ES2900548T3

ES2900548T3 - Películas a base de plasma y procedimientos para hacer y usar las mismas

Info

Publication number: ES2900548T3
Application number: ES17734180T
Authority: ES
Inventors: Daniel Grant Ericson
Original assignee: Octapharma AG
Current assignee: Octapharma AG
Priority date: 2016-05-31
Filing date: 2017-05-31
Publication date: 2022-03-17
Anticipated expiration: 2037-05-31
Also published as: US11383001B2; CN109789245B; EP4194017A1; EP3701973B1; DK3463498T3; CA3224181A1; EP3463498A2; CN114796630A; AU2017275577B2; DK3701973T3; US20210008243A1; CN114796630B; IL263093B; EP3463498B1; MX2018014889A; BR122022006547B1; RU2018146094A3; RU2021119683A3; BR112018074591A2; TR2021016542A2

Abstract

Un procedimientos para fabricar una película a base de plasma flexible que comprende las etapas de: (a) mezclar plasma sanguíneo con uno o dos activadores del sistema de coagulación seleccionados de: más de 2,5 Unidades Internacionales (UI) de trombina por mililitro (ml) de dicho plasma; y 0,65 a 1,3 mg de iones de calcio por mililitro (ml) de dicho plasma, para inducir la coagulación de dicho plasma, donde dicho plasma está contenido dentro de un molde; y (b) mantener dicho plasma en dicho molde durante el tiempo requerido para que el plasma se coagule y forme dicha película, donde opcionalmente durante o al final de dicho tiempo se aplica una presión a dicho plasma en dicho molde.

Description

DESCRIPCIÓN

Películas a base de plasma y procedimientos para hacer y usar las mismas

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a películas a base de plasma y en particular a películas flexibles a base de plasma. La invención se refiere además a procedimientos para fabricar y utilizar las películas a base de plasma flexible. Las realizaciones de la invención se han desarrollado particularmente para hacer películas flexibles a base de plasma útiles como hemostato en el tratamiento y/o prevención de hemorragias arteriales de leves a graves, como una lámina antiadherencia para reducir o prevenir el desarrollo de adherencias inducidas por cirugía, como un parche de cicatrización de heridas, como un apósito para heridas o como una película útil en la reparación de hernias. Las realizaciones de la invención se describirán a continuación con referencia a estas aplicaciones. Sin embargo, se apreciará que la invención no se limita a este campo de uso particular.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Cualquier discusión de la técnica de fondo a lo largo de la memoria descriptiva no debe considerarse de ninguna manera como una admisión de que dicha técnica es ampliamente conocida o forma parte del conocimiento general común en el campo.

Las películas o láminas para uso como productos médicos a menudo contienen material incrustado, como fibras o telas, para alterar/mejorar las propiedades mecánicas de dichas películas o láminas, en particular para mejorar su resistencia a la presión. Sin embargo, dependiendo del tipo de fibras y/o telas utilizadas, se sabe que dichas películas o láminas forzadas desencadenan complicaciones in situ debido a la biodegradabilidad solo parcial de las fibras y telas. Las complicaciones típicas que surgen incluyen el desarrollo de tejido conectivo entre tejidos y/u órganos no relacionados que conducen a adherencias inducidas por cirugía/posquirúrgicas

Las adherencias inducidas por cirugía/posquirúrgicas pueden conducir a complicaciones clínicas graves, como pérdida de sensibilidad, infertilidad, bloqueo intestinal y dolor pélvico. La gravedad de los síntomas depende de la ubicación y el tamaño de la adherencia. El número de pacientes que sufren adherencias inducidas por cirugía/posquirúrgicas está aumentando y 55%-90% de los pacientes que se someten a cirugías ginecológicas y/o abdominales enfrentan complicaciones derivadas de las adherencias.

Se conocen películas de fibrina totalmente biodegradables y se han descrito películas a base de plasma, por ejemplo, véase los documentos EP 0485210 A2 y US 8.529.959 B2. Como ya se indicó anteriormente, los productos médicos a base de plasma, tópicos o implantables tales como películas o láminas generalmente tienen una ventaja de biocompatibilidad en comparación con películas o láminas similares que comprenden materiales no a base de plasma tales como fibras y/o telas. Además de las complicaciones descritas anteriormente, los productos a base de plasma, como las películas, son adecuados para proporcionar a los pacientes individuales un producto implantable a base de plasma generado a partir de su propio plasma que proporciona un grado muy alto de biocompatibilidad.

El documento EP 0485210 A2 describe un procedimiento de fabricación para películas a base de plasma sanguíneo que comprende la coagulación de 50 ml de plasma citratado con 8-10 unidades de NIH de trombina en un aparato de molde. Sin embargo, las películas a base de plasma sanguíneo preparadas de acuerdo con la descripción de EP 0485210 A2 son quebradizas y, por lo tanto, inflexibles, y solo muestran una resistencia mecánica deficiente de modo que las películas se rompen al plegarse, lo que las hace inadecuadas para aplicaciones donde se requiere flexibilidad y/o resistencia a la presión. El documento U^s8.529.959 B2 describe láminas que comprenden un plástico derivado de plasma sanguíneo. El plástico derivado de plasma sanguíneo se describe como obtenido por coagulación de sangre con calcio, secando el coágulo obtenido y moliendo el coágulo seco para producir polvo de coágulo de plasma, que se mezcla con glicerol para preparar una masa que comprende 65% de polvo de coágulo de plasma y 35% de glicerol, y donde la masa se moldea a presión posteriormente a una temperatura elevada y alta presión para formar las láminas. Las láminas preparadas de acuerdo con la descripción de US 8.529.959 B2 tienen una flexibilidad muy limitada y una resistencia mecánica deficiente de modo que las láminas se rompen al plegarse, lo que las hace inadecuadas para aplicaciones donde se requiere flexibilidad y/o resistencia a la presión.

El documento EP 0342 007 A2 se refiere al suministro de un material adherente quirúrgico. El material adherente (pegamento) descrito se prepara utilizando plasma autógeno junto con colágeno y trombina. El documento EP 0342 007 A2 describe además que el material adherente se prepara mezclando dos componentes justo antes del uso a través de un dispensador/mezclador de doble jeringa. El primer componente comprende el plasma junto con el colágeno y el segundo componente comprende la trombina.

El documento WO 03/035115 A2 se refiere a membranas de biopolímero que se pueden incorporar en una estructura de biopolímero de múltiples capas con un producto de biopolímero, donde la estructura presenta propiedades hemostáticas, no adherente y antiadherencia. La membrana de biopolímero del documento WO 03/035115 A2 comprende un biomaterial y trombina, donde el biomaterial es preferentemente fibrina o fibrinógeno. La membrana de biopolímero se describe adicionalmente por su espesor (en su forma sustancialmente seca/liofilizada es igual o menor a aproximadamente 75 micras) y su flexibilidad (expresada por un radio de curvatura de menos de aproximadamente 5 cm).

Por consiguiente, existe la necesidad de películas o láminas a base de plasma flexibles y biodegradables mejoradas en el campo. En particular, se necesitan películas o láminas a base de plasma que tengan un alto grado de flexibilidad, así como una alta resistencia mecánica.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

Un objeto de la presente invención es superar o mejorar al menos una de las desventajas de la técnica anterior, o proporcionar una alternativa útil. En particular, un objeto de la presente invención es proporcionar películas flexibles mejoradas a base de plasma y proporcionar procedimientos mejorados para fabricar y utilizar dichas películas, por ejemplo, en el tratamiento y/o prevención de indicaciones médicas.

La presente invención se basa, entre otras cosas, en el hallazgo sorprendente de que la flexibilidad y/o elasticidad y/o resistencia mecánica de las películas a base de plasma, cuando se expresan en función del número de pliegues, la resistencia a pliegues y/o en función de la resistencia de una película a base de plasma a la presión de rotura, se pueden mejorar mezclando plasma sanguíneo con trombina y/o calcio en exceso de la cantidad requerida para inducir la coagulación del plasma, donde el plasma está contenido dentro de un molde de un volumen y forma deseados. Por consiguiente, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento de elaboración de una película a base de plasma flexible que comprende las etapas de:

(a) mezclar plasma sanguíneo con uno o dos activadores del sistema de coagulación seleccionados de: más de 2.5 Unidades Internacionales (UI) de trombina por mililitro (ml) del plasma; y alrededor de 0.65 a 1.3 mg de iones de calcio por mililitro (ml) del plasma, para inducir la coagulación del plasma, donde el plasma está contenido dentro de un molde; y

(b) mantener el plasma en el molde durante el tiempo requerido para que el plasma se coagule y forme la película, donde opcionalmente durante o al final del tiempo se aplica una presión al plasma en el molde.

Además, se descubrió sorprendentemente que la flexibilidad de las películas a base de plasma se puede mejorar mezclando plasma sanguíneo con al menos un activador del sistema de coagulación en un molde, y aplicando presión al plasma en el molde durante o al final del tiempo requerido para que el plasma se coagule.

A la luz de lo anterior, se entenderá que la presente invención, en una o más realizaciones preferidas, también se refiere a un procedimiento de elaboración de una película a base de plasma flexible que comprende las etapas de: (a) mezclar plasma sanguíneo con aproximadamente más de 2,5 Unidades Internacionales (UI) de trombina por mililitro (ml) del plasma y/o con aproximadamente 0,65 a 1,3 mg de iones de calcio por mililitro (ml) del plasma para inducir la coagulación del plasma, donde el plasma está contenido dentro de un molde; y

(b) mantener el plasma en el molde durante el tiempo requerido para que el plasma se coagule y forme la película, donde durante o al final del tiempo se aplica una presión que varía de alrededor de 0,3 a 125 libras por pulgada cuadrada (psi) al plasma en el molde.

En los procedimientos del primer aspecto, el plasma sanguíneo se mezcla con aproximadamente 2,9 a 3,1 UI de trombina por ml de plasma para inducir la coagulación en el molde y posteriormente se mantiene en el molde durante el tiempo necesario para que el plasma se coagule y forme la película, y se aplica una presión que varía de aproximadamente 40 a 45 psi al plasma en el molde durante aproximadamente 50 a 70 segundos durante o al final del tiempo requerido para que el plasma se coagule.

FIGURAS

Las realizaciones de la invención se describirán a continuación solo a modo de ejemplo, con referencia a los dibujos adjuntos en los que:

La Figura 1 muestra esquemáticamente una película flexible a base de plasma (1) preparada según una realización de la presente invención.

La Figura 2 ilustra esquemáticamente una película a base de plasma (1) como la que se muestra en la Figura 1 que comprende uno o más agentes farmacéuticamente activos (2).

La Figura 3 ilustra esquemáticamente una película a base de plasma (1) como la que se muestra en la Figura 1 que comprende uno o más agentes farmacéuticamente activos (2) incrustados en toda la película a los que se han aplicado dos agentes farmacéuticamente activos adicionales (3, 4) mediante secado por pulverización posterior. En algunas realizaciones, los dos agentes farmacéuticamente activos adicionales pueden ser plasma secado por pulverización (3) y un activador secado por pulverización del sistema de coagulación (4).

La Figura 4 ilustra esquemáticamente una sección vertical a través de un aparato adecuado para hacer una película a base de plasma, donde (5) es un pistón de fuerza descendente, (6) es una placa no porosa para aplicar presión uniformemente al plasma de coagulación/coagulado (no mostrado) en el molde (7) y que comprende un sistema de eliminación de líquido de material absorbente (8) y succión impulsada por vacío (9).

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Con el fin de proporcionar una comprensión clara y coherente de la memoria descriptiva y las reivindicaciones, y del alcance que se debe dar a dichos términos, se proporcionan las siguientes definiciones.

Definiciones

En el contexto de la presente solicitud, el término “flexible” significa que una estructura tal como una película a base de plasma es capaz de doblarse, incluso en giros cerrados, sin romperse. En particular, una película flexible en el contexto de la presente solicitud es capaz de plegarse sin romperse y, como tal, el grado de flexibilidad de la película se puede expresar mediante número de pliegues o resistencia plegable como se define a continuación. Además, el grado de flexibilidad de una película se puede expresar por la presión de rotura de la película también como se define a continuación.

En el contexto de la presente solicitud, el término «a base de plasma», en general, significa estructuras y materiales tales como las películas según la presente invención, y en el caso de películas de múltiples capas las capas de película individuales, que se producen a partir del plasma sanguíneo como el material fuente. En particular, si la mayoría de los componentes de dichas estructuras o materiales es plasma, se entiende que son estructuras o materiales a base de plasma.

En el contexto de la presente solicitud, el término «película», en general significa, estructuras membranosas delgadas, sustancialmente planas, que también se pueden describir como láminas. No obstante, el término película en el contexto de la presente solicitud comprende expresamente películas o láminas de una sola capa, así como películas o láminas de múltiples capas compuestas. Además, una película en el contexto de la presente solicitud puede comprender agentes farmacéuticamente activos aplicados tópicamente a la película, distribuidos homogéneamente a lo largo de la película o encapsulados entre las capas de película de una película de múltiples capas. El término «película» también comprende estructuras que tienen un grado de porosidad que permite una absorción y/o liberación de sustancias tales como agentes farmacéuticamente activos de la película. Como tal, el término «película» en el contexto de la presente solicitud también comprende un andamiaje membranoso delgado, sustancialmente plano sobre el cual, o dentro del cual, pueden estar contenidos los agentes farmacéuticamente activos. Por consiguiente, el término película, cuando se utiliza para describir realizaciones de la presente invención, también abarca recipientes a base de plasma o dispositivos de suministro para agentes farmacéuticamente activos comprendidos en o dentro de la película. En el contexto de la presente solicitud, el término «agente farmacéuticamente activo» significa una sustancia, partícula y/o fármaco utilizado para proporcionar actividad farmacológica o para tener un efecto directo en el diagnóstico, curación, mitigación, tratamiento o prevención de una indicación médica, o para tener un efecto directo en la restauración, corrección o modificación de funciones fisiológicas.

En el contexto de la presente solicitud, el término «agente que aumenta el grado de unión cruzada entre polímeros de fibrina» significa agentes que aumentan la cantidad de enlaces entre las cadenas y y a de moléculas de fibrina estabilizando así las fibras de fibrina. Dichos agentes, entre otros, incluyen factor XIII de coagulación activado (FXIIIa), cloruro de calcio, moléculas de fibrina modificadas tales como moléculas de fibrina truncadas mutadas y anticuerpos específicos de cadena.

En el contexto de la presente solicitud, el término «número de pliegues» significa la cantidad de veces que una estructura tal como una película a base de plasma se puede doblar en giros cerrados hasta que la película se interrumpa. A continuación se describe una prueba simple para determinar el número de pliegues.

En el contexto de la presente solicitud, el término «resistencia al plegado» significa la cantidad de veces que una estructura tal como una película a base de plasma puede plegarse repetidamente en un giro apretado y volver a desplegarse a su posición original. La resistencia al plegado en el contexto de la presente solicitud proporciona un medio para la estimación de la resistencia al desgaste de una estructura flexible.

En el contexto de la presente solicitud, el término «presión de rotura» significa la presión máxima que una estructura puede soportar antes de romperse o interrumpirse. En el contexto de la presente solicitud, el término presión de rotura significa particularmente la presión máxima que una película a base de plasma puede soportar antes de romperse o interrumpirse.

En el contexto de la presente solicitud, la expresión «tiempo requerido para que el plasma se coagule» tiene el significado en español simple, es decir, significa el tiempo requerido para que el plasma utilizado en la preparación de las películas a base de plasma descritas en esta invención se coagule.

En el contexto de la presente solicitud, el término «activador del sistema de coagulación» significa sustancias, partículas o agentes que inician la coagulación/coagulación. Dichos activadores pueden iniciar la coagulación en cualquier etapa de la cascada de coagulación y, como tal, incluir agentes que actúan sobre las vías intrínseca, extrínseca y común de la coagulación.

En el contexto de la presente solicitud, el término «hemostato» significa dispositivos adecuados para reducir y finalmente detener el sangrado. En particular, el término abarca películas a base de plasma adecuadas para cerrar vasos sanguíneos. Como tal, los hemostatos en el contexto de la presente solicitud incluyen películas a base de plasma que pueden cerrar los vasos sanguíneos como una barrera física, películas a base de plasma que pueden administrar agentes hemostáticos al sitio de la hemorragia para cerrar el vaso sanguíneo, así como combinaciones de estos.

Además de las definiciones anteriores, y a menos que el contexto lo requiera claramente, a lo largo de la descripción y las reivindicaciones, las palabras «comprender», «que comprende» y similares deben interpretarse en un sentido inclusivo en oposición a un sentido exclusivo o exhaustivo; es decir, en el sentido de «que incluye, pero no se limita a».

Además, la referencia a lo largo de esta memoria descriptiva a «una realización», «algunas realizaciones» o «una realización» significa que una característica, estructura o característica particular descrita en relación con la realización se incluye en al menos una realización de la presente invención. Por lo tanto, las apariencias de las frases «en una realización», «en algunas realizaciones» o «en una realización» en varios lugares a lo largo de esta memoria descriptiva no se refieren necesariamente a la misma realización, pero pueden. Además, los rasgos, estructuras o características particulares se pueden combinar de cualquier manera adecuada, como sería evidente para un experto en la materia a partir de esta descripción, en una o más realizaciones.

Tal como se usa en esta invención, a menos que se especifique lo contrario, el uso de los adjetivos ordinales «primero», «segundo», «tercero», etc., para describir un objeto común, simplemente indica que se hace referencia a diferentes instancias de objetos similares y no pretende implicar que los objetos descritos de esta manera deben estar en una secuencia dada, ya sea temporalmente, espacialmente, en clasificación o de cualquier otra manera.

Como se usa en esta invención, el término «ejemplar» se usa en el sentido de proporcionar ejemplos, en lugar de indicar calidad. Es decir, una «realización ejemplar» es una realización proporcionada como un ejemplo, en lugar de ser necesariamente una realización de calidad ejemplar.

Películas flexibles a base de plasma y procedimientos para hacer y usar las mismas

Como se describió anteriormente, la flexibilidad, elasticidad y/o resistencia mecánica de las películas a base de plasma es importante para que dichas películas a base de plasma se utilicen de manera eficiente y exitosa como hemostatos para detener las hemorragias leves a graves e incluso para detener las hemorragias arteriales. En particular, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención proporcionan la flexibilidad, elasticidad y resistencia mecánica requeridas para que las películas sellen dichas hemorragias, es decir, la flexibilidad necesaria para que la película se ajuste a la topología fisiológica del sitio de la hemorragia y para soportar incluso la presión arterial en el sitio de la hemorragia.

De manera similar, la flexibilidad, elasticidad y resistencia mecánica de las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos según la presente invención es importante para que dichas películas a base de plasma se utilicen eficientemente como láminas antiadherencias para reducir o prevenir el desarrollo de adherencias inducidas por la cirugía.

Las adherencias inducidas por cirugía/posquirúrgicas son el resultado de la formación de tejido cicatricial después de la cirugía. Si bien la adherencia es parte de la respuesta de curación normal al trauma tisular, puede conducir a complicaciones posquirúrgicas graves cuando surge una conexión cruzada estable entre tejidos que de otro modo no estarían conectados como resultado de las adherencias.

De hecho, más del 90% de los pacientes desarrollan adherencias peritoneales después de la cirugía abdominal o pélvica. En la mayoría de los pacientes, el tejido adherente se remodela posteriormente y, en última instancia, se disuelve. Sin embargo, en millones de pacientes se forman adherencias entre órganos y/o tejidos que normalmente están separados, como los intestinos, intestinos, útero, ovarios y otros órganos, causando disfunción y otras complicaciones posiblemente graves. Por ejemplo, las adherencias dentro de la cavidad abdominal pueden conducir a la obstrucción del intestino delgado, infertilidad femenina y dolor. Además, las adherencias a menudo dificultan la cirugía posterior y limitan las opciones de tratamiento posteriores. Por ejemplo, las adherencias a menudo impiden la posterior cirugía mínimamente invasiva.

Las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención son adecuadas para proporcionar láminas de barrera antiadherente diseñadas para actuar como un escudo físico que mantiene el tejido dañado separado del tejido circundante, evitando así la adherencia no deseada. La película a base de plasma cuando se utiliza como una lámina antiadherencia separa el tejido traumatizado durante su tiempo inicial de curación, pero finalmente se descompondrá por completo debido a su biodegradación. En este sentido, cabe destacar que el crecimiento de la adherencia se inicia dentro de los primeros 3-5 días después de la cirugía. Como tal, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención son particularmente útiles como láminas antiadherencias que permiten la separación del tejido traumatizado del tejido circundante durante estos primeros días de cicatrización posquirúrgica, reduciendo o previniendo así el desarrollo de adherencias inducidas por la cirugía y, en última instancia, reduciendo o previniendo el riesgo de complicaciones que surgen debido a la formación de adherencias inducidas por la cirugía. Como se apreciará, la flexibilidad de las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención proporciona una ventaja significativa cuando dichas películas se utilizan como láminas antiadherencias debido a su capacidad de ajustarse a la topología fisiológica del tejido traumatizado proporcionando así una barrera antiadherencia eficiente entre el tejido traumatizado y los tejidos circundantes.

Debido a su biocompatibilidad y biodegradación completa a lo largo del tiempo, las películas flexibles a base de plasma tales como la película (1) mostrada esquemáticamente en la Figura 1 también son particularmente adecuadas para su uso como apósitos para heridas, parches de cicatrización de heridas o para su uso en la reparación de hernias o lesiones vasculares. En este sentido, cabe destacar que las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención son típicamente no tóxicas, no interfieren con la cicatrización normal, no interfieren con las funciones inmunológicas, aplicables en diversos entornos tales como sangrado, infecciones y cirugía anastomótica y son, debido a su flexibilidad, elasticidad y alta resistencia mecánica fácil de manejar y fácil de aplicar. Además, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención 5 pueden servir como portadores, recipientes y/o dispositivos de suministro para agentes farmacéuticamente activos, por ejemplo, para agentes útiles en el tratamiento de las aplicaciones médicas mencionadas anteriormente. Por ejemplo, si la película se utiliza como un parche de cicatrización de heridas, la película puede llevar uno o más agentes de cicatrización de heridas farmacéuticamente activos, es decir, agentes que apoyan la cicatrización de heridas. Alternativamente, las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se pueden utilizar como apósitos para heridas desnudas.

Como tal, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención tales como la película (1) ilustrada esquemáticamente en la figura 2 pueden comprender al menos un agente farmacéuticamente activo (2). Preferentemente, el al menos un agente farmacéuticamente activo se selecciona del grupo que consiste en: agentes antibióticos; agentes antiinflamatorios; agentes antiinfecciosos; factores de crecimiento; quimiocinas; inmunomoduladores; agentes de cicatrización de heridas; activadores del sistema de coagulación; agentes anticoagulantes; agentes antiadherentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; plata; clorhexidina; células; quimiocinas derivadas de células estromales; factor 1 alfa derivado de células estromales; factor 1 beta derivado de células estromales; fibrinógeno; Factor Vila; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexámico; tensioactivos no iónicos; Pluronic F68; TWEEN 80; inhibidores de COX-2; y nimesulida.

Las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención pueden modificarse específicamente como dispositivos de administración para los agentes farmacéuticamente activos enumerados anteriormente. Por ejemplo, existe una necesidad de películas a base de plasma flexibles tópicamente aplicables o implantables, que pueden contener los agentes farmacéuticamente activos y/o administrarlos a un sitio de tratamiento. Los tensioactivos no iónicos, tales como ésteres de sorbitán de polioxietileno, en particular monooleato de sorbitán polioxietileno (20) (TWEEN-80®), copolímeros en bloque de polioxietileno-polioxipropileno, en particular Pluronic F68®, o inhibidores de COX-2, en particular AA(4-Nitro-2-fenoxifenil)metanosulfonamida (Nimesulide®), o combinaciones de estos son particularmente útiles cuando se preparan películas a base de plasma para su uso como láminas antiadherencias para reducir o prevenir el desarrollo de adherencias inducidas por cirugía. En dichas películas, estos agentes pueden distribuirse homogéneamente a lo largo de la película, o pueden aplicarse tópicamente a la película, ya sea solos o como una combinación de agentes.

En algunas realizaciones, el agente se distribuye de forma homogénea a lo largo de la película. En otras realizaciones, el agente se aplica tópicamente a la película. En aun otras realizaciones de la presente invención, la película a base de plasma puede comprender un agente farmacéuticamente activo distribuido homogéneamente a lo largo de la película y comprender además el mismo u otro agente farmacéuticamente activo aplicado tópicamente a una superficie de la película.

En realizaciones donde los agentes se distribuyen de manera homogénea a lo largo de la película, los agentes se «atrapan» dentro de la película durante la formación de las películas a base de plasma debido a la coagulación del plasma. Después de la implantación, la película a base de plasma se degradará (principalmente debido a factores líticos, hidratación y desgaste mecánico) liberando así sucesivamente los agentes farmacéuticamente activos distribuidos a lo largo.

Cuando un agente se aplica tópicamente a una película según la invención, el agente se puede aplicar mediante recubrimiento por pulverización, secado por pulverización, cepillado y/o remojo.

Las quimiocinas derivadas de células estromales son particularmente interesantes para su uso con películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención. Los factores derivados de células estromales 1 -alfa y 1-beta son pequeñas citocinas que pertenecen a la familia de las quimiocinas, cuyos miembros activan los leucocitos y a menudo son inducidos en respuesta a estímulos proinflamatorios tales como lipopolisacáridos, factor de necrosis tumoral (TNF) o interleucina-1 (IL1). Las quimiocinas tales como CXCL-12 inhiben la formación de tejido conectivo y, por lo tanto, son agentes útiles para su aplicación o distribución a través de películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención cuando se utilizan como láminas antiadherencias.

Una vez que se han preparado las películas, los agentes que inhiben la formación adicional de fibrina, tales como heparina, aprotinina, ácido tranexámico u otros antifibrinolíticos también se pueden agregar a las películas a base de plasma para ser utilizadas como láminas antiadherencias, por ejemplo, mediante aplicación tópica.

En algunas realizaciones, el agente puede ser un agente único o puede ser una mezcla de agentes 5 tales como proteínas, por ejemplo, que comprende una mezcla de activadores del sistema de coagulación tales como el propio plasma.

En algunas realizaciones, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención pueden comprender más de un agente farmacéuticamente activo distribuido homogéneamente a lo largo de la película y/o más de un agente farmacéuticamente activo aplicado tópicamente a la película.

En una o más realizaciones preferidas

(i) un primer agente farmacéuticamente activo se aplica tópicamente a la película, opcionalmente mediante secado por pulverización,

(ii) una capa de separación se aplica posteriormente sobre el primer agente aplicado tópicamente, y

(iii) se aplica tópicamente un segundo agente farmacéuticamente activo sobre la capa de separación.

En tales realizaciones, el primer agente farmacéuticamente activo puede ser fibrinógeno, la capa de separación puede comprender almidón, opcionalmente almidón gelatinizado, y el segundo agente farmacéuticamente activo puede ser trombina. Preferentemente, el fibrinógeno se aplica mediante secado por pulverización sobre una capa de película, aplicación de almidón gelatinizado todavía líquido (preparado, por ejemplo, mediante gelatinización de 2,5 g de almidón en 50 ml de agua mediante calentamiento a 125 °C) sobre la capa de fibrinógeno y aplicación de una presión de aproximadamente 15,5 psi (105 kPa) a la película. Típicamente, 2 ml de almidón gelatinizado son suficientes para cubrir una película de 4”x4” con una capa de separación. Posteriormente, se aplica trombina sobre la capa de separación. El secado por aspersión de aproximadamente 5 ml de una solución de trombina de 300 UI/ml en una película de 4”x4” demostró ser el más eficaz.

En realizaciones alternativas, la película preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención puede comprender un agente farmacéuticamente activo aplicado tópicamente para su uso como un hemostato en solo una superficie externa de la película en capas, mientras que una de las capas internas comprende un agente diferente, por ejemplo, un antibiótico. El agente hemostático aplicado tópicamente en la superficie de la película puede liberarse y actuar inmediatamente después de la aplicación de la película a una herida, proporcionando así un efecto hemostático beneficioso inmediato, mientras que el agente antibiótico de la o las capas internas de la película solo se libera después del efecto hemostático inmediato, proporcionando así un efecto antibiótico durante etapas de curación posteriores. Como tal, en tales realizaciones, la aplicación tópica puede proporcionar un efecto de liberación inmediata de un agente, mientras que la distribución homogénea en toda la película puede permitir un efecto de liberación retardada o de liberación lenta de un agente.

En otras realizaciones, y con referencia a la Figura 3, la película a base de plasma (1) que comprende opcionalmente un agente farmacéuticamente activo (2) distribuido de forma homogénea en toda la película, también se puede recubrir con plasma secado por pulverización (3) para proporcionar una capa de proteínas plasmáticas a la superficie externa de la película. La pulverización con pistola de aire se puede utilizar para la aplicación tópica de plasma, ya que mantiene la actividad de las proteínas plasmáticas después del secado.

En efecto, esta aplicación tópica mediante secado por pulverización proporciona una película a base de plasma que comprende proteínas de coagulación activas en su superficie externa. Las actividades del fibrinógeno y FXa del sistema de coagulación permanecen intactas de modo que la película puede usarse como un apósito hemostático con una capa secada por pulverización de proteínas de coagulación activas. Además, se puede rociar una capa final de un activador del sistema de coagulación (4) tal como un convertidor de trombina sobre el plasma secado por pulverización. Por ejemplo, el convertidor de trombina puede seleccionarse de: factor de tejido, factor de tejido recombinante, trombina, caolín, tierra de diatomea y activadores del sistema de coagulación. La película a base de plasma así modificada puede usarse como hemostato para sangrados leves, moderados o graves.

Además, una película a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención puede ser una película compuesta que comprende varias capas de película a base de plasma, es decir, una película a base de plasma de múltiples capas. En algunas películas a base de plasma de múltiples capas, cada capa de película individual puede comprender ningún agente farmacéuticamente activo, el mismo o diferente.

El grado de reticulación entre polímeros de fibrina de la película a base de plasma flexible influye en la velocidad de degradación de la película, donde un alto grado de reticulación se correlaciona con degradación lenta, y donde un bajo grado de reticulación se correlaciona con degradación rápida. Por consiguiente, controlar el grado de reticulación permite controlar la velocidad de degradación y, por lo tanto, permite personalizar la película de acuerdo con su aplicación.

Por ejemplo, si la película se va a utilizar como una lámina antiadherencia, la película debe degradarse dentro de una o dos semanas de la implantación. Por el contrario, las películas utilizadas para la reparación de hernias deben tener una velocidad de degradación mucho más lenta que conduce a un implante casi permanente, preferentemente que requiera de varias semanas a meses o, en casos particulares, incluso de varios meses a años, antes de la degradación completa de la película.

En general, la velocidad de degradación se puede optimizar para adaptarse a la función particular de una película, es decir, para promover la cicatrización, proporcionar estabilidad mecánica para una ruptura o lesión cubierta por la película, etc.

De manera similar, el grado de reticulación entre polímeros de fibrina de la película influye en el tiempo de liberación de un agente farmacéuticamente activo distribuido homogéneamente dentro de la película, donde un alto grado de reticulación se correlaciona con tiempos de liberación más largos, y donde un bajo grado de reticulación se correlaciona con tiempos de liberación más cortos. Por consiguiente, controlar el grado de reticulación permite controlar la velocidad de liberación de un agente farmacéuticamente activo distribuido homogéneamente a lo largo de las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención.

La combinación de las diferentes características de las películas descritas en esta invención, es decir, películas monocapa, películas multicapa, diferentes agentes aplicados tópicamente o distribuidos a lo largo de la película, permiten la producción de películas hechas a medida para aplicaciones específicas e incluso para pacientes individuales.

La película a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se prepara típicamente a partir de plasma líquido, donde el plasma puede ser plasma humano o animal. Por ejemplo, el plasma es plasma fresco congelado (FFP) o es plasma seguro ante patógenos. El FFP se puede obtener de un banco de sangre. Sin embargo, los plasmas obtenidos de un fabricante de plasma profesional como CLS Behring, Baxter u Octapharma son típicamente preferidos, ya que proporcionan una seguridad de patógenos mucho mayor debido a la eliminación de patógenos y los procedimientos de inactivación incorporados en sus procedimientos de producción. Los plasmas de los fabricantes de plasma suelen ser plasmas combinados y seguros ante patógenos.

En realizaciones en las que se utiliza plasma seguro ante patógenos como material fuente para las 5 películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención, el plasma se ha sometido preferentemente a tratamiento de inactivación viral, se ha pasteurizado, se ha irradiado y/o se ha nanofiltrado. Típicamente, el plasma seguro ante patógenos que se utiliza como material fuente para las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se ha sometido a tratamiento con solvente/detergente (tratamiento S/D) para inactivar cualquier patógeno viral posiblemente contenido en el mismo.

En una o más realizaciones preferidas, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención tienen un espesor que varía de alrededor de 0,005 a 0,1 mm, o de alrededor de 0,005 a 0,09 mm, o de alrededor de 0,0075 a 0,08 mm, o de alrededor de 0,01 a 0,08 mm, o de alrededor de 0,01 a 0,07 mm, o de alrededor de 0,015 a 0,065 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,06 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,055 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,05 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,04 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,03 mm, o alrededor de 0,01 mm, o alrededor de 0,02 mm, o alrededor de 0,03 mm, o alrededor de 0,04 mm, o alrededor de 0,05 mm, o alrededor de 0,06 mm.

Como ya se indicó anteriormente, la flexibilidad, elasticidad y resistencia mecánica particularmente ventajosas de las películas flexibles a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención pueden expresarse mediante número de pliegues, resistencia al plegado y presión de rotura de las películas.

Una prueba simple para determinar la flexibilidad de la película es la evaluación del número de pliegues de una película. Dicha determinación se logra doblando una mitad de la película sobre la otra mitad, girando la pila 90° y doblando nuevamente una mitad de la pila sobre la otra y así sucesivamente hasta que la película se rompa o se rompa. Cada pliegue sin desencadenar la ruptura de la película aumenta el número de pliegues en 1. Esta prueba es particularmente útil para la evaluación de la capacidad de una película a base de plasma para mantener su integridad cuando se dobla en giros cerrados. Las películas flexibles a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se caracterizan típicamente por un número de pliegues de al menos 1, tal como al menos 2, tal como al menos 3, tal como al menos 4, tal como al menos 5.

Otra prueba para determinar la flexibilidad de la película es la evaluación de la resistencia al plegado. Dicha determinación 5 se logra doblando repetidamente una mitad de la película sobre la otra mitad y desplegando a su posición original. La resistencia al plegado se expresa por el número de repeticiones de plegado/despliegue y proporciona un medio para la estimación de la resistencia al desgaste. Las películas flexibles a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se caracterizan típicamente por una resistencia al plegado de al menos 10, tal como al menos 20, tal como al menos 30, tal como al menos 40, tal como al menos 50, tal como al menos 60, tal como al menos 70, tal como al menos 80, tal como al menos 90, tal como al menos 100.

Otro procedimiento para la determinación de la flexibilidad de la película es la determinación de la presión de rotura según el Procedimiento de prueba estándar para la resistencia a la rotura de los selladores quirúrgicos (ASTM-F 2392 04). Una película se sujeta en un accesorio de acuerdo con ASTM-F 2392-04 y el accesorio se conecta a una bomba con un transductor de presión que se une en línea entre la bomba y el accesorio de presión de rotura. El bombeo de un fluido en el sistema aumenta la presión hasta que la película explota. La presión de rotura así obtenida se indica como [mm Hg], Las películas a base de plasma flexible preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se caracterizan típicamente por una presión de rotura de aproximadamente 50 a 1000 mm Hg, o de aproximadamente 100 a 1000 mm Hg, o de aproximadamente 100 a 800 mm Hg, o de aproximadamente 100 a 600 mm Hg, o de aproximadamente 100 a 500 mm Hg, o de aproximadamente 100 a 450 mm Hg, o de aproximadamente 140 mm Hg, o de aproximadamente 150 mm Hg, o de aproximadamente 175 mm Hg, o de aproximadamente 200 mm Hg, o de aproximadamente 225 mm Hg, o de aproximadamente 250 mm Hg, o de aproximadamente 275 mm Hg, o de aproximadamente 300 mm Hg, o de aproximadamente 325 mm Hg, o de aproximadamente 350 mm Hg, o de aproximadamente 375 mm Hg, o de aproximadamente 400 mm Hg.

En algunas realizaciones preferidas de la presente invención, una película a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos se caracteriza por una presión de rotura de al menos 130 a 240 mm Hg, cuando la película seca (con aproximadamente 4% de agua residual) tiene un espesor de película de 0,03 mm, en particular por una presión de rotura de 170 a 240 mm Hg para una película de 0,03 mm en estado seco, o 130 a 180 mm Hg para una película de 0,03 mm (espesor de película en estado seco) después de remojar durante 10 minutos en una solución acuosa que contiene 10 % de glicerol.

En otras realizaciones preferidas de la presente invención, una película 5 a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos se caracteriza por una presión de rotura de al menos 190 a 450 mm Hg cuando la película seca (con aproximadamente 4% de agua residual) tiene un espesor de película de 0,05-0,06 mm, en particular por una presión de rotura de 300 a 450 mm Hg para una película de 0,05-0,06 mm en estado seco, o 190 a 400 mm

Hg para una película de 0,05-0,06 mm (espesor de película en estado seco) después de remojar durante 10 minutos en una solución acuosa que contiene 10 % de glicerol.

La resistencia a la tracción se determinó de acuerdo con el Procedimiento de Prueba Estándar para las Propiedades de Resistencia de las Adherencias de Tejido en Cizallamiento por Vuelta por Carga de Tensión (ASTM F2255-05) por medición con un Ensayo Mecánico Instron Modelo 58R4505

Sistema que utiliza una célula de carga de 50 N (~10#) y una velocidad de cruce de 1.0 pulgadas por minuto. Las muestras tenían forma de hueso de perro con una región estrecha de 0,25" y se colocaron en el instrumento con agarraderas neumáticas revestidas de caucho con la presión establecida a 20 psi. La resistencia a la tracción obtenida se da en libras-fuerza [IbfJ. Las películas a base de plasma flexible preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se caracterizan típicamente por una resistencia a la tracción de al menos 0,25 Ibf (aproximadamente 1,1 N), tal como al menos 0,5 Ibf (aproximadamente 2,2 N), tal como al menos 0,75 Ibf (aproximadamente 3,3 N), tal como al menos 1 Ibf (aproximadamente 4,4 N), tal como al menos 1,2 Ibf (aproximadamente 5,28 N), o por una resistencia a la tracción que varía de aproximadamente 0,25 Ibf (aproximadamente 1,1 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N), tal como de aproximadamente 0,5 Ibf (aproximadamente 2,2 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N), tal como de aproximadamente 0,7 Ibf (aproximadamente 3,08 N) a 1,5 (aproximadamente 6,6 N), tal como de aproximadamente 0,8 Ibf (aproximadamente 3,52 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N), tal como de aproximadamente 0,9 Ibf (aproximadamente 3,96 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N), tal como de aproximadamente 1 Ibf (aproximadamente 4,4 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N).

En algunas realizaciones preferidas, la película a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención comprende uno o más humectantes. En particular, la película se puede recubrir con humectantes tales como glicerol, por ejemplo, remojándola en glicerol al 10% durante 10 a 15 minutos, para evitar que la película se vuelva quebradiza durante el almacenamiento. También es posible mezclar el humectante durante la coagulación del plasma al preparar la película. En tales realizaciones, mezclar 1- 2% de glicerol, en función del peso total de la mezcla de coagulación, es típicamente suficiente para evitar que las películas se vuelvan quebradizas durante el almacenamiento.

Alternativamente, la película puede envasarse o guardarse en una bolsa en un recipiente con control de humedad después de la preparación para preservar la flexibilidad de la película. La bolsa o recipiente puede ser una bolsa de aluminio u otro recipiente de esterilización. Típicamente, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se esterilizan, preferentemente mediante esterilización gamma, esterilización por haz electrónico y/o esterilización UV.

Se puede aplicar un soporte adherente a la película para proporcionar adherencia adicional de la película al tejido si se desea. No obstante, típicamente, las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención sin un soporte adherente se adhieren al tejido al que se aplican de modo que las suturas de retención generalmente no fueron necesarias durante las pruebas in situ en estudios en animales.

Como se indicó anteriormente, se descubrió sorprendentemente que las películas flexibles a base de plasma que tienen los rasgos y características descritas anteriormente pueden prepararse ventajosamente mediante los procedimientos de los primeros aspectos de la presente invención mencionados anteriormente, es decir, que la flexibilidad, elasticidad y resistencia mecánica de las películas a base de plasma pueden mejorarse mediante los procedimientos particulares de preparación.

A saber, en el primer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento de fabricación de una película flexible a base de plasma que comprende las etapas de:

Además, se descubrió sorprendentemente que la flexibilidad de las películas a base de plasma se puede mejorar mezclando plasma sanguíneo con al menos un activador del sistema de coagulación en un molde, y aplicando presión al plasma en el molde durante o al final del tiempo requerido para que el plasma se coagule. El molde tiene preferentemente un volumen y una forma adecuados para la preparación de dichas películas.

En una o más realizaciones preferidas, la presión varía de aproximadamente 30 a 95 psi, o de 30 a 56 psi, o de 40 a 50 psi, o de 40 a 45 psi, o es 44 psi. Preferentemente, la presión se aplica solo durante una fracción del tiempo requerido para que el plasma, tal como durante 30 a 120 segundos, tal como durante 45 a 85 segundos, tal como durante 50 a 70 segundos, tal como durante 60 segundos.

Típicamente, el activador del sistema de coagulación está presente en exceso, de modo que el tiempo requerido para que el plasma coagule es relativamente corto y varía de aproximadamente 5 a 20 minutos desde la mezcla de la trombina o el activador del sistema de coagulación con el plasma, o de aproximadamente 10 a 20 minutos, o de aproximadamente 12 a 18 minutos. En algunas realizaciones, el tiempo requerido para que el plasma coagule es de 15 minutos. Por consiguiente, en algunas realizaciones, la presión se aplica después de aproximadamente 5 a 20 minutos de la mezcla de la trombina del activador del sistema de coagulación con el plasma, o después de aproximadamente 10 a 20 minutos, o después de aproximadamente 12 a 18 minutos, o después de aproximadamente 15 minutos.

En este sentido, cabe destacar que la inducción de la coagulación puede lograrse en algunos casos simplemente por recalcificación del plasma. Alternativamente, la coagulación se puede inducir mediante la adición de agentes que convierten el fibrinógeno en el plasma en fibrina, tal como trombina y activadores de la coagulación similares a trombina. Además, la vía extrínseca del sistema de coagulación se puede activar para inducir la coagulación del plasma. Dichos activadores extrínsecos son fosfolípidos, fosfolípidos que contienen fosfatidilserina y fosfatidilcolina, factor tisular, factor tisular recombinante tal como Dade Innovin, tierra de diatomeas u otros activadores de vías extrínsecas comunes.

En algunas realizaciones de los procedimientos del primer aspecto, el plasma se mezcla con 5 alrededor de 2,5 a 3,5 UI de trombina por ml de plasma, o con alrededor de 2,9 a 3,1 UI de trombina por ml de plasma, o el plasma se mezcla con más de 2,5 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 2,75 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 3 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 3,25 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 3,5 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 3,75 UI de trombina por ml de plasma, tal como más de 4 UI de trombina por ml de plasma y/o con alrededor de 0,65 a 1,3 mg de iones de calcio por mililitro (ml) de plasma. En algunas realizaciones de los procedimientos del primer aspecto, las etapas de mezcla y mantenimiento del plasma se realizan a un intervalo de temperatura desde temperatura ambiente hasta alrededor de 40 °C, o de 36 a 38 °C, o a 37 °C.

En algunas realizaciones adicionales de los procedimientos del primer aspecto, la presión se aplica al plasma dentro del molde a través de una placa para formar la película, preferentemente la placa se presiona sobre el plasma en el molde mediante una prensa neumática.

En algunas realizaciones, los procedimientos del primer aspecto comprenden además una etapa de:

(c) eliminar el exceso de líquido del molde.

Durante esta etapa adicional, el exceso de líquido se extruye típicamente del plasma coagulado o que coagula cuando se aplica la presión. Preferentemente, el exceso de líquido se elimina por medio de un sistema de eliminación de líquido, opcionalmente seleccionado de: un sistema de succión tal como un sistema de succión impulsado por vacío; y un sistema que comprende materiales adsorbentes tales como paños absorbentes, toallas, membranas o geles. Por ejemplo, y con referencia a la Figura 4, la presión se puede aplicar a la mezcla de coagulación (5) a través de una placa sólida no porosa (6) que es ligeramente más pequeña que el perímetro exterior del molde (7). A continuación, la placa se coloca bajo un sistema de eliminación de líquido (8) que eliminará el exceso de porción acuosa de la película a base de plasma durante la compresión. Una vez que el sistema de eliminación acuosa (8) está en su lugar, la fuerza se coloca uniformemente en la placa (6), por ejemplo, mediante un pistón de fuerza descendente (9) de una prensa neumática. La fuerza sobre la placa que presiona la mezcla de coagulación en el molde puede ser muy baja, por ejemplo, tan baja como 5 libras, o la fuerza puede ser alta, por ejemplo, 2000 libras. Durante la aplicación de la presión, la porción acuosa sobrante de la película a base de plasma, que contiene principalmente suero sanguíneo y exceso de agua, se extruye o «aplasta» de modo que la porción acuosa sobrante de la película a base de plasma se desplaza al perímetro exterior de la placa (6). Durante esta etapa de desplazamiento, el sistema de eliminación de líquido (8) elimina la fase acuosa a través de una succión impulsada por vacío y también se puede recolectar a través de material absorbente (10). Al final de la compresión, la película «aplastada» se puede retirar del recipiente como una película plana, altamente comprimida, de bajo contenido de agua y de alta resistencia.

(d) secar la película a base de plasma.

Durante esta etapa adicional, la película se seca típicamente a temperatura ambiente y/o en condiciones de presión negativa, tal como en un conjunto de flujo laminar o un conjunto de vacío, o a temperaturas aumentadas, tal como en un horno.

En algunas realizaciones, la película preparada comprende además al menos un agente farmacéuticamente activo, preferentemente el agente se distribuye de forma homogénea a lo largo de la película o se aplica tópicamente a la película y puede seleccionarse del grupo que consiste en: agentes antibióticos; agentes antiinflamatorios; agentes antiinfecciosos; factores de crecimiento; quimiocinas; inmunomoduladores; agentes de cicatrización de heridas; activadores del sistema de coagulación; agentes anticoagulantes; agentes antiadherentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; plata; clorhexidina; quimiocinas derivadas de células estromales; factor 1 alfa derivado de células estromales; factor 1 beta derivado de células estromales; fibrinógeno; Factor Vila; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexámico; tensioactivos no iónicos; F68 plurónico; TWEEN 80; inhibidores de COX-2; y Nimesida.

En algunas realizaciones adicionales de los procedimientos del primer aspecto, el al menos un agente farmacéuticamente activo se distribuye de forma homogénea a lo largo de la película. En tales realizaciones, la etapa de mezclar el plasma sanguíneo con la trombina y/o calcio o con el activador del sistema de coagulación también comprende mezclar el plasma con al menos un agente farmacéuticamente activo para proporcionar una mezcla de coagulación con la condición de que el agente no pueda ser un agente anticoagulante. Típicamente, el al menos un agente farmacéuticamente activo puede constituir hasta el 5% del peso total de la mezcla de coagulación, tal como hasta el 2%, preferentemente entre el 1 y el 2%.

En este sentido, cabe destacar que la mezcla de los agentes hasta el 5% del peso total de la mezcla de coagulación no comprometió la estabilidad mecánica de las películas producidas. Como se muestra con más detalle en los Ejemplos a continuación, la adición de 1 -2% de agentes antiadherentes fue suficiente para que las películas muestren ninguna o muy pequeñas adherencias en un estudio con animales. En el modelo animal para el desarrollo de adherencias, las láminas antiadherencias de la presente invención llevaron a que menos del 25% de la superficie de la herida inicialmente aplicada estuviera cubierta con adherencias, en particular mostraron una cobertura de superficie de la herida del 0-15%. Por el contrario, la película antiadherente comercialmente disponible de mejor rendimiento probada en el mismo modelo animal para el desarrollo de adherencias condujo a una cobertura de la superficie de la herida de al menos 40%.

En algunas realizaciones adicionales de los procedimientos del primer aspecto, el al menos un agente farmacéuticamente activo se aplica tópicamente a la película, opcionalmente el agente se puede aplicar mediante recubrimiento por pulverización, secado por pulverización, cepillado y/o remojo. En algunas realizaciones preferidas, el agente puede ser una mezcla de proteínas que comprende activadores del sistema de coagulación tal como plasma. En algunas realizaciones adicionales de los procedimientos del primer aspecto, la película puede comprender varias capas de película preparadas repitiendo sucesivamente las etapas de los procedimientos de la invención en el molde para formar una película a base de plasma de múltiples capas, donde, opcionalmente, cada capa de película individual puede comprender ninguno, el mismo o diferentes agentes farmacéuticamente activos. Preferentemente, varios agentes farmacéuticamente activos se pueden aplicar tópicamente de forma simultánea o sucesiva.

En algunas realizaciones adicionales de los procedimientos del primer aspecto, la etapa de mezclar el plasma sanguíneo con la trombina y/o calcio o con el activador del sistema de coagulación también comprende mezclar el plasma con un agente que aumenta el grado de reticulación entre los polímeros de fibrina generados durante la coagulación del plasma, preferentemente el agente es cloruro de calcio.

La mezcla con cloruro de calcio adicional conduce a la formación de películas a base de plasma altamente reticuladas que son resistentes a la degradación en urea 8M durante días, semanas, meses. Como tal, si la película a base de plasma que se va a preparar va a ser una película que se degrada más rápidamente, no se debe añadir cloruro de calcio. En ausencia de cloruro de calcio, la fibrina en la película a base de plasma tiene un grado muy bajo de reticulación y es rápidamente degradable. Por ejemplo, una película con un bajo grado de reticulación se disuelve en urea 8M en aproximadamente 4 horas. No obstante lo anterior, incluso si tienen un alto grado de reticulación, las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención son completamente biodegradables. El plasma sanguíneo adecuado para su uso en los procedimientos del primer aspecto puede ser plasma sanguíneo animal o humano. Por lo general, el plasma es plasma fresco congelado (FFP) o es plasma seguro ante patógenos. En los procedimientos donde se utiliza plasma seguro ante patógenos, el plasma se ha sometido a tratamiento de inactivación viral, preferentemente tratamiento con solvente/detergente (tratamiento S/D), y/o se ha pasteurizado, y/o se ha irradiado, y/o se ha nanofiltrado.

En algunas realizaciones, la película a base de plasma preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención tiene un contenido de agua de alrededor de 3 a 6% en peso, o de alrededor de 4 a 5% en peso, o de alrededor de 4% en peso. El contenido de agua residual se determinó mediante la evaluación del peso de la película antes de la determinación (peso total) y después del secado en un horno a 105 °C a peso constante. La diferencia de peso representa el peso del agua residual (antes del secado en horno) y se da como % de agua residual, en función del peso total antes del secado en horno. Las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención que tienen un contenido de agua residual de aproximadamente 4% se denominan películas «secas» en los Ejemplos a continuación, mientras que dichas películas después de remojar durante 10 minutos en una solución acuosa que contiene 10 % de glicerol se denominan «películas empapadas».

Los procedimientos del primer aspecto son adecuados para hacer películas flexibles a base de plasma que tienen un espesor que varía de alrededor de 0,005 a 0,1 mm, o de alrededor de 0,005 a 0,09 mm, o de alrededor de 0,0075 a 0,08 mm, o de alrededor de 0,01 a 0,08 mm, o de alrededor de 0,01 a 0,07 mm, o de alrededor de 0,015 a 0,065 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,06 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,055 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,05 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,04 mm, o de alrededor de 0,02 a 0,03 mm, o alrededor de 0,01 mm, o alrededor de 0,02 mm, o alrededor de 0,03 mm, o alrededor de 0,04 mm, o alrededor de 0,05 mm, o alrededor de 0,06 mm. No obstante, películas con otros espesores también se pueden derivar simplemente escalando hacia arriba o hacia abajo los volúmenes de los componentes utilizados en los procedimientos del primer aspecto.

Además, el espesor y la resistencia de la película corresponden a la cantidad de presión colocada en la placa superior y la cantidad de plasma aplicada. Las películas preparadas en un molde de 4”x4” presurizado durante 30 a 120 segundos con 700 libras de fuerza, es decir, aproximadamente 44 psi o 300 kPa, tienen un espesor de aproximadamente 0.02 mm cuando se preparan a partir de 30 ml de mezcla de coagulación (dichas películas se denominan «SUBC 30» a continuación). Las películas preparadas de manera correspondiente pero a partir de una mezcla de coagulación de 60 ml tienen un espesor de aproximadamente 0.03 mm (dichas películas se denominan «SUBC 60» a continuación) y las películas preparadas de forma correspondiente pero a partir de una mezcla de coagulación de 120 ml tienen un espesor de 0.05-0.06 mm (dichas películas se denominan «SUBC 120» a continuación).

Como ya se describió anteriormente, las películas preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención se caracterizan por una flexibilidad ventajosa y, por lo tanto, por: un número de pliegues de al menos 1, tal como al menos 2, tal como al menos 3, tal como al menos 4, tal como al menos 5; una resistencia al plegado de al menos 10, tal como al menos 20, tal como al menos 30, tal como al menos 40, tal como al menos 50, tal como al menos 60, tal como al menos 70, tal como al menos 80, tal como al menos 90, tal es al menos 100; y/o una presión de rotura de alrededor de 50 a 1000 mm Hg, o de alrededor de 100 a 1000 mm Hg, o de alrededor de 100 a 800 mm Hg, o de alrededor de 100 a 600 mm Hg, o de alrededor de 100 a 500 mm Hg, o de alrededor de 100 a 450 mm Hg, o de alrededor de 140 mm Hg, o de alrededor de 150 mm Hg, o de alrededor de 175 mm Hg, o de alrededor de 200 mm Hg, o de alrededor de 225 mm Hg, o de alrededor de 250 mm Hg, o de alrededor de 275 mm Hg, o de alrededor de 300 mm Hg, o de alrededor de 325 mm Hg, o de alrededor de 350 mm Hg, o de alrededor de 375 mm Hg, o de alrededor de 400 mm Hg.

En una realización preferida de la invención adicional, las películas a base de plasma flexible se caracterizan por una presión de rotura reducida después de haber sido remojadas en una solución acuosa que contiene glicerol al 10 % durante 10 minutos. En particular, dichas películas empapadas se caracterizan por una presión de rotura de 75% a 80% de la de una película «seca» correspondiente, es decir, una película que tiene un contenido de agua residual de alrededor de 4% y que tiene el mismo espesor cuando está seca.

En una realización preferida de la invención adicional, la película a base de plasma flexible se caracteriza por una relación de presión de rotura/espesor de película de 5000 a 9000 mm Hg/mm de espesor de película cuando está seca (es decir, cuando tiene un contenido de agua residual de alrededor de 4%) y tiene un espesor de película de 0,05-0,06 mm, o por una relación de presión de rotura/espesor de película de 6000 a 7500 mm Hg/mm de espesor de película cuando está seca (es decir, cuando tiene un contenido de agua residual de alrededor de 4%) y tiene un espesor de película de 0,03 mm.

Como tal, una película a base de plasma flexible preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención y que tiene un espesor que varía de alrededor de 0,005 a 0,1 mm, puede caracterizarse por una cantidad de pliegues de al menos 1, tal como al menos 2, tal como al menos 4, tal como al menos 5. Preferentemente, la película a base de plasma flexible se caracteriza por una resistencia al plegado de al menos 10, tal como al menos 20, tal como al menos 30, tal como al menos 40, tal como al menos 50, tal como al menos 60, tal como al menos 70, tal como al menos 80, tal como al menos 90, tal como al menos 100, y/o por una presión de rotura de alrededor de 50 a 1000 mm Hg, o de alrededor de 100 a 1000 mm Hg, o de alrededor de 100 a 800 mm Hg, o de alrededor de 100 a 600 mm Hg, o de alrededor de 100 a 500 mm Hg, o de alrededor de 100 a 450 mm Hg, o de alrededor de 140 mm Hg, o de alrededor de 150 mm Hg, o de alrededor de 175 mm Hg, o de alrededor de 200 mm Hg, o de alrededor de 225 mm Hg, o de alrededor de 250 mm Hg, o de alrededor de 275 mm Hg, o de alrededor de 300 mm Hg, o de alrededor de 325 mm Hg, o de alrededor de 350 mm Hg, o de alrededor de 375 mm Hg, o de alrededor de 400 mm Hg.

En particular, las películas a base de plasma flexible preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención son adecuadas para su uso como hemostato, preferentemente como hemostato para detener una hemorragia leve a grave y/o para detener una hemorragia arterial. Preferentemente, las películas también son adecuadas: para su uso como una lámina antiadherencia para reducir o prevenir el desarrollo de una adherencia inducida por la cirugía; para su uso como un parche de cicatrización de heridas; para su uso como un apósito para heridas; o para su uso en la reparación de hernias.

Ejemplos

La invención se describe adicionalmente mediante los siguientes ejemplos no limitantes.

Películas SUBC

SUBC30

Se preparó una película altamente flexible a base de plasma mezclando plasma de 30 ml con 10 trombina 280 320 pi (300 lU/ml) o solución de calcio 280-320 pi (2 M Ca2+) o trombina 280-320 pi (300 lU/ml) junto con solución de calcio 280-320 pi (2 M Ca2+), posteriormente incubando la mezcla a 25-37 °C durante unos 15 minutos, en un molde de 4”x4” y presurizando el coágulo de plasma obtenido en el molde con una presión de aproximadamente 44 psi durante unos 60 segundos.

Finalmente, la película obtenida se secó en una campana laminar durante la noche hasta un contenido de humedad residual de alrededor de 4%. Esta película se indica en las Tablas 3 y 4 a continuación como «SUBC 30 (seco)».

SUBC60

Se preparó una película altamente flexible a base de plasma mezclando plasma de 60 ml con trombina 580-620 pi (300 lU/ml) o solución de calcio 580-620 pi (2 M Ca2+) o trombina 580-620 pi (300 lU/ml) junto con solución de calcio 580-620 pi (2 M Ca2+), posteriormente incubando la mezcla a 25-37 °C durante unos 15 minutos, en un molde de 4”x4” y presurizando el coágulo de plasma obtenido en el molde con una presión de aproximadamente 44 psi durante unos 60 segundos.

Finalmente, la película obtenida se secó en una campana laminar durante la noche hasta un contenido de humedad residual de alrededor de 4%. Esta película se indica en las Tablas 3 y 4 a continuación como «SUBC 60 (seco)». Algunas de las películas SUBC 60 (secas) se remojaron posteriormente en glicerol al 10 % durante 10 minutos. Tales películas se indican como «SUBC 60 (empapado)».

SUBC 120

Se preparó una película altamente flexible a base de plasma mezclando plasma de 120 ml con trombina 1180 1220 pi (300 lU/ml) o solución de calcio 1180-1220 pi (2 M Ca2+) o trombina 1180-1220 pi (300 lU/ml) junto con solución de calcio 1180-1220 pi (2 M Ca2+), posteriormente incubando la mezcla a 25-37 °C durante unos 15 minutos, en un molde de 4”x4” y presurizando el coágulo de plasma obtenido en el molde con una presión de aproximadamente 44 psi durante unos 60 segundos.

Finalmente, la película obtenida se secó en una campana laminar durante la noche hasta un contenido de humedad residual 10 de alrededor de 4%. Esta película se indica en las Tablas 3 y 4 a continuación como «SUBC 120 (seco)».

Algunas de las películas SUBC 120 (secas) se remojaron posteriormente en glicerol al 10 % durante 10 minutos-. Tales películas se indican como «SUBC 120 (empapado)».

Películas CE

Ejemplo comparativo 1 - CE-1

Se conoce una película basada en plasma sanguíneo de la técnica previa a partir de EP 0485210 A2. El procedimiento de producción «4. Membrana de plasma» enseña la mezcla de 50 ml de plasma citratado con 8-10 unidades de trombina NIH en un aparato de molde a 4 °C y el calentamiento a temperatura ambiente o 37 °C. Las películas obtenidas eventualmente pueden secarse durante la noche en una campana de flujo laminar, comprimirse o desecarse. Para obtener los resultados más comparables, la mezcla se escaló a 60 ml. En particular, se mezclaron 60 ml de plasma con 12 unidades de NIH de trombina. La mezcla se calentó a 37 °C en un molde de 4"x4" y se mantuvo durante 2 horas a esta temperatura. Finalmente, las películas se comprimieron con 44 psi durante 60 segundos, se retiró el exceso de agua y suero y las películas se secaron durante la noche bajo una campana de flujo laminar.

Por lo tanto, las películas preparadas se indican en las tablas 1 y 2 como «CE-160 (seco)» y las películas que se empaparon adicionalmente en glicerol al 10 % durante 10 minutos se indican como «CE-1 60 (empapado)». Ejemplo comparativo 2 - CE-2

El documento US 8.529.959 B2 describe una lámina que comprende un plástico derivado del plasma sanguíneo A, que es flexible, elástico o una combinación de los mismos.

El material fuente (un polvo de plasma coagulado) se obtuvo como se describe en el Ejemplo 11 mediante la coagulación de 52.6 partes de plasma mediante la adición de 1 parte de cloruro de calcio 1M en agua y la liofilización del coágulo durante 72 horas a una presión reducida de 6 mTorr. El polvo de plasma se logró moliendo el material seco en un molinillo mecánico y a continuación tamizando a través de un tamiz de 150 pm. Otros procedimientos para formular y formar el plástico derivado del plasma fueron los siguientes. Para formular el plástico, se añadieron 650 mg de polvo de plasma y 350 mg de glicerol (como plastificante) a un pequeño vaso de precipitados. Los componentes se mezclaron hasta ser homogéneos y se dejaron incubar a temperatura ambiente en un recipiente cerrado durante aproximadamente 21 horas. La «masa» resultante se moldeó en una prensa a 59 °C. No se proporciona una descripción real de la formación de una lámina o película, pero el documento US 8.529.959 B2 se refiere a la solicitud de patente estadounidense Ser. N.° 11/495,115 (US 11/495.115) para procesar láminas elásticas.

Lamentablemente, dicha solicitud de patente solo contiene información sobre la producción de películas a base de fibrinógeno y gelatina. Mediante la combinación de las enseñanzas descritas en los Ejemplos 24,16,2 y 1, se dedujo el procedimiento común de mezclar un polvo (fibrina molida, coágulo de plasma molido, gelatina molida o fibrinógeno no polimerizado) con diversas cantidades de un plastificante (glicerol) para producir una «masa» y formar la masa en una prensa calentada. También se indicó que las películas preparadas a partir de una masa que contenía 12,5% de glicerol eran más flexibles y que las películas se podían hacer a cualquier presión con 1000 a 8000 libras.

Por lo tanto, se decidió llevar a cabo experimentos con fibrinógeno no polimerizado y un polvo de coágulo de plasma preparado como se indica en US 8.529.959 B2, mezclando 12.5% de glicerol como se indica en US 11/495,115 o 35% como se indica en US 8.529.959 B2 y finalizar el procedimiento de producción mediante moldeo a presión en un molde a menor escala de 2”x1.6” a 59°C y 5000 libras. Los experimentos iniciales con masas que contenían 35% de glicerol revelaron que las películas obtenidas eran bastante rígidas, apenas flexibles y no era posible lograr un solo pliegue con tal película. Las películas preparadas con 12,5% de glicerol fueron hasta cierto punto flexibles y esta estrategia se examinó más a fondo. Las películas preparadas con 12,5% de agua, que también se menciona en la patente (solicitud) como plastificante, pero ningún glicerol reveló prácticamente ninguna cohesión.

Con base en la experiencia inicial de propiedades de película bastante deficientes, se decidió producir películas comparables en contenido plasmático a las películas de 120 ml preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención. Para obtener resultados más comparables, se coaguló una porción, que es equivalente al área del molde de 4”x4” dividida por el área del molde de menor escala, de plasma de 120 ml y se liofilizó como se indica en el documento US 8.529.959 B2. El peso de este coágulo, es decir, 88-92 mg, en particular alrededor de 90 mg, se había determinado y servido como el peso del coágulo de plasma en polvo que se utilizará para los experimentos que se asemejan a una película de 120 ml. Las películas eran hasta cierto punto plegables, flexibles y casi lograron sobrevivir a un pliegue en la prueba de número de pliegues, pero finalmente no lograron alcanzar un número de pliegues de 1. Era posible determinar la presión de rotura, pero los resultados de las películas secas eran tan pobres que no se probaron como películas empapadas. Las películas comparativas que se asemejan a una película de 120 ml se indican en las tablas 1 y 2 como «CE-2120 (seco)».

Ejemplo comparativo 3 (CE-3)

CE-3 es una película antiadherencia comercialmente disponible utilizada en el estudio de animales antiadherencia. Ejemplo comparativo 4 (CE-4)

CE-4 es una película antiadherencia comercialmente disponible utilizada en el estudio de animales antiadherencia. Películas antiadherencia 1 a 4

Película 1

Inicialmente se preparó una película de acuerdo con la preparación de la película SUBC 120 (seca) descrita anteriormente.

Posteriormente, la película se remojó en una solución de agente antiadherente antes de su uso. En particular, la película SUBC 120 (seca) se remojó en 7,5 ml de una solución que consiste en 0,5 ml de Tween-80®, 0,25 ml de glicerina, 15 mg de heparina y 6,75 ml de agua. Por lo tanto, las películas Tween-80® empapadas se utilizaron en un estudio animal antiadherencia y los resultados se dan en la Tabla 2 indicada como «Película 1».

Película 2

Sin embargo, durante la preparación de la película SUBC 120 (seca), se mezcló 1-2% de un agente antiadherencia 10, tal como Pluronic F68®, con el plasma. Esta película puede ser utilizada como película seca o como una película empapada después de la inmersión. El remojo de una película de plasma Pluronic F68® que contenía 120 ml en 7,5 ml de una solución que consistía en 0,75 ml de glicerina, 15 mg de heparina y 6,75 ml de agua proporcionó una buena barrera antiadherencia.

Por lo tanto, las películas plurónicas empapadas se utilizaron en un estudio animal antiadherencia y los resultados se dan en la Tabla 2 indicada como «Película 2».

Película 3

Sin embargo, durante la preparación de la película SUBC 120 (seca), se mezcló 1-2% de dos agentes antiadherentes al mismo peso con el plasma. Es decir, se mezclaron cantidades iguales de Tween-80® y Pluronic F68® en peso con el plasma

Dichas películas se utilizaron en un estudio animal antiadherencia y los resultados se dan en la Tabla 2 indicada como «Película 2».

Película 4

Posteriormente, se aplicaron tópicamente agentes antiadherentes a la película. Es decir, se aplicó un inhibidor de COX-2, tal como Nimesulide® en 1 mg/cm2 mediante secado por pulverización, y la película se utilizó como una película seca.

Dichas películas con Nimesulide® aplicado tópicamente en 1 mg/cm2 se utilizaron en un estudio animal antiadherencia y los resultados se dan en la Tabla 2 indicada como «Película 4».

Ejemplo 1

Películas hemostáticas - estudio animal para la determinación de la eficacia.

Se prepararon películas a base de plasma altamente flexibles para su uso como hemostatos de acuerdo con la preparación de la película SUBC 120 (seca) descrita anteriormente.

Las películas se modificaron a continuación mediante aplicación tópica para hemostasia rápida con trombina. También se prepararon películas similares con fibrinógeno secado por pulverización en un lado de una película, seguido de cubrir el fibrinógeno con una capa de almidón y finalmente secar por pulverización la trombina en la parte superior del almidón.

La eficacia de las películas hemostáticas se evaluó en un modelo porcino mediante la inducción de una lesión en el bazo, riñón o hígado utilizando un dispositivo de sangrado de plantilla, que creó una herida poco profunda de aproximadamente 1 cm de diámetro.

La evaluación de la eficacia se realizó después de presionar manualmente la película sobre la herida durante 3 minutos y esperar 15 minutos a partir de entonces sin presionar. Las películas flexibles a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención analizados tenían un agente hemostático farmacéuticamente activo aplicado tópicamente. Es decir, se analizaron hemostáticos que comprenden trombina aplicada tópicamente, factor de coagulación activado VII (FVIIa) o una combinación de trombina y fibrinógeno.

Las películas hemostáticas con trombina o una combinación de trombina y fibrinógeno fueron más efectivas y detuvieron las hemorragias en 3 minutos. Las películas con FVIIa fueron ligeramente menos efectivas ya que una hemorragia arterial particularmente fuerte no pudo detenerse completamente con una película de FVIIa después de varios minutos, con el fin de detener esta hemorragia, finalmente se utilizó una película recubierta con trombina preparada de acuerdo con los procedimientos de la presente invención, que detuvo esta hemorragia arterial.

Ejemplo 2

Láminas antiadherencias - estudio en animales para la determinación de la eficacia.

La eficacia de las láminas antiadherencias según la presente invención se evaluó en un modelo animal de rata. En cada animal, se aplicaron lesiones quirúrgicas estandarizadas (área de 2,0 x 2,5 cm) tanto en el peritoneo de la pared lateral derecha e izquierda como en los cuernos uterinos utilizando un citocepillo hasta que se produjo un sangrado puntuado.

Las láminas de prueba o control asignadas se aplicaron para cubrir la abrasión en cada cuerno uterino y se suturaron en su lugar. Las películas de control eran implantes comercialmente disponibles con función antiadherencia dedicada. En el día 7 después de la cirugía, todos los animales fueron sacrificados humanamente y sometidos a necropsia para la evaluación macroscópica de las adherencias.

La calidad y cantidad de adherencias se evaluaron de la siguiente manera:

Cantidad: La cantidad se puntuó según la incidencia de áreas traumatizadas con adherencias y la cobertura de adherencia (que se calcula como una fracción de adherencias y se traduce en un porcentaje del área traumatizada). Calidad: La calidad de las adherencias inducidas se calificó de acuerdo con la Tabla 1. Los resultados de calidad y cantidad se presentan en la Tabla 2. La calidad de la adherencia se consideraba «membranosa» si la escala de una regla era visible a través del tejido y, de lo contrario, se consideraba «densa».

Tabla 1 Puntuación de la calidad de adherencia

Tabla 2 Calidad cantidad de resultados antiadherencia

Las películas 1-4 de la presente invención tuvieron un rendimiento notablemente mejor que las 5 películas antiadherencia disponibles comercialmente.

Ejemplo 3

Evaluación de la flexibilidad de la película.

La flexibilidad de las películas a base de plasma preparadas de acuerdo con los procedimientos de la presente invención, a saber, para las películas SUBC 30 (seca), SUBC 60 (seca) y (empapada), SUBC 120 (seca) y (empapada) y para las películas comparativas CE-160 (seca) y (empapada) y CE-2120 (seca) se evaluó determinando el número de pliegues, la resistencia al plegado y las presiones de rotura como se describió anteriormente.

Resultados

Tabla 3 (Número de pliegues, resistencia al plegado)

Como ninguna de las películas comparativas CE-1 y CE-2 logró lograr un solo pliegue sin romperse, no fue posible determinar la resistencia al plegado.

Tabla 4 resión de rotura

Las películas CE-1 (secas) eran tan frágiles e inflexibles que no se podían colocar en el dispositivo sin romperlas. Por lo tanto, no fue posible determinar la presión de rotura para estas películas.

Muchas modificaciones y otras realizaciones de la invención expuestas en esta invención vendrán a la mente para el experto en la materia a la que pertenece la invención que tiene el beneficio de las enseñanzas presentadas en la descripción anterior y los dibujos asociados. Por lo tanto, debe entenderse que la invención no debe limitarse a las realizaciones específicas descritas y que se pretende que las modificaciones y otras realizaciones estén incluidas dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas. Aunque se emplean términos específicos en esta invención, se usan solo en un sentido genérico y descriptivo y no con fines de limitación.

Lista de números de referencia

1 película a base de plasma

2 agente farmacéuticamente activo

3 agente adicional farmacéuticamente activo - plasma secado por pulverización

4 agente adicional farmacéuticamente activo - activador secado por pulverización del sistema de coagulación

5 mezcla de coagulación

6 placa sólida, no porosa

7 molde

sistema de eliminación de líquido, tal como succión impulsada por vacío material absorbente del pistón hacia abajo

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un procedimientos para fabricar una película a base de plasma flexible que comprende las etapas de: (a) mezclar plasma sanguíneo con uno o dos activadores del sistema de coagulación seleccionados de: más de 2,5 Unidades Internacionales (UI) de trombina por mililitro (ml) de dicho plasma; y 0,65 a 1,3 mg de iones de calcio por mililitro (ml) de dicho plasma, para inducir la coagulación de dicho plasma, donde dicho plasma está contenido dentro de un molde; y

(b) mantener dicho plasma en dicho molde durante el tiempo requerido para que el plasma se coagule y forme dicha película, donde opcionalmente durante o al final de dicho tiempo se aplica una presión a dicho plasma en dicho molde.

2. El procedimientos según la reivindicación 1, donde: dicha presión varía de 30 a 95 psi, o de 30 a 56 psi, o de 40 a 50 psi, o de 40 a 45 psi, o es 44 psi, y/o

dicha presión se aplica solo durante una fracción del tiempo requerido para que el plasma se coagule, tal como durante 30 a 120 segundos, tal como durante 45 a 85 segundos, tal como durante 50 a 70 segundos, tal como durante 60 segundos; y/o

dicha presión se aplica después de 5 a 20 minutos de la mezcla de dicho activador del sistema de coagulación con dicho plasma, o después de 10 a 20 minutos, o después de 12 a 18 minutos, o después de 15 minutos; y/o dicha presión se aplica a dicho plasma dentro de dicho molde mediante una placa para formar dicha película, preferentemente dicha placa se presiona sobre dicho plasma en dicho molde mediante una prensa neumática.

3. El procedimiento según la reivindicación 1 o reivindicación 2, donde:

dicho tiempo requerido para que el plasma coagule oscila entre 5 y 20 minutos a partir de la mezcla de dicho activador del sistema de coagulación con dicho plasma, o entre 10 y 20 minutos, o entre 12 y 18 minutos, o es de 15 minutos; y/o

dicho plasma se mezcla con 2,5 a 3,5 UI de trombina por ml de dicho plasma, o con 2,9 a 3,1 UI de trombina por ml de dicho plasma.

4. El procedimientos según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde dichas etapas de mezclar y mantener dicho plasma se realizan a un intervalo de temperatura de 40 °C a temperatura ambiente, o de 36 a 38 °C, o a 37 °C; y/o

dicha etapa de mezclar dicho plasma sanguíneo con dicha trombina y/o calcio o con dicho activador del sistema de coagulación también comprende mezclar dicho plasma con un agente que aumenta el grado de reticulación entre los polímeros de fibrina generados durante la coagulación de dicho plasma, preferentemente dicho agente es cloruro de calcio; y/o

dicho plasma es plasma fresco congelado (FFP) o es plasma seguro para patógenos, opcionalmente dicho plasma seguro para patógenos se ha sometido a tratamiento de inactivación viral, preferentemente tratamiento con solvente/detergente (tratamiento S/D), y/o se ha pasteurizado, y/o se ha irradiado, y/o se ha nanofiltrado.

5. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde:

el grado de reticulación entre polímeros de fibrina de dicha película influye en la velocidad de degradación de dicha película, donde un alto grado de reticulación se correlaciona con degradación lenta, y donde un bajo grado de reticulación se correlaciona con degradación rápida; y/o

el grado de reticulación entre polímeros de fibrina de dicha película influye en el tiempo de liberación de un agente farmacéuticamente activo distribuido homogéneamente dentro de dicha película, donde un alto grado de reticulación se correlaciona con tiempos de liberación más largos, y donde un bajo grado de reticulación se correlaciona con tiempos de liberación más cortos.

6. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además una etapa de:

(c) retirar el exceso de líquido de dicho molde, preferentemente el exceso de líquido extruido de dicho plasma coagulado o de coagulación cuando se aplica dicha presión, preferentemente dicho exceso de líquido se retira por medio de un sistema de eliminación de líquido, opcionalmente seleccionado de: un sistema de succión tal como un sistema de succión impulsado por vacío; y un sistema que comprende materiales adsorbentes tales como paños absorbentes, toallas, membranas o geles.

7. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además una etapa de:

(d) secar dicha película a base de plasma, preferentemente a temperatura ambiente y/o en condiciones de presión negativa, tal como en un conjunto de flujo laminar o un conjunto de vacío, o a temperaturas aumentadas, tal como en un horno.

8. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde:

dicha película comprende además al menos un agente farmacéuticamente activo, preferentemente dicho agente se distribuye homogéneamente a lo largo de dicha película o se aplica tópicamente a dicha película; y/o

dicho al menos un agente farmacéuticamente activo se selecciona del grupo que consiste en: agentes antibióticos; agentes antiinflamatorios; agentes antiinfecciosos; factores de crecimiento; quimiocinas; inmunomoduladores; agentes de cicatrización de heridas; activadores del sistema de coagulación; agentes anticoagulantes; agentes antiadherentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; plata; clorhexidina; quimiocinas derivadas de células estromales; factor 1 alfa derivado de células estromales; factor 1 beta derivado de células estromales; fibrinógeno; Factor Vila; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexámico; tensioactivos no iónicos; Pluronic F68; TWEEN 80; inhibidores de COX-2; y nimesulida.

9. El procedimientos según la reivindicación 8, donde, cuando dicho al menos un agente farmacéuticamente activo se distribuye homogéneamente a lo largo de dicha película, dicha etapa de mezclar dicho plasma sanguíneo con dicha trombina y/o calcio o con dicho activador del sistema de coagulación también comprende mezclar dicho plasma con dicho al menos un agente farmacéuticamente activo para proporcionar una mezcla de coagulación con la condición de que dicho agente no pueda ser un agente anticoagulante.

10. El procedimientos según la reivindicación 9, donde dicho al menos un agente farmacéuticamente activo puede constituir hasta el 5% del peso total de dicha mezcla de coagulación, tal como hasta el 2%, preferentemente entre el 1 y el 2%.

11. El procedimientos según la reivindicación 8, donde, cuando dicho al menos un agente farmacéuticamente activo se aplica tópicamente a dicha película, opcionalmente dicho agente se puede aplicar mediante recubrimiento por pulverización, secado por pulverización, cepillado y/o remojo, opcionalmente dicho agente puede ser una mezcla de proteínas que comprende activadores del sistema de coagulación tal como plasma, opcionalmente varios agentes farmacéuticamente activos se pueden aplicar tópicamente de forma simultánea o sucesiva.

12. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde:

dicha película puede comprender varias capas de película preparadas repitiendo sucesivamente las etapas de los procedimientos de cualquiera de las reivindicaciones anteriores en dicho molde para formar una película a base de plasma de múltiples capas, donde, opcionalmente, cada capa de película individual puede comprender ningún agente farmacéuticamente activo, igual o diferente; y/o

(i) un primer agente farmacéuticamente activo se aplica tópicamente sobre dicha película, opcionalmente mediante secado por pulverización,

(ii) una capa de separación se aplica posteriormente sobre dicho primer agente aplicado tópicamente, y (iii) se aplica tópicamente un segundo agente farmacéuticamente activo sobre dicha capa de separación.

13. El procedimientos según la reivindicación 12, donde dicho primer agente farmacéuticamente activo es fibrinógeno, dicha capa de separación comprende almidón, almidón opcionalmente gelatinizado y dicho segundo agente farmacéuticamente activo es trombina.

14. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde:

dicha película a base de plasma tiene un contenido de agua del 3 al 6% en peso, o del 4 al 5% en peso, o del 4% en peso; y/o

dicha película tiene un espesor que varía de 0,005 a 0,1 mm, o de 0,005 a 0,09 mm, o de 0,0075 a 0,08 mm, o de 0,01 a 0,08 mm, o de 0,01 a 0,07 mm, o de 0,015 a 0,065 mm, o de 0,02 a 0,06 mm, o de 0,02 a 0,055 mm, o de 0,02 a 0,05 mm, o de 0,02 a 0,04 mm, o de 0,02 a 0,03 mm, o 0,01 mm, o 0,02 mm, o 0,03 mm, o 0,04 mm, o 0,05 mm, o 0,06 mm; y/o

dicha película flexible se caracteriza por un número de pliegues de al menos 1, tal como al menos 2, tal como al menos 3, tal como al menos 4, tal como al menos 5; y/o

dicha película flexible se caracteriza por una resistencia al plegado de al menos 10, tal como al menos 20, tal como al menos 30, tal como al menos 40, tal como al menos 50, tal como al menos 60, tal como al menos 70, tal como al menos 80, tal como al menos 90, tal como al menos 100; y/o

dicha película flexible se caracteriza por una presión de rotura de 50 a 1000 mm Hg, o de 100 a 1000 mm Hg, o de 100 a 800 mm Hg, o de 100 a 600 mm Hg, o de 100 a 500 mm Hg, o de 100 a 450 mm Hg, o de 140 mm Hg, o de 150 mm Hg, o de 175 mm Hg, o de 200 mm Hg, o de 225 mm Hg, o de 250 mm Hg, o de 275 mm Hg, o de 300 mm Hg, o de 325 mm Hg, o de 350 mm Hg, o de 375 mm Hg, o de 400 mm Hg.

15. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde:

dicha película comprende uno o más humectantes; y/o

dicha película comprende un soporte adherente; y/o

dicha película se esteriliza, preferentemente mediante esterilización con rayos gamma, esterilización con haces electrónicos y/o esterilización con rayos UV y/o

dicha película está envasada en un recipiente con control de humedad.