ES2621806T3 - Método inmunoterapéutico para tratar el cáncer de próstata - Google Patents
Método inmunoterapéutico para tratar el cáncer de próstata Download PDFInfo
- Publication number
- ES2621806T3 ES2621806T3 ES11751668.2T ES11751668T ES2621806T3 ES 2621806 T3 ES2621806 T3 ES 2621806T3 ES 11751668 T ES11751668 T ES 11751668T ES 2621806 T3 ES2621806 T3 ES 2621806T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- polypeptide
- hzp3
- pharmaceutical composition
- use according
- fragments
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 58
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 41
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 title description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 214
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 185
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 169
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 42
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 41
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 25
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 25
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims abstract description 16
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 50
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 43
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 37
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 26
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 25
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 19
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 claims description 14
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims description 14
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 10
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 6
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 4
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims description 4
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 claims description 4
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 claims description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 238000002725 brachytherapy Methods 0.000 claims description 2
- 238000002681 cryosurgery Methods 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 2
- 244000047478 Afzelia bijuga Species 0.000 claims 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 abstract description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 abstract description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 34
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 32
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 26
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 26
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 25
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 25
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 24
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 19
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 15
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 15
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 15
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- 101000818870 Homo sapiens Zona pellucida sperm-binding protein 2 Proteins 0.000 description 14
- 101000976428 Homo sapiens Zona pellucida sperm-binding protein 4 Proteins 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 12
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 11
- 101000818877 Homo sapiens Zona pellucida sperm-binding protein 1 Proteins 0.000 description 10
- 102100021401 Zona pellucida sperm-binding protein 1 Human genes 0.000 description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- -1 deletions (eg Chemical class 0.000 description 8
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 7
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 6
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 6
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 6
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 5
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 5
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- 101100298998 Caenorhabditis elegans pbs-3 gene Proteins 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 3
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 3
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 102000055963 human ZP2 Human genes 0.000 description 3
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- AVWQQPYHYQKEIZ-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-dodecylbenzenesulfonate;3-dodecylbenzenesulfonate;4-dodecylbenzenesulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].CCCCCCCCCCCCC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1.CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O AVWQQPYHYQKEIZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 3
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 3
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-h]quinoline Chemical class C1=CN=C2C(N=CN3)=C3C=CC2=C1 RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108010035452 HLA-A1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 108010093013 HLA-DR1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000005705 Keratin-5 Human genes 0.000 description 2
- 108010070553 Keratin-5 Proteins 0.000 description 2
- 102000005706 Keratin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108010070557 Keratin-6 Proteins 0.000 description 2
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 2
- 241001183012 Modified Vaccinia Ankara virus Species 0.000 description 2
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 2
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108091036414 Polyinosinic:polycytidylic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 241000589970 Spirochaetales Species 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 102000057586 human ZP4 Human genes 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011293 immunotherapeutic strategy Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 1
- AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)acetic acid Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(CC(=O)O)C3 AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 239000012110 Alexa Fluor 594 Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 description 1
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 description 1
- RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N CoASH Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 102100039328 Endoplasmin Human genes 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 1
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 1
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010013476 HLA-A24 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010086377 HLA-A3 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010091938 HLA-B7 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010064885 HLA-DR3 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010046732 HLA-DR4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010001041 HLA-DR7 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 101100268272 Homo sapiens ZP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000976442 Homo sapiens Zona pellucida sperm-binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 108010066345 MHC binding peptide Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 1
- DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N Methanethial Chemical compound S=C DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100268273 Mus musculus Zp1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004879 Racemases and epimerases Human genes 0.000 description 1
- 108090001066 Racemases and epimerases Proteins 0.000 description 1
- 108010034634 Repressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009661 Repressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- GZOSMCIZMLWJML-VJLLXTKPSA-N abiraterone Chemical compound C([C@H]1[C@H]2[C@@H]([C@]3(CC[C@H](O)CC3=CC2)C)CC[C@@]11C)C=C1C1=CC=CN=C1 GZOSMCIZMLWJML-VJLLXTKPSA-N 0.000 description 1
- 229960000853 abiraterone Drugs 0.000 description 1
- 238000010317 ablation therapy Methods 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000030120 acrosome reaction Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011360 adjunctive therapy Methods 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005899 aromatization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 125000006367 bivalent amino carbonyl group Chemical group [H]N([*:1])C([*:2])=O 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 201000007452 breast secretory carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000006355 carbonyl methylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 1
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009109 curative therapy Methods 0.000 description 1
- HJZLEGIHUQOJBA-UHFFFAOYSA-N cyclohexane propionic acid Chemical compound OC(=O)CCC1CCCCC1 HJZLEGIHUQOJBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007711 cytoplasmic localization Effects 0.000 description 1
- 238000012303 cytoplasmic staining Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940061607 dibasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000010502 episomal replication Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 108010017007 glucose-regulated proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930004094 glycosylphosphatidylinositol Natural products 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 102000055956 human ZP3 Human genes 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000012606 in vitro cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N isocyanate Chemical compound [N-]=C=O IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N isonipecotic acid Chemical compound OC(=O)C1CCNCC1 SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 1
- 208000010658 metastatic prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N mifamurtide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OCCNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N 0.000 description 1
- 229960005225 mifamurtide Drugs 0.000 description 1
- 108700007621 mifamurtide Proteins 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 229940045641 monobasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- NKAAEMMYHLFEFN-UHFFFAOYSA-M monosodium tartrate Chemical compound [Na+].OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O NKAAEMMYHLFEFN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000007498 myristoylation Effects 0.000 description 1
- 230000002914 neoplasic effect Effects 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 208000017497 prostate disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005212 secondary lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000037432 silent mutation Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241000701366 unidentified nuclear polyhedrosis viruses Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
- A61K2039/884—Vaccine for a specifically defined cancer prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Composición farmacéutica que comprende una fuente de un polipéptido que comprende un epítopo de célula T de zona pelúcida nativo restringido a MHC de clase I y/o MHC de clase II o su variante inmunológicamente activa, para usar en un método para tratamiento terapéutico y/o profiláctico de cáncer de próstata y/o su metástasis en un humano, donde dicho polipéptido es seleccionado de hZP3, sus homólogos y fragmentos inmunológicamente activos de hZP3 y sus homólogos.
Description
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
DESCRIPCION
Metodo inmunoterapeutico para tratar el cancer de prostata CAMPO DE LA INVENCION
[0001] La presente invencion se refiere al campo del tratamiento de cancer de prostata y su metastasis. Mas espeaficamente, la invencion se refiere a polipeptidos inmunogenicos que comprenden al menos una porcion de una (glico)protema asociada a celulas de tumor de prostata o sus variantes inmunologicamente activas y a acidos nucleicos que codifican tales polipeptidos.
Tales polipeptidos y secuencias de acidos nucleicos se pueden utilizar en vacunas y composiciones farmaceuticas para el tratamiento terapeutico y profilactico del cancer de prostata y su metastasis.
ANTECEDENTES DE LA INVENCION
[0002] El cancer de prostata es el cuarto cancer mas predominante en hombres.
En Norteamerica y Europa del norte, es con diferencia el cancer mas comun en varones y es la segunda causa de muerte por cancer en hombres.
En Estados Unidos solo, unos 40.000 hombres mueren anualmente por esta enfermedad, despues del cancer de pulmon.
A pesar de la magnitud de estas figuras, sigue sin haber un tratamiento eficaz para el cancer de prostata metastasico.
Una inmensa evidencia clfnica muestra que el cancer de prostata humano es propenso a convertirse en metastasis al hueso, y la enfermedad resulta progresar inevitablemente del estado androgeno-dependiente al estado androgeno refractario, conduciendo a una mayor mortalidad de pacientes.
[0003] A pesar de la investigation considerable en terapias para la enfermedad, el cancer de prostata sigue siendo diffcil de tratar.
Prostatectoirna quirurgica, terapia de radiation, terapia de ablation hormonal, castration quirurgica y quimioterapia siguen siendo las modalidades de tratamiento principales.
Desafortunadamente, estos metodos son inefectivos en un porcentaje significativo de casos.
La edad y salud subyacente del hombre, la extension de la metastasis, la apariencia bajo el microscopio, y la respuesta del cancer al tratamiento inicial son importantes para determinar los resultados de la enfermedad y el tratamiento potencial.
La decision de tratar o no el cancer de prostata localizado (un tumor contenido en la prostata) con intento curativo es una compensation del paciente entre los efectos beneficiosos y nocivos previstos en cuanto a supervivencia del paciente y calidad de vida.
[0004] La identification de objetivos terapeuticos nuevos es esencial para mejorar el tratamiento actual de pacientes con cancer de prostata.
Los ultimos avances en medicina molecular han aumentado el interes en los antfgenos espedficos de la superficie celular del tumor que podrian servir como objetivos para varias estrategias inmunoterapeuticas o de moleculas pequenas.
[0005] Entre los varios elementos del sistema inmunologico, los linfocitos T son probablemente los mas adeptos para reconocer y eliminar celulas que expresan antfgenos extranjeros o asociados al tumor.
Linfocitos T citotoxicos (CTL) expresan el marcador superficial de celulas CD8 y se especializan en la induction de lisis de las celulas diana con las cuales reaccionan por medio de la perforina/granzima y/o las vfas Fas/Fas-L.
El receptor de celulas T (TCR) para antfgeno de CTL se enlaza a un complejo molecular en la superficie de la celula objetivo formada por residuos de peptidos pequenos (8-11) derivados de antfgenos extranjeros procesados o asociados al tumor, que se asocian con moleculas de clase I de complejo mayor de histocompatibilidad (MHC).
[0006] El otro subconjunto mayor de celulas T, linfocitos T auxiliares (celulas auxiliares T o HTL), se caracterizan por la expresion del marcador superficial CD4.
Las celulas auxiliares T reconocen peptidos ligeramente mayores (11-20 residuos), tambien derivados de antfgenos asociados extranjeros o tumorales, pero en el contexto de las moleculas de MHC de clase II, que son expresados solo por celulas presentadoras de antfgenos (APC) especializadas tales como linfocitos B, macrofagos y celulas dendriticas (DC).
[0007] A consecuencia de la estimulacion con TCR de CTL ingenuos y HTL por complejos de peptido/MHC en APC, las CTL maduran en celulas asesinas efectoras capaces de lisar celulas (tumorales) que expresan el complejo de clase I de peptido/MHC correspondiente.
HTL activados amplifican respuestas de CTL haciendo las APC mas eficaces en la estimulacion de los CTL ingenuos y produciendo linfoquinas que estimulan la maduracion y proliferation de CTL.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
El efecto potenciador de celulas T auxiliares ocurre en los organos linfoides secundarios donde se inicia la respuesta immune y en el sitio tumoral donde las respuestas de CTL necesitan ser sostenidas hasta que las celulas tumorales son eliminadas.
As^ se podria predecir que las vacunas deberian estimular los CTL reactivos al tumor y los HTL para generar inmunidad antitumoral eficaz.
[0008] Anrigenos adecuados para estrategias para el tratamiento del cancer inmunoterapeuticas deberian ser altamente expresados en tejidos cancerosos e idealmente no en tejidos adultos normales.
La expresion en tejidos que son innecesarios para la vida, sin embargo, puede ser aceptable.
RESUMEN DE LA INVENCION
[0009] Los presentes inventores han descubierto sorprendentemente que antfgenos adecuados para estrategias inmunoterapeuticas en el tratamiento del cancer de prostata y su metastasis se proporcionan por las (glico)protemas de la zona pelucida.
Conforme a la invencion, los anrigenos de ZP3 que son capaces de inducir una respuesta de celulas T CD8+ y/o CD4+ al igual que secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos antfgenos, pueden idoneamente usarse en una estrategia inmunoterapeutica para el tratamiento terapeutico y/o profilactico del cancer de prostata.
[0010] La presente invencion reside en el hallazgo de que las celulas de tumor de prostata muestran expresion significativa de (glico)protemas ZP3, hasta tal extension que estas celulas son previstas eficazmente por la respuesta inmune suscitada por la administracion de (glico)protemas ZP3 derivadas de antfgenos, dando como resultado un crecimiento disminuido o incluso tamano reducido de tumores prostaticos primarios al igual que de la metastasis que se origina a partir de estos.
La presente estrategia es igualmente apta para prevenir metastasis de un tumor de prostata al igual que para prevenir la recurrencia de tumores de prostata en sujetos tratados.
[0011] ZP3 es normalmente encontrada en la denominada "zona pelucida" que forma una matriz extracelular que rodea el ovocito en desarrollo y ovulado y el embrion en preimplantacion.
Esta zona pelucida induce la reaccion del acrosoma en el esperma, determina la especificidad de especies para fertilizacion y previene la polispermia en mairnferos.
La zona pelucida contiene cuatro glicoprotemas mayores, ZP1, ZP2, ZP3 y ZP4.
[0012] WO02/12330 divulga el tratamiento de cancer de prostata por protemas de fusion a toxina o citocina del polipeptido ZP1.
Analisis de PCR y secuenciacion parcial ha mostrado que la protema ZP1 de la Zona peludica, llamada Zzp1 en WO02/12330, se expresa en la prostata y otros seis tipos de tejido y podrian por lo tanto servir para, entre otras cosas, el tratamiento de tumores en estos tejidos o para prevenir la metastasis del tumor.
[0013] WO 2007/058536 trata el tratamiento del cancer ovarico en ratones por inmunizacion con hZP1, hZP2, hZP3 o hZP4.
En los ejemplos rhZP2 fue usado.
[0014] La expresion de (glico)protema ZP3 en las celulas (derivadas) de tumores de prostata nunca ha sido establecida antes.
Asf no hay ninguna indicacion en el estado de la tecnica de que las celulas de tumor prostatico puedan de hecho volverse el objetivo de una respuesta inmune celular suscitada por la administracion de anrigenos (derivados) de ZP3.
[0015] La presente invencion por lo tanto proporciona por primera vez un metodo para tratar los tumores de prostata en un humano que comprende inmunizar dicho humano con una fuente de un polipeptido que comprende un epftopo de celulas T de zona pelucida nativo restringido a MHC de clase I o MHC de clase II o una de sus variantes inmunologicamente activas, al igual que a composiciones adecuadas para usar en tales metodos.
[0016] La presente invencion se describe con mas detalle de aqu en adelante.
DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION
[0017] Un primer aspecto de la presente invencion se refiere a una fuente de un polipeptido, dicho polipeptido comprendiendo un epftopo de celulas T de zona pelucida 3 humano restringido a MHC de clase I y/o MHC de clase II que es capaz de suscitar una respuesta inmune mediada por celulas T in vivo o una de sus variantes inmunologicamente activas, para usar en metodos de tratamiento terapeutico y/o profilactico de cancer de prostata y/o su metastasis en un humano.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una forma de realizacion particularmente preferida de la invencion, dicho metodo es un metodo para tratamiento terapeutico.
[0018] La denominacion de los componentes de glicoprotema ZP ha sido mas bien inconsistente durante estos ultimos anos, utilizando diferentes criterios, incluyendo peso molecular aparente, longitud de secuencia de protemas y comparacion de identidad de secuencias, que ha resultado en una nomenclatura confundida. Harris et al. [(1994) DNA seq. 96:829-834] propusieron un sistema constante de nomenclatura donde genes ZP fueron nombrados en orden de longitud de su secuencia de protema codificada desde la mas larga a la mas corta.
Ya que, bajo aquellos criterios, los genes ZP de raton cayeron en el orden ZP2, luego ZP1 y luego ZP3, un sistema nuevo fue introducido donde ZP2 se volvio ZPA, ZP1, se volvio ZPB y ZP3 se volvio ZPC.
Mas recientemente Hughes et al [(1999) BBA-Gene Structure and Expression 1447:303-306], entre otros, informaron que el ortologo humano real del gen ZP1 conocido de raton no es ZPB, sino que hay un gen ZP1 humano diferente.
Esta ahora aceptado generalmente que hay cuatro familias de glicoprotema ZP (humanas) diferentes ZP1, ZP2, ZP3 y ZPB [cf. Lefievre et al (2004) Hum. Reprod. 19:1580-1586].
La glicoprotema ZPB segun esta nomenclatura es ahora tambien referida como ZP4.
Esta nomenclatura es por ejemplo aplicada en las bases de datos Uniprot/SWISSprot, ensEMBL, BLAST (NCBI), SOURCE, SMART, STRING, PSORT2, CDART, UniGene y SOSUI, todas implementadas en el Bioinformatic Harvester (
http://harvester.embl.de).
http://harvester.embl.de).
[0019] Segun esto, los terminos ZP1, ZP2, ZP3 y ZP4 son empleados aqu para indicar las cuatro familias de glicoprotema ZP, donde ZP2, ZP3 y ZP4 corresponden a ZPA, ZPC y ZPB respectivamente segun la nomenclatura propuesta por Harris et al.
De forma mas particular, los terminos hZP1, hZP2, hZP3 y hZP4 como se utilizan en este caso se refieren a las (glico)protemas que tienen esqueletos de polipeptidos de protocolos de secuencias SEQ ID n° 1, SEQ ID n° 2, SeQ ID n° 3 y SEQ ID n° 4 respectivamente y sus variantes alelicas.
[0020] Por lo tanto, variantes alelicas de las secuencias ZP1, ZP2, ZP3 y ZP4 que pueden ocurrir en el humano estan comprendidas tambien por los terminos respectivos (h)ZP1, (h)ZP2, (h)ZP3 y (h)ZP4.
Variantes alelicas incluyen en particular variantes resultantes de polimorfismos de nucleotidos unicos (SNP). SNP pueden caer dentro de las secuencias codificantes de genes, regiones no codificantes de genes, o en las regiones intergenicas entre genes.
SNP dentro de una secuencia codificante no necesariamente cambiaran la secuencia de aminoacidos de la protema que es producida.
Un SNP donde ambas formas llevan a la misma secuencia polipeptfdica es denominado sinonimo (llamado a veces una mutacion silenciosa) - si una secuencia polipeptfdica diferente es producida se denomina no sinonimo.
Para una variante para ser considerada un SNP, debe ocurrir en al menos el 1% de la poblacion.
En el contexto de la presente invencion "variantes alelicas" tambien puede incluir variantes de secuencias polipeptfdicas resultante de mutaciones (no sinonimas), es decir variantes polipeptfdicas resultantes de mutaciones puntuales, inserciones, deleciones, etc. que ocurren en menos del 1% de la poblacion.
[0021] Asf, conforme a la presente invencion los terminos (h)ZP1, (h)ZP2, (h)ZP3 y (h)ZP4 incluyen (glico)protemas ZP que difieren de SEQ ID n° 1, SEQ ID n° 2, Seq ID n° 3 y SEQ ID n° 4 respectivamente por modificaciones de secuencia menores.
Tales modificaciones incluyen, pero de forma no limitativa: cambios en uno o unos pocos aminoacidos, incluyendo deleciones (por ejemplo, una version truncada del peptido) inserciones y/o sustituciones. Tfpicamente, cuando se alinean optimamente, tal como por los programas GAP o BESTFIT usando parametros por defecto una variante alelica comparte al menos un porcentaje determinado de identidad de secuencia con secuencias a las que se hace referencia arriba.
GAP usa el algoritmo de alineamiento global de Needleman y Wunsch para alinear dos secuencias sobre su longitud entera, maximizando el numero de coincidencias y minimiza el numero de espacios.
Generalmente, los parametros por defecto de GAP se usan, con una penalizacion por creacion de espacio = 8 y penalizacion por extension de espacio = 2.
Para las protemas la matriz de puntuacion por defecto es Blosum62 (Henikoff & Henikoff, 1992, PNAS 89,915-919).
Alineaciones de secuencia y puntuaciones para porcentaje de identidad de secuencias se pueden determinar utilizando programas informaticos, tal como el GCG Wisconsin Package, version 10.3, disponible de Accelrys Inc., 9685 Scranton Road, San Diego, CA 92121-3752, USA.
El porcentaje de similitud o identidad alternativamente se puede determinar por la busqueda en las bases de datos tal como FASTA, BLAST, etc. Una "variante alelica" se entiende aqu que tiene al menos 90%, preferiblemente al menos 95%, mas preferiblemente al menos 98%, todavfa mas preferiblemente al menos 98%, todavfa mas preferiblemente al menos 99%, todavfa mas preferiblemente al menos 99,5 % y de la forma mas preferible al menos 99,9 % de identidad de secuencia de aminoacidos con cualquiera de SEQ ID n° 1, SEQ ID n° 2, SEQ ID n° 3 y SEQ ID n° 4.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
[0022] En este documento y en sus reivindicaciones, la palabra "comprender" y sus conjugaciones se usan en su sentido no limitativo para significar que los artfculos despues de la palabra estan incluidos, pero los artfculos no mencionados espeaficamente no estan excluidos.
Ademas, la referencia a un elemento por el artfculo indefinido "un" no excluye la posibilidad de que mas de uno del elemento este presente, a menos que el contexto requiere claramente que haya uno y solo uno de los elementos.
El artfculo indefinido "un" asf normalmente significa "al menos un".
[0023] El termino "cancer de prostata", como se utiliza en este caso, se refiere tanto a tumores de prostata primarios como a metastasis de dichos tumores de prostata primarios que pueden estar establecidos en cualquier sitio del cuerpo.
[0024] Tfpicamente, para los fines de la presente invention, el termino "cancer de prostata" o "tumor de prostata" es sinonimo de "enfermedad neoplasica de prostata " o "neoplasma de prostata".
Estos terminos son considerados totalmente intercambiables, aunque cabe senalar que para enfermedades de ciertos tejidos ademas de la prostata, los terminos "neoplasma" y "tumor" se puede considerar que no coinciden totalmente.
Conforme a la presente invencion el termino "cancer de prostata" tfpicamente no incluye condiciones preneoplasticas, tales como hiperplasia, metaplasia, displasia o similar.
[0025] Un aspecto importante de la presente invencion es el descubrimiento de la expresion de (glico)protema ZP3 en la celula (tumoral) prostatica que permite suscitar una respuesta inmune contra dichas celulas.
No obstante, como tumores diferentes pueden tener patrones diferentes o alterados de expresion genica, determinados tumores prostaticos que no expresan (glico)protemas ZP3 en cualquier extension significativa pueden ocurrir tambien, como se entendera por la persona experta.
Por lo tanto, tfpicamente, la invencion concierne el tratamiento de cancer de prostata o su metastasis, que expresa ZP3.
[0026] El metodo segun la invencion puede constituir el tratamiento primario o ser aplicado como terapia adjuntiva durante o despues del tratamiento de pacientes que utilizan cualquiera de los metodos convencionales, incluyendo por ejemplo cirugfa, criocirugfa, terapia de radiation, incluyendo braquiterapia y radiation de rayo externo, ultrasonido focalizado de alta intensidad (HIFU), terapia hormonal o quimioterapia, o alguna de sus combinaciones.
Es sin embargo de conocimiento comun que muchos de los tratamientos anti-cancer convencionales, especialmente quimioterapia y radiacion pueden ser altamente inmunosupresores.
Sera claro para la persona experta que la eficacia del presente metodo puede ser inferior cuando se siguen tales tratamientos.
[0027] Conforme a la invencion, los metodos son adecuadamente empleados para el tratamiento de cancer de prostata primaria y su metastasis, que se considera aqu que constituyen un "tratamiento terapeutico" o "tratamiento curativo", al igual que para prevenir la metastasis y/o recurrencia de cancer de prostata opcionalmente despues o en combination con otros metodos de tratamiento, tal como se ha descrito antes, que se considera aqu que constituye el "tratamiento profilactico".
En una forma de realizacion particularmente preferida de la invencion el metodo segun la invencion se aplica en combinacion con cirugfa, terapia hormonal y/o tratamiento con un agente seleccionado de docetaxel, bevacizumab, talidoma, cabzitaxel, abiraterona, temozolomida.
[0028] El sujeto que se debe tratar es preferiblemente un varon humano.
[0029] Conforme a la presente invencion, la "fuente de un polipeptido" que se administra al humano segun el presente metodo, puede ser o comprender una protema o glicoprotema, una digestion de la protema o glicoprotema y/o sus fragmentos, que pueden estar en una forma purificada o comprendidos dentro de una composition cruda, preferiblemente de origen biologico, tales como lisados, sonicados o fijados de lmeas celulares eucariotas o procariotas.
Alternativamente, dicha fuente de un polipeptido puede ser o comprender (poli)peptidos sintetizados qdiriicamente o (poli)peptidos que han sido producidos in vitro enzimaticamente, que pueden estar en una forma purificada o pueden estar comprendidos dentro de una composicion cruda.
La fuente del polipeptido tambien puede ser o comprender un acido nucleico que codifica el polipeptido, a partir de un molde de ARN o de ADN.
Las moleculas de ARN o de ADN pueden ser ADN "desnudo", preferiblemente comprendidas en vesmulas o liposomas, o pueden estar comprendidas en un vector.
El vector puede ser cualquier vector de ADN (recombinante) o de ARN conocido en la tecnica, y es preferiblemente un plasmido donde los genes que codifican antfgenos de latencia estan operativamente enlazados a secuencias reguladoras que confieren expresion y traduccion de los mensajeros codificados.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
El vector tambien puede ser cualquier virus de ADN o ARN, tal como pero no limitado a Adenovirus, virus adeno-asociado (AAV), un retrovirus, un lentivirus, virus modificado de Vaccinia Ankara (MVA) o virus de viruela aviar, o cualquier otro vector vmco capaz de conferir expresion de polipeptidos que comprenden epftopos de latencia a un huesped.
Vectores de ADN pueden ser no integrantes, tales como vectores de replicacion de forma episomal o pueden ser vectores que se integran en el genoma huesped por integracion aleatoria o por recombinacion homologa. Un ejemplo de la construction de plasmidos que incorporan ADNc de ZP2 humano, plasmidos que podrian adecuadamente ser usados conforme a la presente invencion se pueden encontrar en una publicacion por Martinez et al. [(1996) Journal of Reproduction and Fertility Supplement 50:35-41].
[0030] Moleculas de ADN que comprenden genes que codifican los polipeptidos segun esta invention, opcionalmente introducidas en vectores tales como virus o plasmidos, se pueden integrar en un genoma de un huesped.
En una forma de realization preferida de la invencion, tal huesped puede ser un microorganismo. Preferiblemente tal microorganismo recombinante es un Mycobacterium, por ejemplo las especies M. Tuberculosis o M. Bovis y de la forma mas preferible M. bovis Bacillus Calmette Guerin (BCG), capaz de entregar a un huesped los polipeptidos o sus fragmentos segun la invencion.
BCG recombinante y metodos para la recombinacion son conocidos en la tecnica, por ejemplo en WO2004094469.
Tal microorganismo recombinante se puede formular como una vacuna recombinante viva y/o atenuada viva, como por ejemplo en Jacobs et al. 1987, Nature, 327(6122):532-5).
El vector tambien se puede comprender en un huesped de origen bacteriano, tal como pero no limitado a bacterias de Shigella o Salmonella atenuadas vivas y/o recombinantes.
[0031] El termino "epftopo" como se utiliza en este caso se refiere a una portion de un antfgeno, definido tfpicamente por un peptido, que es capaz de suscitar una respuesta celular o humoral inmunitaria cuando se presenta en un contexto in vivo relevante fisiologicamente.
Un "epftopo de celulas T" se refiere a un peptido o porcion del mismo que se enlaza a una molecula de MHC y se reconoce por celulas T cuando se presentan en moleculas de MHC.
Un epftopo de celulas T es capaz de inducir una respuesta inmune mediada por celulas via presentation directa o indirecta en las moleculas de MHC de membrana heterodimerica.
En resumen, las moleculas de MHC preferentemente enlazan residuos de aminoacidos particulares conocidas como residuos de "anclaje" (K. Falk et al., Nature 351:290-96 (1991)).
Esta caracterizacion permite identificar epftopos de reconocimiento de MHC de clase I y II dentro de cualquier secuencia peptfdica conocida.
En el presente contexto, el termino "epftopo restringido de MHC" es sinonimo de epftopo de celulas T.
El termino "epftopo restringido de MHC de clase I", como se utiliza en este caso, se refiere a secuencias de peptidos reconocidas por linfocitos T citotoxicos (llamados tambien celulas CD8+ o CTL) en asociacion con MHC de clase I.
El termino "epftopo restringido de MHC de clase II", como se utiliza en este caso, se refiere a un peptido reconocido por celulas T auxiliares (tambien llamadas celulas CD4+ o HTL).
Un "epftopo de celulas B" es una porcion de un antfgeno, tfpicamente un peptido, capaz de unirse a un sitio de union de antfgeno de una inmunoglobulina y por lo tanto capaz de estimular una respuesta humoral sin presentacion en una molecula de MHC.
Como se ha explicado aqu anteriormente el polipeptido util en la presente invencion, o el acido nucleico que codifica dicho polipeptido, comprende al menos un epftopo de celulas T.
El uso de polipeptidos que tambien comprenden un epftopo de celulas B sin embargo no esta excluido de la presente invencion.
Los presentes polipeptidos inmunogenicos tambien pueden incluir epftopos de celulas T multiples y, opcionalmente un epftopo de celulas B.
Cuando epftopos multiples estan presentes en un peptido, los epftopos se pueden orientar en serie o en una configuration anidada o superpuesta donde al menos un residuo de aminoacido se puede compartir por dos o mas epftopos.
[0032] El polipeptido de la invencion incluye preferiblemente uno o mas epftopos de union de clase I de MHC. Como se conoce generalmente por la persona experta, un antfgeno que comprende un epftopo de peptido unico sera util solo para tratar un subconjunto (pequeno) de pacientes que expresan el producto de alelo de MHC que es capaz de unir este peptido especfico.
Se ha calculado que, en seres humanos, las vacunas que contienen epftopos de CTL restringidos por HLA- A1, -A2, -A3, -A24 y -B7 ofrecerian cobertura para aproximadamente el 80 % de individuos de antecedentes mas etnicos.
Por lo tanto, si el presente metodo se utiliza para tratar un varon humano, es particularmente preferido que la presente fuente de un polipeptido comprenda una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos diferentes que comprende uno, mas preferiblemente dos, de la forma mas preferible tres epftopos de hZP3 de union de clase I de MHC seleccionados de epftopos restringidos de HLA-A1, HLA-A2, HLA-A3, HLA-A24 y HLA-B7; o
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
sus homologos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dicho uno o mas polipeptidos o sus homologos.
[0033] Segun otra forma de realizacion el polipeptido de la invencion incluye preferiblemente uno o mas epftopos de union de MHC de clase II.
Los productos de alelos de MHC de clase II mas frecuentemente encontrados en seres humanos incluyen HLA-DR1, -DR3, -DR4 y -DR7.
Por consiguiente, se prefiere que la presente fuente de un polipeptido comprenda una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos diferentes, dicho uno o mas polipeptidos diferentes que comprenden uno, mas preferiblemente dos y de la forma mas preferible tres epftopos de hZP3 nativos que unen MHC de clase II seleccionados de epftopos restringidos de HLA-DR1, HLA-DR3, HLA-DR4 y HLA-DR7; o sus homologos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dicho uno o mas polipeptidos o sus homologos.
[0034] En todavfa otra forma de realizacion, la presente fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos, dicho uno o mas polipeptidos que comprenden uno o mas epftopos de union de clase I de MHC y uno o mas epftopos de union de MHC de clase II, como se describe aqu arriba; sus homologos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos polipeptidos o sus homologos.
Aun, mas preferiblemente dicha fuente comprende una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos diferentes que juntos incluyen esencialmente todos los epftopos de MHC de clase I y de MHC de clase II comprendidos en glicoprotemas hZP3 nativas; u homologos de dicho uno o mas polipeptidos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifica dichos polipeptidos o sus homologos.
[0035] En una forma de realizacion, la presente fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos inmunogenicos diferentes, que uno o mas polipeptidos diferentes juntos comprenden al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70%, todavfa mas preferiblemente al menos 80%, todavfa mas preferiblemente al menos 90 % y de la forma mas preferible al menos 95 % de epftopos de union restringidos de MHC de clase I y de MHC de clase II comprendidos en glicoproteina hZP3 nativa; u homologos de dicho uno o mas polipeptidos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que los codifican.
[0036] En una forma de realizacion preferida la presente fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico, polipeptido que comprende al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70%, todavfa mas preferiblemente al menos 80%, todavfa mas preferiblemente al menos 90 % y de la forma mas preferible al menos 95 % del esqueleto de aminoacido completo de hZP3 o un homologo de dicho polipeptido o una secuencia de acidos nucleicos que codifica dicho polipeptido o su homologo.
[0037] En otra forma de realizacion particularmente preferida, la fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de una pluralidad de diferentes fragmentos de polipeptidos superpuestos de hZP3, dichos fragmentos de polipeptidos superpuestos diferentes tienen entre 18-60 aminoacidos de longitud, preferiblemente 18-45 aminoacidos, y juntos comprenden al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70%, todavfa mas preferiblemente al menos 80%, todavfa mas preferiblemente al menos 90 % y de la forma mas preferible al menos 95 % del esqueleto de aminoacido completo de dichas glicoprotemas de hZP3; homologos de dichos polipeptidos o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos polipeptidos o sus homologos.
Tfpicamente, el recubrimiento de aminoacido entre los diferentes fragmentos de polipeptido de 16-80 aminoacidos consecutivos es al menos 7 aminoacidos, preferiblemente al menos 8, mas preferiblemente al menos 9 y de la forma mas preferible al menos 10 aminoacidos.
[0038] Los motivos de union a MHC para los alelos de MHC de clase I y clase II mas comunes se han descrito.
Estos motivos especifican los residuos de aminoacidos que sirven como anclas de union de MHC para alelos de MHC de clase I y clase II espedficos.
Algoritmos basados en ordenador sofisticados que tienen en cuenta las anclas de union de MHC al igual que la secuencia de aminoacidos de un peptido se utilizan para predecir y cuantificar la afinidad de union de la interaction de peptido/MHC.
Asf, a partir de la entrada de la secuencia de aminoacidos conocida de (glico)protemas de zona pelucida, estos algoritmos hacen una lista de todos los epftopos de celulas T potenciales, cada uno con su puntuacion de union predictiva correspondiente.
Herramientas de bioinformatica comunmente conocidas para estos fines incluyen HLA_BIND, SYFPEITHI, NetMHC y TEPITOPE 2000 [ver referencias 1-6].
Alternativamente, el experto en la materia sera capaz de determinar epftopos de union de HTL y CTL experimentalmente utilizando experimentation estandar (Current Protocols in Immunology, Wiley Interscience 2004).
[0039] En algunos casos se ha observado que el mismo peptido se puede enlazar con diferentes productos de alelos de MHC I o II.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En una forma de realization, el uso de tales peptidos de union de MHC "promiscuos" en el presente metodo es particularmente preferido.
[0040] En una forma de realizacion, la presente invention proporciona una fuente de un polipeptido para usar en un metodo para la induction de una respuesta inmune primaria a glicoprotemas de zona pelucida nativa en un varon humano, donde el metodo comprende la etapa de administrar al humano una fuente de un polipeptido, dicho polipeptido comprendiendo un epftopo de celulas T de hZP3 restringido de MHC de clase I y/o MHC de clase II o una de sus variantes inmunologicamente activas, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico seleccionado de (glico)protemas hZP3, sus homologos, y fragmentos inmunologicamente activos de dichas (glico)protemas y sus homologos; o una secuencia de acidos nucleicos que codifica dicho polipeptido inmunogenico.
[0041] Segun una forma de realizacion particularmente preferida, la fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico seleccionado de (glico)protemas hZP3, su homologo y fragmentos activos inmunologicamente de estas (glico)protemas y sus homologos, o una secuencia de acidos nucleicos que codifica dicho polipeptido inmunogenico.
[0042] El termino "sus fragmentos inmunologicamente activos " sera generalmente entendido en la tecnica para referirse a un fragmento de un antfgeno de polipeptido que comprende al menos un epftopo, que significa que el fragmento al menos comprende 4, 5, 6,7 o 8 aminoacidos contiguos desde la secuencia del antfgeno de polipeptido.
Segun la presente invencion el fragmento comprende al menos un epftopo de celulas T.
Asf un "fragmento inmunologicamente activo " segun esta invencion comprende al menos 8, 9, 10, 11, 12, 13, o 14 aminoacidos contiguos desde la secuencia del antfgeno u homologo de (glico)protema hZP3 o derivado analogo.
Todavfa mas preferiblemente el fragmento comprende tanto un CTL como un epftopo auxiliar T.
De la forma mas preferible, sin embargo, el fragmento es un peptido que requiere tratamiento por una celula presentadora de antfgenos, es decir el fragmento tiene una longitud de al menos aproximadamente 18 aminoacidos, estos 18 aminoacidos no son necesariamente una secuencia contigua del antfgeno de polipeptidos.
[0043] El termino "sus homologos", como se utiliza en este caso se refiere a polipeptidos que difieren del polipeptido de origen natural por modificaciones menores, pero que mantienen el polipeptido basico y estructura de cadena lateral de la forma de origen natural.
Tales cambios incluyen, pero de forma no limitativa: cambios en una o unas pocas cadenas laterales de aminoacidos; cambios en uno o unos pocos aminoacidos, incluyendo deleciones (por ejemplo, una version truncada del peptido) inserciones y/o sustituciones; cambios en la estereoqunriica de uno o unos pocos atomos; aminoacidos N- o C- terminales adicionales; y/o derivaciones menores, incluyendo pero no limitado a: metilacion, glicosilacion, fosforilacion, acetilacion, miristoilacion, prenilacion, palmitacion, amidacion y/o adicion de glicosilfosfatidil inositol.
Como se utiliza en este caso, un homologo o analogo tiene funcionalidad mejorada o sustancialmente similar como el polipeptido de origen natural.
[0044] Un homologo aqu se entiende que comprende un polipeptido inmunogenico teniendo al menos 70%, preferiblemente al menos 80%, mas preferiblemente al menos 90%, todavfa mas preferiblemente al menos 95%, todavfa mas preferiblemente al menos 98 % y de la forma mas preferible al menos 99% de identidad de secuencia de aminoacidos con los polipeptidos ZP3 de origen natural de la invencion, cuando se alinean optimamente, tal como por los programas GAP o BESTFIT que usan parametros por defecto, y siguen siendo capaces de suscitar al menos la respuesta inmune obtenible asf.
Generalmente, los parametros por defecto de GAP se usan, con una penalization por creation de espacio = 8 y penalizacion por extension de espacio = 2.
Para las protemas la matriz de puntuacion por defecto es Blosum62 (Henikoff & Henikoff, 1992, PNAS 89,915-919).
Alineaciones de secuencia y puntuaciones para el porcentaje de identidad de secuencias se pueden determinar utilizando programas informaticos, tal como el GCG Wisconsin Package, version 10.3, Scranton Road, San Diego, CA 92121-3752, EE.UU.
Alternativamente el porcentaje de similitud o identidad se puede determinar por la busqueda contra las bases de datos tales como FASTA, BLAST, etc.
[0045] Segun una forma de realizacion de la invencion, los presentes polipeptidos inmunogenicos tal y como se define aqu antes, son glicosilados.
Sin deseo de estar ligados por la teoria se supone que por la glicosilacion de estos polipeptidos su inmunogenicidad es aumentada.
Por lo tanto, segun una forma de realizacion preferida, el polipeptido inmunogenico anteriormente mencionado tal y como se define aqu antes, es glicosilado, con un contenido de carbohidrato variable de 1080 % en peso, basado en el peso total de la glicoprotema o polipeptido glicosilado.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Mas preferiblemente dicho contenido de carbohidrato varia de 15-70 % en peso, todavfa mas preferiblemente de 20-60 % en peso.
En otra forma de realization, dicho polipeptido inmunogenico glicosilado comprende un modelo de glicosilacion que es similar al de hZP3 (o su fragmento).
Se supone que esto incluso aumenta mas la inmunogenicidad de dicho polipeptido.
Asf, en una forma de realizacion se prefiere que el polipeptido inmunogenico comprenda un modelo de glicosilacion que es similar a aquel del correspondiente (fragmento de) glicoprotema hZP3.
Sin embargo, como se conoce por la persona experta, tecnicas recombinantes para la production del polipeptido inmunogenico pueden producir polipeptidos que son no glicosilados o que contienen modelos de glicosilacion diferentes, dependiendo de entre otras cosas la election de las celulas huesped, como sera explicado aqu mas abajo.
Sera claro para la persona experta, que el uso de polipeptidos recombinantes, teniendo modelos de glicosilacion distintos a aquel del correspondiente (fragmento) de hZP3, esta tambien totalmente dentro del campo de la presente invention y puede ser preferido en formas de realizacion determinadas, por ejemplo para cuestiones practicas.
[0046] El presente metodo de immunization preferiblemente comprende la administration de una fuente de fragmentos de polipeptidos inmunogenicamente activos, dichos fragmentos de polipeptido siendo seleccionados de fragmentos de protema hZP3 y/o su homologo tal y como se define aqu anteriormente, dichos fragmentos de polipeptido que comprenden CTL dominantes y/o epftopos de HTL y cuyos fragmentos estan entre 18 y 45 aminoacidos de longitud.
Se ha observado que los peptidos que tienen una longitud entre 18 y 45 aminoacidos proporcionan propiedades inmunogenicas superiores como se describe en WO 02/070006.
Los peptidos pueden ser sintetizados ventajosamente qunriicamente y pueden opcionalmente ser (parcialmente) superpuestos y/o tambien se pueden unir a otras moleculas, peptidos o protemas.
Los peptidos tambien se pueden fusionar para formar protemas sinteticas, como en PCT/NL03/00929 y en Welters et al. (Vaccine. 2004 Dec 2,23(3):305-11).
Tambien puede ser ventajoso anadir al termino amino o carboxi del peptido fracciones quumicas o aminoacidos (modificados o D) adicionales para aumentar la estabilidad y/o reducir la biodegradabilidad del peptido.
Para mejorar la inmunogenicidad / fracciones inmunoestimulantes pueden ser unidas, por ejemplo por lipidacion o glicosilacion.
Para mejorar la solubilidad del peptido, puede ser utilizada la adicion de aminoacidos cargados o polares, para mejorar la solubilidad y aumentar la estabilidad in vivo.
[0047] Para fines de inmunizacion los polipeptidos inmunogenicos anteriormente mencionados segun la invencion tambien se pueden fusionar con protemas tales como pero no limitadas a toxina/toxoide de tetanos, toxina/toxoide de difteria u otras moleculas portadoras.
Los polipeptidos segun la invencion tambien se pueden fusionar ventajosamente con protemas de choque termico, tal como gp96 (GRP94) (murino) endogeno recombinante como un portador para peptidos immunodominantes como se describe en (referencias: Rapp UK and Kaufmann SH, Int Immunol. 2004 Apr; 16(4):597-605; Zugel U, Infect Immun. 2001 Jun;69(6):4164-7) o protemas de fusion con Hsp70 (Triebel et al; WO9954464).
[0048] Los residuos de aminoacidos individuales de los presentes (poli)peptidos inmunogenicos de la invencion se pueden incorporar en el peptido por un enlace peptfdico o mimetico de enlace peptfdico.
Un mimetico de enlace peptfdico de la invencion incluye modificaciones del esqueleto peptfdico bien conocidas por los expertos en la tecnica. Tales modificaciones incluyen modificaciones de amida nitrogeno, el a-carbono, amida carbonilo, sustitucion completa del enlace amida, extensiones, deleciones o reticulaciones del esqueleto.
Ver, generalmente, Spatola, Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, Vol. VII (Weinstein ed., 1983).
Diferentes modificaciones del esqueleto peptfdico son conocidas, estas incluyen, y [CH2S], y [CH2NH], y [CSNH2], y [NHCO], y [COCH2] y y [(E) o (Z) CH=CH].
La nomenclatura usada mas arriba, sigue aquella sugerida por Spatola, arriba.
En este contexto, y indica la ausencia de un enlace amida.
La estructura que reemplaza el grupo amida esta especificado entre parentesis.
[0049] Un mimetico de aminoacidos tambien se puede incorporar en los polipeptidos.
Un "mimetico de aminoacido" como se usa aqu es una fraction diferente de un aminoacido de origen natural que conformacionalmente y funcionalmente sirve como un sustituto para un aminoacido en un polipeptido de la presente invencion.
Tal fraccion sirve como un sustituto para un residuo de aminoacido si esta no interfiere con la capacidad del peptido para suscitar una respuesta inmune contra los epftopos de celulas T hZP3.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Mimeticos de aminoacidos pueden incluir aminoacidos no protemicos, tal como p-, g-, S-aminoacidos, p-, g-, S- iminoacidos (tal como acido piperidina-4-carboxNico) al igual que muchos derivados de L a-aminoacidos.
Un numero de mimeticos de aminoacidos adecuados se conocen por el experto en la materia, estos incluyen ciclohexilalanina, acido 3-ciclohexilpropionico, L-adamantilo alanina, acido adamantilacetico y similares. Mimeticos de peptidos adecuados para peptidos de la presente invention se discuten por Morgan y Gainor, (1989) Ann. Repts. Med. Chem. 24:243-252.
[0050] Segun una forma de realization preferida, el presente metodo comprende la administration de una composition que comprende uno o mas de los presentes polipeptidos inmunogenicos tal y como se define mas arriba, y al menos un excipiente.
Los excipientes se conocen bien en la tecnica de farmacia y pueden por ejemplo encontrarse en libros de texto tales como Remmington's pharmaceutical sciences, Mack Publishing, 1995.
[0051] El presente metodo para immunization puede comprender ademas la administracion, preferiblemente la coadministracion, de al menos un adyuvante.
Adyuvantes pueden comprender cualquier adyuvante conocido en la tecnica de vacunacion y se pueden seleccionar manuales como Current Protocols in Immunology, Wiley Interscience, 2004.
[0052] Los adyuvantes estan aqu destinados a incluir cualquier sustancia o compuesto que, cuando se usan, en combination con un antfgeno, para inmunizar un humano o un animal, estimulan el sistema inmunologico, asf provocando, aumentando o facilitando la respuesta inmune contra el antfgeno, preferiblemente sin generar una respuesta inmune espetifica al adyuvante mismo.
Adyuvantes preferidos mejoran la respuesta inmune contra un antfgeno dado por al menos un factor de 1.5, 2, 2.5, 5, 10 o 20, en comparacion con la respuesta inmune generada contra el antfgeno bajo las mismas condiciones pero en ausencia del adyuvante.
Pruebas para determinar la mejora de promedio estadfstico de la respuesta inmune contra un antfgeno dado como se produce por un adyuvante en un grupo de animales o seres humanos sobre un grupo de control correspondiente estan disponibles en la tecnica. El adyuvante es preferiblemente capaz de aumentar la respuesta inmune contra al menos dos antfgenos diferentes.
El adyuvante de la invencion usualmente sera un compuesto que es extranjero a un humano, asf excluyendo compuestos inmunoestimuladores que son endogenos a los seres humanos, tal como por ejemplo interleucinas, interferones y otras hormonas.
[0053] Un numero de adyuvantes son bien conocidos por un experto en la tecnica. Adyuvantes adecuados incluyen por ejemplo adyuvante de Freund incompleto, alumbre, fosfato de aluminio, hidroxido de aluminio, N- acetil-muramil-L-treonil-D-isoglutamina (tr-MDP), N-acetil-normuramil-L-alanil-D-isoglutamina (CGP 11637, referido como nor-MDP), N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutaminil-L-alanina-2-(1'-2'-dipalmitoil-sn-glicero-3- hidroxi-fosforiloxi)-etilamina (CGP 19835A, referido como MTP-PE), DDA (bromuro de 2- dimetildioctadecilamonio), polilC, Poli-A-poli-U, RIBI™, GERBU™, Pam3™, Carbopol™, Specol™, Titermax™, toxoide tetanico, toxoide de difteria, protemas de membrana externa meningococica, protema de difteria CRM197.
Adyuvantes preferidos comprenden un ligando que se reconoce por un receptor tipo Toll (TLR) presente en celulas presentadoras de antfgenos.
Varios ligandos reconocidos por TLR se conocen en la tecnica e incluyen por ejemplo lipopeptidos (ver por ejemplo WO 04/110486), lipopolisacaridos, peptidoglicanos, acidos lipoteicoicos, lipoarabinomananos, lipoprotemas (de micoplasma o espiroquetas), ARN bicatenario (poli I:C), ADN no metilado, flagelina, ADN que contiene CpG, e imidazoquinolinas, tambien derivados de estos ligandos teniendo modificaciones quumicas.
[0054] El metodo para inmunizacion puede comprender ademas la administracion, preferiblemente la coadministracion, de una molecula de union CD40 para mejorar una respuesta de CTL y asf mejorar los efectos terapeuticos de los metodos y composiciones de la invencion.
El uso de moleculas de union CD40 es descrito en WO 99/61065.
La molecula de union CD40 es preferiblemente un anticuerpo o su fragmento o un ligando CD40 o una de sus variantes, y se puede adicionar separadamente o se puede comprender dentro de una composicion segun la corriente invencion.
Para usos terapeuticos, los presentes polipeptidos inmunogenicos o secuencias de acidos nucleicos que los codifican o las presentes composiciones que comprenden estos polipeptidos o secuencias de acidos nucleicos que los codifican se administran a un paciente que sufre de un tumor de prostata y posiblemente su metastasis o a un paciente que ha recibido otros metodos de tratamiento de los tumores de prostata, por ejemplo cualquiera de los metodos convencionales descritos aquf antes, en una cantidad suficiente para inducir una respuesta autoinmune primaria dirigida contra glicoprotemas ZP nativas y celulas tisulares que expresan glicoprotemas ZP.
Una cantidad suficiente para realizarlo esta definida como una "dosis profilacticamente eficaz" o "terapeuticamente eficaz".
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Tales dosificaciones eficaces dependeran de una variedad de factores con la condicion y estado general de salud del paciente.
Asf regnmenes de dosificacion se pueden determinar y ajustar por personal medico preparado para proporcionar el efecto terapeutico o profilactico optimo.
[0055] En el metodo uno o mas polipeptidos inmunogenicos se administran tfpicamente a una dosificacion de aproximadamente 1 |jg/kg peso corporal del paciente o mas al menos una vez.
Frecuentemente las dosificaciones son mayores de 10 jg/kg.
Segun la presente invencion las dosificaciones preferiblemente se encuentran en la gama de 1 jg/kg a 1 mg/kg.
[0056] Segun una forma de realizacion preferida los regfmenes de dosificacion tfpicos comprenden administrar una dosificacion de 1-1000 jg/kg, mas preferiblemente 10-500 jg/kg, todavfa mas preferiblemente 10-150 jg/kg, una vez, dos veces o tres veces por semana durante un periodo de una, dos, tres, cuatro o cinco semanas.
Segun una forma de realizacion preferida 10-100 jg/kg se administra una vez por semana durante un periodo de una o dos semanas.
[0057] El metodo preferiblemente comprende la administracion de los presentes polipeptidos inmunogenicos y composiciones que los comprenden por medio de la via parenteral u oral, preferiblemente la via parenteral. En otra forma de realizacion de la invencion, el metodo comprende la administracion ex vivo de una composition comprendiendo los presentes peptidos inmunogenicos a celulas mononucleares desde la sangre del paciente, particularmente DC aisladas de la misma.
Un compuesto farmaceutico para facilitar la cosecha de DC puede ser usado, tal como Progenipoietina.TM. (Monsanto, St. Louis, Mo.) o Gm-CSF/IL-4.
Despues de impulsar las DC con peptidos y lavado para eliminar peptidos no unidos, las DC se infunden de nuevo en el paciente.
En esta forma de realizacion, una composicion es proporcionada que comprende DC impulsadas con peptido que presentan los epftopos impulsados con peptidos en moleculas HLA en una de sus superficies.
Metodos de induccion de una respuesta inmune utilizando DC impulsadas con peptidos ex vivo son conocidos por la persona experta.
[0058] Otro aspecto de la invencion se refiere a un producto farmaceutico que comprende como ingrediente activo la presente fuente de un polipeptido tal y como se define aqu antes.
Mas particularmente la preparation farmaceutica comprende como ingrediente activo uno o mas de los polipeptidos inmunogenicos anteriormente mencionados seleccionados del grupo de protemas hZP3, sus homologos y fragmentos de dichas protemas hZP3 y sus homologos, o, alternativamente, un vector de terapia genica tal y como se define aqu mas arriba.
[0059] Segun una primera forma de realizacion se preve una preparacion farmaceutica comprendiendo uno o mas de los polipeptidos inmunogenicos de la invencion.
La concentracion de dicho polipeptido en la composicion farmaceutica puede variar mucho, es decir, de menos de aproximadamente 0,1% en peso, normalmente siendo al menos aproximadamente 1% en peso hasta tanto como 20% en peso o mas.
[0060] La composicion comprende preferiblemente al menos un portador farmaceuticamente aceptable ademas de la sustancia activa.
El portador farmaceutico puede ser cualquier sustancia compatible, no toxica, adecuada para entregar los polipeptidos inmunogenicos o vectores de terapia genetica al paciente.
Para polipeptidos, agua esterilizada, alcohol, grasas, ceras, y solidos inertes se pueden utilizar como el portador.
Adyuvantes farmaceuticamente aceptables, agentes tampon, agentes de dispersion, y similares, tambien se pueden incorporar en las composiciones farmaceuticas.
[0061] Segun una forma de realizacion particularmente preferida, la presente composicion farmaceutica comprende un adyuvante, tal y como se define con mas detalle aqu anteriormente.
Adyuvantes para incorporation en la presente composicion son preferiblemente seleccionados del grupo de ligandos que se reconocen por un receptor tipo Toll (TLR) presente en celulas presentadoras de antfgenos, incluyendo lipopeptidos (ver por ejemplo WO 04/110486), lipopolisacaridos, peptidoglicanos, acidos lipoteicoicos, lipoarabinomanano, lipoprotemas (de micoplasma o espiroquetas), ARN bicatenario (poli I:C), ADN no metilado, flagelina, ADN que contiene CpG, e imidazoquinolinas, tambien derivados de estos ligandos teniendo modificaciones quHriicas.
La persona experta sera capaz de determinar las cantidades exactas de alguno de estos adyuvantes para ser incorporados en los presentes productos farmaceuticos para hacerlos suficientemente inmunogenicos.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Segun otra forma de realizacion preferida, el presente producto farmaceutico puede comprender uno o mas ingredientes adicionales que se utilizan para mejorar la inmunidad de CTL como se explica aqu anteriormente.
Segun una forma de realizacion particularmente preferida la presente preparacion farmaceutica comprende una molecula de union CD40.
[0062] Metodos de produccion de las composiciones farmaceuticas que comprenden polipeptidos son descritos en las patentes US No.'s 5,789,543 y 6,207,718.
La forma preferida depende del modo destinado de administracion y aplicacion terapeutica.
[0063] Para terapia genetica, los vectores, por ejemplo, un plasmido, fagemido, fago, cosmido, virus, retrovirus, episoma o elemento transponible, que comprende una secuencia de acidos nucleicos que codifica un polipeptido inmunogenico tal y como se define aqu anteriormente se puede incorporar en composiciones farmaceuticas.
Vectores de terapia genetica se pueden entregar a un sujeto por, por ejemplo, inyeccion intravenosa, administracion local (ver Pat. U.S. N° 5,328,470) o por inyeccion estereotactica (ver por ejemplo, Chen et al., PNAS 91:3054-3057,1994).
La composition farmaceutica del vector de terapia genica puede incluir el vector de terapia genica en un diluyente aceptable, o puede incluir una matriz de liberation lenta donde el vehfculo de administracion de gen es insertado.
Alternativamente, donde el vector de administracion de gen completo se puede producir intacto a partir de celulas recombinantes, por ejemplo, vectores retrovmcos, el producto farmaceutico puede incluir una o mas celulas que producen el sistema de entrega de genes.
[0064] Los presentes polipeptidos inmunogenicos son preferiblemente administrados parenteralmente.
Los polipeptidos para preparaciones para administracion parenteral deben ser esteriles.
La esterilizacion se realiza facilmente por membranas de filtration esteriles a traves de filtration, antes de o despues de la liofilizacion y reconstitucion.
La via parenteral para administracion del polipeptido es conforme a metodos conocidos, por ejemplo, inyeccion o infusion por vfas intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intraarterial, subcutanea o intralesional.
El polipeptido se administra continuamente por infusion o por inyeccion en bolo.
Una composicion tfpica para infusion intravenosa podria ser elaborada para contener 10 a 50 ml de NaCl esteril al 0,9% o glucosa al 5% opcionalmente suplementada con una solution de albumina al 20% y entre 10 |jg y 50 mg, preferiblemente entre 50 |jg y 10 mg, del polipeptido.
Una composicion farmaceutica tfpica para inyeccion intramuscular seria formada para contener, por ejemplo, 1-10 ml de agua tamponada esteril y entre 10 jg y 50 mg, preferiblemente entre 50 jg y 10 mg, del polipeptido de la presente invencion.
Metodos para la preparacion de composiciones administrables parenteralmente se conocen bien en la tecnica y se describen con mas detalle en varias fuentes, incluyendo, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Science (15a ed., Mack Publishing, Easton, PA, 1980).
[0065] Para administracion oral, la sustancia activa se puede administrar en formas de dosificacion solidas, tales como capsulas, comprimidos, y polvos, o en formas de dosificacion lfquidas, tales como elixires, jarabes, y suspensiones.
Componente(s) activo(s) se pueden encapsular en capsulas de gelatina junto con ingredientes inactivos y portadores en polvo, tal como glucosa, lactosa, sacarosa, manitol, almidon, celulosa o derivados qunriicos de celulosa, estearato de magnesio, acido estearico, sacarina de sodio, talco, carbonato de magnesio y similar. Ejemplos de ingredientes inactivos adicionales que se pueden adicionar para proporcionar color deseable, sabor, estabilidad, capacidad de tampon, dispersion u otras caracteristicas deseables conocidas son oxido de hierro rojo, gel de sflice, lauril sulfato de sodio, dioxido de titanio, tinta blanca comestible y similar.
Diluyentes similares pueden utilizarse para hacer pastillas comprimidas.
Tanto pastillas como capsulas se pueden fabricar como productos de liberacion prolongada para proveer a la liberacion continua de medication durante un periodo de horas.
Pastillas comprimidas pueden ser azucar recubierta o pelfcula recubierta para ocultar cualquier sabor desagradable y proteger la pastilla de la atmosfera, o recubierta enterica para desintegracion selectiva en el tracto gastrointestinal.
Formas de dosificacion Kquidas para administracion oral pueden contener coloration y aromatizacion para aumentar la aceptacion del paciente.
[0066] Los polipeptidos inmunogenicos para usar en la presente invention se pueden preparar utilizando tecnicas recombinantes donde una secuencia de nucleotidos que codifica el polipeptido de interes se expresa en celulas huesped adecuadas tal como se describen en Ausubel et al., "Current Protocols in Molecular Biology", Greene editorial y Wiley-Interscience, Nueva York (1987) y en Sambrook y Russell (2001) "Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3a edicion), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Nueva York.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
[0067] Tambien ver, Kunkel (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. 82:488 (describiendo mutagenesis sitio dirigida) y Roberts et al. (1987) Nature 328:731-734 or Wells, J.A., et al. (1985) Gene 34:315 (describiendo mutagenesis de casete).
[0068] Un ejemplo de la preparacion de ZPA y ZPB humano recombinante, usando baculovirus se pueden encontrar en la publicacion anteriormente mencionada por Martinez et al. [(1996) Journal of Reproduction and Fertility Supplement 50:35-41].
[0069] Ejemplos de la preparacion de ZPA y ZPB humano recombinante, usando bacterias (E. coli), celulas de levadura (Pichia pastoris), celulas de insecto (virus de poliedrosis nuclear multiple de autographa californica) y celulas de ovario de hamster chino (CHO) como sistemas de expresion se describen en una publicacion por Harris et al. [(1999) Protein Expression and Purification 16:298-307].
[0070] Un aspecto de la invencion asf se refiere a un vector que comprende una molecula de acido nucleico que codifica el presente polipeptido inmunogenico tal y como se define aqu antes.
Preferiblemente el vector es un vector de duplication que incluye un origen de replication (o secuencia de replication autonomamente) que asegura multiplication del vector en un huesped adecuado para el vector. Alternativamente el vector es capaz de integrarse en el genoma de la celula huesped, por ejemplo, a traves de recombinacion homologa o de otro modo.
Un vector particularmente preferido es un vector de expresion donde una secuencia de nucleotidos que codifica un polipeptido tal como se ha definido anteriormente, esta operativamente enlazado a un promotor capaz de dirigir la expresion de la secuencia codificante en una celula huesped para el vector.
[0071] Como se utiliza en este caso, el termino "promotor" se refiere a un fragmento de acido nucleico que funciona para controlar la transcripcion de uno o mas genes, situados arriba con respecto a la direccion de transcripcion del sitio de iniciacion de transcripcion del gen, y se identifica estructuralmente por la presencia de un sitio de union para RNA-polimerasa dependiente del ADN, sitios de initiation de la transcription y cualquiera de las otras secuencias de ADN, incluyendo, pero no limitado a sitios de union de factor de transcripcion, sitios de union a protemas activadoras y represoras, y cualquiera de las otras secuencias de nucleotidos conocidas por un experto en la tecnica para actuar directa o indirectamente para regular la cantidad de transcripcion desde el promotor.
Un promotor "constitutivo" es un promotor que es activo bajo muchas condiciones fisiologicas y evolutivas.
Un promotor "inducible" es un promotor que es regulado dependiendo de las condiciones fisiologicas o evolutivas.
Un promotor "espetifico del tejido" solo es activo en tipos espedficos de celulas/tejidos diferenciados.
[0072] Vectores de expresion permiten que los polipeptidos inmunogenicos tales como se han definido anteriormente se preparen utilizando tecnicas recombinantes donde una secuencia de nucleotidos que codifica el polipeptido de interes se expresa en celulas adecuadas, por ejemplo celulas cultivadas o celulas de un organismo multicelular, tal como se describe en Ausubel et al., "Current Protocols in Molecular Biology", Greene Publishing y Wiley-Interscience, Nueva York (1987) y en Sambrook y Russell (2001, supra). Tambien ver, Kunkel (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. 82:488 (describiendo mutagenesis sitio dirigida) y Roberts et al. (1987) Nature 328:731-734 o Well, J.A., et al. (1985) Gene 34:315 (describiendo mutagenesis de casete).
[0073] Tfpicamente, acidos nucleicos que codifican los polipeptidos deseados se usan en vectores de expresion.
La frase "vector de expresion" generalmente se refiere a secuencias de nucleotidos que son capaces de afectar la expresion de un gen en huespedes compatibles con tales secuencias.
Estos vectores de expresion tfpicamente incluyen por lo menos secuencias de promotor adecuadas y opcionalmente, senales de termination de la transcripcion.
Factores adicionales necesarios o que ayudan a efectuar expresion tambien pueden usarse como se describe en este caso.
ADN que codifica un polipeptido se incorpora en constructos de ADN capaces de introducirse en y expresarse en un cultivo celular in vitro.
Espedficamente, constructos de ADN son adecuados para la replicacion en un huesped procariotico, tales como bacterias, por ejemplo, E. coli, o se pueden introducir en una lmea celular eucariota cultivada de mairnfero, planta, insecto, por ejemplo, Sf9, levadura, hongos u otras.
[0074] Constructos de ADN preparados para la introduction en un huesped particular tfpicamente incluye un sistema de replicacion reconocido por el huesped, el segmento de ADN destinado que codifica el polipeptido deseado, y la iniciacion transcripcional y traslacional y secuencias reguladoras de terminacion operativamente enlazadas al segmento codificante del polipeptido.
Un segmento de ADN es "operativamente enlazado" cuando se coloca en una relation funcional con otro segmento de ADN.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Por ejemplo, un promotor o intensificador esta operativamente enlazado a una secuencia codificante si estimula la transcripcion de la secuencia.
El ADN para una secuencia senal esta operativamente enlazado al ADN que codifica un polipeptido si se expresa como una preprotema que participa en la secrecion del polipeptido.
Generalmente, las secuencias de ADN que estan operativamente enlazadas son contiguas, y, en el caso de una secuencia senal, tanto en la fase contigua como de lectura.
Sin embargo, los potenciadores no necesitan ser contiguos con las secuencias codificantes cuya transcripcion controlan.
La conexion se realiza por union a sitios de restriction convenientes o a adaptadores o enlazadores insertados en su lugar.
[0075] La selection de una secuencia promotora apropiada generalmente depende de la celula huesped seleccionada para la expresion del segmento de ADN.
Ejemplos de secuencias de promotor adecuadas incluyen promotores procarioticos, y eucarioticos bien conocidos en la tecnica (ver, por ejemplo Sambrook y Russell, 2001, supra).
Las secuencias reguladoras transcripcionales tfpicamente incluyen un intensificador heterologo o promotor que se reconoce por el huesped.
La seleccion de un promotor apropiado depende del huesped, pero promotores tales como los promotores trp, lac y de fago, promotores de ARNt y promotores de enzima glicolftica son conocidos y disponibles (ver, por ejemplo Sambrook y Russell, 2001, supra).
Vectores de expresion incluyen el sistema de replication y secuencias reguladoras transcripcionales y traduccionales con el sitio de insercion para el segmento codificante del polipeptido pueden ser empleados. Ejemplos de combinaciones factibles de lmeas celulares y vectores de expresion son descritos en Sambrook y Russell (2001; supra) y en Metzger et al. (1988) Nature 334: 31-36.
Por ejemplo, vectores de expresion adecuados se pueden expresar en celulas de levadura, por ejemplo
S.cerevisiae, por ejemplo, celulas de insecto, por ejemplo, celulas Sf9, celulas mairnferas, por ejemplo, celulas CHO y celulas bacterianas, por ejemplo, E. coli.
Como los procariotas no poseen los organulos necesarios para glicosilacion, los polipeptidos producidos por procariotas no tendran cadenas laterales de carbohidrato.
Eucariotas tienen la maquinaria de glicosilacion, pero celulas de levadura daran un modelo de glicosilacion diferente al de las celulas mamnferas.
Por lo tanto se prefiere usar un sistema de expresion que da el modelo de glicosilacion mas "natural".
Para este fin, las celulas mai^eras son las mas preferidas.
Lmeas celulares con maquinaria de glicosilacion similar a la de un humano pueden ser particularmente utiles, al suponerse que los antfgenos segun la presente invention con un modelo de glicosilacion similar al de los glicopolipeptidos de zona pelucida humanos correspondientes pueden tener inmunogenicidad aumentada. Lmeas celulares adecuadas incluyen celulas CHO, vease, por ejemplo, Pat. U.S N° 5,272,070 y en particular lmeas celulares de ovario o de folmulo humano, cf. WO 99/42581.
[0076] Mutagenesis y expresion in vitro de protemas mutantes son descritas generalmente en Ausubel et al. (1987; supra) y en Sambrook y Russell (2001, supra).
Tambien vease, Kunkel (1985, supra; que describen la mutagenesis sitio dirigida) y Roberts et al. (1987, supra; que describen la mutagenesis de casete).
[0077] Otro metodo para la preparacion de los polipeptidos inmunogenicos presentes es emplear un sistema de transcripcion/traduccion in vitro.
El ADN que codifica un polipeptido se clona en un vector de expresion como se describe supra.
El vector de expresion es luego transcrito y traducido in vitro.
El producto de traduction se puede usar directamente o ser primero purificado.
Los polipeptidos resultantes de la traduccion in vitro tfpicamente no contienen las modificaciones postraduccionales presentes en los polipeptidos sintetizados in vivo, aunque debido a la presencia inherente de los microsomas alguna modification postraduccional puede ocurrir.
Metodos para la smtesis de polipeptidos por transferencia in vitro son descritos por, por ejemplo, Berger & Kimmel, Methods in Enzymology, volumen 152, Guide to Molecular Cloning Techniques, Academic Press, Inc., San Diego, CA, 1987.
[0078] Otro aspecto de la invencion asf se refiere a un huesped que comprende un vector tal como se ha definido anteriormente.
Las celulas huesped pueden ser celulas huesped procariotas o eucariotas como se ha indicado anteriormente.
La celula huesped puede ser una celula huesped que es adecuada para cultivo en medios Kquidos o solidos. Alternativamente, la celula huesped es una celula que es parte de un organismo multicelular tal como una planta transgenica o animal, preferiblemente un animal no humano.
[0079] Otro aspecto de la invencion se refiere a un metodo para la production del presente polipeptido inmunogenico tal como se ha definido anteriormente.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
El metodo comprende el paso del cultivo de una celula huesped tal como se ha definido anteriormente bajo condiciones propicias para la expresion del polipeptido.
Opcionalmente el metodo puede comprender la recuperacion del polipeptido.
El polipeptido puede ser recuperado por ejemplo desde el medio de cultivo por tecnicas de purificacion de protema estandar, incluyendo una variedad de metodos de cromatograffa conocidos en la tecnica per se.
[0080] Otro aspecto de la invencion se refiere a un animal transgenico que comprende en sus celulas germinales y somaticas un vector tal como se ha definido anteriormente.
El animal transgenico es preferiblemente un animal no humano.
Metodos para generar animales transgenicos son por ejemplo descritos en WO 01/57079 y en las referencias citadas en el mismo.
Tales animales transgenicos se pueden utilizar en un metodo para la production de un polipeptido tal como se ha definido anteriormente, el metodo comprendiendo el paso de la recuperacion de un fluido corporal a partir de un animal transgenico comprendiendo el vector o su descendiente hembra, donde el fluido corporal contiene el polipeptido, y, opcionalmente recuperacion del polipeptido desde el fluido corporal.
Tales metodos son tambien descritos en WO 01/57079 y en las referencias citadas en el mismo.
El fluido corporal con el polipeptido es preferiblemente sangre o mas preferiblemente leche.
[0081] Otro aspecto de la invencion se refiere a una planta transgenica que comprende en sus celulas un vector tal como se ha definido anteriormente.
Metodos para generar plantas transgenicas son por ejemplo descritos en U.S 6,359,196 y en las referencias citadas en el mismo.
Tales plantas transgenicas se pueden utilizar en un metodo para la produccion de un polipeptido tal como se ha definido anteriormente, el metodo comprendiendo el paso de la recuperacion de una parte de una planta transgenica que comprende en sus celulas el vector o una parte de un descendiente de tal planta transgenica, por la cual la parte de la planta contiene el polipeptido, y, opcionalmente recuperacion del polipeptido desde la parte de la planta.
Tales metodos son tambien descritos en U.S. 6,359,196 y en las referencias citadas en el mismo.
[0082] La invencion es posteriormente ilustrada en los siguientes ejemplos, que no estan destinados a limitar el ambito de la invencion de ninguna manera.
EJEMPLOS
Experimento 1: expresion de ZP3 en las muestras de carcinoma de prostata humana
[0083] La expresion de ZP3 en el tejido de tumor de prostata humana se determina utilizando metodos inmunohistoqunTiicos.
Muestras de tejidos de tumor de prostata originadas de pacientes diferentes fueron obtenidas de un instituto de patologfas en los Pafses Bajos.
En total 16 muestras de carcinoma de prostata humano y otras 6 muestras de tumor de prostata de otras fuentes diferentes fueron tenidas para ZP3 (IHC & IF), alfa-metil-CoA-Racemasa AMACR (un marcador IHC de carcinoma de prostata como 85% de todos los tintes de cancer de prostata para estas) y citoqueratina 5/6 (para celulas basales).
[0084] Determinaciones inmunohistoqufmicas fueron hechas con anticuerpos ZP3 humanos, anticuerpos policlonales de conejo para ZP3 recombinante humano y con anticuerpos policlonales de cabra.
[0085] Muestras de tejido de prostata normal sirvieron como control.
Ovocitos inmaduros recogidos de folfculos antrales despues de la estimulacion ovarica para IVF fueron tenidos como controles positivos.
Ademas, unas muestras de hfgado normal y tejido de testfculo normal fueron usadas como unos controles negativos.
[0086] El siguiente protocolo de IHC fue usado para todas las muestras Dia 1
[0087]
1. Lamina de incubation en 57°C durante 30 min.
2. Desparafinizacion e hidratacion:
a) Xileno - 2 x 5 min,
b) Abs. EtOH - 2 x 5 min,
c) 96% EtOH - 2 x 5 min,
d) 70% EtOH - 2 x 5min,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
e) 50% EtOH - 2 x 5 min,
f) dH20 - 1 x 5 min,
g) PBS -1 x 5 min.
3. Recuperacion del antfgeno:
a) 10mM tampon de citrato sodico (pH 6.0) en horno microondas durante 15 min,
b) Enfriar durante 15-20 min,
c) PBS - 3 x 5 min.
4. Enfriamiento rapido de peroxidasa endogena (RT en la oscuridad, 3% H2O2 en metanol - 10 min recomendado para secciones de parafina)
5. PB S - 3 x 5 min.
6. Bloqueo - NGS 15% en TPBS - 90 min (RT en camara oscura/humidificada).
7. Anticuerpo primario 1:250 con 5% NGS en TPBS - durante la noche/espacio enfriado/camara humidificada).
[0088] Para control positivo (ovario WT) 1:600 anticuerpo primario diluido fue usado.
Para secciones tumorales, el anticuerpo fue mas concentrado - 1:250.
Dia 2
[0089]
8. PB S - 3 x 5 min.
9. Anticuerpo secundario - anticonejo de cabra (1:1000) con 5% NGS en TPBS - 90 min (RT / camara humidificada).
10. PBS-3 x 5 5 min
11. Incubacion con reactivo ABC diluido 1:50 en PBS (60 min/RT en camara oscura/humidificada).
12. PBS - 3 x 5 min.
13. DBA
14. Aqua - 2 x 5 min.
15. Hematoxilina - 60 s.
16. Aqua - 2 x 5 min.
17. Deshidratacion:
a) 50% EtOH - 2 x 5 min
b) 70% EtOH - 2 x 5 min
c) 96% EtOH - 2 x 5min
d) Abs. EtOH - 2 x 5 min
e) Xileno - 2 x 5 min (ultra claro)
18. Montar con DPX.
[0090] (50.000) Celulas fueron sembradas cada vez en tapas de cristal (que se usan normalmente para IHC). Despues de 24h o menos (dependiendo de la lmea celular) las celulas fueron lavadas con PBS y fijadas con 4% PFA (15 min).
Luego las celulas fueron lavadas nuevamente con PBS (3x5 min).
Despues del lavado, la autofluorescencia fue bloqueada con 100mM NH4Cl (3min RT).
En la siguiente etapa 15% NGS fue usada en combinacion con 5% BSA en PBS con 0.1% Triton X-100 (90 min/RT / camara humidificada).
Anticuerpo primario fue diluido 1:200 (puede ser mas alto) en 5%NGS en T-PBS (durante la noche/espacio enfriado/camara humidificada).
Tras la incubacion con anticuerpos primarios, las celulas fueron lavadas (3x5 min, T-PBS) e incubadas con anticuerpo secundario AlexaFluor 594 (anticonejo de cabra) diluido 1:100 (90 min/RT/camara humidificada). Finalmente, las celulas fueron lavadas (3x5min; PBS) y contratenidas (DAPI-Ultra Cruz).
Soluciones y reactivos
[0091]
• xileno (o Histoclear)
• etanol
• H2O destilado
• Hematoxilina
• 10X PBS (solucion salina tamponada con fosfato):
• 0.58 M fosfato sodico dibasico (Na2HPO4), 0.17 M fosfato sodico monobasico (NaH2PO4), 0.68 M NaCl.
Para preparar 1 litro de 10X PBS: combinar 82,33 g Na2HPO4*4H2O, 23.45 g NaH2PO4*H2O y 40 g NaCl.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Ajustar pH a 7.4.
• 10 mM tampon de citrato sodico:
para preparar 1 litro, anadir 2.94 g citrato sodico a 1 litro dH2O.
Ajustar pH a 6.0
• 1 % tampon de (oxidacion) de peroxido de hidrogeno: en 50ml:
15|jl Triton-X, 10ml metanol, 40ml 1% H2O2 (conc. final)
• solucion de bloqueo: 10% FBS y 10% BSA en PBS
• reactivo ABC (Vectastain ABC kit, Vector laboratories, Inc., Burlingame, CA): preparar segun las instrucciones del fabricante 30 minutos antes del uso
• reactivo DAB: usar segun las instrucciones del fabricante
[0092] En los controles positivos, anticuerpos detectan protemas en el ZP que rodea el ovocito humano (resultados no mostrados).
Protemas ZP3 estan tambien presentes en el citoplasma de ovocito.
Ningun tinte positivo se detecta en secciones de las muestras de tejido tumoral de prostata cuando el anticuerpo primario es omitido (resultados no mostrados).
Ningun tinte positivo es observado, con cada uno de los anticuerpos ZP, en el tejido de hfgado (resultados no mostrados), prostata normal o testmulo humano normal (figuras 3C y 3D respectivamente).
[0093] En las muestras de tumor de prostata, la presencia del ZP3 se confirma por areas del tinte del tejido positivo para ZP3, con intensidades variables entre las muestras obtenidas de distintos pacientes (figuras 3A y 3B).
[0094] En general, el tinte positivo de ZP3 se correlaciono estrictamente con el marcador de cancer de prostata alfa-metil-CoA-Racemasa (AMACR) para el carcinoma de prostata.
Esta coloracion de tumores positiva para expresion de ZP3 se puede tratar por inmunizacion con antfgenos de ZP3 conforme a la presente invencion.
Ejemplo 2: expresion de ZP3 en la linea celular de cancer de prostata humano (PC)
[0095] Expresion de la protema de zona pelucida 3 (ZP3) en la lmea celular de cancer de prostata humana (PC) y cancer de prostata fue demostrado en ARNm (A) y a nivel de protema (B) usando tecnicas de electroforesis de Western blot y RT-PR estandar.
Como se esperaba, se observaron bandas unicas de producto RT-PR (183 par de bases) y electroforesis de Western blot (55 kDa) (figura 4A y B).
ARNm total y protema de ovario de humano normal (hOV) y testmulo (hTE) han sido usados como control negativo y positivo respectivamente.
[0096] Localizacion citoplasmica de ZP3 fue demostrada en las celulas PC-3 (figura 5A) por visualizacion de inmunofluorescencia usando IgG anticonejo de cabra -Alexa Flour 594 (rojo).
[0097] La seleccion del ARNm total de muestras de cancer de prostata marcada como un Gleason 6-9 (n=10) por RT-PCR afirmo la presencia de los productos de ADN (183 pares de bases) equivalentes al fragmento de ZP3 (figura 6).
Ademas, muestras de prostata fueron controladas para la presencia de la expresion del receptor androgeno (AR) y de receptor de hormonas liberadoras de hormonas luteinizantes (LHR) que permanece importante en el desarrollo (AR) y progresion (AR y LHR) del cancer de prostata (Heinlein y Chang7 Pinski et al.8).
Descripcion de las figuras
[0098]
Figura 1: Histologfa (HE) del adenocarcinoma de prostata humana (A; B), prostata normal (C) y testmulo humano normal (D).
Glandulas cancerosas se marcan por flechas.
Figura 2: tincion inmunohistoqufmica con dubel a-metilacil coenzima A racemasa (AMACR (rojo)) y citoqueratina 5/6 (CK5/6 (marron)) en el adenocarcinoma de prostata humana (A; B), prostata normal (C) y en testmulo humano normal (D).
La doble tincion inmune fue realizada como marcadores adicionales a la histologfa para la evaluacion apropiada de las muestras de prostata (Trpkov et al.9).
Celulas epiteliales de carcinoma secretoras de las glandulas de prostata mostraron fuerte tincion roja granular fina citoplasmica circunferencial para AMACR (A, B, flechas) y fueron negativas para CK5/6 (positivo para las celulas epiteliales basales de la prostata normal).
Una tincion tfpica marron oscuro CK5/6 de las celulas basales fue observada en el epitelio prostatico normal que es negativo para AMACR (L).
Secciones de testmulo humano usadas como un control negativo para la coloracion inmunitaria doble quedo negativa para ambos AMACR, y CK5/6 (D).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Figura 3: tincion inmunohistoqmmica de ZP3 unica (marron) en el adenocarcinoma de prostata humana (A; B), prostata normal (C) y en el testmulo humano normal (D).
La tincion citoplasmica positiva y especfica para ZP3 fue observada en la glandula/tejido canceroso del carcinoma prostatico tenido positivamente para AMACR y negativamente para CK5/6 (A, B).
Prostata humana normal fue libre de coloracion para ZP3 de forma similar a AMACR pero no CK5/6 (C). Secciones de testmulo humano fueron negativas para ZP3 (D).
Figura 4: Expresion de la protema de zona pelucida 3 (ZP3) en la lmea celular de cancer de prostata humana (PC) y cancer de prostata a nivel de ARNm (A) y de protema (B).
Figura 5: Visualization de inmunofluorescencia de localization citoplasmica del ZP3 en celulas PC-3 .
Figura 6: ARNm totales de muestras de cancer de prostata marcadas como un Gleason 6-9 (n=10) por RT- PCR para determinar la presencia de ZP3, receptor androgeno (AR) y receptor de hormonas liberadoras de hormona luteinizante (LHR).
REFERENCIAS
[0099]
1. Parker, K. C., M. A. Bednarek, and J. E. Coligan. 1994. Scheme for ranking potential HLA-A2 binding peptides based on independent binding of individual peptide side-chains. J. Immunol. 152:163. HLA_BIND (
http://bimas.cit.nih.gov/molbio/hla_bind/)
http://bimas.cit.nih.gov/molbio/hla_bind/)
2. Rammensee, Friede, Stevanovic, MHC ligands and peptide motifs: 1 st listing, Immunogenetics 41, 178228, 1995; SYFPEITHI (
http://www.syfpeithi.de/) and Rammensee, Bachmann, Stevanovic:MHC ligands and peptide motifs. Landes Bioscience 1997 (International distributor - except North America: Springer Verlag GmbH & Co. KG, Tiergartenstr. 17, D-69121 Heidelberg
http://www.syfpeithi.de/) and Rammensee, Bachmann, Stevanovic:MHC ligands and peptide motifs. Landes Bioscience 1997 (International distributor - except North America: Springer Verlag GmbH & Co. KG, Tiergartenstr. 17, D-69121 Heidelberg
3. Buus S, Lauemoller SL, Worning P, Kesmir C, Frimurer T, Corbet S, Fomsgaard A, Hilden J,Holm A, Brunak S. Sensitive quantitative predictions of peptide-MHC binding by a 'Query by Committee' artificial neural network approach, in Tissue Antigens., 62:378-84, 2003; NetMHC (
http://www.cbs.dtu.dk/services/NetMHC/)
http://www.cbs.dtu.dk/services/NetMHC/)
4. Nielsen M, Lundegaard C, Worning P, Lauemoller SL, Lamberth K, Buus S, Brunak S, Lund O., Reliable prediction of T-cell epitopes using neural networks with novel sequence representations. Protein Sci., 12:1007-17, 2003.
5. Improved prediction of MHC class I and class II epitopes using a novel Gibbs sampling approach, Nielsen M, Lundegaard C, Worning P, Hvid CS, Lamberth K, Buus S, Brunak S, Lund O., Bioinformatics, 20(9):1388- 97, 2004.
6. Sturniolo, T. et al., Nature Biotechnology 17, 555-562, 1999, Generation of tissue-specific and promiscuous HLA ligand databases using DNA chips and virtual HLA class II matrices; TEPITOPE (
http://www.vaccinome.com/pages/597444/).
http://www.vaccinome.com/pages/597444/).
7. Heinlein CA, Chang C. Androgen receptor in prostate cancer. Endocr Rev. 2004, 25(2):276-308.
8. Pinski J, Xiong S, Wang Q, Stanczyk F, Hawes D, Liu SV. Effect of luteinizing hormone on the steroidogenic pathway in prostate cancer. Prostate. 2011,71(8):892-8.
9. Trpkov K, Bartczak-McKay J, Yilmaz A. Usefulness of cytokeratin 5/6 and AMACR applied as double sequential immunostains for diagnostic assessment of problematic prostate specimens. Am J Clin Pathol. 2009; 132(2):211-20.
LISTADO DE SECUENCIAS
[0100]
<110> Pantarhei Bioscience B.V.
<120> Metodo inmunoterapeutico para tratar cancer de prostata <130> P6032277EP <160> 4
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1 <211> 638 <212> PRT <213> human
<400> 1
Claims (16)
- 5101520253035404550556065REIVINDICACIONES1. Composicion farmaceutica que comprende una fuente de un polipeptido que comprende un epftopo de celula T de zona pelucida nativo restringido a MHC de clase I y/o MHC de clase II o su variante inmunologicamente activa, para usar en un metodo para tratamiento terapeutico y/o profilactico de cancer de prostata y/o su metastasis en un humano, donde dicho polipeptido es seleccionado de hZP3, sus homologos y fragmentos inmunologicamente activos de hZP3 y sus homologos.
- 2. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 1, donde el metodo de tratamiento es un metodo de tratamiento terapeutico.
- 3. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 1, donde el metodo de tratamiento es un metodo de prevencion de metastasis y/o recurrencia de cancer de prostata.
- 4. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 3, donde el metodo se combina con cirugfa, criocirugfa, terapia de radiacion, incluyendo braquiterapia y radiacion con rayo externo, ultrasonido focalizado de intensidad alta (HIFU), terapia hormonal o quimioterapia, o una de sus combinaciones.
- 5. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico seleccionado de hZP3, sus homologos y fragmentos inmunologicamente activos de dichas protemas y sus homologos; o una secuencia de acidos nucleicos que codifica dicho polipeptido inmunogenico.
- 6. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que incluye una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico seleccionado de hZP3, sus homologos y fragmentos inmunologicamente activos de dichas protemas y sus homologos.
- 7. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 6, donde dicho polipeptido inmunogenico es seleccionado de hZP3 y sus fragmentos inmunologicamente activos.
- 8. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 1, donde hZP3 comprende el esqueleto de polipeptido de protocolo de secuencia SEQ ID n° 3 o una de sus variantes alelicas, preferiblemente una variante alelica resultante de un polimorfismo de nucleotido unico.
- 9. Composicion farmaceutica para uso segun la reivindicacion 1, donde dicho polipeptido se prepara utilizando una tecnica recombinante donde una secuencia de nucleotidos que codifica el polipeptido se expresa por una celula huesped adecuada.
- 10. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones 1-9, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de fragmentos de polipeptido inmunogenico, dichos fragmentos de polipeptido siendo seleccionados de fragmentos de hZP3 y/o sus homologos, estos fragmentos estan entre 18 y 45 aminoacidos de longitud; o secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos fragmentos de hZP3.
- 11. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de uno o mas polipeptidos inmunogenicos diferentes, dicho uno o mas polipeptidos inmunogenicos juntos comprendiendo al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70%, epftopos de union restringidos de MHC de clase I y de MHC de clase II comprendidos en una glicoproteina hZP3 nativa; homologo de dicho uno o mas polipeptidos inmunogenicos; o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos polipeptidos o sus homologos.
- 12. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de un polipeptido inmunogenico que comprende al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70 % del esqueleto de aminoacido completo de glicoprotema de hZP3; un homologo de dicho polipeptido inmunogenico; o una secuencia de acidos nucleicos que codifica dicho polipeptido o su homologo.
- 13. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde dicha fuente de un polipeptido comprende una cantidad eficaz de una pluralidad de diferentes fragmentos de polipeptido superpuestos de glicoprotema hZP3, estos diferentes fragmentos de polipeptido superpuestos estan entre 18 y 60 aminoacidos de longitud y juntos comprenden al menos 50%, mas preferiblemente al menos 70%, del esqueleto de aminoacido completo de dicha glicoprotema hZP3; homologos de dichos fragmentos de polipeptido; o una o mas secuencias de acidos nucleicos que codifican dichos fragmentos de polipeptido o sus homologos.
- 14. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde el polipeptido es glicosilado.
- 15. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el 5 polipeptido comprende un modelo de glicosilacion que es similar a aquel de la glicoprotema hZP3 nativa o sufragmento.
- 16. Composicion farmaceutica para uso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el metodo comprende la administration, preferiblemente la coadministracion, de al menos un adyuvante.10
imagen1 ^\?^>vvvvrv^^r>v>v*^.v'A\vvv>,vrj.'.sv^j.vvvv*'.vvvv*>vsv».?j.\N«^.«f ' % ■ .%\. 7>* . \ . v\\ ' >» \ \ $list!lllilllSK S<:?:'SSxi1 mnl*$■31v*xyFig 1aFig 1bFig 1cFig 16imagen2 imagen3 ipil|| t'JI *1# ,J§|m #**•$&: t jkS.\<vv>viw.'^\'.v>v^t.>K,.v..v.;fs|psp■ .iKV'aaf :>::;? fx:;:•X-.-.-Xv? ^JyV sVMillWpl < *»f':ptipt ■> ■ %'\,. , % N P\'V«x „ V . ' x.Fig 3aFig 3bFig 3cFig 3dimagen4 Fig 5a Fig 5b Fig 5cimagen5 imagen6 a.mCOIV:K-EXIv£QIV-Svl£0a im■::f-CVi
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP10174349 | 2010-08-27 | ||
| EP10174349 | 2010-08-27 | ||
| PCT/NL2011/050586 WO2012026820A2 (en) | 2010-08-27 | 2011-08-29 | Immunotherapeutic method for treating prostate cancer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2621806T3 true ES2621806T3 (es) | 2017-07-05 |
Family
ID=44543718
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES11751668.2T Active ES2621806T3 (es) | 2010-08-27 | 2011-08-29 | Método inmunoterapéutico para tratar el cáncer de próstata |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9295720B2 (es) |
| EP (1) | EP2608802B1 (es) |
| CN (1) | CN103179977B (es) |
| BR (1) | BR112013004389A2 (es) |
| CA (1) | CA2809153C (es) |
| ES (1) | ES2621806T3 (es) |
| PL (1) | PL2608802T3 (es) |
| RU (1) | RU2586774C2 (es) |
| WO (1) | WO2012026820A2 (es) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016080830A2 (en) * | 2014-11-18 | 2016-05-26 | Pantarhei Bioscience B.V. | Immunotherapeutic method for treating pancreatic cancer |
| CN111511392A (zh) * | 2017-10-31 | 2020-08-07 | 潘塔希生物科学股份有限公司 | 用于治疗和/或预防肺癌的免疫治疗方法 |
| CN114945594B (zh) | 2019-12-23 | 2024-11-26 | 株式会社Lg化学 | 抗lilrb1抗体及其用途 |
| US20250026818A1 (en) | 2021-10-19 | 2025-01-23 | Sciencemed Spóka z ograniczon odpowiedzialnoci | Male contraception |
| CN117567633B (zh) * | 2023-11-27 | 2025-10-24 | 福州迈新生物技术开发有限公司 | 抗p504s蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5328470A (en) | 1989-03-31 | 1994-07-12 | The Regents Of The University Of Michigan | Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor |
| US5641487A (en) * | 1989-06-12 | 1997-06-24 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Contraceptive vaccine based on alloimmunization with zona pellucida polypeptides |
| US5272070A (en) | 1991-03-08 | 1993-12-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method for the preparation of cell lines producing Man3 GlcNac 2 asparagine-linked gylcans and cell lines produced thereby |
| US5789543A (en) | 1993-12-30 | 1998-08-04 | President And Fellows Of Harvard College | Vertebrate embryonic pattern-inducing proteins and uses related thereto |
| US7019114B2 (en) | 1998-02-19 | 2006-03-28 | Eastern Virginia Medical School | Recombinant, biologically active human zona pellucida protein 3 (HZP3) to test male fertility |
| FR2777890B1 (fr) | 1998-04-22 | 2000-12-29 | Roussy Inst Gustave | Composes peptidiques d'hsp70 utiles dans l'immunotherapie du cancer |
| ATE304375T1 (de) | 1998-05-23 | 2005-09-15 | Univ Leiden Medical Ct | Cd40 bindende antikörper und ctl peptide zur behandlung von tumoren |
| ES2253851T3 (es) | 1998-08-07 | 2006-06-01 | Curis, Inc. | Composicion farmaceutica estable de proteinas hedgehog y uso de la misma. |
| US6455041B1 (en) * | 1998-11-17 | 2002-09-24 | Bonita S. Dunbar | Immunogenic epitopes of the human zona pellucida protein (ZP1) |
| US6359196B1 (en) | 1999-09-23 | 2002-03-19 | Finn Lok | Germination-specific plant promoters |
| CA2398707C (en) | 2000-01-31 | 2010-10-26 | Pharming Intellectual Property B.V. | C1 inhibitor produced in the milk of transgenic mammals |
| WO2002012330A2 (en) * | 2000-08-04 | 2002-02-14 | Zymogenetics, Inc. | Human secreted protein, zzp1 |
| AU2002219711B8 (en) | 2000-12-08 | 2006-03-02 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Long peptides of 22-45 amino acid residues that induce and/or enhance antigen specific immune responses |
| AU2003250586B2 (en) * | 2002-08-12 | 2010-09-23 | The Council Of The Queensland Institute Of Medical Research | Novel immunogenic lipopeptides comprising T-helper and B-cell epitopes |
| WO2004094469A1 (en) | 2003-04-23 | 2004-11-04 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Tuberculosis vaccine with improved efficacy |
| AR056245A1 (es) | 2003-06-19 | 2007-10-03 | Bestewil Holding Bv | Membranas virales reconstituidas funcionales que contienen un coadyuvante |
| CN101365473B (zh) * | 2005-11-16 | 2013-04-03 | 潘塔希生物科学股份有限公司 | 用于治疗或预防卵巢癌的药物组合物 |
-
2011
- 2011-08-29 US US13/819,622 patent/US9295720B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-08-29 ES ES11751668.2T patent/ES2621806T3/es active Active
- 2011-08-29 EP EP11751668.2A patent/EP2608802B1/en active Active
- 2011-08-29 CN CN201180051778.XA patent/CN103179977B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2011-08-29 BR BR112013004389A patent/BR112013004389A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2011-08-29 CA CA2809153A patent/CA2809153C/en active Active
- 2011-08-29 PL PL11751668T patent/PL2608802T3/pl unknown
- 2011-08-29 RU RU2013113639/15A patent/RU2586774C2/ru active
- 2011-08-29 WO PCT/NL2011/050586 patent/WO2012026820A2/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2608802A2 (en) | 2013-07-03 |
| WO2012026820A3 (en) | 2012-06-21 |
| CA2809153C (en) | 2023-09-26 |
| WO2012026820A2 (en) | 2012-03-01 |
| BR112013004389A2 (pt) | 2016-05-17 |
| CN103179977B (zh) | 2016-10-26 |
| EP2608802B1 (en) | 2017-02-22 |
| CA2809153A1 (en) | 2012-03-01 |
| RU2013113639A (ru) | 2014-10-10 |
| US9295720B2 (en) | 2016-03-29 |
| RU2586774C2 (ru) | 2016-06-10 |
| CN103179977A (zh) | 2013-06-26 |
| US20130224233A1 (en) | 2013-08-29 |
| PL2608802T3 (pl) | 2017-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2693213T3 (es) | Epítopos agonistas de HLA-A24 de oncoproteína MUC1-C y composiciones y métodos de uso | |
| JP4365784B2 (ja) | Ｈｌａ−ａ２４拘束性癌抗原ペプチド | |
| ES2684684T3 (es) | Métodos y composiciones para inducir una respuesta inmune al EGFRVIII | |
| PT2155243E (pt) | Composição e métodos compreendendo os antigénios klk3, psca ou folh1 | |
| ES2413079T3 (es) | Métodos y composiciones para desencadenar respuestas inmunitarias multivalentes contra epítopos dominantes y subdominantes expresados en células cancerosas y estroma tumoral | |
| ES2769326T3 (es) | Métodos y composiciones para la inmunoterapia contra el cáncer usando células tumorales que expresan la proteína de fusión de flagelina y antígeno asociado al tumor | |
| ES2621806T3 (es) | Método inmunoterapéutico para tratar el cáncer de próstata | |
| CN109073637A (zh) | 用于预测蛋白质或蛋白质片段用于免疫治疗的有用性的方法 | |
| Bei et al. | TAA polyepitope DNA‐based vaccines: a potential tool for cancer therapy | |
| CN101754768B (zh) | 用作癌症疫苗的存活蛋白肽 | |
| US20130039935A1 (en) | Induction of tumor immunity by variants of folate binding protein | |
| US7973128B2 (en) | Immunogenic polypeptide composed of tumor antigen-derived optimized cryptic peptides, and uses thereof | |
| EP1951283B1 (en) | Pharmaceutical composition for treating or preventing ovarian cancer | |
| Wang et al. | Current ideas about applications of heat shock proteins in vaccine design and immunotherapy | |
| Yin et al. | HPV16E7 tumor antigen modified by KDEL sequence induce specific cytotoxic T lymphocytes-dependent antitumor immunity | |
| US20050033023A1 (en) | PTH-rP related peptide cancer therapeutics | |
| KR101970709B1 (ko) | ＰＬＫ１ 단백질에 대한 항원―특이 Ｔ 세포 면역반응을 유도하는 ＨＬＡ―Ａ２ 아형―특이 ＰＬＫｌ―유래 항원결정기 | |
| US11191828B2 (en) | MHC class I associated hepatitis B peptides | |
| WO2016080830A2 (en) | Immunotherapeutic method for treating pancreatic cancer | |
| ES2348524T3 (es) | Composición farmacéutica para tratar o prevenir el cáncer de ovarios. | |
| Miller et al. | From breast cancer immunobiology to her-2 DNA vaccine and autoimmune sequelae | |
| Hsieh et al. | Immune response evoked by tumor-associated NADH oxidase (tNOX) confers potential inhibitory effect on lung carcinoma in a mouse model | |
| Paterson et al. | Fusion to Listeriolysin O and Delivery by |