ES2925982T3 - Utilización de agonistas parciales D3 de dopamina para el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona el uso de agonistas parciales D3 para tratar o inhibir el síndrome de piernas inquietas (SPI) y enfermedades neurodegenerativas, en particular agonistas parciales D3/antagonistas D2. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Utilización de agonistas parciales D3 de dopamina para el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central

[0001] El Síndrome de Piernas Inquietas (RLS (Restless Leg Syndrome), o Enfermedad de Willis Ekbom WED) es un trastorno del movimiento relacionado con el sueño con una prevalencia en la población que oscila entre el 9,4 % y el 15 %. Tiene lugar principalmente cuando el paciente está acostado y se manifiesta por el impulso de mover las piernas. Esto se asocia con las sensaciones anormales en las extremidades que se reducen durante la acción motora y con un patrón circadiano que tiene su pico durante la noche.

[0002] Es un trastorno incapacitante del sistema nervioso central (SNC), y existen evidencias que apoyan el uso de agonistas de dopamina. Misteriosamente, la dopamina hipotalámica tiene un ritmo circadiano con concentraciones más bajas observadas durante la noche, cuando aparece el RLS (Carlsson et al., Psychopathology of affective disorders, 75-85, 1980). Adicionalmente, el tratamiento primario de RLS involucra agonistas completos D2/D3 de dopamina. La primera evidencia de que la estimulación de receptores de dopamina era beneficiosa durante el RLS fue un ensayo con cinco paciente que mostraba que el tratamiento con L-dopa más benserazida, un agonista de dopamina completo indirecto también conocido por compensar el déficit de dopamina en pacientes con enfermedad de Parkinson, completamente remedió los síntomas del RLS en estos cinco pacientes (Akpinar, S. Arch. Neurol., 1982, 39(11), 739). Adicionalmente, el tratamiento con bromocriptina, un agonista de dopamina completo directo, tuvo un efecto similar. Hening et al. (Sleep vol.27, 3, 2004, 560-583) también describió el tratamiento dopaminérgico de RLS con agonistas del receptor D2.

[0003] Desde entonces, varios otros agonistas completos D2/D3 de dopamina utilizados como agentes antiparkinsonianos se han desarrollado y se utilizan actualmente en el tratamiento de RLS: Pramipexol, Ropinirol y Rotigotina (Clemens et al., Advances in Pharmacology, 2019, 84, 79). Todos los agentes dopaminérgicos utilizados actualmente para el tratamiento de RLS son agonistas completos en los receptores D3 y D2.

[0004] Las enfermedades neurodegenerativas, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Huntington, comparten un mecanismo patogenético celular y molecular común que involucra la agregación y la deposición aberrante de proteína o péptido mal plegados.

[0005] La enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington y enfermedad de Alzheimer son enfermedades degenerativas que son consecuencia de la acumulación en las neuronas del Sistema Nervioso Central (SNC) de proteínas tóxicas como parkin, huntingtin o beta-amiloide. Estas proteínas pueden eliminarse utilizando diferentes procedimientos celulares entre los cuales la autofagia es uno muy eficaz (Wang et al International Journal of Molecular Sciences, 2018, 19, 1422-0067).

[0006] La autofagia representa una vía principal de degradación de proteínas celulares agregadas y orgánulos disfuncionales. Estudios recientes han demostrado que la sobrerregulación de autofagia puede llevar a niveles disminuidos de estas proteínas tóxicas y es beneficiosa en el contexto de envejecimiento y diferentes modelos de enfermedades neurodegenerativas. Entender las vías de señalización involucradas en la regulación de la autofagia es crucial para el desarrollo de nuevas terapias.

[0007] La autofagia podría no ser suficientemente eficaz en las enfermedades mencionadas anteriormente y existe una ventaja obvia en su estimulación farmacológica. En este contexto, varios autores han descrito que la activación de los receptores D2 y D3 de dopamina por pramipexol y quinpirol podría promover la activación de autofagia en varias líneas celulares, que incluyen neuronas primarias (Luis-Ravelo et al. Experimental Neurology, 2018, 299, 137-147; Wang et al. Autophagy, 2015, 11,2057-2073).

[0008] En particular se mostró que la autofagia podría potenciarse utilizando pramipexol, un agonista completo de D3/D2 y su efecto era bloqueado por un antagonista de receptor D3 puro. Aunque esto indica que la estimulación completa del receptor D3 estimula la autofagia y, por consiguiente, previene la degeneración neuronal, el efecto de un agonista parcial del receptor D3 no se describió (Wang et al. 2018 (tal como se menciona anteriormente); Barroso-Chinea et al. Autophagy, 2019, 1-17).

[0009] Son necesarios tratamientos de larga duración para estas enfermedades. Se han notificado varios problemas en el tratamiento a largo plazo de la enfermedad, que incluye pérdida de eficacia con el tiempo y varios efectos secundarios asociados a los agonistas completos de D2 y/o D3.

[0010] Náuseas y vómitos son un efecto adverso común debido a la estimulación de receptor D2 por agonistas de D2, y los agonistas completos de D2/D3 de dopamina utilizados actualmente promueven la pérdida de control conductual que conduce a trastornos, tales como adición al juego o hipersexualidad. También, el aumento, es decir, una exacerbación de síntomas después del uso durante un largo periodo de tiempo de los agentes mencionados anteriormente, presuntamente que se debe a la sobreestimulación del receptor D2 o D3, es una desventaja seria de los agonistas completos de D2/D3 de dopamina utilizados actualmente.

[0011] Por lo tanto, aún existe la necesidad de proporcionar un tratamiento eficaz para trastornos del sistema nervioso central (SNC), libre de los efectos secundarios mencionados anteriormente.

[0012] WO 2007/148208 da a conocer ligandos del receptor D3, que pueden ser antagonistas, o agonistas inversos o agonistas parciales o agonistas completos. Di Ciano et al. (Neuropsychopharmacology 44, 1284-1290, 2019) dio a conocer que uno de los compuestos divulgados en el presente documento (BP1.4979) es un agonista parcial de D3 con la propiedad de antagonista de D2 también.

[0013] Ahora se ha descubierto de manera sorprendente que este compuesto con una actividad de agonista parcial de D3 y actividad de antagonista de D2 es completamente activo en trastornos del sistema nervioso central (SNC), aunque es un agonista parcial de D3. De hecho, nunca se había propuesto que un agonista parcial del receptor D3 podría ser tan eficaz como un agonista completo de D3 en el tratamiento de estas enfermedades.

[0014] De acuerdo con un primer objetivo, la presente invención se refiere al compuesto BP1.4979, de fórmula:

W-(4-{2-[4-(3-Cianofenil)piperazin-1-il]etil}ciclohexil)-3-metoxipropanamida

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o sus hidratos o sales hidratadas, o las estructuras polimórficas, cristalinas del mismo,

para utilizar en la prevención o el tratamiento de un trastorno del sistema nervioso central (SNC), que es el síndrome de piernas inquietas (RLS), y en el que se administra una dosis elegida entre 10 y 15 mg dos veces al día (bis in die).

[0015] BP1.4979 es un agonista parcial de D3 y un antagonista de D2. La estructura y el procedimiento de preparación de BP1.4979 se dan a conocer en WO 2007/148208.

[0016] Se descubrió que es un agonista de receptor D3 altamente potente, selectivo, pero parcial: Es activo en el receptor D3 de dopamina humano clonado con una constante de disociación de 1,2 nM y una actividad intrínseca del 30% o 70% cuando se evaluó en dos pruebas diferentes (a saber, mitogénesis y ensayo de genes reporteros, respectivamente). En comparación, muestra solamente un valor de Ki de 661 nM en el receptor D2 humano, en el cual se comporta como un antagonista competitivo puro. Además, es inactivo en otros 160 receptores, canales y enzimas.

[0017] Sin embargo, a pesar de su perfil de agonista parcial de D3, se descubrió de manera sorprendente que era tan potente como la dopamina en sí o agonistas completos de D3 de dopamina.

[0018] La actividad de un agonista parcial de D3, especialmente en el mismo grado que el de un agonista completo de D3 es, por lo tanto, inesperada.

[0019] Adicionalmente, los agonistas parciales de D3 suponen menos efectos secundarios, tales como aquellos implicados por los agonistas completos de D3 (aumento en particular).

[0020] También, los antagonistas de D2 son agentes antieméticos y, por lo tanto, carecen de efectos secundarios, tales como náuseas y vómitos, que se presentan para los agonistas de D2 y que se utilizan hasta la fecha en el tratamiento de RLS.

[0021] Además, la selectividad de los receptores de D3 en relación con los receptores D2 es altamente inesperada, dado que los receptores D2 y D3 son proteínas altamente homólogas.

[0022] En lo que respecta a RLS se refiere a que, se descubrió que BP1.4979 era tan potente como la propia dopamina o los agonistas completos de dopamina en RLS.

[0023] La actividad de un agonista parcial de D3/antagonista de D2 era altamente inesperada dado que hasta la fecha la actividad en RLS se ha logrado presuntamente solamente mediante la estimulación completa de manera preferencial del receptor D3:

- existe un alto predominio del receptor D3 inhibidor en las áreas de procesamiento sensorial de la médula espinal (asta dorsal), que son la puerta de entrada del procesamiento sensorial involucrado en los movimientos involuntarios de las extremidades que se desarrollan durante el sueño en RLS;

- los agonistas no selectivos de dopamina actúan como agonistas del receptor D3 a concentraciones inferiores que en los receptores D2 y también son eficaces en el RLS en dosis relativamente bajas en comparación con las dosis para el tratamiento de enfermedad de Parkinson (supuestamente a través de la estimulación del receptor D2);

- animales sin el receptor D3 (“knockout”) muestran algunos de los síntomas de RLS.

[0024] Por consiguiente, basándose en estas observaciones, solamente se podría esperar que la actividad en el RLS depende de la afinidad hacia el receptor D3, y que un agonista completo de D3 implicaría una actividad superior a la de un agonista parcial de D3.

[0025] De manera similar, EP, EA y EH son enfermedades crónicas en las que la actividad sostenida en el receptor D3 es deseable.

[0026] Tal como se indica anteriormente, los agonistas completos del receptor D3 estimulan el mecanismo de autofagia, lo que lleva a una reducción en agregados de proteínas tóxicas, tales como parkin, huntingtina o betaamiloide, un efecto que se bloqueó utilizando un antagonista del receptor D3. Como un agonista parcial de D3 presenta una actividad con un efecto máximo muy inferior al del agonista completo, difícilmente se podría predecir la obtención de eficacia de un agonista parcial, tal como BP1.4979, similar a la de los agonistas completos en estas patologías.

[0027] De manera ventajosa, BP1.4979, como agonista parcial, es menos propenso a inducir la desensibilización del receptor que un agonista completo.

[0028] Tal como se utiliza en el presente documento:

Un «antagonista» hace referencia a un ligando que puede unirse a un receptor, pero no consigue activar la respuesta fisiológica de dicho receptor.

[0029] Un «agonista» define un ligando que puede unirse a un receptor y desencadena una respuesta fisiológica de dicho receptor.

[0030] El término «agonista completo» hace referencia a un agonista que se une a y activa un receptor con la respuesta máxima que un agonista pueda provocar en el receptor.

[0031] El término «agonista parcial» designa un agonista que también se une a y activa un receptor determinado, pero tiene solamente una eficacia parcial en el receptor, en relación a un agonista completo, incluso a la máxima ocupación del receptor.

[0032] La potencia de un agonista define la cantidad de dicho agonista para provocar la respuesta deseada: se relaciona de manera inversa con la mitad de la concentración máxima efectiva (EC50) es decir, la concentración de dicho agonista que induce una respuesta a medio camino entre la referencia y el máximo después de un tiempo de exposición específico.

[0033] Habitualmente, un agonista completo de D3 provoca una eficacia del 100% (o actividad intrínseca) con relación a un agonista completo de referencia hacia dicho receptor D3.

[0034] Habitualmente, un agonista parcial de acuerdo con la invención provoca una eficacia (o actividad intrínseca) inferior a 100% en relación con un agonista completo de referencia hacia el receptor D3, comprendido de manera general entre 10 y 90%, particularmente entre 20 y 80%.

[0035] Un agonista completo de referencia hacia el receptor D3 se escoge de manera general entre agonistas endógenos, tales como dopamina. También se puede escoger entre agonistas completos de referencia, tales como quinelorano o 7-OHDPAT.

[0036] La actividad intrínseca de un compuesto hacia un receptor puede medirse utilizando pruebas in vitro, tales como mitogénesis (Chio et al., Mol. Pharmacol, 45: 51-60, 1994), ensayo de gen informador (Fitzgerald et al., Anal. Biochem. 275: 54-61, 1999), o flujo de calcio (Moreland et al., Biochem. Pharmacol. 68:761-772, 2004).

[0037] «Ligando» hace referencia a la capacidad de un compuesto para unirse a un receptor o receptores D2 y/o D3 dopaminérgicos para formar un complejo con el mismo/los mismos.

[0038] El término «afinidad» muestra la fuerza impulsora intermolecular entre el ligando (compuesto) y el receptor. En particular, la unión de ligando con alta afinidad implica que una concentración relativamente baja de un ligando es adecuada para ocupar de manera máxima un sitio de unión a ligando del receptor o receptores D2 y/o D3, mientras que una unión con afinidad baja implica que sea necesaria una concentración relativamente alta de un ligando antes de que se ocupe de manera máxima el sitio de unión.

[0039] Tal como se utiliza en el presente documento, «sales farmacéuticamente aceptables» hace referencia a derivados de los compuestos divulgados, en los que el compuesto original se modifica preparando sales ácidas o básicas de los mismos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no toxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto original formadas, por ejemplo, a partir de ácidos no tóxicos inorgánicos u orgánicos. Por ejemplo, tales sales no tóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos, tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico y similares; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos, tales como acético, propanoico, succínico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, bencenosulfónico, glucurónico, glutámico, benzoico, salicílico, toluenosulfónico, oxálico, fumárico, maleico y similares. Otras sales de adición incluyen sales de amonio, tales como trometamina, meglumina, epolamina, etc., sales metálicas, tales como sodio, potasio, calcio, zinc o magnesio. Se prefieren las sales de clorhidrato y oxalato.

[0040] Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto original que contiene una resto básico o ácido utilizando procedimientos químicos convencionales. Generalmente, tales sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o el ácido apropiados en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de los dos. Generalmente, se prefieren medios no acuosos, tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Las listas de sales adecuadas se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, página 1418, la divulgación de las cuales se incorpora en el presente documento por referencia.

[0041] La actividad de un compuesto en RLS puede predecirse por su eficacia en modelos de animales relevantes. Los modelos de animales que pueden predecir el RLS se describen en Ondo WG et al. (Movement Disorders, 2000, 15, 154-158) y Clemens S et al. (J. Neurosci. 2004, 24, 11337-11345).

[0042] De manera particular, la invención proporciona un ensayo in vivo que predice la actividad en el RLS, tal como en un roedor. Se da a conocer un procedimiento de predicción de la actividad en el RLS para compuestos de prueba, que comprende hacer funcionar dicho compuesto en un modelo electrofisiológico de reflejo monosináptico de médula espinal en la rata.

[0043] Más particularmente, se da a conocer un procedimiento de cribado in vivo para identificar un fármaco candidato para el tratamiento del RLS, comprendiendo dicho procedimiento realizar un ensayo in vivo que comprende

- hacer funcionar un modelo electrofisiológico de reflejo monosináptico de médula espinal en un roedor con un compuesto de prueba y un compuesto de referencia;

- comparar la respuesta medida del compuesto de prueba con la respuesta medida de un compuesto de referencia en dicha prueba a una concentración deterrminada;

- seleccionar dicho compuesto de prueba si su actividad es superior a la del compuesto de prueba.

[0044] De acuerdo con una realización, este modelo comprende:

- estimular la raíz sensible y registrar el potencial de acción resultante en la raíz motora;

- aplicar en la asta dorsal un compuesto de referencia o un compuesto de prueba

- evaluar la inhibición del reflejo monosináptico con el compuesto de referencia o el compuesto de prueba.

[0045] De acuerdo con una realización, la respuesta medida es la inhibición de la transmisión sináptica.

[0046] Más particularmente, la respuesta medida en esta prueba refleja la entrada moduladora inhibidora de una vía neuronal dopaminérgica hipotálamo-dorsoespinal descendente, que aparece defectuosa en el RLS, lo que da lugar a una exageración del reflejo en esta enfermedad.

[0047] De acuerdo con una realización, el compuesto de referencia es un agonista completo del receptor D2/D3 de dopamina, tal como Pramipexol, utilizado actualmente en el RLS, dopamina o 7-OHDPAT. De acuerdo con una realización, dicho compuesto de prueba es un agonista parcial de D3.

[0048] La identificación de estos sujetos que necesitan el tratamiento de enfermedades y afecciones descritas en el presente documento se encuentra dentro de la capacidad y el conocimiento de un experto en la técnica. Un experto clínico en la técnica puede identificar fácilmente, utilizando pruebas clínicas, exámenes físicos, pruebas genéticas y el historial médico/familiar, a aquellos sujetos que necesitan dicho tratamiento.

[0049] De acuerdo con una realización, la dosis recomendada de B1.4979 puede estar comprendida entre 10 y 100 mg y preferiblemente entre 10 y 15 mg dos veces al día (bis in die). Sin embargo, una cantidad terapéuticamente eficaz de BP1.4979 se puede determinar fácilmente por el especialista responsable, al igual que un experto en la técnica, mediante el uso de técnicas convencionales y observando los resultados obtenidos en circunstancias análogas. Para determinar la cantidad terapéuticamente eficaz el especialista responsable considera un número de factores, que incluyen, pero no se limitan a: los tipos de sujeto; su tamaño, edad y salud general; la enfermedad específica involucrada; el grado de implicación o la gravedad de la enfermedad; la respuesta del sujeto individual; el compuesto particular administrado; el modo de administración; la biodisponibilidad característica de la preparación administrada; la pauta de dosificación seleccionada; el uso de medicación que se administra simultáneamente; y otras circunstancias relevantes. La cantidad de BP1.4979, que se necesita para alcanzar el efecto biológico deseado, variará dependiendo de un número de factores, que incluyen la dosis del fármaco a administrar, las características químicas (por ejemplo, hidrofobicidad) de los compuestos empleados la potencias de los compuestos, el tipo de enfermedad, el estado de la enfermedad del paciente y la vía de administración.

[0050] «Farmacéuticamente» o «farmacéuticamente aceptable» se refiere a entidades moleculares y composiciones que no producen una reacción adversa, alérgica u otra reacción inapropiada cuando se administran a un animal o un humano, según corresponda.

[0051] Tal como se utiliza en el presente documento, «portador farmacéuticamente aceptable» incluye cualquier diluyente, adyuvante, excipiente o vehículo, tal como agentes conservantes, cargas, agentes disgregantes, agentes humidificantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensión, disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y que retrasan la absorción, y similares. Se conoce bien en la técnica el uso de dichos medios y agentes para las sustancias farmacéuticamente activas. Excepto en el caso en que algún medio o agente convencional sea incompatible con el principio activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. En las composiciones se pueden incorporar principios activos suplementarios.

[0052] En el contexto de la invención, el término «tratar» o «tratamiento», tal como se utiliza en el presente documento, significa revertir, mitigar, inhibir el progreso de, o prevenir el trastorno o la afección a los cuales se aplica dicho término, o uno o más síntomas de dicho trastorno o afección. «Cantidad terapéuticamente eficaz» significa una cantidad de un compuesto/medicamento, de acuerdo con la presente invención, eficaz en la producción del efecto terapéutico deseado. De acuerdo con la invención, el término «paciente» o «paciente que lo necesita» está destinado a un humano o un mamífero no humano afectado o posiblemente afectado por un trastorno neurofisiológico. Preferiblemente, el paciente es un humano.

[0053] En términos generales, los compuestos de esta invención pueden proporcionarse en una solución acuosa de tampón fisiológico que contiene de 0,1 a 10% p/v del compuesto para la administración parenteral. La dosis habitual oscila de 1 pg/kg a 0,1 g/kg de peso corporal por día; una dosis preferida oscila de 0,01 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal por día. Una dosis diaria preferida para humanos adultos incluye 5, 50, 100 y 200 mg, y una dosis equivalente en un niño humano. La dosis preferida de fármaco para la administración probablemente depende de variables, tales como el tipo y el grado de progresión de la enfermedad o el trastorno, el estado de salud general del paciente particular, la eficacia biológica relativa del compuesto seleccionado y la formulación del excipiente del compuesto y su vía de administración.

[0054] Los compuestos de la presente invención son capaces de ser administrados en formas de dosis unitaria, donde el término «dosis unitaria» significa una dosis única que es capaz de ser administrada a un paciente y que se puede manipular y envasar fácilmente, permaneciendo como una dosis unitaria físicamente y químicamente estable, que comprende o el compuesto activo en sí o una composición farmacéuticamente aceptable, tal como se describe a continuación en el presente documento. Por tanto, una dosis diaria habitual oscila de 0,01 a 10 mg/kg de peso corporal. A modo de guía general, las dosis unitarias para humanos oscilan de 1 mg a 100 mg por día. Preferiblemente, la dosis unitaria oscila de 1 a 500 mg administrados de una a cuatro veces por día, e incluso más preferiblemente, de 10 mg a 300 mg, dos veces por día. Los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden formular en composiciones farmacéuticas mezclándolos con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Tales composiciones pueden prepararse para su uso en administración oral, particularmente en forma de comprimidos o cápsulas; o administración parenteral, particularmente en forma de soluciones, suspensiones o emulsiones líquidas; o por vía intranasal, particularmente en forma de polvos, gotas nasales o aerosoles; o por vía dérmica, por ejemplo, por vía tópica o a través de parches transdérmicos.

[0055] Las composiciones se pueden administrar de manera conveniente en forma de dosificación unitaria y se pueden preparar utilizando cualquier método bien conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, tal como se describe en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a edición; Gennaro, A. R., Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Filadelfia, PA, 2000. Se pueden incluir agentes aglutinantes y/o materiales adyuvantes compatibles farmacéuticamente como parte de la composición. Las composiciones orales incluirán de manera genérica un portador diluyente inerte o un portador comestible.

[0056] Los comprimidos, pastillas, polvos, cápsulas, trociscos y similares pueden contener uno o más de cualquiera de los siguientes ingredientes o compuestos de una naturaleza similar: un aglutinante, tal como celulosa microcristalina o goma tragacanto; un diluyente, tal como almidón o lactosa; un disgregante, tal como almidón y derivados de celulosa; un lubricante, tal como estearato de magnesio; un glidante, tal como dióxido de silicio coloidal; un agente edulcorante, tal como sacarosa o sacarina; o un agente aromatizante, tal como menta o salicilato de metilo. Las cápsulas pueden estar en forma de una cápsula dura o una cápsula blanda, que generalmente se fabrican a partir de mezclas de gelatina mezcladas opcionalmente con plastificantes, así como también una cápsula de almidón. Adicionalmente, las formas de unidades de dosificación pueden contener otros materiales diferentes que modifican la forma física de la unidad de dosificación, por ejemplo, recubrimientos de azúcar, goma laca o agentes entéricos. Otras formas de dosificación orales, jarabe o elixir, pueden contener agentes edulcorantes, conservantes, colorantes, pigmentos y aromatizantes. Adicionalmente, los compuestos activos se pueden incorporar en preparaciones y formulaciones de disolución rápida, liberación modificada o liberación sostenida y en donde tales formulaciones de liberación sostenida son preferiblemente bimodales. Las formulaciones preferidas incluyen composiciones farmacéuticas en las que un compuesto de la presente invención se formula para la administración oral o parenteral, o más preferiblemente aquellas en las que un compuesto de la presente invención se formula como un comprimido. Los comprimidos preferidos contienen lactosa, almidón de maíz, silicato de magnesio, croscarmelosa sódica, povidona, estearato de magnesio o talco en cualquier combinación. Un aspecto de la presente divulgación es también que un compuesto de la presente invención puede incorporarse en un producto alimenticio o un líquido. Las preparaciones líquidas para la administración incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones estériles acuosas o no acuosas. Las composiciones líquidas pueden incluir también aglutinantes, tampones, conservantes, agentes quelantes, edulcorantes, agentes aromatizantes y colorantes, y similares. Los disolventes no acuosos incluyen alcoholes, propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y ésteres orgánicos, tales como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen mezclas de alcoholes y agua, medios tamponados y solución salina. Particularmente, un polímero de lactida biocompatible, biodegradable, copolímero de lactida/glicólido o copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno pueden ser excipientes útiles para controlar la liberación de los compuestos activos. Los vehículos intravenosos pueden incluir rellenos fluidos y de nutrientes, rellenos de electrolitos tales como aquellos basados en dextrosa de Ringer, y similares. Otros sistemas de administración parenteral potencialmente útiles para estos compuestos activos incluyen partículas de copolímero de etileno-acetato de vinilo, bombas osmóticas, sistemas de infusión implantables y liposomas.

[0057] Las vías alternativas de administración incluyen formulaciones para inhalación, que incluyen medios, tales como polvo seco, aerosol o gotas. Pueden ser soluciones acuosas que contienen, por ejemplo, polioxietilen-9-lauril éter, glicocolato y desoxicolato o soluciones oleosas para su administración en forma de gotas nasales o como un gel para aplicarse por vía intranasal. Las formulaciones para la administración bucal incluyen, por ejemplo, píldoras o pastillas y pueden incluir también una base saborizante, tal como sacarosa o acacia y otros excipientes, tales como glicocolato. Las formulaciones adecuadas para la administración rectal se presentan preferiblemente como supositorios de dosis unitaria, con un portador de base sólida, tal como manteca de cacao, y puede incluir un salicilato. Las formulaciones para la administración tópica en la piel preferiblemente adoptan forma de una pomada, crema, loción, pasta, gel, pulverizador, aerosol o aceite. Los portadores que se pueden utilizar incluyen vaselina, lanolina, polietilenglicoles, alcoholes o sus combinaciones. Las formulaciones adecuadas para la administración transdérmica pueden presentarse como parches discretos y pueden ser emulsiones lipófilas o tamponadas, soluciones acuosas, disueltas y/o dispersadas en un polímero o un adhesivo.

Figuras:

[0058] La Figura 1 representa los efectos de BP1.4979 (30 nM) sobre la amplitud de la respuesta de la raíz ventral provocada por una estimulación supraliminar (40 V, 50 js ) de la raíz dorsal, mostrando el potencial de acción, promedio de 15 registros cada uno, bajo las condiciones de control y perfusión de BP1.4979.

[0059] La Figura 2 representa los efectos de BP1.4979 (30 nM) sobre la amplitud de la respuesta de la raíz ventral provocada por una estimulación supraliminar (40 V, 50 js ) de la raíz dorsal, mostrando la amplitud de la respuesta máxima con el tiempo.

[0060] La presente invención se ilustrará adicionalmente con los siguientes ejemplos no limitativos:

Ejemplos

[0061] La eficacia de BP1.4979 y los tres agonistas de dopamina utilizados actualmente en receptores D2 y D3 de dopamina humanos se evaluaron en los siguientes sistemas.

Ensayo de m itogénesis de la activación del receptor D3

[0062] Se colocaron en placas células de ovario de hámster chino (CHO) que expresan de manera estable el receptor D3 de dopamina humano durante la noche en placas de 96 pocilios. A continuación, las células se lavaron con un medio libre de suero y se incubaron durante 20 horas con diferentes concentraciones de ligandos. Se añadió timidina tritiada durante un pulso de 4 horas. A continuación, las células se separaron utilizando tripsina/EDTA, se transfirieron en microplacas de multicribado GF/C, se enjuagaron con PBS y etanol enfriados en hielo y se secaron. La incorporación de [3H]-timidina se midió mediante centelleo líquido en un contador MicroBeta.

[0063] Los resultados se expresan como el porcentaje de la incorporación máxima de [3H]-timidina producida con el agonista completo quinelorano.

[0064] En este ensayo, BP1.4979 se comportó como agonista parcial (actividad intrínseca de 30%, EC50 de 0,7 nM), mientras que Pramipexol y Ropinirol fueron agonistas completos con EC50 de 0,6 y 0,7 nM, respectivamente.

Ensayo de gen informador de luciferasa de la activación de receptor D3

[0065] El receptor D3 de dopamina humano recombinante se expresó de manera funcional en las células de Ovario de Hámster Chino (CHO) que expresan un elemento sensible a AMPc que impulsa el gen informador de luciferasa (Fitzgerald et al., Anal Biochem 275: 54-61, 1999). Las células se sembraron durante la noche en una placa de 96 pocillos, a continuación, se lavaron y se colocaron en presencia de dopamina o compuestos de prueba (BP1.4979). Después de 4 horas en la incubadora de células, las células se incubaron con el reactivo del ensayo de gen informador de luciferasa.

[0066] Se midió la actividad de dopamina como la inhibición de bioluminiscencia de luciferasa estimulada por forskolina utilizando un aparato de FDSS/jcélula (Hamamatsu). Los resultados se expresaron como el porcentaje de respuesta máxima a dopamina en bioluminiscencia estimulada por forskolina.

[0067] En este ensayo, BP1.4979 se comportó como un agonista parcial (actividad intrínseca de 70%, EC50 de 2,5 nM), mientras que Pramipexol, Rotigotina y Ropinirol fueron agonistas completos con EC50 de 0,1, 0,1 y 0,8 nM, respectivamente.

[0068] Adicionalmente, la eficacia de los compuestos se comparó en la activación del receptor D2 de dopamina humano.

Ensayo de flu jos de calcio de la activación/inhibición del receptor D2

[0069] Se utilizaron células HEK293 que expresaban la isoforma corta de D2 de dopamina humana para evaluar la propiedad potencial de antagonista de compuestos de prueba. Las células se cargaron con solución Fluo-4-AM suplementada con sulfinpirazona, a continuación, se colocaron en una placa de 96 pocillos y se introdujeron en una estación FLEX para la medición de fluorescencia después de transiciones de calcio.

[0070] Las respuestas se calcularon como los recuentos de fluorescencia máximos menos los mínimos (Fmax - Fmin). Los resultados se proporcionan como el porcentaje de la respuesta máxima producida por el agonista completo de referencia de quinelorano.

[0071] En esta prueba, Pramipexol, Rotigotina y Ropinirol se comportaron como agonistas completos con valores EC50 de 5,4, 0,3 y 20 nM, respectivamente. En cambio, BP1.4979 no consiguió activar el receptor en concentraciones hasta 1.000 nM e incluso fue capaz de bloquear completamente el efecto de dopamina o agonistas.

[0072] En resumen, BP 1.4979 se difiere claramente de los tres ligandos de dopamina utilizados actualmente en el tratamiento de RLS: todos son agonistas potentes completos de D3R y D2R, mientras que BP 1.4979 es un agonista parcial de D3R y es inactivo como agonista en el D2R.

Efectos de BP1.4979 en un modelo de rata de RLS

[0073] Se cree que RLS refleja una sensibilidad anormal de reflejos de estiramiento espinal. Estos reflejos se modulan de un modo inhibidor por la dopamina liberada en el asta dorsal desde una proyección dopaminérgica descendente generada por las células de dopamina A11 en el hipotálamo.

[0074] Por consiguiente, fue de interés investigar los efectos de BP1.4979 en la respuesta monosináptica en la médula espinal aislada, un modelo electrofisiológico del reflejo de estiramiento, que podría considerarse para algunos aspectos de los mecanismos implicados en el RLS. Se analizaron las respuestas electrofisiológicas, es decir, los potenciales de acción motora registradas en la raíz ventral de la médula espinal aislada de crías de ratas después de la estimulación de la raíz dorsal.

[0075] Utilizando una intensidad umbral de estimulación (40 V, 50 js), se analizó BP1.4979 en 3 concentraciones (30, 100, y 300 nM) y se registró la respuesta.

[0076] Los resultados se muestran en las Figuras 1 y 2. A una concentración de 30 nM, BP1.4979 inhibió completamente la transmisión sináptica para estas fibras, es decir, en la misma medida que la dopamina o un agonista completo de receptor D2/D3 de dopamina, tal como Pramipexol y 7-OHDPAT.

[0077] La dopamina, Pramipexol y 7-OHDPAT dieron lugar a una inhibición total o casi completa del reflejo monosináptico. De manera sorprendente, la aplicación de BP1.479 en concentraciones nanomolares en lugar de dopamina o agonistas completos de dopamina produce inhibiciones de la misma amplitud que los últimos.

[0078] En otras series de experimentos, la dosis de BP1.4979 inhibió de manera dependiente la amplitud de la respuesta postsináptica medida sobre la raíz ventral de la médula espinal después de la estimulación supraliminar de la raíz dorsal y este efecto se impidió en presencia del antagonista de D3 de dopamina BP1.4096 (ejemplo 107 de WO 2007/148208) que por sí mismo carecía del efecto.

[0079] En resumen, aunque es un agonista parcial de receptor D3 y antagonista de receptor D2, que lo diferencia de otros agentes habitualmente utilizados en el RLS, de manera inesperada BP1.4979 pareció ser completamente activo en un modelo de esta enfermedad.

Claims (1)

REIVINDICACIONES

1. Compuesto BP1.4979 de fórmula:

W-(4-{2-[4-(3-C¡anofeml)p¡peraz¡n-1-¡l]et¡l}ddohex¡l)-3-metox¡propanam¡da o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o sus h¡dratos o sales h¡dratadas, o las estructuras pol¡mórf¡cas, cr¡stal¡nas del m¡smo,

para ut¡l¡zar en el tratam¡ento o la prevenc¡ón del síndrome de p¡ernas ¡nqu¡etas (RLS), y en el que se adm¡n¡stra a una dos¡s eleg¡da entre 10 y 15 mg dos veces al día (bis in die).