ES2628043T3

ES2628043T3 - Recipiente y procedimiento de producción de biomembrana

Info

Publication number: ES2628043T3
Application number: ES07254716.9T
Authority: ES
Inventors: Connie Hui-Ju Hsu
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2007-05-11
Filing date: 2007-12-05
Publication date: 2017-08-01
Anticipated expiration: 2027-12-05
Also published as: CN101302474B; CN101302474A; EP1990403B1; EP1990403A3; EP1990403A2

Abstract

Un recipiente para cultivar una biomembrana (20) que comprende: una placa de fondo (11); una pared lateral (12) situada en la placa de fondo y rodeando y conectando la periferia de la placa de fondo para formar un espacio interior, en el que diversos agujeros (123) se definen en la superficie superior de la pared lateral y se sitúan diversos vástagos (124) que se corresponden con los agujeros en la superficie inferior de la pared lateral; y al menos una protrusión (13) situada en la superficie de la placa de fondo, en la que una pluralidad de los recipientes es capaz de ser apilada de forma vertical mediante la inserción de los vástagos en los agujeros, en los que se forma un hueco vertical entre los recipientes apilados para ventilar los recipientes, en el que diversos rebajes (125) se sitúan en la superficie externa de la pared lateral; y en el que hay cuatro protrusiones (132, 133, 134) dispuestas en un patrón facial que corresponde a los ojos, boca y nariz para una máscara facial humana.

Description

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DESCRIPCION

Recipiente y procedimiento de produccion de biomembrana Antecedentes de la invencion

1. Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a un recipiente y a un procedimiento para la produccion de una biomembrana y, mas particularmente, a un recipiente y a un procedimiento de usar microorganismos para producir polfmero que forma una biomembrana.

2. Descripcion de la tecnica relacionada

En el mercado, existen diversas mascaras para el fin de satisfacer la necesidad de mantener las condiciones cutaneas del ser humano. En general, se usa tela sin tejer como base de mascaras para contener diversos cosmeticos y medicamentos. Este tipo de tela sin tejer no es una tela tejida mediante subproceso, sino un material de fibra sin haber sido tejido por procedimientos textiles. Por lo tanto, la tela sin tejer tiene propiedades de permeabilidad al aire, higroscopicidad, durabilidad, tolerancia a los farmacos, aislamiento, etcetera. Sin embargo, debido a la buena higroscopicidad de la tela sin tejer, se exponen diversos cosmeticos y medicamentos activos contenidos en el presente documento en una direccion de dos vfas. De este modo, los cosmeticos y medicamentos activos se descomponen o evaporan facilmente de forma que las mascaras no pueden presentar todas sus funciones.

Actualmente, se ha desarrollado una biomembrana fabricada de polfmero producido por microorganismos. Este tipo de biomembrana puede procesarse en, por ejemplo, fibras dieteticas para la alimentacion, mascaras para el mantenimiento de la piel y similares. La biomembrana tiene un alto nivel de absorcion de agua como para transportar grandes cantidades de nutrientes. Si la biomembrana se fabrica en una mascara, la mascara puede proporcionar nutricion para la piel. Ademas, la biomembrana tiene muchas propiedades ventajosas de, por ejemplo, tener grupos funcionales libres que pueden absorber la suciedad de la piel.

Para evitar cubrir organos como los ojos, nariz, boca, etc. en la cara del usuario y asf no impedirle ver, oler, comer o hablar, las mascaras fabricadas de tela sin tejer o fabricadas de biomembranas se procesan todas para formar agujeros predeterminados de forma que los requisitos anteriormente mencionados del usuario sean satisfechos. Sin embargo, la formacion de los agujeros predeterminados necesita troquelado, lo que ocasiona etapas complejas en su fabricacion y el deterioro en el borde de las mascaras o los agujeros predeterminados. Por consiguiente, el rendimiento de las mascaras se nivela a la baja de forma que los costes de la produccion para las mascaras aumentan. Los documentos US5,605,836 y GB2413652 desvelan un recipiente que comprende una serie de protrusiones, en el que el recipiente es adecuado para el cultivo de celulas que forman una biomembrana. El documento US2006/0286434 se refiere a compuestos celulosicos y procedimientos para fabricar tales compuestos. El documento US6,071,727 se refiere a procedimientos para producir geles de pelfcula de celulosa microbiana. El documento CN100367925C desvela una pelfcula facial de gel de celulosa y su procedimiento de produccion.

Resumen de la invencion

A la vista de las deficiencias anteriormente mencionadas, un objeto de la presente invencion es proporcionar un recipiente para la produccion de una biomembrana que no necesite cambiar la forma de la misma. Ademas, los recipientes pueden apilarse verticalmente para obtener mas espacio horizontal para la produccion. Los recipientes apilados de forma vertical siguen teniendo una buena ventilacion entre los mismos.

Otro objeto de la presente invencion es proporcionar un procedimiento para la produccion de una biomembrana. A traves de cepas bacterianas que producen polfmeros de forma natural tales como polisacarido, poliglutamato, etc. en un recipiente predeterminado, puede formarse una biomembrana para que tenga una forma de acuerdo con el recipiente predeterminado. Asimismo, cuando la biomembrana se procesa en una mascara, no se necesitan procedimientos para cambiar la biomembrana. Por lo tanto, el rendimiento de las mascaras aumenta. De otro modo, la mascara fabricada puede usarse para el mantenimiento de la piel y suministro de humedad para la piel.

Para conseguir el objeto, se proporciona un recipiente para cultivar una biomembrana de acuerdo con la presente reivindicacion 1, que incluye una placa de fondo; una pared lateral como se define en la reivindicacion 1 dispuesta en la placa de fondo y rodeando la periferia de la placa de fondo para formar un espacio interior; y al menos una protrusion situada en la superficie de la placa de fondo en la que una pluralidad de los recipientes son capaces de apilarse verticalmente mediante la insercion de vastagos en los agujeros, en los que se forma un hueco vertical entre los recipientes apilados para ventilar los recipientes, en los que se situan diversos rebajes en la superficie externa de la pared lateral; y en los que hay cuatro protrusiones dispuestas en un patron facial que corresponde a los ojos, boca y nariz para una mascara facial humana.

En el recipiente anteriormente mencionado, la pared lateral puede tener un borde de rebaje y un borde prominente, el borde de rebaje esta en la parte superior de la pared lateral y el borde prominente esta en la parte inferior de la

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pared lateral. Ademas, se definen diversos agujeros en la superficie superior de la pared lateral, y se colocan diversos vastagos que se corresponden con los agujeros en la superficie inferior de la pared lateral. Si los recipientes de apilan de forma vertical uno por uno, se puede ahorrar espacio horizontal para el cultivo. Asimismo, a traves de la insercion de vastagos en los agujeros o el borde prominente que corresponde al borde de rebaje, los recipientes apilados pueden ser mas estables y no aflojarse facilmente para caer. La profundidad de los agujeros puede ser igual o menor que la altura de los vastagos. Ademas, la seccion transversal de la parte superior de los vastagos puede ser igual o mayor que la de los vastagos.

Asimismo, diversos rebajes se situan en la superficie externa de la pared lateral, y estos no se limitan en ninguna forma. La forma de la pared lateral que rodea la periferia de la placa de fondo no se limita a, pero preferentemente es circular, elfptica, poligonal, irregular u oval. La protrusion no esta limitada a, pero preferentemente es en forma de columna, ahusada o laminada. La protrusion puede disponerse mediante las caractensticas correspondientes faciales de una persona, es decir, ojos, nariz, boca, etcetera. La placa de fondo puede ser plana o no, la ultima significa que la placa de fondo es una superficie inclinada.

En el recipiente anteriormente mencionado, la protrusion puede formarse haciendo una hendidura desde la superficie exterior de la placa de fondo hasta la superficie interior de la placa de fondo. De este modo, el material del recipiente puede ahorrarse mediante el procedimiento anteriormente mencionado. Ademas, el material del recipiente no se limita a, pero preferentemente es un material organico transparente o no transparente (tal como PVC, PP y PE) o un metal antioxidante. La superficie del recipiente puede recubrirse selectivamente con PEP.

Ademas, la presente invencion tambien desvela un procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 7 para la produccion de una biomembrana que comprende utilizar un recipiente para cultivar una biomembrana de acuerdo con la reivindicacion 1, que incluye las siguientes etapas:

(a) proporcionar un primer medio y una cepa microbiana en el mismo, y agitarlas para formar un cultivo de siembra; (b) poner el cultivo de siembra en el recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1 que tiene un segundo medio; y (c) cultivar el cultivo de siembra hasta que se forme una biomembrana que tenga un espesor predeterminado, en el que la biomembrana formada tiene una mascara facial humana integral despues de retirarse del recipiente.

En el procedimiento anteriormente mencionado de la presente invencion, la cepa microbiana es preferentemente Acetobacter spp., Gluconacetobacter spp., Xanthomonas spp., o Bacillus spp. Mas preferentemente, la cepa microbiana del Acetobacter spp. es A. xylinum; la cepa microbiana del Gluconacetobacter spp. 5 es G xylinus subsp. Xylinus, o G Hansenii; la cepa microbiana del Xanthomonas spp. es X camperastris\ y la cepa microbiana del Bacillus spp. es B. substilis var Natto.

Ademas, el primer medio y el segundo medio pueden comprender un carbohidrato, un compuesto que contiene N, un mineral y un cofactor de crecimiento. El contenido del carbohidrato 10, el compuesto que contiene N, el mineral y el cofactor de crecimiento preferentemente es 1-30 %, 0,1-6%, 0,05-3 % y 0,05-2 %, respectivamente. El carbohidrato no esta limitado a, pero preferentemente es uno seleccionado de monosacarido, disacaridos, polisacaridos, o compuestos que contienen carboxilo. El compuesto que contiene N no 15 se limita a, pero preferentemente es uno seleccionado de extracto de levadura, peptona, polvos de soja o gelatina. El mineral no esta limitado a, pero preferentemente es uno seleccionado de sal de cloruro, sal de amonio, sal de sulfuro, sal de potasio, fosfato, sal de magnesio o sal de sodio. El cofactor de crecimiento no esta limitado a, pero preferentemente es uno seleccionado de vitamina, acido nicotmico 20, acido cftrico o derivados del mismo.

Para obtener cultivo de siembra a gran escala para la produccion, el procedimiento desvelado en la presente invencion puede comprender adicionalmente una etapa (al): amplificar el cultivo de siembra para proporcionar mayor cantidad de cultivo de siembra para la produccion en masa despues de que se haya conseguido la etapa (a).

La biomembrana fabricada mediante el procedimiento de la presente invencion puede procesarse en una mascara facial, una mascara de ojos, una mascara pectoral o una mascara labial. Las mascaras anteriormente mencionadas pueden proporcionar de forma eficaz agua para mantener las condiciones cutaneas. Asimismo, estas mascaras no necesitan cambiar su forma mediante etapas posteriores ya que la biomembrana en la presente invencion puede formarse en la forma final. Ademas, la biomembrana de la presente invencion no tiene las deficiencias de las mascaras convencionales que necesitan que su forma se cambie. De este modo, la membrana de la presente invencion puede tener un buen rendimiento sin ningun deterioro debido al procedimiento de cambio de forma.

Otros objetos, ventajas y caractensticas novedosas de la invencion seran mas evidentes a partir de la siguiente descripcion en detalle cuando se aborde en conjunto con los dibujos adjuntos.

Breve descripcion de los dibujos

La FIG. 1a es una vista en perspectiva de un recipiente para la produccion de una biomembrana en la presente invencion;

La FIG. 1b es una vista en perspectiva de un recipiente cuando se produce la produccion de una biomembrana en el ejemplo de la presente invencion;

La FIG. 2 es una vista en perspectiva de un recipiente cuando se produce la produccion de una biomembrana en el ejemplo de la presente invencion;

La FlG. 3 es una vista en perspectiva de un recipiente cuando se produce la produccion de una biomembrana en el ejemplo de la presente invencion;

5 La FlG. 4 es una vista en perspectiva de un recipiente cuando se produce la produccion de una biomembrana en

el ejemplo de la presente invencion;

La FIG. 5 es una vista superior de una biomembrana producida a partir de los ejemplos de la presente invencion; La FIG. 6 es un grafico de produccion de biocelulosa entre los ejemplos 1 a 30 de la presente invencion; y la FIG. 10 7 es un grafico de produccion de biocelulosa entre los ejemplos 31 a 60 en la presente invencion.

Descripcion detallada de la realizacion preferente

En los siguientes ejemplos, la cepa microbiana usada en la presente invencion es Acetobacter spp., Gluconacetobacter spp., Xanthomonas spp., o Bacillus spp. En el Acetobacter spp., se usa A. xylinum; en el Acetobacter spp., se usa G. xylinus subsp. Xylinus ATTC 10821, G. xylinus subsp. Xylinus ATTC 700187, o G. 15 HanseniiATTC 23769; en el Xanthomonas spp., se usa Xcamperastris; y en el Bacillus spp., se usa B. substilis var

Natto. En lo anteriormente mencionado, aunque A. xylinum no se denomina como G xylinus, son el mismo microorganismo.

Los medios usados en el procedimiento de la presente invencion comprenden un carbohidrato, un compuesto que contiene N, un mineral y un cofactor de crecimiento. En los siguientes ejemplos, el contenido del carbohidrato es 20 1~30%; el contenido del compuesto que contiene N es 0,1~6%; el contenido del mineral es 0,05~3%; y el contenido

del cofactor de crecimiento es 0,05~2%. Ademas, al menos uno de monosacarido, disacaridos, polisacaridos y compuestos que contienen carboxilo se usa como carbohidrato; al menos uno de extracto de levadura, peptona, polvos de soja y gelatina se usa como compuesto que contiene N; al menos uno de sal de cloruro, sal de amonio, sal de sulfuro, sal de potasio, fosfato, sal de magnesio y sal de sodio se usa como mineral; y al menos uno de vitamina, 25 acido nicotmico, acido cftrico, y los derivados del mismo se usa como cofactor de crecimiento.

En el procedimiento de la presente invencion, la forma del recipiente que se usa es en vista de la forma de biomembrana que se necesita, por ejemplo, si se necesita una biomembrana rectangular, puede usarse un recipiente cuboide, o si se necesita una membrana circular, puede usarse un recipiente cilrndrico. En los siguientes ejemplos, el recipiente usado en el presente documento es como se muestra en las FIG. 1a~4, pero sin limitarse a 30 ellas. El recipiente puede fabricarse de PVC, PP, PE o metales antioxidantes. Ademas, el recipiente puede recubrirse selectivamente con PEP. PEP es una membrana que protege contra la oxidacion de alto peso molecular, y que puede evitar que se propague gas corrosivo recubriendo el recipiente y neutralizando el gas corrosivo que se propaga.

Ejemplos 1-30

35 Alrededor de 1~5 bucles de A. xylinum se transfieren del cultivo inclinado a un medio ftquido esteril (como la siguiente tabla 1). El medio ftquido se cultiva durante 1~3 dfas a 37 °C mediante agitacion, y despues se amplifica con medio ftquido esteril de 2~30-concentraciones. Esta ampliacion puede realizarse durante 1~2 dfas en un tanque de fermentacion o una incubadora con agitacion para obtener cultivo de siembra para produccion a gran escala.

Tabla 1

Componentes: Contenido (%)

Glucosa: 2

Peptona: 1

Extracto de levadura: 1

Acido cftrico: 0,1

Bifosfato de sodio: 0,3

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El recipiente para cultivar usado en los presentes ejemplos se muestra en la FIG. 1a. El recipiente una placa de fondo 11; una pared lateral 12 dispuesta en la placa de fondo 11 y rodeando la periferia de la placa de fondo 11, en la que un espacio interior esta rodeado por la pared lateral 12 y la placa de fondo 11; y al menos una protrusion 13 que se situa en la superficie de la placa de fondo 11. La protrusion 13 anteriormente mencionada puede tener 45 cualquier forma, por ejemplo, la primera protrusion 132 es un cilindro eftptico; la primera protrusion 133 es un cono; y la tercera protrusion 133 es un pilar en forma de hoja. Ademas, la protrusion 13 puede situarse en cualquier lugar de acuerdo con la forma de la biomembrana que se necesite.

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Como se muestra en la FIG. 1b, alrededor del 1 %~50 % del cultivo de siembra se mezcla con el medio de cultivo en la tabla 2 y este se cultiva en el espacio interior del recipiente anteriormente mencionado. Se forma una biomembrana 20 con una forma de acuerdo con la del recipiente. Se cultiva la biomembrana 20 a una temperature constante, hasta que tenga un espesor predeterminado. Despues, se extrae la biomembrana 20. Como se muestra en la FIG. 5, la biomembrana 20 tiene varias aberturas 232, 233 y 234 respectivamente que corresponden con la primera protrusion 132, la segunda protrusion 133 y la tercera protrusion 133.

Componente (%): Ejemplo

1: 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Peptona: 1

MgSO4: 0,1

Extracto de levadura: 1

CaCO3: 0 0,1 0,3

Glucosa: 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30

Tabla 2-continua

Componente (%): Ejemplo

16: 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

Peptona: 1

MgSO4: 0,1

Extracto de levadura: 1

CaCO3: 0 0,1 0,3

Glucosa: 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30

A traves de las pruebas de los ejemplos 1~30, el resultado se muestra en la FIG. 6. De acuerdo con el peso de formacion de la biomembrana 20, el medio de cultivo que comprende un 1 % de extracto de levadura, un 0,1 % de CaCO3, y un 2,5% de glucosa puede ser un medio optimo para cultivar una biomembrana que tenga un peso de produccion optimo.

Ejemplos 31~60

Alrededor de 1~5 bucles de A. xylinum se transfieren del cultivo inclinado a un medio lfquido esteril (como la tabla 1 en los ejemplos 1~30). El medio lfquido se cultiva durante 1~3 dfas a 37 °C mediante agitacion, y despues se amplifica con medio lfquido esteril de 2~30-concentraciones. Esta ampliacion puede realizarse durante 1~2 dfas en un tanque de fermentacion o una incubadora con agitacion para obtener cultivo de siembra para produccion a gran escala.

En los presentes ejemplos, el recipiente usado en los mismos es como se muestra en la FIG. 2 y aproximadamente es similar al recipiente que se muestra en la FIG. 1a. Sin embargo, el recipiente en la FIG. 2 tiene diversos agujeros 123 a traves de la superficie superior de la pared lateral 12 y diversos vastagos 124 en la superficie interior de la pared lateral 12. Los vastagos 124 se situan a traves de los agujeros 123 correspondientes.

Alrededor del 1 %~50 % del cultivo de siembra se mezcla con el medio de cultivo en la tabla 2 y este se cultiva en el espacio interior del recipiente anteriormente mencionado. Ademas, los recipientes pueden apilarse de forma vertical uno por uno. A traves de los vastagos 124 que se insertan a traves de los agujeros 123, los recipientes apilados pueden convertirse en una estructura vertical estable. Asimismo, los recipientes apilados no se caen facilmente o se aflojan. De este modo, puede ahorrarse el espacio horizontal para la produccion. Se forma una biomembrana 20 con una forma de acuerdo con la del recipiente. Se cultiva la biomembrana 20 a una temperatura constante, hasta que la biomembrana 20 tiene un espesor predeterminado. Despues, se extrae la biomembrana 20 como se muestra en la FIG. 5.

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Tabla 3

Componente (%): Ejemplo

31: 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45

Peptona: 1

MgSO4: 0,1

Extracto de levadura: 0,5

CaCO3: 0 0,1 0,3

Glucosa: 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30

Tabla 3-continua

Componente (%): Ejemplo

46: 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Peptona: 1

MgSO4: 0,1

Extracto de levadura: 0,5

CaCO3: 0 0,1 0,3

Glucosa: 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30 2,5 5 10 20 30

A traves de las pruebas de los ejemplos 31~60, el resultado se muestra en la FIG. 7. De acuerdo con el peso de formacion de la biomembrana 20, el medio de cultivo que comprende un 0,5% de extracto de levadura, un 2 % de CaCO3, y un 5% de glucosa puede ser un medio optimo para cultivar una biomembrana que tenga un mejor peso de produccion.

Ejemplos 61~63

Alrededor de 1~5 bucles de G. xylinus subsp. Xylinus ATTC 10821, G. xylinus subsp. Xylinus ATTC 700187, y G. Hansenii ATCC 23769 se transfieren del cultivo inclinado a un medio lfquido esteril (como la siguiente tabla 4). El medio lfquido se cultiva durante 1~3 dfas a 37 °C mediante agitacion, y despues se amplifica con medio lfquido esteril de 2~30-concentraciones. Esta ampliacion puede realizarse durante 1~2 dfas en un tanque de fermentacion o una incubadora con agitacion para obtener cultivo de siembra para produccion a gran escala.

En los presentes ejemplos, el recipiente usado en los mismos es como se muestra en la FIG. 3 y aproximadamente es similar al recipiente que se muestra en la FIG. 2. Sin embargo, la pared lateral 12 del recipiente en la FIG. 3 tiene un borde de rebaje 121 en la parte superior de la misma y un borde prominente 122 en la parte inferior de la misma. Ademas, la seccion transversal de la parte superior de los vastagos 124 es mayor que la seccion transversal de los agujeros 123.

Alrededor del 1 %~50 % del cultivo de siembra se mezcla con el medio de cultivo en la tabla 2 y este se cultiva en el espacio interior del recipiente anteriormente mencionado. Aunque la FIG 3 muestra que el borde de rebaje 121 y el borde prominente 122 se situan en el interior de la pared lateral 12, estos tambien pueden situarse en el exterior de la pared lateral 12. De este modo, el recipiente puede apilarse de forma vertical uno por uno a traves del borde de rebaje 121 y el borde prominente 122 insertados de forma correspondiente con cada uno.

Ademas, el recipiente tambien puede apilarse de forma vertical uno por uno como se muestra en la FIG. 3. A traves de los vastagos 124 que se insertan a traves de los agujeros 123, hay un hueco vertical entre los recipientes vecinales. De este modo, el aire puede ventilar el recipiente para promover el crecimiento de la biomembrana. Se forma una biomembrana 20 con una forma de acuerdo con la del recipiente. Se cultiva la biomembrana 20 a una temperatura constante, hasta que la biomembrana 20 tenga un espesor predeterminado. Despues, se extrae la biomembrana 20 como se muestra en la FIG. 5.

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Tabla 4

Componente: Contenido (%)

Glucosa: 2

Peptona: 1

Extracto de levadura: 1

CaCO3: 0,5

MgSO4: 0,1

Ejemplo 64

Alrededor de 1~5 bucles de X. campeastris se transfieren del cultivo inclinado a un medio Ifquido esteril (como la siguiente tabla 5). El medio lfquido se cultiva durante 1~3 dfas a 37 °C mediante agitacion, y despues se amplifica con medio lfquido esteril de 2~30-concentraciones. Esta ampliacion puede realizarse durante 1~2 d^as en un tanque de fermentacion o una incubadora con agitacion para obtener cultivo de siembra para produccion a gran escala.

Tabla 5

Componente: Contenido (%)

Glucosa: 4

Fructosa: 2

Peptona: 2

Extracto de levadura: 2

Acido cftrico: 0,2

Bifosfato de potasio: 0,2

En los presentes ejemplos, el recipiente usado en los mismos es como se muestra en la FIG. 4 y aproximadamente es similar al recipiente que se muestra en la FIG. 2. Sin embargo, la pared lateral 12 tiene diversos rebajes 125 en la superficie externa de la misma. Ademas, los rebajes 125 no se limitan a formarse en toda la superficie externa de la pared lateral 12, sino que tambien pueden formarse en una, dos o tres superficies externas de la misma.

Alrededor del 1 %~50 % del cultivo de siembra se mezcla con el medio de cultivo en la tabla 2 y este se cultiva en el espacio interior del recipiente anteriormente mencionado. Ademas, el recipiente tambien puede apilarse de forma vertical uno por uno como se muestra en la FIG. 3. De este modo, el aire puede ventilar el recipiente para promover el crecimiento de la biomembrana a traves de los rebajes 125. Se forma una biomembrana 20 con una forma de acuerdo con la del recipiente. Se cultiva la biomembrana 20 a una temperatura constante, hasta que la biomembrana 20 tiene un espesor predeterminado. Despues, se extrae la biomembrana 20 como se muestra en la FIG. 5.

Ejemplo 65

Alrededor de 1~5 bucles de B. subtilis var Natto se transfieren del cultivo inclinado a un medio lfquido esteril (como la tabla 5 del ejemplo 65). El medio lfquido se cultiva durante 1~3 dfas a 37 °C mediante agitacion, y despues se amplifica con medio lfquido esteril de 2~30-concentraciones. Esta ampliacion puede realizarse durante 1~2 dfas en un tanque de fermentacion o una incubadora con agitacion para obtener cultivo de siembra para produccion a gran escala.

En los presentes ejemplos, los recipientes usados en los mismos son como se muestran en las FIG. 1~4. Alrededor del 1 %~50 % del cultivo de siembra se mezcla con el medio de cultivo en la tabla 2 y este se cultiva en el espacio interior de los recipientes anteriormente mencionados. Se forma una biomembrana 20 con una forma de acuerdo con la del recipiente. La biomembrana 20 se cultiva a una temperatura constante hasta que la biomembrana 20 tiene un espesor predeterminado. Despues, se extrae la biomembrana 20 como se muestra en la FIG. 5.

Las biomembranas preparadas anteriormente en ejemplo 1~65 se tratan previamente con solucion alcalina y se tratan con solucion acida. Despues, las biomembranas se procesan mediante etapas convencionales para biomembranas en el campo tal como ebullicion, lavado, etc. y despues se somete a procedimientos siguientes de

fabricacion de mascaras tales como esterilizacion, adicion de compuestos eficientes, empaquetado, marcado, etcetera. De este modo, pueden formarse mascaras biologicas con composiciones eficientes.

Durante la fabricacion, las biomembranas fabricadas mediante el procedimiento de la presente invencion no necesitan cambiar en forma mediante etapas posteriores tales como moldeado, corte, etcetera. Ademas, la 5 biomembrana de la presente invencion no tiene las deficiencias de las mascaras convencionales que necesitan que su forma se cambie. De este modo, la biomembrana de la presente invencion puede tener un buen rendimiento sin ningun deterioro debido al procedimiento de cambio de forma. Asimismo, el coste de fabricacion puede reducirse ya que no se genera ningun residuo.

Debido a las realizaciones espedficas que ilustran la practica de la presente invencion, todo experto en la materia 10 puede entender facilmente otras ventajas y eficiencia de la presente invencion a traves del contenido desvelado en el presente documento.

Claims

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REIVINDICACIONES

1. Un recipiente para cultivar una biomembrana (20) que comprende:

una placa de fondo (11);

una pared lateral (12) situada en la placa de fondo y rodeando y conectando la periferia de la placa de fondo para formar un espacio interior, en el que diversos agujeros (123) se definen en la superficie superior de la pared lateral y se situan diversos vastagos (124) que se corresponden con los agujeros en la superficie inferior de la pared lateral; y

al menos una protrusion (13) situada en la superficie de la placa de fondo,

en la que una pluralidad de los recipientes es capaz de ser apilada de forma vertical mediante la insercion de los vastagos en los agujeros, en los que se forma un hueco vertical entre los recipientes apilados para ventilar los recipientes, en el que diversos rebajes (125) se situan en la superficie externa de la pared lateral; y en el que hay cuatro protrusiones (132, 133, 134) dispuestas en un patron facial que corresponde a los ojos, boca y nariz para una mascara facial humana.
2. El recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que la pared lateral tiene un borde de rebaje (121) y un borde prominente (122), el borde de rebaje esta en la parte superior de la pared lateral y el borde prominente esta en la parte inferior de la pared lateral.
3. El recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que la profundidad de los agujeros es menor o igual a la altura de los vastagos.
4. El recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el area de la seccion transversal de la parte superior de los vastagos es mayor o igual que el area de la seccion transversal de los agujeros.
5. El recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que la protrusion tiene forma de columna, ahusada o laminada y forma al menos un espacio vacfo en la biomembrana.
6. El recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que la forma de la pared lateral que rodea la periferia de la placa de fondo es circular, elfptica, poligonal, irregular u oval.
7. Un procedimiento para la produccion de una biomembrana (20), que comprende utilizar un recipiente para cultivar una biomembrana de acuerdo con la reivindicacion 1 y que comprende adicionalmente las siguientes etapas:

(a) proporcionar un primer medio y una cepa microbiana en el mismo, y agitarlos para formar un cultivo de siembra;

(b) poner el cultivo de siembra en el recipiente de acuerdo con la reivindicacion 1 que tiene un segundo medio; y

(c) cultivar el cultivo de siembra hasta que se forme una biomembrana que tenga un espesor predeterminado, en el que la biomembrana formada tiene una mascara facial humana integral despues de retirarse del recipiente.
8. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 7, en el que la cepa microbiana es Acetobacter spp., Gluconacetobacter spp., Xanthomonas spp. o Bacillus spp.
9. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 8, en el que la cepa microbiana del Acetobacter spp. es A.

xylinum.
10. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 8, en el que la cepa microbiana del Gluconacetobacter spp. es G. xylinus subsp. Xylinus o G. Hansenii.
11. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 8, en el que la cepa microbiana del Xanthomonas spp. es X. camperastris.
12. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 8, en el que la cepa microbiana del Bacillus spp. es B. substilis var Natto.
13. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 7, en el que el primer medio y el segundo medio comprenden un carbohidrato, un compuesto que contiene N, un mineral y un cofactor de crecimiento.
14. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, en el que el contenido del carbohidrato, el compuesto que contiene N, el mineral y el cofactor de crecimiento es 1~30 %, 0,1~6%, 0,05~3% y 0,05~2% respectivamente.
15. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, en el que el al menos un carbohidrato se selecciona del grupo que consiste en monosacarido, disacaridos, polisacaridos y compuestos que contienen carboxilo.
16. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, en el que al menos un compuesto que contiene N se selecciona del grupo que consiste en extracto de levadura, peptona, polvos de semilla de soja y gelatina.
17. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, en el que al menos un mineral se selecciona del grupo que

consiste en sal de cloruro, sal de amonio, sal de sulfuro, sal de potasio, fosfato, sal de magnesio y sal de sodio.
18. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, en el que al menos un cofactor de crecimiento se selecciona del grupo que consiste en vitamina, acido nicotmico, acido cftrico y los derivados del mismo.
19. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 13, que comprende adicionalmente una etapa (a1):

5 amplificar el cultivo de siembra para proporcionar mayor cantidad de cultivo de siembra para la produccion en

masa despues de que se haya conseguido la etapa (a).