ES2637778T3 - Nuevas composiciones antifúngicas - Google Patents
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Classifications
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Abstract
Una composición que comprende natamicina y al menos un compuesto antifúngico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol.
Description
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DESCRIPCION
Nuevas composiciones antifungicas Campo de la invencion
La presente invencion describe nuevas composiciones antimicrobianas para reprimir enfermedades de las plantas y para prevenir el deterioro microbiano de los cultivos.
Antecedentes de la invencion
Se estima que alrededor del 25% de la produccion mundial de cultivos se pierde debido al deterioro microbiano, del cual el deterioro por hongos es con mucho la causa mas importante. No solo desde un punto de vista economico, sino tambien desde un punto de vista humano es de gran importancia evitar el deterioro de productos alimenticios. Despues de todo, en muchas partes del mundo las personas padecen hambruna.
El exito en la lucha contra enfermedades de las plantas y los cultivos y en la reduccion del dano que causan a las cosechas y la calidad depende, en gran medida, de la aplicacion oportuna de fungicidas. El uso prolongado y frecuente de muchos fungicidas tales como, p. ej., benzamidazoles, ha contribuido a reducir su eficacia gracias al desarrollo de fenomenos de resistencia.
A lo largo de los pasados cuarenta anos se han desarrollado y comercializado nuevas clases de fungicidas. Una de esas clases es la clase de los fenilpirroles.
Los fungicidas de fenilpirrol no han sido inmunes a los retos en su desarrollo y mantenimiento. Una gran preocupacion ha sido el desarrollo de resistencia. Se ha observado ahora una resistencia a fungicidas de fenilpirrol en varias enfermedades (vease lacomi-Vasilescu et al., 2004; Kanelis et al., 2006; Kinay et al., 2007).
Durante muchas decadas, se ha utilizado el macrolido de polieno natamicina antimicotico para prevenir el crecimiento de hongos en productos alimentarios tales como quesos y salchichas. Este conservante natural, el cual es producido por fermentacion utilizando Streptomyces natalensis, es ampliamente utilizado en todo el mundo como conservante de alimentos y tiene un largo historial de uso seguro en la industria alimentaria. Es muy eficaz frente a todos los hongos conocidos de deterioro de los alimentos. A pesar de que la natamicina se ha aplicado durante muchos anos, p. ej., en la industria quesera, hasta ahora nunca se ha observado el desarrollo de especies de hongos resistentes.
Por consiguiente, se puede concluir que existe una necesidad seria de composiciones antimicrobianas mas eficaces, p. ej. composiciones antifungicas, para el tratamiento del crecimiento de hongos en y sobre plantas y cultivos.
El documento WO2012/117055 describe el uso de composiciones fungicidas sinergicas que comprenden natamicina y un fungicida dicarboxamida (tal como procimidona, vinclozolin o iprodiona) para tratar productos agncolas, en particular post-cosecha (ejemplos 1-11; reivindicaciones 1-15).
Descripcion de la invencion
La presente invencion resuelve el problema proporcionando una nueva composicion antimicrobiana sinergica, p. ej., antifungica, que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Tal como se utiliza en esta memoria, el termino "sinergico" significa que el efecto combinado de los compuestos antifungicos cuando se utilizan en combinacion es mayor que sus efectos aditivos cuando se utilizan individualmente.
En general, la actividad sinergica de dos ingredientes activos se puede someter a ensayo, por ejemplo, en el analisis del modelo de varianza utilizando la interaccion de tratamiento por estrato (vease Slinker, 1998). La eficacia relativa se puede calcular por medio de la siguiente formula: ((valor de estado de evolucion de control no tratado - valor de estado de evolucion de composicion) / (valor de estado de evolucion del control sin tratar)) * 100. Un coeficiente de interaccion se puede calcular por medio de la siguiente formula: ((eficacia relativa de la combinacion compuesto A + compuesto B) / (eficacia relativa de compuesto A + eficacia relativa de compuesto B)) * 100. Un coeficiente de interaccion mayor que 100 indica sinergia entre los compuestos.
Alternativamente, la sinergia se puede calcular como sigue: la actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales se puede determinar calculando la reduccion en el crecimiento de moho observado en productos tratados con los ingredientes activos en comparacion con el crecimiento de moho en productos tratados con una composicion control. La actividad antifungica esperado (E en %) de la composicion antifungica combinada que comprende ambos ingredientes activos se puede calcular segun la ecuacion de Colby (Colby, 1967): E = X + Y - [(XY) / 100], en donde X e Y son las actividades antifungicas observadas (en %) de los ingredientes activos individuales X e Y, respectivamente. Si la actividad antifungica observada (O en %) de la combinacion supera la
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actividad antifungica esperada (E en %) de la combinacion y el factor de sinergia O/E es, por lo tanto, > 1,0, la aplicacion combinada de los ingredientes activos conduce a un efecto antifungico sinergico.
En una realizacion de la invencion, el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol se selecciona del grupo que consiste en fludioxonil y fenpiclonil.
En una realizacion, las composiciones pueden contener tambien dos o mas compuestos antifungicos diferentes de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Ha de entenderse que derivados de compuestos antifungicos de la familia de los fungicidas de fenilpirrol incluyen, pero no se limitan a sales o solvatos de compuestos antifungicos de la familia de los fungicidas de fenilpirrol o formas modificadas de compuestos antifungicos de la familia de los fungicidas de fenilpirrol tambien se pueden aplicar en las composiciones de la invencion. Ejemplos de productos comerciales que contienen fungicidas de fenilpirrol tal como fludioxonil son los productos con los nombres comerciales Maxim®, Celest® y Switch®. Ejemplos de productos comerciales que contienen fungicidas de fenilpirrol tal como fenpiclonil son productos con los nombres comerciales Beret®, Galbas® y Gambit®. Dichos productos comerciales se pueden incorporar en la presente invencion.
Ejemplos de productos comerciales que contienen natamicina son los productos con la marca Delvocid®. Tales productos son producidos por DSM Food Specialties (Pafses Bajos) y pueden ser solidos que contienen, p. ej., 50% (p/p) de natamicina, o lfquidos que comprenden entre, p. ej., 2-50% (p/v) de natamicina. Dichos productos comerciales se pueden incorporar en las composiciones de la invencion.
La composicion de la presente invencion comprende generalmente de aproximadamente 0,005 g/l a
aproximadamente 100 g/l y preferiblemente de aproximadamente 0,01 g/l a aproximadamente 50 g/l de natamicina. Preferiblemente, la cantidad es de 0,01 g/l a 3 g/l.
La composicion de la presente invencion comprende generalmente de aproximadamente 0,0001 g/l a
aproximadamente 2000 g/l y preferiblemente de aproximadamente 0,0005 g/l a aproximadamente 1500 g/l de un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Mas preferiblemente, la cantidad es de 0,001 g/l a 1000 g/l.
En una realizacion, la composicion de la presente invencion comprende, ademas, al menos un compuesto adicional seleccionado del grupo que consiste en un agente de pegajosidad, un soporte, un agente colorante, un coloide protector, un adhesivo, un herbicida, un fertilizante, un agente espesante, un agente secuestrante, un agente tixotropico, un tensioactivo, un compuesto antimicrobiano adicional, un detergente, un conservante, un agente de extension, una carga, un aceite de pulverizacion, un aditivo de flujo, una sustancia mineral, un disolvente, un dispersante, un emulsionante, un agente humectante, un estabilizador, un agente antiespumante, un agente tampon, un absorbedor UV y un antioxidante. Un compuesto antifungico antimicrobiano adicional puede ser un compuesto antifungico (p. ej., imazalil, tiabendazol) o un compuesto para combatir insectos, nematodos, acaros y/o bacterias. Naturalmente, las composiciones de acuerdo con la invencion tambien pueden comprender dos o mas de cualquiera de los compuestos adicionales anteriores. Cualquiera de los compuestos adicionales mencionados anteriormente tambien se pueden combinar con natamicina y/o el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol en el caso de que los compuestos antifungicos se apliquen por separado. En una realizacion, los compuestos adicionales son aditivos aceptables para el uso espedfico, p. ej., alimentos, piensos, medicamentos, cosmeticos o la agricultura. Compuestos adicionales adecuados para uso en alimentos, piensos, medicinas, cosmeticos o la agricultura son conocidos por la persona experta en la tecnica.
En una realizacion espedfica, el compuesto antimicrobiano adicional es un compuesto de proteccion de cultivos naturales pertenecientes al grupo de los fosfitos, p. ej., KH2PO3 o K2HPO3 o una mezcla de las dos sales de fosfito. Compuestos con contenido en fosfitos, tal como se utiliza en esta memoria, significan compuestos que comprenden un grupo fosfito, es decir, PO3 (en forma de, p. ej., H2PO3", H2PO32" o PO33") o cualquier compuesto que permita la liberacion de un ion fosfito, incluidos compuestos tales como acido fosforoso y acido fosfonico, asf como sus derivados tales como esteres y/o sales de metales alcalinos o de metales alcalinoterreos de los mismos. En el caso de que las composiciones de la presente invencion comprendan natamicina y al menos un compuesto que contiene fosfito, comprenden preferiblemente 0,1 g o menos de lignosulfonato, mas preferiblemente 0,1 g o menos de polifenol por gramo de natamicina. Preferiblemente, comprenden 0,01 g o menos de lignosulfonato, mas preferiblemente 0,01 g o menos de polifenol por gramo de natamicina. En particular, estan exentas de lignosulfonato y preferiblemente exentas de polifenol. Ejemplos adecuados de compuestos que contienen fosfito son acido fosforoso y sus sales (de metales alcalinos o alcalinoterreos) tales como fosfitos de potasio, p. ej., KH2PO3 y K2HPO3, fosfitos de sodio y fosfitos de amonio, y esteres alquilicos (C1-C4) de acido fosforoso y sus sales tales como etil-fosfito de aluminio (fosetil-AI), etil-fosfito de calcio, isopropil-fosfito de magnesio, isobutil-fosfito de magnesio, sec-butil-fosfito de magnesio y N-butil-fosfito de aluminio. Naturalmente, tambien se incluyen mezclas de compuestos que contienen fosfitos. Una mezcla de, p. ej., KH2PO3 y K2HPO3 puede obtenerse facilmente anadiendo, p. ej. KOH o K2CO3 a un pH final de 5,0 - 6,0 a una disolucion de KH2PO3. Como se ha indicado anteriormente, tambien pueden incluirse en las composiciones de la presente invencion compuestos de tipo precursor que en el cultivo o la planta se metabolizan en compuestos de fosfito. Ejemplos son los fosfonatos tales como el complejo de fosetil-aluminio. P. ej., en un cultivo o planta la parte de etil-fosfonato de esta molecula se metaboliza en un fosfito. Un ejemplo de un compuesto de este tipo en el producto comercial hidrogeno-fosfonato de etilo denominado Aliette®
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(Bayer, Alemania). La relacion de fosfito a natamicina (en peso) en las composiciones esta en general entre 2:1 y 500:1 (p/p), preferiblemente entre 3:1 y 300:1 (p/p) y mas preferiblemente entre 5:1 y 200:1 (p/p).
Las composiciones de acuerdo con la invencion pueden tener un pH de 1 a 10, preferiblemente de 2 a 9, mas preferiblemente de 3 a 8 y lo mas preferiblemente de 4 a 7. Pueden ser solidas, p. ej., composiciones en polvo, o pueden ser Kquidas. Las composiciones de la presente invencion pueden ser composiciones acuosas o no acuosas listas para el uso, pero tambien pueden ser composiciones/suspensiones concentradas, acuosas o no acuosas, o composiciones, suspensiones y/o disoluciones madre que antes de su uso han de ser diluidas con un diluyente adecuado tal como agua o un sistema tampon. Alternativamente, las composiciones de la invencion tambien pueden ser utilizadas para preparar emulsiones de revestimiento. Las composiciones de la presente invencion tambien pueden tener la forma de productos secos concentrados tales como, p. ej., polvos, granulados y comprimidos. Se pueden utilizar para preparar composiciones para inmersion o pulverizacion de productos tales como productos agncolas, incluyendo plantas, cultivos, verduras y/o frutas. Naturalmente, lo anterior tambien es aplicable cuando natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol se aplican como composiciones separadas.
En un aspecto adicional, la invencion se refiere a un kit que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol pueden estar presentes en dos paquetes separados, p. ej., recipientes. Los componentes del kit pueden estar en forma seca o en forma lfquida en el paquete. Si es necesario, el kit puede comprender instrucciones para disolver los compuestos. Ademas, el kit puede contener instrucciones para aplicar los compuestos.
En un aspecto adicional, la invencion se refiere a un metodo para proteger un producto frente a los hongos mediante el tratamiento del producto con natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Ademas, el producto puede ser tratado con otros compuestos antifungicos/antimicrobianos ya sea antes de, junto con o despues del tratamiento de los productos con natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. El producto puede ser tratado por aplicacion secuencial de natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol o viceversa. Alternativamente, el producto puede ser tratado mediante la aplicacion simultanea del compuesto antifungico de polieno natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. En caso de aplicacion simultanea, los compuestos pueden estar presentes en diferentes composiciones que se aplican de forma simultanea o los compuestos pueden estar presentes en una sola composicion. En aun otra realizacion, el producto puede ser tratado por modos de aplicacion de los compuestos antifungicos separados o alternativos. En una realizacion, la invencion se refiere a un procedimiento para el tratamiento de productos mediante la aplicacion a los productos de natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Al aplicar los compuestos se puede prevenir el crecimiento de hongos sobre o en los productos. En otras palabras, los compuestos protegen los productos frente al crecimiento de hongos y/o a una infeccion por hongos y/o al deterioro por hongos. Los compuestos tambien pueden utilizarse para tratar productos que han sido infectados con un hongo. Mediante la aplicacion de los compuestos puede ralentizarse, detenerse el desarrollo de la enfermedad debida a los hongos sobre o dentro de estos productos, o los productos pueden incluso ser curados de la enfermedad. En una realizacion de la invencion, los productos son tratados con una composicion o kit de acuerdo con la invencion. En una realizacion, el producto es un alimento, pienso, producto farmaceutico, cosmetico o producto agncola. En una realizacion preferida, el producto es un producto agncola.
Natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol, las composiciones de acuerdo con la invencion y los kits de acuerdo con la invencion se pueden aplicar a los productos por pulverizacion. Otros metodos adecuados para aplicar estos compuestos, composiciones y kits en forma lfquida a los productos son tambien una parte de la presente invencion. Estos incluyen, pero no se limitan a, inmersion, riego, empapamiento, introduccion en un tanque basculante, vaporizacion, atomizacion, nebulizacion, fumigacion, pintura, cepillado, eliminacion de polvo, formacion de espuma, dispersion, empaquetado y revestimiento (p. ej., por medio de cera o electrostaticamente). Ademas, los compuestos antifungicos tambien se pueden inyectar en el suelo. Es conocido que aplicaciones de pulverizacion utilizando sistemas automaticos reducen los costos laborales y son rentables. Pueden utilizarse para ese proposito metodos y equipos bien conocidos para una persona experta en la tecnica. Las composiciones de acuerdo con la invencion se pueden pulverizar regularmente cuando el riesgo de infeccion es alto. Cuando el riesgo de infeccion es bajo, los intervalos de pulverizacion pueden ser mas largos. Dependiendo del tipo de aplicacion, la cantidad de natamicina aplicada puede variar de 5 ppm a 10.000 ppm, preferiblemente de 10 ppm a 5.000 ppm y lo mas preferiblemente de 20 a 1.000 ppm. Dependiendo del tipo de aplicacion, la cantidad del al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol aplicadas puede variar de 10 ppm a 5.000 ppm, preferiblemente de 20 ppm a 3.000 ppm y lo mas preferiblemente de 50 a 1.000 ppm.
En una realizacion espedfica del producto agncola puede ser tratado despues de la cosecha. Mediante el uso de natamicina y el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol se consigue el control de enfermedades post-cosecha y/o de almacenamiento durante un largo penodo de tiempo para permitir el transporte del producto agncola cosechado a lo largo de largas distancias y bajo diversas condiciones de
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almacenamiento, con diferentes sistemas de atmosfera controlada con respecto a la temperature y la humedad. Alteraciones de almacenamiento despues de la cosecha son, p. ej., manchas lenticulares, chamuscamiento, descomposicion senescente, mancha amarga, quemadura, corazon acuoso, pardeamiento, descomposicion vascular, lesiones por CO2, deficiencia de CO2 u O2, y ablandamiento. Enfermedades provocadas por hongos pueden ser provocadas, por ejemplo, por los siguientes hongos: Blumeria spp., p. ej. Blumeria graminis; Uncinula spp., p. ej., Uncinula necator, Leveillula spp., p. ej., Leveillula taurica; Podosphaera spp., p. ej., Podosphaera leucotricha, Podosphaera fusca, Podosphaera aphanis; Microsphaera spp., p. ej., Microsphaera syringae; Sawadaea spp., p. ej., Sawadaea tulasnei; Mycosphaerella spp., Mycosphaerella musae, Mycosphaerella fragariae, Mycosphaerella citri; Mucor spp., p. ej.,Mucor piriformis; Monilinia spp., p. ej., Monilinia fructigena, Monilinia laxa; Phomopsis spp, Phomopsis natalensis; Colletotrichum spp., p. ej., Colletotrichum musae, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum coccodes; Verticillium spp., p. ej., Verticillium theobromae; Nigrospora spp.; Botrytis spp., p. ej., Botrytis cinerea; Diplodia spp., p. ej., Diplodia citri; Pezicula spp.; Alternaria spp., p. ej., Alternaria citri, Alternaria alternata; Septoria spp., p. ej., Septoria depressa; Venturia spp., p. ej., Venturia inaequalis, Venturia pyrina; Rhizopus spp., p. ej., Rhizopus stolonifer, Rhizopus oryzae; Glomerella spp., p. ej., Glomerella cingulata; Sclerotinia spp., p. ej., Sclerotinia fruiticola; Ceratocystis spp., p. ej. Ceratocystis paradoxa; Fusarium spp., p. ej., Fusarium semitectum, Fusarium moniliforme, Fusarium solani, Fusarium oxysporum; Cladosporium spp., p. ej., Cladosporium fulvum, Cladosporium cladosporioides, Cladosporium cucumerinum, Cladosporium musae; Penicillium spp., p. ej., Penicillium funiculosum, Penicillium expansum, Penicillium digitatum, Penicillium italicum; Phytophthora spp., p. ej., Phytophthora citrophthora, Phytophthora fragariae, Phytophthora cactorum, Phytophthora parasitica; Phacydiopycnis spp., p. ej., Phacydiopycnis malirum; Gloeosporium spp., p. ej., Gloeosporium album, Gloeosporium perennans, Gloeosporium fructigenum, Gloeosporium singulata; Geotrichum spp., p. ej.,. Geotrichum candidum; Phlyctaena spp., p. ej., Phlyctaena vagabunda; Cylindrocarpon spp., p. ej., Cylindrocarpon mail; Stemphyllium spp., p. ej., Stemphyllium vesica um; Thielaviopsis spp., p. ej., Thielaviopsis paradoxy; Aspergillus spp., p. ej., Aspergillus niger, Aspergillus carbonarius; Nectria spp., p. ej., Nectria galligena; Cercospora spp., p. ej., Cercospora angreci, Cercospora apii, Cercospora atrofiliformis, Cercospora musae, Cercospora zeae-maydis.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere al uso de natamicina y de al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol para proteger un producto frente a los hongos. Como se indico anteriormente, se pueden utilizar los compuestos, p. ej., aplicar, secuencial o simultaneamente. En una realizacion, la invencion se refiere a un uso, en donde una composicion o kit de acuerdo con la invencion se aplica al producto. En una realizacion, el producto es un alimento, pienso, producto farmaceutico, cosmetico o producto agncola. En una realizacion preferida, el producto es un producto agncola.
En una realizacion espedfica, natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol se puede utilizar en medicina, p. ej., para tratar y/o prevenir enfermedades fungicas. Natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol pueden utilizarse, por ejemplo, en forma de una composicion farmaceutica. La composicion puede comprender, ademas, excipientes farmaceuticamente aceptables. Los compuestos antifungicos pueden administrarse por via oral o parenteral. El tipo de composicion depende de la via de administracion.
Un aspecto adicional de la invencion se refiere a un producto tratado con natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. En una realizacion, el producto se trata con una composicion o kit de acuerdo con la invencion. Por lo tanto, la invencion se dirige a un producto que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Los productos tratados pueden comprender natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol en su superficie y/o dentro del producto. Alternativamente, los productos tratados pueden comprender un revestimiento que comprende estos compuestos. En una realizacion, los productos tratados comprenden de 0,000001 a 200 mg/dm2, preferiblemente 0,00001 a 100 mg/dm2 y mas preferiblemente de 0,00005 a 10 mg/dm2 del natamicina en su superficie. En una realizacion adicional, comprenden de 0,000001 a 200 mg/dm2, preferiblemente 0,00001 a 100 mg/dm2, mas preferiblemente de 0,00005 a 10 mg/dm2 del al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol en su superficie. En una realizacion, el producto es un alimento, pienso, producto farmaceutico, cosmetico o producto agncola. En una realizacion preferida, el producto es un producto agncola.
La expresion "productos alimenticios", tal como se utiliza en esta memoria, debe entenderse en un sentido muy amplio e incluye, pero no se limita a: queso, queso para untar, queso rallado, requeson, queso procesado, nata agria, producto carnico fermentado secado, incluyendo salamis y otros embutidos, vino, cerveza, yogur, zumos y otras bebidas, alinos para ensaladas, aderezo para requeson, salsas, productos de panadena y rellenos de panadena, esmaltes de superficie y la formacion de hielo, productos para untar, coberturas de pizzas, confitena y rellenos de pastelena, aceitunas, salmuera de oliva, aceite de oliva, zumos, pures de tomate y pasta, condimentos, y pulpa de la fruta, y productos alimenticios similares.
La expresion "productos de piensos", tal como se utiliza en esta memoria, tambien debe entenderse en un sentido muy amplio e incluye, pero no se limita a alimentos para mascotas, piensos para pollos de engorde, etc.
La expresion "producto farmaceutico", tal como se utiliza en esta memoria, tambien debe entenderse en un sentido muy amplio e incluye productos que comprenden una molecula activa tal como un farmaco, agente o compuesto
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farmaceutico y, opcionalmente, un excipiente farmaceuticamente aceptable, es dedr, cualquier sustancia inerte que se combina con la molecula activa para preparar una forma de dosificacion agradable o conveniente.
La expresion "producto cosmetico", tal como se utiliza en esta memoria, tambien debe entenderse en un sentido muy amplio e incluye productos que se utilizan para proteger o tratar tejidos rugosos tales como la piel y los labios, el cabello y las unas frente al secado mediante la prevencion de la transpiracion de la humedad de los mismos y, ademas, el acondicionamiento de los tejidos, asf como el proporcionar un buen aspecto a estos tejidos. Productos contemplados por la expresion "producto cosmetico" incluyen, pero no se limitan a, cremas hidratantes, productos de limpieza personales, parches de suministro de farmacos oclusivos, esmalte de unas, polvos, toallitas, acondicionadores para el cabello, emulsiones para el tratamiento de la piel, cremas de afeitar y similares.
La expresion "productos agncolas", tal como se utiliza en esta memoria, tambien debe entenderse en un sentido muy amplio e incluye, pero no se limita a cereales, p. ej., trigo, cebada, centeno, avena, arroz, sorgo y similares; remolachas, p. ej., remolacha azucarera y forrajera; frutas con pepitas y frutas con hueso y bayas, p. ej., manzanas, peras, ciruelas, albaricoques, melocotones, almendras, cerezas, fresas, frambuesas y moras; plantas leguminosas, p. ej., habas, lentejas, guisantes, habas de soja; plantas oleaginosas, p. ej., colza, mostaza, amapola, oliva, girasol, coco, planta del aceite de ricino, cacao, cacahuetes; cucurbitaceas, p. ej., calabazas, pepinillos, melones, pepinos, calabazas, berenjenas; plantas fibrosas, p. ej., algodon, lino, canamo, yute; dtricos, p. ej., naranjas, limones, pomelos, mandarinas, limas; frutas tropicales, p. ej., papayas, fruta de la pasion, mangos, carambolas, pinas tropicales, platanos, kiwis; verduras, p. ej., espinaca, lechuga, esparragos, crudferas tales como coles y nabos, zanahorias, cebollas, tomates, patatas, patatas de siembra, chile picante y pimientos morrones; plantas similares al laurel, p. ej., aguacate, canela, alcanforero; o productos tales como mafz, tabaco, nueces, cafe, cana de azucar, te, vides, lupulo, plantas de caucho, asf como plantas ornamentales, p. ej., flores cortadas, rosas, tulipanes, lirios, narcisos, jacintos, azafranes, dalias, gerbera, claveles, crisantemos, fucsias y bulbos de flores, arbustos, arboles de hoja caduca y arboles de hoja perenne tales como comferas, plantas y arboles de invernaderos. Incluye, pero no se limita a plantas y sus partes, frutas, semillas, esquejes, cultivares, injertos, bulbos, tuberculos, tuberculos radicales, rizomas, flores cortadas y hortalizas.
Un metodo para preparar una composicion segun se describe en esta memoria es otro aspecto de la presente invencion. El metodo comprende anadir natamicina a al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol. Los compuestos pueden anadirse, por ejemplo, por separado a una composicion acuosa y mezclarse, seguido, si es necesario, del ajuste del pH, viscosidad, etc. Si se anaden por separado, algunos o todos los compuestos separados pueden estar en forma de polvo, pero, alternativamente, algunos o todos pueden estar tambien en forma Kquida. Los compuestos pueden anadirse, por ejemplo, tambien el uno al otro en forma de polvo y mezclarse para obtener una composicion en polvo. La composicion en polvo puede entonces anadirse a una composicion acuosa.
EJEMPLOS
Ejemplo 1
Tratamiento de bananas
Por tratamiento se utilizan cuatro bananas (verdes) organicas. La piel de cada una de las bananas es lesionada tres veces utilizando un taladracorchos de acuerdo con el metodo descrito por de Lapeyre de Bellaire y Dubois (1987). Subsiguientemente, cada una de las lesiones se inocula con 15 pi de una suspension de Fusarium proliferatum que contema 1 x 105 esporas/ml. Despues de la incubacion durante 4 horas a 20°C, cada una de las lesiones de las bananas se trata con 100 pi de una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprende natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), fludioxonil o ambos. Ademas, se testa el fungicida de fenilpirrol fenpiclonil solo o en combinacion con natamicina. Las composiciones antifungicas comprenden 1,00% (p/p) de metilhidroxietilcelulosa (MHEC), 0,40% (p/p) de goma xantano, 0,20% (p/p) de agente antiespumante, 0,30% (p/p) de acido dtrico, 0,39% (p/p) de acido lactico y 0,11% (p/p) de sorbato de potasio. El pH de la composicion es 4.0. Como control se utiliza una composicion sin natamicina o un fungicida de fenilpirrol. Las bananas verdes tratadas se incuban en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C y una humedad relativa del aire del 95%, que se obtiene en presencia de una disolucion acuosa saturada de Na2HPO4. Durante los primeros 20 dfas de incubacion, se incluye una banana madura (amarilla) en la caja cerrada para elevar el nivel de gas de etileno y, asf, para inducir la maduracion de las bananas verdes tratadas.
Durante la incubacion, se evalua de dos maneras el grado de desarrollo de moho en las bananas: (i) se cuenta el numero de lesiones por mohos por un total de 12 lesiones; y (ii) se determina la actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales calculando la reduccion en el desarrollo de moho observado en las lesiones de bananas tratadas con la composicion antifungica en comparacion con el desarrollo de moho en las lesiones de bananas tratadas con la composicion de control. La actividad antifungica esperada (E en %) de la composicion antifungica combinada que comprende los dos ingredientes activos se calcula de acuerdo con la ecuacion de Colby (Colby, 1967):
E = X + Y-I(XY) / 100]
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en donde X e Y son las actividades antifungicas observadas (en %) de los ingredientes activos individuales X e Y, respectivamente. Si la actividad antifungica observada (O en %) de la combinacion excede de la actividad antifungica esperada (E en %) de la combinacion y el factor de sinergia O/E es, por lo tanto, > 1,0, la aplicacion combinada de los ingredientes activos conduce a un efecto antifungico sinergico.
Los resultados demuestran claramente que la composicion antifungica que comprende tanto natamicina como un fungicida de fenilpirrol protege mejor a las bananas frente al desarrollo de moho que natamicina o un fungicida de fenilpirrol solo.
Por lo tanto, la combinacion de natamicina y un fungicida de fenilpirrol tiene actividad antifungica sinergica sobre las bananas.
Ejemplo 2
Tratamiento de fresas
Por tratamiento se utilizan doce fresas frescas, organicas. Cada una de las fresas es lesionada con un corte de 0,5 mm de longitud y cada una de las lesiones se inocula con 10 pi de una suspension de Botrytis cinerea que contiene 1 x 105 esporas/ml. Despues de un penodo de incubacion de 2 horas a 20°C, cada una de las fresas se sumerge individualmente durante 1 minuto en una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprende natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), fludioxonil o ambos. Ademas, se testa el fungicida de fenilpirrol fenpiclonil solo o en combinacion con natamicina. Las composiciones antifungicas tambien comprenden 1,00% (p/p) de metilhidroxietilcelulosa (MHEC), 0,40% (p/p) de goma xantano, 0,20% (p/p) de agente antiespumante, 0,30% (p/p) de acido cftrico, 0,39 % (p/p) de acido lactico y 0,11% (p/p) de sorbato de potasio. El pH de la composicion es 4,0. Como control se utiliza una composicion sin natamicina o un fungicida de fenilpirrol. Las fresas tratadas se incuban en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C.
Despues de la incubacion se evalua el desarrollo de mohos en las fresas de una manera doble: (i) se cuenta el numero total de fresas con mohos para un total de 12 fresas, y (ii) se determina la actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales, calculando la reduccion en el desarrollo de moho observada en las fresas tratadas con la composicion antifungica en comparacion con el desarrollo de moho en las fresas tratadas con la composicion de control de acuerdo con el metodo de Colby descrito en el Ejemplo 1 (Colby, 1967).
Los resultados demuestran que la composicion antifungica que comprende natamicina y un fungicida de fenilpirrol tiene una actividad antifungica mas fuerte sobre fresas que natamicina o un fungicida de fenilpirrol solo.
Por lo tanto, la aplicacion combinada de natamicina y un fungicida de fenilpirrol reduce sinergicamente el desarrollo de moho en fresas.
Ejemplo 3
Tratamiento de mandarinas
Por tratamiento se utilizan diez mandarinas frescas, organicas. La cascara de cada una de las mandarinas es lesionada una vez utilizando un taladracorchos de acuerdo con el metodo descrito por de Lapeyre de Bellaire y Dubois (1987). Subsiguientemente, cada una de las lesiones se inocula con 10 pi de una suspension de Penicillium italicum que contiene 1 x 104 esporas/ml. Despues de incubacion durante 2 horas a 20°C, las mandarinas se sumergen individualmente durante 1 minuto en una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprende natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), fludioxonil o ambos. Ademas, se testa el fungicida de fenilpirrol fenpiclonil solo o en combinacion con natamicina. Ademas, composiciones antifungicas comprenden 3,1% (p/p) de cera de abejas, 0,76% (p/p) de glicerol, 0,66% (p/p) de monoestearato de polioxietilen- sorbitan (Tween 60), 0,03% (p/p) de metilhidroxietilcelulosa (MHEC ), 0,02% (p/p) de goma xantano, 0,02% (p/p) de agente anti-espumante, 0,15% (p/p) de acido cftrico y 0,01% (p/p) de sorbato de potasio. El pH de la composicion es 4,0. Como control se utiliza una composicion sin natamicina o un fungicida de fenilpirrol.
Las mandarinas tratadas se incuban en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C y se evaluan en el desarrollo de moho despues de 25, 28, 31 y 34 dfas de incubacion. La actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales y combinados se determina mediante el calculo de la reduccion en el desarrollo de moho observado en las mandarinas tratadas con la composicion antifungica en comparacion con el desarrollo de moho en las mandarinas tratadas con la composicion de control de acuerdo con el metodo de Colby (Colby, 1967) descrito en los Ejemplos 1 y 2.
Los resultados demuestran que la composicion antifungica que comprende natamicina y un fungicida de fenilpirrol es superior a las composiciones que comprenden natamicina o un fungicida de fenilpirrol en la prevencion del desarrollo de moho en las mandarinas.
Por lo tanto, la aplicacion combinada de natamicina y un fungicida de fenilpirrol reduce sinergicamente el desarrollo de moho en mandarinas.
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Ejemplo 4
Actividad antifungica in vitro
Para demostrar la actividad antifungica sinergica de la combinacion de natamicina con un fungicida de fenilpirrol contra Botrytis cinerea se realiza un ensayo in vitro utilizando placas de microtitulacion de 96 pocillos. Se testan las siguientes composiciones:
- Control (sin ingrediente activo),
- natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos),
- un fungicida de fenilpirrol,
- natamicina + un fungicida de fenilpirrol.
Despues de llenar cada uno de los pocillos de una placa de microtitulacion con 92 pi de medio PCB, se anaden el o los ingredientes activos a partir de soluciones madre separadas, preparadas en medio PCB o metanol, lo que resulta en un volumen intermedio de 100 pi por pocillo. Subsiguientemente, se utilizan 100 pi de una suspension de Botrytis cinerea, preparada en medio PCB, para inocular cada uno de los pocillos con 2,5 x 103 esporas/ml. Cada uno de los pocillos contiene, por lo tanto, un volumen final de 200 pi y < 1% de metanol, que no afectaba al desarrollo de hongos (datos no mostrados).
Despues de la incubacion de las placas de microtitulacion a 25°C, se evalua la actividad antifungica in vitro (%) de los ingredientes activos individuales calculando la reduccion en el desarrollo de moho observada en presencia del ingrediente activo en comparacion con el desarrollo de moho observado en ausencia del ingrediente activo. La actividad antifungica esperada (E en %) de la combinacion de ingredientes activos se calcula de acuerdo con la ecuacion de Colby (Colby, 1967):
E = X + Y-I(XY) / 100]
en donde X e Y son las actividades antifungicas observados (en %) de los ingredientes activos individuales X e Y, respectivamente. Si la actividad antifungica observada (O en %) de la combinacion excede la actividad antifungica esperada (E en %) de la combinacion y el factor de sinergia resultante O/E es, por lo tanto, > 1,0, la aplicacion combinada de los ingredientes activos conduce a un efecto antifungico sinergico.
Los resultados demuestran que la combinacion de natamicina + fungicida de fenilpirrol tiene una actividad antifungica mucho mas fuerte frente a Botrytis cinerea que natamicina y un fungicida de fenilpirrol individualmente.
Por lo tanto, la aplicacion combinada de natamicina y un fungicida de fenilpirrol inhibe sinergicamente el desarrollo de Botrytis cinerea.
Ejemplo 5
Tratamiento de fresas
Por tratamiento se utilizaron doce fresas frescas, organicas. Cada una de las fresas fue lesionada con un corte de 0,5 mm de longitud y cada una de las lesiones se inoculo con 10 pi de una suspension de Botrytis cinerea que contiene 1 x 105 esporas/ml. Despues de un penodo de incubacion de 3 horas a 20°C, cada una de las fresas se sumergio individualmente durante 1 minuto en una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprendfa 500 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 500 ppm de fludioxonil o ambos. Cada una de las composiciones antifungicas tambien comprendfa 3,2% (p/p) de cera de abejas, 0,8% (p/p) de glicerol, 0,7% (p/p) de monoestearato de polioxietilen-sorbitan (Tween 60), 0,1% (p/p) de monooleato de polioxietilen-sorbitan (Tween 80), 0,05% (p/p) de metilhidroxietil-celulosa (MHEC ), 0,03% (p/p) de agente anti- espumante, 0,02% (p/p) de goma xantano, 0,02% (p/p) de acido citrico, 0,01 % (p/p) de acido lactico y 0,01% de sorbato de potasio. Como control se utilizo una composicion sin natamicina o fludioxonil. Cada una de las composiciones tema un pH de 4. Las fresas tratadas se incubaron en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C durante 19 dfas.
Durante la incubacion, se evaluo de dos maneras el desarrollo de moho en las fresas: (i) se conto el numero de fresas con moho por un total de 12 fresas; y (ii) se determino la actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales y combinados calculando la reduccion en el desarrollo de moho observado en las fresas tratadas con la composicion antifungica en comparacion con el desarrollo de moho en las fresas tratadas con la composicion de control. La actividad antifungica esperada (E en %) de la composicion antifungica combinada que comprende los dos ingredientes activos se calculo de acuerdo con la ecuacion de Colby (Colby, 1967):
E = X + Y-[(XY) / 100]
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en donde X e Y son las actividades antifungicas observadas (en %) de los ingredientes activos individuales X e Y, respectivamente. Si la actividad antifungica observada (O en %) de la combinacion excede de la actividad antifungica esperada (E en %) de la combinacion y el factor de sinergia O/E es, por lo tanto, > 1,0, la aplicacion combinada de los ingredientes activos conduce a un efecto antifungico sinergico.
Los resultados en la Tabla 1 (numero de fresas con moho por un total de 12 fresas) y en la Tabla 2 (actividad antifungica) demuestran ineqmvocamente que la composicion antifungica combinada que comprende 500 ppm de natamicina y 500 ppm de fludioxonil protegfa a las fresas mas eficazmente frente al desarrollo de moho que las composiciones que comprenden natamicina o fludioxonil solo.
Despues de 7, 8, 9, 10 y 11 dfas de incubacion, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control o natamicina sola teman moho, al igual que, respectivamente, 3, 5, 8, 9 y 9 de las 12 fresas tratadas con fludioxonil solo. Sin embargo, ninguna de las 12 fresas tratadas con la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fludioxonil tuvieron moho en este penodo de incubacion de 11 dfas (vease la Tabla 1).
Los dfas 12 y 13, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control o natamicina sola teman moho, al igual que 9 y 11 de las 12 fresas tratadas con fludioxonil solo, respectivamente. Sin embargo, de las 12 fresas tratadas tanto con natamicina como fludioxonil, solo 1 mostro un desarrollo de moho el dfa 12 y 2 el dfa 13 (vease la Tabla 1).
Despues de 14 a 17 dfas de incubacion, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control, natamicina sola o fludioxonil solo teman moho. Sin embargo, tantas como 8, 6, 3 y 3 de las 12 fresas tratadas tanto connatamicina como con fludioxonil segrnan estando libres de desarrollo de moho los dfas, 14, 15, 16 y 17, respectivamente (vease la Tabla 1).
Ademas, la actividad antifungica observada excedfa la actividad antifungica esperada con aproximadamente 9 a > 60% entre 7 y 19 dfas de incubacion. Por consiguiente, el factor de sinergia era siempre > 1,0 y aumentaba de 1,1 el dfa 7 a incluso de 12 los dfas 18 y 19 (vease la Tabla 2).
Por lo tanto, la aplicacion combinada de 500 ppm de natamicina y 500 ppm de fludioxonil conduce a una reduccion sinergica sorprendentemente fuerte en el desarrollo de moho en fresas.
Ejemplo 6
Tratamiento de fresas
El experimento se llevo a cabo tal como se describe en el Ejemplo 5, excepto por el hecho de que cada una de las fresas lesionadas e inoculadas se sumergio individualmente durante 1 minuto en una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprendfa 250 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 250 ppm de fludioxonil o ambos. Durante la incubacion, las fresas tratadas se evaluaron en el desarrollo de moho de acuerdo con los dos metodos descritos en el Ejemplo 5.
Los resultados en la Tabla 3 (numero de fresas con moho por un total de 12 fresas) y en la Tabla 4 (actividad antifungica) demuestran claramente que la composicion antifungica que comprende 250 ppm de natamicina y 250 ppm de fludioxonil tema un efecto antifungico mucho mas fuerte sobre las fresas que natamicina o fludioxonil solo.
Despues de 6 a 9 dfas de incubacion, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control teman moho, al igual que 11 de las 12 fresas tratadas con natamicina sola. Ademas, de las 12 fresas tratadas con fludioxonil solo, 5 mostraban desarrollo de moho los dfas 6 a 8, y 8 el dfa 9. Sin embargo, ninguna de las 12 fresas tratadas con la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fludioxonil tuvieron moho en este penodo de incubacion de 9 dfas (vease la Tabla 3).
Los dfas 10 y 11, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control o natamicina sola teman moho, al igual que 9 y 10 de 12 fresas tratadas con fludioxonil solo, respectivamente. Sin embargo, de las 12 fresas tratadas tanto con natamicina como fludioxonil, ninguna mostro un desarrollo de moho el dfa 10 y solo una el dfa 11 (vease la Tabla 3).
Despues de 12 a 15 dfas de incubacion, todas las 12 fresas tratadas con la composicion de control, natamicina sola o fludioxonil solo teman moho. Sin embargo, de las 12 fresas tratadas tanto connatamicina como con fludioxonil, tantas como 8, 5, 4 y 2 segrnan estando libres de moho los dfas, 12, 13, 14 y 15, respectivamente (vease la Tabla 3).
Ademas, la actividad antifungica observada era aproximadamente 8 a 60% mayor que la actividad antifungica esperada entre 6 y 19 dfas de incubacion. Por lo tanto, el factor de sinergia siempre excedfa 1,0 y aumentaba de 1,1 el dfa 6 a incluso >20 los dfas 18 y 19 (vease la Tabla 4).
Por lo tanto, la aplicacion combinada de 250 ppm de natamicina y 250 ppm de fludioxonil tiene un efecto antifungico sinergico extremadamente fuerte sobre fresas.
Ejemplo 7
5
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40
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50
Tratamiento de naranjas
Se utilizaron ocho naranjas frescas, organicas por tratamiento. Cada una de las naranjas se empapo en una disolucion de 180 ppm de hipoclorito durante 10 minutos, despues se enjuago a fondo con agua fresca del grifo y se seco. La cascara de cada una de las naranjas desinfectadas se lesiono una vez utilizando un taladracorchos de acuerdo con el metodo descrito por de Lapeyre de Bellaire y Dubois (1987). Subsiguientemente, cada una de las lesiones se inoculo con 10 pi de una suspension de Penicillium italicum que contiene 5 x 105 esporas/ml. Despues de incubacion durante 3 horas a 20°C, cada una de las lesiones y el area de 1 cm de la cascara de la naranja alrededor de la lesion se trato con un total de 150 pl de una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprende 500 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 300 ppm de fludioxonil o ambos. Cada una de las composiciones antifungicas comprendfa tambien 3,2% (p/p) de cera de abejas, 0,8% (p/p) de glicerol, 0,7% (p/p) de monoestearato de polioxietilen-sorbitan (Tween 60), 0,1% (p/p) de monooleato de polioxietilen-sorbitan (Tween 80), 0,05% (p/p) de metilhidroxietil-celulosa (MHEC), 0,03% (p/p) de agente anti- espumante, 0,02% (p/p) de goma xantano, 0,02% (p/p) de acido dtrico, 0,01% (p/p) de acido lactico y 0,01% (p/p) de sorbato de potasio. Como control se utilizo una composicion sin natamicina o fludioxonil. Cada una de las composiciones tema un pH de 4.
Las naranjas tratadas se incubaron en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C y se evaluaron en el desarrollo de moho durante un periodo de incubacion de 27 dfas. La actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales y combinados se determino de acuerdo con los dos metodos descritos en el Ejemplo 5.
Los resultados en la Tabla 5 (numero de naranjas con moho por un total de 8 naranjas) y en la Tabla 6 (actividad antifungica) revelan claramente que la combinacion de ingredientes activos de 500 ppm de natamicina y 300 ppm de fludioxonil tuvo mas exito en limitar el desarrollo de moho en naranjas que natamicina o fludioxonil solo.
Despues de 18 a 27 dfas de incubacion, todas las 8 naranjas tratadas con la composicion de control teman moho, al igual que 6 de las 8 naranjas tratadas con natamicina sola y 7 de las 8 naranjas tratadas con fludioxonil solo. Sin embargo, solo 4 de las 8 naranjas tratadas con la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fludioxonil teman moho entre el dfa 18 y el 27 (vease la Tabla 5).
Ademas de ello, la actividad antifungica observada de la composicion que comprende natamicina y fludioxonil era 7 a aproximadamente 20% mas alta que la actividad antifungica esperada entre el dfa 18 y 27. Por lo tanto, los factores de sinergia correspondientes excedieron todos > 1,0 e incluso aumentaron de 1,2 el dia 18 a 1,7 los dfas 21 a 27 (vease la Tabla 6).
En conclusion, los resultados de este ejemplo demuestran el fuerte efecto antifungico sinergico de 500 ppm de natamicina y 300 ppm de fludioxonil cuando se aplican en combinacion en naranjas.
Ejemplo 8
Tratamiento de naranjas
El experimento se realizo como se describe en el Ejemplo 7, excepto por el hecho de que cada una de las naranjas lesionadas e inoculadas se trato con 150 pl de una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprendfa 250 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 100 ppm fludioxonil o ambos. Durante la incubacion, las naranjas tratadas se evaluaron en cuanto al desarrollo de moho de acuerdo con los dos metodos descritos en el Ejemplo 5.
Los resultados en la Tabla 7 (numero de naranjas con moho por un total de 8 naranjas) y en la Tabla 8 (actividad antifungica) demuestran que la combinacion de ingredientes activos de 250 ppm de natamicina y 100 ppm de fludioxonil tiene una mayor actividad antifungica sobre las naranjas que natamicina o fludioxonil individualmente.
Despues de 14 a 27 dfas de incubacion, todas las 8 naranjas tratadas con la composicion de control o fludioxonil mostraron un desarrollo de moho, al igual que 6 o 7 de las 8 naranjas tratadas con natamicina sola. Sin embargo, solo 4 o 5 de las 8 naranjas tratadas con la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fludioxonil tuvieron moho entre el dfa 14 y el 27 (vease la Tabla 7).
Ademas de ello, la actividad antifungica observada de la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fludioxonil era 8 a alrededor de 30% mayor que la actividad antifungica esperada despues de 19 a 27 dfas de incubacion. Por consiguiente, los factores de sinergia oscilaban entre 1,2 el dfa 19 y 2,8 los dfas 26 y 27 (vease la Tabla 8).
Por lo tanto, la aplicacion combinada de 250 ppm de natamicina y 100 ppm de fludioxonil provoca una fuerte reduccion sinergica en el desarrollo de moho en naranjas.
Ejemplo 9
Tratamiento de naranjas
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
El experimento se realizo como se describe en el Ejemplo 7, excepto por el hecho de que cada una de las naranjas lesionadas e inoculadas se trato con 150 jl de una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprendfa 500 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 400 ppm fenpiclonil o ambos. Durante un periodo de incubacion de 23 dfas, las naranjas tratadas se evaluaron en cuanto al desarrollo de moho de acuerdo con los dos metodos descritos en el Ejemplo 5.
Los resultados en la Tabla 9 (numero de naranjas con moho por un total de 8 naranjas) y en la Tabla 10 (actividad antifungica) revelan claramente que la combinacion de ingredientes activos de 500 ppm de natamicina y 400 ppm de fenpiclonil tema mas exito en limitar el desarrollo de moho sobre las naranjas que natamicina o fenpiclonil solo.
Despues de 14 y 15 dfas de incubacion, todas las 8 naranjas tratadas con la composicion de control 5 de las 8 naranjas tratadas con natamicina sola y 6 de las 8 naranjas tratadas con fenpiclonil solo mostraron un desarrollo de moho. Sin embargo, solo 2 de las 8 naranjas tratadas con la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fenpiclonil tuvieron moho los dfas 14 y 15 (vease la Tabla 9).
Los dfas 16, 18 y 19 a 23, todas las 8 naranjas tratadas con la composicion de control o fenpiclonil solo teman moho, ademas de 5 o 6 de las 8 naranjas tratadas con natamicina sola. Sin embargo, entre las 8 naranjas tratadas con la combinacion de ingredientes activos de natamicina y fenpiclonil, solo 2, 3 y 4 mostraron un desarrollo de moho los dfas 16, 18 y 19 a 23, respectivamente (vease la Tabla 9).
Ademas de ello, la actividad antifungica observada de la composicion que comprende natamicina y fenpiclonil era 8 a 40% mayor que la actividad antifungica esperada entre 12 y 23 dfas de incubacion. Por lo tanto, los factores de sinergia correspondientes eran todos > 1,0 y aumentaban de 1,1 el dfa 12 a 3,6 los dfas 22 y 23 (vease la Tabla 10).
En conclusion, los resultados de este ejemplo demuestran claramente el efecto antifungico sinergico de 500 ppm de natamicina y 400 ppm de fenpiclonil cuando se aplican en combinacion en naranjas.
Ejemplo 10
Tratamiento de pimientos dulces
Se utilizaron 10 pimientos dulces frescos, organicos por tratamiento. La piel de cada uno de los pimientos dulces se lesiono una vez utilizando un taladracorchos de acuerdo con el metodo descrito por de Lapeyre de Bellaire y Dubois (1987). Subsiguientemente, cada una de las lesiones se inoculo con 15 jl de una suspension de Botrytis cinerea que contema 1 x 105 esporas/ml. Despues de la incubacion durante 3 horas a 20°C, cada una de las lesiones y el area de la piel de 0,5 cm alrededor de la lesion se trato con un total de 75 jl de una composicion antifungica acuosa recien preparada que comprende 400 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos), 600 ppm de fenpiclonil o ambos. Cada una de las composiciones antifungicas comprendfa tambien 3,2% (p/p) de cera de abejas, 0,8% (p/p) de glicerol, 0,7% (p/p) de monoestearato de polioxietilen-sorbitan (Tween 60), 0,2% (p/p) de monooleato de polioxietilen-sorbitan (Tween 80), 0,05% (p/p) de metilhidroxietil-celulosa (MHEC), 0,03% (p/p) de agente anti- espumante, 0,02% (p/p) de goma xantano, 0,02% (p/p) de acido cftrico, 0,01% (p/p) de acido lactico y 0,01% de sorbato de potasio. Como control se utilizo una composicion sin natamicina o fenpiclonil. Cada una de las composiciones tema un pH de 4.
Los pimientos dulces tratados se incubaron en una caja cerrada en la oscuridad a 20°C y se evaluo el desarrollo de moho durante la incubacion. La actividad antifungica (en%) de los ingredientes activos individual y combinado se determino calculando la reduccion en el desarrollo de moho observada en los pimientos dulces tratados con la composicion antifungica en comparacion con el desarrollo de moho en los pimientos dulces tratados con la composicion de control de acuerdo con el metodo de Colby (Colby, 1967) tal como se describe en el Ejemplo 5.
Los resultados en la Tabla 11 demuestran que la composicion antifungica combinada que comprenden 400 ppm de natamicina y 600 ppm de fenpiclonil protegfa mas eficazmente a los de los pimientos dulces contra el desarrollo de moho que las composiciones que comprenden natamicina o fenpiclonil.
Despues de 47 a 50 dfas de incubacion, la actividad antifungica observada de la combinacion de ingrediente activo de natamicina y fenpiclonil excedfa la actividad antifungica esperada en aproximadamente 30 a 45%, lo que dio como resultado factores de sinergia entre 4,0 y 14,0 (vease la Tabla 11).
Por lo tanto, este ejemplo demuestra el efecto antifungico sinergico de la aplicacion combinada de 400 ppm de natamicina y 600 ppm de fenpiclonil en pimientos dulces.
Ejemplo 11
Tratamiento de pinas tropicales
En este experimento se seleccionaron pinas tropicales de una planta de empaquetado localizada en Costa Rica. Estas pinas tropicales fueron seleccionadas en base a la uniformidad en color y tamano. Ademas, las mismas estaban libres de desarrollo visual de moho o cualquier otra lesion visual provocada por plagas o enfermedades.
5
10
15
20
25
30
35
40
La superficie de las pinas tropicales se desinfecto primero por immersion de los frutos durante un minuto en una disolucion que comprendfa 150 ppm de hipoclorito sodico. A continuacion, se secaron los frutos y despues se aplicaron las composiciones antimicrobianas sobre los frutos utilizando una regadera modificada. Esta ducha, para simular la cascada de cera utilizada en las plantas de empaquetado de pina tropical, cubrio la corteza de los frutos con una delgada capa de cera. La corona de la pina tropical no fue tratada. Se aplicaron las siguientes composiciones antimicrobianas sobre los frutos:
Composicion A: composicion acuosa que comprende cera al 20% v/v (STA FRESH 2952);
Composicion B: composicion acuosa que comprende 200 ppm de natamicina (DSM Food Specialties, Delft, Pafses Bajos) y cera al 20% v/v (STA FRESH 2952);
Composicion C: composicion acuosa que comprende 250 ppm de fludioxonil y cera al 20% v/v (STA FRESH 2952); Composicion D: composicion acuosa que comprende 200 ppm de natamicina, 250 ppm de fludioxonil y cera al 20% v/v (STA FRESH 2952).
El experimento se realizo cuarenta veces (5 cajas por composicion, cada una de las cajas con 8 pinas tropicales). Todas las composiciones teman un pH de 7,2. Ademas, las composiciones respectivas se pulverizaron sobre el pedunculo (la lesion) de cada uno de los frutos tratados a una tasa de 1 ml por fruto. Despues de la aplicacion de las composiciones, las pinas tropicales se secaron.
Para simular el transporte de las pinas tropicales en un contenedor de transporte, las pinas tropicales se almacenaron en una camara fna a una temperatura de 7,5°C durante 21 dfas. Despues de 21 dfas, la temperatura se elevo a 18 a 20°C para simular la vida util en un supermercado. Las pinas tropicales se almacenaron durante otros 7 dfas a 18 hasta 20°C. Asf, el tiempo total de almacenamiento fue de 28 dfas.
Despues de 28 dfas, la incidencia de moho sobre las cortezas de las pinas tropicales se evaluo utilizando el siguiente metodo. Se conto el numero de pinas tropicales con incidencia visual de moho en la corteza por un total de 40 pinas tropicales para todas las composiciones. Posteriormente, se determino la actividad antifungica (en %) de los ingredientes activos individuales y combinados (composiciones B, C y D), calculando la reduccion en la incidencia de moho observada en la corteza de las pinas tropicales en comparacion con la composicion A. La actividad antifungica observada de la composicion D se comparo con la actividad antifungica esperada de la composicion D de acuerdo con el metodo de Colby (Colby, 1967) tal como se describe en el Ejemplo 5.
Los resultados (vease la Tabla 12) demuestran que la composicion antifungica que comprende 200 ppm de natamicina y 250 ppm de fludioxonil tiene una actividad antifungica mas fuerte en las pinas tropicales que la natamicina o el fludioxonil solo.
Por lo tanto, la aplicacion combinada de natamicina y fludioxonil reduce sinergicamente el desarrollo de moho en pinas tropicales.
Tabla 1. Numero de fresas con moho, incubadas a 20°C despues de tratamiento con composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 500 ppm de fludioxonil o ambas.
- Composicion Antifungica
- Numero de fresas con moho/numero total de 12 fresas
- Durante tiempo de incubacion (en dfas)
- D^a 7
- D^a 8 D^a 9 D'ias 1011 D^a 12 D^a 13 D^a 14 D^a 15 D'ias 1617
- Control
- 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12
- Natamicina 500 ppm
- 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12
- Fludioxonil 500 ppm
- 3/12 5/12 8/12 9/12 9/12 11/12 12/12 12/12 12/12
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 0/12 0/12 0/12 0/12 1/12 2/12 4/12 6/12 9/12
Tabla 2. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 500 ppm de fludioxonil o ambos en fresas tras incubacion a 20°C.
- Composicion Antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 11 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 7 90 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 100 91 1,1
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 14 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 8 80 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 100 83 1,2
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 4,8 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 9 67 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 100 68 1,5
- Control
- 10 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 2,4 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 56 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 100 57 1,8
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 2,4 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 11 52 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 100 54 1,9
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 12 44 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 98 44 2,2
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 13 33 - -
- Natamicina 500 ppm fludioxonil 500 ppm
- + 94 33 2,8
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 14 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 24 - -
- Composicion Antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 90 24 3,8
- Control
- 15 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 81 17 4,8
- Control
- 16 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 13 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 73 13 5,6
- Control
- 18 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 4,8 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 56 4,8 12
- Control
- 19 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 500 ppm
- 3,6 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 500 ppm
- 44 3,6 12
Tabla 3. Numero de fresas con moho incubadas a 20°C despues de tratamiento con composiciones que comprenden 250 ppm de natamicina, 250 ppm de fludioxonil o ambos.
- Composicion Antifungica
- Numero de fresas con moho/numero total de 12 fresas durante el tiempo de incubacion (en dfas)
- D'ias 6-8
- D^a 9 D^a 10 D^a 11 D^a 12 D^a 13 D^a 14 D^a 15
- Control
- 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12
- Natamicina 250 ppm
- 11/12 11/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12
- Fludioxonil 250 ppm
- 5/12 8/12 9/12 10/12 12/12 12/12 12/12 12/12
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 0/12 0/12 0/12 1/12 4/12 7/12 8/12 10/12
5
Tabla 4. Actividad antifungica (%) de composiciones fludioxonil o ambos en fresas tras incubacion a 20°C.
que comprenden 250 ppm de natamicina, 250 ppm de
- Composicion Antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 6 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 23 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 89 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 100 92 1,1
- Control
- 7 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 23 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 81 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 100 86 1,2
- Control
- 8 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 18 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 81 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 100 85 1,2
- Control
- 9 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 13 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 69 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 100 73 1,4
- Control
- 10 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 4,8 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 55 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 100 57 1,8
- Control
- 11 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 4,8 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 44 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 99 47 2,1
- Control
- 12 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 1,2 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 32 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 90 33 2,7
- Control
- 13 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 1,2 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 26 - -
- Composicion Antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 83 27 3,1
- Control
- 14 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 1,2 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 19 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 76 20 3,8
- Control
- 15 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 11 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 70 11 6,4
- Control
- 16 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 6,0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 57 6,0 9,5
- Control
- 18 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 1,2 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 35 1,2 29
- Control
- 19 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 0 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 250 ppm
- 20 0 >20
Tabla 5. Numero de naranjas con moho incubadas a 20°C despues de tratamiento con composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 300 ppm de fludioxonil o ambos
- Composicion antifungica
- Numero de naranjas con moho/numero total de 8 naranjas durante el tiempo de incubacion (en dfas)
- D^as 18 -27
- Control
- 8/8
- Natamicina 500 ppm
- 6/8
- Fludioxonil 300 ppm
- 7/8
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 4/8
Tabla 6. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 300 ppm de fludioxonil o ambos en naranjas tras incubacion a 20°C.
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 32 - -
- Fludioxonil 300 ppm
- 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 18 50 43 1,2
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 29 - -
- Fludioxonil 300 ppm
- 19 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 50 40 1,3
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 20 - -
- Fludioxonil 300 ppm
- 20 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 50 33 1,5
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 16 - -
- Fludioxonil 300 ppm
- 21 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 50 30 1,7
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 14 - -
- Fludioxonil 300 ppm
- 22-27 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fludioxonil 300 ppm
- 50 29 1,7
5 Tabla 7. Numero de naranjas con moho incubadas a 20°C despues de tratamiento con composiciones que comprenden 250 ppm de natamicina, 100 ppm de fludioxonil o ambos.
- Composicion antifungica
- Numero de naranjas con moho/numero total de 8 naranjas durante el tiempo de incubacion (en dfas)
- D'ias 14 -18
- Das 19-22 D^as 23-27
- Control
- 8/8 8/8 8/8
- Natamicina 250 ppm
- 6/8 7/8 7/8
- Fludioxonil 100 ppm
- 8/8 8/8 8/8
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 4/8 4/8 5/8
Tabla 8. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 250 ppm de natamicina, 100 ppm de 10 fludioxonil o ambos en naranjas tras incubacion a 20°C.
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 19 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 36 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 9 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 50 42 1,2
- Control
- 20 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 34 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 2 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 50 35 1,4
- Control
- 21 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 32 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 50 32 1,6
- Control
- 22 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 29 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 50 29 1,7
- Control
- 23 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 25 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 48 25 1,9
- Control
- 25 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 19 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 48 19 2,5
- Control
- 26-27 0 - -
- Natamicina 250 ppm
- 17 - -
- Fludioxonil 100 ppm
- 0 - -
- Natamicina 250 ppm + fludioxonil 100 ppm
- 48 17 2,8
Tabla 9. Numero de naranjas con moho incubadas a 20°C despues de tratamiento con composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 400 ppm de fenpiclonil o ambos
- Composicion antifungica
- Numero de naranjas con moho/numero total de 8 naranjas durante el tiempo de incubacion (en dfas)
- D'ias 14 -15
- ^a 16 D^a 18 D'ias 19 -23
- Control
- 8/8 8/8 8/8 8/8
- Composicion antifungica
- Numero de naranjas con moho/numero total de 8 naranjas durante el tiempo de incubacion (en dfas)
- D'ias 14 -15
- ^a 16 D^a 18 D'ias 19 -23
- Natamicina 500 ppm
- 5/8 5/8 6/8 6/8
- Fenpiclonil 400 ppm
- 6/8 8/8 8/8 8/8
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 2/8 2/8 3/8 4/8
Tabla 10. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 500 ppm de natamicina, 400 ppm de fenpiclonil o ambos en naranjas incubadas a 20°C.
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica observada esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 55 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 12 78 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 98 90 1,1
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 52 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 13 70 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 94 86 1,1
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 48 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 14 66 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 92 82 1,1
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 45 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 15 59 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 90 78 1,1
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 43 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 16 47 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 85 70 1,2
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 32 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 18 28 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 81 51 1,6
- Control
- 19 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 29 - -
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica observada esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Fenpiclonil 400 ppm
- 17 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 73 41 1,8
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 20 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 20 6 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 65 25 2,6
- Control
- 21 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 16 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 3 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 54 19 2,8
- Control
- 0 - -
- Natamicina 500 ppm
- 14 - -
- Fenpiclonil 400 ppm
- 22-23 0 - -
- Natamicina 500 ppm + fenpiclonil 400 ppm
- 50 14 3,6
Tabla 11. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 400 ppm de natamicina, 600 ppm de fenpiclonil o ambos en pimientos dulces tras incubacion a 20°C.
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 0 - -
- Natamicina 400 ppm
- 15 - -
- Fenpiclonil 600 ppm
- 47 0 - -
- Natamicina 400 ppm + Fenpiclonil 600 ppm
- 60 15 4,0
- Control
- 0 - -
- Natamicina 400 ppm
- 6 - -
- Fenpiclonil 600 ppm
- 48 0 - -
- Natamicina 400 ppm + Fenpiclonil 600 ppm
- 48 6 7,6
- Control
- 0 - -
- Natamicina 400 ppm
- 4 - -
- Fenpiclonil 600 ppm
- 49 0 - -
- Natamicina 400 ppm + Fenpiclonil 600 ppm
- 41 4 11,0
- Control
- 0 - -
- Natamicina 400 ppm
- 50 3 - -
- Fenpiclonil 600 ppm
- 0 - -
- Natamicina 400 ppm +
- 35 3 14,0
- Composicion antifungica
- Tiempo incubacion (dfas) Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Fenpiclonil 600 ppm
Tabla 12. Actividad antifungica (%) de composiciones que comprenden 200 ppm de natamicina, 250 ppm de fludioxonil o ambos en pinas tropicales despues de 28 dfas de almacenamiento (21 dfas a 7,5°C y posteriormente 7 d^as a 18 hasta 20°C.
5
- Composicion antifungica
- Actividad antifungica observada O (%) Actividad antifungica esperada E (%) Factor de sinergia O/E
- Control
- 0 - -
- Natamicina 200 ppm
- 35 - -
- Fludioxonil 250 ppm
- 90 - -
- Natamicina 200 ppm + Fludioxonil 250 ppm
- 97,5 93,5 1,04
REFERENCIAS
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Kanetis L, Forster H, Jones CA, Borkovich KA y Adaskaveg JE (2008), Characterization of genetic and biochemical 10 mechanisms of fludioxonil and pyrimethanil resistance in field isolates of Penicillium digitatum. Phytopathology 98: 2005-214.
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Slinker BK (1998), The Statistics of Synergism. Journal of Mol. and Cell. Cardiology 30:723-731.
Claims (12)
- 510152025REIVINDICACIONES1. Una composicion que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol.
- 2. Una composicion de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol se selecciona del grupo que consiste en fludioxonil y fenpiclonil.
- 3. Una composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, en donde la composicion comprende, ademas, al menos un compuesto adicional seleccionado del grupo que consiste en un agente de pegajosidad, un soporte, un agente colorante, un coloide protector, un adhesivo, un herbicida, un fertilizante, un agente espesante, un agente secuestrante, un agente tixotropico, un tensioactivo, un compuesto antimicrobiano adicional, un detergente, un conservante, un agente de extension, una carga, un aceite de pulverizacion, un aditivo de flujo, una sustancia mineral, un disolvente, un dispersante, un emulsionante, un agente humectante, un estabilizador, un agente antiespumante, un agente tampon, un absorbedor UV y un antioxidante.
- 4. Una composicion de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la cantidad de natamicina esta en el intervalo de 0,005 g/l a 100 g/l y la cantidad del al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol esta en el intervalo de 0,0001 g/l a 2000 g/l.
- 5. Un kit que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de fungicidas de fenilpirrol.
- 6. Un metodo para proteger a un producto frente a los hongos, tratando el producto con natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de fungicidas de fenilpirrol.
- 7. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 6, en el que el producto se trata con una composicion de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o un kit de acuerdo con la reivindicacion 5.
- 8. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 6 o 7, en el que el producto se selecciona del grupo que consiste en un producto alimenticio, un producto de pienso, un producto farmaceutico, un producto cosmetico y un producto agncola.
- 9. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 8, en el que el producto es un producto agncola.
- 10. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 9, en el que el producto se trata despues de la cosecha.
- 11. Un producto que comprende natamicina y al menos un compuesto antifungico de la familia de los fungicidas de fenilpirrol, en donde el producto se selecciona del grupo que consiste en un producto alimenticio, un producto de pienso, un producto farmaceutico, un producto cosmetico y un producto agncola.
- 12. Un producto de acuerdo con la reivindicacion 11, en donde el producto es un producto agncola.
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