ES2970875T3 - Mezcla sinérgica de inductores de defensa de las plantas - Google Patents
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Abstract
La presente invención describe una mezcla de compuestos, uno de los cuales es un inductor de inmunidad desencadenado por un patrón y el otro es un inductor de resistencia sistémica que mejora los mecanismos de defensa de las plantas, en particular proporcionando un efecto sinérgico sobre los mecanismos de defensa de las plantas. Otros aspectos de la invención son el uso de dicha invención para activar la resistencia de las plantas contra patógenos y un kit para proporcionar una composición agrícola para usar en semillas, cultivos y plantas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Mezcla sinérgica de inductores de defensa de las plantas
Campo técnico
La presente divulgación se refiere a una composición que comprende un inductor de inmunidad desencadenada por patrones y un inductor de resistencia sistémica como se indica en las reivindicaciones, adecuada para la defensa de las plantas frente a patógenos. La divulgación también se refiere al método para obtener la composición y a los usos de dicha composición.
Antecedentes de la técnica
Con el paso del tiempo, las especies de plantas han estado continuamente expuestas a una amplia gama de patógenos y plagas, así como a condiciones ambientales adversas. Esto ha producido un proceso evolutivo de adaptación de las plantas, caracterizado por el desarrollo de sólidos y complejos mecanismos de resistencia. Una de las características de esta adaptación es la autonomía de las células vegetales para percibir y reconocer patógenos, y para activar mecanismos de resistencia. Estas capacidades han llevado al desarrollo de un sistema inmunitario, que puede distinguir las propias señales (endógenas, procedentes de la propia planta) de las de otros (exógenos, derivados de los patógenos).
Los procesos de defensa natural de las plantas, denominados inmunidad de la planta, comprenden una compleja red de rutas y cascadas de señalización, mediadas por muchos reguladores y mensajeros secundarios, que se activan cuando los patógenos pueden superar todas las barreras de defensa.
El primer tercio del sistema inmunitario de la planta corresponde a la percepción del patógeno mediante el reconocimiento de signaturas moleculares de patógenos (patrones moleculares asociados a patógenos, PAMP) por los receptores de las membranas de las células vegetales. Este reconocimiento induce la inmunidad activada por patrones (PTI), una respuesta de defensa caracterizada por un reforzamiento de la pared celular y la activación de la expresión de los genes de defensa.
La planta también es capaz de detectar patrones moleculares asociados a daños (DAMP), que son productos de degradación de las plantas resultado de la acción de los patógenos invasores, o péptidos endógenos, presentes de forma constitutiva o de nueva síntesis, que se liberan por las plantas después de los ataques de los patógenos (Boller T. y Felix G. (2009) Annu Rev Plant Biol. 60:379-406.). El reconocimiento de los DAMP también activa respuestas inmunitarias similares a la respuesta de la PTI (Yamaguchi Y. y Huffaker A. (2011) Curr Opin Plant Biol 14(4):351-7).
La percepción de los patógenos también se produce mediante el reconocimiento de efectores, que son moléculas sintetizadas por los patógenos y suministradas a la matriz extracelular o al interior de la célula vegetal para potenciar la adaptación al patógeno mediante, por ejemplo, contrarrestar la inducción de la PTI. Las plantas que tienen la capacidad de reconocer estos efectores directa o indirectamente mediante las proteínas de resistencia a enfermedades R, pueden implementar una respuesta inmunitaria denominada inmunidad disparada por efectores, o ETI (Chisholm S.T., Coaker G., Day B., Staskawicz B.J. (2006) Cell, 124(4), 803-814). Esta respuesta es el resultado de la coevolución de planta y patógenos.
Las respuestas de defensa activadas por PTI y ETI llevan a la activación de las respuestas de defensa, tanto local como sistémica, denominadas resistencia sistémica (SR), que está modulada por fitohormonas, especialmente ácido salicílico, ácido jasmónico y etileno (WE Durrant y X Dong, 2004; 42:185-209; y RM Bostock, Annu Rev Phytopathol 2005; 43:545-80).
La resistencia sistémica (SR) es una respuesta de defensa duradera y de amplio espectro, que depende de las rutas de señalización mediadas y cuyo objetivo es la síntesis y acumulación de compuestos antimicrobianos y proteínas de defensa en tejidos y órganos no infectados. (Ward E.R., Uknes S.J., Williams S.C., Dincher S.S., Wiederhold D.L., Alexander D.C., Ahl-Goy P., Metraux J.P., Ryals J.A. (1991) Plant Cell Oct; 3(10): 1085-1094 y Fu Z. Q. y Dong X. (2013) Annu Rev Plant Biol 64: 839-63). PTI y ETI, a diferencia de la Resistencia sistémica, parece ser independiente de las rutas de transducción de señales mediadas por las fitohormonas ácido salicílico, ácido jasmónico y etileno.
Si estos mecanismos de defensa están activados en las plantas antes de la infección por patógenos, la enfermedad se puede reducir. De este modo, la aplicación exógena y preventiva de los inductores de defensa de las plantas es la forma de conseguir este objetivo.
Los inductores de inmunidad activados por patrón son sustancias que, cuando se aplican a las plantas, son reconocidos por los receptores de las membranas de las células vegetales, activando una respuesta de defensa. Los inductores de inmunidad activados por patrón comprenden PAMP, compuestos que proceden de patógenos y DAMP, compuestos que proceden de las propias plantas. Los lipopolisacáridos bacterianos, endotoxinas que aparecen en las membranas celulares de las bacterias gram negativas, quitooligosacáridos fúngicos y oligogalacturónidos son clases prototípicas de inductores de PTI.
Un inductor de Resistencia sistémica es un compuesto directamente implicado en la activación de la defensa de las plantas a través de las rutas de señalización mediadas por fitohormonas, que impulsan la resistencia sistémica y la síntesis de proteínas de defensa en toda la planta. (Bektas Y. y Eulgem T. (2015) Frontiers in plant science, 5, 804 y Faize L. y Faize, M. (2018) Agronomy, 8(1), 5).
Tsusa K.et al.,en "Comparing signaling mechanisms engaged in pattern-triggered and effector-triggered immunity", Current Opinion in Plant Biology, Reino Unido, vol. 13, n.° 4, (2010-08-01), páginas 459-465, divulgan que las plantas emplean dos modos de su sistema inmunológico innato para resistir la infección por patógenos: el primer modo de inmunidad se conoce como inmunidad desencadenada por patrones, que se desencadena por patrones moleculares comunes a muchos tipos de microbios, y el segundo modo se desencadena por el reconocimiento de efectores patógenos y se denomina inmunidad desencadenada por efectores. Por ejemplo flagelina, quitina, peptidoglicanos y oligogalacturinidas se citan como inductores de inmunidad desencadenada por patrones.
El documento JP2015 077116 A divulga inductores de inmunidad activada por patrón seleccionados entre polisacáridos, quitooligosacáridos, glucooligosacáridos, lipopolisacáridos y flagelina e inductores vegetales sistémicos tales como un tiadiazol o un compuesto de ácido jasmónico.
El documento WO03/051120A1 divulga composiciones que comprenden un inductor de resistencia sistémica, concretamente ácido salicílico, y un inductor de inmunidad activada por patrón, concretamente, quitosano hidrolizado. Se divulga la sinergia entre el quitosano y el ácido salicílico. Otros inductores de resistencia sistémica divulgados son el ácido jasmónico y los etilenos.
El documento US2020/281585A1 divulga una composición para aumentar la resistencia a los patógenos de las plantas mediante la inducción de una reacción inmune de una planta, en donde dicha composición comprende un inductor de resistencia sistémica seleccionado de BTH (2,1,3,-benzotiadiazol), etefón, ácido salicílico, jasmonato de metilo o ácido DL-p-amino-n-butírico.
El documento US2010/087369 A1 divulga composiciones para aumentar la resistencia a los patógenos de las plantas, que comprenden inductores de inmunidad desencadenada por patrones, que son oligogalacturonatos, quitooligosacáridos o quitopolisacáridos e inductores de resistencia sistémica, concretamente vitaminas.
Huey-Wen Chuanget al.,en "Harpin Protein, an Elicitor of Disease Resistance, Acts as a Growth Promoter in Phalaenopsis Orchids", Journal of Plant Growth Regulation., vol. 33, n.° 4, (13 de mayo de 2014), páginas 788-797, divulgan que proteína harpina, ácido salicílico, etileno, quitosano y ácido jasmónico son inductores de resistencia a enfermedades en las plantas.
Tatiana E. Mishinaet al.,en "Pathogen-associated molecular pattern recognition rather than development of tissue necrosis contributes to bacterial induction of systemic acquired resistance in Arabidopsis: SAR induction by nonadapted bacteria and PAMPs", The Plant Journal, vol. 50, n.° 3, (2007-04-05), páginas 500-513, divulgan composiciones que comprenden flagelina o polisacáridos que actúan como inductores de resistencia a enfermedades en las plantas. También se menciona el uso de harpina.
Min-Seon Choiel al.,en "Harpins, Multifunctional Proteins Secreted by Gram-Negative Plant-Pathogenic Bacteria", Molecular Plant-Microbe Interactions, vol. 26, n.° 10, (01-10-2013), páginas 1115-1122, divulgan que existen varias harpinas, concretamente diferentes tipos de proteínas ricas en glicina y termoestables, que se secretan a través del sistema de secreción tipo III en bacterias fitopatógenas gramnegativas. Las harpinas se mencionan como inductoras de respuestas de defensa en plantas y activadoras de resistencia sistémica adquirida.
El documento US2010/325755A1 divulga composiciones que comprenden harpina, que actúan como inductores de resistencia a enfermedades en las plantas al ser tanto un inductor de inmunidad desencadenada por patrones como inductor de resistencia sistémica y divulga la función de harpina, ácido salicílico, acibenzolar-S-metilo, ácido benzoico y dihidrojasmonatos de magnesio como inductores de resistencia adquirida del sistema.
Existe por tanto una intensa investigación en este campo para mejorar la resistencia de las plantas y aumentar su supervivencia. Por lo tanto, existe la necesidad de mejorar y/o fomentar los mecanismos de defensa de la planta.
Sumario de la invención
Los inventores han descubierto que el uso de una composición de compuestos, siendo uno un inductor de la inmunidad activada por patrón y siendo el otro un inductor de resistencia sistémica, según se proporciona en las reivindicaciones, mejora los mecanismos de defensa de la planta, más importante aún, proporcionando un efecto sinérgico sorprendente sobre los mecanismos de defensa de la planta.
Por lo tanto, un aspecto de la presente invención proporciona una composición que comprende un inductor de la inmunidad activada por patrón y un inductor de resistencia sistémica, según se proporciona en las reivindicaciones.
La composición que potencia la resistencia de las plantas de la invención se puede usar como método para mejorar la defensa de la planta contra los patógenos, más específicamente, la composición mejora la activación de la defensa de la planta contra el estrés de la planta producida por patógenos.
Otros aspectos de la invención son el uso de la composición según se ha definido anteriormente para activar la resistencia de las plantas frente a patógenos, una composición agrícola que comprende los siguientes componentes: (a) un inductor de la inmunidad activada por patrón; y (b) un inductor de resistencia sistémica y un kit como se indica en las reivindicaciones.
Breve descripción de los dibujos
La Fig. 1 es un diagrama de barras que muestra la expresión del gen PR1 en la plantaArabidopsis thalianaen cuatro condiciones diferentes: T1, T2, T3, T4. En T1, la planta se ha tratado con 100 ppm de quitooligosacáridos disueltos en agua; en T2, el tratamiento de la planta se realiza con 300 ppm de sacarina sódica en agua; en T3, de acuerdo con la invención, la planta se ha tratado con una solución de agua que consiste en 100 ppm de quitooligosacáridos y 300 ppm de sacárido sódico; en T4, la planta se ha tratado con agua, como control. En el eje y, los valores representan cuántas veces más el gen del estudio se expresa en las muestras tratadas con el inductor con respecto a las muestras del control (n-veces versus control).
La Fig.2 es un diagrama de barras que muestra la expresión del gen ICS1 en la plantaArabidopsis thalianaen cuatro condiciones diferentes: T1, T2, T3, T4. En T1, la planta se ha tratado con 100 ppm de quitooligosacáridos disueltos en agua; en T2, el tratamiento de la planta se realiza con 300 ppm de sacarina sódica en agua; en T3, de acuerdo con la invención, la planta se ha tratado con una solución de agua que consiste en 100 ppm de quitooligosacáridos y 300 ppm de sacárido sódico; en T4, la planta se ha tratado con agua, como control. En el eje y, los valores representan cuántas veces más el gen del estudio se expresa en las muestras tratadas con el inductor con respecto a las muestras del control (n-veces versus control).
La Fig.3 es un diagrama de barras que muestra la expresión del gen PR2 en la plantaArabidopsis thalianaen cuatro condiciones diferentes: T1, T2, T3, T4. En T1, la planta se ha tratado con 100 ppm de quitooligosacáridos disueltos en agua; en T2, el tratamiento de la planta se realiza con 300 ppm de sacarina sódica en agua; en T3, de acuerdo con la invención, la planta se ha tratado con una solución de agua que consiste en 100 ppm de quitooligosacáridos y 300 ppm de sacárido sódico; en T4, la planta se ha tratado con agua, como control. En el eje y, los valores representan cuántas veces más el gen del estudio se expresa en las muestras tratadas con el inductor con respecto a las muestras del control (n-veces versus control).
La Fig.4 es un diagrama de barras que muestra la expresión del gen PR5 en la plantaArabidopsis thalianaen cuatro condiciones diferentes: T1, T2, T3, T4. En T1, la planta se ha tratado con 100 ppm de quitooligosacáridos disueltos en agua; en T2, el tratamiento de la planta se realiza con 300 ppm de sacarina sódica en agua; en T3, de acuerdo con la invención, la planta se ha tratado con una solución de agua que consiste en 100 ppm de quitooligosacáridos y 300 ppm de sacárido sódico; en T4, la planta se ha tratado con agua, como control. En el eje y, los valores representan cuántas veces más el gen del estudio se expresa en las muestras tratadas con el inductor con respecto a las muestras del control (n-veces versus control).
Descripción detallada de la invención
1- Inductor de la inmunidad activada por patrón (PTI)
La composición de la presente invención es una composición que potencia la resistencia de las plantas. Comprende un inductor de inmunidad desencadenada por patrones que es un quitooligosacárido.
Los quitooligosacáridos son oligosacáridos derivados de quitina o quitosana por tratamiento químico o enzimático. La quitina es un polisacárido modificado que contiene nitrógeno; se sintetiza a partir de unidades de N-acetil-D-glucosamina (precisamente, 2-(acetilamino)-2-desoxi-D-glucosa). Estas unidades forman uniones covalentes p-(1^4) (similares a las uniones entre las unidades de glucosa que forman la celulosa). Por tanto, la quitina se puede describir como celulosa que tiene un grupo hidroxilo de cada monómero sustituido por un grupo acetilamina. Esto permite un aumento en los enlaces de hidrógeno entre polímeros adyacentes, dando mayor resistencia a la matriz de polímero de quitina. (Véanse las siguientes referencias en las que la quitosana, chitooligosaccharides and oligosaccharides are related to plant defense: Kaku H., Nishizawa Y., Ishii-Minami N.,et al.(2006) Proc Natl Acad Sci USA, 103, 11086-91; Yin H., Zhao X., Du Y. (2010) Carbohydr Polym, 82, 1-8 y Das S.N., Madhuprakash J., Sarma P.V.S.R.N., Purushotham P., Suma K., Manjeet K., Rambabu S., El Gueddari N.E., Moerschbacher B., Podile, A.R. (2015) Critical reviews in biotechnology, 35(1), 29-43).
2- Inductor de resistencia sistémica (SR)
La presente composición reivindicada comprende un inductor de resistencia sistémica que es sacarina sódica.
Sacarina sódica
3- Composiciones
La relación en peso entre el inductor de PTI y el SRI en la composición de la invención puede variar típicamente entre 200:1 a 1:6.000, o de 100:1 a 1:5.000, o de 50:1 a 1:1.000; o de 25:1 a 1:500 o de 10:1 a 1:250 o de 5:1 a 1:100, por ejemplo de 2:1 a 1:50 o de 1:1 a 1:25, tal como 1:5, o 1:10, o 1:20.
De acuerdo con la composición de la invención, el inductor de la inmunidad activada por patrón (inductor de PTI) son quitooligosacáridos, en donde el inductor de PTI está presente en una cantidad comprendida entre 10 y 4000 ppm o, por ejemplo, entre 50 y 3500 ppm o, por ejemplo, de 100 a 3000 ppm. En las realizaciones preferidas se utilizan quitooligosacáridos en una cantidad entre 50 y 500 ppm, más preferentemente entre 100 y 400 ppm, por ejemplo 200 ppm, 250 ppm o 300 ppm.
La sacarina sódica se usa en una cantidad comprendida entre 5 y 350 ppm, como 10 o 20, o 40, o 100 ppm, 200 ppm o 300 ppm.
La presente invención se refiere además a una composición acuosa que comprende un inductor de inmunidad activada por patrón, un inductor de resistencia sistémica y agua, según se define en las reivindicaciones.
La presente invención divulga además el uso de las composiciones anteriormente definidas: para activar la resistencia de las plantas frente a patógenos.
Asimismo, la presente invención se refiere también a un kit para proporcionar una composición agrícola que comprende los siguientes componentes: (a) un inductor de la inmunidad activada por patrón; y (b) un inductor de resistencia sistémica según se indica en las reivindicaciones.
Ejemplos
Semillas deArabidopsis thalianaCol-0 naturales se hicieron crecer en macetas con un fotoperiodo de 16 horas de luz/8 horas de oscuridad (día largo), con una temperatura diurna de 22 °C, una temperatura nocturna de 20 °C y una humedad relativa del 65 %. Las plantas se pulverizaron con cada inductor disuelto en agua (los inductores solos o combinados). 24 y 48 horas después del tratamiento (horas después del tratamiento, hdt), se recogieron muestras de los tejidos y se realizó el análisis de expresión génica de los genes marcadores específicos de la defensa, con tecnología de PCR cuantitativa (qPCR).
Los genes implicados en la defensa de la planta analizados fueron uno o más de los 5 siguientes:
• PR1 (PROTEÍNA 1 RELACIONADA CON LA PATOGÉNESIS). Código AGI: AT2G14610
• PDF1.2 (DEFENSINA DE PLANTA 1.2). Código AGI: AT5G44420
• PR2 (PROTEÍNA 2 RELACIONADA CON LA PATOGÉNESIS; BETA-1,3-GLUCANASA 2). Código AGI: AT3G57260 • PR5 (GEN 5 RELACIONADO CON LA PATOGÉNESIS). Código AGI: AT1G75040
• ICS1 (ISOCORISMATO SINTASA 1). Código AGI: AT1G74710
UBC21 (ENZIMA 21 DE CONJUGACIÓN CON UBIQUITINA; Código AGI: AT5G25760) fue el gen de normalización (o constitutivo) utilizado.
PR1 (gen marcador de la ruta de señalización del ácido salicílico) y PDF1.2 (gen marcador de la ruta de señalización del ácido jasmónico) son importantes genes marcadores del sistema de defensa de la planta, ya que son necesarios para activar los mecanismos de defensa de la planta.
Para evaluar si hay un efecto sinérgico entre las diferentes combinaciones posibles, se usó la fórmula de Limpel/Colby. Esta fórmula se utiliza para calcular la actividad esperada de las combinaciones que contienen dos principios activos, A y B:
(E) esperadas =A+B-(AxB/100)
En donde,
A = activación génica observada del principio activo A a la misma concentración que la utilizada en la mezcla B = activación génica observada del principio activo B a la misma concentración que la utilizada en la mezcla Cuando la actividad encontrada experimentalmente (observada) es mayor que el valor de E, se deberá considerar dicha actividad como un efecto sinérgico, y el Factor de sinergia (F) es > 1:
Factor de sinergia (F)= Actividad observada/Actividad esperada (E)
En los siguientes experimentos, se demostró el efecto sinérgico con respecto a al menos uno de los genes marcadores de defensa anteriormente mencionados.
A continuación:
OV: Valor de activación génica observado
CEV: Valor de activación génica esperado de Colby con la mezcla [CEV = A+B-(AxB/100)]
Factor de sinergia (F) = OV (A+B) / CEV (A+B)
hdt: horas después del tratamiento.
Composiciones ninguna de ellas según la presente invención en las Tablas 1 a 5 con laminarina, o quitooligosacáridos o una mezcla de quitooligosacáridos y oligogalacturónidos, o flagelina o proteína harpina y con un SRI
�
�
�
Composición que comprende quitooligosacáridos y sacarina sódica
Las mezclas de inductores analizadas fueron tres mezclas diferentes y un control:
T1: 100 ppm de Quitooligosacáridos, disueltos en agua [inductor activado por patrón]
T2: 300 ppm de sacarina sódica, disueltos en agua [inductor de resistencia sistémica]
T3: 100 ppm de Quitooligosacáridos 300 ppm de sacarina sódica, disueltos todos juntos en agua [inductor activado por patrón e inductor de resistencia sistémica]
T4: agua (control)
La composición que comprende un inductor de la inmunidad activada por patrón y un inductor de resistencia sistémica en el mismo tratamiento (T3) produce un aumento significativo en la expresión de los cuatro genes marcadores analizados, mucho mayor que la expresión obtenida cuando los inventores trataron con los inductores por separado (T1 y T2). Por lo tanto, la mezcla de inductores proporciona un efecto sinérgico, ya que el valor obtenido con la mezcla para los cuatro genes analizados es mayor que una simple suma de cada uno de los inductores cuando se utilizan independientemente.
Las Figuras muestran la expresión de cada gen (la Figura 1 corresponde a la expresión génica de PR1, la Figura 2 a la expresión génica de ICS1, la Figura 3 a la expresión génica de PR2 y la Figura 4 a la expresión génica de PR5, respectivamente) de acuerdo con cada tratamiento, y se comparó con el valor obtenido para el tratamiento con agua (control). Los valores representan cuántas veces más el gen del estudio se expresa en las muestras tratadas con el inductor con respecto a las muestras del control (n-veces versus control). De este modo, los valores de T1, T2 y T3 en la Figura 1 son 2,88; 94,28 y 210,71, respectivamente; los valores de T1, T2 y T3 en la Figura 2 son 1,28; 7,65 y 13,14, respectivamente; los valores de T1, T2 y T3 en la Figura 3 son 9,56; 49,95 y 297,74, respectivamente; y los valores de T1, T2 y T3 en la Figura 4 son 39,19; 193,97 y 769,79, respectivamente. Obsérvese que, en todos los casos, el aumento de la expresión génica durante el tratamiento de las plantas con la combinación de quitooligosacáridos, un inductor de la PTI y sacarina sódica, un inductor de la SR (T3), de acuerdo con la invención, está significativamente aumentado (valor p < 0,05) en comparación con el tratamiento con cualquiera de los componentes en solitario (T1, T2) o la suma teórica de los valores de expresión de los componentes en solitario (T1 T2). Por lo tanto, la mezcla de los dos compuestos tiene un efecto sinérgico sobre la expresión de dichos genes en plantas.
Los resultados se muestran en las siguientes tablas:
Gen: PR1 (PROTEÍNA 1 RELACIONADA CON LA PATOGÉNESIS)
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 300 48 1,46 94,28 210,72 94,362,23
Gen: ICS1 (ISOCORISMATO SINTASA 1)
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 300 48 1,28 7,65 13,14 8,831,49Gen: PR2 (PROTEÍNA 2 RELACIONADA CON LA PATOGÉNESIS; BETA-1,3-GLUCANASA 2)
Quitooligosacáridos 100 300 48
Sacarina sódica9,56 49,95 297,74 54,73 5,44
Gen: PR5 (GEN 5 RELACIONADO CON LA PATOGÉNESIS)
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 300 48 39,19 193,97 769,79 157,14 4,90
Ensayos con patógenos
Los siguientes ensayos con patógenos y las siguientes combinaciones, en donde sólo la combinación de quitooligosacáridos y sacarina sódica es según la presente invención, se llevaron a cabo:
1.Podosphaera xanthiien pepino (Mildiu pulverulento del pepino)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
> Quitooligosacáridos Diclobentiazox
> Quitooligosacáridos Probenazol
> Quitooligosacáridos Isotianilo
> Quitooligosacáridos Tiadinilo
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Sacarina sódica
> Carragenano Sacarina sódica
2.Pseudomonas syringaepv.Lachrymansen pepino (Mancha bacteriana en el pepino)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
> Quitooligosacáridos Probenazol
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
3.Puccinia reconditaen trigo (Tizón marrón del trigo)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
4.Blumeria graministsp.Triticien trigo (Mildiu pulverulento del trigo)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
5.Pyricularia oryzaeen arroz (Tizón de plántulas del arroz)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
> Quitooligosacáridos Probenazol
> Quitooligosacáridos Isotianilo
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Acibenzolar-S-metilo
> Laminarina Ácido beta-aminobutírico
> Carragenano Probenazol
> Carragenano Isotianilo
> Carragenano Tiadinilo
> Carragenano Acibenzolar-S-metilo
> Carragenano Ácido beta-aminobutírico
6.Pseudomonas cannbinapv.alisalensisen col china (Mancha bacteriana de la col china) > Quitooligosacáridos Sacarina sódica
> Quitooligosacáridos Diclobentiazox
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
> Quitooligosacáridos Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Probenazol
> Laminarina Diclobentiazox
> Laminarina Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
> Carragenano Sacarina sódica
> Carragenano Probenazol
> Carragenano Diclobentiazox
> Carragenano Acibenzolar-S-metilo
> Carragenano Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
7.Colletotrichum orbiculareen pepino (Antracnosis en pepino)
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
8.Phakopsora pachyrhizien soja (Tizón asiático de la soja)
> Quitooligosacáridos Probenazol
> Quitooligosacáridos Diclobentiazox
> Quitooligosacáridos Isotianilo
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Probenazol
> Laminarina Isotianilo
> Carragenano Isotianilo
Metodología general:
Los experimentos se llevaron a cabo en condiciones controladas de invernadero. Los efectos de la temperatura, humedad y condiciones de luz en las cámaras del invernadero se ajustaron según las necesidades de las plantas hospedadoras y de los patógenos.
El valor de la eficacia o control de la enfermedad (W) se calculó según la fórmula de Abbott:
W = (1 -x/y) x 100
en donde
x = porcentaje de infección fúngica o bacteriana en las plantas tratadas
y = porcentaje de infección fúngica o bacteriana en plantas de control no tratadas. Una eficacia de 0 significa que el nivel de infección de las plantas tratadas corresponde al de las plantas de control no tratadas; y la eficacia de 100 significa que las plantas tratadas no están infectadas.
Para evaluar si hay un efecto sinérgico entre las diferentes combinaciones posibles, se usó la fórmula de Limpel/Colby. Esta fórmula se utiliza para calcular el valor de control de la enfermedad esperado de las combinaciones que contienen dos principios activos, A y B:
(E) esperadas =A+B-(AxB/100)
en donde,
A = valor de control de la enfermedad observado para el componente A, a la misma concentración que la utilizada en la mezcla
B = valor de control de la enfermedad observado para el componente B, a la misma concentración que la utilizada en la mezcla
Cuando el valor de control de la enfermedad encontrado experimentalmente (observado) con la combinación es mayor que el valor de E, se deberá considerar dicha actividad como un efecto sinérgico, y el Factor de sinergia (F) es > 1:
Factor de sinergia (F)= Valor de control de la enfermedad observado/Valor de control de la enfermedad esperado (E)
Por lo tanto, existe un efecto sinérgico en cualquier momento donde la eficacia de una combinación que contiene dos principios activos es mayor que la suma de la eficacia de los componentes individuales.
Como en el caso anterior, en las siguientes Tablas:
OV: Valor de control observado
CEV: Valor de control esperado de Colby con la mezcla [CEV = A+B-(AxB/100)]
Factor de sinergia (F) = OV (A+B) / CEV (A+B)
1. Podosphaera xanthii en pepino
Enfermedad: Mildiu pulverulento del pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas o empapando el suelo con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Las plantas se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 80 % de HR. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePodosphaera xanthiiy, 10 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 200 0 63 80 63 1,27
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 300 0 60 83 60 1,38
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica200 100 7 67 83 69 1,20
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica200 200 7 63 80 66 1,21Ensayo 1
(tratamientoQuitooligosacáridos
de+ Sacarina sódica200 300 7 60 90 63 1,43pulverización)
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 40 0 60 63 60 1,05
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 100 0 67 70 67 1,04
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 200 0 63 87 63 1,38
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 300 0 60 83 60 1,38
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 100 0 67 77 67 1,15
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 200 0 80 83 80 1,04
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 300 0 80 98 80 1,23Ensayo 2
(tratamientoQuitooligosacáridos 0 13 67 93 71 1,31de+ Sacarina sódica200 10
pulverización)Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica200 200 13 80 93 83 1,12
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 200 3 80 88 81 1,09
Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica300 300 3 80 83 81 1,02 continuación
Ensayo 3Quitooligosacáridos
+ Sacarina sódica100 300 33 53 73 69 1,06(tratamiento
de empapado
del suelo)Quitooligosacáridos * Diclobentiazox<100 100 0 0 33 0>
Quitooligosacáridos
+ Probenazol100 100 0 0 27 0 *
Ensayo 4Quitooligosacáridos
(tratamiento+ Isotianilo100 100 0 10 43 10 4,3de
pulverización)<Quitooligosacáridos>
+ Tiadinilo100 100 0 0 33 0 * Quitooligosacáridos
Ácido beta- 100 300 0 20 73 20 3,65 aminobutírico
* El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
Combinaciones con laminarina (tratamiento de pulverización):
Laminarina Sacarina sódica 30 300 71 95 100 99 1,01
Laminarina Sacarina sódica 100 300 76 95 100 99 1,01
Combinaciones con carragenano (tratamiento de pulverización):
Carragenano Sacarina
sódica100 300 75 95 100 99 1,01
Carragenano Sacarina 3000 300 61 95 100 98 1,02 sódica
2. Pseudomonas syringae pv. Lachrymans en pepino
Enfermedad: Mancha bacteriana del pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 2 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión acuosa dePseudomonas syringaepv.Lachrymans(1 x 108 ufc/ml), y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90% de HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Ensayo 1<Quitooligosacáridos>
Sacarina sódica100 300 14 36 79 45 1,76
Ensayo 2<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 46 45 85 70 1,21
Ensayo 3<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 63 45 87 80 1,09
Ensayo 4<Quitooligosacáridos>
Acibenzolar-S-metilo100 100 0 86 91 86 1,06
3. Puccinia recóndita en trigo
Enfermedad: Roya marrón del trigo
Metodología:
Plantas de trigo en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 4 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePuccinia recondite(1 x 106 uredosporas/ml) y, 10 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente. Resultados: 4
Quitooligosacáridos 100 300 0 4 63 4 15,75 Sacarina sódica
4. Blumeria graminis f. sp. Tritici en trigo
Enfermedad: Mildiu pulverulento del trigo
Metodología:
Plantas de trigo en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 4 días, las plantas se inocularon por salpicado conBlumeria graminis f. sp. Tritici,y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 20 °C y aproximadamente 60 % de HR. 10 días después de la infección con el patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica 100 300 0 40 61 40 1,53
5. Pyricularia oryzae en arroz
Enfermedad: Tizón de plántulas del arroz
Metodología:
Plantas de arroz en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por empapamiento del suelo con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePyricularia oryzae(4x105 esporas/ml) y, 14 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 10 0 30 55 30 1,83
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 20 0 45 57 45 1,27
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 100 0 53 61 53 1,15 Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 200 0 40 45 40 1,13Ensayo 1
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 300 0 15 84 15 5,60
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 20 2 45 58 46 1,26
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 100 2 53 72 54 1,33
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 300 2 15 75 17 4,41
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 4 0 29 87 29 3>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 0 49 82 49 1,67>Ensayo 2
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 0 87 96 87 1,10>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 40 0 83 93 83 1,12>(continuación)
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 0 70 82 70 1,17>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 4 0 29 82 29 2,83>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 0 49 78 49 1,59>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 0 87 100 87 1,15>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 40 0 83 91 83 1,10>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 4 0 29 61 29 2,10>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 10 0 49 82 49 1,67>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 40 0 83 86 83 1,04>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 100 0 70 85 70 1,21>Quitooligosacáridos
Probenazol100 100 0 71 75 71 1,06 Quitooligosacáridos
Isotianilo100 100 0 77 79 77 1,03 Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 0 71 76 71 1,07>Quitooligosacáridos Ácido * beta-aminobutírico<100 300 0 0 61 0>Laminarina Acibenzolar-S-metilo100 100 47 71 86 84 1,02 Laminarina Ácido beta-Ensayo 3aminobutírico100 300 47 0 76 47 1,62
Carragenano Probenazol 100 100 44 71 89 84 1,06
Carragenano Isotianilo 100 100 44 77 91 87 1,05
Carragenano Tiadinilo 100 100 44 80 92 89 1,03
Carragenano Acibenzolar-S-metilo100 100 44 71 89 83 1,07 Carragenano Ácido beta-aminobutírico100 300 44 0 46 44 1,05
Ensayo 4<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 19 71 88 77 1,14 (continuación)
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 19 71 84 76 1,11>
* El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
6. Pseudomonas cannbina pv. alisalensis en col china
Enfermedad: Tizón bacteriano de la col china
Metodología:
Plantas de col china en estado de 3,5 hojas (cv. Muso), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión bacteriana dePseudomonas cannbinapv.alisalensis(1 x 108 ufc/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90 % de HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Ensayo 1<Quitooligosacáridos>
Sacarina sódica100 300 0 57,1 58 57,1 1,02 Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 4 1 5 37 6 6,17>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 1 18 100 19 5,26>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 1 12 48 13 3,69>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 40 1 84 94 84 1,12>Ensayo 2
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 1 89 91 89 1,02>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 4 5 5 23 10 2,3>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 5 18 64 22 2,91>Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 5 12 89 16 5,56>(continuación)
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 11 35 85 42 2,02>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 11 17 98 26 3,77>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 14 35 85 44 1,93>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 14 17 96 29 3,31>
Quitooligosacáridos
Ensayo 3Acibenzolar-S-metilo<200 40 14 95 100 96 1,04>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 10 5 35 87 38 2,29>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 20 5 17 96 21 4,57>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 40 5 95 100 95 1,05>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 100 5 98 100 98 1,02>
Quitooligosacáridos * Diclobentiazox<100 100 0 0 57 0>
Ensayo 4<Quitooligosacáridos Ácido>
2,6-dicloroisonicotínico100 300 0 83 93 83 1,12
Quitooligosacáridos Ácido
beta-aminobutírico<100 300 0 46 66 46 1,43>
* El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
Combinaciones con laminarina:
Ensayo 1Laminarina Probenazol 100 100 25 25 62 44 1,41
Laminarina Diclobentiazox 100 100 11 0 41 11 3,73
Ensayo 2
Laminarina Ácido 2,6-dicloroisonicotínico<100 300 11 83 98 85 1,15>Combinaciones con carragenano:
Carragenano Sacarina
sódica100 300 0 75 79 75 1,05 Carragenano Sacarina
sódica3000 300 13 75 90 78 1,15Ensayo 1
Carragenano Probenazol 100 100 0 25 56 25 2,24
Carragenano Acibenzolar-S-metilo100 100 0 85 91 85 1,07
Carragenano
Diclobentiazox100 100 13 0 24 13 1,85Ensayo 2
Carragenano Ácido 2,6-dicloroisonicotínico<100 300 13 83 93 85 1,09>
7. Colletotrichum orbiculare en pepino
Enfermedad: Antracnosis en pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas deColletotrichum orbiculare(1 x 104 esporas/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90 % HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo 100 100 8 92 100 92 1,09
8. Phakopsora pachyrhizi en soja
Enfermedad: Tizón asiático de la soja
Metodología:
Plantas de soja en estado de 1,5 hojas (cv. Tsurunoko-daizu), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePhakopsora pachyrhizi(1 x 106<uredosporas/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90% de h>R.<10 días después de la>inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Quitooligosacáridos
Probenazol100 100 7 7 73 13 5,62 Quitooligosacáridos
Diclobentiazox100 100 7 53 60 56 1,07 Quitooligosacáridos
Isotianilo100 100 7 20 40 26 1,54 Quitooligosacáridos Ácido
beta-aminobutírico<100 100 7 0 40 7 5,71>Combinaciones con laminarina:
Laminarina Probenazol 100 100 0 7 33 7 4,71 Laminarina Isotianilo 100 100 0 20 60 20 3Combinaciones con carragenano: 6
Carragenano Isotianilo 100 100 20 20 47 36 1,31 6.Pseudomonas cannbinapv.alisalensisen col china (Mancha bacteriana de la col china)
> Quitooligosacáridos Sacarina sódica
> Quitooligosacáridos Diclobentiazox
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
> Quitooligosacáridos Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Probenazol
> Laminarina Diclobentiazox
> Laminarina Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
> Carragenano Sacarina sódica
> Carragenano Probenazol
> Carragenano Diclobentiazox
> Carragenano Acibenzolar-S-metilo
> Carragenano Ácido 2,6-dicloroisonicotínico
7.Colletotrichum orbiculareen pepino (Antracnosis en pepino)
> Quitooligosacáridos Acibenzolar-S-metilo
8.Phakopsora pachyrhizien soja (Tizón asiático de la soja)
> Quitooligosacáridos Probenazol
> Quitooligosacáridos Diclobentiazox
> Quitooligosacáridos Isotianilo
> Quitooligosacáridos Ácido beta-aminobutírico
> Laminarina Probenazol
> Laminarina Isotianilo
> Carragenano Isotianilo
Metodología general:
Los experimentos se llevaron a cabo en condiciones controladas de invernadero. Los efectos de la temperatura, humedad y condiciones de luz en las cámaras del invernadero se ajustaron según las necesidades de las plantas hospedadoras y de los patógenos.
El valor de la eficacia o control de la enfermedad (W) se calculó según la fórmula de Abbott:
W=(1-x/y)x100
en donde
x = porcentaje de infección fúngica o bacteriana en las plantas tratadas
y = porcentaje de infección fúngica o bacteriana en las plantas del control no tratadas
Una eficacia de 0 significa que el nivel de infección de las plantas tratadas corresponde al de las plantas del control no tratadas; y la eficacia de 100 significa que las plantas tratadas no están infectadas.
Para evaluar si hay un efecto sinérgico entre las diferentes combinaciones posibles, se usó la fórmula de Limpel/Colby. Esta fórmula se utiliza para calcular el valor de control de la enfermedad esperado de las combinaciones que contienen dos principios activos, A y B:
(E) esperadas =A+B-(AxB/100)
en donde,
A = valor de control de la enfermedad observado para el componente A, a la misma concentración que la utilizada en la mezcla
B = valor de control de la enfermedad observado para el componente B, a la misma concentración que la utilizada en la mezcla
Cuando el valor de control de la enfermedad encontrado experimentalmente (observado) con la combinación es mayor que el valor de E, se deberá considerar dicha actividad como un efecto sinérgico, y el Factor de sinergia (F) es > 1:
Factor de sinergia (F)= Valor de control de la enfermedad observado/Valor de control de la enfermedad esperado (E)
Por lo tanto, existe un efecto sinérgico en cualquier momento donde la eficacia de una combinación que contiene dos principios activos es mayor que la suma de la eficacia de los componentes individuales.
Como en el caso anterior, en las siguientes Tablas:
OV: Valor de control observado
CEV: Valor de control esperado de Colby con la mezcla [CEV = A+B-(AxB/100)]
Factor de sinergia (F) = OV (A+B) / CEV (A+B)
1. Podosphaera xanthii en pepino
Enfermedad: Mildiu pulverulento del pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas o empapando el suelo con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Las plantas se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 80 % de HR. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePodosphaera xanthiiy, 10 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 200 0 63 80 63 1,27
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 300 0 60 83 60 1,38
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 100 7 67 83 69 1,20
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 200 7 63 80 66 1,21Ensayo 1
(tratamientoQuitooligosacáridos
deSacarina sódica200 300 7 60 90 63 1,43pulverización)
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 40 0 60 63 60 1,05
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 100 0 67 70 67 1,04
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 200 0 63 87 63 1,38
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 300 0 60 83 60 1,38
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 100 0 67 77 67 1,15
Ensayo 2Quitooligosacáridos
(tratamientoSacarina sódica100 200 0 80 83 80 1,04de
pulverización)Quitooligosacáridos
Sacarina sódica100 300 0 80 98 80 1,23 Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 100 13 67 93 71 1,31 continuación
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 200 13 80 93 83 1,12
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 200 3 80 88 81 1,09
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 300 3 80 83 81 1,02Ensayo 3
(tratamientoQuitooligosacáridos 33 53 73 69 1,06de empapadoSacarina sódica100 300
del suelo)
Quitooligosacáridos * Diclobentiazox<100 100 0 0 33 0>
Quitooligosacáridos
Probenazol100 100 0 0 27 0 *Ensayo 4
(tratamientoQuitooligosacáridos
deIsotianilo100 100 0 10 43 10 4,3pulverización)
Quitooligosacáridos
Tiadinilo100 100 0 0 33 0 * Quitooligosacáridos
Ácido beta-aminobutírico<100 300 0 20 73 20 3,65>
* El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
Combinaciones con laminarina (tratamiento de pulverización):
Laminarina Sacarina
sódica30 300 71 95 100 99 1,01 Laminarina Sacarina
sódica100 300 76 95 100 99 1,01
Combinaciones con carragenano (tratamiento de pulverización):
Carragenano Sacarina
sódica100 300 75 95 100 99 1,01 Carragenano Sacarina
sódica3000 300 61 95 100 98 1,02
2. Pseudomonas syringae pv. Lachrymans en pepino
Enfermedad: Mancha bacteriana del pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 2 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión acuosa dePseudomonas syringaepv.Lachrymans(1 x 108 ufc/ml), y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90% de HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Ensayo 1<Quitooligosacáridos>
Sacarina sódica100 300 14 36 79 45 1,76
Ensayo 2<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 46 45 85 70 1,21
Ensayo 3<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 63 45 87 80 1,09
Ensayo 4Quitooligosacáridos 100 100 0 86 91 86 1,06 Acibenzolar-S-metilo
3. Puccinia recóndita en trigo
Enfermedad: Roya marrón del trigo
Metodología:
Plantas de trigo en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 4 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePuccinia recondite(1 x 106 uredosporas/ml) y, 10 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
<Quitooligosacáridos>
Sacarina sódica100 300 0 4 63 4 15,75
4. Blumeria graminis f. sp. Tritici en trigo
Enfermedad: Mildiu pulverulento del trigo
Metodología:
Plantas de trigo en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 4 días, las plantas se inocularon por salpicado conBlumeria graminis f. sp. Tritici,y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 20 °C y aproximadamente 60 % de HR. 10 días después de la infección con el patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos 40 1,53 Sacarina sódica<100 300>
5. Pyricularia oryzae en arroz
Enfermedad: Tizón de plántulas del arroz
Metodología:
Plantas de arroz en estado de 1,2 hojas, cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por empapamiento del suelo con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePyricularia oryzae(4x105 esporas/ml) y, 14 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 10 0 30 55 30 1,83
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 20 0 45 57 45 1,27
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 100 0 53 61 53 1,15
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 200 0 40 45 40 1,13Ensayo 1
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica200 300 0 15 84 15 5,60
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 20 2 45 58 46 1,26
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 100 2 53 72 54 1,33
Quitooligosacáridos
Sacarina sódica300 300 2 15 75 17 4,41
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 4 0 29 87 29 3>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 0 49 82 49 1,67>Ensayo 2
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 0 87 96 87 1,10>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 40 0 83 93 83 1,12>(continuación)
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 0 70 82 70 1,17>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 4 0 29 82 29 2,83>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 0 49 78 49 1,59>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 0 87 100 87 1,15>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 40 0 83 91 83 1,10>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 4 0 29 61 29 2,10>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 10 0 49 82 49 1,67>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 40 0 83 86 83 1,04>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 100 0 70 85 70 1,21>Quitooligosacáridos
Probenazol100 100 0 71 75 71 1,06
Quitooligosacáridos
Isotianilo100 100 0 77 79 77 1,03
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 0 71 76 71 1,07>
Quitooligosacáridos Ácido * beta-aminobutírico<100 300 0 0 61 0>
Laminarina Acibenzolar-S-metilo100 100 47 71 86 84 1,02
Laminarina Ácido beta-Ensayo 3aminobutírico100 300 47 0 76 47 1,62
Carragenano Probenazol 100 100 44 71 89 84 1,06
Carragenano Isotianilo 100 100 44 77 91 87 1,05
Carragenano Tiadinilo 100 100 44 80 92 89 1,03
Carragenano Acibenzolar-S-metilo100 100 44 71 89 83 1,07
Carragenano Ácido beta-aminobutírico100 300 44 0 46 44 1,05
Ensayo 4<Quitooligosacáridos>
Probenazol100 100 19 71 88 77 1,14 (continuación)
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo 100 100 19 71 84 76 1,11 * El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
6. Pseudomonas cannbina pv. alisalensis en col china
Enfermedad: Tizón bacteriano de la col china
Metodología:
Plantas de col china en estado de 3,5 hojas (cv. Muso), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión bacteriana dePseudomonas cannbinapv.alisalensis(1 x 108 ufc/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90 % de HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Ensayo 1<Quitooligosacáridos>
Sacarina sódica100 300 0 57,1 58 57,1 1,02
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 4 1 5 37 6 6,17>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 1 18 100 19 5,26>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 1 12 48 13 3,69>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 40 1 84 94 84 1,12>Ensayo 2
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 1 89 91 89 1,02>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 4 5 5 23 10 2,3>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 5 18 64 22 2,91>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 5 12 89 16 5,56>continuación
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 10 11 35 85 42 2,02>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 20 11 17 98 26 3,77>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 10 14 35 85 44 1,93>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<200 20 14 17 96 29 3,31>
Quitooligosacáridos
Ensayo 3200 40 14 95 100 96 1,04
Acibenzolar-S-metilo
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 10 5 35 87 38 2,29>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 20 5 17 96 21 4,57>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 40 5 95 100 95 1,05>
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<300 100 5 98 100 98 1,02>
Quitooligosacáridos * Diclobentiazox<100 100 0 0 57 0>
Ensayo 4<Quitooligosacáridos Ácido>
2,6-dicloroisonicotínico100 300 0 83 93 83 1,12
Quitooligosacáridos Ácido
beta-aminobutírico<100 300 0 46 66 46 1,43>* El valor de control observado (OV) con la composición A B es mayor que el valor de control esperado de Colby (CEV), pero F no se puede calcular matemáticamente
Combinaciones con laminarina:
Ensayo 1Laminarina Probenazol 100 100 25 25 62 44 1,41
Laminarina Diclobentiazox 100 100 11 0 41 11 3,73
Ensayo 2
Laminarina Ácido 2,6-dicloroisonicotínico<100 300 11 83 98 85 1,15>Combinaciones con carragenano:
Carragenano Sacarina
sódica100 300 0 75 79 75 1,05 Carragenano Sacarina
sódica3000 300 13 75 90 78 1,15Ensayo 1
Carragenano Probenazol 100 100 0 25 56 25 2,24
Carragenano Acibenzolar-S-metilo100 100 0 85 91 85 1,07
Carragenano Diclobentiazox 100 100 13 0 24 13 1,85Ensayo 2
Carragenano Ácido 2,6-dicloroisonicotínico<100 300 13 83 93 85 1,09>
7. Colletotrichum orbiculare en pepino
Enfermedad: Antracnosis en pepino
Metodología:
Plantas de pepino en estado de 1,2 hojas (cv. Suzunari-suyo), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas deColletotrichum orbiculare(1 x 104 esporas/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90 % HR. 7 días después de la inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Quitooligosacáridos
Acibenzolar-S-metilo<100 100 8 92 100 92 1,09>
8. Phakopsora pachyrhizi en soja
Enfermedad: Tizón asiático de la soja
Metodología:
Plantas de soja en estado de 1,5 hojas (cv. Tsurunoko-daizu), cultivadas en macetas en condiciones controladas, se trataron por pulverización de las hojas con la mezcla en cuestión, dispersa en una solución acuosa. Después de 7 días, las plantas se inocularon y se infectaron con una suspensión de esporas dePhakopsora pachyrhizi(1 x 106<uredosporas/ml) y se mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C y 90% de h>R.<10 días después de la>inoculación del patógeno, se evaluaron los niveles de infección y se calcularon los porcentajes de los valores de control de la enfermedad y los esperados según las fórmulas de Abbott y Colby, respectivamente.
Resultados:
Combinaciones con quitooligosacáridos:
Quitooligosacáridos 100 100 7 7 73 13 Probenazol
Quitooligosacáridos 100 100 7 53 60 56 Diclobentiazox
Quitooligosacáridos 100 100 7 20 40 26 Isotianilo
Quitooligosacáridos
Ácido beta-aminobutírico<100 100 7 0 40 7>
naciones con laminarina:
Laminarina Probenazol 100 100 0 7 33 7
Laminarina Isotianilo 100 100 0 20 60 20
naciones con carragenano:
Carragenano Isotianilo 100 100 20 20 47 36
Claims (9)
1. Una composición que comprende un inductor de inmunidad desencadenada por patrones y un inductor de resistencia sistémica en donde el inductor de inmunidad desencadenada por patrones son quitooligosacáridos y el inductor de resistencia sistémica es sacarina sódica.
2. La composición según la reivindicación 1 en donde la proporción en peso entre los quitooligosacáridos inductores de la inmunidad activada por patrón y la sacarina sódica inductora de la resistencia sistémica es de 10:1 a 1:10.
3. La composición según la reivindicación 2 en donde la proporción en peso entre los quitooligosacáridos y la sacarina sódica es de 5:1 a 1:5.
4. La composición según la reivindicación 3 en donde la proporción en peso entre los quitooligosacáridos y la sacarina sódica es de 1:1 a 1:5.
5. Método para producir la composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende mezclar los quitooligosacáridos y la sacarina sódica.
6. Composición acuosa que comprende quitooligosacáridos y sacarina sódica y agua.
7. La composición según la reivindicación 6 en donde la concentración en peso de los quitooligosacáridos y la sacarina sódica es de 1 ppm al 95 % en peso.
8. Uso de la composición según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o 6-7 para activar la resistencia de la planta frente a los patógenos.
9. Un kit para proporcionar una composición agrícola que comprende los siguientes componentes: (a) quitooligosacáridos y (b) sacarina sódica.
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