ES2973331T3 - Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y aplicación del mismo - Google Patents

Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y aplicación del mismo Download PDF

Info

Publication number
ES2973331T3
ES2973331T3 ES19852944T ES19852944T ES2973331T3 ES 2973331 T3 ES2973331 T3 ES 2973331T3 ES 19852944 T ES19852944 T ES 19852944T ES 19852944 T ES19852944 T ES 19852944T ES 2973331 T3 ES2973331 T3 ES 2973331T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
compound
pharmaceutically acceptable
formula
stereoisomers
acceptable salts
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES19852944T
Other languages
English (en)
Inventor
Weiwei Mao
Wenyuan Qian
Xuejian Zheng
Guoping Hu
Changqing Wei
Jian Li
Shuhui Chen
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhuhai United Laboratories Co Ltd
Original Assignee
Zhuhai United Laboratories Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhuhai United Laboratories Co Ltd filed Critical Zhuhai United Laboratories Co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2973331T3 publication Critical patent/ES2973331T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Se divulga un compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y una aplicación del mismo en la preparación de un fármaco para tratar una enfermedad relacionada con JAK1 y/o TYK2. Específicamente, la presente invención se refiere a un compuesto representado por la fórmula (I) o un isómero o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y aplicación del mismo
Referencia cruzada a la solicitud relacionada
Esta solicitud reivindica el beneficio de prioridad de la solicitud de China No. de serie CN201810968207.6 presentada el 23 de agosto de 2018.
Campo técnico
La presente solicitud se refiere a compuestos de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridinas como inhibidores de JAK, así como al uso de los mismos para preparar productos farmacéuticos para el tratamiento de enfermedades asociadas con JAK1 y/y TYK2. En particular, la presente solicitud se refiere a un compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo.
Técnica antecedente
JAK pertenece a la familia de la tirosina quinasa que se relaciona con inflamaciones, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades proliferativas, rechazo de trasplantes, enfermedades asociadas con alteraciones del recambio de cartílago, malformaciones congénitas del cartílago y/o enfermedades asociadas con la hipersecreción de IL6. La presente solicitud proporciona además del compuesto anterior, un método para producir una composición farmacéutica que contiene los compuestos anteriores, un método para prevenir y/o tratar inflamaciones, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades proliferativas, rechazo de trasplantes, enfermedades asociadas con alteración del recambio de cartílago, malformación congénita del cartílago y/o enfermedades asociadas con la hipersecreción de IL6 al administrar los compuestos de acuerdo con la presente solicitud.
Janus quinasa (JAK) es una tirosina quinasa citoplasmática que media las señales de citocinas desde un receptor de membrana hasta un factor de transcripción STAT. Se han descrito cuatro tipos de quinasas JAK, es decir, JAK1, JAK2, JAK3 y TYK2 en las tecnologías existentes. Cuando una citocina se combina con su receptor, los miembros de la familia de quinasas JAK se autofosforilan y/o transfosforilan entre sí, y luego las STAT se fosforilan, seguido por la migración en el núcleo para regular la transcripción. La transducción de señales intracelulares de JAK-S<t>A<t>es aplicable al interferón, la mayoría de las interleucinas y una variedad de citocinas y factores endocrinos, tales como EPO, TPO, GH, OSM, LIF, CNTF, GM-CSF y PRL (Vainchenker W. et al. (2008)).
Un estudio sobre la combinación del modelo genético e inhibidores de JAK de pequeño peso molecular revela parte de la potencia terapéutica de las JAK. JAK3 fue identificado como un objetivo inmunosupresor por la genética humana y de ratones (O’Shea J. et al. (2004)). Los inhibidores de JAK3 se utilizan con éxito en el desarrollo clínico, inicialmente se utilizan para el rechazo de trasplantes y posteriormente se utilizan para otras enfermedades de inflamación inmunitarias, tales como la artritis reumatoide (RA), psoriasis y enfermedad de Crohn (http://clinicaltrials.gov/). Se ha demostrado mediante estudios genéticos y de inactivación de genes en ratones (Levy D. and Loomis C. (2007)) que TYK2 es un objetivo potencial para la inflamación inmunitaria. JAK1 es un nuevo objetivo en el campo de las enfermedades de inflamación inmunitarias. JAK1 se heterodimeriza con otras JAK para la transducción con señales proinflamatorias impulsadas por señales citoplasmáticas transducidas. Por lo tanto, es predecible que la inhibición de JAK1 y/u otras JAK tenga un beneficio de tratamiento para una variedad de enfermedades inflamatorias y/u otras enfermedades impulsadas por la transducción de señales mediada por JAK.
El documento US 2009220688 ha divulgado el Filgotinib, que es un fármaco clínico de fase III utilizado para el tratamiento de la artritis reumatoide desarrollado por Galapagos.
El documento WO2010/010187 ha divulgado compuestos de [1,2,4]Triazolo[1,5-a]piridina que tienen la siguiente fórmula:
Estos compuestos se pueden preparar como una composición farmacéutica, y se pueden utilizar para la prevención y el tratamiento de una variedad de afecciones tales como la artritis reumatoide.
Resumen
La presente solicitud proporciona un compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo.
en la que,
E1 y E2 se seleccionan independientemente del enlace sencillo, -CH2- o -(CH2)2-,
L1 se selecciona del enlace sencillo, -(CH2)g-, -C(=O)- o -C(=O)-(CH2)h-;
m es 1 o 2;
n es 1 o 2;
g es 1,2 o 3;
h es 1,2 o 3;
R1 se selecciona de H, CN, grupo alquilo C i-6 o los grupos cicloalquilo de 3~6 miembros, en los que el grupo alquilo C i-6 y los grupos cicloalquilo de 3~6 miembros están opcionalmente sustituidos por uno, dos o tres Ra;
R2 se selecciona de H, F, Cl, Br, I o el grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 está opcionalmente sustituido por uno, dos o tres Rb;
R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br, I o el grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 está opcionalmente sustituido por uno, dos o tres Rc;
R6, R7 y R8 se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br, I o el grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 está opcionalmente sustituido por uno, dos o tres Rd;
Cada uno de Ra se selecciona independientemente de H, F, Cl, Br, I, CN o el grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 está opcionalmente sustituido por uno, dos o tres R;
Cada Rb se selecciona independientemente de F, Cl, Br o I;
Cada Rc se selecciona independientemente de F, Cl, Br o I;
Cada Ra se selecciona independientemente de F, Cl, Br o I;
Cada R se selecciona independientemente de F, Cl, Br o I.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, cada uno del Ra anterior se selecciona independientemente de H, F, Cl, Br, I o CN, y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el R1 anterior se selecciona de H, CN, grupo alquilo C1-3 o grupo cicloalquilo de 3~5 miembros, en el que el grupo C1-3 y el grupo cicloalquilo de 3~5 miembros están opcionalmente sustituidos por uno, dos o tres Ra, y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el R1 anterior se selecciona de H, CN, CH3,
" ' V
en el que CH3,
están opcionalmente sustituidos por uno, dos o tres Ra, y otras variables son como se define en la presente solicitud. En algunas realizaciones de la presente solicitud, el R1 anterior se selecciona de H, CN, CF3, CHF2,
y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el R2 anterior se selecciona de H, F, Cl, Br o I, y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, los R3, R4 y R5 anteriores se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br o I, y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, los R6, R7 y R8 anteriores se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br o I, y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el L1 anterior se selecciona del enlace sencillo, -CH2-, -(CH2)2-, -C(=O)- o -C(=O)-(CH2)-, y otras variables son como se define en la presente solicitud. En algunas realizaciones de la presente solicitud, la unidad estructural anterior
se selecciona de
y otras variables son como se define en la presente solicitud. En algunas realizaciones de la presente solicitud, la unidad estructural anterior
se selecciona de
y otras variables son como se define en la presente solicitud. En algunas realizaciones de la presente solicitud, la unidad anterior
y otras variables son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, la unidad estructural anterior
se selecciona de
y otras variables son como se define en la presente solicitud.
Hay algunas realizaciones combinadas de cualquiera de las variables anteriores.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el compuesto de la fórmula (I) anterior, estereoisómeros del mismo, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se seleccionan de
en la que,
L1, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 y R8 son como se define en la presente solicitud.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, los compuestos de la fórmula (I) anteriores, estereoisómeros del mismo, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se seleccionan de
en la que,
Li, Ra, R2, R3, R4, R5, R6, R7 y R8 son como se define en la presente solicitud.
La presente solicitud proporciona además los siguientes compuestos, estereoisómeros de los mismos, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el compuesto de la fórmula (I) anterior, estereoisómeros del mismo, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se seleccionan de
La presente solicitud proporciona además una composición farmacéutica, que contiene una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos anteriores, estereoisómeros de los mismos, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o portadores farmacéuticamente aceptables de los mismos como ingredientes activos.
La presente solicitud proporciona además el uso de los compuestos anteriores o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o composición farmacéutica de los mismos en la preparación de productos farmacéuticos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con JAK1 y/o TYK2.
En algunas realizaciones de la presente solicitud, el uso anterior se caracteriza porque los productos farmacéuticos anteriores son productos farmacéuticos para el tratamiento de artritis reumatoide.
Efecto técnico
Una variedad de compuestos en la presente solicitud han mostrado buenos efectos de inhibición selectiva de JAK1 y/o TYK2 en las pruebas in vitro de 4 subtipos de quinasa JAK (JAK1, JAK2, JAK3 y TYK2), y estos compuestos muestran alta exposición y buena biodisponibilidad oral en experimentos de farmacocinética, lo que es ventajoso para producir buenos eficacia in vivo.
Definición y descripción
A menos que se indique lo contrario, los términos y frases en el contexto se refieren a los siguientes significados. Un término o frase específica sin una definición particular no se debe considerar incierto o poco claro, y se debe considerar su significado corriente. Cuando se menciona un nombre comercial en el contexto, se hace referencia a sus productos o ingredientes activos.
El término “farmacéuticamente aceptable” como se utiliza en el presente documento se refiere a compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance de un juicio médico confiable, son adecuados para uso en contacto con tejidos humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, reacción alérgica u otros problemas o complicaciones, y son proporcionales a una relación beneficio/riesgo razonable.
El término “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a una sal del compuesto en la presente solicitud, preparada por compuestos a partir de un sustituyente específico encontrado en la presente solicitud y un ácido o base relativamente no tóxico. Cuando hay grupos funcionales relativamente ácidos en los compuestos de la presente solicitud, se pueden preparar sales de adición de álcalis al poner en contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente de álcali en solución pura o solvente inerte adecuado. Las sales de adición de álcalis farmacéuticamente aceptables incluyen sales de sodio, potasio, calcio, amonio, aminas orgánicas o magnesio y similares. Cuando los compuestos de la presente solicitud contienen grupos funcionales relativamente alcalinos, se pueden preparar sales de adición de ácido al poner en contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente de ácido en una solución pura o un solvente inerte adecuado. Ejemplos de sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen sales derivadas de ácidos minerales que incluyen ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido nítrico, ácido carbónico, ácido bicarbonato, ácido fosfórico, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, ácido sulfúrico, hidrosulfato, ácido yodhídrico, ácido fosforoso, etc. ; sales derivadas de ácidos orgánicos que incluyen ácido acético, ácido propiónico, ácido isobutírico, ácido maleico, ácido malónico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido octanodioico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido bencenosulfónico, ácido para-toluenosulfónico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido metanosulfónico y similares; y sales derivadas de aminoácidos (por ejemplo arginina), y sales de ácidos orgánicos tales como ácido glucurónico y similares. Algunos compuestos específicos en la presente solicitud contienen grupos funcionales alcalinos y ácidos y, por lo tanto se pueden traducir en cualquier sal de adición alcalina o ácida.
Las sales farmacéuticamente aceptables en la presente solicitud se pueden preparar a partir de un compuesto original que tiene un radical ácido o un grupo básico mediante métodos químicos convencionales. En general, un método para preparar dichas sales incluye prepararlas al hacer reaccionar estos compuestos en forma de ácidos o bases libres con bases o ácidos estequiométricos apropiados en agua o solventes orgánicos o una mezcla de los mismos.
Los compuestos en la presente solicitud pueden estar presentes en forma de isómero o estereoisómero geométrico específico. Los compuestos concebidos en la presente solicitud incluyen isómeros cis y trans, enantiómeros (-) y (+),enantiómeros(R)y (S), diastereoisómeros, isómeros(D),isómeros (L), así como sus mezclas racémicas y otras mezclas, tales como mezclas de enantiómeros y diastereoisómeros, todas las cuales están incluidas en el alcance de la presente solicitud. Otros átomos de carbono asimétricos pueden estar presentes en sustituyentes tales como grupos alquilo. Todos estos isómeros y sus mezclas están incluidos en el alcance de la presente solicitud.
A menos que se indique lo contrario, los términos “enantiómero” o “isómero óptico” son estereoisómeros que son imágenes especulares entre sí.
A menos que se indique lo contrario, los términos “isómero cis-trans” o “isómero geométrico” se forman porque los enlaces dobles o enlaces simples de un átomo de carbono que forma un anillo no pueden girar libremente.
A menos que se indique lo contrario, el término “diastereoisómero” se refiere a moléculas que tienen dos o más centros quirales y son estereoisómeros sin relación de imagen especular entre las moléculas.
A menos que se indique lo contrario, “(D)” o “(+)” se refiere a la rotación hacia la derecha, “(L)” o “(-)” se refiere a la rotación hacia la izquierda,“(DL)”o “(±)” se refiere a racémico.
A menos que se indique lo contrario, un enlace de linea completa en forma de cuna ( ) y enlace de linea punteada en forma de cuña ) representa una configuración absoluta del estereocentro, un enlace de línea continua recta (
) y línea recta punteada ) representa la configuración relativa del estereocentro, una línea ondulada ( )
representa el enlace de línea continua en forma de cuña ( ) o el enlace de línea punteada en forma de cuña ( ), o una línea ondulada ( ) representa el enlace de línea continua recta ( ) y la línea recta punteada( )
A menos que se indique lo contrario, cuando hay dobles enlaces en los compuestos, como dobles enlaces C=C, dobles enlaces C=N y dobles enlaces N=N, y los átomos de los dobles enlaces están conectados a dos grupos sustituyentes diferentes (en dobles enlaces que contienen átomos de nitrógeno, un par de electrones solitarios en el átomo de nitrógeno se consideran un grupo sustituyente conectado), si los átomos en los dobles enlaces de los compuestos están conectados a sus grupos sustituyentes con una línea o n d u la d a ^), se considera como un isómero (Z), un isómero (E), o mezcla de ambos compuestos. Por ejemplo, la siguiente fórmula (A) representa que el compuesto existe como un único isómero de fórmula (A-1) o fórmula (A-2), o una mezcla de dos isómeros de fórmula (A-1) y fórmula (A -2); la siguiente fórmula (B) representa que el compuesto existe en forma de un único isómero de fórmula (B-1) o fórmula (B-2), o una mezcla de dos isómeros de fórmula (B-1) y fórmula (B-2). La siguiente fórmula (C) representa que el compuesto existe en forma de un único isómero de fórmula (C-1) o fórmula (C-2), o una mezcla de dos isómeros de fórmula (C-1) y fórmula (C -2).
A menos que se indique lo contrario, el término “tautómero” o “forma de tautómero” significa que diferentes isómeros de grupos funcionales pueden mantener el equilibrio dinámico y se pueden convertir mutuamente a temperatura ambiente. Cuando hay tautómeros disponibles (por ejemplo en solución), puede haber un equilibrio químico de los tautómeros. Por ejemplo, los tautómeros de protones (también llamados tautómeros prototrópicos) incluyen conversión mutua mediante protólisis, tales como tautomerismo ceto-enol y tautomerismo imino-enamina. Los tautómeros de valencia incluyen la conversión mutua mediante alguna recombinación de electrones de enlace. En particular, un ejemplo específico es la conversión mutua de tautómeros de pentano-2,4-diona y 4-hidroxiatnil-3-en-2-ona.
A menos que se indique lo contrario, los términos “rico en un isómero”, “enriquecimiento de isómero”, “rico en un enantiómero”, “enriquecimiento de enantiómero” significan que el contenido de uno de estos isómeros o enantiómeros es menor del 100 %, y el contenido de dicho isómero o enantiómero es mayor o igual al 60 %, o mayor o igual al 70 %, o mayor o igual al 80 %, o mayor o igual al 90 %, o mayor o igual al 95 %, o mayor o igual al 96 %, o mayor o igual al 97 %, o mayor o igual al 98 %, o mayor o igual al 99 %, o mayor o igual al 99.5 %, o mayor o igual a 99.6 %, o mayor o igual al 99.7 %, o mayor o igual al 99.8 %, o mayor o igual al 99.9 %.
A menos que se indique lo contrario, los términos “exceso de isómero” o “exceso de enantiómero” se refieren a las diferencias entre porcentajes relativos de dos isómeros o enantiómeros. Por ejemplo, el contenido de un isómero o enantiómero es del 90%, mientras que el contenido de otro isómero o enantiómero es del 10%, entonces el valor (valor ee) del exceso de isómero o enantiómero es del 80 %.
Se pueden preparar los isómeros(R)y (S) y los isómerosDyLópticamente activos mediante síntesis quiral o reactivos quirales u otras técnicas convencionales. Si se desea un enantiómero de un compuesto de la presente solicitud, se puede preparar mediante síntesis asimétrica o derivatización con un promotor quiral, en la que se separa la mezcla de diastereómeros resultante y se divide el grupo auxiliar para proporcionar el enantiómero puro deseado. Alternativamente, cuando la molécula contiene un grupo funcional alcalino (tal como un grupo amino) o un grupo funcional ácido (tal como un grupo carboxilo), se forma una sal del diastereómero con un ácido o base ópticamente activo apropiado, y luego el diastereómero se separa mediante un método convencional conocido en la técnica, y luego se recupera el enantiómero puro. Además, la separación de enantiómeros y diastereómeros generalmente se logra al utilizar cromatografía, que utiliza una fase estacionaria quiral y se combina selectivamente con derivatización química (por ejemplo, desde aminas hasta carbamatos). El compuesto de la presente solicitud puede contener una proporción no natural de isótopos atómicos en uno o más átomos que constituyen el compuesto. Por ejemplo, los compuestos se pueden marcar con radioisótopos, tales como el tritio (3H), yodo-125 (125I), o C-14 (14C). Por ejemplo, se puede utilizar hidrógeno pesado para reemplazar el hidrógeno y formar fármacos deuterados. El enlace formado por el deuterio y el carbono es más fuerte que el formado por el hidrógeno y el carbono ordinarios. En comparación con los fármacos no deuterados, los fármacos deuterados tienen las ventajas de reducir los efectos secundarios, aumentar la estabilidad de los fármacos, potenciar el efecto curativo y prolongar la vida media biológica de los fármacos. La transformación de todas las composiciones isotópicas del compuesto de la presente solicitud, ya sean radiactivas o no, está incluida en el alcance de la presente solicitud. “Opcional” u “opcionalmente” significa un evento o condición que se puede, pero no necesariamente, describir posteriormente, y dicha descripción incluye las circunstancias en las que el evento o condición ocurre y las circunstancias en las que el evento o condición no ocurre.
El término “sustituido” se refiere a la sustitución de uno o más átomos de hidrógeno en un átomo específico por un sustituyente, que puede incluir hidrógeno pesado y variantes de hidrógeno, siempre que el estado de valencia del átomo específico sea normal y el compuesto sustituido sea estable. Cuando el sustituyente es oxígeno (es decir =O), significa que dos átomos de hidrógeno están sustituidos. La sustitución de oxígeno no ocurre en los grupos aromáticos. El término “opcionalmente sustituido” significa que puede sustituirse o no sustituirse. A menos que se especifique lo contrario, el tipo y número de sustituyentes pueden ser opcionales en base a la implementabilidad química.
Cuando cualquier variable (por ejemplo R) existe más de una vez en la composición o estructura de un compuesto, su definición es independiente en cada caso. Por lo tanto, por ejemplo, si un grupo se sustituye por 0-2 R, el grupo puede sustituirse opcionalmente por como máximo dos R, y el R en cada caso tiene una opción independiente. Además, las combinaciones de sustituyentes y/o sus variantes sólo se permiten si dichas combinaciones producen un compuesto estable.
Cuando el número de un grupo de enlace es 0, tal como -(CRR)o-, el grupo de enlace es un enlace sencillo.
Cuando una de las variantes se selecciona de un enlace sencillo, significa que los dos grupos de enlace están directamente ligados. Por ejemplo, cuando L representa un enlace sencillo, la estructura de A-L-Z es en realidad A-Z.
Cuando un sustituyente está vacante, significa que el sustituyente no existe. Por ejemplo, cuando X en A-X está vacante, significa que la estructura es en realidad A. Cuando los sustituyentes enumerados no indican qué átomo está conectado al grupo sustituido, el sustituyente puede estar unido por cualquier átomo del sustituyente. Por ejemplo, el grupo piridinilo como sustituyente puede estar conectado al grupo sustituido mediante cualquier átomo de carbono en el anillo de piridina.
Cuando los grupos de enlace enumerados no indican su dirección de conexión, la dirección de conexión es opcional. Por ejemplo, cuando el grupo de conexión L en
es - M-W-, -M-W- puede conectar los anillos A y B en la misma dirección que la lectura de izquierda a derecha para formar
o conectar los anillos A y B en la dirección opuesta a la lectura de izquierda a derecha para formar
La combinación de los grupos de enlace, sustituyentes y/o variantes de los mismos está permitida sólo si dicha combinación produce un compuesto estable.
A menos que se indique lo contrario, los números de los átomos en los anillos se identifican como números de miembros de los anillos, tal como “anillo de 5-7 miembros” se refiere a un anillo con 5-7 átomos dispuestos alrededor.
A menos que se especifique lo contrario, “anillo de 5-6 miembros” significa cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, heteroalquenilo, cicloalquinilo, heterocicloalquinilo, arilo o heteroarilo que consiste en 5 a 6 átomos en el anillo. El anillo incluye un anillo sencillo, y también un sistema de anillo doble tal como un anillo en espiral, un anillo combinado y un anillo puente. A menos que se especifique lo contrario, el anillo contiene opcionalmente 1 ,2 o 3 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N. El anillo de 5-6 miembros incluye un anillo de 5 elementos, un anillo de 6 elementos, etc. El “anillo de 5-6 miembros” incluye, por ejemplo, fenilo, piridilo, piperidinilo, etc.; por otra parte, el término “alquilo heterocíclico de 5-6 miembros” incluye piperidinilo, etc., pero no incluye fenilo. El término “anillo” también incluye un sistema de anillos que contiene al menos un anillo, cada uno de los cuales se ajusta independientemente a la definición anterior.
A menos que se indique lo contrario, el término “grupo alquilo C i-6” se refiere a grupos de hidrocarburo saturados ramificados o no ramificados que consisten en 1 a 6 átomos de carbono. El grupo alquilo C1-6 incluye los grupos alquilo C1-5, C1-4, C1-3, C1-2, C2-6, C2-4, C6 y C5, etc., que pueden ser de monovalencia (por ejemplo metilo), bivalencia (por ejemplo metileno) o multivalencia (por ejemplo metino). Los ejemplos de grupo alquilo C1-6 incluye, pero no se limita a, metilo (Me), etilo (Et), propilo (incluye n-propilo e isopropilo), butilo (que incluye n-butilo, isobutilo, s-butilo y /-butilo), pentilo (que incluye n-pentilo, isopentilo y neopentilo), hexilo, etc.
A menos que se indique lo contrario, el término “grupo alquilo C1-3” se refiere a grupos de hidrocarburo saturados ramificados o no ramificados que consisten en 1 a 3 átomos de carbono. El grupo alquilo C1-3 descrito incluye grupos alquilo C1-2 y C2-3, etc., que pueden ser de monovalencia (por ejemplo metilo), divalencia (por ejemplo metileno) o multivalencia (por ejemplo metino). Los ejemplos de grupos alquilo C1-3 incluyen, pero no se limitan a, metilo (Me), etilo (Et), propilo (incluye n-propilo e isopropilo), etc.
A menos que se indique lo contrario, “grupo cicloalquilo C3-6” se refiere a grupos de hidrocarburo cíclicos saturados, que incluyen sistemas monocíclicos y bicíclicos. El grupo cicloalquilo C3-6 incluye el grupo cicloalquilo C3-5, C4-5 y C5-6, etc., que puede ser de monovalencia, divalencia o multivalencia. Los ejemplos del grupo cicloalquilo C3-6 incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc.
A menos que se indique lo contrario, Cn-n+m o Cn-Cn+m incluye cualesquier circunstancias específicas con carbono n a n+m, por ejemplo, C1-12 incluye C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11, y C12, y además incluye cualquier rango desde n hasta n+m, por ejemplo, C1-12 incluye C1-3, C1-6, C1-9, C3-6, C3-9, C3-12, C6-9, C6-12, y C9-12, etc. De manera similar, n-miembros a n+m-miembros significa que el número de átomos en un anillo es n a n+m, por ejemplo, un anillo de 3 12 miembros incluye anillos de 3 miembros, anillos de 4 miembros, anillos de 5 miembros, anillos de 6 miembros, anillos de 7 miembros, anillos de 8 miembros, anillos de 9 miembros, anillos de 10 miembros, anillos de 11 miembros y anillos de 12 miembros, y además incluye cualquier rango desde n hasta n+m, por ejemplo, un anillo de 3-12 miembros incluye anillos de 3-6 miembros, anillos de 3-9 miembros, anillos de 5-6 miembros, anillos de 5-7 miembros, anillos de 6-7 miembros, anillos de 6-8 miembros, y anillos de 6-10 miembros, etc.
Los compuestos de la presente solicitud se pueden preparar mediante una variedad de métodos de síntesis bien conocidos por los expertos en la técnica, que incluyen las realizaciones específicas enumeradas a continuación, las realizaciones formadas por la combinación de los compuestos con otros métodos de síntesis química, y los métodos de sustitución equivalente bien conocidos por los expertos en la técnica. Las realizaciones preferidas incluyen, pero no se limitan a, las realizaciones de la presente solicitud.
El solvente utilizado en la presente solicitud está disponible comercialmente. La presente solicitud adopta las siguientes abreviaturas: ac para agua; HATU para hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurea; EDC para clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida; m-CPBA para ácido 3-cloroperoxibenzoico; EQ por cantidad equivalente o igual; CDI para carbonil diimidazol; DCM para diclorometano; PE para éter de petróleo; DIAD para azodicarboxilato de diisopropilo; DMF para N,N-dimetilformamida; DMSO para sulfóxido de dimetilo; EtOAc para acetato de etilo; EtOH para etanol; MeOH para metanol; CBz para benciloxicarbonilo, un grupo protector de amina; BOC para tert butoxicarbonilo, un grupo protector de amina; HOAc para ácido acético; NaCNBH3 para epicianoberbohidruro; T.Amb. para temperatura ambiente; O/N para durante la noche; THF para tetrahidrofurano; BoczO para dicarbonato de di-tert-butilo; TFA para ácido trifluoroacético; DIPEA para diisopropiletilamina; SOCh para cloruro de sulfóxido; CS2 para disulfuro de carbono; TsOH para ácido ptoluenosulfónico; NFSI para N-fluoro-N-(fenilsulfonil)bencenosulfonamida; NCS para 1-cloropirrolidina-2,5-diona; n-Bu4NF para fluoruro de tetrabutilamonio; iPrOH para 2-propanol; pf para punto de fusión; LDA para diisopropilaminolitio; Pd(dppf)Ch.CH2Ch para el complejo de diclorometano de dicloruro de [1 ,1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno] paladio; DIEA para W,A/-diisopropiletilamina; IPA para isopropanol; HOBt para 1-hidroxibenzotriazol; LiHMDs para hexametildisilicilaminolitio; TEA para trietilamina; HEPES para ácido 4-hidroxietil piperazina etanosulfónico; LiHMDS para hexametildisilicilaminolitio; EDCI para carbodiimida; Pd/C para paladiocarbono; METANOL para metanol; KOAc para acetato de potasio; K2CO3 para carbonato de potasio.
Los compuestos se nombran manualmente o mediante el software ChemDraw® y los compuestos disponibles comercialmente se nombran según el nombre del catálogo del proveedor.
Breve descripción de los dibujos
Figura. 1 Las puntuaciones clínicas promedio de ratones con artritis;
Figura. 2 Las tasas inhibidoras de la artritis en ratones calculadas por las áreas bajo el AUC en el período de administración;
Figura. 3 Las tasas de incidencia de artritis en ratones durante el período de administración;
Figura. 4 Cambio en el peso corporal de ratones con artritis.
Figura. 5 Puntuación clínica de rata con artritis;
Figura. 6 Curva de cambio de volumen de las patas de rata con artritis;
Figura. 7 Curva de cambio de peso corporal de rata con artritis.
Descripción detallada
La presente solicitud se describirá en detalle mediante las realizaciones a continuación, pero no se pretende imponer ninguna limitación adversa a la presente solicitud. La presente solicitud se describe en detalle en el presente documento, y también se divulgan realizaciones específicas.
Etapa 1: Se goteó LiHMDS (1 M, 51.2 ml) en una solución de THF (150 ml) que contenía el compuesto 1-1 (10.2 g, 42.6 mmol) a -78 °C. Después de agitar la solución de reacción durante 1 hora a -78 °C, se agregó una solución de THF (150 ml) que contenía 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometanosulfonil) metanosulfonamida (16.7 g, 46.9 mmol) a la solución de reacción y luego se agitó durante 12 horas a 15 °C. La TLC (PE:EA=10:1) mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se generaron nuevos puntos. La solución se inactivó al utilizar 250 ml de cloruro de amonio saturado, se diluyó con 200 ml de agua y luego se extrajo con EtOAc (200 ml * 3). Se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con solución salina saturada, se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto 1-2. Se utilizó el producto grueso en las siguientes reacciones sin purificación. RMN 1H (400 MHz, CDCls) 55.63 (br s, 1H),3.50-3.65 (m, 4H), 2.34 (br s, 4H), 1.88 (br t, J=5.90 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H).
Etapa 2: Se agregaron acetato de potasio (12.7 g, 129.3 mmol) y Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (3.5 g, 4.3 mmol) a una solución de DMF (100 ml) que contenía el compuesto 1-2 (16 g, 43.1 mmol) y bis(pinacolato)diboro (12.0 g, 47.4 mmol), luego se reemplazó con nitrógeno 3 veces y se agitó en condición de nitrógeno durante 3 horas a 70 °C. La TLC mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se generaron nuevos puntos. La solución de reacción se dispersó en una mezcla de 300 ml de agua y 400 ml de EtOAc. Se separaron las fases orgánicas, se lavaron con solución salina saturada, se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso. El producto grueso se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice para proporcionar el compuesto 1 3. RMN 1H (400MHz, CDCls) 56.46 (br s, 1H), 3.71 - 3.53 (m, 4H), 2.31 (br d, J=3.0 Hz, 2H), 2.24 - 2.16 (m, 2H), 1.74 (t, J=6.3 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.26 (s, 12H).
Etapa 3: En una atmósfera de nitrógeno, se agregaron carbonato de potasio (3.8 g, 27.3 mmol) y Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (744 mg, 911.0 ^mol) a la solución de dioxano (60 ml) y agua (15 ml) que contenía el compuesto 1-3 (3.5 g, 10.0 mmol) y N-(5-bromo-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-il)ciclopropanoformamida (2.6 g, 9.1 mmol). Esta solución de reacción se agitó durante 3 horas a 90 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se concentró para proporcionar un producto grueso, que se purificó y se separó mediante cromatografía para proporcionar el compuesto 1-4. LCMS (ESl) m/z: 424.3 [M H]+.
Etapa 4: Se agregó solución de diclorometano (10 ml) que contenía el compuesto 1-4 (3.5 g, 8.2 mmol) con ácido clorhídrico/EtOAc (4 M, 30 ml) y se agitó durante 0.5 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. El sólido se precipitó, se filtró y se secó para proporcionar el compuesto 1-5 (3.3 g de clorhidrato, producto grueso), luego se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. L<c>M<s>(ESl) m/z: 324.1.
Etapa 5: En una atmósfera de nitrógeno, se agregó Pd/C (1 g, 10 %) a una solución de metanol (100 ml) que contenía el compuesto 1-5 (3.0 g, 8.34 mmol, clorhidrato). La suspensión se reemplazó con hidrógeno 3 veces, luego se agitó durante 12 horas en una atmósfera de hidrógeno (30 psi) a 30 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se filtró y luego se concentró para proporcionar el compuesto 1-6. LCMS (ESl) m/z: 326,2 [M H]+
Etapa 6: Se disolvió el compuesto 1-6 (0.87 g, 2.40 mmol, clorhidrato) en N,N-dimetilformamida (10 ml), se agregó con HOBt (487 mg, 3,6 mmol) y EDCI (691 mg, 3.6 mmol), luego se agregó ácido (1S)-2,2-difluorociclopropanocarboxílico (323 mg, 2.6 mmol) y etildiisopropilamina (621 mg, 4,8 mmol), y se dejó reaccionar durante 12 horas a 15 °C. La LC MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida y los residuos se procesaron mediante H<p>LC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 1-13:<r>M<n>1H (400MHz, METANOL-d4) 57.32-7.73 (m, 2H), 6.95 (br s, 1H), 3.62-4.22 (m, 4H), 3.45 (br s, 1H), 3.18-3.37 (m, 1H), 2.61 (br s, 1H), 1.45-2.27 (m, 10H), 0.78-1.17 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 430.0[M H]+.
Los siguientes compuestos que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron a partir del compuesto 1-6 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para los compuestos 1-13 (es decir los ácidos carboxílicos para sintetizar el compuesto 1-13 se reemplazaron por ácidos carboxílicos correspondientes a las siguientes moléculas objetivo en reacciones de condensación de amidas ácidas):
Compuesto 1-7: RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 511.08 (br s, 1H), 7.48-7.78 (m, 2H), 7.03 (d, J=7.0 Hz, 1H), 3.86-4.25 (m, 2H), 3.61-3.80 (m, 2H), 3.29-3.38 (m, 1H), 2.69-2.88 (m, 1H), 1.85-2.19 (m, 7H), 1.51-1.79 (m, 4H), 0.83-0.96 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 430.0[M H]+.
Compuesto 1-8: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 11.14 (br s, 1H), 7.52-7.66 (m, 2H), 7.00 (d, J=7.03 Hz, 1H), 3.54 3.83 (m, 6H), 3.29 (br t, J=11.54 Hz, 1H), 1.94-2.09 (m, 5H), 1.41-1.70 (m, 4H), 0.77-0.90 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 393.1[M H]+.
Compuesto 1-9: RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 510.99 (br s, 1H), 7.49-7.65 (m, 2H), 6.99 (br d, J=7.03 Hz, 1H), 4.02 4.20 (m, 2H), 3.61-3.78 (m, 2H), 1.94-2.13 (m, 5H), 1.48-1.72 (m, 4H), 1.14-1.32 (m, 4H), 0.77-0.87 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 412.1[M H]+.
Compuesto 1-10: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 5 7.77-7.87 (m, 1H), 7.62 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=7.28, 11.80 Hz, 1H), 4.08 (s, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.43-3.56 (m, 1H), 3.22 (dq, J=6.90, 10.75 Hz, 2H), 2.06-2.23 (m, 4H), 1.94 (br s, 1H), 1.56-1.84 (m, 3H), 1.56-2.00 (m, 1H), 0.94-1.14 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 436.1 [M H]+.
Compuesto 1-11: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.56-7.67 (m, 1H), 7.50 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.00 (t, J=7.15 Hz, 1H), 4.26-4.48 (m, 2H), 3.70-3.90 (m, 2H), 3.42-3.59 (m, 1H), 2.08-2.24 (m, 4H), 1.48-1.99 (m, 9H), 0.87-1.10 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 419.1[M H]+.
Compuesto 1-12: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.56-7.64 (m, 1H), 7.48 (d, J=9.03 Hz, 1H), 6.97 (d, J=7.28 Hz, 1H), 3.91-4.17 (m, 2H), 3.78-3.86 (m, 1H), 3.67-3.75 (m, 1H), 3.40-3.54 (m, 1H), 2.53-2.69 (m, 1H), 1.92-2.21 (m, 6H), 1.72-1.85 (m, 3H), 1.50-1.69 (m, 2H), 0.86-1.08 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 430.1[M H]+.
Compuesto 1-14: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.57-7.66 (m, 1H), 7.50 (d, J=8.78 Hz, 1H), 6.95-7.03 (m, 1H), 6.01-6.38 (m, 1H), 4.62 (s, 1H), 3.65-4.10 (m, 4H), 3.43-3.58 (m, 1H), 2.76-2.93 (m, 2H), 2.04-2.21 (m, 4H), 1.51-1.87 (m, 4H), 1.01-1.07 (m, 2H), 0.93 (qd, J=3.74, 7.34 Hz, 2H). LCMS (ESI) m/z: 418.1[M H]+.
Compuesto 1-15: RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 511.01 (br s, 1H), 7.48-7.66 (m, 2H), 7.00 (dd, J=7.53, 9.79 Hz, 1H), 4.11-4.33 (m, 2H), 3.60-3.81 (m, 2H), 3.25-3.32 (m, 1H), 2.03 (br t, J=9.03 Hz, 5H), 1.53-1.73 (m, 4H), 1.49 (d, J=4.77 Hz, 6H), 0.76-0.88 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 421.1[M H]+.
Síntesis del compuesto 1-16: Se disolvió el compuesto 1-6 (100 mg, 227.6 ^mol, TFA) en N,N-dimetilformamida (5 ml), se agregó con carbonato de potasio (94 mg, 682.7 ^mol) y 2-bromoacetonitrilo (30 mg, 250.3 ^mol) y se agitó durante 12 horas a 10 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (5 ml), se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 10 ml), se lavó con solución salina saturada (10 ml), se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Los residuos se procesaron mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 1-16. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.83 (t, J=8.03 Hz, 1H), 7.64 (br d, J=8.78 Hz, 1H), 7.21 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.23 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.49 (br t, J=11.92 Hz, 1H), 2.14-2.30 (m, 4H), 1.79-1.97 (m, 3H), 1.59-1.74 (m, 2H), 0.95-1.12 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 365.0[M H]+.
Los siguientes compuestos que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron a partir del compuesto 1-6 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuesto 1-16 (el bromoacetonitrilo se reemplazó correspondientemente por bromopropionitrilo en las moléculas diana):
Compuesto 1-17: RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 511.00 (br s, 1H), 7.50-7.63 (m, 2H), 6.96 (d, J=6.27 Hz, 1H), 3.33 3.34 (m, 2H), 3.23-3.30 (m, 1H), 2.95 (s, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.58-2.69 (m, 2H), 1.99 (br d, J=10.29 Hz, 5H), 1.40-1.65 (m, 4H), 0.74-0.88 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 379.0[M H]+.
Ejemplo 2
Etapa 1: En atmósfera de nitrógeno a -78 °C, se disolvió ácido tert-butil 9-oxigen-3-azaspiro[5.5]hendecano-3-carboxílico (3-1) (5 g, 18.7 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (150 ml), se goteó lentamente con bis(trimetilsilil)amina litio (1 M, 22.4 ml) y se agitó durante 1 hora a -78 °C. Luego, se agregó a la solución de reacción una solución de tetrahidrofurano anhidro (50 ml) que contenía 1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metano sulfonamida (7.35 g, 20.6 mmol) y se agitó durante 12 horas a 15 °C. La TLC mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se inactivó con cloruro de amonio saturado (50 ml) y se extrajo con EtOAc (200 ml * 2). La fase orgánica combinada se lavó con solución salina saturada (50 ml), se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto 3-2, que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin ser purificado.
Etapa 2: Se disolvieron el compuesto 3-2 (8 g, 20.0 mmol) y bis(pinacolato)diboro (5.59 g, 22.0 mmol) en N,N-dimetilformamida (100 ml), se agregaron acetato de potasio (5.90 g, 60.1 mmol) y dicloruro de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(N) diclorometano (1.64 g, 2.0 mmol) y se agitó durante 3 horas a 70 °C. La TLC mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (300 ml) y se extrajo con EtOAc (200 ml * 2). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (150 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se separaron mediante una columna rápida de gel de silicio (0~10%de EtOAc/PE) para proporcionar el compuesto 3-3. RMN 1H (400MHz, CDCl3) 56.41 (br s, 1H), 6.34-6.47 (m, 1H), 3.32-3.44 (m, 2H), 3.14-3.29 (m, 2H), 2.00-2.10 (m, 2H), 1.90 (br d, J=3.01 Hz, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.28 (br t, J=5.52 Hz, 4H), 1.19 (s, 12H).
Etapa 3: En una atmósfera de nitrógeno, una solución mezclada de dioxano (40 ml) y agua (10 ml) que contenía N-(5-bromo-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-2-il)ciclopropilformamida (2 g, 7.1 mmol), compuesto 3-3 (3.49 g, 9.3 mmol), carbonato de potasio (2.95 g, 21.3 mmol) y dicloruro de [1,1-bis(difenilfosfina)ferroceno]paladio diclorometano (581 mg, 711.5 ^mol) ce reemplazó con nitrógeno 3 veces y la solución de reacción se calentó a 90 °C durante 3 horas. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida, y el residuo se separó mediante una columna rápida de gel de sílice (0~4 % de metanol/diclorometano) para proporcionar el compuesto 3-4. LCMS (ESI) m/z: 452.4[M H]+.
Etapa 4: Se disolvió el compuesto 3-4 (3.5 g, 7.8 mmol) en diclorometano (15 ml), se agregó con ácido clorhídrico/EtOAc (4 M, 30 ml) y se dejó reaccionar durante 30 minutos a 20 °C. La lC-MS mostró que se completó la reacción. El sólido se precipitó, se filtró y se secó para proporcionar el compuesto 3-5. LCMS (ESI) m/z: 352.2[M H]+.
Etapa 5: El atmósfera de N2, se disolvió el compuesto 3-5 (2.9 g, 7.4 mmol, clorhidrato) en metanol (100 ml), se agregó con catalizador de paladio/carbono seco (1 g, 10 %), y se reemplazó por hidrógeno 3 veces. La solución de reacción se agitó durante 12 horas a una presión de hidrógeno (30 psi) y una temperatura de reacción de 25 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. El sólido se filtró con diatomita para proporcionar un filtrado, que luego se concentró para proporcionar el compuesto 3-6 ((2.6 g de clorhidrato). LCMS (ESI) m/z: 354.7[M H]+.
Etapa 6: Se disolvió el compuesto 3-6 (1 g, 2.6 mmol, clorhidrato) en N,N-dimetilformamida (20 ml), se agregó con HOBt (573 mg, 4.2 mmol) y EDCI (813 mg, 4.2 mmol) y luego ácido (1S)-2,2-difluorociclopropilcarboxílico (380 mg, 3.1 mmol) y DIEA (731 mg, 5.7 mmol), y se dejó reaccionar durante 12 horas a 15 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 150 ml * 2). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (100 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se procesó mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 3-7. (400 MHz, METANOL-d4) 57.57-7.64 (m, 1H), 7.48 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.02 (d, J=7.28 Hz, 1H), 3.63-3.77 (m, 3H), 3.41-3.61 (m, 2H), 2.93 (dt, J=8.28, 11.80 Hz, 1H), 1.36-2.06 (m, 15H), 1.04 (quin, J=3.76 Hz, 2H), 0.93 (qd, J=3.66, 7.34 Hz, 2H). LCMS (ESI) m/z: 458.1[M H]+.
Los siguientes compuestos que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron a partir del compuesto 3-6 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuestos 3-7 (los ácidos carboxílicos para el compuesto 3-7 se reemplazaron por ácidos carboxílicos en las siguientes moléculas objetivo en reacciones de condensación de amidas ácidas):
Compuesto 3-8: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.57-7.67 (m, 1H), 7.49 (d, J=8.53 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=3.76, 6.78 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.83-3.91 (m, 1H), 3.62 (td, J=3.76, 7.53 Hz, 2H), 3.42-3.54 (m, 3H), 1.68-2.08 (m, 9H), 1.40 1.56 (m, 4H), 1.05 (quin, J=3.76 Hz, 2H), 0.88-0.97 (m, 2H).LCMS (ESI) m/z: 421.1[M H]+.
Compuesto 3-9: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.61 (dd, J=7.28, 8.78 Hz, 1H), 7.49 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.02 (dd, J=4.52, 6.78 Hz, 1H), 3.63 (td, J=3.83, 7.40 Hz, 2H), 3.43-3.58 (m, 5H), 1.67-2.07 (m, 9H), 1.39-1.54 (m, 4H), 1.01 1.08 (m, 2H), 0.93 (qd, J=3.68, 7.28 Hz, 2H).LCMS (ESI) m/z: 464.1[M H]+.
Ejemplo 3
Etapa 1: A 0 °C, se disolvió 5-bromo-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridil-2-amina (4-1) (5 g, 23.5 mmol) en acetonitrilo (50 ml), se agregó con trietilamina (11.87 g, 117.4 mmol) y cloruro de ciclopropanocarbonilo (6.13 g, 58.7 mmol) y se dejó reaccionar durante 12 horas a 25 °C. La TLC mostró que se completó la reacción. El acetonitrilo solvente se eliminó mediante concentración bajo presión reducida y los residuos se separaron mediante una columna rápida (0~5 % de metanol/diclorometeno) para proporcionar el compuesto 4-2. LCMS (ESI) m/z: 350.8[M H]+.
Etapa 2: En atmósfera de N2, se disolvieron el compuesto 4-2 (1.99 g, 5.7 mmol) y el compuesto 1-1 (1.5 g, 6.3 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml), se agregó lentamente con una solución de n-butillitio (2.5 M, 5.7 ml) a -70 °C y se agitó durante 30 minutos a 10 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se inactivó con cloruro de amonio saturado (50 ml) a 0 °C y se extrajo con EtOAc (150 ml * 2). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (10 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se separaron mediante una columna rápida de gel de silicona (0~3 % de metanol/diclorometano) para proporcionar el compuesto 4-3. LCMS (ESI) m/z: 442.3 [M H]+.
Etapa 3: A 0 °C, se disolvió el compuesto 4-3 (0.8 g, 1.81 mmol) en diclorometano anhidro (10 ml), se agregó con trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST) (351 mg, 2.17 mmol), se dejó reaccionar durante 15 minutos a 0 °C y luego se dejó reaccionar durante 1 hora después de calentar a 25 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se inactivó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 ml) a 0 °C, se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con diclorometano (50 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (20 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se separaron mediante una columna rápida de gel de silicio (0~100% de EtOAc/pE) para proporcionar el compuesto 4-4. LCMS (ESI) m/z: 444.3 [M H]+.
Etapa 4: Se disolvió el compuesto 4-4 (410 mg, 924.4 jm ol) en diclorometano (5 ml), se agregó con ácido clorhídrico/EtOAc (4 M, 10 ml) y se dejó reaccionar durante 30 minutos a 20 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. El sólido se precipitó, se filtró y se secó para proporcionar el compuesto 4-5 (390 mg de clorhidrato). LCMS (ESI) m/z: 344.2[M H]+.
Etapa 5: Se disolvió el compuesto 4-5 (130 mg, 342.2 jmol, clorhidrato) en N,N-dimetilformamida (10 ml), se agregó con HOBt (77 mg, 567.9 jm ol) y EDCI (109 mg, 567.9 jmol), luego se agregó con ácido 2-cianoacético (35 mg, 416.4 |jmol) y diisopropiletilamina (98 mg, 757.1 jmol), y se dejó reaccionar durante 12 horas a 15 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida y los residuos se procesaron mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 4-6. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 87.66-7.72 (m, 1H), 7.56-7.62 (m, 1H), 7.25 (t, J=7.28 Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.03 (s, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.26-3.30 (m, 2H), 2.97-3.28 (m, 2H), 1.74-2.08 (m, 7H), 0.89-1.13 (m, 4H). LCMS (ESI) m/z: 411.1[M H]+.
Los siguientes compuestos 4-7 y 4-8 que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron a partir del compuesto 4-5 como intermedio común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuesto 4-6 (se agregaron los compuestos de ácidos carboxílicos con diferentes sustituyentes del compuesto 4-6):
Compuesto 4-7: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7.65-7.73 (m, 1H), 7.59 (dt, J=1.13, 9.72 Hz, 1H), 7.20-7.29 (m, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.01 (d, J=11.29 Hz, 2H), 3.76 (s, 1H), 2.99-3.30 (m, 4H), 1.74-2.10 (m, 7H), 0.88-1.12 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 454.1[M H]+.
Compuesto 4-8: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7.64-7.73 (m, 1H), 7.59 (dt, J=1.25, 9.16 Hz, 1H), 7.20-7.28 (m, 1H), 6.01-6.44 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.99 (d, J=11.80 Hz, 2H), 3.73 (s, 1H), 2.99-3.27 (m, 2H), 2.76-2.99 (m, 2H), 1.75 2.10 (m, 7H), 0.89-1.10 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 436.1[M H]+.
Ejemplo 4
Etapa 1: A -78 °C, se goteó LiHMDS (1 M, 770 ^l) en THF (8 ml) que contenía el compuesto 5-1 (0.15 g, 592.1 ^mol). La mezcla se agitó durante 1 hora a -78 °C. A -78 °C, se goteó solución de tetrahidrofurano (4 ml) que contenía 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (233 mg, 651 ^mol) en la solución de reacción y luego se agitó durante 12 horas a 15 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que se completó la reacción y se generaron nuevos puntos. La solución de reacción se inactivó con 10 ml de una solución saturada de cloruro de amonio, luego se agregaron con 20 ml de agua y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto 5-2, que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación.
Etapa 2: Se agregaron KOAc (191 mg, 2.0 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (48 mg, 64.9 ^mol) en una solución de DMF (10 ml) que contenía el compuesto 5-2 (0.25 g, 648.7 ^mol) y bis(pinacolato)diboro (165 mg, 648.7 ^mol). La solución de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que se completó la reacción y se detectó la generación de nuevos puntos. A la solución de reacción se agregaron 20 ml de agua y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso, que se separó y purificó mediante cromatografía (SiO2, PE:EA =50:0~20:1) para proporcionar un compuesto aceitoso incoloro 5-3.<r>M<n>1H (400 MHz, METANOL-d4) 56.50 (br s, 1 H), 3.35-3.49 (m, 2 H), 3.07-3.15 (m, 2 H), 2.02-2.22 (m, 4 H), 1.54-1.81 (m, 4 H), 1.47 (s, 9 H), 1.27 (s, 12 H).
Etapa 3: La solución de dioxano (4 ml) y agua (1 ml) que contenía el compuesto 5-3 (0.13 g, 357.8 ^mol), N-(5-bromo-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-il)ciclopropanoformamida (101 mg, 357.8 ^mol), K2CO3 (149 mg, 1.1 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (26 mg, 35.8 ^mol) se reemplazó por gas nitrógeno. La mezcla se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 12 horas a 90 °C. La LCMS mostró que se completó la reacción, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se eliminó del solvente mediante concentración, luego se dispersó en 10 ml de agua, y se extrajo con DCM/MeOH (10:1,30 ml * 3). Se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con solución salina saturada (40 ml) y se secaron con sulfato de sodio anhidro, luego se filtraron para proporcionar un filtrado, que se destiló a presión reducida para proporcionar un producto grueso. El producto grueso se purificó mediante el método de columna cromatográfica (SiO2, DCM:MeOH =1:0 a 20:1) para proporcionar el compuesto 5-4. LCMS (ESI) m/z: 438.3[M H]+. Etapa 4: En atmósfera de argón, se agregó Pd/C (10 %, 50 mg) en metanol (10 ml) que contenía el compuesto 5-4 (0.2 g, 457.1 ^mol). La mezcla se reemplazó por hidrógeno durante 3 veces y luego se agitó en una atmósfera de hidrógeno (15 psi) durante 2 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto 5-5, que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. L<c m>S (ESI) m/z: 440.4[M H]+. Etapa 5: Diclorometano (10 ml) que contenía el compuesto 5-5 (150 mg, 341.3 ^mol) y TFA (4 ml) se reemplazaron por nitrógeno 3 veces, y la solución de reacción se agitó durante 30 minutos a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se concentró y se eliminó el solvente para proporcionar el compuesto 5-6 (0.15 g, sal de TFA), que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 340.2[M H]+.
Etapa 6: Se agregaron EDCI (104 mg, 541.1 ^mol), HOBt (73 mg, 541.1 ^mol) y DIEA (140 mg, 1.1 mmol, 189 ^l) en DMF (4 ml) que contenía ácido (1S)-2,2-difluorociclopropil fórmico. (44 mg, 360.7 ^mol), se agitó para reaccionar durante 5 minutos a 25 °C, luego se agregó el compuesto 5-6 (122 mg, 270 ^mol, sal de TFA) y se agitó durante 16 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. Se separó el producto grueso (condición de separación neutra, columna cromatográfica: Waters Xbridge 150mm*25mm 5 |jm; fase móvil: [H2O(NH4HCOs 10 mM)-ACN]; B(CH)sCN)%: 25 %-55 %, 7 min) y separación quiral SFC (columna cromatográfica: D<a>ICEL CHIRALCEL OD-H (250 mm*30 mm, 5 ^m); fase móvil:
[0.1 % de NH3H2O EtOH]; B(CO2)%: 40%) para proporcionar el compuesto 5-7, tiempo de retención SFC: 3.685 minutos. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 57.48 - 7.55 (m, 1 H), 7.39 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 6.92 (dd, J=6.90, 3.39 Hz, 1 H), 3.35 -3.76 (m, 5 H), 2.66 -2.94 (m, 1 H), 1.51 -2.10 (m, 13 H), 0.94 (br s, 2 H), 0.78 -0.88 (m, 2 H). LCMS (ESI) m/z: 444.1 [M H]+. Compuesto 5-8, tiempo de retención SFC: 4.283 min. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 57.48 -7.59 (m, 1 H), 7.40 (br d, J=8.53 Hz, 1 H), 6.94 (br d, J=6.78 Hz, 1 H), 3.23 - 3.78 (m, 5 H), 2.65 - 2.81 (m, 1 H), 1.54 -2.06 (m, 13 H), 0.95 (br s, 2 H), 0.77 - 0.87 (m, 2 H). LCMS (ESI) m/z: 444.2[M H]+.
Los siguientes compuestos que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron a partir del compuesto 5-6 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuesto 5-7 (se agregaron compuestos de ácidos carboxílicos con sustituyentes diferentes del compuesto 5-7):
Compuesto 5-9: Utilice HPLC (condición de separación neutra, columna cromatográfica: Waters Xbridge<150 mm*25 mm 5 ^m; fase móvil: [H2O(NH4HCO310 mM)-ACN];>B(<c>H)3CN)%:<18 %-32 %, 9 min) para separación,>tiempo de retención de 2.117 min. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.60-7.68 (m, 1H), 7.52 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.05 (dd, J=3.4, 6.8 Hz, 1H), 3.44-3.73 (m, 4H), 3.31 (br s, 2H), 2.11 (td, J=7.6, 14.9 Hz, 3H), 2.01 (br t, J=7.3 Hz, 1H), 1.96 (br s, 1H), 1.66-1.88 (m, 6H), 1.31 (br s, 1H), 1.02-1.10 (m, 2H), 0.91-0.99 (m, 2H).LCMS (ESI) m/z: 407.2[M H]+. Compuestos 5-10: Condición de resolución quiral SFC, columna cromatográfica: DAICEL CHIRALCEL OD-H<(250 mm*30 mm, 5 ^m); fase móvil: [0.1 % de>N<h>3H2O<EtOH]; B(CO2)%: 40 %-40 %, tiempo de retención de 4.114>min. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7.52 (br d, J=8.0 Hz, 1H), 7.40 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 6.89-6.98 (m, 1H), 3.57 (t, J=7.0 Hz, 1H), 3.25-3.51 (m, 6H), 1.78-2.09 (m, 5H), 1.51-1.76 (m, 6H), 0.94 (br d, J=3.8 Hz, 2H), 0.79-0.88 (m, 2H). LCMS (ESI) m/z: 450.2[M H]+.
Ejemplo 5
Etapa 1: A -78 °C, se goteó LiHMDS (1 M, 1.3 ml) en THF (8 ml) que contenía el compuesto 6-1 (250 mg, 986.8 |jmol). La mezcla se agitó durante 1 hora a -78 °C. A -78 °C, se goteó tetrahidrofurano (4 ml) que contenía 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metano sulfonamida (388 mg, 1.1 mmol) a la solución de reacción y luego se agitó durante 12 horas a 25 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que las materias primas reaccionaron completamente, y se generaron nuevos puntos. La solución de reacción se inactivó al utilizar 10 ml de una solución saturada de cloruro de amonio, luego se agregaron 20 ml de agua y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso, luego se separaron y purificaron mediante columna cromatográfica (SiO2, PE:EA =20:1~10:1) para proporcionar el compuesto 6-2.
Etapa 2: Se agregaron KOAc (295 mg, 3.0 mmol) y Pd(dppf)ChCH2Ch (82 mg, 100 jm ol) en una solución de DMF (5 ml) que contenía el compuesto 6-2 (386 mg, 1.0 mmol) y bis(pinacolato)diboro (254 mg, 1.0 mmol). La solución de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectó la generación de nuevos puntos. A la solución de reacción se agregaron 20 ml de agua y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso, que se separó y se purificó mediante columna cromatográfica (SO 2, PE:EA =50:0~20:1) para proporcionar el compuesto 6-3.
Etapa 3: La solución de dioxano (4 ml) y agua (1 ml) que contenía el compuesto 6-3 (186 mg, 512 jmol), N-(5-bromo-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-il)ciclopropano formamida (144 mg, 512 jmol), K2CO3 (212 mg, 1.5 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (42 mg, 51.2 jm ol) se reemplazó por nitrógeno 3 veces. En condiciones de nitrógeno, la mezcla se agitó durante 12 horas a 90 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. Se eliminó el solvente de la solución de reacción, se dispersó en 10 ml de agua, y se extrajo con DCM:MeOH (10:1, 30 ml * 3). Se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y luego se destilaron bajo presión reducida para proporcionar un producto grueso. El producto grueso se purificó mediante el método de columna cromatográfica (SiO2, DCM:MeOH =1:0~20:1) para proporcionar el compuesto 6-4. LCMS (ESI) m/z: 438.7[M H]+. Etapa 4: En atmósfera de argón, estaba Pd/C (10%, 50 mg) en solución de metanol (10 ml) que contenía el compuesto 6-4 (196 mg, 448 jmol). La mezcla se reemplazó por hidrógeno 3 veces y luego se agitó durante 16 horas en una atmósfera de hidrógeno (15 psi) a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se filtró y luego se concentró para proporcionar el compuesto 6-5, que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 440.3 [M H]+. Etapa 5: La solución de diclorometano (10 ml) que contenía el compuesto 6-5 (130 mg, 296 jmol) y TFA (4 ml) se reemplazó por nitrógeno 3 veces y luego se agitó durante 30 minutos a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se concentró para eliminar el solvente, proporcionar el compuesto 6-6 (134 mg, sal de TFA), que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación.
Etapa 6: Se agregaron EDCI (85 mg, 443.3 jmol), HOBt (60 mg, 443.3 jm ol) y DIEA (115 mg, 886.5 jmol, 154.4 j l) en DMF (4 ml) que contenía ácido (1S)-2,2-bifluorociclopropanocarboxílico (36 mg, 295.5 jmol), se agitó para reaccionar durante 5 minutos a 25 °C, luego se agregó el compuesto 6-6 (134 mg, 295.5 jmol, sal de TFA) y se agitó durante 16 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. Se separó el producto grueso (condición neutra, columna cromatográfica: Waters Xbridge 150*25 5 jm ; fase móvil: [agua (NH4HCO310 mM)-ACN]; B%: 30 %-50 %, 7 min) y separación quiral SFC (columna cromatográfica: YMC CHIRAL Amilosa-C (250 mm*30 mm, 10 |jm; fase móvil: [0.1%de NH3H2O EtOH]; B%: 50 %). El compuesto 6-7 se obtuvo con un tiempo de retención SFC de 2.339 min. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 11.01 (br s, 1 H), 7.51-7.63 (m, 2 H), 7.08 (br d, J=6.78 Hz, 1 H), 3.83 (br s, 1 H), 3.41-3.66 (m, 4 H), 3.15 (br d, J=5.02 Hz, 1 H), 2.14-2.35 (m, 2 H), 2.06 (br s, 1 H), 1.75-1.95 (m, 4 H), 1.40-1.73 (m, 6 H), 0.84 (br s, 4 H).LCMS (ESI) m/z: 444.1[M H]+. Compuesto 6-8 : el tiempo de retención SFC es, 4.142 min. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 11.01 (br s, 1 H), 7.54-7.65 (m, 2 H), 7.08 (br s, 1 H), 3.80-3.90 (m, 1 H), 3.45-3.66 (m, 4 H), 3.09-3.22 (m, 1 H), 2.18 2.36 (m, 2 H), 2.06 (br s, 1 H), 1.75-1.95 (m, 4 H), 1.68 (br d, J=7.28 Hz, 3 H), 1.50 (br d, J=4.77 Hz, 3 H), 0.77-0.88 (m, 4 H). LCMS (ESI) m/z: 444.1 [M H]+.
Ejemplo 6
Etapa 1: A -78 °C, se agregó LiHMDS (1 M, 1.7 ml) en una solución de THF (8 ml) que contenía el compuesto 7-1 (0.3 g, 1.33 mmol). Después de agitar durante una hora a -78 °C, la mezcla se goteó con una solución de tetrahidrofurano (4 ml) que contenía 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metano sulfonamida (523 mg, 1.46 mmol). y luego se agitó durante 12 horas a 25 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que las materias primas reaccionaron completamente, y se generaron nuevos puntos. La solución de reacción se inactivó con cloruro de amonio saturado, luego se le agregaron 20 ml de agua y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso, que se separó y purificó mediante el método de columna cromatográfica (SO 2, PE:EA =20:1~10:1) para proporcionar el compuesto 7-2. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 85.72 (s, 1 H), 3.86-3.92 (m, 2 H), 3.76-3.82 (m, 2 H), 2.53-2.61 (m, 2 H), 2.18-2.25 (m, 2 H), 1.37 (s, 9 H).
Etapa 2: Se agregaron KOAc (379 mg, 3.9 mmol) y Pd(dppf)Ch.CH2Ch (105 mg, 128.7 pmol) en una solución de DMF (5 ml) que contenía el compuesto 7-2 (0.46 g, 1.3 mmol) y bis(pinacolato)diboro (327 mg, 1.3 mmol). La solución de reacción se agitó durante 12 horas a 70 °C. La TLC (PE:EA=5:1) mostró que las materias primas reaccionaron completamente, y se detectó la generación de nuevos puntos. La solución de reacción se inactivó al agregar 20 ml de agua, y se extrajo con EtOAc (30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un producto grueso, que se purificó mediante el método cromatográfico (SO 2, PE:EA =50:0~20:1) para proporcionar el compuesto 7-3. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 86.45 (t, J=1.88 Hz, 1 H), 3.83-3.88 (m, 2 H), 3.73-3.78 (m, 2 H), 2.36-2.42 (m, 2 H), 2.04 (t, J=7.03 Hz, 2 H), 1.37 (s, 9 H), 1.21 (s, 12H).
Etapa 3: La solución de dioxano (4 ml) y agua (1 ml) que contenía el compuesto 7-3 (0.15 g, 447.43 pmol), N-(5-bromo-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-il)ciclopropano formamida (126 mg, 447.43 pmol), K2CO3 (186 mg, 1.34 mmol) y Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (37 mg, 44.7 pmol) se reemplazó por nitrógeno 3 veces. La mezcla se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 12 horas a 90 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectó el pico de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se concentró para eliminar el solvente, luego se dispersó en 10 ml de agua y se extrajo con DCM:MeOH (10:1, 30 ml * 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución salina saturada (40 ml), se secaron con sulfato de sodio hidratado, se filtraron y se destilaron bajo presión reducida para proporcionar un producto grueso, que se purificó mediante el método de columna cromatográfica (SO 2, DCM:MeOH =1:0~20:1) para proporcionar el compuesto 7-4. LCMS (ESI) m/z: 410.2[M H]+. Etapa 4: En atmósfera de argón, se agregó Pd/C (10 %, 0.05 g) en una solución de metanol (10 ml) que contenía el compuesto 7-4 (0.15 g, 366.3 pmol). La mezcla se reemplazó por hidrógeno 3 veces y luego se agitó durante 16 horas en una atmósfera de hidrógeno (15 psi) a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto 7-5, que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 412.2[M H]+.
Etapa 5: La solución de diclorometano (10 ml) que contenía el compuesto 7-5 (0.13 g, 315.9 |jmol) y TFA (4 ml) se reemplazó por nitrógeno 3 veces y luego se agitó durante 30 minutos a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción y eliminar el solvente para proporcionar el compuesto. 7-6 (130 mg, sal de TFA), que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 312.1[M H]+.
Etapa 6: Se agregaron EDCI (88 mg, 458.4 jmol), HOBt (62 mg, 458.4 jm ol) y DIEA (119 mg, 916.8 jmol, 160 j l) a una solución de DMF (4 ml) que contenía ácido (1S)-2,2-bifluorociclopropil fórmico (37 mg, 305.6 jm ol) luego se agitó para reaccionar durante 5 minutos a 25 °C, luego se agregó el compuesto 7-6 (0.13 g, 305.6 jmol, sal TFA) y se agitó durante 16 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. El producto grueso se separó (columna cromatográfica: Waters Xbridge 150*25 5 jm ; fase móvil: [H2O(NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B(CH3CN)%: 20 %-50 %, 7 min) y separación quiral (columna cromatográfica: DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm*30 mm, 10 jm ); fase móvil, A%: (0.1% de NH3H3O EtOH); B(CO3)%: (40 %-40 %) para proporcionar el compuesto 7-7, tiempo de retención SFC: 3.714 minutos. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 6 =9.59 (br d, J=12.05 Hz, 1 H), 7.34-7.57 (m, 2 H), 6.70-6.84 (m, 1 H), 4.06-4.21 (m, 2 H), 3.92-3.99 (m, 1 H), 3.74-3.92 (m, 2 H), 1.81-2.38 (m, 8 H), 1.59 (dtd, J=11.36, 7.62, 7.62, 3.76 Hz, 1 H), 1.08-1.24 (m, 2 H), 0.79 0.96 (m, 2 H). LCMS (ESI) m/z: 416.0[M H]+.
La separación se realizó para proporcionar el compuesto 7-8, Tiempo de retención SFC: 4.468 min. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 6 = 9.48 (br s, 1 H), 7.34-7.54 (m, 2 H), 6.76 (br d, J=7.03 Hz, 1 H), 4.03-4.25 (m, 2 H), 3.73-3.99 (m, 3 H), 2.50 (ddd, J=16.81, 13.18, 8.16 Hz, 1 H), 1.80-2.40 (m, 8 H), 1.53-1.66 (m, 1 H), 1.05-1.23 (m, 2 H), 0.80-0.95 (m, 2 H). LCMS (ESI) m/z: 416.0[M H]+.
Ejemplo 7
Etapa 1: En una atmósfera de nitrógeno, una solución mezclada de dioxano (40 ml) y agua (10 ml) que contiene el compuesto 8-1 (1.11 g, 5.21 mmol), el compuesto 1-3, carbonato de potasio (2.16 g, 15.6 mmol) y dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II) diclorometano (425 mg, 520.6 jmol) se reemplazó por nitrógeno 3 veces, y luego se calentó a 90 °C para reaccionar durante 3 horas. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar residuos, que se separaron mediante columna rápida (0~4 % de metanol/diclorometano) para proporcionar el compuesto 8-2. LCMS (ESI) m/z: 356.3[M H]+.
Etapa 2: Bajo la protección de atmósfera de N2, se disolvió el compuesto 8-2 (2 g, 5.6 mmol) en una solución de metanol (100 ml), se agregó con catalizador, es decir paladio/carbono seco (0.5 g, 10%), y se reemplazó por hidrógeno 3 veces. La solución de reacción se agitó durante 12 horas en condiciones de presión de hidrógeno (30 psi) y temperatura de reacción de 30 °C. La LC-MS mostró que quedaba el 50 % de las materias primas. El catalizador se eliminó mediante filtración, se agregó catalizador nuevo, es decir paladio/carbono seco (1 g), y la reacción se continuó durante 3 horas. La LCMS mostró que se completó la reacción. El sólido se filtró con diatomita para proporcionar un filtrado, que se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto 8-3. LCMS (ESI) m/z: 358.2[M H]+.
Etapa 3: Se disolvió ácido (1R)-2,2-difluorociclopropilcarboxílico (282 mg, 2.3 mmol) en piridina (10 ml), se le agregó E<d>C<i>(4.0 g, 21.0 mmol) y el compuesto 8-3 (0.75 g, 2.1 mmol) y se agitó durante 12 horas a 10 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (30 ml) y se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 50 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (30 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se separaron mediante una columna rápida de gel de silicio (0~3 % de metanol/diclorometano) y luego se purificaron con EtOAc para proporcionar el compuesto 8-4. LCMS (ESI) m/z: 462.3 [M H]+.
Etapa 4: Se disolvió el compuesto 8-4 (300 mg, 650.1 ^mol) en diclorometano (5 ml), se agregó ácido clorhídrico/EtOAc (4 M, 10 ml) y se dejó reaccionar durante media hora a 15 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró para proporcionar el compuesto 8-5 (clorhidrato). LCMS (ESI) m/z: 362.2[M H]+.
Etapa 5: Se disolvió el compuesto 8-5 (100 mg, 251.4 ^mol, HCl) en N,N-dimetilformamida (5 ml), se agregó HOBt (51 mg, 377.0 ^mol) y EDCI (72.28 mg, 377.0 ^mol), luego se agregó ácido (1 S)-2,2-difluorociclopropilcarboxílico (34 mg, 276.5 ^mol) y diisopropiletilamina (65 mg, 502.7 ^mol), y se dejó reaccionar durante 12 horas a 15 °C. La LC MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida y los residuos se procesaron mediante H<p>LC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 8-6. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 57.59-7.67 (m, 1H), 7.51 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.01 (br d, J=7.53 Hz, 1H), 3.92-4.20 (m, 2H), 3.79-3.88 (m, 1H), 3.67-3.77 (m, 1H), 3.43-3.57 (m, 1H), 2.81 (br s, 1H), 2.62 (dq, J=7.78, 11.96 Hz, 1H), 2.07-2.24 (m, 5H), 1.52 2.05 (m, 7H).LCMS (ESI) m/z: 466.2[M H]+.
Los siguientes compuestos 8-7 y 8-8 que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron del compuesto 8-5 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuestos 8-6 (se agregaron compuestos de ácidos carboxílicos con diferentes sustituyentes del compuesto 8-6):
Compuesto 8-7, El producto grueso se procesó mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para purificación. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.59-7.66 (m, 1H), 7.51 (d, J=8.78 Hz, 1H), 6.97-7.04 (m, 1H), 4.30 (d, J=4.27 Hz, 1H), 4.18 (d, J=4.27 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.49 (br t, J=11.80 Hz, 1H), 2.81 (br s, 1H), 2.05-2.28 (m, 5H), 1.74 1.96 (m, 3H), 1.53-1.70 (m, 2H), 1.23-1.33 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 448.2[M H]+.
Compuesto 8-8, El producto grueso se procesó mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para purificación. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.59-7.67 (m, 1H), 7.51 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.00 (t, J=7.40 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.69 4.11 (m, 4H), 3.41-3.54 (m, 1H), 2.82 (br s, 1H), 2.04-2.26 (m, 5H), 1.72-1.93 (m, 3H), 1.61 (q, J=11.80 Hz, 2H).LCMS (ESI) m/z: 429.0[M H]+.
Síntesis del compuesto 8-9: Se disolvió el intermedio 8-5 (100 mg, 227.6 ^mol, TFA) en N,N-dimetilformamida (5 ml), se agregó con carbonato de potasio (94 mg, 682.7 ^mol) y 2-bromoacetonitrilo (30 mg, 250.3 ^mol) y se agitó durante 12 horas a 10 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (5 ml) y se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 10 ml). Las fases orgánicas se lavaron con solución salina saturada (10 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, luego se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se procesaron mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para purificación, para proporcionar el compuesto 8-9. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.59-7.66 (m, 1H), 7.50 (d, J=8.78 Hz, 1H), 6.99 (d, J=7.53 Hz, 1H), 3.62 (s, 2H), 3.46 (br t, J=12.05 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.80 (br s, 1H), 2.14 (br d, J=9.79 Hz, 5H), 1.82-1.95 (m, 1H), 1.52-1.77 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 401.0[M H]+.
Ejemplo 8
Etapa 1: Se disolvió ácido (S)-2,2-difluorocidopropilcarboxílico (1.13 g, 9.2 mmol) en piridina (150 ml), se agregó EDCI (16.1 g, 84 mmol) y el compuesto 8-3 (3 g, 8.4 mmol) y se agitó durante 12 horas a 10 °C. La LC-M<s>mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con ac (100 ml) y luego se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 100 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución salina saturada (30 ml), luego se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se separaron mediante una columna rápida (0~3 % de metanol/diclorometano) y luego se purificaron mediante batido al utilizar EtOAc para proporcionar el compuesto 9-1. LCMS (ESI) m/z: 462.3 [M H]+.
Etapa 2: Se disolvió el compuesto 9-1 (2.3 g, 4.9 mmol) en diclorometano (5 ml), se agregó con ácido clorhídrico/EtOAc (4 M, 20 ml) y se dejó reaccionar durante media hora a 15 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. El sólido precipitado se filtró, y se secó para proporcionar el compuesto 9-2 (clorhidrato). LCMS (ESI) m/z: 362.2[M H]+.
Etapa 3: Se disolvió el compuesto 9-2 (1.23 g, 3.1 mmol, HCl) en N,N-dimetilformamida (20 ml), se agregó HOBt (626 mg, 4.6 mmol) y EDCI (889 mg, 4.6 mmol), luego se agregó ácido (1S)-2,2-difluorociclopropilcarboxílico (414.92 mg, 3.40 mmol) y diisopropiletilamina (798.70 mg, 6.18 mmol), y se dejó reaccionar durante 12 horas a 15 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con diclorometano/metanol (10/1,50 ml). Las fases orgánicas se lavaron con solución salina saturada (10 ml), se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Los residuos se procesaron mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para proporcionar el compuesto 9-3. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 57.63 (dd, J=7.53, 8.78 Hz, 1H), 7.51 (d, J=8.78 Hz, 1H), 7.01 (br d, J=7.28 Hz, 1H), 3.92-4.19 (m, 2H), 3.79-3.87 (m, 1H), 3.67 3.76 (m, 1H), 3.44-3.55 (m, 1H), 2.52-2.92 (m, 2H), 1.53-2.25 (m, 12H).LCMS (ESI) m/z: 466.1[M H]+.
Los siguientes compuestos 9-4, 9-5 que tienen los siguientes datos característicos se obtuvieron del compuesto 9-2 como intermediario común al utilizar los mismos métodos de síntesis y separación como aquellos utilizados para el compuesto 9-3 (se agregaron compuestos de ácidos carboxílicos con diferentes sustituyentes del compuesto 9-3):
Compuesto 9-4: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.58-7.68 (m, 1H), 7.51 (d, J=8.78 Hz, 1H), 6.97-7.05 (m, 1H), 4.30 (d, J=4.02 Hz, 1H), 4.18 (d, J=4.27 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.49 (br t, J=11.80 Hz, 1H), 2.82 (br s, 1H), 2.07-2.25 (m, 5H), 1.73-1.95 (m, 3H), 1.51-1.70 (m, 2H), 1.24-1.35 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 448.2[M H]+.
Compuesto 9-5: RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.58-7.68 (m, 1H), 7.51 (d, J=9.03 Hz, 1H), 7.00 (t, J=7.53 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.69-4.10 (m, 4H), 3.43-3.55 (m, 1H), 2.82 (br s, 1H), 2.05-2.25 (m, 5H), 1.72-1.97 (m, 3H), 1.51 1.69 (m, 2H).LCMS (ESI) m/z: 429.0[M H]+.
Síntesis del compuesto 9-6: El compuesto intermedio 9-2 (190 mg, 525.8 ^mol) se disolvió en N,N-dimetilformamida (5 ml), se agregaron carbonato de potasio (218 mg, 1.6 mmol) y 2-bromoacetonitrilo (70 mg, 578.3 ^mol), y la solución de reacción se agitó durante 12 horas a 10 °C. La LC-MS mostró que se completó la reacción. La solución de reacción se diluyó con agua (5 ml), se extrajo con diclorometano/metanol (10/1, 10 ml), se lavó la fase orgánica con solución salina saturada (10 ml), se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Los residuos se procesaron mediante HPLC preparativa (sistema neutro) para purificación, para proporcionar el compuesto 9-6. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 57.58-7.66 (m, 1H), 7.50 (d, J=8.53 Hz, 1H), 6.99 (d, J=7.28 Hz, 1H), 3.62 (s, 2H), 3.46 (br t, J=11.42 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.81 (br s, 1H), 2.14 (br d, J=10.29 Hz, 5H), 1.81-1.95 (m, 1H), 1.51-1.78 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 401.2[M H]+.
Ejemplo 9
Etapa 1: Dioxano mezclado (12 ml) y H2O (3 ml) que contenía el compuesto 10-1 (100 mg, 334.3 ^mol), el compuesto 3-3 (126 mg, 334.3 ^mol), Pd(dppf)Cl2 (25 mg, 33.4 ^mol) y carbonato de potasio (139 mg, 1.00 mmol) se reemplazó por nitrógeno 3 veces y se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 2 horas a 90 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y el pico principal se detectó como pico de ion molecular objetivo. La solución de reacción se filtró y se concentró para eliminar el solvente, y se separó y purificó utilizando una placa de preparación para proporcionar el compuesto 10-2. LCMS (ESI) m/z: 470.4[M H]+.
Etapa 2: La solución de diclorometano (1 ml) que contenía el compuesto 10-2 (130 mg, 276.9 ^mol) y HCl/EtOAc (4 M, 2 ml) se agitaron durante 5 minutos a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y el pico principal se detectó como pico de ion molecular objetivo. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar un compuesto sólido amarillo 10-3 (120 mg, clorhidrato), que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 370.6[M H]+.
Etapa 3: En la atmósfera de nitrógeno, se agregó Pd/C (20 mg, 10 %) en una solución de MeOH (25 ml) que contenía el compuesto 10-3 (120 mg, 295.6 ^mol, clorhidrato). La suspensión se reemplazó por hidrógeno 3 veces y luego se agitó durante 12 horas en una atmósfera de nitrógeno (15 Psi), 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y el pico principal se detectó como el pico de ion molecular objetivo. La solución de reacción se filtró, se concentró bajo presión reducida para eliminar el solvente, y proporcionar el compuesto 10-4 (130 mg, clorhidrato), que se utilizó directamente en las siguientes reacciones sin purificación. LCMS (ESI) m/z: 372.3 [M H]+. Etapa 4: La solución de DMF (5 ml) que contenía el compuesto 10-4 (130 mg, 318.7 ^mol, clorhidrato), ácido 2-cianoacético (33 mg, 382.4 ^mol), E<d>C<i>(92 mg, 478 ^mol), HOBt (65 mg, 478 ^mol) y DIEA (206 mg, 1.6 mmol, 277.6 ^l) se agitó durante 12 horas a 25 °C. La LCMS mostró que las materias primas se consumieron por completo, y se detectaron picos de iones moleculares objetivo. La solución de reacción se concentró bajo presión reducida para eliminar el solvente, y luego se separó para proporcionar el compuesto (sistema neutro) 10-5. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 =7.57-7.65 (m, 1H), 7.49-7.55 (m, 1H), 3.59-3.81 (m, 3H), 3.44-3.54 (m, 2H), 3.34-3.38 (m, 2H), 2.48 (br s, 2H), 1.81-2.04 (m, 5H), 1.64-1.77 (m, 2H), 1.36-1.58 (m, 4H), 0.86-1.12 (m, 4H).LCMS (ESI) m/z: 439.1[M H]+.
Prueba de actividad biológica
Experimento 1: pruebain vitrode actividades de las quinasas Jak1, Jak2, Jak3, Tyk2
Materiales
La proteasa JAK1, JAK2, JAK3, Tyk2 humana recombinante, la mayoría de los aparatos y reactivos se suministraron por Eurofins (Reino Unido).
Métodos
Dilución de JAK2, JAK3 y TYK2: Ácido 3-(N-morfolina)propanosulfónico (MOPS) 20 mM, EDTA 1 mM, 0.1 % de Brij-35.5 % de glicerol, 0.1 % de p-mercaptoetanol, 1 mg/ml de BSA; dilución de JAk 1: TRIS 20 mM, EDTA 0.2 mM, 0.1 % de p-mercaptoetanol, 0.01 % de Brij-35.5 % de glicerol. Todos los compuestos se prepararon en una solución de DMSO al 100 % y la concentración alcanzó la concentración medida final de 50 veces. El compuesto de prueba se diluyó mediante un gradiente de concentración de 3 veces y la concentración final fue 9 concentraciones desde 10 pM hasta 0.001 pM. El contenido de DMSO en la reacción de detección fue del 2 %. La solución madre de este compuesto se agregó a los pocillos como un primer componente y luego se agregaron los demás componentes según el siguiente proceso detallado.
Reacción enzimática de JAK1 (h)
JAK1(h) se incubó con Tris/HCl 20 mM, pH 7.5, EDTA 0.2 mM, MGEEPLYWSFPAKKK 500 pM, acetato de magnesio 10 mM y [y-33P]-ATP (las actividades y la concentración se personalizaron según fuera necesario). Se agregó una mezcla de Mg/ATP para iniciar la reacción, que se detuvo al agregar ácido fosfórico al 0.5 % después de 40 minutos de incubación a temperatura ambiente. Luego se dispersaron 10 pl de la reacción sobre la almohadilla del filtro P30, se lavaron con ácido fosfórico al 0.425 % tres veces y con metanol una vez en 4 minutos, se secaron y se contó el centelleo.
Reacción enzimática de JAK2 (h)
JAK2(h) se incubó con MOPS 8 mM pH 7.0, EDTA0.2 mM, KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC 100 pM, acetato de magnesio 10 mM y [<y>-33P]-ATP (las actividades y la concentración se personalizaron según fuera necesario). Se agregó una mezcla de Mg/ATP para iniciar la reacción, que se detuvo al agregar ácido fosfórico al 0.5 % después de 40 minutos de incubación. Luego se dispersaron 10 pl de la solución de reacción sobre la almohadilla del filtro P30, se lavaron con ácido fosfórico al 0.425 % tres veces y con metanol una vez en 4 minutos, se secaron y se contó el centelleo.
Reacción enzimática de JAK3(h)
JAK3 (h) se incubó con MOPS 8 mM, pH 7.0, EDTA 0.2 mM, GGEEEEYFELVKKKK 500 pM, acetato de magnesio 10 mM y [y-33P] -ATP (las actividades y la concentración se personalizaron según fuera necesario). Se agregó una mezcla de Mg/ATP para iniciar la reacción, que se detuvo al agregar ácido fosfórico al 0.5% después de 40 minutos de incubación. Luego se dispersaron 10 pl de la solución de reacción sobre la almohadilla del filtro P30, se lavaron con ácido fosfórico al 0.425 % tres veces y con metanol una vez en 4 minutos, se secaron y se contó el centelleo.
Reacción enzimática de TYK2(h)
TYK2(h) se incubó con MOPS 8 mM, pH 7.0, EDTA 0.2 mM, GGMEDIYFEFMGGKKK 250 pM, acetato de magnesio 10 mM y [<y>-33P] -ATP (las actividades y la concentración se personalizaron según fuera necesario). Se agregó una mezcla de Mg/ATP para iniciar la reacción, que se detuvo al agregar ácido fosfórico al 0.5 % después de 40 minutos de incubación. Luego se dispersaron 10 pl de la solución de reacción sobre la almohadilla de filtro P30, se lavaron con ácido fosfórico al 0.425 % tres veces y con metanol una vez en 4 minutos, se secaron y se contó el centelleo.
Análisis de datos
Resultados de la IC50 se proporcionaron mediante análisis de XLFIT5 (fórmula 205) de IDBS, y los detalles se muestran en la tabla 1.
Tabla 1. Los resultados de la prueba de cribado de compuestosin vitro
Conclusión: Los compuestos en la presente solicitud mostraron una buena inhibición selectiva de JAK1 y/o TYK2 en la pruebain vitrode actividades de los 4 subtipos de quinasas JAK1, JAK2, JAK3 y quinasas TYK2.
Experimento 2: Prueba de farmacocinética (PK)
La solución transparente obtenida al disolver el compuesto de prueba se inyectó en la vena de la cola y se administró por vía intragástrica a ratones macho (C57BL/6) o ratas (SD) (en ayunas durante la noche, 7-8 semanas de edad). Después de la administración del compuesto de prueba, para el grupo intravenoso (2 mg/kg) a 0.117, 0.333, 1, 2, 4, 7 y 24 horas y el grupo intravenoso (15 mg/kg) a 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 y 24 horas, se recolectó sangre de la vena mandibular y se centrifugó para obtener plasma. Se utilizó el método LC-MS/MS para determinar la concentración plasmática y se utilizó el software farmacocinético WinNonlin™ versión 6.3 para calcular las farmacocinéticas pertinentes mediante los parámetros del método de escalera logarítmica lineal del modelo no compartimental. Los resultados de la prueba son los siguientes:
Tabla 2-1 El r l l r PK l m 1-11 n r n
| Biodisponibilidad (%)a________________________________ |____________ 42.1%
Tabla 2-2 El r l l r PK l m 1-1 n r n
Ta l 2- El r l l r PK l m -7 n r n
Conclusión: El compuesto de la presente solicitud tiene buena biodisponibilidad, alta exposición, y excelente eficacia in vivo.
Experimento 3: estudio de eficaciain vivode la artritis inducida por colágeno (CIA) en ratones
Propósito experimental:
La artritis reumatoide (RA) es un tipo de enfermedad autoinmunitaria múltiple con una tasa de incidencia global de aproximadamente el 1 %, que provoca inflamación, daños y malformaciones de la artrosis, y en situaciones graves, provoca reacciones de inflamación sistémica. Los estudios de fármacos para el tratamiento de la RA pueden ayudar a aliviar los síntomas de la artritis reumatoide y mejorar la calidad de vida de un paciente. El modelo de artritis en ratones inducida por colágeno es un modelo animal que se utiliza a menudo para evaluar la eficacia de los fármacos en el tratamiento de la RA. Su patogénesis y síntomas están significativamente relacionados con la enfermedad de RA. La reactividad de las células B y T al colágeno óseo se activa al inyectar colágeno tipo II en el modelo, y las células B y T activadas ingresan al sitio de la articulación para causar daño articular, lo que desencadena una serie de síntomas similares a la artritis reumatoide humana. La evaluación del tratamiento de fármaco para la artritis reumatoide antes de la clínica en el proceso de compuestos candidatos para la artritis, la artritis inducida por colágeno en ratones, se utiliza a menudo para evaluar su eficacia.
El propósito del experimento es estudiar los efectos terapéuticos del compuesto 1-13, el compuesto 3-7 y el compuesto de referencia Filgotinib en la artritis de ratones inducida por colágeno, para proporcionar de esta manera información farmacodinámica preclínica para estudios clínicos posteriores.
Métodos experimentales:
1. Colágeno tipo II/adyuvante inmunitario completo de Freund
Preparación de ácido acético: Se diluyó ácido acético 2 N hasta 100 mM, se filtró mediante una membrana de filtro de 0.22 micrómetros y se almacenó a 4 °C.
Se disolvió colágeno bovino tipo 2 (CII) en una solución de ácido acético 100 mM y luego se almacenó durante la noche a 4 °C. La concentración final del colágeno es de 8 mg/ml.
Preparación de la emulsión: la solución de CII almacenada durante la noche se mezcló con un volumen igual de adyuvante completo de Freund, y se homogeneizó en hielo en un homogeneizador de alta velocidad a 30,000 revoluciones por minuto durante aproximadamente 60 minutos hasta que la solución formó una emulsión estable.
2. Inducción de artritis:
Los ratones se dividieron aleatoriamente en diferentes grupos de tratamiento. El día de la primera inmunización se registra como día 0 y los días siguientes se marcan en orden.
Se anestesiaron ratones DBA/1 con isoflurano y se inyectaron 50 ml de emulsión de colágeno preparada (que contenía 200 mg de CII) por vía subcutánea (2-3 cm desde la raíz de la cola). El día 21, se inyectó a la cola el mismo volumen de emulsión de colágeno de la misma manera. Los ratones en el grupo normal no se inmunizaron.
3. Diseños de administración y dosificaciones
El día 28, cuando la puntuación clínica promedio es de aproximadamente 1, se seleccionaron 50 ratones con incidencia moderada y se dividieron aleatoriamente en 5 grupos de tratamiento en base a los pesos corporales y las puntuaciones, y cada grupo tenía 8 ratones.
Se utilizó dexametasona (Dex.) como un fármaco de referencia para medir si el modelo se estableció con éxito, con una dosis de 0.3 mg/kg (una dosis comúnmente utilizada en un modelo CIA). Además, de acuerdo con los resultados de los experimentos preliminares, las dosificaciones del compuesto de prueba 1-13, el compuesto 3-7 y el compuesto de referencia Filgotinib se determinaron y se muestran en la tabla 3-1: el primer grupo es de ratones normales sin ningún tratamiento; el segundo grupo es un grupo blanco al que se le ha dado sólo solvente; al tercer grupo se le proporciona una dosis de 0.3 mg/kg de dexametasona; al sexto grupo, séptimo grupo y octavo grupo se les proporciona la dosis de 15 mg/kg. Se administraron dos veces al día durante un total de 14 días.
Tabla 3-1. Diseño de dosificaciones a ru ación
4. Medición del índice de incidencia de artritis
Observación clínica: desde 7 días antes de la inmunización hasta el día 21 después de la inmunización, se observó diariamente el estado de salud básico y los cambios de peso de los ratones DBA/1 (registrados una vez por semana). Después del día 22, se observó el estado de salud, las circunstancias de incidencia, y los cambios de peso de los ratones todos los días (registrados al menos tres veces por semana) hasta el final del experimento.
Puntuación clínica: la incidencia de los ratones se observó todos los días después de reforzar la función inmunitaria. Después de que los ratones se atacaron (que mostraban síntomas clínicos de artritis), la incidencia se puntuó desde 0-4 como estándar de puntuación de acuerdo con los diferentes niveles de la enfermedad (enrojecimiento, deformación de las articulaciones). La puntuación más alta para cada extremidad es 4, y la puntuación más alta para cada animal es 16. Los estándares de puntuación se muestran en la Tabla 3-2. La puntuación se realizó tres veces por semana. Tabl -2. ri ri n i n líni l rrii
5. Procesamiento estadístico
Los datos experimentales se expresan como media ± error estándar (Media ± EEM) y el área bajo la curva (AUC) se analiza mediante ANOVA unidireccional. P <0.05 se considera significativo.
Resultados experimentales:
1. Puntuación clínica e incidencia:
El día 28 después de la primera inmunidad (día 7 después de la segunda inmunidad), los ratones comenzaron a mostrar síntomas clínicos de artritis. La administración se inició el día 28. Los resultados experimentales detallados se muestran en la tabla 5 y la figura 1. La puntuación clínica promedio del grupo de control con solvente aumentó gradualmente, alcanzando 5.8 el día 41, lo que indica el establecimiento exitoso del modelo de artritis inducida por colágeno. Los compuestos 1-13, 3-7 y Filgotinib en la misma dosis de 15 mg/kg puede reducir significativamente las puntuaciones clínicas de los ratones con artritis en el punto final (día 41) del experimento. La puntuación promedio de los compuestos 1-13, 3-7 y Filgotinib en la misma dosificación cayó a 1.5, 3.0 y 5.6 puntos (ver los valores en la Tabla 5), lo que muestra que los compuestos 1-13, 3-7 a 15 mg/kg puede reducir eficazmente la artritis inducida por colágeno. El tratamiento con dexametasona 0.3 mg/kg (grupo G3) puede inhibir significativamente la puntuación clínica de la artritis inducida por colágeno y, a partir del día 27, la puntuación clínica se mantiene en aproximadamente 0.3 y el día 31 (la puntuación clínica cae a 0, ver el valor en la Tabla 3-3) la curva y la curva del grupo normal (grupo G1) coinciden hasta el final del experimento, (ver Figura 1).
Tabla 3-3* Puntuaciones clínicas promedio de la presente solicitud
Fecha Grupo blanco Dex G3 Compuesto 1-13 Compuesto 3-7 Filgotinib Normal G1 G2 G6 G7 G8 J
21 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00
24 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00 0.00 ± 0.00
27 0.38 ± 0.18 0.25 ± 0.16 0.50 ± 0.19 0.50 ± 0.19 0.25 ± 0.16 0.00 ± 0.00
28 0.50 ± 0.19 0.50 ± 0.27 0.26 0.63 ± 0.26 0.26 0.00
29 1.38 ± 0.38 0.25 ± 0.16 1.00 ± 0.38 0.25 0.40 0.00
31 2.50 ± 0.73 0.00 ± 0.00 1.38 ± 0.53 1.00 ± 0.33 1.88 ± 0.81 0.00
34 4.25 ± 0.73 0.00 ± 0.00 1.50 ± 0.63 1.63 ± 0.38 0.82 0.00
36 4.75 ± 1.08 0.00 ± 0.00 1.75 ± 0.67 2.50 ± 0.46 3.88 ± 1.27 0.00 ± 0.00
38 5.38 ± 1.00 0.00 ± 0.00 1.88 ± 0.77 3.13 ± 0.58 1.39 0.00 ± 0.00
41 5.75 ± 0.96 0.00 ± 0.00 1.50 ± 0.71 3.00 ± 0.60 5.63 ± 1.45 0.00 ± 0.00
*Nota: puntuación clínica promedio ± error estándar
Al analizar la curva de puntuación clínica de cada animal en cada grupo, se calculó el área bajo la curva (AUC), y la tasa de inhibición de cada grupo de administración en relación con el grupo de control de solvente se calculó mediante el promedio del AUC entre grupos. Los resultados detallados se muestran en la Tabla 3-4 y la Figura 2. Los compuestos 1-13, 3-7 y Filgotinib puede reducir la puntuación clínica AUC de animales artríticos con la misma dosis de 15 mg/kg, y las tasas de inhibición son del 59.9 %, 48.6 % y 18.7 %, respectivamente. La dexametasona también puede reducir significativamente la puntuación clínica de los animales con artritis, con una tasa de inhibición del 97.3 %.
Tabla 3-4* AUC de incidencia
Grupo blanco G2 Dex G3<Compuesto 1 13>Compuesto 3-7
G6 G7Filgotinib G8
AUC=EEM 51.75 ± 10.97 1.38 ± 0.81 20.75 ± 8.05 26.63 ±4.57 42.06 ± 12.30
Tasa de
inhibiciónN/A 973 % 59.9 % 48.6 % 18.7 % *Nota: el valor del área bajo la curva se ajusta de acuerdo con el software clínico del animal Graphpad Prism®, y son el área bajo la curva de incidencia de cada ratón en cada grupo durante el período de administración.
Tasa de inhibición = (área promedio bajo la curva en el grupo blanco Valor: el promedio del área bajo la curva del grupo de administrac¡ón)/el promedio del área bajo la curva del grupo blanco_________________________
Varios factores del tratamiento también pueden afectar la incidencia de la artritis inducida por colágeno. Los resultados detallados del experimento se muestran en la Tabla 7 y la Figura 3. La incidencia de los compuestos de prueba 1-13 alcanzó el 63 % el día 29 y se mantuvo hasta el final del experimento (ver valores específicos en la tabla 3-5). La incidencia de los compuestos 3-7 alcanzó el 88 % el día 34 y se mantuvo en el 100 % hasta el final. La incidencia del grupo de Filgotinib disminuyó después de la administración inicial y luego aumentó gradualmente hasta el 100% después de la última administración. La incidencia de artritis en el grupo de control con solvente alcanzó y se mantuvo en el 100% el día 34 después de la inmunización; y la incidencia del grupo de control positivo de dexametasona 0.3 mg/kg comenzó a disminuir después de la administración y disminuyó al 0 % el día 31.
Tabla 3-5* Incidencia de la presente solicitud_____________________________________________________________ Fecha Grupo blanco Dex G3 Compuesto 1-13 G6 Compuesto 3-7 G7 Filgotinib G8 Normal G1 ^
G2
21 0% 0% 0% 0% 0% 0%
24 0% 0% 0% 0% 0% 0%
27 38 % 25 % 50 % 50 % 25 % 0%
28 50 % 38 % 50 % 50 % 50 % 0%
29 75 % 25 % 63 % 63 % 50 % 0%
31 75 % 0% 63 % 75 % 75 % 0%
34 100 % 0% 63 % 88 % 88 % 0%
36 100 % 0% 63 % 100 % 88 % 0%
38 100 % 0% 63 % 100 % 88 % 0%
41 100 % 0% 63 % 100 % 100 % 0%
*Nota: incidencia = el número de animales patógenos en cada grupo/el número total de animales en cada grupo *100 %
2. Peso corporal
Los resultados detallados del experimento se muestran en la Tabla 8 y la Figura 4. En comparación con el grupo normal, el peso de los ratones después de la inmunización y el modelado se redujo después de la inmunización, y el peso de cada grupo de administración disminuyó desde el día 28 hasta el día 34 (ver Figura 4), luego comenzó a recuperarse lentamente. El grupo de dexametasona tuvo la mayor pérdida de peso, pero no hubo diferencias significativas en comparación con otros grupos. No hubo diferencias significativas entre los compuestos 1-13, 3-7 y Filgotinib, y los pesos corporales de los mismos se cambian básicamente de la misma manera (ver valores específicos en la Tabla 3-6), lo que sugiere que el compuesto no tiene mucho efecto sobre el peso de los ratones.
Tabla 3-6* Peso corporal promedio en la presente solicitud
Fecha Grupo blanco Dex G3 Compuesto 1 Compuesto 3 Filgotinib G8 Normal G1 ^
G2 13 G6 7 G7
21 22.38 ± 0.23 22.41 = 0.26 22.38 ± 0.30 22.59 = 0.27 22.63 ± 0.27 22.30 ± 1.10
24 21.89 ± 0.67 22.36 = 0.20 22.33 ± 0.37 22.66 = 0.28 22.50 ± 0.33 23.00 ± 1.07
27 21.96 ± 0.63 22.35 = 0.25 21.99 ± 0.44 22.10 = 0.33 22.25 ± 0.32 23.22 ± 1.11
28 22.14 ± 0.56 22.43 = 0.26 22.08 ± 0.51 22.36 = 0.30 22.30 ± 0.35 23.12 ± 1.12
29 21.89 ± 0.47 21.51 = 0.23 21.59 ± 0.41 22.26 = 0.38 21.95 ± 0.40 23.30 ± 1.15
31 21.64 ± 0.48 21.24 = 0.23 21.80 ± 0.58 22.40 = 0.42 21.61 ± 0.49 23.78 ± 1.17
34 22.21 ± 0.54 20.71 = 0.26 22.18 ± 0.53 22.25 = 0.49 21.46 ± 0.57 23.70 ± 1.24
36 22.40 ± 0.52 21.28 = 0.20 22.53 ± 0.47 22.46 = 0.42 21.84 ± 0.61 24.26 ± 1.36
38 21.79 ± 0.44 19.91 = 0.20 22.09 ± 0.40 21.88 = 0.49 20.88 ± 0.54 23.56 ± 1.32
41 23.06 ± 0.49 20.84 = 0.30 22.99 ± 0.34 22.59 = 0.43 22.30 ± 0.52 24.24 ± 1.42
Nota: peso corporal promedio ± error estándar
Conclusión: En el modelo de artritis en ratones inducida por colágeno (CIA), los compuestos de acuerdo con la presente solicitud mostraron un buen efecto terapéutico sobre la enfermedad, sin ningún efecto significativo sobre el peso corporal de los ratones, y tienen mejor eficaciain vivoque Filgotinib a la misma dosis.
Experimento 4: estudio de eficaciain vivode la artritis inducida por adyuvante (AIA)
Propósito experimental:
El modelo de rata con artritis inducida por adyuvante (AIA) es uno de los modelos animales comúnmente utilizados en la investigación de la enfermedad de la artritis reumatoide y en el desarrollo de nuevos fármacos. Su patogénesis y síntomas clínicos son similares a los de la artritis reumatoide humana. El modelo se establece al inyectar Mycobacterium tuberculosis en la almohadilla plantar para inducir células inmunitarias y anticuerpos con funciones de daño a huesos y articulaciones, lo que provocó una respuesta sistémica que se manifiesta como hinchazón de las articulaciones, osteólisis, daño sinovial y otros síntomas similares a la artritis reumatoide humana. El propósito de este experimento es evaluar el efecto terapéutico del compuesto 1-13 en un modelo de rata con artritis inducida por adyuvantes al utilizar dexametasona y filgotinib como compuestos de referencia. Hay 8 grupos en este experimento, a saber, el grupo normal (grupo Normal), el grupo de control de solvente (grupo Vehículo), el compuesto 1-13 grupos de dosis de 1 mg/kg dos veces al día, 3 mg/kg dos veces al día, 10 mg/kg dos veces al día y 30 mg/kg dos veces al día, el grupo del fármaco positivo dexametasona 0.3 mg/kg una vez al día y el compuesto de referencia Filgotinib 30 mg/kg dos veces al día. A excepción del grupo normal, a todas las ratas se les inyectó el adyuvante completo de Freund por vía subcutánea en la pata izquierda el día 0 para inducir artritis. De acuerdo con el protocolo experimental, los grupos se agruparon de acuerdo con el peso corporal y las puntuaciones, y la administración se inició el día 13, la cual continuó durante 14 días. Durante el experimento, se monitorizaron el peso corporal, el volumen de las patas (medido tres veces por semana después del día 13) y la puntuación clínica de las ratas. Al final del experimento, se recolectaron las patas traseras derechas de las ratas para realizar tinción con hematoxilina-eosina (HE) para el análisis de puntuación patológica.
Método experimental:
1. Modelo de artritis
Preparación adyuvante: Se pesaron 100 mg de Mycobacterium tuberculosis H37Ra, se molieron durante aproximadamente 5 minutos, se agregaron 3 ml de aceite de parafina para disolver el polvo, y se transfirieron a una botella dispensadora de color marrón. El mortero se lavó dos veces con 3 ml y 4 ml de aceite de parafina, y todo el aceite se transfirió a la botella dispensadora de color marrón, que tenía una concentración final de 10mg/ml. La solución se rompió mediante ondas ultrasónicas en una mezcla de agua helada durante aproximadamente 30 minutos.
2. Inducción de artritis
Los adyuvantes preparados se homogeneizaron bajo agitación y se eliminaron las burbujas de aire al extraer con una jeringa de vidrio de 1 ml (aguja de 20 G) y luego con una aguja de 25 G. Las ratas se anestesiaron con isoflurano. Antes de la inmunización, se puso la jeringa boca abajo para que la Mycobacterium tuberculosis se mezclara completamente. Después de la anestesia, se inyectaron por vía subcutánea 0.1 ml de adyuvante en la planta de la pata izquierdo de la rata. El día de la inyección de 0.1 ml de aceite de parafina por vía subcutánea en las plantas de las ratas en el grupo normal fue el día 0.
3. Administración
En el día 13, todos los animales mostraron síntomas de artritis tal como eritema o hinchazón de las patas, y se estratificaron y agruparon aleatoriamente de acuerdo con la puntuación, tamaño de las patas y peso. La agrupación se muestra en la Tabla 9. Se dividieron 70 ratas en 7 grupos, 10 ratas en cada grupo y 5 ratas en el grupo normal. De acuerdo con la Tabla 4-1, la dosificación de cada grupo es la siguiente. El volumen de administración intragástrica fue de 5 ml/kg. El compuesto se administró dos veces al día durante un total de 14 días.
Tabla 4-1 Diseño de agrupación y dosificación.
Grupo<Fármacos de>ón cia depruebaNúmero Administraci
mg/mlConcentración Dosificación Frecuen
mg/kg administración
G1 Normal 5 N/A N/A N/A N/A
G2 Vehículo 10 p.o. N/A N/A<dos veces al día,>
14 días
G3 Dex. 10 po 0.06 0.3<una vez al día, 14>
días
G4 Filgotinib 10 p.o. 6 30.<dos veces al día.>
14 días
G5<Compuesto>
1-1310 p.o. 0.2 1 dos veces al día,
14 días
G6<Compuesto>dos veces al día,
1-1310 p.o. 0.6 3 14 días G7<Compuesto>dos veces al día,
1-1310 p.o. 2 10 14 días G8<Compuesto>dos veces al día,
1-1310 p.o. 6 30 14 días 4. Determinación de la incidencia de artritis
Peso: las ratas se pesaron tres veces por semana desde el día 13 hasta el día 27.
Volumen de la pata: se midió una vez antes de la inmunización, tres veces por semana desde el día 13 hasta el día 27.
Puntuación: la puntuación se realizó tres veces por semana desde el día 13 hasta el día 27. De acuerdo con los diferentes grados de las lesiones (enrojecimiento, deformación de las articulaciones) y el estándar de 0-4 puntos, la puntuación más alta para cada extremidad es de 4 puntos y la puntuación más alta para cada animal es de 12 puntos (excepto la extremidad trasera izquierda en el lado de inyección). Los estándares de puntuación se muestran en la Tabla 4-2.
Ta l 4-2. ri ri n i n líni l rrii
5. Análisis patológico
En el día 27, las ratas se sacrificaron. Después de la recolección de sangre, se tomó la pata trasera derecha de la rata, se empapó en una solución de formalina al 10 %, se descalcificó con una solución de ácido fórmico, se embebió en parafina, se seccionó, se tiñó con HE y se observó bajo el microscopio. El grado de daño articular se evaluó a partir de cuatro aspectos: infiltración de células inflamatorias, formación del paño, lesión del cartílago y resorción ósea, y se puntuó de acuerdo con el estándar de 0-4 puntos. Los estándares de puntuación son los siguientes (Tabla 4-3)
Tabla 4-3. Estándar para la puntuación de patología de la artritis
Lesión Características de la lesión Puntuación No se observaron células inflamatorias;
Las células subsinoviales eran fibróticas con mínima infiltración celular;
Las células sinoviales proliferaron con una pequeña cantidad de células
infiltración de células mononucleares infiltradas; 2 inflamatorias Proliferación de células sinoviales, gran cantidad de monocitos, células plasmáticas, linfocitos infiltrados; 3 Una gran cantidad de células inflamatorias infiltradas alrededor de la 4 articulación, fibrosis de tejido, engrosamiento sinovial;
No se observó formación de paño;
Había muy poca formación de paño en el margen del cartílago;
Formación de paño Hubo una proliferación de tejido fibroso intercartilaginoso con una
pequeña cantidad de formación de paño en el margen de la articulación; 2 La formación de Paño estuvo presente en el 50 % del cartílago articular;
Se observó formación del paño en todo el cartílago articular;
No se observó lesión del cartílago;
Condrocitos articulares proliferados;
Se perdió la matriz de condrocitos y se destruyó una pequeña cantidad
2 lesión del cartílago de condrocitos;
Se produce una proliferación de tejido fibroso alrededor de la articulación y se destruye una gran cantidad de condrocitos; 3 Había mucha hiperplasia del tejido fibroso entre el cartílago articular,
erosión del cartílago; 4 No se observó resorción ósea;
Se observó una mínima resorción ósea en el margen sinovial;
Se puede formar una pequeña cantidad de osteoclastos en pequeñas
Resorción ósea áreas de tejido óseo;
Tejido óseo del cartílago subarticular local con resorción ósea;
Resorción ósea en grandes áreas de tejido óseo con erosión del cartílago;______________________________________________________
6. Procesamiento estadístico
Los datos experimentales se expresan mediante la media ± error estándar (media ± EEM), y el peso, la puntuación clínica y la puntuación de patología se expresan mediante ANOVA unidireccional, y p <0.5 se considera significativo.
Resultados experimentales:
1. Puntuación clínica
Este experimento evaluó el efecto de mejora del compuesto 1-13 sobre puntuaciones clínicas en un modelo de artritis en rata (AIA) al utilizar dexametasona y filgotinib como referencias. Las ratas comenzaron a desarrollar síntomas de artritis al 6° día después de la inmunización adyuvante. La administración comenzó el día 13 y la puntuación clínica promedio del grupo de control con solvente aumentó gradualmente. Los resultados experimentales mostraron que la puntuación clínica promedio del grupo de control con solvente alcanzó un pico el día 24 y se estabilizó en aproximadamente 8 puntos, lo que indica el establecimiento exitoso del modelo AIA (Figura 5, Tabla 4-4).
Al final del experimento (día 27), el compuesto 1-13 a cuatro dosis de 1,3, 10 y 30 mg/kg inhibieron significativamente la puntuación clínica de ratas artríticas (en comparación con el grupo de control con solvente, los valores de p son todos <0.0001), y las puntuaciones clínicas de ratas artríticas se redujeron a 5.4, 3.9, 3.2 y 2.7, respectivamente, en forma dependiente de dosis (en comparación con el grupo de dosis alta y el grupo de dosis baja, p<0.0001). Entre ellos, el efecto del compuesto 1-13 a 30 mg/kg es el más obvio (a partir del día 17, hay una diferencia muy significativa en comparación con el grupo de control con solvente, p<0.0001). La puntuación clínica de artritis promedio de este grupo es de 6.0 desde el pico en el día 13, y cayó a 2.7 puntos el día 27 del punto final experimental (Figura 5, Tabla 12). La puntuación del compuesto de referencia Filgotinib 30 mg/kg dos veces al día cayó a 5.1 el día 27 del punto final experimental, que fue significativamente menor que la del grupo de control con solvente (p<0.001) pero significativamente mayor que la del compuesto 1-13 30 mg/kg dos veces al día (p<0.001). El efecto de mejora del compuesto 1-13 en la puntuación clínica de la artritis fue significativamente mejor que el efecto de Filgotinib en la misma dosificación.
La puntuación clínica promedio del grupo de tratamiento con dexametasona de control positivo alcanzó el valor más alto de 6.0 después del día 13. Después de la administración, la puntuación clínica continuó disminuyendo y cayó a 2.7 en el punto final experimental el día 27. En comparación con el grupo de control, existe una diferencia muy significativa (Figura 5, Tabla 4-4).
2. Volumen de las patas
Este experimento evaluó el efecto del compuesto 1-13 sobre el volumen de las patas en un modelo de artritis en rata (AIA), con dexametasona y Filgotinib como referencias. El volumen promedio de las patas de los animales en el grupo de control con solvente aumentó constantemente desde 1.9 ml el día 13 hasta 2.9 ml al final del experimento el día 27, lo que marca el establecimiento exitoso del modelo AIA (Figura 6, Tabla 4-5). Al final del experimento, el compuesto 1-13 a dosis de 1, 3, 10 y 30 mg/kg puede inhibir significativamente el aumento del volumen de las patas de ratas artríticas (en comparación con el grupo de control con solvente, todos los valores p son <0.0001). El volumen medio de las patas de las ratas inflamatorias se redujo a 1.59 ml, 1.26 ml y 1.21 ml, respectivamente, en forma dependiente de dosis (en comparación entre el grupo de dosis alta y el grupo de dosis baja, p<0.0001). El compuesto de referencia Filgotinib 30 mg/kg dos veces al día. El día 27 después del final del experimento, el volumen de la pata disminuyó a 1.91 puntos, que fue significativamente menor que el grupo de control de solvente (p<0.0001) pero significativamente mayor que el del compuesto 1-13. 30 mg/kg dos veces al día (p<0.0001) del compuesto 1-13 en ratas. El efecto de mejorar el volumen de la pata es significativamente mejor que el de Filgotinib en la misma dosificación. El grupo de tratamiento con dexametasona de control positivo también suprimió muy bien el aumento en el volumen promedio de la pata. Después de la administración, el volumen de la pata disminuyó constantemente hasta el final del experimento, que se estabilizó el día 17 y fue significativamente diferente del grupo de control con solvente, P<0.0001 (Figura 6, Tabla 4-5).
3. Peso
En comparación con el grupo normal, el peso corporal de las ratas se redujo después de la inmunización y el modelado. Después del inicio de la administración el día 13, el peso corporal de cada grupo de administración aumentó lenta y continuamente en comparación con el grupo de control con solvente, mientras que el peso del grupo de control positivo con dexametasona se recuperó más lentamente, lo que sugiere que las ratas toleran bien el Filgotinib y el compuesto 1-13. El peso corporal del compuesto 1-13 30 mg/kg del grupo aumentó más rápido y el peso corporal para 4 dosificaciones aumentó de forma dependiente de dosis (Figura 7 y Tabla 4-6).
4 Resultados de las pruebas histopatológicas
Las ratas con artritis en el grupo de control con solvente tuvieron una puntuación patológica total de 16 0.00, y para aquellas a las que se les administró el compuesto 1-13 a una dosis de 1 mg/kg, la puntuación disminuyó a 13.3 0.44 (en comparación con el grupo de control con solvente, P = 0.09, sin diferencia estadística), con una tasa de inhibición del 16.9%; mientras que las dosis de 3 mg/kg, 10 mg/kg y 30 mg/kg pueden reducir significativamente las puntuaciones patológicas de ratas artríticas a 11.3 ± 1.64, 4.4 ± 1.16 y 1.6 ± 0.47, respectivamente, con valores p de 0.014, <0.0001 y <0.0001, y tasa de inhibición del 29.4%, 72.5% y 90%. El compuesto de referencia Filgotinib 30 mg/kg tuvo una puntuación patológica total de 15.2 ± 0.49 y la tasa de inhibición fue del 5 %. No hubo diferencias significativas en comparación con el grupo de solventes. El compuesto 1-13 a la misma dosis (30 mg/kg) tiene una puntuación patológica total significativamente menor que Filgotinib (p<0.0001). El compuesto de control dexametasona en una dosis de 0.3 mg/kg redujo de manera extremadamente significativa la puntuación patológica de las ratas artríticas a 4.40.8, valor de p <0.0001, tasa de inhibición del 72.5 % (Tabla 4-7).
��
T l 4-7 P n i n l i
Conclusión: Las ratas del grupo de control con solvente mostraron síntomas clínicos de artritis y continuaron empeorando. En comparación con el grupo de control con solvente, los compuestos 1-13 (1,3, 10, 30 mg/kg), Filgotinib (30 mg/kg) y dexametasona (0.3 mg/kg) mostraron un efecto inhibidor significativo sobre la artritis inducida por adyuvante, que se manifiesta por un retraso en el tiempo de aparición, y una reducción significativa de los síntomas clínicos y cambios patológicos, y el compuesto 1-13 tiene un efecto terapéutico dependiente de la dosis sobre el modelo de artritis inducida por adyuvante. Los resultados experimentales anteriores muestran que el compuesto 1-13 tiene un efecto terapéutico significativo sobre la artritis inducida por adyuvante en ratas y el efecto es mejor que Filgotinib.

Claims (19)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo,
    en la que, Ei y E2 se seleccionan independientemente del enlace sencillo, -CH2- o -(CH2)2-, L1 se selecciona del enlace sencillo, -(CH2)g-, -C(=O)- o -C(=O)-(CH2)h-; m es 1 o 2; n es 1 o 2; g es 1,2 o 3; h es 1,2 o 3; R1 se selecciona de H, CN, grupo alquilo C1-6 o el grupo cicloalquilo de 3~6 miembros, en el que el grupo alquilo C1-6 y el grupo cicloalquilo de 3~6 miembros anteriores están opcionalmente sustituidos por 1,2 o 3 Ra; R2 se selecciona de H, F, Cl, Br, I o grupos alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 anterior está opcionalmente sustituido por 1, 2 o 3 Rb; R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente l grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 anterior está opcionalmente sustituido por 1, 2 o R6, R7 y R8 se seleccionan independientemente l grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 anterior está opcionalmente sustituido por 1, 2 o Cada Ra se selecciona independientemente de l grupo alquilo C1-3, en el que el grupo alquilo C1-3 anterior está opcionalmente sustituido por 1, 2 Cada Rb se selecciona independientemente de Cada Rc se selecciona independientemente de Cada Rd se selecciona independientemente de Cada R se selecciona independientemente de F,
  2. 2. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que cada Ra se selecciona independientemente de H, F, Cl, Br, I o CN. 3. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en el que, R1 se selecciona de H, CN, grupo alquilo C1-3 o grupo cicloalquilo de 3~5 miembros, en el que el grupo alquilo C1-3 y el grupo cicloalquilo de 3~5 miembros están opcionalmente sustituidos por 1, 2 o 3 Ra. 4. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 3, en el que, R1 se selecciona de H, CN, CH3,
  3. en el que el CH3,
  4. < ] y
  5. están opcionalmente sustituidos por 1,2 o 3 Ra. 5. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 4, en el que, Ri se selecciona de H, CN, CF3, CHF2,
  6. 6. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, R2 se selecciona de H, F, Cl, Br o I.
  7. 7. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br o I.
  8. 8. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, R6, R7 y Rs se seleccionan independientemente de H, F, Cl, Br o I.
  9. 9. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, L1 se selecciona del enlace sencillo, -CH2-, -(CH2)2-, -C(=O)- o -C(=O)-(CH2)-.
  10. 10. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, la unidad estructural
    se selecciona de
  11. 11. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, la unidad estructural
    se selecciona de
  12. 12. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, la unidad estructural
    se selecciona de
  13. 13. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que, se seleccionan de
  14. en la que, Li se define como en la reivindicación 1 o 9; Ri se define como en las reivindicaciones 1~5; R2 se define como en la reivindicación 1 o 6 ; R3, R4 y R5 se definen como en la reivindicación 1 o 7; R6, R7 y R8 se definen como en la reivindicación 1 o 8. 14. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 13, en el que, se seleccionan de
  15. en la que, L1 se define como en la reivindicación 1 o 9; Ra se define como en la reivindicación 1 o 2; R2 se define como en la reivindicación 1 o 6 ; R3, R4 y R5 se definen como en la reivindicación 1 o 7; R6, R7 y R8 se definen como en la reivindicación 1 o 8. 15. El compuesto de la fórmula (I) estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que, se seleccionan de
  16. 16. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con la reivindicación 15, en el que, se seleccionan de
  17. 17. Una composición farmacéutica, que comprende los compuestos, estereoisómeros de los mismos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1~16 y un portador farmacéuticamente aceptable.
  18. 18. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1~16 o la composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 17 para uso en el tratamiento de inflamaciones, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades proliferativas, rechazo de trasplantes, enfermedades asociadas con alteración del recambio del cartílago y/o malformación congénita del cartílago.
  19. 19. El compuesto de la fórmula (I), estereoisómeros del mismo o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o la composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado porque, la inflamación es artritis reumatoide.
ES19852944T 2018-08-23 2019-08-23 Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y aplicación del mismo Active ES2973331T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810968207 2018-08-23
PCT/CN2019/102209 WO2020038457A1 (zh) 2018-08-23 2019-08-23 作为JAK抑制剂的[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶类化合物及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2973331T3 true ES2973331T3 (es) 2024-06-19

Family

ID=69592871

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES19852944T Active ES2973331T3 (es) 2018-08-23 2019-08-23 Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina como inhibidor de JAK y aplicación del mismo

Country Status (13)

Country Link
US (1) US11919896B2 (es)
EP (1) EP3842431B1 (es)
JP (1) JP7140920B2 (es)
KR (1) KR102603729B1 (es)
CN (1) CN112739696B (es)
AU (1) AU2019326647B2 (es)
CA (1) CA3106490C (es)
ES (1) ES2973331T3 (es)
HR (1) HRP20240300T1 (es)
HU (1) HUE065919T2 (es)
PL (1) PL3842431T3 (es)
RS (1) RS65243B1 (es)
WO (1) WO2020038457A1 (es)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12419873B2 (en) * 2020-02-13 2025-09-23 Zhuhai United Laboratories Co., Ltd. Use of JAK inhibitors in preparation of drugs for treating JAK kinase-related diseases
AU2021222686B2 (en) * 2020-02-21 2023-06-29 Zhuhai United Laboratories Co., Ltd. Crystalline form of JAK inhibitor and application thereof
WO2022161205A1 (zh) 2021-01-29 2022-08-04 珠海联邦制药股份有限公司 一种含有jak抑制剂或其盐或其晶型的口服制剂及其制备方法和应用
CA3229388A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 Zhuhai United Laboratories Co., Ltd. Local topical preparation containing jak inhibitor, salts or crystal forms thereof, and preparation method and use thereof
EP4423086A1 (en) 2021-10-25 2024-09-04 Kymera Therapeutics, Inc. Tyk2 degraders and uses thereof
CN117924272A (zh) * 2022-10-26 2024-04-26 珠海联邦制药股份有限公司 一种jak抑制剂类药物中间体的合成方法及其应用
CN121712509A (zh) 2023-05-04 2026-03-20 锐新医药公司 用于ras相关疾病或病症的组合疗法
US20250049810A1 (en) 2023-08-07 2025-02-13 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
IL327306A (en) 2023-10-12 2026-05-01 Revolution Medicines Inc Macrocyclic RAS inhibitors
WO2025171296A1 (en) 2024-02-09 2025-08-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025240847A1 (en) 2024-05-17 2025-11-20 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025255438A1 (en) 2024-06-07 2025-12-11 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
WO2025265060A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Revolution Medicines, Inc. Therapeutic compositions and methods for managing treatment-related effects
WO2026006747A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026015790A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015801A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015796A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015825A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitor for treating pancreatic cancer
WO2026050446A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026072904A2 (en) 2024-09-26 2026-04-02 Revolution Medicines, Inc. Compositions and methods for treating lung cancer
WO2026090116A2 (en) 2024-10-21 2026-04-30 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026090245A1 (en) 2024-10-22 2026-04-30 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitors for treating cancer
US20260108528A1 (en) 2024-10-22 2026-04-23 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090220688A1 (en) 2005-07-27 2009-09-03 Buddy Tools, Llc Drywall tape and joint compound dispenser
JO3041B1 (ar) * 2008-07-25 2016-09-05 Galapagos Nv مركبات جديدة مفيدة لمعالجة الأمراض التنكسية والالتهابية
WO2010010187A1 (en) * 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases
AR077468A1 (es) * 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
WO2018019223A1 (zh) * 2016-07-26 2018-02-01 张文燕 作为选择性jak抑制剂化合物，该化合物的盐类及其治疗用途
CA2939286A1 (en) 2016-08-17 2018-02-17 Pharmascience Inc. Spirocyclic containing compounds and pharmaceutical uses thereof
CN108341814B (zh) * 2017-01-23 2021-09-03 上海翔锦生物科技有限公司 Jak激酶抑制剂及其应用
EP3668993A4 (en) * 2017-08-14 2021-05-12 Camp4 Therapeutics Corporation HEPATIC DISEASE TREATMENT METHODS

Also Published As

Publication number Publication date
CA3106490C (en) 2023-03-07
US20210155621A1 (en) 2021-05-27
WO2020038457A1 (zh) 2020-02-27
AU2019326647B2 (en) 2022-02-10
JP2021534259A (ja) 2021-12-09
EP3842431C0 (en) 2023-12-27
AU2019326647A1 (en) 2021-02-18
CA3106490A1 (en) 2020-02-27
KR102603729B1 (ko) 2023-11-17
EP3842431A1 (en) 2021-06-30
CN112739696B (zh) 2022-08-02
HRP20240300T1 (hr) 2024-05-24
CN112739696A (zh) 2021-04-30
EP3842431B1 (en) 2023-12-27
EP3842431A4 (en) 2022-06-01
JP7140920B2 (ja) 2022-09-21
RS65243B1 (sr) 2024-03-29
PL3842431T3 (pl) 2024-05-20
KR20210049858A (ko) 2021-05-06
US11919896B2 (en) 2024-03-05
HUE065919T2 (hu) 2024-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA3106490C (en) [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridine compound as jak inhibitor and use thereof
ES2970715T3 (es) Composiciones y métodos para inhibir la actividad de la arginasa
ES2947446T3 (es) Compuestos inhibidores de RIP1 y métodos para fabricar y usar los mismos
ES2791525T3 (es) Derivados de aminopirimidina novedosos
KR102856998B1 (ko) Jak 키나아제 관련 질병의 치료를 위한 약물의 제조에 있어서 jak 억제제의 용도
ES2997111T3 (en) Pyridazinyl amino derivatives as alk5 inhibitors
AU2016335086B2 (en) Quinoxaline and pyridopyrazine derivatives as pI3Kbeta inhibitors
ES2945561T3 (es) Derivados de fosfato y fosfonato de 7-amino-5-tio-tiazolo[4,5-d]pirimidinas y su uso para tratar afecciones asociadas a niveles elevados de CX3CR1 y/o CX3CL1
ES3056340T3 (en) Fluorovinylbenzamide compound as pd-l1 immunomodulator
US20230257351A1 (en) Substituted n-phenylacetamides having p2x4 receptor antagonistic activity
ES2795418T3 (es) Derivados de difenil purina restringidos periféricamente
ES2608787T3 (es) Derivados de 1H-indol-3-carboxamida y sus usos como antagonistas de P2Y12
WO2020089397A1 (en) Substituted quinazolin-4(3h)-one derivatives having multimodal activity against pain
WO2023197914A1 (zh) 一种吡唑并嘧啶类化合物的新用途
KR20220146348A (ko) 아데노신 A2a 수용체 길항제로서의 화합물 및 이를 포함하는 약학적 조성물
EP1764134B1 (en) Purine derivatives linked to arylpiperazines
CN121487943A (zh) 用于电化学器件的隔膜及包括其的电化学器件
EP4126874A1 (en) Compounds active towards nuclear receptors
HK1065734B (en) Tetrahydroindolone derivatives linked to arylpiperazines