ES2904608T3 - Fucosil lactosa como oligosacárido no digerible idéntico al de la leche materna para tratar y/o prevenir la diarrea vírica - Google Patents

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Abstract

Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso en el tratamiento y/o la prevención de la diarrea vírica causada por rotavirus, donde dicha composición no es leche humana.

Description

DESCRIPCIÓN
Fucosil lactosa como oligosacárido no digerible idéntico al de la leche materna para tratar y/o prevenir la diarrea vírica
Campo de la invención
[0001] La presente invención se refiere a un alimento infantil con oligosacáridos no digeribles, en particular a una composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso en el tratamiento y/o la prevención de diarreas víricas causadas por rotavirus, tal como se define en las reivindicaciones.
Antecedentes de la invención
[0002] Los lactantes alimentados con leche humana tienen una menor incidencia de infecciones, incluyendo infecciones víricas, que los lactantes alimentados con leche maternizada. Se cree que muchos componentes presentes en la leche humana, incluyendo las inmunoglobulinas (como IgA), la interleucina (IL)-1, IL-6, IL-8, IL-10, el interferón-y (IFN-y), las células inmunocompetentes, el factor de crecimiento transformante p (TGF-P), la lactoferrina, los nucleótidos y los oligosacáridos no digeribles (OND) están involucrados en la protección contra las infecciones por patógenos entéricos o respiratorios. Se ha descubierto que el TGF-p y los nucleótidos de la dieta son componentes que pueden ser responsables del aumento de la actividad de las células K naturales.
[0003] Los OND son un componente importante de la leche humana y son un elemento importante del sistema inmunitario innato de la leche humana. Los OND humanos estimulan el crecimiento de una microbiota beneficiosa dominada por bifidobacterias y lactobacilos. También se sabe que algunos OND humanos pueden prevenir directamente la adhesión de patógenos y toxinas.
[0004] La leche humana es el alimento preferido para los lactantes. Sin embargo, no siempre es posible o deseable amamantar a un bebé. En tales casos, las leches maternizadas o las leches de continuación son una buena alternativa. Estas leches artificiales deben tener una composición óptima para imitar al máximo los efectos beneficiosos de la leche materna.
En el documento WO 2007/067053 se describe una leche maternizada infantil que comprende los prebióticos de origen vegetal inulina y oligosacárido de ácido galacturónico y el prebiótico transgalactooligosacárido sintetizado a partir de lactosa para reducir las infecciones.
En el documento WO 2007/010084 se describen polisacáridos y oligosacáridos de manano para la estimulación inmunitaria.
En el documento US 6,576,251 se divulga una mezcla de carbohidratos para alimentos dietéticos administrados por vía enteral o parenteral que consiste en (a) monosacárido(s), (b) oligosacárido(s) (como máximo hexasacáridos) y (c) polisacárido(s) (como mínimo heptasacáridos), donde la relación de mezcla a, b, c, con respecto al peso, es: alfa=1, b=40 a 1000, y c=1 a 50, y que contiene al menos un 1 por ciento en peso de fucosa que está libre y/o ligada a un oligosacárido y/o un polisacárido. Se dice que la mezcla de carbohidratos tiene un efecto nutricional y biológico considerablemente mayor que la acción correspondiente de los constituyentes individuales.
En el documento EP 1 629 850 se proporciona una composición para usar en un método para el tratamiento y/o la prevención de infecciones de las vías respiratorias y/o enfermedades infecciosas de las vías respiratorias, donde dicho método comprende administrar oralmente una composición a un mamífero, donde dicha composición comprende un oligosacárido no digerible que contiene galactosa y al menos un 5 % en peso de sacárido de galactosa digerible.
El documento EP 2 072 052 se refiere a una composición adecuada para su uso en la prevención de infecciones oportunistas en individuos inmunodeprimidos que comprende un probiótico y un oligosacárido fucosilado seleccionado del grupo que comprende 2'-fucosil lactosa, 3'fucosil lactosa, difucosil lactosa, lacto-N-fucopentaosa, lacto-N-fucohexaosa, fucosilacto-N-hexaosa y fucosilacto-N-neohexaosa. El documento describe además una composición de este tipo para su uso en la prevención de infecciones oportunistas en individuos inmunodeprimidos.
En el documento WO 2005/055944 se describe el tratamiento, la prevención o la reducción del riesgo de infección mediante una composición que, por ejemplo, puede añadirse a una leche maternizada infantil, a una composición nutricional o a un suplemento dietético para personas mayores o personas inmunodeprimidas, que contiene una molécula que comprende un grupo fucosa unido a un grupo galactosa. Se ha descubierto que la 2'-fucosil lactosa protege contra las infecciones bacterianas por C. jejuni, pero no contra las infecciones por calicivirus.
Resumen de la invención
[0005] La leche humana se diferencia de la leche de los animales domésticos en que contiene más OND y en que los OND son estructuralmente diferentes. El grupo de los OND humanos es muy complejo, ya que representa un grupo heterogéneo de más de 130 compuestos diferentes con composición de azúcares diversa.
[0006] Debido a su estructura compleja y polimórfica, la síntesis a gran escala es complicada. Por lo tanto, todavía no es factible desde el punto de vista técnico y económico preparar leche maternizada con una composición de OND idéntica a la de la leche humana.
[0007] Recientemente, se dispone de nuevas técnicas para sintetizar químicamente tipos específicos de OND idénticos a los OND humanos específicos, lo que ofrece la oportunidad de analizar la capacidad inmunomoduladora de OND humanos específicos en ensayos in vitro e in vivo.
[0008] Los inventores han descubierto inesperadamente que la fucosil lactosa (FL), un oligosacárido presente en abundancia en la leche materna humana y con una estructura relativamente simple, aumenta específicamente el número y, por lo tanto, la actividad de las células asesinas naturales (NK). Las células NK tienen un papel importante en la defensa natural contra las infecciones víricas y las células tumorales. El hallazgo de qué oligosacárido específico es responsable de aumentar la actividad de las células NK permite el diseño de composiciones nutricionales que comprenden FL, más particularmente 2'-FL, para el uso para el aumento de células NK y/o de la actividad de las células NK.
Descripción detallada
[0009] La presente invención se refiere a una composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso en el tratamiento y/o la prevención de la diarrea vírica causada por rotavirus, donde dicha composición no es leche humana.
Fucosil lactosa
[0010] La presente composición comprende 2'-fucosil lactosa. La fucosil lactosa (FL) es un oligosacárido no digerible presente en la leche humana. No está presente en la leche bovina. Consiste en tres unidades de monosa, fucosa, galactosa y glucosa unidas entre sí. La galactosa unida a la glucosa a través de un enlace beta 1^4 se llama lactosa. Una unidad de fucosa está unida a una unidad de galactosa de una lactosa a través de un enlace alfa 1,2 (2'-fucosil lactosa, 2'-FL) o a la unidad de glucosa de la lactosa a través de un enlace alfa 1,3 (3-fucosil lactosa, 3 -FL). La presente composición comprende 2'-FL.
[0011] 2'-FL, preferiblemente a-L-Fuc-(1^-2)-p-D-Gal-(1^4)-D-Glc, y 3-FL, preferiblemente a-L-Fuc-(1^-3)-[p-D-Gal-(1^-4)]-D-Glc), están comercializadas, por ejemplo, por Sigma-Aldrich. Alternativamente, pueden aislarse de la leche humana, por ejemplo, como se describe en Andersson y Donald, 1981, J Chromatogr.
211:170-1744, o pueden producirlas microorganismos modificados genéticamente, por ejemplo como se describe en Albermann et al, 2001, Carbohydrate Res. 334:97-103.
[0012] Preferiblemente, la composición comprende de 1 mg a 3 g de fucosil lactosa por 100 ml, más preferiblemente de 10 mg a 2 g, incluso más preferiblemente de 20 mg a 100 mg de FL por 100 ml. Con respecto a su peso en seco, la composición comprende preferiblemente del 0,007 % al 20 % en peso de fucosil lactosa, más preferiblemente del 0,07 % al 10 % en peso, incluso más preferiblemente del 0,15 % al 1 % en peso. Una cantidad menor de fucosil lactosa será menos eficaz para aumentar las células NK y/o aumentar la actividad de las células NK, mientras que una cantidad demasiado alta dará como resultado costos innecesarios del producto. Oligosacáridos no digeribles distintos de FL
[0013] La presente composición comprende preferiblemente oligosacáridos no digeribles (OND) distintos de FL. Preferiblemente, los o Nd distintos de FL estimulan el crecimiento de bifidobacterias y/o lactobacilos, más preferiblemente de bifidobacterias. Un mayor contenido de bifidobacterias y/o lactobacilos estimula la formación de una microbiota intestinal saludable. Los OND preferiblemente no se digieren o se digieren solo parcialmente en el intestino por la acción de ácidos o enzimas digestivas presentes en el tubo digestivo superior humano, en particular en el intestino delgado y el estómago, y son fermentados por la microbiota intestinal humana. Por ejemplo, la sacarosa, la lactosa, la maltosa y las maltodextrinas comunes se consideran digeribles.
[0014] Preferiblemente, la presente composición comprende oligosacáridos no digeribles con un GP en el rango de 2 a 250, más preferiblemente de 2 a 60. El oligosacárido no digerible es preferiblemente al menos uno, más preferiblemente al menos dos, preferiblemente al menos tres seleccionados del grupo formado por fructooligosacáridos, galactooligosacáridos, xilooligosacáridos, arabinooligosacáridos, arabinogalactooligosacáridos, glucooligosacáridos, quitooligosacáridos, glucomanooligosacáridos, galactomanooligosacáridos, mananooligosacáridos, oligosacáridos que comprenden ácido siálico y oligosacáridos de ácido urónico. El grupo de los fructooligosacáridos incluye inulinas, el grupo de los galactooligosacáridos incluye transgalactooligosacáridos o beta-galactooligosacáridos, el grupo de los glucooligosacáridos incluye ciclodextrinas, gentio- y nigerooligosacáridos y polidextrosa no digerible, el grupo de los galactomanooligosacáridos incluye goma guar parcialmente hidrolizada, y el grupo de los oligosacáridos de ácido urónico incluye oligosacáridos de ácido galacturónico y productos de degradación de pectina.
[0015] Más preferiblemente, la presente composición comprende al menos uno, más preferiblemente al menos dos, más preferiblemente tres seleccionados del grupo que consiste en fructooligosacáridos, betagalactooligosacáridos y oligosacáridos de ácido urónico. Más preferiblemente la composición comprende betagalactooligosacáridos.
[0016] En una forma de realización preferida, la composición comprende una mezcla de inulina y fructooligosacáridos de cadena corta. En una forma de realización preferida, la composición comprende una mezcla de galactooligosacáridos y fructooligosacáridos seleccionados del grupo que consiste en fructooligosacáridos de cadena corta e inulina, más preferiblemente inulina. Una mezcla de al menos dos oligosacáridos no digeribles diferentes estimula ventajosamente en mayor medida las bacterias beneficiosas de la microbiota intestinal. Preferiblemente, la relación en peso en una mezcla de dos oligosacáridos no digeribles diferentes, preferiblemente galactooligosacáridos y fructooligosacáridos, está entre 25 y 0,05, más preferiblemente entre 20 y 1. Los galactooligosacáridos, preferiblemente beta-galactooligosacáridos, son más capaces de estimular las bifidobacterias. Preferiblemente, la presente composición comprende galactooligosacáridos, preferiblemente beta-galactooligosacáridos, con un grado de polimerización (GP) de 2 a 10 y/o fructooligosacáridos con un GP de 2 a 60.
[0017] Los galactooligosacáridos son preferiblemente beta-galactooligosacáridos. En una forma de realización particularmente preferida, la presente composición comprende beta-galactooligosacáridos ([galactosa]n-glucosa; en donde n es un número entero que oscila entre 2 y 60, es decir, 2, 3, 4, 5, 6, ...., 59,60; preferiblemente n se selecciona de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), donde las unidades de galactosa están en su mayoría unidas entre sí a través de un enlace beta. Los beta-galactooligosacáridos también se conocen como trans-galactooligosacáridos (TOS). Los beta-galactooligosacáridos se venden, por ejemplo, con la marca registrada Vivinal(™) (Borculo Domo Ingredients, Países Bajos). Otra fuente adecuada es Bi2Munno (Classado). Preferiblemente, el TOS comprende al menos un 80 % de enlaces beta-1,4 y beta-1,6 con respecto a los enlaces totales, más preferiblemente al menos un 90 %.
[0018] El fructooligosacárido es un OND que comprende una cadena de unidades de fructosa unidas por enlaces beta con un GP o un GP medio de 2 a 250, más preferiblemente de 2 a 100, aún más preferiblemente de 10 a 60. El fructooligosacárido incluye inulina, levano y/o un tipo mixto de polifructano. Un fructooligosacárido especialmente preferido es la inulina. Los fructooligosacáridos adecuados para su uso en las composiciones también están disponibles comercialmente, por ejemplo, Raftiline®HP (Orafti). Preferiblemente, el fructooligosacárido tiene un GP medio superior a 20.
[0019] Los oligosacáridos de ácido urónico se obtienen preferiblemente a partir de productos de degradación de pectina. Por tanto, la presente composición comprende preferiblemente un producto de degradación de pectina con un GP de 2 a 100. Preferiblemente, el producto de degradación de pectina se prepara a partir de pectina de manzana, pectina de remolacha y/o pectina de cítricos. Preferiblemente, el oligosacárido de ácido urónico es un oligosacárido de ácido galacturónico. Preferiblemente, la composición comprende 2'-FL y uno del grupo seleccionado entre galactooligosacárido y oligosacárido de ácido urónico.
[0020] Además de FL, de la manera más preferible la composición comprende beta-galactooligosacárido, fructooligosacárido y un oligosacárido de ácido urónico. Se descubrió que dicha combinación actúa sinérgicamente con la fucosil lactosa, en particular con la 2'-fucosil lactosa. La relación en peso de betagalactooligosacárido:fructooligosacárido:oligosacárido de ácido urónico es preferiblemente de (20 a 2):1:(1 a 20), más preferiblemente de (20 a 2):1:(1 a 10), incluso más preferiblemente de (20 a 2):1:(1 a 3), incluso más preferiblemente de (12 a 7):1:(1 a 2). De la manera más preferible, la relación en peso es de aproximadamente de 9:1:1,1. Preferiblemente, la proporción en peso de FL a beta-galactooligosacárido, preferiblemente TOS, es de 5 a 0,05, más preferiblemente de 5 a 0,1, más preferiblemente de 2 a 0,1. Preferiblemente, la proporción en peso de FL a fructooligosacárido, preferiblemente inulina, es de 10 a 0,05, más preferiblemente de 10 a 0,1, más preferiblemente de 2 a 0,5. Preferiblemente, la proporción en peso de FL a oligosacárido de ácido urónico, preferiblemente derivado de pectina, es de 10 a 0,05, más preferiblemente de 10 a 0,1, más preferiblemente de 2 a 0,5.
[0021] Preferiblemente, la composición comprende de 80 mg a 4 g de oligosacáridos no digeribles, incluida la 2'-fucosil lactosa, por 100 ml, más preferiblemente de 150 mg a 2 g, aún más preferiblemente de 300 mg a 1 g de oligosacáridos no digeribles por 100 ml. Con respecto al peso en seco, la composición comprende preferiblemente del 0,25 % en peso al 25 % en peso de oligosacáridos no digeribles que incluyen 2'-fucosil lactosa, más preferiblemente del 0,5 % en peso al 10 % en peso, incluso más preferiblemente del 1,5 % en peso al 7,5 % en peso. Una cantidad menor de oligosacáridos no digeribles será menos eficaz para estimular las bacterias beneficiosas en la microbiota, mientras que una cantidad demasiado alta provocará efectos secundarios de hinchazón y molestias abdominales.
Composición nutricional
[0022] Preferiblemente, la composición que comprende 2'-fucosil lactosa es una composición nutricional. La composición para usar en la presente invención no es leche humana. La presente composición se administra preferiblemente por vía enteral, más preferiblemente por vía oral.
[0023] La presente composición es preferiblemente una leche maternizada nutricional, preferiblemente una leche maternizada infantil. La presente composición se puede aplicar ventajosamente como alimento completo para lactantes. La presente composición comprende preferiblemente un componente lipídico, un componente proteico y un componente carbohidrato y se administra preferiblemente en forma líquida. La presente composición para su uso en la invención incluye alimento seco, preferiblemente en polvo, que va acompañado de instrucciones para mezclar dicha mezcla de alimento seco con un líquido adecuado, preferiblemente con agua.
[0024] La presente invención proporciona ventajosamente una composición en la que el componente lipídico proporciona del 5 al 50 % de las calorías totales, el componente proteico proporciona del 5 al 50 % de las calorías totales y el componente carbohidrato digerible proporciona del 15 al 85 % de las calorías totales. La presente invención proporciona ventajosamente una composición en la que el componente lipídico proporciona del 20 al 50 % de las calorías totales, el componente proteico proporciona del 5 al 30 % de las calorías totales y el componente carbohidrato digerible proporciona del 30 al 70 % de las calorías totales. Preferiblemente, en la presente composición el componente lipídico proporciona del 35 al 50 % de las calorías totales, el componente proteico proporciona del 7,5 al 12,5 % de las calorías totales y el componente carbohidrato digerible proporciona del 40 al 55 % de las calorías totales. Para el cálculo del % de calorías totales para el componente proteico, se debe tener en cuenta la energía total proporcionada por las proteínas, los péptidos y los aminoácidos.
[0025] La presente composición comprende preferiblemente al menos un lípido seleccionado del grupo que consiste en lípidos animales, excluyendo lípidos humanos y lípidos vegetales. Preferiblemente, la presente composición comprende una combinación de lípidos vegetales y al menos un aceite seleccionado del grupo que consiste en aceite de pescado, aceite animal, aceite de algas, aceite fúngico y aceite bacteriano. La presente composición comprende preferiblemente ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (LC-PUFA). Los LC-PUFA son ácidos grasos o cadenas de acilo graso con una longitud de 20 a 24 átomos de carbono, preferiblemente 20 o 22 átomos de carbono, que comprenden dos o más enlaces insaturados. Más preferiblemente, la presente composición comprende ácido eicosapentaenoico (EPA, n-3), ácido docosahexaenoico (DHA, n-3) y/o ácido araquidónico (ARA, n-6).
[0026] Preferiblemente, la presente composición comprende al menos el 0,1 % en peso, preferiblemente al menos el 0,25 % en peso, más preferiblemente al menos el 0,6 % en peso, incluso más preferiblemente al menos el 0,75 % en peso de LC-PUFA con 20 y 22 átomos de carbono con respecto contenido de materia grasa total.
[0027] El contenido de LC-PUFA, particularmente el LC-PUFA con 20 y 22 átomos de carbono, preferiblemente no supera el 6 % en peso, más preferiblemente no supera el 3 % en peso del contenido de materia grasa total, ya que es deseable imitar al máximo la leche humana. Los LC-PUFA se pueden proporcionar como ácidos grasos libres, en forma de triglicéridos, en forma de diglicéridos, en forma de monoglicéridos, en forma de fosfolípidos o como una mezcla de uno o más de los anteriores. La presente composición comprende preferiblemente entre el 5 y el 75 % en peso de ácidos grasos poliinsaturados con respecto al contenido de materia grasa total, preferiblemente entre el 10 y el 50 % en peso.
[0028] La proteína utilizada en la composición nutricional se selecciona preferiblemente del grupo formado por proteínas animales no humanas (preferiblemente proteínas de la leche), proteínas vegetales (preferiblemente proteína de soja y/o proteína de arroz), hidrolizados de estas, aminoácidos libres y sus mezclas. La presente composición contiene preferiblemente caseína, suero, caseína hidrolizada y/o proteína de suero hidrolizada. Preferiblemente, la proteína comprende proteínas intactas, más preferiblemente proteínas de suero bovino intactas y/o caseínas bovinas intactas.
[0029] La presente composición contiene preferiblemente carbohidratos digeribles seleccionados del grupo que consiste en sacarosa, lactosa, glucosa, fructosa, sólidos de jarabe de maíz, almidón y maltodextrinas, más preferiblemente lactosa.
[0030] En vista de lo anterior, también es importante que el alimento líquido no tenga una densidad calórica excesiva, pero que proporcione suficientes calorías para alimentar al sujeto. Por tanto, el alimento líquido tiene preferiblemente una densidad calórica de entre 0,1 y 2,5 kcal/ml, incluso más preferiblemente una densidad calórica de entre 0,5 y 1,5 kcal/ml, de la manera más preferible entre 0,6 y 0,8 kcal/ml
[0031] Preferiblemente la presente composición comprende nucleótidos y/o nucleósidos, más preferiblemente nucleótidos. Preferiblemente, la composición comprende citidina 5'-monofosfato, uridina 5'-monofosfato, adenosina 5'-monofosfato, guanosina 5'-monofosfato y/o inosina 5'-monofosfato, más preferiblemente citidina 5'-monofosfato, uridina 5'-monofosfato, monofosfato, adenosina 5'-monofosfato, guanosina 5'-monofosfato y inosina 5'-monofosfato. Preferiblemente, la composición comprende de 5 a 100, más preferiblemente de 5 a 50 mg, de la manera más preferible de 10 a 50 mg de nucleótidos y/o nucleósidos por 100 gramos de peso seco de la composición. La presencia de nucleótidos y/o nucleótidos estimula ventajosamente la actividad de las células NK. Se considera que los nucleótidos y/o nucleósidos actúan sinérgicamente con la fucosil lactosa de la presente composición.
Aplicación
[0032] Las células NK son un tipo de linfocitos citotóxicos que constituyen un componente importante del sistema inmunitario innato. Las células NK desempeñan un papel importante en la defensa contra las infecciones intracelulares. Las células NK se definen como linfocitos grandes granulares que no expresan receptores de antígeno de los linfocitos T (TCR) o marcador Pan T CD3 o inmunoglobulinas de superficie (Ig) de receptor de linfocitos B pero que generalmente expresan los marcadores de superficie CD16 (FcyRIII) y CD56 en humanos. Se las denominó "asesinas naturales" (Natural Killers, en inglés) debido a la noción inicial de que no requieren activación para destruir las células a las que les faltan los "automarcadores" del complejo mayor de histocompatibilidad (CMH) de clase I. Las células NK tienen dos tipos principales de función efectora; la destrucción celular y la secreción de citocinas. El aumento de la actividad de las células NK (al aumentar el número de células Nk y/o al aumentar la actividad específica de una célula NK), da como resultado una mayor resistencia contra las infecciones víricas. En una forma de realización preferida, la presente invención se usa para pacientes con VIH. En una forma de realización, la presente invención se refiere a proporcionar alimento a un paciente con VIH. La presente composición es ventajosa para pacientes con VIH, ya que los pacientes con VIH tienen una actividad disminuida de las células asesinas naturales.
[0033] Por lo tanto, el uso de una composición nutricional que comprende 2'-fucosil lactosa es especialmente beneficioso para la leche maternizada infantil. En una forma de realización, la presente invención se refiere a proporcionar alimento a un lactante. Los lactantes alimentados con leche maternizada tienen un sistema inmunitario subdesarrollado en comparación con los adultos y son más propensos a las infecciones víricas que los lactantes alimentados con leche humana. Preferiblemente, el lactante tiene de 0 a 36 meses de edad, más preferiblemente de 0 a 18 meses, incluso más preferiblemente de 0 a 12 meses, de la manera más preferible de 0 a 6 meses de edad. Cuanto más pequeño es el lactante, menos desarrollado está el sistema inmunitario [0034] La composición que comprende 2'-fucosil lactosa se utiliza incluso más ventajosamente en lactantes prematuros y/o lactantes de muy bajo o bajo peso al nacer, ya que estos lactantes son aún más vulnerables y/o propensos a infecciones víricas.
[0035] La composición que comprende 2'-fucosil lactosa se usa incluso más ventajosamente en bebés nacidos por cesárea. Los bebés nacidos por cesárea nacen en un hospital en un ambiente que tiene más patógenos contra los cuales los anticuerpos, que aporta la madre al bebé, no son efectivos. Los bebés nacidos por cesárea tienen una colonización tardía y menos óptima del intestino grueso y, por lo tanto, también son más propensos a las infecciones intestinales.
[0036] La composición que comprende 2'-fucosil lactosa se utiliza ventajosamente para la alimentación de personas mayores. En una forma de realización, la presente invención se refiere a proporcionar alimento a una persona mayor. Una persona mayor es una persona que tiene una edad de 55 años o más, en particular de 65 años o más. Las personas mayores tienen una menor actividad demostrada de la actividad de las células asesinas naturales que los adultos jóvenes sanos. Las personas mayores son especialmente vulnerables a las complicaciones de las infecciones víricas. En una forma de realización preferida, la presente invención se usa para el tratamiento y/o la prevención de la inmunosenescencia en personas mayores. Las personas mayores son más propensas al desarrollo de tumores. La actividad de las células NK suprime la proliferación de células tumorales. En una forma de realización preferida, la presente invención se usa para la alimentación de pacientes con cáncer. Los pacientes oncológicos tienen una menor actividad de células asesinas naturales que los adultos jóvenes sanos.
Ejemplos
Ejemplo 1: (ilustrativo)
Materiales y métodos
[0037] Ratones hembra C57BL/6 de 6-8 semanas de edad (Charles River) recibieron dietas semipurificadas basadas en AIN-93G (Research Diet Service, Wijk bij Duurstede, Países Bajos), que comprendían
1) 2 % en peso de betagalactooligosacárido (GOS; fuente Vivinal GOS, Borculo Domo), fructooligosacárido (FOS; fuente RaftilineHP, Orafti) y oligosacárido de ácido galacturónico (fuente AOS) en una proporción de 9:1:1,1. Los AOS se producen a partir de pectina (Südzucker AG, Mannheim, Alemania), con un GP de 1­ 20. Consiste en aproximadamente un 75 % de oligómeros de ácido galacturónico, con respecto al peso total;
2) 1 % en peso de lactoneotetraosa (LNnT),
3) 1 % en peso de 3'-sialil lactosa (3'-SL), o
4) 1 % en peso de 2'-fucosil lactosa (2'-FL).
[0038] Todos los grupos se compararon con la dieta de control sin suplementos. La suplementación dietética comenzó 14 días antes de la primera vacunación y duró hasta el final del experimento, 31 días después de la primera vacunación.
[0039] Los experimentos de vacunación se realizaron con Influvac (Solvay Pharmaceuticals, Weesp, Países Bajos) desde la temporada 2005/2006. Los ratones recibieron una vacunación primaria y una vacunación de refuerzo, consistente en una inyección subcutánea (sc) de una mezcla 1:1 de vacuna y adyuvante en un volumen total de 100 |_il. La vacunación de refuerzo se administró a los 21 días después de la vacunación primaria. Los experimentos terminaron 10 días después de la vacunación de refuerzo. Se tomaron muestras de sangre al final del experimento. Los grupos de control negativo que se incluyeron recibieron inyecciones con una mezcla 1:1 de PBS y adyuvante en un volumen total de 100 |_il. Para determinar el porcentaje de células NK, las células se marcaron con mAb anti- CD3 de ratón marcado con FITC en combinación con mAb anti NK1.1 de ratón marcado con PE. La citotoxicidad de las células NK en suspensiones de células de bazo se analizó utilizando ensayos de liberación de 51Cr. Brevemente, la citotoxicidad de las células NK se analizó usando células diana YAC-1. El porcentaje de liberación de 51Cr se calculó como el porcentaje de lisis específica = (liberación experimental -liberación espontánea)/(liberación total con detergente - liberación espontánea) x 100. Los valores de liberación espontánea siempre fueron <15 % de la lisis total.
[0040] El porcentaje de linfocitos T reguladores (Treg) se determinó por citometría de flujo (FACSCalibur) usando mAb anti CD3 de ratón marcado con aloficocianina (APC), mAb anti CD4 de ratón marcado con Pe-Cy5 y mAb anti CD4 de ratón marcado con ficoeritrina (PE). mAb CD25 en combinación con tinción intracelular de mAb Foxp3 marcado con isotiocianato de fluoresceína (FITC), según las instrucciones ofrecidas por los fabricantes (eBiosciences, San Diego, CA).
[0041] Se realizó un análisis estadístico utilizando el programa informático GraphPadPrism. Las diferencias estadísticas entre los grupos de prueba y de control se analizaron mediante ANOVA y la prueba de Dunnett post hoc si se comparaban varios grupos con un único grupo (de control). Los valores de p < 0,05 se consideraron significativos en todos los experimentos.
Resultados
[0042] El efecto inmunomodulador de tres oligosacáridos humanos sintetizados químicamente se comparó con GOS/FOS/AOS. La suplementación con GOS/FOS/AOS, LNnT, 2'-FL o 3'-SL resultó en un aumento significativo de la respuesta DTH, un parámetro dependiente de TH1, en comparación con los animales alimentados con el control.
[0043] Curiosamente, el porcentaje de células NK en el bazo aumentó significativamente en ratones que recibieron el suplemento de oligosacáridos humanos en comparación con los ratones de control y que recibieron el suplemento de GOS/FOS/AOS, véase la tabla 1. Este efecto fue mayor con 2'-FL. Para examinar si el aumento en el porcentaje de células NK en los grupos con suplemento de oligosacáridos humanos también estaba correlacionado con la actividad funcional, se midió la actividad de las células NK en esplenocitos de ratón. Se detectó un aumento significativo de la actividad de las células NK en los esplenocitos de los ratones que habían recibido sumplemento de 2'-FL en comparación con los controles, véase la Tabla 1.
Tabla 1: Efecto del OND dietético similar al OND de la leche humana sobre las células NK y la actividad de las células NK.
Figure imgf000007_0001
[0044] Finalmente, la cantidad de linfocitos T reguladores (Treg) disminuyó al máximo con la dieta con FL, como se puede ver en la Tabla 2.
Tabla 2: Efecto del OND dietético similar al OND de la leche humana sobre el porcentaje de linfocitos T ______________________ reguladores Treg.______________________ Intervención dietética Porcentaje de Treg (EEM)
Control simulado 3,6 (0,4)
Control 3,9 (0,2)
SMO/F 4,1 (0,3)
LNnT 3,2 (0,2)
3'-SL
Figure imgf000008_0001
2,8 (0,2)*
2'-FL 2,8 (0,2)*
* indica p <0,05 en comparación con el grupo d
Figure imgf000008_0002
[0045] La disminución de los linfocitos T reguladores es indicativa de una disminución de la inhibición de la respuesta inmunitaria y, por lo tanto, permite una mayor respuesta de vacunación a los antígenos virales. Una disminución temporal de los linfocitos T reguladores puede ser especialmente beneficiosa cuando se va a realizar la vacunación.
[0046] En general, estos resultados respaldan que la suplementación oral con 2'-FL estimula el crecimiento y/o la actividad de las células NK. Estos resultados son indicativos de un efecto de la 2'-FL dietética para potenciar la respuesta a la vacunación, en particular la vacunación con antígenos virales. Estos resultados son indicativos de un efecto de la 2'-FL dietética para tratar y/o prevenir infecciones víricas.
Ejemplo 2 (ilustrativo)
[0047] Leche maternizada infantil para estimular la actividad de las células NK que comprende por 100 ml (13,9 de peso seco):
1,4 g de proteína (suero y caseína)
7,3 g de carbohidratos digeribles (incluida la lactosa)
3,6 g de grasa (grasa vegetal, aceite de pescado)
0,8 g de oligosacáridos no digeribles, entre ellos 80 mg de 2'-fucosil lactosa y 640 mg de betagalactooligosacáridos, y 80 mg de fructooligosacáridos
[0048] Además, se incluyen: colina, mioinositol, taurina, minerales, oligoelementos y vitaminas como se conocen en la técnica.
Ejemplo 3 (ilustrativo)
[0049] Una composición preferida que se puede usar para la estimulación de la actividad de las células asesinas naturales en pacientes con VIH puede comprender, por 100 g de peso en seco:
Fibra dietética 5-50 g
Fructooligosacárido 5 % de fibra dietética total Galactooligosacárido 40 % de fibra dietética total
Hidrolizado de pectina 50 % de fibra dietética total
2'-FL 5 % de fibra dietética total
N-acetilcisteína 0,5-5 g
Carbohidratos (no fibra dietética) 2-20 g
Grasa 4-20 g

Claims (12)

REIVINDICACIONES
1. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso en el tratamiento y/o la prevención de la diarrea vírica causada por rotavirus, donde dicha composición no es leche humana.
2. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según la reivindicación 1 en lactantes, pacientes con VIH, personas mayores y/o pacientes oncológicos.
3. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para proporcionar alimento a un lactante.
4. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en lactantes prematuros y/o lactantes de bajo o muy bajo peso al nacer.
5. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en lactantes nacidos por cesárea
6. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según la reivindicación 1 o 2 para proporcionar alimento a un paciente con VIH, una persona mayor y/o un paciente oncológico.
7. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición comprende adicionalmente al menos uno seleccionado del grupo que consiste en beta-galactooligosacáridos, fructooligosacáridos y oligosacáridos de ácido urónico.
8. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según la reivindicación 7, en donde la composición comprende adicionalmente beta-galactooligosacáridos.
9. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición comprende ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (LC-PUFA) con una longitud de 20 o 22 átomos de carbono que comprenden dos o más enlaces insaturados.
10. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición comprende nucleótidos y/o nucleósidos, más preferiblemente nucleótidos.
11. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición comprende del 0,07 al 1 % en peso de fucosil lactosa con respecto al peso seco de la composición.
12. Composición que comprende 2'-fucosil lactosa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la composición comprende del 5 al 50 % de proteína, del 15 al 85 % de carbohidratos digeribles y del 5 al 50 % de grasa con respecto a la energía total.
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