ES2904645T3

ES2904645T3 - Derivados de pirrolopirazina como inhibidores de integrina alfa v

Info

Publication number: ES2904645T3
Application number: ES18804882T
Authority: ES
Inventors: Guohua Zhao; James Mignone
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2017-11-07
Filing date: 2018-11-05
Publication date: 2022-04-05
Anticipated expiration: 2038-11-05
Also published as: SG11202004077WA; CA3081805A1; AU2018365793A1; WO2019094319A1; CN111433207B; EA202091136A1; BR112020008893A2; US20210163501A1; JP7291696B2; EP3707142A1; EP3707142B1; MX2020004455A; CN111433207A; IL274425A; KR102700471B1; US11292802B2; JP2021502358A; KR20200084879A

Abstract

Un compuesto de Fórmula I: **(Ver fórmula)** , en la que: X es un enlace, -O-, -S-, -NR7-, alquileno, alquilenoxi, alquilentio o alquileno-NR7-; R1 es hidrógeno, halo o alquilo; R2 es (piridinil)amino, tetrahidronaftiridinilo o naftiridinilo, y está sustituido con 0-2 sustituyentes alquilo; R3 es hidrógeno, halo o alquilo; R4 es hidrógeno o Ar1; R5 es hidrógeno, benciloxicarbonilamino o Ar1SO2NH; R6 es hidrógeno; R7 es hidrógeno o alquilo; y Ar1 es: fenilo, naftilo, dihidrobenzofuranilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolinilo o quinoxalinilo, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados a partir de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, (cicloalquil)alcoxi, y haloalcoxi; o un estereoisómero, un tautómero, una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de pirrolopirazina como inhibidores de integrina alfa v

Antecedentes de la invención

La descripción se refiere a compuestos de pirrolopirazina como inhibidores de av integrina, composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos y a su uso en terapia, especialmente en el tratamiento o en la profilaxis de enfermedades, trastornos, y condiciones para las cuales un inhibidor de integrina av está indicado en un humano.

Las integrinas pertenecen a una gran familia de proteínas de transmembrana heterodimérica a/p que participan en la adhesión celular a una amplia variedad de proteínas de matriz extracelular, interacciones célula-célula, migración celular, proliferación, supervivencia y en el mantenimiento de la integridad de los tejidos (Barczyk et al. Cell and Tissue Research 2010, 339, 269; Srichai, M. B.; Zent, R. en Cell-Extracellular Matrix Interactions in Cáncer, 2010). En mamíferos, existen 24 heterodímeros de integrina a/p conocidos por diversas combinaciones de subunidades de 18 alfa y 8 beta. La transformación del factor de crecimiento-p (TGF-p, por sus siglas en inglés) tiene la función central de impulsar una cantidad de procesos patológicos que causan fibrosis, crecimiento celular y enfermedades autoinmunitarias. Las integrinas alfa V (aV), que incluyen aVpl, aVp3, aVp5, aVp6 y aVp8, participan en una trayectoria crítica que conduce a la conversión de TGF-p latente en su forma activa (Henderson, N. C.; Sheppard, D. Biochim, Biophys. Acta 2013, 1832, 891). De este modo, el antagonismo de tal activación mediada por la integrina aV del TGF-p latente proporciona un procedimiento terapéutico viable para intervenir en los estados patológicos impulsados por TGF-6-(Sheppard, D. Eur. Resp. Rev. 2008, 17, 157; Goodman, S. L.; Picard, M. Trends Pharmacol. Sciences 2012, 33(7), 405; Hinz, B. Nature Medicine 2013, 19(12), 1567; Pozzi, A.; Zent, R. J. Am. Soc. Nephrol. 2013, 24(7), 1034. Las cinco integrinas aV pertenecen a un subconjunto pequeño (8 de 24) de integrinas que reconocen la porción del ácido de Arginina-Glicina-Aspartato (RGD) presente en sus ligandos nativos, tales como fibronectina, vitronectina y el péptido asociado a la latencia (LAP, por sus siglas en inglés).

La expresión de los subtipos de integrina aV varía significativamente. Por ejemplo, aVp6 se expresa en células epiteliales a niveles muy bajos en el tejido sano pero se regula de manera ascendente durante la inflamación y la cicatrización. aVp3 y aVp5 se expresan en osteoclastos, células endoteliales, células del músculo liso y células tumorales sólidas, así como en pericitos y podocitos, mientras que aVp1 se expresa en fibroblastos activados y células mesangiales.

Las condiciones fibróticas que representan la mayor parte de las necesidades médicas no satisfechas son fibrosis pulmonar idiopática (IPF, por sus siglas en inglés), fibrosis hepática y renal, enfermedad de hígado graso no alcohólica (NAFLD, por sus siglas en inglés), esteatohepatitis no alcohólica (NASH, por sus siglas en inglés), así como esclerosis sistémica. Dos fármacos, pirfenidona y nintedanib, que actúan como mecanismos no mediados por la integrina, se aprobaron recientemente para el tratamiento de IPF. La presente invención se refiere a compuestos que inhiben o antagonizan la acción de una o más de las integrinas aV en el tratamiento de afecciones patológicas, tales como fibrosis y cáncer, mediadas por estas integrinas.

Se ha reportado en la literatura una cantidad de inhibidores de molécula pequeña, peptídicos y basados en anticuerpos selectivos o no selectivos de integrinas aV (Kapp, T. G. et al. Expert Opin. Ther. Patents 2013, 23(10), 1273; O'Day, S. et al. Brit. J. Cancer 2011, 105(3), 346; Pickarski, M. et al. Oncol. Rep. 2015, 33, 2737; Wirth, M. et al. Eur. Urol.

2014, 897; Henderson, N. C. et al. Nature Medicine 2012, 19(12), 1617; Horan, G. S. et al. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2008, 177, 56; Puthawala, K. et al. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2008, 177, 82; Reed, N. I. et al. Sci. Transl. Med.

2015, 7(288), 288ra79; Anderson, N. A. et al. WO 2014/154725 A1, WO 2016/046225 A1, WO 2016/046226 A1, WO 2016/046230 A1, WO 2016/046241 A1).

Descripción de la invención

La descripción se refiere a compuestos de Fórmula I:

los cuales inhiben las integrinas que contienen av, e incluyen composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y para usos en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, o condición asociada a la disregulación de integrinas que contienen aV, tales como fibrosis patológicas, rechazo al transplante, cáncer, osteoporosis, y trastornos inflamatorios.

Un aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I

donde:

X es un enlace, -O-, -S-, -NR7-, alquileno, alquilenoxi, alquilentio, o alquileno-NR7-;

R1 es hidrógeno, halo, o alquilo;

R2 es (piridinil)amino, tetrahidronaftiridinilo o naftiridinilo, y es sustituido con 0-2 sustituyentes alquilo;

R3 es hidrógeno, halo, o alquilo;

R4 es hidrógeno o Ar1;

R5 es hidrógeno, benciloxicarbonilamino, o Ar1SO2NH;

R6 es hidrógeno;

R7 es hidrógeno o alquilo; y

Ar1 es fenilo, naftilo, dihidrobenzofuranilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolinilo, o quinoxalinilo, y es sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados a partir de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, (cicloalquil)alcoxi, y haloalcoxi;

o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde X es un enlace o alquileno.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde R1 es hidrógeno o halo.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde R3 es hidrógeno.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde R4 es Ar1 y R5 es hidrógeno.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde R4 es hidrógeno y R5 es benciloxicarbonilamino o Ar1SO2NH.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula I donde Ar1 es fenilo, piridinilo, o pirimidinilo, y es sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados a partir de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, (cicloalquil)alcoxi, y haloalcoxi.

Para un compuesto de Fórmula I, el alcance de cualquier instancia de un sustituyente variable, que incluye X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, y Ar1 puede ser usado independientemente con el alcance de cualquier otra instancia de un sustituyente variable. Como tal, la invención incluye combinaciones de los diferentes aspectos.

A menos que se especifique de otro modo, estos términos tienen los siguientes significados. "Alquilo" significa un grupo alquilo recto o ramificado compuesto de 1 a 6 carbonos. "Alquenilo" significa un grupo alquilo recto o ramificado compuesto de 2 a 6 carbonos con al menos un enlace doble. "Alquinilo" significa un grupo alquilo recto o ramificado compuesto de 2 a 6 carbonos con al menos un enlace triple. "Cicloalquilo" significa un sistema de anillo monocíclico compuesto de 3 a 7 carbonos. Los términos con una porción hidrocarburo (por ejemplo, alcoxi), incluyen isómeros rectos y ramificados para la porción de hidrocarburo. "Halo" incluye fluoro, cloro, bromo, y yodo. "Haloalquilo" y "haloalcoxi" incluyen todos los isómeros halogenados de monohalo a perhalo "Arilo" significa grupos hidrocarburos aromáticos monocíclicos o bicíclicos que tienen 6 a 12 átomos de carbono, o un sistema de anillo fusionado bicíclico en donde uno o ambos de los anillos es aromático. Los sistemas de anillos fusionados bicíclicos consisten de un grupo fenilo fusionado a un anillo carbocíclico aromático o no aromático de cuatro a siete elementos. Ejemplos representativos de grupos arilo incluyen, pero no se limitan a, fenilo, indanilo, indenilo, naftilo, y tetrahidronaftilo. "Heteroarilo" significa un sistema de anillo aromático monocíclico de 5 a 7 elementos o bicíclico de 8 a 11 elementos con 1-5 heteroátomos seleccionados independientemente a partir de nitrógeno, oxígeno, y azufre. Donde una ubicación de unión de enlace no es especificada, el enlace puede ser unido en cualquier ubicación apropiada como se entiende por los practicantes en la técnica. Las combinaciones de sustituyentes y asociados de unión son solamente aquellas que resultan en compuestos estables como se entiende por practicantes en la técnica. Los términos en paréntesis y paréntesis múltiples son propuestos para clarificar las relaciones de unión con aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, un término tal como ((R)alquilo) significa un sustituyente alquilo sustituido además con un sustituyente R.

La invención incluye todas las formas de sal farmacéuticamente aceptable de los compuestos. Las sales farmacéuticamente aceptables son aquellas en las cuales los contraiones no contribuyen significantemente a la actividad fisiológica o toxicidad de los compuestos y como tal, funcional como equivalentes farmacológicos. Estas sales pueden ser elaboradas de conformidad con las técnicas orgánicas comunes empleando reactivos comercialmente disponibles. Algunas formas de sal aniónica incluyen acetato, acistrato, besilato, bromuro, cloruro, citrato, fumarato, glucouronato, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, yoduro, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato, y xinofoato. Algunas formas de sal catiónica incluyen amonio, aluminio, benzatina, bismuto, calcio, colina, dietilamina, dietanolamina, litio, magnesio, meglumina, 4-fenilciclohexilamina, piperazina, potasio, sodio, trometamina, y cinc.

Algunos de los compuestos de la invención pueden existir en formas estereoisoméricas. La invención incluye todas las formas estereoisoméricas de los compuestos que incluyen enantiómeros y diastereómeros. Los métodos para elaborar y separar estereoisómeros se conocen en la técnica. La invención incluye todas las formas tautoméricas de los compuestos. La invención incluye atropisómeros e isómeros rotacionales.

La invención incluye todos los isótopos de átomos que se originan en los compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números de masa. Por medio del ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos isotópicamente etiquetados pueden en general, ser preparados por técnicas convencionales conocidas por aquellos expertos en la técnica o por procesos análogos a aquellos descritos en la presente, usando un reactivo isotópicamente etiquetado apropiado en lugar del reactivo no etiquetado de otro modo empleado. Tales compuestos pueden tener varios usos potenciales, por ejemplo, como estándares y reactivos para determinar la actividad biológica. En el caso de isótopos estables, tales compuestos pueden tener el potencial para modificar favorablemente las propiedades biológicas, farmacológicas, o farmacocinéticas.

MÉTODOS DE SÍNTESIS

Los compuestos de esta invención pueden ser elaborados por varios métodos conocidos en la técnica que incluyen aquellos de los siguientes esquemas de reacción y en la sección de modalidades específicas. La numeración de la estructura y numeración variable mostrada en los esquemas de reacción de síntesis son distintos de, y no deben ser confundidos con, la estructura o numeración variable en las reivindicaciones o el resto de la especificación. Las variables en los esquemas de reacción están significando solamente para ilustrar cómo elaborar algunos de los compuestos de esta invención.

Los análogos de pirrolona de Fórmula (I') pueden ser preparados de conformidad con las turas generales mostradas en los Esquemas de reacción 1 a 4. Dependiendo de la molécula particular de la Fórmula (I') que es preparada, R1, R2-X-, R3, R4, y R5 pueden ser ya sea completamente instalados previo a, o elaborados después del ensamblaje de la estructura de núcleo de dihidropirrolopirazinona de Fórmula (I'). Como se muestra en el Esquema de reacción 1, el pirrol éster 4 puede ser sintetizado a partir de pirrol éster 1 mediante reacción de Suzuki o reacción de Stille como se describe en Tetrahedron Lett. 2003, 44, 427 (Handy, et al.). Alternativamente, el pirrol éster 4 puede ser elaborado ya sea a partir del 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo correspondiente por transformaciones de síntesis conocidas por aquellos expertos en la técnica o mediante ciclización de sal de vinamidinio 2 y éster de glicina 4 usando los procedimientos de Gupton et al. (J. Org. Chem. 1990, 55, 4735). La sal de vinamidinio 2 es ya sea comercialmente disponible o puede ser sintetizada usando los procedimientos de Davies et al. (J. Org. Chem. 2001,66, 251; sales de hexafluorofosfato) o los procedimientos de Arnold et al. (Collect. Czech. Chem. Commun. 1973, 38, 2633; sales de perclorato). El ácido pirrolcarboxílico 5 puede ser sintetizado por la saponificación del pirrol éster 4 con una base tal como NaOH, KOH o LiOH, en un solvente tal como EtOH o MeOH, seguido por acidificación con un ácido tal como HCl o H2SO4. Los compuestos de Fórmula (I'), cuando R6 = H, se pueden obtener por la formación del enlace amida entre el amino éster 6 con ácido pirrolcarboxílico 5 usando una de la variedad de procedimientos conducivos a la formación de amida conocidos por aquellos expertos en la técnica, la dialquilación con compuestos de Fórmula 7, los cuales son comercialmente disponibles o pueden ser preparados usando los procedimientos fácilmente conocidos por aquellos expertos en la técnica, en la presencia de una base tal como NaH, KOtBu, Et3N, /P^NEt, NaOH/ Bu4NBr etc., donde X = halógeno, OTs, OMs, y la desprotección subsecuente del éster carboxílico resultante. Alternativamente, el producto de dialquilación puede ser sintetizado por la reacción de la amida resultante a partir de un amino éster 6 y ácido pirrolcarboxílico 5 con triflato de difenilvinilsulfonio (8) en la presencia de KOH (An et al. Chem. Commun., 2011, 47, 1869). Los amino ásteres 6 pueden ser preparados usando los métodos conocidos en la literatura (por ejemplo, Hutchinson, J. H. et al. J. Med Chem. 2003, 46, 4790; Henderson, N. C. et al. Nature Medicine 2013, 19, 1617).

Esquema de reacción 1: Esquema de reacción general para la preparación de compuestos de fórmula (I’)(R6 = H)

reactivo de acoplamiento

2. X ^ x 7 / base

3. desprotección de áster

La síntesis de compuestos de Fórmula (I’) (R6 = H; Fórmulas 15, y 16) los cuales contienen tetrahidronaftiridinas como un mimético de Arginina se ilustra en el Esquema de reacción 2. El pirrol áster 4 puede ser convertido a áster de cetona 11 por acoplamiento con a) alqueno de cetona 9 o b) hidroxilalquilalqueno 10 bajo condiciones estándares de acoplamiento de Heck (Felpin, F.-X.; Nassar-Hardy, L.; Le Callonnec, F.; Fouquet, E. Tetrahedron 2011, 67, 2815 2831) y oxidación subsecuente del alcohol resultante. El áster de naftiridina 12 puede ser formado por la condensación de áster de cetona 11 con 2-amino-3-formilpiridina bajo condiciones de Friedlander (Jose Marco-Contelles; Elena Perez-Mayoral; Abdelouahid Samadi; María do Carmo Carreiras; Elena Soriano (2009). "Recent Advances in the Friedlander Reaction". Chemical Reviews. 109 (6): 2652-2671). La naftiridin amida 14 se puede obtener por acoplamiento del ácido carboxílico resultante a partir de la desprotección de áster de naftiridina 12 con el amino áster 6 usando una de la variedad de procedimientos de formación de amida conocidos por aquellos expertos en la tácnica. Los ácidos de tetrahidronaftiridina 15 (mayor) y 16 (menor) pueden ser sintetizados por la dialquilación con naftiridin amida 14 en la presencia de una base tal como NaH, KOtBu, Et3N, iP^NEt, NaOH/ Bu4NBr etc., donde X = halógeno, OTs, OMs, o alternativamente, la reacción de naftiridin amida 14 con triflato de difenilvinilsulfonio (8) en la presencia de KOH, la reducción selectiva del anillo, del anillo de naftiridina en la presencia de un catalizador tal como PtO2 y la desprotección subsecuente del áster carboxílico resultante. Los ácidos de tetrahidronaftiridina 15 y 16 tambián pueden ser preparados por la condensación del áster de aldehído 17 con un material de partida que tiene un anillo de naftiridina pre-formado, tal como metil naftiridina, en la presencia de sulfonamida, tal como p-tosilamida (Yizhe Yan; Kun Xu; Yang Fang; y Zhiyong Wang. J. Org. Chem. 2011, 76, 6849-6855), y empleando subsecuentemente el mátodo similar al usado para la conversión de 12 a 15 y 16. Alternativamente, 15 y 16 pueden ser sintetizados por la reducción selectiva del anillo de 12 o 18 para dar el áster de tetrahidronaftiridina 19 (mayor) y 20 (menor) seguido por las transformaciones similares a aquellas usadas para la conversión de 12 a 15 y 16.

Esquema de reacción 2: Esquema de reacción general para la preparación de compuestos de Fórmula (I’)(R6 = H; Fórmula 15 y 16) con tetrahidronaftiridina como un mimético de Arginina (R1)

Esquema de reacción 3: Ejemplo de la síntesis de los compuestos de Fórmula (I’) (R6 = H; Fórmula 25) con 2-aminopiridina como un mimético de Arginina (R1):

Ejemplos de R :

Me, Et, f-Bu, Bn 1. agente de acoplamiento

El Esquema de reacción 3 describe un ejemplo de la síntesis de compuestos de Fórmula (I’) (R6 = H; Formula 25) con 2-aminopiridina como un mimético de Arginina. El amino éster 22 puede ser preparado a partir de pirrol éster 4 por acoplamiento con amino alqueno protegido 21 bajo condiciones de reacción de Heck y desprotección subsecuente. El N-óxido 23 puede ser formado por la sustitución nucleofílica de óxido de 2-cloropiridina con amino éster 22. El ácido de aminopiridina 24 puede ser elaborado por la reducción de N-óxido 23 en la presencia de Pd/C seguido por desprotección de éster. El ácido de aminopiridina 25 se puede obtener a partir del amino éster 6 y ácido de aminopiridina 24 empleando el método similar al usado para la conversión de 5 a compuestos de Fórmula (I’) en el Esquema de reacción 1.

Esquema de reacción 4: Ejemplo de la síntesis de compuestos de Fórmula (I’)(R6 = H; Fórmula 29) con 2-aminodihidroim idazol como un mimético de Arginina (R1):

e ester

1. agente de acoplamiento

3. desproteccion de ester

Un ejemplo de la síntesis de compuestos de Fórmula (I’) (R6 = H; Fórmula 29) con 2-aminodihidroimidazol como un mimético de Arginina se resume en el Esquema de reacción 4. El éster de aminodihidroimidazol 27 puede ser elaborado por la reacción de amino éster 22, descrito anteriormente, con un electrófilo adecuado tal como 2-(metiltio) 4,5-dihidro-1H-imidazol seguido por desprotección de éster. El ácido de aminodihidroimidazol 28 puede ser preparado por la reducción del enlace doble del éster de aminodihidroimidazol 27 en la presencia de Pd/C seguido por desprotección de éster. El ácido de aminopiridina 29 se puede obtener a partir de amino éster 6 y ácido de aminodihidroimidazol 28 utilizando el método similar al usado para la conversión de 5 a compuestos de Fórmula (I') en el Esquema de reacción 1.

MÉTODOS BIOLÓGICOS

Todos los ensayos de unión usan la tecnología HTRF (fluorescencia resuelta en tiempo homogéneo) de Cisbio International, por lo tanto, todos los ensayos son descritos como ensayos de unión a1HTRF. Los resultados del ensayo para los Ejemplos se listan en la Tabla 1, ejemplificado por aVp6(?) humana. Los ensayos de unión de HTRF se establecen para las siguientes integrinas: aVp6 humana, aVpl humana, aVp3 humana, aVp5 humana, y aVp8 humana. Todos los ensayos usan el siguiente amortiguador de ensayo: 20 mM de Tris, pH 7,4, 1 mM de MgCh, 1 mM de MnCl2, 0,01 % de Tween 20, y 0,01 % de BSA. Alternativamente, un ensayo a base de SPA se usó para evaluación de la unión del receptor.

Lo siguiente describe los componentes y un procedimiento representativo para el ensayo de unión de HTRF de aVp6 humana: Se biotiniló la integrina aVp6 humana recombinante (R & D systems, 3817-AV). La integrina aVp6 humana biotinilada se agregó a un recipiente de ensayo a una concentración final de 1,25 nM. Fibronectina conjugada a FITC se agregó entonces (Cytoskeleton, FNR02) a la concentración final de 5 nM. La mezcla se centrifugó a 600 rpm por tres minutos usando centrífuga Thermo Fisher Heraeus Multifuge X3 y después se incubó a temperatura ambiente por una hora. Se agregó entonces estreptavidina de terbio (Cisbio international 610STLB) a la concentración final de 0,625 nM. La mezcla resultante se centrifugó a 600 rpm por tres minutos usando centrífuga Thermo Fisher Heraeus Multifuge X3 y después se incubó a temperatura ambiente durante la noche en la oscuridad antes de leer las señales de HTRF.

El ensayo a base de SPA se llevó a cabo de conformidad con el protocolo y procedimientos similares a los descritos en la siguiente referencia con modificaciones apropiadas con agentes y ligandos los cuales son fácilmente entendidos por un experto en la técnica: Pachter JA, Zhang R, Mayer-Ezell R., "Scintillation proximity assay to measure binding of soluble fibronectin to antibody-captured aVp1 integrin" Anal Biochem. 1995 Sep 1; 230(1):101-7.

Tabla 1.

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y USO TERAPÉUTICO

Otro aspecto de la invención proporciona un compuesto de la presente invención, o un estereoisómero, un tautómero, o una sal farmacéuticamente aceotable o solvato del mismo para uso en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, o condición asociada a la disregulación de integrinas aV en un paciente en necesidad de tal tratamiento.

Otro aspecto de la invención proporciona al menos uno de los compuestos de la presente invención, solo, u, opcionalmente, en combinación con otro compuesto de la presente invención y/o al menos otro tipo de agente terapéutico para uso en el tratamiento de la enfermedad, trastorno o afeccción.

Otro aspecto de la invención proporciona un compuesto de la presente invención, o un estereoisómero, un tautómero, o una sal o solvato del mismo farmacéuticamente aceptable para su uso en la obtención de un efecto antagonista del receptor de la integrina en un paciente. En una modalidad, el efecto antagonizante del receptor de integrina es un efecto antagonizante a cualquiera de aVp6, aVpl, aVp3, aVp5, y aVp8; o una combinación de uno o más de aVp6, aVpl, aVp3, aVp5, y aVp8. Por ejemplo, el efecto antagonizante del receptor de integrina puede ser un efecto antagonizante de aVp6, a V p l, aVp3, aVp5, y aVp8.

Otro aspecto de la invención es donde la enfermedad, trastorno, o condición está asociado a fibrosis, que incluye fibrosis pulmonar, hepática, renal, cardiaca, dermal, ocular, y pancreática.

Otro aspecto de la invención es donde la enfermedad, trastorno, o condición está asociado a trastornos proliferativos celulares, tales como cáncer. En algunas modalidades, el cáncer incluye crecimiento del tumor sólido o neoplasia. En otras modalidades, el cáncer incluye metástasis del tumor. En algunas modalidades, el cáncer es del hígado, sangre, hueso, cerebro, mama, sistema nervioso central, cerviz, colon, endometrio, esófago, vesícula biliar, genitales, tracto genitourinario, cabeza, riñón, laringe, hígado, pulmón, tejido muscular, cabeza, mucosa oral o nasal, ovario, páncreas, próstata, piel, bazo, intestino delgado, intestino grueso, estómago, testículo, o tiroides. En otras modalidades, el cáncer es un carcinoma, sarcoma, linfoma, leucemia, melanoma, mesotelioma, mieloma múltiple, o seminoma. Ejemplos de enfermedades, trastornos, o condiciones asociadas a las actividades de integrinas aV que pueden ser prevenidas, moduladas, o tratadas de conformidad con la presente invención incluyen, pero no se limitan a: inyección por transplante, trastornos fibróticos (por ejemplo, fibrosis pulmonar idiopática (IPF), enfermedad pulmonar intersticial, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis de piel, esclerosis sistémica), trastornos inflamatorios (por ejemplo, hepatitis aguda, hepatitis crónica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), psoriasis, síndrome del intestino irritable (IBS), enfermedad del intestino inflamatorio (IBD)), osteoporosis, así como también trastornos proliferativos celulares (por ejemplo, cáncer, mieloma, fibroma, hepatocarcinoma, leucemia, sarcoma de Kaposi, tumores sólidos).

Los trastornos fibróticos, trastornos inflamatorios, así como también trastornos proliferativos celulares que son adecuados para ser prevenidos o tratados por los compuestos de la presente invención incluyen, pero no se limitan a: fibrosis pulmonar idiopática (IPF), enfermedad pulmonar intersticial, neumonía intersticial no específica (NSIP), neumonía intersticial usual (UIP), fibrosis inducida por radiación, fibrosis pulmonar familiar, fibrosis de las vías respiratorias, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), nefropatía diabética, glomeruloesclerosis segmental focal, nefropatía de IgA, nefropatía inducida por fármacos o transplante, nefropatía autoinmune, nefritis por lupus, fibrosis hepática, fibrosis renal, enfermedad renal crónica (CKD), enfermedad renal diabética (DKD), fibrosis de piel, queloides, esclerosis sistémica, escleroderma, fibrosis viralmente inducida, enfermedad hepática grasa no alcohólica (NAFLD), esteatohepatitis alcohólica o no alcohólica (NASH), hepatitis aguda, hepatitis crónica, cirrosis hepática, colangitis esclerosante primaria, hepatitis inducida por fármaco, cirrosis biliar, hipertensión portal, insuficiencia regenerativa, hipofunción hepática, trastorno de flujo sanguíneo hepático, nefropatía, neumonía, psoriasis, síndrome del intestino irritable (IBS), enfermedad del intestino inflamatorio (IBD), secreción pancreática anormal, hiperplasia prostática benigna, enfermedad de vejiga neuropática, tumor de médula espinal, hernia del disco intervertebral, estenosis del canal espinal, insuficiencia cardiaca, fibrosis cardiaca, fibrosis vascular, fibrosis perivascular, enfermedad del pie y boca, cáncer, mieloma, fibroma, hepatocarcinoma, leucemia, leucemia linfocítica crónica, sarcoma de Kaposi, tumores sólidos, infarto cerebral, hemorragia cerebral, dolor neuropático, neuropatía periférica, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), glaucoma, fibrosis ocular, cicatrización corneal, retinopatía diabética, vitreretinopatía proliferativa (PVR), cicatrización de cirugía por filtración de glaucoma penfigoide cicatricial, enfermedad de Crohn o lupus eritematoso sistémico; formación queloide que resulta de cicatrización anormal de heridas; fibrosis que ocurre después del transplante de órgano, mielofibrosis, y fibroides. En una modalidad, la presente invención proporciona al menos uno de los compuestos de la presente invención, solo, u, opcionalmente, en combinación con otro compuesto de la presente invención y/o al menos otro tipo de agente terapéutico para su uso en el tratamiento de un trastorno fibrótico, un trastorno inflamatorio o un trastorno de proliferación celular en un paciente que necesite tal tratamiento.

Otro aspecto de la invención proporciona un compuesto de la presente invención para uso en terapia para el tratamiento de un trastorno fibrótico, un trastorno inflamatorio, o un trastorno proliferativo celular del mismo.

Otro aspecto de la invención proporciona un primer y segundo agente terapéutico, en donde el primer agente terapéutico es un compuesto de la presente invención para su uso en el tratamiento de un trastorno fibrótico, un trastorno inflamatorio o un trastorno de proliferación celular, en un paciente que lo necesite.

Otro aspecto de la invención proporciona una preparación combinada de un compuesto de la presente invención y agente(s) terapéutico(s) adicional(es) para uso simultáneo, separado o secuencial en terapia.

Otro aspecto de la invención proporciona una preparación combinada de un compuesto de la presente invención y agente(s) terapéutico(s) adicional(es) para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de un trastorno fibrótico, un trastorno inflamatorio, o un trastorno proliferativo celular.

Los compuestos de la presente invención pueden ser empleados en combinación con agente(s) terapéutico(s) adicional(es), tales como uno o más agentes terapéuticos anti-fibróticos y/o anti-inflamatorios.

Otro aspecto de la invención se refiere a agente(s) terapéutico(s) adicional(es) usados en composiciones farmacéuticas combinadas o usos combinados, se seleccionan a partir de uno o más, preferiblemente uno a tres, de los siguientes agentes terapéuticos: inhibidores de la síntesis del TGFp (por ejemplo, pirfenidona), inhibidores del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y cinasas del receptor del factor de crecimiento del fibroblasto (FGF) (por ejemplo, nintedanib), anticuerpo monoclonal anti-avp6 humanizado (por ejemplo, 3G9), pentraxina-2 recombinante humana, Suero Amiloide P humano recombinante, anticuerpo humano recombinante contra el TGFp-1, -2, y -3, antagonistas del receptor de endotelina (por ejemplo, macitentan), gamma interferón, inhibidor de cinasa amino-terminal c-Jun (JNK) (por ejemplo, ácido 3-pentilbencenacético de 4-[[9-[(3S)-tetrahidro-3-furanil]-8-[(2,4,6-trifluorofenil)amino]-9H-purin-2-il]amino]-transciclohexanol, (PBI-4050), derivado de porfirina tetra-sustituido que contiene manganeso (III), anticuerpo monoclonal dirigido a eotaxina-2, anticuerpo de interleucina-13 (IL-13) (por ejemplo, lebrikizumab, tralokinumab), anticuerpo biespecífico dirigido a interleucina 4 (IL-4) e interleucina 13 (lL-13), agonista del receptor de taquicinina NK1 (por ejemplo, Sar9, Met(O2)11-Sustancia P), Cintredecina Besudotox, derivado de ADN recombinante humano, anticuerpo monoclonal kappa IgG1 al factor de crecimiento conectivo, y anticuerpo kappa IgG1 completamente humano, selectivo para el ligando 2 de quimiocina-CC (por ejemplo, carlumab, CCX140), antioxidantes (por ejemplo, N-acetilcisteína), inhibidores de fosfodiesterasa 5 (PDE5) (por ejemplo, sildenafil), agentes para el tratamiento de enfermedades de las vías respiratorias obstructivas tales como antagonistas muscarínicos (por ejemplo, tiotropio, bromuro de ipatropio), agonistas p2 adrenérgicos (por ejemplo, salbutamol, salmeterol), corticosteroides (por ejemplo, triamcinolona, dexametasona, fluticasona), agentes inmunosupresores (por ejemplo, tacrolimus, rapamicina, pimecrolimus), y agentes terapéuticos útiles para el tratamiento n A l FD, NASH, o esclerosis sistémica, tales como agonistas del FXR (por ejemplo OCA, GS-9674, y LJN452), inhibidores de LOXL2 (por ejemplo simtuzumab), antagonistas del LPA1 (por ejemplo, SAR 100842), moduladores de PPAR (por ejemplo, elafibrinor, pioglitazona, y saroglitazar, IVA337), inhibidores de SSAO/VAP-1 (por ejemplo, PXS-4728A y SZE5302), inhibidores de ASK-1 (por ejemplo GS-4997), inhibidores de ACC (por ejemplo, CP-640186 y NDI-0lO976), agonistas de FGF21 (por ejemplo, LY2405319), inhibidores de caspasa (por ejemplo, emricasan), inhibidores de NOX4 (por ejemplo, GKT137831), inhibidor de MGAT2 y conjugados de ácido graso/ácido biliar (por ejemplo aramcol). Los inhibidores de av de varias modalidades de la presente invención también pueden ser usados en combinación con uno o más agentes terapéuticos tales como inhibidores de CCR2/5 (por ejemplo, cenicriviroc), inhibidores de Galectina-3 (por ejemplo, TD-139, GR-MD-02), antagonistas del receptor de leucotrieno (por ejemplo, tipelukast, montelukast), inhibidores de SGLT2 (por ejemplo, dapagliflozina, remogliflozina), agonistas de GLP-1 (por ejemplo, liraglutida y semaglutida), inhibidores de fAk (por ejemplo, GSK-2256098), agonistas inversos de CB1 (por ejemplo, JD-5037), agonistas de CB2 (por ejemplo, ApD-371 y JBT-101), inhibidores de autotaxina (por ejemplo, GLPG1690), inhibidores de sintetasa de prolil t-ARN (por ejemplo, halofugenona), agonistas de FPR2 (por ejemplo, ZK-994), y agonistas de THR (por ejemplo, MGL:3196).

Los compuestos pueden ser administrados para cualquiera de los usos descritos en la presente por cualquier medio adecuado, por ejemplo, oralmente, tal como tabletas, cápsulas, (cada una de las cuales incluye formulaciones de liberación sincronizada o liberación sostenida), píldoras, polvos, gránulos, elíxires, tinturas, suspensiones, jarabes, y emulsiones; sublingualmente; bucalmente; parenteralmente, tales como por técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, o intrasternal (por ejemplo, como soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas inyectables estériles); nasalmente, que incluyen administración a las membranas nasales, tales como por atomización por inhalación; tópicamente, tal como en la forma de una crema o ungüento; o rectalmente tal como en la forma de supositorios. Pueden ser administrados solos, pero en general serán administrados con un vehículo farmacéutico seleccionado con base en la ruta de administración elegida y práctica farmacéutica estándar.

"Composición farmacéutica" significa una composición que comprende un compuesto de la invención en combinación con al menos un vehículo farmacéuticamente adicional.

"Vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un medio en general aceptado en la técnica para el suministro de agentes biológicamente activos a animales, en particular, mamíferos, que incluye, es decir, adyuvante, excipiente o vehículo, tal como diluyentes, agentes preservadores, rellenadores, agentes reguladores de flujo, agentes desintegrantes, agentes humectantes, agentes emulsificantes, agentes de suspensión, agentes endulzantes, agentes saborizantes, agentes perfumantes, agentes antibacterianos, agentes anti-fúngicos, agentes lubricantes y agentes de dispensión, que dependen de la naturaleza del modo de administración y formas de dosificación. Los vehículos farmacéuticamente aceptables son formulados de conformidad con un número de factores también dentro de la competencia de aquellos de habilidad ordinaria en la técnica. Estos incluyen, sin limitación: el tipo y naturaleza del agente activo que es formulado; el sujeto al cual la composición que contiene el agente es administrada; la ruta propuesta de administración de la composición; y la indicación terapéutica que será tratada. Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen tanto medio líquido acuoso como no acuoso, así como también varias formas de dosificación sólidas como semi-sólidas. Tales vehículos pueden incluir un número de diferentes ingredientes y aditivos además del agente activo, tal como ingredientes adicionales que son incluidos en la formulación por varias razones por ejemplo, estabilización del agente activo, aglutinantes, etc., bien conocidos por aquellos de habilidad ordinaria en la técnica. Las descripciones de vehículos farmacéuticamente aceptables adecuados, y factores involucrados en su selección, se encuentran en varias fuentes fácilmente disponibles, tales como, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a edición (1990).

"Tratar" o "tratamiento" se refieren a un procedimiento para obtener resultados benéficos o deseados, que incluyen resultados clínicos, usando un compuesto o una composición e incluyen los siguientes: disminución de la severidad y/o frecuencia de uno o más síntomas que resultan de la enfermedad, trastorno, o condición; disminución de la extensión de, o causar la regresión de la enfermedad, trastorno, o condición; estabilizar la enfermedad, trastorno, o condición (por ejemplo, prevenir o retardar el empeoramiento de la enfermedad, trastorno, o condición); retardo o disminución del progreso de la enfermedad, trastorno, o condición; alivio del estado de la enfermedad, trastorno, o condición; disminución de la dosis de una o más de otras medicaciones requeridas para tratar la enfermedad, trastorno, o condición; y/o incrementar la calidad de vida.

El régimen de dosificación por supuesto, variará, dependiendo de factores conocidos, tales como las características farmacodinámicas del agente particular, y su modo y ruta de administración; las especies, edad, sexo, salud, condición médica, y peso del recipiente; la naturaleza y extensión de los síntomas; el tipo de tratamiento concurrente; la frecuencia del tratamiento; la ruta de administración, la función renal y hepática del paciente, y el efecto deseado.

Por medio de guía general, la dosificación oral diari(a de cada ingrediente activo, cuando se usa para los efectos indicados, variarán entre aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5000 mg por día, preferiblemente entre aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 1000 mg por día, y muy preferiblemente entre aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 250 mg por día. Intravenosamente, la dosis muy preferida variará desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg/kg/minuto durante una infusión a velocidad constante. Los compuestos de esta invención pueden ser administrados en una dosis diaria individual, o la dosificación diaria total puede ser administrada en dosis divididas de dos, tres, o cuatro veces diariamente.

Los compuestos son administrados normalmente en mezcla con diluyentes, excipientes, o vehículos farmacéuticos adecuados (colectivamente referidos en la presente como vehículos farmacéuticos) adecuadamente seleccionados con respecto a la forma propuesta de administración, por ejemplo, tabletas orales, cápsulas, elíxires, y jarabes, y consistente con prácticas farmacéuticas convencionales.

Las formas de dosificación (composiciones farmacéuticas) adecuadas para administración pueden contener desde aproximadamente 0,1 miligramo hasta aproximadamente 2000 miligramos de ingrediente activo por unidad de dosificación. En estas composiciones farmacéuticas el ingrediente activo estará ordinariamente presente en una cantidad de aproximadamente 0,1-95 % en peso con base en el peso total de la composición. Una cápsula típica para administración oral contiene al menos uno de los compuestos de la presente invención (250 mg), lactosa (75 mg), y estearato de magnesio (15 mg). La mezcla se pasa a través de un tamiz de malla 60 y se envasa en una cápsula de gelatina n.° 1. Una preparación inyectable típica se produce colocando asépticamente al menos uno de los compuestos de la presente invención (250 mg) en un vial, secando por congelación asépticamente y sellando. Para uso, los contenidos del vial se mezclan con 2 ml de salina fisiológica, para producir una preparación inyectable.

Los compuestos pueden ser administrados solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Por "administrado en combinación" o "terapia de combinación" significa que el compuesto, cuando se administra en combinación, cada componente puede ser administrado al mismo tiempo o secuencialmente en cualquier orden en diferentes puntos en tiempo. De este modo, cada componente puede ser administrado separadamente pero suficientemente cerca en tiempo para así proporcionar el efecto terapéutico deseado.

Los compuestos también son útiles como compuestos estándares o de referencia, por ejemplo como un estándar de calidad o control, en pruebas o ensayo que involucran las integrinas aV. Tales compuestos pueden ser proporcionados en un kit comercial, por ejemplo, para uso en investigación farmacéutica que involucra la actividad de integrinas aV. Por ejemplo, como una referencia en un ensayo para comparar su actividad conocida a un compuesto con una actividad conocida. Esto podría asegurar el experimento de que el ensayo se realiza apropiadamente y proporciona una base para comparación, especialmente si el compuesto de prueba se deriva del compuesto de referencia.

Ejemplos

Las abreviaturas como se usan en la presente, se definen como sigue: "1 x" para una vez, "2 x" para dos veces, "3 x" para tres veces, " °C" para grados Celsius, "eq" para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos, "mg" para miligramo o miligramos, "L" para litro o litros, "ml" para mililitro o mililitros, " ^|jL" para microlitro o microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol", "nM" para nanomolar", "mol" para mol o moles, "mmol" para milimol o milimoles, "min" para minuto o minutos, "h" para hora o horas, "ta" para temperatura ambiente, "RT" para tiempo de retención, "atm" para atmósfera, "psi" para libras por pulgada cuadrada, "conc." para concentrado, "sat" o "satd" para saturado, "MW" para peso molecular, "mp" para punto de fusión, "MS" o "Espec de Masas" para espectrometría de masas, "ESI" para espectroscopia de masas por ionización por electrorrocío, "HR" para alta resolución, "HRMS" para espectrometría de masas de alta resolución, "LCMS" para espectrometría de masas por cromatografía líquida, "HPLC" para cromatografía líquida de alta presión, "RP HPLC" para HPLC de fase inversa, "TLC" o "tlc" para cromatografía de capa delgada, "RMN" para espectroscopia de resonancia magnética nuclear, "nOe" para espectroscopía de efecto Overhauser nuclear, "1H" para protón, "8" para delta, "s" para singlete, "d" para doblete, "t" para triplete, "q" para quartete, "" para multiplete, "br" para amplio, "Hz" para hertz, y "a", "p", "R", "S", "E", y "Z" son designaciones estereoquímicas familiares para un experto en la técnica.

Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados como se muestra en los siguientes esquemas de reacción y descripciones de los mismos, así como también procedimientos de literatura publicadas relevantes que pueden ser usados por un experto en la técnica. Reactivos y procedimientos a modo de ejemplo para estas reacciones aparecen en la presente posteriormente y en los Ejemplos de trabajo.

ABREVIATURAS

Las siguientes abreviaturas se emplean en la presente:

Bn = bencilo

t-Bu = butilo terciario

Boc = ferc-Butiloxicarbonilo

Boc2O = dicarbonato de di-terc-butilo

Cs2COa = carbonato de cesio

DBU = 1,8-Diazabiciclo[5,4.0]undec-7-eno

DCM o CH2Cl2 = diclorometano

DIAD = azodicarboxilato de diisopropilo

Periodinano Dess-Martin o DMP = 1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benciodoxol-3(1H)-ona

DIPEA o /-P^NEt = diisopropiletilamina

DMAP = 4-dimetilaminopiridina

DMF = dimetil formamida

Et = etilo

Et3N = trietilamina

EtOH = etanol

Et2O = éter dietílico

EtOAc = acetato de etilo

HOAc o AcOH = ácido acético

K2CO3 = carbonato de potasio

LiCl = cloruro de litio

LiOAc = acetato de litio

LiOH = hidróxido de litio

Me = metilo

MeCN o ACN = acetonitrilo

MeOH = metanol

MgSO4 = sulfato de magnesio

NaBH4 = borohidruro de sodio

NaOH = hidróxido de sodio

NaHCO3 = bicarbonato de sodio

PBu3 = tributilfosfina

Ph = fenilo

Pd/C = paladio en carbono

Pd(OAc)2 = acetato de paladio (II)

Ph3P = trifenilfosfina

PtO2 = dióxido de platino

TBAF = fluoruro de tetra-n-butilamonio

TBDMS = terc-butildimetilsililo

TMS = trimetilsililo

THF = tetrahidrofurano

TFA = ácido trifluoroacético

min = minuto(s)

hr u horas = hora(s)

L = litro

ml = mililitro

|jL = microlitro

g = gramo(s)

mg = miligramo(s)

mol = moles

mmol = milimol(es)

meq = miliequivalente

sat o satd = saturado

ac. = acuoso

TLC = cromatografía de capa delgada

HPLC = cromatografía líquida de alto rendimiento

LC/MS = cromatografía líquida de alto rendimiento/espectrometría de masas

MS o Espec de Masas = espectrometría de masas

NMR = resonancia magnética nuclear

mp = punto de fusión

Los espectros de NMR (resonancia magnética nuclear) se obtuvieron normalmente en instrumentos Bruker o JEOL de 400 MHz y 500 MHz en los solventes indicados. Todos los cambios químicos son reportados en ppm a partir de tetrametilsilano con la resonancia del solvente como el estándar interno. Los datos espectrales de 1HRMN son normalmente reportados como sigue: cambio químico, multiplicidad (s = singlete, br s = singlete amplio, d = doblete, dd = doblete de dobletes, t = triplete, q = quartete, sep = septete, m = multiplete, ap = aparente), constantes de acoplamiento (Hz), e integración.

HPLC se refiere a un instrumento de cromatografía líquida de alto rendimiento Shimadzu con uno de los siguientes métodos:

Método de HPLC Analítico n.° 1: Phenomenex® Luna 5|j C18 4,6 x 50 mm, gradiente de 4 min, 10 % de MeOH/90 % de H2O/0,1 % de H3PO4 a 90 % de MeOH/10 % de H2O/0J % de H3PO4, 1 min de retención; 4 ml/min, detección UV a 220 nm.

Método de HPLC Analítico n.° 2: YMC s5 Combiscreen ODS 6 x 50 mm, gradiente de 4 min, 10 % de ACN/90 % de H2O/0,1 % de TFA a 90 % de ACN/10 % de H2O/0,1 % de TFA, 1 min de retención; 4 ml/min, detección UV a 220 nm.

Intermediario 1

HCl de (S)-3-amino-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

Se prepararon el Int-1A, Int-1B, e Int-1C de conformidad con el procedimiento descrito en: Hutchinson, J. H. et. al., J. Med. Chem. 2003, 46, 4790.

Int-1A. (E)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)acrilato de etilo: RMN 1H (500 MHz, CDCI3) 57,59 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 2H), 6,96 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 225,1 [M+H]+.

Int-1B. (S)-3-(bencil((S)-1-feniletil)amino)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: RMN 1H (500 MHz, CDCI3) 5 7,59 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 2H), 6,96 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 436,2 [M+H]+.

Int-1C. (S)-3-amino-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: RMN 1H (500 MHz, CDCh) 57,13 (dd, J = 12,2, 2,1 Hz, 1H), 7,07 (dt, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 6,92 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 4,37 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,15 (qd, J = 7,1, 1,0 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 2,65 - 2,55 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 242,1 [M+H]+.

Int-1D. (S)-3-(terc-butoxicarbonil)amino)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: A una solución a 0°C del Int-1C (31,8 g, 132 mmol) en THF (189 ml) se agregó trietilamina (20,2 ml, 145 mmol) y (Boc)2O (30,6 ml, 132 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 18,5 h, la reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, 10 % de ácido cítrico y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para dar el Int-1D. Int-1E. 3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de (S)-etilo: El Int-1D se purificó por SFC quiral preparativa (Columna: Whelko-RR (5 x 50 cm, 10 uM, n.° 4080), Presión BPR: 100 bars, Temperatura: 35 °C, Velocidad de Flujo: 300 ml/min, Fase Móvil: CO2/MeOH (70/30), Longitud de Onda del Detector: 220 nm; Programa de Separación: Inyección de Pila; Inyección: 4 ml con tiempo de ciclo: 2 mins; Preparación de Muestra: 44,4g/310 ml MeOH:DCM (9:1), 143,2 mg/ml; Rendimiento: 16,3 g/hr) para proporcionar el Int-1E (41,1 g, 91 %) como un sólido blanco: RMN 1H (500 MHz, CDCh) 57,09 - 6,97 (m, 2H), 6,94 - 6,87 (m, 1H), 5,47 (s a, 1H), 5,03 (s a, 1H), 4,09 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 2,92 - 2,70 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 364,1 [M+Na]+.

>99 % de ee. [a]D20 -27,36°(c 1,54, CHCI3).

Int-1F. (R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: La separación SFC quiral preparativa anterior proporcionó el (fi)-enantiómero (Int-1F, 1,5 g, 3 %) como un sólido blanco: RMN 1H (500 MHz, CDCI3) 57,10 - 6,97 (m, 2H), 6,95 - 6,86 (m, 1H), 5,47 (s a, 1H), 5,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,09 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 2,91 - 2,69 (m, 2H), 1,47 - 1,37 (m, 9H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 364,1 [M+Na]+. 96,4 % de ee. [a]D20 20,76°(c 1,54, CHCb).

Intermediario 1: Una solución del Int-1E (1,0 g, 2,93 mmol) en 4 M HCl en dioxano (48 ml) se agitó a temperatura ambiente por 1 h. El solvente se removió al vacío y el residuo se secó bajo vacío. El residuo se disolvió en EtOH (10 ml), se concentró al vacío y se secó bajo vacío para proporcionar el Intermediario 1 (0,801 g, 98 %) como un sólido blanco. RMN 1H (500 MHz, CDCb) 58,80 (s a, 3H), 7,37 - 7,28 (m, 2H), 6,95 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 4,68 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 4,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,22 (dd, J = 16,6, 6,2 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 16,5, 7,7 Hz, 1H), 1,18 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 242,1 [M+H]+. >99 % de ee. [a]D20 11,82°(c 1,54, CHCb).

Intermediario 2

HCl de (fi)-3-amino-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

Intermediario 2: Usando el procedimiento descrito para la síntesis del Intermediario 1 ,3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de (Int-1F, 1,5 g, 4,39 mmol) de (R)-etilo y 4 M HCl en dioxano (48 ml) proporcionando el Intermediario 2 (1,16 g, 95 %) como un sólido blanco: RMN 1H (500 MHz, CDCb) 58,81 (s a, 3H), 7,37 - 7,27 (m, 2H), 7,01 - 6,88 (m, 1H), 4,68 (s a, 1H), 4,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,23 (dd, J = 16,6, 6,2 Hz, 1H), 3,01 (dd, J = 16,6, 7,6 Hz, 1H), 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 242,1 [M+H]+. 96,4 % de ee. [a]D20-11,26°(c 1,54, CHCb).

Intermediario 3

(S)-3-amino-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo

El Intermediario 3 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 1. RMN 1H (500MHz, CDC^b) 5 8,14 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,46 (dd, J = 8,8, 5,0 Hz, 1H), 4,15 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 2,82 (dd, J = 16,2, 8,8 Hz, 1H), 2,72 -2,56 (m, 1H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 1,132 min.; LCMS (ES): m/z 225,0 [M+H]+.

Intermediario 4

(R)-3-amino-3-(3-bromo-5-(terc-butil)fenil)propanoato de etilo

El Intermediario 4 se preparó de conformidad con el procedimiento descrito en: Henderson, N. C. et. al., Nature Medicine 2013 19, 1617.

Intermediario 5

3-amino-3-(3,5-diclorofenil)propanoato de (±)-metilo

Intermediario 6

(S)-3-amino-3-(3,5-didorofenil)propanoato de metilo

Intermediario 7

(R)-3-amino-3-(3,5-diclorofenil)propanoato de metilo

Int-5A: Ácido 3-Amino-3-(3,5-diclorofenil)propanoico: Una mezcla de acetato de amonio (14,1 g, 183 mmol), 3,5-diclorobenzaldehído (8,0 g, 45,7 mmol) y ácido malónico (5,23 g, 50,3 mmol) en EtOH (90 ml) se calentó a reflujo por 16 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, lo sólido se recolectó por filtración, se lavó con EtOH (15 ml), y se secó bajo vacío para dar el Int-5A crudo (7,0 g, 66 %) como un sólido blanco. LCMS (ES): m/z 234,3 [M+H]+. Intermediario 5: A una mezcla del Int-5A (7,0 g, 29,9 mmol) en MeOH (50 ml) se agregó SOCh (5,02 ml, 68,8 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 6 h, lo sólido se removió por filtración. Lo filtrado se concentró al vacío para dar un producto crudo el cual se disolvió en EtOAc (150 ml). La capa orgánica se lavó con solución de NaHCO3 saturada, salmuera, se secó (MgSO4), se filtró, y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el producto crudo el cual se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, CH2Ch:MeOH, 100:0 a 95:5) para proporcionar el Intermediario 5 (3,3 g, 46 %) como un aceite amarillo: RMN 1H (500 MHz, CDCh) 57,31 (d, J = 1,9 Hz, 2H), 7,28 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 4,44 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,81 -2 ,63 (m, 2H). LCMS (ES): m/z 248,3 [M+H]+. Intermediario 6: El Intermediario 5 (3,3 g) se purificó por SFC quiral preparativa (Columna: Chiralpak AD, 30 x 250 mm, 5 micras, Presión BPR: 150 bars, Temperatura: 40 oC, Velocidad de Flujo: 80 ml/min, Fase Móvil: CO2/MeOH (95/5)+ 0,1 % de DEA, Longitud de Onda del Detector: 220 nm) para proporcionar el Intermediario 6 (2,3 g) como un aceite amarillo. RMN 1H (500 MHz, CDCh) 57,28 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 4,43 - 4,34 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,76 -2 ,56 (m, 2H).

Intermediario 7: El Intermediario 5 (3,3 g) se purificó por SFC quiral preparativa (Columna: Chiralpak AD, 30 x 250 mm, 5 micras, Presión BPR: 150 bars, Temperatura: 40 oC, Velocidad de Flujo: 80 ml/min, Fase Móvil: CO2/MeOH (95/5)+ 0,1 % de DEA, Longitud de Onda del Detector: 220 nm) para proporcionar el Intermediario 7 (1,31 g) como un aceite amarillo. RMN 1H (500 MHz, CDCb) 57,27 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 4,38 (dd, J = 8,7, 4,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,65 (dd, J = 16,0, 4,8 Hz, 1H), 2,60 (dd, J = 16,0, 8,7 Hz, 1H).

Intermediario 8

3-amino-3-(2,3-dihidrobenzofuran-6-il)propanoato de (S)-etilo

El Intermediario 8 se preparó de conformidad con el procedimiento descrito para el Intermediario 1. RMN 1H (400 MHz, D M S O d) 57,17 -7,10 (m, 1H), 6,86 -6,74 (m, 2H), 4,49 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 4,19 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,06 -3,94 (m, 2H), 3,12 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 2,70 -2,54 (m, 3H), 1,21 - 1,05 (m, 3H). RMN 13C (400 MHz, DMSO-d6) 5171,13, 159,75, 146,24, 125,43, 124,37, 118,21, 106,80, 70,80, 59,62, 52,61,44,12, 28,79, 14,02. LCMS (ES): m/z 236,0 [M+H]+. [a]o25 C 6,0 °(c 0,10 en CHCb).

Intermediario 9

(S)-3-amino-3-(2-metoxipirimidin-5-il)propanoato de etilo

El Int-9A se preparó de conformidad con el procedimiento descrito en Int-1A. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 58,68 (s, 2H), 7,58 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,46 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 4,28 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 4,06 (s, 3H), 1,35 (t, J = 7,0 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 209,0 [M+H]+.

Intermediario 9: Se purgó alcohol terc-butílico (300 ml) con amoníaco manteniendo la temperatura entre 0 - 20 °C por 1 h. El amoníaco se purgó con alcohol terc-butílico e Int-9A (20 g, 96 mmol) se agregó a un autoclave de 1 L. La reacción se calentó a 80 °C por 30 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se removió de la autoclave y se concentró. Lo sólido crudo se trituró con el éter dietílico y se filtró. Lo filtrado se concentró y se purificó por ISCO (5 % de metanol en cloroformo) para proporcionar el compuesto de racemato (5,9 g). El racemato se purificó adicionalmente por SFC (Chiralpak IA (250 x 4,6)mm, 5u; % de CO2: 80 %; % de Co solvente: 20 %(0,2 % de DEA en metanol); Flujo Total: 120,0g/min; Contra Presión: 100bars; Temperatura: 30°C; Detección: UV a 220 nm) para proporcionar el Intermediario 9 (2,3 g, 10 %) como el primer isómero eluyente. RMN 1H (300 MHz, D M S O d) 5 8,58 (s, 2H), 4,20 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,02 (q, J = 6,9 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 2,67 (dd, J = 7,2, 4,9 Hz, 2H), 2,09 (br s, 2H), 1,13 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 226,2 [M+H]+.

Intermediario 10

3-amino-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanoato de (S)-etilo

Intermediario 10

El Intermediario 10 se preparó de conformidad con el procedimiento descrito para el Intermediario 9. RMN 1H (400 MHz, D M S O d) 58,66 (s, 2H), 4,20 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 4,05 - 3,98 (m, 2H), 2,68 (dd, J = 7,0, 5,0 Hz, 2H), 2,57 (s, 3H), 2,09 (br s, 2H), 1,15 - 1,09 (m, 3H). LCMS (ES): m/z 210,2 [M+H]+.

Intermediario 11

3-amino-3-(pirimidin-5-il)propanoato de (S)-etilo

Intermediario 11

El Intermediario 11 se preparó de conformidad con el procedimiento descrito para el Intermediario 9. RMN 1H (300 MHz, DMSO-de) 59,05 (s, 1H), 8,80 (s, 2H), 4,24 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 4,01 (q, J = 6,90 Hz, 2H), 2,74 (q, J = 3,90 Hz, 2H), 1,11 (t, J = 6,90 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 196,2 [M+H]+.

Intermediario 12

3-amino-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanoato de (±)-etilo

Int-12A. Ácido 3-Amino-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanoico: Una mezcla de 2-metilpirimidin-5-carbaldehído comercialmente disponible (1,00 g, 8,19 mmol), ácido malónico (1,28 g, 12,3 mmol) y NH4OAc (1,58 g, 20,5 mmol) en EtOH (6,55 ml) se calentó a 80 °C por 4 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, lo precipitado se recolectó por filtración, se lavó con EtOH frío y se secó bajo vacío para proporcionar el Int-12A (1,08 g, 73 %) como un sólido blancuzco el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (500MHz, D2O) 58,79 (s, 2H), 4,75 - 4,73 (m, 1H), 3,01 - 2,92 (m, 1H), 2,90 - 2,82 (m, 1H), 2,70 (s, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,168 min.; LCMS (ES): m/z 182,1 [M+H]+.

Intermediario 12: SOCh (0,185 ml, 2,54 mmol) se agregó por goteo a una solución a temperatura ambiente del Int-12A (0,200 g, 1,10 mmol) en EtOH (2,90 ml). Después de la agitación a temperatura ambiente durante la noche, el solvente se removió al vacío y el residuo se disolvió en DCM, se lavó con NaHCOs saturado, agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhídro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:MeOH, 100:0 a 90:10) para proporcionar el Intermediario 12 (0,115 g, 50 %) como un sólido amarillo ligero. RMN 1H (500MHz, CDCls) 58,68 (s, 2H), 4,47 (dd, J = 8,0, 5,5 Hz, 1H), 4,16 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,79 - 2,58 (m, 5H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,317 min.; LCMS (ES): m/z 210,1 [M+H]+. Intermediario 13

3-amino-3-(2-metoxipirimidin-5-il)propanoato de (±)-etilo

El Intermediario 13 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 12. RMN 1H (500MHz, CDCh) 5 8,54 (s, 2H), 4,46 - 4,39 (m, 1H), 4,16 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,01 (d, J = 0,6 Hz, 3H), 2,75 - 2,60 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,490 min.; LCMS (ES): m/z 226,1 [M+H]+.

Intermediario 14

3-amino-3-(pirimidin-5-il)propanoato de (±)-etilo

El Intermediario 14 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 12. RMN 1H (500MHz, CDCh) 5 9,15 (s, 1H), 8,79 (s, 2H), 4,50 (dd, J = 7,8, 5,6 Hz, 1H), 4,16 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,77 - 2,64 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,318 min.; LCMS (ES): m/z 196,1 [M+H]+

Intermediario 15

3-amino-3-(quinolin-3-il)propanoato de (S)-Etilo

Int-15A. (S,E)-2-Metil-W-(quinolin-3-ilmetilen)propan-2-sulfinamida: A una solución de quinolin-3-carbaldehído (25,0 g, 159 mmol) en DCM (700 ml) se agregó (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (19,3 g, 159 mmol) seguido por Ti(OEt)4 (167 ml, 795 mmol). La reacción se calentó a 40 °C durante la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se apagó con agua. Lo sólidos se filtraron a través de una almohadilla de CELITE ® y se lavó con DCM. La capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea para proporcionar el Int-15A (40 g, 97 %) como un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 59,45 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,54 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,83-7,86 (m, 1H), 7,63-7,67 (m, 1H), 1,34 (s, 9H).

Int-15B. 3-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-(quinolin-3-il)propanoato de (S)-Etilo: A una solución de 1 N NaHMDS en THF (230 ml, 230 mmol) en THF (750 ml) a -78 °C se agregó acetato de etilo (22,56 ml, 230 mmol) por goteo. La reacción se agitó por 0,5 h y se agregó Int-15A (40 g, 154 mmol) en THF (500 ml) por goteo. La reacción se agitó por 1 h a -78 °C y se apagó con solución de NH4Cl saturada. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. Lo crudo se purificó por cromatografía instantánea (2-3 % de metanol en DCM) para proporcionar el Int-15B (50 g, 93 %) como un líquido amarillo pálido. RMN 1H (300 MHz, DMSO-de) 5 8,91-9,02 (m, 1H), 8,38 - 8,25 (m, 1H), 7,93-8,03 (m, 2H), 7,74-7,77 (m, 1H), 7,58 7,63 (m, 1H), 4,92 -4,80 (m, 1H), 4,10 -3,92 (m, 2H), 3,06 -2,89 (m, 2H), 1,18 -1,01 (m, 12H). LCMS (ES): m/z 349,0 [M+H]+.

Intermediario 15: A una solución del Int-15B (50 g, 143 mmol) en etanol (500 ml) se agregó 4 M HCl en 1,4-dioxano (200 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 h. El solvente se removió bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (150 ml) y se lavó con MTBE (3 x 75 ml). La capa acuosa se basificó con 10 % de solución de NaHCO3 y se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. Lo crudo se purificó por SFC (Whelk (RR) (250 x 30)mm, 5u; % de CO2: 70 %; % de Co solvente: 30 %(0,2 % de DEA en metanol); Flujo Total: 130,0g/min; Contra Presión: 100bars; Temperatura: 30°C; Detección: UV a 226 nm) para proporcionar el Intermediario 15 (15 g, 43 %) como un líquido marrón. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58,94 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,92-8,02 (m, 2H), 7,74 -7,69 (m, 1H), 7,56-7,60 (m, 1H), 4,44 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 4,05 - 3,97 (m, 2H), 2,76 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,17 (s a, 2H), 1,09 (t, J = 7,3 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 245,2 [M+H]+. 99,3 % de ee.

Intermediario 16

3-amino-3-(quinoxalin-2-il)propanoato de (±)-etilo

Int-16A. (E)-2-Metil-N-(quinoxalin-2-ilmetilen)propan-2-sulfinamida. A una solución de quinoxalin-2-carbaldehído comercialmente disponible (0,500 g, 3,16 mmol) en DCM (14,0 ml) se agregó 2-metilpropan-2-sulfinamida (0,383 g, 3.16 mmol) y Ti(OEt) ⁴ (3,31 ml, 15,8 mmol). La mezcla de reacción se sometió a reflujo por 17 h, se enfrió a temperatura ambiente y se apagó con agua. Lo sólidos se filtraron a través de una almohadilla de CELITE ® y se lavaron con DCM. La fase orgánica se separó y se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na ² SO ⁴ anhídro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos:EtOAc, 100:0 a 50:50) para proporcionar el Int-16A (0,690 g, 84 %) como un sólido tostado. RMN ¹ H (500MHz, DMSO-d^e) 59,54 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,29 - 8,17 (m, 2H), 8,06 - 7,92 (m, 2H), 1,27 (s, 9H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 2,132 min.; LCMS (ES): m/z 262,2 [M+H]⁺.

Int-16B. 3-((terc-butilsulfinil)amino)-3-(quinoxalin-2-il)propanoato de etilo. Se preparó el Int-16B usando el procedimiento descrito por el Int-15B. RMN ¹ H (500 MHz, D M S O d) 59,23 (s, 1H), 8,07-8,14 (m, 1H), 7,99-8,07 (m, 1H), 7,82-7,91 (m, 2H), 6,17 (d, J = 9,35 Hz, 1H), 4,97-5,14 (m, 1H), 4,05 (quin, J = 6,81 Hz, 2H), 3,10-3,26 (m, 1H), 2,94 (dd, J = 8,80, 15,68 Hz, 1H), 1,10-1,19 (m, 12H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,935 min.; LCMS (ES): m/z 350,1 [M+H]⁺.

Intermediario 16: A una solución a temperatura ambiente del Int-16B (0,111 g, 0,318 mmol) en EtOH (1,11 ml) se agregó HCl 4M en dioxano (0,443 ml). Después de la agitación a temperatura ambiente por 1,5 h, el solvente se removió al vacío. El residuo se disolvió en agua y se lavó con éter dietílico (3x). La capa acuosa se basificó usando 10 % de NaHCO ³ acuoso y después se extrajo con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na ² SO ⁴ anhídro y se concentraron al vacío para proporcionar el Intermediario 16 (59,3 mg, 76 %) como un aceite tostado el cual no se purificó adicionalmente. RMN ¹ H (400MHz, CD ³ OD) 58,99 (s, 1H), 8.16 - 8,00 (m, 2H), 7,90 - 7,74 (m, 2H), 4,66 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,08 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,14 - 3,03 (m, 1H), 2,98 -2,87 (m, 1H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,983 min.; LCMS (ES): m/z 246,2 [M+H]⁺.

Intermediario 17

HCl de (S)-3-amino-2-(((benciloxi)carbonil)amino)propanoato de etilo,

Intermediario 17. El Intermediario 17 se preparó usando el procedimiento descrito en la Patente: WO 2000021932. RMN 1H (500MHz, D M S O d) 58,16 (s a, 3H), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,43 - 7,26 (m, 5H), 5,08 (s, 2H), 4,38 (td, J = 8,7, 4,7 Hz, 1H), 4,13 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,22 (dd, J = 12,9, 4,4 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 12,8, 9,5 Hz, 1H), 1,18 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,078 min.; LCMS (ES): m/z 267 [M+H]+.

Intermediario 18

(S)-3-amino-2-((2,4,6-trimetilfenil)sulfonamido)propanoato de etilo

El Intermediario 18 se preparó usando el procedimiento descrito en: Pitts, J. W. et. al., J.Med. Chem. 2000 43, 27. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) 56,95 (s, 2H), 5,63 (s a, 1H), 5,31 (s, 1H), 3,97-4,05 (m, 2H), 3,82 (t, J = 4,68 Hz, 1H), 2,94-3,05 (m, 2H), 2,66 (s, 6H), 2,29 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,15 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 315 [M+H]+.

Intermediario 19

HCl del ácido (E)-4-(2-(1,8-Naftiridin-2-il)vinil)-1H-pirrol-2-carboxílico,

Int-19A. 2-Metil-1,8-naftiridina: El Int-19A se preparó usando el procedimiento descrito en la Patente: WO 2011150156. RMN 1H (500MHz, D M S O d) 59,02 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,40 (dd, J = 8,0, 1,9 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 8,1, 4,3 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 2,70 (s, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 0,303 min.; LCMS (ES): m/z 145,0 [M+H]+.

Int-19B. (E)-4-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo: Una solución del Int-19A (0,300 g, 2,08 mmol), 4-formil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo comercialmente disponible (0,348 g, 2,08 mmol), y 4-metilbencensulfonamida (0,356 g, 2,08 mmol) en tolueno (4,5 ml) se agitó a reflujo por 21 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, lo precipitado se recolectó por filtración, se trituró con DCM (2x) y se secó bajo vacío para proporcionar el Int-19B (0,519 g, 94 %) como un sólido amarillo el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (500MHz, DMSO-d6) 5 12,14 (s a, 1H), 9,01 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,41 - 8,28 (m, 2H), 7,82 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,0, 4,1 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,24 -7,16 (m, 2H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,31 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 1,973 min.; LCMS (ES): m/z 294,0 [M+H]+.

Intermediario 19: Una solución 95:5 de EtOH/H2O (421 ml) que contiene el Int-19B (35,0 g, 95,0 mmol) y NaOH (11,5 g, 286 mmol) se sometió a reflujo por 4 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el EtOH se removió al vacío y el residuo se acidificó a pH ~2 con HCl 1M acuoso. Lo precipitado se recolectó por filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío para proporcionar el Intermediario 19 (14,2 g, 39 %) como un sólido anaranjado crudo. RMN 1H (500MHz, D M S O d) 5 12,31 (s a, 1H), 9,16 (dd, J = 4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,75 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,22 - 8,08 (m, 2H), 7,85 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 2,6, 1,5 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 1,402 min.; LCMS (ES): m/z 266,0 [M+H]+.

Preparación alternativa del Intermediario 19.

1) NaOH, EtOH/H20

2) HCl ac. 1 M Intermediario 19

Int-19C. 4-bromo-1H-pirrol-1,2-dicarboxilato de 1-(terc-butil) 2-metilo: se preparó el Int-19C usando el procedimiento descrito en: Desplat, V. et. al., Journal o f Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry 2010, 25, 204. Rm N 1H (500MHz, CDCl3) 57,31 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 1,58 (s, 9H). LCMS (ES): m/z 249,9 [M-tBu+H]+.

Int-19D. (E)-4-(3-oxobut-1-en-1-il)-1H-pirrol-1,2-dicarboxilato de 1-(terc-butil) 2-metilo: El Int-19D se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-1A. RMN 1H (500MHz, CDCh) 57,53 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 1,60 (s, 9H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 3,193 min.; LCMS (ES): m/z 294,1 [M+H]+.

Int-19E. TFA de (E)-4-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1H-pirrol-1,2-dicarboxilato de 1-(terc-butil) 2-metilo: Una solución del Int-19D (36 mg, 0,123 mmol), 2-aminonicotinaldehído (19,5 mg, 0,160 mmol) y L-prolina (4,58 mg, 0,115 mmol) en EtOH (0,366 ml) se agitó a 80 oC por 19 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el solvente se removió al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna Ax IA 5u C1821,1 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 15 min, 10 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar el Int-19E (11,3 mg, 19 %) como un aceite anaranjado. LCMS (ES): m/z 280,0 [M-Boc+H]+.

Intermediario 19. Una solución del Int-19E (11,3 mg, 0,023 mmol) y NaOH (4,58 mg, 0,115 mmol) en EtOH (0,177 ml) y agua (9,32 pL) se sometió a reflujo por 4 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el EtOH se removió al vacío y el residuo se acidificó a pH ~2 con HCl 1M acuoso. Lo precipitado se recolectó por filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío para proporcionar el Intermediario 19 (6,9 mg, 100 %) como un sólido anaranjado crudo. LCMS (ES): m/z 266,0 [M+H]+.

Intermediario 20

HCl del ácido de (E)-4-(2-(1,8-Naftiridin-2-il)vinil)-5-metil-1H-pirrol-2-carboxílico,

El Intermediario 20 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 19 partiendo de 4-formil-5-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo el cual se preparó de conformidad con el procedimiento descrito en la Patente: WO 2005026149. LCMS (ES): m/z 280,1 [M+H]+.

Intermediario 21

HCl del ácido de 4-(1,8-Naftiridin-2-il)-1H-pirrol-2-carboxílico,

Int-21A. 4-(1,8-naftiridin-2-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo: A una solución a temperatura ambiente de 4-acetil-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (0,342 g, 2,05 mmol) y pirrolidina (0,372 ml, 4,50 mml) en DCM (1,71 ml) y MeOH (5,12 ml) se agregó 2-aminonicotinaldehído (0,250 g, 2,05 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 24 h, lo precipitado se recolectó por filtración, se trituró con MeOH y se secó bajo vacío para proporcionar el Int-21A (0,345 g, 67 %) como un sólido amarillo ligero. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) ó 12,37 (s a, 1H), 9,00 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,44 - 8,30 (m, 2H), 8,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,0, 4,1 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 1,515 min.; LCMS (ES): m/z 254,1 [M+H]+. Intermediario 21. El Intermediario 21 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 19. RMN 1H (500MHz, DMSO-d6) ó 12,62 (s a, 1H), 9,17 (dd, J = 5,0, 1,7 Hz, 1H), 8,91 -8,81 (m, 1H), 8,72 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,23 -8,13 (m, 1H), 7,88 (dd, J = 8,1, 5,1 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 1,9 Hz, 1H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 1,205 min.; LCMS (ES): m/z 240,1 [M+H]+.

Intermediario 22

3NaCl de HCl del ácido 4-(3-(1,8-Naftiridin-2-il)propil)-1H-pirrol-2-carboxílico,

ntlnt-22D

NaOH

Interm ediario 22

E tO H /H 20

Int-22A. (E)-4-(4-hidroxipent-1-en-1-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo: El Int-22A se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-1A. RMN 1H (500MHz, CDCls) 5 8,99 (s a, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,91 - 6,87 (m, 1H), 6,34 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,01 - 5,90 (m, 1H), 4,36 -4,28 (m, 2H), 3,89 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 1H), 2,40 -2,32 (m, 1H), 2,30 -2,19 (m, 1H), 1,41 - 1,32 (m, 3H), 1,25 (d, J = 6,3 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,568 min.; LCMS (ES): m/z 224,2 [M+H]+.

Int-22B. (E)-4-(4-oxopent-1-en-1-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo: periodinano Dess-Martin (0,456 g, 1,08 mmol) se agregó a una solución del Int-22A (0,200 g, 0,896 mmol) en DCM (8,37 ml). Después de la agitación a temperatura ambiente por 1h, la reacción se diluyó con éter dietílico y se filtró a través de una almohadilla de CELITE®. Lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos:EtOAc, 100:0 a 70:30) para proporcionar el Int-22B (106 mg, 53 %) como un aceite amarillo. RMN 1H (500MHz, CDCh) 58,93 (s a, 1H), 6,90 - 6,88 (m, 1H), 6,81 (dd, J = 2,8, 1,7 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,92 (dt, J = 15,7, 7,2 Hz, 1H), 4,22 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,16 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,703 min.; 1,733 min LCMS (ES): m/z 222,2 [M+H]+.

Int-22C. 4-(4-oxopentil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo: A una solución del Int-22B (95 mg, 0,185 mmol) en EtOH (6,33 ml) se agregó PtO2 (22 mg, 0,095 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2 (1 atm, balón) por 2 h y después se filtró a través de una almohadilla de CELITE®. Lo filtrado se concentró al vacío para proporcionar el Int-22C (82 mg, 77 %) como un aceite amarillo el cual no se purificó adicionalmente. RMN 1H (500MHz, CDCl3) 58,91 (s a, 1H), 6,79 - 6,68 (m, 2H), 4,31 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,47 (dt, J = 17,5, 7,5 Hz, 4H), 2,13 (s, 3H), 1,86 (quin, J = 7,4 Hz, 2H), 1,36 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,788 min.; LCMS (ES): m/z 224,2 [M+H]+.

Int-22D. 4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo: A una solución del Int-22C (82 mg, 0,367 mmol) y pirrolidina (36 pL, 0,441 mmol) en DCM (0,307 ml) y EtOH (0,921 ml) se agregó 2-aminonicotinaldehído (45 mg, 0,367 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 7 h, el solvente se removió al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:EtOAc, 100:0 a 25:75) para proporcionar el Int-22D (61,2 mg, 54 %) como un sólido blanco. RMN 1H (500MHz, CDCb) 59,10 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,88 (s a, 1H), 8,16 (dd, J = 8,0, 1,9 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,1, 4,3 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,79 (s, 2H), 4,30 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,18 - 3,00 (m, 2H), 2,61 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,20 (quin, J = 7,6 Hz, 2H), 1,35 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,140 min.; LCMS (ES): m/z 310,3 [M+H]+.

Intermediario 22: Una solución 95:5 de EtOH/H2O (1,58 ml) que contiene el Int-22D (61,2 mg, 0,198 mmol) y NaOH (23,7 mg, 0,593 mmol) se sometió a reflujo por 2 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el EtOH se concentró al vacío y el residuo se acidificó a pH ~2 con HCl 1M acuoso. La mezcla se concentró nuevamente y el residuo se secó bajo vacío para proporcionar el Intermediario 22 (98 mg, 100 %) como un sólido anaranjado crudo el cual no se purificó adicionalmente. R^mN 1H (500MHz, DMSO-ck) 511,43 (s a, 1H), 9,25 (s a, 1H), 8,88 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 6,79 (s a, 1H), 6,59 (s a, 1H), 3,14 (s a, 2H), 2,56 - 2,51 (m, 2H), 2,09 (s a, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,703 min.; LCMS (ES): m/z 282,2 [M+H]+.

Intermediario 23

(S)-3-(7-bromo-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

(CH2)2Br2, Bu4NBr _{Intermediario 23}

NaOH 1 N, DCE

Int-23A. (S)-3-(4-bromo-1H-pirrol-2-carboxamido)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: A una solución de ácido 4-bromo-1H-pirrol-2-carboxílico comercialmente disponible (1,00 g, 5,26 mmol) e Intermediario 1 (1,46 g, 5,26 mmol) en DMF (26,3 ml) se agregó EDC (2,02 g, 10,5 mmol), HOBT (1,61 g, 10,5 mmol) y DIPEA (2,02 ml, 11,6 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente por 1,5 h, la reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NH4O sat., agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhídro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos/EtOAc, 100:0 a 0:100) para proporcionar el Int-23A (1,99 g, 91 %) como un sólido gomoso blanco. RMN 1H (500MHz, CDCh) 59,35 (s a, 1H), 7,24 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,10 - 7,01 (m, 2H), 6,94 - 6,87 (m, 2H), 6,67 (dd, J = 2,6, 1,5 Hz, 1H), 5,46 (dt, J = 8,5, 5,4 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 2,99 - 2,79 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 2,368 min.; LCMS (ES): m/z 413,1, 415,1 [M+H]+.

Intermediario 23: Una mezcla del Int-23A (1,99 g, 4,82 mmol), NBu4Br (1,55 g, 4,82 mmol), 1,2-dibromoetano (2,08 ml, 24,1 mmol) y NaOH ac. 1N (14,5 ml, 14,5 mmol) en dicloroetano (14,7 ml) se agitó a 50 °C por 1,5 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la reacción se diluyó con EtOAc después se lavó con NH4O sat.y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 anhídro, se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos/EtOAc, 100:0 a 50:50) para proporcionar el Intermediario 23 (0,818 g, 39 %) como un semi-sólido gomoso blanco. RMN 1H (500MHz, CDCh) 57,12 - 7,01 (m, 2H), 6,97 - 6,89 (m, 2H), 6,68 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,27 (dd, J = 9,1, 6,9 Hz, 1H), 4,17 -4,09 (m, 2H), 4,03 (ddd, J = 12,2, 7,6, 4,1 Hz, 1H), 3,96 - 3,85 (m, 4H), 3,61 - 3,51 (m, 1H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 3,05 - 2,85 (m, 2H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 2,465 min.; LCMS (ES): m/z 439,1,441,1 [M+H]+.

Intermediario 24

(S)-3-(7-bromo-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo

El Intermediario 24 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 23. RMN 1H (500MHz, CDCI3) 5 8,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,23 (dd, J = 9,2, 7,0 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 7,2, 1,7 Hz, 2H), 4,06 - 4,00 (m, 1H), 3,97 - 3,88 (m, 4H), 3,61 (ddd, J = 12,4, 7,8, 4,3 Hz, 1H), 3,37 - 3,27 (m, 1H), 3,07 - 2,98 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,955 min.; LCMS (ES): m/z 422,2, 424,1 [M+H]+.

Intermediario 25

(S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(7-formil-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo

El Intermediario 25 se preparó usando el procedimiento descrito para el intermediario 23 partiendo de ácido 4-formil-1H-pirrol-2-carboxílico el cual se preparó siguiendo la Patente: WO 2009148004. RMN 1H (400MHz, CDCh) 59,81 (s, 1H), 7,37 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,15 - 7,03 (m, 2H), 6,96 - 6,86 (m, 1H), 6,36 - 6,18 (m, 1H), 4,24 - 4,09 (m, 3H), 4,07 - 3,98 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,71 - 3,57 (m, 1H), 3,39 - 3,24 (m, 1H), 3,03 - 2,96 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,808 min.; LCMS (ES): m/z 389,3 [M+H]+.

Ejemplo 1

Ácido (S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

y

Ejemplo 2

Ácido (3S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(2-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

IA. (S,E)-3-(4-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1H-pirrol-2-carboxamido)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: A una solución del Intermediario 19 (13,9 g, 37,0 mmol) e Intermediario 1 (10,3 g, 37,0 mmol) en DMF (185 ml) se agregó EDC (14,2 g, 73,9 mmol), HOBT (11,3 g, 73,9 mmol) y DIPEA (20,5 ml, 118 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 2 h, la reacción se diluyó con agua (200 ml). Lo precipitado se recolectó por filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío para proporcionar 1A (20,0 g, 100 %) como un sólido amarillo. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) 5 11,76 (s a, 1H), 9,00 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,40 - 8,32 (m, 2H), 7,87 - 7,76 (m, 2H), 7,51 (dd, J = 8,1, 4,3 Hz, 1H), 7,36 - 7,22 (m, 3H), 7,20 -7,10 (m, 2H), 7,04 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,46 -5,33 (m, 1H), 4,08 - 3,97 (m, 2H), 3,83 - 3,78 (m, 3H), 2,99 - 2,79 (m, 2H), 1,12 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,440 min.; LCMS (ES): m/z 489,0 [M+H]+.

IB. (S,E)-3-(7-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: Una mezcla de 1A (12,6 g, 23,2 mmol), NBu4Br (7,48 g, 23,2 mmol), 1,2-dibromoetano (10,0 ml, 116 mmol) y NaOH ac. 1N (69,6 ml, 69,6 mmol) en dicloroetano (70,8 ml) se agitó a 50 °C por 1 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la reacción se diluyó con EtOAc (150 ml). Lo precipitado marrón viscoso se recolectó por filtración y se lavó con EtOAc. Lo filtrado se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:MeOH, 100:0 a 93:7 ) para proporcionar 1B (2,16 g, 18,1 %) como un sólido amarillo. RMN 1H (500MHz, CDCh) 89,07 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,19 -8,05 (m, 2H), 7,94 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 8,0, 4,1 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,16 -7,03 (m, 3H), 6,99 -6,87 (m, 2H), 6,39 -6,24 (m, 1H), 4,19 -4,05 (m, 3H), 3,99 (ddd, J = 12,2, 7,6, 4,1 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,66 -3,54 (m, 1H), 3,31 (ddd, J = 12,4, 7,7, 4,1 Hz, 1H), 3,05 -2,93 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,475 min.; LCMS (ES): m/z 515,1 [M+H]+.

1C-1. (S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo:

A una solución de 1B (95 mg, 0,185 mmol) en EtOH (5,0 ml) se agregó PtO2 (8,4 mg, 0,037 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera H2 (1 atm., balón) por 24 h. Se agregó PtO2 adicional (8,39 mg, 0,037 mmol) y la hidrogenación se continuó por unas 24 h adicionales. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y la almohadilla se lavó bien con EtOH. Lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5-pm; Fase Móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con 10 mM de acetato de amonio; Fase Móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con 10 mM de acetato de amonio; Gradiente: 38-68 % de B durante 25 minutos, después una retención de 5 minutos a 68 % de B; Flujo: 20 ml/min.) para proporcionar 1C-1 (33 mg, 32 %) como un sólido blanco. RMN 1H (500MHz, CDCh) 87,16 - 7,02 (m, 3H), 6,95 - 6,87 (m, 1H), 6,79 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,32 - 6,27 (m, 1H), 4,12 (qd, J = 7,1, 1,0 Hz, 2H), 3,97 (dd, J = 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,92 -3,82 (m, 4H), 3,53 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,46 - 3,38 (m, 2H), 3,24 (ddd, J = 12,2, 7,7, 4,3 Hz, 1H), 3,03 -2,91 (m, 2H), 2,88 -2,79 (m, 4H), 2,71 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,92 (quin, J = 6,0 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,285 min.; LCMS (ES): m/z 521,2 [M+H]+.

1C-2. (3S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(2-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: La reducción de 1B y purificación subsecuente mediante HPLC preparativa descrita por 1C-1 proporcionó 1C-2 (4,5 mg, 4,5 %) como un sólido amarillo ligero como una mezcla de diastereómeros. RMN 1H (500MHz, CDCla) 87,82 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,11 - 7,03 (m, 2H), 6,95 -6,89 (m, 1H), 6,80 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,50 (dd, J = 7,2, 5,2 Hz, 1H), 6,30 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,12 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 6,9, 5,0 Hz, 1H), 3,92 - 3,83 (m, 4H), 3,59 - 3,51 (m, 1H), 3,45 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,26 (ddd, J = 12,4, 7,7, 4,1 Hz, 1H), 3,05 -2,92 (m, 2H), 2,77 -2,68 (m, 2H), 2,65 -2,51 (m, 2H), 2,01 - 1,94 (m, 1H), 1,85 - 1,77 (m, 2H), 1,68 - 1,60 (m, 1H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,340 min.; LCMS (ES): m/z 521,2 [M+H]+.

Ejemplo 1: A una solución a temperatura ambiente de 1C-1 (11,1 mg, 0,021 mmol) en EtOH (0,388 ml) se agregó NaOH ac. 1M (64 pL, 0,064 mmol). Después de agitar por 1 h, la reacción se concentró al vacío y se acidificó a pH ~2 con HCl 1M acuoso. La mezcla se concentró nuevamente y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5-pm; Fase Móvil A: 5:95 CH3CN:H2O con 0,1 % de TFA; Fase Móvil B: 95:5 CH3CN:H2O con 0,1 % de TFA; Gradiente: 10-50 % de B durante 20 minutos, después una retención de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min.) para proporcionar el Ejemplo 1 (5,5 mg, 52 %) como un sólido blancuzco. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 87,39 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,18 - 7,11 (m, 2H), 7,06 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,47 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,01 (td, J = 8,3, 4,0 Hz, 1H), 3,93 - 3,87 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,67 (ddd, J = 12,9, 6,9, 4,1 Hz, 1H), 3,48 - 3,33 (m, 2H), 3,29 - 3,22 (m, 1H), 2,93 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 2,86 - 2,79 (m, 2H), 2,78 - 2,65 (m, 4H), 1,88 (quin, J = 6,0 Hz, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,087 min.; LCMS (ES): m/z 493,1 [M+H]+

Ejemplo 2: El Ejemplo 2 se preparó como una mezcla de diastereómeros usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 87,66 (s a, 1H), 7,36 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 7,18 - 7,10 (m, 2H), 7,06 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 6,70 -6,63 (m, 2H), 6,60 -6,52 (m, 1H), 6,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,13 -4,01 (m, 1H), 3,98 -3,89 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,73 -3,62 (m, 1H), 3,51 -3,39 (m, 1H), 3,27 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 3,01 -2,86 (m, 2H), 2,82 -2,67 (m, 2H), 2,58 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,05 - 1,97 (m, 1H), 1,88 - 1,80 (m, 1H), 1,75 (dt, J = 14,2, 7,2 Hz, 1H), 1,66 - 1,57 (m, 1H). LCMS (ES): m/z 493,1 [M+H]+.

Preparación alternativa de 1B (1)

1B

(S,£)-3-(7-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

1D. (S,E)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(3-oxobut-1-en-1-il)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 1D se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-1A. RMN 1H (500MHz, CDCI3) ó 7,40 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,11 -7,05 (m, 2H), 6,97 -6,90 (m, 2H), 6,48 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,30 (dd, J = 9,1, 6,9 Hz, 1H), 4,19 - 4,04 (m, 3H), 4,02 - 3,94 (m, 1H), 3,92 - 3,83 (m, 3H), 3,65 - 3,52 (m, 1H), 3,31 (td, J = 8,2, 3,7 Hz, 1H), 3,07 - 2,92 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,878 min.; LCMS (ES): m/z 429,1 [M+H]+.

1B: A una solución de 1D (29,8 mg, 0,070 mmol) y pirrolidina (1,44 |jL, 0,017 mmol) en DCM (0,070 ml) y MeOH (0,209 ml) se agregó 2-aminonicotinaldehído (8,49 mg, 0,070 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 17 h, el solvente se removió al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex® Luna AXIA 5 u 21,2 x 100 mm, gradiente de 15 min, corrida de 10 min, 20 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 8,4 mg de la sal de TFA de 1B. Este material se disolvió en MeOH (0,200 ml) y se agregó 40 mg de resina Dianion WA21J. Después de agitar a temperatura ambiente por 1 h, la resina se removió por filtración y se lavó bien con MeOH. Lo filtrado se concentró al vacío para proporcionar 1B (7,0 mg, 20 %) como un aceite anaranjado. RMN 1H (500MHz, CDCh) ó 9,08 (s a, 1H), 8,16 -8,06 (m, 2H), 7,92 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,40 (dd, J = 8,0, 4,1 Hz, 1H), 7,26 -7,23 (m, 1H), 7,16 -7,03 (m, 3H), 6,98 - 6,88 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 4,19 -4,07 (m, 3H), 4,02 -3,95 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,59 (dd, J = 7,4, 4,1 Hz, 1H), 3,33 - 3,26 (m, 1H), 3,05 - 2,93 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,582 min.; LCMS (ES): m/z 515,1 [M+H]+.

Preparación alternativa de 1B (2)

1B

(S,E)-3-(7-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

y

1E

(S)-3-(7-(1,3-di(1,8-naftiridin-2-il)propan-2-il)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo

1B y 1E: Una solución de 2-Metil-1,8-naftiridina (0,037 g, 0,257 mmol), Intermediario 25 (0,100 g, 0,257 mmol) y 4-metilbencensulfonamida (0,044 g, 0,257 mmol) en tolueno (0,555 ml) se agitó a 110 °C por 14 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el solvente se removió al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5 u 21,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 15 min, 10 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar sales de TFA de 1B y 1E, respectivamente. Estas sales se disolvieron individualmente en MeOH (1,000 ml) y se agregaron 250 mg de resina Dianion WA21J. Después de agitar a temperatura ambiente por 1 h, la resina se removió por filtración y se lavó bien con MeOH. Lo filtrados se concentraron al vacío para proporcionar 1B (25,8 mg, 20 %) como un aceite anaranjado-marrón y 1E (32,5 mg, 19 %) como un aceite marrón, respectivamente.

1B: RMN 1H (500MHz, CDCb) 59,06 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,16 -8,05 (m, 2H), 7,92 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 8,0, 4,1 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,13 - 7,04 (m, 3H), 6,98 - 6,86 (m, 2H), 6,32 (dd, J = 8,8, 7,2 Hz, 1H), 4,17 - 4,05 (m, 3H), 4,02 - 3,95 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,34 - 3,25 (m, 1H), 3,05 - 2,92 (m, 2H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,430 min.; LCMS (ES): m/z 515,1 [M+H]+

1E.: RMN 1H (500MHz, CDCl3) 59,04 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,07 (dt, J = 8,0, 1,5 Hz, 2H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,48 - 7,31 (m, 4H), 7,08 - 7,00 (m, 2H), 6,93 - 6,83 (m, 1H), 6,81 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,23 (dd, J = 8,7, 7,3 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 4,07 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,92 - 3,79 (m, 4H), 3,77 - 3,68 (m, 1H), 3,48 -3,33 (m, 5H), 3,20 - 3,08 (m, 1H), 3,02 - 2,81 (m, 3H), 1,12 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,430 min.; LCMS (ES): m/z 659,2 [M+H]+.

Los Ejemplos en la siguiente Tabla (Tabla 2) se prepararon en manera similares como el Ejemplo 1. Se midió la RMN 1H a 500 MHz, DMSO-ck, a menos que se indique de otro modo.

Tabla 2

continuación

continuación

Separación de diastereómeros del Ejemplo 9.

Ácido (3S)-3-(6-Metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-M)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2 a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

Ejemplo 11: Separación SFC Quiral del Ejemplo 9 (Dionex Ultímate 3000; Columna: Chiralpak ID 21 x 250 mm, 5 mieras; Fase Móvil: 10 mM de acetato de amonio en (50 % de MeOH, 50 % de acetonitrilo); Condiciones de flujo: 20 ml/min.; Longitud de Onda del Detector: 220 nm; Detalles de Inyección: 600 uL de 40 mg/ml en MeOH) proporcionó el Ejemplo 11 como un sólido blanco como un diastereómero único. Pico 1, pico de elución más rápida. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 58,17 (d, J = 2,20 Hz, 1H), 7,72 (dd, J = 2,53, 8,69 Hz, 1H), 7,63 (s a, 1H), 7,43 (d, J = 7,04 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,58 Hz, 1H), 6,68-6,75 (m, 2H), 6,61 (t, J = 6,16 Hz, 1H), 6,24 (t, J = 8,03 Hz, 1H), 4,04-4,14 (m, 1H), 3,92-4,01 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,67-3,77 (m, 1H), 3,44-3,53 (m, 1H), 2,71-2,99 (m, 4H), 2,61 (t, J = 7,70 Hz, 2H), 1,97 2,05 (m, 1H), 1,84-1,91 (m, 2H), 1,74-1,82 (m, 1H), 1,57-1,68 (m, 1H). LCMS (ES): m/z 476,4 [M+H]+.

Ejemplo 12, Pico 2

Ácido (3S)-3-(6-Metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

Ejemplo 12: Separación SFC Quiral del Ejemplo 9 (Dionex Ultimate 3000; Columna: Chiralpak ID 21 x 250 mm, 5 micras; Fase Móvil: 10 mM de acetato de amonio en (50 % de MeOH, 50 % de acetonitrilo); Condiciones de flujo: 20 ml/min.; Longitud de Onda del Detector: 220 nm; Detalles de Inyección: 600 uL de 40 mg/ml en MeOH) proporcionó el Ejemplo 12 como un sólido blanco como un diastereómero único. Pico 2, pico de elución más lenta. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 5 8,18 (d, J = 2,42 Hz, 1H), 7,72 (dd, J = 2,53, 8,69 Hz, 1H), 7,57-7,70 (m, 1H), 7,38 (d, J = 7,26 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,58 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 4,84 Hz, 2H), 6,58 (s a, 1H), 6,25 (t, J = 7,92 Hz, 1H), 4,04-4,15 (m, 1H), 3,92-4,01 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,67-3,77 (m, 1H), 3,42-3,51 (m, 1H), 3,33-3,38 (m, 1H), 2,87-2,97 (m, 2H), 2,71-2,83 (m, 2H), 2,60 (t, J = 7,70 Hz, 2H), 1,83-1,89 (m, 2H), 1,70-1,82 (m, 1H), 1,56-1,67 (m. 1H). LCMS (ES): m/z 476,4 [M+H]+.

Preparación alternativa del Ejemplo 3.

Ejemplo 3

Ácido (S)-3-(6-Metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoico

3A. (S,E)-3-(4-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1H-pirrol-2-carboxamido)-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo. 3A se preparó usando el procedimiento descrito por 1A. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) ó 11,76 (s a, 1H), 9,00 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,56 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,40 - 8,30 (m, 2H), 8,19 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,90 - 7,72 (m, 3H), 7,51 (dd, J = 8,1, 4,3 Hz, 1H), 7,31 (s a, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,04 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,48 - 5,32 (m, 1H), 4,04 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,06 - 2,94 (m, 1H), 2,91 - 2,81 (m, 1H), 1,12 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,332 min.; LCMS (ES): m/z 472,7 [M+H]+.

3B. (S,E)-3-(7-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinil)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo. A una solución a 0°C de 3A (0,250 g, 0,530 mmol) en DCM (35,3 ml) se agregó KOH (0,074 g, 1,33 mmol). Después de agitar por 10 min, una solución de triflato de difenilsulfonio (0,231 g, 0,636 mmol) en DCM (8,83 ml) se agregó por goteo y la agitación se continuó a 0 °C por 10 min. El baño de hielo se removió y la reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE ®, lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Luna-AXIA C18 21,5 x 250 mm 5 pm, gradiente de 25 min, corrida de 31 min, 15 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-10 mM de NH4OAc, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-10 mM de NH4OAc) para proporcionar 3B (0,168 g, 64 %) como un sólido amarillo.

RMN 1H (500MHz, CD3OD) ó 8,98 (dd, J = 4,4, 1,9 Hz, 1H), 8,34 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,73 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,0, 4,4 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,25 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,18 (s, 1H), 4,14 - 4,05 (m, 3H), 3,91 (s, 3H), 3,75 (ddd, J = 12,9, 7,2, 4,1 Hz, 1H), 3,44 - 3,35 (m, 1H), 3,20 - 3,10 (m, 2H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,438 min.; LCMS (ES): m/z 498,4 [M+H]+.

3C. 2 TFA de (S)-3-(6-metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo. A una solución de 3B (30 mg, 0,060 mmol) en EtOH (1,10 ml) se agregó y PtO2 (2,7 mg, 0,012 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2 (1 atm., balón) por 5 h. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de CELITE®, lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5u C18 21,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 12 min, 10 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 3C (36,6 mg, 83 %) como un aceite amarillo.

RMN 1H (500MHz, CD3OD) 88,16 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,20 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,17 -4,02 (m, 3H), 4,00 -3,94 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,74 -3,64 (m, 1H), 3,53 -3,45 (m, 2H), 3,33 (d, J = 0,6 Hz, 1H), 3,18 - 3,09 (m, 2H), 2,92 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 2,86 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 2,80 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,01 - 1,88 (m, 2H), 1,26 -1,11 (m. 3H). LCMS (ES): m/z 504,2 [M+H]+.

Ejemplo 3: El Ejemplo 3 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) 8 (br. s, 1H), 8,14 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,30 - 6,24 (m, 2H), 6,02 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,04 - 3,89 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,66 - 3,56 (m, 1H), 3,26 - 3,17 (m, 3H), 3,07 (dd, J = 15,5, 7,8 Hz, 1H), 2,97 - 2,88 (m, 1H), 2,72 - 2,66 (m, 2H), 2,66 - 2,62 (m, 2H), 2,60 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,79 - 1,68 (m, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,245 min.; LCMS (ES): m/z 476,5 [M+H]+

Los Ejemplos en la siguiente Tabla (Tabla 3) se prepararon en una manera similar como la preparación alternativa del Ejemplo 3. RMN 1H se midió a 500 MHz, DMSO-de a menos que se indique de otro modo.

Tabla 3

continuación

continuación

Ejemplo 22

Ácido (S)-3-(6-Isobutoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoico

22A. TFA de ácido (S)-3-(6-Hidroxipiridin-3-il)-3-(1 -oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etM)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico: El Ejemplo 3 (25 mg, 0,053 mmol) y clorhidrato de piridina (75 mg, 0,65 mmol) se agitaron en un vial de reacción sellado a 125 °C por 7,5 min. (Fusión pura). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5u C1821,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 12 min, 0 % a 100 % de Solvente B = 90 % de ACN-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de ACN-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 22A (23 mg, 63 %) como un sólido claro. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 57,62 (dd, J = 9,4, 2,8 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 5,99 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,13 -3,95 (m, 2H), 3,72 - 3,63 (m, 1H), 3,51 - 3,46 (m, 2H), 3,41 (dt, J = 12,7, 4,0 Hz, 1H), 3,02 (dd, J = 8,0, 3,0 Hz, 2H), 2,95 -2,90 (m, 2H), 2,87 - 2,83 (m, 2H), 2,82 - 2,76 (m, 2H), 1,94 (dd, J = 6,2, 5,4 Hz, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2) 0,823 min.; LCMS (ES): m/z 462,3 [M+H]+.

22B. TFA de (S)-3-(6-isobutoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de isobutilo: Carbonato de plata (104 mg, 0,377 mmol) se agregó a una solución de 22A (26,0 mg, 0,038 mmol) en tolueno (0,510 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un vial de reacción sellado por 22 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE®, lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (XBridge Prep C185u OBD 19 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida 15 min, 5 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 22B (2,8 mg, 9,3 %) como un aceite amarillo. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 58,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,73 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J= 1,7 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,20 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,10 - 4,00 (m, 3H), 3,99 - 3,92 (m, 1H), 3,84 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 3,73 - 3,63 (m, 1H), 3,52 - 3,46 (m, 2H), 3,36 - 3,32 (m, 1H), 3,20 - 3,10 (m, 2H), 2,96 - 2,90 (m, 2H), 2,87 - 2,83 (m, 2H), 2,81 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,06 (dt, J = 13,3, 6,7 Hz, 1H), 1,97 - 1,91 (m, 2H), 1,89 - 1,79 (m, 1H), 1,01 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 0,87 (dd, J = 6,7, 2,9 Hz, 6H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2) 1,633 min.; LCMS (ES): m/z 574,5 [M+H]+.

Ejemplo 22: El Ejemplo 22 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 5 8,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,73 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,18 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,11 -4,00 (m, 3H), 4,00 -3,94 (m, 1H), 3,70 (ddd, J = 12,9, 6,9, 4,4 Hz, 1H), 3,52 - 3,46 (m, 2H), 3,34 - 3,32 (m, 1H), 3,14 - 3,04 (m, 2H), 2,97 - 2,89 (m, 2H), 2,89 -2,82 (m, 2H), 2,81 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,06 (dt, J = 13,3, 6,8 Hz, 1H), 1,98 - 1,90 (m, 2H), 1,01 (d, J = 6,6 Hz, 6H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,707 min.; LCMS (ES): m/z 518,5 [M+h ]+

Los Ejemplos en la siguiente Tabla (Tabla 4) se prepararon en una manera similar como el Ejemplo 22. RMN 1H se midió a 500 MHz, CD3OD a menos que se indique de otro modo.

Tabla 4

Ejemplo 25

Ácido (S)-2-(((Bendloxi)carbonil)amino)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

25A. (E)-4-(2-(1,8-naftiridin-2-il)vinM)-1H-pirrol-1,2-dicarboxilato de 1-(terc-butil) 2-etilo: A una solución del Int-19B (2,50 g, 8,52 mmol) en ACN (17,2 ml) se agregó DMAP (0,104 g, 0,852 mmol) y BOC2O (2,42 g, 11,1 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente por 2 h, la reacción se apagó con NH4Cl sat. y se diluyó con EtOAc (50 ml). La capa orgánica se lavó con NaHCO3 saturado, agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhídro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:EtOAc, 100:0 a 50:50) para proporcionar 25A (2,40 g, 72 %) como un sólido verde ligero. RMN 1H (500MHz, CDCb) 59,09 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,18 - 8,07 (m, 2H), 7,84 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 8,1,4,3 Hz, 1H), 7,18 - 7,06 (m, 2H), 4,35 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,61 (s, 9H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,973 min.; LCMS (ES): m/z 394,2 [M+H]+.

25B. 4-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-1H-pirrol-1,2-dicarboxilato de 1-(terc-butil) 2-etilo: A una solución de 25A (2,40 g, 6,10 mmol) en EtOH (81 ml) se agregó PtO2 (0,277 g, 1,22 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2 (1 atm, balón) por 3,5 h. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de CELITE®, lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:MeOH, 100:0 a 95:5) para proporcionar 25B (1,46 g, 60 %) como un aceite anaranjado. RMN 1H (500MHz, CDCl3) 57,09 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,78 (s a, 1H), 4,29 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,46 - 3,37 (m, 2H), 2,81 - 2,74 (m, 4H), 2,70 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,92 (quin, J = 6,0 Hz, 2H), 1,57 (s, 9H), 1,35 (t, J = 7 .2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 2,080 min.; LCMS (ES): m/z 400,3 [M+H]+.

25C. HCl de ácido 4-(2-(5,6,7,8-Tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-1H-pirrol-2-carboxílico: Una solución de NaOH (1,50 g, 37,5 mmol) en agua (2,78 ml) se agregó por goteo a una solución a temperatura ambiente de 25B (5,00 g, 12,5 mmol) en EtOH (52,8 ml). La reacción se calentó a 80 °C y se agitó por 2 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el EtOH se removió al vacío y el residuo se acidificó a pH ~6 con HCl 1M acuoso. Lo precipitado se recolectó por filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío. Este material se disolvió en HCl 4M en dioxano (2 ml) y se agitó a temperatura ambiente por 5 min. El solvente se removió al vacío para proporcionar 25C (2,03 g, 53 %) como un sólido anaranjado como la sal de HCl. Lo filtrado se concentró al vacío y después se purificó por cromatografía ISCO de fase inversa (columna de 50g - cartucho de gel de sílice HPC 18 Aq, corrida de 24 min.) y se eluyó con un gradiente desde 10 % de ACN/H2O/TFA (5 %/95 %/0,05 %) a 100 % de ACN/H2O/TFA (95 %.5 %/0,05 %) para proporcionar 25C (0,679 g, 14 %) como un sólido anaranjado como la sal de TFA. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 57,09 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,57 - 6,51 (m, 2H), 6,34 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 2H), 2,74 (s, 4H), 2,68 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,96 - 1,79 (m, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 0,930 min.; LCMS (ES): m/z 272,1 [M+H]+.

25D. TFA de (S)-2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(4-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-1H-pirrol-2-carboxamido)propanoato de etilo: A una solución de 25C (sal de HCl) (0,750 g, 2,44 mmol) e Intermediario 17 (0,738 g, 2,44 mmol) en DMF (4,65 ml) se agregó BOP (1,62 g, 3,66 mmol) y DIPEA (2,13 ml, 12,2 mmol). Después de la agitación a temperatura ambiente durante la noche, la reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhídro y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:MeOH, 100:0 a 90:10) para proporcionar 25D (1,1 g, 87%) como un sólido blancuzco. RMN 1H (500MHz, D M S O d) ó 11,16 (s a, 1H), 7,97 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,41 - 7,20 (m, 5H), 7,06 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,59 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,35 (s a, 1H), 6,29 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,05 (s, 2H), 4,23 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,07 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,60 - 3,51 (m, 2H), 3,25 (s a, 2H), 2,69 (s, 4H), 2,62 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 1,78 - 1,71 (m, 2H), 1,13 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,815 min.; LCMS (ES): m/z 520,3 [M+H]+.

Ejemplo 25. A una solución a 0°C de 25D (50 mg, 0,067 mmol) en DCM (4,50 ml) se agregó KOH (16,9 mg, 0,301 mmol) y la reacción se agitó a 0 °C por 10 min. Se agregó una solución de triflato de difenilvinilsulfonio (29,1 mg, 0,080 mmol) en DCM (1,12 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C por 10 min. El baño de hielo se removió y la agitación se continuó a temperatura ambiente por 3,5 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE®, lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5u C1821,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 12 min, 5 % a 100 % de Solvente B = 90 % de ACN-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de ACN-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar el Ejemplo 25 (17,3 mg, 40 %) como un sólido blanco. RMN 1H (400MHz, CD3OD) ó 7,55 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,32 -7,20 (m, 5H), 6,71 (s, 1H), 6,65 -6,59 (m, 2H), 5,14 - 5,08 (m, 1H), 5,03 - 4,97 (m, 1H), 4,60 (dd, J = 9,2, 4,8 Hz, 1H), 3,99 - 3,90 (m, 3H), 3,80 (dd, J = 13,9, 9,5 Hz, 1H), 3,72 - 3,62 (m, 2H), 3,51 - 3,44 (m, 2H), 2,94 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,89 - 2,84 (m, 2H), 2,79 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,93 (quin, J = 5,9 Hz, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,467 min.; LCMS (ES): m/z 518,4 [M+H]+.

Ejemplo 26

Ácido (S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(6-iodo-1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

26A. (S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(6-iodo-1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)etil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: I2 (0,024 g, 0,096 mmol) se agregó en forma de porciones a una solución a 5 °C de 1C-1 (0,050 g, 0,096 mmol) y Trifluoroacetato de Plata (0,021 g, 0,096 mmol) en DCM (1,0 ml). Después de agitar a 5 °C por 1 h, la reacción se calentó a temperatura ambiente y la agitación se continuó por 1 h. La mezcla de reacción se filtró y lo filtrado se lavó con 5 % de Na2S2O3 (2x) seguido por agua. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5-pm; Fase Móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con 10 mM de acetato de amonio; Fase Móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con 10 mM de acetato de amonio; Gradiente: 41-77 % de B durante 25 minutos, después una retención de 8 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min.) para proporcionar 26A (23 mg, 35 %) como un sólido amarillo ligero. RMN 1H (500MHz, CDCh) ó 7,12 - 7,04 (m, 3H), 6,95 - 6,90 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,29 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,17 -4,06 (m, 2H), 3,93 (dd, J = 7,6, 4,5 Hz, 1H), 3,90 -3,82 (m, 4H), 3,59 -3,51 (m, 1H), 3,45 -3,39 (m, 2H), 3,27 (ddd, J = 12,5, 7,7, 4,3 Hz, 1H), 3,04 - 2,91 (m, 2H), 2,84 - 2,74 (m, 4H), 2,70 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,90 (dt, J = 11,7, 6,0 Hz, 2H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,620 min.; LCMS (ES): m/z 647,1 [M+H]+.

Ejemplo 26: El Ejemplo 26 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, DMSO-d6) ó 7,55 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,05 (m, 4H), 6,72 (s, 1H), 6,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,97 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,66 - 3,55 (m, 1H), 3,47 (s a, 1H), 3,39 (s a, 1H), 3,28 -3,18 (m, 1H), 3,06 (dd, J = 15,6, 7,6 Hz, 1H), 2,93 - 2,82 (m, 3H), 2,75 - 2,64 (m, 4H), 1,81 (s a, 2H). LCMS (ES): m/z 619,3 [M+H]+.

Ejemplo 27

Ácido (S)-3-(3-Fiuoro-4-hidroxifenii)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-ii)etii)-3,4-dihidropirroio[1,2-a]pirazin-2(1 H)-ii)propanoico

27A. (S)-3-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(1-oxo-7-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-M)etii)-3,4-dihidropirroio[1,2-a]pirazin-2(1H)-ii)propanoato de etilo: Tribromoborano (1,0 M en hexanos) (0,958 mi, 0,958 mmoi) se agregó por goteo a una solución a 0 oC de 1C-1 (0,050 g, 0,096 mmoi) en DCM (0,915 mi). Después de agitar a 0 °C por 30 min., ia reacción se apagó ientamente con EtOH. La mezcia se diiuyó con DCM y se iavó cuidadosamente con NaHCO3 saturado. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro, se concentró ai vacío y ei residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5u C1821,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 12 min, 10 % a 100 % de Soivente B = 90 % de ACN-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Soivente A = 10 % de ACN-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 27A (22,1 mg, 45 %) como un sóiido bianco.

RMN 1H (500MHz, CDCh) 57,14 - 7,04 (m, 2H), 7,01 - 6,89 (m, 2H), 6,75 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,21 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,71 (s a, 1H), 4,11 (qd, J = 7,1, 1,2 Hz, 2H), 3,94 (dd, J = 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,89 - 3,78 (m, 1H), 3,63 - 3,46 (m, 1H), 3,41 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 3,25 (ddd, J = 12,4, 7,8, 4,3 Hz, 1H), 2,98 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 2,78 (s, 4H), 2,70 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,96 - 1,83 (m, 2H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,062 min.; LCMS (ES): m/z 507,1 [M+H]+.

Ejempio 27. Ei Ejempio 27 se preparó usando ei procedimiento descrito por ei Ejempio 1. RMN 1H (500MHz, DMSO-d6) 5 12,67 - 11,76 (m, 1H), 10,09 -9,61 (m, 1H), 7,08 (dd, J = 12,4, 1,9 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,97 -6,92 (m, 1H), 6,91 - 6,83 (m, 1H), 6,71 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,00 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,03 - 3,84 (m, 2H), 3,53 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 3,27 - 3,19 (m, 2H), 3,13 (ddd, J = 13,0, 8,2, 4,4 Hz, 1H), 2,93 (s a, 1H), 2,79 (s a, 1H), 2,72 - 2,56 (m, 6H), 1,78 - 1,68 (m, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,188 min.; LCMS (ES): m/z 479,2 [M+H]+.

Ejempio 28

Ácido (S)-3-(3-Fiuoro-4-metoxifenii)-3-(1-oxo-7-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-ii)-3,4-dihidropirroio[1,2-a]pirazin-2(1H)-ii)propanoico

28A. (S)-3-(4-(1,8-naftiridin-2-il)-1H-pirrol-2-carboxamido)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: 28A se preparó usando el procedimiento descrito por 1A. RMN 1H (500MHz, DMSO-cfe) 5 11,93 (s a, 1H), 8,99 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 8,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,42 - 8,29 (m, 2H), 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,50 (dd, J = 8,1,4,3 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 12,7, 1,9 Hz, 1H), 7,24 - 6,99 (m, 3H), 4,06 - 4,01 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,92 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 2,85 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 1,12 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,395 min.; LCMS (ES): m/z 463,1 [M+H]+.

8B. (S)-3-(7-(1,8-naftiridin-2-il)-1 -oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: 28B se preparó usando el procedimiento descrito por 1B. RMN 1H (500MHz, CDCI3) 59,11 - 9,04 (m, 1H), 8,18 - 8,15 (m, 2H), 7,86 - 7,82 (m, 1H), 7,80 - 7,75 (m, 1H), 7,56 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,46 - 7,39 (m, 1H), 7,17 -7,09 (m, 2H), 7,00 -6,91 (m, 1H), 6,39 -6,34 (m, 1H), 4,19 -4,13 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 3,72 -3,59 (m, 1H), 3,42 -3,27 (m, 1H), 3,05 - 3,01 (m, 2H), 1,26 - 1,20 (m, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,438 min.; LCMS (ES): m/z 489,1 [M+H]+.

28C. (S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: A una solución de 28B (70,4 mg, 0,144 mmol) en EtOH (3,90 ml) se agregó PtO2 (6,56 mg, 0,029 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2 (1 atm., balón) por 5 h. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de CELITE ® y lo filtrado se concentró al vacío para proporcionar 28C (63 mg, 88 %) como un sólido amarillo el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación. LCMS (ES): m/z 493,2 [M+H]+.

Ejemplo 28: El Ejemplo 28 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) 512,83 - 11,59 (m, 1H), 7,34 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,20 (s, 1H), 6,06 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,15 -3,97 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,69 - 3,55 (m, 1H), 3,28 -3,18 (m, 3H), 3,08 (dd, J = 15,4, 7,7 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 15,4, 8,3 Hz, 1H), 2,62 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 1,82 - 1,68 (m, 2H). LCMS (ES): m/z 465,1 [M+H]+.

Ejemplo 29

Ácido (S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-((5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)metil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

29A. (S,Z)-3-(3-fluoro-4-metox¡fen¡l)-3-(7-(2-nitroprop-1-en-1-¡l)-1-oxo-3,4-d¡h¡drop¡rrolo[1,2-a]p¡raz¡n-2(1H)-il)propanoato de et¡lo: Una soluc¡ón del Intermed¡ar¡o 25 (0,215 g, 0,554 mmol) y NH4OAc (0,043 g, 0,554 mmol) en nitroetano (1,11 ml, 15,5 mmol) se agitó a 110 °C por 30 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con DCM (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhídro y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos:EtOAc, 100:0 a 0:100) para proporcionar 29A (0,204 g, 83 %) como un sólido amarillo. RMN 1H (500MHz, CDCl3) 87,98 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,13 - 7,05 (m, 2H), 7,01 (s, 1H), 6,97 - 6,90 (m, 1H), 6,36 - 6,25 (m, 1H), 4,20 -4,09 (m, 3H), 4,03 (ddd, J = 12,2, 7,4, 4,3 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,71 - 3,58 (m, 1H), 3,33 (ddd, J = 12,4, 7,8, 4,3 Hz, 1H), 3,07 - 2,90 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 2,482 min.; LCMS (ES): m/z 446,3 [M+H]+.

29B. (S)-3-(3-fluoro-4-metox¡fen¡l)-3-(1-oxo-7-(2-oxopropil)-3,4-d¡h¡drop¡rrolo[1,2-a]p¡raz¡n-2(1H)-¡l)propanoato de etilo: Una mezcla de 29A (0,204 g, 0,458 mmol) y Dihidrato de Cloruro de Estaño (II) (1,03 g, 4,58 mmol) en THF (2,05 ml) se agitó a 100 °C bajo irradiación jW por 10 min. La mezcla de reacción se diluyó con una mezcla 1:1 (25 ml) de agua y DCM y se filtró a través de una almohadilla de CELITE®. Lo filtrado se lavó cuidadosamente con NaHCO3 saturado. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhídro y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, hexanos:EtOAc, 100:0 a 25:75) para proporcionar 29B (97 mg, 51 %) como un sólido blanco. RMN 1H (500MHz, CDCla) 87,12 - 7,04 (m, 2H), 6,96 -6,88 (m, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,30 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,12 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 4,01 (dd, J = 7,3, 4,5 Hz, 1H), 3,95 - 3,85 (m, 4H), 3,60 - 3,48 (m, 3H), 3,27 (ddd, J = 12,2, 7,5, 4,3 Hz, 1H), 3,04 - 2,92 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,958 min.; LCMS (ES): m/z 417,3 [M+H]+.

29C. (S)-3-(7-((1,8-naft¡r¡d¡n-2-¡l)met¡l)-1-oxo-3,4-d¡h¡drop¡rrolo[1,2-a]piraz¡n-2(1H)-¡l)-3-(3-fluoro-4-metox¡fen¡l)propanoato de etilo: 29C se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-22D. Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,618 min.; LCMS (ES): m/z 503,4 [M+H]+.

29D. (S)-3-(3-fluoro-4-metox¡fen¡l)-3-(1-oxo-7-((5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naft¡r¡d¡n-2-¡l)met¡l)-3,4-d¡h¡drop¡rrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 29D se preparó usando el procedimiento descrito por 28C. LCMS (ES): m/z 507,3 [M+H]+.

Ejemplo 29: El Ejemplo 29 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, CD3OD) 8 7,30 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,18 -7,10 (m, 2H), 7,05 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 6,70 (s, 1H), 6,63 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,25 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,06 (td, J = 8,5, 4,3 Hz, 1H), 3,98 - 3,89 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,75 - 3,64 (m, 3H), 3,40 (dd, J = 6,2, 3,4 Hz, 2H), 3,30 - 3,25 (m, 1H), 2,91 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 2,72 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,87 (quin, J = 5,9, Hz, 2H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,383 min.; LCMS (ES): m/z 479,2 [M+H]+.

Ejemplo 30

Ácido (S)-3-(6-Metox¡p¡r¡d¡n-3-¡l)-3-(1-oxo-7-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naft¡r¡d¡n-2-¡l)prop¡l)-3,4-d¡h¡drop¡rrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

30A. (3S)-3-(7-((E)-4-hidroxipent-1-en-1-il)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo: 30A se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-1A. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) ó 8,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,68 (d, J =1,4 Hz, 1H), 6,39 - 6,23 (m, 2H), 5,95 (dd, J = 15,4, 8,0 Hz, 1H), 4,18 - 4,12 (m, 2H), 4,07 - 4,01 (m, 1H), 4,00 - 3,86 (m, 5H), 3,61 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,37 -3,25 (m, 1H), 3,12 -2,99 (m, 2H), 2,42 -2,34 (m, 1H), 2,31 -2,21 (m, 1H), 1,28 -1,17 (m, 6H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,587 min.; LCMS (ES): m/z 428,3 [M+H]+.

30B. (S,E)-3-(6-metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(4-oxopent-1-en-1-il)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: periodinano Dess-Martin (0,089 g, 0,211 mmol) se agregó a una solución de 30A (0,075 g, 0,175 mmol) en DCM (1,64 ml). Después de la agitación a temperatura ambiente por 1h, la reacción se diluyó con éter dietílico y se filtró a través de una almohadilla de CELITE®. Lo filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, DCM:EtOAc, 100:0 a 0:100) para proporcionar 30B (41,1 mg, 55%) como un sólido anaranjado. LCMS (ES): m/z 426,3 [M+H]+.

30C. (S)-3-(6-metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(4-oxopentil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 30C se preparó usando el procedimiento descrito por 28C. RMN 1H (500MHz, CDCh) 88,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,26 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,13 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,00 (td, J = 8,0, 3,7 Hz, 1H), 3,94 - 3,88 (m, 4H), 3,58 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,29 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,10 -2,98 (m, 2H), 2,45 (td, J = 7,3, 3,6 Hz, 4H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (quin, J = 7,4 Hz, 2H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,717 min.; LCMS (ES): m/z 428,3 [M+H]+.

30D. (S)-3-(7-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(6-metoxipiridin-3-il)propanoato de etilo: 30D se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-19E. RMN 1H (500MHz, CDCh) 8 9.07 (dd, J = 4,3, 2,1 Hz, 1H), 8,15 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 8,1, 4,3 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,14 -4,09 (m, 2H), 3,98 (td, J = 8,0, 3,7 Hz, 1H), 3,93 -3,85 (m, 4H), 3,60 - 3,52 (m, 1H), 3,27 (ddd, J = 12,4, 7,7, 4,1 Hz, 1H), 3,10 - 2,98 (m, 4H), 2,57 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,15 (quin, J = 7,6 Hz, 2H), 1,21 -1,26 (m, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,342 min.; LCMS (ES): m/z 514,4 [M+H]+.

30E. (S)-3-(6-metoxipiridin-3-il)-3-(1-oxo-7-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 30E se preparó usando el procedimiento descrito por 28C RMN 1H (500MHz, CDCla) 88,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 6,29 - 6,21 (m, 2H), 4,12 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 7,6, 4,5 Hz, 1H), 3,94 - 3,85 (m, 4H), 3,58 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3,49 - 3,40 (m, 2H), 3,29 (ddd, J = 12,3, 7,6, 4,3 Hz, 1H), 3.08 - 2,98 (m, 2H), 2,73 - 2,62 (m, 4H), 2,50 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,96 - 1,82 (m, 4H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,612 min.; LCMS (ES): m/z 518,4 [M+H]+.

Ejemplo 30: El Ejemplo 30 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, CDCla) 8 14,57 (s a, 1H), 9,47 (s a, 1H), 8,17 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,70 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,37 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,31 (dd, J = 10,0, 5,6 Hz, 1H), 4,01 (td, J = 8,0, 3,7 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,93 -3,87 (m, 1H), 3,63 -3,54 (m, 1H), 3,49 (s a, 2H), 3,29 (ddd, J = 12,3, 7,8, 4,1 Hz, 1H), 3,16 - 3,08 (m, 1H), 3,07 - 2,94 (m, 1H), 2,76 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,71 - 2,61 (m, 2H), 2,50 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,98 -1,87 (m, 4H). Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 2): 1,290 min.; LCMS (ES): m/z 490,1 [M+H]+.

Ejemplo 31

Ácido (S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

31A. (S,E)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(5-oxohex-1-en-1-il)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 31A se preparó usando el procedimiento descrito por el Int-1A. Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 3,068 min.; LCMS (ES): m/z 457,2 [M+H]+.

31B. (S,E)-3-(7-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-1-oxo-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)propanoato de etilo: Una solución de 31A (17,7 mg, 0,039 mmol), 2-aminonicotinaldehído (6,16 mg, 0,050 mmol) y L-prolina (4,46 mg, 0,039 mmol) en EtOH (0,194 ml) se agitó a reflujo por 18 h. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, el solvente se removió al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Phenomenex Luna AXIA 5u C18 21,2 x 100 mm, gradiente de 10 min, corrida de 12 min, 0 % a 100 % de Solvente B = 90 % de MeOH-10 % de H2O-0,1 % de TFA, Solvente A = 10 % de MeOH-90 % de H2O-0,1 % de TFA) para proporcionar 21,2 mg de la sal de TFA de 31B. Este material se disolvió en MeOH (0,250 ml) y se agregaron 100 mg de resina Dianion WA21J. Después de agitar a temperatura ambiente por 1 h, la resina se removió por filtración y se lavó bien con MeOH. Lo filtrado se concentró al vacío para proporcionar 31B (15,0 mg, 71 %) como un sólido amarillo. LCMS (ES): m/z 543,3 [M+H]+.

31C. (S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: 31C se preparó usando el procedimiento descrito por 28C. Tiempo de retención de HPLC (Método n.° 1): 2,660 min.; LCMS (ES): m/z 549,3 [M+H]+.

Ejemplo 31: El Ejemplo 31 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500MHz, DMSO-de) 57,18 - 7,06 (m, 3H), 7,02 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 6,24 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,01 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,99 - 3,87 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,59 (s a, 1H), 3,22 (s a, 2H), 3,15 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,05 -2,98 (m, 1H), 2,91 - 2,82 (m, 1H), 2,61 - 2,56 (m, 2H), 2,41 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,35 (t, J=7,0 Hz, 2H), 1,72 (s a, 2H), 1,54 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 1,46 (d, J = 7,0 Hz, 2H). LCMS (ES): m/z 521,5 [M+H]+.

Ejemplo 32

TFA de ácido (S)-3-(3-Fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)propanoico

32A. (S)-3-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(1-oxo-7-((piridin-2-ilamino)metil)-3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)propanoato de etilo: Una mezcla del intermediario 25 (10 mg, 0,026 mmol), piridin-2-amina (2,42 mg, 0,026 mmol) y NaBH4 (1,95 mg, 0,051 mmol) en DCM (0,257 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 32A (11,2 mg, 93 %) en forma de un aceite en bruto de color amarillo que se usó en la siguiente etapa sin purificación. LCMS (ES): m/z 467,1 [M+H]+.

Ejemplo 32: El Ejemplo 32 se preparó usando el procedimiento descrito por el Ejemplo 1. RMN 1H (500 MHz, DMSO-de) ó 7,93 (br d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,80 (br t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,20 - 7,08 (m, 4H), 7,00 - 6,93 (m, 2H), 6,79 (br t, J = 6,4 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,02 (br t, J = 7,9 Hz, 1H), 4,34 (s, 2H), 4,07 - 3,93 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,64 - 3,52 (m, 1H), 3,17 (br d, J = 8,2 Hz, 1H), 3,10 -3,01 (m, 1H), 2,91 (dd a, J = 15,4, 8,4 Hz, 1H). LCMS (ES): m/z 439,4 [M+H]+.

Otras características de la invención deben llegar a ser aparentes en el curso de las descripciones anteriores de modalidades a modo de ejemplo que se proporcionan para ilustración de la invención y no están propuestas para ser limitantes de la misma. La presente invención puede ser incluida en otras formas específicas sin apartarse del espíritu o atributos esenciales de las mismas. Esta invención abarca todas las combinaciones de aspectos preferidos de la invención indicados en la presente. Se entiende que cualquiera y todas las modalidades de la presente invención pueden ser tomadas en conjunto con cualquiera de otra modalidad o modalidades para describir modalidades adicionales. Se entiende también que cada elemento individual de las modalidades es su propia modalidad independiente. Además, cualquier elemento de una modalidad significa ser combinado con cualquiera y todos los otros elementos de cualquier modalidad para describir una modalidad adicional.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmula I:

en la que:

X es un enlace, -O-, -S-, -NR7-, alquileno, alquilenoxi, alquilentio o alquileno-NR7-;

R1 es hidrógeno, halo o alquilo;

R2 es (piridinil)amino, tetrahidronaftiridinilo o naftiridinilo, y está sustituido con 0-2 sustituyentes alquilo;

R3 es hidrógeno, halo o alquilo;

R4 es hidrógeno o Ar1;

R5 es hidrógeno, benciloxicarbonilamino o Ar1SO2NH;

R6 es hidrógeno;

R7 es hidrógeno o alquilo; y

Ar1 es: fenilo, naftilo, dihidrobenzofuranilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolinilo o quinoxalinilo, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados a partir de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, (cicloalquil)alcoxi, y haloalcoxi;

o un estereoisómero, un tautómero, una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde X es un enlace o alquileno.

3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde R1 es hidrógeno o halo.

4. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde R3 es hidrógeno.

5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde R4 es Ar1 y R5 es hidrógeno.

6. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde R4 es hidrógeno y R5 es benciloxicarbonilamino o Ar1SO2NH.

7. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde Ar1 es: fenilo, piridinilo o pirimidinilo; y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados a partir de: ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, (cicloalquil)alcoxi y haloalcoxi.

8. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y un vehículo.

9. Un compuesto de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para su uso en terapia.

10. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para su uso en el tratamiento de una enfermedad, de un trastorno o de una afección seleccionados entre: fibrosis patológica, rechazo de trasplante, cáncer, osteoporosis o trastornos inflamatorios, en una paciente que lo necesita.

11. El compuesto o estereoisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable del mismo o solvato del mismo para uso de conformidad con la reivindicación 10, en donde la fibrosis patológica es: fibrosis pulmonar, hepática, renal, cardíaca, demal, ocular o pancreática.

12. El compuesto o estereoisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable del mismo o solvato del mismo para su uso de conformidad con la reivindicación 10, en donde la enfermedad, el trastorno o la afección son: fibrosis pulmonar idiopática (FPI), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica.

13. El compuesto o estereoisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable del mismo o solvato del mismo para su uso de conformidad con la reivindicación 10, en donde el cáncer es de: vejiga, sangre, hueso, cerebro, mama, sistema nervioso central, cuello uterino, colon, endometrio, esófago, vesícula biliar, genitales, tracto genitourinario, cabeza, riñón, laringe, hígado, pulmón, tejido muscular, cuello, mucosa oral o nasal, ovario, páncreas, próstata, piel, bazo, intestino delgado, intestino grueso, estómago, testículo o tiroides.