ES2910165T3 - Sales de fosforamidato de difosfato de nucleósidos como compuestos contra el cáncer - Google Patents

Sales de fosforamidato de difosfato de nucleósidos como compuestos contra el cáncer Download PDF

Info

Publication number
ES2910165T3
ES2910165T3 ES18819340T ES18819340T ES2910165T3 ES 2910165 T3 ES2910165 T3 ES 2910165T3 ES 18819340 T ES18819340 T ES 18819340T ES 18819340 T ES18819340 T ES 18819340T ES 2910165 T3 ES2910165 T3 ES 2910165T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
alkyl
compound
occurrence
cycloalkyl
aryl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18819340T
Other languages
English (en)
Inventor
Hugh Griffith
Michaela Serpi
Fabrizio Pertusati
Magdalena Slusarczyk
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nucana PLC
Original Assignee
Nucana PLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nucana PLC filed Critical Nucana PLC
Application granted granted Critical
Publication of ES2910165T3 publication Critical patent/ES2910165T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C07H19/207—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids the phosphoric or polyphosphoric acids being esterified by a further hydroxylic compound, e.g. flavine adenine dinucleotide or nicotinamide-adenine dinucleotide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: **(Ver fórmula)** en el que R1 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: alquilo C1-C24, alquenilo C3-C24, alquinilo C3-C24, alquileno C0-C4-cicloalquilo C3-C8 y alquileno C0-C4-arilo; R2 y R3 cada uno independientemente en cada ocurrencia se seleccionan de H, alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7; o R2 y R3 junto con el átomo al cual se adhieren forman un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; R4 es independientemente en cada ocurrencia H o alquilo C1-C4; o R4, un grupo seleccionado de R2 y R3 y los átomos a los cuales se adhieren pueden formar un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; R5 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6, 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3- C8, heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, alquileno C1-C3-R5a y alquilo C1-C8, dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8; R5a se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6, 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3- C8, heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8; R6 se selecciona independientemente de: **(Ver fórmula)** y **(Ver fórmula)** R7 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, imidazol, indol, SRa, ORa, CO2Ra, CO2NRaRa, NRaRb y NH(=NH)NH2; R8 se selecciona independientemente de H y **(Ver fórmula)** Z1 y Z2 cada uno se seleccionan independientemente de O y S; Y se selecciona independientemente de H, F, Cl y OMe; X es independientemente en cada ocurrencia un catión farmacéuticamente aceptable; en el que cualquier grupo arilo es ya sea fenilo o naftilo; en el que cuando cualquiera de R1, R2, R3, R4, R5 o R7 es un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo, ese grupo alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo se sustituye opcionalmente con desde 1 hasta 4 sustituyentes seleccionados de: halo, nitro, ciano, NRaRa, NRaS(O)2Ra, NRaC(O)Ra, NRaCONRaRa, NRaCO2Ra, ORa; SRa, SORa, SO3Ra, SO2Ra, SO2NRaRa, CO2Ra C(O)Ra, CONRaRa, CRaRaNRaRa, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4 y haloalquilo C1-C4; en el que Ra se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H y alquilo C1-C4; y Rb se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H, y alquilo C1-C4 y C(O)-alquilo C1-C4.

Description

DESCRIPCIÓN
Sales de fosforamidato de difosfato de nucleósidos como compuestos contra el cáncer
La presente invención proporciona compuestos útiles en el tratamiento del cáncer, por ejemplo, la leucemia. Los compuestos comprenden una sal de un fosforamidato de difosfato. La presente invención también proporciona formulaciones de dichos compuestos y dichos compuestos para uso en el tratamiento del cáncer.
Antecedentes de la invención
Los fármacos basados en nucleósidos se han convertido en una poderosa herramienta en el tratamiento de enfermedades humanas. En el tratamiento del cáncer, en particular, está muy extendido el uso de fármacos nucleósidos tales como gemcitabina, clofarabina, citarabina, fludarabina.
Sin embargo, la eficacia de todos los fármacos nucleósidos se puede ver limitada por mecanismos de resistencia tanto inherentes como adquiridos.
Una forma en la que se puede mejorar la eficacia de los fármacos nucleósidos es mediante la administración como un fármaco de la clase ProTide. Los fármacos de la clase ProTide son profármacos de nucleósidos monofosforilados y se ha mostrado que son agentes terapéuticos particularmente potentes en los campos de los antivirales y la oncología. Estos compuestos parecen evitar muchos de los mecanismos de resistencia que limitan la utilidad de los nucleósidos originales (véase, por ejemplo, ‘Solicitud de tecnología ProTide a gemcitabina: A Successful Approach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a New Agent (NUC-1031) in Clinical Development’; Slusarczyk et al; J. Med. Chem.; 2014, 57, 1531-1542; McGuigan et al.; Phosphoramidate ProTides of the anticancer agent FUDR successfully deliver the preformed bioactive monofosfato in cells and confer advantage over the parent nucleoside; J. Med. Chem.; 2011, 54, 7247­ 7258; and Vande Voorde et al.; The cytostatic activity of NUC-3073, a phosphoramidate prodrug of 5-fluoro-2’-desoxiuridina, is independent of activation by thymidine kinase and insensitive to degradation by phosphorolytic enzymes; Biochem. Pharmacol.; 2011, 82, 441-452; WO2005/012327; WO2006/100439; WO2012/117246 y WO2016/083830). Un ProTide ejemplar es NUC-1031, un ProTide de gemcitabina:
Figure imgf000002_0001
Si bien la estrategia ProTide ha demostrado ser muy efectiva para ciertos nucleósidos, no es tan efectiva con otros fármacos nucleósidos. Por lo tanto, subsiste una necesidad de encontrar métodos adicionales para potenciar las moléculas de fármacos nucleósidos.
Los fármacos de la clase ProTide también pueden ser poco solubles en solventes acuosos y esto puede dificultar la administración.
Es un objetivo de ciertas realizaciones de la presente invención proporcionar un agente terapéutico que, en uso, tenga eficacia terapéutica en la profilaxis o el tratamiento del cáncer.
Es un objetivo de ciertas realizaciones de la presente invención proporcionar un agente terapéutico que, en uso, tenga una mayor eficacia terapéutica en la profilaxis o el tratamiento del cáncer que el nucleótido original o el ProTide correspondiente.
Es un objetivo de ciertas realizaciones de la presente invención proporcionar un agente terapéutico que se administre más convenientemente que el ProTide correspondiente.
Ciertas realizaciones de la presente invención resuelven algunos o todos los objetos mencionados anteriormente.
El documento WO2014124430 divulga composiciones terapéuticas de nucleótidos y nucleósidos y usos relacionados con las mismas. En determinadas realizaciones, la divulgación se refiere a nucleósidos halogenados conjugados opcionalmente con un óxido de fósforo o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. En determinadas realizaciones, la divulgación se refiere a compuestos conjugados o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos que comprenden un éster de aminoácido o un esfingolípido o derivado ligado por un óxido de fósforo a un nucleótido o nucleósido. En ciertas realizaciones, la divulgación contempla composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos para usos en el tratamiento de enfermedades infecciosas, infecciones virales y cáncer.
Shelton et al. (Chem. Rev. 2016, 116, 23, 14379-14455) divulga la síntesis química y la biología de los análogos de nucleósidos, nucleótidos y bases contra el cáncer que están aprobados por la FDA y en desarrollo clínico desde 2000. Se destacan la biología celular y la biología clínica de los análogos, los mecanismos de resistencia a fármacos y la especificidad de los compuestos hacia diferentes tipos de cáncer. Se exploran las síntesis analógicas, así como las síntesis mejoradas y ampliadas.
El documento WO 2016099982 divulga compuestos para el tratamiento de enfermedades infecciosas y métodos para tratar dichas enfermedades. Los compuestos son derivados de la clevudina.
Jessen et al (Angew Chem Int Ed Engl. 2008;47(45):8719-22) divulga un nuevo enfoque de profármaco desarrollado para facilitar la difusión de nucleósidos polifosforilados altamente polares a través de las membranas celulares. Dentro de la célula, los grupos enmascaradores del nucleósido difosfato deben ser escindidos rápidamente por las enzimas para liberar la carga antiviral activa.
Pradere et al (Chem. Rev. 2014, 114, 18, 9154-9218) discuten la síntesis de nucleósidos fosfato y profármacos de fosfonato.
Declaración de la invención
En un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000003_0001
en el que
R1 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: alquilo C1-C24, alquenilo C3-C24, alquinilo C3-C24, alquileno C0-C4- cicloalquilo C3-C8 y alquileno Cü-C4-arilo;
R2 y R3 cada uno independientemente en cada ocurrencia se seleccionan de H, alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7; o R2 y R3 junto con el átomo al cual se adhieren forman un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros;
R4 es independientemente en cada ocurrencia H o alquilo C1-C4 ;
o R4, un grupo seleccionado de R2 y R3 y los átomos a los cuales se adhieren pueden formar un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros;
R5 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6, 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3-C3 , heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, alquileno C rC 3-R5a y alquilo C1-C8; dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8;
R5a se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6, 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3-C3 , heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8;
R6 se selecciona independientemente de:
Figure imgf000004_0001
R7 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, imidazol, indol, SRa, ORa, CO2Ra, CO2NRaRa, NRaRb y NH(=NH)NH2 ;
R8 se selecciona independientemente de H y
Figure imgf000004_0002
Z1 y Z2 cada uno se seleccionan independientemente de O y S;
Y se selecciona independientemente de H, F, Cl y OMe;
X es independientemente en cada ocurrencia un catión farmacéuticamente aceptable;
en el que cualquier grupo arilo es ya sea fenilo o naftilo;
en el que cuando cualquiera de R1, R2, R3, R4, R5 o R7 es un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo, ese grupo alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo se sustituye opcionalmente con desde 1 hasta 4 sustituyentes seleccionados de: halo, nitro, ciano, NRaRa, NRaS(O)2Ra, NRaC(O)Ra, NRaCONRaRa, NRaCO2Ra, ORa; SRa, SORa, SO3Ra, SO2Ra, SO2NRaRa, CO2Ra, C(O)Ra, CONRaRa, CRaRaNRaRa, alquilo C1-C4 , alquenilo C2-C4 , C4 y haloalquilo C1-C4;
en el que Ra se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H y alquilo C1-C4; y Rb se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H, alquilo C1-C4 y C(O)-alquilo C1-C4.
Los inventores han encontrado que los difosfatos fosforamidados de fórmula (I) tienen buenas actividades contra un rango de estirpes celulares de cáncer, que incluyen estirpes celulares de tumor sólido y cáncer hematológico. En muchos casos los difosfatos de fórmula (I) son más activos que el ProTide correspondiente.
Los profármacos de difosfato informados en la literatura tal como, por ejemplo, los diésteres de pirofosfato de nucleósido basados en glicéridos (K. Y. Hostetler et al. J. Biol. Chem. 1990, 265, 6112-6117; G. M. T. can Wijk, K. Y.Hostetler et al.
Biochim. Biophys. Acta Lipids Lipid Metab. 1991, 1084, 307-310) se sabe que son inestables debido a la escisión de un
enlace del grupo P-O-P, liberando de esta manera el monofosfato de nucleósido correspondiente en lugar del difosfato deseado. Los inventores han descubierto, sin embargo, que la desprotonación del grupo a-fosfato de los fosforamidato de difosfatos proporciona una alta estabilidad. La naturaleza iónica de los compuestos de la invención también hace que sean más solubles en agua que el ProTide correspondiente.
Se necesita una serie de procesos enzimáticos para convertir un ProTide en el nucleótido de monofosfato correspondiente, que incluye la escisión del éster mediante carboxilesterasa y la escisión del aminoácido resultante a partir de las enzimas de tipo monofosfato nucleósido fosforamidasa. Los fosforamidatos de difosfato de la invención son moléculas más grandes, que tienen una forma diferente y son iónicos, lo que genera dudas sobre si interactuarán con las enzimas relevantes de la misma manera para la conversión al nucleótido de difosfato. De hecho, en datos preliminares, los inventores han mostrado que los fosforamidato de difosfatos de fórmula (I) son estables con respecto a las carboxipeptidasas, por ejemplo, la carboxipeptidasa Y, las enzimas que llevan a cabo la etapa de escisión del éster en la conversión de fármacos de la clase ProTide a los monofosfatos. No obstante, los fosforamidatos de difosfato de fórmula (I) todavía están activos en las células, lo que sugiere que se está produciendo un mecanismo de acción alternativo en comparación con los fármacos de la clase ProTide. Los inventores también han mostrado que cuando hay un grupo alquiloxi sobre el fósforo de fosforamidato (OR5 en la Fórmula I) los compuestos de la invención son activos. En los fármacos de la clase ProTide, este no es normalmente el caso y solo los compuestos que tienen grupos ariloxi en esta posición proporcionan una buena actividad. Se entiende que esto se debe a que el grupo ariloxi actúa como grupo saliente durante la activación de fármacos de la clase ProTide. De nuevo, esto indica que los fosforamidatos de difosfato de la invención se activan a través de un mecanismo diferente a los fármacos de la clase ProTide.
En las realizaciones, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (II):
Figure imgf000005_0001
Los fosforamidatos de difosfato de clofarabina tales como aquellos de la fórmula (II) fueron más activos que el ProTide correspondiente frente a una serie estirpes celulares de cáncer, que incluyen las estirpes celulares hematológicas.
En las realizaciones, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (III):
Figure imgf000005_0002
Figure imgf000006_0001
En las realizaciones, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (V):
Figure imgf000006_0002
En las realizaciones, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (VI):
Figure imgf000006_0003
En las realizaciones, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (VII):
Figure imgf000006_0004
En estas realizaciones, puede ser que R1, R2, R3, R5 y X sean iguales en ambas ocurrencias.
Las siguientes declaraciones se aplican a los compuestos de cualquiera de las fórmulas (I) para (VII). Estas declaraciones son independientes e intercambiables. En otras palabras, cualquiera de las características descritas en cualquiera de las siguientes declaraciones (cuando sea químicamente permisible) se puede combinar con las características descritas en una o más declaraciones a continuación. En particular, cuando se ejemplifica o ilustra un compuesto en esta especificación, cualquiera de las dos o más de las declaraciones a continuación que describen una característica de ese compuesto, expresada en cualquier nivel de generalidad, se pueden combinar para representar la materia objeto que se contempla como formando parte de la divulgación de esta invención en esta especificación.
R1 independientemente en cada ocurrencia se puede seleccionar de: alquilo C1-C24, alquenilo C3-C24, alquinilo C3-C24, alquileno Cü-C4-cicloalquilo C3-C6 y alquileno Cü-C4-arilo.
R1 independientemente en cada ocurrencia se puede seleccionar de: alquilo C1-C24, alquileno Cü-C4-cicloalquilo C3-C8 y CH2-arilo. R1 independientemente en cada ocurrencia se puede seleccionar de: alquilo C1-C10, cicloalquilo C4-C6 y bencilo. R1 independientemente en cada ocurrencia se puede seleccionar de: alquilo C1-C8 , cicloalquilo C6 y bencilo.
R1 puede ser alquilo C1-C8.
R1 se puede seleccionar de tal manera que comprenda tres o más átomos de carbono. R1 se puede seleccionar de tal manera que comprenda cinco o más átomos de carbono. Por lo tanto, R1 se puede seleccionar de tal manera que incluya seis o más átomos de carbono. R1 se selecciona preferiblemente de tal manera que comprenda solo átomos de carbono e hidrógeno. R1 se puede seleccionar de cicloalquilo C5-C7, alquilo C5-C8 y bencilo, opcionalmente en el que dichos grupos son no sustituidos. R1 puede ser bencilo no sustituido. R1 puede ser neopentilo. R1 puede ser etilo.
Puede ser que R3 sea H. Puede ser que R3 sea alquilo C1-C4. Puede ser que R3 sea metilo. Puede ser que R2 se seleccione de alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7. Puede ser que R2 sea alquilo C1-C4. Puede ser que R2 se seleccione de metilo e isopropilo. R2 puede ser metilo. R2 puede ser H.
R4 es preferiblemente H.
Puede ser que R4, un grupo seleccionado de R2 y R3, y los átomos a los cuales se adhieren formen un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros. Puede ser que R4, un grupo seleccionado de R2 y R3, y los átomos a los cuales se adhieren no formen un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros. Puede ser que R2 y R3 cada uno independientemente en cada ocurrencia se seleccionen de H, alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7; o R2 y R3 junto con el átomo al cual se adhieren formen un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; y R4 sea independiente en cada ocurrencia H o alquilo C1-C4.
Puede ser que R5 sea fenilo sustituido o no sustituido, que se puede fusionar opcionalmente a un anillo de cicloalquilo C3-C3 , por ejemplo, un anillo de ciclohexano. Puede ser que R5 sea fenilo sustituido o no sustituido. Puede ser que R5 sea naftilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, 1-naftilo). Preferiblemente, R5 se selecciona de fenilo no sustituido o naftilo no sustituido (por ejemplo, 1-naftilo). Por tanto, R5 puede ser fenilo no sustituido. Alternativamente, R5 puede ser naftilo no sustituido (por ejemplo, 1-naftilo).
R6 puede ser
Figure imgf000007_0001
R6 puede ser
Figure imgf000008_0001
R6 puede ser.
Figure imgf000008_0002
R6 puede ser.
Figure imgf000008_0003
Y puede ser H. Y puede ser F.
R8 puede ser H. R8 puede ser
Figure imgf000008_0004
Z2 puede ser S. Z2 puede ser O.
Cuando R8 es
Figure imgf000009_0001
, puede ser que R1, R2, R3, R5, X y Z2 sean los mismos en ambas ocurrencias. R6 puede ser
Figure imgf000009_0002
R6 puede ser
Figure imgf000009_0003
R6 puede ser
Figure imgf000009_0004
El compuesto de la fórmula (I) se puede seleccionar de:
Figure imgf000010_0001
Figure imgf000011_0001
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000013_0001
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000015_0001
Figure imgf000016_0001
X+ puede ser un catión metálico o puede ser un catión de amonio. X+ puede ser un catión metálico, por ejemplo, un catión de un metal alcalino o alcalinotérreo. X+ puede ser un catión de amonio, por ejemplo, un catión de trialquilamonio o un catión de amonio de un heterociclo de nitrógeno. Los cationes ilustrativos incluyen aquellos derivados de cationes de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina, trietilamina y zinc. X+ puede ser un catión de trietilamina.
Los compuestos de la invención comprenden un centro quiral en el átomo de fósforo (fósforo p) que está unido a OR5. El compuesto puede estar presente como una mezcla de diastereoisómeros de fosfato, como el (S)-epímero en el átomo de fósforo en forma sustancialmente diastereoméricamente pura o como el (R)-epímero en el átomo de fósforo en forma sustancialmente diastereoméricamente pura. ‘Sustancialmente diastereoisómeramente puro' se define para los fines de esta invención como una pureza diastereoisómera mayor de aproximadamente el 90%. Si está presente como una forma sustancialmente diastereoisómeramente pura, el compuesto puede tener una pureza diastereoisómera mayor del 95%, 98 %, 99 % o incluso al 99.5%. Alternativamente, el compuesto puede estar presente como una mezcla de diastereoisómeros de fosfato.
Los (R)- y/o (S)-epímeros del compuesto se pueden obtener en forma sustancialmente diastereoméricamente pura mediante cromatografía, por ejemplo, HPLC, opcionalmente utilizando una columna quiral. Alternativamente, los (R)- y/o (S)-epímeros del compuesto se pueden obtener en forma sustancialmente diastereoisómeramente pura mediante cristalización de un solvente o sistema de solventes apropiados.
De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en un método de tratamiento.
De acuerdo con un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en la profilaxis o el tratamiento del cáncer.
De acuerdo con un cuarto aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento del cáncer.
De acuerdo con un quinto aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula (I) para uso en un método de profilaxis o tratamiento del cáncer que comprende la administración a un paciente en necesidad de dicho tratamiento de una dosis eficaz de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Cualquier referencia en la descripción a métodos de tratamiento se refiere a los compuestos, composiciones farmacéuticas o medicamentos de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia.
Con respecto a cada uno de los tercero, cuarto y quinto aspectos de la presente invención, las realizaciones de la invención comprenden un cáncer seleccionado pero no restringido al grupo que consiste en: cáncer de páncreas, cáncer de vejiga, otros cánceres uroteliales (por ejemplo, cánceres de uréter y pelvis renal), cánceres gastrointestinales (también conocidos como cáncer del tracto digestivo, que incluyen: cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer de estómago, cáncer de intestino, cáncer de intestino delgado, cáncer de colon, cáncer colorrectal, apéndice mucinoso, carcinoide de células caliciformes, cáncer de hígado, cáncer biliar, cáncer de vesícula biliar, cáncer anal y cáncer rectal), cáncer de pulmón, cáncer renal (o de riñón), cáncer biliar, cáncer de próstata, colangiocarcinoma, cáncer neuroendocrino, sarcoma, linfoma, cáncer tímico, glioblastoma multiforme, un cáncer de origen primario desconocido, mesotelioma, cáncer suprarrenal, cáncer testicular, cáncer del sistema nervioso central, carcinoma de células basales, enfermedad de Bowens, otros cánceres de piel (tal como melanoma maligno, tumor de células de Merckel y tumores raros de los apéndices), neoplasia epidermoide de la superficie ocular, tumores de células germinales, leucemia, mieloma múltiple, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello, neuroblastoma, carcinoma de tiroides, carcinoma oral de células epidermoides, cáncer urinario, cáncer de vejiga, tumor de células de Leydig y cánceres ginecológicos (que incluyen cáncer de ovario, cáncer de las trompas de Falopio, el cáncer peritoneal, cáncer de endometrio, cáncer de útero y cáncer de cuello uterino, que incluye carcinoma epitelial del cuello uterino).
En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia o un linfoma.
El cáncer puede ser una leucemia.
Existen cuatro tipos principales de leucemia dependiendo de si son crónicas o agudas, y de origen mieloide o linfoide. Estos son: leucemia mieloblástica aguda (AML), leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mielógena crónica (CML) y leucemia linfocítica crónica (CLL).
También se conocen mezclas de estos; por ejemplo, leucemia aguda bifenotípica (BAL, que es una mezcla de AML y ALL).
En realizaciones particulares, la leucemia se selecciona del grupo que consiste en: leucemia mieloblástica aguda (AML), leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mielógena crónica (CML), leucemia linfocítica crónica (CLL) y leucemia aguda bifenotípica (BAL; que es una mezcla de AML y ALL).
La leucemia linfocítica crónica (CLL) incluye los subtipos: CLL de células B (B-CLL), leucemia prolinfocítica de células B (PLL) y leucemia prolinfocítica crónica de células T (T-PLL) y varios subtipos que difieren a nivel genético.
La leucemia linfoblástica aguda (ALL) incluye los subtipos: ALL de células B precursoras (BALL), ALL de células T precursoras (T-ALL), ALL tipo Burkitt y ALL positiva para el cromosoma Filadelfia (fusión BCR-ABL).
La leucemia mieloblástica aguda (AML) incluye los subtipos: leucemia mieloide, leucemia monocítica y leucemia promielocítica aguda (APL).
La leucemia mielógena crónica (CML) incluye los subtipos: leucemia granulocítica crónica (CGL) (CGL), CML juvenil (JCML), leucemia neutrofílica crónica (CNL), leucemia mielomonocítica crónica (CMML) y CML atípica (aCML).
En realizaciones particulares, cualquiera de los subtipos anteriores de CLL, ALL, AML y CML son adecuados para el tratamiento con los compuestos de la invención o las composiciones farmacéuticas que los contienen.
Otras formas de leucemia que se pueden considerar fuera de estos cuatro grupos principales incluyen: eritroleucemia, que surge de precursores de glóbulos rojos; y un linterna que se ha ido a la sangre.
El cáncer puede ser un linterna, por ejemplo, un linterna sólido.
Hay dos tipos principales de linterna: Linterna de Hodgkin y linterna no Hodgkin. Dentro de cada uno de estos hay varios subtipos.
En realizaciones particulares, el linterna se selecciona del grupo que consiste en: Linterna de Hodgkin y linterna no Hodgkin.
En realizaciones particulares, el linterna se selecciona del grupo que consiste en: Linterna de Burkitt (BL), linterna de células del manto (MCL), linterna folicular (FL), linterna linfocítico pequeño (SLL), linterna no Hodgkin de células B indolente, linterna histiocítico (también conocido como linterna inmunoblástico; IBL) y linterna difuso de células B grandes (DLBCL), que incluye el linterna difuso de células B grandes similar a células activadas (DLBCL-ABC) y el linterna difuso de células B grandes similar a células B del centro germinal (DLBCL-GCB).
En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer gastrointestinal y se puede seleccionar del grupo que consiste en: cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer de estómago, cáncer de intestino, cáncer de intestino delgado, cáncer de colon, cáncer colorrectal, apéndice mucinoso, carcinoide de células caliciformes, cáncer de hígado cáncer, cáncer biliar, cáncer de vesícula biliar, cáncer anal y cáncer rectal.
En ciertas realizaciones, el cáncer es de origen ginecológico y puede seleccionarse del grupo que consiste en: cáncer de útero, cáncer de trompa de Falopio, cáncer de endometrio, cáncer de ovario, cáncer de peritoneo y cáncer de cuello uterino). De forma adecuada, el cáncer de ovario puede ser cáncer de ovario epitelial. De forma adecuada, el cáncer peritoneal puede ser un cáncer peritoneal primario.
En particular, el cáncer se puede seleccionar de, pero no restringirse a, cáncer de páncreas, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer biliar, un linfoma, una leucemia, un cáncer gastrointestinal y un cáncer ginecológico. Se ha encontrado que los compuestos de la invención conservan la actividad incluso bajo condiciones hipóxicas. Los cánceres particularmente asociados con la hipoxia son los cánceres pancreáticos y renales (o de riñón).
El cáncer puede tener una recaída. El cáncer puede ser metastásico. El cáncer puede no haber sido tratado previamente. El cáncer puede ser un cáncer refractario que se ha tratado previamente pero que no ha respondido al tratamiento anterior. Alternativamente, el paciente de cáncer puede ser intolerante a una terapia previa, por ejemplo, puede desarrollar efectos secundarios que hagan que el paciente sea intolerante al tratamiento adicional con el agente que se está administrando. De acuerdo con un sexto aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede ser para uso en la profilaxis o tratamiento de cáncer, por ejemplo, un cáncer o grupo de cánceres mencionados anteriormente.
El compuesto de la fórmula (I) puede ser como se describe en los siguientes párrafos numerados:
1. En un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000018_0001
en el que
R1 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: alquilo C1-C24, alquenilo C3-C24, alquinilo C3-C24, alquileno Cü-C4-cicloalquilo C3-C6 o alquileno Cü-C4-arilo;
R2 y R3 cada uno independientemente en cada ocurrencia se seleccionan de H, alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7; o R2 y R3 junto con el átomo al cual se adhieren forman un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros;
R4 es independientemente en cada ocurrencia H o alquilo C1-C4 ;
R5 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo y heteroarilo de 5, 6, 9 o 10 miembros;
R6 se selecciona independientemente de:
Figure imgf000019_0002
R7 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, imidazol, indol, SRa, ORa, CO2Ra, CO2NRaRa, NRaRb y NH(=NH)NH2 ;
R8 se selecciona independientemente de H y
Figure imgf000019_0001
Y se selecciona independientemente de H, F, Cl y OMe;
X es independientemente en cada ocurrencia un catión farmacéuticamente aceptable;
en el que cualquier grupo arilo es ya sea fenilo o naftilo;
en el que cuando cualquiera de R1, R2, R3, R4, R5 o R7 es un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo, ese grupo alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo se sustituye opcionalmente con desde 1 hasta 4 sustituyentes seleccionados de: halo, nitro, ciano, NRaRa, NRaS(O)2Ra, NRaC(O)Ra, NRaCONRaRa, NRaCO2Ra, ORa; SRa, SORa, SO3Ra, SO2R,a SO2NRaRa, CO2Ra, C(O)Ra, CONRaRa, CRaRaNRaRa, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4 y haloalquilo C1-C4;
en el que Ra se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H y alquilo C1-C4; y Rb se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H, y alquilo C1-C4 y C(O)-alquilo C1-C4.
2. Un compuesto del párrafo 1, en el que R4 es H.
3. Un compuesto del párrafo 1 o párrafo 2, en el que R6 es
Figure imgf000020_0001
4. Un compuesto del párrafo 1 o párrafo 2, en el que R6 es
Figure imgf000020_0002
5. Un compuesto del párrafo 1 o párrafo 2, en el que R6 es
Figure imgf000020_0003
6. Un compuesto del párrafo 1 o párrafo 2, en el que R6 es
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000021_0002
Figure imgf000022_0001
14. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1 a 13, en el que R1 se selecciona de cicloalquilo C5-C7 , alquilo C1-C8 y bencilo.
15. Un compuesto del párrafo 14, en el que R1 es bencilo.
16. Un compuesto del párrafo 14, en el que R1 es alquilo C1-C8 , por ejemplo, etilo.
17. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1
Figure imgf000022_0002
16, en el que R3 es H.
18. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1
Figure imgf000022_0003
17, en el que R2 es alquilo C1-C4.
19. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1
Figure imgf000022_0004
17, en el que R2 es H.
20. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1
Figure imgf000022_0005
19, en el que R5 es fenilo.
21. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1
Figure imgf000022_0006
19, en el que R5 es naftilo.
22. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1 a 21 en el que X+ es un catión metálico o un catión de amonio.
23. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1 a 22 para uso médico.
24. Un compuesto de una cualquiera de los párrafos 1 a 23 para uso en el tratamiento de cáncer.
25. Un compuesto para uso del párrafo 24, en el que el cáncer es leucemia o linfoma.
26. Un compuesto para uso del párrafo 25, en el que el cáncer es una leucemia seleccionada del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda, síndromes mielodisplásicos, leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena crónica, leucemia linfocítica crónica, leucemia monoblástica y leucemia de células pilosas.
27. Una composición farmacéutica que comprende los compuestos de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Breve descripción de las figuras
Las realizaciones de la invención se describen adicionalmente a continuación con referencia a los dibujos acompañantes, en los que:
La Figura 1 muestra curvas dosis-respuesta sigmoideas para (A) clofarabina, (B) Ejemplo 1 y (C) Ejemplo 2. La clofarabina y el Ejemplo 1 mostraron la mayor potencia. Todos los ensayos se llevaron a cabo utilizando células KG1a y los datos se presentan como la media (± DE) de tres experimentos independientes.
La Figura 2 muestra el análisis de la capacidad de direccionamiento de LSC de la clofarabina del Ejemplo 1 y Ejemplo 2. En condiciones normóxicas, todos los compuestos mostraron un direccionamiento de células madre en concentraciones superiores a 1 x 10-7 M. Todos los datos son la media (± DE) de tres experimentos independientes.
La Figura 3 muestra la comparación de la fracción de células KG1a que expresan un fenotipo LSC en condiciones normóxicas e hipóxicas. (A) Las células KG1a muestran un aumento dependiente del tiempo en las células que expresan un fenotipo LSC en condiciones hipóxicas, que (B) se revirtió cuando las células se transfirieron en condiciones de cultivo normóxicas. Todos los datos son la media (± DE) de cuatro experimentos independientes.
La Figura 4 muestra la comparación de los valores de LD50 media para (A) clofarabina, (B) Ejemplo 1 y (C) Ejemplo 2 en condiciones normóxicas e hipóxicas. La clofarabina mostró una pérdida significativa de potencia en condiciones hipóxicas. Por el contrario, los compuestos de la invención mantuvieron su potencia en condiciones hipóxicas. Todos los datos son la media (± DE) de tres experimentos independientes.
La Figura 5 muestra una comparación del daño en el ADN, medido por el ensayo de fosforilación de yH2A.X, inducido en las LSC purificadas y células de masa tumoral después de 2 horas de exposición a (A) clofarabina, (B) Ejemplo 1 y (C) Ejemplo 2 en condiciones hipóxicas (5% de O2). Todos los datos son la media (± DE) de tres experimentos independientes.
Descripción detallada
El término 'solución salina' se refiere a una solución acuosa de cloruro de sodio. Las soluciones salinas de la presente invención normalmente serán estériles y normalmente estarán en una concentración adecuada para uso en la administración parenteral. Las concentraciones adecuadas son de hasta el 2% p/v o hasta el 1% p/v. Para optimizar la osmolaridad, se pueden utilizar diferentes concentraciones de solución salina en las formulaciones de la invención, por ejemplo, 0.9% o 0.45%.
Las formulaciones de la presente invención se pueden utilizar en el tratamiento del cuerpo humano. Pueden ser para uso en el tratamiento del cuerpo animal.
Los compuestos de las formulaciones de la invención se pueden obtener, almacenar y/o administrar en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen, entre pero no se limitan a, sales de ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables, tales como los ácidos clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, carbónico, bórico, sulfámico y bromhídrico, o sales de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables, tales como ácidos acético, propiónico, butírico, tartárico, maleico, hidroximaleico, fumárico, málico, cítrico, láctico, mucico, glucónico, benzoico, succínico, oxálico, fenilacético, metanosulfónico, toluenosulfónico, bencenosulfónico, salicílico, sulfanílico, aspártico, glutámico, edético, esteárico, palmítico, oleico, láurico, pantoténico, tánico, ascórbico y valérico. Las sales básicas adecuadas se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas. Ejemplos incluyen las sales de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc. También se pueden formar hemisales de ácidos y bases, por ejemplo, sales de hemisulfato, hemioxalato y hemicálcico.
Para las formulaciones de la invención mencionadas anteriormente, la dosificación administrada variará, por supuesto, con el compuesto empleado, el modo preciso de administración, el tratamiento deseado y el trastorno indicado. Se espera que los niveles de dosificación, la frecuencia de dosis y la duración del tratamiento de los compuestos de la invención difieran dependiendo de la formulación y la indicación clínica, la edad y las condiciones médicas comórbidas del paciente. El tamaño de la dosis para propósitos terapéuticos de los compuestos de la invención variará naturalmente de acuerdo con la naturaleza y severidad de las afecciones, edad y sexo del animal o paciente y ruta de administración, de acuerdo con principios bien conocidos de medicina.
Una formulación farmacéutica toma normalmente la forma de una composición en la que los compuestos activos, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, están asociados con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. Uno de dichos adyuvantes, diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables en las formulaciones de la invención es el solvente polar aprótico. Los procedimientos convencionales para la selección y preparación de formulaciones farmacéuticas adecuadas se describen, por ejemplo, en “Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs”, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
Las formulaciones pueden ser adecuadas para aplicación tópica (por ejemplo, para la piel o vejiga), para administración oral o parenteral (por ejemplo, administración intravenosa).
Cualquier solvente utilizado en las formulaciones farmacéuticas de la invención debe ser de calidad farmacéutica, lo que significa que tienen un perfil de impurezas que los hace adecuados para la administración (por ejemplo, administración intravenosa) a humanos.
Para la administración oral, las formulaciones de la invención pueden comprender el compuesto activo mezclado con un adyuvante o un portador, por ejemplo, lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol; un almidón, por ejemplo, almidón de papa, almidón de maíz o amilopectina; un derivado de celulosa; un aglutinante, por ejemplo, gelatina o polivinilpirrolidona; y/o un lubricante, por ejemplo, estearato de magnesio, estearato de calcio, polietilenglicol, una cera, parafina y similares, y luego se comprime en comprimidos. Si se requieren comprimidos recubiertos, los núcleos, preparados como se describió anteriormente, se pueden recubrir con una solución de azúcar concentrada que puede contener, por ejemplo, goma arábiga, gelatina, talco y dióxido de titanio. Alternativamente, el comprimido se puede recubrir con un polímero adecuado disuelto en un solvente orgánico fácilmente volátil.
Para la preparación de cápsulas de gelatina blanda, los compuestos activos se pueden mezclar, por ejemplo, con un aceite vegetal o polietilenglicol. Las cápsulas de gelatina dura pueden contener gránulos del compuesto utilizando cualquiera de los excipientes para comprimidos mencionados anteriormente. También las cápsulas de gelatina dura se pueden llenar con formulaciones líquidas o semisólidas de los compuestos activos.
Las preparaciones líquidas para aplicación oral pueden presentarse en forma de jarabes o suspensiones, por ejemplo soluciones que contienen el compuesto de la invención, siendo el resto azúcar y una mezcla de etanol, agua, glicerol y propilenglicol. Opcionalmente, dichas preparaciones líquidas pueden contener agentes colorantes, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes (tal como sacarina), agentes conservantes y/o carboximetilcelulosa como agente espesante u otros excipientes conocidos por aquellos expertos en la técnica.
Las formulaciones pueden ser para administración parenteral (por ejemplo, intravenosa). Para la administración parenteral (por ejemplo, intravenosa), los compuestos activos se pueden administrar como una solución acuosa u oleosa estéril. Preferiblemente, los compuestos activos se administran como una solución acuosa estéril. La solución acuosa puede comprender adicionalmente al menos un tensioactivo y/o un solvente orgánico. Los solventes orgánicos ilustrativos incluyen dimetilacetamida, etanol, etilenglicol, N-metil-pirrolidinona, dimetilsulfóxido, dimetilformamida e isopropanol. Los tensioactivos ilustrativos incluyen ácidos grasos polietoxilados y ésteres de ácidos grasos y mezclas de los mismos. Los tensioactivos adecuados incluyen aceite de ricino polietoxilado (por ejemplo, que se vende bajo el nombre comercial Kolliphor® PEL); o ácido esteárico polietoxilado (por ejemplo, que se vende bajo los nombres comerciales Solutol® o kolipor® SA15); o monooleato de sorbitán polietoxilado (por ejemplo, polioxietileno (20)), (por ejemplo, que se venden bajo los nombres comerciales Polysorbate 80 o Tween® 80).
La composición farmacéutica de la invención comprenderá preferiblemente de 0.05 a 99% en peso (por ciento en peso) de compuesto de la invención, más preferiblemente de 0.05 a 80% en peso del compuesto de la invención, aún más preferiblemente de 0.10 a 70% en peso del compuesto de la invención, e incluso más preferiblemente del 0.10 al 50% en peso del compuesto de la invención, todos los porcentajes en peso se basan en la composición total.
Se ha mostrado que las ciclodextrinas encuentran una amplia aplicación en el suministro de fármacos (Rasheed et al, Sci. Pharm., 2008, 76, 567-598). Las ciclodextrinas son una familia de oligosacáridos cíclicos. Actúan como una 'jaula molecular' que encapsula las moléculas del fármaco y altera las propiedades de esas moléculas del fármaco, tales como la solubilidad. Las ciclodextrinas comprenden unidades de a-D-glucopiranosa ligadas a (a-1,4). Las ciclodextrinas pueden contener 6, 7 u 8 unidades de glucopiranosa (designadas a-, p- y Y-ciclodextrinas respectivamente). Las ciclodextrinas utilizadas en formulaciones farmacéuticas suelen ser p-ciclodextrinas. Los grupos hidroxilo colgantes se pueden alquilar con un grupo alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido. Ejemplos de ciclodextrinas son a-ciclodextrina, p-ciclodextrina, yciclodextrina, 2-hidroxipropil-p-ciclodextrina (HP-p-CD), sal de sodio de sulfobutiléter p-ciclodextrina, p-ciclodextrina parcialmente metilada. Las formulaciones de la invención también pueden comprender al menos una ciclodextrina.
El término Cm-Cn se refiere a un grupo con m a n átomos de carbono.
El término “alquilo” se refiere a un grupo hidrocarburo lineal o ramificado. Un grupo alquilo es monovalente. Por ejemplo alquilo Ci-Ca se puede referir a metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, sec-butilo, tert-butilo, n-pentilo y n-hexilo. Los grupos alquilo son preferiblemente no sustituidos.
El término “alquileno” se refiere a una cadena de hidrocarburos lineal. Un grupo alquileno es divalente. Por ejemplo, alquileno Ci se puede referir a un grupo CH2. El alquileno C2 se puede referir al grupo -CH2CH2-. Los grupos alquileno son preferiblemente no sustituidos.
El término “haloalquilo” se refiere a una cadena de hidrocarburos sustituida con al menos un átomo de halógeno elegido independientemente cada ocurrencia entre: flúor, cloro, bromo y yodo. El átomo de halógeno puede estar presente en cualquier posición de la cadena de hidrocarburos. Por ejemplo, haloalquilo C1-C4 se puede referir a clorometilo, fluorometilo, trifluorometilo, cloroetilo por ejemplo, 1-clorometilo y 2-cloroetilo, tricloroetilo por ejemplo, 1,2,2-tricloroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, fluoroetilo por ejemplo, 1-fluorometilo y 2-fluoroetilo, trifluoroetilo por ejemplo, 1,2,2-trifluoroetilo y 2,2,2-trifluoroetilo, cloropropilo, tricloropropilo, fluoropropilo, trifluoropropilo. Un grupo haloalquilo puede ser un grupo fluoroalquilo, es decir, una cadena de hidrocarburos sustituida con al menos un átomo de flúor.
El término “alquenilo” se refiere a una cadena de hidrocarburos ramificada o lineal que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono. El(los) doble(s) enlace(s) puede(n) estar presente(s) como el isómero E o Z. El doble enlace puede estar en cualquier posición posible de la cadena de hidrocarburos. Por ejemplo, “alquenilo C2-C4” se puede referir a etenilo, alilo y butenilo. Los grupos alquenilo preferiblemente no son sustituidos.
El término “alquinilo” se refiere a una cadena de hidrocarburos ramificada o lineal que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono. El triple enlace puede estar en cualquier posición posible de la cadena de hidrocarburos. Por ejemplo, “alquinilo C2-C6” se puede referir a etinilo, propinilo, butinilo. Los grupos alquinilo preferiblemente no son sustituidos.
El término “cicloalquilo” se refiere a un sistema de anillo de hidrocarburo saturado que contiene 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Por ejemplo, “cicloalquilo de 3 a 6 miembros” se puede referir a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo. Los grupos cicloalquilo preferiblemente son no sustituidos.
El término “heterocicloalquilo” se puede referir a un grupo monocíclico saturado o parcialmente saturado que comprende 1 o 2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N en el sistema de anillos (en otras palabras, 1 o 2 de los átomos que forman el sistema de anillos se seleccionan de O, S y N). Ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen; piperidina, piperazina, morfolina, tiomorfolina, pirrolidina, tetrahidrofurano, tetrahidrotiofeno, tetrahidropirano, dihidropirano, dioxano, azepina. Los grupos heterocicloalquilo preferiblemente son no sustituidos o sustituidos.
La presente invención también incluye formulaciones de todas las formas de compuestos marcadas con isótopos farmacéuticamente aceptables en las que uno o más átomos se reemplazan por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa del isótopo predominante usualmente encontrado en la naturaleza.
Ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbono, tal como 11C, 13C y 14C, cloro, tal como 36Cl, flúor, tal como 18F, yodo, tal como 123I y 125I, nitrógeno, tal como 13N y 15N, oxígeno, tal como 15O, 17O y 18O, fósforo, tal como 32P, y azufre, tal como 35S.
Ciertos compuestos marcados isotópicamente, por ejemplo, aquellos que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. Los isótopos radiactivos tritio, es decir 3H, y carbono-14, es decir 14C, y 18F son particularmente útiles para este propósito en vista de su facilidad de incorporación y rápidos medios de detección.
Sustitución con isótopos más pesados tales como el deuterio, es decir 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, semivida in vivo en aumento o requisitos de dosificación reducidos y, por lo tanto, puede ser preferible en algunas circunstancias.
Los compuestos marcados isotópicamente se pueden preparar generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por aquellos expertos en la técnica o mediante procesos análogos a aquellos descritos utilizando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado anteriormente.
La formulación para uso en el tratamiento del cáncer, que incluye linfoma o leucemia, puede implicar, además de las formulaciones de la invención, cirugía convencional o radioterapia o quimioterapia. Dicha quimioterapia puede incluir la administración de uno o más agentes activos.
Cuando se deba administrar otro principio activo como parte de un método de tratamiento, dicho tratamiento combinado se puede lograr mediante la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Dichos productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro de un rango de dosificación terapéuticamente eficaz descrita anteriormente y uno o más agentes farmacéuticamente activos dentro de su rango de dosificación aprobado.
Por lo tanto, las formulaciones farmacéuticas de la invención pueden comprender otro principio activo.
El uno o más agentes activos pueden ser una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:
(i) fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de los mismos, tales como agentes alquilantes (por ejemplo, ciclofosfamida, mostaza nitrogenada, bendamustina, melfalán, clorambucilo, busulfano, temozolamida y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo, gemcitabina y antifolatos tales como fluoropirimidinas tales como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, pemetrexed, arabinósido de citosina e hidroxiurea); antibióticos (por ejemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo, alcaloides de la vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina y taxoides como taxol e inhibidores de taxotero y poloquinasa); inhibidores de proteosomas, por ejemplo, carfilzomib y bortezomib; terapia con interferón; e inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán, mitoxantrona y camptotecina);
(ii) agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno), antiandrógenos (por ejemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas o agonistas de LHRH (por ejemplo, goserelina, leuprorelina y buserelina), progestágenos (por ejemplo, acetato de megestrol), inhibidores de la aromatasa (por ejemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de la 5a-reductasa, tales como finasterida;
(iii) agentes anti-invasión, por ejemplo, dasatinib y bosutinib (SKI-606), e inhibidores de metaloproteinasas, inhibidores de la función del receptor activador del plasminógeno de uroquinasa o anticuerpos contra heparanasa;
(iv) inhibidores de la función del factor de crecimiento: por ejemplo, dichos inhibidores incluyen anticuerpos contra el factor de crecimiento y anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento, por ejemplo, el anticuerpo anti-erbB2 trastuzumab [Herceptin™], el anticuerpo anti-EGFR panitumumab, el anticuerpo anti-erbB1 cetuximab, los inhibidores de tirosina quinasa, por ejemplo, los inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo, los inhibidores de la tirosina quinasa de la familia EGFR tales como gefitinib, erlotinib y 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (CI 1033), inhibidores de tirosina quinasa erbB2 tales como lapatinib); inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos; inhibidores de la familia del factor de crecimiento de insulina; moduladores de proteínas reguladoras de apoptosis celular (por ejemplo, inhibidores de Bcl-2); inhibidores de la familia de factores de crecimiento derivados de plaquetas tales como imatinib y/o nilotinib (AMN107); inhibidores de serina/treonina cinasas (por ejemplo inhibidores de señalización de Ras/Raf tal como inhibidores de la farnesil transferasa, por ejemplo sorafenib, tipifarnib y lonafarnib), inhibidores de la señalización celular a través de las cinasas MEK y/o AKT, inhibidores de c-kit, inhibidores de cinasa abl, inhibidores de quinasa PI3, inhibidores de quinasa Plt3, inhibidores de quinasa CSF-1R, receptor de IGF, inhibidores de quinasa; inhibidores de aurora quinasa e inhibidores de quinasa dependientes de ciclina tales como inhibidores de CDK2 y/o CDK4;
(v) agentes antiangiogénicos tales como aquellos que inhiben los efectos del factor de crecimiento endotelial vascular, [por ejemplo, el anticuerpo anti-factor de crecimiento de células endoteliales vasculares bevacizumab (Avastin™); talidomida; lenalidomida; y por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor VEGF tal como vandetanib, vatalanib, sunitinib, axitinib y pazopanib;
(vi) enfoques de terapia génica, que incluyen, por ejemplo, enfoques para reemplazar genes aberrantes tales como p53 aberrante o BRCA1 o BRCA2 aberrante;
(vii) enfoques de inmunoterapia, que incluyen, por ejemplo, la transferencia celular adoptiva, tal como la terapia de células T con CAR; terapia con anticuerpos tal como alemtuzumab, rituximab, ibritumomab tiuxetan (Zevalin®) y ofatumumab; interferones tales como interferón a; interleucinas tales como IL-2 (aldesleukina); inhibidores de interleucina, por ejemplo, inhibidores de IRAK4; vacunas contra el cáncer que incluyen vacunas profilácticas y de tratamiento tales como vacunas contra el HPV, por ejemplo, Gardasil, Cervarix, Oncophage y Sipuleucel-T (Provenge); y moduladores de receptores de tipo toll, por ejemplo, agonistas de TLR-7 o TLR-9;
(viii) agentes citotóxicos, por ejemplo, fludarabina (fludara), cladribina, pentostatina (Nipent™);
(ix) esteroides tales como corticosteroides, que incluyen glucocorticoides y mineralocorticoides, por ejemplo, aclometasona, dipropionato de aclometasona, aldosterona, amcinonida, beclometasona, dipropionato de beclometasona, betametasona, dipropionato de betametasona, fosfato de sodio de betametasona, valerato de betametasona, budesonida, clobetasona, butirato de clobetasona, propionato de clobetasol, cloprednol, cortisona, acetato de cortisona, cortivazol, desoxicortona, desonida, desoximetasona, dexametasona, fosfato de sodio de dexametasona, isonicotinato de dexametasona, difluorocortolona, fluclorolona, flumetasona, flunisolida, fluocinolona, acetónido de fluocinolona, fluocinonida, butilo de fluocortina, fluorocortisona, fluorocortolona, caproato de fluorocortolona, pivalato de fluocortolona, fluorometolona, fluprednideno, acetato de fluprednideno, flurandrenolona, fluticasona, propionato de fluticasona, halcinonida, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, butirato de hidrocortisona, aceponato de hidrocortisona, buteprato de hidrocortisona, valerato de hidrocortisona, icometasona, enbutato de icometasona, meprednisona, metilprednisolona, mometasona parametasona, monohidrato de furoato de mometasona, prednicarbato, prednisolona, prednisona, tixocortol, pivalato de tixocortol, triamcinolona, acetónido de triamcinolona, alcohol de triamcinolona y sus respectivos derivados farmacéuticamente aceptables. Se puede utilizar una combinación de esteroides, por ejemplo, una combinación de dos o más esteroides mencionados en este párrafo;
(x) terapias dirigidas, por ejemplo, inhibidores de PI3Kd, por ejemplo, idelalisib y perifosina; o compuestos inhibidores de puntos de control que incluyen moléculas anti-PD-1, anti-PD-L1 y anti-CTLA4, tales como nivolumab, pembrolizumab, pidilizumab, atezolizumab, durvalumab y avelumab.
El uno o más de los otros agentes activos también pueden ser antibióticos.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones de esta especificación, las palabras “comprenden” y “contienen” y las variaciones de las mismas significan “que incluyen pero no se limitan a”, y no pretenden (y no excluyen) otras fracciones, aditivos, componentes, enteros o etapas. A lo largo de la descripción y las reivindicaciones de esta especificación, el singular abarca el plural a menos que el contexto requiera lo contrario. En particular, cuando se utiliza el artículo indefinido, la especificación se debe entender que contempla tanto la pluralidad como la singularidad, a menos que el contexto requiera lo contrario.
La invención se define por las reivindicaciones adjuntas. Se debe entender que los rasgos, enteros, características, compuestos, fracciones químicas o grupos descritos junto con un aspecto, realización o ejemplo particular de la invención son aplicables a cualquier otro aspecto, realización o ejemplo descrito en el presente documento a menos que sea incompatible con el mismo. Todas las características divulgadas en esta especificación (que incluyen las reivindicaciones, resumen y dibujos acompañantes), y/o todas las etapas de cualquier método o proceso así divulgado, se pueden combinar en cualquier combinación, excepto combinaciones en las que al menos algunas de dichas características y/o etapas sean mutuamente excluyentes. La invención no está restringida a los detalles de cualquiera de las realizaciones anteriores siempre que estén dentro del alcance de las reivindicaciones. La invención se extiende a cualquier novedad o combinación novedosa de las características divulgadas en esta especificación (que incluye las reivindicaciones, resumen y dibujos acompañantes), o a cualquier novedad o combinación novedosa de las etapas de cualquier método o proceso así divulgado siempre que caigan dentro del alcance de las reivindicaciones.
Se dirige la atención del lector a todos los papeles y documentos que se presentan simultáneamente o antes de esta especificación en relación con esta solicitud y que están abiertos a inspección pública con esta especificación.
Ejemplos
A lo largo de la especificación, estas abreviaturas tienen los siguientes significados.
Figure imgf000026_0001
Figure imgf000027_0002
Procedimiento general para la síntesis de fosforamidato de difosfatos
Figure imgf000027_0001
Se disolvió nucleósido seco A (~1.0 mmol, 1.0 eq.) en 5 ml de trietilfosfato (TEP) y se agitó durante 5 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió a 4 °C y se agrego 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno seco (Proton Sponge®, 1.5 eq.), seguido de la adición gota a gota de POCh (1.3 equiv.). La suspensión resultante se agitó a 4 °C durante 2-3 horas. Después de este tiempo, a la mezcla de reacción se le agregó tampón de hidrogenocarbonato de trietilamonio (TEAB) ac.
0.5 M frío (pH 7.5) y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos y luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h adicional. Se extrajo el TEP con éter de tert-butilmetilo (4 x 50 ml), y la solución acuosa se evaporó y se secó a alto vacío durante la noche para producir la sal de trietilamonio del nucleósido 5'-monofosfato correspondiente B como aceite incoloro vítreo o polvo blanco, que se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional. La formación del nucleósido 5'-monofosfato se confirmó mediante espectrometría de masas de iones negativos.
Se preparó una solución 0.5 M de TEAB al burbujear CO2 a través de una solución de trietilamina (TEA) 0.5 M en agua a 0-4 °C durante 30-45 min (pH de aproximadamente 7.4-7.6, a menos que se indique lo contrario)
Se logró una síntesis de la sal de trietilamonio del nucleósido 5'-monofosfato en la primera etapa siguiendo la referencia modificada: El-Tayeb A. et al. J.Med. Chem. 2006, 49(24), 7076-7087.
Una mezcla de sal de trietilamonio de nucleósido 5'-monofosfato B (1 mmol) en una mezcla 1:1 de 1,4-dioxano/acetonitrilo (20 ml) se agitó a temperatura ambiente (T.amb.) en atmósfera de argón y se agregó gota a gota un fosforocloridato C apropiado (1.0 eq.) disuelto en acetonitrilo anhidro. La mezcla de reacción resultante se agitó durante 18 h a T.amb. La mezcla bruta se evaporó bajo presión reducida y el residuo se redisolvió en DCM y se adsorbió sobre gel de sílice desactivado con TEA (3%) en una mezcla de DCM/MeOH (92%/5%). La purificación de materiales crudos (preparadas para carga seca) mediante Biotage Isolera One automático sobre cartucho SNAP Ultra de 50 g precebado con 3CV de TEA (3%) en una mezcla de DCM/MeOH (92%/5%) con un gradiente de MeOH en DCM (del 2% al 20%, flujo de 50 ml/min) proporcionó los compuestos deseados, que se volvieron a purificar adicionalmente sobre Biotage Isolera One (cartucho C18 SNAP Ultra de 30 g con gradiente de TEAB 0.1 M en AcCN (acetonitrilo) de 100 al 0% como eluyente en 60 min., flujo 15 ml/min.) o mediante HPLC sobre columna semipreparativa (Varian Pursuit XRs 5C18, 150 x 21.22 mm) utilizando gradiente de TEAB 0.1 M en AcCN de 90/10 a 0/100 en 30 min.
Ejemplo 1: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000028_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2’-desoxi-2’-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5’-monofosfato (0.58 g, 0.98 mmol), fenil(benzoxi-L-alaninil)fosforodoridato (0.35 g, 0.98 mmol) como una espuma blanca (0.04 g, 6%).
RMN 31P (202 MHz, MeOD): 5r - 7.73 (d, J = 21.0 Hz), -7.93 (d, J = 21.2 Hz), -11.96 (d, J = 18.4 Hz), -12.06 (d, J = 20.8 Hz). RMN 1H (500 MHz, MeOD): 5h 8.29, 8.28 (2x0.5H , H-8), 7.33 - 7.24 (9H, m, H-Ar), 7.18 -7.14 (1H, m, H-Ar), 6.44, 6.41 (2 x 0.5H, 2 x d, J = 3.5 Hz, H-1’), 5.20 -5.19 (0.5H, m, H-2’), 5.11 (2H, s aparente, OCH2RI-1), 5.10 -5.08 (0.5H, m, H-2’), 4.58 -4.54 (1H, m, H-3’), 4.26 -4.24 (2H, m, 2 x H -5 ’), 4.16 -4.13 (2H, m, H-4’, NHCHCH3), 3.08 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 1.39, 1.35 (3H, 2 x d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.26 (9H, t, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 699 ([M-H]'), Masa precisa: C25H28CFN 6O10R2 requerida 700.93 encontrada 699.20 ([M - H]'). HRLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCn 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR= 14.05 min.
Ejemplo 2: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2’-Desoxi-2’-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5’-O-[fenil(etoxi-L-alaninil)] difosfato
Figure imgf000028_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2’-desoxi-2’-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5’- monofosfato (0.58 g, 0.98 mmol), fenil (etoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.28 g, 0.98 mmol) como un sólido blanco (0.07 g, 10%).
RMN 31R (202 MHz, MeOD): 5r - 7.72 (d, J = 20.2 Hz), -7.89 (d, J = 20.2 Hz), -11.94 (d, J = 18.2 Hz), -12.10 (d, J = 18.2 Hz). RMN 1H (500 MHz, MeOD): 5h 8.29 (1H, s, H-8), 7.34 - 7.27 (4H, m, H-Ar), 7.17 - 7.15 (1H, m, H-Ar), 6.45, 6.42 (2 x 0.5H, 2 x t aparente, J = 1.5 Hz, H-1’), 5.24, 5.10 (2 x 0.5H, 2 x t aparente, J = 1.5 Hz, H-2’), 4.59, 4.55 (2 x 0.5H, 2 x t aparente, J = 2.0 Hz, H-3’), 4.26 - 4.24 (2H, m, OCH2CH3), 4.17 - 4.07 (4H, m, H-5’, NHCHCH3, H-4’), 3.05 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 1.39, 1.34 (2 x 1.5H, 2 x d, J = 7.0 NHCHCH3), 1.26 - 1.20 (12H, m, OCH2CH3 , 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 637 ([M - H]'), Masa precisa: C21H26CFN 6O10R2 requerida 638.86 encontrada 637.12 ([M - H]'). HRLC de fase inversa, eluyendo con H2O/AcCN desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, dos picos para dos diastereoisómeros con tR= 14.20 min.
Ejemplo 3: sal de trietilamonio 2-cloro-9-(2’-Desoxi-2’-fluoro-p-o-arabinofuranosil)adenina-5’-O-[fenil(benzoxi-L-glicinil)] difosfato.
Figure imgf000029_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.58 g, 0.98 mmol), fenil (benzoxi-L-glicinil)fosforocloridato (0.335 g, 0.98 mmol) como un sólido blanco (0.10 g, 13%).
RMN 31P (202 MHz, MeOD): 6P-6.70 (d, J = 20.2 Hz), -11.86 (d, J = 22.2 Hz). RMN 1H (500 MHz, MeOD): 6h 8.30, 8.29 (2 x 0.5H, 2 x d, J = 2.0 Hz, H-8), 7.36 - 7.28 (9H, m, H-Ar), 7.18-7.14 (1H, m, H-Ar), 6.44, 6.41 (2x0.5H, 2 x d , J = 4.5 Hz, H-1'), 5.20 - 5.18 (0.5H, m, H-2'), 5.16 (2H, s aparente, OCH2Ph), 5.09 - 5.07 (0.5H, m, H-2'), 4.61 - 4.55 (1H, m, H-3'), 4.29-4.25 (2H, m, 2 x H-5'), 4.17 -4.13 (1H, m, H-4'), 3.96 -3.84 (2H, m, NHCH2), 2.89 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 1.19 (9H, t, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 685 ([M - H]-), Masa precisa: C25H26CFN 6O10P2 requerida 686 encontrada 685.119 ([M - H]-). HPLC de fase inversa, eluyendo con t Ea B/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR= 13.6 min.
Ejemplo 4: Sal de trietilamonio de 5-Fluoro-2'-desoxiuridina-5'-O-[1-naftil-(benzoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000029_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 5-fluoro-2'-desoxiuridina-5'-monofosfato (1.07 g, 2.03 mmol), 1-naftil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.82 g, 2.03 mmol) como un sólido blanco (0.16 g, 10%).
RMN 31P (202 MHz, MeOD): 6P - 7.43 (d, J = 22.2 Hz), -7.79 (d, J = 22.2 Hz), -11.89 (d, J = 20.2 Hz), -12.02 (d, J = 20.2 Hz). RMN 1H (MeOD, 500 MHz) 6h 8.39 - 8.35 (1H, m, H-Ar), 7.99 (1H, t aparente, J = 6.0 Hz, H-Ar), 7.87 - 7.86 (1H, m, H-Ar), 7.69 (1H, t, J = 7.0 Hz, H-Ar), 7.58 (1H, d aparente, J = 7.0 Hz, H-Ar), 7.53 - 7.51 (2H, m, H-Ar, H-6), 7.43 - 7.36 (1H, m, H-Ar), 7.29 -7.26 (5H, m, H-Ar), 6.26 (1H, q aparente, J = 6.5 Hz, H-1'), 5.02 -4.94 (2H, 2 x d aparente, J = 13.5, J = 12.5 Hz, OCH2Ph), 4.46 -4.43 (1H, m, H-3'), 4.24 -4.16 (3H, m, 3H, 2 x H-5', NHCHCH3), 4.03 (1H, s aparente, H-4'), 3.09 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 2.22 - 2.19 (1H, m, H-2'), 2.16 - 2.4 (1H, m, H-2'), 1.37 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.29 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.26 (9H, t, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 692 ([M - H]-), Masa precisa: C29H30FN3O12P2 requerida 693 encontrada 692.128 ([M - H]-). Hp Lc de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR = 14.24 min., 14.34 min.
Ejemplo 5: Sal de trietilamonio de 8-cloroadenosina-5'-O-[1-naftil-(benzoxi-L-alaninil)]difosfato
Figure imgf000030_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 8-cloroadenosina-5-monofosfato (0.46 g, 0.795 mmol), 1-naftil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.32 g, 0.795 mmol) después de dos repurificaciones sobre Biotage Isolera One (cartucho C1830 g) y HPLC (columna C18 semipreparativa) como un sólido blanco (0.02 g, 4%).
RMN 31P (202 MHz, MeOD): 5r - 7.58 (d, J = 22.2 Hz), - 8.0 (d, J = 20.2 Hz), -11.85 (d, J = 22.2 Hz), -12.05 (d, J = 20.2 Hz). RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.36 -8.33 (1H, m, H-Ar), 8.14, 8.10 (2x0.5H, 2 x s, H-2), 7.86 -7.84 (1H, m, H-Ar), 7.66 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-Ar), 7.56 - 7.45 (3H, m, H-Ar), 7.38 - 7.33 (1H, m, H-Ar), 7.29 - 7.24 (5H, m, H-Ar), 6.02 (1H, t, J = 6.0 Hz, H-1'), 5.35 -5.32 (1H, m, H-2'), 5.00, 4.98, 4.97, 4.94 (2H, AB, Jab = 12.3 Hz, OCH2PIU 4.54 -4.50 (1H, m, H-3 '), 4 . 4 0 -4.33 (1H, m, H-5'), 4.26 -4.13 (3H, m, H-5', H-4', NHCHCH3), 3.06 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 1.36 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.26 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.25 (9H, t, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 747 ([M - H]-), Masa precisa: C30H31ClN6OnP2 requerida 749 encontrada 747.1102 ([M - H]-). HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 245 nm, tR = 14.32, 14.48 min.
Ejemplos 6 y 7: sal de trietilamonio de 3'-Desoxiadenosina-5'-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)]difosfato (6) y sal de trietilamonio de 3'-Desoxiadenosina-5',2'-bis-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)]-difosfato (7).
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 3'-desoxiadenosina-5'-monofosfato (0.63 g, 1.186 mmol), fenil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.42 g, 1.186 mmol). Se aislaron dos productos: sal de trietilamonio de 3'-desoxiadenosina-5',2'-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)]difosfato (0.05 g, 5%) y 3'-desoxiadenosina- 5'-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)] difosfato como una película incolora (0.01 g, 1.3%).
Figure imgf000030_0002
RMN 31P (202 MHz, MeOD): Sr - 7.76 (d, J = 21.0 Hz), - 8.03 (d, J = 21.8 Hz), -11.70 (d, J = 20.4 Hz), -11.81 (d, J = 16.76 Hz). RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.45 (1H, s, H-8), 8.21 (1H, s, H-2), 7.34 -7.23 (9H, m, H-Ar), 7.14 -7.11 (1H, m, H-Ar), 6.02 (1H, s aparente, H-1'), 5.10 (2H, t aparente de sistema AB, Jab = 16.5 Hz, OCH2Ph), 4.66 -4.60 (2H, m, H-2', H-4'), 4.29 -4.27 (1H, m, H-5'), 4.19 -4.13 (2H, m, H-5', NHCHCH3), 3.06 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 2.42 -2.33 (1H, m, H-3'), 2.11 -2.06 (1H, m, H-3'), 1.40 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.35 (1.5H, d, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.25 (9H, t, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 647 ([M - H]-), Masa precisa: C26H30N6O10P2 requerida 648 encontrada 647.154 ([M - H]-). HpLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 20 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR = 8.20 min.
Figure imgf000031_0001
RMN 31P (202 MHz, MeOD): Sr - 7.78 (d, J = 20.4 Hz), -7.84 (d, J = 22.08 Hz), -8.01 (d, J = 21.0 Hz), -12.08 (d, J = 21.6 Hz), -12.18 (d, J = 22.0 Hz), -13.50 (d, J = 20.6 Hz), -13.56 (d, J = 20.2 Hz). RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.20 (0.5H, s, H-8), 8.19 (0.5H, s, H-8), 8.04 (1H, s, H-2), 7.21 - 7.19 (12H, m, H-Ar), 7.14 - 6.97 (8H, m, H-Ar), 6.16 (0.5H, s, H-1'), 6.15 (0.5H, s, H-1'), 5.27 (0.5H, t aparente, J = 7.0 Hz, H-2'), 5.15 (0.5H, t aparente, J = 5.0 Hz, H-2'), 5.0 - 4.94 (4H, m, 2xOCH2Ph), 4.48 -4.60 (1H, m, H-4'), 4.13 -4.08 (1H, m, H-5'), 4.05 -3.95 (3H, m, H-5', 2 x NHCHCH3), 3.06 (12H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 2.50 -2.42 (1H, m, H-3'), 2.27 -2.20 (1H, m, H-3'), 1.26 -1.17 (6H, m, 2 x NHCHCH3), 1.25 (18H, t, J = 7.0 Hz, 3xCH2CH3). MS (e S) modo negativo m/z: 1044 ([M - H]-), Masa precisa: C42H47N7O17P4 requerida 1045 encontrada 1044.232 ([M - H]-). HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AccN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR= 9.75 min, 10.37 min.
Ejemplo 8: Sal de trietilamonio de 2'-Desoxi-2',2'-difluoro-D-citidina-5'-O-[fenil(benzoxi-L-alaninil)] difosfato
Figure imgf000031_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2'-desoxi-2',2'-difluoro-D-citidina 5'-monofosfato (0.62 g, 1.13 mmol), fenil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.40 g, 1.13 mmol) como un sólido blanco (0.05 g, 6%).
RMN 31P (202 MHz, MeOD): Sr -7.65 (d, J = 21.0 Hz), -7.87 (d, J = 21.0 Hz), -12.12 (d, J = 16.9 Hz), -12.21 (d, J = 21.4 Hz). RMN 1H (500 MHz, MeOD): Sh 7.83 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-6), 7.35 - 7.25 (9H, m, H-Ar), 7.16 (1H, t aparente, J = 7.0 Hz, H-Ar), 6.27 -6.24 (1H, m, H-1'), 5.96, 5.95 (1H, 2 x d , J = 5.0 Hz, H-5), 5.13 (2H, sistema AB, s aparente, OCH2Ph), 4.37 - 4.25 (3H, m, 2xH -5 ', H-3'), 4.18 - 4.12 (1H, m, H-4'), 4.00 - 3.97 (1H, m, NHCHCH3), 3.20 (6H, q, J = 7.0 Hz, 3 x CH2CH3), 1.40, 1.35 (3H, 2 x d, J= 7.5 Hz, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, 3 x CH2CH3). MS (ES) modo negativo m/z: 659 ([M - H]-), Masa precisa: C25H28F2N4O11R4 requerida 660 encontrada 659 ([M - H]-). Hr Lc de fase inversa, eluyendo con TeAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR= 12.55 min, 12.85 min.
Ejemplo 9: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[fenil(neopentoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000032_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.77 g, 1.32 mmol), fenil (neopentoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.43 g, 1.32 mmol) y TEA (0.53 ml, 3.81 mmol) como un sólido blanco (0.065 g, 6%).
RMN 301P (202 MHz, CD3OD): 6p -7.67 (d, J = 21.0 Hz), -7.93 (d, J = 21.0 Hz), -11.93 (d, J = 21.21 Hz), -12.04 (d, J = 21.21 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6h 8.18 (0.5H, s, H-8), 8.17 (0.5H, s, H-8), 7.22 - 7.15 (4H, m, H-Ar), 7.12 - 7.09 (1H, m, H-Ar), 6.33 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 6.30 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.08 (0.5H, t aparente, J = 1.5 Hz, H-2'), 4.96 (0.5H, t aparente, J = 1.5 Hz, H-2'), 4.46 (0.5H, t aparente, J = 2.0 Hz, H-3'), 4.43 (0.5H, t aparente, J = 2.0 Hz, H-3'), 4.15 - 4.11 (2H, m, H-5'), 4.05 - 3.99 (2H, m, NHCHCH3 , H-4'), 3.72, 3.69, 3.63, 3.61 (2H, sistema AB, J = 10.50 Hz, OCH2C(CH3)3), 3.05 (6H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.31, 1.25 (2 x 1.5H, 2 x d , J = 7.0 NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 0.80 (9H, s, OCH2C(CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 6o 175.10 (d, 3Jc-p = 6.4 Hz, C=O, éster), 173.56 (d, 3Jc-p = 6.4 Hz, C=O, éster), 156.72 (C-6), 154.16 (C-2), 153.42 (d, 2Jc-p = 3.8 Hz, C-Ar), 150.90 (d, 2Jc-p = 5.8 Hz, C-Ar), 150.26 (C-4), 142.68 (C-8), 129.26, 128.73, 124.65, 124.60, 122.40 (CH-Ar), 120.38, 120.15 (2xd, 3Jc-p = 4.6 Hz, CH-Ar), 117.15 (C-5), 94.99 (d, 1Jc-f = 191.4 Hz, C-2'), 82.92 (d, 3Jc-f = 8.25 Hz, C-4'), 82.78 (d, 2Jc-f = 8.5 Hz, C-1'), 73.96, 73.66 (OCH2C(CH3)3), 73.61 (d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C-3'), 65.05 (C-5'), 50.59, 50.29 (NHCHCH3), 46.26 (N(CH2CH3)3), 30.91 (OCH2C(CH3)3), 25.36 (OCH2C(CH3)3), 19.75, 19.63 (2 x d, 3Jc-p = 5.4 Hz, NHCHCH3), 7.84 (N(CH2CH3)3). C24H32ClFNr6O1üP2 masa requerida m/z 680.94; encontrada MS (ES-) m/z: 679.19 ([M - H]-). Hp Lc de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 15.83 min.
Ejemplo 10: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[fenil(benzoxidimetilglicinil)] difosfato.
Figure imgf000032_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.96 g, 1.64 mmol), fenil (benzoxi-dimetilglicinil)fosforocloridato (0.60 g, 1.64 mmol) y TEA (0.66 ml, 4.75 mmol) como un sólido blanco (0.085 g, 6%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6p -9.79 (d, J = 22.6 Hz), -9.82 (d, J = 22.6 Hz), -12.17 (d, J = 21.20 Hz), -12.20 (d, J = 21.0 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6h 8.29 (0.5H, s, H-8), 8.27 (0.5H, s, H-8), 7.36 - 7.26 (9H, m, H-Ar), 7.16 - 7.13 (1H, m, H-Ar), 6.43 (0.5H, d, J = 1.5 Hz, H-1'), 6.39 (0.5H, d, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.20 - 5.17 (0.5H, m, H-2'), 5.15 - 5.13 (2H, m, OCH2Ph), 5.11 - 5.07 (0.5H, m, H-2'), 4.60 - 4.52 (1H, m, H-3'), 4.26 -4.23 (2H, m, H-5'), 4.15 -4.11 (1H, m, H-4'), 3.05 (6H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.54 (6H, s, NHC(CH3)2), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 8 c 174.96 (d, 3Jc-p = 6 . 6 Hz, C=O, éster), 156.69 (C-6 ), 154.13 (C-2), 151.06 (d, 2Jc-p = 7.3 Hz, C-Ar), 150.22 (C-4), 140.21 (C-8 ), 136.04 (C-Ar), 129.15. 128.12. 127.76, 127.68, 124.48, 120.47, 120.43 (CH-Ar), 117.12 (C-5), 95.49 (d, 1Jc-f = 192.5 Hz, C-2'), 82.84 (d, 3Jc-f = 3.6 Hz, C-4'), 82.68 (d, 2Jc-f = 11.5 Hz, C- 1'), 73.59 (d, 2Jc-f = 11.5 Hz, C-3'), 73.41 (d, 2Jc-f = 10.5 Hz, C-3'), 66.74 (OCH2Ph), 64.90 (C-5'), 48.47 (NHC(CHa)2), 46.35 (N(CH2CHs)3), 26.14, 26.12 (NHC(CH3)2, 9.85 (N(CH2CH3)3).
C27H30ClFNr6O1üP2 masa requerida m/z 714.96; encontrada MS (ES-) m/z: 713.13 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR= 14.51 min.
Ejemplo 11: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-naftil(benzoxidimetilglicinil)] difosfato.
Figure imgf000033_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2-desoxi-2-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.96 g, 1.64 mmol), 1-naftil(benzoxi-dimetilglicinil)fosforocloridato (0.68 g, 1.64 mmol) y TEA (0.66 ml, 4.75 mmol) como un sólido blanco, que se volvió a purificar adicionalmente por HPLC preparativa (0.14 g, 10%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 8p -9.79 (d, J = 22.6 Hz), -9.82 (d, J = 22.6 Hz), -12.17 (d, J = 21.20 Hz), -12.20 (d, J = 21.0 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 8 h 8.38 - 8.34 (2H, m, H-Ar), 8.24 (0.5H, d, 5Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.22 (0.5H, d, 5Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.85 - 7.83 (2H, m, H-Ar), 7.65 - 7.60 (3H, m, H-Ar), 7.48 - 7.44 (3H, m, H-Ar), 7.38 - 7.29 (2H, m, H-Ar), 6.39 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 6.36 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.17 - 5.15 (0.5H, m, H-2'), 5.14 - 5.07 (2H, m, OCH2Ph), 5.05 - 5.02 (0.5H, m, H-2'), 4.57 - 4.50 (1H, m, H-3'), 4.27 - 4.24 (2H, m, H-5'), 4.15 - 4.10 (1H, m, H-4'), 3.05 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.90 (6 H, s, NHC(CH3)2), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 8 c 176.53, 174.95 (2 x d, 3Jc-p= 6.7 Hz, C=O, éster), 156.64 (C-6 ), 154.08 (C-2), 150.16, 149.36 (2 x d, 3Jc-p= 7.0 Hz, C-Ar), 146.91, 146.85 (C-4), 142.89 (C-8 ), 136.23, 135.99, 134.79 (C-Ar), 128.07, 127.70, 127.65, 127.61, 127.16, 126.99, 126.18, 125.83, 125.59, 125.43, 125.06, 124.76, 124.20, 122.57, 122.25, 122.20, 121.44 (CH-Ar), 117.07 (C-5), 115.9 (d, 4Jc-p= 3.2 Hz, CH-Ar), 113.15 (d, 4Jc-p = 3.2 Hz, CH-Ar), 94.98, 94.95 (2 x d, 1Jc-f = 191.5 Hz, C-2'), 82.80 (d, 3Jc-f = 3.8 Hz C-4'), 82.68 (d, 2Jc-f = 24.5 Hz C-1'), 73.57, 73.45 (2 x d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C- 3'), 66.69, 66.37 (OCH2Ph), 64.94 (C-5'), 56.95, 55.87 (NHC(CH3)2), 46.28 (N(CH2CH3)3), 26.10 (d, 3Jc-p= 4.1 Hz, NHC(CH3)2), 7.86 (N(CH2CH3)3).
C31H32CIFN6 01qP2 masa requerida m/z 764.13; encontrada MS (ES-) m/z: 763.15 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR= 14.85 min.
Ejemplo 12: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[fenil(ciclohexoxi-L-valinil)] difosfato.
Figure imgf000034_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.96 g, 1.64 mmol), fenil(ciclohexoxi-L-valinil)fosforocloridato (0.61 g, 1.64 mmol) y TEA (0.66 ml, 4.75 mmol) como un sólido blanco (0.19 g, 14%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6p -6.74 (d, J = 21.2 Hz), -6.78 (d, J = 21.0 Hz), -12.0 (d, J = 21.4 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.18 (0.5H, d, 5Jh-f = 1.0 Hz, H-8 ), 8.17 (0.5H, d, 5Jh-f = 1.0 Hz, H-8 ), 7.22 - 7.15 (4H, m, H-Ar), 7.01 - 6.98 (1H, m, H-Ar), 6.34 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 6.30 (0.5H, t, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.08 - 5.06 (0.5H, m, H-2'), 4.97 - 4.96 (0.5H, m, H-2'), 4.62 - 4.54 (1H, m, OCH), 4.46 (0.5H, t aparente, J = 2.0 Hz, H-3'), 4.43 (0.5H, t aparente, J = 2.0 Hz, H-3'), 4.15 - 4.12 (2H, m, H-5'), 4.06 - 4.02 (1H, m, H-4'), 3.68 (0.5H, dd- aparente, J = 10.0 Hz, J = 5.5 Hz, NHCHCH(CH3)2), 3.64 (0.5H, dd- aparente, J = 10.0 Hz, J = 5.5 Hz, NHCHCH(CH3)2), 3.05 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.91 - 1.80 (1H, m, NHCHCH(CH3)3), 1.67 - 1.58 (5H, m, CH2), 1.39 - 1.37 (1H, m, CH2), 1.36 - 1.31 (3H, m, CH2), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 0 .8 6 - 0.78 (6 H, m, NHCHCH(CH3)2).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 6 o 171.98, 171.95 (2xd , 3Jc-p= 4.5 Hz, C=O, éster), 156.69 (C-6 ), 154.14 (C-2), 151.02 (d, 2Jc-p = 3.8 Hz, C-Ar), 150.23 (C-4), 142.25 (C-8 ), 129.16, 128.60, 124.56, 124.47, 120.44 (CH-Ar), 117.13 (C-5), 94.96 (d, 1Jc-f = 191.4 Hz, C-2'), 82.90 (d, 3Jc-f = 3.8 Hz C-4'), 82.81 (d, 2Jc-f = 32.5 Hz C-1'), 73.59, (d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C-3'), 73.42 (d, 2Jc-f = 16.8 Hz, C-3'), 62.88 (d, 2Jc-p = 7.5 Hz, C-C-5'), 60.45, 60.20 (NHCHCH(CH3)2), 46.42 (N(CH2CH3)3), 32.56, 32.09 (NHCHCH(CH3)2), 31.14 (CH2), 25.00 (CH2), 23.25 (CH2), 17.79, 16.76 (NHCHCHCH3), 7.82 (N(CH2CH3)3). C27H36ClFN6O1üP2 masa requerida m/z 720.16; encontrada MS (ES-) m/z: 719.17 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 15.73 min.
Ejemplo 13: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-naftil(neopentoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000034_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.57 g, 0.97 mmol), 1-naftil(neopentoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.37 g, 0.97 mmol) y TEA (0.39 ml, 2.86 mmol) como un sólido blanco (0.13 g, 16%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6 p -7.41 (d, J = 23.5 Hz), -7.82 (d, J = 22.5 Hz), -11.82 (d, J = 22.69 Hz), -11.95 (d, J = 21.80 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.36 - 8.25 (2H, m, H-Ar), 7.85 - 7.79 (2H, m, H-Ar), 7.68 - 7.65 (2H, m, H-8 ), 7.58 - 7.36 (2H, m, H-Ar), (6 H, m, H-Ar), 6.4 (1H, dd J = 16.68 Hz, 4.1 Hz, H-1'), 5.19 - 5.05 (1H, m, H-2'), 4.58 - 4.53 (1H m, H-3'), 4.29 - 4.25 (2H, m, H-5'), 4.17 - 4.14 (1.5H, m, H-4' y NHCHCH3), 4.06 - 4.01 (0.5H, m, NHCHCH3), 3.75-3.66 (2H, m, OCH2C(CH3)3), 3.14 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.31 -1.26 (12H, m, NHCHCH3, N(CH2CH3)3).
C28H34CIFN6O10P2 masa requerida m/z 730.15; encontrada MS (ES-) m/z: 729.09 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con 0.1 M TEAB (pH 7.2) /AcCN desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 14.63 min.
Ejemplo 14: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[fenil(neopentoxi-D-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000035_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(neopentoxi-D-alaninil)fosforocloridato (0.49 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.16 g, 14%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): Sp -7.68 (d, J = 21.0 Hz), -7.91 (d, J = 21.0 Hz), -12.04 (d, J = 20.08 Hz), -12.14 (d, J = 20.08 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.30 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.29 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.35 - 7.27 (4H, m, H-Ar), 7.18 - 7.14 (1H, m, H-Ar), 6.45 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 6.42 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 5.20 (0.5H, t aparente, J = 3.5 Hz, H-2'), 5.09 (0.5H, t aparente, J = 3.5 Hz, H-2'), 4.61 - 4.54 (1H, m, H-3'), 4.27 - 4.23 (2H, m, H-5'), 4.17 - 4.10 (2H, m, NHCHCH3 , H-4'), 3.80 - 3.72 (2H, m, OCH2C(CH3)3), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.42 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.36 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 0.80 (9H, s, OCH2C(CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): So 173.56, 173.48 (t aparente, 3Jc-p = 7.6 Hz, C=O, éster), 156.70 (C-6 ), 154.13 (C-2), 150.89 (t aparente, 2Jc-p = 6 .6 Hz, C-Ar), 150.24 (C-4), 142.68 (C-8 ), 129.22, 128.67, 124.65, 124.60, 122.34 (CH-Ar), 120.38, 120.36 (2 xd , 3Jc-p = 4.6 Hz, CH-Ar), 117.14 (C-5), 95.0, 94.99 (2 xd , 1Jc-f = 191.6 Hz, C-2'), 82.76 (d, 3Jc-f = 8.25 Hz, C-4'), 82.68 (d, 2Jc-f = 8.5 Hz, C-1'), 73.95, 73.92 (OCH2C(CH3)3), 73.58, 73.50 (2 x d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C- 3'), 64.98, 64.86 (2 x d, 2Jc-p = 4.6 Hz, C-5'), 50.36, 50.27 (2 x d, 3Jc-p = 2.4 Hz, NHCHCH3), 46.36 (N(CH2CH3)3), 30.92, 30.89 (OCH2C(CH3)3), 25.35, 25.33 (OCH2C(CH3)3), 19.75, 19.61 (2 x d, 3Jc-p= 5.6 Hz, NHCHCH3), 7.82 (N(CH2CH3)3).
C24H32ClFN6O1üP2 masa requerida m/z 680.94; encontrada MS (ES-) m/z: 679.19 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 14.23 min.
Ejemplo 15: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(isopropoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000035_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(isopropoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.45 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.126 g, 11%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): Sp -7.62 (d, J = 21.0 Hz), -7.85 (d, J = 21.0 Hz), -12.14 (t aparente, J = 20.2 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.30 (1H, d, 5Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.35 -7.27 (4H, m, H-Ar), 7.18 -7.14 (1H, m, H-Ar), 6.45 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 6.42 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 5.22 (0.5H, q, J = 3.5 Hz, H-2'), 5.13 (0.5H, q, J = 3.5 Hz, H-2'), 4.96 - 4.94 (1H, m, OCH(CHa)2), 4.61 - 4.58 (0.5H, m, H-3'), 4.57 - 4.55 (0.5H, m, H-3'), 4.29 - 4.25 (2H, m, H-5'), 4.19 -4.15 (1H, m, NHCHCH3), 4.07 - 4.00 (1H, m, H-4'), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CHa)a), 1.38 (1H, d, J = 7.5 Hz, NHCHCH3), 1.33 (2H, dd, J = 7.5 Hz, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 1.20 (6 H, t aparente, J = 6.0 Hz, OCH(CH3)2).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): So 173.10 (d, 3Jc-p = 7.1 Hz, C=O, éster), 173.02 (C=O, éster), 156.73 (C-6 ), 154.16 (C- 2), 150.92, 150.86 (2 x d, 2Jc-p = 5.2 Hz, C-Ar), 150.24 (C-4), 142.55 (C-8 ), 129.26, 124.64, 124.62 (CH-Ar), 120.34 (d, 3Jc-p = 4.5 Hz, CH-Ar), 117.16 (C-5), 95.00 (d, 1Jc-f = 191.5 Hz, C-2'), 82.90 (d, 3Jc-f = 6.5 Hz C-4'), 82.80, 82.76 (2xd , 2Jc-f = 10.5 Hz C-1'), 73.60, 73.59 (2 x d, 2Jc-f = 24.5 Hz C-3'), 68.71 (OCH(CH3)2), 65.08 (d, 2Jc-p= 4.2 Hz, C-5'), 50.39, 50.34 ( 2 x d, 2Jc-p = 1 .8 Hz, NHCHCH3), 46.23 (N(CH2CH3)a), 20.61, 20.54 (OCH(CH3)2), 19.60, 19.47 ( 2 x d, 3Jc-p = 6 .0 Hz, NHCHCH3), 7.86 (N(CH2CH3)3).
C22H28CIFN6O10P2 masa requerida m/z 652.10; encontrada MS (ES-) m/z: 651.13 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 12.32 min.
Ejemplo 16: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(metoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000036_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(metoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.41 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.182 g, 17%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): Sp -7.73 (d, J = 20.7 Hz), -7.84 (d, J = 20.8 Hz), -12.04 (d, J = 21.0 Hz), -12.11 (d, J = 20.8 Hz). RMN 1H (500 MHz, CD3OD): Sh 8.31 (0.5H, d, Jh-f = 2.5 Hz, H-8 ), 8.30 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.35 - 7.27 (4H, m, H-Ar), 7.18 -7.14 (1H, m, H-Ar), 6.44 (0.5H, dd, Jh-f = 16.4 Hz, J = 3.9 Hz, H-1'), 6.42 (0.5H, dd, Jh-f = 16.4 Hz, J = 3.7 Hz, H-1'), 5.20 - 5.09 (1H, m, H-2'), 4.68 - 4.52 (1H, m, H-3'), 4.28 - 4.24 (2H, m, H-5'), 4.18 - 4.15 (1H, m, H-4'), 4.12 -4.07 (1H, m, NHCHCH3), 3.66 (1.5H, s, OCH3), 3.65 (1.5H, s, OCH3), 3.78 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.37 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.32 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.14 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
C20H24CIFN6O10P2 masa requerida m/z 724.07; encontrada MS (ES-) m/z: 723.01 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 12.24 min.
Ejemplo 17: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-1-naftil(benzoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000037_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), 1-naftil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.59 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.226 g, 18%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6 P -7.26 (d, J = 20.2 Hz), -7.61 (d, J = 20.2 Hz), -12.07 (d, J = 20.40 Hz), -12.27 (d, J = 20.40 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.19 - 8.17 (2H, m, H-Ar), 8.13 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.12 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.72 - 7.68 (2H, m, H-Ar), 7.54 - 7.52 (1H, d aparente, J = 9.5 Hz, H-Ar), 7.44 - 7.40 (4H, m, H-Ar), 7.37 - 7.35 (1H, m, H-Ar), 6.28 (0.5H, t, J = 4.0 Hz, H-1'), 6.25 (0.5H, t, J = 4.0 Hz, H-1'), 5.06 - 5.02 (0.5H, m, H-2'), 4.95 - 4.93 (0.5H, m, H-2'), 4.89 - 4. 80 (2H, OCH2Ph), 4.43 - 4.43 (0.5H, m, H-3'), 4.41 - 4.40 (0.5H, m, H-3'), 4.15 - 4.12 (2H, m, H-5'), 4.09 -4.06 (1H, m, NHCHCH3), 4.03 - 4.01 (1H, m, H-4'), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.23 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.20 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
C30H30CIFN6O10P2 masa requerida m/z 750.99; encontrada MS (ES-) m/z: 749.19 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR = 14.69, 14.81 min.
Ejemplo 18: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(hexoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000037_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), 1-fenil(hexoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.51 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.235 g, 20%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6 P -7.55 (d, J = 23.00 Hz), -7.77 (d, J = 19.40 Hz), -12.09 (d, J = 19.40 Hz), -12.19 (d, J = 20.10 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.18 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.17 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.23 - 7.11 (4H, m, H-Ar), 7.08 - 7.03 (1H, m, H-Ar), 6.33 (0.5H, dd, J = 4.0, 1.5 Hz, H-1'), 6.29 (0.5H, dd, J = 4.0 Hz, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.08 -5.06 (0.5H, m, H-2'), 4.98 -4.96 (0.5H, m, H-2'), 4.47 -4.45 (0.5H, m, H-3'), 4.44 -4.42 (0.5H, m, H-3'), 4.15 -4.11 (2H, m, H-5'), 4.06 - 4.03 (1H, m, NHCHCH3), 3.97 - 3.90 (5H, m, H-4', 2 x CH2 , OCH2(CH2)4CH3), 3.84 - 3.78 (1H, m, OCH2(CH2)4CH3), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3 , 1.50 - 1.43 (4H, m, 2 x CH2 , OCH2(CH2)4CH3), 1.31 -1.22 (6 H, m, CH2 , OCH2(CH2)4CH3 , NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 0.81 - 0.76 (3H, m, OCH2(CH2)4CH3).
C25H34CIFN6O10P2 masa requerida m/z 694.97; encontrada MS (ES-) m/z: 693.14 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR = 15.13 y 15.21 min.
Ejemplo 19: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-5,6,7,8-tetrahidro-1 -naftil( benzoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000038_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), 5,6,7,8-tetrahidro-1-naftil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.603 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.19 g, 15%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 8 P -7.06 (d, J = 24.0 Hz), -7.55 (d, J = 21.2 Hz), -11.24 (d, J = 21.2 Hz), -11.38 (d, J = 24.0 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 5h 8.27 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.25 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.33 - 7.30 (3H, m, H-Ar), 7.22 -7.18 (2H, m, H-Ar), 7.00 -6.93 (2H, m, H-Ar), 6.84 (1H, t aparente, J = 6.5 Hz, H-Ar), 6.72 (1H, d aparente, J = 7.5 Hz, H-Ar), 6.43 (0.5H, dd, J = 4.0 Hz, J = 2.0 Hz, H-1'), 6.39 (0.5H, dd, J = 4.0 Hz, J = 2.0 Hz, H-1'), 5.19 - 5.16 (0.5H, m, H-2'), 5.09 -5.06 (0.5H, m, H-2'), 5.06 -5.03 (2H, m, OCH2Ph), 4.56 -4.49 (1H, m, H-3'), 4.27 -4.10 (3H, m, H-5', H-4'), 4.02 - 3.97 (1H, m, NHCHCH3), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 2.73 (4H, bt, 2 x CH2), 1.75 - 1.72 (4, m, 2 x CH2), 1.42 (1.5H, d, J = 7.5 Hz, NHCHCH3), 1.38 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
C30H34CIFN6O10P2 masa requerida m/z 754.15; encontrada MS (ES-) m/z: 753.23 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, tR = 15.32 y 15.44 min.
Ejemplo 20: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-flluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-etil(benzoxi-L-alaninil)] difosfato.
Figure imgf000038_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2-desoxi-2-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), etil(benzoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.45 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.218 g, 20%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 8p -2.73 (d, J = 20.2 Hz), -3.04 (d, J = 20.4 Hz), -11.96 (d, J = 20.2 Hz), -12.07 (d, J = 20.04 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 5h 8.32 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.31 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.37 - 7.27 (5H, m, H-Ar), 6.46 (0.5 H, dd, J = 4.0 Hz, J = 2.0 Hz, H-1'), 6.43 (0.5H, dd, J = 4.0 Hz, J = 2.0 Hz, H-1'), 5.24 - 5.22 (0.5H, m, H-2'), 5.20 -5.14 (2H, m, OCH2Ph), 5.13-5. 11 (0.5H, m, H-2'), 4.62 -4.60 (0.5H, m, H-3'), 4.59-4.57 (0.5H, m, H- 3'), 4.29 - 4.26 (2H, m, H-5'), 4.19 - 4.17 (2H, m, NHCHCH3), 4.12- 4.04 (3H, m, H-4', OCH2CH3), 2.86 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.43 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.42 (1.5H, dd, J = 7.0 Hz, J = 0.5 Hz, NHCHCH3), 1.27 - 1.23 (3H, m, OCH2CH3), 1.19 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
C22H28CIFN6O10P2 masa requerida m/z 652.89; encontrada MS (ES-) m/z: 651.15 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 14.12 min.
Ejemplo 21: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(benzoxi-L-leucinil)] difosfato.
Figure imgf000039_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(benzoxi-L-leucinil)fosforocloridato (0.58 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.30 g, 24%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 8 p - 7.28 (d, J = 21.4 Hz), -7.57 (d, J = 21.6 Hz), -12.18 (d, J = 21.6 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 8 h 8.18 (1H, s, H-8), 7.19 - 7.10 (8H, m, H-Ar), 7.06 - 6.99 (2H, m, H-Ar), 6.32 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 6.29 (0.5H, t, J = 3.5 Hz, H-1'), 5.10 - 5.08 (0.5H, m, H-2'), 4.97 - 4.88 (2.5H, m, H-2', OCH2Ph), 4.46 (0.5H, t aparente, J = 3.5 Hz, H-3'), 4.43 (0.5H, t aparente, J = 3.5 Hz, H-3'), 4.17 - 4.13 (2H, m, H-5'), 4.06 - 4.04 (1H, m, H-4'), 3.94 -3.88 (1H, m, NHCHCH2CH(CH3)2), 3.33 (6H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.13 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3), 1.43 - 1.37 (3H, m, NHCHCH2CH(CH3)2), 0.75 - 0.72 (3H, m, NHCHCH2CH(CH3B 0.65 - 0.64 (3H, dd- aparente, J = 14.0 Hz, J = 6.0 Hz, NHCHCH2CH(CH3)2).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 8 c 173.43, 173.22 (2 x d, 3Jc-p = 3.5 Hz, C=O, éster), 156.78, 156.72 (C-6), 154.16 (C- 2), 150.92 (d, 2Jc-p = 7.0 Hz, C-Ar), 150.24 (C-4), 135.84, 84, 135.81 (C-8), 129.26, 128.74, 128.26, 128.13, 127.95, 127.90, 127.88, 127.83, 124.68, 124.57, 122.30 (CH-Ar), 120.44 (d, 3Jc-p = 4.6 Hz, CH-Ar), 120.27 (d, 3Jc-p = 5.2 Hz, CH-Ar), 119.98, 119.94 (CH-Ar), 117.17 (C-5), 95.00 (d, 1Jc-f = 191.6 Hz, C-2'), 82.90 (d, 3Jc-f = 4.1 Hz C-4'), 82.74 (d, 2Jc-f = 11.0 Hz C-1'), 73.63, 73.58 (2 x d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C-3'), 66.43, 66.05 (OCH2Ph), 65.10 (d, 2Jc-p = 5.5 Hz, C-5'), 53.70 (NHCH), 53.31 (d, 2Jc-p = 5.5 Hz, NHCH), 46.21 (N(CH2CH3)3), 43.20, 43.00 (2 x d, 3Jc-p = 7.0 Hz, NHCHCH2), 24.13, 24.08 (NHCHCH2CH(CH3)2), 21.66, 21.45, 21.07, 20.99 (NHCHCH2CH(CH3)2), 7.83 (N(CH2CH3)3).
C29H34CIFN6O1üP2 masa requerida m/z 742.15; encontrada MS (ES-) m/z: 741.18 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 14.91 min.
Ejemplo 22: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(benzoxi-L-fenilalaninil)] difosfato.
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(benzoxi-L-fenilalaninil)fosforocloridato (0.63 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.185 g, 14%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 5r - 7.88 (d, J = 20.6 Hz), -7.98 (d, J = 20.0 Hz), -12.00 (d, J = 21.21 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.17 (0.5H, d, 5Jh-f = 2.5 Hz, H-8 ), 8.14 (0.5H, d, 5Jh-f = 2.5 Hz, H-8 ), 7.18 - 7.08 (10, m, H-Ar), 6.97 - 6.87 (5H, m, H-Ar), 6.30 (0.5 H, dd, J = 4.0 Hz, J = 1.5 Hz, H-1'), 6.27 0.5H dd, J = 4.0 Hz, J = 1.5 Hz, H-1'), 5.08 - 5.050.5H m, H-2' 4.97 - 4.95 (0.5H, m, H-2'), 4.86 - 4.77 (4H, m OCH2Ph, NHCHCH2PIU 4.46 - 4.44 (0.5H, m, H-3 '), 4 . 4 3 - 4 .4 1 (0.5H, m, H-3'), 4.25 -4.17 (1H, m, NHCHCH2Ph), 4.16 -4.12 (2H, m, H-5'), 4.10 -4.05 (1H, m, H-4'), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 6 o 173.46 (d, 3Jc-p = 4.6 Hz, C=O, éster), 172.05 (d, 3Jc-p = 4.5 Hz, C=O, éster), 156.68 (C-6 ), 154.13 (C-2), 153.36 (d, 2Jc-p = 7.1 Hz, C-Ar), 150.85, 150.83 (C-4), 150.23 (C-Ar), 136.73, 136.11 (d, 2Jc-p = 4.7 Hz, C-Ar), 135.69 (C-8 ), 135.52, 135.50 (CAr), 129.20 (d, 3Jc-p = 3.1 Hz, CH-Ar), 128.74, 128.09, 128.05 (d, 3Jc-p = 2.8 Hz, CH-Ar), 127.90, 127.84, 127.78, 126.44, 126.25, 124.59, 122.40, 120.38, 120.34, 120.30, 120.26, 120.15, 120.11 (CH-Ar), 117.15 (C-5), 95.01 (d, 1Jc-f = 191.0 Hz, C-2'), 95.00 (d, 1Jc-f = 191.0 Hz, C-2'), 82.84 (d, 3Jc-f = 3.8 Hz C-4'), 82.68 (d, 2Jc-f = 32.5 Hz C-1'), 73.58 (d, 2Jc-f = 24.5 Hz C-3'), 66.45, 66.44 (OCH2Ph), 66.11 (OCH2Ph), 65.04 (d, 2Jc-p = 4.8 Hz, C-5'), 56.44 (NHCHCH2Ph), 56.19 (NHCHCH2Ph), 46.21 (N(CH2CH3)3), 40.79, 40.74 (CH2Ph), 9.85 (N(CH2CH3)3).
C32H32CIFN6O10P2 masa requerida m/z 776.13; encontrada MS (ES-) m/z: 775.17 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 24.28 min.
Ejemplo 23: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(benzoxi-L-prolinil)] difosfato.
Figure imgf000040_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(benzoxi-L-prolinil)fosforocloridato (0.55 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.17 g, 14%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 6p - 9.05 (d, J = 17.6 Hz), -9.72 (d, J = 21.6 Hz), -11.75 (d, J = 17.6 Hz), -12.12 (d, J = 21.6 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 6 h 8.17 (0.5H, d, Jh-f = 2.5 Hz, H-8 ), 8.16 (0.5H, d, Jh-f = 2.5 Hz, H-8 ), 7.21 - 7.15 (8 H, m, H-Ar), 7.11 - 7.09 (1H, m, H-Ar), 7.04 - 7.00 (1H, m, H-Ar), 6.32 (0.5H, d, J = 4.0 Hz, H-1'), 6.31 (0.5H, d, J = 4.0 Hz, H-1'), 5.08 - 5.06 (0.5H, m, H-2'), 5.01 -4.99 (0.5H, m, H-2'), 4.98 -4.91 (2H, m, OCH2Ph), 4.48 -4.45 (1H, m, NCH), 4.43 -4.41 (0.5H, m, H-3'), 4.34 - 4.30 (0.5H, m, H-3'), 4.16 - 4.09 (2H, m, H-5'), 4.05 - 4.00 (1H, m, H-4'), 3.46 - 3.38 (2H, m, NCH2), 2.21 - 2.05 (1H, m, un H de NCH2CH2), 1.85 - 1.76 (3H, m, 1 x H, NCH2CH2 , 2 x H, NCH2CH2CH2), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3 , 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
RMN 13C (125 MHz, CD3OD): 6 o 173.60, 173.31 (C=O, éster), 156.69 (C-6 ), 154.14 (C-2), 150.78 (d, 2Jc-p = 3.8 Hz, C­ Ar), 150.22 (C-4), 136.37 (C-8 ), 136.03, 135.96 (C-Ar), 129.29, 129.23, 128.13, 127.80, 127.76, 127.67, 124.57 (CHAr), 120.15 (d, 3Jc-p = 5.2 Hz, CH-Ar), 119.96 (d, 3Jc-p = 5.2 Hz, CH-Ar), 117.14 (C-5), 95.02 (d, 1Jc-f = 191.7 Hz, C-2'), 94.99 (d, 1Jc-f = 191.7 Hz, C-2'), 82.85 (d, 3Jc-f = 5.6 Hz C-4'), 82.71 (d, 2Jc-f = 32.5 Hz, C-1'), 73.59 (d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C-3'), 73.55 (d, 2Jc-f = 24.5 Hz, C-3'), 66.32, 66.25 (OCH2Ph), 65.02 (d, 2Jc-p = 4.0 Hz, C-5'), 64.90 (d, 2Jc-p = 4.0 Hz, C-5'), 60.72 (2Jc-p = 7.75 Hz, NCH), 60.35 (2Jc-p = 7.75 Hz, NCH), 46.31 (N(CH2CH3)3), 30.99 (2Jc-p = 11.0 Hz, NCH2), 30.89 (2Jc-p = 11.0 Hz, NCH2), 24.84 (3Jc-p = 9.0 Hz, NCH2CH2), 24.40 (3Jc-p = 9.0 Hz, NCHCH2), 7.85 (N(CH2CH3)3).
C28H3qCIFN6 01qP2 masa requerida m/z 726.97; encontrada MS (ES-) m/z: 725.67 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 15.39 min.
Ejemplo 24: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(metoxi-L-metioninil)] difosfato.
Figure imgf000041_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(metoxi-L-metioninil)fosforocloridato (0.49 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.25 g, 22%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 5r - 7.41 (d, J = 21.33 Hz), -7.69 (d, J = 21.6 Hz), -12.29 (d, J = 20.6 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 8 h 8.19 (0.5H, d, Jh-f = 2.1 Hz, H-8 ), 8.18 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.21 - 7.16 (4H, m, H-Ar), 7.09 - 7.02 (1H, m, H-Ar), 6.32 (0.5H, dd, Jh-f = 16.6 Hz, J = 4.3 Hz, H-1'), 6.31 (0.5H, dd, Jh-f = 16.6 Hz, J = 4.2 Hz, H-1'), 5.02 (0.5H, dd Jh-f = 51.9 Hz, Jh-f = 2.2 Hz, H-2') 5.00 (0.5H, dd, Jh-f = 51.9 Hz, JH-H = 2.2 Hz, H-2'), 4.48 -4.43 (1H, m, H-3'), 4.17 -4.13 (2H, m, H-5'), 4.08 -4.00 (m, 2H, NHCHCH3 , H-4'), 3.56, 3.43 (3H, 2s, OCH3), 2.80 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CHa)3 , 2.42 - 2.39 (1H, m, CHsSCH2CH2a), 2.28 - 2.24 (1H, m, CHaSCH2CH2b), 1.90, 1.86 (3H, 2 x s, SCH3), 1.90 -1.71 (2H, m, CH3SCH2CH2a).
C22H28CIFN6O10P2S masa requerida 684.96; encontrada MS (ES-) m/z: 683 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 12.28 min.
Ejemplo 25: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-fenil(etoxi-L-isoleucinil)] difosfato.
Figure imgf000041_0002
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), fenil(etoxi-L-isoleucinil)fosforocloridato (0.49 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.26 g, 23%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): Sr - 6.84 (d, J = 21.5 Hz), -6.99 (d, J = 22.3 Hz), -12.00 (d, J = 21.6 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 5h 8.30, (0.5H, d, Jh-f = 2.4 Hz, H-8 ), 8.29 (0.5H, d, Jh-f = 2.3 Hz, H-8 ), 7.35 - 7.23 (4H, m, H-Ar), 7.19 - 7.13 (1H, m, H-Ar), 6.44 (0.5H, dd, Jh-f = 16.7 Hz, J = 3.9 Hz, H-1'), 6.43 (0.5H, dd, Jh-f = 16.7 Hz, JH-H = 4.2 Hz, H-1'), 5.21 -5.08 (1H, m, H-2'), 4.59 -4.54 (1H, m, H-3'), 4.28 -4.25 (2H, m, OCH2CH3), 4.18 -4.07 (3H, m, H-5'a, H-4', NHCHCH3), 3.83 (0.5H, dd, J = 9.8 Hz, J = 5.7 Hz, H-5'b,), 3.82 (0.5H, dd, J = 9.8 Hz, J = 5.7 Hz, Hb-5'), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3 , 1.77 - 1.68 (1H, m, CHCH3), 1.55 - 1.42 (1H, m, CHCH2a), 1.15 -1.09 (1H, m, CHCH2b), 1.27 - 1.20 (12H, m, N(CH2CH3)3 , OCH2CH3), 0.91 - 0.82 (6 H, CHCH3 , CH2CH3).
C24H32CIFN6O10P2 masa requerida 680.14; encontrada MS (ES-) m/z: 680.18 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 13.57 min.
Ejemplo 26: Sal de trietilamonio de 2-cloro-9-(2'-Desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'-O-[1-naftil(benzoxi-L-alaninil)] fosforoclorotiol-fosfato.
Figure imgf000042_0001
Preparada de acuerdo con el procedimiento general de la sal de TEA de 2-cloro-9-(2'-desoxi-2'-fluoro-p-D-arabinofuranosil)adenina-5'- monofosfato (0.86 g, 1.48 mmol), 1-naftil(benzoxi-L-alaninil)fosforoclorotiocloridato (0.62 g, 1.48 mmol) y TEA (0.59 ml, 4.25 mmol) como un sólido blanco (0.054 g, 4%).
RMN 31P (202 MHz, CD3OD): 8 r 55.05 (d, J = 28.5 Hz), 53.71 (d, J = 28.5 Hz), -12.24 (amplio d, J = 28.7 Hz).
RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 5h 8.37 - 8.34 (1H, m, H-Ar), 8.28 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 8.26 (0.5H, d, Jh-f = 2.0 Hz, H-8 ), 7.85 - 7.82 (1H, m, H-Ar), 7.66 - 7.64 (2H, m, H-Ar), 7.50 - 7.43 (2H, m, H-Ar), 7.38 - 7.19 (5H, m, H-Ar), 6.42 (0.5H, t, J = 4.0 Hz, H-1'), 6.39 (0.5H, t, J = 4.0 Hz, H-1'), 5.19 - 5.16 (1H, m, H-2'), 5.11 - 5.02 (2H, m, OCH2Ph), 4.60 - 4.57 (0.5H, m, H-3'), 4.56 -4.54 (0.5H, m, H-3'), 4.44 -4.28 (3H, m, H-5', NHCHCH3), 4.20 -4.17 (1H, m, H-4'), 3.33 (6 H, q, J = 7.0 Hz, N(CH2CH3)3), 1.47 -1.41 (3H, m, NHCHCH3), 1.31 (9H, t, J = 7.5 Hz, N(CH2CH3)3).
C30H30CIFN6O9P2S masa requerida m/z 767.06; encontrada MS (ES-) m/z 766.12 ([M - H]-).
HPLC de fase inversa, eluyendo con TEAB/AcCN 0.1 M desde 90/10 hasta 0/100 en 30 min, F = 1 ml/min, A = 254 nm, un pico para dos diastereoisómeros con tR = 16.39 min.
Ejemplo 27 - Análisis de citotoxicidad in vitro
Se ensayó un subconjunto de compuestos de la invención en cuanto a su actividad citotóxica en una matriz de diferentes tumores sólidos y neoplasias hematológicas utilizando el siguiente ensayo.
Ensayo de tumor sólido y neoplasia hematológica.
Se realizaron ensayos de viabilidad in vitro para evaluar los efectos de los compuestos sobre la viabilidad celular en estirpes celulares seleccionadas durante 72 h utilizando el ensayo CellTiterGlo (c Tg , Promega-G7573). Las pruebas se realizaron por duplicado con tratamiento de compuestos en 9 puntos, titulación de 3.16 veces en placas de 96 pozos durante ~72 horas Las concentraciones iniciales del compuesto fueron 198 pM. Se realizó un ensayo de viabilidad celular utilizando CellTiterGlo en una placa de 96 pozos. Tratamiento de compuesto 72 h, condiciones de crecimiento estándar, duplicados. Los compuestos se disolvieron a 40 mM con un 100% descongelado. Los compuestos se diluyeron en serie a 3.16 veces en DMSo descongelado y se calentaron a 37 °C antes de disolverlos en el medio (2 pl 200 pl). Después de que los compuestos se disolvieron en el medio, el medio que contenía los compuestos se calentó a 37 °C en una incubadora y luego los compuestos en medio se agregaron a las placas de células (50 pl 50 pl) por duplicado. Las concentraciones finales de los compuestos fueron de 198 pM a 19.8 nM. Todas las solubilidades de los compuestos se verificaron y registraron nuevamente, luego las placas se transfirieron a incubadora de cultivo de tejidos con CO2 inmediatamente y se incubaron durante 3 días. La concentración final de DMSO es del 0.5%. El nucleósido original en cada caso se probó como un comparador, al igual que un ProTide de ejemplo. Los fármacos de la clase ProTide que se probaron fueron los siguientes:
Figure imgf000043_0001
Se probaron las siguientes estirpes celulares y se mencionan en la Tabla 1 a continuación:
Tabla 1
Estirpe celular Neoplasia Estirpe celular Neoplasia
MOLT-4 Leucemia linfoblástica T aguda MCF-7 Adenocarcinoma de mama
CCRF-CEM Leucemia linfoblástica aguda HL-60 Leucemia promielocítica
RL Linfoma no Hodgkin MV4-11 Leucemia mielomonocítica bifenotípica B RPMI-8226 Mieloma múltiple humano HepG2 Carcinoma hepatocelular
K562 Leucemia mielógena crónica HT29 Adenocarcinoma de colon
OVCAR-3 Adenocarcinoma de ovario Mia-Pa-Ca-2 Carcinoma de páncreas
KG-1 Leucemia mielógena aguda
Los resultados de este cribado se presentan en las Tablas 2, 3 y 4.
En la Tabla 3, A representa un EC50 de no más de 0.2 |jm; B representa una EC50 de más de 0.2 |jm pero no más de 2 |jm; C representa un EC50 de más de 2 jm pero no más de 5 jm ; D representa una EC50 de más de 5 jm pero no más de 10 jm ; y E representa un EC50 de más de 10 jm . Ninguna entrada significa que no se llevó a cabo el cribado del compuesto indicado frente a la estirpe celular indicada.
En la Tabla 4, A representa un EC50 de no más de 0.2 jm ; B representa una EC50 de más de 0.2 jm pero no más de 1 jm ; C representa un EC50 de más de 1 jm pero no más de 5 jm ; D representa una EC50 de más de 5 jm pero no más de 10 jm ; y E representa un EC50 de más de 10 jm . Las letras en negrita representan un EC50 menor que el ProTide A de ejemplo.
En las Tablas 2, 3 y 4, 'Ab EC50' se refiere a la EC50 absoluta e 'Inhibición superior' se refiere al porcentaje de inhibición logrado en la concentración más alta probada.
Tabla 2
Figure imgf000044_0001
Figure imgf000044_0002
Tabla 2 (continuación)
Figure imgf000045_0001
Tabla 3
Figure imgf000046_0001
Tabla 3 (continuación)
Figure imgf000046_0002
Tabla 4
Figure imgf000047_0006
Tabla 4 (continuación)
OVCAR3
Figure imgf000047_0001
K 562
Figure imgf000047_0002
Inhibí Inhibición Inhibición Irhibición CCsq Ab EC» citan Su Ab ECsa Ab ECíd Superior Superior Superior flM ) OlM} perior (HM) (M-M)
% % %
E 42 E 32 A 97 F 94 F 85 B 97 t 43 E 40 A 96 E 42 E 37 A 96 E 70 E 50 A 96 198 41 198 40 0.07 96 E 80 E 44 A 96 E 43 E 36 A 96 193 41 198 36 0.06 96
Figure imgf000047_0003
E 44
Figure imgf000047_0004
E 33
Figure imgf000047_0005
A 96
Figure imgf000048_0002
Tabla 4 (continuación)
Figure imgf000048_0001
Como se puede ver a partir de las Tablas 3 y 4, ciertos compuestos de la invención fueron más activos que el ProTide A frente a un rango de diferentes estirpes celulares cancerosas.
Ejemplo 28 - Estabilidad metabólica
El ensayo se realizó de acuerdo con el procedimiento publicado ((Kuhnz, W.; Gieschen, H. Drug Metab. Dispos. 1998, 26, 1120-1127).
Los hepatocitos crioconservados agrupados se descongelaron, lavaron y resuspendieron en tampón Krebs-Henseleit (pH 7,3). La reacción se inició al agregar el compuesto de prueba (concentración final de 1 j M) en la suspensión celular y se incubó en un volumen final de 100 j l sobre una placa de 96 pozos de fondo plano durante 0 y 120 min, respectivamente, a 37 °C/5% de CO2. La reacción se detuvo al agregar 100 j l de acetonitrilo en la mezcla de incubación. A continuación, las muestras se mezclaron suave y brevemente sobre un agitador de placas, se transfirieron por completo a una placa de 96 pozos con fondo en V de 0.8 ml y se centrifugaron a 2500 x g durante 15 min a temperatura ambiente. Cada sobrenadante (150 j l) se transfirió a un tubo de clúster limpio, seguido por un análisis HPLC-MS/MS sobre un sistema de triple cuadrupolo Thermo Electron.
A modo de comparación, el nucleósido original y un ProTide correspondiente se probaron en el mismo ensayo
Los resultados se muestran en las Tablas 5 y 6 :
Tabla 5
Figure imgf000049_0001
Tabla 6
Figure imgf000049_0002
Ejemplo 29 - Evaluación de clofarabina y fosforamidatos de difosfato de clofarabina seleccionados en un modelo de estirpe celular KG1a de leucemia mieloide aguda (AML)
Resumen
Se seleccionaron clofarabina y los Ejemplos 1 y 2 para análisis para determinar si: (1) los compuestos de la invención poseían una mayor potencia en comparación con el compuesto original y (2) los compuestos de la invención se dirigían preferiblemente a las células madre leucémicas (LSC). Para establecer esto, se empleó la estirpe celular de leucemia mieloide aguda, KG1a, ya que manifiesta un compartimento similar a una célula madre menor con un inmunofenotipo distinto (LinVCD34+/CD38VCD123+). Los compuestos se evaluaron en un rango de dosis ampliado. Además, se evaluaron los efectos de los compuestos sobre el compartimento de células madre en todo el rango de dosis. La LD50 media de clofarabina (la concentración de fármaco requerida para destruir el 50% de las células) fue de 1.69 x 10-8M. El ejemplo 1 mostró un valor de LD50 media similar (1.37 x 10-8M), mientras que el Ejemplo 2 mostró valores de LD50 media significativamente mayores (4.38 x 10-8M y 7,10 x 10-8M respectivamente).
En condiciones normóxicas, el compartimento de LSC (LinVCD34+/CD38YCD123+) constituía ~3.5% de la estirpe celular total. Sin embargo, en condiciones hipóxicas (1% y 5% de oxígeno), la proporción de las LSC mostró un aumento dependiente del tiempo (hasta un 23.7%). Adicionalmente, esto se revirtió cuando la estirpe celular se transfirió de nuevo a condiciones normóxicas. No hubo diferencia significativa en la fracción de las LSC en los cultivos entre el 1% y el 5% de oxígeno. Al considerar la potencia relativa de los compuestos en condiciones normóxicas e hipóxicas (5% de oxígeno), la clofarabina mostró un aumento significativo en la LD50 media en condiciones hipóxicas (1.69 x 10-8M a 5.31 x 10-8M; P = 0.01). Por el contrario, el Ejemplo 1 no mostró una diferencia significativa en los valores de LD50 media.
Objetivos
1. Generar una curva dosis-respuesta de citotoxicidad completa para una serie de compuestos seleccionados y sus respectivos nucleósidos originales en células KG1a
2. Establecer los efectos de los compuestos probados sobre el compartimento de LSC en todo el rango de concentraciones utilizadas
3. Comparar los efectos de los compuestos probados en condiciones hipóxicas (1% y 5% de oxígeno)
4. Investigar la persistencia de focos yH2A.X en LSC y células de masa tumoral después del tratamiento con clofarabina y los compuestos probados en condiciones hipóxicas.
Materiales y métodos
Condiciones de cultivo de células KG1a
La estirpe celular de leucemia mieloide aguda (AML) KG1a se mantuvo en medio RPMI (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) suplementado con 1 0 0 unidades/ml de penicilina, 1 0 0 pg/ml de estreptomicina y suero de ternero fetal al 2 0 %. Posteriormente, las células se dividieron en alícuotas (105 células/100 pl) en placas de 96 pozos y se incubaron a 37 °C en una atmósfera normóxica (20% de oxígeno) o hipóxica (1% o 5% de oxígeno) humidificada durante 48 h en presencia de clofarabina o fosforamidatos de difosfato de clofarabina de la invención (1 x 10-10M -1 x 10-6M). Además, se realizaron cultivos de control a los que no se agregó fármaco. Posteriormente, las células se recolectaron mediante centrifugación y se analizaron mediante citometría de flujo utilizando el ensayo de Anexina V.
Medición de la apoptosis in vitro
Las células cultivadas se recolectaron por centrifugación y luego se resuspendieron en 195 pl de tampón rico en calcio. Posteriormente, se agregaron 5 pl de Anexina V (Caltag Medsystems, Botolph Claydon, Reino Unido) a la suspensión celular y las células se incubaron en la oscuridad durante 10 minutos antes del lavado. Finalmente, las células se resuspendieron en 190 pl de tampón rico en calcio junto con 10 pl de yoduro de propidio. La apoptosis se evaluó mediante citometría de flujo inmunofluorescente de doble color como se describió anteriormente. Posteriormente se calcularon los valores de LD50 (la dosis requerida para destruir el 50% de las células en un cultivo) para cada análogo de nucleósido y fosforamidato de difosfato.
Identificación inmunofenotípica del compartimento de células madre leucémicas
Las células KG1a se cultivaron durante 48 h en presencia de un amplio rango de concentraciones de cada análogo de nucleósido y su respectivo fosforamidato de difosfato. A continuación, las células se recolectaron y marcaron con un cóctel de anticuerpos antilinaje (PE-cy7), anti-CD34 (FITC), anti-CD38 (PE) y anti-CD123 (PERCP cy5). La subpoblación que expresa un fenotipo de células madre leucémicas (LSC) se identificó posteriormente y se expresó como un porcentaje de todas las células viables que quedaban en el cultivo. Los porcentajes de células madre restantes se trazaron luego en un gráfico de dosis-respuesta y los efectos del fosforamidato de difosfato se compararon con los nucleósidos originales.
Clasificación de células
Las células KG1a se cultivaron en condiciones hipóxicas durante 7 días para generar 107 células y aumentar el porcentaje de células que expresan un fenotipo LSC. Posteriormente, las LSC Lin-/CD34+/CD38-/CD123+ y células de “masa” tumoral Lin-/CD34+/CD38+/CD123+ se purificaron mediante clasificación celular de alta velocidad utilizando un clasificador de células FACS Melody (Becton Dickenson) y se colocaron nuevamente bajo condiciones de cultivo celular hipóxico antes de la adición de clofarabina o fosforamidatos de difosfato de clofarabina.
Ensayo de fosforilación yH2A.X
La fosforilación de la variante de histona yH2A.X se produce como una respuesta rápida a las rupturas de ADN de doble cadena. El kit de Ensayo de Fosforilación de yH2A.X (citometría de flujo) es un ensayo basado en células formateado para la detección por citometría de flujo de niveles de histona fosforilada yH2A.X (Merck, Reino Unido). Las LSC y células de “masa tumoral” se cultivaron en placas de 96 pozos en presencia de clofarabina o fosforamidatos de difosfato de clofarabina. Después de 2 h de exposición al fármaco, las células se recolectaron por centrifugación y luego se fijaron y permeabilizaron en preparación para la tinción y detección. La histona yH2A.X fosforilada en la serina 139 se detecta mediante la adición de la antifosfohistona yH2A.X conjugada con APC. A continuación, las células se ejecutaron en un citómetro de flujo para cuantificar el número de células que se tiñeron positivas para histona yH2 A.X fosforilada.
Análisis estadístico
Los datos obtenidos en estos experimentos se evaluaron utilizando ANOVA de una vía. Todos los datos se confirmaron como gaussianos o una aproximación gaussiana utilizando la prueba K2 de ómnibus. Los valores de LD50 se calcularon a partir de la regresión no lineal y la línea de análisis de mejor ajuste de las curvas dosis-respuesta sigmoideas. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software Graphpad Prism 6.0 (Graphpad Software Inc., San Diego, CA).
Resultados
Ensayo de citotoxicidad in vitro
La sensibilidad al fármaco in vitro de las células KG1a se evaluó utilizando el ensayo de anexina V/yoduro de propidio. Las curvas dosis-respuesta sigmoidal para cada compuesto probado se muestran en la Figura 1A-C. Los resultados se resumen en la Tabla 7.
Tabla 7
Figure imgf000051_0002
La clofarabina y los compuestos de la invención mostraron una potencia en el rango nanomolar; la clofarabina y el Ejemplo 1 tenían valores de LD50 similares siendo el Ejemplo 1 ligeramente más potente.
La fracción de células KG1a que expresan un fenotipo LSC se modula por hipoxia
Las células KG1a se cultivaron en condiciones normóxicas e hipóxicas y se monitorizó el fenotipo de LSC a lo largo del tiempo. En condiciones normóxicas, el fenotipo de LSC se mantuvo estable en aproximadamente el 3.5% de las células en cultivo. Por el contrario, en condiciones hipóxicas, la fracción de células en cultivo que expresan el fenotipo de LSC aumentó de manera dependiente del tiempo (Figura 3A). Cuando las células se volvieron a transferir a condiciones de cultivo normóxicas, la fracción de células que expresaban el fenotipo de LSC volvió a ~3.5%, de nuevo en función del tiempo (Figura 3B).
Comparación de clofarabina y compuestos de la invención en condiciones normóxicas e hipóxicas
Dado el aumento observado en un fenotipo de LSC en condiciones hipóxicas, la potencia relativa de la clofarabina y los compuestos se evaluó en células KG1a cultivadas en condiciones normóxicas e hipóxicas (5% de O2) condiciones. La Figura 4 muestra las curvas de dosis-respuesta sigmoidales superpuestas para la clofarabina y los compuestos de la invención. Los resultados se resumen en la Tabla 8 :
Figure imgf000051_0001
Como se puede ver, la clofarabina mostró una reducción significativa de la potencia cuando se utilizó sobre células cultivadas en condiciones hipóxicas. Esta reducción de la potencia no se observó cuando se utilizaron los Ejemplos 1 y 2 en las mismas condiciones hipóxicas.
La clofarabina induce significativamente menos daño en el ADN en las LSC que en las células de masa tumoral en condiciones hipóxicas
En un intento por comprender por qué las células tratadas con clofarabina eran menos sensibles a los efectos del fármaco en condiciones hipóxicas, las células se cultivaron en condiciones hipóxicas y luego las LSC y las fracciones de masa tumoral se purificaron mediante clasificación celular de alta velocidad. A continuación, las células purificadas se expusieron al fármaco durante 2 horas y se cuantificó la cantidad de daño en el ADN utilizando un ensayo de fosforilación yH2A.X. La Figura 5 muestra que el nivel de daño en el ADN en las LSC fue significativamente menor que en las células de masa tumoral después del tratamiento con clofarabina. Por el contrario, los Ejemplos 1 y 2 indujeron niveles similares de daño en el ADN tanto en las LSC como en las células de masa tumoral.
1. En términos de direccionamiento a células madre, todos los compuestos probados mostraron evidencia de direccionamiento a células madre en concentraciones superiores a 1 0 -8m. El Ejemplo 1 mostró una tendencia hacia una mayor selectividad contra las LSC LinVCD34+/CD38YCD123+.
2. Se demostró que el fenotipo de LSC era inducible en condiciones hipóxicas y esto se invirtió cuando las células se reintroducieron bajo condiciones de cultivo normóxicas. La dinámica de los cambios en la fracción de LSC sugiere una plasticidad en el fenotipo en lugar de una expansión/contracción selectiva en una subpoblación de LSC fija.
3. La clofarabina mostró una reducción significativa de la potencia cuando se utilizó sobre células cultivadas en condiciones hipóxicas. Esta reducción de la potencia no se observó cuando se utilizaron los Ejemplos 1 y 2 en las mismas condiciones hipóxicas. Muchos cánceres existen en un estado hipóxico en el cuerpo humano.
4. Una explicación de la potencia reducida de la clofarabina en condiciones hipóxicas es que hay una expansión significativa de la fracción de LSC en estas condiciones y las LSC mostraron un daño en el ADN significativamente menor, medido por la fosforilación de yH2A.X, luego de una exposición a corto plazo a la clofarabina. Por el contrario, los Ejemplos 1 y 2 indujeron niveles similares de daño en el ADN en las células de masa tumoral y en las LSC en las mismas condiciones.

Claims (17)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000053_0001
en el que
R1 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: alquilo C1-C24, alquenilo C3-C24, alquinilo C3-C24, alquileno C0-C4-cicloalquilo C3-C8 y alquileno C0-C4-arilo;
R2 y R3 cada uno independientemente en cada ocurrencia se seleccionan de H, alquilo C1-C6 y alquileno C1-C3-R7; o R2 y R3 junto con el átomo al cual se adhieren forman un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros;
R4 es independientemente en cada ocurrencia H o alquilo C1-C4 ;
o R4, un grupo seleccionado de R2 y R3 y los átomos a los cuales se adhieren pueden formar un grupo heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros;
R5 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6 , 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3-C8, heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, alquileno C1-C3-R5a y alquilo C1-C8, dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8;
R5a se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, heteroarilo de 5, 6 , 9 o 10 miembros, cicloalquilo C3-C8, heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros, dicho arilo se fusiona opcionalmente a cicloalquilo C6-C8;
R6 se selecciona independientemente de:
Figure imgf000053_0002
y
Figure imgf000054_0001
R7 se selecciona independientemente en cada ocurrencia de arilo, imidazol, indol, SRa, ORa, CO2 Ra, CO2 NRaRa, NRaRb y NH(=NH)NH2 ;
R8 se selecciona independientemente de H y
Figure imgf000054_0002
Z1 y Z2 cada uno se seleccionan independientemente de O y S;
Y se selecciona independientemente de H, F, Cl y OMe;
X es independientemente en cada ocurrencia un catión farmacéuticamente aceptable;
en el que cualquier grupo arilo es ya sea fenilo o naftilo;
en el que cuando cualquiera de R1, R2, R3, R4, R5 o R7 es un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo, ese grupo alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo se sustituye opcionalmente con desde 1 hasta 4 sustituyentes seleccionados de: halo, nitro, ciano, NRaRa, NRaS(O)2Ra, NRaC(O)Ra, NRaCONRaRa, NRaCO2Ra, ORa; SRa, SORa, SO3 Ra, SO2 Ra, SO2NRaRa, CO2Ra C(O)Ra, CONRaRa, CRaRaNRaRa, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4 , alquinilo C2-C4 y haloalquilo C1-C4;
en el que Ra se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H y alquilo C1-C4 ; y Rb se selecciona independientemente en cada ocurrencia de: H, y alquilo C1-C4 y C(O)-alquilo C1-C4.
2. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que R4 es H.
3. Un compuesto de la reivindicación 1 o reivindicación 2, en el que R6 es
Figure imgf000054_0003
4. Un compuesto de la reivindicación
Figure imgf000054_0004
Figure imgf000055_0001
en el que R6 es
Figure imgf000055_0002
en el que R6 es
Figure imgf000055_0003
en el que R6 es
Figure imgf000055_0004
en el que R6 es
Figure imgf000055_0005
en el que R6 es
Figure imgf000056_0001
5. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R1 se selecciona de cicloalquilo C5-C7 , alquilo C1-C8 y bencilo.
6. Un compuesto de la reivindicación 5, en el que R1 es bencilo.
7. Un compuesto de la reivindicación 5, en el que R1 es alquilo C1-C8, por ejemplo, etilo.
8. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que R3 es H.
9. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 , en el que R2 es alquilo C1-C4.
10. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 , en el que R2 es H.
11. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que R5 es fenilo.
12. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que R5 es naftilo.
13. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto de la fórmula (I) se selecciona de:
Figure imgf000057_0001
Figure imgf000058_0001
Figure imgf000059_0001
Figure imgf000060_0001
Figure imgf000061_0001
14. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 en el que X+ es un catión metálico o un catión de amonio.
15. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 para uso médico.
16. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 para uso en el tratamiento de cáncer; opcionalmente en el que el cáncer es leucemia o linfoma; adicional y opcionalmente
en el que el cáncer es una leucemia seleccionada del grupo que consiste en leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfoide aguda (ALL), leucemia mieloide crónica (CML), leucemia linfoide crónica (CLL) y leucemia aguda bifenotípica (BAL); o
en el que el cáncer es un linfoma seleccionado del grupo que consiste en linfoma de Hodgkin y linfoma no Hodgkin.
17. Una composición farmacéutica que comprende los compuestos de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
ES18819340T 2017-12-05 2018-12-05 Sales de fosforamidato de difosfato de nucleósidos como compuestos contra el cáncer Active ES2910165T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1720279.7A GB201720279D0 (en) 2017-12-05 2017-12-05 Anticancer compounds
PCT/GB2018/053525 WO2019110991A1 (en) 2017-12-05 2018-12-05 Salts of diphosphate phosphoramidate of nucleosides as anticancer compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2910165T3 true ES2910165T3 (es) 2022-05-11

Family

ID=60950385

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18819340T Active ES2910165T3 (es) 2017-12-05 2018-12-05 Sales de fosforamidato de difosfato de nucleósidos como compuestos contra el cáncer

Country Status (22)

Country Link
US (2) US11560400B2 (es)
EP (2) EP4043471A1 (es)
JP (1) JP7268819B2 (es)
KR (1) KR20200092980A (es)
CN (1) CN111527098A (es)
AU (1) AU2018379713A1 (es)
BR (1) BR112020011221A2 (es)
CA (1) CA3082269A1 (es)
CL (1) CL2020001479A1 (es)
DK (1) DK3720864T3 (es)
EA (1) EA202091218A1 (es)
ES (1) ES2910165T3 (es)
GB (1) GB201720279D0 (es)
HR (1) HRP20220451T1 (es)
IL (1) IL274808B2 (es)
MA (2) MA51006A (es)
MX (1) MX2020005850A (es)
PH (1) PH12020550728A1 (es)
PL (1) PL3720864T3 (es)
PT (1) PT3720864T (es)
SG (1) SG11202004342TA (es)
WO (1) WO2019110991A1 (es)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LT3224268T (lt) 2014-11-28 2019-09-25 NuCana plc Naujieji 2` ir (arba) 5` aminorūgšties esterio fosforamidato 3`-deoksi adenozino dariniai, kaip priešvėžiniai junginiai
JP2020164521A (ja) * 2019-03-29 2020-10-08 国立大学法人 長崎大学 抗ウィルス薬
CN116768949B (zh) * 2022-07-12 2026-03-03 南京工业大学 一种基于3’-脱氧腺苷经化学修饰改性的具有抗癌效应的化合物

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
GB0505781D0 (en) 2005-03-21 2005-04-27 Univ Cardiff Chemical compounds
US20100297079A1 (en) 2009-05-20 2010-11-25 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating viral infection
GB201016855D0 (en) 2010-10-06 2010-11-17 Nucana Biomed Ltd Chemical compounds
DK3031812T3 (en) 2011-03-01 2018-09-17 NuCana plc CHEMICAL COMPOUNDS
WO2014124430A1 (en) * 2013-02-11 2014-08-14 Emory University Nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
LT3043803T (lt) 2013-09-11 2022-08-10 Emory University Nukleotidų ir nukleozidų kompozicijos ir jų panaudojimas
CN105646629A (zh) 2014-11-25 2016-06-08 广州市恒诺康医药科技有限公司 L-核苷类化合物及其应用
LT3224268T (lt) 2014-11-28 2019-09-25 NuCana plc Naujieji 2` ir (arba) 5` aminorūgšties esterio fosforamidato 3`-deoksi adenozino dariniai, kaip priešvėžiniai junginiai
CN107428792B (zh) * 2014-12-15 2023-01-24 埃默里大学 用于治疗乙型肝炎病毒的磷酰胺
JP7381190B2 (ja) 2014-12-26 2023-11-15 エモリー・ユニバーシテイ Ｎ４－ヒドロキシシチジン及び誘導体並びにそれに関連する抗ウイルス用途
WO2017106710A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Emory University Nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
US20190085013A1 (en) 2016-03-07 2019-03-21 Emory University Nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
GB201609602D0 (en) 2016-06-01 2016-07-13 Nucuna Biomed Ltd Chemical compounds
GB201609601D0 (en) 2016-06-01 2016-07-13 Nucana Biomed Ltd Phosphoramidate compounds

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20220451T1 (hr) 2022-05-27
KR20200092980A (ko) 2020-08-04
PH12020550728A1 (en) 2021-02-15
AU2018379713A1 (en) 2020-07-23
EP3720864B1 (en) 2022-01-05
US20210171566A1 (en) 2021-06-10
US11560400B2 (en) 2023-01-24
IL274808A (en) 2020-07-30
PT3720864T (pt) 2022-04-06
BR112020011221A2 (pt) 2020-11-17
SG11202004342TA (en) 2020-06-29
MA51007A (fr) 2020-10-14
CL2020001479A1 (es) 2020-12-18
US20230192750A1 (en) 2023-06-22
MA51006A (fr) 2020-10-14
GB201720279D0 (en) 2018-01-17
EP3720864A1 (en) 2020-10-14
JP7268819B2 (ja) 2023-05-08
MX2020005850A (es) 2020-09-07
EA202091218A1 (ru) 2020-09-14
IL274808B2 (en) 2023-08-01
IL274808B1 (en) 2023-04-01
CN111527098A (zh) 2020-08-11
JP2021505578A (ja) 2021-02-18
EP4043471A1 (en) 2022-08-17
DK3720864T3 (da) 2022-04-11
PL3720864T3 (pl) 2022-05-02
WO2019110991A1 (en) 2019-06-13
CA3082269A1 (en) 2019-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2948660T3 (es) Profármacos de gemcitabina
US20230192750A1 (en) Salts of diphosphate phosphoramidate of nucleosides as anticancer compounds
AU2024203637B2 (en) Formulations of phosphoramidate derivatives of nucleoside drugs
EP3464309B1 (en) Phosphoramidate nucleoside derivatives as anticancer agents
ES2778933T3 (es) Terapia de combinación
EP3947408B1 (en) Salt of triphosphate phosphoramidates of nucleotides as anticancer compounds
HK40070782A (en) Salts of diphosphate phosphoramidate of nucleosides as anticancer compounds
HK40028717A (en) Salts of diphosphate phosphoramidate of nucleosides as anticancer compounds
HK40028717B (en) Salts of diphosphate phosphoramidate of nucleosides as anticancer compounds
EA042712B1 (ru) Соли дифосфатфосфорамидата нуклеозидов в качестве противораковых соединений
HK1262307A1 (en) Phosphoramidate nucleoside derivatives as anticancer agents
HK1262307B (en) Phosphoramidate nucleoside derivatives as anticancer agents