ES2973267T3

ES2973267T3 - Purificación de virus

Info

Publication number: ES2973267T3
Application number: ES16828745T
Authority: ES
Inventors: Calzado Jana Barbero; Mario Nebenführ; Robert Schlegl; Michael Weber; Jürgen Wruss
Original assignee: Valneva SE
Current assignee: Valneva SE
Priority date: 2015-12-23
Filing date: 2016-12-23
Publication date: 2024-06-19
Anticipated expiration: 2036-12-23
Also published as: MX2018007627A; EP3393506C0; EP3393508B1; ES2941967T3; SI3393510T1; EP4218807A2; EP4218807A3; WO2017109223A1; EP3393508C0; WO2017109224A1; US20200384099A1; EP3393507B1; US20210093707A1; EP3393509C0; WO2017109228A1; US11406700B2; US20190008945A1; US12005111B2; CN108697785A; FI3393510T3

Abstract

En el presente documento se describen métodos de purificación mejorados para vacunas y composiciones víricas. También se describen vacunas contra Zika, Chikungunya, dengue y fiebre amarilla y métodos para producir y administrar dichas vacunas a sujetos que las necesitan. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Purificación de virus

CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0001]La divulgación se refiere a métodos para la purificación de virus para su uso en vacunas y, en particular, se refiere a una etapa mejorada del proceso de gradiente de sacarosa que permite la separación de impurezas como el sulfato de protamina.

FONDO DE LA INVENCIÓN

[0002]Las respuestas adversas al sulfato de protamina se conocen desde hace muchos años. La exposición previa a la protamina puede inducir una respuesta inmunitaria humoral y predisponer a los individuos susceptibles al desarrollo de reacciones adversas por el uso posterior de este medicamento. Los pacientes expuestos a la protamina a través del uso de insulina que contiene protamina o durante la neutralización con heparina pueden experimentar reacciones potencialmente mortales y anafilaxia mortal al recibir grandes dosis de protamina por vía intravenosa. Pueden producirse reacciones graves a la protamina intravenosa en ausencia de reacciones alérgicas locales o sistémicas a la inyección subcutánea de insulina que contiene protamina. Aunque no hay pruebas claras de reacciones de hipersensibilidad al sulfato de protamina relacionadas con la vacunación, las vacunas que contienen impurezas de protamina tienen una advertencia de precaución y contraindicación en sus etiquetas que indica que una reacción alérgica grave tras una dosis previa de una vacuna que contenga protamina de este tipo (p. ej., IXIARO®, véase el sitio de los CDC http://www.cdc.gov/japaneseencephalitis/vaccine/) es una contraindicación para recibir más dosis. Así pues, la eliminación de dicha impureza es una petición médica para mejorar el perfil de seguridad. Por otro lado, el sulfato de protamina es una herramienta excelente (y a menudo mejor que otros reactivos como la benzonasa) para purificar cosechas crudas de virus cultivados en sustratos celulares.

[0003]El virus Chikungunya (ChikV) es un virus ARN monocatenario de sentido positivo del género Alphavirus, familia Togaviridae. La enfermedad por el virus chikungunya es principalmente una enfermedad de brote y se asocia a altas tasas de ataque. El virus se transmite a los humanos a través de un mosquito vector y provoca fiebre, erupción cutánea, fatiga y poliartralgia grave. Por lo general, las infecciones por ChikV se resuelven espontáneamente y no suelen ser mortales, salvo en casos excepcionales de infección del CNS, en los que la tasa de mortalidad oscila entre el 10 y el 30%. Los lactantes menores de un año y los adultos mayores de 65 años están especialmente expuestos al riesgo de enfermedad del CNS por ChikV, con una tasa de infección 25 veces y 6 veces superior a la de la población general, respectivamente, y con una tasa de discapacidades persistentes estimada entre el 30% y el 45% (Gerardin, 2016). Además, aproximadamente 30% de todos los pacientes de ChikV experimentan artralgia durante meses o años después de la recuperación. En algunos casos, también pueden producirse complicaciones neurológicas, renales, cardiacas, respiratorias o hepáticas.

[0004]Actualmente no hay vacunas ni medicamentos disponibles para el tratamiento o la prevención de la enfermedad por el virus Chikungunya. En el pasado, los brotes se producían principalmente en África, pero el genotipo de África Central/Este/Sur (ECSA) ha ampliado recientemente su área de distribución geográfica, dando lugar a brotes en la India, Asia e incluso la Europa templada (Weaver, S., Arrival of Chikungunya Virus in the New World: Prospects for Spread and Impact on Public Health PLOS Neglected Tropical Diseases (2014) 8(6): e2921). Aunque el ChikV se ha importado repetidamente a las Américas desde 1995, no se notificó transmisión autóctona hasta 2013 en el Caribe. En 2015, la epidemia se había extendido al continente y había causado más de 1000000 de casos sospechosos en 43 países de las Américas (Organización Panamericana de la Salud (2015) Número de casos acumulados de fiebre chikungunya en las Américas). Es posible que la propagación del mosquito vector del ChikV a regiones no endémicas, así como la capacidad del ChikV para adaptarse a las especies locales de mosquitos, hayan contribuido a la aparición de nuevas epidemias (Vega-Rua et al., Chikungunya Virus Transmission Potential by Local Aedes Mosquitoes in the Americas and Europe, 20 de mayo de 2015, PLOS Neglected Tropical Diseases DOI: 10.1371/journal.pntd.0003780). La alta tasa de contagio de la enfermedad por el virus Chikungunya, su potencial de complicaciones duraderas y su propagación geográfica subrayan la necesidad de desarrollar medidas preventivas, como las vacunas. Konishi et al. (1980. Microbiol. Immunol., 24: 419 428) divulgan estudios sobre las proteínas estructurales del virus Chikungunya. Athmaram et al. (2013. J. Virol. Res. 2, 18-21) divulgan una estrategia de purificación en dos etapas para la purificación de viriones de Chikungunya utilizando la separación en gradiente de densidad boyante de sacarosa.

[0005]En 2007, el virus Zika se detectó por primera vez fuera de las regiones endémicas de Asia y África desde su descubrimiento en un mono Rhesus en Uganda en 1947. Desde entonces, el virus ha causado una gran epidemia en la Polinesia Francesa, extendiéndose por las islas del Pacífico y llegando a América del Sur y Central en 2015 (OMS "Informe sobre la situación del Zika" 5 de febrero de 2016). Las pruebas sugieren que, además de ser transmitido por mosquitos de la especie Aedes, pueden existir otros vectores, y el virus puede transmitirse por transfusión sanguínea, por vía transplacentaria y por transmisión sexual (WHO Zika Virus Fact Sheet, Feb. 2016). Aunque los síntomas de la infección por el virus de Zika incluyen fiebre leve, erupción cutánea y conjuntivitis, existe una correlación probable entre la infección y los trastornos neurológicos, incluido el síndrome de Guillain-Barré y la microcefalia en fetos/neonatos tras la infección durante el embarazo. En la actualidad no hay tratamiento ni vacuna específicos para el virus del Zika, y las únicas medidas preventivas consisten en controlar el mosquito vector. El virus del Zika representa una importante amenaza para la salud pública debido a la amplia circulación del mosquito Aedes, las múltiples vías de transmisión y los efectos neurológicos potencialmente graves de la infección.

[0006]La fiebre amarilla sigue representando una amenaza constante para la salud pública en las regiones endémicas de África tropical y Sudamérica. La Organización Mundial de la Salud (OMS) calcula que cada año se producen 200.000 casos y 30.000 muertes (OMS 2009). El virus de la fiebre amarilla (VFA), un virus ARN monocatenario, pertenece a la familia de los Flaviviridae y es transmitido por mosquitos (Lindenbach B D, Thiel H J y Rice C M 2007). La enfermedad de la fiebre amarilla puede dividirse en tres fases. Tras un periodo de incubación de tres a seis días, los pacientes desarrollan una enfermedad febril con síntomas como fiebre, malestar general, lumbalgia, cefalea, mialgia, náuseas, vómitos y postración que duran de tres a cuatro días. Los síntomas desaparecen entre dos y cuarenta y ocho horas antes de que entre el quince y el veinticinco por ciento de los pacientes entren en la tercera fase, el periodo de intoxicación, caracterizado por fiebre, vómitos, dolor epigástrico, diátesis hemorrágica, ictericia e insuficiencia hepática y renal. Entre el 20% y el 50% de los casos graves de FY fallecen entre el séptimo y el décimo día (Monath 2001; Monath 2004; Gubler, Kuno y Markoff 2007).

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0007]Los aspectos y las realizaciones de la invención se exponen en las reivindicaciones adjuntas. Durante el curso de la purificación del virus, se observó que la adición de sulfato de protamina a una cosecha de virus producida en un sustrato celular eliminaba no sólo el ADN contaminante derivado de las células huésped, como era de esperar, sino que sorprendentemente también eliminaba prácticamente las partículas de virus inmaduras y por lo demás no infecciosas de la preparación. Este hallazgo proporcionó un proceso racionalizado, suave, reproducible y de amplia aplicación para obtener partículas de virus infecciosos altamente purificadas para aplicaciones como la preparación de vacunas. Además, se descubrió sorprendentemente que dicho sulfato de protamina puede separarse muy eficazmente de la fracción vírica, lo que permite producir una vacuna más segura con altos rendimientos.

[0008]En el presente documento se describen vacunas víricas y composiciones que comprenden virus inactivados o atenuados, y métodos relacionados de producción de dichas vacunas y composiciones. También se proporcionan métodos de administración de dichas vacunas víricas para la prevención de la infección vírica y/o para la producción de una respuesta inmunitaria antivírica en sujetos, por ejemplo sujetos con riesgo de exposición al virus. Tal como se describe en el presente documento, la "prevención" de una infección vírica equivale a la "protección frente a" una infección vírica; es decir, la vacuna protege al sujeto vacunado de una infección notable o grave y/o de secuelas leves o graves de la infección. En particular, el procedimiento de la invención puede utilizarse para producir una vacuna contra el virus Chikungunya que comprenda una partícula vírica óptimamente inactivada, en la que la partícula vírica en una dosis apropiada sea capaz de seroconvertir a un sujeto al que se administre la vacuna vírica con al menos un 70% de probabilidad, preferiblemente un 80% de probabilidad; es decir, conferir seroprotección. Otra ventaja de la invención es que los métodos son muy eficaces y proporcionan composiciones puras desprovistas en gran medida de impurezas, en particular sulfato de protamina, lo que permite la producción de vacunas en grandes cantidades. Se proporcionan ejemplos de lo anterior para el virus Zika, el virus Chikungunya y el virus de la fiebre amarilla.

[0009]Los datos in vivo divulgados en el presente documento relativos a la inmunogenicidad de la vacuna inactivada contra el virus del Zika indican que el virus es sorprendentemente potente desde el punto de vista inmunogénico y también con alta inmunidad cruzada (inmunogenicidad muy similar en las cepas africanas y asiáticas). Los datos indican que la inmunogenicidad fue inesperadamente superior a la de la vacuna inactivada contra el virus del Zika de la que se ha informado recientemente (Larocca, et. al, 2016, Nature doi:10.1038/nature18952.). Los virus inactivados se encuentran entre las vacunas más seguras y se prefieren especialmente para su administración a poblaciones en las que la seguridad es especialmente preocupante, como las mujeres embarazadas, los niños y las personas inmunodeprimidas, lo que hace que el virus del Zika inactivado aquí descrito sea especialmente adecuado. Obtener un título elevado de virus inactivado es un reto sobre el terreno. El proceso aquí descrito para purificar el virus Zika inactivado da como resultado no sólo un alto rendimiento, sino también una sustancia farmacológica muy pura.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

[0010]No se pretende que los dibujos adjuntos estén dibujados a escala. Las figuras son meramente ilustrativas y no son necesarias para la habilitación de la divulgación. Por motivos de claridad, es posible que no todos los componentes estén etiquetados en todos los dibujos, las alineaciones se realizaron con el paquete de alineación múltiple Jalview (Waterhouse et al., 2009, Bioinformatics 25 (9) 1189-1191). En los dibujos:

Figura 1:Árbol de distancias medias (por % de identidad, nt), genomas completos.

Figura 2:Árbol de unión de vecinos (por % de identidad, nt), genomas completos.

Figura 3:Alineación por pares-Jalview (% identidad, nt), genomas completos.

Figura 4:Árbol de distancias medias (por % de identidad, aa), proteína E.

Figura 5:Árbol de unión de vecinos (por % de identidad, aa), proteína E.

Figura 6:Alineación por pares-Jalview (% identidad, aa), proteína E.

Figura 7:Alineación (sombreado: % identidad, aa), proteína E.

Figura 8:Ejemplo de maduración de una partícula vírica en la célula huésped. Como se observa en los flavivirus, la maduración completa de las partículas requiere la escisión proteolítica de la glicoproteína de membrana precursora (prM) por la proteasa furina del huésped. No todas las moléculas prM se escinden, lo que da lugar a la liberación de conformaciones maduras, en mosaico o inmaduras de las células. Las formas en mosaico e inmaduras no suelen ser infecciosas; sólo los viriones maduros son infecciosos y tienen actividad hemaglutinina (HA)/TCID<50>. (Figura adaptada de Plevka, et al., Maturation of flaviviruses starts from one or more icosahedrally independent nucleation centres, EMBO reports (2011) 12, 602-606).

Figura 9:Genoma esquemático del virus Chikungunya ("CHIKV"), incluidas las proteínas no estructurales (nsP1-4) y estructurales (C, E3, E2, 6K y E1), así como una representación del virus Chikungunya atenuado A5nsP3 utilizado para ejemplificar el proceso de purificación de la presente invención (etiquetado "A5nsP3"). El triángulo negro indica la localización aproximada de la deleción en la región codificante de nsP3. (Figura adaptada de Hallengard et al. 2014, supra.)

Figura 10:Diagrama de flujo que muestra un proceso ejemplar de purificacióndownstreamdel virus A5nsP3 ChikV desde la cosecha en bruto hasta la formulación de la sustancia farmacológica (vacuna), una realización preferida del proceso de la invención.

Figura 11:Absorbancia a 214 nm, 260 nm y 280 nm de fracciones individuales de centrifugación en gradiente de sacarosa (SGC) de un ciclo de purificación representativo del proceso de la invención (A); análisis SEC-HPLC de las fracciones finales agrupadas que contienen partículas infecciosas atenuadas purificadas del virus ASnsP3 ChikV (B); y un gel SDS-PAGE teñido con plata que muestra el contenido proteico de la preparación del virus tras diferentes etapas del proceso de la invención (definidos en la tabla bajo la figura) (C). El pool purificado por centrifugación en gradiente de sacarosa (SGC) consistente en las fracciones SGC F7-F11 se muestra en el carril 12.

Figura 12:Área SEC (mAU*min; eje derecho) y resultados de TCID<50>(log TCID<50>/1T1L; eje izquierdo) de cosechas de producción de ChikV A5nsP3 atenuada antes y después del tratamiento con PS. Las partes grises de las barras indican grandes pérdidas en el área SEC tras el tratamiento con PS, pero ningún cambio correspondiente en el número total de partículas infecciosas (indicado por las partes negras de las barras) (A); perfil SEC de la preparación del virus antes y después de la adición de PS, que muestra la eliminación completa de los agregados de virus de gran tamaño por el tratamiento con PS, así como una reducción de las proteínas de la célula huésped (HCP) y de las impurezas de bajo peso molecular (LMW) (B).

Figura 13:Micrografías electrónicas de la cosecha atenuada de A5nsP3 ChikV antes y después del tratamiento con PS.

Figura 14:Preparación del gradiente de sacarosa optimizado de la invención.

Figura 15:Comparación de cuatro experimentos diferentes de centrifugación en gradiente de sacarosa realizados para determinar empíricamente la combinación óptima de capas de sacarosa para una purificación ejemplar de ChikV. El contenido de ChikV en las fracciones del gradiente se determinó mediante SEC. El contenido de sacarosa en las fracciones del gradiente se determinó por refractometría como °Bx (porcentaje en peso de sacarosa). El contenido de sulfato de protamina (PS) se determinó mediante SEC. La PS se separó dentro del gradiente de sacarosa junto con los contaminantes residuales derivados de las células huésped y, por lo tanto, se utilizó para evaluar la calidad de la separación del ChikV de los contaminantes residuales en los gradientes probados. A: Sobre una capa de sacarosa al 50 % (p/p) se cargó material de carga ChikV que contenía un 10 % de sacarosa. La determinación del contenido de sacarosa en las fracciones mostró la formación de un gradiente lineal. La SEC mostró una concentración de ChikV dentro de un intervalo de concentración de sacarosa del 40-30 % (p/p) de sacarosa. PS SEC mostró una separación insuficiente de PS de ChikV. B: El material de carga ChikV que contenía un 10 % de sacarosa se cargó encima de un sistema de dos capas consistente en una capa inferior de 50 % (p/p) de sacarosa y una segunda capa de 35 % (p/p) de sacarosa. La determinación del contenido de sacarosa en las fracciones mostró la formación de un gradiente lineal. La SEC mostró una concentración de ChikV dentro de un intervalo de concentración de sacarosa del 40-30 % (p/p) de sacarosa. El PS SEC mostró una separación aceptable entre PS y ChikV, aunque sigue existiendo un ligero solapamiento. C El material de carga ChikV que contenía un 10 % de sacarosa se cargó encima de un sistema de dos capas consistente en una capa inferior de 50 % (p/p) de sacarosa y una segunda capa de 25 % (p/p) de sacarosa. La determinación del contenido de sacarosa en las fracciones mostró la formación de un gradiente lineal. La SEC mostró una concentración de ChikV dentro de un intervalo de concentración de sacarosa del 40-30 % (p/p) de sacarosa. PS SEC mostró una buena separación de PS de ChikV. 25.853(D) El material de carga ChikV que contenía un 10 % de sacarosa se cargó encima de un sistema de tres capas que consistía en una capa inferior con un 50 % (p/p) de sacarosa, así como una capa con un 35 % y un 15 % (p/p) de sacarosa. La determinación del contenido de sacarosa en las fracciones mostró la formación de un gradiente lineal y la SEC mostró la concentración de ChikV dentro de un intervalo de concentración de sacarosa del 40-30 %(p/p) de sacarosa. PS SEC mostró una muy buena separación de PS y contaminantes residuales de ChikV. De los cuatro sistemas de capas de sacarosa probados, la combinación de 3 capas (mostrada en la Figura 16D) mostró la mejor separación de las partículas de virus de los contaminantes residuales y, por lo tanto, se utilizó para el desarrollo posterior de la DSP.

Figura 16:Cantidades relativas de partículas A5nsP3 ChikV atenuadas y otros componentes medidos por análisis SEC-HPLC en las diferentes etapas del proceso de la invención incluyendo, de arriba a abajo: cosecha cruda (a); cosecha concentrada 10X; cosecha concentrada diafiltrada; material tratado con PS; material tratado con CC700 y pool purificado con SGC.

Figura 17:Un proceso ejemplar de purificacióndownstreamde virus corriente abajo desde la cosecha cruda hasta la formulación de la sustancia farmacológica (vacuna), una realización preferida del proceso de la invención (A). En (B) se muestra un diagrama de flujo de un proceso ejemplar de inactivación de virus. Ambos procesos se ejemplificaron en detalle con el virus del Zika.

Figura 18:El tratamiento con PS dio lugar a la eliminación selectiva de los agregados del virus Zika y de las impurezas HCP y LMW de Vero (SEC-HPLC de la cosecha de virus Zika concentrado 30x día 5).

Figura 19:SEC-HPLC de la cosecha individual de Zika concentrada 30x antes del tratamiento con PS en diferentes puntos temporales.

Figura 20:SEC-HPLC de la cosecha individual de Zika concentrada 30x tras el tratamiento con PS en diferentes puntos temporales. El gráfico más pequeño indica el efecto citopático (ECP) observado a lo largo del tiempo.

Figura 21:Se muestra un SDS-PAGE teñido con plata representativo de la cosecha en gradiente de sacarosa de una purificación del virus Zika.

Figura 22:Correlación entre el contenido de antígeno JEV en el virus inactivado neutralizado (NIV) analizado por ELISA y SEC-HPLC (Dionex Ultimate 3000, columna Superose 6).

Figura 23:Comparación de los rendimientos de la cosecha de JEV y ZikaV en diferentes puntos temporales.

Figura 24:Perfil de elución SEC-HPLC del VNI del Zika. Los datos se procesaron en la columna Dionex Ultimate 3000 / Superose 6 Increase. Ambos paneles proceden del mismo cromatograma. El gráfico superior es el perfil de elución completo; el inferior es una ampliación del pico de elución del virus ZIKA.

Figura 25:Análisis SEC-MALLS del ZikaV inactivado.

Figura 26:Distribución acumulativa del tamaño de las partículas de Zika NIV.

Figura 27:Representación gráfica de la neutralización del virus del Zika H/PF/2013 con sueros de ratones inmunizados combinados. El número de placas sin suero se fijó en el 100%. La EC<50>se calculó utilizando el método de los 3 parámetros.

Figura 28:Representación gráfica de la neutralización del virus Zika MR766 con sueros de ratones inmunizados. El número de placas sin suero se fijó en el 100%. La EC<50>se calculó utilizando el método de los 3 parámetros.

Figura 29:Cambio en el perfil SEC del pico del virus de la fiebre amarilla tras la adición de PS que muestra una eliminación completa de los agregados de gran tamaño y de las impurezas LMW.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0011]En el presente documento se describen vacunas y composiciones víricas que comprenden un virus inactivado o atenuado, y métodos relacionados de producción de dichas vacunas y composiciones. También se proporcionan métodos de administración de dichas vacunas víricas para la prevención de la infección vírica y/o para la producción de una respuesta inmunitaria antivírica en sujetos, por ejemplo, sujetos con riesgo de exposición al virus. En particular, la invención proporciona un proceso para fabricar una vacuna contra el virus Chikungunya que comprende una partícula vírica óptimamente inactivada o atenuada, en la que la partícula vírica en una dosis apropiada es capaz de seroconvertir a un sujeto al que se administra la vacuna vírica con al menos un 70% de probabilidad, preferiblemente un 80% de probabilidad, es decir, es capaz de conferir seroprotección en al menos el 70% de los sujetos vacunados. Otra ventaja de la invención es que los métodos son muy eficaces y proporcionan composiciones puras desprovistas en gran medida de impurezas, en particular sulfato de protamina, lo que permite la producción de vacunas en grandes cantidades. Se proporcionan ejemplos de lo anterior para el virus Zika, el virus Chikungunya y el virus de la fiebre amarilla.

[0012]En el presente documento se describen procesosdownstreampara purificar partículas víricas a partir de una preparación en bruto. El procesodownstreampuede aplicarse tanto a un virus que no se ha adaptado a la propagación en un sustrato celular concreto como a una partícula vírica parcial o totalmente adaptada al sustrato celular.

[0013]Aspectos de la invención proporcionan procesos para la purificación de partículas infecciosas de virus de Chikungunya que comprenden las etapas de (a) proporcionar una cosecha bruta (a) que comprende partículas de virus e impurezas, donde las impurezas se generan a partir del cultivo de dichas partículas de virus en un sustrato celular; (b) reducir las impurezas de la cosecha bruta (a) mediante precipitación con sulfato de protamina para obtener una preparación de virus Chikungunya (b); y purificar aún más la preparación de virus (b) mediante una centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa optimizada como se describe en el presente documento para obtener una preparación de virus (c) que comprende las partículas de virus infecciosas.

[0014]En algunas realizaciones, la concentración de sulfato de protamina en la etapa (b) es de aproximadamente 1 a 10 mg/ml, más preferiblemente de aproximadamente 1 a 5 mg/ml, más preferiblemente de aproximadamente 1 a 2 mg/ml. En una realización, la concentración de sulfato de protamina en la etapa (b) es de aproximadamente 2 mg/mL. En una realización, la concentración de sulfato de protamina es de 1,2 a 1,8 mg/ml, más preferiblemente de 1,4 a 1,6 mg/ml. En una realización preferida, la concentración de sulfato de protamina en la etapa (b) es de aproximadamente 1,6 mg/ml (para, p. ej., Chikungunya) o de aproximadamente 2 mg/ml.

[0015]En algunas realizaciones, el ADN de célula huésped residual de la preparación de virus (c) es inferior a 1 pg/mL, especialmente inferior a 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300 o 200 ng/mL, preferiblemente inferior a 100 ng/mL. En una realización preferida, el ADN residual de la célula huésped de la preparación vírica (c) es inferior a 10 ng/mL. En algunas realizaciones, la proteína residual de la célula huésped de la preparación final del virus (c) es inferior a 10 pg/mL, especialmente inferior a 9, 8, 7, 6 , 5, 4, 3 o 2 pg/mL, preferiblemente inferior a 1 pg/mL. En una realización preferida, la proteína residual de la célula huésped de la preparación vírica (c) es inferior a 100 ng/mL. En algunas realizaciones, las partículas víricas residuales no infecciosas de la preparación vírica final (c) es inferior a 10 pg/mL, especialmente inferior a 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 o 2 pg/mL, preferentemente inferior a 1 pg/mL. En una realización preferida, las partículas víricas residuales no infecciosas de la preparación vírica (c) es inferior a 100 ng/mL.

[0016]En algunas realizaciones, la protamina residual es inferior a 1 pg/mL, especialmente inferior a 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300 o 200 ng/mL, preferiblemente inferior a 100 ng/mL, más preferiblemente está por debajo del límite de detección de HPLC, en particular por debajo del límite de detección en la sustancia farmacológica final. En algunas realizaciones, el contenido de PS se comprueba mediante HPLC o cromatografía de exclusión por tamaño (SEC). Por ejemplo, la HPLC está validada para la determinación de PS en muestras de pool de gradiente de sacarosa de JEV como un ensayo de liberación de rutina y es muy sensible (es decir, LOQ 3 pg/mL; LOD 1 pg/mL). En la invención actual, el contenido de PS en las muestras de virus DS era <LOD. En una realización, la evaluación por HPLC del contenido de PS puede realizarse en una columna Superdex Peptide 10/300GL (GE: 17-5176-01) utilizando acetonitrilo al 30%, ácido trifluoroacético al 0,1% como disolvente con un caudal de 0,6 ml/min a 25°C y detección a 214 nm. Un método más sensible para medir la protamina residual en una preparación de virus purificada es la espectrometría de masas (EM). En algunas realizaciones, los niveles residuales de PS en una preparación de virus se analizan mediante MS u otro método de alta sensibilidad, p. ej., resonancia magnética nuclear (NMR). Con este método, la PS residual, así como los fragmentos y/o productos de descomposición de la PS, pueden detectarse en cantidades traza, como niveles tan bajos como, por ejemplo, 106, 107 o 108 moléculas por carga de muestra típica. En algunas realizaciones, los niveles de PS se analizan en el grupo de gradiente de sacarosa. En algunas realizaciones, los niveles de PS se analizan en el medicamento. En algunas realizaciones, los niveles de PS se analizan en la sustancia farmacológica.

[0017]En algunas realizaciones, la cosecha bruta (a) que comprende las partículas de virus y las impurezas se somete a una o más etapa(s) de pre-purificación antes de la etapa (b). En algunas realizaciones, la(s) etapa(s) de pre-purificación comprende(n) la digestión del ADN genómico de la célula huésped en la cosecha bruta (a) que comprende las partículas de virus y las impurezas mediante tratamiento enzimático. En algunas realizaciones, la(s) etapa(s) de pre-purificación comprende(n) filtración, ultrafiltración, concentración, intercambio de tampón y/o diafiltración. En algunas realizaciones, la una o más etapas de pre-purificación es la filtración utilizando un filtro que tiene un tamaño de poro igual o inferior a 1 pm. En algunas realizaciones, el filtro tiene un tamaño de poro igual o inferior a 0,2 pm. En una realización preferida, el filtro tiene un tamaño de poro de 0,2 pm. En algunas realizaciones, la concentración y/o ultra/diafiltración y/o intercambio tampón se realiza por filtración de flujo tangencial (TFF). En algunas realizaciones, la ultra/diafiltración de la cosecha bruta (a) que comprende las partículas de virus y las impurezas se lleva a cabo utilizando una membrana de fibra hueca que tiene un corte igual o inferior a 300 kDa. En una realización preferida, la membrana de fibra hueca tiene un corte de aproximadamente 100 kDa.

[0018]El proceso según la invención actual comprende el uso de un gradiente de sacarosa optimizado para la eliminación de sulfato de protamina, y también optimizado para la eliminación de partículas virales inmaduras u otras partículas virales que no son infecciosas o proteínas de la célula huésped o ácidos nucleicos (ADN, ARN, ARNm, etc.) u otros restos de la célula huésped. En la presente divulgación, el gradiente de sacarosa optimizado comprende al menos cuatro capas de soluciones de sacarosa con diferentes densidades. El preparado de virus de Chikungunya que debe purificarse se suministra en una solución de sacarosa que tiene una densidad aproximada del 10% de sacarosa (p/p). Una solución de sacarosa en el gradiente tiene una densidad de aproximadamente 50% de sacarosa (p/p), una solución de sacarosa en el gradiente tiene una densidad de aproximadamente 35% de sacarosa (p/p) y una solución de sacarosa en el gradiente tiene una densidad de aproximadamente 15% de sacarosa (p/p).

[0019]El gradiente de sacarosa comprende tres capas de soluciones de sacarosa de aproximadamente 50%, aproximadamente 35% y aproximadamente 15% (p/p) de sacarosa y la composición vírica a purificar está contenida en aproximadamente 10% (p/p) de sacarosa. Dado que la divulgación proporciona medios no sólo para analizar el ADN de la célula huésped sino también las partículas virales inmaduras, el experto en la materia puede optimizar con mayor precisión el gradiente de sacarosa para una purificación más eficaz e incluir herramientas adicionales como el ensayo PRNT para supervisar el éxito de la purificación.

[0020]En algunas realizaciones, la partícula vírica es un virus vivo, un virus quimérico, un virus vivo atenuado, un virus vivo modificado o un virus vivo recombinante. En una etapa posterior, las partículas víricas pueden inactivarse opcionalmente. En algunas realizaciones, la partícula vírica es una forma atenuada de la partícula vírica. Por ejemplo, el virus puede tener una infectividad, virulencia y/o replicación reducidas en un hospedador, en comparación con un virus de tipo salvaje. En algunas realizaciones, el virus es un virus mutado o modificado, por ejemplo, el ácido nucleico del virus puede contener al menos una mutación en relación con el virus de tipo salvaje. En algunas realizaciones, el virus es un virus vivo recombinante, es decir, un virus que se genera de forma recombinante y que puede contener ácido nucleico de diferentes fuentes.

[0021]Según la divulgación, el virus puede pertenecer a una familia de virus seleccionada del grupo que consiste en Paramyxoviridae, Orthomyxoviridae, Flaviviridae, Filoviridae, Arenaviridae, Rhabdoviridae y Coronaviridae. Según la invención, el virus pertenece a la familia de los Togaviridae (vivos o inactivados) y al género de los alfavirus. Según la divulgación, el virus puede ser un virus de la familia Flaviviridae, es decir, un flavivirus, un virus Zika (p. ej., un virus Zika del linaje asiático) o el virus de la fiebre amarilla. Según la invención, el virus es un virus Chikungunya, preferentemente un virus Chikungunya atenuado. En una realización preferida, el virus Chikungunya atenuado contiene una deleción en la proteína no estructural 3, como la proporcionada por, p. ej., SEQ ID N°: 77. Según la divulgación, el virus puede ser un virus de la fiebre amarilla como, p. ej., SEQ ID N°: 76.

[0022]En algunas realizaciones, la reducción relativa de impurezas del preparado vírico final con respecto al medio líquido (a) que comprende las partículas víricas y las impurezas se sitúa en un intervalo del 60 al 95%. En algunas realizaciones, la impureza residual del preparado vírico final es inferior al 1%.

[0023]En algunas realizaciones, el virus se propaga en una línea celular seleccionada del grupo que consiste en una línea celular EB66, una línea celular Vero, una línea celular Vero-aHis, una línea celular HeLa, una línea celular HeLa-S3, una línea celular 293, una línea celular PC12, una línea celular CHO, una línea celular 3T3, una línea celular PerC6 , una línea celular MDSK, una línea celular de fibroblastos embrionarios de pollo, una línea celular de pato y una línea celular aviar diploide. En algunas realizaciones, dicha línea celular es una línea celular de pato. En algunas realizaciones, dicha línea celular es una línea celular aviar diploide. En algunas realizaciones, dicha línea celular es una línea celular EB66. En una realización preferida, dicha línea celular es una línea celular Vero.

[0024]Aspectos de la invención proporcionan un uso de cualquiera de los procesos aquí descritos para fabricar una composición para inmunización contra una infección viral de Chikungunya. En una realización preferida, la composición es una vacuna. La composición o vacuna está dirigida contra el virus Chikungunya, como un virus Chikungunya atenuado. También se divulgan en el presente documento composiciones o vacunas en las que la composición o vacuna está dirigida contra un flavivirus, virus de la fiebre amarilla o virus Zika como, p. ej., un virus Zika de linaje asiático.

[0025]Otros aspectos proporcionan composiciones que comprenden las partículas víricas obtenibles por cualquiera de los procesos descritos en el presente documento para tratar y/o prevenir una infección vírica por Chikungunya. Según la divulgación, la infección vírica puede estar causada por un flavivirus, un virus de la fiebre amarilla o un virus Zika como, p. ej., un virus Zika de linaje asiático.

[0026]Además, se divulgan en el presente documento vacunas y composiciones que comprenden un virus Zika o un virus de la fiebre amarilla inactivados o un virus Chikungunya atenuado y métodos relacionados de producción de dichas vacunas y composiciones. También se proporcionan métodos de administración de dichas vacunas para la prevención de la infección por los virus Zika, fiebre amarilla o Chikungunya y/o para la producción de una respuesta inmunitaria anti virus Zika, fiebre amarilla o Chikungunya en sujetos, por ejemplo sujetos en riesgo de exposición a los virus Zika, fiebre amarilla o Chikungunya.

[0027]El virus del Zika es un flavivirus estrechamente relacionado con el virus del dengue y se transmite de forma similar por el mosquito de la especie Aedes, aunque son posibles otros artrópodos vectores del virus del Zika. Desde que se aisló por primera vez en un mono Rhesus en el bosque Zika de Uganda en 1947, se han registrado muy pocos casos de infección humana, especialmente fuera de las regiones endémicas de África y Asia, hasta que se produjo un gran brote en la Polinesia Francesa en 2007 (Haddow et al. PLoS Neglected Tropical Diseases (2012) 6(2), Malone et al. PLoS Neglected Tropical Diseases (2016) 10(3)). Desde entonces, el virus se ha propagado por las islas del Pacífico, incluida Oceanía, y a América del Sur y Central (OMS "Informe de situación del Zika" 5 de febrero de 2016).

[0028]Además de propagarse por la picadura de un mosquito infectado, las pruebas también sugieren que la transmisión puede producirse entre individuos, como por la sangre de un individuo infectado, la transmisión in utero/transplacentaria de una madre infectada al feto, la transmisión sexual entre parejas sexuales y posiblemente por otras vías de transmisión locales. Existe una posible asociación entre la infección por el virus de Zika durante el embarazo y la microcefalia en el feto/neonato. La microcefalia es una enfermedad poco frecuente en la que el perímetro cefálico de un bebé es significativamente inferior al esperado según la media de su edad, sexo y etnia. Esto se debe a que el cerebro no ha experimentado un desarrollo embrionario adecuado, y en el 90% de los casos se asocia a retraso mental (Rocha et al. (2016) Bull World Health Organ 8 feb. 2016).

[0029]Existe una probable asociación entre los individuos que han tenido una infección previa por el virus del Zika y la incidencia del síndrome de Guillain-Barré, un trastorno neurológico en el que el sistema inmunitario del individuo destruye la vaina de mielina que rodea los axones del sistema nervioso periférico (OMS "Informe sobre la situación del Zika" 5 de febrero de 2016).

[0030]En la actualidad no existen tratamientos ni vacunas específicas para el virus del Zika, y las únicas medidas para prevenir la infección son el control de los vectores y evitar los viajes a regiones en las que se estén produciendo brotes.

[0031]En el presente documento se describen vacunas contra el virus del Zika y composiciones que comprenden virus del Zika inactivados que proporcionan un método seguro para generar una respuesta inmunitaria al virus del Zika, incluidos anticuerpos neutralizantes del virus, que pueden ayudar a prevenir la infección por el virus del Zika.

[0032]Cualquier cepa del virus Zika puede utilizarse en los métodos y composiciones aquí descritos. El virus del Zika puede ser un aislado de un sujeto infectado durante un brote del virus del Zika. El virus del Zika puede ser una cepa aislada de África o del linaje del virus africano. El virus del Zika puede ser una cepa aislada de Asia o del linaje asiático (incluye también cepas de la Polinesia Francesa). El virus Zika puede ser una cepa aislada de América (América del Sur, América Central o América del Norte), como una cepa del virus Zika de Surinam.

[0033]El virus del Zika puede tener un genoma de ARN correspondiente a la secuencia de ADN proporcionada por el GenBank Accession No. AY632535.2, KU321639.1, KU497555.1, KU501215.1, KU509998.1, KU527068.1, KU681081.3, KU681082.3, KU707826.1, KU744693.1, o LC002520.1 o el genoma de ARN descrito parcial o totalmente en el presente documento (SEQ ID N°: 2 a 69). El virus Zika puede comprender la secuencia de ARN correspondiente a la secuencia de ADN proporcionada por SEQ iD N°: 78. La secuencia de ADN puede tener al menos un 95%, 96%, 97%, 98%, al menos un 99% de identidad de secuencia con SEQ ID N°: 78. El virus Zika puede contener una molécula de ARN que codifica la poliproteína completa según SEQ ID N°: 79 o una poliproteína con una identidad de secuencia de al menos el 95%, 96%, 97%, 98% o 99% con SEQ ID N°: 79.

[0034] En algunas realizaciones, la forma atenuada de ChikV se deriva del clon infeccioso de ChikV LR2006-OPY1 (aislado de La Reunión). En algunas realizaciones, la forma atenuada de ChikV es un mutante A5nsP3 similar al virus atenuado descrito por Hallengard et al. (Novel Attenuated Chikungunya Vaccine Candidates Elicit Protective Immunity in C57BL/6 mice (2014) Journal of Virology 88(5):2858-2866) o una variante inmunogénica de la misma. La variante inmunogénica del mutante A5nsP3 ChikV se define en el presente documento como aquella que tiene al menos un 80% de identidad de secuencia con la secuencia de nucleótidos de la secuencia del mutante A5nsP3 (SEQ ID N°: 77), especialmente al menos 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88% 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o al menos 99% de identidad de secuencia.

[0035] En algunas realizaciones, el procedimiento de la invención da lugar a un enriquecimiento de partículas virales infecciosas a partir de la cosecha bruta que comprende partículas virales infecciosas y partículas virales no infecciosas y otros productos virales de tal manera que el enriquecimiento de las partículas virales infecciosas es de al menos el 50%, al menos el 60%, al menos el 70%, al menos el 80%, al menos el 90%, al menos el 95%, preferentemente al menos el 80%, especialmente al menos el 85% en relación con el contenido total de partículas virales de la cosecha bruta (a) que comprende las partículas virales y las impurezas.

[0036] En algunas realizaciones, la impureza residual de la preparación final del virus con respecto a todas las impurezas de la cosecha cruda es inferior al 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, preferentemente inferior al 5% según se determine por SEC-HPLC (Cromatografía de Exclusión de Tamaño - HPLC).

[0037] Un aspecto único de la presente divulgación es la comprensión de que los conocimientos técnicos relacionados con el diseño de la vacuna y el enfoque de purificación utilizados para la vacuna contra la encefalitis japonesa (JEV) IXIARO® (véase Srivastava A.K. et al., 2001, Vaccine 19, 4557-4565, WO99/11762) pueden emplearse y mejorarse para acelerar el desarrollo de una vacuna contra el virus del Zika (o, p. ej., el Chikungunya o la fiebre amarilla) y proporcionarla a los sujetos que la necesiten lo antes posible. El proceso industrial divulgado para IXIARO®, que proporciona una vacuna muy eficaz contra el JEV, se complementó con otras mejoras significativas divulgadas en el presente documento con el fin de proporcionar una vacuna contra el Zika más eficaz (mayor rendimiento) y más segura (menos o ningún sulfato de protamina con su potencial alérgico) en comparación con la vacuna contra el JEV disponible. Una innovación particular de las vacunas aquí divulgadas es su sal de protamina muy reducida (SEQ ID N°: 1) en la sustancia farmacológica final, facilitado por el desarrollo de un gradiente de sacarosa mejorado. Dicho gradiente de sacarosa no sólo permitió la separación del sulfato de protamina sino que también permitió una inactivación muy efectiva por formaldehído y resultó en el caso del Zika con un rendimiento de más del 90% con el proceso mejorado aquí divulgado frente a un rendimiento de aproximadamente 35% con el proceso JEV publicado, véase la parte experimental para la comparación). Curiosamente, este proceso tan eficaz también puede aplicarse a vacunas vivas como la vacuna contra la Chikungunya aquí divulgada. Los resultados preliminares divulgados con una vacuna contra la fiebre amarilla también apoyan la posibilidad de utilizar este enfoque. Así, la divulgación proporciona un proceso robusto y ampliamente aplicable para vacunas víricas.

[0038] Aspectos de la divulgación se refieren a métodos de producción de un virus en células de cultivo tisular Vero. Las células Vero son una línea celular de cultivo tisular de uso común derivada del riñón de un mono verde africano. Las células Vero utilizadas en los métodos aquí descritos son la línea celular VERO (OMS), obtenida de la colección general de células de la Agencia de Protección de la Salud con el número de catálogo 88020401.

[0039] Las células Vero pueden cultivarse en monocapas confluentes, por ejemplo en frascos de cultivo tisular; en suspensión (sobre microportadores), por ejemplo en frascos de rodillos; o en cualquier otro sistema de cultivo celular para la producción viral. En algunas realizaciones, las células Vero se cultivan en un biorreactor para la producción viral. Para los ensayos de placas o la prueba de neutralización por reducción de placas (PRNT), las células Vero se cultivan en monocapas en frascos de cultivo de tejidos, platos o pocillos de una placa. Para infectar las células Vero con el virus, se inocula el medio de cultivo con virus y se incuban las células con el virus durante un periodo de tiempo. Las células pueden lavarse después de la inoculación para eliminar cualquier virus que no se haya adsorbido a las células en un tiempo determinado.

[0040] Los métodos proporcionados en el presente documento implican el pasaje del virus en células Vero. Tal como se utilizan en el presente documento, el término "pasaje" se refiere a la infección de una población de células Vero con virus y la posterior inoculación de una segunda población de células Vero con virus producido por la infección de la primera población de células Vero. En algunas realizaciones, una porción del medio de cultivo de las células Vero infectadas (que contiene el virus que se liberó de las células infectadas) se utiliza para inocular una segunda población de células Vero. Esto se denomina un pasaje o una ronda de pasaje. El pasaje puede realizarse en serie, por ejemplo, una porción del medio de cultivo de la segunda población infectada de células Vero se utiliza para inocular una tercera población de células Vero, y así sucesivamente. En algunas realizaciones, el virus obtenido de una sola placa se utiliza para inocular otra población de células.

[0041]En algunas realizaciones, el virus se pasa en células Vero varias veces, como al menos 4, 5, 6 , 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 o 40 veces. En algunas realizaciones, el virus se pasa en células Vero al menos 4 veces o 5 veces. En algunas realizaciones, el virus se pasa en células Vero al menos 30 veces. Es importante que la población de virus, es decir, las secuencias de virus, permanezcan lo más constantes posible a lo largo de dicho pasaje. Si se produce la adaptación del virus (es decir, la aparición de virus mutados en la población vírica original), se prefiere que dichos pasajes no se utilicen en el contexto de la fabricación de dicho virus, p. ej., para el Zika se ha comprobado que se puede utilizar hasta el pasaje 3 y cultivar hasta el día 7 sin que se produzcan cambios importantes en la población vírica, es decir, la introducción de población vírica con mutaciones. Sin embargo, esta observación debe hacerse para cada cepa de virus y puede ser diferente.

[0042]En algunas realizaciones, las células Vero se incuban durante al menos 2 días después de la inoculación con el virus a, p. ej., una MOI (multiplicidad de infección) típica de 0,01, para permitir la producción viral, antes del pasaje. En algunas realizaciones, las células Vero se incuban durante al menos 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más de 10 días, p. ej., al menos 7 días después de la inoculación con el virus antes del paso. El número de días que se incuban las células Vero tras la inoculación viral puede depender de factores como la multiplicidad de infección utilizada para inocular las células y el título viral deseado en el medio de cultivo. El pasaje en serie del virus en células Vero puede dar lugar a la generación de una cepa de virus adaptada a células Vero.

[0043]El medio de cultivo de las células Vero infectadas puede cosecharse (recogerse) para obtener el virus. En algunas realizaciones, el medio de cultivo se recoge de las células Vero infectadas y se sustituye por medio de cultivo fresco, que se recoge después de otro período de tiempo. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado de las células Vero infectadas se agrupa a partir de cultivos de células Vero independientes y/o de días independientes. La recolección puede repetirse hasta 4 veces a los 7 o 9 días de la infección, por ejemplo, y dar lugar a un alto rendimiento de virus por unidad de cultivo celular. Con el fin de minimizar la adopción de la cepa del virus Zika a las células Vero, se descubrió que las células Vero podían incubarse durante al menos 7 días, más preferiblemente 5 días, antes del pasaje y, posteriormente, los sobrenadantes podían cosecharse en los días 2, 3, 5 y 7 o 2, 3 y 5 (véase también la parte experimental). El medio de cultivo cosechado puede almacenarse a 4°C antes de la purificación del virus a partir del medio de cultivo durante un máximo de 2 semanas.

[0044]En algunas realizaciones, los restos de células Vero infectadas y lisadas pueden eliminarse del medio de cultivo cosechado, lo que se denomina una "clarificación" del medio de cultivo. El medio de cultivo cosechado puede clarificarse por métodos comunes conocidos en la técnica, como la centrifugación a baja velocidad, por ejemplo, a 1500 g durante 10 min, y/o por filtración a través de un filtro de tamaño de poro de 0,45 pm. El medio de cultivo cosechado puede almacenarse a 4°C antes de su concentración.

[0045]Los procesos inventivos de esta invención también pueden aplicarse a la purificación de partículas de virus infecciosas cultivadas en otros sustratos celulares, como células de embrión de pollo (CEF), Sf-9, high five, MRC-5, WI-38, MDCK, PER.C6 , y líneas celulares aviares, p. ej., la línea celular de pato EB66 y muchas otras.

[0046]Para concentrar el título del virus en el medio de cultivo cosechado, puede someterse a concentración por cualquier método conocido en la técnica. Por ejemplo, el medio de cultivo cosechado puede concentrarse mediante métodos que incluyen la ultrafiltración, la ultracentrifugación, el concentrador centrífugo, la centrifugación al vacío y la liofilización. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se concentra por ultrafiltración y se recoge el retentado que contiene el virus. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se concentra por precipitación en la que se disuelve polietilenglicol (PEG) 8000 en el medio de cultivo (hasta el 10%) y el precipitado se disuelve en un tampón, por ejemplo solución salina tamponada con fosfato (PBS, pH 7,0).

[0047]El medio de cultivo cosechado puede precipitarse para producir un sobrenadante de virus. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se precipita para eliminar el ADN de la célula huésped, como el ADN de la célula Vero, y otros materiales no deseados, como los restos de la célula Vero, del medio de cultivo cosechado. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se concentra antes de la precipitación. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se precipita añadiendo sulfato de protamina (p. ej., SEQ ID N°: 1) al medio de cultivo cosechado e incubando la mezcla, por ejemplo a 4°C o en hielo. En algunas realizaciones, el medio de cultivo cosechado se trata con benzonasa para eliminar del medio de cultivo cosechado el ADN de la célula huésped, p. ej., el ADN de la célula Vero y otros materiales no deseados, como los restos de células Vero. Sin embargo, se comprobó que es preferible el tratamiento con sulfato de protamina (véase la parte experimental). En algunas realizaciones, el medio de cultivo precipitado se centrifuga para recoger el material precipitado y se recoge el sobrenadante que contiene el virus, denominado "sobrenadante viral".

[0048]El sobrenadante del virus puede purificarse aún más después de la precipitación, por ejemplo mediante ultracentrifugación en gradiente de densidad. En algunas realizaciones, el sobrenadante del virus se purifica aún más mediante gradiente de sacarosa. Pueden recogerse fracciones de los gradientes de sacarosa y analizarse para detectar la presencia del virus.

[0049]Los métodos para ensayar fracciones positivas al virus incluyen el ensayo de placa, el ensayo de hemaglutinación, la electroforesis en gel de poliacrilamida y ensayos de antígenos como inmunoelectrotransferencia y ELISA. Las fracciones que contienen virus pueden agruparse en función del título del virus y del nivel de otras impurezas. El nivel o la cantidad de impurezas presentes en el sobrenadante del virus puede estimarse analizando el ADN de la célula huésped, p. ej., el ADN de la célula Vero, los agregados del virus y/o la proteína de la célula huésped, p. ej., la proteína de la célula Vero (véase la parte experimental). La invención se refiere a un gradiente de sacarosa mejorado que permite una separación eficiente de protamina como se muestra en la parte experimental. Se descubrió sorprendentemente que la adición de una fracción que contenía virus con un 10% (p/p) de sacarosa a un gradiente de densidad de sacarosa simple de tres capas (p. ej., un gradiente que comprendía una solución de sacarosa al 15% (p/p), una solución de sacarosa al 35% (p/p) y una solución de sacarosa al 50% (p/p)) daba lugar a una separación eficaz del sulfato de protamina sin mucha pérdida de virus. Así, la invención proporciona el uso de un gradiente de densidad de sacarosa que es capaz de separar eficientemente el sulfato de protamina, en el que dicho gradiente de densidad de sacarosa se utiliza en la purificación del virus Chikungunya.

[0050]Para conseguir una vacuna o composición segura para la administración a sujetos, el sobrenadante del virus puede inactivarse (véase la parte experimental para el virus Zika). De acuerdo con la presente divulgación, la etapa o etapas de inactivación pueden realizarse en cualquier punto del proceso, como p. ej., directamente después de la cosecha, antes o después del tratamiento PS o la centrifugación en gradiente de sacarosa o cualquier otra permutación de los mismos. En el presente documento, los términos "inactivado" y "óptimamente inactivado" pueden utilizarse indistintamente y se refieren a un proceso (o su resultado) por el cual el virus se vuelve incapaz de infectar una célula huésped (no infeccioso), pero que no afecta o afecta sustancialmente a la antigenicidad del virus, p. ej., los antígenos inmunogénicos expuestos en la superficie del virus son capaces de estimular una respuesta inmunitaria en un sujeto (p. ej., anticuerpos específicos de antígeno). Por "no afecta o afecta sustancialmente a la antigenicidad del virus" se entiende que el virus inactivado conserva al menos el 50%, al menos el 55%, al menos el 60%, al menos el 65%, al menos el 70%, al menos el 75%, al menos el 80%, al menos el 85%, al menos el 90%, al menos el 95%, al menos el 96%, al menos el 97%, al menos el 98%, al menos el 99%, o incluso esencialmente el 100% de la antigenicidad de un virus que no se somete a inactivación.

[0051]Se conocen diversos métodos para inactivar virus. En algunas realizaciones, el virus se inactiva mediante inactivación química, inactivación térmica, inactivación por pH o inactivación por UV.

[0052]En algunas realizaciones, la inactivación es por inactivación química e implica el contacto del virus con uno o más agentes de inactivación química durante un periodo de tiempo en condiciones tales que el virus se inactiva pero los epítopos antigénicos están sustancialmente intactos. En algunas realizaciones, el virus se inactiva durante un periodo de tiempo superior al necesario para inactivarlo completamente. En algunas realizaciones, el sobrenadante del virus se inactiva durante el número de días necesarios para inactivar el virus más al menos un día adicional. Pueden tomarse muestras del sobrenadante del virus en uno o más momentos a lo largo del proceso de inactivación y evaluarse la viabilidad viral (infectividad) por cualquier método conocido en la técnica, como por ejemplo infectando una monocapa de células huésped (es decir, ensayo de placa). Utilizando este procedimiento, se puede determinar el periodo de tiempo necesario para inactivar completamente el virus, y se selecciona un periodo de tiempo más largo para garantizar la inactivación completa.

[0053]En algunas realizaciones, el virus se pone en contacto con un agente de inactivación química durante entre 1 día y 50 días, entre 2 días y 40 días, entre 2 días y 30 días, entre 2 días y 20 días, entre 2 días y 10 días, entre 3 días y 9 días, entre 4 días y 8 días, entre 5 días y 7 días, entre 2 días y 5 días, o entre 5 y 10 días. En algunas realizaciones, el virus se pone en contacto con uno o más agentes de inactivación química durante al menos 1 día, 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 6 días, 7 días, 8 días, 9 días, 10 días, 11 días, 12 días, 13 días, 14 días, 15 días, 16 días, 17 días, 18 días, 19 días, 20 días, 21 días, 22 días, 23 días, 24 días, 25 días, 26 días, 27 días, 28 días, 29 días, 30 días, 31 días, 32 días, 33 días, 34 días, 35 días, 36 días, 37 días, 38 días, 39 días, 40 días, 41 días, 42 días, 43 días, 44 días, 45 días, 46 días, 47 días, 48 días, 49 días, o al menos 50 días.

[0054]En algunas realizaciones, la inactivación química se lleva a cabo a aproximadamente 5°C, 10°C, 15°C, 20°C, 25°C, 30°C, 35°C, 40°C, o aproximadamente 45°C. En algunas realizaciones, la inactivación química se lleva a cabo a aproximadamente 4°C. En algunas realizaciones, la inactivación química se lleva a cabo a aproximadamente 22°C.

[0055]Cualquier agente químico de inactivación conocido en la técnica puede ser adecuado para inactivar el virus en los métodos aquí descritos. Un experto en la materia apreciará que factores como el agente químico de inactivación y la temperatura a la que se realiza la inactivación pueden afectar a la duración (número de días) necesaria para inactivar completamente el virus. Algunos ejemplos de agentes de inactivación química son el formaldehído, las enzimas, la ppropiolactona, el etanol, el ácido trifluroacético, el acetonitrilo, la lejía, la urea, el clorhidrato de guanidina, el fosfato de trin-butilo, la etileno-imina o un derivado de ésta, y disolventes orgánicos como Tween, Triton, desoxicolato sódico y sulfobetaína. Una inactivación preferida es la inactivación con formaldehído a 22°C /- 2°C durante aproximadamente 10 días.

[0056]En algunas realizaciones, el agente inactivador se neutraliza tras la inactivación química del virus. En algunas realizaciones, el agente inactivador es formaldehído y se neutraliza tras la inactivación química utilizando tiosulfato sódico o metabisulfito sódico.

[0057]En algunas realizaciones, el virus se inactiva por inactivación térmica. En algunas realizaciones, la inactivación térmica implica exponer el virus al calor, como calor seco o calor de vapor, durante un periodo de tiempo. En algunas realizaciones, la inactivación térmica implica exponer el virus a temperaturas de aproximadamente 40°C, 45°C, 50°C, 55°C, 60°C, 65°C, 70°C, 75°C, 80°C, 85°C, 90°C,+ 95°C, o aproximadamente 100°C. En algunas realizaciones, el virus se expone al calor durante al menos 5 horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas, 18 horas, 19 horas, 20 horas, 21 horas, 22 horas, 23 horas, 24 horas, 36 horas, 48 horas, 60 horas, 72 horas, 84 horas, unas 96 horas, o más tiempo. Una inactivación térmica preferida consiste en exponer el virus a temperaturas de aproximadamente 56°C durante 60 minutos.

[0058]En algunas realizaciones, el virus se inactiva exponiéndolo a condiciones ácidas o alcalinas durante un periodo de tiempo tal que el virus se inactiva completamente. El pH de una preparación vírica puede ajustarse a un pH deseado, por ejemplo mediante la adición de un ácido, una base o un tampón con un pH particular a la preparación vírica. En algunas realizaciones, el virus se inactiva a un pH ácido de aproximadamente 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5 o aproximadamente 5,5. En otras realizaciones, el virus se inactiva a un pH alcalino de aproximadamente 8, 8,5, 9, 9,5, 10 o aproximadamente 10,5.

[0059]En algunas realizaciones, el virus se inactiva mediante inactivación UV. La inactivación por UV consiste en exponer el virus a una radiación rica en energía, como la luz UV-A, UV-B o UV-C, durante un periodo de tiempo.

[0060]Se apreciará que dos o más métodos de inactivación pueden combinarse y realizarse simultáneamente o en serie.

[0061]El virus inactivado puede dializarse posteriormente para eliminar cualquier material no deseado, incluido el agente inactivador y cualquier agente neutralizante, y/o para sustituir el tampón por un tampón farmacéuticamente aceptable para su administración a los sujetos. En algunas realizaciones, el virus inactivado se dializa con PBS. Además o alternativamente, el virus inactivado puede filtrarse, por ejemplo de forma estéril, a través de un filtro de 0,22 pm.

[0062]Se cree que el proceso mejorado aquí descrito (que comprende el tratamiento PS en combinación con el gradiente de sacarosa optimizado) es aplicable y eficiente a cualquier purificación de virus y, en particular, eficiente para cualquier virus de tipo ARN (como los virus Zika y Chikungunya y de la fiebre amarilla aquí descritos) de tamaño similar (es decir, de aproximadamente 50 a 100 nm). Además, se cree que la combinación del tratamiento de PS con el gradiente de sacarosa optimizado que permite una separación completa (o casi completa) de PS proporciona una purificación de virus muy eficiente en el rango muy alto, p. ej., por encima del 70%, más preferiblemente 75%, 80% o 90%, incluso más preferiblemente 95%. Se cree que la reducción completa de PS en la fracción de virus mediante el proceso de la invención permite una inactivación muy eficaz con una pérdida viral casi nula o muy baja, p. ej., inferior al 30%, más preferiblemente inferior al 25%, 20% o 10% de pérdida, incluso más preferiblemente inferior al 15% de pérdida. Cualquiera de los métodos o usos aquí descritos puede ser para la prevención de una infección vírica en un sujeto. En el presente documento, los términos "prevenir" y "prevenir" incluyen la administración de una vacuna o composición vírica a un sujeto para reducir o retrasar la aparición de síntomas clínicos o subclínicos, complicaciones, patologías o indicios bioquímicos de una enfermedad o infección, o para reducir o inhibir la propagación/transmisión del virus. Tal como se utiliza aquí, "prevenir" también puede interpretarse como "proteger de". Tal como se utiliza en el presente documento, el antígeno o antígenos, como un virus inactivado, que se administra a un sujeto de forma profiláctica (p. ej., antes de la infección) puede denominarse vacuna.

Vacuna contra el Zika que no forma parte de la invención

[0063]Como se describe en el presente documento, el virus del Zika puede causar una variedad de síntomas tras la infección de un sujeto, y generalmente se caracteriza por fiebre leve; erupción cutánea (exantema) en la cara, tronco del cuello, parte superior de los brazos; dolor de cabeza; sensibilidad a la luz; dolor articular no inflamatorio; conjuntivitis; falta de apetito; diarrea; dolor abdominal; y/o mareos. Es probable que la infección por el virus de Zika durante el embarazo esté asociada a microcefalia en el feto/neonato. También existe una probable asociación entre la aparición del síndrome de Guillain-Barré o sus síntomas. El diagnóstico de la infección por el virus del Zika en sujetos expuestos al virus del Zika o sospechosos de estar expuestos al virus del Zika implica la detección de la presencia de anticuerpos específicos del virus y/o pruebas moleculares, como la detección del virus del Zika mediante<p>C<r>o PCR en tiempo real.

[0064]En el presente documento se proporcionan métodos para administrar una dosis de una cantidad terapéuticamente eficaz de una vacuna contra el virus del Zika a un sujeto que la necesite. El sujeto puede ser un mamífero, como un ser humano, un primate no humano, un roedor, un conejo, una oveja, un perro, un gato, un caballo o una vaca. El sujeto puede ser un ratón. El sujeto puede ser un ser humano, como un niño, un adulto o un anciano. El sujeto puede ser una mujer. La sujeto puede estar embarazada o planear quedarse embarazada. El sujeto puede estar expuesto al virus del Zika. El sujeto puede estar viviendo o viajando a una zona donde el virus Zika está presente o se cree que está presente.

[0065]El sujeto puede estar viviendo o viajando a una zona que esté experimentando un brote de infección por el virus Zika. El sujeto puede estar viviendo o viajando a una zona en la que esté presente o se crea que está presente un artrópodo vector capaz de transmitir el virus del Zika.

[0066]Cualquiera de las vacunas o composiciones contra el virus del Zika aquí descritas puede administrarse a un sujeto en una cantidad terapéuticamente eficaz o en una dosis de una cantidad terapéuticamente eficaz. Tal y como se utiliza en el presente documento, una "cantidad terapéuticamente eficaz" de vacuna es cualquier cantidad que produzca una respuesta o resultado deseado en un sujeto, como los descritos en el presente documento, incluida la prevención de la infección, una respuesta inmunitaria o una respuesta inmunitaria mejorada frente al virus del Zika, o la prevención o reducción de los síntomas asociados a la enfermedad del Zika.

[0067]La cantidad terapéuticamente eficaz de una vacuna o composición contra el virus del Zika descrita en el presente documento puede ser una cantidad suficiente para generar anticuerpos específicos contra el antígeno (p. ej., anticuerpos contra el virus del Zika). La cantidad terapéuticamente eficaz puede ser suficiente para seroconvertir a un sujeto con al menos un 70% de probabilidad. La cantidad terapéuticamente eficaz puede ser suficiente para seroconvertir a un sujeto con al menos 75%, 80%, 85% 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, o al menos 99% de probabilidad. La seroconversión de un sujeto puede evaluarse mediante cualquier método conocido en la técnica, como la obtención de una muestra de suero del sujeto y la realización de un ensayo para detectar anticuerpos contra el virus del Zika. Un sujeto puede estar seroconvertido si una muestra de suero del sujeto contiene una cantidad de anticuerpos contra el virus del Zika que supera un umbral o línea de base predeterminada. En general, se puede considerar que un sujeto ha seroconvertido si hay un aumento de al menos 4 veces en los anticuerpos contra el virus del Zika (es decir, anticuerpos IgG contra la proteína E del Zika) presentes en una muestra de suero del sujeto en comparación con una muestra de suero tomada previamente del mismo sujeto.

[0068]La seroconversión de un sujeto puede evaluarse realizando una prueba de neutralización por reducción de placas (PRNT). Brevemente, la PRNT se utiliza para determinar el título de suero necesario para reducir el número de placas del virus Zika en un 50% (PRNT50) en comparación con un suero/anticuerpo de control. La PRNT50 puede llevarse a cabo utilizando monocapas de células Vero o cualquier otro tipo/línea celular que pueda infectarse con el virus Zika. Los sueros de los sujetos se diluyen y se incuban con virus Zika vivos no inactivados. La mezcla de suero/virus puede aplicarse a las células Vero e incubarse durante un periodo de tiempo. Se cuentan las placas formadas en las monocapas de células Vero y se comparan con el número de placas formadas por el virus Zika en ausencia de suero o de un anticuerpo de control. Un umbral de anticuerpos neutralizantes de 1: 10 de dilución de suero en un PRNT50 se acepta generalmente como prueba de protección (Hombach et. al. Vaccine (2005) 23:5205-5211).

[0069]El virus Zika puede formularse para su administración en una composición, como una composición farmacéutica. El término "composición farmacéutica", tal como se utiliza aquí, significa un producto que resulta de la mezcla o combinación de al menos un ingrediente activo, como un virus Zika inactivado, y uno o más ingredientes inactivos, que pueden incluir uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

[0070]Las composiciones farmacéuticas producidas por el proceso descrito en el presente documento, incluidas las vacunas, pueden prepararse de acuerdo con métodos bien conocidos y practicados rutinariamente en la técnica (véase, p. ej., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Mack Publishing Co. 20th ed. 2000; e Ingredients of Vaccines - Fact Sheet from the Centers for Disease Control and Prevention, p. ej., adyuvantes y potenciadores como el alumbre para ayudar a la vacuna a mejorar su acción, conservantes y estabilizadores para ayudar a la vacuna a permanecer inalterada (p. ej., albúmina, fenoles, glicina)). Las composiciones farmacéuticas se fabrican preferentemente en condiciones BPF. Típicamente se emplea una dosis terapéuticamente eficaz del preparado de virus Zika inactivado en la composición farmacéutica de la divulgación. El virus Zika inactivado se formula en formas farmacéuticas aceptables mediante métodos convencionales conocidos por los expertos en la materia. Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (p. ej., la respuesta profiláctica).

[0071]Las dosis de los principios activos en las composiciones farmacéuticas pueden variarse para obtener una cantidad del principio activo que sea eficaz para lograr la respuesta farmacéutica deseada para un sujeto, composición y modo de administración particulares, sin ser tóxica para el sujeto. El nivel de dosificación seleccionado depende de diversos factores farmacocinéticos, como la actividad de las composiciones particulares empleadas, la vía de administración, el tiempo de administración, la tasa de excreción del compuesto particular empleado, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales utilizados en combinación con las composiciones particulares empleadas, la edad, el sexo, el peso, el estado, la salud general y el historial médico previo del sujeto tratado, y factores similares.

[0072]Un médico, veterinario u otro profesional capacitado puede comenzar a administrar dosis de la vacuna inactivada contra el virus del Zika empleada en la composición farmacéutica a niveles inferiores a los necesarios para lograr el efecto terapéutico deseado y aumentar gradualmente la dosis hasta lograr el efecto deseado (p. ej., la producción de anticuerpos contra el virus del Zika). En general, las dosis eficaces de las composiciones, para el tratamiento profiláctico de grupos de personas como se describe en el presente documento varían en función de muchos factores diferentes, incluidos los medios de administración, el lugar de destino, el estado fisiológico del paciente, si el paciente es humano o animal, otros medicamentos administrados y el título de anticuerpos contra el virus de Zika deseado. Las dosis deben ajustarse para optimizar la seguridad y la eficacia. El régimen de dosificación puede implicar la administración subcutánea o intramuscular de una dosis de virus de Zika inactivado dos veces, una en el día 0 y otra aproximadamente en el día 7. El régimen de dosificación puede implicar la administración subcutánea de una dosis de virus Zika inactivado dos veces, una en el día 0 y otra aproximadamente en el día 14. El régimen de dosificación puede implicar la administración subcutánea de una dosis de virus Zika inactivado dos veces, una en el día 0 y otra aproximadamente en el día 28. El virus Zika inactivado puede administrarse al sujeto una sola vez.

[0073]Cualquiera de las vacunas o composiciones contra el virus del Zika descritas en el presente documento puede administrarse a un sujeto con, antes de o después de la administración de uno o más adyuvantes. Un adyuvante es una molécula que potencia una respuesta en un sujeto, como una respuesta inmunitaria, a un antígeno u otra molécula. El adyuvante puede estabilizar un antígeno u otra molécula. La determinación de si una vacuna contra el virus de Zika o sus composiciones se administran con un adyuvante depende de varios factores (p. ej., el tipo y el alcance de la respuesta deseada) y será evidente para un experto en la materia. La administración de cualquiera de las vacunas o composiciones contra el virus del Zika descritas en el presente documento con, antes de o después de la administración de un adyuvante puede aumentar la producción de anticuerpos neutralizantes del virus (anti-virus del Zika). Un sujeto al que se le administre cualquiera de las vacunas o composiciones contra el virus del Zika descritas en el presente documento con, antes de o después de la administración de un adyuvante puede necesitar una sola administración de la vacuna o composición contra el virus del Zika para ser seroconvertido (producir un nivel de anticuerpos contra el virus del Zika). Ejemplos de adyuvantes pueden incluir sal de aluminio (hidróxido de aluminio o fosfato de aluminio), hidróxido de fosfato de calcio, aceite de parafina, bacterias muertas, toxinas bacterianas, toxoides, subunidades de bacterias, escualeno, timerosal, detergentes, IL-1, IL-2, IL-12, adyuvantes de 2 componentes, como los adyuvantes de 2 componentes que contienen un péptido antibacteriano y un agonista TLR9 (p. ej., IC31®), y combinaciones como el adyuvante completo de Freund y el adyuvante incompleto de Freund. Las vacunas o composiciones contra el virus del Zika pueden administrarse con hidróxido de aluminio. La vacuna o composición inactivada contra el virus Zika puede administrarse con sal de fosfato de aluminio. Una sal de aluminio preferida es el hidróxido de aluminio con contenido reducido de Cu, p. ej., inferior a 1,25ppb basado en el peso de la composición de Zika, un adyuvante descrito en detalle en WO 2013/083726 o Schlegl et al., Vaccine 33 (2015) 5989-5996.

[0074]El adyuvante puede constar de dos componentes. El adyuvante de 2 componentes puede comprender un péptido antibacteriano y un agonista TLR9. El péptido antibacteriano puede estar constituido por la secuencia de aminoácidos KLKL5 KLK (s Eq ID N°: 71). El agonista TLR9 puede ser una molécula de ácido inmunoestimuladoroligodeoxinucleico (I-ODN) que contiene desoxinosina. El I-ODN puede comprender la secuencia de ácido nucleico (dIdC)13 (SEQ ID N°: 70). El adyuvante puede ser IC31®. El adyuvante puede estar en forma de nanopartículas (véase, p. ej., la patente estadounidense n.° 8.765.148 B2). El adyuvante puede ser IC31®, es decir, KLKL5 KLK (SEQ ID N°: 7 l) y la secuencia de ácido nucleico (dIdC)13 (SEQ ID N°: 70), en combinación con una sal de aluminio como el hidróxido de aluminio.

[0075]Las vacunas o composiciones contra el virus del Zika descritas en el presente documento pueden administrarse a un sujeto concomitantemente con una o más vacunas contra otro agente infeccioso, como por ejemplo otro agente infeccioso que esté presente o se crea que está presente en la misma área geográfica que el virus del Zika. El otro agente infeccioso puede ser uno con el que el sujeto también corra el riesgo de estar en contacto. El otro agente infeccioso puede ser transmitido por el mismo artrópodo vector que el virus Zika. El otro agente infeccioso puede ser el virus de la encefalitis japonesa, el virus de la fiebre amarilla, el virus del dengue y/o el virus Chikungunya.

[0076]También dentro del alcance de la presente divulgación se encuentran los kits para su uso en la administración profiláctica a un sujeto, por ejemplo para prevenir o reducir la gravedad de la infección por el virus Zika. Dichos kits pueden incluir uno o más recipientes que contengan una composición con virus de Zika inactivado, como una vacuna con virus de Zika inactivado. El kit puede incluir además uno o más envases adicionales que contengan una segunda composición, como una segunda vacuna. La segunda vacuna puede ser una vacuna contra otro arbovirus. La segunda vacuna puede ser una vacuna contra el virus del dengue y/o una vacuna contra el virus de Chikungunya.

[0077]El kit puede comprender instrucciones de uso de acuerdo con cualquiera de los métodos aquí descritos. Las instrucciones incluidas pueden comprender una descripción de la administración de la composición que contiene virus de Zika inactivado para prevenir, retrasar la aparición o reducir la gravedad de la infección por el virus de Zika. El kit puede comprender además una descripción de la selección de un sujeto adecuado para la administración basada en la identificación de si ese sujeto está en riesgo de exposición al virus del Zika o de contraer una infección por el virus del Zika. Las instrucciones pueden comprender una descripción de la administración de una composición que contenga virus del Zika inactivado a un sujeto con riesgo de exposición al virus del Zika o de contraer la infección por el virus del Zika.

[0078]Las instrucciones relativas al uso de la composición que contiene virus de Zika inactivado generalmente incluyen información sobre la dosis, el programa de dosificación y la vía de administración para el tratamiento previsto. Los envases pueden ser dosis unitarias, paquetes a granel (p. ej., paquetes multidosis) o subdosis unitarias. Las instrucciones suministradas en los kits suelen ser instrucciones escritas en una etiqueta o prospecto (p. ej., una hoja de papel incluida en el kit), pero también se aceptan instrucciones legibles a máquina.

[0079]Los kits de la presente divulgación se presentan en envases adecuados. Los envases adecuados incluyen viales, botellas, tarros, envases flexibles y similares. También se contemplan envases para su uso en combinación con un dispositivo específico, como una jeringa o un dispositivo de infusión. El contenedor puede tener un puerto de acceso estéril, por ejemplo, el contenedor puede ser un vial con un tapón perforable por una aguja de inyección hipodérmica. Al menos un agente activo de la composición es un virus Zika inactivado, tal como se describe en el presente documento.

[0080]A menos que se definan de otro modo en el presente documento, los términos científicos y técnicos utilizados en relación con la presente divulgación tendrán los significados comúnmente comprendidos por los expertos en la materia. Además, salvo que el contexto exija lo contrario, los términos singulares incluirán los plurales y los plurales los singulares. Los métodos y técnicas de la presente divulgación se realizan generalmente según métodos convencionales bien conocidos en la técnica. En general, las nomenclaturas utilizadas en relación con las técnicas de bioquímica, enzimología, biología molecular y celular, microbiología, virología, cultivo de células o tejidos, genética y química proteínica y nucleica descritas en el presente documento son las conocidas y comúnmente utilizadas en la técnica. Los métodos y técnicas de la presente divulgación se llevan a cabo generalmente de acuerdo con métodos convencionales bien conocidos en la técnica y como se describe en diversas referencias generales y más específicas que se citan y discuten a lo largo de la presente especificación a menos que se indique lo contrario.

[0081]La presente invención se ilustra además mediante los siguientes ejemplos.

[0082]Sin embargo, la cita de cualquier referencia no pretende ser una admisión de que la referencia es estado de la técnica.

Tabla 1. Visión general de tampones y soluciones madre del proceso

Tabla 2.Abreviaturas

Tabla A. Cebadores para la secuenciación del virus del Zika: las letras minúsculas indican bases no incluidas en ZIKA pero que contienen sitios de restricción para clonación posterior cuando sea necesario (por lo tanto, se proporcionan dos Tms).

(Continuación)

SECUENCIAS

[0083]

SEQ ID N°: 1

Una forma típica de protamina

PRRRRSSSRP VRRRRRPRVS RRRRRRGGRR RR

A continuación, se proporcionan ejemplos de secuencias de ácidos nucleicos de los genomas de los virus del zika que pueden usarse en los métodos, las composiciones o las vacunas descritos en la presente.

SEQ ID N°: 2

KU321639.1 CEPA DE VIRUS DEL ZIKA ZIKASPH2015, BRASIL, GENOMA COMPLETO

GTTGTTACTGTTGCTGACTCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTGG ATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACG CGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGG ATGGTCTTGGCAATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTG GGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGGA AGGAGAAGAAGAGACGGGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGG TCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTG GGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCT GGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCAT CACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGT CGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTC GCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCT GATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGG GTTGATATTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTAC AACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCT GCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGC TGGGGAAATGGATGTGGACmTTGGCAAAGGGAGTCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCG GGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCGT TAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACC CTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATG AATAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAAC TCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGG AGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCT CTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTTCA CATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTG CAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCA CTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGG GAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCA AGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCAT CCATCAAATTmGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTG ATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCC ACAGCCGTCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCT ATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCA AGCCTGGGAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAG CTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTC CACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGCACTTCGTCAGAGCAGC AAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTC TTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGAT CCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGA ATG ACACATGGAGGCT GAAGAGGGCCCAT CT GAT CGAGATG AAAACAT GT GAATGGCCAAAGT CCCACACATT GTGG AC AGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCT ACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCA CGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTG CTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGG AAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGGAGT GCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCA GTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGC GGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTT TCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCG CCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCA CTGATAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGC CTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGC CCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGGCTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGG AGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGA GATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTG AAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATG AGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATC TGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTG CTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAG ACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGA TCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTC CATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGA ACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAAC TTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGGAGT TATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGA AGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATA AAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCTTCC AGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCAC TTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGT ATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAG GAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCA GGCTTTGATTGGGTGACGGATTATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGC TTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAACATC AAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGG AGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGC CCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGAC TGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCT CTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTG GAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAG ATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGA GAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTT GCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTC CAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAAT TGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTmGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATGAGG AACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTG AGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGAT CTCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGAT GGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATGGGATTCTCAATGG ACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGT GACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGC CATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACGCCCCTGACCCTAATAGTGG CCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGA ACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCCA AGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATGGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGG TGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTC TACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGC TGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTC GGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGAC GGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAG CCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGA AGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGT CTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATC TAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCC TTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAG GACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAA AGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGA ATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGG ATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGA GGCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTG GAGTCACAGGAAT AGCCATG ACCGACACCACACCGT ATGGTCAG CAAAGAGTTTT CAAGGAAAAAGTGG ACACT AGGGT GCCAGACCCCCAAGAAGGTACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAAC GGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGA AAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAGCACCA CCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGTTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGC CAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGG ATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAG AGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTTGATCT GGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATAC CAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAAACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAA GGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCT GAGGAAGTCCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCAACGGA TGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCT CAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAACTGGGAA GAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAA GATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCAT ATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAG TTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGT GGTGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATTCCC TATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTA AAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTAC TTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTT GGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGG CACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGAT GGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGG GACTAGTGGTTAGAGGAGA

SEQ ID N°: 3

KU497555.1 Aislado del virus Zika Brazil-ZKV2015, Brasil, genoma completo

CCAATCTGTGAATCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTTGGATTTG GAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACGCGGA GTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGGATGG TCTTGGCGATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTGGGGA AAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCCAGGAAGGA GAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATCGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGGTCACT AGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTGGGGAT GAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCTGGATG AGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCATCACAA AAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGTCGCAA ACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTCGCGTT AGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGC CCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGAT GTTGTCTTGGAACATGGGGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAAC AGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAA CACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGCTGGGG AAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCGGGAAG AGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCGTTAATGA CACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACCCTGGGG GGTTTTGGAAGCTTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATGAATAAC AAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAACTCCACA CTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGGACTCAA GAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCTCTGGCC ACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTTCACATTCA CCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTGCAAGGT TCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCACTGAAA GCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGGGAGAAG AAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCAAGAGAA TGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCATCCATCAA ATTTTTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTGATGTGGT TGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCCACAGCCG TCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGTGGTACAGGGGTGTTCGTCTATAACGA CGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCTCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCAAGCCTGG GAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAGCTTAACG CAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTCCACAGAG ATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCAGCAAAGACA AATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTCTTGTGGA GGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGATCCAGCCG TTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGAATGACAC ATGGAGGCTGAAGAGGGCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGACAGATGGA ATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCTACAGGAC CCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCACGTGGAG GAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTGCTGCAGG GAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGGAAAGAAC CAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGGAGTGCTTGTG ATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCAGTGCTGG TAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGCGGAAATG AACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTTTCATCTTC AGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTG l i l i l í GCAAACTGCGATCTCCGCCTTGGAA GGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCACTGACAAC ATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGCCTTGCTAC TTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGCCCTGGGAC TAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGGAGCTGGCC CCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGAGATGGCT GGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTGAAAGAG CAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATGAGAGTG GTGACTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATCTGTGGC ATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTGCTCTATG GGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAGACTGCTA GGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGATCCGCGC TGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTCCATGGAA GCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGAACATCCA GACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAACTTCAGGA TCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATAAAAAATGGGAGTTATGTTA GTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGAAGCAGCT AACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATAAAAACAA GACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCTTCCAGTGCGT TATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCACTTCACGT CTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGCATAGCA GCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAGGAACCC GTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCAGGCTTT GATTGGGTGACGGATCATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGCTTGTCT GACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAACATCAAGAG TGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGGAGATG CCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGCCCAGA GGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTACCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGACTGACG AAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCTCTATC GACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTGGAAC TCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAGATGG TGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGAGAAA AGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTTGCCGC TGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTCCAGGA AGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAATTGCCG GAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATGAGGAACAA GGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTGAGCCA GCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGATCTCCC CAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGATGGTT GGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATAGGATTCTCAATGGACAT TGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGTGAC CACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGCCAT TCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAATAGTGGCCA TCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGAACG GCAGCT G GCAT CATG AAG AACCCT GTT GTGGAT GGAAT AGTGGTG ACTG ACATT GACACAATG ACAATT GACCCCCAAGT GGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGGTGG GGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTCTAC AGCCACTTCACTGTGTAACATTmAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGCTGG CTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTCGGC CCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGACGGT GTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAGCCC TATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGAAG TGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGTCT TAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATCTA GTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCCTT TTGCATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAGGA CTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAAAG TGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGAAT CTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGGAT CCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAAAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGTG GCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTGG AGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGACACTAGGGTG CCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAACG ACCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGAA AAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAGCACCAC CT GAGAG GAGAGTGCCAGAGTT GT GT GT ACAACATG ATGGGAAAAAG AGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGCC AAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGGA TCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAGA GATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTTGATCTG GAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATACC AAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAAACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAAG GGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCTG AGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCAACGGAT GGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCTC AGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAACTGGGAA GAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAA GATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCAT ATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAG TTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGT GGTGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATTCCC TATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTA AAAATACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTAC TTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTGAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTT GGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCTCCAGGAGAAGCTGGGTAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGGC ACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGATG GGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGGG ACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACTCCATGAGTTT CCACCACGCTGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAATAGCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCA

SEQ ID N°: 4

KU501215.1 Cepa del virus del Zika PRVABC59, Puerto Rico, genoma completo

GTTGTTGATCTGTGTGAATCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTTG GATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAAC GCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAG GATGGTCTTGGCGATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGT GGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAACAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGG AAGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAG GTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATT GGGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGC TGGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCA TCACAAAAAAGGT GAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCT GTGACGCT CCCCT CCCATTCCACCAGGAAGCT GCAAACGCGG TCGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTT CGCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCT GATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGG GTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTAC AACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCTGACAGCCGCT GCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGC TGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCG GGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCGT TAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAAGTTGAGATAACGCCCAATTCACCGAGAGCCGAAGCCACC CTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATG AATAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAAC TCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGG AGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCT CTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACTGCAGCGTTCA CATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTG CAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCA CTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGG GAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCA AGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCAT CCATCAAA I I I I I GGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTG ATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCC ACAGCCGTCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCT ATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCA AGCCTGGGAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAG CTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTC CACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTATTTCGTCAGAGCAGC AAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTC TTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGAT CCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGA ATGACACATGGAGGCTGAAGAGGGCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGAC AGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCT ACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCA CGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTG CTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGG AAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGACCACTTCTCCCTTGGAGT GCTTGTGATCCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCA GTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGC GGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTT TCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCG CCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCA CTGATAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGC CTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGC CCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGG AGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGA GATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTG AAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATG AGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATC TGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTG CTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAG ACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGA TCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTC CATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGATGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGA ACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAAC TTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAACGGGAGT TATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCCTCGATGCTGAAGAAGA AGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATA AAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAGGCCCTTAGAGGGCTTCC AGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCAC TTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGT ATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAG GAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCA GGCTTTGATTGGGTGACGGATCATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGC TT GTCT GACAAAGGCT GGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTT GAGACAGAGTT CCAGAAAACAAAACATC AAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGG AGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGC CCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGAC TGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCT CTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTG GAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAG ATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGA GAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTT GCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTC CAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAAT TGCCGGAGACCCTAGAGACCATAATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTCTTCGTCTTGATGAGG AACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTG AGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGAT CTCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGAT GGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATAGGATTCTCAATGG ACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGT GACCACCTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGCATGGGCAAAGGGATGC CATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAATAGTGG CCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGA ACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCCA AGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGG TGGGGGGAGGCTGGGGCTCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTC TACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGC TGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTC GGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGAC GGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAG CCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGTCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGA AGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGT CTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATC TAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCC TTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAG GACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAA AGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGA ATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGG ATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGA GGCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTG GAGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGACACTAGGGT GCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAAC GGCCACGAGTCTGCACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGA AAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAGCACCA CCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGCTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGC CAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGG ATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAG AGATGAGTCGTATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATTAGCAGGTTTGATCT GGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATAC CAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAAACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAA GGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCT GAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACrGGTTGCAGAGCAACGGA TGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCT CAG GTT CTTG AATG ATATGGGAAAAGTT AGGAAGGACACACAAGAGT GG AAACCCT CAACTGGATGGG ACAACT GGG AA GAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAA GATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCAT ATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAG TTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGT GGTGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATTCCC TATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTA AAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTAC TTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTT GGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGG CACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGAT GGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGG GACT AGT GGTTAGAG GA

SEQ ID N°: 5

KU509998.1 Cepa del virus del Zika Haiti/1225/2014, Haití, genoma completo

GTTGTTACTGTTGCTGACTCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTGG ATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACG CGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGG ATGGTCTTGGCAATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTG GGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGGA AGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGG TCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTG GGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCT GGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCAT CACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGT CGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTC GCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCT GATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGG GTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTAC AACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCT GCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGC TGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGTCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCG GGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCGT TAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACC CTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATG AATAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAAC TCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGG AGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCT CTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTTCA CATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTG CAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCA CTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGG GAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCA AGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCAT CCATCAAATmTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTG ATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCC ACAGCCGTCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCT ATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCA AGCCTGGGAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAG CTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTC CACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGCACTTCGTCAGAGCAGC AAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTC TTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGAT CCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGA ATGACACATGGAGGCTGAAGAGGGCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGAC AGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCT ACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCA CGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTG CTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGG AAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGGAGT GCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCA GTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGC GGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTT TCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCG CCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCA CTGATAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGC CTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGC CCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGGCTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGG AGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGA GATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTG AAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATG AGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATC TGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTG CTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAG ACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGA TCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTC CATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGA ACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAAC TTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGGAGT TATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGA AGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATA AAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCTTCC AGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCAC TTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGT ATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAG GAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCA GGCTTTGATTGGGTGACGGATTATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGC TT GTCT GACAAAGGCT GGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTT GAGACAGAGTT CCAGAAAACAAAACATC AAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGG AGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGC CCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGAC TGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCT CTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTG GAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAG ATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGA GAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTT GCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTC CAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAAT TGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCrGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATGAGG AACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTG AGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGAT CTCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGAT GGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATGGGATTCTCAATGG ACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGT GACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGC CATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACGCCCCTGACCCTAATAGTGG CCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGA ACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCCA AGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATGGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGG TGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTC TACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGC TGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTC GGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGAC GGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAG CCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGA AGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGT CTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATC TAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCC TTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAG GACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAA AGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGA ATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGG ATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGA GGCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTG GAGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGACACTAGGGT GCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAAC GGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGA AAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAGCACCA CCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGTTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGC CAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGG ATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAG AGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTTGATCT GGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATAC CAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAA GGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCT GAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCAACGGA TGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCT CAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAACTGGGAA GAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAA GATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCAT ATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAG TTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGT GGTGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATTCCC TATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTA AAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTAC TTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTT GGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGG CACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGAT GGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGG GACTAGTGGTTAGAGGAGA

SEQ ID N°: 6

KU527068.1 Cepa del virus del Zika Natal RGN, Brasil: Rio Grande do Norte, Natal, genoma completo

AGTTGTTGATCTGTGTGAATCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTT GGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAA CGCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCA GGATGGTCTTGGCAATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAG TGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAG GAAGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGA GGTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACAT TGGGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATG CTGGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCC ATCACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCG GTCGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCT TCGCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGC TGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTG GGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTA CAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGC TGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGG CTGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACC GGGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCG TTAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCAC CCTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTAT GAATAACAAGCACTGGTTGGTCCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAA CTCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGG GAGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTC CTCTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTT CACATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCT TGCAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAAT CACTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCG GGGAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTG CCAAGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGG CATCCATCAAATTTTTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATCCTCATTGGAACGTTG CTGATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTA TCCACAGCCGTCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCG TCTATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAG CAAGCCTGGGAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAGAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGG AGCTCAACGCAATCTTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGG TCCACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCA GCAAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCGAACATAGAGCATGGAACAGCT TTCTTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGT GATCCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGGAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGA AGAATGACACATGGAGGCTGAAGAGGGCCCATCTAATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTG GGCAGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATTCCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGG GCTACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCGGGCACTAAGGT CCACGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATG GTGCTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCC AGGAAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAGTGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGG AGTGCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATG GCAGTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGCGCCACCTT CGCGGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTA TCTTTCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCT CCGCCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCAC GCACTGATAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCA GGCCTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCAT GGCCCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAG CGGAGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATAT AGAGATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTAC ATTGAAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAG ATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACC ATCTGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTG GTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCG TAGACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAA GGATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTG GTCCATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGA GGAACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGG AACTTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGG AGTTATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGA AGAAGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCC ATAAAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCT TCCAGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTT CACTTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCA AGTATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGG7TGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCAC CAGGAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAG CTCAGGCTTTGATTGGGTGACGGATCATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCG CAGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAA ACATCAAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATT CCAGGAGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTTTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGC GCTGCCCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCA GAGACTGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGC CTCGCTCTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACC TTTGTGGAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGAT AGAAGATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACAC GGAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGG AGTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGA GATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGC CCAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGAT GAGGAACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGA AATTGAGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCA AAGATCTCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACT CGGATGGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGAGCAACCATAGGATTCTC AATGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACA TGCAGTGACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAG GGATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAA TAGTGGCCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAG AAGAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTG ACCCCCAAGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCAGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGC CTGGGGGTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGG AACTCCTCTACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACATAGTAACAA GAAACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAAC CAGATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCC TCAAGGATGGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGAT ACCTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAA GTTCAAGAAGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAAC ATAGTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGA GTCATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGA CCAGGAGCCTTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTA TGGGGGAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAAC ACCATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGG AGGATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGC ATTGAAAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATG GAAGCTATGAGGCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGAT GTGGTGACTGGAGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGG ACACTAGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGC AAACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATT TGAAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAG AGAGCACCACCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGTTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATT TGGAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCT TGAACGAGGATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATG TCCTAGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAG GTTCGATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCATAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGT ACACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAAACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAA GACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATAT GGAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAG CAACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCA CATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACA ACTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCC GCCACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGC AAAATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATC TGTGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGAC ATGCTT GTGGT GT GGAACAGAGT GTGGATTG AGGAGAACGACCACATGG AAGAC AAGACCCCAGTT ACGAAATGG ACA GACATTCCCTATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGA GAACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAG TTCGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGC CACAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAAC GCCATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCATGCGCTTGGAGGC GCAGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCA GAAGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACTC CATGAGTTTCCACCACGCrGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAATAGCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCATGGGTCTT

SEQ ID N°: 7

KU681081.3 Aislado del virus del Zika virus Zika/H.sapiens-tc/THA/2014/SV0127-14, Tailandia, genoma completo

AGTTGTTGATCTGTGTGAATCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTT GGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAA CGCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCA GGATGGTCTTGGCGATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAG TGGGAAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAG GAAGGAGAAGAAGAGACGAGGCACAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGA GGTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAGCGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACAC TGGGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATG CTGGATGAGGGGGTAGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCC ATCACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCCAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCG GTCGCAGACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCT TCGCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGC TGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGTAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTG GGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTA CAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCGGACATGGCTTCGGACAGCCG CTGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAG GCTGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGAC CGGGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATC GTTAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCA CCCTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTA TGAACAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACACTGGGGCAGACACCGGA ACTCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAG GGAGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGT CCTCTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGT TCACATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACC TTGCAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAA TCACTGAAGGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCG GGGAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTG CCAAGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGTTCTTAACTCATTGGGCAAGGG CATCCATCAAATTTTTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTG CTGATGTGGTTGGGTCTGAATACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTA TCCACAGCCGTCTCCGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAAACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCG TCTATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCTCGTAGATTGGCAGCAGTAGTCAAG CAAGCCTGGGAAGATGGTATCTGTGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGG AGCTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGG TCCACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCA GCAAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTT TCTTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCACTAGAGTGTG ATCCAGCCGTCATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAA GAACGACACATGGAGGCTGAGGAGGGCCCACCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGG ACAGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAACACCAGAGAGG GCTACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGT CCACGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATG GTGCTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCC AGGAAAGAACCAGAAAGTAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTTTCCCTTGG AGTGCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATG GCAGTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGATCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTT GCGGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGGTAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTAT CTTTCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTC CGCCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACG CACTGACAATATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAG GCCTTGCTACTTGCGGGGGGTTCATGCTCCTCTCTCTGAAGGGGAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATG GCCCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGC GGAGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATAT AGAGATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTAC ATTGAAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTTACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCACTAG ATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAAGTGGTCCTGATGACC ATCTGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAAACTGGAAAAAGGAGTG GTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCG TAGACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCATGTCACAAAAG GATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGG TCCATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAG GAACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGACTATCCAGCAGGA ACTTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTCTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAGAATGGGA GTTATGTCAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAA GAAGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCA TAAAAACGAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCTT CCAGTG CGTTATAT G ACAACAGCAGT CAAT GT CACCCATT CTG G G AC AG AAAT CGTT G ACTT AAT GT G CCAT G CCACCTT C ACTTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAA GTATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCAGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACC AGGAACCCGTGACGCATTCCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGC TCAGGCTTTGATTGGGTGACGGATCATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTCCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGC AGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAA CATCAAGAGTGGGACTTCGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTC CAGGAGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCG CTGCCCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAG AGACTGATGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCT CGCTCTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTT TGTGGAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATA GAAGATGGTGCTTTG ATGGCAT GACCAACAACACCAT AATGGAAG ACAGT GTGCCGGCAGAGGT GT GGACCAGACACG GAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGA GTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACGGAGAG ATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCC CAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATG CGGAACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAA TTGAGCCAGCCAGAATTGCATGCGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAA GATCCCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCG GATGGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATAGGATTCTCAA TGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTCGGCCTGGGCCATCTATGCTGCCCTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATG CAGTGACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGG ATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAATA GTGGCTATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAA GAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACTATTGAC CCCCAAGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCT GGGGGTGGGGGGAAGCTGGGGCCCTGATCACAGCTGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAA CTCCTCTACAGCCACTTCACTGTGCAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGA AACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCA GATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTC AAGGACGGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATAC CTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGT TCAAGAAGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCATGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATA GTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTC ATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCA GGAGCCTTTTGTGTAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGG GGGAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACC ATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCCAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAG GATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCAT TGAAAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGA AGCTATGAGGCCCCTACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGT GGT GACTGGAGTCACAGGAATAGCCATG ACCGACACCACACCGTATGGT CAGCAAAGAGTTTT CAAG G AAAAAGTGG AC ACCAGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCA AACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTT GAAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACCGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGA GAGCACCACCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGCTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAA7TT GGAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTT AAATGAGGATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGT CCTAGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAG GTTTGATCTGGAGAATGAAGCTTTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTAGCATTGGCCATAATCAAGT ACACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGACATTATTTCAAGACAA GACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATAT GGAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAG CAACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCA CATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACA ACTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGTTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCC GCCACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGCCCGTGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGC AAAGTCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATCTGTTCATC TGTGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGAC ATGCTT GTGGT GT GGAACAGAGT GTGGATT GAGGAGAACGACCACATGG AAGACAAGACCCCAGTT ACG AAATGG ACA GACATTCCCTATCTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTG AGAACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAA GTTCGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTATAAGCACCAATCTTAGTGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAG CCACAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAGGCTGGGAAACCAAGCCCATAGTCAGGCCGAGAA CGCCATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGG CGCAGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCC AGAAGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACT CCATGAGTTTCCACCACGCTGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAATAGCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCATGGGTCT

SEQ ID N°: 8

KU681082.3 Aislado del virus del Zika virus del Zika/H.sapiens-tc/PHL/2012/CPC-0740, Filipinas, genoma completo

AGTTGTTGATCTGTGTGAATCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTT GGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAA CGCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGCCATGGGCCCATCA GGATGGTCTTGGCGATACTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCA GTGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTA GGAAGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGCGTCGGAATTGTTGGCCTCCTCCTGACCACAGCCATGGCAGTAG AGGTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAGCGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACA CTGGGGATGAATAAGTGTTACATACAAATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTAT GTTGGATGAGGGGGTAGAACCAGATGACGTCGATTGCTGGTGCAACACGACATCAACTTGGGTTGTGTATGGAACCTGC CACCACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGC GGTCGCAGACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACCTGATTAGAGTTGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGG CTTCGCGTTAGCAGCAGCTGTCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGTTCAACGAGCCAAAAAGTCATATATCTGGTCATGATACT GCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACT TGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTTACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGT TACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCGGATATGGCTTCGGACAGCC GCTGCCCAACACAAGGTGAGGCCTACCTTGACAAGCAGTCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGA GGCTGGGGAAATGGATGTGGACmTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGA CCGGGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGAT CGTTAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCC ACCCTGGGGGGTTTTGGGAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACCTGACT ATGAATAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCATGCTGGGGCAGACACTGG AACTCCACATTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCAAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTA GGGAGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGAGCCAAGGGAAGGCTG TCCTCTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGCACTGCAGCG TTCACATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGAC CTTGCAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGATATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCTGTA ATCACTGAAAGCACCGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTC GGGGAGAAGAAGATCACCCATCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGT GCCAAGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGGGGTGCTCTCAACTCATTGGGCAAGG GCATCCATCAAATTTTTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTCGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTT GCTGGTGTGGTTGGGTCTGAATACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTACGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTT ATCCACAGCCGTTTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAAACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTC GTCTATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCTCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAA GCAAGCCTGGGAAGATGGGATCTGTGGGATCTCCTCTGTCTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGG GAGCTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAG GTCCACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGC AGCAAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGC TTTCTTGTGGAGGATCATGGGTTTGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGT GATCCAGCCGTCATTGGAACAGCTGCTAAGGGAAAGGAGGCTGTGCACAGCGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGA AGAACGACACATGGAGGCTGAAGAGGGCCCACCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTG GACAGATGGAGTAGAAGAAAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAACACCAGAGAG GGCTACAGGACTCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGG TCCACGTGGAGGAAACATGTGGGACAAGAGGACCATCCCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAAT GGTGCTGCAGGGAATGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGAGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCC CAGGAAAGAACCAGAAAGTAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCTCTTG GAGTGCTTGTGATTTTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAAT GGCAGTGCTGGTAGCCATGATCCTGGGAGGATmCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCT TCGCGGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATTTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCTGCGTTGCTGGTA TCmrCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAGAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTCTGCAAACTGCGATCT CCGCCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCAC GCACTGACAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCA GGCCTTGCTACTTGCGGGGGGTTCATGCTCCTCTCTCTGAAGGGGAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACCTACCATTTGTCAT GGCCTTGGGACTAACTGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAG CGGAGCTGGCCCCCTAGTGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCGGATA TAGAGATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTA CATTGAAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAATCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCACTA GATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTAGTGGAGGATGATGGTCCACCCATGAGAGAGATCATACTCAAAGTGGTCCTGATGAC CATCTGCGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTGTATGTGAAGACTGGAAAAAGGAGT GGTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTC GTAGACTGCTTGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTCATGCAAGAGGGGGTCTTCCACACTATGTGGCACGTCACAAA AGGATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGT GGTCCGTGGAAGCTAGACGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCG AGGAACATCCAGACTCTGCCCGGAACATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCAGTTGCGCTGGACTACCCAGCAG GAACTTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTCTATGGTAATGGGGTCGTGATAAAAAATGG GAGTTATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAG AAGAAGCAGCTAACTGTCTTAGACCTGCATCCTGGAGCCGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGC CATAAAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTCGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGC TTCCAGTTCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCATTCTGGGACAGAAATCGTTGACTTAATGTGCCATGCTACCTT CACTTCACGCCTACTACAACCAATCAGAGTCCCCAACTATAATTTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCA AGTATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCAC CAGGAACCCGTGACGCATTCCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAGGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAG CACAGGCTTTGATTGGGTGACGGATCATTCTGGGAAAACAGTCTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATC GCAGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACGA AAAATCAAGAGTGGGACTTCGTCGTGACAACCGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGAT TCCAGGAGATGCTTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTTTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAG CGCTGCTCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGC AGAGACTGATGAAGATCACGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTTCTTGACAACATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAG CTTCGCTCTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCTATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGAC CTTTGTGGAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCGGTTTGGTTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAG ATAGAAGATGGTGCTTTGATGGCATGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGATA CGGAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAA GAGTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCCTTTGGAGTGATAGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAG AGATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGG CCCAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGA TGCGGAACAAGGGCATGGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTTATGTGGCTCTCGGA AATTGAGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTCGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCA AAGATCTCCTCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTGGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACT CGGATGGTTGGAGAGAACAAAAAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCACAGGATTCTC AATGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCTATCTATGCTGCTCTGACAACTTTCATCACCCCAGCCGTCCAACA TGCGGTGACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGGGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAG GGATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATGGGTTGCTACTCACAATTAACACCTCTGACCCTAA TAGTGGCCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGGGCTGCCCAG AAGAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTG ACCCCCAAGTGGAAAAAAAGATGGGGCAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGC CTGGGGGTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCTGCAACTTCCACCTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGG AACTCCTCCACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAA GAAACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACGGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCCTGAAC CAGATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGTGCCCT CAAGGACGGTGTGGCAACAGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTTAGATGGCTGGTGGAGAGAGGATA CCTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTATGCCGCCACCATCCGCAAAG TTCAGGAAGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCATGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACAT AGTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCACATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACTTTGCTGTGTGATATAGGTGAGT CATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACC AGGAGCCTTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATG GGGGAGGACTGGTCAGGGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACAC CATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCCAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAG GATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCAT TGAGAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGA AGCTATGAGGCCCCTACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGT GGTGACTGGAGTCACAGGAATAGCCATGACTGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGAC ACTAGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTATGGAAGGAGCTAGGCAA ACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTG AAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAATGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAG AGCATCACCTGAGAGGAGAGTGTCAGAGCTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTG GAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTCCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTG AAT GAGGAT CATTGGATGGG GAG AGAGAATT CAGG AGGT GGT GTT GAAGGACTGGGATTACAAAGACT CGGAT AT GT C CTAGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGATACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGT TTGATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTAC ACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGACATTATTTCAAGACAAG ACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAATACATTCACCAACCTGGTGGTGCAGCTCATTCGGAATATG GAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGCCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAAAGC AACGGATGGGATAGGCTCAAAAGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAACCAATTGATGATAGGTTTGCAC ATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAA CTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAACTCCATCTTAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCG CCACCAAGATGAACTGATTGGCCGAGCCCGCGTATCACCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCA AAATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCT GTGCCAGTTGATTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACA TGCTTGTGGTATGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAAAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACAAAATGGACAGA CATTCCCTATTTGGGAAAAAGAGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGTACTACCTGGGCTGAGA ACATCAAAAATACAGTCAACATGATGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAGGTT CGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCCACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAGTGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCA CAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGC CATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGC AGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGA AGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACTCCA TGAGTTTCCACCACGCTGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAATAGCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCATGGGTCT

SEQ ID N°: 9

KU707826.1 Aislado del virus del Zika SSABR1, Brasil, genoma completo

GACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTGGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCAT GAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACGCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTT GGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGGATGGTCTTGGCGATTCTAGCCTTTTT GAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATA ATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGGAAGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCA GATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGGTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTA TATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTGGGGATGAATAAGTGTTATATACAGA TCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCTGGATGAGGGGGTGGAACCAGATGAC GTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCATCACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGAT CTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGTCGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAA TACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTCGCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTG GCTnTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGT GCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACCTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGG TTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAG GTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCT TGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGCTGGGGAAATGGATGTGGACTTTTT GGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCGGGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATC TGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATTGTTAATGACACAGGACATGAAACTGAT GAGAATAGAGCGAAAGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACCCTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGAC TTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATGAATAACAAGCACTGGTTGGTTCACA AGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAACTCCACACTGGAACAACAAAGAAGC ACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGGAGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACG GCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCTCTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGA AAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACTGCAGCGTTCACATTCACCAAGATCCCGGCTGAAA CACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTGCAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGT GGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCACTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGA TGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGGGAGAAGAAGATCACCCACCACTGG CACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCAAGAGAATGGCAGTCTTGGGAGAC ACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCATCCATCAAATTTTTGGAGCAGCTTT CAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTGATGTGGTTGGGTCTGAACACAAA GAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCCACAGCCGTCTCTGCTGATGTGGG GTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCTATAACGACGTTGAAGCCTGGAGG GACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCAAGCCTGGGAAGATGGTATCTGCG GGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAGCTCAACGCAATCCTGGAAGAGAA TGGAGTTCAACT GACGGT CGTT GTGGGAT CT GT AAAAAACCCCAT GTGGAGAGGT CCACAGAGATT G CCCGT GCCT GTG A ACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCAGCAAAGACAAATAACAGCTTTGTCGT GGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTCTTGTGGAGGATCATGGGTTCGGG GTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGATCCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTT AAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGAATGACACATGGAGGCTGAAGAGG GCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGACAGATGGAATAGAAGAGAGTGATC TGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCTACAGGACCCAAATGAAAGGGCCA TGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCACGTGGAGGAAACATGTGGAACAA GAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTGCTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCC ACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGGAAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTA AGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGACCACTTCTCCCTTGGAGTGCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAG GAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCAGTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAG GATTrTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGCGGAAATGAACACTGGAGGAGATGTA GCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTTTCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCC CGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCGCCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTC ATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCACTGATAACATCACCTTGGCAATCCTG GCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGCCTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCT CCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGCCCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGG TCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGGAGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCAC AGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGAGATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTC GGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTGAAAGAGCAGGTGACATCACATGGG AAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGA GGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATCTGTGGCATGAACCCAATAGCCATAC CCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAA GGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAGACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGG AGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGG GAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTCCATGGAAGCTAGATGCCGCCTGG GACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGAACATCCAGACTCTGCCCGGAATAT TTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAACTTCAGGATCTCCAATCCTAGACAA GTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGGAGTTATGTTAGTGCCATCACCCAAGGG AGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGAAGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGC ATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATAAAAACAAGACTCCGTACTGTGATC TTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAGGCCCTTAGAGGGCTTCCAGTGCGTTATATGACAACAGCAGT CAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCACTTCACGTCTACTACAGCCAATCAGA GTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGTATAGCAGCAAGAGGATACATTTCA ACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAGGAACCCGTGACGCATTTCCGGACT CCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCAGGCTTTGATTGGGTGACGGATCA TTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAAC GGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAACATCAAGAGTGGGACTTTGTCGTGAC AACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGGAGATGCCTAAAGCCGGTCATAC TTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGCCCAGAGGAGGGGGCGCATAGG CAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGACTGACGAAGACCATGCACACTGG CTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCTCTATCGACCTGAGGCCGACAAA GTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTGGAACTCATGAAAAGAGGAGAT CTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAGATGGTGCTTTGATGGCACGACC AACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGG TGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGG CTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTCGC TGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCATT ATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTCTTCGTCTTGATGAGGAACAAGGGCATAGGGAAGATGG GCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTGAGCCAGCCAGAATTGCATGTGTC CTCATTGTTGTGTTTCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGATCTCCCCAGGACAACCAAATGGCA ATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGATGGTTGGAGAGAACAAAGAGTGA CCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATAGGATTCTCAATGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTCA GCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGTGACCACTTCATACAACAACTACT CCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGGA GTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAATAGTGGCCATCATTTTGCTCGTGGCGCACT ACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGAA CCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCCAAGTGGAGAAAAAGATGGGACAG GTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGGTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGA TCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTCTACAGCCACTTCACTGTGTAACA TTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGG GGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACA AAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGACGGTGTGGCAACGGGAGGCCATG CTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCT TGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGAAGTGAAAGGATACACAAAAGG AGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTC TTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGC ACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCCTTTTGTATAAAGGTGTTGTGCC CATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTC CCGCAACTCTACACATGAGATGTATTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGC TCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGC TGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGAA ACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGAGGCCCCCACACAAGGGTCAGC GTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTGGAGTCACAGGAATAGCCATGA CCG ACACCACACCGTAT GGT CAGC AAAGAGTTTT CAAG G AAAAAGT GG ACACT AGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCAC TCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAG AAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAGT GGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGATAAGGAAAGAGAGCACCACCTGAGAGGAGAGTGCCAGAG TTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTG GTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGGATCACTGGATGGGGAGAGAG AACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAGAGATGAGTCGTATACCAGGAG GAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTTGATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCACC AACCAAATGGAAAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCC TTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAAACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCAC TTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAG ACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCAACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATGG CAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGA AAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAACTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGCTCCCACC ACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGCC CGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCT TTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGGAG AACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGTGGTGTGGAACAGAGTGTGGATT GAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATCCCCTATTTGGGAAAAAGGGAAGACT TGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGCGC AGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACACC TGGAGTGCTGTAAGCACCAGTCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGA CCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGT GAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTC CCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAG

SEQ ID N°: 10

KU744693.1 Aislado del virus del Zika VE_Ganxian, China, genoma completo

GTTGTTACTGTTGCTGACTCAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTGG ATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACG CGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGG ATGGTCTTGGCAATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTG GGGAAAAAAGATGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGGA AGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGG TCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGATGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTG GGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCT GGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCAT CACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCTTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGT CGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTC GCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCT GATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGG GTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGCAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTAC AACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCT GCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTTTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGC TGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGTCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCG GGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGCTCGTT AATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACCC TGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACnTTCAGATTTGTATTACTTGACTATGA ATAACAAGCACTGGTTGGCTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGCCACCGGAACT CCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGGCAAACTGTCGTGGTTCTAGGGA GTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCTC TGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTTCAC ATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACAGTGGACGGGACAGTCACAGTGGAGGGACAGTACGGAGGGACAGATGGACCTTG CAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAGACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCA CTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGG GAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCA AGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCAT CCATCAAATTATTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGGACGTTGCTG ATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCC ACAGCCGTCTCAGGTGGTGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCT ATAACGATGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCA AGCCTGGGAAGATGGTATCTGCGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAG CTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTC CACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCAGC AAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTC TTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGACTATTGGTTAGAGTGTGAT CCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGA ATGACACATGGTGGCTGAAGAGGGCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGAC AGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATGCCAGAGAGGGCT ACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCA CGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTG CTCCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCCTTCCAGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGG AAAGAACCAGAAAGCAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGGAGT GCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCAATGGCA GTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGC GGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTT TCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCG CCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCA CTGATAACATCACCTTAGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGC CTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGC CCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGG AGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGA GATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTG AAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATG AGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATC TGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTG CTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGCAG ACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGA TCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTC CATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGA ACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCACTGGATTACCCAGCAGGAAC TTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGGAGT TATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGA AGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATA AAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTGGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAGGCCCTTAGAGGGCTTCC AGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCAC TTCACGTCTACTACAGCCAATTAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGT ATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAG GAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCA GGCTTTGATTGGGTGACGGAGTATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCACGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAG CTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAACAT CAAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAG GAGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGGTGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTG CCCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGA CTGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGC TCTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGT GGAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAA GATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAG AGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTT TGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATT CCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAA TTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATGAGG AACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTG AGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGAT CTCCCCAGGACAACCAAATGGCCATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGAT GGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATGGGATTCTCAATGG ACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATCCTGCCTTGACATCTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGT GACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGC CATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACGCCCCTGACCCTAATAGTGG CCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGA ACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGAGGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCC AAGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATGGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGAGGACCGCCTGGGG GTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCCGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCC TCTACAGCCACCTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAAC GCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGAT GTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAG GACGGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTG CAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCA AGAAGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCGTGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGT CCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCAT CATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGG AGCCTTTT GT AT AAAAGTGTT GTGCCCAT ACACCAGCACT AT GATGG AAACCCTGGAGCGACTGCAGCGT AGGTATGGGG GAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATA AAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCTAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGAT GTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGA AAGGATCCGCGCTGAGAAAGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGC TATGATGCCGCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGT GACTGGAGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGACACT AGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAAC ACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAA GAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAG CACCACCTGAGAGGAGAGTGCCAGAGTTGTGTGTACATCACAATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGA AAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAA CGAGGATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCT AGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTT GATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACA CATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGA CCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTCAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGG AGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCA ACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATGGCGGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAACCAATTGATGATAGGTTTGCACA TGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAAC TGGGAAGAAGTTCCCTTCTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGC CACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAA AATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTG TGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACAT GCTTGTGGCGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTCACGAAATGGACAGA CATTCCCTATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGA ACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTT CGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAATGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCA CAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGC CATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGC AGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGA AGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGA

SEQ ID N°: 11

LC002520.1 ARN genómico del virus Zika, cepa: MR766-NIID, Uganda, genoma completo

AGTTGTTGATCTGTGTGAGTCAGACTGCGACAGTTCGAGTCTGAAGCGAGAGCTAACAACAGTATCAACAGGTTTAATTT GGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAGAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAA ACGCGGAGTAGCCCGTGTAAACCCCTTGGGAGGTTTGAAGAGGTTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGACCCATCA GAATGGTTTTGGCGATACTAGCCTTTTTGAGATTTACAGCAATCAAGCCATCACTGGGCCTTATCAACAGATGGGGTTCCG TGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTTGCTGCCATGTTGAGAATAATCAATGCTAG GAAAGAGAGGAAGAGACGTGGCGCAGACACCAGCATCGGAATCATTGGCCTCCTGCTGACTACAGCCATGGCAGCAGA GATCACTAGACGCGGGAGTGCATACTACATGTACTTGGATAGGAGCGATGCCGGGAAGGCCATTTCGTTTGCTACCACAT TGGGAGTGAACAAGTGCCACGTACAGATCATGGACCTCGGGCACATGTGTGACGCCACCATGAGTTATGAGTGCCCTATG CTGGATGAGGGAGTGGAACCAGATGATGTCGATTGCTGGTGCAACACGACATCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGTC ATCACAAAAAAGGTGAGGCACGGCGATCTAGAAGAGCCGTGACGCTCCCTTCTCACTCTACAAGGAAGTTGCAAACGCG GTCGCAGACCTGGTTAGAATCAAGAGAATACACGAAGCACTTGATCAAGGTTGAAAACTGGATATTCAGGAACCCCGGG TTTGCGCTAGTGGCCGTTGCCATTGCCTGGCTTTTGGGAAGCTCGACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTG CTGATTGCCCCGGCATACAGTATCAGGTGCATTGGAGTCAGCAATAGAGACTTCGTGGAGGGCATGTCAGGTGGGACCT GGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGCTGCGTTACCGTGATGGCACAGGACAAGCCAACAGTTGACATAGAGTTGGT CACGACGACGGTTAGTAACATGGCCGAGGTAAGATCCTATTGCTACGAGGCATCGATATCGGACATGGCTTCGGACAGTC GTTGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACATTAGTGGACAGA GGTTGGGGAAACGGTTGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCTTGGTGACATGTGCCAAGTTTACGTGTTCTAAGAAGATGA CCGGGAAGAGCATTCAACCGGAAAATCTGGAGTATCGGATAATGCTATCAGTGCATGGCTCCCAGCATAGCGGGATGAC TGTCAATGATATAGGATATGAAACTGACGAAAATAGAGCGAAAGTCGAGGTTACGCCTAATTCACCAAGAGCGGAAGCA ACCTTGGGAGGCTTTGGAAGCTTAGGACTTGACTGTGAACCAAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATCTGTATTACCTGACC ATGAACAATAAGCATTGGTTGGTGCACAAAGAGTGGTTTCATGACATCCCATTGCCTTGGCATGCTGGGGCAGACACTGG AACTCCACACTGGAACAACAAAGAGGCATTGGTAGAATTCAAGGATGCCCACGCCAAGAGGCAAACCGTCGTCGTTCTG GGGAGCCAGGAAGGAGCCGTTCACACGGCTCTCGCTGGAGCTCTAGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAAGCTG TTCTCTGGCCATTTGAAATGCCGCCTAAAAATGGACAAGCTTAGATTGAAGGGCGTGTCATATTCCTTGTGCACTGCGGCA TTCACATTCACCAAGGTCCCAGCTGAAACACTGCATGGAACAGTCACAGTGGAGGTGCAGTATGCAGGGACAGATGGAC CCTGCAAGATCCCAGTCCAGATGGCGGTGGACATGCAGACCCTGACCCCAGTTGGAAGGCTGATAACCGCCAACCCCGTG ATTACTGAAAGCACTGAGAACTCAAAGATGATGTTGGAGCTTGACCCACCATTTGGGGATTCTTACATTGTCATAGGAGTT GGGGACAAGAAAATCACCCACCACTGGCATAGGAGTGGTAGCACCATCGGAAAGGCATTTGAGGCCACTGTGAGAGGC GCCAAGAGAATGGCAGTCCTGGGGGATACAGCCTGGGACTTCGGATCAGTCGGGGGTGTGTTCAACTCACTGGGTAAGG GCATTCACCAGATTTTTGGAGCAGCCTTCAAATCACTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAGATCCTCATAGGCACGC TGCTAGTGTGGTTAGGTTTGAACACAAAGAATGGATCTATCTCCCTCACATGCTTGGCCCTGGGGGGAGTGATGATCTTCC TCTCCACGGCTGTTTCTGCTGACGTGGGGTGCTCAGTGGACTTCTCAAAAAAGGAAACGAGATGTGGCACGGGGGTATTC ATCTATAATGATGTTGAAGCCTGGAGGGACCGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGCAGATTGGCAGCAGCAGTCAA GCAGGCCTGGGAAGAGGGGATCTGTGGGATCTCATCCGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAAATCAGTAGAAGGG GAGCTCAATGCTATCCTAGAGGAGAATGGAGTTCAACTGACAGTTGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAG GTCCACAAAGATTGCCAGTGCCTGTGAATGAGCTGCCCCATGGCTGGAAAGCCTGGGGGAAATCGTATTTTGTTAGGGCG GCAAAGACCAACAACAGTTTTGTTGTCGACGGTGACACACTGAAGGAATGTCCGCTTGAGCACAGAGCATGGAATAGTTT TCTTGTGGAGGATCACGGGTTTGGAGTCTTCCACACCAGTGTCTGGCTTAAGGTCAGAGAAGATTACTCATTAGAATGTG ACCCAGCCGTCATAGGAACAGCTGTTAAGGGAAGGGAGGCCGCGCACAGTGATCTGGGCTATTGGATTGAAAGTGAAAA GAATGACACATGGAGGCTGAAGAGGGCCCACCTGATTGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCTCACACATTGTGG ACAGATGGAGTAGAAGAAAGTGATCTTATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGTCCACTCAGCCACCACAACACCAGAGAGGG TTACAGAACCCAAGTGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATCCGGTTTGAGGAATGTCCAGGCACCAAGGTT TACGTGGAGGAGACATGCGGAACTAGAGGACCATCTCTGAGATCAACTACTGCAAGTGGAAGGGTCATTGAGGAATGGT GCTGTAGGGAATGCACAATGCCCCCACTATCGTTTCGAGCAAAAGACGGCTGCTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAG GAAAGAACCAGAGAGCAACTTAGTGAGGTCAATGGTGACAGCGGGGTCAACCGATCATATGGACCACTTCTCTCTTGGA GTGCTTGTGATTCTACTCATGGTGCAGGAGGGGTTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATGAGCACATCAATGG CAGTGCTGGTAGTCATGATCTTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCCAAGCTTGTGATCCTGATGGGTGCTACTTTCG CAGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCACTTGGCATTGGTAGCGGCATTTAAAGTCAGACCAGCCTTGCTGGTCTCC TTCATTTTCAGAGCCAATTGGACACCCCGTGAGAGCATGCTGCTAGCCCTGGCTTCGTGTCTTCTGCAAACTGCGATCTCT GCTCTTGAAGGTGACTTGATGGTCCTCATTAATGGATTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATTCGAGCAATGGCCGTGCCACGC ACTGACAACATCGCTCTACCAATCTTGGCTGCTCTAACACCACTAGCTCGAGGCACACTGCTCGTGGCATGGAGAGCGGG CCTGGCTACTTGTGGAGGGATCATGCTCCTCTCCCTGAAAGGGAAAGGTAGTGTGAAGAAGAACCTGCCATTTGTCATGG CCCTGGGATTGACAGCTGTGAGGGTAGTAGACCCTATTAATGTGGTAGGACTACTGTTACTCACAAGGAGTGGGAAGCG GAGCTGGCCCCCTAGTGAAGTTCTCACAGCCGTTGGCCTGATATGTGCACTGGCCGGAGGGTTTGCCAAGGCAGACATTG AGATGGCTGGACCCATGGCTGCAGTAGGCTTGCTAATTGTCAGCTATGTGGTCTCGGGAAAGAGTGTGGACATGTACATT GAAAGAG CAGGT GACAT CACAT GGG AAAAGG ACGCGG AAGT CACT GG AAACAGT CCTCGGCTT GACGTGGCACTGG AT GAGAGTGGTGATTTCTCCTTGGTAGAGGAAGATGGTCCACCCATGAGAGAGATCATACTTAAGGTGGTCCTGATGGCCAT CTGTGGCATGAACCCAATAGCTATACCTTTTGCTGCAGGAGCGTGGTATGTGTATGTGAAGACTGGGAAAAGGAGTGGC GCCCTCTGGGACGTGCCTGCTCCCAAAGAAGTGAAGAAAGGAGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTGATGACTCGCA GACTGCTAGGTTCAACACAGGTTGGAGTGGGAGTCATGCAAGAGGGAGTCTTCCACACCATGTGGCACGTTACAAAAGG AGCCGCACTGAGGAGCGGTGAGGGAAGACTTGATCCATACTGGGGGGATGTCAAGCAGGACTTGGTGTCATACTGTGG GCCTTGGAAGTTGGATGCAGCTTGGGATGGACTCAGCGAGGTACAGCTTTTGGCCGTACCTCCCGGAGAGAGGGCCAGA AACATTCAGACCCTGCCTGGAATATTCAAGACAAAGGACGGGGACATCGGAGCAGTTGCTCTGGACTACCCTGCAGGGA CCTCAGGATCTCCGATCCTAGACAAATGTGGAAGAGTGATAGGACTCTATGGCAATGGGGTTGTGATCAAGAATGGAAG CTATGTTAGTGCTATAACCCAGGGAAAGAGGGAGGAGGAGACTCCGGTTGAATGTTTCGAACCCTCGATGCTGAAGAAG AAGCAGCTAACTGTCTTGGATCTGCATCCAGGAGCCGGAAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCAT AAAAAAGAGACTCCGGACAGTGATCTTGGCACCAACTAGGGTTGTCGCTGCTGAGATGGAGGAGGCCTTGAGAGGACTT CCGGTGCGTTACATGACAACAGCAGTCAACGTCACCCATTCTGGGACAGAAATCGTTGATTTGATGTGCCATGCCACTTTC ACTTCACGCTTACTACAACCCATCAGAGTCCCTAATTACAATCTCTACATCATGGATGAAGCCCACTTCACAGACCCCTCAA GTATAGCTGCAAGAGGATATATATCAACAAGGGTTGAAATGGGCGAGGCGGCTGCCATTTTTATGACTGCCACACCACCA GGAACCCGTGATGCGTTTCCTGACTCTAACTCACCAATCATGGACACAGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTC AGGCTTTGATTGGGTGACAGACCATTCTGGGAAAACAGTTTGGTTCGTTCCAAGCGTGAGAAACGGAAATGAAATCGCA GCCTGTCTGACAAAGGCTGGAAAGCGGGTCATACAGCTCAGCAGGAAGACTTTTGAGACAGAATTTCAGAAAACAAAAA ATCAAGAGTGGGACTTTGTCATAACAACTGACATCTCAGAGATGGGCGCCAACTTCAAGGCTGACCGGGTCATAGACTCT AGGAGATGCCTAAAACCAGTCATACTTGATGGTGAGAGAGTCATCTTGGCTGGGCCCATGCCTGTCACGCATGCTAGTGC TGCTCAGAGGAGAGGACGTATAGGCAGGAACCCTAACAAACCTGGAGATGAGTACATGTATGGAGGTGGGTGTGCAGA GACTGATGAAGGCCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTTCTTGACAACATCTACCTCCAGGATGGCCTCATAGCCTC GCTCTATCGGCCTGAGGCCGATAAGGTAGCCGCCATTGAGGGAGAGTTTAAGCTGAGGACAGAGCAAAGGAAGACCTTC GTGGAACTCATGAAGAGAGGAGACCTTCCCGTCTGGCTAGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACTTACACAGACAG AAGATGGTGCTTTGATGGCACAACCAACAACACCATAATGGAAGACAGCGTACCAGCAGAGGTGTGGACAAAGTATGGA GAGAAGAGAGTGCTCAAACCGAGATGGATGGATGCTAGGGTCTGTTCAGACCATGCGGCCCTGAAGTCGTTCAAAGAAT TCGCCGCTGGAAAAAGAGGAGCGGCTTTGGGAGTAATGGAGGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGGT TTCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCCGTGCTCATGCGAGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTATAAGGCAGCGGCAGCCCA ACTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTCTTAGGTTTGCTGGGAACAGTTTCACTGGGGATCTTCTTCGTCTTGATGCG GAATAAGGGCATCGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTAACCCTTGGGGCCAGTGCATGGCTCATGTGGCTTTCGGAAATT GAACCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTTTTATTACTGGTGGTGCTCATACCCGAGCCAGAGAAGCAAAGA TCTCCCCAAGATAACCAGATGGCAATTATCATCATGGTGGCAGTGGGCCTTCTAGGTTTGATAACTGCAAACGAACTTGGA TGGCTGGAAAGAACAAAAAATGACATAGCTCATCTAATGGGAAGGAGAGAAGAAGGAGCAACCATGGGATTCTCAATG GACATTGATCTGCGGCCAGCCTCCGCCTGGGCTATCTATGCCGCATTGACAACTCTCATCACCCCAGCTGTCCAACATGCG GTAACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACACAAGCTGGAGTGCTGTTTGGCATGGGCAAAGGGAT GCCATTTTATGCATGGGACCTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATGGGTTGCTATTCACAATTAACACCCCTGACTCTGATAGT AGCTATCATTCTGCTTGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGCCTACAAGCGGCAGCAGCGCGTGCTGCCCAGAAAA GGACAGCAGCTGGCATCATGAAGAATCCCGTTGTGGATGGAATAGTGGTAACTGACATTGACACAATGACAATAGACCC CCAGGTGGAGAAGAAGATGGGACAAGTGTTACTCATAGCAGTAGCCATCTCCAGTGCTGTGCTGCTGCGGACCGCCTGG GGATGGGGGGAGGCTGGAGCTCTGATCACAGCAGCGACCTCCACCTTGTGGGAAGGCTCTCCAAACAAATACTGGAACT CCTCTACAGCCACCTCACTGTGCAACATCTTCAGAGGAAGCTATCTGGCAGGAGCTTCCCTTATCTATACAGTGACGAGAA ACGCTGGCCTGGTTAAGAGACGTGGAGGTGGGACGGGAGAGACTCTGGGAGAGAAGTGGAAAGCTCGTCTGAATCAGA TGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCTTATAAAAAGTCAGGTATCACTGAAGTGTGTAGAGAGGAGGCTCGCCGTGCCCTCAAG GATGGAGTGGCCACAGGAGGACATGCCGTATCCCGGGGAAGTGCAAAGCTCAGATGGTTGGTGGAGAGAGGATATCTG CAGCCCTATGGGAAGGTTGTTGACCTCGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGCTATTATGCCGCCACCATCCGCAAAGTGC AGGAGGTGAGAGGATACACAAAGGGAGGTCCCGGTCATGAAGAACCCATGCTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAG TTCGTCTCAAGAGTGGAGTGGACGTCTTCCACATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACTCTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCA TCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAGACACGAACACTCAGAGTGCTCTCTATGGTGGGGGACTGGCTTGAAAAAAGACCAG GGGCCTTCTGTATAAAGGTGCTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCATGGAGCGACTGCAACGTAGGCATGG GGGAGGATTAGTCAGAGTGCCATTGTCTCGCAACTCCACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGGGCAAAGAGCAACATCA TAAAAAGTGTGTCCACCACAAGTCAGCTCCTCCTGGGACGCATGGATGGCCCCAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGA TGTGAACCTCGGCTCGGGTACACGAGCTGTGGCAAGCTGTGCTGAGGCTCCTAACATGAAAATCATCGGCAGGCGCATTG AGAGAATCCGCAATGAACATGCAGAAACATGGTTTCTTGATGAAAACCACCCATACAGGACATGGGCCTACCATGGGAGC TACGAAGCCCCCACGCAAGGATCAGCGTCTTCCCTCGTGAACGGGGTTGTTAGACTCCTGTCAAAGCCTTGGGACGTGGT GACTGGAGTTACAGGAATAGCCATGACTGACACCACACCATACGGCCAACAAAGAGTCTTCAAAGAAAAAGTGGACACC AGGGTGCCAGATCCCCAAGAAGGCACTCGCCAGGTAATGAACATAGTCTCTTCCTGGCTGTGGAAGGAGCTGGGGAAAC GCAAGCGGCCACGCGTCTGCACCAAAGAAGAGTTTATCAACAAGGTGCGCAGCAATGCAGCACTGGGAGCAATATTTGA AGAGGAAAAAGAATGGAAGACGGCTGTGGAAGCTGTGAATGATCCAAGGTTTTGGGCCCTAGTGGATAGGGAGAGAGA ACACCACCTGAGAGGAGAGTGTCACAGCTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAGCAAGGAGAGTTCGG GAAAGCAAAAGGTAGCCGCGCCATCTGGTACATGTGGTTGGGAGCCAGATTCTTGGAGTTTGAAGCCCTTGGATTCTTGA ACGAGGACCATTGGATGGGAAGAGAAAACTCAGGAGGTGGAGTCGAAGGGTTAGGATTGCAAAGACTTGGATACATTC TAGAAGAAATGAATCGGGCACCAGGAGGAAAGATGTACGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATTAGTAAGTT TGATCTGGAGAATGAAGCTCTGATTACCAACCAAATGGAGGAAGGGCACAGAACTCTGGCGTTGGCCGTGATTAAATAC ACATACCAAAACAAAGTGGTGAAGGTTCTCAGACCAGCTGAAGGAGGAAAAACAGTTATGGACATCATTTCAAGACAAG ACCAGAGAGGGAGTGGACAAGTTGTCACTTATGCTCTCAACACATTCACCAACTTGGTGGTGCAGCTTATCCGGAACATG GAAGCTGAGGAAGTGTTAGAGATGCAAGACTTATGGTTGTTGAGGAAGCCAGAGAAAGTGACCAGATGGTTGCAGAGC AATGGATGGGATAGACTCAAACGAATGGCGGTCAGTGGAGATGACTGCGTTGTGAAGCCAATCGATGATAGGTTTGCAC ATGCCCTCAGGTTCTTGAATGACATGGGAAAAGTTAGGAAAGACACACAGGAGTGGAAACCCTCGACTGGATGGAGCAA TTGGGAAGAAGTCCCGTTCTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTGTACCTCAAGGATGGGAGATCCATTGTGGTCCCTTGCCG CCACCAAGATGAACTGATTGGCCGAGCTCGCGTCTCACCAGGGGCAGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCCTGTCTTGCA AAATCATATGCGCAGATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGAGACCTTCGACTGATGGCTAATGCCATTTGCTCGGCT GTGCCAGTTGACTGGGTACCAACTGGGAGAACCACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAGGACA TGCTCATGGTGTGGAATAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCATATGGAGGACAAGACTCCTGTAACAAAATGGACAGA CATTCCCTATCTAGGAAAAAGGGAGGACTTATGGTGTGGATCCCTTATAGGGCACAGACCCCGCACCACTTGGGCTGAAA ACATCAAAGACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTATCTATCCACCCAAGTC CGCTACTTGGGTGAGGAAGGGTCCACACCCGGAGTGTTGTAAGCACCAATTTTAGTGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCA CAGTTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTAACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCTCATAGTCAGGCCGAGAACGC CATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAAGCGC AGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGACTAGCTGTGAATCTCCAGC AGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACTCCA TGAGTTTCCACCACGCTGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAACAGCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCATGGTTTCT

SEQ ID N°: 12

AY632535.2 NC_012532.1 Cepa del virus del Zika MR 766. Uganda, genoma completo

AGTTGTTGATCTGTGTGAGTCAGACTGCGACAGTTCGAGTCTGAAGCGAGAGCTAACAACAGTATCAACAGGTTTAATTT GGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCCAAAGAAGAAATCCGGAGGATCCGGATTGTCAATATGCTAAA ACGCGGAGTAGCCCGTGTAAACCCCTTGGGAGGTTTGAAGAGGTTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGACCCATCA GAATGGTTTTGGCGATACTAGCCTTTTTGAGATTTACAGCAATCAAGCCATCACTGGGCCTTATCAACAGATGGGGTTCCG TGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTTGCTGCCATGTTGAGAATAATCAATGCTAG GAAAGAGAGGAAGAGACGTGGCGCAGACACCAGCATCGGAATCATTGGCCTCCTGCTGACTACAGCCATGGCAGCAGA GATCACTAGACGCGGGAGTGCATACTACATGTACTTGGATAGGAGCGATGCCGGGAAGGCCATTTCGTTTGCTACCACAT TGGGAGTGAACAAGTGCCACGTACAGATCATGGACCTCGGGCACATGTGTGACGCCACCATGAGTTATGAGTGCCCTATG CTGGATGAGGGAGTGGAACCAGATGATGTCGATTGCTGGTGCAACACGACATCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGTC ATCACAAAAAAGGTGAGGCACGGCGATCTAGAAGAGCCGTGACGCTCCCTTCTCACTCTACAAGGAAGTTGCAAACGCG GTCGCAGACCTGGTTAGAATCAAGAGAATACACGAAGCACTTGATCAAGGTTGAAAACTGGATATTCAGGAACCCCGGG TTTGCGCTAGTGGCCGTTGCCATTGCCTGGCTTTTGGGAAGCTCGACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTG CTGATTGCCCCGGCATACAGTATCAGGTGCATTGGAGTCAGCAATAGAGACTTCGTGGAGGGCATGTCAGGTGGGACCT GGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGCTGCGTTACCGTGATGGCACAGGACAAGCCAACAGTCGACATAGAGTTGGT CACGACGACGGTTAGTAACATGGCCGAGGTAAGATCCTATTGCTACGAGGCATCGATATCGGACATGGCTTCGGACAGTC GTTGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACATTAGTGGACAGA GGTTGGGGAAACGGTTGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCTTGGTGACATGTGCCAAGTTTACGTGTTCTAAGAAGATGA CCGGGAAGAGCATTCAACCGGAAAATCTGGAGTATCGGATAATGCTATCAGTGCATGGCTCCCAGCATAGCGGGATGAT TGGATATGAAACTGACGAAGATAGAGCGAAAGTCGAGGTTACGCCTAATTCACCAAGAGCGGAAGCAACCTTGGGAGGC TTTGGAAGCTTAGGACTTGACTGTGAACCAAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATCTGTATTACCTGACCATGAACAATAAG CATTGGTTGGTGCACAAAGAGTGGTTTCATGACATCCCATTGCCTTGGCATGCTGGGGCAGACACCGGAACTCCACACTG GAACAACAAAGAGGCATTGGTAGAATTCAAGGATGCCCACGCCAAGAGGCAAACCGTCGTCGTTCTGGGGAGCCAGGAA GGAGCCGTTCACACGGCTCTCGCTGGAGCTCTAGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTTCTCTGGCCATT TGAAATGCCGCCTAAAAATGGACAAGCTTAGATTGAAGGGCGTGTCATATTCCTTGTGCACTGCGGCATTCACATTCACCA AGGTCCCAGCTGAAACACTGCATGGAACAGTCACAGTGGAGGTGCAGTATGCAGGGACAGATGGACCCTGCAAGATCCC AGTCCAGATGGCGGTGGACATGCAGACCCTGACCCCAGTTGGAAGGCTGATAACCGCCAACCCCGTGATTACTGAAAGC ACTGAGAACTCAAAGATGATGTTGGAGCTTGACCCACCATTTGGGGATTCTTACATTGTCATAGGAGTTGGGGACAAGAA AATCACCCACCACTGGCATAGGAGTGGTAGCACCATCGGAAAGGCATTTGAGGCCACTGTGAGAGGCGCCAAGAGAATG GCAGTCCTGGGGGATACAGCCTGGGACTTCGGATCAGTCGGGGGTGTGTTCAACTCACTGGGTAAGGGCATTCACCAGA TTTTTGGAGCAGCCTTCAAATCACTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAGATCCTCATAGGCACGCTGCTAGTGTGGT TAGGTTTGAACACAAAGAATGGATCTATCTCCCTCACATGCTTGGCCCTGGGGGGAGTGATGATCTTCCTCTCCACGGCTG TTTCTGCTGACGTGGGGTGCTCAGTGGACTTCTCAAAAAAGGAAACGAGATGTGGCACGGGGGTATTCATCTATAATGAT GTTGAAGCCTGGAGGGACCGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGCAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCAGGCCTGGG AAGAGGGGATCTGTGGGATCTCATCCGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAAATCAGTAGAAGGGGAGCTCAATGC TATCCTAGAGGAGAATGGAGTTCAACTGACAGTTGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTCCACAAAGAT TGCCAGTGCCTGTGAATGAGCTGCCCCATGGCTGGAAAGCCTGGGGGAAATCGTATTTTGTTAGGGCGGCAAAGACCAA CAACAGTTTTGTTGTCGACGGTGACACACTGAAGGAATGTCCGCTTGAGCACAGAGCATGGAATAGTTTTCTTGTGGAGG ATCACGGGTTTGGAGTCTTCCACACCAGTGTCTGGCTTAAGGTCAGAGAAGATTACTCATTAGAATGTGACCCAGCCGTCA TAGGAACAGCTGTTAAGGGAAGGGAGGCCGCGCACAGTGATCTGGGCTATTGGATTGAAAGTGAAAAGAATGACACAT GGAGGCTGAAGAGGGCCCACCTGATTGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCTCACACATTGTGGACAGATGGAGT AGAAGAAAGTGATCTTATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGTCCACTCAGCCACCACAACACCAGAGAGGGTTACAGAACCC AAGTGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATCCGGTTTGAGGAATGTCCAGGCACCAAGGTTTACGTGGAGG AGACATGCGGAACTAGAGGACCATCTCTGAGATCAACTACTGCAAGTGGAAGGGTCATTGAGGAATGGTGCTGTAGGGA ATGCACAATGCCCCCACTATCGTTTCGAGCAAAAGACGGCTGCTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGGAAAGAACCA GAGAGCAACTTAGTGAGGTCAATGGTGACAGCGGGGTCAACCGATCATATGGACCACTTCTCTCTTGGAGTGCTTGTGAT TCTACTCATGGTGCAGGAGGGGTTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATGAGCACATCAATGGCAGTGCTGGTA GTCATGATCTTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCCAAGCTTGTGATCCTGATGGGTGCTACTTTCGCAGAAATGAA CACTGGAGGAGATGTAGCTCACTTGGCATTGGTAGCGGCATTTAAAGTCAGACCAGCCTTGCTGGTCTCCTTCATTTTCAG AGCCAATTGGACACCCCGTGAGAGCATGCTGCTAGCCCTGGCTTCGTGTCTTCTGCAAACTGCGATCTCTGCTCTTGAAGG TGACTTGATGGTCCTCATTAATGGATTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATTCGAGCAATGGCCGTGCCACGCACTGACAACAT CGCTCTACCAATCTTGGCTGCTCTAACACCACTAGCTCGAGGCACACTGCTCGTGGCATGGAGAGCGGGCCTGGCTACTT GTGGAGGGATCATGCTCCTCTCCCTGAAAGGGAAAGGTAGTGTGAAGAAGAACCTGCCATTTGTCATGGCCCTGGGATT GACAGCTGTGAGGGTAGTAGACCCTATTAATGTGGTAGGACTACTGTTACTCACAAGGAGTGGGAAGCGGAGCTGGCCC CCTAGTGAAGTTCTCACAGCCGTTGGCCTGATATGTGCACTGGCCGGAGGGTTTGCCAAGGCAGACATTGAGATGGCTG GACCCATGGCTGCAGTAGGCTTGCTAATTGTCAGCTATGTGGTCTCGGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTGAAAGAGCA GGTGACATCACATGGGAAAAGGACGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCTCGGCTTGACGTGGCACTGGATGAGAGTGGT GACTTCTCCTTGGTAGAGGAAGATGGTCCACCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGGCCATCTGTGGCAT GAACCCAATAGCTATACCTTTTGCTGCAGGAGCGTGGTATGTGTATGTGAAGACTGGGAAAAGGAGTGGCGCCCTCTGG GACGTGCCTGCTCCCAAAGAAGTGAAGAAAGGAGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTGATGACTCGCAGACTGCTA GGTTCAACACAGGTTGGAGTGGGAGTCATGCAAGAGGGAGTCTTCCACACCATGTGGCACGTTACAAAAGGAGCCGCAC TGAGGAGCGGTGAGGGAAGACTTGATCCATACTGGGGGGATGTCAAGCAGGACTTGGTGTCATACTGTGGGCCTTGGAA GTTGGATGCAGCTTGGGATGGACTCAGCGAGGTACAGCTTTTGGCCGTACCTCCCGGAGAGAGGGCCAGAAACATTCAG ACCCTGCCTGGAATATTCAAGACAAAGGACGGGGACATCGGAGCAGTTGCTCTGGACTACCCTGCAGGGACCTCAGGAT CTCCGATCCTAGACAAATGTGGAAGAGTGATAGGACTCTATGGCAATGGGGTTGTGATCAAGAATGGAAGCTATGTTAGT GCTATAACCCAGGGAAAGAGGGAGGAGGAGACTCCGGTTGAATGTTTCGAACCCTCGATGCTGAAGAAGAAGCAGCTA ACTGTCTTGGATCTGCATCCAGGAGCCGGAAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATAAAAAAGAG ACTCCGGACAGTGATCTTGGCACCAACTAGGGTTGTCGCTGCTGAGATGGAGGAGGCCTTGAGAGGACTTCCGGTGCGT TACATGACAACAGCAGTCAACGTCACCCATTCTGGGACAGAAATCGTTGATTTGATGTGCCATGCCACTTTCACTTCACGC TTACTACAACCCATCAGAGTCCCTAATTACAATCTCAACATCATGGATGAAGCCCACTTCACAGACCCCTCAAGTATAGCTG CAAGAGGATACATATCAACAAGGGTTGAAATGGGCGAGGCGGCTGCCATTTTTATGACTGCCACACCACCAGGAACCCGT GATGCGTTTCCTGACTCTAACTCACCAATCATGGACACAGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCAGGCTTTGA TTGGGTGACAGACCATTCTGGGAAAACAGTTTGGTTCGTTCCAAGCGTGAGAAACGGAAATGAAATCGCAGCCTGTCTGA CAAAGGCTGGAAAGCGGGTCATACAGCTCAGCAGGAAGACTTTTGAGACAGAATTTCAGAAAACAAAAAATCAAGAGTG GGACTTTGTCATAACAACTGACATCTCAGAGATGGGCGCCAACTTCAAGGCTGACCGGGTCATAGACTCTAGGAGATGCC TAAAACCAGTCATACTTGATGGTGAGAGAGTCATCTTGGCTGGGCCCATGCCTGTCACGCATGCTAGTGCTGCTCAGAGG AGAGGACGTATAGGCAGGAACCCTAACAAACCTGGAGATGAGTACATGTATGGAGGTGGGTGTGCAGAGACTGATGAA GGCCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTTCTTGACAACATCTACCTCCAGGATGGCCTCATAGCCTCGCTCTATCGG CCTGAGGCCGATAAGGTAGCCGCCATTGAGGGAGAGTTTAAGCTGAGGACAGAGCAAAGGAAGACCTTCGTGGAACTC ATGAAGAGAGGAGACCTTCCCGTCTGGCTAGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACTTACACAGACAGAAGATGGTG CTTTGATGGCACAACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTACCAGCAGAGGTTTGGACAAAGTATGGAGAGAAGAGA GTGCTCAAACCGAGATGGATGGATGCTAGGGTCTGTTCAGACCATGCGGCCCTGAAGTCGTTCAAAGAATTCGCCGCTGG AAAAAGAGGAGCGGCTTTGGGAGTAATGGAGGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGGTTTCAGGAAGC CATTGACAACCTCGCCGTGCTCATGCGAGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTATAAGGCAGCGGCAGCCCAACTGCCGGAG ACCCTAGAGACCATTATGCTCTTAGGTTTGCTGGGAACAGTTTCACTGGGGATCTTCTTCGTCTTGATGCGGAATAAGGGC ATCGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTAACCCTTGGGGCCAGTGCATGGCTCATGTGGCTTTCGGAAATTGAACCAGCCA GAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTTTTATTACTGGTGGTGCTCATACCCGAGCCAGAGAAGCAAAGATCTCCCCAAG ATAACCAGATGGCAATTATCATCATGGTGGCAGTGGGCCTTCTAGGTTTGATAACTGCAAACGAACTTGGATGGCTGGAA AGAACAAAAAATGACATAGCTCATCTAATGGGAAGGAGAGAAGAAGGAGCAACCATGGGATTCTCAATGGACATTGATC TGCGGCCAGCCTCCGCCTGGGCTATCTATGCCGCATTGACAACTCTCATCACCCCAGCTGTCCAACATGCGGTAACCACTT CATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACACAAGCTGGAGTGCTGTTTGGCATGGGCAAAGGGATGCCATTTATG CATGGGGACCTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATGGGTTGCTATTCACAATTAACACCCCTGACTCTGATAGTAGCTATCATT CTGCTTGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGCCTACAAGCGGCAGCAGCGCGTGCTGCCCAGAAAAGGACAGCAG CTGGCATCATGAAGAATCCCGTTGTGGATGGAATAGTGGTAACTGACATTGACACAATGACAATAGACCCCCAGGTGGA GAAGAAGATGGGACAAGTGTTACTCATAGCAGTAGCCATCTCCAGTGCTGTGCTGCTGCGGACCGCCTGGGGATGGGGG GAGGCTGGAGCTCTGATCACAGCAGCGACCTCCACCTTGTGGGAAGGCTCTCCAAACAAATACTGGAACTCCTCTACAGC CACCTCACTGTGCAACATCTTCAGAGGAAGCTATCTGGCAGGAGCTTCCCTTATCTATACAGTGACGAGAAACGCTGGCCT GGTTAAGAGACGTGGAGGTGGGACGGGAGAGACTCTGGGAGAGAAGTGGAAAGCTCGTCTGAATCAGATGTCGGCCCT GGAGTTCTACTCTTATAAAAAGTCAGGTATCACTGAAGTGTGTAGAGAGGAGGCTCGCCGTGCCCTCAAGGATGGAGTG GCCACAGGAGGACATGCCGTATCCCGGGGAAGTGCAAAGATCAGATGGTTGGAGGAGAGAGGATATCTGCAGCCCTAT GGGAAGGTTGTTGACCTCGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGCTATTATGCCGCCACCATCCGCAAAGTGCAGGAGGTG AGAGGATACACAAAGGGAGGTCCCGGTCATGAAGAACCCATGCTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTTCGTCTCA AGAGTGGAGTGGACGTCTTCCACATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACTCTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATCTAGT CCTGAAGTGGAAGAGACACGAACACTCAGAGTGCTCTCTATGGTGGGGGACTGGCTTGAAAAAAGACCAGGGGCCTTCT GTATAAAGGTGCTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCATGGAGCGACTGCAACGTAGGCATGGGGGAGGATT AGTCAGAGTGCCATTGTGTCGCAACTCCACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGGGCAAAGAGCAACATCATAAAAAGTG TGTCCACCACAAGTCAGCTCCTCCTGGGACGCATGGATGGCCCCAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGAACCT CGGCTCGGGTACACGAGCTGTGGCAAGCTGTGCTGAGGCTCCTAACATGAAAATCATCGGCAGGCGCATTGAGAGAATC CGCAATGAACATGCAGAAACATGGTTTCTTGATGAAAACCACCCATACAGGACATGGGCCTACCATGGGAGCTACGAAGC CCCCACGCAAGGATCAGCGTCTTCCCTCGTGAACGGGGTTGTTAGACTCCTGTCAAAGCCTTGGGACGTGGTGACTGGAG TTACAGGAATAGCCATGACTGACACCACACCATACGGCCAACAAAGAGTCTTCAAAGAAAAAGTGGACACCAGGGTGCC AGATCCCCAAGAAGGCACTCGCCAGGTAATGAACATAGTCTCTTCCTGGCTGTGGAAGGAGCTGGGGAAACGCAAGCGG CCACGCGTCTGCACCAAAGAAGAGTTTATCAACAAGGTGCGCAGCAATGCAGCACTGGGAGCAATATTTGAAGAGGAAA AAGAATGGAAGACGGCTGTGGAAGCTGTGAATGATCCAAGGTTTTGGGCCCTAGTGGATAGGGAGAGAGAACACCACC TG AGAGGAGAGT GTCACAGCTGT GT GT ACAACAT GAT GGG AAAAAGAG AAAAG AAGCAAGGAG AGTT CGGG AAAGCA AAAGGTAGCCGCGCCATCTGGTACATGTGGTTGGGAGCCAGATTCTTGGAGTTTGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGGA CCATTGGATGGGAAGAGAAAACTCAGGAGGTGGAGTCGAAGGGTTAGGATTGCAAAGACTTGGATACATTCTAGAAGA AATGAATCGGGCACCAGGAGGAAAGATGTACGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATTAGTAAGTTTGATCTG GAGAATGAAGCTCTGATTACCAACCAAATGGAGGAAGGGCACAGAACTCTGGCGTTGGCCGTGATTAAATACACATACC AAAACAAAGTGGTGAAGGTTCTCAGACCAGCTGAAGGAGGAAAAACAGTTATGGACATCATTTCAAGACAAGACCAGAG AGGGAGTGGACAAGTTGTCACTTATGCTCTCAACACATTCACCAACTTGGTGGTGCAGCTTATCCGGAACATGGAAGCTG AGGAAGTGTTAGAGATGCAAGACTTATGGTTGTTGAGGAAGCCAGAGAAAGTGACCAGATGGTTGCAGAGCAATGGAT GGGATAGACTCAAACGAATGGCGGTCAGTGGAGATGACTGCGTTGTGAAGCCAATCGATGATAGGTTTGCACATGCCCT CAGGTTCTTGAATGACATGGGAAAAGTTAGGAAAGACACACAGGAGTGGAAACCCTCGACTGGATGGAGCAATTGGGA AGAAGTCCCGTTCTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTGTACCTCAAGGATGGGAGATCCATTGTGGTCCCTTGCCGCCACCA AGATGAACTGATTGGCCGAGCTCGCGTCTCACCAGGGGCAGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCCTGTCTTGCAAAATCA TATGCGCAGATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGAGACCTTCGACTGATGGCTAATGCCATTTGCTCGGCTGTGCCA GTTGACTGGGTACCAACTGGGAGAACCACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAGGACATGCTCA TGGTGTGGAATAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCATATGGAGGACAAGACTCCTGTAACAAAATGGACAGACATTCC CTATCTAGGAAAAAGGGAGGACTTATGGTGTGGATCCCTTATAGGGCACAGACCCCGCACCACTTGGGCTGAAAACATCA AAGACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTATCTATCCACCCAAGTCCGCTAC TTGGGTGAGGAAGGGTCCACACCCGGAGTGTTGTAAGCACCAATTTTAGTGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGTTT GGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTAACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCTCATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGG CACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAAGCGCAGGAT GGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGACTAGCTGTGAATCTCCAGCAGAGG GACTAGTGGTTAGAGGAGACCCCCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGTGGGAAAGACCAGAGACTCCATGAGTTT CCACCACGCTGGCCGCCAGGCACAGATCGCCGAACTTCGGCGGCCGGTGTGGGGAAATCCATGGTTTCT

SEQ ID N°: 13

KJ776791.1, Cepa del virus del Zika H/PF/2013 gen de poliproteína, cds completo

AGTATCAACAGGTTTTATTTTGGATTTGGAAACGAGAGTTTCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTC CGGATTGTCAATATGCTAAAACGCGGAGTAGCCCGTGTGAGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCT GCTGGGTCATGGGCCCATCAGGATGGTCTTGGCGATTCTAGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCT CATCAATAGATGGGGTTCAGTGGGGAAAAAAGAGGCTATGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATG CTGAGAATAATCAATGCTAGGAAGGAGAAGAAGAGACGAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGA CCACAGCTATGGCAGCGGAGGTCACTAGACGTGGGAGTGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGACGCTGGGGAGGC CATATCTTTTCCAACCACATTGGGGATGAATAAGTGTTATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCAT GAGCTATGAATGCCCTATGCTGGATGAGGGGGTGGAACCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGG GTTGTGTACGGAACCTGCCATCACAAAAAAGGTGAAGCACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCAC TAGGAAGCTGCAAACGCGGTCGCAAACCTGGTTGGAATCAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGG ATATTCAGGAACCCTGGCTTCGCGTTAGCAGCAGCTGCCATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCAT ATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAG GTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACT GTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCGG ACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTGAAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAA AGAACGTTAGTGGACAGAGGCTGGGGAAATGGATGTGGACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTG CATGCTCCAAGAAAATGACCGGGAAGAGCATCCAGCCAGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCC CAGCACAGTGGGATGATCGTTAATGACACAGGACATGAAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATT CACCAAGAGCCGAAGCCACCCTGGGGGGTTTTGGAAGCCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCA GATTTGTATTACTTGACTATGAATAACAAGCACTGGTTGGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCAC GCTGGGGCAGACACCGGAACTCCACACTGGAACAACAAAGAAGCACTGGTAGAGTTCAAGGACGCACATGCCAAAAGG CAAACTGTCGTGGTTCTAGGGAGTCAAGAAGGAGCAGTTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATG GTGCAAAGGGAAGGCTGTCCTCTGGCCACTTGAAATGTCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATAC TCCTTGTGTACCGCAGCGTTCACATTCACCAAGATCCCGGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTA CGCAGGGACAGATGGACCTTGCAAGGTTCCAGCTCAGATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTG ATAACCGCTAACCCCGTAATCACTGAAAGCACTGAGAACTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCT TACATTGTCATAGGAGTCGGGGAGAAGAAGATCACCCACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTG AAGCCACTGTGAGAGGTGCCAAGAGAATGGCAGTCTTGGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCT CAACTCATTGGGCAAGGGCATCCATCAAATTTTTGGAGCAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACA AATTCTCATTGGAACGTTGCTGATGTGGTTGGGTCTGAACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGG GGGAGTGTTGATCTTCTTATCCACAGCTGTCTCTGCTGATGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGAT GCGGTACAGGGGTGTTCGTCTATAACGACGTTGAAGCCTGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGA TTGGCAGCAGCAGTCAAGCAAGCCTGGGAAGATGGTATCTGTGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTG GAGATCAGTAGAAGGGGAGCTCAACGCAATCCTGGAAGAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAA AACCCCATGTGGAGAGGTCCACAGAGATTGCCCGTGCCTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAAT CGTACTTCGTCAGAGCAGCAAAGACAAATAACAGCTTTGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACAT AGAGCATGGAACAGCTTTCTTGTGGAGGATCATGGGTTCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGA TTATTCATTAGAGTGTGATCCAGCCGTTATTGGAACAGCTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACT GG ATTG AG AGT GAG AAGAATG ACACATGGAGGCT GAAG AGGGCCCATCT GAT CG AG AT GAAAACATGT GAAT GGCCAA AGTCCCACACATTGTGGACAGATGGAATAGAAGAGAGTGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCAT CACAATACCAGAGAGGGCTACAGGACCCAAATGAAAGGGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAAT GCCCAGGCACTAAGGTCCACGTGGAGGAAACATGTGGAACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAG GGTGATCGAGGAATGGTGCTGCAGGGAGTGCACAATGCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGA ATGGAGATAAGGCCCAGGAAAGAACCAGAAAGTAACTTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGG ATCACTTCTCCCTTGGAGTGCTTGTGATTCTGCTCATGGTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATC ATAAGCACATCGATGGCAGTGCTGGTAGCTATGATCCTGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTT GATGGGTGCCACCTTCGCGGAAATGAACACTGGAGGAGATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGA CCAGCGTTGCTGGTATCTTTCATCTTCAGAGCTAATTGGACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCTTGGCCTCGTGTCTTT TGCAAACTGCGATCTCCGCCTTGGAAGGCGACCTGATGGTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAG CGATGGTTGTTCCACGCACTGATAACATCACCTTGGCAATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTG TGGCGTGGAGAGCAGGCCTTGCTACTTGCGGGGGGTTTATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAA CTTACCATTTGTCATGGCCCTGGGACTAACCGCTGTGAGGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCAC AAGGAGTGGGAAGCGGAGCTGGCCCCCTAGCGAAGTACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTC GCCAAGGCAGATATAGAGATGGCTGGGCCCATGGCCGCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGA GTGTGGACATGTACATTGAAAGAGCAGGTGACATCACATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCT CGATGTGGCGCTAGATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTGGTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAG GTGGTCCTGATGACCATCTGTGGCATGAACCCAATAGCCATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGAC TGGAAAAAGGAGTGGTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTCCCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTA CAGAGTAATGACTCGTAGACTGCTAGGTTCAACACAAGTTGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGT GGCACGTCACAAAAGGATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAAGGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATC TGGTGTCATACTGTGGTCCATGGAAGCTAGATGCCGCCTGGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCC CGGAGAGAGAGCGAGGAACATCCAGACTCTGCCCGGAATATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCT GGATTACCCAGCAGGAACTTCAGGATCTCCAATCCTAGACAAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTC GTGATCAAAAATGGGAGTTATGTTAGTGCCATCACCCAAGGGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGC CTTCGATGCTGAAGAAGAAGCAGCTAACTGTCTTAGACTTGCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAA ATAGTCCGTGAAGCCATAAAAACAAGACTCCGTACTGTGATCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGA AGCCCTTAGAGGGCTTCCAGTGCGTTATATGACAACAGCAGTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAAT GTGCCATGCCACCTTCACTTCACGTCTACTACAGCCAATCAGAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCAC TTCACAGATCCCTCAAGTATAGCAGCAAGAGGATACATTTCAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCAT GACCGCCACGCCACCAGGAACCCGTGACGCATTTCCGGACTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAG AGAGAGCCTGGAGCTCAGGCTTTGATTGGGTGACGGATCATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAAC GGCAATGAGATCGCAGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAAACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGT TCCAGAAAACAAAACATCAAGAGTGGGACTTTGTCGTGACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGAC CGTGTCATAGATTCCAGGAGATGCCTAAAGCCGGTCATACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGT CACACATGCCAGCGCTGCCCAGAGGAGGGGGCGCATAGGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGA GGTGGGTGCGCAGAGACTGACGAAGACCATGCACACTGGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGA TGGCCTCATAGCCTCGCTCTATCGACCTGAGGCCGACAAAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAG CAAAGGAAGACCTTTGTGGAACTCATGAAAAGAGGAGATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAAT AACCTACACAGATAGAAGATGGTGCTTTGATGGCACGACCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTG TGGACCAGACACGGAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGAGGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGA AGTCATTCAAGGAGTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGCGGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACA CATGACAGAGAGATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTCGCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAA GCCGCGGCGGCCCAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCATTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTT TTTCGTCTTGATGAGGAACAAGGGCATAGGGAAGATGGGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATG TGGCTCTCGGAAATTGAGCCAGCCAGAATTGCATGTGTCCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAG CCAGAAAAGCAAAGATCTCCCCAGGACAACCAAATGGCAATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTAC CGCCAATGAACTCGGATGGTTGGAGAGAACAAAGAGTGACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAAC CATAGGATTCTCAATGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTCAGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCA GCCGTCCAACATGCAGTGACCACTTCATACAACAACTACTCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGT ATGGGCAAAGGGATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGGAGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACC CCTGACCCTAATAGTGGCCATCATTTTGCTCGTGGCGCACTACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGC GTGCTGCCCAGAAGAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGAACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACAC AATGACAATTGACCCCCAAGTGGAGAAAAAGATGGGACAGGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGT CGCGGACCGCCTGGGGGTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTGATCACAGCGGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGA ACAAGTACTGGAACTCCTCTACAGCCACTTCACTGTGTAACATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTA CACAGTAACAAGAAACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGGGGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGG CCCGCTTGAACCAGATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTACAAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCC CGCCGCGCCCTCAAGGACGGTGTGGCAACGGGAGGCCATGCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTG GAGCGGGGATACCTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATCTTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCA CCATCCGCAAAGTTCAAGAAGTGAAAGGATACACAAAAGGAGGCCCTGGTCATGAAGAACCCATGTTGGTGCAAAGCTA TGGGTGGAACATAGTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTCTTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTG ACATAGGTGAGTCATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGCACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTT GAAAAAAGACCAGGAGCCTTTTGTATAAAAGTGTTGTGCCCATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCA GCGTAGGTATGGGGGAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTCCCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCG AAAAGCAACACCATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGCTCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCCAGGAGGCCAGTGA AATATGAGGAGGATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGGCTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCAT TGGTAACCGCATTGAAAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGAAACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGG GCTTACCATGGAAGCTATGAGGCCCCCACACAAGGGTCAGCGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAA ACCCTGGGATGTGGTGACTGGAGTCACAGGAATAGCCATGACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAG GAAAAAGTGGACACTAGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCACTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGA AAGAGCTAGGCAAACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAAGAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATT AGGGGCAATATTTGAAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAGTGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGT GG ACAAG G AAAG AGAG CACCACCT GAG AGGAG AGT GCCAGAGTT GTGTGT ACAACAT GATGGGAAAAAGAGAAAAGA AACAAGGGGAATTTGGAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCTGGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGA AGCCCTTGGATTCTTGAACGAGGATCACTGGATGGGGAGAGAGAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACA AAGACTCGGATATGTCCTAGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGAGGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGAC ACCCGCATCAGCAGGTTTGATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCACCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCAT TGGCCATAATCAAGTACACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGTCCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGA CATTATTTCGAGACAAGACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTCACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGC AACTCATTCGGAATATGGAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAAGACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGAC CAACTGGTTGCAGAGCAACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATGGCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATT GATGATAGGTTTGCACATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGGAAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCT CAACTGGATGGGACAACTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGCTCCCACCACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCC ATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGCCCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGG AGACTGCTTGCCTAGCAAAATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTCCTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCA ATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGGAGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGG ATGACCACTGAAGACATGCTTGTGGTGTGGAACAGAGTGTGGATTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCA GTTACGAAATGGACAGACATTCCCTATTTGGGAAAAAGGGAAGACTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGC GCACCACCTGGGCTGAGAACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGCGCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGA CTACCTATCCACCCAAGTTCGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACACCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAGTGTTGTC AGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGTGACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTA TAGTCAGGCCGAGAACGCCATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCTGTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACC CCACGCGCTTGGAGGCGCAGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCTTCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGAT CAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAG

[0084] En algunas realizaciones, el virus Zika tiene un genoma de ARN correspondiente a la secuencia de ADN proporcionada por la secuencia de ácido nucleico de cualquiera de los SEQ ID N°: 2-13, o 78. En algunas realizaciones, el virus Zika tiene un genoma variante que es al menos 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%. 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8% o 99,9% idéntico a cualquiera de los SEQ ID N°: 2-13, o 78.

[0085] A continuación se proporcionan secuencias de aminoácidos de las proteínas E de las cepas de Zika que pueden utilizarse en los métodos, composiciones y/o vacunas descritos en el presente documento.

SEQ ID N°: 14

isol-ARB15076.AHF49784.1.República Centroafricana/291-788 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDENRAKVEVT PNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFKDAHAK RQTVWLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTVEVQYAG TDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAFEATVRG AKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGVMIFLSTA VSA

SEQ ID N°: 15

isol-lbH_30656.AEN75265.1.Nigeria/291-788 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDENRAKVEVT PNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHSGADTETPHWNNKEALVEFKDAHAK RQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTVEVQYAG RDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSIIGKAFEATVRG AKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGVMIFLSTA VSA SEQ ID N°: 16

ArB1362.AHL43500.1.-/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDXXXXXXXNR AEVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 17

ArD128000.AHL43502.1.-/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMXXXXXGHETDEN RAKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHRLVRKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWLKKGSSIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGVHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGG VMIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 18

ArD158095.AHL43505.1.-/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF

EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 19

ArD158084.AHL43504.1.-/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQ.TLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 20

isol-ARB13565.AHF49783.1.Central_African_Republic/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGVHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGG VMIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 21

isol-ARB7701.AHF49785.1.Central_African_Republic/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQ.TVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGVHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGG VMIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 22

isol-ArD_41519.AEN75266.1.Senegal/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGFIETDEN RAKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVE FKDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVT VEVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKA FEATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGG VMIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 23

MR766-NIID.BAP47441.1.Uganda/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMTVNDIGYETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGKLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKIPVQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 24

LC002520.1/326-829 ARN genómico del virus del Zika, cepa: MR766-NIID, Uganda, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 25

isol-MR_766.AEN75263.1.Uganda/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGYETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGKLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKIPVQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 26

ArD7117.AHL43501.1./-291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAVCTAAKVPAETLHGTVT VEVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQ.TLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKA FEATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGG VMIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 27

AY632535.2/326-825 NC 012532.1 cepa del virus del Zika MR 766, Uganda, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIGYETDEDRAKVE VTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFKDAH AKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTVEVQY AGTDGPCKIPVQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAFEATV RGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGVMIFL STAVSA SEQ ID N°: 28

MR_766.AAV34151.1.Uganda/291-790 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus. |Q32ZE1| Q32ZE1_9FL

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIGYETDEDRAKVE VTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFKDAH AKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTVEVQY AGTDGPCKIPVQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAFEATV RGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGVMIFL STAVSA

SEQ ID N°: 29

MR_766.YP_009227198.1.Uganda/1-500 proteína E de envoltura [virus del Zika]

SEQ ID N°: 30

KU681081.3/308-811 aislado del virus del Zika virus del Zika/H.sapiens-tc/THA/2014/SV0127-14, Tailandia, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHTGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITEGTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVLNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 31

isol-Zika-virus%H .sapiens-tc%THA%2014%SV0127-_14.AM D61710.1.Tailandia/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 32

CK-ISL_2014.AIC06934.1.Cook_Islands/1-504 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus. (Fragmento) OS=virus del Zika GN=E PE=4 SV=1

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 33

Natal_RGN.AMB18850.1.Brasil:_Rio_Grande_do_Norte,_Natal/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.]

SEQ ID N°: 34 IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 35

KU707826.1/317-820 Asilado del virus del Zika SSABR1, Brasil, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRUTANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 36

KU509998.1/326-829 cepa del virus del Zika Haití/1225/2014, Haití, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 37

isol-GDZ16001.AML82110.1.China/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 38

BeH819015.AMA12085.1.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.]

SEQ ID N°: 39

MRS_OPV _Martinique_PaRi_2015.AMC33116.1.Martinique/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 40

KU501215.1/308-811 cepa del virus del Zika PRVABC59, Puerto Rico, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQ.TVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 41

Haiti%1225%2014.AMB37295.1.Haiti/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 42

KU527068.1/308-811 cepa del virus del Zika Natal RGN, Brasil: Rio Grande do Norte, Natal, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 43

isol-Z1106027.ALX35662.1.Suriname/5-508 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 44

isol-FLR.AMM39804.1.Colombia:_Barranquilla/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 45

PLCal_ZV_isol-From_Vero_E6_cells.AHL37808.1.Canada/254-757 Glicoproteína E de envoltura deFlavivirus.

SEQ ID N°: 46

BeH818995.AMA12084.1.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus. [Zika virus].

SEQ ID N°: 47

H/PF/2013.AHZ13508.1.French_Polynesia/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 48

PRVABC59.AMC13911.1.Puerto_Rico/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 49

KU321639.1/326-829 cepa del virus del Zika ZikaSPH2015, Brasil, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDIVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 50

ZikaSPH2015.ALU33341.1.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDIVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV

EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 51 103344.AMC13912.1.Guatemala/291 794 poliproteína [Zika virus]. 103344.AMC13912.1.Guatemala Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEIRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 52

isol-Brazil-ZKV2015.AMD16557.1.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGTQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 53

KU497555.1/308-811 aislado del virus del Zika Brasil-ZKV2015, Glicoproteína E de envoltura deFlavivirus.

SEQ ID N°: 54

isol-ZJ03.AMM39806.1.China/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGARRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 55

isol-FSS13025.AFD30972.1.Cambodia/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSN R DFVEG MSGGTWVDW LE H GG CVTV MAQD KPTVDIE LVTTTVSN M AEVR5YCY EASI5D M AS D5RCPTQGE AYLDKQ SDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFG KGSLVTCAKFAC5KK MTG K5IQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTG H ETDENF1AKVEIT 3 NSP RA EAT LG G F GSLGLD CE P RT G LOF SD LYYLTMNNK H WLVHKEW F H D l P LPW HAGA DTGTP HWNN KEALV E F K DA H AK RQT WVLGSQE G AV HTA LAGALEAE M DGA KGRLSSG H L KCRlL K M D KLR L K GVSYS L CTAA FTFTKIPA ET LH GTVTVE VQYAGTDG PCK V PAQMAVD M QTLTP VG R Ll TAN P VITESTE NS K M M LE L D P P FG D 5YIV IG VG E KK IT H H W H RSGSTIG K A FE ATVRG AKRMAVLGD TAWDFG5V G G ALN SLG KGIH QlFGAAFKSLF G G MSW F5QILIGT LLVWLG LN [KNG515 LM CLA LG G VU FLSTAVSA

SEQ ID N°: 56

isol-Z1106032.ALX35660.1.Suriname/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus. [Zika virus]

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNAKNGSISLMCLALGG VLIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 57

isol-Z1106033.ALX35659.1.Suriname/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus. [Zika virus]

SEQ ID N°: 58

isol-BeH828305.AMK49165.1.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDTQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAFE ATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGGV LIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 59

isol-GD01.AMK79468.1.China/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IFCIGVSN R DFVEG MSGGTWVDW LE H G G CVTV MAQD KPTVDIE LVTTTVSN M AEVRSYCY E ASI5D M AS DSRCPTQGEAYLDKQ SDTQYVC KRT LV DRG WG NGCG L FG KG SLVTCA KFAC 5 K K MTG K51QP E N L EY RIM LSV HG SQ H SG MIV NGTG H ETD E N RA KVE IT ^NSP RA EAT LG G F GSLG LD C E P RT G LQFSD LYY LTMNNK HWLVH< EW F H D l P LPW H AGA DT GTP HWNN K EALV E F K DA H AK RQT VV VLGS QE GAV HTA LAGAI FAF M DGA KGRLSSGH LKCRLKM DKLRLKG VSVS. CTAA FT FT KI PA ET LH GTVTVEVQYAGTDG PCK VPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVG EKKITHHWHRSGSTIGKAFEATVRGAKRMAVLGD TAWDFGSVGGALNSLGKG lHQIFGAAFKSL F G G M SWFSQILIGTLLMWLG LNTKNGSiS.MCLALGGVLlFLSTAVSA

SEQ ID N°: 60

isol-Z1106031.ALX35661.1.Suriname/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIG VS N R DFVEG MSGGTWV □ W L E H G G CVTV MAQD KPTVDI E LVTTTVSNMAEVRSYCY EA5I5D MASDS RCPTQGEAYLDKQ SDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFG KG SLVTCA KFAC5KK MTG K5IQPENLEYRIMLSVHGSQH5GMIVNDTGH ETDENRAKVErT P NSP RA EAT LG G F GSLG LDC E P RTG LDFSD LYYLTMNN KH WL VHKEWF H DI PLPW HAGA DT GTP HWNN KEALV E F K DAH A K RQT WVLGS QE G AVHTA LAGALEA E M D GA KGRLSSG H L KCRLK M DKL R L KGVSYS LCTAA FTFTK I PA ET LH GTVTVE VQYAGTDG PCK V LAQMAV D M QTLT PVG R LITAN PVIT E 5TEN 5KM M L E LD P P FG DSYIVIG VG EK.KITHHWH R5G STIG KAF E ATVRGA K R MAV LG D TAW DFGSV GG A LNSLG KGl HQJFGAAFKS L'GGMSW FSQI LIGT LLMWLG L N TKNG SISLMC LALGGVLIF LSTAVSA

SEQ ID N°: 61

ACD75819.1.Micronesia/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDWLEHGGCVTVMAQDKPAVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV LIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 62

KU681082.3/308-811 aislado del virus del Zika virus del Zika/H.sapiens-tc/PHL/2012/CPC-0740, Filipinas, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTV EVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV LIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 63

isol-Zika_virus%H.sapiens-tc%PHL%2012%CPC-0740.AMD61711.1.Philippines/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

SEQ ID N°: 64

isol-BeH823339.AMK49164.2.Brazil/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVSTTVSNMAEVRSYCYEATISDIASDSRCPTQGEAYLD KQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDENR AKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFK DAHAKRQTAVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTVE VQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAFE ATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGGV LIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 65

isol-P6-740.AEN75264.1.Malaysia/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

RCIGVSN RElFVEG MSGGTWV DWLE H G G CVTV MAQDKPTVDIE LVmVSNM AEVRSYCY FAS ISO M AS DSRCPTQG E AY L D Kq SDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFG KG5LVTCAKFAC5KKMTG K5IQPENLEYRIMLSVHGSQH5GMIVNDXG HETDEN RAKVEIT P NSPR A E AT LG G F GSLG L DC E P RT G LDF $D L Y Y LT MN N K H WL VHKE W F H D l P L P W H AG A DTGTP H WNN KE A. V E F K D A H AK RQT VWLGSqE G AV HTA LASA LEAE M DGA KG RLSSG H LKCRIL K M DKLR L K GVSYS LCTAA FTFTKIPA ET L H GTVTVEVQYAGTEíG PCK V PAQMAV D M QTLTPVG RUTANPVITESTENS KMMLELDPP FG □ SYIVIG VG D KKITH HWXR 5 G 5TIG KAFEATVRGAKRMAVLG DT A WD FGSV G GA LNS LG KG l H Ql FG AAF KS LFGG MSWFSQILIGT LLVWLG LNT KN GSIS LTCLALG GV Ll FLSTAVSA

SEQ ID N°: 66

KU744693.1/326-829 asilado del virus del Zika VE_Ganxian, China, Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGV5N R DFV EG MSGGTWV □ WLE H G G CVTAMAQD K PTVDIE LVTTTVSN MAEV RSYCYEASI5D MASDSRC PTQG EAY L D KQ SDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFG KGSLVTCAK.FAC5KKMTG KSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMLVNDTGHETDEN FLAKVEIT PNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLOFSDLYYLTMNNKHWLAHKEWFHDIPLPWHAGAATGTPHWNNKEALVEFKDAHAKRQT VVVIG5ÍLEG AV HTA LAGA LEAE M QGA KGR L55GH L KCRL KM D K L R LKGVSY5 LCTAA FTFTKIPA ETV DGTVTV E G QYG GTDG PC K V P AQM AV D MQTLTPVG R Ll TAN PVITE STE NS K M M L E L DP P FG DSYIVIGVGEKK IT HH WH RSGSTIG K AFE ATVRG AK R MAVLG D TAW DFGSVG G ALNSLG KGIHQJIGAAF KSL FG G M SW FSQI Ll G_ LLMW LG LNT K N GS15 LM CLALG G V LIFLSTAVSG

SEQ ID N°: 67

isol-VE_Ganxian.AMK79469.1.China/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDWLEHGGCVTAMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMLVNDTGHETDEN RAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLAHKEWFHDIPLPWHAGAATGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETVDGTVTV EGQYGGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIIGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGG VU FLSTAVSG

SEQ ID N°: 68

ArD157995.AHL43503.1.-/291-794 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

ISCIGVSNRDLVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTEMAQDKPTVDIELVTMTVSNMAEVRSYCYEASLSDMASASRCPTQGEPSL DKQSDTQSVCKRTLGDRGWGNGCGIFGKGSLVTCSKFTCCKKMPGKSIQPENLEYRIMLPVHGSQHSGMIVNDIGHETDENR AKVEVTPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEF KDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTV EVQSAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAF EATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGV MIFLSTAVSA

SEQ ID N°: 69

MR_766.ABI54475.1.Uganda/291-788 Glicoproteína E de envoltura de Flavivirus.

IRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIELVTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYL DKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFTCSKKMTGKSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDENRAKVEVT PNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKHWLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFKDAHAK RQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLFSGHLKCRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKVPAETLHGTVTVEVQYAG TDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKMMLELDPPFGDSYIVIGVGDKKITHHWHRSGSTIGKAFEATVRG AKRMAVLGDTAWDFGSVGGVFNSLGKGIHQIFGAAFKSLFGGMSWFSQILIGTLLVWLGLNTKNGSISLTCLALGGVMIFLSTA VSA

SEQ ID N°: 705'-(dIdC)13-3'

dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldC dldCdldC

SEQ ID N°: 71

péptido KLK

KLKLLLLLKLK

SEQ ID N°: 72

Secuencia Z!KV H/PF/2013 como se secuenció

CAGACTGCGACAGTTCGAGTTTGAAGCGAAAGCTAGCAACAGTATCAACAGGTTTTATTTTGGATTTGGAAACGAGAGTT TCTGGTCATGAAAAACCCAAAAAAGAAATCCGGAGGATTCCGGATTGTCAATATGCTAAAACGCGGAGTAGCCCGTGTG AGCCCCTTTGGGGGCTTGAAGAGGCTGCCAGCCGGACTTCTGCTGGGTCATGGGCCCATCAGGATGGTCTTGGCGATTCT AGCCTTTTTGAGATTCACGGCAATCAAGCCATCACTGGGTCTCATCAATAGATGGGGTTCAGTGGGGAAAAAAGAGGCTA TGGAAATAATAAAGAAGTTCAAGAAAGATCTGGCTGCCATGCTGAGAATAATCAATGCTAGGAAGGAGAAGAAGAGAC GAGGCGCAGATACTAGTGTCGGAATTGTTGGCCTCCTGCTGACCACAGCTATGGCAGCGGAGGTCACTAGACGTGGGAG TGCATACTATATGTACTTGGACAGAAACGACGCTGGGGAGGCCATATCTTTTCCAACCACATTGGGGATGAATAAGTGTT ATATACAGATCATGGATCTTGGACACATGTGTGATGCCACCATGAGCTATGAATGCCCTATGCTGGATGAGGGGGTGGAA

CCAGATGACGTCGATTGTTGGTGCAACACGACGTCAACTTGGGTTGTGTACGGAACCTGCCATCACAAAAAAGGTGAAGC ACGGAGATCTAGAAGAGCTGTGACGCTCCCCTCCCATTCCACTAGGAAGCTGCAAACGCGGTCGCAAACCTGGTTGGAAT CAAGAGAATACACAAAGCACTTGATTAGAGTCGAAAATTGGATATTCAGGAACCCTGGCTTCGCGTTAGCAGCAGCTGCC ATCGCTTGGCTTTTGGGAAGCTCAACGAGCCAAAAAGTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGC ATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATAGGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGATGTTGTCTTGGAAC ATGGAGGTTGTGTCACCGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACAT GGCGGAGGTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCGGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTGAA GCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGGCTGGGGAAATGGATGTG GACTTTTTGGCAAAGGGAGCCTGGTGACATGCGCTAAGTTTGCATGCTCCAAGAAAATGACCGGGAAGAGCATCCAGCC AGAGAATCTGGAGTACCGGATAATGCTGTCAGTTCATGGCTCCCAGCACAGTGGGATGATCGTTAATGACACAGGACATG AAACTGATGAGAATAGAGCGAAGGTTGAGATAACGCCCAATTCACCAAGAGCCGAAGCCACCCTGGGGGGTTTTGGAAG CCTAGGACTTGATTGTGAACCGAGGACAGGCCTTGACTTTTCAGATTTGTATTACTTGACTATGAATAACAAGCACTGGTT GGTTCACAAGGAGTGGTTCCACGACATTCCATTACCTTGGCACGCTGGGGCAGACACCGGAACTCCACACTGGAACAACA AAGAAGCACTGGTAGAGTT CAAGG ACGCACAT GCCAAAAGGCAA ACTGTCGTGGTT CT AGGGAGTCAAGAAGGAGCAG TTCACACGGCCCTTGCTGGAGCTCTGGAGGCTGAGATGGATGGTGCAAAGGGAAGGCTGTCCTCTGGCCACTTGAAATG TCGCCTGAAAATGGATAAACTTAGATTGAAGGGCGTGTCATACTCCTTGTGTACCGCAGCGTTCACATTCACCAAGATCCC GGCTGAAACACTGCACGGGACAGTCACAGTGGAGGTACAGTACGCAGGGACAGATGGACCTTGCAAGGTTCCAGCTCAG ATGGCGGTGGACATGCAAACTCTGACCCCAGTTGGGAGGTTGATAACCGCTAACCCCGTAATCACTGAAAGCACTGAGAA CTCTAAGATGATGCTGGAACTTGATCCACCATTTGGGGACTCTTACATTGTCATAGGAGTCGGGGAGAAGAAGATCACCC ACCACTGGCACAGGAGTGGCAGCACCATTGGAAAAGCATTTGAAGCCACTGTGAGAGGTGCCAAGAGAATGGCAGTCTT GGGAGACACAGCCTGGGACTTTGGATCAGTTGGAGGCGCTCTCAACTCATTGGGCAAGGGCATCCATCAAATTTTTGGAG CAGCTTTCAAATCATTGTTTGGAGGAATGTCCTGGTTCTCACAAATTCTCATTGGAACGTTGCTGATGTGGTTGGGTCTGA ACACAAAGAATGGATCTATTTCCCTTATGTGCTTGGCCTTAGGGGGAGTGTTGATCTTCTTATCCACAGCTGTCTCTGCTGA TGTGGGGTGCTCGGTGGACTTCTCAAAGAAGGAGACGAGATGCGGTACAGGGGTGTTCGTCTATAACGACGTTGAAGCC TGGAGGGACAGGTACAAGTACCATCCTGACTCCCCCCGTAGATTGGCAGCAGCAGTCAAGCAAGCCTGGGAAGATGGTA TCTGTGGGATCTCCTCTGTTTCAAGAATGGAAAACATCATGTGGAGATCAGTAGAAGGGGAGCTCAACGCAATCCTGGAA GAGAATGGAGTTCAACTGACGGTCGTTGTGGGATCTGTAAAAAACCCCATGTGGAGAGGTCCACAGAGATTGCCCGTGC CTGTGAACGAGCTGCCCCACGGCTGGAAGGCTTGGGGGAAATCGTACTTCGTCAGAGCAGCAAAGACAAATAACAGCTT TGTCGTGGATGGTGACACACTGAAGGAATGCCCACTCAAACATAGAGCATGGAACAGCTTTCTTGTGGAGGATCATGGGT TCGGGGTATTTCACACTAGTGTCTGGCTCAAGGTTAGAGAAGATTATTCATTAGAGTGTGATCCAGCCGTTATTGGAACAG CTGTTAAGGGAAAGGAGGCTGTACACAGTGATCTAGGCTACTGGATTGAGAGTGAGAAGAATGACACATGGAGGCTGA AGAGGGCCCATCTGATCGAGATGAAAACATGTGAATGGCCAAAGTCCCACACATTGTGGACAGATGGAATAGAAGAGAG TGATCTGATCATACCCAAGTCTTTAGCTGGGCCACTCAGCCATCACAATACCAGAGAGGGCTACAGGACCCAAATGAAAG GGCCATGGCACAGTGAAGAGCTTGAAATTCGGTTTGAGGAATGCCCAGGCACTAAGGTCCACGTGGAGGAAACATGTGG AACAAGAGGACCATCTCTGAGATCAACCACTGCAAGCGGAAGGGTGATCGAGGAATGGTGCTGCAGGGAGTGCACAAT GCCCCCACTGTCGTTCCGGGCTAAAGATGGCTGTTGGTATGGAATGGAGATAAGGCCCAGGAAAGAACCAGAAAGTAAC TTAGTAAGGTCAATGGTGACTGCAGGATCAACTGATCACATGGATCACTTCTCCCTTGGAGTGCTTGTGATTCTGCTCATG GTGCAGGAAGGGCTGAAGAAGAGAATGACCACAAAGATCATCATAAGCACATCGATGGCAGTGCTGGTAGCTATGATCC TGGGAGGATTTTCAATGAGTGACCTGGCTAAGCTTGCAATTTTGATGGGTGCCACCTTCGCGGAAATGAACACTGGAGGA GATGTAGCTCATCTGGCGCTGATAGCGGCATTCAAAGTCAGACCAGCGTTGCTGGTATCTTTCATCTTCAGAGCTAATTGG ACACCCCGTGAAAGCATGCTGCTGGCCrTGGCCTCGTGTCTTTTGCAAACTGCGATCTCCGCCTTGGAAGGCGACCTGATG GTTCTCATCAATGGTTTTGCTTTGGCCTGGTTGGCAATACGAGCGATGGTTGTTCCACGCACTGATAACATCACCTTGGCA ATCCTGGCTGCTCTGACACCACTGGCCCGGGGCACACTGCTTGTGGCGTGGAGAGCAGGCCTTGCTACTTGCGGGGGGTT TATGCTCCTCTCTCTGAAGGGAAAAGGCAGTGTGAAGAAGAACTTACCATTTGTCATGGCCCTGGGACTAACCGCTGTGA GGCTGGTCGACCCCATCAACGTGGTGGGACTGCTGTTGCTCACAAGGAGTGGGAAGCGGAGCTGGCCCCCTAGCGAAGT ACTCACAGCTGTTGGCCTGATATGCGCATTGGCTGGAGGGTTCGCCAAGGCAGATATAGAGATGGCTGGGCCCATGGCC GCGGTCGGTCTGCTAATTGTCAGTTACGTGGTCTCAGGAAAGAGTGTGGACATGTACATTGAAAGAGCAGGTGACATCAC ATGGGAAAAAGATGCGGAAGTCACTGGAAACAGTCCCCGGCTCGATGTGGCGCTAGATGAGAGTGGTGATTTCTCCCTG GTGGAGGATGACGGTCCCCCCATGAGAGAGATCATACTCAAGGTGGTCCTGATGACCATCTGTGGCATGAACCCAATAGC CATACCCTTTGCAGCTGGAGCGTGGTACGTATACGTGAAGACTGGAAAAAGGAGTGGTGCTCTATGGGATGTGCCTGCTC CCAAGGAAGTAAAAAAGGGGGAGACCACAGATGGAGTGTACAGAGTAATGACTCGTAGACTGCTAGGTTCAACACAAGT TGGAGTGGGAGTTATGCAAGAGGGGGTCTTTCACACTATGTGGCACGTCACAAAAGGATCCGCGCTGAGAAGCGGTGAA GGGAGACTTGATCCATACTGGGGAGATGTCAAGCAGGATCTGGTGTCATACTGTGGTCCATGGAAGCTAGATGCCGCCT GGGACGGGCACAGCGAGGTGCAGCTCTTGGCCGTGCCCCCCGGAGAGAGAGCGAGGAACATCCAGACTCTGCCCGGAA TATTTAAGACAAAGGATGGGGACATTGGAGCGGTTGCGCTGGATTACCCAGCAGGAACTTCAGGATCTCCAATCCTAGAC AAGTGTGGGAGAGTGATAGGACTTTATGGCAATGGGGTCGTGATCAAAAATGGGAGTTATGTTAGTGCCATCACCCAAG GGAGGAGGGAGGAAGAGACTCCTGTTGAGTGCTTCGAGCCTTCGATGCTGAAGAAGAAGCAGCTAACTGTCTTAGACTT GCATCCTGGAGCTGGGAAAACCAGGAGAGTTCTTCCTGAAATAGTCCGTGAAGCCATAAAAACAAGACTCCGTACTGTGA TCTTAGCTCCAACCAGGGTTGTCGCTGCTGAAATGGAGGAAGCCCTTAGAGGGCTTCCAGTGCGTTATATGACAACAGCA GTCAATGTCACCCACTCTGGAACAGAAATCGTCGACTTAATGTGCCATGCCACCTTCACTTCACGTCTACTACAGCCAATCA GAGTCCCCAACTATAATCTGTATATTATGGATGAGGCCCACTTCACAGATCCCTCAAGTATAGCAGCAAGAGGATACATTT CAACAAGGGTTGAGATGGGCGAGGCGGCTGCCATCTTCATGACCGCCACGCCACCAGGAACCCGTGACGCATTTCCGGA CTCCAACTCACCAATTATGGACACCGAAGTGGAAGTCCCAGAGAGAGCCTGGAGCTCAGGCTTTGATTGGGTGACGGATC ATTCTGGAAAAACAGTTTGGTTTGTTCCAAGCGTGAGGAACGGCAATGAGATCGCAGCTTGTCTGACAAAGGCTGGAAA ACGGGTCATACAGCTCAGCAGAAAGACTTTTGAGACAGAGTTCCAGAAAACAAAACATCAAGAGTGGGACTTTGTCGTG ACAACTGACATTTCAGAGATGGGCGCCAACTTTAAAGCTGACCGTGTCATAGATTCCAGGAGATGCCTAAAGCCGGTCAT ACTTGATGGCGAGAGAGTCATTCTGGCTGGACCCATGCCTGTCACACATGCCAGCGCTGCCCAGAGGAGGGGGCGCATA GGCAGGAATCCCAACAAACCTGGAGATGAGTATCTGTATGGAGGTGGGTGCGCAGAGACTGACGAAGACCATGCACACT GGCTTGAAGCAAGAATGCTCCTTGACAATATTTACCTCCAAGATGGCCTCATAGCCTCGCTCTATCGACCTGAGGCCGACA AAGTAGCAGCCATTGAGGGAGAGTTCAAGCTTAGGACGGAGCAAAGGAAGACCTTTGTGGAACTCATGAAAAGAGGAG ATCTTCCTGTTTGGCTGGCCTATCAGGTTGCATCTGCCGGAATAACCTACACAGATAGAAGATGGTGCTTTGATGGCACGA CCAACAACACCATAATGGAAGACAGTGTGCCGGCAGAGGTGTGGACCAGACACGGAGAGAAAAGAGTGCTCAAACCGA GGTGGATGGACGCCAGAGTTTGTTCAGATCATGCGGCCCTGAAGTCATTCAAGGAGTTTGCCGCTGGGAAAAGAGGAGC GGCTTTTGGAGTGATGGAAGCCCTGGGAACACTGCCAGGACACATGACAGAGAGATTCCAGGAAGCCATTGACAACCTC GCTGTGCTCATGCGGGCAGAGACTGGAAGCAGGCCTTACAAAGCCGCGGCGGCCCAATTGCCGGAGACCCTAGAGACCA TTATGCTTTTGGGGTTGCTGGGAACAGTCTCGCTGGGAATCTTTTTCGTCTTGATGAGGAACAAGGGCATAGGGAAGATG GGCTTTGGAATGGTGACTCTTGGGGCCAGCGCATGGCTCATGTGGCTCTCGGAAATTGAGCCAGCCAGAATTGCATGTGT CCTCATTGTTGTGTTCCTATTGCTGGTGGTGCTCATACCTGAGCCAGAAAAGCAAAGATCTCCCCAGGACAACCAAATGGC AATCATCATCATGGTAGCAGTAGGTCTTCTGGGCTTGATTACCGCCAATGAACTCGGATGGTTGGAGAGAACAAAGAGTG ACCTAAGCCATCTAATGGGAAGGAGAGAGGAGGGGGCAACCATAGGATTCTCAATGGACATTGACCTGCGGCCAGCCTC AGCTTGGGCCATCTATGCTGCCTTGACAACTTTCATTACCCCAGCCGTCCAACATGCAGTGACCACTTCATACAACAACTAC TCCTTAATGGCGATGGCCACGCAAGCTGGAGTGTTGTTTGGTATGGGCAAAGGGATGCCATTCTACGCATGGGACTTTGG AGTCCCGCTGCTAATGATAGGTTGCTACTCACAATTAACACCCCTGACCCTAATAGTGGCCATCATTTTGCTCGTGGCGCAC TACATGTACTTGATCCCAGGGCTGCAGGCAGCAGCTGCGCGTGCTGCCCAGAAGAGAACGGCAGCTGGCATCATGAAGA ACCCTGTTGTGGATGGAATAGTGGTGACTGACATTGACACAATGACAATTGACCCCCAAGTGGAGAAAAAGATGGGACA GGTGCTACTCATAGCAGTAGCCGTCTCCAGCGCCATACTGTCGCGGACCGCCTGGGGGTGGGGGGAGGCTGGGGCCCTG ATCACAGCGGCAACTTCCACTTTGTGGGAAGGCTCTCCGAACAAGTACTGGAACTCCTCTACAGCCACTTCACTGTGTAAC ATTTTTAGGGGAAGTTACTTGGCTGGAGCTTCTCTAATCTACACAGTAACAAGAAACGCTGGCTTGGTCAAGAGACGTGG GGGTGGAACAGGAGAGACCCTGGGAGAGAAATGGAAGGCCCGCTTGAACCAGATGTCGGCCCTGGAGTTCTACTCCTAC AAAAAGTCAGGCATCACCGAGGTGTGCAGAGAAGAGGCCCGCCGCGCCCTCAAGGACGGTGTGGCAACGGGAGGCCAT GCTGTGTCCCGAGGAAGTGCAAAGCTGAGATGGTTGGTGGAGCGGGGATACCTGCAGCCCTATGGAAAGGTCATTGATC TTGGATGTGGCAGAGGGGGCTGGAGTTACTACGCCGCCACCATCCGCAAAGTTCAAGAAGTGAAAGGATACACAAAAGG AGGCCCTGGTCATGAAGAACCCATGTTGGTGCAAAGCTATGGGTGGAACATAGTCCGTCTTAAGAGTGGGGTGGACGTC TTTCATATGGCGGCTGAGCCGTGTGACACGTTGCTGTGTGACATAGGTGAGTCATCATCTAGTCCTGAAGTGGAAGAAGC ACGGACGCTCAGAGTCCTCTCCATGGTGGGGGATTGGCTTGAAAAAAGACCAGGAGCCTTTTGTATAAAAGTGTTGTGCC CATACACCAGCACTATGATGGAAACCCTGGAGCGACTGCAGCGTAGGTATGGGGGAGGACTGGTCAGAGTGCCACTCTC CCGCAACTCTACACATGAGATGTACTGGGTCTCTGGAGCGAAAAGCAACACCATAAAAAGTGTGTCCACCACGAGCCAGC TCCTCTTGGGGCGCATGGACGGGCCCAGGAGGCCAGTGAAATATGAGGAGGATGTGAATCTCGGCTCTGGCACGCGGG CTGTGGTAAGCTGCGCTGAAGCTCCCAACATGAAGATCATTGGTAACCGCATTGAAAGGATCCGCAGTGAGCACGCGGA AACGTGGTTCTTTGACGAGAACCACCCATATAGGACATGGGCTTACCATGGAAGCTATGAGGCCCCCACACAAGGGTCAG CGTCCTCTCTAATAAACGGGGTTGTCAGGCTCCTGTCAAAACCCTGGGATGTGGTGACTGGAGTCACAGGAATAGCCATG ACCGACACCACACCGTATGGTCAGCAAAGAGTTTTCAAGGAAAAAGTGGACACTAGGGTGCCAGACCCCCAAGAAGGCA CTCGTCAGGTTATGAGCATGGTCTCTTCCTGGTTGTGGAAAGAGCTAGGCAAACACAAACGGCCACGAGTCTGTACCAAA GAAGAGTTCATCAACAAGGTTCGTAGCAATGCAGCATTAGGGGCAATATTTGAAGAGGAAAAAGAGTGGAAGACTGCAG TGGAAGCTGTGAACGATCCAAGGTTCTGGGCTCTAGTGGACAAGGAAAGAGAGCACCACCTGAGAGGAGAGTGCCAGA GTTGTGTGTACAACATGATGGGAAAAAGAGAAAAGAAACAAGGGGAATTTGGAAAGGCCAAGGGCAGCCGCGCCATCT GGTATATGTGGCTAGGGGCTAGATTTCTAGAGTTCGAAGCCCTTGGATTCTTGAACGAGGATCACTGGATGGGGAGAGA GAACTCAGGAGGTGGTGTTGAAGGGCTGGGATTACAAAGACTCGGATATGTCCTAGAAGAGATGAGTCGCATACCAGGA SEQ ID N°: 73

GGAAGGATGTATGCAGATGACACTGCTGGCTGGGACACCCGCATCAGCAGGTTTGATCTGGAGAATGAAGCTCTAATCA CCAACCAAATGGAGAAAGGGCACAGGGCCTTGGCATTGGCCATAATCAAGTACACATACCAAAACAAAGTGGTAAAGGT CCTTAGACCAGCTGAAAAAGGGAAGACAGTTATGGACATTATTTCGAGACAAGACCAAAGGGGGAGCGGACAAGTTGTC ACTTACGCTCTTAACACATTTACCAACCTAGTGGTGCAACTCATTCGGAATATGGAGGCTGAGGAAGTTCTAGAGATGCAA GACTTGTGGCTGCTGCGGAGGTCAGAGAAAGTGACCAACTGGTTGCAGAGCAACGGATGGGATAGGCTCAAACGAATG GCAGTCAGTGGAGATGATTGCGTTGTGAAGCCAATTGATGATAGGTTTGCACATGCCCTCAGGTTCTTGAATGATATGGG AAAAGTTAGGAAGGACACACAAGAGTGGAAACCCTCAACTGGATGGGACAACTGGGAAGAAGTTCCGTTTTGCTCCCAC CACTTCAACAAGCTCCATCTCAAGGACGGGAGGTCCATTGTGGTTCCCTGCCGCCACCAAGATGAACTGATTGGCCGGGC CCGCGTCTCTCCAGGGGCGGGATGGAGCATCCGGGAGACTGCTTGCCTAGCAAAATCATATGCGCAAATGTGGCAGCTC CTTTATTTCCACAGAAGGGACCTCCGACTGATGGCCAATGCCATTTGTTCATCTGTGCCAGTTGACTGGGTTCCAACTGGG AGAACTACCTGGTCAATCCATGGAAAGGGAGAATGGATGACCACTGAAGACATGCTTGTGGTGTGGAACAGAGTGTGGA TTGAGGAGAACGACCACATGGAAGACAAGACCCCAGTTACGAAATGGACAGACATTCCCTAT7TGGGAAAAAGGGAAGA CTTGTGGTGTGGATCTCTCATAGGGCACAGACCGCGCACCACCTGGGCTGAGAACATTAAAAACACAGTCAACATGGTGC GCAGGATCATAGGTGATGAAGAAAAGTACATGGACTACCTATCCACCCAAGTTCGCTACTTGGGTGAAGAAGGGTCTACA CCTGGAGTGCTGTAAGCACCAATCTTAGTGTTGTCAGGCCTGCTAGTCAGCCACAGCTTGGGGAAAGCTGTGCAGCCTGT GACCCCCCCAGGAGAAGCTGGGAAACCAAGCCTATAGTCAGGCCGAGAACGCCATGGCACGGAAGAAGCCATGCTGCCT GTGAGCCCCTCAGAGGACACTGAGTCAAAAAACCCCACGCGCTTGGAGGCGCAGGATGGGAAAAGAAGGTGGCGACCT TCCCCACCCTTCAATCTGGGGCCTGAACTGGAGATCAGCTGTGGATCTCCAGAAGAGGGACTAGTGGTTAGAGGAGACCC CCCGGAAAACGCAAAACAGCATATTGACGCTGGGAAAGACCAGAGACTCCATGAGTTTCCACCACGCTGGCCGCCAGGC ACAGATCGCCGAATAGCGGCGGCCGGTGTGGGG

AHZ13508.1, poliproteína del virus del Zika del brote de Polinesia (H/PF/2013)

MKNPKKKSGGFRIVNMLKRGVARVSPFGGLKRLPAGLLLGHGPIRMVLAILAFLRFTAIKPSLGLINRWGSVGKKEAMEIIKKFKK DLAAMLRIINARKEKKRRGADTSVGIVGLLLTTAMAAEVTRRGSAYYMYLDRNDAGEAISFPTTLGMNKCYIQIMDLGHMCDA TMSYECPMLDEGVEPDDVDCWCNTTSTWVVYGTCHHKKGEARRSRRAVTLPSHSTRKLQTRSQTWLESREYTKHLIRVENWI FRNPGFALAAAAIAWLLGSSTSQKVIYLVMILLIAPAYSIRCIGVSNRDFVEGMSGGTWVDVVLEHGGCVTVMAQDKPTVDIEL VTTTVSNMAEVRSYCYEASISDMASDSRCPTQGEAYLDKQSDTQYVCKRTLVDRGWGNGCGLFGKGSLVTCAKFACSKKMTG KSIQPENLEYRIMLSVHGSQHSGMIVNDTGHETDENRAKVEITPNSPRAEATLGGFGSLGLDCEPRTGLDFSDLYYLTMNNKH WLVHKEWFHDIPLPWHAGADTGTPHWNNKEALVEFKDAHAKRQTVVVLGSQEGAVHTALAGALEAEMDGAKGRLSSGHLK CRLKMDKLRLKGVSYSLCTAAFTFTKIPAETLHGTVTVEVQYAGTDGPCKVPAQMAVDMQTLTPVGRLITANPVITESTENSKM MLELDPPFGDSYIVIGVGEKKITHHWHRSGSTIGKAFEATVRGAKRMAVLGDTAWDFGSVGGALNSLGKGIHQIFGAAFKSLF GGMSWFSQILIGTLLMWLGLNTKNGSISLMCLALGGVLIFLSTAVSADVGCSVDFSKKETRCGTGVFVYNDVEAWRDRYKYHP DSPRRLAAAVKQAWEDGICGISSVSRMENIMWRSVEGELNAILEENGVQLTVVVGSVKNPMWRGPQRLPVPVNELPHGWK AWGKSYFVRAAKTNNSFVVDGDTLKECPLKHRAWNSFLVEDHGFGVFHTSVWLKVREDYSLECDPAVIGTAVKGKEAVHSDL GYWIESEKNDTWRLKRAHUEMKTCEWPKSHTLWTDGIEESDUIPKSLAGPLSHHNTREGYRTQMKGPWHSEELEIRFEECPG TKVHVEETCGTRGPSLRSTTASGRVIEEWCCRECTMPPLSFRAKDGCWYGMEIRPRKEPESNLVRSMVTAGSTDHMDHFSLG VLVILLMVQEGLKKRMTTKIIISTSMAVLVAMILGGFSMSDLAKLAILMGATFAEMNTGGDVAHLAUAAFKVRPALLVSFIFRA NWTPRESMLLALASCLLQTAISALEGDLMVUNGFALAWLAIRAMVVPRTDNITLAILAALTPLARGTLLVAWRAGLATCGGFM LLSLKGKGSVKKNLPFVMALGLTAVRLVDPINVVGLLLLTRSGKRSWPPSEVLTAVGLICALAGGFAKADIEMAGPMAAVGLLIV SYVVSGKSVDMYIERAGDITWEKDAEVTGNSPRLDVALDESGDFSLVEDDGPPMREIILKVVLMTICGMNPIAIPFAAGAWYVY VKTGKRSGALWDVPAPKEVKKGETTDGVYRVMTRRLLGSTQVGVGVMQEGVFHTMWHVTKGSALRSGEGRLDPYWGDVK QDLVSYCGPWKLDAAWDGHSEVQLLAVPPGERARNIQTLPGIFKTKDGDIGAVALDYPAGTSGSPILDKCGRVIGLYGNGVVIK NGSYVSAITQGRREEETPVECFEPSMLKKKQLTVLDLHPGAGKTRRVLPEIVREAIKTRLRTVILAPTRVVAAEMEEALRGLPVRY MTTAVNVTHSGTEIVDLMCHATFTSRLLQPIRVPNYNLYIMDEAHFTDPSSIAARGYISTRVEMGEAAAIFMTATPPGTRDAFP DSNSPIMDTEVEVPERAWSSGFDWVTDHSGKTVWFVPSVRNGNEIAACLTKAGKRVIQLSRKTFETEFQKTKHQEWDFWTT DISEMGANFKADRVIDSRRCLKPVILDGERVILAGPMPVTHASAAQRRGRIGRNPNKPGDEYLYGGGCAETDEDHAHWLEAR MLLDNIYLQDGUASLYRPEADKVAAIEGEFKLRTEQRKTFVELMKRGDLPVWLAYQVASAGITYTDRRWCFDGTTNNTIMEDS VPAEVWTRHGEKRVLKPRWMDARVCSDHAALKSFKEFAAGKRGAAFGVMEALGTLPGHMTERFQEAIDNLAVLMRAETGS RPYKAAAAQLPETLETIMLLGLLGTVSLGIFFVLMRNKGIGKMGFGMVTLGASAWLMWLSEIEPARIACVUVVFLLLVVUPEPE KQRSPQDNQMAIIIMVAVGLLGLITANELGWLERTKSDLSHLMGRREEGATIGFSMDIDLRPASAWAIYAALTTFITPAVQHAV TTSYNNYSLMAMATQAGVLFGMGKGMPFYAWDFGVPLLMIGCYSQLTPLTLIVAIILLVAHYMYLIPGLQAAAARAAQKRTAA GIMKNPVVDGIVVTDIDTMTIDPQVEKKMGQVLUAVAVSSAILSRTAWGWGEAGALITAATSTLWEGSPNKYWNSSTATSLC NIFRGSYLAGASUYTVTRNAGLVKRRGGGTGETLGEKWKARLNQMSALEFYSYKKSGITEVCREEARRALKDGVATGGHAVSR GSAKLRWLVERGYLQPYGKVIDLGCGRGGWSYYAATIRKVQEVKGYTKGGPGHEEPMLVQSYGWNIVRLKSGVDVFHMAAE PCDTLLCDIGESSSSPEVEEARTLRVLSMVGDWLEKRPGAFCIKVLCPYTSTMMETLERLQRRYGGGLVRVPLSRNSTHEMYWV SGAKSNTIKSVSTTSQLLLGRMDGPRRPVKYEEDVNLGSGTRAVVSCAEAPNMKIIGNRIERIRSEHAETWFFDENHPYRTWAY HGSYEAPTQGSASSLINGVVRLLSKPWDVVTGVTGIAMTDTTPYGQQRVFKEKVDTRVPDPQEGTRQVMSMVSSWLWKELG KHKRPRVCTKEEFINKVRSNAALGAIFEEEKEWKTAVEAVNDPRFWALVDKEREHHLRGECQSCVYNMMGKREKKQGEFGKA KGSRAIWYMWLGARFLEFEALGFLNEDHWMGRENSGGGVEGLGLQRLGYVLEEMSRIPGGRMYADDTAGWDTRISRFDLE NEALITNQMEKGHRALALAIIKYTYQNKVVKVLRPAEKGKTVMDIISRQDQRGSGQVVTYALNTFTNLVVQLIRNMEAEEVLEM QDLWLLRRSEKVTNWLQSNGWDRLKRMAVSGDDCVVKPIDDRFAHALRFLNDMGKVRKDTQEWKPSTGWDNWEEVPFC SHHFNKLHLKDGRSIVVPCRHQDELIGRARVSPGAGWSIRETACLAKSYAQMWQLLYFHRRDLRLMANAICSSVPVDWVPTG RTTWSIHGKGEWMTTEDMLVVWNRVWIEENDHMEDKTPVTKWTDIPYLGKREDLWCGSUGHRPRTTWAENIKNTVNMV RRIIGDEEKYMDYLSTQVRYLGEEGSTPGVL

SEQ ID N°: 749320_Zika_PF_lF

ttaggatccGTTGTTGATCTGTGTGAAT

SEQ ID N°: 759321_Zika_PF_lR

taactcgagCGTACACAACCCAAGTT

SEQ ID N°: 769322_Zika_PF_2F

ttaggatccTCACTAGACGTGGGAGTG

SEQ ID N°: 779323_Zika_PF_2R

taactcgagAAGCCATGTCYGATATTGAT

SEQ ID N°: 789324_Zika_PF_3F

ttaggatccGCATACAGCATCAGGTG

SEQ ID N°: 799325_Zika_PF_3R

taactcgagTGTGGAGTTCCGGTGTCT

SEQ ID N°: 809326_Zika_PF_4F

ttaggatccGAATAGAGCGAARGTTGAGATA

SEQ ID N°: 81 9327_Zika_PF_4R

taactcgAGTGGTGGGTGATCTTCTTCT

SEQ ID N°: 829328_Zika_PF_5F

ttaggatcCAGTCACAGTGGAGGTACAGTAC

SEQ ID N°: 839329_Zika_PF_5R

taactcgagCRCAGATACCATCTTCCC

SEQ ID N°: 849330_Zika_PF_6F

ttaggatCCCTTATGTGCTTGGCCTTAG

SEQ ID N°: 859331_Zika_PF_6R

taactcgagTCTTCAGCCTCCATGTG

SEQ ID N°: 869332_Zika_PF_7F

ttaggatccAATGCCCACTCAAACATAGA

SEQ ID N°: 879333_Zika_PF_7R

taactcgagTCATTCTCTTCTTCAGCCCTT

SEQ ID N°: 889334_Zika_PF_8F

ttaggatccAAGGGTGATCGAGGAAT

SEQ ID N°: 899335_Zika_PF_8R

taactcgagTTCCCTTCAGAGAGAGGAGC

SEQ ID N°: 909336_Zika_PF_9F

ttaggatccTCTTTTGCAAACTGCGATC

SEQ ID N°: 91 9337_Zika_PF_9R

taactcgagTCCAGCTGCAAAGGGTAT

SEQ ID N°: 929338_Zika_PF_10F

ttaggatccGTGTGGACATGTACATTGA

SEQ ID N°: 939339_Zika_PF_10R

taactcgagCCCATTGCCATAAAGTC

SEQ ID N°: 949340_Zika_PF_11F

ttaggatccTCATACTGTGGTCCATGGA

SEQ ID N°: 959341_Zika_PF_11R

taactcgagGCCCATCTCAACCCTTG

SEQ ID N°: 969342_Zika_PF_12F

ttaggatccTAGAGGGCTTCCAGTGC

SEQ ID N°: 979343_Zika_PF_12R

taactcgAGATACTCATCTCCAGGTTTGTTG

SEQ ID N°: 989344_Zika_PF_13F

ttaggatccGAAAACAAAACATCAAGAGTG

SEQ ID N°: 999345_Zika_PF_13R

taactcgagGAATCTCTCTGTCATGTGTCCT

SEQ ID N°: 1009346_Zika_PF_14F

ttaggatccTTGATGGCACGACCAAC

SEQ ID N°: 101 9347_Zika_PF_14R

ttaggatccGTTGTTGATCTGTGTGAAT

SEQ ID N°: 1029348_Zika_PF_15F

taactcgagCAGGTCAATGTCCATTG

SEQ ID N°: 1039349_Zika_PF_15R

ttaggatccTGTTGTGTTCCTATTGCTGGT

SEQ ID N°: 1049350_Zika_PF_16F

taactcgaGTGATCAGRGCCCCAGC

SEQ ID N°: 1059351_Zika_PF_16R

ttaggatccTGCTGCCCAGAAGAGAA

SEQ ID N°: 1069352_Zika_PF_17F

taactcgaGCACCAACAYGGGTTCTT

SEQ ID N°: 1079353_Zika_PF_17R

ttaggatcCTCAAGGACGGTGTGGC

SEQ ID N°: 1089354_Zika_PF_18F

taactcgagCAATGATCTTCATGTTGGG

SEQ ID N°: 1099355_Zika_PF_18R

ttaggatccTATGGGGGAGGACTGGT

SEQ ID N°: 1109356_Zika_PF_19F

taactcGAGCCCAGAACCTTGGATC

SEQ ID N°: 111 9357_Zika_PF_19R

ttaggatcCAGACCCCCAAGAAGGC SEQ ID N°: 1129358_Zika_PF_20F

taactcgagCCCCTTTGGTCTTGTCT

SEQ ID N°: 1139359_Zika_PF_20R

ttaggatccAGGAAGGATGTATGCAGATG

SEQ ID N°: 1149360_Zika_PF_21F

taactcgagACATTTGCGCATATGATTTTG

SEQ ID N°: 1159361_Zika_PF_21R

ttaggatccAGGAAGGACACACAAGAGT

SEQ ID N°: 1169362_Zika_PF_22F

taactcgagACAGGCTGCACAGCTTT

SEQ ID N°: 1179363_Zika_PF_22R

ttaggatccTCTCTCATAGGGCACAGAC

SEQ ID NO: 1189358_Zika_PF_20F

taactcgagCCCCTTTGGTCTTGTCT

SEQ ID NO: 1199359_Zika_PF_20R

ttaggatccAGGAAGGATGTATGCAGATG

SEQ ID NO: 1209360_Zika_PF_21F

taactcgagACATTTGCGCATATGATTTTG

SEQ ID NO: 121 9361_Zika_PF_21R

ttaggatccAGGAAGGACACACAAGAGT

SEQ ID NO: 1229362_Zika_PF_22F

taactcgagACAGGCTGCACAGCTTT

SEQ ID NO: 1239363_Zika_PF_22R

ttaggatccTCTCTCATAGGGCACAGAC

[0086] El virus Zika puede tener una poliproteína que incluye una proteína de envoltura (E) con una secuencia de aminoácidos proporcionada por cualquiera de los SEQ ID N°: 14-69. La secuencia de poliproteína o proteína E puede ser de al menos 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%. 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8% o 99,9% idéntico a cualquiera de los SEQ ID N°s: 2-69.

[0087] Los términos "idéntico" o "porcentaje de identidad" en el contexto de dos o más ácidos nucleicos o secuencias de aminoácidos se refieren a dos o más secuencias o subsecuencias que son iguales. Dos secuencias son "sustancialmente idénticas" si dos secuencias tienen un porcentaje especificado de residuos de aminoácidos o nucleótidos que son iguales (p. ej., al menos 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, o 99% de identidad) en una región especificada o en toda la secuencia, cuando se comparan y alinean para obtener la máxima correspondencia en una ventana de comparación, o región designada según se mida utilizando uno de los siguientes algoritmos de comparación de secuencias o mediante alineación manual e inspección visual. Opcionalmente, la identidad existe sobre una región que tiene al menos aproximadamente 50 nucleótidos (o 10 aminoácidos) de longitud, o más preferiblemente sobre una región que tiene de 100 a 500 o 1000 o más nucleótidos (o 20, 50, 200 o más aminoácidos) de longitud. La identidad puede existir a lo largo de una proteína, como la proteína E.

[0088] Para la comparación de secuencias, normalmente una secuencia actúa como secuencia de referencia, con la que se comparan las secuencias de prueba. Los métodos de alineación de secuencias para su comparación son bien conocidos en la técnica. Véase, p. ej., el algoritmo de homología local de Smith y Waterman (1970) Adv. y Pub. Matemáticas. 2:482c, mediante el algoritmo de alineación homológica de Needleman y Wunsch, J. MoI. Biol. 48:443, 1970, mediante el método de búsqueda de similitudes de Pearson y Lipman. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:2444, 1988, mediante implementaciones informáticas de estos algoritmos (GAP, BESTFIT, FASTA, Jalview y TFASTA en el Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group. 575 Science Dr., Madison. WI), mediante la implementación de alineamientos multi-secuencia utilizando, p. ej., CLUSTALW (Larkin et al., (2007). Bioinformatics, 23, 2947-2948.) o MAFFT (Katoh & Toh, 2008, Briefings in Bioinformatics 9:286-298), o mediante alineación manual e inspección visual (véase, p. ej., Brent et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc. (Ringbou ed., 2003)). Dos ejemplos de algoritmos adecuados para determinar el porcentaje de identidad y similitud de secuencias son los algoritmos BL<a>S<t>y BLAST 2.0, que se describen en Altschul et al., Nuc. Acids Res. 25:3389-3402, 1977 and Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-410, 1990, respectivamente.

EJEMPLOS

Ejemplo 1: Desarrollo de un proceso de purificación para una vacuna viva atenuada contra el virus Chikungunya producida en células Vero

[0089] Se desarrolló un procesodownstreampara la purificación de partículas infecciosas del virus Chikungunya por el que se eliminan las partículas y agregados de virus no infecciosos mediante la adición de sulfato de protamina. Las inesperadas y novedosas propiedades de purificación del sulfato de protamina (PS) se evaluaron en procesos de purificación del virus de Chikungunya (ChikV) de la siguiente manera:Se desarrolló un proceso de purificacióndownstreampara el mutante atenuado del virus de Chikungunya "A5nsP3" (descrito por Hallengard et al., 2014, supra) producido en condiciones de cultivo celular estándar en células Vero. El virus Chikungunya A5nsP3 atenuado se derivó de la cepa LR2006-OPY1, cuyo genoma completo se proporciona en el presente documento como SEQ ID N°: 72. Brevemente, el procesodownstreamconsiste en la filtración de la cosecha bruta seguida de la concentración y la diafiltración en un sistema de filtración de flujo tangencial (TFF). El ADN y las proteínas de la célula huésped se redujeron por precipitación con sulfato de protamina y por adsorción discontinua, respectivamente. La centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa se realizó como etapa final de pulido. De 16 frascos de rodillo se purificaron 1 * 1012 UFP totales con un rendimiento global del proceso DSP del 10-15 % (pérdida de ~1 log10 TCID50). Las muestras del pool de gradiente de sacarosa se caracterizaron con respecto a las impurezas relacionadas con el producto, tales como ADNhc, HCP y endotoxinas, y cumplieron los criterios de seguridad.

Cosecha del medio de cultivo de células Vero que contiene ChikV A5nsP3.

[0090] ChikV A5nsP3 se cultivó en células Vero en frascos de rodillo. Se realizó una primera cosecha a las 24 horas posinfección (hpi; cosecha del día 1) y se almacenó a 2-8°C hasta su posterior procesamiento. Tras la primera cosecha, se añadió medio fresco y se devolvieron los frascos de rodillos a la incubadora. Se realizó una segunda cosecha tras 48 horas después de la infección (cosecha del día 2) y se almacenó a 2-8°C.

Filtración de la cosecha bruta de cultivos celulares

[0091] En ambos puntos temporales de la cosecha, la cosecha cruda se filtró inmediatamente utilizando una cápsula filtrante de 0,2 pm (GE ULTA™ CG, 2 pulgadas). La cosecha filtrada después de 48 hpi se juntó con la cosecha de 24 hpi y el material de cosecha filtrado juntado se procesó inmediatamente por ultrafiltración.

Purificación de ChikV A5nsP3 por filtración de flujo tangencial (TFF)

[0092] El material de cosecha filtrado y agrupado se procesó posteriormente mediante filtración de flujo tangencial (TFF) para concentrar la cosecha, reducir las proteínas de las células huésped y sustituir el medio de cultivo celular agotado por un sistema tampón definido (intercambio tampón). Se utilizó un sistema TFF Millipore (portamembranas Millipore Pellicon II mini) equipado con un módulo de membrana PES de 100 kDa de corte (Pellicon2 Biomax, 1000 cm2) para la concentración y el intercambio de tampones. Se montó un módulo de membrana Pellicon2 Biomax en el minifiltro Pellicon II y se conectó el dispositivo a una bomba peristáltica. El sistema se enjuagó primero con agua ultrapura y después se desinfectó mediante recirculación de NaOH 0,1 M durante 60 minutos. En caso de que el sistema no se utilizara inmediatamente, se almacenó en NaOH 0,1 M hasta su uso. Antes de su uso, el sistema se enjuagó con 1 L de agua de ósmosis inversa seguida de tampón A hasta que el valor de pH del permeado fue constante a pH 7,4 ± 0,2.

Ajuste de la cosecha de ChikVA5nsP3 (pH, sal)

[0093] El material de cosecha filtrado y agrupado se ajustó a una concentración final de 25 mM Tris y 150 mM NaCl utilizando soluciones madre de ambos componentes (véase la Tabla 1). Este ajuste se realizó para aumentar la capacidad tampón y reducir la adsorción inespecífica a la membrana. Los volúmenes necesarios de las soluciones madre D (1 M Tris, pH 7,4) y E (4,5 M NaCl) se calcularon del siguiente modo:

Volumen de la solución madre D 1 M Tris, pH 7,4 añadida a la cosecha filtrada = Volumen de la cosecha filtrada / 40 Volumen de la solución madre E 4,5 M NaCl añadida a la cosecha filtrada = Volumen de la cosecha filtrada / 30 Ejemplo: La cosecha de 4 L obtenida de 20 RB (850cm2) requeriría la adición de 100 mL de solución madre D (1 M Tris, pH 7,4) y 133 mL de solución madre E (4,5 M NaCl).

[0094] Los volúmenes calculados de solución madre D y tampón E se añadieron a la cosecha filtrada mezclada bajo agitación suave. A continuación, la mezcla ajustada se agitó con un agitador magnético durante 5 minutos a temperatura ambiente.

Concentración y diafiltración de la cosecha de ChikV A5nsP3 mediante TFF.

[0095] En una primera etapa, el material de cosecha ajustado se concentró aproximadamente 10 veces. El caudal de alimentación fue de aproximadamente 220 mL/min. El flujo transmembrana a una presión transmembrana de aproximadamente 0,6 bar fue del orden de 90 ± 5 mL/min por 1000 cm2 de membrana. Tras la concentración, el medio de cultivo celular se intercambió con 25 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7,5, mediante diafiltración continua con 6 intercambios de volumen. El tampón de diafiltración se suministraba al recipiente de alimentación desde un cilindro de medición mediante una segunda bomba peristáltica ajustada a un caudal de aproximadamente 90 mL/min. Se realizaron manualmente pequeños ajustes del caudal de la segunda bomba peristáltica en el intervalo de ± 10 mL/min para garantizar un volumen constante de cosecha en el recipiente de alimentación. Tras 6 intercambios de volumen, se detuvo la diafiltración. El líquido restante en el módulo de membrana se recuperó bombeando el módulo vacío con aire.

Adición de sacarosa al material ChikVA5nsP3 diafiltrado.

[0096] Después de la diafiltración, se añadió la solución madre de sacarosa H (solución de sacarosa al 50% (p/p)) al material diafiltrado para alcanzar una concentración final de sacarosa del 10% (p/p). El volumen de tampón H se calculó de la siguiente manera:

Volumen de solución madre H añadida mL = Volumen mL de material ChikV diafiltrado * 0,25 factor de dilución = 1:4 es decir, la concentración final de sacarosa es del 10

Ejemplo: 400 mL de solución diafiltrada de ChikV requerirían la adición de 100 mL de solución madre H (sacarosa al 50%).

[0097] El volumen calculado de solución H se añadió al material ChikV A5nsP3 diafiltrado bajo agitación suave y la solución se agitó a continuación utilizando un agitador magnético durante otros 5 minutos a temperatura ambiente. (En esta fase del proceso, el material puede seguir procesándose inmediatamente o almacenarse congelado (< -65°C, fase de mantenimiento).

Reducción del ADN por precipitación de sulfato de protamina

[0098] Se realizó una etapa de precipitación del ADN utilizando sulfato de protamina (PS) para reducir el ADNhc. La solución madre L de sulfato de protamina (50 mg/mL PS en PBS) se añadió al material diafiltrado ChikV A5nsP3 hasta una concentración nominal final de ~1,6 mg/mL. El volumen necesario de solución madre L se calculó del siguiente modo: Volumen de solución madre L 50 mg / mL PS añadido = Volumen de material diafiltrado ChikV A 5nsP3 en sacarosa al 10 % / 31

Ejemplo: 500 mL de solución diafiltrada de ChikV A5nsP3 en sacarosa al 10% requerirían la adición de 16 mL de solución madre L (50 mg/mL de PS en PBS).

[0099] La solución madre de sulfato de protamina se añadió mientras se agitaba el material ChikV A5nsP3 utilizando un agitador magnético, seguido de una incubación a 2-8°C durante 30 minutos. Tras la incubación, no se eliminó el precipitado. El material se procesó inmediatamente mediante adsorción por lotes con el medio de cromatografía Capto™ Core 700.

Adsorción por lotes con Capto™ Core 700

[0100] Para reducir los HCP, se realizó una etapa de adsorción por lotes con el medio de cromatografía Capto™ Core 700 (CC700) después de la precipitación del ADN. La papilla CC700 (50% de papilla en tampón A) se añadió directamente al material tratado con sulfato de protamina. El volumen de purín necesario se determinó basándose en el volumen de material de cosecha A5nsP3 ChikV (d1+d2) y se calculó de la siguiente manera:

Volumen de lechada de CC700 añadida a la cosecha concentrada tratada con PS mL = Volumen de A 5nsP3 ChikV material de cosecha mL * 0,02 factor de dilución = 1:50 es decir, la concentración final de CC700 es del 1%).

[0101] Tras la adición de la pasta, el material se incubó a 4°C durante 15 minutos bajo agitación constante utilizando un agitador magnético. Tras la incubación, la materia sólida CC700 se dejó sedimentar por gravedad durante 10 minutos. A continuación, se retiró el material A5nsP3 ChikV de la parte superior de la solución para evitar el bloqueo del filtro por las partículas CaptoCore. A continuación, las partículas CaptoCore restantes y el precipitado de ADN se eliminaron de la solución mediante filtración con una cápsula filtrante Mini Kleenpak EKV de 0,2 pm (Pall). El filtrado resultante se procesó posteriormente mediante centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa.

Centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa

[0102] La centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa (SGC) se utilizó para la concentración final y el pulido del material A5nsP3 ChikV. El material A5nsP3 ChikV se cargó encima de una solución formada por tres capas de sacarosa con diferentes densidades. Las tres capas de sacarosa se seleccionaron basándose en un estudio preliminar que mostró la formación de un gradiente lineal de sacarosa y una buena separación de las partículas de virus de los contaminantes residuales. Los volúmenes óptimos de las soluciones de sacarosa se determinaron empíricamente. Los volúmenes de las capas individuales para una centrifugación a escala de 500 mL se muestran en la Tabla 3.

Tabla 3. Concentraciones volúmenes de sacarosa escala de 500 mL

Preparación del gradiente de sacarosa

[0103] Los frascos de gradiente de sacarosa (500 mL) se prepararon superponiendo las capas individuales de sacarosa. Se conectó un tubo de plástico de 3,5 mm de diámetro interior a 60 cm de tubo de bomba peristáltica. El tubo de plástico se montó en un soporte de laboratorio mediante una abrazadera y se colocó en el frasco de la centrifugadora. La boquilla del tubo de plástico se colocó en el fondo de la botella. Utilizando una bomba peristáltica ajustada a un caudal de 25 mL por minuto, se bombeó al cilindro el material A5nsP3 ChikV y las soluciones de sacarosa. Se utilizó una probeta graduada como recipiente de alimentación. La primera solución bombeada fue el material A5nsP3 ChikV, ya que tenía la densidad más baja (10% de sacarosa (p/p)). Tras la adición del material A5nsP3 ChikV, las soluciones de sacarosa se bombearon en orden ascendente empezando por la de menor densidad (15%), seguida de la solución de sacarosa al 35% y terminando con la solución de sacarosa de mayor densidad (50%). Una vez transferidas todas las soluciones de sacarosa, se retiró con cuidado el tubo de plástico para no alterar las capas. En la Figura 14 se muestra una ilustración de un gradiente completado.

Centrifugación

[0104] Antes de la centrifugación, se preenfrió a 4°C una centrifugadora Beckman Avanti JXN-26 equipada con un rotor Beckman 10.500. Los frascos de SG preparados se transfirieron cuidadosamente al rotor preenfriado (4°C) para no perturbar las capas de sacarosa. Los frascos se centrifugaron a 10.000 rpm (-18.500 rcf) a 4°C durante 17-20 horas. (En caso de que se utilizara otro sistema de centrifugación con un rotor diferente, habría que calcular la velocidad y los tiempos de centrifugación necesarios basándose en el factor k para conseguir una eficacia de centrifugación comparable).

Cosecha en gradiente de sacarosa

[0105] La recolección del gradiente de sacarosa tras la centrifugación se realizó manualmente utilizando una bomba peristáltica. Para recoger el gradiente de sacarosa se utilizó un tubo de plástico de 3,5 mm de diámetro interior unido a 60 cm de tubo de bomba peristáltica. El frasco de 500 mL que contenía el gradiente centrifugado se montó en un soporte de laboratorio en posición inclinada (~12°) utilizando una pinza. A continuación, se introdujo el tubo de plástico en la botella tocando el borde inferior de la misma y se fijó en su posición con una abrazadera. Esto dio lugar a un pequeño espacio de 1-2 mm entre la entrada del tubo y el fondo de la botella (véase la Fig. 14). Utilizando una bomba peristáltica ajustada a un caudal de 60 mL por minuto, se recogió el gradiente y se dividió manualmente en fracciones de 5 mL. Se cosechó un tercio del volumen de la botella y se desechó el resto. Las fracciones se analizaron inmediatamente midiendo la absorbancia UV en un lector de placas como se describe a continuación.

Análisis de fracciones por absorbancia UV y SEC-HPLC

[0106] La medición de la absorbancia UV se utilizó como método primario para el análisis de las fracciones del gradiente de sacarosa. La absorbancia a 214, 280 y 260 nm se comprobó inmediatamente después de finalizar el fraccionamiento. Brevemente, se transfirió una muestra de 100 pl de cada fracción a una placa de 96 pocillos y se midió la absorbancia a 214, 260 y 280 nm utilizando un lector de placas. Los valores de absorbancia se representaron gráficamente frente al número de fracción. En la Fig. 11A se muestra un perfil representativo. Las fracciones que contenían A5nsP3 ChikV estaban indicadas por un pico en las tres longitudes de onda medidas (Fig. 11A, área sombreada en gris). La presencia de impurezas se indicó por un aumento de la señal UV214 tras el pico principal. Las fracciones que comprendían el pico principal se agruparon desde el inicio del pico hasta el valle de la curva de 214 nm. Este método puede utilizarse como método único para agrupar fracciones A5nsP3 ChikV.

[0107] Tras la identificación de las fracciones que contenían virus, se mezclaron las fracciones respectivas. Los criterios de agrupación de las fracciones SGC se basaron en los datos de UV 260 nm, p. ej., inicio de la agrupación al -10% del pico máximo, fin de la agrupación al -30% del pico máximo. (Puede ser necesario determinar empíricamente los criterios finales de agrupación a escala de fabricación). El gradiente de sacarosa se almacenó a < -65 °C o se formuló inmediatamente como sustancia activa (FS).

Cromatografía de exclusión por tamaño

[0108] Se analizó la pureza de las fracciones SGC agrupadas finales que contenían partículas infecciosas A5nsP3 ChikV purificadas mediante SEC-HPLC. En resumen, la SEC se realizó de la siguiente manera: se utilizó una columna Superóse 6 10/300 Increase (GE Healthcare) equilibrada con PBS 250 mM NaCl, pH 7,4 a 1 ml/min y 25°C, para detectar partículas ChikV a una longitud de onda de detección de 214 nm en las muestras agrupadas. La SEC-HPLC es un método semicuantitativo (rendimiento relativo) y cualitativo (pureza) que separa las partículas víricas intactas de los agregados víricos y las proteínas de la célula huésped (HCP). El método no puede distinguir entre partículas víricas infecciosas y no infecciosas debido a su idéntico tiempo de retención.

[0109] Como se muestra en la Fig. 11B, había dos picos definidos identificados por SEC: el pico A5nsP3 ChikV y un pico correspondiente a los componentes del tampón. El rendimiento de la etapa SGC basado en los datos SEC-HpLC para las fracciones agrupadas F6-F11 se estimó en ~70 %. La pureza final de la reserva de A5nsP3 ChikV SGC, basada en el análisis SEC-HPLC, se estimó en > 95%.

SDS-PAGE y tinción de plata

[0110] Se realizó una tinción de plata SDS-PAGE para evaluar cualitativamente la pureza de la muestra a lo largo del proceso de purificación, desde la primera cosecha de crudo hasta el SGC. Brevemente, las muestras del proceso ChikV analizadas por SDS-PAGE/tinción de plata se diluyeron 1:1,33 con tampón LDS y se calentaron a 70°C durante 5 minutos. Las muestras se cargaron en geles Bis-Tris al 4-12 % (NuPAGE). La tinción con plata se realizó con el kit de tinción Silver Express (Invitrogen).

[0111] En la Fig. 11C se muestra un gel teñido con plata de una purificación representativa de ChikV A5nsP3. Las proteínas virales E1, E2 y C están marcadas en la parte derecha del gel. El pool final de SGC (fracción 7-fracción 11) se muestra en el carril 12. Obsérvese que tras el tratamiento con CaptoCore700 sigue apareciendo una banda HCP definida que migra entre la proteína ChikV E2 y C y que se ha identificado como una banda única en SDS-PAGE. Esta impureza se elimina por centrifugación en gradiente de sacarosa, pero aún puede observarse en las fracciones 13 y 14 (correspondientes a los carriles 14 y 15 de la Fig. 11C).

Enriquecimiento de partículas infecciosas A5nsP3 ChikV mediante tratamiento PS.

[0112] Aunque generalmente se utiliza como método para eliminar ADNhc contaminante, en el curso de la presente invención se observó que el tratamiento con PS también elimina agregados de virus y HCP. Durante todo el proceso de purificación se utilizó la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC-HPLC, como se ha descrito anteriormente) para determinar la pureza del virus ChikV en relación con las impurezas que también generan absorción UV.

[0113] Como puede verse en la Fig. 12B, el tratamiento con PS reduce no sólo las proteínas de la célula huésped y los contaminantes de bajo peso molecular de la preparación de A5nsP3 ChikV, sino que también reduce el área SEC correspondiente a los productos del virus, incluidos los agregados como se indica. Un hallazgo sorprendente, sin embargo, fue que incluso una reducción del área SEC total en un 86% (en un experimento representativo mostrado en la Fig. 12A, porción gris de las barras) no resultó en una reducción concomitante de partículas de virus infecciosas medidas por TCID50 (Fig. 12A, eje izquierdo). En cambio, aunque se eliminó un gran porcentaje de partículas víricas mediante el tratamiento con PS, la mayoría de las partículas infecciosas permanecieron. Esta observación indica que el tratamiento con PS enriquece selectivamente las partículas víricas infecciosas a partir de un conjunto mayor de partículas víricas totales presentes en la cosecha bruta.

[0114] La TCID50 se realizó para cuantificar las partículas de virus infecciosas durante el transcurso del proceso de purificación y para asignar un título de virus activo a las muestras finales de sustancia farmacológica y producto farmacológico. Brevemente, se sembraron células Vero a razón de 2 * 104 células por pocillo en 100 pl de medio (EMEM con 2 mM de L-glutamina 5 % de FBS 1 % de antibiótico/antimicótico) en placas de fondo plano de 96 pocillos tratadas con TC y se incubaron durante la noche a 35 °C / 5 % de CO2. El segundo día, se infectaron monocapas de células Vero añadiendo 100 pl de diluciones seriadas 1:10 de las muestras de ensayo a cada uno de los pocillos sembrados por quintuplicado con células Vero y se incubaron a 35 °C / 5% CO2. El séptimo día, se contaron las placas mediante visualización al microscopio. La TCID50 se calculó según el método de cálculo de puntos finales de Reed & Münch (Reed, L.J.; Muench, H. (1938) A simple method of estimating fifty percent endpoints, The American Journal of Hygiene 27: 493 497).

[0115] Además, la microscopía electrónica de muestras de A5nsP3 ChikV antes y después del tratamiento con PS mostró que no sólo los agregados grandes sino también las partículas más pequeñas similares a virus no infecciosos (esencialmente partículas no completamente ensambladas que carecen del genoma de ARN) fueron eliminadas eficazmente por PS (Fig. 13).

[0116] Este enriquecimiento de partículas virales infecciosas también se observó cuando se analizaron por separado las cosechas crudas del día uno y del día dos. Como se presenta en la Tabla 4, el área SEC (partículas virales totales) de la cosecha del día 1 permanece más o menos igual tras el tratamiento con PS; mientras que se observa una gran disminución del área del pico viral en la cosecha del día 2 tras el tratamiento con PS. Esta observación fue confirmada por el análisis MALLS de la preparación de virus, en el que se observó que un mayor porcentaje de partículas de virus tenían el tamaño correcto tras el tratamiento con PS. De forma similar a los resultados mostrados en la Fig. 12, las cosechas de los días 1 y 2 no mostraron ninguna reducción en las partículas infecciosas medidas por TCID50 tras el tratamiento con PS, lo que indica que principalmente las partículas de virus no infecciosas, inmaduras y/o agregadas se eliminan durante el tratamiento con PS y las partículas infecciosas se enriquecen en la preparación.

[0117] Las muestras tratadas con PS se purificaron aún más mediante centrifugación en gradiente de sacarosa (véase la Fig. 14 para una preparación esquemática de un gradiente de sacarosa optimizado). Se determinó experimentalmente un gradiente óptimo de sacarosa como se muestra en la Fig. 15. Los resultados de la purificación adicional de ChikV tratada con PS en el gradiente de sacarosa optimizado de la invención se muestran en la Fig. 15D.

Tabla 4. Resumen del proceso de purificación de A5nsP3 ChikV descrito en el Ejemplo 1. El análisis SEC-MALLS de cosechas antes y después del tratamiento con PS muestra la eliminación de partículas de virus más grandes (agregados), un efecto que es particularmente pronunciado para las cosechas del día 2.

[0118] Finalmente, en la Fig. 16 se presenta una visión general de las cantidades relativas de partículas de A5nsP3 ChikV y otros componentes, medidas por SEC-HPLC en varias etapas a lo largo de todo el proceso de purificación del virus, desde la cosecha en bruto (a) hasta el pool final purificado con SGC. En resumen, el proceso no sólo elimina la gran mayoría de contaminantes y productos no deseados, sino que también purifica en gran medida las partículas infecciosas de ChikV. Como muestran los datos presentados anteriormente, la preparación final es una preparación altamente enriquecida de partículas infecciosas de ChikV

Formulación de la sustancia farmacológica (DS)

[0119] Las fracciones SGC agrupadas se diluyen con tampón de formulación DS M (10 mM Tris, 5% Sacarosa (p/p), 1% (10 mg/mL) rHSA, pH 7.4 ± 0.2). El volumen final objetivo de DS debe estar en el rango de aproximadamente 2 L. Basándose en los datos actuales, el rango estimado del factor de dilución podría ser de 1:20 a 1:50.

Filtración estéril de la DS final

[0120] El DS final se filtró en condiciones asépticas en una campana de flujo laminar utilizando un filtro de jeringa de grado de esterilidad de 0,2 pm (p. ej., cápsula filtrante Mini Kleenpak EKV de 0,2 pm con superficie filtrante de 220 cm2, Pall).

Cuantificación del ADN de la célula huésped (ADNhc), de la proteína de la célula huésped (HCP) y de la endotoxina

[0121] Se determinó el contenido residual de ADN de la célula huésped en las muestras de gradiente de sacarosa utilizando el ensayo basado en qPCR. Se determinó que el contenido de ADN en el pool de SGC era < 0,002 ng/mL. La presencia de proteína residual de células huésped (HCP) de células Vero se determinó mediante ELISA. Las proteínas residuales de la célula huésped presentes en las muestras del pool de gradiente de sacarosa se cuantificaron utilizando el kit ELISA Vero Cell HCP (Cygnus, F500). Se determinó que el contenido residual de proteína de la célula huésped en el pool de SGC era < 200 ng/mL.

[0122] El contenido de endotoxinas del pool de SGC y DS se midió mediante el sistema Endosafe®-PTS™ (Charles River). El sistema utiliza reactivos de lisado de ambocitos de Limulus (LAL) mediante una metodología cromogénica cinética para medir la intensidad del color directamente relacionada con el contenido de endotoxinas en una muestra. Cada cartucho contiene cantidades precisas de un reactivo LAL autorizado, un sustrato cromogénico y un estándar de control de endotoxinas. Las muestras se diluyeron 1:100 en WFI. Se determinó que el SGC Pool F7-F11 tenía < 5,00 EU/mL; asimismo, también se determinó que la Sustancia Fármaco tenía < 5,00 EU/mL.

[0123] Se propusieron las siguientes especificaciones para impurezas en el Producto Farmacéutico final: ADNhc < 10 ng/dosis; Endotoxinas < 50 UE/dosis; HCP < 200 ng/dosis. Estas especificaciones residuales ya se cumplirían en el pool de SGC altamente concentrado (~10 log TCID50/1T1L), lo que proporciona un alto margen de seguridad considerando el alto factor de dilución del pool de SGC a DP final de > 1:1000.

Ejemplo 2: Producción de una sustancia farmacológica del Zika apta para su aplicación como vacuna en humanos y animales Materiales y métodos:

[0124] Para la producción de ZikaV se utilizó como base la plataforma de proceso JEV (Srivastava et al., Vaccine 19 (2001) 4557-4565; US 6,309,650B1). Se adaptaron pequeños cambios de ciertas etapas del proceso a las propiedades del ZikaV y para mejorar la pureza. A continuación se resumen brevemente las fases del proceso (véanse también las figuras 17A y B). Brevemente, se evaluaron las inesperadas y novedosas propiedades de purificación del sulfato de protamina (PS) en procesos de purificación del virus Zika similares a los encontrados anteriormente. Una vez más, los agregados de partículas de virus no infecciosos, HCP y otras impurezas LMW se eliminaron mediante precipitación con PS, como lo demuestra la eliminación del hombro de agregados en SEC-HPLC y la ausencia de pérdida del título de virus infecciosos por el tratamiento con PS (Figura 18). A continuación se ofrece una mayor optimización del protocolo de purificación del Zika.

Upstream:

[0125]

• Expansión de células Vero basada en botella de rodillo (25x850cm2 CellBind):

• 5%<c>CO2, 35°C, MEM+2mM L-Glutamina 10% FBS

• Infección con el banco maestro de semillas de investigación del ZikaV (rMSB) a MOI 0,01

• Producción de virus sin suero

• 5% CO2, 35°C, MEM+2mM L-Glutamina

• Cosechas múltiples (días 2, 3, 5 y 7) con realimentación

• Filtración estéril de las cosechas y almacenamiento a 2-8°C hasta su posterior procesamiento

Downstream:

[0126]

• Agrupación de las cosechas y concentración por ultrafiltración (100kDa)

• Estabilización de la cosecha concentrada (Tris/10% sacarosa) para su almacenamiento en caso necesario (-80°C) • Eliminación del ADNhc mediante sulfato de protamina (2 mg/mL)

• Purificación en gradiente de sacarosa (gradiente optimizado de tres capas)

• Formaldehído Inactivación (0,02%, 22°C, 10 días), neutralización con Na-metabisulfito

• Dilución al contenido objetivo de antígeno DS y formulación con hidróxido de aluminio (0,5mg Al/mL)

[0127] La cepa H/PF/2013 del virus del Zika se aisló originalmente de una mujer de 51 años (número de acceso KJ776791.1, también SEQ ID N°: 13) de la Polinesia Francesa. Se obtuvo una muestra del Archivo Europeo de Virus (EVAg; Ref-SKU: 001v-EVA1545). A partir de este material, se preparó un banco maestro de semillas de investigación (rMSB) en células Vero como sustrato celular y se comprobó la secuencia genómica mediante secuenciación. Dado que se desconocía la secuencia genómica en las secuencias 5'y 3'flanqueantes de la cepa H/PF/2013 del virus Zika, se diseñaron cebadores para la secuenciación en esas regiones basándose en otras cepas del virus Zika, mientras que los cebadores internos se diseñaron a partir de la secuencia publicada (SEQ ID N°s: 80 a 123, véase también el cuadro A). La secuencia obtenida del rMSB mediante el uso de estos cebadores se proporciona mediante SEQ ID N°: 78. Había un solapamiento del 100% de la secuencia con la secuencia publicada de la cepa H/PF/2013 del virus del Zika (SEQ ID N°: 13). Sin embargo, secuenciamos regiones adicionales 5' (40 pb adicionales) y 3 (160 pb adicionales) representadas en SEQ ID N°: 78. El virus Zika puede comprender SEQ ID N°: 78. El ARN genómico es algo más largo que la secuencia según SEQ ID N°: 78 (quizás 200 pb adicionales). Además, cabe esperar que un virus Zika adaptado a una célula huésped como, p. ej., las células Vero, contenga una o más mutaciones. Por estas razones, el virus Zika puede comprender la secuencia de SEQ ID N°: 78 o, preferiblemente, una secuencia con al menos un 95%, 96%, 97%, 98% o al menos un 99% de identidad de secuencia con la secuencia proporcionada por SEQ ID N°: 78. Además, como es probable que el genoma vírico contenga aún más regiones flanqueantes a SEQ ID N°: 78; el virus Zika puede contener la secuencia de SEQ ID N°: 78 y opcionalmente comprende además extensiones en los extremos 5' y/o 3' de al menos 10, al menos 20, al menos 30, al menos 40, al menos 50, al menos 60, al menos 70, al menos 80, al menos 90, al menos 100, al menos 110, al menos 120 o al menos 130 nucleótidos. El virus Zika puede comprender al menos la secuencia codificante para toda la poliproteína de la cepa H/PF/2013 del virus Zika, es decir, la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°: 79 o una poliproteína con al menos 95%, 96%, 97%, 98%, o al menos 99% de identidad de secuencia con la secuencia proporcionada por SEQ ID N°: 79. Además, el virus Zika comprende al menos la secuencia codificante para la proteína E de la cepa H/<p>F/2013 del virus Zika SEQ ID N°: 47 o una proteína E de la misma con al menos un 95%, 96%, 97%, 98%, o al menos un 99% de identidad de secuencia con la secuencia proporcionada por SEQ ID N°: 47.

Crecimiento del virus en células Vero

[0128] Las células Vero se cultivaron en medio esencial mínimo de Eagle (EMEM) que contenía un 10% de suero bovino fetal (FBS). Se infectaron cultivos de monocapas celulares Vero con la cepa H/PF/2013 del virus del Zika a una multiplicidad de infección (moi) de 0,01 unidades formadoras de placas (ufp) por célula. Tras 2 horas de adsorción del virus, los cultivos se lavaron 3 veces con PBS y se alimentaron con EMEM sin FBS y se incubaron a 35°C con un 5% de CO2. Los cultivos de células Vero infectadas se incubaron hasta que el título del virus alcanzó el nivel deseado.

[0129] El medio de cultivo se cosechó en los días 2, 3, 5 y 7 y se juntaron de esos días de cosecha y luego se centrifugaron en una centrífuga estándar. A continuación, se filtraron los sobrenadantes. Los sobrenadantes de los cultivos de virus se concentraron mediante ultrafiltración TFF para eliminar los componentes de los medios de cultivo celular y reducir el volumen del lote.

Evaluación del procedimiento de cosecha

[0130] El proceso actual de cosecha del JEV ha programado cosechas en los días 3, 5, 7 y 9 post infección. Para imitar el proceso del JEV, se infectaron frascos de rodillos con el banco P4-FBS del ZIKV a una MOI de 0,01 en medio de infección (MEM con 2% de FBS 2mM de L-glutamina) durante 2 horas. Tras retirar el inóculo, las células se lavaron dos veces con PBS y se añadieron 200 mL de medio de producción (MEM+ 2mM L-glutamina).

[0131] Después de tomar una muestra el día 2, la primera cosecha de virus se realizó el día 3 después de la infección. En este punto se pudo observar un CPE significativamente mayor en comparación con las células en las que se eliminó el virus el día 2. El análisis de la placa mostró que los títulos virales en el día 2 estaban en el mismo rango que para el programa de recolección estándar. Sin embargo, a partir de la cosecha del día 3, los títulos observados fueron significativamente más bajos, en correlación con el aumento del ECP observado en comparación con el programa de cosecha estándar. El día 5 después de la infección ya no se observaron células vivas, por lo que el experimento se dio por concluido con la cosecha final del día 5.

Tabla 5: Los títulos calculados por ensayo de placa se resumen en la lista a continuación.

[0132] Este hallazgo condujo a un programa de cosecha optimizado para controlar mejor el CPE y permitir días adicionales de cosecha 5 y 7, ver Figura 23. Para ambos días de cosecha, el protocolo optimizado de ZikaV produjo títulos de virus significativamente más altos en comparación con el protocolo modificado, lo que demuestra que el momento de la primera cosecha es crucial para los rendimientos de producción. Además, la primera cosecha en el día 3 da como resultado un máximo de 2 puntos de cosecha, mientras que la primera cosecha en el día 2 permite 4 puntos de cosecha, lo que aumenta aún más la ganancia de rendimiento.

Purificación downstream del virus Zika

[0133] El proceso de purificación se llevó a cabo a temperatura ambiente (18-22°C) a menos que se indique lo contrario. La purificación del virus comenzó con la concentración de la cosecha combinada filtrada utilizando módulos de ultrafiltración TFF de 100 kDa de corte para eliminar los componentes del medio de cultivo celular y reducir el volumen del lote. Tras la concentración, el material de cosecha filtrado y agrupado se ajustó a una concentración final de 25 mM de Tris pH 7,5 y 10% de sacarosa (p/p) utilizando una solución madre de ambos componentes (véase la Figura 19 para la SEC-HPLC de diferentes cosechas antes del tratamiento con PS). Esto permitió congelar la cosecha concentrada a < -65°C en caso necesario.

[0134] La reducción del ADN de la célula huésped y de las proteínas, así como la reducción de los agregados de virus no infecciosos en el material concentrado se logró mediante precipitación con sulfato de protamina (2 mg/mL) seguida de centrifugación por densidad de sacarosa (2-8°C) como etapa final de pulido (véase la Figura 20 para SEC-HPLC de diferentes cosechas después del tratamiento con PS). El proceso de purificación se diseñó para que se completara en 2 días laborables, comenzando el SGC al final del día 1, seguido del fraccionamiento y el análisis SDS-PAGE el día 2. Las fracciones del gradiente de sacarosa se almacenaron a 2-8 °C durante el análisis SDS-PAGE (tinción de plata) para identificar las fracciones puras que contenían ZikaV (véase la Figura 21). Tras agrupar las fracciones pertinentes, se diluyó el pool y se inactivó con formol. Tras agrupar las fracciones relevantes de la centrifugación en gradiente de sacarosa, el pool se diluyó 1:3 en PBS y se inactivó con Formalina (0,02% v/v, 200ppm). Las fracciones se sometieron a análisis por SDS-PAGE.

Efecto del tratamiento con PS en la recuperación del virus

[0135] Muestras de cosechas individuales concentradas 30x días 2, 3, 5 y 7 fueron analizadas antes (Figura 19) y después del tratamiento PS (Figura 20) por SEC-HPLC y ensayo de placa. La SEC-HPLC se utilizó para determinar el contenido total relativo del ZikaV (activo inactivo) expresado como área del pico, mientras que el valor rel. La pureza del pico del ZikaV se indica como el contenido relativo de la población de monómeros del virus respecto al pico total del virus. El ensayo en placa establece el contenido de partículas virales activas totales en cada muestra. Los resultados experimentales se resumen en la Tabla 1. La recuperación del pico de virus por SEC-HPLC fue sólo de entre el 12 y el 36%, con una pureza del pico tras el tratamiento con PS del orden del > 90% (no se detectaron agregados de virus). La recuperación de partículas víricas activas mediante el ensayo en placa fue en todos los casos de > 100% (130-700%, rango dentro de la variabilidad del ensayo), lo que demuestra que no se perdieron partículas víricas activas durante el tratamiento con PS. Estos resultados muestran que durante el tratamiento con PS sólo se eliminaron las partículas no infecciosas (virus inmaduros y/o agregados).

Tabla6:Recuperación de ZikaV por SEC-HPLC y ensayo de placas antes y después del tratamiento con PS.SEC-HPLC

Ensayo de placas

[0136]

Centrifugación en gradiente de sacarosa

[0137] La cosecha tratada con PS se dividió en dos partes y se cargó en dos botellas de centrífuga. Se utilizó la centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa (SGC) para la concentración final y el pulido del material del ZikaV. La cosecha concentrada tratada con ZikaV PS se cargó sobre una solución consistente en tres capas de sacarosa con diferentes densidades. Las tres capas de sacarosa se seleccionaron basándose en un estudio preliminar que mostró la formación de un gradiente lineal de sacarosa y la separación completa de las partículas de virus de los contaminantes residuales, como se demostró para el ChikV (Fig. 15D). Los volúmenes óptimos de las soluciones de sacarosa se determinaron empíricamente. Los volúmenes de las capas individuales para una centrifugación en escala de botella de 100 mL se muestran en la Tabla 2.

Tabla 7: Capas/volúmenes individuales para una centrifugación en botella.

[0138] Los frascos de gradiente de sacarosa se prepararon estratificando las capas individuales de sacarosa. Se fijó un tubo de plástico al tubo de la bomba peristáltica. El tubo de plástico se montó en un soporte de laboratorio mediante una abrazadera y se colocó en el frasco de la centrifugadora. La boquilla del tubo de plástico tocaba el fondo de la botella. Mediante una bomba peristáltica se bombeó el material ZikaV y las soluciones de sacarosa al cilindro. Se utilizó una probeta graduada como recipiente de alimentación. La primera solución bombeada fue el material ZikaV, ya que representaba la solución de menor densidad (10 % de sacarosa (p/p)). Después del material ZikaV, se bombearon las soluciones de sacarosa en orden ascendente, comenzando con la solución J al 15 % (p/p), seguida de la solución I al 35 % de sacarosa y terminando con la solución H de sacarosa de mayor densidad (50 % (p/p)). La configuración descrita se muestra en la figura 14. Una vez transferidas todas las soluciones de sacarosa, se retiró con cuidado el tubo de plástico para no alterar las capas.

[0139] Antes de la centrifugación, la centrifugadora se preenfrió a 4°C. Los frascos de SG preparados se transfirieron cuidadosamente al rotor preenfriado. (Nota: Debe evitarse el movimiento brusco de las botellas durante la transferencia al rotor para no alterar las capas de sacarosa). Los frascos se centrifugaron a ~11.000 RCF máx. a 4 °C durante al menos 20 horas, sin freno/desaceleración activados. En caso de que se utilice un sistema de centrifugación con un rotor diferente, la velocidad y los tiempos de centrifugación necesarios deben calcularse en función del factor k para conseguir una eficacia de centrifugación comparable.

[0140] La recolección del gradiente de sacarosa se realizó manualmente utilizando una bomba peristáltica. Para recoger el gradiente de sacarosa se utilizó un tubo de plástico conectado a una bomba peristáltica. El frasco que contenía el gradiente se montó en un soporte de laboratorio en posición inclinada (~12°) utilizando una pinza. A continuación, se introdujo el tubo de plástico en la botella tocando el borde inferior de la misma y se fijó en su posición con una abrazadera. Esto dio lugar a un pequeño espacio de 1-2 mm entre la entrada del tubo y el fondo de la botella (véase la figura 14).

[0141] Utilizando una bomba peristáltica ajustada a un caudal de 30 mL por minuto, se recogió el gradiente y se dividió manualmente en fracciones de 2 mL. Se recogió un total de 32 fracciones por frasco (~ 64 mL) y se desechó el volumen restante. Las fracciones se analizaron inmediatamente mediante SDS-PAGE / tinción de plata para identificar las fracciones que contenían virus con una pureza suficientemente elevada. En la Figura 21 se muestra un SDS-PAGE representativo. Las fracciones 10-14 se mezclaron y se procesaron posteriormente.

[0142] La solución viral purificada se inactivó mediante incubación con formaldehído al 0,02% durante un periodo de diez días en una incubadora a temperatura controlada de 22°C. El formaldehído se neutraliza añadiendo metabisulfito sódico el décimo día.

[0143] El grupo de gradiente de sacarosa (~17 mL después del muestreo) se diluyó 3 veces más con PBS hasta un volumen final de 51 mL en un recipiente PETG. Se añadió a esta piscina un volumen de solución de formaldehído al 1% (10.000 ppm) equivalente a 1/50 del volumen final de la piscina de preformaldehído, lo que dio lugar a una concentración efectiva de 200 ppm. La solución tratada con formaldehído se mezcló en un agitador magnético durante 10 minutos. Tras la toma de muestras, la solución vírica tratada con formaldehído se colocó en una incubadora refrigerada a 22°C ± 2°C. El día 5 tras la adición de formaldehído, la solución vírica tratada con formaldehído se filtró a través de un filtro de 0,2 pm y se volvió a colocar en la incubadora a 22°C ± 2°C. El día 10, tras retirar la muestra final de inactivación de 10 días, se transfirió asépticamente un volumen del 1 % (del peso de la solución viral final tratada con formaldehído) de solución de metabisulfito sódico 200 mM (concentración final 2mM) al recipiente PETG que contenía la solución viral tratada con formaldehído. Después de mezclar durante 5 minutos en un agitador magnético, la solución viral inactivada neutralizada se mantiene a temperatura ambiente (20 a 25°C) durante un mínimo de 30 minutos. Tras la toma de muestras, la solución vírica inactivada neutralizada se almacena a 5°C ± 3°C hasta su posterior procesamiento.

Inactivación por formaldehído

[0144] Los parámetros críticos para esta etapa son la concentración final de formalina, la temperatura, la mezcla y la transferencia a un nuevo recipiente. Se ha establecido un criterio de aceptación preliminar para un máximo de ufp/mL (determinado mediante ensayo en placa) en el pool diluido antes del tratamiento con formaldehído.

[0145] La calidad de la solución viral inactivada neutralizada se controló mediante los siguientes parámetros: Ensayo en placa el día 10, SEC-HPLC, SDS-PAGE/Western Blot.

[0146] Curiosamente, el análisis SEC-HPLC de las muestras tomadas durante el periodo de inactivación seguido de la neutralización con bisulfito mostró un área de pico más o menos constante durante todo el periodo de inactivación. Esto contrasta con el JEV, en el que se observan pérdidas de partículas virales de hasta el 60% utilizando el proceso divulgado por Srivastava et al. Vaccine 19 (2001) 4557-4565. En un modelo a escala reducida, las pérdidas virales fueron incluso mucho mayores debido a la relación superficie/área a menor escala y a las elevadas pérdidas debidas a la adsorción inespecífica. Se observaron las siguientes diferencias entre el experimento de inactivación del ZikaV y el de inactivación del JEV:

A) Pureza mucho mayor de la reserva de SGP del ZikaV con respecto a la PS residual (< 2pg/mL) en comparación con el JEV. La muestra 3 veces inactivada del ZikaV contenía, por tanto, < 1pg/mL de PS residual. El pool comercial JEV SGP contiene una media de ~120pg/mL (hasta 152 pg/mL posible). La dilución media a la solución de inactivación de ~14 veces da como resultado un contenido residual de PS de hasta ~11 pg/mL. Es posible que una mayor cantidad de PS residual pueda causar la precipitación del virus debido a la reticulación / reacción con la formalina.

B) La muestra de inactivación del ZikaV contenía ~10% de sacarosa (dilución triple de la reserva de SGP que contenía -30-35% de sacarosa). La sacarosa podría tener un efecto estabilizador de las partículas virales del ZikaV durante el tratamiento con formalina.

Dilución a DS y formulación con hidróxido de aluminio (DP)

[0147] Para la preparación de la sustancia farmacológica del ZikaV utilizada en el ensayo de potencia en ratones, se buscó un contenido de antígeno (expresado como partículas virales totales o área de pico SEC) 5 veces mayor en comparación con Ixiaro. La base para la determinación del contenido de antígeno fue la SEC-HPLC. Brevemente, se utilizó una columna Superose 610/300 Increase (GE Healthcare) equilibrada con PBS 250 mM NaCl, pH 7,4 a 1 ml/min y 25°C, para detectar el ZikaV a una longitud de onda de detección de 214 nm en las muestras de cosecha y durante todo el procesodownstream.En el proceso actual del JEV, el contenido de antígeno en la VNI se determina mediante un ELISA específico. Se observó una buena correlación entre el contenido de antígeno determinado por ELISA y por SEC-HPLC. En promedio, el contenido de antígeno en las muestras comerciales de VNI está en el rango de 33 AU/mL correspondiente a ~5.2mAU de área de pico de JEV, ver Figura 22.

[0148] NIV ZikaV día10 (pico de Zika ~36 mAU, analizado en la columna Waters HPLC/Superose6 Increase) se diluyó con PBS hasta un objetivo de 6,3 (dilución ~5,7x). Se añadió hidróxido de aluminio a una concentración final de 0,5 mg/mL de aluminio (1/20 v/v de solución madre de alumbre al 2% añadida) para preparar el Producto Farmacéutico (DP) del ZikaV. La DP se mezcló suavemente durante 5 minutos. Se extrajo una alícuota de la DP, se sedimentó el alumbre por centrifugación y se analizó el sobrenadante claro por SEC-HPLC. No se detectó ningún pico de ZikaV en el sobrenadante, lo que indica una adsorción completa (estimada en > 95%) de las partículas víricas en el adyuvante mineral. El ZikaV DP formulado se almacenó a 2-8°C.

[0149] El perfil de impurezas de la DS del virus Zika inactivado es comparable al perfil de la DS del JEV, con la excepción de un menor contenido de PS (Tabla 8).

Tabla 8: Determinación del perfil de impurezas en muestras de DS de Zika y JEV:

Resultados SEC-MALLS

[0150 En la Figura 24 se muestra un perfil de elución SEC-HPLC representativo del NIV de ZikaV a una longitud de onda de detección de 214 nm. Obsérvese que se añadió BSA (50|jg/mL) a la muestra para minimizar las pérdidas en el vial de vidrio de HPLC debidas a la adsorción superficial inespecífica. El contenido de monómeros del ZikaV se estimó en ~98% con un contenido de multímeros de ~2%.

[0151] El análisis SEC-MALLS (Figura 25) de la muestra confirmó que el radio Rz del pico poblacional 1 del ZikaV monómero era de 21,6 nm y de -49 nm para el pico 2 del multímero. La distribución acumulativa del tamaño de las partículas mostró que el 89% de todas las partículas víricas se encuentran en un intervalo de radio entre 18 y 25 nm (Figura 26).

[0152] Los resultados confirman la pureza y homogeneidad del NIV de ZikaV.

Título viral por ensayo en placa

[0153]

Tabla 9: Los pfus del ZikaV activo se cuantificaron mediante un ensayo de placa durante todo el proceso.

Comparación de PS y Benzonase en el rendimiento del proceso

[0154] Se realizó una comparación directa del método de extracción de ADN del pool de cosecha concentrado de ZikaV. Una alícuota se trató con PS (2 mg/mL, 15min a temperatura ambiente), la otra alícuota se trató con Benzonasa (50 U/mL, 2 mM MgCl2, 4h RT, 48h 2-8°C). Ambas muestras se purificaron posteriormente mediante gradiente de sacarosa, tal como se describe en este informe. Curiosamente, las muestras tratadas con Benzonasa no produjeron fracciones puras tras la centrifugación en gradiente de sacarosa de la cosecha tratada con ZikaV. En las fracciones en las que se detectaron las bandas específicas del virus, se detectó una elevada cantidad de proteína de la célula huésped en todas las fracciones recogidas. El material tratado con PS dio lugar a fracciones que contenían ZikaV puro, como era de esperar. Este hallazgo puede sugerir que la PS no sólo es eficaz para la eliminación del ADN por precipitación, sino que además mejora la recuperación de partículas de virus en el gradiente al interrumpir la interacción del ADN (fragmentos) y las partículas de virus. El tratamiento con benzonasa no elimina el ADN, sólo lo fragmenta. Los fragmentos de ADN residuales podrían seguir interactuando con las partículas de virus y los HCP residuales, lo que daría lugar a una contaminación cruzada y a una copurificación en el gradiente de sacarosa. Las fracciones SGP agrupadas también se analizaron mediante SEC-HPLC. Aunque se detectó un pico grande, SDS-PAGE confirmó que esta muestra estaba muy contaminada con HCP. Tras el análisis SEC-HPLC podría detectarse un gran pico en UV214 y 280 nm debido a la posible interacción de los HCP con partículas víricas de gran tamaño, lo que modificaría la absorbancia UV.

Inmunogenicidad del virus Zika cultivado en Vero

Inmunización de ratones

[0155] Antes de la inmunización, se sangraron por vena facial grupos de diez ratones CD1 hembra de 6 semanas de edad y se prepararon sueros preinmunes. Se administró una inmunización intraperitoneal de 200 pl. Una titulación de dosis (12 |jg, 3 pg, 1 pg, 0,33 pg, 0,11 pg, 0,037 pg y 0,012 pg, equivalentes a la cantidad de proteína en IXIARO) de virus Zika inactivado formulado con hidróxido de aluminio (Al(OH)3) a una concentración final del 0,7%. Tres semanas después de la inmunización, se extrajo sangre y se prepararon sueros inmunes. Todos los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con la legislación austriaca (BGB1 Nr. 501/1989) y aprobado por el "Magistratsabteilung 58".

Prueba de neutralización de la reducción de placas (PRNT)

[0156] Para la PRNT se utilizaron placas de doce pocillos. Cada pocillo se sembró con 1 mL de medio que contenía 4 *105 células Vero y se incubó a 35°C con 5% de CO2 durante la noche. Se analizaron por triplicado grupos de sueros inactivados por calor de cada grupo de dosis. Los virus diana (H/PF/2013 (SEQ ID N°: 13) o MR766 (SEQ ID N°: 11)) se diluyeron a 100 ufp/165 pl. Se incubaron volúmenes iguales de virus diana y de dilución de suero a 35°C con un 5% de CO2 durante 1 hora. Se aspiró el medio de cultivo celular de las células Vero y se añadieron 330 pl de la mezcla objetivo de dilución de virus/suero a cada pocillo y se agitaron las placas 5 veces hacia delante y hacia atrás antes de incubarlas durante 2 horas a 35°C con un 5% de CO2. A cada pocillo se añadió 1 mL de una solución de metilcelulosa al 2% que contenía EMEM y nutrientes, las placas se incubaron durante 5 días a 35°C con 5% de CO2 antes de teñir las células durante 1 hora con violeta cristalino/5% de formaldehído y posteriormente se lavaron 3 veces con agua desionizada. Las placas se secaron al aire y se contó manualmente el número de placas en cada pocillo.

Resultados

[0157] Se observó neutralización con grupos de suero de ratones inmunizados con la vacuna inactivada contra el virus del Zika (H/PF/2013) hasta 37 ng (dosis equivalente a la cantidad de proteína en IXIARO®) contra los virus del Zika de linajes asiático (H/PF/2013) y africano (MR766) (Figuras 27 y 28, respectivamente). Se observó una inhibición completa en la dilución sérica 1:20 con una dosis de inmunización de hasta 110 ng (dosis equivalente a la cantidad de proteína en IXIARO®). La neutralización de los linajes asiático (H/PF/2013) y africano (MR766) del virus del Zika fue equivalente, lo que indica una elevada neutralización cruzada entre diferentes cepas del virus del Zika de la vacuna inactivada contra el virus del Zika (H/PF/2013).

[0158] Se realizó otro ensayo de neutralización utilizando el ensayo de microneutralización descrito por Larocca, et al. (2016, Nature doi: 10.1038/nature18952). Se observó que el virus Zika inactivado descrito en el presente documento tenía un título MN50 (microneutralización) de 90 a 1 |jg de virus purificado inactivado.

[0159] Otros métodos: Se evalúa la inmunogenicidad de preparados inactivados del virus Zika utilizando un modelo de ratón de infección por Zika. Grupos de ratones adultos se inmunizan por vía subcutánea (s.c.) con 500, 50 o 5 ng de virus Zika inactivado con adyuvante (p. ej., hidróxido de aluminio con o sin IC31®), o sin adyuvante. Un grupo adicional de ratones recibe PBS como control negativo. A cada grupo se le administra el inóculo indicado en t=0 y, en algunos casos, también entre tres y cuatro semanas después (t=3/4). A partir de aproximadamente tres semanas después de la administración de la última inmunización, se obtienen muestras de suero de cada uno de los ratones a intervalos regulares. Las muestras de suero se analizan para detectar la presencia de anticuerpos neutralizantes mediante PRNT.

[0160] La eficacia protectora in vivo de los preparados de virus Zika inactivados también se evalúa utilizando un modelo de ratón de infección por Zika, es decir, ratonesknock-outdel receptor IFN-alfa/beta (A129) (véase, p. ej., Dowall et al. marzo de 2016, http://dx.doi.org/10.1101/042358) o el bloqueo del receptor IFN-alfa/beta mediante la administración de anticuerpos monoclonales contra el receptor IFN-alfa/beta a ratones C57BL/6 o BALB/c (véase, p. ej., Pinto et al. Diciembre de 2011, DOI: 10.1371/journal.ppat.1002407). Para los ensayos de protección, se inoculan grupos de 10 ratones A129, C57BL/6 o BALB/c de tres a ocho semanas de edad por vía subcutánea en los cuartos traseros con virus Zika inactivado con adyuvante (hidróxido de aluminio) o sin adyuvante en t=0. Los controles de la misma edad se inoculan con PBS o antígenos inespecíficos en alumbre. Los ratones se refuerzan opcionalmente con una segunda administración de la inoculación indicada tres o cuatro semanas después. A continuación, los ratones son desafiados por vía subcutánea entre tres y ocho semanas después de la inmunización mediante la inoculación de una dosis mortal del virus del Zika vivo. Un día antes de la provocación de los ratones C57BL/6 y BALB/c, se les administra pasivamente (por vía intraperitoneal) anticuerpos monoclonales contra los receptores IFN-alfa/beta. Se realiza un seguimiento diario de la morbilidad y mortalidad de los ratones desafiados durante un máximo de veintiún días. Otra alternativa es desafiar intracranealmente a ratones adultos vacunados/no vacunados y observar la protección.

[0161] Se espera que el virus Zika producido por el proceso aquí descrito proporcione resultados funcionales muy similares en ensayos in vitro, in vivo y, finalmente, en humanos, a los de la vacuna contra el VEJ actualmente autorizada en la UE y EE.<u>U. y en otros lugares, IXIARO®. La dosificación puede variar, pero debido al perfil de impurezas muy similar y a la fabricación casi idéntica, se esperará un resultado de eficacia y seguridad muy similar al que se determinó para la vacuna contra el virus de la encefalitis japonesa actualmente autorizada (autorizada en la UE y EE.UU. y en otros lugares).

Debate y conclusión

[0162] La plataforma de fabricación existente para la producción de la vacuna inactivada IXIARO® contra el JEV se utilizó como base para un estudio de viabilidad de fabricación de la vacuna candidata inactivada contra el ZikaV (cepa asiática H/PF/2013). El virus se produjo en células Vero cultivadas en frascos de rodillos. El virus se purificó mediante tratamiento PS seguido de un gradiente de sacarosa optimizado. La inactivación se realizó mediante tratamiento con formol (0,02 %, 10 días a 22 °C). Para los estudios exploratorios de inmunización en ratones, se preparó una DP formulada con Alumbre con un contenido estimado de partículas de virus 5 veces mayor en comparación con IXIARO®, la Vacuna comercial contra el JEV. El perfil de impurezas de la DS cumplía todos los criterios definidos en la especificación para IXIARO®, la vacuna comercial contra el VEJ. La neutralización de los linajes asiático (H/PF/2013) y africano (MR766) del virus del Zika fue equivalente, lo que indica una elevada neutralización cruzada entre diferentes cepas del virus del Zika de la vacuna inactivada contra el virus del Zika (H/PF/2013).

[0163] Los datos in vivo relativos a la inmunogenicidad de la vacuna inactivada contra el virus Zika aquí descrita indican que el virus es sorprendentemente potente inmunogénico y también altamente protector cruzado (inmunogenicidad muy similar en cepas africanas y asiáticas). Los datos indican que la inmunogenicidad fue superior a la del candidato a vacuna inactivada contra el virus del Zika de la que se ha informado recientemente (Larocca, et. al, 2016, supra.). Los virus inactivados se encuentran entre las vacunas más seguras y son especialmente preferibles para administrar a poblaciones en las que la seguridad es especialmente preocupante, como mujeres embarazadas, niños y personas inmunodeprimidas, lo que hace que el virus del Zika inactivado aquí descrito sea especialmente adecuado. Obtener un título elevado de virus inactivado es un reto sobre el terreno. El proceso aquí descrito para purificar el virus Zika inactivado da como resultado no sólo un alto rendimiento, sino también una sustancia farmacológica muy pura.

Vero

[0164] Se desarrolló un procesodownstreampara la purificación de partículas infecciosas del virus de la fiebre amarilla por el que se eliminan los ácidos nucleicos de la célula huésped, las partículas no infecciosas del virus y los agregados mediante la adición de sulfato de protamina como se describe en los Ejemplos 1 y 2. Las inesperadas y novedosas propiedades de purificación del sulfato de protamina (PS) se evaluaron en procesos de purificación para la fiebre amarilla (YF) de la siguiente manera:Como antes, el tratamiento de la YF-cosecha con PS reduce significativamente la cantidad de agregados, como se observa con SEC para dos cepas vacunales actualmente en desarrollo (Figura 29).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Uso de una centrifugación en gradiente de sacarosa optimizada para eliminar el sulfato de protamina de las partículas infecciosas purificadas del virus de Chikungunya, en la que dicha centrifugación en gradiente de sacarosa optimizada comprende una fracción que comprende el virus de Chikungunya en una solución de sacarosa al 10% /-1% (p/p) y tres capas más de soluciones de sacarosa con densidades diferentes, es decir, una primera solución de sacarosa con un 15% /-1% (p/p) de sacarosa, una segunda solución de sacarosa con un 35% /-1% (p/p) de sacarosa,y una tercera solución de sacarosa con un 50% /-1% (p/p) de sacarosa.

2. Un proceso para la purificación de partículas infecciosas del virus Chikungunya, que comprende las etapas de: a) proporcionar una cosecha bruta (a) que comprenda partículas de virus Chikungunya e impurezas, en la que dichas impurezas se generan a partir del cultivo de dichas partículas de virus Chikungunya en un sustrato celular; b) reducir las impurezas de la cosecha bruta (a) por precipitación con sulfato de protamina, para obtener un preparado de virus Chikungunya (b);

c) purificar aún más la preparación de virus de Chikungunya (b) mediante centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa, para obtener una preparación de virus de Chikungunya (c), en la que el gradiente de sacarosa se proporciona de manera que la protamina pueda separarse completamente o casi completamente de la fracción de virus; y en la que la concentración de protamina se reduce mediante esta etapa hasta el punto de que la concentración de protamina en la sustancia farmacológica final es inferior a 1 pg/ml, preferentemente inferior a 0,5 pg/mL, más preferentemente inferior a 0,1 pg/mL, más preferentemente inferior a 0,05 pg/mL, medida por espectroscopia de masas o resonancia magnética nuclear, en la que dicha centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa comprende la preparación de virus Chikungunya (b) proporcionada en una solución de sacarosa al 10% /-1% (p/p) y tres capas de sacarosa con diferentes densidades, es decir, una primera solución de sacarosa con un 15% /-1% (p/p) de sacarosa, una segunda solución de sacarosa con un 35% /-1% (p/p) de sacarosa, y una tercera solución de sacarosa con un 50% /-1% (p/p) de sacarosa.

3. El proceso de la reivindicación 2, que comprende adicionalmente una etapa de purificación adicional de:

d) purificar aún más dicho preparado de virus de Chikungunya (c) en una matriz en fase sólida empaquetada en una columna que comprende un núcleo activado por ligando y una envoltura inactiva que comprende poros, en la que el corte de peso molecular de los poros impide que las partículas de virus de Chikungunya entren en el núcleo activado por ligando, y en la que una molécula más pequeña que el corte de peso molecular de los poros puede entrar en el núcleo activado por ligando y recoger las partículas de virus para obtener un preparado de virus de Chikungunya (d).

4. El proceso de la reivindicación 2 o 3, en el que el contenido residual de ADN de células huésped de dicha preparación de virus Chikungunya (c) es inferior a 10 ng/mL y el contenido residual de proteínas de células huésped de dicha preparación de virus Chikungunya (c) es inferior a 100 ng/mL.

5. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que la cosecha bruta (a) que comprende las partículas de virus y las impurezas se somete a una o más etapa(s) de pre-purificación antes de la etapa (b).

6. El proceso de la reivindicación 5, en el que dicha(s) etapa(s) de pre-purificación comprende(n)

i) filtración mediante un filtro con un tamaño de poro igual o inferior a 0,2 pm; y/o

ii) digestión del ADN genómico de la célula huésped mediante tratamiento enzimático; y/o

iii) ultra/diafiltración utilizando una membrana de fibra hueca con un tamaño de poro igual o superior a 300 kDa, preferentemente igual o superior a 100 kDa.

7. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 6, en el que la concentración de sulfato de protamina es de aproximadamente 0,5 a 3 mg/ml, más preferiblemente de 1 a 2 mg/ml, más preferiblemente de 1,2 a 1,8 mg/ml, más preferiblemente de 1,4 a 1,6 mg/ml, más preferiblemente de 1,6 mg/ml o 2 mg/ml.

8. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, en el que el enriquecimiento de partículas infecciosas del virus Chikungunya en dicha preparación del virus Chikungunya (c) o (d), en relación con los productos virales totales en la cosecha bruta (a), está en el intervalo de al menos 50% a 95%, preferiblemente al menos 80%.

9. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 8, en el que la impureza residual de dicho preparado de virus Chikungunya (c) es inferior al 10%, en el que dicha impureza residual comprende proteína de célula huésped, ADN, agregados de virus y sulfato de protamina.

10. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 9, en el que dicho virus Chikungunya se propaga en una línea celular Vero.

11. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 10, en el que dicha partícula de virus infeccioso es una partícula de virus infeccioso que es un virus vivo, un virus vivo atenuado, un virus quimérico, un virus vivo modificado o un virus vivo recombinante.

12. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 11, en el que dicho virus Chikungunya es un virus Chikungunya atenuado, preferiblemente un virus Chikungunya con una mutación de deleción en la proteína no estructural 3 como se define por SEQ ID N°: 77 o una variante inmunogénica de la misma.

13. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 12, en el que dicho proceso que da lugar a dicha preparación de virus Chikungunya (c) o (d) va seguido de una etapa de inactivación, en la que el virus se inactiva mediante formaldehído.

14. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 13 para fabricar una composición para la inmunización contra una infección por el virus Chikungunya.