ES2945869T3

ES2945869T3 - Composición que contiene aminoácidos

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Publication number: ES2945869T3
Application number: ES17700936T
Authority: ES
Inventors: Wolfgang Priemer; Robert Finke
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2016-01-13
Filing date: 2017-01-13
Publication date: 2023-07-10
Anticipated expiration: 2037-01-13
Also published as: NZ744289A; DE102017200434A1; DK3402573T3; PL3402573T3; US10842164B2; EP3402573A1; US20190029280A1; WO2017121859A1; CA3011273A1; EP3402573B1

Abstract

La invención se relaciona con un proceso para la preparación de una composición que comprende aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos libres, caracterizado porque el proceso comprende al menos el siguiente paso: agregar a una composición al menos dos peptidasas diferentes, que están presentes en forma purificada. que comprende al menos una proteína. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composición que contiene aminoácidos

La presente invención se refiere a una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos, así como a su producción mediante la digestión enzimática de fuentes de albúmina naturales. La invención se describe en particular en relación con el uso en la producción de alimentos/bebidas, la producción de cosméticos y de jabones, o la producción de productos para el cuidado corporal y productos adelgazantes. Se indica que la invención también puede emplearse en otros campos, tal como por ejemplo en la producción de pienso.

Los 20 aminoácidos proteinogénicos son los componentes de todas las proteínas celulares que comprenden proteínas estructurales, proteínas transportadoras, proteínas de reserva, inmunoglobulinas y enzimas. La mayoría de los organismos superiores dependen del suministro de aminoácidos individuales con la alimentación (aminoácidos esenciales). En el caso del ser humano estos son isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina. Un abastecimiento suficiente con aminoácidos es esencial para la síntesis de proteínas. A este respecto, la síntesis de proteínas está limitada cuantitativamente por el aminoácido en cada caso limitante. La síntesis de proteínas es indispensable para todos los procesos celulares. Un abastecimiento deficiente con aminoácidos conduce a enfermedades carenciales, marasmo y un claro debilitamiento del sistema inmunitario y tiene efectos sobre la energía y el aspecto externo de cabellos, uñas y piel. Por tanto, un abastecimiento suficiente con aminoácidos es importante en particular para seres humanos que hacen deporte, así como para seres humanos que quieren reducir su peso o que debido a problemas de salud existentes muestran una ingesta de alimentos/metabolización de alimentos deficiente y aun así quieren conseguir un abastecimiento rápido y completo con aminoácidos y péptidos/proteínas, para obtener las defensas y la musculatura o aumentar la musculación. Los aminoácidos forman además parte del FHN (factor hidratante natural) - un componente de la piel, que es responsable de la regulación de la humedad y otras funciones de la piel, así como del colágeno, una de las proteínas estructurales más importantes del tejido conjuntivo y de la piel. Por lo demás, los aminoácidos libres estabilizan el manto ácido protector de la piel. Por estos motivos se utilizan aminoácidos, péptidos y proteínas en la cosmética para la piel y el cabello.

Los aminoácidos se toman a través de la alimentación sobre todo en forma de proteínas, que a continuación se hidrolizan en el estómago y el intestino. Los aminoácidos que se generan a este respecto, así como también di- y tripéptidos, se reabsorben en el intestino. Se conoce que mediante la ingesta de proteínas ya digeridas previamente, es decir hidrolizadas, puede acelerarse claramente la biodisponibilidad. Los aminoácidos libres prácticamente pueden reabsorberse directamente después de llegar al intestino. En particular los médicos deportivos administran aminoácidos tras el entrenamiento y señalan un periodo de tiempo de aproximadamente 30 minutos para la absorción de los aminoácidos en la circulación sanguínea. En comparación con esto, el consumo de huevos conduciría a una absorción de aminoácidos tras más de cinco horas. Entretanto podrían producirse faltas de abastecimiento y puede debilitarse el sistema inmunitario.

El documento DE 196 06 439 A describe un procedimiento para la degradación enzimática de proteínas. En el procedimiento descrito preferiblemente no se utilizan proteasas purificadas, que se generan y proporcionan por separado, sino microorganismos que producen proteasas.

El documento WO 2014/130007 A1 describe composiciones proteolíticas para la digestión rápida y extensa de suplementos de proteínas. Los compuestos proteolíticos contienen subtilisina Carlsberg y opcionalmente bromelina y la digestión proteolítica no tiene lugar hasta que se encuentran en el cuerpo de los sujetos de ensayo.

La invención se basa en el objetivo de poner a disposición un procedimiento alternativo para la producción de una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos.

Esto se consigue según la invención mediante la enseñanza de la reivindicación independiente 1. Perfeccionamientos preferidos de la invención son el objeto de las reivindicaciones dependientes.

Según un primer aspecto, la invención se refiere a un procedimiento para la producción de una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos.

Un procedimiento según la invención presenta al menos la etapa de añadir al menos dos peptidasas diferentes, que se encuentran en forma purificada, a una composición, que presenta al menos una proteína, añadiéndose al menos una exopeptidasa y al menos una endopeptidasa a la composición que presenta al menos una proteína, y

(a) siendo las al menos dos peptidasas diferentes de origen microbiano;

(b) presentando la composición que presenta al menos una proteína una concentración de proteína de desde el 5 hasta el 30 por ciento en peso con respecto al peso total de la composición que presenta al menos una proteína; (c) teniendo la composición que presenta al menos una proteína durante la adición de las al menos dos peptidasas diferentes un valor de pH de desde 4 hasta 6 e incubándose a una temperatura de desde 40°C hasta 60°C con las al menos dos peptidasas diferentes; y

(d) ascendiendo la cantidad total de peptidasa añadida en cada caso a desde 2 hasta 10 gramos por 100 gramos de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína.

En el marco de la presente invención se encontró que puede mejorarse el rendimiento de aminoácidos libres y/o de oligopéptidos con una longitud de hasta 10 aminoácidos durante la digestión enzimática de al menos una proteína con el diseño correspondiente, si a la al menos una proteína se le añaden al menos dos peptidasas diferentes en forma purificada, en lugar de añadir bacterias que producen peptidasas. En particular se encontró que mediante el uso de dos peptidasas purificadas diferentes con el diseño correspondiente del proceso de producción pueden obtenerse composiciones con los ocho aminoácidos esenciales para el ser humano o incluso con los veinte aminoácidos proteinogénicos. Por tanto, las composiciones generadas mediante el procedimiento de producción según la invención son adecuadas para cubrir las faltas de abastecimiento de aminoácidos individuales y pueden prevenir así enfermedades carenciales o manifestaciones carenciales tal como por ejemplo de la piel o del cabello, marasmo y un debilitamiento del sistema inmunitario.

Dado el caso, la composición puede presentar además cantidades variables de la proteína de partida no escindida, en función de la duración y la eficacia de la fermentación, así como de la cantidad utilizada de peptidasas.

Por lo demás se encontró que la duración de procedimiento del procedimiento según la invención con el diseño correspondiente puede acortarse con respecto a la fermentación bacteriana de proteínas, es decir la digestión enzimática de proteínas mediante la adición de bacterias que producen peptidasas. De ese modo pueden diseñarse los ciclos de producción de manera más eficaz y la utilización de grandes tanques de fermentación se vuelve prescindible.

Las composiciones que contienen aminoácidos, que se obtienen mediante fermentación bacteriana convencional, es decir mediante la adición de bacterias que producen peptidasas, tienen normalmente un marcado sabor amargo. Además, con frecuencia se observa un fuerte sabor a podredumbre, que puede hacer que tales composiciones sean prácticamente inadecuadas para el consumo humano. Tanto el sabor a podredumbre como el sabor amargo pueden sorprendentemente reducirse o incluso impedirse completamente mediante el procedimiento según la invención con el diseño correspondiente. Las composiciones que contienen aminoácidos producidas mediante el procedimiento según la invención pueden, con el diseño correspondiente del procedimiento, estar libres de sabor extraño y libres de un sabor residual o regusto a queso.

Los términos “albúmina” y “proteína” se usan de manera sinónima en el presente documento. Por estos términos deben entenderse en el sentido de la invención moléculas orgánicas, que están constituidas a partir de aminoácidos, que están unidas entre sí mediante enlaces peptídicos. Las proteínas en el sentido de la invención no están digeridas, es decir no se han generado mediante la hidrólisis de una proteína más grande. El tamaño de las proteínas en el sentido de la invención no está limitado, pero las proteínas presentan preferiblemente al menos 100 aminoácidos. Las proteínas en el sentido de la invención comprenden en particular proteínas animales, vegetales y fúngicas, pero no se descarta el uso de proteínas de origen bacteriano o de otro origen microbiano como sustrato de partida para la hidrólisis enzimática. Las proteínas en el sentido de la invención no están limitadas de modo alguno en cuanto a su estructura secundaria, terciaria y cuaternaria y comprenden proteínas globulares y fibrosas. Las proteínas en el sentido de la invención tampoco están limitadas en cuanto a su función y comprenden, entre otras, proteínas estructurales, proteínas transportadoras, proteínas de reserva, inmunoglobulinas y enzimas.

Por el término “peptidasa” en el sentido de la invención deben entenderse enzimas, que pueden escindir proteínas o péptidos. Las peptidasas catalizan la hidrólisis de enlaces peptídicos en péptidos y proteínas. Los términos “escisión de proteínas o de péptidos”, “digestión de proteínas o de péptidos” e “hidrólisis de enlaces peptídicos” se usan de manera sinónima en el presente documento. Por el término “fermentación de proteínas, péptidos o fuentes de albúmina” en el sentido de la invención debe entenderse la escisión enzimática de proteínas y péptidos. Por el término “fermentación bacteriana” debe entenderse la fermentación mediante la adición de bacterias que producen peptidasas. Por el término “fermentación enzimática” debe entenderse la fermentación mediante la adición de peptidasas purificadas. El término “peptidasa” se usa en el presente documento de manera sinónima a los términos “proteasa” y “proteinasa”. En el sentido de la invención, por el término “peptidasa” debe entenderse la enzima en forma purificada, si no se menciona expresamente lo contrario. Por el término “en forma purificada” debe entenderse la existencia de la enzima en forma libre en una preparación enzimática. La producción de tales preparaciones enzimáticas puede tener lugar de cualquier manera, por ejemplo, mediante el aislamiento y la purificación de la enzima tras la expresión homóloga o heteróloga en microorganismos. El uso de peptidasas purificadas ofrece con respecto al uso de bacterias que producen peptidasas la ventaja de una mejor capacidad de control y reproducibilidad del proceso. Además, puede evitarse el riesgo de una contaminación con bacteriófagos.

Por el término “aminoácidos libres” en el sentido de la presente invención deben entenderse aminoácidos, que no presentan ningún enlace peptídico con otros aminoácidos. Los aminoácidos libres en el sentido de la invención se generan mediante la digestión enzimática de proteínas o péptidos, incluyendo oligopéptidos, mediante la hidrólisis enzimática de enlaces peptídicos en estas proteínas o péptidos.

Por el término “péptido” en el sentido de la invención debe entenderse un producto de escisión de una proteína, que se ha generado mediante la hidrólisis enzimática de uno o dos de los enlaces peptídicos presentes en la proteína. Por el término “oligopéptido” en el sentido de la invención debe entenderse un péptido, es decir un producto de escisión de una proteína producido mediante digestión enzimática, que está compuesto por de 2 a 10 aminoácidos. Por consiguiente, el término oligopéptido comprende los términos dipéptido (péptido compuesto por dos aminoácidos), tripéptido (péptido compuesto por tres aminoácidos), tetrapéptido (péptido compuesto por cuatro aminoácidos) y pentapéptido (péptido compuesto por cinco aminoácidos).

Por el término “polipéptido” en el sentido de la invención debe entenderse un péptido, es decir un producto de escisión de una proteína producido mediante digestión enzimática, que está compuesto por al menos 11 aminoácidos. Hacia arriba, la longitud del polipéptido en el sentido de la invención únicamente está limitado porque presenta al menos un aminoácido menos que la proteína de partida, a través de cuya escisión se ha generado el polipéptido.

Las composiciones, que se generan por medio del procedimiento de producción según la invención, tienen con respecto a la albúmina alimenticia convencional la ventaja de que los aminoácidos y oligopéptidos pueden reabsorberse en el cuerpo claramente más rápido que las proteínas no escindidas. Los aminoácidos libres se reabsorben prácticamente inmediatamente después de que hayan alcanzado el intestino. Según la cantidad de los aminoácidos tomados, la reabsorción dura por ejemplo hasta una hora. Los oligopéptidos se escinden todavía para dar aminoácidos libres antes de su reabsorción, con lo que resulta un retardo temporal de la reabsorción de aproximadamente media hora. En el caso de los polipéptidos, la escisión en el intestino hasta dar aminoácidos libres dura aproximadamente de una a dos horas, según la longitud de los polipéptidos. Por consiguiente, el procedimiento de producción según la invención proporciona composiciones, que provocan un abastecimiento rápido, prácticamente inmediato, gradual, con aminoácidos. Debido a la existencia simultánea de aminoácidos libres, de oligopéptidos cortos, de polipéptidos más largos y dado el caso de proteínas todavía no escindidas en la composición se posibilita un abastecimiento que empieza prácticamente de manera inmediata y que dura varias horas, sin faltas, con aminoácidos.

En los productos para el cuidado corporal, los aminoácidos y oligopéptidos generados mediante el procedimiento según la invención pueden servir como fuente de albúmina para la constitución de colágeno y elastina, que aparecen de manera natural en la piel. Los colágenos presentan un alto peso molecular y por tanto no pueden penetrar en la piel. Actúan estirando la piel y se unen en gran medida al agua. El colágeno soluble acelera la curación de heridas y la reepitelización espontánea de la piel. A este respecto estimula la recuperación de tejido y la generación de macromoléculas.

Los péptidos forman además parte del tejido conjuntivo, de los cabellos y de las uñas. Actúan como mensajeros, hormonas o coenzimas, y son actores esenciales en prácticamente todos los procesos biológicos. Así aceleran procesos de curación y la renovación celular. Los péptidos tienen con frecuencia funciones reguladoras. La insulina, por ejemplo, es un péptido que controla el metabolismo del azúcar en el cuerpo.

En la superficie de la piel se degradan péptidos, en particular oligopéptidos, parcialmente para dar aminoácidos libres y por consiguiente respaldan el contenido de humedad natural de la piel. Los aminoácidos son importantes como componente del FHN (factor hidratante natural) para la regulación de la humedad y otras funciones de la piel. Por lo demás, los aminoácidos libres estabilizan el manto ácido protector de la piel.

En el procedimiento según la invención se añaden al menos una exopeptidasa y al menos una endopeptidasa a la composición que presenta al menos una proteína. Esto ofrece la ventaja de que puede aumentarse el porcentaje de aminoácidos libres y/u oligopéptidos a costa de los polipéptidos y/o de la al menos una proteína de partida, es decir de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína, con respecto al uso de exclusivamente endopeptidasas o exclusivamente exopeptidasas con la misma cantidad total de peptidasas utilizadas y con la misma duración de procedimiento. Esto ofrece en particular la ventaja de que con una configuración correspondiente puede conseguirse una razón óptima de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos.

Por el término “endopeptidasa” en el sentido de la invención debe entenderse una peptidasa, que puede catalizar la escisión hidrolítica de enlaces peptídicos en el interior de una cadena peptídica. Los productos de escisión presentan en cada caso al menos dos aminoácidos, normalmente más aminoácidos.

Por el término “exopeptidasa” en el sentido de la invención debe entenderse una peptidasa, que puede catalizar la escisión de aminoácidos individuales en los extremos de una cadena peptídica.

Una composición óptima se caracteriza por un alto porcentaje de aminoácidos libres y oligopéptidos. En la composición generada mediante el proceso de producción están contenidos del 0,5 al 25 por ciento en peso de aminoácidos libres y del 25 al 65 por ciento en peso de oligopéptidos y preferiblemente como máximo el 40 por ciento en peso de proteína de partida no escindida, con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas. De manera especialmente preferible, en la composición generada mediante el proceso de producción están contenidos del 2 al 20 por ciento en peso de aminoácidos libres y como máximo el 10 por ciento en peso de proteína de partida no escindida, con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas. En comparación con esto, mediante la fermentación convencional de fuentes de albúmina mediante bacterias que producen peptidasas en función de la duración de la fermentación, que asciende habitualmente a de algunos días a varias semanas o incluso años, tal como por ejemplo en el procedimiento KOSO tradicional de Japón, es sólo aproximadamente del 1 a como máximo el 12 por ciento en peso de aminoácidos libres con respecto al con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas.

La determinación del porcentaje de aminoácidos libres y oligopéptidos en la composición producida tiene lugar mediante el método descrito a continuación. Tras completarse la incubación con las al menos dos peptidasas se toman muestras y se homogeneizan. Se pesan 0,5 g - 2,5 g de la muestra homogeneizada exactamente hasta 0,1 mg en un tubo Falcon. Se añade 1 ml de disolución de norleucina (0,1312 g/200 ml) como patrón interno (IS) y se llena con ácido 5-sulfosalicílico al 3% hasta 25 ml. Los tubos se introducen en el agitador y se agitan con fuerza durante 20 minutos. A continuación se centrifuga a 5000 rpm durante 5 minutos. El sobrenadante se filtra a través de un filtro de jeringa (0,45 |im). Se pipetean 0,5 ml del filtrado y 0,5 ml de tampón de muestra para la cromatografía a un recipiente de reacción y este se cierra. La disolución así obtenida se utiliza para el análisis cromatográfico en el analizador de aminoácidos.

En paralelo a esto se determina la composición de aminoácidos de la fracción que contiene aminoácidos libres y oligopéptidos (fracción NPN soluble en agua de la composición). Para ello se pesan de nuevo 0,5 g - 2,5 g de la muestra homogeneizada exactamente hasta 0,1 mg en un tubo Falcon. Se pipetean a esto 2,5 ml disolución de norleucina como patrón interno (IS) y se llena con ácido 5-sulfosalicílico al 3% hasta 25 ml. Los tubos se agitan y se centrifugan tal como se describió anteriormente, los polipéptidos y proteínas insolubles en agua, contenidos en el precipitado, se desechan. Se pipetea 1 ml del sobrenadante a un recipiente de disgregación de vidrio de 50 ml, se mezcla con 9 ml de ácido clorhídrico 6 N y se cierran bien los recipientes con una tapa de rosca. Los recipientes se introducen en el bloque térmico y la disolución de muestra se disgrega durante 8 h a 105°C. 2 ml de la disolución disgregada se concentran hasta sequedad. El residuo se lleva a 1 ml de tampón de muestra para la cromatografía y se pasa a un recipiente de reacción, que se cierra. La disolución así obtenida se utiliza para el análisis cromatográfico en el analizador de aminoácidos. Mediante la resta del porcentaje de aminoácidos libres determinado en la etapa 1 puede determinarse además mediante cálculo el porcentaje de oligopéptidos en la composición.

Se prefiere aproximadamente del 40 al 80 por ciento en peso, de manera especialmente preferible aproximadamente del 50 al 70 por ciento en peso de los aminoácidos libres aminoácidos esenciales, es decir isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina.

Preferiblemente están contenidos los 20 aminoácidos proteinogénicos, es decir los aminoácidos isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano, valina, alanina, arginina, ácido aspártico, asparagina, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, prolina, serina y tirosina, en la composición generada mediante el procedimiento de producción según la invención.

La presencia simultánea de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos en dichas concentraciones y las razones entre sí que resultan de ello en la composición producida ofrece la ventaja del abastecimiento gradual, sin faltas, con aminoácidos, prácticamente de manera directa tras la toma de la composición a lo largo de varias horas.

Según la invención, las al menos dos peptidasas diferentes son de origen microbiano. Según un perfeccionamiento preferido, las al menos dos peptidasas diferentes son de origen bacteriano o fúngico. Las peptidasas microbianas son en comparación con las peptidasas humanas o de mamífero claramente más variadas. Esto ofrece la ventaja de que también fuentes de albúmina difíciles de metabolizar para el ser humano pueden digerirse eficazmente.

Por el término “de origen microbiano” deben entenderse peptidasas, cuya secuencia de aminoácidos corresponde a aquella de una peptidasa microbiana, es decir de una peptidasa que se expresa de manera endógena en un microorganismo. El organismo, en el que se produjo la peptidasa por ejemplo mediante expresión heteróloga, no es relevante para la designación del origen en el sentido de la invención. Por consiguiente, las peptidasas de origen microbiano se expresan de manera endógena en microorganismos. Como microorganismos en el sentido de la invención deben entenderse la totalidad de los organismos que no pueden reconocerse a simple vista. A estos pertenecen virus, bacterias, arqueas, protozoos, hongos y microalgas.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína presenta una concentración de proteína de desde el 10 hasta el 20 por ciento en peso con respecto al peso total de la composición que presenta al menos una proteína. Se encontró que dichas concentraciones de sustrato son ventajosas para la actividad enzimática, dado que la enzima y el sustrato pueden entrar comparativamente rápido en contacto a dichas concentraciones de sustrato. Por consiguiente, este perfeccionamiento ofrece la ventaja de buenos rendimientos de aminoácidos libres y/u oligopéptidos y/o una corta duración de procedimiento.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína se incuba durante al menos 1 h, preferiblemente durante un periodo de tiempo de desde 1 h hasta 24 h, de manera especialmente preferible durante un periodo de tiempo de desde 4 h hasta 12 h, lo más preferiblemente durante un periodo de tiempo de desde 6 h hasta 10 h con al menos una de las al menos dos peptidasas diferentes. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que se cumplen tanto la pretensión de una escisión eficaz de la al menos una proteína de partida como aquella de un proceso eficaz en el tiempo. Mediante dichos tiempos de incubación puede obtenerse una razón óptima de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína se incuba a una temperatura de desde 45°C hasta 55°C con las al menos dos peptidasas diferentes. Estas temperaturas relativamente altas ofrecen la ventaja de que mediante estas temperaturas relativamente altas puede evitarse una contaminación con bacterias, y en consecuencia también una contaminación con bacteriófagos. De ese modo se minimizan los riesgos para la salud y se impiden procesos de putrefacción, a través de los que puede influirse negativamente en el sabor y el olor del producto final. El conocimiento de que puede realizarse una hidrólisis enzimática de proteínas a temperaturas relativamente tan altas fue totalmente sorprendente, dado que los fabricantes de enzimas recomiendan habitualmente temperaturas de incubación de aproximadamente 37°C para peptidasas, para evitar la desnaturalización de enzimas a temperaturas mayores. Se encontró que a temperaturas de aproximadamente 50°C las peptidasas usadas muestran actividades especialmente altas y de ese modo puede acortarse el proceso de producción. Para obtener rendimientos óptimos de aminoácidos libres y oligopéptidos, puede ser razonable utilizar las al menos dos peptidasas en cantidades mayores a las recomendadas habitualmente para la digestión enzimática a 37°C. Además, la adición repetida de las peptidasas durante el proceso de producción puede tener un efecto positivo sobre el rendimiento de aminoácidos libres y oligopéptidos.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína tiene durante la adición de las al menos dos peptidasas diferentes un valor de pH de desde 4 hasta 6, preferiblemente desde 4,5 hasta 5,5, ajustándose el valor de pH dado el caso mediante la adición de al menos un ácido orgánico, seleccionado en particular de ácido láctico, ácido cítrico y ácido málico. Preferiblemente no se añade ninguna bacteria ni otro microorganismo tal como por ejemplo levadura durante el proceso de producción. Dichos intervalos de valor de pH son óptimos para la actividad enzimática de peptidasas. Por el contrario, en la fermentación convencional con bacterias que producen peptidasas, el valor de pH tiene que disminuirse hasta aproximadamente de 3 a 4. El producto fermentado generado tiene de ese modo un sabor muy ácido. Mediante el uso de peptidasas purificadas en un intervalo de pH de más de 4 puede mejorarse claramente el sabor del producto generado. Las composiciones generadas presentan de una ligera acidez sensorial hasta un sabor neutro.

Según un perfeccionamiento preferido, el procedimiento presenta adicionalmente la etapa de añadir carbonato de calcio y/o carbonato de magnesio, teniendo lugar la adición preferiblemente tras la adición de las al menos dos peptidasas diferentes, de manera especialmente preferible tras el final de la incubación de la composición que presenta al menos una proteína con las al menos dos peptidasas. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que la razón de calcio con respecto a magnesio en el producto final puede ajustarse a un valor deseado. Preferiblemente, la razón en peso de magnesio con respecto a calcio en la composición generada se encuentra a desde aproximadamente 1,25:1 hasta aproximadamente 3:1, de manera especialmente preferible desde aproximadamente 1,5:1 hasta aproximadamente 2,5:1 y lo más preferiblemente a aproximadamente 2:1. Este perfeccionamiento ofrece por lo demás la ventaja de que puede aumentarse el valor de pH del producto final tras el final de la hidrólisis enzimática, con lo que puede mejorarse el sabor del producto final.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína presenta al menos una fuente de albúmina seleccionada de lactosuero, concentrado de proteína de lactosuero, concentrado de proteína de la leche, residuo desecado de la producción de alimentos tal como por ejemplo residuo desecado de destilería o residuo desecado de la fabricación de cerveza, guisantes, lentejas, judías, soja y una combinación de dos o más de los mismos. El uso de fuentes de albúmina naturales, tales como las mencionadas anteriormente, ofrece la ventaja de que las sustancias contenidas que aparecen de manera natural en estas fuentes de albúmina, tales como coenzimas, vitaminas y elementos traza se conservan en la composición generada y pueden provocar una reabsorción especialmente rápida y/o eficaz en el intestino. En principio son concebibles todos los tipos de fuentes de albúmina como sustrato para el proceso de producción según la invención. Según el uso del producto final, pueden seleccionarse y dado el caso combinarse fuentes de albúmina con un valor especialmente alto tal como por ejemplo lactosuero y concentrado de proteína de lactosuero, fuentes de albúmina vegetales tales como por ejemplo soja, guisantes, lentejas, judías, residuos desecados de la fabricación de cerveza y de destilería para la producción de producto vegetarianos o veganos, o fuentes de albúmina relativamente económicas tales como residuos deseados de la fabricación de cerveza y de destilería. El lactosuero como fuente de albúmina ofrece además del alto valor por lo demás la ventaja de un alto porcentaje de sustancias contenidas adicionales, valiosas para el ser humano, tal como vitaminas, coenzimas, sustancias minerales y otras. Esta “matriz de lactosuero” aumenta además la biodisponibilidad de los aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos mediante una reabsorción acelerada. El abastecimiento con aminoácidos y oligopéptidos, que se encuentran en una matriz de lactosuero de este tipo, se considera más eficaz que el abastecimiento con aminoácidos sintetizados químicamente, que se añaden a un producto. El concentrado de proteína de lactosuero ofrece además la ventaja de un alto porcentaje de albúmina de aproximadamente el 80% y de un porcentaje de hidratos de carbono y de grasa reducido. Por consiguiente, el concentrado de proteína de lactosuero es comparativamente bajo en calorías. Además, tiene un porcentaje de lactosa muy reducido. Independientemente de la fuente de albúmina utilizada, la lactosa que queda en el producto final puede eliminarse dado el caso sin problemas, por ejemplo, mediante la adición de lactasa purificada o lactobacilos que producen lactasa.

Por el término “fuente de albúmina” en el sentido de la invención debe entenderse una composición que presenta al menos una proteína, preferiblemente una mezcla de proteínas. Los términos “albúmina” y “proteína” se usan en este contexto de manera sinónima y comprenden proteínas animales, vegetales y microbianas.

Según un perfeccionamiento preferido, la cantidad total de peptidasa añadida en cada caso asciende a desde 500 hasta 20.000, preferiblemente desde 1.000 hasta 15.000, de manera especialmente preferible desde 2.000 hasta 10.000 U por 100 gramos de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína. Por U en el sentido de la invención debe entenderse aquella cantidad de enzima, que escinde un micromol de proteína de sustrato por minuto a 37°C.

Según la invención, la cantidad total de peptidasa añadida asciende a desde 2 hasta 10 gramos por 100 gramos de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína.

Las cantidades indicadas de peptidasa añadida se encuentran por encima de las recomendaciones del fabricante para una digestión enzimática a 37°C. Estos perfeccionamientos ofrecen la ventaja de que puede aumentarse la eficacia de la digestión enzimática de la al menos una proteína de partida, es decir que puede aumentarse el rendimiento de aminoácidos libres y/u oligopéptidos y/o que puede reducirse la duración del proceso de producción. Se encontró sorprendentemente que la utilización de las peptidasas en exceso, por ejemplo, en los intervalos de cantidad indicados, permite un aumento de la temperatura de incubación hasta más de 40°C hasta aproximadamente 60°C, sin que la hidrólisis enzimática se paralice de manera temprana debido a la degradación enzimática. Debido al aumento de la temperatura de incubación hasta más de 40°C se reduce o incluso se evita completamente a su vez el riesgo de una contaminación con bacterias, incluyendo gérmenes patógenos bacterianos, y con ello al mismo tiempo el riesgo de una contaminación con bacteriófagos. Preferiblemente, el proceso de producción se realiza a de aproximadamente 45°C a aproximadamente 55°C, de manera especialmente preferible a aproximadamente 50°C, dado que en este intervalo de temperatura puede evitarse en su mayor parte una contaminación con bacterias y/o bacteriófagos y se minimiza al mismo tiempo la degradación de las peptidasas añadidas.

Según un perfeccionamiento preferido tiene lugar una adición repetida de al menos una de las al menos dos peptidasas a la composición que presenta al menos una proteína. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que puede evitarse la paralización temprana del proceso debido a la degradación de las peptidasas añadidas, o que puede reducirse la cantidad total de peptidasa añadida, en particular a temperaturas de incubación de más de 40°C, más de 45°C o a aproximadamente 50°C.

Según un perfeccionamiento preferido, al menos una de las al menos dos peptidasas se añade de manera repetida en cantidades sustancialmente igual de grandes y a intervalos de tiempo sustancialmente igual de grandes a la composición que presenta al menos una proteína. Se encontró que mediante la adición repetida de las peptidasas en cantidades sustancialmente igual de grandes y a intervalos de tiempo sustancialmente igual de grandes puede aumentarse la eficacia de la hidrólisis enzimática, o que con una composición comparable del producto final obtenido puede reducirse la cantidad total de peptidasas utilizadas.

Según un perfeccionamiento preferido, la adición de la al menos una endopeptidasa tiene lugar antes de la adición de la al menos una exopeptidasa. Sorprendentemente se encontró que de ese modo puede reducirse o incluso evitarse totalmente el sabor amargo de la composición generada. En particular los aminoácidos valina, leucina, isoleucina y arginina tienen un sabor amargo. Una alta concentración de estos aminoácidos libres puede hacer que una composición sea de muy amarga a incomestible. Las composiciones que contienen aminoácidos, que se obtienen mediante fermentación bacteriana, es decir mediante la adición de bacterias que producen peptidasas, tienen normalmente un marcado sabor amargo, que las puede hacer inadecuadas para el consumo humano. La disminución del amargor de la composición generada mediante el procedimiento según la invención podría provocarse mediante la formación de ornitina durante la digestión enzimática. Se conoce que la ornitina puede contribuir a la disminución del amargor de composiciones que contienen aminoácidos.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición que presenta al menos una proteína se incuba en primer lugar durante de 1 a 10 h, preferiblemente durante de 2 a 6 h, de manera especialmente preferible durante aproximadamente 5 h con la al menos una endopeptidasa y a continuación durante de 3 a 40 h, preferiblemente durante de 20 a 40 h, de manera especialmente preferible durante aproximadamente 30 h con la al menos una exopeptidasa, teniendo lugar la incubación con la exopeptidasa preferiblemente en presencia de la al menos una endopeptidasa. Preferiblemente, la al menos una endopeptidasa y/o la al menos una exopeptidasa se añade de manera repetida, preferiblemente dos veces, tres veces, cuatro veces, cinco veces o seis veces en cantidades sustancialmente igual de grandes y a intervalos de tiempo sustancialmente igual de grandes. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que se obtiene una composición con razones de cantidad óptimas de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos.

Según un segundo aspecto, la invención se refiere a una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos, que puede obtenerse mediante al menos uno de los procedimientos descritos en el presente documento, caracterizada porque la composición (a) presenta desde el 0,5 por ciento en peso hasta el 25 por ciento en peso de aminoácidos libres con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas y (b) presenta desde el 25 hasta el 65 por ciento en peso de oligopéptidos con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas.

Se describe además una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos, coenzimas, vitaminas y elementos traza, presentando la composición preferiblemente al menos los siguientes aminoácidos libres: isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina, presentando de manera especialmente preferible la composición los 20 aminoácidos proteinogénicos isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano, valina, alanina, arginina, ácido aspártico, asparagina, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, prolina, serina y tirosina.

Los aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos se obtuvieron mediante la hidrólisis enzimática de al menos una proteína con al menos dos peptidasas purificadas diferentes. Esto ofrece con respecto a la fermentación convencional de fuentes de albúmina mediante bacterias que producen peptidasas u otros microorganismos la ventaja de porcentajes especialmente altos de aminoácidos libres y/u oligopéptidos en la composición. En particular, con el diseño correspondiente de la hidrólisis enzimática con las al menos dos peptidasas purificadas diferentes puede obtenerse una composición con los ocho aminoácidos esenciales para el ser humano o incluso con los veinte aminoácidos proteinogénicos. Por tanto, estas composiciones son adecuadas para cubrir faltas de abastecimiento de aminoácidos individuales y pueden prevenir así enfermedades carenciales, marasmo y un debilitamiento del sistema inmunitario.

Según la invención, la composición presenta desde el 0,5 por ciento en peso hasta el 25 por ciento en peso, preferiblemente desde el 2 por ciento en peso hasta el 20 por ciento en peso, de manera especialmente preferible desde el 5 por ciento en peso hasta el 15 por ciento en peso de aminoácidos libres con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas.

Según un perfeccionamiento preferido adicional, la composición presenta desde el 0,3 hasta el 15 por ciento en peso, preferiblemente desde el 1,2 por ciento en peso hasta el 12 por ciento en peso, de manera especialmente preferible desde el 3 hasta el 9 por ciento en peso de los aminoácidos esenciales libres isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina en suma con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas.

Según la invención, la composición presenta desde el 25 hasta el 65 por ciento en peso de oligopéptidos con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas. Según un perfeccionamiento preferido adicional, del 0 por ciento en peso al 40 por ciento en peso, preferiblemente del 0 por ciento en peso al 20 por ciento en peso, de manera especialmente preferible del 0 por ciento en peso al 10 por ciento en peso de la al menos una proteína de partida para la hidrólisis enzimática en la composición se encuentra como proteína no escindida.

Estos perfeccionamientos ofrecen la ventaja del abastecimiento gradual, sin faltas, con aminoácidos, prácticamente de manera directa tras la toma de la composición a lo largo de varias horas.

Según un perfeccionamiento preferido, la composición presenta un valor de pH de desde 4 hasta 6, de manera especialmente preferible desde 4,5 hasta 5,5. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que el valor de pH de la composición se asemeja al de la piel y por tanto puede usarse ventajosamente para la producción de productos para el cuidado corporal. Este perfeccionamiento ofrece por lo demás la ventaja de que presenta un sabor relativamente neutro, en particular no es demasiado ácida, y por tanto puede usarse ventajosamente para la producción de productos alimenticios.

Según un perfeccionamiento preferido, la razón en peso de magnesio con respecto a calcio en la composición asciende a desde 1,25:1 hasta 3:1, preferiblemente desde 1,5:1 hasta 2,5:1, de manera especialmente preferible aproximadamente 2:1.

La composición puede seguir usándose directamente tras la digestión enzimática sin etapas de purificación y/o de aislamiento adicionales para la producción de productos alimenticios o productos para el cuidado corporal. También es concebible la eliminación de componentes individuales de la composición, tal como por ejemplo lactosa o proteína no escindida y/o polipéptidos insolubles en agua. El volumen de la composición obtenida mediante la digestión enzimática también puede concentrarse en primer lugar mediante cualquier medida o puede obtenerse un polvo que presenta aminoácidos y oligopéptidos, así como dado el caso polipéptidos y/o proteína no escindida a partir de la composición generada.

Según un tercer aspecto, la invención se refiere al uso de la composición según la invención para la producción de un producto alimenticio, en particular para la producción de una bebida de zumo de fruta, de una bebida de leche, de una bebida de lactosuero, de un yogur, de un ayran o de un kéfir.

Según un perfeccionamiento preferido, una parte del agua de un producto alimenticio, en particular de un producto alimenticio conocido previamente, se sustituye por la composición según la invención. Así pueden “refinarse” productos alimenticios de manera especialmente sencilla mediante la adición de la composición según la invención y mejorarse en su valor.

Según un cuarto aspecto, la invención se refiere al uso de la composición según la invención para la producción de un producto para el cuidado corporal, en particular para la producción de un jabón, de un champú, de un tratamiento capilar, de una mascarilla capilar, de un ritual de belleza para el cabello, de una loción capilar, de un acondicionador, de una sal de baño, de una loción corporal, de un gel corporal, de una loción para el tratamiento de la rosácea, de una crema para el tratamiento del acné, de una mascarilla facial o de una crema facial.

Según un perfeccionamiento preferido, una parte del agua, preferiblemente al menos el 80% del agua, de un producto para el cuidado corporal, en particular de un producto para el cuidado corporal conocido previamente, preferiblemente de un jabón, se sustituye por la composición según la invención. Así pueden “refinarse” productos para el cuidado corporal de manera especialmente sencilla mediante la adición de la composición según la invención y mejorarse en su valor. A este respecto puede destacarse en particular la compatibilidad con la piel mejorada de tales composiciones. Los oligo- y polipéptidos en jabones y productos para el cuidado del cuerpo así producidos pueden favorecer la formación de colágeno en la piel y el cabello y contrarrestar así irritaciones de la piel.

Según un quinto aspecto, la invención se refiere a un producto alimenticio que presenta la composición según la invención.

Según un perfeccionamiento preferido, el porcentaje total de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos en el producto alimenticio asciende a desde el 2 por ciento en peso hasta el 25 por ciento en peso, de manera preferible aproximadamente del 5 al 10 por ciento en peso.

Según un perfeccionamiento preferido, la cantidad total de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos en el producto alimenticio asciende a desde 5 hasta 50 gramos, de manera preferible aproximadamente 10 gramos. Este perfeccionamiento ofrece la ventaja de que puede cubrirse un porcentaje significativo de la dosis diaria de albúmina recomendada mediante la toma del producto alimenticio. Para un adulto se recomienda una toma de desde aproximadamente 50 hasta 100 gramos proteína por día. En el caso de una carga corporal aumentada se duplica la cantidad de proteína recomendada.

Según un perfeccionamiento preferido, el producto alimenticio es una bebida que presenta magnesio y calcio. Preferiblemente, la razón de magnesio con respecto a calcio en la bebida se encuentra a desde 1,25:1 hasta 3:1, de manera especialmente preferible a aproximadamente 2:1.

Según una configuración preferida de este perfeccionamiento, la bebida es un ayran. Preferiblemente, la cantidad total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin peptidasas asciende a entre 5 y 25 g por porción, de manera especialmente preferible aproximadamente 10 g por porción. Preferiblemente, la bebida de ayran presenta exclusivamente aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos vegetales, de manera especialmente preferible aminoácidos, oligopéptidos y polipéptidos derivados de la proteína de la soja. Preferiblemente, la bebida está sustancialmente libre de bacterias.

Según una configuración alternativa de este perfeccionamiento, la bebida presenta cafeína y/o taurina. Junto con la cafeína y/o taurina y junto con calcio y magnesio, la bebida según la invención abastece el cuerpo con nutrientes importantes, y puede mejorar así el estado físico de gente madrugadora, gente trasnochadora o gente que trabaja de noche, reforzar las defensas y reducir el peligro de contagio en el caso de sobreesfuerzo.

Según un sexto aspecto, la invención se refiere a un producto para el cuidado corporal que presenta la composición según la invención.

Según un perfeccionamiento preferido, el producto para el cuidado corporal es un baño de cuidado o una sal de baño. Preferiblemente, el baño de cuidado o la sal de baño es un baño de lactosuero que presenta lactosuero fermentado enzimáticamente. Preferiblemente, el baño de cuidado se ofrece como producto acabado de desde 1 hasta 25 I. Preferiblemente, el baño de cuidado o la sal de baño no presenta jabón ni champú. El baño de cuidado o la sal de baño limpia la piel protegiéndola y disminuye su deshidratación. Puede regenerar el manto ácido de la piel y respalda la curación de inflamaciones y eccemas de la piel.

Según un perfeccionamiento preferido, el producto para el cuidado corporal es un jabón. Preferiblemente, el jabón presenta un valor de pH de desde 5 hasta 7, de manera especialmente preferible de aproximadamente 5,5. Esto corresponde aproximadamente al valor de pH de la piel y por consiguiente es especialmente suave para la piel. Pero tampoco se descartan jabones en el intervalo alcalino, por ejemplo, con un pH de desde aproximadamente 7 hasta 8,5. Se encontró que los péptidos generados mediante fermentación enzimática, contenidos en el jabón, pueden disminuir el efecto negativo del jabón sobre el manto ácido de la piel y respaldar la regeneración de la piel. Los jabones que presentan la composición que contiene aminoácidos producida mediante fermentación enzimática pueden reducir la deshidratación de la piel y el picor.

En el presente documento se describen también jabones que presentan aminoácidos y péptidos, que se obtienen mediante fermentación enzimática y/o bacteriana.

Ejemplos

Ejemplo 1:

Se diluyó concentrado de proteína de lactosuero WPC 80 con un porcentaje de masa seca del 25% y un porcentaje de albúmina del 80% en la masa seca con agua 1:2. El porcentaje de albúmina de la disolución así producida ascendía al 10 por ciento en peso, con respecto al peso total de la disolución producida.

El valor de pH de esta disolución se ajustó con ácido cítrico a 5,5.

Se produjeron dos mezclas básicas de prueba con en cada caso 1 I (100 g de albúmina). A ambas mezclas básicas se les añadieron al principio y cinco veces más con una separación de en cada caso una hora en cada caso 2 g de una endopeptidasa con aproximadamente 1000 SAPU/g. La cantidad total de endopeptidasa añadida ascendía en cada caso a 12 g/100 g de albúmina de partida.

Las mezclas básicas se incubaron a 50°C.

Tras cinco horas se tomó en cada caso una muestra de 50 ml (muestras I5 y II5 - ejemplo comparativo). Las mezclas básicas se incubaron durante la noche además a 50°C.

Después, a las dos mezclas básicas se les añadieron adicionalmente cinco veces con una separación de en cada caso una hora en cada caso 2 g de una exopeptidasa con aproximadamente 900 CPGU.

La cantidad total de exopeptidasa añadida ascendía en cada caso a 10 g/100 g de albúmina de partida. Las mezclas básicas se incubaron adicionalmente a 50°C.

A continuación se tomó de nuevo en cada caso una muestra de 50 ml (muestras I9 y II9) y se analizaron las cuatro muestras.

Las muestras se homogeneizaron para ello. Se pesaron 0,5 g - 2,5 g de las muestras homogeneizadas hasta exactamente 0,1 mg en un tubo Falcon. Se añadió 1 ml de disolución de norleucina (0,1312 g/200 ml) como patrón interno (IS) y se llenó con ácido 5-sulfosalicílico al 3% hasta 25 ml. Los tubos se introdujeron en el agitador y se agitaron con fuerza durante 20 minutos. A continuación se centrifugó a 5000 rpm durante 5 minutos. El sobrenadante se filtró a través de un filtro de jeringa (0,45 μm). Se pipetearon 0,5 ml del filtrado y 0,5 ml de tampón de muestra para la cromatografía a un recipiente de reacción y este se cerró. La disolución así obtenida se utilizó para el análisis cromatográfico en el analizador de aminoácidos.

En paralelo a esto se determinó la composición de aminoácidos de la fracción que contenía aminoácidos libres y oligopéptidos. Para ello se pesaron de nuevo 0,5 g - 2,5 g de la muestra homogeneizada hasta exactamente 0,1 mg en un tubo Falcon. A este se pipetearon 2,5 ml disolución de norleucina como patrón interno (IS) y se llenó con ácido 5-sulfosalicílico al 3% hasta 25 ml. Los tubos se agitaron y centrifugaron como se describió anteriormente, los polipéptidos y proteínas insolubles en agua, contenidos en el precipitado, se desecharon. Se pipeteó 1 ml del sobrenadante a un recipiente de disgregación de vidrio de 50 ml, se mezcló con 9 ml de ácido clorhídrico 6 N y se cerraron bien los recipientes con una tapa de rosca. Los recipientes se introdujeron en el bloque térmico y se disgregó la disolución de muestra durante 8 h a 105°C. Se concentraron 2 ml de la disolución disgregada hasta sequedad. El residuo se llevó a 1 ml de tampón de muestra para la cromatografía y se pasó a un recipiente de reacción, que se cierra. La disolución así obtenida se utilizó para el análisis cromatográfico en el analizador de aminoácidos.

Mediante la resta del porcentaje de aminoácidos libres determinado en la etapa 1 puede determinarse mediante cálculo por lo demás el porcentaje de oligopéptidos en la composición.

La tabla 1 muestra la composición de las cuatro muestras estudiadas.

Tabla 1: Composición de las muestras

En las mezclas básicas, que se incubaron con la endo- y la exopeptidasa, tras el final de la hidrólisis aproximadamente del 50 al 60% de los oligopéptidos y aproximadamente el 15% de los aminoácidos libres estaban presentes divididos en aproximadamente un 10% de aminoácidos esenciales y un 5% de aminoácidos no esenciales, en cada caso con respecto al peso total de albúmina de partida, en el presente caso 100 g de albúmina. Además, se sometió a prueba el valor de pH, el contenido de lactosa y el sabor de las cuatro muestras. Los resultados se resumen en la tabla 2.

Tabla 2: Análisis del sabor de los hidrolizados generados:

Ejemplo 2:

Se diluyó concentrado de proteína de lactosuero WPC 80 con un porcentaje de masa seca del 25% y un porcentaje de albúmina del 80% en la masa seca con agua 1:2. El porcentaje de albúmina de la disolución así producida ascendía al 9,98 por ciento en peso, con respecto al peso total de la disolución producida.

El valor de pH de esta disolución ascendía originariamente a 6,32 y se ajustó a continuación con ácido cítrico a 5,45. El volumen de mezcla básica ascendía en cada caso a 2 I. Se añadió una endopeptidasa con aproximadamente 1000 SAPU/g y una exopeptidasa con aproximadamente 900 CPGU. La hidrólisis enzimática tuvo lugar a 50°C. La tabla 3 muestra el esquema de hidrólisis:

Tabla 3: Esquema de hidrólisis

A continuación se tomaron muestras y se analizaron como se describió en el ejemplo 1.

La tabla 4 muestra la composición de las muestras estudiadas.

Tabla 4: Composición de las muestras

Además, se estudiaron las muestras en cuanto a la separación de fases, el valor de pH y el sabor. Los resultados se resumen en la tabla 5.

Tabla 5: Análisis del sabor de los hidrolizados generados:

Ejemplo 3:

Se diluyó concentrado de proteína de lactosuero WPC 80 con un porcentaje de masa seca del 25% y un porcentaje de albúmina del 80% en la masa seca con agua o se utilizó sin diluir.

La tabla 6 muestra la composición de las mezclas básicas de ensayo con sus valores de pH. No fue necesario un ajuste del pH.

Tabla 6: Composición de las mezclas básicas de ensayo:

Se añadió una endopeptidasa con aproximadamente 1000 SAPU/g y una exopeptidasa con aproximadamente 900 CPGU. La hidrólisis enzimática tuvo lugar a 50°C.

La tabla 7 muestra el esquema de hidrólisis.

Tabla 7: Esquema de hidrólisis:

A continuación se tomaron muestras y se analizaron como se describió en el ejemplo 1. La tabla 8 muestra la composición de las muestras estudiadas.

Tabla 8: Composición de las muestras

Las muestras se estudiaron de manera dirigida en cuanto a su sabor. Las muestras no eran amargas.

Claims

REIVINDICACIONES

i. Procedimiento para la producción de una composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos

caracterizado porque

el procedimiento presenta al menos la siguiente etapa:

añadir al menos dos peptidasas diferentes, que se encuentran en forma purificada, a una composición que presenta al menos una proteína, añadiéndose al menos una exopeptidasa y al menos una endopeptidasa a la composición que presenta al menos una proteína, y

(a) siendo las al menos dos peptidasas diferentes de origen microbiano;

(b) presentando la composición que presenta al menos una proteína una concentración de proteína de desde el 5 hasta el 30 por ciento en peso con respecto al peso total de la composición que presenta al menos una proteína;

(c) teniendo la composición que presenta al menos una proteína durante la adición de las al menos dos peptidasas diferentes un valor de pH de desde 4 hasta 6 e incubándose a una temperatura de desde 40°C hasta 60°C con las al menos dos peptidasas diferentes; y

(d) ascendiendo la cantidad total de peptidasa añadida en cada caso a desde 2 hasta 10 gramos por 100 gramos de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína.
2. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado porque las al menos dos peptidasas diferentes son de origen bacteriano o fúngico.
3. Procedimiento según al menos una de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque la composición que presenta al menos una proteína

(a) presenta una concentración de proteína de desde el 10 hasta el 20 por ciento en peso con respecto al peso total de la composición que presenta al menos una proteína;

(b) se incuba durante al menos 1 h, preferiblemente durante un periodo de tiempo de desde 1 h hasta 24 h, de manera especialmente preferible durante un periodo de tiempo de desde 4 h hasta 12 h, lo más preferiblemente durante un periodo de tiempo de desde 6 h hasta 10 h con al menos una de las al menos dos peptidasas diferentes;

(c) se incuba a una temperatura de desde 45°C hasta 60°C, de manera especialmente preferible a una temperatura de desde 45°C hasta 55°C con las al menos dos peptidasas diferentes;

(d) tiene durante la adición de las al menos dos peptidasas diferentes un valor de pH de desde 4,5 hasta 6, ajustándose el valor de pH dado el caso mediante la adición de al menos un ácido orgánico, seleccionado en particular de ácido láctico, ácido cítrico y ácido málico; y/o

(e) presenta al menos una fuente de albúmina seleccionada de lactosuero, concentrado de proteína de lactosuero, concentrado de proteína de la leche, residuo desecado de la producción de alimentos tal como por ejemplo residuo desecado de destilería o residuo desecado de la fabricación de cerveza, guisantes, lentejas, judías, soja y una combinación de dos o más de los mismos.
4. Procedimiento según al menos una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el procedimiento presenta adicionalmente la siguiente etapa: añadir carbonato de calcio y/o carbonato de magnesio, teniendo lugar la adición tras el final de la incubación de la composición que presenta al menos una proteína con las al menos dos peptidasas.
5. Procedimiento según al menos una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque

(a) la cantidad total de peptidasa añadida en cada caso asciende a desde 500 hasta 20.000, preferiblemente desde 1.000 hasta 15.000, de manera especialmente preferible desde 2.000 hasta 10.000 U por 100 gramos de la al menos una proteína en la composición que presenta al menos una proteína;

(b) tiene lugar una adición repetida de al menos una de las al menos dos peptidasas a la composición que presenta al menos una proteína;

(c) al menos una de las al menos dos peptidasas se añade de manera repetida en cantidades sustancialmente igual de grandes y a intervalos de tiempo sustancialmente igual de grandes a la composición que presenta al menos una proteína; y/o

(d) la adición de la al menos una endopeptidasa tiene lugar antes de la adición de la al menos una exopeptidasa.
6. Procedimiento según al menos una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la composición que presenta al menos una proteína se incuba en primer lugar durante de 1 a 10 h, preferiblemente durante de 2 a 6 h, de manera especialmente preferible durante aproximadamente 5 h con la al menos una endopeptidasa y a continuación durante de 3 a 40 h, preferiblemente durante de 20 a 40 h, de manera especialmente preferible durante aproximadamente 30 h con la al menos una exopeptidasa, teniendo lugar la incubación con la exopeptidasa preferiblemente en presencia de la al menos una endopeptidasa.
7. Procedimiento según la reivindicación 6, caracterizado porque la al menos una endopeptidasa y/o la al menos una exopeptidasa se añade de manera repetida, preferiblemente dos veces, tres veces, cuatro veces, cinco veces o seis veces en cantidades sustancialmente igual de grandes y a intervalos de tiempo sustancialmente igual de grandes.
8. Composición que presenta aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos, que puede obtenerse mediante el procedimiento según al menos una de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la composición (a) presenta desde el 0,5 por ciento en peso hasta el 25 por ciento en peso de aminoácidos libres con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas y (b) desde el 25 hasta el 65 por ciento en peso de oligopéptidos con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas.
9. Composición según la reivindicación 8, caracterizada porque

(a) la composición presenta desde el 2 por ciento en peso hasta el 20 por ciento en peso, de manera especialmente preferible desde el 5 por ciento en peso hasta el 15 por ciento en peso de aminoácidos libres con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas;

(b) la composición presenta desde el 0,3 por ciento en peso hasta el 13 por ciento en peso, preferiblemente desde el 1,2 por ciento en peso hasta el 12 por ciento en peso, de manera especialmente preferible desde el 3 por ciento en peso hasta el 9 por ciento en peso de los siguientes aminoácidos libres en suma con respecto al peso total de aminoácidos libres, oligopéptidos, polipéptidos y proteínas sin las peptidasas añadidas: isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina;

(c) la composición presenta un valor de pH de desde 4 hasta 6, de manera especialmente preferible desde 4,5 hasta 6; y/o

(d) la razón en peso de magnesio con respecto a calcio en la composición asciende a desde 1,25:1 hasta 3:1, preferiblemente desde 1,5:1 hasta 2,5:1, de manera especialmente preferible aproximadamente 2:1.
10. Composición según la reivindicación 8 o 9, caracterizada porque del 0 por ciento en peso al 40 por ciento en peso, preferiblemente del 0 por ciento en peso al 20 por ciento en peso, de manera especialmente preferible del 0 por ciento en peso al 10 por ciento en peso de la al menos una proteína se encuentra como proteína no escindida.
11. Uso de la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10 para la producción de un producto alimenticio, en particular para la producción de una bebida de zumo de fruta, de una bebida de leche, de una bebida de lactosuero, de un yogur, de un ayran o de un kéfir.
12. Uso según la reivindicación 11, caracterizado porque una parte del agua de un producto alimenticio se sustituye por la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10.
13. Uso de la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10 para la producción de un producto para el cuidado corporal, en particular para la producción de un jabón, de un champú, de un tratamiento capilar, de una mascarilla capilar, de un ritual de belleza para el cabello, de una loción capilar, de un acondicionador, de una sal de baño, de una loción corporal, de un gel corporal, de una loción para el tratamiento de la rosácea, de una crema para el tratamiento del acné, de una mascarilla facial o de una crema facial.
14. Uso según la reivindicación 13, caracterizado porque una parte del agua, preferiblemente al menos el 80% del agua, de un producto para el cuidado corporal, preferiblemente de un jabón, se sustituye por la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10.
15. Producto alimenticio que presenta la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10.
16. Producto alimenticio según la reivindicación 15, caracterizado porque el porcentaje total de aminoácidos libres, oligopéptidos y polipéptidos en el producto alimenticio (a) asciende a desde el 2 por ciento en peso hasta el 25 por ciento en peso, preferiblemente desde el 5 hasta el 10 por ciento en peso; y/o (b) asciende a desde 5 hasta 50 gramos, de manera preferible aproximadamente 10 gramos.
17. Producto para el cuidado corporal que presenta la composición según al menos una de las reivindicaciones 8 a 10.