ES2913398T3 - Composiciones y métodos para el tratamiento o la prevención de trastornos relacionados con oxalato - Google Patents

Abstract

Una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto que la necesita, comprendiendo dicha cápsula una composición farmacéutica que comprende: (i) de un 10 % a un 25 % en peso seco de Oxalobacter formigenes, (ii) de un 50 % a un 65 % en peso seco de sacarosa; (iii) de un 10 % a un 30 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes; en donde dicha cápsula con revestimiento entérico es para distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto, y en donde la actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes, cuando está presente en dicha cápsula con revestimiento entérico, no es inferior a (NLT) 100 mmol/cápsula/19 horas y en donde dicha cápsula comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de 109 a 1010 UFC.

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones y métodos para el tratamiento o la prevención de trastornos relacionados con oxalato

CAMPO TÉCNICO

La presente divulgación se refiere al campo de trastornos relacionados con oxalato y a composiciones farmacéuticas y sus usos para el tratamiento o la prevención de trastornos relacionados con oxalato. Más específicamente, la presente divulgación pertenece al tratamiento o la prevención de trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, y tales como enfermedad renal crónica (ERC). También se refiere a la prevención o el tratamiento de inflamación relacionada con oxalato.

ANTECEDENTES DE LA DIVULGACIÓN

El oxalato es un producto metabólico final que los humanos no pueden descomponer. El cuerpo humano tiene dos vías principales de órganos excretores para oxalato; el riñón y el intestino. Ambas vías están controladas por proteínas transportadoras abundantes en el epitelio tubular e intestinal. Es de suma importancia que se mantenga la excreción de oxalato a través de la orina y a través de la luz intestinal.

La hiperoxaluria primaria y secundaria son dos expresiones clínicas distintas caracterizadas, por ejemplo, por excreciones anómalas de oxalato en la orina. La hiperoxaluria primaria es un trastorno genético hereditario con actividades enzimáticas defectuosas. Por el contrario, la hiperoxaluria secundaria puede estar causada por una serie de factores que incluyen una mayor ingesta dietética de oxalato o precursores de oxalato, o alteraciones en la absorción intestinal o excreción de oxalato o grasa y alteraciones en la microbiota intestinal o variaciones genéticas de la expresión de proteína transportadora de oxalato intestinal o tubular. La hiperoxaluria es una complicación conocida de enfermedad inflamatoria intestinal (EII) y la hiperoxaluria con hiperoxalemia es una consecuencia común de la resección de partes del intestino delgado y cirugía de derivación gástrica en Y de Roux. Los síntomas de estas enfermedades varían desde cálculos renales únicos, cálculos renales recurrentes y nefrocalcinosis hasta enfermedad renal crónica (ERC) y enfermedad renal en estadio terminal (ESRD, end stage renal disease).

Hiperoxaluria secundaria

La ERC relacionada con oxalato debida a hiperoxaluria secundaria es un problema de salud en todo el mundo. Por ejemplo, se caracteriza por el aumento progresivo de concentraciones de oxalato en orina conduciendo a cálculos renales.

La hiperoxaluria secundaria normalmente no conduce a ESRD a menos que se haya producido hiperoxalemia. Esto es más común en pacientes con un intestino delgado resecado, tales como pacientes con SIC (síndrome de intestino corto) y pacientes con cirugía bariátrica.

El hígado, el principal órgano metabólico del organismo, es el sitio principal de producción de oxalato. Sin embargo, el oxalato no se metaboliza más y, por tanto, debe excretarse. Esta excreción ocurre por dos rutas; a través de excreción tubular renal y a través de excreción intestinal; ambas rutas de excreción están mediadas por proteínas transportadoras activas de la familia SLC26. La concentración de oxalato en plasma y, por tanto, en fluidos tubulares es crítica, por ejemplo, durante la excreción renal, donde el aumento de las concentraciones de oxalato causa riesgos de formación de cristales de oxalato cálcico en los túbulos distales y el conducto de conexión con formación posterior de sedimentaciones de oxalato cálcico o calcificación del riñón. La ruta de excreción intestinal es particularmente importante para prevenir afecciones patológicas que implican concentraciones elevadas de oxalato en plasma y calcificación de tejido blando.

La hiperoxaluria secundaria puede estar causada por una serie de factores que incluyen mayor ingesta dietética de oxalato o precursores de oxalato, o alteraciones en absorción o excreción intestinal de oxalato o grasa y alteraciones en la microbiota intestinal o variaciones genéticas de los transportadores de oxalato intestinal. La hiperoxaluria es una complicación conocida de la enfermedad inflamatoria intestinal. El espectro de enfermedad se extiende de cálculos renales recurrentes, nefrocalcinosis e infecciones del tracto urinario a enfermedad renal crónica y enfermedad renal en fase terminal (Bhasin, 2015). Esto sucede habitualmente en enfermedades con alteración de excreción intestinal debida a inflamación, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, vulvodinia, sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SIBS, small intestine bacterial overgrowth), gastroenteritis, gastritis, enteritis, enterocolitis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y trastornos relacionados con oxalato en pacientes tratados con un inhibidor de lipasa gastrointestinal.

Cuando la carga de oxalato cálcico excede la capacidad excretora renal, el oxalato cálcico comienza a depositarse en todos los fluidos y tejido blando corporales. Esto es más común en pacientes con un intestino delgado resecado, tales como pacientes con síndrome de intestino corto (SIC), algunos pacientes con EII, pacientes con cáncer intestinal y pacientes con cirugía bariátrica.

Además, los pacientes con ESRD en diálisis tienden a acumular oxalato plasmático como consecuencia de la insuficiencia renal y también pueden sufrir oxalosis que podría influir en la supervivencia del injerto en trasplante renal.

Hiperoxaluria primaria

La hiperoxaluria primaria (HOP) es una enfermedad genética pediátrica, gravemente debilitante y potencialmente mortal con una gran necesidad médica sin satisfacer. La HOP es un error congénito autosómico recesivo raro del metabolismo del glioxilato, con morbilidad y mortalidad significativas, especialmente en niños pequeños. La HOP ocurre como consecuencia de un aumento de la producción hepática de oxalato y se caracteriza por una cristalización generalizada de oxalato cálcico, hiperoxalemia progresiva seguida de función renal reducida. Como resultado de la excreción renal de oxalato, los pacientes con HOP tienen niveles elevados de oxalato urinario (>0,5 mmol/24 h/1,73 m2 frente a <0,5 mmol/24 h/1,73 m2 en pacientes sanos) [Hoppe, 2012]. Los pacientes con HOP tienen una amplia variedad de producción de oxalato, reflejada por hiperoxaluria que varía de leve a muy elevada (>0,5 - 4,5 mmol/día, 1,73 m2). El alcance de la sobreproducción de oxalato está parcialmente relacionado con genotipos específicos, de los cuales se conocen más de 140. Se ha mostrado que la progresión a ESRD se correlaciona con la edad en el momento del diagnóstico (tiempo de exposición a niveles elevados de oxalato), el nivel de excreción urinaria de oxalato y función renal en el momento del diagnóstico [Zhao et al., 2016]. Los pacientes con una excreción urinaria de oxalato elevada y una tasa de filtración glomerular estimada (TFGe) baja en el momento del diagnóstico tienden a progresar más rápidamente a ESRD. En pacientes con HOP, el oxalato plasmático aumenta gradualmente de 1-3 pmoles/l en estadios iniciales a 45-50 pmoles/l en ESRD precoz. Es común que el oxalato plasmático aumente hasta 150 -300 pmoles/l durante ESRD y tratamiento de diálisis, conduciendo a una acumulación sistémica de oxalato y oxalosis sistémica.

A menudo, los primeros síntomas clínicos de HOP son trastornos tubulares renales, manifestados por dolor en el costado y cálculos renales. Los síntomas están causados principalmente por inflamación mediada por cristales de oxalato cálcico de las células epiteliales tubulares y sedimentación creciente de cristales de oxalato cálcico causando gradualmente la calcificación del riñón. El daño renal progresivo está causado por una combinación de toxicidad tubular por oxalato, nefrocalcinosis y obstrucción renal por cálculos o procedimientos de extracción de cálculos [Cochat y Rumsby, 2013; Tang et al., 2015]. Actualmente, no existe terapia farmacéutica aprobada para el tratamiento de HOP. Finalmente, la única terapia curativa, solo para HOP de tipo 1, es un trasplante combinado de riñón e hígado en ESRD (Cochat et al., 2012). En general, la mediana de supervivencia renal es 24-33 años [Lieske et al., 2005, Harambat et al., 2010].

Hay tres tipos conocidos de HOP (tipo 1, 2 y 3), siendo el tipo 1 el más grave y más extendido (70-80 % de los casos conocidos) [Hoppe et al., 2009]. Los tres tipos de HOP están causados por una deficiencia o mala localización de diferentes enzimas que influyen en la producción hepática de oxalato: el tipo 1 está causado por una deficiencia de alanina-glioxilato aminotransferasa peroxisomal específica hepática, el tipo 2 por una falta de glioxilato reductasahidroxipiruvato reductasa y el tipo 3 por falta de la enzima mitocondrial específica hepática, 4-hidroxi-2-oxoglutarato aldolasa [Cochat y Rumsby 2013, Belostotsky et al., 2010]. La incidencia estimada de HOP de tipo 1 es de un caso por 120.000 nacidos vivos al año en Europa y la prevalencia es de uno a tres por millón de habitantes [Cochat et al., 1995; Kopp y Leumann, 1995; van Woerden et al., 2003]. La incidencia y la prevalencia pueden haberse subestimado debido a un diagnóstico insuficiente [Leumann y Hoppe, 2001, Hopp et al., 2015].

La disminución de la función renal da como resultado hiperoxalemia progresiva y sobresaturación de oxalato cálcico plasmático. Las concentraciones crecientes de oxalato plasmático hacen que se acumulen depósitos de oxalato cálcico en el organismo. Los depósitos pueden localizarse en hueso, tejido blando, medios arteriales, nervios periféricos, piel, ojos y corazón [Beck et al., 2013]. Ya en los primeros estadios de la enfermedad, la hiperoxalemia daña células en el corazón, causa calcificación (rigidez) y causa inflamación en el miocardio, conduciendo a una reducción progresiva de la tensión del ventrículo izquierdo conduciendo a arritmia cardíaca e insuficiencia cardíaca (Lagies et al., 2013, Lagies et al., 2014, Lagies et al., 2015).

La interacción entre moléculas biológicas y formación de cristales es un campo de investigación emergente (véase, por ejemplo, Aggarwal et al., 2013). En plasma, el oxalato puede estar presente como oxalato libre, oxalato libre unido a metal divalente, oxalato asociado a proteínas y lípidos y como cristales sólidos de oxalato de metal divalente. La proporción entre oxalato total y oxalato libre aumenta con el tiempo y la progresión de la enfermedad.

Tras un trasplante combinado de hígado-riñón, donde el nuevo hígado produce niveles normales de oxalato, se observa una disminución inicial de oxalato libre. Sin embargo, cuando la concentración de oxalato plasmático se reduce por debajo del límite de saturación, los depósitos de oxalato cálcico en proteínas y lípidos, en paredes de vasos y tejidos blandos comienzan a disolverse, dando como resultado un nuevo aumento de la concentración de oxalato plasmático. El oxalato urinario y plasmático puede ser elevado durante muchos meses o años después del trasplante y puede conducir nuevamente al deterioro de los riñones nuevos (Leumann y Hoppe, 2001). Por tanto, la prevención de la acumulación de oxalato antes y durante la diálisis y la mejora de la excreción de oxalato a través del intestino delgado y la orina es muy beneficiosa para los pacientes con HOP. Además, para pacientes con función renal mantenida, es crucial retrasar o detener la acumulación de sedimentación de oxalato cálcico para prevenir el deterioro renal.

Hiperoxaluria secundaria con hiperoxalemia

Gregory et al., 1975, mostraron que la cirugía de derivación yeyuno-ileal (JIB, jejuno-ileal bypass) en pacientes bariátricos por lo demás sanos causaba insuficiencia renal. La eliminación de la mayor vía de excreción intestinal causó concentraciones plasmáticas elevadas de oxalato, que a su vez conducen a insuficiencia renal. El procedimiento se suspendió en 1979. Actualmente, el procedimiento dominante para la cirugía bariátrica es en Y de Roux, una resección menor del yeyuno/íleon. Aunque este procedimiento está asociado a cálculos renales recurrentes, no causa ESRD.

El síndrome de intestino corto, SIC, se define como un estado de enfermedad donde un paciente presenta resección de intestino delgado y le quedan menos de 200 cm de intestino. Como en los pacientes con JIB, los pacientes con SIC tienen un riesgo del 45 % de insuficiencia renal (ESRD) causada por aumento de concentraciones de oxalato plasmático.

La enfermedad de Zellweger, o los trastornos del espectro de Zellweger (ZDS, Zellweger spectrum disorders) se caracterizan por una pérdida general de funciones peroxisomales causada por un ensamblaje peroxisomal deficiente. La enfermedad Tiene presentación y supervivencia heterogéneas. A pesar de un nivel normal de la enzima AGT (alanina:glioxilato aminotransferasa), que es deficiente en la hiperoxaluria primaria, se ha informado hiperoxaluria grave en varios pacientes con ZSD (van Woerden et al., 2006).

La infección por Aspergillus niger es una infección fúngica rara. Un niger es un organismo productor de oxalato y puede causar oxalato plasmático a niveles que pueden conducir a ESRD.

Oxalobacter formigenes

Oxalobacter formigenes es una bacteria anaeróbica estricta que depende exclusivamente del oxalato como sustrato para obtener energía para su supervivencia y crecimiento. Actualmente se cree que es el sistema enzimático reductor de oxalato más eficaz que opera a pH neutro. No todos los humanos portan poblaciones de O. formigenes en su tracto intestinal. Por ejemplo, hay una ausencia baja o total de bacterias degradantes de oxalato en las muestras fecales de personas que se han sometido a cirugía de derivación yeyuno-ileal. Se ha mostrado que la administración de O. formigenes a un sujeto que la necesita tiene efecto en la absorción de oxalato en la dieta, pero también se ha mostrado que tiene efecto en la eliminación de oxalato del plasma al intestino, promoviendo la vía de excreción intestinal natural de oxalato. Además, se ha mostrado que O. formigenes promueve la eliminación activa de oxalato, posiblemente mediante interacción con proteínas transportadoras SLC26 que mejoran el flujo de oxalato del plasma al intestino delgado (Hatch et al., 2011; Hatch y Freel, 2013).

En la técnica han desvelado previamente composiciones que comprenden bacterias degradantes de oxalato, tales como O. formigenes, para uso en métodos para reducir el oxalato urinario y plasmático para tratar afecciones relacionadas con oxalato, tales como en los documentos de Patente US 6.200.562, US 6.355.242, WO2007075447 y WO2005123114.

El documento de Patente WO2007070677 A2 desvela una composición para administración oral, que comprende un vehículo de administración oral que comprende aproximadamente un 0,5-95 % de bacterias degradantes de oxalato, tales como O. formigenes, aproximadamente un 0,1-50 % de uno o más agentes crioconservantes, y aproximadamente un 3-90 % de uno o más excipientes (por ejemplo, maltodextrina, oligofructosa o alginato), para distribución de bacterias degradantes de oxalato en los intestinos de un ser humano o un animal tras la administración oral. El vehículo de administración oral puede comprender una cápsula de gel. El vehículo de administración oral puede comprender un revestimiento entérico. La composición puede tener una ufc/g de aproximadamente 103 a aproximadamente 1013, o una ufc/forma de dosificación unitaria de aproximadamente 5 x 105 a aproximadamente 1 x 1010.

El documento de Patente EP1771201 B1 desvela una composición que comprende O. formigenes viable para uso en el tratamiento de una afección relacionada con oxalato por reducción de una concentración de oxalato en un ser humano, en donde la composición se administra más de una vez al día continuamente cada día durante un período de meses o años.

Sidhu et al. (Journal of Urology, 2001, 166(4): 1487-1491) informa de una reducción de oxalato urinario en ratas hiperoxalúricas tras el tratamiento con O. formigenes viable. Las bacterias se administraron a las ratas en forma de suspensión celular. Subramanian Vaidyanathan et al. (The Scientific World JOURNAL, 2006, 6: 2403-2410), menciona estudios previos que indican que la administración oral de O. formigenes a pacientes hiperoxalúricos puede desempeñar un papel en la prevención o alivio de la hiperoxaluria. El documento de Patente US 6.242.230 describe un proceso para la microencapsulación de alginato de Oxalobacter formigenes, que permite que las bacterias encapsuladas sigan produciendo y liberando enzimas tras su introducción en un ser humano o animal.

Sin embargo, todavía se necesitan composiciones mejoradas para tratar trastornos relacionados con oxalato, particularmente para tratar o prevenir trastornos relacionados con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, así como para tratar pacientes con ESRD en diálisis. También se necesitan composiciones farmacéuticas que puedan potenciar o aumentar la excreción de oxalato para reducir la carga de oxalato sistémica y la inflamación relacionada en pacientes con sedimentación de oxalato cálcico.

SUMARIO DE LA DIVULGACIÓN

Los problemas en la técnica en relación con el tratamiento y la prevención de trastornos relacionados con oxalato o, más particularmente, trastornos relacionados con sedimentación de oxalato cálcico tales como trastornos relacionados con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, ahora se han superado, o al menos mitigado, por la provisión en el presente documento de productos farmacéuticos en forma de nuevas cápsulas con revestimiento entérico, que comprenden composiciones farmacéuticas. La excreción mantenida de oxalato es crucial en pacientes que padecen dichos trastornos.

Sorprendentemente, los productos farmacéuticos que comprenden las composiciones farmacéuticas desveladas en el presente documento se proponen para disolver cristales de oxalato cálcico y aumentar la excreción de oxalato de los fluidos corporales, por ejemplo, oxalato urinario, retrasando o deteniendo así el deterioro progresivo de la función renal, particularmente en pacientes con enfermedad renal crónica.

También se proporcionan usos que incluyen los productos farmacéuticos que comprenden las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación. Además, También se proporciona una forma para tratar o prevenir la inflamación relacionada con oxalato.

En el presente documento se proporcionan medios mejorados para tratar trastornos relacionados con sedimentación de oxalato cálcico que comúnmente están asociados a una capacidad progresivamente decreciente para excretar oxalato conduciendo a una disminución de la función renal. Un efecto de disolución propuesto para depósitos de oxalato cálcico sistémicos atribuido a las nuevas composiciones comprendidas en los productos farmacéuticos presentados en el presente documento confiere efectos particularmente beneficiosos a pacientes con hiperoxalemia que tienen una función renal reducida; dichas composiciones potencian la excreción de oxalato de fluidos corporales. También se proporciona una forma para tratar o prevenir la inflamación relacionada con oxalato.

Por tanto, para mitigar al menos algunos de los problemas restantes en la técnica, por la presente se proporcionan cápsulas con revestimiento entérico que comprenden composiciones farmacéuticas, como se describe adicionalmente a continuación.

En un aspecto, se proporciona una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto que la necesita, comprendiendo dicha cápsula una composición farmacéutica que comprende:

(i) de un 10 % a un 25 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

(ii) de un 50 % a un 65 % en peso seco de sacarosa; y

(iii) de un 10 % a un 30 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes; en donde dicha cápsula con revestimiento entérico es para distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto, y

en donde la actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes, cuando está presente en dicha cápsula con revestimiento entérico, no es inferior a (NLT, no less than) 100 mmol/cápsula/19 horas y en donde dicha cápsula comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de 109 a 1010 UFC.

Naturalmente, las composiciones descritas en el presente documento pueden comprender cierta cantidad de agua, tal como un 3 % de agua.

En el presente documento también se describe una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto, comprendiendo dicha cápsula Oxalobacter formigenes en una cantidad de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC, y excipientes y/o agentes crioconservantes, en donde dicha cápsula con revestimiento entérico está dirigida a la distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto, no mostrando dicha cápsula esencialmente desintegración en una hora de incubación en fluido gástrico simulado (FGS) que tiene un pH de aproximadamente 1,2 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 3,2 mg/ml de pepsina a una temperatura de aproximadamente 37 °C, pero en donde se detecta un inicio de desintegración de dicha cápsula tras aproximadamente una hora de incubación en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C.

También se proporciona una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica como se desvela en el presente documento, para uso como medicamento.

Además, en el presente documento se proporciona un uso de las cápsulas con revestimiento entérico para tratar y/o prevenir un trastorno relacionado con oxalato, o más particularmente trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia; aumentando dicha composición la excreción de oxalato de fluidos corporales. En el presente documento también se proporciona el uso de las cápsulas con revestimiento entérico para tratar y/o prevenir la inflamación relacionada con oxalato.

En un aspecto general, la presente divulgación se refiere a: hiperoxaluria, hiperoxaluria primaria e hiperoxaluria secundaria; pero más específicamente a hiperoxalemia, acumulación de oxalato en plasma sanguíneo, oxalosis asociada a enfermedad renal crónica (ERC) y enfermedad renal en fase terminal (ESRD) tal como en el síndrome de intestino corto (SIC), cirugía bariátrica con resección yeyunal/ileal o procedimientos en Y de Roux, enfermedad de Zellweger, cánceres con resección yeyunal/ileal, renales u otras infecciones con Aspergillus niger; hiperoxalemia en pacientes con ESRD en diálisis y además, en algunos casos, a inflamación relacionada con oxalato, tales como hiperoxaluria entérica, inflamación en el epitelio intestinal o tubular, trastornos de conducción cardíaca, vulvodinia, enfermedad idiopática de cálculos renales de oxalato cálcico (urolitiasis), enfermedad inflamatoria intestinal (EII), sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SIBS), gastroenteritis, gastritis, enteritis, enterocolitis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y un trastorno relacionado con oxalato en pacientes tratados con un inhibidor de lipasa gastrointestinal.

Una composición de acuerdo con la presente divulgación puede ser capaz de ralentizar, detener o revertir la progresión de la enfermedad y/o la progresión de hiperoxalemia y sedimentación de oxalato cálcico que conduce a ERC.

Además, una composición de acuerdo con la presente divulgación es capaz de aumentar la excreción de oxalato, por ejemplo, excreción urinaria de oxalato, reduciendo de ese modo la sedimentación de oxalato sistémico.

También se describe un método para tratar y/o prevenir un trastorno relacionado con oxalato, u otro trastorno o patología como se describe en el presente documento, comprendiendo dicho método administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz de una composición farmacéutica como se define en el presente documento o una cápsula con revestimiento entérico como se define en el presente documento que comprende una cantidad farmacéuticamente eficaz de una composición farmacéutica a un sujeto que la necesita.

Además, se describe un método para preparar una composición farmacéutica, comprendiendo dicho método las etapas de:

a) mezclar una pasta celular de Oxalobacter formigenes con excipientes y/o agentes crioconservantes y opcionalmente agua; y

b) liofilizar la composición obtenida en la etapa a).

En el presente documento también se proporcionan nuevos usos médicos de una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición que comprende Oxalobacter formigenes considerando los efectos mejorados mostrados en el presente documento.

En el presente documento se proporciona además una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición que comprende Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, tal como en donde dicho uso es para el tratamiento y/o prevención de enfermedad renal crónica (ERC).

También se proporciona una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición que comprende Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de inflamación relacionada con oxalato.

BREVE SUMARIO DE LOS DIBUJOS

Figura 1: Recuperación del estado liofilizado de una nueva composición farmacéutica (OC5), desvelada actualmente y una composición previa (OC3).

Figura 2: Actividad degradante de oxalato de una composición previa (OC3) comparada con la nueva composición farmacéutica (OC5). La potencia se representa como la cantidad de oxalato degradado por UFC. Todas las formulaciones híbridas diferentes contienen sacarosa, pero no la formulación de OC3.

Figura 3: Imagen gammagráfica de la liberación de cápsula de la composición farmacéutica (OC5) desvelada actualmente en el tracto gastrointestinal de un voluntario humano.

DESCRIPCI N DETALLADA DE LA DIVULGACI N

Definiciones

Se considerará que todos los términos y expresiones usados en el presente documento tienen el mismo significado que les suele dar el experto en la materia, a menos que del contexto sea evidente otro significado.

La expresión "peso seco", como se menciona en el presente documento, pretende significar el peso de una composición en donde se ha retirado la mayor parte del agua de la misma, tal como por un proceso de secado (por ejemplo, liofilización).

En ocasiones, la expresión "agentes crioconservantes" y el término "excipientes" pueden usarse intercambiablemente en el presente documento. Sin embargo, la expresión "agente crioconservante" pretende referirse en el presente documento a un agente usado para preservar la viabilidad celular cuando se enfría a temperaturas bajo cero. La crioconservación es un proceso que se conoce bien en la técnica. En el presente documento, las composiciones también comprenden uno o más "excipientes", término que se usa principalmente para describir otros ingredientes presentes en la composición, tales como ingredientes que se le añaden para, de otras maneras que no sean la crioconservación, preservar la estabilidad o evitar la degradación de la composición, así como para absorber la humedad. Una finalidad de un excipiente puede ser también lograr propiedades de polvo deseadas (por ejemplo, polvo de flujo libre).

Una cápsula con "revestimiento entérico" como se define en el presente documento, se refiere a una cápsula que tiene características de revestimiento de la superficie exterior, lo que la hace adecuada para distribución dirigida de un agente farmacéutico, presente en ella, a un segmento específico de una parte entérica del intestino. Un revestimiento entérico también puede describirse como una barrera aplicada en un fármaco oral que evita que se disuelva o desintegre en el entorno gastrointestinal. Por consiguiente, tal revestimiento permite que el fármaco sobreviva al ambiente ácido y enzimático del estómago y el duodeno. En el presente documento, el término "cápsula" puede tener cualquier forma adecuada siempre que encapsule la composición farmacéutica de modo que la haga adecuada para transporte y administración al intestino delgado, tal como el íleon, de un sujeto tras la administración oral. En el presente documento, una cápsula con revestimiento entérico está dirigida específicamente al intestino delgado y/o al íleon. Se demostró que esto era particularmente eficaz en el presente contexto.

Las composiciones que "comprenden" uno o más elementos enumerados también pueden incluir otros elementos no enumerados específicamente.

Se interpretará que el singular "un" y "uno" incluyen también el plural.

Descripción detallada

De acuerdo con la presente divulgación, en el presente documento se proporciona un producto farmacéutico en forma de una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica que comprende Oxalobacter formigenes, que tiene un efecto mejorado en trastornos relacionados con oxalato, y particularmente en trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia. La hiperoxalemia se caracteriza por niveles elevados de oxalato en el plasma, por ejemplo, conduciendo a la formación y sedimentación de complejos de oxalato cálcico en el organismo. En la técnica se ha mostrado que es difícil identificar composiciones farmacéuticas que tengan efecto en los depósitos de oxalato cálcico formados per se y/o en hiperoxalemia. Si puede lograrse tal efecto, esto puede ayudar a retrasar o detener la formación de dichos depósitos de oxalato o ayudar a la disolución de dichos depósitos de oxalato y por último también posiblemente a una inversión de un trastorno asociado a ellos, tales como trastornos de la función renal. En el presente documento se observa tal efecto para una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición de acuerdo con la divulgación que se describe adicionalmente a continuación.

Particularmente, en el presente documento, las expresiones "depósitos de cristales de oxalato", "depósitos de oxalato", el término "depósitos" o similares, son intercambiables por, o al menos están relacionados con, las expresiones "depósitos de oxalato cálcico" y "complejos de oxalato cálcico" que también se usan en el presente documento.

Por lo tanto, en el presente documento se prevé un uso de dicha cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica particularmente en el tratamiento de un trastorno que implica niveles elevados de oxalato plasmático, depósitos de cristales de oxalato sistémicos frecuentes y una función renal reducida. Dado que puede llevar tiempo excretar los depósitos de oxalato disueltos tras el tratamiento con O. formigenes, se prevén períodos de tratamiento de varios meses a varios años para sujetos que padecen tales trastornos.

Como se presenta adicionalmente a continuación, al realizar un estudio clínico completo, el solicitante ha mostrado un efecto mejorado en forma de aumento del efecto de excreción urinaria de oxalato y también en relación con usos médicos más específicos de una composición farmacéutica que comprende O. formigenes como se define en el presente documento. Además, se mostró que un vehículo farmacológico en forma de una cápsula con revestimiento entérico proporciona ventajas incluso mayores a un producto farmacéutico final que incluye dicha composición farmacéutica, cuando dicha cápsula está dirigida a una parte particular del intestino, como se explica adicionalmente en el presente documento. El producto farmacéutico usado en el estudio clínico, denominado OC5, es representativo de la composición farmacéutica y la cápsula con revestimiento entérico, definidas en el presente documento. Por tanto, en la divulgación también están incluidas variaciones del mismo, como se presenta en la siguiente divulgación.

La composición farmacéutica mejorada compuesta por OC5 y usada en el estudio clínico realizado comprende bacterias altamente concentradas secas (por ejemplo, liofilizadas) de O. formigenes que tienen un tiempo de recuperación rápido, un recuento mínimo de células viables no inferior a (NLT) 109 UFC/cápsula (tal como de aproximadamente 109 a 1010 UFC/cápsula, y una capacidad reductora de oxalato de NLT aproximadamente 100 mmol de oxalato/cápsula/19 horas, tal como aproximadamente 200 mmol, aproximadamente 300 mmol, aproximadamente 400 mmol, aproximadamente 500 mmol, o incluso hasta aproximadamente 2 moles de oxalato/cápsula/19 horas, o similares. La composición farmacéutica se presenta en una cápsula con revestimiento entérico para administración oral, formulada particularmente para distribución dirigida al intestino delgado y/o al íleon. En el presente documento se mostró que era un sitio particularmente útil para la acción de O. formigenes. Tal combinación fue particularmente útil para obtener los efectos desvelados en el presente documento.

Sorprendentemente, el tratamiento con la composición presentada en el presente documento, OC5, no redujo, sino que aumentó, la excreción urinaria de oxalato en pacientes tratados, sugiriendo de ese modo la disolución de depósitos de oxalato en los pacientes, sugiriendo a su vez una composición altamente eficaz para tratar trastornos relacionados con sedimentación de oxalato como se define más específicamente en el presente documento. O. formigenes se distribuyó satisfactoriamente al tracto gastrointestinal, y más particularmente al intestino delgado y/o al íleon, y fue bien tolerado por los sujetos que recibieron la composición. Los análisis discutidos en el presente documento mostraron un aumento estadísticamente significativo de oxalato urinario normalizado con respecto a creatinina para el grupo tratado con la composición (Tabla 4) e, incluso más importante, también mostró un aumento de excreción urinaria de calcio (Tabla 14), una reducción del nitrógeno ureico en sangre (Tabla 9), una reducción del volumen urinario (Tabla 10) un aumento de la excreción urinaria de citrato (datos no mostrados). Todos son marcadores de una mayor excreción de depósitos de oxalato cálcico y detención de la progresión del deterioro renal. Por tanto, la presente composición está prevista para tal fin, y también una composición que comprende Oxalobacter formigenes, para un nuevo uso médico.

En un estudio previo sin ocultación (Hoppe et al., 2006), la administración de una composición alternativa, denominada OC3, condujo a una reducción estadísticamente significativa de la excreción urinaria de oxalato durante 4 semanas en casi todos los pacientes, y no hubo problemas de seguridad. Sin embargo, un ensayo posterior mayor con doble ocultación con una formulación modificada, otra composición alternativa, que comprende, por ejemplo, una concentración menor de O. formigenes que la composición farmacéutica desvelada en el presente documento, no demostró efecto en la excreción urinaria de oxalato [Hoppe et al., 2011] durante 24 semanas. Para mejorar la eficacia de una composición que comprende O. formigenes y superar los problemas de baja actividad y largo tiempo de recuperación y administración farmacológica para las formulaciones previas, se realizaron mejoras que dieron como resultado la composición farmacéutica presentada en el presente documento.

La composición farmacéutica mejorada contenida en este producto farmacéutico ahora ha sido objeto de un ensayo clínico controlado con placebo que ilustra sus efectos, que mostraron ser particularmente útiles en el contexto de trastornos relacionados con oxalato, o más particularmente trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia.

El análisis del ensayo clínico mostró sorprendentemente un aumento estadísticamente significativo de excreción urinaria de oxalato normalizada con respecto a excreción urinaria de creatinina en el grupo tratado con la nueva formulación activa (fármaco (OC5)) frente al grupo tratado con placebo (Tabla 4).

Como se menciona en la sección Resultados, hubo una correlación negativa entre TFGe inicial (tasa de filtración glomerular estimada, una medida de la función renal) y concentración de oxalato plasmático (p = 0,007) al iniciar el estudio para todos los pacientes, lo que demuestra que el oxalato plasmático aumenta progresivamente a medida que TFGe disminuye. La TFGe tiene gran importancia clínica y, por tanto, el oxalato plasmático podría ser un buen indicador de la progresión de la enfermedad HOP. En una publicación reciente, se mostró que TFGe en el momento del diagnóstico estaba asociada a ESRD incidente en pacientes con HOP [Zhao et al., 2016]. En la progresión de HOP, la tasa de deterioro renal está relacionada con el tiempo de exposición para oxalato elevado (edad) y parece que se acelera con la disminución de TFGe. Paralelamente, la sedimentación de oxalato plasmático y oxalato cálcico aumenta gradualmente.

En el análisis de subgrupos, que se explica adicionalmente en la sección experimental, las diferencias más notables entre pacientes tratados con OC5 y placebo se observaron en subgrupos de pacientes mayores (>18 años) y pacientes con función renal reducida (<90 ml/min/1,73 m2). Que estos dos subgrupos fueran similares no fue sorprendente dado que ambos estuvieron expuestos a niveles de oxalato elevados durante mucho tiempo y, por consiguiente, desarrollaron depósitos de oxalato cálcico que causan función renal reducida.

Es importante destacar que el tratamiento con la composición farmacéutica parecía tener un efecto más notable en aquellos pacientes con HOP más avanzada. La diferencia fue opuesta a lo esperado; en lugar de una disminución de la excreción urinaria de oxalato, la administración de la composición condujo realmente a un aumento de excreción. Este es un hallazgo muy relevante, que crea tratamientos mejorados de trastornos relacionados con oxalato con hiperoxalemia que experimentan sedimentación de oxalato cálcico usando una composición de acuerdo con la presente divulgación.

O. formigenes puede ser de genotipo 1 o genotipo 2; ambos tipos son naturales. OC5 comprende O. formigenes de genotipo 1. Una correlación negativa estadísticamente significativa entre el cambio de concentración de oxalato plasmático y cambio del número de O. formigenes de genotipo 1 en el grupo activo (es decir, el grupo que recibe OC5) sugiere que las bacterias O. formigenes introducidas pueden metabolizar el oxalato libre que se origina en el plasma (Tabla 8). O. formigenes de genotipo 2, que estaba presente en 3 pacientes de cada uno de los grupos, activo y placebo, al iniciar el estudio, aumentó solo en el grupo activo. O. formigenes de genotipo 2 no aumentó en el grupo de placebo, lo que indica que el fármaco transporta el exceso de oxalato del plasma al intestino, es decir, activa el transporte activo. Estos hallazgos respaldan que la composición farmacéutica presentada en el presente documento en forma de OC5 está creando un flujo activo de oxalato del plasma al intestino.

Pueden establecerse paralelismos con pacientes con gota en el sentido de que, al igual que los pacientes con HOP tienen mayor concentración plasmática de oxalato, los pacientes con gota tienen mayor concentración plasmática de urato. Con el tiempo, esto conduce a sedimentación de cristales de urato monosódico en las articulaciones. Se ha informado que el tratamiento de la gota para reducir el ácido úrico altera el equilibrio entre urato plasmático y cristales de urato, que a continuación se disuelven gradualmente de 3-33 meses [Pascual y Sivera, 2007].

La calcificación de tejidos blandos mediada por sedimentación de fosfato cálcico es un problema como un en pacientes con enfermedad renal crónica. Hay varios enfoques disponibles para reducir calcio o fosfato, y ambos enfoques conducen satisfactoriamente a una mayor excreción y disolución de depósitos de fosfato cálcico.

Igualmente, en los pacientes tratados con OC5, O. formigenes promueve la eliminación activa de oxalato, mediando la transferencia de oxalato libre del plasma al intestino. Este proceso rompe el equilibrio entre oxalato plasmático libre, oxalato asociado a proteínas y oxalato cálcico sedimentado. La ruptura del equilibrio puede conducir hacia oxalato libre y conducir a una disolución de los cristales de oxalato cálcico sedimentados. Como la disolución de los cristales está controlada por la concentración aparente circundante del respectivo contraión, los cristales pueden disolverse momentáneamente bajo la concentración de saturación e impulsar el aumento de oxalato plasmático y orina como consecuencia de la disolución.

Dado que se espera que los depósitos de oxalato cálcico sean más pronunciados en pacientes con función renal reducida, esto puede explicar por qué el efecto del tratamiento con OC5 fue mayor en pacientes con enfermedad renal más avanzada (TFGe < 90 ml/min/1,73 m2). La mayor excreción urinaria de calcio en pacientes con TFGe < 90 ml/min/1,73 m2 añade más peso a la teoría de la disolución de cristales de oxalato cálcico.

Por tanto, en el presente documento se propone un efecto directo sobre los depósitos de oxalato cálcico per se, consiguiendo su disolución, lo que proporciona una herramienta eficaz para potenciar la retirada de depósitos de oxalato cálcico sistémicos en el tratamiento de trastornos asociados a sedimentación de oxalato cálcico en el organismo, e incluso en la reversión, o al menos detención, de la progresión de tal trastorno.

Los análisis adicionales también indicaron que el tratamiento con OC5 dio como resultado beneficios adicionales de uso en la práctica clínica; BUN reducido y disminución de producción de orina en el grupo de OC5 sugirieron que la reabsorción renal de agua y la capacidad de concentración de orina, ambas características de deterioro renal, estaban mejorando en estos pacientes (Tabla 9 y Tabla 10). La publicación reciente de Zhao et al., 2016, concluye que el volumen urinario es generalmente elevado en pacientes con HOP, que el volumen urinario en el momento del diagnóstico se correlaciona negativamente con TFGe (p = 0,001). Los autores sugieren que el aumento de los volúmenes urinarios refleja disminución de la capacidad de concentración urinaria y deshidratación entre pacientes con HOP que tienen lesión tubulointersticial establecida. Estas observaciones respaldan los hallazgos presentados en el presente documento donde se observó una reducción del volumen urinario tras el tratamiento con OC5 y, por tanto, indicarían un efecto de tratamiento beneficioso para el riñón. El nitrógeno ureico en sangre (BUN, blood urea nitrogen), que es un marcador de lesión tubular, está muy elevado en pacientes con HOP. El hallazgo de que el tratamiento con OC5 tendía a reducir BUN y el volumen urinario podría indicar mejor capacidad de concentración de orina y reducción de la deshidratación, un efecto de tratamiento beneficioso, por ejemplo, para el riñón. Es sorprendente que tal efecto ya se muestre tras solo 8 semanas de tratamiento, habiendo progresado el deterioro renal durante años.

Se sabe que los cristales de oxalato cálcico causan respuestas inflamatorias (Worcester et al., 2013). La disminución significativa de eosinófilos y la tendencia a disminuir los recuentos leucocitarios y linfocitarios en pacientes tratados con OC5 y aumentar en pacientes tratados con placebo durante 8 semanas (como se muestra en la sección de Resultados) indicaron que el tratamiento con O. formigenes, al reducir potencialmente los cristales de oxalato cálcico, también puede haber tenido un efecto beneficioso en la inflamación asociada a HOP (Tablas 9 y 11). Por consiguiente, en el presente documento se presenta un uso médico adicional de la composición farmacéutica como se define en el presente documento para inflamación relacionada con oxalato, que puede ser un resultado de hiperoxaluria secundaria. La inflamación relacionada con cristales de oxalato ocurre en todos los tejidos blandos expuestos a dichos cristales, incluyendo riñón y corazón. En el riñón, la inflamación causa fagocitosis de cristales e internalización de depósitos en células (nefrocalcinosis). En el corazón, la inflamación causa internalización de depósitos en el miocardio, dando como resultado rigidez y reducción de la capacidad de contracción cardíaca.

El tratamiento con la composición farmacéutica también aumentó significativamente el número de células de O. formigenes en el intestino y se toleró bien (Tabla 5). A diferencia de las expectativas previas al estudio, el tratamiento aumentó significativamente la excreción urinaria de oxalato por creatinina.

Las expectativas eran que Oxalobacter metabolizaría el oxalato libre y, por tanto, disminuiría la carga de oxalato en el organismo, provocando menor excreción. Esta hipótesis se basó en el supuesto de que los depósitos de oxalato cálcico eran insolubles. Por el contrario, Oxalobacter aumentó la excreción de oxalato supuestamente mediante la disolución de cristales y también posiblemente mediante el aumento de la actividad de las proteínas transportadoras en el epitelio intestinal y tubular.

Los resultados del análisis fueron coherentes con una nueva hipótesis de que O. formigenes promovía la eliminación activa de oxalato del plasma, al íleon (intestino), y posteriormente alteraba el equilibrio entre oxalato plasmático libre, oxalato asociado a proteínas y oxalato cálcico sedimentado. Esto condujo a mayor disolución de depósitos de oxalato cálcico y posteriormente a mayor excreción de oxalato (urinario). Dado que el oxalato plasmático aumenta gradualmente en pacientes con HOP, esta hipótesis sugiere que, de acuerdo con el modelo de gota, una estabilización o una reducción de la concentración de oxalato plasmático con el tiempo en comparación con el placebo podría ser la métrica preferente para la eficacia del tratamiento con OC5.

Como resultado de los estudios clínicos, en el presente documento se propone una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica mejorada que comprende Oxalobacter formigenes.

Por consiguiente, en el presente documento se proporciona una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto que la necesita, comprendiendo dicha cápsula una composición farmacéutica que comprende:

(i) de un 10 % a un 25 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

(ii) de un 50 % a un 65 % en peso seco de sacarosa; y

(iii) de un 10 % a un 30 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes; en donde dicha cápsula con revestimiento entéricos es para distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto, y

en donde la actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes cuando está presente en dicha cápsula con revestimiento entérico no es inferior a (NLT) 100 mmol/cápsula/19 horas y en donde dicha cápsula comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de 109 a 1010 UFC.

Naturalmente, dicha composición farmacéutica también puede comprender agua, tal como en una cantidad de aproximadamente un 1-5 %, tal como aproximadamente un 3 %.

Una composición farmacéutica también puede consistir en los ingredientes descritos anteriormente y opcionalmente agua.

Los contenidos de las composiciones farmacéuticas mencionadas en el presente documento se describen en porcentajes y en peso seco. Esta composición seca se obtuvo mediante un proceso de secado, tal como liofilización, y, en tal contexto, también puede denominarse composición de polvo o composición liofilizada/secada por congelación (polvo). Cuando se seca una composición, puede crear una cierta cantidad de agua que se ilustra por las composiciones que comprenden una cierta cantidad de agua.

Más específicamente, se proporciona una composición farmacéutica que comprende de aproximadamente un 10 % a aproximadamente un 20 %, de aproximadamente un 10 % a aproximadamente un 25 %, de aproximadamente un 15 % a aproximadamente un 20 %, de aproximadamente un 15 % a aproximadamente un 25 %, de aproximadamente un 17 % a aproximadamente un 21 %, de aproximadamente un 18 % a aproximadamente un 22 %, o de aproximadamente un 18 % a aproximadamente un 20 %, tal como aproximadamente un 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 % o un 22 % en peso seco de Oxalobacter formigenes en dicha composición. Las cantidades de Oxalobacter formigenes también pueden variar ligeramente (principalmente hacia un porcentaje mayor), o puede ser como se ejemplifica adicionalmente en el presente documento. Como se señaló, la composición farmacéutica desvelada en el presente documento comprende una concentración de bacterias elevada, adecuada. La mayor concentración de bacterias proporciona un efecto o tasa de recuperación mejorados para la composición, como se ilustra adicionalmente en el presente documento.

Además, en el presente documento una composición farmacéutica puede comprender de aproximadamente un 50 % a aproximadamente un 65 % en peso seco de sacarosa, tal como de aproximadamente un 52 % a aproximadamente un 62 %, de aproximadamente un 54 % a aproximadamente un 60 %, o de aproximadamente un 56 % a aproximadamente un 58 %, tal como aproximadamente un 54 %, 55 %, 56 %, 57 %, 58 %, 59 %, 60 %, 61 %, 62 %, 63 %, 64 % o un 65 %. Las cantidades también pueden variar ligeramente, o pueden ser como se ejemplifica adicionalmente en el presente documento. Se demostró que el uso de sacarosa en la composición farmacéutica presentaba una buena alternativa para otros disacáridos, ya que proporcionaba mayor estabilidad de la composición. Se demostró que la combinación de una concentración elevada de Oxalobacter formigenes y sacarosa como excipiente principal de la composición farmacéutica era una combinación satisfactoria para lograr un efecto médico mejorado presentado en el presente documento. La recuperación y la actividad degradante de oxalato mejoradas de una composición que comprende sacarosa como excipiente principal también se muestra en la Figura 2. Las composiciones híbridas representan diferentes porcentajes de contenido de sacarosa, ilustrando las composiciones mejoradas. El híbrido 1:1 comprende la mayor cantidad de sacarosa (híbrido:pasta celular:solución de excipiente que incluye sacarosa).

La(s) cantidad(es) de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes puede(n) ser de aproximadamente un 10 % a aproximadamente un 30 % en peso seco, tal como aproximadamente un 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 % o un 30 % de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes.

Particularmente, todas las cantidades en % mencionadas en el presente documento pueden variar generalmente al menos en aproximadamente un 1-3 %, es decir, ± 1-3 % dependiendo del proceso de elaboración exacto y la densidad celular usada para preparar la composición farmacéutica. Las composiciones se preparan a partir de una pasta celular y excipientes en solución y a continuación se congelan y liofilizan por procedimientos conocidos en la técnica.

En una composición farmacéutica presentada en el presente documento, los excipientes y/o agentes crioconservantes en (iii) pueden seleccionarse entre el grupo que consiste en maltodextrina, oligofructosa y alginato. También pueden usarse otros agentes funcionalmente iguales y estructuralmente similares.

En una composición farmacéutica, como se presenta en el presente documento, puede usarse de aproximadamente un 15 % a aproximadamente un 21 %, tal como de aproximadamente un 16 % a aproximadamente un 19 %, tal como aproximadamente un 15 %, 16 %, 17 %, 18 % o un 19 % en peso seco de maltodextrina.

La composición farmacéutica puede comprender:

i) de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 5 % en peso seco de oligofructosa; y

ii) de aproximadamente un 0,5 % a aproximadamente un 2 % en peso seco de alginato. Dicha composición farmacéutica también puede comprender agua, tal como en la cantidad de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 5 % en peso de dicha composición.

Una composición farmacéutica, como se presenta en el presente documento, puede comprender de aproximadamente un 0,5 % a aproximadamente un 1,5 % en peso seco de alginato, o un agente similar al alginato, tal como aproximadamente un 1 %. La oligofructosa puede estar en aproximadamente un 1 %, 2 %, 3 %, 4 % o un 5 % en peso seco.

La cápsula con revestimiento entérico proporcionada en el presente documento que comprende una composición farmacéutica puede comprender:

de un 17 % a un 22 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

de un 52 % a un 62 % en peso seco de sacarosa;

de un 17 % a un 25 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes.

Más particularmente, la composición farmacéutica puede comprender:

un 19 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

un 57 % en peso seco de sacarosa;

un 21 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes, y el resto de agua. Los agentes crioconservantes y/o excipientes pueden ser alginato, maltodextrina y/u oligofructosa, y pueden estar presentes en las cantidades de un 1 % de alginato, un 17 % de maltodextrina y un 3 % de oligofructosa en peso seco.

Además se describe una cápsula, que comprende las características de revestimiento estructurales para dirigir la distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado, o más particularmente, al intestino delgado y/o al íleon, de dicho sujeto. Se mostró un efecto médico ventajoso a dirigir la distribución de Oxalobacter formigenes a estas partes del intestino delgado.

Las características estructurales de la cápsula con revestimiento entérico usadas pueden describirse de manera funcional haciendo referencia, por ejemplo, a su capacidad para resistir la desintegración en condiciones in vitro simulando condiciones en la parte gastrointestinal del organismo. En el presente documento, la cápsula se describe con respecto a su capacidad para resistir la desintegración en el entorno estomacal, y con respecto a su capacidad para resistir la desintegración durante un período de tiempo limitado, también en un entorno intestinal. Por tanto, en el presente documento, las características de la cápsula con revestimiento entérico se describen principalmente con respecto a su capacidad para resistir la desintegración durante la incubación en "Fluido Gástrico Simulado" (FGS) y en "Fluido Intestinal Simulado" (FIS).

El "Fluido Gástrico Simulado" (FGS) es un medio de disolución artificial que pretende representar el ácido estomacal. Puede prepararse disolviendo cloruro sódico y añadiendo posteriormente pepsina purificada (derivada, por ejemplo, de mucosa estomacal porcina, con una actividad de aproximadamente 800 a 2500 unidades por mg de proteína), en ácido clorhídrico. La solución de ensayo tiene un pH de aproximadamente 1,2 ± 0,1. La temperatura del FGS se mantiene a aproximadamente 37 °C y la concentración de la enzima en el fluido es aproximadamente 3,2 mg/ml.

El "Fluido Intestinal Simulado" (FIS) es un medio de disolución artificial que pretende representar el fluido intestinal. Puede prepararse disolviendo fosfato potásico en agua y añadiendo hidróxido sódico y ajustando el pH a pH 6,8 ± 0,1 y añadiendo posteriormente pancreatina purificada. La temperatura del FIS se mantiene aproximadamente 37 °C y la concentración de la enzima en el fluido es aproximadamente 10 mg/ml.

Pueden someterse a ensayo seis cápsulas al mismo tiempo. La desintegración completa se define como el estado en que cualquier resto de la unidad, excepto fragmentos de revestimiento o cubierta de cápsula insolubles, permanece en la pantalla del aparato de ensayo o se adhieren a la superficie inferior de los discos, es una masa blanda sin núcleo palpablemente firme. El criterio de aceptación para FGS se satisface si las seis cápsulas no muestran evidencias de desintegración o ruptura que permita el escape de contenidos. Los criterios de aceptación para FIS se satisfacen si las seis cápsulas muestran evidencias de inicio de desintegración en 60 minutos. Un procedimiento para la desintegración de comprimidos y cápsulas también se describe en la farmacopea europea 5.0, 2.9.1 (Ensayo A).

De acuerdo con ello, puede definirse que la cápsula con revestimiento entérico no muestra básicamente desintegración en una hora de incubación en fluido gástrico simulado (FGS) que tiene un pH de aproximadamente 1,2 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 3,2 mg/ml de pepsina a una temperatura de aproximadamente 37 °C, pero en donde se detecta un inicio de desintegración de dicha cápsula en aproximadamente una hora en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C. Estas características de la cápsula con revestimiento entérico explican la supervivencia en el entorno ácido del estómago, y también la permanencia durante cierto tiempo en el entorno intestinal, dirigiéndose de ese modo eficazmente a la distribución de Oxalobacter al intestino delgado y/o al íleon. Se mostró que esta era la diana más eficaz para distribuir e iniciar la liberación de esta composición farmacéutica. De hecho, en el presente documento también se muestra que la definición de desintegración in vitro corresponde a una desintegración in vivo en el intestino delgado y/ola parte superior del intestino grueso en un sujeto clínico. Esto se visualiza, por ejemplo, en la Figura 3.

Particularmente, se demostró que en el presente documento una cápsula, que tiene las características de inicio de desintegración en aproximadamente una hora en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C, era particularmente útil. Por tanto, esto significa que la cápsula permanece durante cierto tiempo en el tracto intestinal, dando como resultado una liberación lenta de la composición farmacéutica. Esta es una diferencia en comparación con otras cápsulas, por ejemplo, donde se observa una desintegración (o colapso) completa en aproximadamente una hora en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C. Como se mencionó anteriormente en el presente documento, la cápsula puede ser una cápsula de gelatina, tal como una casa de gelatina dura, u otra cápsula similar que proporcione características similares, dando como resultado de ese modo un perfil de liberación del fármaco preferente.

Algunos ejemplos de revestimientos poliméricos que pueden usarse para preparar un revestimiento para una cápsula que comprende una composición farmacéutica de acuerdo con la presente divulgación, que resiste la desintegración en los límites definidos anteriormente son, por ejemplo, polímeros de ácido metacrílico que incluyen copolímeros de ácido metacrílico y copolímeros de ácido metacrílico aniónico tales como los proporcionados por los revestimientos de Eudragit®. Estos pueden adquirirse, por ejemplo, en Evonik Industries (http://eudragit.evonik.com) y también puede prepararlos un experto en la materia, teniendo en cuenta opcionalmente la información adicional disponible para el experto, tal como Remington's Pharmaceutical Sciences. La selección de los polímeros apropiados para producir o revestir una cápsula la puede realizar el experto teniendo en cuenta los detalles presentados en el presente documento con respecto al direccionamiento de las cápsulas al intestino delgado y/o al íleon.

La cápsula puede ser una cápsula de gelatina, tal como una cápsula de gelatina dura, u otra cápsula similar que proporcione características similares.

La cápsula con revestimiento entérico, como se desvela en el presente documento, comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC (Unidades Formadoras de Colonias). La cantidad de Oxalobacter formigenes también puede ser mayor, pero se ha mostrado que la cantidad por cápsula mencionada funciona particularmente bien en el contexto de la presente composición con respecto al efecto asociado a ello y también hace que la preparación de la composición sea más eficaz. Algunos ejemplos de cantidades por cápsula mayores son 1011, 1012, 1013, 1014 y 1015 UFC/cápsula.

La actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes, cuando está presente en dicha cápsula con revestimiento entérico, no es inferior a (NLT) aproximadamente 100 mmol/cápsula/19 horas, tal como aproximadamente 200 mmol, aproximadamente 300 mmol, aproximadamente 400 mmol, aproximadamente 500 mmol o incluso hasta aproximadamente 2 moles, como se mencionó anteriormente en el presente documento. En lugar de, por cápsula, también puede hacerse referencia a, por dosis. Esto define la actividad de las bacterias seleccionadas para la preparación de la composición farmacéutica, es decir, permite omitir ciertos lotes de células, que pueden contener células menos activas cuando se prepara la composición. En el presente documento se mostró que era posible obtener un producto farmacéutico muy eficaz usando bacterias que poseen tal actividad degradante de oxalato. La identificación de bacterias que poseen tales características puede realizarse en un ensayo que mida la actividad degradante de oxalato como se ilustra en la sección experimental.

La potencia (actividad degradante de oxalato) de la nueva composición farmacéutica también se ilustra en la Figura 1, que muestra que la nueva composición comienza a replicarse más rápidamente que la formulación usada previamente. Esto ilustra las características mejoradas de la presente composición.

Además, en el presente documento se describe una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto, comprendiendo dicha cápsula Oxalobacter formigenes en una cantidad de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC, y excipientes y/o agentes crioconservantes, en donde dicha cápsula con revestimiento entérico está dirigida a la distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto. Además, se describe esta cápsula que básicamente no muestra desintegración en una hora de incubación en fluido gástrico simulado (FGS) que tiene un pH de aproximadamente 1,2 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 3,2 mg/ml de pepsina a una temperatura de aproximadamente 37 °C, pero en donde se detecta un inicio de desintegración de dicha cápsula en aproximadamente una hora en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C. La actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes, cuando está presente en dicha cápsula, puede ser no inferior a (NLT) aproximadamente 100 mmoles/cápsula/19 horas, o como se definió previamente en el presente documento. En el presente documento se proporcionan ejemplos de cápsulas y revestimientos poliméricos.

Además, se proporciona una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica para uso como medicamento. Dicho uso puede ser para tratamiento y/o prevención de un trastorno relacionado con oxalato, o más particularmente trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, Tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia.

En el presente documento, siempre que se hace referencia a un uso médico de dicha composición farmacéutica o dicha cápsula con revestimiento entérico, también se pretende hacer referencia a sus usos en la elaboración de un medicamento para tratamiento o prevención de una afección médica mencionada en el presente documento.

También se proporciona una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica para uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno relacionado con oxalato, en donde dicho trastorno se seleccionan entre el grupo que consiste en hiperoxaluria, hiperoxaluria primaria e hiperoxaluria secundaria.

En el presente documento también se proporciona una cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica para uso para tratar y/o prevenir inflamación relacionada con oxalato.

La presente divulgación se refiere a hiperoxaluria, hiperoxaluria primaria e hiperoxaluria secundaria. En un contexto adicional, se dirige a hiperoxalemia, acumulación de oxalato en plasma sanguíneo, oxalosis asociada a enfermedad renal crónica (ERC) y enfermedad renal en fase terminal (ESRD) tal como en el síndrome de intestino corto (SIC), cirugía bariátrica con resección yeyunal/ileal o procedimientos en Y de Roux, enfermedad de Zellweger, cánceres con resección yeyunal/ileal, infecciones renales con Aspergillus niger, y pacientes con ESRD en diálisis. Además, se dirige a hiperoxaluria entérica, inflamación en el epitelio intestinal o tubular, trastornos de conducción cardíaca, vulvodinia, enfermedad idiopática de cálculos renales de oxalato cálcico (urolitiasis), enfermedad inflamatoria intestinal (EII), sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SIBS), gastroenteritis, gastritis, enteritis, enterocolitis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y un trastorno relacionado con oxalato en pacientes tratados con un inhibidor de lipasa gastrointestinal.

En el presente documento también se describe Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de inflamación relacionada con oxalato.

La cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición farmacéutica definida en el presente documento puede administrarse en cantidades que contienen de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC de O. formigenes al menos dos veces al día durante un período de tiempo continuo, tal como un período que dura al menos meses o años, a un sujeto que la necesita. Tal período puede durar 1, 2, 3, 4, 5, 6 o hasta 12 meses, 1, 2, 3, 4, o 5 o incluso más años, hasta que la progresión de los niveles aumentados de oxalato plasmático se hayan ralentizado, detenido o disminuido y mantenido en un nivel menor, más saludable, tal como en 1-3 pmol/l.

Como se mencionó anteriormente en el presente documento, la presente cápsula con revestimiento entérico que comprende una composición es particularmente útil para el tratamiento y/o prevención de un trastorno relacionado con oxalato asociado a hiperoxalemia y la formación de depósitos de oxalato cálcico sistémicos.

En el presente documento también se describe el uso de la composición farmacéutica o las cápsulas con revestimiento entérico para tratar y/o prevenir inflamación relacionada con oxalato.

Además, se describe un método para tratar y/o prevenir un trastorno relacionado con oxalato o, más particularmente, trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, comprendiendo dicho método administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz de una composición farmacéutica, como se define en el presente documento, o una cápsula con revestimiento entérico, como se define en el presente documento, que comprende una cantidad farmacéuticamente eficaz de una composición farmacéutica, como se define en el presente documento, a un sujeto que la necesita.

Dicho sujeto puede ser un mamífero, tal como un ser humano.

Dicho método comprende tratar y/o prevenir hiperoxaluria con hiperoxalemia, hiperoxaluria primaria e hiperoxaluria secundaria. Además, dicho método se refiere al tratamiento y/o prevención de hiperoxalemia, acumulación de oxalato en plasma sanguíneo, oxalosis asociada a enfermedad renal crónica (ERC) y enfermedad renal en fase terminal (ESRD) tal como en el síndrome de intestino corto (SIC), cirugía bariátrica con resección yeyunal/ileal o procedimientos en Y de Roux, enfermedad de Zellweger, cánceres con resección yeyunal/ileal, infecciones renales con Aspergillus niger, pacientes con ESRD en diálisis. Además con el método está relacionado con inflamación relacionada con oxalato, y, más particularmente, al tratamiento y/o prevención de inflamación entérica de hiperoxaluria, inflamación en el epitelio intestinal o tubular, trastornos de conducción cardíaca, vulvodinia, enfermedad idiopática de cálculos renales de oxalato cálcico (urolitiasis), enfermedad inflamatoria intestinal (EII), sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SIBS), gastroenteritis, gastritis, enteritis, enterocolitis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y un trastorno relacionado con oxalato en un paciente tratado con un inhibidor de lipasa gastrointestinal.

Dicho método también se dirige aumentar adicionalmente la excreción de oxalato sistémico cuando dicha composición se administra a un sujeto que la necesita. En el presente documento, se identifica que un sujeto que la necesita padece uno o más de los trastornos de la divulgación.

También se describe un método, en donde dicha cantidad farmacéuticamente eficaz comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC al menos dos veces al día durante un período de tiempo continuo, tal como un período que dura al menos meses o años a un sujeto que la necesita. Tal período puede durar 1, 2, 3, 4, 5, 6 o hasta 12 meses, 1, 2, 3, 4, o 5 o incluso más años, hasta que los niveles de oxalato plasmático hayan disminuido, y se mantengan en un nivel menor, más saludable, tal como en 1-3 pmol/l.

También se describe un método para preparar una composición farmacéutica, como se define en el presente documento, comprendiendo dicho método las etapas de:

a) mezclar una pasta celular de Oxalobacter formigenes con excipientes y/o agentes crioconservantes y opcionalmente agua; y

b) liofilizar la composición obtenida en la etapa a).

En el presente documento se describe lo siguiente:

También se describe Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de infecciones renales con Aspergillus niger.

En el presente documento también se describe Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia, como se define más específicamente en el presente documento en otros contextos.

En el presente documento también se describe Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de enfermedad renal crónica (ERC).

En el presente documento también se describe Oxalobacter formigenes para uso en el tratamiento y/o prevención de inflamación relacionada con oxalato, como se define más específicamente en el presente documento en otros contextos.

Se proporciona Oxalobacter formigenes en una composición farmacéutica en una cantidad terapéuticamente eficaz de la misma, como se ejemplifica en el presente documento.

La presente divulgación se ilustrará ahora por la siguiente sección experimental, pero no pretende quedar limitada a ello.

SECCIÓN EXPERIMENTAL

CONTENIDO, ACTIVIDAD Y DESINTEGRACIÓN DE LA NUEVA FORMULACIÓN

Actividad degradante de oxalato

El ensayo de potencia, es decir, la actividad degradante de oxalato de O. formigenes, se realiza indirectamente midiendo la cantidad de formiato generada a partir de la actividad degradante de oxalato durante el cultivo celular en medios que contienen oxalato (medio "OxB" de oxalato 60 mM, Allison et al., 1985, Medio B). Las muestras se extraen y se filtran, tras incubación a 37 °C. La concentración de formiato se determina por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) frente a una curva estándar de formiato usando una columna de intercambio catiónico. Estequiométricamente, se genera un mol de formiato por cada mol de oxalato consumido (Steward et al., 2004):

Oxalato ^ oxalil-CoA ^ formil-CoA CO2 ^ formiato

El ensayo para la presente formulación, por ejemplo, OC5 mide la degradación acumulada de oxalato aproximadamente a las 19 horas, un momento donde se observa linealidad entre diluciones de muestra y las células han alcanzado la fase exponencial.

Por esta ruta, se permite que el ensayo discrimine la actividad degradante de oxalato activo de la actividad metabólica de fondo.

El gráfico de la Figura 1 revela que la composición farmacéutica de la presente invención comienza a replicarse mucho más rápido que un material usado anteriormente. Dado que las células de O. formigenes tienen un tiempo limitado para recuperarse y comenzar a degradar oxalato in vivo una vez que la cápsula se ha desintegrado, es importante que las células tengan un tiempo de recuperación corto. Si la recuperación no es lo suficientemente rápida, las células habrán pasado por el tracto gastrointestinal antes de haber tenido la oportunidad de ejercer su efecto. Por tanto, es preferente usar un material que tenga la tasa de crecimiento particular y la actividad degradante de oxalato como se describe en el presente documento para lograr la formulación farmacéutica mejorada.

Por consiguiente, la formulación farmacéutica mejorada dio como resultado i) una recuperación más rápida del polvo liofilizado (de OC5) en comparación con el polvo liofilizado del producto previo, como se define por la medición de la actividad degradante de oxalato in vitro descrita anteriormente y ii) una concentración de recuento de células viables mayor. La actividad degradante de oxalato por dosis de producto es aproximadamente 100 veces mayor en la presente composición.

La presente formulación también es más concentrada (como se presenta en el presente documento) que las sustancias previas. Por tanto, los recuentos de células tanto totales como viables son mayores por gramo de material.

T l 1: n ni lv li filiz n l f rm l i n

Los contenidos enumerados en la tabla previa son aproximados y pueden variar dentro de los intervalos ejemplificados en el presente documento. Una de las diferencias entre las formulaciones anteriores y las nuevas es el excipiente sacarosa. Los rastros de recuperación en la Figura 2 muestran tasas de recuperación para diferentes formulaciones que contienen sacarosa mientras que la formulación OC3 no (es decir, la Figura 2 muestra mejor recuperación y degradación de oxalato para formulaciones híbridas en comparación con OC3).

Desintegración de cápsulas de OC5 revestidas con polímeros

El sitio fijado como diana para liberar la composición farmacéutica presentada en el presente documento, y ejemplificada por OC5, es el intestino delgado, en particular, un inicio preferente de liberación de Oxalobacter en la formulación se dirige al duodeno, al yeyuno o al íleon, ya que se ha encontrado que el sitio físico para el flujo de oxalato hacia la luz intestinal ocurre en el íleon, así como en el ciego y colon distal (Hatch y Freel, 2008, 2013).

El polvo liofilizado de OC5 contiene células de O. formigenes con características de crecimiento rápido. En el desarrollo de OC5 se decidió usar cápsulas con revestimiento entérico para la liberación dirigida de las bacterias, con los detalles presentados a continuación. La cápsula de OC5 puede comprender un revestimiento de polímeros Eudragit FS30D y L30D55, pero una composición presentada en el presente documento no se limita a ello.

Tabla 2: Descri ción de cá sulas de OC5

Evaluación de cápsulas de OC5 revestidas con polímeros in vivo

El objeto fue evaluar el comportamiento in vivo de una cápsula con revestimiento entérico formulada para desintegrarse en el intestino delgado. Las cápsulas se revistieron con polímeros y están diseñadas para resistir una hora en fluido gástrico simulado (FGS) y mostrar signos de disolución de la cápsula en una hora en fluido intestinal simulado (FIS).

El proceso de desintegración y tránsito de las cápsulas a través del tracto gastrointestinal se caracteriza usando un método gammagráfico. La técnica de gammagrafía se ha convertido en una herramienta cada vez más útil para evaluar el rendimiento in vivo de las formas de dosificación farmacéuticas. La gammagrafía no es invasiva y proporciona información sobre sedimentación, dispersión y movimiento de la formulación. La carga radiactiva es mínima y todos los procedimientos están bien establecidos y generalmente se consideran seguros.

Se realizó un estudio gammagráfico para evaluar el comportamiento in vivo de cápsulas con revestimiento entérico dirigidas en voluntarios humanos masculinos. La cápsula, diseñada para desintegrarse en 1 h en FIS, comenzó a desintegrarse en un tiempo medio de 91,6 ± 0,6 min después del vaciamiento gástrico in vivo. Basándose en las imágenes gammagráficas obtenidas y evaluación de los tiempos de tránsito gastrointestinal, puede resumirse que la mayoría de las cápsulas comenzaron a liberarse en el intestino delgado, específicamente en el íleon. Por tanto, en el presente documento se ha desarrollado por primera vez un producto capaz de liberar Oxalobacter en el íleon.

La Figura 3 muestra imágenes representativas de los resultados obtenidos en el estudio, es decir, que ilustran episodios principales que ocurren en el tránsito gastrointestinal de la cápsula.

Los episodios principales ilustrados en la Figura 3 (a)-(d) son imágenes gammagráficas anteriores del tránsito gastrointestinal de la cápsula de OC5 en el Sujeto 006 en diversos momentos tras la ingesta oral: (a) En t = 0 min, tras la ingesta oral, la cápsula está intacta y ubicada en el estómago, como lo muestra el rastro distintivo de la cápsula. (b) En t = 100 min, confirmación del vaciado gástrico de la cápsula; es decir, la cápsula ha salido del estómago. El rastro de la cápsula todavía es nítido. (c) En t = 170 min, inicio de la desintegración y liberación del contenido de la cápsula en el intestino delgado, como se visualiza por un rastro mayor alrededor de la cápsula. (d) En t = 260 min, desintegración completa y liberación del contenido de la cápsula en el colon ascendente, como lo demuestra la mayor dispersión del rastro. La flecha blanca dibujada en cada una de las imágenes (a)-(d) apunta al rastro radiactivo de la cápsula. Los contornos de estómago y colon se dibujan solo con fines de visualización. El círculo relleno blanco ubicado a la izquierda del estómago se usa como marcador de posición.

ESTUDIO CLÍNICO CON DOBLE OCULTACIÓN USANDO LA NUEVA FORMULACIÓN

Diseño del estudio

El estudio de OC5 fue un estudio aleatorio, controlado con placebo, con doble ocultación (OC5-DB-01), realizado en Alemania, Reino Unido y Francia.

Una dosis de OC5 consistió en una cápsula que contenía no menos de 109 unidades formadoras de colonias (UFC) de O. formigenes con capacidad para metabolizar no menos de 100 mmol por dosis (cápsula), leído a las 19 horas. El producto placebo tenía la misma apariencia y propiedades de liberación que el producto activo y consistió en cápsulas de tamaño 4 con revestimiento entéricos llenas de celulosa microcristalina. Durante el período de tratamiento, los pacientes proporcionaron muestras de orina de 24 h en las semanas de tratamiento 2, 4, 6, 8 y 10 (si fuera necesario). Se recogieron muestras de heces y muestras de plasma en las semanas 4 y 8 de tratamiento. Para garantizar que hubiera una recogida de orina idónea al final del período de tratamiento, el tratamiento se extendió a 10 semanas para obtener una recogida adicional, si se considerara que la recogida de orina en la semana de tratamiento 8 no era idónea.

Criterios de inclusión

Los pacientes masculinos o femeninos idóneos tenían > 2 años de edad (> 5 años en el Reino Unido) con un diagnóstico de HOP de tipo 1,2 o 3 (como se determina por métodos de diagnóstico estándar) y una excreción urinaria media de oxalato (Uox) > 1,0 mmol/24 h/1,73 m2, basándose en al menos tres recogidas de orina idóneas realizadas durante el inicio del estudio (inicio del estudio 1-4 semanas antes de comenzar el tratamiento). Era necesario que los pacientes tuvieran una tasa de filtración glomerular estimada (TFGe) > 40 ml/min/1,73 m2 o una depuración de creatinina > 40 ml/min/1,73 m2 al iniciar el estudio para inclusión en el estudio.

Los pacientes que tomaban vitamina B6 (piridoxina) debían haber estado tomando una dosis estable durante al menos 3 meses antes del privado y no debían cambiar la dosis durante el estudio. Se pidió que los pacientes que no recibían vitamina B6 al ingresar en el estudio se abstuvieran de iniciar la ingesta de piridoxina durante el estudio.

Métodos estadísticos

Los análisis estadísticos del criterio de valoración principal (cambio en la excreción urinaria de oxalato al iniciar el estudio hasta la semana 8 de tratamiento) se realizaron con un análisis de covarianza de medidas repetidas de modelo mixto (MMRM, mixed-model repeated measures) que incluía los siguientes efectos fijados: grupo de tratamiento, valor inicial de oxalato urinario, visita e interacción de visita por tratamiento. Este cambio se comparó entre OC5 y placebo tras 8 semanas de tratamiento. Todos los criterios de valoración secundarios basados en cambios desde el inicio del estudio hasta el final del tratamiento (cambio en los niveles urinarios de oxalato en subgrupos de sujetos, cambio en los niveles de oxalato plasmático, cambio en el número de O. formigenes en heces) se analizaron usando la misma metodología que para el criterio de valoración principal. El cambio en el número de O. formigenes en heces desde el inicio del estudio hasta la semana 8 de tratamiento se evaluó mediante estadística descriptiva.

Todos los análisis de eficacia se realizaron en pacientes aleatorios que recibieron al menos una dosis del medicamento del estudio y que proporcionaron al menos una medición idónea de oxalato urinario durante el tratamiento con OC5/placebo.

RESULTADOS

Población de estudio

Se cribaron cuarenta y cuatro pacientes. El motivo principal del fracaso del cribado fue una excreción urinaria de oxalato inferior a 1 mmol/24 h/1,73 m2 durante el inicio del estudio. Se asignaron aleatoriamente veintiocho pacientes; 14 pacientes recibieron OC5 y 14 pacientes recibieron placebo y todos los pacientes completaron el estudio.

Hubo una clara relación entre edad del paciente y función renal, coherente con la progresión de la enfermedad. En ambos grupos, la mayoría de los pacientes menores de 18 años (15 de 19) tenían una función renal normal (TFGe > 90 ml/min/1,73 m2) mientras que solo tres de los nueve pacientes > 18 años tenían una función renal normal. Las diferencias en las composiciones de los grupos mostraron que el grupo de OC5 tenía una TFGe media menor (97,47 ml/min/1,73 m2) que el grupo de placebo (123,11 ml/min/1,73 m2).

El historial de trastornos renales y urinarios fue mayor en el grupo de OC5 (11 pacientes, 79 %) que en el grupo de placebo (ocho pacientes, 57 %), lo que podría explicarse por las diferencias en la función renal entre grupos al iniciar el estudio.

Tabla 3: Sumario del historial médico general y renal

OC5 (N = 14) Placebo (N = 14) Total (N = 28)

n (%) n (%) n (%)

Cualquier otro historial médico 12 (85,7) 11 (78,6) 23 (82,1)

Trastornos renales y urinarios 11 (78,6) 8 (57,1) 19 (67,9)

Cálculos urinarios 6 (42,9) 2 (14,3) 8 (28,6)

Disuria 0 1 (7,1) 1 (3,6)

Hematuria 2 (14,3) 0 2 (7,1)

Hidronefrosis 1 (7,1) 0 1 (3,6)

(continuación)

OC5 (N = 14) Placebo (N = 14) Total (N = 28)

n (%) n (%) n (%)

Hipercalciuria 0 1 (7,1) 1 (3,6)

Hiperoxaluria 1 (7,1) 1 (7,1) 2 (7,1)

Nefrocalcinosis 5 (35,7) 5 (35,7) 10 (35,7)

Nefrolitiasis 7 (50,0) 4 (28,6) 11 (39,3)

Proteinuria 2 (14,3) 1 (7,1) 3 (10,7)

Cólico renal 2 (14,3) 0 2 (7,1)

Insuficiencia renal 0 1 (7,1) 1 (3,6)

Insuficiencia renal crónica 4 (28,6) 0 4 (14,3)

Alteración renal 2 (14,3) 1 (7,1) 3 (10,7)

Dolor renal 1 (7,1) 0 1 (3,6)

El historial médico está codificado de acuerdo con MedDRA, versión 16.1

Cambio en la excreción urinaria de oxalato

Al estudiar el grupo de placebo frente al grupo tratado en los resultados a continuación, puede verse que la composición farmacéutica de OC5 proporcionó un efecto mejorado en comparación con la formulación de OC3 previa.

Se anticipó que el grupo tratado con OC5 disminuiría más el oxalato urinario por creatinina urinaria que el grupo de placebo. Sin embargo, en cambio, el grupo de OC5 aumentó la excreción urinaria de oxalato por excreción urinaria de creatinina mientras que el grupo de placebo disminuyó. En la semana 8 de tratamiento, la diferencia entre los grupos de OC5 y placebo alcanzó significación estadística (p = 0,030). El aumento sorprendente en el grupo de OC5 indica mayor excreción de oxalato y una movilización de depósitos de oxalato (Tabla 4) que no ocurrió en estudios con la formulación de OC3 previa. La movilización de depósitos también forma parte de una serie de episodios donde una disminución de la concentración de oxalato libre en plasma cambia el equilibrio de oxalato en los pacientes con HOP hacia la movilización de depósitos. Esto es particularmente evidente en pacientes con HOP y función renal baja (TFGe baja).

Tabla 4: Análisis de cambio desde el valor inicial en la proporción de excreción urinaria de oxalato con respecto a x r i n rin ri r inin r m n r mi n

(continuación)

La tabla muestra que la diferencia entre OC5 y placebo en la proporción de la excreción urinaria de oxalato con respecto al excreción urinaria de creatinina aumentó con el tiempo desde el valor inicial y fue estadísticamente significativa para OC5 en la semana 8 de tratamiento en el estudio OC5-DB-01 (p = 0,030, usando análisis de medidas repetidas). Para OC3, la diferencia entre OC3 y placebo en el cambio en la proporción de excreción urinaria de oxalato con respecto a excreción urinaria de creatinina desde el valor inicial en la semana 8 de tratamiento en el estudio OC3-DB-02 no fue estadísticamente significativa (p = 0,607, usando análisis de Wilcoxon-Mann-Whitney).

Cambio en el recuento de Oxalobacter

Oxalobacter formigenes es un tipo de bacteria natural. Hay dos genotipos conocidos de Oxalobacter, tipo 1 y tipo 2. La cepa HC-1 en OC5 es del genotipo 1 de Oxalobacter formigenes. Los números de Oxalobacter formigenes de ambos genotipos se midieron usando un método cuantitativo de reacción en cadena de polimerasa en tiempo real. Solo un paciente (que estaba en el grupo tratado con OC5) tenía el genotipo 1 de O. formigenes detectable al comienzo del estudio. En la semana 8 de tratamiento, 13 de los 14 pacientes del grupo OC5 mostraron niveles considerables de recuento del genotipo 1 de O. formigenes. El paciente sin aumento de O. formigenes de tipo 1 en la semana 8 de tratamiento, sin embargo, tuvo niveles aumentados en la semana 4 de tratamiento. No se detectaron bacterias del genotipo 1 en ningún paciente del grupo de placebo en ningún momento durante el estudio.

T res pacientes en el grupo de OC5 y tres pacientes en el grupo de placebo tenían niveles detectables del genotipo 2 de O. formigenes al iniciar el estudio. El genotipo 2 de O. formigenes empezó a crecer en el grupo de OC5 pero no en el grupo de placebo, indicando que OC5 media una transferencia de exceso de oxalato del plasma al intestino, alimentando también de ese modo a O. formigenes del genotipo 2.

La diferencia media de mínimos cuadrados (MC) entre el cambio en el número de O. formigenes en heces Al iniciar el estudio hasta la semana 8 fue 1,27 x 107 células/g mayor en el grupo de OC5 que en el grupo de placebo (IC del 95 %: 4,79 x 106-2,07 x 107; p < 0,0002) (Tabla 5).

Tabla 5: Cambio en el número total de O. formigenes en heces después de 8 semanas de tratamiento (células/g)

Cambio en el número de O. formigenes Diferencia con Placebo

T ratamiento Media de MC IC 95 % Media de MC IC 95 % Valor p OC5 13.814.394 7.992.437-19.636.352 12.723.497 4.788.219-20.658.775 0,00023 Placebo 1.090.897 -4.293.285-6.475.081 - - -IC: intervalo de confianza, MC: mínimos cuadrados

Basándose en un análisis de varianza de medidas repetidas de modelo mixto que incluye tratamiento, visita y visita por interacción de tratamiento y valor inicial de número de O. formigenes como covariable.

El valor inicial de O. formigenes se definió como la última evaluación sin fallos y válida antes de la primera dosis del fármaco de estudio.

Cambio en la concentración de oxalato plasmático y correlación con función renal

La correlación entre oxalato plasmático y función renal al iniciar el estudio fue estadísticamente significativa (Tabla 6).

T l : rr l i n nr n nr i n x l l m i f n i n r n l TF l ini i r l i

Para la población completa del estudio, hubo una correlación negativa entre el valor inicial de oxalato plasmático y TFGe (r = -0,508, p < 0,007). La concentración media de oxalato plasmático para la población completa del estudio fue 14,7 pmol/l. Los pacientes con TFGe > 90 ml/min/1,73 m2 tuvieron una concentración media de oxalato plasmático de 10,2 pmol/l mientras que los pacientes con una TFGe < 90 ml/min/1,73 m2 tuvieron una concentración media de oxalato plasmático de 23,7 pmol/l. En el estudio OC5-DB-01, la concentración de oxalato plasmático en el grupo de placebo con enfermedad avanzada (TFGe < 95 ml/min/1,73 m2) aumentó con 2,95 pmol/l durante 8 semanas, mientras que en el grupo de OC5 ya después de 8 semanas no aumentó en la misma medida. La concentración de oxalato plasmático se correlaciona negativamente con la función renal (Tabla 6 anterior). Dado que la disminución de la función renal es indicativa de progresión de HOP, el cambio en el oxalato plasmático también es una medida del avance de la enfermedad. La acumulación de oxalato plasmático seguida de cristalización de oxalato cálcico es, en última instancia, el factor impulsor de la enfermedad. Al impactar en el aumento de la concentración de oxalato plasmático con el tiempo, OC5 puede retrasar o detener la progresión de la enfermedad (Tabla 7).

Tabla 7: Sumario del análisis de cambio de medidas repetidas desde el valor inicial en la concentración de oxalato l m i rn l l n l i -DB- 1 r n f n i n r n l

Cambio en la concentración de oxalato plasmático y correlación con el recuento de Oxalobacter

Hubo una correlación negativa entre el cambio en la concentración de oxalato plasmático y el cambio en el genotipo 1 de O. formigenes, de modo que la concentración de oxalato plasmático disminuyó con el aumento del recuento del genotipo 1 de Oxalobacter. Esta correlación alcanzó significación estadística (máx. r = 0,624; p = 0,040) (Tabla 8) en la semana 4 de tratamiento. Este hallazgo sugiere que las bacterias O. formigenes introducidas son capaces de metabolizar el oxalato libre que se origina a partir del plasma.

Tabla 8: Correlación entre el cambio en la concentración de oxalato plasmático desde el valor inicial (pmol/l) y ____________________ cambió en el genotipo 1 de O. formigenes desde el valor inicial____________________ Semana de OC5 (N = 14)

tratamiento N R P

Semana 4 11 -0,624 0,040

Semana 8 10 -0,148 0,684

El cambio se calcula como el valor posterior al inicial menos el valor inicial. Las correlaciones son valores r de Pearson.

Impacto en la función renal

En pacientes con un valor inicial de TFGe < 90 ml/min/1,73 m2, hubo tendencia de disminución de nitrógeno ureico en sangre (BUN) desde el valor inicial en el grupo de OC5 y aumento en el grupo de placebo (diferencia media de MC desde el valor inicial después de 8 semanas, OC5: -3,95 mg/dl; placebo: 5,24 mg/dl; p = 0,085) (Tabla 9).

Tabla 9: Análisis de cambio de medidas repetidas desde el valor inicial de nitrógeno ureico en sangre (mg/dl) en ________________________pacientes con valor inicial de TFGe < 90 ml/min/1,73 m2________________________ Semana de Parámetro Cambio desde el valor inicial de nitrógeno ureico en sangre (mg/dl) tratamiento

OC5 Placebo

Semana 4 N 6 3

Media de MC (EE) -3,19 (2,202) 4,29 (3,278) Valor p 0,095

(continuación)

Semana de Parámetro Cambio desde el valor inicial de nitrógeno ureico en sangre (mg/dl) tratamiento

OC5 Placebo

Semana 8 N 7 3

Media de MC (EE) -3,95 (2,566) 5,24 (3,920) Valor p 0,085 -MC: mínimos cuadrados; TFGe: tasa de filtración glomerular estimada; EE: error estándar

La diferencia media de mínimos cuadrados desde el valor inicial en el volumen de diuresis entre los grupos de OC5 y placebo en la semana 2 de tratamiento fue -235,2 ml en el grupo de OC5 y 242,3 ml en el grupo de placebo; esta diferencia alcanzó significación estadística (p = 0,039). En la semana 6 de tratamiento, la diferencia media de MC desde el valor inicial en la diuresis entre los grupos de OC5 y placebo fue -453,7 ml en el grupo de OC5 y 375,4 ml en el grupo de placebo y esto también alcanzó significación estadística (p = 0,001) (Tabla 10). En la semana 8, la diferencia fue una fuerte tendencia, pero no alcanzó significación estadística (p = 0,141). Todos los pacientes, tanto los pacientes tratados con compuesto activo (OC5) y los pacientes tratados con placebo en el estudio, recibieron las mismas instrucciones con respecto a la ingesta de líquidos.

Tabla 10: Análisis de medidas de cambio repetidas desde el valor inicial en el volumen de orina (ml) Semana de Parámetro Cambio desde el valor inicial en el volumen de orina (ml) ^{tratamiento ... ,}OC5 (N = 14) Placebo (N = 14)

Semana 2 Media de MC (EE) -235,2 (149,93) 242,3 (160,16)

Valor p 0,039 -Semana 4 Media de MC (EE) -246,0 (176,66) -163,0 (172,71)

Valor p 0,739 -Semana 6 Media de MC (EE) -453,7 (160,23) 375,4 (165,13)

Valor p 0,001 -Semana 8 Media de MC (EE) -392,2 (139,72) -82,7 (148,25)

Valor p 0,141 -

MC: mínimos cuadrados; EE: error estándar

El volumen de orina es el volumen de orina recogida en un periodo de 24 h.

Estos análisis post hoc indicaron que el tratamiento con OC5 tuvo un posible beneficio clínico. El BUN reducido y la disminución de la diuresis en el grupo de OC5 sugieren que la reabsorción renal de agua y la capacidad de concentración de orina estaban mejorando en estos pacientes. La publicación reciente de Zhao et al., 2016, concluye que el volumen urinario generalmente está aumentado en pacientes con HOP y que el volumen urinario en el momento del diagnóstico se correlaciona negativamente con la TFGe (p = 0,001). Aunque un volumen mayor podría reflejar recomendaciones para aumentar la ingesta de líquidos en pacientes con HOP, los autores sugieren una interpretación alternativa de que los volúmenes urinarios aumentados reflejan una capacidad de concentración de orina disminuida entre pacientes con HOP que tienen una lesión tubulointersticial establecida. Los hallazgos de los investigadores respaldan estas observaciones, y el tratamiento con OC5 indicaría un efecto de tratamiento beneficioso para la capacidad de reabsorción de agua de los riñones. El nitrógeno ureico en sangre (BUN), que es un marcador de lesión tubular, está muy elevado en pacientes con HOP. El hallazgo de que el tratamiento con OC5 tendía a reducir BUN también podría indicar un efecto beneficioso del tratamiento para el riñón.

Impacto en marcadores inflamatorios

Se sabe que los cristales de oxalato cálcico provocan respuestas inflamatorias [Worcester et al., 2013; Anders et al., 2013]. Hubo una tendencia a que el número de leucocitos totales disminuyera en pacientes tratados con OC5 y aumentara en pacientes tratados con placebo desde el inicio (p = 0,067 en la semana 8). La diferencia en el cambio de eosinófilos desde el inicio fue estadísticamente significativa en la semana 8 de tratamiento (p = 0,044). También hubo una tendencia a que el número de linfocitos disminuyera en pacientes tratados con OC5 y aumentara en pacientes tratados con placebo (Tabla 11). La disminución significativa de eosinófilos y la tendencia a disminuir los recuentos leucocitarios linfocitarios en pacientes tratados con OC5 y aumentar en pacientes tratados con placebo durante 8 semanas indicaron que el tratamiento con O. formigenes tiene efectos en la inflamación asociada a HOP. Sin embargo, al comparar los efectos de las dos formulaciones, OC3 y OC5, es evidente que OC5 ya tiene un efecto mejorado después de 8 semanas de tratamiento. Además, como se indica en la Tabla 11, no hubo tendencia positiva para OC3.

Tabla 11: Sumario de análisis de cambio de medidas repetidas desde el valor inicial en el número de glóbulos ________________________________________ blancos (OC5-DB-01)________________________________________ Leucocitos totales (109/l)

Semana de Parámetro OC5 (N = 14) Placebo OC5-placebo OC3-placebo OC3-DB-02 tratamiento (N = 14) (véase la Tabla 15) Semana 4 Media de MC (EE) -0,23 (0,389) 0,49 (0,375) -0,72

Valor P 0,196 -Semana 8 Media de MC (EE) -0,28 (0,565) 1,26 (0,565) -1,54 -0,45

Valor P 0,067 - 0,338

Linfocitos (109/l)

Semana de Parámetro OC5 (N = 14) Placebo OC5-placebo

tratamiento (N = 14)

Semana 4 Media de MC (EE) -0,15 (0,132) 0,19 (0,128) -0,34

Valor P 0,071 -Semana 8- Media de MC (EE) -0,20 (0,187) 0,27 (0,187) -0,47

Valor P 0,089 -Eosinófilos (109/l)

Semana de Parámetro OC5 (N = 14) Placebo OC5-placebo

tratamiento (N = 14)

Semana 4 Media de MC (EE) -0,06 (0,036) 0,00 (0,036) -0,06

Valor P 0,267 -Semana 8 Media de MC (EE) -0,06 (0,042) 0,07 (0,042) -0,13

Valor P 0,044 -MC: Mínimos cuadrados; EE: error estándar

ESTUDIO CLÍNICO SIN OCULTACIÓN USANDO LA NUEVA FORMULACIÓN

El plan de desarrollo clínico para OC5 también incluye un estudio multicéntrico de fase 2, sin ocultación, para evaluar la eficacia de OC5 para reducir el oxalato plasmático en sujetos con hiperoxaluria primaria que se encuentran en diálisis. Los pacientes reciben tratamiento durante 6 semanas con el fármaco del estudio, con 4 semanas de mediciones iniciales antes del inicio de la medicación del estudio y 4 semanas de mediciones después de la administración del fármaco. A partir de ese momento, la ampliación del tratamiento continúa anualmente.

Uno de los pacientes es un hombre de 59 años con un nivel inicial de oxalato en plasma muy elevado. Durante el primer año de ampliación del estudio, la proporción entre oxalato plasmático total y soluble disminuyó de 2,5 a 1,9. La cantidad de oxalato plasmático libre se ha estancado varias veces alrededor del límite de saturación de oxalato cálcico, 50-60 |jmol/l, seguido cada vez por un aumento en la concentración de oxalato plasmático total en la siguiente medición (es decir, de la semana 4 a la semana 5, de las semanas 16-20 a la semana 24, de la semana 32 a la semana 36 y de la semana 40 a la semana 44 (Tabla 12)). Estos hallazgos sugieren que a medida que se disuelven diversos compartimentos de depósitos tisulares de oxalato, el oxalato satura primero las proteínas plasmáticas y a continuación se transfiere al oxalato plasmático libre. A medida que Oxalobacter extrae oxalato plasmático libre hacia los intestinos, se libera más oxalato de las proteínas plasmáticas.

Tabla 12: Oxalato plasmático total y soluble (libre) (Pox; jmol/l) con el tiempo durante el tratamiento con Oxalobacter formigenes

Semana Pox Total (jmol/l) Pox libre (jmol/l) Proporción

0 162 64 2,5

4 134 55 2,4

8 155 78 2,0 (continuación)

Semana Pox Total (pmol/l) Pox libre (pmol/l) Proporción

12 125 68 1,8

16 124 45 2,8

20 112 50 2,2

24 137 59 2,3

28 138 60 2,3

32 126 57 2,2

36 137 67 2,0

40 121 60 2,0

44 154 79 1,9

48 164 86 1,9

52 144 74,3 1,9

ANÁLISIS DE ESTUDIOS CLÍNICOS PREVIOS Y ANÁLISIS INTEGRADO DE ESTUDIOS USANDO FORMULACIONES FARMACÉUTICAS PREVIAS Y PRESENTES

Cambio en la concentración de oxalato plasmático usando la formulación de OC3 previa

En un estudio previo con OC3, se mostró que la progresión natural del oxalato plasmático para el grupo de placebo durante 24 semanas fue de 3,25 pmol/l para pacientes que tenían una TFGe inicial < 90 ml/min/1,73 m2.

El grupo tratado con OC3 se mantuvo estable o redujo la concentración de oxalato plasmático, lo que indica una progresión de la enfermedad más lenta o detenida (Tabla 13).

Tabla 13: Sumario del análisis de cambio de medidas repetidas desde el valor inicial en la concentración de oxalato plasmático (pmol/l) usando la formulación de OC3 previa (estudio de OC3-DB-02 y subgrupos con función renal

Cambio en la excreción de calcio en el análisis integrado de todos los estudios realizados con doble ocultación Ante los hallazgos inesperados de que el grupo de OC5 aumentó la excreción urinaria de oxalato por excreción urinaria de creatinina mientras que el grupo de placebo disminuyó y que OC5 puede influir en la tasa de acumulación de la concentración de oxalato plasmático con el tiempo, se realizó un análisis integrado de todos los estudios con doble ocultación con tratamiento con Oxalobacter formigenes. Los datos del análisis integrado de los estudios con doble ocultación de los investigadores con OC3 y OC5 frente a placebo muestran que la excreción urinaria de calcio aumentó con el tiempo en pacientes con función renal baja, es decir, pacientes que es probable que hayan acumulado depósitos de oxalato (TFGe < 90 ml/min/1,73 m2). Este hallazgo es estadísticamente significativo (p = 0,007) (Tabla 14). Tabla 14: Cambio en la excreción de calcio (pmol/24 h) como respuesta al tratamiento con Oxalobacter formigenes

Sin desear ligarse a ninguna teoría, se postula que el tratamiento con Oxalobacter, mediante el mecanismo de retirada de oxalato libre del plasma, moviliza los depósitos de oxalato cálcico. Los hallazgos de que la excreción de oxalato y la excreción de calcio aumentan en los estudios clínicos respaldan esta hipótesis.

Impacto en marcadores de inflamación

Al igual que los hallazgos para el tratamiento con OC5, el tratamiento con OC3 tiene impacto en marcadores inflamatorios. En el estudio OC3-DB-02 (Tabla 15) hubo una reducción significativa de leucocitos en el grupo tratado con OC3 tras 24 semanas de tratamiento. La diferencia con el placebo seguía siendo significativa 4 semanas después de detener el tratamiento. Sin embargo, al comparar los efectos de las dos formulaciones, OC3 y OC5, es evidente que OC5 ya tiene un efecto mejorado después de 8 semanas de tratamiento.

T l 1 : Im n m r r infl m ri m r l r mi n n

Claims (17)

REIVINDICACIONES

1. Una cápsula con revestimiento entérico para administración oral a un sujeto que la necesita, comprendiendo dicha cápsula una composición farmacéutica que comprende:

(i) de un 10 % a un 25 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

(ii) de un 50 % a un 65 % en peso seco de sacarosa;

(iii) de un 10 % a un 30 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes;

en donde dicha cápsula con revestimiento entérico es para distribución de Oxalobacter formigenes al intestino delgado y/o al íleon de dicho sujeto, y

en donde la actividad degradante de oxalato in vitro de Oxalobacter formigenes, cuando está presente en dicha cápsula con revestimiento entérico, no es inferior a (NLT) 100 mmol/cápsula/19 horas y en donde dicha cápsula comprende Oxalobacter formigenes en una cantidad de 109 a 1010 UFC.

2. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende de un 15 % a un 25 %, tal como de un 15 % a un 20 %, en peso seco de Oxalobacter formigenes, o de un 17 % a un 22 % en peso seco de Oxalobacter formigenes.

3. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en donde los excipientes y/o agentes crioconservantes en (iii) se seleccionan entre el grupo que consiste en maltodextrina, oligofructosa y alginato.

4. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende de un 15 % a un 21 % en peso seco de maltodextrina, tal como de un 16 % a un 19 % en peso seco de maltodextrina.

5. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende

de un 1 % a un 5 % en peso seco de oligofructosa;

de un 0,5 % a un 2 % en peso seco de alginato, tal como de un 0,5 % a un 1,5 % en peso seco de alginato.

6. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde dicha composición comprende:

(i) de un 17 % a un 22 % en peso seco de Oxalobacter formigenes,

(ii) de un 52 % a un 62 % en peso seco de sacarosa;

(iii) de un 17 % a un 25 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes.

7. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde dicha composición comprende:

(i) un 19 % en peso seco de Oxalobacter formigenes;

(ii) un 57 % en peso seco de sacarosa;

(iii) un 21 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes, y el resto de agua.

8. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con la reivindicación 7, en donde dicha composición comprende, en peso seco de dichos uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes: un 1 % de alginato, un 17 % de maltodextrina y un 3 % de oligofructosa.

9. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde dicha composición comprende:

(i) un 19 % ± 1-3 % en peso seco de Oxalobacter formigenes;

(ii) un 57 % ± 1-3 % en peso seco de sacarosa;

(iii) un 21 % ± 1-3 % en peso seco de uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes; opcionalmente en donde dicha composición comprende, en peso seco de dichos uno o más agentes crioconservantes y/o excipientes: un 1 % ± 1 % de alginato, un 17 % ± 1-3 % de maltodextrina y un 3 % ± 1-3 % de oligofructosa.

10. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde dicha cápsula con revestimiento entérico no muestra esencialmente desintegración en una hora de incubación en fluido gástrico simulado (FGS) que tiene un pH de aproximadamente 1,2 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 3,2 mg/ml de pepsina a una temperatura de aproximadamente 37 °C, pero en donde se detecta un inicio de desintegración de dicha cápsula en aproximadamente una hora en fluido intestinal simulado (FIS) que tiene un pH de aproximadamente 6,8 ± 0,1 y que comprende aproximadamente 10 mg/ml de pancreatina a aproximadamente 37 °C.

11. La cápsula con revestimiento entérico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para uso como medicamento.

12. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con la reivindicación 11, en donde dicho uso es para tratar y/o prevenir un trastorno relacionado con oxalato.

13. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con la reivindicación 11, en donde dicho uso es para tratar y/o prevenir trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico, tales como trastorno(s) relacionado(s) con sedimentación de oxalato cálcico que implican hiperoxalemia.

14. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con la reivindicación 11, en donde dicho uso es para tratar y/o prevenir inflamación relacionada con oxalato, opcionalmente en donde dicho trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en hiperoxaluria entérica, inflamación en el epitelio intestinal o tubular, trastornos de conducción cardíaca, vulvodinia, enfermedad idiopática de cálculos renales de oxalato cálcico (urolitiasis), enfermedad inflamatoria intestinal (EII), sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SIBS), gastroenteritis, gastritis, enteritis, enterocolitis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y un trastorno relacionado con oxalato en un paciente tratado con un inhibidor de lipasa gastrointestinal.

15. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 12 a 13, en donde dicho trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en hiperoxaluria, hiperoxaluria primaria e hiperoxaluria secundaria.

16. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 12 a 13, en donde dicho trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en hiperoxalemia, acumulación de oxalato en plasma sanguíneo, oxalosis asociada a enfermedad renal crónica (ERC) y enfermedad renal en fase terminal (ESRD) tal como en el síndrome de intestino corto (SIC), cirugía bariátrica con resección yeyunal/ileal o procedimientos en Y de Roux, enfermedad de Zellweger, cánceres con resección yeyunal/ileal, e infecciones renales con Aspergillus niger y pacientes con ESRD en diálisis, opcionalmente en donde dicha composición es capaz de disolver cristales de oxalato cálcico y/o aumentar la excreción urinaria de oxalato y ralentizar o detener la progresión de ERC en un sujeto.

17. La cápsula con revestimiento entérico para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16, en donde dicha composición farmacéutica se administra en una cantidad de aproximadamente 109 a aproximadamente 1010 UFC al menos dos veces al día durante un período de tiempo continuo, tal como un período que dura al menos meses o años a un sujeto que la necesita, opcionalmente en donde dicho período dura meses o años, tal como de 1, 2, 3, 4, 5, 6 o hasta 12 meses, o 1, 2, 3, 4, o 5 o incluso más años, o hasta que los niveles de oxalato plasmático se hayan reducido, y se mantengan en un nivel menor, más saludable, tal como en aproximadamente 1-3 pmol/l.