ES2628084T3 - Proceso novedoso para la reducción enzimática de acrilamida en productos alimenticios - Google Patents
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- C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
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- C12N9/82—Asparaginase (3.5.1.1)
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- C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12Y301/01001—Carboxylesterase (3.1.1.1)
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- C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12Y301/01003—Triacylglycerol lipase (3.1.1.3)
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- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01001—Alpha-amylase (3.2.1.1)
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- C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
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Abstract
Composición enzimática adecuada para reducir el contenido de acrilamida en productos alimenticios preparados con esta composición enzimática que comprende: a. asparaginasa y; b. al menos una enzima hidrolizante, en la que la enzima hidrolizante es una alfa-amilasa.
Description
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DESCRIPCION
Proceso novedoso para la reduccion enzimatica de acrilamida en productos alimenticios
La presente invencion se refiere a una composicion enzimatica novedosa adecuada para su uso en un proceso de preparacion de alimentos con el fin de reducir el contenido de acrilamida en productos alimenticios.
La composicion enzimatica novedosa es especialmente adecuada para su uso en la industria panadera.
Recientemente, se publico la aparicion de acrilamida en varios alimentos y alimentos preparados en horno (Tareke et al. Chem. Res. Toxicol. 13, 517-522 (2000). Desde que la acrilamida se considera probablemente carcinogenica para animales y seres humanos, este hallazgo habfa producido preocupacion mundial. Investigacion adicional revelo que cantidades considerables de acrilamida son detectables en una variedad de alimentos comunes horneados, fritos y preparados en el horno y se demostro que la aparicion de acrilamida en el alimento era el resultado del proceso de horneado.
El lfmite oficial en el RU para la contaminacion por acrilamida en productos alimenticios esta establecido a 10 ppb (10 microgramos por kilogramo) y los valores presentados anteriormente superaron con creces este valor para muchos productos, especialmente cereales, productos de pan y productos basados en patata o mafz.
Se ha propuesto una via para la formacion de acrilamida a partir de aminoacidos y azucares reductores como resultado de la reaccion de Maillard por Mottram et al. Nature 419:448 (2002). Segun esta hipotesis, puede formarse acrilamida durante la reaccion de Maillard. Durante el horneado y asado, la reaccion de Maillard es principalmente responsable del color, olor y sabor. Una reaccion asociada a la de Maillard es la degradacion de Strecker de aminoacidos y se propuso una via hacia la acrilamida. La formacion de acrilamida llego a ser detectable cuando la temperatura supero 120 °C, y la velocidad de formacion mas alta se observo a aproximadamente 170 °C. Cuando estaban presentes asparagina y glucosa, podnan observarse los niveles mas altos de acrilamida, mientras que la glutamina y el acido aspartico solo produjeron cantidades traza. El hecho de que la acrilamida se forme principalmente a partir de la asparagina (combinada con azucares reductores) puede explicar los altos niveles de acrilamida en productos de planta cocinados en horno o asados. Se sabe que varios materiales de partida de planta contienen niveles sustanciales de asparagina. En las patatas, la asparagina es el aminoacido libre dominante (940 mg/kg, correspondiente al 40 % del contenido de aminoacido total) y en harina de trigo la asparaginasa esta presente como un nivel de aproximadamente 167 mg/kg, correspondiente al 14 % del conjunto de aminoacidos libres totales (Belitz y Grosch en Food Chemistry - Springer New York, 1999). Por tanto, en interes de la salud publica, hay una necesidad urgente de productos alimenticios que tengan niveles sustancialmente mas bajos de acrilamida o, preferentemente, carezcan de ella.
Se ha propuesto una variedad de soluciones para reducir el contenido de acrilamida, tanto alterando las variables de procesamiento, por ejemplo la temperatura o duracion de la etapa de calentamiento, como previniendo qmmicamente o enzimaticamente la formacion de la acrilamida o eliminando la acrilamida formada. La presente invencion implica la disminucion enzimatica de la formacion de acrilamida.
Las vfas enzimaticas para reducir la formacion de acrilamida son, entre otras, el uso de asparaginasa para reducir la cantidad de asparagina en el producto alimenticio, ya que la asparagina se considera un precursor importante para la acrilamida.
Sin embargo, para algunas aplicaciones el uso de asparaginasa sola no es suficiente para reducir el contenido de acrilamida del producto alimenticio al nivel deseado. Por tanto, es el objetivo de la presente invencion proporcionar una composicion enzimatica que produzca una disminucion mejorada de los niveles de acrilamida en el alimento preparado por el uso de la composicion segun la invencion.
El objetivo de la presente invencion se alcanza proporcionando una composicion enzimatica adecuada para reducir el contenido de acrilamida en productos alimenticios preparados con esta composicion enzimatica que comprende asparaginasa y al menos una enzima hidrolizante, en la que la enzima hidrolizante es una alfa-amilasa.
Sorprendentemente, se encontro que la adicion de alfa-amilasa junto con asparaginasa produce un efecto sinergico con respecto a reducir los niveles de acrilamida en el alimento preparado con esta composicion enzimatica.
El documento W02004/037007 desvela un metodo de reduccion de la acrilamida en granos de cafe tostados, granos de cafe tostados que tienen niveles reducidos de acrilamida y un artfculo de comercio.
Una composicion enzimatica que comprende asparaginasa y una enzima capaz de oxidar los azucares reductores se desvela en el documento WO 2004/032648, ya que esta en lmea con la ensenanza de que la acrilamida se forma mediante la reaccion entre asparagina y azucares reductores.
Sin embargo, la composicion enzimatica segun la presente invencion aumenta la cantidad de azucares reductores, pero aun asf alcanza una espectacular disminucion en el nivel de acrilamida del producto alimenticio, incluso mas bajo que cuando solo se hubiera anadido asparaginasa.
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Puede usarse cualquier asparaginasa (EC 3.5.1.1) disponible en la presente invencion. La asparaginasa (E.C. 3.5.1.1) adecuada puede obtenerse de diversas fuentes, tales como, por ejemplo, de plantas, animales y microorganismos. Ejemplos de microorganismos adecuados son especies de Escherichia, Erwinia, Streptomyces, Pseudomonas, Aspergillus y Bacillus. Ejemplos de asparaginasas adecuadas pueden encontrarse en los documentos WO03/083043 y WO2004/030468. Una asparaginasa preferida es la asparaginasa que tiene SEQ ID NO:3 o un equivalente funcional de la misma como se describe en el documento WO04/030468.
Cualquier enzima hidrolizante (EC 3.x.x.x) puede ser adecuada. Para las referencias de clasificacion EC como las hechas en el presente documento se usaron la Nomenclatura Recomendada de Enzimas (1992) de la IUBMB publicada por Academic Press Inc. (ISBN 65-3). X se usa en el presente documento para indicar un numero entero.
Sin embargo, preferentemente se usan las enzimas hidrolizantes que pertenecen al grupo de las glucosidasas que hidrolizan compuestos de o-glucosilo (EC 3.2.1.x.).
Ejemplos de hidrolasas de ester carboxflico adecuadas son lipasas (EC 3.1.1.3), pectina esterasa (EC 3.1.1.11), galactolipasa EC 3.1.1.26), fosfolipasa A1 (EC 3.1.1.32), fosfolipasa A2 (EC 3.1.1.4), lisofosfolipasa (eC 3.1.1.5).
Ejemplos de compuestos de o-glucosilo hidrolizantes adecuados preferidos son alfa-amilasa (EC 3.2.1.1), beta- amilasa (EC 3.2.1.2), pectinasa (EC 3.2.1.15), celulasa (EC 3.2.1.4), xilanasa (EC 3.2.1.32), arabinofuranosidasa (EC 3.2.1.55) y glucanasa (EC 3.2.1.6).
Tambien pueden usarse mezclas de enzimas hidrolizantes en la composicion segun la invencion, que incluyen mezclas de hidrolasas de ester carboxflico con compuestos de o-glucosilo hidrolizantes. El experto en la materia sabe como obtener las enzimas hidrolizantes adecuadas para su uso en la invencion.
En la composicion segun la invencion, la asparaginasa se combina con una alfa-amilasa. Esta composicion es especialmente adecuada para la industria panadera y podna ser parte de una pre-mezcla.
En un segundo aspecto de la invencion, la invencion se refiere a un proceso novedoso de reduccion del contenido de acrilamida en productos alimenticios. En una realizacion preferida, el producto alimenticio es un producto horneado. En otra realizacion preferida, el producto alimenticio es un producto frito en abundante aceite. En otra realizacion mas preferida, el producto alimenticio es un producto asado o tostado, en particular una masa o pan asado o tostado.
El proceso para la produccion de un producto alimenticio que implica al menos una etapa de calentamiento comprende anadir asparaginasa y al menos una enzima hidrolizante a una forma intermedia de dicho producto alimenticio en dicho proceso de produccion, por el cual la asparaginasa y al menos una enzima hidrolizante se anaden antes de dicha etapa de calentamiento en una cantidad que es eficaz en reducir el nivel de acrilamida del producto alimenticio en comparacion con un producto alimenticio al que no se anadieron asparaginasa y enzima hidrolizante.
La asparaginasa y al menos una enzima hidrolizante pueden anadirse por separado o en una composicion, preferentemente en una composicion segun la invencion. Preferentemente, la composicion se anade al proceso de produccion de alimentos en una cantidad tal que el contenido de acrilamida del producto alimenticio producido en presencia de la composicion enzimatica segun la invencion disminuya con respecto a un producto alimenticio producido sin ninguno de los componentes en la composicion segun la invencion.
Mas preferentemente, la composicion se anade al proceso de produccion de alimentos en una cantidad tal que el contenido de acrilamida del producto alimenticio producido en presencia de la enzima se reduzca al menos el 10 %, 15 %, 20 %, 25 % o el 30 %, preferentemente al menos el 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 % o el 70 %, mas preferentemente al menos el 80 %, 85 % o el 90 %, lo mas preferentemente al menos el 95 %, 97 %, 98 % o el 99 % en comparacion con el alimento producido en presencia de asparaginasa y en ausencia de la enzima hidrolizante. Para la asparaginasa y las enzimas hidrolizantes que van a usarse en el metodo segun la invencion, deben considerarse las mismas preferencias que se han descrito anteriormente.
Una forma intermedia del producto alimenticio se define en el presente documento como cualquier forma que se produzca durante el proceso de produccion antes de obtener la forma final del producto alimenticio, esto incluye partes de plantas, pero tambien una rebanada o un corte de una parte de planta. La forma intermedia puede comprender los materiales de partida individuales usados y/o procesados a partir de los mismos. Por solo dar dos ejemplos, para el producto alimenticio pan, las formas intermedias pueden comprender trigo, harina de trigo, la mezcla inicial de los mismos con otros componentes de pan tales como, por ejemplo agua, sal, levadura y composiciones que mejoran el pan, la masa mezclada, la masa amasada, la masa congelada, la masa fermentada y la masa parcialmente horneada. Para el producto alimenticio patatas fritas moldeadas, las formas intermedias pueden comprender patata cocida, pure de patata, pure de patata seco y masa de patata.
El producto alimenticio puede prepararse a partir de al menos un material de partida que es de origen vegetal, por ejemplo, patata, tabaco, cafe, cacao, arroz, cereal, fruta. Ejemplos de cereales son trigo, centeno, grano, mafz,
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cebada, granones, trigo sarraceno y avena. Se pretende que el trigo englobe aqu y en lo sucesivo todas las especies conocidas del genero Triticum, por ejemplo aestivum, durum y/o spelta. Productos alimenticios preparados a partir de mas de un material de partida tambien estan incluidos en el alcance de la presente invencion, por ejemplo productos alimenticios que comprenden tanto trigo (harina) como patata.
Ejemplos de productos alimenticios en los que el proceso segun la invencion puede ser adecuado son cualquier producto basado en harina - por ejemplo, pan, hojaldre, pastel, bretzels, bagels, pastel de miel holandes, galletas, pan de jengibre, pastel de jengibre y biscote -, y cualquier producto basado en patata - por ejemplo, patatas fritas, patatas fritas de bolsa, bunuelos de patata - y cualquier producto basado en mafz - por ejemplo pan de mafz, frituras de mafz y copos de mafz.
Un proceso de produccion preferido es el horneado de pan y otros productos horneados de harina de trigo y/o harinas de otro origen de cereal. Otro proceso de produccion preferido es frefr con abundante aceite patatas fritas a partir de rebanadas de patata. Todavfa otro proceso de produccion preferido es frefr con abundante aceite frituras de mafz de masa basada en mafz extruida.
Etapas de calentamiento preferidas son aquellas en las que al menos una parte del producto alimenticio intermedio, por ejemplo la superficie del producto alimenticio, se expone a temperaturas a las que se promueve la formacion de acrilamida, por ejemplo 110 °C o mas alta, 120 °C o mas alta. La etapa de calentamiento en el proceso segun la invencion puede llevarse a cabo en hornos, por ejemplo a una temperatura entre 180-220 °C, tal como para el horneado de pan y otros productos de panadena, o en aceite tal como el frefr patatas fritas de bolsa, por ejemplo a 160-190 °C.
La invencion se ilustra despues por los siguientes ejemplos no limitantes.
Breve descripcion de las figuras
Figura 1 El efecto de 50 ppm de asparaginasa en varias combinaciones de enzima sobre los niveles de acrilamida en cortezas de mini-torpedos preparados con sales leudantes (en %). El nivel de acrilamida de la combinacion de enzimas sin asparaginasa se establecio al 100 %.
Figura 2 El efecto de 50 ppm de asparaginasa de A. niger en varias combinaciones de enzima sobre los niveles de acrilamida en cortezas de mini-torpedos preparados con harina marron Mogul Brand Chapatti y levadura de panadero. El nivel de acrilamida de la combinacion de enzima sin asparaginasa se establecio al 100 %.
Figura 3 El efecto de asparaginasa de A. niger en varias combinaciones de enzima sobre los niveles de acrilamida en cortezas de mini-torpedos preparados con harina kolibri y levadura de panadero. El nivel de acrilamida del pan con asparaginasa como la unica enzima de panificacion se establecio al 100 %.
Materiales
Tabla 1. Enzimas de panificacion usadas en los ejemplos
- Enzima de panificacion
- Actividad enzimatica Proveedor
- Bakezyme P500
- Alfa-amilasa DSM Food Specialties
- Bakezyme HSP6000
- Xilanasa DSM Food Specialties
- Bakezyme W
- Glucanasa/celulasa DSM Food Specialties
- Bakezyme XE
- Celulasa DSM Food Specialties
- Bakezyme A
- Alfa-L-arabinofuranosido DSM Food Specialties
- arabinofuranohidrolasa/ arabinofuranosidasa A
- Lipopan F
- Galactolipasa/ fosfolipasa A1 / fosfolipasa A2/ lisofosfolipasa/lipasa Novozymes A/S
Ejemplo 1
Medicion de acrilamida Pretratamiento de muestras
Se extraen 600 mg de muestra secada y homogeneizada usando 5 ml de agua milliQ. Se anade 1 |jg de patron interno 13C3 acrilamida en disolucion (CIL) al extracto. Despues de 10 minutos de centrifugacion (6000 rpm), se
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llevan 3 ml de la capa superior a una columna Extreluut-3BT (Merck). Usando 15 ml de acetato de etilo, se eluye acrilamida de la columna. Se evapora el acetato de etilo bajo una corriente de nitrogeno suave hasta aproximadamente 0,5 ml.
Condiciones cromatograficas
5 La disolucion de acetato de etilo se analiza usando cromatograffa de gases. La separacion se obtiene usando una columna CP-Wax 57 (Varian) (longitud 25 m, diametro interno 0,32 mm, pelfcula 1,2 pm) y helio como gas portador con un flujo constante de 5,4 ml/min. Se realiza inyeccion sin division de 3 pl. La temperatura del horno se mantiene a 50 °C durante 1 minuto, despues de lo cual la temperatura se aumenta con 30 °c/min hacia 220 °C. Despues de 12 minutos de temperatura constante de 220 °C, el horno se enfna y se estabiliza antes de la siguiente inyeccion.
10 La deteccion se realiza usando espectrometna de masas con ionizacion qmmica en lmea en modo de ion positivo, usando metano como gas de ionizacion. Se monitorizan los iones caractensticos m/z 72 (acrilamida) y m/z 75 (13C3 acrilamida) para la cuantificacion.
Equipo usado
CG: HP6890 (Hewlet Packard)
MSD (detector selectivo de masa): HP5973 (Hewlet Packard)
Las cantidades en ppm o ppb se basan en la cantidad de harina, a menos que se establezca de otro modo.
15 Ejemplo 2
Efectos de las enzimas de panificacion y asparaginasa de Aspergillus niger sobre la formacion de acrilamida en panes mini-torpedo preparados con sales leudantes
Se hizo la preparacion de mini-torpedos con sales leudantes mezclando 200 g de harina de trigo integral (harina marron Mogul Brand Chapatti, Mogul Lasu B.V. La Haya, Holanda), 4 g de sal, 68 ppm de acido ascorbico, 2 g de 20 DKS (NaHCO3) (Chem Proha, Chemiepartners B.V. Dordrecht, Holanda), 2,7 g de Sap 40 (pirofosfato acido de sodio, E450) (Chemische Fabrik Budenheim KG, Budenheim, Alemania) 1 g de SSL (estearoil-lactilato de sodio) (Danisco, Dinamarca) 1 g de GMS (monoestearato de glicerilo, (Admul), Quest, Naarden, Holanda). Las cantidades de enzimas de panificacion que van a probarse se indican en la Tabla 1 (Lipopan F y Novamyl son obtenibles de Novo, las otras enzimas son obtenibles de DSM-Gist). Se anadieron 226 ml de agua. La mezcla tuvo lugar en una 25 mezcladora de varilla durante 8 minutos y 45 segundos. La temperatura de la masa fue 27 °C. Directamente despues de la mezcla, la masa se divide en dos trozos de 150 g, se redondea y se fermenta durante 25 minutos en un armario de fermentacion a 32 °C. A partir de aqu se formaron trozos de masa y se realizo una fermentacion final a 32 °C durante 100 minutos. Los trozos de masa se hornearon durante 20 minutos a 225 °C. La acrilamida en la corteza se determino como se describe en el Ejemplo 1. El porcentaje de acrilamida que quedo en los panes 30 tratados con asparaginasa se calculo del siguiente modo:
contenido de acrilamida(combinacion de enzima de panificacion X mas asparaginasa) contenido de acrilamida(combinacion de enzima de panificacion Xsin asparaginasa)
x 100 %
y se muestra en la Tabla 2 y la Figura 1 para varias combinaciones de enzima. Por ejemplo, el porcentaje de acrilamida que queda en el pan tratado con Bakezyme P500 y asparaginasa se calculo dividiendo los resultados de la prueba N.° 4 entre los resultados de la prueba N.° 3 y multiplicando esto por 100 %.
35 Tabla 2. Acrilamida en cortezas de panes mini-torpedo preparados con sales leudantes y varias enzimas de panificacion como se indica en el ejemplo y el efecto de la asparaginasa de Aspergillus niger sobre los niveles de acrilamida.
- Prueba N.°
- Enzima de panificacion Dosificacion (ppm) Contenido de acrilamida (ppb) % de acrilamida restante
- 1
- Ninguna 185 100
- 2
- Asparaginasa 50 30 16
- 3
- Bakezyme P500 150 143 100
- 4
- Bakezyme P500 Asparaginasa 150 50 17 12
- 5
- Bakezyme HSP6000 200 234 100
- Prueba
- Enzima de Dosificacion Contenido de acrilamida % de acrilamida
- N.°
- panificacion (ppm) (ppb) restante
- 6
- Bakezyme HSP6000 200 21 9
- Asparaginasa 50
- 7
- Lipopan F 50 250 100
- Bakezyme A10000 30
- Lipopan F 50
- 8
- Bakezyme A10000 30 13 5
- Asparaginasa 50
- Bakezyme P500 150
- 9
- Bakezyme HSP6000 200 279 100
- Lipopan F 50
- Bakezyme A10000 30
- Bakezyme P500 150
- Bakezyme HSP6000 200
- 10
- Lipopan F 50 25 9
- Bakezyme A10000 30
- Asparaginasa 50
- 11
- Bakezyme W 50 263 100
- 12
- Bakezyme W 50 19 7
- Asparaginasa 50
- 13
- Bakezyme XE 50 228 100
- 14
- Bakezyme XE 50 17 7
- Asparaginasa 50
- Bakezyme P500 150
- Bakezyme HSP6000 200
- 15
- Bakezyme W 50 464 100
- Lipopan F 50
- Bakezyme A10000 30
- Bakezyme XE 50
- Prueba N.°
- Enzima de panificacion Dosificacion (ppm) Contenido de acrilamida (ppb) % de acrilamida restante
- Bakezyme P500 150
- Bakezyme HSP6000 200
- Bakezyme W 50
- 16
- Lipopan F 50 18 4
- Bakezyme A10000 30
- Bakezyme XE 50
- Asparaginasa 50
De la Tabla 2 y la Figura 1 puede llegarse a la conclusion de que la adicion de las enzimas de panificacion
(Ssyw',(SSw'(SS 1 (SS (SS 1
Bakezyme® HSP6000, Lipopan® F, Bakezyme® A10000, Bakezyme® W, Bakezyme® XE y combinaciones de las mismas producira un elevado nivel de acrilamida en la corteza en comparacion con un pan de referencia sin enzimas 5 de panificacion. La adicion de una cantidad apropiada de asparaginasa a la masa producira, sin embargo, un nivel de acrilamida reducido en comparacion con la referencia correspondiente sin asparaginasa e incluso mas bajo que una referencia en la que no se usaron enzimas de panificacion.
Ejemplo 3
Efectos de enzimas de panificacion y asparaginasa de A. niger sobre la formacion de acrilamida en los 10 panes mini-torpedos preparados con levadura de panificacion y harina de trigo integral
Se hizo la preparacion de panes mini-torpedo en un proceso de horneado estandar mezclando 200 g de harina de trigo integral (harina marron Brand Chapatti), 4,6 g de levadura Koningsgist®, 4 g de sal, 68 ppm de acido ascorbico y varias enzimas y combinaciones de enzima como se indica en la Tabla 2. Se anadieron 132 g de agua y la mezcla se realizo en una mezcladora de varilla durante 8 minutos y 45 segundos. La temperatura de la masa fue 27 °C. 15 Directamente despues de la mezcla, la masa se dividio en dos trozos de 150 g, se redondeo y se fermento durante 25 minutos en un armario de fermentacion a 32 °C. A partir de aqrn se formaron trozos de masa y se realizo una fermentacion final de 100 minutos a 32 °C, los trozos de masa se hornearon durante 20 minutos a 225 °C. La acrilamida en la corteza se determino como se describe en el Ejemplo 1. El porcentaje de acrilamida que quedo en los panes tratados con asparaginasa se calculo como se indica en el Ejemplo 2.
20 En la Tabla 3 y la Figura 2 se muestran los efectos de la asparaginasa en varias combinaciones de enzima.
Tabla 3. Acrilamida en cortezas de panes mini-torpedo preparados con harina de trigo integral, levadura y varias enzimas de panificacion y el efecto de la asparaginasa de Aspergillus niger sobre los niveles de acrilamida.
- Prueba
- Enzima de Dosificacion Contenido de acrilamida % de acrilamida
- N.°
- panificacion (ppm) (ppb) restante
- 1
- Ninguna 78 100
- 2
- Asparaginasa 50 70 90
- 3
- Bakezyme P500 15 73 100
- 4
- Bakezyme P500 15 65 89
- Asparaginasa 50
- 5
- Bakezyme P500 150 94 100
- 6
- Bakezyme P500 150 49 52
- Asparaginasa 50
- 7
- Bakezyme HSP6000 50 77 100
- Prueba
- Enzima de Dosificacion Contenido de acrilamida % de acrilamida
- N.°
- panificacion (ppm) (ppb) restante
- 8
- Bakezyme HSP6000 50 67 87
- Asparaginasa 50
- 9
- Bakezyme HSP6000 200 70 100
- 10
- Bakezyme HSP6000 200 60 86
- Asparaginasa 50
- 11
- Lipopan F 50 159 100
- Bakezyme A10000 30
- Lipopan F 50
- 12
- Bakezyme A10000 50 74 47
- Asparaginasa 50
- 13
- Bakezyme XE 50 80 100
- 14
- Bakezyme XE 50 68 85
- Asparaginasa 50
- Bakezyme P500 150
- 15
- Bakezyme HSP6000 200 257 100
- Bakezyme A10000 30
- Lipopan F 50
- Bakezyme P500 150
- Bakezyme HSP6000 200
- 16
- Bakezyme A10000 30 100 39
- Lipopan F 50
- Asparaginasa 50
- 17
- Bakezyme W 50 90 100
- 18
- Bakezyme W 50 71 79
- Asparaginasa 50
En la Figura 2 se presentan los efectos de la asparaginasa de A. niger en presencia de (combinaciones de) enzimas. En comparacion con el nivel de acrilamida en la corteza de panes preparados con la enzima o combinacion de enzima mencionada, los niveles relativos y en algunos casos incluso los absolutos de acrilamida son mas bajos 5 cuando se usa asparaginasa en presencia de (combinaciones de) enzimas.
De la Tabla 3 y la Figura 2 puede llegarse a la conclusion de que la adicion de las enzimas de panificacion Bakezyme P500, Bakezyme A10000, Bakezyme HSP6000, Lipopan F, Bakezyme W, Bakezyme XE y combinaciones de las mismas producira un elevado nivel de acrilamida en la corteza en comparacion con un pan de referencia indiferente si se prepara con la sal leudante NaHCO3 o levadura. La adicion de una cantidad apropiada de 10 asparaginasa a la masa producira, sin embargo, una reduccion del nivel de acrilamida en comparacion con la referencia correspondiente sin asparaginasa y en algunos casos incluso mas baja que una referencia en la que no se usaron enzimas de panificacion, pero donde estaba presente asparaginasa.
Ejemplo 4
5
10
15
20
25
Efectos de las enzimas de panificacion y asparaginasa de A. niger sobre la formacion de acrilamida en los panes mini-torpedo preparados con levadura de panificacion y harina kolibri
Se hizo la preparacion de panes mini-torpedo en un proceso de horneado estandar mezclando 200 g de harina kolibri (Meneba), 4,6 g de levadura Koningsgist®, 4 g de sal, 68 ppm de acido ascorbico y varias enzimas y combinaciones de enzima como se indica en la Tabla 2. Se anadieron 114 g de agua y la mezcla se realizo en una mezcladora de varilla durante 6 minutos y 15 segundos. La temperatura de la masa fue 27 °C. Directamente despues de mezclar la masa, se dividio en dos trozos de 150 g, se redondeo y se fermento durante 25 minutos en un armario de fermentacion a 32 °C. A partir de aqu se formaron trozos de masa y se realizo una fermentacion final de 100 minutos a 32 °C, los trozos de masa se hornearon durante 20 minutos a 225 °C. La acrilamida en la corteza se determino como se describe en el Ejemplo 1. El porcentaje de acrilamida que quedo en los panes tratados con asparaginasa se calculo como se indica en el Ejemplo 2.
En la Tabla 4 y la Figura 3 se muestran los efectos de la asparaginasa en varias combinaciones de enzima.
Tabla 4. Acrilamida en cortezas de panes mini-torpedo preparados con harina kolibri con levadura y varias enzimas de panificacion y el efecto de la asparaginasa de Aspergillus niger sobre los niveles de acrilamida.
- Prueba N.°
- Enzima de panificacion Dosificacion (ppm) Contenido de acrilamida (ppb) % de acrilamida restante
- 1
- Ninguna 50 100
- 2
- Asparaginasa 50 42 84
- 3
- Bakezyme GOX 10,000 1 40 100
- 4
- Bakezyme GOX 10,000 Asparaginasa 1 50 37 93
- 5
- Pectinex* 5 41 100
- 6
- Pectinex Asparaginasa 5 50 34 83
- 7
- Bakezyme MA 10,000 100 48 100
- 8
- Bakezyme MA 10,000 Asparaginasa 100 50 32 67
- 9
- Bakezyme BXP501 3 43 100
- 10
- Bakezyme BXP501 Asparaginasa 3 50 39 91
- *: Pectinex se obtiene de NOVO.
En la Figura 3 se presentan los efectos de la asparaginasa de A. niger en presencia de (combinaciones de) enzimas. En comparacion con el nivel de acrilamida en la corteza de panes preparados con la enzima o combinacion de enzima mencionada, los niveles absolutos de acrilamida son mas bajos cuando se usa asparaginasa en presencia de (combinaciones de) enzimas. En algunos casos, la cantidad relativa de acrilamida que queda es mas alta como resultado del contenido mas bajo de acrilamida en ausencia de la enzima asparaginasa. El nivel absoluto de acrilamida en presencia de la combinacion de enzima mas asparaginasa es, sin embargo, mas bajo que la referencia.
De la Tabla 4 y la Figura 3 puede llegarse a la conclusion de que la adicion de las enzimas de panificacion Bakezyme GOX 10,000, Bakezyme MA 10,000, Bakezyme BXP501 y Pectinex a una masa basada en harina kolibri producira un nivel mas bajo de acrilamida en la corteza cuando la enzima o combinacion de enzima se combinen con una cantidad apropiada de asparaginasa, en comparacion con un pan de referencia con asparaginasa como la unica enzima de panificacion.
Claims (15)
- 510152025303540REIVINDICACIONES1. Composicion enzimatica adecuada para reducir el contenido de acrilamida en productos alimenticios preparados con esta composicion enzimatica que comprende:a. asparaginasa y;b. al menos una enzima hidrolizante, en la que la enzima hidrolizante es una alfa-amilasa.
- 2. Uso de una composicion segun la reivindicacion 1 en la produccion de un producto alimenticio para reducir los niveles de acrilamida en el producto alimenticio.
- 3. Uso segun la reivindicacion 2, en el que el producto alimenticio es un producto alimenticio basado en harina, basado en mafz o basado en patata.
- 4. Uso segun la reivindicacion 2 o 3, en el que el uso es en la industria panadera.
- 5. Metodo para la produccion de un producto alimenticio que implica al menos una etapa de calentamiento, que comprende anadir:a. asparaginasa; yb. al menos una enzima hidrolizante, en el que la enzima hidrolizante es una alfa-amilasaa una forma intermedia de dicho producto alimenticio en dicho proceso de produccion por el cual la asparaginasa y la al menos una enzima hidrolizante se anaden antes de dicha etapa de calentamiento en una cantidad que es eficaz en reducir el nivel de acrilamida del producto alimenticio en comparacion con un producto alimenticio al que no se anadieron asparaginasa y enzima hidrolizante.
- 6. Metodo segun la reivindicacion 5, en el que la asparaginasa y la al menos una enzima hidrolizante se anaden por separado.
- 7. Metodo segun la reivindicacion 5, por el cual los componentes a. y b. se anaden en una unica composicion, preferentemente una segun la reivindicacion 1.
- 8. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que el producto alimenticio es un producto alimenticio basado en harina, basado en mafz o basado en patata.
- 9. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8, por el cual el producto alimenticio es un producto horneado.
- 10. Metodo segun la reivindicacion 9, en el que el producto horneado es un producto horneado de harina de trigo y/o harinas de otro origen de cereal.
- 11. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 10, por el cual el producto alimenticio es un producto frito con abundante aceite, tostado o asado.
- 12. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 11, en el que dicha forma intermedia de dicho producto alimenticio es una masa.
- 13. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 12, en el que dicho producto alimenticio esta hecho de al menos un material de partida que es de origen vegetal.
- 14. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 13, en el que el producto alimenticio es pan, hojaldre, pastel, bretzels, bagels, pastel de miel holandes, galletas, pan de jengibre, pastel de jengibre, biscote, patatas fritas, patatas fritas de bolsa, bunuelos de patata, pan de mafz, frituras de mafz o copos de mafz.
- 15. Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 14, en el que la etapa de calentamiento es una etapa en la que al menos una parte de la forma intermedia de dicho producto alimenticio se expone a temperaturas de 110 °C o mas altas.
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