ES2788749T3 - Métodos pasivos para mallas biológicas antimicrobianas - Google Patents
Métodos pasivos para mallas biológicas antimicrobianas Download PDFInfo
- Publication number
- ES2788749T3 ES2788749T3 ES11757706T ES11757706T ES2788749T3 ES 2788749 T3 ES2788749 T3 ES 2788749T3 ES 11757706 T ES11757706 T ES 11757706T ES 11757706 T ES11757706 T ES 11757706T ES 2788749 T3 ES2788749 T3 ES 2788749T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- tissue
- matrix
- matrices
- antimicrobial agent
- antimicrobial
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 56
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 title claims description 37
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 95
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims abstract description 59
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims abstract description 24
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 22
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Chlorhexidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 229960003260 chlorhexidine Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 10
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 claims abstract description 8
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims abstract description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229960001516 silver nitrate Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 207
- 230000008569 process Effects 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 239000000463 material Substances 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 14
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 11
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 11
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 10
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 7
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 7
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 6
- 125000003169 alpha-Gal epitope group Chemical group [C@H]1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](O[C@@H]([C@@H]1O)CO)O[C@H]1[C@@H]([C@H](C(O[C@@H]1CO)*)NC(C)=O)O)O 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 6
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 108010068483 strattice Proteins 0.000 description 5
- 239000006150 trypticase soy agar Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 241001247437 Cerbera odollam Species 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 4
- FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N diazinon Chemical compound CCOP(=S)(OCC)OC1=CC(C)=NC(C(C)C)=N1 FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 3
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 229940027983 antiseptic and disinfectant quaternary ammonium compound Drugs 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 3
- 210000003195 fascia Anatomy 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 3
- OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241001269524 Dura Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N Peracetic acid Chemical compound CC(=O)OO KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 238000003491 array Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 2
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 2
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 2
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 2
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 2
- 101710110983 Abaecin Proteins 0.000 description 1
- 108010023728 Alloderm Proteins 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- CPIVGTMNHFBEKL-UHFFFAOYSA-N Cl.CNC.Br.CNC Chemical compound Cl.CNC.Br.CNC CPIVGTMNHFBEKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 1
- 206010056559 Graft infection Diseases 0.000 description 1
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- QWZLBLDNRUUYQI-UHFFFAOYSA-M Methylbenzethonium chloride Chemical compound [Cl-].CC1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 QWZLBLDNRUUYQI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 description 1
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 1
- 241000288935 Platyrrhini Species 0.000 description 1
- 229920002413 Polyhexanide Polymers 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical group OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 230000002358 autolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 description 1
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 description 1
- POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N cathelicidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C1=CC=CC=C1 POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N 0.000 description 1
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 230000002828 effect on organs or tissue Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000008570 general process Effects 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960002285 methylbenzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- FFJMLWSZNCJCSZ-UHFFFAOYSA-N n-methylmethanamine;hydrobromide Chemical compound Br.CNC FFJMLWSZNCJCSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000004126 nerve fiber Anatomy 0.000 description 1
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000004309 nisin Substances 0.000 description 1
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 210000003516 pericardium Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003761 preservation solution Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 1
- 229940009188 silver Drugs 0.000 description 1
- -1 silver ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000050 smooth muscle relaxant Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 210000004876 tela submucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium bromide Chemical compound [Br-].CC[N+](CC)(CC)CC HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003777 tissue processing method Methods 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
- A01N25/08—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests containing solids as carriers or diluents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3604—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N33/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic nitrogen compounds
- A01N33/02—Amines; Quaternary ammonium compounds
- A01N33/12—Quaternary ammonium compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
- A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
- A01N47/42—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=CX2 groups, e.g. isothiourea
- A01N47/44—Guanidine; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N55/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing organic compounds containing elements other than carbon, hydrogen, halogen, oxygen, nitrogen and sulfur
- A01N55/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing organic compounds containing elements other than carbon, hydrogen, halogen, oxygen, nitrogen and sulfur containing metal atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/14—Quaternary ammonium compounds, e.g. edrophonium, choline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/38—Silver; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/10—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing inorganic materials
- A61L2300/102—Metals or metal compounds, e.g. salts such as bicarbonates, carbonates, oxides, zeolites, silicates
- A61L2300/104—Silver, e.g. silver sulfadiazine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/204—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials with nitrogen-containing functional groups, e.g. aminoxides, nitriles, guanidines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/204—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials with nitrogen-containing functional groups, e.g. aminoxides, nitriles, guanidines
- A61L2300/206—Biguanides, e.g. chlorohexidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/204—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials with nitrogen-containing functional groups, e.g. aminoxides, nitriles, guanidines
- A61L2300/208—Quaternary ammonium compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/404—Biocides, antimicrobial agents, antiseptic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Un agente antimicrobiano catiónico para usar en un método de tratamiento o prevención de infecciones asociadas con una matriz de tejido acelular dérmico que contiene colágeno implantada en o sobre el cuerpo de un paciente durante la cirugía, en donde el agente antimicrobiano catiónico se une establemente a la matriz por adsorción pasiva, en donde la matriz de tejido no se reticula durante la unión del agente antimicrobiano y en donde el agente antimicrobiano comprende al menos uno de cloruro de bencetonio, clorhexidina, cloruro de benzalconio, o nitrato de plata.
Description
DESCRIPCIÓN
Métodos pasivos para mallas biológicas antimicrobianas
La presente descripción se refiere a matrices de tejidos, y más particularmente, a métodos para preparar matrices de tejidos que incorporan agentes antimicrobianos y matrices de tejidos preparadas de acuerdo con esos métodos.
Se usan varias matrices derivadas de tejidos para regenerar, reparar, o de otra manera tratar tejidos y órganos enfermos o dañados. Tales matrices pueden incluir injertos de tejidos intactos y/o tejidos acelulares o acelulares reconstituidos (por ejemplo, matrices de tejidos acelulares de piel, intestino, u otros tejidos, con o sin siembra celular). Al igual que con muchos cuerpos extraños implantados, la infección puede ocurrir después del uso de tales materiales en aplicaciones quirúrgicas. El documento núm. WO 2007/048099 describe dispositivos de reparación quirúrgica que comprenden una matriz de tejido acelular con nitrato de plata secado encima. El documento núm. WO 2007/106581 describe una matriz de tejido con un agente antimicrobiano catiónico unido por interacciones iónicas. El documento núm. US 4599226 describe una matriz de piel de cerdo con un agente antimicrobiano catiónico unido.
La producción de matrices de tejidos con una actividad antimicrobiana aumentada puede reducir la tasa de infección del injerto y aumentar la probabilidad de éxito después de la cirugía. Por consiguiente, se proporcionan métodos para producir materiales biológicos mediante la unión de agentes antimicrobianos a una matriz de tejido. En adición, se proporcionan, además, matrices de tejidos producidas por tales métodos.
La invención se define en las reivindicaciones.
Se proporciona un método para preparar una matriz de tejido. El método comprende seleccionar una matriz de tejido basada en colágeno y poner en contacto la matriz de tejido con una solución acuosa que contiene un agente antimicrobiano catiónico, en donde el agente se une establemente a la matriz mediante adsorción pasiva, en donde la matriz de tejido no se reticula durante la unión del agente antimicrobiano. El agente puede mantener la unión con la matriz cuando se coloca en un tampón fisiológico a temperatura ambiente durante períodos prolongados.
Se proporciona una matriz de tejido. La matriz comprende una matriz de tejido que se preparó mediante la selección de una matriz de tejido basada en colágeno y la puesta en contacto de la matriz con una solución acuosa que contiene un agente antimicrobiano catiónico, en donde el agente se une establemente a la matriz mediante adsorción pasiva, en donde la matriz de tejido no se reticula durante la unión del agente antimicrobiano.
Se proporciona una matriz de tejido. La matriz comprende una matriz de tejido basada en colágeno y al menos un agente antimicrobiano catiónico que se une establemente a la matriz mediante adsorción pasiva, en donde la matriz de tejido no se reticula durante la unión del agente antimicrobiano.
Descripción de las figuras
La Figura 1 es un gráfico que compara la respuesta del tejido in vivo de varias matrices de tejido, de acuerdo con ciertas modalidades, como se describe en el Ejemplo 1.
Las Figuras 2A y 2B son secciones histológicas de varias matrices de tejidos después de la implantación en un animal, de acuerdo con ciertas modalidades, como se describe en el Ejemplo 1.
Las Figuras 3A y 3B son gráficos que comparan la actividad antimicrobiana de varias matrices de tejidos como se describe en el Ejemplo 3.
Descripción de ciertas modalidades ejemplares
Ahora se hará referencia en detalle a ciertas modalidades ejemplares de acuerdo con la presente descripción, ciertos ejemplos de las cuales se ilustran en las figuras adjuntas. Siempre que sea posible, se usarán los mismos números de referencia en todas las figuras para referirse a las mismas partes o partes similares.
En esta aplicación, el uso del singular incluye el plural a menos que se indique específicamente de otra manera. En esta aplicación, el uso de “o” significa “y/o” a menos que se indique de otra manera. Además, el uso del término “que incluye” o “que comprende”, así como otras formas, tales como “incluye” e “ incluido”, “comprende” o "comprendido” no es limitante. Se entenderá que cualquier intervalo descrito en la presente descripción incluye los puntos finales y todos los valores entre los puntos finales. Se entenderá que los beneficios y ventajas descritos anteriormente pueden relacionarse con una modalidad o pueden relacionarse con varias modalidades. Cuando sea apropiado, los aspectos de cualquiera de los ejemplos y modalidades descritos anteriormente pueden combinarse con aspectos de cualquiera de los otros ejemplos descritos para formar ejemplos adicionales que tengan propiedades comparables o diferentes y aborden los mismos o diferentes problemas.
Los encabezados de sección usados en la presente descripción son solo para fines organizativos y no deben interpretarse como limitantes del tema descrito. Como se usa en la presente descripción, “matriz de tejido” se referirá a material derivado de tejido animal que incluye una matriz que contiene colágeno. Tales matrices de tejidos pueden incluir tejidos intactos, tejidos descelularizados parcialmente o completamente, o matrices de colágeno sintéticas (por ejemplo, matrices 3-D formadas a partir de tejidos suspendidos o procesados de otra manera). Como se describe más adelante, las matrices de tejidos adecuadas pueden ser acelulares. Puede usarse cualquier matriz de tejido adecuada, en dependencia del sitio de implantación previsto, siempre que el tejido se una establemente a los agentes antimicrobianos, como se describe en la presente descripción. La estabilidad de la unión de los agentes antimicrobianos puede determinarse de varias maneras. Por ejemplo, un método para medir la estabilidad se describe a continuación en el Ejemplo 3, en donde las matrices de tejidos modificadas se lavan en PBS a temperatura corporal durante 14 días para determinar si el lavado en tales tampones da como resultado la pérdida de propiedades antimicrobianas.
Pueden usarse varias matrices de tejidos humanos y animales para producir matrices para el tratamiento de pacientes. Por ejemplo, varias matrices de tejidos están disponibles para la regeneración, reparación, aumento, refuerzo, y/o tratamiento de tejidos humanos que se dañaron o perdieron debido a diversas enfermedades y/o daños estructurales (por ejemplo, traumatismos, cirugía, atrofia, y/o desgaste y degeneración a largo plazo) que se produjeron. Sin embargo, tales tejidos generalmente se implantan mediante el uso de procedimientos invasivos, y tales procedimientos (por ejemplo, que incluyen una incisión, punción, etc.) pueden predisponer a un paciente a la infección. En adición, un cuerpo extraño, que incluye una matriz de tejido u otro dispositivo implantable usado junto con el implante (por ejemplo, implante mamario, malla polimérica, etc.) puede aumentar la posibilidad de infección después de la cirugía. En consecuencia, son deseables las matrices de tejidos acelulares que reducen la posibilidad de infección.
Se proporciona un método para preparar una matriz de tejido modificada. El método comprende seleccionar una matriz de tejido basada en colágeno y poner en contacto la matriz de tejido con una solución acuosa que contiene un agente antimicrobiano catiónico, en donde el agente se une establemente a la matriz mediante adsorción pasiva. Este método elimina la necesidad de modificar químicamente la matriz de tejido o el antimicrobiano, lo que asegura de esta manera la funcionalidad completa de los componentes respectivos. Puede proporcionarse una matriz de tejido. La matriz de tejido modificada comprende una matriz de tejido que se preparó mediante la selección de una matriz de tejido basada en colágeno y la puesta en contacto de la matriz con una solución acuosa que contiene un agente antimicrobiano catiónico, en donde el agente se une establemente a la matriz mediante adsorción pasiva. Puede proporcionarse una matriz de tejido. La matriz comprende una matriz de tejido basada en colágeno y al menos un agente antimicrobiano catiónico que se une establemente a la matriz por adsorción pasiva.
En diversas modalidades, la solución usada para aplicar el agente antimicrobiano catiónico puede incluir una variedad de soluciones acuosas diferentes. Por ejemplo, la solución acuosa usada puede ser no desnaturalizante. Las condiciones no desnaturalizantes permiten que los agentes antimicrobianos retengan sus propiedades catiónicas, lo que permite la unión por adsorción pasiva. La solución debe permitir que el agente antimicrobiano presente una carga positiva que es necesaria para la unión al tejido. La solución debe, además, ser compatible con la matriz de tejido y no inducir daños permanentes o irreversibles. La solución acuosa no desnaturalizante puede ser agua. La solución puede comprender, por ejemplo, solución salina isotónica, PBS, HEPES, u otros tampones adecuados.
Puede usarse cualquier agente antimicrobiano catiónico adecuado con los procesos y las matrices de tejidos de la presente descripción. El agente antimicrobiano de la invención incluye al menos uno de cloruro de bencetonio, clorhexidina, cloruro de benzalconio, y nitrato de plata. Los compuestos antimicrobianos descritos incluyen hidrocloruro de polihexametileno biguanida, péptidos catiónicos tales como nisina, catelicidina, y abaecina, compuestos de amonio cuaternario tales como cloruro de metilbencetonio, cloruro de cetalconio, cloruro de dofanio, bromuro de tetraetilamonio, cloruro de didecildimetilamonio, y bromuro de domifeno. En algunas modalidades, pueden usarse combinaciones de diferentes agentes antimicrobianos. Los ejemplos de combinaciones antimicrobianas incluyen plata y clorhexidina, así como clorhexidina con diversos compuestos de amonio cuaternario.
La cantidad de agente antimicrobiano catiónico en la solución acuosa no desnaturalizante puede prepararse a diversas concentraciones. La concentración específica puede depender de una variedad de factores. Por ejemplo, para algunas aplicaciones, el riesgo potencial de infección puede ser mayor que para otras, y pueden usarse concentraciones más altas de antimicrobianos. En otros casos, demasiado antimicrobiano puede tener efectos tóxicos o de otra manera adversos sobre los tejidos, y pueden seleccionarse concentraciones más bajas.
La concentración de cloruro de bencetonio en agua o HEPES puede estar en el intervalo de 0,025 % a 1,0 % p/v o de 0,01 % a 1,0 % p/v. La concentración de clorhexidina en agua o HEPES puede estar en el intervalo de 0,002 % a 0,2 % p/v. La concentración de nitrato de plata en agua o HEPES puede estar en el intervalo de 0,0005 % a 0,1 % p/v. La concentración de cloruro de bencetonio puede ser de 0,05 %, 0,25 %, o 0,5 % p/v, o de al menos 0,05 %, 0,25 %, o 0,5 % p/v. La concentración de clorhexidina puede ser de 0,004 %, 0,02 % o 0,1 % p/v, o de al menos 0,004 %, 0,02 %, o 0,1 % p/v. La concentración de nitrato de plata puede ser de 0,001 %, 0,005 %, o 0,05 % p/v, o de al menos 0,001 %, 0,005 %, o 0,05 % w/v. La concentración de cloruro de benzalconio puede ser de 0,02 %, 0,1 %, o 0,5 % p/v, o de al menos 0,02 %, 0,1 %, o 0,5 % p/v. En un aspecto, las concentraciones descritas son efectivas al menos durante 7 días. En otro aspecto, las concentraciones son efectivas al menos durante 14 días.
Los agentes antimicrobianos catiónicos tales como clorhexidina, compuestos de amonio cuaternario, quitosano, o los iones de plata pueden disolverse en agua o en un solvente apropiado a una concentración adecuada. La matriz de tejido acelular se coloca después en la solución antimicrobiana y se incuba durante un tiempo y temperatura suficientes para permitir la unión de una cantidad deseada de antimicrobiano. Por ejemplo, un tiempo de incubación típico para antimicrobianos disueltos en HEPES o agua es de 4 horas a temperatura ambiente. Después de la incubación, los compuestos antimicrobianos no unidos se eliminan mediante el lavado en un tampón tal como HEPES.
El procesamiento de matrices de tejidos acelulares para mejorar las propiedades antimicrobianas de las matrices puede afectar negativamente las propiedades biológicas de tales matrices. Por ejemplo, la reticulación química puede usarse para unir el agente antimicrobiano a la matriz, pero la reticulación excesiva puede alterar las propiedades biológicas del tejido, lo que previene de esta manera la respuesta deseada del tejido cuando se implanta (por ejemplo, regeneración, remodelación, refuerzo, reparación, etc. en dependencia del uso específico). La reticulación excesiva puede, además, afectar negativamente la actividad antimicrobiana del agente usado. En adición, los agentes de reticulación química pueden ser perjudiciales para los pacientes una vez implantados en el cuerpo. Los métodos de la presente descripción permiten la producción de matrices de tejidos acelulares que incluyen compuestos antimicrobianos, que se unen establemente a las matrices sin el uso de reticulación química. Dado que la matriz de colágeno no se altera significativamente, es decir, no se reticula o desnaturaliza, el proceso no causa cambios inadecuados en la respuesta del tejido regenerativa inherente de la matriz in vivo según se determinó por infiltración celular, revascularización, e inflamación de los tejidos tratados. La reticulación o la desnaturalización de las proteínas puede medirse mediante una serie de procesos tales como la calorimetría diferencial de barrido (DSC) o los ensayos de hidrólisis enzimática con colagenasa, que pueden mostrar cambios debido a la reticulación, desnaturalización, u otras alteraciones de las proteínas.
En adición, la unión del compuesto antimicrobiano a la matriz de tejido por adsorción pasiva no modifica sustancialmente el agente antimicrobiano. Otros medios de unión, tales como la reticulación, pueden dar como resultado modificaciones al agente antimicrobiano, y el uso de condiciones desnaturalizantes puede conducir también a modificaciones del agente antimicrobiano. Estas modificaciones pueden conducir a consecuencias no deseadas, tales como una pérdida de efectividad. Debido a que la reticulación química no es necesaria para unir el compuesto antimicrobiano a las matrices, el compuesto antimicrobiano no es inaceptablemente modificado por el proceso de unión, y se preserva la actividad antimicrobiana.
Como se señaló anteriormente, las matrices de tejidos implantables pueden implantarse en o sobre el cuerpo durante la cirugía o mediante el uso de otros procedimientos algo invasivos. Es beneficioso que las propiedades antimicrobianas que poseen estas matrices permanezcan activas durante el período crítico de infección oportunista después de la cirugía, usualmente de una a dos semanas. Las propiedades antimicrobianas resultantes de las matrices de tejidos producidas a partir del método descrito pueden estar activas durante un período de tiempo significativo después de la implantación en o sobre el cuerpo. Por ejemplo, las propiedades antimicrobianas se retienen durante al menos una semana, al menos dos semanas, al menos tres semanas, o al menos un mes después de la implantación.
El método y las matrices de tejidos descritos pueden usarse junto con una variedad de otras etapas de procesamiento de tejidos. Por ejemplo, las matrices de tejidos implantables se tratan típicamente para producir materiales asépticos o estériles. En consecuencia las matrices de tejidos pueden procesarse para unir compuestos antimicrobianos antes y/o después de la realización de otros procesos de esterilización diseñados para reducir o eliminar los patógenos de los tejidos. Como se usa en la presente descripción, un “proceso de esterilización” puede incluir cualquier proceso que reduzca la carga biológica en una muestra, pero no es necesario que haga a la muestra absolutamente estéril.
Ciertos procesos ejemplares incluyen, pero no se limitan a, un proceso de irradiación gamma, un proceso de irradiación con haz de electrones, un proceso de esterilización con dióxido de carbono supercrítico, y un proceso de tratamiento con ácido peracético. Los procesos de esterilización adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos descritos en, por ejemplo, la publicación de patente de EE. UU. núm. 2006/0073592A1, de Sun y otros; patente de EE. UU. núm.
5,460,962 de Kemp; publicación de patente de EE. UU. núm. 2008/0171092A1, de Cook y otros. La aplicación del agente antimicrobiano puede ocurrir antes o después del proceso de esterilización. En algunas modalidades, el proceso de esterilización puede ser un proceso de esterilización terminal que se realiza justo antes o después de envasar una muestra de tejido.
En ciertas modalidades, el proceso antimicrobiano se aplica antes de un proceso de esterilización terminal mediante el uso de cualquier proceso de esterilización terminal adecuado. En algunas modalidades, la esterilización terminal de la matriz de tejido puede incluir el uso de radiación. En diversas modalidades, las formas adecuadas de radiación incluyen radiación gamma y radiación de rayos X. En una modalidad, la esterilización se realiza mediante el uso de radiación de haz de electrones. Además, pueden usarse combinaciones de diversos procesos de esterilización.
Después del procesamiento para unir los compuestos antimicrobianos y/o realizar la esterilización u otras etapas de procesamiento, las matrices de tejidos pueden almacenarse durante algún tiempo antes de la implantación en un paciente. Además, en algunos casos, las matrices de tejidos pueden almacenarse en medio líquido, por ejemplo, soluciones acuosas de conservación, o pueden congelarse y/o liofilizarse. En consecuencia, sea cual sea el método
de almacenamiento usado, es importante que la composición antimicrobiana permanezca unida establemente durante el almacenamiento. En diversas modalidades, las matrices de tejidos de la presente descripción retendrán las propiedades antimicrobianas por períodos prolongados durante el almacenamiento en soluciones acuosas. En algunas modalidades, el compuesto antimicrobiano permanece unido establemente durante el almacenamiento por hasta 1 mes, 2 meses, 3 meses, o 4 meses, o más.
Matrices de tejidos adecuadas
Como se señaló anteriormente, los métodos descritos en la presente descripción pueden usarse para producir productos que tienen propiedades antimicrobianas mediante el uso de una variedad de diferentes tipos de tejido, siempre que el tejido incluya una matriz que contenga colágeno a la que los antimicrobianos catiónicos puedan unirse establemente. Tales matrices de tejidos pueden incluir tejidos intactos, tejidos descelularizados parcialmente o completamente, o matrices de colágeno sintéticas (por ejemplo, matrices 3-D formadas a partir de tejidos suspendidos o procesados de otra manera).
La matriz de tejido puede producirse a partir de una variedad de tipos de tejido. Por ejemplo, la matriz de tejido puede derivarse de la fascia, tejido pericárdico, duramadre, tejido umbilical, tejido placentario, tejido de la válvula cardíaca, tejido del ligamento, tejido del tendón, tejido arterial, tejido venoso, tejido conectivo neural, tejido de la vejiga urinaria, tejido del uréter, y tejido intestinal. En la invención, la matriz de tejido comprende una matriz de tejido dérmico. En ciertas modalidades, la matriz de tejido comprende matriz dérmica porcina.
Los tejidos pueden incluir un tejido blando de mamífero. Por ejemplo, el tejido puede incluir dermis de mamífero. En ciertas modalidades, la dermis puede separarse de la epidermis circundante y/u de otros tejidos, tales como la grasa subcutánea. La muestra de tejido puede incluir submucosa del intestino delgado. Las muestras de tejido pueden incluir fuentes humanas o no humanas. Ejemplos de fuentes de tejido no humano adecuadas incluyen, pero no se limitan a, cerdos, ovejas, cabras, conejos, monos, y/u otros mamíferos no humanos.
Las matrices de tejidos pueden implantarse o ser implantables en una variedad de sitios anatómicos diferentes. Por ejemplo, las matrices de tejidos pueden implantarse alrededor de los implantes mamarios; alrededor o como reemplazo de estructuras vasculares; alrededor o como reemplazo de estructuras luminales (por ejemplo, uréteres, nervios, tejidos linfáticos, estructuras gastrointestinales); sobre o como reemplazo de válvulas cardíacas, pericardio, u otras estructuras cardíacas; dentro o sobre materiales óseos o cartilaginosos (por ejemplo, orejas, narices, superficies articulares, alrededor de estructuras dentales, o a lo largo de cualquier hueso corto o largo); y/o alrededor de, como forro de, apoyo de o reemplazo de cualquier cavidad del cuerpo (por ejemplo, vejiga, estómago).
Las matrices de tejidos pueden seleccionarse para proporcionar una variedad de diferentes propiedades biológicas y mecánicas. Por ejemplo, puede seleccionarse una matriz de tejido acelular para permitir el crecimiento interno y remodelación del tejido para ayudar en la regeneración del tejido que normalmente se encuentra en el sitio donde se implanta la matriz. Por ejemplo, una matriz de tejido acelular, cuando se implanta sobre o dentro de la fascia, puede seleccionarse para permitir la regeneración de la fascia sin fibrosis excesiva o formación de cicatriz. En ciertas modalidades, la matriz de tejido puede formarse a partir de ALLODERM® o STRATTICE™, que son matrices dérmicas acelulares humanas y porcinas, respectivamente. Alternativamente, pueden usarse otras matrices de tejidos acelulares adecuadas, como se describe más adelante.
El material a base de colágeno comprende una matriz de tejido acelular. Estas matrices pueden descelularizarse completamente para producir matrices de tejidos acelulares que se usarán para los pacientes. Por ejemplo, varios tejidos, tales como piel, intestino, hueso, cartílago, tejido nervioso (por ejemplo, fibras nerviosas o duramadre), tendones, ligamentos, u otros tejidos pueden descelularizarse por completo para producir matrices de tejidos útiles para los pacientes. Los procesos adecuados para producir matrices de tejidos acelulares se describen a continuación.
En general, las etapas implicadas en la producción de una matriz de tejido acelular incluyen la recolección del tejido de un donante (por ejemplo, un cadáver humano o una fuente animal) y la eliminación de células en condiciones que preserven la función biológica y estructural. El proceso puede incluir tratamiento químico para estabilizar el tejido y evitar la degradación bioquímica y estructural junto con o antes de la extracción celular. La solución estabilizante puede detener y prevenir la degradación osmótica, hipóxica, autolítica, y proteolítica, protege contra la contaminación microbiana, y reduce el daño mecánico que puede ocurrir con los tejidos que contiene, por ejemplo, componentes del músculo liso (por ejemplo, vasos sanguíneos). La solución estabilizadora puede contener un tampón apropiado, uno o más antioxidantes, uno o más agentes oncóticos, uno o más antibióticos, uno o más inhibidores de proteasas, y/o uno o más relajantes del músculo liso.
Después el tejido se coloca en una solución de descelularización para eliminar células viables (por ejemplo, células epiteliales, células endoteliales, células de músculo liso, y fibroblastos) de la matriz estructural sin dañar la integridad biológica y estructural de la matriz de colágeno. La solución de descelularización puede contener uno o más de un tampón apropiado, sal, un antibiótico, uno o más detergentes (por ejemplo, TRITON X-100™, desoxicolato de sodio, monooleato de polioxietilen (20) sorbitano), uno o más agentes para prevenir la reticulación, uno o más inhibidores de proteasas, y/o una o más enzimas. La solución de descelularización puede comprender 1% de TRITON X-100™ en
medio RPMI con Gentamicina y EDTA 25 mM (ácido etilendiaminotetraacético). El tejido puede incubarse en la solución de descelularización durante la noche a 37 °C con agitación suave a 90 rpm. Por ejemplo, se adiciona 1-3 % de desoxicolato de sodio o 2 % de desoxicolato de sodio a la solución de descelularización.
Después del proceso de descelularización, la muestra de tejido se lava a fondo con solución salina. En algunas modalidades ejemplares, por ejemplo, cuando se usa material xenogénico, el tejido descelularizado se trata durante la noche a temperatura ambiente con una solución de desoxirribonucleasa (DNasa). En algunas modalidades, la muestra de tejido se trata con una solución de DNasa preparada en tampón de ADNasa (HEPES (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinetanosulfónico) 20 mM, CaCb 20 mM y MgCb 20 mM). Opcionalmente, puede adicionarse una solución antibiótica (por ejemplo, gentamicina) a la solución de DNasa. Puede usarse cualquier tampón adecuado siempre que el tampón proporcione una actividad de DNasa adecuada.
Si bien una matriz de tejido acelular puede obtenerse a partir de uno o más individuos de la misma especie que el receptor del injerto de matriz de tejido acelular, este no es necesariamente el caso. Así, por ejemplo, una matriz de tejido acelular puede obtenerse a partir de tejido porcino e implantarse en un paciente humano. Las especies que pueden servir como receptores de la matriz de tejido acelular y donantes de tejidos u órganos para la producción de la matriz de tejido acelular incluyen, sin limitación, mamíferos, tales como seres humanos, primates no humanos (por ejemplo, monos, babuinos, o chimpancés), cerdos, vacas, caballos, cabras, ovejas, perros, gatos, conejos, cobayas, jerbos, hámsteres, ratas, o ratones.
La eliminación de los epítopos a-gal del material que contiene colágeno puede disminuir la respuesta inmune contra el material que contiene colágeno. El epítopo a-gal se expresa en mamíferos no primates y en monos del Nuevo Mundo (monos de América del Sur) así como en macromoléculas tales como los proteoglicanos de los componentes extracelulares. U. Galili y otros, J. Biol. Chem 263: 17 755 (1988). Sin embargo, este epítopo está ausente en los primates del Viejo Mundo (monos de Asia y África y simios) y en los seres humanos. Id. Los anticuerpos anti-gal se producen en seres humanos y primates como resultado de una respuesta inmune a las estructuras del epítopo a-gal de carbohidratos en bacterias gastrointestinales. U. Galili y otros, Infect. Immun. 56: 1730 (1988); RM Hamadeh y otros, J. Clin. Invest. 89: 1223 (1992).
Dado que los mamíferos no primates (por ejemplo, cerdos) producen epítopos a-gal, el xenotrasplante de material que contiene colágeno de estos mamíferos a primates a menudo da como resultado una activación inmunológica debido a la unión de anticuerpos anti-Gal de primates a estos epítopos en el material que contiene colágeno. U. Galili y otros, Immunology Today 14: 480 (1993); M. Sandrin y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 11391 (1993); H. Good y otros, Transplant. Proc. 24: 559 (1992); BH Collins y otros, J. Immunol. 154: 5500 (1995). Además, el xenotrasplante da como resultado una activación importante del sistema inmune para producir cantidades aumentadas de anticuerpos anti-gal de alta afinidad. Por consiguiente, cuando los animales que producen epítopos a-gal se usan como fuente de tejidos, la eliminación sustancial de epítopos a-gal de las células y de los componentes extracelulares del material que contiene colágeno, y la prevención de la reexpresión de epítopos a-gal celulares puede disminuir la respuesta inmune contra el material que contiene colágeno asociada con la unión del anticuerpo anti-gal a los epítopos a-gal.
Para eliminar los epítopos a-gal, después de lavar el tejido a fondo con solución salina para eliminar la solución de DNasa, la muestra de tejido puede someterse a uno o más tratamientos enzimáticos para eliminar ciertos antígenos inmunogénicos, si están presentes en la muestra. La muestra de tejido puede tratarse con una enzima a-galactosidasa para eliminar los epítopos a-gal si están presentes en el tejido. La muestra de tejido puede tratarse con a-galactosidasa a una concentración de 300 U/L preparada en tampón fosfato 100 mM a pH 6,0. La concentración de a-galactosidasa puede aumentarse a 400 U/L para la eliminación adecuada de los epítopos a-gal del tejido recolectado. Puede usarse cualquier concentración de enzima y tampón adecuadas siempre que se logre una eliminación suficiente de antígenos. Por ejemplo, se deben eliminar suficientes antígenos para prevenir el rechazo agudo u otras respuestas inmunitarias graves cuando se implantan. En algunas modalidades, se eliminan todos o casi todos los epítopos a-gal.
Alternativamente, en lugar de tratar el tejido con enzimas, pueden seleccionarse como la fuente de tejido animales que se modificaron genéticamente para carecer de uno o más epítopos antigénicos. Por ejemplo, los animales (por ejemplo, cerdos) que se modificaron genéticamente para carecer del resto de a-galactosa terminal pueden seleccionarse como la fuente de tejido. Para las descripciones de los animales apropiados ver la patente de E e . UU. núm. 6,166,288 y la solicitud de EE. UU. núm. de serie 10/896,594 en trámite. En adición, se describen ciertos métodos ejemplares de procesamiento de tejidos para producir matrices acelulares con o sin cantidades reducidas o que carecen de restos alfa-1,3-galactosa en Xu, Hui y otros, “A Porcine-Derived Acellular Dermal Scaffold that Supports Soft Tissue Regeneration: Removal of Terminal Galactose-a-(1,3)-Galactose and Retention of Matrix Structure,” Tissue Engineering, vol. 15, 1-13 (2009).
Después de que se forma la matriz de tejido acelular, pueden sembrarse opcionalmente células viables histocompatibles en la matriz de tejido acelular para producir un injerto que puede remodelarse aún más por el huésped. Las células viables histocompatibles pueden adicionarse a las matrices mediante técnicas de cocultivo celular in vitro estándar antes del trasplante, o mediante repoblación in vivo después del trasplante. La repoblación in vivo puede ser por las propias células del receptor que migran hacia la matriz de tejido acelular o por infusión o inyección de células obtenidas del receptor o células histocompatibles de otro donante en la matriz de tejido acelular
in situ. Pueden usarse diversos tipos de células, que incluyen células madre embrionarias, células madre adultas (por ejemplo, células madre mesenquimales) y/o neuronales. Las células pueden aplicarse directamente a la porción interna de la matriz de tejido acelular justo antes o después de la implantación. Las células pueden colocarse dentro de la matriz de tejido acelular a implantar y cultivarse antes de la implantación.
Aunque se describen los parámetros generales del proceso para la producción de matrices de tejidos acelulares, se dispone de una variedad de materiales acelulares que contienen colágeno, y los métodos de procesamiento de tales materiales para producir propiedades antimicrobianas pueden usarse con cualquiera de esos materiales. Por ejemplo, Badylak y otros describen una serie de materiales de andamiaje biológicos, y los métodos de la presente descripción pueden usarse para producir matrices con propiedades antimicrobianas mediante el uso de cualquiera de esos materiales, o cualquier otro material similar. Badylak y otros, “Extracellular Matrix as a Biological Scaffold Material: Structure and Function,” Acta Biomaterialia (2008), doi:10.1016/j.actbio.2008.09.013.
Se entenderá que la descripción anterior de las modalidades preferidas se da solo a modo de ejemplo y que diversas modificaciones pueden realizarse por los expertos en la técnica. La especificación, ejemplos y datos anteriores proporcionan una descripción completa de la estructura y uso de modalidades ejemplares de la invención. Aunque varias modalidades de la invención se describieron anteriormente con un cierto grado de particularidad, o con referencia a una o más modalidades individuales, los expertos en la técnica podrían hacer numerosas modificaciones a las modalidades descritas sin apartarse del alcance de esta invención.
Ejemplo 1: Evaluación histológica de muestras dérmicas implantadas
La matriz de tejido acelular porcina STRATTICE™ se usó para producir matrices de tejidos que tienen agentes antimicrobianos catiónicos unidos. La matriz de tejido STRATTICE™ se obtuvo antes de la esterilización terminal y se procesó como sigue.
Primero, las soluciones de agente antimicrobiano se prepararon mediante el uso de clorhexidina (CHX) o nitrato de plata (AgNO3). Las soluciones de CHX se prepararon mediante la disolución de 0,004 %, 0,02 %, o 0,1 % de CHX p/v en agua. Las soluciones de AgNO3 se prepararon mediante la disolución de 0,001 %, 0,005 %, o 0,05 % de AgNO3 p/v en agua. Las matrices de tejidos se incubaron en una de las soluciones identificadas anteriormente durante cuatro horas a temperatura ambiente. El agente antimicrobiano no unido se eliminó mediante lavado con solución salina. El tejido se empaquetó luego en bolsas de aluminio y se esterilizó terminalmente mediante el uso de radiación de haz de electrones.
Se produjeron dos tipos de controles. Primero, la matriz de tejido estándar STRATTICE™ se obtuvo de LifeCell Corporation y se usó como control sin procesar. En segundo lugar, las muestras de control se produjeron por incubación de la matriz de tejido en agua sola, es decir, sin agentes antimicrobianos presente.
Las matrices de tejidos procesadas y esterilizadas se cortaron en piezas de 1 cm2 y se implantaron por subdérmicamente en la parte dorsal de ratas inmunocompetentes. Los explantes se recolectaron y se lavaron con PBS tanto al día 31 como al día 42. Los explantes se fijaron en 10 % de formalina, y los tejidos fijados se incrustaron en parafina. Las secciones de las muestras de matriz de tejido se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) mediante el uso de procedimientos estándar. D.C. Sheenan y B.B. Hrapchack, Theory and Practice of Histotechnology, 2da edición, Columbus, OH, Battelle Press (1987).
Los portaobjetos con muestras de histología teñidas con H&E de 31 días se evaluaron ciegamente por un histopatólogo en cuanto a la repoblación de fibroblastos, revascularización e inflamación. Estos parámetros se puntuaron mediante el uso de una escala de 0, 1, 2, o 3 (0 = ninguno, 1 = mínimo, 2 = moderado, 3 = significativo). La revascularización y repoblación de fibroblastos se consideran indicativas de las capacidades regenerativas de las matrices de tejidos acelulares. Por lo tanto, es deseable que cualquier medio de unión de un agente antimicrobiano a una matriz de tejido acelular no interfiera con estos procesos. En adición, generalmente es deseable preservar la respuesta del tejido regenerativa de las matrices de tejidos acelulares sin causar una inflamación significativa.
El análisis histopatológico de los explantes de 31 días se resume en la Figura 1. Todas las matrices de tejidos acelulares tratadas con nitrato de plata mostraron una revascularización y una repoblación de fibroblastos comparables a la del control. Las muestras tratadas con nitrato de plata, además, no dieron como resultado una inflamación significativa en comparación con el control. Similarmente, las matrices de tejidos acelulares tratadas con 0,004 % y 0,02 % de clorhexidina mostraron revascularización y repoblación de fibroblastos comparables a las del control sin inflamación significativa.
Además, se tomaron fotografías de explantes subdérmicos teñidos con H&E de 31 y 42 días con un aumento de 400 x mediante el uso de un microscopio. La Figura 2A muestra explantes subdérmicos teñidos con H&E de 31 días y 42 días preparados a partir de STRATTICE™ no tratado, de control y controles tratados con agua. Las puntuaciones de la repoblación de fibroblastos (Fibro), revascularización (Revas) e inflamación (Inflam) se indican cerca de cada imagen. Después de 31 días, los controles no tratados y tratados con agua mostraron una repoblación de fibroblastos significativa (Fibro=3), revascularización significativa (Reva=3), e inflamación moderada (Inflam=2).
La Figura 2B muestra explantes subdérmicos teñidos con H&E de 31 días y 42 días preparados mediante el uso de nitrato de plata y clorhexidina bajo un aumento de 400 x. Después de 31 días, el tejido tratado con nitrato de plata mostró una repoblación de fibroblastos significativa (Fibro=3), revascularización significativa (Revas=2,5), e inflamación mínima (Inflam=0,5). La muestra tratada con clorhexidina también mostró una revascularización y repoblación de fibroblastos con inflamación mínima (Fibro=3, Revas=2,5, Inflam=1).
En base a estos resultados, el método y las matrices de tejidos descritos preservan la funcionalidad del tejido acelular in vivo al permitir la revascularización y repoblación celular con una reacción inflamatoria mínima. Como se demuestra en las Figuras 1, 2A, y 2B, el tratamiento del tejido con un agente antimicrobiano de acuerdo con el método descrito no interfiere con la revascularización y repoblación de fibroblastos en comparación con el tejido de control. Además, la respuesta del tejido regenerativa se mantiene con una inflamación mínima en comparación con el control cuando se utiliza el método descrito.
Ejemplo 2: Ensayo de inhibición del crecimiento bacteriano in vitro
Se prepararon matrices de tejidos con propiedades antimicrobianas, según se describe en el Ejemplo 1, lo que dio como resultado tejidos tratados con 0,25 % de cloruro de bencetonio, 0,02 % de clorhexidina, 0,1 % de cloruro de benzalconio o 0,001 % de nitrato de plata preparados en agua. Los tejidos de control también se prepararon sin usar agentes antimicrobianos.
Las bacterias se prepararon para su uso en un ensayo de inhibición, mediante la inoculación de medio TSB (caldo de soja tríptico) con E. coli o S. aureus. El medio inoculado se incubó después a 37 °C con agitación hasta que se alcanzó una población de 0,5-1 x 109 células/ml.
Tanto los tejidos antimicrobianos como los tejidos de control se enjuagaron en solución salina durante dos minutos antes de su uso en el ensayo de inhibición. Los tejidos se cortaron en piezas de 1,5 cm2 y se secaron mediante el uso de una gasa estéril. Las piezas de tejido se colocaron después en placas TSA (agar de soja tríptico).
Tanto el control como los tejidos antimicrobianos se inocularon individualmente con 1-2 ml de 0,5-1 x 109 células/ml de la solución bacteriana de E. coli o S. aureus, de manera que cada pieza se sembró con aproximadamente 1 x 106 células. Después de la inoculación, las placas de TSA se incubaron a 37 °C durante 20 horas. Después se adicionaron 10 ml de solución de IPTG/X-gal solamente a las placas inoculadas de E. coli. El sustrato X-gal se vuelve azul/verde cuando se escinde por la galactosidasa de E. coli, lo que permite una fácil visualización del crecimiento bacteriano. Las placas de E. coli se dejaron incubar durante 1-2 horas adicionales a 37 °C.
La efectividad de las matrices de tejidos para inhibir el crecimiento bacteriano se determinó después mediante observación visual. El crecimiento de E. coli dio como resultado colonias de color azul, mientras que el crecimiento de S.aureus resultó en colonias de color dorado. Se observó un crecimiento visible para ambos tipos de bacterias en las matrices de tejidos de control, es decir, sin antimicrobianos. No se observó crecimiento en las matrices de tejidos tratadas con cloruro de bencetonio, clorhexidina, cloruro de benzalconio, o nitrato de plata.
Los resultados del ensayo de inhibición bacteriana demuestran que los métodos y matrices de tejidos descritos dan como resultado que el crecimiento microbiano se reduce en comparación con el tejido de control sin antimicrobiano. Los resultados demuestran, además, que los métodos y matrices descritos son compatibles con una variedad de agentes antimicrobianos catiónicos y son efectivos contra una variedad de tipos de bacterias (por ejemplo, bacterias gram(-) y gram(+)).
Ejemplo 3: Evaluación de la estabilidad del agente antimicrobiano
Se prepararon matrices de tejidos antimicrobianas, como se describe en el Ejemplo 1, lo que dio como resultado tejidos tratados con cloruro de bencetonio, clorhexidina, cloruro de benzalconio o nitrato de plata preparados en agua en un intervalo de concentraciones (ver Figuras 3A y 3B para las concentraciones). Los tejidos de control también se prepararon sin usar agentes antimicrobianos.
Los tejidos se lavaron después en solución de PBS a 37 °C con agitación y cambios diarios de PBS durante 14 días. En la marca de 7 días y 14 días, se evaluó la actividad antimicrobiana de los tejidos lavados mediante el uso del mismo ensayo de inhibición del crecimiento bacteriano descrito en el Ejemplo 2 para E. coli y S. aureus. Una caída en la actividad antimicrobiana a lo largo del tiempo indicaría una falta de estabilidad en la interacción entre la matriz de tejido y el agente antimicrobiano ya que cualquier agente antimicrobiano unido se eliminó por lavado.
Los cambios en la actividad antimicrobiana a lo largo del tiempo se evaluaron, además, mediante la medición de unidades formadoras de colonias (CFU) en muestras de matriz de tejido. Para medir las CFU, el ensayo de inhibición del crecimiento bacteriano descrito en el Ejemplo 2 se realizó en matrices de tejidos tomadas al comienzo del período de lavado y en matrices de tejidos que se lavaron durante 7 o 14 días en PBS a 37 °C con cambios diarios de PBS. Las muestras del tiempo 0 no se lavaron. Las muestras lavadas se inocularon y cultivaron, como se describe en el
Ejemplo 2. Después del cultivo, las bacterias se extrajeron de las matrices de tejidos mediante la suspensión de cada matriz de tejido en 5 ml de PBS y la agitación vigorosa durante 5 minutos para extraer las bacterias. El extractante se diluyó en serie y se colocó en una placa de TSA. Las placas de TSA se incubaron después durante 24 horas a 37 °C. Al contar las colonias en las placas, se calcularon las CFU de cada pieza de tejido.
Los resultados según se determinaron por el crecimiento de E. coli y el crecimiento de S. aureus se presentan en las Figuras 3A y 3B, respectivamente. 0,25 % de cloruro de bencetonio, 0,02 % y 0,1 % de clorhexidina, 0,005 % y 0,05 % de nitrato de plata, y 0,1 % y 0,5 % de cloruro de benzalconio fueron efectivos para inhibir el crecimiento de E. coli después de 14 días. Se observaron resultados similares para S. aureus, que incluyen la efectividad de 0,5 % de cloruro de bencetonio en la inhibición del crecimiento de S. aureus después de 14 días de lavado.
Las Figuras 3A y 3B demuestran que el método descrito y las matrices de tejidos dan como resultado la preservación de la actividad antimicrobiana, incluso cuando la matriz de tejido se lava abundantemente durante 14 días. Como se muestra en este ejemplo, el método descrito y las matrices de tejidos dan como resultado la interacción estable entre el agente antimicrobiano catiónico y la matriz de tejido acelular.
Claims (1)
- REIVINDICACIONESUn agente antimicrobiano catiónico para usar en un método de tratamiento o prevención de infecciones asociadas con una matriz de tejido acelular dérmico que contiene colágeno implantada en o sobre el cuerpo de un paciente durante la cirugía, en donde el agente antimicrobiano catiónico se une establemente a la matriz por adsorción pasiva, en donde la matriz de tejido no se reticula durante la unión del agente antimicrobiano y en donde el agente antimicrobiano comprende al menos uno de cloruro de bencetonio, clorhexidina, cloruro de benzalconio, o nitrato de plata.El agente antimicrobiano catiónico para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz de tejido comprende una matriz dérmica porcina.El agente antimicrobiano catiónico para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la matriz de tejido retiene las propiedades antimicrobianas durante al menos dos semanas después de la implantación.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37718210P | 2010-08-26 | 2010-08-26 | |
| PCT/US2011/049062 WO2012027529A1 (en) | 2010-08-26 | 2011-08-25 | Passive methods for anti-microbial biological meshes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2788749T3 true ES2788749T3 (es) | 2020-10-22 |
Family
ID=44651956
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES11757706T Active ES2788749T3 (es) | 2010-08-26 | 2011-08-25 | Métodos pasivos para mallas biológicas antimicrobianas |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US8263101B2 (es) |
| EP (2) | EP2608814B1 (es) |
| JP (1) | JP5930415B2 (es) |
| CN (1) | CN103068414A (es) |
| AU (1) | AU2011293307B2 (es) |
| CA (1) | CA2807833C (es) |
| ES (1) | ES2788749T3 (es) |
| WO (1) | WO2012027529A1 (es) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9089523B2 (en) | 2011-07-28 | 2015-07-28 | Lifecell Corporation | Natural tissue scaffolds as tissue fillers |
| US9238090B1 (en) | 2014-12-24 | 2016-01-19 | Fettech, Llc | Tissue-based compositions |
| CN106310384A (zh) * | 2015-07-01 | 2017-01-11 | 江西瑞诺健医学科技有限公司 | 一种脱细胞异种真皮及其制取方法 |
| WO2017037041A1 (en) | 2015-08-31 | 2017-03-09 | Diaccurate | Use of indole compounds to stimulate the immune system |
| US10188598B1 (en) | 2015-11-25 | 2019-01-29 | Sage Products, Llc | Sterilized chlorhexidine article and method of sterilizing a chlorhexidine article |
| USD856517S1 (en) | 2016-06-03 | 2019-08-13 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Asymmetric tissue graft |
| US10945831B2 (en) | 2016-06-03 | 2021-03-16 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Asymmetric tissue graft |
| EP3592397A4 (en) | 2017-03-06 | 2020-12-30 | Tei Biosciences, Inc. | PERFORATED FABRIC GRAFT |
| CA3081322A1 (en) | 2017-10-30 | 2019-05-09 | Allvivo Vascular, Inc. | Delivery systems for administration of cationic biological actives |
| USD895812S1 (en) | 2018-09-07 | 2020-09-08 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Soft tissue repair graft |
| US10813743B2 (en) | 2018-09-07 | 2020-10-27 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Soft tissue repair grafts and processes for preparing and using same |
| US20230114297A1 (en) | 2019-09-25 | 2023-04-13 | Allosource | Pre-shaped allograft implant for reconstructive surgical use and methods of manufacture and use, and tools for forming a pre-shaped allograft implant for reconstructive surgical use |
| USD1101168S1 (en) | 2023-08-09 | 2025-11-04 | Allosource | Acellular dermal matrix sheet allograft |
Family Cites Families (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3761590A (en) * | 1970-05-18 | 1973-09-25 | Research Corp | Silver sulfadiazine used in the treatment of burns |
| US4446124A (en) * | 1983-03-31 | 1984-05-01 | Fox Jr Charles L | Wound dressing comprising silver sulfadiazine incorporated in animal tissue |
| US4599226A (en) * | 1983-03-31 | 1986-07-08 | Genetic Laboratories, Inc. | Wound dressing comprising silver sulfadiazine incorporated in animal tissue and method of preparation |
| GB8827986D0 (en) * | 1988-11-30 | 1989-01-05 | Geistlich Soehne Ag | Chemical product |
| US8067149B2 (en) | 1990-09-12 | 2011-11-29 | Lifecell Corporation | Acellular dermal matrix and method of use thereof for grafting |
| US5336616A (en) | 1990-09-12 | 1994-08-09 | Lifecell Corporation | Method for processing and preserving collagen-based tissues for transplantation |
| CA2051092C (en) | 1990-09-12 | 2002-07-23 | Stephen A. Livesey | Method and apparatus for cryopreparation, dry stabilization and rehydration of biological suspensions |
| JPH07194687A (ja) * | 1993-12-28 | 1995-08-01 | Gunze Ltd | 医療用コラーゲンマトリックス及びその製造法 |
| US5460962A (en) | 1994-01-04 | 1995-10-24 | Organogenesis Inc. | Peracetic acid sterilization of collagen or collagenous tissue |
| US6166288A (en) | 1995-09-27 | 2000-12-26 | Nextran Inc. | Method of producing transgenic animals for xenotransplantation expressing both an enzyme masking or reducing the level of the gal epitope and a complement inhibitor |
| WO1998022158A2 (en) | 1996-08-23 | 1998-05-28 | Cook Biotech, Incorporated | Graft prosthesis, materials and methods |
| EP1056335A1 (en) * | 1998-02-20 | 2000-12-06 | Lifecell Corporation | Method of processing and preserving collagen based tissues |
| JP4451658B2 (ja) | 2001-10-18 | 2010-04-14 | ライフセル コーポレーション | 組織および器官のリモデリング |
| US6969523B1 (en) | 2001-10-19 | 2005-11-29 | Integra Lifesciences Corporation | Collagen/glycosaminoglycan matrix stable to sterilizing by electron beam radiation |
| US8309117B2 (en) | 2002-12-19 | 2012-11-13 | Novartis, Ag | Method for making medical devices having antimicrobial coatings thereon |
| WO2005009134A1 (en) | 2003-07-21 | 2005-02-03 | Lifecell Corporation | ACELLULAR TISSUE MATRICES MADE FROM GALACTOSE α-1,3-GALACTOSE-DEFICIENT TISSUE |
| US20050266390A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-01 | Yuichiro Ueda | Processes for removing cells and cell debris from tissue and tissue constructs used in transplantation and tissue reconstruction |
| CN101010004B (zh) | 2004-07-30 | 2012-10-03 | 金伯利-克拉克环球有限公司 | 抗微生物的装置和组合物 |
| US20060073592A1 (en) | 2004-10-06 | 2006-04-06 | Wendell Sun | Methods of storing tissue matrices |
| US20090311298A1 (en) | 2005-10-18 | 2009-12-17 | Oranogenesis, In.C | Antimicrobial Collagenous Constructs |
| AU2007225040A1 (en) * | 2006-03-15 | 2007-09-20 | Promethean Lifesciences, Inc. | Preparation and storage of stable, antimicrobially active materials |
| US20070248575A1 (en) | 2006-04-19 | 2007-10-25 | Jerome Connor | Bone graft composition |
| ES2720582T3 (es) | 2006-05-09 | 2019-07-23 | Lifecell Corp | Tejido biológico reforzado |
| EP2254410A4 (en) | 2008-02-21 | 2012-05-02 | Sequoia Pharmaceuticals Inc | PROCESS FOR INHIBITING THE REMOVAL OF MEDICINAL PRODUCTS |
| US20110070284A1 (en) * | 2008-02-22 | 2011-03-24 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Biologic matrices comprising anti-infective methods and compositions related thereto |
| CN101618232A (zh) * | 2008-06-30 | 2010-01-06 | 重庆宗申军辉生物技术有限公司 | 含银猪无细胞真皮及其制备方法 |
| CA2793585C (en) * | 2010-03-25 | 2018-07-17 | Lifecell Corporation | Preparation of regenerative tissue scaffolds |
-
2011
- 2011-08-25 US US13/217,566 patent/US8263101B2/en active Active
- 2011-08-25 EP EP11757706.4A patent/EP2608814B1/en active Active
- 2011-08-25 WO PCT/US2011/049062 patent/WO2012027529A1/en not_active Ceased
- 2011-08-25 EP EP20167318.3A patent/EP3693029A1/en not_active Withdrawn
- 2011-08-25 ES ES11757706T patent/ES2788749T3/es active Active
- 2011-08-25 AU AU2011293307A patent/AU2011293307B2/en active Active
- 2011-08-25 JP JP2013526140A patent/JP5930415B2/ja active Active
- 2011-08-25 CN CN2011800390454A patent/CN103068414A/zh active Pending
- 2011-08-25 CA CA2807833A patent/CA2807833C/en active Active
-
2012
- 2012-08-07 US US13/568,370 patent/US8343717B2/en active Active
- 2012-12-03 US US13/692,079 patent/US8486616B2/en active Active
-
2013
- 2013-05-21 US US13/898,914 patent/US9220259B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3693029A1 (en) | 2020-08-12 |
| EP2608814B1 (en) | 2020-04-15 |
| US9220259B2 (en) | 2015-12-29 |
| US20130095191A1 (en) | 2013-04-18 |
| US8486616B2 (en) | 2013-07-16 |
| US20120053322A1 (en) | 2012-03-01 |
| WO2012027529A1 (en) | 2012-03-01 |
| CN103068414A (zh) | 2013-04-24 |
| JP2013536048A (ja) | 2013-09-19 |
| US8343717B2 (en) | 2013-01-01 |
| US20130253212A1 (en) | 2013-09-26 |
| CA2807833A1 (en) | 2012-03-01 |
| JP5930415B2 (ja) | 2016-06-08 |
| AU2011293307A1 (en) | 2013-01-31 |
| EP2608814A1 (en) | 2013-07-03 |
| AU2011293307B2 (en) | 2015-03-05 |
| CA2807833C (en) | 2019-09-10 |
| US8263101B2 (en) | 2012-09-11 |
| US20120301354A1 (en) | 2012-11-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2788749T3 (es) | Métodos pasivos para mallas biológicas antimicrobianas | |
| ES2847409T3 (es) | Método para el tratamiento enzimático de productos de tejidos | |
| ES2749178T3 (es) | Matrices de tejido funcionalizado | |
| ES2849440T3 (es) | Tejido adiposo procesado | |
| ES2725318T3 (es) | Matriz muscular descelularizada | |
| US20190216977A1 (en) | Nerve treatment devices and methods |