ES2965486T3 - Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración - Google Patents

Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración Download PDF

Info

Publication number
ES2965486T3
ES2965486T3 ES18755604T ES18755604T ES2965486T3 ES 2965486 T3 ES2965486 T3 ES 2965486T3 ES 18755604 T ES18755604 T ES 18755604T ES 18755604 T ES18755604 T ES 18755604T ES 2965486 T3 ES2965486 T3 ES 2965486T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
antibody
aqueous solution
alxn1210
months
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18755604T
Other languages
English (en)
Inventor
Stephan Ortiz
Jillian Gentile
Leena Philominathan
Eric Routhier
Bruce Mason
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Alexion Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Alexion Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alexion Pharmaceuticals Inc filed Critical Alexion Pharmaceuticals Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2965486T3 publication Critical patent/ES2965486T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

La presente divulgación se refiere a soluciones acuosas estables que comprenden una alta concentración de un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) y métodos para preparar las soluciones. La divulgación también proporciona métodos para tratar o prevenir trastornos asociados al complemento, tales como hemoglobinuria paroxística nocturna (PNH) y síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa), utilizando las soluciones. También se presentaron kits terapéuticos que contienen una o más de las soluciones y un medio para administrar las soluciones a un paciente que necesita dicho tratamiento. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración
CAMPO
La presente invención se refiere a soluciones acuosas estables que comprenden un anticuerpo anti-C5 y a procedimientos para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende un anticuerpo anti-C5. La presente invención también se refiere a usos y a kits terapéuticos que comprenden esas soluciones acuosas estables.
ANTECEDENTES
El sistema del complemento actúa junto con otros sistemas inmunológicos del cuerpo para defenderse contra la intrusión de patógenos celulares y víricos. Hay al menos 25 proteínas del complemento, que se encuentran como una colección compleja de proteínas plasmáticas y cofactores de membrana. Las proteínas plasmáticas constituyen aproximadamente el 10% de las globulinas en el suero de los vertebrados. Los componentes del complemento realizan sus funciones defensivas inmunitarias interactuando en una serie de eventos de escisión enzimática y unión a membrana intrincados, pero precisos. La cascada del complemento da lugar a la producción de productos con funciones opsónicas, inmunorreguladoras y líticas. Se proporciona un resumen conciso de las actividades biológicas asociadas con la activación del complemento, por ejemplo, en The Merck Manual, 16a edición.
Mientras que un sistema del complemento que funciona correctamente proporciona una defensa sólida contra los microbios infecciosos, la regulación o la activación inadecuada de las vías del complemento se ha involucrado en la patogénesis de una diversidad de trastornos, incluidos la hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) y el síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa) ( ver, por ejemplo, Socié G, et al., French Society of Haematology. Lancet.
1996;348(9027):573-577; Brodsky, R., Blood. 2014;124(18):2804-2811); Hillmen, P., et al, Am. J. Hematol.
2010;85(8):553-559; Caprioli et al. (2006) Blood 108:1267-1279; y Kavanagh et al. (2006) British Medical Bulletin 77 y 78:5-22). Los pacientes con trastornos asociados al complemento, tales como HPN o SHUa, tienen riesgo de morbimortalidad sustanciales.
En consecuencia, un objeto de la presente invención es proporcionar composiciones y procedimientos mejorados para tratar pacientes con trastornos asociados al complemento.
El documento US 2012/230982 se refiere a soluciones acuosas estables que comprenden una alta concentración de un anticuerpo que se une al componente C5 del complemento humano y a procedimientos para preparar las soluciones.
El documento WO 2015/134894 describe anticuerpos que son útiles para inhibir el complemento terminal (por ejemplo, el ensamblaje y/o la actividad del C5b-9 TCC) y la inflamación mediada por anafilotoxina C5a y, por lo tanto, para tratar los trastornos asociados al complemento.
Douillard et al. Antibodies 2019, 8, 46 enseña que la optimización del marco estructural del dominio V puede mejorar las cualidades biofísicas de un candidato a anticuerpo terapéutico y, como resultado, su fabricabilidad, y también tiene el potencial de mejorar la farmacocinética.
SUMARIO
En el presente documento se proporcionan soluciones acuosas estables y altamente concentradas de anticuerpos anti-C5, así como procedimientos para producir y usar las formulaciones. La divulgación proporciona condiciones de formulación adecuadas para mantener a lo largo de un tiempo considerable la estabilidad física y funcional de un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab, también conocido como "anticuerpo BNJ441" y "ALXN1210") en soluciones de alta concentración. Por ejemplo, la divulgación proporciona condiciones de formulación capaces de mantener un anticuerpo anti-C5 en forma predominantemente monomérica durante un periodo de hasta 2 años a una temperatura de entre 2°C y 8°C, incluso aunque el anticuerpo se mantenga en soluciones a concentraciones de aproximadamente 100 mg/ml o superiores. Además, tal como se describe en el presente documento y se ejemplifica en los ejemplos de trabajo, dichas formulaciones también minimizan la agregación, la fragmentación o la degradación de un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) dentro de las soluciones altamente concentradas. Por ejemplo, la divulgación proporciona condiciones de formulación capaces de mantener durante dos años un anticuerpo anti-C5 en una forma altamente concentrada sin fragmentación de anticuerpos ni productos de degradación detectables (según se determina mediante el uso de una técnica de cromatografía de exclusión por tamaño-cromatografía líquida de alta resolución (SEC-HPLC), tal como por ejemplo HPLC-permeación en gel) y no más del 2% de agregado. También se divulgan en el presente documento condiciones adecuadas para formular soluciones de un anticuerpo anti-C5 tal como ravulizumab a más de 200 mg/ml.
Los beneficios de las soluciones acuosas estables y altamente concentradas de un anticuerpo anti-C5 son numerosos. En primer lugar, para aplicaciones terapéuticas que requieren que el anticuerpo se administre a un paciente en un volumen pequeño, la eficacia terapéutica a menudo depende de la cantidad de anticuerpo que se puede administrar en ese volumen pequeño. En ausencia de capacidad para formular un anticuerpo anti-C5 a altas concentraciones, a menudo se excluiría el uso de, por ejemplo, las vías de administración subcutánea, intravítrea y/o intraarticular. En este escenario, las formulaciones de anticuerpos altamente concentradas permiten más opciones para el paciente con respecto a la vía de administración. Para aplicaciones terapéuticas que requieren una administración frecuente y crónica y/o autoadministración, la administración se posibilita gracias a formulaciones de alta concentración y puede resultar más atractiva para los pacientes que la infusión intravenosa. Por ejemplo, las formulaciones de alta concentración de un anticuerpo anti-C5 pueden permitir que un paciente se autoadministre el anticuerpo mediante, por ejemplo, inyección subcutánea o intravenosa. Por lo tanto, la capacidad para formular el anticuerpo a altas concentraciones puede aumentar el cumplimiento de la administración al proporcionar una alternativa fácil de administración en el hogar a pacientes con trastornos asociados al complemento.
Además, los procedimientos para producir las soluciones acuosas descritas en el presente documento no requieren una etapa de liofilización, ni es necesario reconstituir las soluciones acuosas de alta concentración presentadas en el presente documento a partir de material liofilizado. Las soluciones de anticuerpos a alta concentración presentadas en el presente documento proporcionan varias ventajas sobre las formulaciones de anticuerpos liofilizados reconstituidos. En primer lugar, los médicos deben reconstituir localmente las soluciones de anticuerpos liofilizados de forma aséptica, lo que aumenta la posibilidad de contaminación microbiana de la solución antes de la administración. Además, la reconstitución requiere un cuidado considerable para asegurarse que todos los sólidos contenidos en el recipiente de reconstitución se hayan disuelto adecuadamente en la solución. Las soluciones acuosas de alta concentración proporcionadas en el presente documento proporcionan al médico, cuidador y/o paciente un medio rápido, fácil, seguro y eficaz para administrar un anticuerpo terapéutico a un paciente que lo necesita.
Otros beneficios de las formulaciones de alta concentración incluyen, por ejemplo, ahorros en costes de fabricación al disminuir el espacio de almacenamiento a granel y/o el número de procesos de llenado de producto. Además, la capacidad de producir un producto que tenga una vida útil más larga requerirá, en definitiva, menos series de producción, lo que en última instancia reduce el coste para el fabricante y el consumidor del anticuerpo terapéutico altamente concentrado.
La invención proporciona una solución acuosa estable que comprende: (a) un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa y arginina 23,75 mM a 26,25 mM; o (b) un anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa, del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80 y arginina 23,75 mM a 26,25 mM; en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11, y en la que el pH de la solución se encuentra entre 7,2 y 7,6.
El anticuerpo anti-C5 que comprende las cadenas pesada y ligera que tienen las secuencias mostradas en las SEQ ID NO: 14 y 11, respectivamente, puede ser ravulizumab (también conocido como anticuerpo BNJ441 y ALXN1210). La región variable de la cadena pesada (VH) de ravulizumab tiene la secuencia que se muestra en la s Eq ID NO: 12, y la región variable de la cadena ligera (VL) de ravulizumab tiene la secuencia que se muestra en la SEQ ID NO: 8. Las secuencias de CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena pesada de ravulizumab se exponen en las SEQ ID NO: 19, 18 y 3, respectivamente, y las secuencias de CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena ligera de ravulizumab se exponen en las SEQ ID NO: 4, 5 y 6, respectivamente.
La región constante de la cadena pesada de ravulizumab tiene la secuencia expuesta en la SEQ ID NO: 13.
El anticuerpo comprende una región constante de Fc humana variante que se une al receptor Fc neonatal humano (FcRn), en el que la región constante de CH3 de Fc humana variante comprende sustituciones Met-429-Leu y Asn-435-Ser en los residuos correspondientes a metionina 428 y asparagina 434 de una región constante de Fc de IgG humana nativa, en cada caso en la numeración de la UE.
La solución que comprende el anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa, el 0,05% de polisorbato 80 y arginina 25 mM puede comprender el anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en una concentración de aproximadamente 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295, o 300 mg/ml.
La solución puede comprender un conservante. Los ejemplos de conservantes incluyen, pero sin limitación, alcohol bencílico, m-cresol y fenol.
En una forma de realización, la solución acuosa estable comprende (a) el anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; (d) arginina 25 mM y (e) un tensioactivo.
En otra forma de realización, la solución acuosa estable comprende: (a) el anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; (d) el 0,05% de polisorbato 80 y (e) arginina 25 mM.
La solución acuosa estable puede consistir en: (a) el anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa y (d) arginina 25 mM.
La solución acuosa estable puede consistir en: (a) el anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; (d) el 0,05% de polisorbato 80 y (e) arginina 25 mM.
El pH de la solución se encuentra entre 7,2 y 7,6. En una forma de realización, el pH de la solución es de 7,4.
Las soluciones descritas en el presente documento se pueden formular para cualquier modo de administración adecuado. La solución puede formularse para administración por vía parenteral (por ejemplo, inyección intravenosa, subcutánea, intraperitoneal o intramuscular). En una forma de realización, la solución se formula para administración subcutánea. Por ejemplo, la solución acuosa estable comprende un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml y está formulada para administración subcutánea. En una forma de realización, la solución se formula para administración intravenosa. Por ejemplo, la solución acuosa estable comprende un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml y está formulada para administración intravenosa.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede permanecer al menos el 95 (por ejemplo, al menos el 96, 97, 98 o 99)% monomérico durante el almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses, según se determina por SEC-HPLC (por ejemplo, HPLC de permeación en gel), durante al menos nueve meses según se determina por SEC-HPLC, durante al menos un año según se determina por SEC-HPLC, durante al menos 18 meses según se determina por SEC-HPLC, o durante al menos dos años según se determina por SEC-HPLC.
Menos del 5% o menos del 4% del anticuerpo anti-C5 (por ejemplo ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede agregarse según se determina por SEC-HPLC (por ejemplo, HPLC de permeación en gel). En una forma de realización, se agrega menos del 3%, menos del 2% o menos del 1% del anticuerpo anti-C5 en la solución según se determina mediante SEC-HPLC.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede conservar al menos el 80 (por ejemplo, al menos el 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 o 99)% de su actividad de unión a C5 durante el almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses, durante al menos nueve meses, durante al menos un año, durante al menos dieciocho meses, durante al menos dos años o durante al menos tres años, en comparación con un anticuerpo anti-C5 de referencia correspondiente al anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede conservar al menos el 80 (por ejemplo, al menos el 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 o 99)% de su capacidad para inhibir la hemólisis durante el almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos nueve meses, durante al menos seis meses, durante al menos un año, durante al menos 18 meses, durante al menos dos años o durante al menos tres años, en comparación con un anticuerpo anti-C5 de referencia correspondiente al anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento.
La invención también proporciona un procedimiento para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende un anticuerpo anti-C5 que comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11, a una concentración de 100 mg/ml, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM, comprendiendo el procedimiento:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa y arginina 23,75 mM a 26,25 mM, a pH 7,4 para producir de ese modo una segunda solución acuosa, en el que la segunda solución acuosa tiene una segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM.
En una forma de realización, la solución de anticuerpo concentrada estable comprende además del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80 y el procedimiento comprende:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa y arginina 23,75 mM a 26,25 mM y del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80 a pH 7,4 para producir de ese modo una segunda solución acuosa, en el que la segunda solución acuosa tiene una segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM y del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80.
La invención también proporciona cualquiera de las soluciones acuosas estables descritas en el presente documento para su uso en un procedimiento para tratar a un paciente humano con una afección asociada al complemento y/o un paciente humano con microangiopatía trombótica (MAT). Los ejemplos de afecciones asociadas al complemento incluyen, pero sin limitación, artritis reumatoide, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos, nefritis lúpica, lesión por isquemia-reperfusión, síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa), síndrome urémico hemolítico típico, hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN), enfermedad de depósitos densos, neuromielitis óptica, neuropatía motora multifocal, esclerosis múltiple, degeneración macular, síndrome HELLP, pérdida fetal espontánea, púrpura trombocitopénica trombótica, vasculitis pauci-inmune, epidermólisis ampollosa, pérdida fetal recurrente, lesión cerebral traumática, miocarditis, un trastorno cerebrovascular, un trastorno periférico vascular, un trastorno renovascular, un trastorno vascular mesentérico/entérico, vasculitis, nefritis púrpura de Henoch-Schonlein, vasculitis asociada a lupus eritematoso sistémico, vasculitis asociada con artritis reumatoide, vasculitis por complejos inmunitarios, enfermedad de Takayasu, miocardiopatía dilatada, angiopatía diabética, enfermedad de Kawasaki, embolia gaseosa venosa, reestenosis tras la colocación de una prótesis endovascular, aterectomía rotacional, angioplastia coronaria transluminal percutánea, miastenia gravis, enfermedad de aglutininas frías, dermatomiositis, hemoglobinuria fría paroxística, síndrome antifosfolípido, enfermedad de Graves, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, sepsis de respuesta inflamatoria sistémica, choque séptico, lesión de la médula espinal, glomerulonefritis, rechazo de trasplante, tiroiditis de Hashimoto, diabetes tipo I, psoriasis, pénfigo, anemia hemolítica autoinmunitaria, púrpura trombocitopénica idiopática, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Degos y síndrome antifosfolípido catastrófico. En una forma de realización, la afección asociada al complemento es el síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa) o hemoglobinuria paroxística nocturna (HNP).
La invención también proporciona un kit terapéutico que comprende: (i) cualquiera de las soluciones acuosas estables de la invención; y (ii) un medio para administrar la solución a un ser humano, opcionalmente en el que el medio es una jeringa. El medio pueden ser adecuado para la administración subcutánea de la solución al ser humano. El medio pueden ser adecuado para la administración intravenosa de la solución al ser humano. El kit puede comprender además al menos un principio activo adicional para su uso en un procedimiento para tratar un trastorno asociado al complemento en un sujeto.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
La figura 1 representa los resultados de la dispersión dinámica de la luz para una titulación con sal de ravulizumab (ALXN1210) a 50 mg/ml intercambiado con tampón de histidina.
La figura 2 representa los resultados de la dispersión dinámica de la luz para una titulación con L-arginina de ravulizumab (ALXN1210) a 50 mg/ml intercambiado con tampón.
La figura 3 representa los resultados de la dispersión dinámica de la luz para una titulación con sal de ravulizumab (ALXN1210) a 50 mg/ml intercambiado con tampón fosfato.
La figura 4 representa los resultados de fluorescencia de barrido diferencial de ravulizumab (ALXN1210) a 50 mg/ml intercambiado con tampón.
La figura 5 representa los resultados de dispersión dinámica de la luz para ravulizumab (ALXN1210) a 10 mg/ml y 114 mg/ml sin L-arginina, y 114 mg/ml con la adición de L-arginina.
La figura 6 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T=2 semanas a 2-8°C).
La figura 7 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T=3 semanas a T=2 meses a 2-8°C).
La figura 8 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T=3 semanas a 23-27°C).
La figura 9 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T=1 mes a T=2 meses a 23-27°C).
La figura 10 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T=1 semana a T=3 semanas a 37°C).
La figura 11 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) (T = 1 mes a T = 2 meses a 37°C). La figura 12 muestra los datos de estabilidad de la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 2 meses 2-8°C).
La figura 13 muestra los datos de estabilidad de la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 2 meses 23-27°C).
La figura 14 muestra los datos de estabilidad de la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 2 meses 37°C).
La figura 15 muestra los datos de estabilidad de dispersión de luz dinámica para muestras de ravulizumab (ALXN1210) e histidina (T=0).
La figura 16 muestra los datos de estabilidad de dispersión de luz dinámica para las muestras de ravulizumab (ALXN1210)-histidina AS (T=0).
La figura 17 muestra los datos de estabilidad de dispersión de luz dinámica para las muestras de ravulizumab (ALXN1210)-fosfato (T=0).
La figura 18 muestra los datos de estabilidad de dispersión de luz dinámica para las muestras de ravulizumab (ALXN1210)-fosfato (T=2 meses 2-8°C).
La figura 19 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) congelación-descongelación (T=0 al ciclo 2 a T=1M -20°C).
La figura 20 muestra los datos de estabilidad de ravulizumab (ALXN1210) congelación-descongelación del ciclo 3 al ciclo 5 a T=1 M -20°C.
La figura 21 muestra los datos de estabilidad de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC),% de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (congelación-descongelación a T=1 mes -20°C).
La figura 22 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T=2 meses a 2-8°C).
La figura 23 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=3 meses a T=6 meses a 2-8°C).
La figura 24 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=9 meses a T=12 meses a 2-8°C).
La figura 25 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=1 mes a T=2 meses a 23-27°C).
La figura 26 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=3 meses a T=6 meses a 23-27°C).
La figura 27 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=9 meses a T=12 meses a 23-27°C).
La figura 28 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=2 semanas a T=2 meses a 37°C.
La figura 29 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=1 mes a T=3 meses a -20°C).
La figura 30 muestra los datos de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=6 meses a T=12 meses a -20°C).
La figura 31 muestra los resultados del estudio de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=3 meses a T=6 meses a -80°C).
La figura 32 muestra los resultados del estudio de estabilidad del prototipo para ravulizumab (ALXN1210) (T=12 meses a -80°C).
La figura 33 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo,% de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T=12 meses 2-8°C).
La figura 34 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo,%de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T=12 meses 23-27°C).
La figura 35 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 12 meses 37°C).
La figura 36 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 12 meses -20°C).
La figura 37 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (T=0 a T= 12 meses -80°C).
La figura 38 muestra los datos de dispersión dinámica de la luz de estabilidad del prototipo para muestras de ravulizumab ALXN1210-fosfato a 75 mg/ml (T=0).
La figura 39 muestra los datos de dispersión dinámica de la luz de estabilidad del prototipo para muestras de ravulizumab (ALXN1210)-fosfato a 75 mg/ml (T=1 mes 2-8°C).
La figura 40 muestra los datos de dispersión dinámica de la luz de estabilidad del prototipo para muestras de ravulizumab (ALXN1210)-fosfato a 100 mg/ml (T=1 mes 2-8°C).
La figura 41 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (congelación-descongelación ciclos 1-3 a T=1 mes -20°C. La figura 42 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (congelación-descongelación ciclos 4-5 a T=1 mes -20°C. La figura 43 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210): congelación y descongelación ciclos 1-3 a T=3 meses -80°C. La figura 44 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210): congelación y descongelación ciclos 4-5 a T=3 meses -80°C. La figura 45 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210) (congelación-descongelación ciclos 1-5 a T=1 mes -20°C. La figura 46 muestra los datos de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de estabilidad del prototipo, % de monómero para ravulizumab (ALXN1210): congelación y descongelación ciclos 1-5 a T=3 meses -80°C. La figura 47 representa el diseño general de un estudio de fase 1 diseñado para evaluar la seguridad, tolerabilidad, PK, PD e inmunogenicidad de una dosis única de 400 mg de ravulizumab (ALXN1210) administrada por vía subcutánea en comparación con una dosis única de 400 mg de ravulizumab (ALXN1210) administrada por vía intravenosa o placebo administrado por vía subcutánea en 42 sujetos sanos.
La figura 48 proporciona una visión general de la disposición de todos los sujetos.
La figura 49 es un gráfico que representa las concentraciones séricas individuales de ALXN1210 frente al tiempo nominal usando una escala lineal.
La figura 50 es un gráfico que representa las concentraciones séricas individuales de ALXN1210 frente al tiempo nominal usando una escala logarítmica lineal.
La figura 51 es un gráfico que representa el cambio porcentual medio (± SD) en la concentración sérica de C5 libre desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se les administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV.
La figura 52 es un gráfico que representa el cambio porcentual medio (± SD) en las concentraciones séricas totales de C5 desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se les administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV.
La figura 53 es un gráfico que representa el cambio porcentual medio (± SD) en la hemólisis de glóbulos rojos de pollo (cRBC) desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se les administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
La divulgación presenta soluciones acuosas estables que contienen una alta concentración de anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab). Las soluciones se pueden utilizar en una diversidad de aplicaciones terapéuticas, tales como procedimientos para tratar trastornos asociados al complemento. A continuación se detallan ejemplos de soluciones, formulaciones, kits terapéuticos y procedimientos para preparar y utilizar cualquiera de los anteriores y se ejemplifican en los ejemplos de trabajo.
I. Definiciones
A menos que se definan de otra forma, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que entienden comúnmente los expertos en la técnica. Aunque en la puesta en práctica o en los ensayos de la presente invención se puede utilizar cualquier procedimiento y composición similar o equivalente a los descritos en el presente documento, en el presente documento se describen los procedimientos y composiciones preferidos.
La forma singular "un", "una", "el" y "la" incluye la referencia plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario.
El término "aproximadamente", en particular con referencia a una cantidad o número determinado, se pretende que abarque desviaciones dentro de más o menos el diez por ciento (± 10%), (por ejemplo, ± 5%).
El término "formulación farmacéutica" se refiere a preparaciones que se encuentran en una forma que permite que la actividad biológica de los principios activos sea inequívocamente eficaz y que no contienen componentes adicionales que sean significativamente tóxicos para los sujetos a los que se administraría la formulación.
Tal como se utiliza en el presente documento, una composición farmacéutica "acuosa" es una composición adecuada para uso farmacéutico, en la que el vehículo acuoso es agua. Una composición adecuada para uso farmacéutico puede ser estéril, homogénea y/o isotónica. Las composiciones farmacéuticas acuosas se pueden preparar directamente en forma acuosa y/o se pueden reconstituir a partir de un liofilizado.
Una formulación "isotónica" es aquella que tiene esencialmente la misma presión osmótica que la sangre humana. Las formulaciones isotónicas generalmente tendrán una presión osmótica de aproximadamente 275 a 350 mOsm/kg. El término "hipotónico" describe una formulación con una presión osmótica inferior a la de la sangre humana. De forma correspondiente, el término "hipertónico" se utiliza para describir una formulación con una presión osmótica superior a la de la sangre humana. La isotonicidad se puede medir, por ejemplo, utilizando un osmómetro del tipo de presión de vapor o de punto de congelación. Un "agente de tonicidad" es un compuesto que hace que la formulación sea isotónica.
Tal como se utiliza en el presente documento, la "osmolalidad" de una solución es el número de osmoles de soluto por kilogramo de disolvente. La osmolalidad es una medida del número de partículas presentes en una solución y es independiente del tamaño o del peso de las partículas. Solo se puede medir mediante el uso de una propiedad de la solución que dependa únicamente de la concentración de partículas. Estas propiedades son la depresión de la presión de vapor, la depresión del punto de congelación, la elevación del punto de ebullición y la presión osmótica, y se denominan en conjunto propiedades coligativas.
Una formulación "estéril" es aséptica o está desprovista o esencialmente desprovista de todos los microorganismos vivos y sus esporas.
Una formulación "estable", tal como se utiliza en el presente documento, es aquella en la que el anticuerpo que contiene esencialmente conserva su estabilidad física y/o estabilidad química y/o actividad biológica tras el almacenamiento. Varias técnicas analíticas para medir la estabilidad de las proteínas están disponibles en la técnica y se revisan en Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, N.Y., Pubs. (1991) y Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90 (1993). La estabilidad de las formulaciones de anticuerpos anti-C5 se puede medir a temperaturas seleccionadas después de periodos de tiempo seleccionados. Por ejemplo, un aumento en la formación de agregados después del almacenamiento es un indicador de inestabilidad de una formulación acuosa de anticuerpos anti-C5. Además de la formación de agregados, la conservación de la claridad, el color y el olor originales durante toda la vida útil son indicadores utilizados para controlar la estabilidad de las soluciones acuosas de anticuerpos anti-C5 descritas en el presente documento.
Un anticuerpo "conserva su estabilidad física" en una formulación farmacéutica si sustancialmente no muestra signos de agregación, precipitación y/o desnaturalización tras el examen visual del color y/o claridad, o según se mide mediante dispersión de luz UV o mediante cromatografía de exclusión por tamaño.
El término "agregación" se refiere al ensamblaje de proteínas plegadas nativas para formar agregados que contienen estructuras no nativas. La agregación puede producirse incluso en condiciones fisiológicas no desnaturalizantes y, a menudo, es irreversible, lo que da como resultado agregados no nativos que son inactivos y, a veces, inmunogénicos y tóxicos.
La frase "niveles de agregación bajos a indetectables", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a muestras que contienen no más de aproximadamente el 5%, no más de aproximadamente el 4%, no más de aproximadamente el 3%, no más de aproximadamente el 2%, no más de aproximadamente el 1% y no más de aproximadamente el 0,5% de agregación en peso de proteína, según se mide mediante técnicas de cromatografía líquida de alta resolución de permeación en gel (GP-HPLC), cromatografía de exclusión por tamaño de alta resolución (HPSEC) o dispersión de luz estática (SLS).
Un anticuerpo "conserva su estabilidad química" en una formulación farmacéutica, si la estabilidad química en un momento dado es tal que se considera que el anticuerpo aún conserva su actividad biológica tal como se define a continuación. La estabilidad química se puede evaluar mediante la detección y la cuantificación de formas químicamente alteradas del anticuerpo. La alteración química puede implicar modificación del tamaño (por ejemplo, recorte), desamidación, racemización, hidrólisis, oxidación, eliminación beta e intercambio de disulfuro que pueden evaluarse mediante el uso e técnicas conocidas, por ejemplo, cromatografía de exclusión por tamaño, SDS-PAGE, ionización por desorción láser asistida por matriz/espectrometría de masas de tiempo de vuelo. (MALDI/TOF MS) y/o cromatografía de intercambio iónico.
Un anticuerpo "conserva su actividad biológica" en una formulación farmacéutica, si el anticuerpo en una formulación farmacéutica es biológicamente activo para el fin previsto. Por ejemplo, la actividad biológica se conserva si la actividad biológica del anticuerpo en la formulación farmacéutica se encuentra dentro de aproximadamente el 30%, aproximadamente el 20% o aproximadamente el 10% (dentro de los errores del ensayo) de la actividad biológica mostrada en el momento en que se preparó la formulación farmacéutica (por ejemplo, según se determina en un ensayo de unión a antígeno). En el presente documento, "actividad biológica" de un anticuerpo monoclonal se refiere a la capacidad del anticuerpo para unirse al antígeno. Puede incluir además la unión de anticuerpo a antígeno y que dé como resultado una respuesta biológica medible que se pueda medirin vitrooin vivo.
"Vida útil" de un producto farmacéutico, por ejemplo, una solución acuosa que comprende un anticuerpo anti-C5 es el periodo de tiempo que está almacenado el producto antes de que se produzca la descomposición. Por ejemplo, la vida útil puede definirse como el tiempo de descomposición del 0,1%, 0,5%, 1%, 5% o 10% del producto.
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "anticuerpo" describe polipéptidos que comprenden al menos un sitio de unión a antígeno derivado de anticuerpo (por ejemplo, región VH/VL o Fv, o CDR) Los anticuerpos incluyen formas conocidas de anticuerpos. Por ejemplo, el anticuerpo puede ser un anticuerpo humano o un anticuerpo humanizado. El anticuerpo también puede ser de cualquiera de los siguientes isotipos: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgAsec, IgD e IgE. El término anticuerpo también incluye constructos polipeptídicos artificiales o modificados genéticamente que comprenden al menos un sitio de unión a antígeno derivado de anticuerpo.
Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "unión específica", "unión selectiva", "se une selectivamente" y "se une específicamente" se refieren a la unión de un anticuerpo a un epítopo de un antígeno predeterminado pero no a otros antígenos. Normalmente, el anticuerpo (i) se une con una constante de disociación de equilibrio (K<d>) de aproximadamente menos de 10-7 M, tal como aproximadamente menos de 10-8 M, 10-9 M o 10-10 M o incluso menor cuando se determina mediante, por ejemplo, tecnología de resonancia de plasmón superficial (SPR) en un instrumento de resonancia de plasmón superficial BIACORE® 2000 que utiliza el antígeno predeterminado, por ejemplo, C5, como analito y el anticuerpo como ligando, o análisis de Scatchard de la unión del anticuerpo a células positivas para el antígeno, y (ii) se une al antígeno predeterminado con una afinidad que es al menos dos veces superior a su afinidad de unión a un antígeno no específico (por ejemplo, BSA, caseína) distinto del antígeno predeterminado o un antígeno estrechamente relacionado. En consecuencia, a menos que se indique lo contrario, un anticuerpo que "se une específicamente a C5 humano" se refiere a un anticuerpo que se une a C5 humano soluble o unido a células con una Kd de 10-7 M o inferior, tal como aproximadamente menos de 10-8 M, 10-9 M o 10-10 M o incluso inferior.
El término "resonancia de plasmón superficial", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un fenómeno óptico que permite el análisis de interacciones bioespecíficas en tiempo real mediante la detección de alteraciones en las concentraciones de proteínas dentro de una matriz de biosensores, por ejemplo utilizando el sistema BIAcore (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Suecia y Piscataway, Nueva Jersey). Para más descripciones, véase Jonsson, U., et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Jonsson, U., et al. (1991) Biotechniques 11:620-627; Johnsson, B., et al. (1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131; y Johnnson, B., et al. (1991) Anal. Biochem. 198:268-277.
El término "Koff", tal como se utiliza en el presente documento, pretende referirse a la constante de velocidad de disociación de un anticuerpo del complejo anticuerpo/antígeno.
El término "Kd", tal como se utiliza en el presente documento, pretende referirse a la constante de disociación de una interacción anticuerpo-antígeno particular.
Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "sujeto" o "paciente" se utilizan indistintamente en el presente documento y se refieren a un mamífero tal como un ser humano, ratón, rata, hámster, cobaya, conejo, gato, perro, mono, vaca, caballo, cerdo y similares. La invención proporciona la solución acuosa estable para su uso en el tratamiento de un paciente humano (por ejemplo, un paciente humano que tiene una enfermedad asociada al complemento).
Los términos "tratar", "que trata" y "tratamiento", tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a medidas terapéuticas descritas en el presente documento. Los procedimientos de "tratamiento" emplean la administración a un sujeto de la combinación divulgada en el presente documento para curar, retrasar, reducir la gravedad o mejorar uno o más síntomas de la enfermedad o trastorno o enfermedad o trastorno recurrente, o para prolongar la supervivencia de un sujeto más allá de lo esperado en ausencia de dicho tratamiento.
Tal como se utiliza en el presente documento, "tratamiento eficaz" se refiere a un tratamiento que produce un efecto beneficioso, por ejemplo, la mejora de al menos un síntoma de una enfermedad o trastorno. Un efecto beneficioso puede tomar la forma de una mejora con respecto al valor inicial, es decir, una mejora con respecto a una medición u observación realizada antes del inicio de la terapia según el procedimiento. El tratamiento eficaz puede referirse al alivio de al menos un síntoma de una enfermedad o afección.
El término "cantidad eficaz" se refiere a una cantidad de un agente que proporciona el resultado biológico, terapéutico y/o profiláctico deseado. Ese resultado puede ser una reducción, mejora, paliación, disminución, retraso y/o alivio de uno o más de los signos, síntomas o causas de una enfermedad o afección, o cualquier otra alteración deseada de un sistema biológico. En un ejemplo, una "cantidad eficaz" es la cantidad de una solución acuosa estable para aliviar al menos un síntoma de una enfermedad o afección. Una cantidad eficaz puede administrarse en una o más administraciones.
Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "inducción" y "fase de inducción" se usan indistintamente y se refieren a la primera fase del tratamiento.
Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "mantenimiento" y "fase de mantenimiento" se usan indistintamente y se refieren a la segunda fase del tratamiento. El tratamiento puede continuar mientras se observe un beneficio clínico o hasta que se produzca una toxicidad ingestionable o una progresión de la enfermedad.
II. Anticuerpos C5
Los anticuerpos anti-C5 descritos en el presente documento se unen al componente C5 del complemento (por ejemplo, C5 humano) e inhiben la escisión de C5 en fragmentos C5a y C5b. Tal como se ha descrito anteriormente, dichos anticuerpos también tienen, por ejemplo, propiedades farmacocinéticas mejoradas con respecto a otros anticuerpos anti-C5 (por ejemplo, eculizumab) utilizado con fines terapéuticos.
Los anticuerpos anti-C5 (o dominios VH/VL derivados de los mismos) adecuados para su uso en la invención se pueden generar usando procedimientos bien conocidos en la técnica. Alternativamente, se pueden usar anticuerpos anti-C5 reconocidos en la técnica. También pueden usarse anticuerpos que compiten con cualquiera de estos anticuerpos reconocidos en la técnica por la unión a C5.
Un ejemplo de anticuerpo anti-C5 es ravulizumab que comprende cadenas pesadas y ligeras que tienen las secuencias mostradas en las SEQ ID NO: 14 y 11, respectivamente, o fragmentos de unión a antígeno del mismo. El ravulizumab (también conocido como BNJ441 y ALXN1210) se describe en el documento PCT/US2015/019225 y la patente de Estados Unidos N°: 9.079.949. Los términos ravulizumab, BNJ441 y ALXN1210 pueden usarse indistintamente en el presente documento. El ravulizumab se une selectivamente a la proteína C5 del complemento humano, inhibiendo su escisión en C5a y C5b durante la activación del complemento. Esta inhibición previene la liberación del mediador proinflamatorio C5a y la formación del complejo citolítico de ataque a la membrana formador de poros (MAC) C5b-9, al tiempo que preserva los componentes proximales o tempranos de la activación del complemento (por ejemplo, C3 y C3b) esenciales para la opsonización de microorganismos y la eliminación de complejos inmunitarios.
El anticuerpo anti-C5 comprende las CDR de cadena pesada y ligera y las regiones variables de ravulizumab. En consecuencia, el anticuerpo comprende los dominios CDR1, CDR2 y CDR3 de la región VH de ravulizumab que tiene la secuencia expuesta en la SEQ ID NO: 12 y los dominios CDR1, CDR2 y CDR3 de la región VL de ravulizumab que tiene la secuencia expuesta en la SEQ ID NO: 8. El anticuerpo comprende los dominios CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena pesada que tienen las secuencias expuestas en la SEQ ID NO: 19, 18 y 3, respectivamente, y los dominios CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena ligera que tienen las secuencias expuestas en SEQ ID NO: 4, 5 y 6, respectivamente. El anticuerpo comprende regiones VH y VL que tienen las secuencias de aminoácidos expuestas en la S<e>Q ID NO: 12 y la SEQ ID NO: 8, respectivamente.
Los límites exactos de las CDR se han definido de manera diferente de acuerdo con diferentes procedimientos. Las posiciones de las CDR o regiones estructurales dentro de un dominio variable de cadena ligera o pesada pueden ser tal como se definen por Kabat et al. [(1991) "Sequences of Proteins of Immunological Interest." Publicación NIH N° 91 3242, U.S. Department of Health and Human Services, Bethesda, MD]. En tales casos, los CDR pueden denominarse "CDR de Kabat" (por ejemplo, "LCDR2 de Kabat" o "HCDR1 de Kabat"). Las posiciones de las CDR de una región variable de cadena ligera o pesada pueden ser tal como se definen por Chothia et al. (1989) Nature 342:877-883. En consecuencia, estas regiones pueden denominarse "CDR de Chothia" (por ejemplo, "LCDR2 de Chothia" o "HCDR3 de Chothia"). Las posiciones de las CDR de las regiones variables de cadena ligera y pesada pueden ser tal como se definen mediante una definición combinada de Kabat-Chothia. En dichos casos, estas regiones pueden denominarse "CDR combinadas de Kabat-Chothia". Thomas et al. [(1996) Mol Immunol 33(17/18):1389-1401] ejemplifica la identificación de los límites de las CDR según las definiciones de Kabat y Chothia.
El ravulizumab comprende una CDR1 de la cadena pesada que comprende o consiste en la siguiente secuencia de aminoácidos: GHIFSNYWIQ (SEQ ID NO: 19). El ravulizumab comprende una CDR2 de la cadena pesada que comprende o consiste en la siguiente secuencia de aminoácidos: E<i>LPGSGHTEYTENFKD (SEQ ID NO: 18). El ravulizumab comprende una región variable de la cadena pesada que comprende la siguiente secuencia de aminoácidos:
QVQFVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGFEWMGEIFPGSGH
TEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQG
TFVTVSS (SEQ ID NO: 12).
El ravulizumab comprende una región variable de la cadena ligera que comprende la siguiente secuencia de aminoácidos:
DIQMTQSPSSFSASVGDRVTITCGASENIYGAFNWYQQKPGKAPKFFIYGATNFADGVP
SRFSGSGSGTDFTFTISSFQPEDFATYYCQNVFNTPFTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 8).
El ravulizumab comprende una región constante de Fc humana variante que se une al receptor de Fc neonatal humano (FcRn) con mayor afinidad que la de la región constante de Fc humana nativa de la que se deriva la región constante de Fc humana variante. Las sustituciones aumentan la afinidad de unión de un anticuerpo IgG que contiene la región constante de Fc variante a FcRn a pH 6,0, manteniendo al mismo tiempo la dependencia del pH de la interacción. Los procedimientos para evaluar si una o más sustituciones en la región constante de Fc de un anticuerpo aumentan la afinidad de la región constante de Fc por FcRn a pH 6,0 (mientras se mantiene la dependencia del pH de la interacción) se conocen en la técnica y se ejemplifican en los ejemplos de trabajo. Véanse, por ejemplo, el documento PCT/US2015/019225 y la patente de Estados Unidos N° 9.079.949.
La región constante de Fc humana variante de ravulizumab comprende una metionina en la posición 428 y una asparagina en la posición 434, cada una en la numeración de la UE La ubicación precisa de estas mutaciones se desplaza de la posición de la región constante Fc humana nativa debido a la ingeniería de anticuerpos. La doble sustitución 428L/434S cuando se usa en un Fc quimérico IgG2/4 corresponde a 429L y 435S tal como en las variantes M429L y N435S encontradas en ravulizumab (BNJ441) y descritas en la patente de Estados Unidos N° 9.079.949.
Los anticuerpos anti-C5 adecuados para su uso en los procedimientos descritos en el presente documento comprenden un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11.
El anticuerpo puede unirse a C5 a pH 7,4 y 25°C (y, en caso contrario, en condiciones fisiológicas) con una constante de disociación de afinidad (K<d>) que sea al menos 0,1 (por ejemplo, al menos 0,15, 0,175, 0,2, 0,25, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,525, 0,55, 0,575, 0,6, 0,625, 0,65, 0,675, 0,7, 0,725, 0,75, 0,775, 0,8, 0,825, 0,85, 0,875, 0,9, 0,925, 0,95, o 0,975) nM. La K<d>del anticuerpo anti-C5, o fragmento de unión a antígeno del mismo, no puede ser superior a 1 (por ejemplo, no superior a 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3 o 0,2) nM.
La [KD del anticuerpo para C5 a pH 6,0 en C)/(KD del anticuerpo para C5 a pH 7,4 a 25°C)] puede ser superior a 21 (por ejemplo, superior a 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, o 8000).
Los procedimientos para determinar si un anticuerpo se une a un antígeno proteínico y/o la afinidad de un anticuerpo por un antígeno proteínico son conocidos en la técnica. Por ejemplo, la unión de un anticuerpo a un antígeno proteico se puede detectar y/o cuantificar utilizando una diversidad de técnicas tales como, pero sin limitación, inmunotransferencia Western, inmunotransferencia por puntos(dot blot),procedimiento de resonancia de plasmón superficial (SPR) (por ejemplo, sistema BIAcore; Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Suecia y Piscataway, Nueva Jersey), o ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Véase, por ejemplo, Benny K. C. Lo (2004) "Antibody Engineering: Methods and Protocols," Humana Press (ISBN: 1588290921); Johne et al. (1993) J Immunol Meth 160:191 -198; Jonsson et al. (1993) Ann Biol Clin 51:19-26; y Jonsson et al. (1991) Biotechniques 11:620-627. Además, en los ejemplos de trabajo se exponen procedimientos para medir la afinidad (por ejemplo, constantes de disociación y asociación) .
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "ka" se refiere a la constante de velocidad para la asociación de un anticuerpo a un antígeno. El término ''kd'' se refiere a la constante de velocidad para la disociación de un anticuerpo del complejo anticuerpo/antígeno. Y el término "Kd" se refiere a la constante de disociación de equilibrio de una interacción anticuerpo-antígeno. La constante de disociación en equilibrio se deduce de la relación de las constantes de velocidad cinéticas, Kd = ka/kd. Dichas determinaciones se miden preferentemente a 25°C o 37°C (véanse los ejemplos de trabajo). Por ejemplo, la cinética de unión del anticuerpo al C5 humano se puede determinar a pH 8,0, 7,4, 7,0, 6,5 y 6,0 mediante resonancia de plasmón superficial (SPR) en un instrumento BIAcore 3000 usando un procedimiento de captura anti-Fc para inmovilizar el anticuerpo.
El anticuerpo anti-C5, o su fragmento de unión a antígeno, puede bloquear la generación o la actividad de los fragmentos activos C5a y/o C5b de una proteína C5 (por ejemplo, una proteína C5 humana). Por medio de este efecto de bloqueo, los anticuerpos inhiben, por ejemplo, los efectos proinflamatorios de C5a y la generación del complejo de ataque a la membrana (MAC) C5b-9 en la superficie de una célula.
Los procedimientos para determinar si un anticuerpo particular descrito en el presente documento inhibe la escisión de C5 se conocen en la técnica. La inhibición del componente C5 del complemento humano puede reducir la capacidad de lisis celular del complemento en los fluidos corporales de un sujeto. Dichas reducciones de la capacidad de lisis celular del complemento presente en los fluidos corporales pueden medirse mediante procedimientos bien conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, mediante un ensayo hemolítico convencional tal como el ensayo de hemólisis descrito por Kabat y Mayer (eds.), "Experimental Immunochemistry, 2a Edición", 135-240, Springfield, IL, CC Thomas (1961), páginas 135-139, o una variación convencional de ese ensayo, tal como el procedimiento de hemólisis de eritrocitos de pollo tal como se describe en, por ejemplo, Hillmen et al. (2004) N Engl JMed 350(6):552. Los procedimientos para determinar si un compuesto candidato inhibe la escisión de C5 humano en las formas C5a y C5b se conocen en la técnica y se describen en Evans et al. (1995) Mol Immunol 32(16):1183-95. Por ejemplo, la concentración y/o actividad fisiológica de C5a y C5b en un fluido corporal puede medirse mediante procedimientos bien conocidos en la técnica. Para C5b, pueden usarse ensayos hemolíticos o ensayos para C5b-9 soluble, tal como se describe en el presente documento. También se pueden utilizar otros ensayos conocidos en la técnica. Utilizando ensayos de estos u otros tipos adecuados, se pueden seleccionar agentes candidatos capaces de inhibir el componente C5 del complemento humano.
Se pueden usar técnicas inmunológicas tales como, pero sin limitación, ELISA para medir la concentración de proteína de C5 y/o sus productos divididos para determinar la capacidad de un anticuerpo anti-C5, o fragmento de unión a antígeno del mismo, para inhibir la conversión de C5 en productos biológicamente activos. Se puede medir la generación de C5a. Se pueden usar anticuerpos específicos del neoepítopo C5b-9 para detectar la formación de complemento terminal.
Se pueden usar ensayos hemolíticos para determinar la actividad inhibidora de un anticuerpo anti-C5, o de un fragmento de unión a antígeno del mismo, sobre la activación del complemento. Para determinar el efecto de un anticuerpo anti-C5, o de un fragmento de unión a antígeno del mismo, sobre la hemólisis mediada por la vía clásica del complemento en una solución de ensayo séricoin vitro,por ejemplo, se utilizan como células diana eritrocitos de oveja recubiertos con hemolisina o eritrocitos de pollo sensibilizados con anticuerpo anti-eritrocitos de pollo. El porcentaje de lisis se normaliza considerando que el 100% de lisis es igual a la lisis que se produce en ausencia del inhibidor. La vía clásica del complemento puede activarse mediante un anticuerpo IgM humano, por ejemplo, tal como se utiliza en el Kit de complemento de vía clásica Wieslab® (Wieslab® COMPL CP310, Euro-Diagnostica, Suecia). Brevemente, el suero de ensayo se incuba con un anticuerpo anti-C5, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, en presencia de un anticuerpo IgM humano. La cantidad de C5b-9 que se genera se mide poniendo en contacto la mezcla con un anticuerpo anti-C5b-9 conjugado con enzima y un sustrato fluorogénico y midiendo la absorbancia a la longitud de onda apropiada. Como control, el suero de ensayo se incuba en ausencia del anticuerpo anti-C5 o de un fragmento de unión a antígeno del mismo. El suero de ensayo puede ser un suero deficiente en C5 reconstituido con un polipéptido C5.
Para determinar el efecto de un anticuerpo anti-C5, o fragmento de unión a antígeno del mismo, sobre la hemólisis mediada por vía alternativa, se pueden usar eritrocitos de conejo o cobaya no sensibilizados como células diana. La solución de ensayo sérico puede ser un suero deficiente en C5 reconstituido con un polipéptido C5. El porcentaje de lisis puede normalizarse considerando que el 100% de lisis es igual a la lisis que se produce en ausencia del inhibidor. La vía alternativa del complemento puede activarse mediante moléculas de lipopolisacáridos, por ejemplo, tal como se utiliza en el kit de complemento de vía alternativa Wieslab® (Wieslab® COMPL AP330, Euro-Diagnostica, Suecia). Brevemente, el suero de ensayo se incuba con un anticuerpo anti-C5, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, en presencia de lipopolisacárido. La cantidad de C5b-9 que se genera se mide poniendo en contacto la mezcla con un anticuerpo anti-C5b-9 conjugado con enzima y un sustrato fluorogénico y midiendo la fluorescencia a la longitud de onda apropiada. Como control, el suero de ensayo se incuba en ausencia del anticuerpo anti-C5 o de un fragmento de unión a antígeno del mismo.
La actividad de C5, o su inhibición, se puede cuantificar usando un ensayo CH50eq. El ensayo CH50eq es un procedimiento para medir la actividad del complemento clásico total en suero. Este ensayo es un ensayo lítico que utiliza eritrocitos sensibilizados con anticuerpos como activador de la vía clásica del complemento y varias diluciones del suero de ensayo para determinar la cantidad necesaria para obtener una lisis del 50% (CH50). El porcentaje de hemólisis se puede determinar, por ejemplo, utilizando un espectrofotómetro. El ensayo CH50eq proporciona una medida indirecta de la formación del complejo del complemento terminal (CCT), ya que los propios CCT son directamente responsables de la hemólisis que se mide.
El ensayo es bien conocido y se pone en práctica comúnmente por los expertos en la técnica. Brevemente, para activar la vía clásica del complemento, se añaden muestras de suero sin diluir (por ejemplo, muestras de suero humano reconstituidas) a los pocillos de microensayo que contienen los eritrocitos sensibilizados con anticuerpos para generar así TCC. A continuación, los sueros activados se diluyen en pocillos de microensayo, que se recubren con un reactivo de captura (por ejemplo, un anticuerpo que se une a uno o más componentes del TCC). El TCC presente en las muestras activadas se une a los anticuerpos monoclonales que recubren la superficie de los pocillos de microensayo. Los pocillos se lavan y a cada pocillo se añade un reactivo de detección que está marcado de forma detectable y reconoce el TCC unido. La etiqueta detectable puede ser, por ejemplo, un marcador fluorescente o un marcador enzimático. Los resultados del ensayo se expresan en unidades equivalentes de CH50 por mililitro (CH50 U Eq/ml).
La inhibición, por ejemplo, en lo que respecta a la actividad del complemento terminal, incluye una disminución de al menos el 5 (por ejemplo, al menos del 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 o 60)% en la actividad del complemento terminal en, por ejemplo, un ensayo hemolítico o ensayo CH50eq en comparación con el efecto de un anticuerpo de control (o fragmento de unión a antígeno del mismo) en condiciones similares y a una concentración equimolar. Inhibición sustancial, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la inhibición de una actividad determinada (por ejemplo, actividad del complemento terminal) de al menos el 40 (por ejemplo, al menos el 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 o 95 o más)%.
Un anticuerpo anti-C5 descrito en el presente documento tiene una semivida en suero en suero en seres humanos que es de al menos 20 (por ejemplo, al menos 21,22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31,32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, o 55) días. El anticuerpo anti-C5 descrito en el presente documento puede tener una semivida en suero en seres humanos de al menos 40 días, es decir de aproximadamente 43 días o de entre 39 y 48 días. Se conocen en la técnica procedimientos para medir la semivida en suero de un anticuerpo. Un anticuerpo anti-C5, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, descrito en el presente documento puede tener una semivida en suero al menos el 20 (por ejemplo, al menos el 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 400, 500)% superior que la semivida en suero de eculizumab, por ejemplo, medido en uno de los sistemas modelo de ratón descritos en los ejemplos de trabajo (por ejemplo, el sistema modelo de ratón transgénico con deficiencia de C5/NOD/scid o hFcRn).
Los anticuerpos anti-C5, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos descritos en el presente documento, utilizados en los procedimientos descritos en el presente documento, se pueden generar utilizando una diversidad de técnicas reconocidas en la técnica. Pueden obtenerse anticuerpos monoclonales por diversas técnicas familiares para los expertos en la técnica. Brevemente, las células del bazo de un animal inmunizado con un antígeno deseado pueden inmortalizarse, comúnmente mediante fusión con una célula de mieloma (véase, Kohler y Milstein, Eur. J. Inmunol. 6: 511-519 (1976)). Procedimientos alternativos de inmortalización incluyen transformación con virus de Epstein Barr, oncogenes o retrovirus, u otros procedimientos bien conocidos en la técnica. Las colonias que surgen de células inmortalizadas individuales se seleccionan para la producción de anticuerpos de la especificidad y la afinidad deseadas por el antígeno, y el rendimiento de los anticuerpos monoclonal producidos por dichas células puede potenciarse mediante diversas técnicas, incluyendo inyección en la cavidad peritoneal de un huésped vertebrado. Alternativamente, se pueden aislar secuencias de ADN que codifican un anticuerpo monoclonal o un fragmento de unión del mismo seleccionando una biblioteca de ADN de células B humanas de acuerdo con el protocolo general descrito en Huse, et al., Science 246: 1275-1281 (1989).
III. Soluciones de anticuerpos anti-C5 altamente concentradas
En el presente documento se proporcionan soluciones acuosas estables que comprenden un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab). Las soluciones acuosas pueden ser composiciones estériles de calidad farmacéutica, por ejemplo, para su uso en un procedimiento para tratar un trastorno asociado al complemento, tal como HNP o SHUa. Las soluciones pueden formularse según procedimientos estándar. La formulación farmacéutica es una técnica bien establecida y se describe con más detalle en, por ejemplo, Gennaro (2000) "Remington: The Science and Practice of Pharmacy," 20a edición, Lippincott, Williams & Wilkins (ISBN: 0683306472); Ansel et al. (1999) "Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems," 7a edición, Lippincott Williams & Wilkins Publishers (ISBN: 0683305727); y Kibbe (2000) "Handbook of Pharmaceutical Excipients American Pharmaceutical Association," 3a edición (ISBN: 091733096X). En los ejemplos de trabajo se ejemplifican procedimientos de formulación adecuados para las soluciones de anticuerpos de alta concentración descritas en el presente documento.
Las soluciones acuosas descritas en el presente documento comprenden una alta concentración de un anticuerpo que se une al componente C5 del complemento humano, tal como ravulizumab. En ocasiones, dichas soluciones se denominan en el presente documento "soluciones de anticuerpos de alta concentración". Tal como se utiliza en el presente documento, una "alta concentración" de un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en una solución acuosa es una concentración del anticuerpo que es al menos, igual o superior a 40 (por ejemplo, al menos, igual o superior a 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295, o 300) mg/ml. El anticuerpo anti-C5 puede estar presente en la solución en una concentración superior a 100 (por ejemplo, superior a 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, o 195) mg/ml, superior a 200 (por ejemplo, superior a200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, o 295) mg/ml, o superior a 300 mg/ml. El anticuerpo puede estar presente en la solución a una concentración de, por ejemplo, 40 mg/ml a 200 mg/ml, 50 mg/ml a 200 mg/ml, 60 mg/ml a 200 mg/ml, 70 mg/ml a 200 mg/ml, 80 mg/ml a 200 mg/ml, 90 mg/ml a 200 mg/ml, 100 mg/ml a 200 mg/ml, 110 mg/ml a 200 mg/ml, 120 mg/ml a 200 mg/ml, 130 mg/ml a 200 mg/ml, 140 mg/ml a 200 mg/ml, 150 mg/ml a 200 mg/ml, 40 mg/ml a 100 mg/ml, 50 mg/ml a 100 mg/ml, 60 mg/ml a 100 mg/ml, 70 mg/ml a 100 mg/ml, 80 mg/ml a 100 mg/ml, 90 mg/ml a 100 mg/ml, 40 mg/ml a 150 mg/ml, 50 mg/ml a 150 mg/ml, 60 mg/ml a 150 mg/ml, 70 mg/ml a 150 mg/ml, 80 mg/ml a 150 mg/ml, 90 mg/ml a 150 mg/ml, 100 mg/ml a 150 mg/ml, 110 mg/ml a 150 mg/ml, 120 mg/ml a 150 mg/ml, 40 mg/ml a 50 mg/ml, 40 mg/ml a 250 mg/ml, 50 mg/ml a 250 mg/ml, 60 mg/ml a 250 mg/ml, 70 mg/ml a 250 mg/ml, 80 mg/ml a 250 mg/ml, 90 mg/ml a 250 mg/ml, 100 mg/ml a 250 mg/ml, 110 mg/ml a 250 mg/ml, 120 mg/ml a 250 mg/ml, 130 mg/ml a 250 mg/ml, 140 mg/ml a 250 mg/ml, 150 mg/ml a 250 mg/ml, 160 mg/ml a 250 mg/ml, 170 mg/ml a 250 mg/ml, 180 mg/ml a 250 mg/ml, 190 mg/ml a 250 mg/ml, 200 mg/ml a 250 mg/ml, mayor de 200 mg/ml (por ejemplo, al menos 201 mg/ml) a 250 mg/ml, o superior a 200 mg/ml (por ejemplo, 201 mg/ml o más) a 300 mg/ml.
Tal como se describe en el presente documento y se ejemplifica en los ejemplos de trabajo, las soluciones acuosas presentadas en el presente documento proporcionan al anticuerpo anti-C5 formulado en las mismas una marcada estabilidad física y química, así como estabilidad funcional. Por ejemplo, las formulaciones descritas en el presente documento son capaces de mantener la integridad estructural de un anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) presente en altas concentraciones en una solución. La solución puede ser adecuada para almacenarla a 2-8°C (por ejemplo, 4°C). La solución puede formularse para su almacenamiento a una temperatura inferior a 0°C (por ejemplo, -20°C o -80°C). La solución puede formularse para almacenamiento durante hasta tres años (por ejemplo, un mes, dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 1 año, 1 / años, 2 años, 21/2 años o 3 años) a 2-8°C (por ejemplo, 4°C). La solución puede ser adecuada para su almacenamiento durante al menos 1,2 o 3 años a 2-8°C (por ejemplo, 4°C).
Tal como se ejemplifica en los ejemplos de trabajo descritos en el presente documento, las soluciones descritas en el presente documento son adecuadas para mantener un anticuerpo anti-C5 a aproximadamente 100 mg/ml en forma predominantemente monomérica durante hasta dos años a una temperatura de entre aproximadamente 2°C y 8°C. Tal como se utiliza en el presente documento, un anticuerpo anti-C5 formulado en una alta concentración en una solución acuosa presentada en el presente documento es "predominantemente monomérico" o en "forma predominantemente monomérica", si el anticuerpo presente en la solución tiene al menos el 95 (por ejemplo, al menos el 95,1,95,2, 95,3, 95,4, 95,5, 95,6, 95,7, 95,8, 95,9, 96, 96,1, 96,2, 96,3, 96,4, 96,5, 96,6, 96,7, 96,8, 96,9, 97, 97,1, 97.2, 97,3, 97,4, 97,5, 97,6, 97,7, 97,8, 97,9, 98, 98,1, 98,2, 98,3, 98,4, 98,5, 98,6, 98,7, 98,8, 98,9, 99, 99,1, 99,2, 99.3, 99,4, 99,5, 99,6, 99,7, 99,8, o 99,9 o más)% monomérico, por ejemplo, según se determina usando cromatografía de exclusión por tamaño-cromatografía líquida de alta resolución (SEC-HPLC, tal como HPLC de permeación en gel). El anticuerpo anti-C5 en las soluciones descritas en el presente documento puede permanecer predominantemente monomérico después del almacenamiento durante al menos un mes (por ejemplo, al menos dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, 17 meses, 18 meses, 19 meses, 20 meses, 21 meses, 22 meses, 23 meses, 24 meses o más) a una temperatura de entre aproximadamente 2°C y 8°C (por ejemplo, almacenamiento a, por ejemplo, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10°C).
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede permanecer al menos el 95 (por ejemplo, al menos el 96, 97, 98 o 99)% monomérico durante un almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses, según se determina por SEC-HPLC (por ejemplo, HPLC de permeación en gel), durante al menos nueve meses según se determina por SEC-HPLC, durante al menos un año según se determina por SEC-HPLC, durante al menos 18 meses según se determina por SEC-HPLC, o durante al menos dos años según se determina por SEC-HPLC.
Menos del 5 (por ejemplo, menos del 4,9. 4,8, 4,7, 4,6, 4,5, 4,4, 4,3, 4,2, 4,1,4,0, 3,9, 3,8, 3,7, 3,6, 3,5, 3,4, 3,3, 3,2, 3,1,3,0, 2,9, 2,8, 2,7, 2,6, 2,5, 2,4, 2,3, 2,2, 2,1,2, 1,9, 1,8, 1,7, 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1,2, 1,1, 1,0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, o 0,1) % del anticuerpo en la solución puede ser oligomérico, estar agregado y/o estar fragmentado. Tal como se utiliza en el presente documento, la fragmentación de anticuerpos se refiere a constituyentes ensamblados incorrectamente o productos de degradación de un anticuerpo completo que tienen un peso molecular más bajo que el anticuerpo completo. Dichas formas de fragmentación incluyen, pero sin limitación, un polipéptido de cadena pesada monomérico libre, un polipéptido de cadena pesada dimérico (por ejemplo, polipéptido de cadena pesada unido por puentes disulfuro), un polipéptido de cadena pesada dimérico unido a un polipéptido de cadena ligera, un polipéptido de cadena pesada monomérico unido a un polipéptido de cadena ligera, o producto(s) de degradación adicional(es) o fragmento(s) de un polipéptido de cadena ligera o de cadena pesada. Menos del 2 (por ejemplo, menos del 1,9, 1,8, 1,7, 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1,2, 1,1, 1,0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, o 0,1)% del anticuerpo puede agregarse después de un almacenamiento durante al menos un mes (por ejemplo, al menos dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, 17 meses, 18 meses, 19 meses, 20 meses, 21 meses, 22 meses, 23 meses, 24 meses o más) a una temperatura de entre 2°C y 8°C. Menos del 1 (por ejemplo, menos del 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 o 0,1)% del anticuerpo se puede fragmentar después de un almacenamiento durante al menos un mes (por ejemplo, al menos dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, 17 meses, 18 meses, 19 meses, 20 meses, 21 meses, 22 meses, 23 meses, 24 meses o más) a una temperatura de entre 2°C y 8°C. Los procedimientos para determinar la cantidad de anticuerpo monomérico, así como la cantidad de formas oligoméricas, agregadas o fragmentadas del anticuerpo anti-C5 presentes en solución se describen en el presente documento y se ejemplifican en los ejemplos de trabajo. Por ejemplo, un experto en la técnica puede determinar el porcentaje de intermedios completos, fragmentados, desplegados y/o especies de anticuerpos agregados presentes en una solución dada usando, por ejemplo, cromatografía de exclusión por tamaño-cromatografía líquida de alta resolución (SEC-HPLC, tal como HPLC de permeación en gel), dispersión de luz estática (SLS), espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FTIR), dicroísmo circular (CD), técnicas de desplegado de proteínas inducido por urea, fluorescencia intrínseca de triptófano, electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio no reductor (SDS-PAGE) y calorimetría diferencial de barrido (DSC).
Menos del 5% o menos del 4% del anticuerpo anti-C5 (por ejemplo ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede agregarse según se determina por SEC-HPLC (por ejemplo, HPLC de permeación en gel). En una forma de realización, se agrega menos del 3%, menos del 2% o menos del 1% del anticuerpo anti-C5 en la solución según se determina mediante SEC-HPLC.
Tal como se describe en el presente documento y se ejemplifica en los ejemplos de trabajo, las soluciones que contienen anticuerpo anti-C5 presentadas en el presente documento pueden conservar al menos el 90 (por ejemplo, el 91,92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 o incluso el 100)% de su actividad biológica/funcional (por ejemplo, capacidad de unirse al C5 humano) después de un almacenamiento durante al menos un mes (por ejemplo, al menos dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, 17 meses, 18 meses, 19 meses, 20 meses, 21 meses, 22 meses, 23 meses, 24 meses, 25 meses, 26 meses, 27 meses, 28 meses, 29 meses, 30 meses, 31 meses, 32 meses, 33 meses, 34 meses, 35 meses, 36 meses o más) a una temperatura de entre 2°C y 8°C.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) presente en una solución descrita en el presente documento puede conservar al menos el 90 (por ejemplo, el 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, o incluso el 100)% de su actividad para inhibir la hemólisis después de un almacenamiento durante al menos un mes (por ejemplo, al menos dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, 17 meses, 18 meses, 19 meses, 20 meses, 21 meses, 22 meses, 23 meses, 24 meses, 25 meses, 26 meses, 27 meses, 28 meses, 29 meses, 30 meses, 31 meses, 32 meses, 33 meses, 34 meses, 35 meses, 36 meses o más a una temperatura de entre 2°C y 8°C. En el presente documento se describen, y se conocen en la técnica, procedimientos de ensayo hemolíticos adecuados para determinar si un anticuerpo en una solución presentada en el presente documento conserva su actividad, por ejemplo, ensayos hemolíticosin vitrocon eritrocitos aviares o porcinos. Los procedimientos adecuados para evaluar la capacidad de una preparación de anticuerpos para unirse al componente C5 del complemento humano se conocen en la técnica y se describen en el presente documento.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede conservar al menos el 80 (por ejemplo, al menos el 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 o 99)% de su actividad de unión a C5 durante el almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses, durante al menos nueve meses, durante al menos un año, durante al menos dieciocho meses, durante al menos dos años o durante al menos tres años, en comparación con un anticuerpo anti-C5 de referencia correspondiente al anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento.
El anticuerpo anti-C5 (por ejemplo, ravulizumab) en cualquiera de las soluciones descritas en el presente documento puede conservar al menos el 80 (por ejemplo, al menos el 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 o 99)% de su capacidad para inhibir la hemólisis durante un almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos nueve meses, durante al menos seis meses, durante al menos un año, durante al menos 18 meses, durante al menos dos años o durante al menos tres años, en comparación con un anticuerpo anti-C5 de referencia correspondiente al anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento.
Las soluciones acuosas descritas en el presente documento pueden contener uno o más agentes de uso común (por ejemplo, uno o más excipientes y/o aditivos, tales como agentes tampón, azúcares o sacáridos, sales, tensioactivos, solubilizantes, diluyentes, aglutinantes, estabilizantes, sales, disolventes lipófilos, aminoácidos, quelantes y/o conservantes).
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "agente tampón" se refiere a uno o más componentes que, cuando se añaden a una solución acuosa, son capaces de proteger la solución contra variaciones de pH al añadir ácido o álcali, o al diluir con un disolvente. Los ejemplos no limitantes de tampones típicos incluyen Tris (tris(hidroximetil)metilamina), bis-Tris, bis-Tris propano, histidina, trietanolamina, dietanolamina, formiato, acetato, MES (ácido 2-(N-morfolino)etanosulfónico), fosfato, HEPES (ácido 4-2-hidroxietil-1-piperacinetanosulfónico), citrato, MOPS (ácido 3-(N-morfolino)propanosulfónico), TAPS (ácido 3{[tris(hidroximetil)metil]amino}propanosulfónico), Bicina (N,N-bis(2-hidroxietil)glicina), Tricina (N-tris(hidroximetil)metilglicina), t Es (ácido 2-{[tris(hidroximetil)metil]amino}etanosulfónico), PIPES (piperazina-N,N'-bis(ácido 2-etanosulfónico), cacodilato (ácido dimetilarsínico), SSC (citrato de sodio salino) y fosfato de sodio.
Otro ejemplo de agente tampón es un aminoácido. El aminoácido puede ser, por ejemplo, uno seleccionado del grupo formado por histidina (por ejemplo, L-histidina), serina (por ejemplo, L-serina) y glicina (por ejemplo, L-glicina). La solución puede comprender dos o más agentes tampón. La solución de la invención comprende fosfato de sodio como agente tampón. Las soluciones divulgadas pueden incluir dos o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete o más) aminoácidos diferentes como agentes tampón, por ejemplo, serina e histidina.
La concentración del tampón es suficiente para mantener el pH deseado y también puede variarse, por ejemplo, para mantener la isotonicidad de la formulación. Las concentraciones típicas de agentes tampón convencionales empleados en formulaciones parenterales se pueden encontrar en: Pharmaceutical Dosage Form: Parenteral Medications, Volumen 1 ,2a edición, capítulo 5, página 194, De Luca y Boylan, "Formulation of Small Volume Parenterals", Tabla 5: Commonly used additives in Parenteral Product. La concentración de uno o más agentes tampón en la formulación puede ser de aproximadamente 10 mM a 300 mM, ambos inclusive. La solución puede comprender al menos un agente tampón a una concentración de 10 mM, a 200 mM, ambos inclusive. La solución acuosa descrita en el presente documento puede contener un agente tampón a una concentración de al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, o 300 o más) mM. La solución acuosa puede incluir un agente tampón a una concentración de entre aproximadamente 10 mM a 50 mM, 15 mM a 50 mM, 20 mM a 50 mM, 25 mM a 50 mM, 30 mM a 50 mM, 40 mM a 50 mM, 10 mM a 100 mM, 15 mM a 100 mM, 20 mM a 100 mM, 25 mM a 100 mM, 30 mM a 100 mM, 40 mM a 100 mM, 10 mM a 150 mM, 15 mM a 150 mM, 20 mM a 150 mM, 25 mM a 150 mM, 30 mM a 150 mM, 40 mM a 150 mM, 50 mM a 100 mM, 60 mM a 100 mM, 70 mM a 100 mM, 80 mM a 100 mM, 50 mM a 150 mM, 60 mM a 150 mM, 70 mM a 150 mM, 80 mM a 150 mM, 90 mM a 150 mM, 100 mM a 150 mM, 10 mM a 200 mM, 15 mM a 200 mM, 20 mM a 200 mM, 25 mM a 200 mM, 30 mM a 200 mM, 40 mM a 200 mM, 50 mM a 200 mM, 60 mM a 200 mM, 70 mM a 200 mM, 80 mM a 200 mM, 90 mM a 200 mM, 100 mM a 200 mM, 150 mM a 200 mM, 10 mM a 250 mM, 15 mM a 250 mM, 20 mM a 250 mM, 25 mM a 250 mM, 30 mM a 250 mM, 40 mM a 250 mM, 50 mM a 250 mM, 60 mM a 250 mM, 70 mM a 250 mM, 80 mM a 250 mM, 90 mM a 250 mM, 100 mM a 250 mM, 150 mM a 250 mM o 200 mM a 250 mM. La concentración del tampón en la formulación puede ser aproximadamente 20 mM, 25 mM, 30 mM, 35 mM, 40 mM, 45 mM, 50 mM, 55 mM, 60 mM, 65 mM, 70 mM, 75 mM, 80 mM, 90 mM, 95 mM o aproximadamente 100 mM. El agente tampón puede estar presente en la solución en una concentración de al menos, o igual a, 20 mM. El agente tampón puede estar presente en la solución en una concentración de al menos, o igual a, 25 mM. El agente tampón puede estar presente en la solución en una concentración de al menos, o igual a, 50 mM. Cuando una solución presentada en el presente documento contiene dos o más (por ejemplo, al menos dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o 10 o más) agentes tampón diferentes, cada uno de los dos o más agentes tampón puede estar presente independientemente en, por ejemplo, una de las concentraciones descritas anteriormente. Una solución de la invención comprende tampón fosfato 50 mM.
La solución acuosa puede tener, o puede ajustarse para que tenga, un pH neutro. Tal como se utiliza en el presente documento, "pH neutro" es un pH que se encuentra entre 7 y 8, ambos inclusive. En consecuencia, tal como se utiliza en el presente documento, el pH neutro incluye valores de pH particulares tales como 7, 7,1,7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9 y 8,0. El pH neutro puede ser al menos pH 7 (por ejemplo, al menos pH 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,7 o 7,9), pero inferior a pH 8 (por ejemplo, menos de pH 7,9, 7,8, 7,7, 7,6, 7,5, 7,4, 7,3, 7,2 o 7,1). Es decir, el pH neutro puede ser, por ejemplo, al menos pH 7, pero inferior a pH 7,5. El pH neutro puede encontrarse entre pH 7 y pH 7,5, entre pH 7 y pH 7,2, entre 7,0 y 7,4 o entre 7,2 y 7,8. En una forma de realización, el pH de la solución se encuentra entre 7,2 y 7,6. El pH neutro puede ser, por ejemplo, pH 7. Un experto en la técnica también apreciará que la sangre humana (tal como sangre humana de un paciente sano) tiene un pH neutro tal como se define en el presente documento, por ejemplo, el pH de la sangre humana es de aproximadamente 7,35 a 7,45. Véase, por ejemplo, Boron y Boulpaep (2003) "Medical physiology: a cellular and molecular approach," W.B. Saunders, Nueva York (ISBN:0721632564). El pH de una solución de anticuerpos altamente concentrada descrita en el presente documento puede encontrarse entre aproximadamente 6,4 y 7,5, ambos inclusive (siendo, por ejemplo, aproximadamente 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6 o 7,7). En una forma de realización, el pH de la solución se encuentra entre 7,2 y 7,6. En una forma de realización, el pH de la solución es de 7,4.
La solución puede contener uno o más tensioactivos, tales como un tensioactivo aniónico, catiónico o no iónico. Tal como se utiliza en el presente documento, el término "tensioactivo" se refiere a una molécula tensioactiva que contiene tanto una porción hidrófoba (por ejemplo, cadena alquílica) y una porción hidrófila (por ejemplo, grupos carboxilo y carboxilato). Los tensioactivos adecuados incluyen, pero sin limitación, ésteres de ácidos grasos (por ejemplo, monocaprilato de sorbitán, monolaurato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán), trioleato de sorbitán, ésteres de ácidos grasos de glicerina (por ejemplo, monocaprilato de glicerina, monomiristato de glicerina, monoestearato de glicerina), ésteres de ácidos grasos de poliglicerina (por ejemplo, monoestearato de decaglicerilo, diestearato de decaglicerilo, monolinoleato de decaglicerilo), ésteres de ácidos grasos de polioxietilensorbitán (por ejemplo, monolaurato de polioxietilensorbitán, monooleato de polioxietilensorbitán, monoestearato de polioxietilensorbitán, monopalmitato de polioxietilensorbitán, trioleato de polioxietilensorbitán, triestearato de polioxietilensorbitán), ésteres de ácidos grasos de polioxietilensorbitán (por ejemplo, tetraestearato de polioxietilensorbitol, tetraoleato de polioxietilensorbitol), ésteres de ácidos grasos de polioxietilenglicerina (por ejemplo, monoestearato de polioxietilenglicerilo), ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol (por ejemplo, diestearato de polietilenglicol), éteres de polioxietilenalquilo (por ejemplo, polioxietilen lauril éter), polioxietileno polioxipropilen alquil éteres (por ejemplo, polioxietilen polioxipropilenglicol, polioxietilen polioxipropilen propil éter, polioxietilen polioxipropilen cetil éter), polioxietilen alquilfenil éteres (por ejemplo, polioxietilen nonilfenil éter), aceites de ricino hidrogenados de polioxietileno (por ejemplo, aceite de ricino de polioxietileno, aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno), derivados de cera de abejas de polioxietileno (por ejemplo, cera de abejas de polioxietileno sorbitol), derivados de polioxietilen-lanolina (por ejemplo, polioxietilen-lanolina) y amidas de ácidos grasos de polioxietileno (por ejemplo, amida del ácido polioxietilenesteárico); sulfatos de alquilo C12-C18 (por ejemplo, cetilsulfato de sodio, laurilsulfato de sodio, oleilsulfato de sodio), alquil C10-C18-etersulfato de polioxietileno con un promedio de 2 a 4 moles de unidades de óxido de etileno añadidas (por ejemplo, polioxietilen-laurilsulfato de sodio) y sales de éster de sulfosuccinato de alquilo C10-C18 (por ejemplo, éster de lauril-sulfosuccinato de sodio); y tensioactivos naturales tales como lecitina, glicerofosfolípidos, esfingofosfolípidos (por ejemplo, esfingomielina) y ésteres de sacarosa de ácidos grasos C12-C18.
El tensioactivo puede ser un tensioactivo no iónico. El tensioactivo puede ser un éster de ácido graso de polioxietilensorbitán, por ejemplo, polisorbato 20, 40, 60, 80 o una combinación de uno o más de los mismos. El tensioactivo puede ser polisorbato 80 (Tween 80), polisorbato 60, polisorbato 40 o polisorbato 20 (Tween 20).
La cantidad de tensioactivo añadido a la formulación es suficiente para reducir la agregación del anticuerpo formulado y/o minimizar la formación de partículas en la formulación. Por ejemplo, el tensioactivo puede estar presente en la formulación en una cantidad de aproximadamente el 0,001% a aproximadamente el 1%, o de aproximadamente el 0,001% a aproximadamente el 0,5%, o de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 0,2%. Las soluciones acuosas pueden contener un tensioactivo a una concentración de al menos, o aproximadamente, el 0,001 (por ejemplo, al menos, o aproximadamente, el 0,002, 0,003, 0,004, 0,005, 0,006, 0,007, 0,008, 0,009, 0,01,0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,11, 0,12, 0,13, 0,14, 0,15, 0,16, 0,17, 0,18, 0,19, 0,2, 0,21, 0,22, 0,23, 0,24, 0,25, 0,26, 0,27, 0,28, 0,29, 0,3, 0,31, 0,32, 0,33, 0,34, 0,35, 0,36, 0,37, 0,38, 0,39, 0,4, 0,41, 0,42, 0,43, 0,44, 0,45, 0,46, 0,47, 0,48, 0,49, o 0,5 o más)%. La solución acuosa no puede contener más del 0,2 (por ejemplo, no más del 0,19, 0,18, 0,17, 0,16, 0,15, 0,14, 0,13, 0,12, 0,11, 0,10, 0,09, 0,08, 0,07, 0,06, 0,05, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01,0,009, 0,008, 0,007, 0,006, 0,005, 0,004, 0,003, 0,002, o 0,001)% de un tensioactivo farmacéuticamente aceptable
Las formulaciones pueden comprender polisorbato a una concentración de aproximadamente el 0,001% a aproximadamente el 0,5%, de aproximadamente el 0,005% a aproximadamente el 0,2%, de aproximadamente el 0,01% a aproximadamente el 0,1%, o de aproximadamente el 0,02% a aproximadamente el 0,06%, o de aproximadamente el 0,03% a aproximadamente el 0,05% (p/v). La formulación puede comprender un polisorbato a una concentración del 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, o 0,15% o 0,2% (p/v). El tensioactivo puede estar presente en la formulación en una cantidad del 0,02% o aproximadamente el 0,04% (p/v). El tensioactivo puede estar presente en la formulación en una cantidad del 0,05% (p/v).
La formulación puede comprender al menos aproximadamente el 0,01%, al menos aproximadamente el 0,02%, al menos aproximadamente el 0,05%, al menos aproximadamente el 0,1%, al menos aproximadamente el 0,2%, al menos aproximadamente el 0,3%, al menos aproximadamente el 0,4%, o al menos aproximadamente el 0,5% de Polisorbato 80. La formulación puede comprender entre aproximadamente el 0,01% y aproximadamente el 0,5%, entre aproximadamente el 0,01% y aproximadamente el 0,3%, entre aproximadamente el 0,001% y aproximadamente el 0,2%, entre aproximadamente el 0,02% y aproximadamente el 0,5%, entre aproximadamente el 0,02% y aproximadamente el 0,3%, entre aproximadamente el 0,02% y aproximadamente el 0,2%, entre aproximadamente el 0,05% y aproximadamente el 0,5%, entre aproximadamente el 0,05% y aproximadamente el 0,3%, entre aproximadamente el 0,05% y aproximadamente el 0,2%, entre aproximadamente el 0,075% y aproximadamente el 0,5%, entre aproximadamente el 0,075% y aproximadamente el 0,3%, o entre aproximadamente el 0,075% y aproximadamente el 0,2% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,01%, aproximadamente el 0,02%, aproximadamente el 0,05%, aproximadamente el 0,1%, aproximadamente el 0,2%, aproximadamente el 0,3%, aproximadamente el 0,4%, o aproximadamente el 0,5% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,05% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,04% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,03% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,02% de polisorbato 80. La formulación puede comprender aproximadamente el 0,01% de polisorbato 80.
La solución acuosa puede contener una o más sales, por ejemplo, cloruro de sodio, cloruro de potasio o cloruro de magnesio. Una solución acuosa descrita en el presente documento puede contener una sal a una concentración de al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, o 300 o más) mM. Una solución acuosa descrita en el presente documento puede incluir una sal en una concentración inferior a, o de aproximadamente, 200 (por ejemplo, inferior a, o de aproximadamente, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 25, 20, 15, o 10) mM. Una solución acuosa descrita en el presente documento puede incluir una sal en una concentración de entre aproximadamente 10 mM a 50 mM, 15 mM a 50 mM, 20 mM a 50 mM, 25 mM a 50 mM, 30 mM a 50 mM, 40 mM a 50 mM, 10 mM a 100 mM, 15 mM a 100 mM, 20 mM a 100 mM, 25 mM a 100 mM, 30 mM a 100 mM, 40 mM a 100 mM, 10 mM a 150 mM, 15 mM a 150 mM, 20 mM a 150 mM, 25 mM a 150 mM, 30 mM a 150 mM, 40 mM a 150 mM, 50 mM a 100 mM, 60 mM a 100 mM, 70 mM a 100 mM, 80 mM a 100 mM, 50 mM a 150 mM, 60 mM a 150 mM, 70 mM a 150 mM, 80 mM a 150 mM, 90 mM a 150 mM, 100 mM a 150 mM, 10 mM a 200 mM, 15 mM a 200 mM, 20 mM a 200 mM, 25 mM a 200 mM, 30 mM a 200 mM, 40 mM a 200 mM, 50 mM a 200 mM, 60 mM a 200 mM, 70 mM a 200 mM, 80 mM a 200 mM, 90 mM a 200 mM, 100 mM a 200 mM, 150 mM a 200 mM, 10 mM a 250 mM, 15 mM a 250 mM, 20 mM a 250 mM, 25 mM a 250 mM, 30 mM a 250 mM, 40 mM a 250 mM, 50 mM a 250 mM, 60 mM a 250 mM, 70 mM a 250 mM, 80 mM a 250 mM, 90 mM a 250 mM, 100 mM a 250 mM, 150 mM a 250 mM o 200 mM a 250 mM. Cuando una solución presentada en el presente documento contiene dos o más (por ejemplo, al menos dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o 10 o más) sales diferentes, cada una de las dos o más sales puede estar presente independientemente a, por ejemplo, una de las concentraciones descritas anteriormente.
La solución acuosa puede contener uno o más excipientes de carbohidratos. Los excipientes de carbohidratos adecuados se describen, por ejemplo, en Katakam y Banga (1995) J Pharm Pharmacol 47(2): 103-107; Andya et al. (2003) AAPS PharmSci 5(2): Artículo 10; y Shire (2009) "Current Trends in Monoclonal Antibody Development and Manufacturing," Volume 11, Springer, 354 páginas. Los excipientes de carbohidratos adecuados para su uso en las soluciones descritas en el presente documento incluyen, sin limitación, monosacáridos tales como fructosa, maltosa, galactosa, glucosa, D-manosa y sorbosa; disacáridos tales como lactosa, sacarosa, trehalosa y celobiosa; polisacáridos tales como maltodextrinas, dextranos y almidones; y alcoholes de azúcar tales como manitol, xilitol, maltitol, lactitol y sorbitol. Un excipiente de carbohidratos puede estar presente en una solución presentada en el presente documento a una concentración de al menos, o aproximadamente, 0,5 (por ejemplo, al menos, o aproximadamente, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, o superior) %. Cuando una solución presentada en el presente documento contiene dos o más (por ejemplo, al menos dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o 10 o más) excipientes de carbohidratos diferentes, cada excipiente puede, independientemente, estar presente en cualquiera de las concentraciones descritas anteriormente. Una solución de la invención comprende el 5% de sacarosa.
La solución acuosa estable puede comprender uno o más agentes estabilizantes. Los ejemplos de estabilizantes incluyen, pero sin limitación, polioles, azúcares (por ejemplo, sacarosa o trehalosa), aminoácidos (por ejemplo, arginina), aminas y sales de salazón. La solución según la invención comprende el 5% de sacarosa y arginina 25 mM.
Las soluciones descritas en el presente documento pueden contener uno o más conservantes. Tal como se utiliza en el presente documento, el término "conservante" se refiere a un agente que reduce la acción bacteriana y puede añadirse opcionalmente a las formulaciones del presente documento. La adición de un conservante puede, por ejemplo, facilitar la producción de una formulación de usos múltiples (dosis múltiples). Los ejemplos de conservantes potenciales incluyen cloruro de octadecildimetilbencilamonio, cloruro de hexametonio, cloruro de benzalconio (una mezcla de cloruros de alquilbencildimetilamonio en los que los grupos alquilo son compuestos de cadena larga) y cloruro de bencetonio. Otros tipos de conservantes incluyen alcoholes aromáticos tales como fenol, alcohol butílico y bencílico, alquilparabenos tales como metilparabeno o propilparabeno, catecol, resorcinol, ciclohexanol, 3-pentanol y m-cresol.
La solución acuosa estable puede comprender no más de cinco agentes además del anticuerpo anti-C5 o no más de cuatro agentes además del anticuerpo anti-C5.
La invención proporciona una solución acuosa estable, en la que la solución comprende: (a) un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml, en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; y (d) arginina 25 mM. En una forma de realización, la solución acuosa estable comprende además el 0,05% de polisorbato 80.
La invención también proporciona una solución acuosa estable que comprende: (a) un anticuerpo anti-C5, en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; (d) el 0,05% de polisorbato 80; y (e) arginina 25 mM En una forma de realización, el anticuerpo anti-C5 se encuentra a una concentración de 100 mg/ml.
La solución acuosa estable puede consistir en: (a) un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml, en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) 5% de sacarosa; y (d) arginina 25 mM.
La solución acuosa estable puede consistir en: (a) un anticuerpo anti-C5, en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11; (b) tampón fosfato 50 mM; (c) el 5% de sacarosa; (d) el 0,05% de polisorbato 80; y (e) arginina 25 mM
IV. Procedimientos para preparar soluciones de anticuerpos altamente concentradas
También se proporcionan en el presente documento procedimientos para preparar una solución de anticuerpo anti-C5 altamente concentrada. La invención proporciona un procedimiento para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende un anticuerpo anti-C5 que comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11 a una concentración de 100 mg/ml, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa; y arginina 25 mM, comprendiendo el procedimiento:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato 50 mM, el 5% sacarosa y arginina 25 mM, a pH 7,4 para producir de ese modo una segunda solución acuosa, en el que la segunda solución acuosa tiene una segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa; y arginina 25 mM..
En una forma de realización, la solución de anticuerpo concentrada estable comprende además el 0,05% de polisorbato 80 y el procedimiento comprende:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato 50 mM, el 5% sacarosa, arginina 25 mM y el 0,05% de polisorbato 80, a pH 7,4 para producir de este modo una segunda solución acuosa, en la que la segunda solución acuosa tiene un segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa, arginina 25 mM y el 0,05% de polisorbato 80.
V. Vías de administración
Las soluciones descritas en el presente documento pueden administrarse a un paciente usando una diversidad de procedimientos que dependen, en parte, de la vía de administración. La vía puede ser un modo parenteral, por ejemplo, inyección o infusión intravenosa (IV), inyección subcutánea (SC), inyección intraperitoneal (IP), inyección intraocular, inyección intraarticular o inyección intramuscular (IM). "Administración parenteral", "administrado por vía parenteral" y otras frases gramaticalmente equivalentes, tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, generalmente mediante inyección, e incluyen, sin limitación,inyección e infusión intravenosa, intranasal, intraocular, pulmonar, inyección e infusión intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbitaria, intracardíaca, intradérmica, intrapulmonar, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural, intracerebral, intracraneal, intracarotídea e intraesternal.
En una forma de realización, la solución se administra mediante inyección subcutánea. La administración subcutánea se puede realizar mediante un dispositivo. Los medios del dispositivo pueden ser una jeringa, una jeringa precargada, un autoinyector ya sea desechable o reutilizable, un inyector de pluma, un inyector de parche, un inyector portátil, una bomba de infusión de jeringa ambulatoria con equipos de infusión subcutánea u otro dispositivo.
La solución descrita en el presente documento puede administrarse a un sujeto mediante administración local. Tal como se utiliza en el presente documento, "administración local" o "suministro local" se refiere a la administración que no depende del transporte de la composición o el principio activo (por ejemplo, un anticuerpo anti-C5) al tejido o sitio objetivo previsto a través del sistema vascular. Después de la administración local en las proximidades de un tejido o sitio objetivo, la solución, o uno o más componentes de la misma, puede difundirse al tejido o sitio objetivo previsto.
Por ejemplo, la solución puede administrarse mediante inyección o mediante implante de un dispositivo que contiene la solución. El implante puede ser de un material poroso, no poroso, o gelatinoso, incluyendo membranas, tales como membranas sikalastic, o fibras. El implante puede configurarse para una liberación mantenida o periódica de la solución al sujeto. Véase, por ejemplo, la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos N° 20080241223; las patentes de Estados Unidos N° 5.501.856, 4.863.457 y 3.710.795; los documentos EP488401 y EP 430539. Una solución descrita en el presente documento puede administrarse al sujeto mediante un dispositivo implantable basado, por ejemplo, en sistemas de difusión, erosionables o convectivos, por ejemplo, bombas osmóticas, implantes biodegradables, sistemas de electrodifusión, sistemas de electroósmosis, bombas de presión de vapor, bombas electrolíticas, bombas efervescentes, bombas piezoeléctricas, sistemas basados en erosión o sistemas electromecánicos.
La solución descrita en el presente documento se puede administrar de forma local a una articulación (por ejemplo, una articulación articulada). Por ejemplo, cuando el trastorno es artritis, se puede administrar una solución terapéuticamente apropiada directamente a una articulación (por ejemplo, en un espacio articular) o en las proximidades de una articulación. Los ejemplos de articulaciones intraarticulares a las que se puede administrar localmente una composición descrita en el presente documento incluyen, por ejemplo, la cadera, la rodilla, el codo, la muñeca, el esternoclavicular, el temporomandibular, el carpiano, el tarsiano, el tobillo y cualquier otra articulación expuesta a afecciones artríticas. Una composición descrita en el presente documento también se puede administrar a una bolsa tal como, por ejemplo, acromial, bicipitoradial, cubitoradial, deltoides, infrapatelar, isquiática y cualquier otra bolsa conocida en la técnica de la medicina.
Una solución descrita en el presente documento se puede administrar de forma local al ojo. Tal como se utiliza en el presente documento, el término "ojo" se refiere a cualquiera y todos y cada uno de los tejidos y estructuras anatómicos asociados con un ojo. Se puede administrar una solución descrita en el presente documento a la cámara posterior del ojo. Una solución descrita en el presente documento se puede administrar por vía intravítrea. Una solución descrita en el presente documento se puede administrar por vía transescleral.
Cuando se usa para tratar un trastorno tal como EPOC o asma, una solución descrita en el presente documento puede administrarse a un sujeto por medio del pulmón. La administración pulmonar del fármaco se puede realizar mediante inhalación, y la administración por inhalación en el presente documento puede ser oral y/o nasal. Se puede administrar una solución tal como se describe en el presente documento a los pulmones de un sujeto mediante un nebulizador. Los nebulizadores utilizan aire comprimido para administrar un compuesto en forma de aerosol o niebla licuada. Un nebulizador puede ser, por ejemplo, un nebulizador de chorro (por ejemplo, nebulizadores de aire o de chorro de líquido) o un nebulizador ultrasónico. Dispositivos adicionales y procedimientos de administración intrapulmonar se establecen, por ejemplo, en las publicaciones de solicitud de patente de Estados Unidos N° 20050271660 y 20090110679.
Las soluciones descritas en el presente documento pueden estar presentes en forma de dosificación unitaria, que puede ser particularmente adecuada para la autoadministración. Un producto formulado de la presente divulgación se puede incluir dentro de un recipiente, típicamente, por ejemplo, un vial, cartucho, jeringa precargada o pluma desechable. También se puede utilizar un dosificador, tal como el dispositivo dosificador descrito en la patente de Estados Unidos N° 6.302.855. Un sistema de inyección puede incluir una pluma de administración tal como se describe en la patente de Estados Unidos N° 5.308.341. Los dispositivos tipo pluma, utilizados más comúnmente para la autoadministración de insulina a pacientes con diabetes, son bien conocidos en la técnica. Dichos dispositivos pueden comprender al menos una aguja de inyección (por ejemplo, una aguja de calibre 31 de aproximadamente 5 a 8 mm de longitud), normalmente están precargados con una o más dosis unitarias terapéuticas de una solución, y son útiles para administrar rápidamente la solución a un sujeto con el menor dolor posible.
VI. Usos médicos
Las soluciones descritas se pueden usar en un procedimiento para tratar una diversidad de enfermedades y afecciones en un paciente humano. Las soluciones se pueden usar en un procedimiento para tratar un trastorno asociado al complemento, que incluye, pero sin limitación: artritis reumatoide (AR); síndrome de anticuerpos antifosfolípidos; nefritis lúpica; lesión por isquemia-reperfusión; síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa); síndrome urémico hemolítico típico o infeccioso (SUHt); enfermedad de depósitos densos (DDD); hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN); neuromielitis óptica (NMO); neuropatía motora multifocal (MMN); esclerosis múltiple (EM); degeneración macular (por ejemplo, degeneración macular relacionada con la edad (DMAE)); hemólisis, síndrome de enzimas hepáticas elevadas y plaquetas bajas (HELLP); púrpura trombocitopénica trombótica (PTT); pérdida fetal espontánea; vasculitis pauci inmune; epidermólisis ampollosa; pérdida fetal recurrente; y lesión cerebral traumática (véase, por ejemplo, Holers (2008) Immunological Reviews 223:300-316 y Holers y Thurman (2004) Molecular Immunology 41:147-152.)
El trastorno asociado al complemento puede ser un trastorno vascular asociado al complemento tal como, pero sin limitación, un trastorno vascular asociado a la diabetes (por ejemplo, del ojo), oclusión de la vena central de la retina, un trastorno cardiovascular, miocarditis, un trastorno cerebrovascular, un trastorno vascular periférico (por ejemplo, musculoesquelético), un trastorno renovascular, un trastorno vascular mesentérico/entérico, revascularización a trasplantes y/o reimplantes, vasculitis, nefritis púrpura de Henoch-Schonlein, vasculitis asociada a lupus eritematoso sistémico, vasculitis asociada con artritis reumatoide, vasculitis por complejos inmunitarios, enfermedad de Takayasu, miocardiopatía dilatada, angiopatía diabética, enfermedad de Kawasaki (arteritis), embolia gaseosa venosa (VGE) y reestenosis después de la colocación de una prótesis endovascular, aterectomía rotacional y angioplastia coronaria transluminal percutánea (ACTP) (véase, por ejemplo, la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos N° 20070172483).
Otros trastornos asociados al complemento incluyen, pero sin limitación, miastenia gravis, enfermedad de aglutininas frías, dermatomiositis, enfermedad de Graves, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, síndrome de Guillain-Barré, enfermedad de Degos, rechazo de injerto (por ejemplo, rechazo de trasplante), sepsis, quemadura (por ejemplo, quemaduras graves), sepsis de respuesta inflamatoria sistémica, choque séptico, lesión de la médula espinal, glomerulonefritis, tiroiditis de Hashimoto, diabetes tipo I, psoriasis, pénfigo, anemia hemolítica autoinmunitaria (AIHA), púrpura trombocitopénica idiopática (PTI), síndrome de Goodpasture, síndrome antifosfolípido (SAF), SAF catastrófico (CAPS), esclerosis lateral amiotrófica (ELA), enfermedad de Alzheimer y neuropatía desmielinizante inflamatoria crónica.
En otra forma de realización, las soluciones descritas en el presente documento se pueden usar para tratar la microangiopatía trombótica (MAT), por ejemplo, MAT asociada con un trastorno asociado al complemento tal como cualquiera de los trastornos asociados al complemento descritos en el presente documento.
Los trastornos asociados al complemento también incluyen trastornos pulmonares asociados al complemento tales como, pero sin limitación, asma, bronquitis, una enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), una enfermedad pulmonar intersticial, deficiencia de a-1 antitripsina, enfisema, bronquiectasias, bronquiolitis obliterante, alveolitis, sarcoidosis, fibrosis pulmonar y trastornos vasculares del colágeno.
Se puede administrar una solución descrita en el presente documento a un sujeto para tratar, prevenir o mejorar al menos un síntoma de una respuesta inflamatoria asociada al complemento (por ejemplo, el aspecto de la respuesta inflamatoria asociada al complemento de un trastorno asociado al complemento) en un sujeto. Por ejemplo, se puede usar una composición para tratar, prevenir y/o mejorar uno o más síntomas asociados con una respuesta inflamatoria asociada al complemento tal como rechazo de injerto/enfermedad de injerto contra huésped (EICH), lesiones por reperfusión (por ejemplo, después de derivación cardiopulmonar o un trasplante de tejido) y daño tisular después de otras formas de lesión traumática como una quemadura (por ejemplo, una quemadura grave), un traumatismo cerrado, una lesión de la columna o congelación. Véase, por ejemplo, Park et al. (1999) Anesth Analg 99(1):42-48; Tofukuji et al. (1998) J Thorac Cardiovasc Surg 116(6):1060-1068; Schmid et al. (1997) Shock 8(2):119-124; y Bless et al. (1999) Am J Physiol 276(1):L57-L63.
El trastorno mediado por el complemento puede ser un trastorno vascular mediado por el complemento tal como, pero sin limitación, un trastorno cardiovascular, miocarditis, un trastorno cerebrovascular, un trastorno periférico (por ejemplo, trastorno vascular musculoesquelético, un trastorno renovascular, un trastorno vascular mesentérico/entérico, revascularización para trasplantes y/o replantes, vasculitis, nefritis púrpura de Henoch-Schonlein, vasculitis asociada a lupus eritematoso sistémico, vasculitis asociada con artritis reumatoide, vasculitis por complejos inmunitarios, trasplante de órganos o tejidos, enfermedad de Takayasu, síndrome de fuga capilar, miocardiopatía dilatada, angiopatía diabética, aneurisma aórtico torácico-abdominal, enfermedad de Kawasaki (arteritis), embolia gaseosa venosa (VGE) y reestenosis después de la colocación de una prótesis endovascular, aterectomía rotacional y transluminal percutánea, angioplastia coronaria (ACTP) (véase, por ejemplo, la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos N220070172483.)
VII. Tratamientos de combinación
Las soluciones descritas en el presente documento pueden administrarse a un paciente como monoterapia. Pueden administrarse junto con uno o más agentes adicionales y/u otras terapias (por ejemplo, que son adecuados para el tratamiento de trastornos asociados al complemento). Por ejemplo, la politerapia puede incluir administrar al paciente humano uno o más agentes adicionales (por ejemplo, anticoagulantes, antihipertensivos o antiinflamatorios (por ejemplo, esteroides)) que proporcionan un beneficio terapéutico a un paciente. Las soluciones descritas en el presente documento se pueden administrar en combinación con un agente antiinflamatorio (por ejemplo, AINE, corticosteroides, metotrexato, hidroxicloroquina, agentes anti-TNF tales como etanercept e infliximab, un agente agotador de células B tal como rituximab, un antagonista de interleucina-1 o un agente bloqueante coestimulador de células T tal como abatacept).
Los agentes adicionales para tratar un trastorno asociado al complemento en un sujeto variarán dependiendo del trastorno particular que se esté tratando, pero pueden incluir, sin limitación, uno o más antihipertensivos (por ejemplo, un inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina, labetalol, hidralazina, nifedipina, antagonistas de los canales de calcio, nitroglicerina o nitroprusiato de sodio), anticoagulantes, corticosteroides (por ejemplo, prednisona), agentes inmunodepresores (por ejemplo, vincristina o ciclosporina A), anticoagulantes (por ejemplo, warfarina (Coumadin), aspirina, heparina, fenindiona, fondaparinux, idraparinux), inhibidores de trombina (por ejemplo, argatroban, lepirudina, bivalirudina o dabigatran), agentes fibrinolíticos (por ejemplo, ancrod, ácido a-aminocaproico, antiplasmina-a1, prostaciclina y defibrotida), agentes antihipertensivos (por ejemplo, labetalol, hidralazina, nifedipina, antagonistas de los canales de calcio, nitroglicerina o nitroprusiato de sodio), agentes hipolipemiantes (por ejemplo, un inhibidor de la hidroximetilglutaril CoA reductasa), agentes anticonvulsivos (por ejemplo, sulfato de magnesio), agentes antitrombóticos (por ejemplo, heparina, antitrombina, prostaciclina o aspirina en dosis bajas), simpaticomiméticos (por ejemplo, albuterol), antibióticos, desoxirribonucleasas (por ejemplo, Pulmozyme®), fármacos anticolinérgicos, inhibidores anti-IgE (por ejemplo, anticuerpos anti-IgE), corticosteroides o medicamentos antiinflamatorios no esteroideos (AINE). Hay disponibles muchos AINE diferentes, algunos de venta libre, incluidos ibuprofeno (Advil®, Motrin®, Nuprin®) y naproxeno (Alleve®) y muchos otros están disponibles con receta, incluido meloxicam (Mobic®), etodolaco (Lodine®), nabumetona (Relafen®), sulindaco (Clinoril®), tolementina (Tolectina®), salicilato de colina y magnesio (Trilasate®), diclofenaco (Cataflam®, Voltaren®, Artrotec®), diflusinal (Dolobid®), indometicina (Indocin®), ketoprofeno (Orudis®, Oruvail®), oxaprozina (Daypro®), y piroxicam (Feldene®) (véase, por ejemplo, Mihu et al. (2007) J Gastrointestin Liver Dis 16(4):419-424). Se puede formular una solución descrita en el presente documento para administración a un paciente junto con terapia con gammaglobulina intravenosa (IGIV), plasmaféresis, reemplazo de plasma o intercambio de plasma.
La solución y uno o más agentes y/o terapias adicionales pueden administrarse al mismo tiempo. La solución se puede administrar después de la administración de uno o más agentes y/o terapias adicionales. La solución se puede administrar después de la administración de uno o más agentes y/o terapias adicionales.
Cuando una solución de anticuerpos descrita en el presente documento se usa en combinación con un segundo principio activo, los agentes (por ejemplo, el anticuerpo anti-C5 y el segundo principio) se pueden formular por separado o juntos. Por ejemplo, la solución y el principio se pueden mezclar, por ejemplo, justo antes de la administración, y administrarse juntos o por separado, por ejemplo, en el mismo o en diferentes puntos temporales.
VIII. Kits y formas farmacéuticas unitarias
También se proporciona en el presente documento un kit que comprende una solución acuosa estable de la invención. El kit es adecuado para la administración a un paciente humano (por ejemplo, un paciente que tiene un trastorno asociado al complemento). El kit opcionalmente también puede incluir instrucciones, por ejemplo, que comprenden calendarios de administración, para permitir al médico (por ejemplo, un médico, enfermera o paciente) administrar la composición contenida en el mismo para administrar la solución a un paciente.
El kit también comprende un medio para administrar la solución a un ser humano, por ejemplo, un paciente que padece, se sospecha que padece o corre riesgo de desarrollar un trastorno asociado al complemento. Los medios pueden ser adecuados para una administración invasiva (por ejemplo, intravascular (por ejemplo, intravenosa), subcutánea, intraarticular, intraocular, intravítrea o intramuscular) de la solución a un paciente. Los medios pueden ser adecuados para la administración subcutánea de la solución al paciente. Los medios pueden ser adecuados para la administración intravenosa de la solución al paciente Por ejemplo, el medio puede ser una jeringa o una bomba osmótica. La solución puede formularse como un colirio, siendo el medio un gotero.
Opcionalmente, los kits incluyen múltiples envases de una solución de dosis única, cada uno de los cuales contiene una cantidad eficaz de la solución para una sola administración. También pueden incluirse en los kits los instrumentos o dispositivos necesarios para administrar la solución. Por ejemplo, un kit puede proporcionar una o más jeringas precargadas que contienen la solución.
Los siguientes ejemplos son meramente ilustrativos y no deben interpretarse como limitantes del alcance de la presente divulgación de ninguna forma, ya que muchas variaciones y equivalentes resultarán evidentes para los expertos en la técnica al leer la presente divulgación.
EJEMPLOS
Ejemplo 1: Desarrollo de una formulación de alta concentración de ravulizumab (AXLN1210) para administración subcutánea
Este ejemplo resume el desarrollo de una formulación de alta concentración de ALXN1210 para administración subcutánea (por ejemplo, tampón fosfato 50 mM, 5% de sacarosa, arginina 25 mM, pH 7,4 a 100 mg/ml). Se realizaron experimentos preliminares en el desarrollo temprano de la formulación para obtener datos de preselección de la formulación y evaluar la reducción en la apariencia opalescente a concentraciones más altas de ALXN1210. La formulación inicial de ALXN1210 (fosfato 10 mM, cloruro de sodio 150 mM, pH 7,0, 0,02% de Tween 80, a 10 mg/ml) era incolora y ligeramente opalescente. A medida que aumentó la concentración en ALXN1210, también aumentó la apariencia opalescente. Con los resultados de la preselección de la formulación, se ejecutó un estudio de estabilidad para obtener los mejores datos de estabilidad. Después del estudio de estabilidad inicial, se ejecutó un estudio de estabilidad del prototipo para obtener una formulación óptima para la sustancia farmacológica a granel y el producto farmacológico. Los estudios preliminares y de estabilidad se analizan en detalle a continuación.
1. Procedimientos
A. Apariencia
La apariencia se determinó mediante observación visual utilizando luz normal de laboratorio, sobre un fondo blanco y negro.
B. Unión a C5
El ELISA de unión a C5 es un ensayo de potencia para ALXN1210. Este procedimiento de ensayo es un inmunoensayo de unión directa con detección colorimétrica, que se utiliza para analizar la capacidad de ALXN1210 para unirse a su diana, la proteína del complemento C5 humana. Se recubrió una placa de microtitulación Polysorp con proteína C5 humana y se bloqueó con albúmina sérica bovina (BSA). Se preparó una curva patrón a partir del material de referencia ALXN1210. El material de referencia y las muestras de ensayo se prepararon en tres diluciones realizadas de modo que se encontraran dentro del intervalo de trabajo del ensayo. Después de la incubación con los patrones y las muestras, la placa se lavó y se incubó con IgG4 antihumana de ratón conjugada con peroxidasa de rábano picante (HRP). La placa se lavó de nuevo y después se desarrolló utilizando un sustrato, ácido 2,2'-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfónico), (ABTS). La cantidad de sustrato reaccionado se leyó espectrofotométricamente en un lector de placas a 405 nm. La lectura de la absorbancia fue proporcional a la concentración de ALXN1210 unido a C5 en la placa. Se aplicó un ajuste de curva de cuatro parámetros a la curva patrón y al material de referencia y los resultados de la muestra de ensayo se interpolaron a partir de la curva. Los resultados de los ensayos de las muestras se compararon con los resultados del material de referencia y se notificó la actividad relativa (%).
C. Densidad
Las mediciones de densidad por medio del densímetro DMA 4500 se determinaron mediante el principio del tubo en U. Se llenó un tubo de vidrio hueco en forma de U con muestra y después se excitó electrónicamente con la amplitud más baja posible. La densidad se determinó mediante la siguiente relación:
p = densidad
<t>= el periodo de oscilación
A y B son constantes instrumentales, determinadas mediante la calibración del instrumento con dos sustancias de densidad conocida.
D. Fluorescencia de barrido diferencial
La fluorescencia de barrido diferencial mide el cambio de estabilidad térmica mediante la realización de una curva de desnaturalización térmica en presencia de un tinte fluorescente, tal como Sypro Orange. Cuando la proteína se despliega, las superficies hidrófobas expuestas se unen al tinte aumentando la fluorescencia y generando una curva de estabilidad con un valor de punto medio característico a la temperatura de exposición hidrófoba Th.
E. Dispersión dinámica de la luz
La dispersión dinámica de la luz mide el tamaño y las interacciones de proteínas, nanopartículas y otras macromoléculas,in situen placas de micropocillos mediante el uso de un sistema de iluminación que permite obtener imágenes de los pocillos de una microplaca utilizando una cámara integrada de 3 megapíxeles. Las fluctuaciones de la dispersión de la luz debidas al movimiento browniano proporcionan un coeficiente de difusión relacionado con el radio hidrodinámico de las partículas presentes en la solución.
F. HPLC de permeación en gel
Se utilizó HPLC de permeación en gel (exclusión por tamaño) para distinguir la IgG monomérica de las especies de anticuerpos multiméricos más grandes que pueden ser el resultado de la agregación de los monómeros. Las muestras de ensayo se inyectaron en una columna de gel TSK G3000 SWXL equilibrada con solución salina tamponada con fosfato, pH 7,0, operación seguido de elución isocrática. Los picos de proteína se monitorearon a 214 nm y el porcentaje de pureza de la IgG monomérica se expresó como porcentaje del área del pico total integrada. La detección de los multímeros de mayor masa se realizó mediante la observación de picos que eluyeron antes del pico del monómero.
G. Electroforesis capilar con imágenes (iCE)
Este procedimiento utiliza el sistema Protein Simple iCE280 o iCE3 que realiza un IEF de solución libre en una columna capilar y detecta zonas de proteínas enfocadas utilizando un detector UV de columna completa. Las muestras se prepararon mezclando previamente ALXN1210, anfolitos vehículo y marcadores pI. La muestra se cargó en un cartucho capilar y los tanques electrolíticos de cada extremo del capilar se llenan con ácido y base. Se aplicó voltaje y los analitos se enfocaron en su pI. Una cámara CCD tomó una imagen de absorción de luz ultravioleta de toda la columna capilar cada 30 segundos, lo que permitió monitorear en tiempo real la etapa de enfoque. El patrón de separación resultante se capturó y se analizó, el pI de las proteínas presentes en la muestra se interpoló desde la posición de los marcadores pI añadidos a la muestra.
H. Laboratorio en un chip (LoC)
Este procedimiento evalúa la homogeneidad y pureza del producto. Las muestras no reducidas se desnaturalizaron mediante tratamiento con dodecilsulfato de litio (LDS). Las muestras reducidas se desnaturalizaron mediante tratamiento con dodecilsulfato de litio (LDS) y los enlaces disulfuro se rompieron con ditiotreitol (DTT). Las cadenas polipeptídicas se mezclaron con tinte fluorescente, que se une a LDS, y se separaron según el tamaño molecular mediante electroforesis microcapilar. La proteína se detectó y se cuantificó mediante fluorescencia inducida por láser.
I. Osmolalidad
La osmolalidad de la muestra se determinó utilizando un osmómetro de depresión del punto de congelación. El osmómetro se calibró antes de su uso con patrones de osmolalidad certificados disponibles comercialmente a 50 mOsm/kg y 850 mOsm/kg, que abarcan el intervalo de muestra. Se utilizó una solución de referencia de 290 mOsm/kg para confirmar la calibración exitosa antes de analizar las muestras. Las muestras se analizaron por triplicado y se notificó la media de las determinaciones de las muestras.
J. pH
La medición del pH se realizó utilizando un electrodo combinado de KCl desprovisto de plata saturado resistente a proteínas y un medidor y un monitor de temperatura asociados. El medidor se calibró antes de su uso utilizando soluciones disponibles comercialmente en el intervalo de pH apropiado (es decir, pH 4,0 - pH 7,0).
K. Concentración de proteínas por medio de SoloVPE
Se usó absorbancia a 280 nm para determinar la concentración de proteína utilizando tecnología de longitud de trayectoria variable en las muestras de ensayo utilizando un coeficiente de extinción determinado teóricamente de 1,479. Se realizaron lecturas de absorbancia por triplicado según el procedimiento por muestra.
L. Viscosidad
Las mediciones de viscosidad con el viscosímetro AMVn se determinaron mediante el principio de la bola rodante. Se llenó un tubo hueco con una muestra y una bola sólida de densidad conocida y después se inclinó en un ángulo conocido. Se determinó el tiempo que tarda la bola en moverse de un lado del tubo al otro y se utilizó para calcular la viscosidad mediante la siguiente relación:
n = viscosidad dinámica (mPa*s)
K = constante de proporcionalidad
pb = densidad de la bola (g/ml)
ps = densidad de la muestra (g/ml)
tr = tiempo de rodadura de la bola
Para calcular la viscosidad, se utilizó como ps la densidad de la muestra determinada utilizando el densímetro DMA 4500 M.
M. Determinación de partículas subvisibles mediante imágenes de microflujo (MGI)
El objetivo es evaluar todas las partículas subvisibles en una formulación mediante imágenes de microflujo (MFI). La muestra se retiró del almacenamiento a 2-8°C y se analizó directamente en MFI utilizando el muestreador automático BOT1. Se realizó seis veces una inversión de la muestra antes de cargar la muestra en BOT1 para garantizar un mezclado completo de las partículas. Las muestras se cargaron en tres pocillos consecutivos y cada pocillo tenía una medición para un total de 3 réplicas. Se construyeron tres ciclos de mezclado dentro de BOT1 para garantizar adicionalmente un mezclado uniforme.
2. Desarrollo de la formulación
Las figuras 1 -5 y las tablas 1 -5 muestran los resultados experimentales para el desarrollo temprano de la formulación de ALXN1210 a alta concentración.
En el primer experimento, se observó el efecto de la adición de un aminoácido a ALXN1210 en tampón de fosfato de sodio sobre la opalescencia. Se determinó que la causa de la opalescencia era la falta de repulsión carga a carga entre moléculas de anticuerpos en solución a alta concentración. Se realizaron una serie de experimentos tal como se describe a continuación para optimizar el aminoácido particular y la concentración necesaria para producir una solución transparente estable. Basándose en estos experimentos, se determinó que la adición de un aminoácido cargado positivamente (L-arginina) reducía la opalescencia en una muestra de 50 mg/ml de ALXN1210 en tampón de fosfato de sodio. Se llegó a la misma conclusión mediante inspección visual de los viales (datos no mostrados).
Además, se realizaron los siguientes experimentos utilizando la formulación IV de ALXN1210 a 10 mg/ml y concentrando el anticuerpo y realizando un intercambio de tampón para evaluar diversos sistemas de tampón iniciales para su uso en la búsqueda de una formulación de ALXN1210 de alta concentración. Tal como se muestra en la tabla 1, a continuación, todas las muestras agrupadas tuvieron un intercambio final de tampón de 1: 1000 para obtener el pH deseado. Las muestras agrupadas tenían un intervalo de concentración de 35,3 a 54,0 mg/ml. El porcentaje de recuperación tras el intercambio de tampón varió del 70,6% al 108%. Los resultados de apariencia muestran que los viales intercambiados con tampón de histidina 25 mM, pH 7, y fosfato 25 mM, pH 7, eran transparentes e incoloros, comparables a eculizumab, y las soluciones en todos los demás viales con intercambio de tampón eran opalescentes. Los resultados de la electroforesis capilar con imágenes (iCE) mostraron un intervalo de pI de 5,98 a 6,54, un intervalo de pI principal de 6,19 a 6,24 y un intervalo del % de área del 63,1% al 65,9%. Los resultados de la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) mostraron un % de monómero (pureza) del 98,48% al 98,98%.
T l 1: In r m i m n ALXN121 1 m ml m ml i n n r 1-
e
Tal como se muestra en la figura 1, los resultados de la titulación con sal para muestras intercambiadas con tampón de histidina a pH 7 utilizando DLS muestran que a medida que aumentaba la concentración de sal, la autoasociación también aumentaba en ALXN1210.
Tal como se muestra en la figura 2, los resultados de la titulación con L-arginina utilizando dispersión dinámica de la luz (DLS) muestran que L-arginina 25 mM es la cantidad mínima requerida para reducir la opalescencia en ALXN1210 a 50 mg/ml.
Tal como se muestra en la figura 3, los resultados de la titulación con sal para muestras intercambiadas con tampón fosfato a pH 7 utilizando DLS muestran que sin sal y con adición de sal 150 mM se obtuvo la menor autoasociación también en ALXN1210. Compare los picos etiquetados 2 y 5.
Tal como se muestra en la figura 4, los resultados de las muestras intercambiadas con tampón utilizando DSF muestran que los bolsillos hidrófobos no están expuestos en ALXN1210. Los tampones de citrato y acetato a pH 5 y 6 tienen una baja estabilidad térmica con la temperatura de fusión (Tf) más baja, y los tampones de histidina y fosfato a pH 7 son los más estables con la Tf más alta.
Tal como se muestra en los resultados de apariencia expuestos en la tabla 2, ALXN1210 a aproximadamente 100 mg/ml es transparente e incoloro con la adición de L-arginina 25 mM en tampón fosfato 25 mM a pH 7.
Tabla 2: Apariencia de las muestras de 100 m /ml de ALXN1210
Tal como se muestra en la figura 5, los resultados de ALXN1210 a 10 mg/ml y 114 mg/ml con y sin adición de L-Arginina utilizando DLS mostraron que la adición de L-Arginina 25 mM a una dosis de al menos 100 mg/ml de muestra es más comparable a la referencia de 10 mg/ml. La muestra de al menos 100 mg/ml sin la adición de L-arginina dio como resultado especies de orden superior, lo que indica autoasociación.
Los resultados de osmolalidad establecidos en la tabla 3 muestran que ALXN1210 en histidina 25 mM, pH 7,2 con el 8% de sacarosa o el 4,5% de sorbitol, se encuentran dentro del intervalo de osmolalidad deseado de 275-320. La osmolalidad de ALXN1210 en fosfato 25 mM, L-arginina 25 mM, pH 7 suplementado con el 7% de sacarosa o el 4% de sorbitol también se encontró dentro del intervalo de osmolalidad deseado.
Tabla 3: Osmolalidad de ALXN1210 en diversas formulaciones
Los resultados de viscosidad expuestos en la tabla 4 muestran que a medida que aumenta la concentración de ALXN1210, la viscosidad también aumenta para soluciones de ALXN1210 en tampones de histidina y fosfato. Los resultados de densidad expuestos en la tabla 4 no muestran cambios significativos en la densidad de los tampones de histidina y fosfato a medida que cambia la concentración.
Tabla 4: Viscosidad densidad de muestras de ALXN1210 en distintas concentraciones
Tal como se muestra en la tabla 5, la adición de base de L-arginina aumentó significativamente el pH de la muestra. L-Arginina QS con fosfato monobásico de sodio añadido a una muestra elevó el pH en 1 unidad de pH. L-Arginina HCl añadida a una muestra elevó el pH en 0,25 unidades de pH. Sin embargo, la apariencia disminuyó en opalescencia desde la adición de L-arginina HCl a la adición de L-arginina QS - fosfato monobásico de sodio a la adición de base de L-arginina.
Tabla 5: Tampones de L-Arginina para adición de L-arginina 25 mM pH y efectos en la apariencia para ALXN1210
3. Estabilidad temporal
Las figuras 6-21 muestran los resultados del estudio de estabilidad inicial. Estos resultados muestran que las formulaciones de histidina son las menos estables y las formulaciones de fosfato son las más estables después de 2 meses a 2-8°C, 23-27°C y 37°C. Además, tal como se demuestra mediante la cromatografía de exclusión por tamaño, en las formulaciones de fosfato el sorbitol y la sacarosa eran comparables después de 2 meses a 2-8°C y 23-27°C. Sin embargo, el sorbitol fue ligeramente más estable a 37°C en comparación con la sacarosa después de 2 meses. Los resultados de dispersión dinámica de la luz no mostraron cambios significativos en las muestras de fosfato con L-arginina 25 mM después de 2 meses a 2-8°C con la adición de sacarosa o sorbitol. Los resultados de dispersión dinámica de la luz para las muestras de histidina en T = 2 meses no pudieron superponerse debido a la alta polidispersidad entre adquisiciones, lo que indica una formulación menos estable que las formulaciones de fosfato. Los resultados del ciclo de congelación y descongelación de 5 días no mostraron ningún cambio significativo entre T=0 y los 5 ciclos de congelación y descongelación.
4. Formulación de prototipos
Las figuras 22-46 muestran los resultados del estudio de estabilidad del prototipo.
Estos resultados muestran que todas las formulaciones de fosfato a 75 mg/ml y 100 mg/ml (sustancia farmacológica a granel (BDS) y producto farmacéutico (DP)) son estables durante el transcurso del estudio de estabilidad a 2-8°C, 20°C y -80°C. Todas las formulaciones de sustancias farmacológicas a granel de 100 mg/ml después de 5 ciclos de congelación y descongelación a -20°C y -80°C fueron estables y no mostraron cambios significativos.
5. Conclusiones provisionales antes de los ensayos de degradación a corto plazo
Basándose en los resultados de estos estudios, se determinó la formulación óptima para el material de alta concentración de ALXN1210. Los experimentos preliminares sugirieron la adición de L-arginina para reducir la apariencia opalescente de ALXN1210 a 100 mg/ml. El estudio de estabilidad inicial dio como resultado la selección de la mejor formulación de tampón fosfato con L-arginina a > 50 mg/ml. Los resultados del estudio de estabilidad del prototipo determinaron que la formulación óptima inicial para ALXN1210 era tampón fosfato 50 mM, 5% de sacarosa, arginina 25 mM, pH 7,4 a 100 mg/ml.
6. Desarrollo de la formulación óptima final
La idoneidad de la formulación óptima inicial (100 mg/ml de ALXN1210 en un tampón de formulación (fosfato de sodio 50 mM, arginina 25 mM y el 5% de sacarosa, a pH 7,4) se sometió a estudios de degradación a corto plazo para evaluar si el polisorbato 80 (PS80) u otro tensioactivo era necesario para evitar la degradación. Las dos marcas de PS 80 eran 0,05% (p/v) de NOF America Corporation POLISORBATE 80 (HX2)™ que se notifica que está compuesto por > 99% de ácido oleico puro y AVANTOR™ 4117, J.T. Baker® polysorbate 80, que es un tensioactivo ampliamente utilizado que consiste en una mezcla de ácidos grasos que incluyen ácido oleico y ácido palmítico. Ambos productos suelen denominarse TWEEN 80® y es un tensioactivo no iónico derivado de sorbitán polietoxilado y ácido oleico con los grupos hidrófilos derivados de polímeros de óxido de etileno.
Los procedimientos de ensayo utilizados para la evaluación del uso potencial de J.T. Baker Avantor 4117 PS80 en la formulación de ALXN1210 de 100 mg/ml se enumeran en la tabla 6, a continuación. Consulte el procedimiento de ensayo individual para obtener más detalles y una descripción del procedimiento.
T l : Pr imi n n r l n i l .T. B k r Av n r 4117 P
Los viales que contienen 100 mg/ml de ALXN1210 con J.T. Baker avantor 4117 PS80 o HX2 NOF PS80 se inspeccionaron visualmente. Las muestras, en su totalidad, no mostraron partículas visibles ni cambios de color distintos en todas las muestras expuestas al almacenamiento de degradación a 45°C y agitación adicional durante 5 días a 2-8°C. Los resultados se muestran en la tabla 7.
Tabla 7. Inspección visual de 100 mg/ml de ALXN1210 en viales de 5 cc que contienen J.T. Baker avantor 4117 PS80 o HX2 NOF PS80
La concentración de ALXN1210 mg/ml muestra una ligera disminución causada por la condición de degradación. Consulte la tabla 8 para todas las mediciones de concentración.
Las formulaciones de ALXN1210 de 100 mg/ml que contenían el 0,05% de Avantor PS80 o HX2 NOF PS80 no tuvieron cambios significativos en la concentración cuando se expusieron a la misma condición de degradación que se muestra en la figura 2.
Tabla 8: Mediciones de concentración
Tal como se ha mostrado anteriormente en la tabla 8, las formulaciones de ALXN1210 de 100 mg/ml que contenían el 0,05% de Avantor PS80 o HX2 NOF PS80 no tuvieron cambios significativos en la concentración cuando se expusieron a la misma condición de degradación. La concentración se mantuvo comparable entre las formulaciones de ALXN1210 a 100 mg/ml que contienen el 0,05% de Avantor PS80 o HX2 NOF PS80.
La turbidez se midió supervisando la absorbancia a 650 nm. Las mediciones se muestran en la tabla 9.
Las formulaciones de ALXN1210 a 100 mg/ml que contienen 0,05% de Avantor PS80 o 0,05% de HX2 NOF PS80 no tienen cambios significativos de turbidez. La turbidez se mantiene estable en todos los puntos temporales y condiciones de degradación en este estudio.
Tabla 9: Turbidez medida supervisando la absorbancia a 650 nm
Se observó una disminución en el porcentaje de monómero para las muestras incubadas a 45°C durante 7 días o 14 días más agitación adicional (200 rpm) a 2-8°C tal como se esperaba debido a las condiciones de degradación. Sin embargo, el porcentaje de monómero no mostró una diferencia sustancial entre ambas formulaciones de 100 mg/ml de ALXN1210 que contenían el 0,05% de Avantor PS80 o el 0,05% de HX2 NOF PS80 cuando se expusieron al mismo punto temporal y condición.
Los datos del porcentaje de monómero se muestran en la tabla 10. La figura 4 muestra la disminución del % de monómero tal como se esperaba después de las condiciones de degradación y no hay diferencias significativas entre ambas formulaciones de ALXN1210 a 100 mg/ml que contienen el 0,05% de Avantor PS80 o el 0,05% de HX2 NOF PS80 cuando se exponen a la mismo punto temporal y condición.
Tabla 10: Porcentaje de muestras de monómero incubadas a 45°C durante 7 días o 14 días más agitación adicional 200 RPM a 2-8°C
Se detectó un desplazamiento hacia especies ácidas mediante enfoque isoeléctrico después de la incubación de ALXN1210 con el 0,05% de J.T. Baker Avantor Polysorbate 80 o el 0,05% HX2 NOF Polysorbate 80 a 45°C durante 7 días y 14 días tal como se muestra en la tabla 11. La agitación adicional de las muestras no tuvo un efecto significativo sobre el desplazamiento adicional del pico principal a especies ácidas.
Tabla 11: Enfoque isoeléctrico por CE-SDS
Se realizó un ensayo de estrés con agitación en la formulación óptima inicial, un tampón de formulación de ALXN1210 a 100 mg/ml que contenía fosfato de sodio 50 mM, arginina 25 mM y el 5% de sacarosa, a pH 7,4 en presencia y ausencia de dos marcas de PS 80 incluidas a una concentración del 0,05%. Para evaluar la degradación se utilizó la formación de partículas subvisibles. Las muestras se agitaron a 200 rpm a una temperatura de entre 2 y 8°C. Los puntos temporales para medir si hubo formación de partículas subvisibles fueron 0, 1,3 y 5 días. Los resultados que se muestran en la tabla 12 indican que la adición del 0,05% de PS80 a la formulación reduce en gran medida la formación de partículas subvisibles cuando la formulación de alta concentración se somete a estrés a corto plazo, tal como agitación a 200 rpm.
Tabla 12: Desarrollo de partículas subvisibles reducido mediante la adición de PS80 filtración
7. Conclusión
En conclusión, la formulación subQ óptima para ALXN1210 a 100 mg/ml es un tampón que contiene fosfato de sodio 50 mM, arginina 25 mM, el 5% de sacarosa y el 0,05% de PS80 a pH 7,4
Ejemplo 2: Estudio de fase 1 para evaluar una dosis única de ALXN1210 administrada por vía subcutánea en comparación con la vía intravenosa en sujetos sanos
Se realizó un estudio de fase 1 para evaluar la seguridad, tolerabilidad, eficacia farmacocinética (PK)/farmacodinámica (PD) e inmunogenicidad del anticuerpo BNJ441 (también conocido como ALXN1210) administrado por vía subcutánea (SC) en comparación con la vía intravenosa (IV) en sujetos sanos.
1. Objetivos
Los objetivos principales de este estudio fueron (1) evaluar la seguridad y tolerabilidad de una dosis única de ALXN1210 administrada por vía subcutánea en comparación con ALXN1210 administrado por vía intravenosa en sujetos sanos, según se evalúa mediante resultados del examen físico, mediciones de signos vitales, inmunogenicidad, análisis de laboratorio y evaluaciones de eventos adversos (EA) y (2) determinar la biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 administrado por vía subcutánea.
Un objetivo secundario fue evaluar los efectos en la PD de ALXN1210 administrado por vía subcutánea en comparación con ALXN1210 administrado por vía intravenosa, según se evalúa por el nivel de C5 libre y hemólisis de glóbulos rojos de pollo (cRBC).
2. Diseño del estudio
El diseño general del estudio se realizó tal como se muestra en la figura 47. Este fue un estudio de Fase 1 diseñado para evaluar la seguridad, tolerabilidad, PK, PD e inmunogenicidad de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 administrada por vía subcutánea en comparación con una dosis única de 400 mg de ALXN1210 administrada por vía intravenosa o placebo administrado por vía subcutánea en 42 sujetos sanos. Todos los sujetos se seleccionaron con respecto a su elegibilidad. Los sujetos que no cumplieron con los criterios de elegibilidad no se seleccionaron de nuevo para participar en el estudio, a menos que la condición que condujo al fracaso de la elegibilidad fuera transitoria, autolimitada y fácilmente tratable, y se esperaba que se resolviera en el momento de la dosificación.
Inicialmente, seis sujetos fueron asignados aleatoriamente en una relación de 2:1 a la Cohorte 1a, de forma ciega, para recibir una dosis única de 400 mg de ALXN1210 por vía subcutánea o una dosis única de placebo por vía subcutánea. Se evaluaron las primeras 48 horas de datos de seguridad clínica posteriores a la dosis para los sujetos de la Cohorte 1 a antes de que comenzara la inscripción en las Cohortes 1b o 2. Después, se asignaron aleatoriamente treinta y seis sujetos, en una relación de 2:1, a la Cohorte 1 b (N=24) o a la Cohorte 2 (N=12). Dentro de la cohorte 1 b, los 24 sujetos se asignaron aleatoriamente en una relación de 5:1 y de forma ciega para recibir una dosis única de 400 mg de ALXN1210 por vía subcutánea (20 sujetos) o una dosis única de placebo por vía subcutánea (4 sujetos), respectivamente. Los 12 sujetos de la cohorte 2 recibieron una dosis única de 400 mg de ALXN1210 por vía intravenosa de forma abierta.
Todos los sujetos inscritos se incluyeron en los análisis, según correspondiera. Los sujetos de las Cohortes 1a y 1b se combinaron para los análisis. Los sujetos participaron en el estudio durante hasta 39 semanas, incluido un periodo de selección de hasta 70 días, seguido de un periodo de seguimiento de 200 días para evaluaciones de seguridad, PK, PD e inmunogenicidad después de la administración del fármaco del estudio.
Se evaluaron cuarenta y dos sujetos para los objetivos primarios y secundarios de este estudio: 6 (4 recibieron ALXN1210 por vía subcutánea, 2 recibieron placebo por vía subcutánea) sujetos de la Cohorte 1a; 24 (20 recibieron ALXN1210 por vía subcutánea, 4 recibieron placebo por vía subcutánea) sujetos de la Cohorte 1b y 12 (ALXN1210 IV) sujetos de la Cohorte 2.
3. Justificación de la dosis
Se administró por vía subcutánea una dosis única de 400 mg, equivalente a 4 ml, mediante inyecciones de 4 x 1 ml en la zona abdominal. Se esperaba que la administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC tuviera un perfil de seguridad aceptable. Se anticipó que dosis únicas de 400 mg de ALXN1210 SC y placebo SC, administradas tal como se describe en este protocolo, proporcionarían datos a partir de los cuales se podrían generar múltiples simulaciones de dosis para proyectar los regímenes de dosificación necesarios para lograr concentraciones séricas terapéuticas (> 50 gg/ ml) en pacientes.
La aleatorización paralela de 36 sujetos en la Cohorte 1b y la Cohorte 2 se produjo basándose en la revisión de las primeras 48 horas de datos de seguridad clínica posteriores a la dosis de los 6 sujetos de la Cohorte 1 a. La inscripción en la Cohorte 1b y la Cohorte 2 se realizó tal como se describe en la tabla 13.
Las reglas de toxicidad grupal fueron las siguientes. La toxicidad se refiere a reacciones adversas clínicamente significativas relacionadas con el fármaco. "Progresión de cohorte" se refiere a la progresión a una dosis/régimen de dosificación consecutiva de acuerdo con las reglas de progresión de dosis y los requisitos mínimos de datos.
"Suspensión" se refiere a que no se administró más IMP al nivel de dosis/régimen de dosificación en cuestión y que se suspendió la progresión de la cohorte adicional.
Tabla 13: Re las de toxicidad
4. Calendario de evaluaciones
El programa de los procedimientos de estudio utilizados se proporciona en las tablas 14-15.
��
��
5. Selección y retirada de sujetos
Los sujetos deben haber cumplido todos los siguientes criterios para ser elegibles para el estudio:
1. Sujetos sanos, de 25 a 55 años, ambos inclusive, en el momento de la dosificación.
2. Índice de masa corporal (IMC) de 18 a 29,9 kg/m2, ambos inclusive, y peso entre 50 y 100 kg, ambos inclusive.
3. Intervalo QT corregido utilizando la fórmula de Fridericia (QTcF) < 450 ms para varones y < 470 ms para mujeres en el momento de la selección y antes de la dosificación del Día 1.
4. Dispuesto y capaz de dar su consentimiento informado por escrito y cumplir con el calendario de visitas del estudio.
5. Vacunación documentada con MCV4 al menos 56 días y no más de 3 años antes de la dosificación. La documentación debe haber incluido un título de anticuerpos positivo para confirmar una respuesta inmunitaria antes de la administración del fármaco del estudio.
6. Vacunación con vacuna meningocócica del serogrupo B al menos 56 días antes de la administración del Día 1, con un refuerzo administrado al menos 28 días antes de la administración del Día 1, con al menos 28 días entre la primera y la segunda inyección.
7. Las mujeres en edad fértil, si son heterosexualmente activas, deben haber utilizado un procedimiento anticonceptivo altamente eficaz o aceptable tal como se define a continuación, comenzando en el momento de la selección y continuando hasta al menos 6 meses después de la administración del fármaco del estudio. Durante este estudio se requirió profilaxis antibiótica, lo que puede comprometer la eficacia de la anticoncepción hormonal. Por lo tanto, se recomendó a los sujetos que utilizan anticonceptivos hormonales que también utilizaran anticonceptivos de barrera (por ejemplo, condón o diafragma con espermicida) durante la profilaxis antibiótica. Los sujetos masculinos, si son heterosexualmente activos y tienen una esposa o pareja femenina en edad fértil o una esposa o pareja embarazada o en periodo de lactancia, deben aceptar el uso de un procedimiento anticonceptivo de barrera (condón masculino) durante el periodo de tratamiento y durante al menos 6 meses después de la administración del fármaco del estudio. Se requirió anticoncepción de barrera incluso con una evaluación médica documentada del éxito quirúrgico de una vasectomía. Las esposas o parejas de sujetos masculinos en edad fértil deben haber utilizado un procedimiento anticonceptivo altamente eficaz tal como se define anteriormente, o un procedimiento anticonceptivo aceptable tal como se define a continuación, comenzando en el momento de la selección y continuando hasta al menos 6 meses después de la administración del fármaco del estudio. Los sujetos masculinos no deben haber donado esperma durante los periodos de selección y tratamiento y durante al menos 6 meses después de la administración del fármaco del estudio.
Los sujetos que cumplían cualquiera de los siguientes criterios de exclusión no fueron elegibles para participar en el estudio:
1. Sujetos que estuvieron en contacto íntimo y prolongado con personas menores de 2 años o mayores de 65 años (definido como vivir bajo el mismo techo o brindar cuidado personal a las mismas), o que estaban inmunocomprometidos o tenían uno de los siguientes factores subyacentes: afecciones médicas: asplenia anatómica o funcional (incluida enfermedad de células falciformes); deficiencias congénitas del complemento, properdina, factor D o anticuerpos primarios; deficiencias adquiridas del complemento (por ejemplo, aquellos que reciben eculizumab); o virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).
2. Sujetos que fueran alguno de los siguientes: profesionales que estuvieron expuestos a ambientes de mayor riesgo para la enfermedad meningocócica; personal de laboratorio de investigación, industrial y clínico que estuviera expuesto habitualmente a meningitis N; personal militar durante el entrenamiento de reclutas (el personal militar puede correr un mayor riesgo de infección meningocócica cuando se aloja en espacios reducidos); trabajadores de guarderías; aquellos que viven en un colegio o campus universitario; y aquellos que planearon viajar durante el curso del estudio o han viajado a áreas endémicas de meningitis meningocócica (por ejemplo, India, África subsahariana, peregrinación a Arabia Saudita para el Hajj) dentro de los 6 meses anteriores a la dosificación.
3. Antecedentes de cualquier infección porNeisseria.
4. Antecedentes de infección recurrente inexplicable o infección que requiera tratamiento con antibióticos sistémicos dentro de los 90 días anteriores a la dosificación.5
5. Infección por VIH (evidenciada por el título de anticuerpos contra el VIH-1 o el VIH-2).
6. Infección aguda o crónica por el virus de la hepatitis B (VHB). Se requirió el ensayo de antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) para todos los sujetos antes de la inscripción. No se inscribirán sujetos con HBsAg positivo. Para los sujetos con HBsAg negativo, se requería el siguiente algoritmo de ensayo: si el anticuerpo central de la hepatitis B (HBcAb) era negativo, el sujeto era elegible para inscribirse. Si HBcAb era positivo, se analizaba el anticuerpo de superficie de la hepatitis B (HBsAb). Si tanto HBcAb como HBsAb eran positivos, el sujeto era elegible para inscribirse. Si HBcAb era positivo y HBsAb negativo, el sujeto no se inscribió. 7. Infección aguda o crónica por el virus de la hepatitis C (VHC) (evidenciada por el título de anticuerpos).
8. Infección vírica o fúngica sistémica activa dentro de los 14 días anteriores a la dosificación.
9. Prueba de QuantiFERON®-TB positiva o indeterminada que indica una posible infección por tuberculosis (TB).
10. Antecedentes de tuberculosis latente o activa o exposición a zonas endémicas dentro de las 8 semanas anteriores a la visita de selección.
11. Mujeres que estaban amamantando o eran heterosexualmente activas y no estaban dispuestas a practicar anticoncepción y no eran posmenopáusicas. La posmenopausia se definió como amenorrea > 12 meses consecutivos sin otra causa y un nivel documentado de hormona estimulante del folículo sérico > 40 mUI/ml y una concentración de estradiol < 110 pmol/l dentro de los 6 meses previos a la administración del fármaco del estudio.
12. Prueba de embarazo en suero positiva en el momento de la selección o el Día -1.
13. Creatinina sérica superior al límite superior normal (LSN) del intervalo de referencia del laboratorio de ensayos en el momento de la selección o el Día -1.
14. Alanina aminotransferasa (ALT) o aspartato aminotransferasa (AST) > LSN del intervalo de referencia del laboratorio de ensayos en el momento de la selección o > 1,5 x LSN del intervalo de referencia del laboratorio de ensayos el Día -1.
15. Cualquiera de los siguientes resultados hematológicos: hemoglobina < 130 g/l para varones y < 115 g/l para mujeres, hematocrito < 0,37 l/l para varones y < 0,33 l/l para mujeres, recuento de glóbulos blancos (WBC) < 3,0 x 103/pL, recuento absoluto de neutrófilos < 2,0 x 103/Ml3/pL y recuento de plaquetas < 150 o > 400 x 103/pL en el momento de la selección o el Día -1. Resultados de laboratorio clínico de recuento sanguíneo (CBC) que el investigador considera clínicamente relevantes e inaceptables el Día -1.
16. Antecedentes de deficiencia del complemento o actividad del complemento por debajo del intervalo de referencia normal según se evalúa por CAP ELISA en el momento de la selección.
17. Antecedentes de tumores malignos, con excepción de cáncer de piel no melanoma o carcinomain situdel cuello uterino que haya sido tratado sin evidencia de recurrencia.
18. Participación en un estudio clínico dentro de los 30 días anteriores al inicio de la dosificación del Día 1 o uso de cualquier terapia experimental de molécula pequeña dentro de los 30 días anteriores a la dosificación del Día 1.
19. Participación en más de un estudio clínico de un mAb, o participación en un estudio clínico de un mAb dentro de los 12 meses anteriores a la selección, durante los cuales el sujeto estuvo expuesto al fármaco activo del estudio. Los sujetos que participaron en un solo estudio de un mAb podrían haberse considerado para la inscripción si completaron ese estudio más de 12 meses antes de la selección.
20. Exposición previa a ALXN1210.
21. Cirugía mayor u hospitalización dentro de los 90 días anteriores a la dosificación.
22. Antecedentes de alergia a excipientes de ALXN1210 (por ejemplo, polisorbato 80).
23. Antecedentes documentados de alergia a la penicilina o cefalosporina.
24. Antecedentes de reacción alérgica significativa (por ejemplo, anafilaxia o angioedema) a cualquier producto (alimentario, farmacéutico, etc.).
25. Actualmente fumador de > 10 cigarrillos al día (se puede permitir la inscripción de exfumadores a discreción del investigador).
26. Antecedentes de abuso de drogas ilícitas, historial de abuso significativo de alcohol dentro del año anterior a la visita de selección, o uso regular de alcohol dentro de los 6 meses anteriores a la visita de selección (más de 14 unidades de alcohol por semana [1 unidad = 150 ml de vino, 360 ml de cerveza o 45 ml de alcohol al 40%]).
27. Prueba de detección toxicológica de drogas en orina positiva en el momento de la selección o el Día -1. 28. Consumo de alcohol dentro de las 48 horas anteriores a la administración del fármaco del estudio o prueba de alcoholemia en aire expirado positiva el Día -1.
29. Donación de plasma dentro de los 7 días anteriores a la dosificación. Donación o pérdida (excluyendo el volumen extraído en el momento de la selección) de más de 50 ml de sangre dentro de los 30 días anteriores a la dosificación o más de 499 ml de sangre dentro de los 56 días anteriores a la dosificación.
30. Antecedentes de uso continuo de esteroides tópicos, inhalados o sistémicos > 28 días o antecedentes de cualquier terapia inmunodepresora inhalada o tópica dentro de los 90 días anteriores a la administración del fármaco del estudio.
31. Uso de medicamentos recetados (excluidos los anticonceptivos de uso oral) dentro de los 14 días anteriores a la administración del fármaco del estudio, excepto con la aprobación previa del patrocinador.
32. Uso regular de medicamentos de venta libre y sin receta, incluidos remedios y suplementos a base de hierbas, dentro de los 14 días anteriores a la administración del fármaco del estudio. Se permiten multivitaminas, paracetamol < 2 g por día y productos tópicos para la piel sin absorción sistémica significativa.
33. Diagnóstico clínico de cualquier enfermedad autoinmunitaria o reumatológica (por ejemplo, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide).
34. Inmunización con una vacuna viva atenuada 28 días antes de la dosificación o vacunación planificada durante el transcurso del estudio (excepto la vacunación planificada por el protocolo del estudio). Se permitió la inmunización con vacuna antigripal inactivada o recombinante.
35. Presencia de fiebre (temperatura corporal confirmada > 37,6°C) (por ejemplo, fiebre asociada con una infección vírica o bacteriana sintomática) dentro de los 14 días anteriores a la administración.
36. Sujetos con antecedentes médicos, afecciones o riesgos que, en opinión del investigador, podrían haber interferido con la participación total del sujeto en el estudio o el cumplimiento del protocolo, o podrían haber planteado algún riesgo adicional para el sujeto o haber confundido la evaluación del sujeto o el resultado del estudio.
6. Infección
Para mitigar el riesgo de infección asociada con la inhibición terminal del complemento, se administró a los sujetos de este estudio lo siguiente:
1. Una vacuna contra MCV4 al menos 56 días antes de la dosificación de ALXN1210 el Día 1 (si no se vacunaron contra MCV4 en los últimos 3 años, o si los sujetos se vacunaron previamente, pero no había documentación adecuada para verificar la vacunación previa).
2. Dos inyecciones de la vacuna meningocócica del serogrupo B. La primera inyección debe haberse administrado al menos 56 días antes de la dosificación del Día 1, con un refuerzo administrado al menos 28 días antes de la dosificación del Día 1, con al menos 28 días entre la primera y la segunda inyección.
3. Tratamiento antibiótico profiláctico, 500 mg de penicilina V de uso oral dos veces al día (equivalente a 1 x 106 unidades) hasta que la actividad del complemento se normalizara (según se determina por el ensayo CH50). La primera dosis de antibiótico se administra por vía oral el Día -1 por la noche, antes del Día 1 (administración de la dosis) del fármaco del estudio. Para la parte ambulatoria del estudio, se indicó a los sujetos que tomaran el antibiótico aproximadamente a la misma hora (dos veces al día) en cada día programado. Se utilizó un sistema adecuado (tal como mensajes de texto) para el seguimiento diario del cumplimiento de los sujetos con el régimen de profilaxis antibiótica.
Las siguientes observaciones respaldan la administración de profilaxis antibiótica en este estudio de dosis única:
1. La penicilina fue el fármaco de elección para la erradicación deN meningitidisen los portadores.
2. Los pacientes con deficiencia de complemento que recibieron inyecciones mensuales de penicilina G benzatínica como profilaxis para la enfermedad meningocócica recurrente durante un periodo de 2 a 4 años experimentaron significativamente menos episodios de infección por Neisseria que los individuos deficientes que no reciben profilaxis (Figueroa JE, et al., Clin. Microbiol. Rev. 1991 Jul;4(3):359-95).
3. Rara vez se encontraron altos niveles de resistencia a la penicilina causada por p-lactamasas codificadas por plásmidos en cepas meningocócicas (Yazdankhah SP, et al., J. Med. Microbiol. 2004 Sep;53(Pt 9) :821 -32).
4. Algunos médicos han proporcionado profilaxis antibiótica con 500 mg de penicilina V administrada por vía oral, dos veces al día, en el tratamiento de pacientes con HPN y SHUa con eculizumab (Kelly RJ, et al., Blood 2011 Jun 23;117(25):6786-92 y Leeds Teaching Hospitals NHS Trust, Kings College Hospital NHS Foundation Trust. National Specialised Commissioning Team (NSCT) Service Specification Paroxysmal Nocturnal Haemoglobinuria (PNH). 2013).
5. La incertidumbre sobre la eficacia de las vacunas en pacientes inmunocomprometidos ha llevado a varios países, tales como Francia, a recomendar la profilaxis antibiótica continua durante el tratamiento con eculizumab en pacientes con HPN y SHUa (Zuber J, Fakhouri F, Roumenina LT, Loirat C, Fremeaux-Bacchi V. Use of eculizumab for atypical haemolytic uraemic syndrome and C3 glomerulopathies. Nat.Rev.Nephrol.
2012 Nov;8(11):643-57).
7. Medicamentos y procedimientos previos y concomitantes
Los medicamentos previos (cualquier fármaco o sustancia tomado por el sujeto dentro de los 14 días anteriores al momento en que el sujeto firma el FCI hasta la administración del fármaco del estudio) y medicamentos concomitantes (cualquier fármaco o sustancia tomado por el sujeto después de la administración del fármaco del estudio hasta la finalización de la último visita del estudio) se registraron en el formulario electrónico de informe de caso (eCRF) del sujeto. Los procedimientos previos (cualquier intervención terapéutica [por ejemplo, cirugía/biopsia, fisioterapia] realizados dentro de los 14 días anteriores al momento en que el sujeto firma el consentimiento informado hasta la administración del fármaco del estudio) y procedimientos concomitantes (cualquier intervención terapéutica [por ejemplo, cirugía/biopsia, fisioterapia] realizada después de la administración del fármaco del estudio hasta la finalización de la última visita del estudio) se registraron en el eCRF del sujeto.
Una terapia concomitante era cualquier fármaco o sustancia administrada desde el momento en que el sujeto se seleccionó para el estudio hasta la finalización de la última visita del estudio. Durante la duración del estudio, se indicó a los sujetos que no comenzaran a tomar ningún medicamento nuevo, incluidos los de venta libre y las preparaciones a base de hierbas, a menos que hubieran recibido permiso del investigador. El uso ocasional de antipiréticos o analgésicos de venta libre (por ejemplo, paracetamol) se permitió durante el estudio.
Un procedimiento concomitante fue cualquier intervención terapéutica (por ejemplo, cirugía/biopsia, fisioterapia) o evaluación diagnóstica que no fuera del estudio (por ejemplo, medición de gases en sangre, cultivos bacterianos) realizadas desde el momento en que el sujeto firma el consentimiento informado hasta la última visita del estudio. No se permitieron procedimientos concomitantes a menos que estuvieran médicamente indicados.
8. Aleatorización y cegamiento
A los sujetos elegibles que cumplieron con los criterios de inclusión y exclusión se les asignaron números únicos para la inscripción y la aleatorización.
Este fue un estudio parcialmente ciego tal que:
•Cohorte la .La dosificación (una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC o placebo SC) fue doble ciego.
Los sujetos de la cohorte 1 a se asignaron aleatoriamente en una relación de 2:1 (4 ALXN1210 SC, 2 placebo SC; N = 6).
•Cohorte Ib .La dosificación (una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC o placebo SC) fue doble ciego.
Los sujetos de la cohorte 1 b se asignaron aleatoriamente en una relación de 5:1 (20 ALXN1210 SC, 4 placebo SC; N = 24).
•Cohorte 2.La dosificación (una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV) fue abierta (N = 12).
Durante la dosificación de la Cohorte 2, tanto los sujetos como el personal médico/de enfermería del lugar conocían el fármaco/la dosis que se estaba administrando.
Durante la dosificación de las Cohortes 1a y 1b, los sujetos y el personal médico/de enfermería del centro de estudio estaban cegados con respecto a la asignación del fármaco del estudio. El personal de la farmacia que preparaba las inyecciones subcutáneas no estaba cegado, ni tampoco los administradores del medicamento del estudio, mientras que el resto del personal del centro del estudio involucrado en las evaluaciones de seguridad permaneció cegado a la asignación del medicamento del estudio. El personal patrocinador no estaba cegado según fuera necesario (por ejemplo, para supervisar que las inyecciones subcutáneas se estuvieran preparando adecuadamente, para determinar la notificabilidad de los SAE) y se abstuvo de compartir cualquier información sobre la asignación del fármaco del estudio con el personal del centro de estudio.
9. Descripción del fármaco del estudio
El producto en investigación se describe en la tabla 16.
Tabla 16: Producto en investi ación
10. ALXN1210 y placebo
Cada vial de ALXN1210 SC contenía 100 mg de ALXN1210 (100 mg/ml) en fosfato de sodio 50 mM, arginina 25 mM, el 5% de sacarosa y el 0,05% de polisorbato 80. El ALXN1210 SC está formulado a pH 7,4 y se proporcionó como un solución acuosa formulada, estéril y sin conservantes de 100 mg/ml de ALXN1210 suministrada en viales de un solo uso de 2 ml. Cada vial de ALXN1210 SC incluía un sobrellenado nominal para garantizar que se pudiera retirar 1 ml (100 mg de ALXN1210) para su administración.
Cada dosis de placebo SC contenía una inyección de cloruro de sodio al 0,9%, Ph Eur o BP, en el mismo volumen especificado para las Cohortes 1a y 1b.
Cada vial de ALXN1210 IV contiene 150 mg de ALXN1210 en fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 150 mM, el 0,02% de polisorbato 80 y agua para inyección. El ALXN1210 IV se formuló a pH 7,0 y se proporcionó como una solución acuosa de 10 mg/ml de ALXN1210, estéril y sin conservantes, completamente formulada, suministrada en viales de un solo uso de 20 ml. El ALXN1210 IV se diluyó en una inyección de cloruro de sodio al 0,9%, Ph Eur o BP, y se administró mediante infusión intravenosa a una velocidad máxima de 333 ml/h, excluyendo la interrupción por razones técnicas o de seguridad.
Los viales de ALXN1210 se almacenaron en condiciones refrigeradas a una temperatura de entre 2°C y 8°C (36 °F a 46 °F) y se protegieron de la luz. Los viales de ALXN1210 no se congelaron ni se agitaron.
El ALXN1210 SC y el placebo SC se prepararon de forma ciega en una jeringa para administración SC. No hubo dilución del ALXN1210 SC o del placebo s C. Se colocaron el ALXN1210 SC y el placebo SC directamente en la jeringa.
El ALXN1210 IV se diseño para infusión diluyéndolo en solución salina disponible comercialmente (inyección de cloruro de sodio al 0,9%; Ph Eur o BP) para infusión IV a una velocidad máxima de 333 ml/h, excluyendo la interrupción por razones técnicas o de seguridad.
ALXN1210 IV se diluyó con una inyección de cloruro de sodio al 0,9%, Ph Eur o BP, antes de la administración (solución de dosificación). La vida útil en uso de la solución de dosificación fue de 4 horas a temperatura ambiente de 15°C a 25°C (59°F a 77°F). La fecha y hora de caducidad de la solución de dosificación se calcularon a partir de la rotura del primer vial. La dosis se administró dentro de la fecha y hora de vencimiento de la caducidad. Cada jeringa de 1 ml de ALXN1210 SC o placebo SC que se extrajo (4 jeringas por sujeto) se administró dentro de un periodo de 1 hora una vez que se extrajo del vial a la jeringa.
11. Administración
Todas las dosis de ALXN1210 SC o placebo SC se administraron mediante cuatro inyecciones SC de 100 mg de 1 ml cada una (tabla 17) en la zona abdominal. Las cuatro inyecciones de 1 ml se administraron durante un periodo de 15 minutos, y deberían haber transcurrido al menos 15 minutos entre el final de la inyección en un sujeto y el inicio de la inyección en el siguiente sujeto.
Tabla 17: Tabla de referencia de dosificación para la preparación de ALXN1210 SC Placebo SC
Todas las dosis de ALXN1210 IV se administraron mediante infusión IV, utilizando equipos IV con filtros en línea, a una velocidad máxima de 333 ml/h, excluyendo las interrupciones por razones técnicas o de seguridad. Deberían haber transcurrido al menos 15 minutos entre el final de la infusión en un sujeto y el inicio de la infusión en el siguiente sujeto.
Tabla 18: Tabla de referencia de dosificación para la preparación de ALXN1210 IV
Cohorte Fármaco del Volumen de Volumen Volumen de Velocidad Duración estudio dosis ALXN1210 or de infusión máxima de mínima de la
)
12. Gestión de posibles eventos adversos durante la administración del fármaco del estudio
Algunos sujetos tratados con infusiones IV de anticuerpos monoclonales han experimentado reacciones concurrentes relacionadas con la infusión con signos o síntomas que pueden clasificarse como reacciones alérgicas agudas/reacciones de hipersensibilidad o síndrome de liberación de citoquinas.
Los sujetos se supervisaron estrechamente durante y después de la administración del fármaco del estudio para detectar cualquier síntoma de anafilaxia y otras reacciones de hipersensibilidad, incluidos cambios o paro circulatorio y/o respiratorio, o urticaria, artralgias, mialgias u otros signos de reacciones relacionadas. El tratamiento adecuado estuvo disponible de inmediato. Podrían haber ocurrido eventos adversos asociados con la infusión y, dependiendo de su tipo y gravedad, podría haber sido necesaria la interrupción de la infusión. Se informó a los sujetos sobre los primeros síntomas y signos de reacciones de hipersensibilidad, tales como urticaria, hinchazón de la cara, párpados, labios o lengua, o dificultad para respirar. Se utilizó un algoritmo de reacción a la infusión aguda para gestionar las reacciones relacionadas con la infusión. En este estudio, se realizaron evaluaciones periódicas para supervisar las reacciones a la infusión y las reacciones en el sitio de la infusión. Para garantizar que las reacciones se pudieran tratar rápidamente, hubo al menos 15 minutos entre el final de la infusión/inyección en un sujeto y el inicio de la infusión/inyección en el siguiente sujeto. No se dosificó a más de 6 sujetos por día. Cualquier reacción se trató y se tuvo en cuenta en las reglas de toxicidad y continuación/aumento de dosis. Si se producían reacciones anafilácticas, se seguían las directrices actuales presentadas en "UK Treatment Guideline for Anaphylactic Reactions" del UK Resuscitation Council.
13. Evaluaciones farmacocinéticas (PK) y farmacodinámicas (PD)
Después de la administración del fármaco del estudio, se recogieron muestras de suero para la determinación de las concentraciones séricas de ALXN1210 y para los análisis de las concentraciones de C5 total y libre, la hemólisis de cRBC y potencialmente otras medidas de activación de C5 en los siguientes puntos temporales, registrándose y utilizándose las fechas y horas reales de muestreo del suero en los cálculos de PK y PD:
• Las concentraciones séricas de ALXN1210 se analizaron en los siguientes puntos temporales de muestreo:
predosis (dentro de los 15 minutos anteriores al inicio de la infusión/inyección [SOI]); Día 1 al final de la infusión/inyección (EOI), 30 minutos después de la EOI y los siguientes puntos temporales después de la SOI: 2 h, 4 h y 8 h; Día 2 (24 h); Día 3 (48 h); Día 5 (96 h); Día 8 (168 h); Día 15 (336 h); Día 22 (504 h); Día 29 (672 h); Día 36 (840 h); Día 43 (1008h); Día 50 (1176 h); Día 57 (1344 h); Día 71 (1680 h); Día 90 (2136 h); Día 120 (2856 h); Día 150 (3576 h); y Día 200 (4776 h).
Todos los sujetos que proporcionaron una cantidad adecuada de muestras de PK en suero para caracterizar un perfil de concentración-tiempo se incluyeron en la población de análisis de PK. Todos los sujetos que proporcionaron muestras de PD se incluyeron en la población de análisis de PD.
14. Evaluaciones de inmunogenicidad
Se recogieron muestras de suero en los siguientes puntos temporales: antes de la dosis (dentro de los 15 minutos anteriores al SOI) y en los Días 15 (336 h), 29 (672 h), 57 (1344 h), 90 (2136 h), 120 (2856 h), 150 (3576 h) y 200 (4776 h) y se analizaron para ADA a ALXN1210. Se realizó una caracterización adicional de la respuesta de anticuerpos según correspondía basándose en PK/PD y los datos de seguridad de ALXN1210.
Todos los sujetos que proporcionaron una muestra previa y posterior a la dosis de ADA se incluyeron en la población de análisis de inmunogenicidad.
El ensayo de inmunogenicidad evalúa el anticuerpo antifármaco (ADA) contra ALXN1210. En el manual del laboratorio se proporcionan instrucciones detalladas sobre el procedimiento para recoger, procesar, almacenar y enviar muestras de suero para el análisis de inmunogenicidad.
15. Evaluación de seguridad
Las evaluaciones de seguridad incluyeron pruebas de TB, hallazgos del examen físico, mediciones de signos vitales, pruebas de inmunogenicidad (ADA), evaluaciones de laboratorio, ECG, evaluaciones del sitio de infusión y del sitio de inyección (por ejemplo, sangrado, hematomas, eritema, hinchazón, induración y dolor) y seguimiento de eventos adversos. Los eventos adversos se clasificaron de acuerdo con los Criterios Comunes de Terminología para Eventos Adversos del National Cancer Institute v4.03 (CTCAE v4.03), publicados el 14 de junio de 2010. Las evaluaciones de laboratorio incluyeron paneles de hematología, química y coagulación; hemograma completo con diferencial; análisis de orina; y prueba de embarazo en suero para mujeres.
Se realizaron evaluaciones clínicas y de laboratorio para evaluar la seguridad de ALXN1210. El programa de las evaluaciones se describe en el Calendario de evaluaciones. Los resultados anormales se siguieron hasta su resolución o su estabilización.
Se realizó una revisión de los parámetros demográficos, incluida la edad, el sexo, la raza y el origen étnico, tal como se describe en el Calendario de evaluaciones. Se realizó un historial clínico completo.
Las mediciones de los signos vitales se tomaron después de que el sujeto haya estado descansando en posición supina o semirrecostada durante al menos 5 minutos e incluirán temperatura (°C; oral), frecuencia respiratoria, tensión arterial supina y pulso. El programa de las mediciones de los signos vitales se describe en el Calendario de evaluaciones. Las mediciones de tensión arterial o pulso fuera de intervalo se repitieron a discreción del investigador. Cualquier medición confirmada de signos vitales clínicamente significativa se registró como evento adverso.
El peso, la altura y el IMC se registraron tal como se describe en el Calendario de evaluaciones. Cada examen incluyó las siguientes evaluaciones: apariencia general; piel; cabeza, oídos, ojos, nariz y garganta; cuello; ganglios linfáticos; pecho; corazón; cavidad abdominal; extremidades; sistema nervioso central; y sistema musculoesquelético.
Se obtuvo un ECG de 12 derivaciones por triplicado después de que el sujeto hubiera estado descansando durante al menos 5 minutos. El momento de los ECG se describe en el Calendario de evaluaciones. Además, se realizó un registro cardiaco continuo en cada administración de dosis desde antes de la dosis hasta el final de la infusión IV en la Cohorte 2 y desde antes de la dosis hasta 3 horas después del final de la inyección SC en las Cohortes 1a y 1b. Se midieron la frecuencia cardíaca, PR, QRS, RR y QT y se calcularon los intervalos QTcF corregidos.
Se recogieron muestras de sangre para análisis de hematología, química clínica, coagulación y serología vírica, y muestras de orina para análisis de orina, química de la orina y pruebas de detección de drogas y alcohol, tal como se describe en el Calendario de evaluaciones.
Se analizaron muestras de sangre para determinar los siguientes parámetros hematológicos: recuento de plaquetas, glóbulos rojos (RBC) y glóbulos blancos; diferencial automatizado (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos, basófilos); hemoglobina; hematocrito; e índices de glóbulos rojos (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media y concentración de hemoglobina corpuscular media). El programa de las evaluaciones hematológicas se describe en el Calendario de evaluaciones.
Se analizaron muestras de sangre para determinar los siguientes parámetros de química clínica: nitrógeno ureico en sangre; creatinina; glucosa; sodio; fósforo; potasio; cloruro; dióxido de carbono total; calcio total; magnesio; AST; ALT; gamma-glutamiltransferasa; fosfatasa alcalina; lactato deshidrogenasa; bilirrubina total, directa e indirecta; ácido úrico; albúmina; y proteína total. Teniendo en cuenta que la bilirrubina indirecta se calculó a partir de los valores de bilirrubina total y directa, no había disponibilidad de resultados de bilirrubina indirecta si la bilirrubina directa se encontraba por debajo del límite de cuantificación.
Se midieron el nivel sérico de la hormona estimulante del folículo y las concentraciones de estradiol en el momento de la selección en mujeres posmenopáusicas para confirmar su estado posmenopáusico.
El programa de las evaluaciones de química se describe en el Calendario de evaluaciones.
Se analizaron muestras de sangre para determinar el tiempo de protrombina, la relación internacional normalizada y el tiempo de tromboplastina parcial. El programa de las evaluaciones de la coagulación se describe en el Calendario de evaluaciones.
El análisis de orina incluye gravedad específica, pH, glucosa, proteínas, sangre y cetonas. Solo se realizó un examen microscópico de muestras de orina en caso de hallazgos anormales. También se enviaron muestras de orina al laboratorio de patología para medir la proteína y la creatinina con el fin de calcular la relación proteína:creatinina en la orina. El programa de los análisis de orina y las evaluaciones de la química de la orina se describen en el Calendario de evaluaciones.
Las muestras de sangre recogidas en el momento de la selección se analizaron para determinar los títulos de anticuerpos contra el VIH-1, el VIH-2, el HBsAg y el VHC. Se requirió un ensayo del antígeno de superficie de la hepatitis B para todos los sujetos antes de la inscripción. No se inscribirán sujetos con HBsAg positivo. Para los sujetos con HBsAg negativo, se requería el siguiente algoritmo de ensayo:
1. Si HBcAb era negativo, el sujeto era elegible para inscribirse.
2. Si HBcAb era positivo, se analizaba el anticuerpo de superficie de la hepatitis B (HBsAb).
a. Si tanto HBcAb como HBsAb eran positivos, el sujeto era elegible para inscribirse.
b. Si HBcAb era positivo y HBsAb negativo, el sujeto no se inscribió.
Se analizó una muestra de orina para detección de drogas en busca de los siguientes compuestos: anfetaminas, barbitúricos, benzodiazepinas, cocaína, metadona, opiáceos, fenciclidina, metanfetamina, 3,4-metilendioximetanfetamina y tetrahidrocannabinol (cannabinoides). Se realizó una prueba de alcoholemia en aire espirado. Si era positiva antes de la dosificación, no se procedió con la dosificación. El programa de las pruebas de orina para detectar drogas y de alcohol en el aire espirado se describe en el Calendario de evaluaciones.
Se realizó una prueba de embarazo (beta gonadotropina coriónica humana) en todas las mujeres. El programa de la prueba de embarazo se describe en el Calendario de evaluaciones.
Se recogieron muestras de suero para un ensayo QuantiFERON-TB tal como se describe en el Calendario de evaluaciones.
En el momento de la selección se realizó un ensayo adecuado para determinar la actividad del complemento, tal como la inhibición de CAP ELISA/C5 (hemólisis), para confirmar que los sujetos no tienen una deficiencia del complemento. Los sujetos con deficiencia del complemento se excluyeron de la participación en el estudio.
Se recogieron muestras de suero al inicio y durante el seguimiento para medir la actividad del CH50 utilizando un LIAin vitropara confirmar la normalización de la actividad del complemento. Si se obtuvo un resultado normal de CH50 de la primera muestra de CH50 de un sujeto recogida durante el seguimiento, se podría haber detenido la profilaxis antibiótica y no se requirió la segunda muestra de CH50 programada. Si la primera y la segunda muestra de CH50 no fueran normales, se podría haber analizado la muestra inicial y tomar más muestras de CH50 hasta que se haya restablecido la actividad del complemento.
En el momento de la selección se realizó un título de anticuerpos bactericidas en suero (SBA) contra los serogrupos meningocócicos A, C, W135 e Y. Se utilizaron mediciones de títulos para excluir de la dosificación a sujetos sin respuesta inmunitaria.
Se realizaron evaluaciones del sitio de inyección subcutánea o de infusión IV. El dolor en el sitio de la inyección subcutánea o intravenosa se evaluó mediante una escala analógica visual (0-10). El dolor no se evaluó antes de la dosis. Las induraciones o reacciones < 1 cm de tamaño no se incluyeron como eventos adversos a menos que persistieran durante más de 24 horas.
Se analizaron muestras de suero para detectar anticuerpos antifármacos (ADA). El programa de la recogida de muestras de suero ADA se describió en el Calendario de evaluaciones.
16. Gestión de eventos adversos
El investigador fue responsable de detectar, evaluar, documentar y notificar todos los eventos adversos (EA). Todos los EA se registraron desde la firma del formulario de consentimiento informado hasta la finalización del estudio. No hubo límite de tiempo para los SAE que se consideraban relacionados de forma causal. Todos los EA observados o voluntarios, independientemente de la relación causal, se notificaron y registraron en el sistema de captura de datos. Se recopilaron y se registraron los eventos adversos notificados por el sujeto y/o el padre o tutor legal, y/o identificados en respuesta a una pregunta abierta del personal del estudio, o revelados por observación, examen físico u otros procedimientos del estudio.
Un EA se definió como cualquier signo desfavorable e imprevisto (por ejemplo, incluido un hallazgo anormal de laboratorio), síntoma o enfermedad temporalmente asociado con el uso de un producto médico o un procedimiento, considerado relacionado o no con el producto médico o procedimiento, que tiene lugar durante el transcurso del estudio clínico.
Se consideraron EA las exacerbaciones de una afección preexistente crónica o intermitente, incluido un aumento en la frecuencia y/o la intensidad de la afección. Los hallazgos anormales de los ensayos se consideraron EA. Si se identificaba un valor de laboratorio anormal, se recomendaba encarecidamente a los investigadores que notificaran un diagnóstico, o un signo o síntoma, en lugar de un valor de ensayo anormal aislado. Un hallazgo anormal en el ensayo se documentó como EA si se cumplía alguna de las siguientes condiciones: estaba asociado con un signo o síntoma; requirió ensayos de diagnóstico adicionales (los ensayos repetidos no se consideraron ensayos adicionales); requirió una intervención médica o quirúrgica; dio lugar a un cambio en la dosificación del estudio fuera de los límites de la dosificación definida por el protocolo o dio lugar a la interrupción del estudio; requirió tratamiento adicional significativo; no cumplió ninguna de las condiciones anteriores.
Esta definición también incluye los signos o síntomas resultantes de lo siguiente: sobredosis de drogas, abstinencia de drogas, uso indebido de drogas, interacciones entre fármacos, extravasación, exposición durante el embarazo, exposición a través de la lactancia, error de medicación y exposición ocupacional. Un EA no incluye necesariamente lo siguiente:
• Procedimientos médicos o quirúrgicos (por ejemplo, cirugía, endoscopias, extracciones dentales, transfusiones); la afección que da lugar al procedimiento fue el AE (por ejemplo, la colecistectomía laparoscópica fue el procedimiento o tratamiento para un SAE de vesícula biliar necrótica)
• Enfermedades o afecciones preexistentes, presentes o detectadas antes de la evaluación de selección, que no empeoran
• Situaciones en las que no ha ocurrido un suceso médico adverso (por ejemplo, hospitalización para cirugía electiva, si se planificó antes del inicio del estudio; admisiones sociales y/o de conveniencia)
Cualquier EA que cumpla uno de los criterios enumerados a continuación debía registrarse como SAE. Un SAE se describió como cualquier suceso médico adverso que, en cualquier dosis:
1. Da como resultado la muerte
2. Es potencialmente mortal3
3. Requiere hospitalización o prolongación de la hospitalizaciónb. La hospitalización no necesariamente incluye lo siguiente:
o Centro de rehabilitación/hospicio/enfermería
o Visita al servicio de urgencias en menos de 24 horas
o Admisión/cirugía/cirugía ambulatoria electiva o planificada previamente
o Admisión especificada por protocolo
o Admisión por una afección preexistente no asociada ni con un nuevo EA ni con el empeoramiento de un EA preexistente
4. Tiene como consecuencia discapacidad/incapacidad persistente o significativa
5. Es una anomalía congénita/defecto de nacimiento.
6. Es un evento médico importantec
a La expresión "potencialmente mortal" en la definición de "serio" se refiere a un evento en el que el sujeto estaba en riesgo de muerte en el momento del evento; no se refiere a un evento que hipotéticamente podría haber causado la muerte si fuera más grave.
b La hospitalización requiere ingreso hospitalario o prolongación de una hospitalización existente. Se consideraron AAG los EA que se asociaron con la hospitalización o la prolongación de la hospitalización.
c Evento médico importante: Se debe ejercer el criterio médico y científico para decidir si la notificación acelerada fue apropiada en otras situaciones, tales como eventos médicos importantes que pueden no poner en peligro inmediatamente la vida o provocar la muerte u hospitalización, pero pueden poner en peligro al sujeto o pueden requerir Intervención para prevenir 1 de los otros resultados enumerados en la definición anterior. Por lo general, estos también deben considerarse serios. Ejemplos de tales eventos fueron el tratamiento intensivo en un departamento de emergencias o en el hogar por broncoespasmo alérgico; discrasias sanguíneas o convulsiones que no tienen como consecuencia una hospitalización; o desarrollo de dependencia o abuso de drogas.
Había que diferenciar gravedad y seriedad. La gravedad describe la intensidad de un EA, mientras que el término seriedad se refiere a un EA que ha cumplido los criterios para un SAE, tal como se ha descrito anteriormente.
Todos los EA se calificaron según los siguientes criterios de CTCAE v4.03, publicado el 14 de junio de 2010.
• Grado 1: Leve (conciencia del signo o síntoma, pero fácilmente tolerado)
• Grado 2: Moderado (malestar suficiente para causar interferencia con las actividades normales)
• Grado 3: Grave (incapacitante, con incapacidad para realizar actividades normales)
• Grado 4: Potencialmente mortal
• Grado 5: Mortal
Se documentaron los cambios en la gravedad de un EA para permitir una evaluación de la duración del EA en cada nivel de intensidad que se va a evaluar. Los eventos adversos caracterizados como intermitentes requirieron documentación del inicio y la duración de cada episodio, si la gravedad del evento intermitente cambió.
Se proporcionó una evaluación de causalidad del investigador para todos los EA (tanto serios como no serios). Esta evaluación se registró en el sistema de captura de datos y en los formularios adicionales, según correspondiera. Las definiciones para las evaluaciones de causalidad fueron las siguientes:
• No relacionado (sin relación): Esta relación sugiere que no hubo asociación entre el producto en investigación y el evento notificado.
• Es poco probable que esté relacionado: Esta relación sugiere que el cuadro clínico era muy consistente con una causa distinta al producto en investigación, pero la atribución no se puede hacer con absoluta certeza y no se puede excluir con total confianza una relación entre el producto en investigación y los EA.
• Posiblemente relacionado: Esta relación sugiere que el tratamiento con el producto en investigación puede haber causado o contribuido al EA; es decir, el evento sigue una secuencia temporal razonable desde el momento de la administración del fármaco del estudio y/o sigue un patrón de respuesta conocido al producto en investigación, pero también podría haber sido producido por otros factores.
• Probablemente relacionado: Esta relación sugiere que existe una secuencia temporal razonable del evento con la administración del producto en investigación, así como la probable asociación del evento con el producto en investigación. Esto se basará en la acción farmacológica conocida del producto en investigación, reacciones adversas conocidas o notificadas previamente al producto o clase de fármacos en investigación, o en el juicio basado en la experiencia clínica del investigador.
• Definitivamente relacionado: Relación temporal con el producto en investigación. Otras condiciones (enfermedad concurrente, reacción a medicación concurrente o progresión/expresión del estado de la enfermedad) no parecen explicar el evento; el evento se corresponde con el perfil farmacéutico conocido; mejora tras la interrupción; reaparición en la nueva provocación.
Si un sujeto experimenta un SAE con resultado de muerte, se realizaron los siguientes procedimientos: El SAE que resultó en muerte tiene un resultado documentado como muerte/mortal, siendo la fecha de finalización la fecha de muerte. Si el sujeto tenía EA/SAE adicionales que estaban en curso en el momento de la muerte, estos eventos se documentaron como en curso sin fecha de finalización. Solo 1 evento tiene un resultado de muerte/mortal, a menos que un informe de autopsia o un investigador indique lo contrario.
17. Estadísticas
Se desarrolló y finalizó un plan de análisis estadístico (SAP) formal antes del cierre de la base de datos.
La población de seguridad está formada por todos los sujetos que recibieron al menos 1 dosis del fármaco del estudio. Se utilizaron sujetos de esta población para el análisis de seguridad.
La población de PK está formada por todos los sujetos que tenían suficientes datos de concentración sérica para permitir el cálculo de los parámetros de PK. La población de PK se utilizó para los resúmenes de PK.
La población de PD está formada por todos los sujetos que tenían suficientes datos de concentración de C5 total y libre y datos de hemólisis de cRBC. La población de PD se utilizó para los resúmenes de PD.
La población de análisis de inmunogenicidad está formada por todos los sujetos a los que se les recogió una muestra de ADA antes y después de la dosis.
Un tamaño de muestra total evaluable de 36 sujetos, 24 sujetos con ALXN1210 SC de la Cohorte 1 y 12 sujetos con ALXN1210 IV de la Cohorte 2, proporcionó > 80% de poder para inferir que el límite inferior de un intervalo de confianza del 90% para la relación de biodisponibilidad de ALXN1210 SC a IV fue > 0,4 suponiendo una biodisponibilidad absoluta de 0,6 y un coeficiente de variación de 0,35. Además, 6 sujetos recibieron placebo SC, 2 en la Cohorte 1a y 4 en la Cohorte 1b. La aleatorización a la Cohorte 1a se realizó en una relación de 2:1 y a la Cohorte 1b en una relación de 5:1, para recibir ALXN1210 SC o placebo SC. Esto elevó el número total planificado de sujetos a N=42.
En general, la estadística descriptiva para variables continuas incluye el número de valores no perdidos, la media aritmética, la desviación estándar, la mediana, el mínimo y el máximo. La estadística descriptiva de los parámetros de PK incluyó el número de observaciones, la media aritmética, la desviación estándar, el coeficiente de variación aritmético (%CV), la mediana, el mínimo, el máximo, la media geométrica y el %CV geométrico. Las variables categóricas se resumieron utilizando porcentajes y recuentos de frecuencia, por cohorte y punto temporal.
Todos los sujetos se incluyeron en el resumen de la disposición de los sujetos, que resume la frecuencia y el porcentaje de sujetos seleccionados y tratados que completaron o interrumpieron el estudio, junto con el motivo de la interrupción, por cohorte. Se resumieron las características demográficas y de referencia de todos los sujetos por cada cohorte y en general.
Se realizaron análisis de seguridad en la población de seguridad y se informaron por cada cohorte. Los análisis de seguridad incluyeron un análisis de todos los EA, ECG, datos de laboratorio clínico, exámenes físicos y mediciones de signos vitales, y se presentaron mediante estadística descriptiva. No se planificaron análisis estadísticos inferenciales sobre los parámetros de seguridad de este estudio. La incidencia de EA y SAE emergentes por el tratamiento se resumió por clasificación de sistemas y órganos y término preferido para cada cohorte y, en general, por relación con el fármaco del estudio. Los EA emergentes por el tratamiento también se resumieron por cohorte y, en general, por gravedad. Se enumeraron los EA serios y los EA que dieron lugar a la retirada del estudio. Los sujetos que tienen múltiples EA dentro de una categoría (por ejemplo, en general, clasificación de sistemas y órganos, término preferido) se contaron una vez en esa categoría. Para las tablas de gravedad, se contó el evento más grave de un sujeto dentro de una categoría.
Se resumieron para cada cohorte los cambios desde el inicio en las mediciones de los signos vitales y las evaluaciones de laboratorio (por ejemplo, química, hemograma completo con diferencial y análisis de orina). Los valores de los parámetros de laboratorio se clasificaron según el CTCAE. Se produjeron tablas de turnos por cohorte para estos parámetros de laboratorio. Estas tablas resumen el número de sujetos con cada grado inicial con respecto a los intervalos de referencia y los cambios al peor grado evaluado después de la dosis durante el estudio.
Los parámetros del ECG se midieron en los puntos temporales especificados, incluidos la frecuencia cardiaca, PR, RR, QRS, QT y los intervalos QTcF corregidos. Se calculó el promedio de las lecturas de ECG por triplicado en los puntos temporales recopilados, y se evaluaron los cambios con respecto a los valores iniciales previos al tratamiento en cada cohorte.
Se realizó un análisis de valores atípicos que resume la frecuencia y el porcentaje de sujetos que cumplen cualquiera de los siguientes criterios de valores atípicos en cada visita por cohorte:
• Intervalo QT, QTcF > 450 ms
• Intervalo QT, QTcF > 480 ms
• Intervalo QT, QTcF > 500 ms
• El intervalo QT y QTcF aumenta desde el inicio > 30 ms
• El intervalo QT y QTcF aumenta desde el inicio > 60 ms
Todos los medicamentos concomitantes se codificaron utilizando el Diccionario de Fármacos de la OMS y se resumió la frecuencia y el porcentaje de medicamentos concomitantes.
Los datos de concentración sérica individual de los sujetos tratados con ALXN1210, con fechas y horas de muestreo reales, se utilizaron para derivar los parámetros farmacocinéticos mediante procedimientos de análisis no compartimentales utilizando Phoenix WinNonlin 6.3 o superior.
Se derivaron los siguientes parámetros de PK: concentración sérica máxima observada (Cmáx), tiempo hasta la concentración sérica máxima observada (Tmáx), área bajo la curva de concentración sérica frente al tiempo desde el tiempo cero hasta la última concentración cuantificable (AUCt) área bajo la curva desde el tiempo cero hasta el infinito (AUC~), constante de velocidad de eliminación terminal (Az), semivida de eliminación terminal (Ty2), aclaramiento total (CL o CL/F) y volumen de distribución (Vd o Vd/F).
La relación de medias geométricas (ALXN1210 SC/ALXN1210 IV) y su IC del 90% se calcularon para Cmáx, AUC<e>y A U C y se tabularon. El IC se calculó utilizando la varianza entre sujetos. Se presentaron evaluaciones de la concentración a lo largo del tiempo.
Los efectos de PD de ALXN1210 SC e IV se evaluaron mediante la evaluación de los cambios en las concentraciones séricas de C5 total y libre, la hemólisis de cRBC y otras mediciones de activación de C5 a lo largo del tiempo. Los análisis se realizaron en las muestras recogidas tal como se describe en el Calendario de evaluaciones.
La inmunogenicidad, medida por ADA, se resumió en forma tabular por listas de cohortes y por sujetos.
Ejemplo 3: Resultados del estudio de fase 1 para evaluar una dosis única de ALXN1210 administrada por vía subcutánea en comparación con la vía intravenosa en sujetos sanos
El siguiente es un resumen de los datos de un estudio de fase 1 de dosis única que se realizó sustancialmente tal como se ha descrito anteriormente en el ejemplo 2. Específicamente, el estudio se diseñó para evaluar la seguridad, tolerabilidad, farmacocinética (PK), farmacodinámica (PD) e inmunogenicidad de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 administrada por vía subcutánea en comparación con una dosis única de 400 mg de ALXN1210 administrada por vía intravenosa o un placebo administrado por vía subcutánea en 42 sujetos sanos.
1. Disposición de sujetos
De los 161 sujetos sometidos al proceso de selección, 42 (26,09%) se asignaron aleatoriamente para recibir el fármaco del estudio: placebo SC (n=6), ALXN1210 SC (n=24) y ALXN1210 IV (n=12) (figura 48). Ninguno de los sujetos asignados aleatoriamente interrumpió prematuramente el estudio.
2. Desviaciones del protocolo
Se informó al menos una desviación del protocolo para 36 sujetos (placebo SC: n = 6; ALXN1210 SC: n = 20; y ALXN1210 IV: n = 10). Las categorías de desviación del protocolo incluyeron desviación de la ventana temporal, cumplimiento del sujeto, evaluación no realizada, criterios de exclusión y administración de dosis.
En dos sujetos del grupo de ALXN1210 IV, las desviaciones del protocolo se evaluaron como importantes. En un sujeto, las evaluaciones de ADA, PK, PD y de laboratorio del Día 29 no se realizaron porque el sujeto no asistió a la visita de seguimiento. En el otro sujeto, no se recogieron muestras de PK y PD del Día 71 porque el sujeto no asistió a la visita de seguimiento. Si bien estas desviaciones se evaluaron como importantes debido a la naturaleza del diseño del estudio (criterio de valoración principal relacionado con la farmacocinética), no se consideró que hubieran tenido un efecto en la interpretación de los resultados. Se consideró que ninguna de las otras desviaciones del protocolo había afectado a la interpretación de los resultados o a la seguridad de los sujetos. Los resultados de la prueba de embarazo en suero fueron negativos en todos los sujetos durante el estudio.
3. Evaluación de farmacocinética, farmacodinámica e inmunogenicidad
Los 42 sujetos asignados aleatoriamente recibieron el fármaco del estudio y se incluyeron en el Conjunto de seguridad (tabla 19). Todos estos sujetos también se incluyeron en el Conjunto de PD y en el Conjunto de análisis de Inmunogenicidad basándose en las definiciones. Los 36 sujetos del Conjunto de seguridad que recibieron ALXN1210 SC o ALXN1210 IV tenían suficientes datos de concentración sérica para permitir el cálculo de los parámetros de PK y se incluyeron en el Conjunto de PK (tabla 19).
Tabla 19: Poblaciones de análisis todos los su etos aleatorizados
4. Características demográficas y otras características de referencia
En todos los grupos de tratamiento, la mayor parte de los sujetos eran varones (66,7%) y blancos (69,0%) con una edad media (± SD) de 35,0 (± 7,65) años. El IMC medio (± SD) para la población general fue de 24,035 (± 3,1582). En general, los datos demográficos estuvieron bien equilibrados entre los grupos de tratamiento (tabla 20).
T l 2 :D m r fi - E í i ri iv r r mi n n n ri
El uso de medicamentos previos se notificó por 5 (20,8%) sujetos en el grupo ALXN1210 SC. No hubo informes del uso de medicamentos previos en los grupos de placebo SC y ALXN1210 IV. El uso de medicamentos concomitantes se notificó por 3 (50,0%), 13 (54,2%) y 8 (66,7%) sujetos en los grupos de placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV, respectivamente. Los medicamentos concomitantes más comúnmente utilizados fueron anilidas, tales como paracetamol (15 sujetos) para el tratamiento de EA, seguidos de progestágenos y estrógenos, combinaciones fijas (7 sujetos) para la anticoncepción. No se espera que ninguno de los medicamentos concomitantes informados haya influido en los resultados del estudio.
Ningún sujeto recibió terapias ni procedimientos no farmacológicos. Todas las dosis de ALXN1210 SC o placebo SC se administraron mediante cuatro inyecciones SC de 100 mg de 1 ml cada una en la zona abdominal. Todas las dosis de ALXN1210 IV se administraron mediante infusión IV, utilizando equipos IV con filtros en línea. Todos los sujetos recibieron sus dosis asignadas.
5. Resultados y tabulaciones de farmacocinética, farmacodinámica e inmunogenicidad de datos de sujetos individuales
Los análisis de PK se realizaron en el Conjunto de PK que constaba de todos los sujetos del conjunto de seguridad que recibieron ALXN1210 SC o ALXN1210 IV y que tenían suficientes datos de concentración sérica para permitir el cálculo de los parámetros de PK.
Las figuras 49-50 ilustran los perfiles medios (± SD) de concentración sérica-tiempo para sujetos sanos después de la administración SC e IV de ALXN1210 (escalas lineales y logarítmicas). Los gráficos de las concentraciones séricas individuales de ALXN1210 frene al tiempo nominal se presentan usando una escala lineal (figura 49) y una escala loglineal (figura 50), respectivamente.
Los parámetros farmacocinéticos de ALXN1210 después de la administración SC e IV se resumen en la tabla 21. Un total de 24 sujetos recibieron la administración SC de ALXN1210; la mediana (intervalo) tmáx fue de 169,8 (96,0 a 508,1) horas después de la inyección subcutánea. La media geométrica (%CV) ty2 fue similar a los 31,3 (13,6) días y 29,9 (15,4) días para la administración de ALXN1210 SC e IV, respectivamente. La eliminación de ALXN1210 fue similar entre las vías IV y SC (figura 49).
T l 21: R m n l r m r f rm in i ALXN121 n n f rm in i
a Mediana presentada para tmáx.
Nota: Para el tratamiento ALXN1210 SC, las columnas CL y Vd representan CL/F y Vd/F, respectivamente.
Abreviaturas: AUCs = área bajo la curva de concentración sérica frente al tiempo desde el momento 0 hasta la última concentración cuantificable; AUC- = área bajo la curva de concentración sérica frente al tiempo desde el tiempo 0 extrapolada al infinito; CL o CL/F = aclaramiento corporal total del fármaco del suero;
Cmáx = concentración sérica máxima observada; CV = coeficiente de variación; h = hora;
IV = intravenosa; l = litro; máx = máximo; mín = mínimo; n = número de sujetos;
NA = no aplicable; SC = subcutánea; ty2 = semivida de eliminación terminal; tmáx = tiempo hasta la concentración sérica máxima observada; Vd o Vd/F = volumen de distribución; Az = constante de velocidad de eliminación terminal.
La tabla 22 resume la biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 SC. Los parámetros de PK para ALXN1210 SC (Cmáx, AUCs y AUC-) se compararon con la referencia (ALXN1210 IV) mediante análisis estadístico utilizando un modelo mixto tras transformación logarítmica de los datos. La RMG de Cmáx para ALXN1210 (SC/IV) fue del 26,1% (IC del 95%: 21,3, 32,0). La biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 SC, determinada en función de la RMG de estimaciones de AUC- (SC/IV), fue del 60,4% (IC del 95%: 49,7, 73,3).
Tabla 22: Análisis estadístico de la biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 subcutáneo Conjunto farmacocinético
Los análisis de PD se realizaron en el Conjunto de PD que constaba de todos los sujetos del conjunto de seguridad que tenían suficientes datos de concentración de C5 libre y total y datos de hemólisis de cRBC.
La figura 51 representa el cambio porcentual medio (± SD) en la concentración sérica de C5 libre desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV. El C5 libre medio se mantuvo relativamente constante después de la administración SC de placebo. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV dio como resultado una inhibición inmediata y casi completa del C5 libre (> 99%) hasta el día 8 después de la administración IV. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC también dio como resultado una reducción del C5 libre, pero no en la misma medida ni con un inicio tan rápido como se observó después de la administración IV. Después de la administración de ALXN1210 SC, la inhibición media máxima en C5 libre (77%) se produjo 1 semana después de la dosificación.
La duración y el grado de la reducción de la concentración media libre de C5 dependieron de la exposición. La figura 52 representa el cambio porcentual medio (± SD) en las concentraciones séricas totales de C5 desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV. Las concentraciones medias totales de C5 permanecieron relativamente constantes después de la administración subcutánea de placebo. Sin embargo, la administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 produjo un aumento medio máximo del 82% y el 107% con respecto al valor inicial en el C5 total después de la administración SC e IV, respectivamente.
La figura 53 representa el cambio porcentual medio (± SD) en la hemolisis de glóbulos rojos de pollo (cRBC) desde el inicio a lo largo del tiempo para sujetos a los que se les administró placebo SC, ALXN1210 SC y ALXN1210 IV. La hemólisis media de cRBC se mantuvo relativamente constante después de la administración subcutánea de placebo. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV dio como resultado una inhibición inmediata de la hemólisis media de cRBC con una reducción media máxima del 88%. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC también produjo una inhibición de la hemólisis de cRBC, pero no en la misma medida ni con un inicio tan rápido en comparación con la administración IV. La inhibición media máxima de la hemólisis de cRBC del 29% se produjo aproximadamente 1 semana después de la dosificación SC de ALXN1210. La duración y el grado de la inhibición de cRBC dependieron de la exposición.
El análisis de inmunogenicidad se realizó en el Conjunto de análisis de inmunogenicidad que constaba de todos los sujetos del Conjunto de seguridad a quienes se les recogió una muestra de ADA antes y después de la dosis. La prueba de anticuerpos antifármacos se realizó antes y después de la dosis los días 15, 29, 57, 90, 120, 150 y 200.
Un sujeto (Sujeto 0344-185) en el grupo de tratamiento con ALXN1210 SC tuvo una muestra positiva confirmada para ADA al inicio (antes de la dosis) y en todas las muestras posteriores a la dosis. Todos los títulos de anticuerpos posteriores a la dosis en este sujeto se encontraron por debajo del valor del título previo a la dosis. La respuesta positiva de anticuerpos antifármacos en este sujeto no se consideró clínicamente significativa ni estuvo relacionada con ALXN1210. Por lo tanto, este sujeto no está incluido en los resúmenes de inmunogenicidad que se proporcionan a continuación.
Un total de 4 sujetos (grupo ALXN1210 SC: 3/23 [13%] sujetos y grupo ALXN1210 IV: 1/12 [8,3%] sujetos) desarrollaron ADA emergente por el tratamiento. En el grupo ALXN1210 SC: un primer sujeto fue positivo para ADA los Días 57, 90, 120, 150 y 200. Todos los valores positivos para ADA fueron positivos para la reactividad cruzada de eculizumab. Un segundo sujeto dio positivo en ADA los Días 29, 57, 90, 120, 150 y 200. Todos los valores positivos de ADA fueron positivos para la reactividad cruzada de eculizumab, excepto el Día 90, que fue negativo. Un tercer sujeto fue positivo para ADA los días 90, 120, 150 y 200. Todos los valores positivos para ADA fueron positivos para la reactividad cruzada de eculizumab.
En el grupo ALXN1210 IV: un sujeto fue positivo para ADA los Días 15, 29, 90, 120, 150 y 200. Todos los valores positivos para ADA fueron negativos para la reactividad cruzada de eculizumab.
Las primeras respuestas positivas de ADA después de la dosis se observaron el Día 29 y el Día 15, para las dosis SC e IV, respectivamente. Los títulos de ADA para las muestras positivas para ADA fueron bajos y oscilaron entre <1,0 y 27. En la mayor parte de las muestras positivas para ADA después de la administración subcutánea, los ADA tuvieron reactividad cruzada con eculizumab. Después de la administración intravenosa, los ADA no tuvieron reactividad cruzada con eculizumab. Todos los sujetos positivos para ADA permanecieron positivos hasta el final del periodo de seguimiento. No se pudo realizar una evaluación formal del efecto de ADA sobre la PK y la PD debido al pequeño número de sujetos positivos a ADA. El examen de los resultados limitados de PK y PD individuales en estos sujetos sugiere que no existe un efecto aparente de la inmunogenicidad sobre la PK o PD de ALXN1210.
6. Conclusiones de farmacocinética, farmacodinámica e inmunogenicidad
La mediana (intervalo) tmáx fue de 169,8 (96,0 a 508,1 horas) después de la inyección subcutánea. La media geométrica de la semivida de eliminación terminal fue similar a 31,3 días y 29,9 días después de la administración de ALXN1210 SC e IV, respectivamente.
Las estimaciones de RMG de Cmáx (SC/IV) fueron del 26,1% (IC del 95%: 21,3, 32,0). La biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 SC, basada en la RMG de estimaciones de A<u>C (SC/IV), fue del 60,4% (IC del 95%: 49,7, 73,3).
El grado y la duración de la respuesta de la PD, evaluados mediante la concentración sérica de C5 libre y total y la hemólisis de cRBC, dependieron de la exposición. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV dio como resultado una inhibición inmediata y casi completa del C5 libre (> 99%) hasta el Día 8 después de la administración del fármaco del estudio. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC, administrada en cuatro inyecciones SC de 100 mg, también dio como resultado una reducción del C5 libre, pero no en la misma medida ni con un inicio tan rápido como la administración IV. La inhibición media máxima en C5 libre fue del 77%, lo que ocurrió aproximadamente 1 semana después de la administración SC. La administración de 400 mg de ALXN1210 produjo un aumento medio máximo del 82% y el 107% con respecto al valor inicial en el C5 total después de la dosificación SC e IV, respectivamente. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV dio como resultado una inhibición inmediata de la hemólisis de cRBC media con una reducción media máxima del 87%. La administración de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC también dio como resultado una inhibición de la hemólisis de cRBC, pero no en la misma medida ni con un inicio tan rápido en comparación con la administración intravenosa. La inhibición media máxima de la hemólisis de cRBC del 29% se produjo aproximadamente el Día 8 después de la administración SC.
Se notificaron ADA emergentes del tratamiento en 3/23 (13%) sujetos y 1/12 (8,3%) sujetos en los grupos ALXN1210 SC y ALXN1210 IV, respectivamente, con valores bajos de títulos de ADA que oscilaban entre < 1,0 y 27. La respuesta posdosis más temprana de ADA se observó el Día 29 y el Día 15, para la dosificación SC e IV, respectivamente. Después de la administración SC, los ADA tuvieron reactividad cruzada con eculizumab en la mayor parte de las muestras positivas para ADA. Después de la administración IV, los ADA no tuvieron reactividad cruzada con eculizumab. Todos los sujetos positivos para ADA permanecieron positivos hasta el final del periodo de seguimiento. No hubo un efecto aparente de la inmunogenicidad sobre la PK o la PD de ALXN1210.
Un sujeto adicional en el grupo de tratamiento con ALXN1210 SC tuvo una muestra positiva confirmada para ADA al inicio (antes de la dosis) y en todas las muestras posteriores a la dosis. Todos los títulos de anticuerpos posteriores a la dosis en este sujeto se encontraron por debajo del valor del título previo a la dosis. La respuesta positiva de anticuerpos antifármacos en este sujeto no estuvo relacionada con ALXN1210.
7. Grado de exposición
Todos los sujetos que recibieron la dosis única del fármaco del estudio se incluyeron en el Conjunto de seguridad (N = 42): placebo SC (n = 6); ALXN1210 SC (n = 24); y ALXN1210 IV (n = 12). El volumen total de infusión (80 ml) del fármaco del estudio se administró en cada sujeto asignado para recibir ALXN1210 IV. En un sujeto, la infusión se interrumpió durante un minuto, ya que no se programó tiempo suficiente en la bomba para la infusión completa. El volumen total del fármaco del estudio (4 ml) se administró a cada sujeto que recibió ALXN1210 SC o placebo SC.
8. Eventos adversos
En los tres grupos de tratamiento, 35/42 (83,3%) sujetos experimentaron 75 TEAE (todos de Grado 1). La proporción de sujetos con al menos 1 TEAE fue del 91,7%, 83,3% y 79,2%, respectivamente, en el grupo de ALXN1210 IV, el grupo de placebo SC y el grupo de ALXN1210 SC. No se notificaron muertes ni SAE durante el estudio. Ninguno de los sujetos interrumpió el fármaco del estudio ni se retiró del estudio debido a los TEAE (tabla 23). Todos los TEAE se resolvieron durante el transcurso del estudio. La mayoría de los TEAE no requirieron ningún medicamento y ningún sujeto requirió en ningún momento intervenciones no farmacológicas.
Tabla 22: Eventos adversos emer entes por el tratamiento TEAE : resumen eneral conunto de se uridad
En total, se notificaron 75 TEAE en 35 sujetos. En todos los grupos de tratamiento, los TEAE notificados con mayor frecuencia fueron nasofaringitis (23/42 sujetos, 54,8%) y dolor de cabeza (7/42 sujetos, 16,7%). Todos los TEAE se resumen por clasificación de sistemas y órganos (SOC) y término preferido por tratamiento en la tabla 23.
Tabla 23: Eventos adversos emergentes por el tratamiento: tabla de frecuencia por clasificación de sistemas r n rmin r f ri n n ri
Se consideró que la mayor parte de los TEAE (72/75 TEAE, 96%) no estaban relacionados con el tratamiento con ALXN1210. En todos los grupos de tratamiento, 3/42 (7,1%) sujetos informaron 3 TEAE que el investigador evaluó como relacionados ("posiblemente relacionados") con el tratamiento con ALXN1210 y Grado 1 (leve): (1) infección del sistema respiratorio superior en un sujeto del grupo ALXN1210 SC (2), migraña en un sujeto del grupo ALXN1210 SC y (3) dolor de cabeza en un sujeto del grupo ALXN1210 IV. Los 75 TEAE se clasificaron como Grado 1 (leve). Ningún sujeto murió, experimentó SAE ni suspendió el fármaco o el estudio del estudio debido a un TEAE.
En general, los valores medios de hematología, coagulación, química sanguínea, análisis de orina y química de la orina se encontraron dentro de los intervalos de referencia y no hubo tendencias aparentes en el cambio medio desde el inicio.
La mayor parte de los sujetos ingresaron en el estudio con valores normales (es decir, dentro de los respectivos intervalos de referencia) para parámetros de hematología, análisis de orina, coagulación, química sanguínea y química de la orina. No se observaron tendencias aparentes en los cambios entre los grupos de tratamiento. Se observó un desplazamiento de valores normales al inicio a valores anormales (Grado 1 [leve] o Grado 2 [moderado]) durante el estudio para algunos de los parámetros de laboratorio, que sin embargo no se consideraron clínicamente significativos. La mayor parte de los cambios fueron transitorios y se resolvieron durante el estudio.
Durante el estudio, se informó un cambio a valores anormales de Grado 3 en 3 sujetos del grupo ALXN1210 SC. Ninguno de los cambios a valores anormales de Grado 3 se notificó como EA.
En primer lugar, se notificó una disminución en el recuento de neutrófilos en un sujeto. El recuento de neutrófilos en este sujeto al inicio del estudio era 3,77 x 10A9/l. El recuento de neutrófilos evaluado el Día 43 fue de 0,95 x 10A9/l (intervalo normal: 2,0 a 7,5 x 10A9/l). El recuento de neutrófilos se encontraba en el intervalo normal el Día 57.
En dos sujetos se notificó un aumento en los niveles de potasio (intervalo normal: 3,5 a 5,1 mmol/l). En 1 sujeto con un nivel inicial de potasio de 4,5 mmol/l, el nivel de potasio evaluado el Día 150 fue de 6,1 mmol/l. Un nivel repetido de potasio se encontró en el intervalo normal el mismo día (visita no programada). En otro sujeto con un nivel inicial de potasio de 4,6 mmol/l, el nivel de potasio evaluado el Día 90 fue de 6,4 mmol/l. Este sujeto presentó valores anormales de potasio en la visita de selección (que oscilaron entre 5,2 y 6,2 mmol/l durante diferentes visitas de selección) y durante la mayor parte de las visitas del estudio. Los aumentos en los niveles de potasio fueron transitorios; los valores registrados se encontraron dentro del intervalo normal el Día 150 y el Día 200.
No hubo cambios observables desde el inicio en las mediciones de los signos vitales ni anomalías clínicamente significativas en los signos vitales observadas consistentemente en sujetos individuales.
Ningún sujeto tuvo hallazgos en el examen físico que fueran de importancia clínica distintos de los hallazgos notificados como EA. No hubo cambios medios notables desde el inicio en los resultados de la monitorización del ECG o la telemetría.
Los cambios en los intervalos QT se corrigieron mediante la fórmula de Fridericia (QTcF). En un sujeto del grupo de placebo SC, se observó un intervalo QT medio > 500 ms en el momento de la selección (510,0 ms) y el Día 2 (508,7 ms), el Día 150 (516,6 ms) y el Día 200 (612,9 ms). El intervalo QTcF medio en el mismo sujeto fue de 449,7 ms, 443,7 ms, 451,9 ms y 501,3 ms en el momento de la selección y los Días 2, 150 y 200, respectivamente. El aumento en el intervalo QT y QTcF no se consideró clínicamente significativo en este sujeto mujer que recibió placebo. Estos cambios tampoco se notificaron como EA. Durante el estudio no se observaron cambios notables con respecto al valor inicial en el intervalo medio QT y QTcF.
Las evaluaciones en el sitio de infusión o inyección se realizaron dentro de los 15 minutos posteriores al SOI y ± 15 minutos a los 30 minutos, 2 h, 4 h, 8 h y el Día 2 (48 h), Día 3 (72 h, total de 6 evaluaciones). Las induraciones o reacciones < 1 cm no se consideraron EA a menos que persistieran durante más de 24 horas. Se observó eritema 30 minutos después de la EOI en 5/24 sujetos en el grupo ALXN1210 SC, y en 1 sujeto, 2/4 sitios de inyección tuvieron eritema mínimo (3 mm) 2 horas después de la inyección y ninguno en los últimos puntos temporales. Se notificó una induración o hinchazón mínima (10 mm) 30 minutos después de la EOI en 1/24 sujetos en el grupo ALXN1210 SC que no se observó en las últimas evaluaciones. Sin embargo, ninguno de ellos cumplió con los criterios definidos por el protocolo para ser considerado un EA. Los sujetos calificaron el dolor en el sitio de infusión o inyección mediante VAS (0 a 100 mm). Para la mayor parte de las infusiones e inyecciones, el dolor en el sitio de infusión se calificó como 0 mm en todas las evaluaciones. Dos sujetos del grupo SC notificaron un dolor transitorio de 3 a 5 mm el Día 1, y tres sujetos del grupo IV notificaron un dolor mínimo (1 a 5 mm) después de la infusión.
9. Conclusiones de seguridad
Todos los sujetos que recibieron la dosis única del fármaco del estudio (placebo SC, ALXN1210 SC o ALXN1210 IV) se incluyeron en el Conjunto de seguridad (N = 42). En los 3 grupos de tratamiento, 35/42 sujetos (83,3%) experimentaron 75 TEAE. Solo 3/75 TEAE (4%) se consideraron relacionados con ALXN1210, mientras que 72/75 (96%) se consideraron no relacionados con el tratamiento con ALXN1210. Todos los TEAE fueron leves (Grado 1) y se resolvieron durante el transcurso del estudio. La mayor parte de los TEAE no requirieron ningún medicamento y ningún sujeto requirió en ningún momento intervenciones no farmacológicas. Los TEAE notificados con mayor frecuencia fueron nasofaringitis (23/42 sujetos, 54,8%) y dolor de cabeza (7/42 sujetos, 16,7%).
No hubo muertes ni SAE durante el estudio. Ninguno de los TEAE notificados dio lugar a la interrupción del fármaco del estudio o a la retirada del sujeto del estudio. En general, no hubo cambios clínicamente significativos en los parámetros de laboratorio, signos vitales, exámenes físicos, ECG o telemetría durante el estudio o el seguimiento. No hubo evidencia clínica de hipersensibilidad durante o después de ninguna dosis única de inyección SC o infusión IV. No se observaron signos o síntomas clínicos asociados con reacciones alérgicas o hipersensibilidad en sujetos con resultados positivos para ADA.
10. Discusión y conclusiones generales
El propósito de este estudio de Fase 1 fue evaluar la seguridad, tolerabilidad, PK, PD e inmunogenicidad de una dosis única de 400 mg de ALXN1210 SC en comparación con una dosis única de 400 mg de ALXN1210 IV o una inyección SC de placebo en sujetos sanos. Un total de 42 sujetos se aleatorizaron y recibieron el fármaco del estudio: placebo SC (n = 6); ALXN1210 SC (n = 24); y ALXN1210 IV (n = 12).
La administración de ALXN1210 a una dosis de 400 mg fue bien tolerada por la vía de administración SC en sujetos sanos. La biodisponibilidad absoluta de ALXN1210 SC, basada en la RMG de estimaciones de AUC~ (SC/IV), fue del 60,4% (IC del 95%: 49,7, 73,3). Las estimaciones de la media geométrica de ty2 fueron 31,3 días y 29,9 días después de la administración de ALXN1210 SC e IV, respectivamente. El grado y la duración de la respuesta de la PD, evaluados mediante la concentración sérica de C5 libre y total y la hemólisis de cRBC, dependieron de la exposición.
Se notificaron anticuerpos antifármacos en 3/23 (13%) sujetos y 1/12 (8,3%) sujetos en los grupos de ALXN1210 SC y ALXN1210 IV, respectivamente, con valores de títulos positivos de ADA que oscilaron entre <1,0 y 27. La respuesta más temprana después de la dosis se observó el Día 29 y el Día 15, para la dosificación SC e IV, respectivamente. En la mayor parte de las muestras positivas para ADA después de la administración subcutánea, los ADA tuvieron reactividad cruzada con eculizumab. En los sujetos que mostraron una respuesta positiva a ADA, no hubo signos ni síntomas clínicos compatibles con una reacción alérgica o hipersensibilidad (incluida la anafilaxia). Además, no se pudo identificar ningún efecto aparente sobre la PK o la PD de ALXN1210.
No hubo problemas de seguridad inesperados en ninguno de los grupos de tratamiento durante el estudio. No se produjeron muertes ni SAE durante el estudio y ningún sujeto experimentó ningún TEAE que diera lugar a la interrupción del fármaco del estudio o a la retirada del mismo.
RESUMEN DE SECUENCIAS

Claims (19)

REIVINDICACIONES
1. Una solución acuosa estable que comprende:
(a) un anticuerpo anti-C5 a una concentración de 100 mg/ml, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM; o
(b) un anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa, del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80 y arginina 23,75 mM a 26,25 mM;
en la que el anticuerpo anti-C5 comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11 y
en la que el pH de la solución se encuentra entre 7,2 y 7,6.
2. La solución acuosa estable de la reivindicación 1 (a), que comprende además un tensioactivo, opcionalmente en la que el tensioactivo es del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80.
3. La solución acuosa estable de la reivindicación 1(b), en la que el anticuerpo anti-C5 se encuentra a una concentración de 100 mg/ml.
4. La solución acuosa estable de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa y arginina 25 mM.
5. La solución acuosa estable de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 50 mM, el 5% de sacarosa, el 0,05% de polisorbato 80 y arginina 25 mM.
6. La solución acuosa estable de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el anticuerpo anti-C5 es ALXN1210 (ravulizumab).
7. La solución acuosa estable de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el pH de la solución es 7,4.
8. La solución acuosa estable de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que:
(a) la solución es estéril;
(b) el anticuerpo anti-C5 permanece al menos el 97% monomérico durante un almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses o durante al menos un año, según se determina mediante SEC-HPLC; y/o
(c) se agrega menos del 2% o menos del 1% del anticuerpo anti-C5 en la solución según se determina mediante SEC-HPLC.
9. La solución acuosa estable de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que durante el almacenamiento a una temperatura de entre 2°C y 8°C durante al menos seis meses, el anticuerpo anti-C5 conserva: (a) al menos el 90% de su actividad de unión a C5, en comparación con el anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento; y/o
(b) al menos el 95% de su capacidad para inhibir la hemólisis, en comparación con el anticuerpo anti-C5 antes del almacenamiento.
10. La solución acuosa estable de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la solución es adecuada para administración subcutánea o administración intravenosa.
11. La solución acuosa estable de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la solución es una composición farmacéutica, en la que el anticuerpo anti-C5 es ALXN1210 (ravulizumab), y en la que la solución se proporciona como una solución acuosa estéril, sin conservantes, en un vial de monodosis de 2 ml que contiene 100 mg de ravulizumab a una concentración de 100 mg/ml con un pH de 7,4.
12. Un procedimiento para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende un anticuerpo anti-C5 que comprende un polipéptido de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 14 y un polipéptido de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos representada en la SEQ ID NO: 11, a una concentración de 100 mg/ml, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM, comprendiendo el procedimiento:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato de 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa y arginina de 23,75 mM a 26,25 mM, a pH 7,4 para producir de ese modo una segunda solución acuosa, en el que la segunda solución acuosa tiene una segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM.
13. Un procedimiento según la reivindicación 12, en el que la solución de anticuerpo concentrada estable comprende además del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80, y el procedimiento comprende:
i) proporcionar una primera solución acuosa que comprende el anticuerpo anti-C5, en el que la primera solución acuosa tiene una primera formulación y comprende no más de 10 mg/ml del anticuerpo anti-C5;
ii) someter la primera solución acuosa a diafiltración en una formulación que comprende tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa y arginina 23,75 mM a 26,25 mM y del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80 a pH 7,4 para producir de ese modo una segunda solución acuosa, en el que la segunda solución acuosa tiene una segunda formulación como resultado de la diafiltración; y
iii) concentrar la segunda solución acuosa para producir una solución de anticuerpo concentrada estable que comprende 100 mg/ml del anticuerpo anti-C5, tampón fosfato 47,5 mM a 52,5 mM, del 4,75% al 5,25% de sacarosa; y arginina 23,75 mM a 26,25 mM y del 0,0475% al 0,0525% de polisorbato 80.
14. La solución acuosa estable de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para su uso en un procedimiento de tratamiento de un paciente humano con una afección asociada al complemento y/o un paciente humano con microangiopatía trombótica (MAT).
15. La solución acuosa estable para su uso según la reivindicación 14, en la que la afección asociada al complemento se selecciona del grupo que consiste en artritis reumatoide, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos, nefritis lúpica, lesión por isquemia-reperfusión, síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa), síndrome urémico hemolítico típico, hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN), enfermedad de depósitos densos, neuromielitis óptica, neuropatía motora multifocal, esclerosis múltiple, degeneración macular, síndrome HELLP, pérdida fetal espontánea, púrpura trombocitopénica trombótica, vasculitis pauci-inmune, epidermólisis ampollosa, pérdida fetal recurrente, lesión cerebral traumática, miocarditis, un trastorno cerebrovascular, un trastorno periférico vascular, un trastorno renovascular, un trastorno vascular mesentérico/entérico, vasculitis, nefritis púrpura de Henoch-Schonlein, vasculitis asociada a lupus eritematoso sistémico, vasculitis asociada con artritis reumatoide, vasculitis por complejos inmunitarios, enfermedad de Takayasu, miocardiopatía dilatada, angiopatía diabética, enfermedad de Kawasaki, embolia gaseosa venosa, reestenosis tras la colocación de una prótesis endovascular, aterectomía rotacional, angioplastia coronaria transluminal percutánea, miastenia gravis, enfermedad de aglutininas frías, dermatomiositis, hemoglobinuria fría paroxística, síndrome antifosfolípido, enfermedad de Graves, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, sepsis de respuesta inflamatoria sistémica, choque séptico, lesión de la médula espinal, glomerulonefritis, rechazo de trasplante, tiroiditis de Hashimoto, diabetes tipo I, psoriasis, pénfigo, anemia hemolítica autoinmune, púrpura trombocitopénica idiopática, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Degos y síndrome antifosfolípido catastrófico.
16. La solución acuosa estable para su uso según la reivindicación 15, en la que la afección asociada al complemento es síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa) o hemoglobinuria paroxística nocturna (HNP).
17. La solución acuosa estable para su uso según la reivindicación 15, en la que la afección asociada al complemento es síndrome antifosfolípido catastrófico, nefritis lúpica o glomerulonefritis.
18. La solución acuosa estable para uso según una cualquiera de las reivindicaciones 13-17, en la que la solución acuosa estable se administra por vía subcutánea o intravenosa al paciente.
19. Un kit terapéutico que comprende: (i) la solución acuosa estable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 y (ii) un medio para administrar la solución acuosa estable a un ser humano, opcionalmente en el que el medio es una jeringa.
ES18755604T 2017-07-27 2018-07-27 Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración Active ES2965486T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762537741P 2017-07-27 2017-07-27
PCT/US2018/044071 WO2019023564A1 (en) 2017-07-27 2018-07-27 ANTI-C5 ANTIBODY FORMULATIONS WITH HIGH CONCENTRATION

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2965486T3 true ES2965486T3 (es) 2024-04-15

Family

ID=63209670

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18755604T Active ES2965486T3 (es) 2017-07-27 2018-07-27 Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración

Country Status (19)

Country Link
US (4) US11365241B2 (es)
EP (2) EP3658184B1 (es)
JP (4) JP7079844B2 (es)
KR (2) KR102576012B1 (es)
CN (2) CN116271012A (es)
AU (3) AU2018306612C1 (es)
BR (1) BR112020001703B1 (es)
CA (1) CA3069756C (es)
CO (1) CO2020001960A2 (es)
DK (1) DK3658184T5 (es)
ES (1) ES2965486T3 (es)
FI (1) FI3658184T3 (es)
HU (1) HUE064436T2 (es)
LT (1) LT3658184T (es)
MX (2) MX392444B (es)
PL (1) PL3658184T3 (es)
PT (1) PT3658184T (es)
SI (1) SI3658184T1 (es)
WO (1) WO2019023564A1 (es)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3024618A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods for treatment of refractory generalized myasthenia gravis
DK3658184T5 (da) 2017-07-27 2024-08-26 Alexion Pharma Inc Højkoncentrerede anti-c5-antistofformuleringer
CN118512588A (zh) 2017-10-26 2024-08-20 亚力兄制药公司 用于治疗阵发性夜间性血红蛋白尿(pnh)和非典型溶血性尿毒症综合征(ahus)的抗c5抗体的剂量和施用
EP3802603A1 (en) 2018-06-04 2021-04-14 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of atypical hemolytic uremic syndrome (ahus) in pediatric patients
US12312394B2 (en) 2018-06-28 2025-05-27 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing anti-C5 antibodies
EP3873602B1 (en) * 2018-10-30 2023-12-06 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Subcutaneous dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (pnh)
CN117838856A (zh) * 2019-01-25 2024-04-09 亚力兄制药公司 用于治疗非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的抗c5抗体的剂量和施用
EP3924380A1 (en) * 2019-02-14 2021-12-22 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of generalized myasthenia gravis
WO2021034639A1 (en) * 2019-08-16 2021-02-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High concentration anti-c5 formulations
EP4021497B1 (en) * 2019-08-30 2026-02-25 Kashiv Biosciences, LLC Novel formulation of highly concentrated pharmacologically active antibody
US20220356234A1 (en) * 2019-10-02 2022-11-10 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Complement inhibitors for treating drug-induced complement-mediated response
WO2021091937A1 (en) * 2019-11-08 2021-05-14 Alexion Pharmaceuticals, Inc. High concentration anti-c5 antibody formulations
CN115605184A (zh) * 2020-05-15 2023-01-13 豪夫迈·罗氏有限公司（Ch） 防止胃肠外蛋白质溶液中的可见颗粒形成
EP4213940A1 (en) * 2020-09-21 2023-07-26 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treating c5-mediated glomerular nephritis (gn), including lupus nephritis (ln) and/or iga nephropathy (igan)
EP4281472A1 (en) * 2021-01-22 2023-11-29 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating complement mediated thrombotic microangiopathy using an anti-c5 antibody
TW202404632A (zh) * 2022-04-04 2024-02-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 用於藉由使用抗ｃ５抗體克羅伐單抗治療或預防格林－巴利症候群之劑量及投予方案
TW202423479A (zh) * 2022-09-28 2024-06-16 美商阿雷希昂製藥公司 用於預防或最小化患有慢性腎病的患者中的心臟手術相關急性腎損傷（csa-aki）和/或隨後的主要不良腎事件（make）的抗c5抗體之劑量及投與
CN116712390B (zh) * 2023-08-04 2023-11-14 上海览屹医药科技有限公司 一种高浓度高稳定性的抗体制剂及其制备方法
CN118604345A (zh) * 2024-05-31 2024-09-06 上海览屹医药科技有限公司 酶联免疫方法测定单克隆抗体浓度
CN121186347B (zh) * 2025-11-24 2026-02-24 国家心血管病中心 一种利用动脉血对目标物质进行免疫检测的方法和试剂盒

Family Cites Families (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3710795A (en) 1970-09-29 1973-01-16 Alza Corp Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
IL79289A (en) 1985-07-05 1992-01-15 Whitehead Biomedical Inst Introduction and expression of foreign genetic material into keratinocytes using a recombinant retrovirus
US4863457A (en) 1986-11-24 1989-09-05 Lee David A Drug delivery device
JP3101690B2 (ja) 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
ATE117375T1 (de) 1987-09-11 1995-02-15 Whitehead Biomedical Inst Transduktionsveränderte fibroblasten und ihre anwendung.
JP2914692B2 (ja) 1987-12-11 1999-07-05 ホワイトヘツド・インスチチユート・フオー・バイオメデイカル・リサーチ 内皮細胞の遺伝子修飾
WO1989007136A2 (en) 1988-02-05 1989-08-10 Whitehead Institute For Biomedical Research Modified hepatocytes and uses therefor
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5164188A (en) 1989-11-22 1992-11-17 Visionex, Inc. Biodegradable ocular implants
ES2096750T3 (es) 1990-10-31 1997-03-16 Somatix Therapy Corp Vectores retroviricos utiles para la terapia genica.
KR0185215B1 (ko) 1990-11-30 1999-05-01 요시다 쇼오지 서방성 안구삽입용 약제
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
CA2137667A1 (en) 1992-07-23 1994-02-03 Todd A. Berg Shaped abrasive particles and method of making same
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
DK1621554T4 (da) 1992-08-21 2012-12-17 Univ Bruxelles Immunoglobuliner blottet for lette kæder
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
IT1265573B1 (it) 1993-09-17 1996-11-22 Zanussi Grandi Impianti Spa Forno di cottura di alimenti con porta perfezionata
US5308341A (en) 1993-09-28 1994-05-03 Becton, Dickinson And Company Method of testing the dose accuracy of a medication delivery device
US5443505A (en) 1993-11-15 1995-08-22 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Biocompatible ocular implants
ATE416755T1 (de) 1994-03-07 2008-12-15 Nektar Therapeutics Verfahren und zusammensetzung für die pulmonale darreichung von insulin
US6074642A (en) 1994-05-02 2000-06-13 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
ES2176484T3 (es) 1995-08-18 2002-12-01 Morphosys Ag Bancos de proteinas/(poli)peptidos.
US5773019A (en) 1995-09-27 1998-06-30 The University Of Kentucky Research Foundation Implantable controlled release device to deliver drugs directly to an internal portion of the body
JP4046354B2 (ja) 1996-03-18 2008-02-13 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 増大した半減期を有する免疫グロブリン様ドメイン
US6001329A (en) 1996-05-06 1999-12-14 Uab Research Foundation Radiolabeled fusion toxins for cancer therapy
US6146361A (en) 1996-09-26 2000-11-14 Becton Dickinson And Company Medication delivery pen having a 31 gauge needle
WO1998023289A1 (en) 1996-11-27 1998-06-04 The General Hospital Corporation MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn
GB9626960D0 (en) 1996-12-27 1997-02-12 Glaxo Group Ltd Valve for aerosol container
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
WO1998047531A2 (en) 1997-04-21 1998-10-29 Arch Development Corporation Fc receptor non-binding anti-cd3 monoclonal antibodies deliver a partial tcr signal and induce clonal anergy
US5954047A (en) 1997-10-17 1999-09-21 Systemic Pulmonary Development, Ltd. Methods and apparatus for delivering aerosolized medication
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6302855B1 (en) 1998-05-20 2001-10-16 Novo Nordisk A/S Medical apparatus for use by a patient for medical self treatment of diabetes
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
PL209392B1 (pl) 1999-01-15 2011-08-31 Genentech Inc Przeciwciało, komórka gospodarza, sposób wytwarzania przeciwciała oraz zastosowanie przeciwciała
JP2002541213A (ja) 1999-04-13 2002-12-03 インヘール セラピューティック システムズ， インコーポレイテッド 不妊症の処置のための乾燥粉末処方物の肺投与
WO2000061178A1 (en) 1999-04-13 2000-10-19 Inhale Therapeutics Systems, Inc. Pulmonary administration of dry powder formulations for treating infertility
US6192891B1 (en) 1999-04-26 2001-02-27 Becton Dickinson And Company Integrated system including medication delivery pen, blood monitoring device, and lancer
GB9910975D0 (en) 1999-05-13 1999-07-14 Univ Strathclyde Rapid dehydration of proteins
US6277099B1 (en) 1999-08-06 2001-08-21 Becton, Dickinson And Company Medication delivery pen
PE20011227A1 (es) 2000-04-17 2002-01-07 Chiesi Farma Spa Formulaciones farmaceuticas para inhaladores de polvo seco en la forma de aglomerados duros
DE60135352D1 (de) 2000-08-30 2008-09-25 Univ Johns Hopkins Vorrichtung zur intraokularen wirkstoffverabreichung
US7083784B2 (en) 2000-12-12 2006-08-01 Medimmune, Inc. Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
WO2003022330A2 (en) 2001-09-12 2003-03-20 Becton, Dickinson And Company Microneedle-based pen device for drug delivery and method for using same
AU2003217912A1 (en) 2002-03-01 2003-09-16 Xencor Antibody optimization
US20060141456A1 (en) 2002-06-12 2006-06-29 Cynthia Edwards Methods and compositions for milieu-dependent binding of a targeted agent to a target
US20050271660A1 (en) 2002-09-06 2005-12-08 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases
US9415102B2 (en) * 2002-09-06 2016-08-16 Alexion Pharmaceuticals, Inc. High concentration formulations of anti-C5 antibodies
US20040102469A1 (en) 2002-09-13 2004-05-27 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Method for reducing the mortality rate
GB0222023D0 (en) 2002-09-21 2002-10-30 Aventis Pharma Ltd Inhaler
EP1553975B8 (en) 2002-09-27 2023-04-12 Xencor, Inc. Optimized fc variants and methods for their generation
FR2849436B1 (fr) 2002-12-27 2007-01-05 Patrick Frayssinet Particules et ceramiques de phosphates de calcium pour transfection in vivo et in vitro
US20060167435A1 (en) 2003-02-18 2006-07-27 Adamis Anthony P Transscleral drug delivery device and related methods
MXPA05010555A (es) 2003-04-04 2006-03-09 Genentech Inc Formulaciones de proteina y anticuerpo de alta concentracion.
EP1648511A1 (en) 2003-07-29 2006-04-26 Morphotek, Inc. Antibodies and methods for generating genetically altered antibodies with enhanced effector function
GB0324368D0 (en) 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
EP1697520A2 (en) 2003-12-22 2006-09-06 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites
EP1737890A2 (en) 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
US8685435B2 (en) 2004-04-30 2014-04-01 Allergan, Inc. Extended release biodegradable ocular implants
US7919094B2 (en) 2004-06-10 2011-04-05 Omeros Corporation Methods for treating conditions associated with MASP-2 dependent complement activation
GB0416328D0 (en) 2004-07-21 2004-08-25 Univ Cardiff Use of dry powder compositions for pulmonary delivery
US20060074225A1 (en) 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
AU2005304624B2 (en) 2004-11-12 2010-10-07 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20060234303A1 (en) 2005-03-03 2006-10-19 Xencor, Inc. Methods for the design of libraries of protein variants
WO2006105338A2 (en) 2005-03-31 2006-10-05 Xencor, Inc. Fc VARIANTS WITH OPTIMIZED PROPERTIES
WO2007041635A2 (en) 2005-10-03 2007-04-12 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
BRPI0620316A2 (pt) 2005-12-21 2011-11-08 Wyeth Corp formulações de proteìnas com viscosidades reduzida e seus usos
CA2638811A1 (en) 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
JP5722524B2 (ja) 2006-03-02 2015-05-20 アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 補体活性を抑制することによる同種移植片の生存の延長
US20090220508A1 (en) 2006-03-15 2009-09-03 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Treatment Of Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria Patients By An Inhibitor Of Complement
CN104761637B (zh) 2006-03-31 2021-10-15 中外制药株式会社 调控抗体血液动力学的方法
US8037880B2 (en) 2006-04-07 2011-10-18 The University Of Western Ontario Dry powder inhaler
US20100034194A1 (en) 2006-10-11 2010-02-11 Siemens Communications Inc. Eliminating unreachable subscribers in voice-over-ip networks
AU2007313300A1 (en) 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
WO2008092117A2 (en) 2007-01-25 2008-07-31 Xencor, Inc. Immunoglobulins with modifications in the fcr binding region
JP2010533181A (ja) 2007-07-13 2010-10-21 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド ＴＮＦα阻害剤の肺投与のための方法及び組成物
ES2595638T3 (es) 2007-09-26 2017-01-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Método para modificar el punto isoeléctrico de un anticuerpo mediante la sustitución de aminoácidos en una CDR
HRP20150279T1 (hr) 2007-12-26 2015-05-08 Xencor, Inc. Fc inaäśice s promijenjenim vezanjem na fcrn
KR102057826B1 (ko) 2008-04-11 2019-12-20 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 복수 분자의 항원에 반복 결합하는 항원 결합 분자
JP5913980B2 (ja) 2008-10-14 2016-05-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 免疫グロブリン変異体及びその用途
CA2742802C (en) 2008-11-10 2019-11-26 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating complement-associated disorders
AU2015227544B2 (en) 2008-11-10 2017-05-25 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating complement-associated disorders
US20120282654A1 (en) 2009-04-29 2012-11-08 Schering Corporation Antibody purification
CA2766565A1 (en) 2009-06-23 2010-12-29 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Bispecific antibodies that bind to complement proteins
EP3409289B1 (en) 2010-02-26 2020-09-30 Novo Nordisk A/S Stable antibody containing compositions
JP5932670B2 (ja) 2010-03-11 2016-06-08 ライナット ニューロサイエンス コーポレイション ｐＨ依存性の抗原結合を有する抗体
TWI667257B (zh) 2010-03-30 2019-08-01 中外製藥股份有限公司 促進抗原消失之具有經修飾的ＦｃＲｎ親和力之抗體
MX340696B (es) 2010-04-30 2016-07-21 Alexion Pharma Inc Anticuerpos anti-c5a y metodos para usar los anticuerpos.
BR112012027917A2 (pt) 2010-04-30 2017-11-28 Alexion Pharma Inc anticorpos que apresentam reduzida imunogenicidade em um indivíduo humano
EP2647706B1 (en) 2010-11-30 2023-05-17 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly
AU2012233313C1 (en) 2011-03-30 2017-08-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for altering plasma retention and immunogenicity of antigen-binding molecule
TW201817744A (zh) 2011-09-30 2018-05-16 日商中外製藥股份有限公司 具有促進抗原清除之ＦｃＲｎ結合域的治療性抗原結合分子
JP6322411B2 (ja) 2011-09-30 2018-05-09 中外製薬株式会社 複数の生理活性を有する抗原の消失を促進する抗原結合分子
US10011660B2 (en) 2012-04-30 2018-07-03 Medimmune, Llc Molecules with reduced effector function and extended half-lives, compositions, and uses thereof
US9216219B2 (en) * 2012-06-12 2015-12-22 Novartis Ag Anti-BAFFR antibody formulation
PT3889181T (pt) * 2012-09-07 2024-05-29 Regeneron Pharma Um anticorpo antagonista de il-4r para utilização no tratamento da dermatite atópica por administração
SG10201804960RA (en) * 2013-12-12 2018-07-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Complement component irna compositions and methods of use thereof
NZ631007A (en) 2014-03-07 2015-10-30 Alexion Pharma Inc Anti-c5 antibodies having improved pharmacokinetics
US20160168237A1 (en) * 2014-12-12 2016-06-16 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Method for treating a complement mediated disorder caused by an infectious agent in a patient
BR112017011235A2 (pt) * 2014-12-19 2018-02-06 Chugai Pharmaceutical Co Ltd anticorpos anti-c5 e métodos de uso
EP3236772A4 (en) 2014-12-22 2018-10-17 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of purifying recombinant proteins
US20190135903A1 (en) * 2015-03-31 2019-05-09 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Identifying and treating subpopulations of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (pnh) patients
US20180311299A1 (en) 2015-05-01 2018-11-01 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Efficacy of an anti-c5 antibody in the prevention of antibody mediated rejection in sensitized recipients of a kidney transplant
EP3313437A1 (en) 2015-06-26 2018-05-02 Alexion Pharmaceuticals, Inc. A method for treating a patient in compliance with vaccination with eculizumab or an eculizumab variant
US20170073399A1 (en) 2015-09-11 2017-03-16 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Recombinant glycosylated eculizumab and eculizumab variants
TW201726111A (zh) 2015-09-30 2017-08-01 持田製藥股份有限公司 含高濃度抗體之液體製劑
JP7221691B2 (ja) 2015-10-30 2023-02-14 アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｔ細胞媒介性同種移植片血管障害の増悪を抑制する方法
EP3402816A1 (en) 2016-01-11 2018-11-21 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment
CN116769024A (zh) 2016-06-14 2023-09-19 瑞泽恩制药公司 抗c5抗体及其用途
WO2018071624A1 (en) 2016-10-12 2018-04-19 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Efficacy of an anti-c5 antibody in the prevention of antibody mediated rejection in sensitized recipients of a kidney transplant
DK3658184T5 (da) 2017-07-27 2024-08-26 Alexion Pharma Inc Højkoncentrerede anti-c5-antistofformuleringer
CN118512588A (zh) 2017-10-26 2024-08-20 亚力兄制药公司 用于治疗阵发性夜间性血红蛋白尿(pnh)和非典型溶血性尿毒症综合征(ahus)的抗c5抗体的剂量和施用
EP3802593B1 (en) 2018-05-31 2024-09-11 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (pnh) in pediatric patients
EP3802603A1 (en) 2018-06-04 2021-04-14 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of atypical hemolytic uremic syndrome (ahus) in pediatric patients
US12312394B2 (en) 2018-06-28 2025-05-27 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing anti-C5 antibodies
EP3873602B1 (en) 2018-10-30 2023-12-06 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Subcutaneous dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (pnh)
CN117838856A (zh) 2019-01-25 2024-04-09 亚力兄制药公司 用于治疗非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的抗c5抗体的剂量和施用
WO2021091937A1 (en) 2019-11-08 2021-05-14 Alexion Pharmaceuticals, Inc. High concentration anti-c5 antibody formulations

Also Published As

Publication number Publication date
US20250154233A1 (en) 2025-05-15
WO2019023564A1 (en) 2019-01-31
AU2018306612B2 (en) 2022-09-01
JP2026063214A (ja) 2026-04-10
US20200369751A1 (en) 2020-11-26
JP2022105625A (ja) 2022-07-14
US20230106734A1 (en) 2023-04-06
JP2020528894A (ja) 2020-10-01
MX2022005990A (es) 2022-06-17
CN111315411A (zh) 2020-06-19
CN116271012A (zh) 2023-06-23
PT3658184T (pt) 2023-11-29
US12012448B2 (en) 2024-06-18
KR102576012B1 (ko) 2023-09-07
MX392444B (es) 2025-03-24
AU2018306612C1 (en) 2023-11-09
KR20230066126A (ko) 2023-05-12
EP4218813A2 (en) 2023-08-02
FI3658184T3 (fi) 2023-11-30
AU2022279414A1 (en) 2023-03-02
DK3658184T3 (da) 2023-11-27
CO2020001960A2 (es) 2020-04-13
BR112020001703A2 (pt) 2020-07-21
WO2019023564A8 (en) 2019-12-26
CN111315411B (zh) 2023-02-28
RU2020108198A (ru) 2021-08-27
AU2018306612A1 (en) 2020-01-16
CA3069756A1 (en) 2019-01-31
JP7277649B2 (ja) 2023-05-19
HUE064436T2 (hu) 2024-03-28
EP4218813A3 (en) 2023-08-16
LT3658184T (lt) 2023-11-27
SI3658184T1 (sl) 2024-01-31
BR112020001703B1 (pt) 2024-01-02
KR20200034739A (ko) 2020-03-31
US11365241B2 (en) 2022-06-21
PL3658184T3 (pl) 2024-02-26
RU2020108198A3 (es) 2022-02-04
DK3658184T5 (da) 2024-08-26
US20230257456A1 (en) 2023-08-17
MX2020001052A (es) 2022-05-18
EP3658184B1 (en) 2023-09-06
JP2023090876A (ja) 2023-06-29
EP3658184A1 (en) 2020-06-03
JP7079844B2 (ja) 2022-06-02
AU2025263917A1 (en) 2025-12-04
CA3069756C (en) 2025-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2965486T3 (es) Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración
ES2552954T3 (es) Anticuerpos anti-C5a y métodos para el uso de los anticuerpos
RU2665810C2 (ru) Содержащие антитела составы
ES2897631T3 (es) Procedimientos para tratar o prevenir el asma mediante la administración de un antagonista de IL-4R
JP7467438B2 (ja) 抗ｒｓｖ抗体の製剤及びその使用方法
RU2847524C2 (ru) Высококонцентрированные составы антител к c5
RU2787595C2 (ru) Высококонцентрированные составы антител к c5
US12150991B2 (en) Pharmaceutical compositions comprising anti-human TSLP receptor antibodies and methods of using the same
BR122023005826B1 (pt) Solução aquosa estável compreendendo um anticorpo anti-c5, uso da mesma para tratar uma condição associada ao complemento e kit terapêutico compreendendo a mesma
HK40025392A (en) High concentration anti-c5 antibody formulations
HK40025392B (en) High concentration anti-c5 antibody formulations
EP4434517A1 (en) Anti-sost antibody pharmaceutical composition and use thereof