ES2978108T3

ES2978108T3 - Dispositivos y métodos para disociar una muestra de tejido biológico

Info

Publication number: ES2978108T3
Application number: ES15838851T
Authority: ES
Inventors: Aaron J Middlebrook; Smita Ghanekar; Brian David Warner; Albert Mach; David Vrane
Original assignee: Becton Dickinson and Co
Current assignee: Becton Dickinson and Co
Priority date: 2014-09-04
Filing date: 2015-08-04
Publication date: 2024-09-05
Anticipated expiration: 2035-08-04
Also published as: WO2016036464A1; CN106604985A; EP3189129B1; US20160069781A1; JP2017525382A; JP6691107B2; EP3189129A4; US10173220B2; CN106604985B; EP3189129C0; EP3189129A1

Abstract

Se proporcionan disociadores de tejido configurados para descomponer una muestra de tejido biológico. Los aspectos de los disociadores de tejido pueden incluir una carcasa que tiene un extremo distal y un extremo proximal, una cuchilla de corte colocada en el extremo distal de la carcasa y un actuador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro de la carcasa. También se proporcionan métodos de uso de los disociadores de tejido, así como kits que incluyen los disociadores de tejido. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Dispositivos y métodos para disociar una muestra de tejido biológico

Introducción

El procesamiento de una muestra de tejido biológico suele ser necesario en numerosas aplicaciones terapéuticas, de diagnóstico y de investigación. El procesamiento de tejidos para lograr las composiciones de células individuales deseadas se logra comúnmente mediante desestabilización mecánica seguida de digestión enzimática. En general, la eficiencia y eficacia de la digestión enzimática es proporcional al área superficial de la superficie de contacto entre el tejido y la enzima. Se puede lograr un área superficial aumentada triturando el tejido por medios mecánicos antes de la exposición enzimática. La disociación de tejido a menudo puede requerir protocolos de separación laboriosos y numerosas manipulaciones del tejido para separar la muestra de tejido deseada de otro material biológico. El procesamiento excesivo del tejido a veces puede conducir a aumentos significativos en la muerte celular, es decir, pérdida de viabilidad funcional y/o daño morfológico, y el subprocesamiento, que se suele realizar a través del corte manual usando hojas de bisturí en una placa de Petri, produce fragmentos de tejido que pueden tener un amplio intervalos de distribución de tamaño que varía enormemente de una muestra a la siguiente o de un operador a otro. De forma similar, el tiempo requerido para procesar ciertos tipos de muestras (p. ej., tejidos sanos) pueden requerir un grado diferente de disociación que otros (p. ej., tejido canceroso o necrótico), haciendo que la disociación de muestras biológicas complejas sea difícil e ineficiente.

Existe una necesidad constante de desarrollar métodos simplificados de preparación de muestras de tejido que proporcionen muestras de tejido enriquecidas y de alta calidad para usar en una variedad de diferentes aplicaciones de terapéuticos, diagnóstico e investigación. Los dispositivos y métodos que proporcionan muestras de tejido de alta calidad con poca o ninguna pérdida (física o funcional) son de interés.

El documento de referencia US 2004/018575 A1 describe un dispositivo y método para la recogida y preparación de una muestra para el análisis directo de un analito.

El documento de referencia US 2009/084202 A1 describe un recipiente de trituración que permite una trituración altamente eficiente incluso de muestras duras.

El documento de referencia US 2012/201726 A1 describe un dispositivo de preparación y dispensación de reactivos.

El documento de referencia US 2002/197631 A1 describe un dispositivo y un método para la homogeneización, el procesamiento, la detección y el análisis de muestras biológicas.

El documento de referencia FR 1270511 A describe un método y aparato para la separación de tejido constituyente endocelular.

El documento de referencia US 4 350 768 A describe un método y aparato para la preparación de una suspensión líquida de células tisulares independientes individuales.

El documento de referencia US 6209439 B1 describe un cortador de ajo que tiene un alojamiento y una estructura en forma de vaso de precipitados para recibir ajo de manera giratoria en el alojamiento.

La patente europea EP 2191 750 A2 de referencia describe un dispositivo para prensar y/o cortar hierbas o especias frescas tales como el ajo.

Compendio

Los aspectos de la presente descripción incluyen disociadores de tejido configurados para desestabilizar una muestra de tejido biológico. Los disociadores de tejido según la invención incluyen un alojamiento que tiene un extremo distal y un extremo proximal, una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. Los accionadores de tejido, en algunas realizaciones, incluyen un depósito de líquido que se extiende desde un extremo proximal hasta un extremo distal del accionador de tejido y un émbolo configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del depósito de líquido.

Los aspectos de la descripción también incluyen métodos para disociar una muestra de tejido biológico. Los métodos según la invención incluyen insertar un tejido biológico en un alojamiento del disociador de tejido, presionar el tejido biológico contra las cuchillas de corte ubicadas en el extremo distal del alojamiento desplazando el accionador de tejido desde el extremo proximal al extremo distal del alojamiento de una manera suficiente para producir una muestra de tejido biológico disociado que tenga componentes de forma y tamaño idénticos.

También se proporcionan kits que incluyen un alojamiento, una cuchilla de corte y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento.

Breve descripción de las figuras

La invención puede entenderse mejor a partir de la siguiente descripción detallada con la ayuda de los dibujos adjuntos. En los dibujos se incluyen las siguientes figuras:

LaFIG. 1Arepresenta la configuración de un disociador de tejido dentro de un recipiente según ciertas realizaciones.

LaFIG. 1Brepresentan la unión de manera liberable un disociador de tejido a un recipiente según ciertas realizaciones.

LaFIG. 2Arepresenta una cuchilla de corte que está configurada para unirse de manera liberable a un alojamiento de disociador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 2Brepresenta la unión de una cuchilla de corte a un alojamiento de disociador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 3ilustra aspectos de un accionador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 4ilustra una vista lateral externa de un disociador de tejido que tiene un accionador de tejido que incluye un depósito de líquido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 5ilustra un ejemplo de un accionador de tejido que tiene un depósito de líquido dentro de una cámara interior del accionador de tejido para ciertas realizaciones.

LaFIG. 6representa una vista despiezada de componentes de un disociador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 7Ailustra una vista superior de los componentes de un disociador de tejido según ciertas realizaciones. LaFIG. 7Bilustra una vista superior de componentes de un disociador de tejido según ciertas realizaciones. LaFIG. 8ilustra una sección transversal de un disociador de tejido donde el extremo distal de un accionador de tejido está acoplado con la cuchilla de corte en el extremo distal del alojamiento según ciertas realizaciones. LaFIG. 9Ailustra una vista lateral de un disociador de tejido que tiene una placa separadora y pasadores de alineación entre la placa separadora y el accionador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 9Bilustra el acoplamiento por etapas del accionador de tejido con la placa separadora para preparar fragmentos de tejido en un disociador de tejido según ciertas realizaciones.

LaFIG. 9Cilustra una vista lateral de un disociador de tejido que tiene una placa separadora y un conducto para proporcionar líquido al extremo distal del accionador de tejido según ciertas realizaciones.

Descripción detallada

Se proporcionan disociadores de tejido configurados para romper una muestra de tejido biológico. Los aspectos de los disociadores de tejido pueden incluir un alojamiento que tiene un extremo distal y un extremo proximal, una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. También se proporcionan métodos para usar los disociadores de tejido, así como kits que incluyen los disociadores de tejido.

Antes de describir la presente invención con mayor detalle, debe entenderse que esta invención no se limita a las realizaciones particulares descritas, y que, por tanto, puede variar.

También debe entenderse que la terminología usada en la presente memoria tiene la finalidad de describir realizaciones particulares únicamente y no pretende ser limitante, pues el alcance de la presente invención estará limitado únicamente por las reivindicaciones adjuntas.

Cuando se proporciona un intervalo de valores, se entiende que cada valor intermedio, hasta la décima parte de la unidad del límite inferior a menos que el contexto indique claramente lo contrario, entre el límite superior e inferior de ese intervalo y cualquier otro valor establecido o intermedio en ese intervalo establecido, se engloba dentro de la invención. Los límites superior e inferior de estos intervalos más pequeños pueden incluirse independientemente en los intervalos más pequeños y también están abarcados dentro de la invención, sujetos a cualquier límite específicamente excluido en el intervalo establecido. Cuando el intervalo indicado incluye uno o ambos límites, los intervalos que excluyen uno o ambos de esos límites incluidos también se incluyen en la invención.

A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente memoria tienen el mismo significado que se entiende comúnmente por un experto en la técnica a la que pertenece esta invención. Aunque cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en la presente memoria también se puede usar en la práctica o prueba de la presente invención, ahora se describen métodos y materiales ilustrativos representativos.

La cita de cualquier publicación es para su descripción anterior a la fecha de presentación y no debe interpretarse como una admisión de que la presente invención no tiene derecho a ser previa a dicha publicación en virtud de una invención anterior. Además, las fechas de publicación proporcionadas pueden ser diferentes de las fechas de publicación reales que pueden necesitar confirmarse de forma independiente.

Se observa que, como se emplea en esta memoria y en las reivindicaciones adjuntas, las formas en singular "un/o", "una" y "el/la" incluyen referentes en plural salvo que el contexto indique claramente lo contrario.

Se observa además que las reivindicaciones pueden redactarse para excluir cualquier elemento opcional. Como tal, esta declaración pretende servir como base antecedente para el uso de terminología tan exclusiva como "únicamente", "solamente" y similares en relación con la enumeración de elementos de reivindicación, o el uso de una limitación "negativa".

Como se ha resumido anteriormente, la presente descripción proporciona un disociador de tejido configurado para romper una muestra de tejido biológico. Al describir adicionalmente las realizaciones de la descripción, en primer lugar se describen con mayor detalle los disociadores de tejidos que incluyen un alojamiento con un extremo distal y un extremo proximal, una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento y un accionador de tejidos configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. A continuación, se describen métodos para preparar una muestra de tejido biológico disociado con los presentes disociadores de tejido. También se proporcionan kits para preparar una muestra de tejido biológico disociado.

Dispositivos para disociar una muestra de tejido biológico

Como se ha resumido anteriormente, los aspectos de la presente descripción incluyen un disociador de tejido configurado para disociar una muestra de tejido biológico. El término "disociar" se usa en la presente memoria en su sentido convencional para referirse a romper y separar la muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido de menor tamaño, tal como en 2 o más fragmentos de tejido, tal como 5 o más, tal como 10 o más, tal como de 25 o más, tal como 50 o más e incluyendo romper y separar una muestra de tejido biológico en 100 o más fragmentos de tejido. En realizaciones, una muestra de tejido biológico dada se considera disociada, si después de la disociación, 2 o más, tal como 5 o más, tal como 10 o más, tal como de 25 o más, tal como 50 o más, tal como 100 o más fragmentos de tejido que originalmente estaban asociados de manera estable entre sí ya no están asociados de manera estable entre sí, es decir, que se pueden mover libremente entre sí. En ciertas realizaciones, los métodos incluyen romper un órgano o tejido para recoger los componentes más pequeños que forman colectivamente el órgano o tejido.

Como se emplea en esta memoria, la expresión "muestra de tejido biológico" se usa en su sentido convencional para referirse a un organismo completo, planta, hongos o un subconjunto de tejidos o partes que componen el organismo. Las muestras de tejido biológico pueden obtenerse de una fuentein vitro(p. ej., tejido cultivado en cultivo de laboratorio) o de una fuentein vivo(p. ej., un sujeto mamífero, un sujeto humano, etc.). En algunas realizaciones, la muestra de tejido se obtiene de una fuentein vitro.En algunas realizaciones, la muestra de tejido biológico se obtiene de una fuentein vivo,donde en algunos casos, los tejidos derivados de un sujeto se cultivan, almacenan o manipulan antes de la evaluación. Las fuentesin vivoincluyen organismos pluricelulares vivos y pueden producir muestras de tejido no diagnósticas o diagnósticas.

En ciertas realizaciones, la fuente de la muestra de tejido es un "mamífero" o es "de mamífero", donde estos términos se usan ampliamente para describir organismos que están dentro de la clase de los mamíferos, incluyendo los órdenes de los carnívoros (p. ej., perros y gatos), roedores (p. ej., ratones, cobayas y ratas) y primates (p. ej., seres humanos, chimpancés y monos). En algunos casos, los sujetos son seres humanos. Las muestras de tejido biológico pueden incluir tejido de sujetos humanos de ambos sexos y en cualquier etapa de desarrollo (es decir, neonatos, niños, jóvenes, adolescentes, adultos), donde en ciertas realizaciones el sujeto humano es un joven, adolescente o adulto. Si bien la presente descripción puede aplicarse a muestras de un sujeto humano, debe entenderse que los métodos también pueden llevarse a cabo en muestras de otros sujetos animales (es decir, en "sujetos no humanos") tales como, pero sin limitación, pájaros, ratones, ratas, perros, gatos, ganado y caballos.

En algunas realizaciones, las muestras de tejido biológico incluyen tejido de una parte componente de un sujeto humano, tales como órganos, incluyendo, pero sin limitación, tejido tegumentario (p. ej., secciones de la piel), tejido oral (p. ej., bucal, lingual, palatino, encías), tejido respiratorio (p. ej., faringe, laringe, tráquea, bronquios, pulmones, diafragma), tejido gastrointestinal (p. ej., esófago, estómago, hígado, vesícula biliar, páncreas, intestinos, colon, recto y ano), tejido cardiovascular (p. ej., corazón, vasos sanguíneos), tejido endocrino (p. ej., hipotálamo, glándula pituitaria, cuerpo pineal o glándula pineal, tiroides, paratiroides, glándulas suprarrenales) y tejido genitourinario (riñones, uréteres, vejiga, uretra, ovarios, trompas de Falopio, útero, vagina, glándulas mamarias, testículos, conducto deferente, vesículas seminales, próstata, pene), tejido muscular, tejido nervioso (p. ej., cerebro, médula espinal, nervios), así como tejido esquelético blando (cartílago, ligamentos, tendones). Las muestras biológicas pueden ser cualquier tipo de tejido orgánico, incluyendo tanto tejido sano como enfermo (p. ej., canceroso,, maligno, necrótico, etc.)

Los dispositivos disociadores de tejido de interés pueden configurarse para disociar muestras de tejido biológico de tamaño variable, dependiendo del tipo de tejido y tamaño de alojamiento (como se describe con mayor detalle a continuación) donde, en algunos casos, la longitud de las muestras de tejido biológico puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluso de 10 cm a 25 cm y la anchura de las muestras de tejido biológico puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluyendo de 10 cm a 25 cm. El espesor de las muestras de tejido biológico también puede variar, variando de 0,001 mm a 50 mm, tal como de 0,005 mm a 25 mm, tal como de 0,01 mm a 15 mm, tal como de 0,05 mm a 10 mm e incluso de 0,1 mm a 5 mm. Por ejemplo, los dispositivos disociadores de tejido de interés pueden configurarse para disociar muestras de tejido biológico que tengan un área superficial que varía de 0,01 a 100 cm2, tal como de 0,05 a 50 cm2, tal como de 0,1 a 25 cm2, tal como de 0,5 a 15 cm2, tal como de 0,75 a 10 cm2, tal como de 1 a 7,5 cm2, e incluso de 2 a 5 cm2. Los presentes disociadores de tejido pueden configurarse para disociar muestras de tejido biológico que tienen un volumen que varía de 0,01 a 100 cm3, tal como 0,02 a 50 cm3, tal como de 0,05 a 25 cm3, tal como de 0,1 a 15 cm3, tal como de 0,5 a 10 cm3, tal como de 0,75 a 7,5 cm3, e incluso de 1 a 5 cm3.

En ciertas realizaciones, la muestra de tejido biológico es una muestra que se ha precargado en un alojamiento de disociador y se almacena en el alojamiento durante un período de tiempo predeterminado antes de que se disocie la muestra de tejido biológico. Por ejemplo, la muestra de tejido biológico puede precargarse en un alojamiento de disociador y congelarse en un congelador. La cantidad de tiempo que se almacena la muestra de tejido biológico antes de disociar la muestra de tejido biológico puede variar, tal como de 0,1 horas o más, tal como de 0,5 horas o más, tal como de 1 hora o más, tal como de 2 horas o más, tal como de 4 horas o más, tal como de 8 horas o más, tal como de 16 horas o más, tal como de 24 horas o más, tal como de 48 horas o más, tal como de 72 horas o más, tal como de 96 horas o más, tal como de 120 horas o más, tal como de 144 horas o más, tal como de 168 horas o más e incluyendo precargar la muestra de tejido biológico en el alojamiento del disociador 240 horas o más antes de disociar la muestra de tejido biológico o puede variar tal como de 0,1 horas a 240 horas antes de disociar la muestra de tejido biológico, tal como de 0,5 horas a 216 horas, tal como de 1 hora a 192 horas e incluyendo de 5 horas a 168 horas antes de romper la muestra de tejido biológico. Por ejemplo, la muestra de tejido biológico puede precargarse en un alojamiento de disociador en una ubicación remota (p. ej., en el domicilio usando un kit casero o en el consultorio de un médico) y se envía a un laboratorio para su procesamiento según los presentes métodos. Por "ubicación remota" se entiende una ubicación distinta de la ubicación en la que se obtiene y precarga la muestra de tejido en el recipiente. Por ejemplo, una ubicación remota podría ser otra ubicación (p. ej., oficina, laboratorio, etc.) en la misma ciudad, otra ubicación en una ciudad diferente, otra ubicación en un estado diferente, otra ubicación en un país diferente, etc., en relación con la ubicación del dispositivo disociador de tejido, p. ej., como se describe con mayor detalle a continuación. En algunos casos, dos ubicaciones están alejadas entre sí si están separadas entre sí por una distancia de 10 m o mayor, tal como de 50 m o mayor, incluso de 100 m o mayor, p. ej., de 500 m o mayor, de 1000 m o mayor, de 10.000 m o mayor, etc.

Como se ha resumido anteriormente, los disociadores de tejido según ciertas realizaciones incluyen un alojamiento, una cuchilla de corte ubicada en un extremo distal del alojamiento y un accionador de tejido que está configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. El alojamiento tiene un extremo distal y un extremo proximal con paredes entre el extremo distal y el extremo proximal que forman conjuntamente una cámara interior dentro del alojamiento que está configurada para recibir una o más muestras de tejido biológico. En algunas realizaciones, las paredes exteriores del alojamiento y la cámara interior tienen la misma forma de sección transversal donde las formas de sección transversal de interés incluyen, pero sin limitación, formas de sección transversal rectilíneas, p. ej., cuadrados, rectángulos, trapezoides, triángulos, hexágonos, etc., formas de sección transversal curvilíneas, p. ej., círculos, óvalos, así como formas irregulares, p. ej., una porción inferior parabólica acoplada a una porción superior plana. Por ejemplo, tanto las paredes exteriores del alojamiento como la cámara interior pueden tener secciones transversales circulares u ovaladas, o tanto las paredes exteriores del alojamiento como la cámara interior pueden tener secciones poligonales (p. ej., secciones transversales octogonales). En otras realizaciones, las paredes exteriores del alojamiento y la cámara interior dentro del alojamiento tienen diferentes formas de sección transversal (p. ej., alojamiento que tiene una sección transversal circular y una cámara interior que tiene una sección transversal cuadrada o poligonal).

Dependiendo de la cantidad y del tipo de muestra de tejido que se esté procesando, el tamaño de la cámara interior del alojamiento puede variar, donde, en algunos casos, la longitud de la cámara interior del alojamiento puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluyendo de 10 cm a 25 cm y la anchura de la cámara interior del alojamiento puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluyendo de 10 cm a 25 cm. Cuando la cámara interior del alojamiento tiene una sección transversal cilíndrica, el diámetro puede variar, en algunas realizaciones, de 1 cm a 10 cm, tal como de 2 cm a 9 cm, tal como de 3 cm a 8 cm e incluso de 4 cm a 7 cm. Por consiguiente, el volumen de la cámara interior dentro del alojamiento puede variar, variando de 0,01 a 100 cm3, tal como de 0,05 a 50 cm3, tal como de 0,1 a 25 cm3, tal como de 0,5 a 15 cm3, tal como de 0,75 a 10 cm3, tal como de 1 a 7,5 cm3, e incluso de 2 a 5 cm3.

En algunas realizaciones, el alojamiento del disociador de tejido incluye una porción cilíndrica proximal que define un eje longitudinal y una porción troncocónica distal que termina en un orificio que es transversal al eje longitudinal del alojamiento. La longitud de la porción cilíndrica proximal (medida a lo largo del eje longitudinal) puede variar de 1 cm a 25 cm, tal como de 2,5 cm a 22,5 cm, tal como de 5 cm a 20 cm e incluso de 7,5 cm a 15 cm. La longitud de la porción troncocónica distal (medida a lo largo del eje longitudinal) también puede variar, de 1 cm a 5 cm, tal como de 1,5 cm a 4,5 cm, tal como de 2 cm a 4 cm e incluso de 2 cm a 3 cm. Dependiendo del tipo de muestra de tejido biológico (p. ej., tejido duro, tejido blando), el ángulo de las paredes troncocónicas con respecto al eje longitudinal del alojamiento puede variar, en ciertas realizaciones, variando de 120° a 160°, tal como en un ángulo que varía de 125° a 155°, tal como de 130° y 150° e incluso un ángulo que varía de 135° a 145°.

Como se describe con mayor detalle a continuación, un accionador de tejido puede desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro de la cámara interior del alojamiento en incrementos discretos. Cuando el accionador de tejido se desplaza en incrementos discretos, en algunas realizaciones, la cámara interior del alojamiento puede incluir una o más muescas o protuberancias que proporcionan incrementos predeterminados para desplazar el accionador de tejido dentro del alojamiento. Por ejemplo, la cámara interior del alojamiento puede incluir 2 o más muescas o protuberancias, tal como 3 o más muescas o protuberancias, tal como 4 o más muescas o protuberancias, tal como 5 o más muescas o protuberancias e incluso 10 o más muescas.

En algunas realizaciones, la cámara interior del alojamiento tiene paredes roscadas y está configurada para enroscarse con las paredes exteriores del accionador de tejido. Todas o parte de las paredes de la cámara interior pueden estar roscadas, tal como el 10 % o más de la longitud de la cámara interior, tal como el 15 % o más, tal como el 20 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 30 % o más, tal como el 40 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 80 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más. En algunas realizaciones, toda la longitud (es decir, el 100 %) de la cámara interior del alojamiento está roscada.

El alojamiento puede formarse a partir de cualquier material adecuado que incluye, pero sin limitación, vidrio, metal o plástico, tal como un plástico flexible o rígido, materiales poliméricos o termoplásticos. Por ejemplo, los plásticos poliméricos adecuados pueden incluir policarbonatos, cloruro de polivinilo (PVC), poliuretanos, poliéteres, poliamidas, poliimidas o copolímeros de estos termoplásticos, tales como PETG (tereftalato de polietileno modificado con glicol), entre otros materiales plásticos poliméricos. En ciertas realizaciones, el alojamiento está formado por un poliéster, donde los poliésteres de interés pueden incluir, pero sin limitación, alojamientos hechos de poli(tereftalatos de alquileno) tales como tereftalato de polietileno) (PET), PET de calidad de envase (un copolímero hecho a base de monoetilenglicol, ácido tereftálico y otros comonómeros tales como ácido isoftálico, ciclohexeno-dimetanol, etc.), poli(tereftalato de butileno) (PBT) y poli(tereftalato de hexametileno); poli(adipatos de alquileno) tales como adipato de polietileno), poli(adipato de 1,4-butileno) y poli(adipato de hexametileno); poli(soberatos de alquileno) tales como poli(soberato de etileno); poli(sebacatos de alquileno) tales como poli(sebacato de etileno); poli(s-caprolactona) y poli(p-propiolactona); poli(isoftalatos de alquileno) tales como poli(isoftalato de etileno); poli(2,6-naftalenodicarboxilatos de alquileno) tal como 2,6-naftaleno-dicarboxilato de polietileno); poli(sulfonil-4,4'-dibenzoatos de alquileno) tal como poli(sulfonil-4,4'-dibenzoato de etileno); poli(alquilendicarboxilatos de p-fenileno) tales como dicarboxilatos de poli(p-fenilen-etileno); poli(alquilendicarboxilatos de trans-1,4-ciclohexanodiílo) tales como poli(etilendicarboxilato de trans-1,4-ciclohexanodiílo); poli(alquilendicarboxilatos de 1,4-ciclohexano-dimetileno) tales como poli(etilendicarboxilato de 1,4-ciclohexano-dimetileno); poli(alquilendicarboxilatos de [2.2.2]-biciclooctano-1,4-dimetileno) tales como poli(etilen-dicarboxilato de [2.2.2]-biciclooctano-1,4-dimetileno); polímeros y copolímeros de ácido láctico tales como (S)-polilactida, (R,S)-polilactida, poli(tetrametilglicolida) y poli(lactida-co-glicolida); y policarbonatos de bisfenol A, 3,3'-dimetilbisfenol A, 3,3',5,5'-tetraclorobisfenol A, 3,3',5,5'-tetrametilbisfenol A; poliamidas tales como poli(p-fenileno tereftalamida); Mylar™.

En algunas realizaciones, los disociadores de tejido de interés están configurados para colocarse dentro y unirse de manera liberable a un recipiente. La expresión "de manera liberable" se usa en la presente memoria en su sentido convencional para significar que el disociador de tejido se puede separar y volver a unir libremente al recipiente. Todo o parte del alojamiento del disociador de tejido puede estar configurado para encajar dentro del recipiente, tal como el 10 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más del alojamiento del disociador de tejido puede configurarse para encajar dentro del recipiente. En ciertas realizaciones, todo el alojamiento del disociador de tejido está configurada para colocarse dentro de un recipiente.

Según la invención, el disociador de tejido está configurado para unirse a un recipiente en el extremo proximal del alojamiento, en donde el recipiente es un cilindro de jeringuilla o un tubo de centrífuga, en algunos ejemplos que no forman parte de la presente invención, el disociador de tejido puede unirse al extremo distal del alojamiento, en una posición entre los extremos distal y proximal del alojamiento o cualquier combinación de los mismos. Según la invención, el disociador de tejido está configurado para unirse de manera liberable al extremo proximal del alojamiento. En algunos ejemplos que no forman parte de la presente invención, el disociador de tejido está configurado para unirse de manera liberable al extremo distal del alojamiento. Según la invención, el extremo proximal del alojamiento del disociador de tejido está configurado para unirse de manera liberable a la abertura del recipiente.

El alojamiento puede incluir uno o más elementos de sujeción para unir el disociador al recipiente. Los elementos de sujeción adecuados pueden incluir, pero sin limitación, elementos de sujeción de gancho y bucle, pestillos, muescas, ranuras, alfileres, anclajes, bisagras, velcro, adhesivos no permanentes o una combinación de los mismos.

En ciertos casos, la pared exterior del alojamiento del disociador de tejido está roscada y está configurada para enroscarse con la pared interior del recipiente. Dependiendo del tipo de recipiente empleado, toda o parte de la pared exterior del alojamiento del disociador de tejido puede estar roscada, tal como el 10 % o más de la longitud de la pared exterior del alojamiento del disociador de tejido, tal como el 15 % o más, tal como el 20 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 30 % o más, tal como el 40 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 80 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más. En algunas realizaciones, toda la longitud (es decir, el 100 %) de la pared exterior del alojamiento del disociador de tejido está roscada.

En algunas realizaciones, los disociadores de tejido de interés incluyen una tapa configurada para conectar el extremo proximal del alojamiento al recipiente. Por ejemplo, la tapa puede ser una tapa de rosca, una tapa a presión o una tapa que conecta el alojamiento del disociador de tejido y el recipiente mediante un adhesivo permanente, adhesivo semipermanente o no permanente. En ciertos casos, la tapa forma un sello fluídico entre el alojamiento del disociador de tejido y el recipiente.

Los recipientes de interés son un cilindro de jeringuilla o un tubo de centrífuga, en ejemplos que no forman parte de la presente invención, los recipientes pueden ser un tubo de extracción de sangre, tubo de ensayo, tubo de cultivo, tubo de halcón, tubo eppendorf de microtubo, recipiente de recogida de muestras, recipiente de transporte de muestras, placa de Petri. En algunas realizaciones, el recipiente es un cilindro de jeringuilla y los disociadores de tejido de interés incluyen un cilindro de jeringuilla; un alojamiento colocada dentro del cilindro de jeringuilla, teniendo el alojamiento un extremo distal y un extremo proximal; una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento; y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. En otras realizaciones, el recipiente es un tubo de centrífuga y los disociadores de tejido de interés incluyen un tubo de centrífuga; un alojamiento colocado dentro del tubo de centrífuga, teniendo el alojamiento un extremo distal y un extremo proximal; una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento; y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento.

Por ejemplo, la FIG. 1A ilustra un disociador de tejido configurado para colocarse dentro y unirse de manera liberable a una jeringuilla según ciertas realizaciones de la presente descripción. El disociador de tejido incluye el alojamiento101, la cuchilla de corte102y el accionador de tejido103, donde el alojamiento101está configurado para encajar dentro del cilindro104de la jeringuilla. El alojamiento101está completamente insertado en el cilindro104de la jeringuilla y el extremo proximal del alojamiento101se une de manera liberable a la abertura del cilindro104de la jeringuilla con el elemento de sujeción101a. La unión del extremo proximal del alojamiento101a la abertura del cilindro104de la jeringuilla con el elemento de sujeción101ase muestra con mayor detalle en la FIG. 1B, que muestra el extremo del cilindro104de la jeringuilla encajado y bloqueado dentro del elemento de sujeción101agirando el alojamiento para enganchar el extremo proximal del alojamiento al extremo de apertura del cilindro104de la jeringuilla.

Según la invención, una cuchilla de corte se encuentra ubicada en un extremo distal del alojamiento. Como se ha descrito anteriormente, la cuchilla de corte está configurada de manera que basta con presionar la muestra de tejido biológico contra la cuchilla de corte para disociar el tejido en una pluralidad de fragmentos de tejido. En algunas realizaciones, la cuchilla de corte incluye 1 o más cuchillas, tal como 2 o más cuchillas, tal como 3 o más cuchillas, tal como 5 o más cuchillas, tal como 10 o más cuchillas e incluso 25 o más cuchillas. Dependiendo de la forma deseada de los fragmentos de tejido disociados, la configuración de la cuchilla de corte puede variar. En algunos casos, la cuchilla de corte incluye una única cuchilla que atraviesa el extremo distal del alojamiento. Por ejemplo, en un ejemplo, la única cuchilla se encuentra ubicada a través de la línea media del extremo distal del alojamiento. En otro ejemplo, la cuchilla única se encuentra ubicada a una distancia predeterminada de la línea media del extremo distal del alojamiento, tal como a 1 mm o más desde la línea media del alojamiento, tal como a 2 mm o más, tal como a 3 mm o más, tal como a 5 mm o más, tal como a 7 mm o más e incluso a 10 mm o más de la línea media del extremo distal del alojamiento.

En algunas realizaciones, la cuchilla de corte está configurada como una serie de cuchillas, tal como una pluralidad de cuchillas dispuestas en filas paralelas. Por ejemplo, la cuchilla de corte puede estar dispuesta en 2 filas paralelas o más, tal como 3 filas paralelas o más, tal como 4 filas paralelas o más, tal como 5 filas paralelas o más, tal como 10 filas paralelas o más, tal como 15 filas paralelas o más, tal como 25 filas paralelas o más e incluso 50 filas paralelas o más. La distancia entre cada cuchilla puede variar, dependiendo del tamaño de los fragmentos de tejido disociados deseados y puede ser de 0,01 mm o mayor, tal como de 0,05 mm o mayor, tal como de 0,1 mm o mayor, tal como de 0,5 mm o mayor, tal como de 1 mm o mayor, tal como de 1,5 mm o mayor, tal como de 2 mm o mayor, tal como de 3 mm o mayor, tal como de 5 mm o mayor e incluso una distancia entre cuchillas de 10 mm o mayor. La distancia entre cada fila puede ser igual, diferente o alguna combinación de ambas condiciones. En algunos casos, la distancia entre cada fila de cuchillas es igual. En otros casos, la distancia entre cada fila de cuchillas es diferente. En otros casos más, una primera parte de las filas de cuchillas se encuentran ubicadas equidistantes entre sí, mientras que una segunda parte de filas de cuchillas se encuentran ubicadas a distancias variables entre sí.

En otras realizaciones, la cuchilla de corte está configurada como una pluralidad de cuchillas en forma de anillo dispuestas concéntricamente, tal como 2 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente, tal como 3 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente, tal como 5 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente, tal como 10 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente, tal como 25 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente e incluso 50 cuchillas o más en forma de anillo dispuestas concéntricamente o más. La distancia entre cada cuchilla puede variar, tal como 0,01 mm o más, tal como 0,05 mm o más, tal como 0,1 mm o más, tal como 0,5 mm o más, tal como 1 mm o más, tal como 1,5 mm o más, tal como 2 mm o más, tal como 3 mm o más, tal como 5 mm o más e incluso una distancia entre cuchillas de 10 mm o mayor. La distancia entre cada cuchilla puede ser igual, diferente o alguna combinación de ambas condiciones. En algunos casos, la distancia entre cada cuchilla es igual.

En otros casos, la distancia entre cada cuchilla es diferente. En otros casos más, una primera parte de las cuchillas se encuentran ubicadas equidistantes entre sí, mientras que una segunda parte de filas de cuchillas se encuentran ubicadas a distancias variables entre sí.

En ciertas realizaciones, la cuchilla de corte tiene una configuración de rejilla (es decir, la cuchilla de corte tiene una disposición plana de superficies de corte rectilíneas que interseccionan entre sí, tal como, p. ej., superficies de corte en forma de cuadrados, rectángulos o formas curvilíneas).

Cada unidad (p. ej., cuadrado, rectángulo) de las cuchillas de corte en forma de rejilla de interés puede ser congruente o incongruente o una combinación de los mismos. Dependiendo del tamaño de la cuchilla de corte y del tamaño del tejido disociado deseado, el área de cada unidad en las cuchillas de corte en forma de rejilla puede variar, variando de 0,01 mm2 a 100 mm2, tal como de 0,1 mm2 a 90 mm2, tal como de 0,5 mm2 a 80 mm2, tal como de 0,75 mm2 a 70 mm2, tal como 1 mm2 a 60 mm2 e incluso de 2 mm2 a 50 mm2. En ciertos casos, las cuchillas de corte de interés que tienen una configuración de rejilla son tamices de malla. El tamiz de malla puede ser cualquier tamiz de malla de tamaño conveniente, tal como un tamiz de malla 2 o menor, tal como un tamiz de malla 4 o menor, tal como un tamiz de malla 10 o menor, tal como un tamiz de malla 20 o menor, tal como un tamiz de malla 30 o menor, tal como un tamiz de malla 40 o menor, e incluso un tamiz de malla 60 o menor.

En algunas realizaciones, el presente disociador de tejido está configurado para disociar una muestra de tejido biológico en una pluralidad de componentes que tienen sustancialmente el mismo tamaño y forma. Por sustancialmente el mismo tamaño y forma se entiende que los presentes disociadores de tejido están configurados para disociar una muestra de tejido biológico en fragmentos de tejido que varían en forma o tamaño en un 5 % o menos, tal como en un 4,5 % o menos, tal como en un 4 % o menos, tal como en un 3,5 % o menos, tal como en un 3 % 0 menos, tal como en un 2,5 % o menos, tal como en un 2 % o menos, tal como en un 1,5 % o menos, tal como en un 1 % o menos, tal como en un 0,5 % o menos, tal como en un 0,1 % o menos e incluso estar configurados para disociar una muestra de tejido biológico en fragmentos de tejido que varían en forma o tamaño que varían en un 0,01 % o menos.

Por ejemplo, la cuchilla de corte puede estar configurada para disociar la muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido que varían en tamaño en un 5 % o menos, tal como en un 4,5 % o menos, tal como en un 4 % o menos, tal como en un 3,5 % o menos, tal como en un 3 % o menos, tal como en un 2,5 % o menos, tal como en un 2 % o menos, tal como en un 1,5 % o menos, tal como en un 1 % o menos, tal como en un 0,5 % o menos, tal como en un 0,1 % o menos e incluso estar configurada para disociar una muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido que varían en tamaño en un 0,01 % o menos. En ciertos casos, la cuchilla de corte está configurada para disociar una muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido que tienen tamaños idénticos.

En algunas realizaciones, la cuchilla de corte está configurada para disociar una muestra de tejido biológico en fragmentos de tejido que varían en forma en un 5 % o menos, tal como en un 4,5 % o menos, tal como en un 4 % o menos, tal como en un 3,5 % o menos, tal como en un 3 % o menos, tal como en un 2,5 % o menos, tal como en un 2 % o menos, tal como en un 1,5 % o menos, tal como en un 1 % o menos, tal como en un 0,5 % o menos, tal como en un 0,1 % o menos e incluso estar configurada para disociar una muestra de tejido biológico en fragmentos de tejido que varían en forma en un 0,01 % o menos. En ciertos casos, la cuchilla de corte está configurada para disociar una muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido que tienen la misma forma.

La cuchilla de corte se encuentra ubicada en el extremo distal del alojamiento. En algunas realizaciones, la cuchilla de corte está integrada en el alojamiento, incluso cuando la cuchilla de corte esté soldada o fijada a la carcasa mediante un adhesivo permanente.

En otras realizaciones, la cuchilla de corte está unida de manera liberable al alojamiento. Por "de manera liberable'' se entiende que la cuchilla de corte se puede separar y volver a unir libremente al extremo distal del alojamiento. Cuando la cuchilla de corte está unida de manera liberable al alojamiento, la cuchilla de corte puede sujetarse de forma no permanente al alojamiento mediante cualquier protocolo de unión conveniente, incluyendo, pero sin limitación, un elemento de sujeción de gancho y bucle, un pestillo, una muesca, una ranura, un alfiler, un anclaje, una bisagra, velcro, adhesivo no permanente, un tornillo roscado o una combinación de los mismos. En ciertos casos, la cuchilla de corte incluye una pared exterior roscada y está roscada con las paredes internas del alojamiento.

Las FIGS. 2A y 2B ilustran la unión de manera liberable de una cuchilla de corte al alojamiento de disociador de tejido según ciertas realizaciones. La FIG. 2A muestra una cuchilla de corte202antes de unirse al extremo distal del alojamiento201. La cuchilla de corte202incluye elementos de sujeción202aque están configurados para encajar en muescas dentro del extremo distal del alojamiento201. La FIG. 2B muestra la unión de la cuchilla de corte202al extremo distal del alojamiento201insertando elementos de sujeción202aen muescas201ay girando para asegurar la cuchilla de corte al extremo distal del alojamiento.

En ciertas realizaciones, la cuchilla de corte incluye uno o más alineadores para mantener la alineación con el accionador de tejido. Por ejemplo, la cuchilla de corte puede ser una rejilla plana e incluir uno o más orificios de alineación para alinearse con uno o más pasadores ubicados en el extremo distal del accionador de tejido. Por ejemplo, la cuchilla de corte puede incluir 1 o más orificios de alineación, tal como 2 o más orificios de alineación, tal como 3 o más orificios de alineación e incluso 4 o más orificios de alineación. Los orificios de alineación para alinear la cuchilla de corte con el extremo proximal del accionador de tejido pueden encontrarse en cualquier ubicación conveniente a lo largo del plano de la cuchilla de corte. Por ejemplo, uno o más orificios de alineación pueden encontrarse ubicados en el centro de la cuchilla de corte. En otras realizaciones, los orificios de alineación pueden encontrarse ubicados a lo largo del borde periférico de la cuchilla de corte. Cuando hay más de un orificio de alineación a lo largo del borde periférico de la cuchilla de corte, los orificios pueden ser equidistantes o pueden estar separados a diferentes distancias entre sí. Los orificios de alineación del plano de la cuchilla de corte pueden tener cualquier forma de sección transversal adecuada dependiendo del pasador de alineación en el extremo distal del accionador de tejido. Por ejemplo, la forma en sección transversal puede incluir, pero sin limitación, formas de sección transversal rectilíneas, p. ej., cuadrados, rectángulos, trapezoides, triángulos, hexágonos, etc., formas de sección transversal curvilíneas, p. ej., círculos, óvalos, así como formas irregulares, p. ej., una porción inferior parabólica acoplada a una porción superior plana. Cada orificio de alineación puede tener la misma o diferente forma de sección transversal, según lo deseado.

En ciertas realizaciones, la cuchilla de corte puede incluir o está incorporada en una placa separadora. En estas realizaciones, la placa separadora está configurada para retirar y retener tejido disociado de las púas del accionador de tejido después de pasar el tejido a través de la cuchilla de corte y retraer el accionador de tejido. Por ejemplo, la placa separadora puede estar configurada para retener el 90 % o más del tejido disociado pasado a través de la cuchilla de corte, tal como el 95 % o más, tal como el 97 % o más, tal como el 99 % o más, tal como el 99,5 % o más e incluso el 99,9 % o más. En ciertos casos, la placa separadora está configurada para eliminar todo (es decir, el 100 % del tejido disociado que pasa a través de las cuchillas de corte). Dicho de otro modo, cuando el tejido pasa a través de la cuchilla de corte y el accionador de tejido se retrae, la placa separadora está configurada para garantizar que poco, si algo de, tejido permanece en las púas del accionador de tejido.

La placa separadora puede estar acoplada físicamente a la cuchilla de corte, tal como mediante un elemento de sujeción (p. ej., elementos de sujeción de gancho y bucle, pestillos, muescas, ranuras, alfileres, anclajes, bisagras, Velcro) o por un adhesivo permanente o no permanente o una combinación de los mismos. En otras realizaciones, la cuchilla de corte se incorpora en la placa separadora donde la placa separadora está configurada tanto para disociar el tejido en contacto cuando se presiona con el accionador de tejido como para extraer y retener el tejido de las púas del accionador de tejido.

En algunas realizaciones, la cuchilla de corte es reutilizable. Por "reutilizable" se entiende que la cuchilla de corte es capaz de tener más de un solo uso donde hay poca o ninguna degradación o reducción en el rendimiento de la cuchilla de corte después de cada uso. Como tal, las cuchillas de corte en los presentes disociadores de tejido pueden reutilizarse 1 o más veces, tal como 2 o más veces, tal como 3 o más veces, tal como 5 o más veces, tal como 10 o más veces, tal como 25 o más veces, tal como 50 o más veces e incluso 100 o más veces.

En realizaciones, las cuchillas de corte muestran poca o ninguna degradación o reducción en el rendimiento después de cada uso. Las presentes cuchillas de corte se degradan en un 5 % o menos durante cada uso, tal como en un 4,5 % o menos, tal como en un 4 % o menos, tal como en un 3,5 % o menos, tal como en un 3 % o menos, tal como en un 2,5 % o menos, tal como en un 2 % o menos, tal como en un 1,5 % o menos, tal como en un 1 % o menos, tal como en un 0,5 % o menos e incluso la degradación es de un 0,1 % o menos durante cada uso. En ciertas realizaciones, no hay (es decir, hay un 0 % de) degradación de las cuchillas de corte después de cada uso. Por consiguiente, el rendimiento de las cuchillas de corte se reduce en un 5 % o menos después de cada uso, tal como en un 4,5 % o menos, tal como en un 4 % o menos, tal como en un 3,5 % o menos, tal como en un 3 % o menos, tal como en un 2,5 % o menos, tal como en un 2 % o menos, tal como en un 1,5 % o menos, tal como en un 1 % o menos, tal como en un 0,5 % o menos e incluso hay una reducción en el rendimiento en un 0,1 % o menos después de cada uso. En ciertas realizaciones, el rendimiento de las cuchillas de corte no se ve afectado en absoluto por cada uso.

Cuando las cuchillas de corte se reutilizan, los métodos pueden incluir además lavar las cuchillas de corte después de su uso o antes de su uso posterior, como se describe con mayor detalle a continuación. Las cuchillas de corte pueden lavarse mediante cualquier protocolo conveniente, tal como lavando con un disolvente, usando calor, radiación electromagnética (p. ej., luz ultravioleta) o por ultrasonidos, entre otros protocolos de lavado.

Como se ha resumido anteriormente, los presentes disociadores de tejido incluyen un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento. El término "desplazar" se refiere a mover el accionador de tejido dentro del alojamiento de una manera suficiente para poner en contacto la muestra de tejido biológico y presionar la muestra de tejido biológico contra las cuchillas de corte para disociar el tejido en una pluralidad de fragmentos de tejido. En realizaciones, el presente disociador de tejido está configurado para desplazarse a lo largo del eje longitudinal dentro del alojamiento y puede desplazarse a lo largo de toda o parte de la longitud de la cámara interior del alojamiento, tal como el 25 % o más de la longitud del alojamiento, tal como el 35 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 90 % o más, tal como el 95 % o más, tal como el 97 % o más e incluso el 99 % o más de la longitud del alojamiento. En ciertas realizaciones, el accionador de tejido se puede desplazar a lo largo de toda (es decir, del 100 %) la longitud del alojamiento.

En algunas realizaciones, el accionador de tejido está configurado para desplazarse en un movimiento de vaivén dentro del alojamiento, tal como moverse desde un extremo distal a un extremo proximal dentro del alojamiento y volver desde el extremo proximal al extremo distal dentro del alojamiento. Por ejemplo, el accionador de tejido está configurado para desplazarse en un movimiento de vaivén a lo largo del 25 % o más de la longitud del alojamiento, tal como el 35 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 90 % o más, tal como el 95 % o más, tal como el 97 % o más e incluso el 99 % o más de la longitud del alojamiento. En ciertas realizaciones, el accionador de tejido se puede desplazar en un movimiento de vaivén a lo largo de toda (es decir, del 100 %) la longitud del alojamiento.

La forma de la sección transversal del accionador de tejido puede variar, dependiendo de la forma de la cámara interior dentro del alojamiento, donde las formas de sección transversal de interés incluyen, pero sin limitación, formas de sección transversal rectilíneas, p. ej., cuadrados, rectángulos, trapezoides, triángulos, hexágonos, etc., formas de sección transversal curvilíneas, p. ej., círculos, óvalos, así como formas irregulares, p. ej., una porción inferior parabólica acoplada a una porción superior plana. En algunas realizaciones, el accionador de tejido y la cámara interior del alojamiento tienen la misma forma de sección transversal. Por ejemplo, tanto el accionador de tejido como la cámara interior del alojamiento pueden tener secciones transversales circulares u ovaladas o tanto el accionador de tejido como la cámara interior del alojamiento pueden tener una sección poligonal (p. ej., sección transversal octogonal). En otras realizaciones, el accionador de tejido y la cámara interior dentro del alojamiento tienen diferentes formas de sección transversal. Por ejemplo, el accionador de tejido puede tener una sección transversal curvilínea y la cámara interior del alojamiento puede tener una sección transversal poligonal o el accionador de tejido puede tener una sección transversal poligonal y la cámara interior del alojamiento puede tener una sección transversal curvilínea.

Dependiendo de la cantidad y del tipo de muestra de tejido que se esté procesando y del tamaño de la cámara interior del alojamiento, las dimensiones del accionador de tejido pueden variar donde, en algunos casos, la longitud del accionador de tejido puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluso de 10 cm a 25 cm y la anchura del accionador de tejido puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluso de 10 cm a 25 cm. Cuando el accionador de tejido tiene una sección transversal cilíndrica, el diámetro del accionador de tejido puede variar, en algunas realizaciones, de 1 cm a 10 cm, tal como de 2 cm a 9 cm, tal como de 3 cm a 8 cm e incluso de 4 cm a 7 cm.

En algunas realizaciones, todo o parte del accionador de tejido tiene una sección transversal que es sustancialmente del mismo tamaño que la cámara interior del alojamiento. Dicho de otro modo, las paredes exteriores del accionador de tejido están al ras de las paredes interiores del alojamiento. Por ejemplo, el 5 % o más de la longitud del accionador de tejido puede tener una sección transversal que sea sustancialmente del mismo tamaño que la cámara interior del alojamiento, tal como el 10 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más de la longitud del accionador de tejido puede tener una sección transversal que sea sustancialmente del mismo tamaño que la cámara interior del alojamiento. En ciertas realizaciones, toda la longitud del accionador de tejido tiene una sección transversal que es sustancialmente del mismo tamaño que la cámara interior del alojamiento. En algunos casos, las paredes exteriores del accionador de tejido forman un sello fluídico con la cámara interior del alojamiento. La expresión "sello fluídico'' se usa en la presente memoria en su sentido convencional para referirse a la ausencia de espacio suficiente para que el líquido fluya entre las paredes exteriores del accionador de tejido y la cámara interior del alojamiento. Por ejemplo, la parte distal del accionador de tejido puede formar un sello fluídico con la cámara interior del alojamiento. En otros casos, toda la longitud del accionador de tejido forma un sello fluídico con la cámara interior del alojamiento.

Como se describe con mayor detalle a continuación, el tejido se presiona en contacto y a través de la cuchilla de corte por el extremo distal del accionador de tejido. Como tal, el extremo distal del accionador de tejido puede configurarse para entrar en contacto con la muestra de tejido biológico. En algunas realizaciones, el extremo distal del accionador es plano. En otras realizaciones, el extremo distal del accionador de tejido tiene una forma convexa. En otras realizaciones más, el extremo distal del accionador de tejido incluye una o más protuberancias para entrar en contacto con la muestra de tejido biológico.

Según la invención, el extremo distal del accionador de tejido incluye una o más púas, tal como dos o más púas, tal como 3 o más púas, tal como 5 o más púas, tal como 10 o más púas, tal como 25 o más púas, tal como 50 o más púas e incluso 100 o más púas. En ciertos casos, las púas están dispuestas en una configuración de rejilla. Las púas pueden tener dimensiones que varían, dependiendo de la cuchilla de corte o del tipo de tejido que se está disociando (p. ej., variando según el espesor, la densidad, etc.). En algunas realizaciones, las púas pueden ser de 1 mm o mayores, tal como de 1,5 mm o mayores, tal como de 2 mm o mayores, tal como de 3 mm o mayores, tal como de 5 mm o mayores, tal como de 10 mm o mayores e incluso de 25 mm o mayores. Dependiendo del espacio entre las cuchillas de corte, las púas pueden tener una anchura de 1 mm o mayor, tal como de 2 mm o mayor, tal como de 5 mm o mayor e incluso de 10 mm o mayor. En ciertos casos, el extremo distal del accionador de tejido incluye un espacio entre las púas (es decir, espacios entre las púas). En estos casos, la distancia entre cada púa puede ser de 0,5 mm o mayor, tal como de 1 mm o mayor, tal como de 2 mm o mayor e incluso de 5 mm o mayor.

Las púas de interés pueden tener cualquier forma de sección transversal adecuada, dependiendo de la forma de la cuchilla de corte y la forma de los fragmentos de tejido disociados deseados. Las formas de sección transversal de las púas de interés incluyen, pero sin limitación, formas de sección transversal rectilíneas, p. ej., cuadrados, rectángulos, trapezoides, triángulos, hexágonos, etc., formas de sección transversal curvilíneas, p. ej., círculos, óvalos, así como formas irregulares, p. ej., una porción inferior parabólica acoplada a una porción superior plana.

En algunas realizaciones, las paredes exteriores del accionador de tejido incluyen uno o más alineadores configurados para orientar el accionador de tejido dentro de la cámara interior del alojamiento. Por ejemplo, las paredes exteriores del accionador de tejido pueden incluir una protuberancia de alineación, un carril de alineación, una muesca de alineación, una ranura de alineación, una rendija de alineación o una combinación de las mismas. Cuando las paredes exteriores del accionador de tejido incluyen uno o más alineadores, las paredes de la cámara interior del alojamiento también pueden incluir un alineador, tal como un alineador que es complementario al alineador de las paredes externas del accionador de tejido. Por ejemplo, cuando el accionador de tejido incluye una protuberancia de alineación, la cámara interior del alojamiento puede incluir una muesca de alineación. En otro ejemplo, cuando el accionador de tejido incluye una ranura de alineación, la cámara interior del alojamiento puede incluir un carril de alineación.

Dependiendo del desplazamiento del accionador de tejido dentro de la cámara interior del alojamiento, el tamaño del alineador puede variar. Por ejemplo, el alineador puede extenderse a lo largo de toda o parte de la longitud del accionador de tejido, tal como el 10 % o más de la longitud del accionador de tejido, tal como el 15 % o más, tal como el 20 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 30 % o más, tal como el 40 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 80 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más. En algunas realizaciones, el alineador se extiende por toda la longitud (es decir, el 100 %) del accionador de tejido. Por consiguiente, en las realizaciones, la longitud del alineador puede variar de 0,1 cm a 25 cm, tal como de 0,5 cm a 22,5 cm, tal como de 1 cm a 20 cm, tal como de 2,5 cm a 15 cm e incluso de 5 cm a 10 cm y la anchura del alineador puede variar de 0,01 cm a 5 cm, tal como de 0,05 cm a 2,5 cm, tal como de 0,1 cm a 2 cm e incluso de 0,5 cm a 1,5 cm.

Las paredes exteriores del accionador de tejido pueden incluir 1 o más alineadores, tal como 2 o más alineadores, tal como 3 o más alineadores, tal como 4 o más alineadores e incluyen 5 o más alineadores. Cuando el accionador de tejido incluye más de un alineador, cada alineador puede encontrarse ubicado en cualquier lugar del accionador de tejido según se desee. Por ejemplo, puede haber un alineador en un extremo distal, un extremo proximal, entre el extremo proximal y el extremo distal o una combinación de los mismos. Los alineadores pueden encontrarse ubicados en lados opuestos del accionador de tejido, tal como dos alineadores en lados opuestos en el extremo distal del accionador de tejido o dos alineadores en lados opuestos en el extremo proximal del accionador de tejido. En algunas realizaciones, el accionador de tejido incluye un primer alineador en el extremo distal y un segundo alineador en el extremo proximal.

En ciertas realizaciones, el extremo distal del accionador de tejido puede incluir uno o más alineadores que se acoplan con la cuchilla de corte. Por ejemplo, el extremo distal del accionador de tejido puede incluir uno o más pasadores de alineación que encajan y se alinean el accionador de tejido con la cuchilla de corte. Las dimensiones de los pasadores de alineación pueden variar, dependiendo del tamaño de los orificios de alineación ubicados en la cuchilla de corte. En realizaciones, la longitud de los pasadores de alineación puede variar de 0,1 cm a 25 cm, tal como de 0,5 cm a 22,5 cm, tal como de 1 cm a 20 cm, tal como de 2,5 cm a 15 cm e incluso de 5 cm a 10 cm y la anchura (p. ej., el diámetro) de la alineación puede variar de 0,01 cm a 5 cm, tal como de 0,05 cm a 2,5 cm, tal como de 0,1 cm a 2 cm e incluso de 0,5 cm a 1,5 cm. Cuando está presente más de un pasador de alineación, cada pasador de alineación puede tener una o más de las mismas dimensiones (es decir, longitud y anchura) o cada pasador de alineación puede tener diferentes dimensiones. Por ejemplo, cada pasador de alineación puede tener longitudes iguales o diferentes y puede tener anchuras iguales o diferentes. Los pasadores de alineación del extremo distal del accionador de tejido pueden tener cualquier forma de sección transversal adecuada dependiendo del orificio de alineación en la cuchilla de corte. Por ejemplo, la forma en sección transversal puede incluir, pero sin limitación, formas de sección transversal rectilíneas, p. ej., cuadrados, rectángulos, trapezoides, triángulos, hexágonos, etc., formas de sección transversal curvilíneas, p. ej., círculos, óvalos, así como formas irregulares, p. ej., una porción inferior parabólica acoplada a una porción superior plana. Cada pasador de alineación puede tener la misma o diferente forma de sección transversal, según lo deseado.

Dependiendo de la ubicación de los orificios de alineación en la cuchilla de corte, los pasadores de alineación del extremo distal del accionador de tejido pueden encontrase en cualquier ubicación conveniente, tal como en el centro del accionador de tejido o a lo largo del borde periférico. Cuando hay más de un pasador de alineación a lo largo del borde periférico del extremo distal del accionador de tejido, los pasadores de alineación pueden estar separados equidistantes o a distancias variables entre sí.

Como se describe con mayor detalle a continuación, el accionador de tejido puede desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro de la cámara interior del alojamiento. En algunas realizaciones, el accionador de tejido puede desplazarse continuamente dentro de la cámara interior. En otras realizaciones, el accionador de tejido puede desplazarse en incrementos discretos. Cuando el accionador de tejido se desplaza en incrementos discretos, en algunas realizaciones, el accionador de tejido puede incluir una o más muescas o protuberancias que proporcionan incrementos predeterminados para desplazar el accionador de tejido dentro del alojamiento. Por ejemplo, el accionador de tejido puede incluir 2 o más muescas o protuberancias, tal como 3 o más muescas o protuberancias, tal como 4 o más muescas o protuberancias, tal como 5 o más muescas o protuberancias e incluyendo 10 o más muescas o protuberancias.

En algunas realizaciones, las paredes exteriores del accionador de tejido están roscadas y configuradas para atornillarse con las paredes de la cámara interior del alojamiento. Todas o parte de las paredes exteriores del accionador de tejido pueden estar roscadas, tal como el 10 % o más de la longitud del accionador de tejido, tal como el 15 % o más, tal como el 20 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 30 % o más, tal como el 40 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 80 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más. En algunas realizaciones, toda la longitud (es decir, el 100 %) de las paredes exteriores del accionador de tejido está roscada.

La FIG. 3 ilustra aspectos de accionadores de tejido según ciertas realizaciones de la presente descripción. El accionador de tejido300incluye el extremo proximal301y el extremo distal302, que está configurado para entrar en contacto y presionar una muestra de tejido biológico a través de cuchillas de corte para disociar la muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido. Como se muestra en la FIG. 3, el extremo distal302del accionador de tejido300incluye una serie de púas302aque están configuradas para acoplarse con la muestra de tejido biológico. Las púas pueden configurarse para encajar entre las cuchillas de corte cuando se disocia la muestra de tejido biológico. El accionador de tejido300también incluye protuberancia de alineación303configuradas para orientar el accionador de tejido dentro del alojamiento del disociador de tejido. La tapa304está configurada para conectar el alojamiento del disociador de tejido a un recipiente.

En ciertas realizaciones, el accionador de tejido incluye un depósito de líquido dentro de una cámara interior del accionador de tejido. El depósito de líquido dentro de la cámara interior del accionador de tejido puede tener cualquier forma adecuada, teniendo en algunos casos la misma forma de sección transversal que el accionador de tejido. Por ejemplo, el depósito de líquido puede tener una forma de sección transversal rectilínea, tal como un cuadrado, rectángulo, trapezoide, triángulo, hexágono o una forma de sección transversal curvilínea, tal como un círculo, óvalo, así como formas de sección transversal irregulares, tal como una parte inferior parabólica acoplada a una parte superior plana.

El depósito de líquido puede extenderse por toda o parte de la longitud dentro del accionador de tejido, tal como el 10 % o más de la longitud dentro del accionador de tejido, tal como el 15 % o más, tal como el 20 % o más, tal como el 25 % o más, tal como el 30 % o más, tal como el 40 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 80 % o más, tal como el 90 % o más e incluso el 95 % o más. En algunas realizaciones, la cámara interior se extiende por toda la longitud (es decir, el 100 %) dentro del accionador de tejido.

En algunas realizaciones, el depósito de líquido incluye más de un compartimento, tal como 2 o más compartimentos, tal como 3 o más compartimentos, tal como 4 o más compartimentos e incluyendo 5 o más compartimentos. Cada compartimento puede estar separado por una partición, tal como una barrera permeable, semipermeable o impermeable. En algunas realizaciones, la barrera es una partición que tiene uno o más orificios de modo que cada compartimento está en comunicación fluida con uno o más de los otros compartimentos. En otras realizaciones, cada compartimento está separado por una membrana polimérica semipermeable.

En ciertas realizaciones, el extremo distal del accionador de tejido está en comunicación fluida con el depósito de líquido, extendiéndose tales orificios pasantes desde el depósito a través del extremo distal del accionador de tejido. Cuando se desee, el líquido desde dentro del depósito de líquido puede expulsarse desde el extremo distal del accionador de tejido aplicando una presión positiva dentro del depósito de líquido. En estas realizaciones, el extremo distal del accionador de tejido incluye uno o más orificios que se extienden desde la pared exterior del extremo distal del accionador de tejido hasta el depósito de líquido, tal como 2 o más orificios, tal como 3 o más orificios, tal como 5 o más orificios, tal como 10 o más orificios, tal como 25 o más orificios, tal como 50 o más orificios e incluso 100 o más orificios. En algunos casos, los orificios están dispuestos en un patrón de cuadrícula. En ciertas realizaciones, los orificios pueden intercalarse entre púas ubicadas en el extremo distal del accionador de tejido.

Se puede aplicar presión positiva dentro del depósito de líquido para expulsar líquido del extremo distal del accionador de tejido mediante cualquier protocolo conveniente, tal como mecánicamente con un émbolo o hidráulicamente bombeando aire o un gas en el depósito de líquido. En ciertas realizaciones, se aplica presión positiva para expulsar líquido a través de los orificios del extremo distal del accionador de tejido con un émbolo. En estas realizaciones, el émbolo está configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del depósito de líquido. Cualquier líquido conveniente puede estar presente en el depósito de líquido, donde los líquidos de interés incluyen, pero sin limitación, agua y otros líquidos acuosos, p. ej., soluciones tamponadas (tales como HEPES, MOPS, PBS, etc.) y similares. El accionador de tejido puede desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del depósito de líquido de forma continua o en incrementos discretos. Cuando el émbolo se desplaza en incrementos discretos, en algunas realizaciones, el depósito de líquido puede incluir una o más muescas o protuberancias que proporcionan incrementos predeterminados para desplazar el émbolo dentro del depósito de líquido. Por ejemplo, el depósito de líquido puede incluir 2 o más muescas o protuberancias, tal como 3 o más muescas o protuberancias, tal como 4 o más muescas o protuberancias, tal como 5 o más muescas o protuberancias e incluyendo 10 o más muescas o protuberancias.

La FIG. 4 ilustra una vista lateral de un disociador de tejido que tiene un accionador de tejido que incluye un depósito de líquido según ciertas realizaciones. El disociador de tejido400incluye el alojamiento401que tiene canales de alineación401a. Ubicada en el extremo distal del alojamiento401, hay una cuchilla de corte402. El accionador de tejido403encaja dentro de la cámara interior del alojamiento401e incluye protuberancias de alineación403aque encajan en los canales de alineación401apara orientar el accionador de tejido403para el desplazamiento a lo largo de un eje longitudinal del alojamiento401. El accionador de tejido403incluye una cámara interior403bque tiene un depósito de líquido que está en comunicación fluida a través de orificios con el extremo distal del accionador de tejido403c. En el extremo proximal403bdel accionador de tejido, se inserta el émbolo404para aplicar presión positiva dentro del depósito de líquido a fin de expulsar el líquido del extremo distal del accionador de tejido403c. El alojamiento puede configurarse para colocarse dentro del recipiente405.

La FIG. 5 ilustra un ejemplo de un accionador de tejido que tiene un depósito de líquido dentro de una cámara interior del accionador de tejido para ciertas realizaciones de la presente descripción. El accionador de tejido502encaja dentro de la cámara interior del alojamiento del disociador de tejido501e incluye un extremo proximal502ay un extremo distal502b. El accionador de tejido502incluye un depósito de líquido que tiene dos compartimentos502cy502dconfigurados para retener un medio líquido. Los compartimentos502cy502destán separados por una barrera503que incluye uno o más orificios503ade modo que los compartimentos502cy502destán en comunicación fluida entre sí. El accionador de tejido502incluye una pluralidad de orificios504en una configuración de serie de modo que el depósito de líquido está en comunicación fluida con la pared exterior del extremo distal502b. En este ejemplo, la pared exterior del extremo distal502bincluye una serie de púas502ey cada orificio504se encuentra ubicado entre las púas502e. El accionador de tejido502también incluye el émbolo505en el extremo proximal para aplicar una presión positiva al primer compartimento502cdel depósito de líquido a fin de expulsar líquido505a través de orificios504en el extremo distal del accionador de tejido502. Como se muestra en la FIG. 5, el líquido508expulsado a través de los orificios504del extremo distal del accionador de tejido502se puede usar para limpiar o lavar la muestra de tejido biológico que queda en la cuchilla de corte506. Todo el disociador de tejido se puede ajustar, como se ha descrito anteriormente en un recipiente507tal como un tubo de cultivo.

Las FIGS. 6 y 7 ilustran adicionalmente diferentes aspectos de disociadores de tejido según ciertas realizaciones. La FIG. 6 es una vista despiezada del disociador de tejido600que incluye el alojamiento601que tiene un extremo distal y un extremo proximal, accionador de tejido602que incluye la protuberancia de alineación602aen el extremo distal del accionador de tejido602. La protuberancia de alineación602aestá configurada para encajar en la ranura de alineación601bque se extiende por toda la longitud de la cámara interior601adentro del alojamiento601. Como se ilustra en la FIG. 6, el alojamiento601está configurado para colocarse dentro del recipiente604y conectado por una rosca de tornillo con la tapa603.

La FIG. 7A ilustra una vista superior de un disociador de tejido700según ciertos aspectos de la presente descripción. El alojamiento701del disociador de tejido incluye la muesca de alineación701apara orientar el accionador de tejido702dentro de la cámara interior del alojamiento. El accionador de tejido702incluye la protuberancia de alineación702aque encaja en la muesca de alineación701apara que el accionador de tejido702pueda desplazarse a lo largo de un eje longitudinal fijo dentro de la cámara interior del alojamiento701. En el extremo distal del alojamiento701hay una cuchilla de corte703que tiene una configuración de cuadrícula. Una vista completa de la cuchilla de corte703se muestra en la FIG. 7B, que muestra la configuración de rejilla de la cuchilla de corte e incluye un elemento de sujeción703apara unir la cuchilla de corte al extremo distal del alojamiento del disociador de tejido701.

La FIG. 8 ilustra una sección transversal del disociador de tejido que representa el extremo distal del accionador de tejido802engranando con la cuchilla de corte803en el alojamiento801. Como se muestra en la FIG. 8, hay púas802aubicadas en el extremo distal del accionador de tejido802que están dispuestas para encajar entre las superficies de corte de la cuchilla de corte803. En este caso, el accionador de tejido802incluye la protuberancia de alineación802bpara orientar el accionador de tejido802dentro de la cámara interior del alojamiento801a fin de que las púas802apuedan deslizarse por las superficies de corte de la cuchilla de corte803sin resistencia.

En otras realizaciones, el disociador de tejido puede incluir el accionador de tejido, el alojamiento y una placa separadora. En esta realización, las púas del accionador pueden ser pasadores circulares de longitud sustancial, de modo que antes de la inserción del accionador en el elemento de alojamiento o en superficie de contacto de picado de tejido, la placa separadora se carga en la serie de púas o pasadores y se eleva completamente hasta la parte superior. Se utilizan pasadores de guía largos para mantener el registro de todo el dispositivo. Usando los pasadores de guía, el accionador se inserta a continuación en el alojamiento de tejido y el accionador se presiona completamente hacia abajo. A medida que el tejido se presiona a través de los orificios en el elemento de alojamiento de tejido, la placa separadora se mantiene en la parte más superior de la serie de pasadores. A continuación, el accionador se retrae a medida que la placa de extracción se mantiene en su sitio, eliminando de manera efectiva cualquier tejido residual de la serie de pasadores. Otra característica de esta realización incluye un elemento fluídico de manera que una vez que el tejido se ha picado y una solución tamponada (tal como HEPES, MOPS, PBS, etc.) puede introducirse bajo presión positiva por medio de un tubo conectado a una jeringuilla en el punto más superior del elemento de alojamiento de tejido. Este cilindro se extiende hacia abajo a través del aparato. El extremo del cilindro es una pequeña protuberancia en el lado inferior del elemento de alojamiento. A medida que se aplica líquido al cilindro, una serie de hendiduras en la base del cilindro producen una pulverización radial de líquido de modo que la base del elemento de alojamiento se enjuaga y el tejido residual o los restos celulares se lavan hacia el receptáculo.

La FIG. 9A ilustra una vista lateral de un disociador de tejido que tiene un accionador de tejido según ciertas realizaciones. El disociador de tejido900incluye una serie de pasadores901a, así como tres pasadores de guía principales901bque alinean todo el dispositivo. Tres pasadores de guía901cmenores sirven para alinear, así como para proporcionar un tope duro para dictar la profundidad de acoplamiento del accionador. Esta realización también incluye una placa separadora902que incluye una serie de orificios902ay902ba través de los cuales los pasadores901adel accionador pasan libremente, así como los orificios de pasador de guía a través de los cuales ambos conjuntos de pasadores de guía901by901cpasan libremente. Un elemento de alojamiento903de tejido está configurado con un labio903ade modo que el elemento de alojamiento descanse de forma segura sobre el borde del recipiente904. El elemento de alojamiento903también incluye un depósito903bde tejido que es donde se coloca el tejido. El depósito903bde tejido se compone de una plataforma de orificios a través de los cuales la serie de pasadores90lapasa a través libremente. El elemento de alojamiento903también incluye tres orificios903cque proporcionan alineación y a través de los cuales los pasadores de guía principales901bpasan libremente. Un cilindro hueco largo903dse extiende hacia arriba a través de todo el dispositivo y proporciona un acceso a través del cual se puede aplicar líquido bajo presión positiva a la parte inferior del elemento de alojamiento903.

La FIG. 9B muestra el acoplamiento escalonado del accionador de tejido901, la placa separadora902, el alojamiento de tejido903y el recipiente904. En la etapa 1, el alojamiento de tejido se coloca en el borde del recipiente904. En la etapa 2, la placa separadora902se monta sobre el accionador de tejido901y se mueve a la parte más superior de la serie de pasadores a medida que el accionador se monta hacia abajo en el elemento de alojamiento903. En la etapa 3, el accionador901se empuja hacia abajo en el elemento de alojamiento903hasta que se alcance el tope duro de modo que la serie de pasadores pase completamente a través de los orificios en el elemento de alojamiento904. En la etapa 4, la placa separadora902se mueve hacia abajo hasta su tope duro con la base de la placa separadora902descansando contra la superficie del depósito de tejido dentro del alojamiento903. En la etapa 5, la placa separadora902se mantiene en su posición, cuando el accionador901se retrae.

En la FIG. 9C, se muestra un detalle del componente fluídico del alojamiento. Una vez que el accionador está completamente engranado y la serie de pasadores ha pasado a través de los orificios en el alojamiento903, una jeringuilla o algún otro medio para generar presión positiva, se puede unir a la punta superior del cilindro hueco903d. Una flecha amarilla sigue la trayectoria de la solución tamponada a medida que pasa bajo presión positiva a través del cilindro903dhasta la base, punto en el que generaría una pulverización radial para enjuagar la base del elemento de alojamiento903.

Métodos para disociar una muestra de tejido biológico

Los aspectos de la descripción también incluyen métodos para disociar una muestra de tejido biológico. Los métodos según ciertas realizaciones incluyen: 1) insertar un tejido biológico en el alojamiento de un disociador de tejido, donde el disociador de tejido incluye un alojamiento que tiene un extremo distal y un extremo proximal, una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal del alojamiento y un accionador de tejido configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento; y 2) presionar el tejido biológico contra las cuchillas de corte desplazando el accionador de tejido desde el extremo proximal hasta el extremo distal del alojamiento de una manera suficiente para producir un tejido biológico disociado.

En las realizaciones de la presente descripción, la muestra de tejido biológico puede ser un organismo completo, planta, hongos o un subconjunto de tejidos o partes que componen el organismo. Las muestras de tejido biológico pueden obtenerse de una fuentein vitro(p. ej., tejido cultivado en cultivo de laboratorio) o de una fuentein vivo(p. ej., un sujeto mamífero, un sujeto humano, etc.). En algunas realizaciones, la muestra de tejido se obtiene de una fuentein vitro.En algunas realizaciones, la muestra de tejido se obtiene de una fuentein vivo,donde en algunos casos, los tejidos derivados de un sujeto se cultivan, almacenan o manipulan antes de la evaluación. Las fuentesin vivoincluyen organismos pluricelulares vivos y pueden producir muestras de tejido no diagnósticas o diagnósticas.

En algunas realizaciones, los métodos incluyen disociar tejido de una parte componente de un sujeto humano, tal como órganos que incluyen, pero sin limitación, tejido tegumentario (p. ej., secciones de la piel), tejido oral (p. ej., bucal, lingual, palatino, encías), tejido respiratorio (p. ej., faringe, laringe, tráquea, bronquios, pulmones, diafragma), tejido gastrointestinal (p. ej., esófago, estómago, hígado, vesícula biliar, páncreas, intestinos, colon, recto y ano), tejido cardiovascular (p. ej., corazón, vasos sanguíneos), tejido endocrino (p. ej., hipotálamo, glándula pituitaria, cuerpo pineal o glándula pineal, tiroides, paratiroides, glándulas suprarrenales) y tejido genitourinario (riñones, uréteres, vejiga, uretra, ovarios, trompas de Falopio, útero, vagina, glándulas mamarias, testículos, conducto deferente, vesículas seminales, próstata, pene), tejido muscular, tejido nervioso (p. ej., cerebro, médula espinal, nervios), así como tejido esquelético blando (cartílago, ligamentos, tendones). Las muestras biológicas pueden ser cualquier tipo de tejido orgánico, incluyendo tanto tejido sano como enfermo (p. ej., canceroso,, maligno, necrótico, etc.)

El tamaño del tejido disociado mediante los presentes métodos puede variar, dependiendo del tipo y la fuente de tejido, así como del disociador de tejido empleado. Por ejemplo, la longitud de las muestras de tejido biológico puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluso de 10 cm a 25 cm y la anchura de las muestras de tejido biológico puede variar de 1 cm a 50 cm, tal como de 2,5 cm a 45 cm, tal como de 5 cm a 40 cm, tal como de 7,5 cm a 35 cm e incluyendo de 10 cm a 25 cm. El espesor de las muestras de tejido biológico también puede variar, variando de 0,001 mm a 50 mm, tal como de 0,005 mm a 25 mm, tal como de 0,01 mm a 15 mm, tal como de 0,05 mm a 10 mm e incluso de 0,1 mm a 5 mm. Por ejemplo, los métodos pueden incluir disociar muestras de tejido biológico que tengan un área superficial que varía de 0,01 a 100 cm2, tal como de 0,05 a 50 cm2, tal como de 0,1 a 25 cm2, tal como de 0,5 a 15 cm2, tal como de 0,75 a 10 cm2, tal como de 1 a 7,5 cm2, e incluso de 2 a 5 cm2. En algunas realizaciones, los métodos incluyen disociar muestras de tejido biológico que tienen un volumen que varía de 0,01 a 100 cm3, tal como de 0,05 a 50 cm3, tal como de 0,1 a 25 cm3, tal como de 0,5 a 15 cm3, tal como de 0,75 a 10 cm3, tal como de 1 a 7,5 cm3, e incluso de 2 a 5 cm3.

En la práctica de métodos según ciertas realizaciones, se inserta una muestra de tejido biológico en el alojamiento del disociador de tejido, y la muestra de tejido biológico se desplaza a lo largo de un eje longitudinal dentro de la cámara interior del alojamiento con un accionador de tejido y se pone en contacto con las cuchillas de corte ubicadas en el extremo distal del alojamiento. El accionador de tejido puede desplazarse a lo largo de toda o parte de la longitud de la cámara interior del alojamiento para disociar la muestra de tejido biológico. Por ejemplo, el accionador de tejido puede desplazarse a lo largo del 25 % o más de la longitud del alojamiento para disociar la muestra de tejido biológico, tal como el 35 % o más, tal como el 50 % o más, tal como el 60 % o más, tal como el 75 % o más, tal como el 90 % o más, tal como el 95 % o más, tal como el 97 % o más e incluso el 99 % o más de la longitud del alojamiento. En ciertas realizaciones, el accionador de tejido se desplaza a lo largo de toda (es decir, el 100 %) la longitud del alojamiento para disociar la muestra de tejido biológico.

El accionador de tejido puede desplazarse de forma continua o en incrementos discretos. En algunas realizaciones, el accionador de tejido se desplaza continuamente. En otras realizaciones, el accionador de tejido se desplaza en uno o más incrementos discretos, tal como en 2 o más incrementos discretos, tal como 3 o más, tal como 4 o más, tal como 5 o más, tal como 10 o más e incluso en 25 o más incrementos discretos. Dependiendo del tamaño del alojamiento del disociador de tejido, así como del tipo de muestra de tejido biológico, cada incremento discreto puede variar en longitud. Por ejemplo, cada incremento discreto puede ser de 1 mm o más, tal como a 2 mm o más, tal como a 5 mm o más, tal como a 10 mm o más, tal como 25 mm o más e incluso de 50 mm o más.

En ciertas realizaciones, el accionador de tejido se desplaza en un movimiento de vaivén a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento, tal como moviéndose desde una parte distal hasta una parte proximal del alojamiento y retrocediendo desde la parte proximal a la parte distal del alojamiento. En algunos casos, el accionador de tejido se desplaza en un movimiento de vaivén a lo largo de solo una parte de la cámara interior del alojamiento. Por ejemplo, el accionador de tejido se desplaza en un movimiento de vaivén a lo largo del 99 % o menos de la longitud de la cámara interior del alojamiento, tal como del 95 % o menos, tal como del 90 % o menos, tal como del 85 % o menos, tal como del 80 % o menos, tal como del 75 % o menos, tal como del 70 % o menos, tal como del 65 % o más, desplazándose incluso el accionador de tejido en un movimiento de vaivén a lo largo del 50 % o menos de la longitud de la cámara interior del alojamiento.

Cuando el accionador de tejido se mueve en un movimiento de vaivén, el movimiento del accionador de tejido puede repetirse una o más veces para disociar la muestra de tejido biológico según se desee, tal como 2 o más veces, tal como 5 o más veces, tal como 10 o más veces, tal como 15 o más veces e incluso 25 o más veces.

Dependiendo del tipo de muestra de tejido biológico y del tamaño del disociador de tejido empleado, la velocidad a la que el accionador de tejido se desplaza dentro del alojamiento puede variar. Por ejemplo, el accionador de tejido puede desplazarse dentro del alojamiento a una velocidad de 1 mm/segundo o mayor, tal como 2 mm/segundo o mayor, tal como 3 mm/segundo o mayor, tal como 5 mm/segundo o mayor, tal como 10 mm/segundo o más e incluyendo desplazar el accionador de tejido dentro del alojamiento a una velocidad de 25 mm/segundo o mayor.

En realizaciones, la disociación de tejido se puede llevar a cabo a cualquier temperatura adecuada siempre que la viabilidad de la muestra de tejido biológico y los fragmentos de tejido disociados se conserven según lo deseado. Como tal, la temperatura según las realizaciones de la descripción puede variar, tal como de -80 °C a 100 °C, tal como de -75 °C a 75 °C, tal como de -50 °C a 50 °C, tal como de -25 °C a 25 °C, tal como de -10 °C a 10 °C e incluso de 0 °C a 25 °C.

En ciertas realizaciones, los métodos también incluyen controlar la pluralidad de fragmentos de tejido producidos mientras se disocia la muestra de tejido biológico. El control de la disociación de la muestra de tejido biológico puede incluir evaluar la pluralidad de fragmentos de tejido producidos. Por ejemplo, controlar la disociación de la muestra de tejido biológico puede incluir evaluar la homogeneidad de los tamaños de los fragmentos de tejido producidos. El control de la disociación de la muestra de tejido biológico también puede incluir evaluar la homogeneidad de la forma de los fragmentos de tejido producidos. Se puede emplear cualquier protocolo conveniente para controlar la disociación de la muestra de tejido biológico, tal como por examen visual (ya sea a simple vista o con la ayuda de un ordenador que utilice protocolos fotográficos o de vídeo)

En algunos casos, el control incluye examinar visualmente los fragmentos de tejido disociados en tiempo real. En otros casos, el control incluye evaluar los fragmentos de tejido disociados a intervalos regulares, tal como cada 0,01 minutos, cada 0,05 minutos, cada 0,1 minutos, cada 0,5 minutos, cada 1 minuto, cada 5 minutos o algún otro intervalo.

Los métodos de la presente descripción también pueden incluir una etapa de evaluación de los fragmentos de tejido disociados para identificar cualquier ajuste deseado al presente protocolo. Dicho de otro modo, los métodos en estas realizaciones incluyen proporcionar la evaluación basada en la información de los fragmentos de tejido, donde los ajustes al protocolo pueden variar en términos de objetivo, donde, en algunos casos, el ajuste deseado son ajustes que finalmente dan lugar a una homogeneidad de tamaño mejorada de la homogeneidad de forma de los fragmentos de tejido disociados.

Cuando la información proporcionada indica que un determinado protocolo no es óptimo, tal como cuando los fragmentos de tejido disociados tienen una homogeneidad de tamaño u homogeneidad de forma insatisfactoria, los métodos pueden incluir cambiar una o más partes de los presentes protocolos. Por ejemplo, se pueden ajustar uno o más parámetros para presionar la muestra de tejido biológico a través de la cuchilla de corte. En un ejemplo, los métodos incluyen ajustar la velocidad a la que se presiona la muestra de tejido biológico a través de la cuchilla de corte. En algunos casos, se aumenta la velocidad, tal como aumentando la velocidad de desplazamiento del accionador de tejido en 1 mm/segundo o más, tal como 2 mm/segundo o más, tal como en 5 mm/s o más, tal como en 10 mm/segundo o más y aumentando la velocidad de desplazamiento del accionador de tejido en 25 mm/segundo o más. En otros casos, la velocidad se reduce, tal como disminuyendo la velocidad de desplazamiento del accionador de tejido en 1 mm/s o más, tal como 2 mm/segundo o más, tal como en 5 mm/segundo o más, tal como en 10 mm/segundo o más y disminuyendo la velocidad de desplazamiento del accionador de tejido en 25 mm/segundo o más.

En otro ejemplo, se puede ajustar la temperatura dentro del alojamiento del disociador de tejido mientras la muestra de tejido biológico se presiona a través de la cuchilla de corte. Por ejemplo, la temperatura puede reducirse, tal como en 1 °C o más, tal como en 2 °C o más, tal como en 3 °C o más, tal como en 5 °C o más, tal como en 10 °C o más e incluyendo disminuir la temperatura en 15 °C o más. En otras realizaciones, la temperatura se aumenta en 1 °C o más, tal como en 2 °C o más, tal como en 3 °C o más, tal como en 5 °C o más, tal como en 10 °C o más e incluyendo aumentar la temperatura en 15 °C o más.

En ciertas realizaciones, los métodos pueden incluir además lavar las superficies de corte de la cuchilla de corte expulsando un líquido desde el extremo distal del accionador de tejido. Como se ha descrito anteriormente, los accionadores de tejido pueden incluir un depósito de líquido dentro del accionador de tejido que está en comunicación fluida a través de orificios en el extremo distal del accionador de tejido. La aplicación de una presión positiva dentro del depósito de líquido, tal como con un émbolo, expulsa líquido a través de los orificios. El líquido expulsado del accionador de tejido puede emplearse para lavar el tejido biológico que queda en el extremo distal del accionador de tejido o para lavar el tejido que queda sobre y entre las superficies de corte de la cuchilla de corte. Dependiendo de la cantidad de tejido biológico que quede sobre o entre las superficies de corte de la cuchilla de corte, los métodos pueden incluir lavar las cuchillas de corte una o más veces, tal como dos o más veces, tal como tres o más veces, tal como cinco o más veces e incluso diez o más veces.

En algunas realizaciones, cuando no basta con un solo intervalo para proporcionar los fragmentos de tejido disociados deseados, los métodos pueden incluir realizar uno o más intervalos adicionales. En estas realizaciones, los protocolos descritos en la presente memoria para disociar una muestra de tejido biológico en una pluralidad de fragmentos de tejido se repiten una o más veces de manera secuencial. En la práctica de los presentes métodos, los protocolos de varios intervalos pueden incluir dos o más intervalos, tal como tres o más intervalos, tal como cuatro o más intervalos, tal como cinco o más intervalos, incluyendo diez o más intervalos.

Kits

Los aspectos de la invención incluyen además kits, donde los kits incluyen uno o más alojamientos, cuchillas de corte y accionadores de tejido como se describe en la presente memoria. En algunos casos, los kits pueden incluir uno o más componentes adicionales (p. ej., tampones, agua, disolvente, etc.). En algunos casos, los kits pueden incluir además un dispositivo de recogida de muestras de tejido biológico, p. ej., una lanceta, aguja o bisturí configurado para una muestra de tejido tegumentario, tejido bucal, tejido respiratorio, tejido gastrointestinal, tejido cardiovascular, tejido endocrino, tejido genitourinario, tejido muscular, tejido nervioso o tejido esquelético blando, como se ha descrito anteriormente.

Los diversos componentes de los kits pueden estar presentes en recipientes separados, o algunos o todos ellos pueden estar previamente combinados. Por ejemplo, en algunos casos, uno o más componentes del kit, p. ej., alojamientos, cuchillas de corte y accionadores de tejido, están presentes en una bolsa sellada, p. ej., o una bolsa un sobre de aluminio estéril.

Además de los componentes anteriores, los presentes kits pueden incluir además (en ciertas realizaciones) instrucciones para ensamblar los componentes del presente kit, así como para poner en práctica los métodos para disociar una muestra de tejido biológico como se describe en la presente memoria. Estas instrucciones pueden estar presentes en los presentes kits en una variedad de formas, una o más de los cuales pueden estar presentes en el kit. Una forma en la que estas instrucciones pueden estar presentes es como información impresa en un medio o sustrato adecuado, p. ej., una hoja u hojas de papel en las que se imprime la información, en el envasado del kit, en un prospecto y similares. Otra forma más de estas instrucciones es un medio legible por ordenador, p. ej., disquete, disco compacto (CD), unidad flash portátil y similares, en el que se haya registrado la información. Otra forma de estas instrucciones que puede estar presente es una dirección web que puede utilizarse a través de Internet para acceder a la información en un sitio retirado.

Utilidad

Los presentes dispositivos, métodos y kits encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes en las que es deseable obtener fragmentos de tejido biológico que tengan una alta homogeneidad de tamaño y forma a partir de una muestra de tejido biológico. La presente descripción también encuentra uso en aplicaciones en las que se pueden desear fragmentos de tejido preparados a partir de una muestra biológica para investigación, pruebas de laboratorio o para usar en terapia. En algunas realizaciones, los presentes métodos y dispositivos pueden facilitar la obtención de una gran cantidad de fragmentos de tejido para usar como muestra de investigación o diagnóstico para enfermedades tales como el cáncer. De forma similar, los presentes métodos y sistemas facilitan la obtención de fragmentos de tejido para usar en terapia, tal como en el tratamiento autólogo de heridas. Los métodos y dispositivos de la presente descripción permiten preparar una pluralidad de fragmentos de tejido a partir de muestras de tejido biológico que tienen una gran homogeneidad de tamaño, una forma en la que se desperdicia poco tejido y a bajo coste.

Aunque la invención anterior se ha descrito con cierto detalle a modo de ilustración y ejemplo para facilitar la comprensión, es muy evidente para los expertos en la técnica a la luz de las enseñanzas de esta descripción que se pueden realizar ciertos cambios y modificaciones en la misma sin apartarse del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

El alcance de la presente invención, por lo tanto, no pretende limitarse a las realizaciones ilustrativas mostradas y descritas en la presente memoria. En cambio, el alcance de la presente invención se materializa mediante las reivindicaciones adjuntas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un disociador de tejido (400, 600, 700, 900) que comprende:

un alojamiento (101, 201, 401, 501, 601, 701, 801, 903) que comprende un extremo distal abierto (302) y un extremo proximal;

una cuchilla de corte (102, 202, 402, 506, 703, 803) ubicada en el extremo distal abierto (302) del alojamiento (101, 201,401,501,601, 701,801,903); y

un accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) que comprende una serie de púas y que está configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento (101,201,401,501,601,701, 801,903) hasta la cuchilla de corte en el extremo distal abierto (302),

en donde el disociador (400, 600, 700, 900) comprende además un adaptador ubicado en el extremo proximal (301) del alojamiento (101, 201, 401, 501, 601, 701, 801, 903), en donde el adaptador está configurado para conectar de manera liberable el extremo proximal (301) del alojamiento (101,201,401,501,601,701,801,903) a una abertura de un recipiente (405, 507, 604, 904), en donde el recipiente (405, 507, 604, 904) es un cilindro de jeringuilla (104) o un tubo de centrífuga.

2. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 1, en donde el accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) comprende un depósito de líquido.

3. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 2, en donde el extremo distal del accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) comprende orificios en comunicación fluida con el depósito de líquido.

4. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 3, en donde el accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) comprende orificios intercalados entre las púas.

5. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 4, en donde el accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) comprende además un émbolo configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del depósito.

6. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 1, en donde la cuchilla de corte (102, 202, 402, 506, 703, 803) comprende una configuración de rejilla.

7. El disociador de tejido (400, 600, 700, 900) según la reivindicación 6, en donde la cuchilla de corte (102, 202, 402, 506, 703, 803) está configurada para disociar tejido en componentes de forma idéntica o tamaño idéntico.

8. Un método para disociar un tejido biológico empleando el disociador de tejido de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende las siguientes etapas:

insertar un tejido biológico en el alojamiento (101, 201,401, 501, 601, 701, 801, 903) del disociador de tejido de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y

presionar el tejido biológico contra las cuchillas de corte (102, 202, 402, 506, 703, 803) desplazando el accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 702, 802) desde el extremo proximal hasta el extremo distal (301) del alojamiento (101,201,401, 501,601,701,801,903) de una manera suficiente para producir un tejido biológico disociado que comprenda componentes de forma y tamaño idénticos.

9. El método según la reivindicación 8, que comprende además dispensar un líquido desde un depósito que se extiende desde un extremo proximal (301) hasta un extremo distal (302) dentro del accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) a través de una serie de orificios ubicados en el extremo distal (302) del accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) que están en comunicación fluida con el depósito.

10. El método según la reivindicación 9, en donde dispensar el líquido comprende desplazar un émbolo a lo largo de un eje longitudinal desde el extremo proximal (301) hasta el extremo distal (302) dentro del accionador de tejido (103, 300, 403, 502, 602, 702, 802, 901) para expulsar líquido a través de los orificios en el extremo distal (302).

11. Un kit para disociar un tejido, comprendiendo el kit:

un alojamiento (101, 201, 401, 501, 601, 701, 801, 903) que tiene un extremo distal abierto (302) y un extremo proximal (301);

una cuchilla de corte ubicada en el extremo distal abierto (302) del alojamiento (101,201,401,501,601,701,801, 903); y

un accionador de tejido que comprende una serie de púas y que está configurado para desplazarse a lo largo de un eje longitudinal dentro del alojamiento (101,201,401,501,601,701,801,903) hasta la cuchilla de corte en el extremo distal abierto (302),

en donde el kit comprende además un adaptador ubicado en el extremo proximal (301) del alojamiento (101,201,401, 501, 601, 701, 801, 903), en donde el kit, comprende además un recipiente que tiene una abertura adaptada para conectarse de manera liberable con el extremo proximal del alojamiento, en donde el recipiente es un cilindro de jeringuilla o un tubo de centrífuga

en donde el adaptador está configurado para conectar de manera liberable el extremo proximal (301) del alojamiento (101,201,401,501, 601,701,801,903) a una abertura de dicho recipiente (405, 507, 604, 904).