pyrazin - 2 - one and processes for their preparation
US3487082A (en) 1967-09-28 1969-12-30 Merck & Co Inc 2,4 - diamino - 6 - halopteridines and processes for their preparation
US3503973A (en) 1967-11-07 1970-03-31 Merck & Co Inc Process for preparation of pyrazinoylguanidines
US3515723A (en) 1967-11-14 1970-06-02 Merck & Co Inc 2 - (5 - amino - 1h - 1,2,4 - triazol - 3 - yl)- 3-aminopyrazines and processes for their preparation
US3531484A (en) 1968-02-14 1970-09-29 Merck & Co Inc 1-(3-aminopyrazinoyl)-4,5,5-trisubstituted biguanide products
US3461123A (en) 1968-04-12 1969-08-12 Merck & Co Inc 1h-imidazo(4,5-b)pyrazin-2-ones and processes for their preparation
US3506662A (en) 1968-04-30 1970-04-14 Merck & Co Inc Process for preparation of pyrazinoyland pyrazinamidoguanidines
US3625950A (en) 1968-07-03 1971-12-07 Merck & Co Inc Certain halophenoxy alkanamides, hydrazides and derivatives thereof
US3575975A (en) 1968-07-25 1971-04-20 Merck & Co Inc Process for the preparation of 3-aminopyrazinoylureas
US3539569A (en) 1968-08-21 1970-11-10 Merck & Co Inc Preparation of pyrazinoylguanidines from pyrazinoylureas
US3544571A (en) 1968-09-04 1970-12-01 Merck & Co Inc Process for making pyrazinoylthiourea compounds
US3555023A (en) 1968-11-13 1971-01-12 Merck & Co Inc 1-(3 - aminopyrazinoyl) - 3 - substituted-3-thioisosemicarbazides and method for preparation
US3555024A (en) 1968-11-13 1971-01-12 Merck & Co Inc 1-(3-aminopyrazinoyl)semicarbazides,1-(3-aminopyrazinoyl) - thiosemicarbazides,and method for their preparation
US3668241A (en) 1968-11-25 1972-06-06 Merck & Co Inc Substituted 1-oxoinden-5-yloxy alkanoic acids
US3586688A (en) 1968-12-18 1971-06-22 Merck & Co Inc Certain aminopyridinecarbonyl guanidines
US3573305A (en) 1968-12-30 1971-03-30 Merck & Co Inc (3-amino-pyrazinoyl)sulfamides and their preparation
US3577418A (en) 1969-02-12 1971-05-04 Merck & Co Inc Pyrazinamide derivatives and processes for their preparation
US3565070A (en) 1969-02-28 1971-02-23 Riker Laboratories Inc Inhalation actuable aerosol dispenser
US3573306A (en) 1969-03-05 1971-03-30 Merck & Co Inc Process for preparation of n-substituted 3,5-diamino-6-halopyrazinamides
US3544568A (en) 1969-03-18 1970-12-01 Merck & Co Inc 3-amino-5,6-substituted pyrazinamides
US3660397A (en) 1970-04-17 1972-05-02 Merck & Co Inc Imidazo(4 5-b)pyrazines
US3864401A (en) 1970-12-23 1975-02-04 Merck & Co Inc Substituted 2-aminomethyl-4,6-dihalophenols
US3794734A (en) 1971-03-03 1974-02-26 Merck & Co Inc Methods of treating edema and hypertension using certain 2-aminoethylphenols
US3935313A (en) 1971-03-29 1976-01-27 Jan Marcel Didier Aron-Samuel Pharmaceutical composition containing N-(3-diethyl-aminopropyl)-4-nitro-1-oxide-pyridine-2-carboxamide and process for the treatment of hypertension therewith
US3948895A (en) 1971-09-28 1976-04-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Synthesis of 3,5-diaminopyrazinoic acid from 3,5-diamino-2,6-dicyanopyrazine and intermediates
BE791201A (fr) 1971-11-12 1973-05-10 Merck & Co Inc Indanyloxytetrazoles
US3953476A (en) 1971-12-27 1976-04-27 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-sulfonylbenzoic acids
US3894085A (en) 1972-09-19 1975-07-08 Ciba Geigy Corp New 2-halo nitrones, their manufacture and their use for the manufacture of N-substituted araliphatic aldehyde-nitrones
US4085219A (en) 1972-10-13 1978-04-18 Merck & Co., Inc. 1-Oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkanoic acids
US3976686A (en) 1972-10-13 1976-08-24 Merck & Co., Inc. [1-Oxo-2,3-hydrocarbylene-5-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US3984465A (en) 1972-10-13 1976-10-05 Merck & Co., Inc. 1-Oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkanoic acids
US4081554A (en) 1972-10-13 1978-03-28 Merck & Co., Inc. 1-oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkano acids
US4091015A (en) 1972-10-27 1978-05-23 American Home Products Corporation 15-Substituted prostanoic acids
US4092356A (en) 1972-10-30 1978-05-30 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4066692A (en) 1972-10-30 1978-01-03 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4055597A (en) 1973-01-26 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 10-Aza-11,12-secoprostaglandins
US3987091A (en) 1973-04-12 1976-10-19 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4033996A (en) 1973-04-25 1977-07-05 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US4091107A (en) 1973-04-25 1978-05-23 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US3894065A (en) 1973-04-27 1975-07-08 Merck & Co Inc Aryl-oxo-alkanoic acids
US4177285A (en) 1973-10-11 1979-12-04 Merck & Co., Inc. [1-Oxo-2-thienyl-2-substituted-5-indanyloxy (or thio)]alkanoic acids and derivatives thereof
US4182764A (en) 1973-10-11 1980-01-08 Merck & Co., Inc. Tetrazole derivatives of [1-oxo-2-aryl or thienyl-2-substituted-5-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US3976681A (en) 1973-10-12 1976-08-24 Merck & Co., Inc. [1,3-Dioxo-2-substituted and 2,2-disubstituted- indanyloxy (or thio] alkanoic acids
US4012524A (en) 1973-10-12 1977-03-15 Merck & Co., Inc. [1-Hydroxy-5-indanyloxy (or thio)]-alkanoic acids
US4006180A (en) 1973-10-12 1977-02-01 Merck & Co., Inc. [1,3-Dihydroxy-2-substituted and 2,2-disubstituted-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US3929872A (en) 1973-10-12 1975-12-30 Merck & Co Inc Indanacetic acid compounds
US4003927A (en) 1973-10-12 1977-01-18 Merck & Co., Inc. (1-Oxo-7,8-disubstituted-1,2,3,4-tetrahydro-6-naphthyloxy)- and (3,4-disubstituted-5-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5H-benzocycloheptene-2-yloxy) acetic acids and derivatives
US3966966A (en) 1973-10-12 1976-06-29 Merck & Co., Inc. Pharmaceutical compositions and method of treatment employing 1,3-dioxo-2,2-disubstituted indanyloxy alkanoic acids
US3989749A (en) 1973-10-17 1976-11-02 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US3991087A (en) 1973-12-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 8-Halo-11,12-secoprostaglandins
US3979361A (en) 1974-02-20 1976-09-07 Merck & Co., Inc. 2-Aminomethyl-6-trihalo-methylphenols
US3914253A (en) 1974-03-04 1975-10-21 Merck & Co Inc 5-Oxo-6-substituted-cyclopent-{8 f{9 -indole-2-carboxylic acids
US3931239A (en) 1974-04-03 1976-01-06 Merck & Co., Inc. 6-Oxo-7-substituted-6H-indeno-[5,4-b]furan(and thiophene)-carboxylic acids
US3958004A (en) 1974-04-23 1976-05-18 Merck & Co., Inc. Phenoxyacetic acid derivatives as uricosuric agents
US3928624A (en) 1974-04-25 1975-12-23 Merck & Co Inc Phenol compounds in treating pain, fever and inflammation
US3956374A (en) 1974-05-03 1976-05-11 Merck & Co., Inc. Aryl-oxo-heptenoic acids
US3974212A (en) 1974-05-22 1976-08-10 Merck & Co., Inc. [1-Hydroximino-2,2-disubstituted-5-indanyloxy-(or thio)]alkanoic acids
AT351182B (de) 1974-06-25 1979-07-10 Merck & Co Inc Verfahren zur herstellung von neuen 9-thia-, 9-oxothia- und 9-dioxothia- 11,12-secoprosta- glandinen
PL98342B1 (pl) 1974-07-30 1978-04-29 Sposob wytwarzania kwasu 1-keto-2-arylo-/lub tienylo/-2-podstawionego-indanyloksy-/lub tio/-5-alkanokarboksylowego
US4020177A (en) 1974-08-30 1977-04-26 Merck & Co., Inc. Substituted phenoxy-tridecanoic acids
US4055596A (en) 1974-09-13 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 11,12-Seco-prostaglandins
US3991106A (en) 1974-09-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 16-Ethers of 8-aza-9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US3984552A (en) 1975-02-24 1976-10-05 Merck & Co., Inc. 6-Oxo-7-substituted and 7,7-disubstituted-6H-indeno-[5,4-b]furan (and thiophene) carboxylic acids
JPS51116341A (en) 1975-04-04 1976-10-13 Automob Antipollut & Saf Res Center Detection apparatus for oil pressure
US4018802A (en) 1975-04-09 1977-04-19 Merck & Co., Inc. 9-Thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins and processes
US4097504A (en) 1975-04-23 1978-06-27 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4092414A (en) 1975-04-25 1978-05-30 Merck & Co., Inc. 3,4-Dihydrospiro-2H-1,3-benzoxazines and their use in treating edema, abnormal electrolyte retention, and inflammation
US4059602A (en) 1975-06-06 1977-11-22 Merck & Co., Inc. 8-Methyl-, phenyl-, or substituted phenyl-11,12-secoprostaglandins
US4059601A (en) 1975-06-06 1977-11-22 Merck & Co., Inc. 8-Halo-11,12-secoprostaglandins
US4061643A (en) 1975-06-18 1977-12-06 Merck & Co., Inc. Certain 16-aryloxy-11,12-seco-prostaglandins
US4087542A (en) 1975-07-09 1978-05-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-acyl benzofuran-2-carboxylic acids
US4181727A (en) 1975-07-09 1980-01-01 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-acyl benzofuran-2-carboxylic acids
US4296122A (en) 1975-07-09 1981-10-20 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-(acyl)benzofuran-2-carboxylic acids
US4044153A (en) 1975-08-01 1977-08-23 Merck & Co., Inc. Antiinflammatory 2-aminomethyl-6-trihalomethylphenols
US4203988A (en) 1975-11-12 1980-05-20 Merck & Co., Inc. Pyridinyl ureas and pharmaceutical use
US4029816A (en) 1975-11-25 1977-06-14 Merck & Co., Inc. Substituted 2-aminomethyl-6-iodophenols
US4085211A (en) 1975-12-15 1978-04-18 Merck & Co., Inc. Pyrazinecarboxamides and processes for preparing same
US4070464A (en) 1976-02-19 1978-01-24 Merck & Co., Inc. Method of treating autoimmune diseases
US4085125A (en) 1976-03-22 1978-04-18 Merck & Co., Inc. 9-Thia-, 9-oxothia-, and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins and processes
US4128564A (en) 1976-03-22 1978-12-05 Merck & Co., Inc. 9-Thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US4181661A (en) 1976-05-03 1980-01-01 Merck & Co., Inc. Derivatives of 2-iminothiazolidines and thiazolines
US4029803A (en) 1976-05-03 1977-06-14 Merck & Co., Inc. Method of treatment with 2-iminothiazolidines and thiazolines
US4059587A (en) 1976-05-24 1977-11-22 Merck & Co., Inc. Certain thiazolidine compounds
US4022794A (en) 1976-05-24 1977-05-10 Merck & Co., Inc. Novel analogs of prostaglandins with 4-oxo-thiazolidinyl nucleus and method of preparation thereof
US4025625A (en) 1976-06-15 1977-05-24 Merck & Co., Inc. Imidazothiazines
NL7705652A (nl) 1976-06-15 1977-12-19 Merck & Co Inc 2-imino-3-aminothiazolidinen.
US4054652A (en) 1976-06-15 1977-10-18 Merck & Co., Inc. Dihydro- and tetrahydro- iminothiazines
US4087526A (en) 1976-07-23 1978-05-02 Merck & Co., Inc. (3-Amino-5-substituted-6-fluoropyrazinoyl or pyrazamido)-guanidines and their derivatives bearing substituents on the guanidino nitrogens
US4111877A (en) 1976-07-29 1978-09-05 Air Products & Chemicals, Inc. Allyl esters of n-alkyl-omega-(alkyleneureido) amic acids and their synthesis and use in aqueous emulsion polymer systems
US4067980A (en) 1976-08-16 1978-01-10 Merck & Co., Inc. Spirobenzoxazinium salts, method of use and compositions thereof as antihypertensive agents
US4085117A (en) 1976-10-18 1978-04-18 Merck & Co., Inc. 6,7-Disubstituted-5-(acyl)benzofuran-2-carboxylic acids
US4100294A (en) 1976-12-06 1978-07-11 Merck & Co., Inc. 5-(Hydroxy (substituted) methyl)-2,3-dihydrobenzo furan-2-carboxylic acid and its derivatives
US4150235A (en) 1976-12-17 1979-04-17 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4175203A (en) 1976-12-17 1979-11-20 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4105769A (en) 1977-01-24 1978-08-08 Merck & Co., Inc. Inhibition of indoleamine-N-methyl transferase by 2-iminopyridines
US4087435A (en) 1977-02-17 1978-05-02 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-dioxothiaprostanoic acids
US4208413A (en) 1977-03-04 1980-06-17 Merck & Co., Inc. N-Pyrazinecarbonyl-N'-alkoxycarbonyl and N',N"-bis(alkoxycarbonyl)guanidines and processes for preparing same
US4115573A (en) 1977-03-04 1978-09-19 Merck & Co., Inc. N-pyrazinecarbonyl-N'-substituted-sulfamoylguanidine and processes for preparing same
US4112236A (en) 1977-04-04 1978-09-05 Merck & Co., Inc. Interphenylene 8-aza-9-dioxothia-11,12-secoprostaglandins
US4108859A (en) 1977-06-06 1978-08-22 The Dow Chemical Company Microbicidal (pyridinylamino) alkyl guanidines
US4115402A (en) 1977-06-17 1978-09-19 Merck & Co., Inc. 2,3-Dichloro-4-[(substituted-sulfonyl)-phenoxy]-acetic acids
US4196292A (en) 1977-06-29 1980-04-01 Merck & Co., Inc. 6-Substituted amiloride derivatives
US4229456A (en) 1977-07-18 1980-10-21 Merck & Co., Inc. Substituted naphthyridinones and processes for their preparations
US4133885A (en) 1977-07-18 1979-01-09 Merck & Co., Inc. Substituted naphthyridinones
US4536507A (en) 1977-07-26 1985-08-20 Merck & Co., Inc. Prostaglandin antagonists
US4093728A (en) 1977-08-18 1978-06-06 E. R. Squibb & Sons, Inc. Triazoloisoindoles
US4140776A (en) 1977-09-16 1979-02-20 Merck & Co., Inc. N-pyrazinecarbonyl-N'-acylguanidines
US4130566A (en) 1977-10-27 1978-12-19 Sumitomo Chemical Company, Limited Process for producing 5-carboxy-2-acetylthiophene
US4127584A (en) 1977-11-11 1978-11-28 Merck & Co., Inc. 2,3-Substituted-1,2,5-thiadiazolium salt antimicrobials
US4292430A (en) 1977-11-23 1981-09-29 Merck & Co., Inc. 2,3-Substituted-1,2-isothiazolium salt antimicrobials
US4159279A (en) 1977-11-23 1979-06-26 Merck & Co., Inc. Nuclear substituted 2-hydroxyphenylmethanesulfamic acids
US4267341A (en) 1977-11-23 1981-05-12 Merck & Co., Inc. Process for preparing 2,3-substituted-1,2,-isothiazolium salt antimicrobials
US4166177A (en) 1977-12-27 1979-08-28 Merck & Co., Inc. Substituted 2,2-dioxo-1,2,3-benzoxathiazines
US4145551A (en) 1978-01-09 1979-03-20 Merck & Co., Inc. Pyrazine-2-carbonyloxyguanidines
US4401669A (en) 1978-01-27 1983-08-30 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-substituted-5-benzoyl benzofuran-2-carboxylic acids and their use in treating hypertension
US4189496A (en) 1978-02-16 1980-02-19 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-5-thienylmethyl and furylmethyl-6-substituted and 6,7-disubstituted-benzofuran-2-carboxylic acid
US4163781A (en) 1978-04-17 1979-08-07 Merck & Co., Inc. 3-Amino-N-[(phosphonoamino)iminomethyl]-6-halopyrazinecarboxamide compounds, compositions and methods of use
US4156005A (en) 1978-06-21 1979-05-22 Merck & Co., Inc. Derivatives of 1,2-benzisoxazoles
US4394515A (en) 1978-06-23 1983-07-19 Merck & Co., Inc. 10,11-Dihydro-11-oxodibenzo[b,f]thiepin compounds
US4263207A (en) 1978-08-01 1981-04-21 Merck & Co., Inc. 10,11-Dihydrodibenzo[b,f][1,4]thiazepine carboxylic acids esters and amides thereof
US4190655A (en) 1978-08-28 1980-02-26 Merck & Co., Inc. Amiloride citrate
US4226867A (en) 1978-10-06 1980-10-07 Merck & Co., Inc. 3,3-Substituted spiro-1,2,4-benzothiadiazines
US4178386A (en) 1978-10-11 1979-12-11 Merck & Co., Inc. Inhibitors of glycolic acid oxidase
US4187315A (en) 1978-10-11 1980-02-05 Merck & Co., Inc. N-alkyl(and cycloalkyl)oxamic acid and derivatives as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4207329A (en) 1978-10-11 1980-06-10 Merck & Co., Inc. Derivatives of glycolic and glyoxylic acid as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4390537A (en) 1978-11-16 1983-06-28 Merck & Co., Inc. 1-(Substituted-aminoalkoxyphenyl)-2-methylene-1-alkanones, compositions and use
US4342782A (en) 1978-11-16 1982-08-03 Merck & Co., Inc. 1-(Substituted-aminoalkoxyphenyl)-2-methylene-1-alkanones, compositions and use thereof
US4282365A (en) 1978-11-24 1981-08-04 Merck & Co., Inc. Dibenz[b,e]oxepin compounds
US4249021A (en) 1979-02-26 1981-02-03 Merck & Co., Inc. Indanacetic acid compounds
US4246406A (en) 1979-03-27 1981-01-20 Merck & Co., Inc. Heterocyclic substituted pyrazinoylguanidines
US4224447A (en) 1979-03-27 1980-09-23 Merck & Co., Inc. Novel pyrazinecarboxamides and processes for preparing same
US4221790A (en) 1979-04-16 1980-09-09 Merck & Co., Inc. Substituted 2,2-dioxo-1,2,3-benzoxathiazines
US4233452A (en) 1979-05-03 1980-11-11 Merck & Co., Inc. Derivatives of glycolic and glyoxylic acid as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4220654A (en) 1979-06-04 1980-09-02 Merck & Co., Inc. Cyclic imidazole cyanoguanidines
US4537902A (en) 1979-06-11 1985-08-27 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4256758A (en) 1979-06-11 1981-03-17 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4431660A (en) 1979-06-11 1984-02-14 Merck & Co., Inc. (4'-Biphenylyloxy and-thio-oxy)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones and a method of treating calcium oxalate renal lithiasis therewith
US4237130A (en) 1979-06-21 1980-12-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-(substituted sulfonyl)benzofuran-2-carboxylic acids
US4237144A (en) 1979-06-21 1980-12-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-2,6,7-trisubstituted-5-acylbenzofurans
US4291050A (en) 1979-06-21 1981-09-22 Merck & Co., Inc. 6,7-Disubstituted-2 or 2,2-substituted-5-substituted-1-indanones
JPS6034925B2 (ja) 1979-07-31 1985-08-12 帝人株式会社 持続性鼻腔用製剤およびその製造法
US4459422A (en) 1979-08-17 1984-07-10 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4567289A (en) 1979-08-17 1986-01-28 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4710513A (en) 1979-08-17 1987-12-01 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4375475A (en) 1979-08-17 1983-03-01 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4377588A (en) 1979-09-11 1983-03-22 Merck Sharp & Dohme (I.A.) Corp. 4-(Substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4298743A (en) 1979-09-11 1981-11-03 Merck & Co., Inc. 4-(Substituted phenyl thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones
US4296237A (en) 1979-09-11 1981-10-20 Merck & Co., Inc. 4-(Pyridyl, piperazinyl and thiazolyl substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones
US4379791A (en) 1979-09-11 1983-04-12 Merck & Co., Inc. 4-(Substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4317922A (en) 1979-10-19 1982-03-02 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids and their analogs, esters, salts and derivatives
US4356313A (en) 1979-10-19 1982-10-26 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acid esters and their analogs, the parent acids and their salts
US4337354A (en) 1979-10-19 1982-06-29 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids, their analogs, esters, salts, and derivatives
US4349561A (en) 1979-11-05 1982-09-14 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4342776A (en) 1979-11-05 1982-08-03 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4448786A (en) 1979-11-05 1984-05-15 Merck & Co., Inc. 4-Naphthyl and substituted naphthyl-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones and their use as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4432992A (en) 1979-11-05 1984-02-21 Merck & Co., Inc. 4-[5(and 4)-Substituted-2-thienyl]-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4464363A (en) 1979-12-20 1984-08-07 Merck & Co., Inc. Ajuvants for rectal delivery of drug substances
US4260771A (en) 1979-12-20 1981-04-07 Merck & Co., Inc. Interphenylene 9-thia-11-oxo-12-azaprostanoic acid compounds
US4428959A (en) 1980-04-04 1984-01-31 Merck & Co., Inc. 4-Alkylsubstituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4362724A (en) 1980-05-19 1982-12-07 Merck & Co., Inc. Method of treating edema and hypertension and pharmaceutical composition therefor in which the active ingredient comprises a novel substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazole and a kaliuretic diuretic
US4309540A (en) 1980-05-19 1982-01-05 Merck & Co., Inc. Substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazoles
US4356314A (en) 1980-06-30 1982-10-26 Merck & Co., Inc. [5,6,9A-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids, their analogs, esters, salts, and derivatives
US4272537A (en) 1980-07-02 1981-06-09 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(4,4-disubstituted-6-substituted-1,3,5-triazin-2-yl)-2-pyrazinecarboxamides
US4277602A (en) 1980-07-02 1981-07-07 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(3,4-dihydro-6-substituted-1,3,5-truazin-2-yl)2-pyrazinecarboxamides
US4317822A (en) 1980-07-02 1982-03-02 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(3,4-dihydro-6-substituted-1,3,5-triazin-2-yl)2-pyrazinecarboxamides
US4465850A (en) 1980-09-02 1984-08-14 Merck & Co., Inc. Treatment of brain injury due to gray matter edema with (indanyloxy) butanoic acids
US4389417A (en) 1980-09-05 1983-06-21 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4312860A (en) 1980-10-24 1982-01-26 Regents Of The University Of California Lung surfactant compositions
US4394385A (en) 1980-11-21 1983-07-19 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4316043A (en) 1980-12-19 1982-02-16 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids and their analogs, esters, salts and derivatives
US4337258A (en) 1980-12-29 1982-06-29 Merck & Co., Inc. 2,4-Dioxo-4-substituted-1-butanoic acid derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4428956A (en) 1980-12-29 1984-01-31 Merck & Co., Inc. 4-Hydroxy-5-substituted-3-(2H)-isothiazolone-1,1-dioxide derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4431652A (en) 1980-12-29 1984-02-14 Merck & Co., Inc. 4-Hydroxy-5-substituted-3(2H)-isothiazolone-1,1-dioxide derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4336397A (en) 1980-12-29 1982-06-22 Merck & Co., Inc. 2,4-Dioxo-4-substituted-1-butanoic acid derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
GB2112151B (en) 1981-01-09 1984-10-03 Plant Energy Syst Excess gas flow detectors
US4582842A (en) 1981-02-25 1986-04-15 Merck & Co., Inc. Anti-asthmatic 6H-dibenz-[b,e] [1,4]oxathiepin derivatives, compositions, and method of use therefor
US4778897A (en) 1981-02-25 1988-10-18 Merck & Co., Inc. 6H-dibenz[b,e][1,4]oxathiepin compounds
US4454132A (en) 1981-03-16 1984-06-12 Merck & Co., Inc. Pharmaceutical compositions of novel substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazoles useful in the treatment of edema and hypertension
US4510322A (en) 1981-07-13 1985-04-09 Merck & Co., Inc. Indacrinone having enhanced uricosuric
US4420615A (en) 1981-08-24 1983-12-13 Merck & Co., Inc. Substituted pyridopyrimidines as gastric secretion inhibitors
US4425337A (en) 1981-12-30 1984-01-10 Merck & Co., Inc. Adjuvants for rectal delivery of drug
US4463208A (en) 1981-12-30 1984-07-31 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4594349A (en) 1982-01-04 1986-06-10 Beyer Jr Karl H Hyperuretic agents
US4663322A (en) 1982-01-04 1987-05-05 Beyer Jr Karl H Antihypertensive hyperuretic and saluretic agent combinations
US4952582A (en) 1982-01-04 1990-08-28 Beyer Jr Karl H Pyrazinoylguanidine and derivatives thereof having few polar substituents and being useful as hyperuretic agents
US4389393A (en) 1982-03-26 1983-06-21 Forest Laboratories, Inc. Sustained release therapeutic compositions based on high molecular weight hydroxypropylmethylcellulose
US4440740A (en) 1982-04-26 1984-04-03 Merck & Co., Inc. α-Keto aldehydes as enhancing agents of gastro-intestinal drug absorption
US4540564A (en) 1982-05-18 1985-09-10 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US4479932A (en) 1982-05-18 1984-10-30 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US4501729A (en) 1982-12-13 1985-02-26 Research Corporation Aerosolized amiloride treatment of retained pulmonary secretions
JPS6032714A (ja) 1983-08-01 1985-02-19 Teijin Ltd 鼻腔粘膜に適用するための安定化された粉末状薬学的組成物
US4699917A (en) 1983-09-26 1987-10-13 Merck & Co., Inc. Anti-asthmatic tetrazolyl 6H-dibenz-[B,E]-[1,4]-oxathiepin derivatives, compositions, and method of use therefor
US4596821A (en) 1984-05-01 1986-06-24 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema with 3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones
US4604403A (en) 1984-05-01 1986-08-05 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones for treating grey matter edema
US4634717A (en) 1984-05-01 1987-01-06 Merck & Co., Inc. Substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones, useful for treating persons with gray matter edema
US4605663A (en) 1984-05-01 1986-08-12 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones, for treatment of grey matter edema
US4605664A (en) 1984-05-01 1986-08-12 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones for treatment of grey matter edema
US4680414A (en) 1984-05-01 1987-07-14 Merck & Co., Inc. Substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones
US4604394A (en) 1984-10-01 1986-08-05 Merck & Co., Inc. Antiarrhythmic compositions and method
US4805811A (en) 1985-03-29 1989-02-21 Aktiebolaget Draco Dosage device
US4754061A (en) 1985-06-04 1988-06-28 Merck & Co., Inc. Substituted (2,3-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4579869A (en) 1985-08-02 1986-04-01 Merck & Co., Inc. Substituted [(2,3-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)amino]alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4604396A (en) 1985-09-26 1986-08-05 Merck & Co., Inc. [(2,3,9,9a-tetrahydro-3-oxo-9a-substituted-1H-fluoren-7-yl)oxy]ethanimidamides and [(2,3,9,9a-tetrahydro-3-oxo-9a-substituted-1H-fluoren-7-yl)oxy]ethanimidic acid hydrazides, their derivatives and their salts
US4654365A (en) 1985-09-26 1987-03-31 Merck & Co., Inc. 2,3-dihydro-5-(3-oxo-2-cyclohexen-1-yl)-2-benzofurancarboxylic acids, and their salts useful in the treatment of brain injury
US4719310A (en) 1985-12-23 1988-01-12 Merck & Co., Inc. Ester and amide substituted (2,3-dihydro-4-(3-oxo-1-cyclohexen-1-yl)phenoxy)alkanoic acids and their salts
US4625047A (en) 1985-12-23 1986-11-25 Merck & Co., Inc. Substituted (2,3-dihydro-4-(3-oxo-1-cyclohexen-1-yl)phenoxy) alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4731472A (en) 1986-03-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-9A-propyl-2,3,9,9A-tetrahydrofluoren-7-yl)alkanoic acids and alkanimidamides
US4835313A (en) 1986-03-03 1989-05-30 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-9α-propyl-2,3,9,9α-tetrahydrofluoren-7-yl) alkanimidamides
US4777281A (en) 1986-03-03 1988-10-11 Merck & Co., Inc. [3,4-dichloro-6,7,8,8a,9,10-hexahydro-6-oxo-8a-substituted-2-phenanthrenyl)oxy]-alkanoic acids and -ethanimidamides
US4731473A (en) 1986-04-04 1988-03-15 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4751244A (en) 1986-04-04 1988-06-14 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4699926A (en) 1986-04-04 1987-10-13 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4731381A (en) 1986-04-04 1988-03-15 Merck & Co., Inc. Method of treating a person for sickle cell anemia
US4675341A (en) 1986-08-13 1987-06-23 Merck & Co., Inc. [(5,6-dichloro-3-oxo-9a-propyl-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)oxy]ethanol and its derivatives
US4937232A (en) 1986-09-15 1990-06-26 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
US4797391A (en) 1986-09-24 1989-01-10 Merck & Co., Inc. ((5,6-dichloro-3-oxo-9,9a-disubstituted-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)oxy)alkanoic acids and alkanimidamides
US4769370A (en) 1986-09-24 1988-09-06 Merck & Co., Inc. (1,2-dichloro-8-oxo-5a-substituted-5a,6,7,8-tetrahydrodibenzofuran-3-yl)alkanoic acids and alkanimidamides
US4731470A (en) 1986-11-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. [(5,6-dichloro-3-oxo-2,9a-alkano-2,3,9,9a-tetrahydro-1H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic acids and alkanimidamides
US4731471A (en) 1986-11-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)-alkanoic acids and alkanimidamides bearing novel functional 9a-substituents
US4782073A (en) 1986-12-24 1988-11-01 Merck & Co., Inc. Amides of [(5,6-dichloro-3-oxo-9-alpha-substituted-2,3,9,9-alpha-tetrahydrofluoren-7-yl-oxyl]acetic acids, and pharmaceutical compositions thereof
US4771076A (en) 1987-06-01 1988-09-13 Merck & Co., Inc. [(2-substituted 1,2-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)oxy]alkanesulfonic acids and salts thereof
US4775695A (en) 1987-06-01 1988-10-04 Merck & Co., Inc. Substituted amidinoalkoxy and amidinoalkylamino indanones and salts thereof
US5132296A (en) 1987-08-14 1992-07-21 Cherksey Bruce D Membrane NA+ channel protein and related therapeutic compounds
US5242947A (en) 1988-02-10 1993-09-07 New York University Use of polyamines as ionic-channel regulating agents
US4894376A (en) 1988-02-26 1990-01-16 Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods of treating diseases characterized by hyperexcitability of neurons
US4923874A (en) 1988-07-21 1990-05-08 G. D. Searle & Co. Use of 8-azapurin-6-one derivatives for control of hypertension
US5100806A (en) 1989-03-24 1992-03-31 Macri James N Method for detecting Edwards syndrome
US4955371A (en) 1989-05-08 1990-09-11 Transtech Scientific, Inc. Disposable inhalation activated, aerosol device for pulmonary medicine
CA2063273C (en) 1989-07-11 2002-09-24 Bradley J. Benson Surfactant compositions and methods
US5707644A (en) 1989-11-04 1998-01-13 Danbiosyst Uk Limited Small particle compositions for intranasal drug delivery
US5215991A (en) 1990-01-26 1993-06-01 Allergan, Inc. Combination of selective alpha-adrenergic agonists and Na+ /H+ ex
DE4003272A1 (de) 1990-02-03 1991-08-08 Boehringer Ingelheim Kg Neue treibgasmischungen und ihre verwendung in arzneimittelzubereitungen
US5449682A (en) 1990-02-13 1995-09-12 Merck & Co., Inc. Angiotensin II antagonists incorporating a substituted benzyl element
US5182299A (en) 1990-03-19 1993-01-26 Brigham And Women's Hospital Treatment of osmotic disturbance with organic osmolytes
KR930701992A (ko) 1990-10-05 1993-09-08 웨인 알.조운즈 환자의 폐에 잔존하는 점액 분비물의 제거 방법
US5614216A (en) 1990-10-17 1997-03-25 The Liposome Company, Inc. Synthetic lung surfactant
EP0517573A1 (fr) 1991-06-05 1992-12-09 Synthelabo Compositions pharmaceutiques pour le traitement des affections des voies respiratoires
US5292498A (en) 1991-06-19 1994-03-08 The University Of North Carolina At Chapel Hill Method of treating lung disease with uridine triphosphates
DE69230613T2 (de) 1991-07-02 2000-12-28 Inhale Inc Verfahren und vorrichtung zum abgeben von medikamenten in aerosolform
JP3908269B2 (ja) 1991-12-18 2007-04-25 スリーエム カンパニー 懸濁エアゾール製剤
US7105152B1 (en) 1991-12-18 2006-09-12 3M Innovative Properties Company Suspension aerosol formulations
US5261538A (en) 1992-04-21 1993-11-16 Glaxo Inc. Aerosol testing method
US5312820A (en) 1992-07-17 1994-05-17 Merck & Co., Inc. Substituted carbamoyl and oxycarbonyl derivatives of biphenylmethylamines
DE4236237A1 (de) 1992-10-27 1994-04-28 Behringwerke Ag Prodrugs, ihre Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
DK0612723T3 (da) 1993-02-20 1998-03-30 Hoechst Ag Substituerede benzoylguanidiner, fremgangsmåde til fremstilling, deres anvendelse som lægemiddel, som inhibitor af den cellulære Na+/H+-udbytning eller som diagnostikum samt lægemiddel med indhold deraf
US5384128A (en) 1993-03-02 1995-01-24 University Of Alabama Research Foundation Method of and compounds for treatment for cystic fibrosis
US5512269A (en) 1993-06-09 1996-04-30 Burroughs Wellcome, Co. Method of treating retained pulmonary secretions
US6051576A (en) 1994-01-28 2000-04-18 University Of Kentucky Research Foundation Means to achieve sustained release of synergistic drugs by conjugation
AUPM411494A0 (en) 1994-02-25 1994-03-24 Central Sydney Area Health Service Method and device for the provocation of upper or lower airway narrowing and/or the induction of sputum
US5962477A (en) 1994-04-12 1999-10-05 Adolor Corporation Screening methods for cytokine inhibitors
US6190691B1 (en) 1994-04-12 2001-02-20 Adolor Corporation Methods for treating inflammatory conditions
US5538991A (en) 1994-09-14 1996-07-23 Merck & Co., Inc. Endothelin antagonists bearing 5-membered heterocyclic amides
US5522385A (en) 1994-09-27 1996-06-04 Aradigm Corporation Dynamic particle size control for aerosolized drug delivery
US5618557A (en) 1994-11-22 1997-04-08 E.R. Squibb & Sons, Inc. Prophylactic treatment of allergic contact dermatitis
US5544647A (en) 1994-11-29 1996-08-13 Iep Group, Inc. Metered dose inhalator
US5622163A (en) 1994-11-29 1997-04-22 Iep Group, Inc. Counter for fluid dispensers
US5656256A (en) 1994-12-14 1997-08-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods of treating lung disease by an aerosol containing benzamil or phenamil
HU219899B (hu) 1995-04-14 2001-09-28 Glaxo Wellcome Inc. Inhalálóberendezés flutikaszon-propionát adagolására mért dózisban
US5908611A (en) 1995-05-05 1999-06-01 The Scripps Research Institute Treatment of viscous mucous-associated diseases
US5994336A (en) 1995-06-07 1999-11-30 Magainin Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting proliferation of cells by administering an aminosterol compound
US5635160A (en) 1995-06-07 1997-06-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Dinucleotides useful for the treatment of cystic fibrosis and for hydrating mucus secretions
US5628984A (en) 1995-07-31 1997-05-13 University Of North Carolina At Chapel Hill Method of detecting lung disease
US5855918A (en) 1995-09-12 1999-01-05 Genentech, Inc. Cystic fibrosis therapy
US6399585B1 (en) 1996-05-15 2002-06-04 Janet E. Larson In Utero treatment of CFTR-related deficiencies
US6015828A (en) 1996-05-31 2000-01-18 Cuppoletti; John Chemical modification of chloride channels as a treatment for cystic fibrosis and other diseases
US6071910A (en) 1996-12-05 2000-06-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of agents to treat eosinophil-associated pathologies
CN1262556C (zh) 1997-02-06 2006-07-05 印斯拜尔药品股份有限公司 特定的二核苷酸和它们作为粘膜纤毛清除和纤毛颤动频率调节剂的应用
US6818629B2 (en) 1997-02-10 2004-11-16 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate
US7223744B2 (en) 1997-02-10 2007-05-29 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof
US20010031244A1 (en) 1997-06-13 2001-10-18 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Pharmaceutical aerosol composition
EP1011688B1 (en) 1997-08-29 2005-02-02 The University of North Carolina at Chapel Hill Use of uridine 5'-diphosphate and analogs thereof for the treatment of lung diseases
US6153187A (en) 1997-09-02 2000-11-28 Insight Strategy & Marketing Ltd. Use of glycosaminoglycans degrading enzymes for management of airway associated diseases
US6159968A (en) 1998-01-15 2000-12-12 University Of Cincinnati Activation of chloride channels for correction of defective chloride transport
US6291514B1 (en) 1998-02-09 2001-09-18 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl amidines, methylamidines and guanidines, preparation thereof, and use thereof as protease inhibitors
GB9807232D0 (en) 1998-04-03 1998-06-03 Univ Cardiff Aerosol composition
JP4633927B2 (ja) 1998-05-22 2011-02-16 インスパイアー ファーマシューティカルズ，インコーポレイティド 治療用ジヌクレオチドおよび誘導体
US6294188B1 (en) 1998-07-09 2001-09-25 Aviana Biopharm Inc. Methods involving changing the constitutive and stimulated secretions of the local reproductive system of women
JP4672143B2 (ja) 1998-08-04 2011-04-20 ヤゴテック アーゲー 医薬用エーロゾル製剤
US6136294C1 (en) 1998-09-22 2002-09-24 Aeropharm Technology Inc Amino acid stabilized medical aerosol formulation
US6458338B1 (en) 1998-09-22 2002-10-01 Aeropharm Technology Incorporated Amino acid stabilized medicinal aerosol formulations
EP1143896B1 (en) 1998-10-20 2006-12-13 The University of North Carolina at Chapel Hill Methods of hydrating the nasal mucosal surface
JP2002528412A (ja) 1998-10-27 2002-09-03 イェール ユニバーシティ 分泌通路を通る不適当に折り畳まれたタンパク質のコンダクタンス
US6926911B1 (en) 1998-12-22 2005-08-09 The University Of North Carolina At Chapel Hill Compounds and methods for the treatment of airway diseases and for the delivery of airway drugs
US6329034B1 (en) 1999-01-18 2001-12-11 Roger L. Pendry Label having tab member and methods for forming, applying and using the same
US6116234A (en) 1999-02-01 2000-09-12 Iep Pharmaceutical Devices Inc. Metered dose inhaler agitator
DE60015734D1 (de) 1999-02-26 2004-12-16 Inspire Pharmaceuticals Durham Verwendung von dinukleotidtriphosphaten, cytidindiphosphaten und adenindiphosphaten zur herstellung einer pharmazeutischen zubereitung zur förderung der schleimauthydratation
EP1183061B2 (en) 1999-06-05 2012-10-17 Innovata Biomed Limited Medicament delivery system
GB2353222B (en) 1999-06-23 2001-09-19 Cambridge Consultants Inhalers
US20040195160A1 (en) 1999-07-12 2004-10-07 Marine Desalination Systems, L.L.C. Hydrate-based reduction of fluid inventories and concentration of aqueous and other water-containing products
HK1047091B (en) 1999-07-19 2008-07-04 University Of North Carolina At Chapel Hill Pharmacologically active compounds with two covalently linked active principles (sodium channel blocker/p2y2 receptor agonist) for the treatment of mucosal surfaces
GB9920839D0 (en) 1999-09-04 1999-11-10 Innovata Biomed Ltd Inhaler
US6880555B1 (en) 1999-10-12 2005-04-19 Shl Medical Ab Inhaler
AUPQ344799A0 (en) 1999-10-15 1999-11-11 University Of Sydney, The Treatment of respiratory diseases and infections
US6297226B1 (en) 1999-10-15 2001-10-02 Neotherapeutics, Inc. Synthesis and methods of use of 9-substituted guanine derivatives
JO2178B1 (en) 1999-10-19 2003-04-23 اف . هوفمان لاروش ايه جي Treatment of emphysema using rar selective retinoid antagonists
NZ518401A (en) 1999-10-29 2004-01-30 Nektar Therapeutics Dry powder compositions having improved dispersivity
US6204270B1 (en) 1999-11-12 2001-03-20 Eyal S. Ron Ophthalmic and mucosal preparations
GB9928265D0 (en) 1999-12-01 2000-01-26 Innovata Biomed Ltd Inhaler
US6476048B1 (en) 1999-12-07 2002-11-05 Inotek Pharamaceuticals Corporation Substituted phenanthridinones and methods of use thereof
SE9904706D0 (sv) 1999-12-21 1999-12-21 Astra Ab An inhalation device
WO2001055390A1 (en) 2000-01-28 2001-08-02 Human Genome Sciences, Inc. Human serpin polynucleotides, polypeptides, and antibodies
US7345051B2 (en) 2000-01-31 2008-03-18 Genaera Corporation Mucin synthesis inhibitors
US7171965B2 (en) 2000-02-01 2007-02-06 Valois S.A.S. Breath actuated dry powder inhaler and tape dose strip
US20040199456A1 (en) 2000-08-01 2004-10-07 Andrew Flint Method and apparatus for explaining credit scores
FR2813593B1 (fr) 2000-09-07 2002-12-06 Valois Sa Dispositif de distribution de produit fluide de type multidose
GB0026647D0 (en) 2000-10-31 2000-12-13 Glaxo Group Ltd Medicament dispenser
NZ525699A (en) 2000-11-20 2005-03-24 Biovitrum Ab Piperazinylpyrazines compounds as antagonists of serotonin 5-HT2 receptor
DE10101440B4 (de) 2001-01-15 2017-10-26 REMS-WERK Christian Föll und Söhne GmbH & Co. Preßzange
GB2377532B (en) 2001-07-11 2005-06-29 Sendo Int Ltd Communications devices operable to electronically process text data for representing characters of a text message, and methods for operating such devices
US20030135716A1 (en) 2002-01-14 2003-07-17 Gil Vinitzky Method of creating a high performance virtual multiprocessor by adding a new dimension to a processor's pipeline
US6858615B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenyl guanidine sodium channel blockers
US6858614B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenolic guanidine sodium channel blockers
US6889690B2 (en) 2002-05-10 2005-05-10 Oriel Therapeutics, Inc. Dry powder inhalers, related blister devices, and associated methods of dispensing dry powder substances and fabricating blister packages
AU2003256755A1 (en) 2002-07-24 2004-02-09 Ptc Therapeutics, Inc. Ureido substituted benzoic acid compounds, their use for nonsense suppression and the treatment of diseases caused by such mutations
US20050227974A9 (en) 2002-08-01 2005-10-13 Euro-Celtique S.A. Aminoalkyl-substituted aryl compounds and their use as sodium channel blockers
US6903105B2 (en) 2003-02-19 2005-06-07 Parion Sciences, Inc. Sodium channel blockers
HUE047569T2 (hu) 2003-04-11 2020-04-28 Ptc Therapeutics Inc 1,2,4-oxadiazol-benzoesav vegyület és nonszensz szupresszióra történõ alkalmazása
EP1488819A1 (en) 2003-06-16 2004-12-22 Rijksuniversiteit te Groningen Dry powder inhaler and method for pulmonary inhalation of dry powder
JP2007502829A (ja) 2003-08-18 2007-02-15 パリオン・サイエンシィズ・インコーポレーテッド 環状ピラジノイルグアニジンナトリウムチャネルブロッカー
US20050090505A1 (en) 2003-08-18 2005-04-28 Johnson Michael R. Methods of reducing risk of infection from pathogens
AU2004266704B2 (en) 2003-08-18 2012-02-23 Parion Sciences, Inc. Capped pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7375107B2 (en) 2003-08-18 2008-05-20 Parion Sciences, Inc. Alaphatic pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7745442B2 (en) 2003-08-20 2010-06-29 Parion Sciences, Inc. Methods of reducing risk of infection from pathogens
US20090253714A1 (en) 2003-08-20 2009-10-08 Johnson Michael R Methods of reducing risk of infection from pathogens
DE10339710A1 (de) 2003-08-22 2005-03-17 Siemens Ag Verfahren zur Zulassungsanfrage zu einem Datenzugriff auf Nutzungs- und Zustandsdaten von Mobilfunkteilnehmern in einem Mobilfunknetz
US7499570B2 (en) 2004-03-02 2009-03-03 Siemens Corporate Research, Inc. Illumination invariant change detection
US6887597B1 (en) 2004-05-03 2005-05-03 Prestone Products Corporation Methods and composition for cleaning and passivating fuel cell systems
US8354427B2 (en) 2004-06-24 2013-01-15 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
US7375102B2 (en) 2004-06-28 2008-05-20 Amgen Sf, Llc Tetrahydroquinazolin-4(3H)-one-related and tetrahydropyrido[2,3-D]pyrimidin-4(3H)-one-related compounds, compositions and methods for their use
CA2575670A1 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Michael R. Johnson Aliphatic amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
WO2006023617A2 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Johnson Michael R Cyclic amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7399766B2 (en) 2004-08-18 2008-07-15 Parion Sciences, Inc. Soluble amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US20090324724A1 (en) 2004-08-18 2009-12-31 Parion Sciences, Inc. Soluble amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
EP2402323A3 (en) 2004-10-13 2012-05-30 PTC Therapeutics, Inc. Pyrazole or triazole compounds and their use for the manufacture of a medicament for treating somatic mutation-related diseases
JP2009221164A (ja) 2008-03-17 2009-10-01 Nitto Denko Corp 肺線維症処置剤
CN102600480B (zh) 2005-01-07 2015-07-22 阿尔尼拉姆医药品有限公司 RSV的RNAi调节及其治疗应用
JP4964469B2 (ja) 2005-01-14 2012-06-27 ガジック・テクニカル・エンタープライゼス 磁気ヘッド及びディスクをテストするための真空チャック・スピンスタンド
US20070021439A1 (en) 2005-07-25 2007-01-25 Parion Sciences, Inc. Methods of reducing risk of infection from pathogens with soluble amide and ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7807834B2 (en) 2005-08-03 2010-10-05 Parion Sciences, Inc. Capped pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
EP2036567A3 (en) 2005-12-06 2009-12-09 P2-Science APS Modulation of the P2Y2 receptor pathway
GB0526244D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Novartis Ag Organic compounds
GB0526240D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Novartis Ag Organic compounds
AU2006331565A1 (en) 2005-12-27 2007-07-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful in CFTR assays and methods therewith
CN101404980A (zh) 2006-01-24 2009-04-08 耐百生物制药有限公司 大分子微球的制备技术
US7645789B2 (en) 2006-04-07 2010-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indole derivatives as CFTR modulators
EP2021797B1 (en) 2006-05-12 2011-11-23 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Compositions of n-ý2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl¨-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
US20110195973A1 (en) 2006-06-09 2011-08-11 Parion Sciences, Inc. Cyclic substituted pyrazinoylguanidine sodium channel blockers possessing beta agonist activity
PT2035004E (pt) * 2006-06-09 2012-11-21 Parion Sciences Inc Bloqueadores dos canais de sódio de pirazinoilguanidona substituída com fenilo que possuem actividade agonista beta
US8324218B2 (en) 2006-06-09 2012-12-04 Parion Sciences, Inc. Aliphatic pyrazinoylguanidine sodium channel blockers with beta agonist activity
CN101534813A (zh) 2006-09-07 2009-09-16 帕里昂科学公司 通过使用钠通道阻断剂和渗透调节剂的治疗来增加粘膜水化和粘液清除的方法
AU2007294547A1 (en) * 2006-09-07 2008-03-13 Parion Sciences, Inc. Methods of enhancing mucosal hydration and mucosal clearance by treatment with sodium channel blockers and osmolytes
TW200819430A (en) * 2006-09-07 2008-05-01 Michael R Johnson Enhanced mucosal hydration and mucosal clearance by treatment with sodium channel blockers and osmolytes
US8563573B2 (en) 2007-11-02 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindole derivatives as CFTR modulators
US7754739B2 (en) 2007-05-09 2010-07-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of CFTR
US20080293740A1 (en) 2007-04-03 2008-11-27 Parion Sciences, Inc. Method of treating acid-sensing ion channel mediated pain, cough suppression, and central nervous system disorders
US8288391B2 (en) 2007-04-03 2012-10-16 Parion Sciences, Inc. Pyrazinoylguanidine compounds for use as taste modulators
JP2010527914A (ja) 2007-04-26 2010-08-19 クォーク ファーマシューティカルズ インコーポレーティッド 呼吸器系への抑制性核酸分子の治療的送達
CN101687851B (zh) 2007-05-07 2013-02-27 诺瓦提斯公司 有机化合物
EP1997502A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Reconstituted surfactants having improved properties
AU2008279129A1 (en) 2007-07-24 2009-01-29 Nexbio, Inc. Technology for the preparation of microparticles
US8551534B2 (en) 2007-10-10 2013-10-08 Parion Sciences, Inc. Inhaled hypertonic saline delivered by a heated nasal cannula
EP2217249A4 (en) 2007-11-06 2011-10-12 Benaroya Res Inst INHIBITION OF VERSICAN WITH SIRNA AND OTHER MOLECULES
CL2008003651A1 (es) 2007-12-10 2009-06-19 Novartis Ag Compuestos derivados de 3,5-diamino-6-cloropirazinamida sustituida; composicion farmaceutica; combinacion farmaceutica; y uso en el tratamiento de una condición inflamatoria o alergica, en particular una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vias respiratorias.
WO2009139948A1 (en) 2008-02-26 2009-11-19 Johnson Michael R Poly aromatic sodium channel blockers
NZ720282A (en) 2008-02-28 2017-12-22 Vertex Pharma Heteroaryl derivatives as cftr modulators
US8261047B2 (en) 2008-03-17 2012-09-04 Freescale Semiconductor, Inc. Qualification of conditional debug instructions based on address
EP2271621B1 (en) 2008-03-31 2013-11-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridyl derivatives as cftr modulators
AU2009248179A1 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Novartis Ag 3,5-Diamino-6-chloro-pyrazine-2-carboxylic acid derivatives and their use as epithelial sodium channel blockers for the treatment of arway diseases
CA2727196A1 (en) 2008-06-10 2009-12-17 Novartis Ag Organic compounds
US20100074881A1 (en) 2008-07-11 2010-03-25 Parion Sciences, Inc. Multiple nebulizer systems
PT2358680E (pt) 2008-10-23 2013-05-14 Vertex Pharma Formas sólidas de n-(4-(7-azabiciclo[2.2.1]heptan-7-il)-2- (trifluorometil)fenil)-4-oxo- 5-(trifluorometil)-1,4- dihidroquinolina-3-carboxamida
US20100316628A1 (en) 2008-12-09 2010-12-16 The General Hospital Corporation Agents and methods for treating respiratory disorders
EP2382197B1 (en) 2008-12-30 2016-10-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US8247436B2 (en) 2010-03-19 2012-08-21 Novartis Ag Pyridine and pyrazine derivative for the treatment of CF
WO2011156355A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Kainos Medicine, Inc. Production method of phenyl guanidine salts and their intermediates
KR20120017648A (ko) 2010-08-19 2012-02-29 삼성전자주식회사 디스플레이장치와, 디스플레이 패널의 구동방법
AR086745A1 (es) 2011-06-27 2014-01-22 Parion Sciences Inc 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-(4-(2-(hexil(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil)carbamimidoil)pirazina-2-carboxamida
HUE032851T2 (en) 2011-06-27 2017-11-28 Parion Sciences Inc A chemically and metabolically stable dipeptide having strong sodium channel blocking activity
MX2014014648A (es) 2012-05-29 2015-09-04 Parion Sciences Inc Aminoamidas tipo dendrimero que poseen actividad bloqueadora del canal de sodio para el tratamiento de ojo reseco y otras enfermedades mucosas.
WO2014036445A2 (en) 2012-08-31 2014-03-06 Johnson Michael R Novel mucolytic agents
US9650340B2 (en) 2012-11-15 2017-05-16 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 5-fluoro-N-(pyridin-2-yl)pyridin-2-amine derivatives containing a sulfoximine group
RU2018138195A (ru) 2012-12-17 2018-12-18 Пэрион Сайенсиз, Инк. Соединения 3,5-диамино-6-хлор-n-(n-(4- фенилбутил)карбамимидоил)пиразин-2-карбоксамида
SG10201708931XA (en) 2012-12-17 2017-12-28 Parion Sciences Inc Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration
SG11201601291QA (en) 2013-08-23 2016-03-30 Parion Sciences Inc Dithiol mucolytic agents
US9102633B2 (en) 2013-12-13 2015-08-11 Parion Sciences, Inc. Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
US20150376145A1 (en) 2014-06-30 2015-12-31 Parion Sciences, Inc. Stable sodium channel blockers

Also Published As

Publication number Publication date
HUE032891T2 (hu) 2017-11-28
JP6392242B2 (ja) 2018-09-19
US20140171447A1 (en) 2014-06-19
CN108484513A (zh) 2018-09-04
CN105073717A (zh) 2015-11-18
CA2895512C (en) 2021-10-19
IL256004A (en) 2018-01-31
DK2931713T3 (en) 2017-01-30
GEP20186903B (en) 2018-10-25
AU2018204305A1 (en) 2018-07-05
HK1215702A1 (en) 2016-09-09
MX2015007796A (es) 2015-09-04
AU2013363218B2 (en) 2018-03-15
MX379300B (es) 2025-03-11
AU2013363218A1 (en) 2015-07-02
SG10201708931XA (en) 2017-12-28
RS55618B1 (sr) 2017-06-30
PH12015501363A1 (en) 2016-02-01
IL239452B (en) 2018-01-31
US20190084943A1 (en) 2019-03-21
AU2018204305B2 (en) 2019-12-19
PH12015501363B1 (en) 2016-02-01
PE20151054A1 (es) 2015-08-07
AP2015008556A0 (en) 2015-06-30
LT2931713T (lt) 2017-02-10
CN105073717B (zh) 2018-05-22
GEAP201813881A (en) 2018-06-25
ZA201504559B (en) 2019-10-30
US10071970B2 (en) 2018-09-11
KR20150095871A (ko) 2015-08-21
US9593084B2 (en) 2017-03-14
PT2931713T (pt) 2017-02-22
CY1118678T1 (el) 2017-07-12
US20170327472A1 (en) 2017-11-16
KR102258469B1 (ko) 2021-05-31
JP2016503028A (ja) 2016-02-01
SG11201504799QA (en) 2015-07-30
BR112015014349A2 (pt) 2017-07-11
CL2015001696A1 (es) 2015-10-02
IL239452A0 (en) 2015-07-30
HRP20170060T1 (hr) 2017-03-10
UA120343C2 (uk) 2019-11-25
JP2018199697A (ja) 2018-12-20
EP3150585A1 (en) 2017-04-05
PL2931713T3 (pl) 2017-06-30
ECSP15025947A (es) 2016-01-29
EP2931713B1 (en) 2016-10-19
CA2895512A1 (en) 2014-06-26
SI2931713T1 (sl) 2017-03-31
RU2015129065A (ru) 2017-01-25
SA515360611B1 (ar) 2017-12-24
SMT201700107B (it) 2017-03-08
EP2931713A1 (en) 2015-10-21
SMT201700107T1 (it) 2017-03-08
WO2014099676A1 (en) 2014-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2619954T3 (es) Derivados de cloropiracinocarboxamida útiles para el tratamiento de enfermedades favorecidas por una hidratación mucosa insuficiente
US10246425B2 (en) 3,5-diamino-6-chloro-N-(N-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2-carboxamide compounds
ES2778675T3 (es) 3,5–diamino–6–cloro–N–(N–(4–(4–(2–(hexil(2,3,4,5,6–pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil) carbamimidoil)pirazino–2–carboxamida
US10233158B2 (en) Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
ES2754617T3 (es) Compuestos bloqueantes del canal de sodio epitelial sustituidos por arilalquilo y ariloxialquilo
HK1236513A1 (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives with epithelial sodium channel blocking activity
HK1236513A (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives with epithelial sodium channel blocking activity
HK1215702B (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration
OA17335A (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration.
HK1215703B (en) 3,5-diamino-6-chloro-n-(n-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2- carboxamide compounds