ES2974243T3

ES2974243T3 - Compuestos macrocíclicos y usos de los mismos

Info

Publication number: ES2974243T3
Application number: ES18816354T
Authority: ES
Inventors: Yoshito Kishi; Kazunobu Kira; Ken Ito
Original assignee: Eisai R&D Management Co Ltd; Harvard University
Current assignee: Eisai R&D Management Co Ltd; Harvard University
Priority date: 2017-11-15
Filing date: 2018-11-15
Publication date: 2024-06-26
Anticipated expiration: 2038-11-15
Also published as: US20200325152A1; EP4403560A2; WO2019099646A8; EP4403560A3; JP2023156359A; EP3710454B1; EP3710454A1; CN111566113B; WO2019099646A1; US11407762B2; US11814398B2; JP7353281B2; CN111566113A; US20230016686A1; JP2021512046A; US20240309014A1; CN117924310A

Abstract

La presente invención proporciona nuevos compuestos (por ejemplo, compuestos de Fórmulas (I), (II), (III), (IV)) que tienen un efecto de remodelación vascular tumoral y/o actividad anti-CAF (fibroblastos asociados al cáncer), o sales farmacéuticamente aceptables. del mismo, opcionalmente en un vehículo farmacéuticamente aceptable, y sus usos médicos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos macrocíclicos y usos de los mismos

CAMPO TÉCNICO

La presente invención proporciona nuevos compuestos macrocíclicos que tienen efectos de remodelación vascular y actividad anti-CAF (fibroblastos asociados al cáncer). Los compuestos se pueden utilizar, por ejemplo, para el tratamiento del cáncer o la inhibición del crecimiento tumoral en un sujeto.

ANTECEDENTES

FRANCIS G. FANG ET AL: "Synthetic Studies Towards Halichondrins: Synthesis of the Left Halves of Norhalichondrins and Homohalichondrins", TeTrAHEDRON LETTERS, vol. 33, n° 12, 1 de marzo de 1992, páginas 1557-1560, HICKFORD S J H ET AL: "Antitumour polyether macrolides: Four new halichondrins from the New Zealand deep-water marine sponge Lissodendoryx sp", BlOoRGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, PERGAMON, GB, vol. 17, n° 6, 15 de marzo de 2009, páginas 2199-2203 and KENZO YAHATA ET AL: "Unified, Efficient, and Scalable Synthesis of Halichondrins: Zirconium/Nickel-Mediated One-Pot Ketone Synthesis as the Final Coupling Reaction", ANGEWANDTE CHEMIE INTERNATIONAL EDITION, vol. 56, n° 36, 28 de agosto de 2017, páginas 10796-10800 divulga halicondrinas, norhalicondrinas y homohalicondrinas. Las halicondrinas, como halicondrina B, son agentes anticancerígenos aislados originalmente de la esponja marinaHalichondria okadai(véase, por ejemplo, D. Uemura et al. "Norhalichondrin A: An Antitumor Polyether Macrolide from a Marine Sponge" J. Am. Chem. Soc., 107, 4796 (1985)), and subsequently found inAxinellasp.,Phakellia carteri,andLissodendoryxsp. A total synthesis of Halichondrin B was published in 1992 (véase, por ejemplo, Y. Kishi et al. "Total Synthesis of Halichondrin B and Norhalichondrin B" J. Am. Chem. Soc., 114, 3162 (1992)). La halicondrina B ha demostrado la inhibiciónin vitrode la polimerización de tubulina, en ensamblaje de microtúbulos, la reticulación de beta 5-tubulina, la unión de GTP y vinblastina a tubulina y la hidrólisis de GTP dependiente de tubulina, y ha mostrado propiedades anticangerígenasin vitroein vivo(véase, por ejemplo, Y. Hirata et al. "Halichondrins-antitumor polyether macrolides from a marine sponge" Pure Appl. Chem., 58, 701 (1986); Fodstad et al. "Comparative antitumor activities of halichondrins and vinblastine against human tumor xenografts" J. of Experimental Therapeutics & Oncology 1996; 1: 119, 125).

Mesilato de eribulina (Halaven™), que se ha desarrollado basándose en halicondrina B (véase, por ejemplo, la publicación internacional N° WO 1999/065894, publicada el 23 de diciembre de 1999; la publicación internacional N° WO 2005/118565, publicada el 15 de diciembre de 2005; y W. Zheng et al. "Macrocyclic ketone analogues of halichondrin B" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 14, 5551-5554 (2004)), está actualmente en uso clínico en muchos países para el tratamiento, por ejemplo, de cáncer de mama metastático y liposarcoma avanzado.

Publicaciones de patente adicionales que describen halicondrinas incluyen la patente de EE. UU. N° 5,436,238 de Kishi, et al., expedida el 25 de julio de 1995; la patente de EE. UU. N° 5,338,865 de Kishi, et al.,expedida el 16 de agosto de 1994; y el documento WO 2016/003975 presentado por Kishi, et al., todos ellos asignadas al Presidente y a los Miembros del Harvard College.

Véase también, por ejemplo, la patente de EE. UU. N° 5,786,492; la patente de EE. UU. N° 8,598,373; la patente de EE. UU. N° 9,206,194; la patente de EE. UU. N° 9,469,651; el documento WO/2009/124237A1; el documento WO/1993/017690A1; el documento WO/2012/147900A1; la patente de EE. UU. N° 7,982,060; la patente de EE. UU. N° 8,618,313; la patente de EE. UU. N° 9,303,050; la patente de EE. UU. N° 8,093,410; la patente de EE. UU. N2 8,350,067; la patente de EE. UU. N° 8,975,422; la patente de EE. UU. N° 8,987,479; la patente de EE. UU. N° 8,203,010; la patente de EE. UU. N° 8,445,701; la patente de EE. UU. N° 8,884,031; la patente de EE. UU. N° RE45,324; la patente de EE. UU. N° 8,927,597; la patente de EE. UU. N° 9,382,262; la patente de EE. UU. N° 9,303,039; el documento WO/2009/046308A1; el documento W0/2006/076100A3; el documento W0/2006/076100A2; el documento WO/2015/085193A1; el documento WO/2016/176560A1; la patente de EE. UU. N° 9,278,979; la patente de EE. UU. N° 9,029,573; el documento WO/2011/094339A1; el documento WO/2016/179607A1; el documento WO/2009/064029A1; el documento WO/2013/142999A1; el documento WO/2015/066729A1; el documento WO/2016/038624A1; y el documento W0/2015/000070A1.

Los fibroblastos asociados al cáncer (CAF), que se encuentran ampliamente en una variedad de tumores sólidos, son células estromales. Es bien sabido que los CAF juegan un papel importante en la angiogénesis, la invasión y la metástasis. Hay una estrecha correlación entre la cantidad de CAF y el pronóstico clínico, por ejemplo, en el cáncer de mama invasivo (véase, por ejemplo, M. Yamashita et al. "Role of stromal myofibroblasts in invasive breast cancer: stromal expression of alpha-smooth muscle actin correlates with worse clinical outcome" Breast Cancer 19, 170, 2012) and esophageal adenocarcinoma (véase, por ejemplo, T. J. Underwood et al. "Cancer-associated fibroblasts predict poor outcome and promote periostin-dependent invasion in esophageal adenocarcinoma" Journal of Pathol., 235, 466, 2015). También se ha informado de que los CAF se correlacionan con la resistencia en una variedad de tumores como, por ejemplo, el cáncer de mama (véase, pro ejemplo P. Farmer et al. "A stroma-related gene signature predicts resistance to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer" Nature Medicine., 15(1), 68, 2009), and head and neck cancer (véase, por ejemplo, S. Schmitz et al. "Cetuximab promotes epithelial to mesenchymal transition and cancer associated fibroblasts in patients with head and neck cáncer" Oncotarget, 6 (33), 34288, 2015; Y Matsuoka et al. "The tumor stromal features are associated with resistance to 5-FU-based chemoradiotherapy and a poor prognosis in patients with oral squamous cell carcinoma" APMIS 123(3), 205, 2015).

Por lo tanto, se ha observado que los efectos de la remodelación vascular tumoral y la actividad anti-CAF dan lugar a la mejora del microambiente del cáncer, lo que ayuda al tratamiento tumoral. Los vasos sanguíneos son esenciales para el crecimiento de tumores. Los vasos sanguíneos reconstruidos en los tumores pueden administrar agentes anticancerígenos a los tumores, además de aliviar la hipoxia. Se ha informado de que la remodelación inducida por eribulina de la vasculatura tumoral anómala conduce a un microambiente más funcional que puede reducir la agresividad de los tumores debido a la eliminación de la hipoxia tumoral interna. Ya que los microambientes tumorales anómalos aumentan tanto la resistencia a fármacos como la metástasis, la aparente capacidad de eribulina para revertir estas características agresivas puede contribuir a sus beneficios clínicos (véase, por ejemplo, Y. Funahashi et al. "Eribulin mesylate reduces tumor microenvironment abnormality by vascular remodeling in preclinical human breast cancer models" Cancer Sci. 105 (2014), 1334-1342). Hasta el día de hoy, no se han presentado medicamentos contra el cáncer que tengan efectos de remodelación vascular tumoral y actividades anti-CAF.

A pesar de los avances realizados, se necesitan compuestos adicionales para avanzar en la investigación y la atención médica de pacientes con tumores y cáncer.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

Las halicondrinas, así como sus análogos y derivados de las mismas, son agentes terapéuticos útiles. Se pueden encontrar ejemplos de halicondrinas, análogos y derivados de estas, así como métodos de uso de las mismas y métodos de síntesis de las mismas, por ejemplo, en la publicación de EE. UU. N° 2017/0137437, publicada el 18 de mayo de 2017; la publicación internacional N° WO 2016/003975, publicada el 7 de enero de 2016; la publicación de EE. UU. N° 2018/0230164, publicada el 16 de agosto de 2018; la publicación internacional N° W<o>2016/176560, publicada el 3 de noviembre de 2016; la publicación de EE. UU. N° 2018/0155361, publicada el 7 de junio de 2018; y la patente de EE. UU. N° 9,938,288, expedida el 10 de abril de 2018.

La presente invención se refiere a compuestos macrocíclicos (por ejemplo compuestos de la Fórmula (I), a sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y a composiciones farmacéuticas de los mismos. En ciertas realizaciones, los compuestos tienen efectos de remodelación vascular y actividad anti-CAF.

La invención también proporciona un compuesto, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa en un sujeto. En ciertas realizaciones, la invención incluye un compuesto, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de un sujeto con cáncer. Se describen métodos para la inhibición reversible o irreversible de la mitosis en una célula. En ciertas realizaciones, la invención incluye un compuesto, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la inhibición del crecimiento tumoral en un sujeto. También se describen métodos in vitro para la inhibición del crecimiento tumoral. En otro aspecto, la presente invención proporciona kits que comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo.

En un aspecto, la presente invención proporciona compuestos de la Fórmula (I):

y sales y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde:

RN1 y RN2 son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de nitrógeno, opcionalmente en donde RN1 y RN2 se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido; RP1 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno;

RX es hidrógeno u -ORXa;

RY es hidrógeno u -ORYa;

RXa y RYa son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de oxígeno, opcionalmente en donde RXa y RYa se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido; y

n es 1 o 2,

siempre que el compuesto no sea el siguiente:

una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Se describe un compuesto que es el Compuesto (1):

y sales farmacéuticamente aceptables del mismo; y derivados marcados isotópicamente del mismo. El Compuesto (1) está excluido de la invención. El Compuesto (1) y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo y derivados marcados isotópicamente del mismo están excluidos de la invención.

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable o estereoisómero del mismo. Las composiciones farmacéuticas comprenden uno o más portadores farmacéuticamente aceptables y pueden comprender uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender además uno o más agentes terapéuticos adicionales en combinación, alternancia u otro tipo de terapia sincronizada, para alcanzar el objetivo deseado del tratamiento.

También se describen métodos de producción de los compuestos proporcionados en el presente documento o intermedios de los mismos. También se proporcionan los intermedios sintéticos.

Se ha descubierto que los compuestos proporcionados en el presente documento tienen un efecto ventajoso en la remodelación vascular tumoral y tienen actividad anti-CAF, como se demuestra en las Figuras y los Ejemplos. En consecuencia, los compuestos proporcionados en el presente documento tienen uso potencial en el tratamiento de enfermedades proliferativas. En ciertas realizaciones, los compuestos pueden utilizarse para tratar cáncer (por ejemplo carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN), cáncer de mama, cáncer de esófago, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer de duodeno, cáncer de vejiga, cáncer de glándulas sudoríparas, sarcomas, cánceres raros).

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento del cáncer o la inhibición del crecimiento tumoral en un sujeto. En ciertas realizaciones, la presente invención proporciona un compuesto, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la inhibición de cualquier crecimiento tumoral o cáncer que responderá a un compuesto con efectos de remodelación vascular tumoral y/o actividad anti-CAF en un sujeto, típicamente un humano.

Un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición del mismo, puede administrarse en combinación con cualquier otro agente activo que proporcione resultados beneficiosos para el paciente. En una realización, un compuesto proporcionado en el presente documento se utiliza en combinación, alternancia u otra terapia sincronizada con la inmunoterapia. En ciertas realizaciones, la inmunoterapia es un anticuerpo anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico) un anticuerpo anti-HER2 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano), un anticuerpo anti-PD-1 o un anticuerpo anti-PD-L1, como se describe con más detalle a continuación.

Por ejemplo, se proporciona un compuesto, una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo y una composición del mismo para uso en el tratamiento de carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN) en un sujeto, normalmente un humano que lo necesite, en combinación con una terapia con mAb anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico). En ciertas realizaciones, el mAb anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico) es cetuximab.

Como otro ejemplo, se proporciona un compuesto, una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo y una composición del mismo para uso en el tratamiento del cáncer de mama en un sujeto, normalmente un humano que lo necesite, en combinación con una terapia con mAb HER2(receptor del factor de crecimiento epidérmico humano). En ciertas realizaciones, el mAb HER2 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano) es trastuzumab. En otras realizaciones, el compuesto puede utilizarse para tratar el cáncer de mama en combinación con quimioterapia tradicional, como adriamicina, ciclofosfamida, taxol, etc., o un antiestrógeno como un modulador selectivo de estrógeno (SERM) un degradador selectivo de estrógeno (SERD), un inhibidor parcial o total de estrógeno (como fulvestrant) o un inhibidor de CDK 4/6 como palbociclib (Pfizer).

Otro aspecto de la presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar en forma de hidrato, solvato, polimorfo, o una composición del mismo, en un kit que puede ser un envase de forma de dosificación. Los kits descritos en el presente documento pueden incluir una dosis única o dosis múltiples del compuesto o de la composición farmacéutica del mismo. Un kit de la invención puede incluir instrucciones para uso de las formas de dosificación terapéuticas proporcionadas (por ejemplo instrucciones para uso del compuesto o de la composición farmacéutica incluidos en el kit).

Por lo tanto, la presente invención incluye al menos las siguientes características:

(i) un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de hidrato, solvato o polimorfo;

(ii) un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de hidrato, solvato o polimorfo, para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa. En ciertas realizaciones, la enfermedad proliferativa es cáncer. En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN), carcinoma adenoide quístico), cáncer de mama, cáncer de esófago (por ejemplo adenocarcinoma de esófago), cáncer uterino (por ejemplo sarcoma uterino), cáncer de ovario, cáncer colorrectal o sarcoma (por ejemplo sarcoma sinovial, angiosarcoma, sarcoma de tejidos blandos, fibrosarcoma, sarcoma uterino, sarcoma intimal). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de vejiga (por ejemplo carcinoma urotelial), cáncer gástrico, cáncer de duodeno (por ejemplo adenocarcinoma de duodeno), cáncer de endometrio, cáncer de pulmón (por ejemplo cáncer de pulmón de células no pequeñas) o cáncer de glándulas sudoríparas (por ejemplo carcinoma de glándulas sudoríparas). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer raro;

(iii) un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de un hidrato, solvato o polimorfo, para uso en el tratamiento de un trastorno médico que responde a los efectos de remodelación vascular y/o actividad anti-CAF (por ejemplo una enfermedad proliferativa como cáncer o un tumor);

(iv) un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de hidrato, solvato o polimorfo, para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa. En ciertas realizaciones, la enfermedad proliferativa es cáncer. En ciertas realizaciones, el cáncer es carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN), cáncer de mama, cáncer de esófago, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio o sarcoma; (v) un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de un hidrato, solvato o polimorfo, para uso en el tratamiento de un trastorno médico que responde a los efectos de remodelación vascular y/o actividad anti-CAF (por ejemplo una enfermedad proliferativa como cáncer o un tumor);

(viii) un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo en forma sustancialmente pura (por ejemplo al menos 90 o 95 %);

(ix) una composición farmacéuticamente aceptable de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de hidrato, solvato o polimorfo, y un portador farmacéuticamente aceptable;

(x) una forma de dosificación farmacéuticamente aceptable de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de hidrato, solvato o polimorfo, opcionalmente en un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable;

(xi) un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de un trastorno descrito en el presente documento (por ejemplo una enfermedad proliferativa) que actúa a través de un mecanismo distinto de los efectos de remodelación vascular y/o la actividad de acción anti-CAF.

También se describen:

(i) un derivado deuterado de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; (ii) un proceso para la fabricación de un medicamento destinado al uso terapéutico o la prevención de un trastorno como una enfermedad proliferativa (por ejemplo cáncer o tumor) que responde a efectos de remodelación vascular y/o actividad anti-CAF, caracterizado por un compuesto proporcionado en este documento, o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado marcado isotópicamente del mismo, que puede estar opcionalmente en forma de un hidrato, solvato, estereoisómero o polimorfo descrito anteriormente, o una realización del compuesto activo, se utiliza en la fabricación;

(iii) métodos para la fabricación de los compuestos descritos en el presente documento e intermedios en la síntesis.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

Los dibujos adjuntos, que se incorporan y constituyen una parte de esta memoria descriptiva, ilustran varias realizaciones de la invención y, junto con la descripción, proporcionan ejemplos no limitantes de la invención.

LaFigura 1muestra efectos antitumorales del Compuesto (1) en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu (cáncer de cabeza y cuello) en ratón como monoterapia, como se describe en el Ejemplo de Prueba Farmacológica 4.

LaFigura 2muestra la actividad antitumoral del Compuesto (1) contra el modelo de xenoinjerto subcutáneo OSC-19 (cáncer de cabeza y cuello) en ratón como monoterapia, como se describe en el Ejemplo de Prueba Farmacológica 5.

LaFigura 3muestra la actividad antitumoral del Compuesto (1) contra el modelo de xenoinjerto subcutáneo HCC-1806 (cáncer de mama) en ratón como monoterapia, como se describe en el Ejemplo de Prueba Farmacológica 6.

LaFigura 4muestra efectos antitumorales del Compuesto (1) en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu en combinación con cetuximab en ratón, como se describe en el Ejemplo de Prueba Farmacológica 7. LaFigura 5muestra la actividad antitumoral del Compuesto (1) en el modelo de xenoinjerto subcutáneo KPL-4 (cáncer de mama) en ratón, como se describe en el Ejemplo de Prueba Farmacológica 8.

LaFigura 6A-6Bmuestra el efecto antitumoral del Compuesto (1) en el modelo de ratón de trasplante ortotópico de HSC-2.Figura 6A.Se implantó en la lengua de ratones desnudos HSC-2 transducida con luciferasa (1 x 106 células/punto) La cantidad de HSC-2 transducida con luciferasa se analizó mediante el Sistema de Imágenes In Vivo (IVIS). Los datos muestran los niveles de bioluminiscencia en la lengua de cada ratón.Figura 6B.Imagen representativa de bioluminiscencia de 16 ratones. Se utilizaron como comparadores CDDP, CTX, CDDP+CTX, que se utilizan actualmente en el tratamiento de pacientes con cáncer SCCHN. CDDP = cisplatino, CTX = cetuximab.

LaFigura 7A-7Bmuestra la ventaja de supervivencia del Compuesto (1) en combinación con cetuximab en el modelo de ratón de trasplante ortotópico de HSC-2.Figura 7A.Se implantó en la lengua de ratones desnudos HSC-2 transducida con luciferasa (1 x 106 células/punto). Los datos muestran la curva de supervivencia hasta el día 100 después del tratamiento con fármacos (n=16). *P<0,0001 frente al Compuesto (1) o CTX solo (prueba de rango logarítmico (Mantel-Cox)).Figura 7B.La cantidad de HSC-2 transducida con luciferasa se analizó mediante el Sistema de Imágenes In Vivo (IVIS). Imágenes de bioluminiscencia de 10 ratones supervivientes del grupo combinado Compuesto (1) CTX el día 100. RBW= peso corporal relativo. CDDP = cisplatino, CTX = cetuximab.

LaFigura 8A-8Bmuestra el efecto antitumoral del Compuesto (1) en combinación con la radioterapia el modelo de xenoinjerto de ratón FaDu.Figura 8A.Se implantó en el muslo derecho de ratones desnudos FaDu transducida con luciferasa (5 x 106 células/punto). Trece días después de la inoculación, los ratones se asignaron aleatoriamente (n=6) y se inyectaron por vía intravenosa con Compuesto (1) a 90 gg/kg el día 1 y el día 8 con o sin RT de 18 Gy el día 4 y el día 11. La cantidad de FaDu transducida con luciferasa se analizó mediante el Sistema de Imágenes In Vivo (IVIS). Los datos muestran el nivel medio de bioluminiscencia relativa el día 1 y SEM (n=6). SEM= error estándar de la media. * P<0,05 frente a no tratado el día 29 (prueba t no pareada).Figura 8B.Imágenes de bioluminiscencia representativa de 6 ratones de cada grupo el día 29. RT= radioterapia.

LaFigura 9muestra las actividades antitumorales del Compuesto (1) en combinación con el anticuerpo antimPD-1. El modelo de ratón singénico CT26 s.c. (carcinoma de colon) se trató con el Compuesto (1) y anticuerpo anti- mPD-1 en el programa Q7D y dos veces por semana, respectivamente, durante 3 semanas. Los resultados muestran medias ± SEM de volúmenes tumorales (mm3) (n=8).

LaFigura 10Amuestra un ensayo de polimerización de tubulina libre de células. El Compuesto (1) tiene actividad inhibidora sobre la polimerización de tubulina. LaFigure 10Bmuestra un ensayo de dinámica de microtúbulos. El Compuesto (1) tiene también actividad inhibidora sobre la dinámica de microtúbulos.

LaFigura 11muestra que el Compuesto (1) es un potente agente antiproliferativo en líneas celulares de cáncer de esófago (O<e>21 , OE33 y TE-8) y en el cáncer uterino (MES-SA, MES-SA/Dx5-Rx1).

LaFigura 12muestra que el Compuesto (1) tiene una potente actividad antitumoral en modelos de xenoinjertos subcutáneos de cáncer de mama y ovario (KPL-4 y COLO-704, respectivamente) como monoterapia.

LaFigura 13muestra el efecto del Compuesto (1) sobre microambientes tumorales. Como se muestra, el Compuesto (1) aumenta la densidad microvascular. * P < 0,05, ** P < 0,01, ****p < 0,0001 frente a no tratado (prueba de comparación múltiple de Dunnett).

LaFigura 14muestra el efecto del Compuesto (1) sobre microambientes tumorales. Como se muestra, el Compuesto (1) reduce CAF a-SMA positivos.

LaFigura 15muestra que el Compuesto (1) disminuye las proteínas ECM de CAF en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu. Los tumores de xenoinjerto de FaDu se recogieron el día 6 después de la administración única del Compuesto (1) 180 gg/kg cetuximab el día 1.

LaFigura 16muestra que el Compuesto (1) exhibe un efecto combinacional dependiente de la dosis con cetuximab en un modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu. Dosis única, n = 6. El Compuesto (1) y cetuximab (CTX) se administraron el día 1 en el modelo de xenoinjerto de FaDu.

LaFigura 17muestra efectos antitumorales en modelos de xenoinjerto de sarcoma de tejidos blandos en ratones como monoterapia. Se muestran MES-SA (sarcoma uterino humano), HT-1080 (fibrosarcoma humano) y CTG-2041 (angiosarcoma humano).

LaFigura 18muestra efectos antitumorales en modelos de xenoinjerto de cáncer de endometrio en ratones como monoterapia. Se muestran HEC-108 y AN3CA (cáncer de endometrio).

LasFiguras 19A-19Hmuestran que el Compuesto (1) redujo la expresión de a-SMA inducida por TGF-p en un sistema inductor de CAFin vitro. Figura 19A.Se cocultivaron células BJ (fibroblastos pulmonares humanos normales) con células FaDu durante tres días en ausencia (vehículo) o presencia de A83-01, un potente inhibidor de TGF-p-R selectivo, y se analizó la expresión de a-SMA mediante tinción de inmunofluorescencia (color rojo). Las muestras también se tiñeron con citoqueratina anti-pan humana (color verde) para la tinción de células cancerosas y DAPI (color azul) para la tinción nuclear. Figuras 19B-19F. Se trataron células BJ con Compuesto (1) (0,15 nmol/L en los datos de tinción de inmunofluorescencia y concentraciones indicadas en los datos de análisis Western Blot) y TGF-p durante 2 días.Figuras 19B-19E.Las muestras se tiñeron con el anticuerpo indicado (color rojo) y DAPI (color azul) para la tinción nuclear. Figura 19F. Imágenes de Western Blot y cuantificación de imágenes. El gráfico muestra relaciones de los resultados de grupos de tratamiento con respecto al grupo no tratado. Figuras 19G y 19F. Se pretrataron células BJ con defactinib (1 pmol/L) y TGF-p durante 2 días. El aumento de lente utilizado era x4(Figuras 19A, 19B, 19C,19G y 19H) o x40(Figuras 19Dy19E).

Figuras 20A y20B.Cuantificación de imágenes de inmunofluorescencia de células BJ tratadas con TGF-p (1 ng/mL) y las concentraciones indicadas de Compuesto (1) para a-SMA(Figura 20A),proteína ribosómica fosfo-S6 (Ser235/236)(Figura 20B). Figura 20C.Análisis de inmunofluorescencia de células BJ tratadas con TGF-p en ausencia o presencia de dactolisib, un inhibidor de fosfatidilinositol 3 quinasa.Figura 20D.Análisis de inmunofluorescencia de Smad2/3 en células BJ pretratadas con Compuesto (1) (72 horas) después de 30 minutos de estimulación con TGF-p. La a-tubulina acetilada se tiñó conjuntamente para confirmar la actividad del Compuesto (1).Figura 20E.Análisis Western Blot de Smad2/3 en células BJ tratadas con TGF-p y las concentraciones indicadas de Compuesto (1). El aumento de lente utilizado era x4(Figura20C)o x40 (Figura 20D).

Figura 21A.Tinción por inmunofluorescencia de a-SMA (color rojo) y pan-citoqueratina (color verde) en TIG3 cocultivado con FaDu en ausencia o presencia de A83-01, un inhibidor de FAK.Figuras 21By21C.Cuantificación de imágenes de inmunofluorescencia de células TIG3 tratadas con TGF-p y las concentraciones indicadas de Compuesto (1) para a-SMA(Figura 21B),proteína ribosómica fosfo-S6 (Ser235/236)(Figura 21C). Figuras 21Dy21E.Análisis de inmunofluorescencia de células TIG3 tratadas con TGF-p en ausencia o presencia de Compuesto (1) para p-tubulina(Figura 21D),fosfo-FAK (Tyr397)(Figura 21E). Figura 21FAnálisis de inmunofluorescencia de células TIG3 tratadas con TGF-p en ausencia o presencia de dactolisib 100 nmol/L para a-SMA.Figuras 21Gy21H.Análisis de inmunofluorescencia de células TIG3 tratadas con TGF-p en ausencia o presencia de defactinib 3 pmol/L para a-SMA(Figure 21G),proteína ribosómica fosfo-S6 (Ser235/236)(Figura 21H).El aumento de lente utilizado era x4(Figuras 21A, 21F-21H)o x40 (Figuras 21D y21E).

Figura 22.Efecto antitumoral del Compuesto (1) en un modelo de xenoinjerto de HS-SY-II (sarcoma sinovial humano) en ratones como monoterapia.

Figura 23.Efecto antitumoral del Compuesto (1) en un modelo de xenoinjerto de HuTu80 (célula duodenal humana) en ratones como monoterapia.

DEFINICIONES

Definiciones químicas

Las definiciones de grupos funcionales específicos y términos químicos se describen con más detalle a continuación. Los elementos químicos se identifican según la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75a Ed., cubierta interior, y los grupos funcionales específicos se definen generalmente como se describe en este. Además, los principios generales de la química orgánica, así como las fracciones funcionales específicas y la reactividad, se describen en Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith y March, March's Advanced Organic Chemistry, 5a edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., Nueva York, 1989; y Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3a edición, Cambridge University Press, Cambridge, 1987.

Los compuestos descritos en el presente documento pueden comprender uno o más centros asimétricos y, por lo tanto, pueden existir en diversas formas estereoisoméricas, por ejemplo enantiómeros y/o diastereómeros. Por ejemplo, los compuestos descritos en el presente documento pueden estar en forma de un enantiómero, diasterómero o isómero geométrico, o pueden estar en forma de una mezcla de estereoisómeros, incluyendo mezclas racémicas y mezclas enriquecidas en uno o más estereoisómeros. Los isómeros se pueden aislar de mezclas mediante métodos conocidos por los expertos en la material, incluyendo cromatografía líquida quiral de alta presión (HPLC) y la formación y cristalización de sales quirales; o los isómeros preferidos se pueden preparar mediante síntesis asimétricas. Véase, por ejemplo, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, Nueva York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); y Wilen, S.H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972). La invención abarca adicionalmente compuestos como isómeros individuales sustancialmente libres de otros isómeros y, de manera alternativa, como mezclas de diversos isómeros.

A menos que se indique lo contrario, las estructuras representadas en este documento también están concebidas para incluir compuestos que difieran solo en la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las estructuras presentes, excepto la sustitución de hidrógeno por deuterio o tritio, la sustitución de 19F por 18F o la sustitución de 12C por 13C o 14C están dentro del alcance de la divulgación. Tales compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas o sondas en ensayos biológicos.

Cuando se enumera un intervalo de valores, se pretenda abarcar cada valor y subintervalo dentro del intervalo. Por ejemplo, "alquilo C<1-6>" pretende abarcar, alquilo C<1>, C<2>, C<3>, C<4>, C<5>, C6, C<1-6>, C<1-5>, C<1-4>, C<1-3>, C<3-6>, C<3-5>, C<3-4>, C<4-6>, C<4-5>y C<5-6>.

El término "alifático" se refiere a grupos alquilo, alquenilo, alquinilo y carbocíclicos. Del mismo modo, el término "heteroalifático" se refiere a grupos heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo y heterocíclicos.

El término "alquilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificado que tiene

1 a 10 átomos de carbono ("alquilo C<1-10>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 9 átomos de carbono ("alquilo C<1-9>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 8 átomos de carbono ("alquilo C<1-8>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 7 átomos de carbono ("alquilo C<1-7>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 6 átomos de carbono ("alquilo C<1-6>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 5 átomos de carbono ("alquilo C<1-5>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 4 átomos de carbono ("alquilo C<1-4>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 3 átomos de carbono ("alquilo C<1-3>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 2 átomos de carbono ("alquilo C<1-2>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 átomo de carbono ("alquilo C<1>"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 2 a 6 átomos de carbono ("alquilo C<2-6>").

Ejemplos de grupos alquilo C<1-6>incluyen metilo (C<1>), etilo (C<2>), propilo (C<3>) (por ejemplo, n-propilo, /so-propilo), butilo

(C<4>) (por ejemplo n-butilo, terc-butilo, sec-butilo, /so-butilo), pentilo (C<5>) (por ejemplo n-pentilo, 3-pentanilo, amilo, neopentilo, 3-metil-2-butanilo, amilo terciario) y hexilo (C6) (por ejemplo n-hexilo). Ejemplos adicionales de grupos alquilo incluyen n-heptilo (C<7>) y n-octilo (C8). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo alquilo no está sustituido (un "alquilo no sustituido") o está sustituido (un "alquilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes (por ejemplo halógeno, como F). En ciertas realizaciones, el grupo alquilo es un alquilo C<1-10>no sustituido (como alquilo C<1-6>no sustituido, por ejemplo -CH<3>(Me), etilo (Et) no sustituido, propilo no sustituido (Pr, por ejemplo n-propilo (n-Pr) no sustituido, /'so-propilo (/-Pr) no sustituido), butilo no sustituido (Bu, por ejemplo n-butilo (n-Bu) no sustituido, íerc-butilo(terc-Buo t-Bu) no sustituido, sec-butilo (sec-Bu) no sustituido, /so-butilo (/-Bu) no sustituido) . En ciertas realizaciones, el grupo alquilo es un alquilo C<1-10>sustituido (como alquilo C<1-6>sustituido, por ejemplo -CF<3>, Bn).

El término "haloalquilo" es un grupo alquilo sustituido, en donde uno o más de los átomos de hidrógeno están reemplazados independientemente por un halógeno, por ejemplo flúor, bromo, cloro o yodo. En algunas realizaciones, la fracción haloalquilo tiene 1 a 8 átomos de carbono ("alquilo C<1-8>"). En algunas realizaciones, la fracción haloalquilo tiene 1 a 6 átomos de carbono ("alquilo C<1-6>"). En algunas realizaciones, la fracción haloalquilo tiene 1 a 4 átomos de carbono ("alquilo C<1-4>"). En algunas realizaciones, la fracción haloalquilo tiene 1 a 3 átomos de carbono ("alquilo C<1>-<3>"). En algunas realizaciones, la fracción haloalquilo tiene 1 a 2 átomos de carbono ("alquilo C<1-2>"). Ejemplos de grupos haloalquilo incluyen -CHF<2>, -CH<2>F, -CF<3>, -CH<2>CF<3>, -CF<2>CF<3>, -CF<2>CF<2>CF<3>, -CCla, -CFCl<2>y -CFaCl.

El término "heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo, que incluye además al menos un heteroátomo (por ejemplo 1,

2, 3 o 4 heteroátomos) seleccionados de oxígeno, nitrógeno o azufre dentro (es decir, insertados entre átomos de carbono adyacentes de) y/o colocado en una o más posiciones terminales de la cadena parental. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquilo se refiere a un grupo saturado que tiene 1 a 10 átomos de carbono y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-10>"). En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 9 átomos de carbono y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-9>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 8 átomos de carbono y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-8>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 7 átomos de carbono y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-7>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene

1 a 6 átomos de carbono y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-6>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 5 átomos de carbono y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-5>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 4 átomos de carbono y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-4>").

En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 3 átomos de carbono y 1 heteroátomo dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<1-3>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 2 átomos de carbono y 1 heteroátomo dentro de la cadena parental ("heteroalquilo

C<1-2>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 átomo de carbono y 1 heteroátomo ("heteroalquilo C<1>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 2 a 6 átomos de carbono y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<2-6>"). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo heteroalquilo no está sustituido (un "heteroalquilo no sustituido") o está sustituido (un "heteroalquilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquilo es un heteroalquilo C<1-10>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquilo es un heteroalquilo C<1-10>sustituido.

El término "alquenilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo de cadena lineal o ramificado que tiene 2 a 10 átomos de carbono y uno o más dobles enlaces carbono-carbono (por ejemplo 1,2, 3 o 4 dobles enlaces). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 9 átomos de carbono ("alquenilo C<2-9>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 8 átomos de carbono ("alquenilo C<2-8>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 7 átomos de carbono ("alquenilo C<2-7>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 6 átomos de carbono ("alquenilo C<2-6>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 5 átomos de carbono ("alquenilo C<2-5>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 4 átomos de carbono ("alquenilo C<2-4>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 3 átomos de carbono ("alquenilo C<2-3>"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 átomos de carbono ("alquenilo C<2>"). El uno o más dobles enlaces carbono-carbono pueden ser internos (como en 2-butenilo) o terminal (como en 1-butenilo). Ejemplos de grupos alquenilo C<2-4>incluyen etenilo (C<2>), 1-propenilo (C<3>), 2-propenilo (C<3>), 1-butenilo (C<4>), 2-butenilo (C<4>) y butadienilo (C<4>). Ejemplos de grupos alquenilo C<2-6>incluyen los grupos alquenilo C<2-4>mencionados anteriormente, así como pentenilo (C<5>), pentadienilo (C<5>) y hexenilo (C6). Ejemplos adicionales de alquenilo incluyen heptenilo (C<7>), octenilo (C8) y octatrienilo (C8). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo alquenilo no está sustituido (un "alquenilo no sustituido") o está sustituido (un "alquenilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo alquenilo es un alquenilo C<2-10>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo alquenilo es un alquenilo C<2-10>sustituido. En un grupo alquenilo, un doble enlace para el cual no se especifica la estereoquímica (por ejemplo -CH=CHCH3 o

) puede ser un doble enlace (E) o (Z).

El término "heteroalquenilo" se refiere a un grupo alquenilo, que incluye además al menos un heteroátomo (por ejemplo 1, 2, 3 o 4 heteroátomos) seleccionados de oxígeno, nitrógeno o azufre dentro (es decir, insertados entre átomos de carbono adyacentes de) y/o colocado en una o más posiciones terminales de la cadena parental. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquenilo se refiere a un grupo que tiene 2 a 10 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-10>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 9 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-9>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 8 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-8>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 7 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-7>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 6 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-6>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 5 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-5>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 4 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-4>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 3 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 heteroátomo dentro de la cadena parental ("heteroalquilo C<2-3>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 6 átomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquenilo C<2-6>"). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo heteroalquenilo no está sustituido (un "heteroalquenilo no sustituido") o está sustituido (un "heteroalquenilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquenilo es un heteroalquenilo C<2-10>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquenilo es un heteroalquenilo C<2-10>sustituido.

El término "alquinilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo de cadena lineal o ramificado que tiene 2 a 10 átomos de carbono y uno o más triples enlaces carbono-carbono (por ejemplo 1, 2, 3 o 4 triples enlaces) ("alquinilo C<2-10>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 9 átomos de carbono ("alquenilo C<2-9>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 8 átomos de carbono ("alquenilo C<2-8>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 7 átomos de carbono ("alquenilo C<2-7>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 6 átomos de carbono ("alquenilo C<2-6>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 5 átomos de carbono ("alquenilo C<2-5>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 4 átomos de carbono ("alquenilo C<2-4>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 3 átomos de carbono ("alquenilo C<2-3>"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 átomos de carbono ("alquinilo C<2>"). El uno o más triples enlaces carbono-carbono pueden ser internos (como en 2-butinilo) o terminal (como en 1 -butinilo). Ejemplos de grupos alquenilo C<2-4>incluyen, entre otros, etinilo (C<2>), 1 -propinilo (C<3>), 2-propinilo (C<3>), 1 -butinilo (C<4>) y 2-butinilo (C<4>). Ejemplos de grupos alquenilo C<2-6>incluyen los grupos alquinilo C<2-4>mencionados anteriormente, así como pentinilo (C<5>) y hexinilo (C6). Ejemplos adicionales de alquinilo incluyen heptinilo (C<7>) y octinilo (C8). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo alquinilo no está sustituido (un "alquinilo no sustituido") o está sustituido (un "alquinilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo alquinilo es un alquinilo C<2-10>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo alquinilo es un alquinilo C<2-10>sustituido.

El término "heteroalquinilo" se refiere a un grupo alquenilo, que incluye además al menos un heteroátomo (por ejemplo 1, 2, 3 o 4 heteroátomos) seleccionados de oxígeno, nitrógeno o azufre dentro (es decir, insertados entre átomos de carbono adyacentes de) y/o colocado en una o más posiciones terminales de la cadena parental. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquinilo se refiere a un grupo que tiene 2 a 10 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-10>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 9 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-9>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 8 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-8>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 7 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-7>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 6 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o más heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-6>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 5 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-5>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 4 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-4>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 3 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 heteroátomo dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-3>"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 6 átomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 o 2 heteroátomos dentro de la cadena parental ("heteroalquinilo C<2-6>"). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo heteroalquinilo no está sustituido (un "heteroalquinilo no sustituido") o está sustituido (un "heteroalquinilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquinilo es un heteroalquinilo C<2-10>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquinilo es un heteroalquinilo C<2-10>sustituido.

El término "carbociclilo" o "carbocíclico" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo cíclico no aromático que tiene 3 a 14 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<3-14>") y cero heteroátomos en el sistema de anillo no aromático. En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 10 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<3-10>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 8 átomos de carbono ("carbociclilo C<3-8>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 7 átomos de carbono ("carbociclilo C<3-7>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 6 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<3-6>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 4 a 6 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<4-6>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 5 a 6 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<5-6>"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 5 a 10 átomos de carbono de anillo ("carbociclilo C<5-10>"). Grupos carbociclilo C<3-6>ejemplares incluyen, entre otros, ciclopropilo (C<3>), ciclopropenilo (C<3>), ciclobutilo (C<4>), ciclobutenilo (C<4>), ciclopentilo (C<5>), ciclopentenilo (C<5>), ciclohexilo (C6), ciclohexenilo (C6) y ciclohexadienilo (C6). Grupos carbociclilo C<3-8>ejemplares incluyen, entre otros, los grupos carbociclilo C3-6 mencionados anteriormente, así como cicloheptilo (C<7>), cicloheptenilo (C<7>), cicloheptadienilo (C<7>), cicloheptatrienilo (C<7>), ciclooctilo (C8), ciclooctenilo (C8), biciclo[2.2.1]heptanilo (C<7>) y biciclo[2.2.2]octanilo (C8). Grupos carbociclilo C<3-10>ejemplares incluyen, entre otros, los grupos carbociclilo C<3-8>mencionados anteriormente, así como ciclononilo (C<9>), ciclononenilo (C<9>), ciclodecilo (C<10>), ciclodecenilo (C<10>), octahidro-1H-indenilo (C<9>), decahidronaftalenilo (C<10>) y espiro[4.5]decanilo (C<10>). Como ilustran los anteriores ejemplos, en ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es monocíclico ("carbociclilo monocíclico") o policíclico (por ejemplo que contiene un anillo fusionado, puenteado o espiro, como un sistema bicíclico ("carbociclilo bicíclico") o sistema triclíclico ("carbociclilo tricíclico")), y puede estar saturado o contener uno o más dobles o triples enlaces carbono-carbono. "Carbociclilo" incluye también sistemas de anillo en donde el anillo carbocílico, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos arilo o heteroarilo, en donde el punto de unión está en el anillo de carbociclilo, y en tales casos el número de carbonos continúa designando el número de carbonos en el sistema de anillo carbocíclico. A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo carbociclilo no está sustituido (un "carbociclilo no sustituido") o está sustituido (un "carbociclilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es un carbociclilo C<3-14>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es un carbociclilo C<3-14>sustituido.

En algunas realizaciones, "carbociclilo" es un grupo carbociclilo saturado monocíclico que tiene 3 a 14 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<3-14>"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 3 a 10 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<3-10>"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 3 a 8 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<3-8>"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 3 a 6 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<3-6>"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 4 a 6 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<4-6>"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 5 a 6 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C5-6"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 5 a 10 átomos de carbono de anillo ("cicloalquilo C<5-10>"). Ejemplos de grupos cicloalquilo C<5-6>incluyen ciclopentilo (C<5>) y ciclohexilo (C<5>). Ejemplos de grupos cicloalquilo C<3-6>incluyen los grupos cicloalquilo C<5-6>mencionados anteriormente, así como ciclopropilo (C<3>) y ciclobutilo (C<4>). Ejemplos de grupos cicloalquilo C3-8 incluyen los grupos cicloalquilo C3-6 mencionados anteriormente, así como cicloheptilo (C<7>) y ciclooctilo (C8). A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo cicloalquilo no está sustituido (un "cicloalquilo no sustituido") o está sustituido (un "cicloalquilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo cicloalquilo es un cicloalquilo C<3>-<14>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo cicloalquilo es un cicloalquilo C<3-14>sustituido.

El término "heterociclilo" o "heterocíclico" se refiere a un radical de un sistema de anillo no aromático de 3 a 14 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1 a 4 heteroátomos de anillo, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heterociclilo de 3-14 miembros"). En los grupos heterociclilo que contienen uno o más átomos de nitrógeno, el punto de unión puede ser un átomo de carbono o nitrógeno, según lo permita la valencia. Un grupo heterociclilo puede ser monocíclico ("heterociclilo monocíclico") o policíclico (por ejemplo un anillo fusionado, puenteado o espiro, como un sistema bicíclico ("heterociclilo bicíclico") o sistema triclíclico ("heterociclilo tricíclico")), y puede estar saturado o contener uno o más dobles o triples enlaces carbono-carbono. Sistemas de anillo heterociclilo policíclico pueden incluir uno o más heteroátomos en uno o ambos anillos. "Heterociclilo" incluye también sistemas de anillo en donde el anillo de heterociclilo, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos carbocíclicos en donde el punto de unión está en el anillo de carbociclilo o heterociclilo, o sistemas de anillo en donde el anillo de heterociclilo, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos arilo o heteroarilo en donde el punto de unión está en el anillo de heterociclilo, y en tales ejemplos el número de miembros de anillo continúa designando el número de miembros de anillo del sistema de anillo de heterociclilo. A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo heterociclilo no está sustituido (un "heterociclilo no sustituido") o está sustituido (un "heterociclilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heterociclilo es un heterociclilo de 3-14 miembros no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heterociclilo es un heterociclilo de 3-14 miembros sustituido.

En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromático de 5-10 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heterociclilo de 5-10 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromático de 5-8 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heterociclilo de 5-8 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromático de 5-6 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heterociclilo de 5-6 miembros"). En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5-6 miembros tiene 1-3 heteroátomos de anillo seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5-6 miembros tiene 1-2 heteroátomos de anillo seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5-6 miembros tiene 1 heteroátomo de anillo seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre.

Grupos heterociclilo de 3 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, aziridinilo, oxiranilo y tiiranilo. Grupos heterociclilo de 4 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, azetidinilo, oxetanilo y tietanilo. Grupos heterociclilo de 5 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dihidrotiofenilo, pirrolidinilo, dihidropirrolilo y pirrolil-2,5-diona. Grupos heterociclilo de 5 miembros ejemplares que contienen 2 heteroátomos incluyen, entre otros, dioxolanilo, oxatiolanilo y ditiolanilo. Grupos heterociclilo de 5 miembros ejemplares que contienen 3 heteroátomos incluyen, entre otros, triazolinilo, oxadiazolinilo y tiadiazolinilo. Grupos heterociclilo de 6 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, piperidinilo, tetrahidropiranilo, dihidropiridinilo y tianilo. Grupos heterociclilo de 6 miembros ejemplares que contienen 2 heteroátomos incluyen, entre otros, piperazinilo, morfolinilo, ditianilo y dioxanilo. Grupos heterociclilo de 6 miembros ejemplares contienen 3 heteroátomos incluyen, entre otros triazinilo. Grupos heterociclilo de 7 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, azepanilo, oxepanilo y tiepanilo. Grupos heterociclilo de 8 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, azocanilo, oxecanilo y tiocanilo. Grupos heterociclilo bicíclicos incluyen, entre otros, indolinilo, isoindolinilo, dihidrobenzofuranilo, dihidrobenzotienilo, tetrahidrobenzotienilo, tetrahidrobenzofuranilo, tetrahidroindolilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, decahidroquinolinilo, decahidroisoquinolinilo, octahidrocromenilo, octahidroisocromenilo, decahidronaftiridinilo, decahidro-1,8-naftiridinilo, octahidropirrolo[3,2-b]pirrole, indolinilo, ftalimidilo, naftalimidilo, cromanilo, cromenilo, 1H-benzo[e][1,4]diazepinilo, 1,4,5,7-tetrahidropirano[3,4-b]pirrolilo, 5,6-dihidro-4H-furo[3,2-b]pirrolilo, 6,7-dihidro-5H-furo[3,2-b]piranilo, 5,7-dihidro-4H-tieno[2,3-c]piranilo, 2,3-dihidro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridinilo, 2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidrofuro[3,2-c]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidrotieno[3,2-b]piridinilo y 1,2,3,4-tetrahidro-1,6-naftiridinilo.

El término "arilo" se refiere a un radical de un sistema de anillo aromático 4n+2 monocíclico o policíclico (por ejemplo bicíclico o tricíclico) (por ejemplo que tiene 6, 10 o 14 electrones n compartidos en una matriz cíclica) que tiene 6-14 átomos de carbono de anillo y cero heteroátomos provistos en el sistema de anillo aromático ("arilo C<6-14>"). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 6 átomos de carbono de anillo ("arilo C6"; por ejemplo fenilo). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 10 átomos de carbono de anillo ("arilo C<10>"; por ejemplo naftilo como 1 -naftilo y 2-naftilo). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 14 átomos de carbono de anillo ("arilo C<14>"; por ejemplo antracilo). "Arilo" incluye también sistemas de anillo en donde el anillo de arilo, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos carbociclilo o heterociclilo, en donde el radical o el punto de unión está en el anillo de arilo, y en tales casos el número de carbonos continúa designando el número de carbonos en el sistema de anillo de arilo. A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo arilo no está sustituido (un "arilo no sustituido") o está sustituido (un "arilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo arilo es un arilo C<6-14>no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo arilo es un arilo C<6-14>sustituido.

El término "heteroarilo" se refiere a un radical de un sistema de anillo aromático 4n+2 monocíclico o policíclico de 5 14 miembros (por ejemplo bicíclico, tricíclico) (por ejemplo que tiene 6, 10 o 14 electrones n compartidos en una matriz cíclica) que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos provistos en el sistema de anillo aromático, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heteroarilo de 5-14 miembros"). En los grupos heteroarilo que contienen uno o más átomos de nitrógeno, el punto de unión puede ser un átomo de carbono o nitrógeno, según lo permita la valencia. Sistemas de anillo heteroarilo policíclico pueden incluir uno o más heteroátomos en uno o ambos anillos. "Heteroarilo" incluye también sistemas de anillo en donde el anillo de heteroarilo, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos carbociclilo o heterociclilo, en donde el o el punto de unión está en el anillo de heteroarilo, y en tales casos el número de miembros de anillo continúa designando el número de miembros de anillo en el sistema de anillo de heteroarilo. "Heteroarilo" incluye también sistemas de anillo en donde el anillo de heteroarilo, como se definió anteriormente, está fusionado con uno o más grupos arilo en donde el punto de unión está en el anillo de arilo o heteroarilo, y en tales casos el número de miembros de anillo designa el número de miembros de anillo en el sistema de anillo policíclico (arilo/heteroarilo) fusionado. En los grupos heteroarilo policíclicos en donde un anillo no contiene un heteroátomo (por ejemplo indolilo, quinolinilo y carbazolilo), el punto de unión puede estar en cualquier anillo, es decir, el anillo que porta un heteroátomo (por ejemplo 2-indolilo) o el anillo que no contiene un heteroátomo (por ejemplo 5-indolilo).

En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromático de 5-10 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo provistos en el sistema de anillo aromático, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heteroarilo de 5-10 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromático de 5-8 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1 -4 heteroátomos de anillo provistos en el sistema de anillo aromático, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heteroarilo de 5-8 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromático de 5-6 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo provistos en el sistema de anillo aromático, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre ("heteroarilo de 5-6 miembros"). En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5-6 miembros tiene 1-3 heteroátomos de anillo seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5-6 miembros tiene 1-2 heteroátomos de anillo seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5-6 miembros tiene 1 heteroátomo de anillo seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre. A menos que se especifique lo contrario, cada ejemplo de un grupo heteroarilo no está sustituido (un "heteroarilo no sustituido") o está sustituido (un "heteroarilo sustituido") independientemente con uno o más sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroarilo es un heteroarilo de 5-14 miembros no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroarilo es un heteroarilo de 5-14 miembros sustituido.

Grupos heteroarilo de 5 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, pirrolilo, furanilo y tiofenilo. Grupos heteroarilo de 5 miembros ejemplares que contienen 2 heteroátomo incluyen, entre otros, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo e isotiazolilo. Grupos heteroarilo de 5 miembros ejemplares que contienen 3 heteroátomos incluyen, entre otros, triazolilo, oxadiazolilo y tiadiazolilo. Grupos heteroarilo de 5 miembros ejemplares que contienen 4 heteroátomos incluyen, entre otros, tetrazolilo. Grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, piridinilo. Grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 2 heteroátomos incluyen, entre otros, piridazinilo, pirimidinilo y pirazinilo. Grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 3 o 4 heteroátomos incluyen, entre otros, triazinilo y tetrazinilo, respectivamente. Grupos heteroarilo de 7 miembros ejemplares que contienen 1 heteroátomo incluyen, entre otros, azepinilo, oxepinilo y tiepinilo. Grupos heteroarilo 5,6-bicíclicos incluyen, entre otros, indolilo, isoindolilo, indazolilo, benzotriazolilo, benzotiofenilo, isobenzotiofenilo, benzofuranilo, benzoisofuranilo, benzimidazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzoxadiazolilo, benzotiazolilo, benzoisotiazolilo, benzotiadiazolilo, indolizinilo y purinilo. Grupos heteroaril 6,6-bicicíclicos ejemplares incluyen, entre otros, naftiridilo, pteridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, quinoxalinilo, ftalazinilo y quinazolinilo. Grupos heteroarilo tricíclicos ejemplares incluyen, entre otros, fenantridinilo, dibenzofuranilo, carbazolilo, acridinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo y fenazinilo.

Añadir el sufijo "-eno" a un grupo indica que el grupo es la fracción divalente, por ejemplo alquileno es la fracción divalente de alquilo, alquenileno es la fracción divalente de alquenilo, alquinileno es la fracción divalente de alquinilo, heteroalquileno es la fracción divalente de heteroalquilo, heteroalquenileno es la fracción divalente de heteroalquenilo, heteroalquinileno es la fracción divalente de heteroalquinilo, carbociclileno es la fracción divalente de carbociclilo, heterociclileno es la fracción divalente de heterociclilo, arileno es la fracción divalente de arilo y heteroarileno es la fracción divalente de heteroarilo.

Un grupo está opcionalmente sustituido a menos que se disponga expresamente lo contrario. El término "opcionalmente sustituido" se refiere a ser sustituido o no sustituido. En ciertas realizaciones, los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbocíclico, heterocíclico, arilo y heteroarilo están opcionalmente sustituidos. "Opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo que puede estar sustituido o no estar sustituido (por ejemplo un grupo alquilo "sustituido" o "no sustituido", alquenilo "sustituido" o "no sustituido", alquinilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquenilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquinilo "sustituido" o "no sustituido", carbociclilo "sustituido" o "no sustituido", heterociclilo "sustituido" o "no sustituido", arilo "sustituido" o "no sustituido" o heteroarilo "sustituido" o "no sustituido"). En general, el término "sustituido" significa que el al menos un hidrógeno presente en un grupo se reemplaza por un sustituyente permitido, por ejemplo un sustituyente que en la sustitución de como resultado un compuesto estable, por ejemplo un compuesto que no sufra una transformación espontáneamente, como por redisposición, ciclación, eliminación u otra reacción. A menos que se indique lo contrario, un grupo "sustituido" tiene un sustituyente en una o más posiciones sustituibles del grupo y, cuando se sustituye más de una posición en cualquier estructura dada, el sustituyente es el mismo o diferente en cada posición. Se contempla que el término "sustituido" incluye sustitución con todos los sustituyentes permitidos de compuestos orgánicos, e incluye cualquiera de los sustituyentes descritos en el presente documento que den como resultado la formación de un compuesto estable. La presente invención contempla todas y cada una de las combinaciones para llegar a un compuesto estable. Para los fines de esta invención, los heteroátomos como nitrógeno pueden tener sustituyentes hidrógeno y/o cualquier sustituyente adecuado como se describió en el presente documento que satisfaga las valencias de los heteroátomos y de como resultado la formación de una fracción estable. La invención no pretende ser limitada de ninguna manera por los sustituyentes ejemplares descritos en el presente documento.

Sustituyentes de átomo de carbono ejemplares incluyen, entre otros, halógeno, -CN, -NO<2>, -N<3>, -SO<2>H, -SO<3>H, -OH, -ORaa, -ON(Rbb)<2>, -N(Rbb)<2>, -N(Rbb)3+X-, -N(ORcc)Rbb, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO<2>H, -CHO, -C(ORcc)3, -CO<2>Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)2, -C(=O)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa, -Si(Raa)3, -OSi(Raa)3 -C(=S)N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa, -SC(=S)SRaa, -SC(=O)SRaa, -OC(=O)SRaa, -SC(=O)ORaa, -SC(=O)Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -OP(=O)(Raa)2, -OP(=O)(ORcc)2, -P(=O)(N(Rbb)2)2, -OP(=O)(N(Rbb)2)2, -NRbbP(=O)(Raa)2, -NRbbP(=O)(ORcc)2, -NRbbP(=O)(N(Rbb)2)2, -P(Rcc)2, -P(ORcc)2, -P(Rcc)3+X-, -P(ORcc)3+X-, -P(Rcc)4, -P(ORcc)4, -OP(Rcc)2, -OP(Rcc)3+X-, -OP(ORcc)2, -OP(ORcc)3+X-, -OP(Rcc)4, -OP(ORcc)4, -B(Raa)2, -B(ORcc)<2>, -BRaa(ORcc), alquilo C<1-10>, perhaloalquilo C<1-10>, alquenilo C<2-10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-10>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>y heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; en donde X- es un contraión;

o dos hidrógenos geminales en un átomo de carbono está reemplazado por el grupo =O, =S, =NN(Rbb)<2>, =NNRbbC(=O)Raa, =NNRbbC(=O)ORaa, =NNRbbS(=O)<2>Raa, =NRbb o =NORcc;

cada ejemplo de Raa se selecciona, independientemente, de alquilo C<1-10>, perhaloalquilo C<1-10>, alquenilo C<2>-<10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-10>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Raa se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rdd;

cada ejemplo de Rbb se selecciona, independientemente, de hidrógeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)<2>, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)<2>, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)(Raa)<2>, -P(=O)(ORcc)<2>, -P(=O)(N(Rcc)<2>)<2>, alquilo C<1-10>, perhaloalquilo C<1-10>, alquenilo C<2-10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-1 0>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rbb se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; en donde X- es un contraión;

cada ejemplo de Rcc se selecciona, independientemente, de hidrógeno, alquilo C<1-10>, perhaloalquilo C<1-10>, alquenilo C<2-10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-10>, carbociclilo C<3>-<10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rcc se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd;

cada ejemplo de Rdd se selecciona, independientemente, de halógeno, -CN, -NO<2>, -N<3>, -SO<2>H, -SO<3>H, -OH, -ORee, -ON(Rff)<2>, -N(Rff)<2>, -N(Rff)3+X-, -N(ORee)Rff, -SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO<2>H, -CO<2>Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -C(=NRff)ORee, -OC(=NRff)Ree, -OC(=NRff)ORee, -C(=NRff)N(Rff)2, -OC(=NRff)N(Rff)2, -NRffC(=NRff)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rf )2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, -OSi(Ree)3, -C(=S)N(Rff)2, -C(=O)SRee, -C(=S)SRee, -SC(=S)SRee, -P(=O)(ORee)<2>, -P(=O)(Ree)<2>, -OP(=O)(Ree)<2>, -OP(=O)(ORee)<2>, alquilo C<1-6>, perhaloalquilo C<1-6>, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, heteroalquilo C<1-6>, heteroalquenilo C<2-6>, heteroalquinilo C<2-6>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-10 miembros, arilo C<6-10>, heteroarilo de 5-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rgg, o dos sustituyentes Rdd geminales pueden unirse para formar =O o =S; en donde X- es un contraión;

cada ejemplo de Ree se selecciona, independientemente, de alquilo C<1-6>, perhaloalquilo C<1-6>, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, heteroalquilo C<1-6>, heteroalquenilo C<2-6>, heteroalquinilo C<2-6>, carbociclilo C<3-10>, arilo C<6-10>, heterociclilo de 3-10 miembros y heteroarilo de 3-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rgg;

cada ejemplo de Rf se selecciona, independientemente, de hidrógeno, alquilo C<1-6>, perhaloalquilo C<1-6>, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, heteroalquilo C<1-6>, heteroalquenilo C<2-6>, heteroalquinilo C<2-6>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-10 miembros, arilo C<6-10>y heteroarilo de 5-10 miembros, o dos grupos Rf se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-10 miembros o de heteroarilo de 5-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rgg; y

cada ejemplo de Rgg es, independientemente, halógeno, -CN, -NO<2>, -N<3>, -SO<2>H, -SO<3>H, -OH, -Oalquilo C<1-6>, -ON(alquilo C<1-6>)<2>, -N(alquilo C<1-6>)<2>, -N(alquilo C<1-6>)a+X-, -NH(alquilo C<1-6>)<2>+X-, -NH<2>(alquilo C<1-6>)+X-, -NH<3>+X-, -N(Oalquilo C<1-6>)(alquilo C<1-6>), -N(OH)(alquilo C<1-6>), -NH(OH), -SH, -SCalquilo C<1-6>, -SS(alquilo C<1-6>), -C(=O)(alquilo C<1-6>), -CO<2>H, -CO<2>(alquilo C<1-6>), -OC(=O)(alquilo C<1-6>), -OCO<2>(alquilo C<1-6>), -C(=O)NH<2>, -C(=O)N(alquilo C<1-6>)<2>, -OC(=O)NH(alquilo C<1-6>), -NHC(=O)(alquilo C<1-6>), -N(alquilo C<1-6>)C(=O)(alquilo C<1-6>), -NHCO<2>(alquilo C<1-6>), -NHC(=O)N(alquilo C<1-6>)<2>, -NHC(=O)NH(alquilo C<1-6>), -NHC(=O)NH<2>, -C(=NH)O(alquilo

C<1-6>), -OC(=NH)(alquilo C<1-6>), -OC(=NH)Oalquilo C<1-6>, -C(=NH)N(alquilo C<1-6>)<2>, -C(=NH)NH(alquilo C<1-6>), -C(=NH)NH<2>, -OC(=NH)N(alquilo C<1-6>)<2>, -OC(=NH)NH(alquilo C<1-6>), -OC(=NH)NH<2>, -NHC(=NH)N(alquilo C<1>-<6>)<2>, -NHC(=NH)NH<2>, -NHSO<2>(alquilo C<1-6>), -SO<2>N(alquilo C<1-6>)<2>, -SO<2>NH(alquilo C<1-6>), -SO<2>NH<2>, -SO<2>(alquilo

C<1-6>), -SO<2>O(alquilo C<1-6>), -OSO<2>(alquilo C<1-6>), -SO(alquilo C<1-6>), -Si(alquilo C1-6)3, -OSi(alquilo C1-6)3 -C(=S)N(alquilo C<1-6>)<2>, C(=S)NH(alquilo C<1-6>), C(=S)NH<2>, -C(=O)S(alquilo C<1-6>), -C(=S)Salquilo C<1-6>, -SC(=S)Salquilo C<1-6>, -P(=O)(Oalquilo C<1-6>)<2>, -P(=O)(alquilo C<1-6>)<2>, -OP(=O)(alquilo C<1-6>)<2>, -OP(=O)(Oalquilo

C<1-6>)<2>, alquilo C<1-6>, perhaloalquilo C<1-6>, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, heteroalquilo C<1-6>, heteroalquenilo C<2-6>, heteroalquinilo C<2-6>carbociclilo C<3-10>, arilo C<6-10>, heterociclilo de 3-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros; o dos sustituyentes Rgg gemínales pueden unirse para formar =O o =S; en donde X- es un contraión.

En ciertas realizaciones, los sustituyentes incluyen: halógeno, -CN, -NO<2>, -N<3>, -SO<2>H, -SO<3>H, -OH, -Oalquilo C<1-6>, -ON(alquilo C<1-6>)<2>, -N(alquilo C<1-6>)<2>, -N(alquilo C<1-6>)a+X-, -NH(alquilo C<1-6>)<2>+X-, -NH<2>(alquilo C<1-6>)+X-, -NH<3>+X-, -N(Oalquilo

C<1-6>)(alquilo C<1-6>), -N(OH)(alquilo C<1-6>), -NH(OH), -SH, -Salquilo C<1-6>, -SS(alquilo C<1-6>), -C(=O)(alquilo C<1-6>), -CO<2>H, -CO<2>(alquilo C<1-6>), -OC(=O)(alquilo C<1-6>), -OCO<2>(alquilo C<1-6>), -C(=O)NH<2>, -C(=O)N(alquilo C<1-6>)<2>, -OC(=O)NH(alquilo

C<1-6>), -NHC(=O)(alquilo C<1-6>), -N(alquilo C<1-6>)C(=O)(alquilo C<1-6>), -NHCO<2>(alquilo C<1-6>), -NHC(=O)N(alquilo C<1-6>)<2>, -NHC(=O)NH(alquilo C<1-6>), -NHC(=O)NH<2>, -C(=NH)O(alquilo C<1-6>), -OC(=NH)(alquilo C<1-6>), -OC(=NH)Oalquilo C<1-6>, -C(=NH)N(alquilo C<1-6>)<2>, -C(=NH)NH(alquilo C<1-6>), -C(=NH)NH<2>, -OC(=NH)N(alquilo C<1-6>)<2>, -OC(=NH)NH(alquilo C<1-6>), -OC(=NH)NH<2>, -NHC(=NH)N(alquilo C<1-6>)<2>, -NHC(=NH)NH<2>, -NHSO<2>(alquilo C<1-6>), -SO<2>N(alquilo C<1-6>)<2>, -SO<2>NH(alquilo

C<1-6>), -SO<2>NH<2>, -SO<2>(alquilo C<1-6>), -SO<2>O(alquilo C<1-6>), -OSO<2>(alquilo C<1-6>), -SO(alquilo C<1-6>), -Si(alquilo C1-6)3, -OSi(alquilo C1-6)3 -C(=S)N(alquilo C<1-6>)<2>, C(=S)NH(alquilo C<1-6>), C(=S)NH<2>, -C(=O)S(alquilo C<1-6>), -C(=S)Salquilo C<1-6>, -SC(=S)Salquilo C<1-6>, -P(=O)(Oalquilo C<1-6>)<2>, -P(=O)(alquilo C<1-6>)<2>, -OP(=O)(alquilo C<1-6>)<2>, -OP(=O)(Oalquilo C<1-6>)<2>, alquilo C<1-6>, perhaloalquilo C<1-6>, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, heteroalquilo C<1-6>, heteroalquenilo C<2-6>, C<2-6>carbociclilo C<3-10>, arilo C<6-10>, heterociclilo de 3-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros; o dos hidrógenos gemínales pueden unirse para formar =O o =S; en donde X- es un contraión.

El término "halo" o "halógeno" se refiere a flúor (fluoro, -F), cloro (cloro, -Cl), bromo (bromo, -Br), o yodo (yodo, -I).

El término "hidroxilo" o "hidroxi" se refiere al grupo -OH. El término "hidroxilo sustituido" o "hidroxilo sustituido", por extensión, se refiere a un grupo hidroxilo en donde el átomo de oxígeno unido directamente a la molécula parental se sustituye por un grupo distinto de hidrógeno, e incluye grupos seleccionados de -ORaa, -ON(Rbb)<2>, -OC(=O)SRaa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -OC(=O)N(Rbb)2, -OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -OS(=O)Raa, -OSO<2>Raa, -OSi(Raa)<3>, -OP(Rcc)<2>, -OP(Rcc)<3>+X-, -OP(ORcc)<2>, -OP(ORcc)<3>+X-, -OP(=O)(Raa)<2>, -OP(=O)(ORcc)<2>y -OP(=O)(N(Rbb)<2>)<2>, en donde X-, Raa, Rbb y Rcc son como se definió en el presente documento.

El término "amino" se refiere al grupo -NH<2>. El término "amino sustituido", por extensión, se refiere a un amino monosustituido, un amino disustituido o un amino trisustituido. En ciertas realizaciones, el "amino sustituido" es un grupo amino monosustituido o amino disustituido.

El término "amino monosustituido" se refiere a un grupo amino en donde el átomo de nitrógeno unido directamente a la molécula parental se sustituye por un hidrógeno y un grupo distinto de hidrógeno, e incluye grupos seleccionados de -NH(Rbb), -NHC(=O)Raa, -NHCO<2>Raa, -NHC(=O)N(Rbb)<2>, -NHC(=NRbb)N(Rbb)<2>, -NHSO<2>Raa, -NHP(=O)(ORcc)<2>, y -NHP(=O)(N(Rbb)<2>)<2>, en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definió en el presente documento, y en donde Rbb del grupo -NH(Rbb) no es hidrógeno.

El término "amino disustituido" se refiere a un grupo amino en donde el átomo de nitrógeno unido directamente a la molécula parental se sustituye por dos grupos distintos de hidrógeno, e incluye grupos seleccionados de -N(Rbb)<2>, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO<2>Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)<2>, -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)<2>, -NRbbSO<2>Raa, -NRbbP(=O)(ORcc)<2>y NRbbP(=O)(N(Rbb)<2>)<2>, en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definió en el presente documento, con la condición de que el átomo de nitrógeno unido directamente a la molécula parental no esté sustituida por hidrógeno.

El término "amino trisustituido" se refiere a un grupo amino en el que el átomo de nitrógeno unido directamente a la molécula parental se sustituye por tres grupos, e incluye grupos seleccionados de -N(Rbb)3 y -N(Rbb)3+X-, en donde Rbb y X- son como se definió en el presente documento.

El término "sulfonilo" se refiere a un grupo seleccionado de -SO<2>N(Rbb)<2>, -SO<2>Raa y - SO<2>OR<33>, en donde Raa y Rbb son como se definió en el presente documento.

El término "sulfinilo" se refiere al grupo -S(=O)Raa, en donde Raa es como se definió en el presente documento.

El término "acilo" se refiere a un grupo que tiene la fórmula general -C(=O)RX1, -C(=O)ORX1, -C(=O)-O-C(=O)RX1, -C(=O)SRX1, -C(=O)N(RX1)2, -C(=S)RX1, -C(=S)N(RX1)2, -C(=S)O(RX1), -C(=S)S(RX1), -C(=NRX1)RX1, -C(=NRX1)ORX1, -C(=NRX1)SRX1 y -C(=NRX1)N(RX1)<2>, en donde RX1 es hidrógeno; halógeno; hidroxilo sustituido o no sustituido; tiol sustituido o no sustituido; amino sustituido o no sustituido; acilo sustituido o no sustituido, alifático cíclico o acíclico, sustituido o no sustituido, ramificado o no ramificado; heteroalifático cíclico o acíclico, sustituido o no sustituido, ramificado o no ramificado; alquilo cíclico o acíclico, sustituido o no sustituido, ramificado o no ramificado; alquenilo cíclico o acíclico, sustituido o no sustituido, ramificado o no ramificado; alquinilo sustituido o no sustituido; arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, oxi alifatico, oxi heteroalifatico, alquiloxi, heteroalquiloxi, ariloxi, heteroariloxi, tioxi alifatico, tioxi heteroalifatico, alquiltioxi, heteroalquiltioxi, ariltioxi, heteroariltioxi, mono- or diamino alifático, mono- or di-amino heteroalifático, mono- or di- alquilamino, mono- or di- heteroalquilamino, mono- or di-arilamino o mono- or di-heteroarilamino; o dos grupos RX1 tomados conjuntamente forman un anillo de heterociclo de 5 a 6 miembros. Grupos acilo ejemplares incluyen aldehídos (-CHO), ácidos carboxílicos (-CO<2>H), cetonas, haluros de acilo, ésteres, amidas, imidas, carbonatos, carbamatos y ureas. Los sustituyentes acilo incluyen, entre otros, cualquiera de los sustituyentes descritos en el presente documento que dan como resultado al formación de una fracción estable (por ejemplo alifática, alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalifática, heterocíclica, arilo, heteroarilo, acilo, oxo, imino, tiooxo, ciano, isociano, amino, azido, nitro, hidroxilo, tiol, halo, amino alifático, amino heteroalifático, alquilamino, heteroalquilamino, arilamino, heteroarilamino, alquilarilo, arilalquilo, oxi alifático, oxi heteroalifático, alquiloxi, heteroalquiloxi, ariloxi, heteroariloxi, tioxi alifático, tioxi heteroalifático, alquiltioxi, heteroalquiltioxi, ariltioxi, heteroariltioxi y aciloxi, cada uno de los cuales puede estar sustituido adicionalmente o no).

El término "carbonilo" se refiere a un grupo en donde el carbono unido directamente a la molécula parental presenta hibridación sp2, y está sustituido por un átomo de oxígeno, nitrógeno o azufre, por ejemplo un grupo seleccionado de cetonas (por ejemplo -C(=O)Raa), ácidos carboxílicos (por ejemplo -CO<2>H), aldehídos (-CHO), ésteres (por ejemplo -CO<2>Raa,-C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa), amidas (por ejemplo C(=O)N(Rbb)<2>, -C(=O)NRbbSO<2>Raa, -C(=S)N(Rbb)<2>) e iminas (por ejemplo -C(=NRbb)Raa, - C(=NRbb)ORaa), -C(=NRbb)N(Rbb)<2>), en donde Raa y Rbb son como se definió en el presente documento.

El término "sililo" se refiere al grupo -Si(Raa)3, en donde Raa es como se definió en el presente documento.

El término "oxo" se refiere al grupo =O y el término "tiooxo" se refiere al grupo =S.

Los átomos de nitrógeno pueden estar sustituidos o no estar sustituidos según lo permita la valencia, e incluyen átomos de nitrógeno primarios, secundarios, terciarios y cuaternarios. Sustituyentes de átomo de nitrógeno ejemplares incluyen, entre otros, hidrógeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)<2>, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)<2>, -CO<2>Raa, -SO<2>Raa, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)(ORcc)<2>, -P(=O)(Raa)<2>, -P(=O)(N(Rcc)<2>)<2>, alquilo C<1-10>, perhaloalquilo C<1-10>, alquenilo C<2-10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-10>, carbocíclico C<3-10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rcc unidos a un átomo de N se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rdd, y en donde Raa, Rbb, Rcc y Rdd son como se definió anteriormente.

En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en el átomo de nitrógeno es un grupo protector de nitrógeno (también denominado en el presente documento "grupo protector de amino"). Los grupos protectores de nitrógeno incluyen, entre otros, -OH, -ORaa, -N(Rcc)<2>, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)<2>, -CO<2>Raa, -SO<2>Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)<2>, -SO<2>N(Rcc)<2>, -SO<2>Rcc, -SO<2>ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)<2>, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, alquilo C<1-10>(por ejemplo aralquilo, heteroaralquilo), alquenilo C<2-10>, alquinilo C<2-10>, heteroalquilo C<1-10>, heteroalquenilo C<2-10>, heteroalquinilo C<2-10>, carbociclilo C<3-10>, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C<6-14>, y grupos heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, aralquilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd, y en donde Raa, Rbb, Rcc y Rdd son como se definió en el presente documento. Los grupos protectores de nitrógeno son bien conocidos en la técnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene y P. G. M. Wuts, 3a edición, John Wiley & Sons, 1999.

Por ejemplo, los grupos protectores de nitrógeno, como grupos amida (por ejemplo -C(=O)Raa), incluyen, entre otros, formamida, acetamida, cloroacetamida, tricloroacetamida, trifluoroacetamida, fenilacetamida, 3-fenilpropanamida, picolinamida, 3-piridilcarboxamida, derivados de N-benzoilfenilalanilo, benzamida, p-fenilbenzamida,o-nitofenilacetamida, o-nitrofenoxiacetamida, acetoacetamida, (N'-ditiobenciloxiacilamino)acetamida, 3-(phidroxifenil)propanamida, 3-(o-nitrofenil)propanamida, 2-metil-2-(o-nitrofenoxi)propanamida, 2-metil-2-(o-fenilazofenoxi)propanamida, 4-clorobutanamida, 3-metil-3-nitrobutanamida, o-nitrocinamida, derivados de N-acetilmetionina,o-nitrobenzamida yo-(benzoiloximetil)benzamida.

Los grupos protectores de nitrógeno, como grupos carbamato (por ejemplo -C(=O)ORaa) incluyen, entre otros, carbamato de metilo, carbamato de etilo, carbamato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), carbamato de 9-(2-sulfo)fluorenilmetilo, carbamato de 9-(2,7-dibromo)fluoroenilmetilo, carbamato de 2,7-di-t-butil-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantil)]metilo (DBD-Tmoc), carbamato de 4-metoxifenacilo (Phenoc), carbamato de 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbamato de 2-trimetilsililetilo (Teoc), carbamato 2-feniletilo (hZ), carbamato de 1-(1-adamantil)-1-metiletilo (Adpoc), carbamato de 1,1 -dimetil-2-haloetilo, carbamato de 1,1-dimetil-2,2-dibromoetilo (DB-t-BOC), carbamato de 1,1 -dimetil-2,2,2-tricloroetilo (TCBOC), carbamato de 1 -metil-1 -(4-bifenilil)etilo (Bpoc), carbamato de 1-(3,5-di-t-butilfenil)-1 -metiletilo (t-Bumeoc), carbamato de 2-(2'- y 4'-piridil)etilo (Pyoc), carbamato de 2-(N,N-diciclohexilcarboxamido)etilo, carbamato de t-butilo (BOC o Boc), carbamato de 1-adamantilo (Adoc), carbamato de vinilo (Voc), carbamato de alilo (Alloc), carbamato de 1 -isopropilalilo (Ipaoc), carbamato de cinamilo (Coc), carbamato de 4-nitrocinamilo (Noc), carbamato de 8-quinolilo, carbamato de N-hidroxipiperidinilo, ditiocarbamato de alquilo, carbamato de bencilo (Cbz), carbamato de p-metoxibencilo (Moz), carbamato de p-nitrobencilo, carbamato de pbromobencilo, carbamato de p-clorobencilo, carbamato de 2,4-diclorobencilo, carbamato de 4-metilsulfinilbencilo (Msz), carbamato de 9-antrilmetilo, carbamato de difenilmetilo, carbamato de 2-metiltioetilo, carbamato de 2-metilsulfoniletilo, carbamato de 2-(p-toluenosulfonil)etilo, carbamato de [2-(1,3-ditianil)]metilo (Dmoc), carbamato de 4-metiltiofenil (Mtpc), carbamato de 2,4-dimetiltiofenilo (Bmpc), carbamato de 2-fosfonioetilo (Peoc), carbamato de 2-trifenilfosfonioisopropilo (Ppoc), carbamato de 1,1 -dimetil-2-cianoetilo, carbamato de m-cloro-p-aciloxibencilo, carbamato de p-(dihidroxiboril)bencilo, carbamato de 5-benzoisoxazolilmetilo, carbamato de 2-(trifluorometil)-6-cromonilmetilo (Tcroc), carbamato de m-nitrofenilo, carbamato de 3,5-dimetoxibencilo, carbamato de o-nitrobencilo, carbamato de 3,4-dimetoxi-6-nitrobencilo, carbamato de fenil(o-nitrofenil)metilo, carbamato de t-amilo, tiocarbamato de S-bencilo, carbamato de p-cianobencilo, carbamato de ciclobutilo, carbamato de ciclohexilo, carbamato de ciclopentilo, carbamato de ciclopropilmetilo, carbamato de p-deciloxibencilo, carbamato de 2,2-dimetoxiacilvinilo, carbamato de o-(N,N-dimetilcarboxamido)bencilo, carbamato de 1,1-dimetil-3-(N,N-dimetilcarboxamido)propilo, carbamato de 1,1 -dimetilpropinilo, carbamato de di(2-piridil)metilo, carbamato de 2-furanilmetilo, carbamato de 2-yodoetilo, carbamato de isobornilo, carbamato de isobutilo, carbamato de isonicotinilo, carbamato de p-(p'-metoxifenilazo)bencilo, carbamato de 1 -metilciclobutilo, carbamato de 1-metilciclohexilo, carbamato de 1 -metil-1 -ciclopropilmetilo, carbamato de 1 -metil-1 -(3,5-dimetoxifenil)etilo, carbamato de 1 -metil-1 -(p-fenilazofenil)etilo, carbamato de 1 -metil-1 -feniletilo, carbamato de 1 -metil-1 -(4-piridil)etilo, carbamato de fenilo, carbamato de p-(fenilazo)bencilo, carbamato de 2,4,6-tri-t-butilfenilo, carbamato de 4-(trimetilamonio)bencilo y carbamato de 2,4,6-trimetilbencilo.

Los grupos protectores de nitrógeno, como grupos sulfonamida (por ejemplo -S(=O)<2>Raa), incluyen, entre otros, ptoluenosulfonamida (Ts), bencenosulfonamida, 2,3,6-trimetil-4-metoxibencenosulfonamida (Mtr), 2,4,6-trimetoxibencenosulfonamida (Mtb), 2,6-dimetil-4-metoxibencenosulfonamida (Pme), 2,3,5,6-tetrametil-4-metoxibencenosulfonamida (Mte), 4-metoxibencenosulfonamida (Mbs), 2,4,6-trimetilbencenosulfonamida (Mts), 2,6-dimetoxi-4-metilbencenosulfonamida (iMds), 2,2,5,7,8-pentametilcromano-6-sulfonamida (Pmc), metanosulfonamida (Ms), p-trimetilsililetanosulfonamida (SES), 9-antracenosulfonamida, 4-(4',8'-dimetoxinaftilmetil)bencenosulfonamida (DNMBS), bencilsulfonamida, trifluorometilsulfonamida y fenacilsulfonamida.

Otros grupos protectores de nitrógeno incluyen, entre otros, derivados de fenotiazinil-(10)-acilo, derivados de N'-ptoluenosulfonilaminoacilo, derivados de N'-fenilaminotioacilo, derivados de N-benzoilfenilalanilo, derivados de N-acetilmetionina, 4,5-difenil-3-oxazolin-2-ona, N-ftalimida, N-ditiasuccinimida (Dts), N-2,3-difenilmaleimida, N-2,5-dimetilpirrol, aducto de N-1,1,4,4-tetrametildisililazaciclopentano (STABASE), 1,3-dimetil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona 5-sustituida, 1,3-dibencil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona 5-sustituida, 3,5-dinitro-4-piridona 1 -sustituida, N-metilamina, N-alilamina, N-[2-(trimetilsilil)etoxi]metilamina (SEM), N-3-acetoxipropilamina, N-(1-isopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirrolin-3-il)amina, sales de amonio cuaternarias, N-bencilamina, N-di(4-metoxifenil)metilamina, N-5-dibenzosuberilamina, N-trifenilmetilamina (Tr), N-[(4-metoxifenil)difenilmetil]amina (MMTr), N-9-fenilfluorenilamina (PhF), N-2,7-dicloro-9-fluorenilmetilenamina, N-ferrocenilmetilamina (Fcm), N'-oxido de N-2-picolilamina, N-1,1-dimetiltiometilenamina, N-bencilidenamina, N-p-metoxibencilidenamina, N-difenilmetilenamina, N-[(2-piridil)mesitil]metilenamina, N-(N',N'-dimetilaminometilen)amina, N,N'-isopropilidendiamina, N-p-nitrobencilidenamina, N-salicilidenamina, N-5-clorosalicilidenamina, N-(5-cloro-2-hidroxifenil)fenilmetilenamina, N-ciclohexilidenamina, N-(5,5-dimetil-3-oxo-1 -ciclohexenil)amina, derivados de N-borano, derivados de ácido N-difenilbórico, N-[fenil(pentaacilcromo- o tungsteno)acil]amina, quelatos de N-cobre, quelatos de N-zinc, N-nitroamina, N-nitrosoamina, N-oxido de amina, difenilfosfinamida (Dpp), dimetiltiofosfinamida (Mpt), difeniltiofosfinamida (Ppt), fosfoamidato de dialquilo, fosfoamidato de dibencilo, fosfoamidato de difenilo, bencenosulfenamida, o-nitrobencenosulfenamida (Nps), 2,4-dinitrobencenosulfenamida, pentaclorobencenosulfenamida, 2-nitro-4-metoxibencenosulfenamida, trifenilmetilsulfenamida y 3-nitropiridinsulfenamide (Npys). En ciertas realizaciones, un grupo protector de nitrógeno es bencilo (Bn), ferc-butiloxicarbonilo (BOC), carbobenciloxi (Cbz), 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc), trifluoroacetilo, trifenilmetilo, acetilo (Ac), benzoilo (Bz), p-metoxibencilo (PMB), 3,4-dimetoxibencilo (DMPM), p-metoxifenilo (PMP), 2,2,2-tricloroetilcarbonilo (Troc), trifenilmetilo (Tr), tosilo (Ts), brosilo (Bs), nosilo (Ns), mesilo (Ms), triflilo (Tf) o dansilo (Ds).

En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en un átomo de nitrógeno es un grupo protector de oxígeno (también denominado en el presente documento "grupo protector de hidroxilo"). Los grupos protectores de oxígeno incluyen, entre otros, -Raa, -N(Rbb)<2>, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO<2>Raa, -C(=O)N(Rbb)<2>, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3+X-, -P(ORcc)2, -P(ORcc)3+X-, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(OR<cc)2>y -P(=O)(N(Rbb)<2>)<2>, en donde X-, Raa, Rbb y Rcc son como se describió en el presente documento. Los grupos protectores de oxígeno son bien conocidos en la técnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, T W. Greene y P. G. M. Wuts, 3a edición, John Wiley & Sons, 1999.

Los grupos protectores de oxígeno ejemplares incluyen, entre otros, metilo, metoxilmetilo (MOM), metiltiometilo (MTM), f-butiltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo (SMOM), benciloximetilo (BOM), p-metoxibenciloximetilo (PMBM), (4-metoxifenoxi)metilo (p-AOM), guaiacolmetilo (GUM), t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo (POM), siloximetilo, 2-metoxietoximetilo (MEM), 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo (THP), 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo (MTHP), 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo S,S-dióxido, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-ilo (CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-cloroetoxi)etilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1 -metil-1 -benciloxietilo, 1-metil-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)etilo, f-butilo, alilo, pclorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencilo (Bn), p-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, pnitrobencilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, p-fenilbencilo, 2-picolilo, 4-picolilo, N-óxido de 3-metil-2-picolilo, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzohidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, pmetoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-bromofenaciloxifenil)difenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, 4,4',4"-tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1 -il)bis(4',4"-dimetoxifenil)metilo, 1,1-bis(4-metoxifenil)-1 '-pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-(9-fenil-10-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, S,S-dióxido de benzisotiazolilo, trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), triisopropilsililo (TIPS), dimetilisopropilsililo (IPDMS), dietilisopropilsililo (DEIPS), dimetilthexilsililo, f-butildimetilsililo (TBDMS), f-butildifenilsililo (t Bd Ps ), tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo (DPMS), fbutilmetoxifenilsililo (TBMPS), formato, formato de benzoilo, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-(etilenditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, benzoato de p-fenilo, benzoato de 2,4,6-trimetilo (mesitoato), carbonato de metilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), carbonato de etilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbonato de 2-(trimetilsilil)etilo (TMSEC), carbonato de 2-(fenilsulfonil)etilo(Psec), carbonato de 2-(trifenilfosfonio)etilo (Peoc), carbonato de isobutilo, carbonato de vinilo, carbonato de alilo, carbonato de t-butilo(BOC o Boc), carbonato dep-nitrofenilo, carbonato de bencilo, carbonato de p-metoxibencilo, carbonato de 3,4-dimetoxibencilo, carbonato de onitrobencilo, carbonato de p-nitrobencilo, tiocarbonato de S-bencilo, carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonato de metilo, 2-yodobenzoato, 4-azidobutirato, pentanoato de 4-nitro-4-metilo, benzoato de o-(dibromometilo) 2-formilbencenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-(metiltiometoxi)butirato, benzoato de 2-(metiltiometoximetilo), fenoxiacetato de 2,6-dicloro-4-metilo, fenoxiacetato de 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutilo), fenoxiacetato de 2,4-bis(1,1 -dimetilpropilo), acetato de clorodifenilo, isobutirato, monosuccinato, (E)-2-metil-2-butenoato, benzoato deo-(metoxiacilo) a-naftoato, nitrato, N,N,N',N'-tetrametilfosforodiamidato de alquilo, N-fenilcarbamato de alquilo, borato, dimetilfosfinotioilo, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquilo, sulfato, metanosulfonato (mesilato), sulfonato de bencilo y tosilato (Ts). En ciertas realizaciones, un grupo protector de oxígeno es sililo. En ciertas realizaciones, un grupo protector de oxígeno es t-butildifenilsililo (TBDPS), t-butildimetilsililo (TBDMS), triisopropilsililo (TIPS), trifenilsililo (TPS), trietilsililo (TES), trimetilsililo (TMS), triisopropilsiloximetilo (TOM), acetilo (Ac), benzoilo (Bz), carbonato de alilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbonato de 2-trimetilsililetilo, metoximetilo (MOM), 1-etoxietilo (EE), 2-metioxi-2-propilo (MOP), 2,2,2-tricloroetoxietilo, 2-metoxietoximetilo (Me M), 2-trimetilsililetoximetilo (SEM), metiltiometilo (MTM), tetrahidropiranilo (THP), tetrahidrofuranilo (THF), p-metoxifenilo (PMP), trifenilmetilo (Tr), metoxitritilo (MMT), dimetoxitritilo (DMT), alilo, p-metoxibencilo (PMB), f-butilo, bencilo (Bn), alilo, o pivaloilo (Piv).

En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en un átomo de azufre es un grupo protector de azufre (también denominado en el presente documento "grupo protector tiol"). Los grupos protectores de azufre incluyen, entre otros, -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO<2>Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)<2>, -P(Rcc)a+X-, -P(ORcc)<2>, -P(ORcc)3+X-, -P(=O)(Raa)<2>, -P(=O)(OR<cc)2>y -P(=O)(N(Rbb)<2>)<2>, en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definió en el presente documento. Los grupos protectores de azufre son bien conocidos en la técnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene y P. G. M. Wuts, 3a edición, John Wiley & Sons, 1999. En ciertas realizaciones, un grupo protector de azufre es acetamidometilo, t-Bu, 3-nitro-2-piridinsulfenilo, 2-piridinsulfenilo o trifenilmetilo.

Un "contraión" o ''contraión aniónico" es un grupo cargado negativamente asociado a un grupo cargado positivamente con el fin de mantener la neutralidad electrónica. Un contraión aniónico puede se monovalente (es decir, incluir una carga negativa formal). Un contraión aniónico también puede ser multivalente (es decir, incluir más de una carga negativa formal), como divalente o trivalente. Contraiones ejemplares incluyen iones haluro (por ejemplo F-, Cl-, Br-, I-), NÜ3', CÍO4', OH-, H<2>PO<4>', HCO<3>', HSÜ4', iones sulfonato (por ejemplo metanosulfonato, trifluorometanosulfonato, p-toluenosulfonato, bencenosulfonato, 10-canfosulfonato, naftaleno-2-sulfonato, ácido naftaleno-1-sulfónico-5-sulfonato y ácido etano-1-sulfónico-2-sulfonato), iones carboxilato (por ejemplo acetato, propanoato, benzoato, glicerato, lactato, tartato, glicolato y gluconato), BF<4>-, PF<4>-, PF6-, AsF6-, SbF6-, B[3,5-(CF3)2C6H3]4]-, B(C6Fs)4-, BPh4-, Al(OC(CF3)3)4- y aniones carborano (por ejemplo CB<11>H<12>- o (HCBuMesB^)-). Contraiones ejemplares, que pueden ser multivalentes, incluyen CO<3>2-, HPO<4>2-, PO<4>3-, B<4>O<7>2-, SO<4>2-, S<2>O<3>2-, aniones carboxilato (por ejemplo tartrato, citrato, fumarato, maleato, malato, malonato, gluconato, succinato, glutarato, adipato, pimelato, suberato, azelato, sebacato, salicilato, ftalatos, aspartato y glutamato) y carboranos.

Tal como se utiliza en el presente documento, el uso de la frase "al menos un ejemplo" se refiere a 1, 2, 3, 4 o más ejemplos, pero también abarca un intervalo, por ejemplo, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2, de 2 a 4, de 2 a 3, o de 3 a 4 ejemplos, inclusive.

Otras definiciones

Tal como se utiliza en el presente documento, el término "sal" se refiere a todas y cada una de las sales y abarca sales farmacéuticamente aceptables. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que, dentro del alcance de un buen juicio médico, son adecuadas para uso en contacto con los tejidos de humanos y animales inferiores sin toxicidad, irritación ni respuesta alérgica indebida, y son proporcionales a una relación beneficio/riesgo adecuada. Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, Berge et al. describen en detalle sales farmacéuticamente aceptables en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen aquellas derivadas de ácidos y bases inorgánicos y orgánicos adecuados. Son ejemplos de sales de adición de ácido no tóxicas farmacéuticamente aceptables las sales de un grupo amino formadas con ácidos inorgánicos, como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido perclórico, o con ácidos orgánicos, como ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido malónico, o mediante uso de otros métodos conocidos en la técnica, como intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canfosulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidroyoduro, 2-hidroxi-etanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, propionato de 3-fenilo, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato, undecanoato y valerato. Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metales alcalinos, de metales alcalinotérreos, de amonio y de N+(alquilo C<1>-<4>K. Las sales de metales alcalinos o alcalinotérreos representativas incluyen sodio, litio, potasio, calcio y magnesio. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen, cuando corresponda, amonio no tóxico, amonio cuaternario y cationes de amina formados utilizando contraiones como haluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquilo inferior y sulfonato de arilo. Los compuestos descritos en el presente documento se proporcionan también, y pueden administrarse, como base libre.

También debe entenderse que los compuestos que tienen la misma fórmula molecular pero difieren en la naturaleza o la secuencia de enlace de sus átomos o en la disposición de sus átomos en el espacio se denominan "isómeros". Los isómeros que difieren en la disposición de sus átomos en el espacio se denominan "estereoisómeros".

Los términos "composición" y "formulación" se utilizan indistintamente.

Un "sujeto" para el que se contempla la administración se refiere a un humano (es decir, hombre o mujer de cualquier grupo de edad, por ejemplo un sujeto pediátrico (por ejemplo bebé, niño o adolescente) o un sujeto adulto (por ejemplo adulto joven, adulto de mediana edad o adulto mayor)) o un animal no humano. En ciertas realizaciones, el animal no humano es un mamífero (por ejemplo un primate (por ejemplo mono Cynomolgus o mono Rhesus), mamífero comercialmente relevante (por ejemplo bovino, cerdo, caballo, oveja, cabra, gato o perro) o ave (por ejemplo ave comercialmente relevante, como pollo, pato, ganso o pavo)). En ciertas realizaciones, el animal no humano es un pez, un reptil o un anfibio. El animal no humano puede ser macho o hembra en cualquier etapa de desarrollo. El animal no humano puede ser un animal transgénico o un animal modificado genéticamente. El término "paciente" se refiere a un sujeto humano que necesita tratamiento para una enfermedad.

El término "administrar", "administración" o "administración" se refiere a implantar, absorber, ingerir, inhalar o introducir de otro modo un compuesto descrito en el presente documento o una composición del mismo, en o sobre un sujeto.

Los términos "tratamiento", "tratar" y "tratamiento" se refieren a revertir, aliviar, retrasar la aparición o inhibir el progreso de una enfermedad descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, el tratamiento puede administrarse después de que se hayan desarrollado u observado uno o más síntomas de la enfermedad. En otras realizaciones, el tratamiento puede administrarse en ausencia de signos o síntomas de la enfermedad. Por ejemplo, el tratamiento puede administrarse a un sujeto susceptible antes de la aparición de los síntomas. El tratamiento también puede continuarse después de haber resuelto los síntomas, por ejemplo para retrasar o prevenir la recurrencia.

Una "cantidad efectiva" de un compuesto descrito en el presente documento se refiere a una cantidad suficiente para provocar la respuesta biológica deseada. Una cantidad efectiva de un compuesto descrito en el presente documento puede variar dependiendo de factores tales como el punto final biológico deseado, la farmacocinética del compuesto, la afección que se está tratando, el modo de administración y la edad y salud del sujeto. En ciertas realizaciones, una cantidad efectiva es una cantidad terapéuticamente efectiva. Alternativamente, en un método o uso separado, la invención puede utilizarse cuando esté indicada y sea efectiva, como un tratamiento profiláctico. En ciertas realizaciones, una cantidad efectiva es la cantidad de un compuesto descrito en el presente documento en una dosis única. En ciertas realizaciones, una cantidad efectiva es la cantidad combinada de un compuesto descrito en el presente documento en múltiples dosis.

Una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto descrito en el presente documento es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento de una afección o para retrasar o minimizar uno o varios síntomas asociados a la afección. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto significa una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento de la afección. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" puede abarcar una cantidad que mejore la terapia general, reduzca o evite síntomas, signos o causas de la afección y/o potencie la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico. En ciertas realizaciones, una cantidad terapéuticamente efectiva es una cantidad suficiente para el tratamiento de cualquier enfermedad o afección descrita.

Tal como se utiliza en el presente documento, "inhibición", "inhibir", "inhibir" e "inhibidor" se refiere a la capacidad de un compuesto para reducir, ralentizar, detener o prevenir la actividad de un proceso biológico (por ejemplo el crecimiento tumoral). En ciertas realizaciones, la inhibición es de aproximadamente 45 % a 50 %. En ciertas realizaciones, la inhibición es de aproximadamente 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 99,9 % o 100 %.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE CIERTAS REALIZACIONES

La presente invención se describe en detalle a continuación con referencia a realizaciones de la presente invención. La invención proporciona compuestos (por ejemplo compuestos de la Fórmula (I)), y sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos y composiciones farmacéuticas de los mismos. La invención también proporciona un compuesto, una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, y composiciones de los mismos, para uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas (por ejemplo inhibición del crecimiento tumoral y/o tratamiento del cáncer) en un sujeto. El compuesto o la composición puede administrarse como monoterapia o en combinación con otra terapia, como se describió en el presente documento. También se describen métodos de preparación de compuestos de la Fórmula (I) e intermedios sintético útiles para este fin.

RN1 y RN2 son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de nitrógeno, opcionalmente en donde RN1 y RN2 se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido;

RP1 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno;

RX es hidrógeno u -ORXa;

RY es hidrógeno u -ORYa;

n es 1 o 2,

siempre que el compuesto no sea el siguiente:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En ciertas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es de una de las siguientes fórmulas:

o

En ciertas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en:

y sales y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden estar en forma de hidrato, solvato o polimorfo, opcionalmente en un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable. La presente invención también proporciona estereoisómeros de cualquiera de los compuestos descritos en el presente documento. Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden existir como un polimorfo cristalino, y el compuesto de la presente invención puede estar en cualquier forma monocristalina o en una mezcla de dos o más formas cristalinas. Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden estar en una forma amorfa o pueden ser un anhídrido o un solvato, como un hidrato.

También se describen los derivados marcados isotópicamente de los compuestos proporcionados en el presente documento y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. El compuesto marcado isotópicamente es equivalente a compuestos proporcionados en el presente documento, excepto que uno o más átomos son reemplazados por átomos con una masa atómica o un número másico diferente a los que se encuentran normalmente en la naturaleza. Ejemplos de un isótopo que puede incorporarse al compuesto de la presente invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor, yodo, bromo y cloro, como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 18F, 35S, 1231 y 1251.

El compuesto marcado isotópicamente, como un compuesto al que se incorpora un isótopo radioactivo, por ejemplo, de 3H y/o 14C, es útil para un ensayo de distribución tisular para una medicina y/o una matriz. Los isótopos 3H y 14C se consideran útiles, ya que estos isótopos pueden prepararse y detectarse fácilmente. Los isótopos 11C y 18F son útiles en PET (tomografía por emisión de positrones). El isótopo 125I se considera útil en SPECT (tomografía computarizada por emisión de fotón único) y puede ser útil en obtención de imágenes cerebrales. La sustitución por un isótopo más pesado, como 2H, debido a su mayor estabilidad metabólica, ocasiona algunas ventajas en un tratamiento, por ejemplo, la prolongación de la vida útilin vivoo la reducción de una dosis necesaria y, por lo tanto, se considera útil bajo circunstancias dadas. El compuesto marcado isotópicamente se puede preparar de manera similar utilizando un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible en lugar de un reactivo no marcado isotópicamente y realizando los procesos divulgados en los esquemas y/o ejemplos descritos a continuación.

Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden utilizarse como una sonda química para capturar una proteína diana de un compuesto biológicamente activo de bajo peso molecular. Específicamente, el compuesto de la presente invención puede transformarse en una sonda de cromatografía de afinidad o una sonda de fotoafinidad mediante la introducción de un grupo de marcado o un engarce en una fracción que no sea una fracción estructural indispensable para la expresión de la actividad del compuesto mediante un método descrito en J. Mass Spectrum. Soc. Jpn. Vol. 51, N25, 2003, p. 492-498, WO 2007/139149.

Ejemplos del grupo de marcado o el engarce utilizado en tal sonda química incluyen grupos que pertenecen a los siguientes grupos (1) a (5). (1) Grupos de marcado de proteínas, como grupos de marcado de fotoafinidad (como un grupo benzoilo, un grupo benzofenona, un grupo azida, un grupo carbonilazida, un grupo diaziridina, un grupo enona, un grupo diazo y un grupo nitro) y grupos de afinidad química (como un grupo cetona en el que un átomo de carbono alfa es sustituido por un átomo de halógeno, un grupo carbamoilo, un grupo éster, un grupo alquiltio, un aceptor de Michael o una cetona a,p-insaturada o éster, un grupo oxirano);(2)engarces disociables como S-S, O-Si-O, un monosacárido (como un grupo glucosa o un grupo galactosa) y un disacárido (como lactosa) y engarces oligopeptídicos que pueden disociarse mediante una reacción enzimática; (3) grupos de etiquetado de pesca como biotina y un grupo 3-(4, 4-difluoro-5,7-dimetil-4H-3a,4a-diaza-4-bora-s-indaceno-3-il)propionilo; (4) grupos de marcado radioactivo como 125I, 32P, 3H y 14C; grupos de marcado fluorescente como fluoresceína, rodamina, dansilo, umbeliferona, 7-nitrofurazanilo y un grupo 3-(4,4-difluoro-5,7-dimetil-4H-3a,4a-diaza-4-bora-s-indaceno-3-il)propionilo; grupos quimioluminiscentes como luciferina y luminol; y marcadores capaces de detectar iones de metales pesados como iones metálicos de lantánidos e iones de radio; y (5) grupos a unirse a un portador de fase sólida como perlas de vidrio, un lecho de vidrio, una placa de mitrolitros, perlas de agarosa, un lecho de agarosa, perlas de poliestireno, un lecho de poliestireno, perlas de nylon y un lecho de nylon.

Una sonda preparada mediante introducción en el compuesto de la presente invención de un grupo de marcado seleccionado de los grupos (1) a (5) descritos anteriormente mediante el método descrito en cualquiera de las bibliografías mencionadas anteriormente puede utilizarse como una sonda química para identificar una proteína marcadora útil para la investigación de una nueva diana de fármaco potencial.

Los ejemplos de una "sal" utilizados en el presente documento incluyen sales con ácidos inorgánicos, sales con ácidos orgánicos y sales con aminoácido acídicos y, en particular, son preferentes sales farmacéuticamente aceptables. Además, una sal del compuesto de la presente invención abarca un anhídrido de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un solvato, como un hidrato, de la sal farmacéuticamente aceptable. Ejemplos preferentes de una sal con un ácido inorgánico incluyen sales con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico, y ejemplos preferentes de una sal con un ácido orgánico incluyen sales con ácido acético, ácido succínico, ácido famárico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido esteárico, ácido benzoico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido bencenosulfónico y ácido p-toluenosulfónico. Ejemplos preferentes de una sal con un aminoácido acídico incluyen sales con ácido aspártico y ácido glutámico.

En el caso de que el compuesto según la presente invención se obtenga como una sal del compuesto o un hidrato del compuesto, la sal y el hidrato pueden convertirse en un cuerpo libre del compuesto mediante un método convencional.

Grupos RN1, RN2, RO, RP1, RP2, RX, RY, n y m

Todas las definiciones proporcionadas a continuación se aplican a todos los compuestos de la Fórmula (I) descritos en el presente documento.

Como se definió generalmente en este documento, RN1 y RN2 son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de nitrógeno, opcionalmente en donde RN1 y RN2 se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN1 es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RN1 es alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN1 es acilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN1 es un grupo protector de nitrógeno. En ciertas realizaciones, RN1 es un grupo protector de éster. En ciertas realizaciones, RN1 es un grupo protector alloc. ''Alloc'' es de las siguiente fórmula:

En ciertas realizaciones, RN2 es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RN2 es alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN2 es acilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN2 es un grupo protector de nitrógeno. En ciertas realizaciones, RN2 es un grupo protector de éster. En ciertas realizaciones, RN2 es un grupo protector alloc.

En ciertas realizaciones, RN1 y RN2 son hidrógeno. En ciertas realizaciones, RN1 es hidrógeno; y RN2 es un grupo protector de nitrógeno. En ciertas realizaciones, RN1 es hidrógeno; y RN2 es alloc. En ciertas realizaciones, RN1 y RN2 se unen con los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RN1 y RN2 se unen con los átomos intermedios para formar heteroarilo opcionalmente sustituido.

Como se define generalmente en el presente documento, RP1 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno. En ciertas realizaciones, RP1 es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RP1 es alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RP1 es acilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RP1 es un grupo protector de oxígeno. En ciertas realizaciones, RP1 es sililo (por ejemplo trialquilsililo). En ciertas realizaciones, RP1 es íerc-butildimetilsililo (TBS o TBDMS).

Como se define generalmente en el presente documento, n es 1 o 2. En ciertas realizaciones, n es 1. En ciertas realizaciones, n es 2.

Como se define generalmente en el presente documento, RX es hidrógeno u -ORXa. En ciertas realizaciones, RX es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RX es -ORXa. En ciertas realizaciones, RX es -OH.

Como se define generalmente en el presente documento, RXa es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno. En ciertas realizaciones, RXa es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RXa es alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RXa es acilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RXa es un grupo protector de oxígeno.

Como se define generalmente en el presente documento, RY es hidrógeno u -ORYa. En ciertas realizaciones, RY es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RY es -ORYa. En ciertas realizaciones, RY es -OH.

Como se define generalmente en el presente documento, RYa es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno. En ciertas realizaciones, RYa es hidrógeno. En ciertas realizaciones, RYa es alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RYa es acilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RYa es un grupo protector de oxígeno.

En ciertas realizaciones, RXa y RYa se unen con los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido (por ejemplo heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido).

En ciertas realizaciones, RX y RY son hidrógeno. En ciertas realizaciones, RX es -ORXa; y RY es -ORYa. En ciertas realizaciones, RX y RY son -OH. En ciertas realizaciones, RX es hidrógeno; y RY es -ORYa. En ciertas realizaciones, RX es hidrógeno; y RY es -OH.

Composiciones farmacéuticas, kits y administración

La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la Fórmula (I) o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable. En ciertas realizaciones, el compuesto descrito en el presente documento o la sal o el estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, se proporciona en una cantidad efectiva en la composición farmacéutica (por ejemplo una cantidad efectiva terapéuticamente).

Las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento pueden prepararse mediante cualquier método conocido en el arte de la farmacología. En general, tales métodos preparatorios incluyen la asociación de un compuesto proporcionado en el presente documento (es decir, el "principio activo") con un portador o excipiente y/o uno o más ingredientes accesorios y entonces, si es necesario y/o deseable, la conformación y/o el envasado del producto en una unidad de dosis única o de dosis múltiple deseada.

Una composición farmacéutica de la invención podría prepararse según el método conocido, como un método descrito en las reglas generales para preparaciones de la Farmacopea Japonesa, 16a edición, la Farmacopea de los Estados Unidos y la Farmacopea Europea, 9a edición. Una composición farmacéutica de la invención podría administrarse a los pacientes de forma apropiada dependiendo de la forma de dosificación.

Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse, envasarse y/o venderse a granel, como una única dosis unitaria y/o como una pluralidad de únicas dosis unitarias. Una "dosis unitaria" es una cantidad discreta de la composición farmacéutica que comprende una cantidad predeterminada de principio activo. La cantidad de principio activo es generalmente igual a la dosificación de principio activo que se administraría a un sujeto y/o una fracción conveniente de tal dosificación, como la mitad o un tercio de tal dosificación.

Las cantidades relativas de principio activo, el excipiente farmacéuticamente aceptable y/o cualquier ingrediente adicional en una composición farmacéutica descrito en el presente documento variarán dependiendo de la identidad, el tamaño y/o la condición del sujeto tratado y dependiendo además de la vía por la cual se debe administrar la composición. La composición puede comprender entre 0,1 % y 100 % (w/w) de principio activo.

Los excipientes farmacéuticamente aceptables utilizados en la fabricación de las composiciones farmacéuticas proporcionadas incluyen diluyentes inertes, agentes dispersantes y/o de granulación, agentes tensioactivos y/o emulsionantes, agentes disgregantes, agentes aglutinantes, conservantes, agentes de tamponaje, agentes lubricantes y/o aceites. Los excipientes como manteca de coco y ceras de supositorios, agentes colorantes, agentes de recubrimiento, edulcorantes, saborizantes y agentes perfumantes, también pueden estar presentes en la composición.

El compuesto proporcionado en el presente documento está formulado típicamente en una forma unitaria de dosificación para facilitar la administración y la uniformidad de dosificación. Sin embargo, se entenderá que el uso diario total de las composiciones descritas en este documento se decidirá por un medico dentro del alcance del buen juicio médico. El nivel específico de dosis terapéuticamente efectiva para cualquier sujeto u organismo en particular dependerá de una variedad de factores, incluyendo la enfermedad que se está tratando y la gravedad del trastorno; la actividad del principio activo específico empleado; la composición específica empleada; la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el sexo y la dieta del sujeto; el momento de la administración, la vía de administración y la tasa de excreción de principio activo empleado; la duración del tratamiento; los fármacos utilizados en combinación o en coincidencia con el principio activo específico empleado; y otros factores bien conocidos en las técnicas médicas.

Los compuestos de la presente invención y las composiciones de los mismos proporcionados en el presente documento pueden administrarse por cualquier vía, incluyendo enteral (por ejemplo roal), parenteral, intravenosa, intramuscular, intraarterial, intramedular, intratecal, subcutánea, intraventricular, transdérmica, rectal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (como mediante polvos, ungüentos, cremas y/o gotas), mucosa, nasal, bucal, sublingual; por instilación intratraqueal, instilación bronquial y/o inhalación; y/o como un spray oral, spray nasal y/o aerosol. Las vías específicamente contempladas son administración oral, administración intravenosa (por ejemplo inyección intravenosa sistémica), administración regional a través de suministro de sangre y/o linfa y/o administración directa en el sitio afectado. En general, la vía de administración más apropiada dependerá de una variedad de factores, incluyendo la naturaleza del agente (por ejemplo su estabilidad en el entorno del tracto gastrointestinal) y/o la condición del sujeto (por ejemplo si el sujeto es capaz de tolerar la administración oral).

La cantidad exacta de un compuesto proporcionado en el presente documento requerida para obtener una cantidad efectiva variará de un sujeto a otro, dependiendo, por ejemplo, de la especie, la edad y la condición general de un sujeto, la gravedad de efectos laterales o trastornos, la identidad del compuesto particular y el modo de administración. Se puede incluir una cantidad efectiva en una dosis única (por ejemplo una dosis oral única) o dosis múltiples (por ejemplo dosis orales múltiples). En ciertas realizaciones, cuando se administran dosis múltiples a un sujeto o se aplican estas a un tejido o una célula, dos dosis cualesquiera de las dosis múltiples incluyen cantidades diferentes o sustancialmente iguales de un compuesto descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, cuando se administran dosis múltiples a un sujeto o se aplican estas a un tejido o una célula, la frecuencia de administración de las dosis múltiples al sujeto o la aplicación de las dosis múltiples al tejido o a la célula pueden ser, en ejemplos no limitantes, tres dosis al día, dos dosis al día, una dosis al día, una dosis cada dos días, una dosis cada tres días, una dosis a la semana, una dosis cada dos semanas, una dosis cada tres semanas o una dosis cada cuatro semanas, o incluso un suministro controlado de dosis lenta durante un periodo de tiempo seleccionado utilizando un dispositivo de suministro de fármacos. En ciertas realizaciones, la frecuencia de administración de las dosis múltiples a sujeto o la aplicación de dosis múltiples al tejido o a la célula es una dosis al día. En ciertas realizaciones, la frecuencia de administración de las dosis múltiples a sujeto o la aplicación de dosis múltiples al tejido o a la célula es dos dosis al día. En ciertas realizaciones, la frecuencia de administración de las dosis múltiples a sujeto o la aplicación de dosis múltiples al tejido o a la célula es tres dosis al día. En ciertas realizaciones, cuando se administran dosis múltiples a un sujeto o se aplican estas a un tejido o una célula, la duración entre la primera dosis y la última dosis de las dosis múltiples es aproximadamente o al menos un día, dos días, cuatro días, una semana, dos semanas, tres semanas, un mes, dos meses, tres meses, cuatro meses, seis meses, nueve meses, un año, dos años, tres años, cuatro años, cinco años, siete años, diez años, quince años, veinte años o la vida del sujeto, del tejido o de la célula. En ciertas realizaciones, la duración entre la primera dosis y la última dosis de las dosis múltiples es aproximadamente o al menos tres meses, seis meses o un año. En ciertas realizaciones, la duración entre la primera dosis y la última dosis de las dosis múltiples es la vida del sujeto, del tejido o de la célula. En ciertas realizaciones, una dosis (por ejemplo una dosis única o cualquier dosis de dosis múltiples) descrita en el presente documento incluye independientemente entre 0,001 mg/kg y 0,01 mg/kg, entre 0,01 mg/kg y 0,1 mg/kg, entre 0,1 mg/kg y 1 mg/kg, incluyendo un compuesto proporcionado en el presente documento. Son ejemplos formas de dosificación con al menos aproximadamente 0,05, 0,1,0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 10, 5, 20, 25 o 50 mg de compuesto activo, o su sal en una forma de dosificación.

En ciertas realizaciones, una dosis (por ejemplo una dosis única o cualquier dosis de dosis múltiples) descrita en el presente documento incluye independientemente entre 1,0 pg/m2 y 1,0 mg/m2, incluyendo un compuesto proporcionado en el presente documento. En ciertas realizaciones, una dosis (por ejemplo una dosis única o cualquier dosis de dosis múltiples) descrita en el presente documento incluye independientemente entre 1,0 pg/m2 y 100,0 pg/m2, entre 1,0 pg/m2 y 50 pg/m2, entre 10 pg/m2 y 50 pg/m2, o entre 10 pg/m2 y 30 pg/m2, inclusive, de un compuesto proporcionado en el presente documento. Son ejemplos formas de dosificación con aproximadamente 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 y 40 pg de un compuesto proporcionado en el presente documento.

En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica aproximadamente una vez cada 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, or 30 días. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica aproximadamente dos veces al mes. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica aproximadamente cada 15 días durante la duración del tratamiento. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica el día 1 y el día 15 de un ciclo de 28 días. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica a aproximadamente 25 pg/m2 aproximadamente el día 1 y aproximadamente el día 15 de un ciclo de 28 días. En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento se dosifica a 25 pg/m2 el día 1 y el día 15 de un ciclo de 28 días. El número de ciclos se decidirá por un médico.

Los intervalos de dosis proporcionados en el presente documento proporcionan una orientación para la administración de las composiciones farmacéuticas proporcionadas a un adulto. La cantidad que debe administrarse, por ejemplo, a un niño o adolescente, puede determinarse por un médico o una persona experta en la materia y puede ser inferior o igual a la administrada a un adulto.

En la divulgación también se incluyen kits (por ejemplo paquetes farmacéuticos). Los kits proporcionados pueden comprender una composición farmacéutica o un compuesto proporcionado en el presente documento y un envase (por ejemplo un vial, una ampolla, un frasco, una jeringa y/o un paquete dispensador u otro recipiente adecuado). En algunas realizaciones, los kits proporcionados también pueden incluir opcionalmente un segundo envase que comprende un excipiente farmacéutico para dilución o suspensión de una composición farmacéutica o un compuesto proporcionado en el presente documento. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica o el compuesto proporcionado en el primer envase y el segundo envase se combinan para formar una forma de dosificación unitaria. Un kit descrito en el presente documento puede incluir uno o más agentes farmacéuticos adicionales, descritos como una composición separada en el presente documento.

Métodos de tratamiento y usos

Como se muestra en el presente documento, los compuestos de la Fórmula (I) tienen efectos significativos de remodelación vascular tumoral y actividad anti-CAF y, por lo tanto, tienen un uso potencial para el tratamiento de enfermedades proliferativas (por ejemplo tratamiento del cáncer y/o la inhibición del crecimiento tumoral).

En el presente documento se proporciona un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa. La presente invención también proporciona un compuesto descrito en el presente documento, una sal y un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa en un sujeto. También se describe el uso de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado marcado isotópicamente del mismo o una composición farmacéutica del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad proliferativa. En el presente documento se describen ejemplos de enfermedades proliferativas.

En el presente documento se proporciona un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo para uso en el tratamiento del cáncer en un sujeto. La presente invención también describe el uso de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado marcado isotópicamente del mismo o una composición farmacéutica del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

En el presente documento se proporciona también un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica para uso en la inhibición del crecimiento tumoral en un sujeto. También se describe el uso de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado marcado isotópicamente del mismo o una composición farmacéutica del mismo para la fabricación de un medicamento para la inhibición del crecimiento tumoral.

Una "enfermedad proliferativa" se refiere a una enfermedad que se produce debido a un crecimiento anómalo o una extensión en la multiplicación de células (Walker, Cambridge Dictionary of Biology, Cambridge University Press: Cambridge, UK, 1990). Una enfermedad proliferativa puede estar asociada a: 1) la proliferación patológica de células normalmente quiescentes; 2) la migración patológica de células desde su ubicación normal (por ejemplo metástasis de células neoplásicas); 3) la expresión patológica de enzimas proteolíticas como las metaloproteinasas de matriz (por ejemplo colagenasas, gelatinasas y elastasas); o 4) la angiogénesis patológica como en la retinopatía proliferativa y la metástasis tumoral. Las enfermedades proliferativas ejemplares incluyen cánceres (es decir, "neoplasias malignas"), neoplasias benignas, angiogénesis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunes.

El término "angiogénesis" se refiere al proceso fisiológico a través del cual se forman nuevos vasos sanguíneos a partir de vasos preexistentes. La angiogénesis es distinta de la vasculogénesis, que es la formaciónde novode células endoteliales a partir de precursores de células mesodérmicas. Los primeros vasos de un embrión en desarrollo se forman a través de la vasculogénesis, tras la cual la angiogénesis es responsable de la mayor parte del crecimiento de vasos sanguíneos durante el desarrollo normal o anormal. La angiogénesis es un proceso vital en el crecimiento y el desarrollo, así como en la cicatrización de heridas y al formación de tejido de granulación. Sin embargo, la angiogénesis también es un paso fundamental en la transición de los tumores de un estado benigno a uno maligno, lo que lleva al uso de inhibidores de angiogénesis en el tratamiento de cáncer. La angiogénesis puede ser estimulada químicamente por proteínas angiogénicas, como los factores de crecimiento (por ejemplo VEGF). La "angiogénesis patológica" se refiere a la angiogénesis anómala (por ejemplo excesiva o insuficiente) que equivale y/o está asociada a una enfermedad.

Los términos "neoplasia" y "tumor" se utilizan indistintamente en el presente documento y se refieren a una masa anómala de tejido en donde el crecimiento de la masa supera y no está coordinado con el crecimiento de un tejido normal. Una neoplasia o un tumor puede ser "benigno" o "maligno" dependiendo de las siguientes características: grado de diferenciación (incluyendo morfología y funcionalidad), tasa de crecimiento, invasión local y metástasis. Una "neoplasia benigna" está generalmente bien diferenciada, tiene un crecimiento característicamente más lento que una neoplasia maligna y permanece localizada en el sitio de origen. Además, una neoplasia benigna no tiene la capacidad de infiltrarse, invadir y metastatizar sitios distantes. Las neoplasias benignas ejemplares incluyen, entre otros, lipomas, condromas, adenomas, acrocordones, angiomas seniles, queratosis seborreicas, lentigos e hiperplasias sebáceas. En algunos casos, ciertos tumores "benignos" pueden dar lugar posteriormente a neoplasias malignas, que pueden resultar de cambios genéticos adicionales en una subpoblación de células neoplásicas del tumor, y estos tumores se denominan "neoplasias premalignas". Una neoplasia maligna ejemplar es un teratoma. Por el contrario, una "neoplasia maligna" está generalmente poco diferenciada (anaplasia) y tiene un crecimiento característicamente rápido acompañado de infiltración, invasión y destrucción progresivas del tejido circundante. Además, una neoplasia maligna tiene generalmente la capacidad de metastatizar a sitios distantes. El término "metástasis", "metastático" o "metastatizar" se refiere a la diseminación o migración de células cancerosas de un tumor primario u original a otro órgano o tejido y, por lo general, es identificable con la presencia de un "tumor secundario" o "masa celular secundaria" del tipo de tejido del tumor primario u original y no del órgano o tejido en el que se encuentra el tumor secundario (metastático).

En ciertas realizaciones, la enfermedad a tratar es cáncer. El término "cáncer" se refiere a una clase de enfermedades caracterizadas por el desarrollo de células anómalas que proliferan sin control y tienen la habilidad de infiltrarse y destruir los tejidos normales del cuerpo.

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN), carcinoma adenoide quístico).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer oral (por ejemplo cáncer de cavidad bucal, cáncer de labios, cáncer de lengua, cáncer de boca, cáncer de faringe, cáncer de hipofaringe (por ejemplo carcinoma hipofaríngeo), cáncer de garganta (por ejemplo cáncer de laringe, cáncer de faringe, cáncer nasofaríngeo, cáncer orofaríngeo), cáncer de glándulas salivales).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de esófago (por ejemplo carcinoma de células escamosas de esófago, adenocarcinoma de esófago, adenocarcinoma de Barret, leimiosarcoma de esófago).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer gastrointestinal (por ejemplo cáncer anal, cáncer colorrectal (por ejemplo cáncer de colon, cáncer de recto, adenocarcinoma colorrectal), cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico (por ejemplo cáncer de estómago (por ejemplo adenocarcinoma de estómago)), tumor de estroma gastrointestinal (GIST), cáncer de duodeno (por ejemplo cáncer de apéndice, carcinoma de duodeno, por ejemplo adenocarcinoma de duodeno), cáncer de intestino delgado, cáncer de colon, cáncer de intestino grueso).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer cardiovascular (por ejemplo tumores cardíacos, angiosarcoma (por ejemplo linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, hemangiosarcoma), endoteliosarcoma (por ejemplo sarcoma de Kaposi, sarcoma hemorrágico idiopático múltiple), mixoma cardíaco, rabdomioma cardíaco).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de pulmón (por ejemplo cáncer de bronquios (por ejemplo carcinoma broncogénico, adenoma bronquial), carcinoma alveolar, mesotelioma, cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC), cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), adenocarcinoma de pulmón, hamartoma condromatoso, adenocarcinoma papilar).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer genitourinario (por ejemplo cáncer de vejiga (por ejemplo carcinoma urotelial), cáncer de uretra, cáncer de riñón (por ejemplo nefroblastoma también conocido como tumor de Wilms, carcinoma de células renales), cáncer testicular (por ejemplo seminoma, carcinoma embrionario testicular), cáncer de células germinales, cáncer de próstata (por ejemplo adenocarcinoma de próstata), cáncer de pene (por ejemplo enfermedad de Paget de pene y escroto)).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer ginecológico (por ejemplo cáncer de mama (por ejemplo adenocarcinoma de mama, carcinoma papilar de mama, cáncer de mama, carcinoma medular de mama, cáncer de mama triple negativo, cáncer de mama HER-2 positivo, cáncer de mama HER-2 negativo), cáncer de endometrio (por ejemplo cáncer uterino (por ejemplo sarcoma uterino, coriocarcinoma), cáncer de endometrio), cáncer cervical (por ejemplo adenocarcinoma cervical), cáncer de ovario (por ejemplo cistoadenocarcinoma, carcinoma embrionario de ovario, adenocarcinoma de ovario), cáncer de células germinales, cáncer de vulva (por ejemplo la enfermedad de Paget de la vulva), cáncer de vagina, cáncer de trompas de Falopio).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer hematopoyético (por ejemplo leucemia (por ejemplo leucemia linfocítica aguda (ALL) (por ejemplo ALL de células B, ALL de célulasT),leucemia mielocítica aguda (AML) (por ejemplo AML de células B, AML de célulasT),leucemia mielocítica crónica (CML) (por ejemplo CML de células B, CML de células 7), leucemia linfocítica crónica (CLL) (por ejemplo CLL de células B, CLL de células T)); linfoma (por ejemplo linfoma de Hodgkin (HL) (por ejemplo HL de células B, HL de células 7)), linfoma no Hodgkin (NHL) (por ejemplo NHL de células B como linfoma difuso de células grandes (DLCL) (por ejemplo linfoma difuso de células B grandes)), linfoma folicular, leucemia linfocítica crónica/linfoma linfocítico pequeño (CLL/SLL), linfoma de células del manto (MCL), linfoma de células B de la zona marginal (por ejemplo linfomas de tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT), linfoma de células B de la zona marginal ganglionar, linfoma de células B de la zona marginal esplénica), linfoma mediastínico primario de células B, linfoma de Burkitt, linfoma linfoplasmocítico (es decir, macroglobulinemia de Waldenstrom), leucemia de células pilosas (HCL), linfoma inmunoblástico de células grandes, linfoma linfoblástico B precursor y linfoma primario del sistema nervioso central (CNS), NHL de células 7, como linfoma linfoblástico T precursor/leucemia, linfoma de células T periféricas (PTCL) (por ejemplo linfoma cutáneo de células 7 (CTCL) (por ejemplo micosis fungoide, síndrome de Sezary)), linfoma angioinmunoblástico de células T, linfoma extraganglionar de células T asesinas naturales, linfoma de células T tipo enteropatía, linfoma de células T similar a paniculitis subcutánea, linfoma anaplásico de células grandes); enfermedad de cadenas pesadas (por ejemplo enfermedad de cadenas alfa, enfermedad de cadenas gamma, enfermedad de cadenas mu); un trastorno mieloproliferativo (MPD) (por ejemplo policitemia vera (PV), trombocitosis esencial (ET), metaplasia mieloide agnogénica (AMM), también conocida como mielofibrosis (MF), mielofibrosis idiopática crónica, leucemia mielocítica crónica (CML), leucemia neutrofílica crónica (CNL), síndrome hiperosinofílico (HES)); mieloma múltiple (MM); neoplasia de células plasmáticas; hipereosinofilia familiar; tumores miofibroblásticos inflamatorios; amiloidosis inmunocítica). En ciertas realizaciones, el cáncer es leucemia. En ciertas realizaciones, el cáncer es leucemia linfoblástica aguda (ALL). En ciertas realizaciones, el cáncer es leucemia linfoblástica aguda (ETP) precursora temprana de células-T (ALL).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de hígado (por ejemplo cáncer hepatocelular (HCC) (por ejemplo carcinoma hepatocelular, hepatoblastoma, adenoma hepatocelular) hepatoma maligno, hemangiomas, cáncer biliar (por ejemplo colangiocarcinoma)).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer musculoesquelético (por ejemplo cáncer de hueso (por ejemplo osteosarcoma, osteoma osteoide, histiocitoma fibroso maligno, sarcoma de Ewing, cordoma, cordoma tumoral maligno de células gigantes, condrosarcoma, osteocondroma, condroma benigno, condroblastoma, condromiofibroma, síndrome mielodisplásico (MDS)), cáncer muscular (por ejemplo rabdomiosarcoma, rabdomioma), cáncer de tejido conectivo, sinovioma).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer del sistema nervioso (por ejemplo cáncer de cerebro (por ejemplo astrocitoma, meduloblastoma, glioma (por ejemplo astrocitoma, oligodendroglioma), gliobastomas, glioblastoma multiforme, meduloblastoma, ependimoma, germinoma (es decir, pinealoma) oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, tumores congénitos, craneofaringioma), cáncer de médula espinal, neurofibroma (por ejemplo neurofibromatosis (NF) tipo 1 o tipo 2, schwannomatosis), neuroblastoma, tumores neuroectodérmicos primitivos (PNT), cáncer de meninge (por ejemplo meningioma, meningiosarcoma, gliomatosis), cáncer de cráneo, cáncer de acústico, ependimoma, hemangioblastoma, cáncer ocular (por ejemplo melanoma intraocular, retinoblastoma). En ciertas realizaciones, la enfermedad a tratar es un cáncer cerebral. En ciertas realizaciones, la enfermedad es xenoantocitoma pleomórfico (PXA). En ciertas realizaciones, la enfermedad es xenoantocitoma pleomórfico infantil (PXA).

En ciertas realizaciones, el cáncer se selecciona de cánceres endocrinos/exocrinos (por ejemplo cáncer de tiroides (por ejemplo carcinoma papilar de tiroides, carcinoma folicular de tiroides; carcinoma medular de tiroides, neoplasia endocrina múltiple tipo 2A, neoplasia endocrina múltiple tipo 2B, cáncer medular de tiroides familiar, feocromocitoma, paraganglioma), cáncer de páncreas (por ejemplo adenocarcinoma de páncreas, neoplasia mucinosa papilar intraductal (IPMN), tumores de células de islotes, adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, vipoma), cáncer de glándulas suprarrenales, cáncer neuroendocrino (por ejemplo tumor neuroendocrino gastroenteropancretático (GEP-NET), tumor carcinoide), carcinoma de glándulas sebáceas, carcinoma de glándulas sudoríparas). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de glándulas sudoríparas (por ejemplo carcinoma de glándulas sudoríparas).

En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de piel (por ejemplo carcinoma de células escamosas (SCC), queratoacantoma (KA), melanoma, carcinoma de células basales (CCB), dermatofibroma).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de tejidos blandos (por ejemplo neoplasias intraepiteliales, carcinomas epiteliales, sarcomas epiteliales, adenocarcinomas, adenomas, fibrosarcomas, fibromas, liposarcomas, lipomas, mixomas, teratomas).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer raro. El término "cáncer raro" se refiere a cánceres que se producen en un número de pacientes relativamente reducido. Los cánceres raros incluyen, entre otros, sarcomas (por ejemplo sarcoma de tejido blando, liposarcoma, sarcoma uterino, leimiosarcoma, mixofibrosarcoma, osteosarcoma, angiosarcoma, sarcoma de Ewing, sarcoma sinovial, rabdomiosarcoma, sarcoma intimal), linfomas malignos, cáncer tímico (por ejemplo timomas), mesotelioma, tumores de estroma gastrointestinal (GIST), cáncer neuroendocrino, cáncer de ojo, tumores cerebrales, tumores óseos de tejidos blandos, cáncer de piel y tumores de células germinales.

En el presente documento se proporcionan ejemplos de enfermedades proliferativas, cánceres y tumores. En ciertas realizaciones de los usos proporcionados en el presente documento, el cáncer es cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, carcinoma adenoide quístico, cáncer oral, cáncer de garganta, cáncer de glándulas salivales, cáncer de lengua). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama (por ejemplo cáncer de mama HER2 positivo, cáncer de mama HER2 negativo, cáncer de mama triple negativo). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer colorrectal (por ejemplo carcinoma de colon). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de esófago (por ejemplo adenocarcinoma de esófago). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer uterino (por ejemplo sarcoma uterino). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un sarcoma (por ejemplo sarcoma uterino, fibrosarcoma, angiosarcoma, sarcoma sinovial, sarcoma de tejidos blandos, sarcoma intimal). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer gástrico. En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de pulmón (por ejemplo cáncer de pulmón de células no pequeñas). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de vejiga (por ejemplo carcinoma urotelial). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de endometrio. En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de duodeno (por ejemplo carcinoma de duodeno, por ejemplo adenocarcinoma de duodeno). En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de glándulas sudoríparas (por ejemplo carcinoma de glándulas sudoríparas). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer raro.

Terapia combinada

Además de la administración en monoterapia, los compuestos proporcionados en el presente documento (por ejemplo compuestos de las Fórmulas (I), pueden administrarse en combinación con otros agentes terapéuticos o u otras modalidades de tratamiento. En ciertas realizaciones, el compuesto se administra en combinación con un agente anticancerígeno. Los "agentes anticancerígenos" abarcan tanto agentes anticancerígenos bioterapéuticos como agentes quimioterapéuticos.

Los agentes anticancerígenos bioterapéuticos ejemplares incluyen, entre otros, interferones, citocinas (por ejemplo factor de necrosis tumoral, interferón a, interferón y), vacunas, factores de crecimiento hematopoyético, seroterapia monoclonal, inmunoestimulantes y/o agentes inmunomodulatorios (por ejemplo IL-1, 2, 4, 6 o 12), factores de crecimiento de células inmunitarias (por ejemplo GM-CSF) y anticuerpos (por ejemplo Herceptin (trastuzumab), T-DM1, AVASTIN (bevacizumab), ERBITUX (cetuximab), Vectibix (panitumumab), Rituxan (rituximab), Bexxar (tositumomab) y otros anticuerpos descritos anteriormente.

Los agentes quimioterapéuticos ejemplares incluyen, entre otros, antiestrógenos (por ejemplo tamoxifeno, raloxifeno y megestrol), agonistas de LHRH (por ejemplo goscrclina y leuprolida), antiandrógenos (por ejemplo flutamida y bicalutamida), terapias fotodinámicas (por ejemplo verteporfina (BPD-MA), ftalocianina, fotosensibilizador Pc4 y demetoxi-hiprocrelina A (2BA-2-DMHA)), mostazas nitrogenadas (por ejemplo ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida, clorambucilo, estramustina y melfalán), nitrosoureas (por ejemplo carmustina (BCNU) y lomustina (CCNU)), sulfonatos de alquilo (por ejemplo busulfán y treosulfán), triazenos (por ejemplo dacarbazina, temozolomida), compuestos que contiene platino (por ejemplo cisplatino, carboplatino, oxaliplatino), alcaloides de la vinca (por ejemplo vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina), taxoides (por ejemplo paclitaxel o un equivalente de paclitaxel como paclitaxel uno a albúmina (Abraxane), paclitaxel unido a ácido docosahexaenoico (DHA-paclitaxel, Taxoprexin), paclitaxel unido a poliglutamato (PG-paclitaxel, paclitaxel poliglumex, CT-2103, XYOTAX), el profármaco activado por tumor (TAP) ANG1005 (Angiopep-2 unido a tres moléculas de paclitaxel), paclitaxel-EC-1 (paclitaxel unido al péptido EC-1 que reconoce erbB2) y paclitaxel conjugado con glucosa, por ejemplo 2'-paclitaxel metil 2-glucopiranosil succinato; docetaxel, taxol), epipodofilinas (por ejemplo etopósido, fosfato de etopósido, tenipósido, topotecán, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecán, irinotecán, crisnatol, mitomicina C), antimetabolitos, inhibidores de DHFR (por ejemplo metotrexato, diclorometotrexato, trimetrexato, edatrexato), inhibidores de IMP deshidrogenasa (por ejemplo ácido micofenólico, tiazofurina, ribavirina y EICAR), inhibidores de ribonucleótido reductasa (por ejemplo hidroxiuerea y deferoxamina), análogos de uracilo (por ejemplo 5-fluorouracilo (5-FU), floxuridina, doxifluridina, ratitrexed, tegafururacilo, capecitabina), análogos de citosina (por ejemplo citarabina (ara C), arabinósido de citosina y fludarabina), análogos de purina (por ejemplo mercaptopurina y tioguanina), análogos de vitamina D3 (por ejemplo EB 1089, CB 1093 y KH 1060), inhibidores de isoprenilación (por ejemplo lovastatina), neurotoxinas dopaminérgicas (por ejemplo ion 1 -metil-4-fenilpiridinio) inhibidores del ciclo celular (por ejemplo estaurosporina), actinomicina (por ejemplo actinomicina D, dactinomicina), bleomicina (por ejemplo bleomicina A2, bleomicina B2, peplomicina), antraciclina (por ejemplo daunorrubicina, doxorrubicina, doxorrubicina liposomal pegilada, idarubicina, epirubicina, pirarubicina, zorubicina, mitoxantrona), inhibidores de NMR (por ejemplo verapamilo), inhibidores de Ca2+ ATPasa (por ejemplo tapsigargina), imatinib, talidomida, lenalidomida, inhibidores de tirosina quinasa (por ejemplo axitinib (AG013736), bosutinib (SKI-606), cediranib (RECENTIN™, AZD2171), dasatinib (SPRYCEL®, BMS-354825), erlotinib (TARCEVA®), gefitinib (IRESSA®), imatinib (Gleevec®, CGP57148B, STI-571), lapatinib (TYKERB®, TYVERB®), lestaurtinib (CEP-701), neratinib (<h>K<i>-272), nilotinib (TASIGNA®), semaxanib (semaxinib, SU5416), sunitinib (<s>U<t>ENT®, SU11248), toceranib (PALLADIA®), vandetanib (ZACTIMA®, ZD6474), vatalanib (PTK787, PTK/ZK), trastuzumab (HERCEPTIN®), bevacizumab (AVASTIN®), rituximab (RITUXAN®), cetuximab (ERBITUX®), panitumumab (VECTIBIX®), ranibizumab (Lucentis®), nilotinib (TASIGNA®), sorafenib (NEXAVAR®), everolimus (AFINITOR®), alemtuzumab (CAMPATH®), gemtuzumab ozogamicin (MYLo TAr G®), temsirolimus (To RiSEL®), ENm D-2076, PCI-32765, AC220, dovitinib lactato (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOK™), SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120 (VARGATEF®), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, tivozanib (<a>V-951 ), OSI-930, MM-121, X<l>-184, XL-647 y XI,228), inhibidores de proteasoma (por ejemplo bortezomib (Velcade)), inhibidores de mTOR (por ejemplo rapamicina, temsirolimus (CCI-779), everolimus (RAD-001), ridaforolimus, AP23573 (Ariad), AZD8055 (AstraZeneca), BEZ235 (Novartis), BGT226 (Novartis), XI,765 (Sanofi Aventis), PF-4691502 (Pfizer), GDC0980 (Genentech), SF1126 (Semafore) and OSI-027 (OSI)), oblimersen, gemcitabina, carminomicina, leucovorina, pemetrexed, ciclofosfamida, dacarbazina, procarbizina, prednisolona, dexametasona, campatecina, plicamicina, asparaginasa, aminopterina, metopterina, porfiromicina, melfalán, leurosidina, leurosina, clorambucilo, trabectedina, procarbazina, discodermolida, carminomicina, aminopterina y hexametil melamina.

En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo se utiliza en combinación con radioterapia (RT). En ciertas realizaciones, el compuesto se administra en combinación con cirugía. En ciertas realizaciones, el compuesto se administra en combinación con una inmunoterapia.

Por ejemplo, un compuesto de la presente invención puede administrarse con otro agente terapéutico, como terapia anti-EGFR, terapia anti-HER2, terapia anti-PD-1, terapia anti-PD-L1 o terapia de irradiación.

En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo se administra en combinación con una terapia anti-EGFR (por ejemplo anticuerpo monoclonal (mAb) anti-EGFR, como cetuximab). Por ejemplo, en el presente documento se proporciona un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo para uso en el tratamiento de carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN), en combinación con una terapia con mAb anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico). En ciertas realizaciones, el mAb anti-EGFR es cetuximab (CTX).

En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo se administra en combinación con una terapia anti-HER2 (por ejemplo anticuerpo monoclonal (mAb) anti-HER2, como trastuzumab). Por ejemplo, en el presente documento se proporciona un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo para uso en el tratamiento de cáncer de mama en un sujeto que lo necesite, en combinación con una terapia con mAb HER2(receptor del factor de crecimiento epidérmico humano). En ciertas realizaciones, el mAb anti- HER2 es trastuzumab.

En ciertas realizaciones, un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo se administra en combinación con una terapia anti-PD-1 o anti-PD-L1 (por ejemplo anticuerpo monoclonal anti-PD-1 o anti-PD-L1 ). Por ejemplo, en el presente documento se proporciona un compuesto o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo para uso en el tratamiento de cáncer colorrectal en un sujeto que lo necesite, en combinación con una terapia anti-PD-1 o anti-PD-L1 (por ejemplo terapia con mAb).

EJEMPLOS

Síntesis de compuestos

Procedimientos y métodos generales

El compuesto según la presente invención puede producirse mediante los métodos descritos en los ejemplos siguientes. Sin embargo, estos ejemplos son solo para fines ilustrativos y el compuesto según la presente invención no se limita de ninguna manera a ejemplos específicos mencionados a continuación.

En los ejemplos, a menos que se indique específicamente lo contrario, el gel de sílice para la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice era Hi-Flash™ (gel de sílice Gel, 30 gm 60 Á o 40 gm 60 Á, Yamazen Corporation), el gel de sílice para la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice NH era gel de sílice Chromatorex NH (Fuji Silysia Chemical LTD). La cromatografía analítica en capa fina (TLC) se realizó con gel de sílice TLC 60 F<254>, grosor de capa 0,25mm (Merck KGaA) o gel de sílice Chromatorex TLC NH F<254>, grosor de capa 0,25mm (Fuji Silysia Chemical LTD). Las placas de TLC se visualizaron mediante tinción con p-anisaldehído, tinción de ácido fosfomolíbdico o tinción de Hanessian.

Todas las reacciones sensibles a humedad se realizaron bajo una atmósfera inerte. Los reactivos y disolventes eran de calidad comercial y se utilizaron tal y como se suministraron, a menos que se indique lo contrario.

Los espectros de NMR se registraron en un espectrómetro JEOL ECZ500R (500 MHz), JEOL ECZ400S (400 MHz), Varian Inova 500 (500 MHz), Varian Mercury 400 (400 MHz) o Bruker Avance (600MHz). Los desplazamientos químicos se presentan en partes por millón (ppm). Para espectros de 1H NMR (CDCl3, C6D6 y/o CD<3>OD), es utilizó el pico de disolvente residual como referencia interna (7,27 ppm en CDCL; 7,16 ppm en C6D6; 3,31 ppm en CD<3>OD).

Los resultados analíticos de espectros de masas (MS) se obtuvieron utilizando un UPLC Waters Acquity equipado con un único detector cuadrupolar (SQ Detector 2) o LTQ Orbitrap XL™ (Thermoscientific).

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) se llevó a cabo con Shimadzu LC-10AD en un detector espectrofotométrico Uv (200 nm, Shimadzu SPD-10A).

Las abreviaturas utilizadas en el presente documento son las siguientes: AIBN: 2,2'-azobis(isobutironitrilo); Alloc: aliloxicarbonilo; 9-BBN: 9-borabiciclo[3.3.1]nonano; Bu<3>SnH: hidruro de butilestaño tri-normal; (+)-CSA: ácido (1S)-(+)-10-canfosulfónico; DMAP: 4-dimetilaminopiridina; DCM: diclorometano; DDQ: 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona; DIBAL: hidruro de diisobutilaluminio; DMF: W,W-dimetilformamida; DMSO: dimetilsulfóxido; Et3N: trietilamina; EtOAc: acetato de etilo; HF-piridina: piridina de fluoruro de hidrógeno; HPLC: cromatografía líquida de alta resolución; IPA: alcohol isopropílico; MeCN: acetonitrilo; MeOH: metanol; MPM: para-metoxibencilo; PPh3: trifenilfosfina; t-BuOH: alcohol íerc-butílico; tBuLi: íerc-butil-litio: TBME: metil íerc-butiléter; TBAF: fluoruro de tetrabutilamonio; TBS: íerc-butildimetilsililo; THF: tetrahidrofurano; TMS: trimetilsililo; Ts: para-toluenosulfonilo.

Los intermedios sintéticos divulgados en el presente documento se proporcionan a modo de referencia.

Esquema A-1: Preparación de Compuesto A -7

A-5A-6

Periodinano

de Dess-Martin

NaHC03

DCM

Ejemplo de referencia 1

(4aR.5aS.6R.8aS.9aR)-2.2-d¡-fefc-but¡l-6-met¡loctah¡drofurof2'.3':5.61p¡ranof3.2-d1M.3.21d¡oxas¡l¡n-7-ol

(4aR, 5 aS, 6R, 8aS,9aR)-2,2-di-íerc-butil-6-metilhexahidrofuro[2',3': 5, 6]pirano[3,2-d][1,3,2]dioxasilin-7(8aH)-ona (A-1 18,5 g, 54,0 mmol), obtenido mediante el método escrito en Organic Letters (2009), 11(2), 409-412 (N° CAS; 1095280-04-8) en tolueno (275 mL) a - 78 °C, se añadió DIBAL (70,2 mL, 70,2 mmol, disolución de tolueno 1,0 m ) durante 30 min. Entonces se agitó la mezcla de reacción a -78 °C. Después de 90 min, se extinguió la reacción con MeOH (4,37 mL) cuidadosamente a -78 °C, entonces se retiró el baño de refrigeración. Se añadió disolución saturada de tartrato de potasio y sodio tetrahidrato (300 mL) a la mezcla de reacción, se continuó agitando durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en un embudo separador, entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (300 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (300 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron bajo presión reducida. El lactol crudo se utilizó para la siguiente reacción sin purificación.

Ejemplo de referencia 2

(4aR.6S.7S.8aR)-6-((S)-but-3-en-2-¡l)-2.2-d¡-terc-but¡lhexah¡drop¡ranof3.2-d1f1.3.21d¡oxas¡l¡n-7-ol (Compuesto A-2)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a la suspensión de bromuro de metiltrifenilfosfonio (73,30 g, 205,2 mmol) en THF (200 mL), se añadió íerc-butóxido de potasio (17,27 g, 153,9 mmol) a -5 °C durante 10 min, y entonces se agitó durante 60 min a -5 °C. La disolución de lactol crudo descrita en el Ejemplo de referencia 1 en THF (40 mL) se transfirió a la mezcla de reacción a -5 °C durante 10 min, entonces se agitó a -5 °C durante 1 h, a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se extinguió con agua helada (400 mL), entonces se diluyó con TBME (400 mL) y entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo TBME (400 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (400 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se suspendió con heptano/EtOAc = 1/1 (100 mL). La suspensión resultante se filtró, se aclaró con heptano/EtOAc = 1/1 (100 mL) para eliminar material derivado de trifenilfosfina. Entonces se concentró el filtrado bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de (400 g, gel de sílice 60, esférico, 40-50 gm, Kanto Chemical) utilizando 0 % a 20 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-2. 16,7 g, 90 % de rendimiento).

1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,03 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,05 (s, 9 H) 1,07 (s, 9 H) 1,75 (dt, J=14,5, 3,0 Hz, 1 H) 2,37 (dt, J=14,5, 2,9 Hz, 1 H) 2,65 - 2,76 (m, 1 H) 3,03 (dd, J=9,8, 1,0 Hz, 1 H) 3,31 (m, 1 H) 3,69 (d, J=15,0 Hz, 1 H) 3,75 - 3,79 (m, 1 H) 4,16 - 4,31 (m, 2 H) 4,41 (t, J=2,9 Hz, 1 H) 4,95 - 5,09 (m, 2 H) 6,02 (ddd, J=17,3, 10,5, 6,3 Hz, 1 H).

Ejemplo de referenc¡a 3

(4aR.6S.7S.8aR)-6-((S)-but-3-en-2-¡l)-2.2-d¡-ferc-but¡l-7-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)hexah¡drop¡ranor3.2-d1f1.3.21d¡oxas¡l¡na (Compuesto A-3)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto A-2: (4aR,6S,7S,8aR)-6-((S)-but-3-en-2-il)-2,2-diferc-butilhexahidropirano[3,2-d][1,3,2]dioxasilin-7-ol (9,85 g, 28,8 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 2 en DCM (150 mL) a 0 °C se añadieron 2,6-lutidina (6,68 mL, 57,5 mmol) y trifluorometanosulfonato de íerc-butildimetilsililo (9,25 mL, 40,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, después a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con dietiléter. La capa orgánica se lavó con 0,5 N HCl, NaHCO3 acuoso sat. y entonces salmuera. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron (pequeña cantidad de SiO<2>) y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 15 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-3. 12,0 g, 91 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,10 (s, 3 H) 0,19 (s, 3 H) 0,91 (s, 9 H) 0,96 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 1,02 (s, 9 H) 1,06 (s, 9 H) 1,73 (dt, J=15,0, 4,0 Hz, 1 H) 2,26 (dt, J=15,0, 2,5 Hz, 1 H) 2,66 - 2,74 (m, 1 H) 2,95 (dd, J=9,5, 2,2 Hz, 1 H) 3,17 (m, 1 H) 3,81 - 3,84 (m, 1 H) 4,12 - 4,22 (m, 2 H) 4,24 (t, J=2,7 Hz, 1 H) 4,93 - 5,06 (m, 2 H) 6,08 (ddd, J=17,3, 10,5, 6,3 Hz, 1 H).

Ejemplo de referenc¡a 4

(2R.3R.5S.6S)-6-((S)-but-3-en-2-¡l)-5-((ferc-but¡ld¡met¡lsM¡l)ox¡)-2-(h¡drox¡metM)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol (Compuesto A-4)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto A-3: (4aR,6S,7S,8aR)-6-((S)-but-3-en-2-il)-2,2-diferc-butil-7-((ferc-butildimetilsilil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3,2]dioxasilina (12 g, 26,3 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 3 en MeCN (120 mL) y DCM (40 mL) a -10 °C se añadió disolución premezclada de HF-piridina (4,0 mL) y piridina (20 mL) en 20 mL de MeCN. La mezcla de reacción se agitó a -10 °C durante 15 min, después a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se extinguió con NaHCOs acuoso sat. a 0 ° y se diluyó con DCM, entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera. La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 15 % a 60 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-4, 8,4 g, rendimiento cuant.).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,13 (s, 3 H) 0,19 (s, 3 H) 0,94 (s, 9 H) 0,96 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,72 (dt, J=14,6, 2,9 Hz, 1 H) 2,15 (dd, J=9,8, 2,4 Hz, 1 H) 2,23 (dt, J=14,6, 2,9 Hz, 1 H) 2,55 - 2,65 (m, 1 H) 3,03 (d, J=9,8 Hz, 1 H) 3,41 - 3,46 (m, 1 H) 3,49 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,62 - 3,72 (m, 2 H) 3,92 (ddd, J=11,7, 8,3, 2,4 Hz, 1 H) 4,02 (t, J=2,7 Hz, 1 H) 5,01 - 5,12 (m, 2 H) 5,93 (ddd, J=17,4, 10,4, 7,3 Hz, 1 H).

Ejemplo de referencia 5

(((2S.3S.5R.6R)-2-((S)-but-3-en-2-¡l)-6-(((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3.5-diiDbis(oxi))bis(ferc-butildimetilsilano) (Compuesto A-5)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a la disolución de Compuesto A-4: (2R,3R,5S,6S)-6-((S)-but-3-en-2-il)-5-((íercbutildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)tetrahidro-2H-piran-3-ol (997 mg, 3,15 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 4 en DCM (10 mL) a 5 °C se añadió 2,6-lutidina (1,83 mL, 15,8 mmol) y trifluorometanosulfonato de terc-butildimetilsililo (2,17 mL, 9,45 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla de reacción se diluyó con dietiléter y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat., entonces se separaron las capas. Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con HCl acuoso 0,5 N, NaHCO3 acuoso sat. y entonces salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 5 % de EtOAc/heptano (que contenía 1% de Et3N) proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-5, 1,69 g, 98 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,02 - 0,08 (m, 15 H) 0,11 (s, 3 H) 0,89 (s, 9 H) 0,90 - 0,92 (m, 18 H) 0,94 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,82 (dt, J=14,9, 4,8 Hz, 1 H) 2,00 (dt, J=14,9, 2,9 Hz, 1 H) 2,62 - 2,72 (m, 1 H) 2,93 (dd, J=9,3, 2,0 Hz, 1 H) 3,27 - 3,34 (m, 1 H) 3,66 - 3,79 (m, 3 H) 3,83 - 3,87 (m, 1 H) 4,91 - 5,07 (m, 2 H) 6,11 (ddd, J=17,3, 10,7, 6,1Hz, 1 H).

Ejemplo de referencia 6

(S)-3-((2S.3 S.5R.6R)-3.5-b¡s((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-6-(((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)butan-1-ol (Compuesto A-6)

A una disolución de compuesto A-5: (((2S,3S,5R,6R)-2-((S)-but-3-en-2-il)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-3,5-diil)bis(oxi))bis(terc-butildimetilsilano) (1,32 g, 2,42 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 5 en THF (10 mL) a 0 °C se añadió 9-BBN (9,69 mL, disolución de THF 0,5 M, 4,84 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h y a temperatura ambiente durante 1,5 h. Se añadieron NaOH acuoso 3,0 M (3 mL, 9,00 mmol) y peróxido de hidrógeno (35 % en agua, 3 mL) a la mezcla de reacción a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, entonces a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se extinguió con Na2SO3 acuoso sat. y entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 20 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-6, 1,36 g, 100 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-o) 5 ppm 0,03 (s, 3 H) 0,05 - 0,08 (m, 12 H) 0,10 (s, 3 H) 0,88 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,89 - 0,93 (m, 27 H) 1,55 - 1,65 (m, 1H) 1,82 (dt, J=15,4, 4,4 Hz, 1 H) 1,87 - 1,96 (m, 1 H) 1,97 - 2,03 (m, 1 H) 2,17 2,26 (m, 1H) 2,67 (dd, J=7,8, 3,9 Hz, 1 H) 2,98 - 3,10 (m, 1 H) 3,34 - 3,40 (m, 1 H) 3,59 - 3,86 (m, 6 H) ESI-MS (m/z): 563,64 [M+H]+, 585,62 [M+Na]+

Ejemplo de referencia 7

(S)-3-((2S,3 S.5R.6R)-3.5-b¡s((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡0ox0-6-(((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡0ox0met¡0tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)butanal (Compuesto A-7)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto A-6: (S)-3-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)butan-1-ol (1100 mg, 1,954 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 6 en DCM (30 mL) a 5 °C se añadieron NaHCOs (41,0 mg, 0,49 mmol) y periodinano de Dess-Martin (1077 mg, 2,54 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente. Después de 3 hr, la mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat. y Na2SO3 acuoso, entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM.. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 25 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto A-7, 950 mg, 87 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,00 (s, 3 H) 0,03 - 0,08 (m, 12 H) 0,11 (s, 3 H) 0,88 (s, 9 H) 0,91 - 0,92 (m, 21H) 1,82 (dt, J=15,0, 4,5 Hz, 1 H) 2,01 (dt, J=15,0, 2,5 Hz, 1 H) 2,28 (ddd, J=16,0, 7,3, 2,4 Hz, 1 H) 2,53 -2,58 (m, 1 H) 2,74 (ddd, J=16,0, 5,5, 2,0 Hz, 1 H) 2,94 (dd, J=9,0, 1,7 Hz, 1 H) 3,29 (td, J=5,9, 2,0 Hz, 1 H) 3,68 (d, J=5,9 Hz, 2 H) 3,75 - 3,82 (m, 1 H) 3,82 - 3,90 (m, 1 H) 9,73 (t, J=2,4 Hz, 1 H).

Sulfonato de (2S.3S)-3-((4-metox¡benc¡0ox¡)-2-met¡l-5-(tr¡met¡ls¡l¡l)pent-4-¡n-1-¡l 4-met¡lbenceno (Compuesto B-2)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a la disolución de Compuesto B-1: (2S,3S)-3-((4-metoxibencil)oxi)-2-metil-5-(trimetilsilil)pent-4-in-1-ol (11,08 g, 36,15 mmol) obtenido mediante el método escrito en el documento WO 9317690 A1/US 5436238 A (N° CAS; 157323-41-6) en DCM (330 mL), se añadieron Et3N (12,6 mL, 90,4 mmol) y cloruro de ptoluenosulfonilo (8,27 g, 43,4 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCOs sat. y salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, entonces se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de (gel de sílice 60, esférico, 40-50 pm, Kanto Chemical) utilizando 0 % a 10 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto B-2, 17,7 g, 93 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,17 (s, 9 H) 1,02 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 2,10 - 2,18 (m, 1 H) 2,44 (s, 3 H) 3,82 (s, 3 H) 3,99 (d, J=6,8 Hz, 1 H) 4,04 - 4,07(m, 2 H) 4,33 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,66 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,3 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,3 Hz, 2 H) 7,33 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,77 (d, J=8,8 Hz, 2 H).

Ejemplo de referencia 9

((3S.4R)-5-vodo-3-((4-metoxibencil)oxi)-4-metilpent-1 -in-1 -¡Otrimetilsilano (Compuesto B-3)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a la disolución de Compuesto B-2: sulfonato de (2S,3S)-3-((4-metoxibenciloxi)oxi)-2-metil-5-(trimetilsilil)pent-4-in-1-il 4-metilbenceno (17,7 g, 38,4 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 8 en DMF (360 mL), se añadió Nal (7,49 g, 50,0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 2 h. Se añadieron 2,0 g más de Nal a la mezcla de reacción. La reacción se agitó durante 1,5 h a 80 °C, entonces se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con dietiléter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de (gel de sílice 60, esférico, 40-50 pm, Kanto Chemical) utilizando 10 % a 20 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto B-3, 14,3 g, 89 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,21 (s, 9 H) 1,10 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,74 - 1,84 (m, 1 H) 3,30 - 3,37 (m, 2 H) 3,82 (s, 3 H) 3,96 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 4,44 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,73 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 6,89 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,30 (d, J=8,8 Hz, 2 H).

Ejemplo de referencia 10

(2S.6S.7S)-2-((2S.3S.5R.6R)-3.5-b¡s((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-6-(((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-7-((4-metox¡benc¡l)ox¡)-6-met¡l-9-(tr¡met¡ls¡l¡l)non-8-¡n-4-ol (Compuesto C-1)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto B-3: ((3S,4R)-5-yodo-3-((4-metoxibencil)oxi)-4-metilpent-1-in-1-il)trimetilsilano (1408 mg, 3,382 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 9 en dietiléter (25 mL) a -78 °C se añadió íerc-butil-litio (1,61M en pentano, 4,11 mL, 6,62 mmol). La mezcla de reacción se agitó a - 78 °C durante 45 min. Compuesto A-7: (S)-3-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((íercbutildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)butanal (825 mg, 1,47 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 7 en 5,0 mL de dietiléter se añadió a la mezcla de reacción a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 60 min. La mezcla de reacción se extinguió con NH<4>CI acuoso sat. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, entonces se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 25 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-1, 1167 mg, 93 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,00 - 0,12 (m, 21 H) 0,15 - 0,24 (m, 6 H) 0,82 - 0,96 (m, 30 H) 1,03 (d, J=6,3 Hz, 3H) 1,38 - 1,55 (m, 1H) 1,68 - 1,99 (m, 4 H) 2,10 - 2,30 (m, 2 H) 2,76 - 2,87 (m, 1 H) 3,15 (d, J=9,75 Hz, 1 H) 3,33 - 3,38 (m, 1 H) 3,56 - 4,02 (m, 9 H) 4,37 - 4,50 (m, 1 H) 4,64 - 4,78 (m, 1 H) 6,83 - 6,88 (m, 2H) 7,23 - 7,35 (m, 2H).

Ejemplo de referencia 11

t¡l)tetrah¡dro-

A una disolución de compuesto C-1: (2S,6S,7S)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((íercbutildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-9-(trimetilsilil)non-8-in-4-ol (1165 mg, 1,37 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 10 in MeOH (20 mL) a 20 °C se añadió K<2>CO<3>(189 mg, 1,37 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se extinguió con NH4Cl acuoso sat., entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 15 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto C-2: (2S,6S,7S)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((íerc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-in-4-ol (1050 mg,<9 8>% de rendimiento). ESI-<m>S (m/z): 801,50 [M+Na]+

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto C-2: (2S,6S,7S)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((íercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-in-4-ol (780 mg, 1,00 mmol) obtenido anteriormente en tolueno (15 mL) a 20 °C se añadieron hidruro de tri-n-butilestaño (2,5 mL, 9,36 mmol) y 2,2'-azobis(isobutironitrilo) (82 mg, 0,50 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 15 min. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 15 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-3. 970 mg, 91 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,02 - 0,13 (m, 18 H) 0,84 - 0,96 (m, 48 H) 1,22 - 1,37 (m, 6 H) 1,47 -1,56 (m, 7 H) 1,72 - 1,90 (m, 3 H) 1,95-2,03 (m, 1 H) 2,11 - 2,28 (m, 2 H) 2,82 - 2,86 (m, 1 H) 3,08 - 3,15 (m, 1 H) 3,33 - 3,40 (m, 1 H) 3,43 - 3,53 (m, 1 H) 3,58 - 3,87 (m, 8 H) 4,25 - 4,31 (m, 1 H) 4,49 - 4,54 (m, 1 H) 5,83 (dd, J=19,3, 7,6Hz, 1 H) 6,05 - 6,13 (m, 1 H) 6,83 - 6,90 (m, 2 H) 7,24 (d, J=8,8 Hz, 2 H).

Ejemplo de referenc¡a 12

(2S.6S.7S.E)-2-((2S.3S.5R.6R)-3.5-b¡s((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-6-(((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-9-vodo-7-((4-metox¡benc¡l)ox¡)-6-met¡lnon-8-en-4-ona (Compuesto C-4)

C-3 C-4

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto C-3: (2S,6S,7S)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-9-(tributilstannil)non-8-en-4-ol (970 mg, 0,91 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 11 en 30 mL de DCM a 5 °C se añadió yodo (242 mg, 0,95 mmol) en DCM (6 mL) hasta mantener el color de yodo. La mezcla de reacción se extinguió con Na2SO3 acuoso sat. y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM.. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 25 % de EtOAc/heptano proporcionó (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3, 5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((tercbutildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ol (768 mg, 93 % de rendimiento).

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ol (768 mg, 0,85 mmol) obtenido anteriormente en DCM (25 mL) a temperatura ambiente se añadió NaHCOs (17,8 mg, 0,21 mmol) y periodinano de Dess-Martin (485 mg, 1,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat. y Na2SO3 acuoso sat. y entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM.. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 20 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-4, 776 mg, rendimiento cuant.).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-a) 5 ppm 0,00 (s, 3 H) 0,03 - 0,07 (m, 12 H) 0,10 (s, 3 H) 0,81 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,84 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,89 (s, 9 H) 0,91 (s, 9 H) 0,92 (s, 9 H) 1,80 (dt, J=15,0, 4,5 Hz, 1 H) 1,99 (dt, J=15,0, 2,5 Hz, 1 H) 2,17 (dd, J=16,6, 10,2 Hz, 1 H) 2,20 - 2,29 (m, 2 H) 2,43 - 2,48 (m, 1 H) 2,54 (d, J=12,7 Hz, 1 H) 2,87 (dd, J=9,0, 1,7 Hz, 1 H) 2,99 (dd, J=16,6, 2,9 Hz, 1 H) 3,27 (td, J=5,8, 2,4 Hz, 1 H) 3,50 - 3,56 (m, 1 H) 3,66 - 3,74 (m, 2H) 3,75 -3,78 (m, 1 H) 3,80 (s, 3 H) 3,81 - 3,85 (m, 1 H) 4,26 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 4,50 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 6,26 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,42 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,3 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,3 Hz, 2 H). ESI-MS (m/z): 927,39 [M+Na]+

Ejemplo de referencia 13

(2S.6S.7S.E)-2-((2S.3S.5R.6R)-3.5-b¡s((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox0-6-(h¡drox¡met¡0tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-9-vodo-7-((4-metox¡benc¡noxn-6-metilnon-8-en-4-ona (Compuesto C-5)

A una disolución de compuesto C-4: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-(((tercbutildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona (600 mg, 0,66 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 12 en THF (5,0 mL), IPA (5,0 mL) y t-BuOH (5,0 mL) a 4 °C se añadió ácido (1S)-(+)-10-canfosulfónico (154 mg, 0,66 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 4 °C durante 20 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat., entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 35 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-5. 500 mg, 95 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-O) 5 ppm 0,01 (s, 3 H) 0,04 (s, 3 H) 0,07 (s, 3 H) 0,11 (s, 3 H) 0,86 - 0,91 (m, 15 H) 0,93 (s, 9 H) 1,83 (dt, J=14,9, 4,8 Hz, 1 H) 1,93 - 2,00 (dt, J=14,9, 4,8 Hz, 1 H) 2,19 - 2,26 (m, 1 H) 2,29 (dd, J=14,9, 5,6 Hz, 1 H) 2,39 (dd, J=16,6, 8,3 Hz, 1 H) 2,44 - 2,66 (m, 4 H) 2,91 (dd, J=9,5, 1,7 Hz, 1 H) 3,36 - 3,41 (m, 1 H) 3,48 (td, J=11,3, 2,7 Hz, 1 H) 3,59 (t, J=7,1 Hz, 1 H) 3,74 - 3,78 (m, 2 H) 3,80 (s, 3 H) 3,85 (m, 1 H) 4,25 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,46 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 6,28 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,43 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,8 Hz, 2 H). ESI-MS (m/z): 813,30 [M+Na]+

Ejemplo de referencia 14

4-metilbencenosulfonato de ((2R.3R.5S.6S)-3.5-b¡s((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-6-((2S.6S.7S.E)-9-vodo-7-((4-metox¡benc¡l)ox¡)-6-met¡l-4-oxonon-8-en-2-¡l)tetrah¡dro-2H-piran-2-¡l)met¡lo (Compuesto C-6)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto C-5: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(hidroximetil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona (500 mg, 0,63 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 13 en DCM (10 mL) a 5 °C se añadieron piridina (2,54 mL, 31,6 mmol), cloruro de p-toluenosulfonilo (723 mg, 3,79 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (77 mg, 0,63 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadió cloruro de p-toluenosulfonilo (150 mg, 0,79 mmol) a la mezcla de reacción a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó entonces a temperatura ambiente durante 8 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat., entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 25 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-6, 560 mg, 94 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-o) 5 ppm 0,01 (s, 3 H) 0,04 (s, 3 H) 0,04 (s, 3 H) 0,08 (s, 3 H) 0,81 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,83 (s, 9 H) 0,86 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,89 (s, 9 H) 1,81 (dt, J=14,9, 4,5 Hz, 1 H) 1,91 - 1,96 (m, 1 H) 2,15 - 2,32 (m, 3 H) 2,36 - 2,42 (m, 1 H) 2,43 (s, 3 H) 2,57 (d, J=12,7 Hz, 1 H) 2,77 (dd, J=16,6, 3,4 Hz, 1 H) 2,87 (dd, J=9,0, 1,7 Hz, 1 H) 3,53 - 3,58 (m, 2 H) 3,70 - 3,75 (m, 1 H) 3,80 - 3,85 (m, 1 H) 3,81 (s, 3 H) 4,06 (dd, J=10,0, 5,0 Hz, 1 H) 4,08 - 4,16 (m, 1 H) 4,28 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,51 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 6,30 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,45 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,88 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,24 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,31 (d, J=8,3 Hz, 2 H) 7,76 (d, J=8,3 Hz, 2 H).

Ejemplo de referenc¡a 15

(2S.6S.7S.E)-2-((2S.3S.5R.6R)-6-(az¡domet¡n-3.5-b¡s((fórc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)oxntetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡n-9-vodo-7-((4-metox¡benc¡nox¡)-6-met¡lnon-8-en-4-ona (Compuesto C-7)

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto C-6: 4-metilbencenosulfonato de ((2R,3R,5S,6S)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (560 mg, 0,59 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 14 en DMSO (5,6 mL) a 20 °C se añadió azida sódica (385 mg, 5,92 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C. Después de 2 h se añadió azida sódica (100 mg, 1,54 mmol) a la mezcla de reacción, entonces se agitó la mezcla de reacción a 85 °C durante 14 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se extinguió con H<2>O, entonces se separaron las capas. Los extractos orgánicos se lavaron sucesivamente con agua y salmuera. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un residuo crudo. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 15 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-7. 298 mg, 62 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,03 (s, 3 H) 0,06 (s, 3 H) 0,07 (s, 3 H) 0,10 (s, 3 H) 0,84 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,85 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,91 (s, 9 H) 0,92 (s, 9 H) 1,86 (dt, J=15,0, 4,7 Hz, 1 H) 1,98 (dt, J=15,0, 2,9 Hz, 1 H) 2,19 - 2,32 (m, 3 H) 2,41 - 2,49 (m, 1 H) 2,58 (d, J=12,7 Hz, 1 H) 2,94 (dd, J=16,6, 2,9 Hz, 1 H) 2,98 (dd, J=8,8, 2,0 Hz, 1 H) 3,02 (dd, J=12,7, 2,9 Hz, 1 H) 3,47 (dt, J=8,8, 2,7 Hz, 1 H) 3,49 - 3,54 (m, 1 H) 3,63 (dd, J=12,7, 8,8 Hz, 1 H) 3,69 - 3,73 (m, 1 H) 3,81 (s, 3H) 3,83 - 3,88 (m, 1 H) 4,26 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 4,50 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 6,26 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,42 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,22 (d, J=8,8 Hz, 2 H).

Ejemplo de referencia 16

Carbamato de (((2R.3R.5S.6S)-3.5-b¡s((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-6-((2S.6S.7S.E)-9-vodo-7-((4-metox¡bencil)ox¡)-6-met¡l-4-oxonon-8-en-2-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo) (Compuesto C-8)

A una disolución de compuesto C-7: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-6-(azidometil)-3,5-bis((íercbutildimetilsilil)oxi)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona (298 mg, 0,37 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 15 en THF (10 mL) y agua (1,0 mL) a 20 °C se añadió trifenilfosfina (1437 mg, 5,478 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 1,5 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar una amina cruda. A una disolución de la amina cruda obtenida anteriormente en THF (10 mL) a 5 °C se añadieron Et3N (0,51 mL, 3,66 mmol) y dicarbonato de dialilo (341 mg, 1,83 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 0 % a 25 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto C-8. 300 mg, 94 % de rendimiento).

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,05 - 0,07 (m, 9 H) 0,11 (s, 3 H) 0,85 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,87 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,90 (s, 9 H) 0,93 (s, 9 H) 1,80 (dt, J=15,0, 4,4 Hz, 1 H) 1,96 (dt, J=15,0, 2,8 Hz, 1 H) 2,16 - 2,29 (m, 2 H) 2,32 - 2,39 (m, 1 H) 2,53 - 2,60 (m, 3 H) 2,86 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 3,04 - 3,11 (m, 1 H) 3,30 - 3,34 (m, 1 H) 3,38 - 3,48 (m, 1 H) 3,58 (t, J=7,1 Hz, 1 H) 3,70 - 3,76 (m, 1 H) 3,80 (s, 3 H) 3,81 - 3,84 (m, 1 H) 4,25 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,46 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,53 - 4,63 (m, 2 H) 5,19 (dd, J=10,7, 1,5 Hz, 1 H) 5,32 (d, J=17,1 Hz, 1 H) 5,47 (d, J=6,8 Hz, 1 H) 5,88 - 5,99 (m, 1 H) 6,28 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,43 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,8 Hz, 2 H). ESI-MS (m/z): 896,34 [M+Na]+

Bajo una atmósfera de nitrógeno (en una caja de manipulación con guantes), a una disolución de Compuesto D-2: (S)-N-(2-(4-isopropil-4,5-dihidrooxazol-2-il)-6-metoxifenil)metanosulfonamida (155 mg, 0,497 mmol) obtenido mediante el método escrito en Organic Letters (2002), 4 (25), 4431-4434 (N° CAS; 546141-34-8) y 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno (107 mg, 0,497 mmol) en MeCN (0,75 mL) se añadió cloruro de cromo (II) (55,5 mg, 0,452 mmol) y entonces se agitó la mezcla resultante en la caja de manipulación con guantes a temperatura ambiente durante 1 h. La disolución verde resultante se añadió a una mezcla del Compuesto C-8: carbamato de alil(((2R,3R,5S,6S)-3,5-bis((íercbutildimetilsilil)oxi)-6-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo) (99,0 mg, 0,113 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 16, Compuesto D-1(80,0 mg, 0,09 mmol) obtenido mediante el método escrito en Journal of the American Chemical Society (1992), 114 (8), 3162-3164 (N° CAS; 157322 23-1), Compuesto D-3: dicloro(2,9-dimetil-1,10-fenantrolina)níquel (0,46 mg, 1,36 pmol) obtenido mediante el método escrito en Journal of the American Chemical Society (2009), 131 (42), 15387 - 15393 (N° CAS; 21361-04-6) y cloruro de litio (3,83 mg, 0,09 mmol). La mezcla de reacción se agitó en la caja de manipulación con guantes a temperatura ambiente durante 60 min. La mezcla de reacción se extrajo entonces de la caja de manipulación con guantes, se diluyó con dietiléter-EtOAc (5,0 mL - 5,0 mL), entonces se añadió Florisil® (1600 mg, 15,94 mmol) (N° CAS; 1343-88-0) a la mezcla. La mezcla se agitó entonces a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se filtró (Celite®), se lavó con EtOAc/heptano = 2/1, el filtrado se concentró entonces bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 3 % a 55 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto D-4-1, 140 mg, 95 % de rendimiento).

Ejemplo de referencia 18

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto D-4-1 (140 mg, 0,09 mmol) descrita en el Ejemplo de referencia 17 en DCM (5,0 mL) a 5 °C se añadieron NaHCOs (28,8 mg, 0,34 mmol) y periodinano de Dess-Martin (72,7 mg, 0,17 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat. y Na2SO3 acuoso y entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 2 % a 60 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto D-5-1, 120 mg, 86 %).

1H RMN (500 MHz, BENCENO-d6) 5 ppm 0,01 - 0,05 (m, 9 H) 0,10 - 0,12 (m, 6 H) 0,15 (s, 3 H) 0,76 (d, J=6,1 Hz, 3 H) 0,96 (s, 9 H) 1,02 (s, 9 H) 1,04 (s, 9 H) 0,95 - 1,10 (m, 7H) 1,20 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,31 - 1,37 (m, 3 H) 1,41 (dd, J=12,8, 4,9 Hz, 1 H) 1,40 - 1,58 (m, 4 H) 1,59 - 1,64 (m, 1 H) 1,69 - 1,89 (m, 3H) 1,90 - 1,99 (m, 2 H) 2,02 - 2,25 (m, 8 H) 2,26 - 2,48 (m, 6 H) 2,49 - 2,70 (m, 6 H) 2,71 - 2,84 (m, 2 H) 3,00 - 3,07 (m, 1 H) 3,12 - 3,30 (m, 4 H) 3,36 (s, 3 H) 3,40 (a.s, 1 H) 3,44 - 3,53 (m, 2 H) 3,65 (dd, J=6,4, 4,0 Hz, 1 H) 3,69 - 3,84 (m, 4H) 3,86 - 4,03 (m, 4H) 4,07 - 4,17 (m, 3 H) 4,27 - 4,29 (m, 1H) 4,27 (d, J=11,0 Hz, 1H) 4,48 - 4,58 (m, 1 H) 4,49 (d, J=11,0 Hz, 1H) 4,65 - 4,70 (m, 2 H) 4,68 (d, J=5,5 Hz, 1H) 4,74 - 4,86 (m, 2H) 4,78 (s, 1H) 4,93 (s, 1 H) 5,05 (d, J=10,4 Hz, 1 H) 5,09 (s a., 1 H) 5,19 (s a., 1 H) 5.30 (dd, J=17,1, 1,2 Hz, 1 H) 5,82 (d, J=8,0 Hz, 1 H) 5,86 - 5,96 (m, 1 H) 6,46 (d, J=15,9 Hz, 1 H) 6,84 - 6,92 (m, 3 H) 7.31 (d, J=8,6 Hz, 2 H).

Se disolvió hidrocloruro de imidazol (155 mg, 1,48 mmol) en DMF (2,9 mL) para proporcionar una disolución de hidrocloruro de imidazol 0,5 M en DMF. Se mezcló 1,0 mL de esta disolución con 1,0 mL de TBAF (1,0 M, disolución de THF) para proporcionar una disolución premezclada de TBAF 0,5 M e hidrocloruro de imidazol 0,25 M en THF-DMF (1:1). Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto D-5-1 (80,0 mg, 0,05 mmol) descrita en el Ejemplo de referencia 18 en DMF (7,0 mL) a 20 °C se añadieron 0,588 mL de disolución premezclada de TBAF (0,5 M) e hidrocloruro de imidazol (0,25 M) en THF-DMF (1: 1) preparada anteriormente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. Se añadieron 1,6 g de CaCO3 y 4,0 g de Dowex® 50WX8 (forma de hidrógeno, malla 200-400, SIGMA-ALDRICH) a la mezcla de reacción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se diluyó entonces con EtOAc, después se filtró (Celite®), se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo crudo. Se añadieron 1000 mg de CaCO3 y 2,25 g de Dowex® 50WX8 a la disolución de EtOAc (6,0 mL) de residuo crudo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h. La mezcla se diluyó entonces con EtOAc, se filtró (Celite®), se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo crudo (63,0 mg). A una disolución de residuo crudo (63,0 mg) obtenido anteriormente en DCM (6,0 mL), t-BuOH (0,6 mL) y tampón fosfato pH 7 (0,6 mL, 1/15 M) a temperatura ambiente se añadió DDQ (111 mg, 0,49 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 45 min. La mezcla de reacción se extinguió con NaHCOs acuoso sat., entonces se diluyó con DCM y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo DCM (3 veces). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice NH utilizando 10 % a 100 % de EtOAc/heptano, entonces 10 % de MeOH/EtOAc, proporcionó el compuesto del título purificado gruesamente (Compuesto D-6-1, 15,0 mg, 27 %).1

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,97 (d, J=7,0 Hz, 3 H) 0,97 (d, J=7,0 Hz, 3 H) 1,00 - 1,02 (m, 1 H) 1,05 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,09 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 1,31 - 1,45 (m, 6H) 1,46 - 1,63 (m, 5H) 1,64 - 1,75 (m, 3 H) 1,80 - 1,86 (m, 2 H) 1,87 - 1,93 (m, 2 H) 1,94 - 2,11 (m, 9H) 2,13 - 2,27 (m, 8H) 2,33 (d, J=2,4 Hz, 2 H) 2,39 (dd, J=13,4, 6,1 Hz, 1 H) 2,44 (dd, J=17,6, 2,0 Hz, 1 H) 2,55 (dd, J=17,6, 9,3 Hz, 1 H) 2,75 - 2,84 (m, 1 H) 2,97 (dd, J=9,3, 2,0 Hz, 1 H) 3,21 (dd, J=6,6, 4,6 Hz, 1 H) 3,32 (m, 1 H) 3,41 - 3,46 (m, 1 H) 3,57 (s a., 1 H) 3,60 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,67 - 3,74 (m, 2 H) 3,78 (s a., 1 H) 3,86 - 3,90 (m, 2 H) 3,97 (d, J=2,4 Hz, 1 H) 4,02 - 4,11 (m, 4 H) 4,17 (dd, J=6,6, 4,6 Hz, 1 H) 4,23 (dd, J=11,5, 2,2 Hz, 1 H) 4,29 (a.s, 1 H) 4,31 (td, J=9,3, 3,9 Hz, 1 H) 4,44 (d, J=10,2 Hz, 1 H) 4,51 (d, J=5,4 Hz, 2 H) 4,59 (t, J=4,9 Hz, 1 H) 4,61 (dd, J=7,3, 4,9 Hz, 1 H) 4,69 (t, J=4,6 Hz, 1 H) 4,80 (s, 1 H) 4,85 - 4,87 (m, 1 H) 5,01 (s, 1 H) 5,05 (s, 1 H) 5,16 (dd, J=10,7, 1,0 Hz, 1 H) 5,28 (dd, J=17,1,2,0 Hz, 1 H) 5,92 (m, 1 H). ESI-MS (m/z): 1172,57 [M+Na]+ Ejemplo de referencia 20

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto D-6-1 (15,0 mg, 0,013 mmol) descrito en el Ejemplo 19, pirrolidina (10,8 pL, 0,13 mmol) en DCM (2,0 mL) a temperatura ambiente se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (7,53 mg, 6,52 pmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice NH utilizando 50 % de EtOAc/heptano, entonces 0 % a 20 % de MeOH/EtOAc proporcionó un producto purificado gruesamente. El producto purificado gruesamente se purificó mediante HPLC para proporcionar el compuesto del título (D-7-1, 7,0 mg, 47 %, tiempo de retención = 13,8 min).

Condiciones de HPLC:

Columna: YMC Pak Pro C18 (20 mm x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal: 8 mL/min

Eluato:

MeCN/agua 25 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 25 % a 60 % (gradiente, 20 min)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,99 (d, J=6,7 Hz, 3 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,04 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,06 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,10 (d, J=6,1 Hz, 3 H) 1,29 - 1,63 (m, 10 H) 1,65 - 1,78 (m, 3 H) 1,79 - 1,89 (m, 2 H) 1,92 - 2,12 (m, 10 H) 1,93 (s, 3 H) 2,13 - 2,36 (m, 9 H) 2,41 (dd, J=13,5, 6,1 Hz, 1 H) 2,45 (dd, J=17,6, 2,2 Hz, 1 H) 2,56 (dd, J=17,6, 9,8 Hz, 1 H) 2,75 - 2,84 (m, 1 H) 2,98 (dd, J=9,8, 1,8 Hz, 1 H) 3,12 (dd, J=12,8, 3,7 Hz, 1 H) 3,22 (dd, J=6,4, 4,6 Hz, 1 H) 3,26 (dd, J=13,2, 7,8 Hz, 1 H) 3,39 (d, J=1,8 Hz, 1 H) 3,61 (d, J=12,8 Hz, 1 H) 3,63 - 3,68 (m, 2 H) 3,68 - 3,76 (m, 2 H) 3,81 - 3,94 (m, 3 H) 4,00 (d, J=2,5 Hz, 1 H) 4,03 - 4,15 (m, 4 H) 4,18 (dd, J=6,4, 4,6 Hz, 1 H) 4,25 (ddd, J=11,0, 4,3, 1,8 Hz, 1 H) 4,27 - 4,36 (m, 2 H) 4,46 (d, J=11,0 Hz, 1 H) 4,57 - 4,65 (m, 2 H) 4,70 (t, J=4,6 Hz, 1 H) 4,81 (d, J=1,2 Hz, 1 H) 5,02 (s a, 1 H) 5,06 (d, J=1,8 Hz, 1 H). ESI-MS (m/z): 1066,96 [M+H]+, 1090,19 [M+Na]+

Compuesto (1) (forma libre de sal del Compuesto D-7-1): 1H RMN (600 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,98 (d, J=7,2 Hz, 3 H) 1,00 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,02 (m, 1 H) 1,05 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,09 (d, J=6,4 Hz, 3 H) 1,28 - 1,45 (m, 5 H) 1,46 1,59 (m, 4 H) 1,57 - 1,63 (m, 1 H) 1,65 - 1,71 (m, 1 H) 1,70 - 1,75 (m, 2 H) 1,79 - 1,86 (m, 2 H) 1,91 (dt, J=14,9, 3,1 Hz, 1 H) 1,94 - 2,11 (m, 8 H) 2,14 - 2,34 (m, 9 H) 2,39 (dd, J=13,2, 6,0 Hz, 1 H) 2,44 (dd, J=17,4, 1,9 Hz, 1 H) 2,56 (dd, J=17,6, 9,6 Hz, 1 H) 2,69 (dd, J=13,2, 4,2 Hz, 1 H) 2,79 (ddq, J=15,9, 7,6, 2,0 Hz, 1 H) 2,92 (dd, J=13,2, 8,3 Hz, 1 H) 2,97 (dd, J=9,6, 1,7 Hz, 1 H) 3,21 (dd, J=6,4, 4,9 Hz, 1 H) 3,29 (m, 1 H) 3,34 (dd, J=8,3, 4,15 Hz, 1 H) 3,58 (s a., 1 H) 3,60 (a.d, J=11,3 Hz, 1 H) 3,68 - 3,73 (m, 2 H) 3,80 (s a., 1 H) 3,84 - 3,90 (m, 2 H) 3,98 (d, J=2,3 Hz, 1 H) 4,03 - 4,13 (m, 4 H) 4,17 (dd, J=6,4, 4,9 Hz, 1 H) 4,24 (ddd, J=11,3, 4,5, 1,5 Hz, 1 H) 4,29 (dd, J=4,0, 1,9 Hz, 1 H) 4,32 (td, J=10,2, 4,2 Hz, 1 H) 4,44 (a. d, J=11,0 Hz, 1 H) 4,59 (t, J=4,5 Hz, 1 H) 4,62 (dd, J=7,4, 4,7 Hz, 1 H) 4,69 (t, J=4,7 Hz, 1 H) 4,80 (s a., 1 H) 4,87 (s, 1 H) 5,00 (s a., 1 H) 5,05 (a.d, J=1,1 Hz, 1 H)

ESI-MS (m/z): 1066,57 [M+H]+ , 1088,55 [M+Na]+

Síntesis de Compuesto (D-6)

El Compuesto A-7 del título se obtuvo a partir del Compuesto A-1: (4aR,5aS,6R,8aS,9aR)-2,2-di-terc-butil-6-metilhexahidrofuro[2',3':5,6]pirano[3,2-d][1,3,2]dioxasilin-7(8aH)-ona preparado mediante el método escrito en Organic Letters (2009), 11(2), 409-412 (N° CAS; 1095280-04-8) como se muestra en elEsquema A.

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) ppm 0,00 (s, 3 H) 0,03 - 0,08 (m, 12 H) 0,11 (s, 3 H) 0,88 (s, 9 H) 0,91 - 0,92 (m, 21 H) 1,82 (dt, J=15,0, 4,5 Hz, 1 H) 2,01 (dt, J=15,0, 2,5 Hz, 1 H) 2,28 (ddd, J=16,0, 7,3, 2,4 Hz, 1 H) 2,53 -2,58 (m, 1 H) 2,74 (ddd, J=16,0, 5,5, 2,0 Hz, 1 H) 2,94 (dd, J=9,0, 1,7 Hz, 1 H) 3,29 (td, J=5,9, 2,0 Hz, 1 H) 3,68 (d, J=5,9 Hz, 2 H) 3,75 - 3,82 (m, 1 H) 3,82 - 3,90 (m, 1 H) 9,73 (t, J=2,4 Hz, 1 H)

Ejemplo de referencia 22

El Compuesto B-3 del título se obtuvo a partir del Compuesto B-1: (2S,3S)-3-((4-metoxibencil)oxi)-2-metil-5-(trimetilsilil)pent-4-in-1 -ol preparado mediante el método descrito en el documento WO 93/17690 A1 /US 5436238 A (N° CAS; 157323-41-6) como se muestra en elEsquema B.

Ejemplo de referencia 23

(2S.6S.7S.E)-2-((2S.3S.5R.6R)-3.5-bis((tei'c-butildimetilsilil)oxi)-6-(((tei'c-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-vodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona (Compuesto C-4)

El Compuesto C-4 del título se obtuvo a partir del Compuesto A-7: (S)-3-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)butanal y el Compuesto B-3: ((3S,4R)-5-yodo-3-((4-metoxibencil)oxi)-4-metilpent-1-in-1-il)trimetilsilano según el procedimiento de preparación del Compuesto C-8, como se muestra en elEsquema C.

1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-a) 5 ppm 0,00 (s, 3 H) 0,03 - 0,07 (m, 12 H) 0,10 (s, 3 H) 0,81 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,84 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,89 (s, 9 H) 0,91 (s, 9 H) 0,92 (s, 9 H) 1,80 (dt, J=15,0, 4,5 Hz, 1 H) 1,99 (dt, J=15,0, 2,5 Hz, 1 H) 2,17 (dd, J=16,6, 10,2 Hz, 1 H) 2,20 - 2,29 (m, 2 H) 2,43 - 2,48 (m, 1 H) 2,54 (d, J=12,7 Hz, 1 H) 2,87 (dd, J=9,0, 1,7 Hz, 1 H) 2,99 (dd, J=16,6, 2,9 Hz, 1 H) 3,27 (td, J=5,8, 2,4 Hz, 1 H) 3,50 - 3,56 (m, 1 H) 3,66 - 3,74 (m, 2H) 3,75 -3,78 (m, 1 H) 3,80 (s, 3 H) 3,81 - 3,85 (m, 1 H) 4,26 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 4,50 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 6,26 (d, J=14,6 Hz, 1 H) 6,42 (dd, J=14,6, 7,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,3 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,3 Hz, 2 H). ESI-MS (m/z): 927,4 [M+Na]+

Bajo una atmósfera de nitrógeno (en una caja de manipulación con guantes), a una disolución de Compuesto D-2: (S)-N-(2-(4-isopropil-4,5-dihidrooxazol-2-il)-6-metoxifenil)metanosulfonamida (29,1 mg, 0,093 mmol) obtenido mediante el método escrito en Organic Letters (2002), 4 (25), 4431-4434 (N° CAS; 546141-34-8) y 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno (20,0 mg, 0,093 mmol) en MeCN (0,3 mL) se añadió cloruro de cromo (II) (10,4 mg, 0,085 mmol) y entonces se agitó la mezcla resultante en la caja de manipulación con guantes a temperatura ambiente durante 1 h. La disolución resultante se añadió a la premezcla de Compuesto C-4: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona (18,4 mg, 0,02 mmol) descrito en el Ejemplo de referencia 23, Compuesto D-1 (15,0 mg, 0,017 mmol) obtenido mediante el método escrito en Journal of the American Chemical Society (1992), 114 (8), 3162-3164 (N° CAS; 157322-23-1) , Compuesto D-3: dicloro(2,9-dimetil-1,10-fenantrolina)níquel (0,09 mg, 0,254 pmol) obtenido mediante el método escrito en Journal of the American Chemical Society (2009), 131(42), 15387-15393 (N° CAS; 21361-04-6) y cloruro de litio (1,0 mg, 0,024 mmol). La mezcla de reacción se agitó en la caja de manipulación con guantes a temperatura ambiente durante 60 min. La mezcla de reacción se extrajo entonces de la caja de manipulación con guantes, se diluyó con dietiléter (0,45 mL), entonces se añadió Florisil® (300 mg, 2,99 mmol) (N° CAS; 1343-88 0) a la mezcla. La mezcla se agitó entonces a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se filtró (Celite®), se lavó con EtOAc/heptano = 1/1, el filtrado se concentró entonces bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 3 % a 45 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto D-4, 25,5 mg, 90 % de rendimiento).

Ejemplo de referencia 25

Compuesto D-5

Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto D-4 (25,0 mg, 0,015 mmol) descrita en el Ejemplo de referencia 24 en DCM (1,5 mL) a 0 °C se añadieron NaHCOs (0,38 mg, 4,51 pmol) y periodinano de Dess-Martin (12,7 mg, 0,03 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Se añadió periodinano de Dess-Martin (4,0 mg, 9,43 pmol) a la mezcla de reacción, entonces se agitó la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extinguió con NaHCO3 acuoso sat. y Na2SO3 acuoso sat. y entonces se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice utilizando 3 % a 40 % de EtOAc/heptano proporcionó el compuesto del título (Compuesto D-5, 20 mg, 80%). 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -0,01 - 0,01 (m, 6 H) 0,03 -0,08 (m, 15 H) 0,10 (s, 3 H) 0,80 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 0,84 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,87 (s, 9 H) 0,88 (s, 9 H) 0,91 (s, 9 H) 0,91 (s, 9 H) 0,94 - 0,98 (m, 1H) 1,04 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,07 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 1,29 - 1,51 (m, 5 H) 1,60 - 1,68 (m, 3 H) 1,68 - 1,77 (m, 2 H) 1,80 (dt, J=14,8, 4,6 Hz, 1 H) 1,86 - 2,03 (m, 7 H) 2,06 - 2,27 (m, 9 H) 2,29 (d, J=2,4 Hz, 2 H) 2,37 (dd,J=16,3, 4,6 Hz, 1 H) 2,41 - 2,50 (m, 1 H) 2,54 (d, J=13,7 Hz, 1 H) 2,64 (dd, J=16,6, 7,3 Hz, 1 H) 2,76 - 2,90 (m, 3 H) 2,91 - 3,04 (m, 3 H) 3,24 - 3,30 (m, 1 H) 3,41 (dd, J=5,6, 4,1 Hz, 1 H) 3,54 - 3,59 (m, 1 H) 3,66 - 3,75 (m, 3 H) 3,75 - 3,78 (m, 1 H) 3,80 (s, 3 H) 3,81 - 3,84 (m, 1 H) 3,86 -3,96 (m, 3 H) 4,03 - 4,09 (m, 2 H) 4,20 (dd, J=6,8, 4,9 Hz, 1 H) 4,24 (d, J= 11,2 Hz, 1 H) 4,33 (s a., 2 H) 4,39 -4,45 (m, 2 H) 4,47 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 4,57 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 4,60 (t, J=4,4 Hz, 1 H) 4,69 (t, J=4,6 Hz, 1 H) 4,75 (s, 1 H) 4,83 (s, 1 H) 5,00 (d, J=13,2 Hz, 2 H) 6,23 (d, J=16,1 Hz, 1 H) 6,66 (dd, J=16,1,6,8 Hz, 1 H) 6,87 (d, J=8,8 Hz, 2 H) 7,21 (d, J=8,8 Hz, 2 H).

Ejemplo de referencia 26

Se coevaporó un mililitro de TBAF (1,0 mmol, disolución de THF 1,0 M) con tolueno (3 x 1 mL). Al residuo se añadió hidrocloruro de imidazol (52 mg, 0,5 mmol) y DMF (2,0 mL) para proporcionar una disolución premezclada de TBAF 0,5 M e hidrocloruro de imidazol 0,25 M en DMF. Bajo una atmósfera de nitrógeno, a una disolución de Compuesto D-5 (20,7 mg, 0,012 mmol) descrita en el Ejemplo de referencia 25 en DMF (0,9 mL) y MeOAc (0,1 mL) a temperatura ambiente se añadieron 0,241 mL de disolución premezclada de TBAF (0,5 M) e hidrocloruro de imidazol (0,25 M) en DMF preparada anteriormente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. A la mezcla de reacción se añadieron 210 mg de CaCO3 y 520 mg de Dowex® 50WX8 (forma de hidrógeno, malla 200-400, SIGMA-ALDRICH). La mezcla se diluyó con EtoAc (0,3 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con EtOAc (3 mL), entonces se filtró a través de Celite®, se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo crudo. Al residuo se añadió EtOAc (3 mL). A la disolución se añadieron 210 mg de CaCO3 y 520 mg de Dowex® 50WX8. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con EtOAc, se filtró a través de Celite®, se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo crudo (16,7 mg). A una disolución de residuo crudo (16,7 mg) obtenido anteriormente en DCM (2,1 mL), t-BuOH (0,21 mL) y tampón fosfato pH7 (0,21 mL, 1/15 M) a temperatura ambiente se añadió DDQ (28,3 mg, 0,125 mmol). La mezcla de reacción se agitó enérgicamente a temperatura ambiente durante 50 min. La mezcla de reacción se vertió en NaHCOs acuoso sat. (8 mL) con agitación enérgica a temperatura ambiente, entonces se diluyó con DCM (10 mL) y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo DCM (2 x 5 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía flash del residuo en gel de sílice NH (FUJI SILYSIA CHEMICAL LTD, gel de sílice Chromatorex® NH) utilizando 0 % a 100 % de EtOAc/heptano, entonces 5 % de MeOH/EtOAc proporcionó el compuesto del título purificado gruesamente (4,9 mg). El producto obtenido se purificó mediante HPLC para proporcionar el compuesto del título (D-6, 2,2 mg, 16,5 %) .Tiempo de retención = 8,7 min)

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 205 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua

Caudal: 4,7 mL/min

Eluato:

MeCN/agua 60 % (iso, 2 min), entonces

M e C N /a g u a 60 % a 99 % (g ra d ie n te , 10 m in), e n to n ce s

M e C N /a g u a 99 % (iso, 11 m in)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,97 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 0,99 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,00 - 1,05 (m, 1 H) 1,05 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,09 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,30 - 1,57 (m, 8 H) 1,57 - 1,62 (m, 1 H) 1,64 - 1,70 (m, 1 H) 1,70 - 1,75 (m, 2 H) 1,78 - 1,86 (m, 2 H) 1,90 (ddd, J=14,8, 3,2, 3,2 Hz, 1 H) 1,94 - 2,12 (m, 9H) 2,13 - 2,25 (m, 4 H) 2,25 - 2,34 (m, 5 H) 2,39 (dd,J=13,2, 5,8 Hz, 1 H) 2,44 (dd, J=17,4, 2,3 Hz, 1 H) 2,55 (dd, J=17,6, 9,7 Hz, 1 H) 2,76 - 2,83 (m, 1 H) 2,97 (dd, J=9,7, 1,9 Hz, 1 H) 3,21 (dd, J=6,6, 4,6 Hz, 1 H) 3,30 (m, 1 H) 3,41 (dd, J=6,1,6,1 Hz, 1 H) 3,60 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,65 (d, J=2,9 Hz, 1 H) 3,65 - 3,68 (m, 2 H) 3,68 - 3,74 (m, 2 H) 3,80 (s a., 1 H) 3,84 - 3,91 (m, 2 H) 3,98 (dd, J=4,7, 2,2 Hz, 1 H) 4,03 - 4,13 (m, 4 H) 4,17 (dd, J=6,6, 4,6 Hz, 1 H) 4,23 (ddd, J=11,6, 4,6, 2,0 Hz, 1 H) 4,28 - 4,30 (m, 1 H) 4,32 (dd, J=10,2, 4,2 Hz, 1 H) 4,44 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,59 (dd, J=4,4, 4,4 Hz, 1 H) 4,61 (dd, J=7,6, 4,8 Hz, 1 H) 4,69 (dd, J=4,6, 4,6 Hz, 1 H) 4,80 (d, J=1,2 Hz, 1 H) 4,86 - 4,87 (m, 1 H) 5,01 (s a., 1 H) 5,06 (d, J=1,5 Hz, 1 H). ESI-MS (m/z): 1089,5 [M+Na]+

Síntesis de Compuesto (E-2)

Ejemplo de referencia 27

El Compuesto E-2 del título se obtuvo a partir del Compuesto E-1: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ol (N° CAS; 157323-29-0) preparado mediante el método descrito en el documento WO 93/17690 A1, y el Compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1) preparado mediante el método descrito en Journal of the American Chemical Society 1992, 114, 3162-3164, utilizando los mismos procedimientos descritos para la preparación de los Compuestos D-4, D-5, and D-6 (Ejemplos de referencia 24, 25 y 26). Tiempo de retención = 14,7 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (4,6 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua

Caudal: 1 ml/min

Eluato:

M e C N /a g u a 40 % a 98 % (g ra d ie n te , 20 m in), e n to n ce s

M e C N /a g u a 98 % (iso, 10 m in)

1H RMN (600 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,96 - 0,98 (m, 6 H) 1,01 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 1,05 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,09 (d, J=6,4 Hz, 3 H) 1,30 - 1,56 (m, 7H) 1,63 - 1,71 (m, 3H) 1,72 (d, J=10,6 Hz, 1 H) 1,79-1,86 (m, 2H) 1,89 - 2,12 (m, 11H) 2,13 - 2,21 (m, 3 H) 2,22 - 2,32 (m, 6H) 2,39 (dd, J=13,2, 6,0 Hz, 1 H) 2,44 (dd, J=17,8, 2,3 Hz, 1 H) 2,55 (dd, J=17,4, 9,4 Hz, 1 H) 2,79 (dd, J=15,7, 5,5 Hz, 1 H) 2,97 (dd, J=9,4, 1,5 Hz, 1 H) 3,21 (dd, J=6,4, 4,9 Hz, 1 H) 3,28 (s a., 2 H) 3,47 (s a., 1 H) 3,51 (dd, J=9,1, 3,8 Hz, 1 H) 3,60 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,66 - 3,70 (m, 1 H) 3,67 - 3,71 (m, 1 H) 3,68 -3,73 (m, 2 H) 3,78 (s a., 1 H) 3,86 (s a., 1 H) 3,86 - 3,90 (m, 1 H) 3,98 (c, J=2,3 Hz, 1 H) 4,03 - 4,08 (m, 1 H) 4,07 -4,10 (m, 1 H) 4,09 - 4,12 (m, 1 H) 4,10 - 4,12 (m, 2 H) 4,17 (dd, J=6,4, 4,9 Hz, 1 H) 4,23 (ddq, J=11,0, 4,2, 1,9 Hz, 1 H) 4,29 (t, J=1,9 Hz, 1 H) 4,32 (td, J=10,6, 4,5 Hz, 1 H) 4,44 (d, J=11,0 Hz, 1 H) 4,59 (t, J=4,3 Hz, 1 H) 4,62 (dd, J=7,4, 4,7 Hz, 1 H) 4,69 (t, J=4,7 Hz, 1 H) 4,84 (s a., 1 H) 4,87 (s a., 1 H) 5,00 (s a., 1 H) 5,05 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z):

1103,6 [M+Na]+

Síntesis de Compuesto (G-4)

El Compuesto G-4 del título se obtuvo como una sal de ácido acético a partir del Compuesto F-1: carbamato de alil-(2-((2R,3R,5S,6S)-3,5-b¡s((terc-but¡ldimet¡ls¡l¡l)ox¡)-6-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metox¡benc¡l)ox¡)-6-met¡l-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)etilo) (preparado mediante el procedimiento descrito en elEsquema F),y el compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1) preparado mediante el método descrito en Journal of the American Chemical Society 1992, 114, 3162-3164, basándose en el procedimiento descrito en elEsquema G.Tiempo de retención = 10,7 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal: 4,0 mL/min

Eluato:

M e C N /a g u a 25 % (iso, 2 m in ), e n to n c e s

M e C N /a g u a 25 % a 60 % (g ra d ie n te , 20 m in), e n to n ce s

M e C N /a g u a 60 % (iso, 1 m in)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,99 (d, J=6,7 Hz, 6 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,06 (d, J=6,7 Hz, 3 H) 1,10 (d, J=6,1 Hz, 3 H) 1,26 - 1,64 (m, 11 H) 1,65 - 2,37 (m, 25 H) 2,40 (dd, J=13,4, 6,1 Hz 1 H) 2,45 (dd, J=17,1, 1,8 Hz, 1 H) 2,56 (dd, J=17,7, 9,2 Hz, 1 H) 2,76 - 2,84 (m, 1 H) 2,98 (dd, J=9,8, 1,8 Hz, 1 H) 3,01 - 3,17 (m, 2 H) 3,22 (dd, J=6,7, 4,9 Hz, 1 H) 3,34 (dd, J=6,1,4,3 Hz, 1 H) 3,48 - 3,53 (m, 2 H) 3,61 (d, J=11,6 Hz 1 H) 3,69 - 3,75 (m, 2 H) 3,82 (s a., 1 H) 3,85 - 3,92 (m, 2 H) 3,99 (s a., 1 H) 4,04 - 4,14 (m, 4 H) 4,18 (dd, J=6,7, 4,2 Hz, 1 H) 4,25 (ddd, J=11,6, 4,9, 1,8 Hz, 1 H) 4,29 - 4,35 (m, 2 H) 4,46 (d, J=11,0 Hz, 1 H) 4,58 - 4,63 (m, 2 H) 4,70 (t, J=7,2, 4,6 Hz, 1 H) 4,81 (s a., 1 H) 5,02 (s a., 1 H) 5,06 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z): 1080,6 [M+H] , 1102,6[M+Na]+.

Síntesis de Compuesto (B-2)

Ejemplo 29

El Compuesto H-2 del título se obtuvo como una sal de ácido acético a partir del Compuesto F-1: carbamato de alil-2-((2R,3R,5S,6S)-3,5-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-6-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)etilo) preparado mediante el método descrito en elEsquema F,y el compuesto H-1 (N° CAS; 1353268-98-0) preparado mediante el método descrito en Journal of the American Chemical Society 2012, 134, 893-896, y basándose en el procedimiento descrito en el EsquemaG.Tiempo de retención = 10,2 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal: 4,0 ml/min

Eluato:

MeCN/agua 20 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 20 % a 80 % (gradiente, 20 min)

1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,99 (d, J=7,0 Hz, 6 H) 1,02 - 1,04 (m, 1 H) 1,06 (d, J=7,0 Hz, 3 H) 1,11 (d, J=6,6 Hz, 3 H) 1,24 - 1,45 (m, 7H) 1,46 - 1,54 (m, 2 H) 1,54 - 1,61 (m, 2H) 1,62 - 1,77 (m, 5 H) 1,78 - 1,89 (m, 4 H) 1,90 - 2,16 (m, 7 H) 2,16 - 2,36 (m, 9 H) 2,39 (dd,J=13,3, 5,9 Hz 2 H) 2,55 (dd,J=19,9, 3,5 Hz, 1 H) 2,75 - 2,85 (m, 1 H) 2,95 (dd, J=9,8, 2,0 Hz, 1 H) 3,01 - 3,17 (m, 2 H) 3,22 (dd, J=6,4, 4,5 Hz, 2 H) 3,46 - 3,53 (m, 2 H) 3,61 (d, J=10,5 Hz 1 H) 3,67 - 3,76 (m, 2 H) 3,80 - 3,84 (m, 1 H) 3,84 - 3,92 (m, 2 H) 3,97 - 4,01 (m, 1 H) 4,03 - 4,14 (m, 3 H) 4,17 (dd, J=4,1, 1,4 Hz, 1 H) 4,21 - 4,27 (m, 1 H) 4,27 - 4,34 (m, 2 H) 4,39 - 4,43 (m, 1 H) 4,44 (d, J=10,6 Hz, 1 H) 4,62 (dd, J=7,2, 4,5 Hz, 1 H) 4,82 (s a., 1 H) 4,88 (s a., 1 H) 5,02 (s a., 1 H) 5,06 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z): 1096,6 [M+H] , 1118,6 [M+Na] .

Síntesis de Compuesto (1- 2)

El Compuesto 1- 2 del título se obtuvo a partir del Compuesto 1- 1: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(2-metoxietil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona obtenido mediante el método escrito en elEsquema I,y el compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1), utilizando los procedimientos descritos para la preparación de los Compuestos D-4, D-5 y D-6 (Ejemplos de referencia 24, 25, and 26).

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,98 (d, J=6,8 Hz, 6 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,06 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,10 (d, J=5,8 Hz, 3 H) 1,29 - 1,63 (m, 11 H) 1,65 - 1,78 (m, 3 H) 1,782,13 (m, 12 H) 2,13 - 2,36 (m, 9 H) 2,39 (dd, J=14,1, 5,4 Hz, 1 H) 2,45 (d, J=17,1 Hz, 1 H) 2,57 (dd, J=17,5, 9,7 Hz, 1 H) 2,76 - 2,84 (m, 1 H) 2,98 (d, J=10,2 Hz, 1 H) 3,19-3,24 (m, 1 H) 3,31-3,32 (m, 1 H) 3,32 (s, 3H) 3,49-3,57 (m, 4 H) 3,61 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 3,68-3,76 (m, 2 H) 3,79 (s a., 1 H) 3,84 - 3,92 (m, 2 H) 3,98 (s a., 1 H) 4,03 - 4,15 (m, 4 H) 4,18 (t, J=5,8 Hz, 1 H) 4,25 (d,J=10,2 Hz, 1 H) 4,28 - 4,36 (m, 2 H) 4,45 (d, J= 11,2 Hz, 1 H) 4,58-4,65 (m, 2 H) 4,70 (a. t, J=5,4 Hz, 1 H) 4,81 (s a., 1 H) 4,87 (s a., 1 H) 5,02 (s a., 1 H) 5,06 (s a., J=1,5 Hz, 1 H). ESI-MS (m/z): 1117,6 [M+Na] .

Síntesis de Compuesto (J-1)

Ejemplo de referencia 31

El Compuesto J-1 del título se obtuvo a partir del Compuesto E-1: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5R,6R)-3,5-bis((tercbutildimetilsilil)oxi)-6-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ol (N° CAS; 157323-29-0) y el Compuesto H-1 (N° CAS; 1353268-98-0), basándose en el procedimiento descrito en elEsquema G.Tiempo de retención = 12,8 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua

Caudal: 4,5 ml/min

Eluato:

MeCN/agua 35 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 35 % a 99 % (gradiente, 20 min)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,97 (d, J=2,9 Hz, 3H) 0,99 (d, J=2,9 Hz, 3 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,05 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,11 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,30 - 1,44 (m, 6H) 1,48 - 1,57 (m, 4 H) 1,61 - 1,76 (m, 4 H) 1,79 - 1,87 (m, 3 H) 1,91 - 1,98 (m, 3 H) 2,00-2,14 (m, 8 H) 2,24 - 2,35 (m, 5 H) 2,37 - 2,44 (m, 6 H) 2,55 (dd, J=17,6, 9,8 Hz, 1 H) 2,68 -2,87 (m, 1 H) 2,94 (dd, J=9,8, 2,0 Hz, 1 H) 3,22 (dd, J=6,6, 4,7 Hz, 1 H) 3,22 (dd, J=6,6, 4,7 Hz, 1 H) 3,26 - 3,36 (m, 2 H) 3,42 - 3,56 (m, 2H) 3,60 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,65 - 3,75 (m, 3 H) 3,79 (s a., 1 H) 3,83 - 3,93 (m, 2 H) 3,98 (d, J=2,4 Hz, 1 H) 4,02 - 4,36 (m, 3 H) 4,37 - 4,51 (m, 2 H) 4,62 (dd, J=7,6, 4,6, Hz, 1 H) 4,82 (s a., 1 H) 4,89 (s a., 1 H) 5,01 (s a., 1 H) 5,06 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z): 1119,6 [M+Na] .

Síntesis de Compuesto (K-2)

Esquema K: Preparación de Compuesto K-1

El Compuesto del título K-2 se obtuvo a partir del Compuesto K-1: carbamato de alil((2R,4S)-2,4-bis((tercbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-4-((2S,4S,5S)-4-((terc-but¡ldimet¡ls¡l¡l)ox¡)-5-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metox¡benc¡l)ox¡)-6-met¡l-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidrofuran-2-il)butilo) preparado mediante el método descrito en el Esquema K, y el compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1), basándose en el procedimiento descrito en elEsquema G.Tiempo de retención = 9,5 min.

Condiciones de HPLC

Columna:YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección:200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil:MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal:4ml/min

Eluato:

MeCN/agua 25 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 25 % a 80 % (gradiente, 20 min)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,96 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,01 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,05 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,09 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 1,19 - 1,63 (m, 9 H) 1,64 - 1,76 (m, 4 H) 1,77 - 1,89 (m, 3 H) 1,91 - 2,21 (m, 11 H) 2,12-2,21 (m, 3 H) 2,22 - 2,44 (m, 7 H) 2,44 (dd, J=17,5, 1,9 Hz, 1 H) 2,55 (dd, J=17,6, 9,3 Hz, 1 H) 2,75-2,87 (m, 2H) 2,97 (dd, J=9,8, 2,0 Hz, 1 H) 3,05 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 3,21 (dd, J=6,3, 4,4 Hz, 1 H) 3,58 (s a., 1 H) 3,60 (d, J=12,2 Hz, 1 H) 3,69 (s a., 1 H) 3,73 (d, J=10,2 Hz, 1 H) 3,77 (s a., 1 H) 3,84 - 3,90 (m, 2 H) 3,98 - 4,13 (m, 7 H) 4,17 (dd, J=6,1,4,6 Hz, 1 H) 4,24 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 4,29 (d, J=3,9 Hz, 1 H) 4,32 (dd, J=9,8, 3,9 Hz, 1 H) 4,45 (d, J=10,2 Hz, 1 H) 4,58 - 4,62 (m, 2 H) 4,69 (t, J=4,6 Hz, 1 H) 4,80 (s, 1 H) 4,84 (s, 1 H) 5,02 (s a., 1 H) 5,06 (s a., 1 H)_ESI-MS (m/z): 1110,6. [M+H]+ , 1132,6 [M+Na] .

Síntesis de Compuesto (L-6)

El Compuesto del título L-6 se obtuvo como una sal de ácido acético a partir del Compuesto L-1 (CAS No; 1353269 09-6) preparado mediante el método escrito en Journal of the American Chemical Society 2012, 134, 893-896, mediante el método descrito en elEsquema L.Tiempo de retención = 5,6 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 205 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal: 4,7 mL/min

Eluato:

MeCN/agua 25 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 25 % a 80 % (gradiente, 20 min), entonces

MeCN/agua 80 % (iso, 2 min)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,94 - 1,03 (m, 7 H) 1,05 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,10 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,21 -2,41 (m, 36H) 2,44 (dd,J=17,6, 2,2 Hz, 1 H) 2,54 (dd,J=17,6, 9,2 Hz, 1 H) 2,75 - 2,83 (m, 1H) 2,94 (dd, J=9,5, 1,7 Hz, 1 H) 3,19 - 3,23 (m, 1 H) 3,31 - 3,33 (m, 1 H) 3,53 - 3,73 (m, 7 H) 3,78 (s a., 1 H) 3,84 - 3,90 (m, 2 H) 3,97 - 4,12 (m, 4 H) 4,16 (dd, J=3,9, 1,0 Hz, 1 H) 4,21 (dd, J=5,6, 3,2 Hz, 1 H) 4,21 - 4,26 (m, 1 H) 4,26 - 4,33 (m, 2 H) 4,38 - 4,46 (m, 2 H) 4,58 - 4,63 (m, 2 H) 4,81 (s a., 1 H) 4,86 - 4,87 (m, 1 H) 5,01 (s a., 1 H) 5,06 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z): 1126,6 [M+H]+, 1148,6 [M+Na]+.

Síntesis de Compuesto (M-3)

Ejemplo de referencia 34

El Compuesto M-3 del título se obtuvo a partir del Compuesto M-1: (2S,6S,7S,E)-2-((2S,3S,5S)-3-((tercbutildimetilsilil)oxi)-5-((S)-2,2,3,3,9,9,10,10-octametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-5-il)tetrahidrofuran-2-il)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metilnon-8-en-4-ona preparado mediante el método descrito en el Esquema M, y el compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1), utilizando los procedimientos descritos para la preparación de los Compuestos D-4, D-5 y D-6 (Ejemplos de referencia 24, 25 y 26).

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,96 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,00 - 1,03 (m, 1 H) 1,02 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,06 (d, J=7,3 Hz, 3 H) 1,10 (d, J=6,8 Hz, 3 H) 1,29 - 1,63 (m, 10 H) 1,65 - 1,78 (m, 5 H) 1,79 - 1,89 (m, 3 H) 1,92 - 2,12 (m, 7 H) 2,13 - 2,36 (m, 10 H) 2,40 (dd, J=13,4, 6,1 Hz, 1 H) 2,45 (dd, J=17,5, 2,4 Hz, 1 H) 2,56 (dd, J=18,0, 9,7 Hz, 1 H) 2,76 - 2,84 (m, 1 H) 2,98 (dd, J=9,7, 1,9 Hz, 1 H) 3,22 (dd, J=6,3, 4,9 Hz, 1 H) 3,31 -3,32 (m, 1 H) 3,55 (m, 1H) 3,61 (d, J= 11,7 Hz, 1 H) 3,67-3,76 (m, 5 H) 3,84 - 3,91 (m, 2 H) 3,95 (sept, J=4,9Hz, 1H) 4,03 - 4,11 (m, 4 H) 4,12 (dd, J=6,6, 4,1 Hz, 1 H) 4,18 (dd, J=6,3, 4,4Hz, 1 H) 4,24 (ddd, J=11,2, 9,0, 2,3 Hz, 1 H) 4,28 - 4,31 (m, 1 H) 4,32 (dd, J=10,2, 4,4 Hz, 1 H) 4,46 (d, J=10,7 Hz, 1 H) 4,60 (t, J=3,9 Hz, 1 H) 4,62 (dd, J=7,3, 3,9 Hz, 1H) 4,70 (t, J=4,4 Hz, 1 H) 4,81 (d, J=1,5 Hz, 1 H) 4,87 (s, 1 H) 5,02 (s a., 1 H) 5,06 (d, J=1,5 Hz, 1 H). ESI-MS (m/z): 1103,6 [M+Na]+.

Síntesis de Compuesto (N-1)

El Compuesto N-1 del título se obtuvo como una sal de ácido acético a partir del Compuesto M-2: carbamato de alil-((S)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-3-((2S,4S,5S)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-((2S,6S,7S,E)-9-yodo-7-((4-metoxibencil)oxi)-6-metil-4-oxonon-8-en-2-il)tetrahidrofuran-2-il)propilo)preparado mediante el método descrito en el Esquema M, y el Compuesto D-1 (N° CAS; 157322-23-1), mediante el mismo procedimiento descrito en elEsquemaG. Tiempo de retención = 8,4 min.

Condiciones de HPLC

Columna: YMC Pak Pro C18 (10 mm I.D. x 250 mm)

Longitud de onda de detección: 200 nm

Temperatura de columna: temperatura ambiente

Fase móvil: MeCN-agua (0,05 % de AcOH)

Caudal: 4,5 ml/min

Eluato:

MeCN/agua 25 % (iso, 2 min), entonces

MeCN/agua 25 % a 80 % (gradiente, 20 min)

1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 0,97 (d, J=6,8 Hz 3 H) 1,01 (m, 1H) 1,02 (d, J=7,8 Hz 3 H) 1,07 (d, J=7,3 Hz 3 H) 1,10 (d, J=6,3 Hz, 3 H) 1,26 - 1,41 (m, 6 H) 1,42 - 1,56 (m, 4 H) 1,56 - 1,64 (m, 2 H) 1,64 - 1,78 (m, 4 H) 1,81 -1,88 (m, 3 H) 1,97 - 2,11 (m, 7 H) 2,12 - 2,22 (m, 2 H) 2,23 - 2,37 (m, 9 H) 2,40 (dd, J=13,2, 3,9 Hz, 1 H) 2,45 (dd,J=17,1, 2,4 Hz, 1 H) 2,56 (dd, J=17,8, 10,0 Hz 1 H) 2,75 - 2,87 (m, 1 H) 2,98 (dd, J=9,3, 1,9 Hz, 1 H) 3,06 - 3,14 (m, 2H) 3,22 (dd, J=5,8, 4,4 Hz, 1 H) 3,59 (s a., 1 H) 3,61 (d, J=11,2 Hz, 1 H) 3,68 - 3,76 (m, 3 H) 3,85 - 3,92 (m, 2 H) 3,98 - 4,03 (m, 1 H) 4,04 - 4,14 (m, 4 H) 4,16 - 4,20 (m, 1 H) 4,22 - 4,28 (m, 1 H) 4,28 - 4,35 (m, 2H) 4,46 (d, J=11,21 Hz, 1 H) 4,58 - 4,64 (m, 2 H) 4,70 (t, J = 4,9 Hz 1 H) 4,81 (s a., 1 H) 4,87 (s a., 1 H) 5,03 (s a., 1 H) 5,07 (s a., 1 H). ESI-MS (m/z): 1080,6 [M+H]+ , 1102,6 [M+Na]+.

Ejemplos de prueba farmacológicos

Información general

Los compuestos de halicondrina naturales y los compuestos modificados de los mismos son conocidos en la bibliografía (véase, por ejemplo, D. Uemura et al. "Norhalichondrin A: An Antitumor Polyether Macrolide from a Marine Sponge" J. Am. Chem. Soc., 107, 4796 (1985); Marc Litaudon et al. "Antitumor Polyether Macrolides: New and Hemisynthetic Halichondrins from the New Zealand Deep-Water Sponge Lissodendoryx sp." J. Org. Chem., 1997, 62, 1868-1871). Sin embargo, la mayor parte de estos no se encuentran disponibles fácilmente. Por ejemplo, Dr. Uemuraet.al.aislaron 12,5 mg de halicondrina B, 35,0 mg de norhalicondrina A y 17,2 mg de homohalicondrina A de hasta 600 kg deHalichondria okadaiKadota (véase, por ejemplo, D. Uemura et al. "Norhalichondrin A: An Antitumor Polyether Macrolide from a Marine Sponge" J. Am. Chem. Soc., 107, 4796 (1985)). Entre los compuestos de halicondrina naturales, la halicondrina B muestra las mayores actividades antitumorales contra células de melanoma B-16in vitroy es altamente activo contra leucemia L-1210in vivo(véase, por ejemplo, D. Uemura et al. "Norhalichondrin A: An Antitumor Polyether Macrolide from a Marine Sponge" J. Am. Chem. Soc., 107, 4796 (1985)). La halicondrina C es también activa en diversos modelosin vivopero inestable en disolución acuosa en comparación con halicondrina B. La norhalicondrina B es mucho más débil que la halicondrina B no soloin vitrosino tambiénin vivo,véase, por ejemplo, D. Uemura et al. "Norhalichondrin A: An Antitumor Polyether Macrolide from a Marine Sponge" J. Am. Chem. Soc., 107, 4796 (1985)). Las siguientes pruebas farmacológicas utilizan halicondrina B (Hali-B) como compuestos de referencia según sea necesario.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 1. Ensayo de inhibición de crecim iento de FaDu

En este ensayo se midió la actividad inhibidora del crecimiento de compuestos de prueba en una línea celular FaDu de carcinoma de células escamosas humanas de cabeza y cuello (SCCHN). Se mantuvieron células FaDu en medio RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Nichirei, 12D168) y penilicina y estreptomicina en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 gL de suspensión de células FaDu ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C) Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 gL de Compuesto (1) o halicondrina B en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir los compuestos de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración del compuesto de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se resume en la Tabla 1.

Tabla 1

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 2. Ensayo de inhibición de crecim iento de MDA-MB231

En este ensayo se midió la actividad inhibidora del crecimiento de compuestos de prueba en una línea celular MDA-MB231 de cáncer de mama humano. Se mantuvieron células MDA-MB231 en medio Dulbecco's Modified Eagle (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 044-29765) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Nichirei, 12D168) y penilicina y estreptomicina en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 gL de suspensión de células MDA-MB231 ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 gL de Compuesto (1) o halicondrina B en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir los compuestos de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración del compuesto de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se muestra en la Tabla 2.

Tabla 2

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 3. Ensayo de inhibición de crecimiento de HCC1954

En este ensayo se midió la actividad inhibidora del crecimiento de compuestos de prueba en una línea celular HCC1954 de cáncer de mama humano. Se mantuvieron células HCC1954 en un medio RPMI-1640 modificado para contener L-glutamina 2 mM, HEPES 10 mM, piruvato sódico 1 mM, 4500 mg/L de glucosa y 1500 mg/L de bicarbonato sódico (ATCC 30-2001) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Nichirei, 12D168) y penilicina y estreptomicina en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 pL de suspensión de células HCC1954 ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 pL de Compuesto (1) o halicondrina B en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir los compuestos de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración del compuesto de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se muestra en la Tabla 3.

Tabla 3

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 4. Efectos antitumorales en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu en ratones como monoterapia

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivada en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 4,8 x 107 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 7 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Nueve días después de la inoculación celular, se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral (mm3) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Volumen tumoral relativo (RTV) = Volumen tumoral (dia X) /Volumen tumoral (el primer día)

Regresión tumoral (%) = (1 - RTV mínimo) x 100

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. Cada compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó en disolución salina con 100 pM de hidroxipropil-p-ciclodextrina. Cada muestra de prueba se administró por vía intravenosa a una dosis máxima tolerable (MTD). A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 4 ratones en cada caso. La regresión tumoral (%) de cada compuesto de prueba se mostró en la Tabla 4.

Tabla 4

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 5. Actividad antitumoral contra OSC-19 en modelo de xenoinjerto subcutáneo en ratones como monoterapia

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular OSC-19 de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivada en um medio DMEM/Ham F-12 (1: 1) que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/ml con PBS para preparar una suspensión celular, y la suspensión se mezcló con Matrigel™ (BD Bioscience, #366237) en una relación de 1:1 para preparar una suspensión celular en una concentración de of 5 x 107 células/mL. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 gL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 5 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Seis días después de la inoculación celular, se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral Inim’l = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Volumen tumoral relativo (RTV) = Volumen tumoral (día X) /'Volumen tumoral (el primer día)

Regresión tumoral (%) = (1 - RTV mínimo) x 100

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en disolución salina y se administró por vía intravenosa a dosis de 0,06 mg/kg a 0,18 mg/kg una vez a la semana durante 2 semanas (programa Q7Dx2). La regresión tumoral (%) de cada dosis de prueba se muestra en la Tabla 5.

Tabla 5

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 6. Actividad antitumoral contra HCC1806 en modelo de xenoinjerto subcutáneo en ratones como monoterapia

Una línea celular HCC 1806 de cáncer de mama humano, que se había cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/ml con PBS para preparar una suspensión celular, y la suspensión se mezcló con Matrigel™ (BD Bioscience, #366237) en una relación de 1:1 para preparar una suspensión celular en una concentración de of 5 x 107 células/mL. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 gL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 5 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Doce días después de la inoculación celular, se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Volumen tumoral relativo (RTV) = Volumen tumoral (día X) /Volumen tumoral (el primer día)

Regresión tumoral (%) = (1 — RTV mínimo) x 100

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en disolución salina y se administró por vía intravenosa a 0,18 mg/kg una vez a la semana durante 2 semanas (programa Q7Dx2). La regresión tumoral (%) para el Compuesto (1) se muestra en la Tabla 6.

Tabla 6

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 7. Efectos antitumorales en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu en combinación con cetuximab en ratones

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 7 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular, se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral (mm’) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Volumen tumoral relativo (RTV) = Volumen tumoral {día X) /Volumen tumoral (el primer día)

Regresión tumoral el día 35 (%) = (1 - RTV el día 35) x 100

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. Cada compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó en disolución salina con 100 pM de hidroxipropil-p-ciclodextrina. Cada compuesto de prueba se administró por vía intravenosa a dosis de 1/4 MTD a 1/2 MTD en combinación con cetuximab (Erbitux, Merck Serono Co., Ltd.). A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 4 ratones en cada caso. La regresión tumoral el día 35 (%) de cada compuesto de prueba se muestra en la Tabla 7.

Tabla 7

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 8. Actividad antitumoral en el modelo de xenoinjerto subcutáneo KPL-4 en combinación con trastuzumab en ratones

Una línea celular KPL-4 de cáncer de mama humano HER-2 positivo, que había sido cultivada en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 7 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Dieciséis días después de la inoculación celular, se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral (mm5) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Regresión tumoral (%) = (1 — RTV mínimo) x 100

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. Cada compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó en disolución salina. El compuesto de prueba se administró por vía intravenosa a 0,09 mg/kg o 0,18 mg/kg en combinación con trastuzumab (Herceptin, Genentech, Inc.). La regresión tumoral para el Compuesto (1) se muestra en la Tabla 8.

Tabla 8

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 9. Efecto en vaso CD31 positivo en el modelo subcutáneo FaDu en ratones

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con PBS para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 7 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular se administró por vía intravenosa un compuesto de prueba en disolución salina con 100 pM de hidroxipropil-pciclodextrina a dosis de 1/2 MTD a MTD. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 3 ratones en cada caso. Cinco días después de la administración, se recogieron muestras tumorales y se fijaron con fijador de zinc IHC (BD Pharmingen) a 4 °C durante 24 h. Los tejidos integrados en parafina se seccionaron (3 pm), se montaron en portaobjetos cargados positivamente y se secaron al aire. La tinción inmunohistoquímica de CD31 se realizó utilizando el modelo de autotinción Ventana Discover XT (Roche Diagnostics) según el protocolo del fabricante. Las secciones se desparafinaron, se acondicionaron y los antígenos se recuperaron con CC1 (Ventana Medical Systems). Los portaobjetos se bloquearon con el bloqueador A y el bloqueador B (kit de bloqueo de biotina endógena, Roche Diagnostics). Se aplicó el anticuerpo IgG CD31 anti-ratón en ratas (Dianova GmbH) a 2 pg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante 6 h, seguidas de 32 minutos de incubación con anticuerpo IgG anti-rata biotinilado (Jackson ImmunoResearch Laboratories) a 2,2 pg/mL. La detección se realizó con estreptavidina-HRP D durante 16 min, seguida de incubación con DAB D y DAB H<2>O<2>D (kit DABMap, Ventana Medical Systems, Inc) durante 8 min. Los portaobjetos se contratiñeron con hematoxilina II (Roche Diagnostics) durante 16 min, seguido de incubación con reactivo Bluing durante 4 min. Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX (Merck KGaA).

Los portaobjetos inmunoteñidos se escanearon con el sistema automatizado de imagenología de portaobjetos Vectra 2 (Perkin Elmer Inc.). El número vasos sanguíneos en todo el tumor se cuantificó mediante el recuento de los objetos CD31 positivos utilizando el software inForm 2 (PerkinElmer Inc.). El área de la región tumoral se midió mediante evaluación del área de tinción de hematoxilina utilizando el software inform 2 software (PerkinElmer Inc.). El número de vasos sanguíneos se normalizó por el área de la región tumoral. Se calculó una tasa de aumento del número de vasos sanguíneos del grupo de dosificación del compuesto de prueba con la siguiente fórmula, y esta se muestra en la Tabla 9.

Tasa de aumento del número de vasos sanguíneos (%) = (número de vasos sanguíneos del

grupo de dosificación del compuesto de prueba-número de vasos sanguíneos del grupo de

control) / número de vasos sanguíneos del grupo de control) x 100

Tasa de aumento del número de vasos sanguíneos (%) = ((número de vasos sanguíneos del grupo de dosificación del compuesto de prueba-número de vasos sanguíneos del grupo de

control) / número de vasos sanguíneos del grupo de control) x 100

Tabla 9

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 10. Efecto sobre CAP a-SMA positivas en el modelo subcutáneo FaDu

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con PBS para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 5 a 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular se administró por vía intravenosa un compuesto de prueba en disolución salina con 100 pM de hidroxipropil-pciclodextrina a 1/2 MTD a MTD. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 3 ratones en cada caso. Dos días después de la administración, se recogieron muestras tumorales y se fijaron con fijador de zinc IHC (BD Pharmingen) a 4 °C durante 24 h. Los tejidos integrados en parafina se seccionaron (3 pm), se montaron en portaobjetos cargados positivamente y se secaron al aire durante 6 h. La tinción inmunohistoquímica de a-SMA se realizó utilizando el modelo de autotinción Ventana Discover XT (Roche Diagnostics). Las secciones se desparafinaron, se acondicionaron y los antígenos se recuperaron con tampones patentados, EZPrep y CC1 (Ventana Medical Systems). Se aplicó un anticuerpo monoclonal anti-a-SMA de ratón conjugado con fosfatasa alcalina (clone 1A4, Sigma) a 5 pg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante 6 h. La detección se realizó con el kit RedMap (Ventana Medical Systems, Inc). Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX (Merck KGaA). Los cortes tumorales seriados se desparafinaron y se tiñeron con hematoxilina de Mayer (Muto Pure Chemicals) durante 1 min. Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX (Merck KGaA).

Los portaobjetos inmunoteñidos se escanearon con el sistema automatizado de imagenología de portaobjetos Vectra 2 (Perkin Elmer Inc.). El área de la región a-SMA positiva en todo el tumor se cuantificó mediante recuento de los objetos a-SMA positivos utilizando el software inForm 2 (PerkinElmer Inc.). El área de la región tumoral se midió mediante evaluación del área de tinción de hematoxilina utilizando el software inForm 2 (PerkinElmer Inc.). El área de la región a-SMA positiva se normalizó por el área de la región tumoral. Se calculó una tasa de supresión del área a SMA positiva del grupo de dosificación del compuesto de prueba con la siguiente fórmula, y esta se muestra en la Tabla 10.

Tabla 10

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 11. Modelo de ratón de trasplante ortotópico HSC-2

Se establecieron células HSC-2-Luc transducidas por luciferasa mediante transferencia génica mediada por retrovirus. En primer lugar, el fragmento de ADN que codifica luciferasa de luciérnaga se obtuvo a partir del plásmido potenciador pGL3 (GenBank#:U47297) y se subclonó en el rector retroviral pCX4pur (GenBank#: AB086386). Después se produjeron retrovirus recombinantes mediante transfección del anterior vector de expresión retroviral junto con plásmidos pGP y pE-Ampho (Takara Bio; Shiga, Japón), en células 293T (ATCC; Manassas, USA). A continuación se infectaron células HSC-2 con los retrovirus recombinantes y se cultivaron durante dos semanas en presencia de puromicina (2 pg/mL). Las células infectadas se seleccionaron de una población proliferativa policlonal del cultivo.

Bajo anestesia, la línea celular SCCHN HSC-2-Luc se inoculó en la lengua de ratones hembra desnudos (1 x 106 células en 50 pL de PBS), 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj; Charles River, Inc.; Shizuoka, Japón). Siete días después del trasplante, se analizó el volumen tumoral mediante la señal de bioluminiscencia de células HSC-2-Luc. Para la imagenología de bioluminiscencia se inyectaron 0,1 mL de 15 mg/mL de D-luciferina (Promega, Madison, WI) por vía intraperitoneal en ratones desnudos bajo anestesia inhalada con isoflurano al 1 % hasta al 2 %. La señal de bioluminiscencia se controló utilizando la serie IVIS SPECTRUM (PerkinElmer, Waltham, MA), que consistía en una cámara de dispositivo de carga acoplada refrigerada, altamente sensible. Se utilizó el software Living Image (PerkinElmer, Waltham, MA) para cuadricular los datos de imagenología e integrar la señal de bioluminiscencia total en cada región de interés (ROI). Todas las imágenes de bioluminiscencia se obtuvieron con una exposición de 1 segundo. Los datos se analizaron utilizando la emisión total de flujo de fotones (fotones/segundo) en las ROI.

Sobre la base de la emisión total de flujo de fotones obtenida el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que la emisión total de flujo de fotones era sustancialmente igual entre los grupos. El Compuesto (1) o cisplatino se administró por vía intravenosa con o sin cetuximab (Erbitux, Merck Serono Co., Ltd.) una vez a la semana durante 3 semanas (programa Q7Dx3). Se llevaron a cabo dos experimentos utilizando el mismo procedimiento y se recogieron todos los datos de los experimentos. Cada grupo estaba constituido por 16 ratones.

Los datos de imagenología mostraban que solo el tratamiento del Compuesto (1) con cetuximab reducía claramente la señal de bioluminiscencia en todos los ratones después del día 14 (Figura 6A-6B). La mediana de tiempo de supervivencia (MST) se calculó para cada grupo de tratamiento como la mediana de días de muerte. El aumento de la esperanza de vida (ILS) se calculó mediante la siguiente fórmula: ILS (%) = (MST de animales tratados con compuesto de prueba - MST de animales de control) / MST de animales de control x 100. El ILS (%) de cada compuesto de prueba se muestra en la Tabla 11.

Tabla 11

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 12. Modelo de xenoinjerto FaDu s.c. En combinación con radiación

Se establecieron células FaDu-Luc transducidas por luciferasa mediante transferencia génica mediada por retrovirus. En primer lugar, el fragmento de ADN que codifica luciferasa de luciérnaga se obtuvo a partir del plásmido potenciador pGL3 (GenBank#:U47297) y se subclonó en el rector retroviral pCX4pur (GenBank#: AB086386). Después se produjeron retrovirus recombinantes mediante transfección del anterior vector de expresión retroviral junto con plásmidos pGP y pE-Ampho (Takara Bio; Shiga, Japón), en células 293T (ATCC; Manassas, USA). A continuación se infectaron células FaDu con los retrovirus recombinantes y se cultivaron durante dos semanas en presencia de puromicina (2 pg/mL). Las células infectadas se seleccionaron de una población proliferativa policlonal del cultivo.

Una línea celular SCCHN humana transducida con luciferasa FaDu-Luc, que había sido cultivada en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un muslo derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Trece días después de la inoculación celular, se analizó el volumen tumoral mediante la señal de bioluminiscencia de células FaDu-Luc. Para la imagenología de bioluminiscencia se inyectaron 0,1 mL de 15 mg/mL de D-luciferina (Promega, Madison, WI) por vía intraperitoneal en ratones desnudos bajo anestesia inhalada con isoflurano al 1 % hasta al 2 %. La señal de bioluminiscencia se controló utilizando la serie IVIS SPECTRUM (PerkinElmer, Waltham, MA), que consistía en una cámara de dispositivo de carga acoplada refrigerada, altamente sensible. Se utilizó el software Living Image (PerkinElmer, Waltham, MA) para cuadricular los datos de imagenología e integrar la señal de bioluminiscencia total en cada región de interés (ROI). Todas las imágenes de bioluminiscencia se obtuvieron con una exposición de 1 segundo. Los datos se analizaron utilizando la emisión total de flujo de fotones (fotones/segundo) en las ROI. La emisión total de flujo de fotones se calculó según las siguientes fórmulas de cálculo:

Sobre la base de la emisión total de flujo de fotones obtenida el primer día de administración, se agruparon los ratones de tal manera que la emisión total de flujo de fotones era sustancialmente igual entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. El Compuesto (1) se administró mediante inyección en la vena de la cola los días 1 y 8. La irradiación se realizó 18 Gy el día 4 y el día 11. La regresión tumoral para el Compuesto (1) se muestra en la Tabla 12.

Tabla 12

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 13. Actividad antitumoral en el modelo singénico subcutáneo CT26 en combinación con anticuerpo anti-mPD-1 en ratones

Una línea celular CT26 de carcinoma de colon no diferenciado murino, que había sido cultivada en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 2 x 107 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó el día 1 en un volumen de 100 gL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones BALB/c de 6 semanas de edad (BALB/cAnNCrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Dos días después de la inoculación celular, los ratones se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos y cada grupo consistía en 8 ratones. El diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón se midieron mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según la siguiente fórmula de cálculo:

más corto (mm)/2

T/C = (volumen tumoral medio del grupo tratado)/(volumcn tumoral medio del grupo de

control)

Inhibición del crecimiento tumoral (%) = (1-T/C) x 100

El compuesto de prueba se administró por vía intravenosa a 0,09 mg/kg los días 3 y 11. Se administró anticuerpo AntimPD-1 (BE0146, Bio X Cell) por vía intravenosa a 10 mg/kg los días 3, 7, 11 y 15. La inhibición del crecimiento tumoral el día 15 (%) de cada compuesto de prueba se muestra en la Tabla 13.

Tabla 13

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 14. Efecto sobre la polimerización de tubulinin vitro (Figura 10A)

El kit de ensayo de polimerización de tubulina se adquirió en Cytoskeleton, Inc. (Cat.# BK011P). El kit contenía 1 frasco de proteína tubulina liofilizada purificada de cerebro porcino, 3 tubos de GTP liofilizado, 2 frascos de tampón de ensayo liofilizado y 1 frasco de tampón glicerol de tubulina. El tampón de ensayo se preparó mediante disolución del contenido en 10 mL de agua desionizada y esterilizada. Esta disolución contenía 80 mmol/L de sal sesquisódica de piperazina-N,W-bis[2-ácido etanosulfónico], 2,0 mmol/L de cloruro de magnesio, 0,5 mmol/L de etilenglicol-bis(2-aminoetiléter) N,N,N',Ñ'-ácido tetraacético, pH 6,9 y 10 pmol/L de indicador fluorescente. El tampón se almacenó a -70 °C hasta el uso. El tampón glicerol de tubulina consistía en 80 mmol/L de sal sesquisódica de piperazina-N,W-bis[2-ácido etanosulfónico], 2,0 mmol/L de cloruro de magnesio, 0,5 mmol/L de etilenglicol-bis(2-aminoetiléter) N,N,N',N'-ácido tetraacético y 60 % de glicerol v/v, pH 6,9. Se almacenó a 4 °C hasta el uso. La disolución madre de GTP se preparó mediante disolución del contenido de cada tubo en 100 pL de agua desionizada y esterilizada para obtener una concentración de 100 mmol/L de GTP. Las alícuotas de esta disolución madre se almacenaron a -70 °C hasta el uso. La disolución madre de tubulina (10 mg/mL) se preparó mediante disolución del polvo de tubulina añadiendo 1,1 mL de la mezcla de tampón de ensayo y disolución madre de GTP (100:1, v/v). Las alícuotas se congelaron en nitrógeno líquido y entonces se almacenaron a -70 °C hasta el uso.

En el ensayo de polimerización de tubulina, la mezcla de reacción se preparó mediante mezclado de 820 pL de tampón de ensayo, 17,6 pL de disolución madre de GTP y 600 pL de tampón glicerol de tubulina. La mezcla de reacción (1015 pL) se combinó con 240 pL de disolución madre de tubulina. Esta disolución se denominó mezcla de reacción de tubulina y se utilizó para la medición de pocillos de prueba y control. Se preparó una mezcla de reacción sin tubulina mediante mezclado de 89,85 pL de mezcla de reacción y 21,25 pL de tampón de ensayo para la medición de pocillos en blanco. La disolución de Compuesto (1) (6,25-100 pmol/L; concentraciones finales 0,625-10 pmol/L) o vehículo se añadió en 5 pL a pocillos individuales de una placa de microtitración de media área de 96 pocillos. Se añadió mezcla de reacción de tubulina o mezcla de reacción sin tubulina en 45 pL a cada pocillo de la placa. La emisión de fluorescencia a 460 nm (longitud de onda de excitación a 360 nm) se midió cada 2 minutos durante 90 minutos utilizando el lector de microplacas SpectraMax® M5e (Molecular Devices). La polimerización de tubulina fue seguida de un aumento de la fluorescencia debido a la incorporación de un indicador de fluorescencia en microtúbulos a medida que se producía la polimerización. El ensayo se realizó por duplicado. El ensayo demostró que el Compuesto (1) inhibía la polimerización de tubulina de manera dependiente de la concentración. La intensidad de fluorescencia en cada punto de tiempo se calculó mediante las siguientes fórmulas:

Intensidad de fluorescencia = medición de fluorescencia media de pocillos de prueba o pocillos de control - medición de fluorescencia media de pocilios en blanco; pocilio en blanco: con vehículo sin tubulina; pocilio de control: con vehículo y tubulina; pocillo de prueba: con compuestos y tubulina.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 15. Ensayo de dinámica de m icrotúbulos basado en células(Figura 10B)

Se realizó un ensayo de dinámica de microtúbulos (MT) basado en células con la línea celular de osteosarcoma U2OS-EB3-AG, en el que se expresó de forma estable la proteína de fusión de EB3 (un microtúbulo más proteína de unión del extremo) y Azami-Green (EB3-AG). Las células U2OS-EB3-AG se cultivaron en medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina a 37 °C en una atmósfera humidificada con 5 % de CO<2>. La dinámica de MT en las células vivas se puede visualizar como el movimiento de la estructura de tipo cometa de EB3- AG. Las células U2OS-EB3-AG colocadas en placas de cultivo con base de vidrio (placa EZVIEW, AGC Techno Glass, Japón) se trataron con el Compuesto (1) a la concentración indicada y se dinámica de microtúbulos se controló mediante imagenología de lapso de tiempo utilizando un microscopio fluorescente con lente de objetivo de 60 aumentos sumergida en aceite (BZ-X710, KEYENCE, Japón). Las imágenes fijas en los puntos de tiempo indicados se presentaron en laFigura 10B.Las vistas de mayor aumento de las áreas recuadradas se mostraron en las entradas. Cuando se trataron con Compuesto (1) a 0,5 nM (valor de IC<50>para la actividad antiproliferativa en células U2OS-EB3-AG), las estructuras de tipo cometa se volvieron difíciles de observar alrededor de 60 minutos después de la adición del compuesto. Estos resultados demostraron claramente que el Compuesto (1) tenía la capacidad de suprimir la dinámica de MT.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 16. Actividad antiproliferativain vitro (Figura 11)

Los ensayos antiproliferativosin vitropara el Compuesto (1) se llevaron a cabo utilizando un pequeño panel de líneas celulares cancerosas que incluían carcinoma de células escamosas humanas de esófago (OE21, TE-8), adenosarcoma humano de esófago (OE33) y sarcoma uterino humano (MES-SA, MES-SA-Dx5-Rx1). Todas las líneas celulares se cultivaron en medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina (medio de cultivo) en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C) A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 pL de suspensión celular ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C) Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 pL de Compuesto (1) en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 72 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector 2013 EnVision™ Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir los compuestos de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %.

Se calculó la concentración de Compuesto (1) de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se muestra en laFigura 11.La susceptibilidad a P-gp se calculó como la relación del valor de IC<50>en células MES-SA-Dx5-Rx1, que sobreexpresan P-gp, y el valor de IC<50>en células MES-SA.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 17. Efectos antitumorales en los modelos de xenoinjerto KPL-4 en ratones como monoterapia. efectos antitumorales en modelos de xenoinjerto COLO-704 en ratones como monoterapia(Figura 12)

Una línea celular KPL-4 de cáncer de mama humano HER-2 positivo, que había sido cultivada en un medio DMEM que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 8 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Once días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Volumen tumoral relativo (RTV) - Volumen tumoral (día X) /Volumen tumoral (el primer día)

Peso corporal relativo (RBW) = Peso corporal (día X) / Peso corporal (el primer día)

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. El experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en seis ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 20 pg/kg, 60 pg/kg o 180 pg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). Se observó la regresión tumoral en los grupos tratados con 60 pg/kg y 180 pg/kg y la administración a 180 pg/kg erradicó completamente los tumores de xenoinjerto en todos los ratones el día 15.

Una línea celular COLO-704 de cáncer de ovario humano, que había sido cultivada en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina y estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 5 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Nueve días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral (m m ) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. El experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en seis ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 20 pg/kg, 60 pg/kg o 180 pg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). El tratamiento con compuesto indujo la regresión tumoral a 180 gg/kg y el retraso en el crecimiento a 60 gg/kg. La administración a 180 gg/kg erradicó completamente los tumores de xenoinjerto en todos los ratones el día 22.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 18. Efecto en vaso CD31 positivo en el modelo subcutáneo FaDu en ratones(Figura 13)

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con medio de cultivo para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 gL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. Cada compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de ensayo en disolución salina se administró por vía intravenosa a 20 gg/kg, 60 gg/kg o 180 gg/kg. Cinco días después de la administración única, se recogieron muestras tumorales y se fijaron con fijador de zinc IHC (BD Pharmingen) a 4 °C durante 24 h. Los tejidos integrados en parafina se seccionaron (3 gm), se montaron en portaobjetos cargados positivamente y se secaron al aire. La tinción inmunohistoquímica de CD31 se realizó utilizando el modelo de autotinción Ventana Discover XT (Roche Diagnostics) según el protocolo del fabricante. Las secciones se desparafinaron, se acondicionaron y los antígenos se recuperaron con CC1 (Ventana Medical Systems). Los portaobjetos se bloquearon con el bloqueador A y el bloqueador B (kit de bloqueo de biotina endógena, Roche Diagnostics). Se aplicó el anticuerpo IgG CD31 anti-ratón en ratas (Dianova GmbH) a 2 gg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante 6 horas, seguidas de 32 minutos de incubación con anticuerpo IgG anti-rata biotinilado (Jackson ImmunoResearch Laboratories) a 2,2 gg/mL. La detección se realizó con esteptavidina-HRP D durante 16 minutos, seguida de incubación con DAB D y DAB H<2>O<2>D (kit DABMap, Ventana Medical Systems, Inc.) durante 8 minutos. Los portaobjetos se contratiñeron con hematoxilina II (Roche Diagnostics) durante 16 min, seguido de incubación con reactivo Bluing durante 4 minutos. Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX ® (Merck KGaA). Los portaobjetos inmunoteñidos se escanearon con el sistema automatizado de imagenología de portaobjetos Vectra® 2 (Perkin Elmer Inc.). El número vasos sanguíneos en todo el tumor se cuantificó mediante el recuento de los objetos CD31 positivos utilizando el software inform 2 (PerkinElmer Inc.). El área de la región tumoral se midió mediante evaluación del área de tinción de hematoxilina utilizando el software inform 2 software (PerkinElmer Inc.). El número de vasos sanguíneos se normalizó por el área de la región tumoral. La administración única de compuesto de prueba a dosis de 20, 60 y 180 gg/kg aumentó el número de vasos sanguíneos tumorales. Las relaciones de número de vasos sanguíneos en los grupos de dosificación de compuesto de prueba en comparación con el grupo no tratado se calcularon con la siguiente fórmula:

Relación de vasos tumorales = número de vasos sanguíneos del grupo de dosificación del

compuesto de prueba / número de vasos sanguíneos del grupo no tratado

compuesto de prueba / número de vasos sanguíneos del grupo no tratado)

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 19. Efecto en CAF a-SMA positivos en el modelo subcutáneo FaDu en ratones(Figura 14)

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con medio de cultivo para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 gL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 5 ratones en cada caso. Cada compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de ensayo en disolución salina se administró por vía intravenosa a 20 gg/kg, 60 gg/kg o 180 gg/kg. Cinco días o 5 días después de la administración única, se recogieron muestras tumorales y se fijaron con fijador de zinc IHC (BD Pharmingen) a 4 °C durante 24 h. Los tejidos integrados en parafina se seccionaron (3 gm), se montaron en portaobjetos cargados positivamente y se secaron al aire. Las secciones se desparafinaron, se acondicionaron y los antígenos se recuperaron utilizando microondas con EDTA 1 mM a pH 6,0. Las secciones se bloquearon con 1 % de BSA en TBS. Se aplicó un anticuerpo monoclonal anti-a-SMA de ratón conjugado con fosfatasa alcalina (clone 1A4, Sigma) a 5 gg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante 2,5 h. La detección se realizó con kit de sustrato Fast red II (Nichirei Bioscience Inc.). Las secciones se contratiñeron con hematoxilina de Mayer (Muto Pure Chemicals) durante 50 segundos. Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX (Merck KGaA). Los portaobjetos inmunoteñidos se escanearon con el sistema automatizado de imagenología de portaobjetos Vectra 2 (Perkin Elmer Inc.). El área de la región a-SMA positiva en todo el tumor se cuantificó mediante el recuento de los objetos a-SMA positivos utilizando el software inform 2 (PerkinElmer Inc.). El área de la región tumoral se midió mediante evaluación del área de tinción de hematoxilina utilizando el software inform 2 software (PerkinElmer Inc.). El área de la región a-SMA positiva se normalizó por el área de la región tumoral. La administración única del compuesto de prueba redujo significativamente el área a-SMA positiva a dosis de 60 y 180 pg/kg el día 3 y a dosis de 180 pg/kg el día 6. Se calculó una tasa de supresión del área a-SMA positiva del grupo de dosificación del compuesto de prueba con la siguiente fórmula:

Relación de a-SMA = área de a-SMA del grupo de dosificación del compuesto de prueba / área de a-SMA del grupo no tratado

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 20. Efectos sobre tenascina-C y EDA-fibronectina en el modelo subcutáneo FaDu en ratones(Figura 15)

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con medio de cultivo para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Diez días después de la inoculación celular, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 5 ratones en cada caso. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. El Compuesto (1) (180 pg/kg) y Cetuximab (CTX, Erbitux®, Merck Serono Co. Ltd.) (10 mg/kg) se diluyeron con disolución salina y se inyectaron por vía intravenosa el día 1. Cinco días después de la administración única, se recogieron muestras tumorales y se fijaron con fijador de zinc IHC (BD Pharmingen) a 4 °C durante 24 h. Los tejidos integrados en parafina se seccionaron (3 pm), se montaron en portaobjetos cargados positivamente y se secaron al aire. Las secciones se desparafinaron, se acondicionaron, y los antígenos se recuperaron utilizando microondas con EDTA 1 mM a pH 6,0 para tenascina-C. Para EDA-fibronectina no fue necesario el procedimiento de recuperación de antígenos. Las secciones se incubaron con disolución bloqueante BLOXALL (Vector Labs) durante 10 min para bloquear la peroxidasa endógena y con reactivo bloqueante de Ig Mouse on Mouse (Vector Labs) durante 1 hora, y entonces con suero de caballo normal al 2,5 % durante 30 minutos. Para la tinción inmunohistológica de tenascina-C se aplicó anticuerpo monoclonal anti-tenascina-C de ratón (clon 4C8MS, IBL) a 5 pg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante la noche a 4 °C. Para la tinción inmunohistoquímica de EDA-fibronectina se aplicó el anticuerpo monoclonal anti-EDA-fibronectina (clon IST-9, Abcam) a 1,5 pg/mL. Las secciones se incubaron con el anticuerpo durante 1 h a temperatura ambiente. La detección se realizó con kit de polímero de peroxidasa Mouse On Mouse ImmPRESS™ (Vector Labs). Las secciones se contratiñeron con hematoxilina de Mayer (Muto Pure Chemicals) durante 50 segundos. Las secciones se deshidrataron en etanoles graduados, se desengrasaron en sustitución de xileno y se cubrieron con DPX (Merck KGaA). Los portaobjetos inmunoteñidos se escanearon con el sistema automatizado de imagenología de portaobjetos Vectra 2 (Perkin Elmer Inc.). Los niveles de expresión tanto de tenascina-C como de ED- A fibronectina se redujeron en los tumores tratados con el Compuesto (1) y CTX en comparación con los tumores de control.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 21. Efectos antitumorales en el modelo de xenoinjerto subcutáneo FaDu en combinación con cetuximab en ratones(Figura 16)

Un carcinoma de células escamosas humanas de la línea celular FaDu de cabeza y cuello (SCCHN), que había sido cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 5 x 107 células/mL con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones atímicos (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, 7 semanas de edad, Charles River Japan Inc.). Nueve días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral lmmv) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Sobre la base del TV, los ratones fueron agrupados aleatoriamente (día 1). Cada grupo consistía en seis ratones. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. El Compuesto (1) (20, 60, 180 pg/kg) y Cetuximab (CTX, Erbitux®, Merck Serono Co. Ltd.) (10 mg/kg) se diluyeron con disolución salina y se inyectaron por vía intravenosa el día 1. Los cambios de RTV de cada grupo se mostraron en laFigura 16.A dosis de 180 pg/kg y 60 pg/kg, las eficacias antitumorales del Compuesto (1) con CTX eran mayores que las de la monoterapia de CTX con regresión tumoral. La eficacia antitumoral del Compuesto (1) a dosis de 20 pg/kg en combinación con CTX tendía a ser mayor que la de la monoterapia de CTX.

Ejemplo de prueba farmacológica 22. Efectos antitumorales en modelos de xenoinjerto de sarcoma de tejidos blandos en ratones como monoterapia(Figura 17)

MES-SA

Una línea celular MES-SA de sarcoma uterino humano, que se había cultivado en un medio RPMI-1640 que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 2 x 108 células/ml con disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular, y la suspensión se mezcló con Geltrex® (Thermo Fisher Scientific Inc., #A1413202) en una relación de 1:1 para preparar una suspensión celular en una concentración de of 1 x 108 células/mL. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Seis días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

Volumen tumoral (mm-) = Diámetro más largo (mm) x Diámetro más corto (mm) x Diámetro

más corto (mm)/2

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. A propósito, el experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en 6 ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 180 pg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). La actividad antitumoral se observó con retraso en el crecimiento tumoral en el grupo tratado.

HT-1080

Una línea celular HT-1080 de fibrosarcoma humano, que había sido cultivada en un medio E-MEM que contenía 10 % de FBS, NEAA y antibióticos, se ajustó a una concentración de 3 x 107 células/mL con medio para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones atímicos (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, 6 semanas de edad, Charles River Japan Inc.). Seis días después de la inoculación celular (día 1), se midió la longitud y la anchura de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Sobre la base del TV, los ratones fueron agrupados aleatoriamente (día 1). Cada grupo consistía en seis ratones. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. El Compuesto (1) (180 pg/kg) se diluyó con disolución salina y se inyectó por vía intravenosa el día 1 y el día 8. Los cambios de RTV de cada grupo se mostraron en laFigura 17.La actividad antitumoral se observó con regresión tumoral en el grupo tratado.

CTG-2041

Se implantaron s.c. fragmentos tumorales de angiosarcoma humano CTG-2041 en el flanco izquierdo de ratones hembra. El crecimiento tumoral se controló dos veces por semana mediante un calibrador digital para calcular el volumen del tumor según la siguiente fórmula de cálculo:

más corto (mm)/2

Cuando el volumen de los tumores alcanza aproximadamente 200 mm3, los animales se emparejan según el volumen tumoral en grupos de tratamiento o control y se inicia la dosificación el día 1. Cada grupo consistía en cinco ratones. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. El Compuesto (1) (100 pg/kg) se diluyó en disolución salina y se inyectó por vía intravenosa el día 1 y el día 8. Los cambios de RTV de cada grupo se mostraron en laFigura 17.La actividad antitumoral se observó con regresión tumoral en el grupo tratado.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 23. Efectos antitumorales en modelos de xenoinjerto de sarcoma de cáncer de endometrio en ratones como monoterapia(Figura 18)

HEC-108

Una línea celular HEC-108 de cáncer de endometrio humano, que había sido cultivada en un medio E-MEM que contenía 15 % de FBS y antibióticos, se ajustó a una concentración de 7,14 x 107 células/mL con medio para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 150 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones atímicos (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, hembra, 6 semanas de edad, Charles River Japan Inc.). Trece días después de la inoculación celular (día 1), se midió la longitud y la anchura de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Sobre la base del TV, los ratones fueron agrupados aleatoriamente (día 1). Cada grupo consistía en seis ratones. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. El Compuesto (1) (180 pg/kg) se diluyó en disolución salina y se inyectó por vía intravenosa el día 1 y el día 8. Los cambios de RTV de cada grupo se mostraron en la Figura 18. La actividad antitumoral se observó con retraso en el crecimiento tumoral en el grupo tratado.

AN3CA

Una línea celular AN3CA de cáncer de endometrio humano, que se había cultivado en un medio E-MEM que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1,4 x 108 células/ml con disolución salina equilibrada de Hank para preparar una suspensión celular, y la suspensión se mezcló con Geltrex® (Thermo Fisher Scientific Inc., #A1413202) en una relación de 1:1 para preparar una suspensión celular en una concentración de of 7 x 107 células/mL. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 6 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Doce días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto ( mm)/2

Volumen Inmoral relativo (RTV) = Volumen tumoral (día X) /Volumen tumoral (el primer día)

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. El experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en cinco ratones en cada caso. El compuesto de prueba se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 180 pg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). La actividad antitumoral se observó con regresión tumoral en el grupo tratado.

Ejemplo de prueba farmacológica 24. Inhibición de crecim iento en líneas celulares de NCI-H23, HCC1954 y MES-SA

Ensayo de inh ibición de crecim iento de NCI-H23

En este ensayo se midieron las actividades inhibidoras de crecimiento del Compuesto D-6 (Ejemplo de referencia 26), E-2, G-4, H-2, I-2, J-1, K-2, L-6, M-3 y N-1 humano NCI-H23. Se mantuvieron células NCI-H23 en medio RPM-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Sigma, 172012) y penicilina y estreptomicina (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191) en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 pL de suspensión de células NCI-H23 ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 pL de cada compuesto en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir la sustancia de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración de la sustancia de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se resume en la Tabla 14.

Ensayo de inh ibición de crecim iento de HCC1954

En este ensayo se midieron las actividades inhibidoras de crecimiento del Compuesto D-6 (Ejemplo de referencia 26), E-2, G-4, H-2, I-2, J-1, K-2, L-6, M-3 y N-1 en una línea celular de cáncer de mama humano HCC1954. Se mantuvieron células HCC1954 en medio RPMI-1640 modificado para contener L-glutamina 2 mM, HEPES 10 mM, piruvato sódico 1 mM, 4500 mg/L de glucosa y 1500 mg/L de bicarbonato sódico (ATCC 30-2001) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Sigma, 172012) y penicilina y estreptomicina (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191) en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 pL de suspensión de células HCC1954 ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 pL de cada compuesto en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir la sustancia de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración de la sustancia de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se resume en la Tabla 14.

Ensayo de inh ibición de crecim iento de MES-SA

En este ensayo se midieron las actividades inhibidoras de crecimiento del Compuesto D-6 (Ejemplo de referencia 26), E-2, G-4, H-2, I-2, J-1, K-2, L-6, M-3 y N-1 en una línea celular de cáncer de pulmón humano MES-SA. Se mantuvieron células MES- SA en medio Rp M-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: Sigma, 172012) y penicilina y estreptomicina (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191) en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Becton, Dickinson and Company, 353219) se añadieron 75 pL de suspensión de células MES- SA ajustada a una concentración de 4x104 células/mL con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C) Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 25 pL de cada compuesto en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo luminiscente de viabilidad celular CellTiter-Glo® (Promega) con un lector EnVision 2103 Multilabel (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir la sustancia de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración de la sustancia de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se resume en la Tabla 14.

Tabla 14

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 25. Mecanismos moleculares de la reducción de CAP a-SMA positivo mediante un sistema de cultivoin vitro

La expresión de a-SMA se indujo en fibroblastos humanos normales de BJ tras cocultivo con células FaDu, y la expresión se atenuó mediante tratamiento con A83-01, un potente inhibidor selectivo del receptor TGF-p(Figura 19A).Estos resultados sugerían que TGF-p desempeña un papel importante como mediador de la inducción de a-SMA en este sistema. Además, el análisis de inmunofluorescencia reveló que el tratamiento con el Compuesto (1) interfería con la inducción de a-SMA por TGF-p en células BJ sin actividad inhibidora del crecimiento(Figura 19A, Figura 20A).

El Compuesto (1) no cambió significativamente la fosforilación inducida por TGF-p ni la localización nuclear de Smad2/3(Figuras 20D-20E),pero redujo la activación de la vía PI3K/AKT/mTOR, que desempeña un papel esencial en la expresión de a-SMA inducida por TGF-p(Figuras 19Cy 19F,Figuras 20B-20C).Además, el tratamiento con TGF-p reforzó la expresión de p-tubulina y la formación de redes de microtúbulos, que disminuyeron con el cotratamiento con el Compuesto (1) en células BJ(Figura 19D).Bajo las mismas condiciones experimentales, las formación potenciada de adhesiones focales, que se detectaron como estructuras punteadas con un anticuerpo contra FAK fosforilado en tirosina-397, después de que la estimulación con TGF-p descendiera en células BJ mediante tratamiento con el Compuesto (1)(Figura 19E).Muchos complejos de señalización se ensamblan en sitios de adhesión focal, y estos complejos envían diversas señales aguas abajo, incluyendo las implicadas en la vía PI3K/AKT/mTOR. Véase, por ejemplo, Sulzmaier et. al. "FAK in cancer: mechanistic findings and clinical applications", Nature Reviews Cancer 2014, 14, 598-610. De hecho, el tratamiento con defactinib, un inhibidor de FAK, disminuyó claramente el nivel de expresión de a-SMA,así como la fosforilación de la proteína ribosómica S6 inducida por TGF-p en células BJ(Figuras 19G-19H).Todos los fenómenos mencionados anteriormente se observaron también en otros fibroblastos humanos normales (células TIG3)(Figuras 21A-21H).

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 26. Ensayo de inhibición del crecim iento de líneas celulares de carcinoma de vejiga

En este ensayo se midió la actividad inhibidora del crecimiento del Compuesto (1) en líneas celulares de carcinoma de vejiga humano RT4, RT112/84 y UM-UC-3. Se mantuvieron células RT4 y RT112/84 en medio RPMI-1640 (FUJiFiLM Wako Pure Chemical Corporation, 189-02025) que contenía 10 % de suero bovino fetal (FBS: SIGMALife Science, 172012-500ML) y penicilina y estreptomicina (FUJIFILM Wako Pure Chemical Industries, 168-23191) en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Se mantuvieron células UM-UC-3 en un medio E-MEM (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, 051 -07615) que contenía 10 % de FBS, piruvato sódico 1 mM (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, 190-14881) y penicilina y estreptomicina en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). A cada pocillo de una placa de 96 pocillos (Corning, 3904) se añadieron 90 pL de suspensión de cada célula ajustada a una concentración de 5,55x103 células/mL (RT4 o UM-UC-3) o 3,33x104 células/mL (RT112/84) con el medio de cultivo, y se incubaron las células durante la noche en un incubador con 5 % de CO2 (37 °C). Al día siguiente se añadieron a cada pocillo 10 pL Compuesto (1) en series de dilución triple suspendidas en el medio de cultivo, y se incubó el producto resultante durante 3 días en un incubador con 5 % de CO<2>(37 °C). Entonces se determinó la viabilidad celular mediante ensayo CellTiter-Glo® 2.0 (Promega Corporation, G9243) con un lector de placas multimodal ARVO-X4 (Perkin-Elmer, Wellesley, MA). El valor de los pocillos que contenían celdas sin añadir los compuestos de prueba se definió como 100 % y el valor de los pocillos que no contenían células se definió como 0 %. Se calculó la concentración del compuesto de prueba necesaria para inhibir el crecimiento celular en 50 % (es decir, un valor IC<50>), y esta se muestra en la Tabla 15.

Tabla 15

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 27. Efecto antitumoral en el modelo de xenoinjerto HS-SY-II en ratones como monoterapia(Figure 22)

Una línea celular HS-SY-II de sarcoma sinovial humano, que había sido cultivada en un medio DMEM que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 1 x 108 células/mL con Geltrex al 50 % (Thermo Fisher Scientific) en disolución salina equilibrada de Hanks para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 5 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Treinta días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. El experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en seis ratones en cada caso. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 90 pg/kg o 180 pg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). El retraso del crecimiento tumoral se observó en el grupo tratado con 90 pg/kg y la regresión tumoral se observó en el grupo tratado con 180 pg/kg.

Ejemplo de referencia de prueba farmacológica 28. Efecto antitumoral en el modelo de xenoinjerto HuTu 80 en ratones como monoterapia(Figura 23)

Una línea celular HuTu 80 duodenal humana, que había sido cultivada en un medio EMEM que contenía 10 % de FBS y penicilina-estreptomicina, se ajustó a una concentración de 3 x 107 células/mL en PBS para preparar una suspensión celular. La suspensión celular se inoculó en un volumen de 100 pL en una parte subcutánea de un flanco derecho de ratones desnudos de 7 semanas de edad (CAnN.Cg-Foxn1 nu/CrlCrlj, hembra, Charles River Laboratories Japan Inc.). Siete días después de la inoculación celular (día 1), se midió el diámetro más corto y el diámetro más largo de un tumor en cada ratón mediante el uso de un calibrador digital electrónico (Digimatic™ caliper, Mitutoyo Corporation) para calcular el volumen del tumor según las siguientes fórmulas de cálculo:

más corto (mm)/2

Sobre la base de los volúmenes de tumores obtenidos el día 1, se agruparon los ratones de tal manera que los promedios de volúmenes tumorales eran sustancialmente iguales entre los grupos. El experimento se llevó a cabo en grupos que consistían en seis ratones en cada caso. El Compuesto (1) se disolvió en DMSO y se almacenó una disolución en el congelador antes del uso. Inmediatamente antes de la administración, la disolución madre se diluyó con disolución salina. El compuesto de prueba en disolución salina se administró por vía intravenosa una vez a la semana a 45, 90 o 180 gg/kg durante 2 semanas (el día 1 y el día 8). El retraso del crecimiento tumoral se observó en el grupo tratado con 45 y 90 gg/kg y la regresión tumoral se observó en el grupo tratado con 180 gg/kg. La regresión tumoral (%) para el Compuesto (1) se muestra en la Tabla 16.

Tabla 16

EQUIVALENTES Y ALCANCE

En las reivindicaciones, artículos como "un" "una" y "el" pueden significar uno o más de uno, a menos que se indique lo contrario o se desprenda del contexto de otro modo. Las reivindicaciones o descripciones que incluyen "o" entre uno o más miembros de un grupo se consideran satisfechas si uno, más de uno o todos los miembros de un grupo están presentes, se emplean o son relevantes para un determinado producto o proceso, a menos que se indique lo contrario o se desprenda del contexto de otro modo. La invención incluye realizaciones en las que exactamente un miembro del grupo está presente, se emplea o es relevante de otro modo para un determinado producto o proceso. La invención incluye realizaciones en las que más de uno o todos los miembro del grupo están presentes, se emplean o son relevantes de otro modo para un determinado producto o proceso.

Cuando los elementos se presentan como listas, por ejemplo en formato de grupo Markush, también se divulga cada subgrupo de elementos y se puede eliminar cualquier elemento del grupo. Debe entenderse que, en general, cuando se hace referencia a la invención o a aspectos de la invención en el sentido de que comprendan elementos y/o características particulares, ciertas realizaciones de la invención o aspectos de la invención consisten o consisten esencialmente en tales elementos y/o características. A efectos de simplicidad, esas realizaciones no se han establecido específicamente de manera textual en el presente documento. También se observa que los términos "comprende" y "contiene" pretenden ser abiertos y permiten la inclusión de elementos o pasos adicionales. Cuando se indican intervalos, se incluyen los puntos finales.

Los expertos en la materia reconocerán o serán capaces de determinar muchos equivalentes a las realizaciones específicas descritas en el presente documento utilizando simplemente la experimentación rutinaria. El alcance de las presentes reivindicaciones descritas en este documento no pretende limitarse a la anterior descripción, sino que es establecido en las reivindicaciones adjuntas.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la Fórmula (I):

y sales y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde: RN1 y RN2 son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de nitrógeno, opcionalmente en donde RN1 y RN2 se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido; RP1 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de oxígeno; RX es hidrógeno u -ORXa; RY es hidrógeno u -ORYa; RXa y RYa son independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, acilo opcionalmente sustituido, o un grupo protector de oxígeno, opcionalmente en donde RXa y RYa se unen junto a los átomos intermedios para formar heterociclilo opcionalmente sustituido; y n es 1 o 2; y en donde cada ejemplo de un sustituyente de átomo de carbono se selecciona independientemente de halógeno, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -ORaa, -ON(Rbb)2, -N(Rbb)2, -N(Rbb)3+X-, -N(ORcc)Rbb, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO2H, -CHO, -C(ORcc)3, -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)2, -C(=O)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa, -Si(Raa)3, -OSi(Raa)3 -C(=S)N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa, -SC(=S)SRaa, -SC(=O)SRaa, -OC(=O)SRaa, -SC(=O)ORaa, -SC(=O)Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -OP(=O)(Raa)2, -OP(=O)(ORcc)2, -P(=O)(N(Rbb)2)2, -OP(=O)(N(Rbb)2)2, -NRbbP(=O)(Raa)2, -NRbbP(=O)(ORcc)2, -NRbbP(=O)(N(Rbb)2)2, -P(Rcc)2, -P(ORcc)2, -P(Rcc)3+X-, -P(ORcc)3+X-, -P(Rcc)4, -P(ORcc)4, -OP(Rcc)2, -OP(Rcc)3+X-, -OP(ORcc)2, -OP(ORcc)3+X-, -OP(Rcc)4, -OP(ORcc)4, -B(Raa)2, -B(ORcc)2, -BRaa(ORcc), alquilo C1-10, perhaloalquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-10, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 y heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; o dos hidrógenos geminales en un átomo de carbono están reemplazados por el grupo =O, =S, =NN(Rbb)2, =NNRbbC(=O)Raa, =NNRbbC(=O)ORaa, =NNRbbS(=O)2Raa, =NRbb o =NORcc; cada ejemplo de un sustituyente de átomo de nitrógeno se selecciona independientemente de hidrógeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)(ORcc)2, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(N(Rcc)2)2, alquilo C1-10, perhaloalquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-10, carbocíclico C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rcc unidos a un átomo de N se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; cada ejemplo de un sustituyente de átomo de oxígeno es un grupo protector de oxígeno, que se selecciona independientemente de -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Wc)3+X-, -P(ORcc)2, -P(ORcc)3+X-, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2 y -P(=O)(N(Rbb)2)2; cada ejemplo de un sustituyente de átomo de azufre es un grupo protector de azufre, que se selecciona independientemente de -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3+X-, -P(ORcc)2, -P(ORcc)3+X-, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2 y -P(=O)(N(Rbb)2)2; cada heteroarilo es un radical de un sistema de anillo aromático 4n+2 monocíclico o policíclico de 5-14 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1-4 heteroátomos de anillo provistos en el sistema de anillo aromático, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre; cada heterociclilo es un radical de un sistema de anillo no aromático de 3 a 14 miembros que tiene átomos de carbono de anillo y 1 a 4 heteroátomos de anillo, en donde cada heteroátomo se selecciona independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre; cada grupo protector de nitrógeno es independientemente -OH, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, alquilo C1-10 (por ejemplo aralquilo, heteroaralquilo), alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-10, carbocíclico C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 o heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; y cada ejemplo de Raa se selecciona, independientemente, de alquilo C1-10, perhaloalquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-10, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Raa se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; cada ejemplo de Rbb se selecciona, independientemente, de hidrógeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -P(=O)(N(Rcc)2)2, alquilo C1-10, perhaloalquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-1 0, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rbb se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; cada ejemplo de Rcc se selecciona, independientemente, de hidrógeno, alquilo C1-10, perhaloalquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, heteroalquilo C1-10, heteroalquenilo C2-10, heteroalquinilo C2-10, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-14 miembros, arilo C6-14 y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rcc se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-14 miembros o de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; cada ejemplo de Rdd se selecciona, independientemente, de halógeno, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -ORee, -ON(Rff)2, -N(Rff)2, -N(Rff)3+X-, -N(ORee)Rff, -SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -C(=NRff)ORee, -OC(=NRff)Ree, -OC(=NRff)ORee, -C(=NRff)N(Rff)2, -OC(=NRff)N(Rff)2, -NRffC(=NRff)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, -OSi(Ree)3, -C(=S)N(Rff)2, -C(=O)SRee, -C(=S)SRee, -SC(=S)SRee, -P(=O)(ORee)2, -P(=O)(Ree)2, -OP(=O)(Ree)2, -OP(=O)(ORee)2, alquilo C1-6, perhaloalquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, heteroalquilo C1-6, heteroalquenilo C2-6, heteroalquinilo C2-6, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-10 miembros, arilo C6-10, heteroarilo de 5-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, acilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rgg, o dos sustituyentes Rdd geminales pueden unirse para formar =O o =S; cada ejemplo de Ree se selecciona, independientemente, de alquilo C1-6, perhaloalquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, heteroalquilo C1-6, heteroalquenilo C2-6, heteroalquinilo C2-6, carbociclilo C3-10, arilo C6-10, heterociclilo de 3-10 miembros y heteroarilo de 3-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rgg; cada ejemplo de Rff se selecciona, independientemente, de hidrógeno, alquilo C1-6, perhaloalquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, heteroalquilo C1-6, heteroalquenilo C2-6, heteroalquinilo C2-6, carbociclilo C3-10, heterociclilo de 3-10 miembros, arilo C6-10 y heteroarilo de 5-10 miembros, o dos grupos Rff se unen para formar un anillo de heterociclilo de 3-10 miembros o de heteroarilo de 5-10 miembros, en donde cada alquilo alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está sustituido independientemente por 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rgg; cada ejemplo de Rgg es, independientemente, halógeno, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -Oalquilo C1-6, -ON(alquilo C1-6)2, -N(alquilo C1-6)2, -N(alquilo C1-6)3+X-, -NH(alquilo C1-6)2+X-, -NH2(alquilo C1-6)+X-, -NH3+X-, -N(Oalquilo C1-6)(alquilo C1-6), -N(OH)(alquilo C1-6), -NH(OH), -SH, -Salquilo C1-6, -SS(alquilo C1-6), -C(=O)(alquilo C1-6), -CO2H, -CO2(alquilo C1-6), -OC(=O)(alquilo C1-6), -OCO2(alquilo C1-6), -C(=O)NH2, -C(=O)N(alquilo C1-6)2, -OC(=O)NH(alquilo C1-6), -NHC(=O)(alquilo C1-6), -N(alquilo C1-6)C(=O)(alquilo C1-6), -NHCO2(alquilo C1-6), -NHC(=O)N(alquilo C1 -6)2, -NHC(=O)NH(alquilo C1 -6), -NHC(=O)NH2, -C(=NH)O(alquilo C1 -6), -OC(=NH)(alquilo C1 -6), -OC(=NH)Oalquilo C1-6, -C(=NH)N(alquilo C1-6)2, -C(=NH)NH(alquilo C1-6), -C(=NH)NH2, -OC(=NH)N(alquilo C1 -6)2, -OC(=NH)NH(alquilo C1-6), -OC(=NH)NH2, -NHC(=NH)N(alquilo C1-6)2, -NHC(=NH)NH2, -NHSO2(alquilo C1-6), -SO2N(alquilo C1-6)2, -SO2NH(alquilo C1-6), -SO2NH2, -SO2(alquilo C1-6), -SO2O(alquilo C1-6), -OSO2(alquilo C1-6), -SO(alquilo C1-6), -Si(alquilo C1-6)3, -Osi(alquilo C1-6)3 -C(=S)N(alquilo C1-6)2, C(=S)NH(alquilo C1-6), C(=S)NH2, -C(=O)S(alquilo C1-6), -C(=S)Salquilo C1-6, -SC(=S)Salquilo C1-6, P(=O)(Oalquilo C1-6)2, -P(=O)(alquilo C1-6)2, -OP(=O)(alquilo C1-6)2, -OP(=O)(Oalquilo C1-6)2, alquilo C1-6, perhaloalquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, heteroalquilo C1-6, heteroalquenilo C2-6, heteroalquinilo C2-6, carbociclilo C3-10, arilo C6-10, heterociclilo de 3-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros; o dos sustituyentes Rgg gemínales pueden unirse para formar =O o =S; y X- es un contraión; siempre que el compuesto no sea el siguiente:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es uno de las siguientes fórmulas:
3. El compuesto de la reivindicación 1 o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde n es 1.
4. El compuesto de la reivindicación 1 o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde n es 2.
5. El compuesto de la reivindicación 1 o 2, o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde al menos uno de RN1 y RN2 es hidrógeno, opcionalmente en donde RN1 y RN2 son hidrógeno.
6. El compuesto de la reivindicación 1 o 2 o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde RP1 es hidrógeno.
7. El compuesto de la reivindicación 1 o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde RX es hidrógeno; o en donde RX es -ORXa; o en donde RX es OH; o en donde RY es hidrógeno; o en donde RY es ORYa; o en donde RY es OH; o en donde RX es hidrógeno y RY es -ORYa; opcionalmente en donde RX es hidrógeno y RY es -OH.
8. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde RX es -ORXa, y RY es -ORYa; opcionalmente en donde RX y RY son - OH; o en donde RX y RY son hidrógeno.
9. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
10. El compuesto según la reivindicación 9, en donde el compuesto tiene la estructura:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
11. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-10, una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.
12. El compuesto, o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, o la composición farmacéutica según la reivindicación 11, a) para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa; opcionalmente b) en donde la enfermedad proliferativa es un tumor o cáncer; opcionalmente c) en donde el tumor o cáncer está caracterizado por angiogénesis, invasión o metástasis; o d) para uso en la inhibición del crecimiento del tumor o del cáncer.
13. El compuesto, o la sal o el estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica del mismo, para uso según cualquiera de las reivindicaciones 12b) a d), en donde el cáncer o el tumor es: (a) cáncer de cabeza y cuello; (b) cáncer de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN); (c) cáncer de mama; (d) cáncer de mama HER2 positivo; (e) cáncer de mama HER2 negativo; (f) cáncer de mama triple negativo; (g) cáncer colorrectal; (h) cáncer de esófago; (i) adenocarcinoma de esófago; (j) cáncer uterino; (k) cáncer de ovario; (l) un sarcoma; (m) sarcoma uterino, fibrosarcoma o angiosarcoma; (n) sarcoma de tejidos blandos; (o) cáncer gastrointestinal, opcionalmente en donde el cáncer gastrointestinal es cáncer anal, cáncer colorrectal, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico, tumor del estroma gastrointestinal (GIST), cáncer de duodeno, cáncer de intestino delgado, cáncer de colon o cáncer de intestino grueso; (p) cáncer genitourinario, opcionalmente en donde el cáncer es cáncer de vejiga, cáncer de uretra, cáncer de riñón, cáncer testicular, cáncer de células germinales, cáncer de próstata o cáncer de pene; (q) cáncer de pulmón; (r) cáncer de bronquio, carcinoma alveolar, mesotelioma, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, adenocarcinoma de pulmón, hamartoma condromatoso o adenocarcinoma papilar; (s) cáncer exocrino/endocrino, opcionalmente en donde el cáncer exocrino/endocrino es cáncer de tiroides, cáncer de páncreas, cáncer de glándula suprarrenal, cáncer neuroendocrino, carcinoma de glándulas sebáceas o carcinoma de glándulas sudoríparas; y/o (t) cáncer de endometrio.
14. El compuesto, o la sal o el estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica del mismo, para uso según cualquiera de las reivindicaciones 12b) a d) o 13 en combinación con: (a) una terapia con mAb anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico), opcionalmente en donde el cáncer es un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (SCCHN); y opcionalmente en donde el mAb anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico) es cetuximab; (b) una terapia con mAb HER2 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano), opcionalmente en donde el cáncer es cáncer de mama; y opcionalmente en donde el mAb HER2 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano) es trastuzumab; y/o (c) un anticuerpo de la proteína de muerte programada 1 (PD-1).
15. El compuesto, o la sal o el estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica del mismo para uso según la reivindicación 12 o 13 en combinación con radioterapia.
16. Un kit que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-10, o una sal o un estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica de la reivindicación 11.