ES2709680T3

ES2709680T3 - Carbohidratos medicinales para el tratamiento de afecciones respiratorias

Info

Publication number: ES2709680T3
Application number: ES10793441T
Authority: ES
Inventors: Betty Jin; Paul Arthur Jones; Ee Ling Seah; Wen Yang Wu; Peter James Jenkins
Original assignee: Australian Biomedical Co Pty Ltd
Current assignee: Australian Biomedical Co Pty Ltd
Priority date: 2009-07-03
Filing date: 2010-07-02
Publication date: 2019-04-17
Anticipated expiration: 2030-07-02
Also published as: KR101843391B1; EP2448590B1; AU2010268689B2; IL217185A0; US9040503B2; CA2766239C; EP2448590A1; BR112012000101B1; BR112012000101A2; SG176732A1; JP6057709B2; US20120142619A1; PL2448590T3; NZ597044A; US20150238512A1; RU2011150894A; CN107126436A; KR20120050441A; BR112012000101B8; UA110325C2

Abstract

Un compuesto de la Fórmula 1 o la Fórmula 2 farmacéuticamente aceptable en donde la Fórmula (1) tiene la fórmula**Fórmula** en donde, R1, R2, R3 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), CH2Fenilo, COCR5R6R7 y ésteres de CO; R5, R6, R7 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), C6H5, CH2Fenilo y CH3CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200); R4 es igual o diferente a R1, R2, R3 y se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), CH2Fenilo, COCR5R6R7, ésteres de CO y R5', R6' son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H o una sal inorgánica u orgánica farmacéuticamente adecuada, y un éster farmacéuticamente adecuado; B es H, y A se selecciona del grupo que consiste en NHCOCH3, NH2, y NH2 HX, en donde HX representa un ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente adecuado; y en donde la Fórmula (2) tiene la fórmula**Fórmula** en donde, R8 se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n = 1-20), CH2Fenilo, COCH2Fenilo, éster de CO y COCR14R15R16; en donde R14, R15, R16 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), C6H5, CH2Fenilo, CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200); citidina, monofosfato de citidina, difosfato de citidina, trifosfato de citidina, adenosina, monofosfato de adenosina, difosfato de adenosina y trifosfato de adenosina; R9 se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, una sal inorgánica u orgánica farmacéuticamente aceptable, o un éster farmacéuticamente adecuado; CH2CR17R18R19 en donde R17, R18, R19 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200), C6H5 y CH2Fenilo; R10, R11, R12 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), CH2Fenilo, éster y COCR20R21R22 en donde R20, R21 y R22 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), C6H5, CH2Fenilo, CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m = 1-200); R13 es igual o diferente a R10, R11, R12 y se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n = 1-20), CH2Fenilo, éster y COCR20R21R22 en donde R20,en donde R21, R22 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), C6H5, CH2Fenilo, CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200) y R23, R24 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n = 1-20), CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200), CH2Fenilo, o éster y CH2CR25R26R27, o sal inorgánica u orgánica farmacéuticamente aceptable, y R25, R26, R27 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH3, (CH2)nCH3 (n=1-20), y C6H5, CH2Fenilo, para uso en una cantidad eficaz para promover la recuperación de la viabilidad celular en una célula respiratoria dañada en un sujeto afectado por una infección respiratoria para el tratamiento de una afección respiratoria.

Description

DESCRIPCION

Carbohidratos medicinales para el tratamiento de afecciones respiratorias

Campo de la invencion

Esta invencion se relaciona con un nuevo metodo y un grupo de carbohidratos de Formula (1) y/o (2), y sus composiciones para tratar la tos y afecciones respiratorias relacionadas lo que incluye infecciones post vlricas/bacterianas, bronquitis aguda/cronica, EPOC y afecciones inflamatorias.

Antecedentes de la invencion

En los seres humanos, el tracto respiratorio, con un area de un campo de futbol, es la superficie mas grande que conecta el cuerpo con el mundo exterior,requerido para un intercambio de aire suficiente; mientras tanto, se ve afectado por muchas sustancias flsicas, qulmicas y biologicas en el aire que causan trastornos que incluyen el asma, enfermedad pulmonar obstructiva cronica, afecciones inflamatorias del pulmon y vlas respiratorias. Ademas, algunos trastornos geneticos, tales como la fibrosis clstica, se ven afectados por la conexion del tracto respiratorio con el mundo exterior. Los virus y las bacterias pueden entrar en el cuerpo y causar infecciones en el tracto respiratorio.

La tos es una de las afecciones comunes que deben tratarse. Sin embargo, los tratamientos actualmente disponibles solo estan limitados al alivio de los slntomas, dejando que el cuerpo se recupere por si solo y en muchos casos las recuperaciones son lentas.

En Australia, la venta de jarabe para la tos supera los 20 millones de dolares al ano. Se estima que el mercado mundial de jarabe para la tos supera los mil millones de dolares por ano.

La tos persistente, a veces con un perlodo de normalidad que dura meses o incluso anos, se atribuye al asma bronquial, al reflejo oculto o a las infecciones post vlricas/bacterianas y al tabaquismo que hace que la via aerea se vuelva hipersensible/hiperreactiva. Por consiguiente, existe la necesidad de un tratamiento eficiente que pueda ayudar al cuerpo a recuperarse despues de haber sido afectado por muchas sustancias flsicas, qulmicas y biologicas en el aire que pueden causar trastornos en el sistema respiratorio.

La discusion de documentos, actos, materiales, dispositivos, artlculos y similares se incluye en esta especificacion unicamente con el proposito de proporcionar un contexto para la presente invencion. No se sugiere ni representa que alguno o todos de estos asuntos formen parte de la base de la tecnica anterior o sean de conocimiento general comun en el campo relevante para la presente invencion, tal como existla antes de la fecha de prioridad de cada reivindicacion de esta solicitud.

Compendio de la invencion

La presente invencion proporciona en un aspecto de la realizacion un metodo para promover la restauracion de un sialilglicoconjugado sobre la superficie de una celula respiratoria danada de un sujeto a fin de tratar una afeccion respiratoria en el sujeto, el metodo incluye la etapa de administrar al sujeto al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable capaz de acelerar la bioslntesis del sialilglicoconjugado.

En una realizacion divulgada, el metodo proporciona una recuperacion de la viabilidad de la celula de tal manera que la celula este en mejores condiciones para que la funcion biologica normal responda a factores que pueden afectar la superficie respiratoria, lo que conduce a afecciones respiratorias tales como, pero no limitadas a, la tos, infecciones vlricas o bacterianas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), fibrosis clstica y otras afecciones inflamatorias respiratorias.

En otra realizacion, la divulgacion proporciona el uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en compuestos de Formula (1) y Formula (2) y sus sales y derivados farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos. El uso es para el tratamiento o prevention de una afeccion respiratoria como se describe en este documento.

En otros aspectos de la invencion, se proporcionan composiciones y composiciones farmaceuticas que comprenden al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable capaz de acelerar la bioslntesis de sialilglicoconjugados para uso en el tratamiento y prevencion de afecciones respiratorias.

Las realizaciones de la invencion se especifican en las reivindicaciones.

Tambien se describe en este documento un metodo de selection de un compuesto para el tratamiento de una afeccion respiratoria, dicho metodo comprende:

someter a una celula que tiene sialilglicoconjugados reducidos en una superficie de la celula a un compuesto de prueba; y

medir la recuperacion de los sialilglicoconjugados en la superficie de la celula despues de la exposicion del compuesto de prueba a la celula.

La medicion de la recuperacion de los sialilglicoconjugados en la superficie de la celula se puede determinar mediante una medicion de la viabilidad de la celula.

En otro aspecto mas de la divulgacion, se proporciona un metodo para tratar o prevenir una afeccion respiratoria en un sujeto, el metodo incluye la etapa de administrar al sujeto al menos un compuesto identificado por el metodo de seleccion.

Breve descripcion de las figuras

La Figura 1 muestra la ruta de bioslntesis de los sialilglicoconjugados en celulas vivas.

Descripcion detallada de la invencion

Desde el punto de vista de la biologla celular y de la biologla molecular, la hipersensibilidad/hiperreactividad del tracto respiratorio danado puede ser causada por su superficie celular danada, que luego sera susceptible a la estimulacion de los agentes irritantes. Por ejemplo, los solicitantes han encontrado que las celulas del tracto respiratorio despues de una infeccion vlrica o bacteriana a menudo hablan perdido los acidos sialicos terminales en su superficie de sialilglicoconjugados. Como consecuencia, se redujo la viabilidad de la celula "desnuda". Esto provoco entonces una respuesta inflamatoria que llevo a la bronquitis y la tos. Sin estar limitados por la teorla, se postula que la restauracion de los acidos sialicos en la superficie celular puede reparar el tracto respiratorio danado por una infeccion u otros factores flsicos, qulmicos, biologicos, a fin de afectar eventualmente a la bronquitis y detener la tos.

Los solicitantes han mostrado en esta solicitud experimentos de cultivo celular realizados en dos llneas celulares del tracto respiratorio humano: celulas epiteliales de vlas aereas pequenas (SAECs) y celulas epiteliales bronquiales/traqueales humanas normales (NHBEs). Las celulas fueron tratadas originalmente con neuraminidasas (NAs) de virus de influenza o bacterias. Las NAs escinden los acidos sialicos de la superficie celular de los sialilglicoconjugados. Como consecuencia, se reduce la viabilidad de las celulas "desnudas". Por ejemplo, las SAECs perdieron mas del 25% de viabilidad cuando se trataron con NA de C. perfringens a una concentracion final de 0,01 U/ml, o con NA del virus de la influenza NWS/G70C a una concentracion final de 0,17 pg/pocillo. Tambien se obtuvieron resultados similares en la llnea celular NHBE. Despues de que las celulas se trataron con NA, las celulas se lavaron para eliminar la NA, y luego se incubaron con compuestos de Formula (1) y/o (2) durante 24 horas. Finalmente se determinaron las viabilidades celulares. Los resultados (ejemplos 7-36) mostraron que un grupo de carbohidratos de formula (1) y/o (2) podrlan ayudar a recuperar la viabilidad de las celulas del tracto respiratorio danadas al restaurar los sialilglicoconjugados en su superficie.

En consecuencia, la presente invencion proporciona en un aspecto de la invencion un metodo para promover la restauracion de un sialilglicoconjugado en la superficie de una celula respiratoria danada de un sujeto a fin de tratar una afeccion respiratoria en el sujeto, el metodo incluye la etapa de administrar al sujeto al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable capaz de acelerar la bioslntesis de los sialilglicoconjugados.

La presente divulgacion proporciona en otro aspecto de la invencion un metodo para promover la recuperacion de la viabilidad celular de una celula respiratoria danada de un sujeto a fin de tratar una afeccion respiratoria en el sujeto, el metodo incluye la etapa de administrar al sujeto al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable capaz de acelerar la bioslntesis de los sialilglicoconjugados.

La promocion de la restauracion de los sialilglicoconjugados en la superficie de una celula respiratoria tambien puede indicar la recuperacion de la celula a un estado viable o la recuperacion de la viabilidad de modo que la celula este en mejores condiciones para que la funcion biologica normal responda a factores que pueden afectan la superficie respiratoria, lo que conduce a afecciones respiratorias tales como la tos no limitada, infecciones post vlricas o post bacterianas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), fibrosis clstica y otras afecciones inflamatorias respiratorias.

En otra realization, se selecciona al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable del grupo que consiste en carbohidratos capaces de participar como productos intermedios en la bioslntesis de sialilglicoconjugados, sus precursores y profarmacos y sus sales y derivados farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos. Los compuestos mencionados anteriormente se pueden usar por via oral, por inhalation o administration por inyeccion para el tratamiento de las afecciones respiratorias seleccionadas del grupo que comprende la tos, infecciones post vlricas o post bacterianas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), fibrosis clstica y otras afecciones inflamatorias respiratorias.

A lo largo de la descripcion y las reivindicaciones de esta especificacion, la palabra "comprende" y las variaciones de la palabra, como "que comprende" y "comprende", no pretenden excluir otros aditivos, componentes, numeros enteros o etapas.

En otra realizacion, la presente invencion proporciona el uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en;

compuestos de formula (1):

en donde,

B=H, y A es NHCOCH³, NH², OH, NH²HX, HX puede ser un acido inorganico u organico farmaceuticamente aceptable, tal como el acido clorhldrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido acetico, acido cltrico, etc.

R¹, R², R³, R⁴podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), CH²Fenilo, COCR⁵R⁶R⁷, esteres activos de CO, tales como un ester de piva, ester de indenilo; R⁵, R⁶, R⁷podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH³CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200); y,

R⁴puede ser

R^{5 '}, R^6'podrlan ser iguales o diferentes. Pueden ser H, o una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, tal como, Na, K, Ca, Mg, Zn, NH³, trietilamina, etc., o R^{5 '}, R^{6 '}podrlan ser un ester farmaceuticamente aceptable, tal como (CH²)ⁿCH³(n = 1~20) o CH³CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200) o un ester activo, tal como un ester de piva, ester de indenilo;

y compuestos de formula (2)

En donde,

R⁸podrla ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), CH²Fenilo, COCH²Fenilo, CO-ester activo, tal como un ester de piva, ester de indenilo, COCR¹⁴R¹⁵R¹⁶; en donde R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200);

R⁸puede ser citidina, monofosfato de citidina, difosfato de citidina, trifosfato de citidina, adenosina, monofosfato de adenosina, difosfato de adenosina, trifosfato de adenosina;

R⁹puede ser H, CH³, una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, tal como de Na, K, Ca, Mg, Zn, NH³, trietilamina, etc., o un ester activo farmaceuticamente adecuado, tal como ester de piva, ester de indenilo etc., o CH²CR¹⁷R¹⁸R¹⁹en donde R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹pueden ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200), C⁶H⁵, Ch^hFenilo;

R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), CH²Fenilo, un ester activo, tal como ester de piva, o COCR²⁰R²¹R²². R²⁰, en donde R²¹, R²²podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200);

R¹³puede ser

R²³, R²⁴podrlan ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1~200), CH²Fenilo, o un ester activo, tal como un ester de piva, ester de indenilo o CH²CR²⁵R²⁶R²⁷, o una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, tal como de Na, K, Ca, Mg, Zn, NH³, trietilamina, etc. y R²⁵, R²⁶, R²⁷pueden ser iguales o diferentes. Podrlan ser H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1~20), C⁶H⁵, CH²Fenilo.

En una realization en la Formula (1) cuando A = NHCOCH³, B = H, R¹, R², R³, R⁴= H, el compuesto es N-acetil-D-manosamina. Este se denominara Compuesto (1) a lo largo de esta especificacion.

En otra realizacion en la Formula (2) cuando R⁸, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³= H, R⁹= Na, el compuesto es la sal sodica del acido N-acetilneuramlnico. (Sal sodica del acido sialico). Esto se denominara Compuesto (2) a lo largo de esta especificacion.

Cuando R⁸es el monofosfato de citidina (CMP) y R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³= H, el compuesto es el acido CMP-sialico. Los acidos sialicos como azucares terminales en las cadenas de oligosacaridos del glicoconjugado en la superficie de la celula son bien adecuados como determinantes moleculares de procesos biologicos especlficos tales como la adhesion celular^[1], la formation o el enmascaramiento de los determinantes de reconocimiento^[2I[31y la estabilizacion de la estructura de las glicoprotelnas^[4]. La ruta de bioslntesis de los sialilglicoconjugados en celulas vivas se muestra a continuation en la Figura 1 ^[5].

Figura 1 - Ruta de bioslntesis de los sialilglicoconjugados en las celulas vivas

Se ha informado de que el acido N-acetilneuramlnico, pero no la lactosa, protegio de forma dependiente de la dosis del deterioro del transporte mucociliar^[6]. Ademas, el tratamiento previo con administraciones repetidas (inhalaciones) de acido N-acetilneuramlnico evito notablemente los cambios inflamatorios causados por la exposicion prolongada de SO²en los conejos^[7]. Tambien se informo de que despues de la administracion oral, N-acetil-D-manosamina se metabolizo rapidamente en glucosa en los mamlferos^[8]. Tambien se ha informado sobre metodos de administracion de N-acetilmanosamina o su derivado (para producir acido sialico en pacientes con deficiencia de la molecula de azucar) para el tratamiento de la atrofia muscular, incluida la miopatla hereditaria de cuerpos de inclusion (HIMB) y la miopatla distal con vacuolas de borde (miopatla de Nonaka)). Ciertas afecciones renales, como las derivadas de la hiposializacion de las membranas renales, tambien pueden tratarse con este metodo^{[8b] [8c]}.

Sin embargo, ninguno de estos tratamientos se relaciona con el uso de estos intermedios para el tratamiento de afecciones respiratorias.

Los compuestos de Formula (1) y/o (2) han sido sometidos a pruebas de seguridad por los solicitantes. Por ejemplo, los Compuestos (1) y (2) se usaron en un estudio de tolerancia y toxicidad subcronica en ratones Balb-C (Codigo de aprobacion AEC: BAM / B / 2005/16). Los resultados del estudio de tolerancia mostraron que ambos compuestos a 5 g/kg para dosis orales o 2 g/kg para dosis intraperitoneales fueron bien tolerados. En el estudio de toxicidad subcronica, los resultados mostraron que ambos compuestos a 1 g/kg/dla x 30 dlas para la dosis oral o 0,5 g/kg/dla x 30 dlas para la dosis intraperitoneal no eran toxicos.

Los solicitantes tambien establecieron un modelo de tos en cobayas. Los Compuestos (1) y (2) se probaron en este modelo. A una dosis oral de 500 mg/kg/dla X 3 dlas, ambos compuestos pudieron restaurar los danos en el tracto respiratorio causados por la neuraminidasa en los cobayas. Estos resultados in vivo estan en llnea con los datos in vitro. Por lo tanto, tanto los datos de eficacia como de seguridad respaldan que los compuestos de formula (1) y/o (2) y, en particular, los Compuestos (1) y (2) pueden ser utiles para aplicaciones medicinales.

Los solicitantes han descubierto que los compuestos de formula (1) y/o (2) pudieron acelerar la recuperacion de la viabilidad de las celulas del tracto respiratorio danadas mediante la restauracion de los sialilglicoconjugados en su superficie.

Los compuestos de formula (1) y/o (2) mejoran la produccion de sialilglicoconjugados despues de entrar en las celulas. Por lo tanto, un aspecto de esta invencion se refiere al uso de compuestos de Formula (1) y/o (2), y sus sales y derivados farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos, o sus mezclas como agentes terapeuticos activos para el tratamiento de la tos, y afecciones respiratorias relacionadas incluyendo las infecciones post vlricas/bacterianas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), fibrosis clstica y afecciones inflamatorias.

Composiciones farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula (1) y/o (2) y sus mezclas tambien pueden formarse combinandolos con uno o mas ingredientes activos para el tratamiento de afecciones respiratorias. Por ejemplo, teofilinato de colina (broncodilatador), teofilina (broncodilatador), salbutamol y sulfato de terbutalina (alivio del broncoespasmo asociado con el asma y otras afecciones respiratorias), bromhexina (expectorante, mucolltica), codelna, folcodina (analgesico, antitusivo), clofedanol (antitusivo), pentoxiverina (antitusivo), dimetoxanato, glaucina (antitusivo), promdato, taloximina, acetil piperacetamida, aceite de eucalipto, cloruro de amonio y hierbas como la fritillahae cirrhosae (hierba anti-tos). Inhibidores de la slntesis de mucina tales como el talniflumato, los acidos 2-amino-fenilaceticos, o la combinacion con algunos glucocorticoides como la flunisolida (antiasmatica), o la combinacion con alivio de los slntomas de jarabes para la tos farmaceuticamente compatibles, o la combinacion con un inhibidor de la fosfodiesterasa-4, tal como el cilomilast (Ariflo) para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC).

Ademas, las composiciones farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula (1) y/o (2) y sus sales y derivados farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos, y sus mezclas tambien pueden formarse combinandolos con uno o mas ingredientes activos, por ejemplo, agentes antivlricos tales como zanamivir y/o oseltamivir (agentes anti-virus de la influenza), pleconaril y/o enviroxima (agentes anti-rhinovirus), agentes antimicrobianos, tales como los antibioticos, por ejemplo, las eritromicinas, tetraciclinas, rifamicinas, penicilinas, cefalosporinas; quinolonas, fluoroquinolonas; sulfonamidas y trimetoprimas; agentes antifungicos, tales como, las anfotericinas, clotrimazol, econazol, fluconazol, flucitosina, etc.

Las referencias a los compuestos de formula (1) y/o (2) en este documento incluyen los compuestos de formula (1) y/o (2), y sus derivados y sales de los mismos farmaceuticamente aceptables.

En una realizacion adicional o alternativa, se proporciona un metodo para el tratamiento o prevencion de afecciones respiratorias que incluyen infecciones post viricas/bacterianas, bronquitis aguda/cronica, EPOC, fibrosis cistica y afecciones inflamatorias en animales que incluyen seres humanos que comprende la administration de una cantidad eficaz de compuestos de formula (1) y/o (2).

Tambien se proporciona en un aspecto adicional o alternativo el uso de los compuestos de formula (1) y/o (2) en la fabrication de un medicamento para el tratamiento de afecciones respiratorias que incluyen infecciones post viricas/bacterianas, bronquitis aguda/cronica, EPOC, fibrosis cistica y afecciones inflamatorias en animales, incluidos seres humanos.

La cantidad de los compuestos de Formula (1) y/o (2) requerida para el uso en el tratamiento variara con la via de administracion, la naturaleza de la afeccion que se esta tratando y la edad y condition del animal (incluidos los pacientes humanos), y, en ultima instancia, sera a discretion del veterinario o medico asistente.

En general, una dosis adecuada estara en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg a 500 mg/kg de peso corporal por dia, preferiblemente en el intervalo de 0,1 mg a 50 mg/kg/dia.

En general, la dosis para la administracion oral seria de 1 mg/kg/dia a 500 mg/kg/dia, la dosis inyectable seria de 1 mg/kg/dia a 100 mg/kg/dia. La dosis para inhalation seria de 0,01 mg/kg/dia a 5 mg/kg/dia. Preferiblemente, la dosis seria de 5 mg a 50 mg/kg para administracion oral o por inyeccion, de dos a tres veces al dia durante 5 a 10 dias; la dosis seria de 0,1 a 0,5 mg/kg para inhalacion, de una a cinco veces al dia durante un periodo de 5 a 10 dias.

El tratamiento se inicia preferiblemente despues o en el momento en que se produce la tos o afecciones relacionadas y continua hasta que cesa la tos o afecciones relacionadas. El tratamiento adecuado se administra de 1 a 4 veces al dia y se continua durante de 3 a 30 dias.

La dosis deseada puede presentarse en una dosis unica o en dosis divididas administradas a intervalos apropiados, por ejemplo, como dos, tres, cuatro o mas subdosis por dia.

Los compuestos de formula (1) y/o (2) se administran convenientemente en forma de dosificacion unitaria, por ejemplo, que contiene de 0,1 a 500 mg de ingrediente activo por forma de dosificacion unitaria. Tal como se usa en este documento, el termino "dosis unitaria" incluye no solo dosis unitarias envasadas individualmente, tales como viales, sino tambien partes alicuotas dispensadas de viales a jeringas y composiciones para infusion contenidas en contenedores de infusion.

Si bien es posible que, para uso en terapia, los compuestos de formula (1) y/o (2) puedan administrarse como el producto quimico en bruto, es preferible presentar el ingrediente activo como una formulation farmaceutica.

La invention proporciona ademas una formulacion farmaceutica que incluye los compuestos de formula (1) y/o (2) o un derivado farmaceuticamente aceptable de los mismos junto con uno o mas vehiculos farmaceuticamente aceptables de los mismos y, opcionalmente, otros ingredientes terapeuticos y/o profilacticos. El (los) portador(es) deben ser "aceptables" en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulacion y no ser perjudiciales para el receptor de los mismos.

Las formulaciones farmaceuticas incluyen aquellas adecuadas para administracion oral, rectal, nasal o parenteral (incluyendo intramuscular, intradermica, subcutanea e intravenosa) o en una forma adecuada para la administracion en el tracto gastrointestinal, o en una forma adecuada para la administracion en el tracto respiratorio, (incluyendo las fosas nasales), por ejemplo, por inhalacion o insuflacion o por implantation intradermica o subcutanea o por parche transdermico. Las formulaciones pueden, cuando sea apropiado, presentarse convenientemente en unidades de dosificacion discretas y pueden prepararse por cualquiera de los metodos bien conocidos en la tecnica de la farmacia. Todos los metodos incluyen la etapa de asociar el compuesto activo con portadores liquidos o portadores solidos finamente divididos o ambos y luego, si es necesario, conformar el producto en la formulacion deseada. Las formulaciones farmaceuticas adecuadas para administracion oral pueden presentarse como unidades discretas, tales como capsulas, sellos o comprimidos, cada una de los cuales contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o granulos; como una solution, una suspension o como una emulsion. El ingrediente activo tambien puede presentarse como un bolo, electuario o pasta. Los comprimidos y capsulas para administracion oral pueden contener excipientes convencionales tales como agentes aglutinantes, rellenos, lubricantes, disgregantes o agentes humectantes. Los comprimidos pueden recubrirse segun metodos bien conocidos en la tecnica. Las preparaciones liquidas orales pueden estar en forma de, por ejemplo, suspensiones acuosas u oleosas, soluciones, emulsiones, jarabes o elixires, o pueden presentarse como un producto seco para la reconstitucion con agua u otro vehlcuio adecuado antes de su uso. Dichas preparaciones llquidas pueden contener aditivos convencionaies tales como agentes de suspension, agentes emuisionantes, vehlcuios no acuosos (que pueden inciuir aceites comestibles) o conservantes.

Los compuestos de formuia (1) y/o (2) tambien pueden formuiarse para administracion parenterai (por ejempio, mediante inyeccion, por ejempio, inyeccion en boio o infusion continua) y pueden presentarse en forma de dosis unitaria en ampoiias, jeringas precargadas, infusion de voiumen pequeno o en recipientes de dosis muitipies con un conservante agregado. Las composiciones pueden tomar formas taies como suspensiones, soiuciones o emuisiones con vehlcuios oieosos o acuosos, y pueden contener agentes de formuiacion taies como agentes de suspension, estabiiizantes y/o dispersantes. Aiternativamente, ei ingrediente activo puede estar en forma de poivo, obtenido por aisiamiento aseptico de un soiido esterii o por iiofiiizacion de ia soiucion, para su reconstitucion con un vehlcuio adecuado, por ejempio, agua esterii sin pirogenos, antes dei uso.

Para ia administracion rectai, se prefieren ios supositorios de dosis unitaria en donde ei vehlcuio es un soiido. Vehlcuios adecuados inciuyen ia manteca de cacao y otros materiaies comunmente usados en ia tecnica, y ios supositorios pueden formarse convenientemente mediante ia mezcia dei compuesto activo con ei (ios) vehlcuio(s) abiandado(s) o fundido(s) seguido de enfriamiento y conformation en moides.

Para ia administracion ai tracto respiratorio (inciuyendo ia administracion intranasai), ios compuestos de formuia (1) y/o (2) pueden administrarse por cuaiquiera de ios metodos y formuiaciones empieados en ia tecnica para ia administracion ai tracto respiratorio.

Asl, en generai, ios compuestos de formuia (1) y/o (2) se pueden administrar en forma de una soiucion o una suspension o como un poivo seco.

Las soiuciones y suspensiones seran preferibiemente acuosas, por ejempio, preparadas a partir de agua soia (por ejempio, agua esterii o iibre de pirogenos) o agua y un disoivente conjunto fisioiogicamente aceptabie (por ejempio, etanoi, propiiengiicoi, poiietiiengiicoies, taies como PEG 400).

Dichas soiuciones o suspensiones pueden contener ademas otros excipientes, por ejempio, conservantes (taies como ei cioruro de benzaiconio), agentes soiubiiizantes/tensioactivos, taies como poiisorbatos (por ejempio, Tween® 80, Span® 80, cioruro de benzaiconio), tampones, agentes de ajuste de ia isotonicidad (por ejempio, cioruro de sodio), potenciadores de ia absorcion y potenciadores de ia viscosidad. Las suspensiones pueden contener adicionaimente agentes de suspension (por ejempio, ceiuiosa microcristaiina, carboximetiiceiuiosa sodica).

Las soiuciones o suspensiones se apiican directamente a ia cavidad nasai por medios convencionaies, por ejempio, con un gotero, pipeta o aerosoi. Las formuiaciones se pueden proporcionar en forma unica o muitidosis. En este uitimo caso, deseabiemente se proporciona un medio de medicion de dosis. En ei caso de un gotero o pipeta, esto puede iograrse si ei paciente administra un voiumen apropiado y predeterminado de ia soiucion o suspension. En ei caso de una puiverizacion, esto puede iograrse, por ejempio, por medio de una bomba de puiverizacion atomizadora dosificadora.

Tambien se puede usar una formuiacion de aerosoi para ia administracion ai tracto respiratorio, en ia que ios compuestos de formuia (1) y/o (2) se proporcionan en un paquete presurizado con un propeiente adecuado tai como un ciorofiuorocarbono (CFC), por ejempio, diciorodifiuorometano, triciorofiuorometano o diciorotetrafiuoroetano, dioxido de carbono u otro gas adecuado. Ei aerosoi tambien puede contener convenientemente un agente tensioactivo tai como ia iecitina. La dosis de farmaco puede controiarse mediante ia provision de una vaivuia dosificada.

Aiternativamente, ios compuestos de formuia (1) y/o (2) se pueden proporcionar en forma de poivo seco, por ejempio, una mezcia en poivo dei compuesto en una base en poivo adecuada tai como iactosa, aimidon, derivados de aimidon taies como hidroxipropiimetiiceiuiosa y poiiviniipirroiidina (PVP). Convenientemente, ei portador de poivo formara un gei en ia cavidad nasai. La composition de poivo se puede presentar en forma de dosis unitaria, por ejempio, en capsuias o cartuchos de, por ejempio, geiatina o envases tipo bilster a partir de ios cuaies se puede administrar ei poivo por medio de un inhaiador.

En formuiaciones destinadas a ia administracion ai tracto respiratorio, inciuidas ias formuiaciones intranasaies, ei compuesto generaimente tendra un tamano de partlcuia pequeno, por ejempio, dei orden de 5 micras o menos. Dicho tamano de partlcuia se puede obtener por medios conocidos en ia tecnica, por ejempio, mediante ia micronizacion.

Cuando se desee, pueden empiearse formuiaciones adaptadas para proporcionar una iiberacion sostenida dei ingrediente activo.

Los compuestos de formuia (1) y/o (2) tambien se pueden usar en combination con otros agentes terapeuticos, por ejempio, agentes antiinfecciosos, taies como antibioticos, agentes antivlricos y agentes para ei tratamiento de afecciones respiratorias. La invention proporciona asl en un aspecto adicionai una combinacion que comprende ios compuestos de formuia (1) y/o (2) o un derivado farmaceuticamente aceptabie de ios mismos junto con otro agente terapeuticamente activo.

Las combinaciones mencionadas anteriormente pueden presentarse convenientemente para uso en forma de una formulacion farmaceutica y, asi, tales formulaciones que comprenden una combinacion como se define anteriormente junto con un vehiculo farmaceuticamente aceptable, por lo tanto, comprenden un aspecto adicional de la invencion.

Los componentes individuales de tales combinaciones pueden administrarse tanto secuencialmente como simultaneamente en formulaciones farmaceuticas separadas o combinadas.

Cuando los compuestos de formula (1) y/o (2) se usan con un segundo agente terapeutico activo en terapia, la dosis de cada compuesto puede ser la misma o diferir de la empleada cuando cada compuesto se usa solo. Los expertos en la materia apreciaran facilmente las dosis apropiadas.

Los compuestos de formula (1) y/o (2) y sus derivados farmaceuticamente aceptables pueden prepararse por cualquier metodo conocido en la tecnica para la preparacion de compuestos de estructura analoga.

La presente descripcion tambien divulga un metodo de seleccion de un compuesto para el tratamiento de una afeccion respiratoria, comprendiendo dicho metodo:

someter una celula que tiene sialilglicoconjugados reducidos en la superficie de la celula a un compuesto de prueba; y medir la recuperacion de la viabilidad de la celula despues de la exposicion del compuesto de prueba a la celula. Basandose en la presente invencion, se pueden usar otros compuestos para promover la restauracion de sialilglicoconjugados en la superficie de una celula respiratoria; o para promover la recuperacion de la viabilidad de la celula en cuanto a su capacidad para acelerar la biosintesis de los sialilglicoconjugados. Por lo tanto, puede lograrse la restauracion de las celulas a una mejor condicion para que la funcion biologica normal responda a los factores que pueden afectar la superficie respiratoria, lo que lleva a afecciones respiratorias, siempre que los sialilglicoconjugados sean restaurados en la superficie de la celula.

Este metodo implica obtener una celula, preferiblemente una celula respiratoria que tiene los sialilglicoconjugados en la superficie reducidos. Esta celula se denomina "celula desnuda" y es vulnerable a factores que pueden afectar su capacidad para funcionar normalmente.

La celula puede derivarse sometiendo una celula normal, tal como una celula respiratoria, a una neuraminidasa para eliminar el acido sialico de los sialilglicoconjugados en la superficie de la celula. Esta celula se mide luego en cuanto a la capacidad de un compuesto de prueba para restaurar los sialilglicoconjugados en su superficie. El compuesto de prueba puede restaurar los sialilglicoconjugados acelerando la biosintesis de los sialilglicoconjugados o por otros medios que resulten en la restauracion de los sialilglicoconjugados en la superficie de la celula.

La capacidad para restaurar los sialilglicoconjugados en la superficie de las celulas puede medirse mediante la restauracion de la viabilidad de la celula. La viabilidad de la celula puede medirse por cualquier medio disponible para el destinatario experto. Sin embargo, se puede determinar por la capacidad de las celulas para la proliferacion celular. Esto se puede medir por el uso de kits de proliferacion celular estandar, tales como, pero no limitado a Cell Proliferation Elisa kit que mide BrdU (5-bromo-2'-deoxiuridina) incorporada en el ADN recien sintetizado de celulas en replicacion o por el uso de ensayos de proliferacion celular basado en [3H]-timidina.

La capacidad tambien puede medirse determinando el numero de sialilglicoconjugados restaurados en la celula como consecuencia de la exposicion de la celula al compuesto de prueba. Esto puede medirse por medios disponibles para el experto en la tecnica, tales como, pero sin limitarse al uso de anticuerpos a los sialilglicoconjugados.

En otra realizacion adicional, se proporciona un metodo para tratar o prevenir una afeccion respiratoria en un sujeto, el metodo incluye la etapa de administrar al sujeto al menos un compuesto identificado por el metodo de seleccion. Finalmente, la invencion como se describe en este documento anteriormente es susceptible de variaciones, modificaciones y/o adiciones distintas de las descritas especificamente y se entiende que la invencion incluye todas estas variaciones, modificaciones y/o adiciones que se puedan realizar, se debe entender que varias otras modificaciones y/o adiciones caen dentro del alcance de la descripcion como se indica aqui anteriormente. Los siguientes ejemplos son solo para fines ilustrativos y no deben interpretarse como una limitacion de la invencion. Ejemplos

Metodos generales utilizados en los ejemplos.

• La RMN se grabo en un Bruker Avance 300, Xwin-NMR version 3.5 en DPX 300A.

• La EM se registro en el espectrometro de masas Waters Micromass ZMD utilizando un ESI (sonda de ionizacion por electropulverizacion). El sistema se ejecuto utilizando el software Water Mass Lynx NT.

• La cromatografia ultrarrapida en columna se realizo en gel de silice 60 F²⁴⁵(E. Merck).

• Se realizo una cromatografia de capa fina (CCF) en placas precubiertas de gel de silice (E. Merck).

• HPLC se ejecuto en el modulo de separacion de Waters alliance 2690, detectado por el detector de Waters UV de longitud de onda dual 2487, el software fue Waters Millenium 32.

• Ensayo de cultivo celular y viabilidad celular.

Metodo 1

Celulas utilizadas: celulas epiteliales de las vias respiratorias pequenas (SAECs)

Medio: kit de SAGM Bullet (suplemento de crecimiento SABM)

Y/o

Celulas utilizadas: celulas epiteliales bronquiales humanas normales (NHBEs)

Medio: kit BEGM Bullet (suplemento de crecimiento BEBM)

Detalles experimentales:

Celulas crioconservadas (celulas 1x10⁶en 1 ml) se descongelaron y se cultivaron en una placa de Petri de 175 cm²en medio completo. Los medios se retiraron al dia siguiente y se reemplazaron con medios nuevos. Las celulas se cultivaron durante aproximadamente 5-6 dias para obtener una confluencia del 70-80%. Durante la fase de crecimiento, los medios se cambiaron cada dos dias.

Cuando se obtuvo la confluencia apropiada, se elimino el medio. La monocapa de celulas se lavo con 1x PBS. Tras la eliminacion del PBS, se agregaron 2 ml de tripsina+EDTA. Las celulas se agitaron suavemente a temperatura ambiente durante 2 minutos. Las celulas se recogieron con 1x PBS, y se centrifugaron a 200 g durante 10 minutos. La pellet se resuspendio a 5x10⁴/ml. En una placa de 96 pocillos, las celulas se dividieron en partes alicuotas a 100 pl/pocillo (aproximadamente 5000 celulas/pocillo). Las celulas se incubaron a 37° C durante 24 horas.

Se anadio neuraminidasa bacteriana (de Clostridium perfringens), 10 pl a cada pocillo hasta una concentration final de 0,01 U/ml para SAEC y 0,008 U/ml para NHBE. Las celulas se incubaron a continuation durante 6 horas a 37° C. La centrifugation de la placa se llevo a cabo a 1000 rpm durante 10 minutos, se aspiro el medio y se anadio 200 pl de medio nuevo. La placa se centrifugo de nuevo, y el medio se reemplazo con 100 pl de medio fresco.

Los compuestos para la prueba se prepararon a 6x la concentracion deseada; se anadio 20 pl del compuesto a cada pocillo por triplicado. Las celulas se incubaron entonces a 37° C durante 24 horas.

Las celulas se marcaron durante la noche (aproximadamente 16 horas) a 37° C con 10 pl de etiqueta BrdU (kit ELISA de proliferation celular - Roche).

Se retiro el medio de marcaje y las celulas se fijaron y desnaturalizaron durante 30 minutos a temperatura ambiente con una solution de fijacion suministrada por el fabricante.

Despues de la eliminacion de la solucion de fijacion, se anadio a cada pocillo 100 pl de anti-BrdU-POD (a la concentracion apropiada sugerida por el fabricante). La placa se incubo a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se elimino el conjugado de anticuerpo y los pocillos se lavaron tres veces con 200 pl de solucion de lavado (suministrada). Despues de la eliminacion de la solucion de lavado, se anadio 100 pl de la solucion de sustrato (suministrada); y se incubo a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reaction se detuvo con la adicion de 50 pl de H²SO⁴1 M. La absorbancia de las muestras se midio a 450 nm (longitud de onda de referencia de 690 nm). Celulas epiteliales de las vias respiratorias pequenas (SAECs) tratadas con 0,01 U/ml de neuraminidasa (NA) de Clostridium perfringens.

Celulas epiteliales bronquiales humanas normales (NHBEs) tratadas con 0,008 U/ml de neuraminidasa (NA) de Clostridium perfringens.

El ensayo de viabilidad celular normalmente dio una desviacion operativa de ± 10%. Por lo tanto, solo los resultados que mostraron viabilidad celular > 120% frente a la del control (tratado con neuraminidasa) se consideran significativos. Se indica que los compuestos con resultados positivos podrlan restaurar la viabilidad celular en un plazo de 48 horas. Entre los compuestos de formula (1) y/o (2), los compuestos mas activos con baja citotoxicidad fueron N-acetilmanosamina (Compuesto 1) y acido N-acetilneuramlnico (Compuesto 2).

• Metodo 2

Celulas utilizadas: celulas epiteliales de las vlas respiratorias pequenas (SAECs)

Medio: kit de SAGM Bullet (suplemento de crecimiento SABM)

Y/o

Celulas utilizadas: celulas epiteliales bronquiales humanas normales (NHBEs)

Medio: kit BEGM Bullet (suplemento de crecimiento BEBM)

Detalles experimentales:

Celulas crioconservadas (1 x 10⁶celulas en 1 ml) se descongelaron y se cultivaron en una placa Petri de 175 cm²en medio completo. El medio se retiro al dla siguiente y se reemplazo con medio nuevo. Las celulas se cultivaron durante aproximadamente 5-6 dlas para obtener una confluencia del 70-80%. Durante la fase de crecimiento. El medio se cambio cada dos dlas.

Cuando se obtuvo la confluencia apropiada, se elimino el medio. La monocapa de celulas se lavo con 1x PBS. Tras la eliminacion del PBS, se agregaron 2 ml de tripsina+EDTA. Las celulas se agitaron suavemente a temperatura ambiente durante 2 minutos. Las celulas se recogieron con 1x PBS, y se centrifugaron a 200 g durante 10 minutos. La pellet se resuspendio a 5x10⁴/ml. En una placa de 96 pocillos, las celulas se dividieron en partes allcuotas a 100 pl/pocillo (aproximadamente 5000 celulas/pocillo). Las celulas se incubaron a 37° C durante 24 horas.

Se anadio neuraminidasa vlrica (del virus de la influenza NWS/G70C), 10 pl a cada pocillo hasta una concentration final de 0,017 pg/ml. Las celulas se incubaron a continuation durante 6 horas a 37⁰C.

La centrifugation de la placa se llevo a cabo a 1000 rpm durante 10 minutos, se aspiro el medio y se anadio 200 pl de medio nuevo. La placa se centrifugo de nuevo, y el medio se reemplazo con 100 pl de medio fresco.

Despues de la eliminacion de la solucion de fijacion, se anadio a cada pocillo 100 pl de anti-BrdU-POD (a la concentracion apropiada sugerida por el fabricante). La placa se incubo a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se elimino el conjugado de anticuerpo y los pocillos se lavaron tres veces con 200 pl de solucion de lavado (suministrada). Despues de la eliminacion de la solucion de lavado, se anadio 100 pl de la solucion de sustrato (suministrado); y se incubo a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reaction se detuvo con la adicion de 50 pl de H²SO⁴1 M. La absorbancia de las muestras se midio a 450 nm (longitud de onda de referencia de 690 nm). Ejemplo 1. Preparation de N-acetil-D-manosamina (1).

[Compuesto (1), formula (1), B=H, A=NHCOCH^a, R¹=R²=R³=R⁴=H]

Se disolvio en 3 ml de agua 1 g de N-acetil-D-glucosamina obtenida por hidrolisis de quitina, luego se ajusto a pH>11 usando una solucion de NaOH al 30%. La mezcla se dejo reposar a 20° C~40° C durante 48 horas. La solucion resultante se neutralizo a pH 6,5~7,0 con H²SO⁴5N, luego se evaporo a presion reducida hasta sequedad. El solido se sometio a reflujo en etanol durante 10 minutos, se enfrio a temperatura ambiente y se filtro. El filtrado se evaporo al vaclo hasta sequedad para proporcionar un solido blanco que contenla 85% de N-acetil-D-manosamina y 15% de N-acetil-D-glucosamina, determinado por ¹H-RMN. Este solido se recristalizo fraccionalmente en etanol/isopropanol/AE para proporcionar el compuesto del tltulo en forma de un solido blanco (125 mg, 62,5% basado en una tasa de conversion del 20% de N-acetil-D-manosamina). La N-acetil-D-glucosamina sin reaccionar (0,8 g) podrla reutilizarse para el siguiente lote de reaccion.

¹H-RMN (D²O) 5 (ppm)

5,15 (d, 0,7H), 3,85-3,32 (m, 6,3H), 1,99 (s, 3H).

MS 222 (M+1)

Ejemplo 2. Preparation de la sal sodica del acido N-acetil-neuramlnico (2).

[Compuesto (2), Formula (2), R8=R10=R11=R12=R13=H, R9=Na]

Se anadio a una solucion de pH 7,0~7,5 de N-acetilmanosamina (2,7 g, 12,2 mmoles) y piruvato de sodio (2,7 g, 24,5 mmoles) en agua (15 ml) una bolsa de dialisis (corte de PM de 20,000) que contenla N-acetilneuraminato liasa [EC 4.1.3.3] (25 unidades) en una mezcla de reaccion de N-acetilmanosamina (0,54 g) y piruvato de sodio (0,54 g) en agua (3 ml) a pH 7,0-7,5. La mezcla de reaccion se agito a 60 r.p.m. a 30° C durante 5 dlas. La bolsa de enzimas se retiro y se reutilizo para un nuevo lote de reaccion. La mezcla de reaccion se diluyo con agua (15 ml) y luego se paso a traves de una columna de Amberlite IRA-400 (forma HCOO) (150 ml). La resina se lavo con agua (300 ml), se eluyo con una solucion de HCOOH 0,5 M. El eluato se recogio y se evaporo al vaclo hasta sequedad. El residuo se disolvio en agua (2 ml) y luego se diluyo con acido acetico glacial (10 ml) a 4° C durante la noche, se filtro los cristales, se lavo con EtOH, y se seco para proporcionar el acido N-acetilneuramlnico como un polvo cristalino blanco (1,5 g, 39,8%).

1H-RMN (D²O) 5 (ppm) 4,00 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,87 (d, 1H), 3,77 (dd, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,55 (dd, 1H), 3,48 ( d, 1H), 2,24 (dd, 1H, J = 13,2 Hz, 5,1 Hz), 1,98 (s, 3H), 1,83 (dd, 1H, J = 13,2 Hz, 11,5 Hz). EM 310 (M+1)

Se disolvio acido N-acetilneuramlnico (1 g, 3,23 mmoles) en agua (20 ml), luego se agito con NaHCO³(0,26 g, 3,09 mmoles a pH 6~6,5), y despues de secar por congelation se obtuvo el compuesto del eplgrafe como un polvo blanco (1,05 g, 98%).

Ejemplo 3. Preparacion de N-acetil-neuraminato de etilo (3).

A una suspension de acido N-acetil-neuramlnico (1 g, 3,23 mmoles) en etanol anhidro (75 ml) se le agrego 1,5 ml de cloruro de acetilo. La mezcla se sello y se agito a temperatura ambiente durante 16 horas para formar una solucion trasparente. La solucion resultante se evaporo al vaclo hasta sequedad. El solido blanco se lavo con acetato de etilo y se seco al vaclo para proporcionar el compuesto del eplgrafe en forma de un solido blanco (1 g, 91,7%).

¹H-RMN (D²O) 5 ppm)

4,27 (q, 2H), 4,04 (m, 2H), 3,91 (d, 1H), 3,78 (dd, 1H), 3,68 (dd, 1H), 3,57 (dd, 1H), 3,52 (d, 1H), 2,28 (dd, 1H), 2,01 (s, 3H), 1,88 (dd, 1H), 1,28 (t, 3H).

EM 338 (M+1), 360 (M+23)

Ejemplo 4. Preparacion de 5-acetamido-4,7,8,9-tetra-o-acetil-3,5-didesoxi-p-D-glicero-D-galacto-2-nonulopiranosonato de etilo (5-acetamido 4,7,8,9-tetra-o-acetil-neuraminato de etilo) (4).

Se anadio a una solucion agitada de anhldrido acetico (0,72 g) y acido perclorico acuoso al 60% (5 pl) a 40^°C, en porciones durante 30 minutos 5-acetamido-neuraminato de etilo (230 mg, 0,68 mmoles). La mezcla resultante se agito a 40^°C durante 2 horas. Despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con agua frla (10 ml), se saturo con sulfato de amonio, se extrajo con acetato de etilo (40 ml x 3). Los extractos organicos se combinaron y se lavaron con solucion saturada de NaHCO³y agua sucesivamente. La capa organica se seco sobre MgSO⁴y se evaporo a vaclo hasta sequedad. El residuo se disolvio en acetato de etilo, se diluyo con hexano para dar el compuesto del eplgrafe en forma de un cristal blanco (223 mg, 65%).

¹H-RMN (CDCI³) 5 (ppm)

5,71 (m, 1H), 5,36 (dd, 1H, J=1,5 Hz, 5,6 H^z), 5,25 (ddd, 1H, J=2,4 H^z, 7,5 H^z), 5,22 (ddd, 1H, J=11,4 H^z, 5,4 H^z, 9,5 H^z), 4,51 (dd, 1H, J=12,4 H^z), 4,47 (d, 1H, J=0,8 H^z), 4,21~4,13 (m, 4H), 4,03 (dd, 1H), 2,26 (ddd, 1H, 12,8 H^z), 2,19 (dd, 1H), 2,15, 2,11, 2,03, 2,02 y 1,91 (5s, 15H), 1,29 (t, 3H, J=7,2 H^z).

EM 506 (M+1)

Ejemplo 5. Preparacion del acido citidina-5'-monofosfo-5-acetamido-3,5,-didesoxi-p-D-glicero-D-galacto-2-nonulopiranosonico (acido CMP-sialico) (5).

Se disolvieron acido N-acetilneuramlnico (100 mg, 0,32 mmoles), y la sal de sodio de citidina-5 -trifosfato (156,3 mg, 0,32 mmoles) en 32 ml de tampon Tris-HCI (100 mM, pH 8,8) que contenla MgCl²(20 mM). A esta solucion se le anadio CMP-Neu5Ac sintetasa (5 mg, de N. meningitidis). La mezcla de reaccion se incubo a 37⁰C durante 2~3 horas mientras se monitorizaba por CCF (gel de sllice, EtOH:NH⁴HCO³1 M = 7:3). La mezcla de reaccion se diluyo con metanol (50 ml) y se filtro. El filtrado se evaporo a presion reducida hasta sequedad. El residuo se cromatografio en resina Bio Gel P-2 (50 ml) para proporcionar el compuesto del eplgrafe despues de liofilizarlo en forma de un polvo cristalino blanco (147 mg, 75%).

Analisis de HPLC:

• Columna C-18.

• Fase movil: tampon A (tampon de fosfato de potasio 0,1 M, complementado con bisulfato de tetra-butilamonio 8 mM, pH 5,3) y tampon B (70% tampon A mas 30% metanol, pH 5,9)

• Gradiente:

100% de tampon A durante 2,5 minutos, 0~40% de tampon B durante 7,5 min, 40~100% de tampon B durante 1 minuto, 100% de tampon B durante 4 minutos, 100~0% de tampon B durante 1 minuto, seguido de una fase de equilibrio de tampon A 100% durante 4 minutos.

• Caudal: 1 ml/minuto.

• Deteccion UV a 270 nm

¹H-RMN (D²O) 5 (ppm)

7,87 (d, 1H, J=7,6 Hz), 6,25 (d, 1H, J=7,6 H^z), 5,91 (d, 1H, J=4,4 H^z), 4,26~4,20 (m, 2H), 4,17~4,10 (m, 3H), 4,09~3,98 (m, 2H), 3,90~3,80 (m, 3H), 3,59~3,40 (m, 2H), 2,42 (dd, 1H, J=4,8, 13,2 H^z), 1,98 (s, 3H), 1,60 (dt, 1H, J=5,6, 12,6 H^z).

EM 635 (M^2-+Na⁺)

Ejemplo 6. Preparacion de 5-acetamido-8,9-O-isopropiliden-neuraminato de etilo (6).

Se anadio a una solucion de 5-acetamido-neuraminato de etilo (150 mg, 0,445 mmoles) en DMF anhidra (2 ml) 2,2-dimetoxipropano (1 ml, 8 mmoles) y Amberlyst 15 (50 mg). La mezcla se agito a 60^°C durante 7 horas, despues se enfrio a temperatura ambiente y se filtro. El filtrado se evaporo a presion reducida hasta sequedad. CCF (gel de sllice, AE/MeOH=10:4) indico la finalizacion de la reaccion. El residuo se redisolvio en AE/MeOH=10/1 (1 ml), y luego se sometio a cromatografla ultrarrapida en columna. Las fracciones requeridas se combinaron y se evaporaron al vaclo hasta sequedad para proporcionar el compuesto del eplgrafe como una espuma blanca (135 mg, 75%).

¹H-RMN (D²O) 5 (ppm)

4,28~4,23 (m, 2H), 4,23~4,11 (m, 2H), 4,08~3,92 (m, 2H), 3,96~3,52 (m, 3H), 2,31 (dd, 1/3H), 2,23 (dd, 2/3H), 1,99 (s, 3H), 1,82 (dd, 2/3H), 1,70 (dd, 1/3H), 1,36 (s, 3H), 1,32 (s, 3H), 1,25 (t, 3H).

EM 428 (M+Na)

Ejemplo 7: Actividad del Compuesto (1) sobre la recuperacion de la viabilidad de celulas epiteliales de vlas aereas pequenas (SAECs)

Compuesto (1) [Formula (1), B=H, A=NHCOCH^a, R¹=R²=R³=R⁴=H]

Ejemplo 8: Actividad del Compuesto (1) sobre la recuperacion de la viabilidad de las celulas del bronquio humanas normales/Celulas epiteliales de la traquea normales (NHBEs)

Ejemplo 9. Actividad del compuesto (2) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAEC

Compuesto (2) [Formula (2), R8=R10=R11=R12=R13=H, R9=Na]

Ejemplo 10: Actividad del Compuesto (2) en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 11. Actividad del Compuesto (3) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Compuesto (3) [Formula (2), R⁸=R¹⁰=R¹¹=R¹²=R¹³= H, R⁹=C²H⁵]

Ejemplo 12: Actividad del Compuesto (3) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 13: Actividad del compuesto (4) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs Compuesto (4) [Formula (2), R⁸=H, R⁹=C²H⁵, R¹⁰=R¹¹=R¹²=R¹³=CH³CO]

Ejemplo 14: Actividad del compuesto (4) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 15: Actividad del Compuesto (5) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs Compuesto (5) [Formula (2), R8 =monofosfato de citidina, R9=R10=R11=R12=R13=H]

Ejemplo 16: Actividad del compuesto (5) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 17: Actividad del compuesto (6) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs Compuesto (6) [Formula (2), R8=H, R9=C2H5, R10=R11=H, R12 y R13= >C(CH3)2]

Ejemplo 18. Actividad del compuesto (6) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 19: Actividad del compuesto (7) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs Compuesto (7) [Formula (1), B=H, A=NHCOCHa, R1 =R2=R3=R4=COCHa]

Ejemplo 20: Actividad del compuesto (7) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 21. Actividad del compuesto (8) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Compuesto (8) [Formula (1), B=H, A=NHCOCH³, R¹=H, R²=R³=R⁴=COCH³]

Ejemplo 22: Actividad del compuesto (8) en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 23: Actividad del Compuesto (9) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Compuesto (9) [Formula (1), A=H, B=NHCOCH³, R¹=R²=R³=R⁴=H] - no en el alcance de la invencion reivindicada

Ejemplo 24. Actividad del compuesto (9) sobre la recuperacion de la viabilidad de NHBEs - no en el alcance de la invencion reivindicada

Ejemplo 25. Actividad de D-glucosa en la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Ejemplo 26: Actividad de D-glucosa en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 27. Actividad del Compuesto (1) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Ejemplo 28: Actividad del Compuesto (1) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 29: Actividad del Compuesto (2) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Ejemplo 30: Actividad del Compuesto (2) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de NHBE

Ejemplo 31: Actividad del Compuesto (9) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de SAECs - no en el alcance de la invencion reivindicada

Ejemplo 32: Actividad del Compuesto (9) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs - no en el alcance de la invencion reivindicada

Ejemplo 33: Actividad de una mezcla del Compuesto (1) (85%) y del compuesto (9) (15%) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de SAEC

Ejemplo 34: Actividad de una mezcla de Compuesto (1) (85%) y Compuesto (9) (15%) a alta concentracion en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 35: Actividad de una mezcla de Compuesto (1) (85%) y Compuesto (9) (15%) sobre la recuperacion de la viabilidad de SAECs

Ejemplo 36. Actividad de una mezcla de Compuesto (1) (85%) y Compuesto (9) (15%) en la recuperacion de la viabilidad de NHBEs

Ejemplo 37. Experimentos de tos en cobayas[9] [10]

Cobayas macho fueron alojados en corrales y tenlan acceso a agua y alimentos a voluntad. Este estudio fue aprobado por el Comite del Instituto de etica animal Bio21 (Bio21 Institute Animal Ethics Committee).

Veinticuatro cobayas macho Hartley conscientes (500~550 g) se dividieron en tres grupos A, B, C (8 animales por cada grupo) y se pretrataron con 5 unidades/ml de solucion de neuraminidasa (Sigma N2133, polvo liofilizado, Tipo X, 150~400 unidades/mg de protelna) en agua (grupos B y C) o solucion salina sola (grupo A) via un aerosol durante 5 minutos en el dla uno. Despues, en el dla uno, dos y tres, los cobayas fueron administrados oralmente con 500 mg/kg del Compuesto (1) (grupo C), o agua sola (grupos A y B). En el dla cuatro, todos los animales se expusieron a una solucion de acido cltrico 0,5 M (nebulizada, 10 minutos de exposicion). La frecuencia de la tos, los tiempos hasta la primera, segunda y tercera tos, y los tiempos hasta la primera frotacion de la nariz se registraron durante un perlodo de 15 minutos. Los resultados indicaron una tendencia del Compuesto (1) a ayudar a restaurar los danos causados por la neuraminidasa.

Usando el Compuesto (2) en lugar del Compuesto (1) por el mismo protocolo experimental, se obtuvieron resultados similares.

Bibliograffa

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A. Rosenberg, editor, Nueva York, Estados Unidos. Paginas 7~67 (1995).

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[5] Keppler, O. T., et al. Science 284 (5418), 1372~1376 (1999).

[6] Miyata, T., et al. Archives internationales de pharmacodynamie et de therapie, 296, 202~9 (1988).

[7] Miyata, T., et al. Archives internationales de pharmacodynamie et de therapie, 304, 277~89 (1990).

[8] Amir, S.M., et al. Nature, 211 (5052), 976~7 (1966).

[8b] B. Galeano et al. Mutation in the key enzyme of sialic acid biosynthesis causes severe glomerular proteinuria and is rescued by N-acetylmannosamine. J. Clin. Invest. 2007117 (6) 1585~1594.

[8c] Solicitud Provisional de Estados Unidos N°. 60/932.451 presentada el 31 de mayo de 2007.

[9] Laude, E.A. et al, "A comparative study of the effects of Citric acid, capsaicin and Resiniferatoxin on the Cough challenge in Guinea-pig and Man". Pulmonary Pharmacology 6, 171~175 (1993).

[10] Tanaka, M. et al, "Mecanisms of Capsaicin and Citric acid induced Cough Reflexes in Guinea pig". J. Pharmacol. Sci., 99, 77~82 (2005).

Las solicitudes de patente futuras se pueden presentar sobre la base de o la reivindicacion de prioridad de la presente solicitud. Debe entenderse que las siguientes reivindicaciones se proporcionan solo a modo de ejemplo, y no pretenden limitar el alcance de lo que se puede reivindicar en una futura solicitud de este tipo. Las caracterlsticas se pueden agregar u omitir en las reivindicaciones en una fecha posterior para definir o redefinir la invencion o invenciones.

Finalmente, debe entenderse que se pueden realizar varias otras modificaciones y/o se pueden hacer alteraciones sin apartarse del esplritu de la presente invencion como se describe en este documento.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la Formula 1 o la Formula 2 farmaceuticamente aceptable en donde la Formula (1) tiene la formula

en donde,

R¹, R², R³son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²Fenilo, COCR⁵R⁶R⁷y esteres de CO;

R⁵, R⁶, R⁷son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo y CH³CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200);

R4 es igual 0 diferente a R1, R2, R3 y se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, (CFhJnCFb (n=1-20),

CH²Fenilo, COCR⁵R⁶R⁷, esteres de CO y

R5', R6' son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H o una sal inorganica u organica farmaceuticamente adecuada, y un ester farmaceuticamente adecuado;

B es H, y A se selecciona del grupo que consiste en NHCOCH³, NH², y NH²HX, en donde HX representa un acido inorganico u organico farmaceuticamente adecuado;

y

en donde la Formula (2) tiene la formula

en donde,

R⁸se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), CH²Fenilo, COCH²Fenilo, ester de CO y COCR¹⁴R¹⁵R¹⁶; en donde R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200); citidina, monofosfato de citidina, difosfato de citidina, trifosfato de citidina, adenosina, monofosfato de adenosina, difosfato de adenosina y trifosfato de adenosina;

R⁹se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, o un ester farmaceuticamente adecuado; CH²CR¹⁷R¹⁸R¹⁹en donde R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200), C⁶H⁵y O^{- h}Fenilo;

R¹⁰, R¹¹, R¹²son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²Fenilo, ester y COCR²⁰R²¹R²²en donde R²⁰, R²¹y R²²son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1-200);

R¹³es igual o diferente a R¹⁰, R¹¹, R¹²y se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), ChhFenilo, ester y COCR20R21R22 en donde R20,en donde R21, R22 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH2)nCH3 (n=1-20), C⁶H⁵, ChhFenilo, CH2CH2(OCH2CH2)mCH3 (m=1-200) y

R²³, R²⁴son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200), CH²Fenilo, o ester y CH²CR²⁵R²⁶R²⁷, o sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, y R²⁵, R²⁶, R²⁷son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), y C⁶H⁵, CH²Fenilo,

para uso en una cantidad eficaz para promover la recuperacion de la viabilidad celular en una celula respiratoria danada en un sujeto afectado por una infeccion respiratoria para el tratamiento de una afeccion respiratoria.

2. El compuesto para uso segun la reivindicacion 1, en donde la alteracion respiratoria se selecciona del grupo que consiste en la tos, infecciones post bacterianas o post vlricas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad obstructiva cronica del pulmon (EPOC), fibrosis clstica y otras afecciones inflamatorias respiratorias.

3. El compuesto para uso segun la reivindicacion 1 o 2, en donde el compuesto farmaceuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste en N-acetil manosamina, acido N-acetilneuramlnico, N-acetil-neuraminato de etilo, 5-acetamido-4,7,8,9-tetra-O-acetil-neuraminato de etilo, acido CMP-sialico, 5-acetamido-8,9-O-isopropildineuraminato de etilo y sus sales farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos.

4. El compuesto para uso segun la reivindicacion 1 o 2, en donde el compuesto farmaceuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste en los compuestos de Formula (1) en donde

-B=H, A=NHCOCH³, R¹=R²=R³=R⁴=COCH³; y

-B=H, A=NHCOCH³, R¹=H, R²=R³=R⁴=COCH³

5. Una composicion farmaceutica que incluye una cantidad eficaz de al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable seleccionado del grupo que consiste en los compuestos de Formula (1) y los compuestos de Formula (2),

en donde la Formula (1) tiene la formula:

en donde

R⁴es igual o diferente a R¹, R², R³y se selecciona del grupo que consiste de H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²Fenilo, COCR⁵R⁶R⁷, esteres de CO y

R^5',R^6'son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H o una sal inorganica u organica farmaceuticamente adecuada, y un ester farmaceuticamente adecuado;

y

en donde la Formula (2) tiene la formula

en donde,

R⁸se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), CF^hFenilo, COCF^hFenilo, ester de CO y COCR¹⁴R¹⁵R¹⁶; en donde R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200); citidina, monofosfato de citidina, difosfato de citidina, trifosfato de citidina, adenosina, monofosfato de adenosina, difosfato de adenosina y trifosfato de adenosina;

R⁹se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, o un ester farmaceuticamente adecuado; CH²CR¹⁷R¹⁸R¹⁹en donde R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200), C⁶H⁵y CH²Fenilo;

R¹⁰, R¹¹, R¹²son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), CH²Fenilo, ester y COCR²⁰R²¹R²²en donde R²⁰, R²¹y R²²son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, y CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m = 1-200);

R¹³es igual o diferente a R¹⁰, R¹¹, R¹²y se selecciona del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), CH²Fenilo, ester y COCR²⁰R²¹R²²en donde R²⁰, R²¹, R²²son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), C⁶H⁵, CH²Fenilo, y CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200) y

R²³, R²⁴son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n = 1-20), CH²CH²(OCH²CH²)^mCH³(m=1-200), CH²Fenilo, o ester y CH²CR²⁵R²⁶R²⁷, o una sal inorganica u organica farmaceuticamente aceptable, y R²⁵, R²⁶, R²⁷son iguales o diferentes y cada uno se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, CH³, (CH²)ⁿCH³(n=1-20), y C⁶H⁵, CH²Fenilo, para su uso a fin de promover la recuperacion de la viabilidad celular de una celula respiratoria danada en un sujeto afectado por una infeccion respiratoria para el tratamiento de una afeccion respiratoria.

6. La composition farmaceutica para uso segun la revindication 5, en donde la afeccion respiratoria se selecciona del grupo que consiste en la tos, infecciones pos-bacterianas o post-vlricas, bronquitis aguda/cronica, enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), fibrosis clstica y otras afecciones inflamatorias respiratorias. 7. La composicion farmaceutica para uso, segun las reivindicaciones 5 o 6, en donde el al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste en N-acetilmanosamina, acido N-acetilneuramlnico, N-acetil-neuraminato de etilo, 5-acetamido-4,

7,8,9-tetra-O-acetil-neuraminato de etilo, acido CMP-sialico, 5-acetamido-8,9-O-isopropildineuraminato de etilo y sus sales farmaceuticamente aceptables y combinaciones de los mismos.

8. La composicion farmaceutica para uso segun las reivindicaciones 5 o 6, en donde el al menos un compuesto farmaceuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste en los compuestos de Formula 1 en donde

- B=H, A=NHCOCH³, R¹=R²=R³=R⁴=COCH³; y

- B=H, A=NHCOCH³, R¹=H, R²=R³=R⁴=COCH³.

9. El compuesto o composicion para uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el compuesto se administra en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg a 500 mg/kg de peso corporal por dla, preferiblemente en el intervalo de 0,1 mg a 50 mg/kg/dla.

10. El compuesto o composicion para uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto o composicion se administra por via oral en el intervalo de 1 mg/kg/dla a 500 mg/kg/dla.

11. El compuesto o composicion para uso segun la reivindicacion 10, en donde el compuesto se administra en el intervalo de 5 mg a 50 mg/kg, dos o tres veces al dla durante de 5 a 10 dlas.

12. El compuesto o composicion para uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto se administra por inyeccion en el intervalo de 1 mg/kg/dla a 100 mg/kg/dla.

13. El compuesto o composicion para uso segun la reivindicacion 12, en donde el compuesto se administra en el intervalo de 5 mg a 50 mg/kg, dos o tres veces al dla durante de 5 a 10 dlas.

14. El compuesto o composicion para uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto se administra por inhalacion en el intervalo de 0,01 mg/kg/dla a 5 mg/kg/dla.

15. El compuesto o composicion para uso segun la reivindicacion 14, en donde el compuesto se administra en el intervalo de 0,1 a 0,5 mg/kg/dla, de una a cinco veces al dla, de una a cinco veces al dla durante de 5 a 10 dlas.